具体实施方式
以下实施例用于更为详细的说明本发明,而不是对本发明范围的限制。
实施例1a)2-N-三氟乙酰基-6-N-苄氧基羰基-1-赖氨酸
将100.0g(356.7mmol)6-N-苄氧基羰基-1-赖氨酸溶解在1000ml三氟乙酸乙酯与500ml乙醇的混合物中,然后在室温下搅拌24小时。蒸发至干,由异丙基醚中结晶残留物。
产量:128.9g(96%理论值)无色结晶粉末。
熔点:98.5℃元素分析:计算值:C 51.07 H 5.09 N 7.44 F 15.14实测值:C 51.25 H 5.18 N 7.58 F 15.03b)2-N-三氟乙酰基-6-N-苄氧基羰基-1-赖氨酸[1-(4-全氟辛基磺酰基)哌嗪]-酰胺
在0℃下向125.0g(332.0mmol)实施例1a)的标题化合物和188.7g(332.0mmol)1-全氟辛基磺酰基哌嗪(根据DE19603033制备)在750ml四氢呋喃中的溶液内添加164.2g(0.664mmol)EEDQ(2-乙氧基-1,2-二氢喹啉-1-甲酸乙酯),然后在室温下搅拌过夜。真空蒸发至干,然后在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:二氯甲烷/甲醇=20∶1)。
产量:286.0g(93%理论值)无色固体。
熔点:92℃元素分析:计算值:C 36.30 H 2.83 N 6.05 F 41.01 S 3.46实测值:C 36.18 H 2.94 N 5.98 F 40.87 S 3.40c)6-N-苄氧基羰基-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
在0℃下将氨气引入280.0g(302.2mol)实施例1b)的标题化合物在2000ml乙醇中的溶液内1小时。在0℃下搅拌4小时。蒸发至干,然后残留物由水中进行吸收沉淀。过滤出固体,然后在50℃下真空干燥。
产量:243.5g(97%理论值)无定形固体。元素分析:计算值:C 37.60 H 3.28 N 6.75 F 38.89 S 3.86实测值:C 37.55 H 3.33 N 6.68 F 38.78 S 3.81d)6-N-苄氧基羰基-2-N-[1-O-α-D-羰甲基-(2,3,4,6-四-O-苄基吡喃甘露糖)-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
在0℃下向100.0g(120.4mol)实施例1c)的标题化合物、72.1g(120.4mol)1-O-α-D-羧甲基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖和13.86g(120.4mol)N-羟基琥珀酰亚胺溶解于500ml二甲基甲酰胺中的溶液内添加41.27g(200.0mmol)N,N-二环己基碳二亚胺。在0℃下搅拌3小时,随后在室温下搅拌过夜。过滤沉淀出的脲,蒸发滤液至干,然后在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:二氯甲烷/乙醇=20∶1)。
产量:136.1g(87%理论值)粘稠油。元素分析:计算值:C 57.32 H 4.89 N 4.31 F 24.86 S 2.47实测值:C 57.38 H 5.07 N 4.22 F 24.78 S 2.39e)2-N-[1-O-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖]-1-赖氨酸-1-[(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将130.0g(100.0mmol)实施例1d)的标题化合物溶解在2000ml乙醇中,然后添加10.0g钯催化剂(10%Pd/C)。在室温下氢化12小时。过滤出催化剂,然后真空蒸发滤液至干。
产量:91.7g(定量)无色固体。元素分析:计算值:C 34.07 H 3.63 N 6.11 S 3.50 F 35.24实测值:C 33.91 H 3.72 N 6.04 S 3.40 F 35.31f)6-N-[1,4,7-三(羧酸甲基)]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-10-N-(戊酰基-3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基)]-2-N-[1-O-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺,Gd-络合物
在略微加热下将50.0g(54.55mmol)实施例1e)的标题化合物、6.28g(54.55mmol)N-羟基琥珀酰亚胺、4.62g(109.0mol)氯化锂和34.35g(54.55mol)1,4,7-三(羧酸甲基)-10-(羧基-3-氮杂-4-氧代-5-甲基-戊-5-基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷,Gd-络合物溶解于400ml二甲基亚砜中。在10℃下添加16.88g(81.8mol)N,N-二环己基碳二亚胺,随后在室温下搅拌过夜。将溶液倾倒在3000ml丙酮中,然后搅拌10分钟。过滤出沉淀的固体,随后通过色谱法纯制(RP-18洗脱剂:水/乙醇/乙腈组成的梯度)。
产量:75.9g(91.0%理论值)无色固体。
水含量:8.6%。元素分析(以无水物计):计算值:C 35.34 H 4.09 N 8.24 S 2.10 F 21.12 Gd 10.28实测值:C 35.28 H 4.15 N 8.19 S 2.15 F 21.03 Gd 10.14
实施例2a)6-N-[1,4,7-三(羧酸甲基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-10-N-(戊酰基-3-氮杂-4-氧代-5-基)]-2-N-[1-O-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺,Gd-络合物
在略微加热下将50.0g(54.55mmol)实施例1e)的标题化合物、6.28g(54.55mmol)N-羟基琥珀酰亚胺、4.62g(109.0mol)氯化锂和34.35g(54.55mol)1,4,7-三(羧酸甲基)-10-(羧基-3-氮杂-4-氧代-5-甲基-戊-5-基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷,Gd-络合物溶解于400ml二甲基亚砜中。在10℃下添加16.88g(81.8mmol)N,N-二环己基碳二亚胺,随后在室温下搅拌过夜。将溶液倾倒在3000ml丙酮中并搅拌10分钟。过滤出沉淀的固体,随后通过色谱法纯制(RP-18洗脱剂:由水/乙醇/乙腈组成的梯度)。
产量:76.0g(92.0%理论值)无色固体。
水含量:6.88%元素分析(以无水物计):计算值:C 34.90 H 3.93 N 8.32 S 2.12 F 21.33 Gd 10.38实测值:C 34.81 H 4.02 N 8.27 S 2.09 F 21.22 Gd 10.19
实施例3a)2-[4-3-氧代丙酸乙酯]-苯乙酸甲酯
向200.0g(1204.0mmol)4-羟基苯乙酸甲酯、212.0g(2000.0mmol)碳酸钠在2000ml丙酮中的溶液内添加233.8g(1400.0mmol)2-溴乙酸乙酯并回流5小时。过滤出固体,然后真空蒸发至干。残留物在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:正己烷/乙酸乙酯=15∶1)。
产量:288.5g(95.0%理论值)无色油。元素分析:计算值:C 61.90 H 6.39实测值:C 61.75 H 6.51b)2-[4-3-氧代丙酸乙酯]-苯基-2-溴乙酸甲酯
向285.0g(1130.0mmol)实施例3a)的标题化合物溶解于2000ml四氯化碳中的溶液内添加201.0g(1130.0mmol)N-溴代琥珀酰亚胺和100.0mg过氧化二苯甲酰,然后回流8小时。在冰浴中冷却,过滤沉淀出的琥珀酰亚胺,然后滤液真空蒸发至干。残留物在硅胶上纯制(洗脱剂:正己烷/丙酮=15∶1)。
产量:359.2g(96.0%理论值)无色粘稠油。元素分析:计算值:C 47.28 H 4.57 Br 24.16实测值:C 47.19 H 4.71 Br 24.05c)2-[4-(3-氧杂丙酸乙酯)]-苯基-2-[1-(1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1-基)乙酸甲酯
向603.0g(3500.0mmol)1,4,7,10-四氮杂环十二烷在6000ml氯仿中的溶液内添加350.0g(1057.0mmol)实施例3b)的标题化合物,然后在室温下搅拌过夜。每次用3000ml水萃取3次。有机相在硫酸镁上干燥,然后真空蒸发至干。残留物未进一步纯制即用于下一步反应(实施例3d)中。
产量:448.0g(定量)粘稠油。元素分析:计算值:C 59.70 H 8.11 N 13.26实测值:C 59.58 H 8.20 N 13.18d)2-[4-(3-氧杂丙酸)]-苯基-2-[1,4,7-三(羧酸甲基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-10-基]-乙酸
将445.0g(1053.0mmol)实施例3c)的标题化合物和496.0g(5270.0mmol)氯乙酸溶解在4000ml水中。用30%氢氧化钠水溶液调节pH值为10,然后在70℃下搅拌8小时。随后通过与30%氢氧化钠水溶液混合将反应溶液的pH值调节为13,然后回流30分钟。溶液在冰浴中冷却,然后通过添加浓盐酸将pH值调节为1。真空蒸发至干。残留物溶解在4000ml甲醇中,然后在室温下搅拌1小时。过滤沉淀出的食盐,滤液蒸发至干,然后在RP-18C上纯制残留物(洗脱剂:由水/乙醇/乙腈组成的梯度)。
产量:403.0g(69.0%理论值)无色固体。
水含量:10.2%元素分析(以无水物计):计算值:C 51.98 H 6.18 N 10.10实测值:C 51.80 H 6.31 N 10.01e)2-[4-(3-氧杂丙酸)]-苯基-2-[1,4,7-三(羧酸甲基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-10-基]-乙酸,Gd-络合物
向400g(721.3mmol)实施例3d)的标题化合物在2000ml水中的溶液内添加130.73g(360.65mmol)氧化钆,然后在80℃搅拌5小时。过滤溶液,然后冻干滤液。
产量:511g(定量)无定形固体。
水含量:11.0%元素分析(以无水物计):计算值:C 40.67 H 4.41 N 7.98 Gd 22.19实测值:C 40.51 H 4.52 N 8.03 Gd 22.05f)6-N-[2-[4-(3-氧杂丙酰基)-苯基]-2-[1,4,7-三(羧酸甲基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-10-基]-乙酸]-2-N-(1-O-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖)-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺,Gd-络合物,钠盐
于略微加热下将50.0g(54.55mmol)实施例1e)的标题化合物、6.28g(54.55mmol)N-羟基琥珀酰亚胺、4.62g(109.0mmol)氯化锂和38.66g(54.55mmol)实施例3e)的标题化合物溶解在400ml二甲基亚砜中。在10℃下添加16.88g(81.8mmol)N,N-二环己基碳二亚胺,随后在室温下搅拌过夜。将溶液倾倒在3000ml丙酮中,然后搅拌10分钟。过滤出沉淀的固体,随后通过色谱法纯制(RP-18;洗脱剂:由水/乙醇/乙腈组成的梯度)。所得的产物溶解在少量水中,然用氢氧化钠水溶液调节溶液的pH值为7.4。接着冻干产物溶液。
产量:79.1g(89%理论值)无色固体。
水含量:10.3%元素分析(以无水物计):计算值:C 36.86 H 3.77 N 6.88 S 1.97 F 19.82 Gd 9.65实测值:C 36.75 H 3.84 N 6.80 S 2.03 F 19.75 Gd 9.57
实施例4a)6-N-[1,4,7-三(叔丁氧基羰甲基基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-10-羰甲基]-2-N-(1-O-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖)-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将15.0g(26.19mmol)1,4,7-三(叔丁氧基羰基甲基)-10-羧甲基-1,4,7,10-四氮杂环十二烷(根据W091/05762制备)、24.0g(26.19mmol)实施例1e)的标题化合物和3.01g(26.19mmol)N-羟基琥珀酰亚胺溶解在150ml二甲基甲酰胺中,然后在0℃下添加8.25g(40.0mmol)N,N-二环己基碳二亚胺。在室温下搅拌过夜。过滤沉淀出的脲,滤液真空蒸发至干。残留物在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:二氯甲烷/甲醇=20∶1)。
产量:35.45g(92.0%理论值)无色固体。元素分析:计算值:C 44.08 H 5.69 N 7.62 F 21.95 S 2.18实测值:C 44.01 H 5.81 N 7.53 F 21.87 S 2.03b)6-N-[1,4,7-三(羧酸甲基)]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-10-羰甲基)-2-N-[1-O-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺,Gd-络合物
将30.0g(20.39mmol)实施例4a)的标题化合物溶解在50ml氯仿中,然后添加300ml三氟乙酸。在室温下搅拌10分钟。真空蒸发至干,残留物溶解在300ml水中。添加3.69g(10.19mmol)氧化钆,然后在80℃搅拌5小时。溶液真空蒸发至干,然后在硅胶上纯制(RP-18;洗脱剂:由水/乙醇/乙腈组成的梯度)。
产量:11.0g(37.0%理论值)无色且无定形固体。
水含量:11.3%元素分析(以无水物计):计算值:C 34.62 H 3.87 N 7.69 F 22.16 S 2.20 Gd 10.97实测值:C 34.57 H 3.95 N 7.60 F 22.05 S 2.13 Gd 10.90
实施例5a)6-N-[3,6,9-三(羧酸甲基)-3,6,9-三氮杂十一烷酸-1-羧基-11-酰基]-2-N-[1-O-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
向24.0g(26.19mmol)实施例1e)的标题化合物溶解于100ml二甲基甲酰胺/30ml吡啶中的溶液内添加12.10g(30.0mmol)3-N-(2,6-二氧代吗啉基乙基)-6-N-(乙氧基羰甲基)-3,6-二氮杂辛二酸,然后在50℃搅拌5小时。真空蒸发至干。残留物溶解在200ml水中,所得溶液的pH值通过添加20%氢氧化钠水溶液调节为13。在22℃和pH值为13的条件下搅拌8小时。通过添加浓盐酸调节溶液的pH值为7.2,然后真空蒸发至干。残留物在硅胶RP-18上进行色谱纯制(洗脱剂:由水/乙醇/乙腈组成的梯度)。
产量:17.26g(51.0%理论值)无色固体。
水含量:9.3%元素分析(以无水物计):计算值:C 37.19 H 4.21 N 7.59 F 25.00 S 2.48实测值:C 37.10 H 4.30 N 7.48 F 25.07 S 2.42b)6-N-[3,6,9-三(羧酸甲基)-3,6,9-三氮杂十一烷酸-1-羧基-11-酰基]-2-N-[1-O-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺,Gd-络合物,钠盐
向10.0g(7.74mmol)实施例5a)的标题化合物在100ml水中的溶液内添加1.40g(3.87mmol)氧化钆,然后在70℃下搅拌2小时。过滤溶液。滤液用2N氢氧化钠调节pH值为7.4,然后冻干。
产量:11.36g(定量)无定形固体。
水含量:10.5%元素分析(以无水物计):计算值:C 32.72 H 3.43 N 6.68 S 2.18 Gd 10.71 Na 1.57 F 22.00实测值:C 32.65 H 3.51 N 6.71 S 2.08 Gd 10.61 Na 1.68 F 21.87
实施例6a)6-N-苄氧基羰基-2-N-[1,4,7-三(羧酸甲基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷]-10-(戊酰基-3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基)]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺,Gd-络合物
于略微加热下将50.0g(60.20mmol)实施例1c)的标题化合物、6.93g(60.20mmol)N-羟基琥珀酰亚胺、5.09g(120.0mmol)氯化锂和37.91g(60.20mmol)1,4,7-三(羧酸甲基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-10-(戊酰基-3-氮杂-4-氧代-5甲基-5-基),Gd-络合物溶解在400ml二甲基亚砜中。在10℃下添加20.63g(100.0mmol)N,N-二环己基碳二亚胺,随后在室温下搅拌过夜。将溶液倾倒在3000ml丙酮中,然后搅拌10分钟。过滤出沉淀的固体,随后通过色谱法纯制(硅胶RP-18;洗脱剂:由水/乙醇/乙腈组成的梯度)。
产量:75.53g(87.0%理论值)无色固体。
水含量:10.1%元素分析(以无水物计):计算值:C 37.48 H 3.84 N 8.74 S 2.22 F 22.39 Gd 10.90实测值:C 37.39 H 4.02 N 8.70 S 2.16 F 22.29 Gd 10.75b)2-N-[1,4,7-三(羧酸甲基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-Gd-络合物,10-(戊酰基-3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基)-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将70.0g(48.53mmol)实施例1d)的标题化合物溶解在500ml水/100ml乙醇中,与5.0g钯催化剂(10%Pd/C)混合,然后在室温下于氢气氛(1atm)下氢化,直至不再有氢气吸收。接着抽滤出催化剂,用乙醇彻底洗涤(2次,每次75ml),然后真空浓缩至干。得到非常粘稠的无色油状标题化合物。
产量:63.5g(定量)
水含量:9.8%。元素分析(以无水物计):计算值:C 37.48 H 3.84 N 8.74 S 2.22 F 22.39 Gd 10.90实测值:C 37.39 H 4.03 N 8.65 S 2.20 F 22.31 Gd 10.78c)6-N-(1-O-α-D-羰甲基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖)-2-N-[1,4,7三-(羧酸甲基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷,Gd-络合物-10-(戊酰基-3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基)]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
在略微加热(30-40℃)下将50.0g(38.22mmol)实施例6b)的标题化合物、4.40g(38.22mmol)N-羟基琥珀酰亚胺、3.39g(80.0mmol)氯化锂和22.88g(38.22mmol)1-O-α-D-羧甲基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖溶解在400ml二甲基亚砜中。在10℃下添加10.32g(50.0mmol)N,N-二环己基碳二亚胺,随后在室温下搅拌过夜。将溶液倾倒在3000ml丙酮中,然后搅拌10分钟。过滤出沉淀的固体,随后通过色谱法纯制(硅胶RP-18,洗脱剂:由水/乙醇/乙腈组成的梯度)。
产量:64.25g(89.0%理论值)无色固体。
水含量:10.9%元素分析(以无水物计):计算值:C 46.42 H 4.54 N 6.67 S 1.70 F 17.10 Gd 8.33实测值:C 46.36 H 4.71 N 6.60 S 1.61 F 17.19 Gd 8.21d)6-N-(1-O-α-D-羰甲基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖)-2-N-[1,4,7三-(羧酸甲基)-1,4,8,10-四氮杂环十二烷,Gd-络合物-10-(戊酰基-3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基)]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将60.0g(31.77mmol)实施例6c)的标题化合物溶解在500ml乙醇中,然后与6.0g钯催化剂(10%Pd/C)混合。在室温下于氢气氛(1atm)下氢化,直至不再有氢气吸收。接着抽滤出催化剂,用乙醇彻底洗涤(2次,每次用150ml),然后真空浓缩至干。
产量:48.55g(定量)无色固体。
水含量:3.9%元素分析(以无水物计):计算值:C 35.37 H 4.02 N 8.25 S 2.10 F 21.13 Gd 10.29实测值:C 35.28 H 4.13 N 8.17 S 2.03 F 21.05 Gd 10.20
实施例7a)1,7-二-(苄氧基羰基)-4-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷
于0℃下向50.0g(113.5mmol)1,7-二(苄氧基羰基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷和66.42g(113.5mmol)2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基乙酸(根据DE 196 03 033制备)在300ml四氢呋喃中的溶液内添加49.46g(200.0mmol)EEDQ(2-乙氧基-1,2-二氢喹啉-1-甲酸乙酯),然后在室温下搅拌过夜。真空蒸发至干,然后在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:二氯甲烷/甲醇=20∶1)。
产量:65.2g(57%理论值)无色固体。元素分析:计算值:C 42.91 H 3.80 N 6.95 F 32.05 S 3.18实测值:C 42.85 H 3.90 N 6.87 F 31.98 S 3.15b)1,7-二-(苄氧基)-4-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-10-[1-O-α-D-羰甲基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷
于0℃下向60.0g(59.53mmol)实施例7a)的标题化合物和35.64g(59.53mmol)1-O-α-D-羧甲基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖(根据DE 19728954制备)在300ml四氢呋喃中的溶液内添加24.73g(100mmol)EEDQ(2-乙氧基-1,2-二氢喹啉-1-甲酸乙酯),然后在室温下搅拌过夜。真空蒸发至干,然后在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:二氯甲烷/甲醇=20∶1)。
产量:76.6g(81.0%理论值)无色固体。元素分析:计算值:C 54.44 H 4.70 N 4.41 F 20.33 S 2.02实测值:C 54.37 H 4.81 N 4.35 F 20.27 S 1.96c)1-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-7-(1-O-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷
将70g(44.07mmol)实施例7b的标题化合物溶解在800ml乙醇中,然后添加8g钯催化剂(10%Pd/C)。在室温下氢化。过滤出催化剂,然后滤液真空蒸发至干。
产量:42.3g(定量)无色固体。元素分析:计算值:C 35.04 H 3.99 N 7.30 F 33.65 S 3.34实测值:C 35.15 H 4.13 N 7.13 F 33.48 S 3.26d)1,7-二-[1,4,7-三(羧酸甲基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-Gd-络合物-10-(戊酰基-3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基)-4-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-10-(1-O-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷
于略微加热下将20g(20.84mmol)实施例7c的标题化合物、5.09g(120mmol)氯化锂和37.78g(60mmol)1,4,7-三(羧酸甲基)-10-戊酰基-3-氮杂-4-氧代-5甲基-5-基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷,Gd-络合物溶解在400ml二甲基亚砜中。在10℃下添加29.67g(120mmol)EEDQ,然后在室温下搅拌过夜。将溶液倾倒在3000ml丙酮中,然后搅拌10分钟。过滤出沉淀的固体,随后通过色谱法纯制(硅胶RP-18,洗脱剂:由水/乙醇/乙腈组成的梯度)。
产量:13.2g(29.0%理论值)无色固体。
水含量:11.8%元素分析(以无水物计):计算值:C 36.31 H 4.34 N 9.62 S 1.47 F 14.79 Gd 14.41实测值:C 36.24 H 4.27 N 9.58 S 1.51 F 14.85 Gd 14.25
实施例8a)1,7-二(苄氧基羰基)-4-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-10-[戊酰基-3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基-[1,4,7-三(羧酸甲基)-Gd-络合物,1,4,7,10-四氮杂环十二烷-10-基]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷
于略微加热下将50.0g(49.61mmol)实施例7a)的标题化合物、5.71g(49.61mmol)N-羟基琥珀酰亚胺、4.24g(100mmol)氯化锂和31.24g(49.61mmol)1,4,7-三(羧酸甲基)-10-(戊酰基-3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷,Gd-络合物溶解在350ml二甲基亚砜中。在10℃下添加15.47g(75mmol)N,N-二环己基碳二亚胺,随后在室温下搅拌过夜。将溶液倾倒在2000ml丙酮中,然后搅拌10分钟。过滤出沉淀的固体,随后通过色谱法纯制。(硅胶RP-18,洗脱剂:由水/乙醇/乙腈组成的梯度)。
产量:65.1g(81.0%理论值)无色固体。
水含量:7.9%元素分析(以无水物计):计算值:C 40.79 H 4.11 N 8.65 S 1.98 F 19.94 Gd 9.72实测值:C 40.71 H 4.20 N 8.58 S 2.03 F 19.87 Gd 9.68b)1-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-7-{戊酰基-3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基-[三(羧酸甲基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-10-基]-Gd络合物}-1,4,7,10-四氮杂环十二烷
将60.0g(37.05mmol)实施例8a)的标题化合物溶解在600ml乙醇中,然后添加6.0g钯催化剂(10%Pd/C)。在室温下氢化。过滤出催化剂,然后滤液真空蒸发至干。
产量:50.06g(定量)无色固体。
水含量:3.9%元素分析(以无水物计):计算值:C 34.67 H 4.03 N 10.37 S 2.37 F 23.90 Gd 11.64实测值:C 34.58 H 4.15 N 10.28 S 2.30 F 23.84 Gd 11.57c)1-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-4,10-二[1-O-α-D-羰甲基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖]-7-{戊酰基-3-氮杂-4-氧代-5甲基-5-基-[1,4,7-三(羧酸甲基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-10-基]-Gd络合物}-1,4,7,10-四氮杂环十二烷
在略微加热下将40.0g(29.60mmol)实施例8b)的标题化合物、2.54g(60.0mmol)氯化锂和44.9g(75.0mmol)1-O-α-D-羧甲基-2,3,4,6-四-O-苄基吡喃甘露糖溶解在300ml二甲基亚砜中。在10℃下添加24.73g(100.0mmol)EEDQ,然后在室温下搅拌过夜。将溶液倾倒在3000ml丙酮中,然后搅拌10分钟。过滤出沉淀的固体,随后通过色谱法纯制(硅胶RP-18,洗脱剂:由水/乙醇/乙腈组成的梯度)。
产量:31.98g(43.0%理论值)无色固体。
水含量:3.5%。元素分析(以无水物计):计算值:C 53.06 H 5.05 N 5.57 S 1.28 F 12.85 Gd 6.26实测值:C 52.95 H 5.19 N 5.48 S 1.23 F 12.77 Gd 6.14d)1-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-4,10-二[1-O-α-D-羰甲基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖]-7-{戊酰基-3-氮杂-4-氧代-5甲基-5-基-[1,4,7-三(羧酸甲基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-10-基]-Gd络合物}-1,4,7,10-四氮杂环十二烷
将30.0g(11.94mmol)实施例8c)的标题化合物溶解在300ml乙醇/30ml水中,然后添加4.0g钯催化剂(10%Pd/C)。在室温下氢化。过滤出催化剂,然后滤液真空蒸发至干。
产量:21.39g(定量)无色固体。
水含量:3.4%元素分析(以无水物计):计算值:C 36.87 H 4.39 N 7.82 S 1.79 F 18.03 Gd 8.78实测值:C 36.80 H 4.50 N 7.85 S 1.68 F 17.91 Gd 8.70
实施例9a)6-N-[3,6-二(羧甲基)-辛烷-1,8-二甲酸-1-羧基-8-氧基]-2-N-(1-O-α-D-羧甲基-吡喃甘露糖)-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
向27.5g(30.0mmol)实施例1e)的标题化合物溶解于300ml二甲基甲酰胺/100ml吡啶中的溶液内添加25.62g(100.0mmol)亚乙基二胺-N,N,N′,N′-四乙酸二酐,然后在50℃下搅拌5小时。真空蒸发至干。残留物溶解在300ml水中。通过添加20%氢氧化钠水溶液将pH值调节为10,碱性产物溶液通过添加浓盐酸将pH值调节为3,然后真空蒸发至干。残留物在硅胶RP-18上进行色谱纯制(洗脱剂:由水/乙醇/乙腈组成的梯度)。
产量:18.22g(51.0%理论值)无色固体。
水含量:7.9%元素分析(以无水物计):计算值:C 36.31 H 3.98 N 7.06 F 27.12 S 2.69实测值:C 36.23 H 4.07 N 6.98 F 27.05 S 2.62b)6-N-[3,6-二(羧酸甲基)-辛烷-1,8-二甲酸-1-羧酸-8-氧基-Mn络合物,钠盐]-2-N-(1-O-α-D-羧甲基-吡喃甘露糖)-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将10g(8.397mmol)实施例9a)的标题化合物溶解在200ml水中。添加965mg(8.397mmol)碳酸锰(II),然后在60℃搅拌3小时。溶液用5%氢氧化钠水溶液将pH值调节为7.4,过滤,然后冻干。
产量:10.52g(99.0%理论值)无色固体。
水含量:7.8%元素分析(以无水物计):计算值:C 34.16 H 3.50 N 6.64 S 2.53 F 25.52 Mn 4.34 Na 1.82实测值:C 34.06 H 3.61 N 6.58 S 2.47 F 25.47 Mn 4.30 Na 1.97
实施例10a)1,2,3,4,6-五-O-乙酰基-α,β-D-吡喃甘露糖
类似于文献中描述的方法[M.L.Wolfrom和A.Thomson,在Methodsin Carbohydrate Chemistry(R.L.Whistler,M.L.Wolfrom和J.N.BeMiller编辑),Academic Press,New York,Vol.II.53,pp.211-215(1963)],使150g(832.5mmol)α,β-D-吡喃甘露糖与由1500ml无水吡啶和1500ml乙酸酐组成的混合物反应,在后处理后得到315g(96.7%)上述标题化合物,为粘稠无色油状的粗产物。通过所得标题化合物的1H-NMR光谱研究可测定α与β两种端基异构体的比例为4∶1。可取消分离上述标题化合物的α和β端基异构体,以进行随后的反应步骤。元素分析:计算值:C 49.21 H 5.68实测值:C 49.12 H 5.78b)1-O-α-D-(5-乙氧基羰基)-戊基-2,3,4,6-四-O-乙酰基-吡喃甘露糖
类似于文献中合成芳基吡喃葡糖苷的已知方法[J.Conchie和G.A.Levvy,在Methods in Carbohydrate Chemistry(R.L.Whistler,M.L.Wolfrom和J.N.BeMiller编辑),Academic Press,New York.Vol.II,90,pp.345-347(1963)],使作为α,β-端基异构体混合物的156.2g(400mmol)实施例10a)标题化合物与67ml(400mmol)6-羟基-己酸乙酯和60.8ml(520mmol)氯化锡(IV)反应,在柱色谱纯制(洗脱剂:己烷/乙酸乙酯2∶1)后产生总共600ml的1,2-二氯乙烷,形成100.05g(51%理论值)粘稠无色油状的上述标题化合物。通过所得标题化合物的1H-NMR光谱研究可证实上述标题化合物仅是α-端基异构体。元素分析:计算值:C 52.94 H 6.77实测值:C 52.80 H 6.78c)1-O-α-D-(5-羧基)-戊基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖
搅拌141.0g(289mmol)实施例10b)的标题化合物在200ml二氧六环中的悬浮液,同时在室温下剧烈搅拌地分批与总共238.5g(4.26mol)氢氧化钾细粉末混合。为了更易于搅拌,反应混合物再与200ml二氧六环混合,所得悬浮液随后加热至沸腾,并在该温度下与总共372ml(3.128mol)苄基溴在2小时内逐滴地混合。110℃下反应4小时后,在室温下进行12小时,反应混合物缓慢倾倒至总共2.5升的冰水中进行后处理,含水相随后用乙醚彻底萃取。所得醚相洗涤并在硫酸钠上干燥后,抽滤出盐,真空除去乙醚。过量的苄基溴在油泵真空下定量地由反应混合物中除去,油浴温度为180℃。所得的树脂油状残留物在硅胶上使用乙酸乙酯/己烷(1∶10)作为洗脱剂进行纯制。
产量:172.2.g(91.0%理论值)无色且极其粘稠的油状上述标题化合物。元素分析:计算值:C 75.68 H 7.16实测值:C 75.79 H 7.04d)6-N-苄氧基羰基-2-N-[1-O-α-D-(5-羰基)-戊基-2,3,4,6-四-O-苄基吡喃甘露糖]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将100.0g(134.0mmol)实施例10c)制得的羧酸和32.4g(281.4mmol)N-羟基琥珀酰亚胺溶解在500ml二甲基甲酰胺中,然后在0℃下与总共58.0g(281.4mmol)的N,N′-二环己基碳二亚胺分批混合,并在该温度下搅拌3小时。向如此制得的活性酯溶液中滴加111.3g(134.0mmol)实施例1c)的标题化合物溶解于300ml二甲基甲酰胺中并冷却至0℃的溶液,然后在0℃下搅拌2小时,接着在室温下12小时。在后处理时,过滤出沉淀的二环己基脲,随后蒸发溶剂至干。所得的残留物在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:二氯甲烷/乙醇20∶1;使用溶剂梯度进行色谱纯制,其中连续增加乙醇的比例)。
产量:132.5g(67.4%理论值)无色且非常粘稠油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 54.02 H 4.88 N 3.82 F 22.01 S 2.19实测值:C 53.87 H 4.85 N 4.02 F 22.55 S 2.06e)2-N-[1-O-α-D-(5-羰基)戊基-吡喃甘露糖]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将120.0g(81.77mmol)实施例10d)制得的化合物溶解在800ml乙醇中,然后与4.5g Pearlman-催化剂(Pd 20%C)混合,接着在室温和氢气氛(1atm)下氢化,直至不再有氢气吸收(约8小时)。抽滤出催化剂,用乙醇彻底洗涤(约200ml),然后真空浓缩至干。得到粘稠且无色油状的标题化合物。
产量:78.5g(98.7%理论值)元素分析:计算值:C 37.04 H 4.25 N 5.76 F 33.20 S 3.30实测值:C 36.96 H 4.85 N 5.41 F 34.13 S 3.22f)2-N-[1-O-α-D-(5-羰基)戊基-吡喃甘露糖]-6-N-[1,4,7-三-(羧酸甲基)-10-(3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基-戊酰基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺,Gd-络合物
在40℃和搅拌下将99.8g(158.4mmol;2.2摩尔当量,以所用的实施例10e的氨基组分为基准)在德国专利申请197 28 954 C1的实施例31h中描述的10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三乙酸的Gd-络合物和6.7g无水氯化锂(158.4mmol)溶解于800ml无水二甲基亚砜中。在该温度下随后与溶解于250ml无水二甲基亚砜中的总共18.2g(158.4mmol)的N-羟基琥珀酰亚胺和70.0g(71.96mmol)实施例10e)的标题化合物混合。冷却至室温后,反应溶液与32.7g(158.4mmol)N,N′-二环己基碳二亚胺混合,然后在室温下搅拌12小时。所得悬浮液随后与足够的丙酮混合,直至上述标题化合物沉淀完全,抽滤沉淀物,干燥,溶解在水中,过滤出不溶的二环己基脲,滤液用AMICONYM-3超滤膜(截止:3000Da)脱盐,并除去低分子量组分。然后冻干保留物。
产量:93.0g(81.6%理论值)无色冻干物。
水含量(Karl-Fischer):9.53%元素分析(以无水物计):计算值:C 37.15 H 4.39 N 7.96 F 20.38 S 2.02 Gd 9.92实测值:C 36.92 H 4.50 N 7.68 F 19.77 S 1.91 Gd 10.08
实施例11a)2-N-[1-O-α-D-(5-羰基)戊基-吡喃甘露糖]-6-N-{2-[4-(3-氧杂丙酰基)-苯基]-2-[1,4,7-三-(羧酸甲基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-10-基]-乙酸}-L-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺,Gd-络合物,钠盐
搅拌5.0g(9.06mmol)实施例3e)的标题化合物在15ml无水二甲基亚砜中的悬浮液,在70℃与0.68g(15.9mmol)氯化锂混合。在70℃下搅拌30分钟后,现澄清的反应溶液分批地与总共1.83g(15.9mmol)N-羟基琥珀酰亚胺混合,并且反应混合物在该温度下再保持1小时。冷却至0℃后与4.52g(23.85mmol)二环己基碳二亚胺混合,反应溶液在0℃下再搅拌1小时,然后在22℃下搅拌12小时。所得的实施例3e)的标题化合物的N-羟基琥珀酰亚胺酯反应溶液在22℃下逐滴地与4.0g(4.12mmol)实施例10e)的标题化合物在15ml无水二甲基亚砜中的溶液混合,然后在室温下再搅拌12小时。在后处理时,反应溶液在22℃下滴加于900ml丙酮中,其中标题化合物以无色沉淀物的形式沉淀出来。抽滤沉淀物,溶解在200ml蒸馏水中,然后用1M氢氧化钠溶液将溶液的pH值精确地设定为7.2。所得的产物水溶液在YM3-超滤膜(AMICON;截止:3000Da)上进行超滤三次,以脱盐并除去低分子量组分。所得保留物随后冻干。
产量:6.33g(92.4%理论值,以所添加的氨基组分为基准)无色冻干物,其水含量为7.38%。元素分析(以无水物计):计算值:C 38.48 H 4.13 N 6.65 F 19.16 S 1.90 Gd 9.33 Na 1.36实测值:C 39.52 H 4.12 N 6.67 F 19.70 S 1.89 Gd 9.30 Na 1.41
实施例12a)3,5-二-苄氧基羰基氨基-苯甲酸-N-(3-氧杂-1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-全氟十三烷基)-酰胺
将20g(47.5mmol)3,5-二-苄氧基羰基氨基-苯甲酸(根据以下文献合成:Skulnick,Harvey I.;Johnson,Paul D.;Aristoff,Paul A.;Morris,Jeanette K.;Lovasz,Kristine D.等人,J.Med.Chem.;40;7;1997;1149-1164)和4.78g(47.5mmol)三乙胺溶解在由125ml无水四氢呋喃和125ml无水二氧六环组成的溶剂混合物中。冷却至-15℃后,在搅拌下缓慢滴加6.56g(48mmol)氯甲酸异丁酯在30ml无水四氢呋喃中的溶液,其中内部温度保持低于-10℃。在-15℃下反应15分钟后,在-20℃下滴加58.6g(47.5mmol)1-氨基-1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-氧杂-全氟十三烷和4.78g(47.5mmol)三乙胺在100ml无水四氢呋喃中的溶液。在-15℃下反应1小时并在室温下2小时后,反应溶液真空浓缩至干。残留物溶解在300ml乙酸乙酯中,每次用200ml饱和碳酸氢钠溶液洗涤2次,并用300ml水洗涤1次,有机相在硫酸钠上干燥后,抽滤出盐,真空除去乙酸乙酯。残留的油状残留物在硅胶上使用二氯甲烷/己烷/2-丙醇(10∶5∶1)作为洗脱剂进行纯制。
产量:36.2g(82.5%理论值)无色油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 46.82 H 3.27 N 4.55 F 34.97实测值:C 47.21 H 3.31 N 4.61 F 34.48b)3,5-二-氨基-苯甲酸-N-(3-氧杂-IH,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-全氟十三烷基)]酰胺
将30.0g(32.4mmol)12a)制得的酰胺溶解300ml乙醇中,然后与1.2g Pearlman-催化剂(Pd 20%C)混合。在室温及氢气氛(1atm)下氢化,直至不再有氢气吸收。抽滤出催化剂,用乙醇(约300ml)彻底洗涤,然后真空浓缩至干。得到非常粘稠的黄色油状标题化合物。
产量:20.12g(94.8%理论值)元素分析:计算值:C 36.66 H 2.77 N 6.41 F 49.28实测值:C 36.07 H 2.87 N 6.23 F 49.43c)3-N-[-(1-O-α-D-羰甲基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖)-5-氨基苯甲酸-N-(3-氧杂-1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-全氟十三烷基)-酰胺
将10.95g(18.30mmol)1-羧甲氧基-2,3,4,6-四-O-苄基-α-D-吡喃甘露糖苷[根据DE 197 28 954 C1所述进行制备]溶解在150ml二甲基甲酰胺中,然后与总共2.09g(18.3mmol)N-羟基琥珀酰亚胺混合。冷却至0℃然后添加3.78g(18.3mmol)二环己基碳二亚胺。在0℃下搅拌1小时,然后在室温下搅拌4小时。冷却至0℃,在3小时内缓慢滴加24.0g(36.6mmol,2摩尔当量,以所用羧酸为基准)实施例12b)描述的二氨基化合物在350ml二甲基甲酰胺中的溶液。在0℃下再搅拌1小时,然后在室温下搅拌过夜。真空蒸发至干,然后残留物溶解在300ml乙酸乙酯中。过滤出沉淀的脲,然后洗涤滤液2次,每次用100ml 5%纯碱水溶液。有机相在硫酸镁上干燥,然后真空蒸发至干。残留物在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:正己烷/异丙醇13∶1)。得到16.8g(74.3%理论值,以添加的羧酸为基准)无色油状的标题化合物。增加洗脱剂组合物的极性至正己烷/异丙醇5∶1,在随后的色谱馏分中回收总共10.15g未反应的二氨基化合物12b),其可再根据上述反应指南进行反应。元素分析:计算值:C 54.42 H 4.40 N 3.40 F 26.13实测值:C 54.32 H 4.49 N 3.48 F 25.94d)3-N-[-(1-O-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖)]-5-氨基-苯甲酸-N-(3-氧杂-1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-全氟十三烷基)-酰胺
类似于合成实施例12b)之标题化合物的方法,使用在乙醇/水(9∶1)混合物中的0.5g Pearlman-催化剂(Pd 20%C)对12.0g(9.70mmol)实施例12c)的标题化合物进行氢解。后处理后,得到8.08g(96.7%理论值)黄色粘稠油状的上述标题化合物。元素分析:计算值:C 37.64 H 3.28 N 4.88 F 37.49实测值:C 37.32 H 3.17 N 4.97 F 37.55e)3-N-(1-O-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖)-5-N-{2-[4-(3-氧杂丙酰基)-苯基]-2-[1,4,7-三-(羧酸甲基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-10-基]-乙酸}-苯甲酸-N-(3-氧杂-1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-全氟十三烷基)-酰胺,Gd-络合物,钠盐
在40℃和搅拌下将13.6g(19.2mmol;2.2摩尔当量,以所用的实施例12d)氨基组分为基准)实施例3e)描述的Gd-络合物和0.81g无水氯化锂(19.2mmol)溶解于100ml无水二甲基亚砜中,然后在该温度下与总共2.2g(19.2mmol)N-羟基琥珀酰亚胺和7.5g(8.7mmol)实施例12d)的标题化合物溶解于50ml无水二甲基亚砜中的溶液混合。冷却至室温后,反应溶液与3.96g(19.2mmol)N,N′-二环己基碳二亚胺混合,然后在室温下搅拌2小时。所得悬浮液随后与足够的丙酮混合,直至上述标题化合物沉淀完全,抽滤沉淀物,干燥,溶解在水中,过滤出不溶的二环己基脲,滤液用AMICONYM-3超滤膜(截止:3000Da)脱盐,并除去低分子量组分。然后冻干保留物。
产量:11.51g(84.5%理论值)无色冻干物。
水含量(Karl-Fischer):6.77%元素分析(以无水物计):计算值:C 40.05 H 3.94 N 6.29 F 20.71 Gd 10.08 Na 1.47实测值:C 39.98 H 4.00 N 6.31 F 20.73 Gd 10.11 Na 1.42
实施例13a)3,5-二-(苄氧基羰基氨基)-1-{N-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]}-苯甲酰胺
将10g(23.75mmol)3,5-二-苄氧基羰基氨基-苯甲酸(根据以下文献合成:Skulnick,Harvey I.;Johnson,Paul D.;Aristoff,Paul A.;Morris,Jeanette K.;Lovasz,Kristine D.等人,J.Med.Chem.;40;7;1997;1149-1164)和2.39g(23.75mmol)三乙胺溶解在由60ml无水四氢呋喃和70ml无水二氧六环组成的溶剂混合物中。冷却至-15℃后,在搅拌下缓慢滴加3.28g(24mmol)氯甲酸异丁酯在20ml无水四氢呋喃中的溶液,其中内部温度不超过-10℃。在-15℃下反应15分钟后,在-20℃下滴加23.0g(23.75mmol)全氟辛基磺酰基哌嗪和2.39g(23.75mmol)三乙胺在50ml无水四氢呋喃中的溶液。在-15℃下反应1小时以及在室温下反应2小时后,反应溶液真空浓缩至干。残留物溶解在200ml乙酸乙酯中,然后每次用100ml饱和碳酸氢钠溶液洗涤2次并用300ml水洗涤1次。有机相在硫酸钠上干燥后,抽滤出盐,乙酸乙酯真空除去。残留的油状残留物在硅胶上使用二氯甲烷/己烷/2-丙醇(15∶5∶1)作为洗脱剂进行纯制。
产量:18.35g(79.6%理论值)无色油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 43.31 H 2.80 N 5.77 F 33.27 S 3.30实测值:C 43.21 H 2.75 N 5.61 F 33.38 S 3.22b)3,5-二-氨基-1-{N-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]}-苯甲酰胺
将9.70g(10.0mmol)13a)中制得的酰胺溶解在100ml乙醇中,然后与0.4g Pearlman-催化剂(Pd 20%C)混合。在室温及氢气氛(1atm)下氢化,直至不再有氢气吸收。抽滤出催化剂,用乙醇彻底洗涤(约150ml),然后真空浓缩至干。得到非常粘稠的黄色油状标题化合物。
产量:6.9g(98.2%理论值)元素分析:计算值:C 32.49 H 2.15 N 7.98 F 45.98 S 4.56实测值:C 32.56 H 2.17 N 8.09 F 45.63 S 4.61c)5-氨基-3-N-(1-O-α-D-羰甲基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖)-苯甲酸-N-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将5.48g(9.15mmol)1-羧甲氧基-2,3,4,6-四-O-苄基-α-D-吡喃甘露糖苷[根据DE 197 28 954 C1所述进行制备]溶解在100ml二甲基甲酰胺中,然后与总共1.04g(9.15mmol)N-羟基琥珀酰亚胺混合。冷却至0℃并添加1.89g(9.15mmol)二环己基碳二亚胺。在0℃下搅拌1小时,然后在室温下搅拌4小时。重新冷却至0℃后,在3小时内缓慢滴加12.85g(18.30mmol,2摩尔当量,以所用的羧酸为基准)实施例13b)中描述的二氨基化合物在250ml二甲基甲酰胺中的溶液。随后再于0℃下搅拌1小时,然后在室温下搅拌过夜。真空蒸发至干,然后残留物溶解在100ml乙酸乙酯中。过滤出沉淀的脲,然后洗涤滤液2次,每次用100ml 5%纯碱水溶液。有机相在硫酸镁上干燥,然后真空蒸发至干。残留物在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:正己烷/异丙醇13∶1)。得到8.14g(69.4%理论值,以添加的羧酸为基准)无色油状的标题化合物。在色谱纯制期间增加洗脱剂组成的极性至6∶1(正己烷/异丙醇),由此在后面的馏分中回收总共4.36g未反应的二氨基化合物13b),将可根据上述反应指南重新进行反应。元素分析:计算值:C 51.49 H 4.01 N 4.37 F 25.17 S 2.50实测值:C 51.60 H 4.19 N 4.28 F 25.14 S 2.44d)5-氨基-3-N-(1-O-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖)-苯甲酸-N-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
类似于合成实施例13b)之标题化合物的方法,使用在乙醇/水(8∶1)混合物中的0.3g Pearlman-催化剂(Pd 20%C)对6.4g(5.0mmol)实施例13c)的标题化合物进行氢解。后处理后,得到4.43g(96.2%理论值)黄色粘稠油状的上述标题化合物。元素分析:计算值:C 35.15 H 2.95 N 6.07 F 35.01 S 3.48实测值:C 35.32 H 3.02 N 5.89 F 35.05 S 3.58e)3-N-(1-O-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖)-5-N-[1,4,7-三(羧酸甲基)-10-(3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基-戊酰基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷]-苯甲酸-N-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺,Gd-络合物
在40℃和搅拌下将5.54g(8.8mmol;2.2摩尔当量,以所用的实施例13d)氨基组分为基准)在德国专利申请197 28 954 C1之实施例31h)中描述的10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三乙酸的Gd-络合物和0.37g无水氯化锂(8.8mmol)溶解在60ml无水二甲基亚砜中,然后在该温度下与总共1.01g(8.8mmol)N-羟基琥珀酰亚胺和3.7g(4.0mmol)实施例13d)的标题化合物在40ml无水二甲基亚砜中的溶液混合。冷却至室温后,反应溶液与1.82g(8.8mmol)N,N′-二环己基碳二亚胺混合,然后在室温下搅拌12小时。所得悬浮液随后与足够的丙酮混合,直至上述标题化合物沉淀完全,抽滤沉淀物,干燥,溶解在水中,过滤出不溶的二环己基脲,滤液用AMICONYM-3超滤膜(截止:3000Da)脱盐,并除去低分子量组分。然后冻干保留物。
产量:5.36g(87.4%理论值)无色冻干物。
水含量(Karl-Fischer):6.77%元素分析(以无水物计):计算值:C 36.01 H 3.61 N 8.22 F 21.05 Gd 10.25 S 2.09实测值:C 35.87 H 3.70 N 8.22 F 20.91 Gd 10.18 S 2.16
实施例14a)1,4,7-三氮杂庚烷-1,7-二-(2-N-三氟乙酰基-6-N-苄氧基羰基-1-赖氨酸)-二酰胺
将100g(107.9mmol)实施例1a)制得的羧酸和26.1g(226.59mmol)N-羟基琥珀酰亚胺溶解在500ml二甲基甲酰胺中,然后在0℃下与总共46.7g(226.59mmol)的N,N′-二环己基碳二亚胺分批混合,并在该温度下搅拌3小时。向如此制得的活性酯溶液中滴加5.57g(53.95mmol)二亚乙基三胺在60ml二甲基甲酰胺中并冷却至0℃的溶液,然后在0℃下搅拌2小时以及在室温下搅拌12小时。在后处理时,过滤出沉淀的二环己基脲,随后蒸发溶剂至干。所得残留物随后在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:二氯甲烷/乙醇15∶1;使用溶剂梯度进行色谱纯制,其中连续增加乙醇的比例)。
产量:26.0g(58.8%理论值,以所添加的氨基组分为基准)无色且非常粘稠油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 52.74 H 5.78 N 11.96 F 13.90实测值:C 52.66 H 5.89 N 11.88 F 14.02b)1,4,7-三氮杂庚烷-1,7-二-(2-N-三氟乙酰基-6-N-苄氧基羰基-1-赖氨酸)-二酰胺4-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基
向20g(24.4mmol)14a)中制得的二酰胺在150ml四氢呋喃和15ml氯仿中的溶液,在0℃和氮气氛下添加16.18g(27.0mmol)2-[N-乙基-N-全氟辛基磺酰基]氨基乙酸(根据DE 196 03 033制备)在50ml四氢呋喃中的溶液。随后在0℃下分批添加总共18.0g(36.6mmol)的EEDQ[2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1,2-二氢喹啉],在室温下搅拌过夜,然后真空浓缩。残留的油在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:正己烷/异丙醇15∶1)。得到24.74g(72.4%理论值,以所添加的仲胺为基准)无色油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 42.01 H 3.96 F 31.19 N 8.00 S 2.29实测值:C 41.92 H 4.07 F 31.22 N 7.87 S 2.34c)1,7-二-(6-N-苄氧基羰基-1-赖氨酸)-二酰胺-4-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-1,4,7-三氮杂庚烷
将22.0g(15.7mmol)实施例14b)制得的标题化合物溶解在100ml乙醇中,然后在0℃下向该溶液中引入氨气40分钟。在0℃下再搅拌4小时,并在室温下搅拌3小时,然后在40℃的浴温下真空浓缩至干。残留的油状残留物在硅胶上使用二氯甲烷/己烷/2-丙醇(20∶10∶1)作为洗脱剂进行纯制。
产量:12.92g(98.4%理论值)无色且非常粘稠油状的上述标题化合物。元素分析:计算值:C 44.22 H 4.64 N 9.38 S 2.68 F 27.03实测值:C 44.31 H 4.72 N 9.30 S 2.74 F 26.99d)1,7-二-[6-N-苄氧基羰基-2-N-(1-O-α-D-羰甲基-2,3,4,6-四-O-苄基吡喃甘露糖)-1-赖氨酸]-二酰胺-4-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-1,4,7-三氮杂庚烷
将5.47g(9.15mmol)1-羧甲氧基-2,3,4,6-四-O-苄基-α-D-吡喃甘露糖苷[根据DE 197 28 954 C1所述制备]溶解在80ml二甲基甲酰胺中,然后与总共1.05g(9.15mmol)N-羟基琥珀酰亚胺混合。冷却至0℃并添加1.9g(9.15mmol)二环己基碳二亚胺。在0℃下搅拌1小时,然后在室温下搅拌4小时。冷却至0℃,然后在3小时的时间内缓慢地滴加7.65g(9.15mmol)实施例14c)中描述的氨基化合物在50ml二甲基甲酰胺中的溶液。随后在0℃下再搅拌1小时,然后在室温下搅拌过夜。真空蒸发至干,然后残留物溶解在100ml乙酸乙酯中。过滤出沉淀的脲,然后洗涤滤液2次,每次用50ml 5%纯碱水溶液。有机相在硫酸镁上干燥,然后真空蒸发至干。残留物在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:正己烷/异丙醇20∶1)。得到17.01g(78.9%理论值,以添加的羧酸为基准)无色油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 59.13 H 5.43 N 4.76 F 13.71 S 1.36实测值:C 59.22 H 5.39 N 4.85 F 13.70 S 1.40e)1,7-二-[2-N-(1-O-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖)-1-赖氨酸]-二酰胺-4-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-1,4,7-三氮杂庚烷
将15.0g(6.36mmol)14d)中制得的酰胺溶解在150ml乙醇中,然后与0.5g Pearlman-催化剂(Pd 20%C)混合。在室温及氢气氛(1atm)下氢化,直至不再有氢气吸收。抽滤出催化剂,用乙醇彻底洗涤(约100ml),然后真空浓缩至干。得到合成粘稠的黄色油状标题化合物。
产量:8.54g(97.2%理论值)元素分析:计算值:C 39.13 H 5.04 N 8.11 F 23.38 S 2.32实测值:C 39.07 H 4.98 N 8.18 F 23.40 S 2.30f)1,7-二-[2-N-(1-O-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖)-6-N-[1,4,7-三(羧酸甲基)-10-(3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基-戊酰基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷]-1-赖氨酸]-二酰胺-4-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-1,4,7-三氮杂庚烷,钆-络合物
搅拌5.7g(9.06mmol)在德国专利申请197 28 954 C1之实施例31h)中描述的10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三乙酸的Gd-络合物于75ml无水二甲基亚砜中的悬浮液,在70℃下与0.68g(15.9mmol)氯化锂混合。在70℃下搅拌30分钟后,现澄清的反应溶液分批地与总共1.83g(15.9mmol)N-羟基琥珀酰亚胺混合,并将反应混合物在该温度下保持1小时,冷却至后0℃与4.52g(23.85mmol)二环己基碳二亚胺混合,反应溶液在0℃下再搅拌1小时,然后在22℃下搅拌12小时。所得的10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三乙酸的Gd-络合物的N-羟基琥珀酰亚胺酯反应溶液在22℃下逐滴地与2.84g(2.06mmol)实施例14e)的标题化合物在15ml无水二甲基亚砜中的溶液混合,然后在室温下再搅拌12小时。在后处理时,反应溶液在22℃下滴加于500ml丙酮中,其中沉淀出无色沉淀的标题化合物。抽滤沉淀物,干燥,溶解在水中,过滤出不溶的二环己基脲,滤液用AMICONYM-3超滤膜(截止:3000Da)脱盐,并除去低分子量组分。然后冻干保留物。
产量:4.80g(89.6%理论值,以所添加的氨基组分为基准)无色冻干物,水含量为8.98%。元素分析(以无水物计):计算值:C 38.28 H 4.84 N 9.68 F 12.40 S 1.23 Gd 12.07实测值:C 38.20 H 4.91 N 9.77 F 12.45 S 1.19 Gd 12.10
实施例15a)1,7-二(苄氧基羰基)-4-{3-氧杂-戊烷-1,5-二甲酸-1-酰基-5-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺}-1,4,7,10-四氮杂环十二烷
将0.75g(24.4mmol)1,7-二-[苄氧基羰基]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷在150ml四氢呋喃和5ml氯仿中的溶液在0℃和氮气氛下添加至16.56g(24.4mmol)实施例15e)的题化合物在50ml四氢呋喃中的溶液内。在0℃下分批地与总共18.0g(36.6mmol)EEDQ[2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1,2-二氢喹啉]混合,在室温下搅拌过夜,然后真空浓缩。残留的油在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:正己烷/异丙醇12∶1)。得到17.22g(64.3%理论值,以所添加的仲胺为基准)的单酰胺以及3.8g(8.8%理论值)作为副产物的二酰胺。分离出无色油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 43.41 H 3.92 F 29.18 N 7.59 S 2.60实测值:C 43.52 H 4.07 F 29.24 N 7.67 S 2.55b)1,7-二(苄氧基羰基)-4-{3-氧杂-戊烷-1,5-二甲酸-1-酰基-5-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺}-10-[1-O-α-D-(5-羰基)-戊基-2,3,4,6-四-O苄基-吡喃甘露糖]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷
将10.0g(13.4mmol)实施例10c)制得的羧酸和3.24g(28.1mmol)N-羟基琥珀酰亚胺溶解在100ml二甲基甲酰胺中,然后在0℃下分批地与总共5.8g(28.1mmol)N,N′-二环己基碳二亚胺混合,然后在该温度下搅拌3小时。向所得的活性酯溶液中滴加14.83g(13.4mmol)实施例15a)的标题化合物在100ml二甲基甲酰胺中并冷却至0℃的溶液,然后在0℃下搅拌2小时以及在室温下12小时。在后处理时,过滤沉淀出的二环己基脲,随后蒸发溶剂至干。所得的残留物随后在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:二氯甲烷/乙酸乙酯20∶1;色谱法是使用连续增加乙酸乙酯比例的溶剂梯度进行的)。
产量:18.3g(78.2%理论值)无色且非常粘稠油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 55.11 H 5.03 N 4.82 F 18.52 S 1.84实测值:C 54.87 H 4.85 N 4.92 F 18.55 S 1.86c)1-{3-氧杂-戊烷-1,5-二甲酸-1-酰基-5-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺}-7-[1-O-α-D-(5-羰基)-戊基-吡喃甘露糖]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷
将17.0g(9.75mmol)14b)中制得的化合物溶解在150ml乙醇中,然后与1.0g Pearlman-催化剂(Pd 20%C)混合,并在室温和氢气氛(1atm)下氢化,直至不再有氢气吸收。抽滤出催化剂,用乙醇彻底洗涤(2次,每次用75ml),然后真空浓缩至干。得到粘稠且无色的油状标题化合物。
产量:10.76g(99.0%理论值)元素分析:计算值:C 38.78 H 4.61 N 7.54 F 28.97 S 2.88实测值:C 38.86 H 4.65 N 7.41 F 29.02 S 2.92d)1,7-二-[1,4,7-三(羧酸甲基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-Gd-络合物-10-(戊酰基-3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基)-4-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-2-氧杂-乙酰基]-10-[1-O-α-D-6-羰基戊基-吡喃甘露糖]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷
在40℃和搅拌下将24.86g(39.46mmol;4.4摩尔当量,以所用的15c氨基组分为基准)在德国专利申请197 28 954 C1之实施例31h)中描述的10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三乙酸的Gd络合物和1.67g无水氯化锂(39.46mmol)溶解在200ml无水二甲基亚砜中,然后在该温度下与总共4.53g(39.46mmol)N-羟基琥珀酰亚胺和10.0g(8.97mmol)实施例14c)的标题化合物在100ml无水二甲基亚砜中的溶液混合。冷却至室温后,反应溶液与8.14g(39.46mmol)N,N′-二环己基碳二亚胺混合,然后在室温下搅拌12小时。所得悬浮液随后与足够的丙酮混合,直至上述标题化合物沉淀完全,抽滤沉淀物,干燥,溶解在水中,过滤出不溶的二环己基脲,滤液用AMICONYM-3超滤膜(截止:3000Da)脱盐,并除去低分子量组分。然后冻干保留物。
产量:16.37g(79.3%理论值)无色冻干物。
水含量(Karl-Fischer):7.65%元素分析(以无水物计):计算值:C 38.01 H 4.61 N 9.58 F 13.81 S 1.37 Gd 13.45实测值:C 37.92 H 4.55 N 9.58 F 13.77 S 1.31 Gd 13.48e)3-氧杂-戊烷-1,5-二甲酸-单-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将25g(44.0mmol)1-全氟辛基磺酰基哌嗪溶解在150ml四氢呋喃溶解中,然后在室温下与总共5.1g(44.0mmol)二甘醇酸酐混合,所得的反应溶液回流12小时。冷却至室温后,蒸发至干,残留的油状残留物在硅胶上使用二氯甲烷/2-丙醇(16∶1)作为洗脱剂进行纯制。
产量:27.94g(92.8%理论值)无色且粘稠油状的上述标题化合物。元素分析:计算值:C 58.52 H 4.27 N 1.98 S 2.26 F 22.80实测值:C 58.42 H 4.41 N 1.80 S 2.28 F 23.02
实施例16b)1,7-二(苄氧基羰基)-4-{3-氧杂-戊烷-1,5-二甲酸-1-酰基-5-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺}-[10-[1-O-β-D-6-羰基戊基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃葡萄糖]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷
将68.5g(91.79mmol)1-羧甲氧基-2,3,4,6-四-O-苄基-α-D-吡喃甘露糖苷[根据DE 197 28 954 C1所述进行制备]溶解在750ml无水四氢呋喃中,然后添加9.25g(91.79mmol)三乙胺。反应溶液冷却至-15℃至-20℃后,在该温度和搅拌下缓慢滴加12.64g(92.5mmol)氯甲酸异丁酯在150ml无水四氢呋喃中的溶液,其中选择滴加速率,使得内部温度不超过-10℃。在-15℃下反应15分钟后,在-20℃下缓慢滴加101.6g(91.79mmol)实施例15a)的标题化合物和9.25g(91.79mmol)三乙胺在500ml无水四氢呋喃中的溶液。在-15℃下反应1小时以及在室温下2小时后,反应溶液真空浓缩至干。残留物溶解在450ml乙酸乙酯中,洗涤2次,每次用300ml饱和碳酸氢钠溶液,并用400ml水洗涤1次,有机相在硫酸钠上干燥后,抽滤出盐,乙酸乙酯真空除去。残留的油状残留物在硅胶上使用二氯甲烷/己烷/2-丙醇(10∶20∶1)作为洗脱剂进行纯制。
产量:130.6g(81.6%理论值)无色且非常粘稠油状的上述标题化合物。元素分析:计算值:C 55.11 H 5.03 N 4.82 F 18.52 S 1.84实测值:C 55.20 H 5.09 N 4.91 F 18.48 S 1.80b)1-{3-氧杂-戊烷-1,5-二甲酸-1-酰基-5-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺}-7-[1-O-α-D-(5-羰基)-戊基-吡喃甘露糖]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷
将110.0g(63.08mmol)16a)中制得的化合物溶解在1000ml乙醇中,然后与5.0g Pearlman-催化剂(Pd 20%C)混合,氢化至达到定量的氢吸收。滤出催化剂,用乙醇洗涤并真空浓缩至干。得到粘稠的无色油状标题化合物。
产量:92.61g(99.5%理论值)元素分析:计算值:C 52.10 H 5.12 N 5.70 F 21.89 S 2.17实测值:C 52.20 H 5.09 N 5.71 F 21.87 S 2.20b)1,7-二-[1,4,7-三(羧酸甲基)-10-(3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基-戊酰基)-4-{3-氧杂-戊烷-1,5-二甲酸-1-酰基-5-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺}-10-[1-O-α-D-(5-羰基)-戊基-吡喃甘露糖1-1,4,7,10-四氮杂环十二烷,二钆-络合物
在40℃和搅拌下将55.4g[88.0mmol;4.4摩尔当量,以所用的实施例13d)二氨基组分为基准]在德国专利申请197 28 954 C1之实施例31h)中描述的10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三乙酸的Gd-络合物和3.7g无水氯化锂(88.0mmol)溶解在500ml无水二甲基亚砜中,然后在该温度下与总共10.1g(88.0mmol)N-羟基琥珀酰亚胺和29.5g(20.0mmol)实施例16b)的标题化合物在200ml无水二甲基亚砜中的溶液混合。冷却至室温后,反应溶液与18.2g(88.0mmol)N,N′-二环己基碳二亚胺,然后在室温下搅拌12小时。所得悬浮液随后与足够的丙酮混合,直至上述标题化合物沉淀完全,抽滤沉淀物,干燥,溶解在水中,过滤出不溶的二环己基脲,滤液用AMICONYM-3超滤膜(截止:3000Da)脱盐,并除去低分子量组分。然后冻干保留物。
产量:35.96g(76.9%理论值)无色冻干物。
水含量(Karl-Fischer):5.98%元素分析(以无水物计):计算值:C 38.01 H 4.61 N 8.22 F 13.81 Gd 13.45 S 1.37实测值:C 37.87 H 4.70 N 8.22 F 13.90 Gd 13.48 S 1.36
实施例17a)5-(乙氧基羰基)戊基-2,3,4,6-四-O-乙酰基-α-D-吡喃甘露糖苷
类似于文献中描述的合成芳基吡喃葡糖苷的方法[J.Conchie和G.A.Levvy,在Methods in Carbohydrate Chemistry(R.L.Whistler,M.L.Wolfrom和J.N.BeMiller编辑),Academic Press,New York,Vol.11,90,pp.345-347(1963)],156.2g(400mmol)为α,β-(α,β比例=4∶1)-端基异构体混合物的D-甘露七乙酸酯[用于合成1,2,3,4,6-五-O-乙酰基-α,β-D-吡喃甘露糖,请参见:M.L.Wolfrom和A.Thompson,在Methods in Carbohydrate Chemistry(R.L.Whistler,M.L.Wolfrom和J.N.BeMiller编辑),Academic Press,NewYork,Vol.11,53,pp.211-215(1963)]与67ml(400mmol)6-羟基-己酸乙酯和60.8ml(520mmol)氯化锡(IV)在总共600ml的1,2二氯乙烷中反应,柱色谱纯制后(洗脱剂:己烷/乙酸乙酯2∶1)形成100.05g(51%理论值)无色粘稠油状的上述标题化合物。1H-NMR光谱研究所得的标题化合物可显示上述标题化合物仅为纯的α-端基异构体。元素分析:计算值:C 52.94 H 6.77实测值:C 52.80 H 6.78b)5-(羧基)戊基-2,3,4,6-四-O-苄基-α-D-吡喃甘露糖苷
搅拌141.0g(289mmol)实施例17a)的标题化合物在200ml二氧六环中的悬浮液,在室温以及同时剧烈搅拌下分批地与总共238.5g(4.26mol)的氢氧化钾细粉末混合。为使搅拌更容易,再混合200ml二氧六环,所得悬浮液随后加热至沸腾,然后在该温度下与总共372ml(3.128mol)苄基溴在2小时的时间中逐滴混合。在110℃反应后4小时以及在室温下12小时后,为进行后处理将反应混合物缓慢倾倒在总共2.5升冰水中,含水相随后用乙醚彻底萃取。洗涤所得醚相并随后在硫酸钠上干燥该醚相后,抽滤出盐,乙醚真空除去。过量的苄基溴接着在油泵真空中在180℃的浴温下定量地由反应混合物中蒸馏除去。所得的树脂油状残留物在硅胶上使用乙酸乙酯/己烷(1∶10)作为洗脱剂进行纯制。
产量:172.2.g(91.0%理论值)无色、极为粘稠的油状上述标题化合物。元素分析:计算值:C 75.68 H 7.16实测值:C 75.79 H 7.04c)5-[(羧基)-戊基-2,3,4,6-四-O-苄基-α-D-吡喃甘露糖苷-]N-羟基琥珀酰亚胺酯
将60.0g(91.5mmol)实施例17b)的标题化合物溶解在750ml二甲基甲酰胺中,然后与总共10.4g(91.5mmol)N-羟基琥珀酰亚胺混合。冷却至0℃,然后添加18.9g(91.5mmol)二环己基碳二亚胺。在0℃下搅拌1小时,并在室温下4小时。真空除去溶剂,然后残留物与100ml乙酸乙酯混合,接着冷却至0℃。过滤出沉淀的脲,然后所得滤液真空浓缩至干。所得的树脂油状残留物在硅胶上使用乙酸乙酯/己烷(1∶20)作为洗脱剂进行纯制。
产量:61.23g(89.0%理论值)无色且粘稠油状的上述标题化合物。元素分析:计算值:C 70.29 H 6.57 N 1.86实测值:C 70.39 H 5.64 N 1.91d)2,6-二-{6-Nε-2-Nα-[-[1-O-α-D-6-羰基-戊基-(2,3,4,6-四-O-苄基)吡喃甘露糖]-1-赖氨酸}-甲基酯
向4.26g(18.30mmol;0.5摩尔当量,以所用羧酸为基准)L-赖氨酸甲基酯-二盐酸盐(由Bachem公司市售得到)和4.05g(40.26mmol)三乙胺在100ml二甲基甲酰胺中的溶液内滴加27.51g(36.6mmol)实施例17c)的标题化合物在150ml二甲基甲酰胺中并冷却至0℃的溶液。添加完成后,在0℃下搅拌1小时,然后在室温下过夜。真空蒸发至干,然后残留物溶解在300ml乙酸乙酯中。过滤出沉淀的脲,然后洗涤滤液2次,每次用100ml 5%纯碱水溶液。有机相在硫酸镁上干燥,然后真空蒸发至干。残留物在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:正己烷/异丙醇25∶1)。得到39.56g(75.4%理论值)无色油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 72.88 H 7.31 N 1.95实测值:C 72.90 H 7.29 N 2.02e)2,6-二-[6-Nε-2-Nα-[1-O-α-D-6-羰基-戊基-(2,3,4,6-四-O-苄基)吡喃甘露糖]]-1-赖氨酸
将30.0g(20.92mmol)实施例17d)中制得的化合物溶解在150ml乙醇中。向其中添加4g(100.0mmol)氢氧化钠在10ml蒸馏水中的溶液,然后在50℃下搅拌3小时。根据薄层色谱定量皂化反应。真空浓缩至干,然后剩余的残留物溶解在300ml乙酸乙酯中,并萃取有机相2次,每次用100ml稀柠檬酸水溶液。在硫酸钠上干燥后,过滤并真空浓缩至干。残留物在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:正己烷/异丙醇13∶1)。得到25.56g(88.5%理论值)无色油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 72.88 H 7.31 N 1.95实测值:C 72.78 H 7.33 N 1.96f)2,6-二-[6-Nε-2-Nα-[1-O-α-D-6-羰基-戊基-(2,3,4,6-四-O-苄基)吡喃甘露糖]-1-赖氨酸]-N-羟基琥珀酰亚胺酯
将14.0g(9.15mmol)实施例17e)的标题化合物溶解在100ml二甲基甲酰胺中,然后与总共1.04g(9.15mmol)N-羟基琥珀酰亚胺混合。冷却至0℃并添加1.89g(9.15mmol)二环己基碳二亚胺。在0℃下搅拌1小时,然后在室温下搅拌4小时。随后真空蒸除溶剂,并使残留物与100ml乙酸乙酯混合,然后冷却至0℃。过滤出沉淀的脲,然后所得滤液真空浓缩至干。所得的树脂油状残留物在硅胶上使用乙酸乙酯/正己烷(1∶20)作为洗脱剂进行纯制。
产量:12.94g(92.4%理论值)无色且粘稠油状的上述标题化合物。元素分析:计算值:C 71.40 H 7.05 N 2.74实测值:C 71.39 H 7.14 N 2.81g)2,6-N,N′-二[1-O-α-D-(6-羰基)-戊基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖]-L赖氨酸-1,7-(1,4,7-三氮杂庚烷)-二酰胺
向0.47g(4.57mmol)二亚乙基三胺在25ml二甲基甲酰胺中并冷却至0℃的溶液内缓慢滴加14.0g(9.15mmol;2摩尔当量,以所用胺为基准)实施例17f)的标题化合物在100ml二甲基甲酰胺中的溶液。添加完成后再在0℃下搅拌1小时,然后在室温下过夜。真空蒸发至干,然后残留物溶解在200ml乙酸乙酯中。过滤出沉淀的脲,然后洗涤滤液2次,每次用50ml 5%纯碱水溶液。有机相在硫酸镁上干燥,然后真空蒸发至干。残留物在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:正己烷/异丙醇25∶1)。得到9.53g(71.4%理论值)无色油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 72.79 H 7.42 N 3.36实测值:C 72.90 H 7.39 N 3.32h)2-N-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-6-N-(苄氧基羰基)-1-赖氨酸-甲基酯
将20.8g(35.6mmol)2-[N-乙基-N-全氟辛基磺酰基]-氨基乙酸以及3.60g(35.6mmol)三乙胺溶解在200ml二甲基甲酰胺中,然后添加4.09g(35.6mol)N-羟基琥珀酰亚胺。冷却至0℃并添加7.34g(35.6mmol)二环己基碳二亚胺。在0℃下搅拌1小时,然后在室温下搅拌4小时。冷却至0℃并在10分钟内滴加11.77g(35.6mmol)6-N-苄氧基羰基-1-赖氨酸-甲基酯-盐酸盐和4.0g(40.0mmol)三乙胺在100ml二甲基甲酰胺中的溶液。在0℃搅拌1小时,然后在室温下过夜。真空蒸发至干,然后残留物溶解在100ml乙酸乙酯中。过滤出沉淀的脲,然后洗涤滤液2次,每次用100ml 5%纯碱水溶液。有机相在硫酸镁上干燥,然后真空蒸发至干。残留物在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:正己烷/乙酸乙酯20∶1)。得到27.43g(88.0%理论值)无色油。元素分析:计算值:C 38.41 H 3.45 N 4.80 F 36.89 S 3.66实测值:C 38.45 H 3.38 N 4.88 F 37.02 S 3.71i)2-Nα-{[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基-乙酰基]-6-Nε-(苄氧基羰基)-1-赖氨酸
将25.0g(28.55mmol)实施例17h)中制得的化合物溶解在150ml乙醇中。向其中添加4g(100.0mmol)氢氧化钠在10ml蒸馏水中的溶液,然后在50℃搅拌3小时。根据薄层色谱,皂化反应是定量的。真空浓缩至干,然后剩余的残留物溶解在300ml乙酸乙酯中,并萃取有机相2次,每次用100ml稀柠檬酸水溶液。在硫酸钠上干燥后,过滤并真空浓缩至干。残留物在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:正己烷/异丙醇10∶1)。得到22.73g(92.4%理论值)无色油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 37.64 H 3.28 N 4.88 F 37.49 S 3.72实测值:C 37.65 H 3.38 N 4.88 F 37.52 S 3.73j)1,4,7-三氮杂庚烷-4-{2-N-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-6-N-苄氧基羰基}-1-赖氨酸-酰胺-1,7-二{2,6-N,N′-二[1-O-α-D-(5-羰基)-戊基-2,3,4,6-四-O-苄基吡喃甘露糖]-1-赖氨酸-二酰胺}
将15.33g(17.8mmol)实施例17i)的标题化合物和1.80g(17.8mmol)三乙胺溶解在250ml无水四氢呋喃中。反应溶液冷却至-15℃至-20℃,在该温度和搅拌下缓慢滴加4.92g(35.6mmol)氯甲酸异丁酯在50ml无水四氢呋喃中的溶液,其中选择滴加速率,使得内部温度不超过-10℃。在-15℃下反应15分钟后,于-20℃下缓慢滴加52.0g(17.8mmol)实施例17g)的标题化合物和1.80g(17.8mmol)三乙胺在300ml无水四氢呋喃中的溶液。在-15℃下反应1小时以及在室温下反应2小时后,反应溶液真空浓缩至干。残留物溶解在500ml乙酸乙酯中,并洗涤2次,每次用200ml饱和碳酸氢钠溶液,然后用200ml水洗涤1次。有机相在硫酸钠上干燥后,抽滤出盐,真空除去乙酸乙酯。残留的油状残留物在硅胶上使用乙酸乙酯/正己烷(1∶20)作为洗脱剂进行纯制。
产量:54.6g(81.6%理论值)无色且非常粘稠油状的上述标题化合物。元素分析:计算值:C 65.09 H 6.45 N 3.72 F 8.58 S 0.85实测值:C 65.13 H 4.41 N 3.69 F 8.52 S 0.90k)1,4,7-三氮杂庚烷-4-{2-N-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基}-1-赖氨酸-酰胺-1,7-二{2,6-N,N′-二[1-O-α-D-(5-羰基)-戊基-吡喃甘露糖]-1-赖氨酸-二酰胺}
将50.0g(13.28mmol)17j)中制得的化合物溶解在500ml乙醇中,与4.0g Pearlman-催化剂(Pd 20%C)混合,然后在室温和氢气氛(1atm)下氢化,直至不再有氢气吸收。抽滤出催化剂,用乙醇彻底洗涤(约400ml),然后真空浓缩至干。得到粘稠且无色的油状标题化合物。
产量:26.85g(93.0%理论值)元素分析:计算值:C 45.85 H 6.35 N 6.44 F 14.86 S 1.47实测值:C 45.76 H 6.35 N 6.41 F 14.92 S 1.391)1,4,7-三氮杂庚烷-4-{2-N-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-6-N-[1,4,7-三(羧酸甲基)-10-(3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基-戊酰基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷]-1-赖氨酸-酰胺-1,7-二{2,6-N,N′-二[1-O-α-D-(5-羰基)-戊基-吡喃甘露糖]-1-赖氨酸-二酰胺],钆-络合物
在40℃和搅拌下将5.54g(8.8mmol;2.2摩尔当量,以所用的实施例17k)氨基组分为基准)在德国专利申请197 28 954 C1之实施例31h)中描述的10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三乙酸的Gd-络合物和0.37g无水氯化锂(8.8mmol)溶解在60ml无水二甲基亚砜中,然后在该温度下与总共1.01g(8.8mmol)N-羟基琥珀酰亚胺和1.84g(4.0mmol)实施例17k)的标题化合物在40ml无水二甲基亚砜中的溶液混合。冷却至室温后反应溶液与1.82g(8.8mmol)N,N′-二环己基碳二亚胺混合并在室温下搅拌12小时。所得悬浮液随后与足够的丙酮混合,直至上述标题化合物沉淀完全,抽滤沉淀物,干燥,溶解在水中,过滤出不溶的二环己基脲,滤液用AMICONYM-3超滤膜(截止:3000Da)脱盐,并除去低分子量组分。然后冻干保留物。
产量:8.77g(78.7%理论值)无色冻干物。
水含量(Karl-Fischer):4.43%元素分析(以无水物计):计算值:C 43.98 H 5.97 N 7.54 F 11.59 Gd 5.64 S 1.15实测值:C 43.97 H 6.02 N 7.62 F 11.61 Gd 10.18 S 1.15
实施例18a)2-Nα-6-Nε-二-[1-O-α-D-羰甲基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖]-1-赖氨酸]-甲基酯
将10.95g(18.30mmol)1-羧甲氧基-2,3,4-四-O-苄基-α-D-吡喃甘露糖苷[根据DE 197 28 954 C1制备]溶解在150ml二甲基甲酰胺中,然后与总共2.09g(18.3mmol)N-羟基琥珀酰亚胺混合。冷却至0℃并添加3.78g(18.3mmol)二环己基碳二亚胺。在0℃下搅拌1小时,然后在室温下搅拌4小时。冷却至0℃,然后在1小时内滴加2.13g(9.15mmol;0.5摩尔当量,以所用羧酸为基准)L-赖氨酸甲基酯二盐酸盐(可由Bachem公司市售得到)和2.02g(20.13mmol)三乙胺在70ml二甲基甲酰胺中的溶液。添加完成后在0℃下再搅拌1小时,然后在室温下过夜。真空蒸发至干,然后残留物溶解在300ml乙酸乙酯中。过滤出沉淀的脲,然后洗涤滤液2次,每次用100ml 5%纯碱水溶液。有机相在硫酸镁上干燥,然后真空蒸发至干。残留物在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:正己烷/异丙醇25∶1)。得到10.05g(82.3%理论值)无色油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 71.94 H 6.79 N 2.10实测值:C 71.90 H 6.79 N 2.09b)2-Nα-6-Nε-二-[1-O-α-D-羰甲基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖]-1-赖氨酸
按照类似于实施例17e)中合成相关标题化合物的方法,对15g(11.23mmol)实施例18a)的标题化合物进行甲基酯皂化,形成13.89g(93.6%理论值)无色且粘稠油状的上述标题化合物。元素分析:计算值:C 71.80 H 6.71 N 2.12实测值:C 71.84 H 6.69 N 2.15c)2-Nα-6-Nε-二-[1-O-α-D-羰甲基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖]-1-赖氨酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯
将12.09g(9.15mmol)实施例18b)的标题化合物溶解在100ml二甲基甲酰胺中,然后与总共1.04g(9.15mmol)N-羟基琥珀酰亚胺混合。冷却至0℃并添加1.89g(9.15mmol)二环己基碳二亚胺。在0℃下搅拌1小时,然后在室温下搅拌4小时。随后真空蒸除溶剂,并使残留物与100ml乙酸乙酯混合,然后冷却至0℃。过滤出沉淀的脲,然后所得滤液真空浓缩至干。所得的树脂油状残留物在硅胶上使用乙酸乙酯/正己烷(1∶20)作为洗脱剂进行纯制。
产量:12.24g(94.4%理论值)无色且粘稠油状的上述标题化合物。元素分析:计算值:C 70.27 H 6.47 N 2.96实测值:C 70.31 H 6.44 N 3.01d)6-N-苄氧基羰基-2-N-{[2,6-N,N′-二(1-O-α-D-羰甲基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖)]-1-赖氨酰基-}-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将19.0g(13.4mmol)实施例18c)中制得的羧酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯溶解在75ml二甲基甲酰胺中,然后在0℃下与11.13g(13.4mmol)实施例1c)的标题化合物在50.0ml二甲基甲酰胺中并冷却至0℃的溶液逐滴混合。在0℃下再搅拌所得的反应溶液2小时,然后在室温下搅拌12小时。在后处理时,过滤沉淀出的二环己基脲,然后真空除去溶剂至干。所得残留物在硅胶上进行色谱纯制[洗脱剂:二氯甲烷/乙醇28∶1;使用溶剂梯度进行色谱纯制,其中在色谱纯制过程中连续增加所用极性洗脱剂成分(在此为乙醇)的比例]。
产量:25.28g(88.4%理论值)无色且非常粘稠油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 59.10 H 5.34 N 3.94 F 15.13 S 1.50实测值:C 59.18 H 5.35 N 4.02 F 15.15 S 1.56e)2-N-{[2,6-N,N′-二(1-O-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖)]-1-赖氨酰基-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将20.0g(9.37mmol)18d)中制得的化合物溶解在200ml乙醇中,然后与1.5g Pearlman-催化剂(Pd 20%C)混合,并在室温和氢气氛(1atm)下氢化,直至不再有氢气吸收。抽滤出催化剂,用乙醇彻底洗涤(2次,每次用约100ml),然后真空浓缩至干。得到粘稠且无色油状的标题化合物。
产量:11.62g(97.0%理论值)。元素分析:计算值:C 38.50 H 4.65 N 6.57 F 25.25 S 2.51实测值:C 38.46 H 4.65 N 6.51 F 25.23 S 2.52f)6-N-[1,4,7-三(羧酸甲基)-10-(3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基-戊酰基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷)-2-N-{[2,6-N,N′-二(1-O-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖)]-L-赖氨酰基}-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺,Gd-络合物
在40℃和搅拌下将9.98g(15.84mmol;2.2摩尔当量,以所用的实施例18e)氨基组分为基准)在德国专利申请197 28 954 C1之实施例31h)中描述的10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三乙酸的Gd-络合物和0.67g无水氯化锂(15.84mmol)溶解在100ml无水二甲基亚砜中,然后在该温度下与总共1.82g(15.84mmol)N-羟基琥珀酰亚胺和9.19g(7.19mmol)实施例18e)的标题化合物在50ml无水二甲基亚砜中的溶液混合。冷却至室温后反应溶液与3.27g(15.84mmol)N,N′-二环己基碳二亚胺混合,然后在室温下搅拌12小时。所得悬浮液随后与足够的丙酮混合,直至上述标题化合物沉淀完全,抽滤沉淀物,干燥,溶解在水中,过滤出不溶的二环己基脲,滤液用AMICONYM-3超滤膜(截止:3000Da)脱盐,并除去低分子量组分。然后冻干保留物。
产量:11.85g(87.2%理论值)无色冻干物。
水含量(Karl-Fischer):5.54%元素分析(以无水物计):计算值:C 38.12 H 4.64 N 8.15 F 20.38 S 1.70 Gd 8.32实测值:C 38.16 H 4.59 N 8.18 F 20.37 S 1.68 Gd 8.28实施例19a)1,7-二(苄氧基羰基)-4-(3-氧杂-2H,2H,4H,4H,5H,5H-全氟十三烷酰基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷
在0℃和氮气氛下向10.75g(24.4mmol)1,7-二-(苄氧基羰基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷在150ml四氢呋喃和15ml氯仿中的溶液内添加12.74g(24.4mmol)实施例19g)的标题化合物在150ml四氢呋喃中的溶液。随后在0℃下分批添加总共18.0g(36.6mmol)的EEDQ[2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1,2-二氢喹啉],在室温下搅拌过夜,然后真空浓缩。残留的油在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:正己烷/异丙醇16∶1)。得到15.89g(69.0%理论值,以所添加的仲胺为基准)的单酰胺以及3.8g(8.8%理论值)作为副产物的二酰胺。分离出无色油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 45.77 H 3.95 F 34.19 N 5.93实测值:C 45.72 H 4.01 F 34.22 N 5.88b)1,7-二(苄氧基羰基)-4-(3-氧杂-2H,2H,4H,4H,5H,5H-全氟十三烷酰基)-10-[1-S-α-D-(2-羰基)-乙基-2,3,4,6-四-O-乙酰基-吡喃甘露糖]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷
7.09g(13.4mmol)的3-(2,3,4,6-四-O-乙酰基-1-硫代-α-D-吡喃甘露糖基)丙酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯(根据以下文献制备:J.Haensler等人,Bioconjugate Chem,4,85(1993);Chipowsky,S.和Lee,Y.C(1973),1-硫代-醛糖苷的合成;Carbohydrate Research31,339-346)溶解在100ml二甲基甲酰胺中,然后在0℃下与12.65g(13.4mmol)实施例19a)的标题化合物在100ml二甲基甲酰胺中并冷却至0℃的溶液逐滴混合。在0℃下搅拌2小时以及在室温下12小时。在后处理时,真空除去溶剂至干,然后在硅胶上对所得的残留物进行色谱纯制(洗脱剂:二氯甲烷/乙酸乙酯20∶1;色谱法是使用连续增加乙酸乙酯比例的溶剂梯度进行的)。
产量:16.23g(88.9%理论值)无色且非常粘稠油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 46.70 H 4.36 N 4.11 F 23.69 S 2.35实测值:C 46.66 H 4.35 N 4.12 F 23.65 S 2.30c)1-(3-氧杂-2H,2H,4H,4H,5H,5H-全氟十三烷酰基)-7-[1-S-α-D-(2-羰基)-乙基-2,3,4,6-四-O-乙酰基-吡喃甘露糖]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷
将15.0g(11.0mmol)19b)制得的化合物溶解在150ml乙醇中,然后与1.0g Pearlman-催化剂(Pd 20%C)混合,并在室温和氢气氛(1atm)下氢化,直至不再有氢气吸收。抽滤出催化剂,用乙醇彻底洗涤(2次,每次用75ml),然后真空浓缩至干。标题化合物粘稠且无色的油状得到。
产量:11.56g(96.0%理论值)。元素分析:计算值:C 40.59 H 4.33 N 5.12 F 29.50 S 2.93实测值:C 40.63 H 4.35 N 5.11 F 29.52 S 2.92d)1-(3-氧杂-2H,2H,4H,4H,5H,5H-全氟十三烷酰基)-7-[1-S-α-D-(2-羰基)-乙基-吡喃甘露糖]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷
将10.0g(9.13mmol)实施例19c)的标题化合物悬浮在100ml无水甲醇中,然后在5℃与催化量的甲醇钠混合。在室温下反应3小时后,薄层色谱检查(洗脱剂:氯仿/甲醇4∶1)反应进程,表明反应为定量的。在后处理时,现在澄清的溶液通过与Amberlite IR 120(H+形式)-阳离子交换树脂混合进行中和,抽滤出交换树脂,用甲醇洗涤,所得的甲醇滤液真空蒸发至干。所得油状残留物在硅胶上进行柱色谱纯制(洗脱剂:二氯甲烷/正己烷/乙酸乙酯15∶20∶1;色谱法是使用连续增加乙酸乙酯比例的溶剂梯度进行的)。1H-NMR色谱研究标题化合物后,基于J1,2=0.9Hz的偶联常数,明确表明在D-吡喃甘露糖的端基异构体中心存在α-构型。该α-构型是在端基异构体单独存在的构型,也就是说,有可能形成的标题化合物的β-构型的量低于1H-NMR光谱的检测限。上述标题化合物因此仅为纯的α-构型的端基异构体。
产量:8.28g(98.0%理论值)无色且非常粘稠油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 37.59 H 4.24 N 6.05 F 34.85 S 3.46实测值:C 37.57 H 4.28 N 6.02 F 34.85 S 3.44e)1-(3-氧杂-2H,2H,4H,4H,5H,5H-全氟十三烷酰基)-7-[1-S-α-D-(2-羰基)-乙基-吡喃甘露糖]-4,10-二[1,4,7-三(羧酸甲基)-10-(3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基-戊酰基)]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷,二钆-络合物
在40℃和搅拌下将2.48g[(3.94mmol);4.4摩尔当量,以所用的19d)二氨基组分为基准]在德国专利申请197 28 954 C1之实施例31h)中描述的10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三乙酸的Gd络合物和167mg无水氯化锂(3.94mmol)溶解在40ml无水二甲基亚砜中,然后在该温度下与总共453mg(3.94mmol)N-羟基琥珀酰亚胺和980mg(0.895mmol)实施例19d)的标题化合物在10ml无水二甲基亚砜中的溶液混合。冷却至室温后反应溶液与814mg(3.946mmol)N,N′-二环己基碳二亚胺混合,然后在室温下搅拌12小时。所得悬浮液随后与足够的丙酮混合,直至上述标题化合物沉淀完全,抽滤沉淀物,干燥,溶解在水中,过滤出不溶的二环己基脲,滤液用AMICONYM-3超滤膜(截止:3000Da)脱盐,并除去低分子量组分。然后冻干保留物。
产量:1.32g(69.1%理论值)无色冻干物。
水含量(Karl-Fischer):7.65%元素分析(以无水物计):计算值:C 37.43 H 4.45 N 9.12 F 15.02 S 1.49 Gd 14.63实测值:C 37.42 H 4.50 N 9.18 F 15.07 S 1.51 Gd 14.58f)3-氧杂-2H,2H,4H,4H,5H,5H-全氟十三烷酸-叔丁基酯
将25.0g(53.8mmol)1H,1H,2H,2H-全氟-1-癸醇[可由Lancaster市售得到]溶解在250ml无水甲苯中,然后在室温下与催化量(约0.75g)的四-n-丁基-硫酸氢铵混合。随后在0℃下添加总共7.55g(134.6mmol;2.5当量,以所用的醇组分为基准)氢氧化钾细粉末,然后添加15.73g(80.7mmol;1.5当量,以所用的醇组分为基准)的溴乙酸叔丁基酯,接着在0℃下再搅拌2小时。所得的反应溶液在室温下搅拌12小时,然后与总共500ml乙酸乙酯和250ml水混合进行后处理。分离有机相,然后水洗涤2次,有机相在硫酸钠上干燥后,抽滤出盐,真空除去溶剂。残留的油状残留物在硅胶上使用乙酸乙酯/己烷(1∶10)作为洗脱剂进行纯制。
产量:26.3g(84.6%理论值)无色且非常粘稠的油状上述标题化合物。元素分析:计算值:C 33.23 H 2.61 F 55.85实测值:C 33.29 H 2.61 F 55.90g)3-氧杂-2H,2H,4H,4H,5H,5H-全氟十三烷羧酸
在室温和搅拌下将20.0g(34.58mmol)实施例19f)的标题化合物悬浮在200ml由甲醇和0.5M氢氧化钠的2∶1混合物中,然后加热至60℃。在60℃反应12小时后,现在澄清的反应混合物通过与Amberlite IR120(H+形式)-阳离子交换树脂混合进行中和,抽滤出交换树脂,然后真空浓缩所得的含甲醇的滤液至干。所得无定形油状残留物在硅胶上使用乙酸乙酯/正己烷(1∶3)作为洗脱剂进行纯制。
产量:16.0g(88.6%理论值)无色且非常粘稠的油状上述标题化合物。元素分析:计算值:C 27.60 H 1.35 F 61.85实测值:C 27.58 H 1.36 F 61.90
实施例20a)6-苄氧基羰基-2-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-1-赖氨酸-甲基酯
在0℃和氮气氛下向8.0g(24.4mmol)ε-羰基氧基苄基-1-赖氨酸甲基酯盐酸盐(可由Bachem公司市售得到)在150ml四氢呋喃、15ml氯仿和2.62g(26.0mmol)三乙胺中的溶液内分批添加16.18g(27.0mmol)2-[N-乙基-N-全氟辛基磺酰基]氨基乙酸(根据DE 196 03 033制备)在50ml四氢呋喃中的溶液。随后在0℃下分批添加总共18.0g(36.6mmol)的EEDQ[2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1,2-二氢喹啉],然后在室温下搅拌过夜。真空浓缩,然后在硅胶上对残留的油进行色谱纯制(洗脱剂:正己烷/异丙醇15∶1)。得到17.0g(79.6%理论值,以所用的伯胺为基准)无色油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 38.41 H 3.45 F 36.89 N 4.80 S 3.66实测值:C 38.42 H 3.47 F 36.92 N 4.87 S 3.64b)2-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-1-赖氨酸-甲基酯
将15.0g(20.23mmol)实施例20a)中制得的化合物溶解在200ml乙醇中,然后与800mg Pearlman-催化剂(Pd 20%活性炭上)混合,氢化至吸收了计算量的氢气。滤出催化剂,用乙醇彻底洗涤,然后真空浓缩至干。得到无色油状的标题化合物。
产量:14.68g(97.9%理论值)元素分析:计算值:C 32.40 H 3.26 F 43.56 N 5.67 S 4.32实测值:C 32.42 H 3.27 F 43.60 N 5.67 S 4.34c)6-(1-O-α-D-羰甲基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖)2-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-1-赖氨酸-甲基酯
将21.31g(35.6mmol)1-羧甲氧基2,3,4,6-四-O-苄基-α-D-吡喃甘露糖苷[根据DE 197 28 954 C1所述进行制备]以及3.60g(35.6mmol)三乙胺溶解在500ml无水四氢呋喃中。反应溶液冷却至-15℃至-20℃后,在该温度和搅拌下缓慢滴加4.92g(35.6mmol)氯甲酸异丁酯在75ml无水四氢呋喃中的溶液,其中选择添加速率,使得内部温度不超过-10℃。在-15℃下反应15分钟后,在-20℃下缓慢滴加26.39g(35.6mmol)实施例20b)的标题化合物和3.60g(35.6mmol)三乙胺在100ml无水四氢呋喃中的溶液。在-15℃下反应1小时以及在室温下2小时后,反应溶液真空浓缩至干。残留物溶解在250ml乙酸乙酯中,并洗涤2次,每次用100ml饱和碳酸氢钠溶液,然后用200ml水洗涤1次,有机相在硫酸钠上干燥后,抽滤出盐,真空除去乙酸乙酯。残留的油状残留物在硅胶上使用乙酸乙酯/正己烷(1∶10)作为洗脱剂进行纯制。
产量:38.12g(81.0%理论值)无色且非常粘稠的上述标题化合物。元素分析:计算值:C 49.92 H 3.92 N 2.53 F 29.18 S 2.90实测值:C 49.99 H 4.11 N 2.69 F 29.22 S 3.01d)6-(1-O-α-D-羰甲基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖)2-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-1-赖氨酸
将27.65g(20.92mmol)实施例20c)中制得的化合物溶解在250ml甲醇中。向其中添加4.0g(100.0mmol)氢氧化钠在10ml蒸馏水中的溶液,然后在50℃下搅拌3小时。通过薄层色谱检查反应进程,已经定量地进行了甲基酯皂化。真空浓缩至干,然后剩余的残留物溶解在300ml乙酸乙酯,并萃取有机相2次,每次用100ml稀柠檬酸水溶液。在硫酸钠上干燥后,过滤并真空浓缩至干。所得残留物在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:正己烷/氯仿/异丙醇15∶10∶1)。得到24.31g(88.9%理论值)无色粘稠油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 51.46 H 4.70 N 3.21 F 24.71 S 2.45实测值:C 51.49 H 4.71 N 3.19 F 24.72 S 2.41e)6-(1-O-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖)2-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-1-赖氨酸
将20.0g(15.30mmol)实施例20d)的标题化合物溶解在由250ml2-丙醇和25ml水组成的混合物中,然后与1.0g钯催化剂(10%Pd,在活性炭上)混合。在室温和1个大气压的氢压下氢化12小时。过滤出催化剂,然后滤液真空浓缩至干。残留物溶解在200ml甲醇中,与总共800ml乙醚混合,由此使反应产物沉淀。抽滤出所得的固体后,在50℃下真空干燥。
产量:14.32g(99.0%理论值)无定形固体。元素分析:计算值:C 35.56 H 3.84 N 4.44 S 3.39 F 34.15实测值:C 35.58 H 3.81 N 4.45 S 3.40 F 34.17f)6-(1-O-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖)2-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-1-赖氨酸-N-{2-羟基-丙-3-基-[1,4,7-三(羧酸甲基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-10-基]}-酰胺,Gd-络合物
在40℃下将7.48g(7.91mmol)实施例20e)的标题化合物溶解在50ml二甲基亚砜中,然后添加1.00g(8.70mol)N-羟基琥珀酰亚胺。冷却至20℃并添加1.795g(8.7mmol)二环己基碳二亚胺。在20℃下搅拌1小时,然后在40℃下搅拌4小时。在该温度下于10分钟内滴加4.53g(7.91mmol)10-(2-羟基-3-氨基丙基)-4,7,10-三(羧甲基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷酸的钆-络合物[其制备参考:WO 97/02051]在20ml二甲基亚砜中的溶液。40℃搅拌1小时,然后在室温下过夜。所得悬浮液随后与足够的丙酮混合,直至上述标题化合物沉淀完全,抽滤沉淀物,干燥,溶解在水中,过滤出不溶的二环己基脲,滤液用AMICONYM-3超滤膜(截止:3000Da)脱盐,并除去低分子量组分。然后冻干保留物。
产量:9.71g(81.7%理论值)无色冻干物。
水含量(Karl-Fischer):3.97%元素分析(以无水物计):计算值:C 35.16 H 4.16 N 7.45 F 21.48 Gd 10.46 S 2.13实测值:C 35.17 H 4.20 N 7.42 F 21.49 Gd 10.48 S 2.09
实施例21a)6-N-[1-O-α-D-(5-羰基)-戊基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖]-2N-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-1-赖氨酸-甲基酯
将5.23g(8.0mmol)实施例10c)中描述的5-(羧基)戊基-2,3,4,6-四-O-苄基-α-D-吡喃甘露糖苷、1.3g(8.0mmol)1-羟基苯并三唑和2.6g(8.0mmol)2-(1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基四氟硼酸尿(TBTU;Peboc Limited,UK)溶解在75ml DMF中,然后搅拌15分钟。该溶液随后与5.16ml(30mmol)N-乙基二异丙基胺和5.93g(8.0mmol)实施例20b)中描述的胺混合,然后在室温下搅拌1.5天。在后处理时,真空除去溶剂至干,然后在硅胶上对所得的残留物进行色谱纯制(洗脱剂:二氯甲烷/乙酸乙酯30∶1;色谱法是使用连续增加乙酸乙酯比例的溶剂梯度进行的)。
产量:9.70g(88.0%理论值)无色且非常粘稠油状标题化合物。元素分析:计算值:C 52.29 H 4.97 N 3.05 F 23.43 S 2.33实测值:C 52.33 H 4.95 N 3.12 F 23.50 S 2.30b)6-N-[1-O-α-D-(5-羰基)-戊基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖]-2N-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-1-赖氨酸
将9.0g(12.40mmol)实施例21a)中制得的化合物溶解在150ml甲醇中。向其中添加2.48g(62.0mmol)氢氧化钠在15ml蒸馏水中的溶液,然后在50℃下搅拌3小时。通过薄层色谱检查反应的进程,上述反应时间后的甲基酯皂化定量进行。真空浓缩至干,然后剩余的残留物溶解在300ml乙酸乙酯,萃取有机相2次,每次用100ml稀柠檬酸水溶液。在硫酸钠上干燥后,过滤并真空浓缩至干。所得残留物在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:正己烷/氯仿/异丙醇25∶10∶1)。得到15.88g(93.9%理论值)无色且非常粘稠油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 51.95 H 4.88 N 3.08 F 23.67 S 2.35实测值:C 51.99 H 4.91 N 3.09 F 23.70 S 2.33c)6-N-[1-O-α-D-(5-羰基)-戊基-吡喃甘露糖]-2N-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-1-赖氨酸
将13.0g(9.52mmol)实施例21b)的标题化合物溶解在由150ml 2-丙醇和25ml水组成的混合物中,然后添加1.0g钯催化剂(10%Pd,在活性炭上),在1大气压的氢压和室温下氢化12小时。过滤出催化剂,然后滤液真空浓缩至干。所得残留物在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:正己烷/氯仿/异丙醇15∶10∶1)。得到9.09g(95.1%理论值)无色且非常粘稠油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 37.10 H 4.22 N 4.19 F 32.18 S 3.10实测值:C 37.09 H 4.21 N 4.19 F 32.20 S 3.13d)6-N-[1-O-α-D-(5-羰基)-戊基-吡喃甘露糖]-2N-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-1-赖氨酸-N-{2-羟基-丙-3-基-[1,4,7-三(羧酸甲基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-10-基]}-酰胺,Gd-络合物
在40℃将7.93g(7.91mmol)实施例21c)的标题化合物溶解在75ml二甲基亚砜中,然后与1.00g(8.70mol)N-羟基琥珀酰亚胺混合。冷却至室温,然后添加总共1.795g(8.7mmol)二环己基碳二亚胺。在20℃搅拌1小时,然后在40℃搅拌4小时。在40℃下于10分钟的时间内,向实施例21c)标题化合物的活性酯溶液中滴加4.53g(7.91mmol)10-(2-羟基-3-氨基丙基)-4,7,10-三(羧甲基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷酸的钆-络合物[制备方法参考:WO 97/02051]在20ml二甲基亚砜中的溶液。在40℃搅拌1小时,然后在室温下过夜。所得悬浮液随后与足够的丙酮/2-丙醇(2∶1)混合,直至上述标题化合物沉淀完全,抽滤沉淀物,干燥,溶解在水中,过滤出不溶的二环己基脲,滤液用AMICONYM-3超滤膜(截止:3000Da)脱盐,并除去低分子量组分。然后冻干保留物。
产量:9.71g(78.8%理论值)无色冻干物。
水含量(Karl-Fischer):6.65%元素分析(以无水物计):计算值:C 36.97 H 4.52 N 7.19 F 20.71 Gd 10.08 S 2.06实测值:C 37.02 H 4.50 N 7.22 F 20.69 Gd 10.08 S 2.09
实施例22a)6-N-{4-[2,3-二-(N,N-二(叔丁氧基羰甲基)-氨基)-丙基]-苯基}-3-氧杂-丙酰基-2-N-(1-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖)L-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将5.25g(7.72mmol)1-(4-羧基甲氧基苄基)-EDTA的四-叔丁基酯(参考:US 4622420)和781mg(7.72mmol)三乙胺溶解在50ml二氯甲烷中。在-15℃于5分钟内滴加1.16g(8.5mmol)氯甲酸异丁酯在10ml二氯甲烷中的溶液,然后在-15℃搅拌再搅拌20分钟。将溶液冷却至-25℃,然后于30分钟内滴加7.07g(7.72mmol)实施例10e)的标题化合物和2.12g(21.0mmol)三乙胺在70ml四氢呋喃中的溶液,然后在-15℃下再搅拌30分钟,接着在室温下过夜。在后处理时,真空除去溶剂,然后残留的油状残留物溶解在250ml氯仿中。萃取氯仿相2次,每次用100ml的10%氯化铵水溶液。有机相在硫酸镁上干燥,真空蒸发至干。残留物在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:二氯甲烷/乙醇=20∶1)。
产量:9.60g(79.0%理论值)无色且非常粘稠的油。元素分析:计算值:C 46.39 H 5.55 N 5.32 F 20.45 S 2.03实测值:C 46.42 H 5.51 N 5.29 F 20.49 S 2.09b)6-N-{4-[2,3-二-(N,N-二(羧甲基)-氨基)-丙基]-苯基}-3-氧杂-丙酰基-2-N-(1-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖)L-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将9.0g(5.70mmol)实施例22a)中制得的化合物溶解在150ml甲醇中。向其中添加4.0g(100.0mmol)氢氧化钠在25ml蒸馏水中的溶液,然后在60℃搅拌6小时。通过薄层色谱检查反应进程,在上述反应时间后四叔丁基酯的皂化定量进行。真空浓缩至干,然后剩余的残留物于加热下溶解在50ml二甲基亚砜中,并与足够量的丙酮/乙酸乙酯(1∶1)混合直至上述标题化合物沉淀完。抽滤所得的沉淀物,用乙酸乙酯充分洗涤,干燥,溶解在水中,产物溶液的pH值通过1M盐酸溶液设定在3.5,然后过滤出可能存在的不溶性组分,而滤液在AMICONYM-3超滤膜(截止:3000Da)上脱盐,并除去低分子量组分。保留物随后冻干。
产量:6.76g(87.6%理论值)无色冻干物。
水含量(Karl-Fischer):3.30%元素分析(以无水物计):计算值:C 39.89 H 4.09 N 6.20 F 23.84 S 2.37实测值:C 39.92 H 4.15 N 6.22 F 23.92 S 2.29c)6-N-{4-[2,3-二-(N,N-二(羧酸甲基)-氨基)-丙基]-苯基}-3-氧杂-丙酰基-2-N-(1-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖)L-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺,Mn-络合物,二钠盐
在加热沸腾下将3.0g(2.22mmol)实施例22b)的标题化合物溶解在150ml水/乙醇(3∶1)混合物中,然后在80℃分批地与0.25g(2.22mmol)碳酸锰(II)混合。所得的反应溶液随后回流5小时。冷却至室温后真空完全除去溶剂,残留物溶解在200ml蒸馏水/正丁醇(1∶1)的混合物中。在剧烈的搅拌下,通过与1N氢氧化钠混合,将pH值设定为7.2。真空完全除去正丁醇后,残留的水相在AMICONYM-3超滤膜(截止:3000Da)上进行脱盐,并除去低分子量组分。保留物随后冻干。
产量:3.19g(99.0%理论值)无色冻干物。
水含量(Karl-Fischer):5.08%元素分析(以无水物计):计算值:C 37.23 H 3.54 F 22.25 Mn 3.78 N 5.79 Na 3.17 S 2.21实测值:C 37.30 H 3.49 F 22.29 Mn 3.81 N 5.76 Na 3.19 S 2.18
实施例23a)3-苄氧基羰基氨基-戊二酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-单酰胺
搅拌25.0g(94.96mmol)3-N-(苄基氧基羰基)-戊二酸酐[根据以下文献合成:Hatanaka,Minoru;Yamamoto,Yuichi;Nitta,Hajime;Ishimaru,Toshiyasu TELEAY;Tetrahedron Lett.;EN;22;39;1981;3883-3886]在150ml无水四氢呋喃中的溶液,然后在搅拌下与53.97g(95.0mmol)1-全氟辛基磺酰基哌嗪在150ml四氢呋喃中的溶液逐滴混合,并将所得的反应溶液回流12小时。冷却至室温后,浓缩至干,而残留的油状残留物在硅胶上使用二氯甲烷/2-丙醇(20∶1)作为洗脱剂进行纯制。
产量:75.80g(96.0%理论值)无色且粘稠油状的上述标题化合物。元素分析:计算值:C 36.11 H 2.67 N 5.05 S 3.86 F 38.84实测值:C 36.12 H 2.61 N 5.08 S 3.88 F 38.82b)3-氨基-戊二酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-单酰胺
将31.50g(37.88mmol)23b)中制得的化合物溶解在300ml乙醇中,然后与2.5g Pearlman-催化剂(Pd 20%C)混合,并在1大气压的氢压下氢化至定量的氢吸收。滤出催化剂,用乙醇洗涤,然后真空浓缩至干。得到黄白色粘稠油状的标题化合物。
产量:25.22g(95.5%理论值)元素分析:计算值:C 29.28 H 2.31 N 6.03 S 4.06 F 46.31实测值:C 29.32 H 2.29 N 6.08 S 4.08 F 46.28c)3-N-(1-α-D-羰甲基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖)-戊二酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-单酰胺
在室温下将21.52g(18.96mmol)1-羧甲氧基-2,3,4-四-O-苄基-α-D-吡喃甘露糖苷[根据DE 197 28 954 C1所述进行制备]溶解在100ml无水二甲基甲酰胺中,在0℃下与2.56g(22.2mmol)N-羟基琥珀酰亚胺混合,然后与4.55g(22.2mmol)二环己基碳二亚胺混合。在0℃下反应60分钟以及在22℃反应3小时后,过滤不溶的二环己基脲,在0℃和搅拌下将所得的澄清的上述标题化合物的活性酯溶液缓慢滴加至13.22g(18.96mmol)实施例23b)的化合物在100ml二甲基甲酰胺中的溶液内。在室温下反应12小时后,真空除去溶剂,然后残留物溶解在300ml乙酸乙酯中,过滤出脲,滤液洗涤2次,每次用100ml饱和碳酸氢钠溶液,并用100ml 10%柠檬酸水溶液洗涤1次,接着用200ml水洗涤1次。有机相在硫酸钠上干燥后,抽滤出盐,真空除去乙酸乙酯。残留的油状残留物在硅胶上使用乙酸乙酯/正己烷(1∶15)作为洗脱剂进行纯制。
产量:21.39g(88.3%理论值)无色且非常粘稠的上述标题化合物。元素分析:计算值:C 49.81 H 4.10 N 3.29 F 25.27 S 2.51实测值:C 49.89 H 4.11 N 3.32 F 25.22 S 2.51d)3-N-(1-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖)-戊二酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-单酰胺
将19.55g(15.30mmol)实施例23c)的标题化合物溶解在由250ml2-丙醇和25ml水组成的混合物中,然后与1.5g钯催化剂(10%Pd,在活性炭上)混合。在室温和1大气压的氢压下氢化12小时。过滤出催化剂,然后滤液真空浓缩至干。残留物溶解在200ml甲醇中,反应产物通过与总共800ml乙醚混合进行沉淀。抽滤出所得的固体后,在40℃下真空干燥。
产量:17.49g(97.5%理论值)无定形固体。元素分析:计算值:C 32.73 H 3.08 N 4.58 S 3.49 F 35.20实测值:C 32.68 H 3.15 N 4.55 S 3.50 F 35.17e)3-N-(1-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖)-戊二酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺-5-N-{2-羟基-丙-3-基-[1,4,7-三(羧酸甲基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-10-基]}-酰胺,Gd-络合物
在40℃和搅拌下将14.43g(15.84mmol)实施例23d)的标题化合物和0.67g无水氯化锂(15.84mmol)溶解在100ml无水二甲基亚砜中,并在该温度下与总共1.82g(15.84mmol)N-羟基琥珀酰亚胺以及9.08g(15.84mmol)10-(2-羟基-3-氨基丙基)-4,7,10--三(羧甲基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷酸的钆-络合物[其制备方法参考:WO 97/02051]在50ml二甲基亚砜中的溶液混合。冷却至室温后,反应溶液与3.27g(15.84mmol)N,N′-二环己基碳二亚胺混合,然后在室温下搅拌12小时。所得悬浮液随后与足够的丙酮混合,直至上述标题化合物沉淀完全,抽滤沉淀物,干燥,溶解在水中,过滤出不溶的二环己基脲,滤液用AMICONYM-3超滤膜(截止:3000Da)脱盐,并除去低分子量组分。然后冻干保留物。
产量:18.71g(80.2%理论值)无色冻干物。
水含量(Karl-Fischer):4.87%元素分析(以无水物计):计算值:C 34.24 H 3.83 N 7.6l F 21.92 S 2.18 Gd 10.67实测值:C 34.26 H 3.79 N 7.58 F 21.87 S 2.18 Gd 10.68
实施例241,7-二(苄氧基羰基)-4-{3-氧杂-戊烷-1,5-二甲酸-1-酰基-5-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺}-10-[2,6-N,N-二(1-O-α-D-羰甲基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖)]-1-赖氨酰基-1,4,7,10-四氮杂环十二烷
在0℃和氮气氛下向27.0g(24.4mmol)实施例15a)中制得的仲胺在150ml四氢呋喃和15ml氯仿中的溶液内添加33.04g(25.0mmol)实施例18c)的标题化合物在250ml四氢呋喃中的溶液。随后在0℃下分批添加总共18.0g(36.6mmol)的EEDQ[2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1,2-二氢喹啉],并在室温下搅拌过夜。随后真空浓缩至干,然后残留的油在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:正己烷/异丙醇25∶1)。得到45.87g(78.0%理论值,以所用的仲胺为基准)无色油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 59.30 H 5.39 F 13.40 N 4.65 S 1.33实测值:C 59.32 H 5.37 F 13.37 N 4.70 S 1.34b)1-{3-氧杂-戊烷-1,5-二甲酸-1-酰基-5-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺}-7-[2,6-N,N′-二(1-O-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖)]-1-赖氨酰基-1,4,7,10-四氮杂环十二烷
将24.1g(10.0mmol)实施例24a)制得的标题化合物溶解在250ml乙醇中,然后与1.4g Pearlman-催化剂(Pd 20%C)混合。氢化至达到定量氢吸收,抽滤出催化剂,用乙醇洗涤充分,然后真空浓缩至干。得到黄色非常粘稠的油状产物。
产量:12.80g(90.1%理论值)元素分析:计算值:C 39.72 H 4.89 F 22.73 N 7.88 S 2.26实测值:C 39.72 H 4.87 F 22.77 N 7.90 S 2.24c)1-{3-氧杂-戊烷-1,5-二甲酸-1-酰基-5-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺}-7-[2,6-N,N′-二(1-O-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖)]-1-赖氨酰基-4,10-二[1,4,7-三(羧酸甲基)-10-(3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基-戊酰基)]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷,二钆-络合物
在40℃和搅拌下将5.54g[8.8mmol;2.2摩尔当量,以所用的实施例24b)氨基组分为基准]在德国专利申请197 28 954 C1之实施例31h)中描述的10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三乙酸的Gd-络合物和无水氯化锂(0.37g.8.8mmol)溶解在60ml无水二甲基亚砜中,然后在该温度下与总共1.01g(8.8mmol)N-羟基琥珀酰亚胺和5.68g(4.0mmol)实施例24b)的标题化合物在40ml无水二甲基亚砜中的溶液混合。冷却至室温后,反应溶液与1.82g(8.8mmol)N,N′-二环己基碳二亚胺混合,并在室温下搅拌12小时。所得悬浮液随后与足够的丙酮混合,直至上述标题化合物沉淀完全,抽滤沉淀物,干燥,溶解在水中,过滤出不溶的二环己基脲,滤液用AMICONYM-3超滤膜(截止:3000Da)脱盐,并除去低分子量组分。然后冻干保留物。
产量:8.52g(80.6%理论值;以所用的二氨基组分为基准)无色冻干物。
水含量(Karl-Fischer):6.09%元素分析(以无水物计):计算值:C 38.61 H 4.76 N 9.53 F 12.21 Gd 11.89 S 1.12实测值:C 38.57 H 4.82 N 9.52 F 12.21 Gd 11.93 S 1.15
实施例25a)1,7-二(苄氧基羰基)-4-{3-氧杂-戊烷-1,5-二甲酸-1-酰基-5-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺}-10-{2,6-N,N′-二(1-O-α-D-(5-羰基)-戊基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖)}-1-赖氨酰基-1,4,7,10-四氮杂环十二烷
在0℃和氮气氛下向27.0g(24.4mmol)实施例15a)中制得的仲胺在150ml四氢呋喃和15ml氯仿中的溶液内添加35.80g(25.0mmol)实施例17e)的标题化合物在250ml四氢呋喃中的溶液。随后在0℃下分批添加总共18.0g(36.6mmol)的EEDQ[2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1,2-二氢喹啉],然后在室温下搅拌过夜。随后真空浓缩至干,残留的油在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:正己烷/异丙醇20∶1)。得到49.48g(80.4%理论值,以所用仲胺为基准)无色油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 60.47 H 5.79 F 12.80 N 4.44 S 1.27实测值:C 60.52 H 5.77 F 12.77 N 4.50 S 1.30b)1-{3-氧杂-戊烷-1,5-二甲酸-1-酰基-5-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺}-7-[2,6-N,N′-二(1-O-α-D-(5-羰基)-戊基-吡喃甘露糖)]-1-赖氨酰基-1,4,7,10-四氮杂环十二烷
将25.2g(10.0mmol)实施例25a)中制得的标题化合物溶解在250ml乙醇中,然后与1.8g Pearlman-催化剂(Pd 20%C)混合。氢化至达到定量氢吸收,然后抽滤催化剂,用乙醇充分洗涤,然后真空浓缩至干。得到黄色且极其粘稠的油状产物。
产量:14.11g(92.5%理论值)元素分析:计算值:C 49.60 H 7.20 F 21.17 N 7.34 S 2.10实测值:C 49.62 H 7.17 F 21.20 N 7.30 S 2.14c)1-{3-氧杂-戊烷-1,5-二甲酸-1-酰基-5-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺}-7-[2,6-N,N′-二(1-O-α-D-(5-羰基)-戊基-吡喃甘露糖)]-1-赖氨酰基-4,10-二[1,4,7-三(羧酸甲基)-10-(3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基-戊酰基)]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷,二钆-络合物
在40℃和搅拌下将5.54g[8.8mmol;2.2摩尔当量,以所用的实施例25b]氨基组分为基准]在德国专利申请197 28 954 C1之实施例31h)中描述的10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三乙酸的Gd-络合物和无水氯化锂(0.37g.8.8mmol)溶解在60ml无水二甲基亚砜中,然后在该温度下与总共1.01g(8.8mmol)N-羟基琥珀酰亚胺和6.10g(4.0mmol)实施例25b)的标题化合物在40ml无水二甲基亚砜中的溶液混合。冷却至室温后,反应溶液与1.82g(8.8mmol)N,N′-二环己基碳二亚胺混合,然后在室温下搅拌12小时。所得悬浮液随后与足够的丙酮混合,直至上述标题化合物沉淀完全,抽滤沉淀物,干燥,溶解在水中,过滤出不溶的二环己基脲,滤液用AMICONYM-3超滤膜(截止:3000Da)脱盐,并除去低分子量组分。然后冻干保留物。
产量:9.26g(84.0%理论值;以所用的二氨基组分为基准)无色冻干物。
水含量(Karl-Fischer):5.89%元素分析(以无水物计):计算值:C 40.52 H 5.16 N 9.15 F 11.72 Gd 11.41 S 1.16实测值:C 40.57 H 5.20 N 9.12 F 11.69 Gd 11.43 S 1.18
实施例26a)6-N-叔丁氧基羰基-2-N-苄氧基羰基-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将19.02g(50.0mmol)α-N-(苄氧基羰基)-ε-N′-(叔丁氧基羰基)-1-赖氨酸(可由Bachem公司市售得到)溶解在150ml无水四氢呋喃中。在0℃下滴加8.31g(50.0mmol)羰基二咪唑和5.03g(50.0mmol)三乙胺在75ml无水四氢呋喃中的溶液,然后在该温度下搅拌10分钟。在0℃下滴加48.42g(50.0mmol)全氟辛基磺酰基哌嗪和5.03g(50.0mmol)三乙胺在250ml无水四氢呋喃中的溶液。搅拌过夜后,真空除去四氢呋喃,残留的油在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:正己烷/异丙醇15∶1)。得到49.48g(80.4%理论值,以所添加的仲胺为基准)无色油状的标题化合物。元素分析(以无水物计):计算值:C 40.01 H 3.79 N 6.02 F 34.70 S 3.45实测值:C 40.07 H 3.82 N 6.02 F 34.67 S 3.48b)6-N-叔丁氧基羰基-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将30.0g(32.2mmol)实施例26a)的标题化合物溶解在300ml异丙醇中,然后与1.5g Pearlman-催化剂(20%氢氧化钯,在炭上)混合。在室温下氢化10小时,其中在通过薄层色谱检查反应进程后,甚至在上述反应时间后,进行定量氢解脱除苄氧基羰基保护基。过滤出催化剂,然后真空浓缩滤液至干。残留物在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:正己烷/异丙醇25∶1)。得到25.13g(98.0%理论值)无色油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 34.68 H 3.67 F 40.55 N 7.03 S 4.03实测值:C 34.72 H 3.70 F 40.60 N 7.01 S 3.98c)6-N-叔丁氧基羰基-2-N-[1-S-α-D-(2-羰基)-乙基-2,3,4,6-四-O-乙酰基吡喃甘露糖]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将15.53g(35.60mmol)3-(2,3,4,6-四-O-乙酰基-1-硫代-α-D-吡喃甘露糖基)-丙酸(根据以下文献制备:J.Haensler等人,Bioconjugate Chem.4,85(1993);Chipowsky,S.和Lee,Y.C(1973),1-硫代-醛糖苷的合成;Carbohydrate Research 31,339-346)以及3.60g(35.60mmol)三乙胺溶解在300ml无水四氢呋喃中。反应溶液冷却至-15℃至-20℃,在该温度和搅拌下缓慢滴加4.92g(35.60mmol)氯甲酸异丁酯在75ml无水四氢呋喃中的溶液,其中选择添加速率,使得内部温度不超过-10℃。在-15℃反应15分钟后,在-20℃下缓慢滴加28.35g(35.60mmol)实施例22b)的标题化合物和3.60g(35.60mmol)三乙胺在200ml无水四氢呋喃中的溶液。在-15℃下反应1小时以及在室温下2小时后,反应溶液真空浓缩至干。残留物溶解在250ml乙酸乙酯中,并洗涤2次,每次用100ml饱和碳酸氢钠溶液,然后用200ml水洗涤1次,有机相在硫酸钠上干燥后,抽滤出盐,乙酸乙酯真空除去。残留的油状残留物在硅胶上使用乙酸乙酯/正己烷(1∶25)作为洗脱剂进行纯制。
产量:34.21g(79.1%理论值)无色且非常粘稠的油状上述标题化合物。元素分析:计算值:C 39.54 H 4.23 N 4.61 F 26.58 S 5.28实测值:C 39.49 H 4.21 N 4.59 F 26.52 S 5.31d)6-N-叔丁氧基羰基-2-N-[1-S-α-D-(2-羰基)-乙基-吡喃甘露糖]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将29.93g(24.64mmol)实施例26c)的标题化合物悬浮在400ml无水甲醇中,然后在5℃与催化量的甲醇钠混合。在室温下反应3小时后,即使用薄层色谱检查反应的进程(洗脱剂:氯仿/甲醇=9∶1),都表明是定量反应。为进行后处理,现在澄清的溶液通过与Amberlite120(H+形式)-阳离子交换树脂混合进行中和,抽滤出交换树脂,然后真空浓缩所得的含甲醇的滤液至干。得到的无定形残留物在硅胶上使用2-丙醇/乙酸乙酯/正己烷(1∶1∶15)作为洗脱剂进行色谱纯制。
产量:23.42g(90.8%理论值)无色粘稠油。元素分析:计算值:C 36.72 H 4.14 N 5.35 F 30.85 S 6.13实测值:C 36.69 H 4.11 N 5.35 F 30.82 S 6.11e)2-N-[1-S-α-D-(2-羰基)-乙基-吡喃甘露糖]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
在0℃和剧烈搅拌下将20.93g(20.0mmol)实施例26d)的标题化合物溶解在50ml三氟乙酸和100ml二氯甲烷组成的混合物中,然后在该温度下搅拌10分钟。真空蒸发至干,然后将残留物溶解在150ml水中。产物水溶液的pH值通过逐滴地添加2M氢氧化钠水溶液调节至9.5。产物水溶液在AMICONYM-3超滤膜(截止:3000Da)上脱盐,而且在此情况下,有可能同时除去仍然存在的低分子量组分。保留物随后冻干。
产量:17.79g(94.2%理论值)作为无色冻干物的游离胺。
水含量(Karl-Fischer):3.09%元素分析(以无水物计):计算值:C 34.26 H 3.73 N 5.92 F 34.12 S 6.77实测值:C 34.26 H 3.79 N 5.88 F 34.07 S 6.80f)2-N-[1-S-α-D-(2-羰基)-乙基-吡喃甘露糖]-6-N-[1,4,7-三(羧酸甲基)-10-(3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基-戊酰基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺,钆-络合物
在40℃和搅拌下将5.54g[(8.8mmol,2.2摩尔当量,以所用的实施例26e)氨基组分为基准]在德国专利申请197 28 954 C1之实施例31h)中描述的10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三乙酸的Gd-络合物和0.37g无水氯化锂(8.8mmol)溶解在60ml无水二甲基亚砜中,然后在该温度下与总共1.01g(8.8mmol)N-羟基琥珀酰亚胺和3.78g(4.0mmol)实施例26e)的标题化合物在40ml无水二甲基亚砜中的溶液混合。冷却至室温后,反应溶液与1.82g(8.8mmol)N,N′-二环己基碳二亚胺混合,并在室温下搅拌12小时。所得悬浮液随后与足够的丙酮混合,直至上述标题化合物沉淀完全,抽滤沉淀物,干燥,溶解在水中,过滤出不溶的二环己基脲,滤液用AMICONYM-3超滤膜(截止:3000Da)脱盐,并除去低分子量组分。然后冻干保留物。
产量:5.17g(83.0%理论值)无色冻干物。
水含量(Karl-Fischer):4.43%。元素分析(以无水物计):计算值:C 35.45 H 4.07 N 8.09 F 20.72 Gd 10.09 S 4.11实测值:C 35.50 H 4.01 N 8.12 F 20.68 Gd 10.13 S 4.14
实施例27a)6-N-苄氧基羰基-2-N-(1-O-β-D-羰甲基-2,3,4,6-四-O-苄基吡喃葡萄糖)-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将8.02g(13.4mmol)在德国专利申请197 28 954 C1之实施例46a)中描述的标题化合物[1-羧甲氧基-2,3,4,6-四-O-苄基-β-D-吡喃葡糖苷]和3.24g(28.14mmol)N-羟基琥珀酰亚胺溶解在100ml二甲基甲酰胺中,然后在0℃下分批与总共5.80g(28.14mmol)N,N′-二环己基碳二亚胺混合。在该温度下搅拌3小时。向所得的活性酯溶液中滴加11.13g(13.4mmol)实施例1c)的标题化合物在50ml二甲基甲酰胺中并冷却至0℃的溶液,然后在0℃下搅拌2小时以及在室温下12小时。在后处理时,过滤沉淀出的二环己基脲,并随后蒸发溶剂至干。所得残留物在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:二氯甲烷/乙醇20∶1;使用溶剂梯度进行色谱纯制,其中连续增加比例乙醇)。
产量:12.67g(67.0%理论值)无色且非常粘稠的油状标题化合物。元素分析:计算值:C 52.77 H 4.50 N 3.97 F 22.89 S 2.27实测值:C 52.75 H 4.61 N 3.98 F 22.94 S 2.26b)2-N-(1-O-β-D-羰甲基-吡喃葡萄糖)-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将11.52g(8.17mmol)27a)中制得的化合物溶解在100ml乙醇中,然后与0.5g Pearlman-催化剂(Pd 20%C)混合,并在室温和氢气氛(1atm)下氢化,直至不再有氢气吸收。抽滤出催化剂,用乙醇彻底洗涤(3次,每次约40ml),然后真空浓缩至干。得到粘稠且无色的油状标题化合物。
产量:7.36g(98.4%理论值)元素分析:计算值:C 34.07 H 3.63 N 6.11 F 35.24 S 3.50实测值:C 34.11 H 3.59 N 6.08 F 35.23 S 3.52c)2-N-(1-O-β-D-羰甲基-吡喃葡萄糖)-6-N-[1,4,7-三(羧酸甲基)-10-(氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基-戊酰基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺,Gd-络合物
在40℃和搅拌下将9.98g[(15.84mmol;2.2摩尔当量,以所用的实施例27b)氨基组分为基准]在德国专利申请197 28 954 C1之实施例31h)中描述的10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三乙酸的Gd-络合物和0.67g(15.84mmol)无水氯化锂溶解在80ml无水二甲基亚砜中,然后在该温度下与总共1.82g(15.84mmol)N-羟基琥珀酰亚胺和7.25g(7.19mmol)实施例27b)的标题化合物在30ml无水二甲基亚砜中的溶液混合。冷却至室温后,反应溶液与3.27g(15.84mmol)N,N′-二环己基碳二亚胺混合,并在室温下搅拌12小时。所得悬浮液随后与足够的丙酮混合,直至上述标题化合物沉淀完全,抽滤沉淀物,干燥,溶解在水中,过滤出不溶的二环己基脲,滤液用AMICONYM-3超滤膜(截止:3000Da)脱盐,并除去低分子量组分。然后冻干保留物。
产量:9.11g(83.0%理论值)无色冻干物。
水含量(Karl-Fischer):4.02%元素分析(以无水物计):计算值:C 35.37 H 4.02 N 8.25 F 21.13 S 2.10 Gd 10.29实测值:C 35.42 H 4.07 N 8.18 F 21.09 S 2.06 Gd 10.34
实施例28a)2-N-三氟乙酰基-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将10.0g(11.46mmol)lb)中制得的化合物溶解在100ml乙醇中,然后与1.0g Pearlman-催化剂(Pd 20%/C)混合,并氢化至定量氢吸收。滤出催化剂,用乙醇洗涤,然后真空浓缩至干。得到粘稠的无色油状标题化合物。
产量:8.85g(97.5%理论值)元素分析:计算值:C 30.31 H 2.54 N 7.07 F 47.95 S 4.05实测值:C 30.36 H 2.50 N 7.11 F 47.99 S 4.00b)2-N-三氟乙酰基-6-N-[1-O-α-D-(5-羰基)-戊基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
向29.0g(36.6mmol)实施例28a)的标题化合物和4.05g(40.26mmol)三乙胺在100ml二甲基甲酰胺中并冷却至0℃的溶液内滴加27.51g(36.6mmol)实施例17c)的标题化合物在150ml二甲基甲酰胺中的溶液。添加完成后,在0℃下再搅拌1小时,然后在室温下过夜。真空蒸发至干,然后残留物溶解在300ml乙酸乙酯中。过滤出不溶的组分,然后洗涤滤液2次,每次用100ml 5%纯碱水溶液。有机相在硫酸镁上干燥,然后真空蒸发至干。残留物在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:正己烷/异丙醇25∶1)。得到42.05g(80.4%理论值)无色油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 50.42 H 4.51 N 7.96 F 26.59 S 2.24实测值:C 50.38 H 4.50 N 7.91 F 26.62 S 2.20c)6-N-[1-O-α-D-(5-羰基)-戊基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将20.0g(14.0mmol)实施例28b)中制得的化合物溶解在150ml乙醇中。添加2.8g(70.0mmol)氢氧化钠在25ml蒸馏水中的溶液,然后在50℃下搅拌0.5小时。根据薄层色谱,此时保护基的脱除已经定量进行。真空蒸发至干,通过与乙醇的共同蒸馏除去痕量的水分。残留物在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:正己烷/异丙醇20∶1)。得到16.66g(89.3%理论值)无色油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 52.25 H 4.91 N 4.20 F 24.22 S 2.41实测值:C 52.30 H 4.90 N 4.18 F 24.22 S 2.38d)6-N-[1-O-α-D-(5-羰基)-戊基-吡喃甘露糖]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将15.0g(11.25mmol)28c)中制得的化合物溶解在150ml由10∶1的乙醇和水组成的混合物中,然后与1.0g Pearlman-催化剂(Pd 20%/C)混合。随后在室温和1大气压的氢压下氢化至定量氢吸收。滤出催化剂,用乙醇/水(10∶1)洗涤,然后真空浓缩至干。得到粘稠的无色油状标题化合物。
产量:10.77g(98.4%理论值)元素分析:计算值:C 37.04 H 4.25 N 5.76 F 33.20 S 3.30实测值:C 37.06 H 4.20 N 5.81 F 33.19 S 3.30e)6-N-[1-O-α-D-(5-羰基)-戊基-吡喃甘露糖]-2-N-[1,4,7-三(羧酸甲基)-10-(3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基-戊酰基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺,Gd-络合物
在40℃和搅拌下将5.54g[(8.8mmol;2.2摩尔当量,以所用的氨基组分为基准aus实施例28d)]在德国专利申请197 28 954 C1之实施例31h)中描述的10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三乙酸的Gd-络合物和0.37g(8.8mmol)无水氯化锂溶解在60ml无水二甲基亚砜中,然后在该温度下与总共1.01g(8.8mmol)N-羟基琥珀酰亚胺和3.89g(4.0mmol)实施例28d)的标题化合物在60ml无水二甲基亚砜中的溶液混合。冷却至室温后,反应溶液与1.82g(8.8mmol)N,N′-二环己基碳二亚胺混合,并在室温下搅拌12小时。所得悬浮液随后与足够的丙酮混合,直至上述标题化合物沉淀完全,抽滤沉淀物,干燥,溶解在水中,过滤出不溶的二环己基脲,滤液用AMICONYM-3超滤膜(截止:3000Da)脱盐,并除去低分子量组分。然后冻干保留物。
产量:4.81g(75.9%理论值)无色冻干物。
水含量(Karl-Fischer):8.98%元素分析(以无水物计):计算值:C 37.15 H 4.39 N 7.96 F 20.38 Gd 9.92 S 2.02实测值:C 37.27 H 4.40 N 8.02 F 20.31 Gd 10.00 S 1.98
实施例29a)1,7-二(苄氧基羰基)-4-(1-O-β-D-羰甲基-2,3,4,6-四-O-苄基吡喃半乳糖)-10-{3-氧杂-戊烷-1,5-二甲酸-1-酰基-5-[1-(4-全氟辛基磺酰基)哌嗪]-酰胺}-1,4,7,10-四氮杂环十二烷
在0℃和氮气氛下向27.0g(24.4mmol)实施例15a)中制得的仲胺在150ml四氢呋喃和15ml氯仿中的溶液内添加35.80g(25.0mmol)实施例17e)的标题化合物在250ml四氢呋喃中的溶液。随后在0℃下分批添加总共18.0g(36.6mmol)的EEDQ[2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1,2-二氢喹啉],然后在室温下搅拌过夜。真空浓缩至干,然后残留的油在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:正己烷/异丙醇20∶1)。得到32.11g(78.0%理论值,以所添加的仲胺为基准)无色油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 54.09 H 4.72 F 19.14 N 4.98 S 1.90实测值:C 54.12 H 4.77 F 19.17 N 5.03 S 1.90b)1-(1-O-β-D-羰甲基-吡喃半乳糖)-7-{3-氧杂-戊烷-1,5-二甲酸-1-酰基-5-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺}-1,4,7,10-四氮杂环十二烷
将30.0g(17.77mmol)实施例29a)中制得的标题化合物溶解在250ml乙醇中,然后与3.0g Pearlman-催化剂(Pd 20%/C)混合。氢化至定量氢吸收,抽滤出催化剂,用乙醇充分洗涤,然后真空浓缩至干。得到黄色且极为粘稠的油状产物。
产量:17.89g(95.1%理论值)。元素分析:计算值:C 36.30 H 4.09 F 30.50 N 7.94 S 3.03实测值:C 36.26 H 4.12 F 30.46 N 7.90 S 3.04c)1-(1-O-β-D-羰甲基-吡喃半乳糖)-7-{3-氧杂-戊烷-1,5-二甲酸-1-酰基-5-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺}-4,10-二[1,4,7-三(羧酸甲基)-10-(3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基-戊酰基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷,二钆-络合物
在40℃和搅拌下将5.54g[8.8mmol;4.4摩尔当量,以所用的实施例29b)氨基组分为基准]在德国专利申请197 28 954 C1之实施例31h)中描述的10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三乙酸的Gd-络合物和0.37g(8.8mmol)无水氯化锂溶解在60ml无水二甲基亚砜中,然后在该温度下与总共1.01g(8.8mmol)N-羟基琥珀酰亚胺和2.11g(2.0mmol)实施例29b)的标题化合物在25ml无水二甲基亚砜中的溶液混合。冷却至室温后,反应溶液与1.82g(8.8mmol)N,N′-二环己基碳二亚胺混合,并在室温下搅拌12小时。所得悬浮液随后与足够的丙酮混合,直至上述标题化合物沉淀完全,抽滤沉淀物,干燥,溶解在水中,过滤出不溶的二环己基脲,滤液用AMICONYM-3超滤膜(截止:3000Da)脱盐,并除去低分子量组分。然后冻干保留物。
产量:3.29g(72.2%理论值;以所用的氨基组分为基准)无色冻干物。
水含量(Karl-Fischer):5.99%元素分析(以无水物计):计算值:C 36.84 H 4.37 N 9.82 F 14.15 Gd 19.63 S 1.40实测值:C 36.87 H 4.40 N 9.82 F 14.09 Gd 19.59 S 1.38
实施例30a)3-(1-O-α-D-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖)-2-N-苄氧基羰基-1-丝氨酸甲基酯
将21.42g(39.61mmol)2,3,4,6-四-O-苄基-a-D-吡喃甘露糖(根据以下文献制备:E.Kong等人,J.Carbohydr.Chem.;16;6;1997;877-890)溶解在500ml无水乙腈中。反应溶液冷却至5℃,在该温度和搅拌下缓慢滴加13.23g(59.52mmol)三氟甲烷磺酸-三甲基甲硅烷基酯在30ml乙腈中的溶液,然后滴加20.06g(79.21mmol)N-苄氧基羰基-1-丝氨酸甲基酯(可由Bachem公司市售得到)在50ml乙腈中的溶液,其中选择滴加速率,使得内部温度不超过10℃。在室温下反应15小时后,反应溶液真空浓缩至干。残留物溶解在250ml乙酸乙酯中,然后洗涤2次,每次用100ml饱和碳酸氢钠溶液,接着用200ml水洗涤1次,有机相在硫酸钠上干燥后,抽滤出盐,真空除去乙酸乙酯。残留的油状残留物在硅胶上使用乙酸乙酯/正己烷(1∶5)作为洗脱剂进行纯制。
产量:23.60g(76.8%理论值)上述标题化合物无色油状。元素分析:计算值:C 71.21 H 6.37 N 1.81实测值:C 71.19 H 6.41 N 1.79b)3-(1-O-α-D-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖)-2-N-苄氧基羰基-1-丝氨酸
将10.0g(12.90mmol)实施例30a)中制得的化合物溶解在由20ml甲醇、20ml水和50ml四氢呋喃组成的混合物中,然后在室温下向其中添加0.47g(19.35mmol)氢氧化锂在25ml蒸馏水中的溶液,接着在60℃搅拌6小时。通过薄层色谱(洗脱剂:二氯甲烷/甲醇10∶1)检查反应的进程,在上述反应时间后,实施例30a)的甲基酯皂化已经定量进行。后处理时,真空浓缩产物溶液至干,然后将残留物在加热下(约60℃)溶解在250ml乙酸乙酯中。乙酸乙酯相洗涤2次,每次用50ml的15%盐酸溶液洗涤,然后用100ml蒸馏水洗涤1次。有机相在硫酸镁干燥,过滤,然后蒸发至干。残留物在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:正己烷/乙酸乙酯5∶1)。得到8.40g(85.7%理论值)无色油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 70.94 H 6.22 N 1.84实测值:C 70.97 H 6.30 N 1.78c)3-(1-O-α-D-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃甘露糖-2-N-苄氧基羰基-1-丝氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)哌嗪]-酰胺
在0℃和氮气氛下向13.86g(24.40mmol)1-全氟辛基磺酰基哌嗪(根据DE 19603033制备)在150ml四氢呋喃和15ml氯仿中的溶液内分批添加20.57g(27.0mmol)实施例30b)中制备的羧酸在50ml四氢呋喃中的溶液。随后在0℃下分批添加总共18.0g(36.60mmol)的EEDQ[2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1.2二氢喹啉],然后在室温下搅拌过夜。进行后处理时,反应溶液真空蒸发至干,残留的粘稠油在硅胶上使用正己烷/异丙醇(15∶1)混合物作为洗脱剂进行色谱纯制。得到17.0g(79.6%理论值,以所用的伯胺为基准)无色粘稠油状的标题化合物。元素分析:计算值:C 51.53 H 4.23 N 3.15 F 25.65 S 2.41实测值:C 51.48 H 4.27 N 3.10 F 25.71 S 2.35d)3-(1-O-α-D-吡喃甘露糖)-1-丝氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)哌嗪]-酰胺
将15.0g(11.41mmol)根据实施例30c)制得的化合物溶解在200ml乙醇中,然后与1.5g Pearlman-催化剂(Pd 20%C)混合。反应溶液在室温和氢气氛(1atm)下氢化至不再有氢气吸收(约8小时)。后处理时,抽滤出催化剂,用乙醇彻底洗涤(2次,每次用约100ml),然后真空浓缩含有产物的乙醇滤液至干。得到非常粘稠的无色油状标题化合物。
产量:8.79g(94.0%理论值)元素分析:计算值:C 30.78 H 3.20 N 5.13 F 39.41 S 3.91实测值:C 30.87 H 3.14 N 5.19 F 39.50 S 3.88e)3-(1-O-α-D-吡喃甘露糖)-2-N-[1,4,7-三(羧酸甲基)-10-(3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基-戊酰基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷]-1-丝氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)哌嗪]-酰胺,Gd-络合物
搅拌5.7g[9.06mmol;相应于1.5摩尔当量,以所用的实施例30d)的标题化合物(伯胺)为基准]在德国专利申请197 28 954 C1之实施例31h)中描述的10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三乙酸的Gd-络合物在75ml无水二甲基亚砜中的悬浮液,在70℃与0.68g(15.9mmol)氯化锂混合。在70℃搅拌30分钟后,现澄清的反应溶液分批地与总共1.83g(15.9mmol)N-羟基琥珀酰亚胺混合,反应混合物在70℃下再保持1小时。反应溶液冷却至10℃后,与4.52g(23.85mmol)二环己基碳二亚胺混合,反应溶液在0℃再搅拌1小时,然后在22℃搅拌12小时。所得的10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三乙酸Gd-络合物的N-羟基琥珀酰亚胺酯溶液在22℃下逐滴地与4.94g(6.03mmol)实施例30d)的标题化合物在15ml无水二甲基亚砜中的溶液混合,然后在室温下再搅拌12小时。在后处理时,在22℃缓慢地将反应溶液滴加至由250ml丙酮和250ml 2-丙醇组成的混合物中,其中在10℃下12小时后,标题化合物完全沉淀出来,为淡黄色油。小心倾析出洗脱剂混合物上清夜,并将油状产物溶解在200ml蒸馏水中,其中后者完全溶解,得到标题化合物的淡黄色水溶液。该产物水溶液随后先用过滤膜过滤,然后为脱盐并除去低分子量组分,用YM3-超滤膜(AMICON;截止:3000Da)进行超滤三次。如此得到的保留物随后冻干。
产量:8.63g(80.2%理论值,以所用的实施例30d)标题化合物为基准),无色冻干物,其水含量为7.65%。元素分析(以无水物计):计算值:C 33.57 H 3.80 N 7.83 F 22.57 Gd 10.99 S 2.24实测值:C 33.57 H 3.76 N 7.82 F 22.63 Gd 11.06 S 2.18
实施例31a)6-N-苄氧基羰基-2-N-[O-β-D-吡喃半乳糖基(1-4)-葡糖酸基]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
在室温下向4.98g(6.0mmol)实施例1c)的标题化合物在40ml无水二甲基亚砜中的搅拌溶液内滴加13.3g(37.2mmol)O-β-D-吡喃半乳糖基-(1->4)-D-葡糖酸-1,5-内酯[乳糖酸内酯;根据以下文献制备:(a)Williams,T.J.;Plessas,N.R.;Goldstein,I.J.Carbohydr.Res.1978,67,C1.;(b)Kobayashi,K.;Sumitomo,H.;Ina,Y.Polym.J.1985,17,567;(c)Hiromi Kitano,Katsuko Sohda和Ayako Kosaka,Bioconjugate Chem.1995,6 131-134]在40ml无水二甲基亚砜中的溶液。所得的反应溶液随后在40℃下搅拌14小时。在后处理时,在室温下与500ml无水2-丙醇混合,使用G4玻璃料过滤所产生的无色沉淀物,然后用总共250ml的无水2-丙醇充分洗涤。如此得到的固体溶解在300ml蒸馏水中,然后在YM3超滤膜(AMICON;截止:3000Da)上总共进行3次超滤。通过3次超滤,可分离过量的乳糖酸内酯、以及所希望的产物中仍有可能存在的低分子量组分。在超滤膜中的残留物随后完全溶解在300ml蒸馏水中,然后冻干。
产量:6.51g(92.7%理论值)无色冻干物。
水含量:10.03%元素分析(以无水物计):计算值:C 38.98 H 4.05 N 4.79 F 27.58 S 2.74实测值:C 39.04 H 4.09 N 4.82 F 27.61 S 2.71b)2-N-[O-β-D-吡喃半乳糖基(1->4)-葡糖酸基]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将5.0g(4.27mmol)在31a)中制得的化合物溶解在100ml乙醇中,然后与0.5g Pearlman-催化剂(Pd 20%C)混合,并在1大气压的氢压下氢化至定量的氢吸收。滤出催化剂,用乙醇洗涤,然后真空浓缩至干。得到无色的粘稠油状标题化合物。
产量:4.36g(98.5%理论值)。元素分析:计算值:C 34.76 H 3.99 N 5.40 F 31.51 S 3.09实测值:C 34.78 H 4.04 N 5.34 F 31.51 S 3.15c)2-N-[O-β-D-吡喃半乳糖基(1->4)-葡糖酸基]-6-N-[1,4,7-三(羧酸甲基)-10-(3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基-戊酰基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺,Gd-络合物
在40℃和搅拌下将5.54g[(8.8mmol;2.2摩尔当量,以所用的实施例31b)氨基组分为基准]在德国专利申请197 28 954 C1之实施例31h)中描述的10-(4-羧基-1-甲基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三乙酸的Gd-络合物和0.37g(8.8mmol)无水氯化锂溶解在60ml无水二甲基亚砜中,然后在该温度下与总共1.01g(8.8mmol)N-羟基琥珀酰亚胺和3.85g(4.0mmol)实施例31b)的标题化合物在60ml无水二甲基亚砜中的溶液混合。冷却至室温后,反应溶液与1.82g(8.8mmol)N,N′-二环己基碳二亚胺混合,并在室温下搅拌12小时。所得悬浮液随后与足够的丙酮/2-丙醇(1∶1)混合,直至上述标题化合物完全沉淀。所得的沉淀物随后溶解在300ml水中,然后过滤出不溶的二环己基脲,滤液在AMICONYM-3超滤膜(截止:3000Da)上进行3次超滤。通过3次超滤,可分离过量的乳糖酸内酯、以及所希望的产物中仍有可能存在的低分子量组分。在超滤膜中的残留物随后完全溶解在500ml蒸馏水中,然后冻干。
产量:4.64g(70.4%理论值)无色冻干物。
水含量(Karl-Fischer):10.08%元素分析(以无水物计):计算值:C 35.70 H 4.22 N 7.65 F 19.59 Gd 9.54 S 1.95实测值:C 35.77 H 4.17 N 7.71 F 19.61 Gd 9.60 S 1.99
实施例32a)6-N-苄氧基羰基-2-N-(2,3,4,5-五羟基-己烷酰基)L-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
在50℃下向100.0g(120.4mol)实施例1c)的标题化合物在500ml无水四氢呋喃中的溶液内滴加21.45g(120.4mol)5-葡糖酸内酯在50ml四氢呋喃中的溶液。在60℃搅拌3小时然后在室温下过夜。真空蒸发至干,残留物在硅胶上进行色谱纯制((洗脱剂:二氯甲烷/乙醇=20∶1)。
产量:98.37g(82%理论值)粘稠油。元素分析:计算值:C 38.10 H 3.70 F 32.02 N 5.55 S 3.18实测值:C 38.22 H 3.79 F 32.02 N 5.42 S 3.29b)2-N-(2,3,4,5-五羟基-己烷酰基)-1-赖氨酸-1-[(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将100.9g(100.0mmol)实施例32a)的标题化合物溶解在2000ml乙醇中,然后添加10.0g钯催化剂(10%Pd/C)。在室温下氢化12小时。过滤出催化剂,然后真空蒸发滤液至干。
产量:87.46g(定量)无色固体。元素分析:计算值:C 32.96 H 3.57 N 6.41 S 3.67 F 36.93实测值:C 32.91 H 3.72 N 6.34 S 3.50 F 36.78c)6-N-[1,4,7-三(羧酸甲基)]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-10-N-(戊酰基-3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基)]-2-N-[1-O-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺,Gd-络合物
在略微加热下将50.0g(54.55mmol)实施例1e)的标题化合物、6.28g(54.55mmol)N-羟基琥珀酰亚胺、4.62g(109.0mol)氯化锂和34.35g(54.55mol)1,4,7-三(羧酸甲基)-10-(羧基-3-氮杂-4-氧代-5-甲基-戊-5-基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷,Gd-络合物溶解于400ml二甲基亚砜中。在10℃下添加16.88g(81.8mol)N,N-二环己基碳二亚胺,随后在室温下搅拌过夜。将溶液倾倒在3000ml丙酮中,然后搅拌10分钟。过滤出沉淀的固体,随后通过色谱法纯制(RP-18洗脱剂:由水/乙醇/乙腈组成的梯度)。
产量:75.9g(91.0%理论值)无色固体。
水含量:8.6%元素分析(以无水物计):计算值:C 35.34 H 4.09 N 8.24 S 2.10 F 21.12 Gd 10.28实测值:C 35.28 H 4.15 N 8.19 S 2.15 F 21.03 Gd 10.14实施例33a)6-N-苄氧基羰基-2-N-(2,3,4,5-五羟基-己烷酰基)L-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
在50℃下向100.0g(120.4mmol)实施例1c)的标题化合物和12.18g(120.4mmol)三乙胺在500ml无水四氢呋喃中的溶液内滴加21.45g(120.4mol)5-葡糖酸内酯在50ml四氢呋喃中的溶液。在60℃下搅拌3小时,随后在室温下搅拌过夜。向其中添加400ml的5%盐酸溶,在室温下搅拌5分钟,与氯化钠混合,分离有机相,在硫酸镁上干燥,然后真空蒸发至干。残留物在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:二氯甲烷/乙醇=20∶1)。
产量:100.97g(82%理论值)粘稠油。元素分析:计算值:C 37.58 H 3.45 F 31.58 N 5.48 S 3.14实测值:C 37.72 H 3.59 F 31.72 N 5.42 S 3.29b)2-N-(2,3,4,5-五羟基-己烷酰基)-1-赖氨酸-1-[(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将100.9g(100.0mmol)实施例32a)的标题化合物溶解在2000ml乙醇中,然后添加10.0g钯催化剂(10%Pd/C)。在室温下氢化12小时。过滤出催化剂,然后真空蒸发滤液至干。
产量:87.46g(定量)无色固体。元素分析:计算值:C 32.96 H 3.57 N 6.41 S 3.67 F 36.93实测值:C 32.91 H 3.72 N 6.34 S 3.50 F 3678c)6-N-[1,4,7-三(羧酸甲基)]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-10-N-(戊酰基-3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基)]-2-N-[1-O-α-D-羰甲基-吡喃甘露糖]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺,Gd-络合物
在略微加热下将50.0g(54.55mmol)实施例1e)的标题化合物、6.28g(54.55mmol)N-羟基琥珀酰亚胺、4.62g(109.0mol)氯化锂和34.35g(54.55mol)1,4,7-三(羧酸甲基)-10-(羧基-3-氮杂-4-氧代-5-甲基-戊-5-基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷,Gd-络合物溶解于400ml二甲基亚砜中。在10℃下添加16.88g(81.8mol)N,N-二环己基碳二亚胺,随后在室温下搅拌过夜。将溶液倾倒在3000ml丙酮中,然后搅拌10分钟。过滤出沉淀的固体,随后通过色谱法纯制(RP-18洗脱剂:由水/乙醇/乙腈组成的梯度)。
产量:75.9g(91.0%理论值)无色固体。
水含量:8.6%元素分析(以无水物计):计算值:C 35.34 H 4.09 N 8.24 S 2.10 F 21.12 Gd 10.28实测值:C 35.28 H 4.15 N 8.19 S 2.15 F 21.03 Gd 10.14
在实施例1f的条件下,用葡萄糖和半乳糖替换甘露糖。
实施例34a)6-N-苄氧基羰基-2-N-[1-O-α-D-羰甲基-(2,3,4,6-四-O-苄基吡喃葡萄糖)-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
在0℃下向100.0g(120.4mol)实施例1c)的标题化合物、72.1g(120.4mol)1-O-α-D-羧甲基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃葡萄糖和13.86g(120.4mol)N-羟基琥珀酰亚胺在500ml二甲基甲酰胺中的溶液内添加41.27g(200.0mmol)N,N-二环己基碳二亚胺。在0℃下搅拌3小时,随后在室温下搅拌过夜。过滤沉淀出的脲,蒸发滤液至干,然后在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:二氯甲烷/乙醇=20∶1)。
产量:136.1g(87%理论值)粘稠油。元素分析:计算值:C 57.32 H 4.89 N 4.31 F 24.86 S 2.47实测值:C 57.48 H 5.04 N 4.20 F 24.69 S 2.38b)2-N-[1-O-α-D-羰甲基吡喃葡萄糖]-1-赖氨酸-1-[(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将130.0g(100.0mmol)实施例34a)的标题化合物溶解在2000ml乙醇中,然后添加10.0g钯催化剂(10%Pd/C)。在室温下氢化12小时。过滤出催化剂,然后真空蒸发滤液至干。
产量:91.7g(定量)无色固体。元素分析:计算值:C 34.07 H 3.63 N 6.11 S 3.50 F 35.24实测值:C 33.92 H 3.71 N 6.02 S 3.42 F 35.33c)6-N-[1,4,7-三(羧酸甲基)]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-10-N-(戊酰基-3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基)]-2-N-[1-O-α-D-羰甲基-吡喃葡萄糖]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺,Gd-络合物
在略微加热下将50.0g(54.55mmol)实施例34b)的标题化合物、6.28g(54.55mmol)N-羟基琥珀酰亚胺、4.62g(109.0mol)氯化锂和34.35g(54.55mol)1,4,7-三(羧酸甲基)-10-(羧基-3-氮杂-4-氧代-5-甲基-戊-5-基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷,Gd-络合物溶解于400ml二甲基亚砜中。在10℃下添加16.88g(81.8mol)N,N-二环己基碳二亚胺,随后在室温下搅拌过夜。将溶液倾倒在3000ml丙酮中,然后搅拌10分钟。过滤出沉淀的固体,随后通过色谱法纯制(RP-18洗脱剂:由水/乙醇/乙腈组成的梯度)。
产量:75.9g(91.0%理论值)无色固体。
水含量:8.6%元素分析(以无水物计):计算值:C 35.34 H 4.09 N 8.24 S 2.10 F 21.12 Gd 10.28实测值:C 35.26 H 4.18 N 8.14 S 2.158F 21.01 Gd 10.13
实施例35a)6-N-苄氧基羰基-2-N-[1-O-α-D-羰甲基-(2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃半乳糖)-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
在0℃下向50.0g(60.2mol)实施例1c)的标题化合物、36.05g(60.2mmol)1-O-α-D-羧甲基-2,3,4,6-四-O-苄基-吡喃半乳糖和6.93g(60.2mmol)N-羟基琥珀酰亚胺在500ml二甲基甲酰胺中的溶液内添加20.64g(100.0mmol)N,N-二环己基碳二亚胺。在0℃下搅拌3小时,随后在室温下搅拌过夜。过滤沉淀出的脲,蒸发滤液至干,然后在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:二氯甲烷/乙醇=20∶1)。
产量:68.1g(87%理论值)粘稠油。元素分析:计算值:C 57.32 H 4.89 N 4.31 F 24.86 S 2.47实测值:C 57.47 H 5.05 N 4.19 F 24.72 S 2.29b)2-N-[1-O-α-D-羰甲基-吡喃半乳糖]-1-赖氨酸-1-[(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将65.0g 50.0mmol)实施例35a)标题化合物溶解在1000ml乙醇中,然后添加5.0g钯催化剂(10%Pd/C)。在室温下氢化12小时。过滤出催化剂,然后真空蒸发滤液至干。
产量:45.85g(定量)无色固体。元素分析:计算值:C 34.07 H 3.63 N 6.11 S 3.50 F 35.24实测值:C 33.93 H 3.74 N 6.01 S 3.39 F 35.05c)6-N-[1,4,7-三(羧酸甲基)]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-10-N-(戊酰基-3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基)]-2-N-[1-O-α-D-羰甲基-吡喃半乳糖]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺,Gd-络合物
在略微加热下将50.0g(54.55mmol)实施例35b)的标题化合物、6.28g(54.55mmol)N-羟基琥珀酰亚胺、4.62g(109.0mol)氯化锂和34.35g(54.55mol)1,4,7-三(羧酸甲基)-10-(羧基-3-氮杂-4-氧代-5-甲基-戊-5-基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷,Gd-络合物溶解于400ml二甲基亚砜中。在10℃下添加16.88g(81.8mol)N,N-二环己基碳二亚胺,随后在室温下搅拌过夜。将溶液倾倒在3000ml丙酮中,然后搅拌10分钟。过滤出沉淀的固体,随后通过色谱法纯制(RP-18洗脱剂:由水/乙醇/乙腈组成的梯度)。
产量:37.95g(91.0%理论值)无色固体。
水含量:8.6%元素分析(以无水物计):计算值:C 35.34 H 4.09 N 8.24 S 2.10 F 21.12 Gd 10.28实测值:C 35.22 H 4.17 N 8.18 S 2.19 F 20.91 Gd 10.12
实施例36a)N-三氟乙酰基-1-谷氨酸-单苄基酯
将100g(421.5mmol)L-谷氨酸-单苄基酯溶解在由1000ml三氟乙酸乙酯/500ml乙醇组成的混合物中,然后在室温下搅拌24小时。蒸发至干,然后由异丙基醚中结晶残留物。
产量:140.47g(96%理论值)无色晶体粉末。元素分析:计算值:C 50.46 H 4.23 F 17.10 N 4.20实测值:C 51.35 H 4.18 F 17.03 N 4.28b)2-N-三氟乙酰基-1-谷氨酸-单苄基酯-5-N-(甲基)-N-(2,3,4,5,6-五羟基己基)-酰胺
在0℃下向24.9g(24.08mmol)实施例36a的标题化合物、2xg(24.08mmol)N-甲基葡糖胺和2.77g(24.08mmol)N-羟基琥珀酰亚胺在150ml二甲基甲酰胺中的溶液内添加8.25g(40mmol)N,N-二环己基碳二亚胺。在0℃搅拌3小时,然后在室温下过夜。过滤沉淀出的脲,蒸发滤液至干,然后在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:二氯甲烷/乙醇=20∶1)。
产量:109.40g(89%理论值)粘稠油。元素分析:计算值:C 51.43 H 5.51 F 13.56 N 6.66实测值:C 51.22 H 5.41 F 13.40 N 6.75c)N-三氟乙酰基-1-谷氨酸-N-(甲基)-N-(2,3,4,5,6-五羟基己基)-酰胺
将77.33g(15.15mmol)实施例36b的标题化合物溶解在500ml乙醇中,然后添加3g钯催化剂(10%Pd/C)。在室温下氢化。过滤出催化剂,然后滤液真空蒸发至干。
产量:43.0g(定量)无色固体。元素分析:计算值:C 40.01 H 5.19 F 17.26 N 8.48实测值:C 39.84 H 5.13 F 17.09 N 8.68d)三氟乙酰基-1-谷氨酸-5-N-(甲基)-N-(2,3,4,5,6-五羟基己基)-酰胺-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺哌嗪]-酰胺
在0℃下向10.96g(33.2mmol)实施例36c的标题化合物和18.87g(33.2mmol)1-全氟辛基磺酰基-哌嗪(根据DE 19603033制备)在80ml四氢呋喃中的溶液内添加16.42g(66.4mmol)的EEDQ(2-乙氧基-1,2二氢喹啉-1-甲酸乙酯),然后在室温下搅拌过夜。真空蒸发至干,然后在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:二氯甲烷/甲醇=20∶1)。
产量:28.67g(92%理论值)无色固体。元素分析:计算值:C 39.61 H 2.89 F 35.66 N 6.19 S 3.54实测值:C 39.68 H 2.74 F 35.81 N 6.13 S 3.40e)L-谷氨酸-5-N-(甲基)-N-(2,3,4,5,6-五羟基己基)-酰胺-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
在0℃下向28.36g(30.22mmol)实施例36d的标题化合物在200ml乙醇中的溶液内引入氨气1小时。随后在0℃搅拌4小时。蒸发至干,然后残留物由水中进行吸收沉淀。过滤出固体,然后真空干燥(50℃)。
产量:24.19g(95%理论值)无定形固体。元素分析:计算值:C 41.12 H 2.89 F 35.66 N 6.19 S 3.54实测值:C 41.15 H 2.83 F 35.78 N 6.28 S 3.71f)N-[1,4,7-三(羧酸甲基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-10-(戊酰基-3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基)]-1-谷氨酸-5-N-(甲基)-N-(2,3,4,5,6-五羟基己基)-酰胺-5-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺,Gd-络合物
于略微加热下将20.43g(24.25mmol)实施例36e的标题化合物、2.79g(24.25mmol)N-羟基琥珀酰亚胺、2.12g(50mmol)氯化锂和15.27g(24.25mmol)1,4,7-三(羧酸甲基)-10-[(3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基)]-戊烷酸]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷,Gd-络合物溶解在200ml二甲基亚砜中。在10℃下添加8.25g(40mmol)N,N-二环己基碳二亚胺,随后在室温下搅拌过夜。将溶液倾倒在3000ml丙酮中,然后搅拌10分钟。过滤出沉淀的固体,然后进行色谱纯制(硅胶RP-18,洗脱剂:由水/乙醇/乙腈组成的梯度)。
产量:28.45g(79%理论值)无色固体。
水含量:11.0%元素分析(以无水物计)计算值:C 34.41 H 3.83 F 23.13 N 9.03 S 2.30 Gd 11.26实测值:C 34.34 H 3.98 F 23.29 N 9.19 S 2.15 Gd 11.07
实施例37a)6-N-苄氧基羰基-2-N-[1-O-α-D-羰甲基-(2,3,4-三-O-苄基-葡糖醛酸-苄基酯)-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
在0℃下向100.0g(120.4mol)实施例1c)的标题化合物、73.77g(120.4mol)1-O-α-D-羧甲基-2,3,4-三-O-苄基-葡糖醛酸-苄基酯和13.86g(120.4mol)N-羟基琥珀酰亚胺在500ml二甲基甲酰胺中的溶液内添加41.27g(200.0mmol)N,N-二环己基碳二亚胺。在0℃下搅拌3小时,随后在室温下搅拌过夜。过滤沉淀出的脲,蒸发滤液至干,然后在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:二氯甲烷/乙醇=20∶1)。
产量:147.58g(86%理论值)粘稠油。元素分析:计算值:C 52.25 H 4.31 N 3.93 F 22.66 S 2.45实测值:C 52.38 H 4.17 N 4.12 F 22.78 S 2.39b)2-N-[1-O-α-D-羰甲基-葡糖醛酸]-1-赖氨酸-1-[(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺
将142.52g(100.0mmol)实施例37a)的标题化合物溶解在2000ml乙醇中,然后添加10.0g钯催化剂(10%Pd/C)。在室温下氢化12小时。过滤出催化剂,然后真空蒸发滤液至干。
产量:93.06g(定量)无色固体。元素分析:计算值:C 33.56 H 3.36 N 6.02 S 3.45 F 34.71实测值:C 33.31 H 3.42 N 6.04 S 3.40 F 35.51c)6-N-[1,4,7-三(羧酸甲基)]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-10-N-(戊酰基-3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基)]-2-N-[1-O-α-D-羰甲基-葡糖醛酸]-1-赖氨酸-[1-(4-全氟辛基磺酰基)-哌嗪]-酰胺,Gd-络合物钠盐
在略微加热下将50.76g(54.55mmol)实施例37b)的标题化合物、6.28g(54.55mmol)N-羟基琥珀酰亚胺、4.62g(109.0mol)氯化锂和34.35g(54.55mol)1,4,7-三(羧酸甲基)-10-(羧基-3-氮杂-4-氧代-5-甲基-戊-5-基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷,Gd-络合物溶解于400ml二甲基亚砜中。在10℃下添加16.88g(81.8mol)N,N-二环己基碳二亚胺,随后在室温下搅拌过夜。将溶液倾倒在3000ml丙酮中,然后搅拌10分钟。过滤出沉淀的固体,随后通过色谱法纯制(RP-18洗脱剂:由水/乙醇/乙腈组成的梯度)。
产量:75.14.9g(88.0%理论值)无色固体。
水含量:8.6%元素分析(以无水物计):计算值:C 34.53 H 3.80 N 8.05 Na 1.47 S 2.05 F 20.63 Gd 10.05实测值:C 34.38 H 3.95 N 8.19 Na 1.63 S 2.15 F 20.83 Gd 10.14
实施例38a)6-N-(苄氧基羰基)-2-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-1-赖氨酸
在0℃下向31.82.0g(113.5mmol)6-N-(苄氧基羰基)-1-赖氨酸和66.42g(113.5mmol)2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基乙酸(根据DE 196 03 033制备)在300ml四氢呋喃中的溶液内添加49.46g(200.0mmol)的EEDQ(2-乙氧基-1,2二氢喹啉-1-甲酸乙酯),然后在室温下搅拌过夜。真空蒸发至干,然后在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:二氯甲烷/甲醇=20∶1)。
产量:55.79g(58%理论值)无色固体。元素分析:计算值:C 36.85 H 3.09 N 4.96 F 38.11 S 3.78实测值:C 36.85 H 3.19 N 4.87 F 38.28 S 3.95b)6-N-苄氧基羰基-2-N-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-1-赖氨酸-N-甲基-N-(2,3,4,5,6-五羟基-己基)-酰胺
在0℃下向51.02g(60.2mol)实施例38a)的标题化合物、11.75g(60.2mol)N-甲基-葡糖胺和6.93g(60.2mol)N-羟基琥珀酰亚胺在250ml二甲基甲酰胺中的溶液内添加20.64g(100.0mmol)N,N-二环己基碳二亚胺。在0℃下搅拌3小时,随后在室温下搅拌过夜。过滤沉淀出的脲,蒸发滤液至干,然后在硅胶上进行色谱纯制(洗脱剂:二氯甲烷/乙醇=20∶1)。
产量:53.05g(86%理论值)粘稠油。元素分析:计算值:C 38.68 H 4.03 N 5.47 F 31.52 S 3.13实测值:C 38.49 H 4.17 N 5.32 F 31.70 S 3.29c)2-N-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-1-赖氨酸-N-甲基-N-(2,3,4,5,6-五羟基-己基)-酰胺
将102.48g(100.0mmol)实施例38b)的标题化合物溶解在2000ml乙醇中,然后添加10.0g钯催化剂(10%Pd/C)。在室温下氢化12小时。过滤出催化剂,然后真空蒸发滤液至干。
产量:89.06g(定量)无色固体。元素分析:计算值:C 33.72 H 3.96 N 6.29 S 3.60 F 36.26实测值:C 33.91 H 3.82 N 6.14 S 3.47 F 36.31d)6-N-[1,4,7-三(羧酸甲基)]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-10-N-(戊酰基-3-氮杂-4-氧代-5-甲基-5-基)]-2-N-[2-(N-乙基-N-全氟辛基磺酰基)-氨基]-乙酰基-1-赖氨酸-N-甲基-N-(2,3,4,5,6-五羟基-己基)-酰胺,Gd-络合物
在略微加热下将48.58g(54.55mmol)实施例38c)的标题化合物、6.28g(54.55mmol)N-羟基琥珀酰亚胺、4.62g(109.0mol)氯化锂和34.35g(54.55mol)1,4,7-三(羧酸甲基)-10-(羧基-3-氮杂-4-氧代-5-甲基-戊-5-基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷,Gd-络合物溶解于400ml二甲基亚砜中。在10℃下添加16.88g(81.8mol)N,N-环己基碳二亚胺,随后在室温下搅拌过夜。将溶液倾倒在3000ml丙酮中,然后搅拌10分钟。过滤出沉淀的固体,随后通过色谱法纯制(RP-18洗脱剂:由水/乙醇/乙腈组成的梯度)。
产量:73.27g(89.4%理论值)无色固体。
水含量:8.6%元素分析(以无水物计):计算值:C 35.18 H 4.23 N 4.23 S 2.13 F 21.50 Gd 10.47实测值:C 35.28 H 4.15 N 4.19 S 2.18 F 21.33 Gd 10.61
实施例39在携带前列腺癌的大鼠中静脉给药根据本发明实施例1的造影剂后的器官分布(包括肿瘤和淋巴结浓集)
在向大鼠(在12天之前im植入Cop-inbreeding Dunning R3327MAT-Lu前列腺癌)静脉给药225μmol总钆/kg体重剂量的实施例1标题化合物后,在给药后10分钟、1小时和24小时时测量在各器官、肿瘤和淋巴结(汇集在肠系和周围淋巴结中)中的金属浓度(MW±SD,n=3)。
实施例1的标题化合物
|
Gd浓度[μmol/l] |
总组织的%剂量 |
p.i.10分钟 |
p.i.1小时 |
p.i.24小时 |
p.i.10分钟 |
p.i.1小时 |
p.i.24小时 |
肝脏 |
387±26 |
364±8 |
746±34 |
5.46±0.16 |
5.81±0.16 |
11.65±0.97 |
脾 |
548±22 |
487±25 |
645±27 |
0.39±0.03 |
0.39±0.02 |
0.57±0.03 |
胰 |
229±27 |
199±30 |
130±13 |
0.26±0.05 |
0.21±0.05 |
0.17±0.02 |
肾 |
2081±537 |
883±94 |
1178±139 |
5.02±1 |
2.15±0.23 |
2.97±0.21 |
肺 |
837±32 |
658±29 |
370±34 |
1.69±0.06 |
1.38±0.08 |
0.73±0.04 |
心脏 |
438±29 |
289±24 |
131±9 |
0.46±0.01 |
0.31±0.03 |
0.14±0.02 |
脑 |
47±13 |
26±5 |
14±2 |
0.15±0.03 |
0.08±0.02 |
0.04±0.00 |
肌肉** |
99±5 |
78±1 |
36±1 |
0.11±0.03 |
0.09±0.03 |
0.04±0.00 |
肿瘤 |
185±36 |
184±13 |
199±19 |
0.28±0.10 |
0.21±0.02 |
0.31±0.01 |
股骨 |
184±4 |
127±9 |
87±6 |
0.65±0.01 |
0.46±0.03 |
0.3l±0.03 |
肠系淋巴结 |
359±72 |
697±42 |
854±135 |
0.11±0.04 |
0.24±0.02 |
0.32±0.04 |
周围淋巴结 |
229±15 |
436±44 |
373±24 |
0.10±0.01 |
0.20±0.03 |
0.18±0.01 |
胃(空) |
231±10 |
219±46 |
138±9 |
0.57±0.04 |
0.54±0.12 |
0.37±0.06 |
肠(空) |
342±16 |
409±67 |
243±22 |
2.91±0.18 |
3.41±1.02 |
2.14±0.14 |
血液* |
1665±110 |
825±67 |
214±9 |
42.95±2.59 |
21.47±1.787 |
1.78±0.03 |
身体其余部分**** |
- |
- |
225±3l |
- | - |
30.83±4.05 |
尿0-24小时 |
- |
- |
94±20 |
- |
- |
20.20±4.41 |
粪0-24小时 |
- |
- |
3128±204 |
- |
- |
21.85±1.46 |
* 58ml血液/kg体重
** 仅从后腿得到的组织样品
*** p.i.10分钟和60分钟时器官的总量,不包括其余身体部分
****身体其余部分包括其余血液
实施例40在携带VX2肿瘤的兔子中静脉给药根据本发明实施例1的造影剂后淋巴结显影(MRT)
图1显示了在携带im植入的VX2肿瘤的兔子中髋骨淋巴结造影前以及静脉给药200μmol Gd/kg体重的实施例1标题化合物后最长至24小时的MR图象。T1加权梯度回波图象(T1-weighted gradient-echo image)(1.5 T;顺序:MR范围;TR 11.1毫秒;TE 4.3毫秒;α15°)表明在健康的淋巴结组织中有强烈的信号升高。在淋巴结内没有信号升高的组织诊断为转移,并被组织学证实(淋巴结部分的H/E染色)。但是在给药造影剂后(24小时),足以令人惊奇地观察到相反的信号。在健康淋巴结组织中信号升高被减弱,而转移则表现出相对较高的信号升高。
在给药后足以令人惊奇地观察到原发肿瘤(特别是周边肿瘤)有相当大的增强。之后(p.i.24小时),该增强作用由肿瘤中心扩散至外部。
实施例41在大鼠中静脉给药根据本发明实施例1的造影剂后梗塞显影(MRT)
图2显示了在罹患急性诱发性心肌梗塞的大鼠中静脉给药100μmolGd/kg体重的实施例1标题化合物后24小时的心脏MR图象(体内和死后)。T1加权梯度回波图象(1.5 T;TR:400毫秒;TE:6毫秒;NA:4;基质:128×128;层厚:2.5mm)表明在梗塞区域中有强烈的信号升高。使用NBT染色也证实了急性心肌梗塞的成功显示。