CZ20032470A3

CZ20032470A3 - Metoda na výrobu sloučenin odvozených od camptothecinu

Info

Publication number: CZ20032470A3
Application number: CZ20032470A
Authority: CZ
Inventors: Takanori Ogawa; Hiroyuki Nishiyama; Miyuki Uchida; Seigo Sawada
Original assignee: Kabushiki Kaisha Yakult Honsha
Priority date: 2001-02-21
Filing date: 2002-02-21
Publication date: 2004-02-18
Also published as: RU2003128530A; EE05361B1; JP2008273952A; MXPA03007528A; JP4210119B2; IL156949A0; EP1378505A4; KR100858972B1; HUP0302755A2; EP1378505B1; EE200300373A; US20040106830A1; NO331656B1; PL217238B1; TWI245768B; CA2437702A1; BR0207470A; US7126000B2; NO20093402L; RO125158A2

Description

Oblast techniky

Předkládaný vynález se zabývá způsobem výroby sloučeniny (sloučenin) odvozené(ných) od camptothecinu. Konkrétně se vynález zabývá způsobem přípravy meziproduktů vznikajících při výrobě analogů camptothecinu, které mají protinádorovou aktivitu a jejich použitím, a dále se zabývá úplnou syntézou analogů camptothecinu.

Dosavadní stav techniky

Camptothecin (dále uvedený jako CPT), který se získává z kůry, kořene, plodů, listů apod. stromu Camptotheca acuminata, je pentacyklický alkaloid a je známý tím, že ‘ vykazuje protinádorovou aktivitu, fungující na základě inhibice syntézy nukleových kyselin. V současné době bylo v souvislosti s camptothecinovými deriváty zjištěno, že způsobují průjem nebo mají jiné podobné vedlejší účinky (Gann to Kagaku Ryohou 17, p115-120, 1990). Díky tomuto problému, který způsobuje poruchy gastrointestinálního traktu, bylo prozkoumáno velké množství různých derivátů, kde se hledal takový derivát, u kterého by se v tomto směru snížila toxicita a naopak se zvýšil jeho účinek.

Tak byl vynálezci uveden na trh ve vodě rozpustný polosyntetický derivát CPT, 7ethyl-10-(4-(1- piperidino)-1 -piperidino] karbonyloxycamptothecin hydrochlorid · trihydrát, dále uvedený jako CPT-11, který je v porovnání s CPT méně toxický a který se v současné době široce využívá jako protinádorové činidlo pod obecným názvem , irinotecan hydrochlorid.

Camptothecinové analogy, jako je CPT-11, se většinou získávají chemickou ' modifikací CPT, získaného z přírodních materiálů.

Ovšem díky tomu, že přírodní materiály získávané z listnatého stromu Camptotheca acuminata, což je výchozí surovina, obsahují extrémně malé množství *

h CPT, předpokládá se, že vzhledem ke stoupající potřebě použitelného derivátu CPT-11 _r začne být dostatečný přísun CPT problematický, nehledě k tomu, jak velká by musela být zalesněná plocha, ze které by se výchozí surovina dodávala. Přestože probíhá i studium úplné syntézy, v současné době nemá žádné praktické využití.

Způsob úplné syntézy je známý jako Shenova metoda (Shen, W. et al.), jehož průběh je reprezentován níže uvedeným reakčním schématem, který vede přes

Friedlánderovu reakci aminopropiofenonu a tricyklického ketonu (J. Org. Chem. 1993,

58, 611-617 Concise Total Syntheses of dl-Camptothecin and Related Anticancer

«.· ·

Drugs.). Přesto je tato metoda problematická zejména proto, že některé kroky jsou zdlouhavé, výtěžky nejsou dostatečné a syntetizuje se pouze racemát.

Přestože Curran, D.P. et al. uskutečnili úplnou syntézu způsobem, který využívá kaskádové radikálové cyklizace arylisonitrilu a jodopyridonu, jehož reakční schéma je uvedeno níže (Chem. Eur. J. 1998, 4, 67-83 A General Synthetic Approach to the (20S)-Camptothecin Family of Antitumor Agents by a Regiocontrolled Cascade Radical Cyclization of Aryl Isonítriles.), je tento způsob stále probematický, např. je nedostatečný výtěžek cyklizační reakce a dále je po cykiizaci nutná deprotekce ochranných skupin.

Navíc je krok výše uvedeného způsobu podle Currana, D.P. et al., při kterém se vyrábí 4-jodo-2-methoxy-6-trimethylsilylpyridin-3- karbaldehyd, což je meziprodukt při výrobě tricyklické ketonové části analogů CPT (schéma reakce viz níže), velmi nebezpečný, • ·· · avb

t-BUJ

IbF -1.

-78°C

1h ao ‘'fep^wfe

Me

->

-40°C n-ati

-30 °C 2h

Jcsien, H; Kg S.-B; Βοτη D.; Ctirsn D. P. Ctem Eur. J. 19Θ6,4, Na1,67. zejména vzhledem k nutnosti použití t-BuLi, což je látka, která by se mohla při průmyslovém zpracování ve vysokých objemech lehce vznítit. Navíc požadovaná reakční teplota -78 °C technicky neumožňuje přejít na velkovýrobu. Dále by bylo nutné, aby byla teplota celého reakčního systému kontrolována, což je technicky také velmi složité, a proto tento reakční systém není vhodný pro průmyslové využití v praxi.

Podstata vynálezu

Předmětem tohoto vynálezu je praktickou úplnou syntézou zajistit v dostatečném množství CPT, což je výchozí materiál pro výrobu irinotecan hydrochloridu různých druhů camptothecinových derivátů a analogů, jako je např. 7-ethyl-10-hydroxy camptothecin, což je klíčový meziprodukt při výrobě irinotecan hydrochloridu. Konkrétně je předmětem tohoto vynálezu výroba meziproduktu, který odpovídá AB-kruhové části camptothecinové kostry, a meziproduktu, který odpovídá jeho CDE-kruhové části, a dále výroba analogů camptothecinu použitím těchto meziproduktů.

V této souvislosti byl vynálezci proveden rozsáhlý výzkum, jehož výsledkem byla, co se týče AB-kruhové části, výroba sloučeniny vzorce a, 5-hydroxy-2nitrobenzaldehydu, což je výchozí materiál:

HOl „CHO

Dále byly nalezeny vhodné způsoby k stabilnímu zajištění dostatečného množství CPT a jeho derivátů účinnou přípravou 2’-amino-5’-hydroxypropiofenonu, odpovídajícího ABkruhové části CPT kostry. Co se týče CDE-kruhové části vycházející ze sloučeniny vzorce k, 2-methoxy-6-trimethylsilylpyridinu (MTP):

TMS

kde TMS reprezentuje trimethylsilylovou skupinu a Me je methyl, byly nalezeny vhodné způsoby k stabilnímu zajištění dostatečného množství CPT a jeho derivátů účinnou přípravou tricyklického ketonu, který odpovídal CDE-kruhové části CPT kostry. Také byla zavedena metoda úplné syntézy CPT analogů vhodnou kombinací výše uvedených způsobů výroby bez použití přírodních materiálů, k úplnému dokončení vynálezu.

Jmenovitě se vynález zabývá způsobem přípravy 2’-amino-5’-hydroxypropiofenonu, který odpovídá AB-kruhové části CPT kostry podle schématu dráhy;

OH

(d) (e) (kde R je ochranná skupina),

Zabývá se také způsobem úplné syntézy CPT analogů vhodnou kombinací způsobu, vedoucího k výrobě tricyklického ketonu, který odpovídá CDE-kruhové části CPT kostry. Toto konkrétně zahrnuje výrobu 3-formyl-4-jodo-2-methoxy-6- trimethylsilylpyridinu (sloučenina I) z 2-methoxy-6- trimethylsilylpyridinu (sloučenina k ) nebo z 3hydroxymethyl -4- jodo-2-methoxy-6-trimethylsilylpyridinu (sloučenina v), zlepšením nebo otimalizací metody dle následující syntetické dráhy;

o

(kde TMS je trimethylsilylová skupina, Me je methyl, Et je ethyl, Pr je propyl a ^{Bu je tbutyl), která byla vytvořena na základě Curranovy dráhy (Josien, H,; Ko, S. B.; Bom, D.; Curran, D. P. Chem. Eur. J. 1998, 4 67-83) a Pharmacia & Upjohn dráhy (zde dále uvedená jako P&U dráha; Heneger, K. E.; Ashford, S, W.; Baughman, T. A.; Sih, J. C.; Gu, R. L. J. Org. Chem. 1997, 62, 6588-6597.), což jsou v současné době jediné syntetické dráhy, které jsou známé. Dále vzhledem ktomu, že sloučenina v je vedlejší produkt, který vzniká při procesu výroby 3-(2- butenyloxymethyl)-4-jodo-2-methoxy-6trimethylsilylpyridinu (sloučenina m), je ve výše uvedeném reakčním schématu uvedena hned vedle sloučeniny m.

Konkrétně se vynález zabývá způsobem přípravy 2’-amino-5’-hydroxy propiofenonu, který je třeba na výrobu analogů camptothecinu, kde ze sloučeniny a:

H<X .CHO 'NO₂ se vyrobí sloučenina b:

Ri

CHO (b)

NOz a ze sloučeniny b se vyrobí sloučenina c:

β · • · · ·

a ze sloučeniny c se vyrobí sloučenina d:

a ze sloučeniny d se vyrobí sloučenina e:

kde R je ochranná skupina, která může být odstraněna katalytickou redukcí.

Vynález se také zabývá výše uvedenými procesy, kde se jako ochranná skupina, která může být odstraněna katalytickou redukcí, použije benzyl.

Dále se vynález také zabývá výše uvedenými procesy, které zahrnují jeden nebo více kroků vybraných ze skupiny zahrnující:

1) krok k získání sloučeniny b smícháním sloučeniny a, benzyiačního činidla a zásady, kdy se směs míchá za podmínek zpětného proudění;

2) krok k získání sloučeniny c přidáváním Grignardova činidla do sloučeniny b za podmínek inertní atmosféry;

3) krok k získání sloučeniny d smícháním sloučeniny c a oxidačního činidla a mícháním vzniklé směsi;

4) krok k získání sloučeniny e katalytickou redukcí sloučeniny c.

Dále se vynález zabývá výše uvedenými procesy, ve kterých se použije v kroku

1) jako rozpouštědlo dimethylformamid.

2) jako Grignardovo činidlo vinyl magnesium bromid.

Dále se vynález zabývá výše uvedenými procesy, ve kterých se použije v kroku 3) jako oxidační činidlo Jonesovo činidlo, dioxid manganatý nebo TEMP0-(2, 2, 6, 6 - tetra methylpiperidin-1 -oxyl)-chlornan sodný.

Také se vynález zabývá sloučeninou se vzorcem c':

0 0 00 00 0000

0 0 · 0 · 0 0 0 00 00 000000 0

0 000 0000

000 000 ·0 ·0 ·0

(kde Bn je benzyl).

Dále se vynález zabývá sloučeninou se vzorcem ď:

(kde Bn je benzyl).

Vynálezem je i způsob přípravy 2’-amino-5’-hydroxypropiofenonu na výrobu analogů camptothecinu, kde ze sloučeniny a:

HOl J3HO

a ze sloučeniny c se vyrobí sloučenina d:

(ď’) a ze sloučeniny d se vyrobí sločenina e:

• ·· *

Dále se vynález zabývá výše uvedenými procesy, u kterých je jeden nebo více kroků vybrán ze skupiny zahrnující:

1) krok k získání sloučeniny c přidáváním Grignardova činidla do sloučeniny a za podmínek inertní atmosféry;

2) krok k získání sloučeniny d smícháním sloučeniny c a oxidačního činidla a mícháním vzniklé směsi; a

3) krok k získání sloučeniny e katalytickou redukcí sloučeniny d.

Vynález se také zabývá výše uvedenými procesy, ve kterých se použije v kroku

1) jako Grignardovo činidlo vinyl magnesium bromid.

2) jako oxidační činidlo Jonesovo činidlo, dioxid manganatý nebo TEMPO-chlornan sodný.

Vynález se dále zabývá použitím 2'-amino-5’~hydroxypropiofenonu, který se získává pomocí metod uvedených výše, v přípravě analogů camptothecinu.

Dále se vynález zabývá způsobem přípravy analogů camptothecinu, který obsahuje i reakci 2’-amino-5’-hydroxypropiofenonu, získaného způsobem uvedeným výše, a tricyklického ketonu.

Vynález se také zabývá metodou přípravy tricyklického ketonu na výroby analogů camptothecinu, kde se ze sloučeniny k:

(kde TMS je trimethylsilylová skupina a Me je methyl) nebo ze sloučeniny v:

(kde TMS je trimethylsilylová skupina a Me je methyl) se vyrobí sloučenina I:

TMS

0Μ· ότ (1) (kde TMS je trimethylsilylová skupina a Me je methyl); a ze sloučeniny I se vyrobí sloučenina m:

(kde TMS je trimethylsilylová skupina a Me je methyl); a ze sloučeniny m se vyrobí sloučenina n:

(kde TMS je trimethylsilylová skupina, Me je methyl a Et je ethyl); a ze sloučeniny n se vyrobí sloučenina o:

(kde TMS je trimethylsilylová skupina, Me je methyl a Et je ethyl); a ze sloučeniny o se vyrobí sloučenina p;

(kde TMS je trimethylsilylová skupina, Me je methyl a Et je ethyl); a ze sloučeniny p se vyrobí sloučenina q:

• *	• ·	* »» • · * · • · ·	·· * ·· · * « t • · ·
•	♦ * ·	• · · ·*·	9 9 9 9 99 99

(q) (kde Me je methyl a Et je ethyl); a ze sloučeniny q se vyrobí sloučenina r:

(r) (kde Me je methyl a Et je ethyl a Pr je propyl); a ze sloučeniny r se vyrobí sloučenina s;

(kde Et je ethyl a Pr je propyl); a ze sloučeniny s se vyrobí sloučenina t:

(t) (kde Et je ethyl a tBu je t-butyl); a ze sloučeniny t se vyrobí sloučenina h:

(h) (kde Et je ethyl);

a kde výroba analogů camptothecinu zahrnuje jeden nebo více kroků vybraných ze skupiny skládající se z;

	9 · ·	• ·	9 99 ·
* «	• ·	• · t		♦	•	«
• ♦	•	• ·	«	•	•	•
						•
• ·	9	« ·	•	•	•	• ·
• ·	99 9	• · ·			• ·	• ·

1) kroku vedoucího k získání sloučeniny I smícháním sloučeniny k, lithiačního činidla, formylačního činidla a jodačního činidla;

2) kroku vedoucího k získání sloučeniny m smícháním sloučeniny I, krotylalkoholu, triethylsilanu a kyseliny a reakcí této směsi bez použití rozpouštědla;

3) kroku vedoucího k získání sloučeniny I smícháním sloučeniny v, vedlejšího produktu kroku 2), s oxidačním činidlem a zásadou;

4) kroku vedoucího k získání sloučeniny n smícháním sloučeniny m, palladia jako katalyzátoru, zásady a katalyzátoru fázového přechodu a zpětným prouděním této směsi v rozpouštědle;

5) kroku vedoucího k získání sloučeniny o smícháním sloučeniny n, osmia jako katalyzátoru, ko-oxidačního činidla, zásady a asymetrického činidla;

6) kroku vedoucího k získání sloučeniny p smícháním sloučeniny o, zásady a jódu a zpětným prouděním této směsi v tekutině vzniklé smícháním alkoholu a vody;

7) kroku vedoucího k získání sloučeniny q smícháním sloučeniny p a desilylačnějodačního činidla;

8) kroku vedoucího k získání sloučeniny r smícháním sloučeniny q, palladia jako katalyzátoru a zásady a reakcí této směsi v 1-propanolu pod CO atmosférou;

9) kroku vedoucího k získání sloučeniny s smícháním sloučeniny r a demethylačního činidla a reakcí této směsi při teplotě místnosti.

10) kroku vedoucího k získání sloučeniny t reakcí sloučeniny sv přítomnosti tbutylakrylátu a zásady.

1) jako lithiační činidlo n-butyl lithný.

Vynález se také zabývá výše uvedenými procesy, ve kterých je v kroku 1) reakční teplota konstantní a je -30 °C až -40 °C.

3) jako oxidační činidlo TEMPO-chlornan sodný.

4) jako zásada uhličitan draselný nebo Ν,Ν-diisopropylethylamin.

4) jako rozpouštědlo tetrahydrofuran nebo tekutá směs diisopropyletheru-acetonitriluvody.

5) jako osmiový katalyzátor osmian (VI) draselný.

9 9		9 9 9	99	9 99 9
♦ ·	9 9	99 9 9	9 9	9
• *		9 9 9	9 9	9
				9
• 9		9 9 9	9 9	9 9
9 9	999	99 9 9»	99	99

6) jód vzhledem k sloučenině o 4-násobně.

Vynález se také zabývá výše uvedenými procesy, ve kterých se použije v kroku 7) jako desilylačně-jodační činidlo trifluorooctan jodostříbrný nebojodid N-chlorosukcinimido sodný.

Dále se vynález zabývá výše uvedenými procesy, ve kterých se sloučenina q přečišťuje pomocí purifikačních kroků, zahrnujících krok, ve kterém se přidává reakční produkt, získaný při výrobě sloučeniny q ze sloučeniny p, k vodné fázi zásaditého roztoku a zamíchá se; dále krok, ve kterém se přidává organické rozpouštědlo a zamíchá se, poté následuje odstranění organické fáze; a krok, ve kterém se vodná fáze okyseluje a extrahuje organickým rozpouštědlem.

Tento vynález se také zabývá výše uvedenými procesy, ve kterých se použije jako vodný zásaditý roztok vodný roztok hydroxidu sodného.

Dále se vynález zabývá výše uvedenými procesy, ve kterých se použije jako organické rozpouštědlo chloroform.

Tento vynález se také zabývá výše uvedenými procesy, ve kterých se sloučenina q přečišťuje opticky pomocí purifikačních kroků zahrnujících krok, ve kterém se reakční produkt, získaný při výrobě sloučeniny q ze sloučeniny p, rozpustí ve vysoce polárním rozpouštědle a poté se rozvrství méně polárním rozpouštědlem; a krok, ve kterém se precipitát přefiltruje a poté získaný filtrát koncentruje vysoušením za podmínek sníženého tlaku.

Dále se vynález zabývá výše uvedenými procesy, ve kterých se jako vysoce polární organické rozpouštědlo použije chloroform.

Vynález se také zabývá výše uvedenými procesy, ve kterých se jako méně polární organické rozpouštědlo použije n-hexan.

Dále se vynález zabývá výše uvedenými procesy, ve kterých se použije v kroku 6) jako zásada uhličitan draselný.

Vynález se také zabývá využitím tricyklického ketonu, získaného výše uvedenými metodami, při výrobě analogů camptothecinu.

Dále se vynález zabývá metodou přípravy analogů camptothecinu, ve které se nechá tricyklický keton, získaný pomocí metod popsaných výše, reagovat s 2’-amino-5’hydroxypropiofenonem.

Vynález se také zabývá výše uvedenými procesy, ve kterých se použije 2’-amino5’- hydroxypropiofenon získaný pomocí výše popsané metody.

99 9 ·

9999

4 4

999 99·

Dále se vynález zabývá výše uvedenými procesy, ve kterých se smíchá tricyklický keton a 2’-amino-5’- hydroxypropiofenon a vzniklá směs se nechá reagovat za podmínek inertní atmosféry.

Vynález zajišťuje efektivní přípravu 2’-amino-5’- hydroxypropiofenonu, který odpovídá AB-kruhové části CPT kostry, tak, že využívá tuto složku a umožňuje zavedení úplné syntézy CPT do praxe. Navíc co se týče sloučeniny c'a sloučeniny ď, které se uplatňují v některých způsobech přípravy daného vynálezu, nebyly o nich doposud nikde zjištěny žádné zmínky, a proto je považujeme za velmi užitečné použitelné nové sloučeniny.

Vynález také zajišťuje praktické provádění asymetrické syntézy sloučenin(y) využíváním složek, pomocí kterých získají výsledné sloučeniny(a) CDE-kruhovou část (tricyklickou ketonovou část) CPT kostry.

Co se týče syntézy 2’-amino-5’-hydroxypropiofenonu, který je součástí ABkruhové části CPT kostry, obsahuje tato metoda přípravy 2’-amino-5’hydroxypropiofenonu jeden či více následujících kroků:

1) krok vedoucí k výrobě 5-benzyloxy-2-nitrobenzaldehydu (sloučenina bj z 5hydroxy-2-nitrobenzaldehydu (sloučenina a);

2) krok vedoucí k výrobě 1-(5-benzyloxy-2-nitrofenol) -2-propen-1-ol (sloučenina cj ze sloučeniny b’;

3) krok vedoucí k výrobě 1-(5-benzyloxy-2-nitrofenol) -2-propen-1-on (sloučenina dj ze sloučeniny c’; a

4) krok vedoucí k výrobě 2’-amino-5’-hydroxypropiofenonu (sloučenina e) ze sloučeniny d’.

Jako typickou syntetickou dráhu zde uvádíme tuto dráhu:

·· ··· · > · · • · · >« ··

( kde R je ochranná skupina, kterou je možné odstranit katalytickou redukcí).

V tomto vynálezu není R ochranná skupina, která se může odstranit katalytickou redukcí, konkrétně určena, typickým představitelem jsou benzyletherové typy protektivních skupin, jako např. benzyl, methoxybenzyl, 2,6-dimethylbenzyl nebo 4nitrobenzylové skupiny, a dále benzylkarbonátové typy protektivních skupin, jako např. benzyloxykarbonyl, ačkoli konkrétně se vzhledem k ceně nejvíce používá benzyl.

Dále, co se týče sloučeniny a, která je výchozím materiálem a která se vyrábí známým způsobem, může se použít jak chemicky vyrobená konverzí z jiné sloučeniny, tak izolovaná a purifikovaná z různých druhů přírodních materiálů. Použít se může i komerčně dostupná sloučenina.

V následujícím odstavci jsou výše uvedené kroky 1 až 4 detailněji popsány.

V kroku 1) se sloučenina a rozpustí nebo resuspenduje v rozpouštědle, poté se přidá benzylační činidlo a zásada, a za stálého míchání a zahřívání se ze směsi získá sloučenina b.

Jako rozpouštědlo se použije Ν,Ν-dimethylformamid (DMF), dimethyl sulfoxid, chloroform, acetonitril, éthanol, voda apod. Z hlediska rozpustnosti a reaktivity je však nejlepší použít jako rozpouštědlo DMF.

Množství použitého DMF by mělo být 3-násobné až vícenásobné vzhledem k množství sloučeniny a, nejlépe množství 3 až 20-násobné.

Jako benzylační činidlo je vhodné použít konvenční, běžně dodávané činidlo. Konkrétními příklady jsou benzylchlorid, benzylbromid, benzyljodid, fenyldiazomethan, dibenzylkarbonát apod., nejvhodnější je použít benzylchlorid.

	* ·		•	··		4 4		• 444
•	«	• «		»	•		•
•	•	•	« 4	♦	•		•	•
•	•	4	• ·	4	•		•	4 4
	• ·	4 4·		♦ ♦		44		44

Množství použitého benzylačního činidla by se mělo řídit podle konkrétního druhu činidla, ačkoli v případě použití např. banzylchloridu je vhodné, aby množství činidla vzhledem k množství sloučeniny a bylo 1 až 5-násobné, nejlépe 1 až 2-násobné.

Jako zásada je vhodné použít konvenční, běžně dodávanou zásadu. Konkrétními příklady jsou uhličitan draselný, uhličitan sodný, uhličitan césnatý, hydroxid sodný, hydroxid draselný apod., nejvhodnější je použít uhličitan draselný.

Množství použité zásady by se mělo řídit podle konkrétního druhu zásady, ačkoli v případě použití např. uhličitanu draselného je vhodné, aby množství zásady vzhledem k množství sloučeniny a bylo 1 až 10-násobné, nejlépe 1 až4-násobné.

Teplota, při které se směs zahřívá, je 60 °C až 100 °C, nejlépe 60 °C až 80 °C.

Reakční čas je 0,5 až 24 hod., nejlépe 1 až 20 hod.

V kroku 2) se sloučenina c získá přidáváním Grignardova činidla ke sloučenině b za podmínek inertní atmosféry.

Jako inertní plyn se použije buď vzácný plyn jako je argon, helium, neon, krypton, xenon, radon apod. nebo plyn s nízkou reaktivitou jako je dusík, nejvhodnější je vzhledem k nákladům použití dusíku nebo argonu.

Jako Grignardovo činidlo je vhodné použít konvenční, běžně dodávané činidlo. Konkrétními příklady jsou vinylmagnesium bromid, vinylmagnesium chlorid, vinyl magnesium jodid apod., nejvhodnější je použít vinylmagnesium bromid.

Množství použitého Grignardova činidla by se mělo řídit podle konkrétního druhu činidla, ačkoli v případě použití např. vinylmagnesium bromidu je vhodné, aby množství Grignardova činidla vzhledem k množství sloučeniny b bylo 1 až 2-násobné, nejlépe 1 až 1,5-násobné.

Při výrobě sloučeniny c je možné přidávat Grignardovo činidlo k roztoku sloučeniny b, ale i naopak přidávat roztok sloučeniny b ke Grignardovu činidlu, ovšem vzhledem k tomu, aby se snížil na minimum vznik redukovaného meziproduktu (zde dále uvedeného jako sloučenina f)

(kde R je ochranná skupina, kterou je možno odstranit katalytickou redukcí), je vhodné přidávat Grignardovo činidlo k roztoku sloučeniny b a ne naopak.

• •	• 4	• •	• • 4 4	4 44	44 • •	4 44 4 • •
44 4 4 4	4 4	4 4
• 4		•	4	4 4		4	4	4	• 1
	• 4		4 4 4	444	44			44	44

Množství použitého rozpouštědla v dané reakci, např. tetrahydrofuranu (zde dále uvedeného jako THF) je v rozmezí deseti až stonásobku, pokud je nutno snížit výrobu alkoholu, použije se množství 50 až 100-násobné.

Teplota reakce by neměla být vyšší než 10 °C, pokud je nutno snížit výrobu alkoholu, pracuje se při teplotě -78 °C až -40 °C.

Doba reakce je 0,1 až 3 hodiny, nejlépe však 0,5 až 1 hodina.

V kroku 3) se sloučenina d získá tak, že se sloučenina c smíchá s oxidačním činidlem a směs se řádně zamíchá.

Jako oxidační činidlo je vhodné použít konvenční, běžně dodávané činidlo. Konkrétními příklady jsou dioxid manganatý, Dess-Martinův Periodinan, Jonesovo činidlo (Na2Cr2O7/H2SO₄), PCC, PDC, DMSO/oxalyl chlorid/triethylamin (Swernova oxidace), TEMPO-chlornan sodný apod., nejvhodnější je použít dioxid manganatý, Dess-Martinův Periodinan, Jonesovo činidlo a TEMPO-chlornan sodný.

Nejlepší je, aby se tato oxidační činidla připravila vždy čerstvá, v případě dioxidu manganatého se toto oxidační činidlo připraví čerstvě z manganistanu a síranu manganatého.

Množství použitého oxidačního činidla by se mělo řídit podle konkrétního druhu činidla, ačkoli v případě použití např. dioxidu manganatého je vhodné, aby množství oxidačního činidla vzhledem k množství sloučeniny c bylo 2 až 50-násobné, nejlépe 4 až 10-násobné.

Jako rozpouštědlo se použije chloroform, methylenchlorid, ethylacetát, benzen, toluen apod., nejvhodnější je použít chloroform a methylenchlorid.

Množství použitého rozpouštědla je 5 až 30-násobné, nejlépe 10 až 20-násobné.

Doba reakce je 1 až 48 hodin, nejlépe však 1 až 18 hodin.

V kroku 4) se sloučenina e získá katalytickou redukcí sloučeniny d.

Jako katalyzátor redukce se použije palladium-uhlík, pailadium-hydroxid-uhlík, rhodium-hliník apod., nejvhodnější je použít palladium-uhlík a palladium-hydroxid-uhlík.

Množství použitého katalyzátoru redukce vzhledem k množství sloučeniny d je 0,01 až 0,5-násobné, nejlépe 0,05 až 0,2-násobné.

Jako rozpouštědlo je vhodné použít konvenční, běžně dodávané rozpouštědlo, ovšem vzhledem k rozpustnosti je vhodné použít ethylacetát.

Množství použitého rozpouštědla je 5 až 50-násobné, nejlépe 10 až 20-násobné.

Doba reakce je 0,1 až 24 hodin, nejlépe však 1 až 3 hodiny.

Dále, místo výroby sloučeniny e výše uvedenými kroky 1) až 4) se ze sloučeniny

9 9

999

99 999999

9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9

999 99 99 99

a ze sloučeniny c se vyrobí sloučenina d;

a ze sloučeniny d se vyrobí sloučenina e:

V této syntetické dráze se získá sloučenina c přidáváním Grignardova činidla ke sloučenině a za podmínek inertní atmosféry. Dále, sloučenina d se získá smícháním sloučeniny c a oxidačního činidla, kdy se poté tato směs řádně zamíchá. Sloučenina e se získá katalytickou redukcí sloučeniny d. V této reakci se použije stejné oxidační a Grignardovo činidlo, jaké se použilo ve výše uvedených krocích 2) a 3). V této syntetické dráze se nevyužívá ochranné skupiny, proto se výroba AB-kruhové části provádí jednodušším způsobem.

Deriváty camptothecinu se vyrobí reakcí sloučeniny e, která se získá v kroku 4) nebo podle výše uvedené syntetické dráhy, a tricyklického ketonu. Jako tricyklický keton se použije např. sloučenina h:

(h)

0 0 00 0 <·

000 · 0 0 0 0 * 0 0 0 · 0 ·

0 0 0 ·· · • 0 0 0 0 0 0

000 00 ·· ··

Při výrobě CDE-kruhové části (části obsahující tricyklický keton) CPT kostry, se tricyklický keton připraví podle následující syntetické dráhy:

(kde TMS je trimethylsilylová skupina, Me je methyl, Et je ethyl, Pr je propyl a ^lBu je tbutyl).

Co se týče sloučeniny k, která je výchozím materiálem výše uvedené syntetické dráhy a která se dle této (Curranovy) dráhy vyrábí (Josien, H,; Ko, S. B.; Bom, D.: Curran, D. P. Chem. Eur. J. 1998, 4 67-83), může se použít jak chemicky vyrobená, konverzí z jiné sloučeniny, tak izolovaná a purifikovaná z různých druhů přírodních materiálů. Použít se může i vlastní přírodní materiál, který sloučeninu k obsahuje.

Nejlepší metodou na výrobu syntetického tricyklického ketonu je výše uvedená syntetická dráha, která obsahuje jeden či více kroků, vybraných ze skupiny 12 kroků, kde;

1) v kroku vedoucí k syntéze 4 - jodo - 2 - methoxy - 6-trimethylsilyl-3-pyridinkarbaldehydu (dále uváděného jako sloučenina I) z 2-methoxy-6- trimethylsilylpyridinu (dále uvedeného jako sloučenina k) se použije jako zásada n-butyl lithium a reakce se provádí při teplotě -30 °C až -40 °C;

2) v kroku vedoucí k syntéze 3-(2-butenyloxymethyl)-4-jodo-2- methoxy- 6-trimethylsilylpyridinu (dále uváděného jako sloučenina m) ze sloučeniny I se rozpouštědlo nepoužije;

···· · · · 9 9 9 *

9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 9

999 999 99 99 99 ·« ··«·

3) v kroku vedoucí k syntéze sloučeniny I z 3-hydroxymethyl -4-jodo-2-methoxy-6trimethylsilylpyridinu (dále uváděného jako sloučenina v) se použije jako oxidační činidlo TEMPO-chlornan sodný;

4) v kroku vedoucí k syntéze 4-ethyl-8-methoxy-6- trimethylsilyl-1H-pyrano[3,4-c] pyridinu (dále uváděného jako sloučenina n) ze sloučeniny m se použije jako reakční rozpouštědlo tekutá směs diisopropyletheru, acetonitrilu a vody; a jako zásada se použije N,N-diisopropylethylamin;

5) v kroku vedoucí k syntéze (S)-4-ethyl-3,4-dihydro-3,4- dihydroxy-8-methoxy-6-trimethylsilyl-1H-pyrano[3,4-c] pyridinu (dále uváděného jako sloučenina o) ze sloučeniny n se použije jako osmiový katalyzátor osmian draselný;

6) v kroku vedoucí k syntéze (S)-4-ethyl-3,4-dihydro-4- hydroxy-8-methoxy-6-trimethylsilyl-3-oxo-1H-pyrano[3,4-c] pyridinu (dále uváděného jako sloučenina p) ze sloučeniny o se reakční směs nechá zpětně proudit za použití čtyřnásobného objemu jódu;

7) v kroku vedoucí k syntéze (S)-4-ethyl-3,4-dihydro-4- hydroxy-6-jodo-8-methoxy3-oxo-1H-pyrano[3,4-c] pyridinu (dále uváděného jako sloučenina q) ze sloučeniny p se místo octové kyseliny použije jodid N-chlorosukcinimido-sodný;

8) v kroku, kde se sloučenina q chemicky čistí, se k základnímu roztoku přidá vodný roztok hydroxidu sodného tak, aby byl základní roztok zásaditý. Celá směs se promíchá s organickým rozpouštědlem, jako je chloroform, a poté se po okyselení znovu pomocí organického rozpouštědla, např. chloroformu, extrahuje vodná fáze.

9) v kroku, kde se sloučenina q čistí opticky, se sloučenina q rozpustí ve vysoce polárním rozpouštědle, jako je chloroform, a rozvrství se pomocí méně polárného rozpouštědla, jako je n-hexan. Vzniklý precipitát se odstraní filtrací a filtrát se zahustí;

10) v kroku vedoucí k syntéze propyl (S)-4-ethyl-3,4-dihydro-4- hydroxy-8-methoxy3-oxo-1H-pyrano[3,4-c]pyridin-6- karboxylátu (dále uváděného jako sloučenina r) ze sloučeniny q se použije jako palladiový katalyzátor octan palladia;

11) v kroku vedoucí k syntéze propyl (S)-4-ethyl-3,4,7,8- tetrahydro-4-hydroxy-3,8dioxo-1H-pyrano[3,4-c] pyridin-6- karboxylátu (dále uváděného jako sloučenina s) ze sloučeniny r se reakce provádí při teplotě místnosti;

12) v kroku vedoucí k syntéze 1,1-dimethylethyl (S)-4-ethyl -3,4,8,10-tetrahydro-4,6dihydroxy-3,10-dioxo-1H-pyrano[3,4-f] indolidin-7-karboxylátu (dále uváděného • * • 4

4444 » 4 4 I ·· jako sloučenina t) ze sloučeniny s se pomocí uhličitanu draselného provádí

Michelova adice.

Dále za 13) v kroku vedoucí k syntéze SN-38 z (S)-4-ethyl-7,8-dihydro-4hydroxy-1H-pyrano[3,4-f]indolidin-3,6,10(4H)-trionu (dále uváděného jako sloučenina h) ze sloučeniny e se SN-38 jednoduše získá provedením této reakci za podmínek inertní atmosféry.

V následujících odstavcích je výše uvedených 13 kroků dopodrobna vysvětleno.

V kroku 1) se sloučenina k rozpustí v rozpouštědle, poté se přidá lithiační, formylační nebo jodační činidlo^ směs se řádně zamíchá tak, aby vznikla sloučenina I.

Jako rozpouštědlo se použije tetrahydrofuran (THF), diethyether, hexan, heptan apod., nejvhodnější je použít vzhledem rozpustnosti a reaktivitě THF.

Jako lithiační činidlo je vhodné použít konvenční, běžně dodávané lithiační činidlo. Konkrétními příklady jsou n-butyllithium, s-butyllithium, t-butyllithium, lithium diisopropylamid (LDA), lithium bis(trimethylsilyl)amid (LiHMDS) apod., nejvhodnější je použít vzhledem k reaktivitě a snadnému zacházení n-butyllithium.

Množství použitého lithiačního činidla by se mělo řídit podle konkrétního druhu lithiačního činidla, ačkoli v případě použití např. n-butyllithia je vhodné, aby množství lithiačního činidla vzhledem k množství sloučeniny k bylo 2 až 10-násobné, nejlépe 2 až 5-násobné.

Konkrétními příklady formylačního činidla jsou N-formyl-N,N’,N’-trimethylethylenediamin, dimethylformamid (DMF) apod., nejvhodnější je použít vzhledem k následující jodaci N-formyl-N,N’,N’-trimethylethylenediamin.

Množství použitého formulačního činidla je v případě použití např. N-formylΝ,Ν’,Ν’-trimethylethylenediaminu 1 až 10-násobné vzhledem k množství sloučeniny k, nejlépe 1 až 3-násobné.

Jako jodační činidlo se použije jodid, N-jodosukcinimid (NIS) apod., nejvhodnější je použít vzhledem k reaktivitě a ceně jodid.

Množství použitého jodačního činidla je 1 až 10-násobné vzhledem k množství sloučeniny k, nejlépe 1 až 5-násobné.

Teplota reakce by se měla pohybovat v rozmezí 0 až -78 °C, nejlépe v rozmezí -30 °C až -40 °C.

V kroku 2) se spolu se sloučeninou I do reakce přidává krotylalkohol, triethylsilan a kyselina a směs se řádně zamíchá bez přidání rozpouštědla tak, aby vznikla sloučenina m.

*· · ···

Množství krotylalkoholu je 1 až 10-násobné vzhledem k množství sloučeniny k, nejlépe 2 až 5-násobné.

Množství triethylsilanu je 1 až 10-násobné vzhledem k množství sloučeniny k, nejlépe 1 až 4-násobné.

Jako kyselina se použije kyselina trifluorooctová (TFA), kyselina sírová, kyselina methansulfonová, kyselina chlorovodíková apod., nejvhodnější je vzhledem k reaktivitě použít TFA.

Množství použité kyseliny je v případě použití např. TFA 1 až 15-násobné vzhledem k množství sloučeniny I, nejlépe 5 až 10-násobné.

V kroku 3) se sloučenina I získá rozpuštěním sloučeniny v, vedlejšího produktu kroku 2), v rozpouštědle, poté se přidá oxidační činidlo a zásada a směs se řádně zamíchá.

Jako rozpouštědlo je vhodné použít konvenční, běžně dodávané rozpouštědlo. Konkrétními příklady jsou dichloromethan, chloroform, actonitril, toluen, n-hexan apod., nejvhodnější je použít vzhledem k reaktivitě toluen a n-hexan.

Konkrétními příklady oxidačního činidla jsou dioxid manganatý, Dess-Martinův Periodinan, Jonesovo činidlo (NasC^Oy/HLSCh), PCC, PDC, DMSO-oxalyl chloridtriethylamin (Swernova oxidace), TEMPO-chlornan apod., nejvhodnější je použít TEMPO-chlornan, ještě lépe TEMPO-chlornan sodný.

Množství použitého oxidačního činidla je v případě použití např. TEMPOchlornanu sodného 0,001 až 0,1-násobné (TEMPO) vzhledem k množství sloučeniny v, nejlépe 0,005 až 0,02-násobné. Chlornan sodný se použije v množství 1 až 5násobném, nejlépe 1 až 2-násobné vzhledem k množství sloučeniny v.

Jako zásadu je vhodné použít konvenční, běžně dodávanou zásadu. Konkrétními příklady jsou hydrogenuhličitan sodný, uhličitan sodný, uhličitan draselný, uhličitan vápenatý, hydroxid sodný, hydroxid vápenatý, triethylamin apod., nejvhodnější je použít hydrogenuhličitan sodný.

Množství použité zásady je v případě použití např. hydrogenuhličitanu sodného 1 až 10-násobné vzhledem k množství sloučeniny v, nejlépe 2 až 4-násobné.

Teplota reakce je -10 °C až 30 °C, pokud možno ne -10 °C až 10 °C, aby docházelo k dostatečnému blokování vedlejších reakcí.

Doba reakce je 0,5 až 10 hodin, nejlépe 0,5 až 5 hodin.

·· « • * · · • » · * · • · 9 ·· «·♦

99

9 9

9 » • 9 9

999 99 «· · »··

9 9

9 9 • 9 9

9 9 9

99

V kroku 4) se sloučenina m rozpustí v rozpouštědle, přidá se palladiový katalyzátor, zásada a katalyzátor fázového přechodu a směs se nechá zpětně proudit tak, aby vznikla sloučenina n.

Jako rozpouštědlo se použije acetonitril, tertrahydrofuran (THF), diisopropylether (IPE), diethylether, toluen, voda apod., nejvhodnější je použít vzhledem k reaktivitě použije acetonitril, THF, IPE a vodu, ještě lépe se použije THF nebo tekutá směs acetonitril-IPE-voda.

Jako palladiový katalyzátor se použije palladiumacetát, tetrakis(trifenylfosfin)palladium, dichlorobis- (trifenylfosfine)palladium, palladium chlorid apod., nejvhodnější je použít vzhledem k reaktivitě octan palladia.

Množství použitého palladiového katalyzátoru je 0,01 až 1-násobné vzhledem k množství sloučeniny m, nejlépe 0,05 až 0,2-násobné.

Jako zásadu je vhodné použít konvenční, běžně dodávanou zásadu. Konkrétními příklady jsou uhličitan sodný, uhličitan draselný, uhličitan vápenatý, uhličitan césnatý, triethylamin (TEA), Ν,Ν-diisopropylethylamin (DIPEA), hydroxid sodný, hydroxid draselný apod., nejvhodnější je použít uhličitan draselný a DIPEA .

Množství použité zásady je v případě použití např. DIPEA 1 až 20-násobné vzhledem k množství sloučeniny m, nejlépe 5 až 10-násobné.

Jako katalyzátor fázového přechodu je vhodné použít běžně dostupnou kvartérní amonnou sůl nebo crownový ether, nejvhodnější je použít tetrabutylammonium bromid.

Množství použitého katalyzátoru fázového přechodu je v případě použití např. tetrabutylammonium bromidu 0,1 až 3-násobné vzhledem k množství sloučeniny m, nejlépe 0,5 až 1,5-násobné.

Doba reakce jev případě použití THF 1 až 20 hodin, nejlépe 4 až 10 hodin. V případě použití tekuté směsi acetonitril-IPE-voda je reakční doba 0,5 až 10 hodin, nejlépe 1 až 5 hodin.

V kroku 5) se sloučenina n rozpustí v tekuté směsi alkohol-voda, přidá se osmiový katalyzátor, ko-oxidační činidlo, asymetrický katalyzátor, zásada a methansulfonamid a směs se řádně zamíchá tak, aby vznikla sloučenina o.

Konkrétními příklady alkoholů jsou methanol, ethanol, 1-propanol, isopropanol (IPA), 1-butanol, 2-butanol, t-butyl alkohol apod., nejvhodnější je použít vzhledem k reaktivitě t-butyl alkohol.

Jako katalyzátor osmia se použije osmium tetraoxid, osmian draselný (VI) apod., nejvhodnější je použít vzhledem k snadnému zacházení osmian draselný (VI).

·· ····

• · * ♦·· · · * · ·· «·· *·· ·· ·· ··

Množství použitého katalyzátoru je 0,001 až 0,1-násobné vzhledem k množství sloučeniny n, nejlépe 0,002 až 0,01-násobné.

Jako ko-oxidační činidlo se použije hexakyanoferát(lll) draselný, N-methymorfolin N-oxid (NMO) apod., nejvhodnější je použít vzhledem k reaktivitě hexakyanoferát (III) draselný.

Množství použitého ko-oxidačního činidla je v případě použití např. hexakyanoferátu(lll) draselného 1 až 10-násobné vzhledem k množství sloučeniny n, nejlépe 2 až 5-násobné.

Konkrétními příklady asymetrických katalyzátorů jsou (DHQD)₂PYR, (DHQD)₂PHAL, (DHQD)₂AQN apod., nejvhodnější je použít vzhledem k opticky většímu výtěžku (DHQD)₂PYR.

Množství použitého asymetrického katalyzátoru je v případě použití např. (DHQD)₂PYR 0,005 až 0,1-násobné vzhledem k množství sloučeniny n, nejlépe 0,01 až 0,05-násobné.

Jako zásadu je vhodné použít uhličitan sodný, uhličitan draselný, uhličitan vápenatý, uhličitan césnatý, hydroxid sodný, hydroxid draselný apod., nejvhodnější je použít vzhledem k reaktivitě uhličitan draselný.

Množství použité zásady je v případě použití např. uhličitanu draselného 1 až 20násobné vzhledem k množství sloučeniny n, nejlépe 4 až 10-násobné.

Množství použitého methansulfonamidu je 0,1 až 5-násobné vzhledem k množství sloučeniny n, nejlépe 0,5 až 2-násobné.

Teplota reakce je -10 °C až 30 °C, pokud možno -10 °C až 10 °C.

V kroku 6) se sloučenina o rozpustí v rozpouštědle, přidá se zásada, jód a směs se nechá zpětně proudit tak, aby došlo ke vzniku sloučeniny p.

Konkrétními příklady rozpouštědel jsou methanol, ethanol, 1-propanol, isopropanol (IPA), voda apod., nejvhodnější je použít vzhledem k reaktivitě tekutou směs methanol-voda.

Jako zásadu je vhodné použít konvenční, běžně dodávanou zásadu. Konkrétními příklady jsou uhličitan sodný, uhličitan draselný, uhličitan vápenatý, uhličitan césnatý, hydroxid sodný, hydroxid draselný apod., nejvhodnější je použít uhličitan vápenatý.

Množství použité zásady je v případě použití např. uhličitanu vápenatého 1 až 10-násobné vzhledem k množství sloučeniny o, nejlépe 2 až 5-násobné.

·· · • · · • · · • · · · • · · ··

Množství použitého jódu je 1 až 10-násobné vzhledem k množství sloučeniny o, nejlépe 3 až 5-násobné.

Doba reakce je 0,5 až 20 hodin, nejlépe 1 až 5 hodin.

V kroku 7) se sloučenina p rozpustí v rozpouštědle a směs se nechá reagovat s trifluorooctanem jodostříbrným (zde dále uvedeným jako l₂-CF₃COOAg) nebo jodidem N-chlorosukcinimidosodným (zde dále uvedeným jako NCS-Nal), dokud nevznikne sloučenina q.

Jako rozpouštědlo se použije l2-CF₃COOAg dichloromethan, karbon tetrachlorid, chloroform apod., nejvhodnější je použít dichloromethan. Použít se může i NCS-Nal octová kyselina, acetonitril apod., z nich je lepší použít vzhledem k reaktivitě octovou kyselinu.

Množství použitého l₂ z l₂-CF₃COOAg je 1 až 10-násobné vzhledem k množství sloučeniny p, nejlépe 2 až 4-násobné. Dále je množství použitého CF₃COOAg 1 až 10násobné vzhledem k množství sloučeniny p, nejlépe 2 až 4-násobné.

Množství použitého NCS z NCS-Nal je 1 až 20-násobné vzhledem k množství sloučeniny p, nejlépe 5 až 8-násobné. Dále je množství použitého Nal z NCS-Nal 1 až 20-násobné vzhledem k množství sloučeniny p, nejlépe 5 až 8-násobné.

Teplota reakce je v případě použití l₂-CF₃COOAg 10 °C až 60 °C, pokud možno 20 °C až 40 °C. V případě použití NCS-Nal je teplota zpětného proudění alespoň 20 °C, pokud možno je 50 °C až 80 °C.

Doba reakce je 5 až 48 hodin, nejlépe 15 až 24 hodin.

V kroku 8) se sloučenina q přidá k základnímu rozpouštědlu, jako je např. vodný 0,2N hydroxid sodný, a směs se řádně zamíchá, aby vznikla sloučenina s otevřeným laktonovým kruhem, sloučenina u:

OMe OH (u)

HO Et (kde Me je methyl a Et je ethyl), která je rozpustná v základním vodném roztoku. Při přečišťování roztoku organickým rozpouštědlem se vznikající neutrálně-zásaditá hmota přesouvá do organické vrstvy. Organická vrstva se pak oddělí a poté se vodná fáze okyselí kyselinou a extrahuje pomocí organického rozpouštědla tak, aby se izolovala znovu sloučenina q, ovšem v lepší čistotě.

Normalita základního rozpouštědla je 0,01 až 5N, lépe 0,1 až 1N a nejlépe 0,2 až

0,5N.

Konkrétními příklady zásad jsou hydroxid draselný, hydroxid vápenatý, hydroxid sodný, uhličitan draselný, uhličitan sodný apod., nejvhodnější je použít hydroxid sodný.

Jako rozpouštědlo je vhodné použít konvenční, běžně dodávané rozpouštědlo. Konkrétními příklady jsou dichloromethan, chloroform, ethylacetát, toluen, diethyl ether, diisopropylether apod., nejvhodnější je použít dichloromethan a chloroform.

Konkrétními příklady kyselin jsou kyselina chlorovodíková, kyselina sírová, kyselina dusičná, kyselina fosforečná, kyselina trifluorooctová apod., nejvhodnější je použít kyselinu chlorovodíkovou.

V kroku 9) se sloučenina q rozpustí ve vysoce polárním rozpouštědlu, směs se pak rozvrství pomocí méně polárního rozpouštědla, aby se vysrážely krystaly, které se pak přefiltrují. Filtrát se pak zahustí tak, že se vzorek za podmínek nízkého tlaku vysuší. Získané krystaly jsou racemické povahy. Jako zbytek se získá více opticky čistší sloučenina q.

Jako rozpouštědlo je vhodné použít chloroform, dichloromethan, ethylacetát, methanol, ethanol, propanol apod., nejvhodnější je použít chloroform.

Množství použitého vysoce polárního rozpouštědla je v případě chloroformu 1 až 10 ml, nejlépe 3 až 6 ml na 1 g sloučeniny q.

Konkrétními příklady vysoce polárních rozpouštědel jsou n-hexan, n-heptan, diethylether apod., nejvhodnější je použít n-hexan.

Poměr vysoce polárního rozpouštědla k méně polárnímu rozpouštědlu je v případě dvojice chloroform : n-hexan 10 : 1 až 1 : 20, nejlépe 2 : 1 až 1 : 2.

Teplota při krystalizačním procesu by neměla přesáhnout teplotu místnosti, pokud možno by neměla být vyšší jak 5 °C.

V kroku 10) se sloučenina q rozpustí ve 1-propanolu, přidá se palladiový katalyzátor a zásada a tato směs se nechá spolu reagovat za podmínek CO atmosféry tak, aby vznikla sloučenina r.

Jako palladiový katalyzátor je vhodné použít palladium octan, tetrakis(trifenylfosfin)palladium, dichlorobis- (trifenylfosfin)palladium, palladium chlorid apod., nejvhodnější je vzhledem k reaktivitě použít palladium octan.

Množství použitého palladiového katalyzátoru je 0,005 až 0,5-násobné vzhledem k množství sloučeniny q, nejlépe 0,01 až 0,1-násobné.

Jako zásadu je vhodné použít konvenční, běžně dodávanou zásadu. Konkrétními příklady jsou uhličitan sodný, uhličitan draselný, uhličitan vápenatý, uhličitan césnatý, triethylamin (TEA), Ν,Ν-diisopropylethylamin (DIPEA), hydroxid sodný, hydroxid draselný apod., nejvhodnější je použít uhličitan draselný.

Množství použité zásady je v případě použití např. uhličitanu draselného 1 až 20násobné vzhledem k množství sloučeniny q, nejlépe 4 až 10-násobné.

Teplota zpětného prouděni by měla být 20 °C, pokud možno by neměla být vyšší než 50 °C.

V kroku 11) se sloučenina r rozpustí v rozpouštědle, přidá se demethylační činidlo a zásada a tato směs se nechá spolu reagovat, dokud nevznikne sloučenina s.

Jako rozpouštědlo je vhodné použít acetonitril, chloroform, dichloromethan, toluen apod., nejvhodnější je použít acetonitril.

Konkrétními příklady demethylačních činidel jsou jodid chlorotrimethylsilansodný, jodotrimethylsilan, kyselina jodovodíková, kyselina bromovodíková apod., nejvhodnější je použít jodid chlorotrimethylsilanosodný.

Množství použitého demethylačního činidla je v případě použití např. jodidu chlorotrimethylsilanosodného 1 až 10-násobné vzhledem k množství sloučeniny r, nejlépe 2 až 5-násobné.

V kroku 12) se sloučenina s rozpustí v rozpouštědle, přidá se zásada a tato směs se nechá spolu reagovat za podmínek inertní atmosféry. K získané směsi se přidá tbutyl akrylát a směs se řádně zamíchá za podmínek inertní atmosféry tak, aby vznikla sloučenina t.

Jako rozpouštědlo je vhodné použít dimethylsulfoxid (DMSO), Ν,Ν-dimethylformamid (DMF) apod., nejvhodnější je použít vzhledem k reaktivitě DMSO.

Jako zásadu je vhodné použít uhličitan draselný, uhličitan sodný, hydroxid sodný, hydroxid draselný apod., nejvhodnější je použít uhličitan draselný.

Množství použité zásady je v případě použití např. uhličitanu draselného 1 až 20násobné vzhledem k množství sloučeniny s, nejlépe 2 až 5-násobné.

Jako inertní plyn je vhodné použít vzácný plyn jako je argon, helium, neon, krypton, xenon, radon apod. nebo plyn s nízkou reaktivitou, např. dusík. Nejvhodnější je použít vzhledem k ceně argon a dusík.

Množství použitého t-butylakrylátu je 1 až 20-násobné vzhledem k množství sloučeniny s, nejlépe 8 až 12-násobné.

Teplota reakce je 20 až 80 °C, nejlépe 40 °C až 60 °C.

Doba reakce je 5 až 48 hodin, nejlépe ne více než 24 hodin, aby nedocházelo k rozkladu sloučeniny t.

V kroku 13) se sloučenina h a sloučenina e rozpustí v rozpouštědle, přidá se kyselina a tato směs se za stálého míchání zahřívá za podmínek inertní atmosféry, aby vznikla sloučenina SN-38.

Jako rozpouštědlo je vhodné použít toluen, kyselinu octovou apod., nejvhodnější je použít tekutou směs toluenu a octové kyseliny.

Jako kyselinu je vhodné použít kyselinu toluensulfonovou, kyselinu methansulfonovou, kyselinu trifluoroctovou apod., nejvhodnější je použít vzhledem k reaktivitě kyselinu toluensulfonovou.

Množství použitého kyseliny v případě použití např. kyseliny toluensulfonové je 1 až 100 mg na 1 g sloučeniny h, nejlépe 10 až 30 mg.

Množství použité sloučeniny e je 1 až 3-násobné vzhledem k množství sloučeniny h, nejlépe 1 až 1,5-násobné.

Teplota reakce je mezi 50 °C a teplotou zpětného proudění, pokud možno mezi 80 °C a teplotou zpětného proudění.

Na následujících stránkách bude předkládaný vynález popsán podrobně na příkladech, kterými ovšem není vynález limitován.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Výroba sloučeniny b'

BnO,

CHO

HO.

CHO benzylation reagent base

NO₂ in DMF 'A no₂

(a) (bj kde Bn je benzyl.

Sloučenina a (38,5 g, 0,230 mol) se rozpustila ve 116 ml DMF nebo acetonu. Za stálého míchání se pod argonovou atmosférou a při teplotě místnosti k této směsi přidal uhličitan draselný (33,4 g, 0,242 mol, 2,1 ekv.) a 27,8 ml (0,242 mol, 1,05 ekv) nebo 59,95 ml (0,461 mol, 2 ekv.) benzyl chloridu. Poté se směs zahřála na 60 °C a řádně se třepala po dobu 20 hod. za občasné kontroly přítomnosti sloučeniny a. Poté, co již sloučeninu a nebylo ve směsi možné zjistit, se směs přefiltrovala sáním.

Pevný materiál se promyl stejným rozpouštědlem, kterého se použilo i v reakci. Filtrát a tekutina zbylá po promytí se smíchaly a rozpouštědlo se nechalo odpařovat za podmínek sníženého tlaku. Ke zbytku se přidala voda (300 ml). Směs se řádně promíchala a sraženina se přefiltrovala sáním a nechala se vysušit na vzduchu. Poté se přefiltrovaný materiál rozpustil v 170 ml ethylacetátu. Tato směs se za stálého míchání přidala k 1 I hexanu. Vzniklá sraženina se přefiltrovala sáním, promyla 300 ml směsi ethylacetátu a hexanu (1:10) a nechala vysušit za podmínek sníženého tlaku.

Experiment (Exp.) 1 a 2 se liší v rozdílném množství benzylchloridu a v Exp. 3 se v reakci použilo jako rozpouštědlo aceton.

Tabulka 1

	Rozpouštědlo reakce	Množství benzyl chloridu	Doba reakce	Výtěžek po izolaci
Exp. 1	DMF	1,05 eq.	20 hod	94 %
Exp. 2	DMF	2,00 eq.	1 hod	94 %
Exp. 3	aceton	2,00 eq.	18 hod	-

méně než byl limit detekce

Jak je vidět z tabulky 1, na úplné dokončení reakce s výtěžem 94 % za použití 1,05 ekv. benzylchloridu bylo nutno 20 hod. (Exp. 1). Při použití 2,00 ekv. Benzylchloridu (Exp. 2) reakce skončila po 1 hod a výtěžek byl také 94 %. Minimální vstupní požadavek do reakce bylo trojnásobné množství DMF, které bylo potřeba k tomu, aby během míchání nevznikala sraženina. Pokud se použilo jako rozpouštědlo reakce

aceton, reakce nazačala probíhat ani za podmínek zpětného proudění i 18 hodin po vytvoření reakční směsi.

Podmínky pro HPLC :

Sloupec: Inertsil ODS-2, 5 pm, 4,6 mm IDx250 mm (Gl pro vědecké účely) Teplota: konstantní teplota cca 40 °C Mobilní fáze: směs voda : acetonitril (1:1)

Průtok: 1ml/min

Detekce: 220 nm

Příklad 2

Výroba sloučeniny c'

ΒηΟ,ζΓχΧ

BnO

OC (f) (bj kde Bn je benzyl.

Sloučenina b'(1,0 g, 3,89 mmol) se rozpustila ve 20 ml THF. Za stálého míchání se k této na ledu zchlazené směsi přidával pod ochrannou argonovou atmosférou po dobu 15 minut vinylmagnesium bromid (1,0M THF roztok, 5,84 ml, 5,84 mmol, 1,5 ekv). Během přidávání se vnitřní teplota udržovala na 3 až 10 °C. Po 1 hod. míchání se reakční roztok přidal za stálého míchání k saturovanému vodnému roztoku chloridu amonného (20 ml). Poté se přidalo 20 ml ethylacetátu a 4 ml hexanu a získaná organická vrstva se promyla 20 ml vody a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. Směs se vysušila přidáním 3 g síranu sodného. Rozpouštědlo se nechalo odpařit za podmínek sníženého tlaku, dokud se nezískal reakční produkt A.

Sloučenina b', rozpuštěná v THF roztoku, která se připravila podle výše uvedeného postupu, se přidávala pod ochrannou argonovou atmosférou po dobu 15 minut k ledovému roztoku vinylmagnesium bromidu (1,0M THF roztok, 5,84 ml). Během přidávání se vnitřní teplota udržovala na 3 až 10 °C. Po 1 hod. míchání se reakční roztok přidal za stálého míchání k nasycenému vodnému roztoku chloridu amonného (20 ml). Poté se přidalo 20 ml ethylacetátu a 4 ml hexanu a získaná organická vrstva se promyla 20 ml vody a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. Směs se vysušila přidáním 3 g síranu sodného. Rozpouštědlo se nechalo odpařit za podmínek sníženého tlaku, dokud se nezískal reakční produkt B.

Produkty reakce A a B se přečistily přes silikagelovou sloupcovou chromatografii (ethylacetát : hexan = 1 : 20) a použily v Exp. 4 (produkt reakce A) a Exp. 5 (produkt reakce B).

Tabulka 2

	Výtěžek sloučeniny c'	Výtěžek sloučeniny f (oblast maxima %)
Exp. 4	84,0 %	3,5 %
Exp. 5	26,8 %	11,3%

Jak je vidět z tabulky 2, pokud se přidalo k roztoku, obsahující sloučeninu b', Grignardovo činidlo, výtěžek reakce se zvýšil o 57 % a tvorba sloučeniny f, meziproduktu, se snížila.

Podmínky pro HPLC: viz příklad 1

Příklad 3

Výroba sloučeniny c'

Sloučenina b'(1,0 g, 3,89 mmol) se rozpustila v 10 až 100 ml THF. Za stálého míchání se k této směsi, obsahující sloučeninu b', přidávala pod ochrannou argonovou atmosférou po dobu více jak 15 minut vinylmagnesium bromid (1,0M THF, 5,84 ml, 5,84 mmol, 1,5 ekv). Po 1 hod. míchání se reakční roztok přidal za stálého míchání k nasycenému vodnému roztoku chloridu amonného (20 ml). Poté se přidalo 20 ml ethylacetátu a 4 ml hexanu a získaná organická vrstva se rozvrstvila a promyla 20 ml vody a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. Směs se vysušila přidáním 3 g síranu sodného. Rozpouštědlo se nechalo odpařit za podmínek sníženého tlaku. Zbytek se přečistil stejným způsobem, jak je popsáno v příkladu 2 (Exp. 4 a 5). Exp. 6 představuje výsledky reakce prováděné při 20 °C za použití 20-násobného množství rozpouštědla. Exp. 7 až 9 představuje výsledky reakce prováděné při 3 °C za použití 10, 40 a 100-násobného množství rozpouštědla. Výsledky reakcí jsou uvedeny v tabulce 3.

Tabulka 3

	Teplota reakce	Množství rozpouštědla	Výtěžek sloučeniny ď (oblast maxima %)	Výtěžek sloučeniny f (oblast maxima%)
Exp.4	3°C	20-násobné	84,0 %	3,5 %
Exp.6	20 °C	20-násobné	68,7 %	4,8 %
Exp.7	3°C	10-násobné	81,1 %	5,7 %
Exp.8	3°C	40-násobné	88,6 %	3,5 %
Exp.9	3°C	100-násobné	90,2 %	2,8 %

Jak je vidět z tabulky 3, pokud se reakce prováděla za teplot nižších než je 10 °C, ještě lépe nižších než 5 °C, tvorba sloučeniny f se snížila a výtěžek sloučeniny c'se zvýšil o 15 %. V případě použití 100-násobného množství rozpouštědla (Exp. 9) se tvorba sloučeniny f snížila a výtěžek sloučeniny c'se zvýšil o 6 %.

Podmínky pro HPLC: viz Příklad 1.

Příklad 4

Výroba sloučeniny d'

kde Bn je benzyl.

1) Příprava dioxidu manganatého:

Za stálého míchání a při teplotě místnosti se přidal k vodnému roztoku manganistanu draselného (96,0 g/600 ml, 0,607 mol) vodný roztok pentahydrátu síranu manganatého (122 g, 150 ml, 0,506 mol) a 117 ml 40% hydroxidu sodného. Směs se míchala 18 hod, poté se vzniklá sraženina přefiltrovala sáním a promyla vodou. Ze sraženiny, která se nechala vyschnout volně na vzduchu, se získalo 91,2 g dioxidu manganatého.

2) Výroba sloučeniny ď

Sloučenina c' (2,00 g, 7,02 mmol) se rozpustila v 20 ml chloroformu, dichlormethanu nebo ethylacetátu. Dioxid manganatý (8,0 g, 4-násobné množství, 92,0 mmol, 13 ekv.), který se získal dle výše uvedené metody, se přidal za důkladného míchání při 25 °C za podmínek argonové atmosféry ke sloučenině c'. Směs se dále důkladně míchala po dobu 15 hod. Poté, co již nebylo možné ve směsi zjistit přítomnost výchozí látky, se směs přefiltrovala sáním. Získaná sraženina se promyla 20 ml chloroformu. Filtrát a tekutina zbylá po promytí se smíchaly a rozpouštědlo se nechalo odpařovat za podmínek sníženého tlaku. Prováděl se tak Exp. 10 a Exp. 12.

Tabulka 4

	Rozpouštědlo reakce	Doba reakce	Zbytky výchozího materiálu (oblast maxima %)	Výtěžek
Exp. 10	Chloroform	15 hod	-	91 %
Exp. 11	Dichloromethan	3 hod	-	79 %
Exp. 12	Ethylacetát	24 hod	8%	-

méně než byl limit detekce

Jak je vidět z tabulky 4, pokud se použilo jako rozpouštědlo v reakci chloroform nebo dichlormethan, výtěžek sloučeniny ď byl dobrý. Konkrétně v případě použití dichlormethanu jako rozpouštědla v reakci se doba reakce snížila na jednu třetinu. Na druhou stranu v případě použití ethylacetátu zůstávala sloučenina c' v reakci dokonce i po 24 hodinách.

Příklad 5

Výroba sloučeniny ď (2)

K důkladně míchané, na ledu zchlazené směsi 7,0 g (3,5 mol) sloučeniny c', toluenu (70 ml), ethylacetátu (70 ml), vody (10 ml) a 38,3 mg (1 mol%) TEMPO, se přidal vodný roztok chlornanu sodného (obsah chlóru min. 5,0 %; 42 ml) a vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného (7,1 g v 60 ml vody) za podmínek stálého chlazení (2 až 6 °C, 55 min). Po 5 min byla ve směsi pomocí HPLC (oblast maxima %) zjištěna přítomnost 0,4 % výchozí látky. Směs se nechala odstát a vzniklá organická fáze se odebrala a promyla směsí jodidu draselného a hydrogensíranu draselného (žlutá -» červenohnědá), nasyceným roztokem thiosíranu sodného a poté vodou. Rozpouštědlo se nechalo odpařovat za podmínek sníženého tlaku tak, že se získalo 6,4 g sloučeniny ď (výtěžek 91 %, čistota 92,6 %, zjištěno pomocí HPLC). Sloučenina se pak přečistila rekrystalizací ze směsi methanolu a vody (25 : 1). Přečištěním se získalo 2,3 g sloučeniny ď (z výchozích 3,0 g; purifikovaná sloučenina ď, 2,3 g, zisk: 77 %, čistota: 95,2 %; zjištěno pomocí HPLC).

Podmínky pro HPLC: viz Příklad 1.

Příklad 6

Výroba sloučeniny e

kde Bn je benzyl.

K důkladně míchanému, na ledu zchlazenému roztoku 1,84 g (6,5mmol) sloučeniny ď ve 37 ml ethylacetátu, se přidalo 0,69 g (0,65mmol, 10 mol%) 10% palladium-ůhlíku za podmínek ochranné argonové atmosféry. Směs se důkladně míchala při 25 °C za podmínek vodíkové atmosféry a část směsi se periodicky odebírala jako vzorek pro HPLC. Reakční směs se přefiltrovala a filtrát se nechal odpařit. Získány byly Exp. 13 a Exp. 14.

Tabulka 5

	Doba reakce	Výtěžek sloučeniny e	Výtěžek sloučeniny g (oblast maxima%)
Exp. 13	0,1 hod	71 %	14 %
Exp. 14	13 hod	81 %	0 %

Jak je vidět z tabulky 5, reakce probíhala více jak 13 hodin, výtěžek sloučeniny e vzrostl o 10 % a tvorba vedlejšího produktu, sloučeniny g, se snížila.

Podmínky HPLC:

Sloupec: Inertsil ODS-2, 5 pm, 4,6 mm IDx250 mm (GL pro vědecké účely) Teplota: konstantní teplota cca 40 °C Mobilní fáze: směs voda : acetonitril (1 : 1)

Průtok: 1ml/min

Detekce: 254 nm

Příklad 7

Úplná syntetická výroba 2'-amino-5'- hydroxypropiofenonu

Úplná syntetická výroba 2’-amino-5’- hydroxypropiofenonu probíhala následujícím způsobem:

1) Výroba sloučeniny b'

Sloučenina a (1,0 g, 5,98 mmol) se rozpustila ve 3 ml DMF. K míchané směsi sloučeniny a se přidal za podmínek ochranné argonové atmosféry a teplotě místnosti uhličitan draselný (0,87 g, 6,28 mmol, 2,1 eq.) a 0,72 ml (6,28 mmol, 1,05 eq.) benzylchloridu. Poté se sloučenina zahřála na teplotu 60 °C a po dobu 20 hod. se důkladně míchala. Během této doby se provedly kontroly obsahu sloučeniny a ve směsi pomocí metody HPLC. Poté, co ve směsi již nebylo možné zjistit přítomnost sloučeniny a, se směs přefiltrovala sáním.

Pevný materiál se promyl 3 ml DMF. Filtrát a tekutina zbylá po promytí se smíchaly a rozpouštědlo se nechalo odpařovat za podmínek sníženého tlaku. Po odpaření se zbytek rozpustil ve 100 ml vody. Po chvilce míchání se nerozpustný materiál ofiltroval sáním a nechal se volně uschnout na vzduchu. Poté se materiál nechal znovu vysušit za podmínek sníženého tlaku (1 mmHg, při 20 °C), získalo se tak 1,45 g (výtěžek 95 %) sloučeniny b'jako světle žluté pevné látky. Fyzikální vlastnosti sloučeniny b' jsou následující:

Sloučenina b'; bod tání 71 až 73 °C.

¹H-NMR (400 MHz, CDCI3): δ 5,21 (2H, s, PhCH₂O), 7,21 (1H, dd, J = 2,8; 9,3 Hz), 7,35 až 7,44 (6H, m), 8,16 (1H, d, J = 9,3 Hz), 10,48 (1H, s, CHO).

IR(KBr): 1250, 1333, 1514, 1589, 1697 cm'¹.

EI-MS: m/z 257 (M⁺).

2) Výroba sloučeniny c'

Sloučenina b' (1,0 g, 3,89 mmol) se rozpustila ve 20 ml THF. Za stálého míchání se k této na ledu zchlazené směsi přidával pod ochrannou argonovou atmosférou po dobu 15 minut vinylmagnesium bromid (1,0M THF roztok, 5,84 ml, 5,84 mmol, 1,5 ekv). Během přidávání se vnitřní teplota udržovala na 3 až 10 °C. Po 1 hod. míchání se reakční roztok přidal za stálého míchání k nasycenému vodnému roztoku chloridu amonného. Poté se přidalo 20 ml ethylacetátu a 4 ml hexanu a získaná organická vrstva se oddělila a promyla 20 ml vody a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. Směs se vysušila přidáním 3 g síranu sodného. Rozpouštědlo se nechalo odpařit za podmínek sníženého tlaku. Zbytek (1,19 g) se přečistil pře silikagelovou sloupcovou chromatografií (ethylacetát: hexan = 1 :

··	9	• 9 9	99 9999
♦ ·
• ·	9	9 9 9	9 9 9
9 9	9	9 9·	9 9 9 ·
9 9	99·	99 9 99	• 9 99

20) a získalo se tak 0,93 g sloučeniny c'(výtěžek 84 %) jako oranžové pevné látky. Fyzikální vlastnosti sloučeniny c'jsou následující:

Sloučenina c'; bod tání 60 až 63 °C.

¹H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ: 5,15 (2H, s, PhCH₂O), 5,22 až 5,26 (1H, m), 5,39 až 5,44 (1H, m), 5,90 (1H, d, J = 5.1 Hz), 6,06 (1H, ddd, J = 5,1; 10,5; 15,6 Hz), 6,94 (1H, dd, J = 2,9; 9,0 Hz), 7,34 (1H, d, J = 2,9 Hz), 7,35 až 7,44 (5H, m), 8,04 (1H, d, J = 9,0 Hz).

IR (KBr): 3298, 1614, 1582, 1506, 1292, 1229 cm'¹.

EI-MS: m/z 285 (M⁺).

3) Výroba sloučeniny d'

Sloučenina c' (2,00 g, 7,02mmol) se rozpustila ve 20 ml chloroformu. Dioxid manganatý (8,0 g, 4-násobné množství, 92,0mol, 13 ekv.) se přidal za důkladného míchání při 25 °C za podmínek argonové atmosféry ke sloučenině c'. Směs se dále důkladně míchala po dobu 15 hod. Poté, co již nebylo možné ve směsi zjistit přítomnost výchozí látky, se směs přefiltrovala sáním. Získaná pevná látka se promyla 20 ml chloroformu. Filtrát a tekutina zbylá po promytí se smíchaly a rozpouštědlo se nechalo odpařovat za podmínek sníženého tlaku. Zbytek se přečistil pře silikagelovou sloupcovou chromatografií (ethylacetát : hexan = 1 : 20) a získalo se tak 1,88 g sloučeniny d' (výtěžek 95 %) jako bílé pevné látky. Fyzikální vlastnosti sloučeniny d' jsou následující:

Sloučenina ď; bod tání 84 až 85 °C.

¹H-NMR (400 MHz, CDCI₃) δ 5,17 (2H, s, PhCH₂O), 5,83 (1H, d, J = 17,7 Hz),

6,01 (1H, d, J = 10,6 Hz), 6,62 (1H, dd, J = 10,6; 17,7 Hz), 6,91 (1H, d, J = 2,7 Hz), 7,10 (1H, dd, J = 2,7; 9,0Hz), 7,37 až 7,43 (5H, m), 8,17 (1H, d, J = 9,0 Hz). IR (KBr): 1686, 1578, 1506, 1342, 1244 cm'¹.

EI-MS: m/z 283 (M⁺).

4) Výroba sloučeniny e

K důkladně míchanému, na ledu zchlazenému roztoku s 1,84 g (6,5 mmol) sloučeniny d' ve 37 ml ethylacetátu se přidalo 0,69 g (0,65 mmol, 10 mol%) 10% palladium-uhlíku za podmínek ochranné argonové atmosféry. Směs se důkladně míchala při 25 °C za podmínek vodíkové atmosféry. Po 13 hodinách důkladného míchání se katalyzátor odebral z reakční směsi filtrací. Filtrát se nechal odpařit

za podmínek sníženého tlaku a získalo se tak 0,87 g (výtěžek 81 %, čistota 91,14 %, zjištěno pomocí HPLC) hrubého pruduktu jako oranžové pevné látky. Ze získaného reakčního produktu se nechalo 500 mg přečistit přes silikagelovou sloupcovou chromatografií (ethylacetát: hexan = 1 : 10 -> 1 : 4) a získalo se tak 421 mg sloučeniny e (výtěžek 84 %, čistota 95,59 %, zjištěno pomocí HPLC) jako žluté pevné látky. Fyzikální vlastnosti sloučeniny e, včetně NMR, jsou následující: Sloučenina e; bod tání 131 až 140 °C.

¹H-NMR (400 MHz, CDCI3) 61,20 (3H, t, J = 7,2 Hz), 2,93 (2H, q, J = 7,2 Hz), 6,59 (1H, d, J = 8,8 Hz), 6,88 (1H, dd, J = 2,9; 8,8 Hz), 7,23 (1H, d, J = 2,9 Hz).

IR (KBr): 3379, 3296, 1670, 1447, 1194 cm'¹.

EI-MS: m/z 165 (M⁺).

Příklad 8

Syntetická výroba sloučeniny e bez ochranné skupiny R

1) Výroba sloučeniny c” ze sloučeniny a

Sloučenina a (500 mg, 2,99 mmol) se rozpustila v 15 ml THF. Za stálého míchání se k této na ledu zchlazené směsi přidával pod ochrannou argonovou atmosférou po dobu 5 minut vinylmagnesium bromid (1,0M THF roztok, 7,5 ml, 7,5 mmol, 2,5 ekv.). Po 1 hod. míchání se reakční roztok přidal ke zchlazené kyselině chlorovodíkové (30 ml, 1 mol/l). Poté se přidalo 30 ml ethylacetátu a 5 ml hexanu a získaná organická vrstva se oddělila a nachala promýt 50 ml vody a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného a nechala se vysušit přidáním 3 g síranu sodného. Rozpouštědlo se nechalo odpařit za podmínek sníženého tlaku. Zbytek se přečistil přes silikagelovou sloupcovou chromatografií (ethylacetát : hexan = 1 ; 10 —* 1 :3)a získalo se tak 541 mg sloučeniny c (výtěžek 93 %) jako žluto-hnědé pevné látky.

Sloučenina c;

4444 ·« 44 444444 4

444 4*4 4444

444 ··· ♦· 44 44 ¹H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ 5,22 až 5,26 <1H, m), 5,35 až 5,40 (1H, m), 5,90 až 5,92 (1H, m), 6,06 (1H, ddd, J = 5,2; 10,5; 15,6 Hz), 6,83 (1H, dd, J = 2,7; 9,0 Hz), 7,19 (1H, d, J = 2,7 Hz), 8,00 (1H, d, J = 9,0 Hz).

2) Výroba sloučeniny d ze sloučeniny c

Sloučenina c” (1,00 g, 5,13mmol) se rozpustila v 8 ml acetonu. Za stálého míchání se k této na ledu zchlazené směsi přidalo Jonesovo činidlo (3,0 ml, 5 mmol, 1,5 ekv.). Po 0,5 hod. míchání se k reakční směsi přidaly 3 kusy ledu a nasycený vodný roztok hydrogensíranu sodného (5 ml). Poté se přidalo 50 ml ethylacetátu a 5 ml hexanu a získaná organická vrstva se oddělila a nechala promýt 50 ml vody a nasyceným roztokem chloridu sodného a nechala se vysušit přidáním 5 g síranu sodného. Rozpouštědlo se nechalo odpařit za podmínek sníženého tlaku a získalo se tak 0,82 g sloučeniny d (výtěžek 83 %).

Sloučenina d;

¹H-NMR (400M Hz, DMSO-d₆) δ 5,84 (1H, d, J = 17,6 Hz); 6,11 (1H, d, J = 10,7 Hz); 6,60 (1H, dd, J = 10,7; 17,7 Hz), 6,75 (1H, d, 2,7 Hz), 7,03 (1H, dd, 9,1 Hz), 8,13 (1H, d, J = 9.1 Hz); 11,41(1 H, s).

3) Výroba sloučeniny e ze sloučeniny d

(ď’) (e)

Sloučenina d (100 mg, 0,513 mmol) se rozpustila v 1 ml ethylacetátu. Za stálého míchání se ktéto na ledu zchlazené směsi přidalo 55 mg (0,0513 mmol, 10 mol%) 10% palladium-uhlíku za podmínek ochranné argonové atmosféry. Směs se důkladně míchala při teplotě místnosti pod ochrannou vodíkovou atmosférou. Katalyzátor se odebral z reakční směsi filtrací a filtrát se nechal odpařit za podmínek sníženého tlaku a získalo se tak 64 mg sloučeniny e (výtěžek 76 %) jako žluté pevné látky.

AA A · ·Α AA ♦·«♦ ♦ A A A AAAA AA A

AAA AAAAAA

AAA AAA AAAA

AA ««· AA· AA AA AA

Příklad 9

Výroba 7-ethyl-10-hvdroxycamptothecinu (SN-38)

Sloučenina e (0,36 g, 2,14 mmol) a sloučenina h (0,50 g, 1,82 mmol) se resuspendovaly ve směsi kyseliny octové a toluenu (AcOH-toluen; 1 : 1, 10 ml). K suspenzi se při teplotě místnosti přidal monohydrát kyseliny p-toluensulfonové (pTsOH · H₂O; 10 mg), směs se zahřála na teplotu 100 °C a míchala po dobu 18 hod. Reakční směs se pak zahustila za podmínek sníženého tlaku, ke zbytku se přidal toluen (10 ml) a sňTěs se znovu zahustila za podmínek sníženého tlaku. Ke zbytku se přidal aceton (9 ml) a směs se míchala při teplotě místnosti 2 hod. Nerozpustný materiál se přefiltroval a promyl acetonem ( 2 ml, 2x). Poté se filtrovaný materiál vysušil za podmínek sníženého tlaku a získalo se tak 0,63 g SN-38 (čistota 97,7 %, zjištěno HPLC, výtěžek 89 %) jako černá pevná látka.

Podmínky HPLC:

Sloupec: Inertsil ODS-2, 5 pm, 4,6 mm IDx250 mm (GL pro vědecké účely)

Teplota: konstantní teplota cca 40 °C

Mobilní fáze: směs methanol: acetonitril: 10mM dihydrogenfosforečnan draselný (1 : 1 : 3)

Průtok: 1ml/min

Detekce: 254 nm

SN-38;

¹H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ 0,98 (3H, t, J = 7 Hz, CH₃), 1,38 (3H, t, J = 7 Hz, CH₃), 1,90 (2H, q, J = 7 Hz, CH₂), 3,08 (2H, q, J = 7 Hz, CH₂), 5,17 (2H, s, CH₂O), 5,23 (1H, d, J = 16 Hz), 5,54 (1H, d, J = 16 Hz), 6,83 (1H, d, J = 9 Hz), 7,34 až 7,39 (3H, m).

Příklad 10

Výroba 7-ethyl-10-[4-(1-piperidino)-1- piperidinojkarbonyloxy camptothecinu (SN38B-11) • 9 9 • 9 99

9 9

9 99 9

99 99 9999

9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 ·

9 99 9 9 «9

SN-38B-11 (1,22 g, 2,08 mmol, výtěžek 89 %, enanciočistota 99,8 % ee) byl získán z SN-38 (0,91 g, 2,32 mmol), který byl připraven v příkladu 9 podle popsaného postupu (Sawada, S.; Okajima, S.; Aiyama, R.; Nokata, K.; Furuta, T.; Yokokura, T.; Sugino, E.; Yamaguchi, K.; Miyasaka, T. Chem. Pharm. Bull. 1991, 39, 1446.). Podmínky chirální HPLC

Sloupec; DAICEL CHIRALCEL OD-H, 0,46cm, IDx25cm (#ODHOCE-AK031)

Zásobní náplň: DAICEL CHIRALCEL OD-H, 0,4cm, IDxIcm

Injekční dávka: 10 pg/10 pl

Teplota: konstantní teplota cca 40 °C

Průtok: 1 ml/min

Mobilní fáze: směs dimethylamin : hexan : ethanol (1 : 250 : 250)

Detekce: 254 nm

Příklad 11

Výroba 7-ethyl-10-[4-(1-piperidino)-1- piperidinojkabonyloxy camptothecin (CPT11)

SN-38B-11 (1,00 g, 1,7 mmol), získaný v příkladu 10, se resuspendoval v0,1N kyselině chlorovodíkové (20 ml, 2,0 mmol). Suspenze se zahřála na asi 80 °C, aby došlo k úplnému rozpuštění. Ke směsi se přidal acetonitril (100 ml) a směs se důkladně míchala přes noc při teplotě místnosti. Vzniká sraženina se přefiltrovala, vysušila a pak navlhčila na hodnotu 75 % vlhkosti místnosti. Tak se získal CPT-11 (0,95 mg, výtěžek 89,8 %) jako světle žlutý krystalický prášek.

Příklad 12

Výroba sloučeniny I

Sloučenina I se získala formylací sloučeniny k při teplotě -30 °C nebo -20 °C pomocí n-butyl lithia a /V-formyl-A/,/V’,A/’-trimethylethylendiaminu. Poté následovala jodace při teplotě -30 °C nebo -20 °C za pomoci n-butyl lithia a jódu.

Sloučenina k (5,0 g; 0,028 mol) se rozpustila v nevodném THF (asi 66 ml) pod ochrannou dusíkatou atmosférou. Směs se zchladila na teplotu -30 °C nebo -20 °C. K roztoku se přidalo n-butyl lithium (1,6 mol/l v hexanu; 21,2 ml, 0,034 mol, 1,2 ekv.) a směs se za neustálého chlazení zamíchala. Poté se k reakční směsi jako formylační činidlo přidal /V-formyl-/V,A/’,/V’-trimethylethylendiamin (4,4 g, 0,0034 mol, 1,2 ekv.) a směs se za neustálého chlazení zamíchala.

Pak se ke směsi přidalo n-butyl lithium (1,6 mol/ll v hexanu; 35 ml, 0,05 mol, 1,2 ekv.) a směs se míchala při teplotách uvedených v tabulce 6. Poté se za stálého míchání ke směsi přidal jód (18,4 g) v nevodném THF (19 ml).

Ke směsi se přidal vodný roztok hydrogensiřičitanu sodného ( 12 g ve 200 ml). Směs se zamíchala a vzniklá organická fáze (hexan) se analyzovala pomocí HPLC. Výsledky jsou uvedeny v tabulce 6.

Podmínky HPLC

Sloupec: Capcell Pack ODS UG120, 4,6 mm IDx150 mm

Teplota: teplota místnosti

Průtok: asi 1ml/min

Mobilní fáze: směs 50mM dihydrofosforečnan draselný : acetonitril (9:11)

Detekce: 220 nm

Tabulka 6

	Formylace (°C)¹⁾	Reakční doba (hod)	Jodace (°C)¹⁾	Reakční doba (hod)	Sloučenina (k)³⁾	Sloučenina d)^3>	Výtěžek (%)⁴⁾
Exp. 15	-48 až -30 -32 až -29	3,0	-70 to -65 Cca -75	0,3	NT^S)	67,8	70,6
Exp. 16	-35 až -28 asi -35	1,0	-30 až -20 -35 až -25	0,5	5,9	67,8	71,9
Exp. 17	-20 až -15 -20 až-15	2,0	-10 až -5 -10 až -5	0,5	6,2	70,5	66,7
Exp. 18	-10 až -5 -10 až -5	3,0	-10až0 -10až0	0,5	3,4	77,6	63,7

1) Horní linky uvádějí aktuální rozmezí vnitřních teplot během přidávání. Spodní linky uvádějí aktuální rozmezí vnitřních teplot během míchání.

2) Exp. 15: výsledky pokusu za popsaných podmínek

• 9 9 9

9 «

3) Oblast maxima %

4) Výtěžky byly upraveny podle čistoty (HPLC, oblast maxima)

5) NT: netestováno

Jak je vidět z tabulky 6, pokud se jako lithiační činidlo použilo n-butyl lithium, byl výtěžek sloučeniny I 60 % a více.

Příklad 13

Purifikace sloučeniny I ( promývání zředěnou kyselinou chlorovodíkovou)

Sloučenina k ( 5,0 g, 0,028 mol) se rozpustila v nevodném THF ( asi 66 ml). Reakce se provedla tak, jak je popsáno v příkladu 12, při teplotě - 35 °C. Pak se vrstva, obsahující hexan, získaná z reakční směsi, promyla zředěnou kyselinou chlorovodíkovou (stejným množstvím jako bylo množství organické fáze).

Po promytí se organická vrstva vysušila pomocí síranu sodného, znovu přefiltrovala a část filtrátu se analyzovala pomocí HPLC za podmínek uvedených v příkladu 12. Výsledky jsou uvedeny v tabulce 7.

Tabulka 7 Analytické výsledky promývání hexanové vrstvy zředěnou kyselinou chlorovodíkovou

hexanová vrstva¹⁾ (ml)	HCl (mol/l)	Zbytek (g)	Sloučenina k^{2) 3 4}	MTPC^2,3)	Sloučenina l²⁾	Výtěžek (%)
25	⁴)	1,5	6,0	11,8	54,7	-
50	0,1	2,9	6,6	12,4	58,7	100
50	1,0	2,6	1,8	13,0	61,2	100
50	2,5	2,6	0,4	12,6	62,4	100
50	3,5	2,6	0,2	12,7	64,2	100

1) Hexanová vrstva získaná z reakční směsi se rozdělila na 5 částí ( 25 ml intaktní směsi a 4 části po 50 ml na promývání). Každá část (50 ml) se promyla zředěnou kyselinou chlorovodíkovou, jak je uvedeno v tabulce 7, a získané hexanové vrstvy se analyzovaly pomocí HPLC.

2) Oblast maxima %

3) MTPC; 2-methoxy-6-trimethylsilylpyridin 3-karbaldehyd

4) Nepromyto ♦ ·· ΑΦ ΦΦΦΦ • Φφφ Φ Φ φ

ΦΦΦ ΦΦΦ

Φ Φ Φ Φ Φ Φ Φ

ΦΦΦ ΦΦΦΦ

ΦΦΦ ΦΦ ΦΦ ΦΦ φφφ φφ -φφφ

Jak je vidět v tabulce 7, sloučenina k se odstranila promýváním zředěnou kyselinou chlorovodíkovou. Pokud se na promývání použila koncentrace kyseliny chlorovodíkové 1,0 mol/ml a více, byla získána sloučenina I ve vysoké čistotě. Touto metodou bylo ovšem velmi obtížné odstranit formylační meziprodukt sloučeniny k, 2-methoxy-6- trimethylsilylpyridin 3-karbaldehyd (MTPC).

Příklad 14

Purifikace sloučeniny I postupným promýváním zředěnou kyselinou chlorovodíkovou

Sloučenina k (5,0 g, 0,028 mol) se rozpustila v nevodném THF ( asi 66 ml). Reakce se provedla tak, jak je popsáno v příkladu 12, při teplotě - 35 °C. Pak se vrstva, obsahující n-hexan, získaná z reakční směsi, promyla obráceně (odshora dolů) zředěnou kyselinou chlorovodíkovou, tak jak je uvedeno v tabulce 8 (stejným množstvím jako bylo množství organické fáze).

Po promytí se vodná fáze oddělila a neutralizovala uhličitanem sodným a pak se extrahovala n-hexanem. Organická fáze se vysušila pomocí síranu manganatého, pak se přefiltrovala a část filtrátu se analyzovala pomocí HPLC za podmínek uvedených v příkladu 12. Výsledky jsou uvedeny v tabulce 8.

Tabulka 8 Výsledky analýzy hexanových extraktů z neutralizované vodné fáze, které se získaly postupným promýváním původní hexanové fáze zředěnou kyselinou chlorovodíkovou následujícím způsobem

HCl (mol/l)	Zbytek (g)¹’	Sloučenina k²⁾	Sloučenina Í^Z)	Výtěžek (%)
Promývání vodou		NT³⁾	NT
0,1	0,40	24,9	10,7	-
0,1	0,04	NT	NT	-
1,0	0,21	67,0	13,7	-
2,5	0,28	71,0	3,0	-
5,0	0,54	13,0	4,0	-
Zbytek⁴⁾	7,27	ND³¹	77,9	98,3

·· ···« 9 9 9

9 9

9 9 9

9 9

1) Každý vzorek, promývaný HCl, se neutralizoval pomocí uhličitanu sodného a směs se extrahovala n-hexanem. Organická fáze se nechala vysušit, přefiltrovala se a filtrát se nechal odpařit za podmínek sníženého tlaku, dokud nevyschnul.

2) HPLC (oblast maxima %)

3) Netestováno

4) Zbytek hexanové fáze po následujících promýváních

5) Nebylo zjištěno: méně než byl limit detekce

Jak je vidět z tabulky 8, hexanová fáze se pohodlně přečistila postupným promýváním kyselinou chlorovodíkovou o různých koncentracích, aby tak poskytla sloučeninu o vysoké čistotě.

Příklad 15

Purifikace sloučeniny I destilaci

Sloučenina k (5,0 g, 0,028 mol) se rozpustila v nevodném THF ( asi 66 ml). Reakce se provedla tak, jak je popsáno v příkladu 12, při teplotě - 35 °C. Získaná reakční směs (n-hexanová fáze) se destilovala při 81 až 99 °C za podmínek sníženého tlaku (cca 0,35 mmHg). Po destilaci se zbytek vdestilační nádobě přečistil přes silikagelovou sloupcovou chromatografii n-hexanem a poté směsí n-hexanu a ethylacetátu (50 : 1), aby se získal čistý produkt.

Zbytek a purifikovaný materiál se analyzoval pomocí HPLC za podmínek uvedených níže. Výsledky jsou uvedeny v tabulce 9.

Podmínky HPLC

Sloupec: Capcell Pack ODS UG120, 4,6 mm IDx150 mm

Teplota: teplota místnosti

Průtok: asi 1ml/min

Mobilní fáze: směs 50mM dihydrofosforečnan draselný : acetonitril (1:1)

Vlnová délka: 220 nm

999 9

9 9 9

999 999

Tabulka 9 Výsledky analýzy frakcí zbytku hexanové fáze vzniklé destilací

	(g)	Sloučenina k¹⁾	MTPC¹⁾	Sloučenina l¹⁾	Výtěžek (%)
Původní směs	-	3,6	13,5	71,5	-
Frakce 1	0,19	47,3	36,1	8.,7	-
Frakce 2	1,16	8,9	53,7	28,8	-
Past	1,17	70,3	nd²⁾	ND	-
Zbytek	5,13	0,3	3,1	89,9	75,9
Purifikovaný produkt³	-	-	3,9	95

1) oblast maxima %

2) nebylo zjištěno: méně než je limit detekce

3) Konečný zbytek se purifikoval přes silikagelovou chromatografií

Jak je vidět z tabulky 9, MTPC bylo destilací téměř úplně odstraněno. Další purifikace přes silikagelovou chromatografií umožnila zisk velmi čisté sloučeniny I. Nedoporučuje se, aby se destilace prováděla při teplotách vyšších než je uvedené v tabulce 9, protože bylo pozorováno, že dochází k zabarvování a rozkladu sloučeniny I.

Příklad 16

Purifikace sloučeniny I (její izolací jako soli kyseliny chlorovodíkové)

Sloučenina k (5,0 g, 0,028 mol) se rozpustila v nevodném THF ( asi 66 ml). Reakce se provedla tak, jak je popsáno v příkladu 12, při teplotě - 35 °C. Získaná reakční směs (10 g) se rozpustila v 10N kyselině chlorovodíkové (10 ml) a směs se při teplotě místnosti míchala. Vzniklá žlutá sraženina se přefiltrovala a promyla malým množstvím 10N kyselinou chlorovodíkovou. pH vodného roztoku se upravilo na cca 8 přidáním hydrogenuhličitanu sodného a směs se extrahovala hexanem. Organická fáze se nechala odpařovat za podmínek sníženého tlaku, dokud nevyschla.

Zbytek se analyzoval pomocí HPLC za podmínek uvedených v příkladu 15. Výsledky jsou uvedeny v tabulce 10.

Tabulka 10 Výsledky analýzy extraktů, které vznikly neutralizací soli kyseliny chlorovodíkové, získané z 10 mol/l kyseliny chlorovodíkové • 4 « • ♦ · ·

9 9

4« 444444 • 4 4 4 4 4 Λ • · · »44 • · 4 * · *4* • · 4 4 4 4 «

4 4 44 44 4«

	(gj¹⁾	mtp²⁾	MTPC²⁾	Sloučenina P	Výtěžek(%)
Pre- purifikovaný	10	_3)	16,9	61,8	-
Post- purifikovaný	6	-	3,3	90,0	87,4

1) hmotnost zbytku

2) oblast maxima %

3) netestováno

Jak je vidět z tabulky 10, hrubý reakční produkt byl získán jako sůl kyseliny chlorovodíkové a sloučenina I se získala neutralizací. Tento způsob zajistil skoro úplné odstranění MTPC.

Sloučenina I: žlutý olej.

1H-NMR(499 MHz.CDCI³) δ: 0,30 (9H, s) 4,05 (3H,s), 7,67 (1H, s), 10,19(1 H, s), EI:MS:m/z 335 (M⁺).

Příklad 17

Výroba sloučeniny m

i

Et₃SiH

-►

TFA

Ke směsi sloučeniny I (20,0 g, 56,0 mmol, obsah: 93,9 % zjištěno HPLC), triethylsilanu, (17,9 ml, 112,0 mmol, 2 ekv.) a krotylalcoholu (15,7 ml, 184,8 mmol, 3,3 ekv.) se za stálého míchání při teplotě 0 až 5°C a pod ochrannou dusíkatou atmosférou přidala kyselina trifluorooctová (28,5 ml, 375,3 mmol, 6,7 ekv.). Směs se při této teplotě míchala po dobu 30 min a poté se směs míchala dalších 20 hodin při teplotě místnosti. Ke směsi se přidal vodný roztok uhličitanu sodného (20,8 g v 277 ml vody) a n-hexan (56 ml). Oddělila se organická fáze a vodná fáze se extrahovala n-hexanem (56 ml). Smíchané organické fáze se nechaly odpařovat za podmínek sníženého tlaku, dokud nevyschly. Zbytek se přečistil pře silikagelovou sloupcovou chromatografii; silikagel (80

44	•	t	44			·*		4044
• ·	• 4	• 4 4		•	4		4	4
4	4	4	• 4		•	4		4	4
«	4	•	4 4		4	4		4	• 4
44	>#»	«44	4 »			4«		4 4

g, , Fuji Silysia PSQ100B). Jako eluační činidlo se použila směs n-hexanu a ethylacetátu (73: 3).

Výsledky tohoto příkladu jsou uvedeny v tabulce 11 (Exp. 20). Exp. 19 je pak v tabulce uveden jako výsledek kontrolního pokusu, který byl proveden za popsaných podmínek; Josein, H. ; Ko, S. B.; Bom, D. ; Curran, D. P., Chem. Eur. J. 1998, 4, 67-83. Curran, D. P. ; Ko, S. B. ; Josein, H., Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1995, 34, 2683 2684. Tyto podmínky uvádějí jako reakční rozpouštědlo dichlormethan. Ovšem stejné množství produktu m se stejnou kvalitou a výtěžkem bylo získáno i bez použití dichlormethanu.

Tabulka 11

			HPLC (% oblasti maxima)
	Rozpouštědlo	Time (h)	(l)	(m)	(v)	jiné
Exp..19	CH₂CI₂	17	1,19	68,08	16,94	13,79
Exp. 20	jemné	20	0,40	64,38	24,40	10,82

Podmínky HPLC

Sloupec: GL Science Inertsil ODS-2, 0,46 cm ID *25 cm Teplota: konstantní teplota cca 40 °C Průtok: ImlZmin

Mobilní fáze: směs acetonitril: 10mM dihydrofosforečnan draselný (5:1) Vlnová délka: 254 nm

Příklad 18

Výroba sloučeniny I (2)

Sloučenina m (1,6 g) se rozpustila v rozpouštědlech uvedených výše v tabulce

12. K tomuto roztoku se přidal tetrabutylamonium bromid (0,83 g), uhličitan draselný (0,71 g) a palladium acetát (57 mg). Každá z jednotlivých reakcí byla provedena dle podmínek uvedených v tabulce 12.

φφ φ • φφφ φφφ • · · 9 φφφ φφ Φ·Φ φφφ φφ • · • φ • · φ • · ·« φφ φφφφ • φ · φφφ φ φ φ φ φ φ φ φφ φφ

Reakční směs se za stálého míchání nalila k na ledu zchlazenému n-hexanu (18 ml). Nerozpustný materiál se přefiltroval sáním a promyl se n-hexanem (6 ml x 3). Filtrát a tekutina zbylá po promytí se smíchaly a směs se promyla vodou (9 ml x 2), vysušila nevodným síranem sodným a směs se nechala odpařovat za podmínek sníženého tlaku, dokud nevyschla. Zbytek se přečistil pře silikagelovou sloupcovou chromatografií; silikagel. Jako eluační činidlo se použila směs n-hexanu a ethylacetátu (95 : 5).

Exp. 21 je v tabulce 12 uveden jako výsledek pokusu, který se prováděl za popsaných podmínek; ; Josien, H.; Ko, S. B.; Bom, D.; Curran, D. P., Chem. Eur.J. 1998, 4, 67-83. Curran, D. P.; Ko, S. B.; Josien, H., Angew. Chem. Int Ed. Engl. 1995, 34, 2683-2684.

Poměr endo a exo forem purifikovaných produktů byla měřena pomocí HPLC. Jak je vidět z tabulky 12, získal se uspokojivý výběr (poměr endo-exo) a také izolovaný výtěžek v tom případě, pokud se jako reakční činidlo použilo za podmínek zpětného proudění THF (Exp. 25-27). Získané výtěžky (Exp. 25-27) byly o 10 a více % vyšší než výtěžky získané při experimentech provedených za popsaných podmínek (Exp. 21).

Tabulka 12

	Rozpouštědlo	Teplota	Čas (h)	Poměr	Výtěžek (%)
Exp. 21	DMF	85 °C	1,5	2,3	69
Exp. 22	CHCI₃	Reflux	5,0	3,1	-
Exp. 23	Tol	85 °C	96,0	3,7	-
Exp. 24	MeCN	85 °C	2,0	4,3	-
Exp. 25	THF	Reflux	4,0	6,6	79
Exp. 26	THF	Reflux	5,0	7,0	84
Exp. 27	THF	Reflux	4,0	7,1	82
DMF: Ν,Ν-dimethylformamid, Tol: to	uen, MeCN: acetonitril, THF:

tetrahydrofuran, Poměr: oblast maxima endo formy/oblast maxima exo formy (HPLC),Výtěžek: izolovaný výtěžek, -: neurčeno, Podmínky HPLC; viz příklad 17.

Příklad 20

Výroba sloučeniny n (2)

K roztoku sloučeniny m (1,27 g, 2,6 mmol, obsah; 78,7 %), obsažené ve směsi diisopropyletheru-acetonitrilu-vody (4 : 3 : 1, 20 ml), se přidal tetrabutylammonium

bromid (0,82 g, 2,6 mmol), N,N-diisopropylethylamin (3,48 ml, 20,8 mmol, 8 ekv.) a palladium acetát (57 mg, 0,26 mmol). Směs se zahřívala za podmínek zpětného proudění po dobu 30 minut. Poté, co se vnitřní teplota směsi zchladila na 20 °C či ještě méně, se nerozpustný materiál ze směsi přefiltroval sáním a promyl se n-hexanem (2,6 ml x 3). Filtrát a tekutina zbylá po promytí se smíchaly a k této směsi se přidal n-hexan (10 ml) a 10% siřičitan sodný (16 ml, 13,0 mmol, 5 ekv.). Organická fáze se oddělila a promyla 1N kyselinou chlorovodíkovou (16,4 ml) a poté vodou (10 ml x 2). Organický roztok se nechal odpařovat za podmínek sníženého tlaku, dokud nevyschl. Sloučenina n; žlutohnědý olej, 0,83 g ( 91 % výtěžek), obsah: 73,3 %, zjištěno pomocí HPLC (viz Příklad 17), endo-exo poměr: 10,6.

Tak ve srovnání s Exp. 21, uvedeném v tabulce 12, se zřetelně zvýšila selektivita. Výtěžek se také zvýšil o 20 % ve srovnáni s Exp. 21 z tabulky 12.

Příklad 21

Výroba sloučeniny o

OCH₃ K₂OsO42H₂O OCH,

I K₃Fe(CN)₆ I

K₂co₃ *

As. JL y (DHQD)₂PYR A. A X (CHjhSi^^Y MeSO₂NH₂ <CH₃)₃Si ÚÁX?_h ^0H

C₂H_s ve vodn. t-BuOH ^{2 5} n o

K roztoku ferikyanidu draselného (195,7 g, 0,59 mol), uhličitanu draselného (82,1 g, 0,59 mol) a methanesulfonamidu (37,7 g, 0,40 mol), rozpuštěných ve vodě (990 ml), se přidal (DHQD)₂PYR (4,36 g, 4,95 mmol) a dihydrát osmianu draselného (VI) (1,0 mmol) a směs se míchala při teplotě 5 °C asi po dobu 1 hod. Za stálého míchání se ke směsi přidala sloučenina n (77,8 g, 0,18 mol, obsah: 61,5 %) a výsledná směs se nechala při této teplotě míchat dalších 20 hodin. Ke směsi se přidal siřičitan sodný (74,9 g) a v míchání se pokračovalo při dané teplotě dalších 30 minut. Nerozpustný materiál ze směsi se přefiltroval přes Celitovou destičku a materiál na destičce se promyl ethylacetátem (4x, celkově 770 ml). Organická vrstva filtrátu se oddělila a vodná fáze se dále extrahovala ethylacetátem (770 ml). Smíchané organické fáze se vysušily nevodným síranem sodným, přefiltrovaly se a nechaly se odpařit za podmínek sníženého tlaku, dokud nevyschly. Zbytek se přečistil pře silikagelovou sloupcovou chromatografií směsí dichlormethanu a ethylacetátu (4:1) jako eluačního činidla; silikagel (280 g, Fuji Silysia PSQ100B). Sloučenina o; okrová pevná látka.

Jak je vidět z tabulky 13, použití osmianu draselného jako oxidantu mělo pozitivní efekt na výši výtěžku a mělo vliv i na vyšší zastoupení enantiomeru oproti vysoce těkavému oxidu osmia (Vlil).

Tabulka 13

	Oxidant	Výtěžek (%)	%ee
Exp. 28	OsO₄	82 to 95	95,6 až 96,2
Exp. 29	K₂OsO₄*2H₂O	94	95,9

Exp. 28: provedený podle popsaných podmínek; Josein, H. ; Ko, S.B. ; Bom, D.; Curran, D.P., Chem. Eur. J. 1998, 4, 67-83. Curran, D.P. ; Ko, S.B. ; Josein, H., Angew. Chem. Int Ed. Engl. 1995, 34, 2683-2684.

% ee: Zde získaná sloučenina o se přeměnila konverzí na sloučeninu p metodou popsanou v příkladu 22 a ee této sloučeniny se změřil pomocí chirální HPLC (viz příklad 22).

Příklad 22

Výroba sloučeniny p

K roztoku sloučeniny o (70 g), rozpuštěné vee směsi methanolu a vody (10 : 1, 1,0 I), se za stálého mícháni při teplotě místnosti přidal jód (přesné množství je uvedeno v tabulce 14) a jako prášek uhličitan vápenatý (47,1 g). Reakční směs se míchala za určité teploty a po určitou dobu. Tyto hodnoty jsou uvedeny v tabulce 14.

K reakční směsi se přidal 1 I 10% siřičitanu sodného a chloroform (1,0 I) a výsledná směs se nechala při teplotě místnosti míchat 30 minut. Nerozpustný materiál se odstranil filtrací a oddělila se organická fáze filtrátu. Vodná fáze se extrahovala chloroformem (500 ml x 2). Smíchané extrakty se vysušily nevodným síranem sodným, přefiltrovaly se a nechaly se odpařovat za podmínek sníženého tlaku, dokud nevyschly.

Při použití 4 objemů jódu za podmínek zpětného proudění reakce skončila po 5 hodinách s obdobnými výtěžky jako byly v případě reakce provedené za popsaných podmínek, což je jedna desetina doby reakce uvedené v popsaných podmínkách.

Tabulka 14

	Jód (ekv.)	Teplota	Čas (hod)	Výtěžek (%)
Exp. 30	9	Teplota místnosti	48	86
Exp. 31	4	Teplota místnosti	72	86
Exp. 32	4	40 °C	48	88
Exp. 33	4	60 °C	20	88
Exp. 34	4	Reflux	5	84

Exp. 30: proveden za popsaných podmínek; Josien, H.; Ko, S. B.; Bom, D. Curran, D. P., Chem. Eur.J . 1998, 4, 67-83. Curran, D. P.; Ko, S. B.; Josien, H. Angew. Chem .Int. Ed. Engl., 1995, 34, 2683-2684.

Výtěžek (%): izolované výtěžky

Podmínky pro HPLC :

Sloupec: GL Science Inertsil ODS-2, 0,46 cm IDx25 cm

Teplota: konstantní teplota cca 40 °C

Mobilní fáze: směs 10mM dihydrogenfosforečnan draselný : acetonitril (4 : 3)

Průtok: 1ml/min

Detekce: 254 nm

Podmínky chirální HPLC

Sloupec: DAICEL CHIRALCEL OD-H, 0,46cm, IDx25cm (#ODHOCE-AK031) Zásobní náplň: DAICEL CHIRALCEL OD-H, 0,4cm, IDxIcm Teplota: konstantní teplota cca 25 °C

Průtok: 0,5 ml/min

Mobilní fáze: směs n-hexan : ethanol (200 :1)

Detekce: 254 nm

Příklad 23

Výroba sloučeniny q

OCH

C,H_S‘ OH

K roztoku sloučeniny p (50,2 g), rozpuštěné v rozpouštědle uvedeném v tabulce 15 (400 ml) se přidaly látky, uvedené v tabulce, a výsledná směs se při dané teplotě nechal míchat hodiny. Ke směsi se za stálého míchání přidal 20% uhličitan sodný, (1,7 ml), 10% siřičitan sodný (1,0 I) a chloroform (550 ml). Organická fáze se oddělila a vodná fáze se extrahovala chloroformem (550 ml x 2). Smíchané extrakty se vysušily nevodným síranem sodným, přefiltrovaly se a nechaly se odpařovat za podmínek sníženého tlaku, dokud nevyschly. Množství sloučeniny q ve zbytku se určilo pomocí HPLC. Výsledky jsou uvedeny v tabulce 15.

Tato konverze byla úspěšně provedena pomocí NCS-Nal při 65 °C v prostředí kyseliny octové (Exp. 39). Doba nutná pro dokončení reakce se výrazně zkrátila a výtěžky sloučeniny q za našich podmínek byly o 50 a více % vyšší než výtěžky z reakce prováděné za popsaných podmínek. (Srovnávací experiment 1 - (Com. 1)).

Tabulka 15

	Rozpouštědlo	Reagencie	Ekv.	Teplota	Čas (hod)	Výtěžek (%)
Com. 1	*)	ICI	4	TM až 40 °C	48	45
Exp. 35	AcOH	NIS	12	65 °C	45	63
Exp. 36	CH₂CI₂	l₂ - CF₃CO2Ag	2	TM	17	97
Exp. 37	AcOH	NCS - Nal	6	65 °C	16	95
Exp. 38	AcOH	NCS - Nal	6	65 °C	16	93
Exp. 39	AcOH	NCS-Nal	6	65 °C	15	94

*) směs dichlormethanu a chloroformu (3 : 2), AcOH: octová kyselina, ICI: chlorid jodný, NIS: N-jodosukcinimid, NCS: N-chlorosukcinimid, Ekv.: molární poměr použité reagencie(í), Výtěžek: izolované výtěžky.

Příklad 24

Purifikace sloučeniny q (1)

Sloučenina q (63 g, čistota 89,2 %, zjištěno HPLC), získaná v příkladu 23, se resuspendovala v methanolu (150 ml). K suspenzi se za důkladného míchání přidal 0,2N hydroxid sodný a směs se dále míchala po dobu 2 hod. Zásaditý roztok se přečistil chloroformem (400 ml x 3) a pH vodné fáze se upravila 6N kyselinou chlorovodíkovou na pH 1 až 2 a okyselený roztok se extrahoval chloroformem (400 ml x 3).

Chloroformová fáze se vysušila pomocí nevodného síranu sodného, přefiltrovala se a nechala se odpařit za podmínek sníženého tlaku, dokud nevyschla. Sloučenina q (Exp. 40); čistota 97,7 % (% oblast maxima; Podmínky HPLC: viz příklad 25).

Příklad 25

Purifikace sloučeniny q (2)

Sloučenina q (50 g), která se purifikovala způsobem popsaným v příkladu 24, se rozpustila v chloroformu (240 ml) a na povrch roztoku se opatrně nalil n-hexan (400 ml). Směs se nechala odstát při teplotě místnosti 15 hod. Vzniklá sraženina se ze sloučeniny odstranila filtrací a filtrát se nechal odpařit za podmínek sníženého tlaku, dokud nevyschl. (Exp. 41).

Touto metodou se purifikovala sloučenina q (Exp. 41), která se získala v příkladu 24 (93 až 96 % ee). Sloučenina q, získaná po přečištění (Exp. 41), vykazovala 99,7 až 99,9 % ee, zjištěno pomocí chirální HPLC za podmínek uvedených níže.

Podmínky HPLC

Sloupec; GL Science Inertsil ODS-2, 0,46 cm ID x 25 cm

Teplota: konstantní teplota cca 40 °C

Průtok: 1 ml/min

Mobilní fáze: směs acetonitril: 10mM dihydrogenfosforečnan draselný (5 : 3)

Detekce: 254 nm Podmínky chirální HPLC

Sloupec: DAICEL CHIRALCEL AD-H, #ADHOCE-BC037, 0,46cm, IDx25cm

Zásobní náplň: DAICEL CHIRALCEL AD-H, 0,4cm, IDxIcm

Teplota: konstantní teplota cca 25 °C

Průtok: 0,5 ml/min

Mobilní fáze: směs n-hexan : 2-propanol (25 :1)

Detekce: 254 nm

Příklad 26

Roztok sloučeniny q (42,8 g, 0,1 mol, obsah: 84,5 %), palladium acetát (1,34 g, 6,0 mmol) a uhličitan draselný (24,7 g, 0,18 mol), které byly rozpuštěné v propanolu (490 ml), se smíchaly v reakční nádobě. Z nádoby se odsál vzduch a nádoba se naplnila dusíkem, poté se opět z nádoby vysál dusík a místo něj se nádoba naplnila oxidem uhelnatým. Směs se míchala při 60 °C po dobu 18 hod. Nerozpustný materiál ze směsi se přefiltroval přes Celitovou destičku a materiál na destičce se promyl ethylacetátem (300 ml). K filtrátu se přidal 1N kyselina chlorovodíková (150 ml) a solanka (300 ml) a směs se důkladně promíchala. Organická vrstva filtrátu se oddělila a vodná fáze se dále extrahovala ethylacetátem (300 ml). Smíchané organické fáze se vysušily nevodným síranem sodným, přefiltrovaly se a nechaly se odpařit za podmínek sníženého tlaku, dokud nevyschly. Zbytek se přečistil přes silikagelovou sloupcovou chromatografií; silikagel (100 g, Fuji Silysia PSQ100B) směsí chloroformu a methanu (99 : 1) jako elučního činidla. Sloučenina r; okrový olej, 30,3 g (70 % výtěžek), obsah: 73,4 %, zjištěno HPLC.

Podmínky HPLC

Sloupec: GL Science Inertsil ODS-2, 0,46 cm ID x 25 cm Teplota: konstantní teplota cca 40 °C Průtok: 1 ml/min

Mobilní fáze: směs 10mM dihydrogenfosforečnan draselný : acetonitril (4 : 3) Detekce: 254 nm

Příklad 27

Výroba sloučeniny s

Za stálého míchání se ke sloučenině r (28,7 g, 68,2 mmol, obsah: 73,4 %) a jodidu sodnému, rozpuštěných v absolutním acetonitrilu (141 ml), přidal při teplotě místnosti pod dusíkatou atmosférou chlorotrimethylsilan (23,3 ml, 0,18 mmol). Směs se při teplotě místnosti míchala po dobu 3 hod. Ke směsi se přidala 1N kyselina chlorovodíková (8 ml) a 10% siřičitan sodný (232 ml) a výsledná směs se míchala dalších 30 min. Směs se extrahovala ethylacetátem, oddělila se organická fáze a ta se nechala odpařit za podmínek sníženého tlaku. Sloučenina s: 22,3 g (95 % výtěžek), obsah: 85,6 %, zjištěno pomocí HPLC (viz následující).

• ·

Podmínky HPLC

Sloupec: GL Science Inertsil ODS-2, 0,46 cm ID x 25 cm Teplota: konstantní teplota cca 40 °C Průtok; 1 ml/min

Mobilní fáze: směs 10mM dihydrogenfosforečnan draselný : acetonitril (5 : 2) Detekce: 254 nm

Příklad 28

Výroba sloučeniny t

Roztok sloučeniny s (0,5 g) v dimethylsulfoxidu (DMSO, 7 ml) se v přítomnosti anorganické báze (uhličitan draselný nebo césnatý, 0,4g) a při teplotě 50 °C pod argonovou atmosférou míchá po dobu 20 min. Za stálého míchání se ke směsi přidal tert-butylakrylát (1,8 g) a výsledná směs se při 50 °C pod argonovou atmosférou míchala po dobu 24 hod. Ke zchlazené směsi se přidala voda (10 ml) a koncentrovaná kyselina chlorovodíková (1 ml) a směs se extrahovala směsí toluenu a ethylacetátu (4 : 1, 7 ml x 4). Smíchané extrakty se vysušily nevodným síranem sodným, přefiltrovaly se a nechaly se odpařit za podmínek sníženého tlaku, dokud nevyschly (Exp. 42 až 43). Zbytek se analyzoval pomocí HPLC (viz následující).

Jak je vidět z tabulky 16, při použití uhličitanu césnatého jako zásady byl výtěžek sloučeniny t 72 % (Exp. 42), na druhé straně při použití levného uhličitanu draselného jako zásady byl výtěžek podobný jako v Exp. 42.

Tabulka 16

	Zásada	Výtěžek (%)
Exp. 42	CS2CO3	72
Exp. 43	K₂CO₃	77

Podmínky HPLC

Sloupec: GL Science Inertsil ODS-2, 0,46 cm ID x 25 cm Teplota: konstantní teplota cca 40 °C

Průtok: 1 ml/min

Příklad 29

Výroba SN-38

Směs sloučeniny h (0,5 g, 1,82 mmol, obsah: 96,6 %) a sloučeniny e (0,36 g, 2,18 mmol), rozpuštěných ve směsi toluenu-octové kyseliny (1 : 1, 10 ml), se v přítomnosti p-TsOH · H₂O (10 mg) za stálého míchání zahřála na 90 °C pod dusíkatou atmosférou po dobu 7 hod. Po zchlazení se směs nechala odpařit za podmínek sníženého tlaku. Po azeotropním dvojnásobném odstranění kyseliny octové toluenem (10 ml) se ke zbytku přidal aceton (9 ml) a suspenze se pod dusíkatou atmosférou míchala po dobu 30 min. Pevná část se oddělila filtrací, promyla acetonem (2 ml x 2) a pak se nechala vysušit za podmínek sníženého tlaku. SN-38 (Exp. 45): okrová pevná látka, 0,63 g (89,1 % výtěžek), čistota; 99,6 %, zjištěno HPLC (viz příklad 9).

Exp. 44 v tabulce 17 ukazuje výsledky pokusu provedených za popsaných podmínek; Henegar, K. E.; Ashford, S. W.; Baughman, T. A.; Sih, J. C.; Gu, R. L., J.

Org. Chem. 1997, 62, 6588-6597.

V tabulce 17 jsou uvedeny výtěžky SN-38, které se při použití dusíkaté atmosféry zvýšily.

Tabulka 17

		Čistota (%)	Výtěžek (%)
Exp. 44	Otevřená nádoba	97,6	75
Exp. 45	N₂ atm.	99,6	89

Příklad 30

Výroba tricyklického ketonu

Způsoby úplné syntetické výroby tricyklického ketonu (h), které vychází ze sloučeniny I, jsou uvedeny níže;

1) Výroba sloučeniny m

Za stálého míchání se ke směsi obsahující sloučeninu I (20,0 g, 56 mmol, 2 ekv., obsah: 93,9 %), triethylsilan (17,9 mL, 112 mmol, 2 eq.) a krotylalkohol (15,7 mL, 184,8 mmol, 3,3 ekv.), přidala při teplotě 0 až 5 °C trifluoroctová kyselina a směs se pod • · · • » • · • · · · a·· »·»*»· • · · · ··*··· 9 • · « β · · β · · * ·· 9 9» · · · · · *· ·· dusíkatou atmosférou míchala za této teploty po dobu 30 min. Směs se poté míchala dalších 20 hod. při teplotě místnosti a pak se ke směsi přidal vodný roztok uhličitanu sodného (20,8 g ve 277 ml vody) a n-hexan (56 ml). Ze směsi se oddělila organická fáze a vodná fáze se extrahovala n-hexanem (57 ml). Smíchané organické fáze se nechaly odpařovat za podmínek sníženého tlaku, dokud nevyschly. Zbytek se přečistil přes silikagelovou sloupcovou chromatografií; silikagel (80 g, , Fuji Silysia PSQ100B), eluant; n-hexan-ethylacetát (73 : 3), aby se odstranil vedlejší produkt, sloučenina v (4,95 g, 14,68 mmol, čistota 98,43 %, výtěžek 26 %). Sloučenina m ; 17,8 g (64 % výtěžek), obsah: 80,0 %, zjištěno HPLC (viz příklad 17).

¹H-NMR (400 MHz, CDCI₃) δ: 0,24 (9H, s, TMS), 1,69 (3H, dd, J=1,0, 6,1 Hz, =CHCH₃), 3,85 až 4,05 (2H, m, OCH₂CH=), 3,93 (3H, s, CH₃O), 4,55 (2H, s, OCH₂), 5,55 až 5,83 (2H, m, CH=CH), 7,47 (1H, s).

Sloučenina v; 5,0 g (26 % výtěžek), obsah: 98,4 % (HPLC). ¹H-NMR (400 MHz, CDCI₃) δ: 0,27 (9H, s, TMS), 2,45 (1H, t, J=6,8 Hz, OH), 3,99 (3H, s, CH₃O), 4,79 (2H, d, J=6,8 Hz, CH₂OH), 7,49 (1H, s).

2) Výroba sloučeniny n

Směs sloučeniny m (1,27 g, 2,56 mmol, obsah: 78,73 %), tetrabutylammonium bromidu (0,82 g, 2,56 mmol) a palladium acetátu (57 mg, 0,26 mmol), rozpuštěných ve směsi diisopropyletheru-acetonitrilu-vody (4 : 3 : 1, 20 ml), se zahřívala za podmínek zpětného proudění po dobu 30 min. Po zchlazení vnitřní teploty na 20 °C či ještě nižší, se nerozpustný materiál ze směsi odstranil filtrací a materiál se promyl n-hexanem (10 ml). Filtrát a tekutina zbylá po promytí se smíchaly a ke směsi se přidal n-hexan (10 ml) a 10% siřičitan sodný (16 ml, 113 mmol, 5 ekv.) Organická fáze se oddělila ze směsi a promyla se 1N kyselinou chlorovodíkovou (16,4 ml) a poté vodou (10 ml x 2). Organická vrstva se nechala odpařovat za podmínek sníženého tlaku. Sloučenina n: hnědý olej, 0,83 g (91 % výtěžek), obsah: 73,34 %, zjištěno pomocí HPLC, poměr endo - exo: 10,6, zjištěno pomocí HPLC (viz příklad 17).

¹H-NMR (400 MHz, CDCI₃) δ: 0,26 (9H, s, TMS), 1,12 (3H, t, J=7,3 Hz, CH₂CH₃), 2,31 (2H, dq, J = 1,0, 7,3 Hz, CH₂CH₃), 3,94 (3H, s, OCH₃), 5,00 (2H, s, OCH₂), 6,51 (1H, t, J=1,0 Hz, OCH=), 6,83 (1H, s, aromatický-H).

3) Výroba sloučeniny o

K roztoku ferikyanidu draselného (195,7 g, 0,59 mol), uhličitanu draselného • 999 9 9 9 9 9 9 · • 9 * 999 99* *9 99 9999*9 9 • 9 9 9 9 9 9 9 ·· •9 999 ··· 9· ·· ·* (82,1 g, 0,59 mol) a methansulfonamidu (37,7 g, 0,40 mol), rozpuštěných ve vodě (990 ml), se přidal (DHQD)₂PYR (4,36 g, 4,95 mmol) a dihydrát osmianu (VI) draselného (0,99 mmol) a směs se při teplotě 5 °C míchala po dobu 1 hod. Ke směsi se přidala sloučenina n (77,8 g, 0,18 mol, obsah: 61,5 %) a výsledná směs se při teplotě 5 °C míchala po dobu 20 hod. Poté se ve formě prášku přidal siřičitan sodný (74,9 g). Směs se při teplotě 5 °C míchala dalších 30 min. Nerozpustný materiál ze směsi se přefiltroval přes Celitovou destičku a materiál na destičce se promyl ethylacetátem (4x, celkově 770 ml). Organická vrstva filtrátu se oddělila a vodná fáze se dále extrahovala ethylacetátem (770 ml). Smíchané organické fáze se vysušily nevodným síranem sodným, přefiltrovaly se a nechaly se odpařit za podmínek sníženého tlaku, dokud nevyschly. Zbytek se přečistil přes silikagelovou sloupcovou chromatografií; silikagel (700 g, Fuji Silysia PSQ100B) eluent: dichlormethan - ethylacetát (4 : 1). Sloučenina n: okrová pevná látka.

4) Výroba sloučeniny p

Směs sloučeniny o (70,2 g), jódu (183,7 g, 0,72 mol) a uhličitanu vápenatého (36,23 g, 0,36 mol), rozpuštěných ve směsi methanolu-vody (10 : 1, 1,0 I), se zahřívala za podmínek zpětného proudění po dobu 5 hod. Po zchlazení se ke směsi přidal 10% siřičitan sodný (1,0 I) a chloroform (1,0). Výsledná směs se míchala při teplotě místnosti po dobu 15 min. Nerozpustný materiál se přefiltroval sáním a materiál se promyl chloroformem (0,5 I). Smíchané organické fáze se vysušily nevodným síranem sodným, přefiltrovaly se a nechaly se odpařit za podmínek sníženého tlaku, dokud nevyschly. Sloučenina p: olej okrové barvy, 53,6 g (celkový výtěžek ze sloučeniny m je 81 %), obsah: 80,4 %, zjištěno HPLC (viz příklad 22), 96,2 % ee zjištěno pomocí chirální HPLC (viz příklad 22).

¹H-NMR (400 MHz, CDCI₃) δ: 0,28 (9H, s, TMS), 0,94 (3H, t, J=7,4 Hz, CH₂CH₃), 1,76 (2H, q, J=7,4 Hz, CH₂CH₃), 3,61 (1H, s, OH), 3,98 (3H, s, OCH₃), 5,23 (1H, d, J=15,6 Hz,), 5,54 (1H, d, J=15,6 Hz), 7,33 (1H, s, aromatický-H).

5) Výroba sloučeniny q

Směs sloučeniny p (50,2 g, 0,14 mol, obsah: 80,4 %, 96,2 % ee) N-chlorosukcinimidu (107,36 g, 0,80 mol) a jodidu sodného (120,52 g, 0,80 mol), rozpuštěné v kyselině octové (411 ml), se zahřála na teplotu 65 °C a míchala po dobu 16 hod. Po zchlazení se ke směsi přidal 20% uhličitan sodný (1,7 I), 10% siřičitan sodný • · ♦ · 9 9

9 9 9 9 • · · ·· « « ·

9 9 ·9

9 9 9 99 (1,0 I) a chloroform. Ze směsi se oddělila organická vrstva a vodná fáze se extrahovala chloroformem (0,6 I x 2). Smíchané organické fáze se vysušily nevodným síranem sodným, přefiltrovaly se a nechaly se odpařit za podmínek sníženého tlaku, dokud nevyschly (hrubý produkt q).

6) Purifikace sloučeniny q (1)

Suspenze hrubého produktu sloučeniny q (zbytek z předchozího kroku, čistota 89,2 %, zjištěno pomocí HPLC) v methanolu (150 ml), se za stálého míchání přidala k 0,2N hydroxidu sodnému (0,4 mol). Směs se při teplotě místnosti míchala po dobu 2 hod. Zásaditá směs se promyla chloroformem (400 ml x 3) a od směsi se oddělila vodná fáze, jejíž pH se upravilo 6N kyselinou chlorovodíkovou na hodnotu pH 1 až 2. Okyselená fáze se extrahovala chloroformem (400 ml x 3). Oddělená organická fáze se vysušila nevodným síranem sodným, přefiltrovala se a nechala se odpařit za podmínek sníženého tlaku, dokud nevyschla.

Semi-purifikovaná q, čistota: 97,7 %, zjištěno pomocí HPLC (viz příklad 25).

7) Purifikace sloučeniny q (2)

Semi purifikovaná q se rozpustila v chloroformu (280 ml) a na povrch roztoku se nalil n-hexan. Výsledná směs se nechala odstát při teplotě místnosti 15 hod. Sraženina se od směsi oddělila filtrací a filtrát se nechal odpařovat za podmínek sníženého tlaku, dokud nevyschl.

Sloučenina q: olej, 47,4 g (86 % výtěžek), obsah: 84,5 %, zjištěno pomocí HPLC (viz příklad 25), 99,7 % ee, zjištěno pomocí chirální HPLC (viz příklad 25).

¹H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ: 0,94 (3H, t, J=7,3 Hz, CH2CH3), 1,75 (2H, q, J=7,3 Hz, CH2CH3), 3,58 (1H, s, OH), 3,96 (3H, s, OCH3), 5,16 (1H, d, J=15,6 Hz), 5,47 (1H, d, J=15,6 Hz), 7,59 (1H, s, aromatický-H). [ot]D²⁰ = +51,3 (c = 0,981, CHCI3).

8) Výroba sloučeniny r

Roztoky sloučeniny q (42,8 g, 0,1 mol, obsah: 84,5 %), palladium acetátu (1,34 g, 5,95 mmol) a uhličitanu draselného (24,67 g, 0,179 mol), které byly rozpuštěné v propanolu (490 ml), se smíchaly v reakční nádobě. Z nádoby se odsál vzduch a nádoba se naplnila argonem, poté se z nádoby vysál argon a místo něj se nádoba naplnila oxidem uhelnatým. Směs se míchala při 60 °C po dobu 4 hod. Po zchlazení se nerozpustný materiál ze směsi se přefiltroval přes Celitovou destičku a materiál na destičce se promyl ethylacetátem (300 ml). Filtrát se promyl 1N kyselinou chlorovodíkovou (150 ml) a solankou (300 ml) a oddělila se vodná fáze, která se dále extrahovala ethylacetátem (300 ml). Smíchané organické fáze se vysušily nevodným síranem sodným, přefiltrovaly se a nechaly se odpařit za podmínek sníženého tlaku, dokud nevyschly. Zbytek se přečistil přes silikagelovou sloupcovou chromatografií; silikagel (200 g, Fuji Silysia PSQ100B), eluent: chloroform - methanol (99 : 1). Sloučenina r: hnědý olej, 30,3 g (70 % výtěžek), obsah: 73,4, zjištěno HPLC (viz příklad

26).

¹H-NMR (400 MHz, CDCI₃) δ: 0,88 (3H, t, J=7,3 Hz, CH₃), 1,04 (3H, t, J=7,3 Hz, CH₃), 1,82 (4H, m, CH₂*2), 3,69 (1H, s, OH), 4,09 (3H, s, OCH₃), 4,34 (2H, t, J=6,8 Hz, CH₂), 5,31 (1H, d, J=16,3 Hz), 5,61 (1H, d, J=16,3 Hz), 7,94 (1H, s, aromatický-H).

9) Výroba sloučeniny s

Za stálého míchání se k roztoku sloučeniny r (28,7 g 68,2 mmol, obsah: 73,4 %) a jodidu sodného (27,6 g, 0,18 mol) v absolutním acetonitrilu (141 ml) při teplotě místnosti za podmínek dusíkaté atmosféry přidal chlorotriethylsilan (23,3 ml, 0,18 mmol). Směs se míchala při teplotě místnosti po dobu 3 hod. a poté se prudce zchladila 1N kyselinou chlorovodíkovou (8 ml) a 10% slřičitanem sodným (232 ml). Výsledná směs se míchala při teplotě místnosti po dobu 30 minut. Směs se poté extrahovala ethylacetátem a od směsi se oddělila organická fáze, která se nechala odpařovat za podmínek sníženého tlaku, dokud nevyschla.

Sloučenina s: 22,3 g (95 % výtěžek), obsah: 85,6 %, zjištěno pomocí HPLC (viz příklad

27).

¹H-NMR (400 MHz, CDCI₃) δ: 1,00 (3H, t, J=7,3 Hz, CH₃), 1,02 (3H, t, J=7,3 Hz, CH₃), 1,83 (4H, m, CH2x2), 3,75 (1H, s, OH), 4,35 (2H, t, J=6,8 Hz, CH₂), 5,21 (1H, d, J=17,1 Hz), 5,61 (1H, d, J=17,1 Hz), 7,28 (1H, s, aromatický-H), 9,59 (1H, brs, OH).

10) Výroba sloučeniny t

Roztok sloučeniny s (0,50 g, 1,46 mmol, obsah: 86,6 %) a uhličitanu draselného (0,40 g, 2,92 mmol) v dimethylsulfoxidu (7 ml) se při teplotě 50°C míchal pod argonovou atmosférou po dobu 20 min. Za stálého míchání se ke směsi pod argonovou atmosférou přidal tert-butylakrylát (2,1 ml, 14,6 mmol) a směs se míchala po dobu dalších 20 hodin. Ke směsi, která se chladila v ledové lázni, se přidala voda (10 ml) a koncentrovaná kyselina chlorovodíková (1 ml). Směs se extrahovala směsí toluen59 •a · » ·♦ ·· ♦ ♦··

a a · »a· · · ♦ * a a » · * · a · ·· ·· · · ethylacetát (4 : 1, 7 ml x 4). Smíchané extrakty se promyly vodou (5 ml x 3), vysušily bezvodým síranem sodným, přefiltrovaly se a nechaly se odpařovat za podmínek sníženého tlaku, dokud nevyschly.

Sloučenina t: 0,55 g (77 % výtěžek), obsah: 75,0 %, zjištěno pomocí HPLC (viz příklad

28).

¹H-NMR (400 MHz, CDCI₃) δ: 0,99 (3H, t, J=7,4 Hz, CH₂CH₃), 1,58 (9H, s, t-Bu), 1,83 (2H, m, CH₂CH₃), 4,68 (2H, s, CH₂), 5,25 (1H, d, J=17,8Hz), 5,69 (1H, d, J=17,8Hz), 7,01 (1H, s, aromatický-H).

11)Výroba sloučeniny h

K roztoku sloučeniny t (1,02 g, 1,84 mmol, obsah: 66,0 %) v toluenu (17 ml) se za stálého míchání pod argonovou atmosférou přidala trifluorooctová kyselina. Směs se míchala pod argonovou atmosférou při teplotě 110 °C po dobu 100 minut. Po zchlazení se směs nechala odpařovat za podmínek sníženého tlaku, dokud nevyschla. Zbytek se resuspendoval v dichlormethanu (50 ml) a nerozpustný materiál se odfiltroval pomocí Celitové destičky. Filtrát se promyl vodou (10 ml), oddělila se organická fáze a vodná fáze se extrahovala dichlormethanem (20 ml x 3). Smíchané extrakty se vysušily bezvodým síranem sodným, přefiltrovaly se a nechaly se odpařovat za podmínek sníženého tlaku, dokud nevyschly.

Sloučenina h: (S)-4-ethyl-7,8-dihydro-4- hydroxy-1 H-pyrano- [3,4-f] indolidin-3,6,10(4H)trion; 0,46 g (77 % výtěžek), obsah: 80,7 %, zjištěno pomocí HPLC (viz následující).

¹H-NMR (400 MHz, CDCI₃) δ: 0,98 (3H, t, J=7,3 Hz, CH₂CH₃), 1,81 (2H, m, CH₂CH₃), 2,97 (2H, t, J=6,3 Hz, CH₂CH₂), 3,64 (1H, s, OH), 4,34 (2H, m, CH₂CH₂), 5,25 (1H, d, J=17,1 Hz), 5,68 (1H, d, J=17,1 Hz), 7,22 (1H, s, aromatický-H).

Podmínky HPLC

Sloupec: Inertsil ODS-2, 0,46 cm ID x 25 cm

Teplota: konstantní teplota cca 40 °C

Průtok: 1 ml/min

Mobilní fáze: směs 10mM dihydrogenfosforečnan draselný : methanol (4:1)

Detekce: 254 nm φφ · φ φ φφ φφφ ♦ φφφ φφφ φφ φφφ • φ • φ φ φ • · φ φ φ • φ φ φφ φφφ· • · φ φφφ φ φ φ • φ φ φ • · φ φ

Příklad 31

Výroba 7-ethyl-10-hydroxycamptothecinu (SN-38)

Suspenze sloučeniny h (0,50 g, 1,82 mmol, obsah: 96,6 %), získaná podle návodu popsaného v příkladu 30 (11), a sloučeniny e (0,36 g, 2,14 mmol) za přítomnosti monohydrátu p-toluenesulfonové kyseliny (10 mg), rozpuštěná ve směsi kyselina octová - toluen (1:1,10 ml), se míchala při 100 °C pod dusíkatou atmosférou po dobu 18 hodin. Směs se nechala odpařit za podmínek sníženého tlaku. Pak se ke zbytku přidal toluen (10 ml) a pak se opět směs nechala odpařit za podmínek sníženého tlaku, dokud nevyschla. Zbytek se rozpustil v acetonu (9 ml) a suspenze se míchala při teplě místnosti po dobu 2 hod. Suspenze se přefiltrovala sáním a odfiltrovaná pevná látka se promyla acetonem (2 ml x 2) a pak se vysušila za podmínek sníženého tlaku. SN-38: hnědá pevná látka, 0,63 g (89 % výtěžek), obsah: 97,7 %, zjištěno pomocí HPLC (viz příklad 9).

¹H-NMR (400 MHz, CDCI₃) δ: 0,98 (3H, t, J=7 Hz, CH₃), 1,38 (3H, t, J=7 Hz, CH₃), 1,90 (2H, q, J=7 Hz, CH₂), 3,08 (2H, q, J=7 Hz, CH₂), 5,17 (2H, s, CH₂O), 5,23 (1H, d, J=16 Hz), 5,54 (1H, d, J=16 Hz), 7,34 až 7,39 (3H, m), 6,83 (1H, d, J=9 Hz).

Příklad 32

Výroba 7-ethyl-10-(4-(1-piperidino)-1-piperidino1karbonvloxvcamptothecinu (SN-

SN-38, získaný podle návodu popsaného v příkladu 1, se přeměnil konverzí na SN-38B-11 (1,22 g, 89 % výtěžek, 99,8 % ee, zjitěno chirální HPLC; viz příklad 10) způsobem popsaným v (S. Sawada, etal., Chem. Pharm. Bull., 1991, 39, 1446).

Příklad 32

Výroba 7-ethyl-10-(4-(1 -piperidino)-1-piperidino]karbonyloxycamptothecin hydrochlorid trihydrátu (CPT-11) « * · · ·*·*·· · « · · ·»♦ ·«·» .· ·.« »·· ♦» ·· ··

SN-38B-11 (1,00 g, 1,7 mmol), získaný způsobem popsaným v příkladu 32, se zahříváním asi na 80 °C rozpustil v 0,1N kyselině chlorovodíkové (20 ml). K roztoku se přidal acetonitril (100 ml) a směs se jemně míchala při teplotě místnosti po dobu 15 hod. Sraženina se odfiltrovala sáním a vysušila za podmínek sníženého tlaku a poté se znovu zvlhčila. CPT-11: světle žlutý krystalický prášek, 0,95 mg (89,9 % výtěžek).

Průmyslová využitelnost

Použitím syntetického způsobu výroby, popsaného v tomto vynálezu, se získá za krátkou dobu a s vysokým výtěžkem vysoce čistý 2’-amino-5’-hydroxypropiofenon a tricyklický keton. Použitím těchto látek jako meziproduktů se úspěšně provádí úplná syntéza analogů CPT.

·· · *4 4· • 4 · ·· ·· 4444

4 4 4 4

4 4 ··

4 4 4 ·4

4* 44 44

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Způsob přípravy 2’-amino-5’- hydroxypropiofenonu na výrobu analogů camptothecinu, který se vyznačuje tím, že se ze sloučeniny a:

(a) (b) a ze sloučeniny b se vyrobí sloučenina c:

(c) a ze sloučeniny c se vyrobí sloučenina d:

(d) a ze sloučeniny d se vyrobí sloučenina e:

kde R je ochranná skupina, kterou lze odstranit katalytickou redukcí.

2. Způsob podle nároku 1, který se vyznačuje tím, že se jako ochranná skupina, kterou lze odstranit katalytickou redukcí, použije benzyl.

3. Způsob podle nároku 1 nebo 2, který se vyznačuje tím, že obsahuje jeden nebo více kroků vybraných ze skupiny zahrnující kroky:

1) krok vedoucí k získání sloučeniny b smícháním sloučeniny a, benzylačního činidla a zásady a následným mícháním směsi v rozpouštědle za podmínek zpětného proudění;
2) krok vedoucí k získání sloučeniny c přidáváním Grignardova činidla ke sloučenině b za podmínek inertní atmosféry;
3) krok vedoucí k získání sloučeniny d smícháním sloučeniny c a oxidačního činidla a mícháním vzniklé směsi; a
4) krok vedoucí k získání sloučeniny e katalytickou redukcí sloučeniny d.

4. Způsob podle nároku 3, který se vyznačuje tím, že v kroku 1) se jako rozpouštědlo použije dimethylformamid.

5. Způsob podle nároku 3, který se vyznačuje tím, že v kroku 2) se jako Grignardovo činidlo použije vinylmagnesium bromid.

6. Způsob podle nároku 3, který se vyznačuje tím, že v krokuj se jako oxidační činidlo použije Jonesovo činidlo, dioxid manganatý nebo TEMPO-chlornan sodný.

7. Sloučenina, která má obecný vzorec c'.

8. Sloučenina, která má obecný vzorec ď.

φ φ ·

9. Způsob přípravy 2’-amino-5’- hydroxypropiofenonu na výrobu analogů camptothecinu, který se vyznačuje tím, že se ze sloučeniny a:

se vyrobí sloučenina d:

(d”) a ze sloučeniny d” se vyrobí sloučenina e:

10. Způsob podle nároku 9, který se vyznačuje tím, že obsahuje jeden nebo více kroků vybraných ze skupiny zahrnující kroky:

1) krok vedoucí k získání sloučeniny c přidáváním Grignardova činidla po kapkách ke sloučenině a za podmínek inertní atmosféry;

2) krok vedoucí k získání sloučeniny d smícháním sloučeniny c a oxidačního činidla a mícháním vzniklé směsi; a

3) krok vedoucí k získání sloučeniny e katalytickou redukcí sloučeniny d.

11. Způsob podle nároku 10, který se vyznačuje tím, že v kroku 1) se jako Grignardovo činidlo použije vinylmagnesium bromid.

12. Způsob podle nároku 11, který se vyznačuje tím, že v kroku 2) se jako oxidační činidlo použije Jonesovo činidlo, dioxid manganatý nebo TEMPO-chlornan sodný.

4 4 4 4 4 4 · • 4 4 4 4 4 4 4 4 • 4 • • 4 4 44 4 4 4 4 4 4 • • 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 ♦ 4 · • 4 4 4 4 4* 4 4

13. Použití 2’-amino-5’- hydroxypropiofenonu, který se získává nároků 1 až 6 a 9 až 12, při výrobě analogů camptothecinu.

podle jakéhokoli z

14. Způsob přípravy analogů camptothecinu, obsahující reakci 2’-amino-5’- hydroxypropiofenonu, získaného podle jakéhokoli z nároků 1 až 6 a 9 až 12, a tricyklického ketonu.

15. Způsob přípravy tricyklického ketonu na výrobu analogů camptothecinu, který se vyznačuje tím, že ze sloučeniny k:

(kde TMS je trimethylsilylová skupina a Me je methyl), nebo ze sloučeniny v:

OH (v) (kde TMS je trimethylsilylová skupina a Me je methyl), se vyrobí sloučenina I:

(kde TMS je trimethylsilylová skupina a Me je methyl), a ze sloučeniny I se vyrobí sloučenina m:

(kde TMS je trimethylsilylová skupina a Me je methyl), a ze sloučeniny m se vyrobí sloučenina n:

(kde TMS je trimethylsilylová skupina, Me je methyl a Et je ethyl), a ze sloučeniny n se vyrobí sloučenina o:

(kde TMS je trimethylsilylová skupina, Me je methyl a Et je ethyl), a ze sloučeniny o se vyrobí sloučenina p:

(kde TMS je trimethylsilylová skupina, Me je methyl a Et je ethyl), a ze sloučeniny p se vyrobí sloučenina q:

(kde Me je methyl a Etje ethyl), a ze sloučeniny q se vyrobí sloučenina r:

(kde Me je methyl a Et je ethyl a Pr je propyl), a ze sloučeniny r se vyrobí sloučenina s:

44 4 » 44 *· ····

4 4 44 44 4 4 4 4 4

444 ♦ · ♦ · · ·

4 4 44 «44444 4

444 444 4444

44 444 444 «4 4· 44 (kde Me je methyl a Et je ethyl a Pr je propyl), a ze sloučeniny s se vyrobí sloučenina t:

(kde Et je ethyl a t-Bu jet-butyl), a ze sloučeniny t se vyrobí sloučenina h:

(kde Et je ethyl);

a vyznačuje se dále tím, že obsahuje jeden nebo více kroků vybraných ze skupiny zahrnující kroky:

1) krok vedoucí k získání sloučeniny I smícháním sloučeniny k, lithiačního činidla, formylačního činidla a jodačního činidla;

2) krok vedoucí k získání sloučeniny m smícháním sloučeniny I, krotylalkoholu, triethylsilanu a kyseliny a reakcí této směsi bez přítomnosti rozpouštědla;

3) krok vedoucí k získání sloučeniny I smícháním sloučeniny v, vedlejšího produktu v kroku 2), s oxidačním činidlem a zásadou;

4) krok vedoucí k získání sloučeniny n smícháním sloučeniny m, palladiového katalyzátoru, zásady a katalyzátoru fázového přechodu a zpětným prouděním získané směsi v rozpouštědle;
5) krok vedoucí k získání sloučeniny o smícháním sloučeniny n, osmiového katalyzátoru, ko-oxidačního činidla, zásady a asymetrického činidla;
6) krok vedoucí k získání sloučeniny p smícháním sloučeniny o, zásady a jódu a zpětným prouděním získané směsi ve tekuté směsi alkohol-voda;

·« . » ·· »· ···· • · ·· ·*·· » · » «·* »«··»· ·· ·· ·♦···♦ * • · * »»· .··» ** ·*· ♦·· ·· ·· · ·
7) krok vedoucí k získání sloučeniny q smícháním sloučeniny p a desilylačnějodačního činidla;
8) krok vedoucí k získání sloučeniny r smícháním sloučeniny q, palladiového katalyzátoru a zásady a reakcí této směsi v 1-propanolu pod atmosférou oxidu uhelnatého;
9) krok vedoucí k získání sloučeniny s smícháním sloučeniny r a demethylačního činidla a reakcí vzniklé směsi při teplotě místnosti;
10) krok vedoucí k získání sloučeniny t smícháním sloučeniny sza přítomnosti tbutylakrylátu a zásady.

16. Způsob podle nároku 15, který se vyznačuje tím, že v kroku 1) se jako lithiační činidlo použije n-butyl lithium.

17. Způsob podle nároku 15 nebo 16, který se vyznačuje tím, že v kroku 1) se jako konstantní teplota udržuje teplota -30 až -40 °C.

18. Způsob podle nároku 15, který se vyznačuje tím, že se v kroku 3) použije jako oxidační činidlo chlornan TEMPO-sodný.

19. Způsob podle nároku 15, který se vyznačuje tím, že se v kroku 4) použije jako zásada uhličitan draselný nebo diisopropylethylenamin.

20. Způsob podle nároku 15 nebo 19, který se vyznačuje tím, že se v kroku 4) použije jako rozpouštědlo tetrahydrofuran nebo tekutá směs diisopropylether-acetonitrilvoda.

21. Způsob podle nároku 15, který se vyznačuje tím, že se v kroku 4) použije jako osmiový katalyzátor osmsmian (VI) draselný.

22. Způsob podle nároku 15, který se vyznačuje tím, že se v kroku 6) použije 4násobné množství jódu vzhledem k množství sloučeniny o.

23. Způsob podle nároku 15, který se vyznačuje tím, že se v kroku 7) použije jako desilylačně-jodační činidlo trifluorooctan jodostříbrný nebo jodid N-chlorosukcinimidosodný.

24. Způsob podle nároku 15 nebo 23, který se vyznačuje tím, že se sloučenina q purifikuje chemicky pomocí kroků, které zahrnují:

- krok, ve kterém se reakční produkt, získaný při výrobě sloučeniny q ze sloučeniny p, přidá k vodnému zásaditému roztoku a zamíchá;

- krok, ve kterém se přidá organické rozpouštědlo, zamíchá se a poté se odstraní organická fáze; a

- krok, ve kterém se vodná fáze okyselí a poté extrahuje organickým rozpouštědlem.

25. Způsob podle nároku 24, který se vyznačuje tím, že se jako vodný zásaditý roztok použije vodný roztok hydroxidu sodného.

26. Způsob podle nároku 24, který se vyznačuje tím, že se jako organické rozpouštědlo použije chloroform.

27. Způsob podle nároku 15 nebo 23, který se vyznačuje tím, že se sloučenina q purifikuje chemicky pomocí kroků, které zahrnují:

- krok, ve kterém se reakční produkt, získaný při výrobě sloučeniny q ze sloučeniny p, rozpustí ve vysoce polárním rozpouštědle a poté se rozvrství díky použití méně polárního rozpouštědla; a

- krok, ve kterém se přefiltruje sraženina a poté se filtrát zahušťuje za podmínek sníženého tlaku, dokud nevyschne.

28. Způsob podle nároku 27, který se vyznačuje tím, že se jako vysoce polární rozpouštědlo použije chloroform.

29. Způsob podle nároku 27, který se vyznačuje tím, že se jako méně polární rozpouštědlo použije n-hexan.

30. Způsob podle nároku 15, který se vyznačuje tím, že se v kroku 10) jako zásada použije uhličitan draselný.

·· *···

31. Použití tricyklického ketonu, získaného způsobem podle jakéhokoli z nároků 15 až 30, při výrobě analogů camptothecinu.

32. Způsob výroby analogů camptothecinu, který se vyznačuje tím, že při něm tricyklický keton, který se získá způsobem podle jakéhokoli z nároků 15 až 30, reaguje s 2’-amino-5’-hydroxypropiofenonem.

33. Způsob podle nároku 32, který se vyznačuje tím, že se jako 2’-amino-5’hydroxypropiofenon použije 2’-amino-5’-hydroxypropiofenon získaný způsobem podle jakéhokoli z nároků 1 až 6 a 9 až 12.

34. Způsob podle jakéhokoli z nároků 14, 32 a 33, které se vyznačují tím, že se smíchají tricyklický keton a 2’-amino-5’-hydroxypropiofenon a vzniklá směs se nechá reagovat za podmínek inertní atmosféry.

>· « A ·· • · ·· AA * A

A A · · A *

99 9999

9 9 9

AAA

AAA A · ·

99 ··· »A· A·

Anotace

Název vynálezu: Způsob výroby sloučenin odvozených od camptothecinu

Způsob výroby 2’-amino-5’-hydroxypropiofenonu, který odpovídá AB-kruhové *. části camptothecinu (CPT) kostry, a tricyklického ketonu, který odpovídá CDE-kruhové části, aby byla zajištěna úplná syntéza CPT, což je výchozí materiál pro výrobu * hydrochloridu irinotekanu a dalších různých druhů camptothecinových derivátů, a aby byl zajištěn stabilní CPT a jeho deriváty.