CN1293065C

CN1293065C - 作为类固醇硫酸酯酶抑制剂的哌嗪基－或哌啶基胺─氨基磺酸酰胺

Info

Publication number: CN1293065C
Application number: CNB038083361A
Authority: CN
Inventors: P·莱尔
Original assignee: Novartis AG
Current assignee: Novartis AG
Priority date: 2002-03-28
Filing date: 2003-03-27
Publication date: 2007-01-03
Anticipated expiration: 2023-03-27
Also published as: AU2003226732A1; US7439362B2; AR039156A1; JP4580652B2; WO2003082842A1; RU2329258C2; EP1492782A1; RU2004131822A; IL164267A0; CN1646509A; CO5640113A2; NO20044321L; KR20040094877A; JP2005526812A; US20090042899A1; CA2480686A1; US20060052393A1; AU2003226732B2; PL372602A1; MXPA04009453A

Abstract

本发明涉及哌嗪基-或哌啶基胺-氨基磺酸酰胺以及它们用于制备治疗类固醇硫酸酯酶介导的疾病的药物中的用途。

Description

作为类固醇硫酸酯酶抑制剂的哌嗪基-或哌啶基胺-氨基磺酸酰胺

本发明涉及氨基磺酸酰胺，这些化合物可以用于治疗例如由类固醇硫酸酯酶活性所介导的紊乱。

一方面，本发明提供式I的化合物：

其中

-R₁和R₂与它们相连的氮原子一起为哌嗪基，其中第二个氮原子由(C_1-6)烷氧羰基或由(C_6-18)芳基取代，其中(C_6-18)芳基可由一个或多个卤素、(C_1-6)卤代烷基(如CF₃)、氨基羰基取代；

或者

-R₁为氢而R₂为哌啶基，经哌啶环上的碳原子相连，其中氮原子由(C_1-6)烷氧羰基或由(C_6-18)芳基取代，并且

R₃为(C_6-18)芳基或(C_6-18)芳基(C_1-4)烷基，其中芳基可由一个或多个卤素、氨基羰基或(C_1-6)卤代烷基取代。

如果没有另外指明，此处的(C_6-18)芳基(如苯基)，为由一个或多个卤素、(C_1-6)卤代烷基(如CF₃)或氨基羰基取代的(C_6-18)芳基。

(C_1-6)烷氧羰基包括未取代的或取代的(C_1-6)烷氧羰基，如烷基由(C_6-18)芳基(如苯基)取代的烷氧羰基(如苄氧基羰基)。卤素包括氟、氯、溴、碘，如氟、氯。(C_6-18)芳基(C_1-4)烷基优选为苯基(C_1-4)烷基(如苯乙基)，其中苯基的取代基与所述(C_6-18)芳基取代基相同。

优选的式I化合物定义如下：

-R₁和R₂与氮原子一起为哌嗪基，其中第二个氮原子由

-(C_1-6)烷氧羰基(如叔丁氧基羰基、苄氧基羰基)取代，

-由氨基羰基、(C_1-6)卤代烷基取代的苯基取代，或者

-R₁为氢而R₂为哌啶基，经哌啶环上的碳原子相连，其中氮原子由

-(C_1-6)烷氧羰基(如叔丁氧基羰基、苄氧基羰基)取代，

-由氨基羰基、(C_1-6)卤代烷基取代的苯基取代，且

-R₃为

由一个或多个选自下列的基团取代的苯基：

-卤素，

-(C_1-6)卤代烷基(如CF₃)，

-氨基羰基，

或者为

苯基取代的(C_1-4)烷基，其中苯基由一个或多个选自下列的基团取代：

-卤素，

-(C_1-6)卤代烷基(如CF₃)，

-氨基羰基。

另一方面，本发明提供选自下式化合物组的式I化合物：

其中

a.R_3ss为3，5-二(三氟甲基)苯基而R_4ss为2-氨基羰基-5-三氟甲基苯基，

b.R_3ss为2，3-二氯苯基，R_4ss为2-氨基羰基-5-三氟甲基苯基，

c.R_3ss为3，5-二氯苯基，R_4ss为2-氨基羰基-5-三氟甲基苯基，以及

d.R_3ss为3，5-二(三氟甲基)苯基而R_4ss为叔丁氧基羰基；

优选的R_3ss为3，5-二(三氟甲基)苯基。

另一方面，本发明提供选自下式化合物组的式I化合物

其中

a.R_3s为3，5-二(三氟甲基)苯基而R_4s为叔丁氧基羰基，

b.R_3s为2，3-二氯苯基而R_4s为叔丁氧基羰基，

c.R_3s为3，5-二氯苯基而R_4s为叔丁氧基羰基，

d.R_3s为3，5-二(三氟甲基)苯基而R_4s为苄氧基羰基，

e.R_3s为2，3-二氯苯基而R_4s为苄氧基羰基，

f.R_3s为3，5-二氯苯基而R_4s为苄氧基羰基，

g.R_3s为3，5-二氯苯基而R_4s为苄氧基羰基，

h.R_3s为3，5-二(三氟甲基)苯基而R_4s为2-氨基羰基-5-三氟甲基苯基，

i.R_3s为3，5-二氯苯基而R_4s为2-氨基羰基-5-三氟甲基苯基，

j.R_3s为2，3-二氯苯基而R_4s为2-氨基羰基-5-三氟甲基苯基，以及

k.R_3s为2-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙基而R_4s为叔丁氧基羰基。

本发明所提供的化合物在下文中被称为“本发明化合物”。式I化合物包括式I_s化合物和式I_ss化合物。在本发明化合物中上述的每个取代基本身都可以是一个优选的取代基，而与其他所述的取代基无关。本发明化合物包括任何形式的化合物，如游离形式、盐形式、溶剂化物形式以及盐的溶剂化物形式。

另一方面，本发明提供盐形式的本发明化合物。

虽然优选的盐为药学上可接受的盐，但是在制备、分离、纯化过程中仍可采用药学上不可接受的盐。

本发明化合物的盐包括金属盐、酸加成盐或胺盐。金属盐包括碱金属或碱土金属盐；酸加成盐包括本发明化合物与酸(如HCl)的盐；胺盐包括本发明化合物与胺的盐。盐形式的本发明化合物优选金属盐。

游离形式的本发明化合物可转化为相应盐形式的化合物；反之亦然。游离形式或盐形式及溶剂化物形式的本发明化合物可转化为相应游离形式或盐形式及非溶剂化物形式的化合物；反之亦然。

本发明化合物可以以异构体形式及其混合物存在；如光学异构体、非对应异构体、顺式/反式构象异构体。本发明化合物也可含有例如不对称碳原子，因此也可以以对映异构体或非对映异构体形式及其它们的混合物存在，如外消旋物。不对称碳原子可以(R)-、(S)-或(R，S)-构型存在，优选以(R)-或(S)-构型存在。

根据例如类似于常用方法的方法，分离异构体混合物得到纯的异构体。本发明包括以任何异构体和异构体混合物形式存在的本发明化合物。

本发明也包括式I化合物的互变异构体，如果互变异构体可以存在的话。

根据例如类似于常用方法或本文说明的方法，在适当情况下制备本文所述的化合物，如本发明化合物。

另一方面，本发明提供制备本发明化合物的方法，该方法包含如下步骤且将反应步骤A、B2或反应步骤C6中所获得的式I化合物从反应混合物中分离，

A.以使式II化合物：

其中R₁和R₂如上所述，与如酰氯的活化形式的式III化合物反应，该反应或者在偶联剂存在的情况下进行，式III如下：

其中R₃如上所述；

或者

B1.使其中R₁和R₂与它们相连的氮原子一起为未取代的哌嗪基的式II化合物与其中R₃如上所述的如酰氯的活化形式的式III化合物反应，该反应或者在偶联剂存在的情况下进行，从而得到式IV的化合物：

其中R₃如上所述；并且

B2.在碱(K₂CO₃)存在的情况下，使式IV化合物与任选取代的(C_6-18)氟代芳基(如氟代苯基)反应得到式I化合物，其中所述任选取代的芳基的取代基如式I化合物所定义的，在得到的式I化合物中，R₁和R₂与它们相连的氮原子一起为哌嗪基，其在第二个氮原子上由任选取代的(C_6-18)芳基取代；或者

C1.在NaBH₄存在的情况下，使式V化合物与苯甲醛反应，式V化合物如下：

其中R_SUB为(C_1-6)烷氧羰基，得到式VI化合物：

其中R_SUB如上所定义且Bnz为苄基，

C2.使式VI化合物与H₂N-SO₂-NH₂反应得到式VII化合物：

其中R_SUB和Bnz如上所定义，

C3.使式VII化合物与其中R₃如上所定义的R₃-COOH反应得到式VIII化合物，在R₃-COOH中，羧基为活化形式，式VIII化合物如下：

其中R_SUB、Bnz和R₃如上所定义，

C4.使式VIII化合物与醚化HCl反应，得到式IX化合物，

其中Bnz和R₃如上所定义，

C5.在碱(如K₂CO₃)存在的情况下，使式IX化合物与任选取代的(C_6-18)氟代芳基(如氟代苯基)反应，得到式X化合物，其中上述任选取代的芳基的取代基如式I化合物所定义的，式X化合物为其中Bnz和R₃如上所定义且哌啶基的氮原子由任选取代的(C_6-18)芳基取代的式IX化合物，

C6.在钯催化剂存在的情况下，将步骤C5中得到的化合物氢化，得到式I化合物，其中R₁为H，R₂为由任选取代的(C_6-18)芳基取代的哌啶，且R₃如上所定义。

在式I化合物的制备中，式II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX和X化合物为中间体(原料)。如果这些中间体(原料)中存在官能团，那么这些官能团可以任选为保护形式或者盐形式(如果有形成盐的基团存在)。根据例如与常用方法类似的方法，在适当阶段将任选存在的保护基团去除。因此，获得的式I化合物可以转化为其他式I化合物或者获得的游离形式的式I化合物可以转化为盐形式的式I化合物，反之亦然。

根据例如类似于常用方法或本文说明的方法，在例如适当溶剂和温度下进行上述反应。中间体(原料)是已知的或者可以根据常用方法或本文说明的方法在适当情况下获得。根据例如类似于常用方法或本文说明的方法，在适当情况下可以制备本文所述的化合物，如本发明化合物。

在特定组织中的类固醇激素与多种疾病有关，如乳腺癌、子宫内膜癌和前列腺癌以及毛囊皮脂腺紊乱(如痤疮、男性秃头症和多毛症)。产生这些局部类固醇激素重要前体为类固醇3-O-硫酸酯，由靶组织内的类固醇硫酸酯酶脱硫酸产生。抑制这种酶可使相关活性的类固醇激素局部水平下降，当然也具有治疗上的价值。而且，类固醇硫酸酯酶抑制剂也可用作免疫抑制剂，并且当被递送到脑内时具有增强记忆的功能。

痤疮是由多种因素(如遗传、皮脂、激素和细菌)相互作用的多病因疾病。在痤疮中，最重要的致病因素是皮脂的产生；与健康皮肤的人群相比，几乎所有痤疮患者的皮脂腺都更大且能产生更多的皮脂。雄激素控制皮脂腺的发育及皮脂产生的程度；因此，雄激素在痤疮的发病机理中具有重要作用。在男性中，目标组织中的雄激素有两个主要的来源：(i)分泌睾酮的性腺，(ii)产生脱氢表雄甾酮(DHEA)的肾上腺，脱氢表雄甾酮是以硫酸酯共轭物的形式分泌的。在目标组织(如皮肤)中，睾酮和DHEAS都可以转化为最具有活性的雄激素双氢睾酮(DHT)。证据表明，这种在皮肤内局部合成DHT的途径与血液循环直接提供活性雄激素相比更重要。因此，用特定抑制剂减少目标组织中内源性雄激素的水平在痤疮和脂溢性皮炎的治疗中有重要意义。而且，这开辟了局部治疗该种紊乱的前景，只需调节局部雄激素水平而不需通过系统治疗影响循环系统内的激素水平。

在白种人中，雄激素所致的男性秃头症非常普遍，约占各种类型的秃头症的95％。毛发生长终期的头皮毛囊数量增加以及毛发生长终期持续的时间长导致了男性秃头。雄激素影响的头发脱落是由遗传决定。在男性秃头和非秃头的对照中，血浆DHEA升高而睾酮水平正常，这意味着在雄激素所致的秃头中靶组织产生雄激素起重要作用。

多毛症是毛发病理性的增粗变硬，其特征为在儿童和妇女中毛发的生长类似男性。多毛症是由雄激素引起的，由于雄激素产生的增加或者毛囊对雄激素的敏感性增加。因此，在痤疮、男性秃头症和多毛症的治疗中降低靶组织(皮肤)中内源性雄激素和/或雌激素的水平是有效的。

如上所述，全身大量的前体DHEAS在皮肤内合成了最具活性的雄激素DHT，从DHEAS到DHT的代谢途径的第一步为经类固醇硫酸酯酶催化进行的脱硫酸反应，该反应产生DHEA。已知在角化细胞和源自皮肤的纤维原细胞中存在上述酶。采用已知的类固醇硫酸酯酶抑制剂(如雌酮3-O-氨基磺酸酯和4-甲基伞形基-7-O-氨基磺酸酯)能够证实类固醇硫酸酯酶抑制剂在降低皮肤中内源性类固醇激素水平的可能用途。申请人发现胎盘类固醇硫酸酯酶抑制剂还可抑制人角质细胞(HaCaT)和源自人皮肤的纤维原细胞系(1BR3GN)产生类固醇硫酸酯酶。这些抑制剂同样也抑制HaCaT角质细胞整个单细胞层中的类固醇硫酸酯酶。

因此，类固醇硫酸酯酶抑制剂可降低皮肤内雄激素和雌激素水平。可作为类固醇硫酸酯酶抑制剂用于雄激素依赖性的毛囊皮脂腺紊乱(如痤疮、脂溢性皮炎、男性秃头症、多毛症)和鳞状上皮细胞癌的局部治疗。

此外，非甾族的类固醇硫酸酯酶抑制剂被认为可用于治疗由类固醇激素介导的紊乱，其中起作用的是硫酸酯酶裂解类固醇产物。这些新型抑制剂的适应症包括雄激素依赖型毛囊皮脂腺紊乱(如痤疮、脂溢性皮炎、男性秃头症、多毛症)；雌激素或雄激素依赖型肿瘤如鳞状上皮细胞癌及瘤，如乳腺癌、子宫内膜癌和前列腺癌；感染和自身免疫性疾病如风湿性关节炎、I型和II型糖尿病、系统性红斑狼疮、多发性硬化、重症肌无力、甲状腺炎、脉管炎、溃疡性结肠炎及局限性回肠炎、牛皮癣、接触性皮炎、移植排斥反应、湿疹、哮喘和器官移植排斥。类固醇硫酸酯酶抑制剂也用于癌症的治疗，尤其用于雌激素/雄激素依赖型癌症的治疗，如乳腺癌和子宫内膜癌及鳞状上皮细胞癌和前列腺癌。通过增加中枢神经系统的DHEAS水平，类固醇硫酸酯酶抑制剂也用于增加认知功能，尤其用于治疗老年性痴呆(包括阿尔茨海默病)。

在如下的一系列试验中将证明化合物对类固醇硫酸酯酶的抑制作用：人类固醇硫酸酯酶的纯化

将分娩后得到的新鲜人胎盘剥去膜和结缔组织。冷冻保存在-70℃。融化后，在4℃下进行如下步骤，当20℃时调节pH值。在1.2升的缓冲液A(50mM Tris-HCl，pH 7.4，0.25M蔗糖)中将400g的组织均化。将所得到的组织均浆在10,000xg下离心45分钟。留出上清液并将所得到的沉淀物在500ml缓冲液A中再次均化。离心后，将两次得到的上清液混合并超速离心(100,000xg，1小时)。将得到的沉淀物再次悬浮于缓冲液A中并再次离心。所得的沉淀物悬浮于50ml的50mM Tris-HCl中，pH 7.4并贮存在-20℃直到进行下一步。

融化后，通过超速离心(如上所述)收集微粒体并悬浮于50ml缓冲液B(10mM Tris-HCl，pH 7.0，1mM EDTA，2mM 2-巯基乙醇，1％ TritonX-100，0.1％抑肽酶)中。放置于冰上并轻轻搅拌1小时后，离心混悬液(100,000xg，1小时)。收集含有酶活性的上清液并用1M Tris将pH值调节到8.0。将所得到的溶液经羟基磷灰石柱层析(2.6×20cm)并用缓冲液B(pH8.0)平衡。在流速2ml/min下用缓冲液B冲洗柱。回收含有活性组分的流分。将收集池的pH值调节到7.4，再经缓冲液C(20mM Tris-HCl，pH 7.4，0.1％ Triton X-100，0.5M NaCl)平衡的伴刀豆球蛋白A琼脂糖凝胶柱层析(1.6×10cm)。用缓冲液C冲洗柱，并用溶于缓冲液C的10％甲基甘露糖苷洗脱结合蛋白。时间活性部分并对缓冲液D(20mM Tris-HCl，pH 8.0，1mM EDTA，0.1％ Triton X-100，10％甘油(v/v))透析。

将得到的保留物经缓冲液D平衡的蓝色琼脂糖凝胶柱层析(0.8×10cm)；洗涤柱并采用线性梯度(缓冲液D至溶于缓冲液D的2M NaCl)洗脱。神经活性部分，需要时进行浓缩(Centricon 10)，对缓冲液D透析，分等分在-20℃贮存。

人类固醇硫酸酯酶试验

已知纯化的人类固醇硫酸酯酶不仅能够裂解类固醇硫酸酯，而且能够容易地裂解芳基硫酸酯(如在本试验系列中作为活性指示剂的4-甲基伞形基硫酸酯)。在白色微量滴定板的孔内连续加入下述溶液来制备试验混合物：

1)50μl酶作用物溶液(溶于0.1M Tris-HCl的1.5mM 4-甲基伞形基硫酸酯，pH 7.5)

2)50μl溶于0.1M Tris-HCl(pH 7.5，0.1％ Triton X-100)的试验化合物稀释液在DMSO中制备试验化合物的储液；试验混合物中溶剂的终浓度不超过1％)

3)50μl酶稀释液(约12单位酶/ml)

申请人将1单位酶定义为在37℃下溶于0.1M Tris-HCl，pH 7.5，0.1％Triton X-100中的酶作用物的初始浓度为500μM的条件下，每小时可水解1nmol 4-甲基伞形基硫酸酯的类固醇硫酸酯酶的量。

在37℃下孵育滴定板1个小时。然后加入100μl 0.2M NaOH停止反应。用λ_ex＝355nm和λ_em＝460nm的Titertek Fluoroskan II装置测定荧光强度。

相对IC₅₀值的计算

根据在上述人类固醇硫酸酯酶试验中获得的不同浓度试验化合物的荧光强度数据(I)，用如下方程式计算抑制酶活性50％(IC₅₀)的化合物的浓度：

I = \frac{I_{100}}{1 + {(c / {IC}_{50})}^{s}}

其中I₁₀₀为无抑制剂情况下所得的强度，s为斜率。氨基磺酸雌酮作为参照化合物，它的IC₅₀值测定类似于其他所有试验化合物。相对IC₅₀值的定义如下：

根据对上述试验结果的计算，氨基磺酸雌酮的IC₅₀值约为60nM。

在上述试验中，证明本发明化合物具有活性，相对IC₅₀的范围为0.0046-350。

CHO/STS试验

将用人类固醇硫酸酯酶稳定转染的CHO细胞(CHO/STS)接种在微量滴定板上。达到约90％汇合后，将它们与一系列浓度的试验物(如本发明化合物)一起培养过夜。然后在室温下用4％低聚甲醛固定10分钟并用PBS冲洗4次，之后与溶于0.1M Tris-HCl(pH 7.5)中的0.5mM 4-甲基伞形基硫酸酯(MUS)(100μl/孔)共同培养。在37℃下进行酶反应30分钟。然后加入50μl/孔的中止溶液(1M Tris-HCl，pH 10.4)。将酶反应溶液转入白色培养板(Microfluor，Dynex，Chantilly，VA)上并在Fluoroskan II荧光微量滴定板读板仪上进行读板。从所有值中扣除试剂空白值。在药物试验中，用sulforhodamine B(OD₅₅₀)将细胞蛋白染色后，为了校正细胞数量的偏差，荧光单位(FU)需除以光密度读数。通过两个点(two bracketing points)间的线性内插法测定IC₅₀值。在具有抑制剂的每个试验中，将雌酮3-O-氨基磺酸酯作为参照化合物，IC₅₀值以雌酮3-O-氨基磺酸酯为标准(相对IC₅₀＝化合物IC₅₀/雌酮3-O-氨基磺酸酯IC₅₀)。

在上述试验中，本发明化合物显示出活性(相对IC₅₀的范围为0.05-226)。

人皮肤组织均浆试验

将冷冻的人尸体皮肤样品(每份样品约100mg)用锋利剪刀剪成小片状(约1×1mm)。将所剪的碎片悬浮于10体积(w/w)的含有0.1％ TritonX-100的缓冲液(20mM Tris-HCl，pH 7.5)中。将取自溶于乙醇或DMSO中储液的试验化合物(如本发明化合物)按照一系列的浓度加入。第二步，将DHEAS作为酶作用物加入(1μC/ml[³H]DHEAS，比活性：约60Ci/mmol，和20μM未标记的DHEAS)。在37℃下将样品培养18个小时。培养结束后加入50μl的1M Tris(pH 10.4)和3ml的甲苯。每等份有机相取出1ml并进行液体闪烁计数。将测定的每等份中的dpm值转化为每小时裂解的每克皮肤中的DHEA的nmol值。

本发明化合物在上述试验中显示出活性(IC₅₀的范围为0.03-10μM)。

优选的本发明化合物包括实施例1的化合物。该化合物在人类固醇硫酸酯酶试验中相对IC₅₀的范围为0.0046-0.071，在CHO/STS试验中相对IC₅₀的范围为0.02-0.39，以及在人皮肤组织均浆试验中的IC₅₀的范围为0.03-0.27μM，因此该化合物为高活性的类固醇硫酸酯酶抑制剂。

在上述系列试验中证明了本发明化合物的活性。盐和/或溶剂化物形式的本发明化合物与游离和/或非溶剂化物形式的本发明化合物显示出相当的活性。

因此，本发明化合物可用作类固醇硫酸酯酶抑制剂，用于治疗类固醇硫酸酯酶介导的紊乱，例如包括雄激素依赖型的毛囊皮脂腺紊乱，如

-痤疮，

-脂溢性皮炎，

-男性秃头症，

-多毛症；

-癌症，如雌激素和雄激素依赖型的癌症；

-认知功能紊乱，如包括阿尔茨海默氏病的老年性痴呆。

本发明化合物优选用于痤疮、脂溢性皮炎、男性秃头症、多毛症的治疗；雌激素和雄激素依赖型癌症，更优选用于痤疮的治疗。治疗包括治疗学的治疗和预防。

另一方面，本发明也提供本发明化合物在药物(如药物组合物)制备中的用途，所说的药物用于治疗类固醇硫酸酯酶介导的紊乱，如对类固醇硫酸酯酶的抑制作用有响应的紊乱，更优选痤疮。

在上述用途中，本发明化合物可包括一种或多种本发明化合物，如两种或多种本发明化合物的联合，优选一种化合物。

另一方面，本发明提供用作药物的本发明化合物。

另一方面，本发明提供类固醇硫酸酯酶介导的紊乱的治疗方法，所述紊乱包括痤疮、脂溢性皮炎、男性秃头症、多毛症；癌症，如雌激素和雄激素依赖型的癌症；认知功能紊乱，如包括阿尔茨海默病的老年性痴呆，优选痤疮，所述治疗方法包括给予需要所述治疗的患者治疗有效量的本发明化合物(如以药物组合物的形式)。

所述治疗包括治疗和预防。

在上述治疗中，适当的剂量当然应根据例如所用本发明化合物的化学性质及药物动力学、个体、给药方式和所治疗的疾病的性质和严重程度的不同而不同。然而，在通常情况下，如果每天每公斤动物体重给药约0.1mg-约100mg就可以达到满意的疗效，如每天分两至四次给药。对于大多数哺乳动物来说，每天的总剂量为约5mg-约5000mg，每天给药最多可分为四次或者采用缓释形式。单位剂量形式包括本发明化合物(约1.25mg-约2000mg)与至少一种药学上可接受的赋形剂(如载体、稀释剂)。

本发明化合物的给药可通过任意常用途径进行，如肠内给药，包括鼻内、颊部、直肠、经口给药；肠胃外给药，例如包括静脉、肌肉、皮下给药；或者局部给药，包括表皮(epicutaneous)、鼻内、气管内给药；可以为有包衣或无包衣的片剂、胶囊、安瓿或小瓶形式的注射溶液或者混悬液，可以为膏剂、霜剂、凝胶剂、糊剂、吸入剂、粉剂、泡沫剂、酊剂、唇膏、滴剂、喷雾剂或者栓剂。本发明化合物可以以药学上可接受的盐形式或者游离形式给药；任选溶剂化物形式。盐形式的本发明化合物与游离和任选溶剂化物形式的本发明化合物显示出相同的活性。

根据本发明，本发明化合物可以单独用于治疗，或与一种或多种其他药物活性剂联合。这些其他的药物活性剂包括类视色素，如视磺酸，比如异维A酸、维A酸(Roche)、阿达帕林(6-[3-(1-金刚烷基)-4-甲氧基苯基]-2-萘甲酸)；口服避孕药，如19-降-17a-孕-1，3，5(10)-三烯-20-in-3，17-二醇、6-氯-17-羟基-1a，2a-亚甲基-4，6-孕二烯-3，20-二酮，如Diane(Schering)；包括红霉素类的抗生素，如红霉素A、阿奇霉素、克拉霉素、罗红霉素；包括四环素、lincosamid-抗生素，如氯洁霉素(甲基7-氯-6，7，8-三脱氧-6-(反式-1-甲基-4-丙基-L-2-吡咯烷基-甲酰氨基)-1-硫-L-苏型-a-D-半乳糖-八吡喃糖苷)、壬二酸(nonanedionic acid)，那氟沙星；包括氨苯砜、过氧化苯甲酰；包括角质分离剂，如水杨酸；包括抗炎药物，如皮质类固醇、吡美莫司；包括类固醇5α-还原酶抑制剂。

此外，治疗乳腺癌和子宫内膜癌时，所述药物活性剂还可包括芳香酶抑制剂，如阿那曲唑、来曲唑、依西美坦。

所述联合包括

-固定联合，其中在同一个药物组合物中存在两种或多种药物活性剂，

-药盒，其中两种或多种药物活性剂为单独的组合物，但是被放置于同一个包装内出售，例如还可以包括共同给药的说明；以及

-自由联合，其中药物活性剂各自独立包装，但是提供同时或先后给药的使用说明。

另一方面，本发明提供含有本发明化合物与至少一种药物赋形剂的药物组合物，适当的赋形剂为如载体和/或稀释剂，包括例如填充剂、粘合剂、崩解剂、流动调节剂、润滑剂、甜味剂、香味剂、防腐剂、稳定剂、湿润剂和/或乳化剂、增溶剂、调节渗透压的盐、缓冲剂。

另一方面，根据本发明还提供含有其他药物活性剂的药物组合物。

可根据例如类似于常用方法(如通过混合、制粒、包衣、溶解或冻干方法)的方法，制备这些药物组合物。

在如下实施例中，所涉及的温度为未校正的摄氏温度。如果没有其他说明，在CDCl₃中测定¹HNMR。采用如下缩写：

m.p.：熔点

EtAc：乙酸乙酯

BOC：叔丁氧基羰基

DMF：N，N-二甲基甲酰胺

RT：室温

DMSO：二甲亚砜

实施例1

N-[[4-[1-(2-氨基羰基-5-三氟甲基-苯基)[-哌啶基]-氨基]-磺酰基-3，5-二-三氟甲基-苯甲酰胺

A)4-[N-(氨基磺酰基)-苄基氨基]-哌啶-1-甲酸叔丁基酯

将溶于100ml 1，2-二甲氧基-乙烷中的2.05g 4-苄基氨基-哌啶-1-甲酸叔丁基酯和3.39g磺酰胺溶液回流大约10小时。将所获得的混合物的溶剂蒸发，用EtAc处理所得的蒸发残留物，滤除未溶解部分。滤液经硅胶柱层析。得到4-[N-(氨基磺酰基)-苄基氨基]-哌啶-1-甲酸叔丁基酯。mp140-142℃。¹H-NMR(DMSO)δ：7.30-7.41(s/m，9+2H)，1.64(m，2H)，2.53-2.72(宽峰，2H)，3.71(tt，1H)，8.83-8.96(宽峰，2H)，4.26(s，2H，CH2)，6.86(bs，2H，NH)，7.19(t，1H)，7.28(t，1H)，7.36(d，1H)。¹³C-NMR(DMSO)δ：28.51，30.13，43.35，47.11，56.52，79.12，127.06，127.48，128.49，140.59，154.156。

B)N-(1-BOC-4-哌啶基-苄基氨基)-磺酰基-3，5-二-三氟甲基-苯甲酰胺

将280mg二异丙基-乙胺和1.28ml正丙基膦酸酐(50％ DMF溶液)加入溶于15ml DMF中的400mg 4-[N-(氨基磺酰基)-苄基氨基]-哌啶-1-甲酸叔丁基酯和560mg 3，5-二-(三氟甲基)安息香酸的溶液内。在室温下搅拌所得的混合物大约4天，蒸发溶剂并将所得的蒸发残留物用EtAc处理，用1N HCl、饱和的NaHCO₃溶液和盐水冲洗，然后干燥。将干燥的残留物中的溶剂蒸发并将所得的蒸发残留物经硅胶柱层析。得到N-(1-BOC-4-哌啶基-苄基氨基)-磺酰基-3，5-二-三氟甲基-苯甲酰胺。

¹H-NMR(DMSO)δ：1.28-1.40(m，9+2H)，1.60(m，2H)，2.54-2.70(m，2H)，3.80-3.94(m，2+1H)，4.55(s，2H，CH2)，7.18(t，1H)，7.27(d，1H)，7.37(d，1H)，8.26(s，1H)，8.46(s，2H)，12.6(宽峰，1H，NH).

C)盐酸盐形式的N-(4-哌啶基-苄基氨基)-磺酰基-3，5-二-三氟甲基-苯甲酰胺

用溶于乙醚的60ml 3N HCl(气体)处理溶于5ml CH₂Cl₂中的650mgN-(1-BOC-4-哌啶基-苄基氨基)-磺酰基-3，5-二-三氟甲基-苯甲酰胺溶液。所得混合物搅拌大约12小时，溶剂被蒸发。得到盐酸盐形式的N-(4-哌啶基-苄基氨基)-磺酰基-3，5-二-三氟甲基-苯甲酰胺。¹H-NMR(DMSO)δ：1.72-1.86(m，4H)，2.90(m，2H)，3.20-3.3(m，2H)，4.15(m，1H)，4.60(s，2H，CH2)，7.31(t，1H)，7.40(t，1H)，7.48(d，1H)，8.38(s，1H)，8.48(s，2H)，8.48和8.75(宽峰，2H，NH).

D)N-[[4-[1-(2-氨基羰基-5-三氟甲基-苯基)]-哌啶基]-苄基氨基]-磺酰基-3，5-二-三氟甲基-苯甲酰胺

将430mg 2-氟-4-三氟甲基-苯甲酰胺和430mg K₂CO₃加入溶于15mlDMSO中的570mg N-(4-哌啶基-苄基氨基)-磺酰基-3，5-二-三氟甲基苯甲酰胺盐酸盐溶液内。在150℃下将所得的化合物搅拌大约4小时并且通过过滤去除K₂CO₃。将所得滤液的溶剂蒸发并且使蒸发残留物经硅胶柱层析。得到N-[[4-[1-(2-氨基羰基-5-三氟甲基-苯基)]-哌啶基]-苄基氨基]-磺酰基-3，5-二-三氟甲基-苯甲酰胺。¹H-NMR(DMSO)δ：1.60-1.76(m，4H)，2.72(m，2H)，3.13(m，2H)，3.78(m，1H)，4.55(s，2H，CH2)，7.14(t，1H)，7.23(t，1H)，7.26(d，1H)，7.32(d，1H)，7.41(d，1H)，7.59(宽峰，1H，NH)，7.68(d，1H)，8.08(宽峰，1H，NH)，8.12(s，1H)，8.45(s，2H).

E)N-[[4-[1-(2-氨基羰基-5-三氟甲基-苯基)]-哌啶基]-氨基]-磺酰基-3，5-二-三氟甲基-苯甲酰胺

将830mg N-[[4-[1-(2-氨基羰基-5-三氟甲基-苯基)]-哌啶基]-苄基氨基]-磺酰基-3，5-二-三氟甲基-苯甲酰胺溶解于20ml MeOH中并且在40℃下、在10％披钯炭存在的情况下将所得混合物氢化约12小时。滤除催化剂并将所得滤液经硅胶柱层析。得到N-[[4-[1-(2-氨基羰基-5-三氟甲基-苯基)]-哌啶基]-氨基]-磺酰基-3，5-二-三氟甲基-苯甲酰胺。mp 192-195℃。¹H-NMR(DMSO)δ：1.58(m，2H)，1.94(m，2H)，2.77(m，2H)，3.11-3.21(m，3H)，5.8(宽峰，1H，NH)，7.32(s，1H)，7.36(d，1H)，7.69(宽峰，1H)，7.74(d，1H)，8.16(s，1H)，8.22(宽峰，1H)，8.48(s，2H)。

根据类似于上述实施例1的方法，选用适当的原料得到式Iss化合物

其中R_3ss和R_4ss及其所构成化合物的熔点如表1所定义：

表1

实施例5

3，5-二(三氟甲基)苯甲酰基-氨基磺酸N-BOC-哌嗪酰胺

A)N-BOC-哌嗪-N′-氨基磺酸盐

将溶于20ml CH₂Cl₂中的612mg酰氨基磺酰氯加入1g BOC-哌嗪和1.085g三乙胺的溶液内。在0℃下所得混合物搅拌大约6小时并将温度温热至室温过夜。蒸发所得混合物的溶剂，将所得的蒸发残留物溶解于乙酸乙酯中，用水冲洗，干燥并浓缩。所得的浓缩残留物经硅胶柱层析。得到晶形的N-BOC-哌嗪-N′-氨基磺酸盐。m.p.：167-171℃。

B)3，5-二(三氟甲基)苯甲酰基-氨基磺酸N-BOC-哌嗪酰胺

将195mg N-BOC-哌嗪-N′-氨基磺酸盐和148mg三乙胺的溶液加入溶于50ml CH₂Cl₂的406mg 3，5-二(三氟甲基)苯甲酰氯内。在室温下将所得混合物搅拌大约20小时，去除溶剂，将所得的蒸发残留物溶解于EtAc中，用水冲洗，干燥并浓缩。所得浓缩残余物经硅胶柱层析。得到晶形的3，5-二(三氟甲基)苯甲酰基-氨基磺酸N-BOC-哌嗪酰胺。m.p.：185-190℃。

¹H-NMR δ：1.4(s，9H，BOC)，3.0-3.2(m，4H)，3.3-3.5(m，4H)，7.78(s，1H)，8.28(s，2H).

根据类似于上述实施例5的方法，选用适当的原料得到式Is化合物

其中R_3s和R_4s及其所构成化合物的熔点如表2所示：

TABLE 2

Claims

1.式I化合物：

其中

-R₁和R₂与它们相连的氮原子一起为哌嗪基，其中第二个氮原子由(C_1-6)烷氧羰基或由(C_6-18)芳基取代，其中(C_6-18)芳基由一个或多个卤素、(C_1-6)卤代烷基、氨基羰基取代；

或者

R₃为(C_6-18)芳基或(C_6-18)芳基(C_1-4)烷基，其中芳基由一个或多个卤素、氨基羰基或(C_1-6)卤代烷基取代。

2.权利要求1的式I化合物，其中所述(C_1-6)卤代烷基为CF₃。

3.选自式Iss化合物组的权利要求1的化合物：

其中

a.R_3ss为3，5-二(三氟甲基)苯基，R_4ss为2-氨基羰基-5-三氟甲基苯基，

b.R_3ss为2，3-二氯苯基，R_4ss为2-氨基羰基-5-三氟甲基苯基，

d.R_3ss为3，5-二(三氟甲基)苯基，R_4ss为叔丁氧基羰基。

4.权利要求1或3的化合物，其中化合物的结构式为

5.选自式Is化合物组的权利要求1化合物：

其中

a.R_3s为3，5-二(三氟甲基)苯基，R_4s为叔丁氧基羰基，

b.R_3s为2，3-二氯苯基，R_4s为叔丁氧基羰基，

c.R_3s为3，5-二氯苯基，R_4s为叔丁氧基羰基，

d.R_3s为3，5-二(三氟甲基)苯基，R_4s为苄氧基羰基，

e.R_3s为2，3-二氯苯基，R_4s为苄氧基羰基，

f.R_3s为3，5-二氯苯基，R_4s为苄氧基羰基，

g.R_3s为3，5-二(三氟甲基)苯基，R_4s为2-氨基羰基-5-三氟甲基苯基，

h.R_3s为3，5-二氯苯基，R_4s为2-氨基羰基-5-三氟甲基苯基，

i.R_3s为2，3-二氯苯基，R_4s为2-氨基羰基-5-三氟甲基苯基，以及

j.R_3s为2-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙基，R_4s为叔丁氧基羰基。

6.权利要求1、2、3和5中任一项的化合物，为盐形式。

7.权利要求1至6中任一项的化合物在制备用于治疗类固醇硫酸酯酶介导的紊乱的药物中的用途。

8.权利要求1至6中任一项的化合物在制备治疗类固醇硫酸酯酶介导的紊乱的药物中的用途。

9.药物组合物，该组合物包括权利要求1至6中任一项的化合物和至少一种药物赋形剂。