KR20030024855A - 당 잔기를 포함하는 퍼플루오로알킬 함유 착물, 이의 제조방법 및 용도 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 화학식 (I)(여기서, R은 1-OH 또는 1-SH 위치에서 결합된 단당류 또는 올리고당류 잔기이고, Rf는 퍼플루오르화 탄소 사슬이고, K는 금속 착물이고, Y 및 Z는 연결기임)의 당 잔기를 포함하는 퍼플루오로알킬 함유 착물에 관한 것이다. 본 발명의 착물은 정맥내 림프관조영술, 종양 진단, 및 경색 및 괴사 영상용으로 적합하다.

Description

당 잔기를 포함하는 퍼플루오로알킬 함유 착물, 이의 제조 방법 및 용도{Perfluoroalkyl-containing Complexes Comprising Sugar Residues and Method for Producing the Same and Use thereof}
핵 자기 공명에서, 불소 원자는 수소 원자 다음으로 중요한 것이다.
1.불소는 수소의 83％에 해당하는 높은 감도를 갖는다.
2.불소는 NMR-활성인 동위 원소가 한 개만 있다.
3.불소는 수소와 비슷한 공명 진동수를 갖는다--불소와 수소는 같은 시스템에서 측정될 수 있다.
4.불소는 생물학적으로 불활성이다.
5.불소는 생물학적 물질에서는 나타나지 않기때문에 (예외:치아), 배경(background)에 대해 간섭 신호가 없는 탐침이나 조영제로 사용할 수 있다.
불소의 이러한 성질의 영향으로 불소는 핵 자기 공명에 기초한 진단 방법 특허 문헌에서 광범위한 위치를 점한다: 불소-19-영상, 기능적 진단 방법, 분광법.
따라서, 미국 특허 제 4,639,364호(Mallinckrodt)는 하기 트리플루오로메탄술폰아미드를 불소-19-영상을 위한 조영제로 제안한다:
CF3SO2NH2
CF3SO2NH-CH2-(CHOH)4-CH2OH
독일 특허 DE 4203254 (Max-Planck-Gesellschaft)도 또한 불소-19-영상에 관한 것인데, 여기서는 하기 아닐린 유도체를 제안한다:
불소-19-영상은 WO 93/07907 출원(Mallinckrodt)의 주제인데, 여기서는 또한 조영제로 하기 페닐 유도체를 주장하였다:
훨씬 더 간단한 구조의 화합물이 또한 불소-19-영상을 위해 주장되었다. 따라서, 미국 특허 US 4,586,511호(Children's Hospital Medical Center)는 하기 퍼플루오로옥틸브로마이드를 언급한다:
CF3(CF2)7-Br
유럽 특허 EP 307863호(Air Products)는 하기 퍼플루오로-15-크라운-에테르를 언급하고,
미국 특허 US 4,558,279(University of Cincinnati, Children's Hospital Research Foundation)는 퍼플루오로시클로노난 또는 퍼플루오로시클로옥탄과 같은 퍼플루오로카본 화합물, 하기 테트라히드로푸란과 같은 퍼플루오로화된 에테르
또는 하기 퍼플루오로-프로필렌글리콜-디에테르와 같은 디에테르를 언급한다:
WO 94/22368(Molecular Biosystems)에서 언급된 화합물, 예를 들면, 불소 함유 라디칼로 퍼플루오린-1H 또는 1H-네오펜틸기를 갖는 하기 화합물이 또한 불소-19-영상을 위해 사용된다:
미국 특허 US 5,362,478호(VIVORX)는 더 넓은 진단 용도를 갖는 다른 구조를 제시한다. 여기에서는 플루오로카본/중합체 쉘(shell) 조합이 영상 목적으로 주장되었다. 퍼플루오로노난 및 사람 혈청 알부민이 언급되어 있다. 이 조합은 특히 불소 원자를 국소 체온 측정을 위한 탐침 및 산소 분압을 측정하기 위한 탐침으로 사용하는 것이 적당함을 보여 준다.
퍼플루오로카본이 또한 미국 특허 제 4,586,511호에서 산소 측정을 위한 것으로 주장되었다.
독일 특허 DE 4008179(Schering)에서는 하기 불소 함유 벤젠술폰아미드를 pH 탐침으로 주장한다:
NMR 진단용으로, WO 94/05335 및 WO 94/22368(둘 다 Molecular Biosystems)은 요오드 및 불소 원자를 포함하는 화합물을 조영 증강제(contrast-enhancingagents)로 주장한다:
불소-상자성 금속 이온 조합이 또한 불소-19-영상을 위해 주장되었고, 특히 개방 사슬 착물로서는 WO 94/22368(Molecular Biosystems)에서는, 예를 들면
,
및 EP 292 306(TERUMO Kabushiki Kaisha)에서는 예를 들면,
이 주장되었고, 시클릭 화합물로는 EP 628 316(TERUMO Kabushiki Kaisha)에 언급되어 있는 하기의 화합물이 있다:
불소 원자-희토류 금속 조합이 또한 DE 4317588(Schering)에서 NMR 분광 온도 측정을 위한 것으로 주장되었다:
Ln : 희토류 La, Pr, Dy, Eu
불소와 요오드 원자를 포함하는 화합물에서는 두 핵 간의 상호작용이 없지만, 불소와 상자성 중심(라디칼, 금속 이온)을 포함하는 화합물에서는 강한 상호작용이 일어난다. 이것은 불소 핵 완화 시간(relaxation time)의 단축으로 표현된다. 이러한 영향의 정도는 금속 이온의 짝짓지 않은 전자의 수(Gd3+> Mn2+> Fe3+> Cu2+) 및 상자성 이온과19F 원자 사이의 거리에 따라 달라진다.
금속 이온의 짝짓지 않은 전자가 더 많이 존재하고 이들이 불소 원자에 더 가까이 있을수록, 불소 핵 완화 시간은 더 짧아진다.
상자성 이온으로부터의 거리의 함수로서의 완화 시간의 단축은 홀수 스핀수를 갖는 모든 핵에서 자명하고, 따라서 양성자의 경우에도 역시 그러하고, 따라서 가돌리늄 화합물은 핵 스핀 단층 촬영에서 조영제로 널리 쓰인다(마그네비스트(Magnevist)(R), 프로한세(Prohance)(R), 옴니스캔(Omniscan)(R), 도타렘(Dotarem)(R)).
그러나,1H-MR 영상 (1H-MRI)에서는, 양성자의 완화 시간 T1또는 T2, 즉, 불소 핵의 완화 시간이 아니라 주로 물의 양성자의 완화 시간을 측정하고 영상을 위해 이용한다. 완화 시간 단축의 정량적인 측정은 완화도(relaxivity) [L/mmolㆍs]이다. 상자성 이온 착물은 완화 시간을 단축시키는 데 성공적으로 이용된다. 아래의 표에 몇몇 상업 제품의 완화도가 나타나 있다.
이러한 화합물들에서는, 오로지 양성자와 가돌리늄 이온 사이의 상호작용만 발생한다. 물 중에서 이러한 조영제에 대해서는 약 4 [L/mmolㆍs]의 완화도가 관측된다.
그러므로, 불소-19-영상을 위한 불소 함유 화합물(여기에서는 불소 핵의 완화 시간 단축을 사용한다) 및 불소 비함유 화합물(여기에서는 물의 양성자의 완화 시간을 측정한다) 둘 다는 MR 영상을 위해 성공적으로 사용된다.
퍼플루오로카본 함유 라디칼을 상자성 조영제에 도입할 때, 즉 예전에 단지 불소-영상 화합물에만 적합하다고 알려진 성질들을 조합할 때, 물의 양성자에 관계된 완화도는 또한 양성자 영상을 위해 사용된 화합물의 경우에도 급격히 증가(놀랍게도 충분히)한다. 이 값은 현재 상기 표의 몇몇 상업 제품에서 이미 인용되었던값 3.5 내지 3.8 [L/mmolㆍs]과 대조적으로 10 - 50 [L/mmolㆍs]에 이른다.
퍼플루오로알킬 함유 금속 착물은 DE 196 03 033.1에 공지되어 있다. 그러나, 이들 화합물은 모든 용도에 만족스럽게 사용될 수 없다. 따라서, 악성 종양, 림프절 및 괴사 조직의 가시화용 조영제에 대한 요구가 여전히 존재한다.
악성 종양은 국부 림프절에서 집단으로 전이하고, 이에 의해 복수의 림프절 부위가 또한 관련될 수 있다. 따라서, 림프절 전이는 악성 종양을 가지고 있는 전체 환자의 약 50 내지 69 ％에서 발견된다(엘케, 림프관 조영법, 프롬홀트, 스텐데르, 투른(편집자), Radiologische Diagnostik in Klinik und Praxis [의학 연구 및 실행에 있어서의 방사선 진단 방법], 볼륨 IV, Thieme Verlag Stuttgart, 7th Edition, 434-496, 1984). 림프절의 전이 발생의 진단은 악성 종양의 치료 및 예상에 있어 매우 중요하다. 현대의 영상 방법으로는(CT, US 및 MRI), 대부분의 경우에 림프절의 크기만 진단 영역으로 사용될 수 있기 때문에, 악성 종양의 림프성 전이 부위의 발견은 부정확하다. 따라서, 크지 않은 림프절(< 2 cm)에서의 작은 전이는 악성 종양이 발병하지 않은 림프절 과형성과 구별할 수 없다(스타인캄프 등, Sonographie und Kernspintomographie: Differential Diagnostik von reaktiver Lymphknoten-vergroβerung und Lymphknotenmetastasen am Hals[소노그래피 및 핵 스핀 단층 촬영법: 목 상의 반응성 림프절 확장 및 림프절 전이에 대한 시차 진단], Radiol. Diagn. 33 : 158, 1992).
특별한 조영제를 사용하여 전이 발생한 림프절과 림프절 과형성을 구별할 수 있으면 좋을 것이다.
직접 X-선 림프관 조영법(오일성 조영제 현탁액을 준비한 림프관에 주입하는 방법)은 침습법으로 알려져 있는데, 이 방법은 자주 쓰이지 않고, 단지 작은 림프 분비 부위(small lymphatic drainage stations)만 가시화할 수 있다.
형광 표지화한 덱스트란은 동물 실험에서 덱스트란을 간질 투여한 후 림프 분비를 관찰할 수 있게 하기 위해 실험적으로 사용된다. 간질/피내 투여 후 림프로(lymph tract) 및 림프절 가시화를 위해 통상적으로 쓰이는 모든 마커는 이들이 모두 입자 속성(예를 들면, 에멀젼 및 미소결정 현탁액과 같은 "입자")을 가진 물질 또는 거대 중합체(상기 WO 90/14846 참조)라는 공통점을 갖는다. 그러나, 작은 림프 경로(이것은 부적절한 진단 효율을 야기함)와 부적절한 국소 및 전신 적합성때문에 앞에서 기술한 제제들은 간접 림프관 조영법에는 여전히 최적이지는 않음이 증명되었다.
림프절의 가시화는 암 환자에 있어서 전이 발병을 초기에 감지하는데 매우 중요하기 때문에, 상응하는 림프계의 변화를 진단하기 위한 림프 특이성 조영제에 대한 필요성이 매우 크다.
가능성 있는 가장 높은 조영제의 농도 및 안정성은, 몇몇 림프 부위에 대해 진단에 적절하면서 가능한 가장 균일한 림프 농도만큼 바람직하다. 조영제의 신속하고 완전한 배설에 의해 전 유기체에 주는 부담이 낮아야 한다. 가능하면 조영제의 투여 후 몇 시간 이내 정도로 빨리 신속한 효력 개시가 방사선 진료에 있어서 중요하다. 우수한 적합성이 필요하다.
주로 상기 이유로, 진단 영역에서 원발 종양 및 가능한 림프절 전이를 모두가시화할 수 있는 이용가능한 림프-특이적 조영제를 갖는 것이 요망된다.
의약의 다른 중요한 분야는 괴사 또는 경색의 검출, 위치 측정 및 모니터링이다. 심근 경색은 정지된 과정이 아니고, 장기간 (수주 내지 수개월)에 걸친 활동적 과정이다. 상기 질환은 약 3상에 이르고, 이는 서로 완전히 분리되지 않고, 대신 겹쳐진다. 제1상인 심근 경색의 발생은 경색 후 24 시간을 포함하며, 여기서 심내막하로부터 심근으로의 파괴는 쇼크파 (현상 이전의 파)와 같이 진행된다. 제2상인 기존의 경색은 섬유 형성 (섬유화)가 치유 과정으로 발생하는 부분의 안정화를 포함한다. 제3상인 치유된 경색은 모든 파괴된 조직이 섬유상 상흔 조직으로 대체된 후 시작된다. 이 기간 동안, 광범위한 재구성이 일어난다.
현재까지, 생존 환자에서 심근 경색의 현재 상태를 진단할 수 있도록 하는 정확하고 신뢰할만한 방법은 알려지지 않았다. 심근 경색을 평가하기 위하여, 치료 유형이 이들 지식에 의존하므로, 얼마나 많은 부분의 조직이 경색시 손실되는지 및 어떤 부분에서 손실이 발생하는지를 아는 것이 결정적으로 중요하다.
경색은 심근 뿐만 아니라 다른 조직, 특히 뇌에서 발생한다.
심근이 일정 범위까지 치유될 수 있는 반면, 국소적으로 한정된 조직의 죽음인 괴사에서는, 단지 나머지 유기체에 의한 해로운 결과만이 예방 또는 적어도 감소될 수 있을 뿐이다. 괴사는 외상, 화학물질, 산소 결핍 또는 방사선에 의해 여러 방법으로 발생한다. 경색에서와 같이, 괴사의 범위 및 유형에 대한 지식은 추가 의학적 처치에 중요하다.
신티그램촬영 또는 핵 스핀 단층촬영과 같은 비침습적 과정에서 조영제를 사용하여 경색 및 괴사의 위치측정을 개선하는 시험은 따라서 이미 이전에 수행되었다. 문헌은 모두 괴사 영상용으로 포르포린을 사용하는 시도를 보고하고 있다. 그러나, 얻은 결과는 모순된 것이었다. 따라서, 윈켈만(Winkelman) 및 호이스(Hoyes)는 문헌[Nature, 200, 903 (1967)]에서 망간-5,10,15,20-테트라키스(4-술포나토페닐)-포르포린(TPPS)는 종양의 괴사된 부분에서 선택적으로 축적됨을 기술하였다.
그러나, 라이온(Lyon) 등은 망간-TPPS가 인체, 특히 신장, 간, 종양 및 단지 적은 부분의 근육에 분산됨을 관찰하였다 [Magn. Res. Med. 4, 24 (1987)]. 이 경우, 종양에서의 농도가 제4일째에만 최대치에 도달하는 것이 유리하고, 저자들은 용량을 0.12 mmol/kg에서 0.2 mmol/kg로만 증가시켰다. 따라서, 상기 저자들은 또한 종양에서의 TPPS의 비특이적 유입을 이야기하였다. 그 후, 복후르스트(Bockhurst) 등은 MnTPPS가 종양 세포에 선택적으로 결합함을 보고하였다 [Acta Neurochir 60, 347 (1994, Suppl.)].
포스터(Foster) 등은111In-5,10,15,20-테트라키스-(4-N-메틸-피리디늄)-포르피린(TMPyP)가 괴사 부분에 축적되지 않으며, 생존 말단층에 축적됨을 발견하였다 [J. Nucl. Med. 26, 756 (1985)]. 상기로부터 포르피린-조직 상호작용이 존재하고, 명백하나 필요치는 않다는 것이 수반되었다.
문헌[Circulation Vol. 90, No. 4, part 2, page 1468, Abstract No. 2512 (1994)]에서, 니(Ni) 등은 망간-테트라페닐-포르피린(Mn-TPP) 및 가돌리늄-메소포르피린(Gd-MP)으로 경색 부분을 가시화할 수 있음을 보고하였다. 국제 특허 출원 WO 95/31219에서, 이들 두 물질은 경색 및 괴사 영상에서 사용되었다. 저자인 마르칼(Marchal) 및 니(Ni)는 화합물 Gd-MP에 대하여 경색-신장의 금속 함량이 비경색 기관과 유사하게 높으나(실시예 3 참조), 경색된 조직의 경우 심근에 대하여 9배 더 높음을 기술하였다(실시예 1). 경색 환자에 대한 MRI에서 신호 강도의 비가 두 경우 2.10 또는 2.19로 건강한 조직과 비교하여 상대적으로 높았다는 것은 놀라운 것이었다. 다른 메탈로포르피린은 DE 19835082(Schering AG)에 기술되어 있다.
포르피린은 피부에 저장되는 경향이 있고, 이는 광감작을 일으킨다. 감작은 수일, 나아가 수주간 지속될 수 있다. 이는 진단제로 포르피린을 사용하는 것의 바람직하지 않은 부작용이다. 또한, 예를 들면 Mn-TPPS에 대하여 작용은 0.2 mmol/kg의 용량에서 사용되나, LD50은 약 0.5 mmol/kg이므로, 포르피린에 대한 치료 인덱스는 매우 적다.
포르피린 골격에서 유래되지 않은 괴사 및 경색 영상에 대한 조영제는 DE 19744003(Schering AG), DE 19744004(Schering AG) 및 WO 99/17809(EPIX)에 기술되어 있다. 그러나, 현재까지 경색 및 괴사 영상에 조영제로 만족스럽게 사용될 수 있는 화합물은 여전히 없다.
따라서, 본 발명의 목적은 특히 MRT-림프관조영술 뿐만 아니라 종양 진단 및 괴사 및 경색 영상에 사용될 수 있는 이용가능한 조영제를 제공하는 것이다.
본 발명은 청구항에 특징지워진 바와 같은 주제, 즉 화학식 I의 당 라디칼과의 퍼플루오로알킬 함유 금속 착물, 이의 제조 방법, 및 NMR 진단 및 x-선 진단, MRT-임프관조영술에서 방사선 진단 및 방사선 요법 및 혈액-풀(blood-pool)제로서의 용도에 관한 것이다. 본 발명에 따른 화합물은 특히 종양 진단 및 경색 및 괴사 영상용 정맥내 임프관조영술에 아주 특히 적당하다.
본 발명의 목적은 하기 화학식 Ⅰ의 당 라디칼과의 퍼플루오로알킬 함유 착물에 의해 달성된다.
상기 식에서,
R은 1-OH 또는 1-SH 위치를 거쳐 결합되는 단당류 또는 올리고당류 라디칼이고,
Rf는 화학식 -CnF2nE(여기서, E는 말단 불소, 염소, 브롬, 요오드 또는 수소 원자를 나타내고, n은 4 내지 30의 수를 나타냄)의 퍼플루오르화된 직쇄 또는 분지쇄 탄소 사슬이고,
K는 하기 화학식 II의 금속 착물, 또는
(상기 식에서,
R1은 수소 원자 또는 원자 번호 21-29, 31-33, 37-39, 42-44, 49 또는 57-83의 금속 이온 등가물이고, 단, 2 이상의 R1은 금속 이온 등가물이며,
R2및 R3는 서로 독립적으로 수소, C1-C7알킬, 벤질, 페닐, -CH2OH 또는 -CH2OCH3이고,
U는 -C6H4-O-CH2-ω-, -(CH2)1-5-ω, 페닐렌기, -CH2-NHCO-CH2-CH(CH2COOH)-C6H4-ω-, C6H4-(OCH2CH2)0-1-N(CH2COOH)-CH2-ω, C1-C12-알킬렌기 또는 C7-C12-C6H4-O기이고, 이는 1 이상의 산소 원자, 1 내지 3개의 -NHCO기 또는 1 내지 3개의 -CONH기에 의해 임의로 단속되고(단속되거나) 1 내지 3개의 -(CH2)0-5COOH기로 치환되고, 여기서 ω는 -CO-에 대한 결합 부위를 나타냄)
하기 화학식 III의 금속 착물, 또는
(상기 식에서, R1은 상기 언급한 의미를 가지고, R4는 수소 또는 상기 R1에서 언급한 금속 이온 등가물을 나타내고, U1은 -C6H4-O-CH2-ω-(여기서, ω는 -CO-에 대한 결합 부위를 나타냄)임)
하기 화학식 IV의 금속 착물, 또는
(상기 식에서, R1및 R2는 상기 언급한 의미를 가짐)
하기 화학식 VA 또는 VB의 금속 착물, 또는
(상기 식들에서, R1은 상기 언급한 의미를 가짐)
하기 화학식 VI의 금속 착물, 또는
(상기 식에서, R1은 상기 언급한 의미를 가짐)
하기 화학식 VII의 금속 착물, 또는
(상기 식에서, R1은 상기 언급한 의미를 가지고, U1은 -C6H4-O-CH2-ω-(여기서, ω은 -CO-에 대한 결합 부위임)임)
하기 화학식 VIII의 금속 착물이고,
(여기서, R1은 상기 언급한 의미를 가짐)
라디칼 K에서, 임의로 존재하는 유기산기는 유기 및(또는) 무기 염기 또는 아미노산 또는 아미노산 아미드의 염으로 존재할 수 있고,
G는, K가 금속 착물 II 내지 VII을 의미하는 경우, 3 부분 이상에서 관능화되고, 하기 라디칼 a) 내지 j)로부터 선택되는 라디칼이고,
G는, K가 금속 착물 VIII을 의미하는 경우, 3 부분 이상에서 관능화되고, 하기 k) 또는 l)로부터 선택되는 라디칼이고,
(여기서, α는 착물 K에 대한 G의 결합 부위이고, β는 라디칼 Y에 대한 G의 결합 부위이고, γ는 라디칼 Z에 대한 G의 결합 부위임)
Y는 -CH2-, δ-(CH2)nCO-β(여기서, n = 1-5), δ-CH2-CHOH-CO-β또는 δ-CH(CHOH-CH2OH)-CHOH-CHOH-CO-β(여기서, δ는 당 라디칼 R에 대한 결합 부위이고, β는 라디칼 G에 대한 결합 부위임)이고,
Z는
(여기서, γ는 라디칼 G에 대한 Z의 결합 부위이고, ξ는 퍼플루오르화 라디칼 Rf에 대한 Z의 결합 부위임)이고,
l, m은 서로 독립적으로 1 또는 2의 정수를 의미하고,
p는 1 내지 4의 정수를 의미한다.
본 발명에 따른 화합물을 NMR 진단용으로 사용하는 것을 의도하는 경우, 신호 전달기의 금속 이온은 상자성이어야 한다. 이는 특히 원자 번호 21-29, 42, 44 및 58-70의 원소의 2가 및 3가 이온이다. 적합한 이온은 예를 들면, 크로뮴(III) 이온, 철(II) 이온, 코발트(II) 이온, 니켈(II) 이온, 구리(II) 이온, 프라세오디뮴(III) 이온, 네오디뮴(III) 이온, 사마륨(III) 이온 및 이테븀(III) 이온이 있다. 이들의 강한 자성 모멘트로 인하여, 가돌리늄(III), 테르븀(III), 디스프로슘(III), 홀뮴(III), 에르븀(III), 철(III) 및 망간(II) 이온이 특히 바람직하다.
본 발명에 따른 화합물의 핵 의약 (방사선 진단 및 방사선 요법)에서의 용도를 위하여, 금속 이온은 방사성이어야 한다. 예를 들면, 원자 번호 27, 29, 31-33, 37-39, 43, 49, 62, 64, 70, 75 및 77의 원소의 방사성 동위원소가 적당하다. 테크네튬, 갈륨, 인듐, 레늄 및 이트륨이 바람직하다.
본 발명에 따른 화합물이 x-선 진단용으로 의도되는 경우, 금속 이온은 바람직하게는 x-선의 적합한 흡수를 달성하기 위하여 더 높은 원자 번호의 원소로부터 유래한다. 원자 번호 25, 26 및 39 뿐만 아니라 57-83의 원소의 금속 이온과의 생리적으로 적합한 착물염을 포함하는 진단제가 상기 목적에 적당한 것을 발견하였다.
망간(II), 철(II), 프라세오디뮴(III), 네오디뮴(III), 사마륨(III), 가돌리늄(III), 이테븀(III) 또는 비스무스(III) 이온, 특히 디스프로슘(III) 이온 및 이트륨(III) 이온이 바람직하다.
R1이 임의로 존재하는 산성 수소 원자, 즉 중심 이온에 의해 치환되지 않은 것은 무기 및(또는) 유기 염기 또는 아미노산 또는 아미노산 아미드의 양이온에 의해 부분적으로 또는 완전히 임의로 대체될 수 있다.
적당한 무기 양이온은 예를 들면, 리튬 이온, 칼륨 이온, 칼슘 이온, 특히 나트륨 이온이다. 유기 염기의 적당한 양이온은 에를 들면, 에탄올아민, 디에탄올아민, 모르폴린, 글루카민, N,N-디메틸글루카민, 특히 N-메틸글루카민과 같은 1급, 2급 또는 3급 아민의 것이다. 아미노산의 적당한 양이온은 예를 들면, 리신, 아르기닌 및 오르니틴 뿐만 아니라 다른 산성 또는 중성 아미노산의 아미드이다.
특히 바람직한 화학식 I의 화합물은 화학식 II의 마크로시클릭 화합물 K를 갖는 것이다.
금속 착물 K 중의 라디칼 U는 바람직하게는 -CH2- 또는C6H4-O-CH2-ω(여기서, ω는 -CO-에 대한 결합 부위를 나타냄)를 의미한다.
화학식 II의 마크로시클릭 화합물의 알킬기 R2및 R3는 직쇄 또는 분지쇄일 수 있다. 예를 들면, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, n-부틸, 1-메틸-프로필,2-메틸프로필, n-펜틸, 1-메틸부틸, 2-메틸부틸, 3-메틸부틸 및 1,2-디메틸프로필을 들 수 있다. R2및 R3은 서로 독립적으로 바람직하게는 수소 또는 C1-C4-알킬이다.
더욱 특히 바람직한 실시태양에서, R2는 메틸이고, R3는 수소이다.
화학식 II의 마크로시클릭 화합물 K 중의 벤질기 또는 페닐기 R2및 R3는 또한 고리 중에 치환될 수 있다.
화학식 I에서 라디칼 R은 1-OH 또는 1-SH 위치에서 결합된 단당류 또는 올리고 당류 라디칼 또는 티오 당 라디칼이고, 본 발명에 따르면, 이것은 또한 하나 이상의 OH기 대신에 H 원자를 함유하는 데옥시 당일 수 있다. 본 발명의 바람직한 실시태양에서, R은 C 원자가 5 또는 6 개인 단당류 라디칼을 의마하고, 바람직하게는 글루코스, 만노스, 갈락토스, 리보스, 아라비노스 또는 크실로스, 또는 데옥시 당, 예를 들면, 6-데옥시갈락토스(프럭토스) 또는 6-데옥시만노스(람노스), 또는 그들의 티오 당이고, 글루코스, 만노스 및 갈락토스가 특히 바람직하다.
본 발명에 따른 화학식 I 화합물 중에서, Rf가 -CnF2n+1인 화합물이 바람직하다. n이 4 내지 15인 것이 바람직하다. 라디칼 -C4F9, -C6F13, -C8F17, -C12F25및 -C14F29, 및 실시예에 언급된 화합물들의 라디칼이 특히 바람직하다.
"골격"을 나타내는 화학식 I의 3 개 이상의 위치에서 관능기화된 라디칼 G는 본 발명의 바람직한 실시태양에서 리신 라디칼 (a) 또는 (b)를 의미한다.
Y 및 Z는 화학식 I에 지시된 결합기를 의미하고, 독립적으로, Z가 라디칼인 것이 바람직하고, Y가 라디칼 δ-CH2CO-β인 것이 바람직하다.
K가 화학식 II 내지 VII의 금속 착물이고, G가 화학식 a) 내지 j)인 화학식 I(Y, Z, R, Rf, m, p 및 l은 상기 언급된 의미를 가짐)의 당 라디칼과의 퍼플루오로알킬 함유 금속 착물은 화학식 IIa의 카르복실산, 화학식 IIIa의 카르복실산, 화학식 IVa의 카르복실산, 화학식 Va 또는 Vb의 카르복실산, 화학식 VIa의 카르복실산 또는 화학식 VIIa의 카르복실산을 임의로 활성화된 형태로 화학식 IX의 아민과 커플링 반응시키고, 임의로 존재하는 보호기를 후속적으로 임의로 제거하여 화학식 I의 금속 착물을 형성하거나, 또는 R5가 보호기인 경우, 후속 단계에서 공지의 방법으로 보호기를 절단한 후, 원자 번호 21-29, 31-33, 37-39, 42-44, 49 또는 57-83인 원자의 1 이상의 금속 산화물 또는 금속 염과 반응시킨 다음, 필요한 경우, 임의로 존재하는 산성 수소 원자를 무기 및(또는) 유기 염기의 양이온, 아미노산 또는 아미노산 아미드로 치환함으로써 공지의 방법으로 제조된다.
(상기 식 중에서, R5는 원자 번호 21-29, 31-33, 37-39, 42-44, 49 또는 57-83인 금속 이온 등가물 또는 카르복실 보호기이고, R2, R3및 U는 상기 언급된 의미를 가짐)
(상기 식 중에서, R4, R5및 U1은 상기 언급된 의미를 가짐)
(상기 식 중에서, R5및 R2는 상기 언급된 의미를 가짐)
(상기 식 중에서, R5는 상기 언급된 의미를 가짐)
(상기 식 중에서, R5는 상기 언급된 의미를 가짐)
(상기 식 중에서, R5는 상기 언급된 의미를 가짐)
(상기 식 중에서, R5및 U1은 상기 언급된 의미를 가짐)
(상기 식 중에서, G는 화학식 a) 내지 j)를 의미하고, R, Rf, Y, Z, m 및 p는 상기 언급된 의미를 가짐)
<화학식 I>
K가 화학식 VIII의 금속 착물이고, G가 화학식 k) 또는 l)인 본 발명에 따른 화학식 I 화합물은 화학식 VIIIa의 아민을 화학식 X의 임의로 활성화된 카르복실산과 커플링 반응시키고, 임의로 존재하는 보호기를 후속적으로 임의로 제거하여 화학식 I의 금속 착물을 형성하거나, 또는 R5가 보호기인 경우, 후속 단계에서 공지의 방법으로 보호기를 절단한 후, 원자 번호 21-29, 31-33, 37-39, 42-44, 49 또는 57-83인 원자의 1 이상의 금속 산화물 또는 금속 염과 반응시킨 다음, 필요한 경우, 임의로 존재하는 산성 수소 원자를 무기 및(또는) 유기 염기의 양이온, 아미노산 또는 아미노산 아미드로 치환함으로써 공지의 방법으로 제조된다.
(상기 식 중에서, R5는 원자 번호 21-29, 31-33, 37-39, 42-44, 49 또는 57-83인 금속 이온 등가물 또는 카르복실 보호기임)
(상기 식 중에서, G는 화학식 k) 또는 l)이고, R, Rf, Y, Z, m 및 p는 상기 언급된 의미를 가짐)
사용된 화학식 IIa 내지 VIIa의 카르복실산은 공지의 화합물이거나, 또는 실시예에 기술된 방법에 따라 제조된다. 따라서, 화학식 IIa의 카르복실산의 제조가 DE 196 52 386으로부터 공지되어 있다. 화학식 IIIa의 카르복실산은 본 특허 출원의 실시예 3과 유사하게 제조될 수 있다. 화학식 IVa의 카르복실산의 제조는 DE 196 28 954로부터 도출될 수 있다.
화학식 Va 화합물의 전구체는 N3-(2,6-디옥소모르폴리노에틸)-N6-(에톡시카르보닐메틸)-3,6-디아자-옥탄디온산이고, EP 263 059에 기재되어 있다.
화학식 Vb 화합물은 중심 N 원자 상에 존재하는 아세트산을 통해 결합하는 이성질체 디에틸렌트리아민-펜타아세트산(DTPA)으로부터 도출될 수 있다. 이 DTPA가 특허 DE 195 07 819 및 DE 195 08 058에 기재되어 있다.
화학식 VI 화합물은 그 제조 방법이 문헌[J. Am. Oil. Chem. Soc. (1982), 59(2), 104-107]에 기재된 N-(카르복시메틸)-N-[2-(2,6-디옥소-4-모르폴리닐)-에틸]-글리신으로부터 도출될 수 있다.
화학식 VII 화합물은 그 제조 방법이 미국 특허 제4,622,420호에 기재된 1-(4-카르복시메톡시벤질)-에틸렌디아민-테트라아세트산으로부터 도출될 수 있다.
화학식 IX의 아민 및 화학식 X의 카르복실산의 제조가 본 특허 출원의 실시예에 상세하게 기재되어 있으며, 실시예에 기재된 방법과 유사하게 달성될 수 있다. 화학식 VIIIa의 아민은 공지의 출발 화합물이다.
출발 물질로 사용된 퍼벤질화 당 산은 문헌[Lockhoff, Angew. Chem. [Applied Chem.] 1998, 110, No. 24, p. 3634 ff]과 유사하게 제조될 수 있다. 따라서, 예를 들면, 퍼벤질-글루코스의 1-O-아세트산은 THF 중 BF3-촉매 작용 하의 트리클로로아세트아미데이트 및 히드록시아세트산 에틸 에스테르와의 반응 및 후속적으로 MeOH/THF 중 NaOH를 사용한 비누화를 거쳐, 2 단계로 제조된다.
더 유리한 방법에서, 출발 물질로 사용된 퍼벤질화 당 산은 퍼벤질화 1-OH-당을 수불용성 유기 용매에 용해시키고, 염기 및 임의로 상 전이 촉매의 존재 하에서 화학식 XI의 알킬화제와 반응시킴으로써 제조될 수도 있다. -Cl, -Br, -I, OTs, -OMs, -OSO2CF3, -OSO2C4F9or -OSO2C8F17과 같은 뉴클레오퓨지(nucleofuge)는 화학식 XI의 알킬화제에 함유될 수 있다.
Nu-L-COO-Sg
(상기 식 중에서, Nu는 뉴클레오퓨지이고, L은 -(CH2)-n(여기서, n = 1-5), -CH2-CHOH-, -CH(CHOH-CH2OH)-CHOH-CHOH-이고, Sg는 보호기임)
보호기는 관습적인 산 보호기이다. 이들 보호기는 당업자에게 잘 알려져 있다(Protective Groups in Organic Syntheses, Second Edition, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, John Wiley & Sons Inc., New York 1991).
본 발명에 따른 반응은 0 내지 50 ℃의 온도에서 수행될 수 있고, 0 내지 실온이 바람직하다. 반응 시간은 10분 내지 24 시간이고, 20분 내지 12 시간이 바람직하다.
염기는 고체 형태, 바람직하게는 미분말 형태로 첨가되거나, 또는 10 내지 70%, 바람직하게는 30 내지 50% 수용액으로 첨가된다. NaOH 및 KOH가 바람직한 염기로서 사용된다.
톨루엔, 벤젠, CF3-벤젠, 헥산, 시클로헥산, 디에틸 에테르, 테트라히드로푸란, 디클로로메탄, MTB 또는 이들의 혼합물과 같은 수불용성 유기 용매가 본 발명에 따른 알킬화 과정에 사용될 수 있다.
4차 암모늄염, 포스포늄염 또는 그 밖의 크라운 에테르, 예를 들면, 이러한 목적으로 공지된 [15]-크라운-5 또는 [18]-크라운-6이 상 전이 촉매로서 본 발명에 따른 방법에 사용된다. 바람직하게는, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸 또는 이소부틸로부터 선택된 동일하거나 상이한 탄화수소기를 양이온에 함유한 4차 암모늄염이 적합하다. 양이온의 탄화수소기는 유기 용매 중 알킬화제의 우수한 용해도를 보장할 정도로 커야한다. 본 발명에 따르면, N(부틸)4 +-Cl-, N(부틸)4 +-HSO4 -및 N(메틸)4 +-Cl-를 사용하는 것이 특히 바람직하다.
본 발명에 따른 금속 착물이 NMR 진단 및 X-선 진단 뿐만 아니라 방사선 진단 및 방사선 요법에 특히 적합하다는 것이 밝혀졌다. 따라서, 본 발명의 주제는 본 발명에 따른 퍼플루오로알킬 함유 금속의 당 라디칼과의 착물의, NMR 진단 및 X-선 진단, 특히, 림프관조영술, 종양 진단, 경색 및 괴사 영상용 X-선 진단, 및 방사선 진단 및 방사선 요법에 사용하기 위한 조영제 제조를 위한 용도이기도 하다. 본 발명에 따른 화합물은 간질 림프관조영술, 특히 정맥내 림프관조영술용으로 매우 적합하다. 게다가, 이들은 혈관강의 가시화에 사용될 수도 있다(혈액-풀(blood-pool)제).
본 발명의 주제는 1 이상의 생리학적으로 상용성인 본 발명에 따른 화합물, 및 임의로 생약에 일반적으로 사용되는 첨가제를 함유하는 제제이다.
본 발명의 화합물은 매우 우수한 전신 상용성 및 3 개의 연속적인 림프절 부위에 있어서 높은 림프절 농도(특히 정맥내 림프관조영술에 있어서 중요함)에 의해 구별된다. 따라서, 이들은 MRT 림프관조영술용으로 특히 적합하다.
또한, 본 발명에 따른 화합물은 혈관내 강에 투여시 혈관내 강에 배타적으로 분산되므로, 혈관 질환을 검출하고 국부화하는데 특히 적합하다. 본 발명에 따른 화합물은 핵 스핀 단층촬영술의 보조로, 혈액 공급이 원활한 조직과 혈액 공급이 불량한 조직을 구별 가능하게 하고, 이에 따라 허혈의 진단을 가능하게 한다. 본 발명에 따른 조영제의 사용시, 경색된 조직은 빈혈로 인해 주위의 건강하거나 허혈성 조직과 구별될 수 있다. 이것은, 예를 들어 심근 경색과 허혈을 구별하는데 특히 중요하다.
혈액-풀 약제로서 이전에 사용된 거대분자 화합물, 예를 들면, Gd-DTPA-폴리리신과 비교하여, 본 발명에 따른 화합물은 더 높은 T1-이완(relaxivity)을 나타내며, 따라서, NMR 영상에서 신호 강도가 증가하는 특징을 갖는다. 게다가, 이들은 혈액강에서 연장된 체류를 나타내므로, 상대적으로 소량(예, 체중 L 당 50 μmol 이하의 Gd)으로 투여될 수도 있다. 본 발명에 따른 화합물은 체내로부터 우선 신속하게 제거되며, 가능한한 완전히 제거된다.
또한, 본 발명에 따른 화합물은 혈관 투과성이 증진된 영역, 예를 들면, 종양에 축적된다는 것이 밝혀졌다. 이로 인해, 조직의 관류에 대해 진술하고, 조직 내의 혈액 부피를 결정할 수 있는 가능성을 제시하며, 혈액의 이완 시간 또는 밀도를 선택적으로 단축시키고, 혈관의 투과성을 도표로 가시화하는 것이 가능해진다. 세포외 조영제, 예를 들면, Gd-DTPA (마그네비스트(Magnevist), 등록상표)를 사용해서는 이러한 생리학적 데이타를 얻을 수 없다. 이들을 고려해 볼 때, 본 발명에 따른 화합물은 현대 영상 처리, 핵 스핀 단층촬영술 및 컴퓨터 단층촬영술, 악성 종양의 구체적 진단, 세포분열 억제, 소염 또는 혈관이완 요법에서 초기 요법 컨트롤, 저관류 영역(예, 심근에서)의 초기 검출, 혈관 질환에서 혈관 조영술, 및 멸균 또는 감염성 염증의 검출 및 진단에도 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 제약 제제의 제조는 당업자에게 알려진 방법으로 본 발명에 따른 착화합물을 (임의로 생약에 통상적으로 쓰이는 첨가제를 첨가하여) 수성 매질에 현탁시키거나 용해시킨 후 이 현탁액 또는 용액을 임의로 살균하여 제조한다.적합한 첨가제는 예를 들면, 생리학적으로 무해한 완충액(예를 들면, 트로메타민 등), 착화제 또는 약한 착물 첨가제(예를 들면, 디에틸렌트리아민펜타아세트산 또는 본 발명에 따른 금속 착물에 대응하는 Ca-착물 등), 또는 필요하다면 전해질(예를 들면, 소듐 클로라이드 등), 또는 필요하다면 산화 방지제(예를 들면, 아스코르빈산 등)이다.
장 또는 비경구 투여를 위해 또는 다른 목적을 위해 물 또는 생리 염산 용액 중의 본 발명 제제의 현탁액 또는 용액이 필요하면, 이들은 생약에 통상적으로 쓰이는 1종 이상의 보조제들(예를 들면, 메틸 셀룰로스, 락토스, 만니톨) 및(또는) 계면 활성제들(예를 들면, 레시틴, 트윈(R), Myrj(R)) 및(또는) 맛 교정을 위한 향미제들(예를 들면, 에테르 오일)와 혼합할 수 있다.
기본적으로, 착물을 단리시키지 않고 본 발명에 따른 제약 제제를 제조하는 것이 가능하다. 어떤 경우든, 킬레이트화하는데 특별한 주의를 기울여 본 발명에 따른 착물에 독성이 있는 착화되지 않은 금속 이온이 없도록 해야 한다.
이것은 예를 들면, 크실렌올 오렌지와 같은 색 지시약으로 제조 과정 동안 적정을 조절하여 보증할 수 있다. 따라서 본 발명은 또한 착화합물 및 이들의 염을 제조하는 방법에 관한 것이다. 마지막으로, 단리된 착물의 정제가 남았다.
본 발명에 따른 제제를 생체 내에 투여할 때, 제제는 적절한 비히클(예를 들면, 혈청, 생리 식염 용액 등) 및 다른 단백질(예를 들면, 사람 혈청 알부민(HSA) 등)과 함께 투여할 수 있다.
본 발명에 따른 제제는 일반적으로 비경구적으로, 바람직하게는 정맥내로 투여할 수 있다. 이들은 또한 신체 혈관을 연구할 것인가 또는 신체 조직을 연구할 것인가에 따라 혈관내 투여 또는 간질/피내 투여를 할 수 있다.
본 발명에 따른 제약 제제는 0.1 μmol 내지 1 mol/l의 착물을 포함하고, 일반적으로 0.0001 내지 5 mmol/kg의 양으로 복용한다.
본 발명에 따른 약제는 핵 스핀 단층촬영술용 조영제로서의 적합성에 대한 다수의 요건을 만족한다. 따라서, 경구 또는 비경구 투여 후, 이들은 신호 강도를 증가시킴으로써 핵 스핀 단층촬영술로 얻어진 영상의 정보적 가치를 증진시키는데 매우 적합하다. 또한, 이들은 체내에 가능한 최소량의 외부 물질을 부담시키는데 필요한 높은 효율성, 및 연구의 비침습적 성격을 유지하는데 필요한 우수한 상용성을 나타낸다.
본 발명에 따른 약제의 우수한 수용성 및 낮은 오스몰 농도로 인해 고농축 용액을 제조하는 것이 가능하게 되어, 순환계의 용량 부하를 합리적인 범위 내에서 유지하고, 체액에 의한 희석을 상쇄시킬 수 있게 되었다. 게다가, 본 발명에 따른 약제는 높은 시험관내 안정성 뿐만 아니라, 놀랍게도 높은 생체내 안정성을 나타내어, 이온-본래 독성이고, 착물에 결합된-의 유리 또는 교환이 새로운 조영제가 완전히 재배설되는 시간 이내에 매우 서서히 일어날 수 있다.
일반적으로, NMR 진단제로서 사용하기 위한 본 발명에 따른 약제는 0.0001-5 mmol/kg, 바람직하게는 0.005-0.5 mmol/kg의 양으로 투여된다.
또한, 본 발명에 따른 착화합물은 생체내 NMR 분광법용 감수성 시약 및 시프트(shift) 시약으로 유리하게 사용될 수 있다.
이들의 유리한 방사성 특성 및 거기에 함유된 착화합물의 유수한 안정성을 기초로, 본 발명에 따른 약제는 방사선 진단제로서도 적합하다. 이러한 용도 및 용량에 대한 상세한 설명이 문헌["Radiotracers for Medical Applications," CRC-Press, Boca Raton, Florida]에 기재되어 있다.
또한, 본 발명에 따른 화합물 및 약제는 양자 방출 동위원소, 예를 들면,43Sc,44Sc,52Fe,55Co,68Ga 및86Y를 사용하는 양자 방출 단층촬영에도 사용될 수 있다(Heiss, W. D.; Phelps, M. E.; Positron Emission Tomography of Brain, Springer Verlag Berlin, Heidelberg, New York 1983).
또한, 본 발명에 따른 화합물은 혈뇌장벽이 없는 영역에서 악성 및 양성 종양을 구별하는 데에도 놀라울 정도로 적합하다.
또한, 본 발명에 따른 조영제는 정맥내 투여 후 산소과잉증에 의해 유발된 관상동맥 온전성의 변화(산소과잉증 손상 후 "급성 관상동맥 구멍" 및 정상 내피세포 온전성의 회복을 포함함)를 양적으로 결정하는데 사용될 수 있다.
조직학적 연구는 국소적 미소혈관 과투과성을 입증한다.
따라서, 본 발명에 따른 조영제는 비정상적인 관상동맥 투과성을 가시화하는데 사용될 수도 있다.
이들은 체내로부터 완전히 제거되어, 내성이 우수하다는 특징을 갖는다.
본 발명에 따른 물질은 악성 종양에 축적되므로 (건강한 조직에는 확산되지않으나, 종양 혈관의 투과성이 높음), 악성 종양의 방사선 요법을 지지할 수 있다. 방사선 요법은 사용된 동위원소의 양 및 종류에 의해 대응하는 진단과 구별된다. 이 경우에 있어서, 가능한 한 적은 작용을 갖는 고 에너지 단파 방사선을 사용하여 종양 세포를 파괴하는 것이 목적이다. 이를 위해, 착물에 함유된 금속(예, 철 또는 가돌리늄)과 이온화 방사선(예, X-선) 또는 중성자선과의 상호작용이 사용된다. 이로써, 금속 착물이 위치한 자리(예, 종양)에서의 국소 방사선 용량이 헌저히 증가한다. 악성 조직에서 동량의 방사선을 생성하기 위해, 상기 금속 착물을 사용할 경우, 건강한 조직에 대한 방사선 노출이 상당히 감소될 수 있고, 따라서, 환자에 부하를 부여하는 부작용이 회피된다. 따라서, 본 발명에 따른 금속-착물 콘쥬게이트는 악성 종양의 방사선 요법(예, 모스보어(Mossbauer) 효과의 사용, 또는 중성자 포획 요법)에서 방사선감작 물질로서도 적합하다. 적합한 β-방출 이온으로는46Sc,47Sc,48Sc,72Ga,73Ga 및90Y 등이 있다. 반감기가 짧은 α-방출 이온으로는211Bi,212Bi,213Bi and214Bi 등이 적합하고,212Bi가 바람직하다. 광자 및 전자 방출 이온으로는158Gd가 적합하고, 이것은 중성자 포획에 의해157Gd로부터 얻을 수 있다.
본 발명에 따른 약제를 알. 엘. 밀리스 등(R. L. Mills et al., Nature Vol. 336, (1988), p. 787)에 의해 제안된 방사선 요법의 변형에 사용하고자 할 경우, 중심 이온이 모스보어 동위원소, 예를 들면,57Fe 또는151Eu로부터 유래되어야 한다.
본 발명에 따른 약제를 생체내 투여할 경우, 적합한 비히클, 예를 들면, 혈청 또는 생리학적 염 용액, 및 또다른 단백질, 예를 들면, 인간 혈청 알부민과 함께 투여해야 한다. 이 경우에, 투여량은 세포 질환의 종류, 사용된 금속 이온 및 영상법의 종류에 의존한다.
본 발명에 따른 약제는 보통 비경구, 바람직하게는 정맥내로 투여된다. 이들은 또한 이미 논의된 바와 같이, 연구될 체내 혈관 또는 조직에 따라 혈관내 또는 간질/피내 투여될 수 있다.
본 발명에 따른 약제는 X-선 조영제로서 매우 적합하고, 특히, 생화학-약물학적 연구에서 요오드 함유 조영제로부터 공지된 아나필락시스양 반응이 검출되지 않았다는 점을 강조해야 할 것이다. 관 전압이 더 높은 영역에서 유리한 흡수 속성으로 인해, 이들은 디지털 감법(digital substraction technique)에 특히 유용하다.
일반적으로, 본 발명에 따른 약제를 메글루민-디아트리조에이트 예와 유사하게 X-선 조영제로서 사용할 경우, 0.1-5 mmol/kg, 바람직하게는 0.25-1 mmol/kg의 양으로 투여한다.
특히, 본 발명에 따른 화합물은 세포외 조영제보다 더 높은 혈액 농도가 얻어진다. 이들은 정맥내 투여 후 혈관내강으로만 분산되므로, 세포외 조영제와 비교하여 중요한 장점을 가진다.
실시예 1
a) 2-N-트리플루오로아세틸-6-N-벤질옥시카르보닐-L-리신
6-N-벤질옥시카르보닐-L-리신 100.0 g(356.7 mmol)을 트리플루오로아세트산 에틸 에스테르 1000 ml 및 에탄올 500 ml의 혼합물에 용해시키고, 실온에서 24 시간 동안 교반하였다. 증발 건조시키고, 잔사를 디이소프로필 에테르로부터 결정화하였다.
수율: 무색의 결정질 분말 128.9 g(이론치의 96%)
녹는점: 98.5 ℃
원소 분석:
계산치: C 51.07 H 5.09 N 7.44 F 15.14
실측치: C 51.25 H 5.18 N 7.58 F 15.03
b) 2-N-트리플루오로아세틸-6-N-벤질옥시카르보닐-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
EEDQ(2-에톡시-1,2-디히드로퀴놀린-1-카르복실산 에틸 에스테르) 164.2 g(0.664 mmol)을 0 ℃에서 테트라히드로푸란 750 ml 중 실시예 1a)의 표제 화합물 125.0 g(332.0 mmol) 및 1-퍼플루오로옥틸술포닐피페라진(DE 196 03 033에 따라 제조) 188.7 g(332.0 mmol)에 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 진공에서 증발 건조시키고, 실리카 겔(이동상: 디클로로메탄/메탄올 = 20:1)로 크로마토그래피하였다.
수율: 무색의 고체 286.0 g(이론치의 93%)
녹는점: 92 ℃
원소 분석:
계산치: C 36.30 H 2.83 N 6.05 F 41.01 S 3.46
실측치: C 36.18 H 2.94 N 5.98 F 40.87 S 3.40
c) 6-N-벤질옥시카르보닐-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
암모니아 기체를 0 ℃에서 1 시간 동안 에탄올 2000 ml 중 실시예 1b)의 표제 화합물 280.0 g(302.2 mmol)의 용액에 도입하였다. 이어서, 0 ℃에서 4 시간 동안 교반하였다. 증발 건조시키고, 잔사를 물로부터 흡수 침전시켰다. 고체를 여과하고, 50 ℃의 진공에서 건조시켰다.
수율: 무정형 고체 243.5 g(이론치의 97%)
원소 분석:
계산치: C 37.60 H 3.28 N 6.75 F 38.89 S 3.86
실측치: C 37.55 H 3.33 N 6.68 F 38.78 S 3.81
d) 6-N-벤질옥시카르보닐-2-N-[1-O-α-D-카르보닐메틸-(2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
N,N-디시클로헥실카르보디이미드 41.27 g(200.0 mmol)을 0 ℃에서 디메틸포름아미드 500 ml에 용해된 실시예 1c)의 표제 화합물 100.0 g(120.4 mol), 1-O-α-D-카르보닐메틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스 72.1 g(120.4 mol) 및 N-히드록시숙신이미드 13.86 g(120.4 mol)의 용액에 첨가하였다. 0 ℃에서 3 시간 동안 교반한 다음, 실온에서 밤새 교반하였다. 침전된 우레아를 여과 제거하고, 여액을진공에서 증발 건조시키고, 실리카 겔로 크로마토그래피하였다 (이동상: 디클로로메탄/에탄올 = 20:1)하였다.
수율: 점성의 오일 136.1 g(이론치의 87%)
원소 분석:
계산치: C 57.32 H 4.89 N 4.31 F 24.86 S 2.47
실측치: C 57.38 H 5.07 N 4.22 F 24.78 S 2.39
e) 2-N-[1-O-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
실시예 1d)의 표제 화합물 130.0 g(100.0 mmol)을 에탄올 2000 ml에 용해시키고, 팔라듐 촉매(10% Pd/C) 10.0 g을 첨가하였다. 실온에서 12 시간 동안 수소화반응시켰다. 촉매를 여과 제거하고, 여액을 진공에서 증발 건조시켰다.
수율: 무색의 고체 91.7 g(양적 수치)
원소 분석:
계산치: C 34.07 H 3.63 N 6.11 S 3.50 F 35.24
실측치: C 33.91 H 3.72 N 6.04 S 3.40 F 35.31
f) 6-N-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)]-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-10-N-(펜타노일-3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일)]-2-N-[1-O-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드, Gd 착물
실시예 1e)의 표제 화합물 50.0 g(54.55 mmol), N-히드록시숙신이미드 6.28g(54.55 mmol), 염화리튬 4.62 g(109.0 mol) 및 1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-10-(카르복시-3-아자-4-옥소-5-메틸-펜트-5-일)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸, Gd 착물 34.35 g(54.55 mol)을 약간 가열하면서 디메틸 술폭시드 400 ml에 용해시켰다. 10 ℃에서, N,N-디시클로헥실카르보디이미드 16.88 g(81.8 mol)을 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 용액을 아세톤 3000 ml에 쏟아붓고, 10분 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과하고, 크로마토그래피(RP-18 이동상: 물/에탄올/아세토니트릴 구배)로 정제하였다.
수율: 무색의 고체 75.9 g(이론치의 91.0%)
수분 함량: 8.6%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 35.34 H 4.09 N 8.24 S 2.10 F 21.12 Gd 10.28
실측치: C 35.28 H 4.15 N 8.19 S 2.15 F 21.03 Gd 10.14
실시예 2
a) 6-N-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)]-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-10-N-(펜타노일-3-아자-4-옥소-5-일)]-2-N-[1-O-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드, Gd 착물
실시예 1e)의 표제 화합물 50.0 g(54.55 mmol), N-히드록시숙신이미드 6.28 g(54.55 mmol), 염화리튬 4.62 g(109.0 mol)및 1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-10-(카르복시-3-아자-4-옥소-5-메틸-펜트-5-일)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸,Gd 착물 34.35 g(54.55 mol)을 약간 가열하면서 디메틸 술폭시드 400 ml에 용해시켰다. 10 ℃에서, N,N-디시클로헥실카르보디이미드 16.88 g(81.8 mmol)를 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 용액을 아세톤 3000 ml에 쏟아붓고, 10분 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과하고, 크로마토그래피(RP-18 이동상: 물/에탄올/아세토니트릴 구배)로 정제하였다.
수율: 무색의 고체 76.0 g(이론치의 92.0%)
수분 함량: 6.88%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 34.90 H 3.93 N 8.32 S 2.12 F 21.33 Gd 10.38
실측치: C 34.81 H 4.02 N 8.27 S 2.09 F 21.22 Gd 10.19
실시예 3
a) 2-[4-3-옥사프로피온산 에틸 에스테르]-페닐아세트산 메틸 에스테르
2-브로모아세트산 에틸 에스테르 233.8 g(1400.0 mmol)을 아세톤 2000 ml 중 4-히드록시페닐아세트산 메틸 에스테르 200.0 g(1204.0 mmol)및 탄산나트륨 212.0 g(2000.0 mmol)에 첨가하고, 5 시간 동안 환류시켰다. 고체를 여과하고, 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 실리카 겔(이동상: n-헥산/에틸 아세테이트 = 15:1)로 크로마토그래피하였다.
수율: 무색의 오일 288.5 g(이론치의 95.0%)
원소 분석:
계산치: C 61.90 H 6.39
실측치: C 61.75 H 6.51
b) 2-[4-3-옥사프로피온산 에틸 에스테르]-페닐-2-브로모아세트산 메틸 에스테르
N-브로모숙신이미드 201.0 g(1130.0 mmol) 및 디벤조일 퍼옥시드 100.0 mg을 사염화탄소 2000 ml에 용해된 실시예 3a)의 표제 화합물 285.0 g(1130.0 mmol)에 첨가하고, 8 시간 동안 환류시켰다. 얼음조에서 냉각시키고, 침전된 숙신이미드를 여과하고, 여액을 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 실리카 겔(이동상: n-헥산/아세톤 = 15:1)로 정제하였다.
수율: 무색의 점성 오일 359.2 g(이론치의 96.0%)
원소 분석:
계산치: C 47.28 H 4.57 Br 24.16
실측치: C 47.19 H 4.71 Br 24.05
c) 2-[4-(3-옥사프로피온산 에틸 에스테르)]-페닐-2-[1-(1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1-일]-아세트산 메틸 에스테르
실시예 3b)의 표제 화합물 350.0 g(1057.0 mmol)을 클로로포름 6000 ml 중 1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸 603.0 g(3500.0 mmol)에 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 각 회당 물 3000 ml로 3회 추출하고, 유기상을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 추가의 정제없이 다음 반응(실시예 3d)에 사용하였다.
수율: 점성 오일 448.0 (양적 수치)
원소 분석:
계산치: C 59.70 H 8.11 N 13.26
실측치: C 59.58 H 8.20 N 13.18
d) 2-[4-(3-옥사프로피온산 에틸 에스테르)]-페닐-2-[1,4,7-트리스(카르복시메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-10-일]-아세트산
실시예 3c)의 표제 화합물 445.0 g(1053.0 mmol) 및 클로로아세트산 496.0 g(5270.0 mmol)을 물 4000 ml에 용해시켰다. 30% 수산화나트륨 수용액으로 pH를 10으로 하고, 70 ℃에서 8 시간 동안 교반하였다. 이어서, 30% 수산화나트륨 수용액과 혼합하여 반응 용액의 pH를 13으로 하고, 30분 동안 환류시켰다. 용액을 얼음조에서 냉각하고, 농 염산을 첨가하여 pH를 1로 하였다. 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 메탄올 4000 ml에 용해시키고, 실온에서 1 시간 동안 흡수 침전시켰다. 침전된 염을 여과 제거하고, 여액을 증발 건조시키고, 잔사를 RP-18(이동상: 물/에탄올/아세토니트릴 구배)로 정제하였다.
수율: 무색의 고체 403.0 g(이론치의 69.0%)
수분 함량: 10.2%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 51.98 H 6.18 N 10.10
실측치: C 51.80 H 6.31 N 10.01
e) 2-[4-(3-옥사프로피온산)]-페닐-2-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-10-일]-아세트산, Gd 착물
가돌리늄 산화물 130.73 g(360.65 mmol)을 물 2000 ml 중 실시예 3d)의 표제 화합물 400 g(721.3 mmol)에 첨가하고, 80 ℃에서 5 시간 동안 교반하였다. 용액을 여과하고, 여액을 동결 건조하였다.
수율: 무정형 고체 511 g(양적 수치)
수분 함량: 11.0%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 40.67 H 4.41 N 7.98 Gd 22.19
실측치: C 40.51 H 4.52 N 8.03 Gd 22.05
f) 6-N-[2-[4-(3-옥사프로피오닐)-페닐]-2-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-10-일]-아세트산]-2-N-(1-O-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스)-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드, Gd 착물
실시예 1e)의 표제 화합물 50.0 g(54.55 mmol), N-히드록시숙신이미드 6.28 g(54.55 mmol), 염화리튬 4.62 g(109.0 mmol) 및 실시예 3e)의 표제 화합물 38.66 g(54.55 mol)을 약간 가열하면서 디메틸 술폭시드에 용해시켰다. 10 ℃에서, N,N-디시클로헥실카르보디이미드 16.88 g(81.8 mmol)을 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 용액을 아세톤 3000 ml에 쏟아붓고, 10분 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과한 다음, 크로마토그래피(RP-18; 이동상: 물/에탄올/아세토니트릴 구배)로 정제하였다. 얻어진 생성물을 소량의 물에 용해시키고, 수산화나트륨 수용액으로 용액의 pH를 7.4로 하였다. 이어서, 생성물 용액을 동결 건조하였다.
수율: 무색의 고체 79.1 g(이론치의 89%)
수분 함량: 10.3%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 36.86 H 3.77 N 6.88 S 1.97 F 19.82 Gd 9.65
실측치: C 36.75 H 3.84 N 6.80 S 2.03 F 19.75 Gd 9.57
실시예 4
a) 6-N-[1,4,7-트리스(t-부틸옥시카르보닐메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-10-카르보닐메틸]-2-N-(1-O-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스)-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
1,4,7-트리스(t-부틸옥시카르보닐메틸)-10-카르보닐메틸-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸(WO 91/05762에 따라 제조) 15.0 g(26.19 mmol), 실시예 1e)의 표제 화합물 24.0 g(26.19 mmol) 및 N-히드록시숙신이미드 3.01 g(26.19 mmol)을 디메틸포름아미드 150 ml에 용해시키고, 0 ℃에서 N,N-디시클로헥실카르보디이미드 8.25 g(40.0 mmol)을 첨가하였다. 이것을 실온에서 밤새 교반하였다. 침전된 우레아를 여과하고, 여액을 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 실리카 겔(이동상: 디클로로메탄/메탄올 = 20:1)로 크로마토그래피하였다.
수율: 무색의 고체 35.45 g(이론치의 92.0%)
원소 분석:
계산치: C 44.08 H 5.69 N 7.62 F 21.95 S 2.18
실측치: C 44.01 H 5.81 N 7.53 F 21.87 S 2.03
b) 6-N-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-10-카르보닐메틸]-2-N-(1-O-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스)-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드, Gd 착물
실시예 4a)의 표제 화합물 30.0 g(20.39 mmol)을 클로로포름 50 ml에 용해시키고, 트리플루오로아세트산 300 ml를 첨가하였다. 이것을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 이것을 진공에서 증발 건조시키고, 잔사를 물 300 ml에 용해시켰다. 갈로디늄 산화물 3.69 g(10.19 mmol)을 첨가하고, 80 ℃에서 5 시간 동안 교반하였다. 용액을 진공에서 증발 건조시키고, 실리카 겔(RP-18; 이동상: 물/에탄올/아세토니트릴 구배)로 정제하였다.
수율: 무색의 무정형 고체 11.0 g(이론치의 37.0%)
수분 함량: 11.3%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 34.62 H 3.87 N 7.69 F 22.16 S 2.20 Gd 10.97
실측치: C 34.57 H 3.95 N 7.60 F 22.05 S 2.13 Gd 10.90
실시예 5
a) 6-N-[3,6,9-트리스(카르복시메틸)-3,6,9-트리아자운데칸디온산-1-카르복시-11-오일]-2-N-[1-O-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
3-N-(2,6-디옥소모르폴리노에틸)-6-N-(에톡시카르보닐메틸)-3,6-디아자옥탄디온산 12.10 g(30.0 mmol)을 디메틸포름아미드 100 ml/피리딘 30 ml에 용해된 실시예 1e)의 표제 화합물 24.0 g(26.19 mmol)에 첨가하고, 50 ℃에서 5 시간 동안 교반하였다. 이것을 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 물 200 ml에 용해시키고, 20% 수산화나트륨 수용액을 첨가하여 생성된 용액의 pH를 13으로 하였다. 이것을 22 ℃ 및 pH 13에서 8 시간 동안 교반하였다. 농 염산을 첨가하여 용액의 pH를 7.2로 하고, 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 실리카 겔 RP-18(이동상: 물/에탄올/아세토니트릴 구배)로 크로마토그래피하였다.
수율: 무색의 고체 17.26 g(이론치의 51.0%)
수분 함량: 9.3%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 37.19 H 4.21 N 7.59 F 25.00 S 2.48
실측치: C 37.10 H 4.30 N 7.48 F 25.07 S 2.42
b) 6-N-[3,6,9-트리스(카르복실라토메틸)-3,6,9-트리아자운데칸디온산-1-카르복시-11-오일]-2-N-[1-O-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드, Gd 착물, 나트륨염
가돌리늄 산화물 1.40 g(3.87 mmol)을 물 100 ml 중 실시예 5a)의 표제 화합물 10.0 g(7.74 mmol)에 첨가하고, 70 ℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 용액을 여과하였다. 2N 수산화나트륨 용액으로 여액의 pH를 7.4로 하고, 동결 건조시켰다.
수율: 무정형 고체 11.36 g(양적 수치)
수분 함량: 10.5%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 32.72 H 3.43 N 6.68 S 2.18 Gd 10.71 Na 1.57 F 22.00
실측치: C 32.65 H 3.51 N 6.71 S 2.08 Gd 10.61 Na 1.68 F 21.87
실시예 6
a) 6-N-벤질옥시카르보닐-2-N-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸]-10-(펜타노일-3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일)-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드, Gd 착물
실시예 1c)의 표제 화합물 50.0 g(60.20 mmol), N-히드록시숙신이미드 6.93 g(60.20 mmol), 염화리튬 5.09 g(120.0 mmol) 및 1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸]-10-(펜타노일-3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일), Gd 착물 37.91 g(60.20 mmol)을 약간 가열하면서 디메틸 술폭시드 400 ml에 용해시켰다. 10 ℃에서 N,N-디시클로헥실카르보디이미드 20.63 g(100.0 mmol)을 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 용액을 아세톤 3000 ml에 쏟아붓고, 10분 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과한 다음, 크로마토그래피(실리카 겔 RP-18; 이동상: 물/에탄올/아세토니트릴 구배)로 정제하였다.
수율: 무색의 고체 75.53 g(이론치의 87.0%)
수분 함량: 10.1%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 37.48 H 3.84 N 8.74 S 2.22 F 22.39 Gd 10.90
실측치: C 37.39 H 4.02 N 8.70 S 2.16 F 22.29 Gd 10.75
b)2-N-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)]-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-Gd 착물, 10-(펜타노일-3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일)-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
실시예 1d)의 표제 화합물 70.0 g(48.53 mmol)을 물 500 ml/에탄올 100 ml에 용해시키고, 팔라듐 촉매(10% Pd/C) 5.0 g과 혼합하고, 더 이상의 수소 흡수가 관찰되지 않을 때까지 수소 분위기(1 atm) 하의 실온에서 수소화반응시켰다. 촉매를 흡인 제거하고, 에탄올(각 회당 75 ml로 2회)로 완전히 재세척하고, 진공에서 증발 건조시켰다. 표제 화합물을 매우 점성인 무색 오일로서 얻었다.
수율: 63.5 g(양적 수치)
수분 함량: 9.8%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 37.48 H 3.84 N 8.74 S 2.22 F 22.39 Gd 10.90
실측치: C 37.39 H 4.03 N 8.65 S 2.20 F 22.31 Gd 10.78
c) 6-N-(1-O-α-D-카르보닐메틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스)-2-N-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸, Gd 착물-10-(펜타노일-3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일)]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
실시예 6b)의 표제 화합물 50.0 g(38.22 mmol), N-히드록시숙신이미드 4.40 g(38.22 mmol), 염화리튬 3.39 g(80.0 mmol) 및 1-O-α-D-카르보닐메틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스 22.88 g(38.22 mmol)을 약간(30 내지 40 ℃) 가열하면서디메틸 술폭시드 400 ml에 용해시켰다. 10 ℃에서 N,N-디시클로헥실카르보디이미드 10.32 g(50.0 mmol)을 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 용액을 아세톤 3000 ml에 쏟아붓고, 10분 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과한 다음, 크로마토그래피(실리카 겔 RP-18; 이동상: 물/에탄올/아세토니트릴 구배)로 정제하였다.
수율: 무색의 고체 64.25 g(이론치의 89.0%)
수분 함량: 10.9%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 46.42 H 4.54 N 6.67 S 1.70 F 17.10 Gd 8.33
실측치: C 46.36 H 4.71 N 6.60 S 1.61 F 17.19 Gd 8.21
d) 6-N-(1-O-α-D-카르보닐메틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스)-2-N-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-1,4,8,10-테트라아자시클로도데칸, Gd 착물-10-(펜타노일-3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일)]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
실시예 6c)의 표제 화합물 60.0 g(31.77 mmol)을 에탄올 500 ml에 용해시키고, 팔라듐 촉매(10% Pd/C) 6.0 g과 혼합하였다. 더 이상의 수소 흡수가 관찰되지 않을 때까지 수소 분위기(1 atm) 하의 실온에서 수소화반응시켰다. 촉매를 흡인 제거하고, 에탄올(각 회당 150 ml로 2회)로 완전히 재세척하고, 진공에서 증발 건조시켰다.
수율: 무색의 고체 48.55 g(양적 수치)
수분 함량: 3.9%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 35.37 H 4.02 N 8.25 S 2.10 F 21.13 Gd 10.29
실측치: C 35.28 H 4.13 N 8.17 S 2.03 F 21.05 Gd 10.20
실시예 7
a) 1,7-비스-(벤질옥시카르보닐)-4-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸
EEDQ(2-에톡시-1,2-디히드로퀴놀린-1-카르복실산 에틸 에스테르) 49.46 g(200.0 mmol)을 0 ℃에서 테트라히드로푸란 300 ml 중 1,7-비스-(벤질옥시카르보닐)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸 50.0 g(113.5 mmol) 및 2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노아세트산(DE 196 03 033에 따라 제조) 66.42 g(113.5 mmol)에 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 진공에서 증발 건조시키고, 실리카 겔(이동상: 디클로로메탄/메탄올 = 20:1)로 크로마토그래피하였다.
수율: 무색의 고체 65.2 g(이론치의 57%)
원소 분석:
계산치: C 42.91 H 3.80 N 6.95 F 32.05 S 3.18
실측치: C 42.85 H 3.90 N 6.87 F 31.98 S 3.15
b) 1,7-비스-(벤질옥시)-4-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-10-[1-O-α-D-카르보닐메틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스]-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸
EEDQ(2-에톡시-1,2-디히드로퀴놀린-1-카르복실산 에틸 에스테르) 24.73g(100 mmol)을 0 ℃에서 테트라히드로푸란 300 ml 중 실시예 7a)의 표제 화합물 60.0 g(59.53 mmol) 및 1-O-α-D-카르보닐메틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스(DE 197 28 954에 따라 제조) 35.64 g(59.53 mmol)에 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 진공에서 증발 건조시키고, 실리카 겔(이동상: 디클로로메탄/메탄올 = 20:1)로 크로마토그래피하였다.
수율: 무색의 고체 76.6g(이론치의 81.0%)
원소 분석:
계산치: C 54.44 H 4.70 N 4.41 F 20.33 S 2.02
실측치: C 54.37 H 4.81 N 4.35 F 20.27 S 1.96
c) 1-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-7-(1-O-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸
실시예 7b)의 표제 화합물 70 g(44.07 mmol)을 에탄올 800 ml에 용해시키고, 팔라듐 촉매(10% Pd/C) 8 g을 첨가하였다. 이것을 실온에서 수소화반응시켰다. 촉매를 여과 제거하고, 여액을 진공에서 증발 건조시켰다.
수율: 무색의 고체 42.3g(양적 수치)
원소 분석:
계산치: C 35.04 H 3.99 N 7.30 F 33.65 S 3.34
실측치: C 35.15 H 4.13 N 7.13 F 33.48 S 3.26
d) 1,7-비스-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸, Gd 착물-10-(펜타노일-3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일)]-4-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-10-(1-O-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸
실시예 7c)의 표제 화합물 20 g(20.84 mmol), 염화리튬 5.09 g(120 mmol) 및 1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-10-(펜타노일-3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸, Gd 착물 37.78 g(60 mmol)을 약간 가열하면서 디메틸 술폭시드 400 ml에 용해시켰다. 10 ℃에서 EEDQ 29.67 g(120 mmol)을 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 용액을 아세톤 3000 ml에 쏟아붓고, 10분 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과한 다음, 크로마토그래피(실리카 겔 RP-18; 이동상: 물/에탄올/아세토니트릴 구배)로 정제하였다.
수율: 무색의 고체 13.2 g(이론치의 29.0%)
수분 함량: 11.8%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 36.31 H 4.34 N 9.62 S 1.47 F 14.79 Gd 14.41
실측치: C 36.24 H 4.27 N 9.58 S 1.51 F 14.85 Gd 14.25
실시예 8
a) 1,7-비스(벤질옥시카르보닐)-4-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-10-[펜타노일-3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일-1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-Gd 착물-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-10-일]-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸
실시예 7a)의 표제 화합물 50.0 g(49.61 mmol), N-히드록시숙신이미드 5.71g(49.61 mmol), 염화리튬 4.24 g(100 mmol) 및 1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-10-(펜타노일-3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸, Gd 착물 31.24 g(49.61 mmol)을 약간 가열하면서 디메틸 술폭시드 350 ml에 용해시켰다. 10 ℃에서 N,N-디시클로헥실카르보디이미드 15.47 g(75 mmol)을 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 용액을 아세톤 2000 ml에 쏟아붓고, 10분 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과한 다음, 크로마토그래피(실리카 겔 RP-18; 이동상: 물/에탄올/아세토니트릴 구배)로 정제하였다.
수율: 무색의 고체 65.1 g(이론치의 81.0%)
수분 함량: 7.9%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 40.79 H 4.11 N 8.65 S 1.98 F 19.94 Gd 9.72
실측치: C 40.71 H 4.20 N 8.58 S 2.03 F 19.87 Gd 9.68
b) 1-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-7-{펜타노일-3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-10-일]-Gd 착물}-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸
실시예 8a)의 표제 화합물 60.0 g(37.05 mmol)을 에탄올 600 ml에 용해시키고, 팔라듐 촉매(10% Pd/C) 6.0 g을 첨가하였다. 이것을 실온에서 수소화반응시켰다. 촉매를 여과 제거하고, 여액을 진공에서 증발 건조시켰다.
수율: 무색의 고체 50.06g(양적 수치)
수분 함량: 3.9%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 34.67 H 4.03 N 10.37 S 2.37 F 23.90 Gd 11.64
실측치: C 34.58 H 4.15 N 10.28 S 2.30 F 23.84 Gd 11.57
c) 1-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-4,10-비스[1-O-α-D-카르보닐메틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스]-7-{펜타노일-3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-10-일]-Gd 착물}-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸
실시예 8b)의 표제 화합물 40.0 g(29.60 mmol), 염화리튬 2.54 g(60.0 mmol) 및 1-O-α-D-카르보닐메틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스 44.9 g(75.0 mmol)을 약간 가열하면서 디메틸 술폭시드 300 ml에 용해시켰다. 10 ℃에서 EEDQ 24.73 g(100.0 mmol)을 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 용액을 아세톤 3000 ml에 쏟아붓고, 10분 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과한 다음, 크로마토그래피(실리카 겔 RP-18; 이동상: 물/에탄올/아세토니트릴 구배)로 정제하였다.
수율: 무색의 고체 31.98 g(이론치의 43.0%)
수분 함량: 3.5%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 53.06 H 5.05 N 5.57 S 1.28 F 12.85 Gd 6.26
실측치: C 52.95 H 5.19 N 5.48 S 1.23 F 12.77 Gd 6.14
d)1-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-4,10-비스[1-O-α-D-카르보닐메틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스]-7-{펜타노일-3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-10-일]-Gd 착물}-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸
실시예 8c)의 표제 화합물 30.0 g(11.94 mmol)을 에탄올 300 ml/물 30 ml에 용해시키고, 팔라듐 촉매(10% Pd/C) 4.0 g을 첨가하였다. 이것을 실온에서 수소화반응시켰다. 촉매를 여과 제거하고, 여액을 진공에서 증발 건조시켰다.
수율: 무색의 고체 21.39g(양적 수치)
수분 함량: 3.4%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 36.87 H 4.39 N 7.82 S 1.79 F 18.03 Gd 8.78
실측치: C 36.80 H 4.50 N 7.85 S 1.68 F 17.91 Gd 8.70
실시예 9
a) 6-N-[3,6-비스(카르복시메틸)-옥탄-1,8-디카르복실산-1-카르복시-8-오일]-2-N-(1-O-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스)-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
에틸렌디아민-N,N,N',N'-테트라아세트산 2 무수물 25.62 g(100.0 mmol)을 디메틸포름아미드 300 ml/피리딘 100 ml에 용해된 실시예 1e)의 표제 화합물 27.5 g(30.0 mmol)에 첨가하고, 50 ℃에서 5 시간 동안 교반하였다. 이것을 진공에서증발 건조시켰다. 잔사를 물 300 ml에 용해시키고, 20% 수산화나트륨 수용액을 첨가하여 pH를 10으로 한 다음, 농 황산을 첨가하여 염기성 생성물 용액의 pH를 3으로 하고, 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 실리카 겔 RP-18(이동상: 물/에탄올/아세토니트릴 구배)로 크로마토그래피하였다.
수율: 무색의 고체 18.22 g(이론치의 51.0%)
수분 함량: 7.9%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 36.31 H 3.98 N 7.06 F 27.12 S 2.69
실측치: C 36.23 H 4.07 N 6.98 F 27.05 S 2.62
b) 6-N-[3,6-비스(카르복실라토메틸)-옥탄-1,8-디카르복실산-1-카르복실라토-8-오일-Mn 착물, 나트륨염]-2-N-(1-O-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스)-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
실시예 9a)의 표제 화합물 10 g(8.397 mmol)을 물 200 ml에 용해시켰다. 탄산망간(II) 965 mg(8.397 mmol)을 첨가하고, 60 ℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 5% 수산화나트륨 수용액으로 용액의 pH를 7.4로 하고, 여과하고, 동결 건조시켰다.
수율: 무색의 고체 10.52 g(이론치의 99.0%)
수분 함량: 7.8%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 34.16 H 3.50 N 6.64 S 2.53 F 25.52 Mn 4.34 Na 1.82
실측치: C 34.06 H 3.61 N 6.58 S 2.47 F 25.47 Mn 4.30 Na 1.97
실시예 10
a) 1,2,3,4,6-펜타-O-아세틸-α,β-D-만노피라노스
문헌[M. L. Wolfrom and A. Thompson in Methods in Carbohydrate Chemistry (R. L. Whistler, M. L. Wolfrom and J. N. BeMiller, Eds.), Academic Press, New York, Vol. II, 53, pp. 211-215, (1963)]에 기재된 것과 유사하게, α,β-D-만노피라노스 150 g(832.5 mmol)을 무수 피리딘 1500 ml 및 아세트산 무수물 1500 ml의 혼합물과 반응시키고, 워킹업(working-up) 후, 상기 표제 화합물 315 g(96.7%)을 점성의 무색 오일 형태의 조 생성물로 얻었다. 얻어진 표제 화합물의1H-NMR 분광학 연구에 의해, 2 개의 아노머의 α대 β비율이 4:1인 것으로 결정되었다. 표제 화합물의 α,β-아노머를 분리하지 않고 후속 반응 단계를 수행할 수 있다.
원소 분석:
계산치: C 49.21 H 5.68
실측치: C 49.12 H 5.78
b) 1-O-α-D-(5-에톡시카르보닐)-펜틸-2,3,4,6-테트라-O-아세틸-만노피라노스
글리코피라노시드의 합성에 대해 문헌[M. L. Wolfrom and A. Thompson in Methods in Carbohydrate Chemistry (R. L. Whistler, M. L. Wolfrom and J. N. BeMiller, Eds.), Academic Press, New York, Vol. II, 90, pp. 345-347, (1963)]에 기재된 것과 유사하게, α,β-아노머 혼합물인 실시예 10a)의 표제 화합물 156.2 g(400 mmol)을 1,2-디클로로에탄 600 ml 중에서 6-히드록시-헥산산 에틸 에스테르 67 ml(400 mmol) 및 염화주석(IV) 60.8 ml(520 mmol)과 반응시켜, 칼럼 크로마토그래피 정제(용리제: 헥산/에틸 아세테이트 2:1) 후, 표제 화합물 100.05 g(이론치의 51%)을 무색의 점성 오일로 얻었다. 얻어진 표제 화합물의1H-NMR 분광학 연구에 의해, 표제 화합물은 순수한 α-아노머임이 밝혀졌다.
원소 분석:
계산치: C 52.94 H 6.77
실측치: C 52.80 H 6.78
c) 1-O-α-D-(5-카르복시)-펜틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스
디옥산 200 ml 중 실시예 10b)의 표제 화합물 141.0 g(289 mmol)의 교반된 용액을 실온에서 격렬히 교반하면서 수산화칼륨 미분말 238.5 g(4.26 mol)과 소량씩 혼합하였다. 교반을 더 용이하게 하기 위해, 반응 혼합물을 추가의 디옥산 200 ml와 혼합하고, 얻어진 현탁액을 끓는점까지 가열하고, 이 온도에서 2 시간에 걸쳐 브롬화벤질 372 ml(3.128 mol)과 점적 혼합하였다. 110 ℃에서 4 시간 및 실온에서 12 시간 후, 워킹업을 위해 반응 혼합물을 빙수 2.5 L에 서서히 쏟아붓고, 수성상을 디에틸 에테르로 완전히 추출하였다. 얻어진 에테르상을 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시킨 후, 염을 흡인 제거하고, 디에틸 에테르를 진공에서 휘발시켰다. 과량의 브롬화벤질을 180 ℃의 오일조의 오일 펌프 진공에서 반응 혼합물로부터 증류 제거하였다. 얻어진 수지양 유성 잔사를 에틸 아세테이트/헥산(1:10)을 용리제로하여 실리카 겔로 정제하였다.
수율: 매우 점성인 무색 오일 형태의 표제 화합물 172.2 g(이론치의 91.0%).
원소 분석:
계산치: C 75.68 H 7.16
실측치: C 75.79 H 7.04
d) 6-N-벤질옥시카르보닐-2-N-[1-O-α-D-(5-카르보닐)-펜틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
실시예 10c)에서 제조된 카르복실산 100.0 g(134.0 mmol) 및 N-히드록시숙신이미드 32.4 g(281.4 mmol)을 디메틸포름아미드 500 ml에 용해시키고, 0 ℃에서 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 58.0 g(281.4 mmol)과 소량씩 혼합하고, 이 온도에서 3 시간 동안 교반하였다. 0 ℃로 냉각된, 디메틸포름아미드 300 ml에 용해된 실시예 1c)의 표제 화합물 111.3 g(134.0 mmol)의 용액을 제조된 활성 에스테르 용액에 적가하고, 0 ℃에서 2 시간 및 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 워킹업을 위해, 침전된 디시클로헥실우레아를 여과 제거하고, 용매를 증발 건조시켰다. 얻어진 잔사를 실시카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: 디클로로메탄/에탄올 20:1; 에탄올 분율을 연속적으로 증가시키는 용매 구배를 사용하여 크로마토그래피 수행).
수율: 매우 점성인 무색 오일 형태의 표제 화합물 132.5 g(이론치의 67.4%).
원소 분석:
계산치: C 54.02 H 4.88 N 3.82 F 22.01 S 2.19
실측치: C 53.87 H 4.85 N 4.02 F 22.55 S 2.06
e) 2-N-[1-O-α-D-(5-카르보닐)-펜틸-만노피라노스]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
실시예 10d)에서 제조된 화합물 120.0 g(81.77 mmol)을 에탄올 800 ml에 용해시키고, 펄만(Pearlman) 촉매(Pd 20%, C) 4.5 g과 혼합하고, 더 이상의 수소 흡수가 관찰되지 않을 때까지(약 8 시간) 수소 분위기(1 atm) 하의 실온에서 수소화 반응시켰다. 촉매를 흡인 제거하고, 에탄올(약 200 ml)로 완전히 재세척하고, 진공에서 증발 건조시켰다. 표제 화합물을 매우 점성인 무색 오일로서 얻었다.
수율: 78.5 g(이론치의 98.7%)
원소 분석:
계산치: C 37.04 H 4.25 N 5.76 F 33.20 S 3.30
실측치: C 36.96 H 4.85 N 5.41 F 34.13 S 3.22
f) 2-N-[1-O-α-D-(5-카르보닐)펜틸-만노피라노스]-6-N-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-10-(3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일-펜타노일)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드, Gd 착물
특허 출원 DE 197 28 954 C1의 실시예 31h)에 기재된 10-(4-카르복시-1-메틸-2-옥소-3-아자부틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7-트리아세트산의 Gd 착물 99.8 g(158.4 mmol; 사용된 실시예 10e)의 아민 성분에 대하여 2.2몰 당량) 및 염화리튬 무수물 6.7 g(158.4 mmol)을 40 ℃에서 무수디메틸 술폭시드 800 ml에 교반하면서 용해시켰다. 이 온도에서, 무수 디메틸 술폭시드 250 ml에 용해된 N-히드록시숙신이미드 18.2 g(158.4 mmol) 및 실시예 10e)의 표제 화합물 70.0 g(71.96 mmol)과 혼합하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 용액을 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 32.7 g(158.4 mmol)과 혼합하고, 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 얻어진 현탁액을 표제 화합물의 침전이 완결될 때까지 충분량의 아세톤과 혼합하고, 침전물을 흡인 여과하고, 건조시키고, 물에 용해시키고, 불용성 디시클로헥실우레아를 여과 제거하고, 여액을 AMICON(등록상표) YM-3 초여과막(절단: 3,000 Da)으로 탈염하고, 저분자 성분을 제거하였다. 잔사를 동결 건조하였다.
수율: 무색의 동결건조물 93.0 g(이론치의 81.6%)
수분 함량(칼-피셔): 9.53%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 37.15 H 4.39 N 7.96 F 20.38 S 2.02 Gd 9.92
실측치: C 36.92 H 4.50 N 7.68 F 19.77 S 1.91 Gd 10.08
실시예 11
a) 2-N-[1-O-α-D-(5-카르보닐)펜틸-만노피라노스]-6-N-{2-[4-(3-옥사프로피오닐)-페닐]-2-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-10-일]-아세트산}-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드, Gd 착물, 나트륨염
무수 디메틸 술폭시드 15 ml 중 실시예 3e)의 표제 화합물 5.0 g(9.06 mmol)의 교반된 현탁액을 70 ℃에서 염화리튬 0.68 g(15.9 mmol)과 혼합하였다. 70 ℃에서 30분 동안 교반한 후, 투명한 반응 용액을 N-히드록시숙신이미드 1.83 g(15.9 mmol)과 소량씩 혼합하고, 반응 혼합물을 이 온도에서 1 시간 동안 유지하였다. 0 ℃로 냉각시킨 후, 디시클로헥실카르보디이미드 4.52 g(23.85 mmol)과 혼합하고, 반응 용액을 0 ℃에서 1 시간 및 22 ℃에서 12 시간 동안 교반하였다. 얻어진 실시예 3e)의 표제 화합물의 N-히드록시숙신이미드 에스테르의 반응 용액을 22 ℃에서 무수 디메틸 술폭시드 15 ml 중 실시예 10e)의 표제 화합물 4.0 g(4.12 mmol)의 용액과 점적 혼합하고, 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 워킹업을 위해, 22 ℃에서 반응 용액을 아세톤 900 ml에 적가하였을 때, 표제 화합물이 무색 침전물로 침전하였다. 침전물을 흡인 여과하고, 증류수 200 ml에 용해시키고, 1몰 수산화나트륨 용액으로 용액의 pH를 정확히 7.2로 하였다. 탈염 및 저분자 성분의 분리를 위해, 얻어진 생성물 수용액을 YM-3 초여과막(AMICON(등록상표); 절단: 3,000 Da)으로 3회 초여과하였다. 얻어진 잔사를 동결 건조하였다.
수율: 수분 함량이 7.38%인 무색 동결건조물 6.33 g(이론치의 92.4%; 사용된 아민 성분에 대한 것임)
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 38.48 H 4.13 N 6.65 F 19.16 S 1.90 Gd 9.33 Na 1.36
실측치: C 39.52 H 4.12 N 6.67 F 19.70 S 1.89 Gd 9.30 Na 1.41
실시예 12
a) 3,5-비스-벤질옥시카르보닐아미노-벤조산-N-(3-옥사-1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-퍼플루오로트리데실)-아미드
문헌[Skulnick, Harvey I.; Johnson, Paul D.; Aristoff, Paul A.; Morris, Jeanette K.; Lovasz, Kristine D.; et al.; J. Med. Chem.; 40; 7; 1997; 1149-1164]에 따라 합성된 3,5-비스-벤질옥시카르보닐아미노-벤조산 20 g(47.5 mmol) 및 트리에틸아민 4.78 g(47.5 mmol)을 무수 테트라히드로푸란 125 ml 및 무수 디옥산 125 ml의 용매 혼합물에 용해시켰다. -15 ℃로 냉각시킨 후, 무수 테트라히드로푸란 30 ml 중 이소부틸 클로로포르메이트 6.56 g(48 mmol)의 용액을 교반하면서 서서히 적가하였고, 이 때 내부 온도는 -10 ℃ 이하로 유지되었다. -15 ℃에서 15분 후, 무수 테트라히드로푸란 100 ml 중 1-아미노-1H,1H, 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-옥사-퍼플루오로트리데칸 58.6 g(47.5 mmol) 및 트리에틸아민 4.78 g(47.5 mmol)의 용액을 -20 ℃에서 적가하였다. -15 ℃에서 1 시간 및 실온에서 2 시간 후, 반응 용액을 진공에서증발 건조시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트 300 ml에 용해시키고, 포화 중탄산나트륨 용액(각 회당 200 ml)으로 2회 및 물(300 ml)로 1회 세척하였다. 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시킨 후, 염을 흡인 제거하고, 에틸 아세테이트를 진공에서 휘발시켰다. 유성 잔사를 디클로로메탄/헥산/2-프로판올(10:5:1)을 용리제로 하여 실리카 겔로 정제하였다.
수율: 무색 오일의 표제 화합물 36.2 g(이론치의 82.5%)
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 46.82 H 3.27 N 4.55 F 34.97
실측치: C 47.21 H 3.31 N 4.61 F 34.48
b) 3,5-디-아미노-벤조산-N-(3-옥사-1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-퍼플루오로트리데실)-아미드
실시예 12a)에 따라 제조된 아미드 30.0 g(32.4 mmol)을 에탄올 300 ml에 용해시키고, 펄만 촉매(Pd 20%, C) 1.2 g과 혼합하였다. 더 이상의 수소 흡수가 관찰되지 않을 때까지 수소 분위기(1 atm) 하의 실온에서 수소화 반응시켰다. 촉매를 흡인 제거하고, 에탄올(약 300 ml)로 완전히 재세척하고, 진공에서 증발 건조시켰다. 표제 화합물을 매우 점성인 누르스름한 오일로서 얻었다.
수율: 20.12 g(이론치의 94.8%)
원소 분석:
계산치: C 36.66 H 2.77 N 6.41 F 49.28
실측치: C 36.07 H 2.87 N 6.23 F 49.43
c) 3-N-(1-O-α-D-카르보닐메틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스)-5-아미노-벤조산-N-(3-옥사-1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-퍼플루오로트리데실)-아미드
1-카르복시메틸옥시-2,3,4-테트라-O-벤질-α-D-만노피라노시드(DE 197 28 954 C1에 기재된 바에 따라 제조) 10.95 g(18.30 mmol)을 디메틸포름아미드 150 ml에 용해시키고, N-히드록시숙신이미드 2.09 g(18.3 mmol)과 혼합하였다. 0 ℃로 냉각시키고, 디시클로헥실카르보디이미드 3.78 g(18.3 mmol)을 첨가하였다. 0 ℃에서 1 시간 및 실온에서 4 시간 동안 교반하였다. 0 ℃로 냉각시키고, 디메틸포름아미드 350 ml에 용해된 실시예 12b)에 기재된 디아미노 화합물 24.0 g(36.6 mmol, 사용된 카르복실산에 대하여 2몰 당량)의 용액을 3 시간 이내에 서서히 적가하였다. 0 ℃에서 1 시간 및 실온에서 밤새 교반하였다. 진공에서 증발 건조시키고, 잔사를 에틸 아세테이트에 용해시켰다. 침전된 우레아를 여과 제거하고, 여액을 5% 소다 수용액으로 각 100 ml씩 2회 세척하였다. 유기상을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 실리카 겔(이동상: n-헥산/이소프로판올 13:1)로 크로마토그래피하였다. 표제 화합물 16.8 g(이론치의 74.3%, 사용된 카르복실산에 대한 것임)을 무색 오일 형태로 얻었다. 용리제 조성물의 극성을 n-헥산/이소프로판올 5:1까지 증가시킴으로써, 미반응 디아미노 화합물 12b) 10.15 g이 후속 크로마토그래피 분획에서 회수되었고, 이것은 상기 언급된 반응 지시에 따라 다시 반응될 수 있다.
원소 분석:
계산치: C 54.42 H 4.40 N 3.40 F 26.13
실측치: C 54.32 H 4.49 N 3.48 F 25.94
d) 3-N-(1-O-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스)-5-아미노-벤조산-N-(3-옥사-1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-퍼플루오로트리데실)-아미드
실시예 12b)의 표제 화합물의 합성에 기재된 것과 유사하게, 실시예 12c)의 표제 화합물 12.0 g(9.70 mmol)을 에탄올/물(9:1) 중에서 펄만 촉매(Pd 20%, C) 0.5 g을 사용하여 가수소분해하고, 워킹업 후, 표제 화합물 8.08 g(이론치의 96.7%)을 누르스름하고 점성인 오일 형태로 얻었다.
원소 분석:
계산치: C 37.64 H 3.28 N 4.88 F 37.49
실측치: C 37.32 H 3.17 N 4.97 F 37.55
e) 3-N-(1-O-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스)-5-N-{2-[4-(3-옥사프로피오닐)페닐]-2-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-10-일]-아세트산}-벤조산-N-(3-옥사-1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-퍼플루오로트리데실)-아미드, Gd 착물, 나트륨염
실시예 3e)에 기재된 Gd 착물 13.6 g(19.2 mmol, 사용된 실시예 12d)의 아민 성분에 대하여 2.2몰 당량) 및 염화리튬 무수물 0.81 g(19.2 mmol)을 40 ℃에서 무수 디메틸 술폭시드 100 ml에 교반하면서 용해시키고, 이 온도에서 무수 디메틸 술폭시드 50 ml에 용해된 N-히드록시숙신이미드 2.2 g(19.2 mmol) 및 실시예 12d)의 표제 화합물 7.5 g(8.7 mmol)과 혼합하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 용액을 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 3.96 g(19.2 mmol)과 혼합하고, 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 얻어진 현탁액을 표제 화합물의 침전이 완결될 때까지 충분량의 아세톤과 혼합하고, 침전물을 흡인 여과하고, 건조시키고, 물에 용해시키고, 불용성 디시클로헥실우레아를 여과 제거하고, 여액을 AMICON(등록상표) YM-3 초여과막(절단: 3,000 Da)으로 탈염하고, 저분자 성분을 제거하였다. 잔류물을 동결 건조하였다.
수율: 무색의 동결건조물 11.51 g(이론치의 84.5%)
수분 함량(칼-피셔): 6.77%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 40.05 H 3.94 N 6.29 F 20.71 Gd 10.08 Na 1.47
실측치: C 39.98 H 4.00 N 6.31 F 20.73 Gd 10.11 Na 1.42
실시예 13
a) 3,5-비스-(벤질옥시카르보닐아미노)-1-{N-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]}-벤즈아미드
문헌[Skulnick, Harvey I.; Johnson, Paul D.; Aristoff, Paul A.; Morris, Jeanette K.; Lovasz, Kristine D.; et al.; J. Med. Chem.; 40; 7; 1997; 1149-1164]에 따라 합성된 3,5-비스-벤질옥시카르보닐아미노-벤조산 10 g(23.75 mmol) 및 트리에틸아민 2.39 g(23.75 mmol)을 무수 테트라히드로푸란 60 ml 및 무수 디옥산 70 ml의 용매 혼합물에 용해시켰다. -15 ℃로 냉각시킨 후, 무수 테트라히드로푸란 20 ml 중 이소부틸 클로로포르메이트 3.28 g(24 mmol)의 용액을 교반하면서 서서히 적가하였고, 이 때 내부 온도는 -10 ℃ 이하로 유지되었다. -15 ℃에서 15분 후, 무수 테트라히드로푸란 50 ml 중 퍼플루오로옥틸술포닐피페라진 23.0 g(23.75 mmol) 및 트리에틸아민 2.39 g(23.75 mmol)의 용액을 -20 ℃에서 적가하였다. -15 ℃에서 1 시간 및 실온에서 2 시간 후, 반응 용액을 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트 200 ml에 용해시키고, 포화 중탄산나트륨 용액(각 회당 100 ml)으로 2회 및 물(300 ml)로 1회 세척하였다. 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시킨 후, 염을 흡인 제거하고, 에틸 아세테이트를 진공에서 휘발시켰다. 유성 잔사를 디클로로메탄/헥산/2-프로판올(15:5:1)을 용리제로 하여 실리카 겔로 정제하였다.
수율: 무색 오일의 표제 화합물 18.35 g(이론치의 79.6%)
원소 분석:
계산치: C 43.31 H 2.80 N 5.77 F 33.27 S 3.30
실측치: C 43.21 H 2.75 N 5.61 F 33.38 S 3.22
b) 3,5-디-아미노-1-{N-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]}-벤즈아미드
실시예 13a)에 따라 제조된 아미드 9.70 g(10.0 mmol)을 에탄올 100 ml에 용해시키고, 펄만 촉매(Pd 20%, C) 0.4 g과 혼합하였다. 더 이상의 수소 흡수가 관찰되지 않을 때까지(약 8 시간) 수소 분위기(1 atm) 하의 실온에서 수소화 반응시켰다. 촉매를 흡인 제거하고, 에탄올(약 150 ml)로 완전히 재세척하고, 진공에서 증발 건조시켰다. 표제 화합물을 매우 점성인 누루스름한 오일로서 얻었다.
수율: 6.9 g(이론치의 98.2%)
원소 분석:
계산치: C 32.49 H 2.15 N 7.98 F 45.98 S 4.56
실측치: C 32.56 H 2.17 N 8.09 F 45.63 S 4.61
c) 5-아미노-3-N-(1-O-α-D-카르보닐메틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스)-벤조산-N-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
1-카르복시메틸옥시-2,3,4-테트라-O-벤질-α-D-만노피라노시드(DE 197 28 954 C1에 기재된 바에 따라 제조) 5.48 g(9.15 mmol)을 디메틸포름아미드 100 ml에 용해시키고, N-히드록시숙신이미드 1.04 g(9.15 mmol)과 혼합하였다. 0 ℃로 냉각시키고, 디시클로헥실카르보디이미드 1.89 g(91.5 mmol)을 첨가하였다. 0 ℃에서 1 시간 및 실온에서 4 시간 동안 교반하였다. 0 ℃로 냉각시키고, 디메틸포름아미드 250 ml에 용해된, 실시예 13b)에 기재된 디아미노 화합물 12.85 g(18.30 mmol, 사용된 카르복실산에 대하여 2몰 당량)의 용액을 3 시간 이내에 서서히 적가하였다. 0 ℃에서 1 시간 및 실온에서 밤새 교반하였다. 진공에서 증발 건조시키고, 잔사를 에틸 아세테이트 100 ml에 용해시켰다. 침전된 우레아를 여과 제거하고, 여액을 5% 소다 수용액으로 각 100 ml씩 2회 세척하였다. 유기상을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 실리카 겔(이동상: n-헥산/이소프로판올 13:1)로 크로마토그래피하였다. 표제 화합물 8.14 g(이론치의 69.4%, 사용된 카르복실산에 대한 것임)을 무색 오일 형태로 얻었다. 용리제 조성물의 극성을 n-헥산/이소프로판올 6:1까지 증가시킴으로써, 미반응 디아미노 화합물 13b) 4.36 g이 후속 크로마토그래피 분획에서 회수되었고, 이것은 상기 언급된 반응 지시에 따라 다시 반응될 수 있다.
원소 분석:
계산치: C 51.49 H 4.01 N 4.37 F 25.17 S 2.50
실측치: C 51.60 H 4.19 N 4.28 F 25.14 S 2.44
d) 5-아미노-3-N-(1-O-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스)-벤조산-N-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
실시예 13b)의 표제 화합물의 합성에 기재된 것과 유사하게, 실시예 13c)의 표제 화합물 6.4 g(5.0 mmol)을 에탄올/물(8:1) 중에서 펄만 촉매(Pd 20%, C) 0.3 g을 사용하여 가수소분해하고, 워킹업 후, 표제 화합물 4.43 g(이론치의 96.2%)을 누르스름하고 점성인 오일 형태로 얻었다.
원소 분석:
계산치: C 35.15 H 2.95 N 6.07 F 35.01 S 3.48
실측치: C 35.32 H 3.02 N 5.89 F 35.05 S 3.58
e) 3-N-(1-O-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스)-5-N-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-10-(3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일-펜타노일)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸]-벤조산-N-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드, Gd 착물
특허 출원 DE 197 28 954 C1의 실시예 31h)에 기재된 10-(4-카르복시-1-메틸-2-옥소-3-아자부틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7-트리아세트산, Gd 착물 5.54 g(8.8 mmol, 사용된 실시예 13d)의 아민 성분에 대하여 2.2몰 당량) 및 염화리튬 무수물 0.37 g(8.8 mmol)을 40 ℃에서 무수 디메틸 술폭시드 60 ml에 교반하면서 용해시키고, 이 온도에서 무수 디메틸 술폭시드 40 ml에 용해된 N-히드록시숙신이미드 1.01 g(8.8 mmol) 및 실시예 13d)의 표제 화합물 3.7 g(4.0 mmol)과 혼합하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 용액을 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 1.82 g(8.8 mmol)과 혼합하고, 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 얻어진 현탁액을 표제 화합물의 침전이 완결될 때까지 충분량의 아세톤과 혼합하고, 침전물을 흡인 여과하고, 건조시키고, 물에 용해시키고, 불용성 디시클로헥실우레아를 여과 제거하고, 여액을 AMICON(등록상표) YM-3 초여과막(절단: 3,000 Da)으로 탈염하고, 저분자 성분을 제거하였다. 잔류물을 동결 건조하였다.
수율: 무색의 동결건조물 5.36 g(이론치의 87.4%)
수분 함량(칼-피셔): 6.77%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 36.01 H 3.61 N 8.22 F 21.05 Gd 10.25 S 2.09
실측치: C 35.87 H 3.70 N 8.22 F 20.91 Gd 10.18 S 2.16
실시예 14
a) 1,4,7-트리아자헵탄-1,7-비스(2-N-트리플루오로아세틸-6-N-벤질옥시카르보닐-L-리신)-디아미드
실시예 1a)에 따라 제조된 카르복실산 100 g(107.9 mmol) 및 N-히드록시숙신이미드 26.1 g(226.59 mmol)을 디메틸포름아미드 500 ml에 용해시키고, 0 ℃에서 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 46.7 g(226.59 mmol)과 소량씩 혼합하고, 이 온도에서 3 시간 동안 교반하였다. 0 ℃로 냉각된, 디메틸포름아미드 60 ml에 용해된 디에틸렌트리아민 5.57 g(53.95 mmol)을 제조된 활성 에스테르 용액에 적가하고, 0 ℃에서 2 시간 및 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 워킹업을 위해, 침전된 디시클로헥실우레아를 여과 제거하고, 용매를 건조될 때까지 휘발시켰다. 얻어진 잔사를 실시카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: 디클로로메탄/에탄올 15:1; 에탄올 분율을 연속적으로 증가시키는 용매 구배를 사용하여 크로마토그래피 수행).
수율: 매우 점성인 무색 오일 형태의 표제 화합물 26.0 g(이론치의 58.8%, 사용된 아민 성분에 대한 것임).
원소 분석:
계산치: C 52.74 H 5.78 N 11.96 F 13.90
실측치: C 52.66 H 5.89 N 11.88 F 14.02
b) 1,4,7-트리아자헵탄-1,7-비스(2-N-트리플루오로아세틸-6-N-벤질옥시카르보닐-L-리신)-디아미드-4-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸
테트라히드로푸란 50 ml에 용해된 2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노아세트산(DE 193 03 033에 따라 제조) 16.18 g(27.0 mmol)을 0 ℃의 질소 분위기 하에서, 테트라히드로푸란 150 ml 및 클로로포름 15 ml에 용해된, 실시예 14a)에 따라 제조된 디아미드 20 g(24.4 mmol)의 용액에 첨가하였다. 0 ℃에서 EEDQ(2-에톡시-1,2-디히드로퀴놀린-1-카르복실산 에틸 에스테르) 18.0 g(36.6 mmol)을 소량씩 첨가하고, 실온에서 밤새 교반한 다음, 진공에서 증발 농축하였다. 잔류 오일을 실리카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: n-헥산/이소프로판올 15:1). 표제 화합물 24.74 g(이론치의 72.4%, 사용된 2차 아민에 대한 것임)을 무색 오일 형태로 얻었다.
원소 분석:
계산치: C 42.01 H 3.96 F 31.19 N 8.00 S 2.29
실측치: C 41.92 H 4.07 F 31.22 N 7.87 S 2.34
c) 1,7-비스(6-N-벤질옥시카르보닐-L-리신)-디아미드-4-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-1,4,7-트리아자헵탄
실시예 14b)에 따라 제조된 표제 화합물 22.0 g(15.7 mmol)을 에탄올 100 ml에 용해시키고, 암모니아 기체를 0 ℃에서 40분 동안 도입하였다. 0 ℃에서 4 시간 및 실온에서 3 시간 동안 교반하고, 40 ℃의 진공에서 증발 건조시켰다. 유성잔사를 디클로로메탄/헥산/2-프로판올(20:10:1)을 용리제로 하여 실리카 겔로 정제하였다.
수율: 매우 점성인 무색 오일의 표제 화합물 12.92 g(이론치의 98.4%)
원소 분석:
계산치: C 44.22 H 4.64 N 9.38 S 2.68 F 27.03
실측치: C 44.31 H 4.72 N 9.30 S 2.74 F 26.99
d) 1,7-비스-[6-N-벤질옥시카르보닐-2-N-(1-O-α-D-카르보닐메틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스)-L-리신]-디아미드-4-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-1,4,7-트리아자헵탄
1-카르복시메틸옥시-2,3,4-테트라-O-벤질-α-D-만노피라노시드(DE 197 28 954 C1에 기재된 바에 따라 제조) 5.47 g(9.15 mmol)을 디메틸포름아미드 80 ml에 용해시키고, N-히드록시숙신이미드 1.05 g(9.15 mmol)과 혼합하였다. 0 ℃로 냉각시키고, 디시클로헥실카르보디이미드 1.9 g(9.15 mmol)을 첨가하였다. 0 ℃에서 1 시간 및 실온에서 4 시간 동안 교반하였다. 0 ℃로 냉각시키고, 디메틸포름아미드 50 ml에 용해된, 실시예 14c)에 기재된 아미노 화합물 7.65 g(9.15 mmol)의 용액을 3 시간 이내에 서서히 적가하였다. 0 ℃에서 1 시간 및 실온에서 밤새 교반하였다. 진공에서 증발 건조시키고, 잔사를 에틸 아세테이트 100 ml에 용해시켰다. 침전된 우레아를 여과 제거하고, 여액을 5% 소다 수용액으로 각 50 ml씩 2회 세척하였다. 유기상을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 실리카 겔(이동상: n-헥산/이소프로판올 20:1)로 크로마토그래피하였다.표제 화합물 17.01 g(이론치의 78.9%, 사용된 카르복실산에 대한 것임)을 무색 오일 형태로 얻었다.
원소 분석:
계산치: C 59.13 H 5.43 N 4.76 F 13.71 S 1.36
실측치: C 59.22 H 5.39 N 4.85 F 13.70 S 1.40
e) 1,7-비스-[2-N-(1-O-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스)-L-리신]-디아미드-4-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-1,4,7-트리아자헵탄
실시예 14d)에서 제조된 아미드 15.0 g(6.36 mmol)을 에탄올 150 ml에 용해시키고, 펄만 촉매(Pd 20%, C) 0.5 g과 혼합하였다. 더 이상의 수소 흡수가 관찰되지 않을 때까지 수소 분위기(1 atm) 하의 실온에서 수소화 반응시켰다. 촉매를 흡인 제거하고, 에탄올(약 100 ml)로 완전히 재세척하고, 진공에서 증발 건조시켰다. 표제 화합물을 매우 점성인 누르스름한 오일로서 얻었다.
수율: 8.54 g(이론치의 97.2%)
원소 분석:
계산치: C 39.13 H 5.04 N 8.11 F 23.38 S 2.32
실측치: C 39.07 H 4.98 N 8.18 F 23.40 S 2.30
f) 1,7-비스-[2-N-(1-O-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스)-6-N-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-10-(3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일-펜타노일)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸]-L-리신]-디아미드-4-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-1,4,7-트리아자헵탄, 디가돌리늄 착물
특허 출원 DE 197 28 954 C1의 실시예 31h)에 기재된, 무수 디메틸 술폭시드 75 ml 중 10-(4-카르복시-1-메틸-2-옥소-3-아자부틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7-트리아세트산, Gd 착물 5.7 g(9.06 mmol)의 교반된 현탁액을 70 ℃에서 염화리튬 0.68 g(15.9 mmol)과 혼합하였다. 70 ℃에서 30분 동안 교반한 후, 투명한 반응 용액을 N-히드록시숙신이미드 1.83 g(15.9 mmol)과 소량씩 혼합하고, 반응 혼합물을 이 온도에서 1 시간 동안 유지하였다. 0 ℃로 냉각시킨 후, 디시클로헥실카르보디이미드 4.52 g(23.85 mmol)과 혼합하고, 반응 용액을 0 ℃에서 1 시간 및 22 ℃에서 12 시간 동안 교반하였다. 얻어진 10-(4-카르복시-1-메틸-2-옥소-3-아자부틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7-트리아세트산, Gd 착물의 N-히드록시숙신이미드 에스테르의 반응 용액을 22 ℃에서 무수 디메틸 술폭시드 15 ml 중 실시예 14e)의 표제 화합물 2.84 g(2.06 mmol)의 용액과 점적 혼합하고, 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 워킹업을 위해, 22 ℃에서 반응 용액을 아세톤 500 ml에 적가하였을 때, 표제 화합물이 무색 침전물로 침전하였다. 침전물을 흡인 여과하고, 증류수 200 ml에 용해시키고, 탈염 및 저분자 성분의 분리를 위해 YM-3 초여과막(AMICON(등록상표); 절단: 3,000 Da)으로 3회 초여과하였다. 얻어진 잔류물을 동결 건조하였다.
수율: 수분 함량이 8.98%인 무색 동결건조물 4.80 g(이론치의 89.6%; 사용된 아민 성분에 대한 것임)
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 38.28 H 4.84 N 9.68 F 12.40 S 1.23 Gd 12.07
실측치: C 38.20 H 4.91 N 9.77 F 12.45 S 1.19 Gd 12.10
실시예 15
a) 1,7-비스(벤질옥시카르보닐)-4-{3-옥사-펜탄-1,5-디카르복실산-1-오일-5-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드}-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸
테트라히드로푸란 150 ml에 용해된 실시예 15e)의 표제 화합물 16.56 g(24.4 mmol)을 0 ℃의 질소 분위기 하에서 테트라히드로푸란 150 ml 및 클로로포름 15 ml에 용해된 1,7-비스(벤질옥시카르보닐)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸 10.75 g(24.4 mmol)의 용액에 첨가하였다. EEDQ(2-에톡시-1,2-디히드로퀴놀린-1-카르복실산 에틸 에스테르) 18.0 g(36.6 mmol)을 0 ℃에서 소량씩 첨가하고, 실온에서 밤새 교반한 다음, 진공에서 증발 농축하였다. 잔류 오일을 실리카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: n-헥산/이소프로판올 12:1). 모노아미드 17.22 g(이론치의 64.3%, 사용된 2차 아민에 대한 것임) 및 디아미드 3.8 g(이론치의 8.8%)를 부산물로 얻었다. 표제 화합물을 무색 오일 형태로 단리하였다.
원소 분석:
계산치: C 43.41 H 3.92 F 29.18 N 7.59 S 2.60
실측치: C 43.52 H 4.07 F 29.24 N 7.67 S 2.55
b) 1,7-비스(벤질옥시카르보닐)-4-{3-옥사-펜탄-1,5-디카르복실산-1-오일-5-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드}-10-[1-O-α-D-(5-카르보닐)-펜틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스]-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸
실시예 10c)에 따라 제조된 카르복실산 10.0 g(13.4 mmol) 및 N-히드록시숙신이미드 3.24 g(28.1 mmol)을 디메틸포름아미드 100 ml에 용해시키고, 0 ℃에서 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 5.8 g(28.1 mmol)과 소량씩 혼합하고, 이 온도에서 3 시간 동안 교반하였다. 0 ℃로 냉각된, 디메틸포름아미드 100 ml에 용해된 실시예 15a)의 표제 화합물 14.83 g(13.4 mmol)의 용액을 제조된 활성 에스테르 용액에 적가하고, 0 ℃에서 2 시간 및 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 워킹업을 위해, 침전된 디시클로헥실우레아를 여과 제거하고, 용매를 증발 건조시켰다. 얻어진 잔사를 실시카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: 디클로로메탄/에틸 아세테이트 20:1; 에틸 아세테이트 분율을 연속적으로 증가시키는 용매 구배를 사용하여 크로마토그래피 수행).
수율: 매우 점성인 무색 오일 형태의 표제 화합물 18.3g(이론치의 78.2%).
원소 분석:
계산치: C 55.11 H 5.03 N 4.82 F 18.52 S 1.84
실측치: C 54.87 H 4.85 N 4.92 F 18.55 S 1.86
c) 1-{3-옥사-펜탄-1,5-디카르복실산-1-오일-5-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드}-7-[1-O-α-D-(5-카르보닐)-펜틸-만노피라노스]-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸
실시예 14b)에 따라 제조된 화합물 17.0 g(9.75 mmol)을 에탄올 150 ml에 용해시키고, 펄만 촉매(Pd 20%, C) 1.0 g과 혼합하고, 더 이상의 수소 흡수가 관찰되지 않을 때까지 수소 분위기(1 atm) 하의 실온에서 수소화반응시켰다. 촉매를 흡인 제거하고, 에탄올(각 75 ml씩 2회)로 완전히 재세척하고, 진공에서 증발 건조시켰다. 표제 화합물을 매우 점성인 무색 오일로서 얻었다.
수율: 10.76 g(이론치의 99.0%)
원소 분석:
계산치: C 38.78 H 4.61 N 7.54 F 28.97 S 2.88
실측치: C 38.86 H 4.65 N 7.41 F 29.02 S 2.92
d) 1,7-비스[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-Gd 착물-10-(펜타노일-3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일)-4-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-2-옥사-아세틸]-10-[1-O-α-D-6-카르보닐펜틸-만노피라노스]-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸
특허 출원 DE 197 28 954 C1의 실시예 31h)에 기재된 10-(4-카르복시-1-메틸-2-옥소-3-아자부틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7-트리아세트산, Gd 착물 24.86 g(39.46 mmol, 사용된 실시예 15c)의 아민 성분에 대하여 4.4몰 당량) 및 염화리튬 무수물 1.67 g(39.46 mmol)을 40 ℃에서 무수 디메틸 술폭시드 200 ml에 교반하면서 용해시켰다. 이 온도에서, 무수 디메틸 술폭시드 100 ml에 용해된 N-히드록시숙신이미드 4.53 g(39.46 mmol) 및 실시예 14c)의 표제 화합물 10.0 g(8.97 mmol)과 혼합하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 용액을 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 8.14 g(39.46 mmol)과 혼합하고, 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 얻어진 현탁액을 표제 화합물의 침전이 완결될 때까지 충분량의 아세톤과 혼합하고, 침전물을 흡인 여과하고, 건조시키고, 물에 용해시키고, 불용성 디시클로헥실우레아를 여과 제거하고, 여액을 AMICON(등록상표) YM-3 초여과막(절단: 3,000 Da)으로 탈염하고, 저분자 성분을 제거하였다. 잔류물을 동결 건조하였다.
수율: 무색의 동결건조물 16.37 g(이론치의 79.3%)
수분 함량(칼-피셔): 7.65%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 38.01 H 4.61 N 9.58 F 13.81 S 1.37 Gd 13.45
실측치: C 37.92 H 4.55 N 9.58 F 13.77 S 1.31 Gd 13.48
e) 3-옥사-펜탄-1,5-디카르복실산-모노-[1-4-(퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
1-퍼플루오로옥틸술포닐피페라진 25 g(44.0 mmol)을 테트라히드로푸란 150 ml에 용해시키고, 실온에서 디글리콘산 무수물 5.1 g(44.0 mmol)과 혼합하고, 얻어진 반응 용액을 12 시간 동안 환류시켰다. 실온으로 냉각시킨 후, 증발 건조시키고, 유성 잔사를 디클로로메탄/2-프로판올(16:1)을 용리제로 하여 실리카 겔로 정제하였다.
수율: 무색의 점성 오일 형태의 표제 화합물 27.94 g(이론치의 92.8%)
원소 분석:
계산치: C 58.52 H 4.27 N 1.98 S 2.26 F 22.80
실측치: C 58.42 H 4.41 N 1.80 S 2.28 F 23.02
실시예 16
a) 1,7-비스(벤질옥시카르보닐)-4-{3-옥사-펜탄-1,5-디카르복실산-1-오일-5-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드}-10-[1-O-β-D-6-카르보닐펜틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-글루코피라노스]-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸
1-카르복시메틸옥시-2,3,4-테트라-O-벤질-α-D-만노피라노시드(DE 197 28 954 C1에 기재된 바에 따라 제조) 68.5 g(91.79 mmol)을 무수 테트라히드로푸란 750 ml에 용해시키고, 트리에틸아민 9.25 g(91.79 mmol)을 첨가하였다. 반응 용액을 -15 ℃ 내지 -20 ℃로 냉각시킨 후, 이 온도에서, 무수 테트라히드로푸란 150 ml 중 이소부틸 클로로포르메이트 12.64 g(92.5 mmol)의 용액을 교반하면서 서서히 적가하였고, 이 때 적가 속도는 내부 온도가 -10 ℃ 이하로 유지되도록 선택될 수 있다. -15 ℃에서 15분 후, 무수 테트라히드로푸란 500 ml 중 실시예 15a)의 표제 화합물 101.6 g(91.79 mmol) 및 트리에틸아민 9.25 g(91.79 mmol)의 용액을 -20 ℃에서 서서히 적가하였다. -15 ℃에서 1 시간 및 실온에서 2 시간 후, 반응 용액을 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트 450 ml에 용해시키고, 포화 중탄산나트륨 용액(각 회당 300 ml)으로 2회 및 물(400 ml)로 1회 세척하였다. 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시킨 후, 염을 흡인 제거하고, 에틸 아세테이트를 진공에서 휘발시켰다. 유성 잔사를 디클로로메탄/헥산/2-프로판올(10:20:1)을 용리제로 하여 실리카 겔로 정제하였다.
수율: 매우 점성의 무색 오일인 표제 화합물 130.6 g(이론치의 81.6%)
원소 분석:
계산치: C 55.11 H 5.03 N 4.82 F 18.52 S 1.84
실측치: C 55.20 H 5.09 N 4.91 F 18.48 S 1.80
b) 1-{3-옥사-펜탄-1,5-디카르복실산-1-오일-5-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드}-7-[1-O-α-D-(5-카르보닐)-펜틸-만노피라노스]-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸
실시예 16a)에서 제조된 화합물 110.0 g(63.08 mmol)을 에탄올 1000 ml에 용해시키고, 펄만 촉매(Pd 20%, C) 5.0 g과 혼합하고, 더 이상의 수소 흡수가 관찰되지 않을 때까지 수소화반응시켰다. 촉매를 흡인 제거하고, 에탄올로 완전히 재세척하고, 진공에서 증발 건조시켰다. 표제 화합물을 점성인 무색 오일로서 얻었다.
수율: 92.61 g(이론치의 99.5%)
원소 분석:
계산치: C 52.10 H 5.12 N 5.70 F 21.89 S 2.17
실측치: C 52.20 H 5.09 N 5.71 F 21.87 S 2.20
c) 1,7-비스-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)]-10-(3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일-펜타노일)-4-{3-옥사-펜탄-1,5-디카르복실산-1-오일-5-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드}-10-[1-O-α-D-(5-카르보닐)-펜틸-만노피라노스]-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸, 디가돌리늄 착물
특허 출원 DE 197 28 954 C1의 실시예 31h)에 기재된 10-(4-카르복시-1-메틸-2-옥소-3-아자부틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7-트리아세트산, Gd 착물 55.4 g(88.0 mmol, 사용된 실시예 13d)의 디아민 성분에 대하여 4.4몰 당량) 및 염화리튬 무수물 3.7 g(88.0 mmol)을 40 ℃에서 무수 디메틸 술폭시드 500 ml에 교반하면서 용해시키고, 이 온도에서, 무수 디메틸 술폭시드 200 ml에 용해된 N-히드록시숙신이미드 10.1 g(88.0 mmol) 및 실시예 16b)의 표제 화합물 29.5 g(20.0 mmol)과 혼합하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 용액을 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 18.2 g(88.0 mmol)과 혼합하고, 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 얻어진 현탁액을 표제 화합물의 침전이 완결될 때까지 충분량의 아세톤과 혼합하고, 침전물을 흡인 여과하고, 건조시키고, 물에 용해시키고, 불용성 디시클로헥실우레아를 여과 제거하고, 여액을 AMICON(등록상표) YM-3 초여과막(절단: 3,000 Da)으로 탈염하고, 저분자 성분을 제거하였다. 잔류물을 동결 건조하였다.
수율: 무색의 동결건조물 35.96 g(이론치의 76.9%)
수분 함량(칼-피셔): 5.98%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 38.01 H 4.61 N 8.22 F 13.81 Gd 13.45 S 1.37
실측치: C 37.87 H 4.70 N 8.22 F 13.90 Gd 13.48 S 1.36
실시예 17
a) 5-(에톡시카르보닐)펜틸-2,3,4,6-테트라-O-아세틸-α-D-만노피라노시드
아릴 글리코피라노시드의 합성에 대한 문헌[J. Conchie and G. A. Levvy in Methods in Carbohydrate Chemistry (R. L. Whistler, M. L. Wolfrom and J. N.BeMiller, Eds.), Academic Press, New York, Vol. II, 90, pp. 345-347, (1963)]에 기재된 것과 유사하게, α,β(α,β비율 = 4:1)-아노머 혼합물인 D-만노스펜타아세테이트(1,2,3,4,6-펜타-O-아세틸-α,β-D-만노피라노스의 합성에 대해, M. L. Wolfrom and A. Thompson in Methods in Carbohydrate Chemistry (R. L. Whistler, M. L. Wolfrom and J. N. BeMiller, Eds.), Academic Press, New York, Vol. II, 53, pp. 211-215, (1963) 참조) 156.2 g(400 mmol)을 1,2-디클로로에탄 600 ml 중 6-히드록시-헥산산 에틸 에스테르 67 ml(400 mmol) 및 염화주석(IV) 60.8 ml(520 mmol)과 반응시켜, 칼럼 크로마토그래피 정제(용리제: 헥산/에틸 아세테이트 2:1) 후, 표제 화합물 100.05 g(이론치의 51%)를 점성의 무색 오일로서 얻었다. 얻어진 표제 화합물의1H-NMR 분광학 연구에 의해, 표제 화합물이 순수한 α-아노머임이 밝혀졌다.
원소 분석:
계산치: C 52.94 H 6.77
실측치: C 52.80 H 6.78
b) 5-(카르복시)펜틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-α-D-만노피라노시드
디옥산 200 ml 중 실시예 17a)의 표제 화합물 141.0 g(289 mmol)의 교반된 용액을 실온에서 격렬히 교반하면서 수산화칼륨 미분말 238.5 g(4.26 mmol)과 소량씩 혼합하였다. 교반을 더 용이하게 하기 위해, 반응 혼합물을 추가의 디옥산 200 ml와 혼합하고, 얻어진 현탁액을 끓는점까지 가열하고, 이 온도에서 2 시간에 걸쳐브롬화벤질 372 ml(3.128 mol)과 점적 혼합하였다. 110 ℃에서 4 시간 및 실온에서 12 시간 후, 워킹업을 위해 반응 혼합물을 빙수 2.5 L에 서서히 쏟아붓고, 수성상을 디에틸 에테르로 완전히 추출하였다. 얻어진 에테르상을 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시킨 후, 염을 흡인 제거하고, 디에틸 에테르를 진공에서 휘발시켰다. 과량의 브롬화벤질을 180 ℃의 오일조의 오일 펌프 진공에서 반응 혼합물로부터 정량적으로 증류 제거하였다. 얻어진 수지양 유성 잔사를 에틸 아세테이트/헥산(1:10)을 용리제로 하여 실리카 겔로 정제하였다.
수율: 매우 점성인 무색 오일 형태의 표제 화합물 172.2 g(이론치의 91.0%).
원소 분석:
계산치: C 75.68 H 7.16
실측치: C 75.79 H 7.04
c) 5-[(카르복시)펜틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-α-D-만노피라노시드] N-히드록시숙신이미드 에스테르
실시예 17b)의 표제 화합물 60.0 g(91.5 mmol)을 디메틸포름아미드 750 ml에 용해시키고, N-히드록시숙신이미드 10.4 g(91.5 mmol)과 혼합하였다. 0 ℃로 냉각시키고, 디시클로헥실카르보디이미드 18.9 g(91.5 mmol)을 첨가하였다. 0 ℃에서 1 시간 및 실온에서 4 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공에서 휘발시키고, 잔사를 에틸 아세테이트 100 ml와 혼합하고, 0 ℃로 냉각시켰다. 침전된 우레아를 여과 제거하고, 여액을 진공에서 증발 건조시켰다. 얻어진 수지양 유성 잔사를 에틸 아세테이트/헥산(1:20)을 용리제로 하여 실리카 겔로 정제하였다.
수율: 점성의 무색 오일 형태의 표제 화합물 61.23 g(이론치의 89.0%)
원소 분석:
계산치: C 70.29 H 6.57 N 1.86
실측치: C 70.39 H 5.64 N 1.91
d) 2,6-비스-{6-Nξ-2-Nα-[1-O-α-D-6-카르보닐-펜틸-(2,3,4,6-테트라-O-벤질)-만노피라노스]-L-리신}-메틸 에스테르
디메틸포름아미드 150 ml 중 실시예 17c)의 표제 화합물 27.51 g(36.6 mmol)의 용액을 0 ℃로 냉각된, 디메틸포름아미드 100 ml중 L-리신 메틸 에스테르-디히드로클로리드(바켐사(Bachem Company)로부터 입수 가능) 4.26 g(18.30 mmol, 사용된 카르복실산에 대하여 0.5몰 당량) 및 트리에틸아민 4.05 g(40.26 mmol)의 용액에 적가하였다. 적가가 완결된 후, 0 ℃에서 1 시간 및 실온에서 밤새 교반하였다. 진공에서 증발 건조시키고, 잔사를 에틸 아세테이트 300 ml에 용해시켰다. 침전된 우레아를 여과 제거하고, 여액을 5% 소다 수용액으로 각 100 ml씩 2회 세척하였다. 유기상을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 실리카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: n-헥산/이소프로판올 25:1). 표제 화합물 39.56 g(이론치의 75.4%)를 무색 오일 형태로 얻었다.
원소 분석:
계산치: C 72.88 H 7.31 N 1.95
실측치: C 72.90 H 7.29 N 2.02
e) 2,6-비스-{6-Nξ-2-Nα-[1-O-α-D-6-카르보닐-펜틸-(2,3,4,6-테트라-O-벤질)-만노피라노스]-L-리신}
실시예 17d)에 따라 제조된 화합물 30.0 g(20.92 mmol)을 에탄올 150 ml에 용해시켰다. 증류수 10 ml 중 수산화나트륨 4 g(100.0 mmol)의 용액을 첨가하고, 50 ℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 박층 크로마토그래피로 비누화가 정량적으로 일어났음을 확인하였다. 진공에서 증발 건조시키고, 잔사를 에틸 아세테이트 300 ml에 용해시키고, 유기상을 묽은 시트르산 수용액으로 각 100 ml씩 2회 추출하였다. 황산나트륨 상에서 건조시킨 후, 여과하고, 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 실리카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: n-헥산/이소프로판올 13:1). 표제 화합물 25.56 g(이론치의 88.5%)를 무색 오일 형태로 얻었다.
원소 분석:
계산치: C 72.88 H 7.31 N 1.95
실측치: C 72.78 H 7.33 N 1.96
f) 2,6-비스-{6-Nξ-2-Nα-[1-O-α-D-6-카르보닐-펜틸-(2,3,4,6-테트라-O-벤질)-만노피라노스]-L-리신}-N-히드록시숙신이미드 에스테르
실시예 17e)의 표제 화합물 14.0 g(9.15 mmol)을 디메틸포름아미드 100 ml에 용해시키고, N-히드록시숙신이미드 1.04 g(9.15 mmol)과 혼합하였다. 0 ℃로 냉각시키고, 디시클로헥실카르보디이미드 1.89 g(9.15 mmol)을 첨가하였다. 0 ℃에서 1 시간 및 실온에서 4 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공에서 휘발시키고, 잔사를 에틸 아세테이트 100 ml와 혼합하고, 0 ℃로 냉각시켰다. 침전된 우레아를 여과 제거하고, 여액을 진공에서 증발 건조시켰다. 얻어진 수지양 유성 잔사를 에틸 아세테이트/n-헥산(1:20)을 용리제로 하여 실리카 겔로 정제하였다.
수율: 점성의 무색 오일 형태의 표제 화합물 12.94 g(이론치의 92.4%)
원소 분석:
계산치: C 71.40 H 7.05 N 2.74
실측치: C 71.39 H 7.14 N 2.81
g) 2,6-N,N'-비스[1-O-α-D-(6-카르보닐)-펜틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스]-L-리신-1,7-(1,4,7-트리아자헵탄)-디아미드
디메틸포름아미드 100 ml 중 실시예 17f)의 표제 화합물 14.0 g(9.15 mmol, 사용된 아민에 대하여 2몰 당량)의 용액을 0 ℃로 냉각된, 디메틸포름아미드 25 ml 중 디에틸렌트리아민 0.47 g(4.57 mmol)의 용액에 서서히 적가하였다. 적가가 완결된 후, 0 ℃에서 1 시간 및 실온에서 밤새 교반하였다. 진공에서 증발 건조시키고, 잔사를 에틸 아세테이트 200 ml에 용해시켰다. 침전된 우레아를 여과 제거하고, 여액을 5% 소다 수용액으로 각 50 ml씩 2회 세척하였다. 유기상을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 실리카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: n-헥산/이소프로판올 25:1). 표제 화합물 9.53 g(이론치의 71.4%)를 무색 오일 형태로 얻었다.
원소 분석:
계산치: C 72.79 H 7.42 N 3.36
실측치: C 72.90 H 7.39 N 3.32
h) 2-N-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-6-N-(벤질옥시카르보닐)-L-리신-메틸 에스테르
2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노아세트산 20.8 g(35.6 mmol) 및 트리에틸아민 3.60 g(35.6 mmol)을 디메틸포름아미드 200 ml에 용해시키고, N-히드록시숙신이미드 4.09 g(35.6 mmol)을 첨가하였다. 0 ℃로 냉각시키고, 디시클로헥실카르보디이미드 7.34 g(35.6 mmol)을 첨가하였다. 0 ℃에서 1 시간 및 실온에서 4 시간 동안 교반하였다. 0 ℃로 냉각시키고, 디메틸포름아미드 100 ml 중 6-N-벤질옥시카르보닐-L-리신-메틸 에스테르-염산 11.77 g(35.6 mmol) 및 트리에틸아민 4.0 g(40.0 mmol)의 용액을 10분 이내에 적가하였다. 0 ℃에서 1 시간 및 실온에서 밤새 교반하였다. 진공에서 증발 건조시키고, 잔사를 에틸 아세테이트 100 ml에 용해시켰다. 침전된 우레아를 여과 제거하고, 여액을 5% 소다 수용액으로 각 100 ml씩 2회 세척하였다. 유기상을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 실리카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: 에틸 아세테이트/n-헥산 1:20). 무색 오일 27.43 g(이론치의 88.0%)를 얻었다.
원소 분석:
계산치: C 38.41 H 3.45 N 4.80 F 36.89 S 3.66
실측치: C 38.45 H 3.38 N 4.88 F 37.02 S 3.71
i) 2-Nα-{[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸}-6-Nξ-(벤질옥시카르보닐)-L-리신
실시예 17h)에 따라 제조된 화합물 25.0 g(28.55 mmol)을 에탄올 150 ml에 용해시켰다. 증류수 10 ml 중 수산화나트륨 4 g(100.0 mmol)의 용액을 첨가하고, 50 ℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 박층 크로마토그래피로 비누화가 정량적으로 일어났음을 확인하였다. 진공에서 증발 건조시키고, 잔사를 에틸 아세테이트 300 ml에 용해시키고, 유기상을 묽은 시트르산 수용액으로 각 100 ml씩 2회 추출하였다. 황산나트륨 상에서 건조시킨 후, 여과하고, 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 실리카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: n-헥산/이소프로판올 10:1). 표제 화합물 22.73 g(이론치의 92.4%)를 무색 오일 형태로 얻었다.
원소 분석:
계산치: C 37.64 H 3.28 N 4.88 F 37.49 S 3.72
실측치: C 37.65 H 3.38 N 4.88 F 37.52 S 3.73
j) 1,4,7-트리아자헵탄-4-{2-N-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-6-N-벤질옥시카르보닐}-L-리신-아미드-1,7-비스{2,6-N,N'-비스[1-O-α-D-(5-카르보닐)-펜틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스]-L-리신-디아미드}
실시예 17i)의 표제 화합물 15.33 g(17.8 mmol) 및 트리에틸아민 1.80 g(17.8 mmol)을 무수 테트라히드로푸란 250 ml에 용해시켰다. 반응 용액을 -15 ℃ 내지 -20 ℃로 냉각시킨 후, 이 온도에서, 무수 테트라히드로푸란 50 ml에 용해된 이소부틸 클로로포르메이트 4.92 g(35.6 mmol)의 용액을 교반하면서 서서히 적가하였고, 이 때 적가 속도는 내부 온도가 -10 ℃ 이하로 유지되도록 선택될 수 있다. -15 ℃에서 15분 후, 무수 테트라히드로푸란 300 ml 중 실시예 17g)의 표제 화합물 52.0 g(17.8 mmol) 및 트리에틸아민 1.80 g(17.8 mmol)의 용액을 -20 ℃에서 서서히 적가하였다. -15 ℃에서 1 시간 및 실온에서 2 시간 후, 반응 용액을 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트 500 ml에 용해시키고, 포화 중탄산나트륨 용액으로 각 200 ml씩 2회 및 물 200 ml로 1회 세척하였다. 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시킨 후, 염을 흡인 제거하고, 에틸 아세테이트를 진공에서 휘발시켰다. 유성 잔사를 에틸 아세테이트/n-헥산(1:20)을 용리제로 하여 실리카 겔로 정제하였다.
수율: 매우 점성의 무색 오일인 표제 화합물 54.6 g(이론치의 81.6%)
원소 분석:
계산치: C 65.09 H 6.45 N 3.72 F 8.58 S 0.85
실측치: C 65.13 H 4.41 N 3.69 F 8.52 S 0.90
k) 1,4,7-트리아자헵탄-4-{2-N-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸}-L-리신-아미드-1,7-비스{2,6-N,N'-비스[1-O-α-D-(5-카르보닐)-펜틸-만노피라노스]-L-리신-디아미드}
실시예 17j)에 따라 제조된 화합물 50.0 g(13.28 mmol)을 에탄올 500 ml에 용해시키고, 펄만 촉매(Pd 20%, C) 4.0 g과 혼합하고, 더 이상의 수소 흡수가 관찰되지 않을 때까지 수소 분위기(1 atm) 하의 실온에서 수소화반응시켰다. 촉매를흡인 제거하고, 에탄올(약 400 ml)로 완전히 재세척하고, 진공에서 증발 건조시켰다. 표제 화합물을 매우 점성의 무색 오일로서 얻었다.
수율: 26.85 g(이론치의 93.0%)
원소 분석:
계산치: C 45.85 H 6.35 N 6.44 F 14.86 S 1.47
실측치: C 45.76 H 6.35 N 6.41 F 14.92 S 1.39
l) 1,4,7-트리아자헵탄-4-{2-N-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-6-N-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-10-(3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일-펜타노일)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸]}-L-리신-아미드-1,7-비스{2,6-N,N'-비스[1-O-α-D-(5-카르보닐)-펜틸-만노피라노스]-L-리신-디아미드}, 가돌리늄 착물
특허 출원 DE 197 28 954 C1의 실시예 31h)에 기재된 10-(4-카르복시-1-메틸-2-옥소-3-아자부틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7-트리아세트산, Gd 착물 5.54 g(8.8 mmol, 사용된 실시예 17k)의 아민 성분에 대하여 2.2몰 당량) 및 염화리튬 무수물 0.37 g(8.8 mmol)을 40 ℃에서 무수 디메틸 술폭시드 60 ml에 교반하면서 용해시키고, 이 온도에서, 무수 디메틸 술폭시드 40 ml에 용해된 N-히드록시숙신이미드 1.01 g(8.8 mmol) 및 실시예 17k)의 표제 화합물 1.84 g(4.0 mmol)과 혼합하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 용액을 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 1.82 g(8.8 mmol)과 혼합하고, 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 얻어진 현탁액을 표제 화합물의 침전이 완결될 때까지 충분량의 아세톤과 혼합하고, 침전물을 흡인 여과하고, 건조시키고, 물에 용해시키고, 불용성 디시클로헥실우레아를 여과 제거하고, 여액을 AMICON(등록상표) YM-3 초여과막(절단: 3,000 Da)으로 탈염하고, 저분자 성분을 제거하였다. 잔류물을 동결 건조하였다.
수율: 무색의 동결건조물 8.77 g(이론치의 78.7%)
수분 함량(칼-피셔): 4.43%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 43.98 H 5.97 N 7.54 F 11.59 Gd 5.64 S 1.15
실측치: C 43.97 H 6.02 N 7.62 F 11.61 Gd 10.18 S 1.15
실시예 18
a) 2-Nα-6-Nξ-비스-[1-O-α-D-카르보닐메틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스]-L-리신-메틸 에스테르
1-카르복시메틸옥시-2,3,4-테트라-O-벤질-α-D-만노피라노시드(DE 197 28 954 C1에 기재된 바에 따라 제조) 10.95 g(18.30 mmol)을 디메틸포름아미드 150 ml에 용해시키고, N-히드록시숙신이미드 2.09 g(18.3 mmol)과 혼합하였다. 0 ℃로 냉각시키고, 디시클로헥실카르보디이미드 3.78 g(18.3 mmol)을 첨가하였다. 0 ℃에서 1 시간 및 실온에서 4 시간 동안 교반하였다. 0 ℃로 냉각시키고, 디메틸포름아미드 70 ml 중 L-리신-메틸 에스테르-2염산(바켐사로부터 입수 가능) 2.13 g(9.15 mmol, 사용된 카르복실산에 대하여 0.5몰 당량) 및 트리에틸아민 2.02 g(20.13 mmol)의 용액을 1 시간 이내에 첨가하였다. 첨가가 완결된 후, 0 ℃에서1 시간 및 실온에서 밤새 교반하였다. 진공에서 증발 건조시키고, 잔사를 에틸 아세테이트 300 ml에 용해시켰다. 침전된 우레아를 여과 제거하고, 여액을 5% 소다 수용액으로 각 100 ml씩 2회 세척하였다. 유기상을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 실리카 겔(이동상: n-헥산/이소프로판올 25:1)로 크로마토그래피하였다. 표제 화합물 10.05 g(이론치의 82.3%)을 무색 오일 형태로 얻었다.
원소 분석:
계산치: C 71.94 H 6.79 N 2.10
실측치: C 71.90 H 6.79 N 2.09
b) 2-Nα-6-Nξ-비스-[1-O-α-D-카르보닐메틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스]-L-리신
관련 표제 화합물의 합성에 대해 실시예 17e)에 기재된 것과 유사하게, 실시예 18a)의 표제 화합물 15 g(11.23 mmol)을 메틸 에스테르 비누화반응시켜, 표제 화합물 13.89 g(이론치의 93.6%)을 점성의 무색 오일 형태로 얻었다.
원소 분석:
계산치: C 71.80 H 6.71 N 2.12
실측치: C 71.84 H 6.69 N 2.15
c) 2-Nα-6-Nξ-비스-[1-O-α-D-카르보닐메틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스]-L-리신-N-히드록시숙신이미드 에스테르
실시예 18b)의 표제 화합물 12.09 g(9.15 mmol)을 디메틸포름아미드 100 ml에 용해시키고, N-히드록시숙신이미드 1.04 g(9.15 mmol)을 첨가하였다. 0 ℃로 냉각시키고, 디시클로헥실카르보디이미드 1.89 g(9.15 mmol)을 첨가하였다. 0 ℃에서 1 시간 및 실온에서 4 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공에서 휘발시키고, 잔사를 에틸 아세테이트 100 ml와 혼합하고, 0 ℃로 냉각시켰다. 침전된 우레아를 여과 제거하고, 여액을 진공에서 증발 건조시켰다. 얻어진 수지양 유성 잔사를 에틸 아세테이트/n-헥산(1:20)을 용리제로 하여 실리카 겔로 정제하였다.
수율: 점성의 무색 오일 형태의 표제 화합물 12.24 g(이론치의 94.4%)
원소 분석:
계산치: C 70.27 H 6.47 N 2.96
실측치: C 70.31 H 6.44 N 3.01
d) 6-N-벤질옥시카르보닐-2-N-{[2,6-N,N'-비스(1-O-α-D-카르보닐메틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스)]-L-리실}-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
실시예 18c)에서 제조된 카르복실산-N-히드록시숙신이미드 에스테르 19.0 g(13.4 mmol)을 디메틸포름아미드 75 ml에 용해시키고, 0 ℃에서 0 ℃로 냉각된, 디메틸포름아미드 50.0 ml에 용해된 실시예 1c)의 표제 화합물 11.13 g(13.4 mmol)의 용액과 점적 혼합하였다. 생성된 반응 용액을 0 ℃에서 2 시간 및 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 워킹업을 위해, 침전된 디시클로헥실우레아를 여과 제거하고, 용매를 진공에서 증발 건조시켰다. 얻어진 잔사를 실시카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: 디클로로메탄/에탄올 28:1; 에탄올 분율을 연속적으로 증가시키는 용매 구배를 사용하여 크로마토그래피를 수행함).
수율: 매우 점성인 무색 오일 형태의 표제 화합물 25.28 g(이론치의 88.4%).
원소 분석:
계산치: C 59.10 H 5.34 N 3.94 F 15.13 S 1.50
실측치: C 59.18 H 5.35 N 4.02 F 15.15 S 1.56
e) 2-N-{[2,6-N,N'-비스(1-O-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스)]-L-리실}-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
실시예 18d)에 따라 제조된 화합물 20.0 g(9.37 mmol)을 에탄올 200 ml에 용해시키고, 펄만 촉매(Pd 20%, C) 1.5 g과 혼합하고, 더 이상의 수소 흡수가 관찰되지 않을 때까지 수소 분위기(1 atm) 하의 실온에서 수소화반응시켰다. 촉매를 흡인 제거하고, 에탄올(약 100 ml씩 2회)로 완전히 재세척하고, 진공에서 증발 건조시켰다. 표제 화합물을 매우 점성인 무색 오일로서 얻었다.
수율: 11.62 g(이론치의 97.0%)
원소 분석:
계산치: C 38.50 H 4.65 N 6.57 F 25.25 S 2.51
실측치: C 38.46 H 4.65 N 6.51 F 25.23 S 2.52
f) 6-N-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-10-(3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일-펜타노일)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸]-2-N-{[2,6-N,N'-비스(1-O-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스)]-L-리실}-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드, Gd 착물
특허 출원 DE 197 28 954 C1의 실시예 31h)에 기재된 10-(4-카르복시-1-메틸-2-옥소-3-아자부틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7-트리아세트산, Gd 착물 9.98 g(15.84 mmol, 사용된 실시예 18e)의 아민 성분에 대하여 2.2몰 당량) 및 염화리튬 무수물 0.67 g(15.84 mmol)을 40 ℃에서 무수 디메틸 술폭시드 100 ml에 교반하면서 용해시키고, 이 온도에서, 무수 디메틸 술폭시드 50 ml에 용해된 N-히드록시숙신이미드 1.82 g(15.84 mmol) 및 실시예 18e)의 표제 화합물 9.19 g(7.19 mmol)과 혼합하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 용액을 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 3.27 g(15.84 mmol)과 혼합하고, 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 얻어진 현탁액을 표제 화합물의 침전이 완결될 때까지 충분량의 아세톤과 혼합하고, 침전물을 흡인 여과하고, 건조시키고, 물에 용해시키고, 불용성 디시클로헥실우레아를 여과 제거하고, 여액을 AMICON(등록상표) YM-3 초여과막(절단: 3,000 Da)으로 탈염하고, 존재할 수도 있는 저분자 성분을 동시에 제거하였다. 잔류물을 동결 건조하였다.
수율: 무색의 동결건조물 11.85 g(이론치의 87.2%)
수분 함량(칼-피셔): 5.54%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 38.12 H 4.64 N 8.15 F 20.38 S 1.70 Gd 8.32
실측치: C 38.16 H 4.59 N 8.18 F 20.37 S 1.68 Gd 8.28
실시예 19
a) 1,7-비스(벤질옥시카르보닐)-4-(3-옥사-2H,2H,4H,4H,5H,5H-퍼플루오로트리데카노일)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸
테트라히드로푸란 150 ml에 용해된 실시예 19g)의 표제 화합물 12.74 g(24.4 mmol)을 0 ℃의 질소 분위기 하에서, 테트라히드로푸란 150 ml 및 클로로포름 15 ml에 용해된 1,7-비스(벤질옥시카르보닐)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸 10.75 g(24.4 mmol)의 용액에 첨가하였다. 0 ℃에서 EEDQ(2-에톡시-1,2-디히드로퀴놀린-1-카르복실산 에틸 에스테르) 18.0 g(36.6 mmol)을 소량씩 첨가하고, 실온에서 밤새 교반한 다음, 진공에서 증발 농축하였다. 잔류 오일을 실리카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: n-헥산/이소프로판올 16:1). 모노아미드 15.89 g(이론치의 69.0%, 사용된 2차 아민에 대한 것임) 및 디아미드 3.8 g(이론치의 8.8%)를 부산물로 얻었다. 표제 화합물을 무색 오일 형태로 단리하였다.
원소 분석:
계산치: C 45.77 H 3.95 F 34.19 N 5.93
실측치: C 45.72 H 4.01 F 34.22 N 5.88
b) 1,7-비스(벤질옥시카르보닐)-4-(3-옥사-2H,2H,4H,4H,5H,5H-퍼플루오로트리데카노일)-10-[1-S-α-D-(2-카르보닐)-에틸-2,3,4,6-테트라-O-아세틸-만노피라노스]-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸
3-(2,3,4,6-테트라-O-아세틸-1-티오-α-D-만노피라노실)-프로피온산-N-히드록시숙신이미드 에스테르(J. Haensler et al., Bioconjugate Chem. 4, 85, (1993); Chipowsky, S., and Lee, Y. C. (1973), Synthesis of 1-Thio-aldosides;Carbohydrate Research 31, 339-346에 따라 제조) 7.09 g(13.4 mmol)을 디메틸포름아미드 100 ml에 용해시키고, 0 ℃에서 0 ℃로 냉각된, 디메틸포름아미드 100 ml에 용해된 실시예 19a)의 표제 화합물 12.65 g(13.4 mmol)의 용액과 점적 혼합하였다. 이것을 0 ℃에서 2 시간 및 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 워킹업을 위해, 용매를 진공에서 증발 건조시키고, 얻어진 잔사를 실시카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: 디클로로메탄/에틸 아세테이트 20:1; 에틸 아세테이트 분율을 연속적으로 증가시키는 용매 구배를 사용하여 크로마토그래피를 수행함).
수율: 매우 점성인 무색 오일 형태의 표제 화합물 16.23 g(이론치의 88.9%).
원소 분석:
계산치: C 46.70 H 4.36 N 4.11 F 23.69 S 2.35
실측치: C 46.66 H 4.35 N 4.12 F 23.65 S 2.30
c) 1-(3-옥사-2H,2H,4H,4H,5H,5H-퍼플루오로트리데카노일)-7-[1-S-α-D-(2-카르보닐)-에틸-2,3,4,6-테트라-O-아세틸-만노피라노스]-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸
실시예 19b)에 따라 제조된 화합물 15.0 g(11.0 mmol)을 에탄올 150 ml에 용해시키고, 펄만 촉매(Pd 20%, C) 1.0 g과 혼합하고, 더 이상의 수소 흡수가 관찰되지 않을 때까지 수소 분위기(1 atm) 하의 실온에서 수소화반응시켰다. 촉매를 흡인 제거하고, 에탄올(각 75 ml로 2회)로 완전히 재세척하고, 진공에서 증발 건조시켰다. 표제 화합물을 매우 점성인 무색 오일로서 얻었다.
수율: 11.56 g(이론치의 96.0%)
원소 분석:
계산치: C 40.59 H 4.33 N 5.12 F 29.50 S 2.93
실측치: C 40.63 H 4.35 N 5.11 F 29.52 S 2.92
d) 1-(3-옥사-2H,2H,4H,4H,5H,5H-퍼플루오로트리데카노일)-7-[1-S-α-D-(2-카르보닐)-에틸-만노피라노스]-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸
실시예 19c)의 표제 화합물 10.0 g(9.13 mmol)을 무수 메탄올 100 ml에 현탁시키고, 5 ℃에서 촉매량의 나트륨 메탄올레이트와 혼합하였다. 실온에서 3 시간 후, 박층 크로마토그래피(용리제: 클로로포름/메탄올 4:1)로 반응이 정량적으로 일어났음을 확인하였다. 워킹업을 위해, 투명한 반응 용액을 암베리트(Amberlite) IR 120(H+형태)-양이온 교환 수지와 혼합하여 중성으로 하고, 교환체를 흡인 제거하고, 메탄올로 재세척하고, 얻어진 메탄올성 여액을 진공에서 증발 건조시켰다. 얻어진 유성 잔사를 실리카 겔로 칼럼 크로마토그래피하여 정제하였다(이동상: 디클로로메탄/n-헥산/에틸 아세테이트 15:20:1; 에틸 아세테이트 분율을 연속적으로 증가시키는 용매 구배로 크로마토그래피를 수행함). 표제 화합물의1H-NMR 분광학적 연구 후, J1,2= 0.9 Hz의 커플링 상수 크기에 기초하여 D-만노피라노스의 아노머 중심에 α-배열이 존재함을 명확히 확인하였다. 이 α-배열은 아노머 중심에서 유일하게 존재하는 배열이다. 즉, 형성될 수 있는 표제 화합물의 β-배열 아노머의 양은1H-NMR 분광학 검출 범위 아래에 존재한다. 따라서, 표제 화합물은 순수한α-배열 아노머 형태였다.
수율: 매우 점성인 무색 오일 형태의 표제 화합물 8.28 g(이론치의 98.0%)
원소 분석:
계산치: C 37.59 H 4.24 N 6.05 F 34.85 S 3.46
실측치: C 37.57 H 4.28 N 6.02 F 34.85 S 3.44
e) 1-(3-옥사-2H,2H,4H,4H,5H,5H-퍼플루오로트리데카노일)-7-[1-S-α-D-(2-카르보닐)-에틸-만노피라노스]-4,10-비스[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-10-(3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일-펜타노일)]-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸, 디가돌리늄 착물
특허 출원 DE 197 28 954 C1의 실시예 31h)에 기재된 10-(4-카르복시-1-메틸-2-옥소-3-아자부틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7-트리아세트산, Gd 착물 2.48 g(3.94 mmol, 사용된 실시예 19d)의 디아민 성분에 대하여 4.4몰 당량) 및 염화리튬 무수물 167 mg(3.94 mmol)을 40 ℃에서 무수 디메틸 술폭시드 40 ml에 교반하면서 용해시키고, 이 온도에서, 무수 디메틸 술폭시드 10 ml에 용해된 N-히드록시숙신이미드 453 mg(3.94 mmol) 및 실시예 19d)의 표제 화합물 980 mg(0.895 mmol)과 혼합하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 용액을 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 814 mg(3.946 mmol)과 혼합하고, 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 얻어진 현탁액을 표제 화합물의 침전이 완결될 때까지 충분량의 아세톤과 혼합하고, 침전물을 흡인 여과하고, 건조시키고, 물에 용해시키고, 불용성 디시클로헥실우레아를 여과 제거하고, 여액을 AMICON(등록상표) YM-3초여과막(절단: 3,000 Da)으로 탈염하고, 저분자 성분을 제거하였다. 잔류물을 동결 건조하였다.
수율: 무색의 동결건조물 1.32 g(이론치의 69.1%)
수분 함량(칼-피셔): 7.65%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 37.43 H 4.45 N 9.12 F 15.02 S 1.49 Gd 14.63
실측치: C 37.42 H 4.50 N 9.18 F 15.07 S 1.51 Gd 14.58
f) 3-옥사-2H,2H,4H,4H,5H,5H-퍼플루오로트리데칸산-t-부틸 에스테르
1H,1H,2H,2H-퍼플루오로-1-데칸올(란카스터사(Lancaster Company)로부터 입수 가능) 25.0 g(53.8 mmol)을 무수 톨루엔 250 ml에 용해시키고, 실온에서 촉매량(약 0.75 g)의 테트라-N-부틸-암모늄 히드로겐 술페이트와 혼합하였다. 0 ℃에서, 수산화칼륨 미분말 7.55 g(134.6 mmol, 사용된 알콜 성분에 대하여 2.5 당량)을 첨가하고, 이어서 브로모아세트산-t-부틸 에스테르 15.73 g(80.7 mmol, 사용된 알콜 성분에 대하여 1.5 당량)를 첨가한 다음, 0 ℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 얻어진 반응 용액을 실온에서 12 시간 동안 교반하고, 워킹업을 위해 에틸 아세테이트 500 ml 및 물 250 ml와 혼합하였다. 유기상을 분리하고, 물로 2회 세척하였다. 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시킨 후, 염을 흡인 제거하고, 용매를 진공에서 휘발시켰다. 유성 잔사를 에틸 아세테이트/헥산(1:10)을 용리제로 하여 실리카 겔로 정제하였다.
수율: 매우 점성의 무색 오일인 표제 화합물 26.3 g(이론치의 84.6%)
원소 분석:
계산치: C 33.23 H 2.61 F 55.85
실측치: C 33.29 H 2.61 F 55.90
g) 3-옥사-2H,2H,4H,4H,5H,5H-퍼플루오로트리데칸 카르복실산
실시예 19f)의 표제 화합물 20.0 g(34.58 mmol)을 실온에서 2:1 비율의 메탄올 및 0.5몰 수산화나트륨 용액의 혼합물 200 ml에 교반하면서 현탁시키고, 60 ℃까지 가열하였다. 60 ℃에서 12 시간 후, 워킹업을 위해, 투명한 반응 혼합물을 암베리트 IR 120(H+형태)-양이온 교환 수지와 혼합하여 중성으로 하고, 교환체를 흡인 제거하고, 얻어진 메탄올성-수성 여액을 진공에서 증발 건조시켰다. 얻어진 무정형의 유성 잔사를 n-헥산/에틸 아세테이트(3:1)를 용리제로 하여 실리카 겔로 정제하였다.
수율: 매우 점성의 무색 오일인 표제 화합물 16.0 g(이론치의 88.6%)
원소 분석:
계산치: C 27.60 H 1.35 F 61.85
실측치: C 27.58 H 1.36 F 61.90
실시예 20
a) 6-벤질옥시카르보닐-2-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-L-리신-메틸 에스테르
테트라히드로푸란 50 ml에 용해된 2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노아세트산(DE 196 03 033에 따라 제조) 16.18 g(27.0 mmol)을 0 ℃의 질소 분위기 하에서 테트라히드로푸란 150 ml, 클로로포름 15 ml 및 트리에틸아민 2.62 g(26.0 mmol)의 혼합물에 용해된 ξ-카르보닐옥시벤질-L-리신 메틸 에스테르 염산(바켐사로부터 입수 가능) 8.0 g(24.4 mmol)에 적가하였다. EEDQ(2-에톡시-1,2-디히드로퀴놀린-1-카르복실산 에틸 에스테르) 18.0 g(36.6 mmol)을 0 ℃에서 소량씩 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 진공에서 증발 농축하고, 잔류 오일을 실리카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: n-헥산/이소프로판올 = 15:1). 표제 화합물 17.0 g(이론치의 79.6%, 사용된 일차 아민에 대한 것임)을 무색 오일 형태로 얻었다.
원소 분석:
계산치: C 38.41 H 3.45 F 36.89 N 4.80 S 3.66
실측치: C 38.42 H 3.47 F 36.92 N 4.87 S 3.64
b) 2-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-L-리신-메틸 에스테르
실시예 20a)에 따라 제조된 화합물 15.0 g(20.23 mmol)을 에탄올 200 ml에 용해시키고, 펄만 촉매(활성탄 상의 Pd 20%) 800 mg과 혼합하고, 계산량의 수소가 흡수될 때까지 수소화반응시켰다. 촉매를 흡인 제거하고, 에탄올로 완전히 재세척하고, 진공에서 증발 건조시켰다. 표제 화합물을 무색 오일로서 얻었다.
수율: 14.68 g(이론치의 97.9%)
원소 분석:
계산치: C 32.40 H 3.26 F 43.56 N 5.67 S 4.32
실측치: C 32.42 H 3.27 F 43.60 N 5.67 S 4.34
c) 6-(1-O-α-D-카르보닐메틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스) 2-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-L-리신-메틸 에스테르
1-카르복시메틸옥시-2,3,4-테트라-O-벤질-α-D-만노피라노시드(DE 197 28 954 C1에 기재된 바에 따라 제조) 21.31 g(35.6 mmol) 및 트리에틸아민 3.60 g(35.6 mmol)을 무수 테트라히드로푸란 500 ml에 용해시켰다. 반응 혼합물을 -15 ℃ 내지 -20 ℃로 냉각시킨 후, 무수 테트라히드로푸란 75 ml 중 이소부틸 클로로포르메이트 4.92 g(35.6 mmol)의 용액을 이 온도에서 교반하면서 서서히 적가하였고, 이 때 적가 속도는 내부 온도가 -10 ℃ 이하로 유지되도록 선택될 수 있다. -15 ℃에서 15분 후, 무수 테트라히드로푸란 100 ml 중 실시예 20b)의 표제 화합물 26.39 g(35.6 mmol) 및 트리에틸아민 3.60 g(35.6 mmol)의 용액을 -20 ℃에서 서서히 적가하였다. -15 ℃에서 1 시간 및 실온에서 2 시간 후, 반응 용액을 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트 250 ml에 용해시키고, 포화 중탄산나트륨 용액 각 100 ml로 2회 및 물 200 ml로 1회 세척하였다. 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시킨 후, 염을 흡인 제거하고, 에틸 아세테이트를 진공에서 휘발시켰다. 유성 잔사를 에틸 아세테이트/n-헥산(1:10)을 용리제로 하여 실리카 겔로 정제하였다.
수율: 매우 점성의 무색 오일인 표제 화합물 38.12 g(이론치의 81.0%)
원소 분석:
계산치: C 49.92 H 3.92 N 2.53 F 29.18 S 2.90
실측치: C 49.99 H 4.11 N 2.69 F 29.22 S 3.01
d) 6-(1-O-α-D-카르보닐메틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스) 2-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-L-리신
실시예 20c)에 따라 제조된 화합물 27.65 g(20.92 mmol)을 메탄올 250 ml에 용해시켰다. 증류수 10 ml 중 수산화나트륨 4.0 g(100.0 mmol)의 용액을 첨가하고, 50 ℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 박층 크로마토그래피로 메틸 에스테르 비누화가 정량적으로 일어났음을 확인하였다. 진공에서 증발 건조시키고, 잔사를 에틸 아세테이트 300 ml에 용해시키고, 유기상을 묽은 시트르산 수용액 각 100 ml로 2회 추출하였다. 황산나트륨 상에서 건조시킨 후, 여과하고, 진공에서 증발 건조시켰다. 얻어진 잔사를 실리카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: n-헥산/클로로포름/이소프로판올 15:10:1). 표제 화합물 24.31 g(이론치의 88.9%)를 점성의 무색 오일 형태로 얻었다.
원소 분석:
계산치: C 51.46 H 4.70 N 3.21 F 24.71 S 2.45
실측치: C 51.49 H 4.71 N 3.19 F 24.72 S 2.41
e) 6-(1-O-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스) 2-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-L-리신
실시예 20d)의 표제 화합물 20.0 g(15.30 mmol)을 2-프로판올 250 ml 및 물 25 ml의 혼합물에 용해시키고, 팔라듐 촉매(10% Pd/C) 1.0 g과 혼합하였다. 실온및 1 기압의 수소 압력에서 12 시간 동안 수소화반응시켰다. 촉매를 여과 제거하고, 여액을 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 메탄올 200 ml에 용해시키고, 디에틸 에테르 800 ml와 혼합함으로써 반응 생성물을 침전시켰다. 얻어진 고체를 흡인 여과한 후, 이것을 50 ℃의 진공에서 건조시켰다.
수율: 무정형의 고체 14.32 g(이론치의 99.0%)
원소 분석:
계산치: C 35.56 H 3.84 N 4.44 S 3.39 F 34.15
실측치: C 35.58 H 3.81 N 4.45 S 3.40 F 34.17
f) 6-(1-O-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스) 2-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-L-리신-N-{2-히드록시-프로프-3-일-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-10-일]}-아미드, Gd 착물
실시예 20e)의 표제 화합물 7.48 g(7.91 mmol)을 40 ℃에서 디메틸 술폭시드 50 ml에 용해시키고, N-히드록시숙신이미드 1.00 g(8.70 mmol)을 첨가하였다. 20 ℃로 냉각시키고, 디시클로헥실카르보디이미드 1.795 g(8.7 mmol)을 첨가하였다. 이것을 20 ℃에서 1 시간 및 40 ℃에서 4 시간 동안 교반하였다. 이 온도에서, 디메틸 술폭시드 20 ml 중 10-(2-히드록시-3-아미노프로필)-4,7,10-트리스(카르복시메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸, Gd 착물(제조에 대해 WO 97/02051 참조) 4.53 g(7.91 mmol)의 용액을 10분 이내에 적가하였다. 40 ℃에서 1 시간 및 실온에서 밤새 교반하였다. 얻어진 현탁액을 표제 화합물의 침전이 오나결될 때까지 충분량의 아세톤과 혼합하고, 침전물을 흡인 여과하고, 건조시키고, 물에 용해시키고, 불용성 디시클로헥실우레아를 여과 제거하고, 여액을 AMICON(등록상표) YM-3 초여과막(절단: 3,000 Da)으로 탈염시키고, 저분자 성분을 제거하였다. 잔류물을 동결 건조하였다.
수율: 무색의 동결건조물 9.71 g(이론치의 81.7%)
수분 함량(칼-피셔): 3.97%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 35.16 H 4.16 N 7.45 F 21.48 Gd 10.46 S 2.13
실측치: C 35.17 H 4.20 N 7.42 F 21.49 Gd 10.48 S 2.09
실시예 21
a) 6-N-[1-O-α-D-(5-카르보닐)-펜틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스]- 2N-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-L-리신-메틸 에스테르
실시예 10c)에 기재된 5-(카르복시)펜틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-α-D-만노피라노시드 5.23 g(8.0 mmol), 1-히드록시벤조트리아졸 1.3 g(8.0 mmol) 및 2-(1H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(TBTU; 영국 페보크사(Peboc Limited)) 2.6 g(8.0 mmol)을 DMF 75 ml에 용해시키고, 15분 동안 교반하였다. 이 용액을 N-에틸디이소프로필아민 5.16 ml(30 mmol) 및 실시예 20b)에 기재된 아민 5.93 g(8.0 mmol)과 혼합하고, 실온에서 1.5일 동안 교반하였다. 워킹업을 위해, 용매를 진공에서 증발 건조시키고, 얻어진 잔사를 실리카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: 디클로로메탄/에틸 아세테이트 30:1; 에틸 아세테이트의 분율을 연속적으로 증가시키는 용매 구배를 사용하여 크로마토그래피를수행함).
수율: 매우 점성인 무색 오일 형태의 표제 화합물 9.70 g(이론치의 88.0%)
원소 분석:
계산치: C 52.29 H 4.97 N 3.05 F 23.43 S 2.33
실측치: C 52.33 H 4.95 N 3.12 F 23.50 S 2.30
b) 6-N-[1-O-α-D-(5-카르보닐)-펜틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스]- 2N-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-L-리신
실시예 21a)에 따라 제조된 화합물 9.0 g(12.40 mmol)을 메탄올 150 ml에 용해시켰다. 증류수 15 ml 중 수산화나트륨 2.48 g(62.0 mmol)의 용액을 첨가하고, 50 ℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 박층 크로마토그래피로 상기 반응 시간 후 메틸 에스테르 비누화가 정량적으로 일어났음을 확인하였다. 진공에서 증발 건조시키고, 잔사를 에틸 아세테이트 300 ml에 용해시키고, 유기상을 묽은 시트르산 수용액 각 100 ml로 2회 추출하였다. 황산나트륨 상에서 건조시킨 후, 여과하고, 진공에서 증발 건조시켰다. 얻어진 잔사를 실리카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: n-헥산/클로로포름/이소프로판올 25:10:1). 표제 화합물 15.88 g(이론치의 93.9%)를 매우 점성인 무색 오일 형태로 얻었다.
원소 분석:
계산치: C 51.95 H 4.88 N 3.08 F 23.67 S 2.35
실측치: C 51.99 H 4.91 N 3.09 F 23.70 S 2.33
c) 6-N-[1-O-α-D-(5-카르보닐)-펜틸-만노피라노스]-2N-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-L-리신
실시예 21b)의 표제 화합물 13.0 g(9.52 mmol)을 2-프로판올 150 ml 및 물 25 ml의 혼합물에 용해시키고, 팔라듐 촉매(10% Pd/C) 1.0 g을 첨가하였다. 이것을 실온 및 1 기압의 수소 압력에서 12 시간 동안 수소화반응시켰다. 촉매를 여과 제거하고, 여액을 진공에서 증발 건조시켰다. 얻어진 잔사를 실리카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: n-헥산/클로로포름/이소프로판올 15:10:1). 표제 화합물 9.09 g(이론치의 95.1%)를 매우 점성인 무색 오일 형태로 얻었다.
원소 분석:
계산치: C 37.10 H 4.22 N 4.19 F 32.18 S 3.10
실측치: C 37.09 H 4.21 N 4.19 F 32.20 S 3.13
d) 6-N-[1-O-α-D-(5-카르보닐)-펜틸-만노피라노스]-2N-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-L-리신-N-{2-히드록시-프로프-3-일-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-10-일}-아미드, Gd 착물
실시예 21c)의 표제 화합물 7.93 g(7.91 mmol)을 40 ℃에서 디메틸 술폭시드 75 ml에 용해시키고, N-히드록시숙신이미드 1.00 g(8.70 mmol)과 혼합하였다. 실온으로 냉각시키고, 디시클로헥실카르보디이미드 1.795 g(8.7 mmol)을 첨가하였다. 이것을 20 ℃에서 1 시간 및 40 ℃에서 4 시간 동안 교반하였다. 40 ℃에서, 디메틸 술폭시드 20 ml 중 10-(2-히드록시-3-아미노프로필)-4,7,10-트리스(카르복시메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸, Gd 착물(제조에 대해 WO 97/02051 참조) 4.53 g(7.91 mmol)의 용액을 10분 이내에 실시예 21c)의 표제 화합물의 활성 에스테르 용액에 적가하였다. 40 ℃에서 1 시간 및 실온에서 밤새 교반하였다. 얻어진 현탁액을 표제 화합물의 침전이 완결될 때까지 충분량의 아세톤/2-프로판올(2:1) 혼합물과 혼합하고, 침전물을 흡인 여과하고, 에틸 아세테이트로 재세척하고, 건조시키고, 물에 용해시키고, 불용성 디시클로헥실우레아를 여과 제거하고, 여액을 AMICON(등록상표) YM-3 초여과막(절단: 3,000 Da)으로 탈염시키고, 저분자 성분을 제거하였다. 잔류물을 동결 건조하였다.
수율: 무색의 동결건조물 9.71 g(이론치의 78.8%)
수분 함량(칼-피셔): 6.65%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 36.97 H 4.52 N 7.19 F 20.71 Gd 10.08 S 2.06
실측치: C 37.02 H 4.50 N 7.22 F 20.69 Gd 10.08 S 2.09
실시예 22
a) 6-N-{4-[2,3-비스-(N,N-비스(t-부틸옥시카르보닐메틸)-아미노)-프로필]-페닐}-3-옥사-프로피오닐-2-N-(1-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스)-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
1-(4-카르복시메톡시벤질)-EDTA 테트라-t-부틸-에스테르(미국 특허 제4,622,420호) 5.25 g(7.72 mmol) 및 트리에틸아민 781 mg(7.72 mmol)을 염화메틸렌 50 ml에 용해시켰다. -15 ℃에서, 염화메틸렌 10 ml 중 이소부틸 클로로포르메이트 1.16 g(8.5 mmol)의 용액을 5분 이내에 적가하고, -15 ℃에서 20분 동안 교반하였다. 용액을 -25 ℃로 냉각시키고, 테트라히드로푸란 70 ml 중 실시예 10e)의표제 화합물 7.07 g(7.72 mmol) 및 트리에틸아민 2.12 g(21.0 mmol)의 용액을 30분 이내에 적가하고, -15 ℃에서 30분 동안 교반한 다음, 실온에서 밤새 교반을 계속하였다. 워킹업을 위해, 용매를 진공에서 휘발시키고, 유성 잔사를 클로로포름 250 ml에 용해시켰다. 클로로포름상을 10% 염화암모늄 수용액 각 100 ml로 2회 추출하고, 유기상을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 실리카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: 염화메틸렌/에탄올 = 20:1).
수율: 매우 점성인 무색 오일 9.60 g(이론치의 79.0%)
원소 분석:
계산치: C 46.39 H 5.55 N 5.32 F 20.45 S 2.03
실측치: C 46.42 H 5.51 N 5.29 F 20.49 S 2.09
b) 6-N-{4-[2,3-비스-(N,N-비스(카르복시메틸)-아미노)-프로필]-페닐}-3-옥사-프로피오닐-2-N-(1-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스)-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
실시예 22a)에 따라 제조된 화합물 9.0 g(5.70 mmol)을 메탄올 150 ml에 용해시켰다. 증류수 25 ml 중 수산화나트륨 4.0 g(100.0 mmol)의 용액을 첨가하고, 60 ℃에서 6 시간 동안 교반하였다. 박층 크로마토그래피로 상기 반응 시간 후 테트라-t-부틸 에스테르의 비누화가 정량적으로 일어났음을 확인하였다. 진공에서 증발 건조시키고, 잔사를 가열하면서 디메틸 술폭시드 50 ml에 용해시키고, 표제 화합물의 침전이 완결될 때까지 충분량의 아세톤/에틸 아세테이트(1:1) 혼합물과 혼합하고, 침전물을 흡인 여과하고, 에틸 아세테이트로 재세척하고, 건조시키고,물에 용해시키고, 1몰 염산으로 생성물 용액의 pH를 3.5로 하고, 존재할 수 있는 불용성 성분을 여과 제거하고, 여액을 AMICON(등록상표) YM-3 초여과막(절단: 3,000 Da)으로 탈염시키고, 저분자 성분을 제거하였다. 잔류물을 동결 건조하였다.
수율: 무색의 동결건조물 6.76 g(이론치의 87.6%)
수분 함량(칼-피셔): 3.30%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 39.89 H 4.09 N 6.20 F 23.84 S 2.37
실측치: C 39.92 H 4.15 N 6.22 F 23.92 S 2.29
c) 6-N-{4-[2,3-비스-(N,N-비스(카르복실라토메틸)-아미노)-프로필]-페닐}-3-옥사-프로피오닐-2-N-(1-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스)-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드, Mn 착물, 2 나트륨염
실시예 22b)의 표제 화합물 3.0 g(2.22 mmol)을 끓는 점에서 물/에탄올(3:1) 혼합물 150 ml에 용해시키고, 80 ℃에서 탄산망간(II) 0.25 g(2.22 mmol)과 소량씩 혼합하였다. 얻어진 반응 용액을 5 시간 동안 환류시켰다. 실온으로 냉각시킨 후, 용매 혼합물을 진공에서 완전히 휘발시키고, 잔사를 증류수/n-부탄올(1:1) 혼합물 200 ml에 용해시켰다. 격렬히 교반하면서, 1N 수산화나트륨 용액과 혼합하여 pH를 7.2로 하였다. n-부탄올을 진공에서 완전히 휘발시킨 후, 남은 수성상을 AMICON(등록상표) YM-3 초여과막(절단: 3,000 Da)으로 탈염시키고, 저분자 성분을 제거하였다. 잔류물을 동결 건조하였다.
수율: 무색의 동결건조물 3.19 g(이론치의 99.0%)
수분 함량(칼-피셔): 5.08%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 37.23 H 3.54 F 22.25 Mn 3.78 N 5.79 Na 3.17 S 2.21
실측치: C 37.30 H 3.49 F 22.29 Mn 3.81 N 5.76 Na 3.19 S 2.18
실시예 23
a) 3-벤질옥시카르보닐아미노-글루타르산-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-모노아미드
무수 테트라히드로푸란 150 ml 중 3-N-(벤질옥시카르보닐)-글루타르산-무수물[Hatanaka, Minoru; Yamamoto, Yu-ichi; Nitta, Hajime; Ishimaru, Toshiyasu; TELEAY; Tetrahedron Lett.; EN; 22; 39; 1981; 3883-3886에 따라 제조] 25.0 g(94.96 mmol)의 교반된 용액을 테트라히드로푸란 150 ml 중 1-퍼플루오로옥틸술포닐피페라진 53.97 g(95.0 mmol)의 용액과 교반하면서 점적 혼합하고, 얻어진 반응 용액을 12 시간 동안 환류시켰다. 실온으로 냉각시킨 후, 증발 건조시키고, 유성 잔사를 디클로로메탄/2-프로판올(20:1)을 용리제로 하여 실리카 겔로 정제하였다.
수율: 점성의 무색 오일 형태의 표제 화합물 75.80 g(이론치의 96.0%)
원소 분석:
계산치: C 36.11 H 2.67 N 5.05 S 3.86 F 38.84
실측치: C 36.12 H 2.61 N 5.08 S 3.88 F 38.82
b) 3-아미노-글루타르산-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-모노아미드
실시예 23a)에 따라 제조된 화합물 31.50 g(37.88 mmol)을 에탄올 300 ml에 용해시키고, 펄만 촉매(Pd 20%, C) 2.5 g과 혼합하고, 더 이상의 수소 흡수가 관찰되지 않을 때까지 1 기압의 수소 압력에서 수소화반응시켰다. 촉매를 흡인 제거하고, 에탄올로 재세척하고, 진공에서 증발 건조시켰다. 표제 화합물을 점성인 담황색 오일로서 얻었다.
수율: 25.22 g(이론치의 95.5%)
원소 분석:
계산치: C 29.28 H 2.31 N 6.03 S 4.06 F 46.31
실측치: C 29.32 H 2.29 N 6.08 S 4.08 F 46.28
c) 3-N-(1-α-D-카르보닐메틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스)-글루타르산-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-모노아미드
1-카르복시메틸옥시-2,3,4-테트라-O-벤질-α-D-만노피라노시드(DE 197 28 954 C1에 기재된 바에 따라 제조) 21.52 g(18.96 mmol)을 실온에서 무수 디메틸포름아미드 100 ml에 용해시키고, 0 ℃에서, N-히드록시숙신이미드 2.56 g(22.2 mmol)에 이어 디시클로헥실카르보디이미드 4.55 g(22.2 mmol)과 혼합하였다. 0 ℃에서 1 시간 및 22 ℃에서 3 시간 후, 불용성 디시클로헥실우레아를 여과 제거하고, 얻어진 상기 표제 화합물의 투명한 활성 에스테르 용액을 0 ℃에서 디메틸포름아미드 100 ml에 용해된 실시예 23b)의 화합물 13.22 g(18.96 mmol)의 교반된 용액에 서서히 적가하였다. 실온에서 12 시간 후, 용매를 진공에서 휘발시키고, 잔사를 에틸 아세테이트 300 ml에 용해시키고, 우레아를 여과 제거하고, 유기 여액을포화 중탄산나트륨 용액 각 100 ml로 2회, 10% 시트르산 수용액 100 ml로 1회 및 물 200 ml로 1회 세척하였다. 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시킨 후, 염을 흡인 제거하고, 에틸 아세테이트를 진공에서 휘발시켰다. 유성 잔사를 에틸 아세테이트/n-헥산(1:15)을 용리제로 하여 실리카 겔로 정제하였다.
수율: 매우 점성의 무색 오일인 표제 화합물 21.39 g(이론치의 88.3%)
원소 분석:
계산치: C 49.81 H 4.10 N 3.29 F 25.27 S 2.51
실측치: C 49.89 H 4.11 N 3.32 F 25.22 S 2.51
d) 3-N-(1-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스)-글루타르산-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-모노아미드
실시예 23c)의 표제 화합물 19.55 g(15.30 mmol)을 2-프로판올 250 ml 및 물 25 ml의 혼합물에 용해시키고, 팔라듐 촉매(10% Pd/C) 1.5 g과 혼합하였다. 실온 및 1 기압의 수소 압력에서 12 시간 동안 수소화반응시켰다. 촉매를 여과 제거하고, 여액을 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 메탄올 200 ml에 용해시키고, 디에틸 에테르 800 ml와 혼합함으로써 반응 생성물을 침전시켰다. 얻어진 고체를 흡인 여과한 후, 이것을 40 ℃의 진공에서 건조시켰다.
수율: 무정형의 고체 17.49 g(이론치의 97.5%)
원소 분석:
계산치: C 32.73 H 3.08 N 4.58 S 3.49 F 35.20
실측치: C 32.68 H 3.15 N 4.55 S 3.50 F 35.17
e) 3-N-(1-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스)-글루타르산-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드-5-N-{2-히드록시-프로프-3-일-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-10-일]}-아미드, Gd 착물
실시예 23d)의 표제 화합물 14.43 g(15.84 mmol) 및 염화리튬 무수물 0.67 g(15.84 mmol)을 40 ℃에서 무수 디메틸 술폭시드 100 ml에 교반하면서 용해시키고, 이 온도에서, N-히드록시숙신이미드 1.82 g(15.84 mmol), 및 디메틸 술폭시드 50 ml 중 10-(2-히드록시-3-아미노프로필)-4,7,10-트리스(카르복시메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸, Gd 착물(제조에 대해 WO 97/02051 참조) 9.08 g(15.84 mmol)의 용액과 혼합하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 용액을 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 3.27 g(15.84 mmol)과 혼합하고, 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 얻어진 현탁액을 표제 화합물의 침전이 완결될 때까지 충분량의 아세톤과 혼합하고, 침전물을 흡인 여과하고, 건조시키고, 물에 용해시키고, 불용성 디시클로헥실우레아를 여과 제거하고, 여액을 AMICON(등록상표) YM-3 초여과막(절단: 3,000 Da)으로 탈염시키고, 존재할 수 도 있는 저분자 성분을 동시에 제거하였다. 잔류물을 동결 건조하였다.
수율: 무색의 동결건조물 18.71 g(이론치의 80.2%)
수분 함량(칼-피셔): 4.87%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 34.24 H 3.83 N 7.61 F 21.92 S 2.18 Gd 10.67
실측치: C 34.26 H 3.79 N 7.58 F 21.87 S 2.18 Gd 10.68
실시예 24
a) 1,7-비스(벤질옥시카르보닐)-4-{3-옥사-펜탄-1,5-디카르복실산-1-오일-5-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드}-10-[2,6-N,N'-비스(1-O-α-D-카르보닐메틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스)]-L-리실-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸
테트라히드로푸란 250 ml에 용해된 실시예 18c)의 표제 화합물 33.04 g(25.0 mmol)을 0 ℃ 및 질소 분위기 하에서, 테트라히드로푸란 150 ml 및 클로로포름 15 ml의 혼합물 중 실시예 15a)에서 제조된 이차 아민 27.0 g(24.4 mmol)의 용액에 첨가하였다. 0 ℃에서 EEDQ(2-에톡시-1,2-디히드로퀴놀린-1-카르복실산 에틸 에스테르) 18.0 g(36.6 mmol)을 소량씩 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 진공에서 증발 건조시키고, 잔류 오일을 실리카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: n-헥산/이소프로판올 = 25:1). 표제 화합물 45.87 g(이론치의 78.0%, 사용된 2차 아민에 대한 것임)을 무색 오일 형태로 얻었다.
원소 분석:
계산치: C 59.30 H 5.39 F 13.40 N 4.65 S 1.33
실측치: C 59.32 H 5.37 F 13.37 N 4.70 S 1.34
b) 1-{3-옥사-펜탄-1,5-디카르복실산-1-오일-5-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드}-7-[2,6-N,N'-비스(1-O-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스)]-L-리실-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸
실시예 24a)에서 제조된 표제 화합물 24.1 g(10.0 mmol)을 에탄올 250 ml에 용해시키고, 펄만 촉매(Pd 20%, C) 1.4 g과 혼합하였다. 더 이상의 수소 흡수가 관찰되지 않을 때까지 수소화반응시키고, 촉매를 흡인 제거하고, 에탄올로 완전히 재세척하고, 진공에서 증발 건조시켰다. 생성물을 매우 점성인 누르스름한 오일로서 얻었다.
수율: 12.80 g(이론치의 90.1%)
원소 분석:
계산치: C 39.72 H 4.89 F 22.73 N 7.88 S 2.26
실측치: C 39.72 H 4.87 F 22.77 N 7.90 S 2.24
c) 1-{3-옥사-펜탄-1,5-디카르복실산-1-오일-5-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드}-7-[2,6-N,N'-비스(1-O-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스)]-L-리실-4,10-비스[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-10-(3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일-펜타노일)]-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸, 디가돌리늄 착물
특허 출원 DE 197 28 954 C1의 실시예 31h)에 기재된 10-(4-카르복시-1-메틸-2-옥소-3-아자부틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7-트리아세트산, Gd 착물 5.54 g(8.8 mmol, 사용된 실시예 24b)의 아민 성분에 대하여 2.2몰 당량) 및 염화리튬 무수물 0.37 g(8.8 mmol)을 40 ℃에서 무수 디메틸 술폭시드 60 ml에 교반하면서 용해시키고, 이 온도에서, 무수 디메틸 술폭시드 40 ml에 용해된 N-히드록시숙신이미드 1.01 g(8.8 mmol) 및 실시예 24b)의 표제 화합물 5.68 g(4.0 mmol)과 혼합하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 용액을 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 1.82 g(8.8 mmol)과 혼합하고, 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 얻어진 현탁액을 표제 화합물의 침전이 완결될 때까지 충분량의 아세톤과 혼합하고, 침전물을 흡인 여과하고, 건조시키고, 물에 용해시키고, 불용성 디시클로헥실우레아를 여과 제거하고, 여액을 AMICON(등록상표) YM-3 초여과막(절단: 3,000 Da)으로 탈염하고, 저분자 성분을 제거하였다. 잔류물을 동결 건조하였다.
수율: 무색의 동결건조물 8.52 g(이론치의 80.6%)
수분 함량(칼-피셔): 6.09%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 38.61 H 4.76 N 9.53 F 12.21 Gd 11.89 S 1.12
실측치: C 38.57 H 4.82 N 9.52 F 12.21 Gd 11.93 S 1.15
실시예 25
a) 1,7-비스(벤질옥시카르보닐)-4-{3-옥사-펜탄-1,5-디카르복실산-1-오일-5-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드}-10-[2,6-N,N'-비스(1-O-α-D-(5-카르보닐)-펜틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스)]-L-리실-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸
테트라히드로푸란 250 ml에 용해된 실시예 17e)의 표제 화합물 35.80 g(25.0 mmol)을 0 ℃ 및 질소 분위기 하에서, 테트라히드로푸란 150 ml 및 클로로포름 15 ml의 혼합물 중 실시예 15a)에서 제조된 이차 아민 27.0 g(24.4 mmol)의 용액에 첨가하였다. 0 ℃에서 EEDQ(2-에톡시-1,2-디히드로퀴놀린-1-카르복실산 에틸 에스테르) 18.0 g(36.6 mmol)을 소량씩 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 진공에서 증발 건조시키고, 잔류 오일을 실리카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: n-헥산/이소프로판올 = 20:1). 표제 화합물 49.48 g(이론치의 80.4%, 사용된 2차 아민에 대한 것임)을 무색 오일 형태로 얻었다.
원소 분석:
계산치: C 60.47 H 5.79 F 12.80 N 4.44 S 1.27
실측치: C 60.52 H 5.77 F 12.77 N 4.50 S 1.30
b) 1-{3-옥사-펜탄-1,5-디카르복실산-1-오일-5-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드}-7-[2,6-N,N'-비스(1-O-α-D-(5-카르보닐)-펜틸-만노피라노스)]-L-리실-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸
실시예 25a)에서 제조된 표제 화합물 25.2 g(10.0 mmol)을 에탄올 250 ml에 용해시키고, 펄만 촉매(Pd 20%, C) 1.8 g과 혼합하였다. 더 이상의 수소 흡수가 관찰되지 않을 때까지 수소화반응시키고, 촉매를 흡인 제거하고, 에탄올로 완전히 재세척하고, 진공에서 증발 건조시켰다. 생성물을 매우 점성인 황색 오일로서 얻었다.
수율: 14.11 g(이론치의 92.5%)
원소 분석:
계산치: C 49.60 H 7.20 F 21.17 N 7.34 S 2.10
실측치: C 49.62 H 7.17 F 21.20 N 7.30 S 2.14
c) 1-{3-옥사-펜탄-1,5-디카르복실산-1-오일-5-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드}-7-[2,6-N,N'-비스(1-O-α-D-(5-카르보닐)-펜틸-만노피라노스)]-L-리실-4,10-비스[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-10-(3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일-펜타노일)]-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸, 디가돌리늄 착물
특허 출원 DE 197 28 954 C1의 실시예 31h)에 기재된 10-(4-카르복시-1-메틸-2-옥소-3-아자부틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7-트리아세트산, Gd 착물 5.54 g(8.8 mmol, 사용된 실시예 25b)의 아민 성분에 대하여 2.2몰 당량) 및 염화리튬 무수물 0.37 g(8.8 mmol)을 40 ℃에서 무수 디메틸 술폭시드 60 ml에 교반하면서 용해시키고, 이 온도에서, 무수 디메틸 술폭시드 40 ml에 용해된 N-히드록시숙신이미드 1.01 g(8.8 mmol) 및 실시예 25b)의 표제 화합물 6.10 g(4.0 mmol)과 혼합하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 용액을 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 1.82 g(8.8 mmol)과 혼합하고, 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 얻어진 현탁액을 표제 화합물의 침전이 완결될 때까지 충분량의 아세톤과 혼합하고, 침전물을 흡인 여과하고, 건조시키고, 물에 용해시키고, 불용성 디시클로헥실우레아를 여과 제거하고, 여액을 AMICON(등록상표) YM-3 초여과막(절단: 3,000 Da)으로 탈염하고, 저분자 성분을 제거하였다. 잔류물을 동결 건조하였다.
수율: 무색의 동결건조물 9.26 g(사용된 디아민 화합물에 대하여, 이론치의 84.0%)
수분 함량(칼-피셔): 5.89%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 40.52 H 5.16 N 9.15 F 11.72 Gd 11.41 S 1.16
실측치: C 40.57 H 5.20 N 9.12 F 11.69 Gd 11.43 S 1.18
실시예 26
a) 6-N-t-부틸옥시카르보닐-2-N-벤질옥시카르보닐-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
α-N-(벤질옥시카르보닐)-ξ-N'-(t-부틸옥시카르보닐)-L-리신(바켐사로부터 입수 가능) 19.02 g(50.0 mmol)을 무수 테트라히드로푸란 150 ml에 용해시켰다. 0 ℃에서, 무수 테트라히드로푸란 75 ml에 용해된 카르보닐디이미다졸 8.31 g(50.0 mmol) 및 트리에틸아민 5.03 g(50.0 mmol)을 적가하고, 이 온도에서 10분 동안 교반을 계속하였다. 무수 테트라히드로푸란 250 ml 중 퍼플루오로옥틸술포닐-피페라진 48.42 g(50.0 mmol) 및 트리에틸아민 5.03 g(50.0 mmol)의 용액을 0 ℃에서 적가하였다. 밤새 교반한 후, 테트라히드로푸란을 진공에서 휘발시키고, 잔류 오일을 실리카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: n-헥산/이소프로판올 = 15:1). 표제 화합물 49.48 g(사용된 2차 아민에 대하여, 이론치의 80.4%)을 무색 오일 형태로 얻었다.
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 40.01 H 3.79 N 6.02 F 34.70 S 3.45
실측치: C 40.07 H 3.82 N 6.02 F 34.67 S 3.48
b) 6-N-t-부틸옥시카르보닐-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
실시예 26a)의 표제 화합물 30.0 g(32.2 mmol)을 이소프로판올 300 ml에 용해시키고, 펄만 촉매(Pd 20%, C) 1.5 g과 혼합하였다. 실온에서 10 시간 동안 수소화반응시키고, 벤질옥시카르보닐 보호기가 가수소분해적으로 정량적으로 절단되었음을 박층 크로마토그래피로 확인하였다. 촉매를 여과 제거하고, 여액을 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 실리카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: n-헥산/이소프로판올 = 25:1). 표제 화합물 25.13 g(이론치의 98.0%)를 무색 오일로서 얻었다.
원소 분석:
계산치: C 34.68 H 3.67 F 40.55 N 7.03 S 4.03
실측치: C 34.72 H 3.70 F 40.60 N 7.01 S 3.98
c) 6-N-t-부틸옥시카르보닐-2-N-[1-S-α-D-(2-카르보닐)-에틸-2,3,4,6-테트라-O-아세틸-만노피라노스]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
3-(2,3,4,6-테트라-O-아세틸-1-티오-α-D-만노피라노실)-프로피온산[J. Haensler et al., Bioconjugate Chem. 4, 85, (1993); Chipowsky, S. and Lee, Y. C. (1973), Synthesis of 1-Thio-aldosides; Carbohydrate Research 31, 339-346에 따라 제조] 15.53 g(35.60 mmol) 및 트리에틸아민 3.60 g(35.60 mmol)을 무수 테트라히드로푸란 300 ml에 용해시켰다. 반응 용액을 -15 ℃ 내지 -20 ℃로 냉각시킨 후, 이 온도에서, 무수 테트라히드로푸란 75 ml 중 이소부틸 클로로포르메이트 4.92 g(35.60 mmol)의 용액을 교반하면서 서서히 적가하였고, 이 때 적가 속도는내부 온도가 -10 ℃ 이하로 유지되도록 선택될 수 있다. -15 ℃에서 15분 후, 무수 테트라히드로푸란 200 ml 중 실시예 22b)의 표제 화합물 28.35 g(35.60 mmol) 및 트리에틸아민 3.60 g(35.60 mmol)의 용액을 -20 ℃에서 서서히 적가하였다. -15 ℃에서 1 시간 및 실온에서 2 시간 후, 반응 용액을 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트 250 ml에 용해시키고, 포화 중탄산나트륨 용액 각 100 ml로 2회 및 물 200 ml로 1회 세척하였다. 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시킨 후, 염을 흡인 제거하고, 에틸 아세테이트를 진공에서 휘발시켰다. 유성 잔사를 에틸 아세테이트/n-헥산(1:25)을 용리제로 하여 실리카 겔로 정제하였다.
수율: 매우 점성의 무색 오일인 표제 화합물 34.21 g(이론치의 79.1%)
원소 분석:
계산치: C 39.54 H 4.23 N 4.61 F 26.58 S 5.28
실측치: C 39.49 H 4.21 N 4.59 F 26.52 S 5.31
d) 6-N-t-부틸옥시카르보닐-2-N-[1-S-α-D-(2-카르보닐)-에틸-만노피라노스]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
실시예 26c)의 표제 화합물 29.93 g(24.64 mmol)을 무수 메탄올 400 ml에 현탁시키고, 5 ℃에서 촉매량의 나트륨 메탄올레이트와 혼합하였다. 실온에서 3 시간 후, 박층 크로마토그래피(용리제: 클로로포름/메탄올 9:1)로 반응이 정량적으로 일어났음을 확인하였다. 워킹업을 위해, 투명한 반응 용액을 암베리트 IR 120(H+형태)-양이온 교환 수지와 혼합하여 중성으로 하고, 교환체를 흡인 제거하고, 얻어진 메탄올성 여액을 진공에서 증발 건조시켰다. 얻어진 무정형 잔사를 2-프로판올/에틸 아세테이트/n-헥산(1:1:15)을 용리제로 하여 실리카 겔로 크로마토그래피하여 정제하였다.
수율: 점성인 무색 오일 형태의 표제 화합물 23.42 g(이론치의 90.8%)
원소 분석:
계산치: C 36.72 H 4.14 N 5.35 F 30.85 S 6.13
실측치: C 36.69 H 4.11 N 5.35 F 30.82 S 6.11
e) 2-N-[1-S-α-D-(2-카르보닐)-에틸-만노피라노스]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
0 ℃에서 실시예 26d)의 표제 화합물 20.93 g(20.0 mmol)을 트리플루오로아세트산 50 ml 및 디클로로메탄 100 ml의 혼합물에 격렬히 교반하면서 용해시키고, 이 온도에서 10분 동안 교반하였다. 진공에서 증발 건조시키고, 잔사를 물 150 ml에 용해시켰다. 2몰 수산화나트륨 수용액을 적가하여 이 생성물 수용액의 pH를 9.5로 하였다. 생성물 수용액을 AMICON(등록상표) YM-3 초여과막(절단: 3,000 Da)으로 탈염하고, 존재할 수도 있는 저분자 성분을 동시에 제거하였다. 잔류물을 동결 건조하였다.
수율: 무색의 동결건조물인 유리 아민 17.79 g(이론치의 94.2%)
수분 함량(칼-피셔): 3.09%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 34.26 H 3.73 N 5.92 F 34.12 S 6.77
실측치: C 34.26 H 3.79 N 5.88 F 34.07 S 6.80
f) 2-N-[1-S-α-D-(2-카르보닐)-에틸-만노피라노스]-6-N-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-10-(3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일-펜타노일)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드, 가돌리늄 착물
특허 출원 DE 197 28 954 C1의 실시예 31h)에 기재된 10-(4-카르복시-1-메틸-2-옥소-3-아자부틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7-트리아세트산, Gd 착물 5.54 g(8.8 mmol, 사용된 실시예 26e)의 아민 성분에 대하여 2.2몰 당량) 및 염화리튬 무수물 0.37 g(8.8 mmol)을 40 ℃에서 무수 디메틸 술폭시드 60 ml에 교반하면서 용해시키고, 이 온도에서, 무수 디메틸 술폭시드 40 ml에 용해된 N-히드록시숙신이미드 1.01 g(8.8 mmol) 및 실시예 26e)의 표제 화합물 3.78 g(4.0 mmol)과 혼합하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 용액을 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 1.82 g(8.8 mmol)과 혼합하고, 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 얻어진 현탁액을 표제 화합물의 침전이 완결될 때까지 충분량의 아세톤과 혼합하고, 침전물을 흡인 여과하고, 물에 용해시키고, 불용성 디시클로헥실우레아를 여과 제거하고, 여액을 AMICON(등록상표) YM-3 초여과막(절단: 3,000 Da)으로 탈염하고, 저분자 성분을 제거하였다. 잔류물을 동결 건조하였다.
수율: 무색의 동결건조물 5.17 g(이론치의 83.0%)
수분 함량(칼-피셔): 4.43%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 35.45 H 4.07 N 8.09 F 20.72 Gd 10.09 S 4.11
실측치: C 35.50 H 4.01 N 8.12 F 20.68 Gd 10.13 S 4.14
실시예 27
a) 6-N-벤질옥시카르보닐-2-N-[1-O-β-D-카르보닐메틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-글루코피라노스]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
특허 출원 DE 197 28 954 C1의 실시예 46a)에 기재된 표제 화합물(1-카르복시메틸옥시-2,3,4,6-테트라-O-벤질-β-D-글루코피라노시드) 8.02 g(13.4 mmol) 및 N-히드록시숙신이미드 3.24 g(28.14 mmol)을 디메틸포름아미드 100 ml에 용해시키고, 0 ℃에서 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 5.80 g(28.14 mmol)과 소량씩 혼합하였다. 이것을 이 온도에서 3 시간 동안 교반하였다. 0 ℃로 냉각된, 디메틸포름아미드 50 ml에 용해된 실시예 1c)의 표제 화합물 11.13 g(13.4 mmol)의 용액을 제조된 활성 에스테르 용액에 적가하고, 0 ℃에서 2 시간 및 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 워킹업을 위해, 침전된 디시클로헥실우레아를 여과 제거하고, 용매를 증발 건조시켰다. 얻어진 잔사를 실시카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: 디클로로메탄/에탄올 20:1; 에탄올 분율을 연속적으로 증가시키는 용매 구배를 사용하여 크로마토그래피 수행).
수율: 매우 점성인 무색 오일 형태의 표제 화합물 12.67 g(이론치의 67.0%).
원소 분석:
계산치: C 52.77 H 4.50 N 3.97 F 22.89 S 2.27
실측치: C 52.75 H 4.61 N 3.98 F 22.94 S 2.26
b) 2-N-[1-O-β-D-카르보닐메틸-글루코피라노스]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
실시예 27a)에서 제조된 화합물 11.52 g(8.17 mmol)을 에탄올 100 ml에 용해시키고, 펄만 촉매(Pd 20%, C) 0.5 g과 혼합하고, 더 이상의 수소 흡수가 관찰되지 않을 때까지 수소 분위기(1 atm) 하의 실온에서 수소화반응시켰다. 촉매를 흡인 제거하고, 에탄올(각 40 ml로 3회)로 완전히 재세척하고, 진공에서 증발 건조시켰다. 표제 화합물을 매우 점성인 무색 오일로서 얻었다.
수율: 7.36 g(이론치의 98.4%)
원소 분석:
계산치: C 34.07 H 3.63 N 6.11 F 35.24 S 3.50
실측치: C 34.11 H 3.59 N 6.08 F 35.23 S 3.52
c) 2-N-[1-O-β-D-카르보닐메틸-글루코피라노스]-6-N-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-10-(3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일-펜타노일)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드, 가돌리늄 착물
특허 출원 DE 197 28 954 C1의 실시예 31h)에 기재된 10-(4-카르복시-1-메틸-2-옥소-3-아자부틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7-트리아세트산, Gd 착물 9.98 g(15.84 mmol, 사용된 실시예 27b)의 아민 성분에 대하여 2.2몰 당량) 및 염화리튬 무수물 0.67 g(15.84 mmol)을 40 ℃에서 무수 디메틸 술폭시드 80 ml에 교반하면서 용해시키고, 이 온도에서, 무수 디메틸 술폭시드 30 ml에 용해된 N-히드록시숙신이미드 1.82 g(15.84 mmol) 및 실시예 27b)의표제 화합물 7.25 g(7.19 mmol)과 혼합하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 용액을 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 3.27 g(15.84 mmol)과 혼합하고, 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 얻어진 현탁액을 표제 화합물의 침전이 완결될 때까지 충분량의 아세톤과 혼합하고, 침전물을 흡인 여과하고, 물에 용해시키고, 불용성 디시클로헥실우레아를 여과 제거하고, 여액을 AMICON(등록상표) YM-3 초여과막(절단: 3,000 Da)으로 탈염하고, 저분자 성분을 제거하였다. 잔류물을 동결 건조하였다.
수율: 무색의 동결건조물 9.11 g(이론치의 83.0%)
수분 함량(칼-피셔): 4.02%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 35.37 H 4.02 N 8.25 F 21.13 S 2.10 Gd 10.29
실측치: C 35.42 H 4.07 N 8.18 F 21.09 S 2.06 Gd 10.34
실시예 28
a) 2-N-트리플루오로아세틸-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
실시예 1b)에서 제조된 화합물 10.0 g(11.46 mmol)을 에탄올 100 ml에 용해시키고, 펄만 촉매(Pd 20%, C) 1.0 g과 혼합하고, 더 이상의 수소 흡수가 관찰되지 않을 때까지 수소 분위기(1 atm) 하의 실온에서 수소화반응시켰다. 촉매를 흡인 제거하고, 에탄올로 재세척하고, 진공에서 증발 건조시켰다. 표제 화합물을 점성인 무색 오일로서 얻었다.
수율: 8.85 g(이론치의 97.5%)
원소 분석:
계산치: C 30.31 H 2.54 N 7.07 F 47.95 S 4.05
실측치: C 30.36 H 2.50 N 7.11 F 47.99 S 4.00
b) 2-N-트리플루오로아세틸-6-N-[1-O-α-D-(5-카르보닐)-펜틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
디메틸포름아미드 150 ml 중 실시예 17c)의 표제 화합물 27.51 g(36.6 mmol)의 용액을 0 ℃로 냉각된, 디메틸포름아미드 100 ml 중 실시예 28a)의 표제 화합물 29.0 g(36.6 mmol) 및 트리에틸아민 4.05 g(40.26 mmol)의 용액에 적가하였다. 적가가 완결된 후, 0 ℃에서 1 시간 및 실온에서 밤새 교반하였다. 진공에서 증발 건조시키고, 잔사를 에틸 아세테이트 300 ml에 용해시켰다. 불용성 성분을 여과 제거하고, 여액을 5% 소다 수용액으로 각 100 ml씩 2회 세척하였다. 유기상을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 실리카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: n-헥산/이소프로판올 25:1). 표제 화합물 42.05 g(이론치의 80.4%)을 무색 오일 형태로 얻었다.
원소 분석:
계산치: C 50.42 H 4.51 N 7.96 F 26.59 S 2.24
실측치: C 50.38 H 4.50 N 7.91 F 26.62 S 2.20
c) 6-N-[1-O-α-D-(5-카르보닐)-펜틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
실시예 28b)에서 제조된 화합물 20.0 g(14.0 mmol)을 에탄올 150 ml에 용해시켰다. 증류수 25 ml 중 수산화나트륨 2.8 g(70.0 mmol)의 용액을 첨가하고, 50 ℃에서 0.5 시간 동안 교반하였다. 박층 크로마토그래피로 보호기 절단이 정량적으로 일어났음을 확인하였다. 진공에서 증발 건조시키고, 에탄올과의 공동 증류를 반복하여 물기를 제거하였다. 잔사를 실리카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: n-헥산/이소프로판올 20:1). 표제 화합물 16.66 g(이론치의 89.3%)를 무색 오일 형태로 얻었다.
원소 분석:
계산치: C 52.25 H 4.91 N 4.20 F 24.22 S 2.41
실측치: C 52.30 H 4.90 N 4.18 F 24.22 S 2.38
d) 6-N-[1-O-α-D-(5-카르보닐)-펜틸-만노피라노스]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
실시예 28c)에서 제조된 화합물 15.0 g(11.25 mmol)을 에탄올 및 물(10:1)의 혼합물 150 ml에 용해시키고, 펄만 촉매(Pd 20%, C) 1.0 g과 혼합하였다. 실온 및 1 기압의 수소 압력 하에서, 더 이상의 수소 흡수가 관찰되지 않을 때까지 수소화반응시켰다. 촉매를 흡인 제거하고, 에탄올/물(10:1)로 재세척하고, 진공에서 증발 건조시켰다. 표제 화합물을 점성인 무색 오일로서 얻었다.
수율: 10.77 g(이론치의 98.4%)
원소 분석:
계산치: C 37.04 H 4.25 N 5.76 F 33.20 S 3.30
실측치: C 37.06 H 4.20 N 5.18 F 33.19 S 3.30
e) 6-N-[1-O-α-D-(5-카르보닐)-펜틸-만노피라노스]-2-N-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-10-(3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일-펜타노일)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드, 가돌리늄 착물
특허 출원 DE 197 28 954 C1의 실시예 31h)에 기재된 10-(4-카르복시-1-메틸-2-옥소-3-아자부틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7-트리아세트산, Gd 착물 5.54 g(8.8 mmol, 사용된 실시예 28d)의 아민 성분에 대하여 2.2몰 당량) 및 염화리튬 무수물 0.37 g(8.8 mmol)을 40 ℃에서 무수 디메틸 술폭시드 60 ml에 교반하면서 용해시키고, 이 온도에서, 무수 디메틸 술폭시드 60 ml에 용해된 N-히드록시숙신이미드 1.01 g(8.8 mmol) 및 실시예 28d)의 표제 화합물 3.89 g(4.0 mmol)과 혼합하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 용액을 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 1.82 g(8.8 mmol)과 혼합하고, 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 얻어진 현탁액을 표제 화합물의 침전이 완결될 때까지 충분량의 아세톤과 혼합하고, 침전물을 흡인 여과하고, 물에 용해시키고, 불용성 디시클로헥실우레아를 여과 제거하고, 여액을 AMICON(등록상표) YM-3 초여과막(절단: 3,000 Da)으로 탈염하고, 저분자 성분을 제거하였다. 잔류물을 동결 건조하였다.
수율: 무색의 동결건조물 4.81 g(이론치의 75.9%)
수분 함량(칼-피셔): 8.98%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 37.15 H 4.39 N 7.96 F 20.38 Gd 9.92 S 2.02
실측치: C 37.27 H 4.40 N 8.02 F 20.31 Gd 10.00 S 1.98
실시예 29
a) 1,7-비스(벤질옥시카르보닐)-4-(1-O-β-D-카르보닐메틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-갈락토피라노스)-10-{3-옥사-펜탄-1,5-디카르복실산-1-오일-5-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드}-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸
테트라히드로푸란 250 ml에 용해된 실시예 17e)의 표제 화합물 35.80 g(25.0 mmol)을 0 ℃ 및 질소 분위기 하에서, 테트라히드로푸란 150 ml 및 클로로포름 15 ml의 혼합물 중 실시예 15a)에서 제조된 이차 아민 27.0 g(24.4 mmol)의 용액에 첨가하였다. 0 ℃에서 EEDQ(2-에톡시-1,2-디히드로퀴놀린-1-카르복실산 에틸 에스테르) 18.0 g(36.6 mmol)을 소량씩 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 진공에서 증발 건조시키고, 잔류 오일을 실리카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: n-헥산/이소프로판올 = 20:1). 표제 화합물 32.11 g(이론치의 78.0%)를 무색 오일 형태로 얻었다.
원소 분석:
계산치: C 54.09 H 4.72 F 19.14 N 4.98 S 1.90
실측치: C 54.12 H 4.77 F 19.17 N 5.03 S 1.90
b) 1-(1-O-β-D-카르보닐메틸-갈락토피라노스)-7-{3-옥사-펜탄-1,5-디카르복실산-1-오일-5-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드}-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸
실시예 29a)에서 제조된 표제 화합물 30.0 g(17.77 mmol)을 에탄올 250 ml에 용해시키고, 펄만 촉매(Pd 20%, C) 3.0 g과 혼합하였다. 더 이상의 수소 흡수가관찰되지 않을 때까지 수소화반응시키고, 촉매를 흡인 제거하고, 에탄올로 완전히 재세척하고, 진공에서 증발 건조시켰다. 생성물을 매우 점성인 누르스름한 오일로서 얻었다.
수율: 17.89 g(이론치의 95.1%)
원소 분석:
계산치: C 36.30 H 4.09 F 30.50 N 7.94 S 3.03
실측치: C 36.26 H 4.12 F 30.46 N 7.90 S 3.04
c) 1-(1-O-β-D-카르보닐메틸-갈락토피라노스)-7-{3-옥사-펜탄-1,5-디카르복실산-1-오일-5-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드}-4,10-비스[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-10-(3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일-펜타노일)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸]-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸, 디가돌리늄 착물
특허 출원 DE 197 28 954 C1의 실시예 31h)에 기재된 10-(4-카르복시-1-메틸-2-옥소-3-아자부틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7-트리아세트산, Gd 착물 5.54 g(8.8 mmol, 사용된 실시예 29b)의 아민 성분에 대하여 4.4몰 당량) 및 염화리튬 무수물 0.37 g(8.8 mmol)을 40 ℃에서 무수 디메틸 술폭시드 60 ml에 교반하면서 용해시키고, 이 온도에서, 무수 디메틸 술폭시드 25 ml에 용해된 N-히드록시숙신이미드 1.01 g(8.8 mmol) 및 실시예 29b)의 표제 화합물 2.11 g(2.0 mmol)과 혼합하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 용액을 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 1.82 g(8.8 mmol)과 혼합하고, 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 얻어진 현탁액을 표제 화합물의 침전이 완결될 때까지 충분량의 아세톤과 혼합하고, 침전물을 흡인 여과하고, 건조시키고, 물에 용해시키고, 불용성 디시클로헥실우레아를 여과 제거하고, 여액을 AMICON(등록상표) YM-3 초여과막(절단: 3,000 Da)으로 탈염하고, 저분자 성분을 제거하였다. 잔류물을 동결 건조하였다.
수율: 무색의 동결건조물 3.29 g(사용된 아민 성분에 대하여, 이론치의 72.2%)
수분 함량(칼-피셔): 5.99%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 36.84 H 4.37 N 9.82 F 14.15 Gd 19.63 S 1.40
실측치: C 36.87 H 4.40 N 9.82 F 14.09 Gd 19.59 S 1.38
실시예 30
a) 3-(1-O-α-D-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스)-2-N-벤질옥시카르보닐-L-세린-메틸 에스테르
2,3,4,6-테트라-O-벤질-α-D-만노피라노스(F. Kong et al., J. Carbohydr. Chem.; 16; 6; 1997; 877-890에 따라 제조) 21.42 g(39.61 mmol)을 무수 아세토니트릴 500 ml에 용해시켰다. 반응 용액을 5 ℃로 냉각시킨 후, 이 온도에서, 아세토니트릴 30 ml 중 트리플루오로메탄술폰산-트리메틸 실릴 에스테르 13.23 g(59.52 mmol)의 용액에 이어 아세토니트릴 50 ml 중 N-벤질옥시카르보닐-L-세린-메틸 에스테르(바켐사로부터 입수 가능) 20.06 g(79.21 mmol)의 용액을 교반하면서 서서히 적가하였고, 이 때 적가 속도는 내부 온도가 10 ℃ 이하로 유지되도록 선택될 수있다. 실온에서 15 시간 후, 반응 용액을 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트 250 ml에 용해시키고, 포화 중탄산나트륨 용액 각 100 ml로 2회 및 물 200 ml로 1회 세척하였다. 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시킨 후, 염을 흡인 제거하고, 에틸 아세테이트를 진공에서 제거하였다. 유성 잔사를 에틸 아세테이트/n-헥산(1:5)을 용리제로 하여 실리카 겔로 정제하였다.
수율: 무색 오일인 표제 화합물 23.60 g(이론치의 76.8%)
원소 분석:
계산치: C 71.21 H 6.37 N 1.81
실측치: C 71.19 H 6.41 N 1.79
b) 3-(1-O-α-D-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스)-2-N-벤질옥시카르보닐-L-세린
실시예 30a)에서 제조된 화합물 10.0 g(12.90 mmol)을 메탄올 20 ml, 물 20 ml 및 테트라히드로푸란 50 ml의 혼합물에 용해시켰다. 실온에서, 증류수 25 ml에 용해된 수산화리튬 0.47 g(19.35 mmol)을 첨가하고, 60 ℃에서 6 시간 동안 교반하였다. 박층 크로마토그래피(용리제: 염화메틸렌/메탄올 10:1)로 실시예 30a)의 메틸 에스테르의 비누화가 정량적으로 일어났음을 확인하였다. 워킹업을 위해 생성물 용액을 진공에서 증발 건조시키고, 잔사를 가열 중인(약 60 ℃) 에틸 아세테이트 250 ml에 용해시켰다. 얻어진 에틸 아세테이트상을 15% 염산 수용액으로 각 50 ml씩 2회 및 증류수 100 ml로 1회 세척하였다. 유기상을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공에서 증발 건조시켰다. 잔사를 실리카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: n-헥산/에틸 아세테이트 5:1). 표제 화합물 8.40 g(이론치의 85.7%)를 무색 오일 형태로 얻었다.
원소 분석:
계산치: C 70.94 H 6.22 N 1.84
실측치: C 70.97 H 6.30 N 1.78
c) 3-(1-O-α-D-2,3,4,6-테트라-O-벤질-만노피라노스)-2-N-벤질옥시카르보닐-L-세린-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
테트라히드로푸란 50 ml에 용해된 실시예 30b)에 따라 제조된 카르복실산 20.57 g(27.0 mmol)을 0 ℃의 질소 분위기 하에서, 테트라히드로푸란 150 ml 및 클로로포름 15 ml의 혼합물에 용해된 1-퍼플루오로옥틸술포닐피페라진(DE 196 03 033에 따라 제조) 13.86 g(24.40 mmol)에 적가하였다. 0 ℃에서 EEDQ(2-에톡시-1,2-디히드로퀴놀린-1-카르복실산 에틸 에스테르) 18.0 g(36.60 mmol)을 소량씩 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 워킹업을 위해, 반응 용액을 진공에서 증발 농축하고, 매우 점성인 잔류 오일을 n-헥산/이소프로판올(15:1)을 용리제로 하여 실리카 겔로 크로마토그래피하였다. 표제 화합물 17.0 g(이론치의 79.6%, 사용된 1차 아민에 대한 것임)을 점성인 무색 오일 형태로 얻었다.
원소 분석:
계산치: C 51.53 H 4.23 N 3.15 F 25.65 S 2.41
실측치: C 51.48 H 4.27 N 3.10 F 25.71 S 2.35
d) 3-(1-O-α-D-만노피라노스)-L-세린-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
실시예 30c)에 따라 제조된 화합물 15.0 g(11.41 mmol)을 에탄올 200 ml에 용해시키고, 펄만 촉매(Pd 20%, C) 1.5 g과 혼합하였다. 더 이상의 수소 흡수가 관찰되지 않을 때까지(약 8 시간) 수소 분위기(1 atm) 하의 실온에서 수소화반응시켰다. 워킹업을 위해, 촉매를 흡인 제거하고, 에탄올(각각 약 100 ml로 2회)로 완전히 재세척하고, 생성물을 함유하는 에탄올성 여액을 진공에서 증발 건조시켰다. 표제 화합물을 매우 점성인 무색 오일로서 얻었다.
수율: 8.79 g(이론치의 94.0%)
원소 분석:
계산치: C 30.78 H 3.20 N 5.13 F 39.41 S 3.91
실측치: C 30.87 H 3.14 N 5.19 F 39.50 S 3.88
e) 3-(1-O-α-D-만노피라노스)-2-N-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-10-(3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일-펜타노일)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸]-L-세린-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드, 가돌리늄 착물
무수 디메틸 술폭시드 75 ml 중 특허 출원 DE 197 28 954 C1의 실시예 31h)에 기재된 10-(4-카르복시-1-메틸-2-옥소-3-아자부틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7-트리아세트산, Gd 착물 5.7 g(9.06 mmol, 사용된 실시예 30d)의 표제 화합물(1차 아민)에 대하여 1.5몰 당량)의 교반된 용액을 70 ℃에서 염화리튬 0.68 g(15.9 mmol)과 혼합하였다. 70 ℃에서 30분 동안 교반한 후, 투명한 반응 용액을N-히드록시숙신이미드 1.83 g(15.9 mmol)과 소량씩 혼합하고, 반응 혼합물을 70 ℃에서 1 시간 동안 방치하였다. 반응 용액을 10 ℃로 냉각시킨 후, 디시클로헥실카르보디이미드 4.52 g(23.85 mmol)과 혼합하고, 0 ℃에서 1 시간 및 22 ℃에서 12 시간 동안 교반하였다. 얻어진 10-(4-카르복시-1-메틸-2-옥소-3-아자부틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7-트리아세트산, Gd 착물의 N-히드록시숙신이미드 에스테르 용액을 22 ℃에서 무수 디메틸 술폭시드 15 ml 중 실시예 30d)의 표제 화합물 4.94 g(6.03 mmol)의 용액과 점적 혼합하고, 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 워킹업을 위해, 반응 용액을 22 ℃에서 아세톤 250 ml 및 2-프로판올 250 ml의 용매 혼합물에 서서히 적가하고, 10 ℃에서 12 시간 후, 표제 화합물이 담황색 오일로서 완전히 침착되었다. 상층의 용리제 혼합물을 조심스럽게 따라내고, 표제 화합물의 담황색 수용액이 얻어지도록 유성 생성물을 증류수 200 ml에 완전히 용해시켰다. 생성물 수용액을 우선 막 필터로 여과한 다음, 탈염 및 저분자 성분의 분리를 위해, AMICON(등록상표) YM-3 초여과막(절단: 3,000 Da)으로 3회 초여과하였다. 얻어진 잔류물을 동결 건조하였다.
수율: 무색의 동결건조물 8.63 g(이론치의 80.2%; 사용된 실시예 30d)의 표제 화합물에 대한 것임)
수분 함량: 7.65%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 33.57 H 3.80 N 7.83 F 22.57 Gd 10.99 S 2.24
실측치: C 33.57 H 3.76 N 7.82 F 22.63 Gd 11.06 S 2.18
실시예 31
a) 6-N-벤질옥시카르보닐-2-N-[O-β-D-갈락토피라노실(1→4)-글루코노실]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
무수 디메틸 술폭시드 40 ml 중 O-β-D-갈락토피라노실(1→4)-D-글루코노-1,5-락톤[락토비오노락톤; (a) Williams, T. J.; Plessas, N. R., Goldstein, I. J. Carbohydr. Res. 1978, 67, Cl. (b) Kobayashi, K.; Sumitomo, H.; Ina, Y. Polym. J. 1985, 17, 567, (c) Hiromi Kitano, Katsuko Sohda, and Ayako Kosaka, Bioconjugate Chem. 1995, 6 131-134에 따라 제조] 13.3 g(37.2 mmol)의 용액을 실온에서 무수 디메틸 술폭시드 40 ml 중 실시예 1c)의 표제 화합물 4.98 g(6.0 mmol)의 교반된 용액에 적가하였다. 얻어진 반응 용액을 40 ℃에서 14 시간 동안 교반하였다. 워킹업을 위해, 이것을 실온에서 무수 2-프로판올 500 ml와 혼합하고, 생성된 무색 침전물을 G4 프릿을 사용하여 흡인 여과하고, 무수 2-프로판올 250 ml로 완전히 재세척하였다. 얻어진 고체를 증류수 300 ml에 용해시키고, AMICON(등록상표) YM-3 초여과막(절단: 3,000 Da)으로 3회 초여과하였다. 과량의 락토비오노락톤 및 존재할 수도 있는 목적하는 생성물의 저분자 성분을 상기 초여과 처리에 의해 분리하였다. 초여과막에 잔류하는 잔사를 증류수에 완전히 용해시키고, 동결 건조하였다.
수율: 무색의 동결건조물 6.51 g(이론치의 92.7%)
수분 함량: 10.03%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 38.98 H 4.05 N 4.79 F 27.58 S 2.74
실측치: C 39.04 H 4.09 N 4.82 F 27.61 S 2.71
b) 2-N-[O-β-D-갈락토피라노실(1→4)-글루코노실]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
실시예 31a)에서 제조된 화합물 5.0 g(4.27 mmol)을 에탄올 100 ml에 용해시키고, 펄만 촉매(Pd 20%, C) 0.5 g과 혼합하고, 더 이상의 수소 흡수가 관찰되지 않을 때까지 수소 분위기(1 atm) 에서 수소화반응시켰다. 촉매를 흡인 제거하고, 에탄올로 재세척하고, 진공에서 증발 건조시켰다. 표제 화합물을 점성인 무색 오일로서 얻었다.
수율: 4.36 g(이론치의 98.5%)
원소 분석:
계산치: C 34.76 H 3.99 N 5.40 F 31.51 S 3.09
실측치: C 34.78 H 4.04 N 5.34 F 31.51 S 3.15
c) 2-N-[O-β-D-갈락토피라노실(1→4)-글루코노실]-6-N-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-10-(3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일-펜타노일)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드, 가돌리늄 착물
특허 출원 DE 197 28 954 C1의 실시예 31h)에 기재된 10-(4-카르복시-1-메틸-2-옥소-3-아자부틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-1,4,7-트리아세트산, Gd 착물 5.54 g(8.8 mmol, 사용된 실시예 31b)의 아민 성분에 대하여 2.2몰 당량) 및 염화리튬 무수물 0.37 g(8.8 mmol)을 40 ℃에서 무수 디메틸 술폭시드 60 ml에 교반하면서 용해시키고, 이 온도에서, 무수 디메틸 술폭시드 60 ml에 용해된 N-히드록시숙신이미드 1.01 g(8.8 mmol) 및 실시예 31b)의 표제 화합물 3.85 g(4.0 mmol)과 혼합하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 용액을 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 1.82 g(8.8 mmol)과 혼합하고, 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 얻어진 현탁액을 표제 화합물의 침전이 완결될 때까지 충분량의 아세톤/2-프로판올(1:1)과 혼합하고, 침전물을 흡인 여과하였다. 얻어진 침전물을 물 300 ml에 용해시키고, 불용성 디시클로헥실우레아를 여과 제거하였다. 여액을 AMICON(등록상표) YM-3 초여과막(절단: 3,000 Da)으로 3회 초여과하였다. 과량의 Gd 착물 및 존재할 수도 있는 저분자 성분을 상기 초여과 처리에 의해 목적하는 생성물로부터 분리하였다. 초여과막에 잔류하는 잔사를 증류수 500 ml에 완전히 용해시키고, 동결 건조하였다.
수율: 무색의 동결건조물 4.64 g(이론치의 70.4%)
수분 함량(칼-피셔): 10.08%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 35.70 H 4.22 N 7.65 F 19.59 Gd 9.54 S 1.95
실측치: C 35.77 H 4.17 N 7.71 F 19.61 Gd 9.60 S 1.99
실시예 32
a) 6-N-벤질옥시카르보닐-2-N-(2,3,4,5-펜타히드록시-헥사노일)-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
테트라히드로푸란 50 ml 중 5-글루코노락톤 21.45 g(120.4 mmol)의 용액을50 ℃에서 무수 테트라히드로푸란 500 ml 중 실시예 1c)의 표제 화합물 100.0 g(120.4 mmol)의 용액에 적가하였다. 이것을 60 ℃에서 3 시간 및 실온에서 밤새 교반하였다. 진공에서 증발 건조시키고, 잔사를 실리카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: 디클로로메탄/에탄올 = 20:1).
수율: 점성 오일 98.37 g(이론치의 82%)
원소 분석:
계산치: C 38.10 H 3.70 F 32.02 N 5.55 S 3.18
실측치: C 38.22 H 3.79 F 32.02 N 5.42 S 3.29
b) 2-N-(2,3,4,5-펜타히드록시-헥사노일)-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
실시예 32a)의 표제 화합물 100.9 g(100.0 mmol)을 에탄올 2000 ml에 용해시키고, 팔라듐 촉매(10% Pd/C) 10.0 g을 첨가하였다. 실온에서 12 시간 동안 수소화반응시켰다. 촉매를 여과하고, 여액을 진공에서 증발 건조시켰다.
수율: 무색의 고체 87.46 g(양적 수치)
원소 분석:
계산치: C 32.96 H 3.57 N 6.41 S 3.67 F 36.93
실측치: C 32.91 H 3.72 N 6.34 S 3.50 F 36.78
c) 6-N-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-10-N-(펜타노일-3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일)]-2-N-[1-O-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드, 가돌리늄 착물
실시예 1e)의 표제 화합물 50.0 g(54.55 mmol), N-히드록시숙신이미드 6.28 g(54.55 mmol), 염화리튬 4.62 g(109.0 mol) 및 1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-10-(카르복시-3-아자-4-옥소-5-메틸-펜트-5-일)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸, Gd 착물 34.35 g(54.55 mol)을 약간 가열하면서 디메틸 술폭시드 400 ml에 용해시켰다. 10 ℃에서, N,N-디시클로헥실카르보디이미드 16.88 g(81.8 mol)을 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 용액을 아세톤 3000 ml에 쏟아붓고, 10분 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과하고, 크로마토그래피(RP-18 이동상: 물/에탄올/아세토니트릴 구배)로 정제하였다.
수율: 무색의 고체 75.9 g(이론치의 91.0%)
수분 함량: 8.6%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 35.34 H 4.09 N 8.24 S 2.10 F 21.12 Gd 10.28
실측치: C 35.28 H 4.15 N 8.19 S 2.15 F 21.03 Gd 10.14
실시예 33
a) 6-N-벤질옥시카르보닐-2-N-(2,3,4,5-펜타히드록시-헥사노일)-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
테트라히드로푸란 50 ml 중 5-글루코노락톤 21.45 g(120.4 mmol)의 용액을 50 ℃에서 무수 테트라히드로푸란 500 ml 중 실시예 1c)의 표제 화합물 100.0 g(120.4 mmol) 및 트리에틸아민 12.18 g(120.4 mmol)의 용액에 적가하였다. 이것을 60 ℃에서 3 시간 및 실온에서 밤새 교반하였다. 5% 염산 수용액 400 ml를 첨가하고, 실온에서 5분 동안 교반하고, 염화나트륨과 혼합하고, 유기상을 분리하고, 이것을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공에서 증발 건조시키고, 잔사를 실리카 겔로 크로마토그래피하였다(이동상: 디클로로메탄/에탄올 = 20:1).
수율: 점성 오일 100.97 g(이론치의 82%)
원소 분석:
계산치: C 38.10 H 3.70 F 32.02 N 5.55 S 3.18
실측치: C 38.22 H 3.79 F 32.02 N 5.42 S 3.29
b) 2-N-(2,3,4,5-펜타히드록시-헥사노일)-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
실시예 32a)의 표제 화합물 100.9 g(100.0 mmol)을 에탄올 2000 ml에 용해시키고, 팔라듐 촉매(10% Pd/C) 10.0 g을 첨가하였다. 실온에서 12 시간 동안 수소화반응시켰다. 촉매를 여과하고, 여액을 진공에서 증발 건조시켰다.
수율: 무색의 고체 87.46 g(양적 수치)
원소 분석:
계산치: C 32.96 H 3.57 N 6.41 S 3.67 F 36.93
실측치: C 32.91 H 3.72 N 6.34 S 3.50 F 36.78
c) 6-N-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-10-N-(펜타노일-3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일)]-2-N-[1-O-α-D-카르보닐메틸-만노피라노스]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드, 가돌리늄 착물
실시예 1e)의 표제 화합물 50.0 g(54.55 mmol), N-히드록시숙신이미드 6.28g(54.55 mmol), 염화리튬 4.62 g(109.0 mol) 및 1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-10-(카르복시-3-아자-4-옥소-5-메틸-펜트-5-일)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸, Gd 착물 34.35 g(54.55 mol)을 약간 가열하면서 디메틸 술폭시드 400 ml에 용해시켰다. 10 ℃에서, N,N-디시클로헥실카르보디이미드 16.88 g(81.8 mmol)을 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 용액을 아세톤 3000 ml에 쏟아붓고, 10분 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과하고, 크로마토그래피(RP-18 이동상: 물/에탄올/아세토니트릴 구배)로 정제하였다.
수율: 무색의 고체 75.9 g(이론치의 91.0%)
수분 함량: 8.6%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 35.34 H 4.09 N 8.24 S 2.10 F 21.12 Gd 10.28
실측치: C 35.28 H 4.15 N 8.19 S 2.15 F 21.03 Gd 10.14
실시예 34
a) 6-N-벤질옥시카르보닐-2-N-[1-O-α-D-카르보닐메틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-글루코피라노스]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
N,N-디시클로헥실카르보디이미드 41.27 g(200.0 mmol)을 0 ℃에서 디메틸포름아미드 500 ml에 용해된 실시예 1c)의 표제 화합물 100.0 g(120.4 mmol), 1-O-α-D-카르복시메틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-글루코피라노스 72.1 g(120.4 mmol) 및 N-히드록시숙신이미드 13.86 g(120.4 mmol)의 용액에 첨가하였다. 0 ℃에서 3 시간 동안 교반한 다음, 실온에서 밤새 교반하였다. 침전된 우레아를 여과 제거하고, 여액을 진공에서 증발 건조시키고, 실리카 겔로 크로마토그래피하였다 (이동상: 디클로로메탄/에탄올 = 20:1)하였다.
수율: 점성의 오일 136.1 g(이론치의 87%)
원소 분석:
계산치: C 57.32 H 4.89 N 4.31 F 24.86 S 2.47
실측치: C 57.48 H 5.04 N 4.20 F 24.69 S 2.38
b) 2-N-[1-O-α-D-카르보닐메틸-글루코피라노스]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
실시예 34a)의 표제 화합물 130.0 g(100.0 mmol)을 에탄올 2000 ml에 용해시키고, 팔라듐 촉매(10% Pd/C) 10.0 g을 첨가하였다. 실온에서 12 시간 동안 수소화반응시켰다. 촉매를 여과 제거하고, 여액을 진공에서 증발 건조시켰다.
수율: 무색의 고체 91.7 g(양적 수치)
원소 분석:
계산치: C 34.07 H 3.63 N 6.11 S 3.50 F 35.24
실측치: C 33.92 H 3.71 N 6.02 S 3.42 F 35.33
c) 6-N-벤질옥시카르보닐-2-N-[1-O-α-D-카르보닐메틸-글루코피라노스]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드, Gd 착물
실시예 34b)의 표제 화합물 50.0 g(54.55 mmol), N-히드록시숙신이미드 6.28 g(54.55 mmol), 염화리튬 4.62 g(109.0 mol) 및 1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-10-(카르복시-3-아자-4-옥소-5-메틸-펜트-5-일)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸,Gd 착물 34.35 g(54.55 mol)을 약간 가열하면서 디메틸 술폭시드 400 ml에 용해시켰다. 10 ℃에서, N,N-디시클로헥실카르보디이미드 16.88 g(81.8 mmol)을 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 용액을 아세톤 3000 ml에 쏟아붓고, 10분 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과하고, 크로마토그래피(RP-18 이동상: 물/에탄올/아세토니트릴 구배)로 정제하였다.
수율: 무색의 고체 75.9 g(이론치의 91.0%)
수분 함량: 8.6%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 35.34 H 4.09 N 8.24 S 2.10 F 21.12 Gd 10.28
실측치: C 35.26 H 4.18 N 8.14 S 2.158 F 21.01 Gd 10.13
실시예 35
a) 6-N-벤질옥시카르보닐-2-N-[1-O-α-D-카르보닐메틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-갈락토피라노스]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
N,N-디시클로헥실카르보디이미드 20.64 g(100.0 mmol)을 0 ℃에서 디메틸포름아미드 500 ml에 용해된 실시예 1c)의 표제 화합물 50.0 g(60.2 mmol), 1-O-α-D-카르복시메틸-2,3,4,6-테트라-O-벤질-갈락토피라노스 36.05 g(60.2 mmol) 및 N-히드록시숙신이미드 6.93 g(60.2 mmol)의 용액에 첨가하였다. 0 ℃에서 3 시간 동안 교반한 다음, 실온에서 밤새 교반하였다. 침전된 우레아를 여과 제거하고, 여액을 진공에서 증발 건조시키고, 실리카 겔로 크로마토그래피하였다 (이동상: 디클로로메탄/에탄올 = 20:1)하였다.
수율: 점성의 오일 68.1 g(이론치의 87%)
원소 분석:
계산치: C 57.32 H 4.89 N 4.31 F 24.86 S 2.47
실측치: C 57.47 H 5.05 N 4.19 F 24.72 S 2.29
b) 2-N-[1-O-α-D-카르보닐메틸-갈락토피라노스]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
실시예 35a)의 표제 화합물 65.0 g(50.0 mmol)을 에탄올 1000 ml에 용해시키고, 팔라듐 촉매(10% Pd/C) 5.0 g을 첨가하였다. 실온에서 12 시간 동안 수소화반응시켰다. 촉매를 여과 제거하고, 여액을 진공에서 증발 건조시켰다.
수율: 무색의 고체 45.85 g(양적 수치)
원소 분석:
계산치: C 34.07 H 3.63 N 6.11 S 3.50 F 35.24
실측치: C 33.93 H 3.74 N 6.01 S 3.39 F 35.05
c) 6-N-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-10-N-(펜타노일-3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일)]-2-N-[1-O-α-D-카르보닐메틸-갈락토피라노스]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드, Gd 착물
실시예 35b)의 표제 화합물 50.0 g(54.55 mmol), N-히드록시숙신이미드 6.28 g(54.55 mmol), 염화리튬 4.62 g(109.0 mol) 및 1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-10-(카르복시-3-아자-4-옥소-5-메틸-펜트-5-일)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸, Gd 착물 34.35 g(54.55 mmol)을 약간 가열하면서 디메틸 술폭시드 400 ml에 용해시켰다. 10 ℃에서, N,N-디시클로헥실카르보디이미드 16.88 g(81.8 mmol)을 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 용액을 아세톤 3000 ml에 쏟아붓고, 10분 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과하고, 크로마토그래피(RP-18 이동상: 물/에탄올/아세토니트릴 구배)로 정제하였다.
수율: 무색의 고체 37.95 g(이론치의 91.0%)
수분 함량: 8.6%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 35.34 H 4.09 N 8.24 S 2.10 F 21.12 Gd 10.28
실측치: C 35.22 H 4.17 N 8.18 S 2.19 F 20.91 Gd 10.12
실시예 36
a) N-트리플루오로아세틸-L-글루탐산-모노-벤질 에스테르
L-글루탐산-모노-벤질 에스테르 100 g(421.5 mmol)을 트리플루오로아세트산 에틸 에스테르 1000 ml/에탄올 500 ml의 혼합물에 용해시키고, 실온에서 24 시간 동안 교반하였다. 이것을 증발 건조시키고, 잔사를 디이소프로필 에테르로부터 재결정화하였다.
수율: 무색의 결정질 분말 140.47 g(이론치의 96%)
원소 분석:
계산치: C 50.46 H 4.23 F 17.10 N 4.20
실측치: C 51.35 H 4.18 F 17.03 N 4.28
b) 2-N-트리플루오로아세틸-L-글루탐산-모노-벤질 에스테르-5-N-메틸-N-(2,3,4,5,6-펜타히드록시헥실)-아미드
0 ℃에서 N,N-디시클로헥실카르보디이미드 8.25 g(40 mmol)을 디메틸포름아미드 150 ml에 용해된 실시예 36a)의 표제 화합물 24.9 g(24.08 mmol), N-메틸글루카민 2x g(24.08 mmol) 및 N-히드록시숙신이미드 2.77 g(24.08 mmol)의 용액에 첨가하였다. 0 ℃에서 3 시간 및 실온에서 밤새 교반하였다. 침전된 우레아를 여과 제거하고, 여액을 진공에서 증발 건조시키고, 실리카 겔로 크로마토그래피하였다 (이동상: 디클로로메탄/에탄올 = 20:1)하였다.
수율: 점성의 오일 109.40 g(이론치의 89%)
원소 분석:
계산치: C 51.43 H 5.51 F 13.56 N 6.66
실측치: C 51.22 H 5.41 F 13.40 N 6.75
c) N-트리플루오로아세틸-L-글루탐산-N-메틸-N-(2,3,4,5,6-펜타히드록시헥실)-아미드
실시예 36b)의 표제 화합물 77.33 g(15.15 mmol)을 에탄올 500 ml에 용해시키고, 팔라듐 촉매(10% Pd/C) 3 g을 첨가하였다. 실온에서 수소화반응시켰다. 촉매를 여과 제거하고, 여액을 진공에서 증발 건조시켰다.
수율: 무색의 고체 43.0 g(양적 수치)
원소 분석:
계산치: C 40.01 H 5.19 F 17.26 N 8.48
실측치: C 39.84 H 5.13 F 17.09 N 8.68
d) 트리플루오로아세틸-L-글루탐산-5-N-메틸-N-(2,3,4,5,6-펜타히드록시헥실)-아미드-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미도피페라진]-아미드
0 ℃에서 EEDQ(2-에톡시-1,2-디히드로퀴놀린-1-카르복실산 에틸 에스테르) 16.42 g(66.4 mmol)을 테트라히드로푸란 80 ml 중 실시예 36c)의 표제 화합물 10.96 g(33.2 mmol) 및 1-퍼플루오로옥틸술포닐-피페라진(DE 196 03 033에 따라 제조) 18.87 g(33.2 mmol)에 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 진공에서 증발 건조시키고, 실리카 겔로 크로마토그래피(이동상: 디클로로메탄/메탄올 = 20:1)하였다.
수율: 무색의 고체 28.67 g(이론치의 92%)
원소 분석:
계산치: C 39.61 H 2.89 F 35.66 N 6.19 S 3.54
실측치: C 39.68 H 2.74 F 35.81 N 6.13 S 3.40
e) L-글루탐산-5-N-메틸-N-(2,3,4,5,6-펜타히드록시헥실)-아미드-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
0 ℃에서 암모니아 기체를 에탄올 200 ml 중 실시예 36d)의 표제 화합물 28.36 g(30.22 mmol)의 용액에 1 시간 동안 도입하였다. 이어서, 0 ℃에서 4 시간 동안 교반하였다. 증발 건조시키고, 잔사를 물로부터 흡수 침전시켰다. 고체를 여과하고, 50 ℃의 진공에서 건조시켰다.
수율: 무정형 고체 24.19 g(이론치의 95%)
원소 분석:
계산치: C 41.12 H 2.89 F 35.66 N 6.19 S 3.54
실측치: C 41.15 H 2.83 F 35.78 N 6.28 S 3.71
f) N-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-10-N-(펜타노일-3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일)]-L-글루탐산-5-N-메틸-N-(2,3,4,5,6-펜타히드록시헥실)-아미드-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드, Gd 착물
실시예 36e)의 표제 화합물 20.43 g(24.25 mmol), N-히드록시숙신이미드 2.79 g(24.25 mmol), 염화리튬 2.12 g(50 mmol) 및 1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-10-[(3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일)-펜탄산]-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸, Gd 착물 15.27 g(24.25 mmol)을 약간 가열하면서 디메틸 술폭시드 200 ml에 용해시켰다. 10 ℃에서, N,N-디시클로헥실카르보디이미드 8.25 g(40 mmol)을 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 용액을 아세톤 3000 ml에 쏟아붓고, 10분 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과하고, 크로마토그래피(실리카 겔 RP-18, 이동상: 물/에탄올/아세토니트릴 구배)로 정제하였다.
수율: 무색의 고체 28.45 g(이론치의 79%)
수분 함량: 11.0%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 34.41 H 3.83 F 23.13 N 9.03 S 2.30 Gd 11.26
실측치: C 34.34 H 3.98 F 23.29 N 9.19 S 2.15 Gd 11.07
실시예 37
a) 6-N-벤질옥시카르보닐-2-N-[1-O-α-D-카르보닐메틸-2,3,4-트리-O-벤질-글루쿠론산 벤질 에스테르]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
0 ℃에서 N,N-디시클로헥실카르보디이미드 41.27 g(200.0 mmol)을 디메틸포름아미드 500 ml에 용해된 실시예 1c)의 표제 화합물 100.0 g(120.4 mol), 1-O-α-D-카르복시메틸-2,3,4-트리-O-벤질-글루쿠론산 벤질 에스테르 73.77 g(120.4 mol) 및 N-히드록시숙신이미드 13.86 g(120.4 mol)의 용액에 첨가하였다. 0 ℃에서 3 시간 동안 교반한 다음, 실온에서 밤새 교반하였다. 침전된 우레아를 여과 제거하고, 여액을 진공에서 증발 건조시키고, 실리카 겔로 크로마토그래피하였다 (이동상: 디클로로메탄/에탄올 = 20:1)하였다.
수율: 점성의 오일 147.58 g(이론치의 86%)
원소 분석:
계산치: C 52.25 H 4.31 N 3.93 F 22.66 S 2.45
실측치: C 52.38 H 4.17 N 4.12 F 22.78 S 2.39
b) 2-N-[1-O-α-D-카르보닐메틸-글루쿠론산]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드
실시예 37a)의 표제 화합물 142.52 g(100.0 mmol)을 에탄올 2000 ml에 용해시키고, 팔라듐 촉매(10% Pd/C) 10.0 g을 첨가하였다. 실온에서 12 시간 동안 수소화반응시켰다. 촉매를 여과 제거하고, 여액을 진공에서 증발 건조시켰다.
수율: 무색의 고체 93.06 g(양적 수치)
원소 분석:
계산치: C 33.56 H 3.36 N 6.02 S 3.45 F 34.71
실측치: C 33.31 H 3.42 N 6.04 S 3.40 F 35.51
c) 6-N-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-10-N-(펜타노일-3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일)]-2-N-[1-O-α-D-카르보닐메틸-글루쿠론산]-L-리신-[1-(4-퍼플루오로옥틸술포닐)-피페라진]-아미드, Gd 착물, 나트륨염
실시예 37b)의 표제 화합물 50.76 g(54.55 mmol), N-히드록시숙신이미드 6.28 g(54.55 mmol), 염화리튬 4.62 g(109.0 mol) 및 1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-10-(카르복시-3-아자-4-옥소-5-메틸-펜트-5-일)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸, Gd 착물 34.35 g(54.55 mol)을 약간 가열하면서 디메틸 술폭시드 400 ml에 용해시켰다. 10 ℃에서, N,N-디시클로헥실카르보디이미드 16.88 g(81.8 mmol)을 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 용액을 아세톤 3000 ml에 쏟아붓고, 10분 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과하고, 크로마토그래피(RP-18 이동상: 물/에탄올/아세토니트릴 구배)로 정제하였다.
수율: 무색의 고체 75.149 g(이론치의 88.0%)
수분 함량: 8.6%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 34.53 H 3.80 N 8.05 Na 1.47 S 2.05 F 20.63 Gd 10.05
실측치: C 34.38 H 3.95 N 8.19 Na 1.63 S 2.15 F 20.83 Gd 10.14
실시예 38
a) 6-N-벤질옥시카르보닐-2-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-L-리신
0 ℃에서 EEDQ(2-에톡시-1,2-디히드로퀴놀린-1-카르복실산 에틸 에스테르) 49.46 g(200.0 mmol)을 테트라히드로푸란 300 ml 중 6-N-벤질옥시카르보닐-L-리신 31.820 g(113.5 mmol) 및 2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노아세트산(DE 196 03 033에 따라 제조) 66.42 g(113.5 mmol)에 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 진공에서 증발 건조시키고, 실리카 겔로 크로마토그래피(이동상: 디클로로메탄/메탄올 = 20:1)하였다.
수율: 무색의 고체 55.79 g(이론치의 58%)
원소 분석:
계산치: C 36.85 H 3.09 N 4.96 F 38.11 S 3.78
실측치: C 36.85 H 3.19 N 4.87 F 38.28 S 3.95
b) 6-N-벤질옥시카르보닐-2-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-L-리신-N-메틸-N-(2,3,4,5,6-펜타히드록시헥실)-아미드
0 ℃에서 N,N-디시클로헥실카르보디이미드 20.64 g(100.0 mmol)을 디메틸포름아미드 250 ml에 용해된 실시예 38a)의 표제 화합물 51.02 g(60.2 mol), N-메틸-글루카민 11.75 g(60.2 mol) 및 N-히드록시숙신이미드 6.93 g(60.2 mol)의 용액에 첨가하였다. 0 ℃에서 3 시간 동안 교반한 다음, 실온에서 밤새 교반하였다. 침전된 우레아를 여과 제거하고, 여액을 진공에서 증발 건조시키고, 실리카 겔로 크로마토그래피하였다 (이동상: 디클로로메탄/에탄올 = 20:1)하였다.
수율: 점성의 오일 53.05 g(이론치의 86%)
원소 분석:
계산치: C 38.68 H 4.03 N 5.47 F 31.52 S 3.13
실측치: C 38.49 H 4.17 N 5.32 F 31.70 S 3.29
c) 2-N-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-L-리신-N-메틸-N-(2,3,4,5,6-펜타히드록시헥실)-아미드
실시예 38b)의 표제 화합물 102.48 g(100.0 mmol)을 에탄올 2000 ml에 용해시키고, 팔라듐 촉매(10% Pd/C) 10.0 g을 첨가하였다. 실온에서 12 시간 동안 수소화반응시켰다. 촉매를 여과 제거하고, 여액을 진공에서 증발 건조시켰다.
수율: 무색의 고체 89.06 g(양적 수치)
원소 분석:
계산치: C 33.72 H 3.96 N 6.29 S 3.60 F 36.26
실측치: C 33.91 H 3.82 N 6.14 S 3.47 F 36.31
d) 6-N-[1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸-10-N-(펜타노일-3-아자-4-옥소-5-메틸-5-일)]-2-N-[2-(N-에틸-N-퍼플루오로옥틸술포닐)-아미노]-아세틸-L-리신-N-메틸-N-(2,3,4,5,6-펜타히드록시헥실)-아미드, Gd 착물, 나트륨염
실시예 38c)의 표제 화합물 48.58 g(54.55 mmol), N-히드록시숙신이미드 6.28 g(54.55 mmol), 염화리튬 4.62 g(109.0 mol) 및 1,4,7-트리스(카르복실라토메틸)-10-(카르복시-3-아자-4-옥소-5-메틸-펜트-5-일)-1,4,7,10-테트라아자시클로도데칸, Gd 착물 34.35 g(54.55 mol)을 약간 가열하면서 디메틸 술폭시드 400 ml에용해시켰다. 10 ℃에서, N,N-디시클로헥실카르보디이미드 16.88 g(81.8 mmol)을 첨가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 용액을 아세톤 3000 ml에 쏟아붓고, 10분 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과하고, 크로마토그래피(RP-18 이동상: 물/에탄올/아세토니트릴 구배)로 정제하였다.
수율: 무색의 고체 73.27 g(이론치의 89.4%)
수분 함량: 8.6%
원소 분석(무수물에 대한 것임):
계산치: C 35.18 H 4.23 N 4.23 S 2.13 F 21.50 Gd 10.47
실측치: C 35.28 H 4.15 N 4.19 S 2.18 F 21.33 Gd 10.61
실시예 39
전립선암을 가진 랫트에서 본 발명에 따른 실시예 1의 조영제를 정맥내 투여한 후 기관 분포(종양 및 림프절 농도 포함)
실시예 1의 표제 화합물을 225 μmol의 가돌리늄/체중 kg으로 랫트(12일 전에 Cop-교배 Dunning R3327 MAT-Lu 전립선암을 근욱내에 이식)에 정맥내 투여한 후, 다양한 기관, 종양 및 림프절의 금속 농도를 투여 후 10분, 1 시간 및 24 시간에 측정하였다(MS ±SD, n = 3).
* 혈액 58 ml/체중 kg
** 오른쪽 다리 근육의 조직 샘플임.
*** 주사 후 10분 및 60분에서 모든 조직의 합이 신체의 나머지 부위보다 더 적음.
**** 신체의 나머지 부위는 혈액의 나머지도 포함함.
실시예 40
VX-2 종양을 가진 토끼에서 실시예 1의 조영제를 정맥내 투여한 후 림프절가시화(MRT)
도 1은 조영제 투여 전 및 실시예 1의 표제 화합물을 200 μmol의 가돌리늄/체중 kg으로 근육내 이식된 VX-2 종양을 가진 토끼에 정맥내 투여한 후, 장골 림프절의 MR 영상을 나타낸다. T1-가중 그래디언트-에코(gradient-echo) 영상(1.5 T; sequence: MPRange; TR 11.1 ms, TE 4.3 ms, α 15°) 은 건강한 림프절 조직에서의 강한 신호 증가를 나타낸다. 림프절 내에 신호 증가가 없는 영역은 전이로 진단되었고, 조직학적으로(림프절 구획의 H/E 염색) 확인되었다. 그러나, 조영제 투여 후(24 시간), 놀라울 정도로 신호 반전이 관찰되었다. 건강한 림프절 조직에서의 신호 증가가 감소된 반면, 전이는 상당한 신호 증가를 나타내었다.
투여 후 즉시, 놀라울 정도로, 일차 종양(특히, 말단)의 상당한 증가가 관찰되었다. 나중에(주사 후 24시간), 이 증가는 종양의 중심으로부터 퍼졌다.
실시예 41
랫트에서 본 발명에 따른 실시예 1의 조영제를 정맥내 투여한 후 경색 가시화(MRT)
도 2는 실시예 1의 표제 화합물을 100 μmol의 가돌리늄/체중 kg으로 급성 심근 경색을 가진 랫트에 정맥내 투여 한 후 24 시간에, 심장(생체내 및 사후)의 MR 영상을 나타낸다. T1-가중 스핀-에코(spin-echo) 영상(1.5 T; TR 400 ms, TE 6 ms, NA 4, 매트릭스 128*128, 층 두께 2.5 mm)은 경색 영역에서 강한 신호 증가를 나타낸다. 급성 심근 경색의 성공적인 지시를 NBT 염색을 사용하여 확인하였다.

Claims (23)

  1. 하기 화학식 Ⅰ의 당 라디칼과의 퍼플루오로알킬 함유 착물.
    <화학식 Ⅰ>
    (상기 식에서,
    R은 1-OH 또는 1-SH 위치를 거쳐 결합되는 단당류 또는 올리고당류 라디칼이고,
    Rf는 화학식 -CnF2nE(여기서, E는 말단 불소, 염소, 브롬, 요오드 또는 수소 원자를 나타내고, n은 4 내지 30의 수를 나타냄)의 퍼플루오르화된 직쇄 또는 분지쇄 탄소 사슬이고,
    K는 하기 화학식 II의 금속 착물, 또는
    <화학식 II>
    (상기 식에서,
    R1은 수소 원자 또는 원자 번호 21-29, 31-33, 37-39, 42-44, 49 또는 57-83의 금속 이온 등가물이고, 단, 2 이상의 R1은 금속 이온 등가물이며,
    R2및 R3는 서로 독립적으로 수소, C1-C7알킬, 벤질, 페닐, -CH2OH 또는 -CH2OCH3이고,
    U는 -C6H4-O-CH2-ω-, -(CH2)1-5-ω, 페닐렌기, -CH2-NHCO-CH2-CH(CH2COOH)-C6H4-ω-, -C6H4-(OCH2CH2)0-1-N(CH2COOH)-CH2-ω, C1-C12-알킬렌기 또는 C7-C12-C6H4-O기이고, 이는 1 이상의 산소 원자, 1 내지 3개의 -NHCO기 또는 1 내지 3개의 -CONH기에 의해 임의로 단속되고(단속되거나) 1 내지 3개의 -(CH2)0-5COOH기로 치환되고, 여기서 ω는 -CO-에 대한 결합 부위를 나타냄)
    하기 화학식 III의 금속 착물, 또는
    <화학식 III>
    (상기 식에서, R1은 상기 언급한 의미를 가지고, R4는 수소 또는 상기 R1에서언급한 금속 이온 등가물을 나타내고, U1은 -C6H4-O-CH2-ω-(여기서, ω는 -CO-에 대한 결합 부위를 나타냄)임)
    하기 화학식 IV의 금속 착물, 또는
    <화학식 IV>
    (상기 식에서, R1및 R2는 상기 언급한 의미를 가짐)
    하기 화학식 VA 또는 VB의 금속 착물, 또는
    <화학식 VA>
    <화학식 VB>
    (상기 식들에서, R1은 상기 언급한 의미를 가짐)
    하기 화학식 VI의 금속 착물, 또는
    <화학식 VI>
    (상기 식에서, R1은 상기 언급한 의미를 가짐)
    하기 화학식 VII의 금속 착물, 또는
    <화학식 VII>
    (상기 식에서, R1은 상기 언급한 의미를 가지고, U1은 -C6H4-O-CH2-ω-(여기서, ω은 -CO-에 대한 결합 부위임)임)
    하기 화학식 VIII의 금속 착물이고,
    <화학식 VIII>
    (여기서, R1은 상기 언급한 의미를 가짐)
    라디칼 K에서, 임의로 존재하는 유기산기는 유기 및(또는) 무기 염기 또는 아미노산 또는 아미노산 아미드의 염으로 존재할 수 있고,
    G는, K가 금속 착물 II 내지 VII을 의미하는 경우, 3 부분 이상에서 관능화되고, 하기 라디칼 a) 내지 j)로부터 선택되는 라디칼이고,
    G는, K가 금속 착물 VIII을 의미하는 경우, 3 부분 이상에서 관능화되고, 하기 k) 또는 l)로부터 선택되는 라디칼이고,
    (여기서, α는 착물 K에 대한 G의 결합 부위이고, β는 라디칼 Y에 대한 G의 결합 부위이고, γ는 라디칼 Z에 대한 G의 결합 부위임)
    Y는 -CH2-, δ-(CH2)nCO-β(여기서, n = 1-5), δ-CH2-CHOH-CO-β또는 δ-CH(CHOH-CH2OH)-CHOH-CHOH-CO-β(여기서, δ는 당 라디칼 R에 대한 결합 부위이고, β는 라디칼 G에 대한 결합 부위임)이고,
    Z는
    (여기서, γ는 라디칼 G에 대한 Z의 결합 부위이고, ξ는 퍼플루오르화 라디칼 Rf에 대한 Z의 결합 부위임)이고,
    l, m은 서로 독립적으로 1 또는 2의 정수를 의미하고,
    p는 1 내지 4의 정수를 의미함)
  2. 제1항에 있어서, 금속 이온 등가물 R1이 원자 번호 21-29, 39, 42, 44 또는 57-83의 원자임을 특징으로 하는 금속 착물.
  3. 제1항에 있어서, 금속 이온 등가물 R1이 원자 번호 27, 29, 31-33, 37-39, 43, 49, 62, 64, 70, 75 또는 77의 원자인 금속 착물.
  4. 제1항 내지 3항 중 어느 한 항에 있어서, R이 탄소 원자가 5 내지 6개인 단당류 라디칼 또는 그의 데옥시 화합물, 바람직하게는 글루코스, 만노스 또는 갈락토스인 금속 착물.
  5. 제1항 내지 4항 중 어느 한 항에 있어서, K가 화학식 II의 금속 착물인 금속 착물.
  6. 제5항에 있어서, R2및 R3이 독립적으로, 수소 또는 C1-C4알킬인 금속 착물.
  7. 제1항 내지 6항 중 어느 한 항에 있어서, 화학식 -CnF2nE 중 E가 불소 원자인 금속 착물.
  8. 제1항 내지 7항 중 어느 한 항에 있어서, 화학식 I 중 G가 리신 라디칼 (a) 또는 (b)인 금속 착물.
  9. 제1항 내지 8항 중 어느 한 항에 있어서, 화학식 I 중 Z가(여기서, γ는 라디칼 G에 대한 Z의 결합 부위이고, ξ는 퍼플루오르화 라디칼 Rf에 대한 Z의 결합 부위임)인 금속 착물.
  10. 제1항 내지 9항 중 어느 한 항에 있어서, 화학식 I 중 Z가 δ-(CH2)nCO-β(여기서, δ는 당 라디칼 R에 대한 결합 부위이고, β는 라디칼 G에 대한 결합 부위임)인 금속 착물.
  11. 제1항 내지 10항 중 어느 한 항에 있어서, 금속 착물 K 중 U가 -CH2- 또는 -C6H4-O-CH2-ω-(여기서, ω는 -CO-에 대한 결합 부위를 나타냄)인 금속 착물.
  12. 제2항 기재 금속 착물의, NMR 진단 및 X-선 진단용 조영제의 생산을 위한 용도.
  13. 제12항 기재 금속 착물의, 경색 및 괴사 영상용 조영제의 생산을 위한 용도.
  14. 제3항 기재 금속 착물의, 방사선 진단 및 방사선 요법용 조영제의 생산을 위한 용도.
  15. 제2항 기재 금속 착물의, 림프계의 변화 진단에서 림프관조영술용 조영제의 생산을 위한 용도.
  16. 제2항 기재 금속 착물의, 간접 림프관조영술용 조영제의 생산을 위한 용도.
  17. 제2항 기재 금속 착물의, 정맥내 림프관조영술용 조영제의 생산을 위한 용도.
  18. 제2항 기재 금속 착물의, 혈관강 가시화용 조영제의 생산을 위한 용도.
  19. 제2항 기재 금속 착물의, 종양 영상용 조영제의 생산을 위한 용도.
  20. 제2항 기재 금속 착물의, 비정상적인 관상동맥 투과성의 가시화용 조영제의 생산을 위한 용도.
  21. 제1항 내지 11항 기재의 생리학적으로 상용성인 화합물 1종 이상을 임의로 생약에 일반적으로 사용되는 첨가제와 함께 포함하는 제약 제제.
  22. 화학식 IIa의 카르복실산, 화학식 IIIa의 카르복실산, 화학식 IVa의 카르복실산, 화학식 Va 또는 Vb의 카르복실산, 화학식 VIa의 카르복실산 또는 화학식 VIIa의 카르복실산을 임의로 활성화된 형태로 화학식 IX의 아민과 커플링 반응시키고, 임의로 존재하는 보호기를 후속적으로 임의로 제거하여 화학식 I의 금속 착물을 형성하거나, 또는 R5가 보호기인 경우, 후속 단계에서 공지의 방법으로 보호기를 절단한 후, 원자 번호 21-29, 31-33, 37-39, 42-44, 49 또는 57-83인 원자의 1 이상의 금속 산화물 또는 금속 염과 반응시킨 다음, 필요한 경우, 임의로 존재하는 산성 수소 원자를 무기 및(또는) 유기 염기의 양이온, 아미노산 또는 아미노산 아미드로 치환하는 것을 포함하는, K가 화학식 II 내지 VII의 금속 착물이고, G가 화학식 a) 내지 j)이며, Y, Z, R, Rf, m, p 및 l이 상기 언급된 의미를 가지는 화학식 I의 당 라디칼과의 퍼플루오로알킬 함유 금속 착물을 공지의 방법으로 제조하는 방법.
    <화학식 IIa>
    (상기 식 중에서, R5는 원자 번호 21-29, 31-33, 37-39, 42-44, 49 또는 57-83인 금속 이온 등가물 또는 카르복실 보호기이고, R2, R3및 U는 상기 언급된 의미를 가짐)
    <화학식 IIIa>
    (상기 식 중에서, R4, R5및 U1은 상기 언급된 의미를 가짐)
    <화학식 IVa>
    (상기 식 중에서, R5및 R2는 상기 언급된 의미를 가짐)
    <화학식 Va>
    (상기 식 중에서, R5는 상기 언급된 의미를 가짐)
    <화학식 Vb>
    (상기 식 중에서, R5는 상기 언급된 의미를 가짐)
    <화학식 VIa>
    (상기 식 중에서, R5는 상기 언급된 의미를 가짐)
    <화학식 VIIa>
    (상기 식 중에서, R5및 U1은 상기 언급된 의미를 가짐)
    <화학식 IX>
    (상기 식 중에서, G는 화학식 a) 내지 j)를 의미하고, R, Rf, Y, Z, m 및 p는 상기 언급된 의미를 가짐)
    <화학식 I>
  23. 화학식 VIIIa의 아민을 화학식 X의 임의로 활성화된 카르복실산과 커플링 반응시키고, 임의로 존재하는 보호기를 후속적으로 임의로 제거하여 화학식 I의 금속 착물을 형성하거나, 또는 R5가 보호기인 경우, 후속 단계에서 공지의 방법으로 보호기를 절단한 후, 원자 번호 21-29, 31-33, 37-39, 42-44, 49 또는 57-83인 원자의 1 이상의 금속 산화물 또는 금속 염과 반응시킨 다음, 필요한 경우, 임의로 존재하는 산성 수소 원자를 무기 및(또는) 유기 염기의 양이온, 아미노산 또는 아미노산 아미드로 치환하는 것을 포함하는, K가 화학식 VIII의 금속 착물이고, G가 화학식 k) 또는 l)이며, Y, Z, R, Rf, m, p 및 l은 상기 언급된 의미를 가지는 화학식 I의 당 라디칼과의 퍼플루오로알킬 함유 금속 착물을 공지의 방법으로 제조하는 방법.
    <화학식 VIIIa>
    (상기 식 중에서, R5는 원자 번호 21-29, 31-33, 37-39, 42-44, 49 또는 57-83인 금속 이온 등가물 또는 카르복실 보호기임)
    <화학식 X>
    (상기 식 중에서, G는 화학식 k) 또는 l)이고, R, Rf, Y, Z, m 및 p는 상기 언급된 의미를 가짐)
    <화학식 I>
KR1020037002021A 2000-08-11 2001-07-23 당 잔기를 포함하는 퍼플루오로알킬 함유 착물, 이의 제조방법 및 용도 KR100820387B1 (ko)

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