CN103298341B - 活性成分在抗线虫作物中用于防治线虫的用途 - Google Patents

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Abstract

本发明总体而言涉及氟吡菌酰胺以及含有氟吡菌酰胺的组合物用于在抗线虫作物中防治线虫和/或提高作物收率的方法以及涉及特别适用于在这些作物中防治线虫和/或提高收率的方法。

Description

活性成分在抗线虫作物中用于防治线虫的用途
技术领域
本发明总体而言涉及N-{[3-氯-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙基}-2-(三氟甲基)苯甲酰胺(氟吡菌酰胺(fluopyram))在抗线虫作物中用于防治线虫的用途以及涉及特别适用于在所述作物中防治线虫和/或提高作物收率的方法。
背景技术
氟吡菌酰胺被定义为式(I)的化合物以及该化合物的N-氧化物。
氟吡菌酰胺是在较宽范围的不同作物上用于叶面处理、滴注、灌注和种子处理应用以抵抗许多经济上重要的植物病害的具有渗透和传导(translaminar)特性的广谱杀菌剂。其在抵抗白粉菌种、灰霉菌和白霉菌种的预防性应用中非常有效。其具有抵抗许多其他植物病害的药效。氟吡菌酰胺在孢子萌发、芽管伸长和菌丝生长试验中已经显示出活性。在生物化学水平上,氟吡菌酰胺通过阻断琥珀酸脱氢酶的呼吸链中的电子传递来抑制线粒体的呼吸作用(复合II-SDH抑制剂)。
氟吡菌酰胺以及其由已知且市售可得的化合物的制备方法记载于EP-A-1389614和WO2004/016088。
吡啶基乙基苯甲酰胺衍生物的杀线虫活性的一般描述可见于WO-A2008/126922。
线虫是适合在水中生活的微小的、虫样的多细胞动物。线虫的种类的数量估计为五十万。土壤动物的一个重要部分——线虫,生活在互相连通的由土壤处理形成的通道—被称为孔—的迷宫中。它们在附着于土壤颗粒上的水膜中移动。植物寄生线虫——其大部分为进食根系者——可发现与大多数植物有联系。一些是在根、茎、芽、种子等的组织内生存并进食的内寄生虫。其他是通过植物壁外部进食的外寄生虫。单个的内寄生线虫可杀死植物或降低其生产率。内寄生的进食根系者包括经济上重要的害虫,例如根结线虫(根结线虫(Meloidogyne)属种)、肾状线虫(肾状线虫(Rotylenchulus)属种)、胞囊线虫(胞囊线虫(Heterodera)属种)、和根腐线虫(根腐线虫(Pratylenchus)属种)。被线虫直接啃食可大幅降低植物的营养和水分的吸收。当线虫在种子发芽后立刻攻击秧苗的根时,线虫对作物生产率有最大的影响。线虫啃食也产生开放的创口,其为各种植物致病真菌和细菌提供入口。这些微生物侵染通常比线虫啃食的直接影响在经济上更有害。
线虫抗性的特征通常为在寄生线虫啃食位点处或附近的宿主植物细胞死亡。特定的抗性基因以及线虫的相互作用影响抗性响应的时间和位置。Williamson等(TrendsinGenetics,Vol.22,No.7,July2006)描述了关于植物中抗性的植物-线虫相互作用的本质和机理。
抗线虫植物可与三个主要的途径相关,所述途径为线虫目标、线虫-作物接触面和作物响应。拒食素或杀线虫蛋白质、由RNA干扰造成重要线虫基因的表达的破坏、由RNA干扰、肽或植物抗体造成感觉功能的破坏或杀线虫的代谢物是用于线虫目标的实例;由RNA干扰、肽或植物抗体造成涉及迁移和侵袭或涉及啃食位点诱导和保持的线虫致病因素的破坏、stealth或驱虫植物;或当由线虫侵袭造成植物抗性基因或过敏性反应激活时宿主植物至非宿主植物的转化是用于线虫-作物接触面的实例;由啃食位点特异性激活子来诱导的细胞死亡或其他位点的不相容性或作物转为具有耐性是用于作物响应的实例。
尽管抗线虫植物被记载可抵抗特定的线虫,由于植物不同的防御反应,在线虫和作物之间仍存在某些相互作用,其可能导致部分受损的植物。这些防御反应的一个实例是过敏性反应。一个结果可能导致受损的根以及受影响的作物的活力丧失。
现有的线虫防治主要集中于防止线虫攻击植物。一旦植物被侵害,基本上就不可能在不伤害植物的情况下杀死线虫。因此,提供加强的防治线虫化合物以及处理抗线虫植物以防止或减少线虫伤害的方法将是有利的。
由害虫引起的对作物植物的大部分的损害早到当种子在储存过程中以及在种子被种入土壤中之后、在植物发芽过程中以及在植物发芽后即被攻击时而发生。由于生长中的植物的根和茎特别敏感,且甚至极小的伤害也会导致整棵植物的死亡,因此上述阶段特别重要。因此需要开发用于保护种子和发芽中的植物的方法,其免除了播种后或植物发芽后额外施用作物保护制剂。还需要将以上述方式使用的活性化合物的用量最优化从而提供对种子和发芽中植物抵抗害虫攻击的最大保护,而使用的活性化合物不伤害植物自身。特别地,为了使用最少的作物保护制剂来实现对种子以及发芽中的植物的最佳保护,用于处理种子的方法还应当考虑转基因植物的固有杀虫特性。
发明内容
本发明提供氟吡菌酰胺用于防治侵害抗线虫性作物的线虫和/或提高收率的有益的用途。
因此,本发明也涉及含有氟吡菌酰胺的组合物用于防治侵害抗线虫作物的线虫和/或提高收率的用途。
因此,本发明也涉及含有氟吡菌酰胺的组合物用于防治侵害抗昆虫作物的线虫的用途。
因此,本发明也涉及含有
A)氟吡菌酰胺和
B)至少一种农用化学活性化合物
的组合物用于防治侵害抗线虫作物的线虫和/或提高收率的用途。
因此,本发明也涉及含有
A)氟吡菌酰胺和
B)至少一种农用化学活性化合物
的组合物用于防治侵害抗昆虫作物的线虫的用途。
在本发明的一个优选的实施方案中也涉及含有
A)氟吡菌酰胺和
B)生物防治剂坚强芽孢杆菌(Bacillusfirmus)菌株CNCMI-1582,特别是孢子(美国专利第6,406,690号)
的组合物用于防治侵害抗线虫作物的线虫和/或提高收率的用途。
在本发明的一个优选的实施方案中也涉及含有
A)氟吡菌酰胺和
B)生物防治剂坚强芽孢杆菌菌株CNCMI-1582,特别是孢子(美国专利第6,406,690号)
的组合物用于防治侵害抗昆虫作物的线虫的用途。
本发明的示例性方法包括将本发明的氟吡菌酰胺施用至土壤或植物(例如种子或叶片)以防治线虫损伤和/或提高作物收率。
本发明涉及用于在植物或植物细胞中调节抗害虫性或耐害虫性的组合物和方法。“抗性”意指害虫(例如,昆虫或线虫)在采食或与植物或其部位发生其他接触时被杀死。“耐性”意指对害虫的移动、啃食、繁殖或其他功能的损害或降低。用于测量杀虫活性的方法为本领域所熟知。参见,例如,CzaplaandLang(1990)J.Econ.Entomol.83:2480-2485;Andrewsetal.(1988)Biochem.J.252:199-206;Marroneetal.(1985)J.ofEconomicEntomology78:290-293;以及美国专利第5,743,477号,其全文以引用的形式纳入本说明书。
结合本发明“防治”表示与未经处理的作物相比,昆虫或线虫侵害的预防性或治疗性的降低,更优选基本上排除侵害,最优选完全抑制侵害。
“杀虫活性量”意指能够导致至少一种害虫死亡,或显著减少害虫生长、啃食、或正常生理发育的杀虫剂的量。该量将根据以下因素变化,例如待防治的特定目标害虫、特定的环境、位置、植物、作物、或待处理的农业场所、环境条件、以及杀虫活性多肽组合物的施用的方法、施用率、施用浓度、稳定性和施用量。
本发明也涉及通过将杀虫剂选择地施用至转基因植物的种子来保护种子和发芽中的植物,或植物免受害虫攻击的方法。杀虫剂包括施用至转基因植物的种子的化学或生物防治剂组合物,其中所述防治剂旨在为植物或其种子提供保护以抵抗由一种或多种植物害虫引起的伤害。此外,本发明涉及用本文记载的杀虫剂处理的种子。与由未经本文描述的杀虫剂处理的种子培养的转基因植物、或与由经本文描述的杀虫剂处理的种子培养的参照的转基因植物相同种类但缺少转基因的植物(其在本文中均被称作“对照”植物)相比,将杀虫剂施用至转基因植物的种子产生对一种或多种植物害虫改进的抗性或耐性和/或提高的收率或活力。
在一些实施方案中,用这些杀虫剂处理种子不仅保护种子自身,也保护在发芽后长成的植物免受害虫伤害。以这种方式,可以无需在播种时或播种后即刻处理作物。
具体实施方式
已经发现本发明的方法与由单独施用生物或化学防治剂或单独存在昆虫或线虫防治基因所预期的相比,其在线虫和真菌侵害的环境中提供更高程度的植物活力和收率。在本发明范围内的至少一些昆虫防治剂已经显示出甚至在不存在昆虫压力下可提供提高的根质量,所述提高的根质量引起在根围内有益细菌的更好的确立,其转而降低了或由植物寄生线虫或由真菌引起的作物活力和收率的整体损失。当处理植物和植物材料时伴随这些成分的物理结合,在本发明的一个优选的实施方案中,已经制得本发明的组合物以为活的生物防治剂如孢子形成菌、根内繁殖菌提供稳定的环境。可以根据最终制剂所需的性能将多种添加剂加入到各个发明的组合物中,所述最终制剂具有必需的物理和化学稳定性以制备商业上可行的产品。
抗线虫植物
氟吡菌酰胺特别适用于在携带一种或多种表1列出的基因的植物中防治植物寄生线虫。与至少一种农用化学活性化合物结合的氟吡菌酰胺特别适用于在携带一种或多种表1列出的基因的植物中防治植物寄生线虫。与生物防治剂坚强芽孢杆菌(Bacillusfirmus)菌株CNCMI-1582结合的氟吡菌酰胺特别适用于在携带一种或多种表1列出的基因的植物中防治植物寄生线虫。这些基因各自的核苷酸和氨基酸序列信息,相关于表1的第2列列出的美国专利申请序列号,由表1的第4和第5列列出的序列编号(SEQIDNO)表示。
氟吡菌酰胺特别适用于在携带一种或多种表1列出的基因的植物中防治植物寄生线虫。与至少一种农用化学活性化合物结合的氟吡菌酰胺特别适用于在携带一种或多种表1列出的基因的植物中防治植物寄生线虫。与生物防治剂坚强芽孢杆菌菌株CNCMI-1582结合的氟吡菌酰胺特别适用于在携带一种或多种表1列出的基因的植物中防治植物寄生线虫。
氟吡菌酰胺或与生物防治剂坚强芽孢杆菌菌株CNCMI-1582结合的氟吡菌酰胺或与至少一种农用化学活性化合物结合的氟吡菌酰胺特别适用于在携带一种或多种下文的文件中记载的基因的植物中防治植物寄生线虫:WO2009/027539A2、WO2009/027313A2、WO2008/152008A2、WO2008/110522A1、WO2008/095972A1、WO2008/095970A1、WO2008/095969A1、WO2008/095919A1、WO2008/095916A1、WO2008/095911A2、WO2008/095910A1、WO2008/095889A1、WO2008/095886A1、WO2008/077892A1、WO2008/071726A2、WO2006/020821A2、WO2005/082932A2、WO2009/048847A1、WO2007/095469A2、WO2005/012340A1、WO2007/104570A2、11/765,491、11/765,494、10/926,819、10/782,020、12/032,479、10/783,417、10/782,096、11/657,964、12/192,904、11/396,808、12/166,253、12/166,239、12/166,124、12/166,209、11/762,886、12/364,335、11/763,947、12/252,453、12/209,354、12/491,396或12/497,221。
氟吡菌酰胺或与生物防治剂坚强芽孢杆菌菌株CNCMI-1582结合的氟吡菌酰胺或与至少一种农用化学活性化合物结合的氟吡菌酰胺特别适用于在携带一种或多种下文的基因的植物中防治植物寄生线虫:Hs1pro-1、Mi-1、Mi-1.2、HeroA、Gpa2、Gro1-4、Rhg1、Rhg4、Mi-3、Mi-9、Cre1、Cre3、Ma、Hsa-1Og、Me3、Rmc1、类CLAVATA3肽(例如SYV46)。
一个优选实施方案包括用氟吡菌酰胺处理的上文所述的抗线虫植物。
一个优选实施方案包括用与生物防治剂坚强芽孢杆菌菌株CNCMI-1582结合的氟吡菌酰胺处理的上文所述的抗线虫植物。
一个优选实施方案包括用与至少一种农用化学活性化合物结合的氟吡菌酰胺处理的上文所述的抗线虫植物。
在不同的实施方案中,本发明的组合物和方法包括用氟吡菌酰胺或与生物防治剂坚强芽孢杆菌菌株CNCMI-1582结合的氟吡菌酰胺或与至少一种农用化学活性化合物结合的氟吡菌酰胺处理包含一种或多种表1中列出的基因的转基因植物。在特别的实施方案中,将氟吡菌酰胺或与生物防治剂坚强芽孢杆菌菌株CNCMI-1582结合的氟吡菌酰胺或与至少一种农用化学活性化合物结合的氟吡菌酰胺施用至包含一种或多种表1中列出的基因—包含生物活性变异体及其片段—的转基因植物的种子。
本发明的一个示例性方法包括将本发明的氟吡菌酰胺或与生物防治剂坚强芽孢杆菌菌株CNCMI-1582结合的氟吡菌酰胺或与至少一种农用化学活性化合物结合的氟吡菌酰胺施用至植物的繁殖材料(例如种子)以抵抗线虫伤害和/或提高作物收率。
本发明的又一个示例性的方法包括将氟吡菌酰胺或与生物防治剂坚强芽孢杆菌菌株CNCMI-1582结合的氟吡菌酰胺或与至少一种农用化学活性化合物结合的氟吡菌酰胺施用至土壤或植物(例如,叶片)以抵抗线虫伤害和/或提高作物收率。
在不同的实施方案中,杀线虫生物防治剂是氟吡菌酰胺,且抗线虫作物包括含有Axmi031或Axn2的转基因植物(表1)。
表1中列出的核苷酸和氨基酸序列编号是示例性的序列且不旨在限制本发明的范围。本发明包括包含表1的第1列列出的一种或多种基因的植物和植物部位,包括植物细胞和种子。在一些实施方案中,本发明包括包含表1的第4列列出的一种或多种核苷酸序列的植物和植物部位,包括植物细胞和种子。在一些实施方案中,本发明包括包含编码表1的第5列列出的一种或多种多肽的一种或多种核苷酸序列的植物和植物部位,包括植物细胞和种子。
在另一个实施方案中,本发明包括包含编码表1的第5列列出的氨基酸序列的生物活性变异体或片段的一种或多种核苷酸序列的植物和植物部位,包括植物细胞和种子。
编码本发明的杀虫蛋白质的生物活性部分的核苷酸片段将编码至少约15、25、30、50、75、100、125、150、175、200、250、300、350、400、450个连续的氨基酸,或编码本文的表2中列出的全长杀虫蛋白质中存在的最多至全部数目的氨基酸。这种生物活性部分可通过重组技术制备并用于评估杀虫活性。用于测定杀虫活性的方法为本领域熟知。参见,例如CzaplaandLang(1990)J.Econ.Entomol.83:2480-2485;Andrewsetal.(1988)Biochem.J.252:199-206;Marroneetal.(1985)J.ofEconomicEntomology78:290-293;以及美国专利第5,743,477号,其所有的全文以引用的方式纳入本说明书。
在一些实施方案中,所述片段为蛋白水解裂解片段。例如,蛋白水解裂解片段可具有至少约100个氨基酸、约120、约130、约140、约150或约160个涉及表2中列出的氨基酸序列的氨基酸的N-末端或C-末端截断点。在一些实施方案中,本文中包括的片段通过,例如蛋白质水解或通过在编码序列中插入终止密码子由C-末端结晶域的移除产生。
本发明优选的杀虫蛋白质由与表2中列出的核苷酸序列十分同源的核苷酸序列编码,或是与表2中列出的氨基酸序列十分同源的杀虫蛋白质。“十分同源”意指氨基酸或核苷酸序列,当使用标准参数进行本文描述的比对程序之一时,与参照序列相比,具有至少约60%或65%序列同源性、约70%或75%序列同源性、约80%或85%序列同源性、约90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更高的序列同源性。本领域技术人员将理解可以适当调节这些数值,以通过兼顾密码子简并、氨基酸相似性、读码框定位等确定由两个核苷酸序列编码的相应蛋白质的同源性。
为测定两个氨基酸序列或两个核酸的同源度(percentidentity),为实现最佳比较的目的将序列比对。两个序列之间的同源度随序列共有的相同位点的数量而变化(即,同源度=相同位点的数量/位点总量(例如,重叠位点)x100)。在一个实施方案中,两个序列有相同的长度。在另一个实施方案中,同源度在参照序列的整体上计算(例如,表2中列出的序列)。两个序列之间的同源度可使用与下文描述的技术类似的技术来测定,允许或不允许间隙(gap)。在计算同源度中,通常将精确匹配计数。间隙——即比对中残基存在于一个序列中而不存在于另一个序列中的位点——被认为是非同源的残基位点。
两个序列之间的同源度的测定可以使用数学算法来完成。用于比较两个序列的数学算法的非限制型实例有下述算法:KarlinandAltschul(1990)Proc.Natl.Acad.Sci.USA87:2264,如KarlinandAltschul(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.USA90:5873-5877中的修正。将上述算法纳入Altschuletal.(1990)J.Mol.Biol.215:403的BLASTN和BLASTX程序。BLAST核苷酸搜索可使用BLASTN程序进行——分数=100,字长=12——以得到与本发明的类杀虫核酸分子同源的核苷酸序列。BLAST蛋白质搜索可使用BLASTX程序进行——分数=50,字长=3——以得到与本发明的杀虫蛋白质分子同源的氨基酸序列。为了得到用于比较目的的间隙比对,可以如Altschuletal.(1997)NucleicAcidsRes.25:3389中所述使用GappedBLAST(BLAST2.0中)。或者,可以使用PSI-Blast来实施检测分子之间远程关系的迭代搜索。参见Altschuletal.(1997)supra。当使用BLAST、GappedBLAST、和PSI-Blast程序时,可以使用各个程序的默认参数(例如BLASTX和BLASTN)。也可以通过手动检查来进行比对。
用于序列比较的数学算法的另一个非限制的实例为ClustalW算法(Higginsetal.(1994)NucleicAcidsRes.22:4673-4680)。ClustalW比较序列并使氨基酸或DNA序列的整体比对,从而可提供关于氨基酸序列整体的序列保守性的数据。ClustalW算法用在许多市售可得的DNA/氨基酸分析软件包中,如VectorNTI程序套件的ALIGNX模块(InvitrogenCorporation,Carlsbad,CA)。在用ClustalW比对氨基酸序列后,可以评估氨基酸的同源度。适用于ClustalW比对分析的软件程序的非限制实例为GENEDOCTM。GENEDOCTM(KarlNicholas)能够评估多个蛋白质之间的氨基酸(或DNA)相似性和同源性。用于序列比较的数学算法的另一个非限制性的实例为MyersandMiller(1988)CABIOS4:11-17的算法。该算法被纳入ALIGN程序(2.0版本)中,其是GCGWisconsinGenetics软件包—10版本—的一部分(可由Accelrys,Inc.,9685ScrantonRd.,SanDiego,CA,USA得到)。当使用ALIGN程序比较氨基酸序列时,可以使用PAM120权重残基表,间隙长度罚分为12,以及间隙罚分为4。
除非另外陈述,使用NeedlemanandWunsch(1970)J.Mol.Biol.48(3):443-453算法的GAPVersion10将使用以下参数来测定序列同源性或相似性:使用50个GAP权重和3个长度权重以及nwsgapdna.cmp得分矩阵来测定核苷酸序列的%同源性和%相似性;使用8个GAP权重和2个长度权重和BLOSUM62得分程序来测定氨基酸序列的%同源性和%相似性。可以使用等同的程序。“等同的程序”意指用于任何两个考虑中的序列的任意的序列比较程序,当与由GAP版本10生成的相应比对相比时,生成具有相同核苷酸残基匹配度和相同的序列同源度的比对。
表2中列出的氨基酸序列的“变异体”包括编码本文中公开的杀虫蛋白质,但是由于遗传密码的简并有适当的不同的那些序列以及如上文所述的列十分同源的那些序列。自然存在的等位基因变异体可使用众所周知的分子生物技术来鉴别,如聚合酶链式反应(PCR)以及如下文列出的杂交技术。变异体核苷酸序列也包括例如,通过使用定点突变技术产生的合成来源的核苷酸序列,但是其如下文所述仍编码本发明公开的杀虫蛋白质。
技术人员将进一步地了解可以通过本发明的核苷酸序列的突变来引入改变从而在被编码的杀虫蛋白质的氨基酸序列中产生变化,同时不改变蛋白质的生物活性。因此,可以通过将一个或多个核苷酸的置换、添加、或缺失引入到本文公开的相应核苷酸序列中来生成变异体分离的核酸分子,从而将一个或多个氨基酸的置换、添加、或缺失引入到编码的蛋白质中。可通过标准技术引入突变,如定点突变和PCR-介导的突变。本发明也包括这些变异体的核苷酸序列。
例如,可以在一个或多个、预计的非必需氨基酸残基上进行保守的氨基酸置换。“非必需”氨基酸残基是可从杀虫蛋白质的野生型序列改变同时不改变生物活性的残基,而“必需”氨基酸残基为生物活性所需。“保守的氨基酸置换”指其中的氨基酸残基被具有相似侧链的氨基酸残基替换。具有相似侧链的氨基酸残基族在本领域中已有定义。这些族包括具有碱性侧链的氨基酸(例如,赖氨酸、精氨酸、组氨酸)、具有酸性侧链的氨基酸(例如,天冬氨酸、谷氨酸)、具有不带电荷的极性侧链的氨基酸(例如,甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、半胱氨酸)、具有非极性侧链的氨基酸(例如,丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、色氨酸)、具有β-支化侧链的氨基酸(例如,苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸)以及具有芳族侧链的氨基酸(例如,酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、组氨酸)。
氨基酸置换可在保持功能的非保守区域中进行。通常,这类置换不适于保守的氨基酸残基,或不适于存在于保守基序内的对于蛋白质活性必不可少的氨基酸残基。保守的且对于蛋白质活性必不可少的残基的实例包括,例如,在与本发明的序列相似或相关的毒素的比对中包含的所有蛋白质之间相同的残基(例如,在同源蛋白质的比对中相同的残基)。保守但可进行保守的氨基酸置换且仍具有活性的残基实例包括,例如,在与本发明序列相似或相关的毒素的比对中包含的所有蛋白质之间仅具有保守置换的残基(例如,在比对同源蛋白质中包含的所有蛋白质之间仅具有保守置换的残基)。然而,本领域技术人员将理解在保守残基中功能变异体可具有极少的保守或非保守的改变。
或者,变异体核苷酸序列可通过将突变沿全部或部分编码序列随机地引入,如通过饱和突变而实现,且可筛选生成的突变体转移杀虫活性至识别保留活性的突变体的能力。突变以后,可以重组表达编码的蛋白质,且可使用标准的检测技术来测定蛋白质的活性。
使用方法如PCR、杂交等,可以识别相应的杀虫序列,该序列具有与本发明的序列显著的同源性。参见,例如SambrookandRussell(2001)MolecularCloning:ALaboratoryManual.(ColdSpringHarborLaboratoryPress,ColdSpringHarbor,NY)以及Innis,etal.(1990)PCRProtocols:AGuidetoMethodsandApplications(AcademicPress,NY)。
本发明的变异体核苷酸和氨基酸序列也包括源自突变和重组过程(例如DNA重排)的序列。使用该过程,可用一个或多个不同的杀虫蛋白质编码区域来产生新的具有所需性能的杀虫蛋白质。以这种方式,重组的多核苷酸库由含有序列区域的相关序列多核苷酸的总体产生,所述序列区域具有显著的序列同源性且可在体外或体内同源性地重组。例如,使用这种方法,编码关注结构域的序列基序可在本发明的杀虫基因和其他已知的杀虫基因之间重排以得到编码具有有意义的改进性能—如提高杀昆虫活性—的蛋白质的新基因。对于DNA重排的策略是本领域已知的。参见,例如Stemmer(1994)Proc.Natl.Acad.Sci.USA91:10747-10751;Stemmer(1994)Nature370:389-391;Cramerietal.(1997)NatureBiotech.15:436-438;Mooreetal.(1997)J.Mol.Biol.272:336-347;Zhangetal.(1997)Proc.Natl.Acad.Sci.USA94:4504-4509;Cramerietal.(1998)Nature391:288-291;以及美国专利第5,605,793号和第5,837,458号。
结构域交换或重排是用于产生改变的杀虫蛋白质的另一种机理。结构域可以在杀虫蛋白质之间交换,产生具有改进的杀虫活性或目标谱的杂交的或嵌合的毒素。用于生成重组蛋白质和测试其杀虫活性的方法为本领域众所周知的(参见,例如Naimovetal.(2001)Appl.Environ.Microbiol.67:5328-5330;deMaagdetal.(1996)Appl.Environ.Microbiol.62:1537-1543;Geetal.(1991)J.Biol.Chem.266:17954-17958;Schnepfetal.(1990)J.Biol.Chem.265:20923-20930;Rangetal.91999)Appl.Environ.Microbiol.65:2918-2925)。
本发明包含的蛋白质的变异体和片段是具有生物活性的,即它们继续具有天然蛋白质的所需的生物活性,即,杀虫活性。“保留活性”意指变异体将具有天然蛋白质的杀虫活性的至少约30%,至少约50%,至少约70%,或至少约80%。测定杀虫活性的方法为本领域众所周知的。参见,例如,CzaplaandLang(1990)J.Econ.Entomol.83:2480-2485;Andrewsetal.(1988)Biochem.J.252:199-206;Marroneetal.(1985)J.ofEconomicEntomology78:290-293;以及美国专利第5,743,477号,其所有的全文均以引用的方式纳入本说明书。
在本发明的上下文中,农用化学活性化合物应理解为意指所有常规用于或可用于处理植物的物质。可优选提及杀真菌剂、杀细菌剂、杀昆虫剂、杀螨剂、杀线虫剂、杀软体动物剂、安全剂、植物生长调节剂、和植物营养素以及生物防治剂。
混合成分
以B)列出的农用化学活性化合物是以下的活性成分,可提及的杀真菌剂有:
(1)麦角固醇合成的抑制剂:(1.1)aldimorph(1704-28-5)、(1.2)戊环唑(azaconazole)(60207-31-0)、(1.3)双苯三唑醇(bitertanol)(55179-31-2)、(1.4)糠菌唑(bromuconazole)(116255-48-2)、(1.5)环唑醇(cyproconazole)(113096-99-4)、(1.6)苄氯三唑醇(diclobutrazole)(75736-33-3)、(1.7)噁醚唑(difenoconazole)(119446-68-3)、(1.8)烯唑醇(diniconazole)(83657-24-3)、(1.9)烯唑醇-M(diniconazole-M)(83657-18-5)、(1.10)十二环吗啉(dodemorph)(1593-77-7)、(1.11)吗菌灵(dodemorphacetate)(31717-87-0)、(1.12)氟环唑(epoxiconazole)(106325-08-0)、(1.13)乙环唑(etaconazole)(60207-93-4)、(1.14)异嘧菌醇(fenarimol)(60168-88-9)、(1.15)腈苯唑(fenbuconazole)(114369-43-6)、(1.16)环酰菌胺(fenhexamid)(126833-17-8)、(1.17)苯锈啶(fenpropidin)(67306-00-7)、(1.18)丁苯吗啉(fenpropimorph)(67306-03-0)、(1.19)喹唑菌酮(fluquinconazole)(136426-54-5)、(1.20)呋嘧醇(flurprimidole)(56425-91-3)、(1.21)氟硅唑(flusilazole)(85509-19-9)、(1.22)粉唑醇(flutriafol)(76674-21-0)、(1.23)呋菌唑(furconazole)(112839-33-5)、(1.24)呋醚唑(furconazole-cis)(112839-32-4)、(1.25)己唑醇(hexaconazole)(79983-71-4)、(1.26)烯菌灵(imazalil)(60534-80-7)、(1.27)烯菌灵硫酸盐(imazalilsulfate)(58594-72-2)、(1.28)亚胺唑(imibenconazole)(86598-92-7)、(1.29)种菌唑(ipconazole)(125225-28-7)、(1.30)叶菌唑(metconazole)(125116-23-6)、(1.31)腈菌唑(myclobutanil)(88671-89-0)、(1.32)萘替芬(naftifine)(65472-88-0)、(1.33)氟苯嘧啶醇(nuarimol)(63284-71-9)、(1.34)恶咪唑(oxpoconazole)(174212-12-5)、(1.35)多效唑(paclobutrazol)(76738-62-0)、(1.36)稻瘟酯(pefurazoate)(101903-30-4)、(1.37)戊菌唑(penconazole)(66246-88-6)、(1.38)病花灵(piperalin)(3478-94-2)、(1.39)丙氯灵(prochloraz)(67747-09-5)、(1.40)丙环唑(propiconazole)(60207-90-1)、(1.41)丙硫菌唑(prothioconazole)(178928-70-6)、(1.42)稗草畏(pyributicarb)(88678-67-5)、(1.43)啶斑肟(pyrifenox)(88283-41-4)(1.44)唑喹菌酮(quinconazole)(103970-75-8)、(1.45)硅氟唑(simeconazole)(149508-90-7)、(1.46)螺噁茂胺(spiroxamine)(118134-30-8)、(1.47)戊唑醇(tebuconazole)(107534-96-3)、(1.48)特比萘芬(terbinafine)(91161-71-6)、(1.49)氟醚唑(tetraconazole)(112281-77-3)、(1.50)三唑酮(triadimefon)(43121-43-3)、(1.51)三唑醇(triadimenol)(89482-17-7)、(1.52)十三吗啉(tridemorph)(81412-43-3)、(1.53)氟菌唑(triflumizole)(68694-11-1)、(1.54)嗪氨灵(triforine)(26644-46-2)、(1.55)戊叉唑菌(triticonazole)(131983-72-7)、(1.56)烯效唑(uniconazole)(83657-22-1)、(1.57)高烯效唑(uniconazole-p)(83657-17-4)、(1.58)烯霜苄唑(viniconazole)(77174-66-4)、(1.59)伏立康唑(voriconazole)(137234-62-9)、(1.60)1-(4-氯苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)环庚醇(129586-32-9)、(1.61)1-(2,2-二甲基-2,3-二氢-1H-茚-1-基)-1H-咪唑-5-羧酸甲酯(110323-95-0)、(1.62)N'-{5-(二氟甲基)-2-甲基-4-[3-(三甲基甲硅烷基)丙氧基]苯基}-N-乙基-N-甲基亚氨基甲酰胺、(1.63)N-乙基-N-甲基-N'-{2-甲基-5-(三氟甲基)-4-[3-(三甲基甲硅烷基)丙氧基]苯基}亚氨基甲酰胺、和(1.64)O-{1-[(4-甲氧苯氧基)-3,3-二甲基丁-2-基}-1H-咪唑-1-硫代碳酸酯(111226-71-2)。
(2)呼吸链复合体I或II的抑制剂:例如(2.1)bixafen(581809-46-03)、(2.2)啶酰菌胺(boscalid)(188425-85-6)、(2.3)萎锈灵(carboxin)(5234-68-4)、(2.4)氟嘧菌胺(diflumetorim)(130339-07-0)、(2.5)甲呋酰胺(fenfuram)(24691-80-3)、(2.6)氟吡菌酰胺(fluopyram)(658066-35-4)、(2.7)氟酰胺(flutolanil)(66332-96-5)、(2.8)fluxapyroxad(907204-31-3)、(2.9)呋吡唑灵(furametpyr)(123572-88-3)、(2.10)拌种胺(furmecyclox)(60568-05-0)、(2.11)萘吡菌胺(isopyrazam,顺式-差向异构的外消旋体1RS,4SR,9RS和反式-差向异构的外消旋体1RS,4SR,9SR的混合物)(88165-58-1)、(2.12)萘吡菌胺(isopyrazam,反式-差向异构的外消旋体1RS,4SR,9SR)、(2.13)萘吡菌胺(isopyrazam,反式-差向异构的对映异构体1R,4S,9S)、(2.14)萘吡菌胺(isopyrazam,反式-差向异构的对映异构体1S,4R,9R)、(2.15)萘吡菌胺(isopyrazam,顺式-差向异构的外消旋体1RS,4SR,9RS)、(2.16)萘吡菌胺(isopyrazam,顺式-差向异构的对映异构体1R,4S,9R)、(2.17)萘吡菌胺(isopyrazam,顺式-差向异构的对映异构体1S,4R,9S)、(2.18)灭锈胺(mepronil)(55814-41-0)、(2.19)氧化萎锈灵(oxycarboxin)(5259-88-1)、(2.20)戊苯吡菌胺(penflufen)(494793-67-8)、(2.21)吡噻菌胺(penthiopyrad)(183675-82-3)、(2.22)环丙吡菌胺(sedaxane)(874967-67-6)、(2.23)溴氟唑菌(thifluzamide)(130000-40-7)、(2.24)1-甲基-N-[2-(1,1,2,2-四氟乙氧基)苯基]-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酰胺、(2.25)3-(二氟甲基)-1-甲基-N-[2-(1,1,2,2-四氟乙氧基)苯基]-1H-吡唑-4-甲酰胺、(2.26)3-(二氟甲基)-N-[4-氟-2-(1,1,2,3,3,3-六氟丙氧基)苯基]-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺、(2.27)N-[1-(2,4-二氯苯基)-1-甲氧基丙烷-2-基]-3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(1092400-95-7)(WO2008148570)、(2.28)5,8-二氟-N-[2-(2-氟-4-{[4-(三氟甲基)吡啶-2-基]氧基}苯基)乙基]喹唑啉-4-胺(1210070-84-0)(WO2010025451)、(2.29)N-[9-(二氯亚甲基)-1,2,3,4-四氢-1,4-亚甲基萘-5-基]-3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺、(2.30)N-[(1S,4R)-9-(二氯亚甲基)-1,2,3,4-四氢-1,4-亚甲基萘-5-基]-3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺和(2.31)N-[(1R,4S)-9-(二氯亚甲基)-1,2,3,4-四氢-1,4-亚甲基萘-5-基]-3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺。
(3)呼吸链复合体III的抑制剂:例如(3.1)ametoctradin(865318-97-4)、(3.2)吲唑磺菌胺(amisulbrom)(348635-87-0)、(3.3)腈嘧菌酯(azoxystrobin)(131860-33-8)、(3.4)氰霜唑(cyazofamid)(120116-88-3)、(3.5)coumethoxystrobin(850881-30-0)、(3.6)coumoxystrobin(850881-70-8)、(3.7)醚菌胺(dimoxystrobin)(141600-52-4)、(3.8)烯肟菌酯(enestroburin)(238410-11-2)(WO2004/058723)、(3.9)噁唑菌酮(famoxadone)(131807-57-3)(WO2004/058723)、(3.10)咪唑菌酮(fenamidone)(161326-34-7)(WO2004/058723)、(3.11)fenoxystrobin(918162-02-4)、(3.12)氟嘧菌酯(fluoxastrobin)(361377-29-9)(WO2004/058723)、(3.13)醚菌酯(kresoxim-methyl)(143390-89-0)(WO2004/058723)、(3.14)苯氧菌胺(metominostrobin)(133408-50-1)(WO2004/058723)、(3.15)肟醚菌胺(orysastrobin)(189892-69-1)(WO2004/058723)、(3.16)啶氧菌酯(picoxystrobin)(117428-22-5)(WO2004/058723)、(3.17)唑菌胺酯(pyraclostrobin)(175013-18-0)(WO2004/058723)、(3.18)pyrametostrobin(915410-70-7)(WO2004/058723)、(3.19)pyraoxystrobin(862588-11-2)(WO2004/058723)、(3.20)pyribencarb(799247-52-2)(WO2004/058723)、(3.21)triclopyricarb(902760-40-1)、(3.22)肟菌酯(trifloxystrobin)(141517-21-7)(WO2004/058723)、(3.23)(2E)-2-(2-{[6-(3-氯-2-甲基苯氧基)-5-氟嘧啶-4-基]氧基}苯基)-2-(甲氧基亚氨基)-N-甲基乙酰胺(WO2004/058723)、(3.24)(2E)-2-(甲氧基亚氨基)-N-甲基-2-(2-{[({(1E)-1-[3-(三氟甲基)苯基]亚乙基}氨基)氧基]甲基}苯基)乙酰胺(WO2004/058723)、(3.25)(2E)-2-(甲氧基亚氨基)-N-甲基-2-{2-[(E)-({1-[3-(三氟甲基)苯基]乙氧基}亚氨基)甲基]苯基}乙酰胺(158169-73-4)、(3.26)(2E)-2-{2-[({[(1E)-1-(3-{[(E)-1-氟-2-苯基乙烯基]氧}苯基)亚乙基]氨基}氧基)甲基]苯基}-2-(甲氧基亚氨基)-N-甲基乙酰胺(326896-28-0)、(3.27)(2E)-2-{2-[({[(2E,3E)-4-(2,6-二氯苯基)丁-3-烯-2-亚基]氨基}氧基)甲基]苯基}-2-(甲氧基亚氨基)-N-甲基乙酰胺、(3.28)2-氯-N-(1,1,3-三甲基-2,3-二氢-1H-茚-4-基)吡啶-3-甲酰胺(119899-14-8)、(3.29)5-甲氧基-2-甲基-4-(2-{[({(1E)-1-[3-(三氟甲基)苯基]亚乙基}氨基)氧基]甲基}苯基)-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮、(3.30)(2E)-2-{2-[({环丙基[(4-甲氧基苯基)亚氨基]甲基}硫基)甲基]苯基}-3-甲氧基丙-2-烯酸甲酯(149601-03-6)、(3.31)N-(3-乙基-3,5,5-三甲基环己基)-3-(甲酰氨基)-2-羟基苯甲酰胺(226551-21-9)、(3.32)2-{2-[(2,5-二甲基苯氧基)甲基]苯基}-2-甲氧基-N-甲基乙酰胺(173662-97-0)和(3.33)(2R)-2-{2-[(2,5-二甲基苯氧基)甲基]苯基}-2-甲氧基-N-甲基乙酰胺(394657-24-0)。
(4)有丝分裂和细胞分裂抑制剂:例如(4.1)苯菌灵(benomyl)(17804-35-2)、(4.2)多菌灵(carbendazim)(10605-21-7)、(4.3)苯咪唑菌(chlorfenazole)(3574-96-7)、(4.4)乙霉威(diethofencarb)(87130-20-9)、(4.5)韩乐宁(ethaboxam)(162650-77-3)、(4.6)氟啶酰菌胺(fluopicolide)(239110-15-7)、(4.7)麦穗宁(fuberidazole)(3878-19-1)、(4.8)戊菌隆(pencycuron)(66063-05-6)、(4.9)涕必灵(thiabendazole)(148-79-8)、(4.10)甲基托布津(thiophanate-methyl)(23564-05-8)、(4.11)thiophanate(23564-06-9)、(4.12)苯酰菌胺(zoxamide)(156052-68-5)、(4.13)5-氯-7-(4-甲基哌啶-1-基)-6-(2,4,6-三氟苯基)[1,2,4]三唑[1,5-a]嘧啶(214706-53-3)以及3-氯-5-(6-氯吡啶-3-基)-6-甲基-4-(2,4,6-三氟苯基)哒嗪(1002756-87-7)。
(5)能够有多位点作用的化合物:例如(5.1)波尔多液(bordeauxmixture)(8011-63-0)、(5.2)敌菌丹(captafol)(2425-06-1)、(5.3)克菌丹(captan)(133-06-2)(WO02/12172)、(5.4)百菌清(chlorothalonil)(1897-45-6)、(5.5)氢氧化铜(20427-59-2)、(5.6)环烷酸铜(1338-02-9)、(5.7)氧化铜(1317-39-1)、(5.8)氧氯化铜(1332-40-7)、(5.9)硫酸铜(2+)(7758-98-7)、(5.10)抑菌灵(dichlofluanid)(1085-98-9)、(5.11)二氰蒽醌(dithianon)(3347-22-6)、(5.12)多果定(dodine)(2439-10-3)、(5.13)多果定游离碱(dodinefreebase)、(5.14)福美铁(ferbam)(14484-64-1)、(5.15)fluorofolpet(719-96-0)、(5.16)灭菌丹(folpet)(133-07-3)、(5.17)双胍辛盐(guazatine)(108173-90-6)、(5.18)双胍辛乙酸盐(guazatineacetate)、(5.19)双胍辛胺(iminoctadine)(13516-27-3)、(5.20)双八胍盐(iminoctadinealbesilate)(169202-06-6)、(5.21)双胍辛胺乙酸盐(iminoctadinetriacetate)(57520-17-9)、(5.22)代森锰铜(mancopper)(53988-93-5)、(5.23)代森锰锌(mancozeb)(8018-01-7)、(5.24)代森锰(maneb)(12427-38-2)、(5.25)代森联(metiram)(9006-42-2)、(5.26)代森联锌(metiramzinc)(9006-42-2)、(5.27)喹啉铜(oxine-copper)(10380-28-6)、(5.28)propamidine(104-32-5),(5.29)丙森锌(propineb)(12071-83-9)、(5.30)硫和硫制剂包括多硫化钙(calciumpolysulphide)(7704-34-9)、(5.31)福美双(thiram)(137-26-8),(5.32)对甲抑菌灵(tolylfluanid)(731-27-1)、(5.33)代森锌(zineb)(12122-67-7)和(5.34)福美锌(ziram)(137-30-4)。
(6)能够诱导宿主防御的化合物:例如(6.1)苯并噻二唑(acibenzolar-S-methyl)(135158-54-2)、(6.2)异噻菌胺(isotianil)(224049-04-1)、(6.3)噻菌灵(probenazole)(27605-76-1)和(6.3)噻酰菌胺(tiadinil)(223580-51-6)。
(7)氨基酸和/或蛋白生物合成抑制剂:例如(7.1)胺扑灭(andoprim)(23951-85-1)、(7.2)灭瘟素(blasticidin-S)(2079-00-7)、(7.3)嘧菌环胺(cyprodinil)(121552-61-2)、(7.4)春雷霉素(kasugamycin)(6980-18-3)、(7.5)盐酸春雷霉素水合物(kasugamycinhydrochloridehydrate)(19408-46-9)、(7.6)嘧菌胺(mepanipyrim)(110235-47-7)、(7.7)二甲嘧菌胺(pyrimethanil)(53112-28-0)以及3-(5-氟-3,3,4,4-四甲基-3,4-二氢异喹啉-1-基)喹啉(861647-32-7)(WO2005070917)。
(8)ATP产生抑制剂:(8.1)三苯基乙酸锡(fentinacetate)(900-95-8)、(8.2)三苯锡氯(fentinchloride)(639-58-7)、(8.3)毒菌锡(fentinhydroxide)(76-87-9)和(8.4)硅噻菌胺(silthiofam)(175217-20-6)。
(9)细胞壁合成抑制剂:例如(9.1)苯噻菌胺(benthiavalicarb)(177406-68-7)、(9.2)烯酰吗啉(dimethomorph)(110488-70-5)、(9.3)氟吗啉(flumorph)(211867-47-9)、(9.4)缬霉威(iprovalicarb)(140923-17-7)、(9.5)双炔酰菌胺(mandipropamid)(374726-62-2)、(9.6)多抗霉素(polyoxins)(11113-80-7)、(9.7)多氧霉素(polyoxorim)(22976-86-9)、(9.8)有效霉素A(validamycinA)(37248-47-8)和(9.9)valifenalate(283159-94-4;283159-90-0)。
(10)脂类和膜合成抑制剂:例如(10.1)联苯(biphenyl)(92-52-4)、(10.2)地茂散(chloroneb)(2675-77-6)、(10.3)氯硝胺(dicloran)(99-30-9)、(10.4)敌瘟磷(edifenphos)(17109-49-8)、(10.5)氯唑灵(etridiazole)(2593-15-9)、(10.6)iodocarb(55406-53-6)、(10.7)异稻瘟净(iprobenfos)(26087-47-8)、(10.8)稻瘟灵(isoprothiolane)(50512-35-1)、(10.9)霜霉威(propamocarb)(25606-41-1)、(10.10)霜霉威盐酸盐(propamocarb-hydrochloride)(25606-41-1)、(10.11)硫菌威(prothiocarb)(19622-08-3)、(10.12)定菌磷(pyrazophos)(13457-18-6)、(10.13)五氯硝基苯(quintozene)(82-68-8)、(10.14)四氯硝基苯(tecnazene)(117-18-0)和(10.15)甲基立枯磷(tolclofos-methyl)(57018-04-9)。
(11)黑色素生物合成抑制剂:例如(11.1)环丙酰菌胺(carpropamid)(104030-54-8)、(11.2)氯氰菌胺(diclocymet)(139920-32-4)、(11.3)稻瘟酰胺(fenoxanil)(115852-48-7)、(11.4)四氯苯酞(phthalid)(27355-22-2)、(11.5)咯喹酮(pyroquilon)(57369-32-1)、(11.6)三环唑(tricyclazole)(41814-78-2)和(11.7){3-甲基-1-[(4-甲基苯甲酰基)氨基]丁烷-2-基}氨基甲酸2,2,2-三氟乙酯(851524-22-6)(WO2005042474)。
(12)核酸合成抑制剂:例如(12.1)苯霜灵(benalaxyl)(71626-11-4)、(12.2)精苯霜灵(benalaxyl-M,kiralaxyl)(98243-83-5)、(12.3)磺嘧菌灵(bupirimate)(41483-43-6)、(12.4)clozylacon(67932-85-8)、(12.5)甲菌定(dimethirimol)(5221-53-4)、(12.6)乙菌定(ethirimol)(23947-60-6)、(12.7)呋氨丙灵(furalaxyl)(57646-30-7)、(12.8)土菌消(hymexazole)(10004-44-1)、(12.9)甲霜灵(metalaxyl)(57837-19-1)、(12.10)精甲霜灵(metalaxyl-M,mefenoxam)(70630-17-0)、(12.11)甲呋酰胺(ofurace)(58810-48-3)、(12.12)噁霜灵(oxadixyl)(77732-09-3)和(12.13)喹菌酮(oxolinicacid)(14698-29-4)。
(13)信号转导抑制剂:例如(13.1)乙菌利(chlozolinate)(84332-86-5)、(13.2)拌种咯(fenpiclonil)(74738-17-3)、(13.3)氟噁菌(fludioxonil)(131341-86-1)、(13.4)异丙定(iprodione)(36734-19-7)、(13.5)腐霉利(procymidone)(32809-16-8)、(13.6)喹氧灵(quinoxyfen)(124495-18-7)和(13.7)烯菌酮(vinclozolin)(50471-44-8)。
(14)能够作为解偶联剂的化合物:例如(14.1)乐杀螨(binapacryl)(485-31-4)、(14.2)敌螨普(dinocap)(131-72-6)、(14.3)嘧菌腙(ferimzone)(89269-64-7)、(14.4)氟啶胺(fluazinam)(79622-59-6)和(14.5)meptyldinocap(131-72-6)。
(15)其他化合物,例如(15.1)苯噻硫氰(benthiazole)(21564-17-0)、(15.2)bethoxazin(163269-30-5)、(15.3)卡巴西霉素(capsimycin)(70694-08-5)、(15.4)香芹酮(carvone)(99-49-0)、(15.5)灭螨猛(chinomethionat)(2439-01-2)、(15.6)pyriofenone(chlazafenone)(688046-61-9)、(15.7)硫杂灵(cufraneb)(11096-18-7)、(15.8)环氟菌胺(cyflufenamid)(180409-60-3)、(15.9)清菌脲(cymoxanil)(57966-95-7)、(15.10)环丙磺酰胺(cyprosulfamide)(221667-31-8)、(15.11)棉隆(dazomet)(533-74-4)、(15.12)咪菌威(debacarb)(62732-91-6)、(15.13)双氯酚(dichlorophen)(97-23-4)、(15.14)哒菌酮(diclomezine)(62865-36-5)、(15.15)野燕枯(difenzoquat)(49866-87-7)、(15.16)野燕枯甲基硫酸盐(difenzoquatmethylsulphate)(43222-48-6)、(15.17)二苯胺(diphenylamine)(122-39-4)、(15.18)ecomate、(15.19)fenpyrazamino(473798-59-3)、(15.20)氟酰菌胺(flumetover)(154025-04-4)、(15.21)氟氯菌核利(fluoroimide)(41205-21-4)、(15.22)磺菌胺(flusulfamide)(106917-52-6)、(15.23)flutianil(304900-25-2)、(15.24)乙膦酸铝(fosetyl-aluminium)(39148-24-8)、(15.25)乙膦酸钙、(15.26)乙膦酸钠(39148-16-8)、(15.27)六氯苯(hexachlorobenzene)(118-74-1)、(15.28)人间霉素(irumamycin)(81604-73-1)、(15.29)磺菌威(methasulfocarb)(66952-49-6)、(15.30)异硫氰酸甲酯(556-61-6)、(15.31)苯菌酮(metrafenone)(220899-03-6)、(15.32)米多霉素(mildiomycin)(67527-71-3)、(15.33)多马霉素(natamycin)(7681-93-8)、(15.34)福美镍(nickeldimethyldithiocarbamate)(15521-65-0)、(15.35)酞菌酯(nitrothal-isopropyl)(10552-74-6)、(15.36)异噻菌酮(octhilinone)(26530-20-1)、(15.37)oxamocarb(917242-12-7)、(15.38)oxyfenthiin(34407-87-9)、(15.39)五氯苯酚(pentachlorophenol)及其盐(87-86-5)、(15.40)苯醚菊酯(phenothrin)、(15.41)磷酸及其盐(13598-36-2)、(15.42)propamocarb-fosetylate、(15.43)propanosine-sodium(88498-02-6)、(15.44)丙氧喹啉(proquinazid)(189278-12-4)、(15.45)pyrimorph(868390-90-3)、(15.45e)(2E)-3-(4-叔丁基苯基)-3-(2-氯吡啶-4-基)-1-(吗啉-4-基)丙-2-烯-1-酮(1231776-28-5)、(15.45z)(2Z)-3-(4-叔丁基苯基)-3-(2-氯吡啶-4-基)-1-(吗啉-4-基)丙-2-烯-1-酮(1231776-29-6)、(15.46)吡咯菌素(pyrrolnitrine)(1018-71-9)(EP-A1559320)、(15.47)tebufloquin(376645-78-2)、(15.48)叶枯酞(tecloftalam)(76280-91-6)、(15.49)tolnifanide(304911-98-6)、(15.50)唑菌嗪(triazoxide)(72459-58-6)、(15.51)水杨菌胺(trichlamide)(70193-21-4)、(15.52)氰菌胺(zarilamid)(84527-51-5)、(15.53)(3S,6S,7R,8R)-8-苄基-3-[({3-[(异丁酰氧基)甲氧基]-4-甲氧基吡啶-2-基}羰基)氨基]-6-甲基-4,9-二氧-1,5-二氧戊环-7-基2-甲基丙酸酯(517875-34-2)(WO2003035617)、(15.54)1-(4-{4-[(5R)-5-(2,6-二氟苯基)-4,5-二氢-1,2-噁唑-3-基]-1,3-噻唑-2-基}哌啶-1-基)-2-[5-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基]乙酮(1003319-79-6)(WO2008013622)、(15.55)1-(4-{4-[(5S)-5-(2,6-二氟苯基)-4,5-二氢-1,2-噁唑-3-基]-1,3-噻唑-2-基}哌啶-1-基)-2-[5-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基]乙酮(1003319-80-9)(WO2008013622)、(15.56)1-(4-{4-[5-(2,6-二氟苯基)-4,5-二氢-1,2-噁唑-3-基]-1,3-噻唑-2-基}哌啶-1-基)-2-[5-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基]乙酮(1003318-67-9)(WO2008013622)、(15.57)1-(4-甲氧基苯氧基)-3,3-二甲基丁烷-2-基1H-咪唑-1-羧酸酯(111227-17-9)、(15.58)2,3,5,6-四氯-4-(甲基磺酰基)吡啶(13108-52-6)、(15.59)2,3-二丁基-6-氯噻吩并[2,3-d]嘧啶-4(3H)-酮(221451-58-7)、(15.60)2,6-二甲基-1H,5H-[1,4]二噻英并[2,3-c:5,6-c']二吡咯-1,3,5,7(2H,6H)-四酮、(15.61)2-[5-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基]-1-(4-{4-[(5R)-5-苯基-4,5-二氢-1,2-噁唑-3-基]-1,3-噻唑-2-基}哌啶-1-基)乙酮(1003316-53-7)(WO2008013622)、(15.62)2-[5-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基]-1-(4-{4-[(5S)-5-苯基-4,5-二氢-1,2-噁唑-3-基]-1,3-噻唑-2-基}哌啶-1-基)乙酮(1003316-54-8)(WO2008013622)、(15.63)2-[5-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基]-1-{4-[4-(5-苯基-4,5-二氢-1,2-噁唑-3-基)-1,3-噻唑-2-基]哌啶-1-基}乙酮(1003316-51-5)(WO2008013622)、(15.64)2-丁氧基-6-碘-3-丙基-4H-苯并吡喃-4-酮、(15.65)2-氯-5-[2-氯-1-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)-4-甲基-1H-咪唑-5-基]吡啶、(15.66)2-苯基苯酚及其盐(90-43-7)、(15.67)3-(4,4,5-三氟-3,3-二甲基-3,4-二氢异喹啉-1-基)喹啉(861647-85-0)(WO2005070917)、(15.68)3,4,5-三氯吡啶-2,6-二腈(17824-85-0)、(15.69)3-[5-(4-氯苯基)-2,3-二甲基-1,2-噁唑烷-3-基]吡啶、(15.70)3-氯-5-(4-氯苯基)-4-(2,6-二氟苯基)-6-甲基哒嗪、(15.71)4-(4-氯苯基)-5-(2,6-二氟苯基)-3,6-二甲基哒嗪、(15.72)5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-硫醇、(15.73)5-氯-N'-苯基-N'-(丙-2-炔-1-基)噻吩-2-磺酰肼(134-31-6)、(15.74)5-氟-2-[(4-氟苄基)氧基]嘧啶-4-胺(1174376-11-4)(WO2009094442)、(15.75)5-氟-2-[(4-甲基苄基)氧基]嘧啶-4-胺(1174376-25-0)(WO2009094442)、(15.76)5-甲基-6-辛基[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶-7-胺、(15.77)(2Z)-3-氨基-2-氰基-3-苯基丙-2-酸乙酯、(15.78)N'-(4-{[3-(4-氯苄基)-1,2,4-噻二唑-5-基]氧基}-2,5-二甲基苯基)-N-乙基-N-甲基亚氨基甲酰胺、(15.79)N-(4-氯苄基)-3-[3-甲氧基-4-(丙-2-炔-1-氧基)苯基]丙酰胺、(15.80)N-[(4-氯苯基)(氰基)甲基]-3-[3-甲氧基-4-(丙-2-炔-1-氧基)苯基]丙酰胺、(15.81)N-[(5-溴-3-氯吡啶-2-基)甲基]-2,4-二氯吡啶-3-甲酰胺、(15.82)N-[1-(5-溴-3-氯吡啶-2-基)乙基]-2,4-二氯吡啶-3-甲酰胺、(15.83)N-[1-(5-溴-3-氯吡啶-2-基)乙基]-2-氟-4-碘代吡啶-3-甲酰胺、(15.84)N-{(E)-[(环丙基甲氧基)亚氨基][6-(二氟甲氧基)-2,3-二氟苯基]甲基}-2-苯基乙酰胺(221201-92-9)、(15.85)N-{(Z)-[(环丙基甲氧基)亚氨基][6-(二氟甲氧基)-2,3-二氟苯基]甲基}-2-苯基乙酰胺(221201-92-9)、(15.86)N'-{4-[(3-叔丁基-4-氰基-1,2-噻唑-5-基)氧基]-2-氯-5-甲基苯基}-N-乙基-N-甲基亚氨基甲酰胺、(15.87)N-甲基-2-(1-{[5-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基]乙酰基}哌啶-4-基)-N-(1,2,3,4-四氢萘-1-基)-1,3-噻唑-4-甲酰胺(922514-49-6)(WO2007014290)、(15.88)N-甲基-2-(1-{[5-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基]乙酰基}哌啶-4-基)-N-[(1R)-1,2,3,4-四氢萘-1-基]-1,3-噻唑-4-甲酰胺(922514-07-6)(WO2007014290)、(15.89)N-甲基-2-(1-{[5-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基]乙酰基}哌啶-4-基)-N-[(1S)-1,2,3,4-四氢萘-1-基]-1,3-噻唑-4-甲酰胺(922514-48-5)(WO2007014290)、(15.90){6-[({[(1-甲基-1H-四唑-5-基)(苯基)亚甲基]氨基}氧基)甲基]吡啶-2-基}氨基甲酸戊酯、(15.91)吩嗪-1-羧酸、(15.92)喹啉-8-醇(134-31-6)、(15.93)喹啉-8-醇硫酸盐(2:1)(134-31-6)和(15.94){6-[({[(1-甲基-1H-四唑-5-基)(苯基)亚甲基]氨基}氧基)甲基]吡啶-2-基}氨基甲酸叔丁酯。
(16)其他化合物,例如(16.1)1-甲基-3-(三氟甲基)-N-[2'-(三氟甲基)联苯-2-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺、(16.2)N-(4'-氯联苯-2-基)-3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺、(16.3)N-(2',4'-二氯联苯-2-基)-3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺、(16.4)3-(二氟甲基)-1-甲基-N-[4'-(三氟甲基)联苯-2-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺、(16.5)N-(2',5'-二氟联苯-2-基)-1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酰胺、(16.6)3-(二氟甲基)-1-甲基-N-[4'-(丙-1-炔-1-基)联苯-2-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺(由WO2004/058723已知)、(16.7)5-氟-1,3-二甲基-N-[4'-(丙-1-炔-1-基)联苯-2-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺(由WO2004/058723已知)、(16.8)2-氯-N-[4'-(丙-1-炔-1-基)联苯-2-基]吡啶-3-甲酰胺(由WO2004/058723)、(16.9)3-(二氟甲基)-N-[4'-(3,3-二甲基丁-1-炔-1-基)联苯-2-基]-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(由WO2004/058723已知)、(16.10)N-[4'-(3,3-二甲基丁-1-炔-1-基)联苯-2-基]-5-氟-1,3-二甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(由WO2004/058723已知)、(16.11)3-(二氟甲基)-N-(4'-乙炔基联苯-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(由WO2004/058723已知)、(16.12)N-(4'-乙炔基联苯-2-基)-5-氟-1,3-二甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(由WO2004/058723已知)、(16.13)2-氯-N-(4'-乙炔基联苯-2-基)吡啶-3-甲酰胺(由WO2004/058723已知)、(16.14)2-氯-N-[4'-(3,3-二甲基丁-1-炔-1-基)联苯-2-基]吡啶-3-甲酰胺(由WO2004/058723已知)、(16.15)4-(二氟甲基)-2-甲基-N-[4'-(三氟甲基)联苯-2-基]-1,3-噻唑-5-甲酰胺(由WO2004/058723已知)、(16.16)5-氟-N-[4'-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)联苯-2-基]-1,3-二甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(由WO2004/058723已知)、(16.17)2-氯-N-[4'-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)联苯-2-基]吡啶-3-甲酰胺(由WO2004/058723已知)、(16.18)3-(二氟甲基)-N-[4'-(3-甲氧基-3-甲基丁-1-炔-1-基)联苯-2-基]-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(由WO2004/058723已知)、(16.19)5-氟-N-[4'-(3-甲氧基-3-甲基丁-1-炔-1-基)联苯-2-基]-1,3-二甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(由WO2004/058723已知)、(16.20)2-氯-N-[4'-(3-甲氧基-3-甲基丁-1-炔-1-基)联苯-2-基]吡啶-3-甲酰胺(由WO2004/058723已知)、(16.21)(5-溴-2-甲氧基-4-甲基吡啶-3-基)(2,3,4-三甲氧基-6-甲基苯基)甲酮(由EP-A1559320已知)、(16.22)N-[2-(4-{[3-(4-氯苯基)丙-2-炔-1-基]氧}-3-甲氧基苯基)乙基]-N2-(甲基磺酰基)缬氨酰胺(220706-93-4)、(16.23)4-氧-4-[(2-苯基乙基)氨基]丁酸和(16.24){6-[({[(Z)-(1-甲基-1H-四唑-5-基)(苯基)亚甲基]氨基}氧基)甲基]吡啶-2-基}氨基甲酸丁-3-炔-1-酯、N-[9-(二氯亚甲基)-1,2,3,4-四氢-1,4-亚甲基萘-5-基]-3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺和3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸[2-(2,4-二氯苯基)-2-甲氧基-1-甲基-乙基]-胺。
其中所有(1)至(16)类命名的混合组分可任选与适当的碱或酸形成盐——如果它们的官能团能够如此。
可提及的杀细菌剂有:
溴硝丙二醇(bronopol)、双氯酚(dichlorophen)、氯定(nitrapyrin)、福美镍(nickeldimethyldithiocarbamate)、春雷霉素(kasugamycin)、辛噻酮(octhilinone)、呋喃羧酸、土霉素(oxytetracyclin)、噻菌灵(probenazole)、链霉素(streptomycin)、叶枯酞(tecloftalam)、硫酸铜及其他铜制剂。
可提及的杀昆虫剂、杀螨剂和杀线虫剂有:
(1)乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制剂,例如氨基甲酸酯类,例如,棉铃威(alanycarb)、涕灭威(aldicarb)、砜灭威(aldoxycarb)、除害威(allyxycarb)、灭害威(aminocarb)、噁虫威(bendiocarb)、丙硫克百威(benfuracarb)、合杀威(bufencarb)、畜虫威(butacarb)、丁酮威(butocarboxim)、丁酮砜威(butoxycarboxim)、甲萘威(carbaryl)、克百威(carbofuran)、丁硫克百威(carbosulfan)、除线威(cloethocarb)、敌蝇威(dimetilan)、乙硫苯威(ethiofencarb)、仲丁威(fenobucarb)、苯硫威(fenothiocarb)、伐虫脒(formetanate)、呋线威(furathiocarb)、异丙威(isoprocarb)、威百亩(metam-sodium)、甲硫威(methiocarb)、灭多威(methomyl)、速灭威(metolcarb)、杀线威(oxamyl)、抗蚜威(pirimicarb)、猛杀威(promecarb)、残杀威(propoxur)、硫双威(thiodicarb)、久效威(thiofanox)、混杀威(trimethacarb)、XMC和灭杀威(xylylcarb);或有机磷酸酯类,例如乙酰甲胺磷(acephate)、甲基吡恶磷(azamethiphos)、谷硫磷(azinphos-methyl)、乙基谷硫磷(azinphos-ethyl)、乙基溴硫磷(bromophos-ethyl)、溴苯烯磷(bromfenvinfos(-methyl))、特嘧硫磷(butathiofos)、硫线磷(cadusafos)、三硫磷(carbophenothion)、氯氧磷(chlorethoxyfos)、毒虫畏(chlorfenvinphos)、氯甲硫磷(chlormephos)、甲基/乙基毒死蜱(chlorpyrifos(-methyl/-ethyl))、蝇毒磷(coumaphos)、苯腈磷(cyanofenphos)、杀螟腈(cyanophos)、毒虫畏(chlorfenvinphos)、甲基内吸磷(demeton-S-methyl)、磺吸磷(demeton-S-methylsulfone)、氯亚磷(dialifos)、二嗪农(diazinon)、除线磷(dichlofenthion)、敌敌畏/DDVP(dichlorvos/DDVP)、百治磷(dicrotophos)、乐果(dimethoate)、甲基毒虫畏(dimethylvinphos)、杀抗松(dioxabenzofos)、乙拌磷(disulfoton)、苯硫磷(EPN)、乙硫磷(ethion)、灭线磷(ethoprophos)、氧嘧啶磷(etrimfos)、伐灭磷(famphur)、苯线磷(fenamiphos)、杀螟硫磷(fenitrothion)、丰索磷(fensulfothion)、倍硫磷(fenthion)、flupyrazofos、地虫磷(fonofos)、安果(formothion)、丁苯硫磷(fosmethilan)、噻唑酮磷(fosthiazate)、庚烯磷(heptenophos)、碘硫磷(iodofenphos)、异稻瘟净(iprobenfos)、氯唑磷(isazofos)、异柳磷(isofenphos)、O-水杨酸异丙酯、噁唑啉(isoxathion)、马拉硫磷(malathion)、灭蚜磷(mecarbam)、虫螨畏(methacrifos)、甲胺磷(methamidophos)、杀扑磷(methidathion)、速灭磷(mevinphos)、久效磷(monocrotophos)、二溴磷(naled)、氧化乐果(omethoate)、亚砜磷(oxydemeton-methyl)、甲基/乙基对硫磷(parathion(-methyl/-ethyl))、稻丰散(phenthoate)、甲拌磷(phorate)、伏杀硫磷(phosalone)、亚胺硫磷(phosmet)、磷胺(phosphamidon)、乙丙磷威(phosphocarb)、辛硫磷(phoxim)、虫螨磷/乙基虫螨磷(pirimiphos(-methyl/-ethyl))、丙溴磷(profenofos)、丙虫磷(propaphos)、胺丙畏(propetamphos)、丙硫磷(prothiofos)、发果(prothoate)、吡唑硫磷(pyraclofos)、哒嗪硫磷(pyridaphenthion)、pyridathion、喹噁磷(quinalphos)、硫线磷(sebufos)、治螟磷(sulfotep)、乙丙硫磷(sulprofos)、丁基嘧啶磷(tebupirimfos)、双硫磷(temephos)、特丁硫磷(terbufos)、杀虫畏(tetrachlorvinphos)、甲基乙拌磷(thiometon)、三唑磷(triazophos)、敌百虫(triclorfon)、蚜灭磷(vamidothion)和imicyafos。
(2)GABA受控氯离子通道拮抗剂,例如有机氯类,例如毒杀芬(camphechlor)、氯丹(chlordane)、硫丹(endosulfan)、林丹(gamma-HCH)、六六六(HCH)、七氯(heptachlor)、林丹(lindane)和甲氧滴滴涕(methoxychlor);或苯基吡唑(fiprole)类,例如acetoprole、乙虫腈(ethiprole)、氟虫腈(fipronil)、吡嗪氟虫腈(pyrafluprole)、pyriprole和vaniliprole。
(3)钠通道调节剂/电位依赖性(voltage-dependent)钠通道阻断剂(blocker),例如拟除虫菊酯类,例如氟丙菊酯(acrinathrin)、烯丙菊酯(d-顺-反,d-反)(allethrin(d-cis-trans,d-trans))、β-氟氯氰菊酯(beta-cyfluthrin)、联苯菊酯(bifenthrin)、生物烯丙菊酯(bioallethrin)、生物烯丙菊酯-S-环戊基异构体、bioethanomethrin、生物氯菊酯(biopermethrin)、生物苄呋菊酯(bioresmethrin)、chlovaporthrin、顺式氯氰菊酯(cis-cypermethrin)、顺式苄呋菊酯(cis-resmethrin)、顺式氯菊酯(cis-permethrin)、clocythrin、乙氰菊酯(cycloprothrin)、氟氯氰菊酯(cyfluthrin)、氯氟氰菊酯(cyhalothrin)、氯氰菊酯(α-、β-、θ-、ζ-)(cypermethrin(alpha-,beta-,theta-,zeta-))、苯醚氰菊酯(cyphenothrin)、溴氰菊酯(deltamethrin)、烯炔菊酯((1R)-异构体)(empenthrin((1R)-isomer))、S-氰戊菊酯(esfenvalerate)、醚菊酯(etofenprox)、五氟苯菊酯(fenfluthrin)、甲氰菊酯(fenpropathrin)、fenpyrithrin、氰戊菊酯(fenvalerate)、flubrocythrinate、氟氰戊菊酯(flucythrinate)、氟丙苄醚(flufenprox)、氟氯苯菊酯(flumethrin)、氟胺氰菊酯(fluvalinate)、fubfenprox、γ-氯氟氰菊酯(gamma-cyhalothrin)、咪炔菊酯(imiprothrin)、噻嗯菊酯(kadethrin)、λ-氯氟氰菊酯(lambda-cyhalothrin)、甲氧苄氟菊酯(metofluthrin)、氯菊酯(顺/反)(permethrin(cis-、trans))、苯醚菊酯((1R)-反式异构体)(phenothrin(1R-trans-isomer))、右旋炔丙菊酯(prallethrin)、丙氟菊酯(profluthrin)、protrifenbute、反灭虫菊(pyresmethrin)、苄呋菊酯(resmethrin)、噻嗯菊酯(RU15525)、氟硅菊酯(silafluofen)、τ-氟胺氰菊酯(tau-fluvalinate)、七氟菊酯(tefluthrin)、环戊烯丙菊酯(terallethrin)、胺菊酯((1R)-异构体)(tetramethrin(1R)-isomer)、四溴菊酯(tralomethrin)、四氟苯菊酯(transfluthrin)、溴氟菊酯(ZXI8901)、除虫菊素(pyrethrin(pyrethrum))、eflusilanat;DDT;或甲氧滴滴涕(methoxychlor)。
(4)烟碱能乙酰胆碱受体激动剂/拮抗剂,例如氯烟碱基类(chloronicotinyls),例如,啶虫脒(acetamiprid)、噻虫胺(clothianidin)、呋虫胺(dinotefuran)、吡虫啉(imidacloprid)、imidaclothiz、烯啶虫胺(nitenpyram)、硝虫噻嗪(nithiazine)、噻虫啉(thiacloprid)、噻虫嗪(thiamethoxam)、AKD-1022;或烟碱(nicotine)、杀虫磺(bensultap)、杀螟丹(cartap)、杀虫双(thiosultap-sodium)、和杀虫环(thiocylam)。
(5)变构型乙酰胆碱受体调节剂(激动剂),例如多杀霉素类(spinosyns),例如多杀菌素(spinosad)和spinetoram。
(6)氯离子通道激活剂,例如,mectins/大环内酯类,例如阿维菌素(abamectin)、埃玛菌素(emamectin)、埃玛菌素苯甲酸盐(emamectinbenzoate)、齐墩螨素(ivermectin)、lepimectin和米尔蓓菌素(milbemycin);或保幼激素模拟物(juvenilehormoneanalogues),例如烯虫乙酯(hydroprene)、烯虫炔酯(kinoprene)、烯虫酯(methoprene)、保幼醚(epofenonane)、硫烯酸酯(triprene)、苯氧威(fenoxycarb)、吡丙醚(pyriproxyfen)、和恶茂醚(diofenolan)。
(7)作用机理未知或非特异的活性组分,例如产气剂,例如溴甲烷、氯化苦(chloropicrin)和硫酰氟(sulfurylfluoride);选择性拒食素,例如冰晶石(cryolite)、吡蚜酮(pymetrozine)、pyrifluquinazon、flonicamide;或螨生长抑制剂,例如四螨嗪(clofentezine)噻螨酮(hexythiazox)、乙螨唑(etoxazole)。
(8)氧化磷酸化抑制剂类,ATP干扰剂,例如丁醚脲(diafenthiuron);有机锡化合物,例如三唑锡(azocyclotin)、三环锡(cyhexatin)和苯丁锡(fenbutatinoxide);或炔螨特(propargite)、三氯杀螨砜(tetradifon)。
(9)通过间断H-质子梯度而起作用的氧化磷酸化解偶联剂类,例如虫螨腈(chlorfenapyr)、乐杀螨(binapacyrl)、敌满通(dinobuton)、敌螨普(dinocap)和二硝甲酚(DNOC)。
(10)昆虫肠道膜微生物干扰剂,例如苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)菌株。
(11)几丁质生物合成抑制剂类,例如苯甲酰脲类,例如双三氟虫脲(bistrifluron)、氟啶脲(chlofluazuron)、除虫脲(diflubenzuron)、氟啶蜱脲(fluazuron)、氟环脲(flucycloxuron)、氟虫脲(flufenoxuron)、氟铃脲(hexaflumuron)、虱螨脲(lufenuron)、氟酰脲(novaluron)、多氟脲(noviflumuron)、氟幼脲(penfluron)、氟苯脲(teflubenzuron)或杀铃脲(triflumuron)。
(12)噻嗪酮(buprofezin)。
(13)蜕皮干扰素,例如灭蝇胺(cyromazine)。
(14)蜕皮激素激动剂/干扰剂类,例如二酰基肼类,例如环虫酰肼(chromafenozide)、氯虫酰肼(halofenozide)、甲氧虫酰肼(methoxyfenozide)、虫酰肼(tebufenozide)和呋喃虫酰肼(fufenozide,JS118);或印楝素(azadirachtin)。
(15)章鱼胺能激动剂类,例如双甲脒(amitraz)
(16)位点III电子转移抑制剂类/位点II电子转移抑制剂类,例如灭蚁腙(hydramethylnone)、灭螨醌(acequinocyl)、嘧螨酯(fluacrypyrim);或丁氟螨酯(cyflumetofen)和cyenopyrafen。
(17)电子转移抑制剂类,例如位点I电子转移抑制剂类,METI杀螨剂类,例如,喹螨醚(fenazaquin)、唑螨酯(fenpyroximate)、嘧螨醚(pyrimidifen)、哒螨灵(pyridaben)、吡螨胺(tebufenpyrad)、唑虫酰胺(tolfenpyrad)和鱼藤酮(rotenone);或电位依赖性(voltage-dependent)钠通道阻断剂,例如茚虫威(indoxacarb)和氰氟虫胺(metaflumizone)。
(18)脂肪酸生物合成抑制剂,例如特窗酸(tetronicacid)衍生物,例如螺螨酯(spirodiclofen)和螺甲螨酯(spiromesifen);或特特拉姆酸(tetramicacid)衍生物,例如螺虫乙酯(spirotetramat)。
(19)作用机理未知的神经元抑制剂,例如联苯肼酯(bifenazate)。
(20)兰诺定(ryanodine)受体激动剂,例如二酰胺,例如氟虫酰胺(flubendiamide)、(R),(S)-3-氯-N1-{2-甲基-4-[1,2,2,2-四氟-1-(三氟甲基)乙基]苯基}-N2-(1-甲基-2-甲基磺酰基乙基)邻苯二甲酰胺、氯虫苯甲酰胺(chlorantraniliprole(Rynaxypyr))或溴氰虫酰胺(Cyantraniliprole(Cyazypyr))。
(21)其他作用机理未知的活性组分,例如amidoflumet、benclothiaz、benzoximate、溴螨酯(bromopropylate)、噻嗪酮(buprofezin)、灭螨锰(chinomethionat)、杀虫脒(chlorodimeform)、杀螨酯(chlorobenzilate)、clothiazoben、cycloprene、三氯杀螨醇(dicofol)、dicyclanil、fenoxacrim、氟硝二苯胺(fentrifanil)、噻唑螨(flubenzimine)、flufenerim、flutenzin、诱虫十六酯(gossyplure)、japonilure、恶虫酮(metoxadiazone)、矿油(petroleum)、油酸钾、啶虫丙醚(pyridalyl)、氟虫胺(sulfluramid)、杀螨好(tetrasul)、苯赛螨(triarathene)或verbutin;或以下已知的活性化合物之一:4-{[(6-溴吡啶-3-基)甲基](2-氟乙基)氨基}呋喃-2(5H)-酮、4-{[(6-氟吡啶-3-基)甲基](2,2-二氟乙基)氨基}呋喃-2(5H)-酮、4-{[(2-氯-1,3-噻唑-5-基)甲基](2-氟乙基)氨基}呋喃-2(5H)-酮、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](2-氟乙基)氨基}呋喃-2(5H)-酮、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](2,2-二氟乙基)氨基}呋喃-2(5H)-酮(均由WO2007/115644已知)、4-{[(5,6-二氯吡啶-3-基)甲基](2-氟乙基)氨基}呋喃-2(5H)-酮(由WO2007/115646已知)、4-{[(6-氯-5-氟吡啶-3-基)甲基](甲基)氨基}呋喃-2(5H)-酮、4-{[(6-氯-5-氟吡啶-3-基)甲基](环丙基)氨基}呋喃-2(5H)-酮(均由WO2007/115643已知)、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](环丙基)氨基}呋喃-2(5H)-酮、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](甲基)氨基}呋喃-2(5H)-酮(均由EP-A-0539588已知)、[(6-氯吡啶-3-基)甲基](甲基)氧化-λ4-亚硫基氰胺、[1-(6-氯吡啶-3-基)乙基](甲基)氧化-λ4-亚硫基氰胺(均由WO2007/149134已知)及其非对映异构体(A)和(B)
(也由WO2007/149134已知)、[(6-三氟甲基吡啶-3-基)甲基](甲基)氧化-λ4-亚硫基氰胺(由WO2007/095229已知)或[1-(6-三氟甲基吡啶-3-基)乙基](甲基)氧化-λ4-亚硫基氰胺(由WO2007/149134已知)及其非对映异构体(C)和(D),即氟啶虫胺腈(sulfoxaflor)(也由WO2007/149134已知)
可提及的杀软体动物剂为四聚乙醛(metaldehyde)和甲硫威
可提及的安全剂有:
(1)杂环羧酸衍生物,例如二氯苯基吡唑啉-3-羧酸衍生物,例如1-(2,4-二氯苯基)-5-(乙氧基羰基)-5-甲基-4,5-二氢-1H-吡唑-3-羧酸、1-(2,4-二氯苯基)-4,5-二氢-5-甲基-1H-吡唑-3,5-二羧酸二乙酯("吡唑解草酯(mefenpyr-diethyl)")、以及由WO91/07874已知的类似化合物;例如二氯苯基吡唑羧酸衍生物,例如1-(2,4-二氯苯基)-5-甲基-1H-吡唑-3-羧酸乙酯、1-(2,4-二氯苯基)-5-异丙基-1H-吡唑-3-羧酸乙酯、5-叔丁基-1-(2,4-二氯苯基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯以及由EP-0333131和EP-A0269806已知的类似化合物;例如1,5-二苯基吡唑-3-羧酸衍生物,例如1-(2,4-二氯苯基)-5-苯基-1H-吡唑-3-羧酸乙酯、1-(2-氯苯基)-5-苯基-1H-吡唑-3-羧酸甲酯、以及由EP-A0268554已知的类似化合物;例如三唑羧酸衍生物,例如解草唑(fenchlorazole),解草唑乙酯(fenchlorazole-ethyl)、以及由EP-A0174562和EP-A0346620已知的类似化合物;例如2-异噁唑啉-3-羧酸衍生物,例如5-(2,4-二氯苄基)-4,5-二氢-1,2-噁唑-3-羧酸乙酯、5-苯基-4,5-二氢-1,2-噁唑-3-羧酸乙酯以及由WO91/08202已知的类似化合物、或由WO95/07897已知的5,5-二苯基-4,5-二氢-1,2-噁唑-3-羧酸、5,5-二苯基-4,5-二氢-1,2-噁唑-3-羧酸乙酯(“isoxadifen-ethyl”)、5,5-二苯基-4,5-二氢-1,2-噁唑-3-羧酸丙酯、5-(4-氟苯基)-5-苯基-4,5-二氢-1,2-噁唑-3-羧酸乙酯。
(2)8-羟基喹啉的衍生物,例如,(喹啉-8-基氧基)乙酸的衍生物,如[(5-氯喹啉-8-基)氧基]乙酸庚-2-基酯(“解草酯(cloquintocet–mexyl)”)、[(5-氯喹啉-8-基)氧基]乙酸4-甲基戊-2-基酯、[(5-氯喹啉-8-基)氧基]乙酸4-(烯丙氧基)丁酯、[(5-氯喹啉-8-基)氧基]乙酸1-(烯丙氧基)丙-2-基酯、[(5-氯喹啉-8-基)氧基]乙酸乙酯、[(5-氯喹啉-8-基)氧基]乙酸甲酯、[(5-氯喹啉-8-基)氧基]乙酸烯丙酯、[(5-氯喹啉-8-基)氧基]乙酸2-{[亚丙基氨基]氧基}乙酯、[(5-氯喹啉-8-基)氧基]乙酸2-氧丙基酯,以及由EP-A0086750、EP-A0094349、EP-A0191736或EP-A0492366已知的类似化合物,还有[(5-氯喹啉-8-基)氧基]乙酸、其水合物和盐,如由WO02/34048已知的锂盐、钠盐、钾盐、钙盐、镁盐、铝盐、铁盐、铵盐、季铵盐、锍盐或鏻盐;例如,[(5-氯喹啉-8-基)氧基]丙二酸的衍生物,如[(5-氯喹啉-8-基)氧基]丙二酸二乙酯、[(5-氯喹啉-8-基)氧基]丙二酸二烯丙酯、[(5-氯喹啉-8-基)氧基]丙二酸甲乙酯,以及由EP-A0582198已知的类似的化合物。
(3)二氯乙酰胺类,其经常用作出芽前安全剂(土壤活性安全剂),例如,“烯丙酰草胺(dichlormid)”(N,N-二烯丙基-2,2-二氯乙酰胺)、“R-29148”(3-二氯乙酰基-2,2,5-三甲基-1,3-噁唑烷)和“R-28725”(3-二氯乙酰基-2,2-二甲基-1,3-噁唑烷)(二者均是Stauffer公司的产品)、“解草嗪(benoxacor)”(4-二氯乙酰基-3,4-二氢-3-甲基-2H-1,4-苯并噁嗪)、PPGIndustries的“PPG-1292”(N-烯丙基-N-[(1,3-二氧戊环-2-基)-甲基]-二氯乙酰胺)、Sagro-Chem的“DKA-24”(N-烯丙基-N-[(烯丙基氨基羰基)甲基]-二氯乙酰胺)、Nitrokemia和Monsanto的“AD-67”或“MON4660”(3-二氯乙酰基-1-氧杂-3-氮杂螺[4,5]癸烷)、TRI-ChemicalRT的“TI-35”(1-二氯乙酰基氮杂环庚烷)、BASF的“diclonon”(dicyclonon)或“BAS145138”或“LAB145138”(3-二氯乙酰基-2,5,5-三甲基-1,3-二氮杂双环[4.3.0]壬烷)、“解草噁唑(furilazol)”或“MON13900”[(RS)-3-二氯乙酰基-5-(2-呋喃基)-2,2-二甲基噁唑烷],以及它们的(R)-异构体。
(4)酰基磺酰胺类,例如式(II)的N-酰基磺酰胺或其盐类(由WO97/45016已知),
其中
R1代表(C1-C6)烷基,其未被取代或被选自卤素、(C1-C4)烷氧基、(C1-C6)卤代烷氧基和(C1-C4)烷硫基的取代基单至三取代;
R2代表卤素、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、CF3;
m为1或2;
或例如式(III)的4-(苯甲酰基氨磺酰基)苯甲酰胺类或其盐(已知于WO99/16744),
其中
R3、R4彼此独立地代表氢、(C1-C6)烷基、(C3-C6)烯基、(C3-C6)炔基、(C3-C6)环烷基,
R5代表卤素、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或(C1-C4)烷氧基,
n为1或2,
特别为式(III)的化合物,其中
R3=环丙基,R4=氢且R5 n=2-OMe,(“环丙磺酰胺(cyprosulfamide)”),
R3=环丙基,R4=氢且R5 n=5-Cl-2-OMe,
R3=乙基,R4=氢且R5 n=2-OMe,
R3=异丙基,R4=氢且R5 n=5-Cl-2-OMe,
R3=异丙基,R4=氢且R5 n=2-OMe。
或例如式(IV)的苯甲酰基氨磺酰基苯基脲类(已知于EP-A0365484),
其中
R6、R7彼此独立地代表氢、(C1-C8)烷基、(C3-C6)烯基、(C3-C6)炔基,
R8代表卤素、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、CF3
r为1或2;
特别为
1-[4-(N-2-甲氧基苯甲酰基氨磺酰基)苯基]-3-甲基脲、
1-[4-(N-2-甲氧基苯甲酰基氨磺酰基)苯基]-3,3-二甲基脲、
1-[4-(N-4,5-二甲基苯甲酰基氨磺酰基)苯基]-3-甲基脲。
(5)羟基芳族化合物和芳族-脂族羧酸衍生物,例如,3,4,5-三乙酰氧基苯甲酸乙酯、4-羟基-3,5-二甲氧基苯甲酸、3,5-二羟基苯甲酸、2,4-二羟基苯甲酸、4-氟-2-羟基苯甲酸、2-羟基肉桂酸、2,4-二氯肉桂酸(参见WO2004/084631、WO2005/015994、WO2005/016001)。
(6)1,2-二氢喹喔啉(chinoxalin)-2-酮类,例如,1-甲基-3-(2-噻吩基)-1,2-二氢喹喔啉-2-酮、1-甲基-3-(2-噻吩基)-1,2-二氢喹喔啉-2-硫酮、1-(2-氨基乙基)-3-(2-噻吩基)-1,2-二氢喹喔啉-2-酮盐酸盐、1-(2-甲基磺酰基氨基乙基)-3-(2-噻吩基)-1,2-二氢喹喔啉-2-酮(参见WO2005/112630)。
(7)二苯基甲氧基乙酸衍生物,例如,(二苯基甲氧基)乙酸甲酯(CAS登记号41858-19-9)、(二苯基甲氧基)乙酸乙酯或(二苯基甲氧基)乙酸(参见WO98/38856)。
(8)式(V)的化合物或其盐(已知于WO98/27049),
其中
R9代表卤素、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)卤代烷氧基,
R10代表氢或(C1-C4)烷基,
R11代表氢、各自为未被取代或被单至三取代的(C1-C8)烷基、(C2-C4)烯基、(C2-C4)炔基或芳基,其中取代基选自卤素和(C1-C8)烷氧基,
s为0、1或2。
(9)3-(5-四唑基羰基)-2-喹诺酮类,例如1,2-二氢-4-羟基-1-乙基-3-(5-四唑基羰基)-2-喹诺酮(CAS登记号219479-18-2)、1,2-二氢-4-羟基-1-甲基-3-(5-四唑基羰基)-2-喹诺酮(CAS登记号95855-00-8)(参见WO99/00020)。
(10)式(VI-a)和(VI-b)的化合物(已知于WO2007/023719和WO2007/023764),
其中
R12代表卤素、(C1-C4)烷基、甲氧基、硝基、氰基、CF3、OCF3
Y、Z独立地代表O或S,
t为0、1、2、3或4,
R13代表(C1-C16)烷基、(C2-C6)烯基、芳基、苄基、卤代苄基,
R14代表氢或(C1-C6)烷基。
(11)已知作为种子处理剂的氧基亚氨基化合物,例如,“解草腈(oxabetrinil)”[(Z)-1,3-二氧戊环-2-基甲氧基亚氨基(苯基)乙腈]、“氟草肟(fluxofenim)”[1-(4-氯苯基)-2,2,2-三氟-1-乙酮-O-(1,3-二氧戊环-2-基甲基)-肟]、还有“解草胺腈(cyometrinil)”或“CGA-43089”[(Z)-氰基甲氧基亚氨基(苯基)乙腈],所有均已知作为种子处理安全剂用于高粱来抵抗异丙甲草胺(metolachlor)的损害。
(12)异硫代苯并二氢吡喃酮类,例如,[(3-氧基-1H-2-苯并噻喃-4(3H)-亚基)甲氧基]乙酸甲酯(CAS登记号205121-04-6)以及由WO98/13361已知的类似化合物。
(13)选自以下的化合物:“萘二甲酸酐(naphthalicanhydrid)”(1,8-萘二羧酸酐),其已知作为种子处理安全剂用于玉米来抵抗硫代氨基甲酸酯除草剂的损害;“解草啶(fenclorim)”(4,6-二氯-2-苯基嘧啶),其已知作为种子处理安全剂用于播种稻(sownrice)来抵抗丙草胺(pretilachlor)的损害;“解草胺(flurazole)”(苄基-2-氯-4-三氟甲基-1,3-噻唑-5-羧酸酯),其已知作为种子处理安全剂用于高粱来抵抗甲草胺(alachlor)和异丙甲草胺(metolachlor)的损害;“CL304415”(CAS登记号31541-57-8),AmericanCyanamid的(4-羧基-3,4-二氢-2H-1-苯并吡喃-4-乙酸),其已知作为安全剂用于玉米来抵抗咪唑啉酮(imidazolinone)的损害;Nitrokemia的“MG191”(CAS登记号96420-72-3)(2-二氯甲基-2-甲基-1,3-二氧戊环),已知作为安全剂用于玉米;“MG-838”(CAS登记号133993-74-5),Nitrokemia的(1-氧杂-4-氮杂螺[4.5]癸烷-4-二硫代羧酸2-丙烯酯);“乙拌磷(disulfoton)”(二硫代磷酸O,O-二乙基-S-2-乙硫基乙酯);“增效磷(dietholate)”(O,O-二乙基-O-苯基硫代磷酸酯);“mephenate”(4-氯苯基-甲基氨基甲酸酯)。
(14)除了有除草活性以外还对作物如稻表现出安全剂活性的化合物,例如,“哌草丹(dimepiperate)”或“MY-93”(S-1-甲基-1-苯基乙基-哌啶-1-硫代羧酸酯),其已知作为安全剂用于稻来抵抗禾草敌(molinate)的损害;“杀草隆(daimuron)”或“SK23”[1-(1-甲基-1-苯基乙基)-3-对甲苯基脲],其已知作为安全剂用于稻来抵抗唑吡嘧磺隆(imazosulfuron)的损害;“苄草隆(cumyluron)”=“JC-940”[3-(2-氯苯基甲基)-1-(1-甲基-1-苯基乙基)脲](参见JP-A60-087254),其已知作为安全剂用于稻来抵抗某些除草剂的损害;“苯草酮(methoxyphenon)”或“NK049”(3,3’-二甲基-4-甲氧基二苯甲酮),其已知作为安全剂用于稻来抵抗某些除草剂的损害;Kumiai的“CSB”[1-溴-4-(氯甲基磺酰基)苯](CAS登记号54091-06-4),其已知作为安全剂用于稻来抵抗某些除草剂的损害。
(15)主要用作除草剂但也对某些作物表现出安全剂活性的化合物,例如,(2,4-二氯苯氧基)乙酸(2,4-D)、(4-氯苯氧基)乙酸、(R,S)-2-(4-氯邻甲苯氧基)丙酸(2甲4氯丙酸(mecoprop))、4-(2,4-二氯苯氧基)丁酸(2,4-DB)、(4-氯邻甲苯氧基)乙酸(MCPA)、4-(4-氯邻甲苯氧基)丁酸、4-(4-氯苯氧基)丁酸、3,6-二氯-2-甲氧基苯甲酸(麦草畏(dicamba))、1-(乙氧基羰基)乙基-3,6-二氯-2-甲氧基苯甲酸酯(lactidichlor-ethyl)。
可提及的植物生长调节剂为矮壮素(chlorocholinechloride)和乙烯利(ethephon)。
可提及的植物营养素实例有用于供给植物大量营养素和/或微量营养素的常规的无机或有机肥料。
在一个优选的实施方案中,本发明涉及含有A)氟吡菌酰胺和B)一种或多种以下杀虫剂的组合物的用途:
氯烟碱基类(Chlornicotinyls),优选吡虫啉、噻虫胺、噻虫啉和噻虫嗪
合成除虫菊酯(Pyrethroids),优选λ-氯氟氰菊酯、β-氟氯氰菊酯、七氟菊酯、四氟苯菊酯和溴氰菊酯
氨基甲酸酯,优选甲硫威、硫双威和涕灭威。
有机磷酸酯,优选苯线磷、噻唑酮磷、灭克磷(Ethoprofos)
邻氨基苯甲酰胺,优选氯虫苯甲酰胺、溴氰虫酰胺
大环内脂类,优选阿维菌素、多杀菌素、Spinetoram
苯基吡唑类,优选氟虫腈和乙虫腈
其他杀线虫剂,优选杀线威
酮基烯醇类(Ketoenols),优选Spirotetramate、螺螨酯和螺甲螨酯
4-[(2,2-二氟乙基)氨基]呋喃-2(5H)-酮-2-氯-5-乙基吡啶(1:1)。氟啶虫胺腈、Flonicamid、flupyradifurone
熏蒸剂,以及生物防治剂,优选Pasteuria。
线虫
氟吡菌酰胺或与生物防治剂坚强芽孢杆菌菌株CNCMI-1582结合的氟吡菌酰胺或与至少一种农用化学活性化合物结合的氟吡菌酰胺特别适用于防治抗线虫植物中的植物寄生线虫,其中线虫为以下种:
滑刃线虫属(Aphelenchoidesspp.)、伞滑刃线虫属(Bursaphelenchusspp.)、茎线虫属(Ditylenchusspp.)、球异皮线虫属(Globoderaspp.)、异皮线虫属(Heteroderaspp.)、长针线虫属(Longidorusspp.)、根结线虫属(Meloidogynespp.)、短体线虫属(Pratylenchusspp.)、穿孔线虫属(Radopholusspp.)、毛刺线虫属(Trichodorusspp.)、小垫刃线虫属(Tylenchulusspp.)、剑线虫属(Xiphinemaspp.)、螺旋线虫属(Helicotylenchusspp.)、矮化线虫属(Tylenchorhynchusspp.)、盾线虫属(Scutellonemaspp.)、副毛刺线虫属(Paratrichodorusspp.)、瓢线虫属(Meloinemaspp.)、Paraphelenchusspp.、Aglenchusspp.、刺线虫属(Belonolaimusspp.)、科布线虫属(Nacobbusspp.)、小盘旋线虫属(Rotylenchulusspp.)、盘旋线虫属(Rotylenchusspp.)、Neotylenchusspp.、Paraphelenchusspp.、锥线虫属(Dolichodorusspp.)、纽带线虫属(Hoplolaimusspp.)、斑皮线虫属(Punctoderaspp.)、小环线虫属(Criconemellaspp.)、五沟线虫属(Quinisulciusspp.)、鞘线虫属(Hemicycliophoraspp.)、蟃线虫属(Anguinaspp.)、亚蟃线虫属(Subanguinaspp.)、半轮线虫属(Hemicriconemoidesspp.)、Psilenchusspp.、Pseudohalenchusspp.、轮线虫属(Criconemoidesspp.)、Cacopaurusspp
Aglenchusagricola、小麦粒瘿线虫(Anguinatritici)、花生滑刃线虫(Aphelenchoidesarachidis)、草莓滑刃线虫(Aphelenchoidesfragariae)、细小细线虫(Belonolaimusgracilis)、长尾刺线虫(Belonolaimuslongicaudatus)、诺顿刺线虫(Belonolaimusnortoni)、Cacopauruspestis、弯曲小环线虫(Criconemellacurvata)、刻线小环线虫(Criconemellaonoensis)、装饰小环线虫(Criconemellaornata)、Criconemellarusium、薄叶小环线虫(Criconemellaxenoplax(=Mesocriconemaxenoplax))和宽泛的小环线虫属(Criconemellaspp.),Criconemoidesferniae、Criconemoidesonoense、Criconemoidesornatum和轮线虫属(Criconemoidesspp.),马铃薯茎线虫(Ditylenchusdestructor)、起绒草茎线虫(Ditylenchusdipsaci)、食菌茎线虫(Ditylenchusmyceliophagus)和宽泛的茎线虫属(Ditylenchusspp.),异头锥线虫(Dolichodorusheterocephalus)、苍白球异皮线虫(Globoderapallida(=Heteroderapallida))、马铃薯金线虫(Globoderarostochiensis)、茄球异皮线虫(Globoderasolanacearum)、烟草球异皮线虫(Globoderatabacum)、弗吉尼亚球异皮线虫(Globoderavirginiae)、双角螺旋线虫(Helicotylenchusdigonicus)、双宫双角螺旋线虫(Helicotylenchusdihystera)、刺桐双角螺旋线虫(Helicotylenchuserythrine)、多带双角螺旋线虫(Helicotylenchusmulticinctus)、短小双角螺旋线虫(Helicotylenchusnannus)、假强壮双角螺旋线虫(Helicotylenchuspseudorobustus)和宽泛的螺旋线虫属(Helicotylenchusspp.),半轮线虫(Hemicriconemoides)、蚤缀鞘线虫(Hemicycliophoraarenaria)、Hemicycliophoranudata、微细鞘线虫(Hemicycliophoraparvana)Heteroderaavenae、十字花科异皮线虫(Heteroderacruciferae)、大豆异皮线虫(Heteroderaglycines)、水稻异皮线虫(Heteroderaoryzae)、甜菜异皮线虫(Heteroderaschachtii)、玉米异皮线虫(Heteroderazeae)和宽泛的异皮线虫属(Heteroderaspp.),埃及纽带线虫(Hoplolaimusaegyptii)、Hoplolaimuscalifornicus、哥伦比亚纽带线虫(Hoplolaimuscolumbus)、帽状纽带线虫(Hoplolaimusgaleatus)、印度纽带线虫(Hoplolaimusindicus)、大针纽带线虫(Hoplolaimusmagnistylus)、不强纽带线虫(Hoplolaimuspararobustus)、非洲长针线虫(Longidorusafricanus)、短环长针线虫(Longidorusbreviannulatus)、逸去长针线虫(Longidoruselongatus)、光头长针线虫(Longidoruslaevicapitatus)、藤蔓长针线虫(Longidorusvineacola)和宽泛的长针线虫属(Longidorusspp.),高粱根结线虫(Meloidogyneacronea)、非洲根结线虫(Meloidogyneafricana)、花生根结线虫(Meloidogynearenaria)、Meloidogynearenariathamesi、甘兰根结线虫(Meloidogyneartiella)、奇氏根结线虫(Meloidogynechitwoodi)、Meloidogynecoffeicola、埃塞俄比亚根结线虫(Meloidogyneethiopica)、短小根结线虫(Meloidogyneexigua)、禾草根结线虫(Meloidogynegraminicola)、禾本科根结线虫(Meloidogynegraminis)、北方根结线虫(Meloidogynehapla)、南方根结线虫(Meloidogyneincognita)、Meloidogyneincognitaacrita、爪哇根结线虫(Meloidogynejavanica)、吉库尤根结线虫(Meloidogynekikuyensis)、纳西根结线虫(Meloidogynenaasi)、巴拉那根结线虫(Meloidogyneparanaensis)、泰晤士根结线虫(Meloidogynethamesi)和宽泛的根结线虫属(Meloidogynespp.),瓢线虫属(Meloinemaspp.)、异常科布线虫(Nacobbusaberrans)、Neotylenchusvigissi、Paraphelenchuspseudoparietinus、葱副毛刺线虫(Paratrichodorusallius)、裂片副毛刺线虫(Paratrichodoruslobatus)、Paratrichodorusminor、Paratrichodorusnanus、胼胝副毛刺线虫(Paratrichodorusporosus)、光滑副毛刺线虫(Paratrichodorusteres)和宽泛的副毛刺线虫属(Paratrichodorusspp.),弯钩针线虫(Paratylenchushamatus)、Paratylenchusminutus、突出针线虫(Paratylenchusprojectus)和宽泛的针线虫属(Paratylenchusspp.),敏捷短体线虫(Pratylenchusagilis)、艾氏短体线虫(Pratylenchusalleni)、安第斯短体线虫(Pratylenchusandinus)、最短尾短体线虫(Pratylenchusbrachyurus)、谷类短体线虫(Pratylenchuscerealis)、咖啡短体线虫(Pratylenchuscoffeae)、刻痕短体线虫(Pratylenchuscrenatus)、德式短体线虫(Pratylenchusdelattrei)、圆尾短体线虫(Pratylenchusgiibbicaudatus)、古氏短体线虫(Pratylenchusgoodeyi)、Pratylenchushamatus、六纹短体线虫(Pratylenchushexincisus)、卢斯短体线虫(Pratylenchusloosi)、落选短体线虫(Pratylenchusneglectus)、穿刺短体线虫(Pratylenchuspenetrans)、草地短体线虫(Pratylenchuspratensis)、Pratylenchusscribneri、精美短体线虫(Pratylenchusteres)、索氏短体线虫(Pratylenchusthornei)、伤残短体线虫(Pratylenchusvulnus)、玉米短体线虫(Pratylenchuszeae)和宽泛的短体线虫属(Pratylenchusspp.),Pseudohalenchusminutus、Psilenchusmagnidens、Psilenchustumidus、查尔斑皮线(Punctoderachalcoensis)、锐利五沟线虫(Quinisulciusacutus)、柑橘穿孔线虫(Radopholuscitrophilus)、相似穿孔线虫(Radopholussimilis)、北方小盘旋线虫(Rotylenchulusborealis)、微小小盘旋线虫(Rotylenchulusparvu)、肾形小盘旋线虫(Rotylenchulusreniformis)和宽泛的小盘旋线虫属(Rotylenchulusspp.),直沟盘旋线虫(Rotylenchuslaurentinus)、Rotylenchusmacrodoratus、强壮盘旋线虫(Rotylenchusrobustus)、单型盘旋线虫(Rotylenchusuniformis)和宽泛的盘旋线虫属(Rotylenchusspp.),小班盾线虫(Scutellonemabrachyurum)、缓慢盾线虫(Scutellonemabradys)、格尾盾线虫(Scutellonemaclathricaudatum)和宽泛的盾线虫属(Scutellonemaspp.),根瘿亚蟃线虫(Subanguinaradiciola)、Tetylenchusnicotianae、圆筒毛刺线虫(Trichodoruscylindricus)、Trichodorusminor、原始毛刺线虫(Trichodorusprimitivus)、最近毛刺线虫(Trichodorusproximus)、相似毛刺线虫(Trichodorussimilis)、少见毛刺线虫(Trichodorussparsus)和宽泛的毛刺线虫属(Trichodorusspp.),农田矮化线虫(Tylenchorhynchusagri)、菜蔬矮化线虫(Tylenchorhynchusbrassicae)、清亮矮化线虫(Tylenchorhynchusclarus)、克莱顿矮化线虫(Tylenchorhynchusclaytoni)、指状矮化线虫(Tylenchorhynchusdigitatus)、伊布里矮化线虫(Tylenchorhynchusebriensis)、最大矮化线虫(Tylenchorhynchusmaximus)、裸矮化线虫(Tylenchorhynchusnudus)、普通矮化线虫(Tylenchorhynchusvulgaris)和宽泛的矮化线虫属(Tylenchorhynchusspp.),半穿刺线虫(Tylenchulussemipenetrans)、美洲剑线虫(Xiphinemaamericanum)、短颈剑线虫(Xiphinemabrevicolle)、裂尾剑线虫(Xiphinemadimorphicaudatum)、标准剑线虫(Xiphinemaindex)和剑线虫属(Xiphinemaspp)
植物部位定义
可以根据本发明处理所有植物和植物部位。植物的含义为所有的植物及植物种群如需要的和不需要的野生植物、栽培种和植物品种(无论是否受植物品种或植物育种者权利(plantbreeders’rights)保护)。栽培种和植物品种为可通过常规繁殖和育种方法得到的植物,所述常规繁殖和育种方法可由一种或多种生物技术方法如通过使用单倍体加倍、原生质融合、随机和定向突变、分子或遗传标记或通过生物工程和基因工程协助或补充。植物部位的含义为植物所有的地上及地下的植物部位及植物器官,如芽、叶、花和根,例如叶、针叶、茎、干、花、子实体、果实和种子以及根、块茎、球茎和根茎。作物和无性、有性繁殖材料,例如插枝、球茎、块茎、根茎、分枝和种子也属于植物部位。
如上文已述,可根据本发明处理所有植物及其部位。在一个实施方案中,处理了野生植物种和植物栽培种,或通过常规生物育种,如杂交或原生质融合得到的野生植物种和植物栽培种,及其部位。在又一个实施方案中,处理了由基因工程方法—如果合适,与常规方法相结合—而获得的转基因植物和植物栽培种(遗传修饰的生物体(geneticmodifiedorganism))及其部位。术语“部位”、“植物的部位”和“植物部位”解释如上。
GMO
各自市售可得或使用中的植物栽培种的植物可根据本发明处理。植物栽培种的含义应理解为具有新特性(“特征”)——由常规育种、诱变或重组DNA技术而获得——的植物。它们可以是变种、生物型或基因型。
可根据本发明处理的转基因植物或植物栽培种(即通过遗传工程而获得的那些)包括在基因修饰中接受了遗传物质的所有植物,所述遗传物质赋予了所述植物特别有利、有用的特征。所述特性的实例有更好的植物生长、提高对高温或低温的耐受性、提高对干旱或水或土壤含盐量的耐受性、提高开花品质、使采收更简易、加速成熟、提高采收收率、提高采收产品的品质和/或提高其营养价值、改善采收产品的贮存稳定性和/或其加工性能。特别强调的所述特性的其他实例有植物对动物害虫和有害微生物——例如对线虫、昆虫、螨虫、植物致病真菌、细菌和/或病毒——更好的抵抗力,以及提高植物对某些除草活性化合物的耐受性。特别强调的是蔬菜、马铃薯、玉米、大豆、棉花和香蕉。
本发明的处理方法可用于处理遗传修饰的生物体(GMO),例如植物或种子。遗传修饰植物(或转基因植物)为将异源基因稳定地整合到基因组中的植物。表述“异源基因”主要表示在植物体外部提供或组装的基因,并且当该基因被引入核基因组、叶绿体基因组或线粒体基因组时,通过表达有益的蛋白质或多肽或者通过下调或沉默存在于植物内的其他基因(例如使用反义技术、共抑制技术或RNA干扰—RNAi—技术)而赋予这些被转化植物新的或改进的农学特性或其它特性。位于基因组中的异源基因也被称作转基因。由其在植物基因组中的具体位置来定义的转基因被称作转化株系或转基因株系(transformationortransgenicevent)。
依据植物种或植物栽培种、其种植地点和生长条件(土壤、气候、生长期、营养(diet)),本发明的处理也可产生超加(“协同”)效应。由此可取得例如以下超过实际预期的效果:降低可依据本发明使用的活性化合物和组合物的施用率和/或拓宽其活性谱和/或提高其活性、改善植物生长、提高高温或低温耐受性、提高对干旱或对水或土壤含盐量的耐受性、提高开花品质、使采收更简易、加速成熟、提高采收收率、使果实更大、使植株更高、使叶色更绿、提早开花、提高采收产品的品质和/或提高其营养价值、提高果实内的糖浓度、改善采收产品的贮存稳定性和/或其加工性能。
在某些施用率下,本发明的活性化合物结合物在植物中也可具有强化作用。因此,其也适用于调动植物抵抗不想要的微生物的防御系统。如果合适,这可能是本发明结合物(例如抗菌)的活性增强的原因之一。在本发明中,植物强化(抗性诱导)物质的含义应理解为,能以这样一种方式激活植物防御系统的那些物质或结合物:当随后用不想要的微生物进行接种时,经处理的植物对这些微生物表现出很大程度的抗性。在本发明中,不想要的微生物应理解为植物致病真菌、细菌和病毒。因此,本发明的物质可用于在处理后的某段时间内保护植物免受上文提及的病原体的侵害。实现保护作用的时间通常在植物经活性化合物处理后持续1至10天,优选1至7天。
优选根据本法明处理的植物和植物栽培种包括具有赋予这些植物特别有利、有用特征的遗传物质(通过育种和/或生物技术方式获得)的所有植物。
还优选根据本发明处理的植物和植物栽培种对一种或多种生物胁迫(bioticstresses)具有抗性,即所述植物对动物害虫和有害微生物具有更好的防御,如抵抗线虫、昆虫、螨虫、植物致病真菌、细菌、病毒和/或类病毒。
也可根据本发明处理的植物和植物栽培种是对一种或多种非生物胁迫具有抗性的植物。非生物胁迫条件可包括,例如干旱、低温暴露、热暴露、渗透胁迫、水涝、提高的土壤含盐量、增强的矿物暴露、臭气暴露、强光暴露、有限的氮营养素的利用度、有限的磷营养素的利用度、避荫。
还可根据本发明处理的植物和植物栽培种是以提高的产率特性为特征的那些植物。所述植物产率的提高可由例如以下因素的结果:例如,改良的植物生理机能、生长和发育,例如水利用率、持水率、改善的氮利用、提高的碳同化作用、增强的光合作用、提高的发芽率和加速成熟。产率还可受改良的植物构造(plantarchitecture)(在胁迫和非胁迫条件下)的影响,所述植物构造包括但不限于:提早开花、对杂交种子生产的开花控制、秧苗活力、植株大小、节间数和节间距、根系生长、种子大小、果实大小、荚果大小、荚果数或穗数、每个荚果或穗的种子数、种子质量、提高的种子饱满度、降低的种子散布、减少的荚开裂和抗倒伏性。其他产率特征包括种子组成如碳水化合物含量、蛋白质含量、油含量和组成、营养价值、减少的抗营养化合物、改良的加工性能和更好的储存稳定性。
可根据本发明处理的植物为已经表达出杂交优势特征或杂种活力的杂交植物,所述杂交优势特征或杂种活力通常会导致更高的收率、更高的活力、更加健康以及对生物和非生物胁迫因素的更好的抗性。这类植物通常是通过使一种自交雄性不育亲系(母本)与另一种自交雄性能育亲系(父本)杂交而制成的。杂种种子通常自雄性不育植株采收并售给种植者。雄性不育植物有时(例如在玉米中)可通过去雄,即机械去除雄性繁殖器官(或雄性花朵)而制得,但是更通常地,雄性不育性是由植物基因组中的遗传决定因子产生的。在该情况下,尤其是当种子为待从杂交植株采收的所需产品时,确保杂交植物中的雄性能育性充分恢复通常是有用的。这可通过确保父本具有适当的育性恢复基因来实现,该基因能够恢复含有负责雄性不育的遗传决定因子的杂交植物的雄性能育性。造成雄性不育的遗传决定因子可位于细胞质中。细胞质雄性不育(CMS)的实例例如描述于芸苔属种(Brassicaspecies)中(WO1992/005251、WO1995/009910、WO1998/27806、WO2005/002324、WO2006/021972和US6,229,072)。然而,雄性不育的遗传决定因子也可位于细胞核基因组中。雄性不育植物也可通过植物生物技术方法如基因工程而获得。一种获得雄性不育植物的特别有用的方式描述于WO89/10396中,其中例如核糖核酸酶如芽孢杆菌RNA酶(barnase)选择性地表达于雄蕊的绒毡层细胞中。随后可通过核糖核酸酶抑制剂如芽孢杆菌RNA酶抑制剂(barstar)在绒毡层细胞中的表达来恢复能育性。
可根据本发明处理的植物或植物栽培种(通过植物生物技术方法如基因工程获得的)为除草剂耐受植物,即对一种或多种给定的除草剂耐受的植物。这类植物可通过遗传转化或通过选择含有赋予这种除草剂耐受性的突变的植物而获得。
除草剂耐受植物有例如草甘膦(glyphosate)耐受植物,即对除草剂草甘膦或其盐耐受的植物。植物可通过不同方式实现草甘膦耐受。例如,草甘膦耐受植物可通过用编码5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)的基因转化植物而获得。这种EPSPS基因的实例为鼠伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphimurium)细菌中的AroA基因(突变体CT7)(Comaietal.,1983,Science221,370-371)、细菌农杆菌属属种(Agrobacteriumsp.)中的CP4基因(Barryetal.,1992,Curr.TopicsPlantPhysiol.7,139-145)、编码矮牵牛(petunia)EPSPS的基因(Shahetal.,1986,Science233,478-481)、编码番茄EPSPS的基因(Gasseretal.,1988,J.Biol.Chem.263,4280-4289)或编码蟋蟀草属(Eleusine)EPSPS的基因(WO01/66704)。其也可为突变的EPSPS,如记载于例如EP0837944、WO00/66746、WO00/66747或WO02/26995。草甘膦耐受植物也可通过表达编码草甘膦氧化还原酶的基因而获得,如记载于美国专利第5,776,760号和第5,463,175号。草甘膦耐受植物也可通过表达编码草甘膦乙酰转移酶的基因而获得,如记载于例如WO02/36782、WO03/092360、WO05/012515和WO07/024782。草甘膦耐受植物也可通过选择含有天然存在的上述基因的突变的植物而获得。如记载于例如WO01/024615或WO03/013226。表达赋予草甘膦 耐受性的EPSPS基因的植物记载于例如美国专利申请号11/517,991、 10/739,610、12/139,408、12/352,532、11/312,866、11/315,678、12/421,292、 11/400,598、11/651,752、11/681,285、11/605,824、12/468,205、11/760,570、 11/762,526、11/769,327、11/769,255、11/943801或12/362,774。含有 其他赋予草甘膦耐受性的基因—如脱酸酶基因—的植物记载于例如美 国专利申请号11/588,811、11/185,342、12/364,724、11/185,560或 12/423,926。
其它抗除草剂的植物为,例如对抑制谷氨酰胺合酶的除草剂——如双丙氨膦(bialaphos)、草丁膦(phosphinothricin)或草铵膦(glufosinate)——具有耐受性的植物。这类植物可通过表达使除草剂解毒的酶或对抑制作用有抗性的谷氨酰胺合酶突变体而获得,例如记载于 美国专利申请No11/760,602。一种这类有效的解毒酶是编码草丁膦乙酰转移酶的酶(例如来自链霉菌属属种(Streptomycesspecies)的bar或pat蛋白质)。表达外源草丁膦乙酰转移酶的植物记载于例如美国专利申请5,561,236、5,648,477、5,646,024、5,273,894、5,637,489、5,276,268、5,739,082、5,908,810和7,112,665。
其它除草剂耐受植物还有对抑制羟苯丙酮酸双加氧酶(HPPD)的除草剂耐受的植物。羟苯丙酮酸双甲氧酶HPPD是催化对羟基苯丙酮酸(HPP)转化成尿黑酸的反应的酶。对HPPD抑制剂耐受的植物可用编码天然存在的抗HPPD酶的基因、或编码经突变或嵌合的HPPD酶的基因进行转化,如记载于WO96/38567、WO99/24585、和WO99/24586、WO2009/144079、WO2002/046387、或US6,768,044。对HPPD抑制剂的耐受性也可通过用编码某些即便天然HPPD酶受HPPD抑制剂的抑制却仍能形成尿黑酸的酶的基因对植物进行转化而获得。这类植物和基因记载于WO99/34008和WO02/36787。植物对HPPD抑制剂的耐受性除了用编码HPPD耐受性酶的基因外,还可通过用编码具有预苯酸脱氢酶(PDH)活性的酶的基因对植物进行转化而改进,如记载于WO2004/024928。此外,可通过向植物基因组中添加编码能够代谢或降解 HPPD抑制剂的酶—如WO2007/103567和WO2008/150473中示出的 CYP450酶—的基因,使植物对HPPD-抑制剂除草剂更有耐性。
其他除草剂抗性植物为对乙酰乳酸合酶(ALS)抑制剂具有耐受性的植物。已知的ALS抑制剂包括,例如磺酰脲、咪唑啉酮、三唑并嘧啶、嘧啶氧基(硫基)苯甲酸酯和/或磺酰基氨羰基三唑啉酮除草剂。已知ALS酶(也称为乙酰羟酸合酶,AHAS)的不同突变能赋予对不同除草剂和除草剂类的耐受性,如记载于Tranel和Wright(2002,WeedScience50:700-712),以及美国专利5,605,011、5,378,824、5,141,870、和5,013,659。磺酰脲耐受植物和咪唑啉酮耐受植物的生产已描述于美国专利5,605,011、5,013,659、5,141,870、5,767,361、5,731,180、5,304,732、4,761,373、5,331,107、5,928,937、和5,378,824;以及国际公开WO96/33270。其它的咪唑啉酮耐受植物也记载于例如WO2004/040012、WO2004/106529、WO2005/020673、WO2005/093093、WO2006/007373、WO2006/015376、WO2006/024351、和WO2006/060634。其它磺酰脲耐受植物和咪唑啉酮耐受植物还描述于例如WO2007/024782和美国专利申请第61/288958号
其它对咪唑啉酮和/或磺酰脲耐受的植物可通过诱变、在除草剂的存在下对细胞培养的选择、或通过诱变育种而获得,如例如美国专利5,084,082中对大豆、美国专利97/41218中对稻、美国专利5,773,702和99/057965中对甜菜、美国专利5,198,599中对莴苣或美国专利01/065922中对向日葵所述。
也可根据本发明处理的植物或植物栽培种(通过植物生物技术方法如遗传工程获得的)为昆虫抗性转基因植物,即对某些目标昆虫侵害具有抗性的植物。这类植物可通过遗传转化获得,或通过选择含有赋予这种昆虫抗性的突变的植物而获得。
在本文中使用的“昆虫抗性转基因植物”,包括含有至少一种含编码以下物质的编码序列的转基因的任意植物:
1)苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)的杀虫晶体蛋白质或其杀虫部分,如中由Crickmore等人(1998,MicrobiologyandMolecularBiologyReviews,62:807-813)列出,Crickmore等人更新(2005),以苏云金芽孢杆菌毒素命名的杀虫晶体蛋白质,网址为:http://www.lifesci.sussex.ac.uk/Home/Neil_Crickmore/Bt/,或其杀虫蛋白部分,例如Cry蛋白质类Cry1Ab、Cry1Ac、Cry1B、Cry1C、Cry1D、Cry1F、Cry2Ab、Cry3Aa、或Cry3Bb的蛋白质或其杀虫部分(例如EP1999141和WO2007/107302);或者由合成基因编码的这类蛋白,例 如记载于美国专利申请No12/249,016;
2)在苏云金芽孢杆菌的另一种晶体蛋白或其一部分存在下具有杀虫活性的苏云金芽孢杆菌晶体蛋白或其部分,例如由Cy34和Cy35晶体蛋白组成的二元毒素(Moellenbecketal.2001,Nat.Biotechnol.19:668-72;Schnepfetal.2006,AppliedEnvironm.Microbiol.71,1765-1774);或者由Cry1A或Cry1F蛋白和Cry2Aa或Cry2Ab或Cry2Ae蛋白组成的二元毒素(美国专利申请12/214,022和EP08010791.5);或
3)包含来自苏云金芽孢杆菌的不同杀虫晶体蛋白质的部分的杂种杀虫蛋白,例如上述1)的蛋白质的杂种或上述2)的蛋白质的杂种,例如由玉米株系MON98034产生的Cry1A.105蛋白(WO2007/027777);或者
4)上述1)-3)中任一项的蛋白,其中一些、特别是1-10个氨基酸被另一氨基酸替代,从而获得对目标昆虫种更高的杀虫活性、和/或扩大受影响的目标昆虫种的范围、和/或由于在克隆或转化过程中引入编码DNA的改变,例如玉米株系MON863或MON88017中的Cry3Bb1蛋白、或玉米株系MIR604中的Cry3A蛋白;或者
5)苏云金芽孢杆菌或蜡状芽孢杆菌(Bacilluscereus)的杀虫分泌性蛋白或其杀虫部分,例如以下网址中所列的营养性杀虫蛋白(VIP):http://www.lifesci.sussex.ac.uk/home/Neil_Crickmore/Bt/vip.html,例如VIP3Aa蛋白类的蛋白;或者
6)在苏云金芽孢杆菌或蜡状芽孢杆菌的第二分泌性蛋白存在的情况下具有杀虫活性的苏云金芽孢杆菌或蜡状芽孢杆菌的分泌性蛋白,例如由VIP1A和VIP2A蛋白组成的二元毒素(WO94/21795);或者
7)含有苏云金芽孢杆菌或蜡状芽孢杆菌的不同分泌性蛋白的部分的杂种杀虫蛋白,例如上述1)的蛋白的杂种或上述2)的蛋白的杂种;或者
8)上述5)至7)中任一项的蛋白质,其中一些、特别是1-10个氨基酸被另一氨基酸替代,从而获得对目标昆虫种类更高的杀虫活性、和/或扩大受影响的目标昆虫种类的范围、和/或由于在克隆或转化过程中在编码DNA中引入的改变(其仍编码杀虫蛋白),例如棉花株系COT102中的VIP3Aa蛋白;或
9)在苏云金芽孢杆菌晶体蛋白存在的情况下具有杀虫活性的苏云金芽孢杆菌或蜡状芽孢杆菌的分泌性蛋白,如由VIP3和Cry1A或Cry1F(美国专利申请61/126083和61/195019)蛋白组成的二元毒素,或者由VIP3蛋白和Cry2Aa或Cry2Ab或Cry2Ae蛋白组成的二元毒素(美国专利申请12/214,022和EP08010791.5)。
8)上述9)中的蛋白,其中一些、特别是1-10个氨基酸被另一氨基酸替代,从而获得对目标昆虫种类更高的杀虫活性、和/或扩大受影响的目标昆虫种类的范围、和/或由于在克隆或转化过程中在编码DNA中引入的改变(其仍编码杀虫蛋白)。
当然,本文所用的昆虫抗性转基因植物还包括含有编码上述1至10类中任何一项的蛋白质的基因的组合的任何植物。在一个实施方案中,昆虫抗性植物含有多于一种的编码上述1至10类中任一项的蛋白质的转基因,以当使用针对不同目标昆虫种类的不同蛋白时扩大受影响的目标昆虫种类的范围;或者通过使用对相同目标昆虫种类具有杀虫活性但具有不同作用模式——例如结合至昆虫的不同受体结合位点——的不同蛋白延迟昆虫对植物抗性的产生。
在本文中使用的“昆虫抗性转基因植物”,还包括含有至少一种下述转基因的任意植物,所述转基因包含表达时产生双链RNA的序列,其在被植物害虫摄取时抑制该害虫的生长,如记载于例如WO2007/080126 WO2006/129204、WO2007/074405、WO2007/080127和WO 2007/035650。
也可根据本发明处理的植物或植物栽培种(通过植物生物技术方法如遗传工程获得的)对非生物胁迫具有耐受性。这类植物可通过遗传转化或通过选择包含赋予这种胁迫抗性的突变的植物而获得。特别有用的胁迫耐受植物包括:
1)包含能够降低植物细胞或植物中聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)基因的表达和/或活性的转基因的植物,如记载于WO00/04173、WO/2006/045633、EP04077984.5、或EP06009836.5;
2)包含能够降低植物或植物细胞中PARG编码基因的表达和/或活性的增强胁迫耐受性的转基因的植物,如记载于WO2004/090140。
3)含有编码烟酰胺腺嘌呤二核苷酸补救生物合成途径的植物功能性酶的增强胁迫耐受性的转基因的植物,所述酶包括烟酰胺酶、烟酸盐磷酸核糖基转移酶、烟酸单核苷酸腺苷转移酶、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸合成酶或烟酰胺磷酸核糖基转移酶,如记载于例如EP04077624.7、WO2006/133827、PCT/EP07/002433、EP1999263、或WO2007/107326。
也可根据本发明处理的植物或植物栽培种(通过植物生物技术方法如遗传工程获得的)表现出对采收产品的数量、品质和/或贮存稳定性的改变和/或对采收产品的特定成分性质的改变,例如:
1)合成改性淀粉的转基因植物,所述改性淀粉的物理化学性质——特别是直链淀粉含量或直链淀粉/支链淀粉比、支化度、平均链长、侧链分布、粘度特性、凝胶强度、淀粉粒度和/或淀粉粒形态——与野生型植物细胞或植物中的合成淀粉相比发生了改变,从而使得该改性淀粉更适于特定的应用。所述合成改性淀粉的转基因植物公开于,例如EP0571427、WO95/04826、EP0719338、WO96/15248、WO96/19581、WO96/27674、WO97/11188、WO97/26362、WO97/32985、WO97/42328、WO97/44472、WO97/45545、WO98/27212、WO98/40503、WO99/58688、WO99/58690、WO99/58654、WO00/08184、WO00/08185、WO00/08175、WO00/28052、WO00/77229、WO01/12782、WO01/12826、WO02/101059、WO03/071860、WO2004/056999、WO2005/030942、WO2005/030941、WO2005/095632、WO2005/095617、WO2005/095619、WO2005/095618、WO2005/123927、WO2006/018319、WO2006/103107、WO2006/108702、WO2007/009823、WO00/22140、WO2006/063862、WO2006/072603、WO02/034923、EP06090134.5、EP06090228.5、EP06090227.7、EP07090007.1、EP07090009.7、WO01/14569、WO02/79410、WO03/33540、WO2004/078983、WO01/19975、WO95/26407、WO96/34968、WO98/20145、WO99/12950、WO99/66050、WO99/53072、US6,734,341、WO00/11192、WO98/22604、WO98/32326、WO01/98509、WO01/98509、WO2005/002359、US5,824,790、US6,013,861、WO94/04693、WO94/09144、WO94/11520、WO95/35026、WO97/20936
2)合成非淀粉碳水化合物聚合物或合成与未经遗传修饰的野生型植物相比具有改变的性质的非淀粉碳水化合物聚合物的转基因植物。实例为产生多聚果糖——尤其是菊粉型和果聚糖型多聚果糖——的植物,如记载于EP0663956、WO96/01904、WO96/21023、WO98/39460、和WO99/24593、产生α-1,4葡聚糖的植物,如记载于WO95/31553、US2002031826、US6,284,479、US5,712,107、WO97/47806、WO97/47807、WO97/47808和WO00/14249、产生α-1,6支化α-1,4葡聚糖的植物,如记载于WO00/73422、产生交替糖(alternan)的植物,如记载于例如WO00/47727、WO00/73422、EP06077301.7、US5,908,975和EP0728213。
3)产生透明质酸的转基因植物,例如公开于WO2006/032538、WO2007/039314、WO2007/039315、WO2007/039316、JP2006304779、和WO2005/012529。
4)转基因植物或杂交植物,如具有“高可溶解固体含量”、“低刺激性”(LP)和/或“长储存期”(LS)特性的洋葱,如记载于美国专利申请12/020,360和61/054,026。
还可根据本发明处理的植物或植物栽培种(通过植物生物技术方法如遗传工程获得的)为具有改变的纤维特性的植物,例如棉花植物。这类植物可通过遗传转化或通过选择含有赋予这种改变的纤维特性的突变的植物而获得,这类植物包括:
a)包含形式改变的纤维素合酶基因的植物,如记载于WO98/00549,例如棉花植物,
b)包含形式改变的rsw2或rsw3同源核酸的植物,如记载于WO2004/053219,例如棉花植物,
c)具有增强的蔗糖磷酸合酶的表达的植物,如记载于WO01/17333,例如棉花植物,
d)具有增强的蔗糖合酶的表达的植物,如记载于WO02/45485,例如棉花植物,
e)其中—例如通过纤维选择性β-1,3-葡聚糖酶的下调—在纤维细胞基部的胞间连丝门控的时机改变的植物,如记载于WO2005/017157,或如记载于EP08075514.3或美国专利申请61/128,938,例如棉花植物,
f)具有反应活性改变的纤维—例如通过包含nodC的N-乙酰葡糖胺转移酶基因以及几丁质合成酶基因的表达而改变—的植物,如记载于WO2006/136351,例如棉花植物。
还可根据本发明处理的植物或植物栽培种(通过植物生物技术方法如基因工程而获得的)为具有改变的油分布(profile)特性的植物,例如油菜或相关的芸苔属(Brassica)植物。这类植物可通过遗传转化或通过选择含有赋予这种改变的油特性的突变的植物而获得,这类植物包括:
a)产生具有高油酸含量的油的植物,如记载于US5,969,169、US5,840,946或US6,323,392或US6,063,947,例如油菜植物,
b)产生具有低亚麻酸含量的油的植物,如记载于US6,270,828、US6,169,190、或US5,965,755,例如油菜植物,
c)产生具有低水平的饱和脂肪酸的油的植物,如记载于美国专利5,434,283或美国专利申请12/668303,例如油菜植物。
还可根据本发明处理的植物或植物栽培种(通过植物生物技术方法如基因工程而获得的)为具有抗病毒性,如抗马铃薯病毒Y(Tecnoplant,Argentina的株系SY230和SY233)、抗病害性,如抗马铃薯晚疫病(例如RB基因)、表现出低温诱导糖化的降低(携带Nt-Inhh,IIR-INV基因)或具有矮化表型(基因A-20氧化物)的植物,例如马铃薯。
还可根据本发明处理的植物或植物栽培种(通过植物生物技术方法如基因工程而获得的)为具有改变的种子落粒特征的植物,如油菜或相关芸薹属植物。这类植物可通过遗传转化或通过选择含有赋予这种改变的种子落粒特征的突变的植物而获得,且其包括具有延迟或减少的种子落粒的诸如油菜等植物,如记载于美国专利申请61/135,230,和EP08075648.9、WO09/068313和WO10/006732
可根据本发明处理的特别有用的转基因植物是包含转化株系或转化株系结合物的植物,这些植物是在美国处于呈请非管制状态(nonregulatedstatus)的主题,该呈请递交于美国农业部(USDA)的动植物卫生检验局(APHIS),无论该请求是否授权或仍未决。该信息任何时候可由APHIS(4700RiverRoadRiverdale,MD20737,USA)得到,例如在其网站(URLhttp://www.aphis.usda.gov/brs/not_reg.html)。在本申请提交日,APHIS未决或授权的非管制状态的请求是包含以下信息的表B中列出的那些:
-请求:请求识别号。通过参考该请求号,转化株系的技术描述可在由APHIS得到的各个请求文件中得到,例如在APHIS的网站上。这些描述以引用的方式纳入本说明书。
-请求延期:参考请求延期的在先请求。
-机构:提交请求的实体名称。
-管制物:涉及的植物种。
-转基因表型:由转化株系赋予植物的特征。
-转化株系或系:请求非管制状态的株系(有时也被称为系)的名称。
-APHIS文件:与请求相关的由APHIS公开的以及APHIS要求的各种文件。
制剂
可包含于本发明组合物中的适当的填充剂和/或表面活性剂为所有可常规用于植物处理组合物中的所有制剂助剂。
在本发明组合物中,氟吡菌酰胺与组(B)的农用化学活性化合物的比例可在相对宽的范围内变化。通常每重量份的农用化学活性化合物使用0.02至2.0重量份,优选0.05至1.0重量份的氟吡菌酰胺。
当应用可根据本发明使用的式(I)的活性化合物时,根据施用的类型,施用率可在一定范围内变化。在种子的处理中,式(I)的活性化合物的施用率通常为每千克种子10至10000mg,优选每千克种子10至300mg。当在固体制剂中使用时,式(I)的活性化合物的施用率通常为每千克制剂20至800mg,优选每千克制剂30至700mg。
根据本发明,载体的含义应理解为天然的或合成的、有机的或无机的物质,活性化合物与该物质混合或结合以获得更好的施用性,特别是施用至植物或植物部位或种子。所述载体——可以是固态或液态的——通常是惰性的且应适于农业用途。
适当的固体或液体载体为:例如铵盐或粉碎的天然矿物,如高岭土、粘土、滑石、白垩、石英、绿坡缕石、蒙脱石或硅藻土,以及粉碎的合成材料,如细分散二氧化硅、氧化铝和天然或合成的硅酸盐、树脂、蜡、固体肥料、水、醇类、特别是丁醇,有机溶剂、矿物油和植物油,以及其衍生物。也可以使用上述载体的混合物。适用于颗粒剂的固体载体为:例如粉碎并分级的天然矿物,如方解石、大理石、浮石、海泡石、白云石以及无机及有机的合成颗粒,以及有机材料,如锯屑、椰壳、玉米穗轴以及烟草秸秆的颗粒。适当的乳化剂和/或发泡剂为,例如非离子和阴离子乳化剂,如聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯脂肪醇醚,例如烷芳基聚乙二醇醚、烷基磺酸酯、硫酸烷酯、芳基磺酸酯,以及蛋白质水解产物。适当的分散剂为:例如木素亚硫酸盐废液和甲基纤维素。
适当的液化的气体填充剂或载体是在环境温度和大气压下为气态的液体,例如气溶胶推进剂,如丁烷、丙烷、氮气和CO2。
制剂中可使用增粘剂,如羧甲基纤维素以及粉末、颗粒和乳胶形式的天然和合成聚合物,如阿拉伯树胶、聚乙烯醇、聚乙酸乙烯酯,或天然磷脂,如脑磷脂和卵磷脂,以及合成磷脂。其他可能的添加剂为矿物油和植物油。
如果使用的填充剂是水,也可例如使用有机溶剂作为助溶剂。适当的液体溶剂主要为:芳族化合物,如二甲苯、甲苯或烷基萘;氯代芳烃或氯代脂族烃,如氯苯、氯乙烯或二氯甲烷;脂族烃,如环己烷或链烷烃,例如矿物油馏分、矿物油和植物油;醇类,如丁醇或乙二醇,以及其醚和酯;酮类,如丙酮、甲基乙基酮、甲基异丁基酮或环己酮;强极性溶剂,如二甲基甲酰胺和二甲基亚砜;以及水。
本发明的组合物可另外包含其他成分,例如,表面活性剂。适当的表面活性剂是具有离子或非离子性能的乳化剂、分散剂或润湿剂,或这些表面活性剂的混合物。其实例为聚丙烯酸盐、木素磺酸盐、酚磺酸盐或萘磺酸盐、环氧乙烷与脂肪醇或脂肪酸或脂肪胺的缩聚物、取代的酚(优选烷基酚或芳基酚)、磺基丁二酸酯盐、氨基乙磺酸衍生物(优选烷基氨基乙磺酸盐)、聚乙氧基化醇或酚的磷酸酯、多元醇的脂族酯、以及含硫酸盐、磺酸盐和磷酸盐的化合物的衍生物。如果所述活性化合物之一和/或惰性载体之一在水中不溶且当施用在水中进行时,则需要存在表面活性剂。表面活性剂的比例为本发明组合物的5至40重量%。
可以使用着色剂,如无机颜料例如氧化铁、氧化钛、普鲁士蓝,以及有机染料如茜素染料、偶氮染料和金属酞菁染料,以及微量营养素,如铁盐、锰盐、硼盐、铜盐、钴盐、钼盐和锌盐。
如果合适,也可存在其他额外组分,例如保护胶体、粘合剂(binders)、胶粘剂(adhesives)、增稠剂、触变剂、渗透剂、稳定剂、螯合剂、络合物形成剂(complexformer)。通常,活性化合物可与通常用于制剂目的的任何固体或液体添加剂结合。
通常,本发明的组合物含有0.05至99重量%,优选10至70重量%,特别优选20至50重量%,最优选25重量%的本发明活性化合物结合物。
本发明的活性化合物结合物或组合物可以其自身使用,或者,根据其各自的物理和/或化学特性以其制剂的形式或由该制剂制备的使用形式施用,如气溶胶、胶囊悬浮剂、冷雾剂(cold-foggingconcentrates)、热雾剂、胶囊颗粒剂、细粒剂(finegranules)、种子处理用悬浮剂(flowableconcentrates)、即用溶液剂、粉剂(dustablepowders)、乳油、水包油型乳剂、油包水型乳剂、大粒剂、微粒剂、油分散性粉剂、油悬剂、油剂、泡沫剂、糊剂、种衣剂、浓悬浮剂(suspensionconcentrates)、悬浮乳剂、水溶剂、悬浮剂、可湿性粉剂、可溶性粉剂、粉剂和颗粒剂、水溶性颗粒剂或片剂、种子处理用水溶性粉剂、可湿性粉剂、经活性化合物浸渍的天然产物和合成物质、以及在聚合物质中的微胶囊剂以及种子包衣材料中,以及ULV冷雾化和热雾化制剂。
所述制剂可以本身已知的方式制备,例如通过将活性化合物或活性化合物结合物与至少一种添加剂混合。适当的添加剂是所有常用的制剂助剂,如有机溶剂、填充剂、溶剂或稀释剂、固体载体和填料、表面活性剂(如佐剂(adjuvants)、乳化剂、分散剂、保护胶体、润湿剂和增粘剂)、分散剂和/或粘合剂或固定剂、防腐剂、染料和颜料、消泡剂、无机和有机增稠剂、防水剂、如果合适还有干燥剂和UV稳定剂、赤霉素以及水和其他加工助剂。根据待制备的制剂各自的种类,可能需要其他加工步骤,例如,湿磨、干磨或造粒。
可以存在的有机稀释剂是常规用于此目的的所有极性和非极性有机溶剂。优选的是酮类,如甲基异丁基酮和环己酮,此外还有酰胺类,如二甲基甲酰胺和链烷烃甲酰胺,如N,N-二甲基癸酰胺和N,N-二甲基辛酰胺,此外还有环状化合物,如N-甲基吡咯烷酮、N-辛基吡咯烷酮、N-十二烷基吡咯烷酮、N-辛基己内酰胺、N-十二烷基己内酰胺和丁内酯,还有强极性溶剂,如二甲基亚砜,此外还有芳族烃类,如二甲苯、SolvessoTM、矿物油,如石油溶剂油、石油、烷基苯和锭子油,此外还有酯类,如丙二醇单甲基醚乙酸酯、己二酸二丁酯、乙酸己酯、乙酸庚酯、柠檬酸三正丁酯和邻苯二甲酸二正丁酯,以及还有醇类,如苯甲醇和1-甲氧基-2-丙醇。
适用于颗粒剂的固体载体为:例如粉碎并分级的天然矿物,如方解石、大理石、浮石、海泡石、白云石以及合成的无机及有机粉颗粒,以及有机材料,如锯屑、椰壳、玉米穗轴以及烟草茎的颗粒。
适当的表面活性剂(佐剂、乳化剂、分散剂、保护胶体、润湿剂和增稠剂)为常用离子和非离子物质。可提及的实例是乙氧基化壬基酚、直链或支化醇的聚烷二醇醚、烷基酚与环氧乙烷和/或环氧丙烷的反应产物、脂肪胺与环氧乙烷和/或环氧丙烷的反应产物,此外还有脂肪酯、烷基磺酸盐、烷基硫酸盐、烷基醚硫酸盐、烷基醚磷酸盐、芳基硫酸盐、乙氧基化芳烷基酚,例如三苯乙烯基苯酚乙氧基化合物,此外还有乙氧基化和丙氧基化芳烷基酚以及硫酸化或磷酸化芳烷基酚的乙氧基化合物或乙氧基-丙氧基化合物。还可提及天然和合成的水溶性聚合物,如木素磺酸盐、明胶、阿拉伯树胶、磷脂、淀粉、疏水的改性淀粉和纤维素衍生物,特别是纤维素酯和纤维素醚,还有聚乙烯醇、聚乙烯乙酸酯、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸和(甲基)丙烯酸和(甲基)丙烯酸酯的共聚物,以及碱金属氢氧化物中和的甲基丙烯酸和甲基丙烯酸酯共聚物以及任选取代的萘磺酸盐与甲醛的缩聚物。
适当的固体填料和载体为常规适用于作物保护组合物的所有物质。优选提及无机颗粒,如具有平均颗粒尺寸为0.005至20μm——特别优选0.02至10μm——的碳酸盐、硅酸盐、硫酸盐和氧化物。可提及的实例为硫酸铵、磷酸铵、尿素、碳酸钙、硫酸钙、硫酸镁、氧化镁、氧化铝、二氧化硅、细分散硅酸、二氧化硅凝胶、天然和合成的硅酸盐和硅铝酸盐以及植物产品如谷物细粉、木材粉和纤维素粉。
可存在于可根据本发明使用的拌种剂中的适当的着色剂包括常规用于此目的的所有着色剂。可使用微溶于水的颜料和溶于水的染料。可提到的实例包括已知的名为若丹明B、C.I.颜料红112和C.I.溶剂红1的着色剂。使用的着色剂可以是无机颜料,例如氧化铁、氧化钛、普鲁士蓝,以及有机染料如茜素染料、偶氮染料和金属酞菁染料,以及微量营养素,如铁盐、锰盐、硼盐、铜盐、钴盐、钼盐和锌盐。
可存在于根据本发明可使用的拌种剂中的适当的润湿剂包括常规用于农用化学活性物质制剂中的促进润湿的所有物质。优选使用烷基萘磺酸盐,如二异丙基萘磺酸盐或二异丁基萘磺酸盐。
可存在于根据本发明可使用的拌种剂中的适当的分散剂和/或乳化剂包括常规用于农用化学活性物质制剂中的所有非离子、阴离子和阳离子分散剂。优选地是使用非离子或阴离子分散剂、或非离子或阴离子分散剂混合物。特别适当的非离子分散剂是环氧乙烷/环氧丙烷嵌段聚合物、烷基酚聚乙二醇醚、和三苯乙烯基酚聚乙二醇醚,及其磷酸化或硫酸化衍生物。特别适当的阳离子分散剂是木素磺酸盐、聚丙烯酸盐和芳基磺酸盐/甲醛缩聚物。
可存在于根据本发明可使用的拌种剂中的消泡剂包括常规用于农用化学活性物质制剂中的所有抑制泡沫的化合物。优选使用硅酮消泡剂、硬脂酸镁、硅酮乳剂、长链醇、脂肪酸及其盐以及有机氟化合物以及其混合物。
可存在于根据本发明可使用的拌种剂中的防腐剂包括农用化学组合物中用于此目的的所有化合物。例如,可提到二氯芬和苯甲醇半缩甲醛。
可存在于根据本发明可使用的拌种剂中的二次增稠剂包括农用化学组合物中用于此目的的所有化合物。优选的是纤维素衍生物、丙烯酸衍生物、多糖,如黄原胶(xanthangum)或硅酸铝镁(Veegum)、改性粘土、页硅酸盐(phyllosilicate),如绿坡缕石和膨润土,以及细分散的硅酸。
可存在于根据本发明可使用的拌种剂中的适当的粘合剂包括可用于拌种剂的所有常规粘合剂。可作为优选提及的是聚乙烯吡咯烷酮、聚乙酸乙烯酯、聚乙烯醇和羟乙基纤维素。
可存在于根据本发明可使用的拌种剂中的适当的赤霉素优选为赤霉素A1、A3(=赤霉酸)、A4和A7;特别优选的是使用赤霉酸。赤霉素是已知的(参考R.Wegler“ChemiederPflanzenschutz-and”[ChemistryofCropProtectionAgentsandPesticides],Vol.2,SpringerVerlag,1970,pp.401-412)。
制剂通常包含0.1至95重量%,优选0.5至90重量%的活性化合物。
本发明的活性化合物结合物,以市售制剂的形式以及由所述制剂制备的使用形式,可作为与其他活性化合物的混合物存在,所述其他活性化合物如杀昆虫剂、引诱剂、消毒剂、杀细菌剂、杀螨剂、杀线虫剂、杀真菌剂、生长调节剂或除草剂。也可以是与肥料的混合物。
根据本发明使用活性化合物的结合物或组合物对植物或植物部位的处理是通过常规处理方法直接进行或作用于其环境、生境或贮存空间而进行,所述常规处理方法例如浸渍、喷雾、雾化(atomizing)、灌溉、蒸发、撒粉、弥雾(fogging)、撒播、发泡、涂布(painting)、散布、浇水(浇灌(drenching))、滴灌,并且,对于繁殖材料,特别是对于种子,还可作为干种子处理用粉末、种子处理用溶液、浆液处理用水溶性粉末,通过包以外皮、涂布一层或多层包衣等。优选通过浸渍、喷雾、雾化、灌溉、蒸发、撒粉、弥雾、撒播、发泡、涂布、散布、浇水(浇灌)、滴灌来施用。
制剂的施用按照常规的农业实践以适于施用形式的方式进行。常规的施用为,例如,用水稀释并将得到的喷雾液喷雾、用油稀释后施用、不稀释直接施用、拌种或载体颗粒的土壤施用。
由市售的制剂制备的施用形式的活性化合物含量可在较宽的范围内变化。施用形式的活性化合物的浓度为0.0000001至95重量%,优选0.0001至2重量%的活性化合物。
本发明的组合物不仅包括可使用适当的设备施用至植物或种子的即用型组合物,还包括在使用前必需用水稀释的市售浓缩物。
施用方法
根据本发明用氟吡菌酰胺或组合物对植物或植物部位的处理是通过用常规的处理方法直接进行或作用于其环境、生境或贮存空间而进行,所述常规处理方法为例如浸渍、喷雾、雾化、灌溉、茎注射、垄沟施用、蒸发、撒粉、弥雾、撒播、发泡、涂布、散布、浇水(浇灌)、滴灌,并且,对于繁殖材料,特别是对于种子,还可作为干种子处理用粉末、种子处理用溶液、浆液处理用水溶性粉末,通过包以外皮、涂布一层或多层包衣等。此外可以通过超低容量法施用活性化合物,或将活性化合物制剂或活性化合物自身注入土壤。
通常,氟吡菌酰胺的施用率为每公顷10g至20kg,优选每公顷50g至10kg,最优选每公顷100g至5kg。
本发明还包括处理种子的方法。本发明还涉及根据前文段落中记载的方法处理的种子。
本发明的氟吡菌酰胺或含有氟吡菌酰胺的组合物尤其适用于处理种子。由有害有机体对作物植物造成的大部分损害是由储存期间或在播种后以及在植物萌芽后和植物萌芽期间的种子侵染引发的。该阶段之所以特别关键,是由于生长中植物的根和芽特别敏感,甚至很小的伤害也可能导致植物的死亡。因此,通过使用适当的组合物来保护种子和发芽中的植物受到极大的关注。
通过处理植物的种子来防治线虫为长期已知的且是不断改进的主题。然而,对种子的处理引起了一系列无法总以令人满意的方式得到解决的问题。因而,希望开发用于保护种子和发芽植物的方法,该方法可省却在播种后或植物发芽后额外施用作物保护剂,或至少可显著减少额外施用。还希望优化所施用的活性化合物的量,以对种子和发芽植物提供免受线虫侵害的最大程度的保护,但施用的活性化合物不会伤害植物自身。特别地,为了在施用最少的作物保护剂的情况下实现对种子和发芽植物的最佳保护,处理种子的方法还应考虑转基因植物的固有杀线虫特性。
因此,本发明还具体涉及通过用本发明的氟吡菌酰胺或含有氟吡菌酰胺的组合物处理种子来保护种子和发芽植物免受线虫侵害的方法。本发明还涉及本发明组合物用于处理种子以保护种子和发芽植物抵抗线虫的用途。此外,本发明还涉及经本发明的组合物处理用于获得针对线虫的保护的种子。
对损害出芽后植物的线虫的防治主要通过用作物保护组合物处理土壤和植物的地上部位进行。由于考虑到作物保护组合物对环境以及人和动物健康的可能的影响,正努力降低施用的活性化合物的量。
本发明的优势之一是,由于本发明的氟吡菌酰胺或含有氟吡菌酰胺的组合物的独特的内吸特性,使用这些氟吡菌酰胺或这些组合物处理种子不仅保护种子自身,还保护发芽后长成的植物免受线虫的损害。以这种方式,可以省却在播种时或此后不久对作物的即时处理。
本发明的氟吡菌酰胺或含有氟吡菌酰胺的组合物适用于保护蔬菜的种子,特别是番茄和葫芦、马铃薯、玉米、大豆、棉花、烟草、咖啡、水果,特别是柑橘类水果、菠萝和香蕉,以及葡萄。
如下文进一步描述的,用本发明的氟吡菌酰胺或组合物处理转基因种子特别重要。转基因种子指的是含有至少一种能表达具有杀虫特性的多肽或蛋白质的异源基因的植物种子。转基因种子中的异源基因可来源于例如杆菌属(Bacillus)、根瘤菌属(Rhizobium)、假单细胞菌属(Pseudomonas)、沙雷氏菌属(Serratia)、木霉属(Trichoderma)、棒形杆菌属(Clavibacter)、丛枝菌(Glomus)或粘帚霉属(Gliocladium)微生物。优选地,这些异源基因来源于杆菌属,基因产物对欧洲玉米螟(Europeancornborer)和/或西方玉米根叶甲(Westerncornrootworm)具有活性。特别优选地,该异源基因来源于苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)。
在本发明的上下文中,本发明的氟吡菌酰胺或含有氟吡菌酰胺的组合物可以其本身或以适当制剂的形式施用于种子。优选地,种子在足够稳定的状态下处理从而使处理不会引起任何伤害。通常,对种子的处理可在采收和播种之间的任何时间点进行。通常使用的种子已与植物分离且已除去穗轴、外壳、茎、表皮、绒毛或果肉。因此,可以使用例如已采收、清洁并干燥至含水量少于15重量%的种子。或者,也可以使用干燥后用例如水处理,随后再次干燥的种子。
当处理种子时,通常必须注意的是,选择施用于种子的本发明的氟吡菌酰胺或含有氟吡菌酰胺的组合物的量和/或其他添加剂的量,以使种子发芽不会受到不利影响,或长成的植物不受损害。此点必须牢记,特别是对于在某些施用率下可能具有植物毒性作用的活性化合物。
本发明的氟吡菌酰胺或含有氟吡菌酰胺的组合物可直接施用,即不包含其他组分且不用进行稀释。通常,优选将所述组合物以适当的制剂形式施用于种子。用于处理种子的适当的制剂和方法为本领域技术人员已知并记载于,例如下列文献:US4,272,417A、US4,245,432A、US4,808,430A、US5,876,739A、US2003/0176428A1、WO2002/080675A1、WO2002/028186A2。
可根据本发明使用的氟吡菌酰胺或含有氟吡菌酰胺的组合物可转化为常规的拌种剂,如溶液剂、乳剂、悬浮剂、粉剂、泡沫剂、浆剂或其他的种子包衣材料,以及ULV制剂。
这些制剂以已知方法通过将活性化合物或活性化合物结合物与常规添加剂混合而制备,所述常规添加剂为,例如常规填充剂以及溶剂或稀释剂、着色剂、润湿剂、分散剂、乳化剂、消泡剂、防腐剂、二次增稠剂、粘合剂、赤霉素和水。
可存在于可根据本发明使用的拌种剂中的适当的着色剂包括常规用于此目的的所有着色剂。可使用微溶于水的颜料和溶于水的染料。可提到的实例包括已知的名为若丹明B、C.I.颜料红112和C.I.溶剂红1的着色剂。
可存在于可根据本发明使用的拌种剂中的适当的润湿剂包括常规用于农用化学活性物质制剂中的促进润湿的所有物质。可优选使用烷基萘磺酸盐,如二异丙基萘磺酸盐或二异丁基萘磺酸盐。
可存在于可根据本发明使用的拌种剂中的适当的分散剂和/或乳化剂包括常规用于农用化学活性物质制剂中的所有非离子、阴离子和阳离子分散剂。优选地,可使用非离子或阴离子分散剂、或非离子或阴离子分散剂混合物。特别适当的非离子分散剂是环氧乙烷-环氧丙烷嵌段聚合物、烷基酚聚乙二醇醚、和三苯乙烯基酚聚乙二醇醚,及其磷酸化或硫酸化衍生物。特别适当的阳离子分散剂是木素磺酸盐、聚丙烯酸盐和芳基磺酸盐-甲醛缩聚物。
可存在于可根据本发明使用的拌种剂中的消泡剂包括常规用于农用化学活性化合物制剂中的所有抑制泡沫的化合物。优选使用硅酮消泡剂、硬脂酸镁、硅酮乳剂、长链醇、脂肪酸及其盐以及有机氟化合物以及其混合物。
可存在于可根据本发明使用的拌种剂中的防腐剂包括在农用化学组合物中用于此目的的所有化合物。例如,可提到二氯芬和苯甲醇半缩甲醛。
可存在于可根据本发明使用的拌种剂中的二次增稠剂包括农用化学组合物中用于此目的的所有化合物。优选的是纤维素衍生物、丙烯酸衍生物、多糖,如黄原胶或硅酸铝镁、改性粘土、页硅酸盐,如绿坡缕石和膨润土,以及细分散的硅酸。
可存在于可根据本发明使用的拌种剂中的适当的粘合剂包括可用于拌种剂的所有常规粘合剂。可作为优选提及的是聚乙烯吡咯烷酮、聚乙酸乙烯酯、聚乙烯醇和纤基乙酸钠。
可存在于可根据本发明使用的拌种剂中的适当的赤霉素优选为赤霉素A1、A3(=赤霉酸)、A4和A7;特别优选的是使用赤霉酸。赤霉素是已知的(参考R.Wegler“ChemiederPflanzenschutz-and”[ChemistryofCropProtectionAgentsandPesticides],Vol.2,SpringerVerlag,1970,pp.401-412)。
根据本发明可使用的拌种剂可直接或预先用水稀释后而用于处理极宽范围种类中的任一类的种子。根据本发明可使用的拌种剂或其稀释制剂也可用于转基因植物种子的拌种。在本发明的上下文中,协同效应也可由与表达形成的物质的相互作用中产生。
用可根据本发明使用的拌种剂或其加水制备的制剂处理种子的适当的混合设备包括通常可用于拌种的所有混合设备。拌种时采用的具体程序包括,将种子加入混合机中;加入具体所需量的拌种剂——以其本身或预先用水稀释后;进行混合直到制剂已均匀分布在种子上。任选地,随后进行干燥操作。
本发明的杀线虫组合物可用于治疗性或保护性地防治线虫。因此,本发明也涉及使用本发明的氟吡菌酰胺和含有氟吡菌酰胺的组合物——其施用于种子、植物或植物部位、果实或植物生长的土壤——来防治线虫的治疗性和保护性的方法。优选的是施用于植物或植物部位、果实或土壤。
在作物保护中用于防治线虫的本发明的组合物包括有效但非植物毒性量的本发明的化合物。“有效但非植物毒性量”意指足以防治或完全根除由线虫引起的植物病害并且同时不会造成明显植物毒性症状的本发明组合物的量。该施用率通常可在较宽范围内变化,其取决于多种因素,例如线虫、植物或作物、气候条件和本发明组合物的成分。
所述活性化合物在防治植物病害所需的浓度下被植物耐受良好的这一事实使其可处理植物的地上部位、无性繁殖材料和种子、以及土壤。
在一个示例性种子处理的方法中,含有氟吡菌酰胺的水性组合物的施用率可以为,能提供每100kg种子0.5g至10kg氟吡菌酰胺,优选每100kg种子0.8g至5kg氟吡菌酰胺,最优选每100kg种子1g至1kg氟吡菌酰胺。
在一个示例性的种子处理的方法中,含有生物防治剂,特别是含有坚强芽孢杆菌CNCMI-1582孢子的水性组合物的施用率可以为,能提供每公顷或100.000粒种子0.1g至20g——优选1g至10g,特别优选2.5g至7.5g,且最优选5g——坚强芽孢杆菌CNCMI-1582孢子。上述范围指的是含有1011孢子/g的孢子制剂或悬浮剂。
在不同的实施方案中,生物防治剂加入种子的施用率为每粒种子约1x105至1x108菌落数(colonyformingunit,cfu),包括约1x105cfu/种子、或约1x106cfu/种子、或约1x107cfu/种子、或约1x108cfu/种子,包括约1x105至1x107cfu/种子、约1x105至1x106cfu/种子、约1x106至1x108cfu/种子、约1x106至1x107cfu/种子以及约1x107至1x108cfu/种子。
本发明的一般概念记载在下述实施例中,但其不被认为作为限制。
实验实施例
实施例1.
两个测试组种植Jack(具有PI88788抗性的SCN抗性大豆品种)以及两个已知产生杀线虫蛋白的遗传修饰Jack品种(AXN2和AXMI031)。用着色/涂布底料或相同底料加上两种不同量的氟吡菌酰胺(实施例1使用0.075mg氟吡菌酰胺/种子且实施例2使用0.15mg氟吡菌酰胺/种子)来处理种子。用于接种两组测试品的SCN由能够克服PI88788抗性的自交菌落(OP50)收集。
测试以最少重复10次的非随机单位组(block)进行。将种子种在单独的填有粗砂的4”陶盆中并在十次相同的接种中—种植时开始然后约每三天一次—接种约20,000OP50幼体。将植物保持在发芽室中。约每三天旋转单位组以将环境差异的潜在影响最小化。种植两个月后,采收植物并收集计算胞囊从而评估杀线虫剂的药效和特征—单独和相互结合。
使用底料处理(涂色/涂布),与非转化植物相比,在方案进行到一半时记录到两个遗传修饰品种的高度均降低。
氟吡菌酰胺(AR83685)没有示出提供正生长的响应,其在本试验的非转基因Jack植物中也观察到。然而,氟吡菌酰胺在两组试验的两个遗传修饰品种中提高了植物的平均高度,同时对非转基因的对照植物没有作用。因此,当不受任何特定理论或机制限制时,似乎显示出将氟吡菌酰胺施用至转基因Axn2和Axmi031植物克服了由于转基因的存在导致的生长抑制作用。在非转基因对照组和未经处理的转基因植物中均没有生长促进作用。
在两组试验中(0.075mg氟吡菌酰胺/种子和0.15mg氟吡菌酰胺/种子),由用底料处理(涂色/涂布)的Jack植物收集的胞囊平均数量相对一致(1310个和1190个胞囊)。当将上述平均值与由AXMI031(也用底料处理)植物得到的平均值进行比较时,下降百分比也非常一致(92%和88%)。对于AXN2植物(也用底料处理),第二组实验中得到的单个结果高度易变且最终下降百分比(与Jack相比)总数与第一组试验相比(20%)显著更高(43%)。参见图1。
在第一组实验中,氟吡菌酰胺(0.075mg/种子)在非转基因Jack植物上使SCN群下降了26%。当在第二组试验中使化学药物的量加倍(0.15mg/种子)时,下降几乎也加倍(43%)。考虑到这是实验性的杀线虫剂,限制因素不可能是SCN对化学药物的作用免疫,而更可能是其在根围区域的分布以及暴露于致病浓度下的SCN的数量。
基于上述假设,由于潜在的重叠(例如,较少的线虫可供氟吡菌酰胺作为目标),预期归因于氟吡菌酰胺的防治百分比对转基因种子更少。然而,通过所述特征实现的防治(20/43%-AXN2;92/88%-AXMI31)未使氟吡菌酰胺的作用减小。对于Axmi031和Axn2,氟吡菌酰胺在较低的施用率下提供了约20%的下降且在较高施用率下提供了约40%的下降。因此,尽管由于转基因的存在线虫压力显著更低,但是氟吡菌酰胺引起了线虫防治的恒定水平(图2)。

Claims (8)

1.式(I)的N-{[3-氯-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]乙基}-2-(三氟甲基)苯甲酰胺(氟吡菌酰胺)
或其N-氧化物用于克服在抗线虫作物中由于转基因的存在导致的生长抑制作用的用途,所述抗线虫作物选自含有Axmi031或Axn2的转基因植物,所述转基因选自Axmi031或Axn2。
2.组合物用于克服在抗线虫作物中由于转基因的存在导致的生长抑制作用的用途,所述组合物除了填充剂和/或表面活性剂还含有
氟吡菌酰胺和
至少一种其他农用化学活性化合物,
所述抗线虫作物选自含有Axmi031或Axn2的转基因植物,所述转基因选自Axmi031或Axn2。
3.权利要求1或2的用途,其中线虫为植物寄生线虫,选自滑刃线虫属、伞滑刃线虫属、茎线虫属、球异皮线虫属、异皮线虫属、长针线虫属、根结线虫属、短体线虫属、穿孔线虫属、毛刺线虫属、小垫刃线虫属、剑线虫属、螺旋线虫属、矮化线虫属、盾线虫属、副毛刺线虫属、瓢线虫属、Paraphelenchusspp.、Aglenchusspp.、刺线虫属、科布线虫属、小盘旋线虫属、盘旋线虫属、Neotylenchusspp.、Paraphelenchusspp.、锥线虫属、纽带线虫属、斑皮线虫属、小环线虫属、五沟线虫属、鞘线虫属、蟃线虫属、亚线虫属、半轮线虫属、Psilenchusspp.、Pseudohalenchusspp.、轮线虫属、Cacopaurusspp.。
4.权利要求1或2的用途,将氟吡菌酰胺以每公顷100g至5kg的施用率施用。
5.处理种子用于克服在抗线虫作物中由于转基因的存在导致的生长抑制作用的方法,所述抗线虫作物选自含有Axmi031或Axn2的转基因植物,所述抗线虫作物选自蔬菜、大豆、棉花、烟草、咖啡、水果,所述方法包括将权利要求2的组合物施用至种子。
6.权利要求5的方法,其中所述抗线虫作物选自番茄和葫芦、马铃薯、玉米。
7.权利要求5的方法,其中所述抗线虫作物选自柑橘类水果、菠萝和香蕉,以及葡萄。
8.克服由于转基因的存在导致的生长抑制作用的方法,包括将权利要求1或2的氟吡菌酰胺施用至植物,所述植物选自含有Axmi031或Axn2的转基因植物。
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