CZ20004246A3

CZ20004246A3 - Bicyklické pyrimidiny a bicyklické 3,4- dihydropyrimidiny jako inhibitory buněčné proliferace

Info

Publication number: CZ20004246A3
Application number: CZ20004246A
Authority: CZ
Inventors: Ellen Myra Dobrusin; James Marino Hamby; James Bernard Kramer; Mel Conrad Schroeder; Howard Daniel Hollis Showalter; Peter Laurence Toogood; Susanne A. Trumpp-Kallmeyer
Original assignee: Warner-Lambert Company
Priority date: 1999-05-10
Filing date: 1999-05-10
Publication date: 2001-04-11

Abstract

Předkládaný vynález se týká bicyklických heterocyklů, které jsou užitečné pro léčbu buněčné proliferace, jako je rakovina a restenóza a rovněž angiogenéze a ateroskleróza. Bicyklické sloučeniny podle vynálezu jsou silnými inhibitory na cyklinu závislých kináz (cdks), růstovým faktorem zprostředkovaných kináz a nereceptorových kináz. Sloučeniny se snadno připraví a mohou být podány různými cestami, včetně orální cestou a mají dostatečnou biologickou dostupnost pro klinické použití. Vynález poskytuje sloučeniny obecného vzorce I, kde Z je N nebo CH; Gje N nebo CH; W je NH, SO nebo SO2, R1 zahrnuje fenyl a substituovaný fenyl, R2 zahrnuje alkyl a cykloalkyl, R3 zahrnuje alkyl a vodík, R8 a R9 zahrnují vodík a alkyl a jejich farmaceutické prostředky, obsahující sloučeninu obecného vzorce I společně s farmaceuticky přijatelným nosičem, ředidlem nebo excipientem.

Description

Bicyklické pyrimidiny a bicyklické 3,4-dihydropyrimidiny jako inhibitory buněčné proliferace

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká bicyklických heterocyklů, které inhibují na cyclinu závislé kynázové a tyrosin kinázové enzymy a které jsou užitečné pro léčbu chorob buněčné proliferace, jako je angiogenéza, aterioskleróza, restenóza a rakovina.

Dosavadní stav techniky

Buněčné cyklické kinázy jsou v přírodě se vyskytující enzymy, které se podílejí na regulaci buněčného cyklu (Meijer

L., Chemical Inhibitors of Cyclin-Dependent Kinases, Progress in Cell Cycle Research, 1995; 1: 351-363) .

Typické enzymy zahrnují kinázy závislé na cyclinu (cdk) cdkl (rovněž známé jako cdc2), cdk2, cdk4, cdk5, cdk6 a wee-1 kinázu. Zvýšená aktivita nebo dočasná abnormální aktivace těchto kináz vede k rozvoji lidských nádorů a dalších proliferačních chorob, jako je restenóza. Sloučeniny, které inhibují cdk, buď blokováním interakce mezi cyclinem a jeho kinázovým partnerem nebo vazbou a inaktivací kinázy, způsobují inhibici buněčné proliferace a jsou proto užitečné při léčbě nádorů nebo abnormální proliferace buněk.

U některých sloučenin, které inhibují cdk byla prokázána protinádorová účinnost a to jak v předklinických, tak klinických podmínkách. Například flavopiridol je flavonid, který se ukazuje být silným inhibitorem několika typů prsních a plicních rakovinových buněk (Kaur a kol., J. Nati. Cancer Inst., 1992; 84:1736-1740; Int. J. Oncol., 1996; 9: 1143-1168). Ukázalo se, že sloučenina inhibuje cdk2 a cdk4. Olomoucin [2-(hydroxyethylamin)-6-benzylamin-9-methylpurin] je silným inhibitorem cdk2 a cdk5 (Veselý a kol., Eur. J. Biochem,, 1994; 224: 771-786), a ukazuje se

že inhibuje proliferaci přibližně 60 různých lidských nádorových buněčných linií používaných National Cancer Institut (NCI) pro sledování nových rakovinových terapií (Abraham, akol. Biology of the Cell, 1995; 83: 105-120).

Dále, tyrosinkinázy jsou třídou enzymů, které katalýzují přenos koncového fosfátu adenosin trifosfátu (ATP) do tyrosinovych zbytků na proteinových substrátech.

Tyrosinové kinázy jsou integrální částí receptorů růstového faktoru a jsou podstatné pro propagaci přenosu signálu faktoru růstu vedoucí k buněčné proliferaci, diferenciaci a migraci. Receptory růstového faktoru jsou také známé jako receptory tyrosin kináz (RTK). Aberantní regulace růstových faktorů nebo jejich příbuzných receptorů hraje důležitou úlohu v postupu proliferačních chorob. Například fibroblastový růstový faktor (FGF) a vaskulární endotheliální růstový faktor (VEGF) byly implikovány jako důležité mediátory nádorem podporované angiogenéze. Pevné nádory jsou závislé na tvorbě nových krevních cév z preexistujících cév (angiogenéze) k zajištění jejich růstu a poskytují vedení pro metastázy. Proto jsou inhibitory FGF a VEGF RTK a rovněž ostatních tyrosinkináz užitečnými činidly pro prevenci a léčbu proliferačních chorob závislých na těchto enzymech.

Bez ohledu na postup, který byl v uvedené oblasti dosažen, pokračuje výzkum se zaměřením na sloučeniny s malou molekulární hmotností, které jsou biologicky dostupné a které jsou užitečné pro léčbu široké řady lidských nádorů a proliferačních chorob, jako je restenóza, angiogenéze, diabetická retinopatie, psoriáza, chirurgické adheze, makulární degenerace a ateroskleróza.

Podstata vynálezu

Předkládaný vynález poskytuje bicyklické heterocykly, které jsou užitečné pro léčbu buněčných proliferačních chorob, jako je rakovina, ateroskleróza, restenóza, angiogenéze, diabetická retinopatie, psoriáza a endometrióza.

Objevili jsme skupinu bicyklických pyrimidinových analogů, které jsou silnými inhibitory na cyclinu závislých kináz (CDK) a tyrosin kináz. Sloučeniny se snadno připraví a mohou být podávány různými cestami, včetně orální, parenterální a mají malou nebo žádnou toxicitu.

Sloučeniny podle vynálezu jsou členy třídy sloučenin obecného vzorce I

a jejich farmaceuticky přijatelné soli kde:

přerušovaná čára znamená případnou dvojnou vazbu;

Z je N nebo CH;

G je N nebo CH;

W je NH, S, SO nebo S0₂;

X je bud' 0, S nebo NR¹⁰;

R¹ a R² a R¹⁽} jsou nezávisle vybrány ze souboru, který zahrnuje H, (CH2)nAr, COR⁴, (CH2)_nheteroaryl, (CH₂)_nheterocyklyl, C-_L-C₁₀ alkyl, C₃-C₁₀ cykloalkyl, ^C2^-C1O ^alkenyl ^{a c}2^cl0 alkinyl, kde n je 0, 1, 2 nebo 3 a (CH2)nAr, (CH2)nheteroaryl, alkyl, cykloalkyl, alkenyl a alkinylové skupiny jsou případně substituovány až do 5 skupinami vybranými ze souboru, který zahrnuje NR⁴R^, N(0)R⁴R^, NR⁴R^R®Y, alkyl, fenyl, substituovaný fenyl, (CH2)_nheteroaryl, hydroxy, alkoxy, fenoxy, thiol, thioalkyl, halogen, COR⁴,

CO₂R⁴, CONR⁴R⁵, SO2NR⁴R⁵, SO3R⁴, P03R⁴, aldehyd, nitril, nitro, heteroaryloxy, T(CH2)_mQR⁴,

Φ •

· e

OR⁵

I

T(CH₂)_mC-(CH₂)_mQR⁴,

I

H

C(O)T(CH₂)_mQR⁴, NHC(O)T(CH2)mQR⁴, T(CH2)_mC(O)NR⁴NR⁵nebo T(CH₂)_mCO₂R⁴, kde každé m je nezávisle 1 až 6 a T je O, S, NR⁴, N(0)R⁴, NR⁴R⁶Y nebo CR⁴R⁵ a Q je O, S, NR⁵, N(O)R⁵ nebo NR⁵R⁶Y;

když přerušovaná čára je přítomna, R není přítomno;

jinak R³ má významy R², kde R² má význam definovaný shora, a rovněž OH, NR⁴R⁵, C00R⁴, OR⁴, C0NR⁴R⁵, SO₂NR⁴R⁵,

SO₃R⁴, PO3R⁴, T(CH2)_mQR⁴,

OR⁵ i

T(CH₂)_mC-(CH₂)_mQR⁴,

I

H kde T a Q mají význam uvedený shora;

R⁴ a R⁵ se vždy nezávisle zvolí ze souboru, který zahrnuje vodík, Cg-Cg alkyl, substituovaný alkyl, C₂-Cg alkenyl, C₂-Cg alkinyl, N(C-^-Cgalkyl) _{χ nebo 2}, (CH₂)_nAr, ^c3^cio cykloalkyl, heterocyklyl a heteroaryl nebo R⁴ a R⁵ společně s atomem dusíku ke kterému jsou vázány případně tvoří kruh mající 3 až 7 atomů uhlíku a uvedený kruh případně obsahuje 1, 2 nebo 3 heteroatomy vybrané ze souboru, který zahrnuje dusík, substituovaný dusík, kyslík a síru;

když R⁴ a R⁵ společně s atomem dusíku, ke kterému jsou vázány tvoří kruh, je uvedený kruh případně substituován 1 až 3 skupinami vybranými ze souboru, který zahrnuje OH, OR⁴, NR⁴R⁵, (CH2)mOR⁴, (CH2)_mNR⁴R⁵, T-(CH₂)_mQR⁴,

CO-T-(CH₂)_mQR⁴, NH(CO)T(CH2)mQR⁴, T-(CH2)_mCO₂R⁴, nebo

T(CH₂)_mCONR⁴R⁵.

R ⁶ je alkyl;

φφφφ *

- 5 -·· • · · · * t < φφφ # φφφ • · φ · · » • « φφφφ · • · φ φφφ φφφ φφ φφφ

R⁸ a R⁹ jsou nezávisle Η, alkyl, NR⁴R⁵, N(O)R⁴R⁵,

NR⁴R⁵R⁸Y, hydroxy, alkoxy, thiol, thioalkyl, halogen, cor⁴, co2r⁴, conr⁴r⁵, so2nr⁴r⁵, so3r⁴, po3r⁴, CHO, CN nebo N0₂;

když je přerušovaná čára nepřítomná, R⁹ je dále karbonyl, thiokarbonyl, imin a substituovaný imin, oxim a oximether, a

Y je halogenový protiion.

Ve výhodném provedení předkládaný vynález poskytuje sloučeniny obecného vzorce II, III a IV

II

R‘

III

IV kde R¹, R², R³, W, R⁸ a R⁹ mají význam uvedený shora.

Další výhodné sloučeniny mají shora uvedené vzorce, kde W je NH. Rovněž jsou výhodné ty sloučeniny, kde R¹ je substituovaný alkyl, fenyl nebo pyridyl.

-·* • ·'

Předkládaný vynález dále poskytuje farmaceutické formulace, zahrnující sloučeninu obecného vzorce I společně s farmaceuticky přijatelným nosičem, ředidlem nebo excipientem.

Sloučeniny, které spadají do rozsahu předkládaného vynálezu jsou inhibitory na cyclinu závislých kináz, jako je cdk2, cdc2 a cdk4. Některé ze sloučenin podle vynálezu rovněž inhibuji růstovým faktorem zprostředkované tyrosin kinázy, zahrnující růstový faktor odvozený od krevních destiček (PDGF), fibroblastový růstový faktor (FGF) a epidermální růstový faktor (EGF) a rovněž nereceptorové tyrosin kinázy, jako je c-Src. Jako inhibitory na cyclinu závislých tyrosin kináz, tyrosin kináz zprostředkovaných růstovým faktorem a nereceptorových tyrosin kináz, jsou sloučeniny podle vynálezu užitečné při kontrole proliferačních chorob, jako je rakovina, psoriáza, buněčná proliferace vaskulárních hladkých svalů spojená s aterosklerózou, diabetická retinopatie a angiogenéze a postchirurgická vaskulární stenóza a restenóza u savců.

Dalším provedením předkládaného vynálezu je léčení subjektů, kteří trpí nemocemi způsobenými buněčnou proliferací. Metoda spočívá v inhibici proliferace tumorigenních buněk epitheliálního původu a vaskulární proliferace hladkých svalů a/nebo buněčné migrace, podáním terapeuticky účinného množství sloučeniny obecného vzorce I v případě potřeby takové léčby.

Další provedení předkládaného vynálezu spočívá v metodě léčby subjektů trpících nemocemi způsobenými DNA nádorovými viry jako je herpes virus.

Objevili jsme novou třídu sloučenin, které jsou silnými inhibitory na cyclinu závislých kináz a tyrosinkináz, které jsou užitečná činidla pro léčení subjektů trpících nemocemi způsobenými abnormální buněčnou proliferací.

Sloučeniny spadající do rozsahu předkládaného vynálezu jsou inhibitory na cyclinu závislých kináz, jako cdc2, cdk2 a cdk4 a tyrosin kináz, jako PDGF_r, FGF_r a c-Src. Jako inhibitory těchto kináz jsou sloučeniny podle vynálezu užitečné při regulaci proliferačních chorob, jako je rakovina, psoriáza, proliferace vaskulárních hladkých svalů spojená s aterosklerózou, postchirurgická vaskulární stenóza, angiogenéze, diabetická retinopatie a restenóza u savců.

Sloučeniny podle vynálezu jsou třídou sloučenin obecného vzorce I:

a jejich farmaceuticky přijatelných solí, kde přerušovaná čára znamená případnou dvojnou vazbu;

Z je N nebo CH;

G je N nebo CH;

W je NH, S, SO nebo S0₂;

X je bud' O, S nebo NR¹⁰;

R¹ a R² a R¹⁰ jsou nezávisle vybrány ze souboru, který zahrnuje H, (CH2)nAr, COR⁴, (CH2)_nheteroaryl, (CH₂)_nheterocyklyl, ^ci~C10 alkyl, C3-C1Q cykloalkyl, C2-Cio alkenyl a C2-C10 alkinyl, kde n je 0, 1, 2 nebo 3 a (CH2)nAr, (CH2)nheteroaryl, alkyl, cykloalkyl, alkenyl a alkinylové skupiny jsou případně substituovány až do 5 skupinami vybranými ze souboru, který zahrnuje NR⁴R⁵, N(O)R⁴R⁵, NR⁴R⁵R^Y, alkyl, fenyl, substituovaný fenyl, (CH2)_nheteroaryl, hydroxy, alkoxy, fenoxy, thiol, thioalkyl, halogen, COR⁴,

CO₂R⁴, CONR⁴R⁵, SO2NR⁴R⁵, SO3R⁴, PO3R⁴, aldehyd, nitril, nitro, heteroaryloxy, T(CH2)_mQR⁴,

0R5

I

T(CH₂)_mC-(CH2)_mQR'',

I

H

C(O)T(CH₂)_mQR⁴, NHC(O)T(CH2)mQR⁴, T (CH2) _mC (O) NR⁴NR⁵nebo T(CH₂)_mCO₂R⁴, kde každé m je nezávisle 1 až 6 a T je 0, S, NR⁴, N(0)R⁴, NR⁴R⁶Y nebo CR⁴R⁵ a Q je 0, S, NR⁵, N(0)R⁵ nebo NR⁵R⁶Y;

když přerušovaná čára je přítomna, R^ není přítomno;

o 9 9 >

jinak (když-----není přítomna R ma vyznamy R , kde R ma význam definovaný shora, a rovněž OH, NR⁴R⁵, COOR⁴, OR⁴, C0NR⁴R⁵, SO2NR⁴R⁵, SO3R⁴, P03R⁴, T(CH2)_mQR⁴,

0R5

I

T(CH₂)_mC-(CH₂)_mQR⁴

I

H kde T a Q mají význam uvedený shora;

R⁴ a R⁵ se vždy nezávisle zvolí ze souboru, který zahrnuje vodík, C-^-Cg alkyl, substituovaný alkyl, C₂-Cg alkenyl, C₂-C_g alkinyl, N(C₁-C₆alkyl)_{χ nebo 2}' (CH₂)_nAr, C₃-C₁₀ cykloalkyl, heterocyklyl a heteroaryl nebo R⁴ a R⁵ společně s atomem dusíku ke kterému jsou vázány případně tvoří kruh mající 3 až 7 atomů uhlíku a uvedený kruh případně obsahuje 1, 2 nebo 3 heteroatomy vybrané ze souboru, který zahrnuje dusík, substituovaný dusík, kyslík a síru;

když R⁴ a R⁵ společně s atomem dusíku, ke kterému jsou vázány tvoří kruh, je uvedený kruh případně substituován 1 až 3 skupinami vybranými ze souboru, který zahrnuje OH, OR⁴, NR⁴R⁵, (CH2)m0R⁴, (CH2)_mNR⁴R⁵, T-(CH₂)_mQR⁴,

CO-T-(CH₂)_mQR⁴, NH(CO)T(CH2)mQR⁴ T-(CH2)_mC0₂R⁴ nebo T(CH₂)_mCONR⁴R⁵.

R⁶ je alkyl;

R⁸ a R⁹ jsou nezávisle H, alkyl, NR⁴R⁵, N(O)R⁴R⁵,

NR⁴R⁵R⁶Y, hydroxy, alkoxy, thiol, thioalkyl, halogen,

COR⁴, co2r⁴, conp⁴r⁵, so2nr⁴r⁵, so3r⁴, po3r⁴, cho, cn nebo NO₂;

Y je halogenový protiion.

Zvlášť, výhodná skupina sloučenin má shora uvedený vzorec, kde X je 0.

Další výhodnou skupinou sloučenin jsou ty sloučeniny, kde W je NH.

Výhodná skupina sloučenin obecného vzorce I má shora uvedený vzorec, kde X je 0 nebo NHR¹⁸ a R³ je H nebo substituovaný aryl.

Rovněž jsou výhodné sloučeniny obecného vzorce I, kde R⁸ a R⁹ jsou oba vodík.

Další výhodná skupina sloučenin obecného vzorce I má shora uvedený vzorec, kde X je 0 a R² je Et, Pr, i-Pr, i-Bu, i-pentyl nebo cykloalkyl. Ve zvlášť výhodné skupině

O , sloučenin, X je 0, R je cyklopentyl nebo ethyl.

V ještě další výhodné skupině sloučenin obecného vzorce I X je 0, W je NH a R¹ je alkyl, substituovaný alkyl, fenyl nebo substituovaný fenyl, pyridyl nebo substituovaný pyridyl. Výhodně R¹ jako substituované fenylové skupiny zahrnuje 4-piperidinyl (substituovaný nebo nesubstituovaný),

4-(2-diethylaminoethoxy), 4-pyrrol, 4-pyrazol a

4-(4-methylpiperazin-l-yl). Ve zvlášť výhodné skupině sloučenin, X je 0, R¹ je fenyl substituovaný hydroxy, alkoxy, NR⁴R⁵ nebo T(CH2)mQR⁴, kde R⁴ a R⁵, T, m a Q mají význam uvedený shora. Ještě výhodnější skupina sloučenin jsou sloučeniny, kde X je 0 a R¹ je fenyl substituovaný s NR⁴R^ nebo T(CH2)_mQR⁴, kde R⁴, R⁵, T, m a Q mají význam uvedený shora.

Další výhodná skupina sloučenin obecného vzorce I jsou ty sloučeniny, kde X je NH.

Další výhodná skupina sloučenin jsou pyrimido[4,5-d] pyrimidiny obecného vzorce I, kde Z je N.

Zvlášť. výhodná skupina sloučenin podle vynálezu jsou sloučeniny, které mají obecný vzorec II, III, a IV

kde R¹, R², R³, W, R⁸, R⁹ a X mají význam uvedený shora. Další výhodná skupina sloučenin má shora uvedené vzorce, kde W je NH. Rovněž jsou výhodné ty sloučeniny, kde R¹ je alkyl, substituovaný fenyl nebo pyridyl.

Další výhodné sloučeniny podle vynálezu mají obecný vzorec V:

V

Ατ-

Η R² kde R² má význam uvedený shora, Ar je fenyl, substituovaný fenyl nebo heteroaryl. Ideálně, R² je alkyl, jako je ethyl, isopropyl, propyl, butyl nebo isopentyl nebo cykloalkyl, jako je norbornyl, cyklopentyl, cyklohexyl nebo adamantyl. Nejvýhodněji Ar skupina je fenyl, výhodně substituovaný 1, 2 nebo 3 skupinami vybranými ze souboru, který zahrnuje fenyl, chlor, brom, methyl, methoxy, hydroxy, hydroxymethyl, 2-diethylaminoethoxy, methoxykarbonylmethyl, karboxy, karboxymethyl, ethoxykarbonyl, 2-karboxyethyl,

2-ethoxykarbonylethyl, NR⁴R⁵ a 0 (Cí^) Q_gNR⁴R^, kde R⁴ a R^ mají význam definovaný shora. Další výhodná skupina Ar je pyridyl a thiazolyl, například 3-pyridyl, 2-thiazolyl, přičemž každá tato skupina je případně substituovaná substituenty vybrané ze souboru, který zahrnuje alkyl, halogen, fenyl, hydroxyfenyl nebo alkoxyfenyl.

Další výhodné sloučeniny mají obecný vzorec VI aryl alkyl —N heteroaryl

VI kde alkyl, Ar, aryl, heteroaryl, R a X mají vyznám uvedený shora. Zejména výhodné sloučeniny obecného vzorce VI jsou ty sloučeniny, kde X je 0 nebo NHCOR⁴, například NHCO alkyl a NHCONH alkyl. Výhodné arylové skupiny jsou fenyl a substituovaný fenyl. Výhodné heteroarylové skupiny jsou pyridyl a substituovaný pyridyl.

Sloučeniny obecného vzorce I, kde W je S, SO, nebo S0₂jsou zejména výhodné jako meziprodukty vedoucí ke

sloučeninám, kde W je NH, ale takové sloučeniny rovněž vykazují aktivitu vůči na cyclinu závislé kináze a tyrosin kináze.

Pokud není uvedeno jinak, platí v předkládaném vynálezu následující definice.

Alkyl znamená uhlovodíkovou skupinu s přímým nebo rozvětveným řetězcem, majícím 1 až 10 atomů uhlíku (pokud není uvedeno jinak) a zahrnuje například methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, sek.butyl, isobutyl, terc.butyl, n-pentyl, isopentyl, n-hexyl a podobně.

Halogen zahrnuje fluor, chlor, brom a jod.

Alkenyl znamená uhlovodíkovou skupinu s přímým nebo rozvětveným řetězcem, mající 2 až 10 atomů uhlíku a jednu nebo dvě dvojné vazby a zahrnuje například ethenyl, 3-buten-l-yl,

2-ethenylbutyl, 3-hexen-l-yl, 3,6-oktadien-l-yl a podobně.

Alkinyl znamená uhlovodíkovou skupinu s přímým nebo rozvětveným řetězcem mající 2 až 10 atomů uhlíku a jednu nebo dvě trojné vazby a zahrnuje například ethinyl, 3-bitun-l-yl, propinyl, 2-butin-l-yl, 3-pentin-l-yl, 3,6-oktadien-l-yl a podobně.

Cykloalkyl znamená monocyklickou nebo polycyklickou uhlovodíkovou skupinu, jako je cyklopropyl, cykloheptyl, cyklooktyl, cyklodecyl, cyklobutyl, adamantyl, norpinanyl, dekalinyl, norbornyl, cyklohexyl a cyklopentyl. Takové skupiny mohou být substituované skupinami, jako je hydroxy, keto a podobně. Rovněž jsou zahrnuty kruhy, kde 1 až 3 heteroatomy nahradí atomy uhlíku. Takové skupiny se nazývají heterocyklyl, což znamená, že cykloalkylová skupina také obsahuje alespoň jeden heteroatom vybraný z O, S nebo NR₂ ·

Jako příklady se uvádějí oxiranyl, pyrrolidinyl, piperidyl, tetrahydropyran a morfolin.

Alkoxy znamená alkylová skupiny uvedené shora, které jsou vázané přes kyslík, jako příklady se uvádějí methoxy, ethoxy, isopropoxy, terc.butoxy a podobně. Dále, alkoxy se také týká polyetherů, jako -0-(CH₂)₂-O-CH₂ a podobně.

Alkanoylové skupiny jsou alkylová skupiny vázané přes karbonylovou skupinu, tj. C₁-Cg-C(O)-. Takové skupiny zahrnují formyl, acetyl, propionyl, butyryl a isobutyryl.

Acyl znamená alkylovou nebo arylovou skupinu vázanou přes karbonylovou skupinu, tj. R-C(O)-. Například acyl zahrnuje C₁-C₁₀ alkanoyl, zahrnující substituovaný alkanoyl, kde alkylová část může být substituována NR⁴R⁵ nebo karboxylovou nebo heterocyklickou skupinou. Typické acylové skupiny zahrnují acetyl, benzoyl a podobně.

Alkylové, alkenylové, alkoxy a alkinylové skupiny popsané shora jsou případně substituovány, výhodně 1 až 3 skupinami vybranými ze souboru, který zahrnuje NR⁴R⁵, N(O)R⁴R⁵, NR⁴R⁵R⁶Y, fenyl, substituovaný fenyl, thio C^-CýQ alkyl, ^cl-^cio ^alkoxy# hydroxy, karboxy, C-l-C-lq alkoxykarbonyl, halogen, nitroskupinu, cykloalkyl a 5 nebo 6-členný karbocyklický nebo heterocyklický kruh obsahující 1 nebo 2 heteroatomy vybrané z dusíku, substituovaného dusíku, kyslíku a síry. Substituovaný dusík znamená dusík nesoucí C₁-C₁q alkyl nebo (CH₂)_nPh, kde n je 0, 1, 2 nebo 3. Je rovněž zahrnuta perhalogenová a polyhalogenovaná substituce.

Příklady substituovaných alkylových skupin zahrnují 2-aminoethyl, pentachlorethyl, trifluormethyl,

2- diethylaminoethyl, 2-dimethylaminopropyl, ethoxykarbonylmethyl, 3-fenylbutyl, methansulfanylmethyl, methoxymethyl, 3-hydroxypentyl, 2-karboxybutyl, 4-chlorbutyl,

3- cyklopropyl, pentafluorethyl, 3-morfolinopropyl, piperazinylmethyl a 2-(4-methylpiperazin)ethyl.

Příklady alkinylových skupin zahrnují 2-methoxyethinyl,

2- ethylsulfanylethinyl, 4-(1-piperazinyl)-3-(butinyl),

3- fenyl-5-hexinyl, 3-diethylamino-3-butinyl, 4-chlor-3-butinyl,

4- cyklobutyl-4-hexinyl a podobně.

Typické substituované alkoxylové skupiny zahrnují 2-aminoethoxy, trifluormethoxy, 2-diethylaminoethoxy, 2-ethoxykarbonylethoxy, 3-hydroxypropoxy, 6-karboxyhexyloxy a podobně.

Další příklady substituovaných alkylových, alkenylových a alkinylových skupin zahrnují dimethylaminomethyl, karboxymethyl,

4-dimethylamino-3-buten-l-yl, 5-ethylmethylamino-3-pentin-l-yl,

4-morfolinobutyl, 4-tetrahydropyrinidylbutyl, 3-imidazolidin-1-ylpropyl, 4-tetrahydrothiazol-3-ylbutyl, fenylmethyl,

3-chlorfenylmethyl a podobně.

Výraz Ar a aryl se týká nesubstituovaných a substituovaných aromatických skupin. Heteroarylové skupiny mají 4 až 9 atomů v kruhu, z nichž 1 až 4 jsou nezávisle vybrány ze skupin zahrnující 0, S a N. Výhodné heteroarylové skupiny mají 1 nebo 2 heteroatomy v 5- nebo 6-členném aromatickém kruhu. Do definice arylu a heteroarylu jsou také zahrnuty monocyklické a bicyklické kruhové systémy. Typické arylové a heteroarylové skupiny zahrnují fenyl, 3-chlorfenyl,

2.6- dibromfenyl, 2-pyridyl, 3-methyl-2-pyridyl,

3-benzothienyl, 2,4,6-tribromfenyl, 4-ethyl-2-benzothienyl, 2-furanyl, 3,4-diethyl-2-furanyl, 1-naftyl,

4.7- dichlor-2-naftyl, pyrrol, pyrazol, imidazol, thiazol a podobně. Zvlášť: výhodná heteroarylová skupina je pyridyl.

Výhodné Ar skupiny jsou fenyl a fenyl substituovaný 1, nebo 3 skupinami nezávisle vybranými ze souboru, který zahrnuje alkyl, alkoxy, thio, thioalkyl, hydroxy, -COOR , aminoskupinu vzorce -NR⁴R⁵, C0NR⁴R⁵ a T(CH2)mQR⁴ nebo T(CH2)_mCO₂R⁴, kde m je 1 až 6, TjeO, S, NR⁴, N(0)R⁴,

NR⁴R⁶Y, nebo CR⁴R⁵, Q je 0, S, NR⁵, N(0)R⁵, nebo NR⁵R⁶Y, kde R a R mají vyznám uvedený shora a R je alkyl nebo substituovaný alkyl, například methyl, 2-aminomethyl, trichlorethyl, difenylmethyl a podobně. Alkylové a alkoxylové skupiny mohou být substituovány jak je definováno shora. Například typické skupiny jsou karboxyalkyl, alkoxykarbonylalkyl, hydroxyalkyl, hydroxyalkoxy a alkoxyalkyl a podobně.

Sloučenina pode vynálezu bude pojmenována podle následujícího označení jednotlivých poloh.

4

1

9··· 9 99 · 99

9 9 9 9 9 9 9 99

999 99 999 99 999

kde G = CH.

Je třeba vzít v úvahu, že sloučeniny definované shora uvedeným vzorcem mohou existovat v tautomerních formách. Například 2-ketoforma může tautomerizovat na 2-enol, kde R je vodík následovně:

Podobně, 2-iminosloučenina může tautomerizovat na 2-aminosloučeniny následovně:

H

2-Thiony mohou tautomerizovat na thioly následovně:

H

···· · ·Φ • ·· · 9 9 ·· ·· ··· *· ·*·

Všechny tautomerní formy sloučeniny obecného vzorce I až IV jsou uvažovány a jsou zahrnuty do rozsahu předkládaného vynálezu.

Sloučeniny podle vynálezu mohou existovat v nesolvatovaných formách a rovněž v solvatovaných formách, včetně hydratovaných forem. Obecně, solvatované formy, zahrnující hydratované formy jsou ekvivalentní nesolvatovaným formám a jsou zahrnuty do rozsahu předkládaného vynálezu.

Sloučeniny obecného vzorce I jsou dále schopné tvořit farmaceuticky přijatelné formulace, zahrnující soli, včetně, nikoliv však s omezením, kyselé adiční a/nebo bázické soli, solváty a N-oxidy. Vynález také poskytuje farmaceutické formulace zahrnující sloučeninu obecného vzorce I společně s farmaceuticky přijatelným nosičem, ředidlem nebo excipientem. Všechny tyto formy jsou součástí vynálezu.

Farmaceuticky přijatelné kyselé adiční soli sloučenin obecného vzorce I zahrnují soli odvozené od anorganických kyselin, jako je kyselina chlorovodíková, dusičná, fosforečná, sírová, bromovodíková, jodovodíková, fosforečná a podobně, rovněž soli odvozené od organických kyselin, jako jsou alifatické mono- a dikarboxylové kyseliny, fenyl-substituované alkanové kyseliny, hydoxyalkanové kyseliny, alkandiové kyseliny, aromatické kyseliny, alifatické a aromatické sulfonové kyseliny, atd. Takové soli tak zahrnují sírany, disírany, hydrogensÍrány, siřičitany, hydrogensiřičitany, dusičnany, fosforečnany, monohydrogenfosforečnany, dihydrogenfosforečnany, metafosforečnany, difosforečnany, chloridy, bromidy, jodidy, acetáty, propionáty, kapryláty, isobutyráty, oxaláty, malonáty, sukcináty, suberáty, sebakáty, fumaráty, maleáty, mandeláty, benzoáty, methylbenzoáty, dinitrobenzoáty, ftaláty, benzensulfonáty, toluensulfonáty, fenylacetáty, citráty, laktáty, maleáty, tartaráty, methansulfonáty a podobně. Zahrnuty jsou rovněž soli aminokyselin, jako jsou argináty, glukonáty, galakturonáty a podobně; viz například, Berge, a kol., Pharmaceutical Salts, J. of Pharmaceutical ·»·· · ·» · ·· · • ·· o * ·« · ·· • · ·»» ··· • ···· ···· · ··· ··« ··· ·· ··· ·· ··· ·· ···

Science, 1977; 66:1-19.

Kyselé adiční soli bázických sloučenin se připraví kontaktem volné báze s dostatečným množstvím žádané kyseliny konvenčním způsobem. Volná báze může být regenerována kontaktem soli s bází a izolací volné báze konvenčním způsobem. Volné bázické formy se liší od svých příslušných solí v určitých fyzikálních vlastnostech, jako je rozpustnost v polárních rozpouštědlech, jinak jsou však soli z hlediska vynálezu ekvivalentní volným bázím.

Farmakologicky přijatelné soli vznikají s kovy nebo aminy, jako jsou hydroxidy alkalických kovů nebo kovů alkalických zemin nebo organické aminy. Příklady použitých kovů zahrnují sodík, draslík, hořčík, vápník, a podobně. Příklady vhodných aminů zahrnují N, Ν'-dibenzylethylendiamin, chlorprokain, cholin, diethanolamin, ethylendiamin, N-methylglukamin a prokain; viz například Berge a kol., shora.

Bázické adiční soli kyselin se připraví kontaktem volné kyselinové formy s dostatečným množstvím žádané báze konvenčním způsobem za vzniku soli. Volná kyselá forma se může regenerovat kontaktem soli s kyselinou a izolací volné kyseliny konvenčním způsobem. Volné bázické formy se liší od svých příslušných solí v určitých fyzikálních vlastnostech, jako je rozpustnost v polárních rozpouštědlech, jinak jsou však soli z hlediska vynálezu ekvivalentní volným bázím.

Sloučeniny podle vynálezu jsou užitečné pro léčbu rakoviny (například leukémie a rakoviny plic, prsu, prostaty a kůže, jako je melanom) a dalších proliferačních chorob, zahrnující, nikoliv však s omezením, psoriázu, HSV, HIV, restenózu a aterosklerózu. Využití sloučenin podle vynálezu k léčbě rakoviny spočívá v podání pacientovi, který má rakovinu, terapeuticky účinného množství farmaceuticky přijatelného prostředku, zahrnující sloučeninu podle vynálezu.

Dalším provedením předkládaného vynálezu je způsob léčení subjektů, trpících nemocemi způsobenými proliferaci

vaskulárních hladkých svalů. Sloučeniny spadající do rozsahu předkládaného vynálezu účinně inhibuji buněčnou proliferací hladkých svalů a migraci. Způsob způsobuje inhibici proliferace vaskulárních hladkých svalů a/nebo migraci podáním účinného množství sloučeniny obecného vzorce I subjektu, který má být léčen.

Sloučeniny podle vynálezu je možno zpracovávat na celou řadu dávkovačích forem vhodných pro orální a parenterální podávání, včetně transdermálního a rektálního podávání. Takové dávkovači formy obsahují jako účinnou složku sloučeninu obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodnou sůl nebo solvát.

Předmětem vynálezu jsou dále farmaceutické prostředky, jejichž podstata spočívá v tom, že obsahují sloučeninu obecného vzorce I spolu s farmaceuticky vhodným nosičem, ředidlem nebo excipientem. Při výrobě farmaceutických prostředků ze sloučenin podle vynálezu se používá inertních farmaceuticky vhodných nosičů, které mohou být pevné nebo kapalné. Jako pevné farmaceutické prostředky je možno uvést prášky, tablety, dispergovatelné granule, pilule, kapsle, oplatky a čípky. Jako pevných nosičů se může používat jedné nebo více látek, které mohou také působit jako ředidla, ochucovadla, pojivá, konzervační činidla a bubřidla. Do rozsahu pojmu nosič se též zahrnují zapouzdřující látky.

V prášcích se jako nosiče používá jemně rozdělené pevné látky, jako je mastek nebo škrob, která je smísena s jemně rozmělněnou účinnou složkou. V tabletách je účinná složka smísena s vhodným množstvím nosiče, který má potřebné pojivové vlastnosti a slisována na požadovanou velikost a tvar.

Prostředky podle vynálezu přednostně obsahují asi 5 až asi 70 % hmotnostních účinné přísady. Jako vhodné nosiče je možno uvést uhličitan hořečnatý, stearát hořečnatý, mastek, laktózu, cukr, pektin, dextrin, škrob, želatinu, tragant, methylcelulózu, sodnou sůl karboxymethylcelulózy, nízkotající vosk, kakaové máslo apod. Předností formou pro orální podávání ··· ·

jsou kapsle, v níž je účinná složka (popřípadě ve směsi s nosiči) zapouzdřena. Tablety, prášky, kapsle, pilule, oplatky a pastilky mohou být používány jako pevné dávkovači formy pro orální podávání.

Pro výrobu čípků se používá nízkotajícího vosku, jako směsi glyceridů mastných kyselin nebo kakaového másla. Tato složka se nejprve roztaví a potom se v ní homogenně disperguje (například mícháním) účinná složka. Roztavená homogenní směs se potom nalije do forem vhodné velikosti, nechá zchladnout a přitom ztuhne.

Prostředky v kapalné formě zahrnují roztoky, suspenze a emulze, například roztoky ve vodě nebo ve směsi vody a propylenglykolu. Pro parenterální injekční kapalné přípravky se hodí roztoky vé vodném roztoku polyethylenglykolu, isotonickém roztoku, 5% vodném roztoku glukózy apod. Vodné roztoky, které se hodí pro orální podávání, je možno vyrábět rozpuštěním účinné složky ve vodě, přičemž se podle potřeby mohou přidat vhodné barvicí látky, příchutě, stabilizátory a zahušťovadla. Vodné suspenze, které se hodí pro orální podávání, je možno vyrábět dispergací jemně rozdělené účinné složky ve vodě a smícháním s viskózní látkou, jako jsou přírodní nebo syntetické pryskyřice, methylcelulóza, sodná sůl karboxymethylcelulózy a jiná dobře známá suspenzní činidla.

Do rozsahu vynálezu spadají také pevné prostředky, které mají být krátce před použitím převedeny na prostředky v kapalné formě vhodné pro orální podávání. Takové kapalné formy zahrnují roztoky, suspenze a emulze. Kromě účinné složky mohou takové prostředky obsahovat barvicí činidla, příchutě, stabilizátory, pufry, umělá a přírodní sladidla, dispergátory, zahušťovadla, solubilizátory apod. Vosky, polymery a podobné látky mohou sloužit pro výrobu forem s prodlouženým uvolňováním. Pro rovnoměrnou prodlouženou dodávku účinné sloučeniny je také možno použít tzv.

osmotických pump.

Farmaceutické prostředky se přednostně vyrábějí jako

jednotkové dávkovači formy. V takové formě je prostředek rozdělen do jednotkových dávek obsahujících vhodné množství účinné sloučeniny. Prostředek obsahující jednotkové dávkovači formy může mít podobu obalu obsahujícího oddělená množství prostředku, například tablet, kapslí nebo prášků v lahvičkách nebo ampulích. Pod pojmem jednotková dávkovači forma se rozumí samotná kapsle, oplatka, tableta nebo pastilka nebo též větší počet kapslí, oplatek, tablet nebo pastilek umístěných v obalu.

Terapeuticky účinná dávka sloučeniny obecného vzorce I a/nebo II bude obvykle ležet v rozmezí od asi 1 mg do asi 100 mg/kg tělesné hmotnosti za den. Obvyklá dávka pro dospělého člověka bude činit asi 50 až asi 800 mg/den.

Množství účinné složky v jednotkové dávkovači formě prostředku podle vynálezu se může měnit a může být nastaveno od asi 0,1 do asi 500,0 mg, přednostně na asi 0,5 až do 100 mg podle konkrétní aplikace a účinnosti zvolené účinné složky. Prostředky podle vynálezu mohou také popřípadě obsahovat jiná kompatibilní terapeutická činidla. Pacientovi, který bude vyžadovat léčení sloučeninou obecného vzorce I, se tato sloučenina bude podávat v dávce od asi 1 do asi 500 mg za den, bud' ve formě jediné dávky nebo ve formě několika dávek rozložených v průběhu 24 hodin.

Sloučeniny podle vynálezu jsou schopné vázat se na a inhibovat aktivitu proteinů, majících schopnost fosforylovat jiné proteiny, jako jsou cdks, PDGFr, c-Src a EGFr-FL. Cdks tvoří komplexy s cycliny a tyto komplexy fosforylují klíčové proteiny a umožňují buňkám postupovat přes buněčný cyklus (Meijer L. Progress in Cell Cycle Research, 1995; 1: 351-363). Sloučeniny podle vynálezu inhibují tuto fosforylaci a mohou být proto použity jakc proliferační činidla pro léčbu rakoviny a/nebo restenózy a dalších proliferačních chorob.

Vzhledem ke své inhibiční aktivitě proti cdks a ostatním kinázám, jsou sloučeniny podle vynálezu také užitečným výzkumným nástrojem pro studium mechanismu působení těchto kináz, jak in vitro, tak in vivo.

Vedle výhodných možností zde uvedených, existuje řada dalších možností. Je třeba vzít v úvahu, že všechny ekvivalentní formy spadají do rozsahu vynálezu. Dále je třeba vzít v úvahu, že výrazy zde použité mají pouze informativní význam a nikoliv význam omezující a odborník může realizovat řadu změn, aniž by došlo k odchylce od myšlenky nebo rozsahu vynálezu.

Následující sloučeniny ilustrují specifické provedení vynálezu a sloučeniny uvedené dále patří mezi výhodné provedení.

l-Methyl-7-[4-(pyrazol-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

l-Methyl-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropirimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

l-Methyl-7- [4-(4-hydroxypiperidin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropirimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-1-on;

l-Methyl-7-{4-[4-(dimethylamino)piperidin-l-yl]fenylamino} -3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

l-Isopropyl-7-[4-(pyrazol-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido [4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1-Isopropyl-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

l-Isopropyl-7-[4·(4-hydroxypiperidin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

l-Isopropyl-7-(4-[4-(dimethylamino)piperidin-l-yl]fenylamino}-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1-Bicyklo[2.2.1]hept-2-yl-7-[4-(pyrazol-l-yl)fenylamino] -3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on (exo);

1-Bicyklo [2.2.1]hept-2-yl-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on (exo);

1-Bicyklo[2.2.1]hept-2-yl-7-[4-(4-hydroxypiperidin-l-yl) fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on (exo);

1-Bicyklo[2.2.1]-hept-2-yl-7-{4-[4-(dimethylamino)piperidin-l-yl]fenylamino}-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on (exo);

····

7-[4-(4-Aminoacetylpiperazin-l-yl)fenylamino] -1-cyklopentyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H) -on;

7-{4-[4-(2-Amino-4-methylpentanoyl)piperazin-l-yl] fenylamino} -l-cyklopencyl-3,4-dihydropyrimido [4,5-d] pyrimidin-2(1H)-on;

l-Methyl-7-{4-[4-(3-morfolin-4-ylpropyl)piperidin-l-yl] fenylamino}-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H) -on;

l-Isopropyl-7-{4- [4-(3-morfolin-4-ylpropyl)piperidin-1-yl] fenylamino}-3,4-dihydropyrimido [4,5-d] pyrimidin-2 (1H) -on;

l-Cyklopentyl-7- {4- [4- (3-morfolin-4-ylpropyl) piperidin-1-yl] fenylamino} -3,4-dihydropyrimido [4,5-d] pyrimidin-2 (1H) -on ;

1-Bicyklo[2.2.1]hept-2-yl-7-{4- [4-(3-morfolin-4-ylpropyl)piperidin-l-yl] fenylamino} -3,4-dihydropyrimido [4,5-d] pyrimidin-2(1H)-on (exo);

l-Cyklopentyl-7-(pyridin-4-ylamino)-3,4-dihydropyrimido [4,5-d]-pyrimidin-2(1H)-on;

l-Cyklopentyl-7- (4-methansulfonylfenylamino) -3,4-dihydropyrimido [4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

l-Cyklopentyl-7-(4-fluoro-3-methylfenylamino)-3,4-dihydropyrimido [4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7- [4-(3-Aminopyrrolidin-l-yl)fenylamino]-1-cyklopentyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]-2(1H)-on;

7-[4-(4-Acetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-1-cyklopentyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

l-Cyklopentyl-7-(4-piperazin-l-yl-fenylamino)-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

l-Cyklopentyl-7-[4-(5-methyl-hexahydropyrrolo[3,4-c] pyrrol-2-yl) fenylamino] -3,4-dihydropyrimido [4,5-d] pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(4-Aminoacetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3-(3,5-dimethoxyfenyl) -l-ethyl-3,4-dihydropyrimido [4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(4-Aminoacetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3- (2-chlor-3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d] pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(4-Aminoacetylpiperazin-l-yl)fenylamino] -3-(2,6• •99

9 9

9

9 9

9

- 23 -dichlor-3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(4-Aminoacetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3-(2-methyl-3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(lH)-on;

7-[4-(4-Aminoacetylpiperazin-l-yl)-fenylamino]-3-(2,6-dimethyl-3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7- [4- (2-Diethylarr.inoethoxy) -fenylamino] -3- (3,5-dimethoxyfenyl) -l-ethyl-3,4-dihydropyrimido [4,5-d]pyrimidin-2 (1H) -on,·

7-[4-(2-Diethylaminoethoxy)fenylamino]-3-(2-chlor-3,5-dimethyoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(2-Diethylaminoethoxy)fenylamino] - 3-(2,6-dichlor-3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(2-Diethylaminoethoxy)fenylamino] -3-(2-methyl-3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(2-Diethylaminoethoxy)fenylamino] -3-(2,6-dimethyl-3,5-dimethoxy-fenyl)-i-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-(4-Diethylaminobutylamino)-3-(3,5-dimethoxyfenyl)-1-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-(4-Diethylaminobutylamino)-3-(2-chlor-3,5-dimethoxyfenyl ) - l-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(H)-on;

7-(4-Diethylaminobutylamino)-3-(2,6-dichlor-3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(lH)-on_;

7-(4-Diethylaminobutylamino)-3-(2-methyl-3,5-dimethoxyfenyl) -l-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d] pyrimidin-2(1H)-on;

7- (4-Diethylaminobutylamino)-3-(2,6-dimethyl-3,5dimethoxy-fenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(lH)-on;

7-(Pyridin-4-ylamino)-3-(3,5-dimethoxyfenyl)-1-ethyl-3,4-dihydroxypyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H) -on;

···· · «> · ·· · • ·· » · ·· * · «· • · ··· ··· · ··«· ·«·· · • · · · · · ··· «· ··· ·· ··· ·· ···

7-(Pyridin-4-ylamino)-3-(2-chlor-3,5-dimethoxyfenyl)-1- ethyl-3,4-dihydropyrimido [4,5-d] pyrimidin-2 (1H) - on;

7-(Pyridin-4-ylamino)-3-(2,6-dichlor-3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-(Pyridin-4-ylamino)-3-(2,6-dimethyl-3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-(Pyridin-4-ylamino)-3-(2-methyl-3,5-dimethoxy-fenyl)-1-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-(Pyridin-4-ylamino)-3-(2,6-dichlor-3,5-dimethoxyfenyl) -l-cyklopentyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)- on ;

3-(2-Chlor-3,5-dimethoxyfenyl)-7-(4-diethylaminobutylamino)-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

3-(2-Chlor-3,5-dimethoxyfenyl)-7-[4-(2-diethylaminoethoxy)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2 (1H) -on;

3-(2-Chlor-3,5-dimethoxyfenyl)-7-(pyridin-4-ylamino)-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

3-(3,5-Dimethoxyfenyl)-7-(pyridin-4-ylamino)-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(2-Diethylamino-ethoxy)fenylamino] - 3-(3,5-dimethoxyfenyl) -3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

3-(2,6-Dichlor-3,5-dimethoxyfenyl) -7-(pyridin-4-ylamino)-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

3-(2,6-Dichlor-3,5-dimethoxyfenyl)-7-[4-(2-diethylaminoethoxy) fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d] pyrimidin-2(1H)-on;

7-[3-(Karboxy)fenylamino]-3-(2,6-dichlorfenyl)-1-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-[3-(N-Dimethylaminopropylkarboxamid)fenylamino]-3- (2,6-dichlorfenyl)-1-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(lH)-on;

7-[3-(N-Dimethylaminopropylkarboxamid)fenylamino]-3- (2,6-dichlor-3-hydroxyfenyl)-1-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d] pyrimidin-2(1H)-on;

7-[3-(Karboxy)fenylamino]-3-(2,6-dichlor-3-hydroxyfenyl)-1-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

3-(2,6-Dichlorfenyl)-7-[4-(2-ethylaminoethoxy)25

fenylamino] -l-methyl-3,4-dihydropyrimido [4,5-d] pyrimidin-2(lH)-on;

3-(2,6-Dichlor-3-hydroxyfenyl)-7-[4-(2-ethylaminoethoxy)fenylamino] -l-methyl-3,4-dihydropyrimido [4,5-d] pyrimidin-2(lH)-on;

7-[4-(Karboxamid)fenylamino]-3-(2,6-dichlorfenyl)-1-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(IH) -on;

7-[4-(Karboxamid)fenylamino]-3-(2,6-dichlor-3-hydroxyfenyl)-l-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(IH)-on;

3-(2,6-Dichlorfenyl)-7-(3-hydroxymethylfenylamino)-1-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(IH)-on;

-(2,6-Dichlorfenyl)-7-(4-morfolin-4-yl-fenylamino)-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(IH)on;

3-(2,6-Dichlor-3-hydroxyfenyl)-l-methyl-7-(4-morfolin-4-yl-fenylamino)-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(IH) - on;

3-(2,6-Dichlor-3-hydroxyfenyl)-7-(3-hydroxymethylfenylamino) -l-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(IH)-on;

7-[4-(3-Karboxypropyl)fenylamino]-3-(2,6-dichlorofenyl)-l-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(IH) -on;

7-[4-(3-Karboxypropyl)fenylamino]-3-(2,6-dichlor-3- hydroxy fenyl) -l-methyl-3,4-dihydropyrimido (4,5-d] pyrimidin-2(IH)-on;

3-(2,6-Dichlorfenyl)-7-[4-(formylfenylamino] -1-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(IH)-on;

3- (2,6-Dichlor-3-hydroxyfenyl)-7-[4-(formylfenylamino]-l-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(IH) -on;

1-Methyl-7-[4-(pyrazol-1-yl)fenylamino]pyrimido[4,5-d] pyrimidin-2(IH)-on;

l-Methyl-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(IH)-on;

1-Methyl-7-[4-(4-hydroxypiperidin-l-yl)fenylamino]pyrimido [4,5-d]pyrimidin-2(IH)-on;

l-Methyl-7-{4- [4- (dimethylamino)piperidin-l-yl] fenylamino} pyrimido [4,5-d]pyrimidin-2(IH)-on;

l-Isopropyl-7-[4-(pyrazol-1-yl)fenylamino] pyrimido26 • · · · · [4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1-Isopropyl-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1-Isopropyl-7-[4-(4-hydroxypiperidin-l-yl)fenylamino]pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-on;

1-Isopropyl-7-{4-[4-(dimethylamino)piperidin-l-yl]fenylamino}pyrimido [4,5-d]pyrimidin-2(1H) -on;

1-Bicyklo [2.2.1]hept-2-yl-7-[4-(pyrazol-l-yl)fenylamino]pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on (exo);

1-Bicyklo[2.2.1]hept-2-yl-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H) -on (exo);

1-Bicyklo[2.2.1]hept-2-yl-7-[4-(4-hydroxypiperidin-l-yl)fenylamino]pyrimido [4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on (exo);

1-Bicyklo[2.2.1]hept-2-yl-7-{4-[4-(dimethylamino)piperidin-l-yl] fenylamino}pyrimido [4,5-d] pyrimidin-2 (1H) -on (exo);

7-[4-(4-Aminoacetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-1-cyklopentylpyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H) -on;

7-{4-[4-(2-Amino-4-methylpentanoyl)piperazin-l-yl]fenylamino}-1-cyklopentylpyrimido [4,5-d]pyrimidin-2 (1H) -on;

l-Methyl-7-{4- [4-(3-morfolin-4-ylpropyl)piperidin-l-yl]fenyl amino} pyrimido [4,5-d] pyrimidin-2 (1H) -on;

1-Isopropyl-7-{4-[4-(3-morfolin-4-ylpropyl)piperidin-1-yl] fenyl amino Jpyrimido [4,5-d] pyrimidin-2 (1H) -on;

l-Cyklopentyl-7-{4- [4-(3-morfolin-4-ylpropyl)piperidin-l-yl] fenylamino}pyrimido [4,5-d] pyrimidin-2 (1H) -on;

1-Bicyklo [2.2.1]hept-2-yl-7-{4-[4-(3-morfolin-4-ylpropyl) piperidin-l-yl] fenyl amino} pyrimido [4,5-d] pyrimidin-2 (1H) -on (exo);

1-Cyklopentyl-7-(4-methansulfonylfenylamino)pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1-Cyklopentyl-7-(4-fluor-3-methylfenylamino)pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(3-Amino-pyrrolidin-l-yl)fenylamino]-1-cyklopentylpyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1-Cyklopentyl-7- (4-piperazin-1-ylfenylamino)pyrimido27

[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

l-Cyklopentyl-7-[4-(5-methylhexahydropyrrolo[3,4-c]pyrrol-2-yl)fenylamino]pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(4-Acetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-1-cykloheptylpyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

l-Cyklopentyl-7-(pyridin-4-ylamino)pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2 (1H)-on,·

1-[7-(4-Fluorfenylamino)pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-yl]-3-methylmočovina;

l-Isopropyl-3-(7-fenylaminopyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-yl)močovina;

l-{7-[4-(3-Aminomethylpyrrolidin-l-yl)fenylamino]pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-yl}-3-isopropylmočovina;

l-Isopropyl-3-[7-(4-piperazin-l-yl-fenylamino)pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-yl]močovina;

l-{7-[4-(4-Acetyl-piperazin-l-yl)-fenylamino]pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-yl}-3-isopropylmočovina;

N-{7-[4-(3-Aminopyrrolidin-l-yl)fenylamino] pyrimido[4, 5-d]pyrimidin-2-yl}-3-methylbutyramid;

N-[7-(4-Piperazin-1-yl-fenylamino)pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-yl]isobutyramid;

N-{7-[4-(4-Acetylpiperazin-l-yl)fenylamino]pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-yl}-3-methylbutyramid;

3-Methyl-N-[7-(pyridin-4-ylamino)pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-yl]butyramid;

l-Isopropyl-3-[7-(pyridin-4-ylaminopyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-yl]močovina;

N-{7-[4-(3-Aminomethylpyrrolidin-l-yl)fenylamino]pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-yl}-3-methylbutyramid;

3-Methyl-N-{7-[4-(5-methylhexahydropyrrol[3,4-c]pyrrol-2-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin}butyramid;

1-{7-[4-(4-Acetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydro pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-yl}-3-isopropylmočovina;

1-[7-[4-(2-Dimethylaminoethoxy)fenylamino]-3-(3,5-dimethoxyfenyl)-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin]-3-ethyl28 ···· » «· · φ· * · · «φφφ ··· ·· ·»· φφ φφφ ·· ··· močovina;

1-{3- (2-Chlor-3,5-dimethoxyfenyl) -7- [4- (2-diethylaminoethoxy) f enylamino] - 3,4-dihydropyrimido [4,5-d] pyrimidin-2-yl}-3-ethylmočovina;

1-terc.Butyl-3-[7-[4-(2-diethylaminoethoxy)fenylamino]-3-(3,5-dimethoxyfenyl) -3,4-dihydropyrimido [4,5-d]pyrimidin2 -y1]močovina;

1-terc.Butyl-3-{2-(2-chlor-3,5-dimethoxyfenyl)-7-[4-(2-diethylaminoethoxy)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-yl}močovina;

1-terc.Butyl-3-[3-(3,5-dimethoxyfenyl)-7-(pyridin-4-ylamino) - 3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-yl] močovina;

1-[3-(3,5-Dimethoxyfenyl)-7-(pyridin-4-ylamino)-3,4-dihydropyrimido [4,5-d] pyrimidin-2-yl] -3-ethylmočovina;

1-terc.Butyl-3- [3-(2-chlor-3,5-dimethoxyfenyl)-7- (pyridin-4-ylamino) -3,4-dihydropyrimido [4,5-d] pyrimidyl-2-yl] močovina;

1-[3-(2-Chlor-3,5-dimethoxyfenyl)-7-(pyridin-4-ylamino)-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-yl]-3-ethylmočovina;

1-[3-(2-Chlor-3,5-dimethoxy-fenyl)-7-(4-diethylaminobutylamino) -3,4-dihydropyrimido [4,5-d] pyrimidin-2 -yl] -3-ethylmočovina ;

1-terc.Butyl-3- [3-(2-chlor-3,5-dimethoxyfenyl)-7-(4-diethylaminobutylamino) - 3,4-dihydropyrimido [4,5-d] pyrimidin-2-yl]močovina;

1-(2-Benzyloxyethyl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino] -3,4-dihydropyrido [4,3-d] pyrimidin-2 (1H) -on;

1-(Thiofen-2-yl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino] -3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H) - on;

1-(Thiofen-2-ylmethyl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino] - 3,4-dihydropyrido [4,3-d] pyrimidin-2 (1H) -on;

1-(Tetrahydrofuran-2-yl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino] -3,4-dihydropyrido [4,3-d] pyrimidin-2 (1H) -on;

1-(Hexa-2,4-dien-l-yl)-7- [4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino] -3,4-dihydropyrido [4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1-(Prop-2-in-l-yl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)29 • · · · » ·· · · · ··· · ♦ · · · ·· ·· ··· ·· ··· ·· ··· fenylamino]-3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(ÍH)-on;

1-[3-(Dimethylamino)prop-l-yl]-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(ÍH)-on;

1-(3-Hydroxyprop-l-yl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(ÍH)-on;

1-(Pyridin-4-ylmethyl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(ÍH)-on;

1- (3,5-Dimethylhept-l-yl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(ÍH)-on;

3-(3,5-Dimethoxyfenyl)-7-(pyridin-4-ylamino)-l-ethyl-3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(ÍH)-on;

3- (2-Chlor-3,5-.imethoxyfenyl) -7- (pyridin-4-ylamino) -1-ethyl-3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(ÍH)-on;

3-(2,6-Dichlor-3,5-dimethoxyfenyl)-7-(pyridin-4-ylamino)-l-ethyl-3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(ÍH)-on;

3-(2-Methyl-3,5-dimethoxyfenyl)-7-(pyridin-4-ylamino)-1-ethyl-3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(ÍH)-on;

3-(2,6-Dimethyl-3,5-dimethoxyfenyl)-7-(pyridin-4-ylamino) l-ethyl-3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(ÍH)-on;

7-[4-(4-Aminoacetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3-(3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(ÍH) on;

7-[4-(4-Aminoacetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3-(2-chloro-3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(ÍH)-on;

7-[4-(4-Aminoacetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3-(2,6-dichlor-3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrido[4,3-d] pyrimidin-2(ÍH)-on;

7-[4-(4-Aminoacetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3-(2-methyl-3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrido [4,3-d] pyrimidin-2(ÍH)-on;

7-[4-(4-Aminoacetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3-(2,6-dimethyl-3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrido[4,3,d]pyrimidin-2(ÍH)-on;

1-(2-Benzyloxyethyl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]pyrido[4,3-d]pyrimidin-2(ÍH)-on;

1-(Thiofen-2-yl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]pyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1-(Thiofen-2-ylmethyl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]pyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1-(Tetrahydrofuran-2-yl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]pyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1-(Hexa-2,4-dien-l-yl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]pyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1-(Prop-2-in-l-yl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]pyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1-[3-(Dimethylamino)prop-l-yl]-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]pyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1-(3-Hydroxyprop-l-yl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]pyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1-(Pyridin-4-ylmethyl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]pyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1-(3,5-Dimethylhept-l-yl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]pyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1- Cyklopentyl-7-(4-piperazin-l-ylfenylamino)pyrido[4,3-d] pyrimidin-2(1H)-on;

7- [4-(3-Aminopyrrolidin-l-yl)fenylamino]-1-cyklopentylpyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

2- [4-(3-Aminopyrrolidin-l-yl)fenylamino]-8-isopropyl-8H-pyridol[4,3-d]pyrimidin-7-on;

8- Cyklopentyl-2-[4-(hexahydropyrrol[3,4-c]pyrrol-2-yl) fenylamino]-8H-pyrido[4,3-d]pyrimidin-7-on;

2-[4-(4-Acetylpiperazin-1-yl)fenylamino]-8-cyklopentyl-8H-pyrido[4,3-d]pyrimidin-7-on;

N-{2-[4-(4-Aminoacetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-8-cyklopentylpyrido[4,3-d]pyrimidin-7-yl}-2,2-dimethylpropionamid;

N-(2-{4-[4-(2-Amino-4-methylpentanoyl)piperazin-l-yl]fenylamino}-8-cyklopentylpyrido[4,3-d]pyrimidin-7-yl)-2,2-dimethylpropionamid;

l-Isopropyl-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]-1H-pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2,4-dion;

7-[4-(2-Diethylaminoethoxy)fenylamino]-1-isopropyl-lH31

-pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2,4-dion;

7-(4-Diethylaminobutylamino)-3-(3,5-dimethoxyfenyl)-1-ethyl-lH-pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2,4-dion;

7-[4-(2-Diethylaminoethoxy)fenylamino] - 3-(3,5-dimethoxyfenyl) -1-ethyl-lH-pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2,4-dion; a

7-(Pyridin-4-ylamino)-3-(3,5-dimethoxyfenyl)-1-ethyl-lH-pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2,4-dion.

Sloučeniny obecného vzorce I, kde Z je n nebo CH se mohou připravit podle způsobů uvedených ve schématech 1 až 3. Ačkoliv tato schémata často indikují exaktní struktury, odborník si je vědom toho, že metody se mohou aplikovat i na analogické sloučeniny obecného vzorce I, za příslušné ochrany funkčních skupin a jejich odstranění standardními způsoby organické chemie. Například hydroxyskupina, aby byla chráněna před nežádoucími vedlejšími reakcemi se obecně převede na etherovou nebo esterovou skupinu během reakcí na ostatních místech molekuly. Ochranná skupina hydroxyskupiny se potom snadno odstraní za poskytnutí volné hydroxyskupiny. Aminoskupina a skupina karboxylové kyseliny jsou před nežádoucími vedlejšími reakcemi podobně derivátizovány.

Typické chránící skupiny a způsob jejich štěpení je popsáno Greene-m a Wuts-em v Protective Groups in Organic chemistry, John Wiley and Sons, New York, (2. vyd., 1991), a McOmie-m v Protective Groups in Organic Chemistry, Plenům Press, New York, 1973.

Schéma 1 popisuje typický způsob přípravy bicyklických pyrimidinu a bicyklických 3,4-dihydropyrimidinů podle vynálezu. Příprava začíná z 4-chlor-2-(methylthio)-5-pyrimidinkarbonitrilu nebo 4-chlor-6-(methylthio)-3-pyridinkarbonitrilu, které se snadno připraví z obvyklých reakčních složek.

Náhrada 4-chlorskupiny s aminoskupinou v rozpouštědle jako je tetrahydrofuran (THF) v přítomnosti nebo nepřítomnosti terciárních aminů, jako je triethylamin poskytuje odpovídající 4-amino-2-(methylthio)-5-pyrimidinkarbonitril nebo

4-amino-6-(methylthio)-3-pyridinkarbonitril. Použitý amin • · * · · « ♦ · • ·· · · · · · · · • · # · · ··» · · »» · může být bezvodý nebo ve vodném roztoku, s methyl nebo ethylaminem nebo cyklopentylaminem. Použití vodného hydroxidu amonného poskytuje odpovídající primární amin v poloze 4. Redukcí kyanoskupiny s obvyklým redukčním činidlem, jako je LAH se získá odpovídající aminomethylový analog. Cyklizace se provede reakcí s činidlem, jako je 1,1'-karbonyldiimidazol (CDI). Oxidací methylthioskupiny s oxidačním činidlem, jako je oxaziridin v rozpouštědle, jako je chloroform, při teplotě místnosti se získá methylsulfoxidový derivát. Nahrazení sulfoxidu s aminem (H₂NR^) vede k tvorbě odpovídajícího 7-amino-3,4-dihydrobicyklického pyrimidinů. Teplota požadovaná pro tuto náhradu závisí na použitém aminu. Aromatické, sekundární a terciární aminy obvykle vyžadují vyšší teplotu než primární alifatické aminy nebo benzylaminy. Jestliže se použijí aromatické aminy, jako anilin, reakce se obvykle provádí s aminem jako rozpouštědlem při vyšší teplotě (například 80 až 150 °C).

Bicyklické 3,4-dihydropyrimidiny se snadno oxidují reakcí s oxidačními činidly, jako je terc.butoxid draselný a kyslík za poskytnutí odpovídajících bicyklických pyrimidinů podle vynálezu.

··· ·· ·

Schéma la popisuje typický způsob přípravy o bicyklických pyrimidinů obecného vzorce I, kde R ₂e H a X je NHR¹⁰. Vhodně substituovaný 2-methylthio-5-aminomethyl-4-aminopyrimidin nejprve reaguje s kyanogenbromidem k cyklizaci na dihydropyrimidopyrimidin. Methylthioskupina se oxiduje na sulfoxid reakcí s oxidačním činidlem, jako je oxaziridin nebo kyselina, perbenzoová. Methylsulfoxidová skupina se snadno vytěsní reakcí s aminem (R¹NH₂) a získá se 7-amino-3,4-dihydrobyciklický pyrimidin mající aminoskupinu ve 2-poloze. Tyto dihydropyrimidiny se snadno konvertují na odpovídající aromatické pyrimidiny oxidací obvyklým oxidačním činidlem, jako je terč.butoxid draselný a kyslík.

2-Aminodihydropyrimidiny a 2-aminopyrimidiny jsou cennými biologickými činidly a také slouží jako meziprodukty, kde 2-aminoskupina je derivatizována standardními způsoby, například alkylací nebo acylací, za poskytnutí sloučenin obecného vzorce 1, kde X je NHR¹⁰, například

II c

\r⁴

- 34 SCHÉMA 1

Z CM z—C4 // v

CM >.

I

CO >» c

^c =3 XJ w -c s'S £S

CO

O

Z o

4J

CM

Z

CM _CM

O

CM

Z o

<ς>

Cl,

Z

H

U o

O l·E o

o

CL

Ó o

O

Schéma 1a

BrCN		3-fenyl-2-(fenyí, 7^h sulfonyl)oxaziridin
MeS	X Λ N

O

·· ··· ·· ··· ·· ···

Schéma lb a lc popisují obecné postupy přípravy bicyklických pyrimidinů obecného vzorce I, kde G je C. Ve schématu lb, 2-rnethylthio-4-halo-5-kyanopyrimidin reaguje s alkylmalonátem v přítomnosti báze, jako je hydrid sodný za vzniku pyrimidylmalonatoveho derivátu. Skupiny R , jako je alkyl a cykloalkyl mohou být zavedeny reakcí pyrimidylmalonátového meziproduktu s alkyl nebo arylhalogenidem v přítomnosti báze, jako je uhličitan sodný nebo triethylamin. 5-Kyanoskupina pyrimidylmalonátového meziproduktu snadno reaguje s redukčním činidlem, za vzniku aminomethýlové skupiny. Aminoskupina se potom vytěsní jednou z alkoxyskupin malonátové části a dojde k uzavření kruhu a vznikne odpovídající dipyridopyrimidin. Dekarboxylace zbývající malonátové karboxylové skupiny se snadno provede reakcí s bází, jako je alkalický hydroxid, za vzniku 2-methylthio-5,6-dihydropyridopyrimidinu. Methyl thioskupina se oxiduje na sulfoxid, který se snadno vytěsní reakcí s aminem (R¹NH₂) a vznikne 2-amino-5,6-dihydropyridopyrimidin. Další oxidací reakcí s alkoxidem alkalického kovu a kyslíkem se získá zcela aromatický 7-hydroxy-pyridopyrimidin obecného vzorce

OH ·· · ·· • · · · · · ·

-^7 ·· ··· ·· · · ·

Schéma 1b

MeS

H

H₉NR'

R- H

»··· · ·· · ·· • ·« ···· · · ·

-♦· ··· ·· ··· ·· ···

Schéma lc znázorňuje typickou konverzi 7-hydroxypyridopyrimidinu připraveném jak bylo popsáno shora na 7-aminosloučeninu obecného vzorce I (X = NHR¹⁰). 7-Hydroxysloučenina nejprve reaguje s oxychloridem fosforečným za,poskytnutí odpovídajícího 7-halopyridopyrimidinu. 7-halo skupina se snadno vytěsní reakcí s aminem jako je amoniak a vznikne 7-aminosloučenina, která může být derivatizována standardními postupy za vzniku pyridopyrimidinu obecného vzorce I, kde X je NHR¹⁰, například NHC(=0)R⁴.

Schéma 1c

···· « •	• ·· •	·· • 9 9 9	• ·· 9	99 9 9 9 9	99
»·	···	99	999	99	99

Schéma 2 znázorňuje mírně odlišný postup přípravy sloučenin podle vynálezu, vycházeje z vhodně substituovaného pyridyl nebo pyrimidylaldehydu obecného vzorce

kde R² je například H nebo alkyl, jako ethyl. Všechny reakce ve schématu 2 se provedou dobře známými postupy. Aldehyd se kondenzuje se substituovaným aminem (H₂NR³) za poskytnutí iminu. Imin se redukuje na sekundární amin a redukovaný amin se cyklizuje a následně se konvertuje na klíčový sulfoxidový meziprodukt. Sulfoxidová skupina se snadno vytěsní reakcí s prakticky jakýmkoliv primárním aminem a získá se sloučenina podle vynálezu obecného vzorce

Schéma 2

Výhodné sloučeniny podle vynálezu mají obecný vzorec I, kde R³ je aryl, jako disubstituovaný, trisubstituovaný nebo tetrasubstituovaný fenyl. Ty se snadno připraví jakýmkoliv shora uvedeným způsobem, například reakcí vhodně substituovaného anilinu s pyridyl nebo pyrimidylaldehydem, jak je znázorněno ve schématu 2. Typické aniliny, které se mohou použít při reakci mají vzorec /==Vz (Substituent)Q_4 ···· · ·· · ·· • ·· · «·· · · · • · ··· · · ··· »« *· · kde substituenty jsou vybrány ze souboru, který zahrnuje fenyl, chlor, brom, methyl, methoxy, hydroxy, hydroxymethyl, 2-diethylaminoethoxy, methoxykarbonylmethyl, karboxy, karboxymethyl, ethoxykarbonyl, 2-karboxyethyl,

2-ethoxykarbonylethyl, NR⁴R⁵ a 0 (CH₂) Q_gNR⁴R⁵, kde R⁴ a R⁵mají význam uvedený shora.

Jak bylo uvedeno shora, výhodné sloučeniny podle vynálezu mají obecný vzorec I, kde X je NR¹⁰ a rovněž ty, kde X je 0. Typické sloučeniny podle vynálezu se připraví podle schématu 3, vycházeje z redukovaného iminu popsaného ve schématu 2 (kde R² = H) . Redukovaný imin se cyklizuje reakcí s kyanogenbromidem a 7-methylthioskupina se oxiduje na odpovídající sulfoxid jak je popsáno shora. Methylsulfoxidová skupina se vytěsní reakcí s primárním aminem (í^NR¹) a následuje derivatizace 2-aminoskupiny reakcí s alkylačními činidly nebo acylačními činidly (například alkylisokyanáty nebo acylhalogenidy) a získají se sloučeniny podle vynálezu obecného vzorce I, kde Z je NHR ^u, například,

Všechny sloučeniny podle vynálezu se snadno čistí standardními metodami, je-li to žádoucí. Typické čištění zahrnuje použití chromatografie přes pevný nosič, jako je silikagel nebo alumina. Eluce se obvykle provádí za využití obvyklých rozpouštědel, jako jsou aceton, ethylacetát, tetrahydrofuran, ethanol, triethylamin a směsi takových rozpouštědel. Mohou být využity i další postupy čištění, jako je například krystalizace z obvyklých rozpouštědel jako jsou methanol, ethanol, diethylether, ethylacetát a podobně. Někdy se takovou krystalizací mohou získat solváty, jako ethanolsolvát nebo hydráty, a všechny takové solváty a hydráty jsou zahrnuty do rozsahu předkládaného vynálezu.

Shora uvedená reakční schémata jsou dále posána následujícími příklady provedení, které jsou uvedeny pouze pro ilustraci a v žádném případě neomezují rozsah vynálezu.

Přípravy 1 až 10 a příklady 1 až 47 jsou specifickým provedením obecných reakčních schémat uvedených ve schématu l shora.

Příklady provedení vynálezu

Příprava 1

4-Hydroxy-2-(methylthio)-5-pyrimidinkarbonitril

K roztoku 119 g (703 mmol) čerstvě destilovaného ethyl(ethoxymethylen)kyanoacetátu v 800 ml methanolu, o teplotě 5°C, se přidá 108 g (599 mmol) 2-methyl-2-thiopseudomočoviny.

K této směsi se přidá roztok methoxidu sodného připravený rozpuštěním 35,6 g (1,55 mmol) kovového sodíku v 800 ml methanolu. Roztok se zahřeje na teplotu místnosti a míchá se 6 hodin. Potom se nechá stát přes noc a rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku a zbytek se rozpustí v 1,5 1 vody při teplotě 50 °c a za míchání a roztok se za tepla filtruje. Filtrát se okyselí na pH 2 pomocí koncentrované HC1 a udržuje • · · · se přes noc při teplotě místnosti. Vysrážený produkt se sebere a suší se a získá se 48,3 g (48 %) sloučeniny uvedené v názvu, která se použije přímo v dalším stupni.

Příprava 2

4-Chlor-2-(methylthio)-5-pyrimidinkarbonitril

Směs 48,3 g (289 mmol) 4-hydroxy-2-(methylthio)-5pyrimidinkarbonitrilu a 150 ml oxychloridu fosforečného se zahřívá při zpětném toku po dobu 3 hodin. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti, filtruje se a koncentruje se do sucha. Zbytek se rozdělí mezi dichlormethan a ledovou vodu. Organická fáze se promyje vodou, suší se nad síranem hořečnatým a koncentruje se na zbytek, který se zředí 750 ml hexanu. Míchaná směs se zahřívá při zpětném toku a horký hexanový roztok se dekantuje z nerozpustného materiálu. Po ochlazení na teplotu místnosti se se krystaly seberou a získá se 32 g (60 %) sloučeniny uvedené v názvu.

Příprava 3

4-(Cyklopentylamino)-2-(methylthio)-5-pyrimidinkarbonitril

K roztoku 10,0 g (53,9 mmol) 4-chlor-2-(methylthio)-5-pyrimidinkarbonitrilu v 100 ml dichlormethanu, o teplotě 0°C, se přidá 9,0 ml (64,6 mmol) triethylaminu a poté po kapkách 6,4 ml (64,6 mmol) cyklopentylaminu. Reakční směs se uchová při 0 až 10 °C po dobu 16 hodin, zředí se 100 ml hexanu a filtruje se. Filtrát se chromatografuje na silikagelu eluováním směsí ethylacetát/dichlormethan/hexan 1:4:5 a získá se 4,6 g (36 %) produktu. Filtrované pevné látky obsahující produkt a triethylaminhydrochlorid se resuspendují v 50 ml dichlormethanu a chromatografuji způsobem uvedeným shora a získá se 7,2 g (57 %) dalšího produktu, t.t. 119 až 122 °C.

• · · ·

Analýza: Vypočteno pro C_nH₁₄N₄S:

C, 56,38; H, 6,02; N, 23,91.

Nalezeno: C, 56,48; H, 5,99; N, 24,12.

Příprava 4

4-(Isopropylamino)-2-(methylthio)-5-pyrimidinkarbonitril

K roztoku 20,0 g (107,7 mmol) 4-chlor-2-(methylthio)-5-pyrimidinkarbonitrilu v 200 ml dichlormethanu, o teplotě 0°C, se přidá 18,0 ml (129,3 mmol) triethylaminu a poté po kapkách 11,0 ml (129,3 mmol) isopropylaminu. Reakční směs se míchá při teplotě 0 °C po dobu 3 hodin a potom 30 minut při teplotě místnosti. Vzniklá sraženina triethylaminhydrochloridu se filtruje. Filtrát se chromatografuje na krátké koloně silikagelu eluováním s dichlormethanem. Čisté frakce se spojí, koncentrují, suspendují se v hexanu a filtrací se získá 13,7 g (61 %) produktu. Frakce, které nejsou čisté a obsahující jak produkt, tak triethylaminhydrochlorid se zředí ethylacetátem, promyjí se dvakrát vodou a jednou solankou. Organická fáze se suší nad síranem hořečnatým a koncentruje se. Zbytek se krystalizuje ze směsi acetát/hexan 1:9 a získá se 3,6 g (16 %) dalšího produktu, t.t. 121,0 až 122,5 °C Analýza: Vypočteno pro C_gH₁₂ ^Ni4^S:

C, 51,90; H, 5,81; N, 26,90.

Nalezeno: C, 51,80; H, 5,82; N, 26,73.

Příprava 5

4-(Bicyklo[2.2.1]hept-2-ylamino)-2-(methylthio)-5-pyrimidinkarbonitril (exo)

K roztoku 10,0 g (53,9 mmol) 4-chlor-2-(methylthio)-5-pyrimidinkarbonitrilu v 100 g dichlormethanu, o teplotě 0°C, se přidá 9,0 ml (64,6 mmol) triethylaminu a poté po kapkách 7,0 ml (59,3 mmol) exo-2-aminonobordanu. Reakční směs se míchá při 0 •·9· ♦ «9 9 99 · 9 9 9·· 9 9» • «999 · 9 9 · · ·· · · 9 ···

9· ·»· 99 ··· ·· ··· °C po dobu 2 hodin. Vzniklá sraženina triethylaminhydrochloridu se filtruje. Filtrát se promyje třikrát nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Vodná fáze se zpětně extrahuje dvakrát dichlormethanem. Spojené organické fáze se koncentrují a zbytek se čistí filtrací přes krátkou kolonu silikagelu eluováním s dichlormethanem a získá se 8,9 g (64 %) sloučeniny uvedené v názvu.

Analýza: Vypočteno pro ^C13^H16^N4^S:

C, 59,97; H, 6,19; N, 21,52.

Nalezeno: C, 59,70; H, 6,08; N, 21,41.

Příprava 6

4- (Methylamino)-2-(methylthio)-5-pyrimidinkarbonitril

Roztokem 14,5 g (78,1 mmol) 4-chlor-2-(methylthio)-5-pyrimidinkarbonitrilu v 800 ml diethylesteru, o teplotě 5°C, se probublává plynný methylamin po dobu 15 minut. Reakční směs se nechá ohřát na teplotu místnosti, pak se nechá stát přes noc a filtruje se. Pevné podíly se promyjí diethyletherem, potom účinně 50 ml vody a sušením se získá 12,0 g (81 %) sloučeniny uvedené v názvu. t.t. 189 až 190 °C

Analýza: Vypočteno pro C₇HgN₄S:

C, 46,65; H, 4,47; N, 31,09.

Nalezeno: C, 46,79; H, 4,60; N, 31,26.

Příprava 7

5- (Aminomethyl) -4- (cyklopentylamino) -2- (methylthio)pyrimidin

K míchané suspenzi 1,7 g (44,8 mmol) LAH v 70 ml tetrahydrofuranu, o teplotě 0°C, se přidá po kapkách roztok 5,0 g (21,3 mmol) 4-(cyklopentylamino)-2-(methylthio)-5-pyrimidinkarbonitrilu v 250 ml tetrahydrofuranu. Reakční směs se nechá pomalu ohřát přes noc na teplotu místnosti.

Směs se znovu ochladí na 0 °C a působí se na ní nasyceným

9999 9 99 9 99

999 9999 999

999 99 999 99 999 roztokem šíraného amonného dokud již více nešumí. Směs se míchá dalších 15 minut, šedá pevná látka se odfiltruje a promyje se čtyřikrát horkým ethylacetátem. Spojené organické podíly se promyjí a koncentrují a zbytek se chromatografuje na silikagelu eluováním směsí methanol/hexan/chloroform 1:1:8 a získá se 4,0 g (79 %) sloučeniny uvedené v názvu. t.t. 58 až 60 °C.

Analýza: Nalezeno:	Vypočteno	pro C_1;lH₁₈N₄S:
c, : C,	55,43; 55,45;	H, H,	7,61; 7,56;	N, N,	23,51 23,49
Příprava	8

5-(Aminomethyl)-4-(isopropylamino)-2-(methylthio)pyrimidin

K míchané suspenzi 5,9 g (156,3 mmol) LAH v 200 ml tetrahydrofuranu, o teplotě 0°C, se přidá po kapkách roztok 15,5 g (74,4 mmol) 4 -(isopropylamino)-2 -(methylthio)-5 -pyrimidinkarbonitrilu v 500 ml tetrahydrofuranu. Reakční směs se nechá pomalu ohřát na teplotu místnosti přes noc. Směs se znovu ochladí na 0 °C a působí se na ní nasyceným roztokem šíraného amonného dokud již více nešumí. Směs se míchá dalších 15 minut, šedá pevná látka se odfiltruje a promyje se šestkrát horkým ethylacetátem. Spojené organické podíly se promyjí a koncentrují a zbytek se čistí chromatografii ve dvou dílech na 4 x 15 cm silikagelové koloně Biotage eluováním směsí acetonitril/dichlormethan/triethylamin 60:38:2 a poté směsí acetonitril/dichlormethan/methanol/triethylamin 60:33:5:2 a získá se 12,9 g (82 %) sloučeniny uvedené v názvu jako žlutý olej.

Hmotnostní spektrum (Cl) (m+l)/z 213.

Příprava 9

5-(Aminomethyl)-4-(bicyklo[2.2.1]hept-2-ylamino)-2-(methylthio)pyrimidin (exo) • · · ·

- 48 K míchané suspenzi 2,5 g (65,3 mmol) LAH v 100 ml tetrahydrofuranu, o teplotě 0°C, se přidá po kapkách roztok

8,5 g (32,6 mmol) 4-(bicyklo[2.2.1]hept-2-yl-amino)-2-(methylthio)-5-pyrimidinkarbonitrilu v 375 ml tetrahydrofuranu. Reakční směs se nechá pomalu ohřát přes noc na teplotu místnosti. Směs se znovu ochladí na 0 °C a působí se na ní nasyceným roztokem šíraného amonného dokud již více nešumí.

Směs se míchá dalších 15 minut, šedá pevná látka se odfiltruje a promyje se čtyřikrát horkým ethylacetátem.

Spojené organické podíly se promyjí a koncentrují a zbytek se chromatografuje na silikagelu eluováním směsí methanol/dichlormethan 1:9 a potom 2:8 a získá se 5,8 g (68 %) sloučeniny uvedené v názvu.

Analýza: Vypočteno pro ^ci3^H20^N4^S·

C, 59,06; H, 7,62; N, 21,19.

Nalezeno: C, 58,94; H, 7,86; N, 21,04.

Příprava 10

5- (Aminomethyl) -4- (methylamino) - 2- (methylthio) pyrimidin

K míchané suspenzi 17,0 g (448 mmol) lithium aluminium hydridu v 500 ml tetrahydrofuranu, o teplotě 0°C, se přidá po kapkách roztok 30,0 g (166 mmol) 4-(methylamino)-2-(methylthio)-5-pyrimidinkarbonitrilu v 1,5 1 tetrahydrofuranu. Reakční směs se nechá pomalu chřát přes noc na teplotu místnosti.

Směs se znovu ochladí na 0 °C a působí se na ní nasyceným roztokem šíraného amonného dokud již více nešumí (80-100 ml). Směs se míchá dalších 15 minut, šedá pevná látka se odfiltruje a promyje třikrát horkým tetrahydrofuranem a jednou horkým ethylacetátem. Spojené organické podíly se promyjí a koncentrují a zbytek se chromatografuje na silikagelu eluováním směsí triethylamin/methanol/chloroform 0,5:25:75 a získá se 21,6 g (70 %) oleje, který stáním ztuhne na sloučeninu uvedenou v názvu.

Hmotnostní spektrum (Cl) (m+l)/z 185.

Příklad 1 l-Cyklopentyl-7-methansulfanyl-3,4-dihydropyrimido [4,5-d] pyrimidin-2(1H)-on

K roztoku 4,2 g (17,6 mmol) 5-(aminomethyl)-4-(cyklopentylamino)-2-(methylthio)pyrimidinů v 100 ml tetrahydrofuranu, o teplotě 0°C, se přidá 3,4 g (21,1 mmol)

1,1-karbonyldiimidazolu. Roztok se míchá při teplotě 0 °C po dobu 30 minut a potom se zahřívá při mírném zpětném toku přes noc. Směs se koncentruje na pevný zbytek, který se míchá jako suspenze v chloroformu 4 hodiny. Prášková pevná látka se sebere a sušením se získá 2,6 g produktu znečištěného okolo 5 % imidazolu. Filtrát se chromatografuje na silikágelu eluováním směsí ethylacetát/dichlormethan 6:4 a získá se 1,6 g produktu znečištěného okolo 10 % imidazolu. Malá část se krystalizuje z chloroformu a získá se analyticky čistý vzorek sloučeniny uvedené v názvu. t.t. 179 až 182 °C.

Analýza: Vypočteno pro ^C12^H16^N4^OS:

C, 54,52; H, 6,10; N, 21,19.

Nalezeno: C, 54,42; H, 6,11; N, 21,29.

Příklad 2

1- Isopropyl-7-methansulfanyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

K roztoku 12,0 g (56,5 mmol) 5-(aminomethyl)-4-(isopropylamino)-2-(methylthio)pyrimidinů v 300 ml tetrahydrofuranu, o teplotě 0°C, se přidá 11 g (67,8 mmol)

1,1-karbonyldiimidazolu. Roztok se míchá při 0 °C po dobu 30 minut a potom se zahřívá při mírném zpětném toku přes noc. Směs se koncentruje na pevný zbytek, který se rozpustí v chloroformu, promyje se dvakrát IN HC1, vodou, nasyceným «· roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Organická fáze se suší nad síranem hořečnatým a koncentruje se. Surový pevný zbytek se se krystalizuje ze směsi chloroform/hexan a získá se 9,7 g (72 %) sloučeniny uvedené v názvu. t.t. 175,0 až 176,5 °C.

Analýza: Vypočteno pro ^C10^H14^N4^OS:

C, 50,40; H, 5,92; N, 23,51.

Nalezeno: C, 50,35; H, 5,90; N, 23,54.

Příklad 3

1-Bicyklo [2.2.1] -hept-2- yl-7-methansulfanyl-3,4-dihydropyrimido [4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on (exo)

K roztoku 4,6 g (17,6 mmol) 5-(aminomethyl)-4- (bicyklo [2.2.1] hept - 2-yl-amino) -2- (methylthio) pyrimidinů v 100 ml tetrahydrofuranu, o teplotě 0°C, se přidá 3,7 g (22,7 mmol) 1,l-karbonyldiimidazolu. Roztok se míchá při 0 °C po dobu 30 minut, při teplotě místnosti po dobu 2 hodin a potom se zahřívá při mírném zpětném toku 48 hodin. Směs se zředí solankou a extrahuje se diethyletherem. Organická fáze se koncentruje a zbytek se čistí chromatografii na silikagelu eluováním směsí methanol/dichlormethan 5:95 a potom 10:90 a získá se 2,2 g (85 %·) sloučeniny uvedené v názvu. t.t. 133 až 134 °C.

Analýza: Vypočteno pro ^αΐ4^Η18^Ν4θ^:

C, 57,91; H, 6,25; N, 19,29.

Nalezeno: C, 57,61; H, 6,09; N, 19,12.

Příklad 4

7-Methansulfanyl-1-methyl-3,4-dihydropyrimido [4,5-d] pyrimidin-2(1H)-on

K roztoku 21,2 g (152,2 mmol) 5-(aminomethyl)-4-(methylamino)-2-(methylthio)pyrimidinů v 900 ml tetrahydrofuranu a 100 ml dimethylformadidu, o teplotě 0°C, se přidá 3,4 (21,2 mmol) 1,1'-kařbonyldiimidazolu. Roztok se míchá při 0 °C po dobu 1 hodiny a potom se zahřívá při mírném zpětném toku 10 hodin. Směs se ochladí a pevná látka se sebere, promyje se diethyletherem a sušením se získá 18,6 g (78 %) sloučeniny uvedené v názvu. t.t. 263 až 265 °C.

Analýza: Vypočteno pro Cg^H10^N4^OS:

C, 45,70; H, 4,79; N, 26,65; S, 15,25.

Nalezeno: C, 46,15; H, 4,59; N, 26,62; S, 15,51.

Příklad 5

1-Cyklopentyl-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido [4,5-d] pyrimidin-2(1H)-on

K roztoku 3,7 g (14,0 mmol) l-cyklopentyl-7-methansulfanyl-3,4-dihydropyrimido [4,5-d] pyrimidin-2 (1H) -onu v 40 ml chloroformu, o pokojové teplotě, se přidá 4,4 g (16,8 mmol) 3-fenyl-2-(fenylsulfonyl)oxaziridinu. Reakční směs se míchá 3 hodiny, filtruje se a promyje se směsí chloroform/hexan 1:1 a získá se 2,85 g (73 %) sloučeniny uvedené v názvu, t.t. 235 až 236 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro ^C12^H16^N4°2^S:

C, 51,41; H, 5,75; N, 19,98.

Nalezeno: C, 50,43; H, 5,55; N, 19,52.

Příklad 6

1-Isopropyl-7-methynsulf inyl-3,4-dihydropyrimido (4,5-d] pyrimidin-2(1H)-on

K roztoku 7,0 g (29,4 mmol) 1-isopropyl-7-methansulfanyl -3,4-dihydropyrimido [4,5-d] pyrimidin-2 (1H)-onu v 80 ml chloroformu, o pokojové teplotě, se přidá 9,2 g (35,2 mmol) 3-fenyl-2-(fenylsulfonyl)oxaziridinu. Reakční směs se míchá přes noc, zředí se 40 ml hexanu, filtruje se a promyje se

směsí chloroform/hexan a získá se 6,4 g (85 %) sloučeniny uvedené v názvu. t.t. 218 až 219 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro C10H14N4O2S:

C, 47,23; H, 5,55; N, 22,03.

Nalezeno: C, 46,88; H, 5,40; N, 21,56.

Příklad 7

1-Bicyklo[2.2.1]hept-2-yl-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(ÍH)-on (exo)

K roztoku 2,0 g (6,9 mmol) 1-bicyklo[2.2.1]hept-2-yl-7-methansulfanyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(ÍH) -onu v 20 ml chloroformu, o pokojové teplotě, se přidá 2,1 g (8,3 mmol) 3-fenyl-2-(fenylsulfonyl)oxaziridinu. Reakční směs se míchá přes noc, přidá se dalších 200 mg (0,76 mmol)

3-fenyl-2-(fenylsulfonyl)oxaziridinu a směs se míchá přes noc. Produkt se izoluje chromatografií na silikagelové koloně 4 x 15 cm Biotage eluováním s gradientem methanol/chloroform 2:98, potom 4:96 a potom 8:92 a získá se 1,1 g (51 %) sloučeniny uvedené v názvu. t.t. 220 až 222 °C (rozklad). Hmotnostní spektrum (Cl) (m+l)/z 307 a 264.

Příklad 8

7-Methansulfinyl-1-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d] pyrimidin-2(ÍH)-on

K roztoku 9,0 g (42,8 mmol) 7-methansulfanyl-1-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(ÍH)-onu v 100 ml chloroformu, o pokojové teplotě, se přidá 12,5 g (47,8 mmol)

3-fenyl-2-(fenylsulfonyl)oxaziridinu. Reakční směs se míchá 6 hodin, přidá se 3,1 g (11,9 mmol) 3-fenyl-2-(fenylsulfonyl)oxaziridinu a směs se míchá přes noc. Reakční směs se uchová přes noc při teplotě 0 °C, filtruje se a suší se ve vakuu při 75 °c do konstantní váhy a získá se 9,7 g (100 %) sloučeniny ··· uvedené v názvu. t. t. 225 až 228 °C (rozklad). Hmotnostní spektrum (C.^T) (m+l)/z 227.

Příklad 9 l-Cyklopentyl-7- (4-methoxy fenyl amino) -3,4-dihydropyrimido [4,5-d] pyrimidin-2(1H)-on

Roztok 300 mg (1,07 mmol) 1-cyklopentyl-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido [4,5-d] pyrimidin-2 (1H)-onu, 527 mg (4,28 mmol) p-anisidinu a 1,5 ml dimethylsulfoxidu se zahřívá při teplotě 130 °C po dobu 30 hodin, poté se ochladí a zředí se s ethyl acetátem. Směs se promyje třikrát vodným roztokem chloridu sodného, suší se nad síranem hořečnatým a koncentruje se.

Zbylé pevné látky se promyjí směsí chloroform/ethylacetát/ethanol/triethylamin 9:1:0,1:0,1 a potom chloroformem a suspendují se ve 150 ml směsi chloroform/methanol 7:3. Suspenze se zředí 20 ml hexanu, míchá se 3 hodiny a filtrací se získá 88 mg (24 %) sloučeniny uvedené v názvu jako ne zcela bílý prášek, t. t. 247 až 249 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro

C, 63,70; H, 6,24; N, 20,63.

Nalezeno: C, 63,45; H, 6,04; N, 20,62.

Příklad 10 l-Cyklopentyl-7- [4- (piperidin-l-yl) fenylamino] -3,4-dihydropyrimido [4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Roztok 377 mg (2,14 mmol) 1-(4-aminofenyl)piperidinu, 300 mg (1,07 mmol) 1-cyklopentyl-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido [4,5-d] -pyrimidin-2-(1H) -onu, 745 mg (3,21 mmol) kafrsulfonové kyseliny, a 2 ml p-dioxanu se zahřívá při teplotě 130 °C po dobu 1 hodiny v utěsněné zkumavce. Směs se ochladí a zředí se chloroformem. Roztok se promyje dvakrát s

nasyceným vodným hydrogenuhličitaném sodným a jednou s vodným chloridem sodným a potom solankou. Organická fáze se suší nad síranem hořečnatým a koncentrací se získá tmavě zelený zbytek, který se rozpustí v chloroformu a chromatografuje se na silikagelu eluováním směsí ethylacetát/ethanol/triethylamin 9:1:0,5. Produkty z jednotlivých frakcí se koncentrují a získaný zbytek se rozpustí v chloroformu. Roztok se zředí ethylacetátem, zatímco většina chloroformu se odpaří. Po ochlazení se krystaly seberou a získá se 101 mg (24 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 254 až 257 °C (rozklad). Analýza: Vypočteno pro C₂₂H₂₈N₆O:

C, 67,32; H, 7,19; N, 21,41.

Nalezeno: C, 67,10; H, 7,06; N, 21,58.

Příklad 11 l-Cyklopentyl-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

K roztoku 2,0 g (7,1 mmol) 1-cyklopentyl-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]-2(1H)-onu a 2,7 g (14,3 mmol) 1-(4-aminofenyl)-4-methylpiperazinu v 32 ml acetonitrilu se přidá

2,75 ml (35,7 mmol) trifluoroctové kyseliny. Směs se zahřívá při teplotě 85 °C přes noc. Ochlazená reakční směs se zředí ethylacetátem a promyje se dvakrát nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a jednou solankou. Spojená vodná fáze se zpětně extrahuje dichlormethanem. Spojená organická fáze se suší nad síranem hořečnatým a koncentruje se. Tmavý pevný zbytek se míchá 2 hodiny v 30 ml směsi dichlormethan/ethylacetát 1:1, filtruje se, promyje se ethylacetátem a sušením se získá 2,3 g (80 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 236 až 239 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro ^C22^H29^N7^0:

C, 64,84; H, 7,17; N, 24,06.

Nalezeno: C, 64,55; H, 7,00; N, 24,00.

Obecná metoda pro přípravu dalších l-cyklopentyl-7-(substituovaný fenylamino) -3,4-dihydropyrimido [4,5-d] pyrimidin-2 (ÍH) -onů

K roztoku 200 mg (0,71 mmol) 1-cyklopentyl-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido [4,5-d] pyrimidin-2 (1H)-onu a 2 ekvivalentů substituovaného anilinu v 3,2 ml acetonitrilu se přidá trifluoroctová kyselina. Směs se zahřívá přes noc, ochladí se na teplotu místnosti, zředí se dichlormethanem a promyje se dvakrát nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a jednou solankou. Organická fáze se suší nad síranem hořečnatým a koncentruje a získá se zbytek, který se zpracuje jak je uvedeno shora a získá se sloučenina obecného vzorce I.

Příklad 12 l-Cyklopentyl-7- [4- (pyrazol-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido(4,5-d]pyrimidin-2(ÍH)-on

Připraví se z 222 mg (1,43 mmol) 1-(4-aminofeny)-4-(pyrazol-l-yl)piperidinu a 165 μΐ (2,1 mmol) trifluoroctové kyseliny. Po zahřátí vznikne těžká sraženina. Ochlazená reakční směs se zředí 4 ml ethylacetátu a filtruje se. Pevné látky se promyjí ethylacetátem a sušením se získá 275 mg (79 %) trifluoracetátové soli sloučeniny uvedené v názvu. t. t.

265 až 258 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro C₂2^H28^N6^O2-^C2^HF3^O2··

C, 53,99; H, 4,53; N, 20,03.

Nalezeno: C, 53,82; H, 4,52; N, 20,05.

Příklad 13 l-Cyklopentyl-7-{3-methyl-4- [2- (diethylamino)ethoxy] fenylamino}-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(ÍH) -on

Připraví se z 317 mg (1,43 mmol) 3-methyl-4-[256 ···· · ·· · ·· ·· · 9 99 · · 0

9 0 · 0 0 « • · · ··· · · * ·· ··· ·· ··· «r ···

-(diethylamino)ethoxy]anilinu a 165 μΐ (2,1 mmol) trifluoroctové kyseliny. Surový zbytek se suspenduje ve směsi ethylacetát/dichlormethan a míchá se několik hodin. Pevné látky se seberou, promyjí se ethylacetátem a sušením se získá 210 mg (67 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 175 až 177 °C.

Analýza: Vypočteno pro ^C24^H34^N6°2^:

C, 65,73; H, 7,81; N, 19,16.

Nalezeno: C, 65,42; H, 7,73; N, 19,17.

Příklad 14 l-Cyklopentyl-7-[4-(pyrrol-1-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(IH)-on

Připraví se z 226 mg (1,43 mmol) 1-(4-aminofenyl)pyrrolu a 165 μΐ (2,1 mmol) trifluoroctové kyseliny. Surový zbytek se suspenduje ve směsi ethylacetát/dichlormethan/acetonitril a míchá se několik hodin. Pevné látky se seberou, promyjí se ethylacetátem a sušením se získá 90 mg (32 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. >200 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro ^C21^H22^N6°·⁰'^{33 H}2^0:

C, 66,31; H, 6,00; N, 22,09.

Nalezeno: C, 66,35; H, 5,92; N, 21,94.

Příklad 15 l-Cyklopentyl-7-[4-(4-hydroxypiperidin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(IH)-on

Připraví se z 274 mg (1,43 mmol) 1-(4-aminofenyl)-4-hydroxypiperidinu a 330 μΐ (4,3 mmol) trifluoroctové kyseliny. Surový zbytek se suspenduje ve směsi ethylacetát/dichlormethan/acetonitril a míchá se po dobu několika hodin. Pevné látky se seberou, promyjí se ethylacetátem a sušením se získá 140 mg (47 %) sloučeniny • * • · · · 9 · • · ♦ ♦ t ♦ · » « • 9 * · · ··· · » ·

uvedené v	názvu. t.	t.	>200	°C	(rozklad).
Analýza:	Vypočteno	pro	' c₂₂h	28^N	6θ2‘θ'^2θ^:
	C, 63,29;	H,	7,00;	N,	20,13.
Nalezeno:	C, 63,27;	H,	6,65;	N,	19,99.

Příklad 16 l-Cyklopentyl-7-[4-(3-hydroxypiperidin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Připraví se z 274 mg (1,43 mmol) 1-(4-aminofenyl)-3-hydroxypiperidinu a 330 μΐ (4,3 mmol) trifluoroctové kyseliny. Surový zbytek se resuspenduje ve směsi ethylacetát/dichlormethan a míchá se několik hodin. Pevné látky se seberou, promyjí se ethylacetátem a sušením se získá 135 mg (42 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. >200 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro ^C22^H28^N6°2·⁰'^{15 CH}2^C12^:

C, 63,16; H, 6,77; N, 19,95.

Nalezeno: C, 63,18; H, 6,66; N, 19,97.

Příklad 17 l-Cyklopentyl-7-{4-[4-(dimethylamino)piperidin-l-yl]fenylamino} -3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Připraví se z 313 mg (1,43 mmol) 1-(4-aminofenyl)-4-(dimethylamino)piperidinu a 275 μΐ (3,75 mmol) trifluoroctové kyseliny. Surový zbytek se suspenduje ve směsi ethylacetát/dichlormethan a míchá se několik hodin. Pevné látky se seberou, promyjí se ethylacetátem a sušením se získá 80 mg (24 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 200 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro C₂₄H₃₃N₇O2.0,23 CH₂Cl2:

C, 63,95; H, 7,41; N, 21,54.

Nalezeno: C, 63,99; H, 7,38; N, 21,28.

Příklad 18 l-Cyklopentyl-7- [4- (3,5-dimethylpiperazin-l-yl) fenylamino] -3,4 -dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Připraví se z 292 mg (1,43 mmol) 1-(4-aminofenyl)-3,5-dimethylpiperazinu a 165 μΐ (2,1 mmol) trifluoroctové kyseliny. Surový zbytek se čistí chromatografií na silikagelové koloně 1,2 x 7 cm Biotage a potom se eluuje směsí acetonitril/ethylacetát/methanol/triethylamin 50:40:5:5. Frakce produktu se seberou a koncentrací se získá zbytek, který krystaluje ze směsi dichlormethan/ethylacetát a získá se 16 mg (5 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. >200 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro C₂₃H₃₁N₇O.0,15 CH₂Cl₂.0,01 C₄HgO₂:

C, 64,01; H, 7,27; N, 22,53.

Nalezeno: C, 63,98; H, 7,06; N, 22,60.

Příklad 19 l-Cyklopentyl-7- [4- (2-hydroxymethylpiperidin-l-yl) fenylamino] -3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H) -on

Připraví se z 294 mg (1,43 mmol) 1-(4-aminofenyl)-2-hydroxymethylpiperidinu a 330 μΐ (4,3 mmol) trifluoroctové kyseliny. Surový zbytek se čistí chromatografií na silikagelové koloně 1,2 x 7 cm Biotage a potom se eluuje směsí ethylacetát/dichlormethan 3:2. Frakce produktu se seberou a koncentrací se získá 130 mg (43 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 220 až 221 °C.

Analýza: Vypočteno pro C₂3H₃QNgO₂:

C, 65,38; H, 7,16; N, 19,89.

Nalezeno: C, 65,13; H, 7,15; N, 19,87.

Příklad 20 • ·· • » ·

• » · »··

9» l-Cyklopentyl-7-{4-[4-(3-hydroxypropyl)piperidin-1-yl]fenylamino}-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Připraví se z 335 mg (1,43 mmol) 1-(4-aminofenyl)-4-(3 -hydroxypropyl)piperidinu a 330 μΐ (4,3 mmol) trifluoroctové kyseliny. Surový zbytek se suspenduje ve směsi ethylacetát/dichlormethan a míchá se několik hodin. Pevné látky se seberou a krystalizují se ze směsi ethylacetát/dichlormethan. Znečištěný produkt se dále čistí rozpuštěním ve směsi ethylacetát/ethanol/triethylamin 9:2:1 a potom se čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu eluováním stejným rozpouštědlem a získá se 31 mg (10 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. >230 °C.

Analýza: Vypočteno pro ^C25^H34^N6°2^:

C, 65,67; H, 7,51; N, 18,31.

Nalezeno: C, 65,50; H, 7,40; N, 18,30.

Příklad 21

1-Cyklopentyl-7- [4-(2-(morfolin-l-yl)ethyl)piperidin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Připraví se z 500 mg (1,43 mmol) 1-(4-aminofenyl)-4-(2-(1-morfolino)ethyl))piperidinu a 275 μΐ (4,3 mmol) trifluoroctové kyseliny. Surový se rozpustí v 15 ml dichlormethanu a roztok se koncentruje na 5 ml a potom se zředí 15 ml ethylacetátu a vytvoří se pevná sraženina. Suspenze se míchá 2 hodiny, filtruje se a promyje se ethylacetátem. Hnědý prášek se rozpustí v dichlormethanu a filtruje se přes krátkou kolonu silikagelu směsí methanol/chloroform 1:9. Filtrát se koncentruje na růžový prášek, který se rozpustí v 20 ml dichlormethanu a 3 kapkách methanolu. Roztok se zředí 30 ml ethylacetátu a potom se pomalu míchá a koncentruje se na 30 ml pod proudem argonu. Vysrážený světlý prášek se filtruje a sušením se získá 54 mg (11 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 218 až 220 °C.

• Ο · · · · · · · <» • · · * * « · « · « « v · · · · « • · · 9 9 ···· «·· «· «·· ο· ··»

Analýza: Vypočteno pro ^C22^H28^N6°2·⁰'¹ CH₂C1₂.O,1 H₂0:

C, 65,41; H, 7,70; N, 19,00.

Nalezeno: C, 65,70; H, 7,74; N, 19,37.

Obecná metoda pro přípravu l-isopropyl-7-(substituovaný fenylamino)-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-onů

K roztoku l-isopropyl-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido [4, 5-d] -2 (1H) -onu a 2 ekvivalentů substituovaného anilinu v acetonitrilu se přidá trifluoroctová kyselina. Směs se zahřívá na 85 °C přes noc, ochladí se na teplotu místnosti, zředí se ethylacetátem nebo dichlormethanem a promyje se dvakrát nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a jednou solankou. Organická fáze se suší nad síranem hořečnatým a koncentruje se na zbytek, který se zpracuje jak je popsáno v následujících příkladech a získá se sloučenina obecného vzorce I.

Následující specifické sloučeniny se připraví podle shora uvedeného obecného postupu.

Příklad 22 l-Isopropyl-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Připraví se z 400 mg (1,57 mmol) l-isopropyl-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-onu,

600 mg (3,14 mmol) 1-(4-aminofenyl)-4-methylpiperazinu a 605 μΐ (7,85 mmol) trifluoroctové kyseliny v 6,4 ml acetonitrilu. Reakčni směs se zahřívá na 85 °C po dobu 48 hodin. Potom se surový zbytek trituruje ve směsi ethylacetát/dichlormethan a filtruje se. Pevné látky se znovu rozpustí v dichlormethanu a rozpouštědlo se odpaří pod proudem dusíku za přidávání acetonu k udržení objemu na 5 ml. Suspenze se filtruje a pevné látky se promyjí směsí ethylacetát/dichlormethan a sušením se získá 470 mg (78 %) sloučeniny uvedené v názvu. t.

• » · ♦ » *·♦

t. 234 až 237 °C rozklad).

Analýza: Vypočteno pro C2qH27N₇O.0,15 C₄HgO2-0,05 CH2CI2:

C, 62,17; H, 7,15; N, 24,58.

Nalezeno: C, 62,01; H, 7,06; N, 24,57.

Příklad 23

7-[4-(4-Hydroxypiperidin-l-yl)fenylamino]-l-isopropyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Připraví se z 200 mg (0,79 mmol) 1-isopropyl-7-methansulf inyl-3 , 4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H) - onu, 302 mg (1,57 mmol) 1-(4-aminofenyl)-4-hydroxypiperidinu a 182 μΐ (2,36 mmol) trifluoroctové kyseliny v 3,2 ml acetonitrilu. Po zpracování se surový zbytek trituruje směsí ethylacetát/dichlormethan a filtruje se. Filtrát se koncentruje a získá se druhá část krystalů. Obě části se spojí a sušením se získá 45 mg (13 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. >120 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro 0₂₀Η₂₆Ν₆θ2.0,3 C₄HgO₂.0,5 H₂0:

C, 60,93; H, 7,09; N, 20,11.

Nalezeno: C, 60,95; H, 6,82; N, 20,35.

Příklad 24

7-{4-[4-(Dimethylamino)piperidin-l-yl]fenylamino}-1-isopropyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on; sloučenina s trifluoroctovou kyselinou

Připraví se z 400 mg (1,57 mmol) 1-isopropyl-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-onu, 690 mg (3,14 mmol) 1-(4-aminofenyl)-4-(dimethylamino)piperidinu a 605 μΐ (7,86 mmol) trifluoroctové kyseliny v 5 ml acetonitrilu. Po zahřívání reakční směsi přes noc se vytvoří těžká sraženina. Ochlazená reakční směs se zředí 6 ml ethylacetátu a filtruje se. Pevné látky se promyji dvakrát ··· · » » * 9 9

- 62 ** · 99 9

9 99 9 9 * · • · ř · · i

1· 9 9 9 · i • < 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 9 ethylacetátem, jednou směsí ethylacetát/dichlormethan a sušením se získá 389 mg (38 %) trifluoroctové soli sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 215 až 217 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro 0₂2^Η3ΐ^Ν7θ·2, 0 C2HF3O2.OI C₄HgO₂.0,25 H₂0: C, 48,72; H, 5,31; N, 15,06.

Nalezeno: C, 48,67; H, 5,15; N, 15,05.

Příklad 25 l-Isopropyl-7-[4-(pyrazol-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on; sloučenina s trifluoroctovou kyselinou

Připraví se z 200 mg (0,79 mmol) l-isopropyl-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-onu, 250 mg (1,57 mmol) 1-(4-aminofenyl)pyrazolu a 182 μΐ (2,36 mmol) trifluoroctové kyseliny v 3,2 ml acetonitrilu. Po zahřívání reakční směsi přes noc se vytvoří těžká sraženina. Ochlazená reakční směs se zředí ethylacetátem a filtruje se. Pevné látky se promyjí ethylacetátem a sušením se získá 315 mg (86 %) trifluoroctové soli sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 249 až 252 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro C₁₈H₁₉N₇O.C₂HF₃O₂:

C, 51,84; H, 4,35; N, 21,16.

Nalezeno: C, 51,94; H, 4,37; N, 21,02.

Příklad 26 l-Isopropyl-7-{4-[4-(3-(morfolin-l-yl)propyl)piperidin-l-yl]fenylamino}-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Připraví se z 200 mg (0,79 mmol) 1-isopropyl-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-onu, 477 mg (1,57 mmol) 1-(4-aminofenyl)-4-(3-(1-morfolino)propyl))piperidinu a 303 μΐ (3,93 mmol) trifluoroctové kyseliny v 3,2 ml acetonitrilu. Po zpracování se surový zbytek trituruje ve směsi ethylacetát/dichlormethan a filtruje se.

···»

- 63 Pevné látky se promyjí ethylacetátem a sušením se získá 140 mg (33 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 203 až 205 °C.

Analýza: Vypočteno pro C₂₇H₃gN₇O₂.0,1 Ο₄ΗθΟ₂·0,25 H₂O:

C, 64,92; H, 8,01; N, 19,34.

Nalezeno: C, 65,14; H, 7,96; N, 19,27.

Příklad 27

1-Bicyklo[2.2.1]hept-2-yl-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on (exo)

K suspenzi 300 mg (0,98 mmol) 1-bicyklo[2.2.1]hept-2-yl-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-onu a 374 mg (1,96 mmol) 1-(4-aminofenyl)-4-methylpiperazinu v 4,0 ml acetonitrilu se přidá 377 μΐ (4,90 mmol) trifluoroctové kyseliny. Směs se zahřívá na 85 °C přes noc. Ochlazená reakční směs se zředí ethylacetátem a promyje se dvakrát nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a jednou solankou. Organická fáze se suší nad síranem hořečnatým a koncentruje se. Tmavý pevný zbytek se trituruje ve 4 ml směsi dichlormethan/ethylacetát 1:1, filtruje se, promyje se ethylacetátem a sušením se získá 266 mg (63 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 251 až 254 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro ^C24^H31^N7^O:

C, 66,49; H, 7,21; N, 22,61.

Nalezeno: C, 66,14; H, 7,16; N, 22,22.

Příklad 28 l-Methyl-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido [4 , 5-d] pyrimidin-2 (1H) -on; sloučenina s trifluoroctovou kyselinou

K roztoku 300 mg (1,32 mmol) 7-methansulfinyl-l-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-onu a 507 mg (2,65 mmol) 1-(4-aminofenyl)-4-methylpiperazinu v 5 ml acetonitrilu se přidá 510 μΐ (6,6 mmol) trifluoroctové kyseliny. Reakční směs se zahřívá přes noc na 85 °C a vytvoří se těžká sraženina. Ochlazená reakční směs se zředí 2 ml ethylacetátu a filtruje se. Pevné látky se se promyjí třikrát směsí ethylacetát/acetonitril a sušením se získá 560 mg (84 %) trifluoracetátové soli sloučeniny uvedené v názvu_; t.t. 234 až 235 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro C₁₈H₂₃N₇0.2,0 C₂HF₃O₂:

C, 45,44; H, 4,33; N, 16,77.

Nalezeno: C, 45,49; H, 4,35; N, 16,77.

Příklad 29

7-[4-(4-Hydroxypiperidin-1-yl)fenylamino]-1-methyl-3,4-dihydropyrimido [4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on; sloučenina s trifluoroctovou kyselinou

K roztoku 400 mg (1,77 ml) 7-methansulfinyl-1-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-onu a 680 mg (3,53 mmol) 1-(4-aminofenyl)-4-hydroxypiperidinu v 6 ml acetonitrilu se přidá 408 μΐ (5,3 mmol) trifluoroctové kyseliny. Reakční směs se zahřívá na 85 °C přes noc a vytvoří se těžká sraženina. Ochlazená reakční směs se zředí 2 ml ethylacetátu a filtruje se. Pevné látky se se promyjí ethylacetátem a rekrysfalizuji se z acetonitrilu a získá se 565 mg (51 %) trifluoracetátové soli sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 228 až 229 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro ^C18^H22^N6°2*²'^{0 C}2^HF3°2-^C2^H3^N:

C, 46,23; H, 4,36; N, 15,72.

Nalezeno: C, 46,55; H, 4,48; N, 15,52.

Příklad 30

7-{4-[4-(Dimethylamino)piperidin-l-yl]fenylamino}-l-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2 (1H)-on; sloučenina s

φφφ φ • φ * φφφ · · φ φ φ

φ φ

φφφ trifluoroctovou kyselinou

Κ roztoku 400 mg (1,77 mmol) 7-methansulfinyl-1-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-onu a 775 mg (3,53 mmol) 1-(4-aminofenyl)-4-(dimethylamino)piperidinu v 6 ml acetonitrilu se přidá 680 μΐ (8,8 mmol) trifluoroctové kyseliny. Reakční směs se zahřívá na 85 °C přes noc a vytvoří se těžká sraženina. Ochlazená reakční směs se zředí 6 ml ethylacetátu a filtruje se. Pevné látky se se promyjí ethylacetátem a rekrystalizuji se z acetonitrilu a potom ze směsi acetonitril/dichlormethan/kyselina trifluoroctová a získá se 202 mg (17 %) trifluoracetátové soli sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 190 až 191 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro Ο₂₀ ^Η27^Ν7θ·²'⁰ C₂HF₃O₂.H₂O.0,3 C₂H₃N.0,2

CH₂C1₂:

C, 45,39; H, 4,96; N, 15,59.

Nalezeno: C, 45,37; H, 5,12; N, 15,42.

Příklad 31 l-Methyl-7- [4- (pyrazol-l-yl) fenylamino] -3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on; sloučenina s trifluoroctovou kyselinou

K roztoku 200 mg (0,88 mmol) 7-methansulfinyl-1-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-onu a 281 mg (1,77 mmol) 1-(4-aminofenyl)pyrazolu v 3,2 ml acetonitrilu se přidá 204 μΐ (2,65 mmol) trifluoroctové kyseliny. Reakční směs se zahřívá na 85 °C přes noc a vytvoří se těžká sraženina. Ochlazená reakční směs se zředí 2 ml ethylacetátu a filtruje se. Pevné látky se se promyjí ethylacetátem a získá se 356 mg (93 %) trifluoracetátové soli sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 250 až 251 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro ^C16^H15^N7°-^C2^HF3°2^:

C, 49,66; H, 3,70; N, 22,52.

Nalezeno: C, 49,70; H, 3,60; N, 22,18.

- 66 Obecný postup pro oxidaci l-alkyl-7-[(substituovaný)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-onů na l-alkyl-7-[(substituovaný)fenylamino]pyrimido[4,5-d] pyrimidin-2(1H)-ony

K roztoku l-alkyl-7-[(substituovaný)fenylamin]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-onu v THF nebo DMSO, o pokojové teplotě, se přidají 4 ekvivalenty terč.butoxidu draselného. Zavede se kyslíková atmosféra a roztok se míchá přes noc. Směs se zředí ethylacetátem a promyje se postupně nasyceným vodným hydrogenuhličitanem sodným, vodou a solankou. Organická fáze se suší nad síranem hořečnatým a koncentrací se získá zbytek, který se trituruje ve vhodném rozpouštědle a potom se sebere vysrážený produkt. Dalším čištěním standardními způsoby se získá sloučenina obecného vzorce I.

Příklad 32 l-Cyklopentyl-7- [4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Připraví se z 150 mg (0,37 mmol) l-cyklopentyl-7- [4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-onu a 165 mg (1,47 mmol) terč.butoxidu draselného v 6 ml THF. Tmavá oranžová polotuhá látka se trituruje s diethyletherem a žlutý prášek se sebere a sušením se získá 100 mg (67 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 220 až 225 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro 0₂2^Η27^Ν7θ^:

C, 65,16; H, 6,71; N, 24,18.

Nalezeno: C, 65,22; H, 6,55,- N, 23,78.

Příklad 33 l-Cyklopentyl-7 - [4-(4-hydroxypiperidin-l-yl)fenylamino]pyrimido• * 9 9 9 9 9 • 9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 ft I • 9 999 · » « 99 _{a a}

- 67 [4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Připraví se z 60 mg (0,15 mmol) l-cyklopentyl-7-[4-(4-hydroxypiperidin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-onu a 66 mg (0,58 mmol) terč.butoxidu draselného v 1,5 ml DMSO. Surový polotuhý zbytek se trituruje v 15 ml směsi diethylether/hexan 2:1 a oranžová amorfní pevná látka se suší a získá se 20 mg (30 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. >185 °C (rozklad).

MS (Cl) (m+1)/z 407.

Příklad 34 l-Cyklopentyl-7-{3-methyl-4-[2-(diethylamino)etoxy]fenylamino}pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Připraví se z 70 mg (0,16 mmol) 1-cyklopentyl-7-{3-methyl-4-[2-(diethylamino)ethoxy]fenylamino}-3,4-dihydropyrimido [4 , 5-d] pyrimidin-2 (1H) -onu a 72 mg (0,58 mmol) terč.butoxidu draselného v 3 ml DMSO. Surový polotuhý zbytek se rozpustí ve směsi terč.butylmethy1etheru a hexanu. Roztok se nechá pomalu odpařit na objem menší než 1 ml a potom se zředí 2 ml směsi diethylether/hexan 1:3. Vysrážené pevné látky se seberou a sušením se získá 17 mg (24 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. >95 °C (rozklad).

HS (Cl) (m+1)/z 437 a 232.

Příklad 35 l-Cyklopentyl-7-[4-(3-hydroxypiperidin-l-yl)fenylamino]pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Připraví se z 75 mg (0,18 mmol) l-cyklopentyl-7-[4-(3-hydroxypiperidin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-onu a 82 mg (0,73 mmol) terč.butoxidu draselného v 4,0 ml THF. Polotuhý zbytek se trituruje s diethyletherem a * «· φ ♦ • φ φ φ • φ ♦ * · · φ · φ· φφ» «φ • φφ φ ·· φ ♦ φφ • » * φ • φ φ · · • · » φ • φ · φφ φφφ oranžová pevná látka se sebere a suší a získá se 35 mg (45 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. >135 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro C₂2^H26^N6°2·⁰'^{15 C}2^H10°·⁰'⁷⁵ H₂0:

C, 62,96; H, 6,78; N, 19,49.

Nalezeno: C, 62,98; H, 6,54; N, 19,47.

Příklad 36 l-Cyklopentyl-7-[4-(pyrazol-l-yl)fenylamino]pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Připraví se ze 100 mg (0,20 mmol) trifluoracetátu 1-cyklopentyl-7-[4-(pyrazol-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido [4,5-d]pyrimidin-2(1H)-onu a 115 mg (1,02 mmol) terč.butoxidu draselného v 5,0 ml THF. Polotuhý zbytek se trituruje v diethyletheru a oranžová amorfní pevná látka se sebere a sušením se získá 31 mg (40 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. >135 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro C₂₀H₁gN₇O.0,1 C₂H₁qO.O,5 H₂O:

C, 62,85; H, 5,43; N, 25,15.

Nalezeno: C, 63,09; H, 5,30; N, 25,04.

Příklad 37 l-Cyklopentyl-7-(4-methoxyfenylamino)pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(lH)-on

Reakcí l-cyklopentyl-7-(4-methoxyfenylamino)-3,4-dihydro pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-onu podle obecné metody popsané shora se získá sloučenina uvedená v názvu.

HS (Cl) (m+l)/z 338.

Příklad 38 l-Cyklopentyl-7-[4-(piperidin-1-yl)fenylamino]pyrimido[4,5-d] pyrimidin-2(1H)-on φ

- 69 ΦΦΦΦ « ·· φ • * φ * 9 9 4

9 9 Φ

ΦΦ» »· « Φ ΦΦΦ

Reakcí l-cyklopentyl-7-[4-(piperidin-1-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(ÍH)-onu podle obecné metody popsané shora se získá sloučenina uvedená v názvu.

HS (Cl) (m+l)/z 391.

Příklad 39 l-Cyklopentyl-7- [4-(2-(morfolin-l-yl)ethyl)piperidin-1-yl)fenylamino]pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(ÍH)-on

Připraví se z 37 mg (0,07 mmol) l-cyklopentyl-7-[4-(2- (morfolin-l-yl) ethylpiperidin-l-yl) fenylamino] -3,4-dihydropyrimido [4, 5-d] pyrimidin-2 (ÍH)-onu a 33 mg (0,29 mmol) terč.butoxidu draselného v 2,0 ml THF. Polotuhý zbytek se trituruje v diethyletheru a oranžová amorfní pevná látka se sebere a sušením se získá 11,8 mg (32 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. >140 °C (rozklad).

HS (Cl) (m+l)/z 504.

Příklad 40 l-Isopropyl-7- [4- (4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]pyrimido(4,5-d]pyrimidin-2(ÍH)-on

Připraví se z 200 mg (0,52 mmol) l-isopropyl-7-[4-(4-methylpiperazin-1-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(ÍH)-onu a 235 mg (2,10 mmol) terč.butoxidu draselného v 10 ml tetrahydrofuranu. Polotuhá látka se trituruje ve 14 ml směsi diethylether/hexan a prášek se sebere a sušením se získá 135 mg (68 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 228 až 229 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro ^c20^H25^N7° · θ' θ·^ CgH₁₄.0,5 H₂O:

C, 61,98; H, 6,81; N, 25,07.

Nalezeno: C, 61,95; H, 6,73; N, 25,04.

···*

Příklad 41

7-{4-[4-(Dimethylamino)piperidin-l-yl]fenylamino}-1-isopropylpyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Připraví se z 200 mg (0,31 mmol) 7-{4-[4-(dimethylamino) piperidin-l-yl]fenylamino}-l-isopropyl-3,4-dihydropyrimido [4, 5-d] pyrimidin-2 (1H) -onu, trifluoroctové kyseliny a 211 mg (1,88 mmol), terč.butoxidu draselného v 7 ml tetrahydrofuranu. Reakční směs se míchá 48 hodin a zpracování se provede jak je popsáno v obecném postupu a potom se reakce opakuje po dobu 72 hodin. Po zpracování se polotuhá látka trituruje s diethyletherem a prášek se sebere a sušením se získá 24 mg (18 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. >100 °C.

Analýza: Vypočteno pro 022^Η29^Ν7°·^Η2θ·θ'^{1 :}

C, 61,16; H, 7,25; N, 22,59.

Nalezeno: C, 61,11; H, 6,98; N, 22,49.

Příklad 42

1-Isopropyl-7-[4-(pyrazol-l-yl)fenylamino]pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Připraví se z 150 mg (0,32 mmol) 1-isopropyl-7-[4-(pyrazol-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(lH)-onu, trifluoroctové kyseliny a 218 mg (1,94 mmol) terč.butoxidu draselného v 10 ml tetrahydrofuranu. Reakční směs se míchá po dobu 48 hodin, přidá se 50 mg (0,44 mmol) terč.butoxidu draselného a reakce pokračuje po dobu 72 hodin.

Po zpracování se polotuhý zbytek trituruje s diethyletherem a prášek se sebere a suší a získá se 86 mg (73 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 243 až 247 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro C₁gH₁₇N₇0.0.75 H₂O.0,15 C^H-lqO:

C, 60,05; H, 5,42; N, 26,36.

Nalezeno: C, 60,19; H, 5,36; N, 26,09.

• · · ·

- 71 Příklad 43 l-Isopropyl-7-{4-[4-(3-(morfolin-4-yl)propyl)piperidin-l-yl] fenylamino}pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Připraví se z 100 mg (0,20 mmol) l-isopropyl-7-{4-[4-(3-morfolin-4-yl)propyl)piperidin-l-yl]fenylamino}-3,4-dihydropyrimido [4, 5-d] pyrimidin-2 (1H)-onu a 88,5 mg (0,79 mmol) terč.butoxidu draselného v 10 ml tetrahydrofuranu. Reakční směs se míchá přes noc. přidá se 88,5 (0,79 mmol) terč.butoxidu draselného a reakce pokračuje po dobu 48 hodin.

Po zpracování se polotuhá látka pětkrát suspenduje v diethyletheru a rotačním odpařením do sucha se získá 87 mg (85 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. >95 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro C_igH₁₇N₇O.0,8 H₂0.0,1 C₄H₁₀O:

C, 64,09; H, 7,77; N, 19,10.

Nalezeno: C, 64,02; H, 7,50; N, 19,08.

Příklad 44

1-Bicyklo[2.2.1]hept-2-yl-7- [4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino] pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on, exo

Připraví se z 200 mg (0,46 mmol) 1-bicyklo[2.2.1]hept-2-yl-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido [4, 5-d] pyrimidin-2 (1H)-onu, exo a 207 mg (1,84 mmol) terč.butoxidu draselného v 10 ml tetrahydrofuranu.

Reakční směs se míchá po dobu 48 hodin. Po zpracování se pevná látka trituruje ve směsi diethylether/hexan a prášek se sebere a sušením se získá 140 mg (70 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. >210 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro C₂₄H₂^N₇O.0,5 H₂O:

C, 65,43; H, 6,86; N, 22,26.

Nalezeno: C, 65,29; H, 6,74; N, 21,90.

Příklad 45 l-Methyl-7- [4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Připraví se z 250 mg (0,50 mmol) l-methyl-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d] pyrimidin-2(1H)-onu, trifluoroctové kyseliny a 336 mg (2,99 mmol) terč.butoxidu draselného v 12 ml tetrahydrofuranu. Reakčni směs se míchá po dobu 48 hodin. Po zpracování se polotuhá látka trituruje v dietyhletheru a prášek se sebere a sušením se získá 110 mg (61 %) sloučeniny uvedené v názvu, t. t. 259 až 260 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro C₁gH₂₁N₇.0.0,4 H₂O:

C, 60,29; H, 6,13; N, 27,34.

Nalezeno: C, 60,54; H, 5,99; N, 27,05.

Příklad 46

7-{4-[4-Dimethylamino)piperidin-l-yl]fenylamino}-1-methylpyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Připraví se ze 170 mg (0,26 mmol) 7-{4-[4-(dimethylamino) piperidin-l-yl]fenylamino}-1-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-onu, trifluoroctové kyseliny a 233 mg (2,07 mmol) terč.butoxidu draselného v 20 ml tetrahydrofuranu. Reakčni směs se míchá 6 dnů a provede se zpracování jak je popsáno v obecném postupu, zahrnující zpětnou extrakci spojené vodné fáze s chloroformem. Spojená organická fáze se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a koncentruje. Polotuhý zbytek se trituruje ve směsi diethylether/hexan a prášek se sebere a sušením se získá 64 mg (60 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 198 až 202 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro C₂0^H25^N7°·¹'^{7 H}2^0:

C, 58,58; H, 6,98; N, 23,91.

Nalezeno: C, 58,73; H, 6,71; N, 23,92.

0

Příklad 47 l-Methyl-7-[4-(pyrazol-1-yl)fenylamino]pyrimido[4,5-d]pyrimidin -2(lH)-on

Připraví se z 200 mg (0,46 mmol) l-methyl-7-[4-(pyrazol-1-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(IH)-onu trifluoroctové kyseliny a 309 mg (2,76 mmol) terč.butoxidu draselného v 15 ml tetrahydrofuranu. Reakční směs se míchá přes noc. Po zpracování se polotuhá látka trituruje s diethyletherem a prášek se sebere a sušením se získá 102 mg (65 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. >290 °C (rozklad). Analýza: Vypočteno pro C₁₆H₁₃N₇O.0,4 H₂O.0,2 C₄H₁₀O:

C, 59,11; H, 4,67; N, 28,72.

Nalezeno: C, 59,42; H, 4,39; N, 28,46.

Příklady 48 až 65 jsou specifickým provedením obecných reakčních schémat uvedených ve schématu 2.

Příklad 48

5- [ (3,5-Dimethoxy-fenylimino)methyl]-2-methylsulfanylpyrimidin-4-ylamin

K suspenzi 4,36 g (23,7 mmol) 4-amino-2-methylsulfanylpyrimidin-5-karbaldehydu (připraveného jak je popsáno v WO 98/33798) a 3,65 g (23,7 mmol) 3,5-dimethoxyanilinu v 165 ml vody se přidá 4,5 ml ledové octové kyseliny. Reakce se míchá při teplotě 25 °C přes noc a filtruje se. Filtrační polštářek se promyje vodou a filtrát se suší ve vakuu a získá se 7,02 g (96 %) sloučeniny uvedené v názvu, která se použije v dalším stupni.

HS (APCI) (m+l)/z 305,1.

Příklad 48a

{5- [ (3,5-Dimethoxyfenylimino)methyl] -2-methylsulfanyl-pyrimidin-4-yl}ethylamin

K míchané suspenzi 4-ethylamino-2-methylsulfanylpyrimidin-5-karbaldehydu (5,0 g, 25,09 mmol, připraveného podle metody popsané v J.Med.Chem., 1998; 41 (17): 3276 - 3292), 3,84 g (25,09 mmol) 3,5-dimethoxyanilinu a 190 ml vody se přidá 5 ml ledové kyseliny octové. Reakční směs se míchá při teplotě okolí 24 hodin a suspenduje se a filtruje se. Nerozpustný produkt se suší na filtru a získá se 7,79 g (92 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 100 až 105 °C.

Hmotnostní spektrum (APCI, 80/20 CH₃CN/H₂O, zkouška = 450°C) (m+l)/z 333,1.

Analýza: Vypočteno pro ^C16^H20^N4°2^Sl^:

C, 57,81; H, 6,06; N, 16,85.

Nalezeno: C, 57,63; H, 6,06; N, 16,86.

Příklad 49

5-[(3,5-Dimethoxyfenylamino)-methyl]-2-methylsulfanylpyrimidin-4-ylamin

Do 18,2 ml (18,2 mmol) 1M roztoku lithium aluminium hydridu (LAH) v tetrahydrofuranu (THF) ochlazeném na 5°C, se přidá během 20 minut roztok 5,55. g (18,3 mmol) 5-[(3,5-dimethoxyfenyl imino) methyl] -2-methylsulfanylpyrimidin-4-ylaminu v 94 ml suchého THF. Reakční směs se míchá 1,5 hodiny při teplotě 5 °C, potom se ochladí postupným přidáním 0,72 ml vody, 3,0 ml 25% NaOH a dalšího 1,66 ml vody. Reakční směs se filtruje přes celit a filtrační polštářek se promyje dobře THF. Filtrát se koncentruje do sucha ve vakuu. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu. Ethylacetátový roztok se promyje třikrát roztokem nasyceného chloridu sodného, suší se nad síranem hořečnatým a koncentrací ve vakuu se získá 5,10 g (91 %) sloučeniny uvedené v názvu.

Analýza: Vypočteno pro ^C14^H18^N4°2^S: ·*·· • « · • 9 9··

- 75 C, 54,88; Η, 5,92; N, 18,29; S, 10,47.

Nalezeno: C, 54,92; H, 5,93; N, 18,32; S, 10,68.

Příklad 49a {5- [4-(3,5-Dimethoxyfenylamino)methyl]-2-methylsulfanylpyrimidin- 4 -yl }ethylamin

K roztoku 5,91 mg (17,78 mmol) {5-[(3,5-dimethoxyfenylimino)methyl]-2-methylsulfanylpyrimidin-4-yl}ethylaminu v 100 ml suchého THF se přidá po kapkách při teplotě 5 °C během 20 minut 17,78 ml 1 M roztoku LAH v THF. Reakční směs se míchá při 5 °C po dobu 1 hodiny a potom se ochladí tak, že se v následujícím pořadí přidá po kapkách 0,8 ml vody, 3,2 ml 25% NaOH a 1,8 ml vody. Reakční směs se rozdělí mezi poloviční nasycenou solanku a EtOAc. Organická vrstva se oddělí, promyje se vodou, suší se nad síranem hořečnatým, filtruje se a odpaří. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu eluováním s gradientem 1% až 3% methanolem v dichlormethanu a získá se 5,4 g (91 %) sloučeniny uvedené v názvu.

Hmotnostní spektrum (APCI, 80/20 CH₃CN/H₂O, Probe = 450 °C) (m+l)/z 335,2.

Analýza: Vypočteno pro ^C16^H22^N4°2^S1^:

C, 57,46; H, 6,63; N, 16,75.

Nalezeno: C, 57,75; H, 6,62; N, 16,52.

Příklad 50

3-(3,5-Dimethoxyfenyl)-7-methylsulfanyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Do roztoku 5,0 g (16,3 mmol) 5-[(3,5-dimethoxyfenylamino)methyl]-2-methylsulfanylpyrimidin-4-ylaminu v 55 ml dimethylformadidu ochlazeném na 5 °C, se přidá 1,63 (40,8 mmol) hydridu sodného jako 60%ní suspenze v minerálním oleji.

Ledová lázeň se odstaví a reakční směs se míchá 1 hodinu. K reakční směsi se přidá 7,94 g (48,9 mmol) 1,1'-karbonyldiimidazolu. Směs se míchá další dvě hodiny a potom se koncentruje ve ve vakuu. Zbytek se rozdělí mezi dichlormethan a nasycený roztok chloridu amonného. Dichlormethanová vrstva se promyje dvakrát nasyceným chloridem amonným, vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného. Dichlormethanový roztok se suší nad síranem hořečnatým a koncentruje se ve vakuu. Zbytek se chromatografuge na silikagelu eluováním směsí chloroform/methanol (10:0,25 objem./objem.) a získá se 3,24 g (60 %) sloučeniny uvedené v názvu.

HS (APCI) (m+l)/z 333,2.

Příklad 50a

3- (3,5-Dimethoxyfenyl) -l-ethyl-7-methylsulfanyl-3,4-dihydropyrimido [4,5-d]pyrimidin-2(ÍH)-on

K rozotoku 6,42 g (19,2 mmol) {5-[4-(3,5-dimethoxyfenylamino) methyl] -2-methylsulfanylpyrimidin-4-yl}ethylaminu a 4,96 g (38,39 mmol) diisopropylethylaminu v 120 ml dichlormethanu se přidá po kapkách při teplotě 5 °C během 20 minut 10 ml 20%ního roztoku fosgenu v toluenu. Reakční směs se nechá ohřát na teplotu místnosti a míchá se 4 hodiny. Směs se promyje polovičně nasyceným NaHCO-j a vodou, potom se suší nad síranem hořečnatým a filtruje se. Filtrát se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se čistí sloupcovou chromatografii eluováním s rozpouštědlem s gradientem 1% až 3% methanol v dichlormethanu a získá se 5,96 g (86 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 134 až 136 °C.

Hmotnostní spektrum (APCI, 80/20 CH₃CN/H₂O, Probe = 450 °C) (m+l)/z 361,2.

Analýza: Vypočteno pro ^i7^H20^N4°3^S:

C, 56,65; H, 5,59; N, 15,54.

Nalezeno: C, 56,49; H, 5,54; N, 15,33.

• ·· « • · φ ♦ 9 9 9

Příklad 51

3-(3,5-Dimethoxyfenyl)-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Do roztoku 2,0 g (6,02 mmol) 3-(3,5-dimethoxyfenyl)-7- methyl sul f anyl-3,4-dihydropyrimido [4,5-d] pyrimidin-2 (1H) -onu v 450 ml chloroformu se přidá 1,73 g (6,62 mmol) trans-2(fenylsulfony1)-3-fenyloxaziridinu. Reakční směs se míchá při pokojové teplotě přes noc a poté se koncentruje ve vakuu. Zbytek se chroamtografuje na silikagelu eluováním nejprve chloroformem a potom směsí chloroform/methanol (10/0,25 objem./objem.) a nakonec směsí chloroform/methanol (9:1 objem./objem.) a získá se 1,87 g (85 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 220 až 222 °C.

Analýza: Vypočteno pro C₁₅H₁₆N₄O₄S.0,30 H₂0.0,10 CHC1₃:

C, 49,59; H, 4,60; N, 15,32; S, 8,77; H₂0, 1,48.

Nalezeno: C, 49,62; H, 4,34; N, 15,20; S, 8,87; H₂O, 1,42.

Příklad 51a

3-(3,5-Dimethoxyfenyl)-1-ethyl-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido [4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

K roztoku 3-(3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-7-methylsulfanyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-onu (5,61 g, 15,57 mmol) v dichlormethanu (100 ml) se přidá po částech při pokojové teplotě 3-fenyl-2-(fenylsulfony1)oxaziridin (4,88 g, 18,69 mmol, PD 0191006, Org. Synth., 1987; 66 : 203 - 210). Reakční směs se míchá přes noc a potom se promyje solankou a vodou. Organická vrstva se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a odpaří se za sníženého tlaku. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografii eluováním rozpouštědlovou směsí 3% methanolu v dichlormethanu a získá se 4,6 g (78 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 167 až 169 °C.

Hmotnostní spektrum (APCI, 80/20, CH₃CN/H₂O, Probe = 450 °C) ···· ·«

- 78 (m+l)/z 377,1.

Analýza: Vypočteno pro C₁₇H₂qN₄O₃S:

C, 54,24; H, 5,36; N, 14,88.

Nalezeno: C, 53,95; H, 5,27; N, 14,51.

Přiklad 52

7-(4-Diethylaminobutylamino)-3-(3,5-dimethoxyfenyl)-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Suspenze 0,2261 g (0,65 mmol) 3-(3,5-dimethoxyfenyl)-7 -methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-onu a 0,103 g (0,71 mmol) diethylaminobutylaminu v 10 ml suchého dioxanu se zahřívá na teplotu 60 °C a míchá se přes noc. K reakční směsi se přidá 0,306 g (2,13 mmol) diethylaminobutylaminu a 0,1658 (0,71 mmol) kafrsulfonové kyseliny. Reakční směs se míchá při teplotě 60 °C po dobu dalších 18 hodin. Reakční roztok se koncentruje ve vakuu a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného. Ethylacetátová vrstva se promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, potom vodou, suší se nad síranem hořečnatým a koncentruje se za sucha. Zbytek se chromatografuje na silikagelu eluováním směsí ethylacetát/ethanol/triethylamin (9:2:1 objem./objem./objem.) a získá se 0,173 g (62 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 203 až 207 °C.

Analýza: Vypočteno pro C₂₂H₃₂NgO₃:

C, 61,66; H, 7,53; N, 19,61.

Nalezeno: C, 61,31; H, 7,32; N, 19,23.

Příklad 53

7-(4-Diethylaminobutylamino)-3-(3,5-dimethoxyfenyl)-1-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Směs 3-(3,5-dimethoxyfenyl)-1-ethyl-7-methansulfinyl····

- 79 -3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2 (1H) -onu (0,5 g, 1,33 mmol)

4-diethylaminobutylaminu (0,38 g, 2,66 mmol), a trifluoroctové kyseliny (0,31 g, 2,66 mmol) v acetonitrilu (6 ml) se zahřívá při teplotě 90 °C po dobu 18 hodin v utěsněné zkumavce. Rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku a zbytek se převede do IN HC1. Roztok se alkalizuje 50% NaOH a extrahuje se dvakrát dichlormethanem. Spojené organické vrstvy se suší nad síranem hořečnatým, filtrují a odpaří. Zbytek se čistí radiální chromatografií eluováním směsí rozpouštědel ethylacetát/methanol/ethyl (89:10:1 objem./objem./objem.) a získá se 0,34 g (56 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 83 až 85 °C.

Hmotnostní spektrum (APCI, 80/20 CH₃CN/H₂O, Probe = 450 °C) (m+l)/z 458,2.

Analýza: Vypočteno pro ^C24^H36^N6°3^:

C, 63,13; H, 7,95; N, 8,41.

Nalezeno: C, 62,85; H, 7,84; N, 8,06.

Příklad 53a

7- [4- (2-Diethylaminoethoxy) fenylamino] -3- (3,5-dimethoxyfenyl) -1-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H) -on

Směs 3-(3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-onu (0,5 g, 1,33 mmol),

4-(2-diethylaminoethoxy)anilinu (0,55 g, 2,66 mmol, Helv. Chim. Acta, 1960; 43: 1971 - 1979) a trifluoroctové kyseliny (0,46 g, 3,98 mmol) v acetonitrilu (6 ml) se zahřívá při teplotě 100 °C po dobu 18 hodin v utěsněné zkumavce. Rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku a zbytek se rozpustí ve vodě. Roztok se alkalizuje IN NaOH a extrahuje se dvakrát EtOAc. Spojené organické vrstvy se suší nad síranem hořečnatým, filtrují se a odpaří. Zbytek se suspenduje v etheru (20 ml), přidá se triethylamin (0,27 g, 2,66 mmol) a BOC₂O (0,32 g, 1,46 mmol) a směs se zředí hexanem a ochladí se na 0 °C. Nerozpustný produkt se sebere filtrací a promyje se hexanem a získá se ···· • · · · · · »♦ ··· ·· Φ··

- 80 0,56 g (81 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 139 až 141 °C.

Hmotnostní spektrum (APCI, 80/20 CH₃CN/H₂O, Probe = 450 °C) (m+1)/z 521,3.

Analýza: Vypočteno pro ^C28^H36^N6°4·θ'¹⁹ CF₃CO₂H:

C, 62,86; H, 6,73; N, 15,50.

Nalezeno: C, 62,85; H, 6,65; N, 15,56.

Obecný pokus pro paralelní syntézu 3-aryl-7-(substituovaný alkylamino)-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(ÍH)-onů a 3-aryl-1-alkyl-(substituovaný alkylamino)-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(ÍH)-onů

Do 10 ml reaktoru (Argonaut Technologies' Quest 210) se vloží 0,100 g (0,287 mmol) 3-(3,5-dimethoxyfenyl)-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d] pyrimidin-2(ÍH)-onu v 5 ml suchého dioxanu nebo 0,100 g (0,266 mmol) 3-(3,5dimethoxyfenyl)-l-ethyl-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido-[4,5-d]pyrimidin-2(ÍH)-onu ve 4 ml suchého dioxanu a 0,0753 g (0,3157 mmol) kafrsulfonové kyseliny v 2 ml suchého dioxanu. K reakční směsi se přidá roztok od 2,7 do 3,3 ekvivalentů aminu (R¹NH₂) v 1 ml dioxanu. Reakční směs se míchá při 65 °C po dobu 18 hodin a potom se ochladí na teplotu místnosti. Dioxan se odpaří pod proudem dusíku a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a roztok nasyceného hydrogenuhličitanu sodného. Ethylacetátová vrstva se promyje dvakrát zředěným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a potom jednou vodou. Ethylacetátová vrstva se suší nad síranem hořečnatým a koncentruje se do sucha za použití proudu dusíku. Zbytek se chromatografuje na silikagelu a získá se sloučenina uvedená v názvu.

Příklad 54

3-(3,5-Dimethoxyfenyl)-7-{2-[(pyridin-4-ylmethyl)amino]ethylamino}-3,4-dihydropyrimido(4,5-d]pyrimidin-2-(ÍH)-on

Za použití obecné metody popsané shora se nechá reagovat 3-(3,5-dimethoxyfenyl)-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on a 0,1423 g (0,941 mmol)

N-(4-pikoly)ethylendiaminu. Zbytek se chromatografuje eluováním směsí ethylacetát/ethanol/triethylamin (9:2:1 objem/objem/objem) poté směsí ethylacetát/ethanol/triethylamin (9:3:2 objem/objem/objem) a získá se 0,0162 g (13 %) sloučeniny uvedené v názvu: HPLC = 92%ní čistota.

HS (APCI) (m+1)/z 436,2.

Příklad 54a

3-(3,5-Dimethoxyfenyl)-7-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]-3,4-dihydro-lH-pyrimido[4,95-d]pyrimidin-2(1H)-on

Za použití obecné metody popsané shora se nechá reagovat 3-(3,5-dimethoxyfenyl)-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on a 0,1234 g (0,785 mmol) 3-(4-methylpiperazin-l-yl ) propylaminu . Zbytek se chromatografuje na silikagelu, eluováním směsí ethylacetát/ethanol/triethylamin (9:2:1 objem/objem/objem), poté směsí ethylacetát/ethanol/triethylamin (9:3:2 objem/objem/objem) a získá se 0,0443 g (35 %) sloučeniny uvedené v názvu: HPLC = 92%ní čistota.

HS (APCI) (m+1)/z 442,2.

Příklad 54b

3-(3,5-Dimethoxyfenyl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)butylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Za použití obecné metody popsané shora se nechá reagovat 3-(3,5-dimethoxyfenyl)-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on a 0,1354 g (0,791 mmol) 4-(4-methylpiperazin-l-yl)-butylaminu. Zbytek se chromatografuje na φφφφ «

• · ·· φφφ ··

Φ w • · • φ φ φ φ φφ φφ φ · φ φ φ φ φ φ φφ φ φ •

φ φφφ silikágelu, eluováním směsí ethyl acetát/ethanol/triethylamin (9:2:1 objem/objem/objem), poté směsí ethylacetát/ethanol/triethylamin (9:3:2 objem/objem/objem) se získá 0,0401 g (31 %) sloučeniny uvedené v názvu: HPLC = 99%ní čistota.

HS (APCI) (m+1)/z 456,2.

Příklad 54c

3-(3,5-Dimethoxyfenyl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)pentylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Za použití obecné metody popsané shora se nechá reagovat 3-(3,5-dimethoxyfenyl)-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d] pyrimidin-2(1H)-on a 0,1475 g (0,805 mmol) 5-(4-methylpiperazin-l-yl)pentylaminu. Zbytek se chromatografuje na silikágelu, eluováním směsí ethyl acetát/ethanol/triethylamin (9:2:1 objem/objem/objem), poté směsí ethylacetát/ethanol/triethylamin (9:3:2 objem/objem/objem) a získá se 0,0322 g (24 %) sloučeniny uvedené v názvu: HPLC = 97%ní čistota.

HS (APCI) (m+1)/z 470,2 .

Příklad 55

-(3-Diethylaminopropylamino)-3 -(3,5-dimethoxyfenyl)-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Za použití obecné metody popsané shora se nechá reagovat 3-(3,5-dimethoxyfenyl)-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on a 0,1121 g (0,861 mmol) diethylaminopropylaminu. Zbytek se chromatografuje eluováním směsí acetonitril/ethanol/triethylamin (8:1:0,5 objem/objem/objem), se získá 0,0476 g (40 %) sloučeniny uvedené v názvu:

HPLC = 89%ní čistota.

HS (APCI) (m+1)/z 415,2.

• ·

Příklad 56

3-(3,5-Dimethoxyfenyl)-l-ethyl-7-{2-[(pyridin-4-ylmethyl)amino]ethylamino}-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Za použití obecné metody popsané shora se nechá reagovat 3-(3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido- [4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on a 0,1317 g (0,871 mmol)

N-(4-pikoly)ethylendiaminu. Zbytek se chromatografuje na silikagelu, eluováním směsí ethylacetát/ethanol/triethylamin (9:2:1 objem/objem/objem), se získá 0,0307 g (25 %) sloučeniny uvedené v názvu: HPLC = 87%ní čistota.

HS (APCI) (m+1)/z 464,2.

Příklad 57

3-(3,5-Dimethoxyfenyl)-l-ethyl-7-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Za použití obecné metody popsané shora se nechá reagovat 3-(3,5-dimethoxyfenyl)-1-ethyl-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido [4 , 5-d] pyrimidin-2 (1H) -on a 0,1142 g (0,726 mmol)

3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylaminu. Zbytek se chromatografuje na silikagelu, eluováním směsí ethylacetát/ethanol/triethylamin (9:2:1 objem/objem/objem) , a získá se 0,0712 g (57 %) sloučeniny uvedené v názvu: HPLC = 96%ní čistota.

HS (APCI) (m+1)/z 470,2.

Příklad 58

-(3,5-Dimethoxyfenyl)-l-ethyl-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)butylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Za použití obecné metody popsané shora se nechá reagovat

3- (3,5-dimethoxyfenyl)-1-ethyl-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido [4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on a 0,1253 g (0,732 mmol)

4- (4-methylpiperazin-l-yl)butylaminu. Zbytek se chromatografuje na silikagelu, eluováním směsí ethylacetát/ethanol/triethylamin (9:2:1 objem/objem/objem), se získá 0,0527 g (41 %) sloučeniny uvedené v názvu: HPLC = 94%ní čistota.

HS (APCI) (m+l)/z 484,3.

Příklad 59

3-(3,5-Dimethoxyfenyl)-l-ethyl-7- [5-(4-methylpiperazin-l-yl)pentylamino]-3,4-dihydropyrimido [4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Za použití obecné metody popsané shora se nechá reagovat 3-(3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido [4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on a 0,1365 g (0,745 mmol)

5-(4-methylpiperizin-l-yl)pentylaminu. Zbytek se chromatografuje na silikagelu, eluováním směsí ethylacetát/ethanol/triethylamin (9:2:1 objem/objem/objem), se získá 0,041 g (31 %) sloučeniny uvedené v názvu: HPLC =

98%ní čistota.

HS (APCI) (m+l)/z 498,3.

Příklad 60

7-(3-Diethylaminopropylamino)-3-(3,5-dimethoxy-fenyl)-1-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H) -on

Za použití obecné metody popsané shora se nechá reagovat 3-(3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido [4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on a 0,1038 g (0,797 mmol) diethylaminopropylaminu. Zbytek se chromatografuje na silikagelu eluováním směsí acetonitril/ethanol/triethylamin (8:1:0,5 objem/objem/objem), se získá 0,0719 g (61%) sloučeniny uvedené v názvu: HPLC = 81%ní čistota.

• · · ·

HS (APCI) (m+l)/z 443,2.

Příprava 11

2-Chlor-3,5-dimethoxybenzoová kyselina

Do roztoku 12 g (52,0 mmol) methyl esteru 2-chlor-3,5-dimethoxybenzoové kyseliny (připravené podle metody, kterou popsal T.R.Kasturi a E.M.Abraham, Indián Journal of Chemistry, 1973; 11:1099 - 1104) v 40 ml methanolu se přidá 60 ml (60 mmol) 1 N roztoku hydroxidu draselného. Směs se míchá přes noc při teplotě místnosti, methanol se odstraní ve vakuu a zbytek se suspenduje v 800 ml vody. Vodná vrstva se extrahuje třikrát diethyletherem a okyselí se koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou na pH 3. Vzniklá pevná látka se odfiltruje, promyje se vodou a sušením na vzduchu se získá 9,82 g (87 %) sloučeniny uvedené v názvu.

HS (APCI) (m+l)/z 217.

Příprava 12 terč. Butylester (2-chlor-3,5-dimethoxyfenyl)karbamové kyseliny

Do roztoku 9,57 g (44,18 mmol) 2-chlor-3,5-dimethoxybenzoové kyseliny a 4,78 g (47,3 mmol) triethylaminu v 250 ml toluenu se přidá 13,57 g (49,3 mmol) difenylfosforylazidu. Reakčni směs se zahřívá při zpětném toku 4 hodiny. K reakčni směsi se přidá 3,63 g (49,0 mmol) terč.butanolu. Reakčni směs se zahřívá přes noc při zpětném toku a koncentruje se ve vakuu. Zbytek se rozdělí mezi studený 1 N roztok studené kyseliny citrónové a ethylacetátu. Ethylacetátová vrstva se promyje dvakrát následovně: 1 N roztokem kyseliny citrónové, vodou, a nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Ethylacetátová vrstva se suší síranem hořečnatým a koncentruje se ve vakuu. Zbytek se rozpustí

v tetrahydrofuranu, přidá se silikagel a koncentruje se do sucha. Zbytek se chromatografuje na silikagelu eluováním směsí hexan/diethylether (9:1 objem/objem) a získá se 8,14 g (64 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 94,5 až 95,5 °C. Analýza: Vypočteno pro C₁₃H₁₈NO₄C1:

C, 54,26; H, 6,31; N, 4,87; Cl, 12,32.

Nalezeno: C, 54,20; H, 6,17; N, 4,90; Cl, 12,08.

Příprava 13

2-Chlor-3,5-dimethoxyfenylamin

K 6,01 g (0,021 mmol) terč.butyl esteru (2-chlor-3,5-dimethoxyfenyl)karbamové kyseliny se přidá 15 ml trifluoroctové kyseliny. Reakční směs se míchá 3 hodiny při teplotě místnosti a potom se koncentruje ve vakuu. Zbytek se alkalizuje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a potom se extrahuje třikrát dichlormethanem. Spojené dichlormethanové vrstvy se suší síranem hořečnatým a koncentrací ve vakuu se získá 3,98 g sloučeniny uvedené v názvu, která se použije v následujícím příkladu.

HS (APCI) (m+l)/z 188.

Příklad 61 {5-[(2-Chlor-3,5-dimethoxyfenylimino)methyl]-2-methylsulfanylpyrimidin-4-yl}ethylamin

Do roztoku 3,78 g (20,2 mmol) 2-chlor-3,5-dimethoxyfenylaminu v 110 ml toluenu se přidá 3,97 g (20,15 mmol)

4-ethylamino-2-methylsulfanylpyrimidin-5-karbaldehydu.

Reakční nádoba se opatří Dean-Stárkovým zachycovačem a potom se reakční směs zahřívá při zpětném toku. Po 3 hodinách se přidají 2 kapky koncentrované kyseliny sírové. Reakční směs se zahřívá při zpětném toku přes noc a koncentrací ve vakuu se získá 7,36 g (93 %) sloučeniny uvedené v názvu, která se

použije v následujícím příkladu, t. t. 196,5 až 198,5 °C.

HS (APCI) (m+l)/z 367,0.

Příklad 62 {5- [ (2-Chlor-3,5-dimethoxyfenylamino)methyl] -2-methylsulfanylpyrimidin-4-yl}ethylamin

Do roztoku 6,96 g (18,97 mmol) {5-[ (2-chlor-3,5-dimethoxyfenylimino)methyl] -2-methylsulfanylpyrimidin-4-yl}ethylaminu v 200 ml suchého THF ochlazeném na 5 °C se přidá 18,97 ml (18,97 mmol) 1 M roztoku LAH v THF. Směs se míchá 1 hodinu, studená reakční směs se dále ochladí postupným přidáním 0,8 ml vody,

3,0 ml 25 NaOH a 1,7 ml vody. Reakční směs se filtruje přes Celit, filtrační polštářek se promyje dobře THF a filtrát se koncentruje ve vakuu. Zbytek se rozpustí v dichlormethanu, přidá se silikagel a koncentruje se ve vakuu. Tento zbytek se chromatografuje na silikagelu, eluováním směsí hexan/ethylacetát (2:1 objem/objem), se získá 5,15 g (74 %) sloučeniny uvedené v názvu: t. t. 116,5 až 118,5 °C.

Analýza: Vypočteno pro ^C16^H21ⁿ4°2^C1S:

C, 52,10; H, 5,74; N, 15,19; Cl, 9,61; S, 8,69. Nalezeno: C, 52,45; H, 5,67; N, 14,99; Cl, 9,38; S, 8,66.

Příklad 63

3-(2-Chlor-3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-7-methylsulfanyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(IH)-on

Do roztoku 1,00 g (2,71 mmol) {5-[(2-chlor-3,5-dimethoxyfenylamino)methyl] -2-methylsulfanylpyrimidin-4-yl}ethylaminu v 7 ml suchého DMF ochlazeném na 5 °C se přidá 0,271 g (6,78 mmol) hydridu sodného jako 60%ní suspenze v minerálním oleji.

Ledová lázeň se odstraní a reakční směs se míchá l hodinu. K reakční směsi se poté přidá 1,32 g (8,13 mmol)

1,1'-karbonyldiimidazolu. Směs se míchá další 2 hodiny

a potom se koncentruje ve vakuu, zbytek se rozdělí mezi dichlormethan a nasycený roztok chloridu amonného. Vodná vrstva se promyje dvakrát dichlormethanem. Dichlormethanové vrstvy se spojí, suší se nad síranem hořečnatým a koncentrují se ve vakuu. Zbytek se rozpustí v dichlormethanu, přidá se silikagel a koncentruje se ve vakuu. Zbytek se chromatografuje na silikagelu, eluováním směsí dichlormethan/ethylacetát (9:0,5 objem/objem) a získá se 0,7507 g (70 %) sloučeniny uvedené v názvu: t. t. 189 až 191 °C.

Analýza: Vypočteno pro C₄₇H₄gN₄O₃ClS:

C, 51,71; H, 4,85; N, 14,19.

Nalezeno: C, 51,95; H, 4,81; N, 13,88.

Příklad 64

3-(2-Chlor-3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-7-methansulfinyl-3,4-dihydropyrimido [4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Do roztoku 0,7457 g (1,89 mmol) 3-(2-chlor-3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-7-methylsulfanyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d] pyrimidin-2(1H)-onu v 7 ml chloroformu se přidá 0,5428 g (2,08 mmol) trans-2-(fenylsulfony1)-3-fenyloxaziridinu.

Reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti a koncentruje se ve vakuu. Zbytek se chromatografuje na silikagelu eluováním směsí ethylacetát/ethanol (9:1 objem/objem), a získá se 0,697 g (90 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t.

189 až 191°C.

Analýza: Vypočteno pro C₁₇H_igN₄O₄ClS.0,06 CH₂C1₂:

C, 49,26; H, 4,63; N, 13,47.

Nalezeno: C, 49,58; H, 4,69; N, 13,08.

Příklad 65

3-(2-Chlor-3,5-dimethoxyfenyl)-7-(4-diethylaminobutylamino)-1-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on

Roztok 0,1074 g (0,2614 mmol) 3-(2-chlor-3,5-dimethoxy·· · ·

fenyl)-7-(4-diethylaminobutylamino)-l-ethyl-3,4-dihydro-pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-onu, 0,113 g (0,784 mmol) diethylaminobutylaminu, a 0,067 g (0,287 mmol) kafrsulfonové kyseliny v 4 ml suchého dioxanu se zahřívá při teplotě 60 °C. Směs se míchá přes noc a reakční směs se potom koncentruje ve vakuu a zbytek se rozpustí v dichlormethanu. Dichlormethanový roztok se extrahuje třikrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, suší se nad síranem hořečnatým a koncentruje se ve vakuu. Zbytek se chromatografuje na silikagelu eluováním směsí acetát/ethanol/triethylamin (9:1:0,5 objem/objem/objem) a získá se 0,106 g (82 %) sloučeniny uvedené v názvu: t. t. 189 až 191 °C.

MS (APCI) (m+l)/z 491,1.

Příklady 66 až 67 jsou zobrazeny ve schématu 3.

Příklad 66

3-(3,5-Dimethoxyfenyl)-7-methylsulfanyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-ylamín

Do roztoku 25,0 g (81,6 mmol) 5-[(3,5-dimethoxyfenylamino)methyl]-2-methylsulfanylpyrimidin-4-ylaminu v 125 ml suchého dimethylformamidu ochlazeného na teplotu 5 °C, se přidá po částech roztok 10,1 g (95,5 mmol) kyanogenbromidu v 25 ml suchého dimethylformamidu. Po přidání kyanogenbromidového roztoku se ledová lázeň odstraní a reakční směs se zahřívá na teplotu místnosti 30 minut.

Reakční směs se zahřívá na 80 °C po dobu 4 hodin a potom se přidá 500 ml IN NaOH. Vodná suspenze se extrahuje dichlormethanem (7 x 150 ml). Dichlormethanové vrstvy se spojí a koncentrují ve vakuu. Zbytek se rozpustí v dichlormethanu, extrahuje se třikrát nasyceným roztokem chloridu sodného, suší se nad síranem hořečnatým a koncentruje se ve vakuu. Zbytek se rozpustí v tetrahydrofuranu, přidá se silikagel a koncentruje se ve

•· ··· ·· 99 9 vakuu. Zbytek se chromatografuje na silikagelu eluováním nejprve ethylacetátem a poté směsí ethylacetát/ethanol (9:1 objem/objem.) a získá se produkt, který je mírně znečištěn.

Tento produkt se chromatografuje na silikagelu eluováním nejprve chloroformem a poté směsí chloroform/methanol (9:0,5 objem./objem) a získá se 7,34 g (24 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 198 až 204 °C.

Analýza: Vypočteno pro C₁₅H₁₇N₅O₂S.0,30 CHC1₃:

C, 50,04; H, 4,75; N, 19,07; S, 8,73.

Nalezeno: C, 50,11; H, 4,59; N, 19,18; S, 8,91.

Příklad 67

3- (3,5-Dimethoxyfenyl) -7-methansulf inyl-3,4 - dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-ylamin

Do roztoku 2,00 g (6,04 mmol) 3-(3,5-dimethoxyfenyl)-7-methylsulfanyl-3,4-dihydropyrimido [4,5-d] pyrimidin-2-ylaminu v 50 ml chloroformu se přidá roztok 1,73 g (6,64 mmol) trans-2(fenylsulfonyl)-3-fenyloxaziridinu v 20 ml chloroformu.

Reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti a potom se koncentruje ve vakuu. Zbytek se rozpustí v dichlormethanu, přidá se silikagel a koncentruje se ve vakuu. Zbytek se chromatografuje na silikagelu eluováním nejprve ethylacetátem a poté směsí ethylacetát/ethanol/triethylamin (9:2:1 objem/objem/objem) a získá se 1,4306 g (68 %) sloučeniny uvedené v názvu.

Analýza: Vypočteno pro C₁gH₁₇NgO₃S.0,25 EtOAc.0,25 H₂0:

C, 51,37; H, 5,23; N, 18,73.

Nalezeno: C, 51,15; H, 5,23; N, 18,44.

Příprava 14

Ethyl 4- (isopropylamino) -2- (methylthio)pyrimidin-5-karboxylát

K roztoku 10,0 g (43,0 mmol) ethyl 4-chlor-2-(methylthio)91 pyrimidin-5-karboxylátu a 7,2 ml (51,6 mmol) triethylaminu v 100 ml dichlormethanu, o teplotě 0 °C, se přidá 4,4 ml (51,6 mmol) isoproylaminu. Reakční roztok se míchá při 0 °C po dobu 2 hodin a potom se nechá ohřát na teplotu místnosti. Reakční směs se zředí ethylacetátem, promyje se dvakrát vodnou HC1, dvakrát vodou, jednou nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Organická fáze se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a koncentruje se a získá se 11,1 g (kvantitativní) sloučeniny uvedené v názvu jako olej, který stáním tuhne. t. t. 159 až 160 °C.

Hmotnostní spektrum (Cl) (m+l)/z 256.

Příprava 15

4-(Isopropylamino)-2-(methylthio)pyrimidin-5-karboxylová kyselina

K roztoku 5,0 g (19,6 mmol) ethyl 4-(isopropylamino)-2-(methylthio)pyrimidin-5-karboxylátu v 20 ml ethanolu se přidá roztok 0,8 g (20,6 mmol) hydroxidu sodného v 30 ml vody. Reakční suspenze se míchá při teplotě místnosti přes noc. Reakční roztok se zředí 100 ml vody a promyje se dvakrát diethyletherem. Vodná fáze se neutralizuje 20,6 ml IN HC1. Sraženina se odfiltruje a promyje se vodou, suší se ve vakuu při 70 °C a získá se 4,0 g (90 %) sloučeniny uvedené v názvu, t. t. 202 až 203 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro CgH-^N^SC^:

C, 47,56; H, 5,77; N, 18,49.

Nalezeno: C, 47,38; H, 5,70; N, 18,29.

Příprava 16

N-Allyl-4-(isopropylamino)-2-(methylthio)pyrimidin-5-karboxamid

K 3,5 g (15,4 mmol) 4-(isopropylamino)-2-(methylthio)pyrimidin-5-karboxylové kyseliny se přidá 9,0 ml (123,2 mmol)

·· ··· ·· ··· ·· ··· thionylchloridu, a reakční směs se zahřívá při teplotě 50 °C po dobu 1 hodiny, ochladí se na teplotu místnosti a koncentruje se. Zbytek se dvakrát suspenduje v bezvodém toluenu a koncentruje a získá se bezbarvá pevná látka, chlorid

4-(isopropylamino)-2-(methylthio)pyrimidin-5-karboxylové kyseliny.

K suspenzi chloridu 4-{4-isopropylamino)-2-(methylthio)pyrimidin-5-karboxylová kyseliny teploty 0 °C v 10 ml tetrahydrofuranu se přidá 3,5 ml (46,2 mmol) allylaminu a 20 ml tetrahydrofuranu. Reakční suspenze se nechá krátce ohřát na teplotu místnosti a potom se uchová přes noc při teplotě místnosti. Reakční směs se zředí ethylacetátem, promyje se IN HC1, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Organická fáze se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a koncentruje se a získá 2,1 g (51 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 159 až 161 °C.

Analýza: Vypočteno pro ^c12^h12ⁿ4^SO:

C, 54,11; H, 6,81; N, 21,03.

Nalezeno: C, 54,42; H, 6,69; N, 21,13.

Příprava 17

N-(4-Methoxybenzyl)-4-(isopropylamino)-2-(methylthio)pyrimidin-5-karboxamid

K suspenzi chloridu 4-(isopropylamino)-2-(methylthio)pyrimidin-5-karboxylové kyseliny (připraven jak je popsáno shora, příprava 16) v 30 ml tetrahydrofuranu, o teplotě 0 °C, se přidá 6,0 ml (46,3 mmol) 4-methoxybenzylaminu a 30 ml tetrahydrofuranu. Reakční suspenze se nechá krátce ohřát na teplotu místnosti a potom se uchová přes noc při teplotě 0 °C. Reakční směs se zředí dichlormethanem, promyje se IN HC1 a vodou. Spojená vodná fáze se promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou, suší se nad síranem hořečnatým, filtruje se a koncentruje. Zbytek se krystalizuje ze směsi ethylacetát/hexan a získá se 3,27 g (61 %) ·· · ·· • ·· · · · • · 9 9 ·· ··· ·· ··« sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 176 až 177 °C.

Analýza: Vypočteno pro ^C17^H22^N4^SO2^:

C, 58,94; H, 6,40; N, 16,17.

Nalezeno: C, 58,87; H, 6,34; N, 16,26.

Příklad 68

3-Allyl-7- (imidazol-l-yl) -1-isopropyl-lH-pyrimido [4,5-d] pyrimidin-2,4-dion

K suspenzi 563 mg (14,1 mmol) hydridu sodného (60%), o teplotě 0 °C, se přidá 1,5 g (5,63 mmol) N-allyl-4- (isopropylamino) - 2- (methylthio) pyrimidin-5-karboxamidu a reakčni směs se míchá po dobu 15 minut. K reakčni směsi se přidá po malých částech 2,7 g (16,9 mmol) 1,l'-karbonyldiimidazolu. Reakčni směs se míchá přes noc při teplotě místnosti, zředí se ethylacetátem a promyje se nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vodou a solankou. Spojená organické fáze se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a koncentruje. Zbytek se chromatografuje na silikagelu eluováním směsí ethylacetát/hexan 4:6. Jednotlivé složkové frakce se seberou a krystalizují ze směsi dichlormethan/hexan a získá se 457 mg (26 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 158 až 160 °C

Analýza: Vypočteno pro ^C15^H16^N6°2^:

C, 57,68; H, 5,16; N, 26,91.

Nalezeno: C, 57,57; H, 4,90; N, 26,98.

Směsné složkové frakce se také seberou a krystalizací se získá 782 mg (44 %) analyticky čisté sloučeniny uvedené v názvu.

Příklad 69

7- (Imidazol-l-yl) -1-isopropyl-3- (4-methoxybenzyl) -lH-pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2,4-dion

K suspenzi 865 mg (21,6 mmol) hydridu sodného (60%), o teplotě 0 °C, se přidá 3,0 g (8,66 mmol) N-(4-methoxybenzyl)-4-(isopropylamino)-2-(methylthio)pyrimidin-5-karboxamidu a reakční směs se míchá po dobu 1 hodiny. K reakční směsi se přidá po malých částech 4,2 g (26,2 mmol) 1,1'-kařbonyldiimidazolu. Reakční směs se zahřívá při teplotě 50 °C po dobu 5 hodin, koncentruje se do sucha, a rozpustí se v 300 ml 6N HC1. Roztok se promyje diethyletherem, alkalizuje se 50% vodným roztokem hydroxidu sodného za udržování teploty roztoku pod 40 °C. Suspenze se ochladí na 15 °C a sraženina se odfiltruje, promyje se vodou a suší se ve vakuu při 65 °C a získá se 3,1 g (91 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 148 až 150 °C (rozklad).

Analýza: Vypočteno pro ^20^Η20^Ν6θ3^:

C, 61,22; H, 5,14; N, 21,42.

Nalezeno: C, 60,92; H, 5,25; N, 21,17.

Příklad 70

3-Allyl-l-isopropyl-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]-lH-pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2,4-dion

Směs 300 mg (0,96 mmol) 3-allyl-7-(imidazol-l-yl)-1-isopropyl-lH-pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2,4-dionu a 551 mg (2,88 mmol) 1-(4-aminofenyl)-4-methylpiperazinu se zahřívá při teplotě 180 °C po dobu 2 hodin. Reakční směs se ochladí, rozpustí se v chloroformu a chromatografuje se na silikagelu eluováním směsí methanol/chloroform 4:96. Vzniklý materiál krystaluje ze směsi methanol/voda a získá se 251 mg (60 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 176 až 177 °C.

Analýza: Vypočteno pro ^C23^H29^N7°2-^H2^O:

C, 60,91; H, 6,89; N, 21,62.

Nalezeno: C, 60,79; H, 6,80; N, 21,54.

Příklad 71 l-Isopropyl-3-(4-methoxybenzyl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]-lH-pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2,4-dion

ΦΦΦΦ · »· • ·Φ · · · »· ··· φφ «·» ·· • · · φ φ • Φ Φ· ·

Směs 700 mg (1,78 mmol) 7-(imidazol-l-yl)-1-isopropyl-3-(4-methoxybenzyl)-lH-pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2,4-dionu a 1,02 g (5,35 mmol) 1-(4-aminofenyl)-4-methylpiperazinu se zahřívá při teplotě 180 °C po dobu 2 hodin. Reakční směs se ochladí, rozpustí se v chloroformu a chromatografuje se na silikagelu eluováním směsí methanol/chloroform. Vzniklý materiál se krystaluje ze směsi methanol/voda a získá se 530 mg (58 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 215 až 216 °C. Analýza: Vypočteno pro C_2gH₃₃N₇O₃:

C, 65,22; H, 6,45; N, 19,02.

Nalezeno: C, 65,28; H, 6,41; N, 19,00.

Příklad 72

3-Allyl-7-[4-(2-diethylaminoethoxy)fenylamino]-1-isopropyl-lH-pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2,4-dion

Směs 200 mg (0,64 mmol) 3-allyl-7-(imidazol-l-yl)-1-isopropyl-lH-pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2,4-dionu a 400 mg (1,92 mmol) 4-(2-diethylaminoethoxy)anilinu se zahřívá při teplotě 180 °C po dobu 3 hodin. Reakční směs se ochladí, rozpustí se v chloroformu a chromatografuje se na silikagelu eluováním směsí methanol/chloroform 4:96. Vzniklý olejovitý materiál se krystalizuje stáním a směs se trituruje směsí diethylether/hexan a filtrací se. získá 106 mg (36 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 90 až 96 °C.

Analýza: Vypočteno pro ^C24^H32^N6°3'

C, 63,70; H, 7,13; N, 18,57.

Nalezeno: C, 63,39; H, 7,15; N, 18,36.

Příklad 73

7-[4-(2-Diethylaminoethoxy)fenylamino]-l-isopropyl-3-(4-methoxybenzyl)-lH-pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2,4-dion

Směs 700 mg (1,78 mmol) 7-(imidazol-l-yl)-l-isopropyl-3• ·

-(4-methoxybenzyl)-ΙΗ-pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2,4-dionu a 1,1 g (5,35 mmol) 4-(2-diethylaminoethoxy)anilinu se zahřívá při teplotě 180 °C po dobu 4 hodin, poté se ochladí.

K reakční směsi se přidá 357 mg (3,6 mmol) anhydridu kyseliny jantarové, 1 ml chloroformu, a 3 ml dimethylformamidu.

Reakční směs se zahřívá při teplotě 50 °C po dobu 2 hodin, ochladí se, a zředí se s chloroformem. Směs se promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Organická fáze se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a koncentruje. Zbytek se chromatografuje na silikagelu eluováním směsí methanol/chloroform 5:95 a získá se žlutá pevná látka, která krystalizuje ze směsi methanol/voda a získá se 590 mg (61 %) sloučeniny uvedené v názvu. t. t. 139 až 141 °C

Analýza: Vypočteno pro ^C29^H36^N6°4^:

C, 65,39; H, 6,81; N, 15,78.

Nalezeno: C, 65,35; H, 6,83; N, 15,70.

Jak bylo uvedeno shora, sloučeniny podle vynálezu jsou silnými inhibitory na cyclinu závislých kináz a tyrosin kináz a jsou proto užitečné pro léčbu a prevenci aterosklerózy a dalších proliferačních chorob, jako je rakovina. Sloučeniny mají nízkou toxicitu. Sloučeniny vykazují vynikající inhibiční účinnost proti řadě různých na cyclinu závislých kináz, které jsou využívány ve zkušebních systémech pro měření takové účinnosti. Typické zkoušky jsou například k měření inhibiční účinnosti proti enzymu na cyclinu D závislé kinázy 4 (cdk4/D). Sloučeniny podle vynálezu obecného vzorce I vykazují hodnoty IC₅₀ v rozsahu obecně od okolo 0,04 μΜ do >40 μΜ. Zkouška na cdk4 se provede následovně.

Zkouška na cyclinu D závislé kinázy 4 (cdk4)

Enzymatická stanovení hodnot IC^q (tabulky 1 a 2) a kinetická hodnocení se provádějí za použití 96-jamkových

9Ί

9999 9 ·· · ·· • 99 9 9·· · · • 9 ··· ·· ··· 99 filtračních desek (Millipore, MADVN6550) v celkovém objemu 0,1 ml, v němž je obsažen 20 mM TRIS (tris[hydroxymethyl]aminomethan) při pH 7,4, 50 mM NaCl, lmM dithiothreitol, 10 mM MgCl₂, 25 μΜ ATP obsahující 0,25 μθί [³²P]ATP, 20 ng cdk4, 1 μg retinoblastomu a vhodná ředění sloučeniny podle vynálezu. Do jamek se navzorkují všechny složky s výjimkou ATP a desky se vloží do mixéru na 2 minuty. Reakce se zahájí přídavkem [³²P]ATP a desky se inkubují po dobu 15 minut při 25 °C. Reakce se ukončí přídavkem 0,1 ml 20% kyseliny trichloroctové (TCA). Desky se udržují alespoň 1 hodinu při 4 °C, aby se umožnilo vysrážení substrátu. Poté se jamky promyjí 5 x 0,2 ml 10% TCA a pomocí čítače beta rozpadů ^79 (Wallac, lne. Gaithersburg, MD) se stanoví vázány ^OZ,P.

Zkouška na cyclinu závislé kinázy (cdk2/cyclinE, cdk2/cyclinA, cdc2/cyclinB)

Enzymatická stanovení hodnot IC^q (tabulky 1 a 2) a kinetická hodnocení se provádějí za použití 96-jamkových filtračních desek (Millipore, MADVN6550) v celkovém objemu 0,1 ml, v němž je obsažen 20 mM TRIS (tris[hydroxymethyl]aminomethan) při pH 7,4, 50 mM NaCl, lmM dithiothreitol, 10 mM MgCl₂, 12 mM ATP obsahující 0,25 μCi [³²P]ATP, 20 ng enzymu (cdk2/cyclinE, cdk2/cyclinA, cdc2/cyclinB) 1 μg retinoblastomu a vhodná ředění sloučeniny podle vynálezu. Do jamek se navzorkují všechny složky s výjimkou ATP a desky se vloží do mixéru na 2 minuty. Reakce se zahájí přídavkem [³²P]ATP a desky se inkubují po dobu 15 minut při 25 °C. Reakce se ukončí přídavkem 0,1 ml 20% kyseliny trichloroctové (TCA). Desky se udržují alespoň 1 hodinu při 4 °C, aby se umožnilo vysrážení substrátu. Poté se jamky promyjí 5 x 0,2 ml 10% TCA a pomocí čítače beta rozpadů (Wallac, lne. Gaithersburg, MD) se stanoví vázaný ³²P.

Při měření proti cdk2/E, sloučeniny podle vynálezu vykázaly hodnoty IC^q v rozsahu obecně od 0,9 μΜ do >40 μΜ. Proti cdk2/A, vykazovaly sloučeniny podle vynálezu hodnoty v

rozsahu od 0,5 μΜ do >40 μΜ a proti cdc2/B obecně od okolo 5 μΜ do >40 μΜ. Zkoušky se prováděly jak je popsáno shora a specifická data pro sloučeniny podle vynálezu jsou uvedena v následujících tabulkách.

··· ·

R¹—Ν Η

TABULKA 1

Příklad Rl R2 IC₅₀ (μΜ) nebo procenta inhibice při 40 μΜ

	cdk4/D	cdk2/E	cdk2/A	cdkl/B
9	Ph-4-OMe	cyklopentyl	5,75
10	Ph-4-piperidin	cyklopentyl	1,55
11	Ph-4-(4-Me)piperazÍn	cyklopentyl	0,039	2,12	0,76	11,6 ,
12	Ph-4-pyrazol	cyklopentyl	1,80	4,60	1,33	12,20
13	Ph-3-Me-4-OCH₂CH₂NEt₂	cyklopentyl	0,3
14	Ph-4-pyrrol	cyklopentyl	17.8	38%	5,1	>20
15	Ph-4-(4-OH)-piperidin·	cyklopentyl	0,70	2_f2	0,6	16,76
16	Ph-4-(3-OH)-piperidin	cyklopentyl	0,63	1,5	0,64	14,93
17	Ph-4-(4-NMe₂)-piperidin	cyklopentyl	0.31	3,55	1,31	20,20
18	Ph-4-(3,5-Me₂)-piperazin‘	cyklopentyl	0,35	2,θ
19	Ph-4-(2-CH₂OH)-piperidin	cyklopentyl	¥
20	Ph-4-[4-(CH₂)₃OH]-	cyklopentyl	0,42	5,35	2,72	>40
	piperidin
21	Ph-4-[4-(CH₂)₂ morfolin]-piperidin :	cyklopentyl	0,165	3,00	1,37	36,14
22	Ph-4-(4-Me)piperazin'	isopropyl	0.34	68%	9,31	25%
23	Ph-4-(4-OH)-piperidin	isopropyl		16,85	4,39	>40
24	Ph-4-(4-NMe₂)-piperidin	isopropyl		34,00	12,35	>40
25	Ph-4-pyrazol	isopropyl		10,00	2,31	36.50
26	Ph-4-[4-(CH₂)₃ morfolin]-piperidin	isopropyl	47%	27,00	6,46	>40
27	Ph-4-(4-Me)piperazin	norbomyl	0,77	1,10	0,53	9.77
28	Ph-4-(4-Me)piperazin	methyl	15%	22%	>40	>40
29	Ph-4-(4-OH)-piperidin	methyl	>40	28%	>40	>40
30	Ph-4-(4-NMe₂)-piperidin	methyl	18,25		>40	>40
31	Ph-4-pyrazol	methyl	18%	21%	>40	>40

···· ·

100 • 0 ·

· • 0 0

r! p3 IC₅₀ (μΜ) nebo procenta inhibice při 40 μΜ cdk4/D cdk2/E cdk2/A cdkl/B

70	Ph-4-(4-Me)piperazin	allyl	3,45 0%	>40	>40
72	Ph-4-O(CH₂)₂ NEt₂	allyl	7,35 0%	>40	>40 '
71	Ph-4-(4-Me)piperazin	4-OMe-benzyl	V	>40	>40
73	Ph-4-O(CH₂)₂ NEt₂	4-OMe-benzyl	4,5	>40	>40

Tabulka 2 znázorňuje data pro specifické pyrimido[4,5-d]pyrimidiny (dvojná vazba v poloze 3,4)

TABULKA 2

Příklad R¹ R^{2 ICso} nebo P^rocenta inhibice při 40 μΜ cdk4/D cdk2/E cdk2/A cdkl/B

32	Ph-4-(4-Me)piperazin	cyklopentyl	0,05	1,38	0,83	7,51
η n OJ	Ph-4-(4-OH)-piperidin	cyklopentyl	0,038		0,98	9,76
34	Ph-3-Me-4- OCH₂CH₂NEt₂	cyklopentyl	0,079	3,15	3,22	7,51
35	Ph-4-(3 -OH)piperidin	cyklopentyl	0,082	1,05	0,99	8,54
36	Ph-4-pyrazol·	cyklopentyl	0,435	2,44	1,33	16.13 <
37	Ph-4-OMe	cyklopentyl	0,22	0,9	0,40	4,76
38	Ph-4-piperidin	cyklopentyl	0,15	2,78	0,77	35,25
39	Ph-4-[4-(CH₂)₂ morfolin]-piperidin	cyklopentyl	0,3	1,85	1,44	24,61
40	Ph-4-(4-Me)-piperazin	isopropyl		16,50	4,51	42%

- 101

TABULKA 2 (pokračování)

Příklad Rl r2 |β₅₀ (μΜ) nebo procenta inhibice při 40 μΜ cdk4/D cdk2/E cdk2/A cdkl/B

-	41	Ph-4-(4-NMe₂)- piperidin	isopropyl	>40	14,76	>40
·>	42	Ph-4-pyrrazol	isopropyl 3,9	>40	5,81	>40

43	Ph-4-[4-(CH₂)₃ morfolin]-piperidin	isopropyl	0,54	38,0	7,49	>40
44	Ph-4-(4-Me)-piperazin	norbomyl	0,018	1,2	1,03	7,36
45	Ph-4-(4-Me)-piperazin	methyl	16,2	16%	>40	>40
46	Ph-4-(4-NMe₂)- piperidin	methyl	>40		>40	>40
47	Ph-4-pyrazol	methyl	>40	41%	>40	>40

Některé ze sloučenin podle vynálezu vykazují rovněž dobrou inhibiční účinnost proti enzymům cdk6/D₂ a cdk6/D₃. Tyto zkoušky se provádějí podobným způsobem jak je popsáno shora pro cdk4, jednoduchým použitím příslušného enzymu cdk6 kinázy.

Sloučeniny obecného vzorce I rovněž vykazují dobrou inhibiční účinnost proti určitým tyrosin kinázovým enzymům receptorů růstového faktoru, včetně fibroblastového růstového faktoru (FGF) a od krevních destiček odvozeného růstového faktoru (PDGF). Sloučeniny podle vynálezu vykazují rozsah inhibice IC₅₀ proti FGF tyrosin kináze obecně od okolo 0,3 μΜ do >50 μΜ, proti PDGF tyrosin kináze vykazují IC₅₀ od okolo 0,02 μΜ do >50 μΜ. Zkoušky použité ke stanovení těchto účinností se provedou následovně:

Stanovení tyrosin kinázy receptorů PDGF a FGF

9··· ·· ··· ·· ··· ·· ···

102 cDNA o plné délce tyrosin kináz myšího receptoru PDGF-β a lidského receptoru FGF-1 (flg) byly získány od J. Escobeda a připraveny způsobem popsaným v J. Biol. Chem. 262: 1482 až 1487 (1991). Dále byly sestrojeny PCR primery pro amplifikaci fragmentu DNA kódujícího intracelulární tyrosin kinázovou doménu. Fragment byl zaveden do vektoru Baculoviru, kontransfekován s AcMNPV DNA a rekombinantní virus byl • izolován. Tímto virem byly infikovány hmyzí buňky SF9 za účelem nadexprese tohoto proteinu a buněčného lysátu bylo ’ použito pro vlastní stanovení. Toto stanovení bylo provedeno podle následujícího protokolu. Použije se 96-jamkových misek (100 μΐ inkubační směsi/jamka) a podmínky se optimalitují pro měření inkorporace ³²P z gamma³²P-ATP do glutamát-tyrosinového kopolymerního substrátu. Do každé jamky se přidá 82,5 μΐ inkubačního pufru obsahujícího HEPES (25 mM, ph 7,0), chlorid sodný (150 mM), Triton X100 (0,1%), PMSF (0,2 mM) , vanadičnan sodný Na₃V0₄ (0,2 mM), chlorid manganatý (10 mM) a póly(4:1)glufamát-tyrosin (750 ^g/ml) a poté 2,5 μΐ inhibitoru a 5 μΐ enzymového lysátu (7,5 μg/μl FGF-TK nebo 6,0 μg/μl PDGF-TK) za účelem iniciace reakce. Po lOminutové inkubaci při 25 °C se do každé jamky přidá 10 μΐ gamma³²P-ATP (0,4 μθί + 50 μΜ ATP) a vzorky se dalších 10 minut inkubují při 25 °C. Reakce se zastaví přídavkem 100 μΐ 30% kyseliny trichloroctové (TCA) obsahující difosforečnan sodný (20 mM) a látka se vysráží na filtrační rohoži za skleněných vláken (Wallac). Filtry se promyjí 3 x 15% kyselinou trichloroctovou s obsahem difosforečnanu sodného (100 mM) a radioaktivita zachycená na filtrech se spočítá ve vyhodnovacím zařízení Wallac 1250 Betaplate. Nespecifická aktivita je definována jako radioaktivita zachycená na filtrech po inkubaci vzorků se samotným pufrem (bez enzymu). Specifická enzymatická aktivita je definována jako celková aktivita (enzym + pufr) zmenšená o nespecifickou aktivitu. Koncentrace sloučeniny inhibující specifickou aktivitu z 50 % (IC₅₀) se stanoví z inhibiční křivky. Typické výsledky jsou v následujících tabulkách.

····

- 103 TABULKA 3

R¹ — N H

příklad Rl IC₅₀ (μΜ) nebo procenta inhibice při 40 μΜ _r2 PDGF FGF

9	Ph-4-OMe	cyklopentyl	0,36
10	Ph-4-piperidin	cyklopentyl '		0,64
11	Ph-4-(4-Me)piperazin	cyklopentyl ;	0,175	0,023
13	Ph-3-Me-4-OCH₂CH₂NEt₂	cyklopentyl		0,5-0,05
15	Ph-4-(4-OH)-piperidin	cyklopentyl		0,5-0,05
16	Ph-4-(3-OH)-piperidin	cyklopentyl	0,83
17	Ph-4-(4-NMe₂)-piperidiri	cyklopentyl ..	0,32
18	Ph-4-(3,5-diMe)-piperazin	cyklopentyl	0,21
19	Ph-4-(2-CH₂OH)-piperidin	cyklopentyl ^!		0,5-0,05
21	Ph-4-[4-(CH₂)₂- morfolin]-!	cyklopentyl	1,1
	piperidin
22	Ph-4-(4-Me)-piperazin	isopropyl
25	Ph-4-pyrazol	isopropyl
27	Ph-4-(4-Me)-piperazin'	norbomyl
30	Ph-4-(4-Me)-piperazin'	methyl

104*·TABULKA 3a • · • ·9

R⁴

Příklad	R¹	R²	R³	R⁴	R⁵	R⁶	IC50 (μΜ)
PDGF	FGF
53	(CH₂)₄NEt₂	Et	H	OMe	OMe	H	5	0,06
53a	Ph-4-O(CH₂)₂NEt₂	Et	H	OMe	OMe	H	<0.5	0,02

Příklad RÍ R^{3 lc}so (μΜ) nebo procenta inhibice při 40 μΜ

PDGF FGF

71	Ph-4-(4-Me)piperazin	allyl	>50	>50
73	Ph-4-O(CH₂)₂NEt₂	allyl	>50	>50
72	Ph-4-(4-Me)piperazin	4-OMe-benzyl	>50	>50
74	Ph-4-O(CH₂)₂NEt₂	4-OMe-benzyl	>50	>50

105

TABULKA 4

	R¹—N H	AÁA
N	N O L R²
Příklad	R¹	R2	\|C₅₀ (μΜ) nebo procenta inhibice při 40 μΜ PDGF FGF
32	Ph-4-(4-Me)piperazin	cyklopentyt 1,63	0,37
35	Ph-4-(3-OH)-piperidin	cyklopentyl 2,8	3,49
36	Ph-4-pyrazol	cyklopentyl ^>5θ	>50
39	Ph-4-[4-(CH₂)₂ morfolinj-piperidin	cyklopentyl
40	Ph-4-(4-Me)piperazin	isopropyl	1,13
41	Ph-4-(4-NMe₂) piperidin	isopropyl >50	11,73
43	Ph-4-[4-(CH₂)₂ morfolinj-piperidin .	isopropyl	4,93
44	Ph-4-(4-Me)piperazin	norbomyl	0,47
46	Ph-4-(4-NMe₂) piperidin	methyl		22,6

Src (transformační gen retroviru sarkomu Rous) rodina nereceptorových protein kináz, které všechny obsahují SH2 doménu jsou obsaženy v řadě buněčných signalizačních cest. Například Src je zahrnut v signalizaci receptoru růstového faktoru; v integrinem zprostředkované signalizaci; aktivaci T- a B-buněk a aktivaci osteoklastů. Je známo, že se Src doména SH2 váže k některým klíčovým receptorovým a nereceptorovým tyrosin kinázám, jako jsou tyrosin kinázy obsahující receptory pro PDGF, EGF, HER2/Neu (onkogenní forma EGF), FGF, fokální adhezní kináza, protein pl30 a protein p68. Dále bylo ukázáno, že pp60c-Src je zahrnut při regulaci syntézy DNA, mitózy a jiných buněčných aktivit.

Proto bude užitečné mít k dispozici sloučeniny, které

106 inhibují vazbu proteinů obsahujících doménu SH2 k příbuzným fosforylovaným proteinům jelikož inhibice vazby proteinů obsahujících doménu SH2 k příbuzným fosforylovaným proteinům se může využít při léčbě proliferačních chorob, jako je rakovina, osteoporóza, zánět, alergie, restenóza a kardiovaskulární choroba, které se spoléhají na přenos signálu zahrnující proteiny, které obsahují doménu SH2, která se váže k fosforylovaným proteinům během buněčného signalizačního procesu.

Některé ze sloučenin podle vynálezu byly hodnoceny standardní zkouškou za účelem stanovení jejich schopnosti inhibovat buněčnou Src protein kinázu (c-Src). Sloučeniny podle vynálezu vykazují hodnoty IC₅q v rozsahu obecně od okolo 0,4 do okolo 50 μΜ. Zkoušky se provedly následovně:

Kináza c-Src se purifikuje z buněčného lysátu hmyzích buněk infikovaných Baculovirem za použití antipeptidové monoklonální protilátky zaměřené proti N-terminálním aminokyselinám 2 až 17 c-Src. Tato protilátka kovalentně vázaná k 0,65 μΜ latexovým perlám se přidá k suspenzi pufru pro lysy hmyzích buněk, který obsahuje chlorid sodný (150 mM), Tris o pH 7,5 (50 mM), DTT (1 mM), NP-40 (1%), EGTA (2 mM), vanadičnan sodný (1 mM), PMSF (1 mM), leupeptin (1 μg/ml), pepstatin (1 μg/ml) a aprotinin (1 μg/ml). Lysat hmyzích buněk obsahující protein c-Src se inkubuje s těmito perlami po dobu 3 až 4 hodin při 4 °C, přičemž během inkubace se inkubační nádoba otáčí. Na konci inkubace lysátu se perly 3x opláchnou v pufru pro lysy, resuspendují v pufru pro lysy s obsahem 10 % glycerolu a zmrazí. Zmrazené latexové perly se nechají roztát, 3x se promyjí zkouškovým pufrem, který obsahuje 40 mM Tris o pH

7,5 s přísadou chloridu hořečnatého (5 mM) a suspendují ve stejném pufru. Do jamek 96-jamkové plotny, které jako dno obsahují 0,65 μιη polyvinylidenovou membránu, se přidají tyto reakční složky: 10 μΐ perel c-Src, 10 μΐ poly-Glu-Tyr substrátu (2,5 mg/ml), ATP (5 μΜ), který obsahuje 0,2 μ(2ί ·· ··· 99 999 99 999

- 107 značeného ³²P-ATP, 5 μΐ DMSO s obsahem inhibitorů nabo jako rozpouštědlo (v případě kontrolních vzorků) a pufr do konečného objem 125 μΐ. Reakce se zahájí při teplotě místnosti přídavkem ATP a ukončí po 10 minutách přídavkem 125 μΐ 30% kyseliny trichloroctové a 0,1 M difosforečnanu sodného a chlazením vzniklé směsi po dobu 5 minut na ledu. Potom se obsah jamek přefiltruje a jamky se promyji dvěma 250 μΐ alikvotními vzorky 15% kyseliny trichloroctové a přísadou fosforečnanu (0,1 M). Radioaktivita filtrů se spočítá v kapalinovém scintilačním počítači a zjištěná data se zhodnotí, pokud se týče inhibiční aktivity, porovnáním s daty naměřenými za použití známého inhibitoru, jako je erbstatin. Tento způsob je podrobněji popsán v J. Med. Chem. 37: 598 až 609 (1994). Tabulky 5 a 6 uvádějí seznam c-Src inhibičních koncentrací (ICgg) pro reprezentativní sloučeniny.

♦··· · ·· * « ♦· 9 · ·· • · 9 9 9

9 9 9 9 · • · · · · ♦ ·· »·· ·· ···

- 108 TABULKA 5

N'^> R¹ — H	^kN^O l₂ R²·
Příklad	R¹	R²	c-Src IC50 (μΜ)
10	Ph-4-piperidin	cyklopentyl	>50
11	Ph-4-4-(Me)-piperazini	cyklopentyl	0,71
14	Ph-4-pyrrole	cyklopentyl	>50
15	Ph-4-(4-OH)-piperidin	cyklopentyl	2,4
16	Ph-4-(3-OH)-piperidin	cyklopentyl	4,12
17	Ph-4-(4-NM e2)-piperidin	cyklopentyl	0,37
18	Ph-4-(3,5-diMe)-piperazin	cyklopentyl	0,40
19	Ph-4-(2-CH₂OH)-piperidin	cyklopentyl	4,42
21	Ph-4-[4-(CH2)2!morfolin]-piperidin	cyklopentyl	1,60
22	Ph-4-(4-Me)-piperazin	isopropyl	1.51 é

TABULKA 6

Příklad	R¹	R²	c-Src IC50 (μΜ)
32	Ph-4-(4-Me)piperazin	cyklopentyl	3,95
35	Ph-4-(3-OH)piperidin	cyklopentyl	4,65
39	Ph-4-[4-(CH₂)2 morfolinj-piperidin	cyklopentyl	3,23
40	Ph-4-(4-Me)piperazin	isopropyl	4,30
41	Ph-4-(4-NMe2)piperidin	isopropyl	3,06
44	Ph-4-(4-Me)piperazin	norbomyl	2,30

109

Sloučeniny obecného vzorce I jsou užitečné pro léčbu proliferačních chorob týkající se angiogenéze a hodnotí se v in vitro zkoušce lidské umbilikální žilní endotelové buňky. Tato zkouška, popsaná dále se použije ke stanovení antiproliferačních účinků sloučenin podle vynálezu na lidské umbilikální žilní endotelové buňky a výsledky jsou uvedeny v tabulce 7.

Proliferační zkouška na lidskou umbilikální žilní endotelovou buňku (HUVEC)

Plotny s 96 jamkami s tkáňovou kulturou se očkují 100 μΐ buněk do každé jamky v řadách A až G, přičemž řada H zůstává prázdná. HUVEC (Clonetics, San Diego, CA) rostou v endotelovém růstovém mediu (prostředí EGM, Clonetics), obsahující 2% fetální hovězí sérum. Hustota buněk k očkování buněk HUVEC je 20000 na ml. Buňky C6 (ATCC č. kat. CCL-107) se očkují při 6000 na ml v mediu F10 (nutriční směs Hemes), doplněném 15 % koňského séra, 2,5 % fetálního hovězího séra a 6,0 ml 200 mM glutaminu na 600 ml prostředí. Buňky A90 (Suny, Buffalo, NY) se očkují při 6000 na ml, ale jsou pěstovány v RPMI 1640 (Roswell Park Memoriál Institute) obsahující 10 % fetálního hovězího séra. Pokud není uvedeno jinak, jsou tkáňové kultury a složky od GIBCO. Buňky se nachají inkubovat při 37 °C, 5% C0₂ a 100% relativní vlhkosti po dobu 16 až 24 hodin.

Sloučeniny podle vynálezu se připraví jejich rozpuštěním v DMSO v koncentraci 5 mM, následuje zředění na 50 μΜ v prostředí EGM. 100 mikrolitrů každé sloučeniny se aplikuje do dvojitých jamek v 1. sloupci předem připravených buněčných ploten. Ve sloupci 1, řady H se aplikuje 100 μΐ prostředí EGM. Sloučeniny ve sloupci 1 se zředí přes plotny za použití postupného dvojnásobného zředění.

Plotny se inkubují jak uvedeno shora další čtyři dny a poté se zbarví Sulphorhodaminem B. Zbarvení se provede následovně: Z ploten se odstraní prostředí a buňky se fixují za použití 10% kyseliny trichloroctové po dobu 30 minut při 4

- 110 °C. Po fixaci se plotny promyjí pětkrát destilovanou vodou a poté se přidá do každé jamky 100 μΐ Sulphorhodamidu B. Sulphorhodamid se rozpustí v 1% kyselině octové na koncentraci 0,75 %. Po zbarvení se přebytek barviva odstraní z jamek a plotny se promyjí čtyřikrát s 1% kyselinou octovou. Plotny se suší na vzduchu a vázané barvivo se solubilizuje ve 100 μΐ 10 mM nepufrované TRIS báze. Absorbance se měří na čtecím zařízení při 540 nM za použití referenční filtrační vlnové délky 630 nm. Koncentrace sloučeniny potřebná k potlačení 50% buněčné proliferace (IC₅₀) se stanoví na základě měření absorbance. Sulphorhodamin B a TRIS jsou od firmy Sigma Chemical Company. Kyselina octová a kyselina trichloroctová jsou od Mallinckrodt AR.

·· ···

- 111 TABULKA 7

R⁴

Příklad	R¹	R²	R³	R⁴	R⁵	R⁶	HUVEC IC₅₀(pM)
52	(CH₂)₄NEt₂	H	H	OMe	OMe	H	6,65
53	(CH₂)₄NEt₂	Et	H	OMe	OMe	H	0,192
53a	Ph-4-O(CH₂)₂NEt₂	Et	H	OMe	OMe	H
54	(CH₂)₂NHCH₂-(4-pyridyl)	H	H	OMe	OMe	H	>25
54a	(CH₂)₃-4-Me-piperazin	H	H	OMe	OMe	H	5,99
54b	(CH₂)₄-4-Me-piperazin	H	H	OMe	OMe	H	4,96
54c	(CH₂)5-4-Me-piperazin	H	H	OMe	OMe	H	5,78
55	(CH₂)₃NEt₂	H	H	OMe	OMe	H	>25
56	(CH₂)₂-NHCH₂-(4- pyridyl)	Et	H	OMe	OMe	H	1,93
57	(CH₂)₃-4-Me-piperazin	Et	H	OMe	OMe	H	0,152
58	(CH₂)₄-4-Me-piperazin	Et	H	OMe	OMe	H	0,134
59	(CH₂)5-4-Me-piperazin	Et	H	OMe	OMe	H	0,112
60	(CH₂)₃NEt₂	Et	H	OMe	OMe	H	0,943
65	. (CH₂)₄NEt₂	Et	Cl	OMe	OMe	H	0.036

112

Sloučeniny obecného vzorce I byly rovněž hodnoceny v několika standardních in vivo zkouškách buněčné kultury a bylo zjištěno, že mají dobrou účinnost proti enzymům tyrosin kinázy.

Sloučeniny podle vynálezu mohou být formulovány konvenčním způsobem do konvenčních dávkových forem k dodávání různými cestami, včetně orální nebo parenterální cesty (například subkutánní, intravenózní a intramuskulární), transdermální, například pomalým uvolňováním náplastí na kůži nebo krémem, rovněž zařízením pro pomalé uvolňování, jako jsou osmotické pumpy, čípky a bukální cestou. Následující příklady ilustrují jak se sloučeniny podle vynálezu snadno formuluj i.

Příklad 75 mg tabletová formulace na tabletu na 10000 tablet

0,050	g	l-Cyklopentyl-7-{3-methyl-4-[2-diethylamino)ethoxy]fenylamino}-3,4-dihydro-IH-pyrimido-[4,5-d]pyrimidin-2-on	500	g
0,080	g	laktóza	800	g
0,010	g	kukuřičný škrob (pro směs)	100	g
0,008	g	kukuřičný škrob (pro pastu)	80	g

0,148 g 1480 g

0,002 g stearát hořečnatý (1%) 20 g

0,150 g

1500 g

Pyridopyrimidin, laktóza a kukuřičný škrob (pro směs) se důkladně smísí. Kukuřičný škrob (pro pastu) se suspenduje

113 ·*·· ·· • · · • · ·<· ·« · ·· v 600 ml vody a zahřívá se za míchání k vytvoření pasty. Tato pasta se použije ke granulaci smíchaných prášků. Vlhké granule se protlačí přes ruční síto č. 8a suší se při 80 °C. Suché granule se se potom protlačí přes síto č. 16.

Směs se lubrikuje 1% stearátem hořečnatým a lisují se do tablet na konvenčním tabletovacím zařízení. Tablety, stejně tak jako sloučeniny podle vynálezu jsou užitečné pro léčbu rakoviny, jako je rakovina prsu, prostaty, plic, vaječníků, střeva, slinivky, melanomu, jícnu, mozku, Kaposiho sarkomu a lymfomu. Zvláštní případy, které mají být léčeny zahrnují karcinom plic, karcinom nízkého stupně močového měchýře u lidí a rakovinu střeva a rekta u lidí.

Příklad 76

Příprava orální suspenze

Složka Množství l-cyklopentyl-7-{4- [4-(dimethylamino)piperidin-1-yl]fenylamino}-3,4-dihydro-1H-pyrimido[4,5-d] -

pyrimidin-2-on		500	mg
Roztok sorbitolu	(7% N.F.)	40	ml
Benzoát sodný		150	mg
Sacharin		10	mg
Třešňová příchuť.		50	mg
Destilovaná voda	gs	100	ml

Roztok sorbitolu se přidá k 40 ml destilované vody a suspenduje se do ní pyrádopyrimidin. Přidá se sacharin a benzoát sodný a aromát a směs se rozpustí. Objem se upraví na 100 ml destilovanou vodou. Každý mililitr sirupu obsahuje 5 mg sloučeniny podle vynálezu.

Příklad 77

114

Příprava parenterálního roztoku

V roztoku 700 ml propylenglykolu a 200 ml vody pro injekce se suspenduje 20,0 g l-cyklopentyl-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-onu za míchání. Po kompletním vytvoření suspenze se pH upraví pomocí kyseliny chlorovodíkové na 5,5 a objem se doplní na 1000 ml vodou pro injekce. Formulace se sterilizuje, plní se do 5 ml ampulí, každá obsahuje 2,0 ml (představuje 40 mg sloučeniny podle vynálezu) a zataví se pod dusíkem.

Příklad 78

Čípky

Směs 400 mg 1-cyklopentyl-7-[4-(piperidin-1-yl)fenylamino] pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-onu a 600 mg theobroma (olej)se mísí při 60 °C do dosažení homogenity. Směs se ochladí a nechá se ztuhnout v kónické formě a získá se 1 g čípek.

Příklad 79

Formulace pro pomalé uvolňování

500 mg l-cyklopentyl-7-[4-(3-hydroxypiperidin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydro-lH-pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-onu se převede na hydrochloridovou sůl a vloží se do Oros-ovy osmotické pumpy k regulovanému uvolňování pro léčbu aterosklerózy.

Příklad 80

Formulace pro náplast na kůži mg l-cyklopentyl-7-{3-methyl-4-[2-(diethylamino)····

- 115

ethoxy] fenylamino} -pyrimido [4,5-d] pyrimidin-2 (1H) -onu se smíchá s 50 mg monolaurátu propylenglykolu v polydimethylsiloxaném pojivě. Směs se vrství na elastický film připravený s adhezivní formulací polybutenu, polyisobutylenu a monolaurátu propylenglykolu. Vrstvy se vloží mezi dvě vrstvy polyuretanového filmu. K lepivému povrchu se připojí vložka, která se odstarní před použitím na povrch kůže. Monolaurát propylenglykolu slouží jako činidlo zvyšující prostupnost.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Sloučenina obecného vzorce I:

a její farmaceuticky přijatelné soli kde:

přerušovaná čára znamená případnou dvojnou vazbu;

Z je N nebo CH;

G je N nebo CH;

W je NH, S, SO nebo SO₂;

X je buď O, S nebo NR¹⁰;

R¹ a R² a R¹⁸ jsou nezávisle vybrány ze souboru, který zahrnuje H, (CH2)nAr, COR⁴, (CH2)_nheteroaryl, (CH₂)_nheterocyklyl, C^-C·^ alkyl, C₃-C₁₀ cykloalkyl, ^C2”^C1O alkenyl ^{a c}2^c10 alkinyl, kde n je 0, 1, 2 nebo 3 a (CH2)nAr, (CH2)nheteroaryl, alkyl, cykloalkyl, alkenyl a alkinylové skupiny jsou případně substituovány až 5 skupinami vybranými ze souboru, který zahrnuje NR⁴R⁵, N(O)R⁴R⁵, NR⁴R⁵R⁶Y, alkyl, fenyl, substituovaný fenyl, (CH2)_nheteroaryl, hydroxy, alkoxy, fenoxy, thiol, thioalkyl, halogen, COR⁴,

CO₂R⁴, CONR⁴R⁵, S02NR⁴R⁵, SO3R⁴, PO3R⁴, aldehyd, nitril, nitro, heteroaryloxy, T(CH2)_mQR⁴,

OR⁵

I

T(CH₂)_mC-(CH₂)_mQR⁴,

117

C(O)T(CH₂)_mQR⁴, NHC(O)T(CH2)mQR⁴, T(CH2)_mC(O)NR⁴NR⁵nebo T(CH₂)_mCO₂R⁴, kde každé m je nezávisle l až 6 a T je 0, S, NR⁴, N(0)R⁴, NR⁴R⁶Y nebo CR⁴R⁵ a Q je O, S, NR⁵, N(0)R⁵ nebo NR⁵R⁶Y;

když přerušovaná čára je přítomna, R³ není přítomno;

jinak R³ má významy R², kde R² má význam definovaný shora, a rovněž OH, NR⁴R⁵, COOR⁴, OR⁴, C0NR⁴R⁵, SO₂NR⁴R⁵,

SO₃R⁴, PO3R⁴, T(CH2)_mQR⁴,

OR⁵

I

T(CH₂)_mC-(CH₂)_mQR⁴, í

H kde T a Q mají význam uvedený shora;

R⁴ a R⁵ se vždy nezávisle zvolí ze souboru, který zahrnuje vodík, C₁-C₆ alkyl, substituovaný alkyl, C₂-Cg alkenyl, C₂-Cg alkinyl, N(C₁-Cgalkyl) _{χ ne}]3_{O 2}' (CH₂)_nAr, C₃-C₁₀ cykloalkyl, heterocyklyl a heteroaryl nebo R⁴ a R⁵ společně s atomem dusíku ke kterému jsou vázány případně tvoří kruh mající 3 až 7 atomů uhlíku a uvedený kruh případně obsahuje 1, 2 nebo 3 heteroatomy vybrané ze souboru, který zahrnuje dusík, substituovaný dusík, kyslík a síru;

když R⁴ a R⁵ společně s atomem dusíku, ke kterému jsou vázány tvoří kruh, je uvedený kruh případně substituován 1 až 3 skupinami vybranými ze souboru, který zahrnuje OH, OR⁴, NR⁴R⁵, (CH2)m0R⁴, (CH2)_mNR⁴R⁵, T-(CH₂)_mQR⁴,

CO-T-(CH₂)_mQR⁴, NH(CO)T(CH2)mQR⁴, T-(CH2)_mCO₂R⁴, nebo T(CH₂)_mCONR⁴R⁵.

R ⁸ je alkyl;

R⁸ a R⁹ jsou nezávisle H, alkyl, NR⁴R⁵, N(0)R⁴R⁸,

NR⁴R⁵R⁸Y, hydroxy, alkoxy, thiol, thioalkyl, halogen, COR⁴, co2r⁴, conr⁴r⁵, so2nr⁴r⁵, so3r⁴, po3r⁴, CHO, CN nebo N0₂;

když je přerušovaná čára nepřítomná, R⁹ je dále karbonyl,

- 118 • · · · thiokarbonyl, imin a substituovaný imin, oxim a oximether, a

Y je halogenový protiion.
2. Sloučenina podle nároku 1, kde Z a G jsou dusík, W je NH a R⁸ a R⁹ jsou vodík
3. Sloučenina podle nároku 2 mající obecný vzorec
4. Sloučenina podle nároku 3, kde R¹ je fenyl nebo substituovaný fenyl, pyridyl nebo substituovaný pyridyl.
5. Sloučenina podle nároku 4, kde R je alkyl, substituovaný alkyl nebo nesubstituovaný nebo substituovaný cykloalkyl.
6. Sloučenina, kterou je

1-Methyl-7-[4-(pyrazol-l-yl)fenylamino]pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

l-Methyl-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]pirimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1-Methyl-7-[4-(4-hydroxypiperidin-l-yl)fenylamino]pirimido [4,5-d] pyrimidin-2 (.IHJ -1-on;

l-Methyl-7-{4-[4-(dimethylamino)piperidin-l-yl]fenylamino} pyrimido [4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

l-Isopropyl-7-[4-(pyrazol-l-yl)fenylamino]pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

l-Isopropyl-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1-Isopropyl-7-[4-(4-hydroxypiperidin-l-yl)fenylamino]pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

119 l-Isopropyl-7-{4-[4-(dimethylamino)piperidin-l-yl] fenylamino}pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1-Bicyklo[2.2.1]hept-2-yl-7- [4-(pyrazol-l-yl)fenylamino] pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on (exo);

1-Bicyklo[2.2.l]hept-2-yl-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl) fenylamino]pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on (exo);

1-Bicyklo[2.2.1]hept-2-yl-7-[4-(4-hydroxypiperidin-l-yl) fenylamino]pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on (exo);

1-Bicyklo[2.2.1]-hept-2-yl-7-{4-[4-(dimethylamino)piperidin-l-yl]fenylamino}pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(lH)-on (exo);
7-[4-(4-Aminoacetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-1-cyklopentylpyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-{4-[4-(2-Amíno-4-methylpentanoyl)piperazin-l-yl]fenylamino}-1-cyklopentylpyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

l-Methyl-7-{4-[4-(3-morfolin-4-ylpropyl)piperidin-l-yl] fenylamino}pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

l-Isopropyl-7-{4-[4-(3-morfolin-4-ylpropyl)piperidin-1-yl]fenylamino}pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

l-Cyklopentyl-7-(4-[4-(3-morfolin-4-ylpropyl)piperidin-1-yl]fenylamino}pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on ;

1-Bicyklo[2.2.1]hept-2-yl-7-{4-[4-(3-morfolin-4-ylpropyl) piperidin-l-yl]fenylamino}pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on (exo);

l-Cyklopentyl-7-(4-methansulfonylfenylamino)pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

l-Cyklopentyl-7-(4-fluor-3-methylfenylamino)pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(3-Aminopyrrolidin-l-yl)fenylamino]-1-cyklopentylpyrimido[4,5-d]-2(1H)-on;

1-Cyklopentyl-7-(4-piperaz in-1-yl-fenylamino)pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

l-Cyklopentyl-7-[4-(5-methylhexahydropyrrolo[3,4-c] pyrrol-2-1)fenylamino]pyrimido[4,5-d]-2(1H)-on;

7-[4-(4-Acetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-1-cykloheptyl120 ···· · ·· · ·· • ·· · · ·· · · · ·· ··· ·· ··· ·· ··· pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on, l-Cyklopentyl-7- ^řpyridin-4-ylamino) pyrimido [4,5-d] pyrimidin-2(1H)-on.

7. Sloučenina podle nároku 2, mající vzorec
8. Sloučena podle nároku 7, kde R¹ je alkyl, pyridyl nebo fenyl, přičemž každý je případně substituován hydroxyskupinou, alkoxyskupinou, NR⁴R⁵ nebo T(CH₂)_mOR⁴.
9. Sloučenina, kterou je l-Methyl-7-[4-(pyrazol-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido [4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

l-Methyl-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropirimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

l-Methyl-7-[4-(4-hydroxypiperidin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropirimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-1-on;

l-Methyl-7-{4-[4- (dimethylamino)piperidin-1-yl]fenylamino} -3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

l-Isopropyl-7-[4-(pyrazol-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido [4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

l-Isopropyl-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino] -3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H) -on;

1-Isopropyl-7-[4-(4-hydroxypiperidin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

l-Isopropyl-7-{4- [4-(dimethylamino)piperidin-l-yl] fenylamino} -3,4-dihydropyrimido [4,5-d]pyrimidin-2 (1H) -on;

1-Bicyklo[2.2.1]hept-2-yl-7- [4-(pyrazol-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on (exo);

1-Bicyklo[2.2.1] hept-2-yl-7- [4-(4-methylpiperazin-l-yl)121 ···· * ·* · ·· • ·· « · ·· · · · • · · · · · · • · · · · > · · « ·· ··· ·· ··· ·· ··· fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(IH)-on (exo);

1-Bicyklo[2.2.1]hept-2-yl-7-[4-(4-hydroxypiperidin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(IH)-on (exo);

1-Bicyklo[2.2.1]-hept-2-yl-7-{4-[4-(dimethylamino)piperidin-l-yl]fenylamino}-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(IH)-on (exo);

7-[4-(4-Aminoacetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-1-cyklopentyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(IH)-on;

7-{4-[4-(2-Amino-4-methylpentanoyl)piperazin-l-yl]fenylamino}-l-cyklopentyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(IH)-on;

1-Methyl-7-{4-[4-(3-morfolin-4-ylpropyl)piperidin-l-yl]fenylamino}-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(IH)-on;

l-Isopropyl-7-{4-[4-(3-morfolin-4-ylpropyl)piperidin-1-yl]fenylamino}-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(IH)-on;

l-Cyklopentyl-7-{4-[4-(3-morfolin-4-ylpropyl)piperidin-1-yl]fenylamino}-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2 (IH)-on ;

1-Bicyklo[2.2.1]hept-2-yl-7-{4-[4-(3-morfolin-4-ylpropyl)piperidin-l-yl]fenylamino}-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(lH)-on (exo);

l-Cyklopentyl-7-(pyridin-4-ylamino)-3,4-dihydropyrimido [4, 5-d] -pyrimidin-2(IH)-on;

l-Cyklopentyl-7-(4-methansulfonylfenylamino)-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(IH)-on;

l-Cyklopentyl-7-(4-fluor-3-methylfenylamino)-3,4-dihydropyrimido [4,5-d]pyrimidin-2(IH)-on;

7-[4-(3-Aminopyrrolidin-l-yl)fenylamino]-1-cyklopentyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]-2(IH)-on;

7- [4-(4-Acetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-1-cyklopentyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(IH)-on;

l-Cyklopentyl-7-(4-piperazin-l-yl-fenylamino)-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(IH)-on;

l-Cyklopentyl-7-[4-(5-methylhexahydropyrrolo[3,4-c]pyrrol-2-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(IH)-on;

7-[4-(4-Aminoacetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3- (3,5122

-dimethoxyfenyl)-1-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(4-Aminoacetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3-(2-chlor-3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d] pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(4-Aminoacetylpiperazin-l-yl)fenylamino] -3-(2,6-dichlor-3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d] pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(4-Aminoacetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3-(2-methyl-3,5-dimethoxyfenyl)-1-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(4-Aminoacetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3-(2,6-dimethyl-3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d] pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(2-Diethylaminoethoxy)-fenylamino]-3-(3,5-dimethoxyfenyl) -l-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(2-Diethylaminoethoxy)fenylamino]-3-(2-chlor-3,5-dimethyoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(2-Diethylaminoethoxy)fenylamino]-3-(2,6-dichlor-3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on_;

7-[4-(2-Diethylaminoethoxy)fenylamino]-3-(2-methyl-3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(lH)-on;

7-[4-(2-Diethylaminoethoxy)fenylamino]-3-(2,6-dimethyl-3,5-dimethoxy-fenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-(4-Diethylaminobutylamino)-3-(3,5-dimethoxyfenyl)-1-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-(4-Diethylaminobutylamino)-3-(2-chlor-3,5-dimethoxyfenyl) -l-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(H)-on;

7-(4-Diethylaminobutylamino)-3-(2,6-dichlor-3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-(4-Diethylaminobutylamino)-3-(2-methyl-3,5-dimethoxy123 fenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d] pyrimidin-2(1H)-on;

7-(4-Diethylaminobutylamino)-3-(2,6-dimethyl-3,5dimethoxy-fenyl)-1-ethýl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-(Pyridin-4-ylamino)-3-(3,5-dimethoxyfenyl)-1-ethyl-3,4-dihydroxypyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-(Pyridin-4-ylamino)-3-(2-chlor-3,5-dimethoxyfenyl)-1-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-(Pyridin-4-ylamino)-3-(2,6-dichlor-3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-(Pyridin-4-ylamino)-3-(2,6-dimethyl-3,5-dimethoxyfenyl) -l-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-(Pyridin-4-ylamino)-3-(2-methyl-3,5-dimethoxyfenyl)-1-ethyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-(Pyridin-4-ylamino)-3-(2,6-dichlor-3,5-dimethoxyfenyl)-1-cyklopentyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

3-(2-Chlor-3,5-dimethoxyfenyl)-7-(4-diethylaminobutylamino) -3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

3-(2-Chlor-3,5-dimethoxyfenyl)-7-[4-(2-diethylaminoethoxy) fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

3-(2-Chlor-3,5-dimethoxyfenyl)-7-(pyridin-4-ylamino)-3,4-dihydropyrimido [4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

3-(3,5-Dimethoxyfenyl)-7-(pyridin-4-ylamino)-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(2-Diethylaminoethoxy)fenylamino] -3-(3,5-dimethoxyfenyl)-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

3-(2,6-Dichlor-3,5-dimethoxyfenyl) -7-(pyridin-4-ylamino)-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

3-(2,6-Dichlor-3,5-dimethoxyfenyl) -7-[4-(2-diethylaminoethoxy) fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on.
10. Sloučenina podle nároku 2, mající vzorec

124
11. Sloučenina, kterou je

1-[7-[4-(2-Dimethylaminoethoxy)fenylamino]-3-(3,5-dimethoxyfenyl)-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin]-3-ethylmočovina;

1-{3-(2-Chlor-3,5-dimethoxyfenyl)-7-[4-(2-diethylaminoethoxy)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-yl}-3-ethylmočovina;

1-terc.Butyl-3-[7-[4-(2-diethylaminoethoxy)fenylamino]-3-(3,5-dimethoxyfenyl)-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin2-yl]močovina;

1-terc.Butyl-3-{3 -(2-chlor-3,5-dimethoxyfenyl)-7-(4-(2-diethylaminoethoxy)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-yl}močovina;

1-terc.Butyl-3-[3-(3,5-dimethoxyfenyl)-7-(pyridin-4-ylamino)-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-yl]močovina;

1-(3-(3,5-Dimethoxyfenyl)-7-(pyridin-4-ylamino)-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-yl]-3-ethylmočovina;

1-terc.Butyl-3-[3-(2-chlor-3,5-dimethoxyfenyl)-7-(pyridin-4-ylamino)-3,4-dihydropyrimido(4,5-d]pyrimidyl-2-yl] močovina;

1-[3-(2-Chlor-3,5-dimethoxyfenyl)-7-(pyridin-4-ylamino) -3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-yl]-3-ethylmočovina;

1-[3-(2-Chlor-3,5-dimethoxyfenyl)-7-(4-diethylaminobutylamino)-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-yl]-3-ethylmočovina ;

3-Methyl-N-{7-[4-(5-methylhexahydropyrrolo(3,4-c]pyrrol-2-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2 -1}butyramid;

1-{7-[4-(4-Acetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3,4125 • ••4 · ♦* Φ · · « • · * · ♦ · · · ··· <»«· · · · fc * · ·· ··· ·· ··· «4 444

-dihydropyrimido [4,5-d] pyrimidin-2-yl} -3-isopropylmočovina a 1-terc.Butyl-3- [3- (2-chlor-3,5-dimethoxyfenyl)-7-(4-diethylaminobutylamino) - 3,4-dihydropyrimido [4,5-d] pyrimidin-2-yl]močovina.
12. Sloučenina podle nároku 2, mající vzorec
13. Sloučenina, kterou je

1- [7- (4-Fluorf enylamino) pyrimido [4,5-d] pyrimidin-2-yl] -3-methylmočovina;

1-Isopropyl-3- (7-fenylaminopyrimido [4,5-d] pyrimidin-2-y1)močovina;

l-{7 - [4- (3-Aminomethylpyrrolidin-l-yl)fenylamino] pyrimido t4,5-d] pyrimidin-2-yl}-3-isopropylmočovina;

1-Isopropyl-3- [7- (4-piperazin-l-yl-fenylamino)pyrimido [4,5-d]pyrimidin-2-yl]močovina;

l-{7-[4-(4-Acetylpiperazin-l-yl)fenylamino]pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-yl}-3-isopropylmočovina;

N-{7-[4-(3-Aminopyrrolidin-l-yl)fenylamino]pyrimido[4,5-d] pyrimidin-2-yl}-3-methylbutyramid;

N-[7-(4-Piperazin-1-yl-fenylamino)pyrimido[4,5-d] pyrimidin-2-yl]isobutyramid;

N-{7- [4- (4-Acetylpiperazin-l-yl)fenylamino]pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-yl}-3-methylbutyramid;

3-Methyl-N- [7- (pyridin-4-ylamino)pyrimido [4,5-d] pyrimidin-2-yl]butyramid;

1-Isopropyl-3-[7- (pyridin-4-ylaminopyrimido[4,5-d] pyrimidin-2-yl]močovina;

N-{7- [4- (3-Aminomethylpyrrolidin-l-yl) fenylamino] 126 pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-yl}-3-methylbutyramid.
14. Sloučenina podle nároku 1, kde W je S, SO nebo S0₂.
15. Sloučenina podle nároku 1, mající vzorec
16. Sloučenina, kterou je l-Isopropyl-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]-1H-pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2,4-dion;

7-[4-(2-Diethylaminoethoxy)fenylamino]-1-isopropyl-lH-pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2,4-dion;

7-(4-Diethylaminobutylamino)-3-(3,5-dimethoxyfenyl)-1-ethyl-lH-pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2,4-dion;

7-[4-(2-Diethylaminoethoxy)fenylamino] -3-(3,5-dimethoxyf enyl)-1-ethyl-1H-pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2,4-di on; a

7-(Pyridin-4-ylamino)-3 -(3,5-dimethoxyfenyl)-1-ethyl-lH-pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2,4-dion.
17. Sloučenina podle nároku 1, kde Z je N, G je CH, W je NH a R⁸ a R⁹ jsou oba vodík.
18. Sloučenina podle nároku 17, mající obecný vzorec

127 ····· «» · ·» · ··* « *·· · · · · • · «»♦ · « » • · » · · · 9 · · · ·* *·· * · · · · « · · · ·
19. Sloučenina, kterou je

2-[4-(3-Aminopyrrolidin-l-yl)fenylamino]-8-isopropyl-8H-pyridol[4,3-d]pyrimidin-7-on;

8-Cyklopentyl-2-[4-(hexahydropyrrol[3,4-c]pyrrol-2-yl)fenylamino]-8H-pyrido[4,3-d]pyrimidin-7-on;

2-[4-(4-Acetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-8-cyklopentyl-8H-pyrido[4,3-d]pyrimidin-Ί-on;

N-{2-[4-(4-Aminoacetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-8-cyklopentylpyrido[4,3-d]pyrimidin-7-yl}-2,2-dimethylpropionamid;

N-(2-{4-[4-(2-Amino-4-methylpentanoyl)piperazin-l-yl]fenylamino]-8-cyklopentylpyrido[4,3-d]pyrimidin-7-yl)-2,2-dimethylpropionamid.
20. Sloučenina podle nároku 1, kde Z je CH, G je N, W je NH a R⁸ a R⁹ jsou oba vodík.
21. Sloučenina podle nároku 20, mající obecný vzorec
22. Sloučenina, kterou je

1-(2-Benzyloxyethyl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]pyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1-(Thiofen-2-yl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino] pyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1-(Thiofen-2-ylmethyl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino] pyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1-(Tetrahydrofuran-2-yl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]pyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1-(Hexa-2,4-dien-l-yl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino] pyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

• e ··

- 128 • · β · · « 9 · W • » * » · • 9 · ί

9 9 9.9 9 99

1-(Prop-2-in-l-yl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl) fenylamino]pyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1- [3- (Dimethylamino)prop-l-yl] -7- [4- (4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]pyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H) -on;

1-(3-Hydroxyprop-l-yl)-7- [4- (4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]pyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1-(Pyridin-4-ylmethyl)-7- [4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]pyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1-(3,5-Dimethylhept-l-yl)-7- [4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]pyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

l-Cyklopentyl-7 - (4-piperazin-l-ylfenylamino) pyrido [4,3-d] pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(3-Aminopyrrolidin-l-yl)fenylamino]-1-cyklopentylpyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on.
23. Sloučenina podle nároku 20, mající obecný vzorec
24. Sloučenina, kterou je

1-(2-Benzyloxyethyl)-7- [4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H) -on;

1-(Thiofen-2-yl)-7- [4- (4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino] -3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H) -on;

1-(Thiofen-2-ylmethyl)-7- [4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrido [4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1- (Tetrahydrofuran-2-yl)-7- [4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrido [4,3-d]pyrimidin-2(1H) -on;

1-(Hexa-2,4-dien-l-yl)-7- [4- (4-methylpiperazin-l-yl) fenylamino]-3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H) -on;

1-(Prop-2-in-l-yl)-7- [4- (4-methylpiperazin-l-yl) fenylamino]-3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H) -on;

····

- 129 • · • φ <· · ; ι • »

1-[3-(Dimethylamino)prop-1-yl]-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1-(3-Hydroxyprop-l-yl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino] -3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1-(Pyridin-4-ylmethyl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

1-(3,5-Dimethylhept-l-yl)-7-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

3-(3,5-Dimethoxyfenyl)-7-(pyridin-4-ylamino)-l-ethyl-3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

3-(2-Chlor-3,5-Dimethoxyfenyl)-7-(pyridin-4-ylamino)-1-ethyl-3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

3-(2,6-Dichlor-3,5-dimethoxyfenyl)-7-(pyridin-4-ylamino)-l-ethyl-3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

3-(2-Methyl-3,5-dimethoxyfenyl)-7-(pyridin-4-ylamino)-1-ethyl-3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

3-(2,6-Dimethyl-3,5-dimethoxyfenyl)-7-(pyridin-4-ylamino) l-ethyl-3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(4-Aminoacetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3-(3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H) on;

7-[4-(4-Aminoacetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3-(2-chlor-3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrido[4,3-d] pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(4-Aminoacetylpiperazin-l-yl)-fenylamino]-3-(2,6-dichlor-3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(4-Aminoacetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3-(2-methyl-3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrido[4,3-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(4-Aminoacetylpiperazin-l-yl)fenylamino]-3- (2,6-dimethyl-3,5-dimethoxyfenyl)-l-ethyl-3,4-dihydropyrido [4,3,d]pyrimidin-2(1H)-on.
25. Způsob regulace buněčných chorob vybraných ze souboru, který zahrnuje rakovinu, psoriázu, proliferaci vaskulárních • 9

130

99 9 9 9 999 hladkých svalů, spojenou s chorobami vybranými ze souboru, který zahrnuje aterosklerózu, postchirurgickou vaskulární stenózu a restenózu u savců, diabetickou retinopatii a angiogenézi, vyznačující se tím, že se podá uvedenému savci terapeuticky účinné množství sloučeniny obecného vzorce I kde:

R¹ a R² a R¹⁰ jsou nezávisle vybrány ze souboru, který zahrnuje H, (CH2)nAr, COR⁴, (CH2)_nheteroaryl, (CH₂) nheterocyklyl, C-^-C-^q alkyl, C₃-C_1Q cykloalkyl, C₂-Cio alkenyl a C₂-C₁q alkinyl, kde n je 0, 1, 2 nebo 3 a (CH₂)_nAr, (CH₂)_nheteroaryl, alkyl, cykloalkyl, alkenyl a alkinylové skupiny jsou případně substituovány až 5 skupinami vybranými ze souboru, který zahrnuje NR⁴R³, N(0)R⁴R⁵, NR⁴R⁵R⁸Y, alkyl, fenyl, substituovaný fenyl, (CH₂)_nheteroaryl, hydroxy, alkoxy, fenoxy, thiol, thioalkyl, halogen, COR⁴,

CO₂R⁴, CONR⁴R⁵, SO2NR⁴R⁵,' SO3R⁴, PO3R⁴, aldehyd, nitril, nitro, heteroaryloxy, T(CH2)_mQR⁴,

OR⁵

I

T(CH₂)_mC-(CH₂)_mQR⁴

I

H

C(0)T(CH₂)_mQR⁴, NHC(O)T(CH2)mQR⁴, T (CH2) _mC (0) NR⁴NR⁵nebo T(CH₂)_mCO₂R⁴, kde každé m je nezávisle 1 až 6 a T je 0, S, NR⁴, N(0)R⁴, NR⁴R⁶Y nebo CR⁴R⁵ a Q je 0, S,

131

9 99 9 · ·· 9 ··

99« 99·· ·9·

9 9 9 9 · 9 9 ♦ · (ϊ · 9 999 9

NR⁵, N(O)R⁵ nebo NR⁵R⁶Y;

když přerušovaná čára je přítomna, R³ není přítomno;

jinak R³ má významy R², kde R² má význam definovaný shora, a rovněž OH, NR⁴R⁵, COOR⁴, OR⁴, CONR⁴R⁵, SO₂NR⁴R⁵,

SO₃R⁴, PO3R⁴, T(CH2)_mQR⁴,

OR5

T(CH2)_mC-(CH2)_mQR⁴,

I

H kde T a Q mají význam uvedený shora,·

R⁴ a r5 se vždy nezávisle zvolí ze souboru, který zahrnuje vodík, C^-Cg alkyl, substituovaný alkyl, C₂-Cg alkenyl, C₂-Cg alkinyl, N(C-j^-Cgalkyl) _{1 nebo 2}, (CH₂)_nAr, C₃-C₁₀ cykloalkyl, heterocyklyl a heteroaryl nebo R⁴ a R⁵ společně s atomem dusíku ke kterému jsou vázány případně tvoří kruh mající 3 až 7 atomů uhlíku a uvedený kruh případně obsahuje 1, 2 nebo 3 heteroatomy vybrané ze souboru, který zahrnuje dusík, substituovaný dusík, kyslík a síru;

když R⁴ a R⁵ společně s atomem dusíku, ke kterému jsou vázány tvoří kruh, je uvedený kruh případně substituován 1 až 3 skupinami vybranými ze souboru, který zahrnuje OH, OR⁴, NR⁴R⁵, (CH2)mOR⁴, (CH2)_mNR⁴R⁵, T-(CH₂)_mQR⁴,

CO-T-(CH₂)_mQR⁴, NH(CO)T(CH2)mQR⁴, T-(CH2)_mCO₂R⁴, nebo T(CH₂)_mCONR⁴R⁵.

R ⁶ je alkyl;

R® a R^ jsou nezávisle Η, 0χ-0₃ alkyl, NR⁴R^, N(O)R⁴R®,

NR⁴R⁵R®Y, hydroxy, alkoxy, thiol, thioalkyl, halogen, COR⁴, co2r⁴, conr⁴r⁵, so2nr⁴r⁵, so3r⁴, po3r⁴, cho, cn nebo N0₂;

když je přerušovaná čára nepřítomná, R^ je dále karbonyl, thiokarbonyl, imin a substituovaný imin, oxim a oximether, a

- 132

Y je halogenový protiion.
26. Způsob inhibice na cyclinu závislé kinázy, vyznačující se tím, že zahrnuje kontak na cyclinu závislé kinázy se sloučeninou obecného vzorce I kde:

R¹ a R² a R¹⁸ jsou nezávisle vybrány ze souboru, který zahrnuje H, (CH2)nAr, COR⁴, (CH2)_nheteroaryl, (CH₂)_nheterocyklyl, CiC₁₀ alkyl, C₃~C₁₀ cykloalkyl, C₂-Cio alkenyl a C₂-C₁q alkinyl, kde n je 0, 1, 2 nebo 3 a (CH₂)_nAr, (CH₂)_nheteroaryl, alkyl, cykloalkyl, alkenyl a alkinylové skupiny jsou případně substituovány až 5 skupinami vybranými ze souboru, který zahrnuje NR⁴R⁸, N(O)R⁴R⁸, NR⁴R⁸R⁸Y, alkyl, fenyl, substituovaný fenyl, (CH₂)_nheteroaryl, hydroxy, alkoxy, fenoxy, thiol, thioalkyl, halogen, COR⁴,

CO₂R⁴, CONR⁴R⁵, SO2NR⁴R⁵, SO3R⁴, PO3R⁴, aldehyd, nitril, nitro, heteroaryloxy, T(CH2)_mQR⁴,

OR5

I

T(CH₂)_mC-(CH2)_mQR⁴,

I

H

C(O)T(CH₂)_mQR⁴, NHC(O)T(CH2)mQR⁴, T(CH2)_mC(O)NR⁴NR⁵nebo T(CH₂)_mCO₂R⁴, kde každé m je nezávisle 1 až 6 a T je 0, S, NR⁴, N(0)R⁴, NR⁴R⁶Y nebo CR⁴R⁵ a Q je O, S,

133 ·*· · • ·

96 999

NR⁵, N(O)R⁵ nebo NR⁵R⁶Y;

když přerušovaná čára je přítomna, R³ není přítomno;

jinak R³ má významy R², kde R² má význam definovaný shora, a rovněž OH, NR⁴R⁵, COOR⁴, OR⁴, CONR⁴R⁵, SO₂NR⁴R⁵,

SO₃R⁴, PO3R⁴, T(CH2)_mQR⁴,

OR⁵

I

T(CH₂)_mC-(CH₂)_mQR⁴,

I

H kde T a Q mají význam uvedený shora;

R⁴ a R⁵ se vždy nezávisle zvolí ze souboru, který zahrnuje vodík, C-j^-Cg alkyl, substituovaný alkyl, C₂-Cg alkenyl, C₂-Cg alkinyl, N(C^-Cgalkyl)_{χ nebo 2}' (CH₂)_nAr, ^c3^_cio cykloalkyl, heterocyklyl a heteroaryl nebo R⁴ a R⁵ společně s atomem dusíku ke kterému jsou vázány případně tvoří kruh mající 3 až 7 atomů uhlíku a uvedený kruh případně obsahuje 1, 2 nebo 3 heteroatomy vybrané ze souboru, který zahrnuje dusík, substituovaný dusík, kyslík a síru;

když R⁴ a R⁵ společně s atomem dusíku, ke kterému jsou vázány tvoří kruh, je uvedený kruh případně substituován 1 až 3 skupinami vybranými ze souboru, který zahrnuje OH, OR⁴, NR⁴R⁵, (CK2)mOR⁴, (CH2)_mNR⁴R⁵, T-(CH₂)_mQR⁴,

CO-T-(CH₂)_mQR⁴, NH(CO)T(CH2)mQR⁴, T-(CH2)_mCO₂R⁴, nebo T(CH₂)_mCONR⁴R⁵.

R ⁶ je alkyl;

R⁸ a R⁹ jsou nezávisle H, C-^-C-j alkyl, NR⁴R⁵, N(O)R⁴R⁵,

NR⁴R⁵R⁵Y, hydroxy, alkoxy, thiol, thioalkyl, halogen, COR⁴, co2r⁴, conr⁴r⁵, so2nr⁴r⁵, so3r⁴, po3r⁴, CHO, CN nebo N0₂;

když je přerušovaná čára nepřítomná, R⁹ je dále karbonyl, thiokarbonyl, imin a substituovaný imin, oxim a oximether, a

Y je halogenový protiion.

134
27. Způsob podle nároku 26, vyznačující se tím, že uvedená na cyclinu závislá kináza je cdc2.
28. Způsob podle nároku 26, vyznačuj ící se tím, že uvedená na cyclinu závislá kináza je cdk2.
29. Způsob podle nároku 26, vyznačuj ící tím, že uvedená na cyclinu závislá kináza je cdk4 s e nebo cdk6
30. Způsob inhibice růstovým faktorem zprostředkované tyrosin kinázy, vyznačující se tím, že se uvedená růstovým faktorem zprostředkovaná kináza uvede do kontaktu se sloučeninou obecného vzorce I a její farmaceuticky přijatelnou solí kde:

přerušovaná čára znamená případnou dvojnou vazbu;

Z je N nebo CH;

G je N nebo CH;

W je NH, S, SO nebo S0₂;

X je bud' O, S nebo NR¹^;

R¹ a R² a R¹® jsou nezávisle vybrány ze souboru, který zahrnuje H, (CH2)nAr, COR⁴, (CH2)_nheteroaryl, (CH₂) _nheterocyklyl, Ci~C]_q alkyl, Cg-C-^Q cykloalkyl, ^C2^-C1O alkenyl a C₂-C₁₀ alkinyl, kde n je 0, 1, 2 nebo 3 a (CH₂)_nAr, (CH₂)_nheteroaryl, alkyl, cykloalkyl, alkenyl a alkinylové skupiny jsou případně substituovány až 5 skupinami vybranými ze souboru,

- 135 který zahrnuje NR⁴R⁵, N(O)R⁴R⁵, NR⁴R⁵R⁶Y, alkyl, fenyl, substituovaný fenyl, (CH₂)_nheteroaryl, hydroxy, alkoxy, fenoxy, thiol, thioalkyl, halogen, COR⁴,

CO₂R⁴, CONR⁴R⁵, SO2NR⁴R⁵, SO3R⁴, PO3R⁴, aldehyd, nitril, nitro, heteroaryloxy, T(CH2)_mQR⁴,

OR⁵

I

T(CH₂)_mC-(CH₂)_mQR⁴

I

H

C(0)T(CH₂)_mQR⁴, NHC(O)T(CH2)mQR⁴, T(CH2)_mC(0)NR⁴NR⁵nebo T(CH₂)_mCO₂R⁴, kde každé m je nezávisle 1 až 6 a T je 0, S, NR⁴, N(0)R⁴, NR⁴R⁶Y nebo CR⁴R⁵ a Q je 0, S, NR⁵, N(0)R⁵ nebo NR⁵R⁶Y;

když přerušovaná čára je přítomna, R³ není přítomno;

jinak R³ má významy R², kde R² má význam definovaný shora, a rovněž OH, NR⁴R⁵, COOR⁴, OR⁴, CONR⁴R⁵, SO₂NR⁴R⁵,

SO₃R⁴, PO3R⁴, T(CH2)_mQR⁴,

OR5

I

T(CH₂)_mC-(CH₂)_mQR⁴

I

H kde T a Q mají význam uvedený shora;

R⁴ a R⁵ se vždy nezávisle zvolí ze souboru, který zahrnuje vodík, C-j_-Cg alkyl, substituovaný alkyl, C₂-C_galkenyl, C₂-C_g alkinyl, N(C₁-C_galkyl)_{χ nebo 2}, (CH₂)_nAr, C₃-C₁₀ cykloalkyl, heterocyklyl a heteroaryl nebo R⁴ a R⁵ společně s atomem dusíku ke kterému jsou vázány případně tvoří kruh mající 3 až 7 atomů uhlíku a uvedený kruh případně obsahuje 1, 2 nebo 3 heteroatomy vybrané ze souboru, který zahrnuje dusík, substituovaný dusík, kyslík a síru;

136 * φ φ φ když R⁴ a R⁵ společně s atomem dusíku, ke kterému jsou vázány tvoří kruh, je uvedený kruh případně substituován 1 až 3 skupinami vybranými ze souboru, který zahrnuje OH, OR⁴, NR⁴R⁵, (CH2)mOR⁴, (CH2)_mNR⁴R⁵, T-(CH₂)_mQR⁴,

CO-T-(CH₂)_mQR⁴, NH(CO)T(CH2)mQR⁴, T-(CH2)_mCO₂R⁴, nebo T(CH₂)_mCONR⁴R⁵.

R 6 je alkyl;

R⁸ a R⁹ jsou nezávisle H, alkyl, NR⁴R⁵, N(O)R⁴R⁵,

NR⁴R⁵R⁸Y, hydroxy, alkoxy, thiol, thioalkyl, halogen, COR⁴, co2r⁴, conr⁴r⁵, so2nr⁴r⁵, so3r⁴, po3r⁴, CHO, CN nebo N0₂;

když je přerušovaná čára nepřítomná, R⁹ je dále karbonyl, thiokarbonyl, imin a substituovaný imin, oxim a oximether, a

Y je halogenový protiion.
31. Způsob podle nároku 30,vyznačující se tím, že uvedená tyrosin kináza zprostředkovaná růstovým faktorem je růstový faktor odvozený od krevních destiček (PDGF).
32. Způsob podle nároku 30,vyznačující se tím, že uvedená tyrosin kináza zprostředkovaná růstovým faktorem je fibroblastový růstový faktor (FGF).
33. Způsob podle nároku 30, vyznačující se tím, že uvedená tyrosin kináza zprostředkovaná růstovým faktorem je vaskulární endoteliální růstový faktor (VEGF).
34. Způsob inhibice nereceptorové tyrosin kinázy, vyznačující se tím, že se uvedená nereceptorová tyrosin kináza uvede v kontakt se sloučeninou obecného vzorce I • · · · a její farmaceuticky přijatelnou solí kde:

přerušovaná čára znamená případnou dvojnou vazbu;

Z je N nebo CH;

G je N nebo CH;

W je NH, S, SO nebo SO₂;

X je buď 0, S nebo NR¹⁰;

R¹ a R² a R¹⁰ jsou nezávisle vybrány ze souboru, který zahrnuje H, (CH2)nAr, COR⁴, (CH2)_nheteroaryl, (CH₂) _nheterocyklyl, C-^-C-^q alkyl, C₃~C₁₀ cykloalkyl, ^C2^-C10 ^alkeny! ^{a C}2^-C10 ^alklnyl/ kde n je 0, 1, 2 nebo 3 a (CH2)nAr, (CH2)nheteroaryl, alkyl, cykloalkyl, alkenyl a alkinylové skupiny jsou případně substituovány až 5 skupinami vybranými ze souboru, který zahrnuje NR⁴R^, N(0)R⁴R^, NR⁴R^R°Y, alkyl, fenyl, substituovaný fenyl, (CH2)_nheteroaryl, hydroxy, alkoxy, fenoxy, thiol, thioalkyl, halogen, COR⁴,

C0₂R⁴, C0NR⁴R⁵, SO2NR⁴R⁵, SO3R⁴, PO3R⁴, aldehyd, nitril, nitro, heteroaryloxy, T(CH2)_mQR⁴,

OR⁵ j 1

T(CH₂)_mC-(CH2)_mQR⁴,

I

H

C(0)T(CH₂)_mQR⁴, NHC(O)T(CH2)mQR⁴, T(CH2)_mC(0)NR⁴NR⁵nebo T(CH₂)_mC0₂R⁴, kde každé m je nezávisle 1 až 6 a T je 0, S, NR⁴, N(0)R⁴, NR⁴R⁶Y nebo CR⁴R⁵ a Q je 0, S,

138 • · ... ; : .

• .... .... .

··· ... · · . ·· ... .. ... ., .,.

NR⁵, N(O)R⁵ nebo NR⁵R⁶Y;

když přerušovaná čára je přítomna, R³ není přítomno;

jinak R³ má významy R², kde R² má význam definovaný shora, a rovněž OH, NR⁴R⁵, COOR⁴, OR⁴, CONR⁴R⁵, SO₂NR⁴R⁵,

SO₃R⁴, PO3R⁴, T(CH2)_mQR⁴,

OR⁵

I

T(CH₂)_mC-(CH₂)_mQR⁴,

I

H kde T a Q mají význam uvedený shora;

R⁴ a R⁵ se vždy nezávisle zvolí ze souboru, který zahrnuje vodík, Cg-Cg alkyl, substituovaný alkyl, C₂-Cg alkenyl, C₂-Cg alkinyl, N(C₁-Cgalkyl)_{χ nebo 2}, (CH₂)_nAr, C₃-C₁₀ cykloalkyl, heterocyklyl a heteroaryl nebo R⁴ a R⁵ společně s atomem dusíku ke kterému jsou vázány případně tvoří kruh mající 3 až 7 atomů uhlíku a uvedený kruh případně obsahuje 1, 2 nebo 3 heteroatomy vybrané ze souboru, který zahrnuje dusík, substituovaný dusík, kyslík a síru;

když R⁴ a R⁵ společně s atomem dusíku, ke kterému jsou vázány tvoří kruh, je uvedený kruh případně substituován 1 až 3 skupinami vybranými ze souboru, který zahrnuje OH, OR⁴, NR⁴R⁵, (CH2)mOR⁴, (CH2)_mNR⁴R⁵, T-(CH₂)_mQR⁴,

CO-T-(CH₂)_mQR⁴, NH(CO)T(CH2)mQR⁴, T-(CH2)_mCO₂R⁴, nebo T(CH₂)_mCONR⁴R⁵.

R ⁶ je alkyl;

R⁸ a R⁹ jsou nezávisle H, C₁-C₃ alkyl, NR⁴R⁵, N(O)R⁴R⁵,

NR⁴R⁵R⁸Y, hydroxy, alkoxy, thiol, thioalkyl, halogen, COR⁴, co2r⁴, conr⁴r⁵, so2nr⁴r⁵, so3r⁴, po3r⁴, CHO, CN nebo N0₂;

když je přerušovaná čára nepřítomná, R⁹ je dále karbonyl, thiokarbonyl, imin a substituovaný imin, oxim a oximether, a

Y je halogenový protiion.

139
35. Způsob podle nároku 33,vyznačující se tím, že uvedená nereceptorová tyrosin kináza je vybrána z z rodiny transformačního genu retroviru sarkomu Rous (Src).
36. Způsob inhibice serinové kinázy u savce, vyznačující se tím, že se podá uvedenému savci takové množství sloučeniny podle nároku 1, které je dostatečné k inhibici sérinové kinázy.
37. Způsob léčení subjektu trpícího nemocí způsobenou buněčnou proliferací vaskulárního hladkého svalu, vyznačující se tím, že se uvedenému subjektu podá terapeuticky účinné množství sloučeniny podle nároku 1.
38. Způsob léčení subjektu trpícího rakovinou vyznačující se tím, že se uvedenému subjektu podá terapeuticky účinné množství sloučeniny podle nároku 1.
39. Způsob inhibice angionéze u savce, vyznačuj ící se t i m, že se podá uvedenému savci anti-angiogenicky účinné množství sloučeniny podle nároku 1.
40. Způsob podle nároku 39, vyznačující se tím, že chorobný stav způsobený angiogenézou je vybrán ze souboru, který zahrnuje rakovinu u lidí, makulární degeneraci, diabetickou retinopatii, chirurgickou adhezi a psoriázu.
41. Způsob inhibice wee-1 kinázového enzymu u savce, vyznačující se tím, že se savci podá inhibiční množství sloučeniny podle nároku 1.
42. Sloučenina, kterou je

7-[3-(Karboxy)fenylamino]-3-(2,6-dichlor-fenyl)-1-methyl-3,4-dihydropyrimido [4,5-d] pyrimidin-2 (1H) -on;

«···

- 140

7-[3-(N-Dimethylaminopropylkarboxamid)fenylamino]-3- (2,6 -dichlorfenyl)-l-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-[3-(N-Dimethylaminopropylkarboxamid)fenylamino]-3- (2,6 -dichlor-3-hydroxyfenyl)-l-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d] pyrimidin-2(1H)-on;

7- [3-(Karboxy)fenylamino]-3-(2,6-dichlor-3-hydroxyfenyl) -l-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

3-(2, 6-Dichlorfenyl)-7-[4-(2-ethylaminoethoxy)fenylamino]-l-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

3-(2,6-Dichlor-3-hydroxyfenyl)-7-[4-(2-ethylaminoethoxy) fenylamino]-l-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(Karboxamid)fenylamino]-3-(2,6-dichlorfenyl)-1-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(Karboxamid)fenylamino]-3-(2,6-dichlor-3-hydroxyfenyl)-l-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

3-(2,6-Dichlorfenyl)-7-(3-hydroxymethylfenylamino)-1-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

3-(2,6-Dichlorfenyl)-7-(4-morfolin-4-yl-fenylamino)-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)on;

3-(2,6-Dichlor-3-hydroxyfenyl)-l-methyl-7-(4-morfolin-4-yl-fenylamino)-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2 (1H)-on;

3-(2,6-Dichlor-3-hydroxyfenyl)-7-(3-hydroxymethylfenylamino)-l-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(3-Karboxypropyl)fenylamino] -3-(2,6-dichlorofenyl)-l-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

7-[4-(3-Karboxypropyl)fenylamino]-3-(2,6-dichlor-3-hydroxyfenyl)-l-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

3-(2,6-Dichlorfenyl)-7-[4-(formylfenylamino]-1-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on;

3-(2,6-Dichlor-3-hydroxyfenyl)-7-[4-(formylfenylamino]-l-methyl-3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-on.

····

- 141 ·· · »· • · ·· · . .

• · · » · •99 9 ₉ 9 9 ·· 9 99 •· ··· 99 9
43. Farmaceutická formulace, vyznačující se tím, že zahrnuje sloučeninu podle nároku 1 v kombinaci s farmaceuticky přijatelným nosičem, ředidlem nebo excipientem.