FR2491073A1

FR2491073A1 - Nouveaux derives 1-n- (a-hydroxy-o-aminoalcanoyl des 5,3',4'-tridesoxy- ou 5,3',4'-tridesoxy-6'-n-methyl- ou 5,3',4',6''-tetradesoxykanamycine b, leurs procedes de production et les compositions antibacteriennes les renfermant

Info

Publication number: FR2491073A1
Application number: FR8115781A
Authority: FR
Inventors: Hamao Umezawa; Shinichi Kondo
Original assignee: Microbial Chemistry Research Foundation
Current assignee: Microbial Chemistry Research Foundation
Priority date: 1980-08-12
Filing date: 1981-08-10
Publication date: 1982-04-02
Also published as: ES8308334A1; IT8109493A0; ES504697A0; IT1167959B; ES514621A0; ES514622A0; DE3131731C2; ES8301486A1; ES8401092A1; GB2082575B; CA1175816A; CH648564A5; ES8401093A1; DE3131731A1; GB2082575A; ES514620A0; NL8103639A; FR2491073B1; KR830006325A; KR850000979B1

Abstract

CES NOUVEAUX COMPOSES ANTIBACTERIENS SONT LES 1-N- (A-HYDROXY-O-AMINOALCANOYL)-5,3,4-TRIDESOXYKANAMYCINES B, LES 1-N- (A-HYDROXY-O-AMINOALCANOYL)-5,3,4, 6-TETRADESOXYKANAMYCINES B, LES 1-N- (A-HYDROXY-O-AMINALCANOYL)- 5,3,4-TRIDESOXY-6-N-METHYLKANAMYCINES B, AINSI QUE LA 5,3,4,6-TETRADESOXYKANAMYCINE B ET LA 5,3,4-TRIDESOXY-6-N-METHYLKANAMYCINE B.

Description

La présente invention concerne de nouveaux antibioti- ques

aminoglycosidiques comprenant une l-N-ca-hydroxy-. aminoalcanoyl]-5,3',4'-tridésoxykanamycine B ; les 1-Naci- hydroxy-u -aminoalcanoyl]-5,3',4',6"-tétradésoxykanamycine 5 B et 5,3',4',6"-tétradésoxykanamycine B, ainsi que les 1-N-3a-hydroxy-'-aminoalcanoyl3-5,3',4'-tridésoxy-6'-N- méthyl-kanamycine B et 5,3',4'-tridésoxy-6'-N-méthylka- namycine B, chacun de ces produits étant un agent anti- bactérien utile. L'invention concerne également les pro- 10 cédés d'obtention de ces composés, ainsi que les composi- tions antibactériennes renfermant, en tant qu'ingrédient actif, un de ces composés. La dibékacine, c'est-à-dire la 3',4'-didésoxykanamy- cine B a été produite par voie semi-synthétique à partir 15 de la kanamycine B par les inventeurs (cf. publication brevet japonais n 7595/75 ; brevet japonais n 794 612, USP N 3 753 9731 La dibékacine a été utilisée de façon extensive dans le traitement thérapeutique de diverses infections bactériennes comme agent chimiothérapeutique 20 efficace contre les bactéries sensibles à la kanamycine ainsi que contre différentes bactéries résistantes à la kanamycine. Les inventeurs ont obtenu, de façon semisynthétique, l'habékacine, c'est-A-dire la 1-N-(L-4-amino2-hydroxybutyryl)-dibékacine qui est un agent chimiothé- 25 rapeutique efficace contre les bactéries résistantes à la dibékacine (cf. publication de brevet japonais 33629/77, USP 4 107 424).Ils ont aussi produit par voie semi-syn- thétique une 1-N-EC-hydroxy-au-amino-alcanoyl3-6'-N-méthyldibékacine qui s'est révélée très active contre de nombreu- 30 ses souches bactériennes (demande de brevet japonais 115199/74 ; brevet anglais 1 475 481, US 4 147 861). Lors de recherches ultérieures, la demanderesse a obtenu, par voie semi-synthétique, les dérivés 6"-désoxy et 4",6"-didésoxy de la dibékacine et de l'habékacine, 35 c'est-à-dire la 1-N-(L-4-amino-2-hydroxybutyryl)-dibéka- cine. Elle a de plus découvert que ces dérivés 6"-désoxy et 4",6"-didésoxy de la dibékacine et de l'habékacine 2491073 2 présentent non seulement une faible oto-toxicité mais aussi une activité antibactérienne aussi élevée que celle de la dibékacine et de l'habékacine. (cf. demande de brevet japonais 119323/79, demande de brevet anglais 5 2 058 774 et demande de brevet US 174 630). La demanderesse a également obtenu la 5,3',4'-tri- désoxykanamycine B comme autre dérivé désoxy de la di- békacine (Japanese Journal of Antibiotics, 32 S-178, (1979)), mais on a constaté que ce produit est moins 10 actif que la dibékacine. Il faut ajouter que la demanderesse a également obtenu quelques dériv6s de la 1-N-(L-4-amino-2-hydroxybutyryl)-kanamycine A (c'est-à-dire l'amikacine), y com- pris la 3'-désoxyamikacine (demande de brevet japonais 15 49105/75, USP 4 104 372), la 3',4'-did6soxyamikacine (demande de brevet japonais 11402/79, demande de brevet anglais 2 043 034, demande de brevet US 114 779), la 6"d&soxyamikacine (demande de brevet japonais 54733/79), la 4",6"-didésoxyamikacine (demande de brevet japonais 20 54733/79), la 3',4',4",6"-tétradésoxyamikacine (demande de brevet japonais 138685/79) et la 3',4',6"-tridésoxy- amikacine (demande de brevet japonais 5657/80), ainsi que la 3',6"-did6soxyamikacine, la 5,3'-didésoxyamikacine, et la 5,3',6"-tridésoxyamikacine (demande de brevet ja- 25 ponais 107202/80) qui présentent toutes une faibles to- xicité aigie et une faible oto-toxicité en même temps qu'une activité antibactérienne aussi élevée que l'amikacine. Lors de ses recherches sur les dérivés désoxy de la 30 dibékacine ou de l'habikacine, les inventeurs ont réussi à obtenir un nouveau composé la 5,3',4',6"-tétradésoxykana- mycine B qui s' est r6v616élée active contre certains types de bactéries bien que la 5,3',4'-tridésoxykanamycine B ne pr6sente pas d'activité antibact6rienne utile. Ils ont 35 également réussi à obtenir un nouveau composé, la 5,3',4'tridésoxy-6'-N-méthylkanamycine B qui pr6sente également une activité antibact6rienne supérieure à celle de la 2491073 3 5,3',4'-tridésoxy kanamycine B spécialement contre cer- taines souches résistantes. Lors des essais d'obtention de ces nouveaux dérivés de la 5,3',4'-tridésoxykanamycine B, de la 5,3',4',6"-tétradésoxykanamycine B ou de la 5,3', 5 4'-tridésoxy-6'-N-méthyl-kanamycine B avec une activité antibactérienne améliorée, les inventeurs ont synthétisé de nouveaux dérivés 1-N-[a-hydroxy-a-aminoalcanoyl) de ces désoxykanamycines B par acylation du groupe 1-amino de la désoxykanamycine B avec un acide Q-hydroxy-u&-aminoal- 10 canolque. Ils ont découvert que les dérivés nouveaux 1-N- Ea-hydroxy-u-aminoalkanoyl] de la 5,3',4'-tridésoxykanamycine B, de la 5,3',4'-tridésoxy-6'-N-méthylkanamycine B, et de la 5,3',4',6"-tétradésoxykanamycine B, présentent une activité très élevée contre les bactéries sensibles 15 et résistantes à la kanamycine, ainsi qu'une activité antibactérienne élevée contre toute une série de bactéries. L'invention a donc tout d'abord pour objet en tant que

composés nouveaux, une 1-N-[a-hydroxy-v-aminoalcanoyl,-5,3, 4'-tridésoxyou 1-N-[a-hydroxy-i-aminoalcanoylI-5,3',4'tridésoxy-6'-N-méthylkanamycine B, ou une 5,3',4'-tridésoxy-6'-N-méthylkanamycine B ou une 1-N-[C-hydroxy-w-aminoalcanoylj-5,3',4',6"-tétra-désoxykanamycine B ou 5,3',4', 6"-tétradésoxykanamycine B de formule générale : 25 R \6" HO 0 H HN24' HO2~ x< 6 . 2' ~,0 -I NH2 21~~~ 30 6 4 0 R1 2~~~~~~~~~~ 35 dans laquelle R est un groupe hydroxyle ou un atome d'hydrogène, R1 est un atome d'hydrogène ou un groupe 2491073 4 a-hydroxy-Lu-aminoalcanoyl de formule : -CO-CH- (CH2) -NH2 OH dans laquelle n = 1, 2 ou 3, et R2 est un atome d'hydro- 5 gène ou un groupe méthyl, pourvu que R2 ne soit pas un groupe méthyl quand R est un'atome d'hydrogène, ainsi que les sels d'addition acide pharmaceutiquement acceptables de ces composés. Avantageusement, ces nouveaux composés sont les 1-N- 10 Ea-hydroxy~-aminoalcanoyl -5,3' ,4 '-tridésoxy-kanamycine B ou 1-N-ca-hydroxy-u-aminoalcanoylj-5,3',4' ,6t-tétradé- soxykanamycine B de formule : 15 6" R ` 2' 4' OH " H2N 2" 0' 1" 1 20 6 ' H2~~~ ., ,.O5 H 20 lIN ~23 CO 25 1 CHOH I (CH2)n 2 30 dans laquelle R est un groupe hydroxy ou un atome d'hy- drogène et n = 1, 2 ou 3, et dans laquelle R est un groupe hydroxy quand le composé est une 1-N-[a-hydroxyl-U-amino- alcanoyJj-5,3',4'-tridésoxykanamycine B, mais R est un atome d'hydrogène quand le compos6 de formule II est une 35 1-Na-hydroxy- v-aminoalcanoyl]-5,3' ,4' ,6"-tétradésoxy- kanamycine B, ainsi que les sels d'addition acides pharmaceutiquement acceptables de ces compos6s. 2491073 5 L'invention concerne également le composé de formule générale I qui est la 5,3',4',6"-tétrad6soxykana- mycine B de formule : 5 6" 2' 6f, H ~~N 2' 4, CH3 0 2 3' 4 HO 2" 1' O 6' 5" t6 4 ~~H2N 30 31HN NH2 II 1 15 ainsi que ses sels d'addition acide pharmaceutiquement acceptables. Les propriétés physico-chimiques et biologiques des nouveaux composés de formules II et III sont les sui- vantes : 20 1) Le monocarbonate monohydrate de 1-N-L(S)-4-amino-2- hydroxybutyryl]-5,3' ,4'-tridésoxykanamycine B est une poudre incolore se décomposant à 163-166 C et présentant une rotation optique spécifique (a)2D6 = + 870 (c 1, eau). Son analyse él6émentaire coincide avec les valeurs 25 th6oriques de C22 H 44N609.H2CO 3.H20 (C 44,80 %, H 7,85 %, N 13,63 %). Il donne une tache unique (positive à la ninhydrine) à Rf 0,05 et à Rf 0,09 en chromatographie en couche mince sur gel de silice développée respectivement avec un mé- 30 lange butanol-éthanol-chloroforme solution aqueuse d'am- moniaque à 17 % (4:5:2:5 en volume), et avec un mélange chloroforme-méthanol-solution aqueuse concentrée d'am- moniaque-eau (1:4:2:1 en volume). 2) Le monocarbonate de 1-N-[(RS)-3-amino-2-hydroxypropio- 35 nyl3-5,3',4'-trid6soxykanamycine B est une poudre incolore se décomposant à 113-116 C et présentant une rotation op- tique spécifique(a)27 = + 120 (c 1, eau). 2 4 9 1073 6 Son analyse élémentaire coïncide avec les valeurs théoriques de C21H42N609.H2C03 (C 42,85 %, H 7,19 %, N 13,63 %). Il donne une tache unique (positive à la ninhydrine) 5 à Rf 0,12 et à Rf 0,35 en chromatographie en couche mince sur gel de silice d6veloppée respectivement avec un mélange butanol-éthanol-chloroforme-solution aqueuse d'ammoniaque à 17 % (4:5:2:5 en volume) avec un mélange chloroforme-méthanol-solution aqueuse concentrée d'am- 10 moniaque-eau (1:4:2:1 en volume). 3) Le dicarbonate de 1-N-[(S)-4-amino-2-hydroxybutyryl]- 5,3',4',6"-t6tradésoxykanamycine B est une poudre inco- lore se d6composant à 131-135 C et présentant une rotation optique spécifique (a)27= + 900 (C 1, eau). 15 Son analyse élémentaire coïncide avec les valeurs th6oriques de C22H44N608. 2H2C 3' (C ,71%, H 7,50 N 13,04 %). Il donne une tache unique (positive à la ninhydrine) à Rf 0,07 et Rf 0,23 en chromatographie en couche mince 20 sur gel de silice d6veloppée respectivement avec un mé- lange butanol-éthanol-chloroforme-solution aqueuse d'am- moniaque à 17 % (4:5:2:5 en volume) et avec un mélange chloroforme-méthanol-solution aqueuse concentr6e d'am- moniaque-eau (1:4:2:1 en volume). 25 4) Le dicarbonate mQnohydrate de 5,3',4',6"-t6trad6soxy- kanamycine B est une poudre incolore qui se décompose à 128-138 C, présente une rotation optique spécifique Ca23 = + 102 (c 1, eau). Son analyse élémentaire coïncide avec les valeurs 30 th6oriques de C18H37N506 2H2COH0 (C 2,77 %, H 7,72 %, 18 3725 620242,77 N 12,47 %). Il donne une tache unique (positive à la ninhydrine) à Rf 0,42 et à Rf 0,56 en chromatographie en couche mince sur gel de silice d6velopp6e respectivement avec un m6- 35 lange butanol-6thanol-chloroforme-solution aqueuse d'am- moniaque à 17 % (4:5:2:5 en volume) et avec un mélange chloroforme-m6thanol-solution aqueuse concentr6e d'am- 2 4 9 1 07 3 7 moniaque-eau (1:4:2:1 en volume). La concentration inhibitoire minimum (mcg/ml) de la 1-N-L(S)-4-amino-2-hydroxybutyryl3-5,3',4'-trid6soxyka- namycine B (ci-après AHB-tridésoxy KMB), de la 1-N-(RS)-

5 3-amino-2-hydroxypropionyll-5,3',4'-trid6soxykanamycine B (ci-après ARP-trid6soxy-KMB) et de la 1-N-[(S)-4-amino2-hydroxybutyryl]-5,3',4',6"-t6trad6soxykanamycine B ( ci-après AHB-tétrad6soxy KMB) de formule (II) selon l'invention, ainsi que du nouveau composé la 5,3',4',6"- 10 tétradésoxykanamycine B (ci-après tétradésoxy KMB) de formule (III) selon l'invention vis-à-vis de différents microorganismes a été détermin6e par une méthode de di- lution en s6rie sur milieu agar nutritif à 37 C, l'esti- mation étant faite après 18 heures d'incubation. Dans un 15 but de comparaison on a également d6terminé de la même manière les concentrations inhibitoires minimum de l'ha- békacine. Les spectres antibactériens de ces substances sont rassemblés dans la Table I ci-après. TABLE 1 .__ _ ~MOC. (mcg/ml) . t ~~~~~~~~. Organismes d'essai -e eo Organismes dessai AHB-tri- AHP-triAHB-tétra- Hab6ékacine Tétrad6so- d6soxyKMB d6soxyKMB d6soxy KMB (comparaisor xy M Staphylococcus aureus 209 P "t "~ ~Smith ~" "~ ~APOl Staphylococcus epidermidis 109 Micrococcus flavus FDA 16 Sarcina lutea PCI 1001 Bacillus anthracis Bacillus subtilis PCI 219 Bacillus subtilis NRLRL-B-558 Bacillus cereus ATCC 10702 Mycobacterium smegmatis ATCC 607 Escherichia coli NIHJ " CK-12 ~" " K-12 R5 " "s K-12 R 388 " t" K-12 J5R 11-2 " " K-12 ML 1629 " K-12 ML 1630 ~" " K-12 ML 1410 tt" K-12 ML 1410 R 81 <0,20 <0,20 0,39 0,39 1,56 0,39 <0,20 <0,20 <0,20 0,78 0,20 0,78 0,78 100 0,78 0,78 1,56 1,56 1,56 1,56 <0,20 <f0,20 0,78 0,78 6,25 0,78 <0,20 <.0,20 <0,20 0,78 0120 1,56 1,56 100 1,56 1,56 3,13 3,13 1,56 1,56 <0,20 <0,20 0,78 0,78 6,25 0,78 <0,20 <0,20 < 0,20 0,39 <0,20 0,78 0,78 50 0,39 0,78 0,78 1,56 1,56 0,78 0,39 <0,,20 0,78 0,78 1,56 1,56 <0,20 <0,20 <0,20 1,56 0,39 3,13 3,13 100 1,56 1,56 3,13 3,13 6,25 3,113 3,13 <0,20 6,25 6,25 50 50 0,39 <0,20 <0,20 3,13 0,78 6,25 25 H00 3,13 6,25 6,25 12,5 12,5 6,25 ... /... i r .1 %o .",. w w 1 v 1 1 I -ri Escherichia co li K-12 LA 290 R " K-12 LA 290 R " 1-12 LA 290 R 55 56 64 ,, f W 677 ,, " JR66/W677 ,, , ' K-12 C 600R/35 ,, " JR 255 Klebsiella pneumoniae PCT 602 ,, It 22 3038 Shigella dysenteriae JS 11910 Shigella flexneri 4b JS 11811 Shigella sonnei JS 11746 Salmonella typhi T-63 Salmonella enteritidis 1891 Proteus vulgaris OX19 Proteus rettgeri GN311 Proteus rettgeri GN 466 Serratia marcescens Serratia SOU Serratia 4 3,13 0,78 0,78 0,78 1,56 0,78 0,39 0,78 3,13 3,13 3,13 3,13 25 3,13 0,39 25 3,13 25 100 12,5 3,13 1,56 1,56 1,56 3,13 1,56 1,56 1, 56 6,25 6,25 6,25 6,25 50 6,25 0,78 25 3,13 25 >100 25 1,56 0,39 0,78 0,78 1,56 0,78 0,78 0,78 1,56 1,56 1,56 3,13 25 3,13 0,39 25 1,56 25 100 25 6,25 3,13 3,13 3,13 6,25 1,56 3,13 1,56 3,13 12,5 6,25 6,25 1,56 3,13 0,78 50 12,5 50 >100 50 -> 100 100 100 6,25 >100 6,25 25 3,13 100 12,5 25 12,5 12,5 25 1,56 > OO1 25 100 >100 50 N O _ . cW. w 1 I! Providencia Pv 16 Providencia 2991 Pseudomonas aeruginosa A 3 T" " No 12 " " H 9 i" " H 11 "l " TI-13 " ", GN-315 " "T 99 "l "t 21-75 "i " PSTI ROS134/PU21 Pseudomonas aeruginosa K-Ps-102 Pseudomonas maltophilia GN 907 i à l 12,5 6,25 0,39 3,13 3,13 6,25 3,13 25 3,13 6,25 6,25 6,25 >100 1,56 > 100 25 25 0,78 3,13 3,13 6,25 3,13 50 3,13 12,5 12,5 6,25 >100 3,13 >100 25 25 0,78 6,25 3,13 12,5 3,13 100 6,25 12,5 12,5 6,25 100 3,13 >10oo 25 50 3,13 3,13 6,25 12,5 3,13 6,25 6,25 25 25 25 > 100 3,13 >100 >100 > 100 3,13 25 100 25 12,5 > 100 25 50 >100 >100 >100 12,5 >100 o o 1%> 1 c. w 1 i 1 f. " B-13 2491073 il L'invention concerne également un composé de formule générale I qui est une 1-N-ja-hydroxy-w-aminoalcanoyfj- 5,3', 4'-tridésoxy-6'-N-méthylkanamycine B de formule IV. 5 6" H2N 1 Y{S 1" 10 3 , 2' 4' NHCH3 6 CO Co 15 3 1 (Iv) CHOH (CH2)nNH2 20 dans laquelle n = 1, 2 ou 3, ainsi que ses sels d'addi- tion acide pharmaceutiquement acceptables. Un nouveau composé selon l'invention, de formule gé- nérale I est la 5,3',4'-tridésoxy-6'-N-méthylkanamycine B 25 6" HO H2N 30HN 30 2 1" 3', 4 0 1 2' 5' (V) 3 35 ainsi que ses sels d'addition d'acide pharmaceutiquement acceptables. 2491073 12 Les propriétés physico-chimiques et biologiques de composés de formule IV et V selon l'invention sont rassem- blées ci-après. 5) Le monocarbonate de 1-N SS)-4-amino-2-hydroxybutyryl]- 5 5,3',4'-tridésoxy-6'-N-méthylkanamycine B est une poudre incolore qui se décompose à 162-165 C, présente une rotation optique spécifique (a)2 = + 88 (c 1, eau). Son analyse élémentaire coïncide avec les valeurs théoriques de C23H46N 609H2CO3 (C 4,0 %, H 7,90 10 N 13,72 %). Il donne une tache unique (positive à la ninhydrine) à Rf 0,05 et à Rf 0,08en chromatographie en couche mince sur gel de silice développée respectivement avec un mélange butanol-éthanol-chloroforme-solution aqueuse d'ammoniaque 15 à 17 % (4:5:2:5 en volume) et avec un mélange chloroforme- méthanol-solution aqueuse concentrée d'ammoniaque-eau (1:4:2:1 en volume). 6) Le monocarbonate monohydrate de 1-N- C(RS)-3-amino-2hydroxypropionyl3]-5,3',4'-tridésoxy-6'-N-méthylkanamycine B 20 est une poudre incolore qui se décompose à 162-164o C, pré-

( 2 5 - 0 (C U, 5, sente une rotation optique spécifique ( D5 = + 800 ( ,5 eau). Son analyse élémentaire coincide avec les valeurs théoriques de C H N OH CO .1130 théoriques de C22H44N609H2CO 3H 2 (C 44,80 %, H 7,85 %, 25 N 13,62 %). Il donne une tache unique (positive à la ninhydrine) à Rf 0,05 et à Rf 0,14 en chromatographie en couche mince sur gel de silice développée respectivement avec un mé- lange butanol-éthanol-chloroforme-solution aqueuse d'am- 30 moniaque à 17 % (4:5:2:5 en volume) et avec un mélange chloroforme-méthanol-solution aqueuseconcentrée d'am- moniaque-eau (1:4:2:1 en volume). 7) Le monocarbonate monohydrate de 1-N-[(S)-5-amino-2-hydroxyvaléryl]-5,3',4'-tridésoxy-6'-N-méthylkanamycine B 35 est une poudre incolore qui se décompose à 163-166 C, pré- sente une rotation optique spécifique(a)3 8 + 4 (C 0,5, D= eau). Son analyse éléementaire coïncide 2491073 13 avec les valeurs théoriques de C24H48N609.H2C03.H20 (C 46,57 %, H 8,13 %, N 13,03 %). Il donne une tache unique (positive à la ninhydrine) à Rf 0,03 et à Rf 0,08 en chromatographie en couche mince 5 sur gel de silice développée respectivement avec un mé- lange butanol-éthanol-chloroforme-solution aqueuse d'am- moniaque à 17 % (4:5:2:5 en volume) et avec un mélange chloroforme-méthanol-solution aqueuse concentrée d'ammo- niaque-eau (1:4:2:1 en volume). 10 8) Le monocarbonate monohydrate de 5,3',4'-tridésoxy-6'-N- méthylkanamycine B est une poudre incolore qui se décom- pose à 137-140 C, présente une rotation optique spécifique (a 22 = + 660 (C 1, eau). Son analyse élémentaire coincide avec les valeurs 15 théoriques de C19H39N507.H2C03.H20 (C 45,36 %, H 8,18 %, N 13,23 %). Il donne une tache unique (positive à la ninhydrine) à Rf 0,22 et à Rf 0,49 en chromatographie en couche mince sur gel de silice développée respectivement avec un mé- 20 lange butanol-éthanol-chloroforme-solution aqueuse d'am- moniaque à 17 % (4:5:2:5 en volume) et avec un mélange chloroforme-méthanol-solution aqueuse concentrée d'am- moniaque-eau (1:4:2:1 on volume). Les concentrations inhibitoires minimum (mcg/ml) de la 25 l-N- (S) 4-amino-2-hydroxybutyryl]-5,3',4'-tridéaoxy-6'-Nméthylkanamycine B (ci-après AHB-tridésoxy MKMB), de la l-N(RS)-3-amino-2-hydroxypropionyl]-5,3',4'-tridésoxy- 6'-N-méthylkanamycine B (ci-après AHP-tridésoxy MKMB) et de la 1-N-[(S)-5-amino-2-hydroxyvaléryl-5,3' ,4'-tridésoxy-6'-N-méthylkanamycine B (ci-après AHV-tridésoxy MKMB) de formule(IV) selon l'invention ainsi que du nouveau composé, la 5,3',4,-tridésoxy-6'-N-méthylkanamycine B (ci-après tridésoxy MKMB de formule (V) selon l'invention vis-à-vis de divers microorganismes ont été déterminées 35 selon une méthode de dilution en séries sur milieu agar nutritif à 37 C, l'estimation étant faite après 18 heures d'incubation. Dans un but de comparaison on a également 249 1 0 7 3 14 déterminé de la même manière les concentrations inhibitoires minimum de la 1-N(S)-4-amino-2-hydroxybutyryl -3',4'-di- désoxykanamycine B (l'hab6kacine). Les spectres antibactériens de ces composés sont 5 rassemblés dans la table 2 ci-après. TABLE 2 MIC. (mc m.l) .. ._ Organismes essayes AHB-triAHP-tri-déso- AHV-tri-dé- Hab6kacine Tridéso ._. désoxyM[NBxyMKM5 soxyMXM comparaison mm i~~~~~~~éo K iYM i i- i i- i ii Staphylococcus aureus 209 P ", ,i " Smith ,,8f " AP01 Staphylococcus épidermidis 109 Micrococcus flavus FDA 16 Sarcina lutea PC1 1001 Bacillus anthracis Bacillus subtilis PCI 219 Bacillus subtilis NRRL B-558 Bacillus cereus ATCC 10702 Mycobacterium smegmatis ATCC 6( Escherichia coli NIIIJ ~" " K-12 " '" K-12 R5 "f " K-12 R 388 "l " K-12 J5R 11-2 "i " K-12 ML 1629 f" " K-12 ML 1630 i" " K-12 ML 1410 "i i" K-12 ML 1410 R81 <0,20 <0,20 0,39 0,20 1,56 0,39 <0,20 0,20 0,20 0,39 < 0,20 0,78 0,78 3,13 0,39 1,56 0,78 1,56 1,56 1,56 0,39 <0,20 <0,20 < 0,20 3,13 0,78 <0,20 0,39 0,39 1,56 0,39 3,13 3,13 12,5 1,56 3,13 3,13 3,13 3,13 3,13 0,20 <0,20 0,39 < 0,20 3,13 1,56 <0,20 < 0,20 < 0,20 1,56 0,39 1,56 1,56 6,25 1,56 3,13 3,13 3,13 3,13 3,13 0,39 <0,20 0,78 0,78 1,56 1,56 <0,20 < 0,20 0,20 1,56 0,39 3,13 3,13 100 1,56 1,56 3,13 3,13 6,25 3,13 1,56 0,39 25 6,25 100 25 0,78 <0,20 o0,78 12,5 6,25 12,5 12,5 50 12,5 25 25 25 25 25 S& \A' N o wu -Pb , tw 1 O, Escherichia coli K-12 LA 290 R 55 ~" " K-12 LA 290 R 56 ~" " K-12 LA 290 R 64 " " W 677 ~" " JR66/W677 K-12 C 600R/35 "s " JR255 Klebsiella pneumoniae PCI 602 ~" " ~22.#3038 Shigella dysenteriae JS 11910 Shigella flexneri 4b JS 11811 Shigella sonnei JS 11746 Salmonella typhi T-63 Salmonella enteritidis.1891 Proteus vulgaris OX19 Proteus rettgeri GN 311 Proteus rettgeri GN 466 Serratia marcescens Serratia SOU Serratia 4 Providencia Pv 16 1,56 0,78 1,56 1,56 1,56 1,56 0,78 0,78 1,56 1,56 0,78 3,13 1,56 0,78 40,20 5o 6,25 6,25 25 6,25 6,25 6,25 3,13 3,13 3,13 6,25 1,56 3,13 3,13 3,13 6,25 3,13 *6,25 3,13 6,25 0,78 25 12,5 12,5 50 12,5 '50 3,13 1,56 1,56 1,56 3,13 1,56 1,56 1,56 3,13 6,25 1,56 6,25 3,13 3,13 0,78 100 6,25 12,5 50 12,5 25 6,25 3,13 3,13 3,13

6,25 1,56 3,13 1,56 3,13 12,5 6,25 6,25 1,56 3,13 0,78 50 12,5 50' >1o00 50 25 100 25 25 12,5 100 12,5 100 12,5 100 50 25 25 6,25 25 3,13 100 25 100 >100 50 > 100 Q.' N %0 .e> w 1 i i l i T Providencia 2991 Pseudomonas aeruginosa *. fi {, t. ti t, t, T, IT A3 N 12 H9 H il TI-13 GN 315 99 B-13 21-75 PST1 ROS134/PU21 Pseudomonas aeruginosa K-Ps102 Pseudomonas maltophilia GN907 50 3,13 3,13 6,25 12,5 3,13 6,25 6,25 25 25 25 > 100 3,13 100 -I i I 4 12,5 0,69 1,56 1,56 12,5 1,56 3,13 3,13 12,5 12,5 12,5 5O 1,56 > 100oo 50 0,78 3,13 3,13 12,5 3,13 3,13 12,5 25 25 25 50 3,13 > 100 't t, Et {I {I t, t, IT -J N -P. Cw _4 1 m 1 .4 '>100 3 13 25 25 25 12,5 25 50 100 .> 100 > 100 >100 25 > 100 25 0,39 3,13 3, 13 6,25 1,56 3 13 6,25 i:à,5 12,5 12,5 50 1,56 > loo .. ,{ 2 491073 18 Il ressort des tables 1 et 2 que les nouveaux com- posés de formule I selon l'invention, y compris les com- posés de formule II, III, IV et V inhibent effectivement la croissance d'un grand nombre de souches bact6riennes. 5 Ces nouveaux composés pr6sentent pour les animaux, y com- pris l'homme, une faible toxicité aigie. On a trouvé que les composés de formule Il et III selon l'invention, tels que la 1-N-[(S)-4-amino-2-hydroxybutyryl> 3-5,3',4 '-tridésoxy- kanamycine B, la 1-N-43-amino-2-hydroxypropionyl3-5,3',4'- 10 tridésoxykanamycine B, la 1-N-C(S)-4-amino-2-hydroxybuty- rylj-5,3' ,4' ,6"-tétrad6soxykanamycine B, et la 5,3',4' ,6"- tétra-désoxykanamycine B ont une valeur LD50 de 25 à 50 mg/kg quand leur toxicité aig e est estimée par injection intraveineuse chez les souris. On a 6galement trouvé que 15 les nouveaux compos6s de formule III et IV selon l'inven- tion, tels que la 1-N-U(S)-4-amino-2-hydroxybutyryl}-5,3', 4'-tridésoxy-6 ' -N-méthylkanamycine B, la 1-N-(3-amino-2- hydroxypropionyl ) -5,3',4 '-tridésoxy-6' -N-méthylkanamycine B, la 1-N-[(S )-5-amino-2-hydroxyvaléryl3-5, 3', ,4 '-tridésoxy6'-N-méthylkanamycine B et la 5,3',4'-tridésoxy-6'-N-mé- thyl-kanamycine B ont une valeur LD50 de 50 à 100 mg/kg quand leur toxicité aigae est estimée par injection intra- veineuse chez les souris. Les nouveaux composés selon l'invention sont habituel- 25 lement obtenus sous forme de leur base libre ou d'un hy- drate ou d'un carbonate. Chacun des nouveaux compos6s se- lon l'invention peut être facilement transformé en tl'un de ses sels d'addition acide pharmaceutiquement acceptable tel qu'un chlorure, bromure, sulfate, phosphate, nitrate, 30 acétate, méléate, citrate, ascorbate, m6thane-sulfonate et similaire par réaction avec l'acide minéral ou orga- nique pharmaceutiquement acceptable appropri6, en milieu aqueux. Les nouveaux compos6s de formule I, II, TT, IV ou V 35 selon l'invention ainsi que leurs sels d'addition acide pharmaceutiquement acceptables peuvent être administr6s par voie orale, intrap6riton6ale, intraveineuse, sous-cutan6e 2491073 19 ou intramusculaire en utilisant toute forme pharmaceutique- connue pour le type d'administration, et de façon similaire aux kanamycines connues. Comme exemples de formes pharmaceutiques pour administration orale, on peut citer les 5 poudres, les capsules, les tablettes, les sirops et autres. La dose convenable de ces nouveaux composes pour traite- ment efficace des infections bactériennes se situe entre 0,1 à 1 g/personne/jour quand il s'agit d'administration orale. On préf&re administrer cette dose par voie orale 10 en trois A quatre fois par jour. Les nouveaux composés selon l'invention peuvent également être administrés par injection intramusculaire à une dose de 50 à 500 mg/per- sonne en deux à quatre fois par jour. De plus, ces nouveaux composés peuvent être formulés pour application 15 externe sous forme de pommade à une concentration de 0,5 à 5 % en poids en mélange avec un excipient connu tel que le polyéthylèneglycol. Les nouveaux composés selon l'in- vention sont de plus utiles pour la stérilisation des instruments chirurgicaux, et du matériel sanitaire. 20 L'invention a donc également pour objet une composi- tion antibactérienne qui comporte, comme ingrédient actif, une 1-N-cG-hydroxy-ul-aminoalcanoylJ-5,3',4'-tridésoxyka- na-ycine B, une 1-N-6a-hydroxy-A-aminoalcanoyl -5,3,4t,6t"- tétradésoxykanamycine B, telles que définies par la formule 25 II, ou un de leurs sels d'addition acide pharmaceutiquement acceptables, ou la 5,3',4',6"-tétradésoxy-kanamycine B telle que définie par la formule III, ou un de ses sels d'addition acide pharmaceutiquement acceptables, dans une quantité bactériellement efficace pour inhiber la crois- 30 sance des bactéries, en combinaison avec un support de l'ingrédient actif, ainsi qu'une composition antibacté- rienne contenant, comme ingrédient actif, une 1-N-[O-hydro- xy-w-aminoalcanoyl3-5,3',4'-tridésoxy-6'-N-méthylkanamycine B telle que définie à la formule IV, ou l'un de ses 35 sels d'addition acide pharmaceutiquement acceptables, ou la 5,3',4'-tridésoxy-6'-N-méthylkanamycine B telle que définie par la formule V, ou l'un de ses sels d'addition acide pharmaceutiquement acceptables, en quantité anti-

2491073 20 bactériellement efficace pour inhiber la croissance des bactéries, en combinaison avec un support pour l'ingre-. dient actif. La production du nouveau composé de formule II se- 5 lion l'invention va maintenant être décrite. Le composé de formule II, tel que la 1-NL(S)-4-amino- 2-hydroxybutyryl3-5,3' ,4' -tridésoxy-kanamycine B et la 1-N-C(S)-4-amino-2-hydroxybutyrylj3- 5,3',4',6"-tétradéso- xykanamycine B, peut être synthétisé en utilisant, comme O10 composé de départ, soit la substance connue, la 5,3',4'- tridésoxykanamycine B (Japanese Journal of Antibiotics, 32, S-178 (1979)) soit le-nouveau composé, la 5,3',4',6"tétradésoxykanamycine B, obtenu selon l'invention et en condensant le groupe 1-amino du composé de départ avec 15 un acide a-hydroxy-w-amino-alcanoique correspondant à l'un de ses 6quivalents fonctionnels. L'invention a donc également pour objet un procédé de production d'une 1-N{a-hydroxy-w-aminoalcanoyl]-5,3 ', 4'-tridésoxykanamycine B ou d'une 1-N Ga-hydroxy-&U-aminoalcanoylj-5,3',4',6"-tétradésoxykanamycine B de formule : R 3o0 H2N I~~~~ OH NO 2 t ~~~0~ v o o (INI) 30 I Co CHOII- ( CH2 ) nNH2 ,_ 2491073 21 dans laquelle R est un groupe hydroxyl ou un atome d'hy- drogène et n = 1, 2 ou 3, qui consiste : a) à acyler le groupe 1-amino de la 5,3',4'-tri-désoxykanamycine B ou de la 5,3',4',6"-tétradésoxykanamy- 5 cine B de formule : 10 (vi) O O 0 N2 15 dans laquelle R a la définition ci-avant ou un dérivé partiellement aminoprotégé de la 5,3',4'-tridésoxykana- mycine B ou de la 5,3',4',6"-tétradésoxykanamycine B de 20 formule : A .0O 25HO. A N B "I/ OH 0 30O B A N B N A N ''B (VI') dans laquelle R est un groupe hydroxy ou un atome d'hy- drogène, A est un atome d'hydrogène et au moins l'un des B est un groupe amino-protecteur monovalent et le ou 35 les autres B est ou sont chacun un atome d'hydrogène ou au moins une paire de A et B pris ensemble forment un groupe aminoprotecteur divalent, mais les autres A et B sont chacun un atome d'hydrogène et les groupes amino- 1 2491073 22 protecteurs repr6sent6s par A et B peuvent être semblables ou diff6rents, par r6action avec un acide a-hydroxy- - amino-alcanolque ou l'un de ses d6riv6s amino-protégé de formule A' , ~N(CH2)nCC HOO OH VII dans laquelle A' est un atome dthydrogène et B' est un 10 atome d'hydrogène ou un groupe aminoprotecteur monovalent, ou A' et B' pris ensemble forment un groupe aminoprotecteur divalent n = 1, 2 ou 3, ou un équivalent fonctionnel du composé VII pour produire le produit 1-N-acylé de formule : 15 6" H2N HO 20 CO CHOH (CH2 ) NI' B' (II,') ou de formule : 35 5 25 3o 2491073 23 R A AN~ 5 HO 0 B A A B NOH NB O A 10 - B ~ ~ CO CHOH (CH ) N/A 2 n 3 15 (II") dans lesquelles R, A, B, A', B' et n ont les significations données ci-avant, et b) à éliminer le ou les groupes amino-protecteurs res- tant, là o ils existent> du produit 1-N-acylé deformule 20 II' ou II", de manière connue pour obtenir le composé de formule II. Le procédé selon l'invention peut comprendre une étape supplémentaire de transformation du composé II en l'un de ses sels d'addition acide pharmaceutiquement acceptable 25 par réaction avec un acide minéral ou organique pharmaceu- tiquement acceptable. La marche du procédé selon l'invention va maintenant être décrite de façon plus détaillée. Il est possible d'utiliser, comme produit de départ, 30 la 5,3',4'-tridésoxykanamycine B ou la 5,3',4',6"-tétradé- soxy-kanamycine B (VI) dont les groupes amino ne sont pas protégés, sous forme de base libre ou de sel d'addition acide avec un acide convenable tel que l'acide chlorhy- drique ou l'acide sulfurique. Il est pourtant préf6rable 35 de partir d'un dériv6 amino-protégé de la 5,3',4'-tridé- soxykanamycine B ou de la 5,3',4',6"-tétrad6soxykanamycióe B 2491073 24 selon la formule VI' dans laquelle tout ou partie des grou- pes amino autres que le groupe 1-amino ont ét6 protégés par des groupes amino-protecteurs connus et qui peuvent être préparés par introduction d'un groupe aminoprotecteur connu 5 dans le composé de formule (VI) au moyen d'une technique connue précédemment adoptée dans la synthèse de certains dérivés connus de kanamycine B. Dans la préparation de la 5,3',4'-tridésoxykanamycine B ou de la 5,3',4',6"-tétradé- soxykanamycine B partiellement amino-protégeede formule VI' 10 on peut utiliser les techniques d'amino-protection utilisées par exemple dans la préparation du d6rivé 6'-N-benzyloxycarbonyl de kanamycine B, comme décrit dans les brevets US 3 781 268 ou 3 929 762, ou dans la préparation de la 2',6'di-N-tert-butoxycarbonyl-kanamycine B ou de la 6'-N-benzyloxycarbonyl-kanamycine B, ou du dérivé mono-N- ou di-Ntert-butoxycarbonyl et même tri-N-tert-butoxycarbonyl de 6'-N-benzyloxycarbonyl-kanamycine B, soit isolés, soit en mélange, comme décrit dans le brevet anglais 1 426 908 ou le brevet US 3 939 143, ou dans la préparation du dérivé 20 2',3,3",6'-tétra-N-formyl de kanamycine B, comme décrit dans le brevet belge 817 546. Comme exemples de groupes amino-protecteurs suscep-

tibles d'être utilisés pour la protection de certains grou- pes amino dans le dérivé de formule VII partiellement pro- 25 tégé,-on peut citer les groupes amino-protecteurs classiques comprenant les groupes alcoxycarbonyl tels que les groupes tert-butoxy-carbonyl et tert-amyloxycarbonyl, les groupes cycloalkyloxycarbonyl tels que le groupe cyclohexyloxycarbonyl, les groupes aralkyloxycarbonyl tels que le groupe benzyloxy- 30 carbonyl, les groupes acyl tels que les groupes trifluora- cétyl et le o-nitroph&noxyacétyl, les groupes phosphino- thioyl tels que les groupes diphénylphosphinothioyl et le diméthylphosphinothioyl, les groupes phosphinyl tels que le groupe diphénylphosphinyl, et similaires. Les exemples 35 préférés de groupes amino-protecteurs divalents comprennent le groupe phtaloyl et les groupes du type base de Schiff tels que le groupe salicylidène. L'introduction de ces 2491073 25 types de groupes amino-protecteurs peut être mené A bien en faisant réagir le composé de formule VI avec un réactif connu d'introduction de groupe amino-protecteur qui peut être sous forme d'un halogénure d'acide, d'un azide d'acide, 5 d'un ester actif ou d'un anhydride d'acide et similaires, de façon connue dans la synthèse des peptides. Si l'on utilise 0,5 à 6 moles de réactif introducteur du groupe amino-protecteur par mole de composé de formule VI, il est possible de préparer des mélanges de différents dérivés IV' 10 partiellement amino-protégés en raison de la différence de réactivité des groupes amino du composé VI. Dans le procédé selon le troisième aspect de l'inven- tion, il est pratique d'employer, comme matériau de départ, un dérivé de 5,3',4'-tridésoxykanamycine B ou de 5,3',4',6"tétradésoxykanamycine B, dans lequel tout ou partie des groupes amino autres que le groupe 1-amino ont été bloqués, par exemple un dérivé 3,2',6',3"-tétra-N-protégé, un déri- vé 3,2',6'-tri-N-protégé, un dérivé 2',6',3"-tri-N-protégé, un dérivé 2',6'-di-N-protégé et un dérivé 6'-mono-N-proté- 20 gé et similaires. On peut également utiliser un mélange de deux ou plusieurs de ces dérivés partiellement N-protégés sans purification préalable, pour l'étape d'acylation en 1-N. Pour s'assurer de pouvoir produire avec un rendement 25 élevé les produits de formule II par le procédé de l'in- vention, il est simplement nécessaire d'acyler sélective- ment le groupe 1-amino du composé de formule VI, c'est-à- dire la 5,3',4'-tridésoxykanamycine B ou la 5,3',4',6"-tétra- désoxykanamycine B avec l'acide c-hydroxy-&.-aminoalcanolque 30 (VII) Il est bien évident donc que l'on utilisera de pre- férence comme composé de départ, un dérivé 3,2',6',3"-té- tra-N-protégé du composé VI, c'est-à-dire le dérivé aminoprotégé du composé VI' dans lequel tous les groupes amino autres que le groupe 1-amino ont été bloqués. 35 On peut utiliser, pour préparer le dérivé 3,2',6',3"- tétra-N-protégé de formule Vl A partir du composé de for- mule VI/la marche suivante. On peut appliquer la méthode décrite dans le brevet US 4 136 254 de Nagabhushan et al, 2491073 26 dans laquelle on prépare un dérivé 3,2',6'-tri-N-acylé prot6gé de kanamycine B, en faisant r6agir la kanamycine B avec un cation de m6tal divalent tel que le cuivre (II), le nickel (II), le cobalt (II), etc... pour former un 5 complexe m6tallique de kanamycine B, en faisant réagir ce complexe m6tallique avec un agent d'acylation connu comme r6actif introducteur de groupes amino-protecteurs pour protéger tous les groupes amino autres que les groupes amino en 1 et en 3" du radical kanamycine B du complexe 10 métallique (les dits groupes amino en 1 et 3" ayant été bloqués par formation de complexe avec le cation de métal divalent), puis en éliminant ledit cation du complexe, par exemple par traitement avec de l'hydrogène sulfuré ou avec une solution aqueuse d'ammoniaque. On peut 6gale- 15 ment employer la méthode d6crite dans la demande de brevet japonais n 138402/78 de la demanderesse (demande améri- caine n 090 591, demande anglaise n 2 036 020 A, brevet belge n' 879 925) selon laquelle on prépare un d6rivé 3,2',6'-tri-N-acylé protégé de kanamycine B comme dans la 20 m6thode ci-dessus de Nagabhushan et al mais en utilisant le cation zinc à la place du cation de métal de transition divalent. On peut ainsi préparer un d6rivé 3,2',6'-tri-N- prot6gé de formule VI' à partir du composé de formule VI , avec un rendement élevé. Le groupe amino en 3" de ce dériv6 25 3,2',6t'-tri-N-proté6gé (VI') ainsi pr6paré peut de plus être prot6gé par acylation sélective selon la méthode de la de- mande de brevet japonais n 73064/79 de la demanderesse (cf revendicationl5 du brevet belge n 879.923) pour ob- tenir un d6rivé amino-protégé d'un antibiotique aminogly- 30 cosidique dans lequel tous les groupes amino- à l'excep- tion du groupe 1-amino- ont 6té prot6gés sélectivement, ce qui permet de pr6parer avec un rendement él61ev6 un d6riv6 3,2',6',3"-t6tra-N-prot6g6 du compos6 VI. Selon la m6thode de 3"-N-acylation sélective de la demande de brevet japonais

35 n 73064/79 de la demanderesse (d6crite dans la revendica- tion 15 du brevet belge n 879 923) on fait r6agir le d6- rivé6 3,2',6'-tri-N-prot6g6 ci-dessus mentionn6 du compos6 2491C73 27 VI avec un alkyl-ester de l'acide formique, un alkyl-ester d'un acide di-halo- ou tri-halo-alcanolque, le formylimi- dazole ou un N-alcanoyl-imidazole en tant qu'agent d'acyla- tion ; le groupe 3"-amino peut ainsi être acylé sélective- 5 ment avec un rendement élevé avec le résidu acyl de l'agent d'acylation sans que se produise l'acylation du groupe 1- amino dudit dérivé 3,2',6'-tri-N-protégé. Le dérivé 3,2',6', 3"-tétra-N-acylé, par exemple le dérivé 3,2',6'-tri-N-benzy- loxycarbonyl-3"-N-trifluoracétyl de 5,3',4'-tridésoxykana- 10 mycine B ou de 5,3',4',6"-tétradésoxykanamycine B qui peut être obtenu en appliquant les méthodes du brevet US 4 136 254 et du brevet belge n 879 923, constitue un produit de départ préféré pour être 1-N-acylé sélectivement avec l'aci- de a-hydroxy-W -aminoalcanoique VII dans l'étape de 1-N-acy- 15 lation du présent procédé. Dans le procédé selon la présente invention, le groupe 1-amino du composé de formule VI ou le groupe 1-amino de ses dérivés partiellement amino-protégés VI', seuls ou en mélange de deux ou plusieurs d'entre eux, est acylé avec 20 l'acide a-hydroxy-w-aminoalcanoique de formule : A' B " (CH2) n HCOH (VII) dans laquelle A' et B' ont les définitions données ci-avant 25 et n est un nombre entier de 1, 2 ou 3, et dont les grou- pes amino ne sont pas protégés. Cet acide 0-hydroxy-" -ami- no-alcanoique peut être l'acide 3-amino-2-hydroxy-propio- nique (le composé de formule VII dans laquelle n = 1 et A' et B' sont des atomes d'hydrogène) l'acide 4-amino-2-hy- 30 droxybutyrique (le composé de formule VII dans laquelle n = 2 et A' et B' sont des atomes d'hydrogène) de l'acide 5-amino-2-hydroxyvalérique (le composé de formule VII dans laquelle n = 3 et A' et B' sont des atomes d'hydrogène). Parmi les acides on préfère l'isomère (S). 35 Dans le procédé selon l'invention, la 1-N-acylation avec la l-N-acylation avec l'acide a-hydroxy-u"-amino-alcano1que (VII) peut être effectuée selon l'une des méthodes classi- 24910 73 28 ques pour la synthèse des peptides, par exemple selon la m6éthode à la dicyclohexylcarbodiimide, la méthode à l'an- hydride d'acide mixte, la m6thode à l'azide et la méthode à l'ester actif ou similaires en utilisant l'acide a-hy- 5 droxy-w-aminoalcanolque tel que ou sous forme d'un dérivé r6actif (en tant qu'équivalent fonctionnel). On peut uti- liser, comme groupe amino-protecteur du groupe amino de l'acide a-hydroxy-uJ-aminoalcanoLque , un groupe amino- protecteur semblable à ou différent de celui présent dans 10 le composé de départ (VI'). Le groupe préféré dans ce but est le groupe tert-butoxycarbonyl qui est facilement éli- minable par traitement avec une solution aqueuse d'acide trifluoracétique ou d'acide acétique ou d'acide chlorhy- drique dilué. Le groupe benzyloxycarbonyl qui est élimi- 15 nable par hydrogénolyse classique en présence d'un cata- lyseur tel que le palladium ou le platine est un groupe N-protecteur adapté. La 1-N-acylation peut être de préférence effectuée dans un solvant organique aqueux selon la méthode à l'es- 20 ter actif en utilisant un acide a-hydroxy-UJ-amino-alca- noique sous la forme de son ester actif. On peut par exemple utiliser le N-hydroxysuccinimide ester de l'acide L-4-benzyloxy-carbonylamino-2-hydroxy-butyrique qui peut être préparé de façon classique. Cet ester actif peut 25 être utilisé dans une proportion de 0,5 à 3 équivalents molaires et de préférence de 1 à 1,5 équivalent molaire par mole du composé VI ou VI' à acyler. Le solvant orga- nique aqueux utilisé,dans le milieu réactionnel peut être un solvant organique miscible à l'eau tel que le dioxanne, 30 le 1,2-diméthoxyéthane, le diméthylformamide, le tétra- hydrofuranne et similaires. La 1-N-acylation peut être effectuée à température ambiante ou, si désiré, entre 20 et 90 C,pendant plusieurs heures et de préférence pendant 5-6 heures. 35 Dans le présent procédé, quand l'acylation est effec- tuée en utilisant, comme matériau de départ un dérivé partiellement amino-protégé dans lequel certains seulement 2491073 29 des groupes amino autres que le groupe 1-amino devront être protégés, par exemple le dérivé 6'-N-protégé du composé VI, les produits d'acylation formés peuvent être partiellement purifiés en chromatographie sur colonne par exemple sur gel 5 de silice, afin d'éliminer le matériau de départ n'ayant pas réagi, ce qui donne un mélange du produit 1-N-mono- acylé recherché avec les produits autrement N-acylés, conmme dans le cas de la synthèse de l'habékacine, c'est-à-dire la 1-N- (S)-4-amino-2-hydroxybutyryl -3',4't-didésoxykanamy- 10 cine B comme décrit dans le brevet US N 4 107 424. Ces pro- duits d'acylation mélangés peuvent, sans être purifiés et/ou isolés, être immédiatement soumis à l'étape suivante de dé- protection du présent procédé, suivie de purification et

d'isolation, ce qui permet d'obtenir le produit 1-N-mono-acy- 15 lé recherché. Dans la seconde étape du procédé selon l'invention, le produit de la 1-N-acylation (y compris les produits miktes) obtenu lors de l'étape de 1-N-acylation du procédé est sou- mis & l'élimination des groupes amino-protecteurs s'il en 20 reste encore. Cette élimination est effectuée par une tech- nique connue de déprotection. C'est ainsi que les groupes amino-protecteurs du type alcoxycarbonyl sont éliminés par hydrolyse acide faible avec une solution aqueuse d'acide trifluoracétique ou acétique ou similaires, ou avec une 25 solution aqueuse diluée d'un acide minéral tel que l'acide chlorhydrique. Les groupes aralkyloxycarbonyl tel que le groupe benzyloxycarbonyl peuvent être éliminés par réduc- tion catalytique classique (hydrogénolyse). Quand le grou- pe phtaloyl est présent en tant que groupe amino-protecteur, 30 il peut être éliminé par chauffage dans une solution d'hy- drate d'hydrazine dans un alcanol inférieur. Le produit d'acylation déprotégé obtenu à partir de la deuxième étape du procédé selon l'invention peut conte- nir le produit de 1-N-acylation désiré de formule II en 35 même temps que quelques uns de ses isomères. Le dérivé 1-N-(a-hydroxy-'-amino-alcanoyl) II peut être isolé et purifié par chromatographie en utilisant une résine échan- 24910733 30 geuse de cations contenant des fonctions carboxyliques telle que l'Amberlite CG 50 (Rohm & Haas U.S.A.) ou le CM-Séphadex C-25 (Pharmacia C , Suède) et en éprouvant l'activité antibactérienne des fractions de l'éluat au 5 moyen d'une souche sensible A la kanamycine et d'une couche résistante à la kanamycine appropriées. La 5,3' ,4' , 6"-tétradésoxykanamycine B qui est uti- lisée comme composé de départ dans le procédé de produc- tion de la 1-N-(a-hydroxy-w-amino-alcanoyl)-5,3' ,4' ,6"- 10 tétradésoxykanamycine B dans le procéd6 selon l'invention peut être pr6parée en partant de la 3',4',6"-tridésoxykana- mycine B déjà synthétisée par l'inventeur (ce composé est appelé 6"-désoxydibékacine dans la demande de brevet japonais n 119323/79 et dans la demande de brevet anglais 15 n 2 058 774 A), ou d'un de ses dérivés N,O-protégés de formule : CH A 20 (VIII') A~ OD , NA B A A N-, B 25 B dans laquelle A est un atome d'hydrogène et B est un groupe amino-protecteur monovalent et A et B pris ensemble, for- 30 ment un groupe protecteur divalent et D est un groupe acyl hydroxy-protecteur. L'invention a également pour objet, selon un quatrinème aspect,un procéd6 de production de la 5,3',4',6"-tétradéso- xykanamycine B décrite ci-avant de formule : 35 2491073 31 HO 5 H2N OH H2N (III) O oNH2 H2N qui comporte les 6tapes suivantes : a) protection du groupe 4"-hydroxy d'un dérivé penta-N- protégé et 2"-O-prot6gé de la 3',4',6"-tridésoxykanamy- 15 cine B de formule : A B NA ` B -BA N__B (VIII) dans laquelle A est un atome d'hydrogène et B est un groupe amino-protecteur monovalent, ou A et B, pris ensemble, for- ment un groupe amino-protecteur divalent et D est un groupe 30 acyl hydroxy-protecteur, avec un groupe acyl hydroxy-protecteur monovalentdu même type que le groupe hydroxy-pro- tecteur D présent en position 2" dans le composé VIII afin d'obtenir le composé 4"-O-protégé de formule : 35 10 HO B 25 2491073 32 DO 5A B 10 A 0 B - N OD OH N , A NB 1 B A (VIII') dans laquelle A, B et D ont les significations données 15 ci-avant. b) réaction du composé de formule VIII' avec du chlorure de sulfuryl pour remplacer le groupe 5-hydroxy par un atome de chlore pour obtenir le dérivé 5-chloro correspondant. c) réduction du dérivé 5-chloro pour enlever le groupe 5- 20 chloro et obtenir un dérivé protégé de la 5,3',4',6"-tétra- désoxykanamycine B de formule : - A B__ 25 DO (Ix) A ~ BN B A _N N A B B dans laquelle A et B ont les définitions ci-avant, et d) éliminer du composé IX les groupes hydroxy-protecteurs 35 restantsainsi que les groupes amino-protecteurs restantOde façonr connue pour obtenir le produit de formule III. Dans le procédé selon le quatrième aspect de l'inven- 30 2491073 33 tion, les groupes aminoprotecteurs présents dans la 3',4',6"- tridésoxykanamycine B penta-N-protégée et 2"-O-protégée de formule VIII employ éscomme matériau de départ, peuvent être du même type que ceux présents dans le composé de départ de 5 formule VI' qui est employé dans le procédé selon le troisième aspect de l'invention décrit précédemment. La pré- paration du composé de départ de formule VIII est décrite ci-après. Dans la première étape de ce procédé, le groupe 4"-hy- 10 droxy du composé de départ VIII est protégé avec un groupe hydroxy protecteur monovalent du type acyl qui peut être un groupe alcanoyl inférieur tel que le groupe acétyl ou un groupe aroyl tel que le groupe benzoyl. On introduit facilement un tel groupe acyl hydroxy protecteur dans le 15 groupe 4"-hydroxy du composé de départ VIII en faisant réagir ce composé VIII avec un réactif d'acylation appro- prié sous forme d'anhydride ou d'halogénure d'acide ou

d'ester actif, de façon connue, par exemple dans un sol- vant organique tel que la pyridine entre 10 et 50 C et de 20 préférence à température ambiante. Les réactifs d'acylation préférés dans ce but sont le chlorure d'acétyl et le chlo- rure de benzoyl. Dans cette réaction d'acylation, le grou- pe 5-hydroxy du composé de départ VIII est difficilement acylé en raison de la réactivité inférieure du groupe 5- 25 hydroxyl. On obtient de cette façon les dérivés 1,3,2',6',3"- penta-N-protégés et 2",4"-di-O-protégésde la 3',4',6"-tri- désoxy kanamycine B de formule VIII. Dans la deuxième étape de ce procédé on soumet le dé- 30 rivé protégé VIII' ainsi obtenu à une désoxygénation sur le groupe hydroxy en 5, de façon connue, comme décrit dans le Bulletin of the Chemical Sty,of Japan, vol 51, page 2354 (1978). On fait ainsi réagir le dérivé protégé VIII' selon une proportion molaire de 1 à 5 avec du chlorure de 35 sulfuryl dans un solvant organique tel que la pyridine sèche A une température inférieure à la température am- biante pendant 2 à 20 heures, sous agitation, obtenant 2491073 34 ainsi le dérivé 5-chloro. Dans la troisième étape du procédé, on réduit le dérivé 5-chloro pour effectuer la déshalogénation. Cette élimination du groupe 5-chloro peut être effectuée par 5 réaction avec un hydrure métallique tel que l'hydrure de tri-butyl-étain comme décrit dans le document mentionné ci-avant ou par hydrogénation catalytique classique en présence de nickel de Raney. On obtient ainsi le dérivé N-O-protégé de la 5,3',4',6"-tétradésoxykanamycine B de 10 formule IX. Dans la quatrième étape du procédé, on soumet le dérivé N,O-protégé de la 5,3',4',6"-tétradésoxykanamycine B à la déprotection. Les groupes acyl hydroxy-protecteurs monovalents (D) présents dans le composé désoxygéné en 5 15 (IX) peuvent être facilement éliminés par hydrolyse alca- line à température ambiante par exemple par dissolution du composé (IX) dansl'ammoniaque-méthanol (mélange d'une solution aqueuse d'ammoniaque dans du méthanol. Le groupe amino-protecteur présent dans le composé de départ (VIII) 20 est du type aralkyloxycarbonyl et ce type peut être éli- miné simultanément à l'hydrogénation catalytique à laquelle est soumis le dérivé 5-chloro dans la troisième étape du procédé. Les autres groupes amino-protecteurs peuvent être facilement éliminés de façon connue, par exemple par hy- 25 drolyse avec un acide faible. Quand le groupe amino-protec- teur est un groupe alcoxycarbonyl inférieur tel qu'un groupe éthoxy carbonyl, il peut être éliminé par hydrolyse alcaline avec de l'hydroxyde de baryum. Dans le procédé selon le quatrième aspect de l'inven- 30 tion, il est possible d'entreprendre un procédé modifié dans lequel on utilise comme matériau de départ, la 3',41, 6"-tridésoxykanamycine B,on protège ses cinq groupes amino et simultanément ses deux groupes hydroxy en 2" et 4" avec les mêmes groupes hydroxy protecteurs monovalents (D) pour 35 préparer le dérivé N,O protégé de formule VIII'. La préparation du dérivé penta-N-protégé, 2"-0-protégé de 3',4',6"-didésoxy-kanamycine B de formule VIII em- 2491073 35 ployé comme composé de départ dans le procédé selon le qua- trième aspect de l'invention peut être faite comme décrit dans la demande de brevet britannique 2 058 774. C'est ain- si que l'on utilise, comme matériau de départ, un dérivé 5 penta-N-protégé de la 3',4'-didésoxykanamycine B de for- mule : 6" HO A 2' 4 O B N (3' A- A 3,1Bo AA 15 B N 1 3 B (1) dans laquelle A et B ont les définitions indiquées ci- 20 avant pour la formule VIII, les deux groupes hydroxy 4" et 6" étant protégés simultanément par un groupe hy- droxy protecteur divalent tel que le groupe isopropylidène, le groupe hydroxy en 2" étant protégé par un groupe acyl hydroxy-protecteur monovalent tel que les groupes benzoyl 25 et acétyl pour obtenir un dérivé 2",4",6'"-tri-0-protégé de formule : 6" A X 0 X 0 /20A 30 1' O 2" o m A-. \ \A D ~OH N B A A N (2) -' -J 2491073 36 dans laquelle A et B ont les définitions données ci-avant, le groupe x 5 X y est un groupe hydroxy-protecteur divalent dans lequel X et Y sont un atome d'hydrogène, un groupe alkyl de 1 à 4 atomes de carbone, un groupe aryl tel que le groupe phényl ou un groupe alcoxy de 1 à 4 atomes de carbone, ou 10 le groupe x c Y est un groupe cyclohexylidéne ou tétra-hydropyranylidène, 15 et D est un groupe acyl hydroxy protecteur monovalent. Le dérivé 2",4",6"t'-tri-0-prot6gé de formule (2) ainsi obtenu est traité avec une solution aqueuse d'acide acétique pour enlever le groupe (Y)C =) de protection des groupes hydroxy en 4" et 6", on fait réagir le produit ainsi par- 20 tiellement déprotégé avec un réactif de sulfonylation tel que le chlorure de p-toluènesulfonyl dans de la pyridine pour sulfonyler de façon préférentielle le groupe 6"-hy- droxy et obtenir un dérivé 6"-O-sulfonylé de formule 25 GSO3 A HO B A 0 30 B DOR A 0 N X \4 N- o (3) A - B ~~~~~B 35 dans laquelle A, B et D ont les d6finitions ci-avant et G est un groupe alkyl inférieur, spécialement un groupe alkyl

de 1 à 4 atomes de carbone, un groupe aryl tel que les 2491073 37 groupes phényl ou p-méthylphényl ou un groupe aralkyl tel que le groupe benzyl. Le dérivé 6"-0-sulfonylé obtenu est alors traité avec un iodure ou un bromure de métal alcalin pour remplacer le groupe 6"-sulfonyloxy (GS03 ) par le 5 groupe iodo ou bromo et obtenir ainsi un dérivé 6"-iodo ou 6"-bromo (correspondant a un composé de formule (3) dans lequel le groupe GSO 3 a été remplacé par un atome d'iode ou de brome), qui est ensuite réduit avec de l'hydrogène en présence d'un catalyseur d'hydrogénation connu tel que 10 le palladium pour effectuer la déshalogénation, ce qui donne le dérivé penta-N-protégé et 2"-0-protégé de la 3',4',6"-tridésoxykanamycine B de formule VIII désiré. La production des nouveaux composés de formule IV selon l'invention va maintenant être décrite. 15 Ces nouveaux composés tels que la 1-N- [S)-4-amino-2- hydroxybutyryl3 -5,3',4'-tridésoxy-6'-N-méthylkanamycine B, la 1-N-(3-amino-2-hydroxypropionyl)-5,3',4'-tridésoxy-6'-N- méthylkanamycine B et la 1-N- [S)-5-amino-2-hydroxyvaléryu 5,3',4'-tridésoxy-6'-N-méthyl-kanamycine B peuvent être 20 synthétisés en partant du nouveau composé la 5,3',4'-tridé- soxy-6'-méthylkanamycine B selon l'invention et en conden- sant le groupe 1-amino de ce composé avec un acide a-hydroxy- U-aminoalcanoIque correspondant ou l'un de ses équivalents fonctionnels. 25 Selon son cinquième aspect, l'invention concerne donc également un procédé de production d'une 1-N- a-hydroxy-Waminoalcanoyl -5,3',4't-tridésoxy-6'-N-méthylkanamycine B de formule : 30 35 2491073 38 HO .O HO OH HN I CO CHOH (CH2)nNH2 NH2 W, (Iv) dans laquelle n = 1, 2 ou 3, qui comporte les 6tapes sui- vantes : a) acylation du groupe 1-amino de la 5,3',4'-tridésoxy-6'- 20 N-méthylkanamycine B de formule : HO HO O H2N 2~~~~~~~~~~ 0~~~~~~~ 25 H2N.t 2 OH _- nNHCH3 (V) 30 ou d'un d6riv6 partiellement amino-prot6gé de la 5,3',4'tridésoxy-6'-méthylkanamycine B de formule : 35 5 10 15 24 9 1073 39 HO A HO O B Ao B OH CH -C 3 `B A 10 H N B (V') 1 dans laquelle A est un atome d'hydrog&ne et au moins un B est un groupe amino-protecteur monovalent mais le ou les autres B est ou sont chacun un atome d'hydrogène ou 15 au moins une paire de A et B, pris ensemble, forment un groupe amino-protecteur divalent, les autres A et B étant chacun un atome d'hydrog&ne, et les groupes amino- protecteurs représentés par A et B sont semblables ou différents, par réaction avec un acide a-hydroxy-u-aminoalcanolque ou l'un de ses dérivés amino-protégé représenté par la formule : A' > ( 2)nl ~~~~~~(VII) AI ~' N(CH ) CHCOOH (VII> 2 ni B' OH OH 25 dans laquelle A' est un atome d'hydrogène et B' est un atome d'hydrogène ou un groupe amino-protecteur monovalent ou A' et B', pris ensemble, forment un groupe amino-pro- tecteur divalent, n = 1, 2 ou 3, ou avec un équivalent fonc- tionnel du composé VII pour obtenir le produit 1-N-acylé de 30 formule : 35 2491073 40 6" RkN. CH3 - " B J CO CHOH ICH.) N- A 2 : n BI (IV',)y ou de formule : I CO CHOH tCH2)N A' . %_`Bt dans lesquelles A, B, A', B' et n ont les définitions données ci-avant, et 35 b) à éliminer le ou les groupes amino-protecteurs là ou ils existent, du produit i-N-acylé de formule IV' ou IV", de façon connue en soi pour obtenir le composé de formule IV. HO HO. 5 H2N 10 15 20 AoN B 25 CH 3 NB j "A N B 30 (IV") O' 2491073 41 Le procédé selon le cinquième aspect de l'invention peut comprendre une étape supplémentaire de transformation du composé ainsi produit en un sel d'addition acide pharma- ceutiquement acceptable par réaction avec un acide, minéral 5 ou organique, pharmaceutiquement acceptable, de façon con- nue en soi. Le procédé selon le cinquième aspect de l'invention peut être mené à bien comme décrit pour le procédé selon le troisième aspect de l'invention. 10 Dans le procédé selon le cinquième aspect de l'inven- tion, on peut employer, comme matériau de départ, la 5,3',4'- tridésoxy-6'-N-méthylkanamycine B de formule V dont les groupes amino ne sont pas du tout protégés, sous forme de base libre ou de sel d'addition acide, avec un acide conve- 15 nable, tel que l'acide chlorhydrique. On préfère pourtant employer, comme matériau de départ, un dérivé partiellement protégé de 5,3',4'-tridésoxy-6'-N- méthylkanamycine B de formule V' dans lequel tout ou partie des trois groupes amino autres que le groupe 1-amino ont 20 été protégés avec des groupes amino-protecteurs connus et qui peut être préparé par introduction d'un groupe amino- protecteur connu dans le composé V comme décrit précédemment dans le procédé selon le troisième aspect de l'inven- tion. 25 Dans le procédé selon le cinquième aspect de l'in- vention, l'étape de l-N-acylation des composés de départ V'ou V' et l'étape de déprotection du produit 1-N-acylé IV' et IV" aussi bien que l'étape de purification du produit de 1-N-acylation déprotégé sont effectuées comme décrit ciavant dans les étapes correspondantes du procédé selon le troisime aspect de l'invention.

Le nouveau composé de formule V, la 5,3',4'-tridésoxy6'-N-méthylkanamycine B qui peut être employé comme matériau de départ dans le procédé selon le cinquième objet de l'in- 35 vention peut être préparé en partant d'un composé connu, la 5,3',4'-tridésoxykanamycine B (Japanese Jal of Antibiotics, vol 32, page 178 (1979)). et en effectuant la N-méthylation 2491073 42 sur le groupe 6'-amino dudit composé de départcomme décrit dans la demande de brevet japonais n 8367/72, le brevet US 3 925 353, ou le "Jal of Antibiotics", 25, 743 (1972). L'invention a également pour objet, selon son sixième 5 aspect, un procédé de production de la 5,3',4'-tridésoxy- 6'-N-méthylkanamycine B de formule : HO HO O H N 2 10 H2N OH O NHCH3 O \\ H2N NH2 (V) 15 qui comporte les étapes suivantes : a) introduction d'un groupe alkyloxycarbonyl, d'un groupe cycloalkyloxycarbonyl ou d'un groupe aralkyloxycarbonyl 20 sur le groupe 6'-amino de la 5,3',4'-tridésoxykanamycine B de formule : HO 25 HO O HN 2 (X) H2N 30 NH2 pour obtenir le composé de formule2 pour obtenir le compose de formule 35 24 9 1073 43 5 H HO O ~~~~~~~~2 O HO4 2< CoR(XI) H2oH-O COR3 I~~~~~~~~~~~~~~~~~~' 1 ~ ~ ~~0 0 àl 3 10 H2N NH2 2 dans laquelle R3 est un groupe alkyl de 1 à 6 atomes de carbone, un groupe cycloalkyl de 3 à 6 atomes de carbone 15 ou un groupe aralkyl, sp6cialement un groupe ph6nyl-alkyl (C1-C4), spécialement le groupe benzyl et b) réduction du composé de formule XI avec un hydrure métal- lique dans un solvant organique anhydre pour obtenir le composé de formule V. 20 La mise en oeuvre du procédé selon le sixième aspect de l'invention va maintenant être décrite en détail. Dans la première étape dudit procédé on introduit un groupe alkyloxycarbonyl,cycloalkyloxycarbonyl ou aralkylo- xycarbonyl qui peut être un des groupes habituellement con- 25 nuscomme groupe amino-protecteur du type uréthane, sur le groupe 6'-amino du composé de départ X. L'introduction de ces groupes alkyloxycarbonyl, cycloalkyloxycarbonyl et aral- kyloxycarbonyl (- -OR3) sur le groupe 6'-amino du composé O 30 de départ, la 5,3',4'-tridésoxykanamycine B (X) est ef- fectuée comme décrit ci-avant pour la préparation du dérivé amino-protégé du matériau de départ (VI') employ6 dans le procédé selon le troisième aspect de l'invention. La protec- tion sélective du groupe 6'-amino peut être men6e à bien 35 en raison du fait que ce groupe 6'-amino est le plus r6actif des groupes amino du composé X. Le groupe (-COR3 peut être o de préférence un groupe méthoxycarbonyl, éthoxycarbonyl ou 2491073 44 benzyloxycarbonyl. On forme ainsi le produit de formule XI 6 '-N-alkcyloxycarbonylé, 6' -N-cycloalkyloxycarbonylé, ou 6'-aralkyloxycarbonylé. Les groupes 6' -N-alkyloxycarbonyl, 6 '-N-cycloalkyloxycar- 5 bonyl ou 6'-N-aralkyloxycarbonyl ainsi introduits sont transform6s par r6duction en groupe m6thyl pour effectuer la m6thylation en 6'. On peut y arriver en r6duisant le composé de formule XI avec un hydrure m6tallique tel que l'hydrure de lithium, aluminium et le diborane dans un 10 solvant organique anhydre tel que le têtrahydrofuranne. Cette réduction est habituellement effectuée à une temp6rature de 40 à 90Cpendant 10 heures ou plus. La présente invention sera maintenant illustr6e par les exemples suivants, qui ne la limitent en aucun cas. 15 Les exemples 1 à 3 illustrent le premier et le troisième aspect de l'invention. L'exemple.4 illustre les premier et quatrième aspect de l'invention ; l'exemple 5 illustre le sixième aspect de l'invention et les exemples 6 à 8 le cinquième aspect de l'invention. 20 Exemple 1 Synthèse de la 1-N- US)-4.-amino-2-hydroxybutyryl3-5,.3 ,4' trid6soxykanamycine B a) On dissout 4,36 g (10 mmoles) de 5,3',4'-tridésoxykana- mycine B dans 100 ml de dim6thylsulfoxyde sec, auquel on 25 ajoute alors 10,5 g (48 mmoles) d'ac6tate de zinc LZn(CH3CO2)2.2H203. Le mélange obtenu est agit6 à temp6ra- ture ambiante pendant 20 heures pour former un complexe de la 5,3',4'-tridésoxykanamycine B avec le zinc. Après ad- dition de 12,0 g (39,5 mmoles) de para-m6thoxybenzyl S-4,6dim6thylpyrimid-2-ylthiocarbonate (Kokusan Kagaku K.K., Japon), on agite le mélange à 50 C pendant 7,5 heures pour effectuer la N-p-m6thoxybenzyloxycarbonylation. La solu- tion réactionnelle obtenue est versée dans 1 1 d'eau et le pH réglé6 à Il par addition d'une solution aqueuse d'ammo- 35 niaque pour effectuer la rupture du complexe de zinc, ce qui donne un précipité. Le pr6cipit6 est filtré, lavé avec 500 ml d'eau et dissous dans 60 ml d'un mélange chloroforme- 2491073 45 méthanol-solution aqueuse d'ammoniaque à 17 % (50:10:1 en volume). La solution est soumise à une chromatographie sur colonne de 500 g de gel de silice (Wako-gel C-200) dévelop- pée avec le mélange de solvant ci-dessus pour donner 4,1 g 5 (44 %) d'une poudre incolore de 3,2',6'-tri-N-paraméthçxy- benzyloxycarbonyl-5,3',4'-tridésoxykanamycine B. On dissout 3,7 g (4 mmoles) de la poudre incolore dans 50 ml de diméthylsulfoxyde et 0,95 ml (8 mmoles) de

trifluoracétate d'éthyl sont ajoutés à la solution. Le 10 mélange obtenu est agité à température ambiante pendant 5 heures pour effectuer la 3"-N-trifluoracétylation et don- ner la 3,2',6'-tri-N-paraméthoxybenzyloxycarbonyl-3"-N-trifluoracétyl-5,3',4'-tridésoxykanamycine B. b) On ajoute à la solution réactionnelle contenant le dé- 15 rivé N-protégé de kanamycine B obtenu dans l'étape a) 0,6 ml (4,4 moles) d'ester N-hydroxysuccinimide de l'acide (S)-4-tert-butoxycarbonylamino-2-hydroxybutyrique dans 20 ml de dioxanne. Le mélange est agité à température am- biante pendant 19 heures, après quoi on verse la solution 20 réactionnelle dans 500 ml d'eau pour séparer un précipité. Le précipité est filtré et lavé avec 100 ml d'eau pour donner 10,9 g d'une poudre incolore. Cette poudre est dissoute dans 20 ml d'acide trifluoracétique à 90 % et la solution maintenue à température ambiante pendant 45 25 minutes pour achever l'élimination des groupes amino- protecteurs. La solution est ensuite concentrée à siccité et le résidu repris dans 100 ml d'eau. Le pH de la solu- tion aqueuse est réglée à 10 par addition d'une solution aqueuse d'ammoniaque et agité à température ambiante pen- 30 dant 20 heures pour permettre l'élimination du groupe trifluoracétyl. La solution réactionnelle résultant est concentrée à un volume d'environ 20 ml, son pH réglé à 7 par addition d'une solution aqueuse d'ammoniaque, diluée avec 50 ml 35 d'eau puis on la fait passer à travers une colonne de 150 ml d'Amberlite CG-50 (forme NH4 -Rohm & Haas C U.S.A.). La colonne est lavée successivement avec 750 ml d'eau et 2491073 46 500 ml d'une solution aqueuse d'ammoniaque 0,5 N puis élu6e avec une solution aqueuse d'ammoniaque 0,8 N. Les fractions d'éluat contenant le produit désiré sont combinées et con- centrées à siccité pour donner, sous forme de poudre incolore, 5 1,76 g (72 %) de monocarbonate monohydrate de 1-N- ES)-4- amino-2-hydroxybutyryl -5,3',4'-tridésoxykanamnycine B. Rendement global 32 %. Exemple 2 Synthèse de la 1-N- (3-amino-2-hydroxypropionyl)-5,3',4'tridésoxykanamycine B a) On dissout 435,5 mg (1 mmole) de 5,3',4'-tridésoxykana- mycine B dans 10 ml de diméthylsulfoxyde sec auquel on ajoute alors 1,05 g (4,8 mmoles) d'acétate de zinc EZn(CH3C02)2.2H203. Le mélange obtenu est agité pendant 15 23 heures à température ambiante. On y ajoute alors une solution de 937,3 mg (3,2 mmolesY de tert-butyl S-4,6-di- méthylpyrimid-2-ylthiocarbonate dans 5 ml de diméthylsulfo- xyde et on agite le mélange obtenu pendant 24 heures à 50 C pour effectuer la N-tert-butoxycarbonylation. La solution 20 réactionnelle obtenue est mélangée à 15 ml d'eau, son pH réglé à Il avec une solution aqueuse d'ammoniaque puis on y ajoute 6,4 g de chlorure de sodium et l'on extrait à l'acétate d'éthyle (2x15 ml). Les extraits d'acétate d'é- thyle sont combinés et concentrés à siccité et le résidu 25 repris dans 6 ml de diméthylsulfoxyde. La solution est mélangée à 0,125 ml (1 mmole) de trifluoracétate d'éthyle et le mélange agité à température ambiante pendant 4 heu- res pour effectuer la 3"-N-trifluoro-acétylation. b) On ajoute à la solution réactionnelle contenant la 30 3,2',6'-tri-N-tert-butoxycarbonyl-3"-N-trifluoracétyl-5,3', 4'-tridésoxykanamycine B produite dans l'étape a) ci-avant 0,1 ml (0,7 mmole) de triéthylamine et 384 mg (1,05 mmole) de N-hydroxysuccinimide ester de la paraméthoxybenzyloxy- carbonyl-isosérine. 35 Le mélange obtenu est agité pendant 20 heures à température ambiante, après quoi on mélange la solution réactionnelle à 10 ml d'eau et on extrait avec de l'acé- 2491073 47 tate d'éthyle (2xlO ml). Les extraits combinés sont concen- trés à faible volume, puis on y ajoute 20 ml du mélange acide chlorhydrique 3N-méthanol 50 %. On agite le mélange 2 heures à température ambiante pour arriver à l'élimina- 5 tion simultanée des groupes amino-protecteurs tert-butoxy- carbonyl et paraméthoxybenzyloxycarbonyl. Le pH de la so- lution réactionnelle obtenue est r6glé à 10 par addition d'une solution aqueuse d'ammoniaque puis on agite à tempéra- 10 ture ambiante pendant 21 heures pour permettre l'élimina- tion des groupes trifluoracétyl. La solution réactionnelle ainsi obtenue est évaporée jusqu'à un faible volume, diluée avec de l'eau puis on fait passer la solution aqueuse obte- nue travers une colonne de 25 ml de Diaion W.K.1OS (forme 15 NH+ , Mitsubishi Kasei K.K., Japon). La colonne est lavée avec 125 ml d'eau puis éluée avec une solution aqueuse d'ammoniaque 0,4 N. Les fractions de l'éluat contenant le produit désiré sont combinées et concentrées à siccité pour donner 257 mg de monocarbonate de 1-N-(3-amino-2-hydroxy- 20 propionyl)-5,3',4'-tridésoxykanamycine B sous forme de pou- dre incolore. Rendement global 42 %. Exemple 3 Synthèse de la 1-N-C(S)-4-amino-2-hydroxybutyryll -5,3' ,4't6"- têtradésoxykanamycine B 25 a) On dissout 419,5 mg (0,75 mmole) de bicarbonate mono- hydrate de 5,3',4',6"-tétradésoxykanamycine B dans 10 ml de dim6thylsulfoxyde sec auquel on ajoute 1,05 g (4,8 mmole)

d'acétate de zinc CZn(CH3CO2)2.2H20J puis on agite le m6- lange à température ambiante pendant 18 heures. On ajoute 30 ensuite une solution de 1,44 g(6,0 mmole)de tert-butyl-S- 4,6-diméthylpyrimid-2-ythiocarbonate dans 5 ml de diméthylsul- foxyde et on agite le m6lange obtenu à 50'C pendant 25 heu- res. La solution r6actionnelle obtenue est mélangée à 19 ml d'eau, son pH est r6églé à Il avec une solution aqueuse d'ammoniaque et on l'extrait à l'acétate d'6thyle(2x15 ml). La couche aqueuse est mélangée à 6,4 g de chlorure de sodium puis de nouveau extraite avec 20 ml d'acétate d'éthyle. L'ensemble des extraits à l'acétate d'6thyle sont combin6s 2491073 48 et concentrées à siccité et le résidu est repris dans 6 ml de diméthylsulfoxyde. La solution est mélangée à 0,125 ml (1 mmole) de trifluoracétate d'éthyle et le mélange agité à température ambiante pendant 4 heures. 5 b) On ajoute à la solution réactionnelle contenant la 3,2', 6'-tri-N-tert-butoxycarbonyl-3n-N-trifluoracétyl-5,3',4',6"tétra-désoxykanamycine B produite dans l'étape a) ci-avant O,1 ml (0,7 mmole) de triéthylamine et 399,4 mg (1,05 mmole) d'ester N-hydroxy-succinimide d'acide (S)-4-p-méthoxy-benzyloxycarbonylamino-2-hydroxybutyrique. Le mélange obtenu est agité pendant 18 heures à température ambiante, après quoi la solution réactionnelle est mélangée à 10 ml d'eau et ex- traite à l'acétate d'éthyle (2 x 10 ml). Les extraits combinés sont concentrés à faible volume, puis on ajoute 15 20 ml d'un mélange acide-chlorhydrique 3N 50 % méthanol. Le mélange est agité à température ambiante pendant 2 heures pour effectuer l'élimination à des groupes tert-butoxy-car- bonyl et para-méthoxybenzyloxycarbonyl. Le pH de la solution réactionnelle obtenue est réglé à 10 par addition d'une solution aqueuse d'ammoniaque puis la solution est agitée à température ambiante pendant 20 heures pour permettre l'é- limination du groupe trifluoracétyl. La solution réaction- nelle obtenue est évaporée à un faible volume, diluée avec de l'eau puis on la fait passer à travers une colonne de 25 25 ml de Diaion WK-1OS (forme NH4+). On lave la colonne avec 125 ml d'eau puis on élue avec une solution aqueuse d'ammoniaque 0,32 N. Les fractions de l'éluat contenant le produit désiré sont combinées et concentrées à siccité pour donner, sous forme d'une poudre incolore, 303 mg de 30 bicarbonate de 1-N- (S)-4-amino-2-hydroxybutyryl)-5,3',4', 6"t-tétradésoyykanamycine B. Rendement global 63 %. Exemple 4 Synthèse de la 5,3',4',6"-tétradésoxykanamycine B a) Préparation de la 1,3,2',6',31"-penta-N-éthoxycarbonyl- 35 3',4'-didésoxykanamycine B On dissout 4,64 g (10,3 mmole) de 3',4'-didésoxykana- mycine B dans un mélange de 45 ml d'eau et 45 ml de métha- nol auquel on ajoute ensuite 8 g (95,2 mmole) de bicarbo- 2491073 49 nate de sodium; on ajoute enfin lentement, sous refroidissement & la glace 7,2 ml (75,6 mmoles) de chloroformiate d'éthyle. Le mélange obtenu est agité A température ambiante pendant 18 h pour effectuer la N-éthoxycarbonylation. La solution réac- 5 tionnelle obtenue est mélangée A 500 ml d'eau pour séparer un précipité. Ce dernier est filtré et lavé à l'eau pour donner 6,49 g (78 %) d'une poudre incolore du composé désiré. b) Préparation de la 1,3,2',6',3"-penta-N-éthoxycarbonyl4",6"-0-isopropylidène-3',4'-didésoxykanamycine B On dissout 4,83 g (5,95 mmoles) du produit obtenu dans l'étape a) ci-avant dans 50 ml de diméthylformamide, et l'on ajoute A la solution obtenue 30 mg (0,16 mmole) d'acide p-toluinesulfonique et 1,1 ml (9,0 mmoles) de 2,2diméthoxypropane. On agite le mélange obtenu à température ambiante pendant 25 heures (pour effectuer la 4",6"-0-iso- propylénation). Après quoi, on mélange la solution réac- tionnelle A 1 ml (7,2 mmoles) de triéthylamine puis on concentre A siccité pour obtenir 5,1 g (100 %) d'une pou- 20 dre jaune pâle du composé désiré. c) Préparation de la 1,3,2',6',3"-penta-N-éthoxycarbonyl4",6"-0-isopropylid&ne-2"-0-benzoyl-3',4'-didésoxykana- mycine B On dissout 5,1 g (6,0 mmoles) du produit obtenu dans 25 l'étape (b) ci-avant dans 75 ml de pyridine puis on ajoute 1 ml (8,6 mmoles) de chlorure de benzoyle et l'on agite le mélange A température ambiante pendant 5 heures pour effectuer la 2"-0-benzoylation. La solution réactionnelle ainsi obtenu est mélangée A 10 ml d'eau, agitée à tempé- 30 rature ambiante puis concentrée A siccité. Le résidu est repris dans 250 ml de chloroforme et la solution est lavée successivement avec 10 ml d'acide chlorhydrique 0,2 N et 2 x 100 ml d'une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium. La couche de chloroforme est séparée, séchée 35 sur sulfate de sodium anhydre et concentrée A siccité pour donner 5,7 g (99 %) d'une poudre jaune pâle du composé désiré. d) Préparation de la 1,3,2',6',3"-penta-N-éthoxycarbonyl- 2491073 50 2"-0-benzoyl-3',4'-did&soxykanamycine B On dissout 5,3 g (5,5 mmoles) du produit de l'étape c) ci-avant dans 80 ml du mélange acide ac6tique-m6thanol- eau (2:1:1 en volume) et on maintient la solution réaction-

5 nelle A temp6rature ambiante pendant 21 heures puis on concentre à siccité pour obtenir 4,9 g (97 %) d'une poudre jaune pâle du composé désiré. e) Pr6paration de la 1,3,2',6',3"-penta-N-6thoxycarbonyl2"-0-benzoyl-6"-0-tosyl-3'4'-did6soxykanamycine B 10 On dissout 1,5 g (1,63 mmole) du produit obtenu dans l'6tape d) ci-avant dans 28 ml de pyridine, puis on ajoute 374 mg (1,96 mn"le) de chlorure de p-toluènesulfonique et l'on agite le mélange A température ambiante pendant 28 heures pour effectuer la 6"-O-tosylation. La solution r6actionnelle obtenue est concentrée A siccit6, le résidu pul- vérulent (2,3 g) est repris dans 12,5 ml de dichloromé- thane et la solution obtenue est soumise A une chromato- graphie sur colonne de gel de silice (Wako-gel C-200, 200 g). La colonne est lavée avec 1000 ml de mélange dichlorom620 thane-6thanol (60:1) puis développ6e avec un mélange dichlorométhane-éthanol (50:1) pour donner 1,0 g (60 %) d'une poudre incolore du composé désir6. f) Préparation de la 1,3,2',6',3"-penta-N-éthoxycarbonyl2"-0-benzoyl-6"-iodo-3',4'-didésoxykanamycine B 25 On dissout 900 mg (0,84 mmole) du produit venant de l'étape e) ci-avant dans 18 ml de diméthylformamide, puis on ajoute 12,6 g (84 mmole) d'iodure de sodium et l'on agite A 95 C pendant 2 heures pour effectuer l'ioduration en 6". La solution r6actionnelle obtenue est vers6e dans 30 250 ml d'eau, le pr6cipité qui se d6pose est filtré, puis dissous dans 100 ml de chloroforme. La solution chloro- formique est lavée avec 100 ml d'une solution aqueuse A 20 % de thiosulfate de sodium, puis avec 100 ml d'une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium. La couche 35 de chloroforme est s6ch6e sur sulfate de sodium anhydre et concentrée A siccit6 pour donner 817 mg (95 %) du com- posé désiré sous forme de poudre incolore. 2491073 51 g) Préparation de la 1,3,2',6',3"-penta-N-éthoxycarbonyl2"-O-benzoyl-3',4',6"-tridésoxykanamycine B On dissout 773 mg (0,75 mmole) du produit de l'étape f) ci-avant dans 20 ml de dioxanne et on ajoute ensuite 5 une petite quantité de nickel de Raney W-2 ; on hydrogène le mélange sous une pression d'hydrogène de 3,6 bars pendant 23 heures et demi dans un appareil de Parr. La solution réactionnelle est filtrée pour en éliminer le catalyseur puis concentrée à siccité pour obtenir 65,5 mg (97 %) d'une 10 poudre incolore du composé recherché. h) Préparation de la 2,3,2',6',3"-penta-N-éthoxycarbonyl-2", 4"-di-0-benzoyl-3',4',6'-tridésoxykanamycine B On dissout 622 mg (0,69 mmole) du produit obtenu dans l'étape g) ci-avant dans 30 ml de pyridine ; on ajoute en- 15 suite 0,1 ml (0,86 mmole) de chlorure de benzoyl et on agite le mélange à température ambiante pendant 25 heures pour ef- fectuer la 4"-O-benzoylation. La solution réactionnelle obtenue est concentrée à siccité et le résidu repris dans 50 ml de chloroforme. La solution est lavée successive- 20 ment avec une solution aqueuse à 10 % de bisulfate de po- tassium (2xlO ml), une solution aqueuse saturée de bicar- bonate de sodium (2 x 30 ml) et une solution aqueuse satu- rée de chlorure de sodium (1 x 30 ml), puis séchée sur sulfate de sodium anhydre et concentrée à siccité pour 25 donner 663 mg (96 %) du composé désiré sous forme de poudre incolore. i) Préparation de la 1,3,2',6',3"-penta-N-éthoxycarbonyl2",4"-di-0-benzoyl-5-chloro-3',6"-tridésoxykanamycine B On dissout 600 mg (0,6 mmole) du produit provenant 30 de l'étape (h) ci-avant dans 12 ml de pyridine,puis on ajoute 0,1 ml (1,24 mmole) de chlorure de sulfuryl sous refroidissement à la glace et le mélange est agité à tem- pérature ambiante pendant 18 heures pour effectuer la chloruration en 5. La solution réactionnelle ainsi obtenue 35 est mélangée à 100 ml d'eau et extraite avec 60 ml de chloroforme. L'extrait chloroformique est lavé successi- vement avec 60 ml d'une solution aqueuse à 10 % de bi- 2491073 52 sulfate de potassium, 60 ml d'une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium et 60 ml d'une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, puis séch' sur sulfate de sodium anhydre et concentré à siccité. La résidu pulvéru- 5 lent (572 mg) est repris dans 5 ml de dichlorom6thane et chromatographié sur une colonne de gel de silice (Wako-gel C-200, 50 g). La colonne est lavée avec 500 ml de dichlorométhane et développée avec un mélange dichlorométhane-éthanol (100:1) pour donner 356 mg d'une poudre incolore du composé 10 recherché. j) Préparation de la 1,3,2',6',3"-penta-N-éthoxycarbonyl2",4"-di-0-benzoyl-5,3',4',6"-tétradésoxykanamycine B 308 mg (0,13 mmole) du produit de l'6tape i) ci-avant sont dissous dans 5 ml de dioxanne, puis on ajoute une 15 petite quantité de nickel de Raney W-2 et on traite le mé- lange avec de l'hydrogène avec une pression de 3,6 bars pendant 23 heures et demi dans un appareil de Parr pour effectuer la dichloruration. La solution réactionnelle ob- tenue est filtrée pour éliminer le catalyseur , puis con- 20 centrée à siccité ; on obtient 295 mg (100 %) d'une poudre

incolore du produit désiré. k) Préparation de la 5,3',4',6"-tétradésoxykanamycine B On dissout 120 mg (0,12 mmole) du produit obtenu dans l'étape (j) ci-avant dans un mélange de 1 ml de-dioxanne 25 et de 1 ml d'eau, puis on ajoute 400 mg (1,27 mmole) d'hydroxyde de baryum ÉBa(OH2).8H203 et on déprotège le mé- lange obtenu en le chauffant à 110 C pendant 15 heures sous reflux. On fait ensuite passer du gaz carbonique dans la solution réactionnelle pour précipiter le carbonate de ba- 30 ryum que l'on filtre. Le filtrat est mélangé à 30 ml d'eau et on le fait passer à travers une colonne de 20 ml d'Am- berlite CG 50 (Forme NH4 - Rohm & Haas C U.S.A.). La colonne est lavée avec 100 ml d'eau et 75 ml d'une solu- tion aqueuse 0,1 N d'ammoniaque puis éluée avec une solu35 tion aqueuse 0,3 N d'ammoniaque. Les fractions de l'éluat contenant le produit désiré sont combinées et concentrées à siccité pour donner 19,5 mg (29 %) de bicarbonate mono- 2491073 53 hydrate de 5,3',4',6"-t6trad6soxykanamycine B sous forme de poudre incolore. Exemple 5 Synthèse de la 5,3'14'-tridésoxy-6'-N-méthylkanamycine B 5 a) On dissout 4,0 mg (9,18 mmole) de 5,3',4'-tridésoxyka- namycine B dans un mélange de 40 ml d'eau et de 40 ml de m6thanol, puis on ajoute une solution de 5,8 ml (9,18 mmolee de tri6thylamine et 2,72 g (11,02 mmoles) de 1-(tert-butoxycarbonyloxyimino)-2-phénylacétonitrile (vendu sous la mar- 10 que BOC-ON par Aldrich C , USA) dans 40 ml de m6thanol. Le mélange obtenu est agité A température ambiante pendant 3 heures, après quoi l'on mélange la solution r6actionnelle contenant la 6'-N-tert-butoxycarbonyl-5,3',4'-trid6soxykanamycine B formée à 2 ml d'une solution aqueuse A 17 % d'am- 15 moniaque et l'on concentre A siccité. Le résidu est repris dans 100 ml d'eau et le pH de la solution est réglé6 à 7 avec de l'acide chlorhydrique 6N, lavé avec 50 ml d'6ther éthylique, puis on la fait passer à travers une colonne (diamètre intérieur 20 mm) de 100 ml d'Amberlite CG-50 20 (forme NH4+, Rohm & Haas C , USA). La colonne est lavée avec 300 ml d'eau et 150 ml d'une solution aqueuse 0,1 M d'am- moniaque puis 6élu avec une solution aqueuse 0,2 M d'am- moniaque. L'éluat est rassemblé en fractions de 5 ml et les fractions N 11-24 sont combinées et concentrées à siccité 25 pour donner 2,1 g (42,5 %) de 6'-N-tert-butoxycarbonyl-5,3',4'tridésoxykanamycine B. La concentration à siccité des frac- tions ne 26-33 combin6es permet d'obtenir 1,42 g (35,6 %) de 5,3',4'-tridésoxykanamycine B n'ayant pas réagi . On dissout 1,86 g (3,45 mmoles) de la 6'-N-tert-butoxycarbonyl- 30 5,3',4'-tridésoxykanamycine B obtenue dans 60 ml de tétrahy- drofuranne sec, puis on ajoute 1,31 g (34,5 mmoles) d'hydrure de lithium aluminium et l'on chauffe à 800C pendant 20 heu- res sous reflux. Le mélange r6actionnel obtenu est ajout6 goutte A goutte dans 200 ml d'eau pour s6parer un précipité 35 que l'on filtre. Le filtrat est 6vaporé pour enlever le têtrahydrofuranne puis son pH est réglé6 A 6,5 par addition d'acide chlorhydrique. On fait passer cette solution A tra2491073 54 vers une colonne (diamètre intérieur 12 mm) de 30 ml d'Amberlite CG-50 (forme NH +) et la colonne est lavée avec 150 ml d'eau puis éluée successivement avec des solutions aqueuses d'ammoniaque 0,2 M (150 ml) d'ammoniaque 0,3 M 5 (150 ml) et d'ammoniaque 0,4 M. L'éluat est rassemblé en fractions de 6 ml et les fractions 11-17 sont rassemblées et concentrées à siccité pour donner 740 mg (39,9 %) de 6'-N-tert-butoxycarbonyl-5,3' ,4'-tridésoxykanamycine B n'ayant pas réagi. Les fractions n 37-55 sont également 10 rassemblées et concentrées à siccité pour donner 592 mg (32,4 %) de 5,3' ,4'-tridésoxy-6'-N-méthylkanamycine B. Exemple 6 Synthèse de la 1-N-C(S)-4-amino-2-hydroxybutyryl3-5,3',4' tridésoxy-6'-N-méthylkanamycine B 15 On dissout 583 mg (1,10 mmole) de la 5,3',4'-tridéso- xy-6'-N-méthylkanamycine B préparée dans l'exemple 5 dans 10 ml de sulfoxyde aqueux à 90 %, puis on ajoute 2,16 g (5,28 mmoles) d'acétate de zinc [Zn(CH3C02)2.2H203. Le mé- lange est agité à température ambiante pendant 20 heures 20 puis on ajoute une solution de 1,06 g(4,29 mmoles) de 2-(tert-butoxycarbonyloxyimino)-2-phénylacétonitrile dans 5 ml de diméthylsulfoxyde, et on agite encore à 50 C pen- dant 6 heures pour effectuer la N-tert-butoxycarbonylation. La solution réactionnelle obtenue est mélangée à 2 ml d'une 25 solution aqueuse à 17 % d'ammoniaque, puis à 100 ml d'eau et lavée avec 50 ml d'éther éthylique. Le pH de la couche aqueuse séparée est réglé à Il avec une solution aqueuse d'ammoniaque à 17 % et la solution est mélangée à 2 g de chlorure de sodium ; on extrait la solution obtenue avec 30 de l'acétate d'éthyle (3 x 100 ml). Les extraits d'acétate d'éthyle combinés sont séchés sur sulfate de sodium anhydre et concentrés à siccité. Le résidu est chromatographié sur une colonne (diamètre intérieur 20 mm) de 50 g de gel de silice (Wako-gel C-200 - Wako-Junyaku K.K., Japon), en uti- 35 lisant comme éluant un mélange chloroforme-méthanol-solu-

tion aqueuse concentrée d'ammoniaque (30:10:1 en volume). L'éluat est rassemblé en fractions de 10 ml et les frac- tions n 25-50 sont combinées et concentrées à siccité pour 2491C73 55 donner 607 mg (73,6 %) de 3,2',6'-tri-N-tert-butoxycarbonyl- 5,3',4'-tridésoxy-6'-N-méthylkanamycine B. On dissout 590 mg (0,787 mmole) du produit ci-avant dans 10 ml de diméthylsulfoxyde et l'on ajoute à la solu- 5 tion obtenue 0,14 ml (1,18 mmole) de trifluoracétate d'éthyle. Le mélange est agité A température ambiante pen- dant 1 heure et demi pour effectuer la 3"-N-trifluoracétylation. On mélange la solution réactionnelle obtenue qui contient la 3,2',6'"tri-N-tert-butoxycarbonyl-3"-N-trifluoracétyl-5,3',4'-tridésoxy-6'-N-méthylkanamycine B avec 0,16 ml (1,18 mmole) de triéthylamine et 420 mg (1,18 mmole) d'ester N-hydroxysuccinimide de l'acide (S)-4-p-méthoxybenzy_ loxycarbonylamino-2-hydroxybutyrique dissous dans 4 ml de tétrahydrofuranne et l'on agite le mélange à température 15 ambiante pendant 4 heures pour effectuer l'acylation en 1-N. On ajoute ensuite à la solution réactionnelle 100 ml d'eau et on extrait avec de l'acétate d'éthyl (2 x 100 ml) Les extraits combinés sont séchés sur sulfate de sodium anhydre et concentrés à siccité pour donner le produit 20 1-N acylé sous la forme de son dérivé aminoprotégé. Ce produit 1-N acylé est dissous dans 10 ml d'une solution aqueuse a 90 % d'acide trifluoracétique et la solution est agitée A température ambiante pendant 5 heures pour permettre l'élimination des groupes tert-butoxycarbonyl et 25 p-méthoxy-benzyloxycarbonyl puis la solution réactionnelle est concentrée a siccité. Le résidu est repris dans 30 ml d'eau et le pH de la solution est rég6lé à 10 avec une so- lution aqueuse a 17 % d'ammoniaque. On agite ensuite à tem- pérature ambianteFendant 18 heures pour permettre l'élimi30 nation du groupe trifluoracétyl. Le pH de la solution réac- tionnelle ainsi obtenue est réglé à 7,5 par addition d'acide chlorhydrique 6N ; on la fait ensuite passer A travers une colonne (diamètre i.nt-ricur 13 mm) de 20 ml d'Amberlite CG - 50 (forme NH4 +). La colonne est lavée avec 100 ml 35 d'eau et éluée successivement avec 160 ml d'une solution aqueuse 0,5 M d'ammoniaque et 100 ml d'une solution aqueuse 0,8 M d'ammoniaque. L'éluat est rassemblé en fractions de 2491073 56 4 ml et les fractions n 27-62 sont combinées et concentrées à siccité pour donner 346 mg (71,8 %) du composé désiré, la 1-N [(S)-4-amino-2-hydroxybutyryl -5,3' ,4'-tridésoxy-6'-N- méthylkanamycine B sous la forme de son monocarbonate. 5 Exemple 7 Synthèse de la 1-N- 3-amino-2-hydroxypropionyl -5,3',4'tridésoxy-6'-N-méthylkanamycine B On dissout 102 mg (0,136 mmole) de la 3,2',6'-tri-N-tert-_ butoxycarbonyl-5,3',4 '-tridésoxy-6'-N-méthylkanamycine B 10 préparée dans l'exemple 6 dans 3 ml de diméthylsulfoxyde et l'on ajoute à la solution obtenue 0,02 ml (0,204 mmole) de trifluoracétate d'éthyle. Le mélange est agité une heure à température ambiante; On mélange la solution réactionnelle contenant la 3,2',6'-tri-N-tert-butoxycarbonyl-3"-N-trifluoracétyl-5,3',4'-tridésoxy-6'-N-méthylkanamycine B à 0,03 ml (0,204 mmole)de triéthylamine et'75 mg (0,204 mmole) d'ester N-hydroxysuccinimide de l'acide 3-p-méthoxybenzyloxycarbonyl- amino-2-hydroxypropionique dissous dans 0,5 ml de tétrahy- drofuranne et le mélange est agité à température ambiante- 20 pendant 7 heures pour effectuer l'acétylation en 1N. On ajoute ensuite 10 ml d'eau à la solution réactionnelle que l'on extrait ensuite à l'acétate d'éthyle (2 x 10 ml). Les extraits combinés sont séchés sur sulfate de sodium anhydre et concentrés à siccité pour donner 136 mg du produit 1-N- 25 acylé sous forme de son dérivé amino-protégé. Ce produit 1-N-acylé est dissous dans 3 ml d'une solu- tion aqueuse à 90 % d'acide trifluoracétique et la solution est agitée à température ambiante pendant 2 heures pour per- mettre l'élimination des groupes tert-butoxycarbonyl et p- 30 méthoxybenzyloxycarbonyl ; la solution réactionnelle est ensuite concentrée à siccité. Le résidu est repris dans 10 ml d'eau et le pH de la solution est réglé à 10 avec une solu- tion aqueuse d'ammoniaque à 17 % ; on agite ensuite à tem - pérature ambiante pendant 16 heures pour permettre l'élimina- 35 tion du groupe trifluoracétyl. On règle le pH de la solu- tion réactionnelle ainsi obtenue à 6,4 par addition d'acide chlorhydrique 6N puis on fait passer la solution à travers 2491073 57 une colonne (dimaètre intérieur 11 mm) de 10 ml d'Amberlite CG-50 (forme NH +). La colonne est lavée avec 30 ml d'eau et 30 ml d'une solution aqueuse 0,2 M d'ammoniaque puis éluée avec une solution aqueuse 0,5 M d'ammoniaque. L'éluat 5 est rassemblé en fractions de 1 ml et les fractions n 4-7 sont combinées et concentr6es à siccité pour donner 38,1 mg (45,4 %) de la 1-N-[3-amino-2-hydroxypropionyQ 5,3',4'-tri- désoxy-6'-N-méthylkanamycine B sous la forme de son monocarbonate. 10 Exemple 8 Synthèse de la 1-N-C(S)-5-amino-2-hydroxyvaléry -5,3' ,4'-

tridésoxy-6'-N-méthylkanamycine B On r6pète les processus décrits dans l'exemple 7 mais on utilise 76 mg (0,204 mmole) du N-hydroxysuccinimide 15 ester de l'acide (S)-5-p-méthoxybenzyloxycarbonylamino-2-hydroxyvalérique A la place du N-hydroxysuccinimide ester de l'acide 3-p-méthoxybenzyloxycarbonylamino-2-hydroxy-propio- nique que l'on fait réagir avec la 3,2',6'-tri-N-tert-butoxycarbonyl-3"-N-trifluorac6tyl-5,3',4'-tridésoxy-6'-N-m6thylkanamycine B. Après élution de la colonne d'Amberlite CG-50, on com- bine les fractions n 11-18 et on les concentre à siccité pour obtenir 47,2 mg (53,8 %) du composé désiré (monocarbonate). 2491073 58

Claims

- REVENDICATIONS -

1 - Antibiotiques aminoglycosidiques, caractérisés en ce qu'ils présentent la formule générale : 5 R 6" R HO ~ "5 0 HN 2' 2 3" dans laquelle R est un groupe hydroxyle ou un atome d'hydrogène, R1 est un atome d'hydrogène ou un groupe a-hydroxy-w-aminoalcanoyl de formule -CO-~H-(CH2) -NH2 OH 20 dans laquelle n = 1, 2 ou 3, et R2 est un atome d'hy- drogène ou un groupe m6thyl, pourvu que R ne soit pas 0~~~~~~~ un groupe mthyl quand R est un atome d'hydrogène, ainsi que les sels d'addition acide pharmaceutiquement accep- tables de ces composés. 25

2 - Antibiotiques selon la revendication 1, carac- térisés en ce qu'ils sont les 1-N- -hydroxy-w-aminoalca- noyl} 5,3',4'-tridqsoxykanamycine B ou -N-a-hydro oxy- a aminoalcanoylJ-5,3',4',6"-t6tradésoxykanamycine B de formule : 30 35 2491073 59 6", 0 3 n OH H2N 1', 1" t 2' 4., 4 (II) 0 3 ,NH2 1 CO I CHOH (CH2)nNH2 (CH2)nNH2 dans laquelle R est un groupe hydroxy ou un atome d'hy- drogène et n = 1, 2 ou 3, ainsi que ses sels d'addition acide pharmaceutiquement acceptables. 20

3 - Antibiotique selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il est une 1-N- a-hydroxy-LW-aminoalcanoyl -5,3', 4'-trid6soxy-6'-N-méthylkanamycine B de formule : HO. 5" 0 H2N 1 3 OH O / H N 2' 2 7/r 1' 4' 4' 5 - NHCH3 HN 3o 3 CO CO CHOH (CH2)nNH2 35 5 HO - 4' H2N 10 15 (IV) '2 2491073- 60 dans laquelle n = 1, 2 ou 3, ainsi que ses sels d'ad- dition acide pharmaceutiquement acceptables.

4 - Antibiotique selon la revendication 2, caractéri- sé en ce qu'il est la 1-N-(S)-4-amino-2-hydroxybutyry- 5 5,3',4'-tridésoxykanamycine B ; la 1-N- 3-amino-2-hydroxy- propionyl -5,3',4'-trid6soxykanamycine B ; ou la 1-N- ES)- 4-alino-2-hydroxybutyryl3-5,3',4' ,6"-t6trad6soxykanamy- cine B.

5 - Antibiotique selon la revendication 3, caract6- 10 risé en ce qu'il est la 1-N- C3-amino-2-hydroxypropionyl3 -5,3',4'-trid6soxy-6'-N-m6thylkanamycine B ; la l-N- ES)4-amino-2-hydroxybutyry a-5,3',4 '-tridésoxy-6 '-N-méthyl- kanamycine B ; ou la l-N- CS)-5-amino-2-hydroxyvaléryl1- 5,3',4 '-trid6soxy-6' -N-m6thylkanamycine B. 15

6 - Antibiotique selon la revendication 1, caract6- ris6 en ce qu'il est la 5,3',4',6"-t6tradésoxykanamycine B de formule : 6" 2 20 4" 3 0 2 HO E0~ ~ 2 41 O2 6 (III) H2N OH 06 5 5' 2 3" O 3liNNH 25 H2N 1, 3 ainsi que ses sels d'dddition acide pharmaceutiquemnient acceptables. 30

7 - Antibiotique selon la revendication 1, caract6- ris6 en ce qu'il est la 5,3',4'-trid6soxy-6'-N-m6thyl- kanamycine B de formule : 35 2 4 9 1073 61 H2N 1" 6 H2N 2' 4' 1' (V) 4 ~ %~ 3 1 ainsi que ses sels d'addition acide pharmaceutiquement acceptables.

8 - Procéd6 de production d'une 1-N-Ca-hydroxy-UL-aminoalcanoyl1-5,3',4'-trid6soxykanamycine B ou d'une -N-C:a hydroxy-Lu-aminoalcanoyl1-5,3',4',6"-tétradésoxykanamy- cine B selon la revendication 2, de formule : 0 o 0 2 CO I coU (II) CHOH 1. 30 (CH2)nNH2 dans laquelle R est un groupe hydroxyle ou un atome d'hy- drogène et n = 1, 2 ou 3, caractérisé en ce qu'il consiste : a) A acyler le groupe 1-amino de la 5,3',4'-tridésoxyka- namycine B ou de la 5,3',4',6"-tétradésoxykanamycine B 35 de formule : 6" HO 5 H2N 3" 10 R HO 20 R2N 25 249 1 073 6e 6" H2N 0 ~~~0 H 2 (VI) dans laquelle R a la définition ci-avant ou un dérivé partiellement aminoprotégé de la 5,3',4'-tridésoxykanamycine B ou de la 5,3',4',6t1-tétradésoxykanamycine B de formule : 15 A R B _ 0 H2N A B (VIt) B 111B 25 dans laquelle R est un groupe hydroxy ou un atome d'hy- drogène, A est un atome d'hydrogène et au moins l'un des B est un groupe amino-protecteur monovalent et le ou les autres B est ou sont chacun-un atome d'hydrogène ou au 30 moins une paire de A et B pris ensemble forment un groupe aminoprotecteur divalent, mais les autres A et B sont chacun un atome d'hydrogène et les groupes amino-protec- teurs repr6sentés par A et B peuvent être semblables ou différents, par réaction avec un acide a-hydroxy-%J-amino- 35 alcanoique ou l'un de ses dérivés amino-protég~sde formule : R 5 Ho 10 A 20 N B 12491C073 63 A' N(CH2) CHCOOH (VII) 2nj OH dans laquelle A' est un atome d'hydrogène et B' est un 5 atome d'hydrogène ou un groupe amino-protecteur monova- lent, ou A' et B' pris ensemble forment un groupe amino. protecteur divalent et n = 1, 2 ou 3, ou un équivalent fonctionnel du composé VII pour produire le produit 1-N- acylé de formule : 10 6" R 0 H2N HO 2 2 OH~~H CO I 20 CHOH I A' (CH 2I N'- ou de formule : 2nN B' R A 25H 0 N B A Ad t NfA (II") 0 3~~~~~0 30 HN N A CO CHOH (HIN A' (CH2 ) N-A 35 B' dans lesquelles R, A, B, A', B' et n ont les significa- tions données ci-avant, et 2491073 64 b) à éliminer le ou les groupes amino-protecteurs restants, là o ils existent, du produit 1-N acylé de formule Il' ou III, de manière connue pour obtenir le composé de for- mule II. 5

9 - Procédé de production d'une 1-N- a-hydroxy-W- aminoalcanoyl -5,3',4'-tridésoxy-6'-N-méthylkanamycine B selon la revendication 3, de formule : HO--\ HO 10 H2 H2N NHCH3 (Iv) HN - C1 cc 15 CHOH (CH2)OnH2 20 dans laquelle n = 1, 2 ou 3, caractérisé en ce qu'il com- porte les étapes suivantes : a) acylation du groupe 1-amino de la 5,3',4'-tridésoxy-6'N-méthylkanamycine B de formule : 25 1 HO 30 O0 H2N NHCH3 (v) ou d'un dérivé partiellement amino-protégé de la 5,3',4'tridésoxy-6'-N-méthylkanamycine B de formule : 35 2N 2491073 65 HO HO 0 A 5 B (V'> A -..o CH B OH CH3 N A 10 H N B 1 dans laquelle A est un atome d'hydrogène et au moins un B est un groupe amino-protecteur monovalent mais le ou 15 les autres B est ou sont chacun un atome d'hydrogène ou au moins une paire de A et B, pris ensemble, forment un groupe amino-protecteur divalent, les autres A et B étant chacun un atome d'hydrogène, et les groupes amino-protec- teurs représentés par A et B sont semblables ou diffé- 20 rents, par r6action avec un acide a-hydroxy-it.U-amino- alcanolque ou l'un de ses d6riv6s amino-prot6gés repré- senté par la formule : A' 25 B' N(CH2 ) CHCOOH (Vi) 25 B 2nô(VII) OH dans laquelle A* est un atome d'hydrogène et B' est un atome d'hydrogène ou un groupe amino-protecteur monova- lent ou A' et B', pris ensemble, forment un groupe amino- 30 protecteur divalent, n = 1, 2 ou 3, ou avec un 6quivalent fonctionnel du compos6 VII pour obtenir le produit 1-N acylé de formule : 35 2491073 66 6" H 2N HO HO o (IV') CH ~~~~0 N3 10 O B ~~~B' ou de formule: 20 HO~ A HO O -N A O NH ~~~25 ~~~~~~~NH2 I CO I CHOH 30 I~~~~~~~~~~~~~~ 30 ~~(CH )N _< (C2 nN ou35 dans lesquelles A, B A', B' et n ont les dfinitios don- HOnées ci-avant, et b) à éliminer. le ou les groupes amino-protecteurs là B 0~~~~ '25A N AB CO { CHOH (CH 2)nN 35 dans lesquelles A, B, A', BI et n ont les définitions don- nées ci-avant, et b) à éliminer le ou les groupes amino-protecteurs là 2491C73 67 o ils existent, du produit 1-N acylé de formule IV' ou IV", de façon connue en soi, pour obtenir le composé de formule IV.

10 - Proc6dé de production de la 5,3',4',6"-t6tra- 5 désoxykanamycine B selon la revendication 6 de formule : CH5 HO 0 H2N 10 H2N OH O 2 (III) 2 H2N 2 15 caractérisé en ce qu'il comporte les étapes suivantes : a) protection du groupe 4"-hydroxy d'un dérivé penta-N- protégé et 2"-6-protégé de la 3',4',6"-tridésoxykanamy- 20 cine B de formule : 4" CH3 A 2" . > X< ~~~~A0 ~~~(VIII) 0 0 30 dans laquelle A est un atome d'hydrogène et B est un groupe amino-protecteur monovalent, ou A et B, pris en- semble, forment un groupe amino-protecteur divalent et D est un groupe acyl hydroxy-protecteur avec un groupe acyl hydroxy-protecteur monovalent du même type que le 35 groupe hydroxy-protecteur D présent en position 2" dans le composé VIII afin d'obtenir le composé 4"-0-protégé de formule 24910/3 -68 A 5 OD OH A J (VIII') ~B N A ' B dans laquelle A, B et D ont les significations données ci-avant, 15 b) r6action du composé de formule VIII' avec du chlorure de sulfuryl pour remplacer le groupe 5-hydroxy par un atome de chlore pour obtenir le d6riv6 5-chloro correspondant, c) r6duction du dériv6 5-chloro pour enlever le groupe 20 5-chloro et obtenir un dérivé protégé de la 5,3',4',6"tétradésoxykanamycine B de formule : 25 DO CH, A B (Ix) A X B/N 0 0 o A N_ A 30 JD dans laquelle A et B ont les définitions ci-avant, et d) éliminer du composé IX les groupes hydroxyprotecteurs 35 restants ainsi que les groupes amino-protecteurs restants de façon connue pour obtenir le produit de formule III.

11 - Procédé de production de la 5,3',4'-tridésoxy- - A BjN 10 2491073 69 6'-N-méthylkanamycine B selon la revendication 7, de formule : HO HRN 23 t C~NHH3 I -s H2N NH2 15 caractérisé en ce qu'il comporte les étapes suivantes : a) introduction d'un groupe alkyloxycarbonyl, d'un groupe cycloalkyloxycarbonyl ou d'un groupe aralkyloxycarbonyl sur le groupe 6'-amino de la 5,3',4'-tridésoxykanamycine B de formule : 20 HO HO H2N (X) 0 O H2N NH2 pour obtenir le composé de formule : 35 5 O R2N 10 OH (V) 25 30 2491073 ' 70 HO H N (XI) l~~~~~~~~~~~~0 2OH NHCOR3 1.~0 ~~0 Il H2N NH2 2 dans laquelle R3 est un groupe alkyl de 1 à 6 atomes de carbone, un groupe cycloalkyl de 3 à 6 atomes de carbone 15 ou un groupe aralkyl, spécialement un groupe phényl-al- kyl (C1-C4), spécialement le groupe benzyl et, b) réduction du composé de formule XI avec un hydrure métallique dans un solvant organique anhydre pour obtenir le composé de formule V. 20 12 - Compositions antibactériennes, caractérisées en ce qu'elles comportent, comme élément actif une 1-N-CE- hydroxy-W -aminoalcanoy]3-5,3',4'-tridésoxykanaiycine B, une i-N[C-hydroxy-w-aminoalcanoy-5,3',4' ,6"-tétradéso- xykanamycine B ou l'un de leurs sels d'addition acide 25 pharmaceutiquement acceptables selon la revendication 2 ou la 5,3',4',6"'-tétradésoxykanamycine B ou l'un de ses sels d'addition acide pharmaceutiquement acceptable% selon la revendication 6, en quantit6 antibactériellement efficaces pour inhiber la croissance des bactéries, en 30 combinaison avec un support de l'ingrédient actif. 13 - Compositions antibactériennes, caractérisées en ce qu'elles comportent, comme ingrédient actif, une i-NC.-hydroxy-LU-aminoalcanoy.5,3',4 '-tridésoxy-6'-N-méthyl- kanamycine B ou la 5,3',4'-tridésoxy-6'-N-méthylkanamy- 35 cine B ou l'un de leurs sels d'addition acide pharmaceu- tiquement acceptables selon la revendication 3 ou la re- vendication 7, en quantités antibactériellement efficaces 2491C73 71 pour inhiber la croissance des bactéries en combinai- son avec un support de l'ingrédient actif. o 'tttt, jmj o C'' ...tq LLI o I j4 j:4ttJ t.:: t-t..-. t-. t, -. ..tt ...t. tt. - tt t. t.-. BllliB BillBll. u I IIIIIII ii1111a m II I* un a MEMM ME MMM MM EUE EU MMM ME NI MEEME MUUEM MM v-1 -;-i i - e.- L- e, Il -i- U 1.: e! -1 1 C' z_. i-- 1 i- '71 :3 z Il l Ple ! ! . t i : : : : : : : : - *. ... .. .. : . t:D ; .. . Pw 'à IJ .,,_ . , ._: V ,-._ , ' : t :.,. .,: : *_e ..r. De.. DU @ . . g au * V , = .", s. a. eu es A.. liB Bill I I a a t1tt .tt:. ;::<LflI i t t.*. t:, trt t-t a I* a . * m O m RÉPUBLIQUE FRAN AISE INSTITUT NATIONAL DE LA PROPRIÉTÉ INDUSTRIELLE PARIS O N de publication: (A n'utiliser que pour les commandes de reproduction). 2 491 108 A1 DEMANDE DE BREVET D'INVENTION N 80 20999 () Equipement spécial de découpe de chaussée pour pelle hydraulique.. Classification internationale OInt. CI. 3). Date de dépôt........................ Priorité revendiquée: E 02 F 5/30; E 01 C 23/09, 23/12; E 02 F 9/28. 30 septembre 1980. Date de la mise à la disposition du public de la demande ............ B.O.P.I. - " Listes " n 13 du 2-4-1982. Déposant: FILLIETTE Gérard. résidant en France. Invention de: Zoltan Regele, Jozsef liles, Miklos Kunos, Imre Sipka et Mihaly Sirko. Titulaire: Idem (74) Mandataire D Vente des fascicules à l'IMPRIMERIE NATIONALE. 27, rue de la Convention - 75732 PARIS CEDEX 15 2491108 i La présente invention concerne un procédé et un dispositif de fabrication d'un corps de fondation en béton dans le sol. Dans les travaux intervenant dans le domaine 5 de la construction industrielle, il existe une tendance générale à la mécanisation et à la préfabrication en vue de réduire au minimum les travaux de montage et les frais de main d'oeuvre. En ce qui concerne les travaux de montage ou de construction proprement 10 dits, ces tentatives ont été évidemment couronnées de succès mais par contre dans le domaine des travaux d'exécution de fondetions, l'évolution a été relativement faible. Une res raisons expliquant ce résultat consis- te en ce qu'on ne peut utiliser qu'à un degré limité 15 la préfabrication pour les composants à introduire dans le sol ; en ce qui concerne la mécanisation, on ne peut obtenir une adaptation aux conditions existantes ou bien aux éléments géologiques, qu'en utilisant, dans la plupart des cas, des machines spéciales de haute 20 qualité ou bien des chalnes de machines. Pour la plupart des fondations qui doivent etre réalisées à faible et grande Profondeur, on peut diviser les processus technologiques de construc- tion, de la façon suivante, en opérations (fonctions) 25 qui sont généralement bien délimitées les unes par rapport aux autres : - enlèvement de la terre (avec le cas échéant assèche- ment par excavation, forage, avec des machines spéciales, - soutènement de l'excavation par étaiement, coffrage, 30 en utilisant des tubes de cuvelage, des tubes de pro- tection, contre la boue de forage et l'eau boueuse. - bétonnage d'une manière classique ou bien bétonnage

sous l'eau. Lors de la mise en pratique des procédés com- 35 portant les opéretions décrites ci-dessus, l'enlèvement de la terre et le soutènement sont effectués simultané- 2491108 2 ment (en parallèle), d'un cas à l'autre, ces deux orerations peuvent être permutées entre elles, mais dans tous les cas le b-~tonnage est effectué après enlèvement de la terre et après soutènement. ~5 .L 'invention a pour but de permettre la fabricetion'de corps de fondation en béton dans le sol à l'aide d'un procédé et d'un dispositif à l'aide desquels, pour le soutènement des parois, il n'est pas nécessaire de faire .intervenir des dispositifs et matériaux accessoires, par exemple des étais et des organes de drainage de la boue, il est superflu, lors de la préparation du corps de fondation, d'effectuer un assèchement préalable, les besoins en main d'oeuvre sont réduits au minimum et il est possible de réaliser 15 une structure de fondation de bonne qualité d'une manière rapide et économique. L'invention est basée sur le principe que, à l'endroit du corps de fondation à réaliser, on a ameubli ou désagrégé la terre et on ne l'a pas évacuée, 20 la masse de terre ameublie soutient la paroi de sol non-perturbée jusqu'à ce que cette masse de terre ameu- blie soit enlevée et il est alors possible d'effectuer l'opération citée en dernier en injectant le béton brut servent de matériau dans le corps de fondation, 25 sous une pression supérieure à la pression atmosphérique, dans la masse de terre ameublie de sorte que le sol est ainsi comprimé en surface. L'injection du béton doit évidemment commencer par le bas et être poursuivie vers le haut. En outre, l'invention est basée sur 30 un autre rrincipe consistant en ce sue, pour la dé- sagrégation du sol, on utilise un disque hélicoïdal dont l'axe de rotation sert simultanément de tube d'alimentation en béton qui débouche dans le plan inférieur ou sur sa partie inférieure de manière que, 35 anrrs achèvement de la désagrégation, l'injection du bâton et le compactage du sol puissent 4tre effectués