CN103048460B - 一种用量子点荧光免疫层析试纸条检测的方法 - Google Patents

一种用量子点荧光免疫层析试纸条检测的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN103048460B
CN103048460B CN201210546243.6A CN201210546243A CN103048460B CN 103048460 B CN103048460 B CN 103048460B CN 201210546243 A CN201210546243 A CN 201210546243A CN 103048460 B CN103048460 B CN 103048460B
Authority
CN
China
Prior art keywords
quantum dot
detection
fluorescence
liquid
antibody
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201210546243.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103048460A (zh
Inventor
彭俊
朱小波
庞代文
张志凌
余慧
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
WUHAN JIAYUAN BIOMEDICAL ENGINEERING Co Ltd
Original Assignee
WUHAN JIAYUAN BIOMEDICAL ENGINEERING Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by WUHAN JIAYUAN BIOMEDICAL ENGINEERING Co Ltd filed Critical WUHAN JIAYUAN BIOMEDICAL ENGINEERING Co Ltd
Priority to CN201210546243.6A priority Critical patent/CN103048460B/zh
Publication of CN103048460A publication Critical patent/CN103048460A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103048460B publication Critical patent/CN103048460B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)

Abstract

本发明提供了一种用量子点荧光免疫层析试纸条检测的方法,该方法采用具体步骤是:(1)量子点标记蛋白液的制备,(2)量子点标记蛋白检测液的制备,(3)制备包被有检测指标的反应膜,(4)在上述PVC背衬上顺序粘贴样品垫、步骤(3)制得的反应膜以及吸水垫,得到试纸板,将试纸板切割成试纸条,将试纸条装载于试纸卡内,(5)定性或定量检测。这种用量子点荧光免疫层析试纸条检测的方法是一种高灵敏度、多指标同时检测、简便、直观、价格低廉、应用广泛的量子点荧光免疫层析试纸条快速检测方法。

Description

一种用量子点荧光免疫层析试纸条检测的方法
技术领域
本发明涉及一种用量子点荧光免疫层析试纸条检测的方法,属于免疫检测领域。
背景技术
免疫层析试纸条检测也称为免疫侧向层析,是一种快速、简便、灵敏、直观、价格低廉,并可进行现场检测的方法。具有放射性免疫、酶联免疫吸附法、气相色谱法、液相色谱法、毛细管电泳等仪器检测方法所不具备的优点,在检测技术中处于重要地位,是对传统和大型仪器检测方法的有力补充。随着社会的发展,人类对生活质量有了更高的要求,免疫层析检测技术在面对人类疾病、环境污染物、食品安全、动物医学等重大问题时具有重要的作用。
当前免疫层析产品主要是基于胶体金技术而开发的,在医学检验、毒品检测、食品安全检测等领域得到了广泛的应用。但该技术由于存在颗粒粒径均一性差、免疫标记物不稳定、颜色单一只能单指标检测、无法实现准确定量检测、灵敏度不高等不足,无法满足人们的需求。因此发明高灵敏度、多指标同时检测、简便、直观、价格低廉的免疫层析检测方法十分必要。
量子点是一种在光源激发下发射出明亮荧光的半导体纳米晶粒。具有以下特点:
1、粒径不同,发光颜色不同,并且可以用单一光源激发多种不同颜色的量子点;
2、量子点的发射谱狭窄对称,同时激发的多种量子点不易出现重叠,使多重分子同时检测容易实现;
3、量子点的量子产率高、荧光强,可以接受长时间反复激发,光化学稳定性好,不易猝灭。
由于量子点具有以上优良特性,使其可能成为分子检测和医学诊断的有力工具,经过近20多年的发展,逐步从细胞、组织标记成像、细胞示踪、活体成像等应用研究开始向临床检测、疾病控制、食品安全检测等领域方向发展。但目前各种现有的涉及量子点的免疫层析试纸条检测方法,或者由于选用的为核型量子点、水相合成的量子点或者量子点包裹微球等,或者由于采取固化方法将其固定在结合区,而影响了检测灵敏度的提高并造成精密度差。
发明内容
为克服现有技术中的不足,本发明提供了一种用量子点荧光免疫层析试纸条检测的方法,该方法是一种高灵敏度、多指标同时检测、简便、直观、价格低廉、应用广泛的量子点荧光免疫层析试纸条快速检测方法。
实现上述目的的技术方案为一种用量子点荧光免疫层析试纸条检测的方法,具体采用如下步骤:
(1). 量子点标记蛋白液的制备:取浓度为1μM-10μM的0.2-2nmol羧基水溶性CdSe/ZnS量子点平衡至室温,并用超声波处理;将量子点、EDC、蛋白均用20mM~200mM 、pH6.0~7.4的磷酸盐溶液或硼酸盐溶液溶解;按照1μmol~5μmol EDC/2nmol量子点的比例加入EDC,EDC即碳二亚胺盐酸盐,涡旋振荡混匀,再按1nmol~100nmol 蛋白/1nmol量子点的比例加入浓度为1~10mg/mL的蛋白,涡旋混匀,室温搅拌反应1-4小时;反应结束后用截留分子量为10kDa-100kDa的离心超滤管超滤浓缩至20-100μL,然后采取凝胶尺寸排阻色谱法进行纯化,收集有荧光的部分,再用离心超滤管浓缩至量子点浓度为0.2-2μmol/L,保存于10mM-100mM、 pH为7.4~9.0的、含有质量百分比浓度为0.05%的NaN3的硼酸盐缓冲液中,2~8℃冰箱保存备用;
(2). 量子点标记蛋白检测液的制备:将上述量子点标记蛋白液取出放置至室温,用PBS-TBN稀释100-1000倍成量子点标记蛋白检测液,PBS-TBN为含20mM-150mM氯化钠NaCl、0.02%-0.1% 吐温Tween-20、2mg/mL-10m/mL 牛血清白蛋白BSA、0.05% 叠氮化钠NaN3的10mM-100mM磷酸盐缓冲液PB,然后置于2~8℃冰箱保存备用;
(3). 制备包被有检测指标的反应膜:检测指标为抗体或抗原,以硝酸纤维素膜为反应膜,将反应膜固定粘贴在PVC背衬的中间部位,将抗原或抗体用包被缓冲液调节浓度至0.1~5mg/mL,并将二抗IgG用包被缓冲也调节浓度至0.1~5mg/mL,按照0.8~1.2uL/cm的膜液量,将抗原或抗体,以及二抗IgG喷到反应膜上对应的检测区和控制区上进行包被,检测区和控制区之间间隔为3~7mm,放置25~37℃烘箱处理1-3小时,置于恒温恒湿保藏箱里备用,所用包被缓冲液为含有20mM-150mM氯化钠NaCl、0.05%-3% 聚乙二醇PEG20000、0.2%-1% 海藻糖、2mg/mL-10m/mL 牛血清白蛋白BSA、0.05%叠氮化钠NaN3的10mM-100mM磷酸盐缓冲液PB;
(4). 在上述PVC背衬上顺序粘贴样品垫、步骤(3)制得的反应膜以及吸水垫,得到试纸板,将试纸板切割成试纸条,将试纸条装载于试纸卡内,得量子点荧光免疫层析试纸条;
(5). 定性或定量检测:取300uL-500μL量子点标记蛋白检测液与10μL -50μL待检测样本充分混匀后,取60μL-100μL混合液加入到试纸卡上的加样孔内,反应3-15min即可读取结果;
(5.1)定性检测或半定量检测:采用紫外灯照射加样反应后的反应膜区域,通过肉眼观察条带发光情况,如果体系为检测大分子物质的双抗夹心法,当检测线出现荧光信号时判定该指标为阳性;不出现荧光信号则为阴性;如果检测体系为检测小分子物质的竞争法,则结果相反,出现荧光信号的检测线报告为阴性,未出现荧光信号报告为阳性;无论采取哪种方法,如果控制线没有荧光信号则检测结果无效;
(5.2)定量检测:配备一系列不同浓度的待检分子标准溶液,然后利用荧光定量分析仪分别进行免疫层析检测,通过对每个峰面积对应浓度做标准曲线,再将待检未知样品进行同样处理,得到峰面积,根据标准曲线公式得知样品中待测分子含量。
由上述技术方案可知,本发明所述的量子点荧光免疫层析试纸条检测法与放射性免疫、酶联免疫吸附法、气相色谱法、液相色谱法、毛细管电泳等方法相比,具有操作安全(无放射污染源)、简便(步骤少,操作简单)和快速(3-15min即可出结果)等优点;与胶体金免疫层析法试纸条相比,本发明标记稳定性好(生物分子与量子点共价结合)、多指标同时检测(不同粒径量子点其荧光发射波长不同,可实现多指标同时检测)、灵敏度高(量子点的荧光强度高,可实现对低丰度靶分子的检测)、定性定量皆可等优点。
本发明所述的量子点荧光免疫层析试纸条检测法,具体可以用双抗体或抗原夹心法(待检分子为大分子物质,免疫结合位点多)、免疫竞争法(待检分子为小分子,免疫结合位点少)等检测分析方法,应用领域广,可用于单项指标或者多指标的高灵敏快速检测,能够检测全血、血清、血浆、唾液、尿液、食品等样本;能用于人类疾病诊断、病原微生物检出、环境污染物检测、毒品检测、食品有毒残留物检测等领域。
附图说明
图1为实施例1、2的量子点荧光免疫层析检测示意图。
图2为实施例3的量子点荧光免疫层析多组分检测示意图。
图中:1、样品垫,2、背衬,3、检测区,3-1、检测区A,3-2、检测区B,4、控制区,5、反应膜,6、吸水垫,7、量子点标记蛋白与样品混合物。
具体实施方式
实施例1:诊断超敏C-反应蛋白
量子点标记蛋白检测液的制备:采用的羧基水溶性量子点为羧基水溶性核壳型量子点,量子点的发射波长范围是500nm-630nm,在激发光源辐射作用下能够发射不同波长的荧光,其荧光量子产率不低于45%。取浓度为8μM的羧基水溶性量子点250μL(2nmol)平衡至室温,并用超声波200W处理10秒,按照3μmol EDC/2nmol量子点的比例加入10mg/mL EDC(碳二亚胺盐酸盐)57.5μL,涡旋振荡混匀,再按照40nmol抗人C-反应蛋白单克隆抗体/2nmol量子点的比例加入10mg/mL抗体0.6mL,涡旋混匀。量子点、EDC、蛋白等均用20mM~200mM pH6.0~7.4磷酸盐溶液溶解,并在上述溶液体系中加入1.1mL磷酸盐溶液。室温搅拌反应1-4小时。反应结束后用截留分子量为50kDa的离心超滤管超滤除去没有反应的杂质并浓缩至20μL,通过装填有Superdex G200填料的凝胶分离柱进行纯化,收集有荧光的组分,再用离心超滤管浓缩至量子点浓度为1μmol/L。然后用PBS-TBN(磷酸盐缓冲液PB、含氯化钠NaCl、吐温Tween-20、牛血清白蛋白BSA、叠氮化钠NaN3)稀释100-1000倍,于2~8℃冰箱保存备用。
免疫层析试纸条的组装:如图1所示,以硝酸纤维素膜为反应膜,将反应膜5固定粘贴在PVC背衬2的中间部位,将与标记抗体中所用的抗体非同一表位的抗人C-反应蛋白单克隆抗体和羊抗鼠IgG抗体分别用包被缓冲调节浓度至1mg/mL和0.2mg/mL,,用划膜仪包被到反应膜5上对应的检测区3和控制区4,控制膜液量为1.0μL/cm,检测区3和控制区4之间间隔为5mm,放置25~37℃烘箱处理2小时。在上述PVC背衬上按照顺序互相搭接粘贴样品垫1(可为玻璃纤维垫)、反应膜(已粘贴)以及吸水垫6(可为普通吸水纸),得到试纸板,按照要求切割成3mm宽的试纸条,将试纸条装载于试纸卡内。
取400μL量子点标记蛋白检测液与30μL待检测样本充分混匀成量子点标记蛋白与样品混合物7,取75μL混合物7加入到试纸卡上的加样孔内,反应3-10min即可读取结果。
经过系列调试,超敏C-反应蛋白检测限最低可达0.1mg/L。
本实施例中量子点荧光免疫层析试纸条所用的量子点为羧基水溶性核壳型CdSe/ZnS量子点,其最大发射波长为605nm,在光源激发下发出明亮的橙红色荧光。
本实施例采用的双抗体夹心法可以用于超敏C-反应蛋白诊断,还适用于乙型肝炎表面抗原(HBSAg)、排卵(LH、促黄体生成素)、心肌肌钙蛋白(Tn-I,Tn-T)、肿瘤标志物(AFP、CEA、CA199、PSA、FOB)等采用双抗体(单克隆抗体-单克隆抗体或者单克隆抗体-多克隆抗体)夹心法模式的免疫层析检测。
实施例2:检测黄曲霉毒素M1
量子点标记蛋白检测液的制备:取浓度为8μM的羧基水溶性量子点250μL(2nmol)平衡至室温,并用超声波200W处理10秒,按照3μmolEDC/2nmol量子点的比例加入10mg/mL EDC(碳二亚胺盐酸盐)57.5μL,涡旋振荡混匀,再按照40nmol 抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体/2nmol量子点的比例加入10mg/mL抗体0.6mL,涡旋混匀。量子点、EDC、蛋白等均用20mM~200mM pH6.0~7.4磷酸盐溶液溶解,并在上述溶液体系中加入1.1mL磷酸盐溶液。室温搅拌反应1-4小时。反应结束后用截留分子量为50kDa的离心超滤管超滤除去没有反应的杂质并浓缩至20μL,通过装填有Superdex G200填料的凝胶分离柱进行纯化,收集有荧光的组分,再用离心超滤管浓缩至量子点浓度为1μmol/L,用PBS-TBN(磷酸盐缓冲液PB、含氯化钠NaCl、吐温Tween-20、牛血清白蛋白BSA、叠氮化钠NaN3)稀释100-1000倍,于2~8℃冰箱保存备用。
免疫层析试纸条的组装:如图1所示,将反应膜固定粘贴在PVC背衬的中间部位,分别将BSA-黄曲霉毒素M1复合物和羊抗鼠IgG抗体分别用包被缓冲调节浓度至0.1mg/mL和0.2mg/mL,用划膜仪包被到反应膜上对应的检测区和控制区,控制膜液量为1.0μL/cm,检测区和控制区之间间隔为5mm,放置25~37℃烘箱处理2小时。在上述PVC背衬上按照顺序互相搭接粘贴样品垫、反应膜(已粘贴)以及吸水纸,得到试纸板,按照要求切割成3mm宽的试纸条,将试纸条装载于试纸卡内。
取300μL量子点标记蛋白检测液与40μL待检测样本充分混匀成量子点标记蛋白与样品混合物7,取75μL混合物7加入到试纸卡上的加样孔内,反应3-10min即可读取结果。
经过系列调试,黄曲霉毒素M1的检测限最低可达0.2ng/mL。
所述量子点荧光免疫层析试纸条所用的量子点为羧基水溶性核壳型CdSe/ZnS量子点,其最大发射波长为605nm,在光源激发下发出明亮的橙红色荧光。
本实施例采用的双抗体夹心法可以用于食品安全残留物检测中的黄曲霉毒素M1的检测,还适用于黄曲霉毒素B1、克伦特罗、吗啡等采用免疫竞争法(单克隆抗体-抗原)模式的免疫层析检测。
实施例3:实现手足口病相关柯萨奇病毒A16和肠道病毒71型的联合检测
量子点标记蛋白检测液的制备:参考实施例1,分别用发射波长为525nm和605nm的绿色和橙红色量子点标记柯萨奇病毒A16(CA16)单克隆抗体和肠道病毒71型(EV71)单克隆抗体,用发射波长为565nm的黄色量子点标记鼠IgG,纯化后浓缩至1-2μM,将三种标记蛋白同等浓度混合,纯化后用PBS-TBN稀释100-1000倍,于2~8℃冰箱保存备用。
免疫层析试纸条的组装:如图2所示,将反应膜固定粘贴在PVC背衬的中间部位,分别将抗体和羊抗鼠IgG抗体分别用包被缓冲调节浓度至1mg/mL和0.2mg/mL,用划膜仪将柯萨奇病毒A16(CA16)单克隆抗体和肠道病毒71型(EV71)单克隆抗体包被到反应膜上对应的检测区A3-1和检测区B3-2,将羊抗鼠IgG抗体包被到控制区,控制膜液量为1.0μL/cm,检测区和控制区之间间隔为4mm,放置25~37℃烘箱处理2小时。在上述PVC背衬上按照顺序互相搭接粘贴样品垫、反应膜(已粘贴)以及吸水纸,得到试纸板,按照要求切割成4mm宽的试纸条,将试纸条装载于试纸卡内。经过系列调试,柯萨奇病毒A16和肠道病毒71型的检测限最低可达0.2ng/mL。
所述量子点荧光免疫层析试纸条所用的量子点为羧基水溶性核壳型CdSe/ZnS量子点,检测区对应的量子点的最大发射波长分别为525nm为605nm,在光源激发下发出明亮的绿色和橙红色荧光;控制区对应的量子点的最大发射波长为565nm,在光源激发下发出明亮的黄绿色荧光。
本实施例采用的双抗体夹心法可以用于同时诊断柯萨奇病毒A16和肠道病毒71型抗原,还适用于HIV-HBSAg、HBSAg-HCV等采用双抗体(单克隆抗体-单克隆抗体或者单克隆抗体-多克隆抗体)夹心法模式的免疫层析检测。

Claims (5)

1.一种用量子点荧光免疫层析试纸条检测的方法,其特征是至少采用如下步骤:(1).量子点标记蛋白液的制备:取浓度为1μM-10μM的0.2-2nmol羧基水溶性CdSe/ZnS量子点平衡至室温,并用超声波处理;将量子点、EDC、蛋白均用20mM~200mM、pH6.0~7.4的磷酸盐溶液或硼酸盐溶液溶解;按照1μmol~5μmolEDC/2nmol量子点的比例加入EDC,EDC即碳二亚胺盐酸盐,涡旋振荡混匀,再按1nmol~100nmol蛋白/1nmol量子点的比例加入浓度为1~10mg/mL的蛋白,涡旋混匀,室温搅拌反应1-4小时;反应结束后用截留分子量为10kDa-100kDa的离心超滤管超滤浓缩至20-100μL,然后采取凝胶尺寸排阻色谱法进行纯化,收集有荧光的部分,再用离心超滤管浓缩至量子点浓度为0.2-2μmol/L,保存于10mM-100mM、pH为7.4~9.0的、含有质量百分比浓度为0.05%的NaN3的硼酸盐缓冲液中,2~8℃冰箱保存备用;
(2).量子点标记蛋白检测液的制备:将上述量子点标记蛋白液取出放置至室温,用PBS-TBN稀释100-1000倍成量子点标记蛋白检测液,PBS-TBN为含20mM-150mM氯化钠NaCl、0.02%-0.1%吐温Tween-20、2mg/mL-10m/mL牛血清白蛋白BSA、0.05%叠氮化钠NaN3的10mM-100mM磷酸盐缓冲液PB,然后置于2~8℃冰箱保存备用;
(3).制备包被有检测指标的反应膜:检测指标为抗体或抗原,以硝酸纤维素膜为反应膜,将反应膜固定粘贴在PVC背衬的中间部位,将抗原或抗体用包被缓冲液调节浓度至0.1~5mg/mL,并将二抗IgG用包被缓冲也调节浓度至0.1~5mg/mL,按照0.8~1.2uL/cm的膜液量,将抗原或抗体,以及二抗IgG喷到反应膜上对应的检测区和控制区上进行包被,检测区和控制区之间间隔为3~7mm,放置25~37℃烘箱处理1-3小时,置于恒温恒湿保藏箱里备用,所用包被缓冲液为含有20mM-150mM氯化钠NaCl、0.05%-3%聚乙二醇PEG20000、0.2%-1%海藻糖、2mg/mL-10m/mL牛血清白蛋白BSA、0.05%叠氮化钠NaN3的10mM-100mM磷酸盐缓冲液PB;
(4).在上述PVC背衬上顺序粘贴样品垫、步骤(3)制得的反应膜以及吸水垫,得到试纸板,将试纸板切割成试纸条,将试纸条装载于试纸卡内,得量子点荧光免疫层析试纸条;
(5).定性或定量检测:取300uL-500μL量子点标记蛋白检测液与10μL-50μL待检测样本充分混匀后,取60μL-100μL混合液加入到试纸卡上的加样孔内,反应3-15min即可读取结果;
(5.1)定性检测或半定量检测:采用紫外灯照射加样反应后的反应膜区域,通过肉眼观察条带发光情况,如果体系为检测大分子物质的双抗夹心法,当检测线出现荧光信号时判定该指标为阳性;不出现荧光信号则为阴性;如果检测体系为检测小分子物质的竞争法,则结果相反,出现荧光信号的检测线报告为阴性,未出现荧光信号报告为阳性;无论采取哪种方法,如果控制线没有荧光信号则检测结果无效;
(5.2)定量检测:配备一系列不同浓度的待检分子标准溶液,然后利用荧光定量分析仪分别进行免疫层析检测,通过对每个峰面积对应浓度做标准曲线,再将待检未知样品进行同样处理,得到峰面积,根据标准曲线公式得知样品中待测分子含量。
2.根据权利要求1所述用量子点荧光免疫层析试纸条检测的方法,其特征是:所述量子点为羧基水溶性核壳型量子点,量子点的发射波长范围是500nm-630nm,在激发光源辐射作用下能够发射不同波长的荧光,其荧光量子产率不低于45%。
3.根据权利要求1所述用量子点荧光免疫层析试纸条检测的方法,其特征是:所述检测指标为抗原,则量子点标记蛋白检测液中的标记蛋白和反应膜检测区的包被抗体,应为相应检测指标对应的单克隆抗体。
4.根据权利要求1所述用量子点荧光免疫层析试纸条检测的方法,其特征是:所述检测指标为抗体,则其量子点标记蛋白检测液中的标记蛋白和反应膜检测区的包被抗原,应为相应检测指标对应的基因工程重组抗原。
5.根据权利要求1所述用量子点荧光免疫层析试纸条检测的方法,其特征是:所述样品垫为玻璃纤维垫,吸水垫为普通吸水纸。
CN201210546243.6A 2012-12-15 2012-12-15 一种用量子点荧光免疫层析试纸条检测的方法 Active CN103048460B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201210546243.6A CN103048460B (zh) 2012-12-15 2012-12-15 一种用量子点荧光免疫层析试纸条检测的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201210546243.6A CN103048460B (zh) 2012-12-15 2012-12-15 一种用量子点荧光免疫层析试纸条检测的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103048460A CN103048460A (zh) 2013-04-17
CN103048460B true CN103048460B (zh) 2015-01-21

Family

ID=48061174

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201210546243.6A Active CN103048460B (zh) 2012-12-15 2012-12-15 一种用量子点荧光免疫层析试纸条检测的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN103048460B (zh)

Families Citing this family (42)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103336122B (zh) * 2013-06-24 2016-01-20 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 一种血小板抗体检测的免疫荧光层析试纸条及检测方法
CN103364550A (zh) * 2013-07-16 2013-10-23 天津大学 用量子点标记的免疫层析试纸条快速定量检测肿瘤标志物的方法及装置
CN103389384B (zh) * 2013-07-19 2016-04-20 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 Miltenberger抗体检测试纸条及其检测方法
CN103487574B (zh) * 2013-10-16 2015-06-17 深圳市金准生物医学工程有限公司 一种量子点标记免疫球蛋白的方法
CN104714014B (zh) * 2013-12-16 2016-09-21 南昌大学 基于两种量子点之间能量转移的黄曲霉毒素b1检测方法
CN104007265B (zh) * 2014-05-30 2016-02-24 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 出血性大肠杆菌o157:h7量子点荧光免疫层析定量检测试纸条及其检测方法
CN105319359B (zh) * 2014-08-18 2017-02-08 董俊 人肺炎链球菌量子点免疫层析检测卡及其制备方法和应用
CN105242040B (zh) * 2014-08-18 2017-01-18 董俊 人流感嗜血杆菌量子点免疫层析检测卡及其制备方法和应用
CN104459106A (zh) * 2014-12-15 2015-03-25 天津中新科炬生物制药有限公司 一种量子点-抗体溶液及其制备方法与应用
CN104849452A (zh) * 2015-05-14 2015-08-19 深圳市伯劳特生物制品有限公司 一种pla2r抗体定量检测试纸条及制作、检测方法
CN104897906A (zh) * 2015-06-25 2015-09-09 浙江大学 双重定量蛋白毒素量子点荧光免疫层析试纸条及制备方法
CN104991063A (zh) * 2015-06-25 2015-10-21 天津大学 基于量子点的癌胚抗原免疫层析试纸条的制备方法
CN105044340A (zh) * 2015-07-02 2015-11-11 天津大学 一种基于量子点的前列腺特异抗原免疫层析试纸条的制备方法
CN105259354B (zh) * 2015-11-13 2017-05-10 夏晶 结核T细胞释放γ‑干扰素检测试剂盒及其使用方法
CN105527440A (zh) * 2015-12-31 2016-04-27 上海交通大学 一种免疫层析试纸条及其制备方法与应用
CN106198981A (zh) * 2016-06-30 2016-12-07 天津大学 一种基于量子点的ca199免疫层析试纸条的制备方法
CN106290832A (zh) * 2016-08-12 2017-01-04 上海铭源数康生物芯片有限公司 一种免疫侧向层析定量检测试剂及其制备方法、检测方法
CN106443021B (zh) * 2016-09-13 2018-09-25 天津科技大学 一种检测蛋白同化激素的量子点标记免疫层析试纸条及其制备方法
CN106596937A (zh) * 2016-11-03 2017-04-26 重庆高圣生物医药有限责任公司 一种同步检测胰腺癌标记物的量子点试剂盒
CN107247149A (zh) * 2017-05-23 2017-10-13 哈尔滨医科大学 一种户尘螨特异性IgE半定量检测试剂盒及其用途
CN107202883B (zh) * 2017-05-24 2019-06-04 徐成蔚 检测鸭坦布苏病毒的侧向流免疫层析测定产品及相关试剂与制备方法
CN109116028A (zh) * 2017-06-26 2019-01-01 刘宏飞 一种基于CdSe量子点为标记物的体外诊断试纸条的制备方法
CN109298182A (zh) * 2017-07-24 2019-02-01 北京健平九星生物医药科技有限公司 一种荧光免疫层析卡的制备方法及荧光免疫层析卡
CN108089009A (zh) * 2017-12-13 2018-05-29 福州大学 一种胎儿纤维连接蛋白荧光免疫层析试条及其制备方法
CN108226509A (zh) * 2017-12-15 2018-06-29 武汉市农业科学院 一种鼠伤寒沙门氏菌的荧光免疫层析检测方法及检测试纸
CN108387559B (zh) * 2018-01-15 2023-05-12 南方医科大学 一种表面活性剂临界胶束浓度试纸及其制备方法
CN108717054B (zh) * 2018-04-26 2020-11-27 河南省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 一种量子点标记抗体探针试纸条及其制备方法和应用
CN108918882B (zh) * 2018-05-17 2021-08-06 西安交通大学苏州研究院 一种基于量子点的超敏c反应蛋白免疫层析试纸条的制备方法
CN108918858B (zh) * 2018-05-17 2021-06-11 西安交通大学苏州研究院 一种量子点–抗体免疫复合物的制备方法
CN113341135A (zh) * 2018-07-30 2021-09-03 杭州莱和生物技术有限公司 一种荧光免疫检测毛发痕量毒品的试剂盒及其图像检测方法与系统
CN110045105B (zh) * 2018-11-09 2022-04-26 广州市妇女儿童医疗中心 柯萨奇A16病毒IgA抗体量子点免疫荧光层析试纸条及试剂盒
CN110470843A (zh) * 2019-01-30 2019-11-19 公安部第一研究所 用于毒品检测的量子点荧光免疫层析试纸条及其制备方法
CN110018145B (zh) * 2019-04-23 2022-01-25 吉林大学 一种腹泻性贝毒大田软海绵酸荧光检测试纸及其检测方法
CN110108870B (zh) * 2019-04-30 2022-11-04 中国农业科学院油料作物研究所 同步检测黄曲霉菌代谢物环匹阿尼酸和黄曲霉毒素混合污染的量子点荧光微球层析试剂盒
CN110376381A (zh) * 2019-07-25 2019-10-25 东南大学 一种碲化镉量子点在免疫试纸条上对志贺毒素检测中的应用
CN111289740A (zh) * 2019-08-08 2020-06-16 无锡市第二人民医院 一种量子点荧光免疫法测定全血hs-cTnI的方法
CN110441520A (zh) * 2019-09-05 2019-11-12 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 免疫层析检测系统、样本成像方法及样本图像的分析方法
CN111912984B (zh) * 2020-08-12 2024-04-05 江苏省农业科学院 一种检测非洲猪瘟病毒CD2v与MGF360黏膜抗体的试纸条及其应用
CN111781363A (zh) * 2020-08-12 2020-10-16 江苏省农业科学院 一种检测非洲猪瘟病毒黏膜sIgA抗体的量子点微球免疫层析试纸条及其应用
CN111929438B (zh) * 2020-08-12 2024-04-05 南京农业大学 一种检测非洲猪瘟病毒抗体的量子点微球免疫层析试纸条及其应用
CN113156112A (zh) * 2021-04-25 2021-07-23 渤海大学 同时检测四种硝基呋喃类代谢物的荧光免疫层析试剂盒及其制备方法和应用
CN116047057A (zh) * 2022-10-25 2023-05-02 江苏省农业科学院 量子点银沉积双信号检测试剂盒及其制备方法和应用

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1314952C (zh) * 2004-11-23 2007-05-09 中国检验检疫科学研究院 用于固相膜免疫分析方法流动相的样本处理制剂
US20060257958A1 (en) * 2005-05-13 2006-11-16 Pronucleotein Biotechnologies, Llc Magnetically-assisted test strip cartridge and method for using same
CN1811449A (zh) * 2006-02-23 2006-08-02 上海交通大学 量子点标记快速免疫层析试纸条的检测方法
AT504919B1 (de) * 2007-02-15 2008-09-15 Nanoident Technologies Ag Durchlichtmessvorrichtung
CN101846678A (zh) * 2009-03-26 2010-09-29 益思美诠生物科技(上海)有限公司 适用于多种样品的快速免疫层析试剂条测试法
EP2433137B1 (en) * 2009-05-18 2015-07-29 Washington University Methods of renal cancer detection
CN101893623B (zh) * 2010-06-22 2014-09-24 上海师范大学 超灵敏量子点微球免疫层析试纸条快速检测方法
CN102539751A (zh) * 2010-12-09 2012-07-04 苏州生物医学工程技术研究所 一种免疫荧光试纸条及其定量检测方法
CN102539785B (zh) * 2011-12-29 2014-12-24 深圳康美生物科技股份有限公司 一种全程定量检测c-反应蛋白的荧光免疫层析方法及其试剂盒
CN102520165B (zh) * 2011-12-29 2014-07-30 北京康美天鸿生物科技有限公司 一种量子点荧光免疫层析高灵敏定量检测的方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN103048460A (zh) 2013-04-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103048460B (zh) 一种用量子点荧光免疫层析试纸条检测的方法
CN106872420B (zh) 一种时间分辨荧光定量检测尿微量白蛋白的试剂盒及方法
CN105259158B (zh) 一种表面增强拉曼散射免疫层析试纸条及制备方法与应用
AU2016267091B2 (en) Use of fluorescence for the quick and easy determination of S-Adenosylmethionine, S-Adenosylhomocysteine and Homocysteine
CN102890155B (zh) 基于能量共振转移的荧光试纸条及制备方法与应用
CN103443626B (zh) 链霉亲和素结合磁性粒子及其制造方法
CN111334282B (zh) Pth稀土检测试剂盒及检测卡及其微球及制备与检测方法
CN110632297A (zh) 一种免疫检测试剂盒及其测定方法和制备方法
JP7451431B2 (ja) 側方流動アッセイのシグナルを増幅させるシステム、装置および方法
CN1675545A (zh) 采用时间分辨荧光的基于膜的检测
GB2522262A (en) Test strip and a preparation method of the test strip for upconversion of fluorescence chromatography of a type of bisphenol A
CN102967706A (zh) 检测肿瘤标志物流动注射化学发光免疫传感器的制备及应用
CN106680496A (zh) 一种比色荧光双信号纳米球的制备及其在免疫层析定量检测中的应用
KR101597413B1 (ko) 효소 모방 무기 나노입자를 이용한 고감도 측면유동 면역 발색칩 및 이를 이용한 검출 방법
KR101718485B1 (ko) 면역크로마토그래피의 형광반응 또는 유색반응을 측정하기 위한 디바이스
CN110702893A (zh) 一种aie免疫层析试纸
CN106596937A (zh) 一种同步检测胰腺癌标记物的量子点试剂盒
US20190361029A1 (en) Preparation of visible colored insoluble carrier particles labeled with a fluorescent dye and an immunoassay method using the same
Cai et al. Lateral flow immunoassay based on gold magnetic nanoparticles for the protein quantitative detection: Prostate-specific antigen
WO2019088142A1 (ja) バイオアッセイのための検出剤及びそれを用いたシグナルの増幅方法
Zhang et al. Second near-infrared fluorescent dye for lateral flow immunoassays rapid detection of influenza A/B virus
US20160341723A1 (en) Au nanoparticles encapsulated in nanocompoites and applications thereof in rapid detection of an analyte
CN113980682A (zh) 一种近红外发光Yb和Tm共掺杂核壳壳结构纳米晶的制备及其在免疫层析检测中的应用
Zeng et al. Quantitative immunochromatographic strip biosensor for the detection of carcinoembryonic antigen tumor biomarker in human plasma
Cao et al. An integrated electrochemical immunochromatographic test strip based on the amplification of gold nanoparticles for quantitative detection of alpha-fetoprotein

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant