DE1962387C2 - N↑6↑-(3-Chlorbuten(2)-yl)-adenosin - Google Patents

Description

Die Erfindung betrifft eine neue biologisch aktive Substanz, das N⁵-(3-Chlorbuten(2)-yl)-adenosin, und ein Verfahren zu deren Herstellung.

Das N⁶-(3Ch!orbuten(2)-y!)-adcr,o3in besitzt eine gute entzündungshemmende Wirksamkeit bei geringer subcutaner Toxizität wie die nachfolgend aufgeführten Testergebnisse zeigen.

Bestimmung der entzündungshemmenden Wirksamkeit bei subcutaner Applikation an der Rattenpfote:

SPF-Ratten im Gewicht von 130 bis 150 g werden zur Erzeugung eines Entzündungsherdes 0,1 ml einer 0,5%igen Mycobacterium-butyricum-Suspension in die rechte Hinterpfote injiziert. Vor der Injektion mißt man das Pfotenvolumen der Ratten. 24 Stunden nach der Injektion wird das Pfotenvolumen zur Bestimmung des Ausmaßes des Ödems abermals gemessen. Anschlie-3eiid appliziert man den Ratten oral unterschiedliche Mengen der Testsubstanz — suspendiert in physiologischer Kochsalzlösung. Nach weiteren 24 Stunden wird das Pfotenvolumen erneut ermittelt.

Die Kontrolltiere werden in gleicher Weise behandelt, mit dem Unterschied, daß ihnen eine testsubstanzfreie Kochsalzlösung appliziert wird.

Aus den erhaltenen Pfotenvolumen wird in üblicher Weise die Menge an Testsubstanz bestimmt, weiche erforderlich ist, um eine 50%ige Abheilung des Pfotenödems zu erzielen.

Dieser Test erbrachte folgende Ergebnisse:

N«-(3-Chlorbuten-(2)-yl)-

adenosin ED50= 124 mg/kg

N⁶-(Isopenten-2-yl)-adenosin ED»= 186 mg/kg

Phenylbutazon ED50= 92 mg/kg

50

Bestimmung der subakuten Toxizität

Jeweils 6 weibliche Wulf-Ratten (Gewicht 120- 140 g) werden 14 Tage lang täglich intraperitonal mit 100 mg/kg Testsubstanz — suspendiert in physiologischer Kochsalzlösung — behandelt.

Bei der Behandlung mit N⁶-(3-Chlorbuten-(2)-yl)-adenosin überlebten alle Ratten, bei der Behandlung mit N'-(lsopenten-2-yl)-adenosin überlebten 3 Ratten und bei der Behandlung mit Phenylbutazon überlebten 4 Ratten.

Das erfindungsgemäße Verfanren zur Herstellung von N⁶-(3-Chlorbuten(2)-yl)-adenosin ist dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter Weise a) 3-Chlorbuien(3)-ylamin mit 6-Chlornebularin in Gegenwart einer organischen Base, vorzugsweise eines tertiären Amins, oder

b) Adenosin mit I_r3-Dichlorbuten(2) und einer Base umsetzt

Die Reaktion gemäß a) kann zwischen 0° und 50⁰C, vorzugsweise bei Raumtemperatur, durchgeführt werden. _Als Amine kommen beispielsweise Triethylamin und Äthyi-Diisopropylamin in Betracht.

Die Reaktion gemäß b) kann in einem Ein- oder Zweistufenverfahren durchgeführt werden. In dem Einstufenverfahren wird das Adenosin mit dem 13-Dichlorbuten(2) in Gegenwart einer Base, wie z. B. Kaliumcarbonat, in einem Lösungsmittel, vorzugsweise Dimethylformamid, bei einer Temperatur von etwa 8O⁰C umgesetzt. Das N»-(3-Chlorbuten(2)-yl)-adenosin läßt sich aus dem Reaktionsansatz nach bekannten Methoden isolieren.

In dem Zweistufenverfahren wird das Adenosin zunächst mit dem 13-Dichlorbuten(2) in einem organischen Lösungsmittel, vorzugsweise Dimethylformamid, bei einer Temperatur von etwa 8O⁰C umgesetzt. Das Lösungsmittel wird im Vakuum entfernt und das Reaktionsprodukt wird anschließend mit einer Base, vorzugsweise Ammoniak, zum N~(3-Ch!orbuten(2)-yi)-adenosin umgelagert

Das N⁶-(3-Chlorbuten(2)-yl)-adenosin kann in den pharmazeutisch üblichen Anwendungsformen appliziert werden. Die Anwendung kann peroral, intravenös, intraperitoneal und intramuskulär erfolgen.

Beispiel 1

2,866 g 6-Chlornebularin (10 mMol) und 135 g 3-Chlorbuten(2)-ylamin (12,8 mMol) werden unter Eiskühlung in 30 ml absolutem Dimethylformamid (DMF) gelöst und nach Zugabe von 4 ml Triäthylamin 3 Tage bei Raumtemperatur gerührt. Dann filtriert man das ausgefallene Triäthylamin-hydrochlorid (0,758 g) ab, wäscht den Niederschlag mit wenig DMF und engt das Filtrat bei 40°C/0,01 Torr zur Trockne ein. Der Rückstand wird aus Äthanol umkristallisiert. Man erhält 2.875 g (81% der Theorie) N⁶-(3-Chlorbuten(2)-yl)-adenosin mit einem Schmelzpunkt von 162— 163° C.

An₃IySe(C₁₄HnCIN₅O₄)

Ber.: C 47,26 H 5,10

Gef.: C 4637 H 5,53

N 19,69
N 19,84

Cl 9,96 Cl 9,50

Beispiel 2

1335 g Adenosin (50 mMol) wurden unter Erwärmen auf 7O⁰C in 175 ml absolutem Dimethylformamid gelöst und 14 Stunden mit 18,75 g 13-Dichlor-buten(2) (150 mMol) und 20,7 g K₂CO₃(ISO mMol) feingepulvert) unter Stickstoff auf 80°C erhitzt, dni anorganischen Salze abfiltriert, mit Essigester gewaschen und das Fiitiat im Wasserstrahlvakuum eingedampft. Der Rückstand (193 g) wurde in Chloroform gelöst und an 400 g Silicagel Chromatographien. Mit Chloroform-Methanol (99:1) wurden 6,9 g (38,5% der Theorie) kristalline N⁶-(3-Chlorbuten(2)-yl)-adenosin (Schmelzpunkt 159-161°C)eluiert.

Beispiel 3

26,7 g Adenosin (0,1 Mol) wurden in 350 ml Dimethylformamid bei 8O⁰C unter Stickstoff mit 25 g l.3-Di-chlor-buten(2) (0,2 Mol) 96 Stunden gerührt, das Dimethylformamid im Vakuum entfernt und der Rückstand noch zweimal mit Wasser abgedampft. Der dunkle Rückstand wurde in 500 ml konzentriertem Ammoniak 48 Stunden bei 24°C stehengelassen und dann unter gelegentlicher Zugabe von wenig konzen-

triertem Ammoniak zwei Stunden unter Rückfluß gekocht. Nach Abdampfen wurde der Rückstand mit insgesamt 2 I Essigester ausgekocht, der Extrakt mit Kohle entfärbt und der Rückstand nach Lösen in Chloroform an 80 g Silicagel Chromatographien. Mit Chloroform-Methanol (99,5:0,5 bis 99:1) wurden so 22 g(6,2% der Theorie kristallines N⁶(3-Chlorbuten(2)-yl)-adenosin isoliert (Schmelzpunkt 159 —161"C).

Claims (3)

Patentansprüche:

1. N⁶-(3-ChIorbuten(2)-yl)-adenosin.

2. Verfahren zur Herstellung von N⁶-{3-Chlorbuten(2)-yl)-adenosin, dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter Weise

a) 3-ChIorbuten(2)-ylamin mit 6-Chlornebularin in Gegenwart einer organischen Base umsetzt oder ,ο

b) Adenosin mit 13-Dichlorbuten(2) und einer Base umsetzt.

3. Arzneimittel enthaltend N⁶-(3-Chlorbuten(2)-yl)-adenosin.

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