CN104596815A - 一种竹材滑走切片染色制作方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种竹材滑走切片制作方法,特别涉及一种竹材滑走切片染色制作方法。本发明方法通过采用透明胶带粘附在竹材切片上,然后通过双面胶粘在载玻片上,而能够使切片在染色缸中集中染色。既降低了切片的破碎率,并使显色过程更容易把握,且能多张切片集中染色,染色更加方便成功率更高。
Description
技术领域
本发明涉及一种竹材滑走切片制作方法,特别涉及一种竹材滑走切片染色制作方法。
背景技术
现有技术下,为了观察竹材的组织结构,需要对竹材进行切片染色,传统的切片制作染色方法有以下两种:
1、直接切片染色:
1.1、切片准备。准备好软化的木材或植物枝条小段、培养皿、毛笔、切片机、切片刀等。
1.2、操作准备。软化材料用湿润的棉花固定在切片机的夹物部上进行切片。切一片后,用毛笔在材料上和刀刃上滴加蒸馏水,以提高切片效果。将切好的切片,用毛笔移入水中,或者70%的乙醇中保存。
1.3、脱水、染色、透明与封片,切片按照番红-固绿复染的染色程序进行染色、脱水、透明与封片。
2、聚乙二醇包埋切片:
2.1、将植物材料投入20%的聚乙二醇2000,室温下放置一昼夜,移入55-60℃的温箱内放置一昼夜。再将植物材料移入已预放在温箱中的纯聚乙二醇浸泡。一昼夜后换一次纯聚乙二醇,再过1-2天后取出,室温下迅速凝固。不用的聚乙二醇移出温箱,冷却凝固后保存。
2.2、切片。
2.3、水洗、染色、脱水、透明、封片。
成熟的竹材由于材质较硬,极难切片,而且易碎。传统的切片主要是将竹材用甘油软化剂(50%乙醇:甘油=1:1)软化后,然后直接使用滑走切片进行切片,或者软化后使用聚乙二醇浸透,然后直接进行切片。切出的切片卷缩易碎,而且染色时需要滴染,非常麻烦,难以像石蜡切片那样进行批量染色,制片效率很低。
发明内容
为了解决现有技术的问题,本发明提供了一种竹材滑走切片染色制作方法,其能够高效率的制作滑走切片,精简了实验步骤,制作滑走切片时能够极大程度减少切片的破碎,维持切片的完整性,同时,能够像石蜡切片一样能够批量对染,而不需滴染,染色方便,具有较高的制作效率。
本发明所采用的技术方案如下:
一种竹材滑走切片染色制作方法,包括以下步骤:
A、待切竹材软化后,将一片透明胶带贴到待切竹材的横切面上;
B、平行所述的透明胶带对竹材进行滑走切片动作,切下竹材切片;
C、将切下的切片带有透明胶带的一面用双面胶粘贴在载玻片上;
D、在载玻片的两端放置各放置一段棉绳,所述的竹材切片位于两段棉绳之间;
E、使用另外一张载玻片覆盖在原载玻片上,使其将竹材切片及棉绳压住,并使用胶带固定住两个载玻片;
F、将载玻片放置在染色小筐内进行染色;
G、取出染色好切片,树胶封片,贴上标签、压片。
对载玻片进行染色的具体步骤是:
F1、将盛有载玻片的小筐置于水中30分钟,去除聚乙二醇;
F2、将小筐置于番红染色液中染色过夜,第二天在水中浸洗,取出后置于阿利新兰染色液中染色5-10min;
F3、将染色好并脱水的载玻片移置于装有二甲苯的培养皿中;
F4、将载玻片上的胶带用刀片削开,使染色好的切片在二甲苯中散开。
步骤A中对待切竹材进行软化的具体步骤是:取2-3年生云南箭竹竹秆削成3-4cm长,横切面为1cm*1cm的形状,然后投入50%的酒精:甘油=1:1的酒精甘油软化剂中,抽气直至其沉于底部,浸泡一个月。
番红染色液采用50%酒精配制的番红O。
本发明提供的技术方案带来的有益效果是:
1、采用透明胶带粘贴在竹子材料上,可以防止植物切片蜷缩,破碎。
2、将切片带有透明胶带的一面通过双面胶粘到载玻片上,再用另一张载玻片将其夹住,放置染色筐中,再垂直放入染色缸中进行染色。染色时间容易把握,染色比较均匀。且切片不易脱落导致损失。
综上,本发明的方法能够高效率的制作竹材滑走切片,精简了实验步骤,制作滑走切片时能够极大程度减少切片的破碎,维持切片的完整性。同时,能够像石蜡切片一样批量对染,而不需滴染,染色方便,具有较高的制作效率。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将对本发明实施方式作进一步地详细描述。
本实施例是制作一种云南箭竹竹秆的滑走切片:
实验样品:取2-3年生云南箭竹竹秆削成长3-4cm,横切面为1cm*1cm的形状,然后投入50%酒精:甘油=1:1的酒精甘油软化剂中,抽气直至其沉于底部,浸泡一个月直至软化切的动为止。
实验药品及配方:1、酒精甘油软化剂(50%酒精:甘油=1:1)。
2、番红酒精染色液 酒精(50%)配制的1%番红O。
3、阿利新兰染色液 1%水溶性Alcian Blue(Fluka 05500)。
方法步骤:
1、样品采集、软化:取三年生新鲜竹秆,将选定部位快速切割为1cm*1cm*4cm大小的组织块,放入酒精甘油软化液中,抽气直至材料沉到瓶子底部。放置大约一个月左右用刀片可切的动为止。
2、包埋、切片:将软化好的样品用纸擦拭干净,浸入聚乙二醇(PEG6000),60℃浸泡一周。之后取出冷却,即可滑走切片机切片。
3、将待切材料基部用纱布裹紧,用滑走切片夹物部夹紧,然后用滑走切片机将待切材料表面切平,然后用透明胶带粘贴切平的上表面。
4、调整切片厚度,然后滑动切片机的滑动块,一刀切下。切下的切片即粘附在透明胶带上。
5、在一张干净的载玻片上粘上1-2条双面胶,然后将多张切片的带有透明胶带的一侧,按照顺序贴附在载玻片的双面胶上。
6、在粘有切片的载玻片两侧放置2段棉绳,然后用另外一张载玻片覆盖其上,然后用透明胶带将其两端捆扎起来。
7、然后将载玻片置于染色筐中,置于蒸馏水中浸泡30min,以清除聚乙二醇。
8、将染色筐置于番红染色液中过夜,第二天在水中浸洗,取出后置于阿利新兰染色液中染色5-10min,
9、脱水至无水乙醇及二甲苯中。将载玻片二甲苯捞出,置于装有二甲苯的培养皿中,在培养皿中用刀片将透明胶带划开,染完色的切片即可在二甲苯中散开。
10、将切片捞至干净的载玻片上,滴上树胶封片,切片制作完毕。
以上所述仅为本发明的较佳实施例,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (4)
1.一种竹材滑走切片染色制作方法,包括以下步骤:
A、待切竹材软化后,将一片透明胶带贴到待切竹材的横切面上;
B、平行所述的透明胶带对竹材进行滑走切片动作,切下竹材切片;
C、将切下的切片带有透明胶带的一面用双面胶粘贴在载玻片上;
D、在载玻片的两端放置各放置一段棉绳,所述的竹材切片位于两段棉绳之间;
E、使用另外一张载玻片覆盖在原载玻片上,使其将竹材切片及棉绳压住,并使用胶带固定住两个载玻片;
F、将载玻片放置在染色小筐内进行染色;
G、取出染色好切片,树胶封片,贴上标签、压片。
2.根据权利要求1所述的一种竹材滑走切片染色制作方法,其特征在于,所述的步骤F中,对载玻片进行染色的具体步骤是:
F1、将盛有载玻片的小筐置于水中30分钟,去除聚乙二醇;
F2、将小筐置于番红染色液中染色过夜,第二天在水中浸洗,取出后置于阿利新兰染色液中染色5-10min;
F3、将染色好并脱水的载玻片移置于装有二甲苯的培养皿中;
F4、将载玻片上的胶带用刀片削开,使染色好的切片在二甲苯中散开。
3.根据权利要求1或2所述的一种竹材滑走切片染色制作方法,其特征在于,步骤A中对待切竹材进行软化的具体步骤是:取2-3年生云南箭竹竹秆削成3-4cm长,横切面为1cm*1cm的形状,然后投入50%酒精:甘油=1:1的酒精甘油软化剂中,抽气直至其沉于底部,浸泡一个月。
4.根据权利要求1或2所述的一种竹材滑走切片染色制作方法,其特征在于,番红染色液采用50%酒精配制的番红O。
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