CN104897453A - 一种器官组织的快速染色方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种器官组织的快速染色方法，包括如下步骤：将组织切片放入染色架依次置于100％二甲苯I和100％二甲苯II中各8min；取出后按100％二甲苯I 5min、100％二甲苯II 5min、95％的酒精5min、85％的酒精5min、75％的酒精5min的梯度进行复水后，用自来水中流水冲洗，置于0.2％苏木素染液中染色后，流水冲洗；置于1％盐酸酒精中分化，快速拿起，放入烧杯中，流水水洗；将分化后的组织切片置于1％氨水中蓝化，快速拿起，流水水洗；将蓝化后的组织切片放入1％伊红染液中染色后，放入盛有自来水的烧杯中，轻微震荡，洗去切片上多余伊红染液；脱水、透明处理后，进行中性树脂封片。本发明染色效果好，染色所需的时间短，且稳定性高。

Description

一种器官组织的快速染色方法

技术领域

本发明涉及器官组织染色领域，具体涉及一种器官组织的快速染色方法。

背景技术

目前，植物制片前需要进行前处理，将植物材料进行切成便于观察的薄片才行，有两种方法进行：一种为徒手切片法、另一种为石蜡切片法。徒手切片是用手持双面刀片或剃刀，将新鲜材料或预先固定好的材料(切前水洗)切成薄片，不经染色或经简单染色后，用水封片作临时装片观察。徒手切片法的优点是不需要复杂的设备，方法简便，制片迅速，而且能观察到植物组织的自然色泽和活体结构，常用于研究植物解剖结构、细胞组织化学成分，植物资源鉴定等。同时，它具有利于临时观察、能够较快的得到结果的优点。缺点是对于体积过小、太软、太硬的材料则难于切片，而且不能制成连续切片。

切片法是最常用的一种制片法。其制作过程是：取材→固定→冲洗→脱水→透明→浸蜡→包埋→切片→贴片→烤片→脱蜡→复水→染色→脱水→透明→封藏。石蜡制片是一个连续的操作过程，往往要连续几天才能完成，容易与其它工作发生冲突，也会因前后顺序颠倒或超过了规定的时间，给科研工作带来不小的损失。制片的各个步骤都是互相关联的，如脱水不彻底就会影响到透明的程度，以至影响蜡块的质量，同时还存在染色效果差、稳定性差，速度慢的缺点。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种器官组织的快速染色方法，染色效果好，染色所需的时间短，且稳定性高。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：

一种器官组织的快速染色方法，包括如下步骤：

S1、脱蜡：将组织切片放入染色架依次置于100％二甲苯I和100％二甲苯II中各8min；

S2、复水：将组织切片按浓度为100％的二甲苯I 5min、浓度为100％二甲苯II 5min、浓度为95％的酒精5min、浓度为85％的酒精5min、浓度为75％的酒精5min的梯度进行复水，将复水后的切片置于自来水中流水冲洗5min；

S3、将步骤S2所得的组织切片置于0.2％苏木素染液中染色12分钟，流水冲洗组织切片至组织颜色透亮、切片干净；

S4、将步骤S3所得的组织切片置于1％盐酸酒精中分化5s，快速拿起，放入烧杯中，流水水洗3min；

S5、将分化后的组织切片置于1％氨水中蓝化5s，快速拿起，流水水洗3min；

S6、将蓝化后的组织切片放入1％伊红染液中染色3min后，放入盛有自来水的烧杯中，轻微震荡，洗去切片上多余伊红染液；

S7、脱水：按浓度为75％的酒精10s浓度为85％的酒精30s、浓度为95％的酒精2min、浓度为100％的二甲苯I 5min、浓度为100％的二甲苯II 5min的梯度对组织切片进行脱水，脱水完后将切片放入烘箱5min，加速酒精挥发；

S8、透明、封片：将烘干的切片依次置于100％二甲苯I、100％二甲苯II各8min，进行透明处理后，进行中性树脂封片。

本发明的染色结果为肉眼观察组织切片呈紫红色，光镜下观察细胞质呈红色，细胞核呈蓝紫色。

本发明具有以下有益效果：

染色效果好，染色所需的时间短，且稳定性高。

具体实施方式

为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

本发明实施例提供了一种器官组织的快速染色方法，包括如下步骤：

S1、脱蜡：将组织切片放入染色架依次置于100％二甲苯I和100％二甲苯II中各8min；

S2、复水：将组织切片按浓度为100％的二甲苯I 5min、浓度为100％二甲苯II 5min、浓度为95％的酒精5min、浓度为85％的酒精5min、浓度为75％的酒精5min的梯度进行复水，将复水后的切片置于自来水中流水冲洗5min；

S3、将步骤S2所得的组织切片置于0.2％苏木素染液中染色12分钟，流水冲洗组织切片至组织颜色透亮、切片干净；

S4、将步骤S3所得的组织切片置于1％盐酸酒精中分化5s，快速拿起，放入烧杯中，流水水洗3min；

S5、将分化后的组织切片置于1％氨水中蓝化5s，快速拿起，流水水洗3min；

S6、将蓝化后的组织切片放入1％伊红染液中染色3min后，放入盛有自来水的烧杯中，轻微震荡，洗去切片上多余伊红染液；

S7、脱水：按浓度为75％的酒精10s浓度为85％的酒精30s、浓度为95％的酒精2min、浓度为100％的二甲苯I 5min、浓度为100％的二甲苯II 5min的梯度对组织切片进行脱水，脱水完后将切片放入烘箱5min，加速酒精挥发；

S8、透明、封片：将烘干的切片依次置于100％二甲苯I、100％二甲苯II各8min，进行透明处理后，进行中性树脂封片。其染色效果更稳定。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (1)

1.一种器官组织的快速染色方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、脱蜡：将组织切片放入染色架依次置于100％二甲苯I和100％二甲苯II中各8min；

S2、复水：将组织切片按浓度为100％的二甲苯I 5min、浓度为100％二甲苯II 5min、浓度为95％的酒精5min、浓度为85％的酒精5min、浓度为75％的酒精5min的梯度进行复水，将复水后的切片置于自来水中流水冲洗5min；

S3、将步骤S2所得的组织切片置于0.2％苏木素染液中染色12分钟，流水冲洗组织切片至组织颜色透亮、切片干净；

S4、将步骤S3所得的组织切片置于1％盐酸酒精中分化5s，快速拿起，放入烧杯中，流水水洗3min；

S5、将分化后的组织切片置于1％氨水中蓝化5s，快速拿起，流水水洗3min；

S6、将蓝化后的组织切片放入1％伊红染液中染色3min后，放入盛有自来水的烧杯中，轻微震荡，洗去切片上多余伊红染液；

S7、脱水：按浓度为75％的酒精10s浓度为85％的酒精30s、浓度为95％的酒精2min、浓度为100％的二甲苯I 5min、浓度为100％的二甲苯II 5min的梯度对组织切片进行脱水，脱水完后将切片放入烘箱5min，加速酒精挥发；

S8、透明、封片：将烘干的切片依次置于100％二甲苯I、100％二甲苯II各8min，进行透明处理后，进行中性树脂封片。