CN102625808A - 螺环酰胺衍生物 - Google Patents

螺环酰胺衍生物 Download PDF

Info

Publication number
CN102625808A
CN102625808A CN2010800438228A CN201080043822A CN102625808A CN 102625808 A CN102625808 A CN 102625808A CN 2010800438228 A CN2010800438228 A CN 2010800438228A CN 201080043822 A CN201080043822 A CN 201080043822A CN 102625808 A CN102625808 A CN 102625808A
Authority
CN
China
Prior art keywords
alkyl
compound
formula
halogen
group
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN2010800438228A
Other languages
English (en)
Other versions
CN102625808B (zh
Inventor
L.阿尔卡拉兹
A.贝利
N.金顿
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Pulmagen Therapeutics Synergy Ltd
AstraZeneca AB
Original Assignee
Pulmagen Therapeutics Synergy Ltd
AstraZeneca AB
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=41129405&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CN102625808(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Pulmagen Therapeutics Synergy Ltd, AstraZeneca AB filed Critical Pulmagen Therapeutics Synergy Ltd
Publication of CN102625808A publication Critical patent/CN102625808A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102625808B publication Critical patent/CN102625808B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/10—Spiro-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5386—1,4-Oxazines, e.g. morpholine spiro-condensed or forming part of bridged ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/08—Bronchodilators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00
    • C07D519/04—Dimeric indole alkaloids, e.g. vincaleucoblastine

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)

Abstract

本发明涉及式(I)的螺环酰胺衍生物、它们的制备方法、含有它们的药物组合物、制备所述药物组合物的方法、它们在治疗中的用途及用于制备它们的中间体，其中ArCH2CH2NH-表示β-肾上腺素受体结合基团。

Description

螺环酰胺衍生物
技术领域
本发明涉及螺环酰胺衍生物、其制备方法、含有所述螺环酰胺衍生物的药物组合物、制备所述药物组合物的方法、所述螺环酰胺衍生物在治疗中的用途和用于制备所述螺环酰胺衍生物的中间体。
背景技术
针对多种肺部障碍包括慢性阻塞性肺病(COPD)和哮喘的一线治疗通过使用支气管扩张药来实现。毒蕈碱性受体拮抗剂(抗胆碱能药)为通过降低迷走神经胆碱能水平(即COPD中气道收缩的主要可逆组成)来发挥其效力的支气管扩张药。β-肾上腺素受体激动剂由于其能够功能性地拮抗支气管收缩药对多种介质(包括乙酰胆碱)的应答而也是支气管扩张药。
除改善肺功能外，这些药物还改善呼吸困难(气促)、生活质量和运动耐量且减少恶化。多项临床研究已显示，抗胆碱能药和β2-受体激动剂的联用比相应组分中的任何一种都有效(van Noord，J.A.，Aumann，J-L.，Janssens，E.，Smeets，J.J.，Verhaert，J.，Disse，B.，Mueller，A.&Cornelissen，P.J.G.，2005.“Comparison of tiotropium once daily，formoterol twice daily and both combinedonce daily in patients with COPD”，Eur.Respir.J.，vol 26，pp 214-222)。对毒蕈碱性受体和β2-受体都具有活性的单一分子(MABA)就效力和副作用分布而言可向COPD患者提供好于其它单一药物的额外益处。另外，具有双重活性的分子就使用难易性和患者依从性而言也可提供好于不同疗法共给药的益处。与两种分开的化合物相比，单一药物就制剂而言也可以是有益的，这也在与另一种疗法联用的情况下提供用于三重作用疗法的潜力。
发明内容
本发明第一个方面提供式I的化合物及其药用盐：
Figure BDA0000148749790000021
其中
ArCH2CH2NH-表示β-肾上腺素受体结合基团；
R2、R3、R4、R5、R4’和R5’各自独立为氢或C1-6烷基；
k为0或1；
R6为C1-8烷基，其任选被选自以下的至多3个取代基取代：卤素、C1-6烷基(任选被至多3个卤素原子取代)、OR10、C1-6烷基S(O)0-2、NR8R9、OC(O)(C1-6烷基)和C3-8环烷基(其中一个或两个碳原子可被O、S或N代替)，所述C3-8环烷基任选被独立选自以下的至多3个取代基取代：卤素、C1-6烷基(任选被至多3个卤素原子取代)、OR10、C1-6烷基S(O)0-2、NR8R9和OC(O)(C1-6烷基)；或
R6为被任选取代的芳基或任选取代的杂芳基取代的C1-8烷基；或
R6为C3-9环烷基(其中一个或两个环碳原子可被O、S或N代替)且任选被独立选自以下的至多3个取代基取代：卤素、C1-6烷基(任选被至多3个卤素原子取代和/或其中两个烷基可形成含有至多9个环原子的环)、OR10、C1-6烷基S(O)0-2、NR8R9、OC(O)(C1-6烷基)和任选取代的芳基或任选取代的杂芳基；或
R6为C7-9二环烷基，其任选被独立选自以下的至多3个取代基取代：卤素、C1-6烷基、OR10和C1-6烷基S(O)0-2；或
R6为含有独立选自N、O和S的至多两个杂原子的5或6元芳族或非芳族杂环基；
R8和R9独立为氢或C1-6烷基，或R8和R9可连接在一起以形成包含至多9个环原子(任选含有选自O、N或S的额外杂原子)的杂环基环，其中所述环可任选被独立选自以下的至多三个取代基取代：卤素、羟基、C1-6烷基或C3-6环烷基，且其中烷基和环烷基可任选被独立选自以下的至多三个取代基取代：卤素、羟基和C1-6烷氧基；
R10表示氢、C1-6烷基或C3-6环烷基，其中烷基和环烷基可任选被独立选自以下的至多三个取代基取代：卤素、羟基和C1-6烷氧基；
A为C(O)或S(O)2；
B为任选被至多两个C1-3烷基取代的C1-4亚烷基；
Q为氧、硫或NR7；
R7为氢或C1-6烷基；
L表示含有至多9个碳原子的直链或支链烃链；
其中所述链中的至多三个碳原子任选被独立选自以下的基团取代一次或两次：卤素、S(O)0-2R10、NR8R9、S(O)2NR8R9、C(O)NR8R9、C(O)OR10、NR10S(O)2R11、NR10C(O)R10、NR10C(O)OR11、NR10C(O)NR8R9、OR10、C1-6烷基和C3-6环烷基，且其中烷基和环烷基可任选被独立选自以下的至多三个取代基取代：卤素、羟基和C1-6烷氧基；
其中所述链中的至多三个碳原子可被独立选自以下的基团代替：O、NR10、S、S(O)、S(O)2、C(O)O、OC(O)、NR10C(O)、C(O)NR10、NR10S(O)2、S(O)2NR10、NR10C(O)NR10、NR10S(O)2NR10、OC(O)NR10和NR10C(O)O，条件是所述链中的任何上述基团被至少两个链碳原子隔开；和
其中所述链中的至多六个碳原子可形成芳基环、杂芳基环、稠合二环、脂族环或脂族杂环中的一部分，所述环具有独立选自N、O或S的至多四个杂原子，所述环包含至多10个环原子，且其中所述环任选被独立选自以下的至多三个取代基取代：卤素、S(O)0-2R10、NR8R9、S(O)2NR8R9、C(O)NR8R9、C(O)OR10、NR10S(O)2R11、NR10C(O)R10、NR10C(O)OR11、NR10C(O)NR8R9、OR10、C1-6烷基和C3-6环烷基，且其中烷基和环烷基可任选被独立选自以下的至多三个取代基取代：卤素、羟基和C1-6烷氧基；和
所述链可包含至多两个各自独立选择的上述环；
R11表示C1-6烷基或C3-6环烷基，其中所述C1-6烷基和C3-6环烷基可任选被独立选自以下的至多三个取代基取代：卤素、羟基或C1-6烷氧基；和
其中所述链还可包含至多三个碳-碳双键；和
其中所述链还可包含至多三个碳-碳叁键；
L1和L2独立表示氢、C1-6烷基或C3-6环烷基；
h为0或1；
L3和L4独立表示氢、C1-6烷基或C3-6环烷基；
R1选自：
(1)任选取代的3-8元环基，所述环基为芳族的或为完全或部分饱和的，且其中至多四个环原子可被独立选自N、O和S的杂原子代替。上述环基的实例包括苯基、噻唑基、噻吩基、异噁唑基、呋喃基、环己-3-烯基、环己基或环庚基；
(ii)含有至多10个原子的任选取代的稠合二环系统，所述二环系统为芳族的或为完全或部分饱和的，且其中至多四个环原子可被独立选自N、O和S的杂原子代替。上述二环系统的实例包括苯并[b]噻吩基、苯并呋喃基、苯并[d]咪唑基、喹喔啉基、吡唑并[1，5-a]嘧啶基、吡唑并[1，5-a]吡啶基、二氢苯并[b][1，4]二氧杂环己二烯基、4，5，6，7-四氢-2H-吲唑基或苯并[d][1，3]二氧杂环戊烯基；
(iii)任选取代的C1-6烷基，其中一个或两个碳原子可被O、S或N代替，且其中所述烷基可被独立选自上述(i)和(ii)的环系取代一次或两次，且其中所述C1-6烷基链可被选自以下的至多五个取代基取代：卤素、氰基、S(O)0-2R10、NR8R9、S(O)2NR8R9、C(O)NR8R9、C(O)OR10、NR10S(O)2R11、NR10C(O)R10、NR10C(O)OR11、NR10C(O)NR8R9、OR10、C1-6烷基和C3-6环烷基(其中两个C1-3烷基链可连接成含有至多八个环原子的任选取代的环烷基环)，
且其中对于上述(i)、(ii)和(iii)中的任何环，“任选取代”表示任选被独立选自以下的至多四个取代基取代：卤素、氰基、硝基、SH、S(O)0-2R10、NR8R9、S(O)2NR8R9、C(O)NR8R9、C(O)OR10、NR10S(O)2R11、NR10C(O)R10、NR10C(O)OR11、NR10C(O)NR8R9、OR10、C1-6烷基或C3-6环烷基(其中烷基或环烷基中的碳原子可任选被N、O或S代替，且烷基或环烷基可任选被选自以下的至多五个取代基取代：C1-6烷基、卤素、氰基、SH、S(O)0-2R10、NR8R9、S(O)2NR8R9、C(O)NR8R9、C(O)OR10、NR10S(O)2R11、NR10C(O)R10、NR10C(O)OR11、NR10C(O)NR8R9和OR10)，
且其中(i)和(iii)中的饱和环系也可被至多三个C1-6烷基取代，所述至多三个C1-6烷基可连接成任选被卤素或OR10取代的桥环结构。这些环系的实例包括金刚烷基和二环[2.2.1]庚基；
X表示O、S(O)0-2或CR12R13；
m＝0、1、2或3；
n＝1、2、3或4；条件是m+n大于或等于2；
W表示CR12R13-CR12R13或CR12R13-CR12R13-CR12R13；
V和Z独立表示键、CR12R13或CR12R13-CR12R13，条件是当X表示O或S(O)0-2时，m、V和Z是这样的：环中的所有杂原子被至少两个碳原子隔开；
Y表示C(O)、C(O)NR10、SO2或SO2NR10；
R12和R13各自独立表示氢、氟、C1-6烷基或C3-6环烷基；或
R12和R13，当与同一碳原子连接时，与它们所共同连接的碳原子一起还可形成3至6元脂族环。
具体实施方式
“β-肾上腺素受体结合基团”是指能够与β-肾上腺素能受体结合的基团；诸如参见综述文章“β-adrenergic receptors in Comprehensive MedicinalChemistry，1990，B.E Main，p187(Pergamon Press)”。上述基团也参见例如WO/2005092841、US/20050215542、WO/2005070872、WO/2006023460、WO/2006051373、WO/2006087315和WO/2006032627。也参见WO2007018461、WO 2008075025、WO2008075026和WO2008096119。
β-肾上腺素受体结合基团中合适的Ar基团的实例包括：
M1为S、C(O)、NA5、CA6A7、CH2CH2、CH＝CH、CH2O或OCH2；
M2为S、C(O)、NA5、CA6A7、CH2CH2、CH＝CH、CH2O或OCH2；
A1、A2、A3和A4独立为氢、卤素、三氟甲基、氰基、羧基、羟基、硝基、S(O)2A8、NA9S(O)2A10、C(O)NA11A12、NA13C(O)A14、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C(O)(C1-6烷基)或C(O)OC1-6烷基；
A3也可为CH2OH、NHCHO、NHC(O)OC1-6烷基、NHS(O)2NA15A16或NHSO2A17；
A1A和A2A独立为氢、卤素、三氟甲基、氰基、羧基、羟基、硝基、S(O)2A8、NA9S(O)2A10、C(O)NA11A12、NA13C(O)A14、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C(O)(C1-6烷基)或C(O)OC1-6烷基；
A5、A6、A7、A9、A11、A12、A13和A14独立为氢或C1-6烷基；
A15和A16独立为氢、C1-6烷基或C3-6环烷基；
A8、A10和A17独立为C1-6烷基或C3-6环烷基；和
*定义了Ar与分子中其余部分的连接点。
适当地，Ar基团选自：
Figure BDA0000148749790000061
其中
M1为S、CH＝CH、CH2O或OCH2；
M2为S、CH＝CH、CH2O或OCH2；
A1、A2和A4独立为氢、卤素、C1-6烷基或C1-6烷氧基；
A3可为CH2OH、NHCHO、NHS(O)2NA15A16或NHS(O)2A17；
A1A和A2A独立为氢、卤素、三氟甲基、氰基、羧基、羟基、硝基、S(O)2A8、NA9S(O)2A10、C(O)NA11A12、NA13C(O)A14、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C(O)(C1-6烷基)或C(O)OC1-6烷基；
A15和A16独立选自氢、C1-6烷基或C3-6环烷基；
A17为C1-6烷基或C3-6环烷基。
C1-6烷基的实例包括C1-4烷基和C1-2烷基。C3-6环烷基的实例包括C3-5环烷基和C3-4环烷基。C1-6烷氧基的实例包括C1-4烷氧基和C1-2烷氧基。
适当地，Ar基团选自：
Figure BDA0000148749790000062
其中A1、A2和A4均为氢，A3为CH2OH或NHCHO，A1A和A2A为氢，M1为S、CH＝CH或OCH2，且M2为S、CH＝CH或OCH2。
适当地，Ar基团选自：
Figure BDA0000148749790000071
R2、R3、R4、R5、R4’和R5’各自独立为氢或C1-6烷基；
适当地，R2、R3、R4、R5、R4’和R5’各自为氢或甲基；
更适当地，R2、R3、R4、R5、R4’和R5’各自为氢。
基团R 6
适当地，R6为C1-8烷基，其任选被C1-8环烷基取代和任选被选自以下的至多3个取代基取代：卤素、羟基、C1-6烷基或C1-6烷氧基；更适当地，R6为任选被至多两个C1-6烷基取代的C1-8烷基；
适当地，R6为C3-9环烷基；更适当地，R6为环戊基或环己基或环庚基。
基团Q和A
A为C(O)或S(O)2；适当地，A为C(O)；
B为任选被至多两个C1-3烷基取代的C1-4亚烷基；适当地，B为亚乙基；
Q为氧、硫或NR7；适当地，Q为氧。
整数h和k
h为0至1的整数；适当地，h为1；
k为0或1；适当地，k为0。
基团：
Figure BDA0000148749790000072
适当地，L1和L2独立表示氢，
适当地，L3和L4独立表示氢，
适当地，基团-L-由式(II)的基团表示：
Figure BDA0000148749790000081
其中L5与C(L1)(L2)连接，且L6与C(L3)(L4)连接；和
其中环D表示苯环、噻吩环、呋喃环或噻唑环；
R100、R101和R102各自独立选自氢、卤素(例如氟或氯)、C1-4烷基、C1-4烷氧基和CF3；
L5表示任选被至多2个甲基取代的C1-4亚烷基；或
L5表示-(CH2)qQ1(CH2)t-，其中Q1为氧或硫，t为0、1或2，且q为1或2；
G表示键、氧、CR10R10或S；
当G表示氧或S时，L6为任选被至多两个甲基取代的C1-2亚烷基；
当G表示键或CR10R10时，L6为键或任选被至多两个甲基取代的C1-2亚烷基；
L5和G可被3、4或5个键隔开；
适当地，L5和G可被4或5个键隔开；
适当地，基团-L-选自：
-CH2(苯-1，4-亚基)-；
-CH2(苯-1，3-亚基)-；
-CH2(苯-1，4-亚基)CH2-；
-CH2(苯-1，3-亚基)CH2-；
-CH2(苯-1，3-亚基)OCH2-；
-CH2(苯-1，4-亚基)OCH2-；
-CH2(苯-1，3-亚基)OCH2CH2-；
-CH2(苯-1，4-亚基)OCH2CH2-；
-CH2CH2(苯-1，3-亚基)-；
-CH2CH2(苯-1，4-亚基)-；
-CH2CH2CH2(苯-1，3-亚基)-；
-CH2CH2CH2(苯-1，4-亚基)-；
-CH2OCH2(苯-1，3-亚基)-；
-CH2OCH2(苯-1，4-亚基)-；
-CH2CH2O(苯-1，3-亚基)-；
-CH2CH2O(苯-1，4-亚基)-；
-CH2O(苯-1，3-亚基)-；
-CH2O(苯-1，4-亚基)-；
-CH2CH2S(苯-1，3-亚基)-；
-CH2CH2S(苯-1，4-亚基)-；
-CH2S(苯-1，3-亚基)-；
-CH2S(苯-1，4-亚基)-；
-CH2(噻吩-3，5-亚基)-；
-CH2(噻吩-2，4-亚基)-；
-CH2(噻吩-2，5-亚基)-；
-CH2(噻吩-3，5-亚基)CH2-；
-CH2(噻吩-2，5-亚基)CH2-；
-CH2(噻吩-2，4-亚基)CH2-；
其中在每种情况下，亚苯基任选被Cl、F、C1-3烷基或C1-3烷氧基中的3、2或1个(独立选择)取代；
适当地，-L-选自：
-CH2(苯-1，3-亚基)-；
-CH2(苯-1，4-亚基)CH2-；
-CH2(苯-1，3-亚基)CH2-；
-CH2(噻吩-3，5-亚基)CH2-；
-CH2(噻吩-2，5-亚基)CH2-；
-CH2(噻吩-2，4-亚基)CH2-；
其中在每种情况下，亚苯基任选被Cl、F、C1-3烷基或C1-3烷氧基中的3、2或1个(独立选择)取代；
基团R 1
适当地，R1表示：
(i)苯基环或5或6元杂芳基环；
(ii)稠合二环；
(iii)适当地，R1也可表示任选取代的C1-6烷基，其中一个或两个碳原子可被O、S或N代替，且其中所述烷基可被(i)和(ii)中描述的环系取代，
且适当的C1-6烷基为亚甲基、亚乙基或亚丙基；
其中(i)、(ii)和(iii)中的每个环任选被独立选自以下的至多三个取代基取代：卤素、氰基、OR10、C1-6烷基或C3-8环烷基(其中烷基和环烷基各自任选被至多三个卤素原子取代)，且(i)、(ii)和(iii)中的每个苯基环任选被独立选自以下的至多三个取代基取代：卤素、氰基、OR10、C1-6烷基或C3-6环烷基(其中烷基和环烷基可任选被独立选自以下的至多三个取代基取代：卤素、羟基、C1-6烷氧基、氰基和NH2)。
适当地，R1选自噻吩基、噻唑基、苯并呋喃基或吡唑并[1，5-a]吡啶基，其各自任选被一个或两个取代基取代。适当地，任选的取代基中的一个选自H、Cl、F和C1-3烷基。其它任选的取代基选自甲基、乙基、丙基、正丁基、CF3、CH2CF3、CH(CH3)2、CH(CH2CH3)2、CH(CH3)CH2CH3、CH2CH(CH3)2、C(CH3)3、环丙基、环丁基和环戊基；
适当地，R1选自：
Figure BDA0000148749790000101
其中箭头标明与基团Y的连接点，且R选自甲基、乙基、丙基、正丁基、CF3、CH2CF3、CH(CH3)2、CH(CH2CH3)2、CH(CH3)CH2CH3、CH2CH(CH3)2、C(CH3)3、环丙基、环丁基和环戊基；
基团Y和基团：
Figure BDA0000148749790000102
适当地，Y表示C(O)；
适当地，
X表示O或S；
m＝1或2；
n＝1或2；
W表示CR12R13CR12R13或CR12R13CR12R13CR12R13；
V和Z独立表示键或CR12R13；
V和Z是这样的：环中的所有杂原子被至少两个碳原子隔开(例如当V为键时，Z为CR12R13)；
Y表示C(O)、C(O)NR10、SO2或SO2NR10；
适当地，
(i)m和n＝2，V＝键，Z＝CH2，X＝O，且W＝CH2CH2；
(ii)m和n＝2，V＝键，Z＝CH2，X＝O，且W＝CF2CH2；
(iii)m和n＝1，V＝键，Z＝CH2，X＝O，且W＝CH2CH2；
(iv)m和n＝2，V＝键，Z＝CH2CH2，X＝O，且W＝CH2CH2；
适当地，所述螺环选自上述(i)、(ii)或(iii)。
适当地，所述螺环为(i)。
本发明示例说明的每种化合物或它们的任何适当组合都表示本发明具体和独立的方面。
应该理解的是，本发明某些化合物可按溶剂化形式(例如水合形式)及非溶剂化形式存在。应该理解的是，本发明涵盖所有上述溶剂化形式。某些式(I)的化合物能够以立体异构形式存在。应该理解的是，本发明涵盖式(I)的化合物的所有几何异构体和光学异构体及它们的混合物(包括外消旋体)。互变异构体及其混合物也形成本发明一个方面。
也应该理解的是，本发明涵盖任何季碳(更具体为存在于螺环系统中的季碳)被硅原子代替的情况，例如参见“Silicon switches of Marketed Drugs：Mini-reviews in Med.Chem.”，2006，6，1169-1177。
定义
除非另有说明：
术语’杂芳基’表示含有至多7个原子(适当为5或6个原子)的具有选自N、O和S的至多三个杂原子的芳族环系。上述杂芳基环的实例包括噻唑基、噻吩基、异噁唑基、呋喃基、异噁唑基、异噻唑基、噁唑基、噁二唑基、吡嗪基、哒嗪基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、四唑基、1，3，4-噻二唑基、噻唑基、噻吩基、三唑基等。杂芳基可通过任何可用的碳原子或氮原子来连接。
术语’稠合二环’表示含有至多12个原子的环系，其中2个环稠合在一起。所述系统可任选含有选自N、S和O的至多4个杂原子。所述环可独立为芳族、部分饱和或完全饱和的。上述稠合二环系统的实例包括苯并[b]噻吩基、苯并呋喃基、苯并[d]咪唑基、喹喔啉基、吡唑并[1，5-a]嘧啶基、吡唑并[1，5-a]吡啶基、二氢苯并[b][1，4]二氧杂环己二烯基、4，5，6，7-四氢-2H-吲唑基、苯并[d][1，3]二氧杂环戊烯基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、萘基、茚满基、1，2，3，4-四氢萘基、1，2，3，4-四氢喹啉基、5，6，7，8-四氢喹啉基等。所述环系可通过任何适当的氮原子或碳原子来与分子中的其余部分连接。
术语’芳基’表示芳族碳环。实例为苯基、萘基等。
术语’脂族环’表示具有碳环结构的基团，所述碳环结构可为饱和或不饱和的，但不可为苯型或其它芳族系统。
术语’脂族基团’表示非芳族基团。
术语’脂族杂环’表示完全或部分饱和但不为芳族的杂环。所述环具有至多10个原子，其中具有选自N、O或S的至多4个杂原子。实例为哌啶、吗啉、四氢呋喃、吡咯烷等。
基团’芳基’、’杂芳基’、’稠合二环’、’脂族环’和’脂族杂环’可被选自以下的一个或多个取代基取代：C1-6烷基、C3-6环烷基、卤素、氰基、硝基、SH、S(O)0-2R10、NR8R9、S(O)2NR8R9、C(O)NR8R9、C(O)OR10、NR10S(O)2R11、NR10C(O)R10、NR10C(O)OR11、NR10C(O)NR8N9和OR10。
除非另有说明，在本说明书上下文中，烷基和部分可为直链或支链，且包括例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基或叔丁基。环烷基为单环，例如环戊基或环己基。卤素为例如氟、氯或溴。
在本说明书上下文中，当描述基团可任选取代有至多3个取代基时，所述基团可以是未取代或取代的；当取代时，所述基团通常将取代有1、2或3个取代基。通常，羟基不将与以下碳原子连接，所述碳原子与氮原子、另一个氧原子或硫原子相邻。
本发明还提供制备上述式(I)的化合物或其药用盐的方法，所述方法包括：
(i)当R3为氢时，使式(III)的化合物或其适当的盐(其中R2、R4、R5、R4’、R5’、R6、A、B、k、h、Q、L、L1、L2、L3、L4、R1、m、n、V、W、X、Y和Z如式(I)中所定义)与式(T)的化合物或其适当的盐(其中Ar如式(I)中所定义)在适当的还原剂(例如氰基硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠或在适当的钯/炭或氧化铂催化剂存在下的氢气)存在下在适当的溶剂(诸如甲醇或NMP)中反应：
当R3为氢时，式(III)的化合物可在适当的反应条件(诸如对甲苯磺酸)下在适当的溶剂(诸如四氢呋喃或二氯甲烷)中由式(IV)的化合物来制备，其中R200为烷基，且R2、R4、R5、R4’、R5’、R6、A、B、k、Q、h、L、L1、L2、L3、L4、R1、m、n、V、W、X、Y和Z如式(I)中所定义：
Figure BDA0000148749790000132
另外，当R3为氢时，式(III)的化合物可使用适当的氧化剂(例如戴斯-马丁高碘剂(Dess-Martin periodinane)、斯韦恩(Swern)试剂或氯铬酸吡啶)在适当的溶剂(例如二氯甲烷)中由式(V)的化合物来制备，其中R2、R4、R5、R4’、R5’、R6、A、B、k、h、Q、L、L1、L2、L3、L4、R1、m、n、V、W、X、Y和Z如式(I)中所定义：
Figure BDA0000148749790000133
当R2和R3均为氢时，式(V)的化合物可使用适当的还原剂(例如甲硼烷或甲硼烷-二甲基硫醚复合物)在适当的溶剂(诸如四氢呋喃)中在例如-5℃至70℃的适当温度由式(VI)的化合物来制备，其中R201为氢、烷基或苄基，且R4、R5、R4’、R5’、R6、A、B、k、h、Q、L、L1、L2、L3、L4、R1、m、n、V、W、X、Y和Z如式(I)中所定义：
Figure BDA0000148749790000141
或
(ii)使式(VII)的化合物(其中LG1为适当的离去基诸如卤素、对甲苯磺酸酯基或甲磺酸酯基，R2为氢，且R3、R4、R5、R4’、R5’、R6、A、B、k、h、Q、L、L1、L2、L3、L4、R1、m、n、V、W、X、Y和Z如式(I)中所定义)与式(T)的化合物在适当的溶剂(诸如MeCN或NMP)中在室温至90℃的温度在适当的碱(例如三乙胺、许尼希碱(Hunig’s base)、碳酸铯或碳酸钾)存在下反应：
式(VII)的化合物可使用适当的反应条件由化合物(V)来制备(例如当LG1为OTs或OMs时，反应条件如下：TsCl或MsCl，适当的碱(例如三乙胺、许尼希碱、碳酸铯或碳酸钾)，在适当的溶剂(诸如二氯甲烷或NMP)中；当LG1为溴时，反应条件如下：CBr4和PPh3，在适当的溶剂(诸如二氯甲烷)中)；或
(iii)使式(IX)的化合物(其中R2、R3、R4、R5、R4’、R5’、R6、A、B、k、h、Q、L、L1、L2、L3、L4、R1、m、n、V、W、X、Y和Z如式(I)中所定义)与式(VIII)的化合物(其中Ar如式(I)中所定义)在适当的还原剂(例如氰基硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠或在适当的钯/炭或氧化铂催化剂存在下的氢气)存在下在适当的溶剂(诸如甲醇或NMP)中反应：
Figure BDA0000148749790000143
或
(iv)使式(X)的化合物(其中LG2为适当的离去基诸如卤素、对甲苯磺酸酯基或甲磺酸酯基)与式(IX)的化合物(其中R2、R3、R4、R5、R4’、R5’、R6、A、B、k、h、Q、L、L1、L2、L3、L4、R1、m、n、V、W、X、Y和Z如式(I)中所定义)在适当的碱(诸如三乙胺、许尼希碱、碳酸铯或碳酸钾)存在下在适当的溶剂(诸如MeCN或NMP)中在室温至90℃的温度反应：
Figure BDA0000148749790000151
或
(v)当A为C(O)时，使式(XI)的化合物(其中PG1为适当的氮保护基(例如氨基甲酸叔丁酯基或3-硝基苯基磺酰基)，且Ar、R2、R3、R4、R5、R4’、R5’、R6和k如式(I)中所定义)与式(XII)的化合物(其中LG10表示羟基或离去基(例如氯)，且B、h、Q、L、L1、L2、L3、L4、R1、m、n、V、W、X、Y和Z如式(I)中所定义)反应，然后除去保护基(例如用盐酸、三氟乙酸、苯硫酚或硫代乙酸处理)来制备；
当LG10表示羟基时，所述反应适当地在活化剂(例如羰基二咪唑、丙烷-1-膦酸环酐(1-propanephosphonic acid cyclic anhydride，T3P)或O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HATU))存在下在有机溶剂(例如N，N-二甲基甲酰胺或二氯甲烷)中任选在碱(例如三乙胺)存在下在例如范围为0至60℃的温度进行；
当LG10表示氯时，所述反应适当地在碱(例如三乙胺或二异丙基乙基胺)存在下在有机溶剂(例如二氯甲烷或四氢呋喃)中在例如范围为0至25℃的温度进行：
Figure BDA0000148749790000152
Figure BDA0000148749790000161
或
(vi)当A为C(O)且B为CH2CH2时，使式(XIII)的化合物(其中PG1为适当的氮保护基，且Ar、R2、R3、R4、R5、R4’、R5’、R6和k如式(I)中所定义)与式(XIV)的化合物(其中Q、h、L、L1、L2、L3、L4、R1、m、n、V、W、X、Y和Z如式(I)中所定义)在适当的反应条件(诸如苄基三甲基氢氧化铵)下在适当的溶剂(诸如甲苯或乙腈)或溶剂的混合物中反应，然后除去保护基：
Figure BDA0000148749790000162
或
(vii)当L4表示氢时，使式(XV)的化合物(其中PG2为适当的氮保护基(例如氨基甲酸叔丁酯基或3-硝基苯基磺酰基)，且Ar、R2、R3、R4、R5、R4’、R5’、R6、A、B、k、h、Q、L、L1、L2和L3如式(I)中所定义)与式(XVI)的化合物(其中R1、m、n、V、W、X、Y和Z如式(I)中所定义)在适当的还原剂(例如氰基硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠或在适当的钯/炭或氧化铂催化剂存在下的氢气)存在下反应，然后除去保护基(例如用盐酸、三氟乙酸、苯硫酚或硫代乙酸处理)：
Figure BDA0000148749790000171
或
(viii)使式(XVII)的化合物(其中PG2为适当的氮保护基(例如氨基甲酸叔丁酯基或3-硝基苯基磺酰基)，Ar、R2、R3、R4、R5、R4’、R5’、R6、A、k、h、Q、L、L1、L2、L3和L4如式(I)中所定义，且LG3为适当的离去基诸如卤素、对甲苯磺酸酯基或甲磺酸酯基)与式(XVI)的化合物(其中R1、m、n、V、W、X、Y和Z如式(I)中所定义)在适当的碱(诸如三乙胺、许尼希碱、碳酸铯或碳酸钾)存在下在适当的溶剂(诸如MeCN或NMP)中在室温至80℃的温度反应，然后除去保护基(例如用盐酸、三氟乙酸、苯硫酚或硫代乙酸处理)：
或
(ix)使式(XVIII)的化合物(其中PG3为适当的氮保护基(例如氨基甲酸叔丁酯基或3-硝基苯基磺酰基)，且Ar、R2、R3、R4、R5、R4’、R5’、R6、A、B、k、h、Q、L、L1、L2、L3和L4如式(I)中所定义)与式(XIX)的化合物(其中R1和Y如式(I)中所定义，且LG4表示羟基或离去基(例如卤素诸如氯))或其适当的盐反应，然后除去保护基(例如使用盐酸或三氟乙酸)；
当LG4表示羟基时，所述反应适当地在活化剂(例如羰基二咪唑、丙烷-1-膦酸环酐(T3P)或O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HATU))存在下在有机溶剂(例如N，N-二甲基甲酰胺或二氯甲烷)中任选在碱(例如三乙胺)存在下在例如范围为0至60℃的温度进行；
当LG4表示卤素(例如氯)时，所述反应适当地在碱(例如三乙胺、二异丙基乙基胺或吡啶)存在下在有机溶剂(例如二氯甲烷或四氢呋喃)中在例如范围为0至25℃的温度进行：
Figure BDA0000148749790000181
式(IV)的化合物(其中A为C(O))可由式(XX)的化合物(其中R200为烷基，且R2、R3、R4、R5、R4’、R5’、R6和k如式(I)中所定义)和式(XII)的化合物(其中LG10表示羟基或离去基(例如氯))来制备；
当LG10表示羟基时，所述反应适当地在活化剂(例如羰基二咪唑、丙烷-1-膦酸环酐(T3P)或O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HATU))存在下在有机溶剂(例如N，N-二甲基甲酰胺或二氯甲烷)中任选在碱(例如三乙胺)存在下在例如范围为0至60℃的温度进行；
当LG10表示氯时，所述反应适当地在碱(例如三乙胺或二异丙基乙基胺)存在下在有机溶剂(例如二氯甲烷或四氢呋喃)中在例如范围为0至25℃的温度进行：
Figure BDA0000148749790000182
式(V)的化合物(其中A为C(O))可由式(XXI)的化合物(其中R2、R3、R4、R5、R4’、R5’、R6和k如式(I)中所定义)和式(XII)的化合物(其中LG10表示羟基或离去基(例如氯))来制备；
当LG10表示羟基时，所述反应适当地在活化剂(例如羰基二咪唑、丙烷-1-膦酸环酐(T3P)或O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HATU))存在下在有机溶剂(例如N，N-二甲基甲酰胺或二氯甲烷)中任选在碱(例如三乙胺)存在下在例如范围为0至60℃的温度进行；
当LG10表示氯时，所述反应适当地在碱(例如三乙胺或二异丙基乙基胺)存在下在有机溶剂(例如二氯甲烷或四氢呋喃)中在例如范围为0至25℃的温度进行：
式(VI)的化合物(其中A为C(O))可由式(XXII)的化合物(其中R201为烷基，且R4、R5、R4’、R5’、R6和k如式(I)中所定义)和式(XII)的化合物(其中LG10表示羟基或离去基(例如氯))来制备；
当LG10表示羟基时，所述反应适当地在活化剂(例如羰基二咪唑、丙烷-1-膦酸环酐(T3P)或O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HATU))存在下在有机溶剂(例如N，N-二甲基甲酰胺或二氯甲烷)中任选在碱(例如三乙胺)存在下在例如范围为0至60℃的温度进行；
当LG10表示氯时，所述反应适当地在碱(例如三乙胺或二异丙基乙基胺)存在下在有机溶剂(例如二氯甲烷或四氢呋喃)中在例如范围为0至25℃的温度进行：
Figure BDA0000148749790000192
式(XII)的化合物或其适当的盐(其中LG10为羟基，A为C(O)，且B、h、Q、L、L1、L2、L3、L4、R1、m、n、V、W、X、Y和Z如式(I)中所定义)可在适当的反应条件(诸如酸性条件(例如三氟乙酸/二氯甲烷))下由式(XXIII)的化合物(其中R202为烷基诸如叔丁基)来制备：
式(XII)的化合物或其适当的盐(其中LG10为氯，A为C(O)，且h、Q、L、L1、L2、L3、L4、R1、m、n、V、W、X、Y和Z如式(I)中所定义)可在适当的反应条件(例如草酰氯或亚硫酰氯)下在适当的溶剂(诸如二氯甲烷)中由式(XII)的化合物(其中LG10为羟基)来制备；
式(XXIII)的化合物或其适当的盐(其中A为C(O)，B为CH2CH2，且Q、h、L、L1、L2、L3、L4、R1、m、n、V、W、X、Y和Z如式(I)中所定义)可在适当的反应条件(诸如苄基三甲基氢氧化铵)下在适当的溶剂(诸如甲苯或乙腈)或溶剂的混合物中由式(XIV)的化合物和式(XXIV)的化合物(其中R202为烷基例如叔丁基)来制备：
Figure BDA0000148749790000201
当L4为氢时，式(XIV)的化合物可如下制备：使式(XXV)的化合物(其中Q为氧或硫，且h、L、L1、L2和L3如式(I)中所定义)与式(XVI)的化合物或其适当的盐(其中R1、m、n、V、W、X、Y和Z如式(I)中所定义)在适当的还原剂(例如氰基硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠或在适当的钯/炭或氧化铂催化剂存在下的氢气)存在下在适当的溶剂(诸如甲醇或NMP)中反应：
Figure BDA0000148749790000202
式(XIV)的化合物(其中Q为氧，L4为氢，且L、L1、L2和L3如式(I)中所定义)可如下制备：使式(XXVI)的化合物(其中Q为氧，L4为氢，h、L、L1、L2和L3如式(I)中所定义，且LG4为适当的离去基诸如卤素、对甲苯磺酸酯基或甲磺酸酯基)与式(XVI)的化合物(其中R1、m、n、V、W、X、Y和Z如式(I)中所定义)在适当的碱(诸如三乙胺、许尼希碱、碳酸铯或碳酸钾)存在下在适当的溶剂(诸如MeCN或NMP)中在室温至80℃的温度反应：
式(XIV)的化合物可如下制备：使式(XXVII)的化合物(其中Q为氧，且h、L、L1、L2、L3、L4、m、n、V、W、X和Z如式(I)中所定义)与式(XIX)的化合物(其中R1和Y如式(I)中所定义，且LG4表示羟基或离去基(例如卤素诸如氯))或其适当的盐反应；
当LG4表示羟基时，所述反应适当地在活化剂(例如羰基二咪唑、丙烷-1-膦酸环酐(T3P)或O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HATU))存在下在有机溶剂(例如N，N-二甲基甲酰胺或二氯甲烷)中任选在碱(例如三乙胺)存在下在例如范围为0至60℃的温度进行；
当LG4表示卤素(例如氯)时，所述反应适当地在碱(例如三乙胺、二异丙基乙基胺或吡啶)存在下在有机溶剂(例如二氯甲烷或四氢呋喃)中在例如范围为0至25℃的温度进行：
Figure BDA0000148749790000211
式(IX)的化合物(其中A为C(O))可如下制备：使式(XXVIII)的化合物(其中PG4为适当的氮保护基(例如氨基甲酸叔丁酯基或3-硝基苯基磺酰基)，且R2、R3、R4、R5、R4’、R5’、R6和k如式(I)中所定义)与式(XII)的化合物(其中LG10表示羟基或离去基(例如氯)，且h、Q、L、L1、L2、L3、L4、R1、m、n、V、W、X、Y和Z如式(I)中所定义)反应，然后除去保护基(例如用盐酸、三氟乙酸、苯硫酚或硫代乙酸处理)；
当LG10表示羟基时，所述反应适当地在活化剂(例如羰基二咪唑、丙烷-1-膦酸环酐(T3P)或O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HATU))存在下在有机溶剂(例如N，N-二甲基甲酰胺或二氯甲烷)中任选在碱(例如三乙胺)存在下在例如范围为0至60℃的温度进行；
当LG10表示氯时，所述反应适当地在碱(例如三乙胺或二异丙基乙基胺)存在下在有机溶剂(例如二氯甲烷或四氢呋喃)中在例如范围为0至25℃的温度进行：
Figure BDA0000148749790000212
式(XI)的化合物可如下制备：使式(XXIX)的化合物(其中PG5为适当的保护基，且R2、R3、R4、R5、R4’、R5’、R6和k如式(I)中所定义)与式(VIII)的化合物在适当的还原剂(例如氰基硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠或在适当的钯/炭或氧化铂催化剂存在下的氢气)存在下在适当的溶剂(诸如甲醇或NMP)中反应，然后引入PG1，且除去PG5。
Figure BDA0000148749790000221
或
式(XI)的化合物(其中PG1为适当的保护基)可如下制备：使式(XXIX)的化合物(其中PG5为适当的保护基，且R2、R3、R4、R5、R4’、R5’、R6和k如式(I)中所定义)与式(X)的化合物(其中LG2为适当的离去基诸如卤素、对甲苯磺酸酯基或甲磺酸酯基)在适当的碱(诸如三乙胺、许尼希碱、碳酸铯或碳酸钾)存在下在适当的溶剂(诸如MeCN或NMP)中在室温至80℃的温度反应；或
式(XI)的化合物(其中PG1为适当的保护基)可如下制备：使式(XXX)的化合物(其中PG5为适当的氮保护基，R3为氢，且R2、R4、R5、R4’、R5’、R6和k如式(I)中所定义)与式(T)的化合物在适当的还原剂(例如氰基硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠或在适当的钯/炭或氧化铂催化剂存在下的氢气)存在下在适当的溶剂(诸如甲醇或NMP)中反应，然后引入PG1，且除去PG5：
Figure BDA0000148749790000222
或
式(XI)的化合物(其中PG1为适当的保护基，且R2、R3、R4、R5、R4’、R5’、R6和k如式(I)中所定义)可如下制备：使式(XXXI)的化合物(其中PG6为适当的氮保护基，R2、R3、R4、R5、R4’、R5’、R6和k如式(I)中所定义，且LG5为适当的离去基诸如卤素、对甲苯磺酸酯基或甲磺酸酯基)与式(T)的化合物在适当的碱(诸如三乙胺、许尼希碱、碳酸铯或碳酸钾)存在下在适当的溶剂(诸如MeCN或NMP)中在室温至80℃的温度反应，然后引入PG1，且除去PG6：
Figure BDA0000148749790000231
或
式(XVIII)的化合物(其中A为C(O)，PG3为适当的保护基，且Ar、R2、R3、R4、R5、R4’、R5’、R6、B、k、h、Q、L、L1、L2、L3和L4如式(I)中所定义)可如下制备：使式(XI)的化合物(其中PG1＝PG3，且Ar、R2、R3、R4、R5、R4’、R5’、R6和k如式(I)中所定义)与式(XXXII)的化合物(其中PG7为适当的氮保护基，LG11表示羟基或离去基(例如卤素诸如氯)，且B、h、Q、L、L1、L2、L3、L4、m、n、V、W、X和Z如式(I)中所定义)或其适当的盐反应；
当LG11表示羟基时，所述反应适当地在活化剂(例如羰基二咪唑、丙烷-1-膦酸环酐(T3P)或O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HATU))存在下在有机溶剂(例如N，N-二甲基甲酰胺或二氯甲烷)中任选在碱(例如三乙胺)存在下在例如范围为0至60℃的温度进行；
当LG11表示卤素(例如氯)时，所述反应适当地在碱(例如三乙胺、二异丙基乙基胺或吡啶)存在下在有机溶剂(例如二氯甲烷或四氢呋喃)中在例如范围为0至25℃的温度进行：
式(XXXII)的化合物或其适当的盐(其中LG11为羟基，A为C(O)，B为CH2CH2，h、Q、L、L1、L2、L3、L4、m、n、V、W、X和Z如式(I)中所定义，且PG7为适当的氮保护基)可如下下制备：使式(XXXIII)的化合物(其中PG7为适当的氮保护基，且Q、h、L、L1、L2、L3、L4、m、n、V、W、X和Z如式(I)中所定义)与式(XXIV)的化合物(其中R202为烷基例如叔丁基)在适当的反应条件(诸如苄基三甲基氢氧化铵)下在适当的溶剂(诸如甲苯或乙腈)或溶剂的混合物中反应，然后在适当的条件(例如当R202为叔丁基时，用TFA/二氯甲烷处理)下转化为羧酸(LG11为羟基)；
式(XXXII)的化合物或其适当的盐(其中LG11为氯)可在适当的反应条件(例如草酰氯或亚硫酰氯)下在适当的溶剂(诸如二氯甲烷)中由式(XXXIII)的化合物(其中LG11为羟基)来制备：
Figure BDA0000148749790000241
当L4为氢时，式(XXXIII)的化合物可如下制备：使式(XXV)的化合物(其中Q为氧或硫，且h、L、L1、L2和L3如式(I)中所定义)与式(XXXIV)的化合物或其适当的盐(其中PG7为适当的氮保护基，且m、n、V、W、X和Z如式(I)中所定义)在适当的还原剂(例如氰基硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠或在适当的钯/炭或氧化铂催化剂存在下的氢气)存在下在适当的溶剂(诸如甲醇或NMP)中反应：
Figure BDA0000148749790000242
或
式(XXXIII)的化合物(其中L4为氢)可如下制备：使式(XXVI)的化合物(其中Q为氧，L4为氢，h、L、L1、L2和L3如式(I)中所定义，且LG4为适当的离去基诸如卤素、对甲苯磺酸酯基或甲磺酸酯基)与式(XXXIV)的化合物(其中PG7为适当的氮保护基，且m、n、V、W、X和Z如式(I)中所定义)在适当的碱(诸如三乙胺、许尼希碱、碳酸铯或碳酸钾)存在下在适当的溶剂(诸如MeCN或NMP)中在室温至80℃的温度反应：
Figure BDA0000148749790000243
式(XXXV)的化合物(其中V表示键，X表示O，W表示CH2CH2，Z表示CH2，m和n如式(I)中所定义，且PG8表示适当的氮保护基诸如叔丁氧基羰基)可由式(XXXVI)的化合物(其中m和n如式(XXXV)的化合物中所定义)通过用适当的还原剂(诸如甲硼烷-THF复合物)在适当的溶剂(诸如四氢呋喃)中在30-70℃进行处理(其中所得甲硼烷复合物用适当的胺(诸如N1，N2-二甲基乙烷-1，2-二胺)在甲醇中在60-90℃进行分解)来制备：
Figure BDA0000148749790000251
式(XXXVI)的化合物可由式(XXXVII)的化合物(其中LG12为适当的离去基诸如卤素或对甲苯磺酸酯基，且PG8、m和n如式(XXXV)的化合物中所定义)通过用适当的碱(诸如叔丁醇钾)在适当的溶剂(诸如四氢呋喃)中在50-90℃进行处理来制备：
Figure BDA0000148749790000252
式(XXXVII)的化合物可如下制备：使式(XXXVIII)的化合物与式(XXXIX)的化合物(其中LG13表示羟基或卤素诸如氯，且PG8、m、n和LG12如式(XXXVII)的化合物中所定义)反应；
在LG13表示羟基的情况下，所述反应适当地在活化剂(例如羰基二咪唑、丙烷-1-膦酸环酐(T3P)或O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HATU))存在下在有机溶剂(例如N，N-二甲基甲酰胺或二氯甲烷)中任选在适当的碱(例如三乙胺)存在下在例如范围为0至60℃的温度进行；
在LG13表示氯的情况下，所述反应适当地在碱(例如三乙胺或二异丙基乙基胺)存在下在有机溶剂(例如二氯甲烷或四氢呋喃)中在例如范围为0至25℃的温度进行：
Figure BDA0000148749790000253
式(XXXVIII)的化合物可如下制备：使式(XL)的化合物(其中PG8、m和n如式(XXXV)的化合物中所定义)与氨在适当的溶剂(诸如甲醇)中在范围为20-60℃的温度反应：
Figure BDA0000148749790000261
式(XL)的化合物可如下制备：使式(XLI)的化合物(其中PG8、m和n如式(XXXV)的化合物中所定义)与碘化三甲基氧化锍在适当的碱(诸如氢化钠或叔丁醇钾)存在下在适当的溶剂(诸如二甲基亚砜)中在范围为0-20℃的温度反应：
Figure BDA0000148749790000262
通式(XXXV)的化合物(其中m和n如式(I)中所定义，V表示键，X表示O，W表示CH2CH2，Z表示CH2，且PG8表示适当的氮保护基)可在适当的反应条件(诸如在强酸中)下由式(XLII)的化合物来制备。
Figure BDA0000148749790000263
通式(XLII)的化合物(其中PG8为适当的保护基)可通过使式(XL)的化合物与乙醇胺反应来制备。
通式(XXXV)的化合物(其中m和n如式(I)中所定义，V表示键，X表示O，W表示CH2CH2，Z表示CH2，且PG8表示适当的氮保护基)可在适当的反应条件下由式(XLIII)的化合物(其中LG14为适当的离去基诸如卤素、OMs或OTs)来制备：
Figure BDA0000148749790000264
通式(XLIII)的化合物(其中PG8、m和n如式(XXXV)中所定义)可在适当的条件下由式(XLII)的化合物来制备。
适当的式(III)的化合物包括以下化合物，其中R2、R4和R5为氢，k为0，A为C(O)，B为CH2CH2，h为1，Q为氧，L1、L2、L3和L4各自为氢，m和n＝2，V＝键，Z＝CH2，X＝O，W＝CH2CH2，Y＝CO，R1为任选在噻唑基的2位被以下基团取代的噻唑-4-基：甲基、乙基、丙基、丁基、CF3、CH2CF3、CH(CH3)2、CH(CH2CH3)2、CH(CH3)CH2CH3、CH2CH(CH3)2、C(CH3)3、环丙基、环丁基和环戊基，或R1为任选在噻吩基的5位被以下基团取代的噻吩-3-基：甲基、乙基、丙基、丁基、CF3、CH2CF3、CH(CH3)2、CH(CH2CH3)2、CH(CH3)CH2CH3、CH2CH(CH3)2、C(CH3)3、环丙基、环丁基和环戊基。
噻唑-4-基和噻吩-3-基如式(XLIV)中所示：
Figure BDA0000148749790000271
适当的式(IV)的化合物包括以下化合物，其中R2、R4和R5为氢，k为0，A为C(O)，B为CH2CH2，h为1，Q为氧，L1、L2、L3和L4各自为氢，m和n＝2，V＝键，Z＝CH2，X＝O，W＝CH2CH2，Y＝CO，R1为任选在噻唑基的2位被以下基团取代的噻唑-4-基：甲基、乙基、丙基、丁基、CF3、CH2CF3、CH(CH3)2、CH(CH2CH3)2、CH(CH3)CH2CH3、CH2CH(CH3)2、C(CH3)3、环丙基、环丁基和环戊基，或R1为任选在噻吩基的5位被以下基团取代的噻吩-3-基：甲基、乙基、丙基、丁基、CF3、CH2CF3、CH(CH3)2、CH(CH2CH3)2、CH(CH3)CH2CH3、CH2CH(CH3)2、C(CH3)3、环丙基、环丁基和环戊基。
R1＝噻唑-4-基和噻吩-3-基如式(XLIV)中所示。
适当的式(XII)的化合物包括以下化合物，其中h为1，Q为氧，L1、L2、L3和L4各自为氢，m和n＝2，V＝键，Z＝CH2，X＝O，W＝CH2CH2，Y＝CO，R1为任选在噻唑基的2位被以下基团取代的噻唑-4-基：甲基、乙基、丙基、丁基、CF3、CH2CF3、CH(CH3)2、CH(CH2CH3)2、CH(CH3)CH2CH3、CH2CH(CH3)2、C(CH3)3、环丙基、环丁基和环戊基，或R1为任选在噻吩基的5位被以下基团取代的噻吩-3-基：甲基、乙基、丙基、丁基、CF3、CH2CF3、CH(CH3)2、CH(CH2CH3)2、CH(CH3)CH2CH3、CH2CH(CH3)2、C(CH3)3、环丙基、环丁基和环戊基。
R1＝噻唑-4-基和噻吩-3-基如式(XLIV)中所示。
适当的式(XIV)的化合物包括以下化合物，其中Q为氧，L1、L2、L3和L4各自为氢，m和n＝2，V＝键，Z＝CH2，X＝O，W＝CH2CH2，Y＝CO，R1为任选在噻唑基的2位被以下基团取代的噻唑-4-基：甲基、乙基、丙基、丁基、CF3、CH2CF3、CH(CH3)2、CH(CH2CH3)2、CH(CH3)CH2CH3、CH2CH(CH3)2、C(CH3)3、环丙基、环丁基和环戊基，或R1为任选在噻吩基的5位被以下基团取代的噻吩-3-基：甲基、乙基、丙基、丁基、CF3、CH2CF3、CH(CH3)2、CH(CH2CH3)2、CH(CH3)CH2CH3、CH2CH(CH3)2、C(CH3)3、环丙基、环丁基和环戊基。
R1＝噻唑-4-基和噻吩-3-基如式(XLIV)中所示。
适当的式(XVI)的化合物包括以下化合物，其中m和n＝2，V＝键，Z＝CH2，X＝O，W＝CH2CH2，Y＝CO，R1为任选在噻唑基的2位被以下基团取代的噻唑-4-基：甲基、乙基、丙基、丁基、CF3、CH2CF3、CH(CH3)2、CH(CH2CH3)2、CH(CH3)CH2CH3、CH2CH(CH3)2、C(CH3)3、环丙基、环丁基和环戊基，或R1为任选在噻吩基的5位被以下基团取代的噻吩-3-基：甲基、乙基、丙基、丁基、CF3、CH2CF3、CH(CH3)2、CH(CH2CH3)2、CH(CH3)CH2CH3、CH2CH(CH3)2、C(CH3)3、环丙基、环丁基和环戊基。
R1＝噻唑-4-基和噻吩-3-基如式(XLIV)中所示。
适当的式(XXIII)的化合物包括以下化合物，其中R202为叔丁基，B为CH2CH2，h为1，L1、L2、L3和L4各自为氢，Q为氧，m和n＝2，V＝键，Z＝CH2，X＝O，W＝CH2CH2，Y＝CO，R1为任选在噻唑基的2位被以下基团取代的噻唑-4-基：甲基、乙基、丙基、丁基、CF3、CH2CF3、CH(CH3)2、CH(CH2CH3)2、CH(CH3)CH2CH3、CH2CH(CH3)2、C(CH3)3、环丙基、环丁基和环戊基，或R1为任选在噻吩基的5位被以下基团取代的噻吩-3-基：甲基、乙基、丙基、丁基、CF3、CH2CF3、CH(CH3)2、CH(CH2CH3)2、CH(CH3)CH2CH3、CH2CH(CH3)2、C(CH3)3、环丙基、环丁基和环戊基。
R1＝噻唑-4-基和噻吩-3-基如式(XLIV)中所示。
式(T)、(VIII)、(X)、(XXIV)、(XIX)、(XXXIX)和(XLI)的化合物可商购得到，是文献中已知的，或可由本领域技术人员使用上述方法中的一种或已知的技术来容易地制备。
本领域技术人员应该理解的是，在本发明方法中，试剂中的某些官能团(诸如羟基或氨基)可能需要通过保护基来保护。因此，式(I)的化合物的制备可能在合适的阶段涉及引入或除去一个或多个保护基。
官能团的保护和脱保护参见“Protective Groups in Organic Chemistry”，edited by J.W.F.McOmie，Plenum Press(1973)和“Protective Groups in OrganicSynthesis”，3rd edition，T.W.Greene and P.G.M.Wuts，Wiley-Interscience(1999)。
式(I)的化合物可使用标准操作来转化成其它式(I)的化合物。
式I的化合物具有作为药物的活性，特别是作为肾上腺素能β受体激动剂和抗胆碱能药(包括毒蕈碱性受体(M1、M2和M3)拮抗剂特别是M3拮抗剂)的双重活性。可用式(I)的化合物及其药用盐治疗的疾病和病症包括：
1.呼吸道：气道阻塞性疾病，包括哮喘，包括支气管哮喘、变应性哮喘、内源性哮喘、外源性哮喘、运动诱发性哮喘、药物诱发性(包括由阿司匹林和NSAID诱发的)哮喘和粉尘诱发性哮喘，包括间歇性哮喘和持续性哮喘及各种严重度的哮喘及由其它原因引起的气道高反应性；慢性阻塞性肺病(COPD)；支气管炎，包括传染性支气管炎和嗜酸性支气管炎；肺气肿；支气管扩张；囊性纤维化；结节病；农民肺及相关疾病；超敏感性肺炎；肺纤维化，包括隐原性纤维化肺泡炎、特发性间质性肺炎、抗肿瘤治疗和慢性感染(包括结核病和曲霉病及其它真菌感染)所并发的纤维化；肺移植的并发症；肺血管的血管炎和血栓形成疾病及肺动脉高压；镇咳活性，包括治疗与气道炎症和分泌情况相关的慢性咳嗽及医源性咳嗽；急性鼻炎和慢性鼻炎，包括药物性鼻炎及血管运动性鼻炎；常年性和季节性变应性鼻炎，包括神经性鼻炎(花粉症)；鼻息肉病；急性病毒感染，包括普通感冒和由呼吸道合胞病毒、流行性感冒、冠状病毒(包括SARS)和腺病毒引起的感染；或嗜酸性食管炎；
2.骨和关节：与骨关节炎/骨关节病相关或包括骨关节炎/骨关节病在内的关节炎，包括原发性和继发性关节炎，例如先天性髋关节发育不良；颈和腰脊椎炎及腰背痛和颈部疼痛；骨质疏松；类风湿性关节炎和斯蒂尔病(Still’sdisease)；血清阴性脊柱关节病，包括强直性脊柱炎、牛皮癣性关节炎、反应性关节炎和未分化的脊柱关节病；脓毒性关节炎及其它感染相关关节病和骨疾病，例如结核病，包括波特病(Potts’disease)和蓬塞综合征(Poncet’ssyndrome)；由晶体诱发的急性和慢性滑膜炎，包括尿酸盐沉积病、焦磷酸钙沉积病和与钙磷灰石相关的腱、粘液囊和滑膜炎症；贝切特病(Behcet’sdisease)；原发性和继发性斯耶格伦综合征(Sjogren’s syndrome)；全身性硬化和局限性硬皮病；系统性红斑狼疮、混合性结缔组织病和未分化的结缔组织病；炎性肌病，包括皮肌炎和多肌炎；风湿性多肌痛；幼年型关节炎，包括分布在任何关节的特发性炎性关节炎及相关综合征和风湿热及其全身性并发症；血管炎，包括巨细胞性动脉炎、高安动脉炎(Takayasu’s arteritis)、丘-施综合征(Churg-Strauss syndrome)、结节性多动脉炎、显微镜性多动脉炎和与病毒感染、超敏反应、冷球蛋白和异蛋白相关的血管炎；腰背痛；家族性地中海热、穆-韦综合征(Muckle-Wells syndrome)、家族性爱尔兰热(FamilialHibernian Fever)和菊池病(Kikuchi disease)；药物诱发性关节痛、腱炎和肌病；
3.由损伤(例如运动损伤)或疾病引起的疼痛和肌肉骨骼疾病中的结缔组织再造：关节炎(例如类风湿性关节炎、骨关节炎、痛风或晶体性关节病)、其它关节疾病(诸如椎间盘变性或颞下颌关节变性)、骨再造疾病(诸如骨质疏松、佩吉特病(Paget’s disease)或骨坏死)、多软骨炎、硬皮病、混合性结缔组织病、脊椎关节病或牙周病(诸如牙周炎)；
4.皮肤：牛皮癣、特应性皮炎、接触性皮炎或其它湿疹性皮肤病及迟发型超敏反应；植物性和光照性皮炎；脂溢性皮炎、疱疹样皮炎、扁平苔癣、萎缩性硬化性苔癣、坏疽性脓皮症、皮肤结节病、盘状红斑狼疮、天疱疮、类天疱疮、大疱性表皮松解、荨麻疹、血管性水肿、血管炎、中毒性红斑、皮肤嗜酸粒细胞增多、斑秃、男性型脱发、斯威特综合征(Sweet’s syndrome)、韦-克综合征(Weber-Christian syndrome)或多形性红斑；蜂窝组织炎，包括传染性和非传染性蜂窝组织炎；脂膜炎；皮肤淋巴瘤、非黑素瘤皮肤癌和其它发育不良性损伤；或由药物诱发的疾病，包括固定性药疹；
5.眼：睑炎；结膜炎，包括常年性变应性结膜炎或春季性变应性结膜炎；虹膜炎；前色素层炎和后色素层炎；脉络膜炎；自身免疫；影响视网膜的变性或炎性疾病；眼炎，包括交感性眼炎；结节病；或感染，包括病毒、真菌和细菌感染；
6.胃肠道：舌炎、龈炎或牙周炎；食管炎，包括返流；嗜酸性胃肠炎、肥大细胞增多、克罗恩病(Crohn’s disease)、结肠炎(包括溃疡性结肠炎)、直肠炎或肛门瘙痒；或腹部疾病、肠应激综合征和作用可远离肠的食物相关变态反应(例如偏头痛、鼻炎或湿疹)；
7.腹部：肝炎，包括自身免疫性、酒精性和病毒性肝炎；肝纤维化和肝硬化；胆囊炎；或胰腺炎，包括急性和慢性胰腺炎；
8.生殖泌尿系统：肾炎，包括间质性肾炎和肾小球性肾炎；肾病综合征；膀胱炎，包括急性和慢性(间质性)膀胱炎和杭纳溃疡(Hunner’s ulcer)；急性和慢性尿道炎、前列腺炎、附睾炎、卵巢炎和输卵管炎；女阴阴道炎；佩伦涅病(Peyronie’s disease)；或勃起机能障碍(男性和女性)；
9.同种异体移植物排斥：例如肾脏、心脏、肝脏、肺脏、骨髓、皮肤或角膜移植后或输血后出现的急性和慢性同种异体移植物排斥；或慢性移植物抗宿主病；
10.CNS：阿耳茨海默病(Alzheimer’s disease)和其它痴呆疾病(包括CJD和nvCJD)；淀粉样变性；多发性硬化和其它脱髓鞘综合征；脑动脉粥样硬化和血管炎；颞动脉炎；重症肌无力；急性和慢性疼痛(急性、间歇性或持续性疼痛(无论是中枢源性还是外周源性))，包括内脏痛、头痛、偏头痛、三叉神经痛、不典型面痛、关节和骨痛、由癌症和肿瘤侵入引起的疼痛或神经性疼痛综合征(包括糖尿病性神经病、疱疹后神经病和HIV相关神经病)；神经性肉样瘤病；或恶性、感染性或自身免疫性过程中的中枢和外周神经系统并发症；
11.其它自身免疫性和变态反应性疾病，包括桥本甲状腺炎(Hashimoto’sthyroiditis)、格雷夫斯病(Graves’disease)、阿狄森病(Addison’s disease)、糖尿病、特发性血小板减少性紫癜、嗜酸性筋膜炎、高IgE综合征或抗磷脂综合征；
12.其它具有炎性或免疫性组成的疾病，包括获得性免疫缺陷综合征(AIDS)、麻风病、塞扎里综合征(Sezary syndrome)和瘤外综合征；
13.心血管：影响冠脉和外周循环的动脉粥样硬化；心包炎；心肌炎；炎性和自身免疫性心肌病，包括心肌结节病；缺血性再灌注损伤；心内膜炎、心瓣炎和主动脉炎，包括传染性(例如梅毒性)的；血管炎；或近端和外周静脉疾病，包括静脉炎和血栓形成(包括深静脉血栓形成)及静脉曲张的并发症；
14.肿瘤：对一般癌症的治疗，包括前列腺、乳腺、肺、卵巢、胰腺、肠和结肠、胃、皮肤和脑肿瘤及影响骨髓(包括白血病)和淋巴增殖系统(诸如何杰金(Hodgkin’s)和非何杰金淋巴瘤)的恶性肿瘤；包括对转移性疾病和肿瘤复发及瘤外综合征进行预防和治疗；和
15.胃肠道：腹部疾病、直肠炎、嗜酸性胃肠炎、肥大细胞增生、克罗恩病、溃疡性结肠炎、显微镜性结肠炎、不确定性结肠炎、肠应激病、肠应激综合征、非炎性腹泻或作用可远离肠的食物相关变态反应(例如偏头痛、鼻炎或湿疹)。
因此，本发明提供用于治疗的上述式(I)的化合物或其药用盐。
在另一个方面，本发明提供上述式(I)的化合物或其药用盐在制备用于治疗的药物中的用途。
在本说明书上下文中，术语“治疗”也包括“预防”，除非有相反的具体说明。术语“治疗的”和“治疗地”应该相应地解释。
预期预防与对以下患者的治疗特别相关，所述患者患有所述疾病或病症的先前发作，或被视为面临所述疾病或病症的增加风险。面临发展成具体疾病或病症风险的患者通常包括具有所述疾病或病症家族史的那些患者或已通过遗传学测试或筛选而被确定为特别易于发展成所述疾病或病症的那些患者。
本发明还提供治疗炎性疾病或病症(包括可逆性阻塞性气道疾病或病症)或降低炎性疾病或病症(包括可逆性阻塞性气道疾病或病症)风险的方法，所述方法包括向有此需要的患者给药治疗有效量的上述式(I)的化合物或其药用盐。
具体地，本发明化合物可用于治疗成人呼吸窘迫综合征(ARDS)、肺气肿、支气管炎、支气管扩张、慢性阻塞性肺病(COPD)、哮喘和鼻炎。
就上述治疗用途而言，给药剂量当然将随所使用的化合物、给药模式、所期望的治疗和所适应的疾病而变化。例如，本发明化合物的每日剂量当吸入给药时可以是每千克体重0.05微克(μg/kg)至每千克体重100微克(μg/kg)。可选择地，若口服给药本发明化合物，则本发明化合物的每日剂量可以是每千克体重0.01微克(μg/kg)至每千克体重100毫克(mg/kg)。
式(I)的化合物及其药用盐可单独使用，但通常将按药物组合物的形式来给药，其中式(I)的化合物/盐(活性成分)与药用辅料、稀释剂或载体是混合的。关于选择和制备合适药物制剂的常规操作参见例如“Pharmaceuticals-TheScience of Dosage Form Designs”，M.E.Aulton，Churchill Livingstone，1988。
基于给药模式，所述药物组合物所包含的活性成分将优选为0.05至99％w(重量百分比)，更优选为0.05至80％w，更优选为0.10至70％w，且更优选为0.10至50％w，其中所有重量百分比均基于总组合物。
本发明还提供一种药物组合物，其包含上述式(I)的化合物或其药用盐及药用辅料、稀释剂或载体。
本发明还提供制备本发明药物组合物的方法，所述方法包括对上述式(I)的化合物或其药用盐与药用辅料、稀释剂或载体进行混合。
所述药物组合物可按以下形式来局部给药(例如给药至皮肤或给药至肺和/或气道)：例如乳膏剂、溶液剂、混悬液、七氟代烷烃(HFA)气雾剂和干粉制剂(例如吸入装置(称为)中的制剂)；或按以下形式来全身给药(例如通过口服)：片剂、胶囊剂、糖浆剂、粉末剂或颗粒剂；或按以下形式来胃肠外给药：溶液剂或混悬剂；或皮下给药；或按以下形式来直肠给药：栓剂；或经皮给药。
本发明化合物的干粉制剂和加压HFA气雾剂可通过经口吸入或经鼻吸入来给药。就吸入而言，期望所述化合物是微细分散的。微细分散的化合物优选具有小于10μm的质量中位直径，且可混悬在用分散剂辅助的推进剂混合物中，所述分散剂为诸如C8-C20脂肪酸或其盐(例如油酸)、胆汁盐、磷脂、烷基糖、全氟化表面活性剂、聚乙氧基化表面活性剂或其它药用分散剂。
本发明化合物也可通过干粉吸入器来给药。所述吸入器可以是单剂量吸入器或多剂量吸入器，且可以是由呼吸驱动的干粉吸入器。
一种可能性是对微细分散的本发明化合物与载体物质进行混合，所述载体物质为例如单糖、二糖、多糖、糖醇或其它多元醇。合适的载体为糖，例如乳糖、葡萄糖、棉子糖、松三糖、乳糖醇、麦芽醇、海藻糖、蔗糖或甘露醇；和淀粉。可选择地，微细分散的化合物可用其它物质包衣。也可将粉末混合物分装到硬明胶胶囊中，其中每个胶囊含有所需剂量的活性化合物。
另一种可能性是将微细分散的粉末加工成球，所述球在吸入过程中破裂。可将该球化的粉末装填到多剂量吸入器(例如称为
Figure BDA0000148749790000332
的那种吸入器)的药物贮库中，其中给药单元对所需剂量进行计量，然后所述剂量被患者吸入。带有或不带有载体物质的活性成分用该系统递送至患者。
就口服给药而言，可对本发明化合物与辅料或载体进行混合，然后压制成片剂，所述辅料或载体为例如乳糖、蔗糖、山梨醇或甘露醇；淀粉，例如土豆淀粉、玉米淀粉或支链淀粉；纤维素衍生物；粘合剂，例如明胶或聚乙烯基吡咯烷酮；和/或润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸钙、聚乙二醇、蜡、石蜡等。若需要包衣片，则如上所述制备的片芯可用浓的糖溶液包衣，所述浓的糖溶液可含有例如阿拉伯胶、明胶、滑石和二氧化钛。可选择地，片剂可用溶于易挥发有机溶剂中的合适聚合物包衣。
就制备软明胶胶囊剂而言，可对本发明化合物与例如植物油或聚乙二醇进行混合。硬明胶胶囊剂可含有所述化合物的颗粒，其中使用上述片剂赋形剂。也可将本发明化合物的液体或半固体制品装填到硬明胶胶囊中。
用于口服的液体制剂可呈糖浆剂形式或混悬剂形式，例如含有本发明化合物的溶液剂，其中其余物质为乙醇、水、甘油和丙二醇的混合物和糖。任选地，上述液体制剂可含有着色剂、矫味剂、糖精和/或作为增稠剂的羧甲基纤维素或本领域技术人员已知的其它赋形剂。
具体地，本发明化合物及其盐可用于治疗炎性疾病诸如(但不限于)类风湿性关节炎、骨关节炎、哮喘、变应性鼻炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、牛皮癣和炎性肠病。本发明化合物可与以下药物组合：非甾体抗炎药(以下称为NSAID)，包括非选择性环氧化酶COX-1/COX-2抑制剂(无论是局部给药还是全身给药)(诸如吡罗昔康；双氯芬酸；丙酸类化合物，诸如萘普生、氟比洛芬、非诺洛芬、酮洛芬和布洛芬；芬那酸类化合物，诸如甲芬那酸、吲哚美辛、舒林酸和阿扎丙宗；吡唑酮类化合物，诸如保泰松；和水杨酸酯(盐)，诸如阿司匹林)；选择性COX-2抑制剂(诸如美洛昔康、塞来考昔、罗非考昔、伐地考昔、鲁马考昔、帕瑞考昔和艾托考昔)；抑制环氧化酶的一氧化氮供体(CINOD)；糖皮质激素(无论是通过局部、口服、肌内或静脉内途径还是通过关节内途径来给药)；甲氨蝶呤；来氟米特；羟氯喹；d-青霉胺；金诺芬或其它胃肠外或口服金制剂；镇痛药；双醋瑞因；关节内治疗剂，诸如透明质酸衍生物；和营养补剂，诸如氨基葡萄糖。
本发明化合物也可与用于治疗上述病症的其它化合物联用。
因此，本发明还涉及联合治疗，其中本发明化合物或其药用盐或包含本发明化合物的药物组合物或制剂与用于治疗上述一种或多种病症的其它治疗剂同时或先后给药，或与用于治疗上述一种或多种病症的其它治疗剂一起以组合制剂的形式来给药。
本发明还涉及本发明化合物或其药用盐与以下物质的组合：细胞因子或细胞因子功能激动剂或拮抗剂(包括作用于细胞因子信号传导路径的药物诸如SOCS系统调节剂)，包括α-干扰素、β-干扰素和γ-干扰素；I型胰岛素样生长因子(IGF-1)；白介素(IL)，包括IL-1至IL-17和白介素拮抗剂或抑制剂(诸如阿那白滞素)；肿瘤坏死因子-α(TNF-α)抑制剂，诸如抗TNF单克隆抗体(例如英夫利昔单抗、阿达木单抗和CDP-870)和TNF受体拮抗剂(包括免疫球蛋白分子(诸如依那西普)和低分子量药物(诸如己酮可可碱))。
另外，本发明涉及本发明化合物或其药用盐与以下物质的组合：靶向于B淋巴细胞的单克隆抗体(诸如CD20(利妥昔单抗)或MRA-aIL16R)和靶向于T淋巴细胞的单克隆抗体(CTLA4-Ig或HuMax Il-15)。
本发明还涉及本发明化合物或其药用盐与以下物质的组合：趋化因子受体功能调节剂，诸如CCR1、CCR2、CCR2A、CCR2B、CCR3、CCR4、CCR5、CCR6、CCR7、CCR8、CCR9、CCR10和CCR11(C-C家族)的拮抗剂；CXCR1、CXCR2、CXCR3、CXCR4和CXCR5(C-X-C家族)的拮抗剂；和CX3CR1(C-X3-C家族)的拮抗剂。
本发明还涉及本发明化合物或其药用盐与以下物质的组合：基质金属蛋白酶(MMP)即溶基质蛋白酶、胶原酶和明胶酶及蛋白聚糖酶(尤其是胶原酶-1(MMP-1)、胶原酶-2(MMP-8)、胶原酶-3(MMP-13)、溶基质蛋白酶-1(MMP-3)、溶基质蛋白酶-2(MMP-10)和溶基质蛋白酶-3(MMP-11)及MMP-9和MMP-12)的抑制剂，包括药物，诸如多西环素。
本发明还涉及本发明化合物或其药用盐与以下物质的组合：白三烯生物合成抑制剂、5-脂肪氧化酶(5-LO)抑制剂或5-脂肪氧化酶活化蛋白(FLAP)拮抗剂，诸如齐留通；ABT-761；芬留顿；替泊沙林；Abbott-79175；Abbott-85761；N-(5-取代的)-噻吩-2-烷基磺酰胺；2，6-二叔丁基苯酚腙类化合物；甲氧基四氢吡喃类化合物，诸如Zeneca ZD-2138；化合物SB-210661；吡啶基取代的2-氰基萘类化合物，诸如L-739，010；2-氰基喹啉类化合物，诸如L-746，530；或吲哚或喹啉类化合物，诸如MK-591、MK-886和BAY×1005。
本发明还涉及本发明化合物或其药用盐与以下物质的组合：白三烯(LT)B4、LTC4、LTD4和LTE4的受体拮抗剂，其选自吩噻嗪-3-基类化合物，诸如L-651，392；脒基类化合物，诸如CGS-25019c；苯并噁胺类化合物，诸如昂唑司特；苯甲脒类化合物，诸如BIIL 284/260；和化合物，诸如扎鲁司特、阿鲁司特、孟鲁司特、普仑司特、维鲁司特(MK-679)、RG-12525、Ro-245913、伊拉司特(CGP 45715A)和BAY×7195。
本发明还涉及本发明化合物或其药用盐与以下物质的组合：磷酸二酯酶(PDE)抑制剂，诸如甲基黄嘌呤类化合物，包括茶碱和氨茶碱；和选择性PDE同工酶抑制剂，包括PDE4抑制剂或同工型PDE4D抑制剂或PDE5抑制剂。
本发明还涉及本发明化合物或其药用盐与以下物质的组合：组胺1型受体拮抗剂，诸如西替利嗪、氯雷他定、地氯雷他定、非索非那定、阿伐斯汀、特非那定、阿司咪唑、氮
Figure BDA0000148749790000351
斯汀、左卡巴斯汀、氯苯那敏、异丙嗪、赛克力嗪或咪唑斯汀；口服、局部或胃肠外给药。
本发明还涉及本发明化合物或其药用盐与以下物质的组合：质子泵抑制剂(诸如奥美拉唑)或胃保护性组胺2型受体拮抗剂。
本发明还涉及本发明化合物或其药用盐与以下物质的组合：组胺4型受体拮抗剂。
本发明还涉及本发明化合物或其药用盐与以下物质的组合：α1/α2肾上腺素受体激动剂、血管收缩药或拟交感神经药，诸如丙己君、苯福林、苯丙醇胺、麻黄碱、伪麻黄碱、盐酸萘甲唑啉、盐酸羟甲唑啉、盐酸四氢唑啉、盐酸木甲唑啉、盐酸曲马唑啉或盐酸乙基去甲肾上腺素。
本发明还涉及本发明化合物或其药用盐与以下物质的组合：色原酮，诸如色甘酸钠或奈多罗米钠。
本发明还涉及本发明化合物或其药用盐与以下物质的组合：糖皮质激素，诸如氟尼缩松、曲安奈德、二丙酸倍氯美松、布地奈德、丙酸氟替卡松、环索奈德或糠酸莫米松。
本发明还涉及本发明化合物或其药用盐与以下物质的组合：对核激素受体(诸如PPAR)进行调节的药物。
本发明还涉及本发明化合物或其药用盐与以下物质的组合：免疫球蛋白(Ig)或Ig制品或对Ig功能进行调节的拮抗剂或抗体，诸如抗IgE(例如奥马珠单抗)。
本发明还涉及本发明化合物或其药用盐与以下物质的组合：另一种全身给药或局部给药的抗炎药，诸如沙利度胺或其衍生物、类维生素A、地蒽酚或卡泊三醇。
本发明还涉及本发明化合物或其药用盐与以下物质的组合：氨基水杨酸酯(盐)和磺胺吡啶(诸如柳氮磺吡啶、美沙拉嗪、巴柳氮和奥沙拉嗪)的组合；免疫调节药，诸如硫代嘌呤；和皮质激素，诸如布地奈德。
本发明还涉及本发明化合物或其药用盐与以下物质的组合：抗菌药，诸如青霉素衍生物、四环素、大环内酯、β-内酰胺、氟喹诺酮、甲硝唑或吸入性氨基糖苷；抗病毒药，包括阿昔洛韦、泛昔洛韦、伐昔洛韦、更昔洛韦、西多福韦、金刚烷胺、金刚乙胺、利巴韦林、扎那米韦和奥塞米韦；蛋白酶抑制剂，诸如茚地那韦、奈非那韦、利托那韦和沙奎那韦；核苷逆转录酶抑制剂，诸如去羟肌苷、拉米夫定、司他夫定、扎西他宾或齐多夫定；或非核苷逆转录酶抑制剂，诸如奈韦拉平或依法韦仑。
本发明还涉及本发明化合物或其药用盐与以下物质的组合：心血管药，诸如钙通道阻断剂、β-肾上腺素受体阻断剂、血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂或血管紧张素-2受体拮抗剂；降脂药，诸如他汀类或贝特类；血细胞形态学调节剂，诸如己酮可可碱；和溶栓药或抗凝药，诸如血小板聚集抑制剂。
本发明还涉及本发明化合物或其药用盐与以下物质的组合：CNS药物，诸如抗抑郁药(诸如舍曲林)、抗帕金森病药(诸如司来吉兰、左旋多巴、罗匹尼罗、普拉克索、MAOB抑制剂(诸如司来吉兰和雷沙吉兰)、comP抑制剂(诸如托卡朋)、A-2抑制剂、多巴胺再摄取抑制剂、NMDA拮抗剂、烟碱激动剂、多巴胺激动剂或神经元一氧化氮合酶抑制剂)或抗阿尔茨海默病药(诸如多奈哌齐、利凡斯的明、他克林、COX-2抑制剂、丙戊茶碱或美曲磷酯)。
本发明还涉及本发明化合物或其药用盐与以下物质的组合：用于治疗急性或慢性疼痛的药物，诸如在中枢或外周发挥作用的止痛药(例如阿片样物质或其衍生物)、卡马西平、苯妥英、丙戊酸钠、阿米替林、其它抗抑郁药、对乙酰氨基酚或非甾体抗炎药。
本发明还涉及本发明化合物或其药用盐与以下物质的组合：胃肠外给药或局部给药的(包括吸入的)局麻药，诸如利诺卡因或其衍生物。
本发明化合物或其药用盐也可与以下物质联用：抗骨质疏松药，包括激素药物(诸如雷洛昔芬)或二膦酸盐(诸如阿伦膦酸盐)。
本发明还涉及本发明化合物或其药用盐与以下物质的组合：(i)类胰蛋白酶抑制剂；(ii)血小板活化因子(PAF)拮抗剂；(iii)白介素转化酶(ICE)抑制剂；(iv)IMPDH抑制剂；(v)粘附分子抑制剂，包括VLA-4拮抗剂；(vi)组织蛋白酶；(vii)激酶抑制剂，诸如酪氨酸激酶(诸如Btk、Itk、Jak3或MAP)抑制剂(例如吉非替尼或甲磺酸伊马替尼)、丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂(诸如MAP激酶(诸如p38，JNK，蛋白激酶A、蛋白激酶B、蛋白激酶C或IKK)抑制剂)或细胞周期调节中涉及的激酶(诸如细胞周期蛋白依赖性激酶)的抑制剂；(viii)葡萄糖-6-磷酸脱氢酶抑制剂；(ix)激肽B1受体或激肽B2受体拮抗剂；(x)抗痛风药，例如秋水仙碱；(xi)黄嘌呤氧化酶抑制剂，例如别嘌醇；(xii)排尿酸药，例如丙磺舒、磺吡酮或苯溴马隆；(xiii)生长激素促分泌剂；(xiv)转化生长因子(TGFβ)；(xv)血小板源性生长因子(PDGF)；(xvi)成纤维细胞生长因子，例如基本的成纤维细胞生长因子(bFGF)；(xvii)粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)；(xviii)辣椒素油；(xix)速激肽NK1受体或速激肽NK3受体拮抗剂，诸如NKP-608C、SB-233412(他奈坦)或D-4418；(xx)弹性酶抑制剂，诸如UT-77或ZD-0892；(xxi)TNF-α转化酶抑制剂(TACE)；(xxii)诱导性一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂；(xxiii)TH2细胞上表达的化学引诱物受体同源分子(诸如CRTH2拮抗剂)；(xxiv)P38抑制剂；(xxv)对Toll样受体(TLR)功能进行调节的药物；(xxvi)对嘌呤能受体(诸如P2X7)活性进行调节的药物；(xxvii)转录因子(诸如NFkB、API或STATS)活化抑制剂；或(xxviii)糖皮质激素受体(GR受体)激动剂。
在另一个方面，本发明提供式(I)的化合物与一种或多种药物的组合(例如用于治疗COPD、哮喘或变应性鼻炎)，所述一种或多种药物选自：
●非甾体糖皮质激素受体(GR受体)激动剂；
●PDE4抑制剂，包括同工型PDE4D抑制剂；
●趋化因子受体功能调节剂(诸如CCR1受体拮抗剂)；
●甾类(诸如布地奈德)；和
●p38激酶功能抑制剂。
本发明化合物或其药用盐也可与用于治疗癌症的现有治疗剂联用，例如合适的药物包括：
(i)医用肿瘤学中使用的抗增殖/抗肿瘤药或其组合，诸如烷化剂(例如顺铂、卡铂、环磷酰胺、氮芥、美法仑、苯丁酸氮芥、白消安或亚硝基脲)；抗代谢剂(例如抗叶酸剂，诸如氟嘧啶样5-氟尿嘧啶或替加氟、雷替曲塞、甲氨蝶呤、阿糖胞苷、羟基脲、吉西他滨或紫杉醇)；抗肿瘤抗生素(例如蒽环类抗生素，诸如阿霉素、博来霉素、多柔比星、柔红霉素、表柔比星、伊达比星、丝裂霉素C、更生霉素或光辉霉素)；抗有丝分裂剂(例如长春花属生物碱，诸如长春新碱、长春碱、长春地辛或长春瑞滨；或紫杉烷类化合物，诸如泰素或泰索帝)；或拓扑异构酶抑制剂(例如表鬼臼毒素类，诸如依托泊苷、替尼泊苷、安沙可林、托泊替康或喜树碱)；
(ii)细胞生长抑制药，诸如抗雌激素药(例如他莫昔芬、托瑞米芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬或iodoxyfene)；雌激素受体下调剂(例如氟维司群)；抗雄激素药(例如比卡鲁胺、氟他胺、尼鲁米特或醋酸环丙孕酮)；LHRH拮抗剂或LHRH激动剂(例如戈舍瑞林、亮丙瑞林或布舍瑞林)；孕激素(例如醋酸甲地孕酮)；芳构酶抑制剂(例如阿那曲唑、来曲唑、伏氯唑或依西美坦)；或5α-还原酶抑制剂(例如非那雄胺)；
(iii)抑制癌细胞侵入的药物(例如金属蛋白酶抑制剂(如马立马司他)或尿激酶纤维蛋白溶酶原激活剂受体功能抑制剂)；
(iv)生长因子功能抑制剂，例如生长因子抗体(例如抗erbb2抗体曲妥单抗或抗erbb1抗体西妥昔单抗[C225])；法尼基转移酶抑制剂；酪氨酸激酶抑制剂或丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂；表皮生长因子家族抑制剂(例如EGFR家族酪氨酸激酶抑制剂，诸如N-(3-氯-4-氟苯基)-7-甲氧基-6-(3-吗啉代丙氧基)喹唑啉-4-胺(吉非替尼，AZD1839)、N-(3-乙炔基苯基)-6，7-二(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-胺(埃罗替尼，OSI-774)或6-丙烯酰氨基-N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(3-吗啉代丙氧基)喹唑啉-4-胺(CI 1033))；血小板源性生长因子家族抑制剂；或肝细胞生长因子家族抑制剂；
(v)抗血管生成药，诸如抑制血管内皮生长因子作用的抗血管生成药(例如抗血管内皮细胞生长因子抗体贝伐单抗、WO 97/22596、WO 97/30035、WO 97/32856或WO 98/13354中公开的化合物)；或通过另一种机制来发挥作用的化合物(例如利诺胺、整联蛋白αvβ3功能抑制剂或血管生长抑素)；
(vi)血管损伤剂，诸如考布他汀A4或WO 99/02166、WO 00/40529、WO00/41669、WO 01/92224、WO 02/04434或WO 02/08213中公开的化合物；
(vii)反义治疗中使用的药物，例如指向上述靶标之一的反义治疗药物，诸如ISIS 2503、抗ras反义物；
(viii)以下基因治疗方法中使用的药物：例如置换异常基因(诸如异常的p53或异常的BRCA1或BRCA2)的方法；GDEPT(基因靶向酶前药治疗)方法，诸如使用胞嘧啶脱氨酶、胸苷激酶或细菌硝基还原酶的那些GDEPT方法；和提高患者化学治疗或放射治疗耐受性的方法，诸如多种药物抵抗基因治疗；或
(ix)以下免疫治疗方法中使用的药物：例如提高患者肿瘤细胞免疫原性的离体和在体方法，诸如用细胞因子(诸如白介素2、白介素4或粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子)进行转染；降低T细胞无反应性的方法；使用经转染的免疫细胞(诸如经细胞因子转染的树突细胞)的方法；使用经细胞因子转染的肿瘤细胞系的方法；和使用抗个体基因型抗体的方法。
可将上述式(I)的化合物转化成其药用盐，例如酸加成盐，诸如盐酸盐例如二盐酸盐)、氢溴酸盐(例如二氢溴酸盐)、三氟乙酸盐(例如二(三氟乙酸盐))、硫酸盐、磷酸盐、乙酸盐、富马酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、乳酸盐、枸橼酸盐、丙酮酸盐、琥珀酸盐、草酸盐、甲磺酸盐或对甲苯磺酸盐。
本发明现将通过参考以下实施例来说明，但不限于此，其中使用以下一般方法：
一般方法
除非另有说明，原料为可商购得到的。所有溶剂和商购试剂为实验室级且按原样使用。所有操作在环境温度(即17至28℃)且按需在惰性气体诸如氮气气氛下进行。“微波”加热是指在
Figure BDA0000148749790000401
微波反应器中使用可变功率微波辐射来加热至恒温。氢化反应使用
Figure BDA0000148749790000402
系统或ThalesNano系统如所详细描述的那样来进行。对所有溶液的浓缩通过减压(真空)蒸发例如使用
Figure BDA0000148749790000404
旋转蒸发器来进行。
薄层色谱(TLC)使用涂覆有硅胶(粒度＜63μm；孔径
Figure BDA0000148749790000405
表面积～500m2/g)(含有荧光(UV254)指示剂)的以铝或玻璃为底的板来进行。展开后，板通过UV254辐射或用适当的指示剂[诸如碘(预吸附到硅胶上)、高锰酸钾水溶液或硝酸铈(IV)铵水溶液]进行显影来观察。指示剂的制备实例可参见“Experimental Organic Chemistry：Preparative and Microscale”2nd Ed.(Harwood，L.，Moody，C.and Percy，J.)，WileyBlackwell，1998。
分析性HPLC使用以下条件来进行：Waters XBridgeTMC8 3.5μm柱，用乙腈在0.1％三氟乙酸水溶液、0.1％甲酸水溶液、0.1％乙酸铵水溶液或0.1％氨水中的溶液进行梯度洗脱；Waters XBridgeTMC183.5μm柱，用乙腈在0.1％氨水中的溶液进行梯度洗脱；Waters SymmetryTMC183.5μm柱，用乙腈在0.1％三氟乙酸水溶液中的溶液进行梯度洗脱；Waters SunfireTMC83.5μm柱，用乙腈在0.1％三氟乙酸水溶液中的溶液进行梯度洗脱；或PhenomenexGeminiTMC183μm柱，用乙腈在0.1％三氟乙酸水溶液中的溶液进行梯度洗脱。洗脱峰的UV光谱使用Agilant
Figure BDA0000148749790000406
系统上的二极管阵列或等价装置来测量。
硅胶(粒度＜63μm；孔径
Figure BDA0000148749790000407
表面积～500m2/g)中压液相色谱(MPLC)使用预装填的Biotage FLASHTM柱或等价装置例如Thomson SINGLE StEPTM、Biotage IsoluteTM、Teledyne Isco RediSepTM或Silicycle UltraPure硅胶柱以推荐的溶剂流速和样品载量来进行。馏分纯度通过TLC或分析性HPLC来确定。
制备性HPLC使用乙腈或甲醇在0.1％或0.2％TFA水溶液、甲酸水溶液或氨水中的溶液梯度和使用Phenomenex GeminiTMNX C18(30×100mm，5μm)柱、Waters SunfireTMPrep C8(30×100mm，10μm)柱、Waters SunfireTMPrepC18(30×100mm，5μm)柱或Waters XBridgeTMC8(30×100mm，5μm)柱作为固定相以30-35mL/min的流速如所详细描述的那样来进行。通过UV光谱(波长为诸如220或254nm)进行检测后，收集馏分。馏分纯度通过TLC或分析性HPLC来确定。
1H NMR光谱用Bruker Avance 600(600MHz)、Bruker DRX 500(500MHz)或Varian UnityInova 500MHz、400MHz或300MHz仪器进行记录。氯仿-d的中心峰(CDCl3；δH7.27ppm)、二甲基亚砜-d6的中心峰(d6-DMSO；δH2.50ppm)、甲醇-d4的中心峰(CD3OD；δH3.31ppm)或内标物即四甲基甲硅烷(TMS；δH0.00ppm)用作参照物。进行分析性HPLC后，质谱用AgilentMSD(+ve和-ve APCI和/或电喷雾(例如多模式))进行记录。
所有其它操作使用标准实验室技术[例如参见“Experimental OrganicChemistry：Preparative and Microscale”2nd Ed.(Harwood，L.，Moody，C.andPercy，J.)，WileyBlackwell，1998]来进行。
实施例中使用的缩写或术语具有以下意义：
Figure BDA0000148749790000411
合成中间体的制备
A)芳族连接基部分的制备：
芳族中间体1
4-氯-3-(2-羟基乙基)苯甲醛
Figure BDA0000148749790000422
a)3-(羧基甲基)-4-氯苯甲酸
Figure BDA0000148749790000423
将氢氧化钾(1.55g)在水(15mL)中的溶液加到4-氯-3-(氰基甲基)苯甲酸[WO 2006040568](2.07g)在乙醇(15mL)中的混悬液中且将所得溶液加热回流4小时，然后冷却。将混合物减压浓缩以除去乙醇，然后用水稀释并用乙酸乙酯洗涤两次。弃去有机相同时水相用浓盐酸酸化至pH 1并用乙酸乙酯萃取两次。合并的萃取物用盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥并减压浓缩，得到小标题化合物，其为淡棕色固体。收率2.06g。m/z 214(M+)(EI)。
b)2-(2-氯-5-(羟基甲基)苯基)乙醇
Figure BDA0000148749790000424
在室温历时3分钟将甲硼烷-二甲基硫醚复合物的溶液(2M在THF中，12.0mL)分批加到3-(羧基甲基)-4-氯苯甲酸[芳族中间体1，步骤a](2.06g)在无水THF(30mL)中的混悬液中。将所得泡腾浓稠混悬液在室温搅拌1小时，然后加热至回流且保持1小时。冷却的混合物通过历时2分钟分批加入甲醇(10mL)来淬灭。将溶液在室温搅拌30分钟，然后浓缩到硅胶上并通过硅胶快速色谱(用5％甲醇/二氯甲烷洗脱)来纯化，得到小标题化合物，其为白色固体。收率0.983g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.35(d，J＝8.2Hz，1H)，7.28(d，J＝2.1Hz，1H)，7.18(dd，J＝8.2，2.1Hz，1H)，4.65(s，2H)，3.89(t，J＝6.7Hz，2H)，3.02(t，J＝6.5Hz，2H)。未观察到两个可交换的质子。
c)4-氯-3-(2-羟基乙基)苯甲醛
将二氧化锰(IV)(1.00g)加到2-(2-氯-5-(羟基甲基)苯基)乙醇[芳族中间体1，步骤b](0.205g)在DCM(10mL)中的溶液中且将所得混悬液在室温搅拌过夜。然后混合物用硅藻土过滤，其中滤垫用DCM充分洗涤。将滤液和洗涤液减压浓缩，得到标题化合物，其为无色油状物。收率0.159g。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ9.97(s，1H)，7.81(d，J＝2.0，1H)，7.70(dd，J＝2.0，8.2，1H)，7.53(t，J＝6.7，1H)，3.94(dd，J＝6.4，11.6，2H)，3.10(t，J＝6.6，2H)，1.46(t，J＝5.2，1H)。
芳族中间体2
2-(5-(溴甲基)-2-氟苯基)乙醇
Figure BDA0000148749790000431
将过氧化苯甲酰(1g)加到NBS(10.6g)和2-(2-氟-5-甲基苯基)乙酸(10g)在DCM(250mL)中的溶液中且将所得混合物加热回流12小时。蒸发溶剂且将白色固体在乙酸乙酯(250mL)和10％氯化钠溶液(500mL)之间分配。分离各层且有机相用10％氯化钠溶液(500mL)洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。将所得白色固体在四氢呋喃(150mL)中再次溶解并在冷却浴中冷却。小心加入甲硼烷-二甲基硫醚复合物的溶液(2M在THF中，89mL)，然后将混合物温热至室温并搅拌过夜。将反应混合物在冷却浴中冷却并用甲醇小心淬灭。不再冒泡后，蒸发溶剂且残留物用异己烷∶乙醚的4∶1混合物研磨。通过硅胶色谱(用9∶1至4∶1乙酸乙酯∶异己烷梯度洗脱)来纯化，得到标题化合物，其为澄清油状物。收率6.5g。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.32-7.21(m，2H)，7.04-6.97(m，1H)，4.46(s，2H)，3.87(t，J＝6.5Hz，2H)，2.93-2.87(m，2H)。未观察到一个可交换的质子。
芳族中间体3
(5-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)-2-氟苯基)甲醇
Figure BDA0000148749790000441
a)叔丁基(4-氟苯乙氧基)二甲基甲硅烷
Figure BDA0000148749790000442
在20℃将叔丁基二甲基甲硅烷基氯(9.03g)分批加到搅拌的2-(4-氟苯基)乙醇(7g)和咪唑(4.08g)在DMF(100mL)中的溶液中。将反应混合物在室温搅拌3小时，然后在乙酸乙酯和盐水之间分配。有机层用盐水洗涤两次，干燥，过滤且将溶剂减压浓缩。粗产物通过硅胶快速色谱(用2％乙酸乙酯/异己烷洗脱)来纯化。将含有产物的馏分蒸发至干，得到小标题化合物。收率11.60g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.18-7.13(m，2H)，6.98-6.93(m，2H)，3.77(t，J＝6.9Hz，2H)，2.78(t，J＝6.8Hz，2H)，0.86(s，9H)，-0.03(s，6H)。
b)5-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)-2-氟苯甲醛
Figure BDA0000148749790000443
在0℃历时25分钟向2，2，6，6-四甲基哌啶(10.77g)在THF(200mL)中的溶液中加入丁基锂(1.6M在己烷中，48mL)。将混合物冷却至-78℃并历时25分钟滴加叔丁基(4-氟苯乙氧基)二甲基甲硅烷[芳族中间体3，步骤a](9.7g)在THF(50mL)中的溶液。将反应混合物在-78℃搅拌90分钟。然后历时10分钟滴加DMF(9.3mL)。将反应混合物在0℃搅拌1小时，然后倒入冰冷的盐酸水溶液(0.5M，500mL)中。混合物用乙酸乙酯萃取且有机层用水洗涤两次，干燥，过滤且将溶剂减压浓缩，得到小标题化合物。收率10.00g。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ10.36(s，1H)，7.72-7.69(m，1H)，7.48-7.43(m，1H)，7.11-7.06(m，1H)，3.80(t，J＝6.5Hz，2H)，2.83(t，J＝6.4Hz，2H)，0.85(s，9H)，0.04(s，6H)。
c)(5-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)-2-氟苯基)甲醇
在0℃历时30分钟将硼氢化钠(1.33g)分批加到5-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)-2-氟苯甲醛[芳族中间体3，步骤b](9.9g)在乙醇(120mL)中的溶液中。然后将反应混合物在室温搅拌30分钟，然后通过减压浓缩将体积减小至初始体积的一半。将残留物在乙酸乙酯和盐水之间分配，有机层用盐水洗涤，干燥，过滤且将溶剂减压浓缩。粗产物通过硅胶快速色谱(使用12％乙酸乙酯/异己烷作为溶剂)来纯化。将含有产物的馏分浓缩至干，得到标题化合物。收率7.30g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.26-7.23(m，1H)，7.13-7.08(m，1H)，6.98-6.93(m，1H)，4.73(d，J＝6.2Hz，2H)，3.78(t，J＝6.9Hz，2H)，2.79(t，J＝6.9Hz，2H)，1.71(t，J＝6.5Hz，1H)，0.87(s，9H)，-0.02(s，6H)。
芳族中间体4
2-(3-(溴甲基)-5-氟苯基)乙醇
Figure BDA0000148749790000451
a)2-(3-(溴甲基)-5-氟苯基)乙酸
Figure BDA0000148749790000452
将过氧化苯甲酰(0.5g)加到搅拌的2-(3-氟-5-甲基苯基)乙酸(5.95g)和NBS(6.93g)在二氯甲烷(120mL)中的混合物中。将所得混合物加热回流5小时。将反应混合物冷却至室温，然后用水洗涤两次。将有机层干燥，过滤且将溶剂减压浓缩。粗产物通过硅胶快速色谱(使用1％乙酸和17％乙酸乙酯/异己烷作为溶剂)来纯化。将含有产物的馏分浓缩至干，得到小标题化合物。收率6.50g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ7.22-7.17(m，2H)，7.09-7.05(m，1H)，4.68(s，2H)，3.61(s，2H)。未观察到一个可交换的质子。
b)2-(3-(溴甲基)-5-氟苯基)乙醇
在0℃历时10分钟将甲硼烷-二甲基硫醚复合物(2M在THF中，26.3mL)滴加到2-(3-(溴甲基)-5-氟苯基)乙酸[芳族中间体4，步骤a](6.5g)在THF(120mL)中的溶液中。将混合物在0℃搅拌10分钟，然后在20℃搅拌1小时。反应混合物通过滴加甲醇来淬灭且将溶剂减压除去。粗产物通过硅胶快速色谱(使用30％乙酸乙酯/异己烷)来纯化。将含有产物的馏分浓缩至干，得到标题化合物。收率4.70g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.04(s，1H)，6.98(d，J＝9.3Hz，1H)，6.89(d，J＝9.2Hz，1H)，4.43(s，2H)，3.88(t，J＝6.4Hz，2H)，2.86(t，J＝6.5Hz，2H)，1.43(s，1H)。
芳族中间体5
3-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)-2-氟苯甲醛
Figure BDA0000148749790000461
a)叔丁基(2-氟苯乙氧基)二甲基甲硅烷
将2-(2-氟苯基)乙醇(5.5g)和咪唑(8.0g)在DMF(50mL)中的溶液在冰水中冷却，用叔丁基二甲基氯甲硅烷(6.52g)处理，然后从冷却浴中取出并在室温搅拌3.5小时。将溶液倒入水中并用乙醚萃取三次。合并的有机萃取物用水洗涤三次，用盐水洗涤一次，然后用无水硫酸镁干燥并减压浓缩，得到小标题化合物，其为无色油状物。收率9.9g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.25-7.14(m，2H)，7.07-6.97(m，2H)，3.81(t，J＝7.0Hz，2H)，2.87(t，J＝6.9Hz，2H)，0.86(s，9H)，-0.03(s，6H)。
b)3-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)-2-氟苯甲醛
将2，2，6，6-四甲基哌啶(11.0g)在无水THF(200mL)中的溶液冷却至-78℃并用丁基锂(37.5mL)处理(历时5分钟经由注射器稳定加入)。将溶液在-78℃搅拌15分钟，然后用叔丁基(2-氟苯乙氧基)二甲基甲硅烷[芳族中间体5，步骤a](9.9g)在THF(25mL)中的溶液处理(历时15分钟滴加)。将溶液在-78℃搅拌2小时，然后用DMF(9.0mL)在THF(25mL)中的溶液处理(历时10分钟滴加)。将溶液在-78℃搅拌1小时，然后移开冷却浴且将溶液温热至室温过夜。将反应混合物倒入盐酸水溶液(0.5M)中并用乙酸乙酯萃取三次。合并的有机相用水洗涤三次，用盐水洗涤一次，然后用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩，得到标题化合物。收率10.1g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.41(s，1H)，7.79-7.74(m，1H)，7.55(td，J＝7.4，1.6Hz，1H)，7.22(t，J＝7.6Hz，1H)，3.88(t，J＝6.5Hz，2H)，2.96(t，J＝6.6Hz，2H)，0.88(s，9H)，0.00(s，6H)。
芳族中间体6
4-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)噻吩-2-甲醛和3-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)噻吩-2-甲醛的混合物
Figure BDA0000148749790000471
将丁基锂(36.1mL)滴加到搅拌的冷却至-78℃的叔丁基二甲基(2-(噻吩-3-基)乙氧基)甲硅烷[J.Med.Chem.2000，43(8)，1508](10.0g)在THF(200mL)中的溶液中。加完后，将反应混合物在冰浴中搅拌1小时，然后冷却至-78℃。历时5分钟滴加DMF(31.9mL)且再过10分钟后，移开冷却浴。1小时后，将反应混合物在水和乙酸乙酯之间分配且乙酸乙酯溶液用水和盐水洗涤两次，用硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。通过硅胶色谱(用乙酸乙酯∶异己烷1∶20洗脱)来纯化，得到4-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)噻吩-2-甲醛和3-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)噻吩-2-甲醛的5∶1混合物(通过1HNMR来确定)，其为油状物。收率8.1g。
4-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)噻吩-2-甲醛：1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.93(d，J＝1.2Hz，1H)，7.71(d，J＝1.5Hz，1H)，7.52(s，1H)，3.92-3.84(m，2H)，2.91(t，J＝6.5Hz，2H)，0.92(s，9H)，0.04(s，6H)。
3-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)噻吩-2-甲醛：1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.08(s，1H)，7.69(d，J＝5.0Hz，1H)，7.09(d，J＝5.0Hz，1H)，3.92-3.84(m，2H)，3.22(t，J＝6.5Hz，2H)，0.89(s，9H)，-0.01(s，6H)。
芳族中间体7
2-氯-5-(2-羟基乙基)苯甲醛
Figure BDA0000148749790000472
a)2-氯-5-(氰基甲基)苯甲酸
5-(溴甲基)-2-氯苯甲酸[WO 2001044170](1.75g)在DMF(20mL)中的溶液用氰化钾(0.91g)在水(7mL)中的溶液处理且将所得溶液在室温搅拌3天。混合物用水稀释并用乙酸乙酯萃取两次。弃去有机相同时水相用浓盐酸(5mL)小心酸化，其中经由氮气气流使所释放的任何HCN通过漂白溶液。搅拌20分钟后，水相再用乙酸乙酯萃取两次。合并的有机相用水洗涤三次，用盐水洗涤一次，然后用无水硫酸镁干燥并真空浓缩，得到粗小标题化合物，其为棕色固体。收率1.25g。m/z 195M+(EI)。
b)5-(羧基甲基)-2-氯苯甲酸
Figure BDA0000148749790000481
将氢氧化钾(0.969g)在水(10mL)中的溶液加到2-氯-5-(氰基甲基)苯甲酸[芳族中间体7，步骤a](1.25g)在乙醇(10mL)中的溶液中且将所得混合物加热回流2.25小时，然后冷却。将混合物真空浓缩以除去乙醇，然后用水稀释并用乙酸乙酯洗涤两次。弃去有机相同时水相用浓盐酸酸化至pH 1并用乙酸乙酯萃取两次。合并的萃取物用无水硫酸镁干燥并真空浓缩，得到小标题化合物，其为棕色胶状物。收率1.38g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ12.93(宽单峰，2H)，7.69(d，J＝2.1Hz，1H)，7.48(d，J＝8.3Hz，1H)，7.42(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，3.66(s，2H)。
c)2-(4-氯-3-(羟基甲基)苯基)乙醇
Figure BDA0000148749790000482
在室温历时5分钟将甲硼烷-二甲基硫醚复合物的溶液(2M在THF中，6.50mL)分批加到5-(羧基甲基)-2-氯苯甲酸[芳族中间体7，步骤b](1.37g)在无水THF(20mL)中的溶液中。将所得泡腾溶液在室温搅拌1.5小时，然后加热至回流且保持1小时。冷却的混合物通过历时5分钟分批加入甲醇(5mL)来淬灭。将溶液在室温搅拌2小时，然后通过硅胶快速色谱(用5％甲醇/二氯甲烷洗脱)来纯化，得到小标题化合物，其为无色油状物。收率0.933g。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.36(d，J＝2.1Hz，1H)，7.30(d，J＝7.9Hz，1H)，7.11(dd，J＝8.1，2.2Hz，1H)，4.77(s，2H)，3.87(t，J＝6.5Hz，2H)，2.86(t，J＝6.5Hz，2H)。未观察到两个可交换的质子。
d)2-氯-5-(2-羟基乙基)苯甲醛
将二氧化锰(IV)(1.00g)加到2-(4-氯-3-(羟基甲基)苯基)乙醇[芳族中间体7，步骤c](0.200g)在DCM(5mL)中的溶液中且将所得混悬液在室温搅拌过夜。然后混合物用硅藻土过滤，其中残留物用DCM充分洗涤。将滤液和洗涤液真空浓缩，得到小标题化合物，其为无色油状物。收率0.197g。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ10.47(s，1H)，7.80(d，J＝2.1Hz，1H)，7.42(d，J＝2.1Hz，1H)，7.41(s，1H)，3.89(宽三重峰，J＝5.9Hz，2H)，2.90(t，J＝6.4Hz，2H)，1.42(宽单峰，1H)。
芳族中间体8
2-(3-(溴甲基)-5-氯苯基)乙醇
Figure BDA0000148749790000491
a)2-(3-(溴甲基)-5-氯苯基)乙酸
Figure BDA0000148749790000492
将过氧化苯甲酰(0.112g)加到2-(3-氯-5-甲基苯基)乙酸[WO9746577](0.752g)和N-溴琥珀酰亚胺(0.801g)在DCM(15mL)中的混悬液中且将所得混合物在50℃在氮气下加热过夜。将混合物真空浓缩以除去二氯甲烷且将残留物在乙酸乙酯(10mL)中溶解。将溶液在85℃在氮气下加热4小时，然后冷却。溶液用水洗涤三次并用盐水洗涤一次，然后用无水硫酸镁干燥并通过硅胶快速色谱(用1∶20∶79乙酸∶乙酸乙酯∶异己烷洗脱)来纯化，得到粗小标题化合物，其为淡黄色固体。收率0.735g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.33-7.31(m，1H)，7.24-7.22(m，1H)，7.21-7.18(m，1H)，4.41(s，2H)，3.64(s，2H)。未观察到一个可交换的质子。
b)2-(3-(溴甲基)-5-氯苯基)乙醇
在室温历时5分钟将甲硼烷-二甲基硫醚复合物的溶液(2M在THF中，2.8mL)分批加到2-(3-(溴甲基)-5-氯苯基)乙酸[芳族中间体8，步骤a](0.73g)在无水THF(10mL)中的溶液中。将所得泡腾溶液搅拌1小时，然后在冰水中冷却并通过历时5分钟分批加入甲醇(3mL)来淬灭。将溶液在室温再搅拌20分钟，然后真空浓缩。残留物通过硅胶快速色谱(用25％乙酸乙酯/异己烷洗脱)来纯化，得到粗小标题化合物，其为白色固体。收率0.46g。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.29-7.24(m，1H)，7.19-7.13(m，2H)，4.41(s，2H)，3.87(t，J＝6.5Hz，2H)，2.84(t，J＝6.4Hz，2H)。未观察到一个可交换的质子。
芳族中间体9
甲磺酸3-(2-羟基乙基)苯乙基酯
Figure BDA0000148749790000493
在0℃将甲磺酰氯(0.67mL)在DCM(2mL)中的溶液滴加到搅拌的2，2’-(1，3-亚苯基)二乙醇(1.30g)和三乙胺(1.36mL)在DCM(30mL)中的溶液中。将反应混合物在0℃搅拌1小时，然后用水洗涤。水层用DCM再次萃取且将合并的有机相干燥，过滤且将溶剂减压蒸发。粗产物通过硅胶快速色谱(使用3％甲醇/二氯甲烷作为溶剂)来纯化。将含有产物的馏分蒸发至干，得到标题化合物。收率0.52g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ7.22(t，J＝7.6Hz，1H)，7.15-7.07(m，3H)，4.61(t，J＝5.2Hz，1H)，4.40(t，J＝6.8Hz，2H)，3.62-3.56(m，2H)，3.09(s，3H)，2.96(t，J＝6.9Hz，2H)，2.70(t，J＝7.2Hz，2H)。
芳族中间体10
甲磺酸4-(2-羟基乙基)苯乙基酯
通过芳族中间体9的方法来制备，其中使用2，2’-(1，4-亚苯基)二乙醇(1.30g)代替2，2’-(1，3-亚苯基)二乙醇。收率0.56g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ7.21-7.14(m，4H)，4.60(t，J＝5.3Hz，1H)，4.38(t，J＝6.8Hz，2H)，3.60-3.55(m，2H)，3.10(s，3H)，2.95(t，J＝6.8Hz，2H)，2.69(t，J＝7.2Hz，2H)。
芳族中间体11
2-氯-3-(2-羟基乙基)苯甲醛
Figure BDA0000148749790000502
a)3-(溴甲基)-2-氯苯甲酸
Figure BDA0000148749790000503
将过氧化苯甲酰(1.33g)加到2-氯-3-甲基苯甲酸(25g)和N-溴琥珀酰亚胺(28.7g)在氯苯(250mL)中的混悬液中且将所得混合物加热至85℃且保持4小时。混合物用乙酸乙酯(100mL)稀释并用10％盐水(3×100mL)洗涤。有机层用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。米色固体用乙酸乙酯(～75mL)/异己烷(～250mL)重结晶，得到小标题化合物，其为白色固体。收率25.3g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.93(d，J＝7.7Hz，1H)，7.66(d，J＝7.4Hz，1H)，7.36(t，J＝7.7Hz，1H)，4.67(s，2H)。未观察到一个可交换的质子。
b)2-氯-3-(氰基甲基)苯甲酸
3-(溴甲基)-2-氯苯甲酸[芳族中间体11，步骤a](13.2g)在DMF(150mL)中的溶液用氰化钾(7.23g)在水(50mL)中的溶液处理且将所得溶液在室温搅拌过夜。混合物用水(200mL)稀释并用浓盐酸(25mL)小心酸化，其中经由氮气气流使所释放的任何HCN通过漂白溶液。搅拌2小时后，水相用乙酸乙酯(3×250mL)萃取。合并的有机相用水(3×250mL)和盐水(250mL)洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发，得到小标题化合物，其为白色固体。收率10.3g。1HNMR(300MHz，d6-DMSO)δ13.54(s，1H)，7.75-7.67(m，2H)，7.48(t，J＝7.7Hz，1H)，4.16(s，2H)。
c)3-(羧基甲基)-2-氯苯甲酸
Figure BDA0000148749790000512
将浓硫酸(60mL)滴加到冰冷的水(75mL)中且将所得溶液加到2-氯-3-(氰基甲基)苯甲酸[芳族中间体11，步骤b](14g)中。将所得混悬液加热至回流(165℃)且保持30分钟，在此期间原料溶解且观察到新的析出物。将反应混合物冷却并用水(250mL)稀释并用乙酸乙酯(3×500mL)萃取。合并的有机相用水(250mL)和盐水(250mL)洗涤，然后用硫酸镁干燥并蒸发，得到小标题化合物，其为白色固体。收率13.7g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ7.62(dd，J＝7.7，1.8Hz，1H)，7.54(dd，J＝7.7，1.8Hz，1H)，7.37(t，J＝7.7Hz，1H)，3.78(s，2H)。未观察到两个可交换的质子。
d)2-(2-氯-3-(羟基甲基)苯基)乙醇
Figure BDA0000148749790000513
在室温历时5分钟将甲硼烷-二甲基硫醚复合物的溶液(2M在THF中，220mL)分批加到3-(羧基甲基)-2-氯苯甲酸[芳族中间体11，步骤c](18.9g)在无水THF(800mL)中的混悬液中。将所得冒泡混悬液在室温搅拌30分钟，然后加热至回流且保持60分钟并冷却至室温过夜。混合物通过历时15分钟分批加入甲醇(100mL)来淬灭并搅拌直到不再冒泡。加入浓盐酸水溶液(25mL)，将混合物搅拌30分钟并减压浓缩。将胶状残留物在乙酸乙酯(500mL)和盐酸水溶液(2M，200mL)之间分配。分离各相且水相用乙酸乙酯(2×300mL)萃取。合并的有机相用盐水(300mL)洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发，得到小标题化合物，其为黄色油状物。收率17.8g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ7.40(dd，J＝7.0，2.2Hz，1H)，7.29-7.21(m，2H)，5.34(t，J＝5.5Hz，1H)，4.71(t，J＝4.9Hz，1H)，4.55(d，J＝5.1Hz，2H)，3.63-3.56(m，2H)，2.87(t，J＝7.2Hz，2H)。
e)2-氯-3-(2-羟基乙基)苯甲醛
将二氧化锰(IV)(43.1g)加到2-(2-氯-3-(羟基甲基)苯基)乙醇[芳族中间体11，步骤d](18.5g)在氯仿(500mL)中的轻微混悬液中且将所得混悬液加热回流2小时。将反应混合物冷却，用硅藻土过滤且滤垫用DCM(3×300mL)洗涤。将合并的洗涤液和滤液蒸发且残留物通过硅胶快速色谱(用3∶1至1∶1异己烷∶乙酸乙酯梯度洗脱)来纯化。合并含有产物的馏分并蒸发，得到标题化合物，其为白色固体。收率12.00g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.55(s，1H)，10.54(t，J＝5.6Hz，1H)，7.83(dd，J＝7.7，1.8Hz，1H)，7.55(dd，J＝7.4，1.8Hz，1H)，7.35(t，J＝7.6Hz，1H)，3.94(q，J＝6.4Hz，2H)，3.11(t，J＝6.5Hz，2H)。
芳族中间体12
2-(4-(2-羟基乙基)苯氧基)乙醛
Figure BDA0000148749790000521
a)2-(4-(2，2-二乙氧基乙氧基)苯基)乙醇
Figure BDA0000148749790000522
将碳酸铯(28.3g)加到4-(2-羟基乙基)苯酚(10g)和2-溴-1，1-二乙氧基乙烷(11.8mL)在DMF(150mL)中的溶液中。将所得混悬液在90℃加热16小时。将反应混合物倒入水(500mL)中。水相用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。合并的有机溶液用水(200mL)和盐水(200mL)洗涤，然后用硫酸镁干燥，过滤并真空蒸发。通过硅胶色谱(用异己烷至1∶1乙酸乙酯∶异己烷梯度洗脱)来纯化，得到小标题化合物，其为黄色油状物。收率10g。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.14(d，J＝6.9Hz，2H)，6.88(d，J＝6.9Hz，2H)，4.83(t，J＝5.0Hz，1H)，4.00(d，J＝5.0Hz，2H)，3.87-3.70(m，4H)，3.70-3.56(m，2H)，2.81(t，J＝6.4Hz，2H)，1.25(t，J＝6.9Hz，6H)。
未观察到一个可交换的质子。
b)2-(4-(2-羟基乙基)苯氧基)乙醛
将浓盐酸(5mL)加到2-(4-(2，2-二乙氧基乙氧基)苯基)乙醇[芳族中间体12，步骤a](0.76g)在1，4-二噁烷(10mL)中的溶液中且将所得混合物搅拌1小时。反应混合物用水(50mL)稀释并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。合并的有机溶液用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤，然后用硫酸钠干燥，过滤并真空蒸发，得到小标题化合物，其直接使用。收率0.35g。
芳族中间体13
2-(5-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)噻吩-2-基)乙醇
Figure BDA0000148749790000531
历时20分钟将叔丁基二甲基甲硅烷基氯(6.63g)分批加到咪唑(2.99g)和2-(5-(2-羟基乙基)噻吩-2-基)乙酸[WO 2008096129](3.9g)在DMF(50mL)中的溶液中。将所得溶液搅拌1小时。然后加入THF(50mL)且将反应混合物在冰浴中冷却。然后加入碳酸钾(4.05g)在水(50mL)中的溶液且将混合物搅拌20分钟。将反应混合物在乙酸乙酯和盐水之间分配。分离有机层并用盐水洗涤两次，用硫酸钠干燥，过滤且将溶剂真空蒸发。将残留物在THF(80mL)中溶解并滴加甲硼烷-四氢呋喃复合物(1M在THF中的溶液，62.8mL)。将所得溶液搅拌2小时并通过滴加甲醇(30mL)来淬灭。然后将溶剂真空蒸发。通过硅胶色谱(用83∶17异己烷∶乙酸乙酯洗脱)来纯化，得到小标题化合物，其为黄色液体。收率4.6g。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.69-6.63(m，2H)，3.87-3.75(m，4H)，3.05-2.91(m，4H)，0.89(s，9H)，0.03(s，6H)。未观察到一个可交换的质子。
芳族中间体14
2-(3-(2-羟基乙基)苯氧基)乙醛
Figure BDA0000148749790000532
通过芳族中间体12的方法来制备，其中使用3-(2-羟基乙基)苯酚代替4-(2-羟基乙基)苯酚。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.86(s，1H)，7.28-7.13(m，1H)，6.92-6.66(m，3H)，4.57(s，2H)，3.87(t，J＝6.5Hz，2H)，2.86(t，J＝6.5Hz，2H)。未观察到一个可交换的质子。
芳族中间体15
3-(3-羟基丙基硫基)苯甲醛
Figure BDA0000148749790000541
a)3-(3-乙氧基-3-氧代丙基硫基)苯甲酸
Figure BDA0000148749790000542
3-巯基苯甲酸(3.4g)在DMF(50mL)中的溶液用碳酸钾(3.18g)处理并搅拌5分钟。历时30分钟滴加3-溴丙酸乙酯(2.8mL)在DMF(10mL)中的溶液且将所得混合物再搅拌30分钟。将混合物在乙酸乙酯和水之间分配并分离各相。水相用盐酸水溶液酸化并再用乙酸乙酯萃取。有机相用水洗涤，干燥，过滤并减压浓缩，得到小标题化合物。收率5.3g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ13.11(s，1H)，7.84(t，J＝1.7Hz，1H)，7.77(dt，J＝7.8，1.4Hz，1H)，7.60(ddd，J＝7.7，2.1，1.8Hz，1H)，7.47(t，J＝7.7Hz，1H)，4.06(q，J＝7.1Hz，2H)，3.22(t，J＝7.0Hz，2H)，2.62(t，J＝6.9Hz，2H)，1.17(t，J＝7.2Hz，3H)。
b)3-(3-(羟基甲基)苯基硫基)丙-1-醇
Figure BDA0000148749790000543
历时5分钟将氢化锂铝溶液(2M在THF中，2.2mL)分批加到在冰水中预冷却的3-(3-乙氧基-3-氧代丙基硫基)苯甲酸[芳族中间体15，步骤a](1.0g)在THF(20mL)中的溶液中。加入～1/2后，混合物形成稠厚析出物并再用THF(15mL)稀释以保持搅拌。将混合物从冷却浴中取出并在室温搅拌3.5小时。将混合物在冰水中冷却并再用氢化锂铝(2M在THF中，2.2mL)处理。将混合物从冷却浴中取出并在室温搅拌过夜。将浑浊溶液在冰水中冷却，然后通过小心加入甲醇(5mL)(历时30分钟分批加入)来淬灭。加入～1/2后，将混合物从冷却浴中取出并温热至室温且保持45分钟。将混合物倒入盐酸水溶液(2M)中并用乙酸乙酯萃取三次。合并的有机萃取物用盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩，得到小标题化合物，其为淡黄色油状物。收率0.55g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.38-7.35(s，1H)，7.31-7.24(m，2H)，7.20-7.12(m，1H)，4.67(s，2H)，3.77(t，J＝6.0Hz，2H)，3.06(t，J＝7.0Hz，2H)，1.90(ddd，J＝13.1，7.1，6.1Hz，2H)。未观察到两个可交换的质子。
c)3-(3-羟基丙基硫基)苯甲醛
将二氧化锰(1.76g)加到3-(3-(羟基甲基)苯基硫基)丙-1-醇[芳族中间体15，步骤b](0.40g)在DCM(10mL)中的溶液中。将所得混合物在室温搅拌三天。然后混悬液用硅藻土过滤，其中残留物用DCM充分洗涤。将合并的滤液和洗涤液减压浓缩，得到标题化合物，其为黄色胶状物。收率0.33g。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ9.98(s，1H)，7.82(t，J＝1.8Hz，1H)，7.66(dt，J＝7.5，1.3Hz，1H)，7.58(ddt，J＝0.1，7.7，1.3Hz，1H)，7.45(t，J＝7.6Hz，1H)，3.80(q，J＝5.7Hz，2H)，3.12(t，J＝7.2Hz，2H)，1.97-1.89(m，2H)，1.48(t，J＝5.3Hz，1H)。
芳族中间体16
3-(2-羟基乙基硫基)苯甲醛
a)3-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基硫基)苯甲酸
Figure BDA0000148749790000552
将(2-溴乙氧基)(叔丁基)二甲基甲硅烷(1.48mL)滴加到3-巯基苯甲酸(1.07g)和碳酸钾(1.91g)在DMF(15mL)中的混悬液中。将所得混悬液搅拌2小时。反应混合物通过滴加盐酸水溶液(2M，10mL)来小心酸化并倒入水(100mL)中。所得水相用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。合并的有机物用盐水(50mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发，得到小标题化合物，其为澄清油状物。收率2.8g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ13.11(s，1H)，7.89(t，J＝1.7Hz，1H)，7.79-7.74(m，1H)，7.66-7.61(m，1H)，7.47(t，J＝7.7Hz，1H)，3.82(t，J＝6.4Hz，2H)，3.19(t，J＝6.4Hz，2H)，0.87(s，9H)，0.05(s，6H)。
b)2-(3-(羟基甲基)苯基硫基)乙醇
Figure BDA0000148749790000553
将甲硼烷-二甲基硫醚复合物(2M在THF中，17.3mL)滴加到冰冷的3-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基硫基)苯甲酸[芳族中间体16，步骤a](2.16g)在THF(50mL)中的溶液中。将反应混合物温热至室温，然后加热回流2小时。将反应混合物在冰浴中冷却并滴加盐酸水溶液(2M，50mL)。将所得混合物搅拌过夜。将反应混合物浓缩至其初始体积的一半且所得水相用DCM(3×100mL)萃取。合并的有机物用盐水(100mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发。残留物通过硅胶色谱(用4∶1异己烷∶乙酸乙酯至100％乙酸乙酯梯度洗脱)来纯化。合并含有产物的馏分并蒸发，得到小标题化合物，其为澄清油状物。收率0.77g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ7.29-7.23(m，2H)，7.21-7.17(m，1H)，7.13-7.09(m，1H)，5.20(t，J＝5.8Hz，1H)，4.92(t，J＝5.6Hz，1H)，4.47(d，J＝5.9Hz，2H)，3.59-3.53(m，2H)，3.02(t，J＝6.9Hz，2H)。
c)3-(2-羟基乙基硫基)苯甲醛
将二氧化锰(1.36g)加到2-(3-(羟基甲基)苯基硫基)乙醇[芳族中间体16，步骤b](0.29g)在DCM(10mL)中的溶液中。将所得混合物加热回流4小时，冷却并用硅藻土过滤。滤垫用DCM(3×20mL)洗涤。合并滤液和洗涤液并蒸发，得到小标题化合物，其为黄色胶状物。收率0.2g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.99(s，1H)，7.84(s，1H)，7.71-7.64(m，2H)，7.54(t，J＝7.7Hz，1H)，4.99(t，J＝5.6Hz，1H)，3.64-3.57(m，2H)，3.13(t，J＝6.7Hz，2H)。
芳族中间体17
5-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)噻吩-3-甲醛
Figure BDA0000148749790000561
a)叔丁基(2-(5-氯噻吩-2-基)乙氧基)二甲基甲硅烷
Figure BDA0000148749790000562
将NCS(0.826g)分批加到叔丁基二甲基(2-(噻吩-2-基)乙氧基)甲硅烷[WO 2008096129](1.5g)在氯仿(50mL)中的溶液中且将所得混合物加热回流3天。混合物用DCM(100mL)稀释并用饱和碳酸氢钠水溶液(2×100mL)和盐水(100mL)洗涤，然后用硫酸钠干燥，过滤并蒸发。残留物通过硅胶色谱(用异己烷洗脱)来纯化，得到小标题化合物，其为澄清油状物。收率1.00g。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ6.69(d，J＝3.5Hz，1H)，6.57-6.54(m，1H)，3.75(t，J＝6.5Hz，2H)，2.89(t，J＝6.4Hz，2H)，0.87(2，J＝3.1Hz，9H)，0.01(s，6H)。
b)5-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)-2-氯噻吩-3-甲醛
Figure BDA0000148749790000563
在-78℃历时5分钟将叔丁基(2-(5-氯噻吩-2-基)乙氧基)二甲基甲硅烷[芳族中间体17，步骤a](0.8g)滴加到搅拌的丁基锂(2.5M在己烷中，1.73mL)和2，2，6，6-四甲基哌啶(0.73mL)在THF(25mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌2小时，然后加入DMF(0.67mL)。将混合物再搅拌1小时并温热至室温。将反应混合物小心倒入盐酸水溶液(0.5M，200mL)中并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。合并的有机相用水(2×100mL)和盐水(100mL)洗涤，然后用硫酸钠干燥，过滤并蒸发。所得油状物通过硅胶色谱(用异己烷至5％乙醚/异己烷进行梯度洗脱)来纯化。合并含有产物的馏分并蒸发，得到小标题化合物，其为澄清油状物。收率0.80g。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.96(s，1H)，7.05(s，1H)，3.79(t，J＝6.0Hz，2H)，2.92(t，J＝6.0Hz，2H)，0.91(s，9H)，0.05(s，6H)。
c)5-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)噻吩-3-甲醛
将钯/炭(10％，0.28g)在水(0.5mL)中的浆料小心加到5-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)-2-氯噻吩-3-甲醛[芳族中间体17，步骤b](0.80g)和三乙胺(0.91mL)在乙醇(50mL)中的溶液中且将所得混合物在压力为4巴的氢气下搅拌过夜。混合物用硅藻土过滤且滤垫用乙醇(10mL)洗涤。将合并的滤液和洗涤液蒸发并与甲苯(20mL)共沸，得到黄色油状物。将残留物在DCM(100mL)中溶解，加入二氧化锰(2.28g)且将所得混悬液加热回流过夜。混合物用硅藻土过滤且滤垫用DCM(50mL)洗涤。将合并的滤液和洗涤液蒸发，得到标题化合物，其为黄色油状物。收率0.60g。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.80(s，1H)，7.93-7.90(m，1H)，3.80(t，J＝6.2Hz，2H)，2.99(t，J＝5.9Hz，2H)，0.88(s，9H)，0.01(s，6H)。一个质子被CDCl3峰掩蔽。
芳族中间体18
3-(3-羟基丙基)苯甲醛
Figure BDA0000148749790000571
a)3-(3-(羟基甲基)苯基)丙-2-炔-1-醇
Figure BDA0000148749790000572
将碘化亚铜(I)(0.037g)和四(三苯基膦)钯(0)(0.075g)加到(3-碘苯基)甲醇(2.27g)、叔丁基二甲基(丙-2-炔基氧基)甲硅烷(1.1g)和三乙胺(2.7mL)在NMP(20mL)中的溶液中且将混合物在环境温度在氮气下搅拌18小时。混合物用水稀释并萃取到乙酸乙酯(×3)中。合并的萃取物先后用10％盐水、30％盐水和饱和盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤且除去溶剂。粗产物通过硅胶快速色谱(用10、15和20％乙酸乙酯/异己烷梯度洗脱)来纯化。将适当的馏分蒸发至干，得到产物和原料的混合物。混合物通过制备性HPLC(XBridgeTM，梯度为65-99％乙腈/[0.2％TFA水溶液])来纯化，得到小标题化合物，其为淡黄色油状物。收率0.44g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.46-7.28(m，4H)，4.68(s，2H)，4.49(s，2H)。未观察到两个可交换的质子。
注意：甲硅烷基保护基在HPLC纯化过程中断裂。
b)3-(3-(羟基甲基)苯基)丙-1-醇
3-(3-(羟基甲基)苯基)丙-2-炔-1-醇[芳族中间体18，步骤a](0.44g)在乙醇(20mL)中的溶液通过H-CubeTM氢化反应器(ThalesNano Nanotechnology Inc)用10％Pd/C催化剂在50℃在40巴进行氢化。使溶液通过H-Cube三次并真空浓缩，得到小标题化合物，其为淡黄色油状物。收率(0.40g)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.31-7.12(m，4H)，4.68(s，2H)，3.68(q，J＝6.6Hz，2H)，2.72(t，J＝7.7Hz，2H)，1.94-1.86(m，2H)。未观察到两个可交换的质子。
c)3-(3-羟基丙基)苯甲醛
将二氧化锰(2.07g)加到3-(3-(羟基甲基)苯基)丙-1-醇[芳族中间体18，步骤b](0.40g)在二氯甲烷(20mL)中的溶液中且将混合物在环境温度搅拌18小时。混合物用硅藻土过滤并真空浓缩。粗产物通过硅胶快速色谱(用40％、50％和60％乙酸乙酯/异己烷梯度洗脱)来纯化。将含有产物的馏分蒸发至干，得到标题化合物，其为无色油状物。收率0.21g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.00(s，1H)，7.74-7.69(m，2H)，7.51-7.43(m，2H)，3.73-3.66(m，2H)，2.81(t，J＝7.8Hz，2H)，1.97-1.88(m，2H)，1.34(t，J＝5.0Hz，1H)。
芳族中间体19
3-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)丁基)苯甲醛
Figure BDA0000148749790000582
a)(3-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)丁-1-炔基)苯基)甲醇
Figure BDA0000148749790000583
通过芳族中间体18步骤a的方法来制备，其中使用叔丁基二甲基(丁-3-炔基氧基)甲硅烷(0.92g)代替叔丁基二甲基(丙-2-炔基氧基)甲硅烷。制备性HPLC条件变为XBridgeTM且梯度为75-99％甲醇/[0.2％氨水]以避免甲硅烷基保护基的断裂。收率0.79g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.40(s，1H)，7.34-7.26(m，3H)，4.66(d，J＝5.9Hz，2H)，3.82(t，J＝7.2Hz，2H)，2.62(t，J＝7.0Hz，2H)，1.63(t，J＝6.0Hz，1H)，0.92(s，9H)，0.10(s，6H)。
b)(3-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)丁基)苯基)甲醇
通过芳族中间体18步骤b的方法来制备，其中使用(3-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)丁-1-炔基)苯基)甲醇[芳族中间体19，步骤a](0.79g)代替3-(3-(羟基甲基)苯基)丙-2-炔-1-醇。收率0.72g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.30-7.10(m，4H)，4.66(t，J＝5.8Hz，2H)，3.63(t，J＝6.3Hz，2H)，2.63(t，J＝7.7Hz，2H)，1.72-1.51(m，4H)，0.89(s，9H)，0.04(s，6H)。
c)3-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)丁基)苯甲醛
通过芳族中间体18步骤c的方法来制备，其中使用(3-(4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)丁基)苯基)甲醇[芳族中间体19，步骤b](0.72g)代替3-(3-(羟基甲基)苯基)丙-1-醇。收率0.64g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.00(s，1H)，7.72-7.68(m，2H)，7.46-7.43(m，2H)，3.63(t，J＝6.4Hz，2H)，2.72(t，J＝7.7Hz，2H)，1.76-1.67(m，2H)，1.60-1.52(m，2H)，0.89(s，9H)，0.04(s，6H)。
芳族中间体20
2-(4-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)噻吩-2-基)乙醇
Figure BDA0000148749790000592
a)(4-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)噻吩-2-基)甲醇
Figure BDA0000148749790000593
在0℃将硼氢化钠(1.40g)分批加到搅拌的4-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)噻吩-2-甲醛[芳族中间体6](10g)在乙醇(70mL)中的溶液中。将反应混合物在0℃搅拌1小时，然后在乙酸乙酯和盐水之间分配并分离。将有机层干燥，过滤且将溶剂减压蒸发。粗产物通过硅胶快速色谱(使用12％乙酸乙酯/异己烷作为溶剂)来纯化。将含有产物的馏分蒸发至干，得到小标题化合物。收率6.00g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ7.04(s，1H)，6.82(s，1H)，5.35(t，J＝5.6Hz，1H)，4.55(d，J＝5.6Hz，2H)，3.73(t，J＝7.0Hz，2H)，2.69(t，J＝6.9Hz，2H)，0.85(s，9H)，0.00(s，6H)。
b)2-(4-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)噻吩-2-基)乙腈
Figure BDA0000148749790000601
在0℃在氮气下先后将三苯基膦(7.16g)和四溴化碳(8.62g)一次性加到(4-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)噻吩-2-基)甲醇[芳族中间体20，步骤a](6.00g)在DCM(50mL)中的溶液中。将所得溶液在室温搅拌1小时。将反应混合物冷却至0℃并用四乙基氰化铵(4.92g)处理(一次性加入)。混合物再用二氯甲烷(20mL)稀释并在室温搅拌40分钟。将反应混合物在二氯甲烷和盐水之间分配，分离有机层，用硫酸钠干燥且将溶剂减压除去。粗产物通过硅胶快速色谱(用2至6％乙酸乙酯/异己烷梯度洗脱)来纯化。将含有产物的馏分蒸发至干，得到小标题化合物。收率4.20g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.93(s，1H)，6.92(s，1H)，3.86(s，2H)，3.78(t，J＝6.7Hz，2H)，2.78(t，J＝6.7Hz，2H)，0.88(s，9H)，0.00(s，6H)。
c)2-(4-(2-羟基乙基)噻吩-2-基)乙酸
Figure BDA0000148749790000602
将2-(4-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)噻吩-2-基)乙腈[芳族中间体20，步骤b](4.20g)在乙醇(30mL)中的溶液加到搅拌的氢氧化钾(1.67g)在水(30mL)中的溶液中。将所得混合物在100℃搅拌3小时。将混合物在盐水和乙酸乙酯之间分配并分离各相。水层用冰冷却并通过滴加浓盐酸来酸化。然后水层用乙酸乙酯(×2)萃取，合并的有机相用盐水洗涤，用硫酸钠干燥且将溶剂减压蒸发，得到黄色固体，其用乙醚(20mL)研磨，得到小标题化合物。收率2.33g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ12.46(s，1H)，7.00(s，1H)，6.81(s，1H)，4.61(t，J＝4.9Hz，1H)，3.73(s，2H)，3.60-3.54(m，2H)，2.66(t，J＝7.0Hz，2H)。
d)2-(4-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)噻吩-2-基)乙醇
在20℃历时20分钟将叔丁基二甲基甲硅烷基氯(2.21g)分批加到咪唑(1.00g)和2-(4-(2-羟基乙基)噻吩-2-基)乙酸[芳族中间体20，步骤c](1.3g)在DMF(15mL)中的混合物中。将所得溶液在20℃搅拌1小时。反应混合物用THF(15mL)稀释，在冰水中冷却并用碳酸钾(1.35g)在水(15mL)中的溶液处理。将混合物在0℃搅拌20分钟。将混合物在乙酸乙酯和盐水之间分配并分离各相。有机层用盐水洗涤两次，干燥，过滤且将溶剂减压除去。将残留物在THF(40mL)中溶解，在冰浴中冷却并用甲硼烷-四氢呋喃复合物(1M在THF中，21mL)处理(滴加)。将所得溶液在20℃搅拌2小时。反应混合物通过滴加甲醇(10mL)来淬灭且将溶剂减压除去。粗产物通过硅胶快速色谱(使用17％乙酸乙酯/异己烷作为溶剂)来纯化。将含有产物的馏分蒸发至干，得到标题化合物。收率1.25g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ6.94(s，1H)，6.75(s，1H)，4.75(t，J＝5.3Hz，1H)，3.74(t，J＝6.9Hz，2H)，3.62-3.56(m，2H)，2.86(t，J＝6.9Hz，2H)，2.69(t，J＝6.8Hz，2H)，0.85(s，9H)，0.00(s，6H)。
芳族中间体21
乙酸2-(4-(2-(甲基磺酰基氧基)乙基)噻吩-2-基)乙基酯
Figure BDA0000148749790000611
a)乙酸2-(4-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)噻吩-2-基)乙基酯
Figure BDA0000148749790000612
在20℃历时10分钟将乙酰氯(0.36mL)在无水THF(3mL)中的溶液滴加到搅拌的2-(4-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)噻吩-2-基)乙醇[芳族中间体20](1.10g)和三乙胺(1.18mL)在无水THF(30mL)中的溶液中。将混合物在20℃搅拌20分钟，然后在乙酸乙酯和盐水之间分配。将有机层干燥，过滤且将溶剂减压蒸发，得到小标题化合物。收率1.20g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.81(s，1H)，6.72(s，1H)，4.27(t，J＝6.9Hz，2H)，3.78(t，J＝6.9Hz，2H)，3.09(t，J＝6.8Hz，2H)，2.77(t，J＝6.9Hz，2H)，2.06(s，3H)，0.88(s，9H)，0.00(s，6H)。
b)乙酸2-(4-(2-羟基乙基)噻吩-2-基)乙基酯
Figure BDA0000148749790000613
将TBAF(1M在THF中，3.65mL)滴加到乙酸2-(4-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)噻吩-2-基)乙基酯[芳族中间体21，步骤a](1.2g)在无水THF(30mL)中的溶液中。将该溶液在20℃静置1小时，然后将溶剂减压蒸发且残留物通过硅胶快速色谱(使用40％乙酸乙酯/异己烷作为溶剂)来纯化。将含有产物的馏分蒸发至干，得到小标题化合物。收率0.63g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ6.97(s，1H)，6.80(s，1H)，4.60(t，J＝5.3Hz，1H)，4.17(t，J＝6.7Hz，2H)，3.60-3.54(m，2H)，3.04(t，J＝6.5Hz，2H)，2.65(t，J＝7.0Hz，2H)，2.01(s，3H)。
c)乙酸2-(4-(2-(甲基磺酰基氧基)乙基)噻吩-2-基)乙基酯
乙酸2-(4-(2-羟基乙基)噻吩-2-基)乙基酯[芳族中间体21，步骤b](0.6g)和三乙胺(0.47mL)在DCM(30mL)中的溶液在0℃历时20分钟用甲磺酰氯(0.24mL)在DCM(3mL)中的溶液逐滴处理。将混合物在20℃搅拌1小时，然后用水洗涤。将有机层干燥，过滤且将溶剂减压蒸发，得到标题化合物。收率0.80g。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ6.91(s，1H)，6.74(s，1H)，4.40(t，J＝6.7Hz，2H)，4.27(t，J＝6.7Hz，2H)，3.11(t，J＝6.5Hz，2H)，3.02(t，J＝6.8Hz，2H)，2.91(s，3H)，2.07(s，3H)。
芳族中间体22
3-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)-2-甲基苯甲醛
a)1-溴-3-(2-甲氧基乙烯基)-2-甲基苯(E/Z混合物)
Figure BDA0000148749790000622
历时20分钟将叔丁醇钾(2.64g)分批加到搅拌的在冰水中预冷却的(甲氧基甲基)三苯基氯化鏻(8.66g)在THF(20mL)中的混悬液中。显示出深红色。移开冷却浴且将混合物在室温搅拌1.75小时。将混合物在冰水中冷却并用3-溴-2-甲基苯甲醛[J.Am.Chem.Soc.2009，131(4)，1410](3.87g)在THF(20mL)中的溶液处理(历时45分钟滴加)。将反应混合物搅拌2.5小时，然后倒入盐酸水溶液(1M)中并用乙醚萃取两次。合并的有机萃取物用水洗涤三次，用盐水洗涤一次，然后干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩，得到棕色固体。固体通过硅胶快速色谱(用5％MeOH/DCM洗脱)来纯化以除去大部分三苯基膦氧化物，然后再次通过硅胶(先后用10％DCM/异己烷和25％DCM/异己烷洗脱)来纯化。合并含有E/Z产物混合物的馏分并减压浓缩，得到小标题化合物，其为无色油状物。收率1.76g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.72(d，J＝7.7Hz，0.5H)，7.38(t，J＝8.0Hz，1H)，7.18(d，J＝7.7Hz，0.5H)，6.97(dt，J＝13.6，7.8Hz，1H)，6.80(d，J＝12.6Hz，0.5H)，6.19(d，J＝7.2Hz，0.5H)，5.93(d，J＝12.8Hz，0.5H)，5.34(d，J＝7.2Hz，0.5H)，3.74(s，1.5H)，3.70(s，1.5H)，2.40(s，1.5H)，2.39(s，1.5H)。
b)2-(3-溴-2-甲基苯基)乙醇
Figure BDA0000148749790000631
向冰冷的1-溴-3-(2-甲氧基乙烯基)-2-甲基苯[芳族中间体22，步骤a](1.75g)在THF(25mL)中的溶液中加入乙酸汞(II)(2.95g)在水(30mL)中的溶液且将所得溶液在冰水中搅拌2.75小时。另外，将碳酸钾(35g)在水(30mL)中溶解且将溶液过滤。将硼氢化钠(1.17g)部分溶解/部分混悬在35mL所得碳酸钾溶液中并加到上述反应混合物中。形成灰色浑浊二相混合物，将其在室温搅拌2.5小时，然后倒入水中并用乙酸乙酯萃取两次。合并的有机相用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩，得到小标题化合物，其为无色油状物。收率1.67g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.45(dd，J＝7.9，1.0Hz，1H)，7.12(d，J＝7.4Hz，1H)，6.99(t，J＝7.8Hz，1H)，3.83(dd，J＝12.3，6.7Hz，2H)，2.96(t，J＝6.9Hz，2H)，2.42(s，3H)，1.37(t，J＝5.8Hz，1H)。
c)(3-溴-2-甲基苯乙氧基)(叔丁基)二甲基甲硅烷
Figure BDA0000148749790000632
将2-(3-溴-2-甲基苯基)乙醇[芳族中间体22，步骤b](1.67g)和咪唑(1.60g)在DMF(20mL)中的溶液在冰水中冷却，用叔丁基二甲基氯甲硅烷(1.31g)处理，然后从冷却浴中取出并在室温搅拌过夜。将溶液倒入水中并用乙醚萃取两次。合并的有机萃取物用水洗涤两次，用盐水洗涤一次，然后用无水硫酸镁干燥并通过硅胶快速色谱(用10％二氯甲烷/异己烷洗脱)来纯化，得到小标题化合物，其为无色油状物。收率2.06g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.43(dd，J＝7.9，1.3Hz，1H)，7.11(dd，J＝0.4，7.3Hz，1H)，6.98(t，J＝7.8Hz，1H)，3.78(t，J＝7.2Hz，2H)，2.91(t，J＝7.2Hz，2H)，2.43(s，3H)，0.88(s，9H)，0.00(s，6H)。
d)3-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)-2-甲基苯甲醛
将(3-溴-2-甲基苯乙氧基)(叔丁基)二甲基甲硅烷[芳族中间体22，步骤c](2.06g)在THF(40mL)中的无色溶液在氮气气氛下冷却至-78℃并用丁基锂(2.1M在己烷中，3.3mL)处理(历时3分钟滴加)。将所得淡黄色溶液在-78℃搅拌30分钟，用N，N-二甲基甲酰胺(0.73mL)处理(历时2分钟滴加)，得到无色溶液，在-78℃再搅拌30分钟，然后从冷却浴中取出并历时45分钟温热至室温。溶液通过加入10％氯化铵水溶液(100mL)来淬灭且所得混合物用乙醚萃取两次。合并的有机相用盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥并真空浓缩，得到标题化合物，其为淡黄色油状物。收率1.74g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.35(s，1H)，7.71(dd，J＝7.7，1.3Hz，1H)，7.44(dd，J＝7.6，1.4Hz，1H)，7.32(t，J＝7.6Hz，1H)，3.82(t，J＝7.0Hz，2H)，2.97(t，J＝7.0Hz，2H)，2.68(s，3H)，0.89(t，J＝2.8Hz，9H)，0.00(t，J＝3.1Hz，6H)。
芳族中间体23
2-(3-(溴甲基)-5-甲基苯基)乙醇
Figure BDA0000148749790000641
a)2-(3-(溴甲基)-5-甲基苯基)乙酸
Figure BDA0000148749790000642
在50℃在氮气下历时1小时将NBS(3.12g)分批加到2-(3，5-二甲基苯基)乙酸(3.6g)和AIBN(0.015g)在乙酸乙酯(100mL)中的溶液中。再加入AIBN(0.015g)且将混合物加热至回流且保持3小时。反应混合物用10％氯化钠水溶液(2×200mL)洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。粗物质通过硅胶快速色谱(使用20％乙酸乙酯/异己烷(含有1％乙酸)作为溶剂)来纯化。将含有产物的馏分蒸发至干，得到固体，其用环己烷(10mL)研磨，得到小标题化合物，其为白色固体。收率2.10g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ7.15-7.11(m，2H)，7.01(s，1H)，4.64(s，2H)，3.52(s，2H)，2.28(s，3H)。未观察到一个可交换的质子。
b)2-(3-(溴甲基)-5-甲基苯基)乙醇
在0℃将甲硼烷-二甲基硫醚复合物(2M在THF中，8.6mL)滴加到2-(3-(溴甲基)-5-甲基苯基)乙酸[芳族中间体23，步骤a](2.1g)在THF(50mL)中的溶液中且将混合物在该温度搅拌10分钟，然后在室温搅拌1小时。反应混合物通过滴加甲醇来淬灭，将溶剂减压蒸发且残留物通过硅胶快速色谱(使用30％乙酸乙酯/异己烷作为溶剂)来纯化。将含有产物的馏分蒸发至干，得到标题化合物。收率1.40g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ7.07(s，2H)，6.97(s，1H)，4.61(s，2H)，3.58(t，J＝7.6Hz，2H)，2.67(t，J＝7.0Hz，2H)，2.27(s，3H)。未观察到一个可交换的质子。
芳族中间体24
3-(3-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)丙基)-2-氟苯甲醛
Figure BDA0000148749790000651
a)3-(2-氟苯基)丙-1-醇
将甲硼烷-二甲基硫醚复合物(2M在THF中，27.6mL)滴加到3-(2-氟苯基)丙酸(3.09g)在四氢呋喃(25mL)中的溶液中且将所得混合物温热至室温并搅拌过夜。反应混合物用甲醇小心淬灭并当不再冒泡时进行蒸发。残留物通过硅胶快速色谱(用4∶1至1∶1异己烷∶乙酸乙酯梯度洗脱)来纯化，得到小标题化合物，其为澄清油状物。收率2.72g。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.24-7.13(m，2H)，7.09-6.97(m，2H)，3.67(t，J＝6.3Hz，2H)，2.74(t，J＝7.6Hz，2H)，1.95-1.83(m，2H)。未观察到一个可交换的质子。
b)叔丁基(3-(2-氟苯基)丙氧基)二甲基甲硅烷
Figure BDA0000148749790000653
通过芳族中间体5步骤a的方法来制备，其中使用3-(2-氟苯基)丙-1-醇[芳族中间体24，步骤a](2.72g)代替2-(2-氟苯基)乙醇。收率4.4g。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.23-7.09(m，2H)，7.09-6.94(m，2H)，3.64(t，J＝6.3Hz，2H)，2.75-2.66(m，2H)，1.89-1.76(m，2H)，0.91(s，9H)，0.05(s，6H)。
c)3-(3-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)丙基)-2-氟苯甲醛
在-78℃历时5分钟将叔丁基(3-(2-氟苯基)丙氧基)二甲基甲硅烷[芳族中间体24，步骤b](4.4g)滴加到仲丁基锂(1.4M在环己烷中，11.7mL)和1，1，4，7，7-五甲基二亚乙基三胺(3.4mL)在THF(25mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌2小时，然后小心加入DMF(6.4mL)且将所得混合物温热至室温并搅拌过夜。反应混合物用水(100mL)淬灭，然后加入乙酸乙酯(250mL)。分离各相且有机相用水(2×100mL)、盐酸水溶液(2M，2×50mL)和盐水(100mL)洗涤，然后用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。通过硅胶色谱(用异己烷至10％乙醚/异己烷进行梯度洗脱)来纯化。合并含有产物的馏分并蒸发，得到标题化合物，其为澄清油状物。收率1.0g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.38(s，1H)，7.73-7.67(m，1H)，7.48(td，J＝7.4，1.8Hz，1H)，7.18(t，J＝7.7Hz，1H)，3.66(t，J＝6.0Hz，2H)，2.82-2.75(m，2H)，1.90-1.80(m，2H)，0.91(s，9H)，0.06(s，6H)。
芳族中间体25
3-((2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙氧基)甲基)苯甲醛
Figure BDA0000148749790000661
a)2-(3-溴苄基氧基)乙醇
Figure BDA0000148749790000662
将氢化钠(60％在矿物油中的混悬液，1.23g)分批加到乙烷-1，2-二醇(4.7mL)在THF(70mL)中的溶液中且将混合物在室温搅拌30分钟。加入1-溴-3-(溴甲基)苯(7g)，然后加入四丁基碘化铵(1.03g)且将反应混合物加热回流90分钟。混合物用水稀释并萃取到乙酸乙酯(×2)中。合并的有机物用MgSO4干燥，过滤并蒸发。粗产物通过硅胶色谱(使用30％乙酸乙酯/异己烷作为溶剂)来纯化，得到小标题化合物，其为无色油状物。收率4.90g。1HNMR(400MHz，d6-DMSO)δ7.56-7.53(m，1H)，7.47(dt，J＝7.3，1.9Hz，1H)，7.36-7.28(m，2H)，4.66(t，J＝5.5Hz，1H)，4.50(s，2H)，3.58-3.52(m，2H)，3.49-3.44(m，2H)。
b)(2-(3-溴苄基氧基)乙氧基)(叔丁基)二甲基甲硅烷
Figure BDA0000148749790000663
将2-(3-溴苄基氧基)乙醇[芳族中间体25，步骤a](3g)、咪唑(2.2g)和叔丁基二甲基氯甲硅烷(2.2g)在DCM(50mL)中的溶液在室温搅拌17小时。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。水层用乙酸乙酯(×2)萃取。将合并的有机相干燥并真空蒸发。粗产物通过硅胶色谱(用10至40％乙酸乙酯/异己烷梯度洗脱)来纯化。将含有产物的馏分蒸发至干，得到小标题化合物，其为无色油状物。收率3.8g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ7.54-7.52(m，1H)，7.49-7.45(m，1H)，7.34-7.28(m，2H)，4.51(s，2H)，3.74(t，J＝5.0Hz，2H)，3.50(t，J＝4.9Hz，2H)，0.89-0.85(m，9H)，0.07-0.02(m，6H)。
c)3-((2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙氧基)甲基)苯甲醛
将(2-(3-溴苄基氧基)乙氧基)(叔丁基)二甲基甲硅烷[芳族中间体25，步骤b](2.3g)在THF(15mL)中溶解且将溶液冷却至-10℃。加入异丙基氯化镁(2M在THF中，1.2mL)，然后加入丁基锂(2.1M在己烷中，2.4mL)。将混合物搅拌10分钟，然后加到吗啉-4-甲醛(1.4mL)在THF(15mL)中的溶液中。将混合物搅拌1小时，然后倒入氯化铵溶液(30mL)中并萃取到乙醚(2×30mL)中。合并的乙醚萃取物用水洗涤并用硫酸钠干燥。将溶剂真空蒸发，得到标题化合物，其为无色油状物。收率1.8g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ10.02(s，1H)，7.86(s，1H)，7.83(d，J＝7.4Hz，1H)，7.66(d，J＝7.7Hz，1H)，7.59(t，J＝7.4Hz，1H)，4.61(s，2H)，3.76(t，J＝4.9Hz，2H)，3.53(t，J＝5.0Hz，2H)，0.86(s，9H)，0.29(s，6H)。
芳族中间体26
3-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)-2-甲氧基苯甲醛
Figure BDA0000148749790000671
a)叔丁基(2-甲氧基苯乙氧基)二甲基甲硅烷
Figure BDA0000148749790000672
通过芳族中间体5步骤a的方法来制备，其中使用2-(2-甲氧基苯基)乙醇(3g)代替2-(2-氟苯基)乙醇。收率5.1g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.22-7.14(m，2H)，6.90-6.82(m，2H)，3.82(s，3H)，3.79(t，J＝7.3Hz，2H)，2.86(t，J＝7.3Hz，2H)，0.88(s，9H)，0.00(s，6H)。
b)3-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)-2-甲氧基苯甲醛
在0℃历时5分钟将叔丁基(2-甲氧基苯乙氧基)二甲基甲硅烷[芳族中间体26，步骤a](2.0g)在THF(1mL)中的溶液滴加到搅拌的丁基锂(2.5M在己烷中，4.5mL)和TMEDA(1.7mL)在四氢呋喃(20mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌4小时，然后加入DMF(2.9mL)。将混合物再搅拌30分钟并温热至室温。将反应混合物倒入盐酸水溶液(0.5M，20mL)中并用乙醚(2×50mL)萃取。合并的有机溶液用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。所得胶状物通过硅胶色谱(用异己烷至4∶1异己烷∶乙酸乙酯梯度洗脱)来纯化，得到标题化合物，其为澄清油状物。收率0.40g。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ10.37(s，1H)，7.73(dd，J＝7.7，1.7Hz，1H)，7.53(dd，J＝7.5，1.5Hz，1H)，7.18(t，J＝7.6Hz，1H)，3.92(s，3H)，3.86(t，J＝6.9Hz，2H)，2.92(t，J＝6.9Hz，2H)，0.87(s，9H)，-0.01(s，6H)。
B)羧酸的制备：
羧酸1
2-乙基噻唑-4-羧酸
Figure BDA0000148749790000681
a)硫代丙酰胺
Figure BDA0000148749790000682
将五硫化二磷(15.2g)加到丙酰胺(20g)在甲基叔丁醚(900mL)中的混悬液中且将混合物搅拌18小时。混合物用硅藻土过滤并真空浓缩，得到小标题化合物，其为黄色油状物。收率15.8g。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.59(s，1H)，6.88(s，1H)，2.70(q，J＝7.5Hz，2H)，1.32(t，J＝7.5Hz，3H)。
b)2-乙基噻唑-4-羧酸乙酯
Figure BDA0000148749790000683
在0-10℃在氮气下历时10分钟将3-溴-2-氧代丙酸乙酯(24.7mL)滴加到硫代丙酰胺[羧酸1，步骤a](15.8g)在乙醇(150mL)中的溶液中。加完后，将混合物在环境温度搅拌18小时。将混合物真空浓缩，残留物用水稀释并萃取到乙酸乙酯(×3)中。合并的萃取物用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤且除去溶剂。粗产物通过硅胶快速色谱(用10、15和20％乙酸乙酯/异己烷梯度洗脱)来纯化。将含有产物的馏分蒸发至干，得到小标题化合物，其为淡绿色固体。收率16.0g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.06(s，1H)，4.42(q，J＝7.1Hz，2H)，3.10(q，J＝7.5Hz，2H)，1.44-1.38(m，6H)。
c)2-乙基噻唑-4-羧酸
将浓盐酸(75mL)加到2-乙基噻唑-4-羧酸乙酯[羧酸1，步骤b](16g)在水(75mL)中的混悬液中且将混合物在100℃搅拌24小时。将混合物冷却并真空浓缩。残留物用丙酮研磨，固体通过过滤来收集并真空干燥，得到标题化合物，其为灰色固体。收率14.4g。m/z 158(M+H)+/156(M-H)-(APCI)。1HNMR(400MHz，d6-DMSO)δ8.31(s，1H)，3.01(q，J＝7.5Hz，2H)，1.31(t，J＝7.6Hz，3H)。未观察到一个可交换的质子。
羧酸2
2-环戊基噻唑-4-羧酸
Figure BDA0000148749790000691
a)2-(环戊烷甲酰氨基)-3-巯基丙酸乙酯
Figure BDA0000148749790000692
将CDI(8.5g)加到环戊烷羧酸(5.2mL)在DMF(40mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌1小时并在冰浴中冷却。加入2-氨基-3-巯基丙酸乙酯盐酸盐(8.88g)，然后加入三乙胺(10mL)。将所得混合物温热至室温并搅拌过夜。反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液(50mL)淬灭并分离各层。水层用DCM(2×100mL)萃取。合并的有机溶液用盐水(100mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发。所得固体通过硅胶色谱(用4∶1至1∶1异己烷∶乙酸乙酯梯度洗脱)来纯化。合并含有产物的馏分并蒸发，得到小标题化合物，其为白色固体。收率7.7g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ8.15(d，J＝7.7Hz，1H)，4.41-4.34(m，1H)，4.14-4.05(m，2H)，2.89-2.61(m，3H)，1.81-1.45(m，9H)，1.18(t，J＝7.0Hz，3H)。
b)2-环戊基-4，5-二氢噻唑-4-羧酸乙酯
Figure BDA0000148749790000693
将对甲苯磺酸一水合物(0.78g)加到2-(环戊烷甲酰氨基)-3-巯基丙酸乙酯[羧酸2，步骤a](5g)在甲苯(40mL)中的溶液中。将所得混合物在迪安-斯托克(Dean and Stark)条件下加热回流6小时。将反应混合物冷却，然后甲苯溶液用饱和碳酸氢钠溶液(20mL)洗涤且蒸发溶剂。将残留物与甲苯共沸。所得白色固体通过硅胶色谱(用9∶1异己烷∶乙酸乙酯洗脱)来纯化。合并含有产物的馏分并蒸发，得到小标题化合物，其为澄清油状物。收率3.2g。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ5.08-4.99(m，1H)，4.26(q，J＝7.2Hz，2H)，3.56-3.44(m，2H)，3.08-2.99(m，1H)，2.03-1.93(m，2H)，1.83-1.70(m，4H)，1.64-1.59(m，2H)，1.31(t，J＝7.2Hz，3H)。
c)2-环戊基噻唑-4-羧酸乙酯
Figure BDA0000148749790000701
将二氧化锰(24g)加到2-环戊基-4，5-二氢噻唑-4-羧酸乙酯[羧酸2，步骤b](3.2g)在乙腈(100mL)中的溶液中且将所得混合物加热回流过夜。将反应混合物冷却并用硅藻土垫过滤。滤垫用乙腈(2×100mL)洗涤且将合并的滤液和洗涤液蒸发。残留物通过硅胶色谱(用9∶1异己烷∶乙酸乙酯洗脱)来纯化。合并含有产物的馏分，蒸发并在乙醇(20mL)中再次溶解。加入钯/炭(5％，0.66g)在水(0.5mL)中的浆料且将所得混悬液在压力为5巴的氢气气氛下搅拌2小时。混合物用硅藻土垫过滤，所述硅藻土垫用乙醇(3×50mL)洗涤。将合并的滤液和洗涤液蒸发，得到小标题化合物，其为澄清油状物。收率0.9g。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.04(s，1H)，4.41(q，J＝7.2Hz，2H)，3.60-3.48(m，1H)，2.29-2.18(m，2H)，1.89-1.67(m，6H)，1.40(t，J＝7.0Hz，3H)。
d)2-环戊基噻唑-4-羧酸
将氢氧化锂一水合物(0.67g)加到2-环戊基噻唑-4-羧酸乙酯[羧酸2，步骤c](0.9g)在THF(40mL)和水(10mL)的混合物中的溶液中。将所得混合物搅拌过夜。反应混合物用盐酸水溶液(2M，10mL)酸化且蒸发溶剂。将残留物在盐水(50mL)和乙酸乙酯(50mL)之间分配并分离各层。水相用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的有机溶液用硫酸钠干燥，过滤并蒸发，得到标题化合物，其为淡黄色固体。收率0.77g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ12.89(s，1H)，8.30(s，1H)，3.51-3.41(m，1H)，2.17-2.07(m，2H)，1.82-1.59(m，6H)。
羧酸3
2-(戊-3-基)噻唑-4-羧酸
Figure BDA0000148749790000702
a)2-乙基丁酰胺
Figure BDA0000148749790000703
将2-乙基丁酰氯(5g)小心滴加到冰冷的35％氨水(50mL)中且将所得混悬液搅拌1小时。反应混合物用DCM(3×100mL)萃取。合并的有机相用盐水(100mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发，得到小标题化合物，其为白色固体。收率3.4g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ7.23(s，1H)，6.71(s，1H)，1.98-1.88(m，1H)，1.50-1.27(m，4H)，0.81(t，J＝7.4Hz，6H)。
b)2-乙基硫代丁酰胺
Figure BDA0000148749790000711
通过羧酸1步骤a的方法来制备，其中使用2-乙基丁酰胺[羧酸3，步骤a](3.4g)代替丙酰胺。收率3.8g。其直接使用。
c)2-(戊-3-基)噻唑-4-羧酸乙酯
Figure BDA0000148749790000712
通过羧酸1步骤b的方法来制备，其中使用2-乙基硫代丁酰胺[羧酸3，步骤b](3.8g)代替硫代丙酰胺。收率2.8g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ8.42(s，1H)，4.29(q，J＝7.1Hz，2H)，2.99-2.89(m，1H)，1.82-1.58(m，4H)，1.30(t，J＝7.0Hz，3H)，0.81(t，J＝7.4Hz，6H)。
d)2-(戊-3-基)噻唑-4-羧酸
通过羧酸2步骤d的方法来制备，其中使用2-(戊-3-基)噻唑-4-羧酸乙酯[羧酸3，步骤c](2.8g)代替2-环戊基噻唑-4-羧酸乙酯。收率2.3g。1HNMR(300MHz，d6-DMSO)δ12.91(s，1H)，8.34(s，1H)，2.98-2.86(m，1H)，1.84-1.56(m，4H)，0.81(t，J＝7.3Hz，6H)。
羧酸4
2-异丁基噻唑-4-羧酸
Figure BDA0000148749790000713
通过羧酸3的方法来制备，其中在步骤a中使用3-甲基丁酰氯(10mL)代替2-乙基丁酰氯。收率3.8g。1H NMR(300MHz，d6-DMSO)δ12.90(s，1H)，8.32(s，1H)，2.87(d，J＝7.1Hz，2H)，2.11-1.96(m，1H)，0.94(d，J＝6.7Hz，6H)。
羧酸5
2-丁基噻唑-4-羧酸
Figure BDA0000148749790000721
通过羧酸3步骤b的方法来制备，其中在步骤b中使用戊酰胺(10g)代替2-乙基丁酰胺。收率4.6g。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.18(s，1H)，3.11-3.03(m，2H)，1.88-1.78(m，2H)，1.52-1.38(m，2H)，0.97(t，J＝7.2Hz，3H)。未观察到一个可交换的质子。
C)胺的制备：
胺1
N-(2，2-二乙氧基乙基)四氢-2H-吡喃-4-胺
Figure BDA0000148749790000722
将三乙酰氧基硼氢化钠(10.6g)加到冷却的(0℃)氨基乙醛缩二乙醇(5.8mL)和四氢-4H-吡喃-4-酮(3.7mL)在二氯甲烷(100mL)中的溶液中。将反应混合物搅拌18小时，其中将温度温热至环境条件。加入水(100mL)，然后分批加入碳酸氢钠(16.8g)，这引起冒泡。将混合物剧烈搅拌1小时，然后进行分配。然后分离各相且水相再用二氯甲烷(50mL)萃取。合并的有机萃取物用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到标题化合物，其为无色油状物。收率8.3g。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.59(t，J＝5.7Hz，1H)，3.97(ddd，J＝11.8，3.8，2.5Hz，2H)，3.77-3.66(m，2H)，3.61-3.50(m，2H)，3.39(td，J＝11.7，2.1Hz，2H)，2.76(d，J＝5.6Hz，2H)，2.67(tt，J＝10.6，4.0Hz，1H)，1.86-1.77(m，2H)，1.48-1.34(m，3H)，1.22(t，J＝7.1Hz，6H)。
胺2
(R)-N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-甲基丁-2-胺
将2，2-二甲氧基乙醛(60％在水中，8.7mL)加到(R)-3-甲基丁-2-胺(5.0g)在甲醇(25mL)中的溶液中且将混合物在环境温度搅拌过夜。加入钯/炭(5％，1.2g)在水(10mL)中的浆料且将混合物在压力为5巴的条件下搅拌氢化3小时。混合物用硅藻土过滤且滤垫用甲醇(3×100mL)洗涤。将合并的滤液和洗涤液浓缩至体积为～10mL，然后加入甲苯(200mL)。将混合物浓缩，再加入甲苯(200mL)且将混合物再次浓缩，得到标题化合物，其为黄色油状物。收率8.0g。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.46(t，J＝2.4Hz，1H)，3.38(s，6H)，2.78(dd，J＝5.5，11.9Hz，1H)，2.67(dd，J＝5.5，11.6Hz，1H)，2.49-2.39(m，1H)，1.76-1.62(m，1H)，0.96(d，J＝6.7Hz，3H)，0.90(d，J＝6.7Hz，3H)，0.85(d，J＝6.7Hz，3H)。未观察到一个可交换的质子。
胺3
N-(2，2-二甲氧基乙基)丙-2-胺
Figure BDA0000148749790000731
通过胺2的方法来制备，其中使用丙-2-胺(5.0g)代替(R)-3-甲基丁-2-胺。收率3.0g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.48(t，J＝2.8Hz，1H)，3.39(s，6H)，2.84-2.78(m，1H)，2.73(d，J＝5.5Hz，2H)，1.07(d，J＝6.3Hz，6H)。未观察到一个可交换的质子。
胺4
N-(2，2-二甲氧基乙基)-3，3-二甲基丁-1-胺
Figure BDA0000148749790000732
通过胺2的方法来制备，其中使用3，3-二甲基丁-1-胺(1.0g)代替(R)-3-甲基丁-2-胺。收率1.85g。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.47(t，J＝5.6Hz，1H)，3.40(s，6H)，2.75(d，J＝5.8Hz，2H)，2.65-2.57(m，2H)，1.45-1.35(m，3H)，0.90(s，9H)。未观察到一个可交换的质子。
胺5
(R)-N-(2，2-二甲氧基乙基)-3，3-二甲基丁-2-胺
Figure BDA0000148749790000733
通过胺2的方法来制备，其中使用(R)-3，3-二甲基丁-2-胺(5.1g)代替(R)-3-甲基丁-2-胺。收率8.7g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.47(t，J＝5.6Hz，1H)，3.38(d，J＝4.1Hz，6H)，2.86(dd，J＝12.2，5.5Hz，1H)，2.58(dd，J＝12.0，5.6Hz，1H)，2.23(q，J＝6.4Hz，1H)，0.97(d，J＝6.4Hz，3H)，0.89(s，9H)。未观察到一个可交换的质子。
胺6
N-(2，2-二甲氧基乙基)环戊胺
Figure BDA0000148749790000741
通过胺2的方法来制备，其中使用环戊胺(5.0g)代替(R)-3-甲基丁-2-胺。收率9.4g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.47(t，J＝5.6Hz，1H)，3.39(s，6H)，3.05(五重峰，J＝6.8Hz，1H)，2.72(d，J＝5.4Hz，2H)，1.89-1.80(m，2H)，1.73-1.62(m，2H)，1.58-1.48(m，2H)，1.36-1.27(m，2H)。未观察到一个可交换的质子。
胺7
N-(2，2-二甲氧基乙基)-3，3，3-三氟丙-1-胺
向搅拌的3，3，3-三氟丙-1-胺盐酸盐(0.165g)在甲醇(3mL)中的溶液中加入2，2-二甲氧基乙醛(60％在水中，0.17mL)，然后加入碳酸氢钠(0.093g)且将混合物在环境温度搅拌过夜。加入钯/炭(10％，50mg)在甲醇(1mL)中的浆料且将混合物在压力为5巴的条件下氢化4小时。将混合物过滤并真空浓缩。将所得胶状固体在DCM(5mL)中混悬并用硫酸钠干燥，过滤并蒸发，得到标题化合物，其为黄色胶状物。收率0.152g。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ4.45(t，J＝5.4Hz，1H)，3.40(s，6H)，2.89(t，J＝7.3Hz，2H)，2.75(d，J＝5.4Hz，2H)，2.36-2.23(m，2H)。未观察到一个可交换的质子。
胺8
N-(2，2-二甲氧基乙基)-2-甲基丙-1-胺
Figure BDA0000148749790000743
通过胺2的方法来制备，其中使用2-甲基丙-1-胺(10mL)代替(R)-3-甲基丁-2-胺。没有通过与甲苯共蒸发来干燥，而是将粗产物在DCM(500mL)中溶解，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发。收率14.2g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.45(t，J＝5.6Hz，1H)，3.36(s，6H)，2.69(d，J＝5.6Hz，2H)，2.40(d，J＝6.7Hz，2H)，1.78-1.64(m，1H)，0.87(d，J＝6.7Hz，6H)。未观察到一个可交换的质子。
胺9
N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-甲氧基丙-1-胺
Figure BDA0000148749790000751
通过胺2的方法来制备，其中使用3-甲氧基丙-1-胺(5g)代替(R)-3-甲基丁-2-胺。收率8.4g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.47(t，J＝5.5Hz，1H)，3.44(t，J＝6.3Hz，2H)，3.39(s，6H)，3.33(d，J＝2.6Hz，3H)，2.74(d，J＝5.4Hz，2H)，2.71(t，J＝7.0Hz，2H)，1.76(五重峰，J＝6.7Hz，2H)。未观察到一个可交换的质子。
胺10
5-(2，2-二甲氧基乙基氨基)戊-1-醇
Figure BDA0000148749790000752
通过胺2的方法来制备，其中使用5-氨基戊-1-醇(5.2g)代替(R)-3-甲基丁-2-胺。收率9.9g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.47(t，J＝5.5Hz，1H)，3.65(t，J＝6.5Hz，2H)，3.39(s，6H)，2.73(d，J＝5.6Hz，2H)，2.63(t，J＝7.0Hz，2H)，1.63-1.36(m，6H)。未观察到两个可交换的质子。
胺11
6-(2，2-二甲氧基乙基氨基)己-1-醇
Figure BDA0000148749790000753
通过胺2的方法来制备，其中使用6-氨基己-1-醇(4.8g)代替(R)-3-甲基丁-2-胺。收率7.3g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.47(t，J＝5.5Hz，1H)，3.64(t，J＝6.5Hz，2H)，3.39(s，6H)，2.73(d，J＝5.6Hz，2H)，2.62(t，J＝7.2Hz，2H)，1.61-1.31(m，8H)。未观察到两个可交换的质子。
胺12
N-(2-氟乙基)-2，2-二甲氧基乙胺
Figure BDA0000148749790000754
通过胺7的方法来制备，其中使用2-氟乙胺盐酸盐(1g)代替3，3，3-三氟丙-1-胺盐酸盐。收率0.8g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.66(t，J＝5.2Hz，1H)，4.55(q，J＝5.1Hz，2H)，3.41(s，6H)，3.34(s，1H)，3.06(t，J＝4.7Hz，1H)，2.99(t，J＝4.7Hz，1H)，2.86(d，J＝5.4Hz，2H)。
胺13
N-(2，2-二氟乙基)-2，2-二甲氧基乙胺
Figure BDA0000148749790000761
通过胺8的方法来制备，其中使用2，2-二氟乙胺(1.1g)代替2-甲基丙-1-胺。收率1.8g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.00-5.66(m，1H)，4.43(t，J＝5.2Hz，1H)，3.39(s，6H)，3.04-2.94(m，2H)，2.80(d，J＝5.1Hz，2H)，1.36(s，1H)。
胺14
N-(2，2-二甲氧基乙基)-2，2，2-三氟乙胺
Figure BDA0000148749790000762
通过胺8的方法来制备，其中使用2，2，2-三氟乙胺(1g)代替2-甲基丙-1-胺。收率1.2g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.42(t，J＝5.3Hz，1H)，3.39(s，6H)，3.21(q，J＝9.3Hz，2H)，2.85(d，J＝5.1Hz，2H)，1.49(s，1H)。
胺15
N-(3-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)丙基)丁-1-胺
Figure BDA0000148749790000763
将丁-1-胺(8mL)加到(3-溴丙氧基)(叔丁基)二甲基甲硅烷(0.8g)中且将所得混合物在室温搅拌过夜。挥发物通过减压浓缩来除去且将残留物在饱和碳酸氢钠溶液(20mL)和乙酸乙酯(25mL)之间分配。分离各相且水相再用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。合并的有机相用盐水(25mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发，得到标题化合物，其为澄清油状物。收率0.75g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.64(t，J＝6.2Hz，2H)，2.64(t，J＝6.9Hz，2H)，2.55(t，J＝7.3Hz，2H)，1.66(五重峰，J＝6.5Hz，2H)，1.46-1.26(m，5H)，0.90-0.82(m，12H)，0.00(s，5H)。未观察到一个可交换的质子。
最终化合物的制备：
除非另有说明，以下所有最终化合物被分离为其二(三氟乙酸盐)。
实施例1
N-乙基-N-(2-(2-(4-羟基-2-氧代-2，3-二氢苯并d]噻唑-7-基)乙基氨基)乙基)-3-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790000771
将对甲苯磺酸一水合物(0.54g)一次性加到N-(2，2-二甲氧基乙基)-N-乙基-3-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺(0.26g)在DCM(7mL)中的溶液中。将混合物在20℃搅拌2小时。小心加入饱和碳酸氢钠溶液(10mL)且将所得混合物剧烈搅拌10分钟。混合物用DCM萃取且有机层用饱和碳酸氢钠溶液(×2)和盐水洗涤，然后干燥，过滤并减压浓缩。将残留物在甲醇(10mL)中溶解并先后用乙酸(0.023mL)和7-(2-氨基乙基)-4-羟基苯并[d]噻唑-2(3H)-酮盐酸盐[Org.Proc.Res.Dev.2004，8(4)，628](0.15g)处理。将混合物在20℃搅拌10分钟，然后在冰浴中冷却。加入氰基硼氢化钠(0.038g)且将反应混合物在20℃搅拌18小时。将溶剂减压蒸发且残留物通过硅胶快速色谱(使用8％甲醇/二氯甲烷(含有1％‘880’氨水)作为溶剂)来纯化。残留物通过制备性HPLC(SunfireTM，梯度为40-70％甲醇/[0.2％TFA水溶液])来进一步纯化。将含有所需产物的馏分蒸发至干，得到标题化合物，其为白色固体。收率0.105g。m/z 793M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ7.96(s，1H)，7.17(s，4H)，6.85(d，J＝8.2Hz，1H)，6.75(d，J＝8.2Hz，1H)，3.77-3.52(m，12H)，3.43-3.27(m，7H)，3.20-3.08(m，6H)，3.00-2.93(m，2H)，2.87-2.82(m，2H)，2.80-2.75(m，2H)，2.59-2.53(m，2H)，2.13-2.02(m，2H)，1.88-1.73(m，2H)，1.36(d，J＝6.9Hz，6H)，1.09(t，J＝6.7Hz，3H)。未观察到五个可交换的质子。
用作原料的N-(2，2-二甲氧基乙基)-N-乙基-3-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺如下制备：
a)4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-羧酸叔丁酯
Figure BDA0000148749790000781
将2-异丙基噻唑-4-羧酸(1g)和1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-羧酸叔丁酯盐酸盐[WuXi PharmaTech](1.71g)在DMF(30mL)中的溶液在冰浴中冷却并用三乙胺(2.44mL)处理，然后用HATU(2.89g)处理。移开冰浴且将混合物在20℃搅拌1小时。将混合物在乙酸乙酯和盐水之间分配，有机层用盐水洗涤两次，用硫酸钠干燥，过滤且将溶剂减压蒸发。粗产物通过硅胶快速色谱(使用70％乙酸乙酯/异己烷作为溶剂)来纯化。将含有产物的馏分蒸发至干，得到小标题化合物。收率2.0g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ7.93(s，1H)，3.71-3.63(m，6H)，3.51-3.44(m，2H)，3.35-3.26(m，1H)，3.18-3.10(m，2H)，1.74-1.67(m，2H)，1.49-1.41(m，2H)，1.39(s，9H)，1.34(d，J＝7.6Hz，6H)。
b)(2-异丙基噻唑-4-基)(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)甲酮三氟乙酸盐
Figure BDA0000148749790000782
将4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-羧酸叔丁酯[实施例1，步骤a](2.3g)在二氯甲烷(40mL)和三氟乙酸(10mL)的混合物中的溶液在20℃静置30分钟。加入甲苯(50mL)且蒸发溶剂，然后该操作再用甲苯(50mL)重复进行。残留物用乙醚研磨。然后将胶状物在乙腈中溶解且蒸发溶剂，得到小标题化合物。收率1.64g。m/z 310(M+H)+(APCI)。
c)(9-(4-(2-羟基乙基)苯乙基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮
Figure BDA0000148749790000783
将碳酸钾(0.634g)加到(2-异丙基噻唑-4-基)(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)甲酮三氟乙酸盐[实施例1，步骤b](0.971g)和甲磺酸4-(2-羟基乙基)苯乙基酯[芳族中间体10](0.56g)在乙腈(20mL)和水(0.3mL)中的溶液中。将反应混合物在60℃加热1天。将溶剂减压蒸发且将残留物在水和乙酸乙酯之间分配。水层用乙酸乙酯再次萃取且将合并的有机相干燥，过滤且将溶剂减压蒸发。粗产物通过硅胶快速色谱(使用2％甲醇/二氯甲烷(含有1％三乙胺)作为溶剂)来纯化。将含有产物的馏分蒸发至干，得到小标题化合物。收率0.68g。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ7.91(s，1H)，7.08(s，4H)，4.20(t，J＝4.7Hz，1H)，3.70-3.58(m，8H)，3.35-3.27(m，1H)，2.71-2.65(m，4H)，2.57-2.32(m，6H)，1.75-1.67(m，2H)，1.59-1.52(m，2H)，1.36(d，J＝6.8Hz，6H)。
d)3-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酸叔丁酯
Figure BDA0000148749790000791
将苄基三甲基氢氧化铵(40％在甲醇中，0.031mL)加到(9-(4-(2-羟基乙基)苯乙基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮[实施例1，步骤c](0.62g)在甲苯(20mL)中的溶液中。将溶剂减压除去且将残留物与甲苯共沸。所得液体(其由于含有痕量甲苯而恰可流动)用丙烯酸叔丁酯(0.225g)逐滴处理。将反应混合物在20℃搅拌18小时。混合物通过硅胶快速色谱(使用2％甲醇/二氯甲烷(含有1％三乙胺)作为溶剂)来纯化。将含有产物的馏分蒸发至干，得到小标题化合物。收率0.550g。m/z 586(M+H)+(APCI)。
e)3-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酸
Figure BDA0000148749790000792
将三氟乙酸(10mL)加到3-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酸叔丁酯[实施例1，步骤d](0.55g)在DCM(20mL)中的溶液中且将所得溶液在20℃静置1小时。加入甲苯(30mL)且将溶剂减压蒸发。将残留物与乙腈(×2)共沸，得到小标题化合物。收率0.60g。m/z 530(M+H)+(APCI)。
f)N-(2，2-二甲氧基乙基)-N-乙基-3-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺
Figure BDA0000148749790000801
将T3P(1.6M在THF中，0.33mL)滴加到搅拌的3-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酸[实施例1，步骤e](0.3g)、N-乙基-2，2-二甲氧基乙胺[US 2707186](0.062g)和三乙胺(0.46mL)在DMF(7mL)中的溶液中。将反应混合物在20℃搅拌3小时。将混合物在乙酸乙酯和盐水之间分配，有机层用盐水(×2)洗涤，干燥，过滤且将溶剂减压蒸发，得到小标题化合物。收率0.26g。m/z 645(M+H)+(APCI)。
实施例2
N-环己基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790000802
通过实施例1的方法来制备，其中使用N-环己基-N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺(0.32g)代替N-(2，2-二甲氧基乙基)-N-乙基-3-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺且使用8-(2-氨基乙基)-5-羟基-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-3(4H)-酮盐酸盐[WO 2008075025](0.17g)代替7-(2-氨基乙基)-4-羟基苯并[d]噻唑-2(3H)-酮盐酸盐。收率0.102g。m/z 845M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.39(s，1H)，7.96(s，1H)，7.17(s，4H)，6.66(d，J＝8.5Hz，1H)，6.49(d，J＝8.2Hz，1H)，4.52(s，2H)，3.73-3.57(m，11H)，3.50-3.26(m，7H)，3.19-3.06(m，4H)，3.02-2.93(m，4H)，2.84-2.74(m，4H)，2.61-2.56(m，2H)，2.12-2.00(m，2H)，1.86-1.71(m，4H)，1.67-1.56(m，3H)，1.47-1.39(m，2H)，1.37-1.26(m，8H)，1.11-1.05(m，1H)。未观察到四个可交换的质子。
用作原料的N-环己基-N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺如下制备：
a)N-环己基-N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺
Figure BDA0000148749790000811
将HATU(0.23g)一次性加到冰冷的3-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酸[实施例1，步骤e](0.3g)、N-(2，2-二甲氧基乙基)环己胺[WO 2008075025](0.087g)和三乙胺(0.26mL)在DMF(10mL)中的溶液中。将混合物在20℃搅拌1小时，然后在乙酸乙酯和盐水之间分配。有机层用盐水(×2)洗涤，干燥，过滤且将溶剂减压蒸发，得到小标题化合物。收率0.32g。m/z 699(M+H)+(APCI)。
实施例3
3-(4-(2-(4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(4-羟基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]噻唑-7-基)乙基氨基)乙基)-N-丙基丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790000812
通过实施例1的方法来制备，其中使用N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(4-(2-(4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)-N-丙基丙酰胺(0.43g)代替N-(2，2-二甲氧基乙基)-N-乙基-3-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺。收率0.11g。m/z 793M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.92(s，1H)，7.21-7.14(m，4H)，6.89(d，J＝8.2Hz，1H)，6.73(d，J＝8.2Hz，1H)，3.91-2.96(m，28H)，2.89(t，J＝8.0Hz，2H)，2.81(t，J＝7.1Hz，2H)，2.62(t，J＝6.6Hz，2H)，2.30-2.21(m，2H)，1.85-1.72(m，2H)，1.65-1.54(m，2H)，1.38(t，J＝7.6Hz，3H)，0.91(t，J＝7.3Hz，3H)。未观察到五个可交换的质子。
用作原料的N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(4-(2-(4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)-N-丙基丙酰胺如下制备：
a)4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-羧酸叔丁酯
Figure BDA0000148749790000821
在氮气下将T3P(16M在THF中，51.3mL)滴加到搅拌的1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-羧酸叔丁酯盐酸盐[WuXi PharmaTech](18.1g)、2-乙基噻唑-4-羧酸[羧酸1](12g)和三乙胺(52mL)在DMF(120mL)中的混悬液中且将混合物在环境温度搅拌20小时。其用水稀释并萃取到乙酸乙酯(×3)中。合并的萃取物先后用10％盐水、30％盐水和饱和盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤且除去溶剂。粗产物通过硅胶快速色谱(用乙酸乙酯洗脱)来纯化。将含有产物的馏分蒸发至干，得到小标题化合物，其为黄色油状物。收率24.0g。m/z340(M-tBu+H)+(APCI)。
b)(2-乙基噻唑-4-基)(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)甲酮三氟乙酸盐
Figure BDA0000148749790000822
通过实施例1步骤b的方法来制备，其中使用4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-羧酸叔丁酯[实施例3，步骤a](24.0g)代替4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-羧酸叔丁酯。用乙醚研磨，得到白色固体，其通过过滤来收集并干燥，得到小标题化合物。收率27.7g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ8.55(s，1H)，8.39(s，1H)，8.04-8.00(m，1H)，3.81-3.51(m，6H)，3.18-2.91(m，6H)，2.00-1.90(m，2H)，1.72-1.56(m，2H)，1.32(t，J＝7.2Hz，3H)。
c)(2-乙基噻唑-4-基)(9-(4-(2-羟基乙基)苯乙基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)甲酮
Figure BDA0000148749790000831
将2-(4-(2-溴乙基)苯基)乙醇[Organometallics 2002，21(20)，4217](1.71g)在NMP(5mL)中的溶液加到(2-乙基噻唑-4-基)(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)甲酮三氟乙酸盐[实施例3，步骤b](3.0g)和碳酸铯(5.60g)在NMP(10mL)中的混悬液中且将混合物在75℃在氮气下搅拌4小时。再加入2-(4-(2-溴乙基)苯基)乙醇(0.65g)且将混合物在75℃搅拌18小时。将混合物冷却，用水稀释并萃取到乙酸乙酯(×3)中。合并的萃取物用10％盐水、30％盐水和饱和盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤且除去溶剂。粗产物通过硅胶快速色谱(先后用50％乙酸乙酯/异己烷(含有5％三乙胺)、100％乙酸乙酯(含有5％三乙胺)和10％甲醇/乙酸乙酯(含有5％三乙胺)洗脱)来纯化。将含有产物的馏分蒸发至干，得到小标题化合物，其为黄色油状物。收率1.90g。m/z444(M+H)+(APCI)。
d)3-(4-(2-(4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酸叔丁酯
Figure BDA0000148749790000832
将氢氧化N，N，N-三甲基-1-苯基甲铵(40％在水中，0.51mL)加到(2-乙基噻唑-4-基)(9-(4-(2-羟基乙基)苯乙基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)甲酮[实施例3，步骤c](1.9g)和丙烯酸叔丁酯(1.32mL)在乙腈(1.5mL)中的溶液中且将混合物在环境温度搅拌4小时。将混合物真空浓缩且粗产物通过硅胶快速色谱(用50至75％乙酸乙酯/异己烷(含有5％三乙胺)梯度洗脱)来纯化。将含有产物的馏分蒸发至干，得到小标题化合物，其为无色油状物。收率2.19g。m/z 572(M+H)+(APCI)。
e)3-(4-(2-(4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酸
通过实施例1步骤e的方法来制备，其中使用3-(4-(2-(4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酸叔丁酯[实施例3，步骤d](2.2g)代替3-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酸叔丁酯。收率3.36g。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.90(s，1H)，7.13(dd，J＝29.9，8.1Hz，4H)，3.97-3.92(m，1H)，3.82-3.77(m，3H)，3.74-3.67(m，4H)，3.64-3.56(m，1H)，3.35-3.27(m，1H)，3.10-3.00(m，6H)，2.85(t，J＝6.5Hz，2H)，2.61-2.55(m，2H)，2.21-2.13(m，2H)，2.03-1.92(m，6H)，1.45-1.34(m，3H)。未观察到一个可交换的质子。
f)N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(4-(2-(4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)-N-丙基丙酰胺
在0℃在氮气下将HATU(0.33g)加到3-(4-(2-(4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酸[实施例3，步骤e](0.50g)、N-(2，2-二甲氧基乙基)丙-1-胺[Liebigs Annalen der Chemie 1979，11，1818](0.12g)和三乙胺(0.56mL)在二氯甲烷(5mL)中的溶液中且将混合物在环境温度搅拌2小时。混合物用水洗涤，分离有机相，干燥，过滤并真空浓缩，得到小标题化合物，其为橙色油状物。收率0.43g。m/z 645(M+H)+(APCI)。
以下化合物使用与就实施例1至3所述类似的方法由适当的羧酸和胺来制备。
实施例4
N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790000851
m/z 819M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.92(s，1H)，7.22-7.15(m，4H)，6.70(s，1H)，6.47(d，J＝8.5Hz，1H)，4.59-4.52(m，2H)，3.95-3.09(m，25H)，3.03-2.96(m，2H)，2.88(t，J＝7.1Hz，2H)，2.81(t，J＝7.1Hz，2H)，2.60(t，J＝6.0Hz，2H)，2.30-2.22(m，2H)，1.84-1.72(m，2H)，1.59-1.50(m，2H)，1.41-1.27(m，8H)，0.95(t，J＝7.4Hz，3H)。未观察到五个可交换的质子。
实施例5
N-环庚基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(4-(2-(4-(2-甲基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790000852
m/z 831M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.89(s，1H)，7.21-7.16(m，4H)，6.71(d，J＝8.5Hz，1H)，6.48(d，J＝8.5Hz，1H)，4.59(s，2H)，3.90-2.96(m，23H)，2.89(t，J＝7.3Hz，2H)，2.81(t，J＝7.1Hz，2H)，2.71(s，3H)，2.65(t，J＝6.3Hz，2H)，2.29-2.21(m，2H)，1.84-1.44(m，16H)。未观察到五个可交换的质子。
实施例6
(R)-N-(己-2-基)-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(4-(2-(4-(2-甲基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790000861
m/z 819M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.89(s，1H)，7.22-7.16(m，4H)，6.72(d，J＝8.5Hz，1H)，6.48(d，J＝8.2Hz，1H)，4.59(s，2H)，4.03-2.97(m，27H)，2.89(t，J＝7.1Hz，2H)，2.81(t，J＝7.1Hz，2H)，2.71(s，3H)，2.70-2.54(m，2H)，2.29-2.20(m，2H)，1.84-1.73(m，2H)，1.53-1.46(m，2H)，1.36-1.19(m，2H)，1.15(t，J＝7.0Hz，3H)，0.90(t，J＝7.2Hz，3H)。未观察到五个可交换的质子。
实施例4至6使用以下羧酸和胺来制备：
  实施例编号   羧酸   胺
  4   2-异丙基噻唑-4-羧酸   N-(2，2-二甲氧基乙基)丁-1-胺[备注1]
  5   2-甲基噻唑-4-羧酸   N-(2，2-二甲氧基乙基)环庚胺[备注2]
  6   2-甲基噻唑-4-羧酸   (R)-N-(2，2-二甲氧基乙基)己-2-胺[备注2]
备注1：J.Am.Chem.Soc.1949，71(6)，2272。
备注2：WO 2008075025。
实施例7
N-环庚基-3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790000862
将对甲苯磺酸一水合物(0.219g)加到N-环庚基-N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酰胺(0.165g)在四氢呋喃(2mL)中的溶液中且将所得混合物在室温搅拌过夜。然后将溶液加到8-(2-氨基乙基)-5-羟基-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-3(4H)-酮盐酸盐[WO 2008075025](0.056g)和碳酸氢钠(0.116g)在NMP(2mL)和水(0.2mL)的混合物中的混悬液中。将所得浑浊溶液搅拌10分钟。然后加入乙酸(0.013mL)，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.122g)且将所得混合物搅拌过夜。将反应混合物在2-甲基四氢呋喃(15mL)和饱和碳酸氢钠溶液(15mL)之间分配。分离有机相，用10％盐水(2×15mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发。残留物通过硅胶快速色谱(用97.25∶2.5∶0.25至92.3∶7∶0.7二氯甲烷∶甲醇∶‘880’氨水梯度洗脱)来纯化。合并含有产物的馏分并蒸发。所得胶状物通过制备性HPLC(SunfireTM，梯度为35-60％甲醇/[0.2％TFA水溶液])来进一步纯化。合并含有产物的馏分，蒸发并用乙醚研磨，得到标题化合物，其为白色固体。收率0.069g。m/z 863M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.39-9.29(m，1H)，8.81-8.40(m，2H)，7.99-7.87(m，1H)，7.49-7.37(m，2H)，7.24-7.12(m，1H)，6.73-6.61(m，1H)，6.56-6.44(m，1H)，4.58-4.48(m，2H)，4.38-4.29(m，2H)，3.86-3.59(m，11H)，3.49-3.00(m，11H)，2.91-2.78(m，4H)，2.64-2.55(m，2H)，2.10-1.98(m，2H)，1.85-1.30(m，19H)，1.13-1.04(m，1H)。未观察到两个可交换的质子。
用作原料的N-环庚基-N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酰胺如下制备：
a)(9-(3-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)-2-氟苄基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮
Figure BDA0000148749790000871
将3-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)-2-氟苯甲醛[芳族中间体5](4.07g)加到(2-异丙基噻唑-4-基)(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)甲酮三氟乙酸盐[实施例1，步骤b](6.10g)在N-甲基吡咯烷-2-酮(50mL)和乙酸(0.83mL)的混合物中的溶液中并搅拌30分钟。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(4.58g)且将混合物搅拌过夜。将反应混合物倒入水(100mL)中，使用饱和碳酸氢钠溶液将pH调节至8且混合物用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。合并的有机相用水(3×100mL)和盐水(100mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发。残留物通过硅胶快速色谱(使用77.5∶17.5∶5异己烷∶乙酸乙酯∶三乙胺作为溶剂)来纯化，得到小标题化合物，其为澄清油状物。收率5.35g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ7.96(s，1H)，7.29-7.18(m，2H)，7.09(t，J＝7.4Hz，1H)，3.85(t，J＝6.5Hz，2H)，3.74-3.67(m，6H)，3.54(s，2H)，3.37(七重峰，J＝6.9Hz，1H)，2.88-2.82(m，2H)，2.50-2.34(m，4H)，1.79-1.71(m，2H)，1.63-1.54(m，2H)，1.42(d，J＝6.9Hz，6H)，0.87(s，9H)，0.00(s，6H)。
b)(9-(2-氟-3-(2-羟基乙基)苄基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮
Figure BDA0000148749790000881
将TBAF(1M在THF中，13.9mL)加到(9-(3-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)-2-氟苄基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮[实施例7，步骤a](5.35g)在THF(50mL)中的溶液中且将所得混合物搅拌1小时。蒸发溶剂且将残留物在乙酸乙酯(100mL)和水(100mL)之间分配。分离各层且水相用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。合并的有机相用盐水(100mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发。粗物质通过硅胶快速色谱(用4∶1异己烷∶乙酸乙酯至100％乙酸乙酯梯度洗脱)来纯化，得到小标题化合物，其为澄清油状物。收率3.90g。1H NMR(300MHz，d6-DMSO)δ7.93(s，1H)，7.23-7.14(m，2H)，7.03(t，J＝7.5Hz，1H)，4.48-4.40(m，1H)，3.69-3.56(m，8H)，3.48(s，2H)，3.38-3.24(m，1H)，2.75(t，J＝6.9Hz，2H)，2.45-2.23(m，4H)，1.76-1.62(m，2H)，1.60-1.47(m，2H)，1.35(d，J＝6.9Hz，6H)。
c)3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酸叔丁酯
Figure BDA0000148749790000882
通过实施例1步骤d的方法来制备，其中使用(9-(2-氟-3-(2-羟基乙基)苄基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮[实施例7，步骤b](3.85g)代替(9-(4-(2-羟基乙基)苯乙基)-1-氧杂-4，9-氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮。粗产物通过硅胶快速色谱(用1∶1乙酸乙酯∶异己烷(含有5％三乙胺)至95∶5乙酸乙酯∶三乙胺梯度洗脱)来纯化。将含有产物的馏分蒸发至干，得到小标题化合物。收率3.95g。m/z590(M+H)+(APCI)。
d)3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酸
Figure BDA0000148749790000891
将TFA(10mL)小心加到3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酸叔丁酯[实施例7，步骤c](3.95g)在DCM(40mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌2小时。蒸发溶剂且将残留物与乙腈共沸两次。将残留物在新蒸馏的2-甲基四氢呋喃(100mL)中溶解并用盐水和饱和碳酸氢钠溶液的混合物(10∶1，100mL)洗涤三次。有机相用硫酸钠干燥，过滤并蒸发。将残留物与异己烷共沸三次，得到小标题化合物，其为白色泡沫。收率2.92g。m/z 534(M+H)+(APCI)。
e)N-环庚基-N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酰胺
Figure BDA0000148749790000892
将HATU(0.143g)在DMF(0.5mL)中的溶液加到3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酸[实施例7，步骤d](0.133g)、许尼希碱(0.22mL)和N-(2，2-二甲氧基乙基)环庚胺[WO 2008075025](0.050g)在DMF(0.5mL)中的溶液中。将所得深色溶液在室温搅拌过夜。蒸发溶剂且将残留物在乙酸乙酯(25mL)和20％盐水(25mL)之间分配。分离有机层并用20％盐水(2×25mL)洗涤。将有机溶液蒸发且残留物通过硅胶色谱(用65∶30∶5至47.5∶47.5∶5异己烷∶乙酸乙酯∶三乙胺梯度洗脱)来纯化。合并含有产物的馏分并蒸发，得到小标题化合物，其为油状物。收率0.165g。m/z 717(M+H)+(APCI)。
实施例8
N-苄基-3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b[1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790000901
将N-苄基-N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酰胺(0.114g)在水(1mL)和乙酸(1mL)的混合物中的溶液在50℃加热2小时。将混合物小心加到饱和碳酸氢钠溶液(30mL)中且所得含水混合物用乙酸乙酯(3×25mL)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发。将残留物在NMP(1mL)中溶解并加到8-(2-氨基乙基)-5-羟基-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-3(4H)-酮盐酸盐[WO 2008075025](0.039g)和碳酸氢钠(0.013g)在NMP(1mL)和水(0.2mL)的混合物中的溶液中。然后加入乙酸(1mL)且将混合物搅拌10分钟。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.085g)且将混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物在2-甲基四氢呋喃(15mL)和饱和碳酸氢钠溶液(15mL)之间分配。分离有机相，用10％盐水(2×15mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发。残留物通过硅胶快速色谱(用97.25∶2.5∶0.25至92.3∶7∶0.7二氯甲烷∶甲醇∶‘880’氨水梯度洗脱)来纯化。合并含有产物的馏分并蒸发。所得胶状物通过制备性HPLC来进一步纯化(SunfireTM，梯度为35-60％甲醇/[0.2％TFA水溶液])。合并含有产物的馏分，蒸发并用乙醚研磨，得到标题化合物，其为白色固体。收率0.029g。m/z857M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.34(s，1H)，8.64-8.27(m，1H)，7.93(s，1H)，7.42-7.14(m，8H)，6.64(d，J＝8.4Hz，1H)，6.48(d，J＝8.3Hz，1H)，4.60(s，2H)，4.49(s，2H)，4.27-4.20(m，2H)，3.73-2.98(m，21H)，2.88-2.78(m，4H)，2.66-2.59(m，2H)，2.04-1.95(m，2H)，1.81-1.70(m，2H)，1.35(d，J＝6.8Hz，6H)。未观察到三个可交换的质子。
用作原料的N-苄基-N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酰胺如下制备：
a)N-苄基-N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酰胺
Figure BDA0000148749790000911
通过实施例7步骤e的方法来制备，其中使用N-苄基-2，2-二甲氧基乙胺[J.Chem.Soc.，Perkin Trans.1，1974，19，2185](0.049g)代替N-(2，2-二甲氧基乙基)环庚胺。收率0.114g。m/z 711(M+H)+(APCI)。
实施例9
N-乙基-3-(2-氟-3-((4-(2-(戊-3-基)噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790000912
使用与就实施例1至3所述类似的方法由(9-(2-氟-3-(2-羟基乙基)苄基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-(戊-3-基)噻唑-4-基)甲酮(0.32g)来制备。收率0.11g。m/z 823M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.40(s，1H)，7.96(s，1H)，7.41(t，J＝7.2Hz，2H)，7.19(t，J＝7.7Hz，1H)，6.66(d，J＝8.5Hz，1H)，6.48(d，J＝8.5Hz，1H)，4.53(s，2H)，4.34-4.20(m，2H)，3.72-3.61(m，10H)，3.52(t，J＝6.5Hz，2H)，3.32(q，J＝7.0Hz，2H)，3.14-3.03(m，8H)，2.97-2.90(m，1H)，2.87(t，J＝6.9Hz，2H)，2.82(t，J＝7.8Hz，2H)，2.55(t，J＝6.7Hz，2H)，2.08-1.95(m，2H)，1.82-1.64(m，6H)，1.13-1.02(m，3H)，0.84(t，J＝7.4Hz，6H)。未观察到四个可交换的质子。
用作原料的(9-(2-氟-3-(2-羟基乙基)苄基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-(戊-3-基)噻唑-4-基)甲酮如下制备：
a)2，2，2-三氟-1-(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)乙酮三氟乙酸盐
Figure BDA0000148749790000921
在0℃在氮气下历时15分钟将三氟乙酸酐(9.6mL)在DCM(10mL)中的溶液滴加到搅拌的三乙胺(15.2mL)和1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-羧酸叔丁酯盐酸盐[WuXi PharmaTech](9.95g)在DCM(100mL)中的溶液中。将所得溶液在0℃搅拌30分钟。再加入三乙胺(2.5mL)，然后再加入三氟乙酸酐(1.6mL)在DCM(10mL)中的溶液并在0℃继续搅拌1小时。加入水(100mL)且将混合物剧烈搅拌10分钟。分离有机层，干燥且将溶剂减压蒸发。将残留物在DCM(100mL)中溶解且溶液用三氟乙酸(25mL)处理。将混合物在20℃静置10分钟，然后用甲苯(40mL)稀释。将溶剂减压除去且将残留物再与甲苯(×2)共沸，得到小标题化合物。收率14.0g。m/z 253(M+H)+(APCI)。
b)2-(3-(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基甲基)-2-氟苯基)乙醇
Figure BDA0000148749790000922
将3-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)-2-氟苯甲醛[芳族中间体5](5.0g)加到2，2，2-三氟-1-(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)乙酮三氟乙酸盐[实施例9，步骤a](9.3g)和乙酸(1.0mL)在N-甲基吡咯烷-2-酮(50mL)中的溶液中。将所得混合物搅拌15分钟，然后在冰浴中冷却。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(5.64g)且将混合物搅拌过夜。反应混合物通过加入饱和碳酸氢钠溶液∶盐水(1∶5)来淬灭并用乙酸乙酯萃取四次。将合并的有机相干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩，得到油状物。将油状物在THF(100mL)中溶解并用TBAF(1M在THF中，18.0mL)处理。将所得溶液在室温搅拌50分钟，然后再加入TBAF(1M在THF中，18.0mL)且将混合物再搅拌100分钟。然后将溶液真空浓缩，得到油状物。将油状物在甲醇(100mL)中溶解，溶液用‘880’氨水(20mL)处理，在室温搅拌50分钟，然后真空浓缩，得到油状物。将油状物在甲醇中溶解并真空浓缩到快速硅胶上。所得粉末通过硅胶快速色谱(用‘880’氨水∶甲醇∶二氯甲烷(1∶10∶89)洗脱)来纯化，得到小标题化合物，其为黄色油状物。收率5.8g。纯度60％。按原样使用。m/z 309(M+H)+(APCI)。
c)(9-(2-氟-3-(2-羟基乙基)苄基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-(戊-3-基)噻唑-4-基)甲酮
Figure BDA0000148749790000931
将HATU(0.35g)加到在冰水中预冷却的2-(3-(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基甲基)-2-氟苯基)乙醇[实施例9，步骤b](0.364g)、2-(戊-3-基)噻唑-4-羧酸[羧酸3](0.141g)和三乙胺(0.30mL)在DMF(10mL)中的无色溶液中。将所得黄色混合物在冰水中搅拌1小时，然后在室温搅拌1小时。将溶液倒入水和盐水的混合物中并用乙酸乙酯萃取两次。合并的有机萃取物用水洗涤三次，用盐水洗涤一次，然后干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩到快速硅胶上。所得粉末通过硅胶快速色谱(用三乙胺∶甲醇∶二氯甲烷(1∶2∶97)洗脱)来纯化，得到小标题化合物。收率0.324g。m/z 490(M+H)+(APCI)。
以下化合物使用与就实施例13至15所述类似的方法由适当的羧酸和胺来制备。
实施例10
N-乙基-3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(4-羟基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]噻唑-7-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
m/z 797M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ7.94(s，1H)，7.45-7.36(m，2H)，7.18(t，J＝7.6Hz，1H)，6.85(d，J＝8.2Hz，1H)，6.75(d，J＝8.2Hz，1H)，4.30(s，2H)，3.77-3.48(m，12H)，3.36-3.02(m，11H)，2.93-2.77(m，4H)，2.55(t，J＝6.4Hz，2H)，2.10-1.96(m，2H)，1.87-1.73(m，2H)，1.35(d，J＝6.7Hz，6H)，1.13-1.01(m，3H)。未观察到五个可交换的质子。
实施例11
3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(4-羟基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]噻唑-7-基)乙基氨基)乙基)-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790000941
m/z 853M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ8.70(s，1H)，7.93(s，1H)，7.48-7.38(m，2H)，7.22-7.15(m，1H)，6.86(d，J＝8.0Hz，1H)，6.76(d，J＝8.0Hz，1H)，4.31(s，2H)，4.06-3.84(m，3H)，3.76-3.60(m，10H)，3.54-3.46(m，2H)，3.43-3.27(m，3H)，3.25-2.99(m，8H)，2.92-2.81(m，4H)，2.68-2.59(m，2H)，2.09-1.98(m，2H)，1.86-1.67(m，4H)，1.60-1.49(m，2H)，1.35(d，J＝6.7Hz，6H)。未观察到四个可交换的质子。
实施例12
(R)-3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-N-(3-甲基丁-2-基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790000942
m/z 837M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.33(s，1H)，8.52(s，1H)，7.93(s，1H)，7.43-7.35(m，2H)，7.21-7.13(m，1H)，6.67(d，J＝8.0Hz，1H)，6.49(d，J＝8.1Hz，1H)，4.53(s，2H)，4.24-4.15(m，2H)，3.75-3.26(m，14H)，3.16-2.95(m，8H)，2.90-2.80(m，4H)，2.66-2.54(m，2H)，2.05-1.94(m，2H)，1.82-1.69(m，3H)，1.35(d，J＝6.7Hz，6H)，1.17-1.11(m，3H)，0.96-0.88(m，3H)，0.82-0.74(m，3H)。未观察到三个可交换的质子。
实施例13
3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(4-羟基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]噻唑-7-基)乙基氨基)乙基)-N-甲基丙酰胺二(三氟乙酸盐)
m/z 783M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ7.93(s，1H)，7.45-7.38(m，2H)，7.21-7.15(m，1H)，6.84(d，J＝7.8Hz，1H)，6.75(d，J＝8.2Hz，1H)，4.33-4.24(m，2H)，3.74-3.53(m，12H)，3.34-3.26(m，1H)，3.22-2.80(m，15H)，2.60-2.52(m，2H)，2.08-1.96(m，2H)，1.86-1.71(m，2H)，1.35(d，J＝6.7Hz，6H)。未观察到五个可交换的质子。
实施例14
(R)-3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-N-(1-苯基乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790000952
m/z 871M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.33(s，1H)，8.73-8.24(m，2H)，7.98-7.89(m，1H)，7.48-7.13(m，9H)，6.68-6.58(m，1H)，6.48(s，1H)，5.50-5.12(m，1H)，4.50(d，J＝2.8Hz，2H)，4.27(s，2H)，3.79-2.66(m，28H)，2.07-1.95(m，2H)，1.83-1.70(m，2H)，1.61-1.48(m，3H)，1.41-1.29(m，6H)。
实施例15
N-乙基-3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790000961
m/z 795M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.39-9.33(m，1H)，8.54-8.24(m，1H)，7.96-7.91(m，1H)，7.45-7.38(m，2H)，7.23-7.16(m，1H)，6.70-6.63(m，1H)，6.52-6.45(m，1H)，4.59-4.50(m，2H)，4.27(s，2H)，3.66-2.80(m，27H)，2.57-2.49(m，2H)，2.07-1.97(m，2H)，1.83-1.69(m，2H)，1.41-1.33(m，6H)，1.14-1.04(m，3H)。未观察到三个可交换的质子。
实施例16
3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-N-异丙基丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790000962
m/z 809M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.41-9.26(m，1H)，8.73-8.33(m，1H)，7.98-7.88(m，1H)，7.46-7.36(m，2H)，7.24-7.14(m，1H)，6.72-6.62(m，1H)，6.55-6.45(m，1H)，4.62-4.48(m，2H)，4.31-2.55(m，30H)，2.10-1.94(m，2H)，1.87-1.71(m，2H)，1.47-1.31(m，6H)，1.21-1.05(m，6H)。未观察到三个可交换的质子。
实施例17
N-(3，3-二甲基丁基)-3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
m/z 851M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.37(s，1H)，7.95(s，1H)，7.40-7.31(m，2H)，7.19-7.11(m，1H)，6.69-6.60(m，1H)，6.54-6.45(m，1H)，4.53(s，2H)，4.25-3.95(m，1H)，3.76-2.77(m，30H)，2.01-1.86(m，2H)，1.78-1.63(m，2H)，1.46-1.31(m，8H)，0.91(s，9H)。未观察到四个可交换的质子。
实施例18
(R)-3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(己-2-基)-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
m/z 851M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.38-9.29(m，1H)，8.58(s，1H)，7.98-7.91(m，1H)，7.45-7.33(m，2H)，7.22-7.13(m，1H)，6.72-6.62(m，1H)，6.54-6.44(m，1H)，4.59-4.48(m，2H)，4.26-4.10(m，2H)，3.95-2.79(m，26H)，2.65-2.55(m，2H)，2.04-1.91(m，2H)，1.81-1.68(m，2H)，1.52-1.07(m，15H)，0.93-0.81(m，3H)。未观察到三个可交换的质子。
实施例19
(R)-N-(3，3-二甲基丁-2-基)-3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790000981
m/z 851M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.36(s，1H)，8.59(s，1H)，7.93(s，1H)，7.43-7.37(m，2H)，7.18(t，J＝7.5Hz，1H)，6.67(d，J＝8.3Hz，1H)，6.49(d，J＝8.4Hz，1H)，4.53(s，2H)，4.28-4.18(m，2H)，3.81-3.54(m，13H)，3.33-3.24(m，1H)，3.16-2.97(m，8H)，2.89-2.80(m，4H)，2.73-2.52(m，2H)，2.04-1.95(m，2H)，1.80-1.71(m，2H)，1.35(d，J＝6.9Hz，6H)，1.16(d，J＝5.9Hz，3H)，0.90(s，9H)。未观察到三个可交换的质子。
实施例20
3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-N-(3，3，3-三氟丙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790000982
m/z 863M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.35(s，1H)，7.93(s，1H)，7.44-7.34(m，2H)，7.16(t，J＝7.6Hz，1H)，6.66(d，J＝8.3Hz，1H)，6.49(d，J＝8.4Hz，1H)，4.52(s，2H)，4.22-4.11(m，2H)，3.75-2.80(m，29H)，2.58(t，J＝6.5Hz，2H)，2.04-1.92(m，2H)，1.80-1.68(m，2H)，1.35(d，J＝6.9Hz，6H)。未观察到四个可交换的质子。
实施例21
3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-N-(2-甲基苄基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790000991
m/z 871M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.35(s，1H)，7.93(s，1H)，7.42-7.34(m，2H)，7.20-7.13(m，4H)，7.02-6.97(m，1H)，6.64(d，J＝8.3Hz，1H)，6.48(d，J＝8.3Hz，1H)，4.55(s，2H)，4.51(s，2H)，4.27-4.17(m，2H)，3.74-3.50(m，14H)，3.35-3.27(m，1H)，3.13-2.96(m，8H)，2.88-2.78(m，4H)，2.26(s，3H)，2.03-1.95(m，2H)，1.80-1.69(m，2H)，1.35(d，J＝6.9Hz，6H)。未观察到四个可交换的质子。
实施例22
3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-N-(4-甲基苄基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790000992
m/z 871M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.35(s，1H)，7.96(s，1H)，7.45-7.35(m，2H)，7.22-7.07(m，5H)，6.64(d，J＝8.4Hz，1H)，6.48(d，J＝8.3Hz，1H)，4.51(s，4H)，4.23(s，2H)，3.81-2.57(m，27H)，2.28(s，3H)，2.08-1.94(m，2H)，1.84-1.68(m，2H)，1.42-1.31(m，6H)。未观察到四个可交换的质子。
实施例23
3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-N-(3-甲氧基苄基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001001
m/z 887M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.34(s，1H)，7.93(s，1H)，7.42-7.35(m，2H)，7.28-7.22(m，1H)，7.16(t，J＝7.5Hz，1H)，6.88-6.83(m，1H)，6.80-6.75(m，2H)，6.64(d，J＝8.3Hz，1H)，6.48(d，J＝8.3Hz，1H)，4.57-4.48(m，4H)，4.27-4.17(m，2H)，3.80-2.58(m，30H)，2.05-1.95(m，2H)，1.80-1.65(m，2H)，1.35(d，J＝6.9Hz，6H)。未观察到四个可交换的质子。
实施例24
N-乙基-3-(3-((4-(5-乙基噻吩-3-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-2-氟苯乙氧基)-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001002
m/z 780M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.39(s，1H)，7.49-7.40(m，3H)，7.19(t，J＝7.6Hz，1H)，6.89(s，1H)，6.66(d，J＝8.2Hz，1H)，6.49(d，J＝8.2Hz，1H)，4.52(s，2H)，4.34(s，2H)，3.71-3.61(m，6H)，3.56-3.50(m，4H)，3.47-3.36(m，2H)，3.35-3.28(m，2H)，3.24-3.17(m，2H)，3.14-3.05(m，6H)，2.90-2.77(m，6H)，2.55(t，J＝6.1Hz，2H)，2.09-1.99(m，2H)，1.81-1.70(m，2H)，1.25(t，J＝7.4Hz，3H)，1.12-1.02(m，3H)。未观察到四个可交换的质子。
实施例25
3-(3-((4-(2-环戊基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-2-氟苯乙氧基)-N-乙基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001011
m/z 821M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.39(s，1H)，7.92(s，1H)，7.44-7.38(m，2H)，7.20(d，J＝7.4Hz，1H)，6.66(d，J＝8.2Hz，1H)，6.48(d，J＝8.2Hz，1H)，4.53(s，2H)，4.27(s，2H)，3.75-3.60(m，12H)，3.56-3.28(m，5H)，3.14-3.03(m，6H)，2.91-2.79(m，4H)，2.55(t，J＝7.2Hz，2H)，2.18-2.09(m，2H)，2.04-1.95(m，2H)，1.83-1.62(m，8H)，1.11-1.05(m，3H)。未观察到四个可交换的质子。
实施例10至25使用以下羧酸和胺来制备：
  实施例编号   羧酸   胺
  10   2-异丙基噻唑-4-羧酸   N-乙基-2，2-二甲氧基乙胺[备注1]
  11   2-异丙基噻唑-4-羧酸   胺1
  12   2-异丙基噻唑-4-羧酸   胺2
  13   2-异丙基噻唑-4-羧酸   N-甲基-2，2-二甲氧基乙胺
  14   2-异丙基噻唑-4-羧酸   (R)-2，2-二甲氧基-N-(1-苯基乙基)乙胺[备注2]
  15   2-异丙基噻唑-4-羧酸   N-乙基-2，2-二甲氧基乙胺[备注1]
  16   2-异丙基噻唑-4-羧酸   胺3
  17   2-异丙基噻唑-4-羧酸   胺4
  18   2-异丙基噻唑-4-羧酸   (R)-N-(2，2-二甲氧基乙基)己-2-胺[备注3]
  19   2-异丙基噻唑-4-羧酸   胺5
  20   2-异丙基噻唑-4-羧酸   胺7
  21   2-异丙基噻唑-4-羧酸   2，2-二甲氧基-N-(2-甲基苄基)乙胺[备注4]
  22   2-异丙基噻唑-4-羧酸   2，2-二甲氧基-N-(4-甲基苄基)乙胺[备注4]
  23   2-异丙基噻唑-4-羧酸   2，2-二甲氧基-N-(3-甲氧基苄基)乙胺[备注4]
  24   5-乙基噻吩-3-羧酸   N-乙基-2，2-二甲氧基乙胺[备注1]
  25   羧酸2   N-乙基-2，2-二甲氧基乙胺[备注1]
备注1：US 2707186。
备注2：WO 2005085226。
备注3：WO 2008075025。
备注4：J.Chem.Soc.，Perkin Trans.1，1974，19，2185。
实施例26
3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-乙基-N-(2-(2-(4-羟基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]噻唑-7-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001021
将对甲苯磺酸一水合物(0.51g)加到3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2，2-二甲氧基乙基)-N-乙基丙酰胺(0.35g)在THF(5mL)中的溶液中且将所得混合物在室温搅拌15分钟。然后将溶液加到7-(2-氨基乙基)-4-羟基苯并[d]噻唑-2(3H)-酮盐酸盐[Org.Proc.Res.Dev.2004，8(4)，628](0.20g)和碳酸氢钠(0.29g)在NMP(2mL)和水(0.2mL)的混合物中的混悬液中。将所得浑浊溶液搅拌10分钟，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.34g)且将所得混合物搅拌过夜。将反应混合物在乙酸乙酯(15mL)和饱和碳酸氢钠溶液(15mL)之间分配。分离有机相，用10％盐水(2×15mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发。残留物通过硅胶快速色谱(用97.25∶2.5∶0.25至92.3∶7∶0.7二氯甲烷∶甲醇∶‘880’氨水梯度洗脱)来纯化。合并含有产物的馏分并蒸发。所得胶状物通过制备性HPLC(GeminiTMNX，梯度为27-62％甲醇/[0.1％TFA水溶液])来进一步纯化。合并含有产物的馏分并蒸发，得到标题化合物，其为白色泡沫。收率0.17g。m/z 799M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ11.35(s，1H)，7.95-7.90(m，1H)，7.53-7.47(m，1H)，7.44-7.38(m，1H)，7.36-7.30(m，1H)，6.87-6.81(m，1H)，6.77-6.71(m，1H)，4.36-4.23(m，2H)，3.75-2.54(m，30H)，2.06-1.94(m，2H)，1.83-1.68(m，2H)，1.38-1.29(m，3H)，1.16-1.03(m，3H)。未观察到四个可交换的质子。
用作原料的3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2，2-二甲氧基乙基)-N-乙基丙酰胺如下制备：
a)4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-羧酸叔丁酯
Figure BDA0000148749790001022
在氮气下将T3P(1.6M在THF中，51mL)滴加到搅拌的1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-羧酸叔丁酯盐酸盐[WuXi PharmaTech](18g)、2-乙基噻唑-4-羧酸[羧酸1](12.0g)和三乙胺(52mL)在DMF(120mL)中的混悬液中且将混合物在环境温度搅拌20小时。混合物用水稀释并萃取到乙酸乙酯(×3)中。合并的萃取物先后用10％盐水、30％盐水和饱和盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤且除去溶剂。粗产物通过硅胶快速色谱(用乙酸乙酯洗脱)来纯化。将纯馏分蒸发至干，得到小标题化合物，其为黄色油状物。收率24g。m/z340(M-tBu+H)+(APCI)。
b)(2-乙基噻唑-4-基)(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)甲酮三氟乙酸盐
Figure BDA0000148749790001031
将三氟乙酸(20mL)加到4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-羧酸叔丁酯[实施例26，步骤a](24g)在二氯甲烷(100mL)中的溶液中且将混合物在环境温度搅拌18小时。反应混合物用甲苯(50mL)稀释并真空浓缩。将残留物在二氯甲烷(50mL)中溶解，加入TFA(50mL)且将混合物搅拌4小时。混合物用甲苯(50mL)稀释，真空浓缩，残留物用乙醚研磨且析出的固体通过过滤来收集且干燥，得到小标题化合物，其为白色固体。收率28g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ8.55(s，1H)，8.39(s，1H)，8.04-8.00(m，1H)，3.81-3.51(m，6H)，3.18-2.91(m，6H)，2.00-1.90(m，2H)，1.72-1.56(m，2H)，1.32(t，J＝7.2Hz，3H)。
c)(9-(2-氯-3-(2-羟基乙基)苄基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-乙基噻唑-4-基)甲酮
Figure BDA0000148749790001032
向2-氯-3-(2-羟基乙基)苯甲醛[芳族中间体11](1.5g)和(2-乙基噻唑-4-基)(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)甲酮三氟乙酸盐[实施例26，步骤b](4.25g)在四氢呋喃(50mL)中的混悬液中一次性加入三乙胺(2.5mL)。将混合物搅拌0.5小时，然后一次性加入三乙酰氧基硼氢化钠(2.58g)且将所得溶液搅拌2小时。将反应混合物在乙酸乙酯(100mL)和饱和碳酸氢钠溶液(50mL)之间分配。将混合物剧烈振摇10分钟并分离各层。水相用乙酸乙酯(100mL)萃取。合并的有机溶液用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发。残留物通过硅胶快速色谱(使用95∶5乙酸乙酯∶三乙胺作为溶剂)来纯化。合并含有产物的馏分并蒸发，得到小标题化合物，其为澄清油状物。收率3.40g。1HNMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ7.89(s，1H)，7.33-7.28(m，1H)，7.24-7.16(m，2H)，4.35(t，J＝5.4Hz，1H)，3.68-3.60(m，8H)，3.55(s，2H)，3.02(q，J＝7.5Hz，2H)，2.89(t，J＝6.9Hz，2H)，2.46-2.31(m，4H)，1.75-1.67(m，2H)，1.59-1.51(m，2H)，1.33(t，J＝7.6Hz，3H)。
d)3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酸叔丁酯
Figure BDA0000148749790001041
将Triton-B(40％在水中，0.94mL)加到(9-(2-氯-3-(2-羟基乙基)苄基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-乙基噻唑-4-基)甲酮[实施例26，步骤c](3.2g)和丙烯酸叔丁酯(1.5mL)在乙腈(1mL)中的溶液中且将所得混合物在室温搅拌过夜。蒸发溶剂且残留物通过硅胶快速色谱(用1∶1∶0.05乙酸乙酯∶异己烷∶三乙胺至95∶5乙酸乙酯∶三乙胺梯度洗脱)来纯化，得到小标题化合物，其为澄清油状物。收率3.2g。m/z 592M+(APCI)。
e)3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酸
Figure BDA0000148749790001042
将TFA(10mL)加到3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酸叔丁酯[实施例26，步骤d](3.1g)在DCM(30mL)中的溶液中且将所得混合物搅拌2小时，然后蒸发。将残留物在乙酸乙酯(100mL)和饱和碳酸氢钠溶液(50mL)之间分配。分离各相且水相再用乙酸乙酯(2×100mL)洗涤。然后水相用乙酸酸化并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。合并的有机溶液用硫酸钠干燥，过滤并蒸发，得到小标题化合物，其为白色泡沫。收率2.7g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ7.92(s，1H)，7.60-7.53(m，1H)，7.44-7.39(m，1H)，7.32(t，J＝7.6Hz，1H)，3.76-3.56(m，12H)，3.12-2.92(m，8H)，2.42(t，J＝6.4Hz，2H)，2.01-1.73(m，4H)，1.33(t，J＝7.6Hz，3H)。未观察到一个可交换的质子。
f)3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2，2-二甲氧基乙基)-N-乙基丙酰胺
Figure BDA0000148749790001051
将HATU(1.06g)加到3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酸[实施例26，步骤e](0.75g)、许尼希碱(1.22mL)和N-乙基-2，2-二甲氧基乙胺[US 2707186](0.37g)在DMF(5mL)中的溶液中。将所得深色溶液在室温搅拌过夜。将反应混合物在乙酸乙酯(25mL)和20％盐水(25mL)之间分配。分离有机层并用20％盐水(2×25mL)洗涤。将有机溶液蒸发且残留物通过硅胶色谱(用异己烷∶三乙胺95∶5至乙酸乙酯∶三乙胺95∶5梯度洗脱)来纯化。合并含有产物的馏分并蒸发，得到小标题化合物，其为油状物。收率0.70g。m/z 651M+(APCI)。
实施例27
3-(2-氯-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-环己基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001052
将对甲苯磺酸一水合物(0.29g)加到3-(2-氯-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-环己基-N-(2，2-二甲氧基乙基)丙酰胺(0.22g)在DCM(5mL)中的溶液中且将所得混合物在室温搅拌3小时。然后将溶液加到8-(2-氨基乙基)-5-羟基-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-3(4H)-酮盐酸盐[WO 2008075025](0.11g)和碳酸氢钠(0.17g)在NMP(2mL)和水(0.2mL)的混合物中的混悬液中且将所得浑浊溶液搅拌10分钟。然后加入乙酸(0.018mL)，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.16g)且将所得混合物搅拌过夜。将反应混合物在2-甲基四氢呋喃(15mL)和饱和碳酸氢钠溶液(15mL)之间分配。分离有机相，用10％盐水(2×15mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发。残留物通过硅胶快速色谱(用97.25∶2.5∶0.25至92.3∶7∶0.7二氯甲烷∶甲醇∶‘880’氨水梯度洗脱)来纯化。合并含有产物的馏分并蒸发。所得胶状物通过制备性HPLC(SunfireTM，梯度为35-60％甲醇/[0.2％TFA水溶液])来进一步纯化。合并含有产物的馏分，蒸发并用乙醚研磨，得到标题化合物，其为白色固体。收率0.037g。m/z 865M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.40(宽单峰，1H)，8.40(宽单峰，1H)，7.93(s，1H)，7.49(d，J＝7.2Hz，1H)，7.41(d，J＝6.9Hz，1H)，7.32(t，J＝7.4Hz，1H)，6.66(d，J＝8.2Hz，1H)，6.49(d，J＝8.2Hz，1H)，4.53(s，2H)，4.26(宽单峰，2H)，3.75-3.60(m，11H)，3.51-2.93(m，13H)，2.82(t，J＝7.6Hz，2H)，2.60(t，J＝6.4Hz，2H)，2.03-1.89(m，2H)，1.82-1.69(m，4H)，1.68-1.56(m，4H)，1.50-1.23(m，4H)，1.35(d，J＝6.9Hz，6H)。未观察到三个可交换的质子。
用作原料的3-(2-氯-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-环己基-N-(2，2-二甲氧基乙基)丙酰胺如下制备：
a)(2-异丙基噻唑-4-基)(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)甲酮盐酸盐
Figure BDA0000148749790001061
将2-异丙基噻唑-4-羧酸(12g)和1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-羧酸叔丁酯盐酸盐[WuXi PharmaTech](20g)在2-甲基四氢呋喃(140mL)中的溶液在冰水中冷却并用三乙胺(47mL)处理，然后用T3P(1.6M在THF中，54mL)处理。将混合物温热至室温且搅拌1小时。在搅拌下加入水(140mL)，然后分离各相。有机相用水(80mL)洗涤，然后在温度＜30℃的情况下减压浓缩至体积为～100mL。加入IPA(75mL)且将混合物浓缩至体积为～100mL。再加入IPA(75mL)且将混合物再次浓缩至体积为～100mL。加入氯化氢在IPA中的溶液(～6M，81mL)同时在冰水中冷却，然后将混合物温热至40℃并搅拌3.5小时。将混合物冷却至室温，用MTBE(34mL)稀释并搅拌30分钟。析出的所得固体通过过滤来取出并在55℃在真空烘箱中干燥过夜。收率20.5g。1HNMR(400MHz，d6-DMSO)δ8.88(d，J＝41.0Hz，2H)，8.05(s，1H)，3.86-3.46(m，6H)，3.32(五重峰，J＝6.7Hz，1H)，3.17-3.02(m，2H)，3.01-2.85(m，2H)，1.96(d，J＝14.1Hz，2H)，1.81-1.55(m，2H)，1.35(d，J＝6.9Hz，6H)。
b)(9-(2-氯-3-(2-羟基乙基)苄基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮
Figure BDA0000148749790001071
通过实施例26步骤c的方法来制备，其中使用(2-异丙基噻唑-4-基)(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)甲酮盐酸盐[实施例27，步骤a](1.37g)代替(2-乙基噻唑-4-基)(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)甲酮三氟乙酸盐且使用2-甲基四氢呋喃(50mL)代替四氢呋喃。收率1.00g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO 90℃)δ7.91(d，J＝1.3Hz，1H)，7.30(d，J＝7.2Hz，1H)，7.24-7.16(m，2H)，4.36(t，J＝5.1Hz，1H)，3.73-3.59(m，8H)，3.55(s，2H)，3.32(七重峰，J＝6.8Hz，1H)，2.89(t，J＝7.0Hz，2H)，2.46-2.40(m，1H)，2.40-2.28(m，1H)，2.17(t，J＝8.1Hz，1H)，1.91(五重峰，J＝7.5Hz，1H)，1.77-1.65(m，2H)，1.62-1.50(m，2H)，1.36(d，J＝6.5Hz，6H)。
c)3-(2-氯-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酸叔丁酯
Figure BDA0000148749790001072
通过实施例7步骤c的方法来制备，其中使用(9-(2-氯-3-(2-羟基乙基)苄基)-1-氧杂-4，9-氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮[实施例27，步骤b](1.0g)代替(9-(2-氟-3-(2-羟基乙基)苄基)-1-氧杂-4，9-氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮。收率0.93g。m/z 606M+(APCI)。
d)3-(2-氯-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酸
通过实施例7步骤d的方法来制备，其中使用3-(2-氯-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酸叔丁酯[实施例27，步骤c](0.93g)代替3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酸叔丁酯。收率0.76g。m/z550M+(APCI)。
e)3-(2-氯-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-环己基-N-(2，2-二甲氧基乙基)丙酰胺
通过实施例7步骤e的方法来制备，其中使用3-(2-氯-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酸[实施例27，步骤d](0.28g)代替3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酸且使用N-(2，2-二甲氧基乙基)环己胺[WO 2008075025](0.10g)代替N-(2，2-二甲氧基乙基)环庚胺。收率0.11g。m/z 719M+(APCI)。
以下化合物使用与上述类似的方法由适当的羧酸和胺来制备。
实施例28
3-(2-氯-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-乙基-N-(2-(2-(4-羟基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]噻唑-7-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001082
m/z 813M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ7.94(s，1H)，7.50(d，J＝6.9Hz，1H)，7.43(d，J＝7.2Hz，1H)，7.33(t，J＝7.6Hz，1H)，6.85(d，J＝8.2Hz，1H)，6.74(d，J＝8.2Hz，1H)，4.32(宽单峰，2H)，3.78-3.59(m，10H)，3.53(t，J＝6.7Hz，2H)，3.44-3.24(m，5H)，3.22-3.04(m，6H)，2.99(t，J＝6.9Hz，2H)，2.83(t，J＝7.9Hz，2H)，2.56(t，J＝6.5Hz，2H)，2.06-1.91(m，2H)，1.84-1.67(m，2H)，1.35(d，J＝6.9Hz，6H)，1.09(t，J＝6.9Hz，3H)。未观察到五个可交换的质子。
实施例29
3-(2-氯-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-N-丙基丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001091
m/z 825M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.33(s，1H)，8.45(s，1H)，7.93(s，1H)，7.56-7.49(m，1H)，7.43(d，J＝7.5Hz，1H)，7.33(t，J＝7.6Hz，1H)，6.66(d，J＝8.3Hz，1H)，6.49(d，J＝8.3Hz，1H)，4.55(s，2H)，4.36(s，2H)，3.73-3.62(m，10H)，3.56-3.51(m，3H)，3.34-3.21(m，2H)，3.15-3.05(m，8H)，2.99(t，J＝6.8Hz，2H)，2.83(t，J＝7.7Hz，2H)，2.55(t，J＝6.5Hz，2H)，2.04-1.96(m，2H)，1.83-1.73(m，2H)，1.57-1.45(m，2H)，1.35(d，J＝6.9Hz，6H)，0.85(t，J＝7.2Hz，3H)。未观察到三个可交换的质子。
实施例30
3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-乙基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001092
m/z 797M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.36(s，1H)，8.33(s，1H)，7.92(s，1H)，7.51-7.46(m，1H)，7.45-7.41(m，1H)，7.36-7.31(m，1H)，6.68-6.63(m，1H)，6.50-6.45(m，1H)，4.53(s，2H)，4.31(s，2H)，3.72-2.96(m，26H)，2.86-2.77(m，2H)，2.59-2.54(m，2H)，2.05-1.93(m，2H)，1.84-1.69(m，2H)，1.37-1.28(m，3H)，1.15-1.04(m，3H)。未观察到三个可交换的质子。
实施例31
(R)-N-仲丁基-3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001101
m/z 825M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.34(s，1H)，8.53(s，1H)，7.92(s，1H)，7.54(d，J＝7.6Hz，1H)，7.45(d，J＝7.5Hz，1H)，7.34(t，J＝7.6Hz，1H)，6.67(d，J＝8.3Hz，1H)，6.49(d，J＝8.3Hz，1H)，4.53(s，3H)，4.41(s，3H)，3.73-3.62(m，10H)，3.53-3.42(m，1H)，3.23-3.09(m，6H)，3.07-2.97(m，6H)，2.83(t，J＝7.5Hz，2H)，2.63-2.56(m，2H)，2.05-1.98(m，2H)，1.87-1.75(m，2H)，1.48(五重峰，J＝7.3Hz，2H)，1.32(t，J＝7.5Hz，3H)，1.12(d，J＝6.4Hz，3H)，0.81(t，J＝7.0Hz，3H)。未观察到三个可交换的质子。
实施例32
N-丁基-3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001102
m/z 825M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.34(s，1H)，8.45(s，1H)，7.92(s，1H)，7.53(d，J＝7.4Hz，1H)，7.44(d，J＝7.5Hz，1H)，7.33(t，J＝7.5Hz，1H)，6.66(d，J＝8.2Hz，1H)，6.49(d，J＝8.2Hz，1H)，4.52(s，2H)，4.38(s，2H)，3.73-3.63(m，10H)，3.56-3.51(m，2H)，3.29-3.23(m，2H)，3.21-3.06(m，8H)，3.04-2.97(m，4H)，2.83(t，J＝7.6Hz，2H)，2.55(t，J＝6.4Hz，2H)，2.04-1.96(m，2H)，1.85-1.75(m，2H)，1.54-1.44(m，2H)，1.36-1.23(m，5H)，0.90(t，J＝7.3Hz，3H)。未观察到三个可交换的质子。
实施例33
3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-环戊基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
m/z 837M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.37(s，1H)，8.41(s，1H)，7.92(s，1H)，7.52-7.48(m，1H)，7.44-7.39(m，1H)，7.36-7.30(m，1H)，6.66(d，J＝8.3Hz，1H)，6.48(d，J＝8.3Hz，1H)，4.53(s，2H)，4.34-4.16(m，2H)，3.74-2.96(m，25H)，2.82(t，J＝7.6Hz，2H)，2.62(t，J＝6.2Hz，2H)，2.02-1.41(m，12H)，1.32(t，J＝7.5Hz，3H)。未观察到三个可交换的质子。
实施例33a
3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-环戊基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺硫酸盐
Figure BDA0000148749790001112
向3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-环戊基-N-(2，2-二甲氧基乙基)丙酰胺(9.6g)在THF(80mL)和NMP(8.0mL)中的溶液中加入对甲苯磺酸一水合物(13.25g)且将反应混合物在环境温度搅拌30分钟。
另外，向8-(2-氨基乙基)-5-羟基-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-3(4H)-酮盐酸盐(4.09g)在NMP(48.0mL)和水(4.8mL)中的溶液中加入碳酸氢钠(7.84g)且将反应混合物在环境温度搅拌30分钟。
将上述醛溶液加到上述胺溶液中且将反应混合物搅拌15分钟，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(8.86g)。然后将反应混合物在环境温度搅拌90分钟。
反应混合物用EtOAc(300mL)稀释并用饱和碳酸氢钠(2×300mL)和盐水洗涤。然后将乙酸乙酯溶液真空蒸发。粗产物通过硅胶色谱(先后用DCM(300mL)和6-9％[7N NH3/甲醇]/二氯甲烷洗脱)来纯化，得到3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-环戊基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺(4.90g)。
向3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-环戊基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺(4.9g)在乙醇(50mL)中的溶液中加入硫酸(0.5M水溶液)(10.62mL)。将反应混合物在环境温度搅拌5分钟。
将反应混合物真空蒸发至约5-10ml，加入MeCN且蒸发溶剂(×2)，得到白色固体(5.2g)。
将上述物质(5.2g)在MeOH(100mL)中溶解，用结晶物质(如下所述)*种晶并在环境温度搅拌72小时。将固体过滤，用MeOH洗涤并在环境温度真空干燥过夜，得到3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-环戊基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺硫酸盐(3.04g)，其为结晶白色固体。[M+H]+＝837(计算值＝837)(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.96-9.90(m，1H)，9.82(s，1H)，7.98(s，1H)，7.40-7.18(m，3H)，6.69-6.63(m，1H)，6.51-6.45(m，1H)，4.54(s，2H)，4.17(五重峰，J＝8.5Hz，1H)，3.75-3.45(m，12H)，3.37(t，J＝7.1Hz，2H)，3.09-2.90(m，8H)，2.77(t，J＝7.6Hz，2H)，2.69-2.22(m，8H)，1.84-1.21(m，16H)
*将一些二(三氟乙酸盐)(1.05g)(实施例33)在DCM(30mL)和饱和碳酸氢钠(30mL)之间分配。水层再用DCM萃取。合并的有机物用Na2SO4干燥并真空蒸发，得到3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-环戊基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺(0.82g)，其为白色泡沫。
向3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-环戊基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺(230mg)在乙醇(5mL)中的溶液中加入硫酸(0.5M水溶液)(0.549mL)。5分钟后，将混合物真空蒸发并与MeCN(×2)共沸，得到白色固体(280mg)。
将50mg该物质在甲醇(5mL)中溶解并历时6天在蒸气分散实验条件(使用乙醚作为抗溶剂)下加入15mL乙醚。结晶固体(20mg)通过过滤来收集。
3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-环戊基-N-(2，2-二甲氧基乙基)丙酰胺
Figure BDA0000148749790001131
向3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酸(9.8g)在DCM(100mL)中的溶液中加入许尼希碱(9.58mL)。将反应混合物搅拌10分钟，然后加入N-(2，2-甲氧基乙基)环戊胺(4.12g)，然后加入HATU(7.65g)。1小时后，反应混合物用DCM(200mL)稀释并先后用饱和碳酸氢钠(300mL)和水(300mL)洗涤。DCM溶液用Na2SO4干燥，过滤并真空蒸发。粗产物通过硅胶色谱(用2至5％[7N NH3/甲醇]/二氯甲烷洗脱)来纯化，得到3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-环戊基-N-(2，2-甲氧基乙基)丙酰胺(12.0g)，其为淡黄色胶状物。m/z＝691[M+H]+。
实施例33b
3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-环戊基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺
Figure BDA0000148749790001141
a)4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-羧酸叔丁酯
Figure BDA0000148749790001142
将1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-羧酸叔丁酯盐酸盐(限制试剂)和2-乙基噻唑-4-羧酸(1摩尔当量)的混合物在DCM(4.5倍体积)中混悬并冷却至16℃。向其中逐份加入三乙胺(5摩尔当量)。将稠厚混悬液冷却至6℃且在5-15℃历时0.5小时滴加T3P(1.1摩尔当量，1.57M在THF中的溶液)。将反应混合物温热至22℃且在22℃搅拌2小时。混合物用水(6.5倍体积，4℃放热)稀释且将混合物搅拌10分钟；分离水层并用DCM(4.5倍体积)萃取。合并的有机物用饱和碳酸氢钠水溶液(5.5倍体积)和20％盐水(1.5倍体积)洗涤。有机物用无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发，得到棕色油状物。收率：理论值的96％。m/z[M+H]+＝296-boc(计算值＝396)(多模式+)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.84(s，1H)，4.08-3.51(m，10H)，3.22(dd，J＝15.0，25.7Hz，2H)，3.04(q，J＝7.6Hz，2H)，1.88-1.78(m，2H)，1.55(d，J＝26.2Hz，1H)，1.45(s，9H)，1.40(t，J＝7.6Hz，3H)。
b)(2-乙基噻唑-4-基)(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)甲酮
Figure BDA0000148749790001143
向4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-羧酸叔丁酯(限制试剂)(步骤a)在iPrOH(3倍体积)中的溶液中加入氯化氢(2摩尔当量，5-6N在iPrOH中的溶液)。将反应混合物加热并在49℃(内部)搅拌18小时，然后冷却至22℃。加入TBME(4.3倍体积)且将混悬液在22℃搅拌3天。固体通过过滤来收集，用TBME(3.5倍体积)洗涤并风干2天，得到灰白色固体。收率：理论值的95％。m/z[M+H]+＝295(计算值＝295)(多模式+)。1HNMR(400MHz，DMSO)δ8.03(s，1H)，3.82-3.50(m，8H)，3.14-2.86(m，8H)，1.32(t，J＝7.5Hz，3H)。
c)(9-(2-氯-3-(2-羟基乙基)苄基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-乙基噻唑-4-基)甲酮
向2-氯-3-(2-羟基乙基)苯甲醛(1.1摩尔当量)在DCM(12倍体积)中的溶液中加入(2-乙基噻唑-4-基)(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)甲酮((限制试剂)(步骤b)。加入三乙胺(2摩尔当量)且将混合物搅拌1.15小时。历时15分钟分批加入三乙酰氧基硼氢化钠(2.5摩尔当量)且保持温度低于25℃。将反应混合物在环境温度搅拌22.5小时。缓慢加入饱和碳酸氢钠水溶液(8倍体积)且将混合物剧烈搅拌1小时；分离水层并用DCM(5.3倍体积)萃取。合并的有机物用20％盐水(5.3倍体积)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发，得到棕色油状物。收率：理论值的107％。m/z[M+H]+＝465(计算值＝465)(多模式+)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.80(s，1H)，7.38(d，J＝4.7Hz，1H)，7.17(d，J＝4.3Hz，2H)，3.89(dd，J＝15.4，22.0Hz，4H)，3.78(s，2H)，3.63(d，J＝11.9Hz，3H)，3.04(t，J＝6.6Hz，4H)，2.49(s，4H)，1.85(s，3H)，1.66(d，J＝74.8Hz，2H)，1.42(d，J＝6.5Hz，3H)。
d)3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酸叔丁酯
Figure BDA0000148749790001152
将Triton-B(0.3摩尔当量，40％在水中的溶液)加到(9-(2-氯-3-(2-羟基乙基)苄基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-乙基噻唑-4-基)甲酮(限制试剂)(步骤c)和丙烯酸叔丁酯(5摩尔当量)在乙腈(3.4倍体积)中的溶液中。将反应混合物在环境温度搅拌1小时。蒸发溶剂且将残留物在水(2倍体积)和2-甲基四氢呋喃(2倍体积)之间分配。分离各层且有机物用无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发，得到棕色油状物。收率：理论值的94％。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.80(s，1H)，7.44-7.31(m，1H)，7.22-7.09(m，2H)，4.01-3.48(m，11H)，3.10-2.95(m，4H)，2.62-2.39(m，6H)，1.94-1.63(m，2H)，1.63-1.50(m，2H)，1.47-1.35(m，13H)。
e)3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酸
Figure BDA0000148749790001161
将3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酸叔丁酯(限制试剂)(步骤d)在DCM(2.8倍体积)中的溶液冷却至5℃。历时20分钟加入三氟乙酸(10摩尔当量)(放热至15℃)。将反应混合物温热至环境温度并搅拌18小时。加入甲苯(3倍体积)且将混合物蒸发。所得胶状物用甲苯(2×1.5倍体积)研磨并蒸发，得到棕色胶状物。收率：理论值的200％。(就粗物质而言，NMR测定显示纯度为～45wt％，其中由于TFA留在胶状物中而具有剩余重量)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.88(s，1H)，7.40-7.33(m，2H)，7.27-7.22(m，1H)，4.42(d，J＝5.0Hz，2H)，3.90(d，J＝8.6Hz，2H)，3.82(d，J＝6.8Hz，2H)，3.77(dd，J＝5.9，10.6Hz，4H)，3.69(dd，J＝6.2，11.8Hz，2H)，3.65(s，2H)，3.26-3.13(m，2H)，3.09-2.98(m，4H)，2.67(dt，J＝5.8，11.6Hz，1H)，2.49(t，J＝5.7Hz，2H)，2.16(t，J＝14.1Hz，2H)，1.98(dd，J＝8.5，19.8Hz，2H)，1.45-1.31(m，3H)。
f)3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-环戊基-N-(2，2-二甲氧基乙基)丙酰胺
Figure BDA0000148749790001171
将3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酸(限制试剂)(步骤e)在DCM(6.4倍体积)中的溶液冷却至13℃。历时80分钟加入三乙胺(15摩尔当量)(5℃放热)。历时5分钟加入N-(2，2-二甲氧基乙基)环戊胺(1.3摩尔当量)(无放热)。将混合物温热至环境温度并在22℃搅拌45分钟。历时10分钟分批加入T3P(2摩尔当量，1.57M在THF中的溶液)(8℃放热)。将反应混合物在22℃搅拌1.5小时。加入饱和碳酸氢钠溶液(4.2倍体积)且将混合物搅拌5分钟。分离各层且水层用DCM(1.4倍体积)萃取。合并的有机物用20％盐水(1.4倍体积)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发。粗残留物通过硅胶柱色谱(1500g Biotage快速柱)来纯化(产物用95％DCM：5％(9∶1MeOH∶氨水)洗脱)，得到黄色油状物。收率：理论值的79％。m/z[M+H]+＝691(计算值＝691)(多模式+)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.81(s，1H)，7.41-7.26(m，1H)，7.15(d，J＝3.4Hz，2H)，4.69-4.62(m，1H)，4.37(dd，J＝6.8，12.0Hz，1H)，4.21-4.08(m，1H)，3.99-3.52(m，12H)，3.45-3.36(m，8H)，3.28(t，J＝7.8Hz，2H)，3.11-2.97(m，4H)，2.70(t，J＝6.9Hz，2H)，2.63-2.36(m，4H)，1.93-1.32(m，16H)。
g)3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-环戊基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺
将3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-环戊基-N-(2，2-二甲氧基乙基)丙酰胺(限制试剂)(步骤f)在THF(9.5倍体积)中的溶液加热至40℃。加入对甲苯磺酸一水合物(5摩尔当量)且将混合物在40℃保持10分钟。将碳酸氢钠(8摩尔当量)在水(16倍体积)中的溶液缓慢加到反应混合物中。不再冒泡后，水层用乙酸乙酯(2×16倍体积)萃取。合并的有机物用无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发。将残留物在NMP(4倍体积)中溶解并加到8-(2-氨基乙基)-5-羟基-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-3(4H)-酮盐酸盐(1.2摩尔当量)在NMP(4倍体积)、水(0.4倍体积)和碳酸氢钠(3摩尔当量)中的混悬液中，先前已将所述混悬液在环境温度搅拌3小时。将反应混合物在环境温度搅拌30分钟。一次性加入三乙酰氧基硼氢化钠(3摩尔当量)且将混合物在环境温度搅拌90分钟。向反应混合物中缓慢加入饱和碳酸氢钠溶液(16倍体积)(剧烈泡腾和10℃放热)。加入2-甲基四氢呋喃(16倍体积)。分离各层且水层用2-甲基四氢呋喃(16倍体积)萃取。合并的有机物用含有碳酸氢钠的水(pH 8)(2×16倍体积，15g碳酸氢钠在2000mL水中的溶液)洗涤。有机物用无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发。粗残留物通过硅胶色谱(750g Biotage快速柱)来纯化(用[1％氨水和3％甲醇]/DCM至[1％氨水和5％甲醇]/DCM进行梯度洗脱以洗出产物)。将纯馏分蒸发至干，得到灰白色易碎泡沫。收率：理论值的33％。m/z[M+H]+＝837(计算值＝837)(多模式+)。1HNMR(400MHz，DMSO，90℃)δ7.89(d，J＝1.7Hz，1H)，7.31(d，J＝7.1Hz，1H)，7.20(dt，J＝7.3，14.7Hz，2H)，6.61(d，J＝8.2Hz，1H)，6.43(d，J＝8.2Hz，1H)，4.46(d，J＝1.4Hz，2H)，4.29-4.13(m，1H)，3.71-3.49(m，12H)，3.18(t，J＝7.2Hz，2H)，3.08-2.90(m，7H)，2.71-2.29(m，12H)，1.67(d，J＝14.9Hz，6H)，1.51(d，J＝23.5Hz，6H)，1.33(dd，J＝6.0，7.5Hz，3H)。
h)3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-环戊基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺硫酸盐一水合物
将3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-环戊基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺(限制试剂)(步骤g)(37.85g，45.20mmol)在甲醇(6倍体积)中的溶液加热至50℃且历时10分钟滴加硫酸(1摩尔当量)在甲醇(6倍体积)中的溶液。对混合物进行种晶且在50℃搅拌1小时。历时2小时将混合物冷却至环境温度并搅拌18小时。析出物通过过滤来收集并在烘箱中真空干燥(不加热)，得到白色固体。收率：理论值的76％。m/z[M+H]+＝837(计算值＝837)(多模式+)。1H NMR(500MHz，DMSO)δ7.99(s，1H)，7.43-7.16(m，3H)，6.67(t，J＝7.7Hz，1H)，6.48(t，J＝7.3Hz，1H)，4.59-4.36(m，2H)，4.23-4.13(m，1H)，3.63(dt，J＝27.8，53.1Hz，12H)，3.37(dd，J＝9.0，16.1Hz，6H)，3.11-2.89(m，8H)，2.77(t，J＝7.6Hz，2H)，2.64(t，J＝6.3Hz，2H)，2.38(dd，J＝33.4，51.6Hz，4H)，1.83-1.38(m，12H)，1.32(s，3H)。
实施例28至33a使用以下羧酸和胺来制备：
  实施例编号   羧酸   胺
  28   2-异丙基噻唑-4-羧酸   N-乙基-2，2-二甲氧基乙胺[备注1]
  29   2-异丙基噻唑-4-羧酸   N-(2，2二甲氧基乙基)丙-1-胺[备注2]
  30   羧酸1   N-乙基-2，2-二甲氧基乙胺[备注1]
  31   羧酸1   (R)-N-(2，2-二甲氧基乙基)丁-2-胺[备注3]
  32   羧酸1   N-(2，2-二甲氧基乙基)丁-1-胺[备注4]
  33，33a   羧酸1   胺6
备注1：US 2707186。
备注2：Liebigs Annalen der Chemie 1979，11，1818。
备注3：WO 2008075025。
备注4：J.Am.Chem.Soc.1949，71(6)，2272。
实施例34
N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
将N-丁基-N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺(0.45g)在四氢呋喃(10mL)中溶解并加入对甲苯磺酸(0.28g)。将混合物在室温搅拌1小时，然后加到8-(2-氨基乙基)-5-羟基-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-3(4H)-酮盐酸盐[WO2008075025](0.245g)和碳酸氢钠(0.20g)在NMP(4mL)和水(0.5mL)中的混合物中并搅拌15分钟。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.35g)和乙酸(0.5mL)且将混合物在室温搅拌16小时。将混合物倒入饱和碳酸氢钠溶液中并用乙酸乙酯萃取。合并萃取物并减压蒸发。残留物通过硅胶快速色谱(使用8％甲醇/二氯甲烷(含有1％‘880’氨水)作为溶剂)来纯化。通过制备性HPLC(SunfireTM，梯度为33-68％甲醇/[0.1％TFA水溶液])来进一步纯化，得到标题化合物，其为白色固体。收率0.194g。m/z 819M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.44-9.34(m，1H)，8.36-8.27(m，1H)，7.97(s，1H)，7.26-7.19(m，1H)，7.15-7.08(m，3H)，6.68-6.63(m，1H)，6.51-6.45(m，1H)，4.53(s，2H)，3.73-3.48(m，14H)，3.37-2.52(m，20H)，2.15-1.41(m，6H)，1.36(d，J＝6.9Hz，6H)，1.32-1.25(m，2H)，0.91(t，J＝7.4Hz，3H)。未观察到两个可交换的质子。
用作原料的N-丁基-N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺如下制备：
a)(9-(3-(2-羟基乙基)苯乙基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮
Figure BDA0000148749790001201
将(2-异丙基噻唑-4-基)(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)甲酮盐酸盐[实施例27，步骤a](10g)、2-(3-(2-溴乙基)苯基)乙醇[Organometallics 2002，21(20)，4217](10g)和碳酸钾(16g)在乙腈(600mL)和水(10mL)中的混合物在60℃加热36小时。倾出溶剂并减压蒸发。将残留物在乙酸乙酯和盐水之间分配，水层用乙酸乙酯再次萃取且将合并的有机层干燥，过滤且将溶剂减压蒸发。残留物通过硅胶快速色谱(使用5％甲醇/乙酸乙酯(含有1％三乙胺)作为溶剂)来纯化。将含有产物的馏分蒸发至干，得到小标题化合物。收率11g。m/z 458(M+H)+(APCI)。
b)3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酸叔丁酯
Figure BDA0000148749790001202
将(9-(3-(2-羟基乙基)苯乙基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮[实施例34，步骤a](2.4g)在乙腈(2mL)中溶解并加入丙烯酸叔丁酯(1.7mL)，然后加入苄基三甲基氢氧化铵(40％在水中，0.72mL)。将混合物在环境温度搅拌3小时。减压除去挥发物且残留物通过硅胶快速色谱(用3％甲醇/二氯甲烷(含有1％‘880’氨水)洗脱)来纯化，得到小标题化合物。收率2.7g。m/z 586(M+H)+(APCI)。
c)3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酸
Figure BDA0000148749790001211
将3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酸叔丁酯[实施例34，步骤b](0.70g)在二氯甲烷(8mL)中搅拌并加入三氟乙酸(2mL)。将溶液搅拌18小时，然后减压除去挥发物，得到小标题化合物。收率1.0g。m/z 530(M+H)+(APCI)。
d)N-丁基-N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺
Figure BDA0000148749790001212
将3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酸[实施例34，步骤c](0.50g)、许尼希碱(0.58mL)和N-(2，2-甲氧基乙基)丁-1-胺[J.Am.Chem.Soc.1949，71(6)，2272](0.12g)在二氯甲烷(10mL)中溶解。然后加入HATU(0.33g)且将混合物在室温搅拌24小时。将混合物倒入水中并用二氯甲烷萃取。合并有机萃取物并减压蒸发，得到小标题化合物。收率0.45g。m/z 673(M+H)+(APCI)。
实施例34a
N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺硫酸盐变体A
向N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺(100mg)(制备如下所述)在乙醇(20mL)中的溶液中加入硫酸(244μl，0.5M在水中的溶液)。将一半该溶液静置16小时且N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺硫酸盐变体A通过过滤来收集。收率5mg。
将对甲苯磺酸一水合物(4.24g)加到N-丁基-N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺(3g)在THF(30mL)中的溶液中且将所得混合物在室温搅拌1小时。加入NMP(1mL)，然后将溶液加到8-(2-氨基乙基)-5-羟基-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-3(4H)-酮盐酸盐(1.636g)和碳酸氢钠(3.00g)在NMP(16mL)和水(1.6mL)的混合物中的混悬液中，已将所述混悬液搅拌45分钟。含有所得醛的烧瓶用NMP(2mL)洗涤且将洗涤液加到混悬液中且将所得浑浊溶液搅拌20分钟。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(2.83g)且将所得混合物搅拌1小时。
将反应混合物在2-甲基四氢呋喃(200mL)和饱和碳酸氢钠溶液(150mL)之间分配。加入水(～100mL)直到析出物已溶解。将混合物振摇10分钟(直到不再放出气体)。分离2-甲基四氢呋喃溶液，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发。残留物通过硅胶快速色谱(用8％甲醇/二氯甲烷(含有1％880氨水)洗脱)来纯化。将纯馏分蒸发至干。将该胶状物在乙醇(30mL)中溶解并用1当量硫酸(0.5M水溶液)处理。蒸发溶剂且将残留物与乙腈(×2)共沸。将所得胶状物在乙醇(15mL)中溶解并用硫酸盐变体A(实施例34a，10mg)种晶。将混合物在室温搅拌2天，在氮气下滤出并先后用乙醇(5mL)、乙腈(5mL)和乙醚(10mL)洗涤。收率1.8g。m/z 819.4(多模式+)。
a)(9-(3-(2-羟基乙基)苯乙基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮
Figure BDA0000148749790001221
将(2-异丙基噻唑-4-基)(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)甲酮盐酸盐[实施例27，步骤a](13.6g)、2-(3-(2-溴乙基)苯基)乙醇[Organometallics 2002，21(20)，4217](13.51g)和碳酸钾(21.7g)在乙腈(700mL)和水(13mL)中的混合物在60℃加热36小时。倾出溶剂并减压蒸发。将残留物在乙酸乙酯和盐水之间分配，水层用乙酸乙酯再次萃取且将合并的有机层干燥，过滤且将溶剂减压蒸发。残留物通过硅胶快速色谱(使用5％甲醇/乙酸乙酯(含有1％三乙胺)作为溶剂)来纯化。将含有产物的馏分蒸发至干，得到小标题化合物。收率13.2g。m/z 458(M+H)+(APCI)。
b)3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酸叔丁酯
将(9-(3-(2-羟基乙基)苯乙基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮[实施例34a，步骤a](13.2g)在乙腈(20mL)中溶解并加入丙烯酸叔丁酯(8.13g)，然后加入苄基三甲基氢氧化铵(40％在水中，3.93mL)。将混合物在环境温度搅拌3小时。减压除去挥发物且残留物通过硅胶快速色谱(用[5％甲醇和1％三乙胺]/乙酸乙酯洗脱)来纯化，得到小标题化合物。收率13.2g。m/z 586(M+H)+(APCI)。
c)3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酸三氟乙酸盐
Figure BDA0000148749790001232
将3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酸叔丁酯[实施例34a，步骤b](13.2g)在二氯甲烷(150mL)中搅拌并加入三氟乙酸(50mL)。将溶液搅拌1小时。将溶剂减压蒸发且将残留物在乙腈中溶解且将溶液减压蒸发，得到小标题化合物。收率14.4g。m/z 530(M+H)+(APCI)。
d)N-丁基-N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺
Figure BDA0000148749790001241
历时15分钟将T3P(15.67mL，1.57M在THF中的溶液)滴加到搅拌的3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酸三氟乙酸盐[实施例34a，步骤c](14.4g)、N-(2，2-二甲氧基乙基)丁-1-胺[J.Am.Chem.Soc.1949，71(6)，2272](3.97g)和三乙胺(21.83mL)在DMF(180mL)中的溶液中。将混合物在20℃搅拌3小时，然后在乙酸乙酯和盐水之间分配。有机层用盐水(×2)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤且将溶剂减压蒸发，得到小标题化合物。收率15.00g。m/z 673.4(M+H)+。
实施例34b
N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺
将N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺硫酸盐变体A(实施例34a)(1.73g)在DCM/甲醇中溶解，过滤并蒸发至干。将所得胶状物在饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)和新蒸馏的甲基四氢呋喃(150mL)之间分配且将混合物剧烈搅拌10分钟。分离有机层，用新的碳酸氢钠(×2)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发，得到标题化合物，其为泡沫。收率1.2g。m/z 819.4(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ7.93(s，1H)，7.13(t，1H)，7.03-6.99(m，3H)，6.60(d，1H)，6.42(d，1H)，4.45(s，2H)，3.66-3.56(m，10H)，3.31-3.20(m，5H)，2.74(t，2H)，2.70-2.36(m，16H)，1.69-1.65(m，2H)，1.55-1.53(m，2H)，1.43(s，2H)，1.35(d，6H)，1.25-1.23(m，2H)，0.87(t，3H)。未观察到3个可交换的质子。
实施例34c
N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺硫酸盐变体B
N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺(实施例34b)(0.1g)在乙醇(5mL)中的溶液用硫酸(0.244ml，0.5M水溶液)处理。将溶剂减压真空蒸发且残留物用乙醚研磨，得到白色固体。
将10mg该固体在乙醇和乙酸乙酯的混合物(9∶1，1mL)中混悬并在室温搅拌1周。所得固体通过过滤来收集，得到N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺硫酸盐变体B，其为白色固体。收率3mg。m/z 819.3(M+H)+。
实施例34d
N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺硫酸盐变体C
N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺(实施例34b)(0.1g)在乙醇(5mL)中的溶液用硫酸(0.244ml，0.5M水溶液)处理。将溶剂减压真空蒸发且残留物用乙醚研磨，得到白色固体。
将10mg该固体在二噁烷和乙酸乙酯的混合物(9∶1，1mL)中混悬并在室温搅拌1周。所得固体通过过滤来收集，得到N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺硫酸盐变体C，其为白色固体。收率3mg。m/z 819.3(M+H)+。
实施例34e
N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺硫酸盐变体D
N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺(实施例34b)(0.1g)在乙醇(5mL)中的溶液用硫酸(0.244ml，0.5M水溶液)处理。将溶剂减压真空蒸发且残留物用乙醚研磨，得到白色固体。
将10mg该固体在1，4-二噁烷(1mL)中混悬并在室温搅拌12天。所得固体通过过滤来收集，得到N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺硫酸盐变体D，其为白色固体。收率3mg。m/z 819.3(M+H)+。
实施例34f
N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺硫酸盐变体E
N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺(实施例34b)(0.1g)在乙醇(5mL)中的溶液用硫酸(0.244ml，0.5M水溶液)处理。将溶剂减压真空蒸发且残留物用乙醚研磨，得到白色固体。
将10mg该固体在二噁烷和DMF的混合物(9∶1，1mL)中混悬并在室温搅拌12天。所得固体通过过滤来收集，得到N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺硫酸盐变体E，其为白色固体。收率3mg。m/z 819.3(M+H)+。
实施例34g
N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺硫酸盐变体F
N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺(实施例34b)(0.1g)在乙醇(5mL)中的溶液用硫酸(0.244ml，0.5M水溶液)处理。将溶剂减压真空蒸发且残留物用乙醚研磨，得到白色固体。
将10mg该固体在甲醇和乙腈的混合物(9∶1，1mL)中混悬并在室温搅拌1周。所得固体通过过滤来收集，得到N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺硫酸盐变体F，其为白色固体。收率3mg。m/z 819.3(M+H)+。
实施例34h
N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺硫酸盐变体G
N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺(实施例34b)(0.1g)在乙醇(5mL)中的溶液用硫酸(0.244ml，0.5M水溶液)处理。将溶剂减压真空蒸发且残留物用乙醚研磨，得到白色固体。
将10mg该固体在回流的水(～0.2mL)中溶解并缓慢加入乙腈(～4mL)。将所得混合物冷却过夜。所得析出物通过过滤来分离并真空干燥，得到N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺硫酸盐变体G，其为白色固体。收率2mg。
N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺硫酸盐变体A(实施例34a)(0.117g)用硫酸盐变体G种晶且加入5％水在乙腈中的溶液(3mL)。搅拌1小时后，已形成胶状物且24小时后，已形成白色混悬液。72小时后，N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺硫酸盐变体G(其为白色固体)通过过滤来收集。收率101mg。m/z819.3(M+H)+。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.33(s，1H)，7.92(s，1H)，7.16(t，1H)，7.05-7.02(m，3H)，6.65(d，1H)，6.47(d，1H)，4.51(s，2H)，3.70-3.55(m，10H)，3.50-2.40(m，23H)，1.80-1.70(m，2H)，1.65-1.55(m，2H)，1.48(s，2H)，1.36(d，6H)，1.28-1.27(m，2H)，0.90(t，3H)。未观察到4个可交换的质子。
实施例34i
N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺萘二磺酸盐变体B
将N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺(实施例34b)(332mg)在IPA(3mL)中溶解并加入1，5-萘二磺酸四水合物(144mg)在IPA(8mL)中的溶液。搅拌10分钟后，将所得固体滤出并先后用少量IPA(1mL)和乙醚洗涤。
20mg在甲醇(1mL)中的溶液用实施例39a(0.5mg)种晶并在室温搅拌1天。将N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺萘二磺酸盐变体B滤出。收率10mg。m/z819.3(M+H)+。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.36(s，1H)，8.96(d，2H)，8.30(s，1H)，7.97(d，2H)，7.35(t，2H)，7.21(t，1H)，7.10-7.06(m，3H)，6.65(d，1H)，6.48(d，1H)，4.53(s，2H)，3.72-3.50(m，12H)，3.40-2.45(m，21H)，2.07(s，2H)，1.75(s，2H)，1.46(s，2H)，1.36(d，6H)，1.29-1.26(m，2H)，0.89(t，3H)。3个可交换的质子。
实施例34i
N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺
a)4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-羧酸叔丁酯
在氮气下向1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-羧酸叔丁酯盐酸盐和三乙胺(5摩尔当量)在DCM(10倍体积)中的混悬液中加入2-异丙基噻唑-4-羧酸(1摩尔当量)，然后历时50分钟滴加T3P在THF中的溶液(1.57M溶液，1.1摩尔当量)[观察到23℃放热]。将混合物搅拌4小时，用水(2×1L)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩，得到橙色浆状物。收率：理论值的99％。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.86(s，1H)，4.06-3.86(m，2H)，3.86-3.48(m，6H)，3.30(七重峰，J＝6.8Hz，1H)，3.32-3.10(m，2H)，1.87-1.79(m，2H)，1.64-1.52(m，1H)，1.52-1.40(m，1H)，1.45(s，9H)，1.40(d，J＝6.8Hz，6H)。
b)(2-异丙基噻唑-4-基)(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)甲酮盐酸盐
在40℃在氮气下向4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-羧酸叔丁酯在iPrOH(3倍体积)中的溶液中加入5-6N HCl在异丙醇中的溶液(2-2.4摩尔当量)。将混合物在40℃搅拌18小时，冷却至室温并用TBME(4倍体积)稀释。在室温搅拌2小时，通过过滤来收集，用TBME洗涤并风干，得到灰白色粉末。收率：理论值的97％。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.74-9.59(m，1H)，9.59-9.44(m，1H)，7.88(s，1H)，4.06-3.86(m，2H)，3.86-3.58(m，4H)，3.40-3.12(m，5H)，2.28-2.06(m，2H)，2.06-1.84(m，2H)，1.42(d，J＝6.4Hz，6H)。
c)2，2’-(1，3-亚苯基)二乙醇
Figure BDA0000148749790001292
历时2小时6分钟将2，2’-(1，3-亚苯基)二乙酸(1.50kg，7.72mol，1.0当量)在甲基四氢呋喃(21.0L，14.0倍体积)中的溶液加到氢化锂铝片(1.25kg，32.81mol，4.25当量)在甲基四氢呋喃(12.00L，8倍体积)中的混悬液中同时保持温度在31-40℃的范围内。然后历时2小时10分钟将反应混合物加热至50℃且在50℃再保持15小时18分钟。将混合物冷却至23℃且过量的氢化锂铝通过历时2小时21分钟加入水(1.25L)、历时41分钟加入15％w/v氢氧化钠(1.25L)和历时13分钟加入水(1.25L)来淬灭同时在整个加入过程中保持温度低于30℃。将混悬液过滤且滤饼用DCM(2×15.00L，2×10倍体积)再次浆化。将合并的滤液在45℃浓缩，得到1.18kg物质。当就甲苯含量而进行校正时，分离到收率为1.12kg(87％Th.，75wt.％)的物质，其为灰白色固体。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ7.0-7.25(m，4H)，3.75(t，4H)，2.80(t，4H)。
d)2-(3-(2-溴乙基)苯基)乙醇
将2，2’-(1，3-亚苯基)二乙醇(步骤c)(1.03kg，6.22mol，1.0当量)在甲苯(13.49L，15.0倍体积)和48％HBr(1.44L，12.75mol，2.05当量)中的混悬液在87℃加热14小时。再加入48％w/w HBr(0.35L，3.11mol，0.5当量)且将混合物再回流搅拌24小时。将混合物冷却至环境温度并分离各层。将有机层浓缩，得到1.39kg物质。纯化分两个相等批次进行(800g)。将粗间溴醇(800g)在DCM(1.6L，2倍体积)中溶解并加到干硅胶垫(3.6kg，4重量当量)中。垫用10％IPAc/庚烷(16L)洗脱以除去快速洗脱的杂质，然后用50％IPAc/庚烷(20L)洗脱以洗出产物。将来自每份硅胶垫的含有产物的馏分合并，在40-45℃浓缩，然后干燥至衡重，得到1.32kg(81％Th.)间溴醇，其为淡黄色油状物。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ7.0-7.25(m，4H)，3.75(t，2H)，3.60(t，2H)，3.15(t，2H)，2.82(t，2H)。
e)(9-(3-(2-羟基乙基)苯乙基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮
Figure BDA0000148749790001302
在室温向(2-异丙基噻唑-4-基)(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)甲酮盐酸盐在2-(3-(2-溴乙基)苯基)乙醇(1.15摩尔当量)在乙腈(10倍体积)中的溶液中的混悬液中加入碳酸钾(4摩尔当量)，然后加入水(0.167倍体积)。将混合物在60℃搅拌66小时，冷却至室温，过滤，用MeCN洗涤并真空浓缩，得到粗橙色胶状物。将该胶状物在EtOAc(3倍体积)中溶解并用2N HCl(1.1摩尔当量)洗涤。水层使用2N NaOH(1.5摩尔当量)来碱化并用TBME(2×2倍体积)萃取[在界面处出现不能在TBME中溶解的油状物]。合并的有机物和油状物用EtOAc(1倍体积)稀释[油溶解]，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩，得到橙色胶状物。收率：理论值的88％。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.84(s，1H)，7.23(t，J＝8.0Hz，1H)，7.08-7.06(m，3H)，4.03-3.93(m，1H)，3.93-3.83(m，1H)，3.85(t，J＝6.4Hz，2H)，3.82-3.74(m，4H)，3.71-3.62(m，1H)，3.32(七重峰，J＝6.8Hz，1H)，2.87-2.76(m，2H)，2.84(t，J＝6.8Hz，2H)，2.70-2.40(m，6H)，1.96-1.85(m，2H)，1.85-1.71(m，2H)，1.71-1.53(m，2H)，1.41(d，J＝6.8Hz，6H)。
f)3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酸叔丁酯
向(9-(3-(2-羟基乙基)苯乙基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮(限制试剂)在乙腈(5倍体积)中的混悬液中加入丙烯酸叔丁酯(5摩尔当量)，然后加入苄基三甲基氢氧化铵溶液(40wt％在水中，0.3摩尔当量)。将混合物在室温搅拌1小时。
将混合物真空浓缩，得到粗棕色油状物，将其在甲基四氢呋喃和水(各自5倍体积)之间分配。将有机层干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩，得到淡黄色浆状物。收率：理论值的106％。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.83(s，1H)，7.19(t，J＝8.0Hz，1H)，7.07-7.00(m，3H)，4.03-3.92(m，1H)，3.92-3.84(m，1H)，3.82-3.72(m，3H)，3.684(t，J＝6.4Hz，2H)，3.675(t，J＝6.4Hz，2H)，3.64(t，J＝7.2Hz，2H)，3.31(七重峰，J＝6.8Hz，1H)，2.84(t，J＝7.2Hz，2H)，2.81-2.71(m，2H)，2.68-2.50(m，3H)，2.48(t，J＝6.8Hz，2H)，2.47(t，J＝6.4Hz，2H)，1.94-1.90(m，1H)，1.90-1.85(m，1H)，1.81-1.65(m，1H)，1.63-1.51(m，1H)，1.44(s，9H)，1.41(d，J＝6.8Hz，6H)。
g)N-(2，2-二甲氧基乙基)丁-1-胺
Figure BDA0000148749790001312
向丁-1-胺(限制试剂)在EtOH(5倍体积)中的溶液中加入2，2-二甲氧基乙醛(60％)在水中的溶液(1摩尔当量)且将混合物在室温搅拌4天。加入5％钯/炭(0.01摩尔当量)在EtOH(1倍体积)中的浆料且将混合物在压力为3巴的条件下氢化20小时。混合物用玻璃纤维滤纸过滤，用EtOH(2×3倍体积)洗涤且将母液小心浓缩，得到浑浊棕色油状物。将该油状物在DCM(15倍体积)中溶解，干燥(Na2SO4)，过滤并小心真空浓缩，得到橙色油状物。收率：理论值的101％。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.48(t，J＝5.6Hz，1H)，3.39(s，6H)，2.74(d，J＝5.6Hz，2H)，2.62(t，J＝7.2Hz，2H)，1.48(五重峰，J＝7.2Hz，2H)，1.31(六重峰，J＝7.2Hz，2H)，0.92(t，J＝7.2Hz，3H)。
h)N-丁基-N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺
Figure BDA0000148749790001321
在22℃历时1小时向3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酸叔丁酯(限制试剂)在二氯甲烷(4倍体积)中的溶液中滴加TFA(10摩尔当量)[已加入约5mL TFA后出现8℃放热且1小时后温度降低至25℃]。将混合物在环境温度搅拌72小时，真空浓缩，在乙腈(4倍体积)中再次溶解并在冰浴中冷却。加入三乙胺(10摩尔当量)，然后加入N-(二甲氧基乙基)-N-丁基胺(1.2摩尔当量)，然后滴加1.57M T3P在THF中的溶液(1.3摩尔当量)。将混合物在22℃搅拌20小时，真空浓缩，得到粗红色油状物。在DCM(4倍体积)中再次溶解并用饱和碳酸氢钠溶液(4倍体积)洗涤。干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩，得到红色浆状物。收率：理论值的106％。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.90(s，1H)，7.17(t，J＝7.6Hz，1H)，7.11-6.98(m，3H)，4.50-4.43(m，1H)，3.90-3.59(m，10H)，3.41-3.32(m，13H)，2.78(t，J＝6.8Hz，4H)，2.68-2.54(m，8H)，2.00-1.86(m，1H)，1.80-1.43(m，3H)，1.40(d，J＝6.8Hz，6H)，1.35-1.22(m，2H)，0.97-0.88(m，3H)。
i)N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺
Figure BDA0000148749790001322
将对甲苯磺酸一水合物(4摩尔当量)加到N-丁基-N-(2，2-甲氧基乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺(限制试剂)在THF(10倍体积)中的溶液中且将所得混合物在室温搅拌1小时。然后通过蠕动泵将溶液加到8-(2-氨基乙基)-5-羟基-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-3(4H)-酮盐酸盐(1摩尔当量)和碳酸氢钠(6.5摩尔当量)在NMP(4倍体积)和水(0.45倍体积)的混合物中的混悬液中，已在室温将所述混悬液搅拌1小时。将所得浑浊溶液搅拌30分钟，然后分批加入三乙酰氧基硼氢化钠(3摩尔当量)且将所得混合物搅拌1小时。
反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液(10倍体积)淬灭，加入水(5倍体积)直到析出物已溶解且不再放出气体(～15分钟)。用甲基四氢呋喃(2×10倍体积)萃取且合并的萃取物用水(10倍体积)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩，得到棕色浆状物，其用硅胶(重量为粗反应混合物的10倍)(用DCM/8％MeOH/1％氨洗脱)纯化。收率：理论值的29％。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.82(s，1H)，8.01(s，1H)，7.20-7.10(m，1H)，7.10-6.95(m，3H)，6.60(d，J＝8.0Hz，1H)，6.41(d，J＝8.0Hz，1H)，4.46(s，1H)，3.80-3.45(m，9H)，3.40-3.15(m，12H)，2.78-2.17(m，14H)，1.77-1.37(m，4H)，1.34(d，J＝6.8Hz，6H)，1.30-1.14(m，2H)，0.91-0.82(m，3H)。
j)N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4--二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺一硫酸盐
Figure BDA0000148749790001331
将N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺(限制试剂)在EtOH(15倍体积)中溶解并加入4.9M硫酸(1摩尔当量)且将溶液在室温搅拌48小时。收集析出物，用EtOH(1倍体积)洗涤并真空干燥(40℃烘箱，油泵)，得到白色固体(70％收率)。加入5％水在MeCN中的溶液(20倍体积)且将混合物搅拌6天。然后结晶固体(形式G)通过过滤来收集(95％收率)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)9.92(s，1H)，8.02(s，1H)，7.22-7.13(m，1H)，7.12-6.98(m，3H)，6.65(d，J＝8.0Hz，1H)，6.47(d，J＝8.0Hz，1H)，4.52(d，J＝8.0Hz，2H)，3.82-3.14(m，20H)，3.04-2.90(m，4H)，2.83-2.64(m，7H)，2.63-2.47(m，4H)，1.85-1.37(m，4H)，1.35(d，J＝6.8Hz，6H)，1.32-1.16(m，2H)，0.92-0.83(m，3H)。
实施例35
N-乙基-N-(2-(2-(4-羟基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]噻唑-7-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001341
通过实施例1的方法来制备，其中在步骤c中使用甲磺酸3-(2-羟基乙基)苯乙基酯[芳族中间体9]代替甲磺酸4-(2-羟基乙基)苯乙基酯。m/z 793M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ7.96(s，1H)，7.25-7.19(m，1H)，7.13-7.05(m，3H)，6.85(d，J＝8.2Hz，1H)，6.75(d，J＝8.2Hz，1H)，3.74-3.50(m，12H)，3.42-3.26(m，7H)，3.19-3.05(m，6H)，3.01-2.92(m，2H)，2.87-2.74(m，4H)，2.57-2.52(m，2H)，2.11-2.00(m，2H)，1.87-1.75(m，2H)，1.36(d，J＝6.9Hz，6H)，1.12-1.04(m，3H)。未观察到五个可交换的质子。
以下化合物使用与上述类似的方法由适当的羧酸和胺来制备。
实施例36
N-环己基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001342
m/z 845M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.38(s，1H)，7.96(s，1H)，7.25-7.19(m，1H)，7.13-7.07(m，3H)，6.66(d，J＝8.5Hz，1H)，6.49(d，J＝8.2Hz，1H)，4.53(s，2H)，3.75-3.57(m，11H)，3.50-3.26(m，7H)，3.18-3.05(m，4H)，3.03-2.93(m，4H)，2.85-2.74(m，4H)，2.62-2.55(m，2H)，2.10-1.99(m，2H)，1.87-1.69(m，4H)，1.66-1.54(m，3H)，1.47-1.39(m，2H)，1.39-1.25(m，8H)，1.12-1.02(m，1H)。未观察到四个可交换的质子。
实施例37
(R)-N-仲丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001351
m/z 819M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.81-9.76(m，1H)，8.01(s，1H)，7.17-7.09(m，1H)，7.07-6.98(m，3H)，6.61(dd，J＝8.3，1.7Hz，1H)，6.42(d，J＝8.2Hz，1H)，4.47(d，J＝2.8Hz，2H)，4.22-4.15(m，1H)，4.11-4.06(m，1H)，3.77-3.50(m，12H)，3.34-3.27(m，6H)，3.21-3.00(m，11H)，2.44-2.34(m，2H)，1.73-1.38(m，7H)，1.34(d，J＝6.9Hz，6H)，1.10-1.00(m，3H)，0.81-0.70(m，3H)。未观察到两个可交换的质子。
实施例38
(R)-N-(己-2-基)-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-甲基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001352
m/z 819M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.89(s，1H)，7.26-7.21(m，1H)，7.16-7.10(m，3H)，6.74-6.69(m，1H)，6.51-6.45(m，1H)，4.61(s，2H)，4.01-3.31(m，14H)，3.25-2.56(m，20H)，2.29-2.20(m，3H)，1.84-1.74(m，2H)，1.53-1.45(m，2H)，1.35-1.22(m，3H)，1.16(d，J＝6.7Hz，3H)，0.90(t，J＝7.2Hz，3H)。未观察到五个可交换的质子。
实施例39
N-环戊基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001361
m/z 831M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.95-7.91(m，1H)，7.27-7.21(m，1H)，7.17-7.08(m，3H)，6.73-6.69(m，1H)，6.49-6.46(m，1H)，4.60(s，2H)，4.28-4.19(m，1H)，3.94-3.61(m，10H)，3.53-3.45(m，3H)，3.36-3.30(m，2H)，3.26-3.13(m，6H)，3.12-3.08(m，2H)，3.04-2.99(m，2H)，2.92-2.87(m，2H)，2.85-2.81(m，2H)，2.70-2.66(m，2H)，2.29-2.22(m，2H)，1.91-1.71(m，6H)，1.63-1.56(m，2H)，1.52-1.44(m，2H)，1.40(d，J＝6.9Hz，6H)。未观察到五个可交换的质子。
实施例39a
N-环戊基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺萘二磺酸盐变体A
Figure BDA0000148749790001362
将N-环戊基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺三氟乙酸盐(实施例39)(700mg)在饱和碳酸氢钠水溶液和新蒸馏的2-甲基四氢呋喃之间分配。有机相用饱和碳酸氢钠水溶液(×2)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤且除去溶剂，得到N-环戊基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺，其为白色泡沫。收率0.49g。
将萘-1，5-二磺酸四水合物(52.5mg)加到N-环戊基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺(121mg)在甲醇(5mL)中的溶液中。将0.55mL该溶液蒸发至干并加入乙醇(0.5mL)。将混合物加热至70℃且历时24小时冷却至室温。然后将混合物在室温搅拌11天。然后白色固体通过过滤来收集。
实施例40
N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-N-异丁基-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001371
m/z 819M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.96-7.88(m，1H)，7.26-7.20(m，1H)，7.15-7.08(m，3H)，6.73-6.69(m，1H)，6.50-6.46(m，1H)，4.60(s，2H)，3.95-3.30(m，16H)，3.26-2.97(m，8H)，3.05-2.98(m，2H)，2.91-2.86(m，2H)，2.84-2.78(m，2H)，2.63-2.57(m，2H)，2.30-2.22(m，2H)，1.96-1.89(m，2H)，1.84-1.74(m，2H)，1.39(d，J＝6.9Hz，6H)，0.91(d，J＝6.7Hz，6H)。未观察到五个可交换的质子。
实施例41
N-苄基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001381
m/z 853M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.95-7.89(m，1H)，7.37-7.18(m，6H)，7.15-7.07(m，3H)，6.72-6.67(m，1H)，6.50-6.45(m，1H)，4.62(s，2H)，4.60(s，2H)，3.91-3.43(m，14H)，3.34-3.30(m，2H)，3.25-3.06(m，6H)，3.03-2.97(m，2H)，2.90-2.79(m，4H)，2.70-2.61(m，3H)，2.28-2.20(m，2H)，1.85-1.74(m，2H)，1.39(d，J＝6.9Hz，6H)。未观察到五个可交换的质子。
实施例36至41使用以下羧酸和胺来制备：
  实施例编号   羧酸   胺
  36   2-异丙基噻唑-4-羧酸   N-(2，2-二甲氧基乙基)环己胺[备注1]
  37   2-异丙基噻唑-4-羧酸   (R)-N-(2，2-二甲氧基乙基)丁-2-胺[备注1]
  38   2-甲基噻唑-4-羧酸   (R)-N-(2，2-二甲氧基乙基)己-2-胺[备注1]
  39   2-异丙基噻唑-4-羧酸   胺6
  40   2-异丙基噻唑-4-羧酸   胺8
  41   2-异丙基噻唑-4-羧酸   N-苄基-2，2-二甲氧基乙胺[备注2]
备注1：WO 2008075025。
备注2：J.Chem.Soc.，Perkin Trans.1，1974，19，2185。
实施例42
N-环己基-N-(2-(2-(8-羟基-2-氧代-1，2-二氢喹啉-5-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-((4-(2-甲基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001382
将N-环己基-3-(3-((4-(2-甲基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-氧代乙基)丙酰胺(0.122g)在NMP(2mL)中的溶液加到5-(2-氨基乙基)-8-羟基喹啉-2(1H)-酮盐酸盐[EP 0125052](0.072g)和乙酸(0.011mL)的混合物中。将所得混合物搅拌5分钟，然后冷却至0℃。然后加入氰基硼氢化钠(0.019g)且将混合物温热至室温并搅拌2小时。蒸发溶剂且残留物通过硅胶快速色谱(用95∶5∶0.5至89∶10∶1DCM∶MeOH∶‘880’氨水梯度洗脱)来纯化。合并含有产物的馏分，蒸发并通过制备性HPLC(SunfireTM，梯度为5-40％乙腈/[0.2％TFA水溶液])来进一步纯化。合并含有产物的馏分，蒸发并用乙醚研磨，得到标题化合物，其为白色固体。收率0.036g。m/z799(M+H)+(APCI)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ8.04(d，J＝9.7Hz，1H)，7.90(s，1H)，7.39-7.28(m，4H)，6.98-6.87(m，2H)，6.54(d，J＝9.7Hz，1H)，4.29(s，2H)，3.72-3.57(m，11H)，3.48(t，J＝6.9Hz，2H)，3.26-2.97(m，11H)，2.83(t，J＝6.8Hz，2H)，2.67(s，2H)，2.60(t，J＝6.3Hz，2H)，2.10-1.96(m，2H)，1.83-1.56(m，6H)，1.49-1.23(m，5H)，1.14-1.01(m，1H)。未观察到五个可交换的质子。
用作原料的N-环己基-3-(3-((4-(2-甲基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-氧代乙基)丙酰胺如下制备：
a)(2-甲基噻唑-4-基)(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)甲酮三氟乙酸盐
Figure BDA0000148749790001391
通过实施例3步骤a和b的方法来制备，其中使用2-甲基噻唑-4-羧酸(1.9g)代替2-乙基噻唑-4-羧酸。收率4.6g。1H NMR(300MHz，d6-DMSO)δ8.59-8.18(m，2H)，8.00(s，1H)，3.86-3.49(m，6H)，3.22-2.86(m，4H)，2.69(s，3H)，2.00-1.90(m，2H)，1.74-1.58(m，2H)。
b)(9-(3-(2-羟基乙基)苄基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-甲基噻唑-4-基)甲酮
Figure BDA0000148749790001392
将(2-甲基噻唑-4-基)(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)甲酮三氟乙酸盐[实施例42，步骤a](2.2g)加到2-(3-(溴甲基)苯基)乙醇[EP 0472449](1.2g)和三乙胺(2.3mL)在乙腈(30mL)中的溶液中。将所得混合物在室温在氮气下搅拌过夜。蒸发溶剂且残留物通过硅胶色谱(用99∶1∶0.1至97∶3∶0.3DCM∶MeOH∶‘880’氨水梯度洗脱)来纯化，得到小标题化合物，其为澄清泡沫。收率1.72g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ7.85(s，1H)，7.18(t，J＝7.4Hz，1H)，7.12-7.04(m，3H)，4.24(t，J＝5.1Hz，1H)，3.71-3.54(m，8H)，3.42(s，2H)，2.71(t，J＝6.9Hz，2H)，2.68(s，3H)，2.38-2.27(m，4H)，1.74-1.64(m，2H)，1.57-1.47(m，2H)。
c)N-环己基-N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(3-((4-(2-甲基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酰胺
通过实施例1步骤d、e和f的方法来制备，其中使用(9-(3-(2-羟基乙基)苄基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-甲基噻唑-4-基)甲酮[实施例42，步骤b](1.72g)代替(9-(4-(2-羟基乙基)苯乙基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮且使用N-(2，2-二甲氧基乙基)环己胺[WO 2008075025](0.93g)代替N-乙基-2，2-二甲氧基乙胺。收率0.90g。m/z657(M+H)+(APCI)。
d)N-环己基-3-(3-((4-(2-甲基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-氧代乙基)丙酰胺
将对甲苯磺酸一水合物(1.38g)加到N-环己基-N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(3-((4-(2-甲基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酰胺(0.68g)在DCM(10mL)中的溶液中且将所得混合物在室温搅拌直到缩醛完全消耗(4小时)。小心加入饱和碳酸氢钠溶液(10mL)且将混合物搅拌直到不再冒泡(10分钟)。反应混合物用DCM(50mL)稀释且将水相分离。有机相用饱和碳酸氢钠溶液(2×20mL)和盐水(20mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发，得到小标题化合物，其为胶状物。收率0.61g。m/z611(M+H)+(APCI)。
实施例43
N-乙基-3-(2-氟-5-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(4-羟基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]噻唑-7-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001411
通过实施例1步骤d的方法来制备，其中在步骤d中使用(9-(4-氟-3-(2-羟基乙基)苄基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮(0.25g)代替(9-(4-(2-羟基乙基)苯乙基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮。收率0.13g。m/z 797M+(多模式+)。1HNMR(300MHz，d6-DMSO，90℃)δ11.45(s，1H)，8.71(s，1H)，7.96(s，1H)，7.51-7.37(m，2H)，7.24-7.15(m，1H)，6.85(d，J＝8.3Hz，1H)，6.75(d，J＝8.3Hz，1H)，4.29(s，2H)，3.76-3.00(m，23H)，2.84(t，J＝7.0Hz，4H)，2.55(t，J＝6.9Hz，2H)，2.11-1.96(m，2H)，1.86-1.65(m，2H)，1.34(d，J＝6.9Hz，6H)，1.13-1.05(m，3H)。未观察到三个可交换的质子。
用作原料的(9-(4-氟-3-(2-羟基乙基)苄基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮如下制备：
a)(9-(4-氟-3-(2-羟基乙基)苄基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮
Figure BDA0000148749790001412
将2-(5-(溴甲基)-2-氟苯基)乙醇[芳族中间体2](517g)在乙醇(20mL)中的溶液滴加到(2-异丙基噻唑-4-基)(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)甲酮三氟乙酸盐[实施例1，步骤b](9.4g)和碳酸钾(6.75g)在乙醇(75mL)中的混悬液中且将所得混合物搅拌过夜。将混合物过滤，滤饼用乙醇(50mL)洗涤并合并滤液和洗涤液并蒸发。将残留物在水(100mL)和乙酸乙酯(250mL)之间分配。分离各相且有机相用盐水(100mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发。残留物通过硅胶快速色谱(使用95∶5乙酸乙酯∶三乙胺作为溶剂)来纯化，得到小标题化合物，其为澄清油状物。收率7.9g。m/z 462(M+H)+(APCI)。
实施例44
N-乙基-3-(4-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(4-羟基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]噻唑-7-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺
Figure BDA0000148749790001421
通过实施例1步骤d的方法来制备，其中在步骤d中使用(9-(2-氟-5-(2-羟基乙基)苄基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮(0.19g)代替(9-(4-(2-羟基乙基)苯乙基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮。收率0.12g。m/z 797M+(多模式+)。1HNMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ7.94(s，1H)，7.44-7.32(m，2H)，7.21-7.14(m，1H)，6.85(d，J＝8.2Hz，1H)，6.74(d，J＝8.2Hz，1H)，4.24(s，2H)，3.76-3.50(m，12H)，3.41-3.28(m，3H)，3.20-3.00(m，8H)，2.88-2.77(m，4H)，2.59-2.52(m，2H)，2.07-1.96(m，2H)，1.81-1.70(m，2H)，1.35(d，J＝6.9Hz，6H)，1.13-1.05(m，3H)。未观察到五个可交换的质子。
用作原料的(9-(2-氟-5-(2-羟基乙基)苄基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮如下制备：
a)1-(9-(5-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)-2-氟苄基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)-2，2，2-三氟乙酮
Figure BDA0000148749790001422
在0℃将甲磺酰氯(1.3mL)在DCM(20mL)中的溶液滴加到(5-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)-2-氟苯基)甲醇[芳族中间体3](4.66g)和三乙胺(2.5mL)在DCM(100mL)中的溶液中。将混合物在0℃搅拌1小时，然后用水洗涤。将有机层干燥，过滤且将溶剂减压蒸发。在20℃历时30分钟将所得中间体(5.9g)分批加到搅拌的2，2，2-三氟-1-(1-氧杂-4，9-氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)乙酮三氟乙酸盐[实施例9，步骤a](6g)和三乙胺(9.1mL)在乙腈(130mL)中的溶液中。将反应混合物在20℃搅拌4小时。将溶剂减压蒸发且将残留物在乙酸乙酯和盐水之间分配。将有机层干燥，过滤且将溶剂减压蒸发，得到小标题化合物。收率8.5g。m/z 519(M+H)+(APCI)。
b)2，2，2-三氟-1-(9-(2-氟-5-(2-羟基乙基)苄基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)乙酮
Figure BDA0000148749790001431
将TBAF(1M在THF中，16.4mL)加到1-(9-(5-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)-2-氟苄基)-1-氧杂-4，9-氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)-2，2，2-三氟乙酮[实施例44，步骤a](8.5g)在THF(100mL)中的溶液中且将所得溶液在20℃静置18小时。将溶剂减压蒸发且残留物通过硅胶快速色谱(使用2％甲醇/二氯甲烷(含有1％三乙胺)作为溶剂)来纯化。将含有产物的馏分蒸发至干，得到小标题化合物。收率4.2g。m/z 405(M+H)+(APCI)。
c)2-(3-(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基甲基)-4-氟苯基)乙醇
Figure BDA0000148749790001432
将碳酸钠(1.4g)在水(40mL)中的溶液加到2，2，2-三氟-1-(9-(2-氟-5-(2-羟基乙基)苄基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)乙酮[实施例44，步骤b](4.2g)在乙腈(40mL)中的溶液中。将反应混合物在20℃搅拌20小时。将乙腈减压除去且残留的水溶液用DCM(×9)萃取。将合并的DCM萃取物干燥，过滤且将溶剂减压除去，得到小标题化合物。收率2.7g。m/z309(M+H)+(APCI)。
d)(9-(2-氟-5-(2-羟基乙基)苄基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮
Figure BDA0000148749790001433
将HATU(1.1g)一次性加到冷却的2-(3-(1-氧杂-4，9-氮杂螺[5.5]十一烷-9-基甲基)-4-氟苯基)乙醇[实施例44，步骤c](0.7g)、2-异丙基噻唑-4-羧酸(0.39g)和三乙胺(0.95mL)在DMF(15mL)中的溶液中。将反应混合物在20℃搅拌1小时，然后在乙酸乙酯和盐水之间分配。有机层用盐水(×2)洗涤，干燥，过滤且将溶剂减压除去。粗产物通过硅胶快速色谱(使用3％甲醇/乙酸乙酯(含有1％三乙胺)作为溶剂)来纯化。将含有产物的馏分蒸发至干，得到小标题化合物。收率0.61g。m/z 462(M+H)+(APCI)。
以下化合物使用与上述类似的方法由适当的芳族中间体、羧酸和胺来制备。
实施例45
N-环己基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(4-((4-(2-甲基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001441
m/z 803M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.40(s，1H)，7.90(s，1H)，7.41(d，J＝7.9Hz，2H)，7.30(d，J＝7.9Hz，2H)，6.66(d，J＝8.2Hz，1H)，6.49(d，J＝8.5Hz，1H)，4.53(s，2H)，4.27(s，2H)，3.73-3.56(m，12H)，3.50-3.43(m，2H)，3.23-2.96(m，8H)，2.85-2.79(m，4H)，2.67(s，2H)，2.60(t，J＝6.3Hz，2H)，2.10-1.92(m，2H)，1.81-1.55(m，6H)，1.49-1.23(m，5H)，1.13-1.03(m，1H)。未观察到四个可交换的质子。
实施例46
3-(2-氯-5-((4-(2-甲基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-乙基-N-(2-(2-(4-羟基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]噻唑-7-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001442
m/z 785M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ7.89(s，1H)，7.52-7.42(m，2H)，7.35(d，J＝7.9Hz，1H)，6.85(d，J＝8.2Hz，1H)，6.74(d，J＝8.2Hz，1H)，4.20(宽单峰，2H)，3.78-3.58(m，10H)，3.53(t，J＝6.5Hz，2H)，3.44-3.21(m，6H)，3.16(t，J＝8.0Hz，2H)，3.10(t，J＝6.2Hz，2H)，2.95(t，J＝6.9Hz，2H)，2.83(t，J＝8.0Hz，2H)，2.67(s，3H)，2.56(t，J＝6.5Hz，2H)，2.06-1.91(m，2H)，1.84-1.66(m，2H)，1.09(t，J＝6.9Hz，3H)。未观察到五个可交换的质子。
实施例47
N-环己基-3-(3-氟-5-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
m/z 849M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.35(s，1H)，8.40(s，1H)，7.93(s，1H)，7.19-7.09(m，3H)，6.66(d，J＝8.3Hz，1H)，6.49(d，J＝8.3Hz，1H)，4.53(s，2H)，4.19(s，2H)，3.73-3.62(m，11H)，3.48-3.43(m，2H)，3.33-3.27(m，1H)，3.13-2.97(m，8H)，2.86-2.80(m，4H)，2.61-2.56(m，2H)，2.04-1.94(m，2H)，1.79-1.71(m，4H)，1.65-1.57(m，3H)，1.48-1.38(m，2H)，1.38-1.26(m，8H)，1.12-1.06(m，1H)。未观察到三个可交换的质子。
实施例48
N-乙基-N-(2-(2-(4-羟基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]噻唑-7-基)乙基氨基)乙基)-3-(2-(5-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)噻吩-3-基)乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001452
m/z 785M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ7.94(s，1H)，7.29(s，1H)，7.13(s，1H)，6.84(d，J＝8.4Hz，1H)，6.74(d，J＝8.4Hz，1H)，4.50-4.38(m，2H)，3.78-3.50(m，12H)，3.40-3.25(m，3H)，3.25-2.95(m，8H)，2.90-2.78(m，4H)，2.60-2.55(m，2H)，2.11-1.95(m，2H)，1.82-1.62(m，2H)，1.35(d，J＝6.8Hz，6H)，1.09(t，J＝7.2Hz，3H)。未观察到五个可交换的质子。
实施例49
3-(4-氯-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-环己基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001461
m/z 865M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.34(s，1H)，8.59(s，2H)，7.93(s，1H)，7.53(s，1H)，7.42(d，J＝8.2Hz，1H)，7.33-7.29(m，1H)，6.66(d，J＝8.3Hz，1H)，6.49(d，J＝8.3Hz，1H)，4.53(s，2H)，4.30(s，2H)，3.73-3.61(m，11H)，3.49-3.44(m，2H)，3.34-3.26(m，1H)，3.19-3.06(m，6H)，3.03-2.98(m，2H)，2.85-2.78(m，4H)，2.60-2.55(m，2H)，2.04-1.97(m，2H)，1.84-1.72(m，4H)，1.65-1.57(m，3H)，1.48-1.39(m，2H)，1.36-1.26(m，8H)，1.13-1.03(m，1H)。未观察到两个可交换的质子。
实施例50
3-(3-氯-5-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-乙基-N-(2-(2-(4-羟基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]噻唑-7-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001462
m/z 813M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ7.93(s，1H)，7.42(s，1H)，7.36(s，1H)，7.32(s，1H)，6.85(d，J＝8.3Hz，1H)，6.75(d，J＝8.3Hz，1H)，4.24(s，2H)，3.73-3.61(m，10H)，3.54(t，J＝6.6Hz，2H)，3.35-3.27(m，3H)，3.19-3.03(m，8H)，2.87-2.80(m，4H)，2.55(t，J＝6.5Hz，2H)，2.06-1.99(m，2H)，1.82-1.73(m，2H)，1.35(d，J＝6.9Hz，6H)，1.12-1.06(m，3H)。未观察到五个可交换的质子。
实施例51
N-环己基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙氧基)苯乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001471
m/z 861M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.34(s，1H)，8.52(s，1H)，7.95(s，1H)，7.15(d，J＝7.9Hz，2H)，6.89(d，J＝7.0Hz，2H)，6.66(d，J＝7.9Hz，1H)，6.49(d，J＝7.9Hz，1H)，4.53(s，2H)，4.30(s，2H)，3.77-3.64(m，9H)，3.62-3.56(m，2H)，3.52-3.45(m，4H)，3.41-3.29(m，3H)，3.25-3.17(m，2H)，3.15-3.09(m，2H)，3.04-2.99(m，2H)，2.87-2.81(m，2H)，2.78-2.72(m，2H)，2.63-2.56(m，2H)，2.09-2.02(m，2H)，1.89-1.71(m，4H)，1.68-1.57(m，3H)，1.49-1.40(m，2H)，1.39-1.28(m，8H)，1.14-1.05(m，1H)。未观察到三个可交换的质子。
实施例52
N-乙基-N-(2-(2-(4-羟基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]噻唑-7-基)乙基氨基)乙基)-3-(2-(5-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)噻吩-2-基)乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001481
m/z 799M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ11.26(s，1H)，8.70(s，1H)，7.95(s，1H)，6.90-6.83(m，1H)，6.80-6.69(m，3H)，3.76-3.64(m，8H)，3.63-3.50(m，4H)，3.44-3.27(m，7H)，3.23-3.07(m，8H)，2.98-2.92(m，2H)，2.89-2.82(m，2H)，2.62-2.56(m，2H)，2.10-2.00(m，2H)，1.87-1.74(m，2H)，1.36(d，J＝6.6Hz，6H)，1.15-1.06(m，3H)。未观察到三个可交换的质子。
实施例53
N-环己基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙氧基)苯乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001482
m/z 861M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.42-9.37(m，1H)，8.50-8.41(m，1H)，7.96(s，1H)，7.24-7.18(m，1H)，6.88-6.80(m，3H)，6.66(d，J＝8.2Hz，1H)，6.49(d，J＝8.2Hz，1H)，4.54-4.52(m，2H)，4.35-4.30(m，2H)，3.74-3.59(m，11H)，3.54-3.17(m，10H)，3.13-3.08(m，2H)，3.03-2.98(m，2H)，2.85-2.75(m，4H)，2.62-2.57(m，2H)，2.12-2.01(m，2H)，1.88-1.72(m，4H)，1.67-1.55(m，3H)，1.49-1.25(m，10H)，1.13-1.02(m，1H)。未观察到两个可交换的质子。
实施例54
N-环戊基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯基硫基)丙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001491
m/z 863M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.40(s，1H)，7.94(s，1H)，7.45(s，1H)，7.41-7.33(m，2H)，7.32-7.25(m，1H)，6.66(d，J＝8.2Hz，1H)，6.48(d，J＝8.5Hz，1H)，4.53(s，2H)，4.30-4.15(m，3H)，3.75-3.58(m，8H)，3.53-3.23(m，7H)，3.17-2.93(m，8H)，2.82(t，J＝7.7Hz，2H)，2.62(t，J＝6.7Hz，2H)，2.10-1.91(m，2H)，1.81(五重峰，J＝6.6Hz，2H)，1.74-1.60(m，6H)，1.60-1.39(m，4H)，1.35(d，J＝6.9Hz，6H)。未观察到四个可交换的质子。
实施例55
N-(2-(2-(4-羟基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]噻唑-7-基)乙基氨基)乙基)-3-(2-(3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯基硫基)乙氧基)-N-甲基丙酰胺二(三氟乙酸盐)
m/z 797M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ7.94(s，1H)，7.48(s，1H)，7.43-7.34(m，2H)，7.32-7.26(m，1H)，6.84(d，J＝8.5Hz，1H)，6.74(d，J＝8.2Hz，1H)，4.23(s，2H)，3.73-3.60(m，10H)，3.57(t，J＝6.5Hz，2H)，3.54-3.23(m，3H)，3.22-2.88(m，11H)，2.88-2.79(m，2H)，2.57(t，J＝6.5Hz，2H)，2.10-1.92(m，2H)，1.83-1.62(m，2H)，1.35(d，J＝6.7Hz，6H)。未观察到五个可交换的质子。
实施例56
N-环己基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(2-(4-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)噻吩-2-基)乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001501
m/z 837M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.42-9.33(m，1H)，8.66(s，1H)，7.96(d，J＝2.3Hz，1H)，7.49(s，1H)，6.99(s，1H)，6.69(d，J＝8.4Hz，1H)，6.52(d，J＝8.2Hz，1H)，4.61-4.54(m，2H)，4.33-4.22(m，2H)，3.82-3.00(m，24H)，2.92-2.83(m，2H)，2.70-2.62(m，2H)，2.16-2.00(m，2H)，1.88-1.61(m，6H)，1.54-1.31(m，11H)，1.18-1.09(m，1H)。未观察到三个可交换的质子。
实施例57
N-环己基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯基)丙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001502
m/z 845M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.91(s，1H)，7.40-7.27(m，4H)，6.70(d，J＝8.5Hz，1H)，6.47(d，J＝8.2Hz，1H)，4.59-4.53(m，2H)，4.27(s，2H)，3.90-3.07(m，20H)，2.88(s，2H)，2.73-2.65(m，4H)，2.25-2.18(m，2H)，1.90-1.62(m，10H)，1.54-1.33(m，10H)，1.16(t，J＝7.0Hz，2H)。未观察到五个可交换的质子。
实施例58
N-环己基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(4-(3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯基)丁氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001511
m/z 859M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.90(s，1H)，7.39-7.25(m，4H)，6.71(d，J＝8.5Hz，1H)，6.48(d，J＝8.5Hz，1H)，4.61-4.55(m，2H)，4.27(s，2H)，3.91-3.05(m，20H)，2.88(s，2H)，2.69-2.62(m，4H)，2.26-2.18(m，2H)，1.85-1.10(m，24H)。未观察到五个可交换的质子。
实施例59
N-环己基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(2-(3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯氧基)乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001512
m/z 847M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.37(s，1H)，7.94(s，1H)，7.33(t，J＝7.9Hz，1H)，7.11(s，1H)，7.07(d，J＝7.4Hz，1H)，7.01-6.97(m，1H)，6.66(d，J＝8.2Hz，1H)，6.49(d，J＝8.2Hz，1H)，4.52(s，2H)，4.25(s，2H)，4.10(t，J＝4.7Hz，2H)，3.76-3.62(m，11H)，3.47(t，J＝7.0Hz，2H)，3.34-3.26(m，1H)，3.21-2.98(m，8H)，2.82(t，J＝7.7Hz，2H)，2.63(t，J＝6.4Hz，2H)，2.08-1.97(m，2H)，1.83-1.54(m，7H)，1.49-1.37(m，2H)，1.36-1.23(m，8H)，1.13-1.04(m，1H)。未观察到四个可交换的质子。
实施例60
N-环己基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯氧基)丙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001521
m/z 861M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.37(s，1H)，7.94(s，1H)，7.33(t，J＝8.2Hz，1H)，7.10(s，1H)，7.06(d，J＝8.1Hz，1H)，7.01-6.96(m，1H)，6.66(d，J＝8.2Hz，1H)，6.49(d，J＝8.2Hz，1H)，4.53(s，2H)，4.26(s，2H)，4.05(t，J＝6.4Hz，2H)，3.73-3.61(m，9H)，3.54(t，J＝6.4Hz，2H)，3.48(t，J＝7.3Hz，2H)，3.34-3.26(m，1H)，3.22-2.98(m，8H)，2.84(d，J＝8.2Hz，2H)，2.61(s，2H)，2.08-1.99(m，2H)，1.98-1.89(m，2H)，1.85-1.55(m，7H)，1.50-1.38(m，2H)，1.37-1.25(m，8H)，1.12-1.04(m，1H)。未观察到四个可交换的质子。
实施例61
N-乙基-N-(2-(2-(4-羟基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]噻唑-7-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(3-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)丙氧基)苯乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001522
m/z 823M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ11.36-11.28(m，1H)，8.56-8.51(m，1H)，7.97(s，1H)，7.20-7.15(m，1H)，6.87-6.73(m，5H)，4.04(t，J＝6.0Hz，2H)，3.74-3.51(m，14H)，3.39-3.01(m，14H)，2.87-2.73(m，4H)，2.56(t，J＝6.5Hz，2H)，2.17-2.03(m，3H)，1.82-1.69(m，1H)，1.36(d，J＝6.9Hz，6H)，1.13-1.05(m，3H)。未观察到两个可交换的质子。
实施例62
N-乙基-N-(2-(2-(4-羟基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]噻唑-7-基)乙基氨基)乙基)-3-(4-(3-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)丙氧基)苯乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001531
m/z 823M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ7.91(s，1H)，7.08(d，J＝8.5Hz，2H)，6.78(d，J＝8.5Hz，3H)，6.67(d，J＝8.2Hz，1H)，3.94(t，J＝6.4Hz，2H)，3.70-3.58(m，8H)，3.54(t，J＝6.9Hz，2H)，3.40(q，J＝6.9Hz，2H)，3.34-3.22(m，5H)，2.80-2.24(m，14H)，1.86-1.74(m，2H)，1.73-1.63(m，2H)，1.58-1.48(m，2H)，1.35(d，J＝6.9Hz，6H)，1.09(t，J＝6.9Hz，3H)。未观察到五个可交换的质子。
实施例63
N-环己基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(2-(5-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)噻吩-3-基)乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001532
m/z 851M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.33(s，1H)，7.96(s，1H)，7.00(s，1H)，6.82(s，1H)，6.66(d，J＝8.3Hz，1H)，6.49(d，J＝8.3Hz，1H)，4.52(s，2H)，3.76-3.65(m，9H)，3.59(t，J＝6.9Hz，2H)，3.48(t，J＝6.9Hz，2H)，3.41-3.28(m，5H)，3.22-3.09(m，6H)，3.01(t，J＝7.2Hz，2H)，2.83(t，J＝7.7Hz，2H)，2.74(t，J＝6.9Hz，2H)，2.60(t，J＝6.1Hz，2H)，2.10-2.01(m，2H)，1.86-1.73(m，4H)，1.68-1.58(m，3H)，1.50-1.40(m，2H)，1.39-1.28(m，8H)，1.14-1.05(m，1H)。未观察到四个可交换的质子。
实施例64
N-环戊基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-2-甲基苯乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
m/z 831M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.40(s，1H)，7.94(s，1H)，7.31(d，J＝6.7Hz，1H)，7.25(d，J＝7.2Hz，1H)，7.17(t，J＝7.5Hz，1H)，6.66(d，J＝8.5Hz，1H)，6.49(d，J＝8.5Hz，1H)，4.53(s，2H)，4.39-4.15(m，3H)，3.71(s，4H)，3.70-3.62(m，4H)，3.60(t，J＝7.0Hz，2H)，3.47-3.37(m，3H)，3.36-3.20(m，4H)，3.11(t，J＝7.4Hz，2H)，3.03(t，J＝6.9Hz，2H)，2.90-2.78(m，4H)，2.62(t，J＝6.7Hz，2H)，2.32(s，3H)，2.09-1.91(m，2H)，1.86-1.75(m，2H)，1.74-1.62(m，4H)，1.60-1.41(m，4H)，1.35(d，J＝6.7Hz，6H)。未观察到四个可交换的质子。
实施例65
N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-5-甲基苯乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001542
m/z 819M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.40(s，1H)，7.94(s，1H)，7.16-7.11(m，3H)，6.66(d，J＝8.5Hz，1H)，6.48(d，J＝8.2Hz，1H)，4.53(s，2H)，4.21(s，2H)，3.74-3.02(m，23H)，2.86-2.76(m，4H)，2.58-2.52(m，2H)，2.31(s，3H)，2.11-1.97(m，2H)，1.77-1.60(m，2H)，1.54-1.43(m，2H)，1.35(d，J＝6.5Hz，6H)，1.32-1.25(m，2H)，0.90(t，J＝7.3Hz，3H)。未观察到四个可交换的质子。
实施例66
N-乙基-3-(3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯基)丙氧基)-N-(2-(2-(4-羟基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]噻唑-7-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001551
m/z 811M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.91(s，1H)，7.44-7.33(m，2H)，7.20(s，1H)，6.88(d，J＝8.2Hz，1H)，6.73(d，J＝8.5Hz，1H)，4.39-4.33(m，2H)，3.91-3.18(m，23H)，2.92-2.86(m，2H)，2.75(t，J＝7.6Hz，2H)，2.67(t，J＝6.0Hz，2H)，2.27-2.17(m，2H)，1.89-1.68(m，4H)，1.38(d，J＝6.9Hz，6H)，1.21(t，J＝7.0Hz，3H)。未观察到五个可交换的质子。
实施例67
N-环己基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(2-(3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苄基氧基)乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001552
m/z 861M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.40(s，1H)，7.94(s，1H)，7.48-7.35(m，4H)，6.71-6.63(m，1H)，6.53-6.45(m，1H)，4.58-4.49(m，4H)，4.35-4.27(m，2H)，3.76-3.63(m，8H)，3.62-2.94(m，20H)，2.87-2.75(m，2H)，2.68-2.56(m，2H)，2.05-1.97(m，2H)，1.80-1.54(m，4H)，1.49-0.99(m，4H)，1.35(d，J＝7.2Hz，6H)。未观察到四个可交换的质子。
实施例68
N-乙基-N-(2-(2-(4-羟基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]噻唑-7-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-2-甲氧基苯乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001561
m/z 809M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ7.94(s，1H)，7.40-7.34(m，2H)，7.18-7.12(m，1H)，6.88-6.82(m，1H)，6.77-6.72(m，1H)，4.29-4.23(m，2H)，3.79-3.06(m，24H)，2.91-2.79(m，4H)，2.64-2.53(m，4H)，2.09-1.95(m，2H)，1.83-1.64(m，2H)，1.38-1.31(m，6H)，1.14-1.03(m，3H)。未观察到五个可交换的质子。
实施例69
N-乙基-3-(2-氟-3-((4-(2-异丁基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001562
m/z 809M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.40(s，1H)，7.98-7.90(m，1H)，7.49-7.37(m，2H)，7.26-7.14(m，1H)，6.71-6.61(m，1H)，6.53-6.44(m，1H)，4.57-4.49(m，2H)，4.32(s，2H)，3.82-3.45(m，12H)，3.38-3.27(m，2H)，3.26-3.16(m，2H)，3.16-3.02(m，6H)，2.93-2.77(m，6H)，2.59-2.49(m，2H)，2.12-1.95(m，3H)，1.85-1.68(m，2H)，1.15-1.00(m，3H)，1.00-0.89(m，6H)。未观察到四个可交换的质子。
实施例70
3-(2-氯-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-N-(2-甲氧基乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
m/z 841M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，CD3OD)δ7.96(s，1H)，7.57-7.52(m，2H)，7.45-7.40(m，1H)，6.75(d，J＝8.4Hz，1H)，6.52(d，J＝8.3Hz，1H)，4.64(s，2H)，4.59-4.54(m，2H)，3.97-3.30(m，24H)，3.25-3.19(m，4H)，3.12(t，J＝6.8Hz，2H)，2.93(t，J＝7.2Hz，2H)，2.71(t，J＝6.1Hz，2H)，2.32-2.25(m，2H)，1.87-1.77(m，2H)，1.43(d，J＝6.3Hz，6H)。未观察到五个可交换的质子。
实施例71
3-(2-氯-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-N-(3-甲氧基丙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001572
m/z 855M+(多模式+)。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ7.95(s，1H)，7.56-7.49(m，2H)，7.43-7.37(m，1H)，6.74(d，J＝8.3Hz，1H)，6.51(d，J＝8.3Hz，1H)，4.64(s，2H)，4.56-4.52(m，2H)，3.95-3.38(m，24H)，3.24-3.16(m，4H)，3.10(t，J＝7.0Hz，2H)，2.92(t，J＝7.0Hz，2H)，2.67(t，J＝6.3Hz，2H)，2.31-2.21(m，2H)，1.89-1.77(m，4H)，1.41(d，J＝6.9Hz，6H)。未观察到五个可交换的质子。
实施例72
3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-氟乙基)-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001581
m/z 813M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.38(s，1H)，7.94(s，1H)，7.46-7.39(m，2H)，7.19(t，J＝7.7Hz，1H)，6.66(d，J＝8.5Hz，1H)，6.49(d，J＝8.5Hz，1H)，4.60(s，1H)，4.53(s，2H)，4.47(s，1H)，4.33(s，2H)，3.73-3.57(m，14H)，3.35-3.26(m，1H)，3.25-3.18(m，2H)，3.15-3.06(m，6H)，2.89-2.81(m，4H)，2.58(t，J＝6.5Hz，2H)，2.08-1.99(m，2H)，1.85-1.73(m，2H)，1.35(d，J＝6.9Hz，6H)。未观察到四个可交换的质子。
实施例73
N-(2，2-二氟乙基)-3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001582
m/z 831M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.39(s，1H)，7.94(s，1H)，7.41(t，J＝7.4Hz，2H)，7.19(t，J＝7.6Hz，1H)，6.66(d，J＝8.2Hz，1H)，6.49(d，J＝8.2Hz，1H)，6.35-5.92(m，1H)，4.53(s，2H)，4.28(s，2H)，3.73-3.60(m，14H)，3.35-3.26(m，1H)，3.20-3.02(m，8H)，2.91-2.79(m，4H)，2.66-2.58(m，2H)，2.06-1.96(m，2H)，1.83-1.67(m，2H)，1.35(d，J＝6.9Hz，6H)。未观察到四个可交换的质子。
实施例74
N-乙基-3-(2-氟-3-((4-(5-异丙基噻吩-3-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001591
m/z 794M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.49-7.43(m，2H)，7.42-7.36(m，1H)，7.25-7.18(m，1H)，6.91(s，1H)，6.74-6.68(m，1H)，6.50-6.45(m，1H)，4.60(s，2H)，4.40-4.35(m，2H)，3.75-3.10(m，25H)，2.97-2.85(m，4H)，2.64-2.58(m，2H)，2.26-2.16(m，2H)，1.30(d，J＝7.5Hz，6H)，1.16(t，J＝7.2Hz，3H)。未观察到五个可交换的质子。
实施例75
3-(4-(2-(4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(4-羟基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]噻唑-7-基)乙基氨基)乙基)-N-(5-羟基戊基)丙酰胺二甲酸盐
Figure BDA0000148749790001592
m/z 837M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.40(s，2H)，7.90(s，1H)，7.16(s，4H)，6.90-6.84(m，1H)，6.75-6.70(m，1H)，3.88-2.84(m，32H)，2.80(t，J＝7.1Hz，2H)，2.61(t，J＝5.5Hz，2H)，2.20-2.10(m，2H)，1.88-1.69(m，2H)，1.64-1.48(m，4H)，1.41-1.29(m，5H)。未观察到四个可交换的质子。
实施例76
3-(4-(2-(4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)-N-(2-(2-(4-羟基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]噻唑-7-基)乙基氨基)乙基)-N-(6-羟基己基)丙酰胺二甲酸盐
Figure BDA0000148749790001601
m/z 851M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.40(s，2H)，7.9(s，1H)，7.20-7.14(m，4H)，6.90-6.84(m，1H)，6.75-6.70(m，1H)，3.88-2.84(m，32H)，2.80(t，J＝6.5Hz，2H)，2.60(t，J＝6.2Hz，2H)，2.20-2.11(m，2H)，1.88-1.73(m，2H)，1.62-1.47(m，4H)，1.43-1.26(m，7H)。未观察到四个可交换的质子。
实施例77
3-(3-((4-(2-丁基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-2-氯苯乙氧基)-N-乙基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
m/z 825M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，CD3OD)7.89(s，1H)，7.51-7.47(m，2H)，7.39-7.34(m，1H)，6.71(d，J＝8.0Hz，1H)，6.47(d，J＝8.0Hz，1H)，4.60(s，2H)，4.56-4.50(m，2H)，3.85-2.98(m，26H)，2.89(t，J＝7.1Hz，2H)，2.62(t，J＝6.0Hz，2H)，2.28-2.17(m，2H)，1.83-1.69(m，4H)，1.44-1.36(m，2H)，1.16(t，J＝7.4Hz，3H)，0.94(t，J＝7.4Hz，3H)。未观察到五个可交换的质子。
实施例45至77使用以下芳族中间体、羧酸和胺来制备：
Figure BDA0000148749790001603
Figure BDA0000148749790001611
Figure BDA0000148749790001621
备注1：Tet.Lett.1987，28(13)，1401。
备注2：WO 2008075025。
备注3：US 2707186。
备注4：WO 9733202。
备注5：Org.Proc.Res.Dev.2007，11(6)，1043。
备注6：WO 2008096127。
备注7：J.Am.Chem.Soc.1949，71(6)，2272。
备注8：EP 1852434。
备注9：通过制备性HPLC(SunfireTM，梯度为30-70％甲醇/[0.2％甲酸水溶液])来纯化
备注10：Organometallics 2002，21(20)，4217。
实施例78
N-乙基-N-(2-(2-(4-羟基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]噻唑-7-基)乙基氨基)乙基)-3-(2-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)噻吩-2-基)乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001622
通过实施例1步骤e的方法来制备，其中在步骤e中使用3-(2-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)噻吩-2-基)乙氧基)丙酸叔丁酯(0.84g)代替3-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酸叔丁酯。收率0.18g。m/z799M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ7.95(s，1H)，7.02(s，1H)，6.84(d，J＝8.2Hz，1H)，6.79-6.73(m，2H)，3.74-3.65(m，8H)，3.60(t，J＝6.7Hz，2H)，3.55(t，J＝5.5Hz，2H)，3.42-3.28(m，7H)，3.20-3.06(m，6H)，2.98-2.91(m，4H)，2.84(t，J＝8.0Hz，2H)，2.57(t，J＝7.0Hz，2H)，2.09-1.99(m，2H)，1.86-1.74(m，2H)，1.35(d，J＝6.9Hz，6H)，1.09(t，J＝6.9Hz，3H)。未观察到五个可交换的质子。
用作原料的3-(2-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)噻吩-2-基)乙氧基)丙酸叔丁酯如下制备：
a)乙酸2-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)噻吩-2-基)乙基酯
Figure BDA0000148749790001631
通过实施例1步骤c的方法来制备，其中使用(2-异丙基噻唑-4-基)(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)甲酮的盐酸盐[实施例27，步骤a](1g)代替其三氟乙酸盐且使用乙酸2-(4-(2-(甲基磺酰基氧基)乙基)噻吩-2-基)乙基酯[芳族中间体21](0.8g)代替甲磺酸4-(2-羟基乙基)苯乙基酯。收率1g。m/z506(M+H)+(APCI)。
b)(9-(2-(5-(2-羟基乙基)噻吩-3-基)乙基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮
Figure BDA0000148749790001632
将氢氧化钠水溶液(1M，4.9mL)加到乙酸2-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)噻吩-2-基)乙基酯[实施例78，步骤a](1.0g)在甲醇(20mL)中的溶液中且将所得混合物在20℃搅拌1小时。将混合物在乙酸乙酯和盐水之间分配并分离。将有机相干燥，过滤且将溶剂减压蒸发，得到小标题化合物。收率0.92g。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ7.91(s，1H)，6.86(s，1H)，6.70(s，1H)，4.39(t，J＝5.3Hz，1H)，3.70-3.58(m，8H)，3.35-3.27(m，1H)，2.86(t，J＝6.8Hz，2H)，2.63(t，J＝7.7Hz，2H)，2.52-2.30(m，6H)，1.73-1.65(m，2H)，1.58-1.50(m，2H)，1.36(d，J＝6.9Hz，6H)。
c)3-(2-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)噻吩-2-基)乙氧基)丙酸叔丁酯
Figure BDA0000148749790001641
将苄基三甲基氢氧化铵(40％在水中，0.27mL)一次性加到搅拌的(9-(2-(5-(2-羟基乙基)噻吩-3-基)乙基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮[实施例78，步骤b](0.92g)和丙烯酸叔丁酯(0.38g)在甲苯(1mL)中的溶液中。将所得混合物在20℃剧烈搅拌4小时。加入乙腈(1mL)且将混合物搅拌18小时，然后不经后处理即进行纯化。粗产物通过硅胶快速色谱(使用6％甲醇/乙酸乙酯(含有1％三乙胺)作为溶剂)来纯化。将含有产物的馏分蒸发至干，得到小标题化合物。收率0.84g。m/z592(M+H)+(APCI)。
实施例79
N-乙基-N-(2-(2-(4-羟基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]噻唑-7-基)乙基氨基)乙基)-3-(2-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)噻吩-2-基)乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
将对甲苯磺酸一水合物(0.33g)加到N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2，2，2-三氟乙基)丙酰胺(0.15g)在DCM(3mL)中的溶液中且将所得混合物在室温搅拌20分钟。然后将溶液加到8-(2-氨基乙基)-5-羟基-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-3(4H)-酮盐酸盐[WO 2008075025](0.078g)和碳酸氢钠(0.17g)在NMP(2mL)和水(0.2mL)的混合物中的混悬液中且将所得浑浊溶液剧烈搅拌10分钟。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.14g)且将所得混合物剧烈搅拌4小时。将反应混合物在乙酸乙酯(15mL)和饱和碳酸氢钠溶液(15mL)之间分配。分离有机相，用10％盐水(2×15mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发。残留物通过制备性HPLC(SunfireTM，梯度为20-55％甲醇/[0.1％TFA水溶液])来纯化。将含有所需产物的馏分蒸发至干，得到不纯的产物，其通过制备性HPLC来进一步纯化(SunfireTM，梯度为10-40％乙腈/[0.1％甲酸水溶液])。含有所需产物的馏分用三氟乙酸(20mg)处理，然后蒸发至干，得到标题化合物。收率20mg。m/z 849M+(多模式+)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.39(s，1H)，7.94(s，1H)，7.45-7.37(m，2H)，7.21-7.15(m，1H)，6.66(d，J＝8.2Hz，1H)，6.49(d，J＝8.2Hz，1H)，4.52(s，2H)，4.31-4.15(m，4H)，3.75-3.61(m，12H)，3.35-3.25(m，1H)，3.20-3.01(m，8H)，2.91-2.79(m，4H)，2.69-2.62(m，2H)，2.07-1.96(m，2H)，1.84-1.69(m，2H)，1.35(d，J＝6.9Hz，6H)。未观察到四个可交换的质子。
用作原料的N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2，2，2-三氟乙基)丙酰胺如下制备：
a)N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(2，2，2-三氟乙基)丙酰胺
Figure BDA0000148749790001651
将HATU(0.30g)一次性加到冷却的(冰浴)3-(2-氟-3-((4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酸[实施例7，步骤d](0.32g)、N-(2，2-二甲氧基乙基)-2，2，2-三氟乙胺[胺14](0.17g)和三乙胺(0.25mL)在DMF(7mL)中的溶液中。将混合物在20℃搅拌3天，然后在乙酸乙酯和盐水之间分配。有机相用盐水(×2)洗涤，干燥，过滤且将溶剂减压蒸发。粗产物通过硅胶快速色谱(使用5％甲醇/乙酸乙酯(含有1％三乙胺)作为溶剂)来纯化。将含有产物的馏分蒸发至干，得到小标题化合物。收率0.15g。m/z 703(M+H)+(APCI)。
实施例80
N-乙基-N-(2-(2-(4-羟基-2-氧代-2，3-二氢苯并[d]噻唑-7-基)乙基氨基)乙基)-3-(2-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)噻吩-2-基)乙氧基)丙酰胺二(三氟乙酸盐)
Figure BDA0000148749790001661
在0℃历时3分钟将吡啶三氧化硫(0.20g)在DMSO(5mL)中的溶液滴加到搅拌的N-丁基-3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(3-羟基丙基)丙酰胺(0.28g)和三乙胺(0.18mL)在DMSO(5mL)和DCM(10mL)中的溶液中。将所得溶液在室温搅拌1小时。将反应混合物在乙酸乙酯(25mL)和盐水(25mL)之间分配，有机层用盐水(2×25mL)洗涤，干燥，过滤并蒸发。将残留物在甲醇(5mL)中溶解，加入8-(2-氨基乙基)-5-羟基-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-3(4H)-酮盐酸盐[WO2008075025](0.11g)，然后加入乙酸(0.025mL)且将混合物搅拌15分钟。然后加入氰基硼氢化钠(0.04g)且将混合物搅拌过夜。将反应混合物在乙酸乙酯(25mL)和饱和碳酸氢钠溶液(25mL)之间分配。分离有机相，用10％盐水(2×25mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发。残留物通过硅胶快速色谱(用97.25∶2.5∶0.25至92.3∶7∶0.7DCM∶甲醇∶‘880’氨水梯度洗脱)来纯化。将含有产物的馏分合并并蒸发。所得胶状物通过制备性HPLC(SunfireTM，梯度为40-60％甲醇/[0.2％TFA水溶液])来进一步纯化。合并含有产物的馏分，蒸发，与乙腈共沸并用乙醚研磨，得到标题化合物，其为白色固体。收率0.10g。m/z 839M+(多模式+)。1H NMR(500MHz，d6-DMSO，90℃)δ9.35(s，1H)，8.71-8.45(m，2H)，7.92(s，1H)，7.59-7.52(m，1H)，7.49-7.41(m，1H)，7.37-7.30(m，1H)，6.71-6.64(m，1H)，6.53-6.45(m，1H)，4.49(s，2H)，4.42(s，2H)，3.78-3.61(m，10H)，3.39-2.80(m，18H)，2.58-2.53(m，2H)，2.11-1.98(m，2H)，1.92-1.77(m，4H)，1.55-1.43(m，2H)，1.38-1.23(m，5H)，0.97-0.84(m，3H)。未观察到两个可交换的质子。
用作原料的N-丁基-3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(3-羟基丙基)丙酰胺如下制备：
a)N-丁基-N-(3-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)丙基)-3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酰胺
Figure BDA0000148749790001671
通过实施例26步骤f的方法来制备，其中使用N-(3-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)丙基)丁-1-胺[胺15](0.17g)代替N-乙基-2，2-二甲氧基乙胺。收率0.47g。m/z 763M+(APCI)。
b)N-丁基-3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)-N-(3-羟基丙基)丙酰胺
Figure BDA0000148749790001672
将TBAF(1M在THF中，0.62mL)加到N-丁基-N-(3-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)丙基)-3-(2-氯-3-((4-(2-乙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酰胺[实施例80，步骤a](0.47g)在THF(10mL)中的溶液中且将混合物搅拌过夜。蒸发溶剂且残留物通过硅胶快速色谱(用1∶1∶0.05乙酸乙酯∶异己烷∶三乙胺至95∶5乙酸乙酯∶三乙胺梯度洗脱)来纯化，得到小标题化合物，其为澄清油状物。收率0.40g。m/z 649M+(APCI)。
实施例81-175
Figure BDA0000148749790001673
a)3-(3-氰基苯乙氧基)丙酸叔丁酯
Figure BDA0000148749790001674
通过实施例1步骤d的方法来制备，其中使用3-(2-羟基乙基)苯甲腈[WO2007069986](4.3g)代替(9-(4-(2-羟基乙基)苯乙基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮。通过硅胶快速色谱(使用15％乙酸乙酯/异己烷作为溶剂)来纯化。收率7.0g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.53-7.44(m，3H)，7.37(t，J＝7.7Hz，1H)，3.67(t，J＝6.3Hz，2H)，3.66(t，J＝6.5Hz，2H)，2.89(t，J＝6.5Hz，2H)，2.46(t，J＝6.4Hz，2H)，1.43(s，9H)。
b)3-(3-氰基苯乙氧基)丙酸
Figure BDA0000148749790001681
通过实施例1步骤e的方法来制备，其中使用3-(3-氰基苯乙氧基)丙酸叔丁酯[实施例81-175，步骤a](7.0g)代替3-(4-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)苯乙氧基)丙酸叔丁酯。真空浓缩后，将残留物与甲苯(×2)共沸，得到小标题化合物。收率2.8g。m/z218(M-H)-(APCI)。
c)3-(3-氰基苯乙氧基)-N-环己基-N-(2，2-二甲氧基乙基)丙酰胺
Figure BDA0000148749790001682
3-(3-氰基苯乙氧基)丙酸[实施例81-175，步骤b](5.55g)在二氯甲烷(110mL)和N，N-二甲基甲酰胺(0.22mL)中的无色溶液用草酰氯(2.7mL)处理并在室温搅拌1.75小时，然后真空浓缩。将所得油状物再在二氯甲烷(50mL)中溶解并历时1小时滴加到冰冷的N-(2，2-二甲氧基乙基)环己胺[WO2008075025](5.68g)和许尼希碱(8.85mL)在二氯甲烷(100mL)中的溶液中。将所得溶液从冷却浴中取出并在室温搅拌2.5小时，然后用水洗涤三次并用盐水洗涤一次。将有机相干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩到快速硅胶(50mL)上。所得粉末通过硅胶快速色谱(用75％乙酸乙酯/异己烷洗脱)来纯化，得到小标题化合物。收率8.8g。m/z 389(M+H)+(APCI)。
d)3-(3-氰基苯乙氧基)-N-环己基-N-(2-氧代乙基)丙酰胺
Figure BDA0000148749790001683
通过实施例42步骤d的方法来制备，其中使用3-(3-氰基苯乙氧基)-N-环己基-N-(2，2-二甲氧基乙基)丙酰胺[实施例81-175，步骤c](8.8g)代替N-环己基-N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(3-((4-(2-甲基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酰胺。收率8.0g。m/z343(M+H)+(APCI)。
e)2-(3-(3-氰基苯乙氧基)-N-环己基丙酰氨基)乙基(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA0000148749790001691
向3-(3-氰基苯乙氧基)-N-环己基-N-(2-氧代乙基)丙酰胺[实施例81-175，步骤d](7.8g)在NMP(450mL)和水(23mL)中的溶液中加入8-(2-氨基乙基)-5-羟基-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-3(4H)-酮盐酸盐[WO 2008075025](6.1g)和碳酸氢钠(2.1g)。将混合物搅拌5分钟，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(7.3g)。将混合物搅拌过夜，然后用乙酸乙酯(900mL)和水(900mL)稀释。将碳酸氢钠(9.6g)与一缩二碳酸二叔丁酯(5.0g)一起加入且将二相混合物在室温搅拌过周末。然后将混合物分离且水相再用乙酸乙酯萃取一次。合并的有机相用水洗涤三次并用盐水洗涤一次，然后干燥(MgSO4)并真空浓缩到快速硅胶(50mL)上。残留物通过硅胶快速色谱(先后用75％乙酸乙酯/异己烷和100％乙酸乙酯洗脱)来纯化，得到小标题化合物，其为白色泡沫。收率7.3g。m/z633(M-H)-(APCI)。
f)2-(N-环己基-3-(3-甲酰基苯乙氧基)丙酰氨基)乙基(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA0000148749790001701
向搅拌的2-(3-(3-氰基苯乙氧基)-N-环己基丙酰氨基)乙基(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯[实施例81-175，步骤e](7.3g)在吡啶(115mL)、乙酸(58mL)和水(58mL)中的溶液(在氮气下在冰水中预冷却)中加入次磷酸钠一水合物(14.6g)，然后加入兰尼镍(50％在水中，3.0g)。将反应混合物在45℃搅拌8小时，然后冷却并静置过周末。加入硅藻土且混悬液用硅藻土垫过滤，其中残留物用乙酸和乙酸乙酯充分洗涤。滤液用水洗涤三次，用盐水洗涤一次，然后干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。将残留物与甲苯共沸两次，得到小标题化合物，其为淡黄色泡沫。收率6.6g。m/z 636(M-H)-(APCI)。
g)2-(N-环己基-3-(3-((4-(2，2，2-三氟乙酰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酰氨基)乙基(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA0000148749790001702
2，2，2-三氟-1-(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)乙酮三氟乙酸盐[实施例9，步骤a](4.5g)在NMP(30mL)中的溶液用乙酸(0.6mL)处理，搅拌5分钟，然后一次性加到2-(N-环己基-3-(3-甲酰基苯乙氧基)丙酰氨基)乙基(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯[实施例81-175，步骤f](6.6g)中且再用NMP(30mL)完成转移。将所得溶液在室温搅拌4小时，然后在冰水浴中冷却并一次性用三乙酰氧基硼氢化钠(3.3g)处理。将所得混悬液在室温搅拌过夜，然后再加入硼氢化钠(2.2g)且将混合物再搅拌5小时。将混合物小心倒入饱和碳酸氢钠溶液中并用乙酸乙酯萃取两次。合并的有机相用水洗涤三次，用盐水洗涤一次，然后干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩到快速硅胶(100mL)上。所得粉末通过硅胶快速色谱来纯化(用乙酸∶甲醇∶二氯甲烷(1∶5∶94)洗脱以洗出苄基醇(其对应于经还原的原料)，用100％氯甲烷洗脱以将柱洗涤成不含有乙酸，然后用三乙胺∶甲醇∶二氯甲烷(1∶5∶94)洗脱以洗出产物)。合并含有所需产物的馏分并真空浓缩，得到小标题化合物，其为灰白色泡沫。收率4.6g。m/z 873(M-H)-(APCI)。
h)2-(3-(3-(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基甲基)苯乙氧基)-N-环己基丙酰氨基)乙基(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
2-(N-环己基-3-(3-((4-(2，2，2-三氟乙酰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)苯乙氧基)丙酰氨基)乙基(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯[实施例81-175，步骤g](1.1g)在甲醇(10mL)中的溶液用35％氨水(2.5mL)处理并在室温搅拌4.25小时，然后真空浓缩，得到小标题化合物，其为淡黄色泡沫。收率0.97g。m/z 778M+(APCI)。
i)2-(3-(3-(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基甲基)苯乙氧基)-N-环己基丙酰氨基)乙基(2-(5-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA0000148749790001712
将2-(3-(3-(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基甲基)苯乙氧基)-N-环己基丙酰氨基)乙基(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯[实施例81-175，步骤h](0.97g)在NMP(10mL)中溶解并先后用许尼希碱(1.0mL)和叔丁基二甲基甲硅烷基氯(0.45g)处理。将所得混合物在室温搅拌3小时。将溶液倒入饱和碳酸氢钠溶液中并用乙酸乙酯萃取三次。合并的萃取物用水洗涤三次，用盐水洗涤一次，然后干燥(MgSO4)并真空浓缩到快速硅胶(20mL)上。所得粉末通过硅胶快速色谱(用三乙胺∶甲醇∶二氯甲烷(1∶5∶94)洗脱)来纯化，得到小标题化合物，其为白色泡沫。收率0.81g。m/z 892M+(APCI)。
j)平行合成-实施例81-175的制备
将2-(3-(3-(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基甲基)苯乙氧基)-N-环己基丙酰氨基)乙基(2-(5-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯[实施例81-175，步骤i](1.04g)和三乙胺(0.5mL)在NMP(2.5mL)中的溶液以总体积为30μL的等分液分配到适当的羧酸(0.01mmol)在NMP(80μL)中的溶液或混悬液中。然后向各份反应混合物中加入HATU(4.9mg)在NMP(30μL)中的溶液。将反应混合物振摇混合并在室温静置过夜。加入乙腈(800μL)且使混合物通过Tosic-65树脂(350mg)。树脂用乙腈(800μL)洗涤且收集合并的洗涤液且再次通过Tosic-65树脂。收集合并的洗涤液且两次通过第二批Tosic-65树脂(350mg)。然后两批树脂分别用乙腈(3mL)洗涤。使氨在甲醇中的溶液(3.5M，2.4mL)分别通过两批树脂且收集两组洗涤液并在氮气气流下蒸发。将所得两组残留物在甲醇中合并并在氮气气流下蒸发。将残留物在甲酸(300μL)中溶解，振摇混合并在室温静置过夜。加入乙腈(800μL)且使溶液通过Tosic-65树脂(350mg)。树脂用乙腈(800μL)洗涤且收集合并的洗涤液且再通过Tosic-65树脂两次。然后树脂用乙腈(3mL)洗涤。使氨在甲醇中的溶液(3.5M，2.4mL)通过树脂且收集所得洗涤液并在氮气气流下蒸发。将DMSO(360μL)加到残留物中且所得溶液通过制备性HPLC(使用Waters SunfireTMprep C18(19×50mm，5μm)柱且用乙腈/[0.1％TFA水溶液]梯度洗脱)来纯化。将含有产物的馏分蒸发，得到标题化合物，其为三氟乙酸盐。
Figure BDA0000148749790001731
Figure BDA0000148749790001732
Figure BDA0000148749790001751
Figure BDA0000148749790001761
Figure BDA0000148749790001771
Figure BDA0000148749790001781
Figure BDA0000148749790001801
Figure BDA0000148749790001811
Figure BDA0000148749790001821
Figure BDA0000148749790001831
Figure BDA0000148749790001861
Figure BDA0000148749790001871
Figure BDA0000148749790001881
Figure BDA0000148749790001891
Figure BDA0000148749790001901
Figure BDA0000148749790001911
Figure BDA0000148749790001921
Figure BDA0000148749790001931
Figure BDA0000148749790001941
*实测质谱对应于(M-2+H)+片段且随仪器校正而变化。
**分析性HPLC条件：Waters SunfireTMC18(4.6×30mm，2.5μm)柱，用5-95％乙腈在0.1％TFA含水缓冲液中的溶液进行梯度洗脱，其中时间安排如下所示：
  时间(分钟)   ％含水缓冲液   ％乙腈   流速(ml/min)
  0.3   95   5   2.5
  2.7   5   95   2.5
  2.8   5   95   2.5
  2.9   95   5   2.5
实施例176
N-环己基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(8-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-5-氧杂-2，8-二氮杂螺[3.5]壬-2-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000148749790001951
将对甲苯磺酸一水合物(0.383g)加到N-环己基-N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(3-(2-(8-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-5-氧杂-2，8-二氮杂螺[3.5]壬-2-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺(0.27g)(实施例176，步骤i)在THF(8ml)中的溶液中且将所得混合物在室温搅拌1小时。加入NMP(1mL)，然后将溶液加到8-(2-氨基乙基)-5-羟基-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-3(4H)-酮盐酸盐(0.148g)和碳酸氢钠(0.270g)在NMP(4mL)和水(0.4mL)的混合物中的混悬液中，已将所述混悬液搅拌45分钟。含有醛的烧瓶用NMP(1mL)洗涤且将洗涤液加到上述混悬液中且将所得浑浊溶液搅拌20分钟。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.256g)且将所得混合物搅拌1小时。将反应混合物在乙酸乙酯和饱和碳酸氢钠溶液之间分配。将混合物振摇10分钟(直到不再放出气体)。乙酸乙酯溶液用碳酸氢钠(×2)洗涤，分离，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发。残留物通过硅胶快速色谱(用甲醇∶二氯甲烷∶880氨水(8∶91∶1)洗脱)来纯化。粗产物通过制备性HPLC(Sunfire柱且使用梯度为12-47％的[0.1％三氟乙酸水溶液]/乙腈作为洗脱剂)来纯化。将含有所需化合物的馏分蒸发至干，得到标题化合物。收率0.091g。m/z817.2(多模式+)。1H NMR(400MHz，DMSO，90℃)δ9.46(s，1H)，8.38(s，1H)，7.99(s，1H)，7.23(t，J＝7.6Hz，1H)，7.10(t，J＝9.9Hz，3H)，6.66(d，J＝8.3Hz，1H)，6.48(d，J＝8.3Hz，1H)，4.53(s，2H)，4.14(s，2H)，4.04(s，2H)，3.91(s，2H)，3.79-3.20(m，14H)，3.10(t，2H)，2.99(t，2H)，2.85-2.75(m，6H)，2.60(t，2H)，1.83-1.70(m，2H)，1.66-1.55(m，3H)，1.46-1.27(m，10H)，1.16-1.02(m，1H)。未观察到3个可交换的质子。
a)2-二苯甲基-5-氧杂-2，8-二氮杂螺[3.5]壬烷
Figure BDA0000148749790001952
在室温在氩气下将甲硼烷-二甲基硫醚复合物在THF(13.38mL)中的溶液一次性加到2-二苯甲基-5-氧杂-2，8-二氮杂螺[3.5]壬-7-酮(2.5g)(WO2009098448，实施例33，步骤e)在THF(50mL)中的溶液中。将所得溶液回流搅拌90分钟。将反应混合物冷却至室温，然后反应混合物用甲醇(50.0mL)淬灭。加入N，N’-二甲基乙二胺(5.18mL)且将反应混合物在室温搅拌1周。将反应混合物蒸发至干并在乙酸乙酯(250mL)中再次溶解并用水(250mL)洗涤。有机层用MgSO4干燥，过滤并蒸发，得到粗产物。将粗产物在异己烷(10mL)中溶解并通过硅胶快速色谱(用10％[氨/甲醇]/DCM洗脱)来纯化。将纯馏分蒸发至干，得到2-二苯甲基-5-氧杂-2，8-二氮杂螺[3.5]壬烷。收率1.647g。将产物(1.647g)在1，4-二噁烷(20mL)中溶解并在室温用氯化氢(2.95mL，4M在1，4-二噁烷中)处理。将混合物真空浓缩，然后用乙醚(20mL)研磨，得到小标题化合物。收率2.403g。m/z 295.5(M+H)+。
b)2-二苯甲基-5-氧杂-2，8-二氮杂螺[3.5]壬烷-8-羧酸叔丁酯
Figure BDA0000148749790001961
2-二苯甲基-5-氧杂-2，8-二氮杂螺[3.5]壬烷二盐酸盐(1.52g)(实施例176，步骤a)和三乙胺(1.730mL)在DCM(30mL)中的混合物用一缩二碳酸二叔丁酯(0.961mL)处理且将反应混合物在室温搅拌18小时。混合物用水洗涤且将有机层干燥，过滤且将溶剂减压蒸发。粗产物通过硅胶快速色谱(1％甲醇/二氯甲烷(含有1％三乙胺))来纯化。将纯馏分蒸发至干，得到小标题化合物。收率0.880g。m/z 395.1(M+H)+。
c)5-氧杂-2，8-二氮杂螺13.5]壬烷-8-羧酸叔丁酯
Figure BDA0000148749790001962
将2-二苯甲基-5-氧杂-2，8-二氮杂螺[3.5]壬烷-8-羧酸叔丁酯(0.85g)(实施例176，步骤b)、甲酸铵(0.883g)和钯/炭JM型87L(0.459g)在乙醇(50mL)中的混合物回流30分钟。将混合物冷却至室温并用硅藻土过滤，将溶剂减压蒸发。硅藻土垫用10mL DMF洗涤，然后用50mL乙腈洗涤。这些洗涤液用于溶解通过蒸发初始混合物而得到的残留物。使该溶液通过10g SCX柱，然后用乙腈洗涤。柱用10％880氨水在乙腈(80mL)中的溶液洗脱以洗出产物。将溶剂减压蒸发且残留物用乙腈稀释并减压蒸发，得到小标题化合物。收率0.490g。m/z 229.3(M+H)+。
d)2-(3-(2-羟基乙基)苯乙基)-5-氧杂-2，8-二氮杂螺[3.5]壬烷-8-羧酸叔丁酯
Figure BDA0000148749790001971
将5-氧杂-2，8-二氮杂螺[3.5]壬烷-8-羧酸叔丁酯(0.49g)(实施例176，步骤c)、2-(3-(2-溴乙基)苯基)乙醇(0.738g)[Organometallics 2002，21(20)，4217]和碳酸钾(1.187g)在乙腈(30mL)和水(0.5mL)中的混合物在60℃加热24小时。将混合物冷却至室温并过滤。使溶液通过10g SCX柱，然后再用乙腈洗脱。然后柱用10％880氨水在乙腈(80mL)中的溶液洗脱以洗出产物。将溶剂减压蒸发且残留物用乙腈稀释，然后蒸发至干，得到小标题化合物。收率0.610g。m/z 377.3(M+H)+。
e)2-(3-(2-(5-氧杂-2，8-二氮杂螺[3.5]壬-2-基)乙基)苯基)乙醇二盐酸盐
Figure BDA0000148749790001972
将4M HCl在二噁烷(3mL)中的溶液加到2-(3-(2-羟基乙基)苯乙基)-5-氧杂-2，8-二氮杂螺[3.5]壬烷-8-羧酸叔丁酯(0.61g)(实施例176，步骤d)在甲醇(10mL)中的溶液中且将反应混合物在室温静置8小时。将溶剂减压蒸发且将残留物与乙腈共沸，得到小标题化合物。收率0.560g。(M+H)+为277。
f)(2-(3-(2-羟基乙基)苯乙基)-5-氧杂-2，8-二氮杂螺[3.5]壬-8-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮
Figure BDA0000148749790001973
在0℃将HATU(0.792g)一次性加到搅拌的2-(3-(2-(5-氧杂-2，8-二氮杂螺[3.5]壬-2-基)乙基)苯基)乙醇二盐酸盐(0.56g)(实施例176，步骤e)、2-异丙基噻唑-4-羧酸(0.275g)和三乙胺(1.117ml)在DMF(7mL)中的溶液中。将混合物在20℃搅拌3小时，然后在乙酸乙酯和盐水之间分配，有机层用盐水(×2)洗涤，干燥，过滤且将溶剂减压蒸发。粗产物通过硅胶快速色谱(5％甲醇/乙酸乙酯(含有1％三乙胺))来纯化。将纯馏分蒸发至干，得到小标题化合物。收率0.475g。m/z 430.1(M+H)+。
g)3-(3-(2-(8-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-5-氧杂-2，8-二氮杂螺[3.5]壬-2-基)乙基)苯乙氧基)丙酸叔丁酯
将(2-(3-(2-羟基乙基)苯乙基)-5-氧杂-2，8-二氮杂螺[3.5]壬-8-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮(475mg)(实施例176，步骤f)在乙腈(2mL)中溶解并加入丙烯酸叔丁酯(312mg)，然后加入苄基三甲基氢氧化铵(0.15mL，40wt％水溶液)。将混合物在环境温度搅拌3小时。减压除去挥发物且残留物通过硅胶(用[5％甲醇和1％三乙胺]/乙酸乙酯洗脱)来纯化，得到小标题化合物。收率460mg。m/z 558.3(M+H)+。
h)3-(3-(2-(8-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-5-氧杂-2，8-二氮杂螺[3.5]壬-2-基)乙基)苯乙氧基)丙酸三氟乙酸盐
Figure BDA0000148749790001982
3-(3-(2-(8-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-5-氧杂-2，8-二氮杂螺[3.5]壬-2-基)乙基)苯乙氧基)丙酸叔丁酯(460mg)(实施例176，步骤g)在DCM(6mL)中的溶液用TFA(2mL)处理且将溶液在室温静置1小时。加入甲苯(10mL)且将溶剂减压蒸发且将残留物在乙腈中溶解且将溶液减压蒸发，得到小标题化合物。收率500mg。m/z 502.3(M+H)+。
i)N-环己基-N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(3-(2-(8-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-5-氧杂-2，8-二氮杂螺[3.5]壬-2-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺
Figure BDA0000148749790001983
在0℃将HATU(0.201g)一次性加到搅拌的3-(3-(2-(8-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-5-氧杂-2，8-二氮杂螺[3.5]壬-2-基)乙基)苯乙氧基)丙酸三氟乙酸盐(0.25g)(实施例176，步骤h)、N-(2，2-二甲氧基乙基)环己胺(0.076g)(WO2008075025)和三乙胺(0.283ml)在DMF(4mL)中的溶液中。将混合物在20℃搅拌3小时，然后在乙酸乙酯和盐水之间分配，有机层用盐水(×2)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤且将溶剂减压蒸发，得到小标题化合物。收率0.270g。m/z 671.3(M+H)+。
实施例177
N-乙基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(3-(2-(8-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-5-氧杂-2，8-二氮杂螺[3.5]壬-2-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000148749790001991
将对甲苯磺酸一水合物(0.385g)加到N-(2，2-二甲氧基乙基)-N-乙基-3-(3-(2-(8-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-5-氧杂-2，8-二氮杂螺[3.5]壬-2-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺(0.25g)(实施例177，步骤a)在THF(8mL)中的溶液中且将所得混合物在室温搅拌1小时。加入NMP(1mL)，然后将溶液加到8-(2-氨基乙基)-5-羟基-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-3(4H)-酮盐酸盐(0.149g)和碳酸氢钠(0.272g)在NMP(4mL)和水(0.4mL)的混合物中的混悬液中，已将所述混悬液搅拌45分钟。含有醛的烧瓶用NMP(1mL)洗涤且将洗涤液加到上述混悬液中且将所得浑浊溶液搅拌20分钟。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.258g)且将所得混合物搅拌1小时。将反应混合物在乙酸乙酯和饱和碳酸氢钠溶液之间分配。将混合物振摇10分钟(直到不再放出气体)。有机物用碳酸氢钠溶液(×2)洗涤，分离，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发。残留物通过硅胶快速色谱(8∶91∶1甲醇∶二氯甲烷∶880氨水)来纯化。将纯馏分蒸发至干，得到粗产物。产物通过SunFire Prep C810μm 30×100OBD柱(用18％至53％MeOH/水(0.1％TFA)梯度洗脱)来进一步纯化，得到标题化合物。收率0.096g。m/z 763.3(M+H)+。1H NMR(400MHz，DMSO，90℃)δ9.46(s，1H)，8.37(s，1H)，7.99(s，1H)，7.23(t，J＝7.6Hz，1H)，7.15-7.04(m，3H)，6.66(d，J＝8.3Hz，1H)，6.48(d，J＝8.2Hz，1H)，4.53(s，2H)，4.15(s，2H)，4.05(s，2H)，3.91(s，2H)，3.78-3.27(m，15H)，3.14-3.02(m，4H)，2.88-2.74(m，6H)，2.56(t，J＝6.6Hz，2H)，1.34(d，J＝6.8Hz，6H)，1.09(s，3H)。经归属的H：53个。未观察到3个可交换的质子。
a)N-(2，2-二甲氧基乙基)-N-乙基-3-(3-(2-(8-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-5-氧杂-2，8-二氮杂螺[3.5]壬-2-基)乙基)苯乙氧基)丙酰胺
Figure BDA0000148749790002001
在0℃将HATU(0.201g)一次性加到搅拌的3-(3-(2-(8-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-5-氧杂-2，8-二氮杂螺[3.5]壬-2-基)乙基)苯乙氧基)丙酸三氟乙酸盐(0.25g)(实施例176，步骤h)、N-乙基-2，2-二甲氧基乙胺(0.059g)(US 2707186)和三乙胺(0.283ml)在DMF(4mL)中的溶液中。将混合物在20℃搅拌3小时，然后在乙酸乙酯和盐水之间分配，有机层用盐水(×2)洗涤，干燥，过滤且将溶剂减压蒸发，得到小标题化合物。收率0.250g。m/z 617.4(M+H)+。
实施例178
N-丁基-N-(2-(2-(5-羟基-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-8-基)乙基氨基)乙基)-3-(2-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙氧基)苯乙氧基)丙酰胺三氟乙酸盐
Figure BDA0000148749790002002
将对甲苯磺酸(0.179g)加到搅拌的N-丁基-N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(2-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙氧基)苯乙氧基)丙酰胺(0.130g)(实施例178，步骤e)在THF(1mL)中的溶液中。1.5小时后，将溶液加到5-羟基-8-(2-氨基乙基)-2H-苯并[b][1，4]噁嗪-3(4H)-酮(0.070g)(盐酸盐)和碳酸氢钠(0.127g)在NMP(0.5mL)和水(0.05mL)中的溶液中，已将所述溶液搅拌1小时。含有醛的烧瓶用NMP(0.3ml)洗涤并加到反应混合物中。20分钟后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.120g)。3小时后，将反应混合物在甲基四氢呋喃(6ml)和饱和碳酸氢钠(5ml)之间分配且将混合物剧烈振摇5分钟。加入水(4ml)，然后加入甲基四氢呋喃(4ml)以促进分离。将甲基四氢呋喃层干燥(硫酸钠)，过滤并蒸发。通过制备性HPLC(SunFire Prep C810μm 30×100OBD柱且用18％至53％MeOH/水(0.1％TFA)梯度洗脱)来纯化，得到标题化合物。收率0.05g。m/z 836(M+H)+。1H NMR(400MHz，DMSO，90℃)δ7.97(s，1H)，7.20-7.18(m，2H)，6.99(d，J＝8.4Hz，1H)，6.91(t，J＝8.0Hz，1H)，6.65(d，J＝6.4Hz，1H)，6.48(d，J＝6.4Hz，1H)，4.53(s，2H)，4.35-4.33(m，2H)，3.80-3.00(m，25H)，2.81(t，J＝6.8Hz，4H)，2.55-2.48(m，2H)，2.15-2.00(m，2H)，1.90-1.70(m，2H)，1.50-1.40(m，2H)，1.35(d，J＝6.8Hz，6H)，1.35-1.20(m，2H)，0.99(t，J＝7.2Hz，3H)。未观察到可交换的氢。
a)2-(2-(2，2-二乙氧基乙氧基)苯基)乙醇
Figure BDA0000148749790002011
将2-溴-1，1-二乙氧基乙烷(5.13g)加到搅拌的碳酸铯(8.49g)和2-(2-羟基乙基)苯酚(3.00g)在DMF(20mL)中的混合物中。5分钟后，将反应混合物在80℃加热。16小时后，将反应混合物冷却并在乙酸乙酯和水之间分配。乙酸乙酯层用水(×3)洗涤，然后蒸发。通过硅胶色谱(用乙酸乙酯∶异己烷(1∶3)洗脱)来纯化，得到小标题化合物，其为绿色油状物。收率3.6g。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.23-7.10(m，2H)，7.95-7.80(m，2H)，4.78(t，J＝7.2Hz，1H)，4.01(d，J＝7.2Hz，2H)，3.90-3.70(m，6H)，2.92(t，J＝8Hz，2H)，1.98(t，J＝8.0Hz，1H)，1.25(t，J＝9.2Hz，6H)。
b)(9-(2-(2-(2-羟基乙基)苯氧基)乙基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮
将浓盐酸(3mL)加到搅拌的2-(2-(2，2-二乙氧基乙氧基)苯基)乙醇(2.70g)(实施例178，步骤a)在1，4-二噁烷(10mL)中的溶液中。0.5小时后，将溶液倒入水中并用乙酸乙酯萃取。合并乙酸乙酯溶液，用水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并真空蒸发。将所得胶状物在DCM(30mL)中溶解并加入(2-异丙基噻唑-4-基)(1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)甲酮(1.0g)和三乙酰氧基硼氢化钠(2.0g)。2小时后，加入碳酸氢钠溶液且混合物用DCM(×2)萃取。将合并的DCM萃取物蒸发并加载到硅胶柱上(用10％三乙胺/乙酸乙酯洗脱)，得到1g粗产物。产物通过硅胶色谱(用10％甲醇/DCM洗脱)来再次纯化，得到小标题化合物。收率0.6g。m/z 474(M+H)+。
c)3-(2-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙氧基)苯乙氧基)丙酸叔丁酯
将苄基三甲基氢氧化铵(0.2mL)加到(9-(2-(2-(2-羟基乙基)苯氧基)乙基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基)(2-异丙基噻唑-4-基)甲酮(0.60g)(实施例178，步骤b)和丙烯酸叔丁酯(0.244g)在甲苯(1mL)中的溶液中且将反应混合物剧烈搅拌。16小时后，再加入苄基三甲基氢氧化铵(0.2mL)和丙烯酸叔丁酯(0.244g)。再过48小时后，将反应混合物真空蒸发并加载到硅胶柱上(用5％甲醇/DCM洗脱)，得到胶状物。收率0.52g。1H NMR(400MHz，DMSO)δ8.00(s，1H)，7.13(d，J＝7.6Hz，2H)，7.96-7.89(m，1H)，6.83(t，J＝7.6Hz，1H)，4.10-4.00(m，2H)，3.80-3.50(m，10H)，3.30(m，1H)，2.80-2.65(m，4H)，2.39(m，2H)，1.75-1.60(m，2H)，1.60-1.40(m，2H)，1.37(s，9H)，1.33(d，J＝6.8Hz，6H)。一些H在DMSO峰下。
d)3-(2-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙氧基)苯乙氧基)丙酸
Figure BDA0000148749790002022
将三氟乙酸(2mL)加到搅拌的3-(2-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙氧基)苯乙氧基)丙酸叔丁酯(0.320g)(实施例178，步骤c)在DCM(5mL)中的溶液中。16小时后，蒸发溶液，得到胶状物。将胶状物在乙腈(5mL)中溶解并真空蒸发(重复3次)。收率0.4g。m/z546(M+H)+。
e)N-丁基-N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-(2-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙氧基)苯乙氧基)丙酰胺
Figure BDA0000148749790002031
将HATU(0.337g)加到搅拌的N-(2，2-二甲氧基乙基)丁-1-胺(0.105g)、3-(2-(2-(4-(2-异丙基噻唑-4-羰基)-1-氧杂-4，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)乙氧基)苯乙氧基)丙酸(0.390g)(实施例178，步骤d)和许尼希碱(0.516mL)在N，N-二甲基甲酰胺(3mL)中的溶液中。1小时后，将溶液在乙酸乙酯和盐水之间分配。乙酸乙酯层用盐水(×3)洗涤并真空蒸发。通过硅胶色谱(用10％三乙胺/乙酸乙酯洗脱)来纯化。收率0.4g。m/z 689(M+H)+。
本发明化合物的药物活性可使用本领域已知的测定来测试，诸如：
测定由肾上腺素能β 2 介导的cAMP产生
细胞准备
在225cm2烧瓶培养箱(37℃和5％CO2)中使H292细胞在RPMI培养基(含有10％(v/v)FBS(胎牛血清)和2mM L-谷氨酰胺)中生长。
实验方法
附着的H292细胞通过用AccutaseTM细胞剥离溶液处理15分钟而从组织培养烧瓶中取出。将烧瓶在加湿培养箱(37℃和5％CO2)中孵育15分钟。将剥离的细胞以0.1×106个细胞/mL重新混悬在RPMI培养基(含有10％(v/v)FBS和2mM L-谷氨酰胺)中。将10000个细胞/100μL加到用组织培养基处理的96孔板的每个孔中且将细胞在加湿培养箱(37℃和5％CO2)中孵育过夜。除去培养基，细胞用100μL测定缓冲液洗涤2次且用50μL测定缓冲液(含有10mM HEPES(pH 7.4)和5mM葡萄糖的HBSS溶液)代替。将细胞在室温保持20分钟，然后加入25μL咯利普兰(rolipram)(浓度为1.2mM的在含有2.4％(v/v)二甲基亚砜的测定缓冲液中制备的溶液)。将细胞与咯利普兰一起孵育10分钟，然后加入测试化合物且将细胞在室温孵育60分钟。咯利普兰在测定中的最终浓度为300μM且媒介物的最终浓度为1％(v/v)二甲基亚砜。反应如下停止：除去上清液，用100μL测定缓冲液洗涤1次且用50μL溶胞缓冲液代替。将细胞单层在-80℃冷冻30分钟(或过夜)。
AlphaScreen TM cAMP检测
cAMP(环磷腺苷)在细胞溶胞物中的浓度使用AlphaScreenTM方法学来确定。将冷冻的细胞板在板振荡器上解冻20分钟，然后将10μL细胞溶胞物转移到96孔白色板中。将40μL与生物素化的cAMP一起预孵育的混合性AlphaScreenTM检测珠子加到每个孔中且将板在室温避光孵育3小时。AlphaScreenTM信号使用EnVision分光光度计(Perkin-Elmer Inc.)以制造商推荐的设置来测量。cAMP浓度如下确定：参考在同一实验中使用标准cAMP浓度而确定的校正曲线。构建针对激动剂的浓度响应曲线且将数据拟合成4参数逻辑方程以确定pEC50和内在活性。将内在活性表达为在每项实验中相对于就福莫特罗(formoterol)而确定的最大活性的分数。
毒蕈碱性受体3结合测定
化合物与M3受体结合的亲和力(pIC50)以闪烁迫近测定(scintillationproximity assay，SPA)方式通过[3H]N-甲基东莨菪碱(N-methyl scopolamine，NMS)与表达人毒蕈碱性乙酰胆碱M3受体(M3-ACh)的CHO-K1(中国仓鼠卵巢)细胞膜的竞争结合来确定。
SPA珠子用膜预涂覆，然后以2mg珠子/孔与本发明化合物的系列稀释液、[3H]NMS(0.1nM即四分之一Kd(实验确定的解离常数))和测定缓冲液(含有5mM MgCl2和0.1％(w/v)牛血清白蛋白的20mM HEPES(pH 7.4))一起孵育。测定在最终体积为200μL且存在1％(v/v)二甲基亚砜(DMSO)的情况下进行。[3H]NMS的总结合在不存在竞争化合物的情况下确定且[3H]NMS的非特异性结合在存在1μM阿托品(atropine)的情况下确定。将板在室温孵育16小时，然后在Wallac MicrobetaTM上使用归一化的3H方案来读取。确定pIC50，将所述pIC50定义为使特异性[3H]NMS结合减少50％所需要的化合物摩尔浓度的负对数。
本发明化合物在上述测定中测试且得到以下结果：
Figure BDA0000148749790002041
Figure BDA0000148749790002051
Figure BDA0000148749790002061
Figure BDA0000148749790002062
Figure BDA0000148749790002071
以下实验操作用于测量实施例99-175的化合物当浓度为1μM时对β2的作用百分比(％)。
由肾上腺素能β 2 介导的cAMP产生
细胞准备
在225cm2烧瓶培养箱(37℃和5％CO2)中使H292细胞在RPMI培养基(含有10％(v/v)FBS(胎牛血清)和2mM L-谷氨酰胺)中生长。
实验方法
化合物如下准备：首先稀释到DMSO中，得到1mM储备浓集物。然后以1∶10对储备浓集物进行稀释(10μl储备化合物+90μl DMSO)，得到浓度为0.1mM的化合物。化合物加入板如下准备：进一步以1∶25稀释在含有4％二甲基亚砜的测定缓冲液(含有10mM HEPES(pH 7.4)和5mM葡萄糖的HBSS溶液)中。化合物在测定中的最终浓度为1μM。
附着的H292细胞通过用AccutaseTM细胞剥离溶液处理15分钟而从组织培养烧瓶中取出。将烧瓶在加湿培养箱(37℃和5％CO2)中孵育15分钟。将剥离的细胞以0.1×106个细胞/mL重新混悬在RPMI培养基(含有10％(v/v)FBS和2mM L-谷氨酰胺)中。将10000个细胞/100μL加到用组织培养基处理的96孔板的每个孔中且将细胞在加湿培养箱(37℃和5％CO2)中孵育过夜。除去培养基，细胞用100μL测定缓冲液洗涤2次且用50μL测定缓冲液(含有10mM HEPES(pH 7.4)和5mM葡萄糖的HBSS溶液)代替。将细胞在室温保持20分钟，然后加入25μL咯利普兰(浓度为1.2mM的在测定缓冲液中制备的溶液)。将细胞与咯利普兰一起孵育10分钟，然后加入25μl测试化合物且将细胞在室温孵育60分钟。咯利普兰在测定中的最终浓度为300μM且媒介物的最终浓度为1％(v/v)二甲基亚砜。反应如下停止：除去上清液，用100μL测定缓冲液洗涤1次且用50μL溶胞缓冲液代替。将细胞单层在-80℃冷冻30分钟(或过夜)。
AlphaScreen TM cAMP检测
cAMP(环磷腺苷)在细胞溶胞物中的浓度使用AlphaScreenTM方法学来确定。将冷冻的细胞板在板振荡器上解冻20分钟，然后将10μL细胞溶胞物转移到96孔白色板中。将40μL混合性AlphaScreenTM检测珠子[含有等体积的供体珠子(与生物素化的cAMP一起避光预孵育30分钟)和受体珠子]加到每个孔中且将板在室温避光孵育3小时。AlphaScreenTM信号使用EnVision分光光度计(Perkin-Elmer Inc.)以制造商推荐的设置来测量。所产生的cAMP在每个孔中的浓度通过参考在同一实验中确定的cAMP标准曲线来计算且表达为相对于由1E-07M福莫特罗产生的最大响应的百分比。
以下实验操作用于确定实施例99-175的化合物当浓度为1μM时对M3的抑制百分比(％)。
毒蕈碱性受体3结合测定
化合物对M3受体的活性(对特异性结合的抑制百分比(％))以闪烁迫近测定(SPA)方式通过[3H]N-甲基东莨菪碱(NMS)与表达人毒蕈碱性乙酰胆碱M3受体(M3-ACh)的CHO-K1(中国仓鼠卵巢)细胞膜的竞争结合来确定。SPA珠子用膜预涂覆，然后以2mg珠子/孔与1μM本发明化合物、[3H]NMS(0.1nM即四分之一Kd(实验确定的解离常数))和测定缓冲液(含有5mM MgCl2和0.1％(w/v)牛血清白蛋白的20mM HEPES(pH 7.4))一起孵育。测定在最终体积为200μL且存在1％(v/v)二甲基亚砜(DMSO)的情况下进行。[3H]NMS的总结合在不存在竞争化合物的情况下确定且[3H]NMS的非特异性结合在存在1μM阿托品的情况下确定。将板在室温孵育16小时，然后在WallacMicrobetaTM上使用归一化的3H方案来读取。确定化合物当浓度为1μM时的活性，将所述活性定义为对特异性[3H]NMS结合的抑制百分比(％)。
Figure BDA0000148749790002081
Figure BDA0000148749790002091
Figure BDA0000148749790002101
  实施例编号   β2pEC50  β2内在活性  M3结合pIC50
  176   7.8   1.2   8.6
  177   8.0   1.1   8.9
  178   6.3   1.2   7.9
XRD数据
仪器细节：
○X射线粉末衍射(XRPD)：PANalytical X’Pert仪器在2θ-θ配置下或PANalytical Cubix仪器在θ-θ配置下，扫描范围为2°至40°2θ，100秒暴露时间/0.02°增量。X射线通过铜制长-小焦点管来产生，其在45kV和40mA的条件下操作。铜X射线的波长为
Figure BDA0000148749790002102
数据在零背景容器上采集，将～2mg化合物置于所述容器上。所述容器由单晶硅制造，所述单晶硅沿非衍射平面切割，然后在光学平面精制机上抛光。在该平面入射的X射线被布拉格(Bragg)消光所抵销。
○差示扫描量热法(DSC)热解曲线使用具有铝盘的TA Q1000差示扫描量热计来测量。样品重量为0.5至5mg。操作在以下条件下进行：氮气流速为50mL/min且所研究的温度以每分钟升温10℃的恒速由25℃变为300℃。
○热重量分析(TGA)热解曲线使用具有铂盘的TA Q500热重量分析仪来测量。样品重量为1至5mg。操作在以下条件下进行：氮气流速为60mL/min且所研究的温度以每分钟升温10℃的恒速由室温变为300℃。
○重量分析蒸气吸附(GVS)分布使用Surface Measurements SystemsDynamic Vapour Sorption DVS-1或DVS Advantage Instrument来测量。将约1-5mg固体样品置于玻璃管或金属管中并在双循环步进方法(相对湿度(RH)为40％至90％至0％至90％至0％且步进幅度为10％RH)中记录样品重量。
实施例33a硫酸盐(XRD谱在图1中显示)
Figure BDA0000148749790002103
实施例34a硫酸盐形式A(XRD谱在图2中显示)
Figure BDA0000148749790002112
准确度：+/-0.1
实施例34c硫酸盐形式B(XRD谱在图3中显示)
准确度：+/-0.1
实施例34d硫酸盐形式C(XRD谱在图4中显示)
Figure BDA0000148749790002123
Figure BDA0000148749790002131
准确度：+/-0.1
实施例34e硫酸盐形式D(XRD谱在图5中显示)
Figure BDA0000148749790002132
Figure BDA0000148749790002141
准确度：+/-0.1
实施例34f硫酸盐形式E(XRD谱在图6中显示)
Figure BDA0000148749790002142
Figure BDA0000148749790002151
准确度：+/-0.1
实施例34g硫酸盐形式F(XRD谱在图7中显示)
Figure BDA0000148749790002152
准确度：+/-0.1
实施例34h硫酸盐形式G(XRD谱在图8中显示)
Figure BDA0000148749790002153
Figure BDA0000148749790002161
准确度：+/-0.1
实施例34i萘二磺酸盐形式B(XRD谱在图9中显示)
Figure BDA0000148749790002162
Figure BDA0000148749790002171
准确度：+/-0.1
实施例39a萘二磺酸盐形式A(XRD谱在图10中显示)
Figure BDA0000148749790002172
Figure BDA0000148749790002181
准确度：+/-0.1
附图说明
图1显示了实施例33a的硫酸盐的XRD谱；
图2显示了实施例34a的硫酸盐形式A的XRD谱；
图3显示了实施例34c的硫酸盐形式B的XRD谱；
图4显示了实施例34d的硫酸盐形式C的XRD谱；
图5显示了实施例34e的硫酸盐形式D的XRD谱；
图6显示了实施例34f的硫酸盐形式E的XRD谱；
图7显示了实施例34g的硫酸盐形式F的XRD谱；
图8显示了实施例34h的硫酸盐形式G的XRD谱；
图9显示了实施例34i的萘二磺酸盐形式B的XRD谱；和
图10显示了实施例39的萘二磺酸盐形式A的XRD谱。

Claims (10)

1.式I的化合物或其药用盐：
Figure FDA0000148749780000011
其中
ArCH2CH2NH-表示β-肾上腺素受体结合基团；
R2、R3、R4、R5、R4’和R5’各自独立为氢或C1-6烷基；
k为0或1；
R6为任选被选自以下的至多3个取代基取代的C1-8烷基：卤素、C1-6烷基(任选被至多3个卤素原子取代)、OR10、C1-6烷基S(O)0-2、NR8R9、OC(O)(C1-6烷基)和C3-8环烷基(其中一个或两个碳原子可被O、S或N代替)，所述C3-8环烷基任选被独立选自以下的至多3个取代基取代：卤素、C1-6烷基(任选被至多3个卤素原子取代)、OR10、C1-6烷基S(O)0-2、NR8R9和OC(O)(C1-6烷基)；或
R6为被任选取代的芳基或任选取代的杂芳基取代的C1-8烷基；或
R6为C3-9环烷基(其中一个或两个环碳原子可被O、S或N代替)且任选被独立选自以下的至多3个取代基取代：卤素、C1-6烷基(任选被至多3个卤素原子取代和/或其中两个烷基可形成含有至多9个环原子的环)、OR10、C1-6烷基S(O)0-2、NR8R9、OC(O)(C1-6烷基)和任选取代的芳基或任选取代的杂芳基；或
R6为任选被独立选自以下的至多3个取代基取代的C7-9二环烷基：卤素、C1-6烷基、OR10和C1-6烷基S(O)0-2；或
R6为含有独立选自N、O和S的至多两个杂原子的5或6元芳族或非芳族杂环基；
R8和R9独立为氢或C1-6烷基，或R8和R9可连接在一起以形成包含至多9个环原子(任选含有选自O、N或S的额外杂原子)的杂环基，其中所述环可任选被独立选自以下的至多三个取代基取代：卤素、羟基、C1-6烷基或C3-6环烷基，且其中烷基和环烷基可任选被独立选自以下的至多三个取代基取代：卤素、羟基和C1-6烷氧基；
R10表示氢、C1-6烷基或C3-6环烷基，其中烷基和环烷基可任选被独立选自以下的至多三个取代基取代：卤素、羟基和C1-6烷氧基；
A为C(O)或S(O)2；
B为任选被至多两个C1-3烷基取代的C1-4亚烷基，
Q为氧、硫或NR7；
R7为氢或C1-6烷基；
L表示含有至多9个碳原子的直链或支链烃链；
其中所述链中的至多三个碳原子任选被独立选自以下的基团取代一次或两次：卤素、S(O)0-2R10、NR8R9、S(O)2NR8R9、C(O)NR8R9、C(O)OR10、NR10S(O)2R11、NR10C(O)R10、NR10C(O)OR11、NR10C(O)NR8R9、OR10、C1-6烷基和C3-6环烷基，且其中烷基和环烷基可任选被独立选自以下的至多三个取代基取代：卤素、羟基和C1-6烷氧基；
其中所述链中的至多三个碳原子可被独立选自以下的基团代替：O、NR10、S、S(O)、S(O)2、C(O)O、OC(O)、NR10C(O)、C(O)NR10、NR10S(O)2、S(O)2NR10、NR10C(O)NR10、NR10S(O)2NR10、OC(O)NR10和NR10C(O)O，条件是所述链中的任何上述基团被至少两个链碳原子隔开；和
其中所述链中的至多六个碳原子可形成芳基环、杂芳基环、稠合二环、脂族环或脂族杂环中的一部分，所述环具有独立选自N、O或S的至多四个杂原子，所述环包含至多10个环原子，且其中所述环任选被独立选自以下的至多三个取代基取代：卤素、S(O)0-2R10、NR8R9、S(O)2NR8R9、C(O)NR8R9、C(O)OR10、NR10S(O)2R11、NR10C(O)R10、NR10C(O)OR11、NR10C(O)NR8R9、OR10、C1-6烷基和C3-6环烷基，且其中烷基和环烷基可任选被独立选自以下的至多三个取代基取代：卤素、羟基和C1-6烷氧基；且
所述链可包含至多两个各自独立选择的上述环；
R11表示C1-6烷基或C3-6环烷基，其中所述C1-6烷基和C3-6环烷基可任选被独立选自以下的至多三个取代基取代：卤素、羟基或C1-6烷氧基；和
其中所述链还可包含至多三个碳-碳双键；和
其中所述链还可包含至多三个碳-碳叁键；
L1和L2独立表示氢、C1-6烷基或C3-6环烷基；
h为0或1；
L3和L4独立表示氢、C1-6烷基或C3-6环烷基；
R1选自：
(i)任选取代的3-8元环基，所述环基为芳族的或为完全或部分饱和的，且其中至多四个环原子可被独立选自N、O和S的杂原子代替；
(ii)含有至多10个原子的任选取代的稠合二环系统，所述环为芳族的或为完全或部分饱和的，且其中至多四个环原子可被独立选自N、O和S的杂原子代替；
(iii)任选取代的C1-6烷基，其中一个或两个碳原子可被O、S或N代替，且其中所述烷基可被独立选自上述(i)和(ii)的环系取代一次或两次，且其中所述C1-6烷基链可被选自以下的至多五个取代基取代：卤素、氰基、S(O)0-2R10、NR8R9、S(O)2NR8R9、C(O)NR8R9、C(O)OR10、NR10S(O)2R11、NR10C(O)R10、NR10C(O)OR11、NR10C(O)NR8R9、OR10、C1-6烷基和C3-6环烷基(其中两个C1-3烷基链可连接成含有至多八个环原子的任选取代的环烷基环)，
且其中对于上述(i)、(ii)和(iii)中的任何环，“任选取代”表示任选被独立选自以下的至多四个取代基取代：卤素、氰基、硝基、SH、S(O)0-2R10、NR8R9、S(O)2NR8R9、C(O)NR8R9、C(O)OR10、NR10S(O)2R11、NR10C(O)R10、NR10C(O)OR11、NR10C(O)NR8R9、OR10、C1-6烷基或C3-6环烷基(其中烷基或环烷基中的碳原子可任选被N、O或S代替，且烷基或环烷基可任选被选自以下的至多五个取代基取代：C1-6烷基、卤素、氰基、SH、S(O)0-2R10、NR8R9、S(O)2NR8R9、C(O)NR8R9、C(O)OR10、NR10S(O)2R11、NR10C(O)R10、NR10C(O)OR11、NR10C(O)NR8R9和OR10)，
且其中(i)和(iii)中的饱和环系也可被至多三个C1-6烷基取代，所述至多三个C1-6烷基可连接成任选被卤素或OR10取代的桥环结构；
X表示O、S(O)0-2或CR12R13；
m＝0、1、2或3；
n＝1、2、3或4；条件是m+n大于或等于2；
W表示CR12R13-CR12R13或CR12R13-CR12R13-CR12R13；
V和Z独立表示键、CR12R13或CR12R13-CR12R13，条件是当X表示O或S(O)0-2时，m、V和Z是这样的：环中的所有杂原子被至少两个碳原子隔开；
Y表示C(O)、C(O)NR10、SO2或SO2NR10；
R12和R13各自独立表示氢、氟、C1-6烷基或C3-6环烷基；或
R12和R13，当与同一碳原子连接时，与它们所共同连接的碳原子一起还可形成3至6元脂族环。
2.权利要求1的化合物或其药用盐，其中基团-L-由式(II)的基团表示：
Figure FDA0000148749780000041
其中L5与C(L1)(L2)连接，且L6与C(L3)(L4)连接；和
其中环D表示苯环、噻吩环、呋喃环或噻唑环；
R100、R101和R102各自独立选自氢、卤素(例如氟或氯)、C1-4烷基、C1-4烷氧基和CF3；
L5表示任选被至多2个甲基取代的C1-4亚烷基；或
L5表示-(CH2)qQ1(CH2)t-，其中Q1为氧或硫，t为0、1或2，且q为1或2；
G表示键、氧、CR10R10或S；
当G表示氧或S时，L6为任选被至多两个甲基取代的C1-2亚烷基；
当G表示键或CR10R10时，L6为键或任选被至多两个甲基取代的C1-2亚烷基。
3.权利要求1的化合物或其药用盐，其中R1表示：
(i)苯基环或5或6元杂芳基环；
(ii)稠合二环；
(iii)任选取代的C1-6烷基，其中一个或两个碳原子可被O、S或N代替，且其中所述烷基可被(i)和(ii)中描述的环系取代，
且其中(i)、(ii)和(iii)中的每个环任选被独立选自以下的至多三个取代基取代：卤素、氰基、OR10、C1-6烷基或C3-8环烷基(其中烷基和环烷基各自任选被至多三个卤素原子取代)，且苯基环任选被独立选自以下的至多三个取代基取代：卤素、氰基、OR10、C1-6烷基或C3-6环烷基(其中烷基和环烷基可任选被独立选自以下的至多三个取代基取代：卤素、羟基、C1-6烷氧基、氰基和NH2)。
4.权利要求1的式(I)的化合物或其药用盐，其如本申请任一实施例中所描述。
5.权利要求1的式(I)的化合物或其药用盐，其用于治疗。
6.权利要求1的式(I)的化合物或其药用盐在制备用于治疗的药物中的用途。
7.治疗炎性疾病或病症(包括可逆性阻塞性气道疾病或病症)或降低炎性疾病或病症(包括可逆性阻塞性气道疾病或病症)风险的方法，所述方法包括向有此需要的患者给予治疗有效量的权利要求1的式(I)的化合物或其药用盐。
8.一种药物组合物，其包含权利要求1的式(I)的化合物或其药用盐及药用辅料、稀释剂或载体。
9.制备药物组合物的方法，所述方法包括对权利要求1的式(I)的化合物或其药用盐与药用辅料、稀释剂或载体进行混合。
10.制备上述式(I)的化合物或其药用盐的方法，所述方法包括：
当R3为氢时，使式(III)的化合物或其适当的盐与式(T)的化合物或其盐在还原剂存在下在溶剂中反应，
在式(III)中，R2、R4、R5、R4’、R5’、R6、A、B、k、h、Q、L、L1、L2、L3、L4、R1、m、n、V、W、X、Y和Z如权利要求1中所定义；
在式(T)中，Ar如权利要求1中所定义；
Figure FDA0000148749780000051
CN201080043822.8A 2009-07-31 2010-07-29 螺环酰胺衍生物 Expired - Fee Related CN102625808B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB0913342.2 2009-07-31
GBGB0913342.2A GB0913342D0 (en) 2009-07-31 2009-07-31 Compounds - 801
PCT/GB2010/051242 WO2011012896A2 (en) 2009-07-31 2010-07-29 Compounds - 801

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102625808A true CN102625808A (zh) 2012-08-01
CN102625808B CN102625808B (zh) 2014-08-27

Family

ID=41129405

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201080043822.8A Expired - Fee Related CN102625808B (zh) 2009-07-31 2010-07-29 螺环酰胺衍生物

Country Status (34)

Country Link
US (2) US8455483B2 (zh)
EP (1) EP2459572B1 (zh)
JP (1) JP5612092B2 (zh)
KR (1) KR101664525B1 (zh)
CN (1) CN102625808B (zh)
AR (1) AR080601A1 (zh)
AU (1) AU2010277384B2 (zh)
BR (1) BR112012008043A2 (zh)
CA (1) CA2768527C (zh)
CL (1) CL2012000263A1 (zh)
CO (1) CO6491034A2 (zh)
CR (1) CR20120054A (zh)
CU (1) CU24103B1 (zh)
DO (1) DOP2012000032A (zh)
EA (1) EA020566B1 (zh)
ES (1) ES2702467T3 (zh)
GB (1) GB0913342D0 (zh)
GT (1) GT201200028A (zh)
HK (1) HK1171755A1 (zh)
HN (1) HN2012000217A (zh)
IL (1) IL217557A (zh)
MX (1) MX2012001232A (zh)
MY (1) MY163117A (zh)
NI (1) NI201200018A (zh)
NZ (1) NZ597589A (zh)
PE (1) PE20121441A1 (zh)
SA (1) SA110310628B1 (zh)
SG (1) SG177634A1 (zh)
TR (1) TR201819140T4 (zh)
TW (1) TWI443103B (zh)
UA (1) UA106887C2 (zh)
UY (1) UY32814A (zh)
WO (1) WO2011012896A2 (zh)
ZA (1) ZA201201473B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2018059537A1 (zh) * 2016-09-30 2018-04-05 四川海思科制药有限公司 一种二氮杂螺[5.5]十一碳烷衍生物及其用途

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MY149731A (en) 2008-02-06 2013-10-14 Astrazeneca Ab Compounds
GB0913342D0 (en) 2009-07-31 2009-09-16 Astrazeneca Ab Compounds - 801
TWI466885B (zh) 2009-07-31 2015-01-01 Japan Tobacco Inc 含氮螺環化合物及其醫藥用途
GB201021992D0 (en) * 2010-12-23 2011-02-02 Astrazeneca Ab Compound
GB201021979D0 (en) * 2010-12-23 2011-02-02 Astrazeneca Ab New compound
WO2016179349A1 (en) * 2015-05-05 2016-11-10 Northwestern University Cxcr4 chemokine receptor modulators
KR102278197B1 (ko) 2016-12-14 2021-07-15 베이징 서우바이 파마슈티컬 컴퍼니 리미티드 4차 암모늄염 구조의 이중기능 화합물
RS62277B1 (sr) 2017-06-01 2021-09-30 Bristol Myers Squibb Co Supstituisana jedinjenja koja sadrže azot
EP3682906A1 (en) * 2019-01-17 2020-07-22 Julius-Maximilians-Universität Würzburg Compound targeting norepinephrine transporter

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008096127A2 (en) * 2007-02-07 2008-08-14 Argenta Discovery Ltd Bicyclo[2.2.1]hept-7-ylamine derivatives and their use as m3 muscarinic receptor modulators
WO2009098448A1 (en) * 2008-02-06 2009-08-13 Astrazeneca Ab Compounds
CN101553231A (zh) * 2006-08-15 2009-10-07 弗特克斯药品有限公司 毒蕈碱受体调节剂
CN101636379A (zh) * 2006-12-20 2010-01-27 阿斯利康(瑞典)有限公司 胺衍生物及其在β2肾上腺素受体介导的疾病中的用途

Family Cites Families (38)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2707186A (en) 1954-05-06 1955-04-26 Hoffmann La Roche Imidazolone derivatives
AU565621B2 (en) 1983-04-26 1987-09-24 Smithkline Beckman Corporation Dopaminergic carbostyrils
FR2665440B1 (fr) 1990-07-31 1994-02-04 Lipha Nouveaux cycloalkylsulfonamides substitues, procedes de preparation et medicaments les contenant.
GB9624482D0 (en) 1995-12-18 1997-01-15 Zeneca Phaema S A Chemical compounds
KR19990082463A (ko) 1996-02-13 1999-11-25 돈 리사 로얄 혈관 내피 성장 인자 억제제로서의 퀴나졸린유도체
GB9604578D0 (en) 1996-03-04 1996-05-01 Sericol Ltd Photocurable compositions
WO1997032856A1 (en) 1996-03-05 1997-09-12 Zeneca Limited 4-anilinoquinazoline derivatives
SE9602263D0 (sv) 1996-06-07 1996-06-07 Astra Ab New amino acid derivatives
GB9718972D0 (en) 1996-09-25 1997-11-12 Zeneca Ltd Chemical compounds
GB9714249D0 (en) 1997-07-08 1997-09-10 Angiogene Pharm Ltd Vascular damaging agents
GB9900334D0 (en) 1999-01-07 1999-02-24 Angiogene Pharm Ltd Tricylic vascular damaging agents
GB9900752D0 (en) 1999-01-15 1999-03-03 Angiogene Pharm Ltd Benzimidazole vascular damaging agents
TWI258462B (en) 1999-12-17 2006-07-21 Astrazeneca Ab Adamantane derivative compounds, process for preparing the same and pharmaceutical composition comprising the same
EP1289952A1 (en) 2000-05-31 2003-03-12 AstraZeneca AB Indole derivatives with vascular damaging activity
SK52003A3 (en) 2000-07-07 2003-07-01 Angiogene Pharm Ltd Colchinol derivatives as angiogenesis inhibitors, method for their preparation and pharmaceutical composition comprising the same
AU6623301A (en) 2000-07-07 2002-01-21 Angiogene Pharm Ltd Colchinol derivatives as vascular damaging agents
CA2543858C (en) * 2003-11-21 2014-04-15 Theravance, Inc. Compounds having beta2 adrenergic receptor agonist and muscarinic receptor antagonist activity
TW200531692A (en) 2004-01-12 2005-10-01 Theravance Inc Aryl aniline derivatives as β2 adrenergic receptor agonists
EP1751131B1 (en) 2004-03-10 2008-11-19 Janssen Pharmaceutica N.V. Mtp inhibiting aryl piperidines or piperazines substituted with 5-membered heterocycles
US20050215542A1 (en) 2004-03-23 2005-09-29 Pfizer Inc Compounds for the treatment of diseases
WO2005092841A1 (en) 2004-03-23 2005-10-06 Pfizer Limited Compounds having beta-agonist activity
DE102004024453A1 (de) * 2004-05-14 2006-01-05 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Neue langwirksame Bronchodilatoren zur Behandlung von Atemwegserkrankungen
JP2008510015A (ja) 2004-08-16 2008-04-03 セラヴァンス， インコーポレーテッド β２アドレナリン作用性レセプターアゴニスト活性およびムスカリン性レセプターアンタゴニスト活性を有する化合物
DE102004045648A1 (de) 2004-09-21 2006-03-23 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Neue Betamimetika zur Behandlung von Atemwegserkrankungen
US20080207616A1 (en) 2004-10-15 2008-08-28 Astrazeneca Ab Quinoxalines as B Baf Inhhibitors
WO2006051373A1 (en) 2004-11-12 2006-05-18 Pfizer Limited Compounds for the treatment of diseases
DE102005007654A1 (de) 2005-02-19 2006-08-24 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Neue langwirksame Betamimetika zur Behandlung von Atemwegserkrankungen
US7858788B2 (en) 2005-02-21 2010-12-28 Shionogi & Co., Ltd. Bicyclic carbamoylpyridone derivative having HIV integrase inhibitory activity
TW200738658A (en) 2005-08-09 2007-10-16 Astrazeneca Ab Novel compounds
TW200738659A (en) 2005-08-29 2007-10-16 Astrazeneca Ab Novel compounds
JP5217438B2 (ja) * 2005-11-18 2013-06-19 小野薬品工業株式会社 塩基性基を含有する化合物およびその用途
TW200734342A (en) 2005-12-15 2007-09-16 Astrazeneca Ab New compounds for the treatment of cardiac arrhythmias
TW200745084A (en) 2006-03-08 2007-12-16 Astrazeneca Ab Novel compounds
GB0613154D0 (en) * 2006-06-30 2006-08-09 Novartis Ag Organic Compounds
TW200833670A (en) 2006-12-20 2008-08-16 Astrazeneca Ab Novel compounds 569
WO2008096129A1 (en) 2007-02-07 2008-08-14 Argenta Discovery Ltd Nitrogen containing hetrocyclic compounds useful as bifunctional modulators of m3 receptors and beta- 2 receptors
GB0702459D0 (en) 2007-02-08 2007-03-21 Astrazeneca Ab Salts 669
GB0913342D0 (en) 2009-07-31 2009-09-16 Astrazeneca Ab Compounds - 801

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101553231A (zh) * 2006-08-15 2009-10-07 弗特克斯药品有限公司 毒蕈碱受体调节剂
CN101636379A (zh) * 2006-12-20 2010-01-27 阿斯利康(瑞典)有限公司 胺衍生物及其在β2肾上腺素受体介导的疾病中的用途
WO2008096127A2 (en) * 2007-02-07 2008-08-14 Argenta Discovery Ltd Bicyclo[2.2.1]hept-7-ylamine derivatives and their use as m3 muscarinic receptor modulators
WO2009098448A1 (en) * 2008-02-06 2009-08-13 Astrazeneca Ab Compounds

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2018059537A1 (zh) * 2016-09-30 2018-04-05 四川海思科制药有限公司 一种二氮杂螺[5.5]十一碳烷衍生物及其用途
CN109195975A (zh) * 2016-09-30 2019-01-11 四川海思科制药有限公司 一种二氮杂螺[5.5]十一碳烷衍生物及其用途
CN109195975B (zh) * 2016-09-30 2022-01-04 四川海思科制药有限公司 一种二氮杂螺[5.5]十一碳烷衍生物及其用途

Also Published As

Publication number Publication date
US8455483B2 (en) 2013-06-04
CU20120021A7 (es) 2012-06-21
US20110053909A1 (en) 2011-03-03
EA020566B1 (ru) 2014-12-30
TR201819140T4 (tr) 2019-01-21
HK1171755A1 (zh) 2013-04-05
GT201200028A (es) 2013-09-26
PE20121441A1 (es) 2012-11-16
CA2768527A1 (en) 2011-02-03
JP2013500958A (ja) 2013-01-10
TW201107335A (en) 2011-03-01
WO2011012896A3 (en) 2011-04-21
AU2010277384B2 (en) 2014-01-30
DOP2012000032A (es) 2017-08-15
US20130018037A1 (en) 2013-01-17
EA201290077A1 (ru) 2012-08-30
CO6491034A2 (es) 2012-07-31
TWI443103B (zh) 2014-07-01
KR20120056838A (ko) 2012-06-04
IL217557A (en) 2015-01-29
BR112012008043A2 (pt) 2020-08-25
MX2012001232A (es) 2012-03-26
AR080601A1 (es) 2012-04-25
CR20120054A (es) 2012-03-26
SA110310628B1 (ar) 2014-02-27
HN2012000217A (es) 2015-03-09
EP2459572A2 (en) 2012-06-06
WO2011012896A2 (en) 2011-02-03
US8476265B2 (en) 2013-07-02
MY163117A (en) 2017-08-15
CU24103B1 (es) 2015-07-30
CL2012000263A1 (es) 2012-08-31
SG177634A1 (en) 2012-02-28
KR101664525B1 (ko) 2016-10-11
CN102625808B (zh) 2014-08-27
EP2459572B1 (en) 2018-09-12
ZA201201473B (en) 2012-11-28
IL217557A0 (en) 2012-02-29
UY32814A (es) 2011-02-28
GB0913342D0 (en) 2009-09-16
AU2010277384A1 (en) 2012-03-22
NZ597589A (en) 2013-12-20
UA106887C2 (uk) 2014-10-27
CA2768527C (en) 2017-07-11
ES2702467T3 (es) 2019-03-01
JP5612092B2 (ja) 2014-10-22
NI201200018A (es) 2012-09-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102625808B (zh) 螺环酰胺衍生物
JP4934223B2 (ja) 化合物
JP6128449B2 (ja) キナーゼ阻害剤
JP4604129B2 (ja) ムスカリン受容体アンタゴニストとしてのキヌクリジノール誘導体
TWI752963B (zh) 用於治療或預防與β-3腎上腺素受體相關病症之β-3腎上腺素受體調節劑
CN101305005A (zh) 新二氮杂螺烷以及它们用于治疗ccr8介导的疾病的用途
JP6526275B2 (ja) Ｓｈｉｐ１モジュレーターおよびそれに関連する方法
CN102124003A (zh) 作为治疗呼吸系统疾病的β2肾上腺素受体拮抗剂的苯并噁嗪酮衍生物
EP2976338B1 (en) N-(2-cyano heterocyclyl)pyrazolo pyridones as janus kinase inhibitors
AU2014228574A1 (en) SHIP1 modulators and methods related thereto
JP4837800B2 (ja) ムスカリンｍ３受容体アンタゴニストとしてのキヌクリジン誘導体
JP2021513530A (ja) テトラヒドロイソキノリン化合物、その調製方法、そのような化合物を含む医薬組成物およびその使用
CN101395150A (zh) 用作β2肾上腺素受体激动剂的苯乙醇胺衍生物
TW202134248A (zh) Sstr5拮抗劑
CN101535306B (zh) 作为毒蕈碱受体拮抗剂的（杂）芳基环庚基甲酸的奎宁环衍生物
RU2512318C2 (ru) Производные изохинолина, ингибирующие р38 киназу
CN101443320A (zh) 作为β2肾上腺素受体激动剂的苯并噻唑衍生物
CN101282950B (zh) 新颖的苯并噻唑酮衍生物
JP2011195593A (ja) ムスカリンｍ３受容体アンタゴニストとしてのキヌクリジン誘導体

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 1171755

Country of ref document: HK

C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: GR

Ref document number: 1171755

Country of ref document: HK

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20140827

Termination date: 20210729

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee