CN1126836A - 白细胞的分类方法 - Google Patents

白细胞的分类方法 Download PDF

Info

Publication number
CN1126836A
CN1126836A CN95115317A CN95115317A CN1126836A CN 1126836 A CN1126836 A CN 1126836A CN 95115317 A CN95115317 A CN 95115317A CN 95115317 A CN95115317 A CN 95115317A CN 1126836 A CN1126836 A CN 1126836A
Authority
CN
China
Prior art keywords
leucocyte
reagent
basophil
angle
differential count
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN95115317A
Other languages
English (en)
Other versions
CN1113241C (zh
Inventor
宝田馨
甲月千寻
兵佐义浩
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
EAST ASIAN MEDICAL ELECTRONIC Co Ltd
Sysmex Corp
Original Assignee
EAST ASIAN MEDICAL ELECTRONIC Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by EAST ASIAN MEDICAL ELECTRONIC Co Ltd filed Critical EAST ASIAN MEDICAL ELECTRONIC Co Ltd
Publication of CN1126836A publication Critical patent/CN1126836A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN1113241C publication Critical patent/CN1113241C/zh
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
    • G01N33/5094—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for blood cell populations
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume, or surface-area of porous materials
    • G01N15/10—Investigating individual particles
    • G01N15/14—Electro-optical investigation, e.g. flow cytometers
    • G01N15/1434—Electro-optical investigation, e.g. flow cytometers using an analyser being characterised by its optical arrangement
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume, or surface-area of porous materials
    • G01N15/10—Investigating individual particles
    • G01N15/14—Electro-optical investigation, e.g. flow cytometers
    • G01N15/1456—Electro-optical investigation, e.g. flow cytometers without spatial resolution of the texture or inner structure of the particle, e.g. processing of pulse signals
    • G01N15/1459—Electro-optical investigation, e.g. flow cytometers without spatial resolution of the texture or inner structure of the particle, e.g. processing of pulse signals the analysis being performed on a sample stream
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume, or surface-area of porous materials
    • G01N15/10—Investigating individual particles
    • G01N2015/1006—Investigating individual particles for cytology
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
    • Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10T436/10—Composition for standardization, calibration, simulation, stabilization, preparation or preservation; processes of use in preparation for chemical testing
    • Y10T436/101666—Particle count or volume standard or control [e.g., platelet count standards, etc.]
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
    • Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10T436/10—Composition for standardization, calibration, simulation, stabilization, preparation or preservation; processes of use in preparation for chemical testing
    • Y10T436/107497—Preparation composition [e.g., lysing or precipitation, etc.]
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
    • Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10T436/25—Chemistry: analytical and immunological testing including sample preparation
    • Y10T436/25125—Digestion or removing interfering materials

Abstract

提供使用白细胞4分类测定用试剂和嗜碱粒细胞测定用试剂，将白细胞进行至少5分类的方法。

Description

白细胞的分类方法
本发明涉及白细胞的分类方法，具体地说，是指通过对用不同试剂处理过的白细胞分别测定，将白细胞分成5类的分类方法。
迄今为止，有关将白细胞进行分类的装置及方法发表了许多。这些装置是将血液用溶血剂或染色剂适当处理，基于其物理学及/或电学的特性，或者光学的特性进行分类计数。另外，广泛使用的流体检查计，也可以用来进行白细胞的分类。
例如，有的分类方法是将红细胞溶解，将白细胞用荧光染料染色。通过对被染色的白细胞中荧光的检测，将白细胞进行分类。另一种已知的方法是检测出白细胞亚类中的嗜碱粒细胞，其它的白细胞的亚类用另外的检测系统测定，以各自的计数值为基础，将白细胞分为5类。
上述可将白细胞分为5类的在先装置，其价格很贵，且为大型装置。特别是，先前的流体检查计中的光源或光电倍增管(PMT)价格昂贵，另外，因为使用了氩激光器作为光源，日常需要保养的费用，同时，也需要经常调整光轴。再有，上述将白细胞5分类的方法中，需要2套检测系统，装置的构成变得很复杂。
例如在检测先前2种角度的前方散射光时使用的由分光镜和小孔组成的检测装置中，被检测的2个角度的限度，依赖于小孔的形状。
鉴于上述问题，本发明的目的在于使用廉价且构成简单的装置，提供将白细胞至少5分类的方法。
根据本发明的方法，将(1)(a)能够溶解红细胞，但造成白细胞的细胞膜部分损害的足量的至少一种离子表面活性剂及，
(b)与白细胞内的阳离子带电成分相结合，使白细胞间产生形态差异的足量的至少一种带阴离子基团的有机化合物及，
(c)非离子表面活性剂及，
(d)调节pH的缓冲剂组成的将白细胞分为4类的试剂加入到部分全血试样中，通过测定细胞的大小及形态的信息，将白细胞至少分类为与淋巴细胞、单核细胞及嗜酸粒细胞分别相对应的3个集团及，与中性粒细胞和嗜碱粒细胞相对应的1个集团共4个集团，进行分类计数；
(ii)将测定嗜碱粒细胞用的试剂加入全血试样的另一部分中，至少可以通过测定细胞大小的信息将嗜碱粒细胞分类计数；
(iii)根据分别得到的计数值，可以提供将白细胞至少5分类的白细胞分类方法。
在本发明白细胞分类方法的工序(i)中使用的白细胞4分类用的试剂中，(a)的离子表面活性剂，至少含有阳离子表面活性剂及两性表面活性剂中的一种。作为阳离子表面活性剂，优选季铵盐型表面活性剂及吡啶鎓型表面活性剂。季铵盐型及吡啶鎓盐型表面活性剂，如用下式〔化1〕或
Figure A9511531700062
[R1及R1’为C原子数6—18的烷基或链烯基；R2及R3为原子数1—4的烷基或链烯基；R4为C原子数1～4的烷基及链烯基或苄基；X为卤素原子]表示的C原子总数为9—30的表面活性剂。作为R1及R1’的原子数6—18的烷基或链烯基，可以是己基、辛基、癸基、月桂基、十四烷基、己烯基、庚烯基等，特别优选辛基、癸基、月桂基等的直链烷基。另外，作为R2及R3的碳原子数1～4的烷基、链烯基可以是甲基、乙基、丙基、丁基、丁烯基等，特别优选甲基、乙基、丙基等碳原子数1—3的烷基。另外，作为R4的碳原子数1—4的烷基及链烯基可以是甲基、乙基、丙基、丁基、丁烯基等，特别优选甲基、乙基、丙基等碳原子数1—3的烷基。
另外，作为两性表面活性剂，例如用下式〔化2〕(R1”、R2”及R3”的定义分别与上述R1、R2、R3相同)表示的碳原子数为9—30的两性表面活性剂。
上述的(a)的离子表面活性剂，其用量应足以溶解红细胞，并造成白细胞胞膜的部分损伤。具体为，大约30～5000mg/l，优选50～3000mg/l，最优选100～2000mg/l，也可以根据表面活性剂的种类作适当的调整。各表面活性剂的最佳使用量如表1所示。另外，这些表面活性剂可以只使用一种或一种以上组合使用。
                       表1
    表面活性剂名称   合适的便用浓度
辛基三甲基溴化铵(OTAB)癸基三甲基溴化铵(DTAB)十二烷基三甲基氯化铵(LTAC)十四烷基三甲基溴化铵(MTAB)十六烷基三甲基氯化铵(CTAB)十八烷基三甲基溴化铵十六烷基二甲基溴化铵十二烷基氯化吡啶十二烷基二甲基铵基乙酸内盐十八烷基二甲基铵基乙酸内盐   1000-5000mg/l200-3000mg/l150-2000mg/l100-1500mg/l50-1000mg/l50-500mg/l50-500mg/l50-500mg/l500-3000mg/l500-3000mg/l
即，离子表面活性剂，特别是对白细胞的溶血力，只要能使细孔张开到后述的有机化合物能够通过的程度即可，使细胞产生裸核作用的极强的溶血力是没有必要的。从而，可以使用通常常用的阳离子表面活性剂(如LTAC，MTAB，CTAC)，为了抑制溶血力，最好使用远远少于通常使细胞产生裸核化时使用的量。另外，由于仅破坏细胞膜的一部分即可，所以可以使用溶血力低的表面活性剂。表面活性剂的溶血作用，与疏水基团的C原子数呈比例关系，由于C原子数越多，溶血力越强，所以溶血力低的时候，最好使用如DTAB、OTAB等阳离子表面活性剂或两性表面活性剂。
上述将白细胞4分类的试剂中，除离子表面活性剂外，还有可以与白细胞内的阳离子带电成分相结合，使白细胞间产生形态差异的带阴离子基团(b)的有机化合物。即，带有疏水基团(如由芳香族组成的基团、由C原子数6以上的烃类形成的基团以及C原子数大于6的杂环等)及酸性官能团(阴离子基团：羧基、磺酸基等)，并且在水溶液中带负电荷，通过与白细胞结合可以使白细胞的形态发生变化的物质。关于它的种类，没有特别的限定，几乎所有的酸性色素都可以使用。另外，由于不必测定吸光度及萤光强度，因此色素以外的有机化合物也可以使用。作为酸性色素，可以从如下述各种酸性色素中选择至少一种：酰胺黑[Colour IndexNo.20470]、茜素蓝绿F[CI No.61570]、酸性绿27[CI No.61580]、酸性蓝62[CI No.62045]、直接红31[CI No.29100]、艳硫黄素[CI No.56205]、茜素黄R[CI No.14030]、酸性蓝129[CI No.62058]、酸性绿25[CI No.61570]、克罗姆特罗普2R [CI No.16570]、ュ—マシ—·艳蓝R250[CI No.42660]、胭脂红酸[CI No.75470]、ユ—マシ—·艳蓝G250[CI No.42655]、加モイシンB[CI No.14720]、直接蓝86[CI No.74180]、乙基红[2—4—(二乙基氨基苯偶氮基)苯甲酸]、副品红[CI No.42500]、紫胺R[CI No.54190]、酸性黄34[CINo.18890]、酸性橙51[CI No.26550]、艳番红花精MOD[CINo.27290]、グイネァグリ—ンB[CI No.42085]、酸性蓝29[CI No.20460]、若丹明B[CI No.45170]、磺基若丹明B[CINo.45100]、里沙明绿B[CI No.44090]、酸性蓝9[CI No.42090]坚牢绿FCF[CI No.42053]、偶氮胭脂红B[CI No.50090]、苯胺蓝[CI No.42780]、ァルファズリンA[CI No.42080]、茜素紫3R[CI No.61710]、酸性蓝41[CI No.62130]、バイブリツヒスカ—レツト[CI No.26905]、赤藓红钠盐B[CI No.45430]、甲基红[CI No.13020]、甲基橙[CI No.13025]、橙I[CI No.14600]等酸性色素中选出至少一种。另外，作为色素以外的有机化合物，可以使用如含有疏水性官能团和酸性官能团的芳香族有机酸、C原子数大于6的烃类及带有杂环的酸等。具体的例如8—苯胺基—1—萘磺酸及其盐类、6—(P—甲苯胺基)—2—萘磺酸及其盐类、铬变酸、苯二酸、萘磺酸等。这些有机化合物的使用量，可以根据使用的表面活性剂的种类不同作适当的选择，优选50—5000mg/l，最优选100—3000mg/l。
另外，上述的白细胞4分类用的试剂，还含有非离子表面活性剂(C)。作为非离子表面活性剂，没有特别的限定，一般作为可溶试剂使用，几乎所有的非离子表面活性剂都可以使用。具体优选带有亲水基如聚环氧乙烯二醇(POE)、聚丙撑二醇(POP)、聚环氧乙烷二醇—聚丙撑二醇(POE—POP)嵌段共聚合物的非离子表面活性剂。当使用一种非离子表面活性剂时，可以产生使离子表面活性剂与上述有机化合物结合形成的不溶物以及细胞的构成成分与离子表面活性剂结合形成的不溶物溶解的效果，有时候也产生使白细胞溶解的副作用。对于这种情况，最好将几种非离子表面活性剂，如亲水基团的加成聚合摩尔数不同的非离子表面活性剂配合使用。或者，将亲油基团构造不同的非离子表面活性剂配合起来使用，这样也可以抑制副作用的产生。将不溶物变成可溶物所必要的非离子表面活性剂的量，根据使用的离子表面活性剂的种类而不同，为0.5—10g/升，优选1—8g/升。
上述白细胞4分类用的试剂，还含有调整pH用的缓冲剂(d)。作为缓冲剂如通常是为了维持一定的pH值时使用，没有特别的限定，可以使用维持所定pH±2.0的具有PKa的缓冲剂。具体的为MES、TRIS、HEPES、琥珀酸、苯二酸、柠檬酸等。在本发明中，最好能调整pH在5—11范围内。这时的使用量为5—100mM左右。
另外，上述的白细胞4分类用试剂，最好含有醇类或金属盐类。作为醇类，没有特别的限定，最好使用工业用的廉价且易得的醇类。如甲醇，乙醇等烷醇类、苯乙醇、2—苯氧基乙醇等带有芳香环的醇类。此时的使用量对于甲醇优选为试剂组合物总量的5—20％左右，大致的标准为碳原子数每增加一个则优选使用大约一半的量。另外，对于2—苯氧基乙醇优选0.05～1％。对于金属盐类并没有特别的限定，如氯化钠、氯化钾、氯化锂等碱金属盐较合适。碱金属盐通常虽无必要，但是如果使用后述的利用电阻信号来进行测定的装置则为了进行测定，必须将试样的电导率调节至合适的数值。此时的使用量优选溶液的电导率在5—20ms/cm的范围内。
上述白细胞4分类用试剂在水或水性介质中，含有希望量的上述离子表面活性剂及、有机化合物及、非离子表面活性剂及缓冲剂，相对于血液试样1的容量，优选使用该白细胞分析用试剂2—100的容量。
作为在本发明的白细胞分类方法的工序(ii)中使用的嗜碱粒细胞测定试剂，没有特别限定，例如可以是由(1)聚环氧乙烷的加成聚合的摩尔数为3—10的至少一种非离子表面活性剂及(2)至少一种阳离子表面活性剂及(3)可调整pH为2.5—4.0的缓冲剂组成的白细胞分析用试剂。
作为上述嗜碱粒细胞测定试剂中含有的非离子表面活性剂(1)，可以是由下述结构式表示的化合物。[式中的R1a为碳原子数8—18的烷基或链烯基、R2a为—O—或(C6H4)—O—、n为聚环氧乙烷的平均加成聚合摩尔数是3—10的整数]。
在上述式中，作为碳原子8—18的烷基或链烯基，可以是辛基、壬基、癸其、十一烷基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十五烷基、十六烷基、十七烷基、十八烷基等。其中优选十二烷基。
作为非离子表面活性剂，具体例如聚环氧乙烷(4.2)十二烷基醚(BL4.2、日光ケミカルズ(株))、聚环氧乙烷(9)十二烷基醚(BL9、日光ケミカルズ(株))、聚环氧乙烷(5)十二烷基醚(日光ケミカルズ(株))、聚环氧乙烷(5.5)十六烷基醚(日光クミカルズ(株))、聚环氧乙烷(7)十六烷基醚(日光ケミカルズ(株))、聚环氧乙烷(7)油醚(日光ケミカルズ(株))等。
非离子表面活性剂可以使用的浓度范围是30—20000mg/l，优选500—10000mg/l。具体的如环氧乙烷(3—10)十二烷基醚的最佳使用浓度为500—8000mg/l。当浓度过低时，嗜碱粒细胞以外的粒细胞不能被完全裸核化，当浓度过高时，阳离子表面活性剂阻碍了嗜碱粒细胞以外的粒细胞的裸核化。上述之外的非离子表面活性剂例如在聚环氧乙烷的加成聚合摩尔数过大的情况下，不能将嗜碱粒细胞之外的粒细胞完全裸核化。另外，聚环氧乙烷的加成聚合摩尔数过小时，变得难溶于水，在使用上有困难。
另外，作为表面活性剂(2)，含有由具有下述构造的季铵盐型与吡啶鎓盐型表面活性剂形成的组中选择至少一种的阳离子表面活性剂。[化3]
Figure A9511531700131
[式中R1b为碳原子数10—18的烷基或链烯基、R2b、R3b及R4b为碳原子数1—3的烷基或链烯基，X为卤素]另外，[化4]
Figure A9511531700141
[式中R1c与上述R1b相同，X与上述相同]
在上述式中，作为碳原子数10—18的烷基或链烯基，例如是癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十五烷基、十六烷基、十七烷基、十八烷基等。其中优选癸基、十二烷基、十四烷基、十六烷基或十八烷基等。
另外，作为碳原子数1—3的烷基或链烯基可以是甲基、乙基、丙基、乙烯基、丙烯基等。作为阳离子具体例子如癸基三甲基铵、十二烷基三甲基铵、十四烷基三甲基铵、十六烷基三甲基铵、十六烷基二甲基乙基铵、十二烷基二甲基乙基铵、十四烷基二甲基铵、十二烷基吡啶鎓、十六烷基吡啶鎓等。
另外，作为卤素可以是氟、氯、溴、碘等。
上述的阳离子表面活性剂，其浓度应足以完全溶解红细胞、血小板，并至少使嗜碱粒细胞以外的粒细胞大致能裸核化。该浓度，例如可以通过用通常的光学显微镜观察裸核化的状态，来简单地决定适当的浓度。具体浓度大约为100mg/l～1000mg/l，优选300ml/1～5000mg/l，按阳离子表面活性剂的种类不同可适当地调配。如过低则不能完全溶解红细胞、血小板，另外，过剩量阳离子表面活性剂的存在，会促进单核细胞的裸核化，所以不理想。
表2表示各阳离子表面活性剂的种类及合适的用量。另外，这些表面活性剂也可以一种或一种以上配合使用。
                       表2
 表面活性剂名称      合适的便用浓度
(癸基三甲基溴化铵)十二烷基三甲基氯化铵)(十四烷基三甲基溴化铵)(十六烷基三甲基氯化铵)(十八烷基二甲基氯化铵)(十六烷基二甲基乙基溴化铵)(十六烷基氯化吡啶)      1000～10000mg/l500～5000mg/l400～4000mg/1300～3000mg/l300～3000mg/l300～3000mg/l-300～3000mg/l
阳离子表面活性剂的种类虽然并未特别限定，但上述结构式表示的阳离子表面活性剂较合适。阳离子表面活性剂的溶血能力依赖于其主链的长度。主链长的物质溶血力强，少量即有效果。
上这嗜碱粒细胞测定试剂的pH值通过缓冲剂(3)调整至2.5～4.0，优选在3.0～4.0范围内。pH值在2.5以下时，幼淋巴细胞、单核细胞容易裸核化，从而难于辨别各类白细胞。当pH超过4.0时，白细胞的收缩和裸核化变得困难，并且红细胞、血小板的收缩、溶解也变得困难。本试剂中使用的缓冲剂没有特别限定，可适当使用PKa在2.0—5.0范围内的缓冲剂。例如可使用柠檬酸、苹果酸、二甘醇酸、琥珀酸、蚁酸、酒石酸等。
缓冲剂的浓度没有特别的限定，可使用能将pH值调整至所定pH范围的浓度。通常适当使用5—50mM。
本发明中使用的嗜碱粒细胞测定用试剂中，可适当选择上述所示的非离子表面活性剂、阳离子表面活性剂及缓冲剂，可按希望的比例混合调配。其中优选由DTAB、BL4.2及柠檬酸组成的试剂、由LTAC、BL4.2及柠檬酸组成的试剂、由MTAB、BL4.2及柠檬酸组成的试剂、由CTAC、BL4.2及柠檬酸组成的试剂、由STAC、BL4.2及柠檬酸组成的试剂、由CDMEB、BL4.2及柠檬酸组成的试剂、由CPYC、BL4.2及柠檬酸组成的试剂、由DTAB、BL9及柠檬酸组成的试剂、由LTAC、BL9及柠檬酸组成的试剂、由MTAB、BL9及柠檬酸组成的试剂，由CTAC、BL9及柠檬酸组成的试剂、由STAC、BL9及柠檬酸组成的试剂、由CD-MEB、BL9及柠檬酸组成的试剂、由CPYC、BL9及柠檬酸组成的试剂、由DTAB、BL4.2及琥珀酸组成的试剂、由LTAC、BL4.2及琥珀酸组成的试剂、由MTAB、BL4.2及琥珀酸组成的试剂、由CTAC、BL4.2及琥珀酸组成的试剂、由STAC、BL4.2及琥珀酸组成的试剂、由CDMEB、BL4.2及琥珀酸组成的试剂、由CPYC、BL4.2及琥珀酸组成的试剂、由DTAB、BL9及琥珀酸组成的试剂、由LTAC、BL9及琥珀酸组成的试剂、由MTAB、BL9及琥珀酸组成的试剂、由CTAC、BL9及琥珀酸组成的试剂、由STAC、BL9及琥珀酸组成的试剂、由CDMEB、BL9及琥珀酸组成的试剂、由CPYC、BL9及琥珀酸组成的试剂。
另外，在上述测定嗜碱粒细胞用的试剂中，也可加入金属盐。通常情况下，金属盐是没有必要用的，但在使用通过检出电阻信号来进行测定的装置时，当试样的电导率比较低的情况下，为了进行测定，要将试样的电导率调整到适当值，此时使用金属盐是很必要的。作为可以使用的金属盐，没有特别的限定，最好使用如氯化钠、氯化钾、氯化锂等碱金属盐。这时的使用量，最好能使溶液的电导率在3—20ms/cm的范围内。
另外，在使用上述测定嗜碱粒细胞用的试剂进行白细胞分类时，仅通过将本发明的试剂与血液试样混合的简单操作，即可调制成测定用试样。在试剂与血液试样混合时，最好将试剂的各构成成分与血液试样几乎同时相接触，或根据试剂的构成成分的种类或浓度的不同，依次与血液试样相混合也可以。血液试样与本发明的试剂的混合比例没有特别限定，最好以1∶2～1∶100的比例混合。反应几乎在瞬时内进行，混合后从约10秒到至少120秒左右稳定后才可以测定。反应温度在10～40℃左右时尤其没有问题，可以进行测定。反应的进行在高温度时，需要较短的时间，在温度低时，需要稍长的时间进行反应。
另外，在本发明方法中使用的嗜碱粒细胞测定用试剂，除上述的试剂以外，还可以使用如由聚环氧乙烷加成聚合摩尔数12～30的非离子表面活性剂及阳离子表面活性剂形成的pH3.0～4.0的嗜碱粒细胞测定用试剂(特开平3—20667号公报)及由稀酸及水溶性表面活性剂形成的pH1.8～2.3的水溶液形成的嗜碱粒细胞测定用试剂等(特开昭61—88896号公报)。
本发明使用的白细胞四分类用的试剂以及嗜碱粒细胞测定用的试剂，不限于上述各自的组成。用各种试剂处理后的血液试样，最好用同样的测定参数进行测定。而且，为了提高计数的可信度，最好将白细胞数用至少两种试剂进行测定。
加入了上述白细胞4分类用试剂的一部分全血试样，通过测定其细胞的大小及形态的信息，可以将白细胞至少分类为与淋巴细胞、单核细胞及嗜酸粒细胞分别对应的3个集团、以及与中性粒细胞和嗜碱粒细胞相对应的一个集团共4个集团进行分类计数。另外，加入上述嗜碱粒细胞测定用试剂的另一部分全血试样，至少可以通过测定细胞的大小信息，将嗜碱粒细胞进行分类计数。细胞大小和细胞形态信息的测定方法，以及仅测定细胞大小信息的方法，没有特别的限定，例如测定狭角散射及广角散射两种散射光，或者至少测定狭角散射光的方法。狭角散射光，反映细胞大小的信息，广角散射光可反映细胞形态的信息。作为可反映细胞大小信息的其它测定参数还有电阻。另外，作为可反映细胞形态信息的其它测定参数还有侧向(90℃)散射光。如将狭角散射光与广角散射光组合起来作为测定参数，则因能使用图3所示的简单的装置，所以很理想。测定的顺序为先测定用白细胞4分类用试剂处理的血液试样，再测定用嗜碱粒细胞测定用试剂处理过的血液试样，也可以反过来进行。
通过将全血试样与白细胞4分类用试剂混合，使红细胞溶解，并使白细胞的各亚类之间产生形态的差异。其结果，可以通过测定两种散射光，至少将与白细胞中淋巴细胞，单核细胞、嗜酸粒细胞分别相对应的3个集团，以及与中性粒细胞和嗜碱粒细胞相对应的1个集团共4个集团进行分类计数。
一方面，通过将全血试样与嗜碱粒细胞测定用试剂混合，使红细胞溶解，嗜碱粒细胞几乎不发生变化而留下，其它的白细胞收缩。其结果，通过测定至少反映细胞大小信息的狭角散射光，将白细胞分类为嗜碱粒细胞和嗜碱粒细胞以外的白细胞2类。另外，当白细胞数目较多时，或检体中出现幼淋巴细胞时，嗜碱粒细胞与嗜碱粒细胞以外的白细胞的界限变得不明显，同时也得不到向左方移动的信息，这时候最好测定细胞的大小和形态两方面的信息。另外，在嗜碱粒细胞测定试剂中，当使用由(1)聚环氧乙烷的加成聚合摩尔数为3—10的至少一种非离子表面活性剂及、(2)至少一种阳离子表面活性剂及、(3)用来调节pH值为2.5—4.0的缓冲剂组成的白细胞分析用试剂时，至少可分成嗜碱粒细胞、单核细胞(淋巴细胞及单细胞)、嗜碱粒细胞以外的细胞3类，由于这样也可以将幼淋巴细胞进行分类计数，因此是最优选的。
所以，用白细胞4分类试剂处理得到的计数值和以嗜碱粒细胞测定用试剂处理得到的计数值为基础，可以将白细胞分为5类。例如，通过白细胞4分类试剂，可以求得淋巴细胞、单核细胞、嗜酸粒细胞的分类计数值。另外，通过嗜碱粒细胞测定用试剂，可求得嗜碱粒细胞的分类计数值。中性粒细胞的分类计数值，通过用白细胞分类试剂得到的中性粒细胞与嗜碱粒细胞的分类计数值减去嗜碱粒细胞的分类计数值，即可以求得。或者，在使用上述的嗜碱粒细胞测定用试剂时，通过将嗜碱粒细胞以外的粒细胞的分类计数值，减去用白细胞分类用试剂得到的嗜酸粒细胞的分类计数值，可以求得中性粒细胞的分类计数值。
在本发明的方法中，不要检测出各试剂处理的全血试样的荧光，另外，可以用共用的测定定参数测定，从而可以使用公知的白细胞测定装置，例如可以用廉价简单的装置，如带有半导体激光的小型的分析装置。利用这种采用半导体激光的小型的分析仪器，仅使狭角和广角前方散射光的2个参数受光，可将白细胞分类计数。例如图3所示的一例为使用半导体激光的装置。检出部在流动小室(cell)前方通过聚光镜(L2)和光轴仪(L1)，呈直线地配置有半导体激光仪(LD)。另外，在流动小室(cell)的后方，光束止动器(ビ—ムストツパ)(BS)通过并设的聚光镜(L3)，光电二极管与半导体激光器(LD)及流动小室(cell)被直线配置而构成。作为该检测部的特征在于通过使用半导体激光器及用一个光电二极管(PD)传感器本身即可以进行2个角度的散射光的辨别，使之成为直线的简单的光学构造。
另外，图3装置中使用的一个光电二极管(PD)如图4所示。图4是PD的外观，图5表示PD的感光传感器的配置。PD被装入与一般的PD相同的封闭容器中。中心部上的小圆形传感器的一部分C和上部的部分半圆形传感器A可以分别辨别检出前方狭角(1—5°)的散射光和前方广角(6—20°)的散射光。各自的传感器的灵敏度，和一般的PD的灵敏度相同。由于传感器的部分被分开，所以可以同时检测2个散射光的信号。
另外，除上述的装置及光电二极管以外，也可以使用公知的装置以及光电二极管。
再有，细胞的大小信息，可以不通过测定狭角散射光，而通过测定电阻来测定。
实施例]
本发明中白细胞分类方法的实施例如下所示：实施例1作为白细胞4分类用的试剂，使用下述成分
癸基三甲基溴化铵                         1.5g/l
8—苯胺基—1—萘磺酸镁盐                 2.0g/l
HCO—50(非离子表面活性剂，日光ケミカルス(株))
                                           4g/l
PEN4630(非离子表面活性剂，日光ケミカルス(株))
                                           1g/l
苯二酸                                     50mM
2—苯氧基乙醇                           2.5ml/l
氢氧化钠                         调节pH至5.5的量
氯化钠                                      30mM
调制成试剂。
另外：作为嗜碱粒细胞测定用试剂为使用下述成分
十四烷基三甲基溴化铵                        1g/l
BL9(非离子表面活性剂，日光ケミカルス(株)) 4g/l
柠檬酸                                    10mM
氢氧化钠                      调节pH值至3.3的量
调制成试剂。
在上述白细胞4分类用试剂1.0ml中加入正常人血30μl，10秒钟后用图3所示的流体检测计，测定前方的狭角散射光和广角散射光。其测定结果如图1及表3所示。另外，在嗜碱粒细胞测定用试剂1.0ml中加入健康正常人血30μl，30秒钟后用图3所示的流体检测计测定前方的狭角散射光和广角散射光，其结果如图2及表3所示。
                            表3
  白细胞4分类用试剂   嗜碱粒细胞测定用试剂
白细胞数      8014个     7917个
淋巴细胞      19.2％ 28.0％ 28.2％
单核细胞      8.8％
嗜碱粒细胞 68.8％  72.0％     0.7％     71.8％
中性粒细胞 71.1％
嗜酸粒细胞      3.2％
图1、图2及表3中清楚表明，白细胞数、使用白细胞4分类试剂时的淋巴细胞及单核细胞的比例同使用嗜碱粒细胞试剂时淋巴细胞和单核细胞的比例，以及在使用白细胞4分类用试剂时嗜碱粒细胞、中性粒细胞和嗜酸粒细胞的比例同使用嗜碱粒细胞测定试剂时的嗜碱粒细胞、中性粒细胞和嗜酸粒细胞的比例，都是非常一致的。
按照本发明的方法，通过使用白细胞4分类用试剂和嗜碱粒细胞测定用试剂，可以用廉价的系统，迅速地将白细胞进行5分类计数。
另外，因为白细胞4分类测定和嗜碱粒细胞测定是用同样的检测系统测定2次，所以，可以通过两次测定各细胞的比例、个数，来进行比较，可以提高计数的可信度。即，当发现两次测定的结果出现差异时，可发出某种警报，可以提高对异常细胞的检测能力。
[附图简单说明]图1、在发明的分类方法中，表示在使用白细胞4分类用试剂进行白细胞的分类计数时的狭角散射光及广角散射光的散射图。图2、在本发明的白细胞分类方法中，表示使用嗜碱粒细胞测定用试剂进行白细胞分类计数时的狭角散射光及广角散射光的散射图。图3、表示在本发明的白细胞分类方法中被适当使用的测定装置的概略图。图4、表示在图3的测定装置上使用的光电二极管的斜视图。图5、表示图4的光电二极管的感光传感器的配置概略图。[符号说明]
Lym淋巴细胞
Mono  单核细胞
GRAN  中性粒细胞＋嗜碱粒细胞
Ec  嗜酸粒细胞
LM  淋巴细胞＋单核细胞
Baso  嗜碱粒细胞
GRAN2  中性粒细胞＋嗜酸粒细胞
CELL  流动小室
L1  光轴仪透镜(ユリメ—タレンズ)
L2  聚光镜
L3  聚光镜
LD  半导体激光器
PD  光电二极管
BS  光束止动器(ビ—ムストツパ)

Claims (9)

1.白细胞的分类方法，其特征在于，(i)(a)可以溶解红细胞，且使白细胞的细胞膜部分损伤的足量的至少一种离子表面活性剂同，
(b)与白细胞内阳离子荷电成分相结合，使白细胞间产生形态差异的足量的至少一种带阴离子基团的有机化合物同，
(c)非离子表面活性剂同，
(d)调节pH的缓冲剂组成的白细胞4分类用试剂，加入全血试样的一部分中，测定细胞大小及形态的信息，将白细胞中分别与淋巴细胞、单核细胞及嗜酸粒细胞相对应的3个集团以及与中性粒细胞和嗜碱粒细胞相对应的1个集团共4个集团分类计数。
(ii)将嗜碱粒细胞测定用试剂加入全血试料的另一部分中，通过至少测定细胞大小的信息，将嗜碱性粒细胞分类计数。
(iii)根据分别得到的计数值，将白细胞至少分为5类。
2.根据权利要求1中记载的白细胞分类方法，其中所述测定细胞大小信息的工序为由测定狭角散射光构成。
3.根据权利要求2中记载的白细胞分类方法，其中所述狭角散射光的测定角度为1—5°。
4.根据权利要求1中记载的白细胞分类方法，其中所述形态信息的测定工序，由测定广角散射光构成。
5.根据权利要求4中记载的白细胞分类方法，其中所述广角散射光的测定角度为6—20°。
6.根据权利要求1中记载的白细胞分类方法，其中所述细胞大小的信息和形态的信息的测定工序，是由测定狭角和广角2个散射光构成。
7.根据权利要求6中记载的白细胞分类方法，其中所述测定狭角和广角2个散射光的角度为1—5°及6—20°。
8.根据权利要求6或7二者的任一项中记载的白血球分类方法，用一个光电二极管(PD)传感器进行二个角度散射光的检测。
9.根据权利要求1中记载的白血球分类方法，用同一检测器进行工序(i)的至少4个集团的分类计数及工序(ii)的嗜碱粒细胞的分类计数。
CN95115317A 1994-08-03 1995-08-02 白细胞的分类方法 Expired - Lifetime CN1113241C (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP182633/1994 1994-08-03
JP182633/94 1994-08-03
JP18263394A JP3355038B2 (ja) 1994-08-03 1994-08-03 白血球分類方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1126836A true CN1126836A (zh) 1996-07-17
CN1113241C CN1113241C (zh) 2003-07-02

Family

ID=16121708

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN95115317A Expired - Lifetime CN1113241C (zh) 1994-08-03 1995-08-02 白细胞的分类方法

Country Status (9)

Country Link
US (1) US5677183A (zh)
EP (1) EP0695936B1 (zh)
JP (1) JP3355038B2 (zh)
KR (1) KR100354048B1 (zh)
CN (1) CN1113241C (zh)
AU (1) AU695767B2 (zh)
CA (1) CA2151667A1 (zh)
DE (1) DE69528022T2 (zh)
TW (1) TW325521B (zh)

Cited By (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100335901C (zh) * 2003-09-30 2007-09-05 森永制果株式会社 免疫测定
CN101236192A (zh) * 2007-01-29 2008-08-06 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 溶血剂、白细胞分类试剂体系及分类方法
US7413905B2 (en) 2006-05-23 2008-08-19 Shenzhen Mindray Biomedical Electronics Co., Ltd. Reagents and methods for classifying leukocytes
US7416891B2 (en) 2006-05-22 2008-08-26 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd Reagent and method for classifying leucocytes
CN101424614B (zh) * 2007-10-29 2011-04-13 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 嗜碱性粒细胞分析试剂及测定方法
US8143064B2 (en) 2007-12-24 2012-03-27 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd. Reagents and methods for classifying leukocytes
US8163559B2 (en) 2007-12-18 2012-04-24 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd. White blood cell differentiation reagent and method
CN101097181B (zh) * 2006-06-26 2012-05-09 希森美康株式会社 试样分析用试剂、试样分析用试剂盒及试样分析方法
CN109991052A (zh) * 2019-03-12 2019-07-09 迪瑞医疗科技股份有限公司 一种用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂
CN110031383A (zh) * 2019-04-22 2019-07-19 深圳开立生物医疗科技股份有限公司 一种白细胞分类试剂及方法
CN111006990A (zh) * 2019-12-31 2020-04-14 山东博科生物产业有限公司 血细胞分析用试剂及其应用
CN114047109A (zh) * 2022-01-11 2022-02-15 深圳市帝迈生物技术有限公司 一种样本分析仪及其计数方法

Families Citing this family (34)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5843608A (en) * 1995-06-08 1998-12-01 Coulter International Corp. Reagent and method for differential determination of leukocytes in blood
US5786224A (en) * 1995-06-29 1998-07-28 Coulter Corporation Reagent and method for differential determination of leukocytes in blood
JP4042925B2 (ja) * 1996-11-20 2008-02-06 シスメックス株式会社 幼若白血球の分類計数法
US5830701A (en) * 1997-03-28 1998-11-03 Tao Medical Electronics Co., Ltd. Method of detecting hematopoietic progenitor cells
AU9763198A (en) * 1997-11-11 1999-05-31 Kowa Company Ltd. Method of counting leukocytes and leukocyte counter
US5952192A (en) * 1998-01-07 1999-09-14 Western Michigan University Method of fluorescent analysis of biological sample utilizing biebrich scarlet
FR2791138B1 (fr) * 1999-03-19 2001-04-27 Abx Sa Reactif pour la determination des leucocytes et la mesure de l'hemoglobine dans un echantillon de sang
US6210969B1 (en) 1999-04-28 2001-04-03 Coulter International Corp. Composition and method for differentiation of basophil and eosinophil subpopulations of leukocytes in blood
US6214625B1 (en) 1999-04-28 2001-04-10 Coulter International Corp. Composition and method for differentiation of basophils and eosinophils in blood
US6485923B1 (en) 2000-02-02 2002-11-26 Lifescan, Inc. Reagent test strip for analyte determination having hemolyzing agent
DE60218074T2 (de) * 2001-03-29 2008-02-07 Sysmex Corp. Durchflusszytometer
US6979570B2 (en) * 2001-07-26 2005-12-27 Sysmex Corporation Particle analyzer and particle analyzing method
JP2006313151A (ja) * 2005-04-07 2006-11-16 Sysmex Corp 血液分析装置、試料分析装置及びフローサイトメータ
JP4964446B2 (ja) * 2005-09-14 2012-06-27 シスメックス株式会社 分析装置及び検体情報処理プログラム
JP4796443B2 (ja) * 2006-06-08 2011-10-19 シスメックス株式会社 試料分析用試薬、試料分析用試薬キット及び試料分析方法
CN101349644B (zh) 2007-07-20 2012-06-27 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 一种白细胞分类试剂和其使用方法
MX2010003125A (es) * 2007-09-27 2010-07-05 Sysmex Corp Equipo de reactivos para analisis de muestra y metodo de analisis de muestra.
CN101475754A (zh) 2008-01-04 2009-07-08 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 不对称菁类荧光染料,组合物及在生物样品染色中的用途
EP2280278A4 (en) * 2008-05-09 2015-04-08 Sysmex Corp BLOOD ANALYSIS DEVICE, BLOOD ANALYSIS METHOD, AND HEMOLYTIC AGENT
CN101602762B (zh) 2008-06-10 2013-10-16 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 不对称菁类化合物、其制备方法及应用
CN101726579B (zh) 2008-10-17 2014-06-18 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 血液检测试剂和方法
US8842900B2 (en) * 2008-10-28 2014-09-23 Sysmex Corporation Specimen processing system and blood cell image classifying apparatus
JP5557994B2 (ja) * 2008-10-28 2014-07-23 シスメックス株式会社 検体処理システムおよび血球画像分類装置
CN101723874B (zh) * 2008-10-31 2013-09-11 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 花菁类化合物及其在生物样品染色中的用途
CN101750476B (zh) * 2008-12-08 2015-06-03 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 血液分析试剂及其使用方法
US8367358B2 (en) 2008-12-17 2013-02-05 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd. Reagent, kit and method for differentiating and counting leukocytes
JP5452058B2 (ja) * 2009-03-31 2014-03-26 シスメックス株式会社 血液分析装置
CN101988082B (zh) 2009-07-31 2015-04-08 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 白细胞分类计数试剂、试剂盒及其制备方法和白细胞分类计数的方法
CN102115456B (zh) * 2009-12-30 2014-08-20 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 花菁类化合物，包含所述化合物的组合物及其在细胞检测中的用途
TR201905062T4 (tr) * 2011-04-07 2019-05-21 Beckman Coulter Inc Erken granüle hücrelerin (EGC'ler) tanımlanması ve sayılması.
EP2520926B1 (en) * 2011-05-05 2022-06-15 Sysmex Corporation Blood analyzer, blood analysis method, and computer program product
CA2839542A1 (en) 2011-06-17 2012-12-20 Constitution Medical, Inc. Fixative and staining solutions
CN106104270B (zh) * 2014-02-28 2019-08-02 希森美康株式会社 尿样品分析方法、尿样品分析用试剂及尿样品分析用试剂盒
KR102264612B1 (ko) 2019-06-24 2021-06-14 국민대학교산학협력단 혈액영상을 이용한 백혈구 감별방법

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA1255197A (en) 1984-09-24 1989-06-06 Joseph L. Orlik Leukocyte differentiation composition and method
JPH06100596B2 (ja) * 1986-09-10 1994-12-12 東亜医用電子株式会社 フロ−サイトメトリ−による白血球の分類方法
KR970007077B1 (ko) * 1987-03-13 1997-05-02 코울터 일렉트로닉스 인커퍼레이티드 광산란 기술을 이용한 다중-부분식별 분석 방법
US5155044A (en) * 1987-03-13 1992-10-13 Coulter Electronics, Inc. Lysing reagent system for isolation, identification and/or analysis of leukocytes from whole blood samples
US5389549A (en) * 1987-05-29 1995-02-14 Toa Medical Electronics Co., Ltd. Method for classifying leukocytes and a reagent used therefor
JP2619900B2 (ja) * 1988-01-27 1997-06-11 東亜医用電子株式会社 血液中の白血球およびヘモグロビンの測定用試薬および方法
CA2016699C (en) * 1989-05-15 2003-11-18 Paul N. Marshall Lytic agents and uses thereof
JP2778745B2 (ja) * 1989-06-19 1998-07-23 東亜医用電子株式会社 血液中の白血球弁別測定用試薬
JP2836865B2 (ja) * 1989-10-23 1998-12-14 東亜医用電子株式会社 血液中の白血球およびヘモグロビンの測定用試薬
FR2654744B1 (fr) * 1989-11-20 1992-03-13 Abx Sa Reactif et methode d'utilisation de celui-ci pour la determination automatique en cytometrie de flux d'au moins une sous-population leucocytaire a partir du sang total.
US5242832A (en) * 1990-03-01 1993-09-07 Toa Medical Electronics Co., Ltd. Reagent for measurement of leukocytes and hemoglobin in blood
US5316725A (en) * 1991-06-07 1994-05-31 Edward Lawrence Carver, Jr. Reagent system for the improved determination of white blood cell subpopulations
DE69327775T2 (de) * 1992-11-19 2000-06-21 Sysmex Corp Verfahren zur Vorbehandlung für Blutanalyse

Cited By (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100335901C (zh) * 2003-09-30 2007-09-05 森永制果株式会社 免疫测定
US7416891B2 (en) 2006-05-22 2008-08-26 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd Reagent and method for classifying leucocytes
CN101078720B (zh) * 2006-05-22 2010-12-01 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 一种改进的用于对白细胞进行分类的试剂及方法
US7413905B2 (en) 2006-05-23 2008-08-19 Shenzhen Mindray Biomedical Electronics Co., Ltd. Reagents and methods for classifying leukocytes
CN101078721B (zh) * 2006-05-23 2010-12-22 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 对白细胞进行分类的试剂及方法
CN101097181B (zh) * 2006-06-26 2012-05-09 希森美康株式会社 试样分析用试剂、试样分析用试剂盒及试样分析方法
CN101236192B (zh) * 2007-01-29 2015-05-13 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 溶血剂、白细胞分类试剂体系及分类方法
CN101236192A (zh) * 2007-01-29 2008-08-06 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 溶血剂、白细胞分类试剂体系及分类方法
CN101424614B (zh) * 2007-10-29 2011-04-13 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 嗜碱性粒细胞分析试剂及测定方法
US8163559B2 (en) 2007-12-18 2012-04-24 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd. White blood cell differentiation reagent and method
CN101464454B (zh) * 2007-12-18 2016-08-03 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 白细胞分类试剂及方法
US8143064B2 (en) 2007-12-24 2012-03-27 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd. Reagents and methods for classifying leukocytes
US8304243B2 (en) 2007-12-24 2012-11-06 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd. Reagents and methods for classifying leukocytes
CN101470108B (zh) * 2007-12-24 2013-11-27 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 一种对白细胞进行分类的试剂和方法
CN109991052A (zh) * 2019-03-12 2019-07-09 迪瑞医疗科技股份有限公司 一种用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂
CN110031383A (zh) * 2019-04-22 2019-07-19 深圳开立生物医疗科技股份有限公司 一种白细胞分类试剂及方法
CN111006990A (zh) * 2019-12-31 2020-04-14 山东博科生物产业有限公司 血细胞分析用试剂及其应用
CN114047109A (zh) * 2022-01-11 2022-02-15 深圳市帝迈生物技术有限公司 一种样本分析仪及其计数方法
CN114047109B (zh) * 2022-01-11 2022-06-21 深圳市帝迈生物技术有限公司 一种样本分析仪及其计数方法

Also Published As

Publication number Publication date
CA2151667A1 (en) 1996-02-04
CN1113241C (zh) 2003-07-02
KR960008309A (ko) 1996-03-22
EP0695936B1 (en) 2002-09-04
JP3355038B2 (ja) 2002-12-09
DE69528022D1 (de) 2002-10-10
US5677183A (en) 1997-10-14
AU2053395A (en) 1996-02-15
JPH0843381A (ja) 1996-02-16
KR100354048B1 (ko) 2003-01-29
EP0695936A2 (en) 1996-02-07
DE69528022T2 (de) 2003-06-05
TW325521B (en) 1998-01-21
AU695767B2 (en) 1998-08-20
EP0695936A3 (en) 1997-08-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN1113241C (zh) 白细胞的分类方法
TW316948B (zh)
JP2802710B2 (ja) 全血中の網状赤血球を識別する方法及びそのための試薬組成物
AU685232B2 (en) Reagent for analyzing leukocytes and a method for classifying leukocytes
KR100276145B1 (ko) 세포 구형화시약 조성물 및 이를 사용한 세포분석방법
AU784651B2 (en) Reagent and process for the identification and counting of biological cells
CA2842681C (en) Instrument and method for optical particle sensing
JP4324552B2 (ja) 白血球の分類計数方法
CN101097181B (zh) 试样分析用试剂、试样分析用试剂盒及试样分析方法
CN101078721B (zh) 对白细胞进行分类的试剂及方法
JPH01199161A (ja) 白血球を定量且つ識別する方法
CN101680879B (zh) 幼稚白细胞的分析用试剂及分析用试剂盒
CN101231243B (zh) 网织红细胞检测试剂及检测方法
ES2490865T3 (es) Kit de reactivos para análisis de muestras y método de análisis de muestras
US9404933B2 (en) Methods for determining patient response to anti-platelet aggregation therapy
CN104749144A (zh) 血细胞检测试剂及血细胞处理方法和识别方法
CN101086473A (zh) 试样分析用试剂、试样分析用试剂盒及试样分析方法
CN103424540A (zh) 一种白细胞分类试剂盒及其分类方法
CN101042397B (zh) 尿液分析用试剂及尿液分析方法
CN110132908B (zh) 一种细胞检测试剂盒及其应用
BR112013027349B1 (pt) método para classificação/contagem de leucócitos, kit de reagentes para classificação de leucócitos, e reagentes para classificação de leucócitos
CN101680878A (zh) 幼稚白细胞分析用试剂及分析用试剂盒
CN103398935B (zh) 一种用于白细胞分类计数的方法以及试剂盒
CN106062556B (zh) 尿样品分析方法、尿样品分析用试剂及尿样品分析用试剂盒
KR20180023061A (ko) 소변 시료 분석 방법, 소변 시료 분석용 시약 및 소변 시료 분석용 시약 키트

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CX01 Expiry of patent term

Expiration termination date: 20150802

Granted publication date: 20030702

EXPY Termination of patent right or utility model