CZ286160B6

CZ286160B6 - 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny a naftyridiny a farmaceutické prostředky na jejich bázi

Info

Publication number: CZ286160B6
Application number: CZ19971390A
Authority: CZ
Inventors: Clifton John Blankley; Annette Marian Doherty; James Marino Hamby; Robert Lee Panek; Mel Conrad Schroeder; Howard Daniel Hollis Showalter; Cleo Connolly
Original assignee: Warner-Lambert Company
Priority date: 1994-11-14
Filing date: 1995-11-13
Publication date: 2000-01-12
Also published as: GR3033439T3; PT790997E; TJ342B; MX9702245A; ATE190978T1; SK60997A3; FI971953A0; DE69515898D1; IL115970A0; MD970187A; NO972198D0; EP0790997B1; CZ139097A3; PL181893B1; NO972198L; HUT76853A; SK281724B6; BG63162B1; MD1861G2; AU4107896A

Abstract

6-Arylpyrido/2,3-d/pyrimidiny obecného vzorce I, kde jednotlivé obecné symboly mají význam uvedený v nárocích, jsou inhibitory proteinové tyrozin kinázy, a jsou tedy užitečné při léčbě buněčné proliferace, zejména při léčbě aterosklerózy, restenózy a psoriázy, jakož i bakteriálních infekcí. Použití těchto sloučenin k výše uvedeným účelům a farmaceutické prostředky na jejich bázi.ŕ

Description

6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny, jejich použití a farmaceutické prostředky na jejich bázi

Oblast techniky

Vynález se týká 6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidinů, které inhibují enzymatickou aktivitu proteinové tyrozin kinázy (PTK), jež je mediátorem buněčné proliferace. Vynález se dále týká použití těchto sloučenin a farmaceutických prostředků na jejich bázi.

Dosavadní stav techniky

Mnohé chorobné stavy jsou charakterizovány nekontrolovanou proliferací a diferenciací buněk. Tyto chorobné stavy zahrnují různé buněčné typy a choroby, jako jsou nádory, ateroskleróza a restenóza. Stimulace růstového faktoru, autofosforylace a fosforylace intracelulámích bílkovinných substrátů jsou významnými biologickými jevy v pathomechanismu proliferativních chorob.

U normálních buněk představuje fosforylace tyrozinových zbytků v proteinových substrátech kritickou funkci v signálních drahách intracelulámího růstu, jež jsou iniciovány stimulovanými extracelulámími receptory růstového faktoru. Tak například připojení růstových faktorů, jako je růstový faktor pocházející z krevních destiček (Plateled Derived Growth Factor, PDGF), růstový faktor fibroblastů (FGF) a epidermální růstový faktor (EGF), k příslušným receptorům aktivuje intracelulámí domény enzymu tyrozin kinázy v těchto receptorech a tím katalyzuje fosforylaci buď intracelulámích substrátů, nebo samotných receptorů. Fosforylace receptorů růstového faktoru v odpovědi na vazbu ligandu je známa pod označeným autofosforylace.

Tak například receptor EGF obsahuje jako dva své nejdůležitější ligandy EGF a transformační růstový faktor α (TGFa). Zdá se, že tyto receptory mají jen malou funkci u normálních dospělých lidí, ale hrají svou úlohu při chorobných procesech velké části všech rakovin, zejména rakoviny tlustého střeva a prsu. Blízce příbuzné receptory Erb-B2 a Erb-B3 obsahují jako své hlavní ligandy ligandy spadající do skupiny heregulinů a bylo naděvší pochybnost prokázáno, že nadexprese a mutace receptoru je hlavním rizikovým faktorem u rakoviny prsu se špatnou prognózou.

Proliferace a řízená migrace buněk vaskulámího hladkého svalstva (VSMC) představují důležité složky v takových procesech, jako je vaskulámí remodelace, restenóza a ateroskleróza. Růstový faktor pocházející z krevních destiček byl identifikován jako jeden z nejúčinnějších endogenních mitogenů VSMC a chemoatraktantů. Zvýšená vaskulámí mRNA exprese řetězců PDGF-A a PDGF-B a receptorů PDGF byla pozorována v krysích karotidových artériích poraněných balónkem (J. Cell. Biol. 111: 2149 až 2158 (1990)). Při tomto modelovém poškození infuse PDGF silně zvyšuje ztlušťování intimy a migraci VSMC (J. Clin. Invest. 89: 507 až 511 (1992)). Kromě toho, protilátky neutralizující PDGF významně snižuje ztlušťování intimy po poškození balónkem (Science, 253: 1129 až 1132 (1991)).

Jak kyselý růstový faktor fibroblastů (aFGF), tak bazický růstový faktor fibroblastů (bFGF) vykazuje mnoho biologických účinností včetně schopnosti povzbuzovat proliferací a diferenciaci buněk. Bylo ukázáno, že tyrozin kinázové inhibitory receptoru tyrfostinu, které blokují transdukční dráhu PDGF signálu, inhibují in vivo fosforylaci receptorové tyrozin kinázy stimulovanou PDGF (Drug Develop. Res., 29: 158 až 166 (1993)). Přímý důkaz podporující podíl FGF u VSMC oznámili Lindner a Reidy (Proč. Nati. Acad. Sci. USA, 88: 3739 až 3743 (1991)). Tito vědci demonstrovali, že systemická injekce neutralizační protilátky proti bFGF před balónkovou angioplastikou karotidové artérie krysy inhibuje mediální proliferací SMC indukovanou poraněním o výše než 80 %, při měření 2 dny po poškození. Je pravděpodobné, že

-1 CZ 286160 B6 bFGF uvolněný z poškozených buněk působí parakrinním způsobem a indukuje růst VSMC. Lindner a Reidy (Cir. Res. 73: 589 až 595 (1993)) nedávno demonstrovali zvýšenou expresi mRNA pro bFGF a mRNA pro EGFR-1 v replikujících VSMC a endotheliu v podélných preparátech krysích karotidových artérií, poškozených balónkem. Tato data poskytují důkaz, že v poraněných artériích se může systém ligand/receptor bFGF a FGFR-1 podílet na pokračující proliferativní odpovědi VSMC, která vede ke tvorbě neointimy.

EGF, PDGF, FGF a jiné růstové faktory tedy hrají ústřední role v patomechanismu buněčných proliferativních chorob, jako je rakovina, ateroskleróza a restenóza. Po asociaci s příslušnými receptory stimulují tyto růstové faktory účinnost tyrozin kinázy, jako jeden z úvodních biochemických stupňů vedoucích k syntéze DNA a dělení buněk. Z toho vyplývá, že sloučeniny inhibující proteinové tyrozin kinázy spojené s transdukčními signálními drahami intracelulámího růstového faktoru jsou důležitými činidly pro léčení buněčných proliferativních chorob. Nyní se v souvislosti s vynálezem zjistilo, že určité pyrido[2,3-d]pyrimidiny a naftyridiny inhibují proteinové tyrozin kinázy a jsou užitečné při léčení a prevenci aterosklerózy, restenózy a rakoviny.

Některé pyrido[2,3-d]pyrimidiny a naftyridiny jsou známé. Tak například US patent č. 3 534 039 popisuje řadu 2,7-diamino-6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidinových sloučenin, jako diuretická činidla; US patent č. 3 639 401 popisuje řadu 6-aryl-2,7-bis[(trialkylsiIyl)aminoJpyrido[2,3-d]pyrimidinových sloučenin, jako diuretická činidla; US patent č. 4 271 164 popisuje řadu 6-substituovaný arylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-aminů a derivátů, jako hypertenzivní činidla; zveřejněná evropská patentová přihláška č. 0 537 463 A2 popisuje řadu substituovaných pyrido[2,3-d]pyrimidinů, které jsou užitečné jako herbicidy a US patent č. 4 771 054 popisuje některé naftyridiny, jako antibiotika. Žádný z výše citovaných dokumentů se netýká sloučenin podle našeho vynálezu ani nenaznačuje, že by takové sloučeniny byly užitečné pro léčení aterosklerózy, restenózy a rakoviny.

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu jsou 6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny obecného vzorce I

(I)

kde

Ri, R₂ a Ri představuje každý nezávisle atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, alkenylskupinu se 2 až 8 atomy uhlíku, alkinylskupinu se 2 až 8 atomy uhlíku, Ar', aminoskupinu, alkylaminoskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku nebo dialkylaminoskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku v každé z alkylových částí, přičemž uvedené alkylové, alkenylové a alkinylové skupiny jsou popřípadě substituovány skupinou NR₅R6, kde R₅a Ró představuje každý nezávisle atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, alkenylskupinu se 2 až 8 atomy uhlíku, alkinylskupinu se 2 až 8 atomy uhlíku, cykloalkylskupinu se 3 až 10 atomy uhlíku nebo skupinu obecného vzorce

-2CZ 286160 B6

a kde výše uvedené alkylové, alkenylové a alkinylové skupiny jsou popřípadě substituovány hydroxyskupinou nebo pěti- nebo šestičlenným karbocyklickým kruhem nebo pětičlenným nebo šestičlenným heterocyklickým kruhem, který obsahuje jeden nebo dva heteroatomy zvolené ze souboru zahrnujícího dusík, kyslík a síru, přičemž tyto kruhy jsou popřípadě substituovány jednou nebo dvěma alkylskupinami s 1 až 6 atomy uhlíku, a R₉, R_]0, Rn a R_[2 představuje každý nezávisle atom vodíku, nitroskupinu, trifluormethylskupinu, fenylskupinu, fenylskupinu substituovanou jedním až čtyřmi substituenty ze souboru zahrnujícího halogen, hydroxyskupinu, aminoskupinu, alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku a alkoxyskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, skupinu -CsN, -COORg,

S NH

II II

-CORg, -CRg, -C-Rg, -SO₂Rg, atom halogenu, alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, thioskupinu, skupinu -S-alkyl s 1 až 8 atomy uhlíku, hydroxyskupinu, alkanoylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, alkanoyloxyskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku nebo skupinu -NH₂, nebo R₉ a Ri₀ dohromady, pokud spolu sousedí, popřípadě představují methylendioxyskupinu; n představuje číslo 0, 1, 2 nebo 3; a kde R₅ a Re dohromady s atomem dusíku, ke kterému jsou připojeny, popřípadě tvoří kruh se 3 až 6 atomy uhlíku, který popřípadě obsahuje heteroatom zvolený ze souboru zahrnujícího atom dusíku, kyslíku a síry, přičemž tento kruh je popřípadě substituován jednou nebo dvěma alkylskupinami s 1 až 6 atomy uhlíku;

R₃ představuje acylový analog zvolený ze souboru zahrnujícího skupiny vzorce

NH	O		/r\\
II — C—Rg>	II -r* 0	a	/ 0 nebo λ\ ¹ M	CH₂) 1,2 nebo 3

kde Rg představuje atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, alkenylskupinu se 2 až 8 atomy uhlíku, alkinylskupinu se 2 až 8 atomy uhlíku, cykloalkylskupinu se 3 až 10 atomy uhlíku, která popřípadě obsahuje atom kyslíku, dusíku nebo síry, skupinu vzorce

-3CZ 286160 B6

nebo -NR5R6, přičemž alkylové, alkenylové a alkinylové skupiny ve významu R₈jsou popřípadě substituovány skupinou NRsR^;

Ri a R₂ dohromady s atomem dusíku, k němuž jsou připojeny a

R3 a R4 dohromady s atomem dusíku, k němuž jsou připojeny, popřípadě tvoří také skupinu (H, CH₃ nebo NH₂)

-N=C-R₈ nebo doplňující kruh se 3 až 6 atomy uhlíku, který popřípadě obsahuje 1 až 2 heteroatomy zvolené ze souboru zahrnujícího dusík, kyslík a síru a

Ri	navíc popřípadě představuje acylový analog zvolený ze souboru zahrnujícího skupiny vzorce
	O	O	S
	II	II	II
	C Rg >	— C—ORg’	— C—Rg

NH	O
II —C—Rg,	II -s-R₈	a
II
	0

nebo

ύΗ₂)

1, 2 nebo 3 kde Rg představuje atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, alkenylskupinu se 2 až 8 atomy uhlíku, alkinylskupinu se 2 až 8 atomy uhlíku, cykloalkylskupinu se 3 až 10 atomy uhlíku, která popřípadě obsahuje atom kyslíku, dusíku nebo síry, skupinu vzorce

nebo -NR5R6, přičemž alkylové, alkenylové a alkinylové skupiny ve významu Rg jsou popřípadě substituovány skupinou NRsR^;

-4CZ 286160 B6

Ar a Ar' představuje nesubstituovanou nebo substituovanou aromatickou nebo heteroaromatickou skupinu zvolenou ze souboru zahrnujícího fenylskupinu, imidazolylskupinu, pyrrolylskupinu, pyridylskupinu, pyrimidinylskupinu, benzimidazolylskupinu, benzothienylskupinu, benzofurylskupinu, indolylskupinu, pyrazinylskupinu, thiazolylskupinu, oxazolylskupinu, isoxazolylskupinu, furylskupinu, thienylskupinu a naftylskupinu, přičemž případnými substituenty jsou substituenty Rg, Rio, Rn a Ri₂, které mají výše uvedený význam;

a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami a bázemi.

Přednost se dává sloučeninám obecného vzorce

kde Ri, R₂, R₈ a Ar mají výše uvedený význam a jejich farmaceuticky vhodným adičním solím s kyselinami a bázemi.

Přednost se také dává 6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidinům obecného vzorce I, kde Ar představuje skupinu obecného vzorce

kde obecné substituenty mají význam uvedená v základní definici obecného vzorce I a jejich farmaceuticky vhodným adičním solím s kyselinami a bázemi.

Ze sloučenin uvedených bezprostředně výše se dává přednost 6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidinům obecného vzorce I, kde R₂ a Rq představují atomy vodíku a ostatní symboly mají význam uvedený bezprostředně výše a jejich farmaceuticky vhodným adičním solím s kyselinami a bázemi.

Z nich pak se dává obzvláštní přednost sloučeninám, kde Ri představuje atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo skupinu obecného vzorce

S

II

-CR, nebo

O

-CR₈ a ostatní symboly mají význam uvedený bezprostředně výše a jejich farmaceuticky vhodným adičním solím s kyselinami a bázemi.

Přednostními sloučeninami ze souboru uvedeného bezprostředně výše jsou 6-arylpyrido[2,3djpyrimidiny obecného vzorce I, kde Rg představuje alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo skupinu vzorce -NR5R6 nebo -alkyl-NR₅R6 s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části a ostatní symboly mají význam uvedený v předchozím odstavci, a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami a bázemi.

Obzvláště vhodnými sloučeninami ze souboru uvedeného v předchozím odstavci jsou 6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny obecného vzorce I, kde R₅ představuje atom vodíku a R₆ představuje alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo —alkyl—NR5IU s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části a ostatní symboly mají význam uvedený v předchozím odstavci a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami a bázemi.

Jako zvláště výhodné 6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny spadající do rozsahu souboru uvedené v předchozím odstavci je možno uvést l-terc.butyl-3-[7-(3-terc.butylureido)-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]močovinu;

l-[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu;

l-terc.butyl-3-[7-(3-terc.butylureido}-6-o-tolylpyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]močovinu;

l-[2-amino-6-o-tolylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu;

l-[2-amino-6-(2,6-dimethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu;

N-[2-acetylamino-6-(2,6—dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]acetamid; l-[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-ethylmočovinu;

l-[2-amino-6-(2,3-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu;

l-[2-amino-6-(2,6-difluorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu; l-[2-amino-6-(2,6-dibromfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu;

l-[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-isopropylmočovinu;

l-(2-amino-6-fenylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl)-3-terc.butylmočovinu;

l-[2-amino-6-(2,3-dimethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu;

l-[2-amino-6-(3,5-dimethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu;

l-[2-amino-6-(2-methoxyfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu;

l-[2-amino-6-(3-methoxyfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu a l-[2-amino-6-(2-brom-6-chlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu.

Přednost se také dává 6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidinům obecného vzorce

-6CZ 286160 B6 kde Rj, R₂, R₉ a Rjo mají význam uvedený v základní definici obecného vzorce I a jejich farmaceuticky vhodným adičním solím s kyselinami a bázemi.

Ze souboru sloučenin definovaných v předchozím odstavci se dává přednost 6-arylpyrido[2,3djpyrimidinům, kde R₉ a R]₀ oba představují vždy atom halogenu nebo methylskupinu a ostatní symboly mají význam uvedený v předchozím odstavci a jejich farmaceuticky vhodným adičním solím s kyselinami a bázemi.

Z nich pak jsou zvláště výhodné 6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny, ke Rj a R₂ oba představují vždy atom vodíku a ostatní symboly mají význam uvedený v předchozím odstavci a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami a bázemi, zejména l-[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]imidazolidin-2-onu.

Přednost se také dává 6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidinům obecného vzorce

kde R], R₂, R5, R«, R₉ a R_]0 mají význam uvedený v základní definici obecného vzorce I a jejich farmaceuticky vhodným adičním solím s kyselinami a bázemi.

Dále se také dává přednost 6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidinům obecného vzorce

R₅R₆n— alkyl—NH

kde obecné symboly mají význam uvedený v základní definici obecného vzorce I a jejich farmaceuticky vhodným adičním solím s kyselinami a bázemi.

Z nich pak se dává přednost 6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidinům, kde R₃ představuje

O

II skupinu vzorce -CR₈, R4 představuje atom vodíku a ostatní symboly mají význam uvedený v předchozím odstavci a jejich farmaceuticky vhodným adičním solím s kyselinami a bázemi.

Přednostními 6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny ze souboru definovaného v předchozím odstavci jsou sloučeniny zvolené ze souboru zahrnujícího

-7CZ 286160 B6 l-terc.butyl-3-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-diethylaminopropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-

7-yl]močovinu;

l-terc.butyl-3-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-dimethylaminopropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]močovinu;

1-terc.buty 1-3-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-dimethylamino-2,2-dimethylpropylammo)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]močovinu;

l-terc.butyl-3-{6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(2-methylpiperidin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3d]pyrimidin-7-yl}močovinu;

1-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(4-diethylaminobutylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3feny lmočov inu;

1-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(4-diethylaminobutylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3ethylmočovinu;

hydrochlorid 1-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(4-diethylaminobutylammo)pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl]-3-ethylmočoviny,

1-cyklohexy 1-3-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(4-diethylaminobutylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl]močovinu;

l-terc.butyl-3-[6-(2,6-dibromfenyl)-2-(3-diethylaminopropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl]močovinu;

l-terc.butyl-3-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(2-diethylaminoethylamino)pyrido(2,3-d]pyrimidin-7yljmočovinu;

1-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(2-diethylaminoethylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3ethylmočovinu;

l-terc.butyl-3-{6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[(3-dimethylaminopropyl)methylamino]pyrido[2,3d]pyrimidin-7-yl}močovinu;

1-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-diethylaminopropylamino)pyrido(2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3ethylmočovinu;

1-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-diethylaminopropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3isopropylmočovinu;

l-[2-(3-dimethylaminopropylamino}-6-(2,6-dimethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3ethylmočovinu;

l-terc.butyl-3-[2-(3-diethylaminopropylamino)-6-(2,6-dimethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]močovinu;

1-terc.buty 1-3-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(4-diethylammobutylammo)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7yljmočovinu a

1-(6-(2,6-dichlorfeňyl)-2-(4-diethylaminobutylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-ethylmočovinu.

-8CZ 286160 B6

Přednost se také dává 6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidinům obecného vzorce

kde obecné symboly mají význam uvedený bezprostředně výše a jejich farmaceuticky vhodným adičním solím s kyselinami a bázemi.

Jako přednostní sloučeniny z podskupiny sloučenin definované bezprostředně výše je možno uvést sloučeniny zvolené ze souboru zahrnujícího l-terc.butyl-3-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)butylamino]pyrido[2,3d]pyrimidin-7-yl} močovinu;

l-cyklohexyl-3-{6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl}močovinu;

1-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl}-3-isopropylmočovinu;

l-benzyl-3-{6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3d]pyrimidin-7-yl}močovinu;

l-allyl-3-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3d]pyrimidin-7-yl}močovinu;

1-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl}-3-(4-methoxyfenyl)močovinu;

1-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl}-3-(3-methoxyfenyl)močovinu;

l-{6-(2,6-dichlorfenyl-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl}-3-(2-methoxyfenyl)močovinu;

l-(4-bromfenyl)-3-{6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl}močovinu;

l-(4-chlorfenyl)-3-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl} močovinu;

1-(6-(2,6-dichlorfenyl-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl}-3-p-tolylmočovinu;

1-(6-(2,6-dichlorfenyl-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin7-y 1 }-3-okty lmočovinu;

-9CZ 286160 B6

1-(6-(2,6-dichlorfenyI-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl}-3-(4-trifluormethylfenyl)močovinu;

1-(6-(2,6-dichlorfenyl-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl}-3-ethylmočovinu;

1-(6-(2,6-dichlorfenyl-2-[3-(4-methylpiperazm-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl}-3,3-diethylmočovinu;

l-{6-(2,6-dichlorfenyl-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylammo]pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl}-3-naftalen-l-ylmočovinu;

1-(6-(2,6-dichlorfenyl-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin15 7-yl}-3-fenylmočovinu;

l-terc.butyl-3-{6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3d]pyrimidin-7-yl} močovinu;

l-adamantan-l-yl-3-{6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl}močovinu a

-terč .buty l-3-{ 2-[3-(4-methy lpiperazin-1 -y l)propy lam ino]-6-(2,3,5,6-tetramethy lfeny 1)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl}močovinu.

Přednost se také dává 6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidinům obecného vzorce

Z těchto sloučenin se dává přednost

2-[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]amino—4,5-dihydrooxazolu a

6-(2,6-dichlorfenyl)-N²-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propyl]-N⁷-(5,6-dihydro-4H[ 1,3]oxazin—2-yl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diaminu.

Přednost se také dává 6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidinům obecného vzorce

-10CZ 286160 B6

Z těchto sloučenin se dává přednost sloučeninám zvoleným ze souboru zahrnujícího l-[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-(3-morfolin—4ylpropyl)thiomočovinu;

l-butyl-3-[7-(3-butylureido)-6-(2,6-dichIorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]močovinu;

l-[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin—7-yl]-3-propylmočovinu;

l-terc.butyl-3-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-morfolin-4-ylpropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl]močovinu;

l-terc.butyl-3-{6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3d]pyrimidin-7-yl}thiomočovinu;

l-terc.butyl-3-{6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[N-(3-dimethylaminopropyl)-N-methylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl}močovinu;

1-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(4-diethylaminobutylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-(3morfolin—4-ylpropyl)thiomočovinu a

-terč .buty 1-3- {6-(2,6-dich lorfeny l}-2-[N-(3-dimethy lam inopropy l)-N-methy lamino] pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl} močovinu.

Přednost se také dává 6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidinům obecného vzorce

Z těchto sloučenin se dává přednost sloučeninám zvoleným ze souboru zahrnujícího

-11 CZ 286160 B6 l-[2-amino-6-(pyridin-2-yl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu; l-[2-amino-6-(pyridin-3-yl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu a l-[2-amino-6-(pyridin-4-yl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu.

Přednost se dále dává 6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidinům obecného vzorce

(H, CH₃nebo^NH₂) nebo

N-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-diethylaminopropyl)amino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl-Nethylguanidin;

N'-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(diethylamino)propylamino}pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]N,N-dimethylformamidin;

N'-[6-(2,6-dichlorfenyl)-7-[(dimethylamino)methylenamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]Ν,Ν-dimethylformamidin a

N'-[7-(3-terc.butylureido)-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]-N,N-dimethylformamidin.

Přednost se dále dává 6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidinům obecného vzorce

Z těchto sloučenin se dává přednost l-terc.butyl-3-[[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-fenylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]močovině.

Přednost se dává také 6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidinům obecného vzorce

- 12CZ 286160 B6

Z těchto sloučenin se dává přednost sloučeninám zvoleným ze souboru zahrnujícího l-[2-amino-6-(2,3,5,6-tetramethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu;

l-[2-amino-6-(2,4,6-trimethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu a l-[2-amino-6-(2,3,6-trichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu.

Výhodnou sloučeninou je zejména také [2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl]amidpropan—1-sulfonové kyseliny.

6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny podle vynálezu, jsou užitečné při inhibici proteinové protein kinázy ajsou tedy účinné při léčení buněčných proliferativních chorob, aterosklerózy, restenózy a rakoviny.

Předmětem vynálezu jsou tedy i 6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny obecného vzorce I a jejich 20 farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami nebo bázemi pro použití pro léčení proliferativních chorob vaskulámího hladkého svalstva a pro léčení aterosklerózy nebo postchirurgické restenózy.

Předmětem vynálezu je také farmaceutický prostředek, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje 25 6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidin podle nároku 1 nebo jeho farmaceuticky vhodnou adiční sůl s kyselinou nebo bází spolu s farmaceuticky vhodným nosičem, ředidlem nebo excipientem pro tuto sloučeninu.

Ve výhodném provedení obsahuje tento farmaceutický prostředek 6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidin obecného vzorce I, kde Ar představuje popřípadě substituovanou fenylskupinu obecného vzorce

přičemž všechny obecné symboly mají jinak význam uvedený v základní definici obecného 35 vzorce I, nebo jeho farmaceuticky vhodnou adiční sůl s kyselinou nebo bází.

Zvláště výhodný farmaceutický prostředek popsaný v předchozím odstavci obsahuje 6arylpyrido[2,3-d]pyrimidin obecného vzorce I, kde R? a R4 představují atomy vodíku a R] představuje atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, skupinu -C(=O)-Rg nebo -C(=S)40 R₈, kde R_s představuje alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo skupinu -NR₅Ré, přičemž

- 13 CZ 286160 B6 všechny obecné symboly mají jinak význam uvedený v základní definici obecného vzorce I, nebo jeho farmaceuticky vhodnou adiční sůl s kyselinou nebo bází.

Sloučeniny podle vynálezu vykazují specifickou afinitu vůči jednomu nebo více substrátových míst tyrozin kinázových domén EGF, FGF, PDGF, V-src a C-src. Sloučeniny podle vynálezu účinně inhibují autofosforylaci EGF a PDGF receptorů a inhibují proliferaci a migraci buněk vaskulámího hladkého svalstva.

Jakožto inhibitory protein kinázy jsou sloučeniny podle vynálezu užitečné při potlačování proliferativních poruch, jako je leukémie, rakovina, psoriáza, proliferace vaskulámího hladkého svalstva spojená s aterosklerózou a postchirurgická vaskulámí stenosa a restenóza u savců.

Sloučeniny podle vynálezu se mohou vyskytovat v nesolvatovaných formách nebo též v solvatovaných formách, včetně hydratovaných forem. Obecně jsou solvatované formy, včetně hydratovaných forem, ekvivalentní nesolvatovaným formám a všechny tyto formy spadají do rozsahu tohoto vynálezu.

Ve sloučeninách obecného vzorce I se pod pojmem „alkylskupina s 1 až 8 atomy uhlíku“ rozumí přímý nebo rozvětvený uhlovodíkový zbytek s 1 až 8 atomy uhlíku, jako například methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, sek.butyl, isobutyl, terc.butyl, n-pentyl, 2,2-dimethylpropyl, nhexyl, n-heptyl, n-oktyl apod. Přednost se dává alkylskupinám s 1 až 6 atomy uhlíku.

Pod pojmem „halogen“ se rozumí fluor, chlor, brom a jod.

Pod pojmem „alkenylskupina se 2 až 8 atomy uhlíku“ se rozumí přímý nebo rozvětvený uhlovodíkový zbytek se 2 až 8 atomy uhlíku, který obsahuje jednu dvojnou vazbu. Jako příklady alkenylskupin je možno uvést ethenyl, 3-buten-l-yl, 2-ethenylbutyl, 3-okten-l-yl apod. Alkinylové skupiny se 2 až 8 atomy uhlíku zahrnují propinyl, 2-butin-l-yl, 3-pentin-l-yl apod. Přednost se dává alkenylskupinám se 2 až 6 atomy uhlíku.

Pod pojmem „cykloalkylskupina se 3 až 10 atomy uhlíku“ se rozumí cyklická nebo bicyklická uhlovodíková skupina, jako cyklopropyl, cyklobutyl, cyklohexyl, cyklopentyl, adamantyl, bicyklo[3.2.1]oktyl, bicyklo[2.2.1]heptyl apod., jakož i heterocyklická skupiny, jako piperazinyl, tetrahydropyranyl, pyrrolidinyl apod.

Pod pojmem „alkoxyskupina s 1 až 8 atomy uhlíku“ se rozumí alkylskupina, jak je definována výše, která je vázána ke zbytku molekuly přes atom kyslíku. Jako příklady alkoxyskupin je možno uvést methoxyskupinu, ethoxyskupinu, isopropoxyskupinu, terc.butoxyskupinu, noktyloxyskupinu apod. Přednost se dává alkoxyskupinám s 1 až 6 atomy uhlíku.

Jako „alkanoylskupiny s 1 až 8 atomy uhlíku“ je možno uvést formylskupinu, acetylskupinu, propionylskupinu, butyryl skup inu a isobutyrylskupinu. Pod pojmem „alkanoyloxyskupina s 1 až 8 atomy uhlíku“ se rozumí acetoxyskupina, terc.butanoyloxyskupina, pentanoyloxyskupina apod.

Alkylové, alkenylové a alkinylové skupiny mohou být substituovány skupinou NRsR^ a pěti— nebo šestičlennými karbocyklickými a heterocyklickými skupinami, které obsahují jeden nebo dva heteroatomy zvolené ze souboru zahrnujícího dusík, kyslík a síru. Tyto kruhy mohou být substituovány, například jednou nebo dvěma alkylskupinami s 1 až 6 atomy uhlíku. Jako příklady takových skupin je možno uvést dimethylaminomethyl, 4-diethylamino-3-buten-l-yl, 5-ethylmethylamino-3-pentin-l-yl-4-morfolinobutyl, 4-(4-methylpiperazin-l-yl)butyl, 4-tetrahydropyridylbutyl, 2-methyltetrahydropyridinomethyl, 3-imidazolidin— 1-ylpropyI, 4-tetrahydrothiazol-3-ylbutyl, fenylmethyl, 3-chlorfenylmethyl apod.

- 14CZ 286160 B6

Pod označením „Ar“ a „Ar' “ se rozumí nesubstituované a substituované aromatické a heteroaromatické skupiny, jako fenyl, 3-chlorfenyl, 2,6-dibromfenyl, pyridyl, 3-methylpyridyl, benzothienyl, 2,4,6-tribromfenyl, 4-ethylbenzothienyl, furyl, 3,4-diethylfuryl, naftyl, 4,7dichlomaftyl apod.

Ar a Ar' přednostně představuje fenylskupinu nebo fenylskupinu substituovanou jedním, dvěma nebo třemi substituenty nezávisle zvolenými ze souboru, zahrnujícího atom halogenu, alkylskupinu, alkoxyskupinu, thioskupinu, thioalkylskupinu, hydroxyskupinu, alkanoylskupinu, skupinu -CN, -NO₂, -COORg, -CF₃, alkanoyloxyskupinu a aminoskupinu vzorce -NR₅R$. Přednost se dává disubstituované fenylskupině, zvláště 2,6-disubstituované fenylskupině. Jako jiné přednostní skupiny ve významu Ar a Ar' je možno uvést pyridylskupinu, například 2pyridyl- a 4-pyridylskupinu.

Jako substituované fenylskupiny ve významu Ar a Ar' je tedy možno uvést 2-aminofenyl, 3chlor-4-methoxy-fenyl, 2,6-diethylfenyl, 2-n-hexyl-3-fluorfenyl, 3-hydroxy-fenyl, 3,4dimethoxyfenyl, 2,6-dichlorfenyl, 2-chlor-6-methylfenyl, 2,4,6-trichlorfenyl, 2,6-dimethoxyfenyl, 2,6-dihydroxyfenyl, 2,6-dibromfenyl, 2,6-dinitrofenyl, 2,6-di(trifluormethyl)fenyl, 2,6dimethylfenyl, 2,3,6-trimethylfenyl, 2,6-dibrom-4-methylfenyl apod.

Sloučeniny obecného vzorce I jsou dále schopny tvořit farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami a/nebo bázemi. Všechny tyto formy spadají do rozsahu tohoto vynálezu.

Farmaceuticky vhodné adiční soli sloučenin obecného vzorce I s kyselinami zahrnují soli netoxických anorganických kyselin, jako je kyselina chlorovodíková, kyselina dusičná, kyselina fosforečná, kyselina sírová, kyselina bromovodíková, kyselina jodovodíková, kyselina fosforečná apod. a soli organických kyselin, jako například alifatických monokarboxylových a dikarboxylových kyselin, fenylsubstituovaných alkanových kyselin, hydroxyalkanových kyselin, alkandiových kyselin, aromatických kyselin, alifatických a aromatických sulfonových kyselin atd. Tyto soli tedy zahrnují sulfáty, disulfáty, hydrogensulfáty, sulfity, hydrogensulfity, nitráty, fosfáty, monohydrogenfosfáty, dihydrogenfosfáty, methafosfáty, difosfáty, chloridy, bromidy, jodidy, acetáty, propionáty, kapryláty, isobutyráty, oxaláty, malonáty, sukcináty, suberáty, sebakáty, fumaráty, maleáty, mandeláty, benzoáty, chlorbenzoáty, methylbenzoáty, dinitrobenzoáty, ftaláty, benzensulfonáty, toluensulfonáty, fenylacetáty, citráty, laktáty, maleáty, tartráty, methansulfonáty apod. Do rozsahu solí spadají též soli odvozené od aminokyselin, jako jsou argináty apod. a glukonáty a galakturonáty (viz například Berge, S. M. et al. „Pharmaceutical Salts“, Joumal of Pharmaceutical Science, 66, strana 1 až 19 (1977)).

Adiční soli s kyselinami odvozené od bazických sloučenin podle vynálezu se připravují obvyklým způsobem, tj. tak, že se sloučenina ve formě volné báze uvede do styku s dostatečným množstvím požadované kyseliny, aby vznikla sůl. Volnou bázi lze regenerovat ze soli tím, že se sůl uvede do styku s bází a získaná volná báze se obvyklým způsobem izoluje. Volná báze se poněkud liší od odpovídajících solných forem v určitých fyzikálních vlastnostech, jako je rozpustnost v polárních rozpouštědlech, ale pro účely tohoto vynálezu jsou jinak soli ekvivalentní odpovídajícím volným bázím.

Farmaceuticky vhodné adiční soli s bázemi vznikají skovy nebo aminy, jako například s alkalickými kovy a kovy alkalických zemin nebo organickými aminy. Jako příklady kovů, kterých se může používat jako kationtů, je možno uvést sodík, draslík, hořčík, vápník apod. Jako příklady vhodných aminů je možno uvést Ν,Ν'-dibenzylethylendiamin, chlorprokain, cholin, diethanolamin, ethylendiamin, N-methylglukamin a prokain (viz například Berge, S. M. et al. „Pharmaceutical Salts“, Joumal of Pharmaceutical Science, 66, strana 1 až 19 (1977)).

- 15CZ 286160 B6

Adiční soli s bázemi odvozené od kyselých sloučenin podle vynálezu se připravují obvyklým způsobem, tj. tak, že se sloučenina ve formě volné kyseliny uvede do styku s dostatečným množstvím požadované báze, aby vznikla sůl. Volnou kyselinu lze regenerovat ze soli tím, že se sůl uvede do styku s kyselinou a získaná volná kyselina se obvyklým způsobem izoluje. Volné kyseliny se poněkud liší od odpovídajících solných forem v určitých fyzikálních vlastnostech, jako je rozpustnost v polárních rozpouštědlech, ale pro účely tohoto vynálezu jsou jinak soli ekvivalentní odpovídajícím volným kyselinám.

Formám provedení tohoto vynálezu, které jsou popsány v těchto podlohách, se sice v současné době dává přednost, to však neznamená, že by nebyly možné i formy jiné. Není účelem uvádět zde všechny ekvivalentní formy ajejich alternativy. Popis tohoto vynálezu je pouze destriptivní, ale nemá žádný omezující charakter. Všechny změny a modifikace, které se neodchylují od duchu vynálezu, spadají do rozsahu nárokované ochrany.

Sloučeniny obecného vzorce I je možno připravovat syntetickými postupy ilustrovanými ve schématech I až VII.

Přestože jsou v těchto schématech často uvedeny specifické struktury, způsoby se vztahují i na analogické sloučeniny obecného vzorce I. Přitom je také nutno brát potřebný ohled na nutnost ochrany reaktivních funkčních skupin a následné odstraňování chránících skupin tak, jak je to běžné v oboru organické chemie. Při zavádění a odstraňování chránících skupin se používá standardních postupů. Tak například, aby se zabránilo hydroxyskupinám podílet se na nežádoucích vedlejších reakcích, obvykle je nutno je převádět na ethery nebo estery před prováděním chemických reakcí na jiných místech molekuly. Chrániči skupiny hydroxyskupin se potom snadno odstraní a přitom se regenerují volné hydroxyskupiny. Podobně bývá nutno derivatizovat aminoskupiny a karboxyskupiny, a tím je chránit před nežádoucími vedlejšími reakcemi. Typické chránící skupiny, způsoby jejich zavádění a odštěpování jsou podrobně popsány v publikaci Greene a Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, New York (2. vydání), 1991) a McOmie, Protective Group in Organic Chemistry, Plenům Press, New York, 1973.

Ve schématu I je ilustrován obvyklý způsob výroby l-terc.butyl-3-[7-(3-terc.butylureido)-6(aryl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]močovin a l-[2-amino-6-(aryl)pyrido[2,3-b]pyrimidin-7yl]-3-terc.butylmočovin z klíčového meziproduktu, 2,7-diamino-6-(aryl)-pyrido[2,3-d]pyrimidinu. Tento klíčový meziprodukt je možno získat způsobem popsaným v US patentu č. 3 534 039. Při postupu podle schématu I se obecně nechá reagovat 2,7-diamino-6-(aryl)pyrido[2,3-d]pyrimidinová sloučenina s jedním ekvivalentem acylačního činidla, jako alkylisokyanátu, isothiokyanátu, karbamoylchloridu, karbamoylbromidu, sulfamoylchloridu, chlorformiátu nebo jiného aktivovaného derivátu kyseliny, jako symetrického anhydridu, směsného anhydridu apod. Tato reakce se provádí v neředěném isokyanátu nebo za přítomnosti báze, přednostně natriumhydridu ve vhodném nereaktivním rozpouštědle, jako dimethylformamidu, dioxanu apod. Výchozí látku, 2,7-diamino-6-(aryl)-pyrido[2,3~d]pyrimidin, je možno nechat reagovat stejným způsobem, jaký je popsán výše, za použití dvojnásobného nebo vyššího přebytku acylačního činidla. Tím se získá převážně diacylovaná sloučenina, například 1terc.butyl-3-[7-(3-terc.butyIureido)-6-(aryl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]močovina.

Acylace je obvykle v podstatě dokončena během 1 až 3 hodin při teplotě 20 až 80 °C. Produkt se snadno izoluje běžnými postupy, například tak, že se pevná látka odfiltruje a odpařením se odstraní reakční rozpouštědlo. Je-li to žádoucí, je produkt možno rutinními postupy čistit. Jako příklady takových postupů je možno uvést krystalizaci z organických rozpouštědel, jako ethylacetátu, dichlormethanu, hexanu apod., jakož i chromatografii na pevném nosiči, jako silikagelu. Sloučeniny podle vynálezu jsou obvykle ve formě pevné látky a snadno krystalují.

-16CZ 286160 B6

Ve schématu II je ilustrována obvyklá acylace 2,7-diamino-6-(aryl)-pyrido[2,3-d]pyrimidinu za použití dvojnásobného nebo většího přebytku acetanhydridu za zahřívání, při níž se získá diacylovaný produkt, například N-[2-acetylamino-6-(aryl)-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]acetamid. Diacylované sloučeniny tohoto typu lze tímto způsobem obecně získat z výchozí 2,7diamino-6-(aryl)-pyrido[2,3-d]pyrimidinové sloučeniny reakcí s přebytkem acylačního činidla, jako anhydridu kyseliny, směsného anhydridu kyseliny nebo aktivovaného acylderivátu, jako chloridu kyseliny nebo sulfonylchloridu. Reakce se obecně provádí při teplotě asi 20 až 200 °C. Pro zachycování kyselého vedlejšího produktu vznikajícího v průběhu reakce může být žádoucí k reakční směsi přidat organickou nebo anorganickou bázi, jako triethylamin nebo hydroxid sodný. Diacylovaný produkt se snadno izoluje a purifikuje chromatografií nebo překrystalováním, jak je uvedeno výše.

Ve schématu III je ilustrována několikastupňová výroba 6-(aryl)-N⁷-alkyIpyrido[2,3d]pyrimidin-2,7-diaminu za použití 2,7-diamino-6-(aryl)-pyrido[2,3-d]pyrimidinu, který je možno vyrobit způsobem popsaným v US patentu č. 3 534 039. Reakcí výchozí látky s vodnou minerální kyselinou za podmínek zpětného toku se získá hydrolyzovaný produkt, 2-amino-6(aryl)-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ol. Reakcí 2-amino-6-(aryl)-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-olu s thionylchloridem za podmínek Vilsmeier-Haackovy reakce se získá chlorformamidinový produkt, N'-(7-chlor-6-(aryl)-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-N,N-dimethylformamidin. Tento reaktivní meziprodukt je možno nechat přímo reagovat s nukleofílním činidlem, jako aminem, za vzniku N⁷-alkyl-6-(aryl)-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diaminu. Alternativně je formamidinovou funkční skupinu možno odstranit alkoholýzou za vzniku 7-chlorderivátu, tj. 2-amino-7chlor-6-(aryl)-pyrido[2,3-d]pyrimidinu. Reakcí 7-chlorovaného meziproduktu s nukleofílním činidlem, jako alkylaminem, se získá odpovídající 6-(aryl)-N⁷-alkylpyrido[2,3-d]pyrimidin2,7-diamin.

Ve schématu IV je popsána výroba 3-(aryl)-[l,6]naftyridin-2,7-diaminu, která představuje obecný postup výroby těchto sloučenin. Hydrogenolýzou 6-brom-2,4-diamino-5-kyanopyridinu (JACS, 80: 2838-2840 (1958)) se získá intermediámí 2,4-diamino-5-kyanopyridin. Následnou hydrogenací kyanopyridinové sloučeniny, například ve směsi kyseliny mravenčí a vody za použití Raneyova niklu, jako katalyzátoru, se získá klíčový víceúčelový meziprodukt, 2,4diamino-5-pyridinkarboxaldehyd. Tento aldehyd se poté kondenzuje s arylacetonitrilem způsobem popsaným v reakčním schématu IV na 3-(aryl)-[l,6]naftyridin-2,7-diamin. Kondenzační reakce se provádí za přítomnosti alkoxidové báze, například ethoxidu sodného nebo 2-ethoxyethoxidu sodného, který je možno připravit in šitu přídavkem kovového sodíku nebo natriumhydridu k ethanolu nebo 2-ethoxyethanolu. Ve schématu IV je popsán obecný postup přípravy 3-(aryl)-[l,6]naftyridin-2,7-diaminů podle vynálezu.

Ve schématu V je ilustrována přímá dialkylace 6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diaminu (US patent č. 3 534 039) s alkylaminem v bombě při vysoké teplotě, při níž se získá N²,N⁷-dialkyl-6arylpyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin. Obecně se tato reakce provádí za použití neředěného aminového reakčního činidla, jako isobutylaminu a n-hexylaminu, při teplotě asi 150 až 300 °C v tlakovém zařízení (bombě).

Ve schématu VI je ilustrována syntéza sloučenin obecného vzorce I, kde Ri představuje aminoalkylskupinu, jako diethylaminopropylskupinu. 6-(aryl)-2,7-diaminopyrido[2,3-d]pyrimidin je možno nechat přímo reagovat s nukleofilní aminosloučeninou, jako aminoalkylaminem (například vzorce FENalkyl-NRsRů), obvykle v bombě a za přítomnosti kyseliny, jako amidosírové kyseliny. Touto reakcí se získá aminoalkylsubstituovaná sloučenina podle vynálezu, kterou - je-li to žádoucí - je možno rutinními postupy dále acylovat. Získané sloučeniny se snadno izolují a čistí konvenčními postupy krystalizace a chromatografie.

- 17CZ 286160 B6

Ve schématu VII je ilustrována syntéza sloučenin obecného vzorce I, kde R₃ a R4 dohromady s atomem dusíku, k němuž jsou připojeny, tvoří cyklický zbytek. Tento cyklický zbytek popřípadě obsahuje další heteroatom, jako dusík, kyslík nebo síru. Při postupu podle schématu VII se diaminopyridopyrimidin nechá reagovat s halogenethylisokyanátem za vzniku imidazolidinonu. Reakce se obecně provádí v organickém rozpouštědle, jako dimethylformamidu, obvykle za přítomnosti báze, jako natriumhydridu. Pokud se reakce provádí při asi 30 °C, je obvykle dokončena během asi 8 až 16 hodin. Získaný produkt se snadno izoluje a přečištění se provádí rutinními postupy.

Výše popsanou reakcí se rovněž vyrobí sloučeniny obecného vzorce I, kde Rj nebo R₃představuje acylový analog obecného vzorce (O)------f 1 nebo \\ ²

N-------(CH₂)

1, 2 nebo 3

Tato reakce je ilustrována ve schématu Víla. Získaný produkt se izoluje rutinními postupy, jako je chromatografie, frakční krystalizace apod.

Další skupinu sloučenin podle vynálezu tvoří amidiny, sloučeniny obecného vzorce I, kde R] a R₂ dohromady s atomem dusíku, k němuž jsou připojeny, a R₃ a R4 zbytek dohromady s atomem dusíku, k němuž jsou připojeny tvoří zbytek obecného vzorce (H, CH₃ nebo NH₂)

I -N=C-Rg.

Ve schématu VIII je ilustrována syntéza obvyklých pyridopyrimidinamidinů, které je možno vyrobit reakcí aminopyridopyrimidinu s acetalem amidu nebo cyklického amidu, například dimethylacetalem Ν,Ν-dimethylformamidu nebo dimethylacetalem N-methylpyrrolidonu. Reakce se obvykle provádí tak, že se aminopyridopyrimidin smísí s asi ekvimolámím množstvím nebo přebytkem acetalu v rozpouštědle, které rozpouští obě tyto složky, jako dimethylformamidu, dimethylsulfoxidu, tetrahydrofuranu apod. Pokud se reakce provádí při teplotě asi 5 až asi 50 °C, je obvykle dokončena po asi 3 až 6 hodinách. Produkt se snadno izoluje za použití rutinních postupů a je-li to žádoucí, lze ho přečistit obvyklými postupy, jako chromatografií, překrystalováním apod.

Předmětem vynálezu jsou také aminopyridopyrimidiny, kde je aminoskupina substituována arylskupinou Ar', například fenylskupinou, substituovanou fenylskupinou, pyridylskupinou, thiazolylskupinou, pyrimidinylskupinou apod. Přednostní N-arylové sloučeniny odpovídají obecnému vzorci

kde Ar, Ar' mají výše uvedený význam a B je -NR₃R4. Tyto sloučeniny je možno připravovat několika postupy, například postupy, které jsou ilustrovány ve schématech IX a X.

-18CZ 286160 B6

Při postupu podle schématu IX se pyridopyrimidin substituovaný alkylthioskupinou, alkylsulfoxidovou skupinou nebo alkylsulfonovou skupinou, například ve 2-poloze, nechá reagovat s arylaminem (například vzorce Ar'NH₂), čímž se dosáhne vytěsnění thiosubstituentu nebo 5 sulfoxidového nebo sulfonového substituentu, za vzniku odpovídajícího N-arylaminopyridopyrimidinu. Vytěsňovací reakce se obvykle provádí v organickém rozpouštědle, jako dimethylformamidu, obvykle při teplotě asi 20 až asi 80 °C. Reakce je obvykle dokončena po asi 3 až asi 8 hodinách. Získaný produkt se snadno izoluje tak, že se reakční směs přidá do vody a produkt se z vodné směsi extrahuje do rozpouštědla, jako methylenchloridu apod.

Ve schématu X je ilustrována syntéza N-arylaminopyridopyrimidinů za použití vhodně substituovaného pyrimidinu, například 4-amino-2-chlorpyrimidin-5-karbonitrilu, jako výchozí látky. Halogenová skupina se vytěsní reakcí s arylaminem (Ar'NH₂) za vzniku odpovídajícího 2N-arylaminopyrimidinu, který v poloze 5 obsahuje kyanoskupinu. Kyanoskupina se převede 15 redukcí za použití Raneyova niklu ve vodě a kyseliny mravenčí na aldehydickou skupinu a získaný 2-arylamino—4-aminopyrimidin-5-karboxaldehyd se nechá reagovat s arylacetonitrilem (například fenylacetonitrilem, 2-pyridylacetonitrilem apod.) způsobem popsaným ve schématu IV za vzniku odpovídajícího N-arylaminopyridopyrimidinu podle vynálezu.

-19CZ 286160 B6

Schéma I

1. NaH, DMF

-----------------------------------------------------------------------------------1

2. (CH₃) ₃C—N=C=O

R,

Schéma II

-20CZ 286160 B6

Schéma III

SOC1₂

------►

DMF

Schéma IV

-21 CZ 286160 B6

Schéma V

Schéma VI

-22CZ 286160 B6

Schéma Vila

Schéma VIII

-23 CZ 286160 B6

LAH/THF

-------->

Schéma XI

NaH/DMF_rArCH,CN

Ar

-24CZ 286160 B6

Schéma X

Ar’NH₂

DIEA/THF*

CN

RaNi/H,0 ___________1----►

Kyselina mravenčí nh₂

Ar

NaH/DMF

R₃NCO

Sloučeniny obecného vzorce I jsou cennými inhibitory proteinových tyrozin kináz a mají terapeutickou hodnotu jako celulámí antiproliferativní činidla při léčbě proliferativních chorob. Tyto sloučeniny jsou silnými inhibitory jedné nebo více protein kináz, PDGF, FGF, EGF, V-src a C-src. Sloučeniny podle vynálezu jsou tedy užitečné při léčbě aterosklerózy, restenózy a rakoviny. Jako konkrétní tumory, které se léčí za použití těchto sloučenin, je možno uvést malobuněčný karcinom plic, jako je karcinom popsaný v An. Rev. Respir. Dis., 142: 554 až 556 (1990); rakovina prsu u člověka, která je popsána v Cancer Research, 52: 4773 až 4778 (1992); nízkostupňové karcinomy močového měchýře u člověka typu popsaného v Cancer Research 52: 1457 až 1462 (1992), rakovina kolorekta u člověka, která je diskutována v J. Clin. Invest. 91: 53 až 60 (1993) a v J. Surg. Res. 54: 293 až 294 (1993). Tyto sloučeniny jsou také užitečné jako antibiotika proti bakteriím, jako je Streptococcus pneumoniae. Tak například sloučeniny z příkladů 9 a 18 vykazují při standardních in vitro testech účinnost proti gram-pozitivním bakteriálním kmenům. Tyto sloučeniny jsou kromě toho také užitečné jak herbicidy proti širokému rozsahu nežádoucích plevelných rostlin, jako jsou širokolisté a travní plevelné rostliny.

Sloučeniny podle vynálezu je možno zpracovávat na celou řadu dávkovačích forem vhodných pro orální a parenterální podávání, včetně transdermálního a rektálního podávání. Takové dávkovači formy obsahují jako účinnou složku sloučeninu obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodnou sůl nebo solvát.

Předmětem vynálezu jsou dále farmaceutické prostředky, jejichž podstata spočívá vtom, že obsahují sloučeninu obecného vzorce I spolu s farmaceuticky vhodným nosičem, ředidlem nebo excipientem.

-25CZ 286160 B6

Při výrobě farmaceutických prostředků ze sloučenin podle vynálezu se používá inertních farmaceuticky vhodných nosičů, které mohou být pevné nebo kapalné. Jako pevné farmaceutické prostředky je možno uvést prášky, tablety, dispergovatelné granule, pilule, kapsle, oplatky a čípky. Jako pevných nosičů se může používat jedné nebo více látek, které mohou také působit jako ředidla, ochucovadla, pojivá, konzervační činidla a bubřidla. Do rozsahu pojmu „nosič“ se též zahrnují zapouzdřující látky.

V prášcích se jako nosiče používá jemně rozdělené pevné látky, jako je mastek nebo škrob, která je smísena s jemně rozdělenou účinnou složkou.

V tabletách je účinná složka smísena s vhodným množstvím nosiče, který má potřebné pojivové vlastnosti a slisována na požadovanou velikost a tvar.

Prostředky podle vynálezu přednostně obsahují asi 5 až asi 70 % hmotnostních účinné přísady. Jako vhodné nosiče je možno uvést uhličitan hořečnatý, stearan hořečnatý, mastek, laktózu, cukr, pektin, dextrin, škrob, želatinu, tragant, methylcelulózu, sodnou sůl karboxymethylcelulózy, nízkotající vosk, kakaové máslo apod. Přednostní formou pro orální podávání jsou kapsle, v níž je účinná složka (popřípadě ve směsi s nosiči) zapouzdřena. Spadají sem také oplatky a pastilky. Tablety, prášky, kapsle, pilule, oplatky a pastilky mohou být používány jako pevné dávkovači formy pro orální podávání.

Pro výrobu čípků se používá nízkotajícího vosku, jako směsi glyceridů mastných kyselin nebo kakaového másla. Tato složka se nejprve roztaví a potom se v ní homogenně disperguje (například mícháním) účinná složka. Roztavená homogenní směs se potom nalije do forem vhodné velikosti, nechá zchladnout a přitom ztuhne.

Prostředky v kapalné formě zahrnují roztoky, suspenze a emulze, například roztoky ve vodě nebo ve směsi vody a propylenglykolu. Takové prostředky se hodí pro parenterální podávání ve formě injekcí. Pro tento druh podávání se také může používat roztoků ve vodném polyethylenglykolu. Pro parenterální injekční kapalné přípravky se hodí roztoky ve vodném roztoku polyethylenglykolu, isotonizovaném roztoku chloridu sodného, 5% vodném roztoku glukózy apod.

Vodné roztoky, které se hodí pro orální podávání, je možno vyrábět rozpuštěním účinné složky ve vodě, přičemž se podle potřeby mohou přidat vhodné barvicí látky, příchutě, stabilizátory a zahušťovadla.

Vodné suspenze, které se hodí pro orální podávání, je možno vyrábět dispergací jemně rozdělené účinné složky ve vodě za přítomnosti viskosní látky, jako jsou přírodní nebo syntetické pryskyřice, methylcelulóza, sodná sůl karboxymethylcelulózy a jiná dobře známá suspenzní činidla.

Do rozsahu vynálezu spadají také pevné prostředky, které mají být krátce před použitím převedeny na prostředky v kapalné formě vhodné pro orální podávání. Takové kapalné formy zahrnují roztoky, suspenze a emulze. Kromě účinné složky mohou takové prostředky obsahovat barvicí činidla, příchutě, stabilizátory, pufry, umělá a přírodní sladidla, dispergátory, zahušťovadla, solubilizátory apod. Vosky, polymery a podobné látky mohou sloužit pro výrobu forem s prodlouženým uvolňováním. Pro rovnoměrnou prodlouženou dodávku účinné sloučeniny je také možno použít tzv. osmotických pump.

Farmaceutické prostředky se přednostně vyrábějí jako jednotkové dávkovači formy. V takové formě je prostředek rozdělen do jednotkových dávek obsahujících vhodné množství účinné sloučeniny. Prostředek obsahující jednotkové dávkovači formy může mít podobu obalu obsahujícího oddělená množství prostředku, například tablet, kapslí nebo prášků v lahvičkách nebo injekcích. Pod pojmem Jednotková dávkovači forma“ se rozumí samotná kapsle, oplatka,

-26CZ 286160 B6 tableta nebo pastilka nebo též větší počet kapslí, oplatek, tablet nebo pastilek umístěných v obalu.

Terapeuticky účinná dávka sloučeniny obecného vzorce I bude obvykle ležet v rozmezí od asi mg do asi 100 mg/kg tělesné hmotnosti za den. Obvyklá dávka pro dospělého člověka bude činit asi 50 až asi 800 mg/den. Množství účinné složky v jednotkové dávkovači formě prostředku podle vynálezu se může měnit a může být nastaveno od asi 0,1 do asi 500,0 mg, přednostně na asi 0,5 až do 100 mg podle konkrétní aplikace a účinnosti zvolené účinné složky. Prostředky podle vynálezu mohou také popřípadě obsahovat jiná kompatibilní terapeutická činidla. Pacientovi, který bude vyžadovat léčení sloučeninou obecného vzorce I, se tato sloučenina bude podávat v dávce od asi 1 do asi 500 mg za den, buď ve formě jediné dávky nebo ve formě několika dávek rozložených v průběhu 24 hodin.

Sloučeniny podle vynálezu byly podrobeny standardním testům používaným pro stanovení inhibice tyrozin kináz. Jeden z těchto testů se provádí následujícím způsobem:

Purifikace tyrozin kinázy receptorů epidermálního růstového faktoru

Tyrozin kináza humánního receptorů EGF se izoluje z buněk epidermoidního karcinomu A431 za použití následujících postupů:

Buňky se nechají růst v převalovaných lahvích v 50 % Dulbeccem modifikovaného Eaglova média a 50 % živného média HAMF-12 (Gibco) s obsahem 10% fetálního telecího séra. Přibližně 10⁹ buněk se podrobí lysi ve dvou objemech pufru obsahujícího 20mM 2-(4N-[2hydroxyethyl]piperazin-l-yl)ethansulfonovou kyselinu (hepes) o pH 7,4, 5mM ethylenglykolbis(2-aminoethylether) Ν,Ν,Ν',Ν'-tetraoctovou kyselinu, 1% Triton X-100, 10% glycerol, 0,1 mM orthovanadičnan sodný, 5mM fluorid sodný, 4mM difosforečnan, 4mM benzamid, lmM dithiothreitol, aprotinin (80 pg/ml), leupeptin (40 pg/ml) a lmM fenylmethylsulfonylfluorid. Lysát se 10 minut odstřeďuje při 25 000 x g, supematant se 2 hodiny ekvilibruje při 4 °C s 10 ml pryskyřice Sepharose s aglutininem z pšeničných klíčků, která byla před tím ekvilibrována s 50mM Hepes, 10% glycerolem, 0,1% Triton X—100 a 150mM chloridem sodným o pH 7,5 (ekvilibrační pufr). Kontaminační proteiny se z pryskyřice vymyjí 1M chloridem sodným v ekvilibračním pufru a enzym se eluuje 0,5M N-acetyl-l-D-glukózaminem v ekvilibračním pufru.

Stanovení hodnotIC50

Enzymatická stanovení za účelem získání hodnot IC50 se provádějí v celkovém objemu 0,1 ml, v němž je obsažen 25mM Hepes o pH 7,4, 5mM chlorid hořečnatý, 2mM chlorid manganatý, 50μΜ vanadičnan sodný, tyrozin kináza receptorů EGF (5 až 10 ng), 200μΜ substrátový peptid [například Ac-Lys-His-Lys-Lys-Leu-Ala-Glu-Gly-Ser-Ala-Tyr⁴⁷²-Glu-Glu-Val-NH2] (Wahl, Μ. I. et al., J. Biol. Chem. 265, 3944 až 3948 (1990)), 10μΜ ATP s obsahem 1 pCi [³²P]ATP a vzniklá směs se inkubuje 10 minut při teplotě místnosti. Reakce se ukončí přídavkem ml 75mM kyseliny fosforečné a vzniklá směs se nechá projít 2,5 cm filtračním kotoučkem z fosfocelulózy, aby se peptid navázal. Filtr se promyje 5x75mM kyselinou fosforečnou a umístí se do lahvičky spolu s 5 ml scintilační kapaliny (Ready Gel, Beckman).

Stanovení tyrozin kinázy receptorů PDGF a FGF cDNA o plné délce tyrozin kináz myšího receptorů PDGF-β a lidského receptorů FGF-1 (flg) byly získány od J. Escobeda a připraveny způsobem popsaným v J. Biol. Chem. 262: 1482 až 1487 (1991). Dále byly sestrojeny PCR primery pro amplifíkaci fragmentu DNA kódujícího intracelulámí tyrozin kinázovou doménu. Fragment byl zaveden do vektoru Baculovirů,

-27CZ 286160 B6 kotransfekován s AcMNPV DNA a rekombinantní virus byl izolován. Tímto virem byly infikovány hmyzí buňky SF9 za účelem nadexprese tohoto proteinu a buněčného lysátu bylo použito pro vlastni stanovení. Toto stanovení bylo provedeno podle následujícího protokolu. Použije se 96-jamkových misek (100 μΐ inkubační směsi/jamka) a podmínky se optimalizují pro měření inkorporace ³²P z gamma³²P-ATP do glutamát-tyrozinového kopolymemího substrátu. Do každé jamky se přidá 82,5 μΐ inkubačního pufru obsahujícího HEPES (25mM, pH 7,0), chlorid sodný (150mM), Triton X100 (0,1%), PMSF (0,2mM), vanadičnan sodný Na₃VO₄(0,2mM), chlorid manganatý (lOmM) a poly(4:l)glutamát-tyrozin (750 pg/ml) a poté 2,5 μΙ inhibitoru a 5 μΐ enzymového lysátu (7,5 μg/μl FGF-TK nebo 6,0 μg/μl PDGF-TK) za účelem iniciace reakce. Po lOminutové inkubaci při 25 °C se do každé jamky přidá 10 μΐ gamma³²PATP (0,4 pCi + 50μΜ ATP) a vzorky se dalších 10 minut inkubují při 25 °C. Reakce se zastaví přídavkem 100 μΐ 30% kyseliny trichloroctové (TCA) obsahující difosforečnan sodný (20mM) a látka se vysráží na filtrační rohoži ze skleněných vláken (Wallac). Filtry se promyjí 3 x 15% kyselinou trichloroctovou s obsahem d i fosforečnanu sodného (lOOmM) a radioaktivita zachycená na filtrech se spočítá ve vyhodnocovacím zařízení Wallac 1250 Betaplate. Nespecifická aktivita je definována jako radioaktivita zachycená na filtrech po inkubaci vzorků se samotným pufrem (bez enzymu). Specifická enzymatická aktivita je definována jako celková aktivita (enzym + pufr) zmenšená o nespecifickou aktivitu. Koncentrace sloučeniny inhibující specifickou aktivitu z 50 % (IC50) se stanoví z inhibiční křivky.

Stanovení kinázy V-src a C-src

Kináza V-src a C-src se purifikuje z buněčného lysátu hmyzích buněk infikovaných Baculovirem za použití antipeptidové monoklonální protilátky zaměřené proti N-terminálním aminokyselinám 2 až 17. Tato protilátka kovalentně vázaná k 0,65pm latexovým perlám se přidá k suspenzi pufru pro lysy hmyzích buněk, který obsahuje chlorid sodný (150mM), Tris o pH 7,5 (50mM), DTT (lmM), NP-40 (1%), EGTA (2mM), vanadičnan sodný (lmM), PMSF (lmM), leupeptin (1 pg/ml), pepstatin (1 pg/ml) a aprotinin (1 pg/ml). Lysát hmyzích buněk obsahující buď protein c-src, nebo v-src se inkubuje s těmito perlami po dobu 3 až 4 hodin při 4 °C, přičemž během inkubace se inkubační nádoba otáčí. Na konci inkubace lysátu se perly 3x opláchnou v pufru pro lysy, resuspendují v pufru pro lysy s obsahem 10% glycerolu a zmrazí. Zmrazené latexové perly se nechají roztát, 3x se promyjí zkouškovým pufrem, který obsahuje 40mM Tris o pH 7,5 s přísadou chloridu hořečnatého (5mM) a suspendují ve stejném pufru. Do jamek 96-jamkové plotny, které jako dno obsahují 0,65pm polyvinylidenovou membránu, se přidají tyto reakční složky: 10 μΐ perel v-src nebo c-src, 10 μΐ poly-Glu-Tyr substrátu (2,5 mg/ml), ATP (5μΜ), který obsahuje 0,2 pCi ³²P-ATP, jako značku, 5 μΐ DMSO s obsahem inhibitorů nebo jako rozpouštědlo (v případě kontrolních vzorků) a pufr do konečného objemu 125 μΐ. Reakce se zahájí při teplotě místnosti přídavkem ATP a ukončí po 10 minutách přídavkem 125 μΙ 30% kyseliny trichloroctové a 0,lM difosforečnanu sodného a chlazením vzniklé směsi po dobu 5 minut na ledu. Potom se obsah jamek přefiltruje a jamky se promyjí dvěma 250μ1 alikvotními vzorky 15% kyseliny trichloroctové s přísadou difosforečnanu (0,lM). Radioaktivita filtrů se spočítá v kapalinovém scintilačnim počítači a zjištěná data se zhodnotí, pokud se týče inhibiční aktivity, porovnáním s daty naměřenými za použití známého inhibitoru, jako je erbstatin. Tento způsob je podrobněji popsán v J. Med. Chem. 37: 598 až 609 (1994).

Buněčná kultura

Buňky hladkého svalstva krysí aorty (RASMC) se izolují z hrudní aorty krysy a explantují způsobem popsaným v Ross, J. Cell. Biol. 30, 172 až 186 (1971). Buňky se pěstují v Dulbeccem modifikovaném Eaglově médiu (DMEM, Gibco) s 10% obsahem fetálního telecího séra (FBS, Hyclone, Logan, Utah, USA), 1% obsahem glutaminu (Gibco) a 1% obsahem směsi penicilinu a streptomycinu (Gibco). Buňky se identifikují jakožto buňky hladkého svalstva na základě vzhledu jejich nárůstu, který obsahuje „kopečky a údolí“ a pomocí fluorescentního barvení za

-28CZ 286160 B6 použití monoklonální protilátky specifické pro SMC μ-aktin (Sigma). Při všech experimentech se použije RASMC mezi pasážemi 5 a 20. Zkoušené sloučeniny se rozpustí v dimethylsulfoxidu (DMSO), aby byla zachována konsistence vehikula a aby se zaručilo, že sloučenina bude rozpustná. Spolu se zkoušenými sloučeninami se také současně provádí příslušný kontrolní pokus se samotným dimethylsulfoxidem.

Stanovení inkorporace [³H]-thymidinu

Buňky RASMC se nanesou do 24-jamkových ploten (30 000 buněk na jamku) v DMEM s 10 % 10 FBS. Po 4 dnech dospějí buňky ke konfluenci a uvedou se do quiescentního. Inkubací v médiu

DMEM/F12 (Gibco) s obsahem 0,2% FBS po dobu dalších 2 dnů. Syntéza DNA se indukuje inkubací buněk po dobu 22 hodin buď s PDGF-BB, bFGF, nebo FBS s přísadou zkoušené sloučeniny v substitučním médiu pro sérum (DMEM/F12 + 1 % CPSR-2 od firmy Sigma) (0,5 ml/jamka). Po 18 hodinách se přidá [³H]-thymidin v množství 0,25 pCi/jamka. Po dalších 4 15 hodinách se inkubace zastaví odstraněním radioaktivního média, buňky se 2x promyjí 1 ml chladného roztoku chloridu sodného pufrovaného fosforečnanem a potom se 2x promyjí chladnou 5% kyselinou trichloroctovou. Frakce, která je nerozpustná v kyselině se podrobí lysi v 0,75 ml 0,25N roztoku hydroxidu sodného a radioaktivita se stanoví v kapalinovém scintilačním počítači. Hodnoty IC50 se stanoví graficky.

Autofosforylace receptorů PDGF

Buňky RASMC se pěstují do konfluence ve lOOmm miskách. Růstové médium se odstraní a nahradí séraprostým médiem, načež se buňky inkubují dalších 24 hodin při 37 °C. Potom se 25 přímo k médiu přidají zkoušené sloučeniny a buňky se inkubují další 2 hodiny. Po 2 hodinách se přidá PDGF-BB do končené koncentrace 30 ng/ml (5 minut při 37 °C) za účelem stimulace autofosforylace receptorů PDGF. Potom se médium odstraní a buňky se promyjí chladným roztokem chloridu sodného pufrovaným fosforečnanem a ihned podrobí lysy v 1 ml lysačního pufru (50mM HEPES (pH 7,5), 150mM chlorid sodný, 10% glycerol, 1% Triton X100, lmM 30 EDTA, lmM EGTA, 50mM fluorid sodný, lmM orthovanadičnan sodný, 30mM pnitrofenylfosfát, lOmM difosforečnan sodný, lmM fenylmethylsulfonylfluorid, 10pg/ml aprotininu a 10 pg/ml leupeptinu). Lysáty se 10 minut odstřeďují při 10 000 x g. Supematanty se inkubují s 10 μΐ králičí anti-humánní protilátky vůči receptorů PDGF typu AB (1 : 1000) po dobu 2 hodin. Po inkubaci se na dobu 2 hodin přidají perly obsahující protein-A na Sepharose, 35 přičemž směs se neustále míchá a imunitní komplexy navázané na perly se 4 x promyjí 1 ml promývacího lysačního pufru. Imunitní komplexy se solubilizují ve 30 μΐ Laemliho vzorkového pufru a podrobí elektroforéze v 4 až 20% SDS-polyakrylamidovém gelu. Po elektroforéze se oddělené proteiny přenesou na nitrocelulózu a imunoblotují se za použití anti-fosfotyrozinového antiséra. Po inkubaci s [¹²⁵I]-proteinem-A se deteguje hladina tyrozinem fosforylovaných 40 proteinů analýzou za použití zobrazení fosforu a proteinové pásy se kvantifikují densitometricky.

Z densitometrických dat se určí hodnoty IC₅o·

Biologická data pro reprezentativní sloučeniny podle vynálezu analyzované pomocí výše uvedených stanovení jsou uvedena v následujících tabulkách I a II.

-29CZ 286160 B6

Tabulka I

Inhibice proteinových tyrozin kináz vyjádřená jako IC₅₀ (μΜ) nebo inhibice (%) při 50μΜ koncentraci

Příklad	PDGF	FGF	EGF	V-src	C-src
1	21,2	2,99		(-2,4%)	0,21
2	10,2	1,60	(52,3%)	(27,4%)	19,5
3	1,25	0,140	1,17	(46,8%)	0,22
4	(31,9%)	(21,5%)	(36,65%)	(3,1%)	(33,6%)
5	0,466	1,40	0,928	(23,3%)	0,407
6	0,34	0,397	0,457	(39,8%)	0,11
7	(33,5%)	17,9	(25,15%)	(7,6%)	2,3
9	25,1	10,56			18,3
13	(18,2%)	30,3		(21,2%)	(15,9%)
16	10,72	9,21	7,08	(10,3%)	1,38
17	27,0	4,50	7,22	(5,3%)	2,76
18	21,3	1,19	18,2	(21,4%)	0,514
19	(47,7%)	16,93	(26,1%)	(5,2%)	(52,8%)
20	46,1	2,38		(51,7%)	0,748
21	0,66	0,0824	6,97	(49,4%)	0,073
22	1,3	0,128	(90,4%)	(46,9%)	0,077
23	4,51	0,291	(104,8%)	(10,2%)	0,613
24	11,38	7,29	(58,3%)	(15,6%)	0,214
25	6,04	11,82	(57,55%)	(0,0%)	0,207
26	1,08	0,116			0,0395
28	0,676	0,075			0,117
30	1,78	0,264			(46,8%)
32	0,415	0,0739			5,0
34	0,349	0,0552			0,011
35	2,08	(97,9%)
36	22,88	0,523			0,184
37	0,263	0,0401			(106,5%)
38	0,360	0,047			0,019
39	1,98	0,125			0,021
40	0,697	0,0574
41	0,793	0,139			0,086
42	0,624	0,108			0,032
43	0,405	0,091			0,011
44	1,55	0,196			0,023
45	1,85	0,198			0,04
47	6,17	0,637			0,161
48	5,32	0,613			0,26
49	0,420	0,0535			0,024
50	2,60	0,305
51	0,573	0,084			0,10
52	0,468	0,051			0,032
53	7,08	0,693			0,153
54	0,231	0,0954
58	19,0	3,46			(109,8%)
59	0,838	0,072			0,085
60	35,9	13,0			1,57

-30CZ 286160 B6

Tabulka I - pokračování

Příklad	PDGF	FGF	EGF	V-src	C-src
61	45,6	7,85			0,764
63	7,01	0,543			1,78
64	(13,0%)	(23,8%)			(0,0%)
65	(29,6%)	17,0			(95,0%)
66	5,19	1,28			3,42
67	12,05	1,39			1,56
69	15,55	1,96			4,66
70	31,35	2,59			0,929
78	32,9	4,01			3,99
79	17,78	8,09	(60,93%)
80	(22,9%)	10,2
81				(-20,3%)	(67,5%)
82	4,67	3,71			(77,6%)
83	42,5	1,98		(-9,8%)	(53,6%)
84	2,26	0,162			3,82
85	7,63	0,129			4,46
86	2,96	0,114			1,41
87	1,88	0,118			(92,7%)
88	0,711	0,148	(34,4%)		0,213
89	0,857	0,111			0,036
90	8,01	11,46	22,75	(16,8%)	1,63
92	(33,1%)	2,01		(-10,1%)	(44,5%)
93	6,05	0,343			4,17
94	(11,5%)	17,6
95	41,6	0,605			(0,0%)
96	27,4	3,84
97	1,73	0,34			(28,9%)
98	(34,3%)	1,80			(0,5%)
99	(15,5%)	0,708			(17,1%)
100	(22,3%)	(27,1%)		(6,0%)	(46,6%)
101	4,48	11,22			19,3
102	(44,4%)	3,11		(-8,2%)	(0,8%)
103	19,6	0,300			36,4
104	36,7	5,32
105	0,618	0,181			0,214
106	4,8	0,361			0,236
107	(20,5%)	(37,2%)		(1,4%)	(37,0%)
108	13,7	4,48			5,66
109	(23,6%)	(10,3%)
110	11,5	12,8			(27,5%)
111	23,3	(47,7%)		(-26,4%)	(15,7%)
112	1,26	0,128			0,077
113	1,09	0,077			0,078
114	23,9	19,2
115	2,63	1,24			0,024
116	0,804	0,335			0,098
117	2,79	0,135			(100%)
118	1,92	0,126
119	62,4	7,71
120	3,84	3,27			42,7

-31 CZ 286160 B6

Tabulka I - pokračování

Příklad

PDGF

FGF

EGF V-src

C-src

121	(21,8%)	0,142
122	1,46	0,171
123	0,26	0,045	0,029
124	0,253	0,059	0,026

Tabulka II

Buněčná stanovení [IC50 (μΜ)]

Příklad číslo	Inhibice autofosforylace receptorů stimulovaného PDGF [IC₅₀(pM)]	Inhibice inkorporace [³H]-thymidinu stimulované růstovým faktorem (IC₅₀(pM)]
3	0,97	2,7 (PDGF), 0,9 (FGF)
124	0,245	0,55 (PDGF), 0,93 (FGF)
51	0,365
123	0,296	< 0,30 (PDGF), 0,32 (FGF)
52	0,241	0,45 (PDGF), 0,40 (FGF)
69	6,46
113	1,1
89	1,63
59	1,19
67	9,42
115	5,13
66	5,29
116	0,91
28	1,38
114	15,86
112	1,08
22	3,73
21	1,8
6	0,35
90		>10 (PDGF), 20,0 (FGF)

ίο Sloučeniny podle vynálezu jsou zejména užitečné pro léčení restenózy po balónkové angioplastice okludovaných artérií. K. restenóze dochází u asi 40 % pacientů, kteří prodělali angioplastiku kalcifikovaných artérií a představuje hlavní problém spojený s touto formou léčení pacientů postižených touto srdeční poruchou. Sloučeniny podle vynálezu vykazují dobrou účinnost při zkoušení standardními testy, jako jsou testy uvedené dále.

Balónková angioplastika na krysí karotidové artérii

Samci krysy Sprague-Dawley o hmotnosti 350 až 450 g se podle ošetření rozdělí do dvou skupin: jedna skupina (počet krys ve skupině = 10) se léčí podáváním léčiva (100 mg/kg p.o., 20 BID) a druhé skupině se podává samotné vehikulum (2 ml/kg p.o., BID, n = 10). Všechna zvířata jsou medikována 2 dny před chirurgickým zásahem a v denním podávání léčiva se pokračuje po chirurgickém zásahu až do doby usmrcení.

-32CZ 286160 B6

Poškození balónkovou angioplastikou karotidové artérie krysy se provede podle následujícího protokolu. Krysy se anestetizují Telazolem (0,1 ml/100 g intramuskulámě) a exponuje se jejich karotidová artérie pomocí přední incise ve středové čáře krku. Karotidová artérie se izoluje u rozvětvení na vnitřní a vnější karotidovou artérii. Do vnější karotidové artérie se vloží embolektomický katétr 2F a posune se směrem dolů až na úroveň aortálního oblouku. Balónek se nafoukne a katétr se vleče zpět do místa vstupu a potom se vyfoukne. Tento postup se ještě dvakrát opakuje. Potom se emboleptomický katétr vyjme a vnější karotidová artérie se podváže, přičemž tok vnitřní karotidovou artérii se nechá nezměněn. Incise se uzavřou a zvíře se nechá zotavit z anesteze a poté se vrátí do domovské klece.

V různých dobách po poškození se zvířata usmrtí vdechováním oxidu uhličitého, jejich karotidová artérie se fixuje perfusí a připraví pro histologické vyšetření. Morfologické stanovení velikosti lézí se provede změřením oblasti intimy karotidové artérie a vyjádří se jako poměr média u jednotlivých zvířat. Od každého zvířete se zhotoví až 16 řezů, aby se dosáhlo rovnoměrného zastoupení velikosti léze podél celé karotidové artérie. Průřezová plocha cév se kvantifikuje za použití programu pro obrazovou analýzu od firmy Princeton Gamma Těch (Princeton, New Jersey, USA).

Vynález je blíže objasněn v následujících příkladech provedení. Tyto příklady, v nichž jsou popsány způsoby přípravy meziproduktů a konečných sloučenin, mají výhradně ilustrativní charakter a rozsah vynálezu v žádném ohledu neomezují. Poměry u rozpouštědlových směsí jsou objemové.

Příklad 1

2,7-Diamino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin (připravený způsobem popsaným v US patentu č. 3 534 039)

K roztoku 2-ethoxyethoxidu sodného připravenému z 0,14 g sodíku a 60 ml 2-ethoxyethanolu se přidá 2,07 g 2,4-diamino-5-pyrimidinkarboxaldehydu a 2,79 g 2,6-dichlorfenylacetonitrilu. Reakční směs se 4 hodiny zahřívá ke zpětnému toku, ochladí a nerozpustný produkt se promyje diethyletherem. Získá se 2,7-diamino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin o teplotě tání 325 až 332 °C (MS).

Příklad 2 l-terc.Butyl-3-[7-(3-terc.butylureido)-6-(2,6-dichlorfenyl)pyri0do[2,3-d]pyrimidin-2yljmočovina

K suspenzi 3,0 g 2,7-diamino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidinu připraveného podle předchozího příkladu ve 45 ml dimethylformamidu se po částech přidá 0,48 g natriumhydridu (50% v minerálním oleji). Reakční směs se 1 hodinu míchá a přidá se kní 1,0 g terc.butylisokyanátu a v míchání při teplotě okolí se pokračuje 16 hodin. Poté se reakční směs přefiltruje, čímž se odstraní malé množství nerozpustné látky a filtrát se zředí 500 ml vody. Nerozpustný produkt se shromáždí filtrací, promyje vodou a poté etherem a na filtru vysuší vzduchem. Získaný produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití gradientu 0 až 1% methanolu v chloroformu a poté překiystalováním z ethanolu. Získá se 0,7 g l-terc.butyl-3-[7-(3-terc.butylureido)-6-(2,6-dichlorfeny!)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]močoviny o teplotě tání 200 °C (za rozkladu).

-33 CZ 286160 B6

Analýza pro C2₃H22C12N₇O2.0,lH2O:

vypočteno: C 54,57, H 5,42, N 19,37, H₂O 0,36 nalezeno: C 54,05, H 5,43, N 19,08, H₂O 0,37.

Příklad 3 l-[2-Amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl)-3-terc.butylmočovina

Pokračováním v eluci, která je popsána v příkladu 2, se získá 1,5 g l-[2-amino-6-(2,6dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl)-3-terc.butylmočoviny, která má po překrystalování z ethanolu teplotu tání 335 °C.

Analýza pro CigFhgCbNóO.OJF^O:

vypočteno: C 52,18, H4,62, N 20,28, H₂O2,17 nalezeno: C 51,90, H4,56, N 20,01, H₂O2,39.

Příklad 4 l-terc.Butyl-3-[7-(3-terc.butylureido)-6-o-tolylpyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]močovina

Suspenze 0,5 g 2,7-diamino-6-o-tolylpyrido[2,3-d]pyrimidinu vyrobeného podle výše uvedeného příkladu 1 v 10 ml dimethylformamidu se nechá reagovat s 0,16 g 60% natriumhydridu. Reakční směs se míchá 1,5 hodiny při teplotě okolí. Ke vzniklé suspenzi se přidá 0,49 ml terc.butylisokyanátu a výsledná směs se míchá přes noc při teplotě okolí a poté přefiltruje, čímž se odstraní nerozpustné soli. Filtrát se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se zředí vodou. Nerozpustný surový produkt se shromáždí filtrací, vysuší za vakua a překrystaluje ze směsi hexanu, ethylacetátu a dichlormethanu v poměru 3 : 2 : 5 (objemově). Získá se sloučenina uvedená v nadpisu o teplotě tání 209 až 212 °C (za rozkladu).

Analýza pro C24H3iN₇C>2.0,3H2O: vypočteno: C 63,36, H 7,00, N 21,55 nalezeno: C 63,37, H6,92, N 21,16.

Příklad 5 l-[2-amino-6-o-tolylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovina

Způsobem popsaným výše v příkladu 2 se za použití 2,7-diamino-6-o-tolyIpyrido[2,3djpyrimidinu, jako výchozí látky, vyrobí titulní l-[2-amino-6-o-tolylpyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl]-3-terc.butylmočovina o teplotě tání 285 až 290 °C (za rozkladu), MS (Cl).

Příklad 6 l-[2-amino-6-(2,6-dimethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovina

Způsobem popsaným výše v příkladu 2 se za použití 2,7-diamino-6-(2,6-dimethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidinu, jako výchozí látky, vyrobí titulní l-[2-amino-6-(2,6-dimethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovina o teplotě tání 203 až 205 °C (za rozkladu), CIMS (1% amoniak v methanu) 365 (M+l, 50), 366 (M+2, 10), 84 (100).

-34CZ 286160 B6

Příklad 7

N-[2-Acetylamino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]acetamid

Směs 10 g 2,7-diamino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidinu vyrobeného způsobem popsaným v příkladu 1 ve 100 ml acetanhydridu se 2 hodiny zahřívá ke zpětnému toku. Reakční směs se nechá ochladit na teplotu místnosti a přebytek acetanhydridu se odstraní za vakua. Zbytek se rozpustí v ethanolu, ethanolický roztok smísí s aktivním uhlím a vzniklá směs se přefiltruje. Filtrát se přes noc chladí na 0 °C. Nerozpustný surový produkt se shromáždí filtrací, promyje diethyletherem a vysuší za vakua. Surový produkt se překrystaluje z vroucího ethylacetátu za použití aktivního uhlí. Získá se 2,7 g nečistého produktu, který se dále přečistí tak, že se suspenduje v horkém ethylacetátu. Shromáždí se nerozpustný čistý produkt (1,2 g) o teplotě tání 223 až 225 °C.

Analýza pro C17H13CI2N2O2: vypočteno: C 52,32, H 3,36, N 17,95 nalezeno: C 51,92, H3,43, N 17,78.

Příklad 8

2-Amino-6-fenylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ol

K roztoku 2 litrů koncentrované kyseliny chlorovodíkové a 1 litru vody se přidá 300 g disulfátové soli 2,7-diamino-6-fenylpyrido[2,3-d]pyrimidinu. Vzniklá směs se za míchání přes noc zahřívá ke zpětnému toku, ochladí v ledové lázni a přefiltruje. Nerozpustný produkt se promyje vodou a poté ethanolem. Získá se 149 g titulního 2-amino-6-fenylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-olu o teplotě tání 390 až 395 °C (při teplotách nad 350 °C pomalu tmavne).

Příklad 9

N⁷-Butyl-6-fenylpyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

Ke směsi 23,8 g 2-amino-6-fenylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-olu vyrobeného způsobem popsaným výše v příkladu 8, 250 ml dichlormethanu a 77,5 ml dimethylformamidu se za chlazení přikape 36 ml thionylchloridu, přičemž se teplota udržuje pod 15 °C. Po dokončení přídavku se vzniklá suspenze 5 hodin za míchání zahřívá ke zpětnému toku. Rozpouštědla se odstraní za sníženého tlaku, přičemž se teplota udržuje pod 60 °C. Výsledná pevná látka se za chlazení přidá ke 250 ml n-butylaminu a vzniklá suspenze se 6 hodin za míchání zahřívá ke zpětnému toku. Reakční směs se nechá zchladnout na teplotu místnosti, přefiltruje a z filtrátu se v rotačním odpařováku za sníženého tlaku odstraní těkavé látky. Viskózní olejovitý zbytek se rozdělí mezi diethylether a vodu. Vrstvy se oddělí a etherová vrstva se promyje vodou. Organická vrstva se vysuší bezvodým síranem hořečnatým, přefiltruje a filtrát se odpaří. Zbytek se rozdělí mezi diethylether a zředěnou IN kyselinu chlorovodíkovou. Vodná vrstva se promyje třikrát diethyletherem a přídavkem hydroxidu sodného zalkalizuje na pH 12. Pevný produkt se shromáždí filtrací a vysuší za vakua. Získá se 6,5 g titulního N⁷-butyl-6-fenylpyrido[2,3d]pyrimidin-2,7-diaminu o teplotě tání 174 až 181 °C (za rozkladu).

Analýza pro C|₇H|₉N₅:

vypočteno: C 69,60, H 6,53, N 23,87 nalezeno: C 69,53, H 6,63, N 24,37.

-35CZ 286160 B6

Příklad 10

2-Amino-6-(4-methoxyfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ol

Sloučenina uvedená v nadpisu se vyrobí způsobem popsaným výše v příkladu 8 za použití 2,7diamino-6-(4-methoxyfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidinu, jako výchozí látky (US patent č. 3 534 039). Titulní sloučenina má teplotu tání 380 až 385 °C (za rozkladu).

Analýza pro CuHnNíC^.O^SHíO:

vypočteno: C 59,90, H4,42, N 19,88 nalezeno: C 60,10, H4,32, N 19,64.

Příklad 11

N'-(7-Chlor-6-(4-methoxyfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-N,N-dimethylformamidin

Ke směsi 67,0 g 2-amino-6-(4-methoxyfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-olu z příkladu 10, 1 litru dichlormethanu a 155 ml dimethylformamidu se za chlazení přikape 72 ml thionylchloridu, přičemž se teplota udržuje pod 15 °C. Výsledná suspenze se za míchání 6 hodin zahřívá ke zpětnému toku. Reakční směs se přefiltruje a filtrát se odpaří za sníženého tlaku, přičemž se teplota udržuje pod 60 °C. Zbytek se rozpustí v ledové vodě ke vzniklému roztoku se přidá vodný hydroxid sodný s ledem. Produkt se vyjme do chloroformu, promyje vodou, vysuší bezvodým uhličitanem draselným a odpaří. Zbytek se suspenduje v acetonitrilu a nerozpustný produkt se shromáždí filtrací. Získá se 31 g titulního N'-(7-chlor-6-(4-methoxyfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin—2—yl)-N,N—dimethylformamidinu. Produktu se použije v následujícím stupni bez dalšího přečištění.

Příklad 12

2-Amino-7-chlor-6-(4-methoxyfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin

Směs 10 g N'-(7-chlor-6-(4-methoxyfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl}-N,N-dimethylformamidinu z příkladu 11 a 500 ml 95% ethanolu se 3 hodiny zahřívá ke zpětnému toku. Reakční roztok se zkoncentruje za sníženého tlaku a vyloučená sraženina se shromáždí filtrací. Překrystalováním z ethanolu se získá 2,7 g titulního 2-amino-7-chlor-6-(4-methoxyfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidinu o teplotě tání 275 až 280 °C (za rozkladu).

Analýza pro C14HHN4CIO: vypočteno: C 58,64, H3,87, N 19,54 nalezeno: C 58,70, H 3,94, N 19,51.

Příklad 13

6-(4-Methoxyfenyl)-N⁷-methylpyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

Směs 3,4 g 2-amino-7-chlor-6-(4-methoxyfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidinu z příkladu 12, 40 ml bezvodého methylaminu a 10 ml methanolu se 4 hodiny zahřívá v bombě v parní lázni a ochladí. Vzniklá suspenze se z bomby vypláchne 50 ml směsi methanolu a vody (50 : 50). Rozpouštědla se odstraní za sníženého tlaku a pevný zbytek se suspenduje v 50 ml vody. Výsledná suspenze se

-36CZ 286160 B6 přefiltruje a oddělená pevná látka se překrystaluje z ethanolu. Získá se 2,2 g titulního 6-(4methoxyfenyl)-N⁷-methylpyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diaminu o teplotě tání 270 až 275 °C (za rozkladu).

Analýza pro C₁5H₁₅N₅O: vypočteno: C 64,03, H 5,37, N 24,90 nalezeno: C 63,82, H 5,17, N 24,94.

Příklad 14

2.4- Diamino-5-kyanopyridin

Suspenze 21,3 g 6-brom-2,4-diamino-5-kyanopyridinu (JACS, 80:2838-2840 (1958)) a 1 g 20% palladia na aktivním uhlí ve 250 ml tetrahydrofuranu se třepe v Parrově zařízení pod atmosférou vodíku. Po 2 hodinách se reakce zastaví a k reakční směsi se přidá 10 g octanu draselného a 50 ml methanolu. Reakční nádoba se znovu naplní vodíkem a směs se třepe 18 hodin. Rozpouštědla se odstraní za sníženého tlaku a zbytek se překrystaluje z isopropylalkoholu. Získá se titulní 2,4-diamino-5-kyanopyridin o teplotě tání 201 až 202 °C.

Analýza pro C^H^N^ vypočteno: C 53,73, H4,51, N 41,78 nalezeno: C 53,69, H4,18, N 41,40.

Příklad 15

2.4- Diaminonikotinaldehyd

Suspenze 13,4 g 2,4-diamino-5-kyanopyridinu z příkladu 14, 2 g Raneyova niklu, jako katalyzátoru, 40 ml 97 až 100% kyseliny mravenčí a 80 ml vody se třepe v Parrově zařízení pod atmosférou dusíku až do spotřebování požadovaného množství vodíku. Rozpouštědla se odstraní za sníženého tlaku a zbytek se smísí s 17 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové. Získaná růžová pevná látka se suspenduje v malém množství vody, vzniklá suspenze se přefiltruje, filtrační koláč se promyje isopropylalkoholem a poté diethyletherem a vysuší. Překrystalováním z ethanolu se získá 6,5 g titulního 2,4-diaminonikotinaldehydu.

Analýza pro CůHsNjCIO:

vypočteno: C 41,52, H 4,65, N 24,21 nalezeno: C 41,47, H4,63, N 24,05.

Příklad 16

3-o-Tolyl-[l,6]nafthyridin-2,7-diamin

K. roztoku 0,55 g sodíku rozpuštěnému v 50 ml 2-ethoxyethanolu se přidá 2,3 g 2-methylfenylacetonitrilu a 3,0 g 2,4-diaminonikotinaldehydu z příkladu 15. Reakční směs se 6 hodin zahřívá ke zpětnému toku. Nerozpustné soli se odstraní filtrací a promyjí 2-ethoxyethanolem. Filtrát se smísí s aktivním uhlím, výsledná směs se přefiltruje a filtrát se odpaří do sucha. Zbytek se přečistí chromatografií na florosilu za použití gradientu 0 až 8% methanolu v chloroformu. Získá se 0,7 g titulního 3-o-tolyl[l,6]nafthyridin-2,7-diaminu o teplotě tání 200 až 201,5 °C (za rozkladu).

-37CZ 286160 B6

Analýza pro C15H14N4:

vypočteno: C 72,03, H 5,63, N 22,38 nalezeno: C 71,79, H 5,45, N 22,18.

Příklad 17

3-(2-Chlorfenyl)-[ 1,6]nafthyridin-2,7-diamin

Způsobem popsaným výše v příkladu 16 se za použití 2-chlorfenylacetonitrilu namísto 2methylfenylacetonitrilu získá 3-(2-chlorfenyl)-[l,6]nafthyridin-2,7-diamin o teplotě tání 175 °C (MS).

Příklad 18

3-(2,6-Dichlorfenyl)-[l,6]nafthyridin-2,7-diamin

Způsobem popsaným výše v příkladu 16 se za použití 2,6-dichlorfenylacetonitrilu namísto 2methylfenylacetonitrilu získá 3-(2,6-dichlorfenyl)-[l,6]nafthyridin-2,7-diamin o teplotě tání 235 až 237 °C (za rozkladu).

Analýza pro C14H10N4CI2:

vypočteno: C 55,10, H 3,30, N 18,36, Cl 23,23 nalezeno: C 54,87, H3,21, N 18,45, Cl 23,04.

Příklad 19

N²,N⁷-Dimethyl-6-fenylpyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

Směs 45 g disulfamátové soli 6-fenylpyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diaminu (US patent č. 3 534 039) a 500 g methylaminu se v bombě 10 hodin zahřívá na 205 až 210 °C. Bomba se promyje methanolem a promývací kapalina se spojí s reakční směsí. Výsledná směs se zahřeje k varu, přefiltruje a zředí 200 ml vody. Zředěný filtrát se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se suspenduje ve směsi ledu a vody. Nerozpustná látka se odfiltruje, promyje chladnou vodou a rozpustí v chloroformu. Chloroformový roztok se přefiltruje, aby se odstranily nečistoty a promyje několikrát vodou. Organická vrstva se vysuší uhličitanem draselným a odpaří. Získaný produkt se překrystaluje z isopropylalkoholu. Získá se 15 g titulního N²,N⁷-dimethyl-6fenylpyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diaminu o teplotě tání 204 až 205 °C.

Analýza pro Ci5H_l5N₅:

vypočteno:	C 67,90, H 5,70, N 26,90
nalezeno:	C 67,89, H 5,62, N 26,66.

Příklad 20

7-Amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-diethylaminopropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin

Směs 2,7-diamino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidinu (3,0 g) z příkladu 1, kyseliny amidosírové (2 g) a 3-(diethylamino)propylaminu (30 ml) se za míchání 18 hodin zahřívá ke zpětnému toku. Reakční směs se nechá zchladnout na teplotu místnosti a nalije do směsi ledu a vody (500 ml). Nerozpustný produkt se odfiltruje, promyje vodou a suspenduje v teplém

-38 CZ 286160 B6 diisopropyletheru. Vzniklá suspenze se přefiltruje, čímž se získá bílá pevná látka.

Překrystalováním z ethylacetátu se získá 1,5 g 7-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-diethylaminopropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidinu o teplotě tání 220 až 230 °C.

Příklad 21

1-terc.Buty 1-3-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-diethylaminopropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl]močovina

K. roztoku 7-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-diethylaminopropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidinu (0,48 g) z příkladu 20 v dimethylformamidu (5 ml) se přidá 60% suspenze natriumhydridu (46 mg). Reakční směs se míchá 1 hodinu při teplotě místnosti a přidá se k ní terc.butylisokyanát (0,113 g). Vzniklá směs se 18 hodin míchá a zředí vodou. Nerozpustná látka se shromáždí filtrací a suspenduje ve vodě (20 ml). Vodná suspenze se okyselí l,0N kyselinou chlorovodíkovou, čímž vznikne roztok. K výslednému roztoku se přidá aktivní uhlí, vzniklá suspenze se přefiltruje přes celit a filtrační vrstva se promyje vodou. Filtrát se zalkalizuje l,0N hydroxidem sodným a nerozpustný produkt se shromáždí filtrací a promyje vodou. Vzorek produktu (180 mg) se dále přečistí preparativní vysokotlakou kapalinovou chromatografii s obrácenými fázemi na sloupci C18, přičemž eluce se provádí gradientem 86% 0,1% trifluoroctové kyseliny ve vodě/14% acetonitrilu až 14 % 0,1% trifluoroctové kyseliny ve vodě/86 % acetonitrilu po dobu 22 minut. Získá se 165 mg l-terc.butyl-3-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-diethylaminopropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]močoviny, která se rozkládá při teplotách nad 80 °C.

Analýza pro C25H33N₇OiC12.0,22 CF3CO2H: vypočteno: C 56,21, H6,16, N 18,04 nalezeno: C 56,13, H 6,02, N 18,14.

Příklad 22 l-[2-Amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-ethylmočovina

2.7- Diamino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin se nechá reagovat s ethylisokyanátem způsobem popsaným v příkladu 2. Surový produkt se přečistí radiální chromatografii, přičemž eluce se provádí gradientem 70 % ethylacetátu/30 % chloroformu až 100% chloroformem. Získá se titulní l-[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-ethylmočovina o teplotě tání 185 až 187 °C.

Analýza pro C₁₆H|₄N₆O|C12.0,15 EtOAc: vypočteno: C 51,07, H 3,92, N 21,52 nalezeno: C 50,74, H 3,75, N 21,50.

Příklad 23 l-[2-Amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-(3-morfolin—4-ylpropyl)thiomočovina

2.7- Diamino-6-(2,6-dimethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin se za použití obecného postupu popsaného v příkladu 21 nechá reagovat s 3-morfolinopropylisothiokyanátem. Surový produkt se přečistí radiální chromatografii za použití gradientu 2 až 8% methanolu v methylenchloridu, jako elučního činidla. Získá se l-[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]3-(3-morfolin^4-ylpropyl)thiomočovina o teplotě tání 178 až 181 °C (za rozkladu).

-39CZ 286160 B6

Analýza pro C₂iH₂3N₇0iC1₂: vypočteno: C 51,22, H4,71, N 19,91 nalezeno: C 50,95, H 4,63, N 19,74.

Příklad 24

2-[2-Amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]amino-4,5-dihydrooxazol

K suspenzi 2,7-diamino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidinu (5,0 g) z příkladu 1 v dimethylformamidu (50 ml) se po částech přidá 0,65 g 60% natriumhydridu. Reakční směs se 1 hodinu míchá při teplotě okolí a poté se kní přidá 2-chlorethylisokyanát (1,72 g). Výsledná směs se míchá dalších 18 hodin při teplotě okolí a zředí 100 ml vody. Vodná směs se přefiltruje. Oddělený nerozpustný surový produkt se přečistí mžikovou chromatografií za použití gradientu 2 až 3% methanolu v methylenchloridu, jako elučního činidla. Získá se 1,0 g bílé pevné látky, která se dále přečistí překrystalováním ze směsi chloroformu a ethylacetátu. Získá se titulní 2[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]amino-4,5-dihydrooxazol. Další analýza reakční směsi ukáže také přítomnost l-[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3d]pyrimidin-7-yl]imidazolidin-2-onu, MS(FAB).

Analýza pro Ci6Hi3N60iCl₂.0,12CHCÍ3.0,04: vypočteno: C 51,22, H4,71, N 19,91 nalezeno: C 50,95, H 4,63, N 19,74.

Příklad 25 l-Butyl-3-[7-(3-butylureido)-6-(2,6-dichIorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]močovina

Směs 0,5 g 2,7-diamino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidinu z příkladu 1 a 15 ml nbutylisokyanátu se 2 hodiny zahřívá ke zpětnému toku. Reakční směs se nechá zchladnout na teplotu místnosti a filtrací se oddělí nerozpustná látka, která se několikrát překrystaluje z ethanolu. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu o teplotě tání 200 až 202 °C.

Analýza pro C23H27Cl₂N₇O₂.0,35 H₂O vypočteno: C 54,09, H 5,47, N 19,20 nalezeno: C 54,09, H 5,27, N 19,14.

Příklad 26 l-[2-Amino-6-(2,6-dichIorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-propylmočovina

Sloučenina uvedená v nadpisu se vyrobí způsobem popsaným v příkladu 2 reakci 1,0 g 2,7diamino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidinu z příkladu 1 a 0,339 g n-propylisokyanátu. Surový produkt se přečistí radiální chromatografií za použití gradientu 10 až 100% ethylacetátu v hexanu, jako elučního činidla. MS(CI).

Analýza pro Ci₇Hi6C12N₆Oi.O,43 H2O: vypočteno: C 51,17, H4,26, N 21,06 nalezeno: C 51,15, H3,90, N 20,80.

-40CZ 286160 B6

Příklad 27

7-Amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-dimethylaminopropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin

Sloučenina uvedená v nadpisu se vyrobí způsobem popsaným v příkladu 20 reakcí 3,0 g 2,7diamino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidinu z příkladu 1 a 60 ml 3-(dimethylamino)propylaminu.

Příklad 28 l-terc.Butyl-3-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-dimethylaminopropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]močovina

Způsobem popsaným v příkladu 21 se 1,62 g 7-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-dimethylaminopropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidinu z příkladu 27 nechá reagovat s 0,48 g terc.butylisokyanátu. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu, která se postupně rozkládá při teplotách nad 130 °C.

Analýza pro C2₃H29Cli2N₇O].l,45 H₂O: vypočteno: C 53,48, H 6,22, N 18,98 nalezeno: C 53,50, H 5,84, N 18,73.

Příklad 29

7-Amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-dimethylamino-2,2-dimethylpropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin

Sloučenina uvedená v nadpisu se vyrobí způsobem popsaným v příkladu 20 reakcí 2,0 g 2,7diamino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidinu z příkladu 1 a 15 ml N,N,2,2-tetramethyl-1,3-propandiaminu.

Příklad 30 l-terc.Butyl-3-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-dimethylamino-2,2-dimethylpropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]močovina

Způsobem popsaným v příkladu 21 se z 1,0 g 7-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-dimethylamino-2,2-dimethylpropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidinu z příkladu 29 reakcí s 0,26 g terc.butylisokyanátu získá sloučenina uvedená v nadpisu o teplotě tání 161 až 170 °C.

Analýza pro C25H₃₃Cl₂N₇Oi.O,74 H₂O

Příklad 31

7-Amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-(2-pikolin)propylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin

Způsobem popsaným výše v příkladu 20 se za použití 2,0 g 2,7-diamino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidinu z příkladu 1 a 15 ml l-(3-aminopropyl)-2-pikolinu získá sloučenina uvedená v nadpisu.

-41 CZ 286160 B6

Příklad 32 l-terc.Butyl-3-{6-(2,6-dichlorfenyl}-2-[3-(2-methylpiperidin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3d]pyrimidin-7-yl}močovina

Způsobem popsaným v příkladu 21 se 1,54 g 7-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-(2-pikolin)propylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidinu z příkladu 31 nechá reagovat s 0,377 g terc.butylisokyanátu. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu.

Analýza pro C27H35CI2N7O1: vypočteno: C 59,56, H 6,48, N 18,01 nalezeno: C 59,71, H 6,53, N 17,62.

Příklad 33

7-Amino-6-(2,6-dichIorfenyl)-2-(4—(4-methylpiperazin-l-yl)butylamino)pyrido[2,3-]pyrimidin

Způsobem popsaným v příkladu 20 se 2,0 g 2,7-diamino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3djpyrimidinu z příkladu 1 nechá reagovat 15 ml l-(4-aminobutyl)-4-methylpiperazinu, čímž se získá sloučenina uvedená v nadpisu.

Příklad 34

1—terc.Butyl-3-{6-(2,6—dichlorfenyl)-2-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)butylamino]pyrido[2,3d]pyrimidin-7-yl} močovina

Způsobem popsaným v příkladu 21 se 1,07 g 7-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(4-(4-methylpiperazin-l-yl)butylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidinu z příkladu 33 nechá reagovat s 0,253 g terc.butylisokyanátu. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu.

ESMS (m/z) (relativní intenzita) 559 (M⁺, 100)

Analýza pro C27H36C1₂N8Oi.0,6H₂O: vypočteno: C 56,86, H 6,57, N 19,65 nalezeno: C 56,87, H6,31, N 19,57.

Příklad 35

6-(2,6-Dichlorfenyl)-N⁷-(5,6-dihydro-4H-[l,3]oxazin-2-yl)-N²-[3-(4-methylpiperazin-lyl)propyl]pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

K roztoku 1,0 g 6-(2,6-dichlorfenyl)-N²-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propyl[2,3-d]pyrimidin-

2,7-diaminu z příkladu 36 v 10 ml dimethylformamidu se přidá natriumhydrid (60% voleji, 0,094 g). Vzniklá směs se 1 hodinu míchá při teplotě okolí. K reakční směsi se přidá 0,268 g

3-chlorpropylisokyanátu, výsledná směs se míchá 18 hodin při teplotě místnosti a zředí vodou. Vodná směs se extrahuje dvakrát ethylacetátem. Spojené organické vrstvy se vysuší síranem hořečnatým, přefiltrují a filtrát se odpaří. Surový produkt se přečistí dvakrát radiální chromatografií za použití směsi ethylacetátu, methanolu a triethylaminu v poměru 89 : 10: 1 (objemově), jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu.

ESMS (m/z) (relativní intenzita) 529,4 (M⁺, 100)

-42CZ 286160 B6

Příklad 36

N²-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propyl]-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

Směs 2,7-diamino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidinu (3,0 g) z příkladu 1, amidosírové kyseliny (1,9 g) a l-(3-aminopropyl)-4-methylpiperazinu (15 ml) se 24 hodin zahřívá na asi 150 °C, ochladí a zbytek se rozpustí ve vodě. Vodný roztok se zalkalizuje za použití nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a extrahuje několikrát dichlormethanem. Dichlormethanové vrstvy se spojí, vysuší síranem hořečnatým a zkoncentrují za sníženého tlaku. Zbytek se překrystaluje z ethylacetátu. Získá se 2,0 g N²-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylJ6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diaminu, CIMS (1% NH3 v CH4): 474 = M⁺ + C2H₅, 446 = M⁺ + H (báze), o teplotě tání 208 až 211 °C.

Analýza pro C2iH25N₇Cl₂.0,25 H₂O: vypočteno: C 55,94, H 5,70, N 21,75 nalezeno: C 55,85, H 5,55, N 21,65.

Příklad 37 l-Cyk!ohexyl-3-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl}močovina

K roztoku 6-(2,6-dichlorfenyl)-N²-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propyl]pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diaminu (1,0 g) z příkladu 36 v dimethylformamidu (15 ml) se přidá jeden ekvivalent 60% suspenze natriumhydridu (0,90 g). Vzniklá směs se míchá asi 1 hodinu při teplotě místnosti a přidá se kní jeden ekvivalent cyklohexylisokyanátu (0,19 g). Průběh reakce se monitoruje chromatografií na tenké vrstvě. Po asi 24 hodinách se za sníženého tlaku odstraní rozpouštědlo. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu a ethylacetátový roztok se několikrát promyje, nejprve vodou a poté nasyceným roztokem chloridu sodného. Ethylacetátová vrstva se vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se chromatografuje na silikagelu za použití směsi ethylacetátu, ethanolu a triethylaminu v poměru 9:2:1 (objemově). Získá se 0,75 g l-cyklohexyl-3-{6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propyIamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl}močoviny, ESMS (20/80 MeOH/CH₃CN + 0,1% AcOH): M⁺ + H = 571; o teplotě tání 101 až 106,5 °C.

Analýza pro C28H₃₆N₈C12O.0,50 H₂O:

vypočteno: C 57,93, H 6,42, N 19,30, Cl 12,21, H2O 1,55 nalezeno: C 58,06, H 6,32, N 18,91, Cl 12,11, H₂O 1,68.

Příklad 38

1-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-ylpropylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl}-3-isopropylmočovina

6-(2,6-Dichlorfenyl)-N²-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propyl]pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin (1,09 g) z příkladu 36 se způsobem popsaným v příkladu 37 nechá 8 hodin reagovat s0,19g isopropylisokyanátu. Získá se 0,291 g 1-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-ylpropylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl}-3-isopropylmočovina, MS (ES + 20/80 MeOH/CH₃CN + 0,1% AcOH): M⁺ + H = 531, o teplotě tání 94 až 98 °C.

-43CZ 286160 B6

Analýza pro C₂₅H₃₂N₈Cl₂O.0,75 H₂O/0,10 EtOAc: vypočteno: C 55,09, H 6,24, N 20,23, Cl 12,80, H₂O2,44 nalezeno: C55,14, H6,19, N 20,03, Cl 13,17, H₂O2,14.

Příklad 39 l-Benzyl-3-{6-(2,6-dichIorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3d]pyrimidin-7-yl}močovina

6-(2,6-Dichlorfenyl)-N²-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propyl]pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin (1,08 g) z příkladu 36 se nechá reagovat s 0,298 g benzylisokyanátu za použití obecného postupu popsaného v příkladu 37. Získá se 0,822 g l-benzyl-3-{6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl}močovina, ESMS (20/80 MeOH/CH₃CN + 0,1% AcOH): M⁺ + H = 579, o teplotě tání 144 až 148,5 °C.

Analýza pro C₂₉H₃₂N₈C1₂0.0,10 H₂O .0,10 Et₂O:

vypočteno:	C 59,98, H 5,68, N 19,03, Cl 12,04, H₂O0,31
nalezeno:	C 59,60, H 5,63, N 18,87, Cl 12,15, H₂O 0,49.

Příklad 40 l-Allyl-3-{6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3d] pyrimidin-7-yl} močovina

6-(2,6-Dichlorfenyl)-N²-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propyl]pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin (1,0 g) z příkladu 36 se nechá reagovat s 0,186 g allylisokyanátu za použití obecného postupu popsaného v příkladu 37. Produkt se přečistí chromatografií a překrystalováním z ethylacetátu. Získá se 0,31 g 1—allyl—3—{6—(2,6—dichlorfenyl)-2-[3-(4—methylpiperazin-1yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl}močoviny, ESMS (20/80 MeOH/CH₃CN + 0,1 % AcOH): M⁺ + H = 529 (báze), 472, 446, o teplotě tání 104 až 108 °C.

Analýza pro C₂₅H₃oN₈C1₂0.1,00 H₂O: vypočteno: C 45,85, H 5,89, N 20,47, Cl 12,95, H₂O 3,29 nalezeno. C 55,08, H 5,68, N 20,33, Cl 12,65, H₂O 3,60.

Příklad 41

1—{6—(2,6-Dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl}-3-(4-methoxyfenyl)močovina

6-(2,6-Dichlorfenyl)-N²-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propyl]pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin (1,0 g) z příkladu 36 se nechá reagovat s 4-methoxyfenylisokyanátem (0,334) za použití obecného postupu popsaného v příkladu 37. Získá se 1,16 g l-{6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl}-3-(4-methoxyfenyl)močovina, ESMS (20/80 MeOH/CH₃CN + 0,1% AcOH): M⁺ + H = 595, o teplotě tání 93,5 až 100,5 °C.

Analýza pro C₂₉H₃₂N₈C1₂0₂.0,40, H₂O.0,10 EtOAc:

vypočteno: C 57,74, H 5,54, N 18,32, Cl 11,59, H₂O 1,18 nalezeno: C 58,04, H5,51, N 18,15, Cl 11,25, H₂O 1,38.

-44CZ 286160 B6

Příklad 42

1-(6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl}-3-(3-methoxyfenyl)močovina

6-(2,6-Dichlorfenyl)-N²-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propyl]pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin (1,0 g) z příkladu 36 se nechá reagovat s 3-methoxyfenylisokyanátem (0,334) za použití obecného postupu popsaného v příkladu 37. Získá se 0,920 g 1-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl}-3-(3-methoxyfenyl)močovina, ESMS (20/80 MeOH/CH₃CN + 0,1% AcOH): M⁺ + H = 595, o teplotě tání 87,5 až 92,5 °C.

Analýza pro C29H₃2NsC12O2.0,50 H2O:

vypočteno: C 57,62, H 5,50, N 18,54, Cl 11,73, H₂O 1,49 nalezeno: C 57,93, H 5,62, N 18,47, Cl 11,66, H₂O 1,10.

Příklad 43

1-(6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl}-3-(2-methoxyfenyl)močovina

6-(2,6-Dichlorfenyl)-N²-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propyl]pyrido[2,3-d]pyrimidm-2,7-diamin (1,0 g) z příkladu 36 se nechá reagovat s 2-methoxyfenylisokyanátem (0,334) za použití obecného postupu popsaného v příkladu 37. Získá se 0,9232 g 1-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl}-3-(2-ethoxyfenyl)močoviny, ESMS (20/80 MeOH/CH₃CN + 0,1% AcOH): M⁺ + H = 595, o teplotě tání 152,5 až 154 °C.

Analýza pro C29H₃2NsC12O2:

vypočteno: C 58,49, H 5,42, N 18,82, Cl 11,91 nalezeno: C 58,42, H 5,56, N 18,59, Cl 11,82.

Příklad 44 l-(4-Bromfenyl)-3-{6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl} močovina

6-(2,6-Dichlorfenyl)-N²-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propyl]pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin (1,0 g) z příkladu 36 se nechá reagovat s 0,44 g 4-bromfenylisokyanátu za použití obecného postupu popsaného v příkladu 37. Získá se 0,97 g l-(4-bromfenyl)-3-{6-(2,6dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl}methoxyfenyl)močoviny, ESMS (20/80 MeOH/CH₃CN + 0,1% AcOH + DMSO): M⁺ + H = 645, o teplotě tání 171 až 175 °C.

Analýza pro C28H29NsC12OBr: vypočteno: C 52,19, H4,45, N 17,39, Cl 11,00, Br 12,40 nalezeno: C 51,93, H4,71, N 17,14, Cl 10,81, Br 12,18.

-45 CZ 286160 B6

Příklad 45 l-(4-Chlorfenyl)-3-{6~(2,6-Dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl}močovina

6-(2,6-Dichlorfenyl}-N²-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propyl]pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin (1,0 g) z příkladu 36 se nechá reagovat s 0,344 g 4-chlorfenylisokyanátu za použití obecného postupu popsaného v příkladu 37. Získá se 0,8424 g l-(4-chlorfenyl)-3-{6-(2,6dichlorfenyI)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl}methoxyfenyl)močoviny, ESMS (20/80 MeOH/CH₃CN + 0,1% AcOH + DMSO): M⁺ + H = 601, o teplotě tání 175,5 až 181 °C.

Analýza pro C2sH29N₈C1₃O: vypočteno: C 56,06, H4,87, N 18,68, Cl 17,73 nalezeno: C 56,11, H5,14, N 18,47, Cl 17,67.

Příklad 46

1-(6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl}-3-p-tolylmočovina

6-(2,6-Dichlorfenyl)-N²-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propyl]pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin (z příkladu 36 se nechá reagovat s 0,29 g 4-tolylisokyanátu za použití obecného postupu popsaného v příkladu 37. Získá se 0,9492 g sloučeniny uvedené v nadpisu, ESMS (20/80 MeOH/CH₃CN + 0,1% AcOH): M⁺ + H = 579.

Analýza pro C29H32N8CI2O . 0,30 H2O + 0,20 EtOAc:

vypočteno: C 59,40, H 5,72, N 18,60, Cl 11,77, H₂O 0,90 nalezeno: C 59,69, H5,61, N 18,41, Cl 11,50, H₂O 1,31.

Příklad 47

1-(6-(2,6-Dichlorfenylý-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl}-3-oktylmočovina

6-(2,6-Dichlorfenyl)-N²-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propyl]pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin (1,0 g) z příkladu 36 se nechá reagovat s 0,348 oktylisokyanátu za použití obecného postupu popsaného v příkladu 21. Chromatografie se provádí za použití nejprve směsi ethylacetátu, methanolu a triethylaminu v poměru 90 : 10 : 1, která se nahradí směsí ethylacetátu, ethanolu a triethylaminu v poměru 9:2: 1, jako elučního činidla. Získá se 1,011 g titulní l-{6(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl)3-oktylmočoviny, ESMS (20/80 MeOH/CH₃CN + 0,1% AcOH): M⁺ + H = 601, o teplotě tání

54,5 až 57,5 °C.

Analýza pro C₃oH42N8C120.0,75H₂0:

vypočteno: C 58,58, H7,13, N 18,22, Cl 11,53, H₂O 2,20 nalezeno: C 58,51, H7,13, N 18,13, Cl 11,55, H₂O 2,32.

-46CZ 286160 B6

Příklad 48

1-(6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl}-3-(4-trifluonnethylfenyl)močovina

6-(2,6-Dichlorfenyl)-N²-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propyl]pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin z příkladu 36 se nechá reagovat s trifluor-p-tolylisokyanátem za použití obecného postupu popsaného v příkladu 37. Chromatografie se provádí za použití nejprve směsi ethylacetátu, methanolu a triethylaminu v poměru 90 : 10 : 1, která se nahradí směsí ethylacetátu, ethanolu a triethylaminu v poměru 9:2:1, jako elučního činidla. Získá se 0,8650 g titulní 1-(6-(2,6dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl}-3(trifluormethyl)močoviny, ESMS (20/80 MeOH/CH₃CN + 0,1% AcOH): NT + H = 633, o teplotě tání 145,5 až 151 °C.

Analýza pro C₂9H₂9N₈C1₂F₃0.0,50H₂0: vypočteno: C 54,21, H4,71, N 17,44, Cl 11,04, F 8,87, H₂O 1,40 nalezeno: C 54,39, H 4,59, N 17,28, Cl 11,10, F9,17, H₂O 1,61.

Příklad 49

1-(6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl}-3-ethylmočovina

6-(2,6-Dichlorfenyl)-N²-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propyl]pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin (1,0 g) z příkladu 36 se nechá reagovat s 0,159 g ethylisokyanátu za použití obecného postupu popsaného v příkladu 37. Získá se 0,86 g 1-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl}-3-ethylmočoviny, MS (ES+20/80 MeOH/CH₃CN + 0,1% AcOH): M⁺ + H = 517, o teplotě tání 82 až 90 °C.

Analýza pro C₂4H₃₀N₈Cl₂O . 1,00 H₂O: vypočteno: C 53,83, H 6,02, N 20,93, Cl 13,24, H₂O 3,26 nalezeno: C 53,94, H 6,07, N 20,53, Cl 13,14, H₂O 3,28.

Příklad 50

1-(6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl}-3-naftalen-l-ylmočovina

6-(2,6-Dichlorfenyl)-N²-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propyl]pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin (1,0 g) z příkladu 36 se nechá reagovat s 0,378 g 1-nafitylisokyanátu za použití obecného postupu popsaného v příkladu 36. Chromatografie se provádí za použití nejprve směsi ethylacetátu, methanolu a triethylaminu v poměru 90 : 10 : 1, která se nahradí směsí ethylacetátu, ethanolu a triethylaminu v poměru 9:2: 1, jako elučního činidla. Získá se 0,97 g titulní l-{6(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yI)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl}3-naftalen-l-ylmočoviny, ESMS (20/80 MeOH/CH₃CN + 0,1% AcOH): M⁺ + H = 615 (báze), 446, o teplotě tání 186,5 až 189 °C.

Analýza pro C₃₂H₃₂N₈C1₂0.0,10 H₂O:

vypočteno: C 62,26, H 5,26, N 18,15, Cl 11,49, H₂O 0,29 nalezeno: C 62,25, H 5,26, N 18,38, Cl 11,39, H₂O0,51.

-47CZ 286160 B6

Příklad 51

- {6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l -yl)propylamino]pyrido[2,3-d] pyrimidin7-yl}-3-fenylmočovina

6- (2,6-Dichlorfenyl)-N²-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propyl]pyrido[2,3-d]pyriinidin-2,7-diamin (13,0 g) z příkladu 36 v dimethylformamidu (160 ml) se nechá reagovat s 60% suspenzí natriumhydridu (1,16 g) a fenylisokyanátem (3,47 g) za použití obecného postupu popsaného v příkladu 37. Získaný produkt se chromatografuje a překrystaluje z ethylacetátu. Získá se titulní l-{6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-

7- yl}-3-fenylmočovina (10,78 g) ESMS (20/80 MeOH/CH₃CN + 0,1% AcOH): Nf + H = 565.

Analýza pro C₂₈H₃₀N_gCl₂O.0,30 H₂0.0,20 EtOAc:

vypočteno:	C 58,78, H 5,51, N 19,04, Cl 12,05, H₂O 0,92
nalezeno:	C 58,72, H 5,55, N 18,84, Clil,98, H₂O 1,01.

Příklad 52 l-terc.Butyl-3-{6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3d] pyrimidin-7-y 1} močovina

6-(2,6-Dichlorfenyl)-N²-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propyl]pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin (1,0 g) z příkladu 36 se 1,5 hodiny nechá reagovat s 0,22 g terc.butylisokyanátu za použití obecného postupu popsaného v příkladu 21. Získá se 0,85 g titulní l-terc.butyl-3-{6-(2,6dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl}močoviny, CIMS (1% NH₃ v CH₄): 545 = M⁺ + H, 544 = M⁺, 446, 84 (báze), která se rozkládá při

97,5 °C a taje při 106 až 109 °C.

Analýza pro C₂₆H₃₄N₈C1₂O:

vypočteno: C 57,25, H 6,28, N 20,25 nalezeno: C 56,91, H6,31, N 20,30.

Příklad 53

6-(2,6-Dichlorfenyl)-N²-(4-diethylaminobutyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

Směs 2,7-diamino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidinu (40 g) z příkladu 1, amidosírové kyseliny (25,4 g) a diethylaminobutylaminu (205 ml) se 28 hodin zahřívá na asi 150 °C. Reakční teplota se sníží na 50 °C a za sníženého tlaku se odstraní přebytek diethylaminobutylaminu. Po ochlazení na 25 °C se zbytek suspenduje ve vodě. Vodný roztok se zalkalizuje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a extrahuje několikrát dichlormethanem. Dichlormethanové vrstvy se spojí, několikrát promyjí nejprve nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a poté nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší síranem hořečnatým a zkoncentrují za sníženého tlaku. Zbytek se opakovaně promyje diethyletherem a poté překrystaluje z ethylacetátu. Překrystalovaný produkt se dále přečistí sloupcovou chromatografií za použití nejprve směsi ethylacetátu, methanolu a triethylaminu v poměru 85 : 14 : 1 a poté směsi ethylacetátu, ethanolu a triethylaminu v poměru 9:2: 1, jako elučního činidla. Získá se 36,2 g titulního 6-(2,6-dichlorfenyl)-N²-(4-diethylaminobutyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7diaminu, CIMS (1% N₃ v CPU): 461 = M* + C₂H₅, 433 = M⁺ + H (báze), 417, 403, 360.

-48CZ 286160 B6

Analýza pro C₂iH₂6N6C1₂:

vypočteno: C 58,20, H 6,05, N 19,39, Cl 16,36 nalezeno: C 58,11, H6,21, N 19,09, Cl 16,55.

Příklad 54

1-(6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-(4-<iiethylaminobutylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-fenylmočovina

K roztoku 6-(2,6-dichlorfenyl)-N²-(4-diethylaminobutyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diaminu (1,0 g) z příkladu 53 v dimethylformamidu (15 ml) se přidá jeden ekvivalent 60% suspenze natriumhydridu (0,93 g). Vzniklá směs se míchá asi 1 hodinu při teplotě místnosti a přidá se k ní jeden ekvivalent fenylisokyanátu (0,275 g). Průběh reakce se monitoruje chromatografií na tenké vrstvě. Po asi 24 hodinách se za sníženého tlaku odstraní rozpouštědlo. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu a ethylacetátový roztok se několikrát promyje, nejprve vodou a poté nasyceným roztokem chloridu sodného. Ethylacetátová vrstva se vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se chromatografuje na silikagelu za použití nejprve směsi ethylacetátu, methanolu a triethylaminu v poměru 90 : 10 : 1 a poté směsi ethylacetátu, ethanolu a triethylaminu v poměru 90 : 2 : 1, jako elučního činidla. Získá se 0,8461 g titulní 1-(6-(2,6dichlorfenyl)-2-(4-diethylaminobutylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-fenylmočoviny, ESMS (20/80 MeOH/CH₃CN + 0,1% AcOH): M⁺ + H= 552 (báze), 433; o teplotě tání 81 až

87,5 °C.

Analýza pro C₂₈H_3tN7Cl₂O.0,25H₂O: vypočteno: C 60,38, H 5,70, N 17,60, Cl 12,73, H₂O0,81 nalezeno: C 60,24, H5,61, N 17,42, Cl 12,61, H₂O 0,54.

Příklad 55

1-(6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-(4-diethylaminobutylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-ethylmočovina

6-(2,6-Dichlorfenyl)-N²-(4-<iiethylaminobutyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin (5,0 g) z příkladu 53 v dimethylformamidu (75 ml) se nechá reagovat s 60% suspenzí natriumhydridu (0,461 g) a ethylisokyanátem (0,820 g) za použití obecného postupu popsaného v příkladu 54. Chromatografií za použití směsi ethylacetátu, ethanolu a triethylaminu v poměru 9:2: 1, jako elučního činidla, se získá 4,26 g titulní 1-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(4-diethylaminobutylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-ethylmočoviny, ESMS (20/80 MeOH/CH₃CN + 0,1 % AcOH): M⁺ + H = 504 (báze), 433.

Příklad 56

Hydrochloridová sůl 1-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(4-diethylaminobutylamino)pyrido[2,3-d]pyrim id in-7-y 1]—3—ethy lmočoviny

K. roztoku 1-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(4-diethylammobutylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7yl]-3-ethylmočoviny (3,253 g) z příkladu 55 ve vodě (250 ml) se přidá jeden ekvivalent IN kyseliny chlorovodíkové (6,44 ml). Vzniklý roztok se míchá při teplotě místnosti, dokud se pevná látka nerozpustí, přefiltruje a zmrazí. Lyofilizací se získá 3,63 g hydrochloridové soli 1[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(4-diethylaminobutylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-ethyl

-49CZ 286160 B6 močoviny, ESMS (20/80 MeOH/CH₃CN + 0,1% AcOH): M⁺ + H — 504 o teplotě tání nad 50 °C (za rozkladu).

Analýza pro C₂4H₃₁N7C1₂0.1,10HC1.2,20H₂0: vypočteno: C 49,34, H 6,30, N 16,78, Cl_ceik_em 18,81 Cli_ont 6,67, H₂O 6,78 nalezeno: C 54,61, H6,21, N 16,75, Cl_ceikem 18,70 Clj_ont6,68, H₂O 6,88.

Příklad 57 l-Cyklohexyl-3-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(4-diethylaminobutylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl]močovina

6-(2,6-Dichlorfenyl)-N²-(4-diethylaminobutyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin (1,0 g) z příkladu 53 v dimethylformamidu (15 ml) se nechá reagovat s 60% suspenzí natriumhydridu (0,092 g) s cyklohexyl isokyanátem (0,289 g) za použití obecného postupu popsaného v příkladu 54. Získá se 0,927 g titulní sloučeniny, ESMS (20/80 MeOH/CH₃CN + 0,1% AcOH): M'+H = 558, 433.

Analýza pro C₂8H₃7N7C1₂0.0,10H₂0: vypočteno: C 60,02, H 6,69, N 17,50, Cl 12,65, H₂O 0,32 nalezeno: C 59,75, H 6,69, N 17,41, Cl 12,71, H₂O 0,40.

Příklad 58

6-(2,6-Dichlorfenyl)-N²-(3-morfolin^-ylpropyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

Směs 2,7-diamino-6-(2,6-dichIorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidinu (4,00 g) z příkladu 1, amidosírové kyseliny (2,53 g) a aminopropylmorfolinu (30 ml) se nechá reagovat za podmínek popsaných v příkladu 53. V tomto případě se surový zbytek promyje horkým ethylacetátem a poté diethyletherem, čímž se získá 3,95 g titulního 6-(2,6-dichlorfenyl)-N²-(3-morfolin-4ylpropyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin—2,7-diaminu, CIMS (1% NH₃ v CH»): 461 = M’ + C₂H₅, 433 = M⁺ + H (báze), 346, 332; o teplotě tání 224 až 230,5 °C.

Analýza pro C₂oH₂₂N6Cl₂0: vypočteno: C 55,43, H5,12, N 19,39 nalezeno: C 55,12, H5,12, N 19,14.

Příklad 59 l-terc.Butyl-3-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-morfolin-4-ylpropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin—7-yl]močovina

K roztoku 6-(2,6-dichlorfenyl)-N²-(3-morfolin-4-ylpropyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diaminu (1,0 g) z příkladu 58 v dimethylformamidu (15 ml) se přidá jeden ekvivalent 60% suspenze natriumhydridu (0,92 g). Reakční směs se míchá asi 1 hodinu při teplotě místnosti a přidá se k ní jeden ekvivalent terc.butylisokyanátu (0,230 g). Průběh reakce se monitoruje chromatografií na tenké vrstvě. Po asi 4 hodinách se za sníženého tlaku odstraní rozpouštědlo. Zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a vodu. Vodná fáze se promyje několikrát ethylacetátem. Ethylacetátové vrstvy se spojí, vysuší síranem hořečnatým a zkoncentrují za sníženého tlaku. Zbytek se chromatografuje na silikagelu za použití nejprve ethylacetátu a poté směsi ethylacetátu, ethanolu a triethylaminu v poměru 18:2: 1, jako elučního činidla. Získá se 0,98 g

-50CZ 286160 B6 titulní l-terc.butyl-3-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-morfolin-4-ylpropylamino)pyrido[2,3d]pyrimidin-7-yl]močoviny, CIMS (1%NH₃vCH4): 532 = M⁺ + C₂H₅, 531 =M⁺ +H 433,84 (báze); o teplotě tání 236 až 240 °C.

Analýza pro C₂5H₃iN₇Cl₂O₂.0,25EtOAc: vypočteno: C 56,32, H 6,00, N 17,68 nalezeno: C 56,48, H6,06, N 17,63.

Příklad 60

6-(2,6-Dibromfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

K roztoku 0,23 g 60% suspenze natriumhydridu v 11,0 ml 2-ethoxyethanolu se přidá 4,18 g 2,6dibromfenylacetonitrilu a 2,00 g 2,4-diaminopyrimidin-5-karboxaldehydu. Reakční směs se 4 hodiny zahřívá ke zpětnému toku, ochladí a nalije do ledové vody. Zbytek se důkladně promyje acetonitrilem a poté diethyletherem. Získá se 3,62 6-(2,6-dibromfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin2,7-diaminu, CIMS (1% NH₃ v CH4): 422 = M⁺ + C₂H₅, 396 (báze), 394 - M⁺ + H, 393 = M⁺, o teplotě tání 284 až 289 °C.

Analýza pro Ci₃H₉N₅Br₂:

vypočteno: C 39,52, H 2,30, N 17,73 nalezeno: C 39,20, H 2,27, N 17,77.

Příklad 61

6- (2,6-Dibromfenyl)-N²-(3-diethylaminopropyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

Směs 6-(2,6-dibromfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diaminu (1,0 g) z příkladu 60, amidosírové kyseliny (0,49 g) a diethylaminopropylaminu (8,0 ml) se nechá 5 hodin reagovat a zpracuje způsobem popsaným v příkladu 53. Získá se 0,79 g titulního 6-(2,6-dibromfenyl)N²-(3-diethylaminopropyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diaminu, CIMS (1% NH₃ v CH4): 507 = M⁺ + H, 506 = M⁺, 112 (báze); o teplotě tání 226 až 230 °C.

Analýza pro C₂oH₂₄N₆Br₂:

vypočteno: C 47,26, H 4,76, N 16,53 nalezeno: C 47,61, H 4,69, N 16,40.

Příklad 62 l-terc.Butyl-3-[6-(2,6-dibromfenyl)-2-(3-diethylaminopropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-

7- yl]močovina

6-(2,6-Dibromfenyl)-N²-(3-diethylammopropyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin (0,34 g) z příkladu 61 se nechá reagovat s 0,066 g terc.butylisokyanátu za použití obecného postupu popsaného v příkladu 54. Surový zbytek se přečistí chromatografíí na tenké vrstvě za použití směsi ethylacetátu, ethanolu a triethylaminu v poměru 9:2: 1, jako elučního činidla a poté preparativní vysokotlakou kapalinovou chromatografíí s obrácenými fázemi na sloupci Vydac 218 TP 1022 za použití gradientu 0,1% trifluoroctová kyselina ve vodě až 0,1% trifluoroctová kyselina v acetonitrilu. Získá se 0,214 g titulní sloučeniny, ESMS (20/80 MeOH/CH₃CN + 0,1% AcOH): 606 = M⁺ + H, o teplotě tání nad 45 °C (za rozkladu).

-51 CZ 286160 B6

Analýza pro C25H33N₇Br20.2,50TFA.H₂O: vypočteno: C 39,58, H4,25, N 10,77 nalezeno: C 39,54, H3,82, N 10,49.

Příklad 63

6-(2,6-Difluorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

Způsobem popsaným výše v příkladu 60 se za použití 2,6-difluorfenylacetonitrilu vyrobí 6-(2,6difluorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin, CIMS (1% NH₃ v CH4): 414 = M⁺+ C3H5, 302 = M⁺ + C2H5, 274 = M⁺ + H (báze), 273 = M⁺, 254 = M⁺—F; o teplotě tání nad 300 °C.

Analýza pro C13H9N5F2: vypočteno: C 57,14, H 3,32, N 25,63 nalezeno: C 57,30, H 3,52, N 25,62.

Příklad 64

6-(2,6-Dimethoxyfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

Způsobem popsaným výše v příkladu 60 za použití 2,6-dimethoxybenzylacetonitrilu namísto

2,6-dibromfenylacetonitrilu se tříhodinovou reakcí a překrystalováním produktu z ethylalkoholu získá 6-(2,6-dimethoxyfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin, CIMS (1% NH₃ vCHj): 326 = M⁺ + C2H5, 298 = M⁺ + H (báze), 297 = M⁺, 266 = M⁺-OMe; o teplotě tání nad 300 °C.

Analýza pro C₁₅Hi5N₅0₂.0,50H20: vypočteno: C 58,82, H 5,26, N 22,86 nalezeno: C 58,81, H 5,04, N 22,54.

Příklad 65

6-(2,6-Dichlorfenyl)-N²-(2-diethylaminoethyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

Směs 2,7-diamino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidinu (4,00 g) z příkladu 1, amidosírové kyseliny (2,53 g) a diethylaminoethylaminu (40 ml) se 20 hodin zahřívá asi na 150 °C. Přebytek diethylaminoethylaminu se odstraní za sníženého tlaku. Olejovitý zbytek se rozpustí v diethyletheru, vzniklý roztok se zředí hexanem a poté přefiltruje. Oddělená pevná látka se rozpustí v dichlormethanu, roztok se promyje několikrát vodou, vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se překrystaluje z ethylacetátu. Získá se titulní 6-(2,6dichlorfenyl)-N²-(3-diethylaminoethyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin, CIMS (1% NH₃v CH4): 433 = M⁺ + C2H5, 405 = M⁺ + H, 389 = M⁺ - Et, 360, o teplotě tání 216 až 219,5 °C.

Analýza pro C]9H22N₆C1₂:

vypočteno: C 56,30, H 5,47, N 20,73 nalezeno: C 56,31, H 5,39, N 20,46.

-52CZ 286160 B6

Příklad 66 l-terc.Butyl-3-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(2-diethylaminoethylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl]močovina

6-(2,6-Dichlorfenyl)-N²-(3-diethylaminoethyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin (1,0 g) z příkladu 65 v dimethylformamidu (10 ml) se nechá 1 hodinu reagovat se 60% suspenzí natriumhydridu (0,099 g) a terc.butylisokyanátem (0,244 g) za použití obecného postupu popsaného v příkladu 54. Chromatografií za použití směsi ethylacetátu, ethanolu a triethylaminu v poměru 18:2: 1, jako elučního činidla, se získá 0,76 titulní l-terc.butyl-3-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(2-diethylaminoethylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]močoviny, CIMS (1% NH₃v CH4): 504 = M⁺ + H, 84 (báze), o teplotě tání 94,5 až 96,5 °C.

Analýza pro C₂4H₃₎N₇C1₂O: vypočteno: C 57,14, H6,19, N 19,44 nalezeno: C 56,94, H6,18, N 19,22.

Příklad 67 l-[6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-(2-diethylaminoethylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-ethylmočovina

6-(2,6-Dichlorfenyl)-N²-(3-diethylaminoethyl)pyrido[2,3—d]pyrimidin-2,7-diamin (1,0 g) z příkladu 65 v dimethylformamidu (10 ml) se nechá reagovat s 60% suspenzí natriumhydridu (0,099 g) a ethyl isokyanátem (0,175 g) za použití obecného postupu popsaného v příkladu 54. Získá se titulní 0,86 g 1—[6—(2,6—dichlorfenyl)-2—(2—diethylaminoethylamino)pyrido[2,3—djpyrimidin-7-yl]-3-ethylmočoviny, CIMS (1% NH₃ v CH4): 476 = M⁺ + H, 86 (báze), o teplotě tání

86,5 až 89,5 °C.

Analýza pro C₂₂H₂₃N₇C1₂O:

vypočteno: C 55,47, H5,71, N 20,58 nalezeno: C 55,18, H 5,74, N 20,20.

Příklad 68

6-(2,6-Dichlorfenyl)-N²-(3-dimethylaminopropyl)-N²-methylpyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7diamin

Směs 2,7-diamino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidinu (4,00 g) z příkladu 1, amidosírové kyseliny (2,53 g) a N,N,N'-trimethyl-l,3-propandiaminu (20 ml) se zahřívá v bombě, nejprve 16 hodin na 165 °C a poté 16 hodin na 225 °C. Po ochlazení se reakční směs zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se rozdělí mezi zředěný hydrogenuhličitan sodný a dichlormethan. Vodný roztok se extrahuje několikrát dichlormethanem. Dichlormethanové vrstvy se spojí, přefiltrují a zkoncentrují za sníženého tlaku. Zbytek se chromatografuje za použití směsi ethylacetátu, ethanolu a triethylaminu v poměru 9:3:1, jako elučního činidla. Získá se titulní 6-(2,6-dichlorfenyl)-N²-(3-dimethylaminopropyl)-N²-methylpyrido[2,3d]pyrimidin-2,7-diamin.

-53 CZ 286160 Β6

Příklad 69 l-terc.Butyl-3-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[(3-dimethylaminopropyl)methylamino]pyrido[2,3d]pyrimidin-7-yl]močovina

6-(2,6-dichlorfenyl)-N²-(3-dimethylaminopropyl)-N²-methylpyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin (0,38 g) z příkladu 68 v dimethylformamidu (7,0 ml) se nechá reagovat s 60% suspenzí natriumhydridu (0,022 g) a terc.butylisokyanátem (0,093) za použití obecného postupu popsaného v příkladu 54. Získá se 0,25 titulní l-terc.butyl-3-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[(3dimethylaminopropyl)methylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]močoviny, CIMS (1% NH₃v CH4): 504 = M⁺ + H, 84 (báze), která se rozkládá při 76 °C a taje při 87,5 až 91 °C.

Analýza pro C₂₄H3iN7Cl₂O.0,25H₂O:

vypočteno:	C 56,64, H 6,24, N 19,26
nalezeno:	C 56,55, H 6,07, N 18,94.

Příklad 70

2-({3-[7-Amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]propyl}ethylamino)ethanol

Směs 2,7-diamino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidinu (3,0 g) z příkladu 1, amidosírové kyseliny (1,9 g) a N'-ethyl-N'-(2-hydroxyethyl)propylendiaminu (10,0 g) (J. Med. Chem., 11(3): 583 až 591 (1968)) se nechá reagovat 18 hodin za použití obecného postupu popsaného v příkladu 36. V tomto případě se zbytek chromatografuje za použití směsi ethylacetátu, ethanolu a triethylaminu v poměru 9:3:1, jako elučního činidla. Získá se 2,71 titulního 2-({3-[7-amino-6-(2,6-dichIorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]propyl}ethylamino)ethanolu, CIMS (1% NH₃ VCH4): 463 = M⁺+ C₂H₅, 435 = M⁺+ H, 346 (báze); o teplotě tání 201 až 204 °C.

Analýza pro C₂oH₂₄N₆C1₂0: vypočteno: C 55,18, H 5,56, N 19,30 nalezeno: C 55,11, H 5,53, N 19,09.

Přiklad 71

4-Amino-2-fenylaminopyrimidin-5-karbonitril

Roztok anilinu (3,31 g) v tetrahydrofuranu (40,0 ml) a diisopropylethylaminu (4,60 g) se přidá k roztoku 4-amino-2-chlorpyrimidin-5-karbonitrilu (5,00 g) v tetrahydrofuranu (50,0 ml). Reakční směs se zahřívá ke zpětnému toku. Po 3 dnech se k reakční směsi přidá další anilin (6,02 g) a diisopropylethylamin (8,36 g). Po 24 hodinách se reakční směs zkoncentruje za sníženého tlaku a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a vodu. Ethylacetátová vrstva se promyje dvakrát vodou a poté přefiltruje přes filtr ze skleněných vláken, aby se dispergovala přítomná emulze. Filtrát se promyje vodou a poté nasyceným chloridem sodným, vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se promyje diethyletherem, čímž se získá 6,00 g sloučeniny uvedené v nadpisu, CIMS (1% NH₃ vCFLt): 252 = M⁺ + C3H5, 240 = M⁺ + C2H₅, 212 = M⁺ + H (báze), 211 = M⁺.

Analýza pro C11H9N5:

vypočteno: C 62,55, H4,29, N 33,16 nalezeno: C 62,85, H4,47, N 33,18.

-54CZ 286160 B6

Příklad 72

4-Amino-2-fenylaminopyrimidin-5-karboxaldehyd

4-Amino-2-fenylaminopyrimidin-5-karbonitril (2,00 g) získaný podle příkladu 71 se spojí s vlhkým Raneyovým niklem (2,00 g), 98% kyselinou mravenčí (60 ml) a vodou (40 ml) v Parrově třepaném zařízení. Reakční směs se umístí pod atmosférou vodíku (288,54 kPa) a 20 minut třepe, poté přefiltruje a filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se suspenduje ve vodě, vzniklá suspenze se zalkalizuje nasyceným hydrogenuhličitanem sodným a extrahuje třikrát ethylacetátem. Vodná vrstva se přefiltruje přes filtr ze skleněných vláken, aby se dispergovala přítomná emulze. Vodný filtrát se promyje ethylacetátem. Ethylacetátové promývací louhy se spojí, přefiltrují, promyjí nasyceným chloridem sodným, vysuší síranem hořečnatým a zkoncentrují za sníženého tlaku. Chromatografií na silikagelu za použití směsi ethylacetátu a hexanu v poměru 2:1, jako elučního činidla, se získá 0,73 g sloučeniny uvedené v nadpisu, CIMS (1% NH₃ v CIL): 243 = M⁺ + C₂H₅, 215 = M⁺ + H (báze), 214 = M⁺.

Analýza pro CiiH₁₍)N4O:

vypočteno: C 61,67, H4,71, N 26,15 nalezeno: C 61,79, H4,71, N 26,11.

Příklad 73

6-(2,6-Dichlorfenyl)-N²-fenylpyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

K. roztoku 0,022 g 60% suspenze v natřiumhydridu ve 2,00 ml 2-ethoxyethanolu se přidá 0,46 g

2,6-dichlorfenylacetonitrilu a 0,50 g 4-amino-2-fenylaminopyrimidin-5-karboxaldehydu z příkladu 72. Reakční směs se 4 hodiny zahřívá ke zpětnému toku, ochladí a nalije do vody. Vodná směs se extrahuje několikrát dichlormethanem. Dichlormethanové promývací louhy se spojí, promyjí nasyceným chloridem sodným, vysuší bezvodým síranem hořečnatým a zkoncentrují za sníženého tlaku. Zbytek se promyje diethyletherem, čímž se získá 0,61 g sloučeniny uvedené v nadpisu, CIMS (1%NH₃ v CH4): 410 = M⁺+ C₂H₅, 382 = M⁺+ H, 381 =M⁺.

Výše uvedenou sloučeninu je možno nechat reagovat s terc.butylisokyanátem za použití postupu popsaného v příkladu 52, čímž se získá l-terc.butyl-3-[[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-fenylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]močovina.

Příklad 74

Ethylester 4-amino-2-methylsulfanylpyrimidin-5-karboxylové kyseliny

K. suspenzi ethyl—4-chlor-2-methylthio-5-pyrimidinkarboxylátu (25 g) v ethanolu (200 ml) se přidá 30% hydroxid amonný (38 ml). Reakční směs se míchá 5 hodin při teplotě místnosti a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se suspenduje ve vodě a vodná suspenze se přefiltruje. Filtrační vrstva se promyje vodou a poté diethyletherem. Získá se 17,68 g sloučeniny uvedené v nadpisu, CIMS (1% NH₃ vCIL): 242= M⁺ + C₂H₅, 214 = M⁺ + H (báze), 213 =M⁺, 168 = M⁺-OEt.

Analýza pro C₈HnN₃SO₂: vypočteno: C 45,06, H 5,20, N 19,70 nalezeno: C 44,84, H5,14, N 19,64.

-55CZ 286160 B6

Příklad 75

4-Amino-2-methylsulfanylpyrimidin-5—yl)methanol

K. suspenzi lithiumaluminiumhydridu (1,45 g) v tetrahydrofuranu (50 ml) se přikape roztok 4amino-2-methylsulfanylpyrimidin-5-yl)methanolu (5,00 g) z příkladu 74 v tetrahydrofuranu (120 ml). Reakční směs se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti a rozloží vodou (1,5 ml), 15% hydroxidem sodným (1,5 ml) a nakonec opět vodou (4,5 ml), přefiltruje a filtrační vrstva se promyje tetrahydrofuranem. Filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku, čímž se získá 3,83 g sloučeniny uvedené v nadpisu, CIMS (1% NH₃ v CH4): 200 = M⁺ + C₂H₅, 172 = M⁺ + H (báze), 171 =M⁺, 154 = M⁺-OH.

Příklad 76

4-Amino-2-methylsulfanylpyrimidin-5-karboxaldehyd

K. roztoku surového 4-amino-2-methylsulfanylpyrimidin-5-yl)methanolu (1,5 g) z příkladu 76 v chloroformu (150 ml) se po částech během 3 minut přidá oxid manganičitý (5,67 g). Po 6 hodinách při teplotě místnosti se reakční směs přefiltruje přes celit. Filtrační vrstva se promyje chloroformem a poté ethylacetátem. Filtráty se spojí a zkoncentrují za sníženého tlaku. Získá se 1,40 g sloučeniny uvedené v nadpisu.

Příklad 77

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-methylsulfanylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ylamin

K roztoku 2,6-dichlorfenylacetonitrilu (0,55 g) v dimethylformamidu (5 ml) se přidá 1 ekvivalent 60% suspenze natriumhydridu (0,12 g) a po 10 minutách 4-amino-2-methylsulfanylpyrimidin-5-karbaldehyd (0,50 g) získaný podle příkladu 76. Reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti a rozloží vodou. Vodný roztok se okyselí IN kyselinou chlorovodíkovou na pH 7 a extrahuje několikrát dichlormethanem. Spojené dichlormethanové vrstvy se promyjí nasyceným chloridem sodným, vysuší síranem hořečnatým a zkoncentrují za sníženého tlaku. Zbytek se chromatografuje na silikagelu za použití směsi ethylacetátu a hexanu v poměru 2:1, jako elučního činidla. Získá se 0,32 sloučeniny uvedené v nadpisu, CIMS (1% NH₃ v CH4): 365 = M⁺ + C₂H₅, 337 = M⁺ + H (báze), 336 = M⁺.

Příklad 78

N'-[6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-{3-diethylamino)propylamino}pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]N,N-dimethyIformamidin

K. suspenzi 210 mg (1 mmol) 7-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-diethylamino)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidinu z příkladu 20 v 0,8 ml dimethylformamidu se přidá 0,8 ml dimethylacetalu dimethylformamidu. Reakční směs se 5,5 hodiny míchá při teplotě místnosti a poté zkoncentruje za sníženého tlaku. Olejovitý zbytek se rozdělí mezi dichlormethan a vodu. Organická fáze se vysuší síranem hořečnatým a poté zkoncentruje. Sklovitý produkt se nechá vykrystalovat z acetonitrilu, čímž se získá 160 mg (68%) N'-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-{3(diethylamino)propylamino}pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-N,N-dimethylformamidinu o teplotě tání 100 až 104 °C.

-56CZ 286160 B6

CIMS (1% amoniak v methanu): m/z (relativní intenzita) 476 (MH⁺ + 2, 60), 474 (MH⁺, 94) 361 (100).

Analýza pro C₂₃H₂9CI₂N₇.0,4H₂O:

vypočteno: C 57,36, H 6,24, N 20,36 nalezeno: C 57,28, H 6,05, N 20,07.

Příklad 79

N'-[7-(3-terc.Butylureido)-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]-N,N-dimethylformamidin l-[2-Amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin—7-yl]-3-terc.butylmočovina z příkladu 3 se způsobem popsaným v příkladu 78 13,5 hodiny nechá reagovat s dimethylacetalem dimethylformamidu. Výše popsaným zpracováním a následným přečištěním mžikovou chromatografii na silikagelu za použití směsi dichlormethanu a ethylacetátu, postupně v poměru 100 : 0, 3 : 1, 1:1 a 0 : 100 se získá pevná látka, která se trituruje ve 2—propanolu. Získá se titulní N'-[7-(3-terc.butylureido)-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]-N,Ndimethylformamidin o teplotě tání 190 až 193 °C.

CIMS (1% amoniak v methanu): m/z (relativní intenzita) 462 (MH⁺ + 2, 0,78), 460 (MFT, 0,93).

Analýza pro C₂]H₂₃Cl₂N₇O.0,2C₃H8O.0,2C₃H₇NO: vypočteno: C 54,75, H 5,38, N 20,71 nalezeno: C 54,73, H5,31, N 20,65.

Příklad 80

N'-[6-(2,6-Dichlorfenyl)-7-[(dimethylamino)methylenamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]N,N-dimethylformamidin

2,7-diamino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin z příkladu 1 se postupem popsaným v příkladu 78 se nechá 23 hodin reagovat a dimethylacetalem dimethylformamidu. Po výše popsaném zpracování se provede následné přečištění mžikovou chromatografii na silikagelu za použití směsi ethylacetátu a methanolu postupně v poměru 100 :0, 9:1, 4:1 a 7:3, jako elučního činidla. Olejovitý produkt se nechá vykrystalovat z ethylacetátu, čímž se získá N'-[6(2,6-dichlorfenyl)-7-[(dimethylamino)methylenamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]-N,Ndimethylformamidin o teplotě tání 269 až 272 °C.

CIMS (1% amoniak v methanu): m/z (relativní intenzita) 418 (MH⁺ + 2, 60), 416 (ΜΡΓ, 100).

Analýza pro Cj9H]9Cl₂N₇.0,3H₂O: vypočteno: C 54,11, H4,68, N 23,25 nalezeno: C 54,21, H4,58, N 22,89.

Příklad 81

6-Fenylpyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

Způsobem popsaným v příkladu 1 se fenylacetonitril nechá reagovat s 2,4-diamino-5-pyrimidinkarboxaldehydem za vzniku sloučeniny uvedené v nadpisu o teplotě tání 317 až 318 °C.

-57CZ 286160 B6

Příklad 82 l-(2-Amino-6-fenylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl)-3-terc.butylmočovina

Způsobem popsaným v příkladu 2 se 0,246 g 6-fenylpyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diaminu z příkladu 81 nechá reagovat s 0,128 ml terc.butylisokyanátu. Získaný produkt se přečistí středotlakou chromatografii na silikagelu za použití gradientu směsi trichlormethanu a ethylacetátu od 1:1 do 0 : 1, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu 10 o teplotě tání nad 250 °C, CIMS (1% amoniak v methanu): m/z (relativní intenzita) 337 (MH’ + 1, 64), 338 (ΜΡΓ+ 2, 11), 236 (100).

Příklad 83

6-(2,3-Dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

Způsobem popsaným v příkladu 1 se 2,3-dichlorfenylacetonitril nechá reagovat s 2,4-diamino-

5-pyrimidinkarboxaldehydem za vzniku sloučeniny uvedené v nadpisu o teplotě tání 366 až 20 369 °C (za rozkladu).

Příklad 84 l-[2-Amino-6-(2,3-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovina

Za použití obecného postupu popsaného v příkladu 2 se 0,502 g 6-(2,3-dichlorfenyl)pyrido[2,3d]pyrimidin-2,7-diaminu z příkladu 83 nechá reagovat s 0,206 ml terc.butylisokyanátu. Získaný produkt se přečistí chromatografii na silikagelu za použití gradientu směsi trichlormethanu 30 a ethylacetátu v poměru 98 : 2 až 1 : 2, čímž se získá sloučenina uvedená v nadpisu o teplotě tání 356 až358 °C.

Analýza pro ύιβΗ^Ο^ΝήΟρΟ,ΟδΡ^Ο:

vypočteno: C 53,34, H4,48, N 20,74 nalezeno: C 53,44, H 4,47, N 20,29.

Příklad 85

6-(2,3,6-Trichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

Způsobem popsaným v příkladu 1 za použití 1,0 g (2,3,6-trichlor)fenylacetonitrilu a 0,6 g 2,4diamino-5-pyrimidinkarboxaldehydu se získá sloučenina uvedená v nadpisu o teplotě tání 320 až 322 °C.

Analýza pro C13H8CI3N5:

vypočteno: C 45,84, H 2,37, N 20,56 nalezeno: C 46,22, H 2,57, N 20,54.

-58CZ 286160 B6

Příklad 86 l-[2-Amino-6-(2,3,6-trichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovina

Způsobem popsaným v příkladu 2 se 0,30 g 6-(2,3,6-trichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7diaminu z příkladu 85 nechá reagovat s terc.butylisokyanátem (0,108 ml). Získaný produkt se přečistí středotlakou chromatografií (MPLC) na silikagelu za použití směsi trichlormethanu a ethylacetátu v poměru 1 : 1, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu o teplotě tání 329 až 330 °C, CIMS (1% amoniak v methanu): m/z (relativní intenzita) 439 (MH⁺-1,3), 441 (MFT + 1, 3), 84 (100).

Příklad 87 l-[2-Amino-6-(2,6-difluorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovina

Způsobem popsaným v příkladu 2 se za použití 0,25 g 6-(2,6-difluorfenyl)pyrido[2,3d]pyrimidin-2,7-diaminu z příkladu 63 a 0,112 ml terc.butylisokyanátu, jako výchozích látek, vyrobí sloučenina uvedená v nadpisu. Získaný produkt se přečistí středotlakou chromatografií za použití gradientu směsi trichlormethanu a ethylacetátu v poměru od 1 : 1 až 0 : 1. Získaný čistý produkt má teplotu tání nad 300 °C, CIMS (1% amoniak v methanu): m/z (relativní intenzita) 373 (ΜΡΓ + 1, 60), 374 (MH* + 2, 10), 274 (100).

Příklad 88 l-[2-Amino-6-(2,6-dibromfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovina

Způsobem popsaným v příkladu 2 se za použití 0,25 g 6-(2,6-dibromfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diaminu z příkladu 60 a 0,077 ml terc.butylisokyanátu, jako výchozích látek, vyrobí sloučenina uvedená v nadpisu. Získaný produkt se přečistí středotlakou chromatografií za použití gradientu směsi trichlormethanu a ethylacetátu v poměru od 1 : 1 do 0 : 1, čímž se získá čistý produkt o teplotě tání nad 300 °C (za rozkladu).

Analýza pro C]8Hi8Br₂N6O].0,35H₂O: vypočteno: C 43,20, H3,77, N 16,79, Br 31,93 nalezeno: C 43,53, H3,64, N 16,41, Br31,79.

Příklad 89 l-[2-Amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-isopropylmočovina

Způsobem popsaným v příkladu 2 se z 0,5 g 6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7diaminu z příkladu 1 a 0,172 ml isopropylisokyanátu vyrobí sloučenina uvedená v nadpisu. Získaný produkt se přečistí středotlakou chromatografií za použití gradientu směsi trichlormethanu a ethylacetátu v poměru 1:1, jako elučního činidla, čímž se získá čistý produkt o teplotě tání 184 až 188 °C, CIMS (1% amoniak v methanu): m/z (relativní intenzita) 391 (MH⁺, 16), 393 (MřT + 2, 11), 306 (100).

- 59CZ 286160 B6

Příklad 90

6-o-Tolylpyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

Způsobem popsaným v příkladu 1 se za použití 2-methylbenzylkyanidu a 2,4-diamino-5pyrimidinkarboxaldehydu, jako výchozích látek, vyrobí sloučenina uvedená v nadpisu o teplotě tání 300 až 302 °C.

Analýza pro C14H13N5: vypočteno: C 66,92, H5,21, N 27,87 nalezeno: C 66,4, H 5,2, N 27,9.

Příklad 91 l-(2-Amino-6-o-tolylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl)-3-terc.butylmočovina

Způsobem popsaným v příkladu 2 se z 6-o-tolylpyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diaminu z příkladu 90 a terc.butylisokyanátu vyrobí sloučenina uvedená v nadpisu. Získaný produkt se přečistí středotlakou chromatografií za použití směsi trichlormethanu a ethylacetátu v poměru 1 : 1, jako elučního činidla, čímž se získá čistý produkt o teplotě tání 195 až 197 °C, CIMS (1% amoniak v methanu): m/z (relativní intenzita) 351 (ΜΗ¹ + 1, 55), 352 (ΜΗ* + 2, 12), 84 (100).

Příklad 92

6-(2,3-Dimethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

Způsobem popsaným v příkladu 1 se za použití 2,3-dimethylfenylacetonitrilu a 2,4-diamino-5pyrimidinkarboxaldehydu, jako výchozích látek, vyrobí sloučenina uvedená v nadpisu o teplotě tání 330 až 333 °C.

Příklad 93 l-[2-Amino-6-(2,3-dimethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovina

Způsobem popsaným v příkladu 2 se z 0,5007 g 6-(2,3-dimethylfenyl)pyrido[2,3-]pyrimidin-7diaminu z příkladu 92 a 0,23 ml terc.butylisokyanátu vyrobí sloučenina uvedená v nadpisu. Získaný produkt se přečistí středotlakou chromatografií za použití gradientu směsi trichlormethanu a ethylacetátu v poměru od 2 : 1 do 1 : 1, jako elučního činidla. Čistý produkt má teplotu tání 326 až 330 °C, MS (Cl).

Analýza pro C20H24N6O1.0,811^0: vypočteno: C 63,38, H6,81, N 22,17 nalezeno: C 63,54, H 6,47, N 21,77.

-60CZ 286160 B6

Příklad 94

6-(3,5-Dimethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

Způsobem popsaným v příkladu 1 se za použití 2,0 g 3,5-dimethylfenylacetonitrilu a 1,81 g 2,4diamino-5-pyrimidinkarboxaldehydu vyrobí sloučenina uvedená v nadpisu o teplotě tání 298 až 302 °C MS (Cl).

Analýza pro CisHisNs: vypočteno: C 67,91, H 5,70, N 26,40 nalezeno: C 67,87, H 5,75, N 26,38.

Příklad 95 l-[2-Amino-6-(3,5-dimethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovina

Postupem popsaným v příkladu 2 se z 0,3 g 6-(3,5-dimethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7diaminu z příkladu 94 a 0,14 ml terc.butylisokyanátu vyrobí sloučenina uvedená v nadpisu. Získaný produkt se přečistí středotlakou chromatografií za použití směsi trichlormethanu a ethylacetátu v poměru 1 : 1, jako elučního činidla. Čistý produkt má teplotu tání 180 až 182 °C, CIMS (1% amoniak v methanu): m/z (relativní intenzita) 365 (MFF + 1, 16), 366 (MH + 2, 3), 84(100).

Příklad 96

6-(2,4,6-Trimethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

Způsobem popsaným v příkladu 1 se za použití 0,915 g 2,4,6-trimethylbenzylkyanidu a 0,76 g

2.4— diamino-5-pyrimidinkarboxaldehydu, jako výchozích látek, vyrobí sloučenina uvedená v nadpisu o teplotě tání 276 až 282 °C, CIMS (1% amoniak v methanu): m/z (relativní intenzita) 279 (ΜΡΓ, 54), 280 (MH⁺ + 1, 100).

Příklad 97 l-[2-Amino-6-(2,4,6-trimethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovina

Způsobem popsaným v příkladu 2 se z 0,25 g 6-(2,4,6-trimethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-

2,7-diaminu z příkladu 96 a 0,109 ml terc.butylisokyanátu získá sloučenina uvedená v nadpisu. Získaný produkt se přečistí středotlakou kapalinovou chromatografií za použití směsi trichlormethanu a ethylacetátu v poměru 1 : 1, jako elučního činidla. Čistý produkt má teplotu tání 281 až 297 °C, CIMS (1% amoniak v methanu): m/z (relativní intenzita) 379 (MH⁺ + 1, 100), 380 (MH⁺ + 2, 23).

Příklad 98

6-(2,3,5,6-Tetramethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

Způsobem popsaným v příkladu 1 se za použití 1,999 g 2,3,5,6-trimethylbenzylkyanidu a 1,52 g

2.4- diamino-5-pyrimidinkarboxaldehydu, jako výchozích látek, vyrobí sloučenina uvedená

-61 CZ 286160 B6 v nadpisu o teplotě tání 327 až 331 °C, CIMS (1% amoniak v methanu): m/z (relativní intenzita) 293 (MFf, 65), 294 (MH‘ + 1, 100).

Příklad 99 l-[2-Amino-6-(2,3,5,6-tetramethylfenyl]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovina

Způsobem popsaným v příkladu 2 se z 0,3 g 6-(2,3,5,6-tetramethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diaminu z příkladu 98 a 0,125 ml terc.butylisokyanátu získá sloučenina uvedená v nadpisu. Získaný produkt se přečistí středotlakou kapalinovou chromatografií za použití směsi trichlormethanu a ethylacetátu v poměru 1:1, jako elučního činidla. Čistý produkt má teplotu tání nad 300 °C, CIMS (1% amoniak v methanu): m/z (relativní intenzita) 393 (MfT, 55), 394 (MH⁺+ 1, 13), 84(100).

Příklad 100

6-(2-Methoxyfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

Sloučenina uvedená v nadpisu se vyrobí způsobem popsaným v příkladu 1 za použití 2-methoxybenzylkyanidu a 2,4-diamino-5-pyrimidinkarboxaldehydu, jako výchozích látek. Získaný produkt má teplotu tání 304 až 306 °C (za rozkladu).

Analýza pro C14H13N5O1:

vypočteno: C 62,91, H 4,90, N 26,20 nalezeno: C 63,16, H5,13, N 26,42.

Příklad 101 l-[2-Amino-6-(2-methoxyfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovina

Způsobem popsaným v příkladu 2 se z 0,203 g 6-(2-methoxyfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7diaminu z příkladu 100 a 0,93 ml terc.butylisokyanátu vyrobí sloučenina uvedená v nadpisu. Získaný produkt se přečistí středotlakou kapalinovou chromatografií za použití směsi trichlormethanu a ethylacetátu v poměru 1 : 1, jako elučního činidla. Čistý produkt má teplotu tání 300 až 301 °C, CIMS (1% amoniak v methanu): m/z (relativní intenzita) 367 (MH⁺ + 1, 67), 368 (ΜΡΓ + 2, 14), 236(100).

Příklad 102

6-(3-Methoxyfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

Způsobem popsaným v příkladu 1 se za použití 3-methoxybenzylkyanidu a 2,4-diamino-5pyrimidinkarboxaldehydu, jako výchozích látek, vyrobí sloučenina uvedená v nadpisu o teplotě tání 284 až 286 °C.

Analýza pro C14H13N5O1:

vypočteno: C 62,9, H 4,9, N 26,2 nalezeno: C 62,8, H 5,0, N 26,3.

-62CZ 286160 B6

Příklad 103 l-[2-Amino-6-(3-methoxyfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovina

Způsobem popsaným v příkladu 2 se z 0,50 g 6-(3-methoxyfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7diaminu z příkladu 102 a 0,23 ml terc.butylisokyanátu vyrobí sloučenina uvedená v nadpisu. Získaný produkt se přečistí středotlakou kapalinovou chromatografíí za použití gradientu směsi trichlormethanu a ethylacetátu v poměru od 2 : 1 až 1 : 1 až 0 : 1, jako elučního činidla. Čistý produkt má teplotu tání 275 až 280 °C MS(CI).

Analýza pro C]9H22N₆O2.0,45H2O: vypočteno: C 60,93, H6,16, N 22,44 nalezeno: C 61,22, H 5,89, N 22,09.

Příklad 104

6-(2-Brom-6-chlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

Způsobem popsaným v příkladu 1 za použití 1,0 g 2-brom-6-chlorfenylacetonitrilu a 0,57 g 2,4diamino-5-pyrimidinkarboxaldehydu, jako výchozích látek, se vyrobí sloučenina uvedená v nadpisu o teplotě tání 264 až 280 °C, MS(CI).

Analýza pro Ci₃H9Cl₁BriN₅: vypočteno: C 44,53, H2,59, N 19,97 nalezeno: C 44,48, H2,87, N 20,10.

Příklad 105 l-[2-Amino-6-(2-brom-6-chlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovina

Způsobem popsaným v příkladu 2 se za použití 0,30 g 6-(2-brom-6-chlorfenyl)pyrido[2,3d]pyrimidin-2,7-diaminu z příkladu 104 a 0,105 ml terc.butylisokyanátu vyrobí sloučenina uvedená v nadpisu. Získaný produkt se přečistí středotlakou kapalinovou chromatografíí za použití směsi trichlormethanu a ethylacetátu v poměru 1 : 1, jako elučního činidla. Čistý produkt má teplotu tání 314 °C (za rozkladu), MS(CI).

Analýza pro C_l8Hi₈Br_lCl₁N₆Oi.0,43CHC13.0,27C₄H₈O2: vypočteno: C 44,65, H 3,95, N 16,01, Br 15,22, Cl 15,47 nalezeno: C 44,39, H3,96, N 15,82, Br 14,83, Cl 15,39.

Příklad 106 [2-Amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]amid propan-1-sulfonové kyseliny

K suspenzi 1,00 g 2,7-diamino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pynmidinu z příkladu 1 v 15 ml dimethylformamidu se po částech přidá 0,15 g natriumhydridu (60% v minerálním oleji). Výsledná směs se 1 hodinu míchá a přikape se k ní propansulfonylchlorid (0,39 ml). Reakční směs se 16 hodin míchá při teplotě místnosti a filtrací se odstraní malé množství nerozpustné látky. Filtrát se odpaří za sníženého tlaku. Získaný produkt se přečistí středotlakou kapalinovou

-63CZ 286160 B6 chromatografii na silikagelu za použití gradientu směsi trichlormethanu a ethylacetátu v poměru od 2 : 1 do 1 : 1, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu.

Analýza pro Ci₆Hi₅C12N₅O2S₁.0,25CHC13: vypočteno: C 44,14, H3,48, N 15,84, S 7,25 nalezeno: C 43,92, H3,38, N 15,54, S 7,04.

Příklad 107

6-Pyridin-3-ylpyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

Způsobem popsaným v příkladu 1 se 3-pyridylacetonitril nechá reagovat s 2,4-diamino-5pyrimidinkarboxaldehydem, čímž se získá sloučenina uvedená v nadpisu o teplotě tání 317 až 319 °C (za rozkladu).

Analýza pro C|₂HioN₆: vypočteno: C 60,50, H 4,23, N 35,27 nalezeno: C 60,50, H 4,30, N 35,6.

Příklad 108 l-(2-Amino-6-pyridin-3-ylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl)-3-terc.butylmočovina

Způsobem popsaným v příkladu 2 se 0,30 g 2,7-diamino-6-(3-pyridyl)pyrido[2,3-d]pyrido[2,3djpyrimidinu z příkladu 107 nechá reagovat s 0,16 ml terc.butylisokyanátu. Získaný produkt se přečistí středotlakou chromatografii na silikagelu za použití směsi ethylacetátu, methanolu a triethylaminu v poměru 90:10:1, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu o teplotě tání nad 300 °C, CIMS (1% amoniak v methanu): m/z (relativní intenzita) 338 (MH⁺ + 1,8), 339 (MH⁺ + 2, 1), 84 (100).

Příklad 109

6-Pyridin-4-ylpyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

K ethoxyethanolu ochlazenému na 0 °C (13 ml) se po částech přidá 0,30 g natriumhydridu (60% v minerálním oleji). Vzniklá suspenze se 10 minut míchá a přidá se k ní 1,06 g hydrochloridu 4pyridylacetonitrilu. Vzniklá směs se míchá 30 minut při teplotě místnosti. Neutralizovaný roztok 4-pyridylacetonitrilu v 2-ethoxyethanolu se přidá k reakční směsi obsahující 2-ethoxyethoxid (vyrobený z 0,11 g natriumhydridu a 4,76 ml 2-ethoxyethanolu) a 0,9 g 2,4-diamino-5pyrimidinkarboxaldehydu. Vzniklá směs se 2 hodiny zahřívá ke zpětnému toku, ochladí a nerozpustný produkt se promyje diethyletherem a ethylacetátem. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu o teplotě tání nad 340 °C, MS (Cl).

Analýza pro Ci₂HioN₆.0,05 H₂O: vypočteno: C 60,27, H4,26, N 35,14 nalezeno: C 60,35, H4,31, N 34,75.

-64CZ 286160 B6

Příklad 110 l-(2-Amino-6-pyridin-4-ylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl)-3-terc.butylmočovina

Způsobem popsaným v příkladu 2 se 0,30 g 2,7-diamino-6-(4-pyridyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin z příkladu 109 nechá reagovat s 0,154 ml terc.butylisokyanátu. Získaný produkt se přečistí středotlakou kapalinovou chromatografií na silikagelu za použití směsi ethylacetátu, methanolu a triethylaminu v poměru 90:10:1, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu o teplotě tání nad 350 °C, CIMS (1% amoniak v methanu): m/z (relativní intenzita) 338 (MlT + 1, 6), 339 (MlT + 2, 1), 84 (100).

Příklad 111

6-Pyridin-2-ylpyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

Způsobem popsaným v příkladu 1 se 0,84 ml 2-pyridylacetonitrilu nechá reagovat s 1,0 g 2,4diamino-5-pyrimidinkarboxaldehydu. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu o teplotě tání 312 až 321 °C.

Analýza pro C₁₂H]₀N₆.0,07H₂O: vypočteno: C 60,18, H 4,27, N 35,09 nalezeno: C 60,46, H4,34, N 34,70.

Příklad 112 l-[6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-(3-diethylaminopropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3ethylmočovina

Obecným postupem popsaným v příkladu 21 se 0,85 g 7-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3diethylaminopropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidinu z příkladu 20 nechá reagovat s 0,176 ml ethylisokyanátu. Získaný produkt se přečistí preparativní vysokotlakou chromatografií s obrácenými fázemi na sloupci Cl8 za použití gradientu směsi 90% 0,1% trifluoroctové kyseliny ve vodě/10 % 0,1% trifluoroctové kyseliny v acetonitrilu až 60 % 0,1% trifluoroctové kyseliny ve vodě/40% 0,1% trifluoroctové kyseliny v acetonitrilu. Získaný produkt má teplotu tání 92 až 108 °C.

Analýza pro C₂3H₂9C1₂N7Oi.0,25H₂O: vypočteno: C 55,82, H6,01, N 19,81 nalezeno: C 55,84, H6,02, N 19,68.

Příklad 113

1—[6—(2,6-Dichlorfenyl)-2-(3-diethylaminopropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3isopropylmočovina

Způsobem popsaným v příkladu 21 se 0,30 g 7-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-diethylaminopropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidinu z příkladu 20 nechá reagovat s 0,077 ml isopropylisokyanátu. Získaný produkt se přečistí středotlakou kapalinovou chromatografií na silikagelu za použití směsi ethylacetátu, methanolu a triethylaminu v poměru 90 : 10 : 1, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu o teplotě tání 88 až 100 °C, CIMS (1% amoniak v methanu): m/z (relativní intenzita) 504 (MlT, 3), 506 (MH⁺ + 2, 2), 86 (100).

-65CZ 286160 B6

Příklad 114

N²-(3-Diethylaminopropyl)-6-(2,6-dimethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin

Způsobem popsaným v příkladu 20 se 3,0 g 2,7-diamino-6-(2,6-dimethylfenyI)pyrido[2,3djpyrimidinu z příkladu 6 nechají reagovat s 30 ml l-amino-3-(N,N-diethylamino)propanu, čímž se získá sloučenina uvedená v nadpisu o teplotě tání 216 až 219 °C.

Analýza pro ύ^Ρ^οΝβ.Ο,ΙδΙ^Ο:

vypočteno: C 69,31, H8,01, N 22,04 nalezeno: C 69,29, H 7,89, N 22,04.

Příklad 115 l-[2-(3-Dimethylaminopropylamino)-6-(2,6-dimethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3ethylmočovina

Způsobem popsaným v příkladu 21 se za použití 7-amino-6-(2,6-dimethylfenyl)-2-(3-diethyl20 aminopropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidinu z příkladu 114 a ethylisokyanátu, jako výchozích látek, vyrobí požadovaný produkt. Tento produkt se přečistí preparativní vysokotlakou chromatografií s obrácenými fázemi na sloupci Cl8 za použití gradientu směsi 100 % 0,1% trifluoroctové kyseliny ve vodě/0%0,1% trifluoroctové kyseliny v acetonitrilu až 70% 0,1% trifluoroctové kyseliny ve vodě/30 % 0,1% trifluoroctové kyseliny v acetonitrilu. Sloučenina uvedená 25 v nadpisu má teplotu tání 64 až 70 °C.

Analýza pro C25H3₅N₇Oi.0,35H₂O:

vypočteno: C 65,86, H 7,89, N 21,51 nalezeno: C 65,78, H 7,63, N 21,39.

Příklad 116 l-terc.Butyl-3-[2-(3-diethylaminopropylamino)-6-(2,6-dimethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimi35 din-7-yl]močovina

Způsobem popsaným v příkladu 21 se za použití 0,50 g 7-amino-6-(2,6-dimethylfenyl)-2-(3diethylaminopropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidinu z příkladu 114 a 0,17 ml terc.butylisokyanátu, jako výchozích látek, vyrobí požadovaný produkt. Tento produkt se přečistí preparativní 40 vysokotlakou chromatografií s obrácenými fázemi na sloupci C18 za použití gradientu směsi % 0,1% trifluoroctové kyseliny ve vodě/5 % 0,1% trifluoroctové kyseliny v acetonitrilu až 65% 0,1% trifluoroctové kyseliny ve vodě/35 % 0,1% trifluoroctové kyseliny v acetonitrilu. Sloučenina uvedená v nadpisu pak má teplotu tání 86 až 91 °C.

Analýza pro C2-7H39N7O1:

vypočteno: C 67,89, H 8,23, N 20,53 nalezeno: C 67,70, H 8,24, N 20,43.

-66CZ 286160 B6

Příklad 117 l-Adamantan-l-yl-3-(6-(2,6-dichlorfenyl}-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-y 1} močovina

Způsobem popsaným v příkladu 37 se z 0,5 g N²-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propyl]-6-(2,6dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diaminu z příkladu 36 a 0,218 g 1-adamantylisokyanátu získá požadovaný produkt. Vyrobený produkt se přečistí středotlakou kapalinovou chromatografií na silikagelu za použití směsi ethylacetátu, methanolu a triethylaminu v poměru 90 : 10 : 1, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu o teplotě tání nad 200 °C (za rozkladu), ESMS (20/80 MeOH/CHjCN + 0,1 % AcOH): m/z (relativní intenzita) 623,4 (MET, 100), 625,5 (MET + 2, 48).

Analýza pro C3₂H4oCl₂N₈0₁.0,52H₂0: vypočteno: C 60,72, H 6,54, N 17,70 nalezeno: C 61,06, H6,58, N 17,30.

Příklad 118 l-terc.Butyl-3-{6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3d]pyrimidin-7-yl} thiomočovina

Sloučenina uvedená v nadpisu se připraví způsobem popsaným v příkladu 37 z 0,5 g N²-[3-(4methylpiperazin-l-yl)propyl]-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diaminu z příkladu 36 a 0,142 g terc.butylisothiokyanátu. Vyrobený produkt se přečistí středotlakou kapalinovou chromatografií na silikagelu za použití směsi ethylacetátu, methanolu a triethylaminu v poměru 90 : 10 : 1, jako elučního činidla. Získá se směs dvou produktů, která se dále přečistí preparativní vysokotlakou chromatografií s obrácenými fázemi na sloupci Cl8 za použití gradientu směsi 95% 0,1% trifluoroctové kyseliny ve vodě/5 % 1% trifluoroctové kyseliny v acetonitrilu až 65 % 0,1% trifluoroctové kyseliny ve vodě/35 % 0,1% trifluoroctové kyseliny v acetonitrilu. Sloučenina uvedená v nadpisu má teplotu tání nad 200 °C (za rozkladu), MS(ES).

Příklad 119

3-(6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl}-l,l-diethyImočovina

K roztoku 0,5 g N²-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propyl]-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diaminu z příkladu 36 v 5 ml dimethylformamidu se přidá 0,10 g 60% natriumhydridu. Vzniklá směs se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti. Výsledná suspenze se ochladí na 0 °C přikape se kní 0,15 ml diethylkarbamoylchloridu. Po dokončení přídavku se reakční směs nechá ohřát na teplotu místnosti, při této teplotě 18 hodin míchá a zkoncentruje za sníženého tlaku. Získaný produkt se přečistí středotlakou kapalinovou chromatografií na silikagelu za použití směsi ethylacetátu, methanolu a triethylaminu v poměru 90 : 10 : 1, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu o teplotě tání nad 200 °C (za rozkladu), MS(ES).

-67CZ 286160 B6

Příklad 120

N²-[3-(4-Methylpiperazin-l-yl)propyl]-6-(2,3,5,6-tetramethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin2,7-diamin

Směs 1,00 g 6-(2,3,5,6-tetramethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diaminu z příkladu 98, 0,66 g kyseliny amidosírové a 10 ml l-(3-aminopropyl)-4-methylpiperazinu se za míchání 34 hodin zahřívá ke zpětnému toku. Reakční nádoba se opatří destilační kolonou s krátkou dráhou a destilací za vysokého vakua se odstraní přebytek aminu. Zbytek se zředí 40 ml dichlormethanu, promyje 10 ml vody a poté 15 ml nasyceného hydrogenuhličitanu sodného. Bazická vodná vrstva se extrahuje dichlormethanem (3x25 ml). Spojené organické vrstvy se promyjí vodným roztokem chloridu sodného (3 x 25 ml), vysuší síranem hořečnatým, přefiltrují a odpaří za sníženého tlaku. Získaný produkt se přečistí středotlakou kapalinovou chromatografií na silikagelu za použití směsi ethylacetátu, methanolu a triethylaminu v poměru 90 : 10 : 1, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu o teplotě tání 218 až 223 °C, MS(APCI).

Analýza pro C₂₅H₃5N₇.0,30C4H₈O₂:

vypočteno: C 68,41, H8,19, N 21,31 nalezeno: C 68,05, H 7,95, N 21,70.

Příklad 121 l-terc.Butyl-3-{2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]-6-(2,3,5,6-tetramethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl} močovina

Způsobem popsaným v příkladu 37 za použití 0,41 g N²-[3-(4-methylpiperazin-l-yI)propyl]-6(2,3,5,6-tetramethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diaminu z příkladu 120 a 0,12 ml terc.butylisokyanátu, jako výchozích látek se získá požadovaný produkt. Tento produkt se přečistí středotlakou kapalinovou chromatografií na silikagelu za použití směsi ethylacetátu, methanolu a triethylaminu v poměru 90:10:1, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu o teplotě tání 185 až 198 °C.

Analýza pro C₃oH4₄N₈Oi: vypočteno: C 67,64, H 8,33, N 21,03 nalezeno: C 67,31, H 8,23, N 20,87.

Příklad 122 l-[6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-(4-diethylaminobutylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-(3morfolin-4-ylpropyl)thiomočovina

Způsobem popsaným v příkladu 37 se za použití 0,3926 g N²-[3-(4-methylpiperazin-lyl)propyl]-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diaminu z příkladu 53 a 0,18 g 3-morfolinopropylisothiokyanátu, jako výchozích látek vyrobí požadovaný produkt. Tento produkt se přečistí středotlakou kapalinovou chromatografií na silikagelu za použití směsi ethylacetátu, methanolu a triethylaminu v poměru 90:10:1 se získá sloučenina uvedená v nadpisu o teplotě tání nad 200 °C (za rozkladu), ESMS (20/80 MeOH/CH₃CN + 0,1% AcOH): m/z (relativní intenzita) 619,4 (MlT, 100), 621,5 (MH⁺ 2, 77).

-68CZ 286160 B6

Příklad 123 l-terc.Butyl-3-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(4-diethylaminobutylamino)pyrido[2,3-<i]pyrimidin7-yl] močovina

K. roztoku 6-(2,6-dichlorfenyl)-N²-(4-diethylaminobutyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diaminu (25,0 g) z příkladu 53 v dimethylformamidu (300 ml) se přidá 1 ekvivalent 60% suspenze natriumhydridu (2,31 g). Vzniklá směs se asi 2 hodiny míchá při teplotě místnosti a přidá se k ní 1 ekvivalent fenylisokyanátu (5,72 g). Průběh reakce se monitoruje chromatografií na tenké vrstvě. Po asi 24 hodinách se za sníženého tlaku odstraní rozpouštědlo. Zbytek se rozpustí v dichlormethanu a vzniklý roztok se několikrát promyje, nejprve vodou a poté nasyceným roztokem chloridu sodného. Dichlormethanová vrstva se vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se chromatografuje na silikagelu za použití směsi ethylacetátu, ethanolu a triethylaminu v poměru 9:2:1, jako elučního činidla. Výsledný produkt se překrystaluje z terc.butylmethylesteru, čímž se získá 21,58 g titulní l-terc.butyl-3[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(4-diethylaminobutylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]močoviny, ESMS (20/80 MeOH/CH₃CN + 0,1% AcOH): M⁺ + H = 532, o teplotě tání 157 °C (za rozkladu).

Analýza pro C26H₃₅N₇CI₂O.0,10H₂O: vypočteno: C 58,45, H 6,64, N 18,35, Cl 13,27, H₂O 0,34 nalezeno: C 58,51, H 6,75, N 18,37, Cl 13,17, H₂O 0,57.

Příklad 124 l-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(4-diethylaminobutylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-ethylmočovina

K roztoku 6-(2,6-dichlorfenyl)-N²-(4-diethylaminobutyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diaminu (0,61 g) z příkladu 53 v tetrahydrofuranu (6 ml) ochlazenému na 5 °C se po částech přidá kaliumhexamethyldisilazan (0,308 g). Reakční směs se nechá ohřát na teplotu místnosti a 30 minut míchá, načež se kní přidá ethylisokyanát. Vzniklá směs se míchá dalších 18 hodin při teplotě místnosti. Požadovaný produkt se izoluje tak, že se reakční směs nalije do asi 200 ml 0,25N vodné kyseliny chlorovodíkové a vzniklý roztok se přefiltruje. Filtrát se zalkalizuje 50% vodným hydroxidem sodným a vodná vrstva se extrahuje dvakrát ethylacetátem. Spojené organické extrakty se vysuší síranem hořečnatým, přefiltrují a filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Produkt se přečistí radiální chromatografií za použití směsi ethylacetátu, methanolu a ethylaminu v poměru 90 : 10 : 1, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu.

Analýza pro C₂4H₃iCI₂N7O].0,78H₂O: vypočteno: C 55,59, H 6,33, N 18,91 nalezeno: C 55,59, H 5,93, N 18,62.

Příklad 125

N-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-diethylaminopropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl-Nethylguanidin

K roztoku 7-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-diethylaminopropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidinu (42 mg) z příkladu 20 v dimethylformamidu (1 ml) se přidá 60% suspenze natriumhydridu (5 mg). Výsledná směs se míchá 0,5 hodiny při teplotě místnosti a přidá se k ní N,N'

-69CZ 286160 B6 bis(terc.butoxykarbonyl)-N-(ethyl)-S-(ethyl)isothiomočovina (37 mg). Vzniklá směs se 18 hodin míchá a poté zředí dichlormethanem (50 ml). Zředěná směs se promyje vodou (2x15 ml). Organická vrstva se vysuší síranem sodným a zkoncentruje. Olejovitý zbytek se přečistí na silikagelu za použití směsi methanolu, ethylacetátu a triethylaminu v poměru 8,5 : 1,5 : 0,3, jako elučního činidla. Získá se směs 7-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-diethyIaminopropylaminopyrido[2,3-d]pyrimidinu (40 mg) a 1,1-dimethylethylesteru 7-amino-6-(2,6-dichlorfenyI)-2(3-diethylaminopropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]imino[[l,l-dimethylethoxy)karbonyl]amino]methyl]ethylamino]karbamové kyseliny. Tato směs se rozpustí v bezvodém dichlormethanu (0,5 ml), který obsahuje 2,6—lutidin (8 mg). Ke vzniklému roztoku se přidá trimethylsilyltrifluormethansulfonát (6 mg). Výsledná směs se míchá 30 hodin při teplotě místnosti a nalije do nasyceného vodného hydrogenuhličitanu sodného. Vzniklá směs se extrahuje v dichlormethanu, vysuší síranem sodným a zkoncentruje. Olejovitý zbytek se chromatografuje na silikagelu za použití směsi methanolu, ethylacetátu a triethylaminu v poměru 8,5 : 1,5 : 0,3, jako elučního činidla. Získá « se sloučenina uvedená v nadpisu (7 mg), ESMS (1/4 MeOH/CH₃CN + 0,1% AcOH): m/z (relativní intenzita) 490,5 (MH*. 100), 491,5 (MH⁴ + 1, 27), 492,5 (MH*, 2, 64).

Následující příklady dále ilustrují obvyklé farmaceutické prostředky získané podle vynálezu.

Příklad 126

Farmaceutický prostředek ve formě tvrdých želatinových kapslí pro orální podávání se vyrobí za použití následujících složek:

Složka	Množství
	(mg/kapsle)
Účinná sloučenina	250
Práškový škrob	200
Stearan hořečnatý	10
Celkem	460 mg
Výše uvedené složky se smísí a vzniklou směsí se v množství vždy 460 mg naplní tvrdé
želatinové kapsle. Jako příklad účinné	sloučeniny je možno uvést N-[2-formylamino-6-(3,5-
dimethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-	7-yl]n-butylamid. Získaný přípravek se podává 2 až 4 x
denně při léčení pooperační restenózy.
Příklad 127
Přípravek ve formě suspenze pro orální podávání
Složka	Množství
3-(4,5-Dibromfenyl)-[ 1,6]-
naftyridin—2,7-diamin	500 mg
Roztok sorbitolu (70% N.F.)	40 ml
Benzoan sodný	150 mg
Sacharin	10 mg
Třešňové aroma	50 mg
Destilovaná voda q.s. do	100 ml

-70CZ 286160 B6

Roztok sorbitolu se přidá ke 40 ml destilované vody a ve vzniklém roztoku se suspenduje nafityridin. K výsledné suspenzi se přidá sacharin, benzoan sodný a aroma. Po jejich rozpuštění se objem suspenze destilovanou vodou doplní do 100 ml. Každý mililitr sirupu obsahuje 5 mg účinné složky.

Příklad 128

Tablety obsahující vždy 60 mg účinné složky

Složka Množství

Účinná složka	60 mg
Škrob	45 mg
Mikrokrystalická celulóza	35 mg
Polyvinylpyrrolidon
(jako 10% roztok ve vodě)	4 mg
Sodná sůl karboxymethylškrobu	4,5 mg
Stearan hořečnatý	0,5 mg
Mastek	1,0 mg
Celkem	150 mg

Účinná přísada, škrob a celulóza se protlačí přes síto o velikosti oka 355 pm a důkladně promísí. Roztok polyvinylpyrrolidonu se smísí se získaným práškem a poté protlačí přes síto o velikosti oka 1400 pm. Granule se vysuší při 50 až 60 °C a protlačí přes síto o velikosti oka 1000 pm. Sodná sůl karboxymethylškrobu, stearan hořečnatý a mastek se protlačí přes síto o velikosti oka 250 pm a poté přidají ke granulím. Vzniklá směs se po promísení lisuje v tabletovacím stroji. Získají se tablety, z nichž každá má hmotnost 150 mg.

Jako typickou účinnou přísadu používanou při výše popsaném postupu je možno uvést sloučeninu z příkladu 21.

Příklad 129

Parenterální prostředek vhodný pro injekční podávání se vyrobí tak, že se 100 mg l-[2-amino6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-(3-morfolin-4-ylpropyl)thiomočoviny rozpustí ve 250 ml 0,9% vodného roztoku chloridu sodného. Hodnota pH získaného roztoku se nastaví na 7,0. Tento prostředek je vhodný pro léčbu rakoviny prsu.

Příklad 130

Příprava čípků

Směs 500 mg l-[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]imidazolidin-2onu a 1500 mg theobroma (olej) se mísí při 60 °C až do dosažení homogenity. Poté se směs v kónické licí formě ochladí na 24 °C. Každý čípek má hmotnost asi 2 g. Čípky vyrobené podle výše popsaného způsobuje možno podávat 1 až 2 x denně při léčbě bakteriálních infekcí.

-71 CZ 286160 B6

Příklad 131

Topický prostředek

Složka	Množství
N⁷-(3-Methylaminopropyl)-6- (3,5-d i methoxy feny 1 )pyrido-	(mg)
[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin	20
Propylenglykol	100
Bílá vaselina	500
Cetearylalkohol	50
Glycerylstearát stearan polyethylenglykolu	100
0 molekulové hmotnosti 100	100
Ceteth-20	50
Monobázický fosforečnan sodný	80
Celkem	1 000

PATENTOVÉ NÁROKY

Claims

1. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny obecného vzorce I (I) kde

Ri, R₂ a R4 představuje každý nezávisle atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, alkenylskupinu se 2 až 8 atomy uhlíku, alkinylskupinu se 2 až 8 atomy uhlíku, Ar', aminoskupinu, alkylaminoskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku nebo dialkylaminoskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku v každé z alkylových částí, přičemž uvedené alkylové, alkenylové a alkinylové skupiny jsou popřípadě substituovány skupinou NR₅R6, kde R5 a Ré představuje každý nezávisle atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, alkenylskupinu se 2 až 8 atomy uhlíku, alkinylskupinu se 2 až 8 atomy uhlíku, cykloakylskupinu se 3 až 10 atomy uhlíku nebo skupinu obecného vzorce

-72CZ 286160 B6 a kde výše uvedené alkylové, alkenylové a alkinylové skupiny jsou popřípadě substituovány hydroxyskupinou nebo pěti- nebo šestičlenným karbocyklickým kruhem nebo pětičlenným nebo šestičlenným heterocyklickým kruhem, který obsahuje jeden nebo dva heteroatomy zvolené ze souboru zahrnujícího dusík, kyslík a síru, přičemž tyto kruhy jsou popřípadě substituovány jednou nebo dvěma alkylskupinami s 1 až 6 atomy uhlíku, a R₉, R_]0, Rn a R_í2 představuje každý nezávisle atom vodíku, nitroskupinu, trifluormethylskupinu, fenylskupinu, fenylskupinu substituovanou jedním až čtyřmi substituenty ze souboru zahrnujícího halogen, hydroxyskupinu, aminoskupinu, alkylskupinu s laž 8 atomy uhlíku a alkoxyskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, skupinu -ON, -COORg,

S N

II II

-COR8,-CR₈, -C-Rg, -SO₂Rg, atom halogenu, alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, thioskupinu, skupinu -S-alkyl s 1 až 8 atomy uhlíku, hydroxyskupinu, alkanoylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, alkanoyloxyskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku nebo skupinu -NH₂, nebo R₉ a R₁₀ dohromady, pokud spolu sousedí, popřípadě představují methylendioxyskupinu; n představuje číslo 0, 1, 2 nebo 3; a kde R₅ a R^ dohromady s atomem dusíku, ke kterému jsou připojeny, popřípadě tvoří kruh se 3 až 6 atomy uhlíku, který popřípadě obsahuje heteroatom zvolený ze souboru zahrnujícího atom dusíku, kyslíku a síry, přičemž tento kruh je popřípadě substituován jednou nebo dvěma alkylskupinami s 1 až 6 atomy uhlíku;

R₃ představuje acylový analog zvolený ze souboru zahrnujícího skupinu vzorce

O

II C— Re >

NH O srw II —C—Rg, II —S—Rg II 0 a / 0 nebo ¹ M CH₂) 1, 2 nebo 3 Ix

kde Rg představuje atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, alkenylskupinu se 2 až 8 atomy uhlíku, alkinylskupinu se 2 až 8 atomy uhlíku, cykloalkylskupinu se 3 až 10 atomy uhlíku, která popřípadě obsahuje atom kyslíku, dusíku nebo síry, skupinu vzorce nebo -NR5R6, přičemž alkylové, alkenylové a alkinylové skupiny ve významu Rg jsou popřípadě substituovány skupinou NR₅Ré;

-73 CZ 286160 B6

Ri a R₂ R3 a R> dohromady s atomem dusíku, k němuž jsou připojeny a dohromady s atomem dusíku, k němuž jsou připojeny, popřípadě tvoří také skupinu (H, CH₃ nebo NH,) 1 -N=C-Rg nebo doplňují kruh se 3 až 6 atomy uhlíku, který popřípadě obsahuje 1 až 2 heteroatomy zvolené ze souboru zahrnujícího dusík, kyslík a síru a Ri navíc popřípadě představuje acylový analog zvolený ze souboru zahrnujícího skupinu vzorce

O 0 s II II II -c-r₈, -c-or₈· — C—r₈

NH 0 II —C—r₈, II -s-r₈ a II 0

0 nebo :ch₂)

1,2 nebo 3 kde R₈ představuje atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, alkenylskupinu se 2 až 8 atomy uhlíku, alkinylskupinu se 2 až 8 atomy uhlíku, cykloalkylskupinu se 3 až 10 atomy uhlíku, která popřípadě obsahuje atom kyslíku, dusíku nebo síry, skupinu vzorce nebo -NRjRó, přičemž alkylové, alkenylové a alkinylové skupiny ve významu Rg jsou popřípadě substituovány skupinou NR₅Ró;

Ar a Ať představuje nesubstituovanou nebo substituovanou aromatickou nebo heteroaromatickou skupinu zvolenou ze souboru zahrnujícího fenylskupinu, imidazolylskupinu, pyrrolylskupinu, pyridylskupinu, pyrimidinylskupinu, benzimidazolylskupinu, benzothienylskupinu, benzofurylskupinu, indolylskupinu, pyrazinylskupinu, thiazolylskupinu, oxazolylskupinu, isoxazolylskupinu, furylskupinu, thienylskupinu a naftylskupinu, přičemž případnými substituenty jsou substituenty R₉, R_1o, R]i a R]2, které mají výše uvedený význam;

a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami a bázemi.

-74CZ 286160 B6

2. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny podle nároku 1 obecného vzorce kde R_b R₂, R« a Ar mají význam uvedený v nároku 1 a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami a bázemi.

3. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny podle nároku 1 obecného vzorce I, kde Ar představuje skupinu obecného vzorce kde R9 a R₁₀ mají význam uvedený v nároku 1 a ostatní symboly mají význam uvedený v nároku 1 a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami a bázemi.

4. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny podle nároku 3 obecného vzorce I, kde R₂ a R4 představují atomy vodíku a ostatní symboly mají význam uvedený v nároku 3 a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami a bázemi.

5. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny podle nároku 4 obecného vzorce I, kde R] představuje atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo skupinu obecného vzorce

S

II

-cr₈ nebo

O

II

-CRg a ostatní symboly mají význam uvedený v nároku 4 a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami a bázemi.

6. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny podle nároku 5 obecného vzorce I, kde R_g představuje alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo skupinu vzorce -NR₅R nebo -alkyl-NR₅R6 s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části a ostatní symboly mají význam uvedený v nároku 5 a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami a bázemi.

7. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny podle nároku 6 obecného vzorce I, kde R₅ představuje atom vodíku a R₆ představuje alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo -alkyl-NR₅R6 s 1 až 6 atomy

-75CZ 286160 B6 uhlíku v alkylové části a ostatní symboly mají význam uvedený v nároku 6 a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami a bázemi.

8. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny podle nároku 7 zvolené ze souboru zahrnujícího l-terc.butyl-3-[7-(3-terc.butylureido)-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2yl]močovinu;

l-terc.butyl-3-[7-(3-terc.butylureido)-6-o-tolylpyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]močovinu;

10 l-[2-amino-6-o-tolylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu;

N-[2-acetylamino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]acetamid;

l-[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-ethylmočovinu;

15 l-[2-amino-6-(2,6-difluorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu;

l-[2-amino-6-(2,6-dibromfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu;

l-(2-amino-6-fenylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl)-3-terc.butylmočovinu;

20 l-[2-amino-6-(3,5-dimethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu;

9. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny podle nároku 1 obecného vzorce

30 kde Ri, R₂, R₉ a R₁₀ mají význam uvedený v nároku 1 a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami a bázemi.

10. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny podle nároku 9, kde R₉ a Rio oba představují vždy atom 35 halogenu nebo methylskupinu a ostatní symboly mají význam uvedený v nároku 9 a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami a bázemi.

-76CZ 286160 B6

11. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny podle nároku 10, kde R] a R₂ oba představují vždy atom vodíku a ostatní symboly mají význam uvedený v nároku 10 a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami a bázemi.

12. 6-Aiylpyrido[2,3-d]pyrimidin podle nároku 11, kterým je l-[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]imidazolidin-2-on.

13. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidin podle nároku 1 obecného vzorce kde R], R₂, R₅, Ré, R₉ a R[₀ mají význam uvedený v nároku 1 a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami a bázemi.

14. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny podle nároku 1 obecného vzorce

R,R-N—C.-CO O 10 alkyl—NH

R kde obecné symboly mají význam uvedený v nároku 1 a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami a bázemi.

15. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny podle nároku 14, kde R₃ představuje

O skupinu vzorce -CRg, R> představuje atom vodíku a ostatní symboly mají význam uvedený v nároku 14 a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami a bázemi.

16. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidin podle nároku 15, zvolený ze souboru zahrnujícího l-terc.butyl-3-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-diethylaminopropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin7—yl] močovinu;

-77CZ 286160 B6 l-terc.butyl-3-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-dimethylaminopropylamino)pyrido[2,3d]pyrimidin-7-yl]močovinu;

l-terc.butyl-3-[6-(2,6-dichIorfenyl)-2-(3-dimethylamino-2,2-dimethylpropylamino)pyrido(2,3-d]pyrimidin-7-yl]močovinu;

l-terc.butyl-3-{6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(2-methylpiperidin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3d]pyrimidin-7-yl (močovinu;

1-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(4-diethylaminobutylamino)pyrido(2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3fenylmočovinu;

1-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(4-diethylaminobutylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3ethylmočovinu, hydrochlorid 1-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(4-diethylaminobutylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl]-3-ethylmočoviny, l-cyklohexyl-3-[6-(2,6-dichlorfenyI)-2-(4-diethylaminobutylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl]močovinu;

l-terc.butyl-3-[6-(2,6-dibromfenyl}-2-(3-diethylammopropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl]močovinu;

l-terc.butyl-3-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(2-diethylaminoethylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7yljmočovinu;

1-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-diethylaminopropyIamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3ethylmočovinu;

l-[2-(3-dimethylaminopropylamino)-6-(2,6-dimethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3ethylmočovinu;

l-terc.butyl-3-[2-(3-diethylaminopropylamino)-6-(2,6-dimethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-močovinu;

l-terc.butyl-3-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(4-diethylaminobutylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7yljmočovinu a

1-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(4-diethylaminobutylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3ethylmočovinu.

-78CZ 286160 B6

17. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny podle nároku 15 obecného vzorce kde obecné symboly mají význam uvedený v nároku 15 a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami a bázemi.

18. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidin podle nároku 17, zvolený ze souboru zahrnujícího l-terc.butyl-3-{6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)butyIamino]pyrido[2,3d]pyrimidin-7-yl}močovinu;

1-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin7—y 1} —3—i sopropy lmočo vinu;

l-benzyl-3-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3d]pyrimidin-7-yl} močovinu;

1-(6-(2,6-dichlorfenyl-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl}-3-(2-methoxyfenyl)močovinu;

l-(4-bromfenyl)-3-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl}močovinu;

1-(6-(2,6-dichlorfenyl-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl }-3-p-toly lmočovinu;

1-(6-(2,6-dichlorfenyl-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl}-3-oktylmočovinu;

1-(6-(2,6-dichlorfenyl-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl}-3-(4-trifluormethylfenyl)močovinu;

-79CZ 286160 B6

1-(6-(2,6-dichlorfenyl-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl}-3,3-diethylmočovinu;

1-(6-(2,6-dichlorfenyl-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl}-3-naftalen-l-ylmočovinu;

1-(6-(2,6-dichIorfenyl-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin7-y 1} -3-feny lmočovinu;

1-terc.buty 1-3-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]pyrido[2,3d]pyrimidin-7-yl} močovinu;

l-adamantan-l-yl-3-(6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yI)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl}močovinu a l-terc.butyl-3-(2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]-6-(2,3,5,6-tetramethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl}močovinu.

19. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny podle nároku 1 obecného vzorce kde obecné symboly mají význam uvedený v nároku 1 a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami a bázemi.

20. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidin podle nároku 19, kterým je

2-[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]amino-4,5-dihydrooxazol nebo

6-(2,6-dichlorfenyl)-N²-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propyl]-N⁷-(5,6-dihydro-4H[l,3]oxazin-2-yl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2,7-diamin.

-80CZ 286160 B6

21. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny podle nároku 1 obecného vzorce kde obecné symboly mají význam uvedený v nároku 1 a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami a bázemi.

22. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidin podle nároku 21, zvolený ze souboru zahrnujícího l-[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyridimid-7-yl]-3-(3-morfolin-4ylpropyl)thiomočovinu;

l-butyl-3-[7-(3-butylureido)-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]močovinu;

l-[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-propylmočovinu;

l-terc.butyI-3-{6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propyIamino]pyrido[2,3d]pyrimidin-7-yl}thiomočovinu;

l-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(4-diethylaminobutylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-(3morfolin-4-yl-propyl)thiomočovinu a l-terc.butyl-3-{6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[N-(3-dimethylaminopropyl)-N-methylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl}močovinu.

23. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny podle nároku 1 obecného vzorce kde obecné symboly mají význam uvedený v nároku 1 a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami a bázemi.

-81 CZ 286160 B6

24. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidin podle nároku 23, zvolený ze souboru zahrnujícího l-[2-amino~6-(pyridin-2-yl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu;

l-[2-amino-6-(pyridin-3-yl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu a l-[2-amino-6-(pyridin-4-yl)pyrido[2,3--d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu.

25. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny podle nároku 1 obecného vzorce (H, CH₃nebo NH₂) nebo kde obecné symboly mají význam uvedený v nároku 1 a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami a bázemi.

26. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidin podle nároku 25, zvolený ze souboru zahrnujícího

N-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-diethylaminopropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl-Nethylguanidin;

N'-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[3-(diethylamino)propylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]N,N-dimethylformamidin;

N'-[6-(2,6-dichlorfenyl)-7-[(dimethylamino)methylenamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]Ν,Ν-dimethylformamidin a

N'-[7-(3-terc.butylureido)-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]-N,Ndimethylformamidin.

27. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny podle nároku 1 obecného vzorce kde obecné symboly mají význam uvedený v nároku 1 a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami a bázemi.

-82CZ 286160 B6

28. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidin podle nároku 27, kterým je l-terc.butyl-3-[[6-(2,6dichlorfenyl)-2-fenylamino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]močovina.

29. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny podle nároku 1 obecného vzorce kde obecné symboly mají význam uvedený v nároku 1 a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami a bázemi.

30. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidin podle nároku 29, zvolený ze souboru zahrnujícího l-[2-amino-6-(2,3,5,6-tetramethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu;

l-[2-amino-6-(2,4,6-trimethylfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu a l-[2-amino-6-(2,3,6-trichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimídin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu.

31. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidin podle nároku 1, kterým je [2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]amid propan- 1-sulfonové kyseliny.

32. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje 6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidin podle nároku 1 nebo jeho farmaceuticky vhodnou adiční sůl s kyselinou nebo bází spolu s farmaceuticky vhodným nosičem, ředidlem nebo excipientem pro tuto sloučeninu.

33. Farmaceutický prostředek podle nároku 32, vyznačující se tím, že obsahuje 6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidin obecného vzorce I podle nároku 1, kde Ar představuje fenylskupinu obecného vzorce přičemž všechny obecné symboly mají jinak význam uvedený v nároku 1, nebo jeho farmaceuticky vhodnou adiční sůl s kyselinou nebo bází.

34. Farmaceutický prostředek podle nároku 33, vyznačující se tím, že obsahuje 6-aryIpyrido[2,3-d]pyrimidin obecného vzorce I podle nároku 1, kde R₂ a R4 představují atomy vodíku a Ri představuje atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, skupinu -C(=O)-Rg nebo -C(=S)-R₈, kde R_s představuje alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku

-83CZ 286160 B6 nebo skupinu -NR₅Rfi, přičemž všechny obecné symboly mají jinak význam uvedený v nároku 1, nebo jeho farmaceuticky vhodnou adiční sůl s kyselinou nebo bází.

35. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny obecného vzorce I podle nároku 1 a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami nebo bázemi pro použití při léčení proliferativních chorob vaskulárního hladkého svalstva.

36. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny obecného vzorce I podle nároku 1 a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami nebo bázemi pro použití při léčení aterosklerózy nebo postchirurgické restenózy.

37. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny podle nároku 1 obecného vzorce I (I) kde

R_t, R? a R4 představuje každý nezávisle atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkenylskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku, alkinylskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku, aminoskupinu, alkylaminoskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo dialkylaminoskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v každé z alkylových částí, přičemž uvedené alkylové, alkenylové a alkinylové skupiny jsou popřípadě substituovány skupinou NR5R6, kde R5 a Rů představuje každý nezávisle atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkenylskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku, alkinylskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku, cykloalkylskupinu se 3 až 6 atomy uhlíku nebo skupinu obecného vzorce a kde výše uvedené alkylové, alkenylové a alkinylové skupiny jsou popřípadě substituovány pěti- nebo šestičlenným karbocyklickým kruhem nebo pětičlenným nebo šestičlenným heterocyklickým kruhem, který obsahuje jeden nebo dva heteroatomy zvolené ze souboru zahrnujícího dusík, kyslík a síru, a R₉, R₁₀ a Rn představuje každý nezávisle atom vodíku, nitroskupinu, trifluormethylskupinu, fenylskupinu, fenylskupinu substituovanou jedním až čtyřmi substituenty ze souboru zahrnujícího halogen, hydroxyskupinu, aminoskupinu, alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku a alkoxyskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, skupinu -CsN, -COORg,

S NH

II II

-CORg, -CRg, -C-Rg, -SO₂Rg, atom halogenu, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, thioskupinu, skupinu -S-alkyl s 1 až

-84CZ 286160 B6

6 atomy uhlíku, hydroxyskupinu, alkanoylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, hydroxyskupinu, alkanoylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkanoyloxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo skupinu -NH₂, nebo R₉ a R]₀ dohromady, pokud spolu sousedí, popřípadě představují methylendioxyskupinu; n představuje číslo 0, 1, 2 nebo 3; a kde R₅ a R^ dohromady s atomem dusíku, ke kterému jsou připojeny, popřípadě tvoří kruh se 3 až 6 atomy uhlíku, který popřípadě obsahuje heteroatom zvolený ze souboru zahrnujícího atom dusíku, kyslíku a síry, představuje acylový analog zvolený ze souboru zahrnujícího skupiny vzorce

O II — C—Rg , O II - C-ORg ¹ s II — C—Rg NH O II 3 II — C—Rg, -S-Rg

O kde Rg představuje atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkenylskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku, alkinylskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku, cykloalkylskupinu se 3 až 6 atomy uhlíku, skupinu vzorce

Ri a R₂

R₃ a R4

Ri nebo -NR₅Ré, přičemž alkylové, alkenylové a alkinylové skupiny ve významu Rg jsou popřípadě substituovány skupinou NRjR^;

dohromady s atomem dusíku, k němuž jsou připojeny a dohromady s atomem dusíku, k němuž jsou připojeny, popřípadě doplňují kruh se 3 až 6 atomy uhlíku, který popřípadě obsahuje heteroatom zvolený ze souboru zahrnujícího dusík, kyslík a síru a navíc popřípadě představuje acylový analog zvolený ze souboru zahrnujícího skupiny vzorce

O O S

II II _Λ II — C—Rg ϊ C ORg’ —C—Rg ·

NH

II — C—Rg,

O kde Rg má výše uvedený význam;

-85CZ 286160 B6

Ar představuje nesubstituovanou nebo substituovanou aromatickou nebo heteroaromatickou skupinu zvolenou ze souboru zahrnujícího fenylskupinu, imidazolylskupinu, pyrrolylskupinu, pyridylskupinu, pyrimidinylskupinu, benzimidazolylskupinu, benzothienylskupinu, <benzofurylskupinu, indolylskupinu, pyrazinylskupinu, thiazolylskupinu, oxazolylskupinu, isoxazolylskupinu, fúrylskupinu, thienylskupinu a naftylskupinu, přičemž případnými substituenty jsou substituenty Rg, Rio a Rn, které mají výše uvedený význam;

a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami a bázemi.

38. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny podle nároku 37 zvolené ze souboru zahrnujícího l-terc.butyl-3-[7-(3-terc.butylureido)-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-2yljmočovinu;

l-[2-amino-6-o-tolylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-terc.butylmočovinu;

N-[2-acetylamino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]acetamid;

l-[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-ethylmočovinu;

l-[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3--d]pyrimidin-7-yl]imidazolidin-2-on;

l-terc.butyl-3-[6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3-diethylaminopropylamino)pyrido[2,3-d]pyrimidin7-yl]močovinu; a l-[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-3-(3-morfolin-4-ylpropyl)thiomočovinu.

39. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje 6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidin podle nároku 37 nebo jeho farmaceuticky vhodnou adiční sůl s kyselinou nebo bází spolu s farmaceuticky vhodným nosičem, ředidlem nebo excipientem pro tuto sloučeninu.

40. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny obecného vzorce I podle nároku 37 a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami nebo bázemi pro použití při léčení proliferativních chorob vaskulámího hladkého svalstva.

41. 6-Arylpyrido[2,3-d]pyrimidiny obecného vzorce I podle nároku 37 a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami nebo bázemi pro použití při léčení aterosklerózy nebo postchirurgické restenózy.