CN108844796A - 一种叶片石蜡切片方法 - Google Patents
一种叶片石蜡切片方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN108844796A CN108844796A CN201810701452.0A CN201810701452A CN108844796A CN 108844796 A CN108844796 A CN 108844796A CN 201810701452 A CN201810701452 A CN 201810701452A CN 108844796 A CN108844796 A CN 108844796A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- blade
- alcohol
- paraffin
- dimethylbenzene
- paraffin section
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 title claims abstract description 37
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 34
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 26
- 239000001993 wax Substances 0.000 claims abstract description 26
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 claims abstract description 16
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 claims abstract description 16
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 8
- 238000009738 saturating Methods 0.000 claims abstract description 8
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims abstract description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 75
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 52
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims description 33
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000000975 dye Substances 0.000 claims description 7
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims description 6
- 239000004575 stone Substances 0.000 claims description 6
- RZSYLLSAWYUBPE-UHFFFAOYSA-L Fast green FCF Chemical compound [Na+].[Na+].C=1C=C(C(=C2C=CC(C=C2)=[N+](CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=2C(=CC(O)=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=CC=1N(CC)CC1=CC=CC(S([O-])(=O)=O)=C1 RZSYLLSAWYUBPE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 5
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 claims description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 3
- 230000007704 transition Effects 0.000 claims description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 9
- 238000004040 coloring Methods 0.000 abstract description 2
- 230000008439 repair process Effects 0.000 abstract description 2
- 230000035515 penetration Effects 0.000 abstract 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 abstract 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 4
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 229920001206 natural gum Polymers 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 239000003292 glue Substances 0.000 description 2
- 239000010985 leather Substances 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 208000037656 Respiratory Sounds Diseases 0.000 description 1
- 241001249696 Senna alexandrina Species 0.000 description 1
- 238000005452 bending Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- BCAARMUWIRURQS-UHFFFAOYSA-N dicalcium;oxocalcium;silicate Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca]=O.[O-][Si]([O-])([O-])[O-] BCAARMUWIRURQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- -1 each 30min Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000834 fixative Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000001046 green dye Substances 0.000 description 1
- 238000002386 leaching Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 230000007257 malfunction Effects 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 1
- 238000007711 solidification Methods 0.000 description 1
- 230000008023 solidification Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/286—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q involving mechanical work, e.g. chopping, disintegrating, compacting, homogenising
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/30—Staining; Impregnating ; Fixation; Dehydration; Multistep processes for preparing samples of tissue, cell or nucleic acid material and the like for analysis
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/286—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q involving mechanical work, e.g. chopping, disintegrating, compacting, homogenising
- G01N2001/2873—Cutting or cleaving
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
Abstract
本发明公开了一种叶片石蜡切片方法，操作程序：取材、固定、洗涤、脱水、透明、浸蜡与包埋、修块与粘接、切片、粘片、脱蜡、染色、脱水透明、封片。叶片石蜡切片过程中，对脱水程序、透明程序、透蜡方法、染色方法及封片进行了改进，即进行了脱水程序的确定、透明程序的确定、透蜡程序的确定、染色及封片方法的改进。该方法同样适用于其它不同厚度及性质的叶片。该方法在实际上可以解决厚度性质不一的叶片石蜡切片制作，在石蜡制作理论上试行推广一种统一的行之有效的制作方法。
Description
技术领域
本发明属于石蜡切片技术领域，涉及一种植物石蜡切片方法，特别涉及一种叶片石蜡切片方法。
背景技术
石蜡切片广泛用于组织学常规制片技术中，主要用于观察细胞组织的形态结构，并可长期保存。石蜡切片制作程序及环节繁多，周期长，每个环节都会影响切片质量，例如切片制作过程中容易出现切片弯曲、切片裂纹等问题，这些问题虽然可以克服，但是如果出现材料破碎，却是无法补救，必须重新制作切片。材料破碎的原因追溯到石蜡制作过程的许多步骤，包括脱水、透明、透蜡、包埋、切片、脱蜡及封片等等，只要其中一个步骤出错，都可能导致材料破碎。其中脱水、透明、透蜡、包埋、脱蜡等步骤涉及试剂浓度、成分比例、浸泡时间等因素，切片、染色及封片等过程涉及实际的技术问题。厚革质叶片由于叶片特别厚，制作过程就会带来相当大的困难。首先，试剂进入组织比较困难，但又不能以单纯延长试剂浸泡时间来达到目的，因为浸泡时间过长，会给材料带来不利的影响，比如二甲苯浸泡时间过长，会造成材料脆性增大，组织易碎。其次，脱水过程也比较不容易，而脱水不彻底也会形成空洞蜡片，所以厚革质叶片石蜡切片制作常会出现材料破碎，导致切片制作失败。
发明内容
本发明的目的在于针对现有的石蜡切片制作方法中存在的上述问题，提供一种叶片石蜡切片方法。
本发明具体通过以下技术方案实现：
一种叶片石蜡切片方法，具体包括以下步骤：
1)取材，叶片取过中脉处，长5-8mm，宽2-5mm，且主脉两侧的叶片相等；
2)将所得叶片用固定液固定，用与固定液中同浓度的酒精连续浸洗两次；
3)以70％乙醇开始逐级增加乙醇浓度，对洗涤后的叶片进行脱水；
4)用相同体积的二甲苯和纯酒精混合对脱水后的叶片处理2～3h后，用纯二甲苯处理两次，每次1-2h；
5)浸蜡与包埋，透蜡按二甲苯和石蜡体积比为1:1溶液于恒温箱中过渡浸蜡，之后换成纯石蜡于恒温箱中浸蜡，期间换3次纯石蜡，透蜡后用纸盒包埋；
6)用单面刀片将大蜡块切成合适小块，组织四周留有1-2mm宽的石蜡，将切片用滤纸吸去多余水分并烘干；
7)将粘有蜡片的载玻片脱蜡，将脱蜡的切片放于番红水溶液中染色；
8)用95％酒精和两次纯酒精脱水，每次时间0.5-1min，纯酒精和二甲苯各一半的混合液2min后，纯二甲苯5min；
9)封片。
进一步，所述的固定液的用量为材料体积的20～30倍。
进一步，所述的脱水具体为：以70％乙醇1h，85％乙醇1h，95％乙醇1h，100％乙醇30min，100％乙醇30min。
进一步，所述的切片采用手摇轮转式切片机切片，切片的厚度为8-14μm。
进一步，所述的脱蜡的具体过程为：纯二甲苯10min；1/2二甲苯和1/2纯酒精2min；100％、95％、85％、70％、50％、30％酒精和蒸馏水各5～10min。
进一步，所述的染色过程具体为：将脱蜡的切片放于0.5％-1％番红水溶液中染色2-24h，蒸馏水洗去多余染液，分别经过30％、50％、70％、80％、95％酒精脱水，每级5min，用含0.1％固绿的95％酒精复染10-40s。
本发明的有益效果为：
本发明提供了一种叶片石蜡切片方法，该方法操作简单，缩短了实验时间，节约成本，通过本发明所述的方法切片组织完整、各部位清晰显示，明显增强切片和观察效果。
具体实施方式
下面将结合本发明具体的实施例，对本发明实技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
一种叶片石蜡切片方法，在实际的应用过程，主要通过以下步骤完成：
1.取材
叶片一般取过中脉处，长约5-8mm，宽约2-5mm，且主脉两侧的叶片应相等。
2.固定
FAA固定液新配为好，用量充足，一般为材料体积的20-30倍。若材料投入固定液后悬浮于表面，应立即用抽气机抽气，以排除气泡的干扰，使固定液有效渗入材料组织，抽气时间大约为20-30min，直至材料沉入固定液中。固定时间一般不低于24h。
固定液太少，材料中的水分会稀释固定剂的浓度。
时间过短，不能有效固定；时间过长，不易着色，且部分固定液对材料会有不良影响。
3.洗涤
用与固定液中同浓度的酒精连续浸洗两次，每次30min。
4.脱水
70％(1h)—85％(1h)—95％(1h)—100％(30min)—100％(30min)酒精，在纯酒精内放置时间不宜过长，放纯酒精的染缸要干燥无水，实验时加盖。与现有技术相比，减少了酒精的梯度和处理的时间，简化了程序。
5.透明
1/2二甲苯与1/2纯酒精混合处理2-3h，再换两次纯二甲苯，每次1-2h。整个透明过程，切记确保无水。若材料放入二甲苯时出现白色混浊现象，表明在上一环节脱水不彻底，应将材料退回至纯酒精重新脱水。与现有技术相比，本技术程序简化，用时缩短，节约了处理时间。
6.浸蜡与包埋
1)在恒温箱中(高于熔点3℃)，将材料进行浸蜡，先经过石蜡和二甲苯等量混合液，再用纯石蜡换三次，每次30min，材料较大须延长时间
2)在恒温箱中，将石蜡倒入包埋用的纸盒，用预热的镊子将材料迅速转移到纸盒中，调整材料位置，两手平持纸盒，移至冷水盆中，用口在蜡面上吹气，促其凝结，待蜡面凝成薄层，纸盒全部沉入水中。石蜡全部凝固后，撕去纸盒，得到蜡块。蜡块要迅速冷却，否则易结晶。与现有技术相比，透蜡时间大大缩短，每次用时只用30min,提高了效率。
7.修块与粘接
用单面刀片将大蜡块切成合适小块，组织四周留有1-2mm宽的石蜡，将蜡块粘接在麻将上，注意切片方向(横切或纵切)
8.切片(手摇轮转式切片机)
厚度一般在8-14μm。
9.粘片
1)在洁净载玻片中央滴一滴明胶粘贴剂，用手指涂匀，再滴加数滴蒸馏水；
2)挑取蜡带，光面向下，漂浮于滴加蒸馏水的载玻片上，置于展片台(40-45℃)使蜡片展平；
3)将切片依次排好，用滤纸吸去多余水分，放入恒温箱烘干(30-40℃)，约一昼夜后取出。
10.脱蜡
将粘有蜡片的载玻片脱蜡：
纯二甲苯10min—1/2二甲苯和1/2纯酒精2min—100％、95％、85％、70％、50％、30％酒精—蒸馏水，以上所有各级5-10min。
增加了纯二甲苯10min作为过渡，酒精梯度增加了30％的梯度和蒸馏水，使脱蜡更易进行，材料复水更彻底。
11.染色
1)将脱蜡的切片放于0.5％-1％番红水溶液中染色2-24h，蒸馏水洗去多余染液。
2)分别经过30％、50％、70％、80％、95％酒精脱水，每级5min；
增加了酒精的梯度水平，小幅增加了处理时间，优点是脱水更易进行，脱水更彻底，便于后续染色。
3)用含0.1％固绿的95％酒精复染10-40s。
番红固绿在酒精中脱水时间不能太长，否则易脱色，用固绿染前应检查番红染色是否合适(不合适则重新染)，应稍微深一些，后期脱水会变浅。
12.脱水透明
1)用95％酒精和两次纯酒精脱水，每次时间0.5-1min；
2)纯酒精和二甲苯各一半的混合液2min—纯二甲苯5min。
13.封片
将标本从二甲苯中取出，立即滴一滴用二甲苯溶解的树胶于材料上(在二甲苯干燥之前进行)，盖上盖玻片，不可产生气泡。若胶液不足，可用玻棒再滴一滴树胶从盖玻片边补足，若胶液过多，干燥后用刀片刮去，并用纱布蘸二甲苯拭去残留树胶。置玻片标本于30-35℃恒温箱烘干。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (6)
1.一种叶片石蜡切片方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)取材，叶片取过中脉处，长5-8mm，宽2-5mm，且主脉两侧的叶片相等；
2)将所得叶片用固定液固定，用与固定液中同浓度的酒精连续浸洗两次；
3)以70％乙醇开始逐级增加乙醇浓度，对洗涤后的叶片进行脱水；
4)用相同体积的二甲苯和纯酒精混合对脱水后的叶片处理2～3h后，用纯二甲苯处理两次，每次1-2h；
5)浸蜡与包埋，透蜡按二甲苯和石蜡体积比为1:1溶液于恒温箱中过渡浸蜡，之后换成纯石蜡于恒温箱中浸蜡，期间换3次纯石蜡，透蜡后用纸盒包埋；
6)用单面刀片将大蜡块切成合适小块，组织四周留有1-2mm宽的石蜡，将切片用滤纸吸去多余水分并烘干；
7)将粘有蜡片的载玻片脱蜡，将脱蜡的切片放于番红水溶液中染色；
8)用95％酒精和两次纯酒精脱水，每次时间0.5-1min，纯酒精和二甲苯各一半的混合液2min后，纯二甲苯5min；
9)封片。
2.根据权利要求1所述的一种叶片石蜡切片方法，其特征在于，所述的固定液的用量为材料体积的20～30倍。
3.根据权利要求1所述的一种叶片石蜡切片方法，其特征在于，所述的脱水具体为：以70％乙醇1h，85％乙醇1h，95％乙醇1h，100％乙醇30min，100％乙醇30min。
4.根据权利要求1所述的一种叶片石蜡切片方法，其特征在于，所述的切片采用手摇轮转式切片机切片，切片的厚度为8-14μm。
5.根据权利要求1所述的一种叶片石蜡切片方法，其特征在于，所述的脱蜡的具体过程为：纯二甲苯10min；1/2二甲苯和1/2纯酒精2min；100％、95％、85％、70％、50％、30％酒精和蒸馏水各5～10min。
6.根据权利要求1所述的一种叶片石蜡切片方法，其特征在于，所述的染色过程具体为：将脱蜡的切片放于0.5％-1％番红水溶液中染色3h，蒸馏水洗去多余染液，分别经过30％、50％、70％、80％、95％酒精脱水，每级5min，用含0.1％固绿的95％酒精复染10-40s。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201810701452.0A CN108844796A (zh) | 2018-06-29 | 2018-06-29 | 一种叶片石蜡切片方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201810701452.0A CN108844796A (zh) | 2018-06-29 | 2018-06-29 | 一种叶片石蜡切片方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN108844796A true CN108844796A (zh) | 2018-11-20 |
Family
ID=64200952
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201810701452.0A Pending CN108844796A (zh) | 2018-06-29 | 2018-06-29 | 一种叶片石蜡切片方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN108844796A (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109374378A (zh) * | 2018-11-22 | 2019-02-22 | 黑龙江大学 | 一种甜菜叶石蜡包埋制片的方法 |
| CN110954385A (zh) * | 2019-12-17 | 2020-04-03 | 李惠 | 一种病理组织脱水仪 |
| CN113358391A (zh) * | 2021-06-02 | 2021-09-07 | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 | 一种植物叶片石蜡切片的方法 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102116711A (zh) * | 2011-01-31 | 2011-07-06 | 山东东方海洋科技股份有限公司 | 一种大叶藻胚石蜡切片的制作方法 |
| CN102175482A (zh) * | 2011-01-05 | 2011-09-07 | 厦门大学 | 厚革质叶片石蜡切片方法 |
| CN105241698A (zh) * | 2015-09-25 | 2016-01-13 | 四川农业大学 | 一种黄石爬鮡皮肤石蜡切片的制作方法 |
| CN105806682A (zh) * | 2016-03-08 | 2016-07-27 | 中国环境科学研究院 | 制备豆科植物叶片石蜡切片的方法 |
| CN107702955A (zh) * | 2017-08-24 | 2018-02-16 | 胡雨逸 | 一种石蜡切片的制备方法 |
-
2018
- 2018-06-29 CN CN201810701452.0A patent/CN108844796A/zh active Pending
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102175482A (zh) * | 2011-01-05 | 2011-09-07 | 厦门大学 | 厚革质叶片石蜡切片方法 |
| CN102116711A (zh) * | 2011-01-31 | 2011-07-06 | 山东东方海洋科技股份有限公司 | 一种大叶藻胚石蜡切片的制作方法 |
| CN105241698A (zh) * | 2015-09-25 | 2016-01-13 | 四川农业大学 | 一种黄石爬鮡皮肤石蜡切片的制作方法 |
| CN105806682A (zh) * | 2016-03-08 | 2016-07-27 | 中国环境科学研究院 | 制备豆科植物叶片石蜡切片的方法 |
| CN107702955A (zh) * | 2017-08-24 | 2018-02-16 | 胡雨逸 | 一种石蜡切片的制备方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 张志华 等: "核桃叶片解剖结构与生长势的关系", 《华北农学报》 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109374378A (zh) * | 2018-11-22 | 2019-02-22 | 黑龙江大学 | 一种甜菜叶石蜡包埋制片的方法 |
| CN110954385A (zh) * | 2019-12-17 | 2020-04-03 | 李惠 | 一种病理组织脱水仪 |
| CN113358391A (zh) * | 2021-06-02 | 2021-09-07 | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 | 一种植物叶片石蜡切片的方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN108844796A (zh) | 一种叶片石蜡切片方法 | |
| CN105973673B (zh) | 一种桉树组织的石蜡切片方法 | |
| CN102116711B (zh) | 一种大叶藻胚石蜡切片的制作方法 | |
| Cheadle et al. | A staining combination for phloem and contiguous tissues | |
| CN102967493B (zh) | 植物组织快速石蜡制片的方法 | |
| CN109855936B (zh) | 一种组织完整、利于显微观察的植物组织切片的制备方法 | |
| CN103940648B (zh) | 鱼鳃组织石蜡切片的制备方法 | |
| CN107702959B (zh) | 一种用于植物材料梯度脱水的石蜡切片方法 | |
| Dring | Chapter III techniques for microscopic preparation | |
| CN104849110B (zh) | 一种植物组织的石蜡切片方法 | |
| CN107843470B (zh) | 一种皮肤组织切片的制作方法 | |
| CN109211606A (zh) | 一种梨组织石蜡切片的快速制作方法 | |
| CN106546473B (zh) | 一种用于甘蔗不同节位侧芽包埋制片方法 | |
| CN109187118A (zh) | 一种硬组织病理切片展片的方法及装置 | |
| CN107702955B (zh) | 一种石蜡切片的制备方法 | |
| CN106053177B (zh) | 一种用于观察空气凤梨叶片解剖结构的标本制作方法 | |
| CN110132673B (zh) | 一种制备金针菇子实体组织切片的方法 | |
| CN110073760B (zh) | 一种用于细叶鸢尾种子生活力快速测定的预湿液、染色液及方法 | |
| CN107202720B (zh) | 一种石榴籽粒的石蜡切片方法 | |
| CN103808550A (zh) | 一种便于形态学观察的粘孢子虫染色封存方法 | |
| CN107576552A (zh) | 一种观察月季黑斑病侵染过程的石蜡切片染色方法 | |
| CN108333013A (zh) | 一种枣花石蜡切片的制备方法 | |
| CN106802253A (zh) | 岩黄连茎的石蜡切片方法 | |
| CN107271241B (zh) | 一种高尔基银染神经组织的冰冻切片方法 | |
| JP3548744B2 (ja) | 切花の保存方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20181120 |