CN108871899A - 用于组织细胞染色的切片制作方法 - Google Patents
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Abstract
一种用于组织细胞染色的切片制作方法，发明内容改变以前传统组织块固定、脱水、透明、包埋方法。同时变革组织细胞染色的切片制作方法，包含有具有载有组织切片1的载玻片2的切片装置本体、设置在载玻片2上的内盖玻片3、设置在内盖玻片3与载玻片2之间并且用于浸泡组织切片1的内衬层4，通过切片装置本体，对组织切片1进行封闭，通过内盖玻片3和内衬层4，对组织切片1进行液体包裹，消除了组织切片1的周边气泡，外盖玻片5借助外衬层6对整个切片装置固定密封，从而隔绝了不利因素对组织标本的侵害，达到保持染色艳丽以及长期保持的目的。
Description
技术领域
本发明涉及一种用于组织细胞染色的切片制作方法，改变了传统制作过程，尤其是发明一种切片装置，使得各种封片长期保存（传统脂类染色制片保存期短）。
背景技术
组织细胞染色的切片制作方法常用的是石蜡切片和冷冻切片技术，传统组织细胞染色的切片制作方法由于使用乙醇脱水，二甲苯透明，脂质脱失。如果观察脂质染色，必须应用冷冻切片技术，避开了乙醇脱水、二甲苯透明等步骤，但是此类脂质染色切片保存期短暂，不能够满足教学科研要求。
本发明应用聚乙二醇400固定组织块，应用升高梯度浓度的聚乙二醇400对组织块脱水，再逐步过渡到聚乙二醇1500替代组织块中的聚乙二醇400，最后应用聚乙二醇4000替代聚乙二醇1500，常温下聚乙二醇4000与组织块硬化，完成组织块包埋。本发明根据染色目的进行常规染色过程，本发明应用两种封片剂，采用双盖玻片封存，避免了乙醇、二甲苯等有机溶剂与组织接触和冷冻切片的严苛条件，成功完成组织细胞染色的切片制作。改变了传统的脂质染色切片保存期短暂问题，从而能够满足教学科研要求。
基于现有的技术问题、技术特征和技术效果，做出本发明的申请技术方案。。
发明内容
本发明的客体是一种用于组织细胞染色的切片制作方法。
为了克服传统石蜡切片技术缺点，本发明的目的是提供一种用于各种组织细胞的固定、脱水、包埋、染色、封片方法，从而保持了组织切片1的染色艳丽度并且解决了组织切片长期保存的问题。
为达到上述目的，本发明采取的技术方案是：
①组织块固定：20%聚乙二醇400固定组织块，恒温37℃，持续时间6小时。②组织块脱水：组织块陆续放入30%聚乙二醇400、40%聚乙二醇400、50%聚乙二醇400、60%聚乙二醇400、70%聚乙二醇400、80%聚乙二醇400、100%聚乙二醇400顺浓度梯度脱水，恒温37℃，每梯度持续时间2小时。
③组织块包埋：聚乙二醇1500和聚乙二醇4000放入50℃恒温箱熔融，脱水组织块放入聚乙二醇1500中30分钟；再转入聚乙二醇1500、聚乙二醇4000各半液体中30分钟；然后转入聚乙二醇4000液体中30分钟。最后将聚乙二醇4000液体倒入组织包埋框，调整组织块摆放位置，常温冷却。
④常规修整组织块，常规切片及染色。
⑤封片制作：为保证达到应用效果，必须遵循以下注意事项。
包含有具有载有组织切片1的载玻片2的切片装置本体、设置在载玻片2上的内盖玻片3、设置在内盖玻片3与载玻片2之间并且用于浸泡试样切片1的内衬层4。
由于设计了内盖玻片3、内衬层4和切片装置本体，通过切片装置本体，对试样切片1进行固定，通过内盖玻片3和内衬层4，对试样切片1进行液体包裹，消除了试样切片1的周边气泡，不再都是使用两个玻璃片进行夹持固定，因此保持了试样切片1的染色艳丽度。
本发明设计了，按照液体填充周边区间的方式把用于形成填充区间的内盖玻片3、具有液体状态的内衬层4和用于载体支撑的切片装置本体相互联接。
本发明设计了，按照形成液体夹持区间的方式把内盖玻片3和内衬层4与切片装置本体联接。
切片装置本体设置为还包含有外盖玻片5和外衬层6，在载玻片2上设置有组织切片1并且内盖玻片3设置在组织切片1上，在内盖玻片3与载玻片2之间设置有内衬层4并且在内盖玻片3上设置有外盖玻片5，在外盖玻片5与与载玻片2之间设置有外衬层6。
本发明设计了，载玻片2设置为矩形条状玻璃片并且载玻片2的长度设置为75mm，载玻片2的宽度设置为25mm并且组织切片1设置在载玻片2的中间部。
本发明设计了，内盖玻片3设置为正方形玻璃片并且内盖玻片3的长度设置为15-20mm，内盖玻片3的宽度设置为15-20mm并且内盖玻片3设置为覆盖在组织切片1中，内衬层4设置为沿内盖玻片3的周边分布。
本发明设计了，内衬层4设置为丙三醇的液体滴并且内衬层4设置为环绕组织切片1分布，内衬层4分别设置为与载玻片2和内盖玻片3贴合式联接。
本发明设计了，外盖玻片5设置为正方形玻璃片并且外盖玻片5的长度设置为22-25mm，外盖玻片5的宽度设置为22-25mm并且外盖玻片5设置为覆盖在内盖玻片3上，外盖玻片5设置为沿内盖玻片3的周边外延分布。
本发明设计了，外衬层6设置为中性树胶的液体并且外衬层6设置为填充在外盖玻片5与载玻片2之间，外衬层6设置为环绕在内盖玻片3的周边分布。
本发明设计了，载玻片2、外盖玻片5和外衬层6与内盖玻片3和内衬层4设置为按照液体包裹的方式分布并且载玻片2、外盖玻片5和外衬层6设置为按照固体包裹的方式分布，组织切片1的中心线、载玻片2的中心线、内盖玻片3的中心线、外盖玻片5的中心线设置在同一条直线上。
本发明的技术效果在于：动物组织切片染色完成后，适当保持标本干燥，滴加丙三醇滴，轻轻盖上内盖玻片，再滴加中性树胶滴于盖玻片上，立即轻轻盖上外盖玻片，这样一张制作完毕的标本片放置通风橱晾干即可，实现了组织切片标本与空气和水的隔离，使得切片包括脂质染色切片得以常温下长期保存，盖玻片与载玻片的粘合剂丙三醇，丙三醇是无色、澄明、粘稠液体，应用丙三醇作为封片剂，化学性质稳定，标本得到防腐保色，标本观察效果更加自然透明，颜色艳丽清晰，应用中性树胶与盖玻片及载玻片粘合在一起，丙三醇是吸湿性液体，中性树胶作为最后封片剂使得丙三醇与空气隔绝，解决了丙三醇的吸湿性，同时标本封存更加牢固。
在本技术方案中，液体填充周边区间的内盖玻片3、内衬层4和切片装置本体为重要技术特征，在脂类染色的切片装置的技术领域中，具有新颖性、创造性和实用性，在本技术方案中的术语都是可以用本技术领域中的专利文献进行解释和理解。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1、图2为本发明的示意图。图3展示本发明方法制作的动脉粥样硬化切片。
Claims (9)
1.一种用于组织细胞染色的切片制作方法，其权利要求1是：应用聚乙二醇400、聚乙二醇1500、聚乙二醇4000配制试剂完成组织固定、脱水、包埋过程，包含有具有载有组织切片1的载玻片2的切片装置本体、设置在载玻片2上的内盖玻片3、设置在内盖玻片3与载玻片2之间并且用于浸泡组织切片1的内衬层4。
2.一种用于组织细胞染色的切片制作方法，其特征是：按照液体填充周边区间的方式把用于形成填充区间的内盖玻片3、具有液体状态的内衬层4和用于载体支撑的切片装置本体相互联接。
3.根据权利要求2所述的用于组织细胞染色的切片制作方法，其特征是：按照形成液体夹持区间的方式把内盖玻片3和内衬层4与切片装置本体联接。
4.根据权利要求1所述的用于组织细胞染色的切片制作方法，其特征是：应用聚乙二醇400、聚乙二醇1500、聚乙二醇4000配制试剂完成组织固定、脱水、包埋，切片装置本体设置为还包含有外盖玻片5和外衬层6，在载玻片2上设置有组织切片1并且内盖玻片3设置在组织切片1上，在内盖玻片3与载玻片2之间设置有内衬层4并且在内盖玻片3上设置有外盖玻片5，在外盖玻片5与与载玻片2之间设置有外衬层6。
5.根据权利要求4所述的用于组织细胞染色的切片制作方法，其特征是：载玻片2设置为矩形条状玻璃片并且载玻片2的长度设置为75 mm，载玻片2的宽度设置为25mm并且组织切片1设置在载玻片2的中间部。
6.根据权利要求4所述的用于组织细胞染色的切片制作方法，其特征是：内盖玻片3设置为正方形玻璃片并且内盖玻片3的长度设置为15-20mm，内盖玻片3的宽度设置为15-20mm并且内盖玻片3设置为覆盖在组织切片1中，内衬层4设置为沿内盖玻片3的周边分布。
7.根据权利要求4所述的用于组织细胞染色的切片制作方法，其特征是：内衬层4设置为丙三醇的液体滴并且内衬层4设置为环绕组织切片1分布，内衬层4分别设置为与载玻片2和内盖玻片3贴合式联接。
8.根据权利要求4所述的用于组织细胞染色的切片制作方法，其特征是：外盖玻片5设置为正方形玻璃片并且外盖玻片5的长度设置为22-25mm，外盖玻片5的宽度设置为22-25mm并且外盖玻片5设置为覆盖在内盖玻片3上，外盖玻片5设置为沿内盖玻片3的周边外延分布，外衬层6设置为中性树胶的液体，外衬层6设置为填充在外盖玻片5与载玻片2之间，外衬层6设置为环绕在内盖玻片3的周边分布。
9.根据权利要求4所述的用于组织细胞染色的切片制作方法，其特征是：载玻片2、外盖玻片5和外衬层6与内盖玻片3和内衬层4设置为按照液体包裹的方式分布并且载玻片2、外盖玻片5和外衬层6设置为按照固体包裹的方式分布，组织切片1的中心线、载玻片2的中心线、内盖玻片3的中心线、外盖玻片5的中心线和外衬层6的中心线设置在同一条直线上。
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