CN105555135B - 涉及邻苯二甲酰胺衍生物应用的用于改善对转基因植物生产潜能的利用的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及采用有效量的至少一种本文所述式(I)的化合物处理植物以改善对转基因植物生产潜能的利用的方法。
Description
技术领域
本发明涉及用于改善对转基因植物生产潜能的利用的方法以及用于防治害虫例如昆虫和/或线虫的方法。
背景技术
近年,在农业中,转基因植物的比例有显著的增长。
转基因植物的应用主要是以最有利的方式、以最低的生产资料利用各自植物品种的生产潜能。特别地,植物遗传修饰的的目的在于在植物中产生对某些害虫或有害生物或除草剂以及非生物胁迫(例如干旱、高温或提高的盐水平)的抗性。还可以对植物进行遗传修饰以增加某些品质或产品特征,例如选定的维生素或油类的含量,或改良某些纤维的性质。
通过例如将基因整合到有用植物中以表达解除某些除草剂的毒性的酶,可获得除草剂抗性或耐受性,使得即使这些用于防治阔叶杂草和禾本科杂草的除草剂的存在下,这些植物也可以相对不受妨碍地生长。可提及的实例为耐受除草活性化合物草甘膦(glyphosate)(RoundupMonsanto)或除草剂草铵膦(glufosinate)或苯腈类(oxynil)的棉花品种或玉米品种。
已经培育出包括两种更多种遗传修饰的有用植物(“双重转基因植物”或多重转基因作物)。因此,例如Monsanto已培育出多重转基因玉米品种,其对欧洲玉米螟(Ostrinianubilalis)和西方玉米根虫(Diabrotica virgifera)都具有抗性。还已知的是对西方玉米根虫和棉铃虫都具有抗性并且耐受除草剂的玉米和棉花作物。
目前已发现,采用下文定义的一种或多种式(I)的化合物处理植物,甚至更加能够改善对转基因有用植物生产潜能的利用。在本文中,术语“处理”包括引起这些活性化合物与至少一个植物部位发生接触的所有措施。“植物部位”应理解为是指植物的所有地上和地下部位以及植物器官,例如芽、叶、花和根,如叶、针叶、杆、茎、花、子实体、果实和种子,以及根、块茎和根茎。植物部位还包括采收的材料以及无性和有性繁殖材料,例如插条、块茎、根茎、幼枝(slip)和种子。
发明内容
一方面涉及用于改善对转基因植物生产潜能的利用和/或用于防治/对抗/处理害虫的方法,其特征在于,采用有效量的至少一种式(I)的化合物处理植物
其中
A独立地代表卤素;氰基;硝基;羟基;氨基;C1-C8烷基基团;具有至少一个选自以下的取代基的取代的C1-C8烷基基团:卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、卤代C1-C3烷基基团、C1-C3烷氧基基团、卤代C1-C3烷氧基基团、C1-C3烷硫基基团、卤代C1-C3烷硫基基团、C1-C3烷基亚磺酰基基团、卤代C1-C3烷基亚磺酰基基团、C1-C3烷基磺酰基基团、卤代C1-C3烷基磺酰基基团和C1-C3烷硫基、C1-C3烷基基团;以及所述任选取代的C1-C8烷基基团中的任意饱和碳原子;
n代表0、1、2、3或4,优选0、1或2;
R1代表氢、卤素、氰基C1-C8烷基或C1-C8卤代烷基;
R2代表氢、卤素、氰基C1-C8烷基或C1-C8卤代烷基;
R3代表O或S;
R4代表O或S;
Y独立地代表氢、卤素、氰基、硝基、C1-C6烷基基团、卤代C1-C6烷基基团、C2-C6烯基基团、卤代C2-C6烯基基团、C2-C6炔基基团、卤代C2-C6炔基基团、C3-C6环烷基基团、卤代C3-C6环烷基基团、C1-C6烷氧基基团、卤代C1-C6烷氧基基团、C1-C6烷硫基基团、卤代C1-C6烷硫基基团、C1-C6烷基亚磺酰基基团、卤代C1-C6烷基亚磺酰基基团、C1-C6烷基磺酰基基团或卤代C1-C6烷基磺酰基基团;
m代表0、1、2、3或4;
X代表C1-C8烷基基团或具有至少一个选自以下的取代基的取代的C1-C8烷基基团:卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、卤代C1-C3烷基基团、C1-C3烷氧基基团、卤代C1-C3烷氧基基团。
一个优选的实施方案涉及上文所述的方法,其特征在于,式(I)的化合物是式(I-1):
其中
Hal代表F、Cl、I或Br;并且
X’代表C1-C6烷基或具有至少一个选自以下的取代基的取代的C1-C6烷基:卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、卤代C1-C3烷基基团,优选C1-C6氰基烷基;
A’代表C1-C3烷基、C1-C3卤代烷基、卤素,优选甲基、卤代甲基、乙基或卤代乙基,更优选甲基或乙基;
n代表0、1、2、3或4,优选0、1或2,更优选1。
一个优选的实施方案涉及上文所述的方法,其特征在于,式(I)的化合物选自化合物(I-2)、化合物(I-3)、化合物(I-4)或化合物(I-5):
一个优选的实施方案涉及上文所述的方法,其特征在于,式(I)的化合物是化合物(I-5)。
进一步优选的实施方案涉及上文所述的方法,其特征在于,植物具有至少一种表A或表B或表C中所述的基因修饰的结构或耐受性。
进一步优选的实施方案涉及上文所述的方法,其特征在于,转基因植物包含至少一种编码Bt毒素的cry-基因或cry-基因片段。
一个优选的实施方案涉及上文所述的方法,其特征在于,转基因植物是蔬菜植物、玉米植物、大豆植物、棉花植物、烟草植物、稻植物、甜菜植物、油菜植物或马铃薯植物。
一个优选的实施方案涉及上文所述的方法,其特征在于,式(I)化合物的使用形式为以与至少一种混合配料的混合物存在。
一个优选的实施方案涉及上文所述的方法,其特征在于,Bt-植物的Bt毒素由包括株系(event)MON87701的bt-基因或其片段编码。
另一方面涉及协同组合物,其包含Bt毒素和上文所述的式(I)化合物。
一个优选的实施方案涉及所述协同组合物,其特征在于,Bt毒素由选自cry1、cry2、cry3、cry5和cry9的cry基因或cry-基因片段编码。
一个优选的实施方案涉及所述协同组合物,其特征在于,Bt毒素由尤其优选选自cry1Ab、cry1Ac、cry3A、cry3B和cry9C的cry基因或cry-基因片段编码。
一个优选的实施方案涉及所述协同组合物,其特征在于,Bt毒素由选自亚组cry1A、优选cry1Aa、cry1Ab、cry1Ac或其杂种(例如cry1Ac和cry1Ab的杂种)的cry基因或cry-基因片段编码。
一个优选的实施方案涉及所述协同组合物,其特征在于,Bt毒素由包括株系MON87701的bt-基因或其片段编码。
Bt植物、优选包括株系MON87701的Bt-大豆植物或包括株系MON87701和MON89788的Bt-大豆植物,其特征在于,至少0.00001g式(I)化合物附着于其上。
可将优选的实施方案结合,条件是这种结合不违反现有的自然规律。
具体实施方式
式(I)的化合物
其中
A独立地代表卤素;氰基;硝基;羟基;氨基;C1-C8烷基基团;具有至少一个选自以下的取代基的取代的C1-C8烷基基团:卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、卤代C1-C3烷基基团、C1-C3烷氧基基团、卤代C1-C3烷氧基基团、C1-C3烷硫基基团、卤代C1-C3烷硫基基团、C1-C3烷基亚磺酰基基团、卤代C1-C3烷基亚磺酰基基团、C1-C3烷基磺酰基基团、卤代C1-C3烷基磺酰基基团和C1-C3烷硫基、C1-C3烷基基团;以及所述任选取代的C1-C8烷基基团中的任意饱和碳原子;
n代表0、1、2、3或4,优选0、1或2;
R1代表氢、卤素、氰基C1-C8烷基或C1-C8卤代烷基;
R2代表氢、卤素、氰基C1-C8烷基或C1-C8卤代烷基;
R3代表O或S;
R4代表O或S;
Y独立地代表氢、卤素、氰基、硝基、C1-C6烷基基团、卤代C1-C6烷基基团、C2-C6烯基基团、卤代C2-C6烯基基团、C2-C6炔基基团、卤代C2-C6炔基基团、C3-C6环烷基基团、卤代C3-C6环烷基基团、C1-C6烷氧基基团、卤代C1-C6烷氧基基团、C1-C6烷硫基基团、卤代C1-C6烷硫基基团、C1-C6烷基亚磺酰基基团、卤代C1-C6烷基亚磺酰基基团、C1-C6烷基磺酰基基团或卤代C1-C6烷基磺酰基基团;
m代表0、1、2、3或4;
X代表C1-C8烷基基团或具有至少一个选自以下的取代基的取代的C1-C8烷基基团:卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、卤代C1-C3烷基基团、C1-C3烷氧基基团、卤代C1-C3烷氧基基团;
并且它们的杀虫作用是现有技术(例如参见EP 0 919 542、W0 2004/018410、W02010/012442或WO 2012/034472)中已知的。
本领域的技术人员从这些文献熟悉式(I)化合物的制备方法和使用方法并熟悉式(I)化合物的作用。
下文列出了优选亚组和上述式(I)化合物。
在本发明的一个优选实施方案中,通式(I)的化合物由式(I-1)的化合物表示:
其中
Hal代表F、Cl、I或Br;并且
X’代表C1-C6烷基或具有至少一个选自以下的取代基的取代的C1-C6烷基:卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、卤代C1-C3烷基基团,优选C1-C6氰基烷基;
A’代表C1-C3烷基、C1-C3卤代烷基、卤素,优选甲基、卤代甲基、乙基或卤代乙基,更优选甲基或乙基;
n代表0、1、2、3或4,优选0、1或2,更优选1。
在本发明的一个更优选的实施方案中,组合物包含至少一种选自化合物(I-2)、化合物(I-3)、化合物(I-4)或化合物(I-5)的通式(I)的化合物:
甚至更优选地,式(I)的化合物选自化合物(I-2)或化合物(I-5)。
在一个优选的实施方案中,式(I)的化合物是化合物(I-5)。
根据本发明,“烷基”代表具有1-8个、优选1-6个、更优选1-3个碳原子的直链或支链的脂肪族烃。合适的烷基基团是,例如,甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基、戊基或己基。烷基基团可以是未取代的或被至少一个本文提及的取代基取代。
根据本发明,“卤素”或“Hal”代表氟、氯、溴或碘,优选代表氟、氯或溴。
根据本发明,“卤代烷基”代表具有最多达8个碳原子的烷基基团,其中至少一个氢原子被卤素取代。合适的卤代烷基基团是,例如,CH2F、CHF2、CF3、CF2Cl、CFCl2、CCl3、CF2Br、CF2CF3、CFHCF3、CH2CF3、CH2CH2F、CH2CHF2、CFClCF3、CCl2CF3、CF2CH3、CF2CH2F、CF2CHF2、CF2CF2Cl、CF2CF2Br、CFHCH3、CFHCHF2、CHFCF3、CHFCF2Cl、CHFCF2Br、CFClCF3、CCl2CF3、CF2CF2CF3、CH2CH2CH2F、CH2CHFCH3、CH2CF2CF3、CF2CH2CF3、CF2CF2CH3、CHFCF2CF3、CF2CHFCF3、CF2CF2CHF2、CF2CF2CH2F、CF2CF2CF2Cl、CF2CF2CF2Br、1,2,2,2-四氟-1-(三氟甲基)乙基、2,2,2-三氟-1-(三氟甲基)乙基、五氟乙基、1-(二氟甲基)-1,2,2,2-四氟乙基、2-溴-1,2,2-三氟-1-(三氟甲基)乙基、1-(二氟甲基)-2,2,2-三氟乙基。卤代烷基基团可以是未取代的或被至少一个本文提及的取代基取代。
本文所使用的“生产潜能”是指在特定条件下转基因植物的产量。因此,“改善对转基因植物生产潜能的利用”是指在不利的环境条件如使用除草剂、干旱胁迫、寒冷胁迫以及由昆虫、线虫或真菌等引起的胁迫等条件下,与植物在相同条件下不使用本文所述的式(I)化合物相比,产量提高。
所述方法还可用于对害虫例如昆虫和/或线虫的增强的防治/增强的处理。因此,转基因植物例如Bt-植物与式(I)化合物的结合能够显示比预期效果更好的对昆虫和/或线虫的处理/防治/对抗。
根据本发明提出的方法,采用式(I)的化合物处理转基因植物特别是有用植物以提高农业生产力和/或防治和/或对抗害虫特别是线虫和昆虫。优选地,本发明涉及采用式(I)的化合物、优选采用式(I-5)的化合物处理转基因植物、优选昆虫-抗性的转基因植物例如Bt-植物或Vip-植物而对抗害虫的方法。
为了于本发明的目的,基因修饰的有机体(GMO)例如植物或种子,是基因修饰的植物(或转基因植物),是异源基因已被稳定地整合入基因组的植物。表述“异源基因”主要是指在植物外提供或装配的基因,当其被引入核、叶绿体或线粒体基因组时通过表达感兴趣的蛋白质或多肽或通过下调或沉默植物中存在的其他基因而赋予转化的植物新的或改进的农艺学或其他性质(例如使用反义技术、共抑制技术、RNA干扰-RNAi-技术或微小RNA-miRNA-技术)。位于基因组中的异源基因也称为转基因。通过其在植物基因组中的特定位置而被定义的转基因称为转化或转基因株系。
根据植物种类或植物栽培种、其位置及其生长条件(土壤、气候、生长期、营养),本发明的处理方法也可产生超加和(“协同”)效应。因此,例如,可能出现下列超过实际预期的效应:降低施用率和/或扩大活性谱和/或提高可依据本发明使用的活性化合物和组合物的活性、更好的植物生长、提高对高温或低温的耐受性、提高对干旱、水或土壤盐度的耐受性、增加开花表现、更易于采收、加速成熟、提高采收产量、增大果实、增加植物高度、加深叶子绿色、提早开花、改善采收产品的质量和/或提高营养价值、提高果实的糖含量、提高贮存稳定性、提供对害虫特别是线虫和昆虫的对抗和/或改善所收获产品的加工性。
在某些施用率下,本发明的活性化合物结合物还可对植物具有强化作用。因此,它们还适于调动植物对抗有害微生物侵袭的防御体系。如果合适,这可能是本发明的结合物活性提高的原因之一,例如对抗真菌的活性提高。在本发明的上下文中,植物强化(抗性诱导)物质应理解为是指能够刺激植物的防御体系的那些物质或物质的结合物,方式为当受到有害微生物侵袭后,处理过的植物表现出对这些微生物很大程度的抗性。在本发明情况下,有害微生物应理解为是指植物病原性真菌、细菌和病毒。因此,在处理后的一段时间内,本发明的物质可用于保护植物以抵御上述病原体的侵袭。保护发挥作用的时间通常延长至在用活性化合物处理植物之后的1-10天、优选1-7天。
优选地,待根据本发明处理的植物和植物栽培种包括所有具有遗传修饰物质的植物,所述遗传修饰物质能赋予这些植物(通过育种和/或生物技术方式方式获得)特别有利和有用性状。
还优选地,待根据本发明处理的植物和植物栽培种为对一种或多种生物胁迫具有抗性的植物,即所述植物显示更好的对抗动物与微生物害虫的防御,例如对抗线虫、昆虫、螨虫、植物致病真菌、细菌、病毒和/或类病毒。
线虫或昆虫抗性植物的实例描述于例如美国专利申请11/765,491、11/765,494、10/926,819、10/782,020、12/032,479、10/783,417、10/782,096、11/657,964、12/192,904、11/396,808、12/166,253、12/166,239、12/166,124、12/166,209、11/762,886、12/364,335、11/763,947、12/252,453、12/209,354、12/491,396、12/497,221、12/644,632、12/646,004、12/701,058、12/718,059、12/721,595、12/638,591以及WO 11/002992、WO 11/014749、WO11/103247、WO 11/103248、WO 12/135436、WO 12/135501中。
对其他病原体类型具有抗性的植物的实例描述于例如WO13/050410中。
还可根据本发明处理的植物和植物栽培种为对一种或多种非生物胁迫具有抗性的植物。非生物胁迫条件可包括,例如,干旱、低温暴露、高温暴露、渗透胁迫、水涝、增加的土壤盐渍度、增加的矿物质暴露、臭氧暴露、强光暴露、受限的氮营养素可用性、受限的磷营养素可用性、避荫。
可根据本发明处理的植物和植物栽培种为以增加的产量特征为特征的植物。提高所述植物产量的方法可为例如改善的植物生理、生长与发育,如水利用率、保水率、改善的氮利用率、提高的碳同化作用、改善的光合作用、提高的发芽率、改进的对抗昆虫以及加快成熟的结果。可通过改善的植物结构(在胁迫和非胁迫条件下)来进一步影响产量,所述改善的植物结构包括但不限于,提早开花、控制开花用于杂种制种、幼苗活力、植物大小、节间数量与距离、根部生长、种子大小、果实大小、果荚大小、果荚或穗数量、每荚或每穗的种子数量、种子质量、加强的种子饱满度、减少的种子散落、减少的果荚开裂和抗倒伏。其他产量性状包括种子组成,如碳水化合物含量、蛋白质含量、油含量和组成、营养价值、不良营养素化合物的降低、改善的加工性和提高的贮存稳定性。
具有上述性状的植物的实例非穷尽地列举于表A中。
表A:
可根据本发明处理的植物为已表现出杂种优势或杂种活力特征的杂种植物,所述杂种优势或杂种活力特征通常导致更高的产量、活力、健康及对生物和非生物胁迫的抗性。所述植物通常通过将近交的雄性不育亲系(母本)与另一近交的雄性能育亲系(父本)杂交而获得。杂种子通常收获自雄性不育亲本,并出售给种植者。雄性不育植物(例如玉米)有时可通过去雄产生,即机械地去除雄性繁殖器官(或雄花),但更为常见的是植物基因组中基因决定子造成雄性不育。这种情况下,尤其当种子为杂种植物中待收获的所需产品时,其通常可确保杂种植物的雄性能育性完全恢复。这可通过确保父本具有适当育性恢复基因而实现,所述育性恢复基因能够使含有负责雄性不育的基因决定子的杂种植物恢复雄性能育性。雄性不育基因决定子可位于细胞质中。细胞质雄性不育(CMS)的实例在例如芸苔属种中已有描述(WO 92/05251、WO 95/09910、WO 98/27806、WO 05/002324、WO 06/021972和US 6,229,072)。然而,雄性不育的基因决定子也可位于细胞核基因组中。雄性不育植物也可通过植物生物技术方法例如基因工程获得。获得雄性不育植物的特别有用的方法描述于WO 89/10396中,其中例如核糖核酸酶如芽孢杆菌RNA酶(barnase)选择性地在雄蕊的绒毡层细胞中进行表达。然而,可通过核糖核酸酶抑制剂例如如芽孢杆菌RNA酶抑制剂(barstar)在绒毡层细胞中的表达恢复能育性(例如WO 91/02069)。
可根据本发明处理的植物或者植物栽培种(可由植物生物技术方法例如基因工程获得)为除草剂耐受性植物,即可以耐受一种或多种给定除草剂的植物。所述植物可通过遗传转化或选择包括赋予除草剂耐受性的突变的植物而获得。
除草剂-抗性植物为例如草甘膦抗性植物,即耐受除草剂草甘膦或其盐的植物。可通过不同的方法使植物耐受草甘膦。例如,草甘膦耐受性植物可通过用编码5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸酯合酶(EPSPS)的基因转化植物而获得。所述EPSPS基因的实例为鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)的AroA基因(突变体CT7)(Science 1983,221,370-371)、细菌土壤杆菌属种的CP4基因(Curr.Topics Plant Physiol.1992,7,139-145)、编码矮牵牛花EPSPS(Science 1986,233,478-481)、番茄EPSPS(J.Biol.Chem.1988,263,4280-4289)或牛筋草EPSPS(WO 01/66704)的基因。其也可为突变的EPSPS,例如EP 0837944、WO00/66746、WO 00/66747或WO 02/26995中所述的。草甘膦耐受性植物也可通过表达编码草甘膦氧化还原酶的基因获得,如美国5,776,760和美国5,463,175中所述的。草甘膦耐受性植物也可通过表达编码草甘膦乙酰基转移酶的基因获得,例如WO 02/036782、WO 03/092360、WO 05/012515和WO 07/024782中所述的。草甘膦耐受性植物还可通过选择包含上述基因的天然突变植物获得,例如WO 01/024615或WO 03/013226中所述的。表达赋予草甘膦耐受性的EPSPS基因的植物描述于,例如,美国专利申请11/517,991、10/739,610、12/139,408、12/352,532、11/312,866、11/315,678、12/421,292、11/400,598、11/651,752、11/681,285、11/605,824、12/468,205、11/760,570、11/762,526、11/769,327、11/769,255、11/943801或12/362,774中。包括赋予草甘膦耐受性的其他基因例如脱羧酶基因的植物描述于,例如,美国专利申请11/588,811、11/185,342、12/364,724、11/185,560或12/423,926中。
其他除草剂抗性植物为,例如,耐受抑制谷氨酰胺合成酶的除草剂如双丙氨膦(bialaphos)、草丁膦或草铵膦的植物。所述植物可通过表达可解除除草剂毒性的酶或可抵抗抑制的突变的谷氨酰胺合成酶而获得,例如描述于美国专利申请11/760,602中。一种有效的解除毒性的酶为编码草丁膦乙酰转移酶的酶(如来自链霉菌属(Streptomyces)种的bar或pat蛋白)。表达外源草丁膦乙酰转移酶的植物描述于,例如,美国专利5,561,236、5,648,477、5,646,024、5,273,894、5,637,489、5,276,268、5,739,082、5,908,810和7,112,665中。
其他除草剂耐受性植物也可以是耐受抑制羟苯基丙酮酸双加氧酶(HPPD)的除草剂的植物。HPPD是催化对-羟苯基丙酮酸酯(HPP)转化为黑尿酸的反应的酶。耐受HPPD-抑制剂的植物可用编码天然抗性HPPD酶的基因或编码突变或嵌合HPPD酶的基因转化,如WO 96/38567、WO 99/24585、WO 99/24586、WO 09/144079、WO 02/046387、US 6,768,044、WO 11/076877、WO 11/076882、WO 11/076885、WO 11/076889、WO 11/076892、WO 13/026740、WO13/092552、WO 13/092551或WO12/092555所述的。用编码某些酶的基因转化植物也可获得对HPPD-抑制剂的耐受性,这些酶使得尽管在HPPD-抑制剂抑制天然HPPD酶的情况下,仍可形成黑尿酸。这样的植物和基因描述于WO 99/34008和WO02/36787中。植物对HPPD抑制剂的耐受性,除了用编码HPPD-耐受性酶的基因转化外,也可通过用编码预苯酸脱氢酶(PDH)的基因转化植物而改进,如WO 04/024928中所述。此外,可通过将编码能够代谢或降解HPPD抑制剂的酶的基因加入植物的基因组而获得对HPPD-抑制剂除草剂更具耐受性的植物,所述酶例如是WO 07/103567和WO 08/150473中所示的CYP450酶。
其他除草剂抗性植物还可以是耐受乙酰乳酸合成酶(ALS)抑制剂的植物。已知的ALS-抑制剂包括例如磺酰脲类、咪唑啉酮类、三唑并嘧啶类、嘧啶基氧(硫)苯甲酸酯类和/或磺酰基氨基羰基三唑啉酮类除草剂。已知不同ALS酶(也称为乙酰基羟基酸合成酶,AHAS)的突变体可赋予对不同除草剂和不同类除草剂的耐受性描述于,例如,Tranel和Wright(Weed Science 2002,50,700-712)以及美国专利5,605,011、5,378,824、5,141,870和5,013,659中。磺酰脲类耐受性植物与咪唑啉酮类耐受性植物的制备描述于美国专利5,605,011、5,013,659、5,141,870、5,767,361、5,731,180、5,304,732、4,761,373、5,331,107、5,928,937和5,378,824以及WO 96/33270中。其他咪唑啉酮类耐受性植物还描述于,例如WO04/040012、WO 04/106529、WO 05/020673、WO 05/093093、WO 06/007373、WO 06/015376、WO06/024351和WO 06/060634中。其他磺酰脲类与咪唑啉酮类耐受性植物还描述于,例如,WO07/024782、WO 2011/076345、WO 2012058223、WO 2012150335和美国专利申请61/288958中。
其他耐受咪唑啉酮类和/或磺酰脲类的植物可通过诱变突变、在除草剂的存在下的细胞培养选择或者突变育种获得,例如如美国5,084,082所述的对于大豆,如WO 97/41218所述的对于水稻,如美国5,773,702和WO 99/057965所述的对于甜菜,如美国5,198,599所述的对于莴苣,或如WO 01/065922所述的对于向日葵。
耐受2,4D或麦草畏的植物描述于例如US6153401中。
还可根据本发明处理的植物或植物栽培种(由植物生物技术方法例如基因工程获得)为昆虫抗性转基因植物,即对某些目标昆虫的侵袭具有抗性的植物。所述植物可通过遗传转化、或选择含有赋予这类昆虫抗性的突变体而获得。
本文所使用的“昆虫抗性转基因植物”包括任何含有至少一种转基因的植物,所述转基因包括编码如下的编码序列:
1)来自苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)的杀虫晶体蛋白或其杀虫部分,例如Crickmore等人(Microbiology and Molecular Biology Reviews 1998,62,807-813)所列出的、Crickmore等人(2005)在苏云金芽孢杆菌的毒性命名中在http://www.lifesci.sussex.ac.uk/Home/Neil_Crickmore/Bt/中在线更新的杀虫晶体蛋白,或其杀虫部分,例如Cry蛋白类蛋白Cry1Ab、Cry1Ac、Cry1B、Cry1C、Cry1D、Cry1F、Cry2Ab、Cry3Aa、或Cry3Bb或其杀虫部分(例如EP-A 1 999 141和WO 07/107302);或者由例如美国专利申请12/249,016所述的合成基因编码的这类蛋白质;或者
2)在来自苏云金芽孢杆菌的第二种其他晶体蛋白或其部分的存在下具有杀虫活性的来自苏云金芽孢杆菌的晶体蛋白或其部分,例如由Cry34和Cry35晶体蛋白组成的二元毒素(Nat.Biotechnol.2001,19,668-72;Applied Environm.Microbiol.2006,71,1765-1774)或由Cry1A或Cry1F蛋白与Cry2Aa或Cry2Ab或Cry2Ae蛋白组成的二元毒素(美国专利申请12/214,022和EP-A 2 300 618);或者
3)包含来自苏云金芽孢杆菌的不同杀虫晶体蛋白的部分的杂种杀虫蛋白,例如上述1)的蛋白的杂种或上述2)的蛋白的杂种,例如由玉米株系MON98034产生的Cry1A.105蛋白(WO 07/027777);或者
4)上述1)至3)任一项的蛋白,其中一些氨基酸、特别是1至10个氨基酸被另一氨基酸置换,以获得对于目标昆虫物种更高的杀虫活性和/或扩大受影响的目标昆虫物种的范围,和/或由于在克隆或转化过程中引入到编码DNA中的改变,如玉米株系MON863或MON88017中的Cry3Bb1蛋白,或玉米株系MIR604中的Cry3A蛋白;或者
5)来自苏云金芽孢杆菌或蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)的杀虫分泌性蛋白或其杀虫部分,如在以下网址中所列的营养期杀虫蛋白(VIP):
http://www.lifesci.sussex.ac.uk/home/Neil_Crickmore/Bt/viphtml,例如VIP3Aa蛋白类的蛋白;或者
6)在来自苏云金芽孢杆菌或蜡状芽孢杆菌的第二种分泌性蛋白的存在下具有杀虫活性的来自苏云金芽孢杆菌或蜡状芽孢杆菌的分泌性蛋白,例如由VIP1A和VIP2A蛋白组成的二元毒素;或者
7)包含来自苏云金芽孢杆菌或蜡状芽孢杆菌的不同分泌蛋白的部分的杂种杀虫蛋白,如上述1)的蛋白的杂种,或上述2)的蛋白的杂种;或者
8)上述5)至7)任一项的蛋白,其中一些氨基酸、特别是1至10个氨基酸被另一氨基酸置换,以获得对于目标昆虫物种的更高的杀虫活性,和/或扩大受影响的目标昆虫物种的范围,和/或由于在克隆或转化过程中引入到编码DNA中的改变(同时仍编码杀虫蛋白),例如棉花株系COT102中的VIP3Aa蛋白;或者
9)在来自苏云金芽孢杆菌的晶体蛋白的存在下具有杀虫活性的来自苏云金芽孢杆菌或蜡状芽孢杆菌的分泌性蛋白,例如由VIP3与Cry1A或Cry1F组成的二元毒素(美国专利申请61/126083和61/195019)、或由VIP3蛋白与Cry2Aa或Cry2Ab或Cry2Ae蛋白组成的二元毒素(美国专利申请12/214,022和EP-A 2 300 618)。
10)上述9)的蛋白,其中一些氨基酸、特别是1至10个氨基酸被另一氨基酸置换,以获得对于目标昆虫物种的更高的杀虫活性,和/或扩大受影响的目标昆虫物种的范围,和/或由于在克隆或转化过程中引入到编码DNA中的改变(同时仍编码杀虫蛋白)。
当然,本文所使用的昆虫抗性转基因植物还包括含有编码上述1至10类中任一项的蛋白的基因的组合的任何植物。在一个实施方案中,昆虫抗性植物包括一个以上编码上述1至10类中任一项的蛋白的转基因,以在使用针对不同目标昆虫物种的不同蛋白时扩大受影响的目标昆虫物种的范围,或通过使用对相同目标昆虫物种具有杀虫活性但作用模式不同(例如结合至昆虫中不同受体结合位点)的不同蛋白来延迟昆虫对植物抗性的发展。
本文所使用的“昆虫抗性转基因植物”还包括任何包括至少一个包含表达出双链RNA序列的转基因的植物,所述双链RNA被植物害虫摄取后能抑制所述害虫的生长,例如WO07/080126、WO 06/129204、WO 07/074405、WO 07/080127和WO 07/035650中所述的。
还可根据本发明处理的植物或植物栽培种(通过植物生物技术方法如遗传工程而获得)对非生物胁迫具有耐受性。这类植物可通过遗传转化或通过选择含有赋予所述胁迫抗性的突变的植物而获得。特别有用的胁迫耐受性植物包括:
1)含有能够减少植物细胞或植物中多腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)基因的表达和/或活性的转基因的植物,如WO 00/04173、WO 06/045633、EP-A 1 807 519、或EP-A 2018431中所述;
2)含有能够减少植物或植物细胞的PARG编码基因的表达和/或活性的增强胁迫耐受性的转基因的植物,例如如WO04/090140中所述;
3)含有编码烟酰胺腺嘌呤二核苷酸补救合成途径中的植物功能酶的增强胁迫耐受性的转基因的植物,所述植物功能酶包括烟酰胺酶、烟酸酯磷酸核糖基转移酶、烟酸单核苷酸腺嘌呤基转移酶、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸合成酶或烟酰胺磷酸核糖基转移酶,例如如EP-A 1 794 306、WO 06/133827、WO 07/107326、EP-A 1 999 263、或WO 07/107326中所述。
还可根据本发明处理的植物或植物栽培种(通过植物生物技术方法如遗传工程而获得)显示出采收产品的数量、品质和/或贮存稳定性,和/或改变的采收产品的特定成分特性的改变,所述植物或植物栽培种例如:
1)合成改性淀粉的转基因植物,其中改性淀粉的物理化学特性——特别是直链淀粉的含量或是直链淀粉/支链淀粉的比例、支化度、平均链长、侧链分布、粘度特性、凝胶强度、淀粉粒大小和/或淀粉粒形态——与野生型植物细胞或植物中合成的淀粉相比发生了改变,从而能更好地适于特殊应用。所述合成改性淀粉的转基因植物例如公开于EP-A 0571 427、WO 95/04826、EP-A 0 719 338、WO 96/15248、WO 96/19581、WO 96/27674、WO 97/11188、WO 97/26362、WO 97/32985、WO 97/42328、WO 97/44472、WO 97/45545、WO 98/27212、WO 98/40503、WO 99/58688、WO 99/58690、WO 99/58654、WO 00/08184、WO 00/08185、WO 00/08175、WO 00/28052、WO 00/77229、WO 01/12782、WO 01/12826、WO 02/101059、WO 03/071860、WO 04/056999、WO 05/030942、WO 05/030941、WO 05/095632、WO05/095617、WO 05/095619、WO 2005/095618、WO 05/123927、WO 06/018319、WO 06/103107、WO 06/108702、WO 07/009823、WO 00/22140、WO 06/063862、WO 06/072603、WO 02/034923、WO 08/017518、WO 08/080630、WO 08/080631、WO 08/090008、WO 01/14569,WO 02/79410、WO 03/33540、WO 04/078983、WO 01/19975、WO 95/26407、WO 96/34968、WO 98/20145、WO99/12950、WO 99/66050、WO 99/53072、US 6,734,341、WO 00/11192、WO 98/22604、WO 98/32326、WO 01/98509、WO 01/98509、WO 05/002359、US 5,824,790、US 6,013,861、WO 94/04693、WO 94/09144、WO 94/11520、WO 95/35026、WO 97/20936、WO 10/012796、WO 10/003701、WO 13/053729、WO 13/053730中;
2)与未经遗传修饰的野生型植物相比,合成非淀粉碳水化合物聚合物或合成具有改变特性的非淀粉碳水化合物聚合物的转基因植物。实例是产生多聚果糖、特别是产生菊粉型和果聚糖型多聚果糖的植物,如EP-A 0 663 956、WO 96/01904、WO 96/21023、WO 98/39460和WO 99/24593中公开的;产生α-1,4-葡聚糖的植物,如WO 95/31553、US2002031826、US 6,284,479、US 5,712,107、WO 97/47806、WO 97/47807、WO 97/47808和WO00/14249中公开的;产生α-1,6-支化α-1,4-葡聚糖的植物,如WO 00/73422中公开的;产生交替糖(alternan)的植物,例如WO 00/47727、WO 00/73422、US 5,908,975和EP-A 0 728213中公开的;
3)产生透明质酸的植物,例如WO 06/032538、WO 07/039314、WO 07/039315、WO07/039316、JP-A 2006-304779、和WO05/012529中公开的;
4)转基因植物或杂种植物,例如具有如“高可溶性固体含量”、“低刺激性(LP)”和/或“可长期储存性(LS)”特征的洋葱,如美国专利申请12/020,360中所述的;
5)显示产量增加的转基因植物,例如WO 11/095528中公开的。
还可根据本发明处理的植物或植物栽培种(通过植物生物技术方法如遗传工程而获得)是具有改变的纤维特性的植物,如棉花植物。这类植物可通过遗传转化或通过选择含有赋予这种改变的纤维特性的突变的植物而获得,其包括:
a)含有纤维素合成酶基因的改变型的植物,如棉花植物,如WO98/00549中所述;
b)含有rsw2或rsw3同源核酸的改变型的植物,如棉花植物,如WO 04/053219中所述;
c)具有增强的蔗糖磷酸酯合成酶表达的植物,如棉花植物,如WO 01/17333中所述;
d)具有增强的蔗糖合成酶表达的植物,如棉花植物,如WO02/45485中所述;
e)例如通过下调纤维选择性β-1,3-葡聚糖酶而改变在纤维细胞基部处的连丝门控的时机(timing)的植物,如棉花植物,如WO 05/017157中所述,或如WO 09/143995中所述;
f)具有改变的反应性的纤维——例如,通过表达包含nodC的N-乙酰葡糖胺转移酶基因和几丁质合成酶基因——的植物,如棉花植物,如WO 06/136351、WO 11/089021、WO11/089021、WO 12/074868中所述。
还可依据本发明处理的植物或植物栽培种(通过植物生物技术方法如遗传工程而获得)是具有改变的油特性的植物,例如油菜或相关的芸苔属植物。这类植物可通过遗传转化或通过选择含有赋予所述改变的油特性的突变的植物而获得,所述植物或植物栽培种包括:
a)产生具有高油酸含量的油的植物,如油菜植物,例如如US 5,969,169、US 5,840,946或US 6,323,392或US 6,063,947中所述;
b)产生具有低亚麻酸含量的油的植物,如油菜植物,如US 6,270,828、US 6,169,190、US 5,965,755或WO 11/060946中所述;
c)产生具有低水平的饱和脂肪酸的油的植物,如油菜植物,如US 5,434,283或美国专利申请12/668303中所述;
d)产生具有改变的芥子油苷含量的油的植物,如油菜植物,如WO 2012075426中所述。
还可根据本发明处理的植物或植物栽培种(通过植物生物技术方法如遗传工程而获得)为具有改变的种子落粒特征的植物,例如油菜或相关的芸苔属植物。所述植物可通过遗传转化或通过选择含有能赋予所述改变的种子落粒特征的突变的植物而获得,所述植物包括如WO 2009/068313和WO 2010/006732、WO 2012090499中所述的推迟或降低的种子落粒的油菜植物。
还可根据本发明处理的植物或植物栽培种(通过植物生物技术方法如遗传工程而获得)是具有改变的翻译后蛋白修饰模式的植物,例如烟草植物,例如WO 10/121818和WO10/145846中所述。
可根据本发明处理的特别有用的转基因植物为包含转化株系或包含转化株系的结合的植物,这些是向美国向美国农业部(USDA)的动物与植物健康检疫局(APHIS)请求为非管制状态的主题,不论此请求是否已被准许或仍在审查中。在任何时间,均可自APHIS(4700River Road Riverdale,MD 20737,美国)取得此信息,例如:在互联网网站(URLhttp://www.aphis.usda.gov/brs/not_reg.html)。在本申请的申请日时,仍在APHIS审查中或已由APHIS准许为非管制状态的请求已列于表B,其中包含下列信息:
-请求书:请求书识别编号。转化株系的技术说明可参见从APHIS获得的各请求书文件,例如在APHIS网站上,参考此请求书编号。这些说明通过引用纳入本文。
-请求的延伸:对在先请求要求延期。
-机构:提交请求的机构名称。
-管制项目:相关植物物种。
-转基因表型:通过转化株系赋予植物的性状。
-转化株系或株系:要求为非管制状态的株系名称(有时也被指定为株系)。
-APHIS文献:由APHIS公开的与该请求相关的各种文献,其可向APHIS提出请求。
表B
非监管状态的确定
包含单一转化株系或转化株系的结合的其他特别有用的植物列于例如多个国家的或地区的管理机构的数据库中(例如参见http://gmoinfo.jrc.it/gmp_browse.aspx和http://www.cera-gmc.org/?action=gm_crop_database)。
更具体的转基因植物包括如表C中所列的任一专利公开中所述的在农艺学地处于中立或有益地位的包含转基因的植物。
表C
包含单一转化株系或转化株系的结合的其他特别有用的植物列于例如多个国家或地区的管理机构的数据库中(例如参见http://gmoinfo.jrc.it/gmp_browse.aspx和http://www.cera-gmc.org/?action=gm_crop_database)。
可根据本发明处理的特别有用的转基因植物是包含转化株系或转化株系的结合的植物,它们列于例如多个国家或地区的管理机构的数据库中,包括株系531/PV-GHBK04(棉花,昆虫防治,记载于WO 2002/040677);株系1143-14A(棉花,昆虫防治,未保藏,记载于WO 06/128569);株系1143-51B(棉花,昆虫防治,未保藏,记载于WO 06/128570);株系1445(棉花,除草剂耐受,未保藏,记载于US-A 2002-120964或WO 02/034946);株系17053(稻,除草剂耐受,保藏为PTA-9843,记载于WO 10/117737);株系17314(稻,除草剂耐受,保藏为PTA-9844,记载于WO 10/117735);株系281-24-236(棉花,昆虫防治-除草剂耐受,保藏为PTA-6233,记载于WO 05/103266或US-A 2005-216969);株系3006-210-23(棉花,昆虫防治-除草剂耐受,保藏为PTA-6233,记载于US-A 2007-143876或WO 05/103266);株系3272(玉米,品质性状,保藏为PTA-9972,记载于WO 06/098952或US-A 2006-230473);株系33391(小麦,除草剂耐受,保藏为PTA-2347,记载于WO 2002/027004),株系40416(玉米,昆虫防治-除草剂耐受,保藏为ATCC PTA-11508,记载于WO 11/075593);株系43A47(玉米,昆虫防治-除草剂耐受,保藏为ATCC PTA-11509,记载于WO 11/075595);株系5307(玉米,昆虫防治,保藏为ATCC PTA-9561,记载于WO 10/077816);株系ASR-368(糠穗草,除草剂耐受,保藏为ATCCPTA-4816,记载于US-A 2006-162007或WO 04/053062);株系B16(corn,除草剂耐受,未保藏,记载于US-A 2003-126634);株系BPS-CV127-9(大豆,除草剂耐受,保藏为NCIMB号41603,记载于WO 10/080829);株系BLR1(油菜,雄性不育恢复,保藏为NCIMB 41193,记载于WO 2005/074671),株系CE43-67B(棉花,昆虫防治,保藏为DSM ACC2724,记载于US-A 2009-217423或WO 06/128573);株系CE44-69D(棉花,昆虫防治,未保藏,记载于US-A 2010-0024077);株系CE44-69D(棉花,昆虫防治,未保藏,记载于WO 06/128571);株系CE46-02A(棉花,昆虫防治,未保藏,记载于WO 06/128572);株系COT102(棉花,昆虫防治,未保藏,记载于US-A 2006-130175或WO 04/039986);株系COT202(棉花,昆虫防治,未保藏,记载于US-A 2007-067868或WO 05/054479);株系COT203(棉花,昆虫防治,未保藏,记载于WO 05/054480););株系DAS21606-3/1606(大豆,除草剂耐受,保藏为PTA-11028,记载于WO 012/033794),株系DAS40278(玉米,除草剂耐受,保藏为ATCC PTA-10244,记载于WO 11/022469);株系DAS-44406-6/pDAB8264.44.06.1(大豆,除草剂耐受,保藏为PTA-11336,记载于WO 2012/075426),株系DAS-14536-7/pDAB8291.45.36.2(大豆,除草剂耐受,保藏为PTA-11335,记载于WO 2012/075429),株系DAS-59122-7(玉米,昆虫防治-除草剂耐受,保藏为ATCC PTA 11384,记载于US-A 2006-070139);株系DAS-59132(玉米,昆虫防治-除草剂耐受,未保藏,记载于WO 09/100188);株系DAS68416(大豆,除草剂耐受,保藏为ATCC PTA-10442,记载于WO 11/066384或WO 11/066360);株系DP-098140-6(玉米,除草剂耐受,保藏为ATCC PTA-8296,记载于US-A 2009-137395或WO 08/112019);株系DP-305423-1(大豆,品质性状,未保藏,记载于US-A 2008-312082或WO 08/054747);株系DP-32138-1(玉米,杂交系统,保藏为ATCC PTA-9158,记载于US-A 2009-0210970或WO 09/103049);株系DP-356043-5(大豆,除草剂耐受,保藏为ATCC PTA-8287,记载于US-A 2010-0184079或WO 08/002872);株系EE-1(茄子,昆虫防治,未保藏,记载于WO 07/091277);株系FI117(玉米,除草剂耐受,保藏为ATCC 209031,记载于US-A 2006-059581或WO 98/044140);株系FG72(大豆,除草剂耐受,保藏为PTA-11041,记载于WO 2011/063413),株系GA21(玉米,除草剂耐受,保藏为ATCC 209033,记载于US-A 2005-086719或WO 98/044140);株系GG25(玉米,除草剂耐受,保藏为ATCC 209032,记载于US-A 2005-188434或WO 98/044140);株系GHB119(棉花,昆虫防治-除草剂耐受,保藏为ATCC PTA-8398,记载于WO 08/151780);株系GHB614(棉花,除草剂耐受,保藏为ATCC PTA-6878,记载于US-A 2010-050282或WO 07/017186);株系GJ11(玉米,除草剂耐受,保藏为ATCC 209030,记载于US-A 2005-188434或WO 98/044140);株系GM RZ13(甜菜,病毒抗性,保藏为NCIMB-41601,记载于WO 10/076212);株系H7-1(甜菜,除草剂耐受,保藏为NCIMB 41158或NCIMB 41159,记载于US-A 2004-172669或WO 04/074492);株系JOPLIN1(小麦,疾病耐受,未保藏,记载于US-A 2008-064032);株系LL27(大豆,除草剂耐受,保藏为NCIMB41658,记载于WO 06/108674或US-A 2008-320616);株系LL55(大豆,除草剂耐受,保藏为NCIMB 41660,记载于WO 06/108675或US-A 2008-196127);株系LL棉花25(棉花,除草剂耐受,保藏为ATCC PTA-3343,记载于WO 03/013224或US-A 2003-097687);株系LLRICE06(稻,除草剂耐受,保藏为ATCC 203353,记载于US 6,468,747或WO00/026345);株系LLRice62(稻,除草剂耐受,保藏为ATCC 203352,记载于WO 2000/026345),株系LLRICE601(稻,除草剂耐受,保藏为ATCC PTA-2600,记载于US-A 2008-2289060或WO 00/026356);株系LY038(玉米,品质性状,保藏为ATCC PTA-5623,记载于US-A2007-028322或WO 05/061720);株系MIR162(玉米,昆虫防治,保藏为PTA-8166,记载于US-A2009-300784或WO 07/142840);株系MIR604(玉米,昆虫防治,未保藏,记载于US-A 2008-167456或WO 05/103301);株系MON15985(棉花,昆虫防治,保藏为ATCC PTA-2516,记载于US-A 2004-250317或WO 02/100163);株系MON810(玉米,昆虫防治,未保藏,记载于US-A2002-102582);株系MON863(玉米,昆虫防治,保藏为ATCC PTA-2605,记载于WO 04/011601或US-A 2006-095986);株系MON87427(玉米,授粉控制,保藏为ATCC PTA-7899,记载于WO11/062904);株系MON87460(玉米,胁迫耐受,保藏为ATCC PTA-8910,记载于WO 09/111263或US-A2011-0138504);株系MON87701(大豆,昆虫防治,保藏为ATCC PTA-8194,记载于US-A2009-130071或WO 09/064652);株系MON87705(大豆,品质性状-除草剂耐受,保藏为ATCCPTA-9241,记载于US-A 2010-0080887或WO 10/037016);株系MON87708(大豆,除草剂耐受,保藏为ATCC PTA-9670,记载于WO 11/034704);株系MON87712(大豆,产量,保藏为PTA-10296,记载于WO 2012/051199),株系MON87754(大豆,品质性状,保藏为ATCC PTA-9385,记载于WO 10/024976);株系MON87769(大豆,品质性状,保藏为ATCC PTA-8911,记载于US-A2011-0067141或WO 09/102873);株系MON88017(玉米,昆虫防治-除草剂耐受,保藏为ATCCPTA-5582,记载于US-A 2008-028482或WO 05/059103);株系MON88913(棉花,除草剂耐受,保藏为ATCC PTA-4854,记载于WO 04/072235或US-A 2006-059590);株系MON88302(油菜,除草剂耐受,保藏为PTA-10955,记载于WO 2011/153186),株系MON88701(棉花,除草剂耐受,保藏为PTA-11754,记载于WO 2012/134808),株系MON89034(玉米,昆虫防治,保藏为ATCC PTA-7455,记载于WO 07/140256或US-A 2008-260932);株系MON89788(大豆,除草剂耐受,保藏为ATCC PTA-6708,记载于US-A 2006-282915或WO 06/130436);株系MS11(油菜,授粉控制-除草剂耐受,保藏为ATCC PTA-850或PTA-2485,记载于WO 01/031042);株系MS8(油菜,授粉控制-除草剂耐受,保藏为ATCC PTA-730,记载于WO 01/041558或US-A 2003-188347);株系NK603(玉米,除草剂耐受,保藏为ATCC PTA-2478,记载于US-A 2007-292854);株系PE-7(稻,昆虫防治,未保藏,记载于WO 08/114282);株系RF3(油菜,授粉控制-除草剂耐受,保藏为ATCC PTA-730,记载于WO 01/041558或US-A 2003-188347);株系RT73(油菜,除草剂耐受,未保藏,记载于WO 02/036831或US-A 2008-070260);株系SYHT0H2/SYN-000H2-5(大豆,除草剂耐受,保藏为PTA-11226,记载于WO 2012/082548),株系T227-1(甜菜,除草剂耐受,未保藏,记载于WO 02/44407或US-A 2009-265817);株系T25(玉米,除草剂耐受,未保藏,记载于US-A 2001-029014或WO 01/051654);株系T304-40(棉花,昆虫防治-除草剂耐受,保藏为ATCC PTA-8171,记载于US-A 2010-077501或WO 08/122406);株系T342-142(棉花,昆虫防治,未保藏,记载于WO 06/128568);株系TC1507(玉米,昆虫防治-除草剂耐受,未保藏,记载于US-A 2005-039226或WO 04/099447);株系VIP1034(玉米,昆虫防治-除草剂耐受,保藏为ATCC PTA-3925.,记载于WO 03/052073),株系32316(玉米,昆虫防治-除草剂耐受,保藏为PTA-11507,记载于WO 11/084632),株系4114(玉米,昆虫防治-除草剂耐受,保藏为PTA-11506,记载于WO 11/084621),EE-GM3/FG72(大豆,除草剂耐受,ATCC登记号PTA-11041,WO 2011/063413A2),株系DAS-68416-4(大豆,除草剂耐受,ATCC登记号PTA-10442,WO2 011/066360A1),株系DAS-68416-4(大豆,除草剂耐受,ATCC登记号PTA-10442,WO 2011/066384A1),株系DP-040416-8(玉米,昆虫防治,ATCC登记号PTA-11508,WO 2011/075593A1),株系DP-043A47-3(玉米,昆虫防治,ATCC登记号PTA-11509,WO 2011/075595A1),株系DP-004114-3(玉米,昆虫防治,ATCC登记号PTA-11506,WO2011/084621A1),株系DP-032316-8(玉米,昆虫防治,ATCC登记号PTA-11507,WO 2011/084632A1),株系MON-88302-9(油菜,除草剂耐受,ATCC登记号PTA-10955,WO 2011/153186A1),株系DAS-21606-3(大豆,除草剂耐受,ATCC登记号PTA-11028,WO 2012/033794A2),株系MON-87712-4(大豆,品质性状,ATCC登记号PTA-10296,WO 2012/051199A2),株系DAS-44406-6(大豆,叠加的除草剂耐受,ATCC登记号PTA-11336,WO 2012/075426A1),株系DAS-14536-7(大豆,叠加的除草剂耐受,ATCC登记号PTA-11335,WO 2012/075429A1),株系SYN-000H2-5(大豆,除草剂耐受,ATCC登记号PTA-11226,WO 2012/082548A2),株系DP-061061-7(油菜,除草剂耐受,无可获得的保藏号,WO 2012071039A1),株系DP-073496-4(油菜,除草剂耐受,无可获得的保藏号,US2012131692),株系8264.44.06.1(大豆,叠加的除草剂耐受,登记号PTA-11336,WO 2012075426A2),株系8291.45.36.2(大豆,叠加的除草剂耐受,登记号PTA-11335,WO 2012075429A2),株系SYHT0H2(大豆,ATCC登记号PTA-11226,WO 2012/082548A2),株系MON88701(棉花,ATCC登记号PTA-11754,WO 2012/134808A1),株系KK179-2(苜蓿,ATCC登记号PTA-11833,WO2013003558A1),株系pDAB8264.42.32.1(大豆,叠加的除草剂耐受,ATCC登记号PTA-11993,WO 2013010094A1),株系MZDT09Y(玉米,ATCC登记号PTA-13025,WO 2013012775A1),株系KK179-2(苜蓿,ATCC登记号PTA-11833),WO2013003558A1,株系pDAB8264.42.32.1(大豆,叠加的除草剂耐受,ATCC登记号PTA-11993),WO2013010094A1,株系MZDT09Y(玉米,ATCC登记号PTA-13025),WO2013012775A1,株系VCO-01981-5(玉米,除草剂耐受,NCIMB登记号41842),WO2013014241A1,株系DAS-81419-2X DAS-68416-4(大豆,叠加的昆虫抗性和除草剂耐受,ATCC登记号PTA-10442),WO2013016516A1,株系DAS-81419-2(大豆,叠加的昆虫抗性和除草剂耐受,ATCC登记号PTA-12006),WO2013016527A1,株系HCEM485(玉米,除草剂耐受,ATCC登记号PTA-12014),WO2013025400A1,株系pDAB4468.18.07.1(棉花,除草剂耐受,ATCC登记号PTA-12456),WO2013112525A2,株系pDAB4468.19.10.3(棉花,除草剂耐受,ATCC登记号PTA-12457),WO2013112527A1。
在一个有利的实施方案中,式(I)的化合物用于处理转基因植物,所述转基因植物包含至少一个编码Bt毒素或Vip-相关毒素的基因或基因片段。
优选地,式(I)的化合物用于处理转基因植物,所述转基因植物包含至少一个编码Bt毒素的基因或基因片段。Bt毒素是一种源于或产生于土壤细菌苏云金芽孢杆菌的蛋白质,其属于晶体毒素(crystal toxin,Cry)或溶细胞毒素(cytolytic toxin,Cyt)。在细菌中,它们最初作为原毒素形成并且仅在碱性培养基中代谢——例如在某些饲养昆虫的消化道中——为它们的活性形式。在那里,活性毒素接着在细胞表面与某些碳氢化合物结构结合,引起气孔的形成,从而破坏细胞的渗透势,这可影响细胞溶解作用。结果是昆虫死亡。特别地,Bt毒素在对抗鳞翅目(蝴蝶)、同翅目、双翅目和鞘翅目(甲虫)的某些有害物种的所有发展阶段(即从卵幼虫开始、经幼体形式至其成年形式)是有活性的。
长期以来已知的是,可借助遗传工程将编码Bt毒素、其部分或产生于Bt毒素的多肽或蛋白质的基因序列克隆至农业上有用的植物中以产生对Bt毒素敏感的害虫具有内源抗性的转基因植物。为了本发明的目的,将编码至少一种Bt毒素或产生于其的蛋白质的转基因植物定义为“Bt植物”。
这类Bt植物的“第一代”通常仅包含能够形成某种毒素的基因,因而仅提供对一组病原体的抗性。包含形成Cry1Ab毒素的基因的市售玉米品种的一个实例是Monsanto的其对欧洲玉米螟具有抗性。相反,在Bt棉花品种中,通过克隆引入形成Cry1Ac毒素的基因产生对鳞翅目家族外的其他病原体的抗性。反过来,其他转基因作物植物表达形成Bt毒素的基因,具有抗鞘翅目病原体的活性。可提及的实例是能够形成Cry3A毒素的Bt马铃薯品种(Monsanto),其因而对马铃薯甲虫具有抗性,以及能够形成Cry 3Bb1毒素的转基因玉米品种(Monsanto),其因而能防御西方玉米根虫的各个物种。
在“第二代”中,产生了如已经在上文描述的表达或包含至少两个外源基因的多重转基因植物。
本发明优选具有Cry家族的Bt毒素的转基因植物(例如参见http://www.lifesci.susx.ac.uk/home/Neil_Crickmore/Bt/)。
优选具有选自下列的Bt毒素的转基因植物:
特别优选亚族cry1、cry2、cry3、cry5和cry9的基因或基因片段;尤其优选亚族cry1A的成员例如cry1Aa、cry1Ac、cry2Ab。
此外,优选使用这样的植物:除一种或多种Bt毒素的基因外,如果合适,它们还表达或包含例如蛋白酶或肽酶抑制剂(例如在WO-A 95/35031)、除草剂抗性(例如通过表达pat基因或bar基因而抵抗草铵膦或草甘膦)、或变得抵抗线虫、真菌或病毒(例如通过表达葡萄糖苷酶、几丁质酶)的基因。然而,它们的代谢特征可能被遗传修饰,从而使它们显示成分的定性和/或定量的变化(例如通过能量、碳水化合物、脂肪酸或氮代谢的修饰或通过影响它们的代谢物流)(见上文)。
在一个优选的实施方案中,Bt-植物、优选Bt-大豆包含株系MON87701,其记载于例如WO2009/064652中。因此,在一个优选的实施方案中,根据本发明,采用鱼尼丁受体调节剂处理包含所述株系的Bt-大豆种子,所述株系的代表性样品以登记号PTA-8194保藏在ATCC。
在另一个优选的实施方案中,Bt-大豆包含株系pDAB9582.814.19.1和/或株系pDAB4468.04.16.1,其例如记载于WO 2013/016516中。此育种叠加物包含如WO 2012/075426中所述的cry1F、cry1Ac和pat和aad-12和pat。因此,在一个优选的实施方案中,根据本发明,采用鱼尼丁受体调节剂处理包含所述株系的Bt-大豆种子,所述株系以登记号PTA-10442(pDAB4468.04.16.1)保藏在ATCC。
在一个优选的实施方案中,本发明方法的特征在于,Bt-植物、优选Bt-大豆植物包含至少一个编码Bt毒素的cry-基因或cry-基因片段。
在一个优选的实施方案中,所述方法的特征在于,Bt-植物、优选Bt-大豆植物包含至少一个编码Bt毒素的cry1A-基因或cry1A-基因片段。
在一个优选的实施方案中,所述方法的特征在于,所述Bt-植物、优选Bt-大豆植物还包含编码Bt毒素的cryF-基因或cryF-基因片段
在另一个优选的实施方案中,所述方法的特征在于,所述Bt-植物、优选所述大豆植物包含株系MON87701。
在一个更优选的实施方案中,所述大豆植物包含株系MON87701和株系MON89788,例如IntactaTMRoundup ReadyTM2Pro。
在另一个优选的实施方案中,所述方法的特征在于,所述大豆植物包含DNA,所述DNA包含第一序列和第二序列,所述第一序列选自SEQ ID NO:l的bp 1385-1415、SEQ IDNO:1的bp 1350-1450、SEQ ID NO:1的bp 1300-1500、SEQ ID NO:l的bp 1200-1600、SEQ IDNO:2的bp 137-168、SEQ ID NO:2的bp 103-203、和SEQ ID NO:2的bp 3-303;所述第二序列选自SEQ ID NO:3的bp 2680-2780、SEQ ID NO:15的bp2630-2830、SEQ ID NO:15的bp2530-2930、SEQ ID NO:15的bp9071-9171、SEQ ID NO:15的bp 9021-9221、和SEQ ID NO:15的bp8921-9321,所述第一和第二序列以大豆株系pDAB9582.814.19.1::pDAB4468.04.16.1.pDAB9582.814.19.1::pDAB4468.04.16.1的存在为特征公开于WO2013/016516中。
在一个优选的实施方案中,所述方法的特征在于,所述大豆植物包含SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5或其补体的核苷酸序列。
在一个优选的实施方案中,所述方法的特征在于,所述大豆植物包含SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:9或其补体的核苷酸序列。
在一个优选的实施方案中,所述方法的特征在于,所述大豆植物包含SEQ ID NO:6位置1至5757的核苷酸序列、SEQ ID NO:8位置1至6426的核苷酸序列、SEQ ID NO:7位置379至2611的核苷酸序列或其补体。
在一个优选的实施方案中,所述方法的特征在于,所述大豆植物包含本质上为SEQID NO:9或其补体的核苷酸序列的核苷酸序列。
在另一个优选的实施方案中,所述方法的特征在于,所述害虫选自大豆夜蛾(Pseudoplusia includens,soybean looper)、藜豆夜蛾(Anticarsia gemmatalis,velvetbean caterpillar)和草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda,fall armyworm)。
在另一个优选的实施方案中,所述方法的特征在于,鱼尼丁受体调节剂的使用形式为以具有至少一种混合配料的混合物存在。
第二方面涉及一种用于改善对转基因植物在害虫不存在的情况下的生产潜能的利用的方法。这方面的优选实施方案与本发明第一方面公开的优选实施方案相同。
第三个方面涉及协同组合物,所述协同组合物包含由核苷酸序列编码的Bt毒素,所述核苷酸序列包括:
第一序列,其选自SEQ ID NO:l的bp 1385-1415、SEQ ID NO:1的bp 1350-1450、SEQ ID NO:1的bp 1300-1500、SEQ ID NO:l的bp 1200-1600、SEQ ID NO:2的bp 137-168、SEQ ID NO:2的bp 103-203和SEQ ID NO:2的bp 3-303;和第二序列,其选自SEQ ID NO:3的bp 2680-2780、SEQ ID NO:15的bp2630-2830、SEQ ID NO:15的bp 2530-2930、SEQ ID NO:15的bp 9071-9171、SEQ ID NO:15的bp 9021-9221、和SEQ ID NO:15的bp 8921-9321,或者
SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5或其补体的核苷酸序列
以及本文所述的鱼尼丁受体调节剂。
第四个方面涉及Bt-大豆植物,其特征在于,至少0.00001g本文所述的鱼尼丁受体调节剂附着其上。
SEQ ID No:1(公开于WO 2013/016516中)是大豆株系pDAB9582.814.19.1的5'DNA侧翼边界序列。核苷酸1-1400是基因组序列。核苷酸1401-1535是来自pDAB9582的重排序列。核苷酸1536-1836是插入序列。
SEQ ID No:2(公开于WO 2013/016516中)是大豆株系pDAB9582.814.19.1的3'DNA侧翼边界序列。核苷酸1-152是插入序列。核苷酸153-1550是基因组序列。
SEQ ID No:3(公开于WO 2013/016516中)是大豆株系pDAB4468.04.16.1的固定序列。其包括5'基因组侧翼序列、pDAB4468T-链插入物、和3'基因组侧翼序列。
SEQ ID No:4(公开于WO 2009/064652中)是一段20个核苷酸的序列,其表示大豆基因组DNA和完整的表达组件之间的接点。该序列相当于SEQ ID NO:9的位置5748至5767。此外,SEQ ID NO:1是一段相当于SEQ ID NO:6的位置5748至5757和TIC 107表达组件的完整的右边界(相当于SEQ ID NO:8的位置1至10)的核苷酸序列。SEQ ID NO:1还相当于SEQID NO:6的5'侧翼序列的位置5748至5767。
SEQ ID No:5(公开于WO 2009/064652中)是一段20个核苷酸的序列,其表示完整的表达组件和大豆基因组DNA之间的接点。这段序列相当于SEQ ID NO:9的位置12174至12193。此外,SEQ ID NO:2是相当于SEQ ID NO:8的位置的6417至6426和相当于SEQ ED NO:7的位置379至388的3'侧翼序列的核苷酸序列。
SEQ ID No:6(公开于WO 2009/064652中)是一个5'序列,其位于MON87701的插入DNA的侧翼并包括转化DNA(T-DNA)插入物的区域。
SEQ ID No:7(公开于WO 2009/064652中)是一个3'序列,其位于MON87701的插入DNA的侧翼并包括T-DNA插入物的区域。
SEQ ID No:8(公开于WO 2009/064652中)是完整的TIC 107表达组件的序列,其包括整合后的右和左边界序列。
SEQ ID No:9(公开于WO 2009/064652中)是一段14,416bp的核苷酸序列,其表示位于MON87701的插入DNA侧翼的5'序列(SEQ ID NO:6)、完整的表达组件的序列(SEQ IDNO:8)和位于MON87701的插入DNA侧翼的3'序列(SEQ ID NO:7)的重叠群。
如果核酸分子显示出完全的互补性,则一个核酸分子称为另一个核酸分子的“补体”。如本文所使用,当一个分子的每个核苷酸与其他分子的核苷酸互补,则这些分子称为显示出“完全的互补性”。如果两个分子在至少常规的“低-严格性”条件下可足够稳定地互杂交以允许它们保留相互退火,则这两个分子称为“最低限度地互补”。同样地,如果两个分子在常规的“高-严格性”条件下可足够稳定地相互杂交以允许它们保留相互退火,则这两个分子称为“互补”。常规的严格性条件由Sambrook等人(1989)和Haymes等人(NucleicAcid Hybridization,A Practical Approach,IRL出版社,华盛顿,DC,1985)描述,因此,背离完全的互补性是可允许的,条件是这些背离没有完全妨碍分子形成双链结构的能力。为了使核酸分子能够作为引物或探针使用,只需要其在序列上足够地互补以能够在采用的特定溶剂和盐浓度下形成稳定的双链结构。
如本文所使用的,“基本同源的序列”是这样的核酸序列:其将在高严格性条件下和与之可比的核酸序列的补体特异性地杂交。促进DNA杂交的合适的严格性条件,例如在约45℃的6.0×氯化钠/柠檬酸钠(SSC)随后在50℃的2.0×SSC洗涤,是本领域技术人员已知的或可在Current Protocols in Molecular Biology,John Wiley & Sons,N.Y.(1989),6.3.1-6.3.6中找到。例如,洗涤步骤的盐浓度可选自在50℃约2.0×SSC的低严格性至在50℃约2.0×SSC的高严格性。此外,洗涤步骤的温度可从在室温、约22℃的低严格性条件增加至在约65℃的高严格性条件。温度和盐均可变化,或者温度或盐浓度可保持恒定而其他变量变化。在一个优选的实施方案中,本发明的核酸将在中等严格条件例如在约2.0×SSC和约65℃与SEQ ID NO:1和2中所列的核酸分子或其补体或片段中的一个或多个特异性地杂交。在一个特别优选的实施方案中,本发明的核酸将在高严格条件下与SEQ ID NO:1和SEQID NO:2中所列的核酸分子或其补体或片段中的一个或多个特异性地杂交。在本发明的一个方面,本发明优选的标记核酸分子具有SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2中所列的核酸序列或其补体或片段。在本发明的另一个方面,本发明优选的标记核酸分子与SEQ ID NO:1和SEQID NO:2中所列的核酸序列或其补体或片段具有80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%和100%的序列一致性。在本发明的另一个方面,本发明优选的标记核酸分子与SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2中所列的核酸序列或其补体或片段具有95%、96%、97%、98%、99%和100%的序列一致性。SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2可用作植物育种方法中的标记物来鉴定遗传杂交的后代,类似于“DNA markers:Protocols,applications和综述:(1997)173-185,Cregan,et al.,eds.,Wiley-Liss NY”中所描述的用于简单重复序列DNA标记物分析的方法;所提及的文献的全文通过引用纳入本文。探针与目标DNA分子的杂交可通过本领域技术人员已知的任何方法检测,这些方法可包括但不限于荧光标签、放射性标签、抗体基标签和冷光标签。
关于使用特定的扩增引物扩增目标核酸序列(例如通过PCR),“严格条件”是如下条件:允许引物对仅与目标核酸序列杂交,具有相应的野生型序列(或其补体)的引物会结合至所述目标核酸序列以优选产生唯一的DNA热扩增反应中扩增产物,扩增子。
术语“对(目标序列)的特异性”是指在严格杂交条件下探针或引物仅与包含目标序列的样品中的目标序列杂交。
在一个特别优选的变型中,本发明的方法用于处理转基因蔬菜、玉米、大豆、棉花、烟草、稻、马铃薯和甜菜品种。这些优选是Bt植物。
蔬菜植物或品种例如为下列有用植物:
o马铃薯:优选淀粉马铃薯、甘薯和餐用马铃薯;
o根类蔬菜:优选胡萝卜、芜菁(瑞典无境、胡茬芜菁(stubble turnip)(Brassicarapa var.rapa)、春芜菁、秋芜菁(Brassica campestris ssp.rapifera)、Brassica rapaL.ssp.rapa f.teltowiensis、鸦葱、洋姜、根类欧芹、欧洲防风草、萝卜和山葵;
o块茎蔬菜:优选球茎甘蓝、甜菜根、根芹菜、栽培萝卜;
o鳞茎蔬菜:优选葱、韭和洋葱(种植洋葱和种子洋葱);
o芸苔属蔬菜:优选结球甘蓝(白甘蓝、红甘蓝、羽衣甘蓝、皱叶甘蓝)、花椰菜、青花菜、皱叶羽衣甘蓝、葫芦茎羽衣甘蓝、海甘蓝和抱子甘蓝;
o水果蔬菜:优选番茄(户外番茄、熟藤番茄、牛肉番茄、温室番茄、鸡尾酒番茄、工业的和新鲜上市的番茄)、甜瓜、茄子、紫茄子、胡椒(甜椒和辣椒、西班牙辣椒)、红辣椒、南瓜、小西葫芦和黄瓜(户外黄瓜、温室黄瓜、蛇瓜和腌食用小黄瓜);
o菜用豆:优选矮菜豆(如刀豆、青豆、笛豆、蜡豆、玉米豆的绿色和黄色豆荚栽培种)、架菜豆(如刀豆、青豆、笛豆、蜡豆的绿色、蓝色和黄色豆荚栽培种)、蚕豆(芸豆、掌状豆、具有白色和黑色斑点花的栽培种)、豌豆(野豌豆、鹰嘴豆、大粒豌豆、硬壳豌豆、糖豌豆、光滑豌豆、具有亮和黑绿色新鲜果实的栽培种)和小扁豆;
o绿叶蔬菜和茎类蔬菜:优选大白菜、圆头莴苣、皱叶莴苣、羊莴苣、球叶莴苣、直立莴苣、橡树叶莴苣、苦苣、红菊苣、红叶莴苣(lollo rossa)、ruccola莴苣、菊苣、菠菜、甜菜(叶甜菜和茎甜菜)和香芹菜;
o其他蔬菜:优选芦笋、大黄、细香葱、朝鲜蓟、薄荷变种、向日葵、甘茴香、莳萝、独行菜、芥末、罂粟子、花生、芝麻和沙拉菊苣。
Bt蔬菜,包括制备Bt蔬菜的示例性方法详述于例如Barton et al.,1987,PlantPhysiol.85:1103-1109;Vaeck et al.,1987,Nature 328:33-37;Fischhoff et al.,1987,Bio/Technology 5:807-813中。此外,Bt蔬菜植物作为商业品种已知,例如马铃薯栽培种(Monsanto)。Bt蔬菜的制备也描述于US 6,072,105中。
同样地,Bt棉花原则上是已知的,例如已知于US-A-5,322,938中。在本发明的上下文中,特别优选的是商品名为和的Bt棉花。
同样地,Bt玉米的使用和制备也是长期已知的,例如已知于Ishida,Y.、Saito,H.、Ohta,S.、Hiei,Y.、Komari,T.和Kumashiro,T.(1996),High efficiency transformation ofmaize(Zea mayz L.)mediated by Agrobacterium tumefaciens,Nature Biotechnology 4:745-750中。EP-B-0485506也描述了Bt玉米植物的制备。此外,Bt玉米的不同品种是市售可得的,例如以下列名称销售的(在每种情况中在括号中给出了公司名称):(Novartis Seeds)、(Mycogen Seeds)、(Novartis Seeds、Monsanto、Cargill、Golden Harvest、Pioneer、DeKalb inter alia)、(DeKalb)和(Aventis CropScience、Garst inter alia)。为了本发明的目的,特别优选的尤其是下列玉米栽培种:和
同样地,对于大豆,栽培种或对除草剂Liberty具有抗性的栽培种是可获得的并可根据本发明处理。在稻的情况中,大量“黄金稻”株系是可获得的,其特征同样在于,通过其通过遗传修饰而具有增加的维生素A原的含量。它们也是可根据本发明的方法处理的具有所描述的优势的植物的实例。
本发明的方法适于防治大量的有害生物体,特别是存在于蔬菜、玉米和棉花中的有害生物体,特别是昆虫和蛛形纲,非常特别优选昆虫。所提及的害虫包括:
o来自虱目(Anoplura)(Phthiraptera),例如畜虱属种(Damalinia spp.)、血虱属种(Haematopinus spp.)、毛虱属种(Linognathus spp.)、虱属种(Pediculus spp.)、嚼虱属种(Trichodectes spp.)。
o来自蛛形纲(Arachnida),例如粉螨(Acarus siro)、柑橘瘤瘿螨(Aceriasheldoni)、刺皮瘿螨属种(Aculops spp.)、针刺瘿螨属种(Aculus spp.)、花蜱属种(Amblyomma spp.)、锐缘蜱属种(Argas spp.)、牛蜱属种(Boophilus spp.)、短须螨属种(Brevipalpus spp.)、苜蓿苔螨(Bryobia praetiosa)、皮螨属种(Chorioptes spp.)、鸡皮刺螨(Dermanyssus gallinae)、始叶螨属种(Eotetranychus spp.)、梨上瘿螨(Epitrimerus pyri)、真叶螨属种(Eutetranychus spp.)、瘿螨属种(Eriophyes spp.)、半跗线螨属种(Hemitarsonemus spp.)、璃眼蜱属种(Hyalomma spp.)、硬蜱属种(Ixodesspp.)、毒蛛属种(Latrodectus spp.)、梅塔叶螨属种(Metatetranychus spp.)、小爪螨属种(Oligonychus spp.)、钝缘蜱属种(Ornithodoros spp.)、全爪螨属种(Panonychusspp.)、桔芸锈螨(Phyllocoptruta oleivora)、侧多食跗线螨(Polyphagotarsonemuslatus)、痒螨属种(Psoroptes spp.)、扇头蜱属种(Rhipicephalus spp.)、根螨属种(Rhizoglyphus spp.)、疥螨属种(Sarcoptes spp.)、中东金蝎(Scorpio maurus)、狭跗线螨属种(Steneotarsonemus spp.)、跗线螨属种(Tarsonemus spp.)、叶螨属种(Tetranychus spp.)、斜背瘤瘿螨(Vasates lycopersici)。
o来自双足纲(Bivala),例如饰贝属种(Dreissena spp.)。
o来自唇足目(Chilopoda),例如地蜈蚣属种(Geophilus spp.)、蚰蜒属种(Scutigera spp.)。
o来自鞘翅目(Coleoptera),例如菜豆象(Acanthoscelides obtectus)、喙丽金龟属种(Adoretus spp.)、杨树萤叶甲(Agelastica alni)、叩甲属种(Agriotes spp.)、马铃薯鳃角金龟(Amphimallon solstitialis)、家具窃蠹(Anobium punctatum)、星天牛属种(Anoplophora spp.)、花象属种(Anthonomus spp.)、圆皮蠹属种(Anthrenus spp.)、阿鳃金龟属种(Apogonia spp.)、隐翅甲属种(Atomaria spp.)、毛皮蠹属种(Attagenus spp.)、恶条豆象(Bruchidius obtectus)、豆象属种(Bruchus spp.)、龟象属种(Ceuthorhynchusspp.)、Cleonus mendicus、宽胸叩头虫属种(Conoderus spp.)、根颈象属种(Cosmopolitesspp.)、褐新西兰肋翅鳃角金龟(Costelytra zealandica)、象虫属种(Curculio spp.)、杨干隐喙象(Cryptorhynchus lapathi)、皮蠹属种(Dermestes spp.)、叶甲属种(Diabroticaspp.)、食植瓢虫属种(Epilachna spp.)、烟草钻孔虫(Faustinus cubae)、裸蛛甲(Gibbiumpsylloides)、黑异爪蔗金龟(Heteronychus arator)、Hylamorpha elegans、北美家天牛(Hylotrupes bajulus)、紫苜蓿叶象(Hypera postica)、咪小蠹属种(Hypothenemusspp.)、甘蔗大褐齿爪鳃金龟(Lachnosterna consanguinea)、马铃薯甲虫(Leptinotarsadecemlineata)、稻根象(Lissorhoptrus oryzophilus)、筒喙象属种(Lixusspp.)、粉蠹属种(Lyctus spp.)、油菜花露尾甲(Meligethes aeneus)、大栗鳃角金龟(Melolontha melolontha)、天牛属种(Migdolus spp.)、墨天牛属种(Monochamus spp.)、葡萄短须螨(Naupactus xanthographus)、黄蛛甲(Niptus hololeucus)、椰蛀犀金龟(Oryctes rhinoceros)、锯谷盗(Oryzaephilus surinamensis)、黑葡萄耳象(Otiorrhynchus sulcatus)、小青花金龟(Oxycetonia jucunda)、辣根猿叶虫(Phaedoncochleariae)、食叶鳃金龟属种(Phyllophaga spp.)、日本弧丽金龟(Popilliajaponica)、象甲属种(Premnotrypes spp.)、油菜金头跳甲(Psylliodes chrysocephala)、蛛甲属种(Ptinus spp.)、暗色瓢虫(Rhizobius ventralis)、谷蠹(Rhizoperthadominica)、谷象属种(Sitophilus spp.)、尖隐喙象属种(Sphenophorus spp.)、茎干象属种(Sternechus spp.)、宽幅天牛属种(Symphyletes spp.)、黄粉虫(Tenebrio molitor)、拟谷盗属种(Tribolium spp.)、斑皮蠹属种(Trogoderma spp.)、籽象属种(Tychiusspp.)、脊虎天牛属种(Xylotrechus spp.)、距步甲属种(Zabrus spp.)。
o来自弹尾目(Collembola),例如武装棘跳虫(Onychiurus armatus)。
o来自革翅目(Dermaptera),例如地蜈蚣(Forficula auricularia)。
o来自倍足目(Diplopoda),例如千足虫(Blaniulus guttulatus)。
o来自双翅目(Diptera),例如,伊蚊属种(Aedes spp.)、按蚊属种(Anophelesspp.)、花园毛蚊(Bibio hortulanus)、天青丽蝇(Calliphora erythrocephala)、地中海实蝇(Ceratitis capitata)、金蝇属种(Chrysomyia spp.)、锥蝇属种(Cochliomyia spp.)、人皮蝇(Cordylobia anthropophaga)、库蚊属种(Culex spp.)、黄蝇属种(Cuterebraspp.)、橄榄大实蝇(Dacus oleae)、人肤蝇(Dermatobia hominis)、果蝇属种(Drosophilaspp.)、厕蝇属种(Fannia spp.)、胃蝇属种(Gastrophilus spp.)、黑蝇属种(Hylemyiaspp.)、虱蝇属种(Hyppobosca spp.)、皮蝇属种(Hypoderma spp.)、斑潜蝇属种(Liriomyzaspp.)、绿蝇属种(Lucilia spp.)、家蝇属种(Musca spp.)、绿蝽属种(Nezara spp.)狂蝇属种(Oestrus spp.)、瑞典麦秆蝇(Oscinella frit)、藜泉妮(Pegomyia hyoscyami)、草种蝇属种(Phorbia spp.)、螫蝇属种(Stomoxys spp.)、虻属种(Tabanus spp.)、Tannia属种、沼泽大蚊(Tipula paludosa)、污蝇属种(Wohlfahrtia spp.)。
o来自腹足纲(Gastropoda),例如蛞蝓属种(Arion spp.)、双脐螺属种(Biomphalaria spp.)、小泡螺属种(Bulinus spp.)、野蛞蝓属种(Deroceras spp.)、土蜗属种(Galba spp.)、椎实螺属种(Lymnaea spp.)、钉螺属种(Oncomelania spp.)、琥珀螺属种(Succinea spp.)。
o来自蠕虫纲(helminths),例如十二指肠钩虫(Ancylostoma duodenale)、锡兰钩口线虫(Ancylostoma ceylanicum)、巴西钩口线虫(Acylostoma braziliensis)、钩口线虫属种(Ancylostoma spp.)、人蛔虫(Ascaris lubricoides)、蛔虫属种(Ascaris spp.)、马来布鲁线虫(Brugia malayi)、帝汶布鲁线虫(Brugia timori)、仰口线虫属种(Bunostomumspp.)、夏柏特线虫属种(Chabertia spp.)、枝睾吸虫属种(Clonorchis spp.)、古柏线虫属种(Cooperia spp.)、双腔吸虫属种(Dicrocoelium spp.)、丝状网尾线虫(Dictyocaulusfilaria)、阔节裂头绦虫(Diphyllobothrium latum)、麦地那龙线虫(Dracunculusmedinensis)、细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus)、多房棘球绦虫(Echinococcusmultilocularis)、蠕形住肠蛲虫(Enterobius vermicularis)、片形属种(Faciola spp.)、血毛线虫属种(Haemonchus spp.)、异刺线虫属种(Heterakis spp.)、矮小啮壳绦虫(Hymenolepis nana)、猪圆线虫属种(Hyostrongulus spp.)、罗阿罗阿线虫(Loa Loa)、细颈线虫属种(Nematodirus spp.)、结节线虫属种(Oesophagostomum spp.)、后睾吸虫属种(Opisthorchis spp.)、旋盘尾丝虫(Onchocerca volvulus)、奥斯脱线虫属种(Ostertagiaspp.)、并殖吸虫属种(Paragonimus spp.)、裂体吸虫属种(Schistosomen spp.)、富氏类圆线虫(Strongyloides fuelleborni)、粪类圆线虫(Strongyloides stercoralis)、粪圆线虫属种(Stronyloides spp.)、牛带绦虫(Taenia saginata)、猪带绦虫(Taenia solium)、旋毛形线虫(Trichinella spiralis)、本地毛形线虫(Trichinella nativa)、株布氏旋毛虫(Trichinella britovi)、南方旋毛虫(Trichinella nelsoni)、伪方宠毛线虫(Trichinella pseudopsiralis)、毛圆线虫属种(Trichostrongulus spp.)、人鞭虫(Trichuris trichuria)、班氏吴策线虫(Wuchereria bancrofti)。
o还可防治原生动物(Protozoa),例如艾美球虫(Eimeria)。
o来自异翅目(Heteroptera),例如南瓜缘蝽(Anasa tristis)、拟丽蝽属种(Antestiopsis spp.)、土长蝽属种(Blissus spp.)、俊盲蝽属种(Calocoris spp.)、斑腿微刺盲蝽(Campylomma livida)、异背长蝽属种(Cavelerius spp.)、臭虫属种(Cimexspp.)、绿蝽鋳(Creontiades dilutus)、胡椒缘蝽(Dasynus piperis)、Dichelopsfurcatus、厚氏长棒网蝽(Diconocoris hewetti)、棉红蝽属种(Dysdercus spp.)、美洲蝽属种(Euschistus spp.)、扁盾蝽属种(Eurygaster spp.)、刺盲蝽属种(Heliopeltisspp.)、Horcias nobilellus、稻缘蝽属种(Leptocorisa spp.)、叶喙缘蝽(Leptoglossusphyllopus)、草盲蝽属种(Lygus spp.)、蔗黑长蝽(Macropes excavatus)、盲蝽科(Miridae)、绿蝽属种(Nezara spp.)、稻蝽属种(Oebalus spp.)、蝽科(Pentomidae)、方背皮蝽(Piesma quadrata)、壁蝽属种(Piezodorus spp.)、棉跳盲蝽(Psallus seriatus)、Pseudacysta persea、红猎蝽属种(Rhodnius spp.)、可可褐盲蝽(Sahlbergellasingularis)、黑蝽属种(Scotinophora spp.)、梨冠网蝽(Stephanitis nashi)、Tibracaspp.、锥猎蝽属种(Triatoma spp.)。
o来自同翅目(Homoptera),例如无网长管蚜属种(Acyrthosipon spp.)、沫蝶属种(Aeneolamia spp.)、隆脉木虱属种(Agonoscena spp.)、粉虱属种(Aleurodes spp.)、甘蔗穴粉虱(Aleurolobus barodensis)、须粉虱属种(Aleurothrixus spp.)、杧果叶蝉属种(Amrasca spp.)、圆尾蚜(Anuraphis cardui)、肾圆盾蚧属种(Aonidiella spp.)、苏联黄粉蚜(Aphanostigma piri)、蚜属种(Aphis spp.)、葡萄叶蝉(Arboridia apicalis)、小圆盾蚧属种(Aspidiella spp.)、圆盾蚧属种(Aspidiotus spp.)、圆盾蚧属种(Atanusspp.)、茄沟无网蚜(Aulacorthum solani)、小粉虱属种(Bemisia spp.)、李短尾蚜(Brachycaudus helichrysii)、微管姆属种(Brachycolus spp.)、甘蓝蚜(Brevicorynebrassicae)、小褐稻虱(Calligypona marginata)、丽黄头大叶蝉(Carneocephalafulgida)、甘蔗粉角蚜(Ceratovacuna lanigera)、沫蝉科(Cercopidae)、蜡蚧属种(Ceroplastes spp.)、草莓钉蚜(Chaetosiphon fragaefolii)、蔗黄雪盾蚧(Chionaspistegalensis)、茶绿叶蝉(Chlorita onukii)、核桃黑斑蚜(Chromaphis juglandicola)、黑褐圆盾蚧(Chrysomphalus ficus)、玉米叶蝉(Cicadulina mbila)、葛根贝盾蚧(Coccomytilus halli)、软蚧属种(Coccus spp.)、茶藨隐瘤蚜(Cryptomyzus ribis)、黄翅叶蝶属种(Dalbulus spp.)、裸粉虱属种(Dialeurodes spp.)、桔木虱属种(Diaphorinaspp.)、白背盾蚧属种(Diaspis spp.)、Doralis spp.履绵蚧属种(Drosicha spp.)、西圆尾蚜属种(Dysaphis spp.)、灰粉蚧属种(Dysmicoccus spp.)、小绿叶蝉属种(Empoascaspp.)、绵蚜属种(Eriosoma spp.)、斑叶蝉属种(Erythroneura spp.)、殃叶蝉(Euscelisbilobatus)、咖啡地粉蚧(Geococcus coffeae)、假桃病毒叶蝉(Homalodisca coagulata)、梅大尾蚜(Hyalopterus arundinis)、吹绵蚧属种(Icerya spp.)、片角叶蝉属种(Idiocerus spp.)、扁喙叶蝉属种(Idioscopus spp.)、灰飞虱(Laodelphaxstriatellus)、蜡蚧属种(Lecanium spp.)、蛎盾蚧属种(Lepidosaphes spp.)、萝卜蚜(Lipaphis erysimi)、长管蚜属种(Macrosiphum spp.)、Mahanarva fimbriolata、高粱蚜(Melanaphis sacchari)、Metcalfiella spp.、麦无网蚜(Metopolophium dirhodum)、黑缘平翅斑蚜(Monellia costalis)、黄色山核桃蚜(Monelliopsis pecanis)、瘤蚜属种(Myzusspp.)、莴苣衲长管蚜(Nasonovia ribisnigri)、黑尾叶蝉属种(Nephotettix spp.)、褐飞虱(Nilaparvata lugens)、Oncometopia spp.、Orthezia praelonga、杨梅缘粉虱(Parabemisia myricae)、虱啮属种(Paratrioza spp.)、片盾蚧属种(Parlatoria spp.)、瘿绵蚜属种(Pemphigus spp.)、玉米蜡蝉(Peregrinus maidis)、绵粉蚧属种(Phenacoccusspp.)、杨平翅绵蚜(Phloeomyzus passerinii)、忽布疣蚜(Phorodon humuli)、葡萄根瘤蚜属种(Phylloxera spp.)、苏铁褐点并盾蚧(Pinnaspis aspidistrae)、臀纹粉蚧属种(Planococcus spp.)、梨形原绵蚧(Protopulvinaria pyriformis)、桑白盾蚧(Pseudaulacaspis pentagona)、粉蚧属种(Pseudococcus spp.)、木虱属种(Psyllaspp.)、金小蜂属种(Pteromalus spp.)、蜡蝉属种(Pyrilla spp.)、笠圆盾蚧属种(Quadraspidiotus spp.)、Quesada gigas、平刺粉蚧属种(Rastrococcus spp.)、缢管蚜属种(Rhopalosiphum spp.)、黑盔蚧属种(Saissetia spp.)、葡萄带叶蝉(Scaphoideustitanus)、麦二叉蚜(Schizaphis graminum)、苏铁刺圆盾蚧(Selenaspidusarticulatus)、长唇基飞虱属种(Sogata spp.)、白背飞虱(Sogatella furcifera)、稻飞风属种(Sogatodes spp.)、三角蝶(Stictocephala festina)、Tenalaphara malayensis、Tetragonocephela spp.、美洲山核桃长斑芽(Tinocallis caryaefoliae)、广胸沫蝉属种(Tomaspis spp.)、声蚜属种(Toxoptera spp.)、温室粉虱(Trialeurodes vaporariorum)、个木虱属种(Trioza spp.)、小叶蝉属种(Typhlocyba spp.)、尖盾蚧属种(Unaspis spp.)、葡萄根瘤虱(Viteus vitifolii)。
o来自膜翅目(Hymenoptera),例如松叶蜂属种(Diprion spp.)、实叶蜂属种(Hoplocampa spp.)、毛蚁属种(Lasius spp.)、小家蚁(Monomorium pharaonis)、胡蜂属种(Vespa spp.)。
o来自等足目(Isopoda),例如鼠妇(Armadillidium vulgare)、栉水虱(Oniscusasellus)、球鼠妇(Porcellio scaber)。
o来自等翅目(Isoptera),例如散白蚁属种(Reticulitermes spp.)、土白蚁属种(Odontotermes spp.)。
o来自鳞翅目(Lepidoptera),例如桑剑纹夜蛾(Acronicta major)、烦夜蛾(Aedialeucomelas)、地老虎属种(Agrotis spp.)、棉叶波纹夜蛾(Alabama argillacea)、干煞夜蛾属种(Anticarsia spp.)、甘蓝夜蛾(Barathra brassicae)、棉潜蛾(Bucculatrixthurberiella)、松尺蠖(Bupalus piniarius)、黄尾卷叶蛾(Cacoecia podana)、烟卷蛾(Capua reticulana)、苹果小卷蛾(Carpocapsa pomonella)、冬尺蛾(Cheimatobiabrumata)、禾草螟属种(Chilo spp.)、云杉卷叶蛾(Choristoneura fumiderana)、葡萄果蠹蛾(Clysia ambiguella)、纵卷叶野螟属种(Cnaphalocerus spp.)、埃及钻叶蛾(Eariasinsulana)、地中海粉螟(Ephestia kuehniella)、棕尾毒蛾(Euproctis chrysorrhoea)、切根虫属种(Euxoa spp.)、脏切夜蛾属种(Feltia spp.)、大蜡螟(Galleria mellonella)、铃夜蛾属种(Helicoverpa spp.)、实夜蛾属种(Heliothis spp.)、褐织蛾(Hofmannophilapseudospretella)、茶长卷蛾(Homona magnanima)、苹果巢蛾(Hyponomeuta padella)、贪夜蛾属种(Laphygma spp.)、斑幕潜叶蛾(Lithocolletis blancardella)、绿果冬夜蛾(Lithophane antennata)、豆白隆切根虫(Loxagrotis albicosta)、毒蛾属种(Lymantriaspp.)、黄褐天幕毛虫(Malacosoma neustria)、甘蓝夜蛾(Mamestra brassicae)、稻毛胫夜蛾(Mocis repanda)、粘虫(Mythimma separata)、麦秆夜蛾属种(Oria spp.)、稻负泥虫(Oulema oryzae)、小眼夜蛾(Panolis flammea)、棉红铃虫(Pectinophora gossypiella)、桔潜蛾(Phyllocnistis citrella)、菜粉蝶属种(Pieris spp.)、菜蛾(Plutellaxylostella)、斜纹夜蛾属种(Prodenia spp.)、粘虫属种(Pseudaletia spp.)、大豆夜蛾(Pseudoplusia includens)、玉米螟(Pyrausta nubilalis)、灰翅夜蛾属种(Spodopteraspp.)、干煞夜蛾(Thermesia gemmatalis)、袋谷蛾(Tinea pellionella)、幕谷蛾(Tineolabisselliella)、栎绿卷蛾(Tortrix viridana)、粉夜蛾属种(Trichoplusia spp.)。
o来自直翅目(Orthoptera),例如家蟋(Acheta domesticus)、东方蜚蠊(Blattaorientalis)、德国小蠊(Blattella germanica)、蝼蛄属种(Gryllotalpa spp.)、马得拉蜚蠊(Leucophaea maderae)、飞蝗属种(Locusta spp.)、黑蝗属种(Melanoplus spp.)、美洲大蠊(Periplaneta americana)、沙漠蝗(Schistocerca gregaria)。
o来自蚤目(Siphonaptera),例如角叶蚤属种(Ceratophyllus spp.)、印鼠客蚤(Xenopsylla cheopis)。
o来自综合目(Symphyla),例如白松虫(Scutigerella immaculata)。
o来自缨翅目(Thysanoptera),例如稻蓟马(Baliothrips biformis)、Enneothrips flavens、花蓟马属种(Frankliniella spp.)、网蓟马属种(Heliothripsspp.)、温室条篱蓟马(Hercinothrips femoralis)、卡蓟马属种(Kakothrips spp.)、葡萄蓟马(Rhipiphorothrips cruentatus)、硬蓟马属种(Scirtothrips spp.)、Taeniothripscardamoni、蓟马属种(Thrips spp.)。
o来自缨尾目(Thysanura),例如衣鱼(Lepisma saccharina)。
o植物寄生线虫,包括例如粒线虫属种(Anguina spp.)、滑刃线虫属种(Aphelenchoides spp.)、刺线虫属种(Belonoaimus spp.)、伞滑刃线虫属种(Bursaphelenchus spp.)、续断双垫刃线虫(Ditylenchus dipsaci)、球异皮线虫属种(Globodera spp.)、螺旋属种(Heliocotylenchus spp.)、异皮线虫属种(Heteroderaspp.)、长针线虫属种(Longidorus spp.)、根结线虫属种(Meloidogyne spp.)、短体线虫属种(Pratylenchus spp.)、相似穿孔线虫(Radopholus similis)、盘旋属种(Rotylenchusspp.)、毛刺线虫属种(Trichodorus spp.)、半穿刺线虫属种(Tylenchorhynclus spp.)、垫刃线虫属种(Tylenchulus spp.)、柑橘半穿刺线虫(Tylenchulus semipenetrans)、剑线虫属种(Xiphinema spp.)。
本发明的用于处理Bt蔬菜、Bt玉米、Bt棉花、Bt大豆、Bt烟草以及Bt稻、Bt甜菜或Bt马铃薯的方法特别适于防治蚜虫(Aphidina)、粉虱(粉虱属)、牧草虫(缨翅目)、叶螨(蛛形纲)、软蚧壳虫或粉蚧(分别属于Coccoidae和Pseudococcoidae)。
可根据本发明使用的活性化合物可制成常规制剂,例如例如溶液剂、乳剂、可湿性粉剂、水基悬浮剂和油基悬浮剂、粉末剂(powder)、粉剂(dust)、膏剂(paste)、可溶性粉末剂、可溶性颗粒剂、撒播用颗粒剂、悬乳浓缩剂、经活性化合物浸渍的天然物质、经活性化合物浸渍的合成物质、肥料以及聚合物质中的微胶囊剂。
这些制剂采用已知的方法制备,例如通过将活性化合物与填充剂(即液体溶剂和/或固体载体)混合,如果合适可使用表面活性剂,即乳化剂和/或分散剂和/或发泡剂。这些制剂在适合的设备中制备,或在施用前或施用过程中制备。
可湿性粉剂是可均匀分散在水中的制剂,并且除活性化合物、稀释剂或惰性物质之外,其还包含润湿剂和分散剂,润湿剂例如聚乙氧基烷基酚、聚乙氧基脂肪醇、烷基磺酸酯或烷基苯基磺酸酯,分散剂例如木质素磺酸钠、2,2’-二萘甲烷-6,6’-二磺酸钠。
粉剂通过将活性化合物与细磨的固体物质研磨而获得,所述细磨的固体物质例如滑石、天然粘土例如高岭土、膨润土、叶腊石或硅藻土。颗粒剂可通过将活性化合物喷雾于有吸附能力的颗粒状惰性材料上或通过借助于粘合剂(例如聚乙烯醇、聚丙烯酸钠或矿物油)将活性化合物浓缩物施加于载体物质(例如砂、高岭土或颗粒状惰性材料)的表面而制备。如果期望作为与肥料的混合物,也可将合适的活性化合物以制备肥料颗粒剂的常规方式制粒。
适合用作助剂的是适合用于赋予所述组合物自身和/或由其衍生的制剂(例如喷雾液剂、拌种剂)特定性质例如某些技术性质和/或其他特定生物学性质的物质。典型的合适助剂是:填充剂、溶剂和载体。
合适的填充剂是,例如,水;极性和非极性有机化学液体,例如来自芳烃和非芳烃类例如石蜡、烷基苯、烷基萘、氯苯);醇和多元醇(如果合适,其也可被取代、醚化和/或酯化);酮(例如丙酮、环己酮);酯(包括脂肪和油)和(聚)醚;未取代的和取代的胺、酰胺、内酰胺(例如N-烷基吡咯烷酮类)和内酯、砜和亚砜(例如二甲亚砜)。
如果所用的填充剂是水,则也可以使用例如有机溶剂作为助溶剂。合适的液体溶剂大体上为:芳族化合物,例如二甲苯、甲苯或烷基萘;氯代芳族化合物和氯代脂肪烃,例如氯苯、氯乙烯或二氯甲烷;脂肪烃,例如环己烷或石蜡,例如石油馏分、矿物油和植物油;醇,例如丁醇或乙二醇及其醚和酯;酮,例如丙酮、甲基乙基酮、甲基异丁基酮或环己酮;强极性溶剂,例如二甲亚砜;以及水。
合适的固体载体是例如铵盐和磨碎的天然矿物质,如高岭土、粘土、滑石、白垩、石英、硅镁土、蒙脱石或硅藻土,以及磨碎的合成矿物质,如细分散的二氧化硅、氧化铝及硅酸盐类;用于颗粒剂的合适的固体载体为:例如粉碎并分级的天然岩石,例如方解石、大理石、浮石、海泡石及白云石,和合成的无机及有机粉的颗粒,以及有机材料的颗粒,如纸、锯末、椰壳、玉米穗轴及烟草杆;合适的乳化剂和/或发泡剂为:例如非离子和阴离子乳化剂,例如聚氧乙烯脂肪酸酯,聚氧乙烯脂肪醇醚;例如烷基芳基聚乙二醇醚、烷基磺酸酯、烷基硫酸酯、芳基磺酸酯,及蛋白质水解产物;合适的分散剂为非离子和/或离子物质,例如各类醇-POE和/或POP醚、酸和/或POP POE酯、烷基芳基和/或POP POE酯、脂肪和/或POP POE加合物、POE-和/或POP-多元醇衍生物、POE-和/或POP-山梨聚糖或POP-糖加合物、烷基或芳基硫酸酯、烷基或芳基磺酸酯以及烷基或芳基磷酸酯,或者相应的PO-醚加合物;此外,合适的低聚物或聚合物,例如衍生自单独的乙烯单体、丙烯酸、EO和/或PO或与例如(多元)醇或(多元)胺结合的那些。还可以利用木质素和其磺酸衍生物、未改性和改性的纤维素、芳香族和/或脂肪族磺酸和其与甲醛的加合物。
在制剂中可使用增粘剂例如羧甲基纤维素,以及使用呈粉末、颗粒或胶乳形式的天然及合成聚合物,例如阿拉伯树胶、聚乙烯醇、聚乙酸乙烯酯,以及使用天然磷脂例如脑磷脂和卵磷脂和合成磷脂。
可以使用着色剂,例如:无机颜料,如氧化铁、氧化钛和普鲁士蓝,以及有机染料,例如茜素染料、偶氮染料和金属酞青染料,以及使用痕量营养素,例如铁盐、锰盐、硼盐、铜盐、钴盐、钼盐和锌盐。
其他可能的添加剂为香料、任选经过改性的矿物油或植物油、蜡和营养素(包括微量元素),如铁盐、镁盐、硼盐、铜盐、钴盐、钼盐和锌盐。
稳定剂例如低温的稳定剂、防腐剂、抗氧化剂、光稳定剂或其他可改善化学和/或物理稳定性的成分也可存在。
这些制剂的单个类型原则上是已知的并描述于例如“PesticidesFormulations",2nd Ed.,Marcel Dekker N.Y.;Martens,1979,"Spray DryingHandbook",3rd Ed.,G.Goodwin Ltd.London”中。
基于本领域技术人员的普通专业知识,其能够选择合适的制剂助剂(在本文中,参见例如Watkins,"Handbook of Insecticide Dust Diluents and Carriers",2nd Ed.,Darland Books,Caldwell N.J.)。
在一个优选的实施方案中,根据本发明,采用油基悬浮浓缩剂处理植物或植物部位。有利的悬浮浓缩剂已知于WO 2005/084435(EP 1 725 104A2)。其由以下物质组成:至少一种室温的固体活性农用化学品物质、至少一种“闭合的(closed)”渗透剂、至少一种植物油或矿物油、至少一种非离子表面活性剂和/或至少一种阴离子表面活性剂和任选的一种或多种添加剂,所述添加剂选自乳化剂、泡沫抑制剂、防腐剂、抗氧化剂、染料和/或惰性填充材料。悬浮浓缩剂的优选实施方案描述于上述WO 2005/084435中。为了本公开的目的,两篇文献的全文在此通过引用的方式纳入本文。
在另一个优选的实施方案中,根据本发明,采用包含铵盐或鏻盐以及渗透剂——如果合适——的组合物处理植物或植物部位。有利的组合物已知于WO2007/068355和非在先公开的EP 07109732.3中。所述组合物由至少一种式(I)的化合物和至少一种铵盐或鏻盐以及渗透剂——如果合适——组成。优选的实施方案描述于WO2007/068355和非在先公开EP07109732.3中。为了本公开的目的,这些文献的全文在此通过引用的方式纳入本文。
制剂通常包含0.01至98重量%、优选0.5至90重量%的活性化合物。在可湿性粉剂中,活性化合物浓度是例如10-90重量%,余量由常规制剂成分组成补足至100重量%。在可乳化浓缩物的情况下,活性化合物浓度可以是约5至80重量%。在大多数情况下,粉剂形式的制剂包含5至20重量%的活性化合物,可喷洒溶液包含约2至20重量%。在颗粒剂的情况下,活性化合物含量部分取决于活性化合物以液体形式还是以固体形式存在,并取决于使用何种制粒助剂、填充剂等。
所需的施用率也可随外部条件例如尤其是温度和湿度而变化。其可在很宽的范围内变化,例如介于0.1g/h和5.0kg/ha之间或更多活性物质。然而,优选介于0.1g/ha和1.0kg/ha之间。由于Bt蔬菜与杀虫剂之间的协同效应,特别优选的施用率是0.1至500g/ha。
对于式(I)的化合物,优选的施用率是10至500g/ha;特别优选10至200g/ha。
在本发明方法的一个特别的实施方案中,式(I)化合物的施用率是0.1g/ha至5.0kg/ha,优选0.1至500g/ha,特别优选50至500g/ha,且尤其优选50至200g/ha。
本发明的活性化合物,呈其商业制剂形式以及呈由这些制剂制备的使用形式,可作为与其他活性化合物的混合物存在,所述其他活性化合物例如杀虫剂、引诱剂、杀菌剂、杀螨剂、杀线虫剂、杀真菌剂、生长调节物质或除草剂。
也可以是与其他已知化合物的混合物,所述其他已知化合物例如除草剂、肥料、生长调节剂、安全剂、化学信息素,或者也可以是与增强植物性质的试剂的混合物。
由商业制剂制备的使用形式的活性化合物的含量可以是0.00000001至95重量%活性化合物,优选0.00001至1重量%活性化合物。
实施例
化合物(I-5)作用于转基因Bt-植物
草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)——喷雾施用于转基因大豆,田间试验
为了制备储备溶液,将20mg活性化合物溶解于200μl二甲基甲酰胺中,并用9.78mlBelt的SC空白制剂补足。通过用水稀释制备最终的测试浓度。
该测试采用传统大豆植物(大豆(Glycine max);非转基因)和包含Cry1Ac基因的转基因大豆植物(来自Monsanto的Intacta)进行。当植物处于V2期(3个节点,具有2个未展开的具三小叶)时,通过喷雾施用活性化合物制剂而处理植物。施用后,将具有5-6个草地贪夜蛾(fall army worm,Spodoptera frugiperda)的L2幼虫的微虫笼放在叶片上。
规定的时间段后,在从5块平行测试的土地(R1-R5)上随机摘取的3片大豆叶片上,用肉眼观察在传统大豆上(图1a)较之在Intacta大豆(图1b)上的草地贪夜蛾的取食损伤(叶片上的白洞)。
根据本申请,在本试验中,分别与处理的非转基因植物和未处理的转基因植物相比,以下转基因植物与化合物的结合显示出优越的效果:
表A
表A的实验1、2和9至18的结果示于图1a和1b中。
Claims (16)
1.用于改善对转基因植物生产潜能的利用和/或用于防治/对抗/处理转基因植物中的昆虫或线虫害虫的方法,其特征在于,用有效量的式(I)的化合物处理植物,其中所述式(I)的化合物是化合物(I-5):
其中所述转基因植物包含至少一种编码Bt毒素的cry-基因或cry-基因片段。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,Bt毒素由选自亚组cry1A的cry-基因或cry-基因片段编码。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,Bt毒素由选自亚组cry1Aa、cry1Ab和cry1Ac或其杂种的cry-基因或cry-基因片段编码。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法,其特征在于,Bt毒素由包含株系MON87701的bt-基因或其片段编码。
5.根据权利要求1至3中任一项所述的方法,其特征在于,转基因植物是蔬菜植物、玉米植物、大豆植物、棉花植物、烟草植物、稻植物、甜菜植物、油菜植物或马铃薯植物。
6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,转基因植物是蔬菜植物、玉米植物、大豆植物、棉花植物、烟草植物、稻植物、甜菜植物、油菜植物或马铃薯植物。
7.根据权利要求1至3中任一项所述的方法,其特征在于,式(I)的化合物的使用形式为以与至少一种混合配料的混合物存在。
8.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,式(I)的化合物的使用形式为以与至少一种混合配料的混合物存在。
9.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,式(I)的化合物的使用形式为以与至少一种混合配料的混合物存在。
10.协同组合物,其包含Bt毒素和权利要求1中所述的式(I)的化合物。
11.根据权利要求10所述的协同组合物,其特征在于,所述Bt毒素由包含株系MON87701的bt-基因或其片段编码。
12.根据权利要求10所述的协同组合物,其特征在于,Bt毒素由选自cry1、cry2、cry3、cry5和cry9的cry-基因或cry-基因片段编码。
13.根据权利要求12所述的协同组合物,其特征在于,Bt毒素由选自cry1的cry-基因或cry-基因片段编码。
14.根据权利要求13所述的协同组合物,其特征在于,Bt毒素由亚组cry1A的cry-基因或cry-基因片段编码。
15.根据权利要求14所述的协同组合物,其特征在于,Bt毒素由选自亚组cry1Aa、cry1Ab或cry1Ac的cry-基因或cry-基因片段编码。
16.根据权利要求14所述的协同组合物,其特征在于,Bt毒素由包含株系MON87701的bt-基因或其片段编码。
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