KR970007077B1 - 광산란 기술을 이용한 다중-부분식별 분석 방법 - Google Patents

광산란 기술을 이용한 다중-부분식별 분석 방법 Download PDF

Info

Publication number
KR970007077B1
KR970007077B1 KR1019880701385A KR880701385A KR970007077B1 KR 970007077 B1 KR970007077 B1 KR 970007077B1 KR 1019880701385 A KR1019880701385 A KR 1019880701385A KR 880701385 A KR880701385 A KR 880701385A KR 970007077 B1 KR970007077 B1 KR 970007077B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
signal
information
identification
mals
light scattering
Prior art date
Application number
KR1019880701385A
Other languages
English (en)
Other versions
KR890700829A (ko
Inventor
카를로스 엠 로드리게즈
월레이스 엣취 코울터
Original Assignee
코울터 일렉트로닉스 인커퍼레이티드
월레이스 엣취 코울터
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority to US2544287A priority Critical
Priority to US129,954 priority
Priority to US12995487A priority
Priority to US129954 priority
Priority to US025,442 priority
Application filed by 코울터 일렉트로닉스 인커퍼레이티드, 월레이스 엣취 코울터 filed Critical 코울터 일렉트로닉스 인커퍼레이티드
Priority to PCT/US1988/000753 priority patent/WO1988007198A1/en
Publication of KR890700829A publication Critical patent/KR890700829A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR970007077B1 publication Critical patent/KR970007077B1/ko

Links

Images

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume, or surface-area of porous materials
    • G01N15/10Investigating individual particles
    • G01N15/14Electro-optical investigation, e.g. flow cytometers
    • G01N15/1456Electro-optical investigation, e.g. flow cytometers without spatial resolution of the texture or inner structure of the particle, e.g. processing of pulse signals
    • G01N15/1459Electro-optical investigation, e.g. flow cytometers without spatial resolution of the texture or inner structure of the particle, e.g. processing of pulse signals the analysis being performed on a sample stream
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using infra-red, visible or ultra-violet light
    • G01N21/17Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
    • G01N21/47Scattering, i.e. diffuse reflection
    • G01N21/49Scattering, i.e. diffuse reflection within a body or fluid
    • G01N21/53Scattering, i.e. diffuse reflection within a body or fluid within a flowing fluid, e.g. smoke
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/28Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
    • G01N1/38Diluting, dispersing or mixing samples
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume, or surface-area of porous materials
    • G01N2015/0065Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume, or surface-area of porous materials biological, e.g. blood
    • G01N2015/008White cells
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume, or surface-area of porous materials
    • G01N15/10Investigating individual particles
    • G01N2015/1037Associating coulter-counter and optical flow cytometer [OFC]
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume, or surface-area of porous materials
    • G01N15/10Investigating individual particles
    • G01N2015/1062Investigating individual particles counting the particles by other than electro-optical means
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume, or surface-area of porous materials
    • G01N15/10Investigating individual particles
    • G01N15/12Coulter-counters
    • G01N2015/129Coulter-counters measuring the ratio of AC/DC impedances
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume, or surface-area of porous materials
    • G01N15/10Investigating individual particles
    • G01N15/14Electro-optical investigation, e.g. flow cytometers
    • G01N15/1404Fluid conditioning in flow cytometers, e.g. flow cells; Supply; Control of flow
    • G01N2015/1413Hydrodynamic focussing
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume, or surface-area of porous materials
    • G01N15/10Investigating individual particles
    • G01N15/14Electro-optical investigation, e.g. flow cytometers
    • G01N2015/1477Multiparameters
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using infra-red, visible or ultra-violet light
    • G01N21/17Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
    • G01N21/47Scattering, i.e. diffuse reflection
    • G01N2021/4704Angular selective
    • G01N2021/4711Multiangle measurement

Abstract

내용없음

Description

광산란 기술을 이용한 다중-부분식별 분석 방법

제1도는 본 발명을 구체화한 플로우셀(Flow cell) 및 광검출기를 포함하여 실시가능하게 연결된 하드웨어의 원리적 도면.

제1도의 A는 구멍면을 따라 수평으로 절단한 제 1 도의 플로우셀의 평면도.

제1도의 B는 평탄한 내부면 및 외부면을 가진 사각형 수정(Quartz) 구멍을 구체화한 플로우셀의 평면도.

제1도의 C는 신호 수신영역을 도시하는, 광검출기 조립체의 정면도.

제2도는 2개의 45도 각도를 가진 광검출기 조립체가 있는, 구멍을 수평으로 절단한 제1도의 플로우셀의 평면도.

제2도의 A는 제2도의 장치의 구멍부의 확대 평면도(축척화 하지 않음).

제3도는 제1도의 B의 장치의 변형예의 평면도(축척화하지 않음).

제4도는 제1도의 B의 장치의 다른 변형예의 평면도.

제5도, 제5도의 A 및 B는 코울터형 볼륨 구멍을 이용하는 본 발명을 이용하기 위한 장치 및 기증적 전자회로의 블록 다이어그램을 구성하도록 함께 채택된 도면.

제6도, 제6도의 A 및 B는 광학 플로우실을 이용한 제5도, 제5도의 A 및 B의 회로의 변형예의 블록다이어그램을 구성하도록 함께 채택된 도면.

제6도의 C는 코울터형 감지구멍이 없는 변형된 플로우셀의 확대 측면도(축척화하지 않음).

제7도 내지 제27도는 본 발명의 방법론 및 장치의 결과를 설명하고 도시하는 히스토그램 및 산포도이다.

본 발명은 일반적으로 입자분석방법, 보다 상세하게는 세포화학적 염색기술, 또는 물질을 이용하지 않고서, 코울터형(Coulter形)의 기술을 이용하여, 예를들면 5가지형 백혈구와 같은 개별적 혈액세포의 선택적이며, 식별적이고, 차분적인 분류를 달성하기 위한 방법에 관한 것이다.

세포화학적 염색법을 이용하지 않고서, 세포화학류 장치에 의하여, 백혈구가 임파구, 단구, 과립부의 3가지 주된 형식으로 식별되고, 분류될 수 있음은 잘 알려져 있다.

그러한 방법중의 하나는, 90도, 즉, 고각도 광산란과 결합된 저각 광산란의 이용을 포함한다.

어떠한 방법론은, 전체 혈액 희석액으로부터 원하지 않는 적혈구를 제거하기 위하여 용해제를 사용한다.

다른 방법론들은 피콜(Ficol), 덱스트란(Dextran), "버피코우트(Buffy coat)" 등과 같은 밀도 또는 원심분리 기술에 의존한다.

부가적으로, 어떤 방법론들은 면역학적인 기능에 의하여 임파구 부분집합을 더욱 세분하기 위하여 세포화학적 염색을 이용한다.

미합중국, 히알리이 플로리다에 소재하는 코울터 일렉트로닉스 인코포레이티둬에 양도된 에스. 엘. 레디스(S.L. Ledis) 및 에이치. 알. 크류스(H.R. Crews)에 대한 PCT./US85/00868호는, 다음과 같은 방식으로 시약 시스템을 이용함으로써 4개의 구분적인 모집단으로 차분되는 것을 보여주는 시스템 및 기술을 개시한다.

즉, 적혈구가 표본으로부터 효과적으로 제거되고, 과립구 부집단(副集團), 즉 호산구가 분리되는데, 상술한 기술들에 있어서는, 단지 3개의 구별적인 모집단이 보여지고 명시되며, 호산구는 다른 하위 모집단들과 구별되지 않게 된다.

상기 기술은, 저각 광산란 및 흡수의 조합에 의하여 4개의 구분적인 군을 만들어 내기 위하여, 세포 화학적으로 세포를 염색함으로써 4부분 백혈구 차분-임파구, 단구, 호중구, 및 호산구-를 얻기 위한 방법 및 수단을 기술한다. 이 흡수는, 축방향 광손실의 성분이다.

또한, 미합중국 특허 제3,502,974호에 개시되어 있는 바와 같은 전기적 "불투명도"가 특정세포 또는 클러스터를 검출하기 위한 개별적인 파라미터로서 플롯하는 기술에 있어서는, 34개의 집단이 다시 한번 차분되고, 확실하게 정의되고 있다.

그러나, 이 경우에는 호중구, 호산구 및 호염기구의 과립구 부집단들이 과립구클러스터 데이타 내에 있게 되어, 이들 3하위 모집단의 구별을 못하게 된다.

선행기술문헌, 과학잡지 및 보고서들은 표본을 비추고 탐색하는데에 사용되는 비임의 축에 대한 여러가지 각 위치에서의 광분산 기술의 사용을 예시하거나, 기술하거나, 논의하고 있다.

그러나, 현재까지의 유용한 선행물질들의 대부분의 광축에 대하여, 광교차각을 0도 내지 23도 또는 0도 내지 90도로 제한하는 것으로 인정된다.

본 발명은, 생물학적 세포 표본내에서 고속으로, 정확하게, 세포형들을 상호간으로부터 분석 및 분리하는데 사용되는 새롭고, 유용하며 명백한 생물학적 세포의 계산, 측정 및 식별방법을 제공한다.

넓게 말하면, 본 발명은, 수력학적으로 집속된 입자의 흐름의 형태인 생물학적 표본이 전자기적 방사에너지인 레이저관의 점집속된 광선 내를 통하여 지나가는 구조적 조합을 제공한다.

레이저 에너지의 광축에 관하여 적절히 배치된 광응답수단은, 각 세포의 통로의 광출력 펄스를 제공한다. 유체흐름 경로내의 전기적으로 전도적인 접점은, 각 세포의 코울터 DC 양 및 RF/DC 코울터 불투명도 탐색의 결과로서 부가적인 전기적 펄스를 제공한다.

적절한 전자회로의 수단에 의하여 이들 출력펄스 또는 신호들은 최소한 5개의 상이한 백혈구형을 규정하기 위하여 조합될 수 있으며, 비록 어떤 통계적으로 적지 않은 공통세포 부집단은 사실상 그들의 기본적 세포종류에 의하여 마스크되고 있는 경우에도 효과적으로 하나의 세포종류를 다른 것으로부터 구별한다.

본 발명은, 또한, 광산란 기술만에 의하여 또한 코울터형의 DC 및 RF 기술의 조합에 의하여 하나 이상의 다중 생물학적 세포형의 데이타 표본을 만들어 내는 방법과 관계가 있다.

보다 상세하게는, 이하에서 중간각도 광산란(MALS)으로 특징지워지는 10도 내지 70도의 레이저 축에 대한 각도의 범위에서의 마스크된 레이저 광선의 출력 구역내에 배열된 광응답 펄스발생 조립체로부터 파생된 정보 또는 데이터를 이용하기 위한 신규의 방법론이 본 발명에 의하여 제공된다.

본 출원은 이하에 열거하는 특허 및/또한 출원인 및 회사와 관련한 것이며 이들을 참조함으로써 필요하거나 요구된다고 생각되는 부가적인 설명적인 상세한 내용을 의존한다.

"전체 혈액 표본으로부터 적혈구의 분리, 식별 및/또는 분석용 방법 및 시약계"는 1987년 3월 13일에 출원된 미합중국 특허 출원번호 제07/025,303호로서, 출원인은 스티븐 앨. 레디스 등이며 본 출원의 양수인에게 양도되었다.

1987년 3월 13일 출원된 월러스 에이치 코울터 등의 명의의 동시 계류중인 미합중국 특허 출원번호 제07/025,337호 "생물학적 반응을 촉진하기 위한 소량의 표본을 급속하게 혼합하는 방법 및 장치"

1986년 10월 21일에 출원된 월러스 에이치 코울터 등의 미합중국 특허출원번호 제06/921,654호는 "입자의 저항 및 리액턴스를 측정하기 위한 입자 분석기"이라는 명칭으로서, 본 출원의 양수인에게 양도되었다.

1950년대 초반의 개념정립으로부터, 윌러스 에이치. 코울터에 의하여 발명된 입자 계산 및 분립의 원리는 코울터에 의한 시초적인 미합중국 특허 제2,656,508호에 나타난 바와 같은 유체현탁액 내에서 조작되는 현미경적 입자들의 전자적 계산, 분립, 연구 및 분석용 방법 및 유통장치들을 다수개 출현시켰다.

이러한 종래의 기술구성에 있어서는, 해당 본체 또는 현탁액의 공동부내에 전극을 매달음으로써 2개의 병 또는 방 사이에 직류전류가 형성된다.

2개의 본체 사이의 유체연통은 구멍을 통하여 이루어진다; 따라서, 전류 및 전계가 구멍내에 형성된다.

구멍과, 이 구멍 안쪽 및 구멍 내의 전장은 감지영역을 구성한다. 각 입자가 감지영역을 통과함에 따라, 통과시간 동안, 감지영역의 내용물의 임피던스가 변화되며, 이에 의하여 감지영역 내의 전류 및 전계가 변조되고, 이러한 변화에 따라 적절히 배치된 검출기에 인가되는 신호를 발생시킨다.

히알리이, 플로리다에 소재하는 코울터 일렉트로닉스, 인코포레이티드에 양도된 더블류. 에이치. 코울터 및 더블유. 알. 호그에 대한 미합중국 특허 제3,502,974호는 현미경적 통로를 통한 유제 현탁액 입자의 통과의 결과로서의 신호를 발생하고, 검출함으로써 이러한 통과에 응답하는 입자분석장치를 기술한다.

신호는, 입자의 통과에 기인하여 경로 내에서 발생되는 전류변화와 관련되며, 이러한 변화는 주로 입자의 물리적 특성을 반영하는 저항성 및 용량성 전류성분들을 포함한다.

경로 내의 전류는, 적어도 무선주파수, 바람직하게는 기타의 다른 주파수파의 조합에 의한 전류여기 수단에 의하여 마련된다; 그러나, 주파수 스펙트럼 내의 위치 및/또는 이들의 동상관계 때문에 서로 구분될 수 있는 신호들이라면 어떠한 2개의 상이한 주파수도 적당하다.

적어도 2개의 결과적인 신호들은 각 입자로부터 파생되며, 각 입자의 하나 이상의 물리적 특성들을 확인하기 위하여 사용될 수 있으며, 따라서, 같은 크기일지라도 상이한 물질의 입자들도 개별적으로 탐색된다.

히알리이, 플로리다에 소재하는 코울터 일렉트로닉스, 인코포레이티드에 양도된 더블유. 에이치 코울터 및 더블유. 알. 호그에 대한 미합중국 특허 제3,502,973호(제3,502,974호의 부분 연속)는, 코울터형의 종래의 입자분석장치로 부터의 펄스열을 수납하기 위한 2개의 채널이 있으며, 각 펄스는 통상 동일한 입자에 의해 입자분석장치 내에서 만들어진 동반펄스를 가지고, 펄스들 사이의 관계를 나타내는 신호를 얻기 위한 수단이 마련되는 장치를 개시한다.

다수개의 실시예에 있어서, 하나의 펄스는 특별한 인자와 관련하여 감소되고, 그후, 드레쉬호울드회로내에서 다른 펄스와 비교되며, 따라서 특정범위의 펄스들만이 출력신호를 만들어 낸다.

다른 실시예에 있어서는, 여러쌍의 드레쉬호울드의 수단에 의하여 전자창(Electronic window)이 형성되며, 각 쌍의 하나의 신호는 주어진 범위를 규정하는 2개의 신호를 제공하기 위하여 2개의 감소기내에서 감소 처리된다. 범위내에 들어가는 관계에서만 출력신호가 발생된다.

히알리이, 플로리다에 소재하는 코울터 일렉트로닉스, 인코포레이티드에 양도된 윌러스 에이치. 코울터에 대한 미합중국 특허 제4,527,114호는, 개별적인 입자들을 포함하고 있는 액상 현탸ㄱ류가 소정의 경로를 따라 진행되는 플로우(Flow)실을 가지는 플로우셀을 포함하며 구성되는 입자분석장치를 개시한다; 한쌍의 전극은 소정경로의 대향하는 측들에 위치되며, 전극중의 하나는 주어진 입장의 길이 보다 작은 소정경로에 평행한 폭으로 된 한쪽 끝단을 가지고, 전극의 끝단은 소정경로에 근접하여 베치

히알리이, 플로리다에 소재하는 코울터 일렉트르닉스, 인코프레이티드에 양도된 마이클 알, 그로브즈 및 윌러스 에이치. 코울터에 대한 미합중국 특허 제4,298,836호는 액체류 내에 있는 입자들이 임피던스 오리피스(Orifice)를 통과하도록 수력학적으로 집속되고, 입자크기의 신호표본을 만들기 위하여 저주파 전류원이 구멍을 통해 전류를 공급하며, 입자의 크기 및 내부저항의 신호표본을 만들기 위하여 고주파 전류원이 구멍을 통해 전류를 공급하며, 검출기는 입자의 길이를 결정하며, 디지탈 컴퓨터는 각 입자에 대한 신호를 상관함과 동시에, 그의 형상이다.

변형도 또는 정상적인 형상의 정도, 진정한 크기 및 내부저항치를 계산하는 장치 및 방법을 기술한다.

히알리이, 플로리다에 소재하는 코울터 일렉트로닉스, 인코포레이티드에 양도된 윌리엄 에이. 뉴튼 및 마샬 디. 그레함에 대한 미합중국 특허 제4,420,720호는 개별적으로 포함되는 입자들을 가지는 현탁액의 흐름이 소정경로를 따라 흐르고; 한쌍의 중앙전극이 소정 경로의 마주보는 쪽에 위치하며; 중앙전극들은 그들 사이에 감지전계를 마련하도록 전력이 공급되며, 2쌍의 외부전극들은 1쌍씩이 중앙전극의 각각의 옆에 위치되며; 외부전극들은 소정경로를 따라서 감응장의 폭을 좁히도록 중앙판의 감응장의 방향으로 이들의 전장이 튀어나올 수 있게끔 배향 및/또는 전력을 공급받게 되는 입자분석기를 기술한다.

부가적으로 중앙판 사이의 전장은 부가적인 방향으로 집속될 수 있으며, 감응전극 구성은 구멍과 함께 또는 구멍 없이, 또는 물질의 표면상에서, 플로우셀 내에 실현될 수 있다.

히알리이, 플로리다에 소재하는 코울터 일렉트로닉스, 인코포레이티드에 양도된 죤 디. 홀링거 및 라울 아이. 페드르소에 대한 미합중국 특허 제4,515,274호는 입자가 통과하고 분석되는 입자 감지구멍에 의하여 유체가 연통하도록 접속된 한쌍의 채널을 가지는 플로우셀과; 플로우실을 구획하도록 하류쪽 채널의 끝단에 착설된 노즐과; 입자의 흐름을 수력학적오로집속하고, 노즐로부터 입자의 흐름을 피포액내로 분사하기 위하여 유실의 바닥부로 도입되는 피포액과; 액체분사로부터 방울을 만들어 내고,

히알리이, 플로리다에 소재하는 코울터 일렉트로닉스에 양도된 로버트 씨 레이프에 대한 미합중국 특허 제4,348,107호는 광학적으로 깨끗한 구형 요소 내에 위치된 구멍을 통과하는 유동흐름 내를 현탁된 입자에 대한 광학적 측정 및 전기적 양측정을 동시에 행하기 위한 전자-광학 변환기를 개시한다.

이하, 첨부된 도면을 참조하여 예시의 목적으로, 도시된 본 발명의 실시예를 설명한다.

"히스토그램"은 단일 변수에 대한 주파수 분포의 그래프로서 정의되며 변수는 X축에 그려지고, "#"으로 표시된 주파수는 Y축에 그려진 2차원적인 그래프로 나타낸다.

또한, 히스토그램은 컴퓨터 또는 다른 형태의 전기회로 내에 나타낸 바와 같은 그러한 그래프의 요약 수치표로서 정의된다.

"매트릭스"는 2개의 변수에 대한 주파수분포의 그래프로서 정의되며 하나의 변수는 X축상에, 두번째 변수는 Y축상에 그려지며, 주파수 또는 계수치가 등-계수 윤곽선으로 그려진 3차원적 윤곽그래프이다.

분명히 하기 위하여, 오직 하나의 등-계수 윤곽선이 모집단의 개요을 보이도록 표시된다.

또한 매트릭스는 컴퓨터 또는 다른 전기회로 내에 표현된 바와 같은 그래프의 용약수치표로서 정의된다.

본 명세서 내에서 매트릭스를 기술할 때, X축 변수가 먼저 열거되고, 그 후에 Y축 변수가 열거된다.

"파라미터"는, 이하의 명세서 내용에서 설명되는 바와 같은 본 발명에 있어서는 독립변수와 동의어이며, 플로우세포 계측기 내에서 분석될 입자 또는 세포들로부터 얻어진 동시적, 독립적인 측정치 중 어떤 것을 나타낸다.

어떠한 수학적 함수에 의하여, 2 또는 그 이상의 정수의 조합은 다른 정수를 지배하는 것으로서 정의된다.

"게이팅(Gating)"은, 하나 이상의 다른 파라미터를 질문하면서, 다중 파라미터 데이타로부터 한개의 파라미터의 히스토그램을 형성하는데, 사용되는 여과 과정으로서 정의된다.

플로우셀을 통과하는 단일 백혈구 세포의 통과로서, 파라미터 변환기에 의한 세포측정인 각 사상(Event)에 대하여, 게이팅에 사용되는 각 파라미터에 상당하는 측정치를 하나 또는 두개의 기준치 또는 드레쉬호울드치와 비교되고, 드레쉬 호울드의 아래, 드레쉬 호울드의 위, 또는 2개의 드레쉬 호울드의 사이에 있는 것을 "검사" 받는다.

만약 이러한 검사가 고려되는 모든 게이팅 정수에 대한 진리치의 결과를 산출한다면, 사상은 히스트그램 내에 포함된다.

또한, 게이팅은 매트릭스를 구성하는데 사용될 수도 있다.

따라서, 게이팅을 사용함으로써, 복합-정수 데이타의 분속 및 그래프적 표현을 단순화할 수 있다.

"저각도 광산란(Low angle light scatter)", LALS는, 레이저 광선축에 대하여 0도를 포함하며 10도 아래에서 얻어지는 광산란 정보로서 정의된다.

"고각도 광산란(High angle light scatter)" HALS는, 레이저축에 대하여 90도로 중심을 둔 광산란 정보로서 정의된다.

"중간각도 광산란(Median angle light scatter)" MALS는, 10도 및 70도 사이의 각도에서 얻어지는 광산란 정보로서 정의된다.

"비임댐프"는, 레이저 광선과 플로우셀 사이의 교차에 의하여 검출기를 가로질러 수평선으로 통상 나타나며, 검출한 광산란 신호를 열화하는 소망하지 않는 레이저 광선을 제거하기 위한 장애물로서 정의된다.

"마스크"는 0도 즉, 측 상의 레이저광선 정보 뿐만 아니라, 저각도 광산란 정보와 같은 불필요한 정보를 제거하는 원형 또는 타원형 장애물로서 정의되며, 검출기에 의하여 이 정보의 수납을 방지한다. 이하의 내용에 있어서, 또한 본 명세서 전반을 통하여, 광산란 각도들은, 기술되어질 구멍 또는 감응영역 내의 생물학적 세포를 지나가는 광의 각도로서 정의된다.

간단히 말해서 광검출기 조립체에 닿는 산란된 광의 각도는 표본 희석류 및/또는 수력학적 피포용액, 공기 그밖의 파라미터의 굴절계수의 차이와, 스넬(Snell)의 법칙에 의하여 예견되는 바와 같은 플로우셀(10)의 구성에 의거한 구멍내에 진정한 각들과 다를 수 있다.

제1도는, 본 발명의 방법 및 작용을 채용한 입자분석 장치의 일예를 도시한다. 제1도의 장치는, 플로우셀(10)로서 특정지워지는, 가늘고 긴 원통형 부재를 포함한다. 플로우셀(10)은 예를 들면 용융된 실리카, 석영 또는 사파이어와 같은 어떠한 광학적으로 투명한 물질도 가능하다.

생물학적 세포표본이 본 도면에는 도시되지 않았으나 공지의 수단에 의하여 수력학적 집속류(14)로서 지나가거나 흘러가게 되는, 좁아지거나 또는 목형상으로 된 구멍(12)만 제외하고는 플로우셀(10)의 내부분은 그의 길이를 통하여 원통형상으로 되어 있다. 부재(10)의 외부벽면(15)은 원통형이며, 또한 이하의 기술에서 명백해질 목적을 위한 광학적 평탄면(16)을 포함한다. 렌즈 시스템(18)은, 바람직하게는 레이저(22)로 된 전자광 에너지의 비임(20)을 구멍(12)에서 한점에 집속시킨다.

바람직한 실시예에 있어서는, 레이저는 632.8mm로 방출되는 헬륨-네온 레이저이다. 예를 들면 48mm 파장으로 방출되는 레이저도, 이하에서 기술되는 것에 유사한 결과를 산출하도록 사용될 수 있다. 산란 방사 수납기로서 작용하는 광검출 조립체 구조(24)는 레이저 방사되는 광의 축(26)에 수직인 평면에 위치하며, 축(26)을 중심으로 위치한다.

광검출 조립체(24)는 앞서 정의된 바와 같이 마스크(28)를 가진 광 검출기(25) 및 비임 댐프(30)로 구성된다.

광검출기(25)는, 예를 들면 광전자 증배관과 같은, 어떠한 형식의 광감응 전기장치도 될 수 있다. 본 실시예에 있어서, 광검출기(25)는 박텍(Vactec)사에 의하여 제조되는 VTS3081형의 실리콘 기전형 검출기이다.

광검출 조립체(24)의 중앙부분에는, 상술한 바와 같이, 광산란 마스크(28)가 설치된다.

마스크(28)는, 상술한 바와 같이, 상이한 구성의 플로우셀(10)로부터 등가의 광산란 정보를 얻는데 필요한 바와 같은 원형, 타원형, 또는 기타의 형상이 될 수 있다. 마스크(28)는 레이저 광선(20)과 동축적으로 위치된다.

소위 비임댐프(30)는 도시한 바와 같이, 레이저 광선을 마주보는 포토다이오우드 조립체(24)를 수평적으로 가로질러 연장된다.

비임댐프(30)는 잡음 출력에 대한 제거 신호를 제공하도록, 이하에서 나타내는 바와 같이 중앙축으로부터 약간 모나게 부채꼴로 된다.

제1도의 A는 구멍면을 가로질러 수평적으로 절단한, 제1도의 플로우셀(10)의 평면도이다. 광검출기 조립체(24)는 레이저광선축(6)과 중심을 같이 하여 마스크(28)와 함께 나타내어져 있다.

본 도면에서는 비임댐프(30)가 도시되어 있지 않다. 접속류(14)내의 세포를 탐색하거나 닿은 후에, 구멍(12)의 뒤쪽, 제1도의 왼쪽을 나온 광은 "광산란"(32)으로 특징지위지는 깔대기형으로 확산된다.

마스크(28) 및 비임댐프(30)의 각도배향은, 광산란 출력(32)이 대략 레이저 축에 대하여 60도 각 범위로 수광될 수 있도록 40도 ±30도 또는 대략 10도로부터 70도 까지이다.

따라서, 제1도에서의 왼쪽방향으로, 0도로 채택된 레이저 광선축(26)으로부터 약 40도를 중심으로한 각도 범위가 마련된다. 이러한 광학적 구성은 ±30도의 수집범위를 제공하며, 차례로 레이저 광선축으로부터 대략 10도 내지 70도의 고리가 마련된다.

상술한 바로부터 명백한 바와 같이, 본 발명은 도시한 바와 같이 플로우셀, 즉 전환기(10)의 앞에 위치하는 대략 평평한 판형상 광검출기 구조 또는 조립체(24)를 이용한다.

조립체(24)에는, 상술한 바와 같이, 10도 보다 낮은 각도의 저각도 광산란을 제거하거나 가로막기 위하여 둥근, 또는 원형인 마스크(28)가 마련된다.

부가적으로, 실제적인 구성 목적으로 위하여, 수평적인 비임댐프(30)가 마스크(28)에 연결된다.

마스크(28)는 중앙부분에서 보다는 바깥 끝단들이 더 크거나 넓어지게 되는 나비넥타이 형으로 채택될 수 있다.

세포 또는 입자들이 플로우셀(10)을 통하여 흘러감에 따라 시스템이, 세포 입자위치에 덜 감응되도록, 레이저 광선이 수평방향으로 늘어지거나 평탄해지도록 형상지어지는 조건으로 렌즈가 수용되게끔 수평비임댐프(30)가 이용된다.

따라서, 이러한 광학적 형상은, 광분산 신호출력을 전자적으로 이용하기 위하여 보다 일정한 광출력 신호를 제공한다.

제1도의 C는 제1도에서 나타낸 광검출기 조립체(24)의 정면도이다. 동 도면에는, 원형마스크(28), 비임댐프(30) 및, 이하에서 MALS로 표시되는 중간각도 광산란 신호를 제공하는 광검출기(25)의 노출된 표면이 나타내어져 있다.

제1도에서 나타내지 않은 부가적인 부분들은, 점선(600)으로서, MALS를 각 정보의 2영역(602) 및 (604)로 분할한다.

점선(600)은 20도로 산란된 광이 광탐지기(25)의 표면에 닿는 위치를 표시한다.

원형 또는 포물선형으로 나타나는 점선(600)은, 플로우셀(10)의 기하학적 형태 및 상술한 기타 인자들에 따르며, MALS가 수납되는 방향으로 원통형 구멍(12) 및 원통형 외부면(15)을 가지는, 바람직한 실시예에서 기술한 바와 같은 플로우셀(11)을 사용할 때, 제1도의 C에서 나타낸 바와 같이, 광검출기(25) 표면에 포물선을 그린다.

마스크(28)및 점선(600) 사이의 영역(602)은 10도 및 20도의 각도 내에서 산란된 광을 받는다.

이 영역(602)은 "15도 LS"라 부르며, 본 명세서를 통하여 이하에서는 "하부 중간 각도 광산란", LMALS라 한다.

영역(604)은 점선(600)에 의하여 한계가 정해지며, 광검출기의 외부 모서리들은 20도 및 65도의 각도 내에서 산란된 광을 수납하며, 이는 이하에서 "상부 중간 각도 광산란", UMALS라 부른다.

본 기술 내용에 있어서, 적혈구 세포들은 제1도에서 나타낸 플로우셀(10)의 구멍(12)을 통하여 하나씩 지나가는 것으로 가정된다.

완전한 시스템의 기술, 즉 분류를 달성하기 위하여 혈액세포 또는 기타 입자들이 어떻게 플로우셀(10) 내로 도입되는가, 및 상기 세포에 관한 다중파라미터 데이타들이 어떻게 얻어지고 처리되는가에 대한 기술이 이하에서 설명된다.

거의 살아 있는 상태인 백혈구는 구멍(12)을 가로지르며, 상술한 바와 같이, 10도 내지 70도의 중간 각도 범위 내에서 광을 산란시킨다.

제1도의 C에 나타낸 상부 중간 각도 광산란 영역 UMALS, 영역(604)에서 호산구는, 호중구 보다 광을 더 산란시킨다. 호중구는 상부영역(604)에서 임파구, 호염기구, 단구보다 광을 더 산란시킨다. 영역(602)으로 표시된 하부 중간 각도 광산란 영역, LMALS에서는 호산구 및 호중구가 거의 동일양의 광을 산란시키며, 이들 양자는 구별하기 어렵게 된다.

호중구에 의하여 산란되는 광의 양은, 임파구, 호염기구, 및 단구에 의하여 산란되는 광의 양에 대하여, UMALS영역(604)에서 보다는 LMALS영역(602)에서 더 많다

하부영역(602)과 상부영역(604)을 결합하여, 단일의 중간 각도 광산란, MALS영역을 형성함으로써 광산란 신호 진폭정도의 감소에 따라 3개의 군(群)사이의 최대 편차를 제공하는 측정을 만들어 낸다.

호산구; 호중구; 및 임파구, 호염기구, 단구.

전체 MALS의 UMALS의 하부 집합에 의하여 산출되는 결과들은, 본 명세서의 나머지 부분을 통하여 유사하기 때문에, 중간각도 광산란, MALS를 참조하여도 전체 MALS측정치나, 그의 상부 UMALS하위집합이 설명될 수 있다.

이하에서 RLS로 언급할 회전 광산란(Rotated light scatter)도 전체 MALS 또는 UMALS를 사용하여 유사하게 계산될 수 있다.

이하에서 기술하는 바와 같이 백혈구를 용해제와 함께 처리함으로써 호중구로부터 호산구를 이들의 LMALS 신호의 진폭에 의하여 구별하는 것이 가능하다.

상술한 UMALS에서의 여러가지 세포형들 사이의 관계는 변하지 않는다.

본 발명은 확실하고, 용이하게 구성되는 변경 및 조합을 제공한다.

본 발명 장치의 한 실시형태는 제1도의 B에 도시되어 있다.

본 실시예에 있어서, "정방형" 석영구멍(38)은, 평평한 내부면(40) 및 (42)을 가지고 마련된다. 광검출기 조립체(24)는 제1도의 B에 도시된 바와 같이 위치되며, 그의 구성은 제1도에서의 검출기 조립체(24)와 유사하다.

석영, 공기, 및 표본액 등의 굴절율이 다르기 때문에, 스넬의 법칙에 의하여 예견되는 바와 같이, 빛의 굴절이 있게 된다. 이 경우에 있어서는, 제1도의 B의 왼쪽인, 플로우셀의 뒤쪽으로부터 나온 광선(48)이 플로우셀(10)의 모서리에서의 간섭에 기인하여 작은 검은 부분(50)과 함께, 광축에 대하여 고각도로 휘어진다. 검출기(24)의 표면상에서 각도들이 그리는 십자형과 관계 없이, 입자 및 세포목록 및 분류에 관계가 있는 모든 기타의 각도들이 수집된다.

다른 실시예에 있어서, 제2도는 상술한 제1도에 나타낸 플로우셀(20)의 제1도의 A와 유사한 도면이다.

하나, 또는 두개의 광검출기 조립체(34), (36)은, 표본흐름(14)의 축에 평행한 진행방향으로 레이저축(26)으로부터 45도선으로 수직으로 위치할 수 있다.

검출기(34), (36)로부터의 출력신호들은, 신호대 잡음비를 증가시키기 위하여 전자제어회로 내에 더해질 수 있다. 제 2 도의 A는 제 2 도의 플로우셀(10)의 측면도 및 광탐지기 조립체(34), (36)의 위치를 나타낸다.

십자형 음영이 진 영역은, 광학장치(18) 및 플로우셀(10)의 조합에 의하여 생성된 레이저 광의 수명적 패턴에 대한 비임댐프(30)에 의한 가리워진 부분이다.

제3도의 실시예는 본 발명의 기초개념의 또 다른 변형이다. 이 경우에 플로우셀(10)은, 제1도의 B에서 나타낸 "정방형" 구멍과 함께, 제2도의 광탐지기 검출체(34), (36) 하나 또는 두개와 결합된다.

광선은 상술한 바와 같이 휘어짐을 겪게 되지만, 본 실시예에서 얻어지는 광산란 정보는, 제2도에서 나타낸 실시예에서 얻어지는 것과 동일하다.

본 발명의 또 다른 실시예가 제4도에 나타내어져 있다. 이 구성에 있어서는, 포토다이오우드 센서(52), (54) 및 (56)들이 정방형 구멍(38)의 측면 및 앞에 놓여진다.

원형 마스크(58)는 레이저 광산란의 10도 이하를 차단하도록 앞쪽 포토다이오우드(54)의 앞에 위치하며, 결과적으로 어두운 부분(60)을 남기게 된다.

다시 한번, 제3도의 구성과 동일하게 스넬의 법칙에 의하여 어두운 영역(62), (64)는 레이저 축의 각 측부에서의 모서리에서 나오게 된다.

제4도에는 나타나지 않았으나, 제1도 및 제2도에서의 댐프(30)에 유사한 수평광선방기가 모든 포토 다이오우드 센서(52), (54) 및 (56)에 사용된다.

MALS에 부가하여, 본 발명은 최소한 7개의 다른 파라미터들을 이용할 수 있다; DC, RF 불투명도, RLS, NALS, ALL, 및 MALS의 부집단인 15도, LS이다.

DC 및 RF는 구멍임피던스 세포검지의 코울터 원리에 관한 것이다.

DC는 직류 또는 저주파 ₩전류를 가함으로써 얻어지는 펄스피이크 정보로서 정의되며, 세포막은 투과되지 못하며, 어떠한 전류도 세포를 통과하여 흐르지 않도록 된 것이다.

DC펄스의 피이크 진폭은 셀 볼륨의 함수이다.

RF는 고주파 전류를 가함으로써 얻어지는 수치로부터 유래된 펄스피이크 정보로서 정의되며, 세포막이 침투되고, 전류는 세포내로 통과하게 되는 것이다.

RF는 셀볼륨 및 내부 도전도의 함수이다.

"불투명도"는 모든 개개의 세포측정 또는 이벤트에 있어서, DC신호 데이타에 의하여 RF 신호데이타를 나눔으로써 얻어지는 신호치 또는 데이타로서 정의되며, 크기에 관계없는 새로운 세포파라미터를 만들어내지만, 내부 도전성의 함수이다.

RLS, 회전광산란은 MALS의 대수(Logarithm)로부터 나온 펄스피이크 정보와 정수의 합을 앞서 정의된 바와 같은 정수가 더해진 DC에 의하여 나누어지는 함수로써 정의된다.

RLS를 제공하기 위한 회로의 상세한 예는 본 명세서의 다른 부분에서 기술한다.

이러한 RLS 함수는 크기 성분을 제거하는 효과가 있으며, 내부 구조와 보다 관련된 측정을 행하게 된다.

RLS를 얻기 위한 다른 방법은, DC신호 데이터의 대수에 의하여 MALS신호 데이타의 대수를 나누는 것이다.

저각도 광산란 LALS의 부집단인 좁은 각도 광산란 NALS은, 레이저 광선축으로부터 진행방향으로 0.5도 내지 2도의 각 범위로시 정의된다.

축선 방향의 광손설 ALL은, 레이저 광선이 플로우셀(10)에 존재하고, 레이저광선망을 통과시키도록 크기가 만들어져 있는 작은구멍을 통과한 후에 이 레이저 광선과 정렬하여 광검출기를 배치하고, 이후에 감지 영역(12)을 통하는 입자 또는 세포류의 통과에 따른 신호진폭의 변화를 증폭시킴으로써 얻어지는 신호이다.

NALS 및 ALL의 양자는 세포크기에 의하여 크게 영향을 받으며, 따라서 DC에 대한 치환으로써 이용될 수 있다.15도 LS는 레이저 광선축으로부터 15도, 또한 ±5도의 입사각의 고리형상 범위 내에서 광검출기상으로 광이 들어오도록 함으로써 얻어지는 MALS의 하위 집합으로 정의되며, 이것에 의하여 레이저 광선축 주의의 약 10도 내지 20도의 고리를 만들어낸다.

NALS, ALL 및 15도 LS를 사용한 실시예들은 본 명세서의 다른 곳에서 기술한다.

"자연상태"의 염색되지 않은 백혈구 세포를 이용함으로써, 상술한 장치에 의하여 일반적으로 도시된 바와 같은 별개의 무리들로서, 여러가지 세포군 또는 모집단이 나타나는 제7도 내지 27도의 히스토그램을 만들 수 있다.

파라미터(1) 및 (2)의 조합을 이용하여, RLS 정수를 만드는데 사용된다.

도시된 바와 같이 임파구, 단구, 호중구, 호산구, 및 호염기구들은 별개의 클러스터로서 나타난다.

8개의 파라미터들의 각각은, 각 도면들을 참조하여 이하에서 다소 상세하게 논의되고 고려된다.

본 발명에 대한 유체 및 전기제어회로들은 제5도의 블록다이어그램에서 설명된다.

다이어그램에 있어서, 본 실시예에서는 "자연상태" 또는 비-세포화학적으로 염색된 백혈구인, 실험될 물질들을 담기 위한 시험관 큐베트(Guvette), 또는, 기타 적절한 유사수단들이 될 수 있는 표본용기(70)가 나타내어져 있다.

이 경우에는, 흡출기 바늘(72)을 통하여 표준 코울터 일렉트르닉스, 인코포레이티드 표본 밸브(74)의 수단에 의하여 고정된 양의 전체 혈액이 플로우셀(10)에 공급된다.

대략 28마이크로 리터의 표본이 시약 패키시 구역(73)으로부터의 용해제(76)과 섞여져 도관(82)을 경유하여 혼합실(80)로 보내진다.

혼합실(80)내에서, "생물학적 반응을 촉진시키기 위한 소량의 혈액의 급속 혼합 방법 및 장치"라는 제목으로, 윌러스 에이치 코울터 등의 명의로 1987년 3월 17일에 출원되고, 현재 계류중인 미합중국 특허출원 제07/025,337호에서 기술되고 도시된 바와 같은 믹서 액츄에이터(84)의 조정하에서, 전체 혈액세포 표본 및 용해제들이 약 5내지 6초 동안 흔들어서 혼합된다.

혼합강도는 액츄에이터의 주파수 및 주기를 조정함으로써 제어된다.

5내지 6초 후에, 소광액(86)이 혼합 및 용해된 표본 내에 가해지며, 다시, 5내지 6초 동안 혼합된다. 이제 결과적인 표본이 준비된다.

"결과적"이라는 개념은 용해제(76)가 적혈구 세포 및 혈소판을 용해시켜서, 백혈구 세포 하위모집단이 거의 "살아있는 상태"로 남겨지도록 한다는 사실을 주지시키기 위하여 사용된다.

"준비되었다"는 개념은 여기에서 냉각액(86)이 용해활동을 중지시키고, 그렇지 않으면 백혈구 세포 및 이들의 현탁매체를, 후속 분석을 위하여 조절함을 주시시키기 위하여 사용되었다.

용해 및 소광 방법 및 상세한 내용은, "전체 혈액 표본으로부터의 백혈구의 분리, 판별 및/또는 분석을 위한 방법 및 시약 시스템"이라는 제목으로 스티븐 엘. 레디스 등의 명의로 1987년 3월 13일에 출원되고, 본 출원의 양수인인 코울터 일렉트로닉스, 인코포레이티드에 양도된 현재 계류중인 미합중국 특허출원 제07/025,303호에 개시되어 있다.

양자 택일적으로 제5도에서 나타낸 바와 같이, 소위 공정의 "예비-준비" 방식을 이용하기 위한 수단이 마련된다. 이 방식에 있어서는 예를 들면 원심분리, 밀도, 또는 버피코팅(Buffy coating) 기술에 의하여 표본으로부터 적혈구를 제거한, 순화된 백혈구세포 표본이 마편된다.

이 표본은 앞서와 같이 얻어지지만, 셀유실(10)내로 도입된 후에 "예비-준비" 라인(87)을 통과하여 혼합실(80)로 들어간다.

이와 같이, 본 시스템은 원하는 결과를 얻기 위하여, 용해, 냉각 또는 어떠한 시약을 요구하지 않는 것임을 용이하게 알 수 있다.

이후에, 혼합이 중지되고, 혼합실(80)은 유체 및 기체 공급불록(88)으로부터 압력을 받는다.

혼합된 표본은, 플로우셀(10)의 입구(92)로 소형 내부관(90)을 통하여 공급된다.

플로우셀(10)에는, 이하에서 간단히 설명될 오리피스(12)의 대향하는 양쪽에 마련된 1쌍의 전국(94), (96)이 마련된다.

구멍(12) 및 플로우셀(10)은 제1도를 참조하여 기술된 것과 동일하다.

따라서, 플로우셀(10)은 이하에서 기술되는 바와 같이, 동시에 전자적이며, 광학적인 세포분석 측정이 가능하다.

세포들은 공지의 수단에 의하여 구멍의 중앙을 통과할 때, 피포액(Sheath fluid)(98)에 의하여 수력학적으로 접속된다.

표본 물질 및 피포액은 플로우셀을 흘러나와시 출구(99)를 경유하여 폐기용기(100)로 들어간다.

헬륨-네온(HeNe)레이저(22)는, 예를 들면, 0.8밀리와트의 비교적 작은 힘을 가지며, 렌즈시스템(18) 내로 들어간다.

렌즈시스템(18)은 2개의 교차-원통형 렌즈들로 구성된다.

렌즈시스템의 렌즈들의 초점거리는, 상술한 바와 같이, 광이 수평적으로 뻗어지도록 광선(20)이 편구(偏球) 또는 연장되게끔, 함께 협력할 수 있도록 고안된다.

이러한 광학적 구성은, 광학적 출력을 방해하지 않고서, 광로를 근소하게 변위시키도록 한다.

전원유니트(102)는 RF 및 DC에 대한 전원, 검출 및 증폭수단을 형성한다. 발진-검출기(101)로부터의 무선-주파수 전류 및 DC전원(103)으로부터의 직류는 결합회로(105)내에서 합해지고, 구멍(12)를 통하여 흐르는 전류를 성립시키는 라인(111)을 거쳐 전극(94), (96)에 공급된다.

구멍(12)을 통과하는 입자 또는 세포에 의하여 구멍(12)의 임피던스를 순간적으로 변화시키며, 구멍을 통과하는 전류의 RF 및 DC 성분을 변조한다.

이러한 임피던스 변화에 의하여 생기는 RF 전원의 변조는 필터링되고, 결합회로(105)를 거쳐 발진-검출기(101)로 공급되며, 발진-검출기(101)는 "RF 펄스"(118)를 출력하는 RF 프리앰프(107)에 탐지된 펄스를 공급한다.

동시에, 임피던스 변화에 의하여 야기된 직류에 대한 변조는 필터링되고 결합회로(105)를 통하여 DC프리 앰프(109)에 공급되고, "DC 펄스"(116)로서 출력 된다.

전원유니트(102)의 상기한 내용은, "입자의 저항 및 리액턴스를 측정하기 위한 입자 분석기"라는 제목으로 1986년 10월 21일에 출원되고, 본 출원의 양수인인 코울터 일렉트르닉스, 인코포레이티드에 양도된 윌러스 에이치. 코울터 등의 명의로 된 미합중국 특허 출원번호 제06/921,654호에서 완전히 개시된 바람직한 실시형태이다.

이러한 전원유니트(102)는 동일한 결과를 산출할 수 있으면 다른 고안의 것이라도 가능하다.

본 발명의 어떤 실시예들은 오직 DC만을 이용하고, RF는 이용하지 않는다; 따라서, 이러한 경우에, 전원유니트(102)는 오직 DC 진원(103) 및 DC 프리앰프(109)만을 포함하게 된다.

제5도에 있어서, 제1도 내지 제4도 중의 어느 한 도면 이상에서 기술된 바와 같이, 레이저축에 대하여 10도 이하로 산란되는 광, 즉 저각도 방향 광산란 및 레이저 잡음을 제거하기 위하여 광산란 포토다이오우드 조립체(24)가 마스크(28) 및 비임댐프(30)와 함께 레이저 광축(26)에 중심을 두게 된다. 광탐지기 조립체(24)는 MALS 또는 10도 내지 70도의 고리형상 광수집 범위를 모으고 변환시킨다.

신호는 펄스의 형태로 공급되며, 입자 또는 세포들의 표본을 구멍(12) 내에서 레이저광선(20)을 가로질러 지나가고, 이들 펄스들은 프리앰프(104)의 출력이 된다.

제5도의 A에서 나타낸 바와 같이, 3개의 전기적 출력들은, 전기-광학 시스템, 즉 DC, RF 및 MALS에 의하여 전기적 펄스(116), (118) 및 (120)으로 생성된다.

이들 펄스들은, DC재생과 같은 필터링 및 펄스정형 회로를 포함하는 해당 앰프(124), (122) 및 (126)에 공급된다.

앰프출력들은 다음에 개별 피이크 탐지기 회로(130), (128) 및 (132)에 공급되고, 여기에서 개별 신호들은 피이쿼 검출을 행하고, 각 피이크들의 전압은 해당 아날로그-디지탈 변환기(134), (136) 및 (138)로 공급된다.

앰프(126)는, 펄스 피이크 검출회로(132)의 출력이 MALS의 대수에 비례하도록, 다수적인 응답을 공급한다.

아날로그-디지탈 변환기의 출력은, 이하에서 단순하게 설명되는 바와 같이, 차후 처리를 위하여, 예를 들면 IBM 퍼스널컴퓨터와 같은 데이타 처리 유니트(140)로 입력된다.

스트립 또는 티켓 프린터(142)는 데이타 처리출력(l44) 중의 하나에 결합될 수 있으며, 제 2 출력(146)이 주처리장치(140)로부터 그래픽 프린터(148)에 정보를 공급할 수 있다.

CRT와 같은 영상 모니터(150)는, 주처리장치(140)에 의하여 처리된 데이타의 상태의 점검을 위하여 마련될 수 있다.

상업적으로 유용한 많은 종류가 있는 제산회로(154)는 DC 피이크 펄스 및 RF 피이크 펄스를 수납하기 위하여, 제산회로(154)의 명명기에 공급되는 DC 출력 및 분할회로(154)의 계수기에 공급되는 RF출력과 결합된다.

따라서, 제산회로(154)의 출력라인(160)은, A/D 변환기(172)에 "불투명도"로서 특징 지워지는 신호를 공급한다.

제5도의 B에 상세히 나타낸 기능회로(161)는 "회전광산란", RLS(170)를 발생한다.

제5도의 B에 의하면, DC 피이크 검출기 출력(152)은 감쇠기(155)에 접속되며, 감쇠기(155)는 K의 감쇠율을 가진다.

이후에 감쇠된 DC는 가산회로(166)의 한 노우드에 접속된다. 일정한 옵셋트 전압 V2(153)은, 아날로그 제산회로(162)의 분모 입력에 그의 출력이 인가되는 가산회로(166)의 또다른 노우드에 인가된다.

광산란의 대수, LLS 출력(164)은 가산회로(168)의 한 노우드에 공급된다. 일정 옵셋트 전압 V1(165)은, 그의 출력이 아날로그 제산회로(162)의 계수기 입력으로 인가되는 합산회로(168)의 또다른 입력 노우드로 인가된다.

함수회로(161)의 출력(170)은 다음과 같이 정의된다; RLS=(LLS+V1)/[(DC/K) +V2].

예를 들면, 피이크 검출기의 출력의 범위가 0으로부터 +10V라 가정할 때, K는 5의 감쇠율로서 설정되며, V1은 -4,83V로 되고, V2는 +4.0V가 된다.

아날로그 제산회로(162)의 출력(170)은, 그의 2개의 입력이 1의 비율을 가질때, 전체 스케일, +10V로서 정의된다.

RLS 출력(170)은 아날로그-디지탈 변환기(174)에 인가된다.

양자택일적으로, RLS 피라미터는 디지탈 논리회로의 수단에 의하여 발생될 수도 있다.

제5도, 제5도의 A 및 제5도의 B의 회로 구성은, 2개의 계산된, 회전된, 또는 파생된 인자 즉, "불투명도" 및 "회전된 광산란" 뿐 아니라, 3개의 원래의 파라미터 DC, RF 및 광분산을 제공한다.

이와 같은 구성으로, 본 발명의 바람직한 실시예의 시스템은 이하에서 설명되는 바와 같이 5개의 입자 모집단을 조사하는 것이 가능하다.

5개의 주된 신호들; RF, 불투명도, DC, RLS, 및 MALS들은, 오실로 스코우프 전환제어 및 모집단 판별회로(180)로 공급되며, 이 회로로부터는 데이타 표시 오실로 스코우프(186)의 X 및 Y측 (182) 및 (184)로 신호가 공급된다.

휘도펄스(178)도, 세포데이타가 존재할 때마다 오실로 스코우프(186)에 공급된다.

데이타 표시 오실로스 코우프는 실제시간 축에서 어떠한 2개의 피라미터 데이타를 표시할 수 있다.

회로(180)내에서, 아날로그 비교기는 이몰 펄스들 값에 의하여 대표되는 데이타에 대한 게이트 작용을 수행하며, 호중구, 호산구, 호염기구, 임파구, 및 단구들로서 각각 식별되는 부집단을 대표하는 5개의 계수기 (188), (190), (192), (194) 및 (196) 중의 하나를 분한다.

따라서, 세포형에 의거하여, 개개의 계수기는 중분되며, 반면에 그래픽 프린터(148) 또는 티켓프린터(142)는, 시각적 연구 및/또는 진단을 위한 실제적인 세포하위 모집단의 히스토그램 및 매트릭스들을 만들 수 있다.

상술한 바와 같이, 본 시스템은, 코울터형 구멍 또는 코울터 DC 또는 RF 신호처리를 이용하지 않고서, 생물학적 세포들의 부집단에 관한 유용한 데이타 및 정보를 산출할 수 있다.

제6도 및 제6도의 A에서 도시된 시스템은, 제5도, 제5도의 A 및 B에서 상술한 바와 동일한 표본 넣기 및/또는 준비를 사용한다.

플로우셀(10)의 좌측의 각 부분들은, 제5도, 제5도의 A 및 B에서와 동일한 것이므로, 동일 부호를 사용한다.

제 6 도 및 제 6 도의 A의 순수한 광학적으로 다른 부분에는, 전기적 파라미터 DC 및 RF를 감지하고 처리하는 것과 관련된 성분들을 포함하는, 점선으로 둘러싸인 부분은 포함되지 않는다.

제6도의 C의 분해사시도에 나타낸 구조 플로우셀(199)을 나타내며, 이 플로우셀(199)은 토울터형 감지구멍(12) 및 전기적(DC 및 RF) 감응을 위한 관련 전극(94), (96)을 필요로 하지 않으며, 내부단면이 250마이크로미터인 길고, 균일하며, 정방형인 석영 채널로 구성될 수 있으며, 그의 예는 바이오해자드 플루우셀로서 코울터에픽스(상품명) 내에 채택되어 있다.

플로우셀(199)의 바깥쪽에, 제6도의 오른쪽에는, MALS 감지기(200)가 비치되며, 도시된 바와 같이 2부분 조립체로서 제조될 수 있으며, 중앙축 구멍(202)이 마련된 단일 구조로 될 수도 있다.

감지기 조립체(200)의 광학적으로 아랫쪽에는 마스크(204)가 있으며, 마스크는 다수개의 광구멍(206), (208), (210) 및 (212)이 설치되는 구성의 일체부의 부분이 될 수 있다.

구멍(206) 및 (212)들은 15도 ±5도로 배치되며, 15도 LS를 위하여 마련된다.

광선(211)은 광검출기(214) 및 (216)에 닿은 것으로 도시된다.

구멍(208)은 축으로부터 대략 0.5도 내지 2도 가량 벗어나서 위치되며, 협각 광산란(NALS) 정보를 집어낼 수 있다.

광선(226)은 광검출기(218)에 부딪히는 것으로 도시된다.

구멍(210)은 레이저광선(20)에 대하여 축상에 위치하며 축방향의 광손실(ALL) 정보를 제공한다.

광선(224)은 광검출기(220)에 입사한다. 마스크(204)의 바로 뒤에는, 각각 15도 광산란, 협각 광산란, 및 축방향광손실에 관한 신호 정보의 발생을 위한 광산란 신호 광검출기(214), (216), (218) 및 (220)이 위치한다.

각 광산란센서(200), (214), (216), (218) 및 (220)에 의해 만들어지는 전기 신호출력이 비교적 낮기 때문에, 감지기(214) 및 (216)의 출력들이 프리앰프(228)에 의하여 합산되는 것과 함께, 별도의 프리앰프(222), (224), (226) 및 (228)들이 각 출력신호를 위해 마련된다.

이후에, 미리 증폭된 신호들은 해당 엠프(230), (232), (234) 및 (236)에서 증폭되어 각 피이크 검출기(238), (240), (242) 및 (244)로 공급된다.

각 신호펄스의 전압값이 피이크 검출기의 출력에 나타남과 함께, 각 출력 신호들은 해당 A/D 변환기(246), (248), (250) 및 (252)로 공급되며, 제5도, 제5도의 A 및 B에서와 같이 데이타 처리장치(140)로 공급된다.

오실로 스코우프 전환 제어 및 모집단 식별 회로(180)는 상술한 바와 같이 기능하지만, 히스토그램 및 매트릭스를 만들기 위하여 오직 MALS신호, ALL신호, NALS신호 및 15도 LS신호만을 이용한다.

다른 변형예에 있어서, 제6도 및 제6도의 A의 모든 부분들이 채용된다.

전기적인 RF 및 DC, 광학적인 MALS, ALL, NALS 및 15도 LS파라미터들은 이미 기술되었다.

추가적인 아날로그 제산기(254)가 채택되며, ALL 출력신호는 계수기 입력에 공급되고, DC출럭 신호는 제산기(254)의 분모 입력에 공급된다.

이후에 형성된 ALL/DC 신호는 A/D 변환기(256) 및 오실로 스코우프 전환 제어 및 모집단 판별회로(180)에 상술한 바와 같이 공급된다.

방금 기술된 장치내에서 얻어진 ALL 데이타는, 본 발명에서 코울터 DC 또는 DC로서 언급된, 전자적 세포양으로 얻어진 것에 근접하는 상대적인 세포볼륨의 측정치를 제공한다.

ALL/DC의 구분을 계산하는 것은, 이하에서 기술되는 바와 같이, 특정세포 모집단을 구분하는데 도움이 되는 새로운 파라미터를 산출한다.

제7도 내지 제27도들은, 전체 혈액, 살아있는 백혈구 모집단 및 부집단을 이용한 본 발명의 시스템의 상이한 실시예들에 의하여 만들어 지는 정보들의 설명도이다.

이하의 기술들은, 세포들이 DC, RF 및 MALS에 대한 응답에 의하여 구분되는, 제5도 및 제5도의 A에서 나타낸 시스템 블록 다이어그램에 관한 언급이다.

제7도는, 제5도의 전자-광학시스템에 의하여 마련되는 바와 같은, 제1도의 장치의 MALS 출력의 히스토 그램이다.

동일한 데이타는 제 8 도에 나타내어져 있으며, 이 도면은 MALS의 대수의 히스토그램이다.

제7도 및 제8도는, 백혈구를 3개의 군으로 나누는 3개의 피이크 또는 모집단을 나타낸다; 임파구, 단구 및 호염기구(301); 호중구(302); 및 호산구(303).

수직실선(304) 및 (305)은 이들 3개의 피이크를 구분하는 골짜기부를 나타낸다.

제9도는 매트릭스로서 특징지워지며, DC데이타에 대하거나 비교되는 MALS 데이타를 도시한다.

제10도는 대수 MALS 대 DC의 매트릭스를 나타낸다.

양 경우에 있어서, 데이타는 단지 척도의 차이만 있을 뿐, 동일한 정보를 담고 있다.

5개의 백혈구 모집단은 다음과 같이 구분된다; 호중구(302), 호산구(303), 단구(306), 임파구(307) 및 호염기구(308). 2개의 실선(304) 및 (305)은 제7도 및 제8도에서의 수직선에 해당한다.

제12도는 RLS의 히스토그램을 나타내며, MALS의 대수를 DC에 의하여 나눔으로써 얻어진다.

이의 데이타는 제7도 및 제8도의 데이타에 해당한다.

제11도는 RLS대 DC의 매트릭스를 나타내며, 데이타는 제9도 및 제10도의 데이타에 대응한다.

MALS 데이타를 회전하면 제12도에서 나타낸 바와 같이 3개의 피이크(301), (302) 및 (303) 사이의 구별을 보다 양호하게 한다.

제11도 및 제12도에서 나타낸 점선(315) 및 (316)들은, 모집단 사이의 개선된 구분선이며, 비율기능을 도시하는데 도움이 되도록 제10도에도 나타내어져 있다.

제 13 도는 대수 MALS대 RF의 매트릭스를 나타낸다.

5개의 백혈구의 모집단들은 제9도, 제10도 및 제11도에 나타낸 바와 같이 구별될 수 있으며, 하나의 주된 차이점만 제외하고는 동일하다.

즉, 호염기구(308)들은 제9도, 제10도 및 제11도에서 보다 임파구(307)로부터 확실하게 분리된다.

제14도는 RF대 DC의 매트릭스를 나타낸다. 4개의 백혈구 모집단은 다음과 같이 구별된다; 단구(306), 임파구(307), 호염기구(308) 및 호중구와 호산구로 구성된 군(309).

DC는 세포볼륨을 측정하고, RF 측정은 DC에 현저하게 관계되어 있으며, DC에 의하여 RF을 나눔으로써, 볼륨에 독립적이며 세포의 내부 도전도에 관계된 불투명도를 산출한다.

제15도는 불투명도 대 DC의 매트릭스를 나타내며, 제14도에서 나타낸 바와 같이 4개의 동일한 모집단을 포함하지만, 상이한 척도로 되어 있다.

모집단들이 제15도에서 선(322)에 의하여 나타낸 바와 같이 불투명도에 의하여 2개의 군으로 나뉘어지는 반면, 제14도에서 나타낸 바와 같이, 사선으로 그려진 동등-불투명도선(322)에 따라, RF 또는 DC만으로는 동일한 구분이 이루어질 수 없다는 점은 특히 흥미있다.

선(322)의 용도는 이하에서 설명한다.

제12도에서 선(315)에 의하여 표시된 것보다 작은 값에 대한 RLS의 게이팅 및 불투명도에 DC의 매트릭스의 생성은, 제16도에서 나타낸 데이타를 산출한다.

제16도에는, 제12도의 선(315)의 왼쪽에서 나타낸 백혈구 모집단들만이 나타내어진다; 즉, 단구(306), 임파구(307) 및 호염기구(308)이다.

수평점선(314)은 다른 2개의 모집단(307)-(308)으로부터 단구(306)를 분리한다. 실선(322)은 호염기구(308)로부터 임파구(307)를 분리한다.

이하의 내용은 선(314) 및 (322)를 구하는 방법이다.

제17도에 있어서, 제16도의 데이타를 위한 DC의 히스토그램은 2개의 그룹을 포함하는 2개의 피이크를 나타낸다; 즉, 단구(306) 및 임파구와 호염기군(110)이다.

이러한 데이타는 제12도에서 선(315)에 의하여 나타낸 것보다 작은 양에 대한 RLS를 게이팅하고, 불투명도 대 DC의 매트릭스를 생성함으로써 얻어진다.

이들 2피이크 사이의 골짜기부는 제17도에서의 점선(314)에 의하여 확인된다. 선(314)은 제10도, 제11도 및 제16도에서도 나타난다. 제17도에 있어서, 비정상적인 소량의 임파구에 대응하는 피이크(330)는 임파구 더하기 호염기구 피이크(310)의 왼쪽에서 발견될 수 있으며, 선(334)에 의하여 분리된다.

제11도로 돌아가서, 선(314)보다 소량에 대한 DC의 게이팅 및 선(315)보다 소량에 대한 RLS의 게이팅, 또한 불투명도의 히스토그램을 생성함으로써, 제18도를 얻을 수 있으며, 여기서는 다음의 2피이크를 나타낸다; 임파구(307) 및 호염기구(308)가 그것이며, 선(322)이 이들을 분리한다.

비정상적인 낮은 투명도의 임파구를 나타내는 제 3 의 피이크(322)는, 정상적인 임파구(307)의 왼쪽에서 발견될 수 있으며, 선(340)에 의하여 분리된다.

제19도는 모든 백혈구에 대한 RLS대 DC의 매트릭스를 나타낸다.

이 도면에는 제11도에서 나타낸 모든 모집단이 포함되며, 비정상적인 경우에서만 나타나는 여분의 백혈구 모집단을 포함한다; 호중구(302)와 부분적으로 중첩되는 미숙한 과립구(312); 선(334)에 의하여 보통의 임파구(307)로부터 분리되는 소량의 임파구(330); 고광산탄 임파구, 손상된 호중구, 또는 이들 세포형의 양자로 구성되는 모집단 또는 군(324)이 그것이며, 선(336)에 의하여 통상의 호중구(302)로부터 구분된다.

제19도에서 나타낸 바과 같이, 불투명도 대 DC의 매트릭스를 생성하는 반면, 선(315) 및 (316)의 값 사이의 RLS를 게이팅하면, 제20도에서 나타낸 바와 같이, 이하와 같은 모집단을 산출한다; 통상의 성숙한 호중구(302); 미숙한 과립구(312); 고광산탄 임파구(326); 및 손상된 호중구(328).

선(336)에 의하여 정상적인 호중구(302)로부터 분리하고, 각각은 선(338)에 의하여 분리되는 마지막 2개의 모집단은, 제19도에서 하나의 모집단(324)으로 나타난다.

제24도는 불투명도 대 DC의 매트릭스를 나타내며, 제19도에서 나타낸 바와 같이, 선(315) 보다 적은양에 대한 RLS의 게이팅을 나타낸다.

실선으로 나타낸 것은 다음과 같은 정상적인 모집단들이다; 임파구(307), 호염기구(308) 및 단구(306)이며, 이둘은 점선(314)에 의하여 처음 2개의 모집단으로부터 구별된다.

이러한 데이타는 제16도에서 나타낸 데이타와 등가이다. 점선으로 나타낸 것은 2개의 이상적인 모집단으로서; 선(334)에 의하여 다른 모든 모집단들로부터 분리되는 소량의 임파구(330)와; 제19도에서의 정성적인 임파구(307)와 완전히 중복되는 낮은 불투명의 임파구(332)이다.

제5도 및 제5도의 A에서 나타낸 정치의 실시예의 수단에 의하여 구해진, 제7도 내지 제19도에서 나타낸 데이타의 상술한 내용으로부터 DC, RF 및 MALS를 사용하여 백혈구를 적어도 5개의 모집단으로 분류하는 방법은 다음과 같다;

1. RLS의 히스토그램, 제12도를 만들고, 분리선(315) 및 (316)을 구한다. 호중구(302) 및 호산구(303)을 계산한다.

2. 선(315) 보다 적은 값에 대한 RLS을 게이팅한다; DC 히스토그램, 제17도를 만들고, 분리선(314)을 구한다. 단구(306)를 계산한다. 만약 존재한다면, 소용적 분리선(314)을 찾고 비정상적인 소량 임파구(330)를 계산한다.

3. 제12도에서의 선(315)보다 적은 양에 대한 RLS를 게이팅하고, 제17도에서 나타낸 바와 같이 선(334) 및 (314)사이의 값에 대한 DC를 게이팅한다; 다음에 불투명도 히스토그램 제18도를 만든다. 분리선(322)을 구하고 임파구(307) 및 호염기구(308)를 계산한다. 선(340)을 찾고, 만약 존재한다면, 비정상적으로 낮은 불투명임파구(332)를 계산한다. 다른 방법으로, 임파구 피이크(307)에 대한 가우스분포 또는 정규분포곡선을 적용한다; 피이크(307)를 제거한다; 임파구(307), 호염기구(308) 및 낮은 불투명도 임파구(332)를 계산한다.

4. 제19도의 선(315) 및 (316) 사이의 값에 대한 RLS를 게이팅 한다; 도시하지 않은 DC 히스토그램을 만든다; 제19도에서 나타낸 바와 같이, 다른 비정상 모집단(324)으로부터 정상 호중구(302)를 분리하는 선(336)을 구한다.

5. 선(315) 빛 (316) 사이의 값에 대한 RLS를 게이팅하고, 제19도의 선(336) 보다 큰 값에 대한 DC를 게이팅 한다; 도시하지 않았으나, 불투명도 히스토그램을 만든다; 제10도에서 나타낸 바와 같이, 정상적 호중구 피이크(302)를 식별하고, 왼쪽에서 비정상적인 미숙한 과립구(312)를 계산한다.

6. 선(315) 및 (316) 사이의 값에 대한 RLS틀 케이팅하고, 제19도의 선(336) 보다 작은 값에 대한 DC를 게이팅 한다; 도시하지 않았으나, 불투명도 히스토그램을 만든다; 제20도에서 나타낸 바와 같이, 왼쪽에 고 광산란 임파구를 계산하고, 오른쪽에 손상된 호중구(328)를 계산하며, 선(338)을 구한다.

제5도 및 제5도의 A의 또다른 실시예는 MALS, DC 및 RLS를 사용한다. 이 경우에는, 전원유니트(102)는 DC 전원(103) 및 DC 프리앰프(109)만으로 구성된다.

따라서, 발진-검출기(101), RF 프리앰프(107), 결합회로(105), 앰프(122), 피이크 탐지기(128), 제산회로(154), 아날로그-디지탈 변환기(136) 및 (172)들은 RF와 관계되므로 사용되지 않는다.

상술한 바와 같이 제11도는 5개의 백혈구 모집단과 함께 RLS대 DC의 매트릭스를 나타낸다.

DC 및 MALS를 사용하여, 상기 백혈구를 최소한 5개의 모집단으로 구분하는 방법은 다음과 같다;

1. RLS의 히스토그램, 제12도를 만들고, 분리선(315) 및 (316)을 구한다. 호중구(302) 및 호산구(303)를 계산한다.

2. 선(315) 보다 작은 값에 대한 RLS를 게이팅하고, DC 히스토그램, 제17도를 만들고, 분리선(314)을 구한다. 단구(306)를 계산한다.

3. 선(315) 보다 작은 값에 대한 RLS와, 선(314) 보다 적은 값에 대한 DC를 게이팅하고, RLS 히스토그램(도시하시 않음)을 만든다. 임파구 및 호염기구를 가려내고 계산한다.

제5도 및 제5도의 A의 또 다른 실시예에 있어서는, 단지 RF 및 MALS가 사용된다. 모든 DC 관련성분; DC 전원(103), DC 프리앰프(109), 앰프(124), 피이크검출기(130), 제산회로(156), 아날로그 함수회로(151) 및 아날로그-디지달 변환기(134), (172), (174)는 생략 된다.

제13도에서의 MALS 대 RF 매트릭스의 대수는 5개의 백혈구 모집단을 나타낸다; 임파구(307), 호염기구(308), 단구(306), 호중구(302) 및 호산구(303).

이하의 기술은 제6도의 제1변형예에서 기술된 시스템 블록 다이어그램에 관한 것으로서, DC 또는 RF 측정기구나 코울터형 구멍을 필요로하지 않고, 다만 광학적 측정기구단으로 구성되는 세포화학류 시스템에 관계되며, 점선으로 둘러싸인 구성부분을 포함되지 않는다.

제6도 및 제6도의 A의 실시예에 있어서는 단지 협각 광산란 및 MALS의 대수만을 이용하여, 4개의 모집단 백혈구 차분계산치를 구할 수 있다.

제21도에 있어서, 대수 MALS대 협각 광산란 NALS의 매트릭스는 4개의 모집단을 확실하게 보여준다; 임파구(307), 단구(306), 호중구(302) 및 호산구(303); 5번째 모집단, 호염기구는 임파구(307) 및 단구(306)와 중복된다.

오직 MALS 및 축광손실만을 이용한 제6도 및 제6도의 A의 또다른 실시예는 대수 MALS 대 ALL의 매트릭스를 만들어내며, 제22도에서 나타낸 바와 같이, 5개의 백혈구 모집단이 구별될 수 있다; 임파구(307), 호염기구(308), 단구(306), 호중구(302) 및 호산구(303).

게이팅 선(304) 및 (317)은, 다른 세포형으로부터 호중구(302)를 구분하도록 채택될 수 있다. 선(317)은, 대수 MALS를 ALL에 의하여 나누는 것에 기초한 데이타의 회전에 의하여 찾을 수 있다.

제15도 LS 및 ALL만을 이용한, 제6도 및 제6도의 A의 또다른 실시예에 있어서는, 제23도의 전형이 만들어진다.

제23도는 15도 LS대 ALL의 매트릭스를 나타낸다. 5개의 백혈구 모집단이 탐지되며, 한개의 예외만 제외하고는, 제22도와 유사한 형상이 나타단다; 즉, 제23도에서의 호중구와 호산구 사이의 분리는 제22도에서와 같이 양호하지 않다. 15도 LS 또는 ALL은 호중구(302) 및 호산구(303) 사이에서 그들 자체를 구별할 수 없다.

양 측정기구의 조합이 필요하다. 게이팅 또는 분리선(318)으로서 가장 좋은 것은 사선으로서, 15도 LS를 ALL로 나눔으로써 구해진다.

게이팅선(319)은 호중구(302) 및 3개의 다른 세포 모집단(306), (307) 및 (308) 사이의 분리를 제공하며, MALS 또는 대수 MALS의 선(304)에 유사하다.

이하의 기술은, 제6도 및 제6도의 A에서 나타낸 전체 시스템으로 얻어지는 데이타에 관한 것이다.

적어도 DC, MALS 및 ALL을 채용한, 제6도 및 제6도의 A에서 나타낸 바와 같은 시스템에 있어서는, 제11도, 제25도, 제26도 및 제27도를 참조한, 백혈구를 5개의 모집단으로 구분하는 방법이 기술된다. 제25도는 ALL내 DC의 매트릭스를 나타낸다.

ALL은 DC와 깊은 관계에 있으므로, 단지 3개의 백혈구 모집단만이 구별된다; 임파구(307), 호염기구(308) 및 중복된 단구, 호중구, 호산구(320).

이들 2 측정치의 비율은 독립적인 파라미터를 산출한다.

제26도는 ALL/DC대 DC의 매트릭스를 나타내며, 방금 상술한 것과 동일한 모집단들을 나타내지만, 더 큰 분리, 특히 임파구(307) 및 호염기구(308) 사이의 분리를 산출하기 위하여 회전한다.

상술한 바와 같이, 호중구(302) 및 호산구(303)들은 제11도에 나타낸 RLS대 DC에 계산되고 가리어질 수 있다.

제17도에서 나타낸 바와 같이, DC 히스토그램은, 제11도에서 나타낸 선(315) 보다 작은 값에 대한 RLS를 게이팅함으로써 만들어진다.

이러한 DC 히스토그램에 있어서, 임파구 및 호염기구를 포함하는 군(310)은 선(314)에 의하여 단구(306)로부터 분리된다.

단구가 계산된다. 최종적으로, 선(315) 보다 작은 값에 대한 RLS 및 선(314) 보다 작은 값에 대한 DC의 게이팅에 의하여, 제11도에서 나타낸 바와 같이, 제27도에 나타낸 ALL/DC의 히스토그램이 2개의 모집단을 산출한다; 임파구(307) 및 호염기구(308).

이상에서, 생물학적 세포 모집단의 5부분의 구분을 분석을 제공하고, 진료 목적으로 히스토그램 및 매트릭스와 같은, 모집단에 해당하는 데이타를 표시하기 위한, 전자-광학적 장치 및 순전히 광학적인 장치를 제공하는 새롭고, 신규하며, 분명한 기술 및 장치가 기술되었다.

본 명세서 내에서 기술된 도시된 실시예들은 본 발명의 원리들의 예를 구성하는 것임을 알 수 있으며, 본 발명의 범위를 벗어나지 않고서, 당해기술 분야의 통상의 전문가에 있어서, 여러가지 선택이 가능하다.

Claims (15)

  1. 광축에 따라서 또한 액체통로로 광을 투과함과 함께 이 유체통로로 혈액샘플을 동시에 흘리고; 혈액샘플의 각 셀에 의하며 산란된 광의 일부분을 감지하고, 이 광감지결과를 전기적으로 처리하여 배혈구식별데이타를 발생하도록 하고, 개별의 셀 광산란에 기초하여 식별을 행하도록 한 혈액샘플중의 적어도 1종의 백혈구부 집단을 식별하는 다중-부분식별 분석 방법에 있어서, 상기 감지단계는 염색되어 있지 아니한 호산구를 포함하는 백혈구에 의하어 광축에 대하여 10°내지 70°의 포착각내에서 작동시켜, 상기 전기처리 단계에 의하여 적어도 호산구부집단을 나타내는 데이타를 생기도록 하며, 상기 감지단계로부터 15°광산란 신호정보(15°LS) 및 축방향의 광손실신호정보(ALL)를 얻음과 함께 이들 광산란 신호정보(15°LS)와 광손실 신호정보(ALL)를 비교하고, 상기 전기처리 단계에 의하여 5개의 백혈구부 집단을 식별하는 데이터를 발생시키도록 한 것을 특징으로 하는 다중-부분식별분석방법.
  2. 제1항에 있어서, 상기 혈액샘플을 흘리는 단계에는, 코울터볼륨DC 신호정보(DC)를 발생하도록 하고, 이 신호정보(DC)를 상기 광산란감시에서 얻어진 신호정보와 비교하고, 상기 전기처리에 의하여 5개의 개별의 백혈구부집단을 식별하는 데이타를 생기도록 한 것을 특징으로 하는 다중-부분식별분석방법.
  3. 제2항에 있어서, 상기플로우실로 혈액샘플을 흘리기 전에, 이 혈액샘플을 적혈구용균제와 혼합하도록 한 것을 특징으로 하는 다중-부분식별분석방법.
  4. 제1항에 있어서, 상기 감지단계에 의하여 중각 광산란(MALS) 신호데이타를 발생하도록 한 것을 특징으로 하는 다중-부분식별분석방법.
  5. 제4항에 있어서, 상기 처리 단계에 의하여, MALS신호 데이타에 의하여 중간광산란 신호정보의 대수(log MALS)를 연산하여 백혈구를 3개의 개별의 군으로 분류하도록 한 것을 특징으로 하는 다중-부분식별분석방법.
  6. 제5항에 있어서, 코울터볼륨 DC신호정보(DC)를 발생하고, 이 정보(DC)에 의하여 MALS의 대수를 뺄셈하여 회전광산란 신호정보(RLS)를 발생하도록 한 것을 특징으로 하는 다중-부분식별분석방법.
  7. 제6항에 있어서, 상기 RLS정보와 상기 DC정보를 비교하고, 상기 처리단계에 의하여 5개의 백혈구부집단을 식별하는 데이타를 발생시키도록 한 것을 특징으로 하는 다중-부분식별분석방법.
  8. 제5항에 있어서, 코울터볼륨 DC신호정보(DC)를 발생함과 함께 MALS의 대수와 DC정보를 비교하고, 상기 처리단계에 의하여 5개의 백혈구부집단을 식별하는 데이타를 발생시키도록 한 것을 특징으로 하는 다중-부분식별분석방법.
  9. 제5항에 있어서, 코울터 RF 신호정보(RF)를 발생함과 함께 MALS의 대수와 RF 정보를 비교하고, 상기 처리단계에 의하여 5개의 백혈구부집단을 식별하는 데이타를 발생시키도록 한 것을 특징으로하는 다중-부분식별분석방법.
  10. 제5항에 있어서, 상기 감지단계로부터 협각 광산란 신호정보(MALS)를 얻음과 함께 그 후 상기 MALS의 대수와 MALS 정보를 비교하고, 상기 처리단계에 의하여 4개의 백혈구부집단을 식별하는 데이타를 발생시키도록 한 것을 특징으로 하는 다중-부분식별분석방법.
  11. 제5항에 있어서, 상기 감지단계로부터 축방향의 광손실신호정보(ALL)를 얻음과 함께 그 후 상기 MALS의 대수와 ALL 정보를 비교하고, 상기 처리단계에 의하여 5개의 백혈구부집단을 식별하는 데이터를 발생시키도록 한 것을 특징으로 하는 다중-부분식별분석방법.
  12. 제1항에 있어서, 상기 감지단계로부터 축방향 광손실 신호정보(ALL)를 얻고, 코울터볼륨 DC신호정보(DC)를 발생하고, 정보 ALL를 정보 DC로 뺄셈하고, 상기 처리단계에 의하여 2개의 백혈구부 집단을 식별하는 데이타를 발생시키도록 한 것을 특징으로 하는 다중-부분식별분석방법.
  13. 제1항에 있어서, 상기 플로우셀 통로에 코울터볼륨 DC 신호(DC) 및 코울터 RF 신호(RF)를 동시에 공급하고, DC신호파 RF신호를 비교하고, 상기 처리단계에 의하여 4개의 백혈구부집단을 식별하는 데이타를 발생시키도록 한 것을 특징으로 하는 다중-부분식별분석방법.
  14. 제13항에 있어서, 상기 RF신호를 상기 DC신호에 의하여 전가적으로 뺄셈하여 셀에는 무관계하게, 혈구의 내부도전률에 관련한 불투명신호를 발생하고, 이 불투명신호와 상기 DC신호를 비교하고, 상기 처리단계에 의하여 4개의 백혈구부집단의 식별을 증강하는 데이타를 발생시키도록한 것을 특징으로 하는 다중-부분식별분석방법.
  15. 제1항, 제4항 또는 제13항 중의 어느 한 항에 있어서, 백혈구를 조건부로 하여 이들이 통로를 흘러가면서 살아있는 상태로 근사하도록 한 것을 특징으로 하는 다중-부분식별분석방법.
KR1019880701385A 1987-03-13 1988-03-04 광산란 기술을 이용한 다중-부분식별 분석 방법 KR970007077B1 (ko)

Priority Applications (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US2544287A true 1987-03-13 1987-03-13
US12995487A true 1987-12-04 1987-12-04
US129954 1987-12-04
US025,442 1987-12-04
US129,954 1987-12-04
PCT/US1988/000753 WO1988007198A1 (en) 1987-03-13 1988-03-14 Multi-part differential analyzing apparatus utilizing light scatter techniques

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR890700829A KR890700829A (ko) 1989-04-27
KR970007077B1 true KR970007077B1 (ko) 1997-05-02

Family

ID=26699741

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1019880701385A KR970007077B1 (ko) 1987-03-13 1988-03-04 광산란 기술을 이용한 다중-부분식별 분석 방법

Country Status (11)

Country Link
US (1) US5125737A (ko)
EP (1) EP0311655B1 (ko)
JP (1) JP2505873B2 (ko)
KR (1) KR970007077B1 (ko)
CN (1) CN1014742B (ko)
AU (2) AU602207B2 (ko)
CA (1) CA1315125C (ko)
DE (1) DE3852270T2 (ko)
ES (1) ES2009188A6 (ko)
IL (1) IL85671A (ko)
WO (1) WO1988007198A1 (ko)

Families Citing this family (137)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP3197561B2 (ja) * 1990-11-23 2001-08-13 クールター コーポレイション 光散乱法を用いた微小細胞のスクリーニング法及び装置
US5247188A (en) * 1992-01-23 1993-09-21 High Yield Technology Concentrator funnel for vacuum line particle monitors
US6509192B1 (en) * 1992-02-24 2003-01-21 Coulter International Corp. Quality control method
US5371585A (en) * 1992-11-10 1994-12-06 Pacific Scientific Company Particle detecting instrument with sapphire detecting cell defining a rectangular flow path
JP2716267B2 (ja) * 1993-02-25 1998-02-18 アボツト・ラボラトリーズ 全血試料を高速溶解するための多目的試薬系
US5534999A (en) * 1993-03-05 1996-07-09 Shinmikuni Kikai Ltd. Monitoring sub-micron particles
DE69432410T2 (de) * 1993-05-14 2004-03-04 Coulter International Corp., Miami Retikulozyt bestimmungsverfahren und geraet, das lichtstreuungstechniken verwendet
US5576185A (en) 1994-04-15 1996-11-19 Coulter Corporation Method of positive or negative selection of a population or subpopulation of a sample utilizing particles and gravity sedimentation
JP3355038B2 (ja) * 1994-08-03 2002-12-09 シスメックス株式会社 白血球分類方法
JP3375203B2 (ja) * 1994-08-08 2003-02-10 シスメックス株式会社 細胞分析装置
US5559037A (en) * 1994-12-15 1996-09-24 Abbott Laboratories Method for rapid and simultaneous analysis of nucleated red blood cells
US5879900A (en) * 1994-12-15 1999-03-09 Abbott Laboratories Method for simultaneous analysis of cell viability, nucleated red blood cells and white blood cell differentials
US5686308A (en) * 1995-06-08 1997-11-11 Coulter Corporation Reagent and method for differential determination of leukocytes in blood
US5843608A (en) * 1995-06-08 1998-12-01 Coulter International Corp. Reagent and method for differential determination of leukocytes in blood
US5882933A (en) * 1995-06-08 1999-03-16 Coulter International Corp. Method for determination of leukocytes and hemoglobin concentration in blood
US5786224A (en) * 1995-06-29 1998-07-28 Coulter Corporation Reagent and method for differential determination of leukocytes in blood
US5817518A (en) * 1995-12-18 1998-10-06 Coulter International Corp. Reagent and method for differential determination of leukocytes in blood
US5686309A (en) * 1996-01-19 1997-11-11 Coulter International Corp. Method and apparatus for determination of hemoglobin content of individual red blood cells
JP4136017B2 (ja) * 1996-09-19 2008-08-20 シスメックス株式会社 粒子分析装置
US6175227B1 (en) 1997-07-03 2001-01-16 Coulter International Corp. Potential-sensing method and apparatus for sensing and characterizing particles by the Coulter principle
US5945293A (en) * 1997-10-09 1999-08-31 Coulter International Corp. Protein-colloidal metal-aminodextran coated particle and methods of preparation and use
US5874311A (en) * 1997-11-21 1999-02-23 Coulter International Corp. Method for differentiation of reticulocytes in blood
US5917584A (en) * 1997-11-21 1999-06-29 Coulter International Corp. Method for differentiation of nucleated red blood cells
US5874310A (en) * 1997-11-21 1999-02-23 Coulter International Corp. Method for differentiation of nucleated red blood cells
US6149867A (en) 1997-12-31 2000-11-21 Xy, Inc. Sheath fluids and collection systems for sex-specific cytometer sorting of sperm
US6254834B1 (en) * 1998-03-10 2001-07-03 Large Scale Proteomics Corp. Detection and characterization of microorganisms
FR2779296B1 (fr) * 1998-06-02 2000-08-18 France Telecom Dispositif pour l'emission ou la reception d'un signal crypte par chaos deterministe
JP4101994B2 (ja) * 1999-01-21 2008-06-18 シスメックス株式会社 粒子分析装置および自動粒子分析方法
US6228652B1 (en) 1999-02-16 2001-05-08 Coulter International Corp. Method and apparatus for analyzing cells in a whole blood sample
US6507400B1 (en) 1999-02-27 2003-01-14 Mwi, Inc. Optical system for multi-part differential particle discrimination and an apparatus using the same
JP3817091B2 (ja) * 1999-07-02 2006-08-30 テルモ株式会社 細胞数測定装置
US6232125B1 (en) * 1999-08-09 2001-05-15 Coulter International Corp. Method and apparatus for differentiating and enumerating leukocytes
US6323632B1 (en) * 1999-08-13 2001-11-27 Coulter International Corp. Solid state RF oscillator-detector for flow cytometer
US6646742B1 (en) 2000-02-19 2003-11-11 Mwi, Inc. Optical device and method for multi-angle laser light scatter
DK2258170T3 (en) 2000-05-09 2017-10-16 Xy Llc X-chromosome-bearing and Y-chromosome-bearing populations of high purity spermatozoa
US20060263888A1 (en) * 2000-06-02 2006-11-23 Honeywell International Inc. Differential white blood count on a disposable card
US6784981B1 (en) * 2000-06-02 2004-08-31 Idexx Laboratories, Inc. Flow cytometry-based hematology system
JP4708605B2 (ja) * 2000-07-24 2011-06-22 シスメックス株式会社 粒子分析装置とその粒子分画方法
US7283223B2 (en) * 2002-08-21 2007-10-16 Honeywell International Inc. Cytometer having telecentric optics
US6597438B1 (en) * 2000-08-02 2003-07-22 Honeywell International Inc. Portable flow cytometry
US8354647B2 (en) * 2000-11-08 2013-01-15 University Of North Florida Photoelectric chemical sensor and sensing method utilizing interfacial photo-voltages
BRPI0115792B1 (pt) 2000-11-29 2020-05-05 Colorado State Univ sistema para separação de espermatozóides congelados/descongelados em populações portadoras de cromossomo-x e portadoras de cromossomo-y
US20030048433A1 (en) * 2001-06-01 2003-03-13 Jean-Marie Desjonqueres Cytometer signal processing system and method
EP1412740B1 (en) * 2001-07-27 2015-07-08 Beckman Coulter, Inc. Method for measurement of nucleated red blood cells
US6916658B2 (en) * 2001-07-27 2005-07-12 Beckman Coulter, Inc. Method for measurement of immature granulocytes
US6472215B1 (en) 2001-07-27 2002-10-29 Coulter International Corp. Method of analyzing nucleated red blood cells in a blood sample
US6774995B2 (en) 2001-08-03 2004-08-10 Pointsource Technologies, Llc Identification of particles in fluid
AUPR846501A0 (en) * 2001-10-26 2001-11-15 Btf Pty Ltd A cytometer
US6590652B2 (en) 2001-11-02 2003-07-08 Pointsource Technologies, Inc. Flow through light scattering device
WO2003040703A1 (en) * 2001-11-02 2003-05-15 Pointsource Technologies, Llc. Light scatter detection
US6573992B1 (en) 2001-11-13 2003-06-03 Pointsource Technologies, Llc Plano convex fluid carrier for scattering correction
US6519033B1 (en) 2001-11-19 2003-02-11 Point Source Technologies, Llc Identification of particles in fluid
US6628386B2 (en) 2001-12-12 2003-09-30 Pointsource Technologies, Llc Particle detection beam
US6930769B1 (en) 2002-03-21 2005-08-16 Pointsource Technologies, Llc Optical sensor module tester
US7057724B1 (en) 2002-03-21 2006-06-06 Institute Of Critical Care Medicine Particulate info to field units
US6972424B1 (en) 2002-04-16 2005-12-06 Pointsource Technologies, Llc High detection rate particle identifier
US6710874B2 (en) * 2002-07-05 2004-03-23 Rashid Mavliev Method and apparatus for detecting individual particles in a flowable sample
US6798508B2 (en) * 2002-08-23 2004-09-28 Coulter International Corp. Fiber optic apparatus for detecting light scatter to differentiate blood cells and the like
US6743634B2 (en) * 2002-08-23 2004-06-01 Coulter International Corp. Method and apparatus for differentiating blood cells using back-scatter
US7053783B2 (en) * 2002-12-18 2006-05-30 Biovigilant Systems, Inc. Pathogen detector system and method
US8323984B2 (en) * 2002-12-19 2012-12-04 Beckman Coulter, Inc. Method and apparatus for mixing blood samples for cell analysis
EP2308420B1 (en) 2003-03-28 2016-10-05 Inguran, LLC Flow cytometric system for providing sex-sorted animal sperm
US7092078B2 (en) * 2003-03-31 2006-08-15 Nihon Kohden Corporation Flow cytometer for classifying leukocytes and method for determining detection angle range of the same
US6819421B1 (en) 2003-04-11 2004-11-16 Point Source Technologies, Llc Detection of new species of particles
DE10341520A1 (de) * 2003-09-09 2005-04-07 Schupp, Wolfgang, Dr. Verfahren und Vorrichtung zur Durchführung einer Lichtstreuung
US7198953B2 (en) * 2003-10-12 2007-04-03 Beckman Coulter, Inc. Method of using a reference control composition for measurement of nucleated red blood cells
US7195919B2 (en) * 2003-12-19 2007-03-27 Beckman Coulter, Inc. Hematology controls for reticulocytes and nucleated red blood cells
US7008792B2 (en) * 2004-02-10 2006-03-07 Beckman Coulter, Inc. Method of measurement of nucleated red blood cells
US7208319B2 (en) * 2004-02-10 2007-04-24 Beckman Coulter, Inc. Method of measurement of nucleated red blood cells
US9297737B2 (en) * 2004-03-06 2016-03-29 Michael Trainer Methods and apparatus for determining characteristics of particles
US10620105B2 (en) * 2004-03-06 2020-04-14 Michael Trainer Methods and apparatus for determining characteristics of particles from scattered light
US8634072B2 (en) * 2004-03-06 2014-01-21 Michael Trainer Methods and apparatus for determining characteristics of particles
EP1738163A4 (en) * 2004-04-07 2008-01-23 Beckman Coulter Inc Reference control containing a nucleated red blood cell component
US7625712B2 (en) 2004-05-21 2009-12-01 Beckman Coulter, Inc. Method for a fully automated monoclonal antibody-based extended differential
US7674598B2 (en) * 2004-05-21 2010-03-09 Beckman Coulter, Inc. Method for a fully automated monoclonal antibody-based extended differential
US7075647B2 (en) * 2004-06-30 2006-07-11 Beckman Coulter, Inc. Back-scatter detection in flow cytometers
EP1784912A4 (en) * 2004-07-30 2012-03-14 Biovigilant Systems Inc Pathogen and particle detector system and method
US7256891B2 (en) * 2004-08-23 2007-08-14 Beckman Coulter, Inc. Sensor alignment apparatus for an analysis system
US7616311B2 (en) * 2005-05-02 2009-11-10 Jmar Llc Systems and methods for a multiple angle light scattering (MALS) instrument having two-dimensional detector array
US7130046B2 (en) * 2004-09-27 2006-10-31 Honeywell International Inc. Data frame selection for cytometer analysis
WO2006135902A2 (en) * 2005-06-13 2006-12-21 Jmar Research, Inc. Systems and methods for a multiple angle light scattering (mals) instrument having two-dimensional dectector array
EP1907818A4 (en) * 2005-07-15 2012-03-14 Biovigilant Systems Inc Pathogen and particle detector system and method
US7482165B2 (en) 2005-08-24 2009-01-27 Beckman Coulter, Inc. Method of preventing white blood cell interferences to red blood cell measurements of a blood sample
US7609369B2 (en) * 2005-09-24 2009-10-27 Beckman Coulter, Inc. Methods of detection of iron deficiency and hemochromatosis
US7586589B2 (en) * 2005-09-24 2009-09-08 Beckman Coulter, Inc. Methods of determination of responsiveness to erythropoietin treatment
JP4822562B2 (ja) * 2006-01-20 2011-11-24 ベックマン コールター, インコーポレイテッド 低ヘモグロビン濃度細胞百分率および鉄欠乏の検出における使用方法
US7354767B2 (en) * 2006-03-16 2008-04-08 Beckman Coulter, Inc. Reference control composition containing a nucleated red blood cell component made of non-nucleated blood cells
WO2008061073A2 (en) 2006-11-14 2008-05-22 Beckman Coulter, Inc. Hematology linearity control composition system and method of use
US7804594B2 (en) * 2006-12-29 2010-09-28 Abbott Laboratories, Inc. Method and apparatus for rapidly counting and identifying biological particles in a flow stream
US7867778B2 (en) * 2007-02-23 2011-01-11 Visiongate, Inc. Fluid focusing for positional control of a specimen for 3-D imaging
WO2009058876A1 (en) * 2007-10-29 2009-05-07 Beckman Coulter, Inc. Method for a rapid antibody-based analysis of platelet populations
US8159670B2 (en) * 2007-11-05 2012-04-17 Abbott Laboratories Method and apparatus for rapidly counting and identifying biological particles in a flow stream
US8628976B2 (en) 2007-12-03 2014-01-14 Azbil BioVigilant, Inc. Method for the detection of biologic particle contamination
US8143600B2 (en) 2008-02-18 2012-03-27 Visiongate, Inc. 3D imaging of live cells with ultraviolet radiation
US7738101B2 (en) * 2008-07-08 2010-06-15 Rashid Mavliev Systems and methods for in-line monitoring of particles in opaque flows
US8094299B2 (en) * 2008-07-24 2012-01-10 Beckman Coulter, Inc. Transducer module
US7940105B2 (en) * 2008-08-08 2011-05-10 Beckman Coulter, Inc. High-resolution parametric signal restoration
US8581927B2 (en) 2008-11-04 2013-11-12 Beckman Coulter, Inc. Multidimensional particle analysis data cluster reconstruction
PL2356465T3 (pl) 2008-11-13 2015-04-30 Beckman Coulter Inc Method for correcting molecular interference in the determination of hemoglobin
EP2356426B1 (en) * 2008-11-14 2020-04-15 Beckman Coulter, Inc. Monolithic optical flow cells and method of manufacture
US8254023B2 (en) * 2009-02-23 2012-08-28 Visiongate, Inc. Optical tomography system with high-speed scanner
US20100329927A1 (en) * 2009-06-26 2010-12-30 Perez Carlos A Pipelining Assembly For A Blood Analyzing Instrument
JP5643497B2 (ja) * 2009-08-31 2014-12-17 株式会社堀場製作所 散乱光を用いた粒子測定装置
CN102087197B (zh) * 2009-12-08 2014-06-18 龚维燕 全功能血液分析仪器中库尔特微孔的共轴照明方法及其分析仪器
US8906308B2 (en) 2010-01-15 2014-12-09 Abbott Laboratories Method for determining volume and hemoglobin content of individual red blood cells
JP5533055B2 (ja) 2010-03-10 2014-06-25 ソニー株式会社 光学的測定装置及び光学的測定方法
FR2971337B1 (fr) * 2011-02-04 2013-03-01 Horiba Abx Sas DEVICE AND METHOD FOR MULTIPARAMETRIC MEASUREMENTS OF MICROPARTICLES IN A FLUID
BR112013025329A2 (pt) 2011-04-07 2016-12-13 Beckman Coulter Inc identify and enumerate prematurely granulated cells (ecgs)
CN103430009A (zh) * 2011-04-26 2013-12-04 贝克顿·迪金森公司 用于流式细胞术的轴向光损失传感器系统
KR20140050606A (ko) * 2011-05-13 2014-04-29 베크만 컬터, 인코포레이티드 혈액 기생충을 진단하기 위한 방법 및 장치
EP2798333A4 (en) * 2011-12-29 2016-02-10 Abbott Lab FLOW CYTOMETRY SYSTEMS AND METHOD FOR BLOCKING DIFFACTION PATTERNS
IN2014DN10974A (ko) 2012-07-05 2015-09-18 Beckman Coulter Inc
FR2993677B1 (fr) * 2012-07-18 2015-03-27 Valeo Etudes Electroniques Dispositif et procede d'emission d'un faisceau lumineux destine a former une image, systeme de projection et afficheur utilisant ledit dispositif
FR2993675B1 (fr) * 2012-07-18 2015-05-22 Valeo Etudes Electroniques Dispositif et procede d'emission d'un faisceau lumineux destine a former une image, systeme de projection et afficheur utilisant ledit dispositif
CN104704344A (zh) * 2012-08-13 2015-06-10 贝克曼考尔特公司 使用cpd数据进行白血病分类
KR20150091049A (ko) * 2012-11-30 2015-08-07 베크만 컬터, 인코포레이티드 Cpd 데이터를 이용한 결핵 선별검사
EP2937681B1 (en) * 2012-12-21 2019-12-18 Sony Corporation Particle detection device and particle detection method
CN104903699A (zh) 2012-12-31 2015-09-09 贝克曼考尔特公司 未成熟血小板的计数系统和方法
CN104755905B (zh) 2012-12-31 2018-07-03 贝克曼考尔特公司 具有凝集块校准的血小板计数的系统和方法
US9423336B2 (en) 2013-01-24 2016-08-23 Beckman Coulter, Inc. Systems and methods for particle sensing and characterization
EP2972209B1 (en) * 2013-03-15 2019-08-28 Beckman Coulter, Inc. Compound optical flow cells and method of manufacture and use
CN105324657B (zh) * 2013-03-15 2019-07-16 贝克曼考尔特公司 用于流式细胞仪的辐射光过滤
AU2014235403B2 (en) * 2013-03-15 2018-06-28 Beckman Coulter, Inc. Optics system for a flow cytometer
EP2997363A4 (en) 2013-05-13 2016-11-30 Chiranjit Deka Apparatus and methods for cellular analysis
CN104215562A (zh) * 2013-05-31 2014-12-17 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 粒子分析仪的光学系统
WO2016133760A1 (en) * 2015-02-18 2016-08-25 Becton, Dickinson And Company Optical detection systems and methods of using the same
CN108291863B (zh) 2015-10-02 2020-07-03 国家光学研究所 用于使用光散射技术进行个体颗粒尺寸测量的系统和方法
WO2017078672A1 (en) 2015-11-02 2017-05-11 Chiranjit Deka Light scatter based apparatus and methods for hematology analysis using only three detectors
BR112018014562A2 (pt) 2016-01-28 2018-12-11 Beckman Coulter Inc sistemas e métodos de detecção e diferenciação de infecção
US10197494B2 (en) * 2016-06-23 2019-02-05 Biocomp Instruments Inc. Flow cell and system for simultaneous measurement of absorbance and emission in a sample
US20190128906A1 (en) 2017-10-27 2019-05-02 Beckman Coulter, Inc. Hematology analyzers and methods of operation
WO2019204804A1 (en) 2018-04-20 2019-10-24 Beckman Coulter, Inc. Sepsis infection determination systems and methods
CN111989032A (zh) 2018-06-15 2020-11-24 拜克门寇尔特公司 存在母细胞标志时确定败血症的方法
CN109580550A (zh) * 2018-12-03 2019-04-05 迪瑞医疗科技股份有限公司 一种白细胞的分类处理方法及其装置
WO2020240755A1 (ja) * 2019-05-29 2020-12-03 株式会社島津製作所 光散乱検出装置
WO2021011356A1 (en) 2019-07-12 2021-01-21 Beckman Coulter, Inc. Systems and methods for evaluating immune response to infection
US20210011005A1 (en) * 2019-07-12 2021-01-14 Beckman Coulter, Inc. Systems and methods for evaluating immune response to infection

Family Cites Families (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2656508A (en) * 1949-08-27 1953-10-20 Wallace H Coulter Means for counting particles suspended in a fluid
US3502973A (en) * 1966-05-23 1970-03-24 Coulter Electronics Collating apparatus for pairs of electrical pulses produced by particle analyzing apparatus
US3502974A (en) * 1966-05-23 1970-03-24 Coulter Electronics Signal modulated apparatus for generating and detecting resistive and reactive changes in a modulated current path for particle classification and analysis
US3596035A (en) * 1969-05-13 1971-07-27 Mayflower Electronic Devices I High frequency dielectric heating apparatus
US3705771A (en) * 1970-01-14 1972-12-12 Bio Physics Systems Inc Photoanalysis apparatus
DE2044238A1 (ko) * 1970-09-07 1972-05-18 Masch Konstruktions Ges Mbh
FR2195907A5 (ko) * 1972-08-10 1974-03-08 Meric Jean Paul
US3883247A (en) * 1973-10-30 1975-05-13 Bio Physics Systems Inc Method for fluorescence analysis of white blood cells
US4178103A (en) * 1977-03-28 1979-12-11 Chromatix, Inc. Light scattering photometer and sample handling system therefor
US4577964A (en) * 1978-09-06 1986-03-25 Ortho Diagnostics, Inc. Apparatus and method for detecting platelets in whole blood
US4284412A (en) * 1979-07-13 1981-08-18 Ortho Diagnostics, Inc. Method and apparatus for automated identification and enumeration of specified blood cell subclasses
US4274741A (en) * 1979-09-26 1981-06-23 Compagnie Industrielle Des Lasers Device for determining the granulometric composition of a mixture of particles by diffraction of light
US4298836A (en) * 1979-11-23 1981-11-03 Coulter Electronics, Inc. Particle shape determination
US4348107A (en) * 1980-07-18 1982-09-07 Coulter Electronics, Inc. Orifice inside optical element
US4420720A (en) * 1981-06-29 1983-12-13 Coulter Electronics, Inc. Field focused particle sensing zone
US4515274A (en) * 1981-12-02 1985-05-07 Coulter Corporation Particle analyzing and sorting apparatus
US4527114A (en) * 1982-02-25 1985-07-02 Coulter Electronics, Inc. Electrical slit scanning apparatus
US4596035A (en) * 1983-06-27 1986-06-17 Ortho Diagnostic Systems Inc. Methods for enumerating 3-part white cell differential clusters
IT1179044B (it) * 1983-08-15 1987-09-16 Nils O Rosaen Meccanismo di trattamento di un fluido
US4735504A (en) * 1983-10-31 1988-04-05 Technicon Instruments Corporation Method and apparatus for determining the volume & index of refraction of particles
US4751179A (en) * 1984-05-31 1988-06-14 Coulter Electronics, Inc. Method and reagents for differential determination of four populations of leukocytes in blood
US4702598A (en) * 1985-02-25 1987-10-27 Research Corporation Flow cytometer

Also Published As

Publication number Publication date
CN1031422A (zh) 1989-03-01
AU1497088A (en) 1988-10-10
IL85671D0 (en) 1988-08-31
JP2505873B2 (ja) 1996-06-12
WO1988007198A1 (en) 1988-09-22
EP0311655B1 (en) 1994-11-30
US5125737A (en) 1992-06-30
DE3852270T2 (de) 1995-04-06
AU6848390A (en) 1991-03-14
ES2009188A6 (es) 1989-09-01
CA1315125C (en) 1993-03-30
CN1014742B (zh) 1991-11-13
AU602207B2 (en) 1990-10-04
KR890700829A (ko) 1989-04-27
DE3852270D1 (de) 1995-01-12
EP0311655A4 (en) 1990-09-05
EP0311655A1 (en) 1989-04-19
JPH01502533A (ko) 1989-08-31
IL85671A (en) 1995-12-31
AU632393B2 (en) 1992-12-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US9638621B2 (en) Method for discriminating red blood cells from white blood cells by using forward scattering from a laser in an automated hematology analyzer
US9733233B2 (en) Method and apparatus for analyzing individual cells or particulates using fluorescent quenching and/or bleaching
US20200150023A1 (en) Instrument and Method for Optical Particle Sensing
US10359349B2 (en) Use of focused light scattering techniques in biological applications
Parks et al. [19] Fluorescence-activated cell sorting: Theory, experimental optimization, and applications in lymphoid cell biology
EP2554987B1 (en) Method and apparatus for determining red blood cell indices of a blood sample utilizing the intrinsic pigmentation of hemoglobin contained within the red blood cells
EP0193356B1 (en) Method for analysis of subpopulations of blood cells
US4284412A (en) Method and apparatus for automated identification and enumeration of specified blood cell subclasses
KR100276144B1 (ko) 전혈 중 망상 적혈구의 동정 및 특성화에 사용하는 시약 조성물 및 이를 사용한 세포동정방법
US5464752A (en) Automated analyzer for screening cells or formed bodies for enumeration of populations expressing selected characteristics
JP3049254B2 (ja) 2種類の光源を備えた光学式粒子分析装置
KR100276145B1 (ko) 세포 구형화시약 조성물 및 이를 사용한 세포분석방법
US8828212B2 (en) Dielectric cytometric apparatus and dielectric-cytometric cell sorting method
CA2449401C (en) Optical method and apparatus for red blood cell differentiation on a cell-by-cell basis, and simultaneous analysis of white blood cell differentiation
JP2777536B2 (ja) 散乱光測定用のサンプル・セル及びサンプル・セル・モニタ
US4599307A (en) Method for elimination of selected cell populations in analytic cytology
DE69432410T2 (de) Retikulozyt bestimmungsverfahren und geraet, das lichtstreuungstechniken verwendet
EP0804723B1 (en) A flow fluorometric method and device
JP3375203B2 (ja) 細胞分析装置
ES2228022T3 (es) Metodo para realizar el recuento de celulas de sangre.
JP4965561B2 (ja) サイトメータ細胞計数及びサイズ測定システム
Bain et al. Basic haematological techniques
CA1125050A (en) Apparatus and method for detecting platelets in a whole blood
US3822095A (en) System for differentiating particles
Horan et al. Quantitative single cell analysis and sorting

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
G160 Decision to publish patent application
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20051214

Year of fee payment: 9

LAPS Lapse due to unpaid annual fee