CN104302626B - 4,4-二取代的-1,4-二氢嘧啶及其作为治疗乙型肝炎的药物的用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及式I的HBV复制的抑制剂，包括其立体化学异构形式和盐、水合物、溶剂化物，其中R1‑R5、B和Z具有如本文定义的意义。本发明还涉及制备所述化合物的方法、包含它们的药物组合物，及其单独或与其它HBV抑制剂组合在HBV治疗中的用途。

Description

4,4-二取代的-1,4-二氢嘧啶及其作为治疗乙型肝炎的药物 的用途
技术背景
乙型肝炎病毒(HBV)是肝DNA病毒科(Hepadnaviridae)的一种被膜、部分双链DNA(dsDNA)病毒。其基因组含有4个重叠的阅读框：前核/核基因；聚合酶基因；L、M及S 基因，其编码3个被膜蛋白；及X基因。
感染后，所述部分双链DNA基因组(松弛的环状DNA; rcDNA)在宿主细胞的细胞核中被转化成共价闭合的环状DNA (cccDNA)并转录病毒mRNA。亦编码核心蛋白及Pol的前基因组RNA (pgRNA)一旦被壳体化，作为逆转录的模板起作用，在核衣壳中再度产生部分dsDNA基因组(rcDNA)。
HBV在部分亚洲和非洲引起流行病，并在中国流行。HBV已感染全世界约20亿人口，其中约3.5亿人产生慢性感染。此病毒引起疾病乙型肝炎，并且慢性感染与发展成肝硬化及肝细胞癌的强烈增加的风险相关。
乙型肝炎病毒的传播来自暴露于感染性的血液或体液，而在血清中携带高效价DNA的慢性携带者的唾液、眼泪及尿中已经检测出病毒DNA。
存在有效且耐受性良好的疫苗，但目前直接治疗选择限于干扰素及以下抗病毒药物：替诺福韦、拉米夫定、阿德福韦、恩替卡韦和替比夫定。干扰素是昂贵的且通常耐受不良，且核苷已显示选择用于抗药性突变株。
药物筛选已鉴定杂芳基二氢嘧啶(HAP)在组织培养及动物模型中作为一类HBV抑制剂，在毫微摩尔浓度上有效(Weber等, Antiviral Res. 54: 69-78)。其它研究已显示HAP靶向Cp (Deres等, Science 299: 893-896)，在较高药物浓度下造成衣壳的不当组装。
许多专利及专利申请(包括WO00/058302、WO01/68642和WO2010/069147)公开具有HBV抑制活性的化合物，特别是二氢嘧啶衍生物。
在针对HBV的抗病毒药物可能遇到的问题中，包括毒性、致突变性、缺乏选择性、不良的功效、不良的生物利用度、手性中心的外消旋化及合成困难。
存在对可以克服这些缺点中的至少一个的HBV抑制剂的需求。
发明描述
在一个方面，本发明提供化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，所述化合物可由式I表示：
包括其任何可能的立体异构体或互变异构形式，其中：
B选自任选地被一个或多个氟原子取代的C1-C3烷基；
Z选自H或卤素；
或B和Z与其连接的碳一起形成4-7元环，任选地含有一个或多个杂原子，其中所述4-7元环任选地被一个或多个选自C1-C3烷基、氧代、OH和卤素的取代基取代；
R1选自杂芳基和苯基，其任选地被一个或多个选自卤素及C1-C3烷基的取代基取代；
R2选自-R6-R7、C≡N、环丙基和CF3；
R3选自C1-C3烷氧羰基和C≡N；
R4和R5独立地选自H、甲基和卤素；
R6是C1-C3烷基、C2-C3烯基，两者任选地被一个或多个氟取代；
R7选自氢、杂C3-7环烷基、环丙基、C1-C3烷氧基和CF3。
在一个实施方案中，
B选自任选地被一个或多个氟原子取代的C1-C3烷基；
Z选自H或卤素；
或B和Z与其连接的碳一起形成4-7元环，任选地含有一个或多个杂原子，其中所述4-7元环任选地被一个或多个选自C1-C3烷基、氧代和卤素的取代基取代；
R1选自杂芳基和苯基，其任选地被一个或多个选自卤素及C1-C3烷基的取代基取代；
R2选自-R6-R7、C≡N、环丙基和CF3；
R3选自C1-C3烷氧羰基和C≡N；
R4和R5独立地选自H和卤素；
R6是任选地被氟取代的C1-C3烷基；
且R7选自氢、杂C3-7环烷基、环丙基和CF3。
在依据本发明的一个特定组的式I化合物中，B选自任选地被一个或多个氟原子取代的C1-C3烷基；
Z选自H或卤素；
或B和Z与其连接的碳一起形成4-7元环，任选地含有一个或多个杂原子，其中所述4-7元环任选地被一个或多个选自C1-C3烷基的取代基取代；
R1选自杂芳基和苯基，其任选地被一个或多个卤素原子取代。
本发明还涉及一种药物组合物，其包含式I化合物及药学上可接受的载体。
本发明还涉及用作药物的式I化合物，优选地用于在哺乳动物中预防或治疗HBV感染。
在另一个方面，本发明涉及式I化合物与另一种HBV抑制剂的组合。
在又一个方面，本发明涉及依据式V的化合物
其中B、Z、R1、R3、R4和R5如上所定义。
本发明还涉及式V化合物在合成式I的化合物中的用途。
定义
术语“C1-3烷基”作为基团或基团的一部分时，指式CnH2n+1的烃基，其中n是范围从1至3的数字。在C1-3烷基偶联至其它基团的情况下，其指式CnH2n。C1-3烷基含有1至3个碳原子，更优选1至2个碳原子。C1-3烷基包括含有1至3个碳原子的全部直链或支链的烷基，且因此包括例如甲基、乙基、正丙基和异丙基。
术语“C2-4烯基”作为基团或基团的一部分时，定义具有2至4个碳原子、含至少一个双键的直链与支链饱和烃基，例如乙烯基、丙烯基、丁烯基等。
术语“C1-3烷基氧基”或C1-3烷氧基作为基团或基团的一部分时，指具有式--ORc的基团，其中Rc是C1-3烷基。合适的C1-3烷氧基的非限制性实例包括甲基氧基(也即甲氧基)、乙基氧基(也即乙氧基)、丙氧基和异丙氧基。
如本文所用的，术语羰基，或“(=O)”或“氧代”当连接碳原子时形成羰基部分。应该注意的是当原子的价位容许时，该原子只能被一个氧代基取代。
如本文所用的，术语“杂C3-7环烷基”指如对“杂C3-7环烷基”定义的饱和环状烃基，其中至少一个碳原子被选自N、O和S，特别是选自N和O的杂原子替代。杂C3-7环烷基的实例包括四氢-2H-吡喃基、哌啶基、四氢呋喃基、吗啉基和吡咯烷基。
术语“杂芳基”指单环-或多环的芳族环，其含有碳原子、氢原子和一个或多个杂原子，优选1至3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子。对于本发明的目的，杂芳基只需要有部分程度的芳族特性。杂芳基的说明性实例包括但不限于吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基(pyrazyl)、三嗪基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、(1,2,3,)-和(1,2,4)-三唑基、吡嗪基、嘧啶基、四唑基、呋喃基、噻吩基、异噁唑基、噻唑基、异噁唑基和噁唑基。杂芳基可以是未取代的或被一个或两个合适的取代基取代。杂芳基优选地是单环，其中该环含有2至5 个碳原子和1至3个杂原子，在本文中称为“(C2-C5)杂芳基”。
应该注意到，各种杂环的不同异构体可以存在于如贯穿说明书全文使用的定义中。例如，吡咯基可以是1H-吡咯基或2H-吡咯基。
术语卤素泛指氟、氯、溴或碘。
应该注意的是在定义中使用的任何分子部分上的基团位置可以在所述部分的任何地方，只要其是化学上稳定的。例如吡啶基包括2-吡啶基、3-吡啶基和4-吡啶基；戊基包括1-戊基、2-戊基和3-戊基。
术语“B和Z与其连接的碳一起形成4-7元环”指B和Z一起形成由1、2、3或4个原子组成的桥。B和Z可一起代表一个原子。B和Z可以经由直接饱和或不饱和的键偶联，或B和Z可以经由1或2个其它原子经由饱和或不饱和的键偶联。图形上，其可通过下面的结构式(I)4、(I)5、(I)6和(I)7表示，其中R1-R5具有在本申请书中定义的意义，且X、B和Z代表碳或杂原子，优选碳或氧：
对于4元环：
对于5元环：
对于6元环：
和对于7元环：
当任何变量(例如卤素或C1-4烷基)在任何构成中出现超过一次时，各定义是独立的。
对于治疗用途，式(I)化合物的盐是其中抗衡离子是药学或生理上可接受的那些盐。但是，具有药学上不能接受的抗衡离子的盐也可发现有用，例如在药学上可接受的式(I)化合物的制备或纯化中。所有的盐，不论是否药学上可以接受，都包括在本发明的范围内。
本发明化合物能够形成的药学上可接受或生理上可耐受的加成盐形式可使用适当的酸而方便地制备，例如无机酸如氢卤酸，例如盐酸或氢溴酸；硫酸；半硫酸、硝酸；磷酸等酸；或有机酸例如乙酸、天冬氨酸、十二烷基硫酸、庚酸、己酸、烟酸、丙酸、 羟基乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、环拉酸、水杨酸、对氨基-水杨酸、扑酸等。
相反地，所述酸加成盐形式可以通过用合适的碱处理而转化成游离碱形式。
术语“盐”也包括本发明化合物能够形成的水合物及溶剂加合物形式。这样的形式的实例是例如水合物、醇盐等。
本发明化合物也可以其互变异构形式存在。例如，酰胺(-C(=O)-NH-)基团的互变异构形式是亚氨基醇(-C(OH)=N-)。互变异构形式，虽然没有在本文表示的结构式中明确指出，但是意欲包含在本发明的范围内。
如在前文中使用的，术语本发明化合物的立体化学异构形式，定义本发明化合物可具有的经由相同序列的键连接，但是具有不可互换的不同三维结构的相同原子所组成的所有可能的化合物。除非另外提到或指出，化合物的化学命名包括所述化合物可以拥有的所有可能的立体化学异构形式的混合物。所述混合物可包含所述化合物的基本分子结构的全部非对映体和/或对映体。本发明化合物的全部立体化学异构形式，不论是纯的形式或彼此的混合物，都包含在本发明的范围内。
在本文中提到的化合物及中间体的纯的立体异构形式被定义为基本上没有所述化合物或中间体的相同基本分子结构的其它对映异构或非对映异构形式的异构体。具体地说，术语“立体异构纯的”涉及具有立体异构过量至少80% (即最少90%的一种异构体和最多10%的其它可能的异构体)直到立体异构过量100% (即100%的一种异构体且没有其它异构体)的化合物或中间体，更具体地说，具有立体异构过量90%直到100%的化合物或中间体，甚至更具体地说，具有立体异构过量94%直到100%且最具体地说，具有立体异构过量97%直到100%的化合物或中间体。术语“对映异构纯的”和“非对映异构纯的”应该以相同的方式理解，但是分别指所提及的混合物的对映异构过量和非对映异构过量。
本发明化合物和中间体的纯的立体异构形式可以通过施用本领域已知的程序而获得。例如，对映体可以通过其非对映异构性盐与光学活性酸或碱的选择性结晶而彼此分离。其实例是酒石酸、二苯甲酰基酒石酸、二甲苯酰基酒石酸及樟脑磺酸。或者，对映体可以使用手性固定相通过色谱技术分离。所述纯的立体化学异构形式也可以衍生自合适的起始原料的对应纯的立体化学异构形式，条件是反应立体特异性地发生。优选地，如果需要特定的立体异构体，所述化合物将以立体特异性的制备方法合成。这些方法将有利地使用对映异构纯的起始原料。
式(I)的非对映异构外消旋体可以通过常规方法分别获得。可有利地使用的合适物理分离方法是例如选择性结晶及色谱法，例如柱色谱法。
本发明也意欲包括出现在本发明化合物的原子中的所有同位素。同位素包括具有相同原子数但是不同质量数的那些原子。通过一般性实例而非限制的方式，氢的同位素包括氚和氘。碳的同位素包括C-13和C-14。
发明详述
无论何时在下文使用时，术语“式(I)化合物”
或“本发明化合物”或类似的术语意欲包括通式(I)的化合物、其盐、立体异构形式及外消旋混合物或任何亚组。
本发明提供可由式I表示的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物：
包括其任何可能的立体异构体或互变异构形式，其中：
B选自任选地被一个或多个氟原子取代的C1-C3烷基；
Z选自H或卤素；
或B和Z与其连接的碳一起形成4-7元环，任选地含有一个或多个杂原子，其中所述4-7元环任选地被一个或多个选自C1-C3烷基、氧代、OH和卤素的取代基取代；
R1选自杂芳基和苯基，其任选地被一个或多个选自卤素及C1-C3烷基的取代基取代；
R2选自-R6-R7、C≡N、环丙基和CF3；
R3选自C1-C3烷氧羰基和C≡N；
R4和R5独立地选自H、甲基和卤素；
R6是C1-C3烷基、C2-C3烯基，两者任选地被一个或多个氟取代；
R7选自氢、杂C3-7环烷基、环丙基、C1-C3烷氧基和CF3。
依据本发明化合物的一个有价值的亚组是式(I)化合物，包括其任何可能的立体异构体或互变异构形式，其中：
B选自任选地被一个或多个氟原子取代的C1-C3烷基；
Z选自H或卤素；
或B和Z与其连接的碳一起形成4-7元环，任选地含有一个或多个杂原子，其中所述4-7元环任选地被一个或多个选自C1-C3烷基的取代基取代；
R1选自杂芳基和苯基，其任选地被一个或多个卤素原子取代；
R2选自-R6-R7、C≡N、环丙基和CF3；
R3选自C1-C3烷氧羰基和C≡N；
R4和R5独立地选自H和卤素；
R6是任选地被氟取代的C1-C3烷基；
R7选自氢、杂C3-7环烷基、环丙基和CF3。
式(I)化合物的另一个有价值的亚组是那些式(I)化合物，其中：
B和Z与其连接的碳原子一起形成5-或6-元环，任选地含有一个或多个杂原子，其中所述5-或6-元环任选地被一个或多个选自C1-C3烷基、氧代和卤素的取代基取代；
R1是任选地被一个或多个卤素原子取代的杂芳基；
R2选自-R6-R7、C≡N、环丙基和CF3；
R3选自C1-C3烷氧羰基和C≡N；
R4和R5独立地选自H和卤素；
R6是任选地被氟取代的C1-C3烷基；
R7选自氢、杂C3-7环烷基或CF3。
在这个亚组的一个实施方案中，B和Z与其连接的碳一起形成5-6元环，任选地含有一个或多个杂原子，其中5-或6-元环任选地被一个或多个选自C1-C3烷基的取代基取代。
一个特定组的化合物是那些式(I)化合物，其中R1的杂芳基包含与连接到4,4-二取代的-1,4-二氢嘧啶的碳相邻的氮原子(例如R1是2-吡啶基或2-噻唑基)。
另一个特定组的化合物是那些式(I)化合物，其中-R6-R7代表甲基。
式(I)化合物的一个有价值的亚组是那些式(I)化合物或其亚组，其中下面限定的任何组合均适用：
B和Z与其连接的碳一起形成5或6元环，任选地被一个或多个CH3或氟取代基取代；
R1选自吡啶基或噻唑基；
R2选自-R6-R7、C≡N、环丙基和CF3；
R3是C1-或C2-烷氧羰基，优选是C1-烷氧羰基；
R6是CH2；
R7是选自氢、吗啉基或哌啶基；
R4和R5独立地选自H和氟。
本发明的一个优选亚组是依据式Ia的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物：
包括其任何可能的立体异构体或互变异构形式，其中：
B选自任选地被一个或多个氟原子取代的C1-C3烷基；
Z选自H或卤素；
或B和Z与其连接的碳一起形成4-7元环，任选地含有一个或多个杂原子，其中所述4-7元环任选地被一个或多个选自C1-C3烷基、氧代和卤素的取代基取代；
R1选自杂芳基和苯基，其任选地被一个或多个选自卤素及C1-C3烷基的取代基取代；
R2选自-R6-R7、C≡N、环丙基和CF3；
R3选自C1-C3烷氧羰基和C≡N；
R4和R5独立地选自H和卤素；
R6是任选地被氟取代的C1-C3烷基；
R7选自氢、杂C3-7环烷基、环丙基和CF3。
依据本发明化合物的一个有价值的亚组是式(Ia)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，包括其任何可能的立体异构体或互变异构形式，其中：
B选自任选地被一个或多个氟原子取代的C1-C3烷基；
Z选自H或卤素；
或B和Z与其连接的碳一起形成4-7元环，任选地含有一个或多个杂原子，其中所述4-7元环任选地被一个或多个选自C1-C3烷基的取代基取代；
R1选自杂芳基和苯基，其任选地被一个或多个卤素原子取代；
R2选自-R6-R7、C≡N、环丙基和CF3；
R3选自C1-C3烷氧羰基和C≡N；
R4和R5独立地选自H和卤素；
R6是任选地被氟取代的C1-C3烷基；
R7选自氢、杂C3-7环烷基、环丙基和CF3。
式(Ia)化合物的一个有价值的亚组是那些式(Ia)化合物，其中：
B和Z与其连接的碳一起形成5-或6-元环，任选地含有一个或多个杂原子，其中所述5-或6-元环任选地被一个或多个选自C1-C3烷基、氧代和卤素的取代基取代；
R1是任选地被一个或多个卤素原子取代的杂芳基；
R2选自-R6-R7、C≡N和CF3；
R3选自C1-C3烷氧羰基和C≡N；
R4和R5独立地选自H和卤素；
R6是任选地被氟取代的C1-C3烷基；
R7选自氢、杂C3-7环烷基或CF3。
在这个亚组的一个实施方案中，B和Z与其连接的碳一起形成5-6元环，任选地含有一个或多个杂原子，其中该5-6元环任选地被一个或多个选自C1-C3烷基的取代基取代。
一个特定组的化合物是那些式(Ia)化合物，其中R1的杂芳基包含与连接到4,4-二取代的-1,4-二氢嘧啶的碳相邻的氮原子(例如R1是2-吡啶基或2-噻唑基)。
另一个特定组的化合物是那些式(Ia)化合物，其中-R6-R7代表甲基。
式(Ia)化合物的一个有价值的亚组是那些式(Ia)化合物或其亚组，其中下面限定的任何组合均适用：
B和Z与其连接的碳一起形成5或6元环，任选地被一个或多个CH3或氟的取代基取代；
R1选自吡啶基或噻唑基；
R2选自-R6-R7、C≡N、环丙基和CF3；
R3是C1-或C2-烷氧羰基，优选是C1-烷氧羰基；
R6是CH2；
R7选自氢、吗啉基或哌啶基；
R4和R5独立地选自H和氟。
最优选是列在表1中的化合物。
在另一个方面，本发明涉及药物组合物，其包含治疗或预防上有效量的如本文说明的式I化合物，包括其它式(I)化合物(其中R1是S-甲基)，和药学上可接受的载体。在本文中的预防上有效量是指在有感染风险的个体中足以预防HBV感染的量。在本文中的治疗上有效量是指在感染的受试者中足以稳定HBV感染、降低HBV感染或消除HBV感染的量。在另一个方面，本发明涉及制备如本文说明的药物组合物的方法，其包括将药学上可接受的载体与治疗或预防上有效量的如本文说明的式I化合物，包括其它式(I)化合物(其中R1是S-甲基)，密切混合。
因此，本发明的化合物，包括其它式(I)化合物(其中R1是S-甲基)，或其任何亚组，可被配制成供给药目的的不同的药物形式。至于合适的组合物，可以列举的是通常用于全身性给药的全部组合物。为了制备本发明的药物组合物，将作为活性成分的有效量的特定化合物，任选地呈加成盐形式，与药学上可接受的载体组合在密切的混合物中，所述载体可以采取广泛种类的形式，这取决于给药所需的制剂形式。呈特别适合于口服、直肠、经皮或通过胃肠外注射给药的单位剂量形式的这些药物组合物是合乎需要的。例如，在制备口服剂量形式的组合物时，可以使用任何常用的药用介质，在口服液体制剂例如混悬液、糖浆、酏剂、乳剂和溶液的情形下，可以使用例如水、二醇、油、醇等；或在粉剂、丸剂、胶囊及片剂的情形下，可以使用固体载体例如淀粉、糖、高岭土、润滑剂、粘合剂、崩解剂等。因为容易给药，片剂及胶囊剂代表最有利的口服剂量单位形式，在此情形使用固体药用载体。对于胃肠外的组合物，载体将通常包括无菌水(至少是大部分)，尽管可以包含其它成分，例如帮助溶解度。例如可以制备其中载体包含盐水溶液、葡萄糖溶液或盐水与葡萄糖溶液的混合物的可注射溶液。也可以制备其中可以使用合适的液体载体、混悬剂等的可注射混悬液。也包括在使用前不久意欲将其转化成液体形式制剂的固体形式制剂。在适合于经皮给药的组合物中，载体任选地包含穿透增强剂和/或合适的湿润剂，任选地混合小比例的任何性质的合适添加剂，该添加剂不会对皮肤带来明显的伤害。本发明化合物也可以溶液、混悬液或干粉的形式，经由使用任何本领域已知的递送系统，经由口吸入或吹入而给药。
特别有利的是将上述药物组合物配制成单位剂量形式以便容易给药及使剂量一致。如本文所用的单位剂量形式系指合适作为单位剂量的物理离散单位，各单位含有与所需药用载体缔合的经计算以产生所需治疗效应的预定量的活性成分。这样的单位剂量形式的实例是片剂(包括刻痕片或包衣片)、胶囊、丸剂、栓剂、粉末包、干胶片(wafers)、可注射溶液或混悬液等，及其分离的多重剂量。
式I化合物，包括其它式(I)化合物(其中R1是S-甲基)，作为HBV复制周期的抑制剂是有效的，且可以用于治疗和预防HBV感染或与HBV相关的疾病。后者包括进行性肝纤维化、炎症及坏死，导致肝硬化、末期肝病和肝细胞癌。
由于其抗病毒性质，特别是其抗-HBV性质，式I化合物，包括其它式(I)化合物(其中R1是S-甲基)，或其任何亚组，可用于抑制HBV复制周期，特别是治疗感染HBV的温血动物，特别是人类，以及用于预防HBV感染。本发明还涉及被HBV感染或处于被HBV感染风险的温血动物，特别是人类的治疗方法，所述方法包括给予治疗有效量的式I化合物，包括其它式(I)化合物(其中R1是S-甲基)。
如本文说明的式I化合物，包括其它式(I)化合物(其中R1是S-甲基)，可因此作为药物使用，特别是作为治疗或预防HBV感染的药物。所述作为药物的用途或治疗方法包括全身性给予HBV感染的受试者或容易被HBV感染的受试者有效对抗与HBV感染相关的病况的量或有效预防HBV感染的量。
本发明还涉及本发明化合物在制备用于治疗或预防HBV感染的药物中的用途。
一般来说，构思的抗病毒有效每日量是从约0.01至约50 mg/kg，或约0.01至约30mg/kg体重。可适宜的是将所需要的剂量在一整天中的适当间隔下作为二、三、四或更多个亚剂量给药。所述亚剂量可以配制成单位剂量形式，例如每单位剂量形式含约1至约500mg，或约1至约300 mg，或约1至约100 mg，或约2至约50 mg的活性成分。
本发明还涉及如本文说明的式(I)化合物，包括其它式(I)化合物(其中R1是S-甲基)，或其任何亚组，与其它抗-HBV药物的组合。术语“组合(combination)”可涉及含有(a)如上文说明的式I化合物，包括其它式(I)化合物(其中R1是S-甲基)，和(b)至少一种能够治疗HBV感染的其它化合物(本文称为抗-HBV药物)的产品或药剂盒，作为组合制剂以同时、分开或序贯用于治疗HBV感染。
在一个实施方案中，本发明涉及式(I)化合物，包括其它式(I)化合物(其中R1是S-甲基)，或其任何亚组，与至少一种抗-HBV药物的组合。在一个特定的实施方案中，本发明涉及式(I)化合物，包括其它式(I)化合物(其中R1是S-甲基)，或其任何亚组，与至少两种抗-HBV药物的组合。在一个特定的实施方案中，本发明涉及式(I)化合物，包括其它式(I)化合物(其中R1是S-甲基)，或其任何亚组，与至少三种抗-HBV药物的组合。在一个特定的实施方案中，本发明涉及式(I)化合物，包括其它式(I)化合物(其中R1是S-甲基)，或其任何亚组，与至少四种抗-HBV药物的组合。
先前已知的抗-HBV药物例如干扰素-α (IFN-α)、聚乙二醇化的干扰素-α、3TC、阿德福韦或其组合和式(I)化合物或其任何亚组的组合，可以作为药物在组合疗法中使用。
在另一个方面，本发明涉及式V的化合物
其中R1、R3、R4和R5如上述对于式I和Ia所定义。
本发明还涉及式V化合物在合成式I的化合物中的用途。通用合成示于下面流程1中。合适的反应条件的实例示于通用合成方法部分且在实验部分有更详细的描述。
式(V)化合物的一个有价值的亚组是那些式(V)化合物，其中：
B和Z与其连接的碳一起形成5-或6-元环，任选地含有一个或多个杂原子，其中所述5-或6-元环任选地被一个或多个选自C1-C3烷基的取代基取代；
R1是任选地被一个或多个卤素原子取代的杂芳基；
R2选自-R6-R7、C≡N和CF3；
R3选自C1-C3烷氧羰基和C≡N；
R4和R5独立地选自H和卤素；
R6是任选地被氟取代的C1-C3烷基；
R7选自氢、杂C3-7环烷基或CF3。
一个特定组的化合物是那些式(V)化合物，其中R1的杂芳基含有与连接到4,4-二取代的-1,4-二氢嘧啶的碳相邻的氮原子(例如R1是2-吡啶基或2-噻唑基)。
式(V)化合物的一个有价值的亚组是那些式(V)化合物或其亚组，其中下列限制的任何组合均适用：
B和Z与其连接的碳一起形成5-或6-元环，任选地被一个或多个CH3取代基取代；
R1选自吡啶基或噻唑基；
R3是C1-或C2-烷氧羰基，优选是C1-烷氧羰基；
R6是CH2；
R7选自氢、吗啉基或哌啶基；
R4和R5独立地选自H和氟。
通用合成方法
式I化合物的可能的合成描述于流程1中。
通式II化合物与通式III的脒化合物反应，可能在碱(例如Na2CO3、KOtBu或NaHCO3)存在下，得到通式IV的环状化合物。此通式IV化合物可被氯化成通式V化合物，例如通过在POCl3中加热。然后通式V化合物可转化成通式I化合物，例如在R2等于-CH2-Het (其中het代表杂-C3-7环烷基或环丙基)的情况下通过Suzuki型偶联；在R2等于Me的情况下通过Stille型偶联；在R2等于CN的情况下通过取代作用或如在实验部分的举例。或者，在化合物Ｖ中的两个脒-氮之一可以用例如Boc-基团保护，随后可进行例如Suzuki或Stille偶联，然后将氮脱保护，得到化合物I。
流程 1：
通式II化合物可以如流程2 (a, b, c, d)所述合成，使用的条件取决于在通式II化合物上的取代基Z、B和R3。R8代表C1-C3烷基，优选是甲基或乙基。
一个可能的方法描述于用于合成具有通式IIa的化合物的流程2a中。在B等于C1-3烷基或CF3，或B和Z连接以致通式VI化合物是茚满-1-酮衍生物的情况下，Lehnnert条件(TiCl4/吡啶，例如描述于Tetrahedron Letters No.34, pp. 4723-4724, 1970或其修订版)可用于VI和VII的Knoevenagel缩合。或者，在B等于C1-3烷基的情况下，通式IIb化合物可以如流程2b中所述合成，经由通式IX的硼酸(或其它硼衍生物)与通式VIII的乙烯基氯化物(vinylic chloride) (如在文献中所述制备，条件类似于Organic Syntheses, Coll.Vol. 8, p.247 (1993)；Vol. 66, p.173 (1988))的Suzuki型反应，如在Journal ofOrganic Chemistry2004, 69, 20, 6920-6922中所述。另一种替代方法描述于流程2c中，如Tetrahedron2005, 61, 32, 7807-7813中所述，使通式X的炔与通式VII的丙二酸酯在InCl3存在下反应，得到通式IIc化合物。
流程 2a
流程 2b
流程 2c
在用通式XI的2-氰基乙酸烷基酯与通式VI化合物进行Knoevenagel缩合的情况下，如流程2d中所述，例如可使用在苯中的β-丙氨酸/乙酸作为条件，形成通式IId的加成物。
流程 2d
合成通式II化合物的其它实例可见于：Jones, G. 2011. The KnoevenagelCondensation. Organic Reactions. 204-599。在通式IId化合物与通式III的脒反应的情况下，可能在碱例如KOAc、NaHCO3或Na2CO3存在下，可如流程3中所述，形成式IVa化合物。除了如流程1中所述直接在反应系列中使用此化合物外，其亦可以转化成通式IVb的酯衍生物，通过进行腈醇解例如通过使用在MeOH或EtOH中的盐酸，随后与水反应，得到化合物IVb，如流程3中所述。
流程 3
流程 4
或者，如在流程4中所述，例如通过在POCl3中加热，可将通式XII化合物转化成通式XIII化合物。然后可以通过过渡金属催化反应，例如用R1Sn(Bu)3和催化剂例如双(三叔丁基膦)钯(0)的Stille-型偶联，将式XIII化合物转化成通式I化合物。在此系列期间，如果官能基团与使用的条件不相容，可以使用保护基策略，例如NH官能度上的对甲氧基苄基保护。
流程 5
式XIIa化合物可如流程5中所述，根据在Synthetic Communications, 41(19),2899-2904；2011中描述的条件合成，R9是R8或H。
通式Ib化合物的合成实例描述于流程6。例如通过在DMF中在50℃用2-甲基-2-异硫脲(thiopseudourea)的半硫酸盐及碳酸氢钠处理，使化合物XIV与2-甲基-2-异硫脲缩合，导致形成化合物XV。XV可进一步转化成通式结构Ib的化合物，例如通过使用过渡金属催化的C-C键形成，例如在乙酸钯(II)/丁基二-1-金刚烷基膦及溴化亚铜(I)-二甲基硫存在下，通过微波照射在140℃与R1-Sn(Bu)3偶联。
流程 6
通式XIV化合物的合成实例描述于流程 7a和7b中。在 B等于-CH3的情况下，炔X与C1-C3烷基-3-氧代丁酸酯的InCl3催化偶联，得到通式XIVc的加成物。
流程 7a
或者，化合物VI和C1-C3烷基-3-氧代丁酸酯在Lehnnert条件(TiCl4/吡啶或其改良)下的缩合，得到通式XIV化合物。在此情形中，VI代表的合适化合物的实例是2,2-二氟-2,3-二氢-1H-茚-1-酮衍生物。
流程 7b
实验部分
LCMS方法
方法A：LC测量使用Acquity UPLC (Waters)系统进行。在桥接的乙基硅氧烷/二氧化硅混合物(BEH) C18柱(1.7μm，2.1 x 50 mm；Waters Acquity)上，以0.8 mL/分钟的流速进行反相UPLC (超高效液相色谱法)。使用两种流动相(流动相A：在H2O/乙腈95/5中的10mM乙酸铵；流动相B：乙腈)进行在1.3分钟内从95 % A和5 % B至5 % A和95 % B并保持0.3分钟的梯度条件。使用的注射体积是0.5μl。对于正电离模式，锥电压是10 V。
方法B：流动相A : H2O (0.1%TFA)；B:CH3CN (0.05% TFA)停止时间: 2分钟；梯度时间(分钟) [%A/%B] 0.01 [90/10]至0.9 [20/80]至1.5[20/80]至1.51 [90/10]；流速：1.2 mL/分钟；柱温度：50℃, Xtimate C18 2.1*30 mm，3μm。
方法C：流动相A : H2O (0.1 % TFA )；B:CH3CN (0.05 % TFA)停止时间: 10分钟；梯度时间(分钟) [%A/%B] 0.0 [90/10]至0.8 [90/10]至4.5 [20/80]至7.5 [20/80]；9.5[90/10]；流速：0.8 mL/分钟；柱温度：50℃, Agilent TC-C18, 2.1*50 mm，5μm。
方法D：LC测量使用Acquity UPLC (Waters)系统进行。在桥接的乙基硅氧烷/二氧化硅混合物(BEH) C18柱(1.7μm，2.1 x 50 mm；Waters Acquity)上，以0.8 mL/分钟的流速进行反相UPLC (超高效液相色谱法)。使用两种流动相(流动相A：在H2O/乙腈95/5中的10mM乙酸铵；流动相B：乙腈)进行在1.3分钟内从95 % A和5 % B至5 % A和95 % B并保持0.2分钟的梯度条件。使用的注射体积是0.5μl。对于正电离模式，锥电压是10 V。
方法E：LC测量使用Acquity UPLC (Waters)系统进行。在桥接的乙基硅氧烷/二氧化硅混合物(BEH) C18柱(1.7μm，2.1 x 50 mm；Waters Acquity)上，以0.8 mL/分钟的流速进行反相UPLC (超高效液相色谱法)。使用两种流动相(流动相A：在H2O/乙腈95/5中的10mM乙酸铵；流动相B：乙腈)进行梯度条件：在1.3分钟内从95 % A和5 % B至5 % A和95 % B并保持0.3分钟。使用的注射体积是0.5μl。对于正电离模式，锥电压是10 V。
方法F：HPLC测量使用Alliance HT 2790 (Waters)系统进行。在Xterra MS C18柱(3.5μm，4.6 x 100 mm)上，以1.6 mL/分钟的流速进行反相HPLC。使用三种流动相(流动相A：95% 25 mM乙酸铵+ 5 %乙腈；流动相B：乙腈；流动相C：甲醇)进行梯度条件：在6.5分钟内从100 % A至1 % A, 49 % B和50 % C，在1分钟至1 % A和99 % B并保持这些条件1分钟并用100 % A再平衡1.5分钟。使用的注射体积是10μl。用于正电离模式的锥电压是10 V和用于负电离模式的是20V。
方法G：Agilent TC-C18, 50×2.1 mm，5μm，流动相A : H2O (0.1%TFA)；B:CH3CN(0.05% TFA)停止时间：10分钟；Post时间: 0.5分钟；梯度时间(分钟) [%A/%B]0 [100/0]至1 [100/0]至5 [40/60]至7.5 [15/85]至9.5 [100/0]；流速：0.8 mL/分钟；柱温度：50℃。
方法H：YMC-PACK ODS-AQ, 50×2.0 mm，5μm，流动相A : H2O (0.1%TFA)；B:CH3CN(0.05% TFA)；停止时间：10分钟；梯度时间(分钟) [%A/%B] 0.0 [90/10]至0.8 [90/10]至4.5 [20/80]至7.5 [20/80]至8.0 [90/10]；流速：0.8 mL/分钟；柱温度：50℃。
方法I：YMC-PACK ODS-AQ, 50×2.0 mm，5μm，流动相A : H2O (0.1%TFA)；B:CH3CN(0.05% TFA) 停止时间：10分钟；梯度时间(分钟) [%A/%B] 0.0 [100/0]至1 [100/0]至5[40/60]至7.5 [40/60]至8.0 [100/0]；流速：0.8 mL/分钟；柱温度：50℃。
方法J：XBridge ShieldRP18, 50*2.1 mm，5μm；流动相A : H2O (0.05%NH3.H2O)；B:CH3CN；停止时间：10分钟；梯度时间(分钟) [%A/%B] 0.0 [100/0]至1 [100/0]至5 [40/60]至7.5 [40/60]至8.0 [100/0]；流速：0.8 mL/分钟；柱温度：40℃。
方法K：LC测量采用包括二元泵、样品管理器、柱加热器(设定在55℃)、二极管阵列检测器(DAD)的Acquity UPLC (Waters)系统进行。在Acquity UPLC HSS T3柱(1.8μm，2.1x 100 mm；Waters Acquity)上以0.8 mL/分钟的流速进行反相UPLC (超高效液相色谱法)。使用两种流动相(A：在H2O/乙腈95/5中的10 mM乙酸铵；流动相B：乙腈)进行梯度条件：在2.5分钟内从95 % A和5 % B至0 % A和100 % B且随后在0.5分钟至5 % A和95 % B。使用的注射体积是1μl。用于正电离模式的锥电压是30 V和用于负电离模式的是30 V。
方法L：LC测量使用包括二元泵、样品管理器、柱加热器(设定在55℃)、二极管阵列检测器(DAD)的Acquity UPLC (Waters)系统上进行。在Acquity UPLC HSS T3柱(1.8μm，2.1 x 100 mm；Waters Acquity)上，以0.8 mL/分钟的流速进行反相UPLC (超高效液相色谱法)。使用两种流动相(A：在H2O/乙腈95/5中的10 mM乙酸铵；流动相B：乙腈)进行梯度条件：在2.1分钟内从100 % A和0 % B至5 % A和95 % B且随后在0.9分钟至0 % A和100 % B，在0.5分钟至5% A和95% B。使用的注射体积是1μl。用于正电离模式的锥电压是30 V和用于负电离模式的是30 V。
缩写/名词
NMP: 1-甲基-2-吡咯烷酮
DME: 1,2-二甲氧基乙烷
POPd: [(t-Bu)2P(OH)]2PdCl2
Isolute ®HMN: 含有改良形式的硅藻土的一次性液体-液体萃取柱
PEPPSI(TM)-IPr: [1,3-双(2,6-二异丙基苯基)咪唑-2-亚基](3-氯­吡啶基)二氯化钯(II)
化合物1
在压力试管内装填二甲苯(30 mL)、丙二酸二乙酯(13.3 g，83.3 mmol)、氯化铟(368.2 mg，1.66 mmol)和4-氟苯基乙炔(15 g，125 mmol)。将试管用氮气吹洗，密封并在135℃的油浴中搅拌17小时。将反应混合物冷却至室温并在下面原样使用此溶液。在压力试管内装填吡啶-2-甲脒(carboximidamide)盐酸盐(14.2 g，90.3 mmol)和1-甲基-2-吡咯烷酮(NMP,100 mL)。在氮气下加入叔丁醇钾(18.42 g，164 mmol)并将反应混合物搅拌30分钟。然后加入在二甲苯中的上述所得溶液，在80℃的油浴中将压力试管加热并搅拌5小时。
将反应混合物在冰浴中冷却并在真空中浓缩直到只留下NMP。将混合物倒入冰-水中并搅拌30分钟。用二异丙醚(3 x 100 mL)萃取后，将合并的萃取液用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并在真空中浓缩，得到棕色油。将此油经硅胶柱色谱法纯化(梯度CH2Cl2-庚烷50:50至100:0)。收集所需流分并在真空中浓缩，得到为黄色油的化合物1，其放置后固化(21.3 g)。方法A；Rt: 1.03和1.07分钟，m/z : 356.3 (M+H)+ 精确质量：355.1。
化合物2
将化合物1 (420 mg，1.18 mmol)、甲醇(15 mL)和叔丁醇钾(199 mg，1.77 mmol)在80℃的油浴中搅拌17小时。将所得的反应混合物用水稀释并用CH2Cl2萃取(3 x 100 mL)。将合并的萃取液干燥(MgSO4)，过滤并在真空中浓缩，得到为甲酯(主要)和乙酯(次要)的混合物的残留物。将此混合物与磷酰氯(2 mL，21.5 mmol)回流1小时。将混合物在真空中浓缩。将所得的残留物溶解在CH2Cl2中并用NaHCO3 (sat/aq)洗涤。使用(MgSO4)将有机层干燥，在真空中浓缩后得到甲酯(主要)和乙酯(次要)的混合物。向在微波小瓶内的该所得残留物中加入碳酸铯(4.08 g，12.51 mmol)、(吗啉-4-基)甲基三氟硼酸钾(0.86 g，4.17mmol)、水(蒸馏水，1.1 mL，62.5 mmol)和DME (11 mL)。将此混合物用氮气吹洗5分钟。然后，加入乙酸钯(II) (47 mg，0.21 mmol)和丁基二-1-金刚烷基膦(120 mg，0.33 mmol)并将反应混合物用氮气吹洗另外2分钟。将小瓶封盖并在微波照射下加热至140℃ 30分钟。将所得的反应混合物在真空中浓缩并将残留物溶解在水-二氯甲烷(50 mL/50 mL)中。将水层再用二氯甲烷萃取(2 x 50 mL)。将合并的萃取液干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法纯化(梯度乙酸乙酯-庚烷10:90至50:50)。将所需流分在真空中浓缩后得到为透明油的化合物2，其经制备型HPLC进一步纯化(Uptisphere C18 ODB-10μm，200 g，5cm)。流动相(在水中的0.25% NH4HCO3溶液，CH3CN)。将相关流分在真空中浓缩，与MeOH (2 x10 mL)在50℃共同蒸发并在55℃的真空炉中干燥过夜，得到化合物2 (170 mg)，为白色粉末。方法A；Rt: 1.16分钟，m/z : 425.5 (M+H)+，精确质量：424.2；1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) ppm 1.91 (s, 3 H), 2.52 - 2.66 (m, 4 H), 3.48 (s, 3 H), 3.66 (d, J=16.3Hz, 1 H), 3.73 (d, J=16.3 Hz, 1 H), 3.82 (t, J=4.8 Hz, 4 H), 6.88 - 7.04 (m,2 H), 7.37 (ddd, J=7.5, 4.8, 1.0 Hz, 1 H), 7.40 - 7.49 (m, 2 H), 7.74 (td, J=7.5, 1.8 Hz, 1 H), 8.21 (d, J=7.8 Hz, 1 H), 8.50 - 8.69 (m, 1 H), 10.02 (s, 1H)。
化合物3
条件A:在烧瓶内加入化合物1 (4 g，11.0 mmol)和磷酰氯(10.3 mL，110.3mmol)。将反应混合物在120℃的油浴中搅拌30分钟。然后将反应混合物在真空中浓缩。将残留物溶解在二氯甲烷(100 mL)中并用饱和的NaHCO3 (50 mL)洗涤。将有机层分离并用水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并在真空中浓缩。将粗物质经硅胶柱色谱法纯化(等度CH2Cl2)后得到为透明油的化合物3，其放置后变成固体(2.73 g)。方法A；Rt: 1.18分钟，m/z : 374.3 (M+H)+ 精确质量：373.1。
条件B:在50 mL圆底烧瓶内加入搅拌棒、化合物1 (10.0 g，28.1 mmol)并与磷酰氯(26.2 mL，281 mmol)混合。在氮气氛下将混合物在回流下搅拌30分钟。将反应混合物在真空中蒸发至干燥。将残留物在-20℃储存40小时，溶解在二氯甲烷(200 mL)中并用饱和的碳酸氢钠水溶液(2 x 100 mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中蒸发至干，得到为棕色油的化合物3 (9.9 g)，其原样用于下一步骤。
化合物4
外消旋性化合物4的对映体：化合物4a和化合物4b
在10 mL微波试管内加入搅拌棒、(吗啉-4-基)甲基三氟硼酸钾(665 mg，3.05mmol)、化合物3 (经由条件B获得，600 mg，1.53 mmol)、碳酸铯(2.98 g，9.15 mmol)、蒸馏水(826μl，45.7 mmol)和1,2-二甲氧基乙烷(7.92 mL，76.2 mmol)并在10分钟期间鼓泡通入氮气。在氮气氛下加入乙酸钯(II) (34.5 mg，0.152 mmol)和丁基二-1-金刚烷基膦(87.5 mg，0.244 mmol)并在氮气氛下在微波炉内将反应混合物在140℃搅拌10分钟。弃去1,2-二甲氧基乙烷并将水层用二氯甲烷萃取。将有机层合并并蒸发至干，并将所得的残留物使用硅胶柱色谱法纯化(乙酸乙酯:庚烷30-100 %)，得到外消旋性化合物4 (683 mg)，其在(Chiralcel Diacel OJ 20 x 250 mm)上使用制备型SFC分离而进一步纯化。流动相(二氧化碳、乙醇，含0.2%异丙胺)。收集所需流分，在真空将溶剂移除并将所得的残留物溶解在甲醇中并再度蒸发。得到化合物4a (243 mg)和化合物4b (238 mg)，外消旋性化合物4的对映体。方法E；Rt: 1.21分钟，m/z : 439.3 (M+H)+ 精确质量：438.2。1H NMR (600 MHz, 氯仿-d) ppm 0.99 (t, J=7.1 Hz, 3 H), 1.90 (s, 3 H), 2.52 - 2.66 (m, 4 H), 3.67(d, J=16.4 Hz, 1 H), 3.75 (d, J=16.3 Hz, 1 H), 3.81 (t, J=4.6 Hz, 4 H), 3.86- 3.97 (m, 2 H), 6.96 (t, J=8.8 Hz, 2 H), 7.36 (ddd, J=7.4, 4.9, 1.0 Hz, 1H), 7.43 (dd, J=8.8, 5.4 Hz, 2 H), 7.72 (td, J=7.7, 1.8 Hz, 1 H), 8.18 (d, J=7.9 Hz, 1 H), 8.59 (ddd, J=4.8, 1.6, 0.9 Hz, 1 H), 10.00 (s, 1 H)；柱：OJ-H 500mmx 4.6 mm；流速: 3 mL/分钟；流动相：5 % EtOH (含有0.2 % iPrNH2)保持15.00分钟；柱温度：30℃；Rt, 化合物4a: 3.40分钟；化合物4b: 4.43分钟。
化合物5
将化合物3 (经由条件A获得，0.5 g，1.34 mmol)、1,4-二氮杂二环[2.2.2]­辛烷(0.23 g，2.01 mmol)、四丁基氰化铵(0.54 g，2.01 mmol)和乙腈(25 mL)在压力试管内搅拌并加热至100℃达17小时。将反应混合物在真空中浓缩并将所得的残留物溶解在二氯甲烷/水(50 mL/50 mL)中。将水层用二氯甲烷(2 x 50 mL)萃取并将合并的萃取液用盐水洗涤(50 mL)，干燥(MgSO4)，过滤并在真空中浓缩。将所得的残留物经硅胶柱色谱法纯化(梯度洗脱CH2Cl2-庚烷50:50至100:0)。将所需流分在真空中浓缩，得到黄色油。将此油溶解在二异丙醚中并在玻璃滤器上过滤形成的沉淀物，在55℃的真空炉干燥过夜，得到化合物5(80 mg)，为灰白色固体。方法D；Rt: 1.10分钟，m/z : 365.0 (M+H)+ 精确质量：364.1。
化合物6
在10 mL微波试管内加入搅拌棒、(吗啉-4-基)甲基三氟硼酸钾(144 mg，1.18mmol)、化合物3 (经由条件B获得，170 mg，0.455 mmol)、碳酸铯(889 mg，2.73 mmol)、蒸馏水(200μl，11.1 mmol)和甲苯(2 mL，18.8 mmol)并鼓泡通入氮气10分钟。在氮气氛下加入乙酸钯(II) (20.6 mg，0.0910 mmol)和丁基二-1-金刚烷基膦(52.2 mg，0.146 mmol)并在氮气氛下在微波炉内将反应混合物在100℃搅拌30分钟，容许达到室温并在氮气氛下在微波炉内将反应混合物在125℃搅拌30分钟，并容许达到室温。加入乙酸钯(II) (20.6 mg，0.0910 mmol)和丁基二-1-金刚烷基膦(52.2 mg，0.146 mmol)并在氮气氛下在微波炉内将反应混合物在125℃搅拌1小时。在氮气氛下加入(吗啉-4-基)甲基三氟硼酸钾(144 mg，1.18 mmol)和碳酸铯(889 mg，2.73 mmol)。
在氮气氛下在微波炉内将反应混合物在125℃搅拌10小时。将反应混合物用二氯甲烷(100 mL)稀释并用饱和的碳酸钠水溶液(2 x 20 mL)和水(20 mL)洗涤。将有机层经由isolute HM-N柱干燥并缩缩至干，得到棕色粘稠残留物，使用硅胶柱色谱法将其纯化(梯度洗脱；甲醇：二氯甲烷0至7%)，得到深黄色粘稠粉末，将其溶解在乙醚(2 mL)中并加入石油醚(10 mL)。将溶剂蒸发(旋转蒸发)以保持2 mL的溶剂，其导致深橙色固体沉淀。将溶剂倾析并将固体用石油醚洗涤。将合并的溶液浓缩至干并将粉末在50℃的真空炉中干燥过夜，得到化合物6 (57 mg)，为黄色粉末。方法A；Rt: 1.15分钟，m/z : 354.6 (M+H)+ 精确质量：353.2。
化合物7
在10 mL微波试管内加入搅拌棒、(吡咯烷-1-基)甲基三氟硼酸钾(204 mg，1.07mmol)、化合物3 (经由条件A获得，200 mg，0.535 mmol)、碳酸铯(1.05 g，3.21 mmol)、蒸馏水(290μl，16.1 mmol)和1,2-二甲氧基乙烷(2.78 mL，26.8 mmol)并鼓泡通入氮气经10分钟。在氮气氛下加入乙酸钯(II) (12.1 mg，0.0535 mmol)和丁基二-1-金刚烷基膦(30.7mg，0.0856 mmol)并在氮气氛下在微波炉内将反应混合物在140℃搅拌20分钟。将1,2-二甲氧基乙烷倾析，将水层用二氯甲烷萃取并将有机层合并并蒸发至干。将所得的残留物使用硅胶柱色谱法纯化(梯度洗脱；乙酸乙酯: 庚烷10-80%)，得到化合物7 (119 mg)。方法A；Rt: 1.01分钟，m/z : 423.4 (M+H)+ 精确质量：422.2。
化合物8
在10 mL微波试管内加入搅拌棒、(硫代吗啉-4-基)甲基三氟硼酸钾(227 mg，1.02mmol)、化合物3 (经由条件B获得，200 mg，0.508 mmol)、碳酸铯(994 mg，3.05 mmol)、蒸馏水(275μl，15.2 mmol)和1,2-二甲氧基乙烷(2.64 mL，25.4 mmol)并在10分钟期间鼓泡通入氮气。在氮气氛下加入乙酸钯(II) (11.5 mg，0.0508 mmol)和丁基二-1-金刚烷基膦(29.2 mg，0.0813 mmol)并在氮气氛下在微波炉内将反应混合物在140℃搅拌10分钟。将产物用二氯甲烷萃取并将有机层合并并蒸发至干。将所得的残留物使用硅胶柱色谱法纯化(乙酸乙酯: 庚烷5-70%)，收集所需流分并在真空中浓缩，在50℃的真空炉中干燥过夜，得到化合物8 (172 mg)。方法A；Rt: 1.38分钟，m/z : 423.4 (M+H)+ 精确质量：422.2。
化合物9
在10 mL微波试管内加入搅拌棒、(硫代吗啉-4-基)甲基三氟硼酸钾(227 mg，1.02mmol)、化合物3 (经由条件B获得，200 mg，0.508 mmol)、碳酸铯(994 mg，3.05 mmol)、蒸馏水(275 μl，15.2 mmol)和1,2-二甲氧基乙烷(2.64 mL)并在10分钟期间鼓泡通入氮气。在氮气氛下加入乙酸钯(II) (11.5 mg，0.0508 mmol)和丁基二-1-金刚烷基膦(29.2 mg，0.0813 mmol)并在氮气氛下在微波炉内将反应混合物在140℃搅拌10分钟。将产物用二氯甲烷萃取并将有机层合并并蒸发至干，并使用硅胶柱色谱法纯化两次(第一次：乙酸乙酯:庚烷5-70%；第二次：在甲醇(7N)/CH2Cl2 0-5%中的氨)，在50℃的真空炉中干燥后得到化合物9 (127 mg)。方法A；Rt: 1.33分钟，m/z : 437.4 (M+H)+ 精确质量：436.2。
化合物10
化合物11
将氟化钾(75 mg，1.29 mmol)和碘化亚铜(I) (250 mg，1.31 mmol)的混合物在真空中搅拌并加热直到得到均匀绿色的混合物。使反应冷却至室温，且相同的步骤重复三次。冷却至室温后，在氮气下加入N-甲基­吡咯烷酮(2.00 mL，20.8 mmol)和三甲基(三氟甲基)甲硅烷(74.2 mg，1.00 mmol)。将反应混合物在50℃搅拌45分钟。使其冷却至室温并在氮气下加入化合物3 (393 mg，1.00 mmol)。将反应混合物在50℃搅拌44小时并冷却至室温后加入氨水溶液。将有机层分离。将水层用乙酸乙酯洗涤(3 x 10 mL)。将合并的有机层用硫酸钠干燥。在真空中通过蒸发除去溶剂。使用硅胶柱色谱法纯化粗产物(乙酸乙酯: 庚烷5%-50%)。收集所需流分并浓缩至干，得到化合物10 (1.2 mg) (方法A；Rt: 1.26分钟，m/z :408.5 (M+H)+ 精确质量：407.1)和化合物11 (43 mg) (方法A；Rt: 1.36分钟，m/z :458.5 (M+H)+ 精确质量：457.1).为淡黄色油。
化合物12
在压力试管内加入搅拌棒、丙二酸二甲酯(4.03 g，30.5 mmol)、1-氯-2-乙炔基苯(5.00 g，36.6 mmol)、氯化铟(III) (162 mg，0.731 mmol)、二甲苯(15 mL)，用氮气吹洗并密封。然后将反应混合物在135℃搅拌17小时并使其达到室温。将氯化铟(III) (405 mg，1,83 mmol)添加至反应混合物中，用氮气吹洗并密封。然后将反应混合物在130℃搅拌16小时并使其达到室温，并蒸发至干。使用硅胶柱色谱法纯化残留物(梯度洗脱；在庚烷中20至80%的二氯甲烷)，得到化合物12 (1.26 g)的油。
化合物13
在氮气氛下，向吡啶-2-甲脒盐酸盐(0.813 g，5.16 mmol)中加入二甲基甲酰胺(22 mL，281 mmol)和碳酸钠(0.994 g，9.38 mmol)并将反应混合物搅拌5分钟。然后加入化合物12 (1.26 g，4.69 mmol)并将反应混合物在60℃加热并搅拌90小时，经超声处理并将悬浮液添加至50 mL圆底烧瓶内，在68℃搅拌18小时并使其达到室温。将反应混合物倒入冰水中并搅拌30分钟。用二异丙醚(3 x 50 mL)萃取。将合并的有机萃取液干燥(Na2SO4)，并在减压下浓缩，得到粘稠的油，使用硅胶柱色谱法将其纯化(梯度洗脱，在庚烷中30-100%的二氯甲烷)，收集所需流分并在真空中浓缩后得到残留物(356 mg)。将此残留物(356 mg，0.995 mmol)溶解在磷酰氯(1.61 mL，22.4 mmol)中并在120℃加热1小时。在40℃使用氮气流将反应混合物浓缩至干过夜。将所得的残留物溶解在二氯甲烷中并用饱和的碳酸氢钠水溶液、盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发至干，得到为深棕色粘稠油的残留物(219 mg)，其原样用于下一步骤。在10 mL微波试管内加入搅拌棒、(吗啉-4-基)甲基三氟硼酸钾(254 mg，1.16 mmol),、上面所得的残留物(219 mg)、蒸馏水(315μl，17.5 mmol)和1,2-二甲氧基乙烷(3 mL)。在10分钟期间内鼓泡通入氮气。在氮气氛下加入碳酸铯(1.14 g，3.49 mmol)、乙酸钯(II) (13.2 mg，0.0582 mmol)和丁基二-1-金刚烷基膦(33.4 mg，0.0931 mmol)并在氮气氛下在微波炉内将反应混合物在140℃搅拌10分钟。将产物用二氯甲烷萃取并将有机层合并，干燥(Na2SO4)并浓缩至干。将残留物通过硅胶柱色谱法纯化(梯度洗脱，在庚烷中5至100%的乙酸乙酯)，得到化合物13 (59 mg)，为白色粉末。方法A；Rt: 1.17分钟，m/z :441.5 (M+H)+ 精确质量：440.2。
化合物14
将POPd (582 mg，1.16 mmol)添加至在微波试管内的在四氢呋喃(16 mL)和水(3mL)中的2-(1-氯亚乙基)丙二酸二乙酯(3.00 g，13.6 mmol)、3-氯-4-氟苯基硼酸(3.55 g，20.4 mmol)和碳酸钾(5.64 g，40.8 mmol)的N2-吹洗的搅拌混合物，并用硅隔膜密封。将反应混合物在100℃经历微波照射30分钟。使反应容器达到室温并用二氯甲烷(150 mL)稀释，用水、饱和的碳酸钠水溶液和水(3 x 40 mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并除去溶剂。使用硅胶柱色谱法纯化残留物(梯度洗脱，在庚烷中0至15%的乙酸乙酯)，得到化合物14 (1.89 g)。
化合物15
在氮气氛下，在密封的压力试管内加入搅拌棒、化合物14 (939 mg，2.98 mmol)、吡啶-2-甲脒盐酸盐(470 mg，2.98 mmol)、无水N,N-二甲基甲酰胺(23.1 mL，298 mmol)和叔丁醇钾(670 mg，5.97 mmol)。将反应混合物在60℃搅拌45小时，使其达到室温并倒入冰水中。使用盐酸水溶液(1M)将乳液中和(pH= 7) (pH试纸检查)并用二氯甲烷萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)并浓缩至干。使用甲苯将N,N-二甲基甲酰胺共沸去除，得到淡黄色油，其经硅胶柱色谱法纯化(在庚烷中10至40%的乙酸乙酯)，得到化合物15 (681 mg)，其原样用于下一反应。方法E；Rt: 1.15和1.17分钟，m/z : 390.1 (M+H)+ 精确质量：389.1。
化合物16
向密封小瓶的化合物15 (650 mg，1.67 mmol)中加入磷酰氯(2.14 mL，23.0mmol)。将反应混合物在回流下搅拌并加热30分钟，冷却至室温并浓缩至干。将残留物溶解在二氯甲烷中并用碳酸氢钠(3 x 10 mL)洗涤，经isolute HMN干燥并浓缩至干，得到为黄色泡沫的化合物16 (724 mg)，其原样用于下一步骤。方法E；Rt: 1.23分钟，m/z : 408.1(M+H)+ 精确质量：407.1。
化合物17
在10 mL微波试管内加入搅拌棒、甲基三氟硼酸钾(389 mg，3.18 mmol)、化合物16(250 mg，0.612 mmol)、碳酸铯(2.39 g，7.35 mmol)、蒸馏水(500 µL, 27.7 mmol)和甲苯(5 mL，47.0 mmol)并鼓泡通入氮气经10分钟。在氮气氛下加入乙酸钯(II) (27.7 mg，0.122 mmol)和丁基二-1-金刚烷基膦(70.3 mg，0.196 mmol)并在氮气氛下在微波炉内将反应混合物在125℃搅拌10分钟。将反应混合物在120℃进一步常规加热24小时，冷却至室温，用CH2Cl2稀释(40 mL)并用饱和的碳酸钠水溶液(2 x 5 mL)和水(5 mL)洗涤。将有机层经isolute HMN柱干燥并浓缩至干，得到棕色粘稠残留物，使用硅胶柱色谱法将其纯化(梯度洗脱，在二氯甲烷中0-5%的甲醇)，得到化合物17 (94 mg)。方法A；Rt: 1.27分钟，m/z :388.3 (M+H)+ 精确质量：387.1。
化合物18
在10 mL微波试管内加入搅拌棒、(吗啉-4-基)甲基三氟硼酸钾(159 mg，0.767mmol)、化合物16 (222 mg，0.511 mmol)、碳酸铯(500 mg，1.53 mmol)、水(417μl，23.1mmol)和甲苯(3 mL)并用氮气吹洗5分钟。在氮气氛下加入乙酸钯(II) (11.6 mg，0.051mmol)和丁基二-1-金刚烷基膦(29.3 mg，0.082 mmol)并将反应混合物在氮气氛下在115℃搅拌1小时。在氮气氛下加入更多的乙酸钯(II) (11.6 mg，0.051 mmol)和丁基二-1-金刚烷基膦(29.3 mg，0.082 mmol)，并将反应混合物在110℃搅拌9小时后使其冷却至室温。将混合物用二氯甲烷(30 mL)稀释并用饱和的碳酸钠水溶液(2 x5 mL)和水(5 mL)洗涤。有机层经isolute HMN柱干燥并浓缩至干，得到棕色粘稠残留物，使用柱色谱法(在CH2Cl2中0-2%MeOH)和(梯度洗脱，用在庚烷中10-100%的乙酸乙酯)将其纯化。将产物流分合并，浓缩并在50℃的真空炉内干燥过夜，得到化合物18 (71 mg)的淡黄色粘稠油。方法A；Rt: 1.33分钟，m/z : 473.4 (M+H)+ 精确质量：472.2；1H NMR (400 MHz,86.7 ℃, DMSO-d6 ) ppm 1.01(t, J=7.0 Hz, 3 H), 1.81 (s, 3 H), 2.51 (m., 4 H), 3.53 - 3.75 (m, 6 H), 3.93(q, J=7.0 Hz, 2 H), 7.20 - 7.30 (m, 1 H), 7.33 - 7.43 (m, 1 H), 7.45 - 7.58(m, 2 H), 7.89 (td, J=7.7, 1.6 Hz, 1 H), 8.08 (d, J=7.8 Hz, 1 H), 8.65 (d, J=4.3 Hz, 1 H), 9.85 (br. s., 1 H)。
化合物19
在氮气氛下，在密封压力试管内加入搅拌棒、化合物14 (952 mg，3.297 mmol)、2-噻唑甲脒盐酸盐(539 mg，3.30 mmol)、无水N,N-二甲基甲酰胺(25 mL)和叔丁醇钾(740mg，6.59 mmol)。将反应混合物在60℃搅拌112小时后倒入水中，并使用盐酸水溶液(1M)将乳液中和(pH = 5-6) (pH试纸检查)，用二氯甲烷萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)并浓缩至干，使用甲苯将N,N-二甲基甲酰胺共沸去除，得到淡黄色油，使用柱色谱法将其纯化(乙酸乙酯：庚烷10至40%)，得到化合物19 (379 mg)，为淡黄色粉末，其原样用于下一反应。
化合物20
向化合物19 (335 mg，0.846 mmol)中加入磷酰氯(1.10 mL，11.8 mmol)并将反应混合物在回流下搅拌并加热30分钟，使其冷却至室温并在氮气流下蒸发至干。将残留物溶解在二氯甲烷中并用饱和的碳酸氢钠及水洗涤，经isolute HMN柱干燥并浓缩至干，得到为黄色泡沫的化合物20，其原样用于下一步骤。
化合物21
在微波小瓶内加入甲苯(4 mL)和水(400μl)并将其用氮气吹洗5分钟。然后加入化合物20 (100 mg)，随后加入碳酸铯(944 mg，2.9 mmol)和甲基三氟硼酸钾(153 mg，1.26mmol)并将反应混合物再次吹洗2分钟。然后加入乙酸钯(II)(10.9 mg，0.048 mmol)和丁基二-1-金刚烷基膦(27.7 mg，0.077 mmol)并将反应混合物再次吹洗两分钟。将微波小瓶用氮气吹洗并封盖。将反应混合物在微波照射下加热至140℃达1小时。将反应混合物冷却至室温并倒入二氯甲烷-水(50 mL-50 mL)中。分离各层并将水层用二氯甲烷(2 x 50 mL)萃取两次。将合并的萃取液用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并在真空中浓缩。将滤液浓缩并经硅胶柱色谱法纯化，用在庚烷中10%至100%EtOAc的梯度洗脱并经制备型HPLC进一步纯化(Uptisphere C18 ODB-10μm，200 g，5 cm)。流动相(在水中的0.25% NH4HCO3溶液，CH3CN)，得到化合物21 (4.6 mg)。
化合物22
在压力试管内加入搅拌棒、丙二酸二乙酯(15.4 g，96.1 mmol)、4-氟苯基乙炔(15.0 g，125 mmol)、氯化铟(III) (1.06 g，4.80 mmol)和邻二甲苯(35 mL)，用氮气吹洗并密封。然后将反应混合物在135℃的油浴中搅拌17小时并冷却至室温。将反应混合物原样用在下一步骤。
在氮气氛下，向压力试管内加入3,5-氟-吡啶-2-甲脒(2.91 g，15.0 mmol)、NMP(16.6 mL，173 mmol)和叔丁醇钾(3.06 g，27.3 mmol)并将反应混合物搅拌30分钟。然后加入在邻二甲苯中的部分上面所得的反应混合物(13.6 mmol，5 mL反应混合物，在邻二甲苯中)并将反应混合物在80℃的油浴中加热并搅拌3小时。冷却至室温后，将反应混合物在真空中浓缩而除去邻二甲苯。然后将其倒入冰水中并用盐酸水溶液(1M)中和(pH=7) (pH试纸检查)。将混合物搅拌30分钟，然后用二异丙醚(3 x 50 mL)萃取。将合并的有机萃取液用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)在真空中浓缩并在50℃的真空炉内干燥过周末。所得的棕色油经硅胶柱色谱法纯化(在庚烷中40-100%的二氯甲烷)。将所需流分在真空中浓缩，得到化合物22(740 mg)，为白色粉末。
化合物23
在含搅拌棒的试管内加入化合物22 (740 mg，1.86 mmol)和磷酰氯(1.34 mL，18.6 mmol)并用特氟隆盖密封。将反应混合物在120℃加热30分钟并在40℃使用氮气流浓缩至干。将残留物溶解在二氯甲烷中并用饱和的碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩至干，得到为棕色粘稠油的化合物23 (750 mg)，其原样用于下一步骤。
化合物24
在10 mL微波试管内加入搅拌棒、(吗啉-4-基)甲基三氟硼酸钾(189 mg，0.869mmol)、化合物23 (250 mg，0.58 mmol)、蒸馏水(314μl，17.4 mmol)和1,2-二甲氧基乙烷(3mL)并在10分钟期间内鼓泡通入氮气。在氮气氛下加入碳酸铯(944 mg，2.90 mmol)、乙酸钯(II)(13.1 mg，0.058 mmol)和丁基二-1-金刚烷基膦(33.2 mg，0.0927 mmol)并在微波炉内将反应混合物在140℃搅拌10分钟。将产物用二氯甲烷萃取，将有机层合并，经硫酸钠干燥并蒸发至干，使用硅胶柱色谱法(梯度洗脱用在庚烷中5-80%的乙酸乙酯)纯化，得到为白色粉末的化合物24 (65 mg)，将其在50℃的真空炉中干燥过夜。方法A；Rt: 1.21分钟，m/z: 475.5 (M+H)+ 精确质量：474.2；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) ppm 0.95 (t, J=7.0Hz, 3 H), 1.79 (s, 3 H), 2.37 - 2.48 (m, 4 H), 3.52 (d, J=15.6 Hz, 1 H), 3.57- 3.69 (m, 5 H), 3.79 - 3.96 (m, 2 H), 7.09 (t, J=8.9 Hz, 2 H), 7.36 - 7.46(m, 2 H), 8.05 (ddd, J=10.9, 9.0, 2.3 Hz, 1 H), 8.65 (d, J=2.0 Hz, 1 H), 9.61(s, 1 H)。
化合物25
在微波试管内加入搅拌棒、丙二酸二甲酯(0.712 g，5.39 mmol)、3-氯-5-氟苯基乙炔(1.00 g，6.47 mmol)、氯化铟(III) (71.5 mg，0.324 mmol)、二甲苯(3 mL)，用氮气吹洗并密封。然后将反应混合物在135℃搅拌17小时并冷却至室温。加入氯化铟(III) (71.5mg，0.324 mmol)并将反应混合物在135℃搅拌17小时，然后冷却至室温。反应混合物原样使用。
在氮气氛下，向装有3,5-氟-吡啶-2-甲脒(1.15 g，5.93 mmol)、N-甲基吡咯烷酮( 6.57 mL，68.2 mmol)的压力试管中加入叔丁醇钾(1.21 g，10.8 mmol)。将反应混合物搅拌30分钟。然后加入在二甲苯中的部分上面所得的反应混合物(5.39 mmol，3 mL溶液，在二甲苯中)，并将压力试管在80℃的油浴中加热并搅拌4小时。将反应混合物倒入冰水中并用盐酸水溶液(1M)中和(pH=7) (pH试纸检查)。将混合物搅拌30分钟，然后用二异丙醚(3 x50 mL)萃取。将合并的萃取液用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并在真空中浓缩。使用硅胶柱色谱法纯化残留物(梯度洗脱，在庚烷中40-100%的二氯甲烷)。将所需流分在真空中浓缩，得到化合物25 (400 mg)，为棕色粘稠油。
化合物26
在试管内加入搅拌棒、化合物25 (400 mg，0.826 mmol)、磷酰氯(1.19 mL，16.5mmol)并在120℃加热45分钟。在40℃使用氮气流将反应混合物浓缩至干过夜。将残留物溶解在二氯甲烷中并用饱和的碳酸氢钠水溶液、盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发至干，得到为深棕色油的化合物26 (239 mg)，其原样用于下一步骤。
化合物27
在10 mL微波试管内加入搅拌棒、(吗啉-4-基)甲基三氟硼酸钾(182 mg，0.833mmol)、化合物26 (239 mg，0.556 mmol)、蒸馏水(301μl，16.7 mmol)和1,2-二甲氧基乙烷(2.88 mL)并在10分钟期间内鼓泡通入氮气。在氮气氛下加入碳酸铯(905 mg，2.78 mmol)、乙酸钯(II) (12.6 mg，0.0556 mmol)和丁基二-1-金刚烷基膦(31.9 mg，0.0889 mmol)并在氮气氛下在微波炉内将反应混合物在140℃搅拌10分钟。将产物用二氯甲烷萃取并将有机层合并，干燥(Na2SO4)并蒸发至干。将所得的残留物用硅胶柱色谱法(在庚烷中5至70%的乙酸乙酯)纯化，得到化合物27 (19 mg)，为黄白色粉末。方法A；Rt: 1.26分钟，m/z :495.5 (M+H)+ 精确质量：494.1；1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) ppm 1.89 (s, 3 H), 2.48 -2.65 (m, 4 H), 3.53 (s, 3 H), 3.67 (d, J=16.6 Hz, 1 H), 3.72 (d, J=16.6 Hz, 1H), 3.78 (t, J=4.6 Hz, 4 H), 6.90 (dt, J=8.3, 2.1 Hz, 1 H), 7.24-7.27 (m, 1H), 7.30 (ddd, J=10.0, 7.9, 2.4 Hz, 1 H), 8.35 (d, J=2.0 Hz, 1 H), 9.69 (s, 1H)。
化合物28
在10 mL微波试管内加入丙二酸二甲酯(1.21 g，9.17 mmol)、3-氯-5-氟苯基乙炔(1.70 g，11.0 mmol)、三氯化铟(III) (243 mg，1.10 mmol)、二甲苯(6 mL)，用氮气吹洗并密封。将反应混合物在135℃搅拌40小时，使其冷却至室温并原样用于下一步骤。在50 mL圆底烧瓶内，在氮气氛下加入吡啶-2-甲脒盐酸盐(1.52 g，9.62 mmol)、二甲基甲酰胺(8.98mL)和碳酸钠(2.91 g，27.5 mmol)并将反应混合物在室温搅拌10分钟。然后加入在二甲苯中的上面所得反应混合物(9.17 mmol)并将所得的混合物在60℃加热并搅拌过夜。将混合物倒入冰水中，搅拌30分钟并用二异丙醚(3 x 50 mL)萃取。将合并的有机萃取液干燥(Na2SO4),，在减压下浓缩并使用硅胶柱色谱法纯化残留物(梯度洗脱，在庚烷中30至100%的二氯甲烷)。将所需流分在真空中浓缩，得到化合物28 (1.14 g)的棕色油。
化合物29
在氮气氛下，向试管内加入搅拌棒、化合物28 (1.14 g，3.03 mmol)和磷酰氯(4.37 mL，60.7 mmol)并在120℃加热45分钟。在40℃使用氮气流过夜将反应混合物浓缩至干。将残留物溶解在二氯甲烷中并用饱和的碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发至干，得到残留物，其原样用于下一步骤。
在20 mL微波试管内加入搅拌棒、(吗啉-4-基)甲基三氟硼酸钾(1.03 g，4.72mmol)、上面所得的残留物(969 mg，2.36 mmol)、蒸馏水(1.28 mL，70.9 mmol)和1,2-二甲氧基乙烷(12.3 mL，118 mmol)。在10分钟期间内鼓泡通入氮气。在氮气氛下，加入碳酸铯(4.62 g，14.2 mmol)、乙酸钯(II) (53.5 mg，0.236 mmol)和丁基二-1-金刚烷基膦(135mg，0.378 mmol)并在氮气氛下在微波炉内将反应混合物在140℃搅拌10分钟。将水层用二氯甲烷萃取，将有机层合并并用饱和的碳酸钠水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发至干。使用硅胶柱色谱法纯化残留物(梯度洗脱，在庚烷中5至50%的乙酸乙酯)，得到化合物29 (453mg)。方法A；Rt: 1.30分钟，m/z : 459.5 (M+H)+ 精确质量：458.2；1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) ppm 1.87 (s, 3 H), 2.52 - 2.69 (m, 4 H), 3.50 (s, 3 H), 3.69 (d, J=16.8Hz, 1 H), 3.76 (d, J=16.6 Hz, 1 H), 3.82 (t, J=4.5 Hz, 4 H), 6.90 (dt, J=8.3,2.0 Hz, 1 H), 7.07 (dt, J=10.1, 1.9 Hz, 1 H), 7.24 (t, J= 1.8 Hz, 1 H), 7.38(ddd, J=7.5, 5.0, 0.9 Hz, 1 H), 7.75 (td, J=7.7, 1.6 Hz, 1 H), 8.18 (d, J=7.8Hz, 1 H), 8.60 (d, J=4.8 Hz, 1 H), 10.14 (s, 1 H)。
化合物30
化合物31
将化合物29 (175 mg，0.378 mmol)和乙酸钾(148 mg，1.51 mmol)溶解在甲醇(50mL)中，将反应混合物搅拌并用氮气吹洗5分钟。将披钯碳(10%, 201 mg，0.189 mmol)添加至溶液中并在氢气氛下搅拌2小时。在氮气氛下，将反应混合物经硅藻土过滤并将固体用甲醇洗涤。将滤液浓缩至干并将所得的残留物用硅胶柱色谱法纯化(梯度洗脱，在庚烷中5-65%的乙酸乙酯)，得到化合物30 (66 mg)和化合物31 (13 mg)。化合物30:方法A；Rt: 1.18分钟，m/z : 425.5 (M+H)+ 精确质量：424.2；1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) ppm 1.90 (s, 3H), 2.51 - 2.68 (m, 4 H), 3.47 (s, 3 H), 3.67 (d, J=16.6 Hz, 1 H), 3.74 (d, J=16.6 Hz, 1 H), 3.81 (t, J=4.5 Hz, 4 H), 6.79 - 6.91 (m, 1 H), 7.13 - 7.20(m, 1 H), 7.21 - 7.26 (m, 2 H), 7.36 (ddd, J=7.5, 5.0, 1.1 Hz, 1 H), 7.73(td, J=7.8, 1.8 Hz, 1 H), 8.19 (dt, J=8.0, 1.0 Hz, 1 H), 8.59 (ddd, J=4.8,1.8, 0.8 Hz, 1 H), 10.05 (s, 1 H)。化合物31:方法A；Rt: 1.12分钟，m/z : 340.4 (M+H)+ 精确质量：339.1。
化合物32
将THF (300 mL)缓慢添加至在冰浴中的TiCl4 (1 M在二氯甲烷中；20.3 mL，184.0 mmol)。加入CCl4 (4 mL)。然后在0-5℃的温度下加入2,2,2,4'-四氟苯乙酮(18.9g，98.1 mmol)和丙二酸二乙酯(15.7 g，98.1 mmol)的混合物。用CCl4 (1 mL)洗涤容器。将反应混合物在室温搅拌90分钟。然后在5分钟期间逐滴加入吡啶(30.7 mL)。将反应混合物在室温搅拌90分钟。加入水直到白色沉淀物完全溶解。将混合物用乙醚(250 mL)萃取两次。将有机层分离，经由硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用在庚烷中从0至10%的EtOAc的梯度洗脱。将纯的流分合并并浓缩，得到2-(2,2,2-三氟-1-(4-氟苯基)亚乙基)丙二酸二乙酯，为透明液体(5.35 g)。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) ppm 0.88(t, J=1.0 Hz, 3 H), 1.27 (t, J=7.0 Hz, 3 H), 3.99 (q, J=7.2 Hz, 2 H), 4.33(q, J=7.1 Hz, 2 H), 7.28 - 7.37 (m, 2 H), 7.37 - 7.45 (m, 2 H)。
将2-(2,2,2-三氟-1-(4-氟苯基)亚乙基)丙二酸二乙酯(15.4 mmol)、吡啶-2-甲脒盐酸盐(2.43 g，15.4 mmol)、乙酸钾(2.27 g，23.1 mmol)在DMF (23 mL)中在110℃搅拌并加热2小时。将反应混合物在真空中浓缩。将残留物溶解在水(50 mL)和二氯甲烷(50 mL)中。将有机层经HM-N isolute柱干燥并浓缩。残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用从1至10%甲醇的梯度。将产物流分收集并浓缩。不纯的部分从90/10庚烷/乙酸乙酯混合物结晶。将白色粉末过滤并在50℃的真空干燥过夜，得到化合物32 (2.33 g)。将滤液合并并浓缩，得到油性残留物(2.06 g)，其经由Prep HPLC在(RP Vydac Denali C18- 10μm，200 g，5 cm)进一步纯化。流动相(在水中的0.25% NH4HCO3溶液，CH3CN)，收集所需流分，蒸发，溶解在MeOH中并再度蒸发，得到更多的化合物32 (1.48 g)，为白色粉末。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6)ppm 0.74 (t, J=7.0 Hz, 2 H), 1.14 (t, J=7.2 Hz, 1 H), 3.68 - 3.83 (m, 1 H),4.07 - 4.19 (m, 1 H), 4.57 - 4.65 (m, 1 H), 7.20 - 7.37 (m, 2 H), 7.61 - 7.81(m, 2 H), 8.00 (dd, J=8.8, 5.5 Hz, 1 H), 8.05 - 8.14 (m, 1 H), 8.37 (dt, J=8.0, 1.0 Hz, 1 H), 8.47 (dt, J=7.8, 1.0 Hz, 1 H), 8.68 - 8.78 (m, 1 H), 11.25(s, 1 H), 11.42 (s, 1 H)。
化合物33
将化合物32 (2.29 g，5.48 mmol)溶于磷酰氯(30 mL)中并回流过夜。将反应混合物浓缩并将残留物溶于CH2Cl2 (50 mL)并倒入NaHCO3溶液中。将混合物剧烈搅拌5分钟。有机层经isolute HM-N柱干燥并浓缩。将残留物溶于少量CH2Cl2并进行硅胶柱色谱法，使用从10至100% EtOAc的梯度。将纯的流分收集并浓缩，得到化合物33，其原样用于下一反应。
化合物34
外消旋性化合物34的对映体：化合物34a和化合物34b
将氮气鼓泡通入化合物33 (0.48 g，1.04 mmol)、(吗啉-4-基)甲基三氟硼酸钾(0.34 g，1.56 mmol)、碳酸钾(0.216 g，1.56 mmol)、二噁烷(47 mL)和蒸馏水(9 mL)的混合物。加入双(三叔丁基膦)钯(0) (0.16 g，0.31 mmol)并将反应混合物在140℃的微波中加热30分钟。将反应混合物浓缩，溶于水和CH2Cl2中。将有机层经HM-N柱干燥并浓缩。将残留物经柱色谱法纯化，得到化合物34 (320 mg)，将其在SFC上用于对映体分离。部分残留物(253 mg)经制备型SFC (Chiralcel Diacel OJ 20 x 250 mm)分离对映体。流动相(CO2,MeOH)，收集所需流分，蒸发，溶于MeOH并再度蒸发，得到化合物34a (98.5 mg)和化合物34b(89 mg)。1H NMR (400 MHz, CDCl3-d) ppm 1.00 (t, J=7.0 Hz, 3 H), 2.51 - 2.65 (m,4 H), 3.70 (s, 2 H), 3.81 (t, J=4.5 Hz, 4 H), 3.95 (dddd, J=18.3, 11.1, 7.2,3.6 Hz, 2 H), 6.95 - 7.04 (m, 2 H), 7.42 (ddd, J=7.5, 4.9, 1.1 Hz, 1 H), 7.50(dd, J=8.3, 5.3 Hz, 2 H), 7.79 (td, J=7.7, 1.6 Hz, 1 H), 8.29 (d, J=8.0 Hz, 1H), 8.62 (d, J=4.8 Hz, 1 H), 10.39 (br. s., 1 H).方法E；Rt: 1.26分钟，m/z :493.2 (M+H)+ 精确质量：492.2；SFC: OJ-H 500 mmx 4.6 mm；流速: 3 mL/分钟；流动相：5% MeOH (含0.2 % iPrNH2)保持15.00分钟；柱温度: 30℃ 34a: 2.57分钟；34b: 3.55分钟。
化合物35
在10分钟期间将氮气鼓泡通过化合物33 (145 mg，0.314 mmol)和SnMe4 (112 mg，0.628 mmol)在DMF (2 mL)中的溶液。然后加入双(三叔丁基膦)钯(0) (80.3 mg，0.157mmol)并将反应混合物在140℃在微波照射下搅拌10分钟。将反应混合物浓缩并将所得的残留物溶于CH2Cl2 (25 mL)中，用水洗涤(2x)，经由HM-N isolute柱干燥并浓缩。将残留物溶于二氯甲烷中，过滤并在真空中浓缩至干。将所得的残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用在庚烷中10至50%的EtOAc梯度洗脱。将产物流分收集并浓缩至干。将残留物再次经硅胶柱色谱法纯化，使用CH2Cl2作为洗脱液。将产物流分收集并浓缩。将所得的残留物经Prep HPLC在(RP SunFire Prep C18 OBD-10μm，30x150 mm)纯化。流动相(在水中的0.25% NH4HCO3溶液，CH3CN)，得到化合物35 (36 mg)。方法E；Rt: 1.19分钟，m/z : 408.2 (M+H)+ 精确质量：407.1；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) ppm 1.00 (t, J=7.2 Hz, 3 H), 2.22 (s, 3 H),3.87 - 4.02 (m, 2 H), 7.12 - 7.23 (m, 2 H), 7.53 (dd, J=8.5, 5.5 Hz, 2 H),7.59 - 7.66 (m, 1 H), 7.94 - 8.01 (m, 1 H), 8.13 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 8.65 -8.74 (m, 1 H), 10.10 (s, 1 H)。
化合物36
将5-氟-2,3-二氢-1H-茚-1-酮(20 g，133 mmol)和丙二酸二乙酯(13.5 g，146mmol)溶于无水THF (560 mL)中。在0℃和N2下逐滴加入在无水CH2Cl2 (260 mL)中的TiCl4(29.3 g，266 mmol)。添加后，在0℃和N2下逐滴加入吡啶(56 mL)。将混合物在20℃搅拌过夜。将固体过滤，将滤液在真空中浓缩并加入乙酸乙酯(400 mL)。滤除所得的沉淀物。将滤液用盐水洗涤(2 x 200 mL)并经Na2SO4干燥。在高真空下除去溶剂。将残留物经硅胶色谱法纯化(梯度洗脱液：石油醚：乙酸乙酯：从100:0至10:1)，得到残留物(9.8 g)。将所得的产物经高效液相色谱法进一步纯化(C18, 洗脱液：CH3CN/H2O从15/85至45/55，含0.1% HCl作为缓冲液)。收集纯的流分并将混合物用NaHCO3碱化至pH=8。在真空除去挥发物。将水层用乙酸乙酯萃取(200 mL)。将有机层用盐水洗涤并经由Na2SO4干燥。在真空下除去溶剂，得到化合物36 (5 g)。
化合物37
将化合物36 (7 g，23.9 mmol)、吡啶-2-甲脒盐酸盐(5.7 g)和Na2CO3 (7.6 g，71.8 mmol)在DMF (70 mL)中的混合物在60℃和N2下搅拌过夜。在真空下除去溶剂。将所得的残留物悬浮在二氯甲烷(100 mL)中并滤除沉淀物。将滤液浓缩并经硅胶柱色谱法纯化(梯度洗脱液：石油醚：乙酸乙酯：从100:0至60:40)，得到化合物37 (1.78 g)。方法B；Rt:1.12分钟，m/z : 368.1 (M+H)+ 精确质量：367.1。
化合物38
将在POCl3 (7.9 mL，86 mmol)中的化合物37 (1.58 g，4.3 mmol)在120℃搅拌2小时。将反应混合物浓缩至干。将所得的残留物溶于二氯甲烷(50 mL)中。将有机层用饱和的NaHCO3水溶液(3x 20 mL)和盐水洗涤并经由Na2SO4干燥。在真空下除去溶剂。将所得的残留物经硅胶柱色谱法纯化(梯度洗脱液：石油醚:乙酸乙酯: 从100:0至70:30)，得到化合物38 (1.1 g)。方法B；Rt: 1.19分钟，m/z : 386.1 (M+H)+ 精确质量：385.1。
化合物39
将化合物38 (0.1 g，0.26 mmol)、三氟(吗啉甲基)硼酸钾(0.11 g，0.52 mmol)、Pd(OAc)2 (0.006 g，0.026 mmol)、丁基二-1-金刚烷基膦(0.015 g，0.042 mmol)和Cs2CO3(0.51 g，1.55 mmol)在DME (1.4 mL)和H2O (0.14 mL)中的混合物在140℃的微波照射和N2下搅拌20分钟。加入水(5 mL)和二氯甲烷(5 mL)。将有机层分离并用水洗涤(2 x 5 mL)。将有机层用1N HCl (5 mL)洗涤。将水层用二氯甲烷(2 x 5 mL)洗涤并用NaHCO3碱化至pH=7~8。将混合物用二氯甲烷(15 mL)萃取。将有机层用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。在真空将溶剂移除，得到化合物39 (0.1 g)。方法C；Rt: 3.24分钟，m/z : 451.2 (M+H)+ 精确质量：450.2。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) ppm 9.99 (br. s, 1 H) 8.49 - 8.69 (m, 1 H)8.16 (dt, J=8.0, 1.0 Hz, 1 H) 7.71 (td, J=7.8, 1.8 Hz, 1 H) 7.35 (ddd, J=7.5,5.0, 1.1 Hz, 1 H) 7.04 (dd, J=8.3, 5.5 Hz, 1 H) 6.86 - 6.96 (m, 1 H) 6.73 -6.86 (m, 1 H) 3.88 (q, J=7.3 Hz, 2 H) 3.80 - 3.85 (m, 4 H) 3.81 (d, J=16.6Hz, 1 H) 3.71 (d, J=16.6 Hz, 1 H) 3.16 - 3.27 (m, 1 H) 2.92 - 3.03 (m, 1 H)2.64 - 2.71 (m, 1 H) 2.57 - 2.63 (m, 4 H) 2.28 - 2.38 (m, 1 H) 0.89 (t, J=7.2Hz, 3 H)。
化合物40
将化合物38 (0.2 g，0.52 mmol)、2,4,6-三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三硼烷(borinane) (0.13 g，1.04 mmol)、PEPPSI(TM)-IPr催化剂(0.035 g，0.052 mmol)和K2CO3(0.21 g，1.55 mmol)在无水THF (4 mL)中的混合物在150℃和N2气氛下在微波照射下搅拌5分钟。将混合物过滤。将滤液浓缩至干并经薄层色谱法纯化(洗脱液：石油醚:乙酸乙酯=2:1)。将所得的产物经高效液相色谱法进一步纯化(C18, 洗脱液：CH3CN/H2O从15/85至45/55，含0.1% HCl 作为缓冲液)。收集纯的流分并将混合物蒸发至干，得到化合物40 (HCl 盐)(60 mg)。方法C；Rt: 3.05分钟，m/z : 366.1 (M+H)+ 精确质量：365.2。
化合物41
将POPd (126 mg，0.250 mmol)和碳酸钾(2.08 g，15.0 mmol)添加至2-(1-氯亚乙基)丙二酸二乙酯(1.10 g，5.00 mmol)、2-氯-4-氟苯基硼酸(1.57 g，9.00 mmol)、四氢呋喃(10.0 mL)和水(1.0 mL)在微波试管中用氮气吹洗的搅拌混合物中。将反应混合物用硅隔膜密封并在100℃用微波照射60分钟。将反应共重复五次，将分离的反应容器冷却至室温，将反应混合物合并，用庚烷(600 mL)稀释并用碳酸钠(2 x 100 mL)、水(1 x 50 mL)和盐水(50 mL)洗涤。干燥(MgSO4)后，在真空将溶剂移除。使用硅胶柱色谱法纯化残留物，通过用在庚烷中0至6%的乙酸乙酯梯度洗脱，得到为液体的2-(1-(2-氯-4-氟­苯基)亚乙基)丙二酸二乙酯(860 mg)。将含磁力搅拌棒、吡啶-2-甲脒盐酸盐(0.594 g，3.77 mmol)和N-甲基-2-吡咯烷酮(10 mL)的压力试管在氮气氛下冷却至0℃。在氮气氛下加入叔丁醇钾(0.564 g，5.03 mmol)并将反应混合物在室温搅拌15分钟。加入在N-甲基-2-吡咯烷酮(5mL)中的2-(1-(2-氯-4-氟苯基)亚乙基)丙二酸二乙酯(860 mg，2.51 mmol)并将压力试管在88℃的油浴中加热并搅拌44小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入水(200 mL)中并加入盐酸(1N, 4 mL)。将混合物搅拌5分钟并用二异丙醚(3 x 100 mL)萃取。将合并的有机萃取液干燥(Na2SO4)并在减压下浓缩。将所得的残留物使用硅胶柱色谱法纯化，通过用在庚烷中从30至100%的二氯甲烷梯度洗脱。将所需流分在真空中浓缩，得到4-(2-氯-4-氟苯基)-4-甲基-6-氧代-2-(吡啶-2-基)-1,4,5,6-四氢嘧啶-5-甲酸乙酯(311 mg)。在氮气氛下，将4-(2-氯-4-氟苯基)-4-甲基-6-氧代-2-(吡啶-基)-1,4,5,6-四氢嘧啶-5-甲酸乙酯(311mg，0.798 mmol)和磷酰氯(1.48 mL，16.0 mmol)在110℃搅拌并加热30分钟。冷却后，在真空将反应混合物浓缩至干。将所得的残留物溶于二氯甲烷(50 mL)中，用饱和的碳酸氢钠水溶液(2 x 20 mL)和盐水(20 mL)洗涤。干燥(Na2SO4)后，在真空除去挥发物，得到残留物(260 mg)，其原样用于下一步骤。在微波试管(10 mL)内加入搅拌棒、(吗啉-4-基)甲基三氟硼酸钾(128 mg，0.588 mmol)、上面所得的残留物(260 mg，0.452 mmol)、水(245μl，13.6mmol)和1, 2-二甲氧基乙烷(2.35 mL)并用氮气吹洗10分钟。在氮气氛下加入双(三叔丁基膦)钯(0) (23.1 mg，0.0452 mmol)和碳酸钾(281 mg，2.04 mmol)并将反应混合物在140℃的微波照射下搅拌10分钟。冷却后，将氮气鼓泡通入反应混合物并加入更多的丁基二-1-金刚烷基膦(24.3 mg，0.0678 mmol)和乙酸钯(II)(10.2 mg，0.0452 mmol)。在氮气氛下将反应混合物在140℃的微波照射下搅拌10分钟。将水层用二氯甲烷萃取，将有机层合并并用碳酸钠洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发至干。使用硅胶柱色谱法纯化残留物，通过用在庚烷中5%至50%的乙酸乙酯梯度洗脱，得到化合物41 (73 mg)。方法D；Rt: 1.22分钟，m/z : 473.1 (M+H)+ 精确质量：472.2 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) ppm 0.92 (t, J=7.0 Hz, 3 H), 1.92(s, 3 H), 2.53 - 2.67 (m, 4 H), 3.67 (d, J=16.8 Hz, 1 H), 3.77 - 3.90 (m, 7H), 6.97 (td, J=8.4, 2.8 Hz, 1 H), 7.04 (dd, J=8.8, 2.8 Hz, 1 H), 7.36 (ddd,J=7.5, 5.0, 1.1 Hz, 1 H), 7.61 (dd, J=9.0, 6.3 Hz, 1 H), 7.72 (td, J=7.8, 1.8Hz, 1 H), 8.13 (br. d, J=7.8 Hz, 1 H), 8.61 (br. d, J=4.5 Hz, 1 H), 10.19 (s,1 H)。
化合物42
将POPd (582 mg，1.16 mmol)添加至2-(1-氯亚乙基)丙二酸二乙酯(3.00 g，13.6mmol)、2,4-二氟苯基硼酸(3.22 g，20.4 mmol)、碳酸钾(5.64 g，40.8 mmol)、四氢呋喃(16.0 mL)和水(3.00 mL)在微波试管内用氮气吹洗的搅拌混合物中。将反应混合物密封并在100℃用微波照射1小时。冷却至室温后，将反应混合物用二氯甲烷(150 mL)稀释，用水、饱和的碳酸钠水溶液和水(3 x 40 mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发至干。使用硅胶柱色谱法纯化残留物，用在庚烷中0至15%的乙酸乙酯梯度洗脱，得到为油状物的2-(1-(2,4-二氟苯基)亚乙基)丙二酸二乙酯(1.06 g)。
在氮气氛下，在压力试管内加入磁力搅拌棒、吡啶-2-甲脒盐酸盐(268 mg，1.70mmol)、N,N-二甲基甲酰胺(13.2 mL)、叔丁醇钾(382 mg，3.41 mmol)和2-(1-(2,4-二氟苯基)亚乙基)丙二酸二乙酯(508 mg，1.70 mmol)。将反应混合物密封并在60℃搅拌45小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入冰水(200 mL)中并将所得的乳液用盐酸(1N)中和(pH=7)。将混合物用二氯甲烷萃取。将合并的有机萃取液干燥(Na2SO4)并在减压下浓缩。使用甲苯将N,N-二甲基甲酰胺共同蒸发，得到的黄色油使用在庚烷中的乙酸乙酯从10至40%的梯度的硅胶柱色谱法纯化。将所需流分在真空中浓缩，得到4-(2,4-二氟苯基)-4-甲基-6-氧代-2-(吡啶-2-基)-1,4,5,6-四氢嘧啶-5-甲酸乙酯(203 mg)。在氮气氛下，在试管内加入搅拌棒、4-(2,4-二氟苯基)-4-甲基-6-氧代-2-(吡啶-2-基)-1,4,5,6-四氢嘧啶-5-甲酸乙酯(137 mg，0.367 mmol)和磷酰氯(0.509 mL，5.48 mmol)。将混合物在回流下搅拌并加热30分钟。冷却至室温后，将反应混合物浓缩至干。将所得的残留物溶于二氯甲烷中并用饱和的碳酸氢钠水溶液(3 x 10 mL)洗涤，干燥(isolute HM-N)并蒸发，得到为黄色粉末的6-氯-4-(2,4-二氟­苯基)-4-甲基-2-(吡啶-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸乙酯(154 mg)，其原样用于下一步骤。
在10 mL微波试管内加入搅拌棒、(吗啉-4-基)甲基三氟硼酸钾(381 mg，1.84mmol)、6-氯-4-(2,4-二氟苯基)-4-甲基-2-(吡啶-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸乙酯(154mg，0.354 mmol)、碳酸铯(1.38 g，4.25 mmol)、蒸馏水(300μl)和甲苯(3 mL)。鼓泡通入氮气5分钟，在氮气氛下加入乙酸钯(II)(16.0 mg，0.0708 mmol)和丁基二-1-金刚烷基膦(40.6 mg，0.113 mmol)。在氮气氛下将反应混合物在120℃搅拌18小时。将反应混合物冷却至室温并用二氯甲烷(50 mL)稀释。将混合物用饱和的碳酸钠水溶液(2 x 5 mL)和水(5mL)洗涤。有机层经HM-N柱干燥并浓缩至干，得到棕色粘稠的残留物。将残留物使用硅胶柱色谱法纯化，通过用在二氯甲烷中0至2%的甲醇(7 N氨)的梯度洗脱并再次通过用在二氯甲烷中0至2%的甲醇梯度洗脱，在50℃的真空炉中干燥过夜后得到化合物42 (81 mg)。方法A；Rt: 1.23分钟，m/z : 457.4 (M+H)+ 精确质量：456.2；1H NMR (400 MHz, 氯仿-d): ppm1.00 (t, J=7.2 Hz, 3 H), 1.91 (s, 3 H), 2.54 - 2.65 (m, 4 H), 3.65 (d, J=16.8Hz, 1 H), 3.77 - 3.85 (m, 5 H), 3.92 (m, 2 H), 6.69 (ddd, J=11.7, 9.0, 2.6Hz, 1 H), 6.78-6.86 (m, 1 H), 7.36 (ddd, J=7.5, 4.8, 1.3 Hz, 1 H), 7.44 (td,J=9.0, 6.5 Hz, 1 H), 7.72 (td, J=7.7, 1.6 Hz, 1 H), 8.14 (dt, J=7.8, 1.1 Hz,1 H), 8.60 (ddd, J=4.8, 1.5, 0.8 Hz, 1 H), 10.10 (br. s, 1 H)。
化合物43a
程序C:
将HOAc (3.82 mL，66.74 mmol)、4,4-二甲基-3,4-二氢-2H-萘-1-酮(5 g，28.7mmol)、氰基乙酸乙酯(3.37 mL，31.6 mmol)、苯(19 mL)、β-丙胺酸(0.639 g，7.17 mmol)的混合物在Dean Stark装置内在回流下加热~65小时。将反应混合物缓慢倒入含NaHCO3(12.6 g)的H2O (100 mL)中并搅拌20分钟。将所得的水层用甲苯萃取。将合并的萃取液用盐水洗涤，在MgSO4上干燥，过滤并在真空中蒸发，得到为油状物的化合物43a，其原样使用。
使用程序C中描述的类似条件得到的其它化合物：
化合物43b使用7-氟-3,4-二氢萘-1(2H)-酮作为起始原料。
化合物43c使用6-氟-3,4-二氢萘-1(2H)-酮作为起始原料。
化合物43d使用3,4-二氢萘-1(2H)-酮作为起始原料及17小时反应时间。
化合物43e使用5-氟-2,3-二氢-1H-茚-1-酮作为起始原料。
化合物43f使用2,3-二氢-1H-茚-1-酮作为起始原料。
化合物43g使用苯并二氢吡喃-4-酮作为起始原料及20小时反应时间。
化合物44
将化合物43a (粗混合物，3 g，11.14 mmol)、吡啶-2-甲脒盐酸盐(1.93 g，12.25mmol)、Na2CO3 (1.77 g，16.7 mmol)和DMF (13.6 mL)在压力试管内在75℃的油浴中加热1小时。将所得的反应混合物冷却至室温并在真空中浓缩。将所得的残留物溶于水-CH2Cl2(150 mL/150 mL)中并将水层用CH2Cl2 (2 x 100 mL)萃取。将合并的萃取液用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并在真空中浓缩。将所得的残留物经硅胶柱色谱法色谱分离(等度CH2Cl2)。将所需流分在真空中浓缩，得到化合物44，其原样直接使用。方法A；Rt: 1.09分钟，m/z :345.4 (M+H)+ 精确质量：344.2。
化合物45
程序D:
将化合物43b (9.4 g，36.3 mmol)、吡啶-2-甲脒盐酸盐(6.86 g，43.5 mmol)、KOAc (5.34 g，54.4 mmol)和DMF (87 mL)在压力试管内加热至110℃达1小时。将所得的反应混合物冷却至室温并在真空中浓缩。将残留物溶于水-CH2Cl2 (150 mL-150 mL)中。将水层萃取两次(CH2Cl2, 2 x 100 mL)并将合并的萃取液用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并在真空中蒸发，得到棕色油。将此油经硅胶柱色谱法纯化(梯度洗脱：EtOAc-庚烷1:9至3:7)，得到化合物45 (4.7 g)，其原样使用。方法E；Rt: 0.95分钟，m/z : 335.1 (M+H)+ 精确质量：334.1。
化合物46
根据程序D制备，从化合物43c开始，经硅胶柱色谱法纯化(梯度洗脱: CH2Cl2-MeOH100:0 --> 98:2)。方法A；Rt: 0.99分钟，m/z : 335.3 (M+H)+ 精确质量：334.1。
化合物47
根据程序D制备，从化合物43d开始。方法A；Rt: 0.97分钟，m/z : 317.3 (M+H)+精确质量：316.1。
化合物48
程序E:
将EtOH (30 mL)用HCl (鼓泡通过)饱和90分钟。加入化合物44 (0.5 g，1.45mmol)并将反应混合物在60℃的油浴中搅拌20小时。将所得的反应混合物在真空中浓缩并溶于CH2Cl2 (50 mL)/H2O (50 mL)中。分离各层并将水层用CH2Cl2 (2 x 50 mL)萃取。将合并的萃取液干燥(MgSO4)，过滤并在真空中蒸发，得到为油状物的化合物48 (560 mg)，其原样使用。方法A；Rt: 1.24分钟，m/z : 392.5 (M+H)+ 精确质量：391.2。
化合物49
在压力试管内，将在EtOH (10 mL)中的化合物45 (1 g，2.991 mmol)在冰浴和温和氮气流下冷却。将混合物用浓H2SO4 (3.2 mL，59.8 mmol) 逐滴处理并将小瓶封盖。将所得的反应混合物在40℃的油浴中加热20小时。将所得的反应混合物冷却至室温并加入H2O(20 mL)。在搅拌下分批加入NaHCO3 (10.05 g，119.6 mmol)。将水层萃取(3 x 100 mL)并将合并的萃取液干燥(MgSO4)，过滤并在真空中浓缩。将所得的残留物使用硅胶柱色谱法色谱分离(等度CH2Cl2- MeOH 98:2)。将所需流分在真空中浓缩，得到化合物49，其原样使用。
化合物50
程序F:
将化合物48 (560 mg)用POCl3 (5 mL，53.8 mmol)处理并将其在105-110℃的油浴中搅拌1小时。将所得的反应混合物在真空中浓缩。将残留物用冰水处理，然后用CH2Cl2(3 x 50 mL)萃取。将合并的萃取液用MgSO4干燥并在真空中浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法纯化(等度CH2Cl2)，得到为黄色固体的化合物50 (359 mg)，其原样使用。方法E；Rt: 1.34分钟，m/z : 410.2 (M+H)+ 精确质量：409.2。
类似于方法F的描述制备：
化合物51，从化合物44开始。方法A；Rt: 1.28分钟，m/z : 363.4 (M+H)+ 精确质量：362.1；
化合物52，从化合物45开始。此化合物没有进行柱色谱法而原样使用。方法A；Rt:1.17分钟，m/z : 353.3 (M+H)+ 精确质量：352.1；
化合物53，从化合物49开始，方法D；Rt: 1.29分钟，m/z : 400.0 (M+H)+ 精确质量：399.1；
化合物54，从化合物46开始；
化合物55，从化合物47开始。在120℃而非105℃下搅拌1小时，化合物没有进行硅胶柱色谱法而原样使用。方法A；Rt: 1.17分钟，m/z : 335.3 (M+H)+精确质量：334.1。
化合物56
程序G:
在微波小瓶内加入化合物50 (0.1 g，0.244 mmol)、Cs2CO3 (0.477 g，1.464mmol)、(吗啉-4-基)甲基三氟硼酸钾(0.101 g，0.488 mmol)、水(0.13 mL，7.32 mmol)和DME (1.3 mL，12.2 mmol)。将此混合物用氮气吹洗5分钟。然后加入乙酸钯(II) (0.0055g，0.0244 mmol)和丁基二-1-金刚烷基膦(0.014 g，0.039 mmol)并将反应混合物再次吹洗2分钟。将小瓶封盖并在140℃的微波照射下搅拌30分钟。将所得的反应混合物在真空中浓缩并将残留物溶于H2O - CH2Cl2 (50 mL/50 mL)中并将水层进一步用CH2Cl2 (2 x 50 mL)萃取。将合并的萃取液干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法纯化(梯度洗脱 EtOAc-庚烷10:90 --> 50:50)。将所需流分在真空中浓缩，得到化合物56，为黄色粉末(44.7 mg)。方法A；Rt: 1.34分钟，m/z : 475.3 (M+H)+ 精确质量：474.3；1H NMR (600MHz, 氯仿-d): ppm 0.70 (t, J=7.1 Hz, 3 H), 1.35 (s, 3 H), 1.39 - 1.43 (m, 1H), 1.44 (s, 3 H), 1.90 - 1.99 (m, 1 H), 2.45 - 2.55 (m, 2 H), 2.57 - 2.68(m, 4 H), 3.68 - 3.74 (m, 1 H), 3.71 (d, J=16.5 Hz, 1 H), 3.83 (t, J=4.6 Hz,4 H), 3.85 - 3.91 (m, 1 H), 3.88 (d, J=16.4 Hz, 1 H), 7.05 (ddd, J=7.6, 7.2,1.4 Hz, 1 H), 7.13 (ddd, J=7.9, 7.1, 1.5 Hz, 1 H), 7.17 (dd, J=7.8, 1.5 Hz, 1H), 7.32 (ddd, J=7.5, 4.8, 1.2 Hz, 1 H), 7.35 (dd, J=7.9, 1.4 Hz, 1 H), 7.68(td, J=7.7, 1.7 Hz, 1 H), 8.18 (dt, J=8.0, 1.1 Hz, 1 H), 8.57 (ddd, J=4.8,1.7, 0.9 Hz, 1 H), 10.01 (s, 1 H)。
根据程序G制备：
化合物57，从化合物51开始。方法F；Rt: 6.63分钟，m/z : 428.2 (M+H)+ 精确质量：427.2；
化合物58，从化合物52开始
使用用CH2Cl2-MeOH 100:0 --> 98:2的硅胶柱色谱法纯化，用庚烷/二异丙醚研磨。方法A；Rt: 1.20分钟，m/z : 418.5 (M+H)+ 精确质量：417.2；
化合物59，从化合物53开始；1H NMR (600 MHz, 氯仿-d) ppm 0.83 (t, J=7.1Hz, 3 H), 1.71 - 1.78 (m, 1 H), 2.02 - 2.09 (m, 1 H), 2.23 - 2.30 (m, 1 H),2.30 - 2.36 (m, 1 H), 2.56 - 2.68 (m, 4 H), 2.74 - 2.88 (m, 2 H), 3.74 (d, J=16.8 Hz, 1 H), 3.80 - 3.86 (m, 6 H), 3.90 (d, J=16.8 Hz, 1 H), 6.77 (td, J=8.4, 2.8 Hz, 1 H), 6.89 (dd, J=10.3, 2.7 Hz, 1 H), 7.03 (dd, J=8.4, 5.8 Hz, 1H), 7.34 (ddd, J=7.5, 4.8, 1.2 Hz, 1 H), 7.70 (td, J=7.7, 1.7 Hz, 1 H), 8.16(dt, J=8.0, 1.1 Hz, 1 H), 8.58 (ddd, J=4.8, 1.7, 1.0 Hz, 1 H), 10.09 (s, 1H)；方法A；Rt: 1.38分钟，m/z : 465.2 (M+H)+ 精确质量：464.2；
化合物60，从化合物54开始
使用硅胶柱色谱法纯化，通过用EtOAc-庚烷10:90至50:50梯度洗脱。1H NMR (400MHz, 氯仿-d) ppm 1.93 - 2.29 (m, 4 H), 2.54-2.61 (m, 4 H), 2.83 - 2.95 (m, 2H), 3.52(d, Jab=15.1 Hz, 1 H), 3.56 (d, Jab=15.1 Hz, 1 H), 3.77-3.82 (m, 4H), 6.80 - 6.91 (m, 2 H), 7.24 (dd, J=8.7, 5.9 Hz, 1 H), 7.37 - 7.41 (m, 1H), 7.75 (td, J=7.8, 1.5 Hz, 1 H), 8.20 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 8.59 (d, J=4.8Hz, 1 H), 9.70 (s, 1 H).方法A；Rt: 1.19分钟，m/z : 418.5 (M+H)+ 精确质量：417.2；
外消旋性混合物通过制备型SFC在Chiralpak Diacel AD (30 x 250 mm)上分离成对映体60a和60b。流动相(CO2, iPrOH含0.2% iPrNH2)，得到化合物60a和化合物60b，两者都是黄色粉末。SFC: 柱：AD -H 250 mmx 4.6 mm；流速：3 mL/分钟；流动相：10 % iPrOH(含0.2 % iPrNH2)在CO2中，保持15.00分钟；温度:30℃, Rt: 化合物60a：5.62分钟，60b：8.72分钟；
化合物61，从化合物55开始；使用硅胶柱色谱法纯化，通过用EtOAc-庚烷10:90至50:50梯度洗脱。从二异丙醚-CH3CN中沉淀。
方法A；Rt: 1.17分钟，m/z : 400.5 (M+H)+ 精确质量：399.2。
化合物62
将4-氟-1-茚满酮(10 g，66.6 mmol)、丙二酸二乙酯(11.734 g，73.3 mmol)在四氢呋喃(278 mL)中的溶液在氮气氛下冷却至0℃。逐滴加入四氯化钛(140 mL，140 mmol，1M在二氯甲烷中)，随后加入吡啶(27.8 mL，345 mmol)。将所得的混合物在室温搅拌过夜。过滤后，将滤液用乙酸乙酯(300 mL)稀释。将有机层用盐水洗涤(3 x 200 mL)，干燥(Na2SO4)并蒸发。使用硅胶柱色谱法纯化残留物，用在庚烷中的乙酸乙酯，梯度从0至10%。合并全部所需流分并蒸发至得到体积是~200 mL。加入更多的庚烷并将形成的橙色沉淀物过滤并用庚烷洗涤。在真空将所得的滤液浓缩至干，得到为橙色油的化合物62 (8.81 g)，其放置后固化。
化合物63
在氮气氛下，在圆底烧瓶内加入磁力搅拌棒、吡啶-2-甲脒盐酸盐(9.50 g，60.3mmol)、N,N-二甲基甲酰胺(120 mL)和碳酸钠(12.8 g，121 mmol)。将反应混合物在室温搅拌10分钟。加入化合物62 ( 8.81 g，30.1 mmol)，将反应混合物用橡胶隔膜密封并在70℃加热17小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入冰水(300 mL)中并用二异丙醚(3 x 200mL)萃取。将合并的有机萃取液干燥(Na2SO4)并在减压下浓缩。使用硅胶柱色谱法纯化残留物，使用在庚烷中的乙酸乙酯，梯度从0至100 %。将所需流分在真空中浓缩并使用硅胶柱色谱法纯化残留物，使用在庚烷中的乙酸乙酯30 %。将所需流分在真空中浓缩并使用硅胶柱色谱法纯化残留物，使用二氯甲烷100%，得到化合物63 (430 mg)。
化合物64
在100 mL圆底烧瓶内加入化合物63 (430 mg，1.17 mmol)、甲醇(14.9 mL)和KOtBu (197 mg，1.76 mmol)。将反应混合物搅拌并在80℃加热17小时。将混合物在真空中浓缩并将所得的残留物用水稀释并用二氯甲烷(3 x 100 mL)萃取。将合并的萃取液干燥(Na2SO4)，浓缩并干燥，得到为固体泡沫的化合物64 (300 mg)，其原样被使用。
化合物65
在氮气氛下，在试管内加入搅拌棒、化合物64 (300 mg，0.841 mmol)和磷酰氯(1.17 mL，12.6 mmol)。将混合物在120℃搅拌并加热30分钟。冷却至室温后将反应混合物浓缩至干。将所得的残留物溶于二氯甲烷并用饱和的碳酸氢钠水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)并在真空中蒸发至干，得到为黄棕色泡沫的化合物65 (311 mg)，其原样用于下一步骤。
化合物66
外消旋性化合物66的对映体：化合物66a和化合物66b
在10 mL微波试管内加入搅拌棒、(吗啉-4-基)甲基­三氟硼酸酯内盐(287 mg，1.61 mmol)、化合物65 (300 mg，0.807 mmol)、碳酸铯(1.57 g，4.84 mmol)、水(0.44μl)和1,2-二甲氧基乙烷(4 mL)并鼓泡通入氮气10分钟。在氮气氛下，一起加入乙酸钯(II)(18.3mg，0.0807 mmol)和丁基二-1-金刚烷基膦(46.3 mg，0.129 mmol)并将反应混合物在140℃的微波炉内搅拌。使反应混合物冷却至室温。将水层用二氯甲烷萃取并将有机层合并且用饱和的碳酸钠水溶液(2 x 5 mL)和水(5 mL)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并浓缩至干。使用硅胶柱色谱法纯化残留物，使用在庚烷中的乙酸乙酯，梯度从5至100%，得到化合物66 (250mg)。将化合物66 (200 mg)通过Prep SFC在(Chiralcel Diacel OJ 20 x 250 mm)上进一步纯化。流动相(CO2，含0.2% iPrNH2的甲醇)，收集所需流分，蒸发，溶于甲醇中并再次蒸发，在50℃的真空炉中干燥过夜后，得到化合物66a (70 mg)和化合物66b (80 mg)。方法A；Rt:1.23分钟，m/z : 437.5 (M+H)+ 精确质量：436.2；1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) ppm 2.35(ddd, J=13.1, 9.1, 3.9 Hz, 1 H), 2.56 - 2.68 (m, 5 H), 2.96-3.12 (m, 1 H),3.14 - 3.32 (m, 1 H), 3.42 (s, 3 H), 3.71 (d, J=16.8 Hz, 1 H), 3.79 (d, J=16.8 Hz, 1 H), 3.83 (t, J=4.5 Hz, 4 H), 6.80 - 6.93 (m, 2 H), 7.12 (td, J=7.8, 5.0 Hz, 1 H), 7.34 (ddd, J=7.4, 4.9, 1.0 Hz, 1 H), 7.70 (td, J=7.7, 1.6Hz, 1 H), 8.15 (dt, J=8.0, 1.0 Hz, 1 H), 8.58 (br. d, J=4.3 Hz, 1 H), 10.03(br. s., 1 H)；SFC: 柱：OJ-H 250 mmx 4.6 mm；流速：3 mL/分钟；流动相：5 % EtOH (含0.2 % iPrNH2)在CO2中，保持15.00分钟，温度：30℃, Rt: 化合物66a：5.26分钟，66b：8.34分钟。
化合物67
从化合物43e开始，使用方法D，使用Na2CO3代替KOAc，在70℃加热1小时代替110℃1小时。使用硅胶柱色谱法，用CH2Cl2作为洗脱液进行纯化。
化合物68
使用程序F，从化合物67制备，在100℃加热1.5小时。
化合物69
根据程序G制备。化合物使用硅胶柱色谱法纯化(梯度洗脱:CH2Cl2-MeOH 100:0至98:2)。方法A；Rt: 1.14分钟，m/z : 404.2 (M+H)+ 精确质量：403.2；1 H NMR (400 MHz,氯仿-d) ppm 2.45 (ddd, J=13.2, 8.5, 5.8 Hz, 1 H), 2.50 - 2.67 (m, 5 H), 3.04- 3.22 (m, 2 H), 3.52 (s, 2 H), 3.79 (t, J=4.8 Hz, 4 H), 6.88 (td, J=8.7, 2.3Hz, 1 H), 6.95 (dd, J=8.8, 2.3 Hz, 1 H), 7.10 (dd, J=8.4, 5.1 Hz, 1 H), 7.39(ddd, J=7.5, 4.8, 1.0 Hz, 1 H), 7.75 (td, J=7.8, 1.8 Hz, 1 H), 8.19 (d, J=7.8Hz, 1 H), 8.57 - 8.62 (m, 1 H), 9.67 (br. s., 1 H)。
化合物70
根据程序E从化合物44开始制备，使用MeOH代替EtOH。所得的残留物无需纯化而进一步使用。
根据程序F从化合物70开始制备，在110℃经1小时。方法A；Rt: 1.33分钟，m/z :396.2 (M+H)+ 精确质量：395.1。
化合物72
根据程序G从化合物71开始制备，经硅胶柱色谱法纯化，使用梯度EtOAc-庚烷0:100至50:50洗脱液。方法A；Rt: 1.39分钟，m/z : 461.2 (M+H)+ 精确质量：460.3；1H NMR(400 MHz, 氯仿-d) ppm 1.34 (s, 3 H), 1.40 - 1.47 (m, 1 H), 1.44 (s, 3 H),1.90 - 1.97 (m, 1 H), 2.44 - 2.57(m, 2 H), 2.57 - 2.68 (m, 4 H), 3.29 (s, 3H), 3.55 - 3.98 (d, J=16.6 Hz, 1 H), 3.80 - 3.88 (m, 5 H), 7.03 - 7.19 (m, 3H), 7.29 - 7.39 (m, 2 H), 7.68 (td, J=7.8, 1.8 Hz, 1 H), 8.17 (dt, J=8.0 Hz,1.0 Hz, 1 H), 8.55 - 8.58 (m, 1 H), 10.00 (s, 1 H)。
化合物73
根据程序E从化合物46开始制备，使用MeOH代替EtOH并在60℃搅拌16小时。
化合物74
根据程序F，随后根据程序G，从化合物73开始制备，经硅胶柱色谱法纯化，使用CH2Cl2-MeOH 100:0至98:2梯度洗脱。方法A；Rt: 1.27分钟，m/z : 451.2 (M+H)+ 精确质量：450.2；1 H NMR (400 MHz, 氯仿-d): ppm 1.72 - 1.82 (m, 1 H), 2.03 - 2.10 (m,1 H), 2.25 - 2.38(m, 2 H), 2.59 - 2.67 (m, 4 H), 2.83 - 2.90 (m, 2 H), 3.38(s, 3 H), 3.73 (d, J=16.6 Hz, 1 H), 3.80 - 3.87 (m, 5 H), 6.74 - 6.83 (m, 2H), 7.14-7.19 (m, 1 H), 7.32 - 7.37 (m, 1 H), 7.71 (td, J=7.8, 1.5 Hz, 1 H),8.18 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 8.57-8.61 (m, 1 H), 9.99 (s, 1 H)。
化合物75
从化合物43f开始，根据程序D制备，使用Na2CO3代替KOAc，在75℃加热2小时代替110℃ 1小时。使用硅胶柱色谱法，用CH2Cl2作为洗脱液进行纯化。
化合物76
根据程序F，随后根据程序G，从化合物75开始制备，经硅胶柱色谱法纯化，使用CH2Cl2-MeOH 100:0至98:2梯度洗脱。方法A；Rt: 1.11分钟，m/z : 386.2 (M+H)+ 精确质量：385.2；1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) ppm 2.37 - 2.49 (m, 1 H), 2.50 - 2.61 (m, 5H), 3.02 - 3.25 (m, 2 H), 3.52 (s, 2 H), 3.79 (t, J=4.8 Hz, 4 H), 7.12 - 7.34(m, 4 H), 7.38 (ddd, J=7.5, 4.8, 1.0 Hz, 1 H), 7.74 (td, J=7.8, 1.8 Hz, 1 H),8.20 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 8.59 (d, J=4.8 Hz, 1 H), 9.64 (br. s., 1 H)。
化合物77
将化合物43c (1000 mg，3.86 mmol)、3,5-二氟-2-吡啶甲脒(727 mg，4.63 mmol)和1,4-二噁烷(30 mL)在压力试管内在40℃加热17小时。使反应混合物冷却至室温并在真空中浓缩。将所得的残留物经硅胶柱色谱法色谱分离(梯度乙酸乙酯-庚烷1:9至10:0)，得到为白色固体的化合物77 (670 mg)，其原样用在下一反应。方法A；Rt: 0.98分钟，m/z :371.1 (M+H)+ 精确质量：370.1。
化合物78
在压力试管内加入甲醇(25 mL)。将混合物在冰-水浴中冷却。然后，鼓泡通入HCl-气体30分钟，同时保持冷却。加入化合物77 (670 mg)和水(蒸馏的，78μl，4.3 mmol)，将压力试管密封并在保持冷却下搅拌30分钟。将反应混合物在40℃的油浴中搅拌过周末。将反应混合物在真空中浓缩，溶于CH2Cl2-水(50 mL/50 mL)中。将水层再萃取两次(2 x 50 mL)。将合并的萃取液用MgSO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到不纯的为棕色油的化合物78，其原样用于下一步骤。
化合物79
将化合物78 (693 mg)溶于磷酰氯(5 mL，53.8 mmol)并将此混合物在110℃的油浴中回流1小时。将深棕色反应混合物在真空中浓缩，用冰-水(50 mL)处理并将所得的混合物搅拌15分钟。将所得的水层用CH2Cl2 (3 x 50 mL)萃取。将合并的萃取液用MgSO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将深棕色残留物经硅胶柱色谱法色谱分离(等度CH2Cl2)，得到化合物79(180 mg)，为黄色固体。方法A；Rt: 1.17分钟，m/z : 422.1 (M+H)+ 精确质量：421.1。
化合物80
化合物81
将化合物79 (0.18 g)溶于微波小瓶内的DMF (2.6 mL)中并将其用氮气吹洗10分钟。然后加入四甲基锡(0.084 mL，0.61 mmol)，随后加入双(三叔丁基膦)钯(0.021 g，0.041 mmol)，将小瓶用氮气吹洗并封盖。将反应混合物在140℃的微波照射下加热10分钟。将反应混合物在真空中浓缩并与甲苯(2 x 5 mL)共同蒸发。将所得的残留物溶于水-CH2Cl2(30 mL-30 mL)中并将水层用CH2Cl2 (2 x 30 mL)萃取。将合并的萃取液用Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将所得的粗物质经制备型HPLC在(RP SunFire Prep C18 OBD-10μm，30x150 mm)上纯化。流动相(在水中的0.25% NH4HCO3溶液，CH3CN)，得到化合物80 (69 mg)和化合物81 (4.6 mg)。化合物80:方法A；Rt: 1.16分钟，m/z : 402.1 (M+H)+ 精确质量：401.1；1H NMR (600 MHz, 氯仿-d): 70/30互变异构性混合物(两者都得到描述): ppm1.70 - 1.78 (m, 1 H), 1.80 - 1.86 (m, 2 H), 2.06 - 2.14 (m, 1 H), 2.34 (s, 7H), 2.39 (s, 3 H), 2.76 - 2.81 (m, 2 H), 2.81 - 2.88 (m, 2 H), 3.38 (s, 3 H),3.41 (s, 3 H), 6.75 - 6.81 (m, 3 H), 6.87 (td, J=8.5, 2.7 Hz, 1 H), 7.19 -7.23 (m, 1 H), 7.24 (ddd, J=10.0, 8.0, 2.3 Hz, 1 H), 7.32 (ddd, J=10.3, 8.0,2.3 Hz, 1 H), 7.39 (s, 1 H), 7.55 (dd, J=8.7, 5.9 Hz, 1 H), 7.89 (s, 1 H),8.24 (d, J=2.2 Hz, 1 H), 8.27 (d, J=2.2 Hz, 1 H)；化合物81：方法A；Rt: 1.27分钟，m/z : 398.2 (M+H)+ 精确质量：397.2。
化合物82
根据程序D制备，在70℃加热3小时，使用碳酸氢钠(6当量)代替KOAc，从化合物43g开始，经硅胶柱色谱法纯化(梯度洗脱: CH2Cl2-MeOH 100:0 --> 98:2)。方法A；Rt: 0.86分钟，m/z : 319.1 (M+H)+ 精确质量：318.1。
化合物83
在压力试管内加入甲醇(30 mL)并在冰-水浴中冷却。然后鼓泡通入HCl-气体40分钟，同时保持冷却。将化合物82 (1 g)添加至混合物中，将试管密封并将反应混合物在冰-水浴中搅拌40分钟。然后，将反应混合物在40℃的油浴中搅拌过夜。使反应混合物冷却至室温并在真空中浓缩。将残留物溶于H2O-CH2Cl2 (50 mL-50 mL)中并分离各层。将水层用CH2Cl2 (2 x 100 mL)萃取。将合并的萃取液干燥(MgSO4)，过滤并在真空中浓缩，得到不纯的为淡棕色油的化合物83 (890 mg)，其原样用于下一反应。
化合物84
根据程序F制备，从化合物83开始。方法A；Rt: 1.12分钟，m/z : 370.1 (M+H)+ 精确质量：369.1。
化合物85
将化合物84 (220 mg)溶于微波小瓶内的N,N-二甲基甲酰胺(3.4 mL)中并用氮气吹洗10分钟。然后加入四甲基锡(111μl，0.8 mmol)，随后加入双(三叔丁基膦)钯(82 mg，0.16 mmol)，将此小瓶用氮气吹洗并封盖。将反应混合物在140℃的微波照射下加热10分钟。将反应混合物在真空中浓缩并用甲苯(2 x 5 mL)共同蒸发。然后将其溶于H2O-CH2Cl2(30 mL-30 mL)中并将水层再用CH2Cl2萃取两次(2 x 30 mL)。将合并的萃取液用Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法色谱分离(梯度CH2Cl2-甲醇100:0至98:2)，浓缩含化合物的流分并再次经硅胶柱色谱法纯化(梯度乙酸乙酯-庚烷0:100 -- 15:85)，将含化合物的部分浓缩并将所得的残留物经制备型HPLC在(RP SunFire Prep C18OBD-10μm，30x150 mm)上纯化。流动相(在水中的0.25% NH4HCO3溶液，CH3CN)。将所得的残留物与甲醇(2 x 15 mL)共同蒸发并在真空干燥，得到化合物85 (5 mg)，为黄色粉末。方法E；Rt: 1.05分钟，m/z : 350.2 (M+H)+ 精确质量：349.1。
化合物86
根据程序G制备，从化合物84开始，经硅胶柱色谱法纯化(梯度CH2Cl2-甲醇100:0至98:2)。将所需流分在真空中浓缩并将所得的粉末在真空中干燥。方法A；Rt: 1.18分钟，m/z: 435.2 (M+H)+ 精确质量：434.2；1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.97 (dt, J=13.5,2.5 Hz, 1 H), 2.50 - 2.68 (m, 4 H), 2.73 (ddd, J=13.5, 12.5, 4.0 Hz, 1 H),3.37 (s, 3 H), 3.73 (d, J=16.8 Hz, 1 H), 3.78 - 3.93 (m, 5 H), 4.24 (ddd, J=10.5, 4.0, 2.5 Hz, 1 H), 4.76 (ddd, J=12.5, 10.5, 2.5 Hz, 1 H), 6.76 - 6.91(m, 2 H), 7.08 (ddd, J=8.3, 7.3, 1.5 Hz, 1 H), 7.15 (dd, J=7.7, 1.6 Hz, 1 H),7.35 (ddd, J=7.5, 4.8, 1.0 Hz, 1 H), 7.71 (td, J=7.8, 1.8 Hz, 1 H), 8.19 (m,J=8.0 Hz, 1 H), 8.58 (m, J=4.5 Hz, 1 H), 10.10 (s, 1 H)。
化合物87
在压力试管内加入甲醇并将其在冰-水浴中冷却。然后鼓泡通入HCl气体30分钟，同时持续冷却。然后加入化合物75 (1 g，3.31 mmol)，将压力试管密封并在持续冷却下搅拌30分钟。然后将反应混合物在40℃的油浴中搅拌7小时。加入水(0.15 mL)并将反应混合物在40℃油浴中搅拌17小时。将反应混合物冷却至室温并在真空中浓缩。将残留物溶于CH2Cl2-H2O (50 mL-50 mL)中。分离各层并萃取水层(CH2Cl2- 2 x 100 mL)。将合并的萃取液经MgSO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到为棕色油的化合物87 (750 mg)，其原样用于下一反应。方法A；Rt: 0.99及1.01分钟，m/z : 336.2 (M+H)+ 精确质量：335.1。
化合物88
将化合物87 (0.75 g)溶于磷酰氯(5 mL，53.81 mmol)并将此混合物在110℃的油浴中回流1小时。将深棕色反应混合物在真空中浓缩并用冰-水(100 mL)处理。将所得的水层用CH2Cl2 (3 x 50 mL)萃取。将合并的萃取液用MgSO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将深棕色残留物经硅胶柱色谱法色谱分离(等度CH2Cl2)，得到为深黄色油的化合物88 (460 mg)，其原样用于下一反应。方法A；Rt: 1.15分钟，m/z : 354.1 (M+H)+ 精确质量：353.1。
化合物89
在微波小瓶内加入化合物88 (0.3 g，0.81 mmol)、碳酸铯(1.57 g，4.83 mmol)、(吗啉-4-基)甲基三氟硼酸钾(0.33 g，1.61 mmol)、水(蒸馏，0.44 mL)和1,2-二甲氧基乙烷(4.2 mL)。将此混合物用氮气吹洗5分钟。然后加入乙酸钯(II)(0.018 g，0.081 mmol)和丁基二-1-金刚烷基膦(0.046 g，0.13 mmol)并将反应混合物再次吹洗2分钟。将小瓶封盖并在140℃的微波照射下加热30分钟。将反应混合物冷却至室温并溶于CH2Cl2-H2O (50 mL-50 mL)中。分离各层并萃取水层两次(CH2Cl2 2 x 100 mL)。将合并的萃取液干燥(MgSO4)，过滤并在真空中浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法色谱分离(梯度CH2Cl2-甲醇100:0至98:2)。将所需流分在真空中浓缩并在真空进一步干燥，得到化合物89 (230 mg)，为黄色粉末。方法A；Rt: 1.20分钟，m/z : 419.2 (M+H)+ 精确质量：418.2；1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δppm 2.33 (ddd, J=13.2, 9.0, 4.0 Hz, 1 H), 2.56 - 2.85 (m, 5 H), 3.01 (ddd, J=15.8, 9.5, 4.0 Hz, 1 H), 3.24 (ddd, J=15.8, 9.0, 7.0 Hz, 1 H), 3.40 (s, 3 H),3.71 (d, J=16.6 Hz, 1 H), 3.78 (d, J=16.6 Hz, 1 H), 3.80-3.86 (m, 4 H), 7.05- 7.20 (m, 3 H), 7.21 - 7.25 (m, 1 H), 7.34 (ddd, J=7.5, 5.0, 1.1 Hz, 1 H),7.70 (td, J=7.7, 1.8 Hz, 1 H), 8.17 (dt, J=8.0, 1.0 Hz, 1 H), 8.59 (m, 1 H),9.97 (bs, 1 H)。
化合物90
将化合物88 (160 mg，0.43 mmol)溶于微波小瓶内的N,N-二甲基甲酰胺(2.8 mL)中并将其用氮气吹洗10分钟。然后加入四甲基锡(89.3μl，0.64 mmol)，随后加入双(三叔丁基膦)钯(0.066 g，0.13 mmol)，将小瓶用氮气吹洗并封盖。将反应混合物在140℃的微波照射下加热10分钟。将反应混合物在真空中浓缩并与甲苯(2 x 5 mL)共同蒸发。将混合物溶于水-CH2Cl2 (30 mL-30 mL)中并将水层用CH2Cl2 (2 x 30 mL)萃取另外两次。将合并的萃取液用Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法色谱分离(梯度CH2Cl2-甲醇100:0至98:2)。将含化合物的流分浓缩并经硅胶柱色谱法纯化(梯度:乙酸乙酯- 庚烷0:100至15:85)。将相关的流分浓缩并经制备型HPLC再纯化(RP SunFire Prep C18 OBD-10μm，30x150 mm)。流动相(在水中的0.25% NH4HCO3溶液，甲醇)并进一步经制备型HPLC在(RP SunFire Prep C18 OBD-10μm，30x150 mm)上纯化。流动相(在水中的0.1%TFA溶液+ 5%CH3CN, CH3CN)。将所得的流分溶于CH2Cl2 (15 mL)，然后用氢氧化钠(1M水溶液/ 10 mL)处理。分离各层并用CH2Cl2 (2 X 15 mL)萃取水层两次。将合并的萃取液干燥，过滤并在真空中浓缩。将所得的残留物经硅胶柱色谱法色谱分离(梯度CH2Cl2-甲醇100:0至98:2)，得到化合物90 (3.2 mg)，为纯黄色油。方法A；Rt: 1.14分钟，m/z : 334.1 (M+H)+ 精确质量：333.2。
化合物91
在氮气氛下，在试管内加入搅拌棒、2-(3,3-二甲基-2,3-二氢-1H-茚-1-亚基)丙二酸二甲酯(2.50 g，9.11 mmol，如类似于对化合物62的示例，从3,3-二甲基茚满-1-酮及丙二酸二甲酯制备。将经溶剂处理和蒸发后形成的晶体过滤并用石油醚洗涤)、3,5-二氟吡啶-2-甲脒(1.72 g，10.9 mmol)和1,4-二噁烷(100 mL)，并将反应混合物在50℃加热24小时并在60℃加热5小时。将反应混合物蒸发至干。使用硅胶柱色谱法纯化残留物(在庚烷中的二氯甲烷，梯度从20至100%)，得到化合物91 (380 mg)。方法A；Rt: 1.11及1.14分钟，m/z: 400.2 (M+H)+ 精确质量：399.1。
化合物92
在试管内加入搅拌棒、化合物91 (380 mg)和磷酰氯(1.3 mL，14.3 mmol)并将试管用特氟隆盖密封。将反应混合物在120℃加热30分钟并在40℃使用氮气流浓缩至干。将残留物溶于二氯甲烷中并用饱和的碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发至干，得到为黄棕色粘稠油的化合物92 (270 mg)，其原样用于下一步骤。方法A；Rt: 1.24. m/z :418.1 (M+H)+ 精确质量：417.1。
化合物93
在10 mL微波试管内加入搅拌棒、(吗啉-4-基)甲基三氟硼酸酯内盐(230 mg，1.29mmol)、化合物92 (270 mg)、碳酸铯(1.26 g，3.88 mmol)、水(350μl，19.4 mmol)和1,2-二甲氧基乙烷(3.4 mL，32.3 mmol)并鼓泡通入氮气10分钟。在氮气氛下，一起加入乙酸钯(II) (14.6 mg，0.065 mmol)和丁基二-1-金刚烷基膦(37.1 mg，0.103 mmol)并将反应混合物在140℃的微波炉中搅拌10分钟。将反应混合物冷却至室温。将水层用二氯甲烷(2 x20 mL)萃取，合并有机层并用饱和的碳酸钠水溶液(2 x 5 mL)和水(5 mL)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并浓缩至干。使用硅胶柱色谱法纯化残留物，使用在庚烷中的乙酸乙酯，梯度从5至50%，浓缩至干并在真空干燥后得到化合物93 (169 mg)，为灰白色粉末。方法A；Rt:1.36 m/z : 483.2 (M+H)+ 精确质量：482.2。
化合物94
将2-(6-氟-2,3-二氢-1H-茚-1-亚基)丙二酸二甲酯(2 g，7.57 mmol；类似于如对化合物62的示例，从6-氟-1-茚满酮和丙二酸二甲酯制备)、吡啶-2-甲脒盐酸盐(1.63 g，10.3 mmol)和Na2CO3 (2.17 g，20.5 mmol)在DMF (20 mL)中的混合物在60℃和氮气氛下搅拌过夜。在真空下除去溶剂。将残留物悬浮在二氯甲烷(100 mL)中并滤除形成的沉淀物。将在真空中浓缩后的滤液使用硅胶柱色谱法纯化两次(梯度：在庚烷中的乙酸乙酯从0至40%，随后在CH2Cl2中的甲醇从0至2 %)，得到化合物94 (254 mg)，其原样用于下一步骤。方法A；Rt: 1.00 m/z : 354.1 (M+H)+ 精确质量：353.1。
化合物95
在氮气氛下，在试管内加入搅拌棒、化合物94 (254 mg)和磷酰氯(0.952 mL，10.2mmol)并用特氟隆盖密封。将混合物在120℃搅拌并加热30分钟。达到室温后，将反应混合物在氮气流下浓缩至干。将所得的残留物溶于二氯甲烷中并用饱和的碳酸氢钠水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)并在真空中蒸发至干，得到为深棕色粘稠油的化合物95 (230 mg)，其原样用于下一步骤。方法A；Rt: 1.14 m/z : 372.1 (M+H)+ 精确质量：371.1。
化合物96
在10 mL微波试管内加入搅拌棒、(吗啉-4-基)甲基三氟硼酸酯内盐(220 mg，1.24mmol)、化合物95 (230 mg，0.619 mmol)、碳酸铯(1209 mg，3.71 mmol)、水(335μl，18.6mmol)和1,2-二甲氧基乙烷(3.2 mL)并鼓泡通入氮气10分钟。在氮气氛下，一起加入乙酸钯(II) (14.0 mg，0.062 mmol)和丁基二-1-金刚烷基膦(35.5 mg，0.099 mmol)并将反应混合物在140℃的微波炉中搅拌10分钟。使反应混合物达到室温。将水层用二氯甲烷(2 x 20mL)萃取，合并有机层并用饱和的碳酸钠水溶液(2 x 5 mL)和水(5 mL)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并浓缩至干。使用硅胶柱色谱法纯化残留物，使用在庚烷中的乙酸乙酯，梯度从5至50%，得到为粉末的化合物96 (216 mg)，其在真空干燥。方法A；Rt: 1.21 m/z : 437.2 (M+H)+ 精确质量：436.2.1H NMR (400 MHz, 氯仿-d)δppm 2.34 (ddd, J=13.1, 9.1, 4.1Hz, 1 H), 2.58 - 2.68 (m, 5 H), 2.90 - 3.01 (m, 1 H), 3.12-3.22 (m, 1 H),3.45 (s, 3 H), 3.71 (d, J=16.8 Hz, 1 H), 3.80 (d, J=16.8 Hz, 1 H), 3.82 -3.87 (m, 4 H), 6.79 (dd, J=8.9, 2.4 Hz, 1 H), 6.87 (td, J=8.7, 2.5 Hz, 1 H),7.16 (dd, J=8.3, 5.0 Hz, 1 H), 7.36 (ddd, J=7.5, 4.8, 1.3 Hz, 1 H), 7.71 (td,J=7.7, 1.6 Hz, 1 H), 8.16 (dt, J=8.0, 1.0 Hz, 1 H), 8.59 (br. d, J=4.3 Hz, 1H), 10.04 (br. s., 1 H)。将化合物96 经制备型SFC在(Chiralcel Diacel OD 20 x 250mm)上纯化。流动相(CO2,含0.2% iPrNH2的甲醇)，收集所需流分，蒸发，溶于甲醇中并再度蒸发，得到化合物96a和96b，为淡黄色粉末。SFC：OD -H 250 mmx 4.6 mm；流速：3 mL/分钟；流动相：5% MeOH (含0.2 % iPrNH2)保持17.00分钟，自5-50# MeOH (含0.2% iPrNH2)在10%比例，并保持3.10分钟在50%；温度：30℃。Rt (96a): 10.8分钟；Rt (96b):11.9分钟。
化合物97
将4,5-二氟-1-茚满酮(15 g，89.2 mmol)和丙二酸二甲酯(11.2 mL，98.1 mmol)在四氢呋喃(500 mL)中的溶液在氮气氛下冷却至0℃并逐滴加入在二氯甲烷(50 mL)中的四氯化钛(20.6 mL，187 mmol)。最后加入吡啶(37.4 mL，462 mmol)。将所得的混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物经硅藻土过滤并将乙酸乙酯(500 mL)加入滤液中。将有机层用盐水(3 x 200 mL)洗涤。将合并的水层用1N盐酸(100 mL)酸化并用乙酸乙酯(200 mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤(50 mL)，干燥(Na2SO4)并蒸发。使用硅胶柱色谱法纯化残留物(在庚烷中的二氯甲烷从0至50 %的梯度)。将所需流分合并并浓缩至体积为200 mL。将形成的固体过滤并用庚烷洗涤。将滤液蒸发至干，得到化合物97 (3.74 g)，为棕色粉末。方法A；Rt: 1.10 m/z : 300.1 (M+NH4)+ 精确质量：282.1。
化合物98
在氮气氛下，向试管内加入搅拌棒、化合物97 (3.00 g，10.6 mmol)、3,5-二氟-2-吡啶甲脒(3.34 g，21.3 mmol)和1,4-二噁烷(30 mL)。将反应混合物在50℃加热4小时并使其达到室温过夜。将反应混合物浓缩至干并使用硅胶柱色谱法纯化残留物(在庚烷中的乙酸乙酯从10至50%的梯度)，得到化合物98 (500 mg)，为棕色粉末。方法A；Rt: 1.06 (两种异构体) m/z : 408.1 (M+H)+ 精确质量：407.1。
化合物99
在氮气氛下，在试管内加入搅拌棒、化合物98 (500 mg)和磷酰氯(1.0 mL，11mmol)。将混合物在120℃搅拌并加热30分钟。冷却至室温后，将反应混合物在氮气流下浓缩至干。将所得的残留物溶于二氯甲烷中并用饱和的碳酸氢钠水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)并在真空中蒸发至干。将所得的残留物使用硅胶柱色谱法纯化(等度二氯甲烷)，得到化合物99(130 mg)，为棕色粉末。方法A；Rt: 1.12 m/z : 426.1 (M+H)+ 精确质量：425.1。
化合物100
将化合物99 (100 mg)溶于微波小瓶内的1,2-二甲氧基乙烷(1.60 mL，15.4mmol)中并将溶液经由鼓泡通入氮气10分钟而除氧。然后，加入四甲基锡(0.039 mL，0.28mmol)，随后加入双(三叔丁基膦)钯(0) (36.0 mg，0.071 mmol)，将小瓶用氮气吹洗并封盖。将反应混合物在140℃的微波照射下加热10分钟并使其达到室温。鼓泡通入氮气10分钟。然后加入更多的四甲基锡(0.039 mL，0.282 mmol)，随后加入双(三叔丁基膦)钯(0)(36.0 mg，0.071 mmol)，将小瓶用氮气吹洗并封盖。将反应混合物在140℃的微波照射下加热20分钟。将反应混合物浓缩至干。残留物经制备型HPLC纯化(RP SunFire PreperativeC18 OBD-10μm，30x150 mm)。流动相(在水中的0.1 % TFA溶液+ 5 %乙腈，乙腈)。将所需流分合并并浓缩至干。将残留物用饱和的碳酸氢钠水溶液中和并用二氯甲烷(2 x 20 mL)萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)并在真空中浓缩至干。将所得的残留物与甲醇(2 x 5 mL)共同蒸发并在真空中干燥，得到化合物100 (21 mg)，为黄色粉末。方法A；Rt: 1.12 m/z :406.1 (M+H)+ 精确质量：405.1. 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d): ppm 2.25 - 2.46 (m, 4H), 2.61 - 2.82 (m, 1 H), 2.96 - 3.10 (m, 1 H), 3.12 - 3.30 (m, 1 H), 3.47(s, 3 H), 6.71 - 7.12 (m, 2 H), 7.17 - 7.39 (m, 1 H), 7.98 (br. s, 1 H), 8.27(d, J=2.0 Hz, 1 H)。
化合物101
在10 mL微波试管内加入搅拌棒、(吗啉-4-基)甲基三氟硼酸酯内盐(22.6 mg，0.127 mmol)、化合物99 (30 mg，0.0705 mmol)、水(34.3μl，1.90 mmol)和1,2-二甲氧基乙烷(1.5 mL)。鼓泡通入氮气10分钟。在氮气氛下，一起加入碳酸铯(124 mg，0.38 mmol)、乙酸钯(II) (1.60 mg，0.00705 mmol)和丁基二-1-金刚烷基膦(4.04 mg，0.0113 mmol)并将反应混合物在140℃的微波炉中搅拌10分钟。将反应混合物冷却至室温。将水层用二氯甲烷(10 mL)萃取，合并有机层并用饱和的碳酸钠水溶液(2 x 5 mL)和盐水(5 mL)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并浓缩至干。使用硅胶柱色谱法纯化残留物(在庚烷中的乙酸乙酯，梯度从5至50%)，浓缩并在真空干燥后得到化合物101 (3.2 mg)，为黄色粉末。方法A；Rt: 1.21 m/z: 491.1 (M+H)+ 精确质量：490.2。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) ppm 2.40 (ddd, J=13.0,9.0, 3.8 Hz, 1 H), 2.55 - 2.71 (m, 5 H), 2.98 - 3.10 (m, 1 H), 3.14 - 3.28(m, 1 H), 3.45 (s, 3 H), 3.67 (d, J=16.8 Hz, 1 H), 3.73 - 3.84 (m, 5 H), 6.79(dd, J=8.3, 4.0 Hz, 1 H), 6.93 (dt, J=10.4, 7.7 Hz, 1 H), 7.20 - 7.33 (m, 1H), 8.34 (d, J=2.0 Hz, 1 H), 9.61 (br. s, 1 H)。
化合物102
向在DMF (100 mL)中的2-溴酚(8.6 g，49.7 mmol)中，在室温下加入K2CO3 (34.4g，248 mmol)。经5分钟后，加入2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(12.1 g，59.65 mmol)。将混合物在室温搅拌过夜。其次加入饱和的NH4Cl (200 mL)并将混合物用CH2Cl2 (3x)萃取。将合并的有机层用MgSO4干燥，过滤并在真空下除去溶剂。将所得的残留物经硅胶柱色谱法纯化，用庚烷/EtOAc梯度洗脱，得到2-(2-溴苯氧基)-2,2-二氟乙酸乙酯(7.78 g)。1H NMR (400MHz, DMSO-d6 ) δ ppm 1.27 (t, J=7.2 Hz, 3 H), 4.40 (q, J=7.1 Hz, 2 H), 7.30(td, J=7.7, 1.8 Hz, 1 H), 7.36 - 7.45 (m, 1 H), 7.45 - 7.54 (m, 1 H), 7.78(dd, J=8.0, 1.5 Hz, 1 H).方法A；Rt: 1.19。
向在THF/H2O (50 mL/50 mL)中的2-(2-溴苯氧基)-2,2-二氟乙酸酯(3 g，10.2mmol)中加入LiOH (320 mg，13.4 mmol)，将混合物在40℃搅拌。经2.5小时后，使混合物冷却至室温，用1 N HCl 酸化并在真空除去THF。将水层用CH2Cl2萃取，将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并在真空中除去溶剂除，得到2-(2-溴苯氧基)-2,2-二氟乙酸，为无色油(3011 mg，根据1H-NMR含14 w% THF)。方法A；Rt: 1.21 m/z : 266.9 (M-H)- 精确质量：267.9。在-10℃和氩气下，向在无水THF (150 mL)中的2-(2-溴苯氧基)-2,2-二氟乙酸(6.04 g)，如上所述制备))中，逐滴加入BuLi (2.5M在己烷中；24.2 mL；60.4 mmol)。将混合物搅拌10分钟，然后倒入1N HCl (200 mL)中，用CH2Cl2 (3 x)萃取，用Na2SO4干燥并过滤。除去溶剂(40℃, 直到100毫巴)，得到5.5 g含化合物102的油性残留物，其原样用于下一反应。方法D；Rt: 0.99；19 F NMR (377 MHz, DMSO-d6 ) ppm -92.77. 1H NMR (400 MHz,DMSO-d6) ppm 7.43 (td, J=7.7, 0.7 Hz, 1 H), 7.50 (dt, J=8.5, 0.7 Hz, 1 H),7.91 (ddd, J=7.7, 1.5, 0.7 Hz, 1 H), 7.98 (ddd, J=8.5, 7.5, 1.5 Hz, 1 H)。
化合物103
将氯化钛(IV)逐滴添加至2,2-二氟茚满-1-酮(化合物102；3.18 g)和丙二酸二甲酯(2.5 mL，21.8 mmol)在THF (60 mL)中并在冰浴(0℃)冷却的溶液中。然后逐滴加入吡啶(5.8 mL，73 mmol)并将反应混合物在0℃搅拌2.5小时，然后在室温搅拌64小时。将水(100mL)添加至反应混合物中，接着用CH2Cl2 (2 x 300 mL)萃取。将有机层合并并干燥(Na2SO4)。过滤并浓缩后，将残留物经硅胶柱色谱法纯化(在庚烷中的乙酸乙酯从0至10%)，得到化合物103 (2.6 g)，为无色液体。方法A；Rt: 1.10 m/z : 302.1 (M+NH4)+ 精确质量：284.1。
化合物104
在试管内加入搅拌棒、化合物103 (1.00 g，3.52 mmol)、3,5-二氟-2-吡啶甲脒(693 mg，3.56 mmol)和1,4-二噁烷(5 mL)，并用特氟隆盖密封。将反应混合物在室温搅拌12 小时并在40℃加热1.5小时。加入更多的3,5-二氟-2-吡啶甲脒(315 mg，1.62 mmol)并将应混合物在40℃加热4小时并使其达到室温。将反应混合物蒸发，得到含化合物104的淡橙色油性残留物，其原样用于下一反应。方法A；Rt: 1.02 m/z : 410.1 (M+H)+ 精确质量：409.1。
化合物105
在试管内加入搅拌棒、化合物104 (1.32 g，3.24 mmol)、磷酰氯(4.56 mL，49.1mmol)，并用特氟隆盖密封。将反应混合物在90℃搅拌4小时。将反应混合物蒸发至干并与甲苯共同蒸发。将棕黑色残留物溶于CH2Cl2并与饱和的碳酸氢钠水溶液在室温搅拌30分钟。将水相用二氯甲烷萃取并将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤后蒸发至干。将黑色焦油状残留物使用硅胶柱色谱法纯化(二氯甲烷)。将全部所需流分合并并蒸发至干，得到化合物105(580 mg)，为黄色粉末。方法A；Rt: 1.11 m/z : 428.0 (M+H)+ 精确质量：427.0。
化合物106
将化合物105 (580 mg，1.36 mmol)在微波小瓶内的DMF (5 mL)中的溶液搅拌并鼓泡通入氮气10分钟。然后加入四甲基锡(0.28 mL，2.0 mmol)，随后加入双(三叔丁基膦)钯(0) (69.3 mg，0.136 mmol)并将小瓶用氮气吹洗并封盖。将反应混合物在140℃的微波照射下加热30分钟并使其达到室温。将反应混合物过滤并将滤液蒸发至干。将残留物与甲醇(40 mL)混合，过滤并将滤液蒸发至干，得到橙色粘稠残留物(635 mg)。将540 mg残留物使用硅胶柱色谱法纯化(在庚烷中的乙酸乙酯从5至30%的梯度)。将所需流分合并并蒸发保持100 mL溶剂。将固体过滤并用庚烷洗涤，在50℃的真空炉中干燥2小时，得到化合物106(32 mg)，为淡黄色粉末。方法E；Rt: 1.00 m/z : 408.1 (M+H)+ 精确质量：407.1。将滤液蒸发至干，得到黄色粉末，其经制备型SFC在Chiralcel Diacel OJ 20 x 250 mm上纯化。流动相(CO2，异丙醇)，收集所需流分，蒸发，溶于甲醇中并再次蒸发，得到化合物106a (111mg)和化合物106b。SFC: 柱：OJ-H 250 mmx 4.6 mm；流速：3 mL/分钟；流动相：5% iPrOH(含0.2% iPrNH2)保持15.0分钟，温度: 23℃；Rt (106a)：8.37分钟；Rt (106b)：9.95分钟。
化合物107
将溶于二氯甲烷(30 mL)中的TiCl4 (9.8 mL)在10分钟期间逐滴添加至溶于THF(125 mL)的2,2-二氟茚满-1-酮(8.0 g；47.6 mmol)和丙二酸二甲酯(6.3 g；47.6 mmol)的溶液中，同时在冰浴中冷却。将反应混合物搅拌10分钟。然后加入吡啶(14.9 mL；185mmol)，使反应混合物达到室温，同时搅拌过夜。将混合物用水(100 mL)猝灭并用二氯甲烷(300 mL)稀释。将有机层分离，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用在庚烷中从2至100%的EtOAc梯度洗脱。将产物流分合并并浓缩，得到化合物107 (7.51g)，其原样用于下一反应。方法A；Rt: 1.01 m/z : 300.1 (M+NH4)+ 精确质量：282.1；1HNMR (400 MHz, 氯仿-d) ppm 3.50 (t, J=13.4 Hz, 2 H), 3.88 (s, 3 H), 3.91 (s, 3H), 7.27 - 7.35 (m, 2 H), 7.39 - 7.47 (m, 1 H), 7.66 (d, J=8.5 Hz, 1 H)。
化合物108
将化合物107 (6.8 g)、2-脒基氯化吡啶(3.35 g；21.3 mmol)和碳酸氢钠(7.15g)在二噁烷(100 mL)中的混合物在120℃搅拌并加热5小时。在仍温热时将反应混合物过滤并将滤液在真空中浓缩。将所得的残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用在庚烷中从5至100%的EtOAc梯度洗脱。将产物流分合并，浓缩并在真空干燥过夜，得到化合物108 (非对映异构混合物；3.83 g)，为白色粉末。方法A；Rt: 1.00和1.03 m/z : 372.1 (M+H)+ 精确质量：371.1。
化合物109
将化合物108 (1.05 g)溶于磷酰氯(25 mL)并在100℃加热210分钟。将反应混合物在真空中浓缩。将残留物溶于二氯甲烷(100 mL)并通过将混合物倒入饱和的NaHCO3溶液(200 mL)中同时搅拌而猝灭。将有机层分离，经由硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到黄色粗树脂(1.05 g)，其原样用于下一步骤。方法A；Rt: 1.15 m/z : 390.1 (M+H)+ 精确质量：389.1。
化合物110
将氮气鼓泡通入化合物109 (681 mg)、(吗啉-4-基)甲基三氟硼酸钾(345.5 mg，1.67 mmol)、K2CO3 (319.3 mg，2.31 mmol)、乙二醇二甲醚(5 mL)和水(1 mL)的混合物中。然后加入双(三叔丁基膦)钯(0) (164 mg，0.32 mmol)并将反应混合物在140℃的微波照射下搅拌10分钟。将混合物浓缩并将残留物溶于水(50 mL)和二氯甲烷(50 mL)中。将有机层分离，经HM-N柱干燥并浓缩。残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用在庚烷中从5至100%的EtOAc的梯度。将产物流分合并并浓缩，在真空干燥，得到黄色树脂(214 mg)。方法A；Rt: 1.14 m/z : 455.1 (M+H)+ 精确质量：454.2. 1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ ppm 2.57 - 2.69(m, 4 H), 3.36 (s, 3 H), 3.41 - 3.58 (m, 1 H), 3.59 - 3.71 (m, 1 H), 3.75 -3.88 (m, 6 H), 7.08 - 7.16 (m, 1 H), 7.20 - 7.26 (m, 3 H), 7.37 (ddd, J=7.5,4.8, 1.3 Hz, 1 H), 7.71 (td, J=7.7, 1.6 Hz, 1 H), 8.19 (dt, J=8.0, 1.0 Hz, 1H), 8.56 - 8.64 (m, 1 H), 10.35 (s, 1 H)。
化合物111
在5分钟期间，将氮气鼓泡通入化合物109 (365 mg)、四甲基锡(185 mg，1.03mmol)、乙二醇二甲醚(5 mL)和DMF (1 mL)的混合物。然后加入双(三叔丁基膦)钯(0)(105.5 mg，0.21 mmol)并将反应混合物在140℃的微波照射下搅拌15分钟。加入另一份四甲基锡(100 mg)并鼓泡通入氮气5分钟。然后加入更多的双(三叔丁基膦)钯(0) (100 mg)并在140℃的微波照射下搅拌30分钟。将反应混合物在真空中浓缩并将所得的残留物溶于CH2Cl2 (50 mL)和水(50 mL)中。将有机层经HM-N柱干燥并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用在庚烷中从5至100%的EtOAc梯度。对浓缩的产物流分重复此程序，以在二氯甲烷中从0至10%的甲醇梯度。将产物流分合并，浓缩并在真空干燥，得到化合物111 (54 mg)。方法E；Rt: 1.05 m/z : 370.2 (M+H)+ 精确质量：369.1；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm2.35 (s, 3 H), 3.27 (s, 3 H), 3.38 - 3.64 (m, 2 H), 7.03 - 7.11 (m, 1 H),7.18 - 7.30 (m, 3 H), 7.57 (ddd, J=7.5, 4.8, 1.3 Hz, 1 H), 7.88 (td, J=7.7,1.8 Hz, 1 H), 7.94 - 8.00 (m, 1 H), 8.64 - 8.70 (m, 1 H), 9.83 (s, 1 H)。
化合物112
将化合物110 (106 mg)、1 M NaOH (2 mL，2 mmol)和甲醇(4 mL)在140℃的微波照射下加热3分钟，随后在140℃再经3分钟。在真空将甲醇蒸馏去除并将油从水层用二氯甲烷(50 mL)萃取。将有机层经HM-N柱干燥并浓缩。将残留物经由柱色谱法纯化，使用在庚烷中从5至15%的EtOAc梯度。将产物部分浓缩并在真空中干燥，得到化合物112 (18.5 mg)。方法E；Rt: 1.09 m/z : 435.2 (M+H)+ 精确质量：434.2；1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ ppm2.61-2.68 (m, 4 H), 3.39 (s, 3 H), 3.81 - 3.88 (m, 6 H), 5.96 (s, 1 H), 7.04- 7.10 (m, 1 H), 7.12 - 7.23 (m, 3 H), 7.36 (ddd, J=7.5, 4.8, 1.3 Hz, 1 H),7.71 (td, J=7.7, 1.8 Hz, 1 H), 8.18 (dt, J=7.9, 1.0 Hz, 1 H), 8.56 - 8.63 (m,1 H), 10.36 (br. s., 1 H)。
化合物113
在60℃，将化合物107 (850 mg)、3,5-二氟吡啶-2-甲脒(627 mg，3.99 mmol)、NaHCO3 (894 mg)在二噁烷(30 mL)中搅拌并加热3小时。将反应混合物浓缩并将残余物溶于CH2Cl2 (50 mL)中。将此溶液用水洗涤，经HM-N柱干燥并浓缩。将残留物进行硅胶柱色谱法，使用梯度从5至100%的EtOAc。将产物流分合并，浓缩并在真空干燥，得到化合物113，为白色粉末(494 mg)，为约8比2比例的非对映异构混合物。方法E；Rt: 0.93及0.95 m/z :408.2 (M+H)+ 精确质量：407.1。
化合物114
将化合物113 (459 mg)溶于磷酰氯中并在120℃加热1小时。将反应混合物在真空中浓缩，使所得的残留物溶于CH2Cl2 (50 mL)中并用饱和的NaHCO3溶液(150 mL)猝灭。将此混合物剧烈搅拌15分钟。将有机层分离，经isolute HM-N柱干燥并浓缩，得到为粗棕色粉末的化合物114 (375 mg)，其原样用于下一反应。方法E；Rt: 1.05 m/z : 426.1 (M+H)+ 精确质量：425.1。
化合物115
将氮气鼓泡通入溶于DMF (7 mL)中的化合物114 (375 mg)和四甲基锡(187 mg)的溶液10分钟。加入双(三叔丁基膦)钯(0)(107 mg)并将反应物在140℃的微波照射下搅拌15分钟。将氮气再次鼓泡通入5分钟，加入更多的双(三叔丁基膦)钯(0)(100 mg)和四甲基锡(185 mg)并将反应混合物在140℃的微波照射下搅拌30分钟。将反应混合物过滤并浓缩。将残留物溶于CH2Cl2 (50 mL)中，用水洗涤，经HM-N柱干燥并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用在庚烷中从2.5%至100%的EtOAc梯度。将产物流分合并，浓缩并在真空干燥，得到化合物115 (71.7 mg)，为黄色树脂。方法A；Rt: 1.07 m/z : 406.1 (M+H)+ 精确质量：405.1。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6；描述主要的互变异构体) ppm 2.27 (s, 3 H), 3.27(s, 3 H), 3.37 - 3.55 (m, 2 H), 7.02 - 7.13 (m, 1 H), 7.16 - 7.31 (m, 3 H),8.04 (ddd, J=10.3, 9.1, 2.4 Hz, 1 H), 8.60 (d, J=2.4 Hz, 1 H), 9.91 (s, 1 H)。
化合物116
将6-氟-1-甲基-2,3-二氢-1H-吲哚-2,3-二酮(1751 mg，9.78 mmol)、脲(587 mg，9.78 mmol)、乙酰乙酸甲酯(1.14 g，9.78 mmol)、p-TSA (84.2 mg，0.49 mmol)在乙腈(150mL)中回流4天。使反应混合物冷却至室温并搅拌过夜。使产物结晶出来，滤出淡黄色晶体并在真空干燥，得到化合物116 (602 mg)。方法D；Rt: 0.71 m/z : 337.1 (M+NH4)+ 精确质量：319.1。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.24 (s, 3 H), 3.09 (s, 3 H), 3.30(s, 3 H), 6.75 (ddd, J=10.0, 8.0, 2.3 Hz, 1 H), 6.93 (dd, J=9.5, 2.3 Hz, 1H), 7.18 (dd, J=8.3, 5.5 Hz, 1 H), 7.77 (d, J=1.3 Hz, 1 H), 9.49 (m, 1 H)。
化合物117
将化合物116 (580 mg，1.82 mmol)在POCl3 (25 mL)中在95℃加热6小时。将反应混合物浓缩。将残留物溶于CH2Cl2 (100 mL)中并倒入饱和的NaHCO3溶液(100 mL)中。将此混合物剧烈搅拌20分钟。将有机层分离，经HM-N柱干燥并浓缩，得到为深棕色粉末的化合物117，其原样用于下一反应。方法E；Rt: 0.73 m/z : 338.2 (M+H)+ 精确质量：337.1。
化合物118
将氮气鼓泡通入溶于DMF (7 mL)中的化合物117 (525 mg)、3,5-二氟-2-三丁基甲锡烷基吡啶(722 mg，1.79 mmol)的混合物中。然后加入双(三叔丁基膦)钯(0) (159 mg，0.31 mmol)并将混合物在140℃的微波照射下加热10分钟。将反应混合物浓缩并经制备型HPLC在(RP Vydac Denali C18-10μm，200 g，5 cm)上纯化。流动相(在水中的0.25% NH4HCO3溶液，CH3CN)，收集所需流分，蒸发，溶于MeOH中并再度蒸发，最后在真空中干燥，得到化合物118 (21 mg)。方法E；Rt: 0.85 m/z : 417.1 (M+H)+ 精确质量：416.1。1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.37 (s, 3 H), 3.13 (s, 3 H), 3.35 (s, 3 H), 6.67 - 6.80(m, 1 H), 6.92 (dd, J=9.7, 2.4 Hz, 1 H), 7.15 (dd, J=8.2, 5.6 Hz, 1 H), 7.93- 8.15 (m, 1 H), 8.60 (d, J=2.3 Hz, 1 H), 9.13 - 10.47 (bs, 1 H)。
化合物119
将6-氟吲哚啉-2,3-二酮(15.05 g，91.1 mmol)、脲(5.47 g，91.1 mmol)、p-TSA(7.85 g，45.57 mmol)和乙酰乙酸甲酯(10.6 g，91.1 mmol)在乙腈(500 mL)中回流过周末。使反应混合物冷却至室温。将沉淀物过滤。将沉淀物溶于CH2Cl2 (1升)和饱和的NaHCO3溶液(500 mL)中。将混合物剧烈搅拌15分钟。将沉淀物过滤并在真空干燥，得到化合物119，为米黄色粉末(9.25 g)。方法A；Rt: 0.61 m/z : 323.1 (M+NH4)+ 精确质量：305.1。1H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.24 (s, 3 H), 3.32 (s, 3 H), 6.57 (dd, J=9.4, 2.3Hz, 1 H), 6.63 - 6.75 (m, 1 H), 7.13 (dd, J=8.0, 5.6 Hz, 1 H), 7.81 (s, 1 H),8.31 - 11.56 (m, 2 H)。
化合物120
将化合物119 (1225 mg，4.0 mmol)、4-甲氧基苄基氯(660 mg，4.2 mmol)和碳酸钾(693 mg)在乙腈(30 mL)中搅拌并回流过夜。将反应混合物浓缩并将残留物溶于CH2Cl2(100 mL)和水(100 mL)中。将有机层经HM-N柱干燥并浓缩。残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用在CH2Cl2中从2至10%的CH3OH梯度。将产物流分合并，浓缩并在真空干燥过夜，得到化合物120，为白色粉末(818 mg)。方法A；Rt: 0.91 m/z : 443.1 (M+NH4)+ 精确质量：425.1。1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.24 (s, 3 H), 3.07 (s, 3 H), 3.73 (s, 3 H),4.69 (d, J=15.4 Hz, 1 H), 4.81 (d, J=15.4 Hz, 1 H), 6.68 - 6.81 (m, 2 H),6.86 - 6.95 (m, J=8.8 Hz 2 H), 7.20 (dd, J=7.9, 5.5 Hz, 1 H), 7.39-745 (m, J=8.8 Hz, 2 H), 7.92 (d, J=1.3 Hz, 1 H), 9.51 (bs, 1 H)。
化合物121
将化合物120 (758 mg，1.78 mmol)在POCl3 (30 mL)中在100℃搅拌1小时。然后将反应混合物在110℃进一步加热110分钟。将反应混合物浓缩。使残留物溶于CH2Cl2 (50mL)，倒入饱和的NaHCO3溶液(100 mL)中并剧烈搅拌15分钟。将有机层经HM-N柱干燥并浓缩，得到深棕色粉末，其原样用于下一反应。方法A；Rt: 1.03 m/z : 444.0 (M+H)+ 精确质量：443.1。
化合物122
将氮气鼓泡通入化合物121 (513 mg，1.16 mmol)、3,5-二氟-2-三丁基甲锡烷基吡啶(700 mg，1.73 mmol)和DMF (7 mL)的混合物中 5分钟。加入双(三叔丁基膦)钯(0)(59 mg，0.116 mmol)，并将反应混合物在140℃的微波照射下搅拌10分钟。将反应混合物浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用在CH2Cl2中从0至10%的CH3OH梯度。将产物流分浓缩并在真空干燥，得到化合物122的米黄色粉末(50 mg)。方法E；Rt: 1.07 m/z : 523.2 (M+H)+ 精确质量：522.2。
化合物123
将三氟甲烷磺酸(0.1 mL)添加至化合物122 (23 mg)在二氯甲烷(10 mL)的溶液中并在室温搅拌150分钟。加入饱和的NaHCO3溶液(30 mL)并将混合物剧烈搅拌10分钟。将有机层经HM-N柱干燥并浓缩。残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用在二氯甲烷中从0.5至10%的CH3OH梯度。将产物流分浓缩并在真空干燥，得到为粉末的化合物123 (10.4 mg)。方法E；Rt: 0.80 m/z : 403.2 (M+H)+ 精确质量：402.1。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d)δppm 2.49(s, 3 H), 3.51 (s, 3 H), 6.59 (dd, J=8.8, 2.2 Hz, 1 H), 6.61 - 6.68 (m, 1 H),7.09-7.14 (m, 1 H), 7.23 - 7.30 (m, 1 H), 7.34 (bs, 1 H), 8.29 (m, 2 H)。
化合物124
将化合物103 (245 mg，0.761 mmol)、2-脒基氯化吡啶(240 mg，1.52 mmol)、碳酸氢钠(340 mg，4.05 mmol)在DMF中在80℃搅拌并加热2小时。使混合物冷却至室温，用Et2O和H2O稀释并用Et2O萃取。将合并的有机相用Na2SO4干燥。过滤并将溶剂蒸发后，将所得的残留物(239 mg)在POCl3 (5 mL)中在90℃搅拌2.5小时。在真空将挥发物移除，将所得的残留物溶于CH2Cl2中并与饱和的NaHCO3搅拌30分钟。将混合物用CH2Cl2萃取，用Na2SO4干燥，过滤后除去溶剂。将黑色残留物溶于CH2Cl2中并经硅胶途径过滤。用CH2Cl2洗涤后除去溶剂，得到淡黄色残留物。将此残留物在乙二醇二甲醚(5 mL)、水(0.26 mL)、(吗啉-4-基)甲基­三氟硼酸酯内盐(70 mg，0.41 mmol)和K2CO3 (79 mg，0.57 mmol)的混合物中搅拌。将氮气鼓泡通入混合物10分钟，然后加入双(三叔丁基膦)钯(0) (40.7 mg，0.08 mmol)。将混合物在140℃的微波照射下加热15分钟。加入CH2Cl2，将混合物用H2O洗涤，并将水层用CH2Cl2萃取。将有机层用Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将所得的残留物经使用庚烷至庚烷/EtOAc 50/50的柱色谱法纯化，得到化合物124 (35 mg)。方法E；Rt: 1.13 m/z : 457.2 (M+H)+ 精确质量：456.2。
化合物125
在试管内加入搅拌棒、丙二酸二甲酯(9.56 mL，83.2 mmol)、4-氟苯基乙炔(10 g，83.2 mmol)和氯化铟(III) (550 mg，2.49 mmol)并密封。然后将反应混合物在130℃的油浴中搅拌18小时并使其达到室温。将所得的反应混合物原样用于下一步骤。
化合物126
将化合物125 (5 g上面所得的反应混合物)、3,5-二氟-2-吡啶甲脒乙酸盐(6.46g，29.7 mmol)和碳酸氢钠(3.33 g，39.6 mmol)在1,4-二噁烷(100 mL)中的混合物在60℃搅拌并加热1小时。加入DMF (30 mL)并将反应混合物在60℃再搅拌18小时。将反应混合物在真空中浓缩并将残留物倒入水中。将有机层用乙醚(3 x 200 mL)萃取并将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤后并浓缩至干。将所得的残留物使用硅胶柱色谱法纯化(在庚烷中从10至50%的乙酸乙酯)，得到化合物126 (200 mg)。方法A；Rt: 0.97及1.02 m/z : 378.1 (M+H)+ 精确质量：377.1。
化合物127
将化合物126 (200 mg)悬浮在磷酰氯(1 mL，10.8 mmol)中并在120℃加热30分钟。将反应混合物浓缩至干。将残留物在冷的饱和碳酸氢钠水溶液中搅拌10分钟并用CH2Cl2(3 x 5 mL)萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)并浓缩至干。使用硅胶柱色谱法纯化残留物(二氯甲烷等度)，得到化合物127 (90 mg)，为黄色粉末。方法A；Rt: 1.07 m/z : 396.0 (M+H)+ 精确质量：395.1。
化合物128
将化合物127 (90 mg)溶于微波小瓶内的无水DME (3 mL)中并将氮气鼓泡通入10分钟。然后加入四甲基锡(270 μl，0.195 mmol)，随后加入双(三叔丁基膦)钯(0) (19.9mg，0.0389 mmol)，将小瓶用氮气吹洗并封盖。将反应混合物在140℃的微波照射下加热20分钟并使其达到室温。然后加入四甲基锡(270μl，0.195 mmol)，随后加入双(三叔丁基膦)钯(0) (19.9 mg，0.0389 mmol)，将小瓶用氮气吹洗并封盖。将反应混合物在140℃的微波照射下加热20分钟并使其达到室温。将反应混合物蒸发并将残留物经制备型HPLC在(RPSunFire Prep C18 OBD-10μm，30x150 mm)上纯化。流动相(在水中的0.1 % TFA溶液+ 5 %乙腈，甲醇)。将所需流分合并，浓缩至干。将残留物用饱和的碳酸氢钠水溶液中和并用二氯甲烷(2 x 20 mL)萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)并浓缩至干。将残留物与甲醇(2x 5mL)共同蒸发。在真空干燥后，得到化合物128 (14 mg)，为黄色固体。方法A；Rt: 1.04 m/z: 376.1 (M+H)+ 精确质量：375.1；1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.92 (s, 3 H),2.29 (s, 3 H),3.49 (s, 3 H), 6.91-7.04 (m, 2 H), 7.20 - 7.37 (m, 1 H), 7.38 -7.62 (m, 2 H), 7.93 (br. s, 1 H), 8.27 (d, J=2.0 Hz, 1 H)。
化合物129
在试管内加入搅拌棒、丙二酸二甲酯(8.32 mL，72.4 mmol)、3,4-氟苯基乙炔(10.0 g，72.4 mmol)和氯化铟(III) (479 mg，2.16 mmol)并密封。然后将反应混合物在130℃搅拌18小时并使其达到室温。将粗反应混合物原样用于下一反应。
化合物130
将化合物129 (15 g上面所得的反应混合物)、3,5-二氟-2-吡啶甲脒(11.3 g，72mmol)在圆底烧瓶(250 mL)内的DMF (100 mL)中在40℃搅拌20小时。使溶液冷却至室温。将反应混合物倒入水(800 mL)中。滤除固体并用水洗涤，得到粘稠淡橙色胶体。将胶体溶于二氯甲烷中，干燥(Na2SO4)并蒸发至完全干燥，得到含化合物130 (15.6 g)的粗混合物。方法A；Rt: 1.04及1.08 m/z : 396.0 (M+H)+ 精确质量：395.1。
化合物131
131的对映体：131a和131b
在试管内加入搅拌棒、化合物130 (8.64 g)和磷酰氯(30 mL，323 mmol)并将反应混合物在110℃加热2.5 小时并在室温经18小时。将反应混合物蒸发至干，加入甲苯并将混合物蒸发，得到深棕色残留物。将残留物溶于二氯甲烷(200 mL)中并用饱和的碳酸氢钠水溶液(150 mL)洗涤。将水层用二氯甲烷(2x 200 mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发至干，得到深棕色油。将此油使用硅胶柱色谱法纯化(等度二氯甲烷)，得到化合物131 (4.30 g)。方法A；Rt: 1.11 m/z : 414.0 (M+H)+ 精确质量：413.1。
经制备型SFC (固相：Chiralcel Diacel OD 20 x 250 mm)，流动相：CO2,乙醇)，将外消旋性混合物131分离成其对映体131a和131b，得到化合物131a (634 mg)和化合物131b (661 mg)。OD-H 250 mmx 4.6 mm；流速：3 mL/分钟；流动相：3 % EtOH (含0.2%iPrNH2)保持15.00分钟；温度：30℃；化合物131a: Rt: 11.2分钟；化合物131b: Rt: 12.1分钟。
化合物132
外消旋性混合物132的对映体：132a, 132b
将化合物131 (1500 mg)在微波小瓶内的DMF (10 mL)中的溶液搅拌并将氮气鼓泡通入10分钟。然后加入四甲基锡(0.753 mL，5.44 mmol)，随后加入双(三叔丁基膦)钯(0)(185 mg，0.363 mmol)，将小瓶用氮气吹洗并封盖。将反应混合物在140℃的微波照射下加热30分钟并使其达到室温。将反应混合物过滤并将滤液在真空中浓缩。将残留物与甲醇(40mL)混合并过滤。将滤液蒸发至干，得到橙色粘稠残留物，将其使用硅胶柱色谱法纯化(在庚烷中的乙酸乙酯从5至30%及等度二氯甲烷的梯度)，得到化合物132 (546 mg)，为黄色固体。方法A；Rt: 1.09 m/z : 394.1 (M+H)+ 精确质量：393.1；1H NMR (400 MHz, 氯仿-d,)；约9比1的互变异构比例；描述主要的互变异构体) δ ppm 1.89 (s, 3 H), 2.30 (s, 3H), 3.52 (s, 3 H), 7.05 (dt, J=10.2, 8.4 Hz, 1 H), 7.20-7.24 (m, 1 H), 7.27 -7.35 (m, 2 H), 7.98 (br. s., 1 H), 8.29 (d, J=1.8 Hz, 1 H)。经制备型SFC(Chiralcel Diacel OJ 20 x 250 mm)，将外消旋性混合物132 (230 mg)分离成其对映体132a和132b。流动相(CO2，含0.2% iPrNH2的乙醇)，得到化合物132a (79 mg)和化合物132b(83 mg)，为粘稠树脂。柱：OJ-H 250 mmx 4.6 mm；流速：3 mL/分钟；流动相：3% EtOH (含0.2% iPrNH2)保持15.00分钟；温度：30℃；化合物132a Rt: 7.2分钟；化合物132b Rt: 8.7分钟，化合物132a: [α]20 D: -19.7 ° (c 0.47 w/v %, DMF)。化合物132b: [α]20 D: +20.3 ° (c 0.37 w/v %, DMF)
化合物132b的甲基磺酸盐
将化合物132b (3.01 g，7.66 mmol，类似于如上所述制备)溶于异丙醇(20 mL)并逐滴加入在异丙醇(5 mL)中的甲磺酸(0.488 mL，7.51 mmol)。将溶液在回流下加热并加入二异丙醚(250 mL)至饱和点。使化合物从回流的溶液结晶并加入异丙醇(150 mL)。将溶液回流30分钟，然后冷却至室温。滤除形成的沉淀物并用二异丙醚(10 mL)洗涤，得到化合物132b。将白色固体的MsOH在50℃的真空炉中干燥。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.03(br. s, 3 H), 2.27 (s, 3 H), 2.29 (s, 3 H), 3.50 (s, 3 H), 7.40 - 7.46 (m, 1H), 7.46-7.57 (m, 1 H), 7.61 - 7.81 (m, 1 H), 8.37 (br. t, J=9.0 Hz, 1 H),8.79 - 8.86 (m, 1 H), 11.92 (br. s., NH)。熔点(DSC；从30至300℃在10℃/分钟):196℃。
化合物132b. (-)-樟脑酸
将化合物131b (600 mg，1.45 mmol)在微波小瓶内的DMF (5 mL)中的溶液搅拌并将氮气吹洗10分钟。然后加入四甲基锡(0.301 mL，2.18 mmol)，随后加入双(三叔丁基膦)钯(0) (148 mg，0.29 mmol)，将小瓶用氮气吹洗并封盖。将反应混合物在140℃的微波照射下加热30分钟，然后使其达到室温。将反应混合物蒸发至干。将残留物溶于乙醚中，用水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并在真空中浓缩。将所得的残留物使用硅胶柱色谱法纯化两次(在庚烷中从10至30%的乙酸乙酯) (在庚烷中从10至25%的乙酸乙酯)。将所需流分浓缩至~50mL，将固体过滤并将滤液蒸发至干，得到化合物132b (287 mg)，为粘稠油。将化合物132b(287 mg，0.73 mmol)和(-)-樟脑酸(145 mg，0.73 mmol)溶于沸腾的乙醇(10 mL)中。冷却至室温后，将乙醇蒸发，使固体从温热的二异丙醚(12 mL)再结晶并将混合物冷却过夜至室温。将固体过滤并用冷二异丙醚洗涤。将晶体在50℃的真空中干燥，得到化合物132b.(-)-樟脑酸(221 mg)，为淡黄色固体。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.84 (s, 3 H),1.00 (s, 6 H), 1.44 - 1.60 (m, 1 H), 1.76 (s, 3 H), 1.84 - 2.03 (m, 2 H),2.18 (s, 3 H), 2.27 - 2.41 (m, 1 H), 3.43 (s, 3 H), 7.17 - 7.43 (m, 3 H),8.05 (ddd, J=10.5, 9.0, 2.5 Hz, 1 H), 8.58 (d, J=2.5 Hz, 1 H), 9.55 (br. s.,1 H), 13.52 (br. s, 1H)。
化合物133
将溶于甲醇(50 mL)中的化合物132 (88.5 mg，0.22 mmol)、乙酸钾(84.8 mg，0.87 mmol)和Pd/C (10%；100 mg)在氢气氛下搅拌105分钟。将反应混合物过滤并浓缩。将残留物溶于CH2Cl2 (20 mL)中，用水洗涤，经HM-N柱干燥并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用在庚烷中从10至100%的EtOAc梯度。将产物流分浓缩并将所得的残留物在真空干燥，得到化合物133，为黄色树脂(24.5 mg)。方法D；Rt: 1.21 m/z : 376.1 (M+H)+ 精确质量：375.1，1H NMR (400 MHz, DMSO-d6, 观察到约9比1的互变异构混合物，描述主要的互变异构体) ppm 1.77 (s, 3 H), 2.25 (s, 3 H), 3.42 (s, 3 H), 7.16 - 7.24 (m, 1H), 7.27 - 7.10 (m, 2 H), 7.81 (td, J=8.8, 2.9 Hz, 1 H), 8.09 (dd, J=8.9, 4.7Hz, 1 H), 8.58 - 8.66 (m, 1 H), 9.47 (s, 1 H)。
化合物134
在微波小瓶内加入搅拌棒、化合物92 (80 mg，0.191 mmol)和DMF (无水) (1.22mL，15.7 mmol)。将氮气鼓泡通入10分钟。然后加入四甲基锡(39.8μl，0.287 mmol)，随后加入双(三叔丁基膦)钯(0) (29.4 mg，0.0574 mmol)，将小瓶用氮气吹洗并封盖。将反应混合物在140℃的微波照射下加热10分钟并使其达到室温。将氮气鼓泡通入10分钟。然后加入四甲基锡(39.8μl，0.287 mmol)，随后加入双(三叔丁基膦)钯(0) (29.4 mg，0.0574 mmol)，将小瓶用氮气冲洗并封盖。将反应混合物在140℃的微波照射下加热20分钟。将反应混合物用乙醚(50 mL)稀释并用水(3 x 5 mL)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并浓缩至干。将残留物使用硅胶柱色谱法纯化两次(第一次纯化：在庚烷中的乙酸乙酯从5至50%；第二次CH2Cl2)并经制备型SFC在(Chiralpak Diacel AD 30 x 250 mm)上进一步纯化。流动相(CO2，含0.2%异丙胺的异丙醇)，收集所需流分，蒸发，溶于甲醇中并再次蒸发，得到134a (5.6 mg)和134b (5 mg)。SFC：柱：AD -H 250 mmx 4.6 mm；流速：3 mL/分钟；流动相：10 % iPrOH (含0.2 % iPrNH2)在CO2中，保持15.00分钟，温度：30℃, Rt: 化合物134a：6.4分钟，134b：8.4分钟。
化合物135
将5-氟-2,3-二氢-1H-茚-1-酮(40 g，266.4 mmol)和丙二酸二甲酯(42.2 g，319.4 mmol)溶于无水THF (1400 mL)中。在-20℃~ -10℃和N2下，逐滴加入在无水CH2Cl2(400 mL)中的TiCl4 (101 g，532.5 mmol)。添加后，在-20℃~ -10℃和N2下，逐滴加入吡啶(200 mL)。将混合物在20oC搅拌过夜。滤除固体。将滤饼溶于乙酸乙酯(800 mL)中，将悬浮液搅拌5分钟并过滤。将滤液在真空中浓缩并加入乙酸乙酯(800 mL)。滤除沉淀物。将滤液用盐水(200 mL)洗涤并用Na2SO4干燥。在高真空下除去溶剂，将残留物溶于DMSO (400 mL)中，在滤纸上过滤，然后在滤膜(0.45μm)上过滤。将所得的滤液经高效液相色谱法纯化(C18，洗脱液：CH3CN/H2O从15/85至45/55，含0.1% HCl作为缓冲液)。将纯的流分在真空中浓缩。将水层用二氯甲烷(3 x 400 mL)萃取。将有机层用盐水(200 mL)洗涤并用Na2SO4干燥。在真空将溶剂移除，得到化合物135 (24 g)。
化合物136
将化合物135 (6 g，22.7 mmol)、2-脒基氯化吡啶(5.3 g，33.6 mmol)和Na2CO3(7.2 g，67.9 mmol)在DMF (60 mL)中的混合物在60℃及N2下搅拌过夜。在真空下除去溶剂。将残留物悬浮在二氯甲烷(100 mL)中。滤除沉淀物。在真空下除去溶剂。将残留物经硅胶柱色谱法纯化(梯度洗脱液：石油醚：乙酸乙酯：从100:0至60:40)，得到化合物136 (2.5g)。方法B；Rt: 1.04 m/z : 353.9 (M+H)+ 精确质量：353.1。
化合物137
将化合物136 (2.5 g，7.1 mmol)在POCl3 (20 mL，217 mmol)中在120℃搅拌2小时。将反应混合物在真空中浓缩至干。将残留物溶于二氯甲烷(60 mL)中。将有机层用饱和的NaHCO3水溶液(3 x 30 mL)和盐水洗涤并用Na2SO4干燥。在真空下除去溶剂。将残留物经硅胶柱色谱法纯化(梯度洗脱液：石油醚：乙酸乙酯：从100:0至70:30)，得到化合物137(1.4 g)。方法B；Rt: 1.20 m/z : 372.0 (M+H)+ 精确质量：371.1。
化合物138
将CrO3 (34 mg，0.34 mmol)和70% t-BuOOH水溶液(3.02 mL)溶于无水CH2Cl2 (4mL)中。在室温及N2下，逐滴加入在无水CH2Cl2 (4 mL)中的化合物137 (385 mg，1.03mmol)。添加后，将混合物在20℃搅拌过夜。滤除固体。将滤液在真空中浓缩并加入乙酸乙酯(15 mL)。滤除所得的沉淀物。将滤液用盐水(2 x 10 mL)洗涤并用Na2SO4干燥。在真空下除去溶剂。将残留物经硅胶柱色谱法纯化(梯度洗脱液：石油醚：乙酸乙酯：从100:0至10:1)，得到化合物138 (110 mg)。方法B；Rt: 1.05 m/z : 385.9 (M+H)+ 精确质量：385.1。
化合物139
将化合物138 (0.1 g，0.26 mmol)、(吗啉-4-基)甲基三氟硼酸钾(0.11 g，0.53mmol)、Pd(OAc)2 (0.006 g，0.027 mmol)、丁基二-1-金刚烷基膦(CAS:321921-71-5；0.015g，0.042 mmol)和Cs2CO3 (0.51 g，1.56 mmol)在DME (1.4 mL)和H2O (0.14 mL)中的混合物在N2及140℃的微波照射下搅拌20分钟。加入水(5 mL)和二氯甲烷(5 mL)。将有机层分离并用水(2 x 5 mL)洗涤。将有机层用1 N HCl (5 mL)洗涤。将水层用二氯甲烷(2 x 5 mL)洗涤并用NaHCO3碱化至pH=7~8。将混合物用二氯甲烷(15 mL)萃取。将有机层用盐水洗涤并用Na2SO4干燥。将残留物经制备型高效液相色谱法在RP-18上纯化(洗脱液：在H2O中的CH3CN(0.1% TFA)，从20%至60%, v/v)。收集纯的流分并在真空将溶剂去除，得到化合物139的TFA盐(55 mg)。方法G；Rt: 3.75 m/z : 451.2 (M+H)+ 精确质量：450.2。
化合物140
在小瓶内依序加入化合物131 (2.80 g，5.96 mmol)、乙腈(25 mL，481 mmol)、4-二甲基氨基吡啶(72.8 mg，0.596 mmol)和二碳酸二叔丁酯(3.90 g，17.9 mmol)并用特氟隆盖密封。将反应混合物在室温搅拌18小时。将反应混合物蒸发至干。使用硅胶柱色谱法纯化残留物(在庚烷中的乙酸乙酯从10%至20%)，得到化合物140 (2.73 g)。方法A；Rt: 1.32m/z : 514.1 (M+H)+ 精确质量：513.1。
化合物141
在试管内加入化合物140 (335 mg，0.652 mmol)、1,4-二噁烷(10 mL)和饱和的碳酸钾水溶液(5 mL)。将反应混合物用氮气吹洗10分钟并加入三氟硼酸环丙酯钾盐(144 mg，0.978 mmol)和[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(II)二氯甲烷加成物(26.6 mg，0.0326 mmol)。将反应混合物用氮气冲洗并将管密封，在80℃加热20小时并使其达到室温。将二氯甲烷(50 mL)添加至反应混合物中。将分离的有机层用饱和的碳酸钠水溶液(2 x 10mL)、水(5 mL)和盐水(5 mL)洗涤。将有机溶液干燥(Na2SO4)并蒸发。使用硅胶柱色谱法纯化残留物(在庚烷中的乙酸乙酯从0%至15%)，得到化合物141 (270 mg)。方法A；Rt: 1.35 m/z: 520.1 (M+H)+ 精确质量：519.2。
化合物142
将化合物141 (270 mg)溶于HCl (3 M在甲醇中) (20 mL，60 mmol)并加入搅拌棒，得到冒泡的溶液。将部分反应混合物(~1/4)在密封试管内在45℃搅拌1.5小时。将溶液蒸发至干，得到粘稠残留物。加入乙醚并蒸发至干。将残留物溶于二氯甲烷(30 mL)中并用饱和的碳酸氢钠水溶液(10 mL)和水(5 mL)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并蒸发至干后得到化合物142 (50.5 mg)。方法A；Rt: 1.24 m/z : 420.1 (M+H)+ 精确质量：419.1. 1H NMR(400 MHz, 含一滴TFA的氯仿-d) δ ppm 0.76 - 0.94 (m, 2 H), 1.07 - 1.23 (m, 2H), 2.17 (s, 3 H), 2.31 (tt, J=8.6, 5.6 Hz, 1 H), 3.63 (s, 3 H), 7.15 - 7.29(m, 2 H), 7.33 (ddd, J=10.9, 7.2, 2.3 Hz, 1 H), 7.58 (ddd, J=10.9, 7.1, 2.2Hz, 1 H), 8.51 (d, J=2.0 Hz, 1 H)。
化合物143
将化合物137 (150 mg，0.403 mmol)、(吗啉-4-基)甲基三氟硼酸钾(167 mg，0.806 mmol)、丁基二-1-金刚烷基膦(23 mg，0.064 mmol)、Pd(OAc)2 (9 mg，0.040 mmol)和Cs2CO3 (0.787 g，2.418 mmol)在水(0.21 mL)和DME (2.1 mL)中的混合物在N2气氛及140℃的微波照射下加热20分钟。加入水(10 mL)和二氯甲烷(10 mL)。将有机层分离并用水(10 mL)洗涤。将有机层用1N HCl (5 mL)萃取。将水层用二氯甲烷(2 x 10 mL)洗涤并用NaHCO3碱化至pH=7-8。将混合物用二氯甲烷(2 x 10 mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤并用Na2SO4干燥。在真空中除去溶剂并将所得的残留物用石油醚(2 mL)洗涤，得到化合物143 (120 mg)。方法H；Rt: 3.28 m/z : 437.2 (M+H)+ 精确质量：436.2。
化合物144
将NaBH4 (12.6 mg，0.333 mmol)添加至在MeOH (2 mL)中的化合物139 (50 mg)并将所得的混合物在20℃搅拌10分钟。在真空下除去溶剂。加入二氯甲烷(10 mL)并将混合物用水(2 x 10 mL)洗涤。将有机层用1N HCl (2 x 10 mL)萃取。将合并的水层用二氯甲烷(2 x 10 mL)洗涤并用固体NaHCO3调整至pH=7-8。将水层用二氯甲烷(2 x 10 mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤并用Na2SO4干燥。在真空下除去溶剂。将残留物经制备型高效液相色谱法在RP-18上纯化(洗脱液：在H2O中的CH3CN(0.1% TFA)从15%至25%, v/v)。收集纯的流分并在真空中除去挥发物。用Amberlite IRA-900 (OH)阴离子交换树脂将水层调整至pH=7并将树脂滤除。将水层冷冻至干，得到化合物144 (20 mg)。方法IRt: 3.80 m/z；453.3 (M+H)+ 精确质量：452.2。
化合物145
将化合物135 (12.5 g，47.3 mmol)、NBS (9.3 g，52.3 mmol)和过氧化苯甲酰(12mg，0.05 mmol)在CCl4 (120 mL)中的混合物在80℃及N2下搅拌过夜。在真空下除去溶剂。将残留物经硅胶色谱法纯化(梯度洗脱液：石油醚:乙酸乙酯：从200:1至100:1)，得到化合物135的单溴化衍生物(7.2 g)。将上面所得的化合物135的单溴化衍生物(3.6 g，10.5mmol)、吡啶-2-甲脒盐酸盐(2.5 g，16.0 mmol)和Na2CO3 (3.38 g，31.9 mmol)在DMF (60mL)中的混合物在90℃及N2下搅拌4小时。在真空下除去溶剂。将残留物悬浮在二氯甲烷(100 mL)中。将沉淀物过滤并将所得的滤液在真空中浓缩。将所得的残留物经硅胶柱色谱法纯化(梯度洗脱液：石油醚:乙酸乙酯: 从50:1至1:5)，得到5-氟-6'-氧代-2'-(吡啶-2-基)-5',6'-二氢-1'H-螺[茚-1,4'-嘧啶]-5'-甲酸甲酯(0.4 g)。将5-氟-6'-氧代-2'-(吡啶-2-基)-5',6'-二氢-1'H-螺[茚-1,4'-嘧啶]-5'-甲酸甲酯(0.6 g，1.71 mmol)在POCl3(10 mL，105.7 mmol)中在120℃搅拌2小时。将反应混合物浓缩至干。将残留物溶于二氯甲烷(10 mL)中。将有机层用饱和的NaHCO3水溶液(3 x 30 mL)和盐水洗涤并用Na2SO4干燥。在真空下除去溶剂。将所得的残留物经硅胶柱色谱法纯化(梯度洗脱液：石油醚：乙酸乙酯：从100:0至70:30)，得到6'-氯-5-氟-2'-(吡啶-2-基)-1'H-螺[茚-1,4'-嘧啶]-5'-甲酸甲酯(0.07 g)。将6'-氯-5-氟-2'-(吡啶-2-基)-1'H-螺[茚-1,4'-嘧啶]-5'-甲酸甲酯(75 mg，0.2 mmol)、(吗啉-4-基)甲基三氟硼酸钾(84 mg，0.41 mmol)、Pd(OAc)2 (45 mg，0.2mmol)、丁基二-1-金刚烷基膦(11 mg，0.033 mmol)和Cs2CO3 (390 mg，1.20 mmol)在DME(1.4 mL)和H2O (0.14 mL)中的混合物在N2气氛及140℃的微波照射下加热20分钟。加入水(5 mL)和二氯甲烷(5 mL)。将有机层分离并用水(2 x 5 mL)洗涤。将有机层用1N HCl (5mL)萃取。将水层用二氯甲烷(2 x 5 mL)洗涤并用NaHCO3碱化至pH=7~8。将混合物用二氯甲烷(15 mL)萃取。将有机层用盐水洗涤并用Na2SO4干燥。在真空中除去溶剂，得到化合物145(12 mg)。方法H；Rt: 3.29 m/z；435.2 (M+H)+ 精确质量：434.2.1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ ppm 10.22 (1 H, br. s), 8.61 (1 H, d, J=4.5 Hz), 8.14 (1 H, d, J=8.0Hz), 7.71 (1 H, td, J=7.5, 1.5 Hz), 7.36 (1 H, ddd, J=7.5, 5.0, 1.5 Hz), 7.19(1 H, dd, J=8.0, 5.5 Hz), 6.97 (1 H, dd, J=8.8, 2.5 Hz), 6.81 (1 H, ddd, J=10.0, 8.0, 2.0 Hz), 6.65 (1 H, d, J=5.5 Hz), 6.54 (1 H, d, J=5.5 Hz), 3.82 -3.89 (4 H, m), 3.81 (1 H, d, J=16.5 Hz), 3.73 (1 H, d, J=16.5 Hz), 3.33 (3 H,s), 2.57 - 2.71 (4 H, m)。
化合物146
在5-氟-3-甲基-2,3-二氢-1H-茚-1-酮(24 g，146 mmol)和丙二酸二甲酯(57.9g，439 mmol)在CH2Cl2 (500 mL)和THF (500 mL)的溶液中，在-40℃逐滴加入TiCl4 (54.7g，292 mmol)。将反应混合物在-40℃搅拌30分钟。在-40℃逐滴加入吡啶(57 g，731 mmol)。将反应混合物在室温搅拌12小时。滤除固体并将滤液在真空中浓缩。将所得的残留物经硅胶柱色谱法纯化(己烷：乙酸乙酯=5:1)，得到2-(5-氟-3-甲基-2,3-二氢-1H-茚-1-亚基)丙二酸二甲酯(9.5 g)。将2-(5-氟-3-甲基-2,3-二氢-1H-茚-1-亚基)丙二酸二甲酯(9.2 g，33.09 mmol)、吡啶-2-甲脒(12 g，99.2 mmol)、Na2CO3 (10.5 g，99.2 mmol)和4A分子筛(10g)在ClCH2CH2Cl (50 mL)中的混合物在80℃及氮气氛下搅拌12小时。在真空中除去溶剂并将所得的残留物经硅胶柱色谱法纯化(己烷：乙酸乙酯=1:1)，得到5-氟-3-甲基-6'-氧代-2'-(吡啶-2-基)-2,3,5',6'-四氢-1'H-螺[茚-1,4'-嘧啶]-5'-甲酸甲酯(1.5 g)。将5-氟-3-甲基-6'-氧代-2'-(吡啶-2-基)-2,3,5',6'-四氢-1'H-螺[茚-1,4'-嘧啶]-5'-甲酸甲酯(1 g，2.74 mmol)和POCl3 (10 mL)的混合物在回流下搅拌5小时。当反应完成后，将混合物倒入冰-水(20 mL)中并用乙酸乙酯(3 x 10 mL)萃取。将合并的各层干燥并浓缩至干。将所得的残留物经硅胶色谱法纯化(己烷:乙酸乙酯=1:1)，得到6'-氯-5-氟-3-甲基-2'-(吡啶-2-基)-2,3-二氢-1'H-螺[茚-1,4'-嘧啶]-5'-甲酸甲酯(0.42 g)。将6'-氯-5-氟-3-甲基-2'-(吡啶-2-基)-2,3-二氢-1'H-螺[茚-1,4'-嘧啶]-5'-甲酸甲酯(400 mg，1.03 mmol)、Pd(OAc)2 (22 mg，0.10 mmol)、丁基二-1-金刚烷基膦(35.8 mg，0.103 mmol)、(吗啉-4-基)甲基三氟硼酸钾(256 mg，1.23 mmol)、Cs2CO3 (669 mg，2.06 mmol)、DME (10 mL)和H2O (1mL)的混合物在140℃的微波照射下搅拌50分钟。将反应混合物在真空中浓缩并将所得的残留物溶于乙酸乙酯并用盐水(2 x 10 mL)洗涤。将有机层浓缩至干。将粗产物经制备型高效液相色谱法纯化(洗脱液：CH3CN/ H2O= 30/70至80/ 20, 0.1% CF3COOH)。收集所需流分并用K2CO3将溶液的pH值调整至约8。然后，在减压下除去有机溶剂。将水层用乙酸乙酯萃取(3x 20 mL)。将有机层合并并用Na2SO4干燥。将溶液蒸发并将粗产物在真空干燥，得到化合物146 (60 mg，7/3非手性异构性混合物)。方法J；Rt: 6.44 m/z；451.2 (M+H)+ 精确质量：450.2。
化合物147
将氮气鼓泡通入化合物140 (130 mg，0.24 mmol)和饱和的碳酸钾溶液(2.5 mL)在二噁烷(4 mL)中的溶液10分钟。加入反式-3-甲氧基-1-丙烯基三氟硼酸钾(64 mg，0.36mmol)和[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(II)二氯甲烷加成物(9.8 mg，0.012 mmol)并将反应混合物在密封试管内在80℃加热2小时。将反应混合物浓缩。将残留物溶于CH2Cl2(30 mL)和水(20 mL)中。将有机层经HM-N柱干燥并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法纯化(洗脱液：在庚烷中5至100%的EtOAc)。将产物流分合并并浓缩，得到(E)-1-叔丁基5-甲基4-(3,4-二氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-(3-甲氧基丙-1-烯基)-4-甲基嘧啶-1,5(4H)-二甲酸酯的透明油(94 mg)。将在二噁烷中的HCl (1 mL，4 M)添加至上面化合物(94 mg)在甲醇(5 mL)的溶液中并在室温搅拌过夜。将反应混合物浓缩并在真空干燥过夜。将所得的残留物溶于CH2Cl2 (5 mL)，用饱和的NaHCO3 (5 mL)洗涤，将有机层经HM-N柱干燥并在真空中浓缩。将所得的残留物在50℃的真空干燥过夜，得到化合物147 (61 mg)，为黄色树脂。方法K；Rt: 2.20 m/z；450.2 (M+H)+ 精确质量：449.1。
化合物148
化合物149
在小瓶内加入3-氯-4-氟苯基乙炔(6 g，38.8 mmol)、丙二酸二甲酯(4.4 mL，38.8mmol)和氯化铟(III) (257 mg，1.16 mmol)。将混合物在130℃搅拌18小时，使其达到室温并原样使用。将部分此反应混合物(4.21 g粗混合物)和3,5-二氟皮考啉基脒(3,5-difluoropicolinimidamide) (3.46 g，22 mmol)在1,4-二噁烷(63 mL)中在40℃搅拌并加热90分钟。将所得的反应混合物在减压下浓缩，加入磷酰氯(27.3 mL，293.81 mmol)并将此混合物在110℃的油浴中加热并搅拌7小时。将所得的混合物在减压下浓缩。将所得的残留物用碳酸氢钠(饱和水溶液，150 mL)处理并搅拌30分钟。将此用二氯甲烷(3 x 100 mL)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗物质使用硅胶柱色谱法纯化(梯度：庚烷-二氯甲烷60:40至40:60)。将所需流分在减压下浓缩。将所得的粗物质再次使用硅胶柱色谱法纯化(梯度：100:0至90:10庚烷-乙酸乙酯)，得到6-氯-4-(3-氯-4-氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-4-甲基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(774 mg)，为黄色固体。将该化合物(500 mg，1.16 mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5 mL)中并将溶液用氮气冲洗10分钟。然后，加入四甲基锡(322μl，2.32 mmol)，随后加入双(三叔丁基膦)钯(0) (59.4 mg，0.12 mmol)，将小瓶用氮气冲洗并封盖。将混合物在140℃的微波照射下加热60分钟。将混合物在真空蒸干。将所得的残留物溶于乙醚中并将有机层用蒸馏水(3 x 10 mL)洗涤。将有机层用Na2SO4干燥并在减压下浓缩。将粗物质经制备型HPLC纯化(Hypersyl C18 BDS-3μm，100 x 4.6 mm)，流动相(NH4OAc 0.5%在水中，ACN)。收集所需流分，在真空将有机溶剂移除并将水层用二氯甲烷萃取。将有机层合并并在减压下浓缩，得到化合物148 (211 mg)和化合物149 (29 mg)，为黄色固体。化合物148方法A；Rt: 1.13 m/z；410.1 (M+H)+ 精确质量：409.1。化合物149方法A；Rt: 1.09 m/z；390.1 (M+H)+ 精确质量：389.1。
化合物150
在微波小瓶内加入6-氯-4-(3-氯-4-氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-4-甲基-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(478 mg，1.11 mmol)、碳酸铯(2.18 g，6.68 mmol)、(吗啉-4-基)甲基三氟硼酸钾(276.5 mg，1.34 mmol)、蒸馏水(1 mL)和1,2-二甲氧基乙烷(3 mL)。将混合物用氮气冲洗5分钟。然后加入乙酸钯(II) (50.4 mg，0.22 mmol)和丁基二-1-金刚烷基膦(63.8 mg，0.18 mmol)并将混合物用氮气冲洗另外2分钟。将小瓶封盖并在100℃的微波照射下加热25分钟。使混合物冷却至室温并溶于二氯甲烷(5 mL)和水(5 mL)中。分离各层并将水层用二氯甲烷(2 x 5 mL)萃取。将合并的萃取液用Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将所得的粗物质经制备型HPLC纯化(Hypersyl C18 BDS-3μm100 x 4.6 mm)，流动相(NH4OAc 0.5%在水/乙腈中)。收集所需流分，在真空中除去有机溶剂并将所得的水层用二氯甲烷(2 x 10 mL)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并在减压下浓缩，得到化合物150。方法A；Rt: 1.22 m/z；495.1 (M+H)+ 精确质量：494.1。
化合物151
外消旋混合物151的对映体：151a和151b
将在二氯甲烷(28 mL)中的四氯化钛(11.4 mL，104.1 mmol)逐滴添加至在氮气氛下并在冰浴中冷却的含有四氢呋喃(205 mL)的烧瓶中。然后立即加入1-(3,4-二氟苯基)-2,2-二氟-乙酮(10 g，52 mmol)和丙二酸二甲酯(5.93 mL，52 mmol)两者。将所得的混合物在氮气氛下搅拌60分钟，同时持续冷却。然后，将在四氢呋喃(37 mL)中的吡啶(16.8 mL，208 mmol)添加至混合物中并使其温热至室温并搅拌过夜。此后，将蒸馏水(40 mL)和乙醚(40 mL)添加至混合物中。分离各层并将水层用乙醚(2 x 40 mL)萃取。将合并的有机层用盐水(60 mL)、NaHCO3 (60 mL) (aq / sat)和再次用盐水(60 mL)洗涤。将有机层用MgSO4干燥，过滤并在减压下浓缩，得到2-(1-(3,4-二氟苯基)-2,2-二氟亚乙基)丙二酸二甲酯(15.6 g)的透明油。将2-(1-(3,4-二氟苯基)-2,2-二氟亚乙基)丙二酸二甲酯(5 g)溶于1,4-二噁烷(25 mL)中并用3,5-二氟吡啶-2-甲脒(3.1 g，19.6 mmol)处理。将所得的混合物在40℃搅拌过夜。将混合物在减压下浓缩并将所得的残留物经硅胶柱色谱法纯化(乙酸乙酯-庚烷0:100至50:50)，得到为黄色油的4-(二氟甲基)-4-(3,4-二氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氧代-1,4,5,6-四氢嘧啶-5-甲酸甲酯(5.45 g)，其原样使用。将4-(二氟甲基)-4-(3,4-二氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-氧代-1,4,5,6-四氢嘧啶-5-甲酸甲酯用磷酰氯(10 mL，107.6 mmol)处理并将混合物在回流下搅拌2小时。将混合物在减压下浓缩，得到黑色焦油，将其用冰-水(50 mL)处理。将其用二氯甲烷(3 x 30 mL)萃取。将合并的萃取液用盐水洗涤(30 mL)，用MgSO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将所得的粗物质经硅胶色谱法纯化，使用梯度洗脱(庚烷-二氯甲烷100:0至25:75)，得到为微黄色固体的6-氯-4-(二氟甲基)-4-(3,4-二氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(1.95g)，其原样使用。将6-氯-4-(二氟甲基)-4-(3,4-二氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(450 mg，1 mmol)溶于微波小瓶内的N,N-二甲基甲酰胺(6.4 mL)中并用氮气吹洗10分钟。然后加入四甲基锡(0.21 mL，1.5 mmol)，随后加入双(三叔丁基膦)钯(0) (51 mg，0.1 mmol)，将小瓶用氮气吹洗并封盖。将混合物在140℃的微波照射下加热10分钟。将混合物在真空中浓缩并与甲苯(2 x 20 mL)共同蒸发。将所得的残留物溶于水-二氯甲烷(30 mL-30 mL)中并将水层萃取另外两次(2 x 30 mL二氯甲烷)。将合并的萃取液用Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将残留物经制备型HPLC纯化(Hypersyl C18 BDS-3μm，100 x 4.6 mm)，流动相(在水中的NaHCO3 0.5%, CH3CN)。将所需流分浓缩并与甲醇(2 x 10mL)共同蒸发。将所得的残留物在真空干燥，得到化合物151，为黄色油。使用制备型SFC (固相：Chiralcel Diacel OJ 20 x 250 mm/流动相：CO2, EtOH含0.2% iPrNH2)将外消旋性混合物151分离成对映体151a和151b ，得到为黄色粘稠固体的化合物151a (93 mg)和为黄色粘稠固体的化合物151b (100 mg)。化合物151:方法A；Rt: 1.11 m/z；430.0 (M+H)+ 精确质量：429.1。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d, 互变异构混合物，描述主要的异构体) δppm 2.36(s, 3 H), 3.69 (s, 3 H), 6.71 (t, J= 56 Hz, 1 H), 7.07 (dt, J= 10.0, 8.5 Hz,1 H), 7.26 - 7.31 (m, 1 H), 7.32 - 7.43 (m, 2 H), 8.29 (d, J= 2.0 Hz, 1 H),8.34 (br. s., 1 H)。SFC: 柱：OJ-H 250 mmx 4.6 mm；流速：3 mL/分钟；流动相：5 % EtOH(含0.2% iPrNH2)保持15.00分钟，温度：30℃: 化合物151a Rt: 3.9分钟；化合物151b Rt:4.4分钟)。
化合物152
在微波小瓶内，将化合物131 (180 mg，0.435 mmol)在DMF (2 mL)中的溶液搅拌并用氮气吹洗10分钟。然后，加入三丁基(甲氧基甲基)锡烷(219 mg，0.653 mmol)，随后加入双(三叔丁基膦)钯(0) (44.5 mg，0.087 mmol)，将小瓶用氮气吹洗并封盖。将反应混合物在140℃的微波照射下加热30分钟并使其达到室温。将反应混合物在真空中浓缩后得到粘稠油。将此油使用制备型HPLC纯化(Hypersyl C18 BDS-3μm，100 x 4.6 mm；流动相(NH4HCO3 0.2%在水中，乙腈)。将所需流分合并并蒸发，在残留的溶剂(水)中形成沉淀物。将固体过滤并用水洗涤，在50℃的真空干燥后得到化合物152 (23 mg)，为灰白色固体。方法A；Rt: 1.18 m/z；424.1 (M+H)+ 精确质量：423.1。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d)δppm 1.92(s, 3 H), 3.49 (s, 3 H), 3.51 (s, 3 H), 4.61 (d, J=16.0 Hz, 1 H), 4.67 (d, J=16.0 Hz, 1 H), 7.06 (dt, J=10.0, 8.5 Hz, 1 H), 7.15 - 7.22 (m, 1 H), 7.24 -7.33 (m, 2 H), 8.33 (d, J=2.0 Hz, 1 H), 9.04 (br. s, 1 H)。
化合物153
在试管内加入化合物140 (150 mg，0.277 mmol)、1,4-二噁烷(4 mL)和饱和的碳酸钾水溶液(3 mL)。将反应混合物用氮气吹洗10分钟并加入乙烯基三氟硼酸钾(55.7 mg，0.416 mmol)和 [1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(II)二氯甲烷加成物(11.3 mg，0.0139 mmol)。将反应混合物用氮气吹洗，将试管密封并在80℃加热20小时后使其达到室温。将二氯甲烷(25 mL)添加至反应混合物中。将分离的有机层用饱和的碳酸钠水溶液(2 x5 mL)、水(5 mL)和盐水(5 mL)洗涤。将有机层溶液干燥(Na2SO4)并浓缩。使用硅胶柱色谱法纯化残留物(在庚烷中的乙酸乙酯从0 %至15 %)，得到为黄色粘稠油的1-叔丁基5-甲基4-(3,4-二氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-4-甲基-6-乙烯基嘧啶-1,5(4H)-二甲酸酯(60mg)，将其在40℃的真空炉中干燥过夜并原样用在下一步骤。方法A；Rt: 1.30 m/z；506.1(M+H)+ 精确质量：505.2。将1-叔丁基5-甲基4-(3,4-二氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-4-甲基-6-乙烯基嘧啶-1,5(4H)-二甲酸酯(60 mg，0.119 mmol)、HCl (4M在二噁烷中)(4.00 mL，16.0 mmol)和甲醇(2 mL)在50℃搅拌1小时。将反应混合物浓缩至干，得到黄色粘稠残留物，其使用硅胶柱色谱法纯化(在庚烷中的二氯甲烷从40至100%)，在真空干燥后得到化合物153 (41 mg)。方法A；Rt: 1.18 m/z；406.1 (M+H)+ 精确质量：405.1。
化合物154
在微波小瓶内，将化合物132 (75 mg，0.183 mmol)在DMF (1 mL)中的溶液搅拌并用氮气吹洗10分钟。然后，加入四甲基锡(38.0μl，0.275 mmol)，随后加入双(三叔丁基膦)钯(0) (18.7 mg，0.0366 mmol)，将小瓶用氮气冲洗并封盖。将反应混合物在140℃的微波照射下加热1小时，并使其达到室温。将反应混合物在真空中浓缩，得到深色树脂。将产物与甲醇(10 mL)混合并过滤。将滤液蒸发至干得到深色油性残留物。将油溶于二氯甲烷(30mL)中，用水(2 x 10 mL)、盐水(5 mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并蒸发，得到棕色油。将此油使用硅胶柱色谱法纯化(在庚烷中从5至30%的乙酸乙酯)。将含所要产物的全部流分合并并在真空中浓缩，得到化合物154，为黄色粘稠油。方法A；Rt: 1.17 m/z；390.1 (M+H)+ 精确质量：389.1。1H-NMR (600 MHz, 苯-d6 )；互变异构混合物(~9/1)，描述主要的异构体；δppm 1.90 (s, 3 H), 2.00 (s, 3 H), 2.34 (t, J=0.6 Hz, 3 H), 3.18 (s, 3 H),6.52 (ddd, J=9.1, 2.8, 0.7 Hz, 1 H), 6.81 (dt, J=10.2, 8.5 Hz, 1 H), 7.14 -7.18 (m, 1 H), 7.50 (ddd, J=12.2, 7.8, 2.3 Hz, 1 H), 7.91 (d, J=2.8 Hz, 1 H),8.21 (br. s., 1 H)。
化合物155
外消旋性混合物155的对映体：155a和155b
将化合物129 (2 g，6.29 mmol)和2-噻唑甲脒(1.04 g，8.18 mmol)在DMF (10mL)中的混合物在60℃搅拌并加热6小时。将反应混合物倒入水中，将沉淀物过滤并溶于二氯甲烷中。将有机溶剂干燥(Na2SO4)并在真空中浓缩至干，得到含4-(3,4-二氟苯基)-4-甲基-6-氧代-2-(噻唑-2-基)-1,4,5,6-四氢嘧啶-5-甲酸甲酯(1.91 g)的粗混合物。方法A；Rt: 1.04 m/z；366.0 (M+H)+ 精确质量：365.1。将4-(3,4-二氟苯基)-4-甲基-6-氧代-2-(噻唑-2-基)-1,4,5,6-四氢嘧啶-5-甲酸甲酯(1.91 g粗物质)和POCl3 (7 mL，78 mmol)在密封试管内的混合物在120℃搅拌75分钟。将反应混合物在50℃的氮气流下浓缩。将所得的残留物溶于二氯甲烷(50 mL)中并用饱和的碳酸氢钠水溶液(50 mL)洗涤。将有机相干燥(Na2SO4)并在真空中浓缩，得到深棕色残留物。将所得的残留物使用硅胶柱色谱法纯化(等度二氯甲烷)，得到6-氯-4-(3,4-二氟苯基)-4-甲基-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(721 mg粗物质)。方法A；Rt: 1.10 m/z；384.0 (M+H)+ 精确质量：383.0。将6-氯-4-(3,4-二氟苯基)-4-甲基-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(356 mg，0.751mmol)在微波小瓶内的DMF (2 mL)中的溶液搅拌，并用氮气冲洗10分钟。加入四甲基锡(156μl，1.13 mmol)，随后加入双(三叔丁基膦)钯(0) (76.8 mg，0.15 mmol)，将小瓶用氮气吹洗并封盖。将反应混合物在140℃的微波照射下加热30分钟并使其达到室温。将反应混合物蒸发至干。将残留物溶于二氯甲烷并用水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发至干，得到棕色油。将所得的粗物质使用硅胶柱色谱法纯化(在庚烷中从10至30%的乙酸乙酯)，得到化合物155 (153 mg)。方法A；Rt: 1.12 m/z；364.1 (M+H)+ 精确质量：363.1。1H NMR (400 MHz,氯仿-d, 互变异构混合物(~8/2)，描述主要的异构体) δ ppm 1.87 (s, 3 H), 2.29 (s,3 H), 3.49 (s, 3 H), 7.06 (dt, J=10.0, 8.5 Hz, 1 H), 7.13-7.20 (m, 1 H), 7.23- 7.32 (m, 1 H), 7.44 (d, J=3.0 Hz, 1 H), 7.73 (br. s., 1 H), 7.82 (d, J=3.0Hz, 1 H)。经制备型SFC (固相：Chiralpak Diacel AD 30 x 250 mm)，流动相：CO2，乙醇)将外消旋性混合物155分离成对映体155a和155b，得到化合物155a (54 mg)和化合物155b(50 mg)。柱：AD-H 250 mmx 4.6 mm；流速：3 mL/分钟；流动相：5 % EtOH (含0.2% iPrNH2)保持15.00分钟；温度：30℃ 化合物155a Rt (4.0分钟) 化合物155b Rt (4.9分钟)。
化合物156
化合物157
类似于如对化合物148和149描述的路径制备，从1-氯-4-乙炔基-2-氟-苯代替3-氯-4-氟苯基乙炔开始。2-(1-(3-氯-4-氟苯基)亚乙基)丙二酸二甲酯与3,5-二氟皮考啉基脒在1,4-二噁烷中的反应在40℃进行18小时。化合物156:方法A；Rt: 1.13 m/z；410.1 (M+H)+ 精确质量：409.1。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d, 含一滴TFA) δ ppm 2.22 (s, 3 H),2.50 (s, 3 H), 3.60 (s, 3 H), 7.28 (ddd, J=8.4, 2.4, 0.7 Hz, 1 H), 7.33 (dd,J=9.7, 2.2 Hz, 1 H), 7.47 (dd, J=8.4, 7.5 Hz, 1 H), 7.57 (ddd, J=10.8, 7.0,2.2 Hz, 1 H), 8.49 (d, J=2.2 Hz, 1 H)。
化合物156. MsOH: 类似于化合物132b制备，从化合物156代替132b开始。
化合物157方法A；Rt: 1.09 m/z；390.1 (M+H)+ 精确质量：389.1。1H NMR (400MHz, 氯仿-d，含一滴TFA) δ ppm 2.20 (s, 3 H), 2.29 (d, J=1.8 Hz, 3 H), 2.48 (s,3 H), 3.58 (s, 3 H), 7.13 - 7.21 (m, 2 H), 7.22 - 7.29 (m, 1 H), 7.56 (ddd, J=10.8, 7.2, 2.2 Hz, 1 H), 8.49 (d, J=2.0 Hz, 1 H)。
外消旋性混合物158的对映体：158a和158b
化合物158经由类似于如对化合物132描述的路径，从化合物129制备，使用3-氟-2-吡啶甲脒代替3,5-二氟-2-吡啶甲脒。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d，互变异构混合物(~9/1)，描述主要的异构体) δ ppm 1.90 (s, 3 H), 2.30 (s, 3 H), 3.52 (s, 3 H), 7.05(dt, J=10.0, 8.0 Hz, 1 H), 7.20-7.26 (m, 1 H), 7.33 (ddd, J=12.0, 8.0, 2.0Hz, 1 H), 7.41 (ddd, J=8.0, 4.5, 3.5 Hz, 1 H), 7.50 (ddd, J=10.0, 8.5, 1.5Hz, 1 H), 8.16 (br. s., 1 H), 8.38 (dt, J=4.6, 1.3 Hz, 1 H)。经制备型SFC在(Chiralpak Diacel AD 30 x 250 mm)上分离外消旋性混合物158 (135 mg)成对映体158a和158b。流动相(CO2,乙醇)，收集所需流分，蒸发，溶于甲醇中并再次蒸发，得到化合物158a和化合物158b。柱：AD-H 250 mmx 4.6 mm，流速：3 mL/分钟；流动相：3% EtOH (含0.2%iPrNH2)保持17.5分钟；温度：30℃；化合物158a Rt (7.2分钟；376.1 (M+H)+)，化合物158bRt (8.6分钟；376.1 (M+H)+)。
化合物159
外消旋性混合物159的对映体：159a和159b
将化合物129 (4 g粗物质)、2-嘧啶甲脒(2.35 g，19.2 mmol)和1,4-二噁烷(25mL)的混合物在40℃搅拌72小时并使其达到室温。将反应混合物蒸发至干，得到棕色残留物。在圆底烧瓶内将此残留物与磷酰氯(20.9 mL，225 mmol)在120℃搅拌45分钟。将反应混合物在50℃的真空中浓缩并与甲苯(2 x 100 mL)共同蒸发。将残留物溶于二氯甲烷(250mL)中并用饱和的碳酸氢钠水溶液(100 mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发，得到深棕色残留物。将此残留物使用硅胶柱色谱法纯化(在庚烷中的二氯甲烷从50至100%)，得到6-氯-4-(3,4-二氟苯基)-4-甲基-2-(嘧啶-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(1800 mg)，为淡黄色固体。在微波小瓶内将6-氯-4-(3,4-二氟苯基)-4-甲基-2-(嘧啶-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸甲酯(900 mg)在1,4-二噁烷(10 mL)中的溶液搅拌并用氮气吹洗10分钟。然后加入四甲基锡(494μl，3.56 mmol)，随后加入双(三叔丁基膦)钯(0) (243 mg，0.475 mmol)，将小瓶用氮气冲洗并封盖。将反应混合物在140℃的微波照射下加热30分钟并使其达到室温。将反应混合物搅拌并用氮气吹洗10分钟，加入双(三叔丁基膦)钯(0) (121 mg，0.238 mmol)，将小瓶用氮气吹洗并封盖。将反应混合物在145℃的微波照射下加热30分钟并使其达到室温。将反应混合物在真空中浓缩。将所得的残留物与二氯甲烷(100 mL)混合并滤除橙色沉淀物。将滤液用水(2 x 20 mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并在真空中浓缩。将所得的残留物使用硅胶柱色谱法纯化(在庚烷中的乙酸乙酯从20至100%)，得到化合物159，为黄色粘稠油。方法A；Rt:0.86 m/z；359.2 (M+H)+ 精确质量：358.1。经制备型SFC (固相：Chiralpak Diacel AD 30x 250 mm)，流动相：CO2，乙醇)纯化外消旋性混合物159，得到化合物159a和159b，为黄色粉末。柱：AD-H 250 mmx 4.6 mm；流速：3 mL/分钟；流动相：10 % EtOH (含0.2% iPrNH2)保持15.00分钟；温度：30℃；化合物159a: Rt (3.2分钟)，化合物159b Rt (4.5分钟)。1H NMR(360 MHz, 氯仿-d，互变异构混合物(~9/1)，描述主要的异构体) δ ppm 1.96 (s, 3 H),2.34 (s, 3 H), 3.49 (s, 3 H), 7.04 (dt, J=10.0, 8.0 Hz, 1 H), 7.19 - 7.24 (m,1 H), 7.30 (ddd, J=12.0, 8.0, 3.0 Hz, 1 H), 7.40 (t, J=5.0 Hz, 1 H), 8.41(br. s., 1 H), 8.86 (d, J=5.0 Hz, 2 H)。
化合物160
160的对映体：160a和160b
在高压试管内加入乙酰乙酸甲酯(54.6 mL，507 mmol)、3,4-氟苯基乙炔(70.0 g，507 mmol)和氯化铟(III) (5.61 g，25.3 mmol)并密封。将反应混合物在130℃搅拌18小时，然后冷却至室温。含2-乙酰基-3-(3,4-二氟苯基)丁-2-烯酸甲酯的反应混合物原样用在下一步骤。在氮气氛下，将S-甲基异硫脲半硫酸盐(85.2 g，305.9 mmol)、粗2-乙酰基-3-(3,4-二氟苯基)丁-2-烯酸甲酯(128.9 g)、碳酸氢钠(170.3 g，2.03 mol)和无水N,N-二甲基甲酰胺(900 mL)的混合物在50℃加热20小时。使反应混合物冷却至室温，用氮气冲洗45分钟并加入水(600 mL)。将水性混合物用乙醚(4 x 300 mL)萃取。将合并的有机萃取液用水(300 mL)和盐水(300 mL)洗涤，用Na2SO4干燥并在减压下浓缩。将残留物使用甲苯(2 x200 mL)共同蒸发，得到棕色油。将其溶于二氯甲烷(150 mL)中。经3小时后将晶体收集在滤纸上并用二氯甲烷(2 x 30 mL)洗涤后得到化合物160，为白色晶体(25.8 g)。方法A；Rt:1.04 m/z；327.1 (M+H)+ 精确质量：326.1。1H-NMR (400 MHz, 氯仿-d，含一滴TFA) δ ppm2.04 (s, 3 H), 2.31 (s, 3 H), 2.65 (s, 3 H), 3.54 (s, 3 H), 7.10 - 7.33 (m, 3H)。经制备型SFC (固相：Chiralcel Diacel OJ 20 x 250 mm)，流动相：CO2, iPrOH)将外消旋性混合物160 (20 g)分离成其对映体160a和160b，使用硅胶柱色谱法进一步纯化后(在庚烷中的乙酸乙酯15%),得到化合物160a (9.1 g)和160b (8.6 g)。SFC:柱：OJ-H 250mmx 4.6 mm；流速：3 mL/分钟；流动相：5 % iPrOH (含0.2% iPrNH2)保持15.00分钟，温度：30℃化合物160a: Rt (6.2-7.0分钟)；化合物160b: Rt (7.4-8.2分钟)。
化合物155b的替代合成
在微波小瓶内加入化合物160b (200 mg，0.613 mmol)、溴化亚铜(I) -二甲基硫(504 mg，2.45 mmol)、2-(三丁基甲锡烷基)噻唑(688 mg，1.8 mmol)和1, 2-二甲氧基乙烷(6 mL)。将反应混合物用氮气吹洗并搅拌10分钟，加入乙酸钯(II)(7 mg，0.0306 mmol)和丁基二-1-金刚烷基膦(22.0 mg，0.0613 mmol)。将小瓶用氮气吹洗并封盖。将混合物在140℃的微波照射下搅拌并加热30分钟。将混合物用CH2Cl2 (50 mL)稀释并用氨水(2 x 50 mL；25%)和盐水(50 mL)洗涤。然后用Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。使用硅胶柱色谱法纯化残留物(在庚烷中的乙酸乙酯15 %)，得到化合物155b，为黄色固体。1H NMR ghache_915_1(400 MHz, DMSO-d6，含一滴TFA)δppm 1.99 (s, 3 H), 2.28 (s, 3 H), 3.46 (s, 3 H),7.31 - 7.51 (m, 2 H), 7.58 - 7.71 (m, 1 H), 8.19-8.25 (m, 1 H), 8.25 - 8.34(m, 1 H)。
化合物161
在微波小瓶内加入1,2-二甲氧基乙烷(9 mL)、化合物160 (295 mg，0.9 mmol)、2-(三丁基甲锡烷基)吡嗪(854μl，2.71 mmol)、溴化亚铜(I)-二甲基硫(743 mg，3.61 mmol)并将其用氮气冲洗并搅拌10分钟。然后加入乙酸钯(II) (10 mg，0.045 mmol)和丁基二-1-金刚烷基膦(32 mg，0.09 mmol)，将小瓶用氮气冲洗并封盖。将此混合物在140℃的微波照射下搅拌并加热30分钟。将混合物用乙醚(100 mL)稀释并用氨水(2 x 100 mL，25%)和盐水(100 mL)洗涤。然后用MgSO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将所得的残留物使用反相HPLC纯化(甲醇- NH4HCO3 /柱：Hypersil C18 BDS_3μm)。将所需流分在减压下浓缩并与甲醇(2 x50 mL)共同蒸发。使用硅胶柱色谱法纯化残留物，梯度洗脱(庚烷-乙酸乙酯100:0至70:30)。将所得的流分在减压下浓缩并在55℃的真空干燥，得到化合物161的微黄色粉末(46mg)。方法A；Rt: 1.00 m/z；359.1 (M+H)+ 精确质量：358.1。
化合物162
在氮气氛下，将化合物160 (250 mg，0.77 mmol)、1-甲基-2-(三丁基甲锡烷基)咪唑(0.54 mL，1.69 mmol)和溴化亚铜(I)-二甲基硫(346 mg，1.69 mmol)添加至四氢呋喃(12.5 mL)中。将此溶液在室温搅拌10分钟后加入四(三苯基膦)钯(44.26 mg，0.038mmol)。将所得的混合物回流24小时。将此混合物经硅藻土过滤并用乙酸乙酯(50 mL)洗涤。将残留物在减压下浓缩。将所得的粗物质使用硅胶柱色谱法纯化(梯度洗脱：二氯甲烷-甲醇：100:0至99:1)。收集所需流分并在减压下浓缩，得到黄色油。将此油经制备型HPLC在(RPSunFire Prep C18 OBD-10μm，30x150 mm)上纯化。流动相(在水中的0.25% NH4HCO3溶液，MeOH)。将收集的流分在减压下浓缩并使用甲醇(2 x 20 mL)共同蒸发。将所得的残留物在55℃真空干燥，得到化合物162，为黄色油(21 mg)。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ ppm1.85 (s, 3 H), 2.29 (s, 3 H), 3.49 (s, 3 H), 3.91 (s, 3 H), 6.92 (s, 1 H),7.00 (s, 1 H), 7.01 - 7.10 (m, 1 H), 7.12 - 7.20 (m, 1 H), 7.22 - 7.31 (m, 1H), 7.92 (br. s., 1 H)。
外消旋性化合物163的对映体：163a, 163b
将化合物131 (500 mg，1.21 mmol)、1,4-二氮杂二环[2.2.2]辛烷(0.203 g，1.81mmol)、四丁基氰化铵(0.487 g，1.81 mmol)和无水乙腈(10 mL)与分子筛在100℃的密封微波试管内搅拌并加热90分钟并使其达到室温。将反应混合物在真空中浓缩。将残留物溶于二氯甲烷(50 mL)中并用水(50 mL)洗涤。将水层用二氯甲烷(2 x 50 mL)萃取并将合并的有机层用盐水洗涤(50 mL)，干燥(Na2SO4)，过滤并在真空中浓缩。将所得的残留物使用硅胶柱色谱法纯化(等度二氯甲烷)。将所需流分在真空中浓缩并经制备型SFC在(ChiralcelDiacel OJ 20 x 250 mm)上进一步纯化。流动相(CO2，含0.2%异丙胺的乙醇)，得到分离的对映体，其使用硅胶柱色谱法进一步纯化(在庚烷中的乙酸乙酯从0至95%)，在50℃的真空干燥过夜，得到化合物163a (24 mg)和化合物163b (25 mg)，为黄色粉末。1H NMR (400MHz, 氯仿-d, 含一滴TFA) δ ppm 2.33 (s, 3 H), 3.77 (s, 3 H), 7.21 - 7.33 (m, 2H), 7.39 (ddd, J=10.5, 7.0, 2.0 Hz, 1 H), 7.58 (ddd, J=10.5, 7.0, 2.0 Hz, 1H), 8.51 (d, J=2.0 Hz, 1 H).方法E；Rt: 1.05 m/z；405.1 (M+H)+ 精确质量：404.1。SFC: 柱：OJ-H 250 mmx 4.6 mm；流速：3 mL/分钟；流动相：10% EtOH (含0.2% iPrNH2)保持15.00分钟；温度：30℃；化合物163a Rt (4.5分钟)；化合物163b Rt (5.4分钟)。
化合物164
在氮气氛下，向锌粉(704 mg，10.8 mmol)于无水THF (50 mL)中的混合物中依序加入1,2二溴乙烷(0.016 mL，0.181 mmol)和三甲基氯甲硅烷(114 mg，1.05 mmol)。加入2-溴-5-氟-苯甲醛(2.13 g，10.50 mmol)和溴二氟乙酸乙酯(2.13 g，10.50 mmol)在THF (25mL)中的溶液并将反应混合物回流过夜。将混合物冷却并倒入冰/水(250 mL)中。在搅拌下加入HCl 1M (100 mL)。将混合物搅拌1小时并用叔丁基甲基醚(200 mL)萃取。分离有机层，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得的残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用在庚烷中从5至100%的EtOAc梯度。将产物流分合并并在真空中浓缩，得到3-(2-溴-5-氟苯基)-2,2-二氟-3-羟基丙酸乙酯(1096 mg)。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.35 (t, J=7.0 Hz, 3H), 4.37 (q, J=7.0 Hz, 2 H), 5.72 (ddd, J=15.7, 6.1, 1.0 Hz, 1 H), 6.99 (ddd,J=8.8, 7.7, 3.1 Hz, 1 H), 7.39 (ddd, J=9.5, 3.1, 1.0 Hz, 1 H), 7.54 (dd, J=8.8, 5.3 Hz, 1 H)。以更大量的2-溴-5-氟-苯甲醛(71.2 g，351 mmol)重复此程序，得到3-(2-溴-5-氟-苯基)-2,2-二氟-3-羟基-丙酸乙酯(86 g)。在15分钟期间，将DAST (48.3mL，394.4 mmol)逐滴添加至在冰浴中的3-(2-溴-5-氟-苯基)-2,2-二氟-3-羟基-丙酸乙酯(86 g)在二氯甲烷(500 mL)中的溶液。将反应混合物搅拌并使其达到室温过夜。经15分钟将混合物缓慢添加至剧烈搅拌的饱和NaHCO3溶液(1.5升)。将混合物再搅拌30分钟。将有机层经硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到为淡棕色油的3-(2-溴-5-氟苯基)-2,2,3-三氟丙酸乙酯(78.0 g)，其原样使用。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ ppm 1.38 (t, J=7.2 Hz, 3 H),4.37-4.44 (m, 2 H), 6.19 - 6.41 (m, 1 H), 7.01 - 7.10 (m, 1 H), 7.29 - 7.37(m, 1 H), 7.58 (ddd, J=8.9, 5.1, 1.2 Hz, 1 H)。将3-(2-溴-5-氟-苯基)-2,2,3-三氟-丙酸乙酯(55.4 g，163.5 mmol)、氢氧化锂(3.92 g，163.5 mmol)、THF (100 mL)和蒸馏水(200 mL)在室温下搅拌5分钟，得到透明溶液(1层)。将反应混合物用HCl 1M (164 mL)酸化。将所得的乳液用CH2Cl2 (500 mL)萃取。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到淡棕色油(58.7 g)。在15分钟期间，向于二氯甲烷(2.6 L)和DMF (7 mmol)中的一部分此油(52.5 g)中加入草酰氯(89.3 g)，并将混合物搅拌过夜。将反应混合物浓缩，得到淡棕色油，其原样使用。向于二氯甲烷(1000 mL)中的此油中加入 N,O-二甲基羟胺盐酸盐(16.07g，149.8 mmol)和碳酸钠(17.46 g，164.8 mmol)并将混合物搅拌90分钟。加入水(500 mL)并将混合物搅拌5分钟。将有机层分离，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用在CH2Cl2中从0至10%的CH3OH梯度。将产物流分合并并浓缩，得到3-(2-溴-5-氟苯基)-2,2,3-三氟-N-甲氧基-N-甲基丙酰胺(37.1 g)。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ ppm3.32 (s, 3 H), 3.82 (s, 3 H), 6.41 - 6.64 (m, 1 H), 7.01-7.07 (m, 1 H), 7.34- 7.41 (m, 1 H), 7.56 (ddd, J=8.9, 5.2, 1.1 Hz, 1 H)。将丁基锂(49.5 mL，1.6M在己烷中)在30分钟期间及-70℃下添加至3-(2-溴-5-氟-苯基)-2,2,3-三氟-N-甲氧基-N-甲基-丙酰胺(25.9 g，75.4 mmol)在无水THF (225 mL)的溶液中。将混合物搅拌30分钟，然后在90分钟期间使其达到室温。将反应混合物用HCl (1M, 100 mL)猝灭并用二异丙醚(250mL)稀释。将水层用CH2Cl2 (250 mL)萃取两次。将合并的有机层经由硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用在庚烷中从5至100%的EtOAc梯度。将产物流分浓缩，得到为油状物的化合物164 (12.6 g)。方法L；Rt: 1.69 m/z；202.8 (M-H)- 精确质量：204.0。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ ppm 5.80 - 6.01 (m, 1 H), 7.42 (tt, J=8.6,1.8 Hz, 1 H), 7.47 - 7.54 (m, 1 H), 8.00 (ddd, J=8.6, 5.1, 1.3 Hz, 1 H)。
化合物165
将四氯化钛(16.29 mL)溶于CH2Cl2 (25 mL)并经10分钟逐滴添加至在冰浴中的化合物164 (2,2,3,5-四氟茚满-1-酮；12.6 g，61.5 mmol)和丙二酸二甲酯(12.2 g，92.3mmol)在无水THF (100 mL)和二氯甲烷(100 mL)的溶液中。将反应混合物搅拌10分钟。然后在5分钟期间加入吡啶(21.8 mL)，并使反应混合物在搅拌下达到室温过夜。将反应混合物用水(400 mL)猝灭并用CH2Cl2 (500 mL)稀释。将有机层分离，经由硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法纯化，梯度在庚烷中从10至100 %的EtOAc。将纯的产物部分合并并浓缩，得到化合物165 (21.0 g，含28% w/w丙二酸二甲酯)。方法L；Rt: 1.86 m/z；318.9 (M+H)+ 精确质量：318.1。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ ppm 3.90 (s, 3 H), 3.91(s, 3 H), 5.75 (ddd, J=53.9, 10.6, 2.9 Hz, 1 H), 7.18 - 7.26 (m, 1 H), 7.30(dt, J=7.5, 2.0 Hz, 1 H), 7.87 (ddd, J=8.9, 4.9, 1.4 Hz, 1 H)。
化合物166
外消旋性化合物166的对映体：166a和166b
将化合物165 (5.0 g，11.3 mmol)、2-噻唑甲脒盐酸盐(2.78 g，17.0 mmol)、碳酸氢钠(3.33 g)在二噁烷(100 mL)中在50搅拌过夜。然后将反应混合物在60℃搅拌2小时，在70℃搅拌2小时，并在80℃搅拌4小时，各次加入更多的噻唑甲脒(500 mg)。然后将混合物冷却，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用在庚烷中从10至100%的EtOAc梯度。收集产物流分并浓缩，得到含2,2,3,5-四氟-6'-氧代-2'-(噻唑-2-基)-2,3,5',6'-四氢-1'H-螺[茚-1,4'-嘧啶]-5'-甲酸甲酯(2.33 g)的淡黄色粘稠油。将此油性残留物(2.33 g)在POCl3 (10 mL)中在120℃搅拌5小时。将反应混合物浓缩。将所得的残留物溶于CH2Cl2 (100mL)中并倒入饱和的NaHCO3溶液(200 mL)中。将此混合物剧烈搅拌15分钟。将有机层分离，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将所得的残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用在庚烷中从10至100%的EtOAc梯度。将产物流分在真空中浓缩，得到6'-氯-2,2,3,5-四氟-2'-(噻唑-2-基)-2,3-二氢-1'H-螺[茚-1,4'-嘧啶]-5'-甲酸甲酯，为黄色粉末(799 mg)。方法L；Rt: 1.89及1.99 (4/6 比例) m/z；431.9 (M+H)+ 精确质量：431.0。
将氮气鼓泡通入6'-氯-2,2,3,5-四氟-2'-(噻唑-2-基)-2,3-二氢-1'H-螺[茚-1,4'-嘧啶]-5'-甲酸甲酯(799 mg)于DMF (7 mL)中的溶液。然后加入四甲基锡(331 mg，1.85mmol)和双(三叔丁基膦)钯(0) (95 mg，0.185 mmol)并将反应混合物在140℃的Biotage微波中加热1小时。将混合物过滤并在真空中浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用在庚烷中从10至100%的EtOAc梯度。将产物流分浓缩并在真空干燥，得到2,2,3,5-四氟-6'-甲基-2'-(噻唑-2-基)-2,3-二氢-1'H-螺[茚-1,4'-嘧啶]-5'-甲酸甲酯，为淡黄色树脂(577mg)。方法L；Rt: 1.91 m/z；412.3 (M+H)+ 精确质量：411.1。在10分钟期间，将氮气鼓泡通入溶于无水THF (50 mL)中的2,2,3,5-四氟-6'-甲基-2'-(噻唑-2-基)-2,3-二氢-1'H-螺[茚-1,4'-嘧啶]-5'-甲酸甲酯(565 mg)。加入双(三甲基甲硅烷基)氨基钾(11 mL，0.5 M甲苯，5.5 mmol)并将反应混合物在氮气流下搅拌30分钟。将混合物用水(10 mL)猝灭并部分浓缩。将残留物用CH2Cl2 (50 mL)和水(30 mL)萃取。将有机层经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用在庚烷中从10至100%的EtOAc梯度。将产物流分合并，浓缩，并将所得的残留物在50℃的真空中干燥，得到化合物166，为黄色粉末(272 mg)。方法L；Rt: 2.10 m/z；392.3 (M+H)+ 精确质量：391.1。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d)δppm 2.44(s, 3 H), 3.40 (s, 3 H), 6.86 (ddd, J=10.0, 8.0, 2.5 Hz, 1 H), 7.00 (dd, J=8.0, 2.5 Hz, 1 H), 7.15 (ddd, J=8.0, 5.0, 2.5 Hz, 1 H), 7.48 (d, J=3.0 Hz, 1H), 7.85 (d, J=3.0 Hz, 1 H), 8.01 (br. s., 1 H)。经制备型SFC (固相：ChiralcelDiacel OD 20 x 250 mm)，流动相：CO2, 异丙醇)，将外消旋性混合物166分离成对映体，收集所需流分，蒸发，溶于MeOH中并再度蒸发，得到化合物166a (103 mg)和化合物166b (96mg)，为黄色油。柱：OD-H 250 mmx 4.6 mm；流速：3 mL/分钟；流动相：5 % iPrOH (含0.2%iPrNH2)保持15.00分钟；温度：30℃；化合物166a Rt (9.9分钟) 化合物166b Rt (11.0分钟)。
化合物167
非对映异构混合物167的分离的非对映异构体：167A和167B
将化合物165 (10.2 g，23.1 mmol)、吡啶-2-甲脒盐酸盐(6.37 g，40.4 mmol)、碳酸氢钠(7.76 g，92.4 mmol)和二噁烷(200 mL)在60℃加热并搅拌6小时并在40℃进一步搅拌过夜。将反应混合物过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用在庚烷中从5至100%的EtOAc梯度。将产物流分合并并浓缩，得到2,2,3,5-四氟-6'-氧代-2'-(吡啶-2-基)-2,3,5',6'-四氢-1'H-螺[茚-1,4'-嘧啶]-5'-甲酸甲酯(6.1 g)，为淡黄色无定形粉末。将2',2',3',5'-四氟-6-氧代-2-(2-吡啶基)螺[1,5-二氢嘧啶-4,1'-茚满]-5-甲酸甲酯在磷酰氯(50 g)中的溶液(配备CaCl2干燥管)，在110℃加热210分钟。将反应混合物浓缩，将残留物溶于CH2Cl2 (200 mL)，倒入饱和的NaHCO3溶液(200 mL)中并搅拌30分钟。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用在庚烷中从5至100%的EtOAc梯度。6'-氯-2,2,3,5-四氟-2'-(吡啶-2-基)-2,3-二氢-1'H-螺[茚-1,4'-嘧啶]-5'-甲酸甲酯被分离为两种分开的非对映异构体：化合物167A (1046 mg，第二次纯化后)与化合物167B (1705 mg)。化合物167A:方法L；Rt: 1.94 m/z；425.9 (M+H)+ 精确质量：425.1。化合物167B:方法L；Rt: 2.06 m/z；425.9 (M+H)+ 精确质量：425.1。
化合物168
非对映异构混合物168的分开的非对映异构体：168A和168B
用氮气吹洗化合物167B (1705 mg)、(吗啉-4-基)甲基三氟硼酸钾(1658 mg，8.0mmol)、碳酸钾(1384 mg，10 mmol)在乙二醇二甲醚(5 mL)和水(2.3 mL)中的混合物10分钟。然后加入双(三叔丁基膦)钯(0) (1614 mg，20 mmol)并将反应混合物在140℃的Biotage微波中加热45分钟。将混合物浓缩并使残留物溶于水(50 mL)和CH2Cl2 (50 mL)中。将有机层经 MgSO4干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用在庚烷中从10至100%的EtOAc梯度。将产物流分浓缩并在真空干燥，得到化合物168B (923 mg)，为黄色粉末。方法L；Rt: 2.07 m/z；491.1 (M+H)+ 精确质量：490.2。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δppm 2.51 - 2.73 (m, 4 H), 3.43 (s, 3 H), 3.71 - 3.93 (m, 6 H), 5.96 (ddd, J=55.0, 10.1, 3.7 Hz, 1 H), 7.05 - 7.24 (m, 3 H), 7.41 (ddd, J=8.0, 4.8, 1.3Hz, 1 H), 7.75 (td, J=8.0, 1.8 Hz, 1 H), 8.23 (dt, J=8.0, 1.1 Hz, 1 H), 8.56- 8.68 (m, 1 H), 10.55 (s, 1 H)。类似于如对化合物168B的描述，将化合物167A转化成化合物168A，得到化合物168A (470 mg)，为黄色固体。方法L；Rt: 2.08 m/z；491.1 (M+H)+精确质量：490.2。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ ppm 2.61-2.68 (m, 4 H), 3.39 (s, 3H), 3.77 - 3.92 (m, 6 H), 6.12 (dt, J=54.6, 8.1 Hz, 1 H), 7.06-7.14 (m, 1 H),7.15 - 7.24 (m, 2 H), 7.39 (ddd, J=7.6, 4.8, 1.2 Hz, 1 H), 7.73 (td, J=7.8,1.7 Hz, 1 H), 8.07 (dt, J=8.0, 1.1 Hz, 1 H), 8.57 - 8.65 (m, 1 H), 10.50 (s,1 H)。
化合物169
将双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(4.0 mL，1M THF)添加至化合物168A (0.811mmol，398 mg)在无水THF (50 mL)的溶液中并在室温搅拌30分钟。将反应混合物用水(30mL)猝灭并用CH2Cl2 (50 mL)萃取两次。将有机层经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用从10至100%的EtOAc梯度。将产物流分合并并在50℃的真空浓缩，得到化合物169，为黄色粉末(329 mg)。方法L；Rt: 2.16 m/z；471.1 (M+H)+ 精确质量：470.2。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ ppm 2.55 - 2.71 (m, 4 H), 3.40 (s, 3 H),3.78 - 3.92 (m, 6 H), 6.84 (ddd, J=9.7, 8.1, 2.4 Hz, 1 H), 7.00 (dd, J=8.4,2.4 Hz, 1 H), 7.11 (ddd, J=8.1, 4.8, 2.1 Hz, 1 H), 7.39 (ddd, J=7.5, 4.8, 1.1Hz, 1 H), 7.74 (td, J=7.8, 1.7 Hz, 1 H), 8.15 (dt, J=8.0, 0.9 Hz, 1 H), 8.56- 8.66 (m, 1 H), 10.47 (s, 1 H)。类似于如对168A描述的方法，可以从化合物168B开始制备化合物169。
化合物170
将TFA (4.6 mL，59.8 mmol)添加至4,5-二氟-1-茚满酮(50.3 g，299.2 mmol)和丁基胺(26.3 g，359 mmol)在环己烷(500 mL)的溶液中，并在Dean Stark装置内将混合物回流过夜。将反应混合物浓缩并将残留物溶于二异丙醚(300 mL)中。将溶液用饱和的NaHCO3溶液洗涤，经由硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到深红色液体，其放置后固化。将此所得的粗物质(61.4 g)原样使用。将N-丁基-4,5-二氟-茚满-1-亚胺(28.2 g，部分上面的粗混合物)溶于无水乙腈(500 mL)中，依序加入硫酸钠(8.46 g，59.6 mmol)和1-氯甲基-4-氟-1,4-二氮杂二环[2.2.2]辛烷双(四氟硼酸盐) (60.1 g，169.7 mmol)。将反应混合物回流并搅拌3小时。使反应混合物冷却5分钟，然后在搅拌下分批加入HCl 37% (45 mL)。将混合物搅拌10分钟，然后在真空中浓缩。将所得的残留物用二异丙醚(800 mL)萃取过夜，倾析，过滤并浓缩。将残留物悬浮在水中并用二异丙醚(500 mL)萃取。将合并的有机层经由硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用在庚烷中从5至100 %的EtOAc梯度洗脱。将产物流分合并并在真空中浓缩，得到化合物170 (6.98 g)。1H NMR (400 MHz,氯仿-d) δ ppm 3.61 (t, J=12.3 Hz, 2 H), 7.28 - 7.40 (m, 1 H), 7.65 - 7.76 (m,1 H)。
化合物171
将溶于CH2Cl2 (25 mL)中的四氯化钛(7.94 g，68.4 mmol)在10分钟期间逐滴添加至在冰浴中的2,2,4,5-四氟茚满-1-酮(11 mL，99 mmol)和乙酰乙酸甲酯(6.98 g，34.2mmol)在THF (150 mL)和二氯甲烷(150 mL)的溶液中。将反应混合物搅拌10分钟。然后经5分钟加入吡啶(13.5 mL，167.5 mmol)。在搅拌下使反应混合物达到室温并再搅拌另外5天。将反应混合物用水(100 mL)猝灭并用二氯甲烷(200 mL)萃取。将有机层经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用从5至100 % 的EtOAc梯度。将产物流分浓缩，得到化合物171，为棕色树脂(E/Z混合物，6.17 g)。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) E/Z或Z/E混合物85/15，描述主要的异构体：δ ppm 2.50 (s, 3 H), 3.55 (t, J=13.2 Hz, 2H), 3.89 (s, 3 H), 7.04 - 7.19 (m, 1 H), 7.26 - 7.31 (m, 1 H)。
化合物172
将化合物171 (5.86 g，19.39 mmol)、2-甲基-2-异硫脲硫酸盐(4.05 g，14.5mmol)和碳酸氢钠(6.0 g，116.3 mmol)在DMF (100 mL)中在50℃搅拌过夜。将反应混合物倒入水(800 mL)中并用乙醚(400 mL)萃取3次。将水层也用二氯甲烷(500 mL)萃取两次。两个有机层用水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并一起浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用在庚烷中从10至100%的EtOAc梯度。将产物流分合并并在真空中浓缩，得到化合物172，为棕色固体(5.89 g)。方法L；Rt: 1.97 m/z；375.3 (M+H)+ 精确质量：374.1。1H NMR (400 MHz,氯仿-d, -4℃) : ~4/1互变异构混合物，描述主要的异构体：δ ppm 2.27 (s, 3 H), 2.33(s, 3 H), 3.43 (s, 3 H), 3.54 (dd, J=17.3, 9.3 Hz, 2 H), 6.71 (br. s, 1 H),6.84 (dd, J=8.3, 4.0 Hz, 1 H), 7.02 - 7.11 (m, 1 H)。
化合物173
在10分钟期间，将氮气鼓泡通入分开在三个微波小瓶中的化合物172 (2.83 g，7.56 mmol)、2-(三丁基甲锡烷基)噻唑(8.5 g，22,8 mmol)、溴化亚铜(I) -二甲基硫(6.2g，30.24 mmol)在DME (25 mL)中的混合物。加入(双(三叔丁基膦)钯(0) (290 mg，0,257mmol)并将反应混合物在140℃的微波下照射30分钟。将混合物倒入氨水(500 mL，25 %)中并用乙醚(250 mL)萃取3次。将有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残留物进行硅胶柱色谱法，使用在庚烷中从10至100%的EtOAc梯度。将产物流分在真空中浓缩，得到黄色固体(127 mg)。方法L；Rt: 2.03 m/z；412.3 (M+H)+ 精确质量：411.1。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d)；互变异构混合物(~8/2)，描述主要的异构体：δ ppm 2.41 (s, 3 H), 3.44 (s, 3 H),3.52 - 3.78 (m, 2 H), 6.88 (dd, 1 H, J= 4.2, 8.6 Hz), 7.01 - 7.17 (m, 1 H),7.47 (d, J= 3.1 Hz, 1 H), 7.84 (d, J= 3.1 Hz, 1 H), 8.03 (br. s., 1 H)。
化合物174
外消旋性化合物174的对映体：174a和174b
将(1.11 g，2.7 mmol)、甲醇钠(874 mg，16.2 mmol)在甲醇(7 mL)中在140℃的Biotage微波中加热10分钟。将反应混合物浓缩并将残留物溶于CH2Cl2 (50 mL)和水(50mL)中。将水层再次用CH2Cl2 (50 mL)萃取。将合并的有机层经由硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用在庚烷中从10至100%的EtOAc梯度。将产物流分浓缩并干燥，得到黄色粉末(778 mg)。方法L；Rt: 1.93 m/z；392.2 (M+H)+ 精确质量：391.1。1HNMR (400 MHz, 氯仿-d) δppm 2.44 (s, 3 H), 3.43 (s, 3 H), 6.09 (s, 1 H), 6.78- 6.93 (m, 2 H), 7.47 (d, J=3.3 Hz, 1 H), 7.84 (d, J=3.3 Hz, 1 H), 7.98 (br.s., 1 H)。经制备型SFC (固相：Chiralcel Diacel ID 20 x 250 mm)，流动相：CO2, EtOH，含0.2% iPrNH2)，将化合物174 (205 mg)分离成对映体，收集所需流分，在真空中浓缩，溶于MeOH中，再次蒸发并在50℃的真空干燥过夜，得到化合物174a (68 mg)和化合物174b(74 mg)。SFC: 柱：ID-H 250 mmx 4.6 mm；流速：3 mL/分钟；流动相：5 % EtOH (含0.2%iPrNH2)保持15.00分钟。温度：30℃；化合物174aRt (~6.2分钟)；化合物174b Rt (~7.0分钟)。
化合物175 (一种描述的主要非对映异构体，外消旋混合物)
将化合物169 (840 mg，1.79 mmol)和Pd/C 10% (203 mg)在甲醇(200 mL)中的混合物在氢气氛下搅拌3小时并在没有搅拌下放置过周末。将反应混合物再搅拌45分钟并将混合物过滤。将K2CO3 (1 g)添加至滤液，然后浓缩。将所得的残留物溶于CH2Cl2 (100 mL)和水(50 mL)中。将有机层分离，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。将残留物经硅胶柱色谱法纯化，使用在庚烷中5至100%的EtOAc梯度洗脱。将产物流分合并，浓缩并干燥，得到化合物175(75 mg)的淡黄色粉末。方法L；Rt: 2.04 m/z；455.1 (M+H)+ 精确质量：454.2。1H NMR (600MHz, 丙酮-d6) δ ppm 2.53 - 2.66 (m, 4 H), 3.22 (ddd, J=25.7, 17.2, 4.4 Hz, 1H), 3.39 (s, 3 H), 3.53 (td, J=16.0, 7.7 Hz, 1 H), 3.72 (s, 2 H), 3.73 - 3.80(m, 4 H), 5.15 (ddd, J=53.6, 7.5, 4.7 Hz, 1 H), 6.93 (ddd, J=9.2, 8.5, 2.5Hz, 1 H), 6.99 (m, J=9.2 Hz, 1 H), 7.16 (dd, J=8.4, 5.3 Hz, 1 H), 7.55 (ddd,J=7.5, 4.8, 1.2 Hz, 1 H), 7.90 (td, J=7.7, 1.7 Hz, 1 H), 8.11 (d, J=7.9 Hz, 1H), 8.71 (ddd, J=4.8, 1.6, 0.9 Hz, 1 H), 10.14 (br. s., 1 H)。
生物实施例-式I化合物的抗-HBV活性
使用稳定转染的细胞系HepG2.2.15测量抗-HBV 活性。此细胞系被描述可分泌相对恒定的高水平HBV病毒体颗粒，其已证明在黑猩猩中引起急性和慢性的感染与疾病。
对于抗病毒，按一式两份方式，在96-孔板中使用系列稀释的化合物将测试细胞经三天处理两次。经6天的处理后，通过使用实时PCR和HBV特异性引物组与探针，将来自分泌的病毒体的纯化HBV DNA定量而测定抗病毒活性。
采用与在HepG2.2.15测定中相同的培养期及剂量范围，使用CellTiter-Blue在HepG2细胞中测试化合物的细胞毒性，结果列在表1中。
亦使用HepG2.117细胞系测量抗HBV活性，该细胞系是一种稳定的、可诱导HBV产生的细胞系，其在没有多西环素(Tet-off系统)时复制HBV。对于抗病毒试验，诱发HBV复制，随后按一式两份在96-孔板中使用系列稀释的化合物处理。经处理3天后，使用实时PCR和HBV特异性引物组与探针，通过定量细胞内的HBV DNA测定抗病毒活性。
在化合物存在下培养4天，使用HepG2细胞测试化合物的细胞毒性。使用刃天青(Resazurin)测定法评估细胞的成活力，结果列在表1中。
表1: 式I化合物的抗-HBV活性
。

Claims (15)

1.一种式I化合物或其药学上可接受的盐，
包括其任何可能的立体异构体或互变异构形式，其中：
B选自任选地被一个或多个氟原子取代的C1-C3烷基；
Z选自H或卤素；
或B和Z与其连接的碳一起形成4-7元环，任选地含有一个或多个杂原子，其中所述4-7元环任选地被一个或多个选自C1-C3烷基、氧代、OH和卤素的取代基取代；
R1选自杂芳基和苯基，其任选地被一个或多个选自卤素和C1-C3烷基的取代基取代；其中杂芳基指单环或多环的芳族环，其含有碳原子、氢原子和1至3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子；
R2选自-R6-R7、C≡N、环丙基和CF3；
R3选自C1-C3烷氧羰基和C≡N；
R4和R5独立地选自H、甲基和卤素；
R6是C1-C3亚烷基或C2-C3亚烯基，两者任选地被一个或多个氟取代；
R7选自氢、杂C3-7环烷基、环丙基、C1-C3烷氧基和CF3。
2.权利要求1的化合物，其中B选自任选地被一个或多个氟原子取代的C1-C3烷基；
Z选自H或卤素；
或B和Z与其连接的碳一起形成4-7元环，任选地含有一个或多个杂原子，其中所述4-7元环任选地被一个或多个选自C1-C3烷基、氧代和卤素的取代基取代；和
R1选自任选地被一个或多个卤素原子取代的杂芳基和苯基；其中杂芳基指单环或多环的芳族环，其含有碳原子、氢原子和1至3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子。
3.前述权利要求中任一项的化合物，其中B和Z与其连接的碳一起形成5-或6-元环，其任选地被一个或多个选自C1-C3烷基、氧代及卤素的取代基取代。
4.前述权利要求1-2中任一项的化合物，其中B和Z与其连接的碳一起形成5-或6-元环，其任选地被一个或多个CH3取代基取代。
5.前述权利要求1-2中任一项的化合物，其中R1选自任选地被一个或两个氟取代的吡啶基，或噻唑基。
6.前述权利要求1-2中任一项的化合物，其中R3是C1-或C2-烷氧羰基。
7.前述权利要求1-2中任一项的化合物，其中R6是CH2且R7选自吗啉基或哌啶基。
8.一种式(Ia)的化合物，
其中B、Z、R1、R2、R3、R4和R5依据前述权利要求中任一项定义。
9.前述权利要求1-2和8中任一项的化合物，其中R4和R5独立地选自H和氟。
10.一种药物组合物，其包含权利要求1-8中任一项的化合物及药学上可接受的载体。
11.权利要求1-8中任一项的化合物或权利要求10的药物组合物在制备在哺乳动物预防或治疗HIV感染的药物中的用途。
12.式(I)的化合物，包括其任何可能的立体异构体或互变异构形式，或其药学上可接受的盐，或权利要求10的药物组合物在制备用于在哺乳动物中预防或治疗HBV感染的药物中的用途，
其中：
B选自任选地被一个或多个氟原子取代的C1-C3烷基；
Z选自H或卤素；
或B和Z与其连接的碳一起形成4-7元环，任选地含有一个或多个杂原子，其中所述4-7元环任选地被一个或多个选自C1-C3烷基、氧代、OH和卤素的取代基取代；
R1选自S-甲基、杂芳基和苯基，其任选地被一个或多个选自卤素和C1-C3烷基的取代基取代；其中杂芳基指单环或多环的芳族环，其含有碳原子、氢原子和1至3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子；
R2选自-R6-R7、C≡N、环丙基和CF3；
R3选自C1-C3烷氧羰基和C≡N；
R4和R5独立地选自H、甲基和卤素；
R6是C1-C3亚烷基或C2-C3亚烯基，两者任选地被一个或多个氟取代；
R7选自氢、杂C3-7环烷基、环丙基、C1-C3烷氧基和CF3。
13.一种产品，其含有(a)如权利要求1-8中任一项定义的式(I)化合物，及(b)另一种HBV抑制剂，作为组合制剂以同时、分开或序贯用于治疗HBV感染。
14.一种式V的化合物，
其中B、Z、R1、R3、R4和R5依据权利要求1-8中任一项定义。
15.权利要求14的式V化合物在合成权利要求1-9中任一项的化合物中的用途。
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