CN1085666C

CN1085666C - 用于抑制蛋白质酪氨酸激酶介导的细胞增殖的6－芳基吡啶并[2,3－d]嘧啶和1,5－二氮杂萘

Info

Publication number: CN1085666C
Application number: CN95196230A
Authority: CN
Inventors: C·J·布兰克雷; A·M·朵和提; J·M·哈姆比; R·L·帕内克; M·C·施洛德; H·D·H·朔瓦勒特; C·阔诺里
Original assignee: Warner Lambert Co LLC
Current assignee: Warner Lambert Co LLC
Priority date: 1994-11-14
Filing date: 1995-11-13
Publication date: 2002-05-29
Anticipated expiration: 2015-11-13
Also published as: DK0790997T3; WO1996015128A2; MD1861G2; NO308250B1; DE69515898T2; MX9702245A; FI971953A; NZ296456A; PT790997E; FI971953A0; TJ342B; CZ139097A3; US5952342A; PL320169A1; MD970187A; SK60997A3; NO972198D0; ATE190978T1; NO972198L; RU2191188C2

Abstract

6-芳基吡啶并〔2，3-d〕嘧啶和1，5-二氮杂萘是蛋白质酪氨酸激酶的抑制剂，因此可用于治疗由之介导的细胞增殖。这些化合物特别适用于治疗动脉粥样硬化、再狭窄、牛皮癣，以及细菌感染。

Description

用于抑制蛋白质酪氨酸激酶介导的细胞增殖的6-芳基吡啶并[2，3-d]嘧啶和1，5-二氮杂萘

发明的所属领域

本发明涉及抑制蛋白质酪氨酸激酶(RTK)介导的细胞增殖。更具体地说，本发明涉及吡啶并〔2，3-d〕嘧啶和1，5-二氮杂萘化合物在抑制细胞增殖和蛋白质酪氨酸激酶酶促活性中的应用。

发明的背景

有许多疾病状态是以细胞的不受控制的增殖和分化为特征的。这些疾病状态牵涉到各种各样的细胞类型和病症，例如肿瘤、动脉硬化及再狭窄。细胞内蛋白质底物的生长因子刺激作用、自磷酸化和磷酸化是增殖性疾病的病理机制中的重要生物学过程。

在正常细胞中，蛋白质底物上酪氨酸残基的磷酸化在通过受刺激的细胞外生长因子受体发动的细胞内生长信号传递途径中具有重要功能。例如，血小板衍生的生长因子(PDGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)及表皮生长因子(EGF)等生长因子与其各自的细胞外受体结合，将激活这些受体的细胞内酪氨酸激酶区域，从而催化细胞内底物或受体本身的磷酸化。在对配体结合反应中生长因子受体的磷酸化称为自身磷酸化。

例如，EGF受体具有其当作最重要的配体EGF和转化生长因子α(TGFα)。受体在正常成年人中似乎只有很小功能，但它们可卷入大部分肿瘤，特别是结肠癌和乳腺癌的疾病过程中。密切相关的Erb-B2和Erb-B3受体具有一个Heregulins家族作为它们的主要配体，并且受体过表达和成熟已明确地证明它们是预后不良的乳腺癌的主要危险因子。

血管平滑肌细胞(VSMC)的增殖和定向迁移是血管再建、再狭窄和动脉硬化等过程中的重要构成部分。已将血小板衍生的生长因子鉴定为最强有力的内源性VSMC促分裂原和化学引诱物之一。已在气球损伤的大鼠颈动脉冲观察到PDGF-A和-B链及PDGF受体的提高的血管mRNA表达(J.Cell.Biol.，111：2149-2158(1990))。在该损伤模型中，灌注PDGF也大大增加内膜增厚程度并加快VSMC的迁移(J.Clin.Invest.，89：507-511(1992))。此外，PDGF中和抗体显著减小气球损伤后的内膜增厚程度(Science，253：1129-1132(1991))。

酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)都具有许多生物学活性，包括促进细胞增殖和分化的能力。已显示阻断PDGF信号转导途径的酪氨酸磷酸化抑制剂受体酪氨酸激酶抑制剂在气球血管成形术大鼠模型体内抑制PDGF刺激的受体酪氨酸激酶磷酸化作用(Drug Develop.Res.，29：158-166(1993))。Lindner和Reidy(Proc.Natl.Acad.Sci.USA，88：3739-3743(1991))已报导了支持FGF参于VSMC的直接证据，他们证明当在损伤后2天检测时，在对大鼠颈动脉进行气球血管成形术前全身注射抗bFGF中和抗体，抑制了损伤诱导的中度SMC增殖达80％以上。很可能是从受损的细胞中释放的bFGF以旁分泌方式发挥作用，以诱导VSMC生长。最近，Lindner和Reidy(Cir.Res.，73：589-595(1993))证明增加了气球损伤之大鼠颈动脉内表制剂中复制VSMC和皮内细胞内bFGF及FGFR-2mRNA的表达。这些数据进一步说明，在受损的动脉中bFGF和FGFR-1的配体/受体系统可能参于VSMC的连续增殖反应，以导致新生内膜形成。

因此，EGF、PDGF、FGF及其他生长因子在肿瘤、动脉硬化及再狭窄等细胞增殖性疾病的病理机制中起着关键性作用。在与其各自的受体结合之后，这些生长因子刺激酪氨酸激酶活性，作为最初的生化过程之一导致DNA合成和细胞分裂。从而抑制与细胞内生长因子信号转导途径相关之蛋白质酪氨酸激酶的化合物可以用作治疗细胞增殖性疾病的药剂。我们现已发现，某些吡啶并〔2，3-d〕嘧啶和1，5-二氮杂萘可抑制蛋白质酪氨酸激酶，并可用于治疗和预防动脉硬化，再狭窄及肿瘤。

几种吡啶并〔2，3-d〕嘧啶和1，5-二氮杂萘是已知的。例如，美国专利No.3,534,039公开了一系列作为利尿剂的2，7-二氨基-6-芳基吡啶并〔2，3-d〕嘧啶化合物；美国专利No.3,639,401公开了一系列作为利尿剂的6-芳基-2，7-双〔(三烷基甲硅烷基)氨基〕吡啶并〔2，3-d〕嘧啶化合物；美国专利No.4,271,164公开了一系列抗高血压剂的6位取代的芳基吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-胺及衍生物；欧洲公开专利申请No.0537463 A2公开了一系列用作除草剂的取代的吡啶并〔2，3-d〕嘧啶；美国专利No.4,771,054公开了某些作为抗生素的1，5-二氮杂萘。上述参考文献均没有提到本发明的化合物，也没有提示这些化合物可用于治疗动脉硬化，血管再狭窄和肿瘤。

发明的概要

本发明提供用于抑制蛋白质酪氨酸激酶，并因而可有效地治疗动脉硬化、血管再狭窄及肿瘤等细胞增殖性疾病的，有吡啶并〔2，3-d〕嘧啶和1，5-二氮杂萘特征的新化合物。本发明特别涉及由下列式I限定的化合物。

其中

X是CH或N；

B是卤素、氢或NR₃N₄；

R₁、R₂、R₃和R₄各自是氢、C₁-C₈烷基、C₂-C₈链烯基、C₂-C₈炔基、Ar’、氨基、C₁-C₈烷基氨基或二-C₁-C₈烷基氨基；其中烷基、链烯基和炔基基团可被NR₅R₆取代，这里R₅和R₆独自是氢、C₁-C₈烷基、C₂-C₈链烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₁₀环烷基或

并且其中上述任何烷基、链烯基和炔基基团均可被羟基或含有1或2个选自氮、氧和硫的杂原子的5元或6元碳环或杂环取代，并且R₉、R₁₀、R₁₁和R₁₂各自是氢、硝基、三氟甲基、苯基、被取代的苯基、-C≡N、-COOR₈、-COR₈、

SO₂R₈、卤素、C₁-C₈烷基、C₁-C₈烷氧基、硫代、-S-C₁-C₈烷基、羟基、C₁-C₈链烷酰基、C₁-C₈链烷酰氧基，或-NR₅R₆，或者当R₉和R₁₀相邻时它们一起可以是亚甲二氧基；n是0、1、2或3；并且其中R₅和R₆与它们所连接的氮一起组成一个有3至6碳原子，并且可含有选自氮、氧和硫的杂原子的环。

R₁和R₂与它们所连接的氮一起，以及R₃和R₄与它们所连接的氮一起也可以是

或者可构成一个有3至6个碳原子，并可含有1或2个选自氮、氧及硫的杂原子的环，R₁和R₃还可以是选自

或

的酰基类似物，其中R₈是氢、C₁-C₈烷基、C₂-C₈链烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₁₀环烷基，并可含有氧、氮或硫原子，

以及-NR₅R₆，并且其中R₈烷基、链烯基和炔基基团可被NR₅R₆所取代；

Ar和AR’是选自苯基、咪唑基、吡咯基、吡啶基、嘧啶基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、吡嗪基、噻唑基、噁唑基、异噁唑基、呋喃基、噻吩基、萘基的未被取代或被取代的芳族或杂芳族基团，其中取代基是如上文限定的R₉、R₁₀、R₁₁和R₁₂。

以及其医药上可接受的酸和碱加成盐；条件是当X是N且B是NR₃R₄时，R₃和R₄之一是氢以外的其他基团。

优选的化合物为其中Ar是苯基或式之被取代苯基的式I化合物。

另外优选的是其中B为～NR₃R₄的化合物。

再一种优选的化合物是其中R₁和R₃中之一或两者为

或且R₂和R₄为氢的化合物。

进一步优选的化合物是其中B为NR₃R₄，R₁和R₃独自为氢，

或

这里R₈为C₁-C₈烷基或NR₅R₆的式I化合物。

一组特别优选的化合物具有下列结构式

其中R₂和R₄是氢，R₁和R₃独自是氢、C₁-C₈烷基，或

这里R₈是C₁-C₈烷基或-NR₅R₆，R₅是氢且R₆是C₁-C₈烷基，R₉和R₁₀独自是氢、卤素、C₁-C₈烷基或C₁-C₈烷氧基。

另一组特别优选的化合物具有下列结构式其中R₁、R₂、R₉和R₁₀定义同上。

再一组优选的化合物是下列结构式的化合物：

再一组优选的化合物是下列结构式的化合物特别是其中R₅和R₆与它们所连接的氮一起形成环，例如吗啉代、哌嗪子基、4-烷基哌嗪子基等。

再一组优选的化合物是下列结构式的化合物其中R₂和R₄是氢，R₁和R₃独自是氢、C₁-C₆烷基，或

这里R₈、R₉和R₁₀是如上文所定义的。

再一组优选的化合物是下列结构式的化合物

特别是其中R₅和R₆与它们所连接的氮一起形成环，例如吗啉代、哌嗪子基、4-烷基哌嗪子基等。

本发明的最优选的化合物包括：

1-叔丁基-3-〔7-(3-叔丁基脲基)-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕脲；

1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲；

1-叔丁基-3-〔7-(3-叔丁基脲基)-6-邻-甲苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕脲；

1-〔2-氨基-6-邻甲苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲；

1-〔2-氨基-6-(2，6-二甲基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲；

N-〔2-乙酰氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-乙酰胺；

N⁷-丁基-6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺；

3-邻甲苯基-〔1，6〕-1，5-二氮杂萘-2，7-二胺；

3-(2-氯苯基)-〔1，6〕-1，5-二氮杂萘-2，7-二胺；

N²，N⁷-二甲基-6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺；

7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙基氨基-丙基氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶；

1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕脲；

1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基脲；

1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯(苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基)-3-(3-吗啉代-4-基-丙基)-硫代脲；

1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-咪唑啉-2-酮；

N’-〔7-(3-叔丁基-脲基)-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕-N，N-二甲基-甲咪；

N’-〔6-(2，6-二氯苯基)-7-(二甲基氨基亚甲基氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕-N，N-二甲基-甲咪；

1-叔丁基-3-〔2-(3-二乙氨基-丙氨基)-6-(2，6-二甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲；

1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲；

1-〔2-氨基-6-(2，3-二氯-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；

1-〔2-氨基-6-(3-甲氧基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；

1-〔2-氨基-6-(2，3-二甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；

1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲；

N’-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-N，N-二甲基-甲脒；

1-〔2-氨基-6-(2，3，6-三氯-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；

1-〔2-氨基-6-(2-甲氧基-苯基)-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；

1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔(3-二甲基氨基-丙基)-甲基-氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；

1-(2-氨基-6-吡啶-3-基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基)-3-叔丁基-脲；

1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-苯基脲；

1-〔2-氨基-6-(2，3，5，6-四甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；

1-〔2-氨基-6-(2-溴-6-氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲；

1-(2-氨基-6-吡啶-4-基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基)-3-叔丁基-脲；

1-〔2-氨基-6-(3，5-二甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；

1-〔2-氨基-6-(2-溴-6-氯-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；

1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙基氨基-丁基氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基-脲；

丙烷-1-磺酸〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-酰胺；

1-〔2-氨基-6-(2，6-二氟苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲；

1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二溴苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲；

1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二甲氨基-2，2-二甲基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲；

1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(2-甲基-哌啶-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；

1-〔2-氨基-6-(2，4，6-三甲苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；

1-金刚烷-1-基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；

1-环己基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；

1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-(3-甲氧基-苯基)-脲；

1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯-苯基)-2-〔4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丁氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；

1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯-苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-硫代脲；

1-叔丁基-3-{2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-6-(2，3，5，6-四甲基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；

1-烯丙基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；

6-(2，6-二氯苯基-N⁷-(5，6-二氢-4H-〔1，3〕噁嗪-2-基)-N²-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺；以及

3-{6-(2，6-二氯-苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-1，1-二乙基脲。

再一组优选的化合物是有下列结构式的酰胺

特别是其中R₈为一NR₅R₆。

另一组优选的化合物是其中Ar为苯基或被取代苯基以外基团的式I化合物。这组化合物中典型的是有下列结构式的吡啶：

本发明还提供包含式I的化合物连同医药上可接受的载体、稀释剂或其赋形剂的药物配制品。

本发明范围内的化合物对EGF、FGF、PDGF、V-src和C-src之酪氨酸激酶区域的一个或多个底物位点具有特异亲和性。本发明范围内的化合物有效地抑制受体的EGF和PDGF自身磷酸化作用，并抑制血管平滑肌细胞增殖和迁移。

作为蛋白质激酶的抑制剂，本发明的化合物可用于控制哺乳动物的包括白血病、肿瘤、牛皮癣、与动脉硬化相关的血管平滑肌增殖，以及手术后血管狭窄及再狭窄在内的增殖性疾病。

本发明的再一个实施方案是治疗患有由血管平滑肌增殖引起之疾病的治疗对象的方法。该方法包括给需要治疗的对象投用有效量的式I化合物，以抑制血管平滑肌增殖和/或迁移。

最后，本发明涉及制备式I化合物及合成的中间体的方法。

本发明的详细描述

本发明的化合物可以以未溶剂化的以及溶剂化的，包括水合的形式存在。一般说来，溶剂化的形式，包括水合的形式等同于未溶剂化的形式，并且意欲包括在本发明的范围之内。在式I的化合物中，术语“C₁-C₈烷基”是指有1至8个碳原子的直链或支链烃残基，并包括例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、2，2-二甲基丙基、正己基、正庚基、正辛基等。优选的是C₁-C₆烷基基团。

“卤素”包括氟、氯、溴和碘。

“C₂-C₈链烯基”是指有2至8个碳原子并有1个双键的直链和支链烃残基，并包括乙烯基、3-丁烯-1-基、2-乙烯丁基、3-辛烯-1-基等。典型的C₂-C₈炔基基团包括丙炔基、2-丁炔-1-基、3-戊炔-1-基等。其中C₂-C₆链烯基是优选的。

“C₃-C₁₀环烷基”是指环或双环烃基基团，如环丙基、环丁基、环己基、环戊基、金刚烷基、双环〔3.2.1〕辛基、双环〔2.2.1〕庚基等，以及杂环基团例如哌嗪基、四氢吡喃基、吡咯烷基等。

“C₁-C₈烷氧基”是指通过氧结合的上述烷基基团，其例子包括甲氧基、乙氧基、异丙氧基、叔丁氧基、正辛氧基等。优选的是C₁-C₆烷氧基。

典型的“C₁-C₈链烷酰基”基团包括甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基及异丁酰基。“C₁-C₈链烷酰氧基”包括乙酰氧基、叔丁酰氧基、戊酰氧基等。

烷基链烯基和炔基均可被NR₅R₆和5元或6元碳环和含有1个或2个选自氮、氧和硫的杂环基团取代。这样环也可以是例如被1个或2个C₁-C₆烷基基团取代的。其例子包括二甲氨基甲基、4-二乙氨基-3-丁烯-1-基，5-乙基甲氨基-3-戊烯-1-基-4-吗啉代丁基、4-(4-甲基哌嗪-1-基)丁基，4-四氢吡啶基丁基-2-甲基四氢吡啶并甲基-、3-咪唑烷-1-基丙基、4-四氢噻唑-3-基-丁基、苯基甲基、3-氯苯基甲基等。

术语“Ar”和“Ar’”是指未被取代和被取代的芳族和杂芳族基团，例如苯基、3-氯苯基、2，6-二溴苯基、吡啶基、3-甲基吡啶基、苯并噻吩基、2，4，6-三溴苯基、4-乙基苯并噻吩基、呋喃基、3，4-二乙基呋喃基、萘基、4，7-二氯萘基等。

优选的Ar和Ar’基团是苯基和被1、2或3个独自选自卤素、烷基、烷氧基、硫代、硫代烷基、羟基、烷酰基、-CN、-NO₂、-COOR₈、-CF₃、烷酰氧基、或式-NR₅-R₆的氨基基团取代的苯基。优选的二取代的苯基，且特别优选的是2，6-二取代的苯基。其他优选的Ar和Ar’基团包括吡啶基，例如2-吡啶基和4-吡啶基。

因此典型的Ar和Ar’取代的苯基基团包括2-氨基苯基、3-氯-4-甲氧基苯基、2，6-二乙基苯基、2-正己基-3-氟苯基、3-羟苯基、3，4-二甲氧苯基、2，6-二氯苯基、2-氯-6-甲基苯基、2，4，6-三氯苯基、2，6-二甲氧苯基、2，6-二羟苯基、2，6-二溴苯基、2，6-二硝基苯基、2，6-二-(三氟甲基)苯基、2，6-二甲基苯基、2，3，6-三甲基苯基、2，6-二溴-4-甲基苯基等。

式I的化合物能够进一步形成医药上可接受酸加成盐和/或碱性盐。所有这些形式都包括在本发明范围内。

式I化合物的医药上可接受的酸加成盐包括衍生于无机酸例如盐酸、硝酸、磷酸、硫酸、氢溴酸、氢碘酸、亚磷酸等的盐，以及衍生于有机酸例如脂族单和二羧酸、苯基取代的链烷酸、羟基链烷酸、链烷双酸、芳族酸、脂族和芳族磺酸等的盐。因此这些盐包括硫酸盐、焦硫酸盐、双硫酸盐、亚硫酸盐、双亚硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸盐、丙酸盐、辛酸盐、异丁酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、苯甲酸盐、氯代苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐、苯乙酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐等。另外，还可包括氨基酸的盐，例如精氨酸盐等，以及葡糖酸盐和半乳糖醛酸盐(例如参见Berge S.M.et al.，“Pharmaceutical Salts”，J.ofPharmaceutical Science，66：1-19(1977))。

可以使游离碱形式的化合物与足够量的所需酸接触，以常规方法产生所说碱性化合物的酸加成盐。可以使盐形式的化合物与碱接触，并以常规方法分离游离碱，从而再生游离碱形式的化合物。游离碱形式在某些物质性质方面，例如在极性溶剂中的溶解度稍微不同于它们各自的盐，但从本发明目的考虑，盐等同于它们各自的游离碱。

与金属或胺，例如碱金属和碱土金属或有机胺形成医学上可接受的碱加成盐。作为阳离子使用的金属可以是钠、钾、镁、钙等。适当的胺的例子是N，N’-二苄基乙二胺、氯代普普卡因、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、N-甲基葡糖胺及普普卡因(例如参见Berge S.M.，et al.，“Pharmaceutical Salts”，J.of Pharmaceutical Science，66：1-19(1977))。

使游离酸形式的化合物与足够量的所需碱接触，以常规方法产生所说酸性化合物的碱加成盐。也可以使盐形式的化合物与酸接触，并按常规方法分离游离酸以再生游离酸形式的化合物。游离酸形式在某些物理性质，例如在极性溶剂中的溶解度方面稍不同于它们各自的盐形式，但就本发明的目的来说盐等于它们各自的游离酸。

虽然在本文中本发明是以优选实施方案的形式给出的，但还可能有许多其他方案。本文中使用的术语只是描述性的，而不是用于限制本发明，所以可以在不背离本发明的精神和范围的前提下对本发明作出各种改变。

可以按照路线I-VII简述的合成方法制备式I的化合物。虽然这些路线常常指明确切结构，但所说的方法可广泛应用于式I的类似化合物，其中包括使用有机化学领域中已知的方法适当地保护和去保护功能性反应基团。例如，为了防止不需要的付反应，一般须在化学反应期间，在分子的其他位点将羟基基团转变成醚或酯。可很容易地除去羟基保护基团，以提供游离羟基基团。同样也可以衍化氨基基团和羧酸基团，以防止其发生不期望有的付反应。Greene和Wuts在Protective Groups inOrganic Synthesis，John Wiley and Sons，New York(2nd Ed，1991)中，以及Mcomie在Protective Groups in Organic chemistry，Ple m Press，NewYork，1973中详细描述了典型的保护基团，及连接和除去它们的方法。

路线I描述了制备1-叔丁基-3-〔7-(3-叔丁基脲基)-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕脲和1-〔2-氨基-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲的典型方法，其中所使用关键性中间体2，7-二氨基-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶可按美国专利No.3,534,039中所述的方法制得。一般说来，可使2，7-二氨基-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶化合物与一当量的酰化剂例如异氰酸烷基酯、异硫氰酸盐、氨基甲酰氯、氨基甲酰溴、氨磺酰氯、氯甲酸酯、或其他活化的酸衍生物例如对称酸酐、混合酸酐等反应，以完成此反应。反应在净异氰酸酯中进行，或者在适当的非反应性溶剂如二甲基甲酰胺、二噁烷中，于碱特别是氢化钠存在下进行。可以使用两倍过量或更大量的酰化剂按上述同样方式与起始材料2，7-二氨基-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶反应，主要得到二酰化的化合物，例如1-叔丁基-3-〔7-(3-叔丁基脲基)-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕脲。

一般在大约20℃至80℃的温度下反应1-3小时即可基本上完成酰化作用。可按常规方法，例如过滤固体物并蒸发除去反应溶剂而很容易地分离出产物。必要时可用常规方法，例如从乙酸乙酯、二氯甲烷、己烷等有机溶剂中结晶，以及在固相载体例如硅凝胶上层析等方法进一步纯化产物。本发明的化合物一般是很易于结晶的固体物。

路线II图解显示2，7-二氨基-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶的典型酰化反应，其中使用2倍过量或更大过量的乙酐，经加热制备二酰化产物例如N-〔2-乙酰氨基-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-乙酰胺。更一般地说，可以用这种方法从适当的2，7-二氨基-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶化合物开始，用过量的酰化剂例如酸酐、混合酸酐，或活化的酰基衍生物如酰基氯和磺酰氯处理之，以制得这种类型的二酰化化合物。反应一般在大约20-200℃的温度下进行。为了清除反应过程中产生的酸性付产物，可以进行有机或无机碱例如三乙胺和氢氧化钠的加成反应。可用如上所述的层析和结晶方法很容易地分离并纯化二酰化产物。

路线III图解说明从可按美国专利No.3,534,039中所述方法制备的2，7-二氨基-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶开始，以几个步骤制备6-(芳基)-N⁷-烷基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺。在回流条件下用含水无机酸处理起始材料，以得到水解产物2-氨基-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-醇。在Vilsmeier-Haack条件下2-氨基-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-醇与亚硫酰氯反应产生氯-甲脒产物N’-(7-氯-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基)-N，N-二甲基-甲脒。该反应性中间体可直接与亲核试剂如胺反应，得到N⁷-烷基-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺。或者，也可以经醇化作用除去甲脒功能性，以提供7-氯衍生物，即2-氨基-7-氯-6-(芳基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶。7-氯中间产物与亲核试剂如烷基胺反应，得到相应的6-(芳基)-N⁷-烷基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺。

路线IV描述3-(芳基)-〔1，6〕1，5-二氮杂萘-2，7-二胺的制备，并代表制备这些化合物的通用方法学。6-溴-2，4-二氨基-5-氰基吡啶氢解(JACS，80：2838-2840(1958))后得到中间体2，4-二氨基-5-氰基吡啶。氰基吡啶化合物例如在适用于阮氏镍催化剂的甲酸-水混合物中氢化，得到关键性的多变中间体2，4-二氨基-5-吡啶-甲醛(carboxaldehyde)。然后该醛与路线IV中所述的芳基乙腈缩合，得到3-(芳基)-〔1，6〕1，5-二氮杂萘-2，7-二胺。在醇化物碱，例如乙醇钠或2-乙氧基乙醇钠(其可在原位自乙醇或2-乙氧基乙醇中加入钠金属或氢化钠而产生)存在下完成缩合反应。路线IV描述制备本发明3-(芳基)-(1，6)1，5-二氮杂萘-2，7-二胺的通用方法学。

路线V图解说明在高温度下高压气体贮罐中使用烷基胺对6-芳基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(美国专利No.3,534,039)进行直接二烷基化，得到N²，N⁷-二烷基-6-芳基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺。一般地说，该反应是使用净的胺试剂例如异丁胺和正己胺，于约150-300℃温度下在高压气体贮罐中完成的。

路线VI图解显示其中R₁可以是氨基烷基基团例如二乙氨基丙基的式I化合物的合成。6-(芳基)-2，7-二氨基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶可在高压气体贮罐中，于酸例如甲磺酸存在下与胺亲核试剂，例如氨基烷胺(如H₂N烷基-NR₅R₆)反应，以产生本发明的氨基烷基取代的化合物。必要时可用常规方法进一步酰化该化合物。很容易使用结晶和层析等常规方法学分离和纯化所需化合物。

路线VII图解说明其中R₃和R₄一它们所连接的氮一起形成环的式I化合物的合成。环上可包括另一个杂原子例如氮、氧或硫。在流程VII中，二氨基吡啶并嘧啶与异氰酸卤代乙酯反应，产生咪唑啉酮。反应一般是在有机溶剂例如二甲基甲酰胺中，并于碱例如氢化钠存在下进行。当反应温度为30℃时，反应通常需8至16小时完成。可用常规方法很容易地分离和纯化产物。

上述反应还产生其中R₁或R₃是式

的酰基类似物的式I化合物。

路线VIIa图解显示该反应。可用层析、分级结晶等常规方法分离产物。

本发明提供的另一组化合物是脒，其中R₁和R₂连同它们所连接的氮一起，以及R₃和R₄连接它们所连接的氮一起可以是具有式之基团的式I化合物。

路线VIII图解说明典型的吡啶并嘧啶脒的合成，其可由氨基吡啶并嘧啶与酰胺或环酰胺的乙缩醛，例如N，N-二甲基甲酰胺的二甲基乙缩醛或N-甲基吡咯烷酮的二甲基乙缩醛反应而生成。一般可在互溶剂例如二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、四氢呋喃等溶剂中，使氨基吡啶并嘧啶与大约等摩尔量的或过量的乙缩醛混合进行该反应。反应一般在大约5-50℃温度条件下进行约3-6小时。可用常规方法很容易地分离产物，并在必要时可用层析、结晶等常规技术纯化之。

本发明还提供其中氨基基团被芳基Ar’，例如苯基、被取代苯基、吡啶基、噻唑基、嘧啶基等取代的氨基吡啶并嘧啶。优选的N-芳基化合物具有下列结构式：其中Ar、Ar’和B的定义如上文所述。可用几种方法中的任何一种，例如流程IX和X中所述的方法制备这样的化合物。

在路线IX中，使例如在2位上被烷基硫代、烷基亚砜或烷基砜取代的吡啶并嘧啶与芳基胺(例如Ar’NH₂)反应，进行硫代亚砜或砜取代基的置换，以产生相应的N-芳基氨基吡啶并嘧啶。置换反应一般在例如二甲基甲酰胺等有机溶剂中，于大约20-80℃的温度下进行。反应时间约为3-8小时，并可将反应混合物加到水中，然后用溶剂例如二氯甲烷等提取产物而很容易地分离出所需产物。

路线X同样说明从适当的被取代嘧啶，例如4-氨基-2-氯嘧啶-5-腈开始合成N-芳基氨基吡啶并嘧啶的步骤。经与芳胺(Ar’NH₂)反应置换卤素基团，得到在5位上有氰基基团的相应的L-N-芳基氨基嘧啶。经与阮氏镍在水和甲酸中反应使氰基基团转变成醛，并按路线IV中所述方法使所得到的2-芳基氨基-4-氨基-嘧啶-5-羧醛与芳基乙腈(例如苯基乙腈、2-吡啶基乙腈等)反应，以得到相应的本发明的N-芳基-氨基-吡啶并嘧啶。

路线I

路线II

路线III

路线IV

路线V

路线VI

路线VII

路线VIIa

路线VIII

路线VIII(续)

路线IX

路线X

式I的化合物是蛋白质酪氨酸激酶的有价值的抑制物，作为治疗增殖性疾病的细胞抗增殖剂。而具有治疗价值。这些化合物是一种或多种蛋白质激酶、PDGF、FGF、EGF、V-src和C-src的强有力抑制剂。因此本发明化合物可用于治疗动脉硬化、血管再狭窄和肿瘤。可用这些化合物治疗的特异性肿瘤包括例如An.Rev.Respir.Dis.，142：554-556(1990)中描述的小细胞肺癌、Cancer Research，52：4773-4778(1992)中描述的人乳腺癌、Cancer Research，52：1457-1462(1992)中所述的这种类型的早期人膀胱癌、如J.Clin.Invest.，91：53-60(1993)中以及J.Surg.Res.，54：293-294(1993)中所述的人结肠癌。这类化合物还可用作对抗细菌例如肺炎球菌的抗生素。例如用标准的体外检测法检测时实施例9和18的化合物表现出抗这种革兰氏阳性细菌的活性。这些化合物还可用作抗多种不希望有的植物例如宽叶杂草的除草剂。

可以以多种口服和胃肠道外给药的剂型配制并服用(包括经皮内和直肠给药)本发明的化合物。本领域技术人员可以理解到，下述剂型中可包含作为活性成分的式I化合物或其医药上可接受的相应的盐，或式I化合物的溶剂化物。

本发明的再一个实施方案是包含式I化合物连同其医药上可接受的载体、稀释剂或赋形剂的药物配制品。为了制备本发明化合物的药物组合物，医药上可接受的载体可以是固体或液体的。固体形式的制剂包括粉末剂、片剂、药丸、胶囊剂、扁囊剂、栓剂及可分散颗粒。固体载体可以是一种或多种也能用作稀释剂、香味剂、粘合剂、防腐剂、药片崩解剂或胶囊封装材料的物质。

在粉末剂中，载体是精细粉碎的固体，例如与精细粉碎的活性成分混合的滑石粉或淀粉。

在片剂中，活性成分与适当比例的，有必要的粘结性质的载体混合，并压制成有所需形状和大小的药片。

本发明的药物配制品较好含有大约5％至70％的活性化合物。适当的载体包括碳酸镁、硬脂酸镁、滑石粉、糖、乳糖、果胶、糊精、淀粉、明胶、黄耆胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、低溶点蜡、可可脂等。口服用药的优选剂型是胶囊剂，其包含活性化合物与作为载体的胶囊包裹材料的配制品，在其所提供的胶囊中加有或没有其他载体的活性成分被载体所包绕，因而与之相联系。同样，也包括扁囊剂和锭剂。片剂、粉末剂、胶囊、药丸、扁囊剂和锭剂可用作适于口服给药的固体剂型。

为了制备栓剂，首先熔化低熔点蜡，例如脂肪酸甘油酯或可可脂的混合物，并于搅拌下将活性成分均匀地分散于其中。然后将熔化的物质混合物倒入常规大小的模子中，使之冷却并进而固化成形。

液体制剂包括溶液、悬液和乳液，例如水溶液或水-丙二醇溶液。为了胃肠道外注射，可在聚乙二醇水溶液、等渗盐水、5％葡萄糖溶液等溶液中配制液体制剂。

可以将活性成分溶解于水中并根据需要加入适当的着色剂、香料、稳定剂和增稠剂，以制得适于口服使用的水溶液。

可以将细微粉碎的活性成分分散于含粘性材料例如天然或合成树胶，树脂、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠，以及其他已知悬浮剂的水中，以制得适于口服使用的含水悬液。

另外还包括可在临用前转化成适于口服给药之液体制剂的固体形式的制剂。这样的液体剂型包括溶液、悬液和乳液。这些制剂除活性成分外，还可含有着色剂、香料、稳定剂、缓冲剂、人工和天然甜味剂、分散剂、增稠剂、增溶剂等。可以利用蜡、聚合物等制备缓释剂型。另外，可利用渗透泵长时间均匀地释放活性化合物。

本发明的药物制剂较好是单位剂量形式的。在这种剂型中，制剂被再分成含有适当量活性成分的单位剂量。单位剂量形式可以是包装的制剂，含有不同量制剂的包装，例如包装的片剂、胶囊及在小瓶或安瓶中的粉末。另外，单位剂量形式可以是胶囊、片剂、扁囊剂或锭剂本身，或者是在包装中的适当数目的单位制剂。

治疗有效剂量的式I化合物一般为大约每天每公斤体重1mg至100mg。典型的成人剂量约为每天50至800mg。根据活性化合物的特殊应用和效力的不同，单位剂量制剂中活性成分的量可有所不同并可以从大约0.1mg到500mg，较好大约0.5mg到100mg。需要时，组合物还可含有其他相容性治疗剂。需要用式I化合物治疗的对象每天可服用大约1至500mg，并在24小时内一次或多次服用。

已使用检测对酪氨酸激酶抑制作用的标准检测法估测了本发明的化合物。其中一种检测法如下所示：

表皮生长因子受体酪氨酸激酶的纯化

按下述方法从A431表皮样癌细胞中分离人EGF受体酪氨酸激酶。细胞生长于可加有50％Delbuco氏改良的Eagle培养基和50％含10％胎牛血清之HAM F-12营养培养基(Gibco)的转瓶内。使大约10⁹个细胞在含有20mM 2-(4N-〔2-羟乙基〕-哌嗪-1-基)乙磺酸(pH7.4)、5mM乙二醇双(2-氨基乙基醚)N，N，N’，N’-四乙酸、1％Triton x-100、10％甘油、0.1mM原钒酸钠、5mM氟化钠、4mM焦磷酸盐、4mM苯甲酰胺、1mM二硫苏糖醇、80μg/mL抑蛋白酶肽、40μg/mL亮抑蛋白酶肽和1mM苯基甲基磺酰氯的2倍体积缓冲液中溶胞。25,000xg离心10分钟后，用10mL预先在50mMHepes、10％甘油、0.1％Triton X-100和150mM NaCl(pH7.5)(平衡缓冲液)中平衡过的麦胚凝集素琼脂糖将上清液4℃平衡2小时。用加在平衡缓冲液中的1M NaCl从树脂上洗掉污染蛋白，并用加在平衡缓冲液中的0.5M N-乙酰-1-D-葡糖胺洗脱酶。

IC₅₀值的测定

在含有25mM Hepes(pH7.4)、5mM MgCl₂、2mM MnCl₂、50μm钒酸钠、5-10ng EGF受体酪氨酸激酶、200μM底物肽，例如(Ac-Lys-His-Lys-Lys-Leu-Ala-Glu-Gly-Ser-Ala-Tyr⁴⁷²-Glu-Glu-Val-NH2)(Wahl M.I.，et al.，J.Biol.Chem.，265：3944-3948(1990))、10μM ATr(含1μCi〔³²P〕ATP)的0.1mL总反应体积中进行IC₅₀检测的酶试验，并于室温下保温10分钟。加入2mL 75mM磷酸终止反应并通过2.5cm磷酸纤维素滤膜圆盘以结合肽。用75mM磷酸将滤膜洗5次并放在含5mL闪烁液(Ready gel Beckman)的小瓶内。

PDGF和FGF受体酪氨酸激酶检测法

从J.Escobedo处得到并按J.Biol.Chem.，262：1482-1487(1991)中所述方法制备小鼠PDGF-β和人FGF-1(flg)受体酪氨酸激酶的全长度cDNA，同时设计PCR引物用以扩增编码细胞内酪氨酸激酶区域的DNA片段。将此片段并接到用AcMNPV DNA共转染的杆状病毒载体中，并分离重组体病毒。用病毒感染SF9昆虫细胞以过表达蛋白质，并用细胞溶胞物进行检测。检测在96孔平板(100μl/保温/孔)，所用条件应最适于测定γ³²P-ATP内的³²P向谷氨酸-酪氨酸共聚物底物中的掺入。简单地说，向各孔内加入82.5μl含有25mM Hepes(pH7.0)、150mM NaCl、0.1％Triton X-100、0.2mM PMSF、0.2mMNa₃VO₄、10mM MnCl₂和750μg/mL聚(4∶1)谷氨酸-酪氨酸的保温缓冲液，然后加入2.5μL抑制剂和5μL酶溶胞物(7.5μg/μLFGF-TK或6.0μg/μL PDGF-TK)以启动反应。25℃保温10分钟后，向各孔内加入10μL γ³²P-ATP(0.4μCi加50μMATP)并将样品继续25℃保温10分钟。加入100μL含20mM焦磷酸钠的30％三氯乙酸(TCA)终止反应，并使材料沉淀在玻璃纤维滤膜簇(Wallac)上。用含有100mM焦磷酸钠的15％TCA洗滤膜3次，并在Wallac1250β平板读数器中计数滤膜上保温的放射活性。非特异活性定义为样品单独与缓冲液(无酶)保温后留在滤膜上的放射活性。特异性酶促活性定义为总活性(酶加缓冲液)减去非特异活性的值。基于抑制曲线确定抑制50％特异活性时化合物的浓度(IC₅₀)。

V-srct和C-src激酶检测法

使用针对N末端2-17个氨基酸的抗肽单克隆抗体从杆状病毒感染的昆虫细胞溶胞产物中纯化V-src或C-src激酶。向由150mMNaCl、50mM Tris pH7.5、1mM DTT、1％NP-40、2mMEGTA、1mM钒酸钠、1mM PMSF、各1μg/ml亮抑蛋白酶肽、抑胃酶肽和抑蛋白酶肽组成昆虫细胞溶胞缓冲液的悬液内加入共价结合到0.65-μm胶乳小珠上的抗体。将含有C-src或V-src蛋白质的昆虫细胞溶胞物与这些小珠于4℃下旋转保温3-4小时。在保温结束时，在溶胞缓冲液并洗小珠3次，再悬浮于含有10％甘油的溶胞缓冲液中并冷冻。融化这些乳胶小珠，在由40mM Tris pH7.5，5mg MgCl₂组成的检测缓冲液淋洗3次，并悬浮于同样缓冲液中。在带有聚亚乙烯膜底部的Millipore96孔平板上加入以下反应成分：10μL V-src或C-src小珠、10μL 2.5mg/mL聚Glu Tyr底物、含0.2μCi标记的³²P-ATP的5μMATP、含有抑制剂或溶剂对照物的5μM DMSO，以及补足到终体积125μL缓冲液。在室温下加入ATP开始反应，10分钟后加入125μL 30％TCA、0.1M焦磷酸钠在冰上急冷5分钟。然后过滤平板内容物并用250μL等分的15％TCA，0.1M焦磷酸盐洗各孔。滤膜打孔，在液体闪烁计算器中计数，并将用于检查抑制活性的数据与已知抑制剂例如erbstatin相比较。J.Med.Chem.37：598-609(1994)中充分描述了这一方法。

细胞培养

从大鼠的胸主动脉中分离大鼠主动脉平滑肌细胞(RASMC)并按照Ross，J.Cell.Biol.，30：172-186(1971)的方法进行体外细胞培养。使细胞生长于含有18％胎牛血清(FBS，Hyclone，Logan，Vtah)，1％谷氨酰胺(Gibco)和1％青霉素/链霉素(Gibco)的Bulbecco氏改善的Eagle氏培养基(DMEM，Gibco)中。根据其“坡和谷”(hill andvalley)生长特征并用SMCμ-肌动蛋白特异性单克隆抗体(Sigma)进行荧光染色来鉴定细胞。所有实验均使用5-20代的RASMC。在二甲基亚砜(DMSO)中制备试验化合物，以实现在载体中的一致性并保证化合物溶解性。同时用试验化合物估测适当的DMSO对照。

〔³H〕胸苷掺入试验

将悬浮于含10％FBS之DMEM中的RASMC铺敷于24孔平板中(30,000细胞/孔)。4天后，细胞达到汇合状态并经在含有0.2％FBS的DMEM/F12培养基(Gibco)中继续保温2天而进入静止状态。将细胞与加在0.5mL/孔血清替代培养基(DMEM/F12+1％CPSR，Sigma)中的PDGF-BB、bFGF或FBS加上试验化合物保温22小时，以诱导DNA合成。18小时后，加入0.25μCi/孔〔³H〕-胸苷。4小时后，除去放射活性培养基终止保温，用1mL冷磷酸盐缓冲盐洗细胞两次，然后再用冷5％三氯乙酸洗两次。在0.75mL 0.25N NaOH中裂解酸不溶性部分并用液体闪烁计数法测定放射活性。作图确定IC₅₀值。

PDGF受体自磷酸化

使RASMC在100mm平皿中生长至细胞汇合。除去生长培养基改换无血清培养基，并将细胞于37℃继续保温24小时。然后向培养基内直接加入试验化合物并再将细胞保温2小时。2小时后，以30ng/mL的终浓度加入PDGF-BB，于37℃处理5分钟以刺激PDGF受体的自身磷酸化。经生长因子处理后除去培养基，用冷磷酸盐缓冲盐水洗细胞并直即用1mL溶胞缓冲液(50mM HEPES(pH7.5)、150mM NaCl、10％甘油、1％Triton X-100、1mMEDTA、1mM EGTA、50mMNaF、1mM原钒酸钠、30mM磷酸对硝基苯酯、10mM焦磷酸钠、1mM苯基甲基磺酰氯、10μg/mL抑蛋白酶肽和10μg/mL亮抑蛋白酶肽)裂解细胞。将溶胞产物以10,000xg离心10分钟。将上清液与10μL兔抗人PDGF-A受体抗体(1∶1000)一起保温2小时。保温后，加入蛋白A-琼脂糖凝胶小珠持续混合2小时，并用1mL溶胞洗涤缓冲液将与小珠结合的免疫复合物洗4次。将免疫复合物溶解于40μL Laemmli样品缓冲液中并在4-20％SDS聚丙烯酰胺凝胶中电泳。电泳后，将分离的蛋白转移到硝酸纤维素膜上并用抗磷酸酪氨酸抗血清进行免疫印迹分析。与〔¹²⁵I〕-蛋白A保温后，用磷影象分析法检测酪氨酸磷酸化蛋白质的水平，并以光密度分析法定量蛋白质带。根据光密度检测数据得出IC₅₀值。

下列表I和II中给出前述检测试验中测得的本发明有代表性化合物的生物学数据。表I.对蛋白质酪氨酸激酶的抑制作用(IC₅₀的μm数或在50μm时的(百分抑制率))实施例 PDGF FGF EGF V-src C-src

1 21.2 2.99 (-2.4％) 0.21

2 10.2 1.60 (52.3％) (27.4％) 19.5

3 1.25 0.140 1.17 (46.8％) 0.22

4 (31.9％) (21.5％) (36.65％) (3.1％) (33.6％)

5 0.466 1.40 0.928 (23.3％) 0.407

6 0.34 0.397 0.457 (39.8％) 0.11

7 (33.5％) 17.9 (25.15％) (7.6％) 2.3

9 25.1 10.56 18.3

13 (18.2％) 30.3 (21.2％) (15.9％)

16 10.72 9.21 7.08 (10.3％) 1.38

17 27.0 4.50 7.22 (5.3％) 2.76

18 21.3 1.19 18.2 (21.4％) 0.514

19 (47.7％) 16.93 (26.1％) (5.2％) (52.8％)

20 46.1 2.38 (51.7％) 0.748

21 0.66 0.0824 6.97 (49.4％) 0.073

22 1.3 0.128 (90.4％) (46.9％) 0.077

23 4.51 0.291 (104.8％) (10.2％) 0.613

24 11.38 7.29 (58.3％) (15.6％) 0.214

25 6.04 11.82 (57.55％) (0.0％) 0.207

26 1.08 0.116 0.0395

28 0.676 0.075 0.117

30 1.78 0.264 (46.8％)

32 0.415 0.0739 5.0

34 0.349 0.0552 0.011

35 2.08 (97.9％)

36 22.88 0.523 0.184

37 0.263 0.0401 (106.5％)

38 0.360 0.047 0.019

39 1.98 0.125 0.021

40 0.697 0.0574

41 0.793 0.139 0.086

42 0.624 0.108 0.032

43 0.405 0.091 0.011

44 1.55 0.196 0.023

45 1.85 0.198 0.04

47 6.17 0.637 0.161

48 5.32 0.613 0.26

49 0.420 0.0535 0.024

50 2.60 0.305

51 0.573 0.084 0.10

52 0.468 0.051 0.032

53 7.08 0.693 0.153

54 0.231 0.0954

58 19.0 3.46 (109.8％)

59 0.838 0.072 0.085表I续.对蛋白质酪氨酸激酶的抑制作用(IC₅₀的μm数或在50μm时的(百分抑制率))实施例 PDGF FGF EGF V-src C-src60 35.9 13.0 1.5761 45.6 7.85 0.76463 7.01 0.543 1.7864 (13.0％) (23.8％) (0.0％)65 (29.6％) 17.0 (95.0％)66 5.19 1.28 3.4267 12.05 1.39 1.5669 15.55 1.96 4.6670 31.35 2.59 0.92978 32.9 4.01 3.9979 17.78 8.09 (60.93％)80 (22.9％) 10.281 (-20.3％) (67.5％)82 4.67 3.71 (77.6％)83 42.5 1.98 (-9.8％) (53.6％)84 2.26 0.162 3.8285 7.63 0.129 4.4686 2.96 0.114 1.4187 1.88 0.118 (92.7％)88 0.711 0.148 (34.4％) 0.21389 0.857 0.111 0.03690 8.01 11.46 22.75 (16.8％) 1.6392 (33.1％) 2.01 (-10.1％) (44.5％)93 6.05 0.343 4.1794 (11.5％) 17.695 41.6 0.605 (0.0％)96 27.4 3.8497 1.73 0.34 (28.9％)98 (34.3％) 1.80 (0.5％)99 (15.52) 0.708 (17.1％)100 (22.3％) (27.1％) (6.0％) (46.6％)101 4.48 11.22 19.3102 (44.4％) 3.11 (-8.2％) (0.8％)103 19.6 0.300 36.4104 36.7 5.32105 0.618 0.181 0.214106 4.8 0.361 0.236107 (20.5％) (37.2％) (1.4％) (37.0％)108 13.7 4.48 5.66109 (23.6％) (10.3％)110 11.5 12.8 (27.5％)111 23.3 (47.7％) (-26.4％) (15.7％)112 1.26 0.128 0.077113 1.09 0.077 0.078114 23.9 19.2表I(续).对蛋白质酪氨酸激酶的抑制作用(IC₅₀的μm数或在50μm时的(百分抑制率))实施例 PDGF FGF EGF V-src C-src115 2.63 1.24 0.024116 0.804 0.335 0.098117 2.79 0.135 (100％)118 1.92 0.126119 62.4 7.71120 3.84 3.27 42.7121 (21.8％) 0.142122 1.46 0.171123 0.26 0.045 0.029124 0.253 0.059 0.026

表II.细胞试验(IC₅₀＝μm)

实施例	对PDGF刺激的受体自身磷酸化的抑制作用(IC₅₀＝μM)	对生长因子刺激的[³H]胸苷摄入的抑制作用(IC₅₀＝μM)
实施例	对PDGF刺激的受体自身磷酸化的抑制作用(IC₅₀＝μM)	对生长因子刺激的[³H]胸苷摄入的抑制作用(IC₅₀＝μM)	312451123526911389596711566116281141122221690	0.970.2450.3650.2960.2416.461.11.631.199.425.135.290.911.3815.861.083.731.80.35	2.7(PDGF)，0.9(FGF)0.55(PDGF)，0.93(FGF)＜0.30(PDGF)，0.32(FGF)0.45(PDGF)，0.40(FGF)＞10(PDGF)，20.0(FGF)

本发明的化合物特别适用于治疗闭合的动脉气球血管成形术后的再狭窄。进行已钙化动脉之血管成形术的病人约有40％发生再狭窄，而且是用这种方法治疗心脏病人所造成的一个主要问题。用下述常规试验证明本发明的化合物具有良好的活性。

大鼠颈动脉的气球血管成形术

将雄性Spragul-Dawley大鼠(350-450g)分成两个治疗组：一组大鼠用药物处理(100mg/kg口服，每日两次)(n＝10)，第二组接受载体(2mL/kg口服，每日两次)(n＝10)。外科手术前所有动物都预处理2天，并在损伤后直到处死前每日接受药物处理。

按照下述方法造成大鼠颈动脉中的气球损伤。用Telazol(0.1mL/100g肌肉注射)麻醉大鼠，通过在颈部前正中线切开以暴露颈动脉。在颈内和外动脉的分叉处分离颈动脉。将2F栓塞切除导管插入颈外动脉并向下通过总颈达到动脉拱的水平。吹胀气球并将导管拉回到进入点，然后放气。将此过程重复2次以上。然后移出栓塞切除导管并结扎颈外动脉，留下完整无损的颈内动脉血琉通道。封闭手术切口，使动物甦醒后仍放回笼内。

在损伤后的不同时间点，经CO₂吸入使动物无痛致死。灌注固定并加压颈动脉，用于组织学检查。测量颈动脉的面积(以个别动物的平均比例表示)，得出损伤的形态学检测结果。每只动物制备多达16个切片，求出沿着颈动脉长度的平均损伤大小。使用Princeton GammaTech(Princeton，New Jersey)的影象分析程度定量血管的横截面积。

下列实施例举例说明制备本发明中间体和终产物的方法。它们不是用于限制本发明的范围。溶剂的混合物是以体积/体积表示。

实施例1

2-7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶

(按照美国专利No.3,534,039的方法制备的)。向用0.14g钠和60mL 2-乙氧基乙醇制备的2-乙氧基乙醇钠溶液中加入2.07g 2，4-二氨基-5-嘧啶羧醛和2.79g 2，6-二氯基乙腈。将混合物加热回流4小时，冷却，并用二乙醚洗可溶性产物得到2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶，mp325-332℃(MS)。

实施例2

1-叔丁基-3-〔7-(3-叔丁基脲基)-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕脲

向3.0g如上制得的2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2， 3-d〕嘧啶在45mL DMF中形成的浆液内分几次加入0.48g氢化钠(50％，加在矿物油中)。将混合物搅拌1小时，加入1.0g叔丁基异氰酸盐并将反应混合物室温搅拌16小时。过滤反应混合物以除去小量不溶性材料并用500mL水稀释滤液。过滤收集不溶性产物，先用水，然后再用醚洗，并在滤膜上风干。经硅凝胶层析(用溶于氮仿的0-1％甲醇梯度洗脱)纯化产物，从乙醇中结晶后得到0.7g 1-叔丁基-3-〔7-(3-叔丁基脲基)-6-(二氧苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕脲，mp.200℃(分解)。C₂₃H₂₂Cl₂N₇O₂·0.1H₂O的元素分析：理论值：C，54.57；H，5.42；N，19.37；H₂O，0.36。实测值：C，54.05；H，5.43；N，19.08；H₂O，0.37。

实施例3

1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲

继续上述实施例2的洗脱，从乙醇中结晶后得到1.5g 1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲，mp335℃。C₁₈H₁₈Cl₂N₆O：0.5H₂O的元素分析：理论值：C，52.18；H，4.62；N，20.28；H₂O，2.17。实测值：C，51.90；H，4.56；N，20.01；H₂O，2.39。

实施例4

1-叔丁基-3-〔7-(3-叔丁基脲基)-6-邻甲苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕脲

使0.5g按上文实施例1中所述方法制备的2，7-二氨基-6-邻甲苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶在10mL二甲基甲酰胺中的悬液与0.16g 60％氢化钠反应，并于室温搅拌1.5小时。向悬液内加入0.49mL叔丁基异氰酸并将混合物室温搅拌过夜。过滤反应混合物以除去不溶性盐，并于减压下蒸发滤液。用水稀释残留物，过滤收集不溶性粗产物并真空干燥。从己烷∶乙酸乙酯∶二氯甲烷混合物(3∶2∶5 v/v/v)中结晶后得到标题化合物，mp.209-212℃(分解)。C₂₄H₃₁N₇O₂·0.3H₂O的分析计算值：理论值：C，63.36；H，7.00；N，21.55。实测值：C，63.37；H，6.92；N，21.16。

实施例5

1-〔2-氨基-6-邻甲苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲

按上述实施例2所述，从2，7-二氨基-6-邻甲苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶开始制备，得到标题化合物1-〔2-氨基-6-邻甲苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲，mp.285-290℃(分解)；MS(CI)。

实施例6

1-〔2-氨基-6-(2，6-二甲基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲

从2，7-二氨基-6-(2，6-二甲基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶开始，按上述实施例2的方法制备，得到标题化合物1-〔2-氨基-6-(2，6-二甲基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲，mp.203-205℃(分解)；CIMS(溶于甲醇的1％氨水)365(M+1，50)，366(M+2，10)，84(100)。

实施例7

N-〔2-乙酰氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶-7-基〕-乙酰胺

将10g实施例1中所述方法制备的2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶在100mL乙酸酐中的混合物回流2小时。将反应混合物冷却至室温并于真空下除去过量的乙酸酐。将残留物溶解于乙醇中，活性碳吸附，过滤并于0℃冷却过夜。过滤收集不溶性粗产物，用二乙醚洗并真空干燥。使用活性碳从煮沸乙酸乙酯中结晶出粗产物，得到2.7g不纯产物，然后在热乙酸乙酯中制成淤浆进一步纯化并收集不溶性纯产物(1.2g)，mp.223-225℃。C₁₇H₁₃Cl₂N₅O₂的元素分析计算结果：理论值：C，52.32；H，3.36；N，17.95。实测值：C，51.92；H，3.43；N，17.78。

实施例8

2-氨基-6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-醇

向2L浓HCl和1L水的溶液内加入300g 2，7-二氨基-6-苯基吡啶并〔2，3-d〕嘧啶的焦硫酸盐，并将所得混合物回流搅拌过夜。在冰浴中冷却反应混合物，过滤，并用水再用乙醇洗可溶性产物，得到149g标题化合物2-氨基-6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-醇，mp.390-395℃(350℃以上慢慢变暗)。

实施例9

N⁷-丁基-6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

向23.8g如上实施例8中制备的2-氨基-6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-醇、250mL二氯甲烷和77.5mL二甲基甲酰胺的混合物中逐滴加入冷却的36mL亚硫酰氯以使温度保持在15℃以下。加完之后，搅拌下将悬液加热回流5小时。在保持低于60℃的温度下真空除去溶剂。冷却下将所得固体物加到250mL正丁胺中，并在搅拌下将悬液回流6小时。将反应混合物冷却至室温，过滤，并在旋转蒸发器上真空除去滤液的挥发成分。使粘稠油分配于二乙醚和水之间，分离各层，并用水洗醚层。在无水硫酸镁上方干燥有机层，过滤并蒸发。将残留物分配于二乙醚和1N稀盐酸之间。用二乙醚将水层洗3次，并加入氢氧化钠使之碱化至pH12。过滤收集固体产物并真空干燥，得到6.5g标题化合物N⁷-丁基-6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺，mp.174-181℃(分解)。C₁₇H₁₉N₅的元素分析：理论值：C，69.60；H，6.53；N，23.87。实测值：C，69.53；H，6.63；N，24.37。

实施例10

2-氨基-6-(4-甲氧基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-醇

按实施例8中所述方法从2，7-二氨基-6-(4-甲氧基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(美国专利No.3,534,039)制备标题化合物，mp.380-385℃(分解)。C₁₄H₁₂N₄O₂·0.75H₂O的元素分析：理论值：C，59.90；H，4.42；N，19.88。实测值：C，60.10；H，4.32；N，19.64。

实施例11

N’-(7-氯-6-(4-甲氧基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶-2-基)-N，N-二甲基-甲脒

冷却下向67.0g实施例10的2-氨基-6-(4-甲氧基-苯基)吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-醇、1L二氯甲烷和135mL二甲基甲酰胺的混合物中滴加72mL温度保持在15℃以下的亚硫酰氯。搅拌下将悬液加热回流6小时。过滤反应混合物并在保持温度低于60℃的真空条件下蒸发滤液。将所得残留物溶解在冰水中并加入带冰的氢氧化钠水溶液。使产物溶解于氯仿，用水洗，在无水碳酸钾上干燥并蒸发。用乙腈将残留物制成浆液并过滤收集不溶性产物，得到31g标题化合物N’-(7-氯-6-(4-甲氧基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基)-N，N-二甲基-甲脒。产物不经进一步纯化即用于下一步骤。

实施例12

2-氨基-7-氯-6-(4-甲氧基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶

将10g实施例11中得到的N’-(7-氯-6-(4-甲氧基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基)-N，N-二甲基甲脒和500mL95％乙醇的混合物回流3小时。在真空中浓缩溶液并过滤收集沉淀物。从乙醇中结晶后得到2.7g标题化合物2-氨基-7-氯-6-(4-甲氧基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶，mp.275-280℃(分解)。C₁₄H₁₁N₄ClO的元素分析：理论值：C，58.64；H，3.87；N，19.54。实测值：C，58.70；H，3.94；N，19.51。

实施例13

6-(4-甲氧基苯基)-N⁷-甲基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

在气流浴上的高压气体贮罐中，将3.4g 2-氨基-7-氯-6-(4-甲氧基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自实施例12)、10mL无水甲胺和10mL甲醇的混合物加热4小时。冷却后，用50mL甲醇/水(50∶50)将悬液洗出高压气体贮罐，并在真空下蒸发溶剂。固体残留物加50mL水制成浆液，过滤并从甲醇中结晶得到2.2g标题化合物6-(4-甲氧基苯基)-N⁷-甲基-吡啶并〔2，3-d〕嘧淀-2，7-二胺，mp.270-275℃(分解)。C₁₅H₁₅N₅O的元素分析：理论值：C，64.03；H，5.37；N，24.90。实测值：C，63.82；H，5.17；N，24.94。

实施例14

2，4-二氨基-5-氰基吡啶

在氢气环境下，于Parr装置中振盛21.3g 6-溴-2，4-二氨基-5-氰基吡啶(JACS，80：2838-2840(1958))和1g 20％钯/活性碳在250mL四氢呋喃中形成的悬液。2小时后，停止反应并加入10g乙酸钾和50mL甲醇。向反应混合物中再次充入氢气并振盛18小时。减压下除去溶剂并从异丙醇中结晶出残留物，得到标题化合物2，4-二氨基-5-氰基吡啶，mp.201-202℃。C₆H₆N₄的元素分析：理论值：C，53.73；H，4.51；N，41.78。实测值：C，53，69；H，4.18；N，41.40。

实施例15

2，4-二氨基烟碱醛

在氮气环境下，于Parr装置中振盛13.4g 2，4-二氨基-5-氰基吡啶(实施例14)、2g阮氏镍催化剂、40mL 97-100％甲酸和80mL水的悬液、直到消耗一定量的氢。减压下除去溶剂并用17mL浓HCl处理残留物。将所得粉色固体物在小量水中制成浆液，过滤，用异丙醇再用二乙醚洗，并干燥。从甲醇中结晶得到6.5g标题化合物2，4-二氨基烟碱醛。C₆H₈N₃ClO的元素分析：理论值：C，41.52；H，4.65；N，24.21。实测值：C，41.47；H，4.63；N，24.05。

实施例16

3-邻甲苯基-〔1，6〕1，5-二氮杂萘-2，7-二胺

向溶于50mL 2-乙氧基乙醇的0.55g钠的溶液中加入2.3g 2-甲基苯基乙腈和3.0g 2，4-二氨基烟碱醛(得自实施例15)。将反应混合物加热回流6小时。过滤除去不溶性盐并用2-乙氧基乙醇洗。用活性碳处理滤液，过滤并蒸发至干。在florosil上层析(用溶于氯仿的0-8％甲醇梯度洗脱)纯化残留物，得到0.7g标题化合物3-邻甲苯基-〔1，6〕二氮杂萘-2，7-二胺，mp.200-201.5℃(分解)。C₁₅H₁₄N₄的元素分析：理论值：C，72.03；H，5.63；N，22.38。实测值：C，71.79；H，5.45；N，22.18。

实施例17

3-(2-氯苯基)-〔1，6〕二氮杂萘-2，7-二胺

用2-氯苯基乙腈代替2-甲基苯基乙腈，按实施例16的方法制备3-(2-氯苯基)-〔1，6〕二氮杂萘-2，7-二胺，mp.175℃(MS)。

实施例18

3-(2，6-二氯苯基)-〔1，6〕-二氮杂萘-2，7-二胺

用2，6-二氯苯基乙腈代替2-甲基苯基乙腈，按实施例16的方法制备3-(2，6-二氯苯基)-〔1，6〕-二氮杂萘-2，7-二胺，mp.235-237℃(分解)。C₁₄H₁₀N₄Cl₂的元素分析：理论值：C，55.10；H，3.30；N，18.36；Cl，23.24。实测值：C，54.87；H，3.21；N，18.45；Cl，23.04。

实施例19

N²，N⁷-二甲基-6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

在高压气体贮罐中将45g 6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(美国专利No.3,534,039)的二氨基磺酸盐和500g甲胺的混合物于205-210℃加热10小时。用甲醇洗高压气体贮罐，并与反应混合物合并。将混合物加热至沸，过滤并用200mL水稀释。真空除去滤液并将残留物在冰-水中制成浆液。过滤不溶性材料并用冷水洗。将固体物溶解在氯仿中，过滤除去杂质，并用水洗几次。干燥(碳酸钾)有机层并蒸发之。产物从异丙醇中结晶后得到15g标题化合物N²，N⁷-二甲基-6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺，mp.204-205℃。C₁₅H₁₅N₅的元素分析：理论值：C，67.90；H，5.70；N，26.90。实测值：C，67.89；H，5.62；n，26.66。

实施例20

7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶

搅拌下将2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(3.0g)(得自实施例1)、氨基磺酸(2g)和3-(二乙氨基)丙胺(30mL)的混合物加热回流18小时。将反应混合物冷却到室温并倒入冰-水(500mL)中。过滤不溶性产物，用水洗，在温异丙醚中制成浆液并过滤得到白色固体物。从乙酸乙酯中结晶得到1.5g 7-氨基-6-(2，6-二氯苯基-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶，mp.220-230℃。

实施例21

1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲

向溶于DMF(5mL)的7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(0.48g)(得自实施例10)的溶液中加入60％氢化钠悬液(46mg)，并在室温下将混合物搅拌1小时。向反应混合物中加入异氰酸正丁酯(0.113g)并将混合物搅拌18小时。用水稀释反应混合物并过滤收集不溶性材料。将固体物悬浮于水(20mL)中并用1.0N HCl酸化形成溶液。向溶液内加入活性碳，通过硅藻土过滤悬液并用水洗。用1.0N NaOH将滤液制成碱性，过滤收集不溶性产物并用水洗。进一步在C18反相柱上经反相制备性HPLC纯化产物，其中使用从加在水/14％乙腈中的86％的0.1％三氟乙酸到加在水/86％乙腈中的14％的0.1％三氟乙酸，于22分钟时间内进行梯度洗脱，得到165mg 1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕脲，mp.＞80℃(分解)。

C₂₅H₃₃N₇O₁Cl₂·0.22CF₃CO₂H的元素分析：

理论值：C，56.21；H，6.16；N，18.04。

实测值：C，56.13；H，6.02；N，18.14。

实施例22

1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基脲

按照实施例2的一般方法使2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶与异氰酸乙酯反应。经经向层析纯化粗产物，其中用70％乙酸乙酯/30％氯仿到100％氯仿的梯度洗脱后得到标题化合物，即1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙脲，mp.185-187℃。

C₁₆H₁₄N₆O₁Cl₂·0.15EtOAc的元素分析：

理论值：C，51.07；H，3.92；N，21.52。

实测值：C，50.74；H，3.75；N，21.50。

实施例23

1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-(3-吗啉-4-基-丙基)-硫脲

按照实施例21的通用方法，使2，7-二氨基-6-(2，6-二甲苯基)-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶与3-吗啉代丙基异硫氰酸酯反应。以经向层析法纯化粗产物，用溶于二氯甲烷的2-8％甲醇梯度洗脱后得到1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-(3-吗啉-4-基-丙基)-硫脲，mp.178-181℃(分解)。

C₂₁H₂₃N₇O₁Cl₂的元素分析：

理论值：C，51.22；H，4.71；N，79.91。

实测值：C，50.95；H，4.63；N，19.74。

实施例24

2-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-氨基-4，5-二氢-噁唑

向溶于DMF(50mL)中的2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(5.0g)(得自实施例1)的悬液内分几次加入0.65g NaH(60％)。将混合物室温搅拌1小时，然后加入2-氯代乙基异氰酸酯(1.72g)，再次将混合物室温搅拌18小时。用100mL水稀释反应混合物，过滤得到不溶性粗产物。经步骤层析纯化粗产物，用溶于二氯甲烷的2-3％甲醇梯度洗脱后得到1.0g白色固体物。从氯仿-乙酸乙酯中重结晶进一步纯化该固体物，得到标题化合物2-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-氨基-4，5-二氢-噁唑。进一步分析反应混合物也显示存在1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-咪唑啉-2-酮，MS(FAB)。

C₁₆H₁₃N₆O₁Cl₂·0.12CHCl₃·0.04H₂O的元素分析：

理论值：C，51.22；H，4.71；N，19.91；

实测值：C，50.95；H，4.63；N，19.74。

实施例25

1-丁基-3-〔7-(3-丁基-脲基)-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕-脲

将0.5g 2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自实施例1)和15mL异氰酸正丁酯的混合物回流2小时。将反应混合物冷却到室温并滤出不溶性材料。固体物从乙醇中重结晶几次后得到标题化合物；mp.200-202℃。

C₂₃H₂₇Cl₁₂N₇O₂·0.35H₂O的元素分析：

理论值：C，54.09；H，5.47；N，19.20；

实测值：C，54.09；H，5.27；N，19.14。

实施例26

1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-丙基脲

使1.0g 2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自实施例1)和0.339g异氰酸正丙酯反应，按实施例2中所述方法制备标题化合物。用10-100％乙酸乙酯/己烷梯度洗脱，经经向层析纯化产物。MS(Cl)。

C₁₇H₁₆Cl₂N₆O₁·0.43H₂O的元素分析：

理论值：C，51.17；H，4.26；N，21.06；

实测值：C，51.15；H，3.90；N，20.80。

实施例27

7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二甲氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶

按照实施例20中所述方法，由3.0g 2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自实施例1)与60mL3-(二甲氨基)丙胺反应，制备并得到标题化合物。

实施例28

1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二甲氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲

按照实施例21的方法，由1.62g 7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二甲氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自实施例27)与0.48g异氰酸异丁酯反应，制得标题化合物，熔点＞130℃(逐渐分解)。

C₂₃H₂₉C₁₂N₇O₁·1.45H₂O的元素分析：

理论值：C，53，48；H，6.22；N，18.98；

实测值：C，53.50；H，5.84；N，18.73。

实施例29

7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二甲基氨基-2，2-二甲基-丙基氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶

按照实施例20中所述，使2.0g 2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自实施例1)与16mL N，N，2，2-四甲基-1，3-丙二胺反应，以制得标题化合物。

实施例30

1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二甲氨基-2，2-二甲基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲

按照实施例21的方法，使7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二甲氨基-2，2-二甲基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自实施例29)与0.26g异氰酸叔丁酯反应，得到标题化合物；mp.161-170℃。

C₂₅H₃₃Cl₂N₇O₁·0.74H₂O的元素分析：

理论值：C，56.46；H，6.54；N，18.44；

实测值：C，56.47；H，6.24；N，18.41。

实施例31

7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-(2-甲基吡啶)-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶

按照实施例20中所述的方法，从2.0g 2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自实施例1)和15mL1-(3-氨基丙基)-2-甲基吡啶开始制备并得到标题化合物。

实施例32

1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(2-甲基-哌啶-1-基)-丙基氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲

按照实施例21的方法，使1.54g 7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-(2-甲基吡啶)-丙基氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自实施例31)与0.377g异氰酸叔丁酯反应，得到标题化合物。

C₂₇H₃₅Cl₂N₇O₁的元素分析：

理论值：C，59.56；H，6.48；N，18.01；

实测值：C，59.71；H，6.53；N，17.62。

实施例33

7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶

按照实施例20的方法，使2.0g 2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自实施例1)与15mL 1-(4-氨基丁基)-4-甲基-哌嗪反应，得到标题化合物。

实施例34

1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔4-(4-甲基-哌嗪-1-1基)-丁氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲

按照实施例21的方法，使1.07g 7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-(4-甲基哌嗪)-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自上述实施例33)与0.253g异氰酸叔丁酯反应，得到标题化合物。

ESMSm/z(相对强度)559(M⁺，100)

C₂₇H₃₆Cl₂N₈O₁·0.6H₂O的元素分析：

理论值：C，56.86；H，6.57；N，19.65；

实测值：C，56.87；H，6.31；N，19.57。

实施例35

6-(2，6-二氯苯基)-N⁷-(5，6-二氢-4H-〔1，3〕噁嗪-2-基)-N²-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

向1.0g 6-(2，6-二氯苯基)-N²-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〔2，3-d〕-嘧啶-2，7-二胺(得自实施例36)在10mL二甲基甲酰胺中形成的溶液内加入氢化钠(在油中60％，0.094mg)，并将混合物室温搅拌1小时。向该反应混合物中加入0.268g3-氯丙基异氰酸酯，并将混合物室温搅拌18小时。用水稀释此反应混合物并用乙酸乙酯提取两次。干燥(MgSO₄)、过滤并蒸发合并的有机层。用乙酸乙酯/甲醇/三乙胺(89∶10∶1v/v/v)洗脱，经经向层析纯化粗产物后得到标题化合物。

ESMSm/z(相对强度)529.4(M⁺，100)

实施例36

N²-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

将2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(3.0g)(得自实施例1)、氨磺酸1.9g)和1-(3-氨基丙基)-4-甲基哌嗪(15mL)的混合物于大约150℃加热24小时。冷却后将残留物溶解在水中。用饱和碳酸氢钠溶液使该水溶液成为碱性并用二氯甲烷提取几次。合并二氯甲烷层，在硫酸镁上方干燥并真空浓缩。从乙酸乙酯中重结晶残留物后得到2.0g 6-(2，6-二氯苯基)-N²-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺，CIMS(加在CH₄中的1％NH₃)：474＝M⁺+C₂H₅，446＝M+H(Base)；mp.208-211℃。

C₂₂H₂₅N₇Cl₂·0.25H₂O的元素分析：

理论值：C，55.94；H，5.70；N，21.75；

实测值：C，55.85；H，5.55；N，21.65。

实施例37

1-环己基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲

向溶于DMF(15mL)的6-(2，6-二氯苯基)-N²-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.0g)(得自实施例36)的溶液中加入1当量的60％氢化钠悬液(0.90g)。室温下搅拌约1小时后加入1当量的异氰酸环己酯(0.19g)，并以薄层层析法监测反应。约24小时之后，真空除去溶剂。将残留物溶解于乙酸乙酯中，并先用水然后用饱和氯化钠溶液将该溶液洗几次。用硫酸镁干燥并在真空中蒸发浓缩乙酸乙酯层。使用乙酸乙酯/甲醇/三乙胺(9∶2∶1v/v/v)洗脱，在硅凝胶上层析纯化残留物后得到0.75g 1-环己基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡淀并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲，ESMS(20/80MeOH/CH₃CN+0.1％AcOH)：M⁺+H＝571；mp.101-106.5℃。

C₂₈H₃₆N₈Cl₂O·0.50H₂O的元素分析；

理论值：C，57.93；H，6.42；N，19.30；Cl，12.21；H₂O，1.55。

实测值：C，58.06；H，6.32；N，18.91；Cl，12.11；H₂O，1.68。

实施例38

1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-异丙基脲

按照实施例37的通用方法，使6-(2，6-二氯苯基)-N²-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.09g)(得自实施例36)与0.19g异氰酸异丙酯反应8小时，得到1-{6-(2，6二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-异丙基脲，MS(ES+20/80 MeOH/CH₃CN+0.1％AcOH)：M⁺+H＝531；mp.94-98℃。

C₂₅H₃₂N₈Cl₂O·0.75H₂O/0.10EtOAc的元素分析：

理论值：C，55.09；H，6.24；N，20.23；Cl，12.80；H₂O，2.44。

实测值：C，55.14；H，6.19；N，20.03；Cl，13.17；H₂O，2.14。

实施例39

1-苄基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲

按照实施例37的通用方法使6-(2，6-二氯苯基)-N²-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.08g)与0.298g异氰酸苄酯反应，得到0.822g 1-苄基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲，ESMS(20/80 MeOH/CH₃CN+0.1％AcOH)：M⁺+H＝579；mp.144-148.5℃。

C₂₉H₃₂N₈Cl₂O·0.10H₂O·0.10Et₂O的元素分析：

理论值：C，59，98；H，5.68；N，19.03；Cl，12.04；H₂O，0.31。

实测值：C，59.60；H，5.63；N，18.87；Cl，12.25；H₂O，0.49。

实施例40

1-烯丙基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-1-基}-脲

使6-(2，6-二氯苯基)-N²-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自实施例36)按照实施例37的一般方法与0.186g异氰酸烯丙酯反应。产物经层析纯化并从乙酸乙酯中结晶后得到0.31g 1-烯丙基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲，ESMS(20/80MeOH/CH₃CN+0.1％AcOH)：M⁺+H＝529(Base)，472，446；mp.104-108℃。

C₂₅H₃₀N₈Cl₂O·1.00H₂O的元素分析：

理论值：C，54.85；H，5.89；N，20.47；Cl，12.95；H₂O，3.29。

实测值：，55.08；H，5.68；N，20.33；Cl，12.65；H₂O，3.60。

实施例41

1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-(4-甲氧基-苯基)-脲

按照实施例37的一般方法，使6-(2，6-二氯苯基)-N²-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.0g)(得自实施例36)与4-甲氧基苯基异氰酸酯(0.334)反应，得到1.16g 1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-(4-甲氧基-苯基)-脲，ESMS(20/80MeOH/CH₃CM+0.1％AcOH)：M⁺+H＝595；mp.93.5-100.5℃。

C₂₉H₃₂N₈Cl₂O₂·0.40H₂O·0.10EtOAc的元素分析：

理论值：C，57.74；H，5.54；N，18.32；Cl，11.59；H₂O，1.18。

实测值：C，58.04；H，5.51；N，18.15；Cl，11.25；H₂O，1.38。

实施例42

1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-(3-甲氧基-苯基)-脲

按照实施例37的一般方法，使6-(2，6-二氯苯基)-N²-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.0g)(得自实施例36)与0.334g 3-甲氧基苯基异氰酸酯反应，得到0.920g 1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-(3-甲氧基苯基)-脲，ESMS(20/80MeOH/CH₃CN+0.1％AcOH)：M⁺+H＝595；mp.87.5-92.5℃。

C₂₉H₃₂N₈Cl₂O₂·0.50H₂O的元素分析：

理论值：C，57.62；H，5.50；N，18.54；Cl，11.73；H₂O，1.49。

实测值：C，57.93；H，5.62；N，18.47；Cl，11.66；H₂O，1.10。

实施例43

1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-(2-甲氧基-苯基)-脲

按照实施例37的一般方法，使6-(2，6-二氯苯基)-N²-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.0g)(得自实施例36)与0.334g 2-甲氧基异氰酸酯反应，得到0.9232g 1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-(2-甲氧基-苯基)-脲，ESMS(20/80MeOH/CH₃CN+0.1％AcOH)：M⁺+H＝595；mp.152.5-154℃。

C₂₉H₃₂N₈Cl₂O₂的元素分析：

理论值：C，58.49；H，5.42；N，18.82；Cl，11.91。

实测值：C，58.42；H，5.56；N，18.59；Cl，11.82。

实施例44

1-(4-溴-苯基)-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶-7-基}-脲

按照实施例37的一般方法，使6-(2，6-二氯苯基)-N²-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.0g)(得自实施例36)与0.344g 4-氯苯基异氰酸酯反应，得到0.8424g 1-(4-氯-苯基)-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲，ESMS(20/80MeOH/CH₃CN+0.1％AcOH+DMSO)：M⁺+H＝645；mp171-175℃。

C₂₈H₂₉N₈Cl₂OBr的元素分析：

理论值：C，52.19；H，4.54；N，17.39；Cl，11.00；Br，12.40。

实测值：C，51.93；H，4.71；N，17.14；Cl，10.81；Br，12.18

实施例45

1-(4-氯-苯基)-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶-7-基}-脲

按实施例37的一般方法，将实施例36的6-(2，6-二氯苯基)-N²-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.0g)与0.344g异氰酸4-氯苯酯反应得到0.842g 1-(4-氯-苯基)-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲，ESMS(20/80 MeOH/CH₃CN+0.1％AcOH+DMSO)：M+H⁺＝601；mp.175.5-181℃。

C₂₈H₂₉N₈Cl₃O的元素分析：

理论值：C，56.06；H，4.87；N，18.68；Cl，17.73。

实测值：C，56.11；H，5.14；N，18.47；Cl，17.67。

实施例46

1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-对甲苯基-脲

按照实施例37的一般方法，使6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自实施例36)与0.29g 4-甲苯基异氰酸酯反应，得到0.9492g标题化合物。ESMS(20/80MeOH/CH₃CN+0.1％AcOH)：M⁺+H＝579；

C₂₉H₃₂N₈Cl₂O·0.30H₂O+0.20EtOAc的元素分析

理论值：C，59.40；H，5.72；N，18.60；Cl，11.77；H₂O，0.90。

实测值：C，59.69；H，5.61；N，18.41；Cl，11.50；H₂O，1.30。

实施例47

1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-辛基-脲

按照实施例21的一般方法使6-(2，6-二氯苯基)-N²-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自实施例36)与0.348g异氰酸辛酯反应。层析纯化所得产物，先用乙酸乙酯/甲醇/三乙胺(90∶10∶1)，然后转换成乙酸乙酯/乙醇/三乙胺(9∶2∶1)进行洗脱，得到1.011g标题化合物1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-辛基-脲，ESMS(20/80 MeOH/CH₃CN+0.1AcOH)：M⁺+H＝601：mp.54.5-57.5℃。

C₃₀H₄₂N₈Cl₂O·0.75H₂O的元素分析：

理论值：C，58.58；H，7.13；N，18.22；Cl，11.53；H₂O，2.20。

实测值：C，58.51；H，7.13；N，18.13；Cl，11.55；H₂O，2.32。

实施例48

1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-(4-三氟甲基-苯基)-脲

按照实施例37的一般方法，使6-(2，6-二氯苯基)-N²-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自实施例36)与异氰酸三氟对甲苯酯反应。层析纯化产物，先用乙酸乙酯/甲醇/三乙胺(90∶10∶1)然后转换成乙酸乙酯/乙醇/三乙胺(9∶2∶1)进行洗脱，得到0.8650g标题化合物1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-(4-三氟甲基-苯基)-脲，ESMS(20/80 MeOH/CH₃CN+0.1％AcOH)：M⁺+H＝633；mp.145.5-151℃。

C₂₉H₂₉N₈Cl₂F₃O·0.50H₂O的元素分析：

理论值：C，54.21；H，4.71；N，117.44；Cl，11.04；F，8.87；H₂O，1.40。

实测值：C，54.39；H，4.59；N，17.28；Cl，11.00；F，9.17；H₂O，1.61。

实施例49

1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-乙基-脲

按照实施例37的一般方法，使6-(2，6-二氯苯基)-N²-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.0g)(得自实施例36)与0.159g异氰酸乙酯反应，得到0.86g 1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-乙基脲，MS(ES+20/80 MeOH/CH₃CN+0.1％AcOH)：M⁺+H＝517；mp.82-90℃。

C₂₄H₃₀N₈Cl₂O·1.00H₂O的元素分析：

理论值：C，53.83；H，6.02；N，20.93；Cl，13.24；H₂O，3.26。

实测值：C，53，94；H，6.07；N，20.53；Cl，13.14；H₂O，3.28。

实施列50

1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-萘-1-基-脲

按照实施例37的一般方法，使6-(2，6-二氯苯基)-N²-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.0g)(得自实施例36)与0.378g 1-萘基异氰酸酯反应。层析纯化反应产物先用乙酸乙酯/甲醇/三乙胺(90∶10∶1)然后转换为乙酸乙酯/乙醇/三乙胺(9∶2∶1)洗脱，得到0.97g标题化合物1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-萘-1-基脲，ESMS(20/80 MeOH/CH₃CN+0.1％AcOH)：M⁺+H＝615(Base)，446；mp.186.5-189℃。

C₃₂H₃₂N₈Cl₂O·0.10H₂O的元素分析：

理论值：C，62.26；H，5.26；N，18.15；Cl，11.49；H₂O，0.29。

实测值：C，62.25；H，5.26；N，18.38；Cl，11.39；H₂O，0.51。

实施例51

1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-苯基-脲

按照实施例37的一般方法，使溶于DMF(10mL)中的得自实施例36的6-(2，6-二氯苯基)-N²-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(13.0g)与60％氢化钠悬浮液(1.16g)和异氰酸苯酯(3.47g)反应。从乙酸乙酯中重结晶出经过层析的产物，得到10.78g标题化合物1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-苯基-脲，ESMS(20/80MeOH/CH₃CN+0.1％AcOH：M⁺+H＝565。

C₂₈H₃₀N₈Cl₂O·0.30H₂O·0.20EtOAc的元素分析：

理论值：C，58.78；H，5.51；N，19.04；Cl，12.05；H₂O，0.92。

实测值：C，58.72；H，5.55；N，18.84；Cl，11.98；H₂O，1.01。

实施例52

1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲

按照实施例21的一般方法，使得自实施例36的6-(2，6-二氯苯基)-N²-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺与0.22g异氰酸叔丁酯反应1.5小时，得到0.85g标题化合物1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲，CIMS(加在CH₄中的1％NH₃)：545＝M⁺+H，544＝M⁺，446，84(Base)；mp.97.5℃(分解)，熔融106-109℃。

C₂₆H₃₄N₈Cl₂O的元素分析：

理论值：C，57.25；H，6.28；N，20.25。

实测值：C，56，91；H，6.31；N，20.30。

实施例53

6-(2，6-二氯苯基)-N²-(4-二乙氧基-丁基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

将2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(40g，得自实施例1)、氨磺酸(25.4g)和二乙氨基丁胺(205mL)的混合物于150℃加热28小时。将反应温度降至50℃，并在真空中除去过量的二乙氨基丁胺。冷却至25℃后将残留物悬浮于水中。用饱和碳酸氢钠溶液将此水溶液调成碱性并用二氯甲烷提到几次。合并二氯甲烷层，先用饱和碳酸氢钠溶液，再用饱和氯化钠溶液洗几次，在硫酸镁上方干燥并在真空中浓缩。反复用二乙醚洗残留物，然后从乙酸乙酯中结晶之。经柱层析进一步纯化重结晶的产物，先用乙酸乙酯/甲醇/三乙胺(85∶14∶1)，然后用乙酸乙酯/乙醇/三乙胺(9∶2∶1)洗脱得到36.2g标题化合物6-(2，6-二氯苯基)-N²-(4-二乙氨基-丁基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺，CIMS(溶于CH₄的1％N₃)：461＝M⁺+C₂H₅，433＝M⁺+H(Base)，417，403，360。

C₂₁H₂₆N₆Cl₂的元素分析：

理论值：C，58.20；H，6.05；N，19.39；Cl，16.36。

实测值：C，58.11；H，6.21；N，19.09；Cl，16.55。

实施例54

1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-苯基-脲

向溶于DMF(15mL)的6-(2，6-二氯苯基)-N²-(4-二乙氨基-丁基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自实施例53)的溶液中加入1当量的60％氢化钠悬液(0.93g)。室温搅拌约1小时后加入1当量的异氰酸苯酯(0.275g)，并用薄层层析法监测反应情况。约24小时后真空除去溶剂。将残留物溶解于乙酸乙酯中，先用水再用饱和氯化钠溶液将该溶液洗几次。用硫酸镁干燥乙酸乙酯层并真空浓缩。在硅凝胶上层析残留物，先用乙酸乙酯/甲醇/三乙胺(90∶10∶1)，然后用乙酸乙酯/乙醇/三乙胺(9∶2∶1)洗脱得到0.8461g标题化合物1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-苯基-脲，ESMS(20/80 MeOH/CH₃CN+0.1％AcOH)：M⁺+H＝552(Base)，433；mp.81-87.5℃。

C₂₈H₃₁N₇Cl₂O·0.25H₂O的元素分析：

理论值：C，60.38；H，5.70；N，17.60；Cl，12.73；H₂O，0.81。

实测值：C，60.24；H，5.61；N，17.42；Cl，12.61；H₂O，0.54。

实施例55

1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基-脲

按照实施例54的一般方法，使溶于DMF(75mL)的6-(2，6-二氯苯基)-N²-(4-二乙氨基-丁基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(5.0g，得自实施例53)与60％氢化钠悬液(0.461g)和异氰酸乙酯(0.820g)反应。层析并用乙酸乙酯/乙醇/三乙胺(9∶2∶1)洗脱得到4.26g标题化合物1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基-脲，ESMS(20/80 MeOH/CH₃CN+0.1％AcOH)：M⁺+H＝504(Base)，433。

实施例56

1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基-脲，盐酸盐

向得自实施例55的1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基-脲(3.253g)的水溶液中加入1当量1N盐酸(6.44mL)。室温下搅拌溶液直到固体物溶解，过滤并冷冻。冻干后得到3.63g 1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基-脲，ESMS(20/80 MeOH/CH₃CN+1％AcOH)：M⁺+H＝504；mp.(分解)＞50℃。

C₂₄H₃₁N₇Cl₂O·1.10HCl·2.20H₂的元素分析：

理论值：C，49.34；H，6.30；N，16.78；Cl_总，18.81；Cl_离子，6.67；H₂O，6.78。

实测值：C，49.61；H，6.21；N，16.75；Cl_总，18.70；Cl_离子，6.68；水，6.88。

实施例57

1-环己基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕脲

按照实施例54的一般方法，使溶于DMF(15mL)的实施例53的6-(2，6-二氯苯基)-N²-(4-二乙氨基-丁基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.0g)与60％氢化钠悬液(0.092g)和异氰酸环己酯(0.289g)反应，产生0.927g标题化合物，ESMS(20/80 MeOH/CH₃CN+0.1％AcOH)：M⁺+H＝558，433。

C₂₈H₃₇N₇Cl₂O·0.10H₂O的元素分析：

理论值：C，60.02；H，6.69；N，17.50；Cl，12.65；H₂O，0.32。

实测值：C，59.75；H，6.69；N，17.41；Cl，12.71；H₂O，0.40。

实施例58

6-(2，6-二氯苯基)-N²-(3-吗啉-4-基-丙基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺。

使2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(4.00g，得自实施例1)、氨磺酸(2.53g)和氨丙基吗啉(30mL)的混合物发生反应。在这种情况下，用热乙酸乙酯，然后再用二乙醚治粗残留物，以得到3.95g标题化合物6-(2，6-二氯苯基)-N²-(3-吗啉-4-基-丙基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺，CIMS(溶于CH₄的1％NH₃)：461＝M⁺+C₂H₅，433＝M⁺+H(Base)，346，332；mp.224-230.5℃。

C₂₀H₂₂N₆Cl₂O的元素分析：

理论值：C，55.43；H，5.12；N，19.39。

实测值：C，55.12；H，5.12；N，19.14。

实施例59

1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-吗啉-4-基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲

向溶于DMF(15mL)的6-(2，6-二氯苯基)-N²-(3-吗啉-4-基-丙基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.0g，得自实施例58)的溶液中加入1当量的60％氢化钠悬液(0.92g)。室温下搅拌约1小时后加入1当量异氰酸叔丁酯(0.230g)，并以薄层层析法监测反应。约4小时后，真空下除去溶剂。使残留物分配于乙酸乙酯和水之间。用乙酸乙酯将含水层洗几次。合并乙酸乙酯层，用硫酸镁干燥并真空浓缩。在硅凝胶上层析纯化残留物，使用乙酸乙酯再用乙酸-乙酯/乙醇/三乙胺(18∶2∶1)洗脱得到0.98g标题化合物1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-吗啉-4-基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲，CIMS(溶于CH₄的1％NH₃)：532＝M⁺+H，531＝M⁺，433，84(Base)；mp.236-240℃。

C₂₅H₃₁N₇Cl₂O₂·0.25EtOAc的元素分析：

理论值：C，56.32；H，6.00；N，17.68。

实测值：C，56.48；H，6.06；N，17.63。

实施例60

6-(2，6-二溴-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

向溶于11.0mL 2-乙氧基乙醇中的0.23g60％氢化钠悬液的溶液内加入4.18g 2，6-二溴苯基乙腈和2.00g 2，4-二氨基嘧啶-5-羧醛。将反应混合物回流4小时，冷却，并倒入冰水中。先用乙腈，再用乙酸乙酯充分洗残物，得到3.62g 6-(2，6-二溴苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺，CIMS(加于CH₄中的1％NH₃)：422＝M⁺+C₂H₅，396(Base)，394M⁺+H，393＝M⁺；mp.284-289℃。

C₁₃H₉N₅Br₂的元素分析：

理论值：C，39.52；H，2.30；N，17.73。

实测值：C，39.20；H，2.27；N，17.77。

实施例61

6-(2，6-二溴-苯基)-N²-(3-二乙氨基-丙基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

使得自实施例60的6-(2，6-二溴-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.0g)、氨磺酸(0.49g)和二乙氨基丙胺(8.0ml)的混合物反应5小时，并按实施例53中所述方法处理得到0.79g标题化合物6-(2，6-二溴-苯基)-N²-(3-二乙氨基-丙基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺，CIMS(加于CH₄中的1％NH₃)：507＝M⁺+H，506＝M⁺，112(Base)；mp.226-230℃。

C₂₀H₂₄N₆Br₂的元素分析：

理论值：C，47.26；H，4.76；N，16.53。

实测值：C，47.61；H，4.69；N，16.40。

实施例62

1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二溴-苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲

按照实施例54的一般方法使得自实施例61的6-(2，6-二溴苯基)-N²-(3-二乙氨基-丙基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(0.34g)与0.066g异氰酸叔丁酯反应。用乙酸乙酯/乙醇/三乙胺(9∶2∶1)洗脱，以薄层层析法纯化粗产物，然后使用Vydac218TP 1022反相柱进行制备性HPLC层析，用0.1％三氟乙酸/水和0.1％二氟乙酸/乙腈梯度洗脱，得到0.214g标题化合物，ESMS(20/80MEOH/CH₃CN+0.1％AcOH)：606＝M⁺+H；mp.(分解)＞45℃。

C₂₅H₃₃N₇Br₂O·2.50TFA·H₂O的元素分析：

理论值：C，39.58；H，4.15；N，10.77。

实测值：C，39.54；H，3.82；N，10.49。

实施例63

6-(2，6-二氟-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

按实施例60中所述方法，使用4.65g 2，6-二氟苯基乙腈制备6-(2，6-二氟-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺，CIMS(加于CH₄中的1％NH₃)：414＝M⁺+C₃H₅，302＝M⁺+C₂H₅，274＝M⁺+H(Base)，273＝M⁺，254＝M⁺-F；mp.＞300℃。

实施例64

6-(2，6-二甲氧基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

按照实施例60所述的方法，用2，6-二甲氧基苯基乙腈代替2，6-二溴苯基乙腈，反应3小时并从乙醇中结晶制得6-(2，6-二甲氧基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺，CIMS(加于CH₄中的1％NH₃)：326＝M⁺+C₂H₅，298＝M⁺+H(Base)，297＝M⁺，266＝M⁺-OMe；mp.＞300℃。

C₁₅H₁₅N₅O₂·0.50H₂O的元素分析：

理论值：C，58.82；H，5.26；N，22.86。

实测值：，58.81；H，5.04；N，22.54。

实施例65

6-(2，6-二氯苯基)-N²-(2-二乙氨基-乙基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

将2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(4.0g，得自实施例1)、氨磺酸(2.53g)和二乙氨基乙胺(40mL)的混合物于大约150℃加热29小时。真空下除去过量的二乙氨基乙胺。将所得油状物溶解于二乙醚中，用水稀释，然后过滤。将所得固体物溶解于二氯甲烷中，用水洗几次，用硫酸镁干燥并真空浓缩。从乙酸乙酯中结晶残留物后得到标题化合物6-(2，6-二氯苯基)-N²-(2-二乙氨基-乙基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺，CIMS(加在CH₄中的1％NH₃)：433＝M⁺+C₂H₅，405＝M⁺+H，389＝M⁺-Et，360；mp.216-219.5℃。

C₁₉H₂₂N₆Cl₂的元素分析：

理论值：C，56.30；H，5.47；N，20.73。

实测值：C，56.31；H，5.39；N，20.46。

实施例66

1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(2-二乙氨基-乙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲

按照实施例54的一般方法，使溶于DMF(10mL)的6-(2，6-二氯苯基)-N²-(2-二乙氨基-乙基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.0g，得自实施例65)与60％氢化钠悬液(0.099g)和异氰酸叔丁酯(0.244g)反应1小时。层析纯化并用乙酸乙酯/乙醇/三乙胺(18∶2∶1)洗脱得到0.76g标题化合物1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(2-二乙氨基-乙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲，CIMS(加于CH₄中的1％NH₃)：504＝M⁺+H，84(Base)；mp.94.5-96.5℃。

C₂₄H₃₁N₇Cl₂O的元素分析：

实测值：C，56.94；H，6.18；N，19.22。

实施例67

1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(2-二乙氨基-乙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基-脲

按照实施例54的一般方法，以溶于DME(10mL)的6-(2，6-二氯苯基)-N²-(2-二乙氨基-乙基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(1.0g，得自实施例65)与60％氢化钠悬液(0.099g)和异氰酸乙酯(0.175g)反应，得到0.86g标题化合物1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(2-二乙氨基-乙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基-脲，CIMS(加于CH₄中的1％NH₃)：476＝M⁺+H，86(Base)；mp.86.5-89.5℃。

C₂₂H₂₃N₇Cl₂O的元素分析：

理论值：C，55.47；H，5.71；N，20.58。

实测值：C，55.18；H，5.74；N.20.20。

实施例68

6-(2，6-二氯苯基)-N²-(3-二甲氨基-丙基)-N²-甲基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

将得自实施例1的2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(4.0g)，与氨磺酸(2.53g)和N，N，N’-三甲基-1，3-丙二胺(20mL)的混合物在高压气体贮罐中于165℃加热16小时，然后再于225℃加热16小时。冷却后，真空浓缩反应混合物。将残留物分配于稀碳酸氢钠和二氯甲烷之间。用二氯甲烷将水溶液提取几次。合并二氯甲烷层，过滤，并真空浓缩。层析纯化残留物，用乙酸乙酯/乙醇/三乙胺(9；3∶1)洗脱得到标题化合物6-(2，6-二氯苯基)-N²-(3-二甲氨基-丙基)-N²-甲基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺。

实施例69

1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔(3-二甲氨基-丙基)-甲基-氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲

按照实施例54的一般方法，由溶于DMF(7.0mL)的6-(2，6-二氯苯基)-N²-(3-二甲氨基-丙基)-N²-甲基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(0.38g，得自实施例68)与60％氢化钠悬液(0.022g)和异氰酸叔丁酯(0.093g)反应，得到0.25g标题化合物1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔(3-二甲氨基-丙基)-甲基-氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲，CIMS(加于CH₄中的1％NH₃)：504＝M⁺+H，84(Base)；mp.(分解)76℃，然后(熔融)87.5-91℃。

C₂₄H₃₁N₇Cl₂O·0.25H₂O的元素分析：

理论值：C，56.64；H，6.24；N，19.26。

实测值：C，56.55；H，6.07；N，18.94。

实施例70

2-({3-〔7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-苯基〕-丙基}-乙基-氨基)-乙醇

按照实施例36的一般方法，使2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(3.0g，得自实施例1)、氨磺酸(1.9g)和N’-乙基-N’-(2-羧乙基)-丙二胺(10.0g)(J.Med.Chem.，11(3)：583-591(1968))的混合物反应18小时。在这种情况下，使用乙酸乙酯/乙醇/三乙胺(9；3；1)洗脱，层析纯化残留物，得到2.71g标题化合物2-({3-〔7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基氨基〕-丙基}-乙基-氨基)-乙醇，CIMS(加于CH₄中的1％NH₃)：463＝M⁺+C₂H₅，435＝M⁺+H，346(Base)：mp.201-204℃。

C₂₀H₂₄N₆Cl₂O的元素分析：

理论值：C，55.18；H，5.56；N，19.30。

实测值：C，55.11；H，5.53；N，19.09。

实施例71

4-氨基-2-苯氨基-嘧啶-5-腈

将溶于四氢呋喃(40.0mL)和二异丙基乙胺(4.60g)中的苯胺(3.31g)溶液加到4-氨基-2-氯代嘧啶-5-腈(5.00g)在四氢呋喃(50.0mL)中制成的溶液内。加热回流反应混合物。3天后，向反应中加入另一份苯胺(6.02g)和二异丙基乙胺(8.36g)。24小时后，真空浓缩反应混合物，并使残留物分配于乙酸乙酯和水之间。用水洗乙酸乙酯层，然后通过玻璃纤维滤器过滤以分散原存在的乳液。用水再用饱和氯化钠洗滤液用硫酸镁干燥并真空浓缩。用二乙醚洗残留物得到6.00g标题化合物，CIMS(加于CH₄中的1％NH₃)：252＝M⁺+C₃H₅，240＝M⁺+C₂H₅，212＝M⁺+H(Base)，211＝M⁺。

C₁₁H₉N₅的元素分析：

理论值：C，62.55；H，4.29；N，33.16。

实测值：C，62.85；H，4.47；N，33.18。

实施例72

4-氨基-2-苯氨基-嘧啶-5-羧醛

在Parr振荡器中，将得自实施例71的4-氨基-2-苯氨基-嘧啶-5-腈(2.00g)与湿阮氏镍(2.00g)、98％甲酸(60mL)和水(40mL)合并。在氢气环境下(42psi)发生反应并振荡20分钟。过滤反应物并真空浓缩滤液。将残留物悬浮于水中，用饱和碳酸氢钠调成碱性，并用乙酸乙酯提取3次。通过玻璃纤维滤膜过滤水层以分散原有的乳液。用乙酸乙酯洗含水滤液。合并乙酸乙酯洗出液，过滤，用饱和氯化钠洗，用硫酸镁干燥并真空浓缩。用硅凝胶层析用乙酸乙酯/己烷(2∶1)洗脱得到0.73g标题化合物，CIMS(加于CH₄中的1％NH₃)：243＝M⁺+C₂H₅，215＝M⁺+H(Base)，214＝M⁺。

C₁₁H₁₀N₄O的元素分析：

理论值：C，61.67；H，4.71；N，26.15。

实测值：C，61.79；H，4.71；N，26.11。

实施例73

6-(2，6-二氯苯基)-N²-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

向0.022g 60％氢化钠悬液在2.00mL 2-乙氧基乙醇中制成的溶液中加入0.46g 2，6-二氯苯基乙腈和0.50g 4-氨基-2-苯氨基-嘧啶-5-羧醛(得自实施例72)。将反应混合物回流4小时，冷却，倒入水中并用二氯甲烷提取几次。合并二氯甲烷洗出液，用饱和氯化钠洗，用硫酸镁干燥并真空浓缩。用二乙醚洗残留物，得到0.61g标题化合物，CIMS(加于CH₄中的1％NH₃)：410＝M⁺+C₂H₅，382＝M⁺+H，381＝M⁺。

按照实施例52的方法，可在上述化合物与异氰酸叔丁酯反应得到1-叔丁基-3-{〔6-(2，6-二氯苯基)-2-苯氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲。

实施例74

4-氨基-2-甲磺酰基-嘧啶-5-羧酸乙酯

向4-氯-2-甲基硫代-5-嘧啶羧酸乙酯(25g)在乙醇(200mL)中制成的悬液内加入30％氢氧化铵(38mL)。室温搅拌5小时后，于真空下浓缩反应混合物。将残留物悬浮于水中并过滤。用水再用二乙醚洗过滤垫，得到17.68g标题化合物，CIMS(加于CH₄中的1％NH₃)：242＝M⁺+C₂H₅，214＝M⁺+H(Base)，213＝M⁺，168＝M⁺-OEt。

C₈H₁₁N₃SO₂的元素分析：

理论值：C，45.06；H，5.20；N，19.70。

实测值：C，44.84；H，5.14；N，19.64。

实施例75

4-氨基-2-甲磺酰基-嘧啶-5-基-甲醇

向氢化铝锂(1.45g)在四氢呋喃(50mL)中制成的悬液内滴加4-氨基-2-甲磺酰基-嘧啶-5-基-甲醇(5.00g)(得自实施例74)在四氢呋喃(120mL)中形成的溶液。室温搅拌1小时后，用水(1.5mL)、15％氢氧化钠(1.5mL)，最后再用水(4.5mL)骤冷反应混合物。过滤后用四氢呋喃洗滤垫。真空浓缩滤液得到3.83g标题化合物，CIMS(加于CH₄中的1％NH₃)：200＝M⁺+C₂H₅，172＝M⁺+H(Base)，171＝M⁺，154＝M⁺-OH。

实施例76

4-氨基-2-甲磺酰-嘧啶-5-羧醛

经3分钟时间，向粗制4-氨基-2-甲磺酰-嘧啶-5-基)-甲醇(1.5g)(得自实施例76)在氯仿(150mL)中形成的溶液内分几次加入二氧化锰。室温反应6小时后，通过硅藻土过滤反应混合物。用氯仿再用乙酸乙酯洗滤垫。合并滤液并真空浓缩，得到1.40g标题化合物。

实施例77

6-(2，6-二氯苯基)-2-甲磺酰-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基胺

向2，6-二氯苯基乙腈(0.55g)在二甲基甲酰胺(5mL)中制成的溶液内加入1当量60％氢化钠悬液(0.12g)。10分钟后，加入得自实施例76的4-氨基-2-甲磺酰-嘧啶-5-羧醛。室温搅拌过夜后，用水骤冷反应混合物。用1N盐酸酸化水溶液至pH7，并用二氯甲烷提取几次。用饱和氯化钠洗合并的二氯甲烷层，用硫酸镁干燥，并真空下浓缩。用硅凝胶层析纯化残留物，用乙酸乙酯/己烷(2∶1)洗脱得到0.32g标题化合物，CIMS(加于CH₄中的1％NH₃)：365＝M⁺+C₂H₅；337＝M⁺+H(Base)，336＝M⁺。

实施例78

N’-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-{3-(二乙氨基)丙氨基}吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-N，N-二甲基甲脒

向210mg(1毫摩尔)7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(二乙氨基)丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自实施例20)在0.8mL DMF中制成的悬液内加入0.8mL DMF二甲基乙缩醛。将混合物室温搅拌5.5小时，然后于真空下浓缩。使残留的油状物分配于二氯甲烷和水之间。在硫酸镁上方干燥有机相，然后浓缩并从乙腈中结晶得到160mg(68％)N’-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-{3-(二乙氨基)丙氨基}-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-N，N-二甲基甲脒；mp.100-104℃。CIMS(加在甲烷中的1％氨)：m/z(相对强度)476(MH⁺+2，60)，474(MH⁺，94)，361(100)。

C₂₃H₂₉Cl₂N₇·0.4H₂O的元素分析：

理论值：C，57.36；H，6.24；N，20.36。

实测值：C，57.28；H，6.05；N，20.07。

实施例79

N’-〔7-(3-叔丁基脲基)-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕-N，N-二甲基甲脒

按实施例78所述方法，使1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶-7-基〕-3-叔丁基脲(得自实施例3)与DMF二甲基乙缩醛反应13.5小时。按上述方法处理，然后经急骤硅凝胶层析纯化，依次用100∶10、3∶1、1∶1和0∶100二氯甲烷∶乙酸乙酯洗脱。在2-丙醇中研制洗脱得到的固体物后，最终生产出标题化合物N’-〔7-(3-叔丁基脲基)-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕-N，N-二甲基甲脒，mp.190-193℃。

CIMS(加在甲烷中的1％氨)：m/z(相对强度)462(MH⁺+2，0.78)，460(MH⁺，0.93)。

C₂₁H₂₃Cl₂N₇O·0.20 C₃H₈O·0.2C₃H₇NO的元素分析：

理论值：C，54.75；H，5.38；N，20.17。

实测值：C，54.73；H，5.31；N，20.65。

实施例80

N’-〔6-(2，6-二氯苯基)-7-〔(二甲氨基)亚甲基-氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕-N，N-二甲基甲脒

按实施例78所述，使2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自实施例1)与DMF二甲基乙缩醛反应23小时。按上述方法分离后经急骤硅凝胶层析法纯化，依次用100∶0、9∶1、4∶1和7∶3乙酸乙酯/甲醇梯度洗脱得到油状物，从乙酸乙酯中结晶产生N’-〔6-(2，6-二氯苯基)-7-〔(二甲氨基)-亚甲氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕-N，N-二甲基甲脒，mp.269-272℃。CIMS(加在甲烷中的1％氨)：m/z(相对强度)418(MH⁺+2，60)，416(MH⁺，100)。

C₁₉H₁₉Cl₂N₇·0.3H₂O的元素分析：

理论值：C，54.11；H，4.68；N，23.25。

实测值：C，54.21；H，4.58；N，22.89。

实施例81

6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

按照实施例1的方法，由苯乙腈与2，4-二氨基-5-嘧啶-羧醛反应，得到标题化合物；mp.317-318℃。

实施例82

1-(2-氨基-6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基)-3-叔丁基-脲

按照实施例2的方法，由0.246g得自实施例81的6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺与0.128mL异氰酸叔丁酯反应。使用硅凝胶以中等压力层析法纯化产物，经1∶1 CHCl₃/EtOAc梯度洗脱得到标题化合物；mp.＞250℃，CIMS(加于甲烷中的1％氨)m/z(相对强度)337(MH⁺+1，64)，338(MH⁺+2，11)，236(100)。

实施例83

6-(2，3-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

按照实施例1的方法，由2，3-二氯苯基乙腈与2，4-二氨基-5-嘧啶羧醛反应，产生标题化合物；mp.366-369℃(分解)。

实施例84

1-〔2-氨基-6-(2，3-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲

按照实施例2的一般方法，由0.502g 6-(2，3-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自实施例83)与0.206mL异氰酸叔丁酯反应。经硅凝胶层析纯化产物，用CHCl₃∶EtOAc(98∶2)至CHCl₃∶EtOAc(1∶2)的梯度洗脱，产生标题化合物；mp.356-358℃。

C₁₈H₁₈Cl₂N₆O₁·0.05H₂O的元素分析：

理论值：C，53.34；H，4.48；N，20.74。

实测值：C，53.44；H，4.47；N，20.29。

实施例85

6-(2，3，6-三氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

按照实施例1的方法，从1.0g(2，3，6-三氯)-苯基-乙腈和0.6g 2，4-二氨基-5-嘧啶-羧醛开始制备标题化合物；mp.320-322℃。

C₁₃H₈Cl₃N₅的元素分析：

理论值：C，45.84；H，2.37；N，20.56。

实测值：C，46.22；H，2.57；N，20.54。

实施例86

1-〔2-氨基-6-(2，3，6-三氯-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲

按照实施例2的方法，以0.30g 6-(2，3，6-三氯-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自实施例85)与异氰酸叔丁酯(0.108mL)反应。使用硅凝胶以中等压力层析法纯化产物，用CHCl₃∶EtOAc(1∶1）洗脱得到标题化合物；mp.329-330℃，CIMS(加于甲烷中的1％氨)：m/z(相对强度)439(MH⁺-1，3)，441(MH⁺+1，3)，84(100)。

实施例87

1-〔2-氨基-6-(2，6-二氟苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲

按照实施例2的方法，从0.25g 6-(2，6-二氟苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自实施例63)和0.112mL异氰酸叔丁酯制备标题化合物。经MPLC纯化产物，用CHCl₃∶EtOAc(1∶1)至EtOAc的梯度洗脱得到纯产物；mp.＞300℃，CIMS(加于甲烷中的1％氨)：m/z(相对强度)373(MH⁺+1，60)，374(MH⁺+2，10)，274(100)。

实施例88

1-〔2-氨基-6-(2，6-二溴苯基)-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲

按照实施例2的方法，从0.25g 6-(2，6-二溴-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自实施例60)和0.077mL异氰酸叔丁酯制备标题化合物。经MPLC纯化产物，用CHCl₃∶EtOAc(1∶1)至EtOAc的梯度洗脱得到纯产物：mp.＞300℃(分解)。

C₁₈H₁₈Br₂N₆O₁·0.35H₂O的元素分析：

理论值：C，43.20；H，3.77；N，16.79；Br，31.93。

实测值：C，43.53；H，3.64；N，16.41；Br，31.79。

实施例89

1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶-7-基〕-3-异丙基-脲

按照实施例2的方法，从0.5g 6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自实施例1)和0.172mL异氰酸异丙酯制备标题化合物。经MPLC纯化产物，用CHCl₃∶EtOAc(1∶1)的梯度洗脱得到纯产物；mp.184-188℃，CIMS(加于甲烷中的1％氨)：m/z(相对强度)391(MH⁺，16)，393(MH⁺+2，11)，306(100)。

实施例90

6-邻甲苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

按照实施例1的方法，从2-甲基苄基氰和2，4-二氨基-5-嘧啶-羧醛制备标题化合物；mp.300-302℃。

C₁₄H₁₃N₅的元素分析：

理论值：C，66.92；H，5.21；N，27.87。

实测值：C，66.4；H，5.2；N，27.9。

实施例91

1-(2-氨基-6-邻甲苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基)-3-叔丁基-脲

按照实施例2的方法，从6-邻甲苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自实施例90)和异氰酸叔丁酯制备标题化合物。经MPLC纯化产物，用CHCl₃∶EtOAc(1∶1)洗脱得到纯产物；mp.195-197℃，CIMS(加于甲烷中的1％氨)：m/z(相对强度)351(MH⁺1，55)，352(MH⁺+2，12)，84(100)。

实施例92

6-(2，3-二甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

从2，3-二甲苯基乙腈和2，4-二氨基-5-嘧啶-羧醛开始制备标题化合物；mp.330-333℃。

实施例93

1-〔2-氨基-6-(2，3-二甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲

按照实施例2的方法从0.5007g 6-(2，3-二甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自实施例92)和0.23mL异氰酸叔丁酯制备标题化合物。经MPLC纯化产物，用CHCl₃∶EtOAc(2∶1)CHCl₃∶EtOAc(1∶1)的梯度洗脱得到终产物；mp.326-333℃，MS(CI)。

C₂₀H₂₄N₆O₁·0.81H₂O的元素分析：

理论值：C，63.38；H，6.81；N，22.17。

实测值：C，63.54；H，6.47；N，21.77。

实施例94

6-(3，5-二甲基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

从2.0g 3，5-二甲苯基乙腈和1.81g 2，4-二氨基-5-嘧啶-羧醛开始，按实施例1的方法制备标题化合物；mp.298-302℃，MS(CI)。

C₁₅H₁₅N₅的元素分析：

理论值：C，67.91；H，5.70；N，26.40。

实测值：C67.87；H，5.75；N，26.38。

实施例95

1-〔2-氨基-6-(3，5-二甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲

按照实施例2的方法，从0.30g 6-(3，5-二甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自实施例94)和0.14mL异氰酸叔丁酯制备标题化合物。经MPLC纯化产物，用1∶1CHCl₃∶EtOAc洗脱得到纯产物；mp.180-182℃；CIMS(加在甲烷中的1％氨)：m/z(相对强度)365(MH⁺+1，16)，366(MH⁺+2，3)，84(100)。

实施例96

6-(2，4，6-三甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

从0.915g 2，4，6-三甲基苄氰和0.76g 2，4-二氨基-5-嘧啶-羧醛开始，按实施例1所述方法制备标题化合物；mp.276-282℃；CIMS(加于甲烷中的1％氨)：m/z(相对强度)279(MH⁺，54)，280(MH⁺+1，100)。

实施例97

1-〔2-氨基-6-(2，4，6-三甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲

由0.25g得自实施例96的6-(2，4，6-三甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺和0.109mL异氰酸叔丁酯制备标题化合物。用1∶1CHCl₃∶EtOAc洗脱经中压液相层析法纯化产物；mp.281-297℃；CIMS(加于甲烷中的1％氨)：m/z(相对强度)379(MH⁺+1，100)，380(MH⁺+2，23)。

实施例98

6-(2，3，5，6-四甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

从1.999g 2，3，5，6-四甲基苄基氰和1.52g 2，4-二氨基-5-嘧啶-羧醛开始，按实施例1所述方法制备标题化合物；mp.327-331℃；CIMS(溶于CH₄中的1％氨)：m/z(相对强度)293(MH⁺，65)，294(MH⁺+1，100)。

实施例99

1-〔2-氨基-6-(2，3，5，6-四甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧淀-7-基〕-3-叔丁基-脲

按照实施例2的方法从0.3g 6-(2，3，5，6-四甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自实施例98)和0.125mL异氰酸叔丁酯制备标题化合物。用1∶1 CHCl₃∶EtOAc洗脱，以中压液相层析法纯化产物；mp.＞300℃；CIMS(加于甲烷中的1％氨)：m/z(相对强度)393(MH⁺，55)，394(MH⁺+1，13)，84(100)。

实施例100

6-(2-甲氧基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

按照实施例1的方法，从2-乙氧基苄基氰和2，4-二氨基-5-嘧啶-羧醛制备标题化合物；mp.304-306℃(分解)。

C₁₄H₁₃N₅O₁的元素分析：

理论值：C，62.91；H，4.90；N，26.20。

实测值：C，63.16；H，5.13；N，26.42。

实施例101

1-〔2-氨基-6-(2-甲氧基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲

按照实施例2的方法，由0.203g 6-(2-甲氧基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自实施例100)和0.093mL异氰酸叔丁酯制备标题化合物。用1∶1CHCl₃∶EtOAc洗脱，以中压液相层析法纯化产物；mp.300-301℃；CIMS(加于甲烷于中的1％氨)：m/z(相对强度)367(MH⁺+1，67)，368(MH⁺+2，14)，236(100)。

实施例102

6-(3-甲氧基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

按照实施例1所述方法，从3-甲氧基苄氰和2，4-二氨基-5-嘧啶-羧醛制备标题化合物；mp.284-286℃。

C₁₄H₁₃N₅O₁的元素分析：

理论值：C，62.9；H，4.9；N，26.2。

实测值：C，62.8；H，5.0；N，26.3。

实施例103

1-〔2-氨基-6-(3-甲氧基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲

按照实施例2的方法，从0.50g 6-(3-甲氧基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自实施例102)和0.23mL异氰酸叔丁酯制备标题化合物。用CHCl₃∶EtOAc(2∶1)至CHCl₃∶EtOAc(1∶1)的梯度洗脱，以中压液相层析法纯化产物；mp.275-280℃；MS(CI)。

C₁₉H₂₂N₆O₂·0.45H₂O的元素分析：

理论值：C，60.93；H，6.19；N，22.44。

实测值：C，61.22；H，5.89；N，22.09。

实施例104

6-(2-溴-6-氯-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

按照实施例1中所述方法，从1.0g 2-溴-6-氯苯基乙腈和0.57g2，4-二氨基-5-嘧啶-羧醛制备标题化合物；mp.264-280℃；MS(CI)。

C₁₃H₉Cl₁、Br₁N₅的元素分析：

理论值：C，44.53；H，2.59；N，19.97。

实测值：C44.48；H，2.87；N，20.10。

实施例105

1-〔2-氨基-6-(2-溴-6-氯-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲

按照实施例2的方法，使用0.30g 6-(2-溴-6-氯-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自实施例104)和0.105mL异氰酸叔丁酯制备标题化合物。经MPLC纯化产物并用1∶1CHCl₃∶EtOAc洗脱；mp.314℃(分解)：MS(CI)。

C₁₈H₁₈Br₁Cl₁N₆O₁·0.43CHCl₃·0.27C₄H₈O₂的元素分析：

理论值：C，44.65；H，3.95；N，16.01；Br，15.22；Cl，15.47。

实测值：C，44.39；H，3.96；N，15.82；Br，14.83；Cl，15.39。

实施例106

丙烷-1-磺酸〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-酰胺

向1.00g 2，7-二氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自实施例1)在15mLDMF中制成的浆液内分几次加入0.15g氢化钠(60％在矿物油中)，并将混合物搅拌1小时。逐滴加入丙基磺酰氯并将反应混合物室温搅拌16小时。过滤反应混合物以除去小量不溶性材料并于真空下蒸发滤液。使用硅凝胶进行中压液相层析法(MPLC)纯化产物并用CHCl₃∶EtOAc(2∶1)至CHCl₃∶EtOAc(1∶1)梯度洗脱，得到标题化合物。

C₁₆H₁₅Cl₂N₅O₂S₁·0.25CHCl₃的元素分析：

理论值：C，44.14；H，3.48；N，15.84；S，7.25。

实测值：C，43.92；H，3.38；N，15.54；S，7.04。

实施例107

6-吡啶-3-基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

按照实施例1的方法，由3-吡啶基乙腈和2，4-二氨基-5-嘧啶-羧醛反应得到标题化合物；mp.317-319℃(分解)。

C₁₂H₁₀N₆的元素分析：

理论值：C，60.50；H，4.23；N，35.27。

实测值：C，60.5；H，4.3；N，35.6。

实施例108

1-(2-氨基-6-吡啶-3-基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基)-3-叔丁基-脲

按照实施例2的方法，由0.30g 2，7-二氨基-6-(3-吡啶基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自实施例107)与0.16mL异氰酸-叔丁酯反应。使用硅凝胶以中压液相层析法纯化产物，并用90∶10∶1EtOAc∶MeOH∶TEA洗脱得到标题化合物；mp.＞300℃；CIMS(甲烷中的1％氮)：m/z(相对强度)338(MH⁺+1，8)，339(MH⁺+2，1)，84(100)。

实施例109

6-吡啶-4-基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

向冷却的(0℃)2-乙氧基乙醇(13mL)中分次加入0.30g氢化钠(在矿物油中60％浓度)，并将悬液搅拌10分钟。向该悬液内加入1.06g 4-盐酸吡啶基乙腈，并将混合物室温搅拌30分钟。将4-吡啶基乙腈在2-乙氧基乙醇中形成的中和的溶液加入到含有2-乙氧基乙醇钠(由0.11g氢化钠和4.76mL 2-乙氧基乙醇制得)和0.9g 2，4-二氨基-5-嘧啶羧醛的反应混合物中。将所得到的反应混合物加热回流2小时，冷却并用二乙醚和乙酸乙酯洗不溶性产物得到标题化合物；mp.＞340℃；MS(CI)。

C₁₂H₁₀N₆·0.05H₂O的元素分析：

理论值：C，60.27；H，4.26；N，35.14。

实测值：C，60.35；H，4.31；N，34.75。

实施例110

1-(2-氨基-6-吡啶-4-基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基)-3-叔丁基-脲

按照实施例2的方法，用0.30g 2，7-二氨基-6-(4-吡啶基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自实施例109)与0.154mL异氰酸叔丁酯反应。使用硅凝胶以中压层析法纯化产物，用90∶10∶1EtOAc∶MeOH∶TEA洗脱得到标题化合物，mp.＞350℃；CIMS(甲烷中的1％氨)：m/z(相对强度)338(MH⁺+1，6)，339(MH⁺+2，1)，84(100)。

实施例111

6-吡啶-2-基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

按照实施例1的方法，使0.84g 2-吡啶基乙腈与1.0g 2，4-二氨基-5-嘧啶羧醛反应，得到标题化合物；mp.312-321℃。

C₁₂H₁₀N₆·0.07H₂O的元素分析：

理论值：C，60.18；H，4.27；N，35.09。

实测值：C，60.46；H，4.34；N，34.70。

实施例112

1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基-脲

按照实施例21的-般方法，使0.85g 7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自实施例20)与0.176mL异氰酸乙酯反应。在C18反相柱上以反相制备性HPLC纯化产物，用从90％加在水中的0.1％三氟乙酸/10％加在乙腈中的0.1％三氟乙酸到60％加在水中的0.1％三氟乙酸/40％加在乙腈中的0.1％三氟乙酸的溶剂梯度进行洗脱得到标题化合物，mp.92-108℃。

C₂₃H₂₉Cl₂N₇O₁·0.25H₂O的元素分析：

理论值：C，55.82；H，6.01；N，19.81。

实测值：C，55.84；h，6.02；N，19.68。

实施例113

1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-异丙基-脲

按照实施例21的方法，由0.30g 7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自实施例20)与0.071g异氰酸异丙酯反应。在硅凝胶上的中压层析法纯化产物，用90∶10∶1 EtOAc∶MeOH∶TEA洗脱得到标题化合物；mp.88-100℃；CIMS(甲烷中的1％氨)；m/z(相对强度)504(MH⁺，3)，506(MH⁺+2，2，)，86(100)。

实施例114

N²-(3-二乙氨基-丙基)-6-(2，6-二乙基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

按照实施例20的方法，使3.0g 2，7-二氨基-6-(2，6-二甲基苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自实施例6)与30mL 1-氨基-3-(N，N-二乙氨基)丙烷反应得到标题化合物；mp.216-219℃。

C₂₂H₃₀N₆·0.15H₂O的元素分析：

理论值：C，69.31；H，8.01；N，22.04。

实测值：C，69.29；H，7.89；N，22.04。

实施例115

1-〔2-(3-二甲氨基-丙氨基)-6-(2，6-二甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基-脲

按照实施例21所述的方法，从得自实施例114的7-氨基-6-(2，6-二甲苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶和异氰酸乙酯开始制备。在C18反相柱上以反相制备性HPLC法纯化产物，用从100％加在水中的0.1％三氟乙酸/0％加在乙腈中的0.1％三氟乙酸到70％加在水中的0.1％三氟乙酸/30％加在乙腈中的0.1％三氟乙酸的溶剂梯度洗脱得到纯产物；mp.64-70℃。

C₂₅H₃₅N₇O₁·0.35H₂O的元素分析：

理论值：C，65.86；H，7.89；N，21.51。

实测值：C，65.78；H，7.63；N，21.39。

实施例116

1-叔丁基-3-〔2-(3-二乙氨基-丙氨基)-6-(2，6-二甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲

从0.50g 7-氨基-6-(2，6-二甲基苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(得自实施例114)和0.17mL异氰酸叔丁酯开始，按实施例21中所述方法制备。在C18反相柱上以反相制备性HPLC法纯化产物，用从95％溶于水中的0.1％三氟乙酸/5％溶于乙腈的0.1％三氟乙酸开始到65％溶于水中的0.1％三氟乙酸/35％溶于乙腈的0.1％三氟乙酸的溶剂梯度洗脱，mp.86-91℃。

C₂₇H₃₉N₇O₁的元素分析：

理论值：C，67.89；H，8.23；N，20.53。

实测值：C，67.70；H，8.24；N，20.43。

实施例117

1-金钢烷-1-基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲

按照实施例37中所述方法，从0.5g N²-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自实施例36)和0.218g 1-金钢烷异氰酸酯开始制备。使用硅凝胶以中压层析法纯化产物，用90∶10∶1 EtOAc∶MeOH∶TEA洗脱得到标题化合物；mp.＞200℃(分解)：ESMS(20/80 MeOH/CH₃CN+0.1％AcOH)：m/z(相对强度)623.4(MH⁺，100)，625.5(MH⁺+2，48)。

C₃₂H₄₀Cl₂N₈O₁·0.52H₂O的元素分析：

理论值：C，60.72；H，6.54；N，17.70。

实测值：C，61.06；H，6.58；N，17.30。

实施例118

1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-硫脲

按照实施例37中所述方法，从0.5g N²-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自实施例36)和0.142g并硫氰酸叔丁酯开始制备。使用硅凝胶以中压层析法纯化产物，用90∶10∶1EtOAc∶MeOH∶TEA洗脱得到两种产物的混合物。进一步在C18反相柱上以反相制备性HPLC法纯化，用从95％溶于水中的0.1％三氟乙酸/5％溶于乙腈的0.1％三氟乙酸到65％溶于水中的0.1％三氟乙酸/35％溶于乙腈的0.1％三氟乙酸的溶剂梯度进行洗脱、得到标题化合物；mp.＞200℃(分解)。

实施例119

3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-1，1-二乙基-脲

向0.50g N²〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自实施例36)在5mL DMF中制成的溶液内加入0.10g 60％氢化钠，并将混合物室温搅拌1小时。将悬液冷却到0℃并逐渐加入0.15mL二乙基氨基甲酰氯。加完之后，使反应混合物升至室温并在室温下搅拌18小时。真空浓缩该混合物并在硅凝胶上以中压层析法纯化产物，用90∶10∶1EtOAc∶MeOH∶TEA洗脱得到标题化合物；mp.＞200℃(分解)；MS(ES)。

实施例120

N²-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-6-(2，3，5，6-四甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺

搅拌下将1.00g 6-(2，3，5，6-四甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自实施例98)，0.66g氨磺酸和10mL 1-(3-氨丙基)-4-甲基哌嗪的混合物加热回流34小时。将反应瓶配以短经蒸馏柱并在高真空下蒸馏除去过量的胺。用40mL二氯甲烷稀释残留物，用10mL水再用饱和15mL饱和碳酸氢钠洗。用二氯甲烷(3×25mL)提取碱性含水层，并反过来用盐水(3×25mL)洗合并的有机层。在硫酸镁上方干燥有机层，过滤并真空浓缩。使用硅凝胶以中压层析法纯化产物，用90∶10∶1 EtOAc∶MeOH∶TEA洗脱得到标题化合物；mp.218-223℃；MS(APCI)。

C₂₅H₃₅N₇·0.30C₄H₈O₂的元素分析：

理论值：C，68.41；H，8.19；N，21.31。

实测值：C，68.05；H，7.95；N，21.70。

实施例121

1-叔丁基-3-{2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-6-(2，3，5，6-四甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲

按照实施例37的方法，由0.41g N²-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-6-(2，3，5，6-四甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自实施例120)和0.12mL异氰酸叔丁酯开始制备。使用硅凝胶以中压层析法纯化产物，用90∶10∶1EtOAc∶MeOH∶TEA洗脱得到标题化合物；mp.185-198℃。

C₃₀H₄₄N₈O₁的元素分析：

理论值：C，67.64；H，8.33；N，21.03。

实测值：C，67.31；H，8.23；N，20.87。

实施例122

1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-(3-吗啉-4-基-丙基)-硫脲

接照实施例37中所述方法，从0.3926g N²-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(得自实施例53)和0.18g 3-吗啉代丙基异硫氰酸酯开始制备。在硅凝胶上以中压层析法纯化产物，用90∶10∶1EtOAc∶MeOH∶TEA的溶剂混合物纯化得到标题化合物；mp.＞200℃(分解)；ESMS(20/80 MeOH/CH₃CN+0.1％AcOH)：m/z(相对强度)619.4(MH⁺，100)，621.5(MH⁺，77)。

实施例123

1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲

向6-(2，6-二氯苯基)-N²-(4-二乙氨基-丁基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(25.0g)(得自实施例53)在DMF(300mL)中制成的溶液内加入1当量60％氢化钠悬液(2.31g)。室温下搅拌约2小时后，加入1当量异氰酸苯基酯(5.72g)并用薄层层析法监测反应。约24小时后，真空除去溶剂。将残留物溶解于二氯甲烷中并首先用水，然后用饱和氯化钠溶液将该溶液洗几次。用硫酸镁干燥二氯甲烷层并真空浓缩之。在硅凝胶上层析纯化残留物并用乙酸乙酯∶乙醇∶三乙胺(9∶2∶1)洗脱，然后从叔丁基甲酯中结晶出21.58g标题化合物1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲，ESMS(20/80 MeOH/CH₃CN+0.1％AcOH)：M⁺+H＝532；mp.157℃(分解)。

C₂₆H₃₅N₇Cl₂O·0.10H₂O的元素分析：

理论值：C，58.45；H，6.64；N，18.35；Cl，13.27；H₂O，0.34。

实测值：C，58.51；H，6.75；N，18.37；Cl，13.17；H₂O，0.57。

实施例124

向冷却的6-(2，6-二氯苯基)-N²-(4-二乙氨基-丁基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺(0.61g)(得自实施例53)在THF(6mL)中制成的溶液内分几份加入六甲基硅氮烷钾(0.308g)。使反应混合物升至室温并搅拌30分钟。然后加入异氰酸乙酯，并于室温下将反应混合物继续搅拌18小时。将反应混合物倒入约200mL 0.25N含水HCl加并过滤所得溶液以分离产物。用50％氢氧化钠水溶液将滤液调成碱性，并用乙酸乙酯提取含水层。干燥(MgSO₄)合并的有机提取物，过滤并在真空下浓缩滤液。用经向层析法纯化产物，以90∶10∶1EtOAc∶MeOH∶TEA的溶剂混合物洗脱得到标题化合物。

C₂₄H₃₁Cl₂N₇O₁·0.78H₂O的元素分析：

理论值：C，55.59；H，6.33；N，18.91。

测定值：C，55.59；H，5.93；N，18.62。

实施例125

N-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基-N”-乙基-胍

向7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(42mg)(得自实施例20)在DMF(1mL)制成的溶液内加入60％氢化钠悬液(5mg)，并将反应混合物搅拌0.5小时。向反应混合物中加入N，N’-双(叔丁氧基-羧基)-N-(乙基)-5-(乙基)异硫脲(37mg)，并将混合物搅拌18小时。用二氯甲烷(50mL)稀释反应混合物并用水(2×15mL)洗。用硫酸钠干燥有机层并浓缩之。在硅凝胶上层析纯化所得到的油状物，用甲醇/乙酸乙酯/三乙胺(8.5/1.5/0.3)洗脱得到7-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶(40mg)和[[[6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基]亚氨基[[1，1-二甲基乙氨基)羰基]氨基]甲基]-乙氨基]氨基甲酸-1，1-二甲基乙基酯的混合物。将混合物溶解在含有2，6-二甲基吡啶的无水二氯甲烷(0.5mL)中。加入三氟甲基磺酸三甲基甲硅烷基酯(6mg)，并将混合物室温下搅拌30小时。将混合物倒入饱和碳酸氢钠水溶液中，用二氯甲烷提取，在硫酸钠上方干燥并浓缩。在硅凝胶上层析所得到的油，用甲醇∶乙酸乙酯∶三乙胺(8.5∶1.5∶0.3)洗脱得到标题化合物(7mg)，ESMS(1/4 MeOH/CH₃CN+0.1％AcOH)：m/z(相对强度)490.5(MH⁺，100)，491.5(MH⁺+1，27)，492.5(MH⁺+2，64)。

以下实施例进一步举例描述本发明提供的典型物配方。

实施例126

使用下列成分配制用于口服给药的硬明胶胶囊制剂：

量(mg/胶囊)活性化合物 250淀粉粉末 200硬脂酸镁 10总计 260

混合上述成分并以460mg的量加入硬明胶胶囊中。典型的活性成分是N-〔2-甲酰氨基-6-(3，5-二甲苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-正丁酰胺。用于治疗外科手术后血管再狭窄时每天投用2-4次组合物。

实施例127

口服悬液配方成分量3-(4，5-二溴苯基)-[1，6]-1，5- 500mg二氢杂萘-2，7-二胺山梨醇溶液(70％N.F.) 40mL苯甲酸钠 150mg糖精 10mg樱桃香料 50mg蒸馏水加至 100mL

在40mL蒸馏水中加入山梨醇溶液并将1，5-二氮杂萘加入其中。加入糖精、苯甲酸钠和香料剂并溶解之。用蒸馏水将体积调到100mL。每毫升糖浆含有5mg活性成分。

实施例128

每片含60mg活性成分的片剂活性成分 60g淀粉 45mg微晶纤维素 35mg聚乙烯吡咯烷酮(在水中的10％溶液) 4mg羧甲基淀粉钠 4.5mg硬脂酸镁 0.5mg滑石 1.0mg总计 150mg

使活性成分、淀粉和纤维素通过45号目美国筛网并彻底混合。将聚乙烯吡咯烷酮的溶液与所得粉末混合，然后通过14号目美国筛网。于50-60℃干燥所得颗粒并通过18号目美国筛网。然后将预先已通过60号目美国筛网的羧甲基纤维素钠、硬脂酸镁和滑石加到颗粒中，混合后在压片机上压制得到每片重150mg的片剂。

上述制剂中使用的典型活性成分是实施例21中所述的化合物。

实施例129

将100mg 1-〔2-氨基-6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-(3-吗啉-4-基-丙基)-硫脲溶解在250mL 0.9％氯化钠水溶液中并将溶液的pH调到大约7.0。该制剂特别适于治疗乳腺癌。

实施例130

栓剂的制备

将500mg 1-(2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-咪唑烷-2-酮和1500mg可可油的混合物于60℃掺和均匀。在加善模中将混合物冷却到24℃。每个药栓重约2g，用于处理细菌感染时每天使用1-2次。

实施例131

局部制剂成分量(mg)N⁷-(3-甲基氨基基)-6-(3，5-二甲氧基苯基)-吡啶并 20〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺丙二醇 100白矿脂 500Cetearyl Alcohol 50硬脂酸甘油酯 100PEG 100硬脂酸酯 100Ceteth-20 50磷酸氢钠 80总计 1000

Claims

1.式I的化合物或其医药上可接受的酸和碱加成盐，

其中

X是CH或N；

B是卤素、氢或NR₃N₄；

SO₂R₈、卤素、C₁-C₈烷基、C₁-C₈烷氧基、硫代、-S-C₁-C₈烷基、羟基、C₁-C₈链烷酰基、C₁-C₈链烷酰氧基，或-NR₅R₆，或者当R₉和R₁₀相邻时它们一起可以是亚甲二氧基；n是0、1、2或3；并且其中R₅和R₆与它们所连接的氮一起组成一个有3至6碳原子，并且可含有选自氮、氧和硫的杂原子的环；

或

Ar和AR’是选自苯基、咪唑基、吡咯基、吡啶基、嘧啶基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、吡嗪基、噻唑基、

唑基、异唑基、呋喃基、噻吩基、萘基的未被取代或被取代的芳族或杂芳族基团，其中取代基是如上文限定的R₉、R₁₀、R₁₁和R₁₂；

条件是当X是N且B是NR₃R₄时，R₃和R₄之一是氢以外的其他基团，进一步条件是不包括下面的化合物：

2.有下列结构式的化合物或其医药上可接受的酸和碱加成盐，其中

X是CH或N；

B是卤素、氢或NR₃N₄；

R₁、R₂、R₃和R₄各自是氢、C₁-C₆烷基、C₂-C₆链烯基、C₂-C₆炔基、Ar’、氨基、C₁-C₆烷基氨基或二-C₁-C₆烷基氨基；其中烷基、链烯基和炔基基团可被NR₅R₆取代，这里R₅和R₆独自是氢、C₁-C₆烷基、C₂-C₆链烯基、C₂-C₆炔基、C₃-C₁₀环烷基式

SO₂R₈、卤素、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基、硫代、-S-C₁-C₆烷基、羟基、C₁-C₆链烷酰基、C₁-C₆链烷酰氧基，或-NR₅R₆，或者当R₉和R₁₀相邻时它们一起可以是亚甲二氧基；n是0、1、2或3；并且其中R₅和R₆与它们所连接的氮一起组成一个有3至6碳原子，并且可含有选自氮、氧和硫的杂原子的环；

R₁和R₂与它们所连接的氮一起，以及R₃和R₄与它们所连接的氮一起可构成一个有3至6个碳原子，并可含有1或2个选自氮、氧及硫的杂原子的环，R₁和R₃还可以是选自的酰基类似物，其中R₈是氢、C₁-C₆烷基、C₂-C₆链烯基、C₂-C₆炔基、C₃-C₆环烷基，

以及-NR₅R₆，并且其中烷基、链烯基和炔基基团可被NR₅R₆所取代；

Ar是选自苯基、咪唑基、吡咯基、吡啶基、嘧啶基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、吡嗪基、噻唑基、唑基、异

唑基、呋喃基、噻吩基、萘基的未被取代或被取代的芳族或杂芳族基团，其中取代基是如上文限定的R₉、R₁₀、R₁₁；

3.权利要求1的化合物，其中B是卤素或氢。

4.权利要求1的化合物，其中B是NR₃R₄，条件是不包括下面的化合物：

5.权利要求4的化合物，其中X是CH。

6.权利要求5的化合物，其中Ar可以是式

的被取代的苯环。

7.权利要求6的化合物，其中R₂和R₄是氢。

8.权利要求7的化合物，其中R₁和R₃独自是氢、C₁-C₆烷基、或

9.权利要求8的化合物，其中R₈是C₁-C₆烷基、-NR₅R₆或C₁-C₆烷基-NR₅R₆。

10.权利要求9的化合物，其中R₅和R₆独自是氢、C₁-C₆烷基或C₁-C₆烷基或C₁-C₆烷基-NR₅R₆。

11.权利要求8的化合物，其为3-邻甲苯基-〔1，6〕-1，5-二氮杂萘-2，7-二胺。

12.权利要求8的化合物，其为3-(2-氯-苯基)-〔1，6〕-1，5-二氮杂萘-2，7-二胺。

13.权利要求5的化合物，其中Ar是可以被取代的杂芳环。

14.权利要求4的化合物，其中X是N，条件是不包括下面化合物：

15.权利要求14的化合物，其中Ar是式

的可被取代的苯环。

16.权利要求15的化合物，其中R₂和R₄是氢。

17.权利要求16的化合物，其中R₁和R₃独自是氢、C₁-C₆烷基、

或

18.权利要求17的化合物，其中R₈是C₁-C₆烷基、-NR₅R₆或-C₁-C₆烷基-NR₅R₆。

19.权利要求18的化合物，其中R₅是氢，R₆是C₁-C₆烷基或C₁-C₆烷基NR₅R₆。

20.权利要求19的化合物选自

N⁷-丁基-6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺；

1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙脲；

N²，N⁷-二甲基-6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺；

1-〔2-氨基-6-(2，3-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；

1-〔2-氨基-6-(2，6-二氟苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；

1-〔2-氨基-6-(2，6-二溴苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；

1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-异丙基-脲；

1-〔2-氨基-6-苯基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；

1-〔2-氨基-6-(2-甲氧基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；

1-〔2-氨基-6-(3-甲氧基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；和

21.有下列结构式的权利要求1的化合物，

其中R₁、R₂、R₉和R₁₀是如权利要求1中限定的。

22.权利要求21的化合物，其中R₉和R₂₀都是卤素或甲基。

23.权利要求22的化合物，其中R₁和R₂都是氢。

24.权利要求23的化合物，其为1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-咪唑烷-2-酮。

25.具有下列结构式的权利要求1的化合物其中R₁、R₂、R₅、R₆、R₉和R₁₀是如权利要求1中限定的。

26.具有下列结构式的权利要求1的化合物

27.权利要求26的化合物，其中R₃是

且R₄是氢。

28.权利要求27的化合物，其为

1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二甲氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲；

1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-2，2-二甲基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲；

1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-苯基-脲；

1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基脲；

1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基脲；盐酸盐；

1-环己基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲；

1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二溴-苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲；

1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(2-二乙氨基-乙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲；

1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(2-二乙氨基-乙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶并-7-基〕-3-乙基脲；

1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔(3-二甲氨基-丙基)-甲基-氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶-7-基}-脲；

1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基脲；

1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-异丙基脲；

1-〔2-(3-二甲氨基-丙氨基)-6-(2，6-二甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基脲；

1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲；和

1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-乙基脲。

29.具有下列结构式的权利要求27的化合物

30.权利要求29的化合物，其为

1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丁氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；

1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-异丙基-脲；

1-苄基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；

1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-(4-甲氧基-苯基)-脲；

1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-(2-甲氧基-苯基)脲；

1-(4-溴-苯基)-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；

1-(4-氯-苯基)-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；

1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-对甲苯基-脲；

1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-辛基-脲；

1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-(4-三氟甲基-苯基)-脲；

1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-乙基-脲；

1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3，3-二乙基-脲；

1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-萘-1-基-脲；

1-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-3-苯基-脲；

1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；

1-金刚烷-1-基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；和

1-叔丁基-3-{2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-6-(2，3，5，6-四甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲。

31.具有下列结构式的权利要求1的化合物

32.权利要求31的化合物，其为6-(4-甲氧基苯基)-N⁷-甲基-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺。

33.具有下列结构式的权利要求1的化合物

34.权利要求33的化合物，其为

2-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-氨基-4，5-二氢唑；和

6-(2，6-二氯苯基)-N²-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙基〕-N⁷-(5，6-二氢-4H-〔1，3〕嗪-2-基)吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2，7-二胺。

35.具有下列结构式的权利要求1的化合物

36.权利要求35的化合物，其为

1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-(3-吗啉-4-基-丙基)-硫脲；

1-丁基-3-〔7-(3-丁基-脲基)-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕-脲；

1-〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-丙基-脲；

1-叔丁基-3-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-吗啉-4-基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲；

1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-硫脲；

1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔N-(3-二甲氨基丙基)-N-甲氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲；

1-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-二乙氨基-丁氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-(3-吗啉-4-基-丙基)-硫脲；及

1-叔丁基-3-{6-(2，6-二氯苯基)-2-〔N-(3-二甲氨基丙基)-N-甲氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基}-脲。

37.具有下列结构式的权利要求1的化合物

38.权利要求37的化合物，其为

1-〔2-氨基-6-(吡啶-2-基)-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；

1-〔2-氨基-6-(吡啶-3-基)-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；以及

1-〔2-氨基-6-(吡啶-4-基)-吡啶并〔2，3-d〕-嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲。

39.具有下列结构式的权利要求1的化合物

或

40.权利要求39的化合物，其为

N-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-(3-二乙氨基-丙氨基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基-N”-乙基-胍；

N’-〔6-(2，6-二氯苯基)-2-{3-(二乙氨基)-丙氨基}-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-N，N-二甲基-甲脒；

N’-〔6-(2，6-二氯苯基)-7-(二甲氨基)甲氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕-N，N-二甲基甲脒；和

N’-〔7-(3-叔丁基脲基)-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-2-基〕-N，N-二甲基甲脒。

41.具有下列结构式的权利要求1的化合物

42.权利要求41的化合物，其为

1-叔丁基-3-〔〔6-(2，6-二氯苯基)-2-苯氨基〕-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-脲。

43.具有下列结构式的权利要求1的化合物

44.权利要求43的化合物，其为

1-〔2-氨基-6-(2，4，6-三甲基-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲；和

1-〔2-氨基-6-(2，3，6-三氯-苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-3-叔丁基-脲。

45.权利要求1的化合物，其为

丙烷-1-磺酸〔2-氨基-6-(2，6-二氯苯基)-吡啶并〔2，3-d〕嘧啶-7-基〕-酰胺。

46.包含权利要求1的化合物连同其医药上可接受的载体、稀释剂或赋形剂的药物制剂。

47.权利要求46的制剂，其中使用B是NR₃R₄的化合物。

48.权利要求47的制剂，其中应用X是CH的化合物。

49.权利要求48的制剂，其中应用Ar是有下列结构式的可被取代的苯环的化合物

50.权利要求49的制剂，其中应用R₂和R₄是氢，并且R₁和R₃独自是氢、C₁-C₆烷基，或而R₈是C₁-C₆烷基或-NR₅R₆的化合物。

51.权利要求47的制剂，其中利用X是N的化合物。

52.权利要求51的制剂，其中利用Ar为下式任意取代的苯环的化合物：

53.权利要求52的制剂，其中利用R₂和R₄是氢，R₁和R₃各自是氢、C₁-C₆烷基、

或

而R₈是C₁-C₆烷基或-NR₅R₆的化合物。

54.权利要求1的化合物在制备用于治疗包括动脉粥样硬化和外科手术后再狭窄在内的血管平滑肌增殖性疾病的药物中用途。

55.权利要求1的化合物在制备用于抑制细胞增殖和迁移的药物中用途。

56.权利要求1的化合物在制备用于治疗牛皮癣的药物中用途。

57.权利要求1的化合物在制备用于抑制表皮生长因子受体酪氨酸激酶的药物中用途。

58.权利要求1的化合物在制备用于抑制Erb-B2或Erb-B3或Erb-B4酪氨酸激酶的药物中用途。

59.权利要求1的化合物在制备用于抑制蛋白质酪氨酸激酶的药物中用途。

60.权利要求1的化合物在制备用于抑制V-src酪氨酸激酶的药物中用途。

61.权利要求1的化合物在制备用于抑制C-src酪氨酸激酶的药物中用途。

62.权利要求1的化合物在制备用于抑制碱性成纤维细胞生长因子和/或酸性成纤维细胞生长因子受体酪氨酸激酶的药物中用途。

63.权利要求1的化合物在制备用于治疗哺乳动物的细菌感染的药物中用途。

64.权利要求1的化合物在制备用于治疗哺乳动物的血管再狭窄的药物中用途。

65.权利要求1的化合物在制备用于治疗气球血管成形术后冠状动脉再狭窄的药物中用途。

66.权利要求1的化合物在制备用于抑制正常器官移植后血管狭窄的药物中用途。

67.权利要求1的化合物在制备用于抑制旁路移植物狭窄的药物中用途。

68.权利要求1的化合物在制备用于抑制静脉移植后狭窄的药物中用途。

69.权利要求1的化合物在制备用于抑制血管成形术后外周血管狭窄的药物中用途。

70.权利要求1的化合物在制备用于抑制血小板衍生的生长因子受体酪氨酸激酶的药物中用途。