CN1085901A

CN1085901A - 制备含咪唑并哒嗪衍生物的抗肿瘤药物组合物的方法

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Publication number: CN1085901A
Application number: CN93103896A
Authority: CN
Inventors: 西蒙·田比·霍奇森
Original assignee: Wellcome Foundation Ltd
Current assignee: Wellcome Foundation Ltd
Priority date: 1987-08-15
Filing date: 1993-03-31
Publication date: 1994-04-27
Also published as: FI883758A; AP89A; NO883613L; JPS6468375A; NO168305B; YU202889A; YU202789A; US5538970A; CN1031532A; PL274216A1; PL160045B1; EP0305093A1; ZA885996B; MC1969A1; CA1336432C; RU2017741C1; DD289529A5; EP0305093B1; US5447956A; MY103602A

Abstract

具有通式(I)的化合物。

该化合物及其盐和其具有生理学功能的衍生物适用于肿瘤处理。该化合物的制备、其制备过程中有用的中间体的制备，含有该化合物的药学组合物的制备及其在处理肿瘤上的使用亦被描述。

Description

本发明涉及杂环化合物，该化合物被发现具有细胞毒素活性。本发明尤其涉及咪唑并哒嗪衍生物，其制备方法，由其所构成的药物以及其作为细胞毒素试剂，特别是抗肿瘤试剂的用途。

在癌的化学治疗领域中，业已产生了多种抗瘤试剂，它们都有不同程度的疗效。所用的标准临床试剂包括亚德里亚霉素，放线菌素D，氨甲蝶呤，5-氟尿嘧啶，顺-铂，长春新碱和长春花碱。然而，目前这些常用的抗瘤试剂被发现有多种缺点，如对健康细胞有毒和对一定类型的肿瘤有抵制性。

除具有抗肿瘤活性以外，我们还知道长春新碱是微管功能的抑制剂。其它表现出微管抑制活性且被报导说是潜在抗肿瘤试剂的化合物是喏咳唑（nocodazole），吐吥唑（tubulazole）和NSC-181928;

然而，这些化合物均尚未得到临床检验。因此需要续继寻求新的、经改进的抗肿瘤试剂。

我们现已发现一种新型的咪唑并哒嗪衍生物，其呈现出有效的抗瘤活性。

首先，本发明提供的化合物具有通式（Ⅰ）

其中，R¹代表任意取代的碳环或杂环芳基，或是任意取代的烷基，链烯基，环烷基或环烯基;R²代表任意取代的烷基，链烯基，炔基，环烷基或环烯基，或者任意取代的碳环或杂环芳基或芳烷基;

R³代表氢原子或烷基;

X代表氧或硫原子，-CH₂-或NR⁴基，其中，R⁴代表氢原子或C₁-C₄的烷基;及

Y代表-CH₂-或-CH₂CH₂-基;

或者，X-Y一起表示基团-CH＝CH-。本发明还提供了它的盐及其具有生理学功能的衍生物。

对照通式（Ⅰ）中的R¹和R²，碳环芳基可以含有6个或10个环元，例如苯基和萘基，并且至少有一个芳环。杂环芳基的环内可含有5～10个原子，其中至少有一个是杂原子。杂环的环上通常含有1～4个杂原子，其选自于氮，氧和硫。适用的杂环的例子包括噻吩环，呋喃环，吡啶环，吲哚环和喹啉环。

碳环或杂环芳基上可以存在的取代基包括：C_1-6的烷基，C_1-4的烷氧基（其自身也可用C_1-2的烷氧基或C_1-2烷氧-C_1-2烷氧基任意取代），卤素（如氟，氯或溴），氨基（可被一个或两个C_1-4烷基任意取代），C_1-4卤代烷基（如三氟甲基），C_1-4硫代烷基，羧基，C_1-4烷氧羰基，-SO₃H，氰基和苯基。碳环或杂环芳基可以适当地带有1～4个取代基。

除了另有说明之外，通式（Ⅰ）中的烷基R¹和R²可是直链或支链烷基，并可含有1～10个碳原子，例如3～10个碳原子。链烯基或炔基可含2～10个碳原子，例如3～10个碳原子。环烷基或环烯基可含3～10个碳原子。在烷基，链烯基，炔基，环烷基或环烯基上存在的取代基包括：卤素原子，C_1-4烷氧基，羟基，氨基（可被一个或两个C_1-4烷基任意取代），C_1-4卤代烷基（如三氟甲基），C_1-4硫代烷基，羧基，C_1-4烷氧羰基，-SO₃H和氰基。

当R²代表芳烷基时，其烷基部分可含1～4个碳原子，而芳基部分可以是如上对R¹和R²所限定的碳环或杂环芳基。

当R¹代表烷基时，其最好含有2个以上的碳原子，如C_3-6烷基。

当R²代表烷基时，其最好含1～6个碳原子，如1～4个碳原子。

当R³或R⁴代表烷基时，其可是直链或支链并含有1-4个碳原子。

通式（Ⅰ）的某些化合物可以形成盐。即含有碱性氨基的化合物（Ⅰ）可与酸成盐，而含有酸基的化合物可与碱成盐。

适宜的酸加成盐包括由下列酸所形成的盐：氢氯酸，氢溴酸，硝酸，高氯酸，硫酸，柠檬酸，酒石酸，磷酸，乳酸，苯甲酸，谷氨酸，草酸，天冬氨酸，丙酮酸，乙酸，琥珀酸，富马酸，马来酸，草酰乙酸，羟乙磺酸，硬脂酸，苯二甲酸，甲磺酸，对甲苯磺酸，苯磺酸，乳糖酸和葡糖醛酸。适宜的碱式盐包括无机碱式盐诸如碱金属（如钾和钠）盐和碱土金属（如钙）盐;有机碱式盐如苯乙基苄胺、二苄基亚乙基二胺、乙醇胺和二乙醇胺盐;以及氨基酸盐如赖氨酸盐和精氨酸盐。最可取的盐是药学上可接受的盐。

通式（Ⅰ）的化合物中，R¹最好代表任意取代的苯基或萘基，任意取代的五元或六元杂环芳基，其上含有1～4（例如1-2）个选自氮、氧和硫的杂原子。R¹上存在的较佳取代基包括C_1-4烷氧基，C_1-4烷基，单或双（C_1-4）烷氨基和卤原子。R¹还可代表未取代烷基，例如C_3-6烷基。

R²最好代表苯基或任意取代的C_1-4烷基。R²上的优选取代基包括C_1-4卤代烷基（如三氟甲基），C_1-4烷氧基，羟基，卤素，单或双（C_1-4）烷氨基和五元或六元的氮杂环基（如4-位的吗啉基，1-位的哌啶子基，吡咯基（pyrrolidino））。优先考虑R²是C_1-4烷基。

R³最好是氢或甲基。

Y最好代表-CH₂-。-X-Y-最好代表-CH₂O-，-CH₂S-，-CH₂-CH₂-，或-CH＝CH-。

通式（Ⅰ）化合物的特别优选组是如下述：其中R¹代表可被1～4个取代基取代的苯基或萘基，取代基选自C_1-4烷氧基（如甲氧基或乙氧基），C_1-4烷基（如甲基，乙基，正丙基，异丙基，正丁基或叔丁基），和卤原子（如氯或溴）;

R²代表一个C_1-4烷基（最好是甲基或乙基）;

R³代表氢或甲基;

Y-X代表-CH₂O-;

该组还包括它们的盐和其具有生理学功能的衍生物。

按照其活性，本发明所优选的化合物包括：

N-〔6-（3，4，5-三甲氧苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，

N-〔6-（3，5-二甲氧苄氧基）咪唑并（1，2-b）哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，

N-〔6-（2，5-二甲氧苄氧基）咪唑并（1，2-b）哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，

N-〔6-（1-萘基甲氧基）咪唑并（1，2-b）哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，

N-〔6-（3-甲基苄氧基）咪唑并（1，2-b）哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，

N-〔6-（2，3-二甲氧基苄氧基）咪唑并（1，2-b）哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，

N-〔6-（2，5-二甲基苄氧基）咪唑并（1，2-b）哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，

N-〔6-（2，5-二甲氧基苄氧基）咪唑并（1，2-b）哒嗪-2-基〕氨基甲酸乙酯，

N-〔6-（3、4、5-三甲氧基苄氧基）咪唑并（1，2-b）哒嗪-2-基〕氨基甲酸乙酯，

N-甲基-N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并（1，2-b）哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，

N-〔6-（2-溴-3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并（1，2-b）哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，

N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并（1，2-b）哒嗪-2-基〕氨基甲酸正丙酯，和

N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并（1，2-b）哒嗪-2-基〕氨基甲酸正丁酯，

N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并（1，2-b）哒嗪-2-基〕氨基甲酸-2-甲氧乙酯，

N-〔6-（3，5-二甲氧基-4-乙氧基苄氧基）咪唑并（1，2-b）哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，

以及它们的具有生理学功能的衍生物。

本发明的化合物具有细胞毒素活性，即它们对于某些对哺乳动物有害的活细胞（例如肿瘤细胞）是有毒的。

通式（Ⅰ）化合物的抗肿瘤活性已被大量的标准实验（体外及体内）所证实，这些试验主要是针对该化合物对鼠类白血病细胞系如P388的活性。

我们发现，在体外进行的增殖测定及严格菌落形成测定试验中，通式（Ⅰ）化合物对P388表现出有效的抗瘤活性。在体内实验中，与带有未处理的肿瘤的对照组相比，本发明的化合物有效地减少了载有腹水P388/0白血病肿瘤之小鼠的肿瘤细胞数目，并造成了存活时间的延长。

据报道，上面所说的标准体内肿瘤实验中的活性也表示了其在人体中的抗瘤活性。（见A.Goldin等人“癌研究方法”，V.T.DevitaJr，和H.Busch编，16，198-199，Academic Press出版社，1979）

我们还发现本发明的化合物会干扰微管蛋白功能，如在玻璃管实验中所表现出的微管蛋白聚合的抑制作用。

以前曾报导过：作为微管抑制剂的化合物表现出封锁肿瘤细胞定向迁移的特性。因此可以相信，本发明的化合物将具有抗侵入和抗转移的特性。

除上述性质外，我们还发现，本发明的某些较佳化合物在体外试验中对多种人体肿瘤细胞系表现出活性（DLD-1人体结肠癌，WiDr人体结肠腺癌，HCT-116人体结肠癌和A549人体肺癌），这表明该化合物具有广谱抗肿瘤活性。

根据其活性，特别优选的化合物是N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并（1，2-b）哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯及其具有生理学功能的衍生物。我们还发现，在体内试验中这种化合物对多种鼠类肿瘤展现出良好的活性（B16黑瘤和L1210白血病）。此外，在体内试验中还发现其对P388（细胞）株表现出良好的活性，该（细胞）株对大多数临床用抗肿瘤试剂具有抵抗性，这些试剂包括环磷酰胺，氨甲蝶呤，放线菌素D，长春新碱，亚德里亚霉素，5-氟尿嘧啶，顺-铂，双氯亚硝基脲和胺苯吖啶（amsacrine）。可以相信，对亚德里亚霉素、长春新碱和放线菌素D有抵制性的肿瘤事实上对很大范围内的抗肿瘤药物都具有抵制性。

鉴于不希望被理论所约束，我们相信本发明的某些化合物可作为前体药物来使用。这是由于，R³为烷基的通式（Ⅰ）化合物的（实际）体内活性将会高于予期的其体外活性，并且我们还相信在体内（实验中）它们可被转变成R¹为氢的通式（Ⅰ）化合物。

按照本发明的另一个目的，本发明还提供制备通式（Ⅰ）化合物的工艺方法，该工艺包括：（A）将通式（Ⅱ）的哒嗪衍生物与通式（Ⅲ）的化合物反应;

（其中R¹，X和Y如前所限定）

（这里的R²和R³如前所限定，Z代表卤原子如氯或溴原子）;

（B）将通式（Ⅳ）的哒嗪衍生物与通式（Ⅴ）的化合物反应;

（其中，R²和R³如前面所限定，Z¹代表离去基团（如卤原子）或磺酸基（如甲磺酸盐或对甲苯磺酸盐））;

R¹CH₂X¹H（Ⅴ）

（其中，R¹如前所限定，X¹代表氧或硫原子或如前面所限定的NR⁴基团）;

（C）通式（Ⅵ）化合物与适当的醇R²OH反应;

（D）将通式（Ⅶ）化合物与用作引入-CO₂R²基团的试剂反应;

（E）将一种通式（Ⅰ）化合物转变成另一种通式（Ⅰ）化合物，例如采用将酯化基R²用另一个不同的酯化基R²来交换的方法，或者采用将R³为氢的通式（Ⅰ）化合物烷基化的方法;随后，如果需要和/或合适，进行成盐（操作）。

全部的工艺（A）可在非质子传递溶剂中，如二甲基甲酰胺，1，3-二甲基咪唑啉酮或六甲基磷酰铵，并于非极端温度如50～120℃条件下进行。

X为氧或硫原子或NR⁴基的通式（Ⅱ）化合物可用合适的醇，硫醇或上面限定的通式（Ⅴ）的胺与通式（Ⅷ）化合物反应来制备：

（其中，Z¹如前所限定）。

该反应一般是在碱存在的条件下进行，如叔丁氧钾（存在于如二甲氧乙烷这样的溶剂中）。该反应所能采用的替代的碱和溶剂包括：存在于如二甲基甲酰胺或二甲亚砜这样的非质子传递溶剂中的氢化钠，以及存在于如甲醇，乙醇或如前所述的非质子传递溶剂中的甲醇钠或乙醇钠。

X和Y于一起表示-CH＝CH-基的结构式（Ⅱ）化合物可通过与卤化剂（如三氯化磷和氨）顺序反应由结构式（Ⅸ）的化合物来制备。

通式（Ⅸ）的化合物的制备是通过将适当的芳醛R¹CHO与3-氧代戊酸（乙酰丙酸）在醇水溶液的碱性条件（有碱存在）下进行反应，随后再在酸性条件下与肼反应而制成通式（Ⅹ）的化合物：

该化合物可经脱氢，例如使用存在于醇（如乙醇）中的二氧化硒进行脱氢，以制成通式（Ⅸ）的化合物。

当需要制备X和Y均为亚甲基的公式（Ⅱ）化合物时，通式（Ⅸ）或（Ⅹ）化合物中的乙烯基部分可首先被还原，例如用活性炭上的铂进行催化氢化。

根据本领域的公知技术，公式（Ⅲ）化合物的制备是将通式（Ⅺ）的对应卤代乙酰胺与草酰氯和醇R²OH反应。

通式（Ⅴ）的醇可采用标准工艺由相应的羧酸或醛（carboxal-dehyodes）而得到，例如用存在于如甲醇或乙醇溶剂中的氢硼化钠或用存在于如二乙醚或四氢呋喃溶剂中的氢化锂铝进行还原处理。

通式（Ⅴ）的硫醇的制备是通过相应的卤化物R¹CH₂Z³（Z³是一个卤原子）与存在于乙醇溶剂中的硫脲反应，得到相应的异硫脲鎓盐，随后进行水解，（例如用NaOH溶液水解）。

通式（Ⅴ）的胺的制备可按常规方式进行，即用相应的卤化物与氨反应。

根据工艺（B），通式（Ⅳ）的化合物与通式（Ⅴ）的化合物的反应一般在碱存在的条件下进行。适宜的碱包括碱金属的醇盐如甲醇钾（或钠），乙醇钾（或钠）或叔丁醇钾（或钠）。该反应通常可在溶剂中进行，如二甲氧乙烷溶剂，醇（如甲醇或乙醇），或非质子传递溶剂（如二甲基甲酰胺或二甲亚砜）。

通式（Ⅳ）的化合物的制备是将通式（Ⅶ）的化合物与通式（Ⅲ）的化合物以与上述工艺（A）类同的方式进行反应。

一般工艺（C）是在将通式（Ⅵ）的化合物加热到80～150℃并与醇R²OH反应的条件下被进行，其时可有溶剂存在。

适宜的溶剂包括惰性有机溶剂诸如烃（如苯或甲苯）。作为替代，R²OH自身也可作为溶剂。

可以相信，工艺（C）可借助通式（Ⅻ）的中间物，异氰酸盐衍生物来进行。

通式（Ⅵ）的酰基叠氮衍生物的制备是由相应的羧酸通过生成一种活化的酸衍生物，（例如一种酸性卤化物如酰氯，它是用卤化试剂如草酰氯，亚硫酰氯或五氯化磷反应而生成）随后再与叠氮化物反应（如碱金属叠氮化物）而完成。通常该过程是在醚的水溶液（如二噁烷水溶液）存在的条件下进行。

相应于通式（Ⅵ）化合物的羧酸衍生物之制备是通过将通式（Ⅱ）化合物与溴代丙酮酸乙酯在类似于工艺（A）的一般条件下进行反应，得到一种酯，随后通过水解得到所需要的酸。

在工艺（D）中，用于引入-CO₂R²基的试剂可以是相应的卤代甲酸酯，如卤代甲酸烷基酯（如氯甲酸甲酯或乙酯）。通式（Ⅶ）化合物的制备是由通式（Ⅰ）化合物通过在酸性（例如使用诸如甲酸、氯代甲酸或三氟乙酸这样的任意卤代羧酸）及任意的溶剂（例如象二氯甲烷的卤代烃溶剂）存在的条件下除去-CO₂R²基而完成（该基最好是一个不稳定基如叔丁氧羰基）。因此，在工艺（D）的一个特别实施例中，一种通式（Ⅰ）化合物可通过除去一个-CO₂R²基并引入另个不同的-CO₂R²基的反应（如上所述），转换成另一种不同的通式（Ⅰ）化合物。

根据一般工艺（E），实现通式（Ⅰ）的一种化合物向另一种不同的通式（Ⅰ）化合物转变，须借助用不同的基R²取代通式（Ⅰ）化合物中的酯化基R²，其条件是在碱存在条件下，将带有合适的醇的化合物（Ⅰ）加热到50-180℃。所用的碱例如是碱金属醇盐如叔丁醇钾。虽然这种酯交换可作为一单独的反应步骤来进行，但其也可方便地在通式（Ⅳ）化合物与通式（Ⅴ）化合物反应期间（即工艺B期间）进行。

按工艺（E），互转换也可通过将R³为氢原子的化合物烷基化以得到R³为烷基的化合物这一方法来实现。烷基化可以常规方式进行，例如，在碱（如NaOH）存在的条件下用烷基卤化物（如碘甲烷或碘乙烷）处理。

这些新颖的通式（Ⅱ）到（Ⅺ）的中间体（产物）构成了本发明的进一步特征。较佳的中间体是通式（Ⅱ），（Ⅳ）和（Ⅵ）的那些中间产物。

本发明的化合物可用于瘤的处理。它们可被用来处理多种癌包括白血病，淋巴瘤，肉瘤和固体瘤（Solid tumours）。

本发明进一步提供了处理动物体肿瘤的方法，动物包括哺乳动物特别是人体。该方法包括将一定量（即在临床使用中可表现出功效）的通式（Ⅰ）化合物或其药物学上可以接受的盐或其具有生理学功能的衍生物以药学上可使用的形式投入使用，每日一次或几次也可是其他任何合适的定时形式，口服式、直肠式（灌肠）、非肠胃式或局部式用药。

另外，本发明的另一个特征是提供了用于治疗（如作为抗瘤试剂）的通式（Ⅰ）化合物或其药学上可接受的盐或其具有生理学功能的衍生物。

作为细胞毒素试剂的通式（Ⅰ）化合物之有效需用量当然是可变的，而且，最终是由医师或兽医师自行掌握。应予考虑的因素包括待处理（瘤）的条件，投药方式，所配药物的自然性质，动物的体重，表面积，年令和一般条件，以及被投用的特定化合物。适宜的有效抗瘤剂量为大约0.01～120毫克/公斤体重，例如大约0.1～120mg/Kg体重，最好为大约0.1～50mg/Kg体重，例如0.5～5mg/Kg体重。总的日剂量可以单一剂量给出也可以多步剂量给出（如每日二到六次）或以择定的静脉注入时间的形式给出。例如，对75千克的动物，剂量应当是每天8～9000毫克，典型剂量为每天50mg。如果指明是多次（投药）的剂量，那么处理所用的剂量为每日四次15mg通式（Ⅰ）化合物。

尽管活性的化合物可被单独投药，但该活性化合物最好是以药物学上配制药（formulation）的形式提供。本发明的医用配制药包括式（Ⅰ）的化合物或其盐并伴有一种或多种药物学可接受的载体以及其他任意的治疗成分。载体应当是药学上可接受的，并与配制药中的其他成分相容，并且对接受者无害。

因而，本发明进一步提供一种配制药，其包括式（Ⅰ）的化合物或其药学上可接受的盐或其具有生理学功能的衍生物，并带有其药学上可接受的载体。

本发明还提供了配制药的制备方法，包括将式（Ⅰ）的化合物或其药学上可接受的盐或其具有生理学功能的衍生物与药学上可接受的载体结合在一起。

按照本发明的配制药，其包括那些适宜口服，局部用药，直肠或非肠胃式（包括皮下，肌内和静脉注入）投药的配制药。优选的配制药是那些适宜口服或非肠胃式投药的。

配制药可以常规单位剂量的形式给出，并可按药物学领域中为人熟知的任何方法来制备。所有的方法都包括将活性化合物同含有一种或多种辅助成分的载体形成缔合体这个步骤。一般地讲，配制药的制备是将活性化合物直接并均匀地与液态载体或精细分散的固态载体或液、固两种载体相混合，形成缔合体。然后，如果需要，可将产品成形为所要求的配制药。

本发明中，适于口服投药的配制药可以离散单元的形式存在，例如胶囊、扁胶囊、片或锭，其均含有予先规定量的活性化合物。配制药的存在形式还可是粉状或粒状，或者，水或非水溶液或悬浮液，如糖浆，酏剂，乳剂或顿服剂。

片剂的制备可借助加压或模压，可随意带有一种或多种辅助成分。压制片剂是通过将活性化合物在适当的机器里加压来制备，该活性化合物是以自由流动的形体如粉状或粒状存在，并随意混和有粘结剂、润滑剂、惰性稀释剂、表面活性剂或分散剂。模压片剂是通过将带有合适载体的粉状活性化合物在适当的机器中模压而制备。

糖浆的制备是将活性化合物加到浓缩的糖水溶液（如蔗糖液）中，其中也可加入任何辅助成分。该辅助成分包括：食用香料、阻滞糖结晶的试剂、或增加任何其它成分溶解度的试剂，如多羟基醇（如丙三醇或山梨醇）。

以直肠式投药的配制药可以栓剂的形式存在，其中有常规载体如可可油。

适于非肠胃式投药的配制药通常须进行含有活性化合物的无菌水的制备，其最好是与接受者的血液等渗。该配制药最好包括式（Ⅰ）化合物的药学和药理学可接受的酸加成添加盐溶液，其与接受者的血液等渗。

有用的配制药还包括含有式（Ⅰ）化合物的浓缩溶液或固体，其可借助合适的溶剂稀释，以产生一种适于上述的非肠胃投药方式的溶液。

除上述成分外，本发明的配制药还进一步包括一种或多种由下列物质中选取的辅助成份：稀释剂、缓冲剂、食用香料、粘结剂、表面活性剂、增稠剂、润滑剂、防腐剂（包括抗氧化剂）及其类似物。

另一方面，本发明还提供了式（Ⅰ）化合物或其药学上可接受的盐或其具有生理学功能的衍生物在肿瘤处理药物的制备方面的应用。

下面用非限制性实施例来说明本发明。

所有温度均以摄氏度（℃）表示。

质子核磁共振谱是依据Bruker AH 200 FT NMR型或Bruker HFX90FT NMR型仪器而获得。

在所述的制备过程及实施例中用到下面的缩写：

DME-代表二甲氧基乙烷

DMEU-代表1，3-二甲基-2-咪唑啉酮

LAH-代表氢化锂铝

中间体制备

中间体1

3-氨基-6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）哒嗪

把3，4，5-三甲氧基苯甲醇（奥尔德里厅，19.82克，0.1mol）溶解在DME（20ml）中，然后在约15分钟内，在氮气、搅拌及冰浴冷却的条件下将其添加到80ml DME的叔丁醇钾（11.22g，0.1mol）悬浮液中。半小时之后，用3-氨基-6-氯-哒嗪（12.95g，0.1mol）处理该混合物（Helv.Chem.Acta.1954，37，121，J.Druey，Kol.Meier和K.Eichenberger）。经过1.5小时后，该混合物在回流的条件下被加热3小时。然后对混合物进行冷却、过滤，用乙醚洗涤滤出的固体。真空蒸发滤液以获得油状物，此油状物在乙酸乙酯和水之间被分配。用水洗涤有机相，然后经（硫酸钠）干燥，蒸发而得到油状物（A）。根据5%甲醇-氯仿及硅胶洗脱操作，对该物（A）作色层法分离。洗脱的部分合并得到油状物（B），用氯仿和二-异丙醚对该物（B）进行研制，便产生米色固态主题化合物（9.44g），其熔点142-4°;核磁谱（Nmr）：^δH（CDCl₃）6.87（1H，J_AB8.8Hz，5-H），6.78（1H，J_AB8.8Hz，4-H），6.72（2H，s，PhH），5.38（2H，s，CH₂），4.45（2H，br.s，NH₂），3.87（6H，s，OMe）和3.84（3H，s，OMe）.

中间体2

3-氨基-6-（2，5-二甲氧基苄氧基）哒嗪

在氮气、搅拌及冰浴冷却的条件下，20ml DME的2，5-二甲氧基苯甲醇（30.6g，0.182mol）溶液被加入到60ml DME的叔丁醇钾（20.38g，0.182mol）溶液中。半小时之后，用3-氨基-6-氯哒嗪处理该混合物。经过1.5小时，于回流条件下加热该混合物5小时，然后冷却，过滤。滤液于真空下蒸发，并在乙酸乙酯和水之间进行（相）分配。用水洗涤有机相，然后经（硫酸钠）干燥并蒸发以得到固体（A）。该固体（A）由甲苯中再结晶便可得到固体（B）。对物（B）作色层法分离（根据5%甲醇-氯仿及硅胶洗脱操作）即可得到标题化合物。此化合物为白色固体（27g），

熔点：94-94.5℃。核磁谱：^δH（CDCl₃）7.05（1H，m，PhH），6.90～6.73（4H，m，ArH），5.42（2H，s，CH₂），4.5（2H，brs，NH₂），及3.78和3.75（6H，s，OMe）.

中间体3至12

下面的化合物均由相应的醇，通过上面所述的关于中间体1和2的常规方法来制备。

（3）3-氨基-6-（1-萘基甲氧基）哒嗪，熔点：143-144°，核磁谱^δH（d₆-DMSO）8.00（3H，m，napth H），7.55（4H，m，napth H），6.97（1H，J_AB8.8Hz，4-H），6.89（1H，J_AB8.8Hz，5-H），6.0（2H，s，CH₂）以及5.80（2H，s，NH₂）。（产自1-萘甲醇，Aldrich）。

（4）3-氨基-6-（3-甲氧基苄氧基）哒嗪，熔点：55-60°，核磁谱^δH（d₆-DMSO）7.38（1H，dd，J8-4Hz，PhH），7.13-6.89（5H，m，ArH），6.05（2H，s，NH₂），5.35（2H，s，CH₂）以及3.82（3H，s，OMe）.

（5）3-氨基-6-（3，5-二甲氧基苄氧基）哒嗪，熔点：89-92°，核磁谱^δH（d₆-DMSO）6.88（1H，J_AB8.8Hz，5-H），6.75（1H，J_AB8.8Hz，4-H），6.62（2H，d，2′-H and 6′-H），6.42（1H，t，4′-H），5.35（2H，s，CH₂），4.53（2H，br.s，NH₂）以及3.75（6H，s，OMe）.

（6）3-氨基-6-（3-甲基苄氧基）哒嗪，核磁谱^δH（d₆-DMSO）7.40-7.10（4H，m，PhH），6.90（2H，J_AB8.8Hz，4-H和5-H），5.91（2H，br.s，NH₂），5.17（2H，s，CH₂）以及2.31（3H，s，Me）;M/Z 215（M⁺，30%），198（9），123（23），111（31）和105（100）.

（7）3-氨基-6-（3-二甲氨基苄氧基）哒嗪，熔点：127-129°，核磁谱^δH（d₆-DMSO）7.25（1H，t，5′-H），7.00（1H，J_AB8.8Hz，4-H），6.92（1H，J_AB8.8Hz，5-H），6.90-6.70（3H，m，2′-，4′-和6′-H），5.95（2H，s，CH₂），5.30（2H，br.s，NH₂）和2.98（6H，s，NMe₂）.（产自3-二甲氨基苯甲醇，通过3-二甲氨基苯甲酸的LAH还原制备，Aldrich）

（8）3-氨基-6-（2-甲氧基苄氧基）哒嗪，熔点：166-168°，核磁谱^δH（CDCl₃）7.8（1H，dd，J6.7和2.2Hz，PhH），7.30（1H，dd，J6.6和2.2Hz，PhH），6.98（1H，dt，J6.6Hz，PhH），6.92（1H，d，J6.6Hz，PhH），6.90（1H，J_AB8.8Hz，5-H），6.78（1H，J_AB8.8Hz，4-H），5.5（2H，s，CH₂），4.42（2H，br.s，NH₂）以及3.87（3H，s，OMe）.

（9）3-氨基-6-〔3，5-二甲氧基（4-甲氧基乙氧基甲氧基）苄氧基〕哒嗪，熔点：110-114°，核磁谱^δH（CDCl₃）6.88（1H，J_AB8.8Hz，5-H），6.78（1H，J_AB8.8Hz，4-H），6.7（2H，5.2′-和6′-H），5.35（2H，s，CH₂），5.2（2H，s，CH₂），4.49（2H，br.s，NH₂），4.05（2H，m，CH₂），3.85（6H，s，OMe），3.61-3.51（2H，m，CH₂）以及3.35（3H，s，OMe）.

（10）3-氨基-6-（3-氯苄氧基）哒嗪，核磁谱^δH（d₆-DMSO）7.51-7.32（4H，m，PhH），6.91（2H，J_AB8.8Hz，4H和5-H），5.92（2H，br.s，NH₂）以及5.34（2H，s，CH₂）;M/z 235（M⁺，68%），218（10），125（65）和97（100）.

（11）3-氨基-6-（2-噻吩基甲氧基）哒嗪，熔点：101-103°，核磁谱^δH（d₆-DMSO），7.52（1H，d，5′-H），7.20（1H，d，3′-H），7.02（1H，dd，4′-H），6.94和6.85（2H，J_AB8.8Hz，4-H和5-H），5.95（2H，s，CH₂）和5.50（2H，s，NH₂）.

中间体（12）：3-氨基-6-（3，4，5-三甲氧基苄硫基）哒嗪的制备是按照中间体1和2中所描述的方法，用3，4，5-三甲氧基苄硫醇和3-氨基-6-氯哒嗪（反应）以制得该产品。熔点：143-146°，核磁谱：^δH（CDCl₃）7.07和6.63（2H，J_AB8.8Hz，4-H and 5-H），6.66（2H，s，PhH）4.63（2H，br，s，NH₂），4.44（2H，s，CH₂），3.85（6H，s，OMe）以及3.84（3H，s，OMe）.

中间体13

N-氯乙酰基氨基甲酸-2-甲氧基乙酯

按照R.J Bochis et.al，（J.Med.Chem.1978，21，235）所述方法生产标题化合物。其溶点97-99℃，核磁谱：^δH（d₆-DMSO）11.07（1H，br.s，NH），4.56（2h，s，ClCH₂），4.28（2H，m，CO.OCH₂），3.62（2H，m，CH₂OMe）和3.34（3H，s，Me）.

式（Ⅲ）的下列中间体可由所指出的参考文献中得知：

Z-CH₂CONHCO₂R²

中间体 Z R²参考文献

NO.

14 Cl CH₃a

15 Br t-Butyl b

16 Cl -CH₂CH₃c

17 Cl -CH₂CH₂CH₃c

18 Cl -(CH₂)₃CH₃c

19 Cl -iso-Propyl d

（a）R.J.Bochis et，al J.Med.，Chem.1978，21，235.

（b）N.J.Leonard and K.A.Cruikshank-J.org.Chem，1985，50，2480.

（c）M.Pianka and D.J.Pelton，J.Chem.Soc.，1960，983.

（d）G.I.Derkach and V.P.Belaya，zh obsch，Khim，1966，36，1942.

中间体20-32

下面化合物是通过所述的中间体（1）和（2）中的通常方法，用相应的醇作起始原料来制备的。

中间体20

3-氨基-6-（2，3-二甲氧基苄氧基）哒嗪

由2，3-二甲氧基苯甲醇（Aldrich）制得标题化合物。其熔点为103-106°，核磁谱^δH（CDCl₃）7.12-7.05（2H，m，5′及6′H）;6.91（1H，m，4′H），to 6.85（1H，J_AB9Hz，5H），6.77（1H，J_AB9Hz，4H）;5.50（2H，s，ArCH₂）;4.50（2H，brs，NH₂）和3.89（6H，s，OCH₃）.

中间体21

3-氨基-6-（3，5-二甲氧基-4-乙氧基苄氧基）哒嗪

由3，5-二甲氧基-4-乙氧苄醇制得标题化合物，熔点（m.p）169-171°，核磁谱^δH（CDCl₃）6.89（1H，J_AB8.8Hz，5H）;6.79（1H，J_AB8.8Hz，4H）;6.70（2H，s，ArH）;5.38（2H，s，ArCH₂）;4.48（2H，brs，NH₂）;4.06（2H，q，J7Hz，CH₂CH₃）;3.88（6H，s，OCH₃）以及1.38（3H，t，J7Hz，CH₂CH₃）.

3，5-二甲氧基-4-乙氧基苯甲醇的制备方法如下：

a）3，5-二甲氧基-4-乙氧基苯甲醛

丁香醛（50g，0.275mol），乙基碘（85.8g，0.55mol）和碳酸钾（151.7g，1.09mol）之混合物的DME（60ml）溶液被加热到60-70°并搅拌6小时。冷却该混合物，并进行真空蒸发，然后用水处理并用二乙基醚萃取该混合物。萃取液经（硫酸钠）干燥和蒸发便得到标题化合物（59g）。此化合物为白色固体。通过tlc法（薄层色谱法）提纯，使用时不需再纯化。

b）3，5-二甲氧基-4-乙氧基苯甲醇

把来自上述反应的产品（59g，0.28mol）溶解在甲醇-乙醇（600ml，1∶1）溶液中，用氢硼化钠分批处理该混合物约一小时。在室温下搅拌该混合物24小时，然后用50ml水缓慢处理使之产生沉淀，蒸发该混合物以去除有机溶剂，然后用水（300ml）处理，并用氯仿萃取。萃取液经（硫酸钠）干燥并蒸发，得到白色固体，此固体由乙醚中再结晶可产生白色针状的标题化合物（26g）。

中间体22

3-氨基-6-（2-叔丁基苄氧基）哒嗪

由2-叔丁基苯甲醇制得标题化合物。

熔点147-9°。核磁谱：^δH（DMSO）7.4（2H，m.ArH），7.28（2H，m，ArH），6.9（1H，J_AB，8Hz，4H），6.85（1H，J_AB，8Hz，5H），6.0（2H，brs，NH₂），5.5（2H，s，CH₂），1.4（9H，s，Me₃）.

（醇的制备是用LAH（氢化锂铝）还原2-叔丁基苯甲酸;M.Crawford和F.H.C.Stewart，J.Chem.SOC.，1952，4444）

中间体23

3-氨基-6-（2-乙基苄氧基）哒嗪

从2-乙基苯甲醇制备。

醇是用LAH还原2-乙基苯甲酸来制备，（M.Crawford和F.H.C.Stewart，J.Chem.Soc.，1952，4444）.

中间体24

3-氨基-6-（2，5-二甲基苄氧基）哒嗪

从2，5-二甲基苯甲醇制得标题化合物。

熔点：109-111℃

醇是用LAH还原2，5-二甲基苯甲酸来制备（Aldrich）

中间体25

3-氨基-6-（3，4，5-三甲基苄氧基）哒嗪

从3，4，5-三甲基苯甲醇制备。

醇是用LAH还原3，4，5-三甲基苯甲酸来制备（G.H.Kosolapotf，J.Am.Chem.Soc.，69，1652，1947）.

中间体26

3-氨基-6-（2-苯基苄氧基）哒嗪

从2-苯基苯甲醇制备。

醇是由LAH还原2-苯基苯甲酸来制备。（Aldrich）

中间体27

3-氨基-6-（3-二乙氨基苄氧基）哒嗪

从3-二乙氨基苯甲醇制得标题化合物。

熔点：115～118℃，核磁谱：^δH（DMSO），7.15（1H，t，5′H），6.95（1H，J_AB，8Hz，4H），6.85（1H，J_AB，8Hz，5H），6.75（1H，brs，2′H），6.65（2H，m，4′H+6′H），5.9（2H，s，NH₂），5.25（2H，s，CH₂O），3.3（4H，quad，2X CH₂N），1.05（6H，t，2XMe）.

醇是由LAH还原3-二乙氨基苯甲酸来制备，

（P.Griess，Chem.Ber.，5，1041，1872）.

中间体28

3-氨基-6-（3-甲氨基苄氧基）哒嗪

由3-甲氨基苄醇制备标题化合物，其为树胶状。核磁谱：^δH（DMSO）7.1（1H，t，5′H），6.95（1H，J_AB，8Hz，4H），6.85（1H，J_AB，8Hz，5H），6.6（2H，m，2ArH），6.45（1H，d，ArH），5.95（2H，s，NH₂），5.65（1H，brs，NH），5.2（2H，s，CH₂O），2.65（3H，s，MeN）.

醇的制备是用LAH还原3-甲氨基苯甲酸。（J.Houben W.Brassert，Chem.Ber.，43，209，1910）.

中间体29

3-氨基-6-（3-甲氧基-1-萘基甲氧基）哒嗪

由3-甲氧基-1-萘基甲醇制备标题化合物，熔点：167-170℃。核磁谱：^δH（DMSO），7.95（2H，2d，2ArH），7.40（3H，m，3ArH），7.30（1H，s，2′H），7.0（1H，J_AB，8Hz，4H），6.90（1H，J_AB，8Hz，5H），6.00（2H，s，NH₂），5.75（2H，s，CH₂O），3.90（3H，s，OMe）.

醇的制备是用LAH还原3-甲氧基-1-萘甲酸

（R.Lesser和G.Gad，Chem.Ber.，58B，2551-9，1925）

中间体30

3-氨基-6-〔2-（3，4，5-三甲氧基苯基）乙氧基〕哒嗪

从2-（3，4，5-三甲氧基苯基）乙醇制得一油状物。核磁谱^δH（DMSO），6.95（1H，J_AB，8Hz，4H），6.90（1H，J_AB，8Hz，5H），6.60（2H，s，2ArH）6.25（2H，brs，NH₂），4.45（2H，t，CH₂O），3.75（6H，s，3Meo and 5Meo），3.58（3H，s，4Meo），3.0（2H，t，CH₂）.

醇是由LAH还原3，4，5-三甲氧基苯乙酸来制备（Aldrich）。

中间体31

3-氨基-6-（2-吡啶基甲氧基）哒嗪

从2-吡啶基甲醇（Aldrich）制得标题化合物。熔点：114～115℃。核磁谱^δH（d₆-DMSO），8.65（1H，d，6′-H），7.85（1H，trof d，5′-H），7.55（1H，d，3′-H），7.45（1H，m，4′-H），7.10（1H，J_AB8.8Hz，4-H），6.95（1H，J_AB8.8Hz，5-H），6.05（2H，s，NH₂），5.45（2H，s，CH₂）.

中间体32

3-氨基-6-（2-糠氧基）哒嗪

从糠醇制得标题化合物，熔点：96～99℃核磁谱^δH（d₆-DMSO），7.70（1H，d，5′-H），6.90（1H，J_AB，8.8Hz′，4-H），6.85（1H，J_AB8.8Hz′，5-H），6.60（1H，d，4′-H），6.50（1H，s，3′-H），5.95（2H，s，NH₂），5.30（2H，s，CH₂）.

实施例1

N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯

中间体1（29.1g，0.1mol）和N-氯乙酰基氨基甲酸甲酯（15.15g，0.1mol）在100ml无水1，3-二甲基-2-咪唑啉酮中（DMEU），于氮气下加热到100℃，搅拌3小时。然后冷却该混合物，把混合物倾倒在冰冷却的碳酸氢钠溶液中，经过滤得到固体。用水洗涤此固体。将此固体溶解在5%甲醇-氯仿溶液中，并通过硅酸镁载体进行洗脱。经蒸发得到一种固体。该固体用二甲基甲酰胺和水重结晶便可得到白色粉末状的标题化合物（14g）。其熔点217～220℃，核磁谱（Nmr）：^δH（d₆-DMSO）10.36（1H，br.s，NH），7.87（1H，J_AB8.8Hz 8-H），7.85（1H，s，3-H），6.87（1H，J_AB8.8Hz，7-H），6.85（2H，s，PhH），5.25（2H，s，CH₂），3.79，3.70和3.56（2H，s，OMe）.

实施例2

N-〔6-（2.5-二甲氧苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸乙酯

中间体2（2.61g，10mmol），2，6-二甲基吡啶（卢剔啶）（1.04g，10mmol）和N-氯乙酰基氨基甲酸乙酯（1.66g，10mmol）在10ml无水DMEU中于氮气条件下加热到100℃，搅拌3小时。该混合物经冷却及过滤。用水和乙醚洗涤固体，然后，在用5%甲醇-氯仿溶液洗脱的条件下使该固体通过硅酸镁载体。蒸发流出物可得到一固体，此固体再经二甲基甲酰胺和水重结晶便可得到白色粉末状的标题化合物（1.26g）。其熔点：210～211℃，核磁谱：^δH（d₆-DMSO）10.24（1H，br.s，NH），7.85（2H，M，3-H和8-H），7.10-6.86（4H，m，7-H和PhH），5.27（2H，s，CH₂Ar），4.17（2H，q，J，6.6Hz，CH₂CH₃），3.78和3.73（6H，s，OMe）和1.27（3H，t，J 6.6Hz，CH₂CH₃）.

实施例3

N-〔6-（2，5-二甲氧苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯

中间体2（12.0g，0.046mol），2，6-二甲基吡啶（4.92g，0.046mol）和N-氯乙酰基氨基甲酸甲酯（6.97g，0.046mol）在46ml无水DMEU中，在氮气条件下被加热到100℃，并搅拌4小时。此混合物被加到冰水中，然后过滤得到一固体。此固体再经二甲基甲酰胺和水重结晶便得到淡棕色粉状的标题化合物（2.46g）。其熔点：228～330℃，核磁谱：^δH（d₆-DMSO）10.30（1H，br.s，NH），7.88（1H，J_AB8.8Hz，8-H），7.85（1H，s，3-H），7.12-6.85（4H，m，ArH），5.32（2H，s，CH₂），3.79，3.72和3.69（9H，s，OMe）.

实施例4-22：

下面的化合物均是采用实施例1-3中所描述的一般程序，将3-氨基-6-取代的哒嗪与相应的氯乙酰基氨基甲酸酯反应而制备。

（4）N-〔6-（3，4，5-三甲氧苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸正丙酯

熔点：174-175°，核磁谱^δH（d₆-DMSO）10.25（1H，br.s，NH），7.87（1H，J_AB8.8Hz，8-H），7.85（1H，s，3-H）6.87（1H，J_AB8.8Hz，7-H），6.85（2H，s，PhH），5.26（2H，s，CH₂Ar），4.07（2H，t，J6Hz，CH₂CH₂CH₃），3.80（6H，s，OMe），3.68（3H，s，OMe），1.55（2H，dt，J6Hz，CH₂CH₂CH₃）和0.94（3H，t，J6Hz，CH₂CH₂CH₃）

（5）N-〔6-（3，4，5-三甲氧苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸正丁酯

熔点：185-187°，核磁谱^δH（d₆-DMSO）10.23（1H，br.s，NH），7.85（1H，J_AB8.8Hz，8-H），7.8（1H，s，3-H），6.86（1H，J_AB8.8Hz，7-H），6.65（2H，s，PhH），5.27（2H，s，CH₂Ar），4.12（2H，t，J 6Hz，CH₂CH₂CH₂CH₃），3.80（6H，s，OMe），3.67（3H，s，OMe），1.61（2H，m，CH₂CH₂CH₂CH₃），1.38（2H，m，CH₂CH₂CH₂CH₃）和0.92（3H，t，J6Hz，CH₂CH₂CH₂CH₃）.

（6）N-〔6-（2，5-二甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸正丙酯

熔点：199-200°，核磁谱^δH（d₆-DMSO）9.93（1H，br.s，NH），7.87（2H，m，3-H and 8-H），7.17-6.89（4H，m，7-H and PhH），5.42（2H，s，CH₂Ar），4.17（2H，t，J6Hz，CH₂CH₂CH₃），3.85和3.80（6H，s，OMe），1.73（2H，dt，J6Hz，CH₂CH₂CH₃）和1.04（3H，t，J6Hz，CH₂CH₂CH₃）.

（7）N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸乙酯

熔点：204-206°，核磁谱^δH（d₆-DMSO）10.25（1H，br.s，NH），7.85（1H，J_AB8.8Hz，8-H），7.83（1H，s，3-H），6.85（1H，J_AB8.8Hz，7-H），6.64（2H，s，PhH），5.27（2H，s，CH₂Ar），4.15（2H，q，J6Hz，CH₂CH₃），3.28（6H，s，OMe），3.16（3H，s，OMe）和1.25（3H，t，J6Hz，CH₂CH₃）.

（8）N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸-2-甲氧乙基酯

熔点：183-185°，核磁谱^δH（d₆-DMSO）10.36（1H，br.s，NH），7.85（1H，J_AB8.8Hz，8-H），7.83（1H，s，3-H），6.85（1H，J_AB8.8Hz，7-H），6.84（2H，s，PhH），5.26（2H，s，CH₂Ar），4.25（2H，m，COCH₂），3.79（6H，s，OMe），3.18（3H，s，OMe），3.08（2H，m，CH₂OMe）和3.32（3H，s，CH₂OMe）.

（9）N-〔6-（1-萘基甲氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，熔点

243-246°，^δH（d₆-DMSO）10.05（1H，br.s，NH），8.25-7.55（9H，m，napth H and 3-H and 8-H），6.92（1H，J_AB8.8Hz，7-H），5.92（2H，s，CH₂）和3.80（3H，s，OMe）.

（10）N-〔6-（2-甲氧苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，熔点：241-243°。

^δH（d₆DMSO）10.1（1H，br，s，NH），7.92（1H，s，3-H），7.65（1H，J_AB8.8Hz，8-H），7.45（1H，d，J7Hz，PhH），7.35（1H，dd，J7Hz，PhH），6.95（2H，m，PhH），6.72（1H，J_AB8.8Hz，7-H），5.36（2H，s，CH₂），3.89（3H，s，OMe），3.77（3H，s，OMe）

（11）N-〔6-（3，5-二甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯

熔点：236-238°^δH（d₆DMSO）10.30（1H，br.s，NH），7.88（1H，J_AB，8.8Hz，8-H），7.82（1H，s，3-H），6.90（1H，J_AB8.8Hz，7-H），6.66（2H，d，JO.9Hz，2′-H and 6′-H），6.46（1H，t，JO.9Hz，4′-H），5.36（2H，s，CH₂），3.78（6H，s，OMe），3.70（3H，s，OMe）.

（12）N-〔6-（3-甲氧苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯

熔点：205-208°，核磁谱^δH（d₆-DMSO）9.95（1H，br.s，NH），7.85（1H，s，3-H），7.80（1H，J_AB8.8Hz，8-H），7.30（3H，m，2′-H，4′-H and 6′-H），7.15（1H，m，5′-H），6.82（1H，J_AB8.8Hz，7-H），5.80（2H，s，CH₂），3.72（3H，s，OMe）和2.34（3H，s，Me）.

（13）N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸叔丁酯

熔点：191.5-192.5°，核磁谱^δH（d₆-DMSO）9.95（1H，br.s，NH），7.85（1H，J_AB8.8Hz，8-H），7.79（1H，br.s，3-H），6.87（1H，J_AB8.8Hz，7-H），6.86（2H，s，PhH），5.25（2H，s，CH₂），3.79（6H，s，OMe），3.68（3H，s，OMe），1.05（9H，s，t-Bu）.

（14）N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苄硫基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯

熔点：221-223°，核磁谱^δH（d₆-DMSO）10.51（1H，br.s，NH），8.11（1H，s，3-H），7.87（1H，J_AB8.8Hz，8-H），7.17（1H，J_AB8.8Hz，7-H），6.88（2H，s，PhH），4.49（2H，s，CH₂），3.83（6H，s，OMe）和3.70（3H，s，OMe）.

（15）N-〔6-（二甲氨基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯

熔点：200-203°，核磁谱^δH（d₆-DMSO）10.05（1H，br.s，NH），7.93（1H，s，3-H），7.90（1H，J_AB8.8Hz，8-H），7.30（1H，t，5′-H），6.95-6.80（4H，m，2′-H，4′-H，6′-H and 7-H），5.40（2H，s，CH₂），3.78（3H，s，MeO），2.98（6H，s，NMe₂）.

（16）N-〔6-（3-甲氧苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯

熔点：184-189.5°，核磁谱^δH（CDCl₃）10.55（1H，br，s，NH），8.02（1H，br.s，3-H），7.75（1H，J_AB8.8Hz，8-H），7.32（1H，dd，J7.5Hz，5′-H），7.07（2H，m，ArH），6.88（1H，dd，J7.5 and 2Hz，ArH），6.70（1H，J_AB8.8Hz，7-H），5.34（2H，s，CH₂），3.88和3.83（6H，s，OMe）.

（17）N-〔6-苄氧基咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸乙酯

熔点＞211℃（分解），核磁谱^δH（d₆-DMSO）10.25（1H，br.s，NH），7.87（1H，J_AB8.8Hz，8-H），7.72（1H，s，3-H），7.57-7.37（5H，m，Ph），5.35（2H，s，CH₂Ar），4.15（2H，q，J6Hz，CH₂CH₃），1.27（3H，t，J6Hz，CH₂CH₃）.

（18）N-（6-正丁硫基咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基）氨基甲酸甲酯

熔点170-171°，核磁谱^δH（d₆-DMSO）10.40（1H，br.s，NH），7.94（1H，s，3H），7.76（1H，J_AB8.8Hz，8-H），7.06（1H，J_AB8.8Hz，7-H），3.72（3H，s，OMe），3.18（2H，t，J6Hz，CH₂S），1.68（2H，m，CH₂CH₂S），1.44（2H，m，CH₂CH₂CH₂S），0.93（3H，t，J6Hz，CH₃CH₂CH₂S）.

（19）N-（6-苄硫基咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯

熔点：223-225°（分解），核磁谱^δH（d₆-DMSO）10.42（1H，br，s，NH），7.99（1H，s，3-H），7.77（1H，J_AB8.8Hz，8-H），7.52-7.20（5H，m，Ph），7.07（1H，J_AB8.8Hz，7-H），4.45（2H，s，CH₂），3.68（3H，s，OMe）.

（20）N-〔6-（3，5-二甲氧基-4-（甲氧乙氧甲氧基）苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯

熔点：149-150°，核磁谱^δH（CDCl₃）9.58（1H，br.s，NH），8.02（1H，br.s，3-H），7.75（1H，J_AB8.8Hz，8-H），6.75（1H，J_AB8.8Hz 7-H），6.70（2H，s，2′-H and 6′-H），5.29（2H，s，CH₂），5.18（2H，s，CH₂），4.08-3.91（2H，m，CH₂），3.85（9H，s，OMe），3.6-3.45（2H，m，CH₂），3.35（3H，s，OMe）.

（21）N-〔6-（3-氯代苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯

熔点：268-270°，核磁谱^δH（d₆-DMSO）10.32（1H，br.s，NH），7.87（1H，J_AB8.8Hz，8-H），7.83（1H，s，3-H），7.61（1H，s，2′-H），7.53-7.41（3H，m，PhH），6.91（1H，J_AB8.8Hz，7-H）5.38（2H，s，CH₂），3.68（3H，s，OMe）.

（22）N-〔6-（2-噻吩基甲基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯

熔点：207-209°，核磁谱^δH（d₆-DMSO），10.38（1H，br，s，NH），7.85（1H，s，3-H），7.82（1H，J_AB8.8Hz，8-H），7.58（1H，d，5′-H），7.30（1H，d，3′-H），7.05（1H，t，4′-H），6.82（1H，J_AB8.8Hz，7-H），5.56（2H，s，CH₂），3.66（3H，s，OMe）.

实施例23

2，2，2-三氟乙基-N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸酯

a）6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕羧酸乙酯

将溴代丙酮酸乙酯（117g，0.6mol）加到3-氨基-6-（3，4，5-三甲氧基）哒嗪（174.6g，0.6mol）和2，6-二甲基吡啶（62.4g，0.6mol）的无水DME（600ml）溶液中，通入氮气并搅拌。该混合物被加热到100℃，保温3小时。然后，冷却并经真空浓缩，随后用水处理并过滤，可得到棕色固体。此固体用水和乙醚洗涤。该固体再经由DMF和水中结晶，便产生晶体状标题化合物（88g）。其熔点：159～163℃，核磁谱^δH（CDCl₃）8.31（1H，s，3H），7.84（1H，J_AB8.8Hz，8H），6.82（1H，J_AB8.8Hz，7H），6.70（2H，s，ArH），5.30（2H，s，CH₂Ar），4.45（2H，q，J7Hz，OCH₂CH₃），3.88（6H，s，OCH₃），3.86（3H，s，OCH₃）和1.44（3H，t，J7Hz，CH₃）.

b）6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-羧酸

步骤（a）的产品（1.94g，5mmol）和氢氧化钠溶液（1ml，10M，10mmol），水（9ml）及甲醇（5ml）被加热，并回流搅拌20分钟。冷却该混合物，并用稀盐酸将其酸化，然后过滤得到固状物。此固体在60℃于真空中干燥，便得到粉末状标题化合物（1.5g）。其熔点：224-226°（分解），核磁谱：^δH（d₆-DMSO）8.56（1H，s，3H），8.07（1H，J_AB8.8Hz，8H），7.05（1H，J_AB8.8Hz，7H）6.88（2H，s，ArH），5.29（2H，s，CH₂Ar），3.82（6H，s，OCH₃）3.68（3H，s，OCH₃）和3.32（1H，br，s，CO₂H）.

c）6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-羧酸叠氮化物

在5ml无水苯中，先后加入步骤（b）的产品（0.36g，1mmol），吡啶（0.079g，1mmol），草酰氯（0.13ml，1.5mmol），在氮气下搅拌。此混合物在回流条件下被加热3小时，然后冷却，并经真空蒸发，可得到灰色固态物。用10ml二噁烷、10ml水和过量的叠氮化钠处理该固体，并在室温下剧烈搅拌一整夜。然后过滤该混合物，对固态体进行真空干燥便得到粉末状标题化合物（0.29g）。其熔点＞139℃（分解），核磁谱：^δH（CDCl₃）8.35（1H，s，3H），7.85（1H，J_AB8.8Hz，8H），6.85（1H，J_AB8.8Hz，7H），6.70（2H，s，ArH），5.31（2H，s，CH₂Ar），3.90（6H，s，OCH₃），3.88（3H，s，OCH₃）.

d）2，2，2-三氟乙基-N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸酯

将步骤（c）的产品（2.3g，6mmol），2，2，2-三氟乙醇（约3ml）和甲苯（60ml）混合，在N₂下加热搅拌回流，直到t.l.c（薄层色谱）显示出反应完全（约2小时。）。

此混合物被冷却过夜，然后过滤产生固态物。用乙醚洗涤该固体，然后经干燥，便得到粉末状的标题化合物（0.43g）。其熔点：205-210℃（分解）核磁谱：^δH（d₆DMSO）10.81（1H，br.s，NH），7.88（1H，J_AB8.8Hz，8H），7.85（1H，s，3H），6.90（1H，J_AB8Hz，7H），6.85（2H，s，ArH），5.25（2H，s，CH₂Ar），4.83（2H，q，J9Hz，CH₂CH₃），3.76（6H，s，OCH₃），3.65（3H，s，OCH₃）。

实施例24

2-羟乙基-N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸酯

除了粗产品是用SiO₂柱、5%甲醇-氯仿洗脱并进行色层法分离，以及由DME-水中再结晶以产生标题化合物外，其它工序均与实施例23（d）所述相同。所得化合物呈粉末状，熔点193-5°，核磁谱^δH（d₆DMSO）10.35（1H，br.s，NH），7.85（1H，J_AB，8.8Hz，8H），7.83（1H，s，3H），6，86（1H，J_AB8.8Hz，3H），6.84（2H，s，ArH），5.25（2H，s，CH₂Ar），4.82（1H，t，J4Hz，OH），4.15（2H，m），3.80（6H，s，OCH₃），3.66（5H，m，OCH₂和OCH₃）.

实施例25

2-（1-吗啉代）乙基-N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸酯

除了粗产品是用SiO₂柱、5%甲醇-氯仿洗脱并进行色层法分离，以及用少量乙醇煮沸以获得粉末状标题化合物外，其它工序均与实施例23（d）所述相同。该化合物溶点161～162℃，核磁谱：^δH（d₆DMSO）10.30（1H，br.s，NH），7.88（1H，s，3H），7.85（1H，J_AB，8.8Hz，8H），6.87（1H，J_AB，8.8Hz，7H），6.85（2H，s，ArH），5.26（2H，s，CH₂Ar），4.22（2H，t，J5Hz，CO.OCH₂），3.80（6H，s，OCH₃），3.68（3H，s，OCH₃），3.58（4H，m，CH₂OCH₃），2.59（2H，t，J5Hz，Co.OCH₂CH₂N），2.45（4H，m，CH₂NCH₂）.

实施例26

N-〔N-甲基-6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯

在氮气及室温下，把氢化钠（1.26g，60%，31.5mMol）分批添加到100ml DMEU的N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯（9.51g，24.5mMol）悬浮液（处于搅拌）中。用碘代甲烷（4.9g，2.15ml，35mMol）处理该混合物。经一小时后，再用等摩尔量的氢化钠和碘代甲烷处理该混合物。2小时后，将混合物倾入100ml水中，经过滤得到白色固体，该固体根据SiO₂柱、2%甲醇-氯仿洗脱操作进行色层法分离。该产物经DMF和水重结晶便得到白色粉末状的标题化合物（8.29g）。其熔点：177-178℃，核磁谱：^δH（d₆DMSO）8.04（1H，s，3H），7.96（1H，J_AB，8.8Hz，8H），6.92（1H，J_AB，8.8Hz，7H），6.86（2H，s，ArH），5.25（2H，s，CH₂），3.79（9H，s，OCH₃），3.68（3H，s，Co.OCH₃），3.42（3H，s，NCH₃）.

实施例27

N-〔N-乙基-6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯

采用与实施例26类似的工序制备标题化合物。该化合物为白色固体，熔点153-155℃，核磁谱：^δH（d₆DMSO），8.04（1H，s，3H），7.96（1H，J_AB，8.8Hz，8H），6.92（1H，J_AB，8.8Hz，7H），6.86（2H，s，ArH），5.25（2H，s，ArCH₂），3.90（2H，q，CH₂CH₃），3.78（9H，s，ArOCH₃），3.66（3H，s，NCH₃）和1.19（3H，t，CH₂CH₃）.

实施例28

N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸-2，3-二羟丙酯

除了在酰基叠氮与缩酮溶胶（solketal）之间的反应完成后，粗产品混合物是经真空蒸发，然后与稀盐酸和乙醇一起于60-70℃加热0.5小时之外，采用与实施例23（d）相类似的方法将实施例23（c）的产品与缩酮溶胶（solketal）反应。用碳酸氢钠溶液中和反应混合物，并于真空下蒸发。采用SiO₂柱、7%甲醇-氯仿洗脱操作对该混合物进行色层法分离，可制得白色固状标题化合物。其熔点：175～176℃，核磁谱：^δH（d₆DMSO）10.28（1H，brs，NH），7.88（1H，J_AB8.8Hz，8H），7.86（1H，s，3H），6.87（1H，J_AB8.8Hz，7H），6.85（2H，s，ArH），5.28（2H，s，ArCH₂），4.90（1H，d，J4Hz，2′-OH），4.65（1H，t，J4Hz，1′-OH），4.20-4.0（2H，m，Co.OCH₂），3.8C（6H，s，OCH₃），3.80-3.70（1H，m，HO-CH），3.69（3H，s，OCH₃）和3.40（2H，t，J4Hz，HOCH₂）.

实施例29

N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸-2-二甲氨基乙酯

采用与实施例23（d）相类似的工序将实施例23（c）的产品与（2-二甲氨基）乙醇反应（制得粗产品），然后按照SiO₂柱、5%甲醇-氯仿洗脱操作对粗产品进行色层法分离以获得固态物。所得固体经乙醇洗涤及干燥处理，便产生白色粉末状的标题化合物。其熔点：185-186℃，核磁谱：^δH（d₆DMSO），10.32（1H，brs，NH），7.88（1H，J_AB，8.8Hz，8H），7.85（1H，s，3H），6.89（1H，J_AB，8.8Hz，7H），6.85（2H，s，ArH），5.77（2H，s，ArCH₂），4.60（2H，t，J4Hz，Co.OCH₂），3.80（6H，s，OCH₃），3.69（3H，s，OCH₃），2.50（2H，t，CH₂N）和2.21（6H，s，NMe₂）.

实施例30

N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸苯酯

采用与实施例23（d）相同的方法将实施例23（c）的产物与苯酚反应以获得粗产品，然后根据SiO₂柱、5%甲醇-氯仿洗脱操作对该粗产品进行色层法分离得到固态物。该固体经乙腈洗涤及干燥，便产生白色粉末状的标题化合物。其熔点210～213℃，核磁谱：NMR^δH（CDCl₃）10.12（1H，brs，NH），8.05（1H，s，3H），7.80（1H，J_AB，8.8Hz，8H），7.55-7.15（5H，m，Ph），6.69（2H，s，ArH），6.67（1H，J_AB，8.8Hz，7H），5.28（2H，s，ArCH₂）和3.90（9H，s，OCH₃）.

实施例31

3-氨基-6-（2-溴-3，4，5-三甲氧基苄氧基）哒嗪

a）采用滴加溴（1.59g，10mMol）乙酸（2ml）溶液的形式处理3-氨基-6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）哒嗪（中间体1，2.91g，10mMol）的乙酸（20ml）溶液约5分钟。0.5小时后，过滤该混合物得到悬浮于水中的膏状体，并用氢氧化钠溶液对其碱化。此混合物经氯仿萃取。萃取液经水洗涤及（硫酸钠）干燥，并于真空下蒸发可得到膏状固体，该固体经由甲苯中重结晶便得到标题化合物（2.76g）。此化合物呈膏状针状体，熔点：160～161℃，核磁谱：^δH（CDCl₃）6.93（1H，s，ArH），6.91（1H，J_AB，8.8Hz，5H），6.80（1H，J_AB，8.8Hz，4H），5.49（2H，s，CH₂），4.95（2H，brs，NH₂），3.91（3H，s，OCH₃），3.90（3H，s，OCH₃），3.89（3H，s，OCH₃）.

（b）N-〔6-（2-溴-3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯

采用与实施例1-3相同的方法制得标题化合物。此标题化合物是白色粉末，熔点218-219℃，核磁谱^δH（CDCl₃）9.45（1H，brs，NH），8.03（1H，brs，3H），7.75（1H，J_AB，8.8Hz，8H），6.94（1H，s，ArH），6.75（1H，J_AB，8.8Hz，7H），5.40（2H，s，ArCH₂）和3.96-3.86（12H，m，OCH₃）.

实施例32-45

下面的化合物均采用与实施例1-3相类同的方法制备。

实施例32

N-〔6-（2，3-二甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，熔点：210-211℃，核磁谱^δHd₆（DMSO）10.35（1H，brs，NH），7.86（1H，J_AB，8.8Hz，8H），7.84（1H，s，3H），7.10（3H，s，PhH），6.88（1H，J_AB，8.8Hz，7H），5.35（2H，s，CH₂），以及3.86，3.80和3.72（9H，s，OCH₃）.

实施例33

N-〔6-（3，5-二甲氧基-4-乙氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，熔点190-193°，核磁谱^δH（d₆DMSO）10.33（1H，brs，NH），7.88（1H，J_AB，8.8Hz，8H），7.85（1H，s，3H），6.88（1H，J_AB，8.8Hz，7H），6.85（2H，s，ArH），5.77（2H，s，ArCH₂），3.90（2H，q，J7Hz，CH₂CH₃），3.80（6H，s，ArOCH₃），3.69（3H，s，CO.OCH₃），1.24（3H，t，J7Hz，CH₂CH₃）.

实施例34

N-〔6-（2-叔丁基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，熔点220-223°，^δH（DMSO）9.95（1H，brs，NH），7.85（1H，s，3H），7.8（1H，J_AB8Hz，8H），7.5（2H，m，ArH），7.28（2H，m，ArH），6.8（1H，J_AB8Hz，7H），5.5（2H，s，CH₂），3.7（3H，s，OMe），1.4（9H，s，Me₃）.

（产自中间体22）

实施例35

N-〔6-（2-乙基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，熔点：190-191°，^δH（DMSO）9.95（1H，brs，NH），7.85（1H，s，3H），7.8（1H，J_AB8Hz，8H），7.45（1H，d，ArH），7.3（3H，m，ArH），6.8（1H，J_AB8Hz，7H），5.4（2H，s，O-CH₂），3.7（3H，s，OMe），2.7（2H，quad，CH₂），1.2（3H，t，Me）.

（产自中间体23）

实施例36

N-〔6-（2，5-二甲基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸正丙酯，熔点196-7°，^δH（DMSO）9.85（1H，brs，NH），7.85（1H，s，3H），7.80（1H，J_AB8Hz，8H），7.25（1H，s，6′H），7.1（2H，2d，3′H and 4′H），6.8（1H，J_AB8Hz，7H），5.35（2H，s，OCH₂），4.1（2H，t，OCH₂），2.3（6H，2s，2X ArMe），1.7（2H，quad，CH₂），0.95（3H，t，Me）.

（产自氯乙酰氨基甲酸正丙酯和中间体24）

实施例37

N-〔6-（3，4，5-三甲基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，熔点227-229°，^δH（DMSO）9.90（1H，brs，NH），7.85（1H，s，3H），7.75（1H，J_AB8Hz，8H），7.15（2H，s，ArH），6.80（1H，J_AB8Hz，7H），5.25（2H，s，OCH₂），3.7（3H，s，OMe），2.28（6H，s，2XArMe），2.15（3H，s，ArMe）.

（产自中间体25）

实施例38

N-〔6-（2-苯基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，熔点203-204，^δH（DMSO）9.92（1H，brs，NH），7.75（1H，J_AB8Hz，8H），7.70（1H，s，3H），7.4（9H，m，9ArH），6.75（1H，J_AB8Hz，7H），5.3（2H，s，OCH₂），3.7（3H，s，OCH₃）.

（产自中间体26）

实施例39

N-〔6-（3-二乙氨基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸氢氯甲酯，熔点220-225°，^δH（DMSO），10.35（1H，brs，NH），7.9（1H，J_AB8Hz，8H），7.8（1H，s，3H），7.6（4H，m，4X ArH），6.9（1H，J_AB8Hz，7H），5.4（2H，s，CH₂O），3.7（3H，s，OMe）3.5（4H，brs，2X CH₂N），1.05（6H，t，2X Me）.（产自中间体27）

实施例40

N-〔6-（3-甲氨基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯氢氯酸盐，熔点213-215°（分解），^δH（DMSO）10.4（1H，brs，NH），7.9（1H，J_AB8Hz，8H），7.85（1H，s，3H），7.3（4H，m，4ArH），6.9（1H，J_AB8Hz，7H），5.4（2H，s，CH₂O），3.7（3H，s，OMe），2.85（3H，s，MeN）.

（产自中间体28）

实施例41

N-〔6-（3-二甲胺基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸乙酯，熔点204-8^δH（DMSO）9.95（1H，brs，NH），7.85（1H，s，3H），7.80（1H，J_AB8Hz，8H），7.2（1H，t，5′H），6.85（1H，J_AB8Hz，7H），6.75（3H，m，3ArH），5.3（2H，s，CH₂O），4.2（2H，quad，OCH₂），2.9（6H，s，Me₂N），1.25（3H，t，Me）.

（产自中间体7）

实施例42

N-〔6-（1-萘基甲氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸乙酯，熔点240-245°，^δH（DMSO），10.0（1H，brs，NH），8.2（1H，m，ArH），8.05（2H，m，2ArH），7.95（1H，s，3H），7.90（1H，J_AB8Hz，8H），7.85（1H，d，2′H），7.65（3H，m，3ArH），6.90（1H，J_AB8Hz，7H），5.95（2H，s，CH₂O），4.25（2H，quad，OCH₂），1.35（3H，t，Me）.

（产自中间体3）

实施例43

N-〔6-（1-萘基甲氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸正丙酯

熔点208-210°，^δH（DMSO），10.25（1H，brs，NH），8.15（1H，m，ArH），8.00（2H，m，2ArH），7.90（1H，s，3H），7.85（1H，J_AB8Hz，8H），7.75（1H，d，2′H），7.60（3H，m，3ArH），6.85（1H，J_AB8Hz，7H），5.8（2H，s，OCH₂），4.1（2H，t，OCH₂），1.65（2H，m，CH₂），0.9（3H，t，Me）.

（产自中间体3）

实施例44

N-〔6-（3-甲氧基-1-萘基甲氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯

^δH（DMSO）10.0（1H，brs，NH），8.1（1H，d，ArH），7.9（2H，m，ArH+3H），7.85（1H，J_AB8Hz，8H），6.85（1H，J_AB8Hz，7H），5.8（2H，s，CH₂O），3.90（3H，s，OMe），3.7（3H，s，OMe）.

（产自中间体29）

实施例45

N-〔6-〔2-（3，4，5-三甲氧基苯基）乙氧基〕咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯

熔点203-6°，^δH（DMSO）9.95（1H，brs，NH），7.80（1H，s，3H），7.75（1H，J_AB8Hz，8H），6.8（1H，J_AB8Hz，7H），6.65（2H，s，2ArH），4.5（2H，t，CH₂O），3.8（6H，s，3MeO，5MeO），3.7（3H，s，OMe），3.65（3H，s，4MeO），3.0（2H，t，CH₂）.

（产自中间体30）

实施例46

N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苯乙基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯

（a）4-氧-6-（3，4，5-三甲氧基苯乙基）己-5-烯酸

将乙酰丙酸（50g，0.43mol）的水（200ml）溶液加入到3，4，5-三甲氧基苯甲醛（85g，0.43mol）、乙醇（150ml）和氢氧化钠溶液（5%，700ml）的混合物中，强力搅拌并温热该混合物直到所有的醛溶解。然后将其倾倒在冰上（约2Kg）。将该混合物酸化至PH3～4，并保留过夜。将结晶体滤出，并于真空下干燥，然后再经由乙醇中重结晶，便可得到淡黄色的晶体（30.08g），熔点：187-9℃核磁谱：

^δH（d₆-DMSO），7.57（1H，d，J_A1B1＝18.0Hz，CH），7.08（2H，s，2′H，6′H），6.91（1H，d，J_AB＝18.0Hz，CH），3.83（6H，s，3′-MeO and 5′MeO），3.70（1H，s，4′MeO），3.33（1H，br.m，Unres，CO₂H），2.92（2H，t，J_A2B2＝7.0Hz，CH₂）和2.50（2H，t，J_A2B2＝7.0Hz，CH₂）.

（b）4，5-二氢-6-（3，4，5-三甲氧基-α-苯乙烯基）哒嗪-3（2H）-酮

将4-氧-6-（3，4，5-三甲氧基苯乙基）己-5-烯酸（20g，0.068mol）溶于240ml冰醋酸中，然后加入水合肼（3.4g，0.068mol）。该混合物加热回流2.5小时，然后冷却，并被倾入水中（约21）。静置过夜后，将所形成的晶体抽滤滤出，经真空干燥便得到产品（13.58g）。产品之一部分（3.5g）再经由甲醇中重结晶，获得淡黄色晶体（3.18g），熔点：173-5℃，核磁谱：^δH（CDCl₃），8.91（1H，brs，NH），6.82（2H，s，CH，CH），6.70（2H，s，CH，CH），3.89（6H，s，3′-MeO and 5′-MeO），3.87（3H，s，4′MeO），2.82（2H，t，J_AB＝9.0Hz）和2.56（2H，t，J_AB＝9.0Hz）.

（c）4，5-二氢-6-（3，4，5-三甲氧基苯乙基）哒嗪-3-（2H）-酮

在10%Pd/c催化剂（0.25g）存在的条件下，借助冰醋酸（150ml）对4，5-二氢-6-（3，4，5-三甲氧基-2-苯乙烯基）哒嗪-3（2H）-酮（5g，0.01mol）进行氢化处理，直到所需要的氢吸收被达到。然后通过Hyflo过滤器过滤该混合物，滤液在35℃于真空条件下蒸发。残余的痕量冰醋酸通过与甲苯共沸而去除。所得的棕色固体（4.9g）用硅胶色层分离法进一步纯化（所用洗脱剂为1%甲醇/二氯甲烷）。由相应部分去除溶剂即可得到白色固体产品（3.04g），熔点：116-117℃。核磁谱：^δH（CHCl₃），8.46（1H，s，br，NH），6.43（2H，s，2′H，6′H），3.83（6H，s，3′MeO and 5′MeO），3.81（3H，s，4′MeO），2.84（2H，t，J_AB＝7Hz，CH2），2.61（2H，t，J_AB＝7Hz），1.95（4H，m，Part，res，CH₂，CH₂）.

（d）6-（3，4，5-三甲氧基苯乙基）哒嗪-3（2H）-酮

回流4，5-二氢-6-（3，4，5-三甲氧基苯乙基）哒嗪-3（2H）-酮（1.72g，5.93mmol）和二氧化硒（0.98g，8.83mmol）的乙醇溶液（80ml）4.5天。然后加入二氧化硒（0.5g，4.51mmol）并继续回流5天。过滤该混合物以去除被分离的硒。真空蒸发滤液可得到棕色粘性固体（2.21g）。此固体用闪蒸色层分离法处理（用硅胶柱，1-2%甲醇-二氯甲烷作洗脱剂）。相应部分的结合即可产生砂棕色晶状固体（产品）（1.43g），其熔点122-4℃，核磁谱：^δH（CDCl₃）11.64（1H，brs，NH），7.08（1H，d，J_AB＝6Hz.HetCH），6.89（1H，d，J_AB＝6Hz，HetCH），6.48（2H，s，2′H，6′H），3.83（9H，2s，3′MeO and 5′MeO，4′MeO）和2.82（4H，s，CH₂-CH₂）.

（e）3-氯-6-（3，4，5-三甲氧基苯乙基）哒嗪

将6-（3，4，5-三甲氧基苯乙基）哒嗪-3（2H）-酮（2.80g，9.65mmol）和磷酰氯（70ml）的混合物加热到100℃，（保温）一小时，然后冷却到室温。通过逐步加水使之水解。操作时须注意温度不应超过30℃，该操作需时约3小时。加入氢氧化钠溶液（10N，700ml）碱化该混合物PH＝12，并在4℃下静置过夜。抽滤分离出沉淀，用水洗涤沉淀以去除无机盐。烧结玻璃漏斗上的残余物可用二氯甲烷溶解，经（Na₂SO₄）干燥后，将溶剂去除便可得到浅棕色固体（2.84g）。此固体经闪蒸色层分离法提纯（使用硅胶柱，用10%醋酸乙酯/二氯甲烷作洗脱剂）。将相应的部份结合便可得到白色固体（2.16g），熔点105-106℃，核磁谱：^δH（CDCl₃）7.38（1H，d，J_AB＝9Hz，HetCH），7.16（1H，d，J_AB＝9Hz，HetCH），6.37（2H，s，2′H，6′H），3.82（9H，s，3′MeO，4′MeO and 5′MeO），3.37（2H，t，J_A2B2＝9H，CH₂），3.04（2H，t，J_A2B2＝9Hz，CH₂）.

（f）3-氨基-6-（3，4，5-三甲氧基苯乙基）哒嗪

在不锈钢高压釜中加热3-氯-6-（3，4，5-三甲氧基苯乙基）哒嗪（1.97g，6.38mol）的甲醇氨（饱和的，800ml）溶液至150℃，保温65小时，然后使其冷却。真空蒸发该混合物以得到黑棕色粘性固体（2.84g）。此固体经闪蒸色层分离法提纯（使用硅胶柱，3%甲醇/二氯甲烷作为洗脱剂），将相关部份结合便可得到产品。此产品为白色固体（0.56g），熔点130-132°，核磁谱^δH（CDCl₃）6.96（1H，d，J_AB＝9.0Hz，HetCH），6.67（1H，br，d，J_AB＝9.0Hz，HetCH），6.42（2H，s，2′H，6′H），4.74和1.98（2H，brs，-NH₂），3.83（9H，s，3′MeO，4′MeO 5′Meo），3.13（2H，Part res m，CH₂），3.01（2H，Part res，m.，CH₂）.

（g）N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苯乙基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯

在无水六甲基磷酰胺（从CaH₂中真空蒸馏，15ml）中加入3-氨基-6-（3，4，5-三甲氧基苯乙基）哒嗪（0.50g，1.73mmol）和N-氯乙酰氨基甲酸甲酯（0.26g，1.74mmol）。此混合物在氮气下被加热至100℃并搅拌4小时，然后冷却，倾入150ml水中。于此，沉淀被形成。静置过夜后，沉淀被滤出，并经真空干燥，产生乳白色的晶状固体（0.53g）。该固体经闪蒸色层分离（硅胶、1-2%甲醇/二氯甲烷作洗脱剂，）及由乙酸乙酯中重结晶被进一步纯化，成分灰白色的晶体（0.18g），熔点175-6°。核磁谱：^δH（CDCl₃）10.17（1H，br.s，NH），8.18（1H，br.s，Het 3-H）;7.77（1H，d，J_AB＝10Hz，Het CH），6.85（1H，d，J_AB＝10Hz，HetCH），6.42（2H，s，2′-H，6′-H），3.88（3H，s，CO₂Me）and 3.82（9H，S，3-MeO，4′-MeO，5′-MeO），3.12（2H，Part.res.m，CH₂），3.02（2H，Part，res，m，CH₂）.

实施例47

N-〔6-（3，4，5-三甲氧基-α-苯乙烯基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯

（a）6-（3，4，5-三甲氧基-α-苯乙烯基）哒嗪-3（2H）-酮

实施例46（b）的化合物（10.0g，34.4mmol）和二氧化硒（10g，90.1mmol）于乙醇（300ml）中加热回流80小时。再加入二氧化硒（10g）并继续回流40小时。然后该反应混合物通过Hyflo（过滤器）过滤并蒸发。余留物经真空干燥便成为黑棕色粘性固体（14.48g）。该固体然后经色层法分离（采用硅胶，以1-2%甲醇/二氯甲烷作洗脱剂）。将相应的部份结合，随后经甲醇中重结晶便可产生砂棕色固体（5.57g），熔点194-196℃。核磁谱：^δH（CDCl₃）11.95（1H，br.s，NH），7.66（1H，d，J_A1B1＝10Hz，Het CH），7.10（1H，d，J_A2B2＝18Hz，CH），7.01（1H，d，J_A1B1＝10Hz，HetCH），6.92（1H，d，J_A2B2＝18Hz，CH），6.74（2H，s，2′-H，6′-H），3.91（6H，s，3′-MeO，5′-MeO）和3.88（3H，4′-MeO）.

（b）3-氯-6-（3，4，5-三甲氧基-α-苯乙烯基）哒嗪

6-（3，4，5-三甲氧基-α-苯乙烯基）哒嗪-3（2H）-酮（5.3g，0.018mmol）于磷酰氯（150ml）中被加热至100℃，保温1.25小时。将此混合物于2小时内逐步加到3l水中，以保持温度在10-30℃范围内。然后用氢氧化钠溶液（10N 1.3l）将该混合物碱化至PH＝10。静置过夜后，滤出沉淀，经真空干燥即得到砂棕色固体产品（6.24g）。部分产品经乙醇中重结晶后其熔点为162～163.5℃。核磁谱：^δH（CDCl₃）7.64（1H，d，J_A1B1＝10Hz，Het CH），7.54（1H，d，J_A2B2＝18Hz，CH），7.48（1H，d，J_A1B1＝10Hz，Het CH），7.27（1H，d，J_A2B2＝18Hz，CH），6.82（2H，s，2′-H，6′-H），3.92（6H，s，3′-MeO and 5′-MeO），3.88（3H，s，4′-MeO）.

（c）3-氨基-6-（三甲氧基-α-苯乙烯基）哒嗪

在不锈钢高压釜中将3-氯-6-（3，4，5-三甲氧基-α-苯乙烯基）哒嗪（5.5g，17.1mmol）的甲醇氨饱和溶液（800ml）加热到150℃，保温100小时，然后使其冷却。去除溶剂，并用色层分离法纯化固体（硅胶，2%甲醇/二氯甲烷），可得到浅棕色固体产品（1.58g），熔点139-142°。核磁谱^δH（CDCl₃）7.49（1H，d，J_A1B1＝10Hz，CH），7.24（2H，2X Superimposed d，J_A1B1，J_A2B2＝（10Hz，2XCH）），6.75（3H，d Superimposed on s，J_A2B2＝10Hz，CH，2′-H，6′-H），4.85（2H，br.s，NH₂），3.92（6H，s，3-MeO and 5-MeO）和3.87（3H，s，4-MeO）.

（d）N-〔6-（3，4，5-三甲氧基-α-苯乙烯基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯

在无水的六甲磷酰胺（从CaH₂真空蒸馏，30ml）中，加入3-氨基-6-（3，4，5-三甲氧基-α-苯乙烯基）哒嗪（1.36g，4.72mmol）和N-氯乙酰氨基甲酸甲酯（0.68g，4.49mol），将该混合物加热到100℃搅拌4小时，然后冷却并倾入40ml水中。滤出所形成的沉淀并于真空中干燥，可得黄棕色固体（1.0g）。此固体经色层分离（硅胶柱）得到淡黄色固体产品（0.4g）熔点217-9℃。

核磁谱：^δH（d₆-DMSO）10.49（1H，br.s，NH），7.99（1H，s，Het 3-H），7.94（2H，d，J_A1B1＝10Hz，HetCH），7.60（2H，d，J_A2B2＝18Hz，CH），7.58（2H，d，J_A1B1＝10Hz，HetCH），7.28（2H，d，J_A2B2＝18Hz，CH），7.04（2H，s，2′H，6′H），3.87（6H，s，3′-MeO and 5′-MeO），〔3.72（3H，s）和3.70（2H，s）〕（CO₂Me and 4′-MeO）.

实施例48

6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-羧酸叠氮（化物）（实施例23c）（1.0g，2.6mmol）在甲苯（20ml）和甲醇（约1.5ml）溶液中加热回流24小时。将该混合物冷却并经真空蒸发，得到黄色固体。此固体经由DMF和水中重结晶，便得到标题产品（1.05g），熔点213～215℃。核磁谱与实施例1的产品完全相同。

实施例49

（a）2-氨基-6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪三氟醋酸酯

在2ml二氯甲烷中溶入N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸叔丁酯（实施例13，0.43g，1mmol），并用1ml三氟乙酸处理该混合物。于室温下经2小时后，将该混合物真空蒸发得到棕色油状物，此油状物经二乙醚研制可得膏状标题化合物（0.25g），其熔点150-157℃，核磁谱：^δH（DMSO）8.0（1H，J_AB8.8Hz，8H），7.48（1H，s，3H），7.16（1H，J_AB8.8Hz，7H），6.44（2H，s，CH₂），4.5（brs，NH₈），3.89（6H，s，OMe），3.75（3H，s，OMe）.

（b）N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯

将悬浮于二氯甲烷中的步骤（a）产品（1.0g，3.03mmol）与稀氢氧化钠溶液一起振荡。用硫酸钠干燥有机相，并使其蒸发，可得到棕色油状体。将棕色油状体溶解于二氯甲烷中，并在搅拌条件下用三乙胺（0.42ml，3.03mmol），氯甲酸甲酯（0.23ml，3.03mmol）和4-二甲氨基吡啶（18mg，0.3mmol）处理该混合物。该混合物于室温下被搅拌17小时，然后加热回流2小时，并经真空蒸发。所得的固体在氯仿和水之间分配。有机相被分离，并经硫酸钠干燥及蒸发，得到固态物，随后对该固体进行色层分离（采用二氧化硅，2%甲醇-氯仿进行洗脱操作）。产物经DMF-H₂O重结晶便得到标题化合物（0.27g），熔点：210-212℃，核磁谱与实施例1的产品完全相同。

实施例50-52

用类似于实施例1-3中的方法制备下列化合物：

实施例50

N-〔6-（2，5-二甲基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，熔点208-209°，核磁谱^δH（d₆-DMSO），10.05（1H，br.s，NH），7.95（1H，J_AB8.8Hz，8H），7.85（1H，s，3-H），7.35（1H，s，6′-H），7.20（2H，J_AB8.8Hz，7H+d，3′or 4′-H），6.90（1H，d，3′or 4′-H），5.90（2H，s，CH₂），3.80（3H，s，OMe），2.4（3H，s，Me），2.35（3H，s，Me）.

（产自中间体24）

实施例51

N-〔6-（2-吡啶基甲氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯

熔点：231-233°（dec），核磁谱^δH（d₆-DMSO），9.95（1H，br.s，NH），8.55（1H，d，6′-H），7.85（3H，m，8-H+3-H+5′-H），7.55（1H，d，3′-H），7.35（1H，m，4′-H），6.90（1H，J_AB8.8Hz，7-H），5.45（2H，s，CH₂），3.70（3H，s，OMe）.

（产自中间体31）

实施例52

N-〔6-（2-糠氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，熔点220-224°，核磁谱^δH（d₆-DMSO），10.05（1H，br.s，NH），7.95（1H，s，3-H），7.90（1H，J_AB8.8Hz，8-H），7.75（1H，brs，5′-H），6.90（1H，J_AB8.8Hz，7-H），6.75（1H，d，4′-H），6.55（1H，br.s，3′-H），5.45（2H，s，CH₂），3.80（3H，s，OMe）.

（产自中间体32）

生物试验结果

A）微管蛋白聚合试验

材料和方法

1.微管蛋白的制备

a）鲜马脑

b）缓冲剂

BBG BB BB2G

100mM MES^*/NaOH 与BBG同与BBG同但

2mM EGTA^*但无甘油用8M甘油和

1mM MgSO₄1mMGTP^*

4M 甘油

2mM 二硫赤藓糖醇

在23℃下，PH＝6.9

＊MES＝2（N-吗啉代）乙烷磺酸

EGTA＝乙二醇双乙胺醚-N，N，N′，N′-四乙酸

GTP＝鸟苷三磷酸

除了另有规定之外，所有操作均在4℃下进行。用冰冷却的BBG缓冲剂洗涤马脑并去除表面脑膜和血管。称重后，裂开脑皮，并使其与BBG缓冲剂（75ml/100g脑）均化，以6500g（的加速度）离心处理15分钟。在移去上层清液后，再以100，000g（的加速度）离心处理75分钟。测定上层清液的体积（Vml），并加入（v/10）ml的10mMGTP（锂盐）水溶液。混合物在密闭离心管中于一振动的水浴中被培养（34℃培养30分钟）以聚合微管蛋白。聚合后，平衡试管并在预热旋转器中以100000g（的加速度）离心处理一小时（27℃）。高速颗粒再次被悬浮在（v/4）mlBB缓冲剂中。然后将制品于冰浴上搅拌30分钟，并以100，000g（的加速度）于4℃离心处理一小时，以移去冷稳定的微管。把等体积的BB2G缓冲剂加到已被速冻的上层清液（5ml样品）中（该样品是置于浮在干冰/乙醇浆上的塑料称量盘中），然后于-80℃静置过夜。大约18小时之后，将冷冻的微管蛋白样品融化，加入10mMGTP水溶液。最后得到1mM的浓度，并测定新的体积（Wml）。如上述那样重复聚合/解聚循环，但对再次循环的微管蛋白，其体积为W而不是V

2 微管蛋白聚合的浊度试验

仪器设备：6-位分光光度记录仪

恒温比色皿

满程偏移＝0.2吸光度单位

在1ml分光光度计比色杯中混合100μl由BB缓冲剂配制的10mMGTP（锂盐），10μl水或DMSO（取决于所选择的药物溶剂），BB缓冲剂及微管蛋白制剂，以使得在37℃、终体积为1ml时，A350 nm的最终增加值（16分钟后）为0.15单位（相当于100μl微管蛋白制剂或2.5mg蛋白质）。所有试剂被保存于冰上。

通过将温度升高至37℃引发聚合，记录（一组）三份样品相对参比样品的A350nm的增加值。参比样品包括类似的培养混合物，其中可不含微管蛋白或含有1m MCa⁺⁺。计算迟滞期结束后10分钟（在此时期内对比（样）聚合完成80%）初始A350nm的增加值，表示为对比（样品）值的百分率对药物浓度范围的关系。确定使对比值发生50%变化（IC₅₀）所需的药物浓度。

结果：

表1

化合物对应的全部微管蛋白聚合

实施例序号 Ic₅₀(μm)

1 0.42

2 0.14

3 0.41

4 0.37

5 0.49

7 0.52

8 0.23

9 0.89

11 4.24

12 1.21

B）P338D₁菌落形成试验

方法：

在本试验中，细胞，即P388是来自小鼠淋巴瘤的体外适应系，首先将细胞于24小时的期间内暴露于一系列稀释浓度的实验化合物培养基中，然后确定该处理（后）细胞经半固状无药介质再悬浮后，于14天的期间内形成离散菌落的能力。

首先，将对数生长（10g growth）的细胞引入专用的25cm²组织培养瓶中，每个瓶含有经10%胎盘牛血清、抗生素和试验化合物补足且最终体积为5ml的Hopes缓冲RPMI 1640培养基。将所有化合物首先配制于DMSO中，使之具有相应的浓度，然后取25μl添加到每个瓶中。根据下述浓度范围评价所有的化合物：自最高浓度起顺次以1/4递减，而最高浓度被设定为：比已知的可抑制这些细胞的大约80～90%增殖的（药剂）浓度（早期增殖试验）高大约1/4倍（four-fold）。

将暴露于试验化合物24小时后的细胞计数，把已知数目的活细胞转移到15ml离心试管中，然后向其中加入4ml的0.25%低温胶凝琼脂糖的完整RPMI组织培养基溶液。于37℃经13天培养后，将1ml的1%对碘硝基四鎓紫加到每个试管的顶部，随后经24～48小时使其得以渗过琼脂糖。这种染（色）剂经活细胞代谢变化而产生一种不溶性的红色晶状产物，该产物使得菌落的计数更为方便。从每个试管取样并测定最少含有50个细胞的菌落的数目。测定必要的化合物浓度，亦即在此浓度下化合物能抑制50%的菌落形成（相对于条件相同但无试验化合物的情况下所培养的对比细胞）。

结果如下：

表2

P388D₁菌落形成试验

化合物对应的实施例序号 IC₅₀(M)

1 1.32×10^-8

2 5.16×10^-10

3 2.15×10^-9

4 5.12×10^-9

5 1.26×10^-8

7 6.34×10^-9

8 2.93×10^-9

11 4.10×10^-8

C.淋巴细胞的白血病P388/0试验

方法：

同一性属的、体重为20±3克的CD₂-F₁小鼠被用于本试验。向对比动物及试验动物腹膜内注入含10⁶有活力的P388/0肿瘤细胞的悬浮液，注入当天记为零日。每个试验中，须估算数个剂量水平，这些剂量水平将化合物的LD₂₀归类;每个剂量水平组有6只动物。可用含0.05%的聚山梨醇酯八十的生理盐水或含5%的葡萄糖的蒸馏水来制备试验化合物。于肿瘤植入的第1、5和9天以腹膜内投药的方式投药。剂量是根据每个动物的体重以mg/kg为基准。记录每个动物死亡的日期并给出每组（动物）死亡的平均日期。对比组和处理组之间平均存活时间的差别以寿命增长百分数来表示（%ILS）。

结果：

表3

淋巴细胞的白血病P388/0试验

化合物对应剂量

%ILS 30天存活(率) 60天存活(率)

的实施例序号(mg/kg)

1 10 300 6/6 2/6

2 7.3 31

3 50 136

4 20 44

5 150 61

7 5 111

8 10 44

9 200 180

11 675 155 1/6 0/6

12 675 170

26 300 263

32 750 280 1/6

33 200 240 3/6(第51天)

D.LD₂₀（鼠）

方法：

按淋巴细胞白血病P388/0试验（c）所述的方法制备试验化合物，并在第1、5和9天，以不同的剂量水平给各组CD₂-F₁小鼠（每组6只）进行腹膜内投药。所有小鼠均为同性，体重20±3克。对这些小鼠进行14天的观察（从第1天起），记录每组小鼠的死亡数并确定LD₂₀。

结果：

表4

化合物对应的实施例序号 LD₂₀(mg/kg)

1 20～30

2 5

3 200

4 20

5 140

7 15

8 15

9 450

11 >450

12 >450

26 450

31 165

32 >450

E.对耐药肿瘤的活性

采用类似于淋巴细胞白血病P388/0试验的程序，估测实施例1化合物对耐下列标准临床抗瘤剂的P388/0肿瘤的功效：

联氯亚硝基脲（BCNU）

环磷酰胺（CPA）

亚德里亚霉素（ADR）

放线菌素D（Act D）

氨甲喋呤（MTX）

5-氟尿嘧啶（5FU）

顺-铂（Cis-Pt）

长春新碱（VCR）

胺苯吖啶（Amsacrine）（AMSA）

结果：

表5

实施例1化合物对耐药肿瘤的体内活性

肿瘤/抗药化合物最佳剂量 %ILS 60天存活(率)

(mg/kg)

P388/BCNU 实施例1 7.5 +131 0/6

BCNU 2.0 +36 0/6

P388/Cis-Pt 实施例1 10.0 +50 1/6

Cis-Pt 5.3 +21 0/6

P388/AMSA 实施例1 5.0 +134 4/6(第31天)

AMSA / / /

P388/ADR 实施例1 10.0 +90 0/6

ADR 4.5 +27 0/6

P388/MTX 实施例1 7.5 +100 1/6

MTX 3.0 +15 0/6

P388/Act D 实施例1 12.5 +109 1/6

Act D 0.5 +27 0/6

P388/CPA 实施例1 12.5 +150 1/6

CPA 265.0 +55 0/6

P388/VCR 实施例1 12.5 +145 3/6

VCR 1.5 +36 0/6

P388/5-FU 实施例1 10.0 +92 0/6

5-FU 20.0 +71 0/6

F。对人体肿瘤细胞系的体外活性

方法：

将来自人体肿瘤细胞系DLD-1、HCT-116、WiDr和A549的细胞暴露于一系列（顺次）稀释浓度的试验化合物培养基内，周期为96小时。测定细胞在整个试验周期内的增殖能力。

将对数生长的细胞置于96井的多井组织培养盘上，每只井中含有用10%牛胎盘血清、抗生素和试验化合物补充的100μl RPMI 1640培养基。所有化合物先配制成合适的浓度（于DMSO中），其（在该溶剂中）最终浓度为盘中所需浓度的20倍。于向盘中各井中添加100μl之前，对整个介质作1∶10的最后稀释。根据下述的浓度范围对所有的化合物进行评估：自最高浓度顺次以1/4递减，该最高浓度被设置为：比已知的可抑制小鼠淋巴瘤P388D₁细胞的约80～90%增殖的（药剂）浓度（早期增殖试验）高约1/4倍（four-fold）。

经96小时后，将暴露于试验化合物的细胞的增殖与未处理的对比细胞按下述方法的一种进行比较：

a）抽出培养基的上清液，通过加入亚甲兰溶液（每升50%的乙醇水溶液含5克，每井加100μl）将细胞固定并着色。于室温经30分钟后，通过把盘浸在水中将游离的着色剂洗去。用含1% Sarkosyl（即Sigma）的磷酸盐缓冲盐水（每井100μl）将着色细胞溶解过夜。通过ELISA板（式）分光光度计读出波长为620nm时的吸光度。IC₅₀被定义为：将对比（无药物）培养液的吸光度减少到50%时的药物浓度。该方法被用于DLD-1细胞系。

b）将20μl的MTT（5mg/ml于PBS中）加到每个井中。培养4小时后，抽去每个井中的介质并用200μl的DMSO来代替，以便溶解生成的甲

晶体。通过ELISA板（式）分光光度计读出在540nm波长处的吸光度。IC₅₀被定义为：将对比（无药物）培养溶液的吸光度减少到50%时的药物浓度。本方法被用于WiDr、HCT-116和A549细胞系。

表6

针对人体肿瘤细胞系的体外活性

化合物对应的 IC₅₀(μM)×10^-3

实施例序号

DLD-1^(a)WiDr^(b)HCT-116^(b)A549^(b)

1 11.60 30.00 9.20 23.97

2 2.90 4.57 2.80 3.42

3 1.35 0.92 1.91 1.92

4 6.63 10.98 5.45 20.81

5 7.34 3.65 3.30 4.36

7 5.92 19.70 8.25 22.40

8 8.82 41.00 20.52 38.96

G.实施例1化合物对鼠瘤的体内活性

采用与淋巴细胞白血病P388/0试验相类似的程度，评价实施例1化合物对鼠瘤B16、L1210和M5076的活性。将含有10⁶瘤细胞的悬浮液腹膜下注入对比动物和试验动物体内并记为零日。B16瘤细胞是于0日以1∶10的细胞浆的形式腹膜内投入。于第1、5和9日将试验化合物腹膜下投药。对B16和M5076试验，每十只小鼠为一处理组;对L1210，每个处理组有6只小鼠。记录下每个动物的死亡日期并计算%ILS（寿命增长百分数），结果示于表7。

表7

针对鼠瘤的体内活性

肿瘤剂量(mg/kg) 平均%ILS 鉴定号(No of

(±SEM) expts)

M5076 5 28 1

L1210 10 134(±72) 2

B16 5 69(±4) 3

配制药实施例

A.片剂

通式（Ⅰ）化合物（以氢氯化物的形式） 100.0mg

予先凝胶处理的玉米淀粉 60.0mg

羟基乙酸淀粉钠 20.0mg

硬脂酸镁 4.0mg

将式（Ⅰ）化合物精细研磨并直接与粉末状赋形剂，予先凝胶处理的玉米淀粉和羟基乙酸淀粉钠混合。用经纯化的水湿润粉末以形成粒体。将该粒体干燥并与硬脂酸镁混合。然后将配料加压成药片，每片重大约184mg。

B.片剂

通式（Ⅰ）化合物 100.0mg

羟基乙酸淀粉钠 20.0mg

乳糖 83.8mg

硬脂酸镁 4.2mg

聚乙烯吡咯烷酮 14.0mg

将式（Ⅰ）化合物精细研磨并直接与粉末状赋形剂、羟基乙酸淀粉钠和乳糖混合。用溶解在纯化水和改性乙醇中的聚乙烯吡咯烷酮溶液湿润该粉末以形成颗粒体。该颗粒体经干燥并与硬脂酸镁混合。然后将配料加压成片，每片重大约222mg。

C。胶囊

式（Ⅰ）化合物 100.0mg

玉米淀粉 50.0mg

硬脂酸镁 3.0mg

将精细粉碎的式（Ⅰ）化合物与粉末状玉米淀粉混和。干燥后，将粉与硬脂酸镁混和并装入硬壳胶囊。

D。悬浮剂

式（Ⅰ）化合物 100.0mg

可分散的纤维素 100.0mg

甘油 500.0mg

蔗糖 3500.0mg

调味剂适量

染色剂适量

防腐剂 0.1%

纯化水适量～5ml

将式（Ⅰ）化合物悬浮于甘油和一份纯化水中。蔗糖和防腐剂溶于另一份热的纯化水中，然后加染色剂并溶解，随后加可分散的纤维素。将两种制备液混和并冷却，然后加入调味剂。用纯化水补至最终体积。得到的悬浮液是完全混合的。

E。体内注射剂

式（Ⅰ）化合物 5.0mg

氢氯酸用于调节PH值

注射用水适量～10ml

将式（Ⅰ）化合物加到一份注射用水中。用氢氯酸调节PH使化合物溶解。用注射用水补至最终体积。溶液通过混合成为完全的溶液。将溶液通过0.22微米的滤膜（过滤器）进行过滤灭菌，然后在无菌条件下操作，将其装入到10ml无菌安瓿瓶或管状瓶内。

Claims

1、一种制备含咪唑并哒嗪衍生物的抗肿瘤药物组合物的方法，包括以下步骤：

(1)制备式(Ⅰ)化合物或其盐：

式中：

R¹代表苯基并可任选由1至4个下述取代基所取代：C₁-C₆烷基、C₁-C₄烷氧基、由C₁-C₂烷氧基或C₁-C₂烷氧基-C₁-C₂烷氧基所取代的C₁-C₄烷氧基、苯基、卤素、氨基、以及由一个或二个C₁-C₄烷基取代的氨基；

代表萘基，并任选由C₁-C₄烷氧基所取代；

代表五元或六元杂环芳基，其中含选自氧、氮、硫的一个或二个杂原子；或者

代表C₃-C₆烷基；

R²代表苯基；或

代表C₁-C₄烷基，并任选由以下基团所取代：C₁-C₄烷氧基、羟基、卤素、以氮连接的六元杂环、氨基，所述氨基可任选由一或二个C₁-C₄烷基所取代；

R³代表氢原子或C₁-C₄烷基；

X代表氧或硫原子或-CH₂-；

Y代表-CH₂-或-CH₂-CH₂，或

X与Y一起成为-CH=CH-；

式(Ⅰ)化合物的制备包括：

(A)将通式(Ⅱ)的哒嗪衍生物与通式(Ⅲ)化合物反应

(其中，R¹，X和Y与式(Ⅰ)所限定的相同)

(其中，R²和R³与式(Ⅰ)的定义相同，Z代表一个卤素元子)

(B)将通式(Ⅳ)的哒嗪衍生物与通式(Ⅴ)化合物反应

(其中，R²和R³如式(Ⅰ)所限定，Z¹代表一个离去基团)

R¹CH₂X¹H (Ⅴ)

(其中，R¹如式(Ⅰ)所限定，X¹代表一个氧或硫原子)

(C)将通式(Ⅵ)化合物与相应的醇R²OH反应

(D)将通式(Ⅶ)化合物与用于引入-CO₂R²基的试剂反应

(E)将一种通式(Ⅰ)化合物转化成另一种通式(Ⅰ)化合物，随后，如果需要和/或适宜，制成相应的盐；

(2)将所制备的式(Ⅰ)化合物或其适于作为药物的盐或具生理功能的衍生物与适于用作药物的载体混配到一起。

2、权利要求1的方法，其中所用式（Ⅰ）化合物及其盐之中R¹代表具一至四个如下取代基的苯基：C₁-C₄烷氧基、C₁-C₄烷基、单-或二（C₁-C₄烷基）氨基、卤素。

3、权利要求2的方法，其中所用式（Ⅰ）化合物及其盐之中R¹代表具一至四个如下取代基的苯基：甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、叔丁基、甲基氨基、二甲基氨基、二乙基氨基、溴、氯。

4、权利要求1、2或3方法，其中所用式（Ⅰ）化合物及其盐之中R²代表C₁-C₄烷基，并可任选由甲氧基、三氟甲基、羟基、二甲基氨基、吗啉基所取代。

5、权利要求4的方法，其中所用式（Ⅰ）化合物及其盐之中R³代表氢、甲基、乙基。

6、权利要求1的方法，其中所用式（Ⅰ）化合物及其盐之中，R¹代表苯基，并可任选由一至四个选自C₁-C₄烷氧基、C₁-C₄烷基、卤素的取代基所取代;

R²代表C₁-C₄烷基;

R³代表氢或甲基;

Y-X代表-CH₂O-。

7、权利要求1的方法，其中所用的式（Ⅰ）化合物及其盐是：盐：

N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，

N-〔6-（3，5-二甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，

N-〔6-（2，5-二甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，

N-〔6-（1-萘基甲氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，

N-〔6-（3-甲基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，

N-〔6-（2，3-二甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，

N-〔6-（2，5-二甲基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，

N-〔6-（2，5-二甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸乙酯，

N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸乙酯，

N-甲基-N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，

〔N-〔6-（2-溴代-3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸甲酯，

N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸正丙酯，

N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸正丁酯，

N-〔6-（3，4，5-三甲氧基苄氧基）咪唑并〔1，2-b〕哒嗪-2-基〕氨基甲酸-2-甲氧乙酯。