CN103558400A - 一种降钙素原乳胶增强免疫比浊法检测试剂盒 - Google Patents

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CN103558400A CN201310601388.6A CN201310601388A CN103558400A CN 103558400 A CN103558400 A CN 103558400A CN 201310601388 A CN201310601388 A CN 201310601388A CN 103558400 A CN103558400 A CN 103558400A
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Abstract

本发明公开了一种降钙素原乳胶增强免疫比浊法检测试剂盒及其制备方法，该试剂盒包括试剂R1和试剂R2两种组分，其中R1主要由缓冲液1、稳定剂1、防腐剂1、增凝剂、保护剂1和EDTA组成，试剂R2主要由缓冲液2、稳定剂2、防腐剂2、聚苯乙烯胶乳微球、PCT抗体、和保护剂2组成；所述试剂R2中的聚苯乙烯胶乳微球的粒径为100～600nm，PCT抗体应为鼠抗人PCT抗体、山羊抗人降钙素原抗体或兔抗人降钙素原抗体的一种或者几种，其中PCT抗体与聚苯乙烯胶乳微球之间以共价偶联或物理吸附方式连接。与现有技术相比，本发明中的降钙素原（PCT）检测试剂盒具有制备低廉、稳定性好、易于保存、检测灵敏度高、特异性强的优点，比较容易的在临床进行推广。

Description

一种降钙素原乳胶增强免疫比浊法检测试剂盒
技术领域
本发明涉及一种体外诊断试剂领域，尤其是一种降钙素原胶乳增强免疫比浊法检测试剂盒。
背景技术
降钙素原(procalcitonin,PCT)是一种由116个氨基酸组成的糖蛋白，是降钙素(calcitonin，CT)的前体肽。降钙素原可被酶裂解为许多小的片断，最终形成氨基降钙素原、成熟的降钙素和钙抑肽。降钙素原可以以游离形式存在于正常人血清中。在正常情况下，人体内血清PCT水平很低，大多低于0.1ng/ml，0.5ng/ml是全身性感染（脓毒症）诊断的分界值；新生儿出生2天内PCT生理性增高，最高可达21ng/ml；长期血液透析患者血浆PCT值可达1.5ng/ml。降钙素原在感染后2-3h即可增高， 6-12h后到达顶峰，在48h内保持较高水平，2d后降到基线水平。半衰期大约25-30h。PCT在体内外稳定性较好，与常规用于炎症诊断的指标相比，已被公认为最理想的诊断严重细菌感染的指标。它在细菌性感染和非细菌性感染的鉴别，细菌性感染的严重程度，严重感染或脓毒症的早期诊断，高危患者（如ICU，器官移植术后或免疫抑制治疗的患者）感染性疾病的监测，疾病转归的评估，以及指导治疗方案的选择等方面有很高的价值，优于目前常用的其他检测项目，有很好的应用前景。PCT可广泛用于ICU病房、血液科、肿瘤科、儿科、早产儿及新生儿监护室、外科、内科、器官移植科、急诊科和治疗实验室等。
对于PCT检测，现有检测方法主要有定量方法、半定量检测方法和定性检测方法，定量检测方法有双抗夹心法(ELISA)、免疫发光法、高效液相色谱分析、放射免疫分析法等，其中放射免疫分析法和高效液相色谱分子法在临床中有一定的限制，而ELISA（双抗夹心法）和免疫发光法临床比较常用，ELSA的灵敏度较高，但其操作复杂，需要较多时间，一般结果为定性或半定量，定量时偏差较大，且线性范围窄，对于样品稀释度不好控制；免疫化学发光法具有灵敏度高的优点，可以满足临床PCT测定需求，但是需要配套专门仪器使用，价格昂贵不利于医院推广，而且标准曲线会随着时间漂移（发光持续时间长，可在不同时间测量）。定性方法主要有免疫层析法，其可以作为定性或半定量检测方法，可以快速给出结果，定性时不需要特殊仪器，但是不能给出定量数据，而且主观误差较大。
发明内容
针对现有技术存在的上述不足，本发明所要解决的技术问题是：提供一种制备成本低廉，稳定性好，易于保存，数据重复性好，检测灵敏度高的降钙素原检测试剂盒，以及降钙素原试剂盒的制备方法。
为了解决上述问题，本发明采用了以下的技术方案：
一种降钙素原乳胶增强免疫比浊法检测试剂盒，其特征在于，包括试剂R1和试剂R2两种组分，所述试剂R1主要由缓冲液1、稳定剂1、防腐剂1、EDTA、增凝剂和保护剂1组成；所述试剂R2主要由交联PCT抗体的聚苯乙烯胶乳微球、缓冲液2、稳定剂2、防腐剂2、保护剂2组成，其中聚苯乙烯胶乳微球与PCT抗体之间以共价交联方式连接。
本技术方案中的防腐剂1和2是指可以抑制试剂中细菌和微生物污染的一类试剂，对试剂具有防腐杀菌的作用。试剂R2中的保护剂一类能够保护胶乳颗粒表面的抗体的试剂。稳定剂1和2可以保持试剂内的电荷平衡。
本技术方案中的降钙素原胶乳增强免疫比浊法检测试剂盒，将PCT抗体交联在聚苯乙烯胶乳微球表面，当血液中的PCT与PCT抗体反应时，带动聚苯乙烯胶乳微球聚集产生一定浊度，而浊度与血液中的PCT含量在一定范围成正比，可以用全自动生化仪在400-800nm波长下检测血液中PCT的含量。
作为优化，所述试剂R1中的缓冲液1选自Hepes缓冲液、Tris-HCl缓冲液、MOPS缓冲液、PBS缓冲液、甘氨酸缓冲液、硼砂缓冲液中的一种或几种，其pH为7.0～9.0，浓度为25～500mmol/L；所述试剂R2中的缓冲液2选自PBS缓冲液、硼砂缓冲液、甘氨酸缓冲液、Hepes缓冲液、GOODS缓冲液、MOPS缓冲液中的一种或几种，其pH为7.0～9.0，浓度为25～500mmol/L。
作为优化，所述试剂R1中的稳定剂1选自KCl、NaCl、CaCl中的一种或者几种，其质量浓度为0.5%～10%；所述试剂R2中的稳定剂2采用离子稳定剂和悬浮稳定剂配合使用；其中离子稳定剂为NaCl、KCl、Na2CO3、Na2SO4或者K2SO4，悬浮稳定剂为PEG8000、蔗糖、甘油或者葡萄糖。
上述技术方案中稳定剂1选自KCl、NaCl、CaCl中的一种或者几种，其质量浓度为0.5%～10%，这样的稳定剂1具有价格低廉、原料易得的优点。稳定剂2采用离子稳定剂和悬浮稳定剂配合使用；其中离子稳定剂为NaCl、KCl、Na2CO3、Na2SO4或者K2SO4，悬浮稳定剂为PEG8000、蔗糖、甘油或者葡萄糖；其中优选NaCl和蔗糖配合使用，这样可以保持体系长期稳定。
作为优化，所述试剂R1中的防腐剂1为叠氮钠、硫柳汞或者ProClin300；所述试剂R2中的防腐剂2为叠氮钠、硫柳汞或ProClin300。这样的防腐剂1和2具有优良的防腐杀菌性能。
作为优化，所述试剂R1中的增凝剂为PEG8000或者葡聚糖。优选PEG8000，是由于PEG8000属于非离子型水溶性聚合物，在水中的溶解性比较大，可以调节试剂R1的粘度，促进抗原和抗体分子结合为复合物。
作为优化，所述试剂R2中的聚苯乙烯乳胶微球的表面官能团为氨基、羧基、酰肼、醛基或环氧基，聚苯乙烯乳胶微球的的粒径在100～600nm。优选表面官能团为羧基的聚苯乙烯胶乳微球，这是由于聚苯乙烯胶乳微球表面为羧基的官能团很容易被EDC活化，从而快速与PCT抗体结合，增加偶联效果，保证测试结果的稳定性及准确性。
作为优化，所述试剂R2中的PCT抗体为鼠抗人PCT抗体、山羊抗人降钙素原IgG抗体或兔抗人降钙素原IgG抗体的一种或者几种。
作为优化，所述试剂R1中的保护剂1为牛血清白蛋白；所述试剂R2中的保护剂2为牛血清白蛋白。本技术方案中的保护剂1和2可以保护聚苯乙烯胶乳颗粒表面的PCT抗体的活性。
作为优化，所述EDTA的浓度为10～100mmol/L。
作为优化，所述降钙素原乳胶增强免疫比浊法检测试剂盒，采用如下方法制备：
（1）试剂R1的制备：
在缓冲液1中加入稳定剂1、增凝剂、防腐剂1、保护剂1和EDTA，搅拌混合均匀，即得试剂R1；
（2）试剂R2的制备： 
步骤一：将PCT抗体进行4℃透析，再用缓冲液将PCT抗体稀释至2mg/ml，得到PCT抗体稀释液；将聚苯乙烯胶乳微球用蒸馏水离心、洗涤3次；
步骤二：用缓冲液将经过步骤一洗涤后的聚苯乙烯胶乳微球稀释到质量浓度为1%，再加入质量浓度为0.01%-0.1%的EDC，在室温下搅拌反应30min，反应结束后15000rpm离心洗涤以除去未反应的EDC，然后加入步骤一得到的PCT抗体稀释液，室温下搅拌反应30min，再加入终止液终止反应，将得到的反应液15000rpm离心，用缓冲液2洗涤沉淀，重复离心洗涤3次，最后加入缓冲液2、防腐剂、稳定剂、保护剂搅拌混合均匀即得试剂R2。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
1.采用胶乳增强免疫比浊法，当血液中的PCT与PCT抗体反应时，带动了聚苯乙烯胶乳聚集产生一定的浊度，而浊度与血液中的PCT含量在一定范围内成正比，可以在400～800nm的波长下进行检测，检测更为方便，容易在临床中应用。 
2.聚苯乙烯胶乳微球的表面官能团为氨基、羧基、酰肼或者环氧基等，其表面的官能团可以和抗体表面的氨基等结合形成共价偶联结构，使PCT抗体牢固的结合在胶乳微球表面，保证了R2的稳定性，延长了试剂有效期。
3.采用粒径为100～600nm的大颗粒聚苯乙烯胶乳颗粒，具有较大的粒径，增加了血液中PCT和PCT抗体反应时的浊度，从而增加测试反应的灵敏度、缩短了反应时间，其检测范围为0.24～80ng/ml。
4.试剂R2中采用离子稳定剂和悬浮稳定剂结合使用，使试剂的电荷平衡状态，提高了降钙素原PCT胶乳增强免疫比浊试剂盒的稳定性，使得降钙素原PCT胶乳增强免疫比浊试剂盒的稳定性可达18个月。
附图说明
图1为本发明降钙素原试剂盒实施例的校准曲线。
具体实施方式
下面结合具体实施方式和实验对本发明作进一步的说明。
实施例1：
一种降钙素原乳胶增强免疫比浊法检测试剂盒，包含如下制备步骤：
（1）试剂R1的制备： 
称取23.83g Hepes、9g NaCl、15g PEG8000、0.5g叠氮钠、5g牛血清白蛋白和14.21g EDTA溶于0.8L蒸馏水中，调节pH至7.4，定溶1L即得试剂R1。
（2）试剂R2的制备：
第一步：在鼠抗人PCT抗体中加入pH为7.4、浓度为100mmol/L的PBS缓冲液进行4℃透析，中间换水3次后完成透析，采用100mmol/L的PBS缓冲液将鼠抗人PCT抗体稀释至浓度为2mg/ml的鼠抗人PCT抗体稀释液；将表面官能团为羧基的聚苯乙烯胶乳微球用蒸馏水洗涤。
第二步：再用pH为 7.4、浓度为100mmol/L的PBS缓冲液将上述洗涤过的聚苯乙烯胶乳微球稀释到质量浓度为1%。向1L上述胶乳稀释液中加入0.01g的EDC，在室温下搅拌反应30min，反应结束后离心并用PBS缓冲液洗涤除去未反应的EDC，然后加入步骤一得到的鼠抗人PCT抗体稀释液，室温下搅拌反应1h后，再加入50g 牛血清白蛋白终止反应，将得到的反应液于15000rpm的转速下用用蒸馏水离心洗涤3次，再加入缓冲液2、50g 牛血清白蛋白、0.5g叠氮钠、9g NaCl和80g蔗糖，搅拌混合均匀即得试剂R2。
实施例2：
一种降钙素原乳胶增强免疫比浊法检测试剂盒，包含如下制备步骤：
（1）试剂R1的制备： 
称取23.83g Hepes、30g NaCl、100g PEG8000、0.5g叠氮钠、50g牛血清白蛋白和14.21g EDTA溶于0.8L蒸馏水中，调节pH至7.4，定溶1L即得试剂R1。
（2）试剂R2的制备：
第一步：在鼠抗人PCT抗体中加入pH为7.4、浓度为500mmol/L的PBS缓冲液进行4℃透析，中间换水3次后完成透析，采用500mmol/L的PBS缓冲液将鼠抗人PCT抗体稀释至浓度为2mg/ml的鼠抗人PCT抗体稀释液；将表面官能团为羧基的聚苯乙烯胶乳微球用蒸馏水洗涤。
第二步：再用pH为 7.4、浓度为500mmol/L的PBS缓冲液将上述洗涤过的聚苯乙烯胶乳微球稀释到质量浓度为1%。向1L上述胶乳稀释液中加入0.01g的EDC，在室温下搅拌反应30min，反应结束后离心并用PBS缓冲液洗涤除去未反应的EDC，然后加入步骤一得到的鼠抗人PCT抗体稀释液，室温下搅拌反应1h后，再加入50g 牛血清白蛋白终止反应，将得到的反应液于15000rpm的转速下用蒸馏水离心洗涤3次，再加入缓冲液2、50g牛血清白蛋白、0.5g叠氮钠、9g NaCl和80g蔗糖，搅拌混合均匀即得试剂R2。
实施例3：
一种降钙素原乳胶增强免疫比浊法检测试剂盒，包含如下制备步骤：
（1）试剂R1的制备： 
称取23.83g Hepes、20g NaCl、80g PEG8000、0.5g叠氮钠、50g牛血清白蛋白和14.21g EDTA溶于0.8L蒸馏水中，调节pH至7.4，定溶1L即得试剂R1。
（2）试剂R2的制备：
第一步：在鼠抗人PCT抗体中加入pH为7.4、浓度为500mmol/L的Hepes缓冲液进行4℃透析，中间换水3次后完成透析，采用500mmol/L的Hepes缓冲液将鼠抗人PCT抗体稀释至浓度为2mg/ml的鼠抗人PCT抗体稀释液；将表面官能团为羧基的聚苯乙烯胶乳微球用蒸馏水洗涤。
第二步：再用pH为 7.4、浓度为500mmol/L的Hepes缓冲液将上述洗涤过的聚苯乙烯胶乳微球稀释到质量浓度为1%。向1L上述胶乳稀释液中加入0.01g的EDC，在室温下搅拌反应30min，反应结束后离心并用PBS缓冲液洗涤除去未反应的EDC，然后加入步骤一得到的鼠抗人PCT抗体稀释液，室温下搅拌反应1h后，再加入60g牛血清白蛋白终止反应，将得到的反应液于15000rpm的转速下用蒸馏水离心洗涤3次，再加入缓冲液2、60g牛血清白蛋白、0.5g叠氮钠、30g NaCl和80g蔗糖，搅拌混合均匀即得试剂R2。
 
实施例4：
一种降钙素原乳胶增强免疫比浊法检测试剂盒，包含如下制备步骤：
（1）试剂R1的制备： 
称取23.83g Hepes、50g NaCl、60g PEG8000、0.5g叠氮钠、50g牛血清白蛋白和14.21g EDTA溶于0.8L蒸馏水中，调节pH至7.4，定溶1L即得试剂R1。
（2）试剂R2的制备：
第一步：在鼠抗人PCT抗体中加入pH为7.4、浓度为100mmol/L的PBS缓冲液进行4℃透析，中间换水3次后完成透析，采用100mmol/L的PBS缓冲液将鼠抗人PCT抗体稀释至浓度为2mg/ml的鼠抗人PCT抗体稀释液；将表面官能团为羧基的聚苯乙烯胶乳微球用蒸馏水洗涤。
第二步：再用pH为 7.4、浓度为100mmol/L的PBS缓冲液将上述洗涤过的聚苯乙烯胶乳微球稀释到质量浓度为1%。向1L上述胶乳稀释液中加入0.01g的EDC，在室温下搅拌反应30min，反应结束后离心并用PBS缓冲液洗涤除去未反应的EDC，然后加入步骤一得到的鼠抗人PCT抗体稀释液，室温下搅拌反应1h后，再加入25g牛血清白蛋白终止反应，将得到的反应液于15000rpm的转速下用蒸馏水离心洗涤3次，再加入缓冲液2、30g牛血清白蛋白、0.5g叠氮钠、20g NaCl和75g蔗糖，搅拌混合均匀即得试剂R2。
实施例5：
一种降钙素原乳胶增强免疫比浊法检测试剂盒，包含如下制备步骤：
（1）试剂R1的制备： 
称取20.9g MOPS、9g NaCl、50g PEG8000、0.5g叠氮钠、50g牛血清白蛋白和14.21g EDTA溶于0.8L蒸馏水中，调节pH至7.4，定溶1L即得试剂R1。
（2）试剂R2的制备：
第一步：在鼠抗人PCT抗体中加入pH为7.4、浓度为100mmol/L的PBS缓冲液进行4℃透析，中间换水3次后完成透析，采用100mmol/L的PBS缓冲液将鼠抗人PCT抗体稀释至浓度为2mg/ml的鼠抗人PCT抗体稀释液；将表面官能团为羧基的聚苯乙烯胶乳微球用蒸馏水洗涤。
第二步：再用pH为 7.4、浓度为100mmol/L的PBS缓冲液将上述洗涤过的聚苯乙烯胶乳微球稀释到质量浓度为1%。向1L上述胶乳稀释液中加入0.01g的EDC，在室温下搅拌反应30min，反应结束后离心并用PBS缓冲液洗涤除去未反应的EDC，然后加入步骤一得到的鼠抗人PCT抗体稀释液，室温下搅拌反应1h后，再加入25g牛血清白蛋白终止反应，将得到的反应液于15000rpm的转速下用蒸馏水离心洗涤3次，再加入缓冲液2、40g牛血清白蛋白、0.5g叠氮钠、30g NaCl和50g蔗糖，搅拌混合均匀即得试剂R2。
实施例6：
一种降钙素原乳胶增强免疫比浊法检测试剂盒，包含如下制备步骤：
（1）试剂R1的制备： 
称取20.9g MOPS、20g NaCl、50g PEG8000、0.5g叠氮钠、25g牛血清白蛋白和14.21g EDTA溶于0.8L蒸馏水中，调节pH至7.4，定溶1L即得试剂R1。
（2）试剂R2的制备：
第一步：在鼠抗人PCT抗体中加入pH为7.4、浓度为100mmol/L的PBS缓冲液进行4℃透析，中间换水3次后完成透析，采用100mmol/L的PBS缓冲液将鼠抗人PCT抗体稀释至浓度为2mg/ml的鼠抗人PCT抗体稀释液；将表面官能团为羧基的聚苯乙烯胶乳微球用蒸馏水洗涤。
第二步：再用pH为 7.4、浓度为100mmol/L的PBS缓冲液将上述洗涤过的聚苯乙烯胶乳微球稀释到质量浓度为1%。向1L上述胶乳稀释液中加入0.01g的EDC，在室温下搅拌反应30min，反应结束后离心并用PBS缓冲液洗涤除去未反应的EDC，然后加入步骤一得到的鼠抗人PCT抗体稀释液，室温下搅拌反应1h后，再加入50g牛血清白蛋白终止反应，将得到的反应液于15000rpm的转速下用蒸馏水离心洗涤3次，再加入缓冲液2、50g牛血清白蛋白、0.5g叠氮钠、40g NaCl和75g蔗糖，搅拌混合均匀即得试剂R2。
实施例7：
一种降钙素原乳胶增强免疫比浊法检测试剂盒，包含如下制备步骤：
（1）试剂R1的制备： 
称取20.9g MOPS、30g NaCl、60g PEG8000、0.5g叠氮钠、75g牛血清白蛋白和14.21g EDTA溶于0.8L蒸馏水中，调节pH至7.4，定溶1L即得试剂R1。
（2）试剂R2的制备：
第一步：在鼠抗人PCT抗体中加入pH为7.4、浓度为100mmol/L的PBS缓冲液进行4℃透析，中间换水3次后完成透析，采用100mmol/L的PBS缓冲液将鼠抗人PCT抗体稀释至浓度为2mg/ml的鼠抗人PCT抗体稀释液；将表面官能团为羧基的聚苯乙烯胶乳微球用蒸馏水洗涤。
第二步：再用pH为 7.4、浓度为100mmol/L的PBS缓冲液将上述洗涤过的聚苯乙烯胶乳微球稀释到质量浓度为1%。向1L上述胶乳稀释液中加入0.01g的EDC，在室温下搅拌反应30min，反应结束后离心并用PBS缓冲液洗涤除去未反应的EDC，然后加入步骤一得到的鼠抗人PCT抗体稀释液，室温下搅拌反应1h后，再加入50g牛血清白蛋白终止反应，将得到的反应液于15000rpm的转速下用蒸馏水离心洗涤3次，再加入缓冲液2、75g牛血清白蛋白、0.5g叠氮钠、50g NaCl和75g蔗糖，搅拌混合均匀即得试剂R2。
实施例8：
一种降钙素原乳胶增强免疫比浊法检测试剂盒，包含如下制备步骤：
（1）试剂R1的制备： 
称取20.9g MOPS、50g NaCl、80g PEG8000、0.5g叠氮钠、50g牛血清白蛋白和7.05g EDTA溶于0.8L蒸馏水中，调pH至7.4，定溶1L即得试剂R1。
（2）试剂R2的制备：
第一步：在鼠抗人PCT抗体中加入pH为7.4、浓度为100mmol/L的PBS缓冲液进行4℃透析，中间换水3次后完成透析，采用100mmol/L的PBS缓冲液将鼠抗人PCT抗体稀释至浓度为2mg/ml的鼠抗人PCT抗体稀释液；将表面官能团为羧基的聚苯乙烯胶乳微球用蒸馏水洗涤。
第二步：再用pH为 7.4、浓度为100mmol/L的PBS缓冲液将上述洗涤过的聚苯乙烯胶乳微球稀释到质量浓度为1%。向1L上述胶乳稀释液中加入0.01g的EDC，在室温下搅拌反应30min，反应结束后离心并用PBS缓冲液洗涤除去未反应的EDC，然后加入步骤一得到的鼠抗人PCT抗体稀释液，室温下搅拌反应1h后，再加入75g牛血清白蛋白终止反应，将得到的反应液于15000rpm的转速下用蒸馏水离心洗涤3次，再加入缓冲液2、50g牛血清白蛋白、0.5g叠氮钠、60g NaCl和75g蔗糖，搅拌混合均匀即得试剂R2。
测试结果：
对上述8个实施例制备的试剂用贝克曼AU480全自动生化仪进行测试，测试波长为570nm，副波长800nm，取样本或校准品20uL，再加入150uL的试剂R1，37℃恒温5min，然后加入试剂R2，20s后读取吸光度A1,37℃孵育4分40秒后读取吸光度A2，则反应吸光度ΔA=A2-A1；首先使用标准品进行多点定标，并用样条函数进行计算， 得到定标曲线，如图1所示。样本通过其吸光度变化，与标准曲线进行对比即可得到样本中PCT浓度。对上述8个实施例进行了分析灵敏度、准确度、精密性以及稳定性等进行了验证，验证结果如表1所示：
表1：测试结果                                       
根据其测试结果可知，在本发明参数范围内制得的检测试剂，均能够具备较好的分析灵敏度、准确度、精密性和稳定性，其中实施6为最优实施例，可以最好地提高试剂测试效果。
以上实施例是对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，做出若干等同替代或明显变型，而且性能或用途相同，都应当视为属于本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种降钙素原乳胶增强免疫比浊法检测试剂盒，其特征在于，包括试剂R1和试剂R2两种组分，所述试剂R1主要由缓冲液1、稳定剂1、防腐剂1、EDTA、增凝剂和保护剂1组成；所述试剂R2主要由交联PCT抗体的聚苯乙烯胶乳微球、缓冲液2、稳定剂2、防腐剂2、保护剂2组成，其中聚苯乙烯胶乳微球与PCT抗体之间以共价交联方式连接。
2.根据权利要求1所述的降钙素原乳胶增强免疫比浊法检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1中的缓冲液1选自Hepes缓冲液、Tris-HCl缓冲液、MOPS缓冲液、PBS缓冲液、甘氨酸缓冲液、硼砂缓冲液中的一种或几种，其pH为7.0～9.0，浓度为25～500mmol/L；
所述试剂R2中的缓冲液2选自PBS缓冲液、硼砂缓冲液、甘氨酸缓冲液、Hepes缓冲液、GOODS缓冲液、MOPS缓冲液中的一种或几种，其pH为7.0～9.0，浓度为25～500mmol/L。
3.根据权利要求1所述的降钙素原乳胶增强免疫比浊法检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1中的稳定剂1选自KCl、NaCl、CaCl中的一种或者几种，其质量浓度为0.5%～10%；
所述试剂R2中的稳定剂2采用离子稳定剂和悬浮稳定剂配合使用；其中离子稳定剂为NaCl、KCl、Na2CO3、Na2SO4或者K2SO4，悬浮稳定剂为PEG8000、蔗糖、甘油或者葡萄糖。
4.根据权利要求1所述的降钙素原乳胶增强免疫比浊法检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1中的防腐剂1为叠氮钠、硫柳汞或者ProClin300；
所述试剂R2中的防腐剂2为叠氮钠、硫柳汞或ProClin300。
5.根据权利要求1所述的降钙素原乳胶增强免疫比浊法检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1中的增凝剂为PEG8000或者葡聚糖。
6.根据权利要求1所述的降钙素原乳胶增强免疫比浊法检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R2中的聚苯乙烯乳胶微球的表面官能团为氨基、羧基、酰肼、醛基或环氧基，聚苯乙烯乳胶微球的的粒径在100～600nm。
7.根据权利要求1所述的降钙素原乳胶增强免疫比浊法检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R2中的PCT抗体为鼠抗人PCT抗体、山羊抗人降钙素原IgG抗体或兔抗人降钙素原IgG抗体的一种或者几种。
8.根据权利要求1所述的降钙素原乳胶增强免疫比浊法检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1中的保护剂1为牛血清白蛋白；所述试剂R2中的保护剂2为牛血清白蛋白。
9.根据权利要求1所述的降钙素原乳胶增强免疫比浊法检测试剂盒，其特征在于，所述EDTA的浓度为10～100mmol/L。
10.根据权利要求1所述的降钙素原乳胶增强免疫比浊法检测试剂盒，其特征在于，采用如下方法制备：
（1）试剂R1的制备：
在缓冲液1中加入稳定剂1、增凝剂、防腐剂1、保护剂1和EDTA，搅拌混合均匀，即得试剂R1；
（2）试剂R2的制备： 
步骤一：将PCT抗体进行4℃透析，再用缓冲液将PCT抗体稀释至2mg/ml，得到PCT抗体稀释液；将聚苯乙烯胶乳微球用蒸馏水离心、洗涤3次；
步骤二：用缓冲液将经过步骤一洗涤后的聚苯乙烯胶乳微球稀释到质量浓度为1%，再加入质量浓度为0.01%-0.1%的EDC，在室温下搅拌反应30min，反应结束后15000rpm离心洗涤以除去未反应的EDC，然后加入步骤一得到的PCT抗体稀释液，室温下搅拌反应30min，再加入终止液终止反应，将得到的反应液15000rpm离心，用缓冲液2洗涤沉淀，重复离心洗涤3次，最后加入缓冲液2、防腐剂、稳定剂、保护剂搅拌混合均匀即得试剂R2。
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