CN102066338A

CN102066338A - 蛋白激酶抑制剂

Info

Publication number: CN102066338A
Application number: CN2009801223945A
Authority: CN
Inventors: 宋永红; 徐亲; S·M·鲍尔; Z·J·贾; M·梅赫罗特拉; A·潘迪
Original assignee: Portola Pharmaceuticals LLC
Current assignee: Portola Pharmaceuticals LLC
Priority date: 2008-04-22
Filing date: 2009-04-22
Publication date: 2011-05-18
Also published as: IL208719A0; US20130029944A1; WO2009131687A2; US20090298823A1; JP2011518219A; BRPI0910668A2; US8258144B2; US9139581B2; EP2271631B1; NZ588830A; WO2009131687A3; EP2271631A2; AU2009238590A1; CN103224497A; CA2723185A1

Abstract

本发明涉及式I-II化合物及其可药用盐、酯和前药，它们为syk和/或JAK激酶抑制剂。本发明还涉及用于制备此类化合物的中间体、制备此类化合物的方法、含有此类化合物的药用组合物、抑制syk和/或JAK激酶活性的方法、抑制血小板凝集的方法以及预防或治疗至少部分由syk和/或JAK激酶活性介导的多种疾病的方法，所述疾病例如不期望的血栓形成和非霍奇金淋巴瘤。

Description

蛋白激酶抑制剂

相关申请的交叉参考

本申请要求2008年4月22日提交的美国临时专利申请号61/047077的权益，其全部内容引入本文作为参考。

技术领域

本发明涉及用作脾酪氨酸激酶(syk)和/或JAK激酶抑制剂的嘧啶、吡咯并嘧啶以及嘌呤类生物。本发明还涉及含嘧啶化合物的药用组合物，以及用该化合物或组合物治疗特征在于不需要的血栓形成疾病的方法。本发明还涉及制备本文中所述化合物的方法。

背景技术

蛋白激酶组成结构相关酶的大家族，这些酶负责调控细胞内多种信号转导过程(参见例如Hardie和Hanks，The Protein Kinase Facts Book，I and II，Academic Press，San Diego，Calif.，1995)。由于它们的结构和催化功能的保守性，蛋白激酶被认为是共有祖基因的进化产物。几乎所有激酶都含相似的250-300氨基酸催化域。可通过被它们磷酸化的底物将激酶划分为不同家族(例如蛋白-酪氨酸、蛋白-丝氨酸/苏氨酸、脂质等)。已鉴定出通常对应于这些家族中各家族的序列基元(参见例如Hanks&Hunter，(1995)，FASEB J.9：576-596；Knighton等，(1991)，Science 253：407-414；Hiles等，(1992)，Cell 70：419-429；Kunz等，(1993)，Cell 73：585-596；Garcia-Bustos等，(1994)，EMBO J.13：2352-2361)。

许多疾病与由蛋白激酶介导的事件触发的异常细胞反应有关。这些疾病包括自身免疫病、炎性疫病、骨病、代谢疾病、神经和神经变性疾病、癌症、心血管病、过敏、哮喘、早老性痴呆和激素相关疾病。因此，在药物化学领域，已对寻找用作治疗药物的蛋白激酶抑制剂做了大量工作。

免疫受体酪氨酸激活基元(ITAM)介导的信号为信号通路中与人类疾病有关的主要事件。ITAM介导的信号事件是使免疫细胞中传统免疫受体例如T细胞受体、B细胞受体、Fc受体和血小板中GPVI和FcγRIIa被引发的激活信号传递至下游细胞内分子例如syk和ZAP-70的关键因素(Underhill，D.M and Goodridge，H.S.，Trends Immunol.，28：66-73，2007)。

配体与含ITAM的受体结合触发信号事件，这导致从称为Src家族的非受体酪氨酸激酶家族中募集蛋白。这些激酶将ITAM序列中酪氨酸残基磷酸化，ITAM序列是与syk或ZAP-70上SH2域串联的区域。

Syk与Zap-70一起为蛋白酪氨酸激酶syk家族的一员。syk或ZAP-70与二磷酸化ITAM序列相互作用诱发激酶构象改变，该改变使激酶自身的酪氨酸磷酸化。磷酸化的Syk家族成员将众多下游信号通路蛋白激活，此类蛋白包括含有Src同源2(SH2)域的76kDa(SLP-76)的白细胞特异性磷蛋白，激活的T细胞(LAT)和PLC(磷酸酯酶C)γ2的接头。

归因于功能异常的ITAM介导的信号事件的人疾病包括自身免疫病，例如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、多发性硬化、溶血性贫血、免疫性血小板减少性紫癫、肝素引起的血小板减少症和动脉粥样硬化。有意义的是，据认为，通过抗体使Fc受体交联能够导致发生上述疾病中的很多疾病，所述抗体通过syk在肥大细胞、嗜碱性粒细胞和其它免疫细胞中激活信号级联，导致负责炎性反应的细胞介质释放。在依赖IgE刺激的过敏和炎性反应中，可通过抑制syk的酪氨酸激酶活性控制肥大细胞和嗜碱细胞中的介质释放和细胞因子产生(Rossi，A.B等，J Allergy Clin Immunol.，118：749-755，2006)。在免疫血小板减少症中，脾通过Fc受体/ITAM/syk介导的过程清除与血小板结合的抗体(Crow，A.R等，Blood，106：摘要2165，2005)。由肝素-血小板因子4免疫复合物造成的药物引起的血小板减少症还涉及受体参与(engagement)的syk信号事件下游，肝素-血小板因子4免疫复合物激活血小板FcγRIIa(Reilly，M.P.，Blood，98：2442-2447，2001)。

血小板激动剂诱导内向外(inside-out)整联蛋白信号，导致纤维蛋白原结合和血小板聚集。由此启动外向内(outside-in)信号，该信号进一步刺激血小板。syk在整联蛋白信号的两个期间均被激活，表明syk的抑制可以抑制血小板与固定化蛋白的粘着(Law，D.A等，Blood，93：2645-2652，1999)。由胶原引起的花生四烯酸和5-羟色胺释放以及聚集syk缺乏小鼠的血小板中血小板的显著抑制(Poole，A等，EMBO J.，16：2333-2341，1997)。因此，syk抑制剂也具有抗凝作用。

由于syk在Ig引起的血小板激活中起作用，所以，它可能在动脉粥样硬化和再狭窄中很重要。动脉粥样硬化是特征在于血管动脉壁增厚和硬化的一类疾病。尽管所有血管均对该严重变性疾病敏感，但服务于心脏的主动脉和冠状动脉通常受影响最大。因为动脉粥样硬化可增加心脏病发作、心肌梗塞、中风和主动脉瘤的风险，所以它具有深远的临床重要性。

对动脉粥样硬化的传统治疗包括用于将阻滞不很严重的血管再通的方法和用于将较重阻滞的冠脉搭桥术。血管内方法的严重缺点是，在大量的治疗个体中某些或所有治疗的血管出现再狭窄(即再缩窄)。例如，在10-50％的接受该方法的患者中出现PTCA后的动脉粥样硬化的冠状动脉再狭窄，随后需要再次血管成形术或冠状动脉分流移植。另外，植入支架后，在10-20％的接受该方法的患者中出现动脉粥样硬化的冠状动脉再狭窄，随后需要重复治疗，以维持适当血流通过受影响的动脉。再狭窄通常发生在治疗后的相对短暂时间期，例如约小于6个月。

虽然尚未测定到促进再狭窄的确切的激素和细胞过程，但据认为，再狭窄的原因部分源于气囊导管或其它血管内装置对血管壁造成的机械性损伤。例如，除打通阻塞的动脉外，PTCA过程还损伤冠状动脉平滑肌细胞(SMC)。作为对于该损伤的响应，粘连血小板、浸润巨噬细胞、白细胞或平滑肌细胞自身释放细胞衍生(cell-derived)的生长因子，例如血小板衍生生长因子(PDGF)，随后中膜SMC增殖并通过内弹性层迁移到血管内膜的区域。内膜SMC进一步增殖和增生，而最重要的是，在3-6月期间产生大量细胞外基质从而导致血管空间填充和收窄至足以显著阻塞血流。

syk除在Ig引起的血小板激活中起作用外，syk还在胶原介导的信号中起极重要的作用。负责血小板粘着和激活的主要粘连蛋白是胶原。胶原为包含在粉瘤的纤维变性罩内的丝状蛋白，在噬斑破裂期间，丝状蛋白暴露于血液。胶原最初通过与von Willebrand因子结合起作用，该因子通过与血小板膜GPIb结合束缚血小板。然后，胶原通过连结血小板上的两个胶原受体GPVI和整联蛋白α2β1起作用。

GPVI以与FcRγ的复合物形式存在于血小板膜中，与FcRγ复合是GPVI表达所需要的相互作用。激活血小板上的FcγRIIa导致血小板形状改变、分泌和血栓形成。通过FcRγ的ITAM域的酪氨酸磷酸化，然后募集syk，启动GPVI/FcRγ复合物发出信号。GPVI激活导致诱发多种血小板功能，它们包括：激活整联蛋白α2β1从而加固血小板粘着，激活能够介导血小板聚集和血栓生长的GP IIb-IIIa；分泌血小板，以使炎性蛋白例如CD40L、RANTES和TGFβ传递到血管壁；表达P-选择蛋白，以募集白细胞。因此，人们认为syk抑制剂可抑制由血小板粘连、激活和聚集介导的血栓形成事件。

据报道，通过刺激IgG抗体的受体FcγR而诱发的细胞内蛋白的酪氨酸磷酸化(激活)和由FcγR介导的吞噬在源自syk缺乏小鼠的巨噬细胞中均被显著抑制(Crowley，M.T.等，J.Exp.Med.，186：1027-1039，1997)。该结果说明，syk在FcγR介导的巨噬细胞吞噬中具有显著重要作用。

又据报道，syk的反义寡核苷酸能够抑制由GM-CSF诱发的对嗜酸性粒细胞的凋亡抑制(Yousefi，S.等，J.E.Med.，183：1407-1414，1996)，这说明syk对由GM-CSF等造成的嗜酸性粒细胞的生命延长信号至关重要。因为嗜酸性粒细胞的生命延长与过敏性疾病(例如哮喘)中疾病转变为慢性疾病紧密相关，所以syk抑制剂也可作为慢性嗜酸性炎症的治疗药物。

Syk对通过B细胞抗原受体来激活B细胞而言很重要，它涉及磷脂酰肌醇代谢和由抗原受体刺激造成的细胞内钙浓度增加(Hutchcroft，J E.等，J.Biol.Chem.，267：8613-8619，1992；和Takata，M.等，EMBO J.，13：1341-1349，1994)。因此，syk抑制剂可用于调节B细胞的功能，因此预计可用作与抗体相关的疾病的治疗药物。

Syk与T细胞抗原受体结合，通过受体交联而迅速经历酪氨酸磷酸化，对由Src酪氨酸激酶例如Lck介导的细胞内信号起协同作用(Couture，C.等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，91：5301-5305，1994；和Couture，C.等，Mol.Cell.Biol.，14：5249-5258，1994)。syk存在于成熟T细胞群例如表皮内γδT细胞和原初αβT细胞，据报道，它可使TCR信号级联放大的若干组分磷酸化(Latour，S.等，Mol Cell Biol.，17：4434-4441，1997)。因此，syk抑制剂可用作抑制由T细胞抗原受体介导的细胞免疫的药物。

近期比较基因组杂交研究发现，syk是在套细胞淋巴瘤(MCL)的发病机理中起作用的另一种重要基因(Chen，R.等，Journal of Clinical Oncology，2007 ASCO Annual Meeting Proceedings(Post-Meeting Edition).第25卷，No 18S(June 20 Supplement)，2007：8056)。MCL占所有非霍奇金淋巴瘤的5-10％，它是一种难以治疗的淋巴瘤形式。在具有3年存活率中值的B细胞淋巴瘤中，它的预后最差。据报道，Syk在MCL中过度表达(Rinaldi，A，等，Br.J.Haematol.，2006；132：303-316)，且Syk在滤泡细胞、套细胞、伯基特细胞和弥散性大B细胞非霍奇金淋巴瘤中介导mTOR(雷帕霉素的哺乳动物靶标)存活信号(Leseux，L.等，Blood，2006；108：4156-4162)。

若干条证据显示，多种B细胞淋巴瘤依赖于B细胞受体(BCR)介导的存活信号。通过SRC家族激酶，BCR信号诱发Igα和β免疫受体基于酪氨酸的激活基元的受体寡聚和磷酸化。ITAM磷酸化导致syk的募集和激活，从而启动下游事件并放大原始BCR信号。鉴于紧张性BCR信号在正常B细胞中的作用和体外非霍奇金淋巴瘤细胞系依赖于syk的存活(Chen，L.等，Blood，2006；108：3428-3433)，有人报道，对于某些B细胞淋巴瘤和慢性淋巴白血病(CLL)而言，抑制syk是有前途的合理的治疗靶标(Stefania Gobessi，Luca Laurenti，Pablo Longo，Laura Carsetti，Giuseppe Leone，Dimitar G.Efremov，慢性淋巴白血病B细胞中的蛋白酪氨酸激酶Syk的组成型激活(Constitutive activation of the protein tyrosine kinase Syk in Chronic Lymphocytic Leukemia B-cells)，Blood，2007，110，Abstract1123)。近期发表的数据说明，在CLL患者中给予抑制syk的多激酶(multikinase)抑制剂可能具有显著临床活性(Friedberg JW等，Blood 2008；112(11)，摘要3)。

已有关于脾酪氨酸激酶(Syk)在多个不同环境中的致癌潜力的描述。据报道，在临床上，Syk在套细胞淋巴瘤中过度表达(Rinaldi，A等，Br.J.Haematol.，2006；132：303-316)，通过染色体易位(t(9；12)(q22；p12))产生的TEL-Syk融合蛋白(易位ETS白血病)导致Syk活性增加，且与骨髓增生异常综合征有关(Kuno，Y.等，Blood，2001；97：1050-1055)。在小鼠中，通过过继转移表达人TEL-Syk的骨髓细胞能够诱发白血病(Wossning，T.，JEM，2006；203：2829-2840)。另外，在小鼠初级骨髓细胞中，Syk的过度表达导致IL-7在培养基中独立生长(Wossning，T.等，JEM，2006；203：2829-2840)。

有意义的是，在人和小鼠中，B细胞发育和存活似乎需要Syk信号。B细胞受体(Lam，K.等，Cell，1997；90：1073-1083)或Igα(Kraus，M.等，Cell，2004；117：787-800)的诱发性损失(inducible loss)导致小鼠中外周B细胞损失。已知蛋白酪氨酸磷酸酶PTP-RO的过度表达能够负向调节Syk活性，这种表达在源自非霍奇金氏淋巴瘤的细胞系中抑制增殖并诱导凋亡(Chen，L.等，Blood，2006；108：3428-3433)。因此，B细胞淋巴瘤很少出现BCR表达缺失，抗个体遗传型疗法(idiotype therapy)很少导致耐药(Kuppers，R.Nat Rev Cancer，2005；5：251-262)。

抗原特异性B细胞受体(BCR)的参与(engagement)能够激活多个信号通路，这些通路最终调节细胞激活状态、促进存活和克隆扩充。BCR与免疫球蛋白超家族的两个其它成员Igα和Igβ的结合使得通过BCR发出信号成为可能，Igα和Igβ各自携有基于免疫-酪氨酸的激活基元(ITAM)(Jumaa，Hendriks等，Annu Rev Immunol 23：415-45(2005))。ITAM域被响应于BCR参与的Src家族激酶直接磷酸化。脾酪氨酸激酶(Syk)与ITAM对接并将其磷酸化，这是增强其激酶活性的过程，导致Syk自磷酸化以及多个下游底物的酪氨酸磷酸化(Rolli，Gallwitz等.Mol Cell 10(5)：1057-69(2002))。当表达新形成的前BCR时，该信号通路对处于从原B细胞开始到转变为前B细胞的发育阶段中的B细胞有活性。事实上，在敲除Syk的小鼠中，B细胞发育停止在原B细胞阶段(Cheng，Rowley等，1995；Turner，Mee等，Nature 378(6554)：303-6(1995))。在小鼠中，B细胞受体(Lam，Kuhn等，Cell 90(6)：1073-83(1997))或Igα(Kraus，Alimzhanov等.Cell 117(6)：787-800(2004))的诱发性损失导致外周B细胞损失。人B细胞的增殖和存活似乎也需要Syk。过度表达的蛋白酪氨酸磷酸酶PTP-RO为Syk活性的负性调节剂，它在源自非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)的细胞系中抑制增殖并诱导凋亡(Chen，Juszczynski等，Blood 108(10)：3428-33(2006))。通过NHL系SUDHL-4中的siRNA敲除Syk导致细胞周期的G1/S转变阻断(Gururajan，Dasu等，J Immunol 178(1)：111-21(2007))。这些数据结合表明人和小鼠B细胞发育、增殖、甚至存活需要Syk信号。

相反，已经有关于Syk在多个不同环境中致癌潜力的描述。据报道，在临床上，Syk在套细胞淋巴瘤中过度表达(Rinaldi，Kwee等，Br J Haematol 132(3)：303-16(2006))，通过染色体易位(t(9；12)(q22；p12))产生的TEL-Syk融合蛋白(易位ETS白血病)导致Syk活性增加，且与骨髓增生异常综合征有关(Kuno，Abe等，Blood 97(4)：1050-5(2001))。在小鼠中，通过表达人TEL-Syk的骨髓细胞的过继转移能够诱发白血病(Wossning，Herzog等，J Exp Med 203(13)：2829-40(2006))。另外，在小鼠初级骨髓细胞中，Syk的过度表达导致IL-7在培养基中独立生长(Wossning，Herzog等，2006)。同样，据报道，Syk在滤泡细胞、套细胞、伯基特细胞和弥散性大B细胞NHL中介导mTOR(雷帕霉素的哺乳动物靶标)存活信号(Leseux，Hamdi等，Blood 108(13)：4156-62(2006))。其它近期研究也显示，依赖Syk的存活信号可能在B细胞恶性瘤中起作用，B细胞恶性瘤包括DLBCL、套细胞淋巴瘤和滤泡淋巴瘤(Gururajan，Jennings等，2006；Irish，Czerwinski等，J Immunol 176(10)：5715-9(2006))。鉴于紧张性BCR信号在正常B细胞中的作用和体外NHL细胞系依赖syk的存活，对于某些B细胞淋巴瘤的治疗而言，特异性抑制Syk是有前途的。

据近期报道，R406(Rigel Pharmaceuticals)能够抑制响应于各种刺激(包括FcεR1和BCR诱发的Syk激活)的ITAM信号(Braselmann，Taylor等，J Pharmacol Exp Ther 319(3)：998-1008(2006))。有意义的是，Syk的该ATP竞争性抑制剂对Flt3、cKit和JAK激酶也有活性，但对Src激酶无活性(Braselmann，Taylor等，2006)。Flt3的激活突变与AML有关，对该激酶的抑制目前正在进行临床开发研究(Burnett and Knapper Hematology Am Soc Hematol Educ Program 2007：429-34(2007))。酪氨酸激酶cKit的过度激活还与血液恶性肿瘤有关，为癌症治疗的靶标(Heinrich，Griffith等，Blood 96(3)：925-32(2000))。同样，JAK3信号与白血病和淋巴瘤有关，目前用作潜在治疗靶标(Heinrich，Griffith等，2000)。重要的是，R406的多激酶抑制活性能够减弱在淋巴瘤细胞系和原发人淋巴瘤样品中的BCR信号，导致前者凋亡(Chen，Monti等，Blood 111(4)：2230-7(2008))。另外，II期临床试验报道了该化合物在顽固性NHL和慢性淋巴细胞白血病中的有利结果(Friedberg JW等，Blood 2008；112(11)，摘要3)。尽管不清楚R406作用的精确机理，但数据显示，对在淋巴细胞中介导存活信号的激酶进行抑制在临床上有益。

另外一些近期研究还提示，依赖syk的存活信号可能在B细胞恶性肿瘤中起作用，B细胞恶性肿瘤包括DLBCL、套细胞淋巴瘤和滤泡淋巴瘤(参见例如S.Linfengshen等，Blood，Feb.2008；111：2230-2237；J.M.Irish等，Blood，2006；108：3135-3142；A.Renaldi等，Brit J.Haematology，2006；132：303-316；M.Guruoajan等，J.Immunol，2006；176：5715-5719；L.Laseux等，Blood，2006；108：4156-4162)。

JAK激酶(Janus激酶)，包括JAK1、JAK2、JAK3以及TYK2，为细胞质蛋白酪氨酸激酶家族。JAK在细胞因子信号中起关键作用。尽管多个JAK激酶可能被特定的细胞因子或信号通路所影响，但每个JAK激酶对某些细胞因子的受体具有选择性。研究表明，JAK3与各种细胞因子受体的固有细胞因子受体γ链(Fcγ或γc)有关。JAK3特别与受体选择性结合，是IL-2、IL-4、IL-7、IL-9、IL-15以及IL-21细胞因子信号通路的一部分，并被其激活。其中JAK1与细胞因子IL-2、IL-4、IL-7、IL-9以及IL-21的受体相互作用，而JAK2与IL-9和TNF-α受体相互作用。当某些细胞因子与其受体(例如，IL-2、IL-4、IL-7、IL-9、IL-15和IL-21)结合时，发生受体低聚反应，导致相关JAK激酶的细胞质尾巴接近并促进JAK激酶上的酪氨酸残基发生磷酸根移转。该磷酸根移转反应导致JAK激酶的激活。

JAK家族激酶的下游底物包含转录信号传感激活剂(STAT)蛋白。磷酸化的JAK激酶与各种STAT(转录信号传感器和激活剂)蛋白结合。作为由酪氨酸残基磷酸化激活的DNA结合蛋白，STAT蛋白具有信号分子和转录因子的双重功能，并最终与存在于响应细胞因子的基因的启动子上的特定的DNA序列结合(Leonard等，(2000)，J.Allergy Clin.Immunol.105：877-888).

JAK/STAT信号与多种异常免疫反应的介导有关，例如过敏、哮喘、自身免疫疾病例如移植(同种移植物)排斥反应、类风湿性关节炎、肌萎缩性侧索硬化症以及多发性硬化症，同样还与实体和血液的恶性肿瘤有关，例如白血病和淋巴瘤。关于作用于JAK/STAT通路的药物的综述参见Frank，(1999)，Mol.Med.5：432：456以及Seidel等，(2000)，Oncogene19：2645-2656。

JAK3尤其与各种生物过程有关。例如，报道显示，IL-4和IL-9诱导的小鼠肥大细胞的增生和存活依赖于JAK3-和γ链信号(Suzuki等，(2000)，Blood 96：2172-2180)。JAK3同样在IgE受体介导的肥大细胞的脱粒反应中起关键作用(Malaviya等，(1999)，Biochem.Biophys.Res：Commun.257：807-813)，报道还显示，JAK3激酶的抑制能够阻止包括过敏性反应的I型超敏反应(Malaviya等，(1999)，J.Biol.Chem.274：27028-27038)。也已经显示，JAK3的抑制反应能够导致同种异体移植物排斥反应的免疫抑制(Kirken，(2001)，Transpl.Proc.33：3268-3270).JAK3激酶同样与下列疾病所包含的机制有关：早期和晚期类风湿性关节炎(Muller-Ladner等，(2000)，J.Immunal.164：3894-3901)、家族性肌萎缩性侧索硬化症(Trieu等，(2000)，Biochem Biophys.Res.Commun.267：22-25)、白血病(Sudbeck等，(1999)，Clin.Cancer Res.5：1569-1582)、作为一种T细胞淋巴瘤形式的蕈样肉芽肿(Nielsen等，(1997)，Prac.Natl.Acad.Sci.USA 94：6764-6769)，以及异常的细胞生长(Yu等，(1997)，J.Immunol.159：5206-5210；Catlett-Falcone等，(1999)，Immunity 10：105-115)。

JAK1、JAK2和TYK2被广泛表达，而JAK3主要在造血干细胞中表达。包括JAK3的JAK激酶大量表达于急性成淋巴细胞白血病(最常见的儿童期癌症形式)患儿的原发性白血病细胞中。研究表明，某些细胞中的STAT激活与信号调节的细胞凋亡有关(Demoulin等，(1996)，Mol.Cell.Biol.16：4710-6；Jurlander等，(1997)，Blood.89：4146-52；Kaneko等，(1997)，Clin.Exp.Immun.109：185-193；和Nakamura等，(1996)，J.Biol.Chem.271：19483-8)。也已知它们对于淋巴细胞的分化、功能和存活非常重要。特别是JAK3，在淋巴细胞、巨噬细胞和肥大细胞的功能中起重要作用。鉴于该JAK激酶的重要性，包括对JAK3具有选择性的能够调节JAK通路的化合物，可用于治疗与淋巴细胞、巨噬细胞或肥大细胞的功能有关的疾病或病症(Kudlacz等，(2004)Am.J.Transplant 4：51-57；Changelian(2003)Science 302：875-878)。通过作用于JAK通路或调节JAK激酶、特别是JAK3可以治疗的病症，包括白血病、淋巴瘤、移植排斥反应(例如，胰岛移植排斥反应、骨髓移植排斥反应(例如，移植物抗宿主病))、自身免疫性疾病(例如，糖尿病、类风湿性关节炎、狼疮、银屑病)，以及炎症(例如，哮喘、过敏反应)。通过JAK3抑制作用获益的病症将在下面更详细讨论。近期报告的采用CP-690,550治疗的肾同种异体移植病人得到的关于JAK抑制作用的数据显示，同种异体反应的标记(干扰素γ)可以减少(Van Gurp EA等，(2009)Transplanatation 87：79-86).

考虑到通过调节JAK通路治疗获益的多种疾病，非常明显的是，调节JAK通路的新化合物和使用这些化合物的方法能够对广大患者提供重大的治疗益处。本文中提供的新的2，4-嘧啶二胺、吡咯并嘧啶以及嘌呤类化合物可以用于治疗其中JAK通路为靶向或JAK激酶、尤其是JAK3的抑制有用的病症。

与JAK通路调节有关的专利和专利申请包括：U.S.Pat.Nos.5,728,536；6,080,747；6,080,748；6,133,305；6,177,433；6,210,654；6,313,130；6,316,635；6,433,018；6,486,185；6,506,763；6,528,509；6,593,357；6,608,048；6,610,688；6,635,651；6,677,368；6,683,082；6,696,448；6,699,865；6,777,417；6,784,195；6,825,190；6,506,763；6,784,195；6,528,509；6,608,048；7,105,529；6,699,865；6,825,190；6,815,439；6,949,580；7,056,944；6,998,391；7,074,793；6,969,760；U.S.Pat.App.Pub.No.2001/0007033A1；2002/0115173A1；2002/0137141A1；2003/0236244A1；2004/0102455A1；2004/0142404A1；2004/0147507A1；2004/0214817A1；国际专利申请WO 95/03701A1；WO99/15500A1；WO 00/00202A1；WO 00/10981A1；WO 00/47583A1；WO00/51587A2；WO 00/55159A2；WO 01/42246A2；WO 01/45641A2；WO01/52892A2；WO 01/56993A2；WO 01/57022A2；WO 01/72758A1；WO02/00661A1；WO 02/43735A1；WO 02/48336A2；WO 02/060492A1；WO02/060927A1；WO 02/096909A1；WO 02/102800A1；WO 03/020698A2；WO 03/048162A1；WO 03/101989A1；WO 2004/016597A2；WO2004/041789A1；WO 2004/041810A1；WO 2004/041814A1；WO2004/046112A2；WO 2004/046120A2；WO 2004/047843A1；WO2004/058749A1；WO 2004/058753A1；WO 2004/085388A2；WO2004/092154A1；WO 2005/009957A1；WO 2005/016344A1；WO2005/028475A2；WO 2005/033107A1。

关于取代的嘧啶二胺化合物的专利和专利申请包括：2003年1月31日提交的美国专利申请序列号10/355,543(US2004/0029902A1)、2003年1月31日提交的国际专利申请序列号PCT/US03/03022(WO 03/063794)、2003年7月29日提交的美国专利申请序列号10/631,029、国际专利申请序列号PCT/US03/24087(WO 04/014382)、2004年7月30日提交的美国专利申请序列号10/903,263和国际专利申请序列号PCT/US2004/24716(WO05/016893)，以上公开引入本文作为参考。关于取代的嘧啶二胺化合物的论述还可参见国际专利申请公开号：WO 02/059110、WO 03/074515、WO03/106416、WO 03/066601、WO 03/063794、WO 04/046118、WO 05/016894、WO 05/122294、WO 05/066156、WO 03/002542、WO 03/030909、WO00/39101、WO 05/037800和美国专利公布号2003/0149064。

虽然在本领域中已经取得了进展，但本领域中仍存在对抑制syk激酶以及/或JAK激酶的化合物的需求，也存在对可从这种抑制中受益的患者中治疗疾病例如再狭窄、血栓和/或炎症的方法的需求。另外，还需要相对于其它激酶而言能够选择性抑制这些激酶中的一种的化合物。本发明满足了该需求和其它需求。

发明内容

本发明提供具有作为syk活性抑制剂(又称为“syk抑制剂”)以及/或者JAK激酶活性抑制剂(在本文中又称为“JAK抑制剂”)的新化合物；它们的制备和使用方法以及含所述化合物的药用组合物。此类化合物或其药学上可接受的盐具有以下结构(I-II)：

其中Y^1a、Z^1a、R^1a、R^1c、R^2a、R^2c、R^3a、R^3c、R^4a、R^4b、R^4d、R^5a、R^6a、R^7a和R^7c定义如下。

本发明还提供药用组合物，该组合物含治疗有效量的式I和式Ⅱ化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体和/或稀释剂。

本发明化合物具有多种治疗用途，通常而言，可用于在男人和妇女以及哺乳动物(在本文中又称为“患者”)中治疗多种至少部分由syk活性介导的病症。例如，此类病症包括但不限于与心血管疾病、炎性疾病或自身免疫疾病有关的那些病症。更具体地说，本发明化合物可用于治疗疾病或病症，这些疾病或病症包括但不限于：再狭窄、血栓形成、炎症、肝素引起的血小板减少症、扩张型心肌炎、镰状细胞病、动脉粥样硬化症、心肌梗塞、血管炎、不稳定心绞痛、急性冠状动脉综合征、过敏、哮喘、类风湿性关节炎、B细胞介导的疾病例如非霍奇金氏淋巴瘤、抗磷脂综合征、红斑狼疮、银屑病、多发性硬化、晚期肾病、溶血性贫血、免疫血小板减少性紫癜和慢性淋巴细胞白血病。因此，在一个实施方案中公开方法，该方法包括通常以药用组合物的形式将有效量的式(I和Ⅱ)化合物给予有需要的患者。

与心血管病相关的病症选自急性冠状动脉综合征、心肌梗塞、不稳定心绞痛、顽固性心绞痛、在血栓溶解治疗后或冠状动脉血管成形术后发生的闭塞性冠状动脉血栓形成、血栓形成介导的脑血管综合征、栓塞中风、血栓形成中风、一过性局部缺血发作、静脉血栓形成、深静脉血栓形成、肺栓塞、凝血病、弥散性血管内凝血、血栓形成性血小板减少性紫癜、血栓闭塞性脉管炎、与肝素引起的血小板减少症有关的血栓形成疾病、与体外循环有关的血栓形成并发症、与器械操作法例如心脏或其它血管内导管插入、主动脉内气囊泵、冠状动脉支架或人造心脏瓣膜有关的血栓形成并发症和需要安装假肢装置的病症。

本发明还提供抑制血液样品中的syk激酶活性的方法，该方法包括使所述样品与本发明化合物接触。

本发明还提供纯化形式的化合物和化学中间体。

通过参考以下详述和附图，本发明的这些和其它方面、目的和优点显而易见。为此，在本文中列出各种参考文献，它们更详细地描述了一些背景信息、方法、化合物和/或组合物，各自通过引用全文结合到本文中。

附图说明

图1显示Syk如何在细胞生物学和多种疾病中作为Fc受体介导的信号的关键介质。

图2显示如何对Syk进行基因靶向证明了Syk是动脉血小板生物学中的关键介质和治疗动脉血栓形成的选择性靶标。

图3-5显示本发明化合物的通用合成方法。

图6显示增加本发明化合物剂量对响应B拉莫斯细胞IL4刺激的pSTAT6形成的影响。

图7提供说明本发明化合物以及syk IC₅₀的表1。

图8提供说明本发明化合物以及syk IC₅₀的表2。

图9显示了所选化合物的特异性数据。

图10显示了所选双环化合物的选择性抑制。

发明详述

除另有说明外，本文中所述以下术语具有以下含义：

1.缩写和定义

除另有定义外，本文中使用的缩写为常规术语。使用以下缩写：

AcOH＝乙酸

AIBN＝偶氮双异丁腈

aq.＝含水的

Boc＝叔丁氧基

Bz＝苄基

BOP＝苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)-磷鎓六氟磷酸盐

BPO＝过氧化苯甲酰

nBuOH＝正丁醇

CBr₄＝四溴甲烷

mCPBA＝间-氯过苯甲酸

CH₂Cl₂或DCM＝二氯甲烷

Cs₂CO₃＝碳酸铯

CuCl₂＝氯化亚铜

DIBAL＝氢化二异丁基铝

DIEA＝ Hunig’s碱或二异丙基乙胺

DME＝二甲醚

DMF＝二甲基甲酰胺

DMSO＝二甲亚砜

DPPA＝二苯基磷酰叠氮

Et₃N＝三乙胺

EtOAc＝乙酸乙酯

g＝克

HATU＝ 2-(1H-7-氮杂苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓

六氟磷酸盐

H₂＝氢气

H₂O＝水

HBr＝溴化氢

HCl＝氯化氢

HIV＝人免疫缺陷病毒

HPLC＝高效液相色谱

h＝小时

IgE＝免疫球蛋白E

IC₅₀＝体外抑制50％酶需要的抑制剂的浓度

IPA＝异丙醇

kg＝千克

KCN＝氰化钾

KOH＝氢氧化钾

K₂PO₄＝磷酸钾

LDA＝二异丙胺基锂(lithium diisopropylamine)

LiAlH₄＝氢化铝锂

LiOH＝氢氧化锂

MeCN＝乙腈

MS＝质谱

m/z＝质量与电荷的比例

MHz＝兆赫

MeOH＝甲醇

μM＝微摩尔

μL＝微升

mg＝毫克

mm＝毫升

mM＝毫摩尔

mmol＝毫摩尔

mL＝毫升

mOD/min＝毫光密度单位/分钟

min＝分钟

M＝摩尔

Na₂CO₃＝碳酸钠

ng＝纳克

NaHCO₃＝碳酸氢钠

NaNO₂＝亚硝酸钠

NaOH＝氢氧化钠

Na₂S₂O₃＝硫代亚硫酸钠

Na₂SO₄＝硫酸钠

NBS＝ N-溴代琥珀酰胺

NH₄Cl＝氯化铵

NH₄OAc＝乙酸铵

NaSMe＝甲硫醇钠

NBS＝ N-溴代琥珀酰胺

n-BuLi＝正丁基锂

nm＝纳米

nM＝纳摩尔

N＝当量(Normal)

NMP＝ N-甲基吡咯烷

NMR＝核磁共振

Pd/C＝披钯炭

Pd(PPh₃)₄＝四(三苯基膦)合钯

pM 皮摩尔

Pin＝戊酰(pinacolato)

PEG＝聚乙二醇

PPh₃或Ph₃P＝三苯基膦

RLV＝劳贝尔白血病病毒

Ra-Ni＝ Rainey镍

SOCl₂＝亚硫酰氯

RT＝室温

TEA＝三乙胺

THF＝四氢呋喃

TFA＝三氟乙酸

TLC＝薄层层析

TMS＝三甲基甲硅烷基

Tf＝三氟甲基磺酰基

TSC＝柠檬酸三钠

在本文中应注意，除上下文中另有明确说明外，在本说明书及其权利要求中使用的单数形式“一”和“该”包括复数指代物。

除另有说明外，单独或作为另一个取代基的一部分的“烷基”表示具有指定数目的碳原子的直链或支链全饱和脂族烃基。例如，“C_1-8烷基”是指含1-8个碳原子的通过除去母体烷的单个碳原子上的一个氢原子衍生的直链或支链烃基。短语“未取代的烷基”是指不含全饱和脂族烃基之外的基团的烷基。因此，该短语包括直链烷基，例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基等。该短语还包括支链烷基异构体，例如异丙基、叔丁基、异丁基、仲丁基等。代表性烷基包括具有1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个碳原子的直链和支链烷基。其它代表性烷基包括具有1、2、3、4、5、6、7或8个碳原子的直链和支链烷基。

单独或作为另一个取代基的一部分的“烯基”是指具有指定数目的碳原子的可为单或多不饱和度的直链或支链。例如，“C₂-C₈烯基”表示具有2、3、4、5、6、7或8个原子的通过除去母体烷的单个碳原子上的一个氢原子衍生的烯基。实例包括但不限于乙烯基、2-丙烯基即-CH＝C(H)(CH₃)、-CH＝C(CH₃)₂、-C(CH₃)＝C(H)₂、-C(CH₃)＝C(H)(CH₃)、-C(CH₂CH₃)＝CH₂、丁二烯基例如2-(丁二烯基)、戊二烯基例如2，4-戊二烯基和3-(1，4-戊二烯基)，和己二烯基等，及其高级同系物和立体异构体。“取代的”烯基包括其中非碳或非氢原子与具有碳-碳双键的碳结合的烯基以及其中非碳或非氢原子中的一个与不与碳-碳双键连接的碳结合的那些烯基。各不饱和位点可为环绕双键的顺或反式构型。

单独或作为另一个取代基的一部分的术语“炔基”表示具有标示数目的碳原子的可为单或多不饱和度的直链或支链烃基。例如“C₂-C₈炔基”表示具有2-8个碳原子的通过除去母体烷的单个碳原子上的一个氢原子衍生的炔基。“未取代的炔基”是指直链和支链基团，例如所述以上定义的未取代的烷基但在两个碳原子之间存在至少一个三键的那些基团。实例包括但不限于乙炔基例如-C≡C(H)、1-丙炔基例如-C≡C(CH₃)、-C≡C(CH₂CH₃)、-C(H₂)C≡C(H)、-C(H)₂C≡C(CH₃)和-C(H)₂C≡C(CH₂CH₃)等，及其高级同系物和立体异构体。“取代的”炔基包括其中非碳或非氢原子与具有碳-碳三键的碳结合的炔基以及其中非碳或非氢原子中的一个与不与碳-碳三键连接的碳结合的那些炔基。

单独或作为另一个取代基的一部分的“亚烷基”表示由烷衍生的二价基团，例如-CH₂CH₂CH₂CH₂-。通常，亚烷基具有1、2、3、4、5、6、7或8个碳原子，通过除去母体烷的单个碳原子上的一个氢原子衍生得到。

除另有说明外，单独或与其它术语联合的“环烷基”或“碳环”代表环状形式的“烷基”、“烯基”和“炔基”，其中所有环原子为碳。“环烷基”或“碳环”是指单环或多环基团。当与环烷基取代基联用时，术语“多环”在本文中是指稠合和非稠合的烷基环结构。“环烷基”或“碳环”可形成桥接环或螺环。环烷基可具有一个或多个双键或三键。术语“环烯基”是指在环顶点之间具有至少一个烯基不饱和位点的环烷基。术语“环炔基”是指在环顶点之间具有至少一个炔基不饱和位点的环烷基。当“环烷基”与“烷基”联用时，例如在C_3-8环烷基C_3-8亚烷基-中，环烷基部分具有所述数目的碳原子(例如3-8个碳原子)，而亚烷基部分具有1-8个碳原子。典型的环烷基取代基具有3-8个环原子。环烷基的实例包括环戊基、环己基、1-环己烯基、3-环己烯基、环庚基等。

单独或作为另一个取代基的一部分的“芳基”是指含6-14个碳原子的多不饱和芳族烃基，该基团可为单环或稠合在一起或共价连接的多环(高达3环)。因此，该短语包括但不限于基团例如苯基、联苯基、蒽基、萘基。未取代的芳基的非限制性实例包括苯基、1-萘基、2-萘基和4-联苯基。“取代的芳基”包括例如-CH₂OH(一个碳原子和一个置换碳原子的杂原子)和-CH₂SH。单独或作为另一个取代基的一部分的术语“亚杂烷基”表示由杂烷基衍生的二价基团，例如-CH₂-CH₂-S-CH₂CH₂--和-CH₂-S-CH₂-CH₂-NH-CH₂-。对于亚杂烷基而言，杂原子也可占据链的任一或两个末端(例如亚烷氧基、亚烷二氧基、亚烷氨基、亚烷二氨基等)。再者，对于亚烷基和亚杂烷基连接基团，不指定连接基团的取向。

术语“杂环”、“杂环基”或“杂环状”是指含至少一个杂原子的饱和或不饱和非芳族环基团。本文中使用的术语“杂原子”包括氧(O)、氮(N)、硫(S)和硅(Si)。可在任何可利用的环碳或杂原子上使杂环连接。各杂环可具有一个或多个环。当存在多环时，它们可稠合在一起或共价连接。各杂环通常含1、2、3、4或5个独立选择的杂原子。优选，这些基团含1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子；0、1、2、3、4或5个氮原子；0、1或2个硫原子和0、1或2个氧原子。更优选，这些基团含1、2或3个氮原子；0-1个硫原子和0-1个氧原子。杂环基团的非限制性实例包括吗啉-3-酮、哌嗪-2-酮、哌嗪-1-氧化物、吡啶-2-酮、哌啶、吗啉、哌嗪、异

唑啉(isoxazoline)、吡唑啉、咪唑啉、吡唑-5-酮、吡咯烷-2，5-二酮、咪唑烷-2，4-二酮、吡咯烷、四氢喹啉基、十氢喹啉基、四氢苯并氧氮杂

基(tetrahydrobenzooxazepinyl)、二氢二苯并氧杂

(dihydrodibenzooxepin)等。

“杂芳基”是指含选自N、O和S的1-5个杂原子的环状或多环状芳族基团，其中氮和硫原子任选被氧化，氮原子任选被季铵化。杂芳基可通过杂原子或碳原子与分子的其余部分连接，并可含5-10个碳原子。杂芳基的非限制性实例包括1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、1-吡唑基、3-吡唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、吡嗪基、2-

唑基、4-

唑基、5-

唑基、3-异

唑基、4-异

唑基、5-异

唑基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基和4-嘧啶基。若未具体说明，各上述芳基和杂芳基环系统的取代基选自本文中所述的可接受的取代基。“取代的杂芳基”是指以上定义的未取代的杂芳基，其中一个或多个环原子与例如以上对取代的烷基和取代的芳基描述的非氢原子结合。代表性取代基包括直链和支链烷基-CH₃、-C₂H₅、-CH₂OH、-OH、-OCH₃、-OC₂H₅、-OCF₃、-OC(＝O)CH₃、-OC(＝O)NH₂、-OC(＝O)N(CH₃)₂、-CN、-NO₂、-C(＝O)CH₃、-CO₂H、-CO₂CH₃、-CONH₂、-NH₂、-N(CH₃)₂、-NHSO₂CH₃、-NHCOCH₃、-NHC(＝O)OCH₃、-NHSO₂CH₃、-SO₂CH₃、-SO₂NH₂和卤素。

“双环杂芳基”是指含选自N、O和S的1-5个杂原子的双环芳族基团，其中氮和硫原子任选被氧化，氮原子任选被季铵化。双环杂芳基可通过杂原子或碳原子与分子的其余部分连接，并可含5-10个碳原子。双环杂芳基的非限制性实例包括5-苯并噻唑基、嘌呤基、2-苯并咪唑基、苯并吡唑基、5-吲哚基、吖吲哚(azaindole)、1-异喹啉基、5-异喹啉基、2-喹喔啉基、5-喹喔啉基、3-喹啉基和6-喹啉基。若未具体说明，各上述芳基和杂芳基环系统的取代基选自本文中所述的可接受的取代基。

在标示原子数目以上各实施方案中，例如“C_1-8”是指包括具有少一个(one fewer)原子的所有可能的实施方案。非限制性实例包括C_1-7、C_2-8、C_2-7、C_3-8、C_3-7等。

除另有说明外，本文中各术语(例如“烷基”、“杂烷基”、“芳基”和“杂芳基”)包括“未取代”和任选“取代”形式的所述基团。除另有说明外，通常，各基团可以被0、1、2、3、4或5个取代基取代。以下提供各类型基团的取代基的实例。

“取代的”是指其中连接碳或氢的一个或多个键被连接非氢和非碳原子“取代基”的键置换的本文中定义的基团，非氢和非碳原子为例如但不限于：卤素原子，例如F、Cl、Br和I；基团例如羟基、烷氧基、芳氧基和酰氧基中的氧原子；基团例如硫醇基、烷基和芳基硫醚基团、砜基团、磺酰基和亚砜基团中的硫原子；基团例如氨基、烷基胺、二烷基胺、芳基胺、烷基芳基胺、二芳基胺、烷氧基氨基、羟基氨基、酰基氨基、磺酰基氨基、N-氧化物、亚胺和烯胺中的氮原子；和各种其它基团中的其它杂原子。“取代基”还包括其中连接碳或氢的一个或多个键被被连接杂原子的高级键(例如双键或三键)置换的基团，杂原子为例如：氧代、酰基、酰氨基、烷氧基羰基、氨基羰基、羧基和酯基中的氧；基团例如亚胺、肟、腙和腈中的氮。“取代基”还包括其中连接碳或氢的一个或多个键被连接环烷基、杂环基、芳基和杂芳基的键置换的基团。代表性“取代基”包括但不限于其中连接碳或氢的一个或多个键被连接氟、氯或溴基团的键置换的基团。另一个代表性“取代基”是三氟甲基和含三氟甲基的其它基团。其它代表性“取代基”包括那些其中连接碳或氢的一个或多个键被连接氧原子的键置换的取代基，从而使取代的烷基含羟基、烷氧基或芳氧基。其它代表性“取代基”包括烷基，此类烷基具有胺，或取代或未取代的烷基胺、二烷基胺、芳基胺、(烷基)(芳基)胺、二芳基胺、杂环基胺、二杂环基胺、(烷基)(杂环基)胺或(芳基)(杂环基)胺基团。其它代表性“取代基”包括那些其中连接碳或氢的一个或多个键被连接烷基、环烷基、芳基、杂芳基或杂环基的键置换的取代基。

本文中定义的基团可包括本领域中常用的前缀和/或后缀，以形成其它公认的取代基。例如，“烷基氨基”是指式-NR^aR^b基团。除另有说明外，对于含R^a、R^b、R^c、R^d和R^e的基团而言，R^a和R^b各自独立选自H、烷基、烷氧基、硫代烷氧基、环烷基、芳基、杂芳基或杂环基，或任选与它们所连接的原子连接在一起形成环状基团。当R^a和R^b与同一个氮原子连接时，它们可与该氮原子一起形成5元、6元或7元环。例如，-NR^aR^b包括1-吡咯烷基和4-吗啉基。

R^c、R^d、R^e和R^f各自独立选自本文中定义的烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、杂环基或亚烷基芳基。

通常，特定基团具有0、1、2或3个取代基，在本发明中，优选具有2个或更少取代基的那些基团。更优选，基团未被取代或一取代。最优选，基团未被取代。

烷基和杂烷基(以及称为亚烷基、烯基、亚杂烷基、杂烯基、炔基、环烷基、杂环基的那些基团)的“取代基”可为选自以下的多种基团：-OR^a、＝O、＝NR^a、＝N-OR^a、-NR^aR^b、-SR^a、卤素、-SiR^aR^bR^c、-OC(O)R^a、-C(O)R^a、-CO₂R^a、-CONR^aR^b、-OC(O)NR^aR^b、-NR^bC(O)R^a、-NR^a-C(O)NR^bR^c、-NR^a-SO₂NR^bR^c、-NR^bCO₂R^a、-NH-C(NH₂)＝NH、-NR^aC(NH₂)＝NH、-NH-C(NH₂)＝NR^a、-S(O)R^a、-SO₂R^a、-SO₂NR^aR^b、-NR^bSO₂R、-CN和-NO₂，取代基的数目为0-3，尤其优选具有0、1和2个取代基的基团。

在某些实施方案中，烷基和杂烷基的“取代基”选自：-OR^a、＝O、-NR^aR^b、-SR^a、卤素、-SiR^aR^bR^c、-OC(O)R^a、-C(O)R^a、-CO₂R^a、-CONR^aR^b、-OC(O)NR^aR^b、-NR^bC(O)R^a、-NR^bCO₂R^a、-NR^a-SO₂NR^bR^c、-S(O)R^a、-SO₂R^a、-SO₂NR^aR^b、-NR^cSO₂R、-CN和-NO₂，其中R^a和R^b定义同上。在某些实施方案中，取代基选自：-OR^a、＝O、-NR^aR^b、卤素、-OC(O)R^a、-CO₂R^a、-CONR^aR^b、-OC(O)NR^aR^b、-NR^bC(O)R^a、-NR^bCO₂R^a、-NR^a-SO₂NR^bR^c、-SO₂R^a、-SO₂NR^aR^b、-NR″SO₂R、-CN和-NO₂。

取代的烷基的实例为：-(CH₂)₃NH₂、-(CH₂)₃NH(CH₃)、-(CH₂)₃NH(CH₃)₂、-CH₂C(＝CH₂)CH₂NH₂、-CH₂C(＝O)CH₂NH₂、-CH₂S(＝O)₂CH₃、-CH₂OCH₂NH₂、-CO₂H。取代的烷基的取代基的实例为：CH₂OH、-OH、-OCH₃、-OC₂H₅、-OCF₃、-OC(＝O)CH₃、-OC(＝O)NH₂、-OC(＝O)N(CH₃)₂、-CN、-NO₂、-C(＝O)CH₃、-CO₂H、-CO₂CH₃、-CONH₂、-NH₂、-N(CH₃)₂、-NHSO₂CH₃、-NHCOCH₃、-NHC(＝O)OCH₃、-NHSO₂CH₃、-SO₂CH₃、-SO₂NH₂和卤素。

同样，芳基和杂芳基的“取代基”有多种，选自：-卤素、-OR^a、-OC(O)R^a、-NR^aR^b、-SR^a、-R^a、-CN、-NO₂、-CO₂R^a、-CONR^aR^b、-C(O)R^a、-OC(O)NR^aR^b、-NR^bC(O)R^a、-NR^bC(O)₂R^a、-NR^a-C(O)NR^bR^c、-NH-C(NH₂)＝NH、-NR^aC(NH₂)＝NH、-NH-C(NH₂)＝NR^a、-S(O)R^a、-S(O)₂R^a、-S(O)₂NR^aR^b、-N₃、-CH(Ph)₂、全氟代C_1-8烷氧基和全氟代C_1-8烷基，取代基的数目为0至芳环系统上的开放价键总数；其中R^a、R^b和R^c独立选自氢、C_1-6烷基和杂烷基、未取代的芳基和杂芳基、(未取代的芳基)-C_1-8烷基和(未取代的芳基)氧基-C_1-8烷基。

芳基或杂芳基环的相邻原子上的2个“取代基”可任选被式-T-C(O)-(CH₂)_q-U-的取代基置换，其中T和U独立为-NH-、-O-、-CH₂-或单键，q为0、1或2。或者，芳基或杂芳基环的相邻原子上的2个取代基任选被式-A-(CH₂)_r-B-的取代基置换，其中A和B独立为-CH₂-、-O-、-NH-、-S-、-S(O)-、-S(O)₂-、-S(O)₂NR^a-或单键，r为1、2或3。由此形成的新环的单键中的一个任选被双键代替。或者，芳基或杂芳基环的相邻原子上的2个取代基任选被式-(CH₂)_s-X-(CH₂)_t--的取代基置换，其中s和t独立为0-3的整数，X为-O-、-NR^a-、-S-、-S(O)-、-S(O)₂-或-S(O)₂NR^a-。-NR^a-和-S(O)₂NR^a-中的取代基R^a选自氢或未取代的C_1-6烷基。另外，R′定义同上。

除另有说明外，通过依次命名官能团的末端部分和与连接点相邻的官能团对本文中未明确定义的取代基命名。例如，取代基“芳基烷基氧基羰基”是指基团(芳基)-(烷基)-O-C(O)-。

术语“酰基”是指基团-C(＝O)R^c，其中R^c为烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基或杂环基。酰基包括“乙酰基”-C(＝O)CH₃。

“酰基氨基-”是指基团-NR^aC(＝O)R^c，其中R^c为烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基或杂环基。

“酰氧基”是指-OC(＝O)-R^c，其中R^c为烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基或杂环基。

“烷氧基”是指-OR^d，其中R^d为本文中定义的烷基。烷氧基的代表实例包括甲氧基、乙氧基、叔丁氧基、三氟甲氧基等。

“烷氧基氨基”是指基团-NHOR^d，其中R^d为烷基。

“烷氧基亚烷基氨基”是指基团-NR^a-亚烷基-OR^d，其中R^d为烷基，-NR^a-定义为氨基。

“烷氧基羰基”是指-C(＝O)OR^d，其中R^d为烷基。代表性烷氧基羰基包括例如下示那些基团。

结合本文中的公开内容，这些烷氧基羰基可被进一步取代对具有有机和药物化学技能的技术人员而言是显而易见的。

“烷氧基羰基亚烷基”是指基团-亚烷基-C(＝O)OR^d，其中R^d为烷基。

“烷氧基羰基氨基”是指-NR^aC(＝O)OR^d，其中R^d为烷基。

“烷氧基羰基氨基亚烷基”是指-亚烷基-NR^aC(＝O)OR^d，其中R^d为烷基。

“烷氧基羰基亚烷基氨基磺酰基”是指-SO₂NR^a-亚烷基C(＝O)OR^d，其中R^d为烷基。

“烷氧基磺酰基氨基”是指基团-NR^aS(＝O)₂-OR^d，其中R^d为烷基。

“烷基羰基”是指基团-C(＝O)R^c，其中R^c为烷基

“烷基羰基氧基”是指-OC(＝O)-R^c，其中R^c为烷基。

“烷基羰基氨基”是指-NR^aC(＝O)R^c，其中R^c为烷基。代表性烷基羰基氨基包括例如-NHC(＝O)CH₃、-NHC(＝O)CH₂CH₃、-NHC(＝O)CH₂NH(CH₃)、-NHC(＝O)CH₂N(CH₃)₂或-NHC(＝O)(CH₂)₃OH。

“烷基杂环基”是指基团-杂环基-R^d，其中R^d为烷基。

“烷基杂环基亚烷基”是指基团-亚烷基-杂环基-R^d，其中R^d为烷基。

“烷基硫烷基”、“烷硫基”或“硫代烷氧基”是指基团S-R^d，其中R^d为烷基。

“烷基亚磺酰基”是指-S(＝O)R^e，其中R^e为烷基。应用于本发明化合物的烷基磺酰基基团通常为C_1-6烷基亚磺酰基。

“烷基磺酰基”是指-S(＝O)₂R^e，其中R^e为烷基。用于本发明化合物的烷基磺酰基通常为C_1-6烷基磺酰基。

“烷基磺酰基亚烷基”是指-亚烷基-S(＝O)₂R^e，其中R^e为烷基。应用于本发明化合物的烷基磺酰基通常为C_1-6烷基磺酰基。

“烷基磺酰基氨基”是指-NR^aS(＝O)₂-R^e，其中R^e为烷基。

“炔氧基”是指-O-炔基，其中炔基定义同本文。炔氧基包括例如乙炔氧基、丙炔氧基等。

“脒基”是指基团-C(＝NR^a)NR^bR^c，其中R^b和R^c独立选自氢、烷基、取代的烷基、烯基、炔基、芳基、环烷基、环烯基、杂芳基、杂环，其中R^b和R^c任选与它们连接的氮一起形成杂环或取代的杂环。R^a选自氢、烷基、烯基、炔基、环炔基、芳基、环烷基、环烯基、杂芳基、杂环、取代的杂环、硝基、亚硝基、羟基、烷氧基、氰基、-N＝N-N-烷基、-N(烷基)SO₂-烷基、-N＝N＝N-烷基、酰基和-SO₂-烷基。

“氨基”是指一价基团-NR^aR^b或二价基团-NR^a-。该术语包括“烷基氨基”，指基团-NR^aR^b，其中R^a为烷基，R^b为H或烷基。该术语也包括“芳基氨基”，指基团-NR^aR^b，其中R^a或R^b中的至少一个为芳基。该术语同样包括“(烷基)(芳基)氨基”，指基团-NR^aR^b，其中R^a为烷基，R^b为芳基。另外，对于二烷基氨基而言，烷基部分可相同或不同，且也可和与它们各自连接的氮原子一起形成3-7元环。因此，以-NR^aR^b代表的基团包括哌啶基、吡咯烷基、吗啉基、氮杂环丁烷基等。

“氨基烷氧基”是指-O-亚烷基-NR^aR^b。

“氨基亚烷基”是指-亚烷基-NR^aR^b.

“氨基亚烷基羰基”是指-C(＝O)-亚烷基-NR^aR^b。

“氨基亚烷基氨基羰基”是指-C(＝O)NR^a-亚烷基-NR^aR^b。

“氨基芳基”是指-芳基-NR^aR^b。

“氨基羰基”或“氨基酰基”是指酰胺-C(＝O)-NR^aR^b。术语“烷基氨基羰基”在本文中是指基团-C(＝O)-NR^aR^b，其中R^a为烷基，R^b为H或烷基。术语“芳基氨基羰基”在本文中是指基团-C(＝O)-NR^aR^b，其中R^a或R^b为芳基。代表性氨基羰基包括例如下示那些基团。结合本文中内容，这些氨基羰基可被进一步取代对具有有机和药物化学技能的技术人员而言是显而易见的。

“氨基羰基烷氧基”是指-O-亚烷基-C(＝O)-NR^aR^b，其中R^a为氢或烷基，并且R^a和R^b独立选自氢、烷基、烯基、炔基、芳基、环烷基、环烯基、杂芳基和杂环，其中R^a和R^b任选与它们连接的氮一起形成杂环或取代的杂环基团。

“氨基羰基亚烷基”是指-亚烷基-C(＝O)-NR^aR^b，其中R^a为氢或烷基，并且R^a和R^b独立选自氢、烷基、烯基、炔基、芳基、环烷基、环烯基、杂芳基和杂环，其中R^a和R^b任选与它们连接的氮一起形成杂环或取代的杂环基团。

“氨基羰基亚烷基氨基磺酰基”是指-S(O)₂NR^a-亚烷基-C(＝O)-NR^aR^b，其中R^a为氢或烷基，并且R^a和R^b独立选自氢、烷基、烯基、炔基、芳基、环烷基、环烯基、杂芳基和杂环，其中R^a和R^b任选与它们连接的氮一起形成杂环或取代的杂环基团。

“氨基羰基氨基”是指基团-NR^aC(O)NR^aR^b，其中R^a为氢或烷基，R^a和R^b独立选自氢、烷基、烯基、炔基、芳基、环烷基、环烯基、杂芳基、杂环，且其中R^a和R^b任选与它们连接的氮一起形成形成杂环或取代的杂环基。

“氨基羰基氨基亚烷基”是指基团-亚烷基-NR^aC(O)NR^aR^b，其中R^a为氢或烷基，并且R^a和R^b独立选自氢、烷基、烯基、烃基、芳基、环烷基、环烯基、杂芳基和杂环基，其中R^a和R^b任选与它们连接的氮一起形成杂环基或取代的杂环基基团。

“氨基羧基亚烷基”是指基团-亚烷基-OC(O)NR^aR^b，其中R^a为氢或烷基，并且R^a和R^b独立选自氢、烷基、烯基、炔基、芳基、环烷基、环烯基、杂芳基和杂环基，其中R^a和R^b任选与它们连接的氮一起形成杂环基或取代的杂环基团。

“氨基磺酰基”是指-S(O)₂NR^aR^b，其中R独立选自氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、环烷基、取代的环烷基、环烯基、取代的环烯基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环、取代的杂环，且其中R^a和R^b任选与它们连接的氮一起形成杂环或取代的杂环基，烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、环烷基、取代的环烷基、环烯基、取代的环烯基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环和取代的杂环定义同本文。

“氨基磺酰基亚烷基”是指-亚烷基-S(O)₂NR^aR^b其中R独立选自氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、环烷基、取代的环烷基、环烯基、取代的环烯基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环、取代的杂环，其中R^a和R^b任选与它们连接的氮一起形成杂环基或取代杂环基团，烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、环烷基、取代的环烷基、环烯基、取代的环烯基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基如本文定义。

术语“烷基氨基磺酰基”在本文中指基团-S(O)₂NR^aR^b，其中R^a为氢，R^b为氢或烷基。术语“烷基芳基磺酰基”在本文中指基团-S(O)₂NR^aR^b，其中R^a或R^b为烷基芳基。

“氨基磺酰氧基”是指基团-O-SO₂NR^aR^b，其中R^a和R^b独立选自氢、烷基、烯基、炔基、芳基、环烷基、环烯基、杂芳基和杂环；R^a和R^b任选与它们连接的氮一起形成杂环或取代的杂环基。

“氨基磺酰基氨基”是指基团-NR^a-SO₂NR^bR^c，其中R^a为氢或烷基，R^b和R^c独立选自氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、环烷基、取代的环烷基、环烯基、取代的环烯基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环和取代的杂环，且其中R^b和R^c任选与它们连接的氮一起形成杂环或取代的杂环基，且其中烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、环烷基、取代的环烷基、环烯基、取代的环烯基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环和取代的杂环定义同本文。

“氨基硫代羰基”是指基团-C(S)NR^aR^b，其中R^a和R^b独立选自氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、环烷基、取代的环烷基、环烯基、取代的环烯基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环和取代的杂环，且其中R^a和R^b任选与它们连接的氮一起形成杂环或取代的杂环，且其中烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、环烷基、取代的环烷基、环烯基、取代的环烯基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环和取代的杂环定义同本文。

“氨基硫代羰基氨基”是指基团-NR^aC(S)NR^aR^b，其中R^a为氢或烷基，R^b和R^c任选与它们连接的氮一起形成杂环或取代的杂环。

“芳基烷氧基羰基氨基”是指基团-NR^aC(＝O)O-亚烷基-R^c，其中R^c为芳基。

“芳基羰基”是指基团-C(＝O)R^c，其中R^c为芳基。

“芳基羰基氨基”是指-NR^aC(＝O)R^c，其中R^c为芳基。

“芳基羰基氧基”是指-OC(＝O)-R^c，其中R^c为芳基。

“芳氧基”是指-OR^d，其中R^d为芳基。芳氧基的代表实例包括苯氧基、萘氧基等。

“芳氧基羰基”是指-C(＝O)OR^d，其中R^d为芳基。

“芳氧基羰基氨基”是指-NR^aC(＝O)OR^d，其中R^d为芳基。

“芳基硫烷基”、“芳硫基”或“硫代芳氧基”是指基团S-R^d，其中R^d为芳基。

“芳基磺酰基”是指-S(＝O)₂R^e，其中R^e为芳基。

“芳基磺酰基氨基”是指-NR^aS(＝O)₂-R^e，其中R^e为芳基。

“芳硫基”是指基团-S-芳基，其中芳基定义同本文。在其它实施方案中，硫可氧化为-S(O)-或-SO₂-部分。亚砜可以一种或多种立体异构体形式存在。

“叠氮基”是指-N₃。

当在Markush组(group)中作为一个元素使用时，“键”表示相应的基团不存在，位于两端的基团直接连接。

“羰基”是指二价基团-C(＝O)-。

“羧基”是指基团-CO₂H。

“羧基亚烷基”是指基团-亚烷基-CO₂H。

“羧基亚烷基磺酰基氨基”是指基团-NR^aSO₂-亚烷基-CO₂H。

“羧基酯”或“羰基烷氧基”是指基团-C(＝O)OR^c。

“(羧基酯)氨基”是指基团-NR^a-C(O)OR^c，其中R^a为烷基或氢。

“(羧基酯)氧基”或“碳酸酯”是指基团-O-C(＝O)OR^c。

“氰基”是指-CN。

“氰基亚烷基羰基”是指-C(＝O)-亚烷基-CN。

“环烷氧基”是指-OR^d，其中R^d为环烷基。

“环烷氧基羰基”是指-C(＝O)OR^d，其中R^d为环烷基。

“环烷氧基羰基氨基”是指-NR^aC(＝O)OR^d，其中R^d为环烷基。

“环烷基亚烷基”是指基团-R^xR^y，其中R^x为本文定义的亚烷基，R^y为本文定义的环烷基，例如环丙基甲基、环己烯基丙基、3-环己基-2-甲基丙基等。

“环烷基羰基”是指基团-C(＝O)R^c，其中R^c为环烷基。

“环烷基羰基氨基”是指-NR^aC(＝O)R^c，其中R^c为环烷基。

“环烷基羰基氧基”是指-OC(＝O)-R^c，其中R^c为环烷基。

“环烷基磺酰基氨基”是指-NR^aS(＝O)₂-R^e，其中R^e为环烷基。

“环烷硫基”是指-S-环烷基。在其它实施方案中，硫可氧化为-S(O)-或-SO₂-。亚砜可以一种或多种立体异构体形式存在。

“环烯氧基”是指-O-环烯基。

“环烯硫基”是指-S-环烯基。在其它实施方案中，硫可氧化为亚磺酰基或磺酰基。亚砜可以一种或多种立体异构体形式存在。

“酯”是指-C(＝O)OR^d，其中R^d为烷基、环烷基、芳基、杂芳基或杂环基。

“胍基”是指基团-NHC(＝NH)NH₂。

除另有说明外，单独或作为另一个取代基的一部分的“卤代”或“卤素”表示氟、氯、溴或碘原子。另外，术语例如“卤代烷基”指其中一个或多个氢被可相同或不同的卤素原子取代的烷基，卤素原子的数目为1至高达允许的卤素的最大数目，例如，对于烷基而言，数目为(2m′+1)，其中m′为烷基中碳原子的总数。例如，术语“卤代C_1-8烷基”包括三氟甲基、2，2，2-三氟乙基、4-氯丁基、3-溴丙基等。除另有说明外，术语“全卤代烷基”表示被(2m′+1)卤素原子取代的烷基，其中m′为烷基中碳原子的总数。例如，术语“全卤代C_1-8烷基”包括三氟甲基、五氯乙基、1，1，1-三氟-2-溴-2-氯乙基等。另外，术语“卤代烷氧基”是指被一个或多个卤素原子取代的烷氧基。

“杂烷基”表示含1、2或3个取代基的本文中定义的烷基，所述取代基独立选自氰基、-OR^w、-NR^xR^y和-S(O)_nR^z(其中n为0-2的整数)，须理解，杂烷基的连接点通过杂烷基的碳原子。R^w为氢、烷基、环烷基、环烷基-烷基、芳基、芳烷基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、甲酰氨基或一或二烷基氨基甲酰基。R^x为氢、烷基、环烷基、环烷基-烷基、芳基或芳烷基。R^y为氢、烷基、环烷基、环烷基-烷基、芳基、芳烷基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、甲酰氨基、一或二烷基氨基甲酰基或烷基磺酰基。R^z为氢(前提是n为0)、烷基、环烷基、环烷基-烷基、芳基、芳烷基、氨基、一烷基氨基、二烷基氨基或羟基烷基。代表性实例包括例如2-羟基乙基、2，3-二羟基丙基、2-甲氧基乙基、苄氧基甲基、2-氰基乙基和2-甲基磺酰基-乙基。对于以上各基团而言，R^w、R^x、R^y和R^z可被以下基团进一步取代：氨基、氟、烷基氨基、二烷基氨基、OH或烷氧基。另外，标示碳原子数目的前缀(例如C1-C10)是指除氰基、-OR^w、-NR^xR^y或-S(O)nR^z部分外的杂烷基部分中的碳原子总数。

“杂芳基烯基”是指基团-烯基-R^c，其中R^c是指杂芳基。

“杂芳基羰基”是指基团-C(＝O)R^c，其中R^c为杂芳基。

“杂芳基羰基氨基”是指-NR^aC(＝O)R^c，其中R^c为杂芳基。

“杂芳基羰基氧基”是指-OC(＝O)-R^c，其中R^c为杂芳基。

“杂芳氧基”是指-OR^d，其中R^d为杂芳基。

“杂芳氧基羰基”是指-C(＝O)OR^d，其中R^d为杂芳基。

“杂芳氧基羰基氨基”是指-NR^aC(＝O)OR^d，其中R^d为杂芳基。

“杂芳基磺酰基氨基”是指-NR^aS(＝O)₂-R^e，其中R^e为杂芳基。

“杂芳硫基”是指-S-杂芳基。在其它实施方案中，硫可氧化为-S(O)-或-SO₂-部分。亚砜可以一种或多种立体异构体形式存在。

“杂环基烷基”或“环杂烷基-烷基”表示基团-R^xR^y，其中R^x为本文定义的亚烷基，R^y为本文定义的杂环基，例如四氢吡喃-2-基甲基、4-(4-取代的-苯基)哌嗪-1-基甲基、3-哌啶基乙基等。

“杂环氧基羰基氨基”是指-NR^aC(＝O)OR^d，其中R^d为杂环基。

“杂环基羰基”是指-C(＝O)R^c，其中R^c为杂环基。

“杂环基羰基氨基”是指-NR^aC(＝O)R^c，其中R^c为杂环基。

“杂环基羰基氧基”是指-OC(＝O)-R^c，其中R^c为杂环基。

“杂环基氧基”是指-OR^d，其中R^d为杂环基。

“杂环基氧基羰基”是指-C(＝O)OR^d，其中R^d为杂环基。

“杂环基磺酰基”是指-S(＝O)₂R^e，其中R^e为杂环基。

“杂环基磺酰基氨基”是指-NR^aS(＝O)₂-R^e，其中R^e为杂环基。

“杂环硫基”是指基团-S-杂环基。在其它实施方案中，硫可氧化为-S(O)-或-SO₂-部分。亚砜可以一种或多种立体异构体形式存在。

“羟基”是指基团-OH。

“羟基亚烷基”是指基团-亚烷基-OH。

“羟基亚烷基氨基”是指基团-NR^a-亚烷基-OH。

“羟基亚烷基氨基羰基”是指基团-C(＝O)NR^a-亚烷基-OH。

“羟基亚烷基氨基磺酰基”是指基团-SO₂NR^a-亚烷基-OH。

“羟基氨基”是指基团-NHOH。

“羟基亚烷基羰基氨基”是指基团-NR^aC(＝O)-亚烷基-OH。

“亚胺基”是指基团＝NR^a。

“硝基”是指-NO₂。

“亚硝基”是指基团-NO。

在本说明书全文中使用的术语“任选的”或“任选”表示随后描述的事件或环境可发生但不一定发生，该表述包括其中事件或环境发生的情况和其中事件或环境不发生的情况。例如，“任选被烷基一或二取代的杂环基表示烷基可以存在，但不一定存在，且该表述包括其中杂环基被烷基一或二取代的情况和其中杂环基未被烷基取代的情况。

“任选取代的”表示任选独立被取代基取代的环。未取代的基团的位点可被氢取代。

“氧代”是指二价基团＝O。

“硫烷基”是指基团-SR^f，其中R^f定义同本文。

“亚磺酰基”是指基团-S(＝O)-R^e，其中R^e定义同本文。

“磺酸”是指基团-S(O)₂-OH。

“磺酰基”是指基团-S(O)₂-R^e，其中R^e定义同本文。

“磺酰基氨基”是指-NR^aS(＝O)₂-R^e，其中R^a选自氢、烷基、烯基、炔基、芳基、环烷基、环烯基、杂芳基和杂环基，R^e定义同本文。

“磺酰氧基”是指基团-OSO₂-R^c。

具有相同分子式但它们的性质或原子结合顺序或它们的原子在空间的排列不同的化合物称为“异构体”。它们的原子在空间排列不同的异构体称为“立体异构体”。“立体异构体”是指如果它们具有一个或多个不对称中心或不对称取代的双键从而可产生单个立体异构体或混合物，以不同立体异构式存在的化合物。立体异构体包括对映体和非对映体。互不为镜像的立体异构体称为“非对映体”，彼此镜像不叠加的那些立体异构体称为“对映体”。当化合物具有不对称中心时，例如，与4个不同基团结合时，可存在对映体对。可通过其不对称中心的绝对构型表征对映体，通过Cahn和Prelog的R-和S-定序规则或通过分子使偏振光平面旋转的方式描述对映体，以右旋或左旋表示(即分别为(+)或(-)-异构体)。手性化合物可按单个对映体或其混合物的形式存在。含相等比例对映体的混合物称为“外消旋混合物”。除另有说明外，该表述包括单个立体异构体和混合物。测定立体化学和分离立体异构体的方法在本领域中熟知(参见在Advanced Organic Chemistry的第4章中的论述，第4版，J.March，John Wiley and Sons，New York，1992)，所述立体异构体在一个或多个立体中心上的手性不同。

“硫酰基”是指基团R^a-C(S)-。

“硫醇”是指基团-SH。

“互变异构体”是指质子位置不同的分子的变化形式例如烯醇-酮和亚胺-烯胺互变异构体，或含-N＝C(H)-NH-环原子排列的杂芳基的互变异构形式，例如吡咯、咪唑、苯并咪唑、三唑和四唑。本领域普通技术人员会认识到，可存在其它互变异构的环原子排列。

可以理解，在以上定义的所有取代的基团中，通过对取代基的取代基进行定义获得的聚合形式(例如具有取代的芳基取代基的取代的芳基，该取代基本身被取代的芳基取代，取代的芳基又被取代的芳基等取代)不包括在本文中。在此类情况中，此类取代的最大数目为3。例如，取代的芳基的系列取代限于-取代的芳基-(取代的芳基)-取代的芳基。

“保护基团”是指当与分子中的反应性官能团连接时能够掩盖、减少或阻止官能团的反应性的原子基团。通常，在合成期间，可根据需要将保护基团选择性除去。保护基的实例可在Greene and Wuts，有机化学中的保护基团(Protective Groups in Organic Chemistry)，第3版.，1999，John Wiley&Sons，NY and Harrison等，合成有机方法概要(Compendium of Synthetic Organic Methods)，Vols.第1-8卷，1971-1996，John Wiley&Sons，NY中找到。代表性氨基保护基包括但不限于甲酰基、乙酰基、三氟乙酰基、苄基、苄氧基羰基(“CBZ”)、叔丁氧基羰基(“Boc”)、三甲基甲硅烷基(“TMS”)、2-三甲基甲硅烷基-乙磺酰基(“TES”)、三苯甲基和取代的三苯甲基、烯丙氧基羰基、9-芴基甲氧基羰基(“FMOC”)、硝基-藜芦基氧基羰基(“NVOC”)。代表性羟基保护基包括但不限于其中羟基被酰化或烷化的那些基团，例如苄基和三苯甲基醚以及烷基醚、四氢吡喃基醚、三烷基甲硅烷基醚(例如TMS或TIPPS基团)和烯丙基醚。

术语“药学上可接受的盐”包括根据本文中所述化合物上存在的特定取代基采用相对无毒的酸或碱制备的活性化合物的盐。当本发明化合物含相对酸性的官能团时，可通过使中性形式的这种化合物与足量的需要的碱单独或在合适的惰性溶剂中接触得到碱加成盐。由药学上可接受的无机碱衍生的盐的实例包括铝、铵、钙、铜、三价铁、亚铁、锂、镁、锰、二价锰、钾、钠、锌等。由药学上可接受的有机碱衍生的盐包括伯、仲和叔胺的盐，它们包括取代的胺、环胺、天然胺等，例如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N，N’-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙基氨基乙醇、2-二甲基氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡萄糖胺、葡糖胺、组氨酸、哈胺(hydrabamine)、异丙胺、赖氨酸、甲基葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三醇等。当本发明化合物含相对碱性的官能团时，可通过使中性形式的这种化合物与足量的需要的酸单独或在合适的惰性溶剂中接触得到酸加成盐。药学上可接受的酸加成盐的实例包括由无机酸衍生的那些盐，无机酸盐例如盐酸盐、氢溴酸盐、硝酸盐、碳酸盐、碳酸氢盐、磷酸盐、磷酸氢盐、磷酸二氢盐、硫酸盐、硫酸氢盐、氢碘酸盐或亚磷酸盐等；由相对无毒的有机酸衍生的盐，所述有机酸为例如乙酸、丙酸、异丁酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、富马酸、扁桃酸、苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、柠檬酸、酒石酸、甲磺酸等。还包括氨基酸例如精氨酸等的盐以及有机酸例如葡糖醛酸或半乳糖酸等的盐(参见例如Berge，S.M等，药用盐(“Pharmaceutical Salts，”)Journal of Pharmaceutical Science，66：1-19，1977)。本发明某些特殊化合物含碱性和酸性官能团，这使得化合物可以转化为碱或酸加成盐。

可通过使盐与碱或酸接触再按常规方式分离母体化合物，重新得到中性形式的化合物。化合物的母体形式的某些物理性质例如在极性溶剂中的溶解度与各种盐形式的不同，但对于本发明目的，盐等同于母体形式的化合物。

除盐形式外，本发明提供前药酯形式的化合物。本文中所述化合物的“前药”是在生理环境下容易发生化学变化得到本发明化合物的那些化合物。另外，可通过在离体环境中用化学或生物化学方法将前药转化为本发明化合物。例如，当置于含合适的酶或化学试剂的透皮贴剂储库时，可将前药缓慢转化为本发明化合物。前药经常在转化为活性药物前是药理学惰性化合物，但这种情况并非必须。通常通过将药物中可能是活性所部分需要的官能团用“前体基团(progroup)”(以下定义的)掩盖，形成可以经过转化(例如在特定使用条件下裂解)释放官能团从而得到活性药物的“前体部分(promoiety)”，获得前药。可对前体部分例如通过水解反应，或通过另一种作用物(例如酶、光、酸或碱)或物理或环境参数改变(例如温度改变)或暴露于物理或环境参数将其催化或诱导，进行自发性裂解。作用物相对于使用环境可以是内源性的，例如存在于给予前药的细胞内的酶或胃的酸性环境，或可由外源提供。

“前体基团”是指当用于掩盖活性药物中的官能团形成“前体部分”时能够将药物转化为前药的一类保护基团。前体基团通常通过键与药物的官能团连接，所述键在特定使用条件下可裂解。因此，前体基团为前体部分的一部分，该前体部分在特定使用条件下裂解，释放官能团。作为特定实例，式-NH-C(O)CH₃的酰胺前体部分包含前体基团-C(O)CH₃。

适合掩盖活性syk和/或JAK选择性抑制化合物中官能团以得到前药的很多种前体基团和得到的前体部分在本领域中熟知。例如，可将羟基官能团掩盖变为磺酸酯、酯(例如乙酸酯或马来酸酯)或碳酸酯前体部分，该前体部分可在体内水解，得到羟基。可将氨基官能团掩盖变为酰胺、氨基甲酸酯、亚胺、脲、苯膦基、磷酰基或氧硫基前体部分，它们可在体内水解，得到氨基。可将羧基掩盖成为酯(包括甲基、乙基、新戊酰氧基甲基、甲硅烷基酯和硫代酸酯)、酰胺或酰肼前体部分，它们可在体内水解得到羧基。本发明包括本领域中已知的用于改变溶解度或水解特性的那些酯和酰基，以用作缓释或前药制剂。合适的前体基团和它们的相应前体部分的特定实例对本领域技术人员而言是显而易见的

本发明某些化合物可以非溶剂化形式和包括水合形式在内的溶剂化形式存在。“溶剂化物”是指由溶剂分子与溶质的分子或离子结合形成的复合物。溶剂可为有机化合物、无机化合物或二者的混合物。溶剂的某些实例包括但不限于甲醇、N，N-二甲基甲酰胺、四氢呋喃、二甲亚砜和水。一般而言，溶剂化形式等同于非溶剂化形式，并包括在本发明范围内。本发明某些化合物可以多晶形或无定形形式存在。一般而言，对于本发明设想的用途，所有物理形式均相同并在本发明范围内。

本发明某些化合物具有不对称碳原子(旋光中心)或双键；外消旋体、非对映体、几何异构体、区域异构体和单个异构体(例如分离的对映体)均包括在本发明范围内。可用常规方法将这些异构体拆分或不对称合成，以使异构体“旋光纯”，即基本上不含它的其它异构体。例如，如果需要本发明化合物的特定对映体，可通过不对称合成制备，或通过用手性助剂衍生化，其中将得到的非对映异构的混合物分离，再将助剂基团裂解得到纯的需要的对映体。或者，当分子含碱性官能团例如氨基或酸性官能团例如羧基时，用适当的旋光活性酸或碱形成不对称异构的盐，然后通过本领域中熟知的分级结晶或色谱方法将由此形成的非对映体拆分，然后回收纯对映体。

本发明化合物也可在构成该化合物的一个或多个原子中含非正常比例的原子同位素。例如，可将化合物用放射性同位素例如氚(3H)、碘-125(¹²⁵I)或碳-14(¹⁴C)标记。无论是否具有放射性，本发明化合物的所有同位素形式均包括在本发明范围内。

术语“给予”是指口服给药；以栓剂、局部接触、静脉内、腹膜内、肌内、病变内(intralesional)、鼻内方式给药或皮下给药，或向患者体内植入缓释装置例如微型渗透泵。可以通过任何途径给药，所述途径包括肠胃外和透粘膜(例如含服、舌下、腭、龈、鼻、阴道、直肠或透皮)。肠胃外给药包括例如静脉内、肌内、动脉内、皮内、皮下、腹膜内、心室内和颅内给药。递药的其它模式包括但不限于使用脂质体制剂、静脉内输注、透皮贴剂等。

“激动剂”或“活化剂”是指能够与本发明的受体结合的作用物或分子，能够刺激、增加、开通、激活、促进、增强酶的激活或活性，使本发明受体的活性致敏或上调的作用物或分子。

“拮抗剂”或“抑制剂”是指能够抑制本发明受体或与本发明受体结合的作用物或分子，能够部分或完全阻断刺激或活性，减少、封闭、阻止、延缓激活或酶活性，使本发明受体的活性失活、脱敏或下调。本文中使用的“拮抗剂”还包括反向或逆向激动剂。

本文中使用的术语“响应调节syk和/或JAK的疾病或病症”和相关术语和短语是指与不适当的(例如小于或大于正常)syk和/或JAK活性有关的和至少部分响应于syk和/或JAK的调节或受syk和/或JAK调节影响(例如syk和/或JAK拮抗剂或激动剂在至少一些患者的预后中产生一些改善)的疾病或病症。不适当的syk和/或JAK的功能活性可因下列情况而产生：在通常不表达该受体的细胞中表达syk和/或JAK、大于syk和/或JAK的正常生产或慢于syk和/或JAK或其活性代谢物的正常代谢失活或消除、syk和/或JAK的表达或细胞内激活的程度增加(导致例如炎性和免疫相关病症和疾病)或syk和/或JAK表达减少。与syk和/或JAK有关的疾病或病症可包括“syk和/或JAK介导的疾病或病症”。

本文中使用的短语“至少部分由syk和/或JAK激酶活性介导的疾病或病症”是指特征在于不适当的例如大于正常syk和/或JAK活性的疾病或病症。不适当的syk和/或JAK的功能活性可因在通常不表达该受体的细胞中表达syk和/或JAK或表达syk和/或JAK或细胞内激活的程度增加(导致例如炎性和免疫相关病症和疾病)而产生。不适当的syk和/或JAK功能活性可完全或部分介导至少部分由syk和/或JAK激酶活性介导的疾病或病症。但是，至少部分由syk和/或JAK激酶活性介导的疾病或病症是其中调节syk和/或JAK导致对潜在疾病或病症产生某些作用(例如syk和/或JAK拮抗剂在患者中的至少某些患者中导致某些改善)的病症

本文中使用的术语“炎症”是指白血细胞(例如白细胞、单核细胞等)浸润到因为再狭窄而治疗的区域。

术语“介入”是指产生治疗效果或改变疾病过程进程的作用。例如，“血管介入”是指用血管内方法例如血管成形术或支架使阻塞的血管开通。

术语“血管内装置”是指可用于血管再通使血流重新通过阻塞的血管的装置。血管内装置的实例包括但不限于支架、充气囊导管、自身静脉/动脉移植物、假体静脉/动脉移植物、血管导管和血管支架。

本文中使用的术语“JAK”是指可在体外或体内介导基因表达的Janus激酶(RefSeq登录号P-43408)或其变种。JAK变种包括基本上与天然JAK同源的蛋白，即具有一种或多种天然或非天然存在的氨基酸缺失、插入或取代的蛋白(例如JAK衍生物、同系物和片段)。JAK变种的氨基酸序列优选为与天然JAK至少约80％相同，更优选至少约90％相同，最优选至少约95％相同。

术语“白细胞”是指当将全血离心时分离到薄白色层的具有核和细胞质的各种血细胞中的任何细胞，这些细胞协助阻止感染和疾病影响身体。白细胞的实例包括但不限于嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞。

术语“哺乳动物”包括但不限于人、家畜(例如狗或猫)、农场动物(母牛、马或猪)、猴子、兔子、小鼠和实验室动物。

术语“调节”等是指化合物增加或减少syk和/或JAK功能和/或表达的能力，其中这种功能可包括转录调节性活性和/或蛋白结合。调节可在体外或体内发生。本文中所述调节包括与syk和/或JAK有关的直接或间接被抑制、拮抗、部分拮抗、激活、激动或部分激动的功能或特性，和/或直接或间接上调或下调syk和/或JAK的表达。在优选的实施方案中，调节为直接调节。抑制剂或拮抗剂为例如结合、部分或完全阻断刺激；减少、阻止、抑制、延缓激活；使信号转导失活、脱敏或下调的化合物。激动剂或活化剂是例如结合、刺激、增加、开通、激活、促进、增强激活；或使信号转导激活、致敏或上调的化合物。可在生物化学测定例如结合测定或基于细胞的测定例如瞬时转染测定中，证明化合物抑制syk和/或JAK功能的能力。

活性的“调节剂”是指用体外和体内活性测定鉴定出的“配体”、“拮抗剂”和“激动剂”和它们的同源物和模拟物。调节剂包括天然和合成配体、拮抗剂、激动剂、分子等。鉴定拮抗剂和激动剂的测定方法包括例如在本发明受体的存在或不存在下，在细胞上施用公认的调节剂化合物，然后测定本发明活性的受体的功能作用。将含有用潜在活化剂、抑制剂或调节剂处理的本发明受体的样品或测定与不含抑制剂、活化剂或调节剂的对照样品对比，以检验作用的程度。将对照样品(未用调节剂处理)的相对活性值设为100％。当相对于对照的本发明受体的活性值为约80％，任选50％或25-1％时，实现抑制。当相对于对照的本发明受体的活性值为110％，任选150％，任选200-500％，或1000-3000％更高时，实现激活。

“患者”是指人和非人动物，尤其是哺乳动物。患者的实例包括但不限于人、母牛、狗、猫、山羊、绵羊、猪和兔。

就本发明组合物而言，术语“药学上可接受的载体或赋形剂”表示可用于制备药用组合物的载体或赋形剂，它们通常是安全、无毒和无生物活性及无害，包括兽医用和人药用的载体或赋形剂。用于本说明书和权利要求的“药学上可接受的载体或赋形剂”包括一种和大于一种的此类载体或赋形剂。

术语“药学有效量”、“治疗有效量”或“治疗有效剂量”是指研究人员、兽医、医师或其它临床技师正在寻找的引起组织、系统、动物或人的生物或医学反应的主题化合物的量。术语“治疗有效量”包括给予后足以阻止正在治疗的疾病或病症的一种或多种症状发展或缓解至某种程度的化合物的量。治疗有效量须随化合物、病症或状态及其严重性以及所治疗的哺乳动物的年龄、体重等而变。

术语“血小板”是指存在于哺乳动物血浆中的微小无核碟状细胞，其作用为促使血液凝固。

本文中使用的术语“阻止”、“预防”及其其它语法形式是指部分或完全延缓或排除病症或疾病和/或其一个或多个附带症状的发作或复发，或阻止患者获得或再获得病症或疾病或减少患者获得或再获得病症或疾病或其一个或多个附带症状风险的方法。

术语“再通”是指恢复流动到破坏的身体渠道或使破坏的身体渠道例如血管再结合的方法。

术语“再狭窄”是指在治疗例如进行血管成形术或支架植入的相同位置上动脉再缩窄或阻滞。

当涉及与受体结合时，短语“选择性”或“特异性”是指通常在受体和其它生物体的异源种群中可检测到受体存在结合反应。因此，在设定条件下，化合物与特定受体的结合力至少为背景的2倍，更通常大于背景10-100倍。在此类条件下，化合物的特异性结合需要选择对特定受体具有特异性的化合物。例如，可筛选小有机分子，以仅得到特异性或选择性结合选择的受体且不与其它受体或蛋白结合的那些化合物。可用多种测定模式选择对特定受体有选择性的化合物。例如，按惯例，用高通量筛选测定法选择对特定受体有选择性的化合物。

本文中使用的术语“镰状细胞贫血病”是指红血细胞遗传病，其中两个血红蛋白等位基因均编码镰状血红蛋白(S)蛋白，即S/S基因型。异常血红蛋白的存在导致产生异常形状的细胞，这种细胞在血液循环中的存活时间不能达到通常时间长度。因此，导致贫血病。“贫血病”是指血液中红血细胞和/或血红蛋白的数目减少。

术语“镰状细胞病”是指红血细胞遗传病，其中一个血红蛋白等位基因编码镰状血红蛋白(S)蛋白，另一个等位基因编码另一种异常血红蛋白，例如血红蛋白(S)、(C)、(D)、(E)和(βThal)。镰状细胞病基因型的实例包括但不限于S/S、S/C、S/D、S/E和S/βThal基因型。最普通类型的镰状细胞病包括镰状细胞贫血病、镰状细胞血红蛋白C病、镰状细胞β+(plus)地中海贫血和镰状细胞β0(zero)地中海贫血。

本文中定义的“患者”包括动物，例如哺乳动物，哺乳动物包括但不限于灵长类(例如人)、母牛、绵羊、山羊、马、狗、猫、兔、大鼠、小鼠等。在优选的实施方案中，患者为人。

本文中使用的术语“syk”是指可在体外或体内调节对T细胞受体的细胞反应的脾酪氨酸激酶(RefSeq目录号P-043405)或其变种。syk变种包括基本上与天然syk同源的蛋白，即具有一种或多种天然或非天然存在的氨基酸缺失、插入或取代的蛋白(例如syk衍生物、同系物和片段)。syk变种的氨基酸序列优选为与天然syk至少约80％相同，更优选至少约90％相同，最优选至少约95％相同。

术语“syk抑制剂”是指抑制脾酪氨酸激酶的催化活性的任何物质。

术语“血栓形成”是指由细胞结块造成的血管阻滞或阻塞，导致血流阻塞。术语“血栓形成”是指在血管中形成的凝块。

本文中使用的术语“治疗”及其其它语法形式包括部分或完全延缓、缓解、减轻或减少病症或疾病的一种或多种附带症状和/或缓解、减轻或阻挡病症或疾病的一种或多种起因。本发明的治疗可以为防止性治疗、预防性治疗、缓解(pallatively)性治疗或改善性治疗。

术语“导管”是指传送流体的任何通道，例如动脉或静脉。例如，“血管”是指任何导管，通过其血液在身体中循环。血管内腔是指血管的内开放空间或腔室。

2.本发明的实施方案

a.化合物

在一组实施方案中，本发明提供具有式(I)的化合物、其互变异构体或药学上可接受的盐：

其中：

Y^1a选自N、CH和C；

Z^1a选自键、-N(C_1-4烷基)-、-SO₂-、-CO-、-NR^4dSO₂-、杂环基、杂环羰基和杂环磺酰基；

R^1a选自：

(a)氢；

(b)C_1-8烷基，任选被1-3个选自氨基、羟基、C_1-8烷氧基、杂环基、氨基羰基、氨基C_1-8烷氧基、芳基和杂芳基的基团取代；

(c)C_3-8环烷基，任选被1-3个氨基取代基取代；

(d)芳基，任选被1-3个选自C_1-8烷基、C_1-8烷氧基、C_1-8烷基氨基、C_1-8烷基羰基氨基、氨基羰基C_1-8烷氧基、氨基磺酰基、氨基羰基、氨基C_1-8亚烷基羰基C_1-8烷氧基和卤素的取代基取代；

(e)杂环基，卤素，氰基，任选被1-3个选自C_1-8烷基、氧代和C_1-8烷氧基羰基、氰基C_1-8烷基羰基、氨基羰基、芳基C_1-8烷氧基羰基、芳基氨基羰基基团的取代基取代；和

(f)杂芳基，任选被1-3个选自C_1-8烷基、C_1-8烷基磺酰基和氰基C_1-8亚烷基羰基基团的取代基取代；

R^2a为氢、C_1-8烷基，或与R^1a以及其各自连接的氮一起形成包含1-3个杂原子的并任选被1-2个取代基R^b取代的杂环基或杂芳基环，该杂原子包括N、O和S，R^2b独立选自C_1-8烷氧基、C_1-8烷氧基羰基、C_1-8烷氧基羰基C_1-8亚烷基、C_1-8烷氧基羰基氨基C_1-8亚烷基、氨基、氨基C_1-8亚烷基、氨基芳基、氨基羰基、氨基羰基氨基、氨基羰基C_1-8亚烷基、氨基羰基氨基C_1-8亚烷基、氨基羧基C_1-8亚烷基、氨基磺酰基、氨基磺酰基C_1-8亚烷基、C_1-8烷基、C_1-8烷基磺酰基、C_1-8烷基磺酰基C_1-8亚烷基、C_1-8烷基杂环基、C_1-8亚烷基杂环基C_1-8亚烷基、芳基、芳基C_1-8烷氧基羰基氨基、羧基、羧基C_1-8亚烷基、氰基、C_3-8环烷基、卤素、杂芳基、杂芳基C_1-8亚烷基、杂环基、羟基、羟基C_1-8亚烷基、羟基羰基C_1-8亚烷基、亚胺基、氧代和＝S；

R^3a为氢、C_1-8烷基，或与R^4a-Z^1a部分以及其各自连接的氮一起形成任选被1-2个R^2b和R^2c取代基取代的杂环基或杂芳基环，该取代基每个独立选自C_1-8烷氧基、C_1-8烷氧基羰基、C_1-8烷氧基羰基C_1-8亚烷基、C_1-8烷氧基羰基氨基C_1-8亚烷基、氨基、氨基C_1-8亚烷基、氨基芳基、氨基羰基、氨基羰基氨基、氨基羰基氨基C_1-8亚烷基、氨基羧基C_1-8亚烷基、氨基磺酰基、氨基磺酰基C_1-8亚烷基、C_1-8烷基、C_1-8烷基磺酰基、C_1-8烷基磺酰基C_1-8亚烷基、C_1-8烷基杂环基、C_1-8烷基杂环基C_1-8亚烷基、芳基、芳基C_1-8烷氧基羰基氨基、羧基、羧基C_1-8亚烷基、氰基、C_3-8环烷基、卤素、杂芳基、杂芳基C_1-8亚烷基、杂环基、羟基、羟基C_1-8亚烷基、亚胺基、氧代和＝S；

R^4a选自：

(a)芳基，任选被1-3个各自独立选自下列基团的取代基R^4c取代：C_1-8烷氧基、氨基、C_1-8烷基羰基和氨基羰基C_1-8烷氧基；

(b)杂芳基、杂二环C_1-8烷基、卤素、羟基，任选被1-3个各自独立选自下列基团的取代基R^4c取代：C_1-8烷基、卤素、羟基、氧代C_1-8烷氧基和＝S；

(c)杂环基，各任选被1-3个各自独立选自下列基团的取代基R^4c取代：C_1-8烷基和氧代；

R^4b选自氢、C_1-8烷基、氨基C_1-8亚烷基、C_1-8烷基羰基、C_1-8烷基羰基氨基、C_1-8烷基磺酰基、C_1-8烷基亚磺酰基、C_1-8烷基磺酰基氨基、C_1-8烷基磺酰C_1-8亚烷基、C_1-8烷硫基、C_1-8烷氧基、C_1-8烷氧基C_1-8亚烷基氨基、C_1-8烷氧基羰基氨基、C_1-8烷氧基羰基、C_1-8烷氧基C_1-8亚烷基、C_1-8烷氧基羰基C_1-8亚烷基、氨基、氨基羰基、氨基羰基C_1-8亚烷基、氨基磺酰基、C_1-8烷氧基羰基C_1-8亚烷基氨基磺酰基、氨基C_1-8亚烷基氨基羰基、氨基羰基C_1-8烷氧基、氨基C_1-8亚烷基、氨基C_1-8亚烷基羰基、氨基羰基C_1-8亚烷基氨基磺酰基、羧基、羧基C_1-8亚烷基氨基磺酰基、羧基C_1-8亚烷基、C_3-8环烷基羰基氨基、C_3-8环烷基羰基、卤素、羟基、羟基C_1-8亚烷基、氨基C_1-8亚烷基氨基、氨基C_1-8亚烷基羰基、氨基C_1-8亚烷基氨基羰基C_1-8亚烷基、羟基C_1-8亚烷基羰基氨基、羟基C_1-8亚烷基羰基、羟基C_1-8亚烷基氨基、羟基C_1-8亚烷基氨基磺酰基、羟基C_1-8亚烷基氨基羰基、氧代和杂环基；

如果R^4b为杂环基，则其任选被1-3个各自独立选自下列基团的取代基R^4d取代：C_1-8烷基、C_1-8烷氧基、羟基、氨基、卤素、氰基、氧代、＝S、C_1-8烷氧基羰基、羧基、氨基羰基、氨基磺酰基、C_1-8烷基羰基和C_1-8烷基氨基羰基；

R^5a选自氢、C_1-8烷基、C_3-8环烷基和C_1-8烷基芳基磺酰基；

R^6a选自氢、C_1-8烷基、卤素、羟基和氧代；

R^7a选自氢、C_1-8烷基、氰基、C_1-8烷氧基C_1-8亚烷基、C_2-8炔基、C_3-8环烷基、C_1-8烷基羰基、羟基、氧代、卤素和芳基，其中每个芳基和杂芳基可任选被卤素、C_1-8烷基、C_1-8烷氧基、氰基、氨基、羟基、杂芳基取代；且虚线表示双键或单键。

在另一组实施方案中，R^1a为氢。在另一组实施方案中，R^1a为C_1-8烷基。在另一组实施方案中，R^1a为C_3-8环烷基。在另一组实施方案中，R^1a为环己基、环丙基或环丁基。在另一组实施方案中，R^1a为芳基。在另一组实施方案中，R^1a为苯基。在另一组实施方案中，R^1a为杂环基。在另一组实施方案中，R^1a为杂芳基。

在另一组实施方案中，R^2a为氢。在另一组实施方案中，R^2a为C_1-8烷基。在另一组实施方案中，R^2a与R^1a以及其各自连接的氮一起形成选自哌啶、哌嗪、高哌嗪和吡咯烷的杂环。

在另一组实施方案中，各R^2a独立选自-CH₂NH₂、-CH₂NHCH₃、-CH₂N(CH₃)₂、-CH₂CH₂NH₂、-C(CH₃)₂NH₂、-NH₂、-OH、-CH₂OH、-CH₂CH₂OH、-CH₂NHC(O)NH₂、-C(O)NH₂和-CH₂C(O)NH₂、-CH(NH₂)CO₂CH₃、-CHNH₂)CH₂CO₂Et。

在另一组实施方案中，Y¹为氮。在另一组实施方案中，Y^1a为CH。在另一组实施方案中，Y^1a为C。

在另一组实施方案中，R^3a为氢。在另一组实施方案中，R^3a为C_1-8烷基。在另一组实施方案中，R^3a与R^4a-Z^1a部分以及其连接的氮一起从而形成杂环。在另一组实施方案中，R^3a为与R^4a-Z^1a部分以及其连接的氮一起从而形成杂芳基环。

在另一组实施方案中，R^4a为芳基。在另一组实施方案中，R^4a为苯基。在另一组实施方案中，R^4a为杂芳基。在另一组实施方案中，R^4a为杂环基。

在另一组实施方案中，Z¹为键。在另一组实施方案中，Z¹为-N(C_1-8烷基)-。在另一组实施方案中，Z¹为-SO₂-。在另一组实施方案中，Z¹为-CO-。在另一组实施方案中，Z¹为-NR^4dSO₂-。在另一组实施方案中，Z¹为杂环基。在另一组实施方案中，Z¹为杂环基羰基。在另一组实施方案中，Z¹为杂环基磺酰基。

在另一组实施方案中，R^5a为氢。

在另一组实施方案中，R^6a为氢。

在另一组实施方案中，R^7a选自氢、氰基、苯基和吡啶基。

在另一组实施方案中，R^4b选自氢、C_1-8烷基、C_1-8烷基羰基、C_1-8烷基羰基氨基、C_1-8烷基磺酰基、C_1-8烷基亚磺酰基、C_1-8烷基磺酰基氨基、C_1-8烷基磺酰基C_1-8亚烷基、C_1-8烷硫基、C_1-8烷氧基、C_1-8烷氧基羰基氨基、C_1-8烷氧基羰基、C_1-8烷氧基羰基C_1-8亚烷基、氨基羰基、氨基磺酰基、C_1-8烷氧基羰基C_1-8亚烷基氨基磺酰基、氨基C_1-8亚烷基氨基羰基、氨基C_1-8亚烷基氨基羰基、氨基羰基C_1-8烷氧基、氨基羰基、氨基羰基C_1-8亚烷基氨基磺酰基、羧基、羧基C_1-8亚烷基氨基磺酰基、C_3-8环烷基羰基氨基、卤素、羟基、羟基C_1-8亚烷基、羟基C_1-8亚烷基羰基氨基、羟基C_1-8亚烷基氨基、羟基C_1-8亚烷基氨基磺酰基、羟基C_1-8亚烷基氨基羰基、氧代和杂环基。

在另一实施方案中，本发明提供具有式(Ia)的化合物、其互变异构体或药学上可接受的盐：

其中：

Y^1b为N、CH或C；

Z^1b为杂环基、-NR^4dSO₂-、杂环基磺酰基或键，

R^1b选自

(a)氢，

(b)C_1-8烷基，任选被氨基、氨基C_1-8烷基、氨基羰基、烷氧基、C_1-8烷基氨基羰基、氨基C_1-8亚烷基、氨基C_1-8烷氧基、芳基、羟基或杂环基取代，

(c)C_3-8环烷基，任选被烷基、氨基、羟基、C_1-8烷氧基、C_1-8烷基氨基羰基、氨基C_1-8亚烷基、氨基C_1-8烷氧基取代；

(d)芳基，任选被烷基、氨基、氨基磺酰基、氨基C_1-8亚烷基、C_1-8烷基氨基羰基C_1-8烷氧基、羟基、C_1-8烷氧基、C_1-8烷基氨基羰基、氨基C_1-8亚烷基、氨基C_1-8烷氧基或卤素取代；

(e)杂环基，任选被C_1-8烷基、C_1-8烷氧基羰基、氨基、羟基、C_1-8烷氧基、C_1-8烷基氨基羰基、氨基C_1-8亚烷基、氨基C_1-8烷氧基、氧代或氰基C_1-8亚烷基羰基取代；

(f)杂芳基，任选被烷基、氨基、羟基、C_1-8烷氧基、C_1-8烷基氨基羰基、氨基C_1-8亚烷基或氨基C_1-8烷氧基取代；

R^4b选自氢、羟基、C_1-8烷基羰基、C_1-8烷氧基羰基C_1-8亚烷基、C_1-8烷氧基羰基氨基、氨基羰基C_1-8亚烷基、羟基羰基、羟基羰基C_1-8亚烷基、氨基羰基、氨基C_1-8亚烷基、羟基、羟基C_1-8亚烷基羰基氨基、C_1-8烷基氨基C_1-8亚烷基、C_1-8烷基氨基C_1-8亚烷基氨基羰基、氨基羰基氨基、C_1-8烷基磺酰基C_1-8亚烷基、C_3-8环烷基羰基氨基和C_1-8烷基羰基氨基；并且

R^4c为氢、氨基、C_1-8烷基羰基、氨基羰基C_1-8烷氧基；

R^4d为氢或C_1-8烷基；

R⁵为氢或C_1-8烷基；

R⁶选自氢、C_1-8烷基、卤素、羟基和氧代；

R⁷选自氢、C_1-8烷基、氰基、C_1-8烷氧基C_1-8亚烷基、C_1-8烷基羰基、羟基、氧代、卤素、芳基和杂芳基；且虚线表示双键或单键；或者R^4b-Z^1b部分和R^4c结合形成5-7元含有1-3个杂原子的杂环，该杂原子包括N、O、S，该杂环任选被C_1-8烷基、卤素、氰基、氧代、＝S、氨基、羟基、C_1-8烷基羰基、C_1-8烷氧基或芳氧基羰基C_1-8亚烷基取代。

在另一实施方案中，本发明提供具有选自以下结构式的化合物、其互变异构体或药学上可接受的盐：

其中R^1b为任选被氨基取代的C_1-8烷基、杂环基或氨基杂环基，以及任选被氨基取代的C_3-8环烷基；R⁷为卤素、羟基、C_1-8烷氧基C_1-8亚烷基、C_1-8烷基羰基、氰基或苯基、吡啶基；且R⁶为氢、C_1-8烷基或卤素；R⁹为氢或C_1-8烷基；且R¹⁰为氢、C_1-8烷基、C_1-8烷氧基、C_1-8烷氧基羰基C_1-8亚烷基、氨基C_1-8亚烷基、氨基羰基C_1-8亚烷基、羧基C_1-8亚烷基、C_3-8环烷基和羟基C_1-8亚烷基。

在另一组实施方案中，R^1b为C_1-8烷基，任选被取代。在另一组实施方案中，R^1b为C_3-8环烷基，任选被取代。在另一组实施方案中，R^1b为环己基、环丙基或环丁基，各任选被取代。在另一组实施方案中，R^1b为杂环基，任选被取代。在另一组实施方案中，R^1b为杂环基，选自哌啶基、吗啉代和四氢噻吩基。在另一组实施方案中，R^1b为芳基。在另一组实施方案中，R^1b为单环杂芳基。在另一组实施方案中，R^1b为吡唑。

在另一组实施方案中，Z^1b为杂环基，选自：

在另一组实施方案中，

部分

选自：

其中R⁸选自氢、C_1-8烷基、羟基羰基C_1-8亚烷基、烷氧基羰基C_1-8亚烷基和C_1-8烷基氨基C_1-8亚烷基氨基羰基C_1-8亚烷基。

在另一组实施方案中，化合物具有下式：

其中R^2c为氨基羰基、氨基C_1-8亚烷基或羟基；和R⁷选自卤素、羟基、C_1-8烷氧基C_1-8亚烷基、C_1-8烷基羰基、氰基、苯基和吡啶基。

在另一组实施方案中，化合物具有下式：

其中R^1b为C_1-8烷基、C_3-8环烷基、芳基或杂芳基；各任选被羟基、C_1-8烷氧基或氨基C_1-8烷氧基取代；R^4b为氢或CH₃CO-；R⁷为氢、C_1-8烷基、C_1-8烷基羰基、氨基羰基、氰基、苯基或吡啶基；R⁹为氢或C_1-8烷基；且R¹⁰为氢、C_1-8烷基、C_1-8烷氧基、C_1-8烷氧基羰基C_1-8亚烷基、氨基C_1-8亚烷基、氨基羰基C_1-8亚烷基、羧基C_1-8亚烷基、C_3-8环烷基和羟基C_1-8亚烷基。

在另一实施方案中，本发明提供具有式(Ib)的化合物、其互变异构体或药学上可接受的盐：

其中：

Y^1b为C或N；

各R^2b独立选自氨基、氨基C_1-8亚烷基、氨基羰基、氨基羰基C_1-8亚烷基、羧基、羧基C_1-8亚烷基、C_1-8烷氧基羰基、C_1-8烷氧基羰基C_1-8亚烷基和羟基；

R^4b为C_1-8烷基羰基；

Z^1b为杂环基；

R^4c为氢；

R^7b为氢、氰基、吡啶基或无；

m为0或1；和

p为0或1。

在另一实施方案中，本发明提供具有式(Ic)的化合物、其互变异构体或药学上可接受的盐：

其中：

R^2b选自氢、氨基C_1-8亚烷基、氨基羰基、氨基羰基C_1-8亚烷基、羟基、羟基羰基C_1-8亚烷基、C_1-8烷氧基羰基和C_1-8烷氧基羰基C_1-8亚烷基；

R^4b为氢或CH₃CO-；

R^7b为氢、氰基或吡啶基；且

m为0或1。

在另一实施方案中，本发明提供具有式(Id)的化合物、其互变异构体或药学上可接受的盐：

其中：

Y^1b为C或N；

R^2b选自氢、氨基、氨基C_1-8亚烷基、氨基羰基、氨基羰基C_1-8亚烷基、羟基、羟基羰基C_1-8亚烷基、羧基、C_1-8羧基亚烷基、C_1-8烷氧基羰基和C_1-8烷氧基羰基C_1-8亚烷基；

R^7a为氢、C_1-8烷基、卤素、羟基、C_1-8烷氧基C_1-8亚烷基、C_1-8烷基羰基、氰基或吡啶基；且

m为0或1。

在另一组实施方案中，m为0；且R^7a选自H、氰基或吡啶基。在另一组实施方案中，m为1；且R^7a选自H、氰基或吡啶基。

在另一组实施方案中，化合物具有下式：

且R^4b为氢或CH₃CO-。

在另一实施方案中，本发明提供具有式(Ie)的化合物、其互变异构体或药学上可接受的盐：

其中：

R^7b为氢、氰基、或吡啶基；且

m为0或1。

在另一实施方案中，本发明提供具有下式的化合物、其互变异构体或药学上可接受的盐：

在另一实施方案中，本发明提供具有式(II)的化合物、其互变异构体或药学上可接受的盐：

其中：

R^1c选自

(a)C_3-8环烷基，和

(b)芳基，各任选被1-2个选自C_1-8烷基、氨基和羟基基团的取代基取代；或

与R^2c一起形成含有1-3个杂原子的杂环，该杂原子包括N、O、S，所述杂环任选被1-2个取代基取代，该取代基各独立选自氨基羰基C_1-8亚烷基、C_1-8烷氧基羰基、氨基C_1-8亚烷基、羟基C_1-8亚烷基、C_1-8烷氧基羰基氨基C_1-8亚烷基、氨基、氨基羰基氨基羰基氨基、芳基C_1-8烷氧基羰基氨基、氨基羰基氨基和氧代；

R^2c为氢，或与R^1c一起形成杂环，氰基C_1-8烷基羰基、氰基C_1-6烷基羰基氨基，任选被1-2个取代基取代，该取代基独立选自氨基羰基C_1-8亚烷基、C_1-8烷氧基羰基、氨基C_1-8亚烷基、羟基C_1-8亚烷基、C_1-8烷氧基羰基氨基C_1-8亚烷基、氨基、氨基羰基氨基羰基氨基、芳基C_1-8烷氧基羰基氨基、氨基羰基氨基和氧代；

R^3c为氢，或与R^4d一起形成杂环或杂芳基环，各任选被1-2个取代基取代，该取代基独立选自C_1-8烷基、C_1-8烷基杂环基、氨基C_1-8亚烷基、氨基芳基、羟基C_1-8亚烷基、氨基羰基、C_1-8烷氧基羰基、氨基、亚胺基、C_1-8烷基羰基氨基、氧代、卤素、芳基、杂环基、杂环基C_1-8亚烷基和C_1-8烷基杂环基C_1-8亚烷基；

R^4d独立选自

(a)C_3-8环烷基，

(b)芳基，

(c)杂芳基，和

(d)杂环基；各任选被1-3个R^4e、R^4f和-Z^1cR^4g取代基取代，该取代基各独立选自C_1-8烷基、氨基C_1-8亚烷基、羟基C_1-8亚烷基、氨基羰基、C_1-8烷氧基羰基、羧基、氨基、亚胺基、C_1-8烷基羰基氨基、氧代、卤素、芳基、杂环基和杂环基C_1-8亚烷基，前提是R^1c和R^2c或R^3c和R^4d中至少一组与其各自连接的氮一起形成杂环基或杂芳基环；且

R^7c选自H、C_1-8烷基、C_2-8炔基、氰基、氨基羰基、硝基、C_1-8烷氧基、卤素、芳基、杂芳基和C_3-8环烷基。

在另一实施方案中，本发明提供具有式(IIa)的化合物、其互变异构体或药学上可接受的盐：

在另一组实施方案中，R^3c为氢。

在另一组实施方案中，R^4d为苯基。在另一组实施方案中，R^4d为吲唑基(indazyl)。在另一组实施方案中，R^4d为环己基。在另一组实施方案中，R^4d为二氢吲哚基。

在另一组实施方案中，R^3c与R^4d及其各自连接的氮一起形成选自吡啶基、咪唑基、四氢咪唑基、吲唑基、哌啶基、哌嗪基、吡咯烷基、三唑基和苯并咪唑基的杂环。

在另一组实施方案中，R^4dR^3cN-选自：

虚线表示单或双键；且波浪线表示与分子其余部分的连接点。

在另一实施方案中，本发明提供具有式(IIb)的化合物、其互变异构体或药学上可接受的盐：

其中：

R^7c为卤素；

R^1c和R^2c一起形成杂环，任选被1-2个取代基取代，该取代基独立选自：氨基羰基C_1-8亚烷基、C_1-8烷氧基羰基、氨基C_1-8亚烷基、羟基C_1-8亚烷基、C_1-8烷氧基羰基氨基C_1-8亚烷基、氨基、氨基羰基氨基羰基氨基、芳基C_1-8烷氧基羰基氨基、氨基羰基氨基和氧代；

Z^1c为杂环基、-N(C_1-4烷基)-、-SO₂-或-CO-；

R^4g选自氢、C_1-8烷氧基、C_1-8烷基羰基、C_1-8烷基羰基氨基、氨基、氨基羰基氨基C_1-8亚烷基、氨基羰基和氨基磺酰基；

各R^4e和R^4f独立选自H-、C_1-8烷氧基和C_1-8烷基羰基；或可和-Z^1c-R^4g及各自连接的苯环一起形成稠合的杂环系统，任选被1-2个取代基取代，该取代选自氧代、卤素、C_1-8烷基、C_1-8烷基。

在另一组实施方案中，本发明提供化合物，其中

部分

选自：

在另一组实施方案中，R^7c选自F、Cl、Br、氰基和氨基羰基。在另一组实施方案中，R^7c为CONH₂或F。在另一组实施方案中，R^1c为C_3-8环烷基。在另一组实施方案中，R^1c为环己基。在另一组实施方案中，R^1c为环丙基。在另一组实施方案中，R^1c为环丁基。在另一组实施方案中，R^1c为芳基。在另一组实施方案中，R^1c为苯基。

在另一组实施方案中，R^2c与R^1c及其各自连接氮一起形成吡咯烷基、哌啶基或哌嗪基、二氮杂环庚烯基(diazapenyl)。

在另一组实施方案中，本发明提供具有下式的化合物：

其中Y^2b为N、NH、C或CH；R^2d为H、C_1-8烷基氨基C_1-8亚烷基、氨基羰基、氨基羰基氨基、氨基羰基氨基羰基氨基、氨基、氧代、氨基C_1-8亚烷基、氨基羰基氨基C_1-8亚烷基、羟基C_1-8亚烷基、芳基烷氧基羰基氨基；氰基C_1-8亚烷基羰基、氰基C_1-8亚烷基羰基氨基、羟基、C_1-8烷氧基羰基、烷氧基羰基C_1-8亚烷基，任选被氨基取代；且R^7c为H、卤素、氨基羰基、环烷基、氰基或吡啶基；R⁹为H或C_1-8烷基；R¹⁰为H、C_1-8烷基、C_1-8烷氧基、C_1-8烷氧基羰基C_1-8亚烷基、氨基C_1-8亚烷基、氨基羰基C_1-8亚烷基、羧基C_1-8亚烷基、C_3-8环烷基和羟基C_1-8亚烷基；m为0或1；且q为0或1。

在另一组实施方案中，R^7c选自F、Cl、Br、氰基和氨基羰基。在另一组实施方案中，R^7c为CONH₂或F。

在另一组实施方案中，本发明提供具有下式的化合物、其互变异构体或药学上可接受的盐：

在另一组实施方案中，本发明提供选自下列的化合物：

N2-(1H-吲唑-6-基)-N4-甲基-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；

1-(4-(4-(4-(甲基氨基)-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；

N2-(1H-吲唑-6-基)-N4-甲基-5-(吡啶-3-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；

1-(4-(4-(4-(环丙基氨基)-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；

4-(4-氨基苯基)-1-(5-氨基甲酰基-4-(环丙基氨基)嘧啶-2-基)吡啶鎓；

1-(4-氨基苯基)-3-(5-氨基甲酰基-4-(环丙基氨基)嘧啶-2-基)-1H-咪唑-3-鎓；

2-(6-氨基-7-氯-1H-吲唑-1-基)-4-(环丙基氨基)嘧啶-5-甲酰胺；

1-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-3-甲酰胺；

1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-3-甲酰胺；

4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-N-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-胺；

1-(4-(4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；

(S)-1-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)吡咯烷-3-醇；

(S)-1-(4-(4-(4-(3-羟基吡咯烷-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；

2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈；

1-(4-(4-(6-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-9H-嘌呤-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；

N-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基)-1H-吲唑-6-胺；

4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟-N-(3，4，5-三甲氧基苯基)嘧啶-2-胺；

1-(4-(4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；

N-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-4-(哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-胺；

1-(4-(4-(4-(哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；

N-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-4-(吡咯烷-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-胺；

1-(4-(4-(4-(吡咯烷-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；

1-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺；

1-(2-(4-(4-乙酰哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺；

2-(4-(4-乙酰哌嗪-1-基)苯基氨基)-4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)嘧啶-5-甲酰胺；

1-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-3-甲酰胺；

1-(2-(4-(4-乙酰哌嗪-1-基)苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-3-甲酰胺；

(1-(5-氟-2-(4-(N-甲基乙酰氨基)苯基氨基)嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔丁酯；

N-(4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺；

(1-(2-(4-氨基甲酰基苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔丁酯；

4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺；

4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯磺酰胺；

6-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮；

1-(4-(4-(4-(2-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；

(1-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-2-基)甲基氨基甲酸叔丁酯；

N-(4-(2-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基)-1H-吲唑-6-胺；

1-((1-(5-氟-2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基)脲；

1-(4-(4-(5-氟-4-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；

6-(5-氟-4-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮；

2-(1H-吲唑-6-基氨基)-4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈；

5-(1-丁氧基乙基)-N4-环丙基-N2-(1H-吲唑-6-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；

1-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基)乙酮；

N4-环丙基-N2-(1H-吲唑-6-基)-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；

1-(4-(4-(4-(哌啶-4-基甲基氨基)-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；

2-(4-(4-乙酰哌嗪-1-基)苯基氨基)-4-(哌啶-4-基甲基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈；

2-(4-(4-乙酰哌嗪-1-基)苯基氨基)-4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈；

N-(4-(4-(环丙基氨基)-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺；

6-(4-(环丙基氨基)-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮；

5-溴-N4-环丁基-N2-(1H-吲唑-6-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；

5-氯-N4-环丁基-N2-(1H-吲唑-6-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；

2-(1H-吲唑-6-基氨基)-4-(环丁基氨基)-6，7-二氢吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-酮；

1-(2-(4-(4-乙酰哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-3-甲酰胺；

(S)-4-(2-(氨基甲基)吡咯烷-1-基)-N-(1H-吲唑-6-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-胺；

2-(4-(4-乙酰哌嗪-1-基)苯基氨基)-4-(3-(羟基甲基)哌啶-1-基)嘧啶-5-甲酰胺；

2-(4-(4-乙酰哌嗪-1-基)苯基氨基)-4-(2-(2-羟基乙基)哌啶-1-基)嘧啶-5-甲酰胺；

(S)-4-(3-氨基哌啶-1-基)-N-(1H-吲唑-6-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-胺；

(S)-1-(4-(4-(4-(3-氨基哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；

N-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基)-1H-吲唑-6-胺；

1-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-3-甲酰胺；

2-(4-(4-乙酰哌嗪-1-基)苯基氨基)-4-(4-(2-羟基乙基)-1，4-二氮杂环庚烷-1-基)嘧啶-5-甲酰胺；

4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺；

4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯磺酰胺；

(1-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-2-基)甲基氨基甲酸叔丁酯；和

N-(4-(2-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基)-1H-吲唑-6-胺。

在另一实施方案中，本发明提供选自下列的化合物：

1-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基磺酰基)哌啶-4-醇；

2-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-N-甲基苯基磺酰氨基)乙酸丁酯；

2-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基磺酰氨基)乙酰胺；

2-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-N-甲基苯基磺酰氨基)乙酸；

1-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌啶-4-醇；

4-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯；

N2-(1H-吲唑-6-基)-N4-(哌啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；

N4-环丁基-N2-(1H-吲唑-6-基)-6-甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；

N4-(3-氨基-2，2-二甲基丙基)-N2-(1H-吲唑-6-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；

N2-(1H-吲唑-6-基)-N4-(3-吗啉代丙基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；

N-(4-(4-(4-氨基丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺；

N-(4-(4-(2-氨基环己基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺；

N-(4-(4-(2-氨基乙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺；

N-(4-(4-(5-氨基戊基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺；

1-(4-(4-(4-(4-氨基环己基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；

N-(4-(4-(5-氨基戊基氨基)-5-溴-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺；

N-(4-(4-(5-氨基戊基氨基)-5，6-二溴-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺；

N-(4-(4-(3-氨基磺酰基-苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺；

2-(6-(4-(环丁氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-2-氧代-3，4-二氢喹啉-1(2H)-基)乙酸乙酯；

2-(6-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-2-氧代-3，4-二氢喹啉-1(2H)-基)乙酸；

2-(6-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-2-氧代-3，4-二氢喹啉-1(2H)-基)-N-(2-(二甲基氨基)乙基)乙酰胺；

4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基(甲基)氨基甲酸甲酯；

N-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-2-羟基-N-甲基乙酰胺；

N-(4-(4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-2-羟基-N-甲基乙酰胺；

N⁴-环丁基-N²-(4-甲基磺酰基甲基)苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；

N⁴-环丁基-N²-(3-甲基磺酰基甲基)苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；

2-(3-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯氧基-N-甲基乙酰胺；

N²-(1H-吲唑-6-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；

N-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基环丙烷甲酰胺；

N-(4-(4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基环丙烷甲酰胺；

N-(4-(4-(甲基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基环丙烷甲酰胺；

2-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)乙酰胺；

N-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-2-(二甲基氨基)-N-甲基乙酰胺；

N-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-N-(3-二甲基氨基丙基)苯甲酰胺；

N-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-3-羟基-N-甲基丙酰胺；

N-(4-(4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-3-羟基-N-甲基丙酰胺；

N²-(1H-吲唑-6-基氨基)-N⁴-(1H-吡唑-5-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；

N²-(1H-吲唑-6-基氨基)-N⁴-(2-甲氧基乙基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；

1-(4-(4-(4-(2-甲氧基乙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；

N²-(1H-吲唑-6-基氨基)-N⁴-(2-羟基乙基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；

N⁴-(2-2-(氨基乙氧基)乙基)-N²-(1H-吲唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；

1-(4-(4-(4-(2-(2-氨基乙氧基)氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；

(S)-1-(4-(4-(2-(2-氨基乙氧基)乙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)吡咯烷-2-甲酰胺；

3-(2-(4-(4-乙酰哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯甲酰胺；

3-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯甲酰胺；

3-(2-(4-(4-乙酰哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯磺酰胺；

3-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯磺酰胺；

N-(4-(4-(3-(氨基甲基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺；

(R)-1-(4-(4-(4-(1-羟基丙-2-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；

(R)-2-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)丙-1-醇；

(S)-1-(4-(4-(4-(1-羟基丙-2-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；

(S)-2-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)丙-1-醇；

1-(4-(4-(4-(1，1-二氧基-四氢噻吩-3-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；

N²-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-N⁴-(1，1-二氧基-四氢噻吩-3-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；

4-(4-(环丙基氨基)-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺；

4-(4-氨基-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯甲酸；

4-(环丙基氨基)-2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈；

4-(5-氰基-4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺；

N-(4-(5-氰基-4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺；

4-(5-氰基-4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯磺酰胺；

2-(4-(4-乙酰哌嗪-1-基)苯基氨基)-4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈；

4-(环丙基氨基)-2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲酰胺；

4-(4-(1-(2-氰基乙酰基)哌啶-4-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺；

4-(4-(1-(2-氰基乙酰基)哌啶-3-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺；

4-(4-甲氧基苯基氨基)-2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈；

6-(4-(4-氟苯基氨基)-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮；

6-(4-氨基-5-(4-氟苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮；

6-(4-(苄基氨基)-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮；

4-(苄基氨基)-2-(1-甲基-2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈；

1-(2-(4-(4-乙酰哌嗪-1-基)苯基氨基)-9H-嘌呤-6-基)哌啶-3-甲酸丁酯；

1-(2-(4-(4-乙酰哌嗪-1-基)苯基氨基)-9H-嘌呤-6-基)哌啶-3-甲酸；

1-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-9H-嘌呤-6-基)哌啶-3-甲酸；

1-(2-(4-(4-乙酰哌嗪-1-基)苯基氨基)-9H-嘌呤-6-基)哌啶-3-甲酰胺；

2-(1-(2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)乙酸丁酯；

2-(1-(2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)乙酸；

2-(1-(2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)乙酰胺；

1-(4-(4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氯嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；

6-(5-氟-4-(3-氧代哌嗪-1-基)嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮；

1-(4-(4-(5-氟-4-(哌嗪-1-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；

4-(2-(4-(4-乙酰哌嗪-1-基)苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌嗪-1-甲酰胺；

2-(1-(2-(4-(4-乙酰哌嗪-1-基)苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-4-基)乙酰胺；

1-(2-(4-(4-乙酰哌嗪-1-基)苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-4-基氨基甲酸苄酯；

1-(4-(4-(4-(4-氨基哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；

1-(1-(2-(4-(4-乙酰哌嗪-1-基)苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-4-基)脲；

2-(4-(4-乙酰哌嗪-1-基)苯基氨基)-4-(4-(脲基甲基)哌啶-1-基)嘧啶-5-甲酰胺；

4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯甲酸；

6-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-溴嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮；

4-(4-(4-((二甲基氨基)甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺；

3-氨基-3-(1-(5-氟-2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)嘧啶-4-基)哌啶-4-基)丙酸乙酯；

2-氨基-2-(1-(5-氟-2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)嘧啶-4-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯；

N-(1-(2-(4-(4-乙酰哌嗪-1-基)苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-4-基)-2-氰基乙酰胺；

3-(4-(2-(4-(4-乙酰哌嗪-1-基)苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙腈；

6-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-(吡啶-4-基)嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮；

6-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-环丙基嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮；

6-(4-((1s，4s)-4-氨基环己基氨基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮；

4-(4-((1s，4s)-4-氨基环己基氨基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺；

1-(4-(4-(4-((1s，4s)-4-氨基环己基氨基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；

6-(4-((1s，4s)-4-氨基环己基氨基)-5-(吡啶-4-基)嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮；和

6-(4-((1s，4s)-4-氨基环己基氨基)-5-环丙基嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮。

在另一实施方案中，本发明提供具有实施例中所示结构的化合物。

在另一实施方案中，本发明提供任一表格中所示结构的化合物。

在另一实施方案中，本发明提供任一图中所示结构的化合物。

可以理解，在另一组实施方案中，任一以上实施方案也可与本文中列举的其它实施方案结合，形成本发明其它实施方案。

b.合成方法

可按已知的有机合成技术制备本发明化合物，此类合成技术包括在实施例中更详细描述的方法。一般而言，可按以下图1制备以上结构(I)的化合物，其中除另有说明外，所有取代基定义同上。

可按图1制备具有式I的化合物。2，4-二氯吡咯并嘧啶1.1被例如甲苯磺酰基的保护基保护。通过合适的胺例如R²-NH-R¹(有市售或用本领域技术人员已知的方法合成)，在碱性条件下例如二异丙胺(DIA)，将2，4-二氯吡咯并嘧啶的4-氯选择性置换，得到式1.3的化合物。然后通过合适的胺例如R⁴-NH-R³(有市售或用本领域技术人员已知的方法合成)，将氯置换，得到式1.4的化合物。使用在醇溶剂中的氢氧化物水解保护基得到所需的产物I，其中R¹、R²、R³和R⁴定义同前。

可按图2制备具有式II的化合物。用类似于下述条件，通过一步法，采用氯化剂(例如亚硫酰氯)处理，将羧酸2.1转化为酰氯2.2，用醇例如乙醇酯化，形成化合物2.3。通过例如氯氧化磷的氯化剂将酯2.3二氯化。通过合适的胺例如R²-NH-R¹(有市售或用本领域技术人员已知的方法合成)，在碱性条件下例如二异丙胺(DIA)，将2，4-二氯嘧啶的4-氯选择性置换，得到式2.5的化合物。然后将该酯水解，将第二个氯用EDC置换，用氨水处理，得到化合物2.7。也可通过线性途径制备苯并三唑醚化合物2.7。将苯并三唑醚基团用合适的胺例如R⁴-NH-R³(有市售或用本领域技术人员已知的方法合成)置换，得到需要的产物IIa，其中R¹、R²、R³和R⁴定义同前。

可按图3制备具有式II的化合物。通过合适的胺例如R²-NH-R1(有市售或用本领域技术人员已知的方法合成)，在碱性条件下例如二异丙胺(DIA)，将2，4-二氯嘧啶的4-氯选择性置换，得到式3.2的化合物。将氯用合适的胺例如R⁴-NH-R³(有市售或用本领域技术人员已知的方法合成)置换，得到所需的产物IIb，其中R¹、R²、R³和R⁴定义如前。

本领域技术人员会认识到，在结构(I-II)的一些实施方案中，当R¹或R²含端基杂原子时，使用保护基策略可能比较好。可将保护基用本领域技术人员已知的方法除去，得到结构(I-II)化合物。

通常而言，可使用作为游离碱的本发明化合物。或者，可使用下述酸加成盐形式的本发明化合物。

c.syk和JAK激酶抑制

可在体外或体内评价作为JAK激酶抑制剂的给定化合物的活性。在某些实施方案中，可通过细胞测定法测试给定化合物的活性。也可通过生物化学测定法，用分离的激酶确定选择性。

可用相似类型的测定方法评价相对于syk激酶的JAK激酶抑制活性并测定具体的化合物的选择性程度。测定这种抑制的方法之一为测定本发明化合物对下游基因产物上调的作用。在Ramos/IL4测定法中，用细胞因子白介素-4(IL-4)刺激B细胞，导致通过JAK家族激酶JAK1和JAK3磷酸化的JAK/Stat途径激活，激活JAK/Stat途径又将转录因子Stat-6磷酸化并激活。被激活的Stat-6上调的基因之一为低亲和力IgE受体CD23。为研究抑制剂(例如本文中所述2，4-取代的嘧啶二胺化合物)对JAK1和JAK3激酶的作用，用人IL-4刺激人Ramos B细胞。刺激后10’，将细胞置于细胞内流式细胞计，测定STAT-6磷酸化的程度。刺激后20-24小时，为测定CD23上调，将细胞染色，用流式细胞计分析。与对照相比，减少的磷酸化的STAT-6和/或存在的细胞表面CD23的量证明试验化合物能有效抑制JAK激酶途径。

另外，Ramos B细胞的IL-6刺激还诱导JAK 1、2和Tyk2，导致Stat-3和Erk磷酸化。刺激后10’，将细胞置于细胞内流式细胞计，测定化合物抑制这些磷酸化事件的能力。为具体测定JAK2的活性，需使用由Stat5控制的表达β-内酰胺酶报道基因的CellSens或irf1-bla HEL细胞系(Invitrogen，Carlsbad，CA)。这些细胞表达组成型活性JAK2突变体(JAK2V617F)，该突变体自然存在于骨髓增生瘤中(Constantinescu，S.等，Trends Biochem。Sci.，2008；33：122-31)。用减少的β-内酰胺酶报道基因的量表示化合物的JAK2抑制活性的指标。

还可通过测定本文中所述本发明化合物对A549肺上皮细胞和U937细胞的作用表征本发明化合物的活性。A549肺上皮细胞和U937细胞上调ICAM-1(CD54)表面表达，以响应多种不同刺激。因此，用ICAM-1表达作为示值读数，可在相同细胞类型中评价试验化合物对不同信号事件途径的作用。用通过IL-1β受体的IL-1β刺激可以激活TRAF6/NFκB途径，导致ICAM-1上调。IFNγ通过激活JAK1/JAK2途径诱导ICAM-1上调。可通过流式细胞计得出的化合物剂量曲线定量ICAM-1，并计算EC₅₀值。

还可通过测定本文中所述本发明化合物对A549肺上皮细胞和U937细胞的作用表征本发明化合物的活性。A549肺上皮细胞和U937细胞上调ICAM-1(CD54)表面表达，以响应多种不同刺激。因此，用ICAM-1表达作为示值读数，可在相同细胞类型中评价试验化合物对不同信号事件途径的作用。用通过IL-1β受体的IL-1β刺激可激活TRAF6/NFκB途径，导致ICAM-1上调。IFNγ通过激活JAK1/JAK2途径诱导ICAM-1上调。可通过流式细胞计得出的化合物剂量曲线定量ICAM-1，并计算EC₅₀值。该类型测定方法的举例在实施例中有更详细的描述。

按本文中所述测定方法测定，本文中所述活性化合物通常抑制JAK激酶途径，它们的IC₅₀为约1mM或更小。当然，有经验的技师会意识到，显示较小IC₅₀(在例如100μM、75μM、50μM、40μM、30μM、20μM、15μM、10μM、5μM、1μM、500nM、100nM、10nM、1nM或更小数量级)的化合物尤其可用于治疗用途。在其中需要对特定细胞类型具有特异性活性的情况下，测定化合物对需要的细胞类型的活性，对其它细胞类型缺乏活性的化合物进行逆筛选(counter-screened)。在此类逆筛选中，所需要的“无活性”或需要的活性与无活性的比例可不同，可由使用者选择。

活性化合物通常也可抑制IL-4刺激的在B-细胞中的CD23的表达，它们的IC₅₀为约20μM或更小，通常为约10μM、1μM、500nM、100nM、10nM、1nM或更小。可使用的合适的测定方法为在实施例“用于用IL-4刺激的Ramos B细胞系的测定方法”中描述的测定方法。在一些实施方案中，按实施例中所述测定方法，本发明活性化合物的IC₅₀小于或等于5μM、大于5μM但小于20μM、大于20μM，或大于20μM但小于50μM。。

活性化合物通常还可抑制由U937或A549细胞暴露于IFNγ诱导的ICAM1(CD54)表达，活性化合物的IC₅₀为20μM或更小，通常为约10μM、1μM、500nM、100nM、10nM、1nM或更小。可通过功能细胞测定方法，用分离的A549或U937细胞系测定抗在IFNγ刺激的细胞中表达ICAM(CD54)的IC₅₀。可使用的合适的测定法为实施例中所述测定方法，分别为“用IFNγ刺激的A549表皮细胞系”和“U937 IFNγICAM1 FACS测定”。在一些实施方案中，按实施例中所述测定方法，本发明活性化合物的IC₅₀小于或等于20μM、大于20μM或大于20μM但小于50μM。

d.组合物和给予方法

本发明还提供组合物，该组合物含一种或多种式(I)化合物或其药学上可接受的盐、酯或前药，以及药学上可接受的载体或稀释剂。可以意识到，在本发明中，可使式(I))化合物中的官能团衍生，得到前药衍生物，该衍生物可在体内再转化为母体化合物。此类前药的实例包括生理学上可接受的和代谢易变酯衍生物，例如由该化合物的羟基衍生的甲氧基甲酯、甲硫基甲酯或新戊酰氧基甲酯，或由该化合物的氨基衍生的氨基甲酰基部分。另外，可在体内产生母体式(I)化合物的类似于代谢易变酯或氨基甲酰基的式(I)化合物的任何生理上可接受的等价物也在本发明范围内。

本文中使用的术语“药学上可接受的盐”是指任何酸或碱加成盐，在药学剂量的盐中，它们的相反离子对患者无毒。许多药学上可接受的盐在药学领域中熟知。如果本发明化合物的药学上可接受的盐用于这些组合物，则优选那些由无机或有机酸和碱衍生的盐。此类酸式盐包括以下：乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、富马酸盐、lucoheptanoate、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、草酸盐、扑酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基-丙酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐、十一酸盐、氢卤酸盐(例如盐酸盐和氢溴酸盐)、硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐、氨基磺酸盐、丙二酸盐、水杨酸盐、亚甲基-双-b-羟基萘磺酸盐(naphthoate)、2，5二羟苯甲酸盐(gentisate)、羟乙磺酸盐、二-对甲苯酰酒石酸盐、乙磺酸盐、环己基氨基磺酸盐、奎尼酸盐等。药学上可接受的碱加成盐包括但不限于由碱或碱土金属碱或常用有机碱例如三乙胺、吡啶、哌啶、吗啉、N-甲基吗啉衍生的那些盐；铵盐；碱金属盐例如钠和钾盐；碱土金属盐例如钙和镁盐；由有机碱形成的盐例如二环己基胺盐、N-甲基-D-葡糖胺，以及由氨基酸例如精氨酸、赖氨酸等形成的盐。

另外，还可用试剂如低级烷基卤例如甲基、乙基、丙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物；硫酸二烷基酯例如硫酸二甲基、二乙基、二丁基和二戊基酯；长链烷基卤例如癸基、十二烷基、十四烷基和十八烷基的氯化物、溴化物和碘化物；芳烷基卤例如苄基溴和苯乙基溴等将含碱性氮的基团季铵化。由此得到水或油溶性或可分散产物。

也可通过引入合适的官能团修饰用于本发明组合物和方法的化合物以增加选择性生物性质。此类修饰在本领域中已知，包括使增加进入给定生物系统(例如血液、淋巴系统、中枢神经系统等)的生物渗透、增加口服利用度、增加溶解度以便通过注射给药、改变代谢和改变排泄速度的那些修饰。

可通过本领域熟知的方法例如常规制粒、混合、溶解、包囊、冻干或乳化方法等制备本发明药用组合物。可以包括颗粒、沉淀或粒子、粉末在内的各种形式制备组合物，包括冻干、旋转干燥或喷雾干燥粉末、无定形粉末、片剂、胶囊剂、糖浆、栓剂、注射剂、乳剂、酏剂、混悬液或溶液。制剂可任选含稳定剂、pH调节剂、表面活性剂、生物利用度改性剂和这些的组合。

术语“单位剂量形式”是指适合人患者和其它哺乳动物用的单一剂量的物理上分离的单元，各单元含计算的产生需要的起效、耐受性和/或疗效的预定量的药物和药用赋形剂(例如安瓿)。另外，可制备较浓组合物，然后可由该浓组合物制备较稀的单位剂量组合物。因此，较浓组合物须基本上含大于一种或多种syk和/或JAK抑制剂的量，例如至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多倍。

本领域技术人员已知制备此类剂型的方法(参见例如Remington′s Pharmaceutical Sciences，第18版，Mack Publishing Co.，Easton，PA(1990))。另外，还可用合成有机化学领域中的技术人员已知的标准方法，例如按照J，March，Advanced Organic Chemistry：Reactions，Mechanisms and Structure，第4版(New York：Wiley-Interscience，1992)制备本发明syk和/或JAK抑制剂的药学上可接受的盐(例如酸加成盐)并加入组合物中。

组合物通常含常规药物载体或赋形剂，还可含其它药用物质、载体、辅料、稀释剂、组织渗透促进剂、稳定剂等。优选，组合物含约0.01％-约90％，优选约0.1％-约75％，更优选约0.1％-50％，还更优选约0.1％-10％(重量)的一种或多种syk和/或JAK抑制剂，其余部分由合适的药物载体和/或赋形剂组成。可通过本领域中熟知的方法例如Remington′s Pharmaceutical Sciences(同上)，使合适的赋形剂与具体组合物和给药途径相匹配。

可用于这些组合物的药学上可接受的载体包括离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂；血清蛋白例如人血清白蛋白；缓冲物质例如磷酸盐；甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、水、盐或电解质例如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐；胶体二氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素类物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛酯。

合适的赋形剂的实例包括但不限于乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯胶、磷酸钙、藻酸盐、黄芪胶、明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、水、盐水、糖浆、甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素和聚丙烯酸，例如卡波普。组合物还可含润滑剂例如滑石粉、硬脂酸镁和矿物油；湿润剂；乳化剂；悬浮剂；防腐剂例如甲基-、乙基-和丙基-羟基-苯甲酸酯；pH调节剂例如无机和有机酸和碱；甜味剂；和矫味剂。

有利的是，可通过任何可接受的给药模式给予含一种或多种syk和/或抑制剂和一种或多种合适的药物赋形剂的组合物。因此，给药可以是例如口服、局部、静脉内、皮下、经皮、透皮、肌内、关节内、肠胃外、动脉内、皮内、心室内、颅内、腹膜内、病变内、鼻内、直肠、阴道、吸入或通过植入储库。本文中使用的术语“肠胃外”包括皮下、静脉内、肌内、关节内、滑液内、胸骨内、鞘内、肝内、病变内和颅内注射或输注技术。优选，通过口服或静脉内给予组合物。可将本发明制剂设计为短效、速释或长效。再另外，可通过局部而非全身方式给予化合物，例如给予(例如注射)缓释制剂。按照代表性实施方案，将本发明组合物配制为给予哺乳动物优选人的药物。

可重复给予含一种或多种syk和/或JAK抑制剂的本发明组合物，例如至少2、3、4、5、6、7、8或更多次，或可通过连续输注给予组合物。给药的合适部位包括但不限于皮肤、支气管、肠胃、肛门、阴道、眼睛和耳朵。制剂可采用固体、半固体、冻干粉末形式或液体剂型，例如片剂、丸剂、胶囊剂、散剂、溶液、混悬液、乳液、栓剂、滞留型灌肠剂、霜剂、软膏剂、洗剂、凝胶剂、气雾剂等，优选适合简单给予准确剂量的单位剂型。

本发明药用组合物可以为任何口服可接受的剂型，它们包括片剂、胶囊剂、扁囊剂、乳液、混悬液、溶液、糖浆、酏剂、喷雾剂、大药丸剂(boluses)、锭剂、散剂、颗粒剂和缓释制剂。用于口服给药的合适的赋形剂包括药用级甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、滑石粉、纤维素、葡萄糖、明胶、蔗糖、碳酸镁等。在用于口服的片剂的情况下，常用的载体包括乳糖和玉米淀粉。通常还加入润滑剂例如硬脂酸镁。对于胶囊剂，有用的稀释剂包括乳糖和干燥玉米淀粉。当口服用药需要水混悬液时，将活性成分与乳化和悬浮剂混合。也可酌情加入一些甜味剂、矫味剂或着色剂。

在某些实施方案中，组合物采用丸剂、片剂或胶囊剂形式，因此，组合物可含与一种或多种syk和/或JAK抑制剂联合一起的稀释剂，例如乳糖、蔗糖、磷酸氢二钙等；崩解剂，例如淀粉或其衍生物；润滑剂，例如硬脂酸镁等；和/或粘合剂，例如淀粉、阿拉伯胶、聚乙烯吡咯烷酮、明胶、纤维素及其衍生物。可通过本领域技术人员已知的任何压制或模塑方法制备片剂。可通过在合适的机器中压制任选与辅助成分(例如粘合剂、润滑剂、稀释剂、崩解剂或分散剂)混合的自由流动形式(例如粉末或颗粒)的syk和/或JAK抑制剂，制备压制片剂。可通过在合适的机器中塑造syk和/或JAK抑制剂与任何合适的载体的粉末混合物制备模塑片剂。

或者，本发明药用组合物可以为用于直肠给药的栓剂形式。可通过使药物与合适的在室温下为固体但在直肠温度下为液体并从而在直肠中释放药物的适合的非刺激性赋形剂混合，制备这些栓剂。此类材料包括可可豆脂、蜂蜡、聚乙二醇(PEG)、硬化脂和/或氢化椰油甘油酯。适合直肠给药的组合物也可含直肠灌肠剂单位，该单位含一种或多种syk和/或JAK抑制剂和药学上可接受的溶媒(例如50％乙醇水溶液或盐水溶液)，此类溶媒与直肠和/或结肠在生理上相容。直肠灌肠剂单位含被惰性盖(inert cover)保护的涂药器尖端，该尖端优选由聚乙烯组成，用润滑剂例如白凡士林润滑，优选由单向阀保护，以阻止发出的药物回流。直肠灌肠剂单位还具有足够长度，优选2英寸，将其通过肛门插入结肠。

可通过将一种或多种syk和/或JAK抑制剂和任选一种或多种药学上可接受的辅料溶于或分散在载体例如盐水溶液、葡萄糖水溶液、甘油、乙醇等中，形成例如用于口服、局部或静脉内给药的溶液或混悬液，制备液体组合物。可用无菌液体例如油、水、乙醇及其组合制备液体混悬液或溶液形式的药物制剂。对于口服或肠胃外给药，可加入可药用的表面活性剂、悬浮剂或乳化剂。混悬液可含油，例如花生油、芝麻油、棉籽油、玉米油和橄榄油。混悬液制剂也可含脂肪酸的酯，例如油酸乙酯、肉豆蔻酸异丙酯；脂肪酸甘油酯和乙酰脂肪酸甘油酯。混悬液制剂可包含醇，例如乙醇、异丙醇、十六醇、甘油和丙二醇。醚例如聚(乙二醇)；石油烃例如矿物油和凡士林，水也可用于混悬液制剂。

本发明药用组合物也可为局部给药形式，尤其是当治疗靶标包括通过局部施用容易进入的区域或器官时，这些器官的疾病包括眼睛、皮肤或下肠道的疾病。容易制备用于这些区域或器官中各区域或器官的合适的局部制剂。对于局部给药，含一种或多种syk和/或JAK抑制剂的组合物可为乳液、洗剂、凝胶剂、泡沫、霜剂、胶冻、溶液、混悬液、软膏剂和透皮贴剂形式。

可通过直肠栓剂制剂(参见以上)或合适的灌肠剂制剂实现在下肠道局部施用。也可使用局部透皮贴剂。对于局部施用，可配制合适的软膏剂形式的药用组合物，该软膏剂含悬浮于或溶于一种或多种载体的活性成分。用于局部给予本发明化合物的载体包括但不限于矿物油、液体凡士林、白凡士林、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯化合物、乳化蜡和水。或者，可配制合适的洗剂或霜剂形式的药用组合物，这些洗剂或霜剂含悬浮于或溶于一种或多种药学上可接受的载体的活性成分。合适的载体包括矿物油、司盘-60、吐温-60、鲸蜡酯、蜡、鲸蜡醇、2-辛基十二醇、苯甲醇和水。

也可通过鼻气雾剂或吸入给予本发明药用组合物。对于通过吸入递药，可通过喷雾器递送干燥粉末或液体形式的组合物。按照药物制剂领域中已知技术制备此类组合物，且可在盐水中，用苯甲醇或其它合适的防腐剂、加强生物利用度的吸收促进剂、氟碳化合物和/或其它常规增溶剂或分散剂制备溶液形式的组合物。

对于眼用，可在等渗调pH的无菌盐水中，配制微粉化混悬液形式的药用组合物，或优选在等渗调pH的无菌盐水中，用或不用防腐剂例如苯扎氯铵配制溶液形式的药用组合物。或者，对于眼用，可以配制膏剂形式的药用组合物，如石油蜡(petrolatum)。

对于肠胃外给药，组合物可为无菌注射液和无菌包装粉末形式。优选，在pH约4.5-约7.5中配制注射液。

无菌注射形式的本发明组合物为水或油混悬液。可按本领域中已知技术，用合适的分散或湿润剂和悬浮剂配制这些混悬液。无菌注射制剂也可为溶于或悬浮于无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂的无菌注射溶液或混悬液，例如溶于1，3-丁二醇的溶液。可使用的可接受的溶媒和溶剂包括水、林格氏液和等渗氯化钠溶液。另外，无菌非挥发油通常还用作溶剂或悬浮基质。为此，可使用包括合成的甘油单酯或二酯在内的任何品牌的非挥发油。与天然药学上可接受的油例如橄榄油或蓖麻油，尤其是它们的聚氧乙基化形式相同，脂肪酸例如油酸及其甘油酯衍生物可用于制备注射制剂。这些油溶液或混悬液也可含长链醇稀释剂或分散剂，例如羧甲基纤维素或通常用于包括乳液和混悬液在内的药学上可接受的剂型的制剂中的类似分散剂。其它常用的表面活性剂例如吐温、司盘和通常用于制备药学上可接受的固体、液体或其它剂型的其它乳化剂或生物利用度促进剂也可用于制剂目的。可配制通过注射例如大剂量注射或连续输注用于肠胃外给药的化合物。注射用单位剂型可以在安瓿或多剂量容器中。

也可提供冻干形式的本发明组合物。此类组合物可包含给药前用于复溶的缓冲剂例如碳酸氢盐，或冻干组合物中可包含缓冲剂，用于用例如水复溶。冻干组合物还可含合适的血管收缩药，例如肾上腺素。可通过注射器提供冻干组合物，任选与用于复溶的缓冲剂包装在一起，以便可立即给予患者该复溶组合物。

任何含有效量的化合物的以上剂型均在常规实验范围和本发明范围内。可根据给药途径和剂型调整治疗有效剂量。本发明代表性化合物为显示高治疗指数的制剂。治疗指数是毒性与疗效的剂量比例，可按LD₅₀与ED₅0的比例表示该指数。LD₅₀为使50％种群致死的剂量，ED₅₀为在50％种群中达到治疗有效的剂量。通过标准药学方法，在动物细胞培养基或实验动物中测定LD₅₀和ED₅₀。

除上述那些代表性剂型外，本领域技术人员通常还知道其它药学上可接受的赋形剂和载体以及剂型，且包括在本发明中。应理解，任何具体患者的特定剂量和治疗方案要取决于多种因素，它们包括使用的具体化合物的活性、患者的年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食状况、给药时间、排泄速度、联合药物、治疗医师的判断和所治疗的具体疾病的严重性。活性成分的量还取决于具体化合物和(如果存在的话)组合物中的其它治疗药物。

e.使用方法

本发明提供在有需要的患者(例如人或非人)中抑制或减少syk和/或JAK活性和治疗或缓解syk和/或JAK相关状态、症状、状况、病症或疾病的方法。在一个实施方案中，syk和/或JAK相关状态、症状、状况、病症或疾病至少部分由syk和/或JAK激酶活性介导。在更具体的实施方案中，本发明提供治疗至少部分由syk和/或JAK激酶活性介导的疾病或病症的方法，所述疾病或病症为心血管病、炎性疾病或自身免疫疾病。

在一个实施方案中，本发明提供在哺乳动物中预防或治疗特征在于不需要的血栓形成的疾病的方法，该方法包括给予所述哺乳动物治疗有效量的本发明化合物的步骤。此类疾病包括但不限于再狭窄、急性冠状动脉综合征、心肌梗塞、不稳定心绞痛、顽固性心绞痛、血栓溶解治疗后或冠状动脉血管成形术后发生的闭塞性冠状动脉血栓形成、血栓形成介导的脑血管综合征、栓塞性中风、血栓形成中风、一过性局部缺血发作、静脉血栓形成、深静脉血栓形成、肺栓塞、凝血病、弥散性血管内凝血、血栓形成性血小板减少性紫癜、血栓闭塞性脉管炎、与肝素引起的血小板减少症有关的血栓形成疾病、与体外循环有关的血栓形成并发症、与器械操作法(例如心脏或其它血管内导管插入)有关的血栓形成并发症、主动脉内气囊泵、冠状动脉支架或人造心脏瓣膜、需要安装假体装置的情况等。

在再一个实施方案中，本发明提供治疗以下疾病的方法：血栓形成、免疫性血小板减少性紫癜、肝素引起的血小板减少症、扩张型心肌病、镰状细胞病、动脉粥样硬化症、心肌梗塞、血管炎、不稳定心绞痛或急性冠状动脉综合征。

在另一个实施方案中，本发明还提供治疗以下疾病的方法：过敏、哮喘、风湿性关节炎、B细胞介导的疾病(例如非霍奇金氏淋巴瘤)、抗磷脂综合征、红斑狼疮、银屑病、多发性硬化、晚期肾病或慢性淋巴细胞白血病。

在另一个实施方案中，本发明提供治疗溶血性贫血或免疫血小板减少性紫癜的方法。

本文中所述化合物还是JAK激酶的有效和/或选择性抑制剂。因为该活性，化合物可用于多种体外、体内和离体环境，以调节或抑制JAK激酶活性、其中JAK激酶起作用的信号事件级联以及受此类信号事件级联影响的生物反应。例如，在一个实施方案中，可用化合物在体外或体内、在基本上表达JAK激酶的任何细胞类型(例如，其中例如主要表达JAK3的造血细胞中)抑制JAK激酶。也可用它们调节其中JAK激酶，尤其是JAK3起作用的信号转导级联。此类依赖JAK的信号转导级联包括但不限于细胞因子受体的信号事件级联，细胞因子受体的信号事件级联涉及共有γ链，例如IL-4、IL-7、IL-5、IL-9、IL-15和IL-21，或IL-2、IL-4、IL-7、IL-9、IL-15和IL-21受体信号事件级联。也可在体外或体内使用化合物，以调节，尤其是抑制受此类依赖JAK的信号转导级联影响的细胞或生物反应。此类细胞或生物反应包括但不限于IL-4/ramos CD23上调和IL-2介导的T细胞增殖。重要的是，可用所述化合物在体内抑制JAK激酶作为用于治疗或预防全部或部分由JAK激酶活性介导的疾病(本文中称为“JAK激酶介导的疾病”)的治疗方法。可用所述化合物治疗或预防的JAK激酶介导的疾病的非限制性实例包括但不限于以下：过敏；哮喘；自身免疫病例如移植排斥(例如肾、心脏、肺、肝脏、胰腺、皮肤、小肠、大肠、移植物抗宿主病(HVGR)和移植物抗宿主反应(GVHR))、类风湿性关节炎和肌萎缩性侧索硬化；T细胞介导的自身免疫病，例如多发性硬化、银屑病和斯耶格伦综合征；II型炎性疫病，例如血管炎症(包括脉管炎、动脉炎、动脉粥样硬化症和冠状动脉病)；中枢神经系统疾病，例如中风；肺病例如闭塞性支气管炎和原发性肺动脉高血压；实体瘤、迟发型IV过敏反应；以及血液系统恶性疾病例如，白血病和淋巴瘤。

可按所述方法治疗或预防的至少部分由JAK激酶介导的疾病的实例包括但不限于过敏、哮喘、自身免疫病例如移植排斥(例如肾、心脏、肺、肝脏、胰腺、皮肤、移植物抗宿主病(HVGR)等)、类风湿性关节炎和肌萎缩性侧索硬化、多发性硬化、银屑病和斯耶格伦综合征、II型炎性疾病例如血管炎(包括脉管炎、动脉炎(ateritis)、动脉粥样硬化症和冠状动脉病)或其它炎性疫病，例如骨关节炎、炎性肠疾病、溃疡性结肠炎、局限性回肠炎、自发性炎性肠疾病、过敏性肠综合征、痉挛性结肠、低度伤疤(例如硬皮病、增加的纤维变性、疤痕疙瘩、手术后疤痕、肺纤维变性、血管痉挛、偏头痛、再灌注损伤和心肌梗塞后)，以及干燥复征或综合征；中枢神经系统疾病例如中风；肺病例如闭塞性支气管炎和原发性肺动脉高血压、迟发性或细胞介导的IV型过敏和实体癌，以及血液系统恶性疾病，例如白血病和淋巴瘤。

在另一个实施方案中，本发明提供抑制JAK激酶活性的方法，该方法包括使JAK激酶与有效抑制JAK激酶活性的量的化合物接触，其中所述化合物选自本发明化合物。在本文中所述方法的一些实施方案中，在体内实施所述方法。

在另一个实施方案中，本发明提供抑制JAK激酶活性的方法，该方法包括在体外使JAK3激酶与有效抑制JAK激酶活性的量的化合物接触，其中化合物选自本发明化合物。

在特定实施方案中，可用所述化合物在接受者中治疗和/或预防器官和/或移植排斥(即治疗和/或防止同种异体排斥)。可通过接受者的细胞介导的或体液免疫反应对存在于供体细胞膜上的移植物(组织相容性)抗原排斥同种异体移植物。最强的抗原受称为人A类白细胞(HLA)抗原的遗传loci的复合物的支配。与ABO血液类抗原一起，它们是可在人中可检测到的主要移植抗原。

移植后排斥通常可分为3类：超急性，发生在移植后数小时-数天；急性，发生在移植后数天-数月；和慢性，发生在移植后数月-数年。

超急性排斥主要通过攻击移植组织的宿主抗体产生造成。在超急性排斥反应中，移植后，很快在移植血管中观察到抗体。随即，发生血管凝块，导致局部缺血，最后坏死和死亡。移植梗塞对已知的免疫抑制疗法不产生应答。因为HLA抗原可在体外鉴定，用移植前筛选显著减少超急性排斥。因为该筛选，超急性排斥目前相对少见。

据认为，急性排斥由在移植组织中蓄积的抗原特异性细胞介导。由T细胞介导的对抗原的免疫反应(即HVGR或GVHR)是急性排斥的主要机制。这些细胞蓄积导致对移植组织的损害。据信，CD4+辅助T-细胞和CD8+细胞毒T-细胞参与了该过程，由供体和宿主树状细胞提供抗原。CD4+辅助T-细胞帮助使其它效应细胞例如巨噬细胞和嗜酸性粒细胞募集到移植物。也涉及接入(accessing)T细胞激活信号转导级联(例如CD28、CD40L和CD2级联)。

在多种情况下，细胞介导的急性排斥可通过强化免疫疗法反转。成功反转后，严重损害的移植物的元件通过纤维化愈合，移植物的其余部分似乎正常。急性排斥处理后，免疫抑制药物的剂量可减至极低水平。

慢性排斥是在肾移植中存在的特殊问题，通常隐性进行，尽管增加免疫抑制治疗。据认为，其大部分由于细胞介导的IV型超敏所致。该病理特性不同于急性排斥的病理特性。动脉内皮主要涉及广泛增生，该增生可逐渐使血管腔闭塞，导致局部缺血、纤维化、内膜增厚和动脉粥样硬化改变。慢性排斥主要由于移植血管系统的进行性消失所致，象缓慢的血管炎过程。

在IV型超敏中，当抗原分别与I类或II类MHC分子复合时，CD8细胞毒T-细胞和CD4辅助T细胞识别细胞内或细胞外合成的抗原。巨噬细胞与提供抗原的细胞具有相同的功能并释放IL-1，IL-1促进辅助T-细胞增殖。辅助T-细胞释放干扰素γ和IL-2，干扰素γ和IL-2一起调节由巨噬细胞激活介导的迟发型活性过强反应(hyperactivity)和由T细胞介导的免疫。在器官移植的情况下，当接触时，细胞毒T-细胞摧毁移植物细胞。

因为JAK激酶在T细胞激活中起关键作用，所以可用本文中所述化合物治疗和/或预防移植排斥的多个方面，尤其可用于治疗和/或预防至少部分由T细胞介导的排斥反应，例如HVGR或GVHR。也可用所述化合物在移植物接受者，尤其是在肾移植物接受者中治疗和/或预防移植慢性排斥。也可在将组织或器官移植到接受移植者前，给予组织或器官所述化合物。

在另一个实施方案中，本发明提供治疗T细胞介导的自身免疫疾病的方法，该方法包括给予患这种自身免疫疾病的患者有效治疗自身免疫疾病的量的化合物，其中所述化合物选自本发明化合物。在一些方法实施方案中，自身免疫疾病为多发性硬化(MS)、银屑病或斯耶格伦综合征。此类自身免疫疾病包括但不限于通常称为单器官或单细胞型自身免疫病的那些自身免疫病和通常称为涉及全身自身免疫疾病的那些自身免疫疾病。通常称为单器官或单细胞型自身免疫病的疾病的非限制性实例包括：桥本甲状腺炎、自身免疫溶血性贫血、恶性贫血病的自身免疫萎缩性胃炎、自身免疫脑脊髓炎、自身免疫睾丸炎、古德帕斯彻病、自身免疫血小板减少症、交感性眼炎、重症肌无力、格雷夫斯病、原发性胆汁性肝硬变、慢性活动性肝炎、溃疡性结肠炎和膜性肾小球肾炎。通常称为涉及全身性自身免疫病的疾病的非限制性实例包括：系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、斯耶格伦综合征、赖特综合征、多肌炎-皮肌炎、全身性硬皮病、结节性多动脉炎、多发性硬化和大疱性类天疱疮。可为β-细胞(体液)类或T细胞类的其它自身免疫病包括科根综合征、关节强硬性脊髓炎、韦格纳肉芽肿病、自身免疫脱发、I型或青少年糖尿病和甲状腺炎。

可用此类前药治疗或预防的自身免疫病的类型包括涉及因对免疫原或对内源性和/或外源性来源的抗原的体液和/或细胞介导的反应发生组织损伤的那些病症。此类疾病通常称为与非致敏性(即II型、III型和/或IV型)过敏反应有关的疾病。

I型过敏反应通常是因与特异性外源性抗原接触后药理活性物质释放例如从肥大和/或嗜碱性细胞中释放组织胺所致。如上所述，此类I型反应在多种疾病中起作用，这些疾病包括过敏性哮喘、过敏性鼻炎等。

当免疫球蛋白与细胞或组织的抗原成分或与细胞或组织紧密偶合的抗原或半抗原反应时，产生II型过敏反应(又称为细胞毒、依赖溶细胞补体或细胞刺激性过敏反应)。通常与II型过敏反应有关的疾病包括但不限于自身免疫溶血性贫血、新生儿溶血病和古德帕斯彻疾病。

III型过敏反应(又称为毒性综合、可溶性综合或免疫综合过敏反应)是由在血管或组织中的可溶性循环抗原-免疫球蛋白复合物的沉淀所致，伴随在免疫复合物沉淀的位置发生急性炎症反应。原型III型反应疾病的非限制性实例包括阿图斯反应、类风湿性关节炎、血清病、系统性红斑狼疮、某些类型的肾小球性肾病、多发性硬化和大疱性类天疱疮。

IV型过敏反应(通常称为细胞、细胞介导的、迟发型或结核菌素型过敏反应)通过与特定抗原接触导致的敏化的T淋巴细胞造成。与IV型反应有关的疾病的非限制性实例为接触性皮炎和同种异体移植排斥。

可用结构式(I)和(Ia)前药治疗或预防与任何以上非致敏性过敏反应相关的自身免疫病。具体地说，可用所述方法治疗或预防通常特征为单器官或单细胞型自身免疫病的那些自身免疫病，它们包括但不限于：桥本甲状腺炎、自身免疫溶血性贫血、自身免疫萎缩性胃炎、恶性贫血病、自身免疫脑脊髓炎、自身免疫睾丸炎、古德帕斯彻疾病、自身免疫血小板减少症、交感性眼炎、重症肌无力、格雷夫斯疾病、原发性胆汁性肝硬变、慢性活动性肝炎、溃疡性结肠炎和膜性肾小球肾炎，以及通常特征为与全身性自身免疫病有关的那些自身免疫病，它们包括但不限于：系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿性关节炎、斯耶格伦综合征、赖特综合征、多肌炎-皮肌炎、全身性硬皮病、结节性多动脉炎、多发性硬化和大疱性类天疱疮。

本领域技术人员会意识到，许多上列自身免疫病与严重症状有关，甚至在其中所述自身免疫疾病未缓解的情况下，症状的缓解可提供重要的治疗利益。

可单独应用使用本文中所述化合物的疗法，或可联合其它普通免疫抑制疗法，例如联合以下药物或方法：巯嘌呤；皮质类固醇，例如泼尼松；甲基泼尼松龙和泼尼松龙；烷化剂，例如环磷酰胺；神经钙蛋白抑制剂，例如环胞菌素、西罗莫司和他克莫司；肌苷一磷酸脱氢酶(IMPDH)的抑制剂，例如麦考酚酸、麦考酚酸莫酯和硫唑嘌呤；和设计的抑制细胞免疫但保留接受者体液免疫反应完整的物质，它们包括各种抗体(例如抗淋巴细胞球蛋白(ALG)、抗胸腺细胞球蛋白(ATG)、单克隆抗T细胞抗体(OKT3))和放射。可按它们的标准或常用剂量，按市售形式的药物附带的处方信息(也可参见：2006版The Physician′s Desk Reference中的处方信息)说明使用这些物质，文献中的内容通过引用结合到本文中。目前可从Salix Pharmaceuticals，Inc.得到商标名为AZASAN的硫唑嘌呤；目前可从Gate Pharmaceuticals，Inc.得到商标名为PURINETHOL的巯嘌呤；目前可从Roxane Laboratories，Inc.得到泼尼松和泼尼松龙；目前可从Pfizer得到甲基泼尼松龙；目前可从Wyeth-Ayerst得到商标名为RAPAMUNE的西罗莫司(雷帕霉素)；目前可从Fujisawa得到商标名为PROGRAF的他克莫司；目前可从Novartis得到商标名为SANDIMMUNE和可从Abbott得到商标名为GENGRAF的环胞菌素；目前可从Roche得到商标名为CELLCEPT和从Novartis得到商标名为MYFORTIC的IMPDH抑制剂，例如麦考酚酸莫酯和麦考酚酸；目前可从Glaxo Smith Kline得到商标名为IMURAN的硫唑嘌呤；和目前可从Ortho Biotech得到商标名为ORTHOCLONE、从Novartis得到商标名为SIMULECT(巴利昔单抗)和从Roche得到商标名为ZENAPAX(达珠单抗)的抗体。

在另一个实施方案中，可将所述化合物与syk激酶抑制剂联合给予。syk激酶为已知在Fcr受体信号事件和其它信号事件级联例如涉及B细胞受体信号事件中起关键作用的酪氨酸激酶(Turner等，(2000)，Immunology Today 21：148-154)和中性粒细胞中的整联蛋白β(1)、β(2)和β(3)(Mocsai等，(2002)，Immunity 16：547-558)。例如，syk激酶在肥大细胞中的高亲和力IgE受体信号事件中起关键作用，该信号事件导致引发过敏性攻击的多种化学介质激活并随后释放。但是，与协助调节涉及迟发型或细胞介导的IV型过敏反应的途径的JAK激酶不同，syk激酶协助调节涉及速发型IgE介导的I型过敏反应的途径。影响syk途径的一些化合物可能影响也可能不影响JAK途径。

有关合适的syk抑制性化合物的描述参见例如2003年1月31日提交的专利序列号10/355,543(公布号2004/0029902)；WO 03/063794；2003年7月29日提交的专利申请序列号10/631,029；WO 2004/014382；2004年7月30日提交的专利申请序列号10/903,263；2004年7月30日提交的PCT/US2004/24716(WO005/016893)；2004年7月30日提交的专利申请序列号10/903,870；2004年7月30日提交的PCT/US2004/24920；2004年11月24日提交的专利申请序列号60/630,808；2005年1月19日提交的专利申请序列号60/645,424；和2005年2月18日提交的专利申请序列号60/654,620，这些文献公开的内容通过引用结合到本文中。可单独使用本文中所述和syk抑制性化合物，或与一种或多种上述常规移植排斥治疗联用。

在一个特定实施方案中，可用所述化合物在患者中治疗或预防这些疾病，这些患者对syk抑制性化合物治疗或目前对特定疾病进行的其它治疗方法之一初期不产生应答(耐药)或变为不应答。所述化合物也可与syk抑制性化合物联合用于对syk-化合物耐药或不应答的患者。在下文中提供与所述化合物联合给予的合适的syk-抑制化合物。

在另一个实施方案中，本发明提供治疗T细胞介导的自身免疫疾病的方法，该方法包括给予患这种自身免疫疾病的患者有效治疗自身免疫疾病的量的化合物，其中所述化合物选自本发明化合物，且将该化合物与抑制syk激酶的化合物联合给予，抑制syk激酶的化合物的IC₅₀为至少10μM。

在另一个实施方案中，本发明提供在移植物接受者中治疗或预防同种异体移植排斥的方法，该方法包括给予移植物接受者有效治疗或预防排斥的量的化合物，其中所述化合物选自本文中所述本发明化合物。在再一个实施方案中，在将组织或器官移植给接受移植者前，给予组织或器官所述化合物。

在另一个实施方案中，本发明提供在接受移植者中治疗或预防同种异体移植排斥的方法，其中排斥为急性排斥，该方法包括给予接受移植者有效治疗或预防排斥的量的化合物，其中所述化合物选自本文中所述本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明提供在接受移植者中治疗或预防同种异体移植排斥的方法，其中排斥为慢性排斥，该方法包括给予接受移植者有效治疗或预防排斥的量的化合物，其中所述化合物选自本文中所述本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明提供在接受移植者中治疗或预防同种异体移植排斥的方法，其中排斥由HVGR或GVHR介导，该方法包括给予接受移植者有效治疗或预防排斥的量的化合物，其中所述化合物选自本文中所述本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明提供在接受移植者中治疗或预防同种异体移植排斥的方法，其中所述同种异体移植物选自肾、心脏、肝脏和肺，该方法包括给予接受移植者有效治疗或预防排斥的量的化合物，其中所述化合物选自本文中所述本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明提供在接受移植者中治疗或预防同种异体移植排斥的方法，其中所述同种异体移植物选自肾、心脏、肝脏和肺，该方法包括给予接受移植者有效治疗或预防排斥的量的化合物，其中所述化合物选自本文中所述本发明化合物，其中将该化合物与另一种免疫抑制剂联合给予。

在另一个实施方案中，本发明提供在接受移植者中治疗或预防同种异体移植排斥的方法，其中所述同种异体移植物选自肾、心脏、肝脏和肺，该方法包括给予接受移植者有效治疗或预防排斥的量的化合物，其中所述化合物选自本文中所述本发明化合物，其中将该化合物与另一种免疫抑制剂联合给予，其中所述免疫抑制剂选自环胞菌素、他克莫司、西罗莫司、IMPDH抑制剂、麦考酚酸、麦考酚酸莫酯、抗T细胞抗体和OKT3。

本文中所述化合物为IL-4信号事件的细胞因子调节剂。因此，所述化合物可延缓I型过敏反应的发生。因此，在一个特定实施方案中，可用化合物治疗此类反应，因此，可预防与这种过敏反应有关的、由这种过敏反应介导或造成的疾病(例如过敏)。例如，在预计暴露于抗原前，过敏患者可服用一种或多种本文中所述JAK选择性化合物，以延迟过敏反应发作或恶化或消除所有过敏反应。

当用于治疗或预防此类疾病时，可以一种或多种化合物的混合物形式单独，或以与可用于治疗此类疾病和/或与此类疾病有关的症状的其它药物形成的混合物或联合药物形式，给予所述化合物。也可按与可用于治疗其它病症或疾病的药物形成的混合物或联合药物的形式给予所述化合物，所述其它药物为例如甾体类、膜稳定剂、5-脂氧化酶(5LO)抑制剂、白三烯合成和受体抑制剂、IgE同工型开关或IgE合成的抑制剂、IgG同工型开关或IgG合成的抑制剂，β-激动剂、类胰蛋白酶抑制剂、阿司匹林、环氧合酶(COX)抑制剂、甲氨蝶呤、抗TNF药物、抗CD20抗体、PD4抑制剂、p38抑制剂、PDE4抑制剂和抗组织胺药物等，这些仅是示例的一小部分。可按前药或含活性化合物或前药的药用组合物的形式给予所述化合物。

在另一个实施方案中，本发明提供治疗或预防IV型过敏反应的方法，该方法包括给予患者有效治疗或预防过敏反应的量的化合物，其中所述化合物选自本文中所述本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明提供治疗或预防IV型过敏反应的方法，该方法实际上为预防性方法，该方法包括给予患者有效治疗或预防过敏反应的量的化合物，其中所述化合物选自本文中所述本发明化合物，且在暴露于过敏原前给予。

在另一个实施方案中，本发明提供抑制其中JAK3激酶起作用的信号转导级联事件的方法，该方法包括使表达与这种信号级联事件有关的受体的细胞与化合物接触，其中所述化合物选自本文中所述本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明提供治疗或预防JAK激酶介导的疾病的方法，该方法包括给予患者有效治疗或预防JAK激酶介导的疾病的量的化合物，其中所述化合物选自本文中所述本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明提供治疗或预防JAK激酶介导的疾病的方法，其中所述JAK介导的疾病为HVGR或GVHR，该方法包括给予患者有效治疗或预防JAK激酶介导的疾病的量的化合物，其中所述化合物选自本文中所述本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明提供治疗或预防JAK激酶介导的疾病的方法，其中所述JAK介导的疾病为急性同种异体移植物排斥，该方法包括给予患者有效治疗或预防JAK激酶介导的疾病的量的化合物，其中所述化合物选自本文中所述本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明提供治疗或预防syk和/或JAK激酶介导的疾病的方法，其中所述JAK介导的疾病为慢性同种异体移植物排斥，该方法包括给予患者有效治疗或预防JAK激酶介导的疾病的量的化合物，其中所述化合物选自本文中所述本发明化合物。

本发明活性化合物通常抑制syk和/或JAK/STAT途径。可在体外或体内，评价所述化合物作为syk激酶抑制剂的活性。在某些实施方案中，可按细胞测定法测试所述化合物的活性。

“细胞增殖病症”是指特征在于细胞异常增殖的病症。增殖病不表示对细胞生长速度的任何限制，而是仅表示丧失对影响生长和细胞分裂的正常控制。因此，在某些实施方案中，增殖病的细胞可具有与正常细胞相同的细胞分裂速度，但不响应限制这种生长的信号。“细胞增殖病”在赘生物或肿瘤范围内，赘生物或肿瘤为组织的异常生长。癌症是指特征在于细胞增殖的各种恶性肿瘤中任意一种，这些肿瘤具有侵入周围组织和/或转移到新的定居部位的能力。

通常，可用本文中公开的化合物治疗的细胞增殖病涉及特征在于异常细胞增殖的任何病症。这些包括各种良性或恶性、转移或非转移的肿瘤和癌症。可用本文中所述方法对抗癌症的特殊性质，例如组织侵袭性或转移性。细胞增殖病包括多种癌症，它们包括但不限于卵巢癌、肾癌、肠胃癌、肾癌、膀胱癌、胰腺癌、肺鳞状细胞癌和腺癌。

在某些实施方案中，所治疗的细胞增殖病是血液肿瘤，该肿瘤为造血系统的细胞畸形生长。造血系统恶性肿瘤的起源可位于与造血作用有关的多能性干细胞、多能性始祖细胞、低能定向始祖细胞、前体细胞和终末分化细胞。据信，某些造血系统恶性肿瘤疾病起源于具有自我更新能力的造血干细胞。例如，移植后可发展为特殊亚型的急性骨髓粒细胞白血病(AML)的细胞(Cynthia K。Hahn，Kenneth N。Ross，Rose M。Kakoza，Steven Karr，Jinyan Du，Shao-E Ong，Todd R。Golub，Kimberly Stegmaier，Sky是AML分化的新靶标(Syk is a new target for AML differentiation)，Blood，2007，110，摘要209)出现造血干细胞的细胞表面标记，表明造血干细胞是白血病细胞的来源。没有造血干细胞的细胞标记特性的母细胞似乎在移植后不能产生肿瘤(Blaire等，1997，Blood 89：3104-3112)。也能在一些造血系统恶性肿瘤疾病的干细胞起源中找到支持证据，该证据是可在造血细胞谱系的正常细胞和白血病母细胞中观察到与特定类型白血病有关的特殊染色体异常。例如，与约95％慢性髓细胞白血病有关的相互易位t(9q34；22q11)似乎存在于髓细胞、类红细胞和淋巴谱系细胞中，表明染色体异常起源于造血干细胞。在一些类型的CML中的细胞亚型显示造血干细胞的细胞标记表型。

尽管血液肿瘤通常起源于干细胞，但发育谱系的定向始祖细胞或更终末分化的细胞也可为某些白血病的来源。例如，在普通骨髓始祖细胞或粒细胞/巨噬细胞始祖细胞中强迫表达融合蛋Bcr/Abl(与慢性骨髓粒细胞白血病有关)产生白血病样病症。另外，未在具有标记表型的造血干细胞的细胞群中发现与白血病亚型有关的某些染色体异常，但在显示造血细胞途径的更分化状态的标记表型的细胞群中发现所述异常(Turhan等，1995，Blood 85：2154-2161)。因此，在模拟造血干细胞的自我更新的特性的某些情况下，尽管定向始祖细胞和其它分化的细胞可能对细胞分裂仅具有有限的潜力，但是白血病细胞可能已获得不受调控生长的能力(Passegue等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，2003，100：11842-9)。

在某些实施方案中，所治疗的血液肿瘤为淋巴细胞瘤，其中异常细胞源自淋巴样细胞谱系细胞和/或显示淋巴样细胞谱系细胞的特征表型。淋巴样细胞瘤可细分为B细胞瘤、T和NK细胞瘤，以及霍奇金淋巴瘤。B细胞瘤可再细分为始祖B细胞瘤和成熟/外周B细胞瘤。举例说明的B细胞瘤为前体B淋巴性白血病/淋巴瘤(前体B细胞急性淋巴性白血病)，而举例说明的成熟/外周B细胞瘤为B细胞慢性淋巴性白血病/小淋巴性淋巴瘤、B细胞幼淋巴性白血病、淋巴浆性淋巴瘤、脾缘区B细胞淋巴瘤、多毛细胞白血病、血浆细胞骨髓瘤/浆细胞瘤、MALT型的泛域缘区B细胞淋巴瘤、节缘区B细胞淋巴瘤、滤泡淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、弥散性大B细胞淋巴瘤、纵隔大B细胞淋巴瘤、原发性渗透性淋巴瘤和伯基特淋巴瘤/伯基特细胞白血病。T细胞和Nk细胞瘤再细分为前体T细胞癌和成熟(外周)T细胞瘤。具有代表性的前体T细胞瘤为前体T-淋巴细胞淋巴瘤/白血病(前体T细胞急性淋巴细胞白血病)，而具有代表性的成熟(外周)T细胞瘤为T细胞幼淋巴细胞白血病T细胞颗粒淋巴细胞白血病、攻击性NK细胞白血病、成人T细胞淋巴瘤/白血病(HTLV-1)、结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤；鼻型、致病型T细胞淋巴瘤、肝脾γ-δT细胞淋巴瘤、皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤、早样肉芽肿(Mycosis fungoides)/赛塞利综合征、退行性大细胞淋巴瘤；T/无效细胞，初级皮肤型外周T细胞淋巴瘤、未另外表征的(not otherwise characterized)血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤、退行性大细胞淋巴瘤、T/无效细胞，初级全身型。淋巴样细胞瘤中的第三种是霍奇金淋巴瘤，又称为霍奇金病。可用所述化合物治疗的该类疾病的具有代表性的诊断包括但不限于节状淋巴细胞超优势霍奇金淋巴瘤以及各种经典形式的霍奇金病，其中具有代表性的疾病是节状硬化霍奇金淋巴瘤(1级和2级)、富集淋巴细胞的经典霍奇金淋巴瘤、混合型细胞构成霍奇金淋巴瘤和淋巴细胞耗竭霍奇金淋巴瘤。在各种实施方案中，可用syk和/或JAK抑制性化合物治疗与异常JAK活性有关的任何淋巴样细胞瘤。

在某些实施方案中，所治疗的血液肿瘤为髓细胞瘤。该类瘤包括涉及或显示髓细胞谱系细胞的特征表型的一大类细胞增殖病。髓细胞瘤可细分为骨髓增生病、骨髓增生异常/骨髓增生疾病、骨髓增生异常综合征和急性髓细胞白血病。具有代表性的骨髓增生疾病为慢性骨髓粒细胞白血病(例如Philadelphia染色体阳性(t(9；22)(qq34；q11))、慢性嗜中性粒细胞白血病、慢性嗜酸性粒细胞白血病/嗜酸细胞增多综合征、慢性自发性骨髓纤维变性、红细胞增多症和原发性血小板增多症。具有代表性的骨髓增生异常/骨髓增生疾病为慢性单核髓细胞白血病、非典型性慢性骨髓粒细胞白血病和青少年单核髓细胞白血病。具有代表性的骨髓增生异常综合征为有环纹成高铁红细胞和无环纹成高铁红细胞的顽固性贫血病、伴多系发育不良的顽固性血细胞减少症(骨髓增生异常综合征)、伴过量胚细胞的顽固性贫血病(骨髓增生异常综合征)、5q-综合征和骨髓增生异常综合征。在各种实施方案中，可用所述syk和/或JAK抑制性化合物治疗与异常syk和/或JAK活性有关的任何髓细胞瘤。

在某些实施方案中，可用所述化合物治疗急性髓细胞白血病(AML)，该白血病代表具有可再细分病症的一大类髓细胞瘤。这些分支包括但不限于伴复发性细胞遗传易位的AML、伴多系发育不良的AML和其它未分类的AML。具有代表性的伴轮回细胞遗传易位的AML包括但不限于具有t(8；21)(q22；q22)的AML，AML1(CBF-α)/ETO、急性早幼粒细胞白血病(具有t(15；17)(q22；q11-12)的AML和变型，PML/RAR-α)、伴异常骨髓嗜酸性粒细胞(inv(16)(p13q22)或t(16；16)(p13；q11)、CBFb/MYH11X)的AML以及和11q23(MLL)异常的AML。具有代表性的伴多系发育不良的AML是与前骨髓增生异常综合征有关或无关的那些AML。未划分在任何可定义类的其它急性髓细胞白血病包括最小分化的AML、未成熟的AML、成熟AML、急性单核髓细胞白血病、急性单核型白血病、急性类红细胞型白血病、急性巨核细胞型白血病、急性嗜碱细胞白血病以及和伴骨髓纤维变性的急性全髓白血病。

本发明文中的“治疗”表示缓解与病症或疾病有关的症状，或终止那些症状进一步发展或恶化，或阻止或预防疾病或病症。

术语“哺乳动物”包括表达syk和/或JAK的生物体。哺乳动物的实例包括小鼠、大鼠、母牛、绵羊、猪、山羊、马、熊、猴、狗、猫，优选人。表达syk和/或JAK的转基因生物体也包括在该定义中

本发明方法包括给予哺乳动物或非人动物有效量的本文中所述化合物或组合物。本文中使用的本发明化合物或组合物的“有效量”包括拮抗或抑制syk和/或JAK的那些量。可通过例如可测定syk和/或JAK活性的任何测定方法检测拮抗或抑制syk和/或JAK的量，所述方法包括作为说明性试验方法的下述方法之一。有效量也可包括使与可通过抑制syk和/或JAK治疗的病症有关的症状缓解的那些量。因此，“syk拮抗剂”或“JAK拮抗剂”包括分别与syk或JAK相互作用并调节例如抑制或减少第二种化合物例如另一种syk或JAK配体分别与syk或JAK相互作用的能力的化合物。结合syk或JAK的化合物优选分别为syk或JAK拮抗剂。术语“结合syk的化合物”和“结合JAK的化合物”(例如显示与受体结合的结合亲和力)包括与syk或JAK相互作用从而分别调节syk或JAK活性的那些化合物。可用体外(例如细胞和非细胞类)或体内方法鉴定结合Syk和/或JAK的化合物。以下提供体外方法说明

用于本文中所述方法的化合物和组合物的量应在病症的严重程度中足以造成可按实施例中所述任何测定方法测定的减少值。需要的syk和/或JAK调节剂的量取决于调节剂对给定细胞型的有效性和治疗该病症需要的时间长度。在一些实施方案中，本发明组合物还可含另一种治疗药物。当使用第二种药物时，可以独立的剂型或作为单一剂型的一部分的形式给予第二种药物和本发明化合物或组合物。虽然一种或多种本发明化合物可作为单一疗法治疗病症、疾病或症状，但它们也可用于联合疗法，其中使用本发明化合物或组合物(治疗药物)与使用一种或多种治疗相同和/或其它类型病症、症状和疾病的其它治疗药物相结合。联合疗法包括同时或顺序给予两种或多种治疗药物。可按任何顺序给予药物。或者，可将多种治疗药物结合到可给予患者的单一组合物中。例如，单一药用组合物可含式I化合物、其药学上可接受的盐、酯或前药；另一种治疗药物(例如甲氨蝶呤)或其互变异构体、药学上可接受的盐、酯或其前药；以及药学上可接受的赋形剂或载体。

本发明包括具有式I的化合物、制备本发明化合物的方法、由至少一种本发明化合物和至少一种药学上可接受的载体或赋形剂制备药用组合物的方法，和用一种或多种本发明化合物治疗多种病症、症状和疾病(例如炎性、自身免疫性、神经、神经变性、肿瘤和心血管)的方法，此类疾病为例如RA、骨关节炎、过敏性肠疾病IBD、哮喘、慢性阻塞性肺部疾病COPD和MS。可将本发明化合物和它们的药学上可接受的盐和/或中性组合物与药学上可接受的赋形剂或载体配制在一起，得到的组合物可体内给予哺乳动物，例如男人、妇女和动物，治疗各种病症、症状和疾病。另外，可用本发明化合物制备可用治疗多种病症、症状和疾病的药物。

所有本发明化合物为有效的syk和/或JAK激酶抑制剂，它们的IC₅₀在相应测定中显示小于5μM数量级，其中多数化合物的IC₅₀为纳摩尔数量级，若干化合物的IC₅₀为亚纳摩尔数量级。在某些实施方案中，本发明化合物可为syk/JAK“双重”抑制剂，也就是说它们在一定程度上既抑制syk激酶，又抑制JAK激酶。在其它实施方案中，本发明化合物可选择性抑制syk激酶，但不显著抑制一种或多种JAK激酶。在其它实施方案中，本发明化合物可选择性抑制JAK激酶，但不显著抑制一种或多种syk激酶。

f.药盒

本发明的另一个方面是提供单一包装形式的药盒，该药盒包含独立的容器，其中本发明药用化合物、其组合物和/或盐与药学上可接受的载体联用，用于治疗其中syk和/或JAK起作用的状态、病症、症状和疾病。

实施例

提供以下实施例，用于说明但不限制要求保护的本发明。

用于制备这些化合物的原料和试剂通常可从产品供应商例如Aldrich Chemical Co.购得，或通过本领域技术人员已知方法，按照参考文献例如Fieser and Fieser’s Reagents for Organic Synthesis；Wiley&Sons：纽约，1967-2004，第1-22卷；Rodd’s Chemistry of Carbon Compounds，Elsevier Science Publishers，1989，第1-5卷和增补版；和Organic Reactions，Wiley&Sons：纽约，2005，第1-65卷中列举的方法制备。

如有需要，可用常规技术将原料和本合成反应流程的中间体分离，也可纯化，这些技术包括但不限于过滤、蒸馏、结晶、色谱等。可用常规方法表征此类材料，这些方法包括物理常数和光谱数据。

除有不同说明外，优选在惰性气氛下，在常压下，在约-78℃-约150℃下，更优选约0℃-约125℃下，最优选且方便在约室温(环境)温度例如约20℃-约75℃下进行本文中所述反应。

参考下面的实施例，采用本文中公开的方法或本领域熟知的其它方法合成本发明化合物。

可用配备2695 Separation Module的Waters Alliance色谱系统(Milford，Mass.)，通过高效液相色谱(HPLC)鉴定化合物和/或中间体。分析柱可以是Merck KGaA(Darmstadt，德国)的C-18 SpeedROD RP-18E柱。或者，可用配备Waters Acquity UPLC BEH C-18 2.1mm×15mm柱的Waters Unity(UPLC)系统特征。可用梯度洗脱，通常从5％乙腈/95％水开始至95％乙腈为止，对于Alliance系统，该梯度变化时间5分钟；对于Acquity系统，该梯度变化时间1分钟。所有溶剂可含0.1％三氟乙酸(TFA)。可通过在220或254nm的紫外线(UV)吸收检测化合物。HPLC溶剂可从EMD Chemicals，Inc。(Gibbstown，NJ)得到。在某些情况下，可通过使用玻璃载体硅胶板例如EMD Silica Gel 60 2.5cm×7.5cm板的薄层层析(TLC)评价纯度。可在紫外线下，或通过使用熟知的碘蒸汽和其它各种显色技术容易目检TLC结果。

可在两种Agilent 1100系列LCMS仪器中的一种仪器上进行质谱分析，以乙腈/水作流动相。一个系统可用TFA作为调节剂，按正离子模式测定[按MH+，(M+1)或(M+H)⁺报告]，另一个系统可使用甲酸或乙酸铵盐，按正离子模式[按MH+，(M+1)或(M+H)⁺报告]和负离子模式[按M-，(M-1)或(M-H)^-报告]测定。

可在Varian 400MHz NMR(Palo Alto，Calif.)上，对某些化合物进行核磁共振(NMR)分析。波谱对照可为TMS或已知化学位移的溶剂。

可通过元素分析(Robertson Microlit，Madison NJ.)评价某些本发明化合物的纯度。

可在Laboratory Devices Mel-Temp仪(Holliston，Mass.)上测定熔点。

可根据需要，用均购自Teledyne Isco，(Lincoln，NE)的Sq16x或Sg100c色谱系统和预装硅胶柱进行制备型分离。或者，可通过使用硅胶(230-400目)填充材料的闪柱层析或通过使用C-18反相柱的HPLC，纯化化合物和中间体。用于Isco系统和闪柱层析的典型溶剂可为二氯甲烷、甲醇、乙酸乙酯、己烷、丙酮、羟胺水溶液和三乙胺。用于反相HPLC的典型溶剂可为各种浓度的含0.1％三氟乙酸的乙腈和水。

通用方法

下列合成反应流程仅仅用于对能够合成本发明化合物的某些方法进行说明，在参考本申请公开的内容后，本领域技术人员可对这些反应流程进行各种改进，并建议他们进行此类改进。

实施例1

N2-(1H-吲唑-6-基)-N4-甲基-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺

于室温下，向2，4-二氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(2.0g，10.6mmol)的DCM(32mL)混悬液中加入NIS(2.4g，10.6mmol)。搅拌1小时后，通过过滤收集获得的沉淀物，获得2，4-二氯代-5-碘-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(1.8g)。

向2，4-二氯代-5-碘-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(1.80g，5.73mmol)的DCM(20mL)混合物中加入TsCl(1.09g，5.73mmol)和TEA(1.60mL，11.46mmol)，随后加入DMAP(70mg，0.573mmol)。于室温下搅拌1h后，浓缩溶液，残留物在EtOAc和H₂O之间分配，分离有机相，采用1N HCl、5％NaHCO₃洗涤，干燥并浓缩获得2，4-二氯代-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(2.0g)。

向2，4-二氯代-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(0.6g，1.28mmol)的nBuOH(2mL)混合物中加入甲基胺(2M THF，0.77mL，1.54mmol)和DIPEA(0.274mL，1.54mmol)。于室温下搅拌1h后，通过过滤收集获得的沉淀物，获得2-氯代-N-甲基-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(0.275g)。

向2-氯代-N-甲基-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.11mmol)、Pd(PPh₃)₂Cl₂(0.015g，0.022mmol)和吡啶-4-基硼酸(0.03g，0.24mmol)的对-二氧六环(0.7mL)混合物中加入Na₂CO₃(0.035g，0.33mmol)的水溶液(0.3mL)。脱气后，将混合物于100℃加热1.5h。混合物通过快速柱色谱纯化(己烷/EtOAc＝1∶1)，获得2-氯代-N-甲基-5-(吡啶-4-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(0.02g)。

向2-氯代-N-甲基-5-(吡啶-4-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(0.041g，0.091mmol)的nBuOH(0.8mL)混合物中加入6-氨基吲唑(0.024g，0.18mmol)和TMSCl(0.03mL，0.23mmol)。于115℃加热48h后，混合物通过制备性HPLC纯化，获得N²-(1H-吲唑-6-基)-N⁴-甲基-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺(0.011g)，MS(MH 357.1)，λ＝214.5，247.5，306.8。

实施例2

1-(4-(4-(4-(甲基氨基)-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基) 苯基)哌嗪-1-基)乙酮

向2-氯代-N-甲基-5-(吡啶-4-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(0.044g，0.11mmol)的nBuOH(0.6mL)混合物中加入1-(4-4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(0.047g，0.22mmol)和TMSCl(0.043mL，0.33mmol)。于115℃加热48h后，混合物通过制备性HPLC纯化，获得1-(4-(4-(4-(甲基氨基-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮(0.015g)，MS(MH 443.3)，λ＝259.4，302.1。

实施例3

N2-(1H-吲唑-6-基)-N4-甲基-5-(吡啶-3-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺

向2-氯代-N-甲基-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(0.175g，0.38mmol)、Pd(PPh₃)₂Cl₂(0.053g，0.076mmol)和吡啶-3-基硼酸(0.102g，0.83mmol)的二氧六环(2mL)混合物中加入Na₂CO₃(0.12g，1.14mmol)的水溶液(1mL)。脱气后，混合物于100℃加热1.5h。混合物通过快速柱色谱纯化(己烷/EtOAc＝1∶1)，获得2-氯代-N-甲基-5-(吡啶-3-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(0.084g)。

向2-氯代-N-甲基-5-(吡啶-3-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(0.075g，0.182mmol)的nBuOH(1mL)混合物中加入6-氨基吲唑(0.048g，0.36mmol)和TMSCl(0.06mL，0.46mmol)。于115℃加热72h后，混合物通过制备性HPLC纯化，获得N²-(1H-吲唑-6-基)-N⁴-甲基-5-(吡啶-3-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺(0.03g)，MS(MH 357.2)，λ＝203.9，246.3，305.6。

实施例4

1-(4-(4-(4-(环丙基氨基)-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基) 苯基)哌嗪-1-基)乙酮

向2，4-二氯代-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(0.414g，0.88mmol)的nBuOH(1.5mL)混合物中加入环丙基胺(0.0674mL，1.06mmol)和DIPEA(0.188mL，1.06mmol)。于室温下搅拌15h后，通过过滤收集获得的沉淀物，获得2-氯代-N-环丙基-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(0.3g)。

向2-氯代-N-环丙基-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(0.3g，0.61mmol)、Pd(PPh₃)₂Cl₂(0.086g，0.122mmol)和吡啶-4-基硼酸(0.165g，1.342mmol)的二氧六环(3mL)混合物中加入Na₂CO₃(0.2g，1.83mmol)的水溶液(1.5mL)。脱气后，将混合物于100℃加热1.5h。混合物通过快速柱色谱纯化(己烷/EtOAc＝1∶1)，获得2-氯代-N-环丙基-5-(吡啶-4-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(0.241g)。

向2-氯代-N-环丙基-5-(吡啶-4-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(0.12g，0.27mmol)的nBuOH(1mL)混合物中加入1-(4-4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(0.12g，0.54mmol)和TMSCl(0.087mL，0.68mmol)。于115℃48h后，混合物通过制备性HPLC纯化，获得1-(4-(4-(4-(环丙基氨基-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮(0.015g)，MS(MH 469.4)，λ＝203.9，280.7nm。

实施例5

4-(4-氨基苯基)-1-(5-氨基甲酰基-4-(环丙基氨基)嘧啶-2-基)吡啶鎓

步骤1：向搅拌的羧酸1.1(85g，540mmol)的亚硫酰氯(425mL)溶液中缓慢加入吡啶(8.5mL，0.11mmol)。将反应物于75℃搅拌过夜，此时将其浓缩，真空干燥，获得浅黄色粉末，它可以立即用于下一步骤。

步骤2：将获自步骤1的黄色固体用750mL乙醇缓慢稀释，回流过夜。第二天，通过HPLC确定反应完成，然后在冰浴中冷却，过滤固体，用乙醚洗涤，获得需要的乙基酯1.3，为类白色粉末(91g，两步收率87％)。C₇H₈N₂O₄的MS实测值为(M+H)⁺185.0。

步骤3：将酯1.3(22g，120mmol)溶于磷酰氯(60mL，600mmol)，混合物采用N，N-二乙基苯胺(27mL，167mmol)处理，将混合物加热至105℃直到HPLC确定反应完成。然后将其冷却至室温，缓慢加入1L的碎冰，形成米色沉淀，通过过滤收集沉淀，真空干燥，获得需要的二氯化物(1.4)，为浅黄色粉末(22.5g，85％)。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ9.13(s，1H)，4.37(q，2H)，1.32(t，3H)。

步骤4：将二氯嘧啶1.4(5.9g，27mmol)溶于乙腈(50mL)，采用二异丙基胺(5.2mL，30mmol)处理，随后采用环丙基胺(1.9g，27mmol)处理，于室温下搅拌直到所有的原料消耗完毕。然后反应混合物用水稀释至总体积为150mL，过滤收集沉淀物，获得需要的产物，为浅黄色固体(6.02g，87％)。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ8.60(S，1H)，8.48(d，1H)，4.52(m，1H)，4.29(q，2H)，2.30(m，2H)，2.04(m，2H)，1.73(m，2H)，1.30(t，3H)。

步骤5：乙基酯1.5(6.02g，24mmol)采用1，4-二氧六环(26mL)稀释，随后采用氢氧化锂水溶液(1.0M，26mL，26mmol)稀释，于室温下搅拌直到所有的原料转化为羧酸。然后反应物用水稀释至总体积为100mL，采用6MHCl将其酸化至pH＝2。然后过滤获得的混悬液，抽吸干燥获得3.51g羧酸(64％)。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ8.64(d，1H)，8.74(s，1H)，4.50(m，1H)，2.31(m，2H)，2.03(m，2H)，1.72(m，2H)。

步骤6：将羧酸1.6(3.15g，15mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(70mL)，采用HOBt(3.13g，23mmol)和EDC(4.4g，23mmol)处理。搅拌约25分钟后，加入氨(0.5M的1，4-二氧六环溶液，72mL，36mmol)，将反应物搅拌过夜。第二天早晨，反应物用水稀释至总体积为500mL，过滤收集需要的产物，获得浅米色固体3.62g(74％)。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ9.30(d，1H)，8.54(s，1H)，8.15(d，1H)，8.09(s，1H)，7.74(d，1H)，7.64(m，2H)，7.51(t，1H)，3.77(m，1H)，1.79(m，2H)，1.74(m，2H)，1.53(m，1H)，1.41(m，1H)。

步骤7：将苯并三唑基醚1.7(50mg，0.17mmol)、4-(吡啶基)-苯胺(0.26mmol)和对甲苯磺酸(30mg，0.17mmol)采用1，4-二氧六环(5mL)稀释，于120℃搅拌直到所有的原料消耗完全。将反应物冷却至室温，用水稀释，直接通过制备性HPLC纯化，冷冻干燥后获得需要的产物1。C₁₉H₁₉N₆O的MS实测值为(M)⁺347.3。

实施例6

1-(4-氨基苯基)-3-(5-氨基甲酰基-4-(环丙基氨基)嘧啶-2-基)-1H-咪唑 -3-鎓

根据实施例5步骤7中所述相似方法，采用4-(1H-咪唑-1-基)苯胺，制备上述化合物。C₁₇H₁₈N₇O的MS实测值为(M)⁺336.0。

实施例7

2-(6-氨基-7-氯代-1H-吲唑-1-基)-4-(环丙基氨基)嘧啶-5-甲酰胺

根据实施例5步骤7中所述相似方法，采用7-氯代-1H-吲唑-6-胺(自6-氨基吲唑，采用N-氯代琥珀酰亚胺，在一步反应中合成)，制备上述化合物。C₁₅H₁₇N₇OCl的MS实测值为(M+H)⁺344.2，346.2。

实施例8和9

1-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-3-甲酰胺和1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-3-甲酰胺

向2，4-二氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(1.67g，8.88mmol)、对甲苯磺酰氯(1.72g，9.02mmol)和三乙胺(2.50mL，18.0mmol)的CH₂C₂(15mL)混合物中加入二甲基氨基吡啶(30mg，0.24mmol)。将其于室温下搅拌20h。加入水和CH₂Cl₂。分离有机相，用1N HCl洗涤，然后用5％碳酸氢钠洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得为固体的2，4-二氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(3.03g)。

将2，4-二氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(200mg，0.584mmol)、3-哌啶甲酰胺(75mg，0.586mmol)和三乙胺(0.130mL，0.934mmol)的二氧六环(5mL)于70℃搅拌20h。加入水和EtOAc。分离有机相，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得1-(2-氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-3-甲酰胺(250mg)。

将1-(2-氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-3-甲酰胺(125mg，0.288mmol)、1-(4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(100mg，0.456mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.100mL，0.79mmol)的n-BuOH(3mL)化合物于116℃搅拌20h。真空除去n-BuOH。残留物通过HPLC纯化，获得1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-3-甲酰胺(12mg)。

向1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-3-甲酰胺(12mg，0.019mmol)的MeOH(2mL)溶液中加入aq.1N KOH(1mL)。将其于60℃搅拌2h。真空浓缩后，残留物采用HOAc(1mL)酸化。然后将混合物通过HPLC纯化，获得1-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-3-甲酰胺(2mg)(MS421.5(M+H))和1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-3-甲酰胺(8mg)(MS 463.6(M+H))；UV 202.6，274.6nm)。

实施例10和11

4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-N-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-胺和1-(4-(4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮

将2，4-二氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(200mg，0.584mmol)、4-N-Boc-氨基甲基哌啶(125mg，0.584mmol)和三乙胺(0.160mL，1.15mmol)的二氧六环(5mL)溶液于70℃搅拌20h。加入水和EtOAc。分离有机相，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得(1-(2-氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(303mg)。

将(1-(2-氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(303mg，0.583mmol)、1-(4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(191mg，0.872mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.400mL，3.16mmol)的n-BuOH(6mL)混合物于135℃搅拌40h。真空除去n-BuOH。残留物通过HPLC纯化，获得1-(4-(4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮(60mg)。

向1-(4-(4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮(60mg，0.10mmol)的MeOH(3mL)溶液中加入aq.1N KOH(1mL)。将其于60℃搅拌3h。真空浓缩后，残留物采用HOAc(1mL)酸化。然后将混合物通过HPLC纯化，获得4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-N-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-胺(3mg)(MS407.5(M+H)；UV 202.6，269.9nm)和1-(4-(4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮(15mg)(MS449.5(M+H)；UV 202.6，273.4nm)。

实施例12和13

(S)-1-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)吡咯烷 -3-醇和(S)-1-(4-(4-(4-(3-羟基吡咯烷-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基) 苯基)哌嗪-1-基)乙酮.

将2，4-二氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(200mg，0.584mmol)、(S)-3-羟基吡咯烷(58mg，0.667mmol)和三乙胺(0.160mL，1.15mmol)的二氧六环(5mL)溶液于70℃搅拌20h。加入水和EtOAc。分离有机相，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得(S)-1-(2-氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)吡咯烷-3-醇(201mg)。MS 393.3和395.3(M+H，Cl模式)。

将(S)-1-(2-氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)吡咯烷-3-醇(201mg，0.512mmol)、1-(4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(160mg，0.730mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.200mL，1.58mmol)的n-BuOH(5mL)混合物于120℃搅拌40h。真空除去n-BuOH。残留物通过HPLC纯化，获得(S)-1-(4-(4-(4-(3-羟基吡咯烷-1-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮(80mg)。MS 576.5(M+H)

向(S)-1-(4-(4-(4-(3-羟基吡咯烷-1-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮(80mg，0.14mmol)的MeOH(3mL)溶液中加入aq.1N KOH(1mL)。将其于60℃搅拌4h。真空浓缩后，残留物采用HOAc(1mL)酸化。然后将混合物通过HPLC纯化，获得(S)-1-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)吡咯烷-3-醇(5mg)(MS380.5(M+H))和(S)-1-(4-(4-(4-(3-羟基吡咯烷-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮(20mg)(MS 422.5(M+H))。

实施例14

2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈

向2，4-二氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(3.00g，16.0mmol)的CH₂Cl₂(30mL)混悬液中加入N-碘代琥珀酰亚胺(3.60g，16.0mmol)。将其于室温下搅拌20h。收集细沉淀，真空干燥，获得2，4-二氯代-5-碘-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(2.80g)。MS 314.1和316.1(M+H)。

向2，4-二氯代-5-碘-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(2.80g，8.92mmol)和对甲苯磺酰氯(1.65g，8.66mmol)的CH₂Cl₂(30mL)混悬液中加入三乙胺(3.0mL，21.6mmol)和二甲基氨基吡啶(0.047g，0.38mmol)。将混合物于室温下搅拌2h。加入水和CH₂C₁₂。分离有机相，用1N HCl洗涤，然后用5％碳酸氢钠洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得为固体的2，4-二氯代-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(4.00g)。MS 468.2和470.2(M+H)

将2，4-二氯代-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(310mg，0.662mmol)、4-N-Boc-氨基甲基哌啶(142mg，0.663mmol)和三乙胺(0.200mL，1.44mmol)的CH₃CN(10mL)混合物于室温下搅拌20h。加入水和EtOAc。分离有机相，用1N HCl洗涤，然后用5％碳酸氢钠洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得(1-(2-氯代-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(418mg)。MS646.5和648.4(M+H)。

将(1-(2-氯代-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(418mg，0.647mmol)、Pd₂(dba)₃(60mg，0.065mmol)、dppf(72mg，0.130mmol)和Zn(CN)₂(91mg，0.778mmol)的DMF(5mL)混合物于70℃搅拌20h。真空除去DMF。将残留物上样于快速柱，通过10-30％EtOAc的己烷溶液梯度洗脱，获得(1-(2-氯代-5-氰基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(180mg)。

将(1-(2-氯代-5-氰基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(180mg，0.330mmol)、1-(4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(137mg，0.625mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.300mL，2.37mmol)的n-BuOH(5mL)混合物于135℃搅拌40h。真空除去n-BuOH。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(25mg)。MS 474.5(M+H)；UV 200.8，277.8nm。

实施例15

1-(4-(4-(6-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-9H-嘌呤-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基) 乙酮

将2，6-二氯代嘌呤(189mg，1,00mmol)、4-N-Boc-氨基甲基哌啶(214mg，1.00mmol)和三乙胺(0.300mL，2.15mmol)的CH₃CN(4mL)混合物于70℃搅拌。最初它转变为澄清的溶液，然后析出白色沉淀，收集沉淀，真空干燥，获得(1-(2-氯代-9H-嘌呤-6-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(310mg)。MS 367.4和369.4(M+H，Cl模式)。

将(1-(2-氯代-9H-嘌呤-6-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(100mg，0.272mmol)、1-(4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(120mg，0.548mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.300mL，2.37mmol)的n-BuOH(4mL)混合物于135℃搅拌70h。真空除去n-BuOH。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(12mg)。MS 450.6(M+H)；UV 200.0，270.8nm。

实施例16

N-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基)-1H-吲唑-6-胺

将2，4-二氯代-5-氟嘧啶(167mg，1.00mmol)、4-N-Boc-氨基甲基哌啶(214mg，1.00mmol)和三乙胺(0.300mL，2.15mmol)的CH₃CN(4mL)混合物于室温下搅拌20h。将其真空浓缩。残留物溶于nBuOH(6mL)。向2mL的该nBuOH溶液中加入6-氨基吲唑(66mg，0.49mmol)。将溶液于116℃搅拌20h。真空除去nBuOH。残留物溶于TFA(2mL)。于室温下搅拌2h后，真空除去TFA。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(40mg)。MS 342.5(M+H)；UV 205.8，246.8，276.8nm。

实施例17

4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟-N-(3，4，5-三甲氧基苯基)嘧啶-2-胺

将2，4-二氯代-5-氟嘧啶(167mg，1.00mmol)、4-N-Boc-氨基甲基哌啶(214mg，1.00mmol)和三乙胺(0.300mL，2.15mmol)的CH₃CN(4mL)混合物于室温下搅拌20h。将其真空浓缩。残留物溶于nBuOH(6mL)。向2mL该nBuOH溶液中加入3，4，5-三甲氧基苯胺(91mg，0.50mmol)。将溶液于116℃搅拌20h。真空除去nBuOH。残留物溶于TFA(2mL)。于室温下搅拌2h，真空除去TFA。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(42mg)。MS 392.5(M+H)；UV 223.8，257.8nm。

实施例18

1-(4-(4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基) 乙酮

将2，4-二氯代-5-氟嘧啶(167mg，1.00mmol)、4-N-Boc-氨基甲基哌啶(214mg，1.00mmol)和三乙胺(0.300mL，2.15mmol)的CH₃CN(4mL)混合物于室温下搅拌20h。将其真空浓缩。残留物溶于nBuOH(6mL)。向2mL该nBuOH溶液中加入1-(4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(108mg，0.49mmol)。将溶液于116℃搅拌20h。真空除去nBuOH。残留物溶于TFA(2mL)。于室温下搅拌2h后，真空除去TFA。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(43mg)。MS 428.6(M+H)；UV 206.8，265.8nm。

实施例19和20

N-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-4-(哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-胺和 1-(4-(4-(4-(哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮

将2，4-二氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(100mg，0.531mmol)、哌啶(0.060mL，0.607mmol)和三乙胺(0.200mL，1.43mmol)的二氧六环(4mL)混合物于70℃搅拌20h。加入水和EtOAc。分离有机相，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得2-氯代-4-(哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(123mg)。MS 237.3和239.3(M+H，Cl模式)。

将2-氯代-4-(哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(123mg，0.520mmol)、1-(4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(200mg，0.913mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.200mL，1.58mmol)的n-BuOH(5mL)混合物于120℃搅拌20h。真空除去n-BuOH。残留物通过HPLC纯化，获得N-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-4-(哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-胺(5mg)(MS 378.5(M+H))和1-(4-(4-(4-(哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮(31mg)(MS420.5(M+H)；UV 205.8，275.8nm)。

实施例21和22

N-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-4-(吡咯烷-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-胺和 1-(4-(4-(4-(吡咯烷-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基) 乙酮

将2，4-二氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(100mg，0.531mmol)、吡咯烷(0.050mL，0.600mmol)和三乙胺(0.200mL，1.43mmol)的二氧六环(4mL)混合物于70℃搅拌20h。加入水和EtOAc。分离有机相，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得2-氯代-4-(吡咯烷-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(116mg)。MS223.3和225.3(M+H，Cl模式)。

将2-氯代-4-(吡咯烷-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(116mg，0.521mmol)、1-(4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(200mg，0.913mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.200mL，1.58mmol)的n-BuOH(5mL)混合物于120℃搅拌20h。真空除去n-BuOH。残留物通过HPLC纯化，获得N-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-4-(吡咯烷-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-胺(3mg)(MS 364.5(M+H))和1-(4-(4-(4-(吡咯烷-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮(30mg)(MS 406.5(M+H))。

实施例23和24

1-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺和1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺

将2，4-二氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(140mg，0.744mmol)、3-哌啶甲酰胺(95mg，0.742mmol)和三乙胺(0.300mL，2.15mmol)的二氧六环(4mL)混合物于70℃搅拌20h。收集沉淀物并真空干燥，获得1-(2-氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺(205mg)。MS 280.3和282.3(M+H，Cl模式)。

将1-(2-氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺(80mg，0.28mmol)、1-(4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(125mg，0.57mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.200mL，1.58mmol)的n-BuOH(3mL)混合物于130℃搅拌20h。真空除去n-BuOH。残留物通过HPLC纯化，获得1-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺(4mg)(MS421.5(M+H))和1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺(6mg)(MS 463.5(M+H)；UV 200.0，272.8nm)。

实施例25

2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)嘧啶-5- 甲酰胺

向2，4-二氯代嘧啶-5-甲酸乙酯(221mg，1.00mmol)和DIEA(0.347mL，2.00mmol)的CH₃CN(4mL)溶液中加入4-N-Boc-氨基甲基哌啶(214mg，1.00mmol)的CH₃CN(4mL)混悬液。将混合物于室温下搅拌20h。加入水和EtOAc。分离有机相，用1N HCl洗涤，然后用5％碳酸氢钠洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得4-(4-((叔-丁氧基羰基)甲基)哌啶-1-基)-2-氯代嘧啶-5-甲酸乙酯(368mg)。MS 399.5和401.5(M+H，Cl模式)。

向4-(4-((叔-丁氧基羰基)甲基)哌啶-1-基)-2-氯代嘧啶-5-甲酸乙酯(368mg，0.923mmol)的THF(5mL)溶液中加入aq.1M LiOH(2.20mL，2.20mmol)。将其加热至回流5h。真空除去THF。采用HOAc(2mL)酸化后，残留物通过HPLC纯化，获得4-(4-((叔-丁氧基羰基)甲基)哌啶-1-基)-2-氯代嘧啶-5-甲酸(150mg)。MS 371.4和373.4(M+H，Cl模式)。

向4-(4-((叔-丁氧基羰基)甲基)哌啶-1-基)-2-氯代嘧啶-5-甲酸(150mg，0.40mmol)和HOBt(93mg，0.61mmol)的DMF(2mL)溶液中加入EDC(116mg，0.61mmol)。搅拌90分钟后，加入NH₃(0.5M的二氧六环溶液，4.00mL，2.00mmol)。将混合物于室温下搅拌20h。加入水和EtOAc。分离有机相，采用5％的碳酸氢钠洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得(1-(2-(1H-苯并[d][1，2，3]三唑-1-基氧基)-5-氨基甲酰基嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(138mg)。MS 469.6(M+H)。

将(1-(2-(1H-苯并[d][1，2，3]三唑-1-基氧基)-5-氨基甲酰基嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(138mg，0.294mmol)、1-(4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(84mg，0.38mmol)和对甲苯磺酸(56mg，0.294mmol)的二氧六环(4mL)混合物于100℃搅拌3h。真空除去二氧六环。残留物溶于CH₂Cl₂(5mL)和TFA(5mL)。将溶液于室温下搅拌30min。然后将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(15mg)。MS 453.6(M+H)；UV222.8，263.8nm。

实施例26

1-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-3-甲酰胺

将2，4-二氯代-5-氟嘧啶(167mg，1.00mmol)、3-哌啶甲酰胺(128mg，1.00mmol)和DIEA(0.350mL，2.01mmol)的CH₃CN(4mL)混合物于室温下搅拌20h。将其真空浓缩。残留物溶于nBuOH(4mL)。向2mL该nBuOH溶液中加入6-氨基吲唑(100mg，0.75mmol)。将溶液于116℃搅拌6h。真空除去nBuOH。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(63mg)。MS356.3(M+H)；UV 206.8，249.8，276.8，291.8nm。

实施例27

1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-3-甲酰胺

将2，4-二氯代-5-氟嘧啶(167mg，1.00mmol)、3-哌啶甲酰胺(128mg，1.00mmol)和DIEA(0.350mL，2.01mmol)的CH₃CN(4mL)混合物于室温下搅拌20h。将其真空浓缩。残留物溶于nBuOH(4mL)。向2mL该nBuOH溶液中加入1-(4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(150mg，0.68mmol)。将溶液于116℃搅拌6h。真空除去nBuOH。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(75mg)。MS 442.4(M+H)；UV 208.8，261.8nm。

实施例28和29

(1-(5-氟-2-(4-(N-甲基乙酰氨基)苯基氨基)嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯和N-(4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺

将2，4-二氯代-5-氟嘧啶(334mg，2.00mmol)、4-N-Boc-氨基甲基哌啶(428mg，2.00mmol)和DIEA(0.700mL，4.02mmol)的CH₃CN(8mL)混合物于室温下搅拌20h。将其真空浓缩。残留物溶于nBuOH(12mL)。向3mL该nBuOH溶液中加入N-(4-氨基苯基)-N-甲基乙酰胺(98mg，0.60mmol)。将溶液于116℃搅拌20h。真空除去nBuOH。残留物通过HPLC纯化，获得(1-(5-氟-2-(4-(N-甲基乙酰氨基)苯基氨基)嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(65mg)。MS 473.4(M+H)；UV 205.8，262.8nm。

将(1-(5-氟-2-(4-(N-甲基乙酰氨基)苯基氨基)嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(60mg，0.13mmol)的TFA(2mL)溶液于室温下搅拌60min。真空除去TFA。残留物通过HPLC纯化，获得N-(4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺(25mg)。MS373.3(M+H)；UV 201.8，266.8nm。

实施例30和31

(1-(2-(4-氨基甲酰基苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯和4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺

将2，4-二氯代-5-氟嘧啶(334mg，2.00mmol)、4-N-Boc-氨基甲基哌啶(428mg，2.00mmol)和DIEA(0.700mL，4.02mmol)的CH₃CN(8mL)混合物于室温下搅拌20h。将其真空浓缩。残留物溶于nBuOH(12mL)。向3mL该nBuOH溶液中加入4-氨基苯甲酰胺(82mg，0.60mmol)。将溶液于116℃搅拌20h。真空除去nBuOH。残留物通过HPLC纯化，获得(1-(2-(4-氨基甲酰基苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(15mg)。MS 445.4(M+H)；UV 212.0，282.8nm。

将(1-(2-(4-氨基甲酰基苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(10mg，0.023mmol)的TFA(2mL)溶液于室温下搅拌60min。真空除去TFA。残留物通过HPLC纯化，获得4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺(5mg)MS 345.3(M+H)；UV 210.0，281.8nm。

实施例32

4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯磺酰胺

将2，4-二氯代-5-氟嘧啶(334mg，2.00mmol)、4-N-Boc-氨基甲基哌啶(428mg，2.00mmol)和DIEA(0.700mL，4.02mmol)的CH₃CN(8mL)混合物于室温下搅拌20h。将其真空浓缩。残留物溶于nBuOH(12mL)。向3mL该nBuOH溶液中加入磺胺(103mg，0.60mmol)。将溶液于116℃搅拌20h。真空除去nBuOH。残留物通过HPLC纯化，获得4-(4-(4-(N-tBoc-氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯磺酰胺(10mg)。MS 481.3(M+H)。

将4-(4-(4-(N-tBoc-氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯磺酰胺(10mg，0.021mmol)的TFA(2mL)溶液于室温下搅拌60min。真空除去TFA。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(5mg)MS 381.3(M+H)。

实施例33

6-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)- 酮

将2，4-二氯代-5-氟嘧啶(334mg，2.00mmol)、4-N-Boc-氨基甲基哌啶(428mg，2.00mmol)和DIEA(0.700mL，4.02mmol)的CH₃CN(8mL)混合物于室温下搅拌20h。将其真空浓缩。残留物溶于nBuOH(12mL)。向3mL该nBuOH溶液中加入6-氨基-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮(98mg，0.60mmol)。将溶液于116℃搅拌20h。真空除去nBuOH。残留物通过HPLC纯化，获得(1-(5-氟-2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(55mg)。MS 471.4(M+H)。

将(1-(5-氟-2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(55mg，0.12mmol)的TFA(3mL)溶液于室温下搅拌60min。真空除去TFA。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(30mg)MS 371.3(M+H)；UV 206.8，274.8nm。

实施例34

1-(4-(4-(4-(2-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基) 乙酮

将2，4-二氯代-5-氟嘧啶(167mg，1.00mmol)、2-N-Boc-氨基甲基哌啶(214mg，1.00mmol)和DIEA(0.400mL，2.30mmol)的CH₃CN(4mL)混合物于室温下搅拌20h。将其真空浓缩。残留物溶于nBuOH(6mL)。向3mL该nBuOH溶液中加入1-(4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(142mg，0.65mmol)。将溶液于116℃搅拌20h。真空除去nBuOH。残留物通过HPLC纯化，获得(1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-2-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(56mg)。MS 528.4(M+H)。

将(1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-2-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(56mg，0.11mmol)的TFA(3mL)溶液于室温下搅拌60min。真空除去TFA。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(35mg)MS428.4(M+H)；UV 213.8，258.8nm。

实施例35和36

(1-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-2-基)甲基氨基甲酸叔- 丁基酯和N-(4-(2-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基)-1H-吲唑-6-胺

将2，4-二氯代-5-氟嘧啶(167mg，1.00mmol)、2-N-Boc-氨基甲基哌啶(214mg，1.00mmol)和DIEA(0.400mL，2.30mmol)的CH₃CN(4mL)混合物于室温下搅拌20h。将其真空浓缩。残留物溶于nBuOH(6mL)。向3mL该nBuOH溶液中加入6-氨基吲唑(86mg，0.65mmol)。将溶液于116℃搅拌20h。真空除去nBuOH。残留物通过HPLC纯化，获得(1-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-2-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(41mg)。MS442.3(M+H)；UV 201.8，246.8，281.8nm。

将(1-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-2-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(41mg，0.093mmol)的TFA(4mL)溶液于室温下搅拌60min。真空除去TFA。残留物通过HPLC纯化，获得N-(4-(2-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基)-1H-吲唑-6-胺(25mg)MS 342.3(M+H))；UV 201.8，246.8，278.8nm。

实施例37

1-((1-(5-氟-2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)嘧啶-4-基)哌啶-4-基) 甲基)脲

向6-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮(26mg，0.070mmol)的CH₃CN(1mL)混悬液中加入氰酸钾0.42mmol)的H₂O(1mL)水溶液。将溶液搅拌1h。真空除去溶剂。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(8mg)。MS 414.3(M+H)；UV 205.8，276.8nm。

实施例38

1-(4-(4-(5-氟-4-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基) 乙酮

将2，4-二氯代-5-氟嘧啶(167mg，1.00mmol)、4-哌啶甲醇(115mg，1.00mmol)和DIEA(0.400mL，2.30mmol)的CH₃CN(4mL)混合物于室温下搅拌2h。将其真空浓缩。残留物溶于nBuOH(6mL)。向3mL该nBuOH溶液中加入1-(4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(120mg，0.55mmol)。将溶液于116℃搅拌20h。真空除去nBuOH。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(53mg)。MS 429.3(M+H)；UV 207.8，266.8nm。

实施例39

6-(5-氟-4-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)- 酮

将2，4-二氯代-5-氟嘧啶(167mg，1.00mmol)、4-哌啶甲醇(115mg，1.00mmol)和DIEA(0.400mL，2.30mmol)的CH₃CN(4mL)混合物于室温下搅拌2h。将其真空浓缩。残留物溶于nBuOH(6mL)。向3mL该nBuOH溶液中加入6-氨基-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮(88mg，0.54mmol)。将溶液于116℃搅拌20h。真空除去nBuOH。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(52mg)。MS 372.3(M+H)；UV 208.8，275.8nm。

下列化合物根据实施例5中所述相似方法制备，但是在步骤4中采用试剂A代替环丁基胺。

实施例40

2-(1H-吲唑-6-基氨基)-4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈

将2-氯代-N-环丙基-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(200mg，0.409mmol)、Pd₂dba₃(23mg，0.025mmol)和dppf(45mg，0.081mmol)的DMF(2mL)溶液采用氩气脱气，然后加入Zn(CN)₂(28mg，0.24mmol)。将混合物于70℃搅拌2h。加入水和EtOAc。分离有机相，硫酸钠干燥，真空浓缩。残留物经快速硅胶柱纯化，采用EtOAc/己烷(0-15％)洗脱，获得2-氯代-4-(环丙基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈(110mg)。

将2-氯代-4-(环丙基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈(109mg，0.28mmol)、6-氨基吲唑(75mg，0.56mmol)和TMSCl(0.089mL，0.70mmol)的nBuOH(4mL)混合物于116℃搅拌18h。然后将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(6mg)。MS 331.1(M+H)；UV 246.2，307.9nm。

实施例41

5-(1-丁氧基乙基)-N4-环丙基-N2-(1H-吲唑-6-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺

将2-氯代-N-环丙基-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(190mg，0.389mmol)的二氧六环(3mL)溶液采用氩气脱气，然后加入四乙烯锡(0.105mL，0.576mmol)和Pd(Ph₃P)₄(41mg，0.035mmol)。将混合物于100℃搅拌3h。加入水和EtOAc。分离有机相，硫酸钠干燥，真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得2-氯代-N-环丙基-7-甲苯磺酰基-5-乙烯基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(39mg)。

将2-氯代-N-环丙基-7-甲苯磺酰基-5-乙烯基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(39mg，0.10mmol)、6-氨基吲唑(40mg，0.30mmol)和TMSCl(0.050mL，0.40mmol)的nBuOH(1mL)混合物于116℃搅拌18h。然后将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得5-(1-丁氧基乙基)-N4-环丙基-N2-(1H-吲唑-6-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺(20mg)。

向5-(1-丁氧基乙基)-N4-环丙基-N2-(1H-吲唑-6-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺(20mg，0.036mmol)的二氧六环(2mL)溶液中加入aq.1N KOH(1.0mL，1.0mmol)。将混合物于65℃搅拌18h。真空浓缩后，残留物采用HOAc(1mL)酸化；然后将其通过HPLC纯化，获得目标化合物(3mg)。MS 406.2(M+H)；UV 203.8，223.8，243.8，315.0nm。

实施例42

1-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基) 乙酮

将2-氯代-N-环丙基-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(489mg，1.00mmol)的二氧六环(6mL)溶液采用氩气脱气，然后加入三丁基(乙氧基乙烯基)锡(0.371mL，1.10mmol)和Pd(Ph₃P)₄(90mg，0.078mmol)。将混合物于100℃搅拌18h。加入水和EtOAc。分离有机相，硫酸钠干燥，真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得1-(2-氯代-4-(环丙基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基)乙酮(185mg)。

将1-(2-氯代-4-(环丙基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基)乙酮(85mg，0.21mmol)、6-氨基吲唑(56mg，0.42mmol)和TMSCl(0.070mL，0.55mmol)的nBuOH(3mL)混合物于116℃搅拌18h。然后将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(30mg)。MS 348.1(M+H)；UV248.7，305.7nm。

实施例43

N4-环丙基-N2-(1H-吲唑-6-基)-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶 -2，4-二胺

将2-氯代-N-环丙基-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(225mg，0.460mmol)的二氧六环(3mL)溶液采用氩气脱气，然后加入4-三丁基甲锡烷基吡啶(371mg，1.01mmol)和Pd(Ph₃P)₄(98mg，0.085mmol)。将混合物于100℃搅拌18h。加入水和EtOAc。分离有机相，硫酸钠干燥，真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得2-氯代-N-环丙基-5-(吡啶-4-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(51mg)。

将2-氯代-N-环丙基-5-(吡啶-4-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(51mg，0.12mmol)、6-氨基吲唑(31mg，0.23mmol)和TMSCl(0.040mL，0.32mmol)的nBuOH(2mL)混合物于116℃搅拌18h。然后将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(12mg)。MS383.2(M+H)；UV 204.9，250.9，307.9nm。

实施例44

1-(4-(4-(4-(哌啶-4-基甲基氨基)-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶 -2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮

将2，4-二氯代-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(244mg，0.520mmol)、1-N-BOC-4-氨基甲基哌啶盐酸盐(130mg，0.520mmol)和TEA(0.200mL，1.44mmol)的CH₃CN(6mL)混合物于室温下搅拌16h。加入水和EtOAc。分离有机相，用1N HCl洗涤，然后用5％碳酸氢钠洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得4-((2-氯代-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(336mg)。

将4-((2-氯代-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(336mg，0.520mmol)的二氧六环(4mL)溶液采用氩气脱气，然后加入4-三丁基甲锡烷基吡啶(452mg，1.23mmol)和Pd(Ph₃P)₄(110mg，0.095mmol)。将混合物于100℃搅拌4h。加入水和EtOAc。分离有机相，硫酸钠干燥，真空浓缩。残留物经快速柱色谱纯化，采用EtOAc/己烷(0-100％)洗脱，获得4-((2-氯代-5-(吡啶-4-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(90mg)。

将4-((2-氯代-5-(吡啶-4-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(90mg，0.15mmol)、1-(4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(66mg，0.30mmol)和TMSCl(0.100mL，0.79mmol)的nBuOH(4mL)混合物于135℃搅拌68h。然后将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(26mg)。MS 526.47(M+H)；UV 202.6，259.2，304.3nm。

实施例45

2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-4-(哌啶-4-基甲基氨基)-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-5-甲腈

将4-((2-氯代-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(360mg，0.557mmol)、Pd₂dba₃(50mg，0.055mmol)和dppf(62mg，0.11mmol)的DMF(5mL)溶液采用氩气脱气，然后加入Zn(CN)₂(80mg，0.68mmol)。将混合物于70℃搅拌18h。加入水和EtOAc。分离有机相，硫酸钠干燥，真空浓缩。残留物经快速硅胶柱纯化，采用EtOAc/己烷(0-35％)洗脱，获得4-((2-氯代-5-氰基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(127mg)。

将4-((2-氯代-5-氰基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(127mg，0.233mmol)、1-(4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(100mg，0.456mmol)和TMSCl(0.200mL，1.58mmol)的nBuOH(5mL)混合物于135℃搅拌68h。然后将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(25mg)。MS 475(M+H)；UV 204.9，265.1，297.2nm。

实施例46

将2，4-二氯代-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(310mg，0.662mmol)、4-N-BOC-氨基甲基哌啶(142mg，0.663mmol)和TEA(0.200mL，1.44mmol)的CH₃CN(10mL)混合物于室温下搅拌16h。加入水和EtOAc。分离有机相，用1N HCl洗涤，然后用5％碳酸氢钠洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得(1-(2-氯代-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(418mg)。

将(1-(2-氯代-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(418mg，0.647mmol)、Pd₂dba₃(60mg，0.065mmol)和dppf(72mg，0.13mmol)的DMF(5mL)溶液采用氩气脱气，然后加入Zn(CN)₂(91mg，0.78mmol)。将混合物于70℃搅拌18h。加入水和EtOAc。分离有机相，硫酸钠干燥，真空浓缩。残留物经快速硅胶柱纯化，采用EtOAc/己烷(10-30％)洗脱，获得(1-(2-氯代-5-氰基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(180mg)。

将(1-(2-氯代-5-氰基-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(180mg，0.330mmol)、1-(4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(137mg，0.625mmol)和TMSCl(0.300mL，2.37mmol)的nBuOH(5mL)混合物于135℃搅拌48h。然后将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(25mg)。MS 474.5(M+H)。

实施例47

N-(4-(4-(环丙基氨基)-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基) 苯基)-N-甲基乙酰胺

将2-氯代-N-环丙基-5-(吡啶-4-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(85mg，0.19mmol)、N-(4-氨基苯基)-N-甲基乙酰胺(72mg，0.44mmol)和TMSCl(0.100mL，0.79mmol)的nBuOH(3mL)混合物于135℃搅拌18h。然后将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(25mg)。MS 414.3(M+H)；UV 202.8，280.8nm。

实施例48

6-(4-(环丙基氨基)-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-3，4- 二氢喹啉-2(1H)-酮

将2-氯代-N-环丙基-5-(吡啶-4-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(85mg，0.19mmol)、6-氨基-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮(70mg，0.43mmol)和TMSCl(0.100mL，0.79mmol)的nBuOH(3mL)混合物于135℃搅拌18h。加入更多的TMSCl(0.200mL)。于135℃再继续搅拌68h。然后将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(5mg)。MS 412.3(M+H)；UV 201.8，295.8nm。

实施例49

5-溴-N4-环丁基-N2-(1H-吲唑-6-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺

于室温下，向2，4-二氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(105mg，0.560mmol)的CH₂Cl₂(7mL)混悬液中加入NBS(109mg，0.610mmol)。将混合物于室温下搅拌18h。真空除去CH₂Cl₂。残留物在水和EtOAc之间分配。分离有机相，采用5％的碳酸氢钠洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得5-溴-2，4-二氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(142mg)。

将5-溴-2，4-二氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(142mg，0.530mmol)、环丁基胺(0.090mL，1.06mmol)和TEA(0.150mL，1.08mmol)的nBuOH(6mL)溶液于70℃搅拌18h。加入CH₂Cl₂和H₂O。分离有机相，采用5％的碳酸氢钠洗涤，然后采用1N HCl洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得5-溴-2-氯代-N-环丁基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(154mg)。

将5-溴-2-氯代-N-环丁基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(64mg，0.21mmol)、6-氨基吲唑(56mg，0.42mmol)和TMSCl(0.050mL，0.40mmol)的nBuOH(2mL)混合物于116℃搅拌4h。然后将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得样品，将其经制备性薄层色谱纯化，采用CH₂Cl₂/MeOH(95/5)作为展开剂，获得目标化合物(1mg)。MS 398.3，400.3(M+H，Br模式)；UV 203.8，247.4，309.1nm。

实施例50

5-氯代-N4-环丁基-N2-(1H-吲唑-6-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺

于室温下，向2-氯代-N-环丁基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(102mg，0.460mmol)的CH₂Cl₂(5mL)混悬液中加入NCS(68mg，0.51mmol)。将混合物回流18h。真空浓缩后，残留物通过HPLC纯化，获得2，5-二氯代-N-环丁基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(23mg)。

将2，5-二氯代-N-环丁基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(23mg，0.089mmol)、6-氨基吲唑(40mg，0.30mmol)和TMSCl(0.040mL，0.32mmol)的nBuOH(2mL)混合物于116℃搅拌18h。然后将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(8mg)。MS 354.0，356.0(M+H，Cl模式)；UV 201.4，246.2，307.9nm。

实施例51

2-(1H-吲唑-6-基氨基)-4-(环丁基氨基)-6，7-二氢吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-酮

将2，4-二氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(200mg，1.06mmol)和氟试剂(SelectFluor)(560mg，1.58mmol)在CH₃CN(5mL)和HOAc(1mL)中的混合物于70℃搅拌18h。然后将混合物真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得2，4-二氯代-5-氟-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(50mg)。

将2，4-二氯代-5-氟-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(50mg，0.24mmol)、环丁基胺(0.041mL，0.48mmol)和TEA(0.070mL，0.50mmol)的nBuOH(2mL)溶液于70C搅拌5h。加入CH₂Cl₂和H₂O。分离有机相，采用5％的碳酸氢钠洗涤，然后采用1N HCl洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得2-氯代-N-环丁基-5-氟-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(54mg)。

将2-氯代-N-环丁基-5-氟-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(54mg，0.22mmol)、6-氨基吲唑(90mg，0.68mmol)和TMSCl(0.090mL，0.71mmol)的nBuOH(3mL)混合物于116℃搅拌18h。然后将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得样品，将其经制备性薄层色谱进一步纯化，采用CH₂Cl₂/MeOH(95/5)作为展开剂，获得目标化合物(2mg)。MS 336.1(M+H)。

实施例52

1-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基磺酰基)哌啶-4-醇

于室温下，向4-硝基苯磺酰氯(512mg，2.31mmol)的CH₂Cl₂(8mL)溶液中加入4-羟基哌啶(404mg，4.00mmol)。再加入三乙基胺(0.400mL，2.88mmol)。将混合物于室温搅拌过夜。加入水和EtOAc。分离有机相，用1N HCl洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得为固体的1-(4-硝基苯基磺酰基)哌啶-4-醇(559mg)。

将该固体(559mg，1.95mmol)和Pd-C(10％，90mg)的含有HOAc(0.15mL)的MeOH(15mL)溶液在氢气环境中氢化。通过硅藻土过滤。滤液真空浓缩，获得为固体的1-(4-氨基苯基磺酰基)哌啶-4-醇(491mg)。

向6-氨基尿嘧啶(15.0g，0.118mol)的H₂O(600mL)混悬液中加入NaOAc(15.0g，0.183mol)和ClCH₂CHO(50％的H₂O溶液，30mL)。将混合物于回流下加热4h，冷却至室温。过滤收集获得的深棕色沉淀物，获得粗品7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二醇(14.4g，收率81％)。

将7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二醇(2.25g，0.015mol)的PhPOCl₂混悬液于165℃搅拌3h，于180℃再搅拌3h，获得黑色浆状物缓慢倒入冰水中，滤出黑色沉淀物，滤液用乙醚萃取。合并醚层，采用饱含NaHCO₃、盐水洗涤，硫酸钠干燥并浓缩，获得2，4-二氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(0.800g，收率28％)。

向2，4-二氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(0.765g，4.05mmol)的n-BuOH(7.5mL)混悬液中加入环丁基胺(0.415mL，4.86mmol)和DIPEA(0.865mL，4.86mmol)。将混合物于65℃加热4h，然后将其冷却至室温。混合物采用CHCl₃稀释，采用水、sat.NaHCO₃、盐水洗涤，干燥并浓缩，获得粗品2-氯代-N-环丁基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(0.800g，88％)，它无需纯化可以直接用于下一步骤。

最后偶合步骤的通用方法：将2-氯代-N-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(80mg，0.36mmol)、1-(4-氨基苯基磺酰基)哌啶-4-醇(138mg，0.54mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.030mL，0.24mmol)的nBuOH(2mL)混合物于116℃搅拌4h。混合物通过反相HPLC纯化，采用10-55％CH₃CN的水溶液作为洗脱液梯度洗脱10分钟，获得粉末(8mg)。MS 443.1(M+H)；UV228.5，306.7nm。

实施例53

2-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-N-甲基苯基磺酰氨基)乙酸丁基酯

根据实施例关于1-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基磺酰基)哌啶-4-醇中所述相似方法，制备目标化合物。MS 487.0(M+H)；UV 206.1，311.5nm。

实施例54

2-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基磺酰氨基) 乙酰胺

根据实施例关于1-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基磺酰基)哌啶-4-醇中所述相似方法，制备目标化合物。MS 416.1(M+H)；UV 202.6，227.3，311.5nm。

实施例55

2-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-N-甲基苯基磺酰氨基)乙酸

向2-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-N-甲基苯基磺酰氨基)乙酸丁基酯(15mg，0.031mmol)的MeOH(2mL)溶液中加入1NNaOH水溶液(1.00mL，1.00mmol)。将混合物于室温下搅拌3h。加入冰HOAc(0.20mL)中和NaOH。当加入水时，析出沉淀，过滤收集沉淀，获得目标化合物(3mg)。MS 431.0(M+H)；UV 206.1，312.7nm。

实施例56

1-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌啶-4-醇

将1-氟-4-硝基苯(0.588mL，5.55mmol)、4-羟基哌啶(0.560g，5.54mmol)和K₂CO₃(1.50g，10.9mmol)的DMF(10mL)于室温搅拌过夜。加入水诱导沉淀生成。过滤收集黄色固体(0.90g)。

将该黄色固体(0.90g，4.05mmol)和Pd-C(10％，120mg)的含有6N HCl(0.20mL)的MeOH(20mL)混合物在氢气环境中氢化过夜。通过硅藻土过滤。滤液真空浓缩，获得为固体的1-(4-氨基苯基)哌啶-4-醇(0.841g)。

将2-氯代-N-环丁基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(80mg，0.36mmol)、1-(4-氨基苯基)哌啶-4-醇(104mg，0.54mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.030mL，0.24mmol)的nBuOH(2mL)混合物于116℃搅拌3h。混合物通过反相HPLC纯化，采用5-40％CH₃CN的水溶液作为洗脱液梯度洗脱10min，获得粉末(5mg)。MS 379.2(M+H)；UV 204.9，229.6，272.2，305.5nm。

实施例57

4-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯

将2，4-二氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(220mg，1.17mmol)、4-氨基-N-BOC-哌啶(280mg，1.40mmol)和三乙胺(0.400mL，2.88mmol)的nBuOH(8mL)混合物于70℃搅拌过夜。混合物通过HPLC纯化，获得粉末(87mg)。

将该粉末(40mg，0.11mmol)、6-氨基吲唑(40mg，0.30mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.020mL，0.16mmol)的nBuOH(2mL)混合物于116℃搅拌过夜。混合物通过反相HPLC纯化，采用20-65％CH₃CN的水溶液作为洗脱液梯度洗脱10min，获得粉末(5mg)。MS 449.0(M+H)；UV 204.9，242.6，307.9nm。

实施例58

N2-(1H-吲唑-6-基)-N4-(哌啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺

将4-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(4mg，0.009mmol)的TFA(1mL)溶液于室温下搅拌2h。将其真空浓缩。残留物通过反相HPLC纯化，采用3-30％CH₃CN的水溶液作为洗脱液梯度洗脱10min，获得粉末(1mg)。MS 349.0(M+H)；UV 201.4，242.6，306.7nm。

实施例59

N4-环丁基-N2-(1H-吲唑-6-基)-6-甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺

将6-氨基尿嘧啶(1.00g，7.87mmol)、乙酸钠(1.00g，12.2mmol)和氯代丙酮(95％，1.00mL，11.9mmol)的H₂O(40mL)混合物回流加热72h。收集固体，真空干燥，获得6-甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二醇(495mg)。

将6-甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二醇(490mg，2.97mmol)的苯膦酰二氯(phenylphosphonic dichloride)(10mL)混合物于180℃加热5h。将其倒入冰中。加入Et₂O(100mL)。分离有机相，采用5％的碳酸氢钠洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得为固体的2，4-二氯代-6-甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(380mg)。

将2，4-二氯代-6-甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(190mg，0.94mmol)、环丁基胺(0.160mL，1.88mmol)和三乙胺(0.200mL，1.44mmol)的nBuOH(6mL)溶液于70℃搅拌过夜。然后将其通过HPLC纯化，获得2-氯代-N-环丁基-6-甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(100mg)。

将2-氯代-N-环丁基-6-甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(55mg，0.23mmol)、6-氨基吲唑(62mg，0.46mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.040mL，0.31mmol)的nBuOH(2mL)混合物于116℃加热过夜。然后将其通过HPLC纯化，获得目标化合物(6mg)。MS 334.4(M+H)；UV 239.1，316.2nm。

实施例60

N4-(3-氨基-2，2-二甲基丙基)-N2-(1H-吲唑-6-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶 -2，4-二胺

向在圆底烧瓶中的固体形式的2，4-二氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(170mg，0.904mmol)中加入2，2-二甲基-1，3-丙二胺(0.325mL，2.71mmol)和三乙胺(0.150mL，1.08mmol)的nBuOH(4mL)溶液。将混合物于70℃加热3h。然后将其通过HPLC纯化，获得为固体的N-(3-氨基-2，2-二甲基丙基)-2-氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(212mg)。

将N-(3-氨基-2，2-二甲基丙基)-2-氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(70mg，0.28mmol)、6-氨基吲唑(93mg，0.70mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.100mL，0.72mmol)的nBuOH(2mL)混合物于116℃加热过夜。然后将其通过HPLC纯化，获得目标化合物(15mg)。MS 351.4(M+H)；UV 206.1，242.6，304.3nm。

实施例61

N2-(1H-吲唑-6-基)-N4-(3-吗啉代丙基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺

将2，4-二氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(105mg，0.56mmol)，3-吗啉代丙基胺(0.164mL，1.12mmol)和三乙胺(0.150mL，1.08mmol)的nBuOH(3mL)溶液于60℃搅拌过夜。然后将其通过HPLC纯化，获得为固体的2-氯代-N-(3-吗啉代丙基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(204mg)。

将2-氯代-N-(3-吗啉代丙基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(65mg，0.22mmol)、6-氨基吲唑(80mg，0.60mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.100mL，0.72mmol)的nBuOH(3mL)混合物于116℃加热过夜。然后将其通过HPLC纯化，获得目标化合物(16mg)。MS 393.5(M+H)；UV 217.9，239.1，309.1nm。

实施例62

N-(4-(4-(4-氨基丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺

将2，4-二氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(100mg，0.53mmol)、1，4-二氨基丁烷(0.125mL，1.25mmol)和三乙胺(0.150mL，1.08mmol)的nBuOH(4mL)溶液于70℃搅拌4h。然后将其通过HPLC纯化，获得为固体的N-(4-氨基丁基)-2-氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(63mg)。

将N-(4-氨基丁基)-2-氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(63mg，0.26mmol)、N-(4-氨基苯基)-N-甲基乙酰胺(81mg，0.49mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.067mL，0.52mmol)的nBuOH(3mL)混合物于116℃加热4h。然后将其通过HPLC纯化，获得目标化合物(5mg)。MS 368.2(M+H)；UV203.8，268.7，301.9nm。

实施例63

N-(4-(4-(2-氨基环己基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N- 甲基乙酰胺

将2，4-二氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(100mg，0.53mmol)、顺式-1，2-二氨基环己烷(0.107mL，0.91mmol)和三乙胺(0.150mL，1.08mmol)的nBuOH(4mL)溶液于70℃搅拌4h。然后将其通过HPLC纯化，获得为固体的N1-(2-氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)环己烷-1，2-二胺(89mg)。

将N1-(2-氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)环己烷-1，2-二胺(44mg，0.17mmol)、N-(4-氨基苯基)-N-甲基乙酰胺(56mg，0.34mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.146mL，1.15mmol)的nBuOH(2mL)混合物于116℃加热4h。然后将其通过HPLC纯化，获得目标化合物(6mg)。MS 394.2(M+H)；UV201.4，262.7，306.7nm。

实施例64

N-(4-(4-(2-氨基乙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺

将2，4-二氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(160mg，0.85mmol)、乙二胺(0.170mL，2.55mmol)和三乙胺(0.100mL，0.72mmol)的nBuOH(4mL)溶液于70℃搅拌4h。然后将其通过HPLC纯化，获得为固体的N-(2-氨基乙基)-2-氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(71mg)。

将N-(2-氨基乙基)-2-氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(71mg，0.34mmol)、N-(4-氨基苯基)-N-甲基乙酰胺(110mg，0.67mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.085mL，0.67mmol)的nBuOH(2mL)混合物于116℃加热3h。加入更多的三甲基甲硅烷基氯(0.100mL，0.79mmol)。于116℃再搅拌2h后，将混合物通过HPLC纯化，获得目标化合物(28mg)。MS 340.2(M+H)；UV 201.4，262.7，303.1nm。

实施例65

N-(4-(4-(5-氨基戊基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺

将2，4-二氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(70mg，0.37mmol)、1，5-二氨基戊烷(0.130mL，1.11mmol)和三乙胺(0.150mL，1.08mmol)的nBuOH(3mL)溶液于70℃搅拌1h。然后将其通过HPLC纯化，获得为固体的N-(5-氨基戊基)-2-氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(79mg)。

将N-(5-氨基戊基)-2-氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(79mg，0.31mmol)、N-(4-氨基苯基)-N-甲基乙酰胺(100mg，0.61mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.150mL，1.19mmol)的nBuOH(2mL)混合物于116℃加热4h。然后将混合物通过HPLC纯化，获得目标化合物(9mg)。MS 382.2(M+H)；UV 210.8，267.5，305.5nm。

实施例66

1-(4-(4-(4-(4-氨基环己基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基) 哌嗪-1-基)乙酮

向2，4-二氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(1.12g，5.96mmol)的DMSO(8mL)溶液中加入甲硫醇钠(0.500g，7.14mmol)。将混合物于室温下搅拌2h。加入水诱导沉淀生成。收集沉淀物，真空干燥，获得为固体的2-氯代-4-(甲硫基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(0.90g)。

将2-氯代-4-(甲硫基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(484mg，2.43mmol)、1-(4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(645mg，2.95mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.500mL，3.95mmol)的nBuOH(10mL)混合物于116℃加热48h。冷却后，加入H2O和EtOAc。分离有机相，采用5％的碳酸氢钠洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得为固体的1-(4-(4-(4-(甲硫基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮(453mg)。

向1-(4-(4-(4-(甲硫基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮(451mg，1.18mmol)的CH₂Cl₂(12mL)溶液中加入mCPBA(320mg，65％，1.20mmol)。将混合物于室温下搅拌1h。然后将其真空浓缩，残留物通过HPLC纯化，获得为固体的1-(4-(4-(4-(甲基亚磺酰基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮(136mg)。

向1-(4-(4-(4-(甲基亚磺酰基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮(34mg，0.085mmol)的DMSO(1mL)溶液中加入1，4-二氨基环己烷(顺式和反式混合物，35mg，0.31mmol)和二异丙基乙基胺(0.060mL，0.35mmol)。将混合物于116℃加热过夜。然后将其通过HPLC纯化，获得目标化合物(5mg)。MS 449.3(M+H)；UV 208.5，265.1，305.5nm。

实施例67

N-(4-(4-(5-氨基戊基氨基)-5-溴-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺和N-(4-(4-(5-氨基戊基氨基)-5，6-二溴-7H-吡咯并[2，3-d] 嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺

向N-(4-(4-(5-氨基戊基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺(44mg，0.12mmol)的DMF(1mL)溶液中加入N-溴代琥珀酰胺(25mg，0.14mmol)。将混合物于室温下搅拌2h。然后将其通过HPLC纯化，获得单-溴代化合物(3mg)和二溴代化合物(5mg)。MS 460.1和462.1(单-溴代，M+H，Br模式)；UV 207.3，228.5，298.4nm；539.0，540.0，541.0和542.0(二溴代，M+H，2Br模式)；UV 202.6，232.0，300.7nm。

实施例68

N-(4-(4-(3-氨基磺酰基-苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺

将2，4-二氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(200mg，0.58mmol)、3-氨基苯磺酰胺(111mg，0.65mmol)和三乙胺(0.200mL，1.44mmol)的nBuOH(6mL)混合物于80℃加热过夜。然后将混合物于110℃再加热24h。冷却后，加入H2O和EtOAc。分离有机相，用1N HCl洗涤，然后用5％碳酸氢钠洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得为固体的2-氯代-N-(3-氨基磺酰基-苯基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(210mg)。

将2-氯代-N-(3-氨基磺酰基-苯基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(100mg，0.21mmol)、N-(4-氨基苯基)-N-甲基乙酰胺(100mg，0.61mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.050mL，0.40mmol)的nBuOH(2mL)和二氧六环(2mL)混合物于110℃加热4h。加入更多的三甲基甲硅烷基氯(0.100mL，0.79mmol)。将混合物于110℃再加热72h。然后将其通过HPLC纯化，获得为固体的N-(4-(4-(3-氨基磺酰基-苯基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺(20mg)。

向N-(4-(4-(3-氨基磺酰基-苯基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺(20mg，0.033mmol)的MeOH(2mL)溶液中加入aq.1N KOH(0.60mL，0.60mmol)。将混合物于60℃加热3h。将其真空浓缩。残留物采用HOAc(1mL)酸化，然后通过HPLC纯化，获得目标化合物(7mg)。MS 452.0(M+H)；UV 208.5，284.1，317.4nm。

实施例69

2-(6-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-2-氧代-3，4-二氢喹啉-1(2H)-基)乙酸乙酯

向6-硝基-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮(0.5g，2.6mmol)和Cs₂CO₃(1.70g，5.2mmol)的DMF(5mL)混合物中加入2-溴乙酸乙酯(0.317mL，2.86mmol)。于65℃搅拌3h后，混合物用H₂O和EtOAc稀释，分离有机相，水层再用EtOAc萃取，合并有机层，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得2-(6-硝基-2-氧代-3，4-二氢喹啉-1(2H)-基)乙酸乙酯，它可以直接用于下一步骤。

向2-(6-硝基-2-氧代-3，4-二氢喹啉-1(2H)-基)乙酸乙酯的EtOH(10mL)和H₂O(5mL)混悬液中加入甲酸铵(1.5g，23.8mmol)和Fe(0.3g，5.4mmol)。回流下搅拌2h后，过滤黑色混合物，滤液采用EtOAc和水稀释，分离EtOAc层，水层采用EtOAc再次萃取，合并有机层，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得2-(6-氨基-2-氧代-3，4-二氢喹啉-1(2H)-基)乙酸乙酯(0.2g，31％)。

根据合成1-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基磺酰基)哌啶-4-醇的通用方法，采用2-(6-氨基-2-氧代-3，4-二氢喹啉-1(2H)-基)乙酸乙酯和2-氯代-N-环丁基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺，获得2-(6-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-2-氧代-3，4-二氢喹啉-1(2H)-基)乙酸乙酯(C₂₃H₂₆N₆O₃的MS计算值为434.2，实测值[MH]435.2；UV 209.8，304.5nm)。

实施例70

2-(6-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-2-氧代-3，4-二氢喹啉-1(2H)-基)乙酸

向2-(6-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-2-氧代-3，4-二氢喹啉-1(2H)-基)乙酸乙酯(10mg，0.023mmol)的THF(0.6mL)和H₂O(0.4mL)溶液中加入NaOH(5N，2滴)。于室温下搅拌3h后，反应混合物通过制备性HPLC纯化，得到2-(6-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-2-氧代-3，4-二氢喹啉-1(2H)-基)乙酸(C₂₁H₂₂N₆O₃的MS计算值为406.2，实测值[MH]407.0；UV 207.5，304.5nm)。

实施例71

2-(6-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-2-氧代-3，4-二氢喹啉-1(2H)-基)-N-(2-(二甲基氨基)乙基)乙酰胺

向2-(6-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-2-氧代-3，4-二氢喹啉-1(2H)-基)乙酸(4mg，0.01mmol)的DMF(0.3mL)溶液中加入HATU、DIPEA和N，N-二甲基氨基乙基胺。于室温下搅拌1h后，将其通过制备性HPLC纯化，获得2-(6-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-2-氧代-3，4-二氢喹啉-1(2H)-基)-N-(2-(二甲基氨基)乙基)乙酰胺(C₂₅H₃₂N₈O₂的MS计算值为476.3，实测值[MH]477.0；UV 205.1，304.5nm)。

实施例72

4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基(甲基)氨基甲酸甲基酯

根据合成1-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基磺酰基)哌啶-4-醇的通用方法，采用4-氨基苯基(甲基)氨基甲酸甲酯和2-氯代-N-环丁基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺，获得4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基(甲基)氨基甲酸甲酯(C₁₉H₂₂N₆O₂的MS计算值为366.2，实测值[MH]368.0；UV209.8，271.2，304.5nm)。

实施例73

根据合成1-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基磺酰基)哌啶-4-醇的通用方法，采用4-氨基苯基(甲基)氨基甲酸甲酯和2-氯代-N-环丙基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺，获得4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基(甲基)氨基甲酸甲酯(C₁₈H₂₀N₆O₂的MS计算值为352.2，实测值[MH]353.0；UV 227.5，292.6nm)。

实施例74

N-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-2-羟基 -N-甲基乙酰胺

于0℃，向4-硝基-N-甲基苯胺的DCM(10mL)混悬液中加入Et₃N(0.63mL，4.5mmol)和2-苄氧基乙酰氯(0.513mL，3.3mmol)。于室温下搅拌15h后，反应混合物采用EtOAc稀释，采用饱和的碳酸氢钠、盐水洗涤，干燥并浓缩，获得2-苄氧基-N-甲基-N-(4-硝基苯基)乙酰胺(0.63g，70％)。

向上述2-苄氧基-N-甲基-N-(4-硝基苯基)乙酰胺的EtOH(8mL)和H₂O(4mL)混悬液中加入甲酸铵(1.3g，20mmol)和Fe(0.47g，8.4mmol)。回流加热2h后，将反应物冷却至室温，滤除铁，滤液用EtOAc和水稀释，分离EtOAc层，水层采用EtOAc再萃取，合并有机层，硫酸钠干燥并真空浓缩，获得2-苄氧基-N-甲基-N-(4-氨基苯基)乙酰胺(0.4g，53％)。

根据合成1-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基磺酰基)哌啶-4-醇的通用方法，采用2-苄氧基-N-甲基-N-(4-氨基苯基)乙酰胺和2-氯代-N-环丁基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺，获得2-苄氧基-N-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺(C₂₆H₂₈N₆O₂的MS计算值为456.2，实测值[MH]457.0)。

向2-苄氧基-N-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺(0.012g，0.026mmol)的EtOH(0.4mL)溶液中加入Pd/C(10mg)，充入H₂(1atm)。于室温下搅拌15h后，将其通过制备性HPLC纯化，获得N-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-2-羟基-N-甲基乙酰胺(C₁₉H₂₂N₆O₂的MS计算值为366.2，实测值[MH]367.0；UV 208.7，272.4，304.5nm)。

实施例75

N-(4-(4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-2-羟基 -N-甲基乙酰胺

根据合成1-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基磺酰基)哌啶-4-醇的通用方法，采用2-苄氧基-N-甲基-N-(4-氨基苯基)乙酰胺和2-氯代-N-环丙基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺，获得2-苄氧基-N-(4-(4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺(C₂₅H₂₆N₆O₂的MS计算值为442.2，实测值[MH]443.5)。

向2-苄氧基-N-(4-(4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺(0.015g，0.034mmol)的EtOH(0.4mL)溶液中加入Pd/C(10mg)，充入H₂(1atm)。于室温下搅拌15h后，将其通过制备性HPLC纯化，获得N-(4-(4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-2-羟基-N-甲基乙酰胺(C₁₈H₂₀N₆O₂的MS计算值为352.2，实测值[MH]352.8；UV 206.3，228.7，297.3nm)。

实施例76

N ⁴ -环丁基-N ² -(4-甲基磺酰基甲基)苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺

向4-硝基苄基氯(1g，5.8mmol)和TBAI(0.11g，0.29mmol)的EtOH(12mL)混合物中加入NaOSOCH₃(0.77g，6.38mmol)。回流加热2h后，将混合物冷却至室温，过滤收集沉淀物，获得1-(甲基磺酰基甲基)-4-硝基苯(1.5g)。

向1-(甲基磺酰基甲基)-4-硝基苯(1.5g，7mmol)的EtOH(20mL)和H₂O(10mL)混合物中加入铁(1.96g，35mmol)和甲酸铵(4.41g，70mmol)。于90℃加热2h，然后将其采用EtOAc稀释，采用饱和的NaHCO₃、盐水洗涤，干燥并浓缩，获得4-(甲基磺酰基甲基)苯胺(0.5g)。

根据合成1-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基磺酰基)哌啶-4-醇的通用方法，采用4-(甲基磺酰基甲基)苯胺和2-氯代-N-环丁基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺，获得N⁴-环丁基-N²-(4-甲基磺酰基甲基)苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺(C₁₈H₂₁N₅O₂S的MS计算值为371.5，实测值[MH]372.1；UV 205.1，273.6，304.5nm)。

实施例77

N ⁴ -环丁基-N ² -(3-甲基磺酰基甲基)苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺

向3-硝基苄基溴(1g，4.63mmol)的EtOH(12mL)混合物中加入NaOSOCH₃(0.61g，5.09mmol)。回流加热2h后，将混合物冷却至室温，过滤收集沉淀物，获得1-(甲基磺酰基甲基)-3-硝基苯(0.77g)。

向1-(甲基磺酰基甲基)-4-硝基苯(0.77g，3.56mmol)的EtOH(10mL)和H₂O(5mL)混合物中加入铁(1.0g，17.82mmol)和甲酸铵(2.25g，35.6mmol)。于90℃加热2h，将其采用EtOAc稀释，采用饱和的NaHCO₃、盐水洗涤，干燥并浓缩，获得3-(甲基磺酰基甲基)苯胺(0.47g)。

根据合成1-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基磺酰基)哌啶-4-醇的通用方法，采用3-(甲基磺酰基甲基)苯胺和2-氯代-N-环丁基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺，获得N⁴-环丁基-N²-(3-甲基磺酰基甲基)苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺(C₁₈H₂₁N₅O₂S的MS计算值为371.5，实测值[MH]372.1；UV 214.5，267.6，304.5nm)。

实施例78

2-(3-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯氧基 -N-甲基乙酰胺

向2，4-二氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(0.062g，0.33mmol)的DMSO(1mL)溶液中加入DIPEA(0.117mL，o.66mmol)和2-(3-氨基苯氧基)-N-甲基乙酰胺(0.095g，0.49mmol)。于100℃加热15h后，采用EtOAc稀释，用饱和的NaHCO₃、盐水洗涤，干燥并浓缩，获得2-(3-(2-氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯氧基-N-甲基乙酰胺(0.062g)。

向2-(3-(2-氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯氧基-N-甲基乙酰胺(0.062g)的nBuOH(0.6mL)混合物中加入6-氨基吲唑(0.028g)和TMSCl(0.013mL)。于115℃加热15h后，将混合物通过prep HPLC纯化，获得2-(3-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯氧基-N-甲基乙酰胺(0.007g，C₂₂H₂₀N₈O₂的MS计算值为428.4，实测值[MH]429.1；UV 238.1，311.6nm)。

实施例79

N ² -(1H-吲唑-6-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺

将2，4-二氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(0.1g，0.53mmol)的氨(7N的MeOH溶液，1mL)混合物于100℃加热24h，然后将其采用EtOAc稀释，采用饱和的碳酸氢钠、盐水洗涤，干燥并浓缩，获得2-氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(0.06g)。

向2-氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(0.06g，0.353mmol)的nBuOH(0.7mL)混合物中加入6-氨基吲唑(0.094g，0.70mmol)和TMSCl(0.023mL，0.175mmol)。于115℃加热8h后，将其冷却，通过prep HPLC纯化，获得N²-(1H-吲唑-6-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺(0.012g，C₁₃H₁₁N₇的MS计算值为265.3，实测值266.1；UV 216.9，308.0nm)。

实施例80

N-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基环丙烷甲酰胺

步骤1：于室温下，向N-甲基-4-硝基苯胺(2g，13.1mmol)的DCM(30mL)混合物中加入Et3N(2.75mL，20mmol)和环丙烷碳酰氯(1.32mL，14.4mmol)，于室温下搅拌1h后，混合物采用EtOAc稀释，有机相采用饱和的碳酸氢钠、盐水洗涤，干燥并浓缩，获得N-甲基-N-(4-硝基苯基)环丙烷甲酰胺的粗品产物(3g)。

向上述粗品产物(3g)的EtOH(20mL)和H₂O(10mL)的混悬液中加入铁(3.67g，65.5mmol)和甲酸铵(826g，130mml)。将混合物于90℃加热2h，冷却至室温。混合物采用EtOAc稀释，采用饱和的碳酸氢钠、盐水洗涤，干燥并浓缩，获得N-(4-氨基苯基)-N-甲基环丙烷甲酰胺(1.6g)。

步骤2：向2-氯代-N-环丁基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(67mg，0.3mmol)的nBuOH(0.8mL)混合物中加入N-(4-氨基苯基)-N-甲基环丙烷甲酰胺(85mg，0.45mmol)和TMSCl(0.02mL，0.15mmol)。于115℃加热2h后，将混合物冷却，通过制备性HPLC纯化，获得N-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基环丙烷甲酰胺(7mg)。C₂₁H₂₄N₆O的MS实测值为(M+H)⁺377.2。λ＝208.7，272.4，304.5。

实施例81

N-(4-(4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基环丙烷甲酰胺

根据实施例关于N-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基环丙烷甲酰胺中所述相同合成方法，制备目标化合物。C₂₀H₂₂N₆O的MS实测值为(M+H)⁺363.1。λ＝211.0，228.7，296.1。

实施例82

N-(4-(4-(甲基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基环丙烷甲酰胺

根据实施例关于N-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基环丙烷甲酰胺中所述相同合成方法，制备目标化合物。C₁₈H₂₀N₆O的MS实测值为(M+H)⁺337.1。λ＝212.2，303.3。

实施例83

2-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)乙酰胺

步骤1：向2-氯代-4-(甲硫基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(177mg，0.88mmol)的nBuOH(2mL)混悬液中加入TMSCl(0.111mL，0.88mmol)。于115℃加热24h，将混合物冷却，通过制备性HPLC纯化，获得2-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-4-(甲硫基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(53mg)。

步骤2：向2-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-4-(甲硫基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(53mg，0.18mmol)的DCM(1mL)溶液中加入mCPBA(50mg，0.187mmol)。于室温下搅拌2h后，混合物采用EtOAc稀释，采用饱和的碳酸氢钠、盐水洗涤，干燥并浓缩，获得相应的砜和亚砜混合物(100mgtotal)。

步骤3：向上述砜和亚砜混合物(100mg)的DMSO(1mL)溶液中加入盐酸甘氨酰胺(60mg，0.534mmol)和DIPEA(0.16mL，0.89mmol)。于65℃加热48h，将混合物冷却，通过制备性HPLC纯化，获得2-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)乙酰胺(6mg)。C₁₅H₁₄N₈O的MS实测值为(M+H)⁺323.2。λ＝244.0，312.8。

实施例84

N-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-2-(二甲基氨基)-N-甲基乙酰胺

根据实施例关于N-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基环丙烷甲酰胺中所述相同合成流程，制备目标化合物。C₂₁H₂₇N₇O的MS实测值为(M+H)⁺394.3。λ＝206.3，273.6.304.5。

实施例85

N-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-N-(3-二甲基氨基丙基)苯甲酰胺

根据实施例关于N-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基环丙烷甲酰胺中所述相同合成流程，制备目标化合物。C₂₂H₂₉N₇O的MS实测值为(M+H)⁺408.4。λ＝208.7，227.5，312.8。

实施例86

N-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-3-羟基 -N-甲基丙酰胺

根据实施例关于N-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基环丙烷甲酰胺中所述相同合成流程，制备目标化合物。C₂₀H₂₄N₆O₂的MS实测值为(M+H)⁺381.2。λ＝229.8，271.2，304.5。

实施例87

N-(4-(4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-3-羟基 -N-甲基丙酰胺

根据实施例关于N-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基环丙烷甲酰胺中所述相同合成流程，制备目标化合物。C₁₉H₂₂N₆O₂的MS实测值为(M+H)⁺367.2。λ＝229.8，296.1。

实施例88

N ² -(1H-吲唑-6-基氨基)-N ⁴ -(1H-吡唑-5-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4- 二胺

步骤1：向2，4-二氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(100mg，0.29mmol)的nBuOH(1mL)混悬液中加入3-氨基吡唑(26mg，0.32mmol)和DIPEA(0.057mL，0.32mmol)。于90℃加热3h后，混合物采用EtOAc稀释，采用饱和的碳酸氢钠、盐水洗涤，干燥并浓缩，获得2-氯代-N-(1H-吡唑-5-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺混合物(100mg)。

步骤2：向2-氯代-N-(1H-吡唑-5-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(100mg，0.26mmol)的nBuOH(1mL)混合物中加入6-氨基吲唑(68mg，0.512mmol)和TMSCl(0.016mL，0.128mmol)。于115℃搅拌15h后，将混合物冷却，加入MeOH(1mL)，随后加入KOH(100mg)的H₂O(0.5mL)溶液。于65℃加热2h，浓缩溶液，残留物通过制备性HPLC纯化，获得N2-(1H-吲唑-6-基氨基)-N4-(1H-吡唑-5-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺(7mg)。C₁₆H₁₃N₉的MS实测值为(M+H)⁺332.1.λ＝209.8，251.1，310.4。

实施例89

N ² -(1H-吲唑-6-基氨基)-N ⁴ -(2-甲氧基乙基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4- 二胺

根据实施例关于N²-(1H-吲唑-6-基氨基)-N⁴-(1H-吡唑-5-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺中所述相同合成流程，制备目标化合物。C₁₆H₁₇N₇O的MS实测值为(M+H)⁺324.2.λ＝246.4，315.2。

实施例90

1-(4-(4-(4-(2-甲氧基乙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基) 哌嗪-1-基)乙酮

根据实施例关于N²-(1H-吲唑-6-基氨基)-N⁴-(1H-吡唑-5-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺中所述相同合成流程，制备目标化合物。C₂₂H₂₈N₆O₂的MS实测值为(M+H)⁺410.2.λ＝231.0，265.3，302.1。

实施例91

N ² -(1H-吲唑-6-基氨基)-N ⁴ -(2-羟基乙基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺

根据实施例关于N²-(1H-吲唑-6-基氨基)-N⁴-(1H-吡唑-5-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺中所述相同合成流程，制备目标化合物。C₁₅H₁₅N₇O的MS实测值为(M+H)⁺310.2.λ＝241.6，309.2。

实施例92

N ⁴ -(2-2-(氨基乙氧基)乙基)-N ² -(1H-吲唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d] 嘧啶-2，4-二胺

根据实施例关于N²-(1H-吲唑-6-基氨基)-N⁴-(1H-吡唑-5-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺中所述相同合成流程，制备目标化合物。C₁₇H₂₀N₈O的MS实测值为(M+H)⁺353.2.λ＝241.6，308.0。

实施例93

1-(4-(4-(4-(2-(2-氨基乙氧基)氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮

根据实施例关于N²-(1H-吲唑-6-基氨基)-N⁴-(1H-吡唑-5-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺中所述相同合成流程，制备目标化合物。C₂₃H₃₁N₇O₂的MS实测值为(M+H)⁺439.1.λ＝266.5，303.3。

实施例94

(S)-1-(4-(4-(2-(2-氨基乙氧基)乙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)吡咯烷-2-甲酰胺

根据实施例关于N²-(1H-吲唑-6-基氨基)-N⁴-(1H-吡唑-5-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺中所述相同合成流程，制备目标化合物。C₂₂H₂₉N₇O₂的MS实测值为(M+H)⁺425.1.λ＝239.3，303.3。

实施例95

3-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯甲酰胺和3-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯甲酰胺

将2，4-二氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(200mg，0.580mmol)、3-氨基苯甲酰胺(83mg，0.61mmol)和三乙胺(0.200mL，1.44mmol)的二氧六环(5mL)溶液于110℃搅拌20h。将其真空浓缩。残留物采用HOAc(1mL)酸化后，将其通过HPLC纯化，获得3-(2-氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯甲酰胺(85mg)。

将3-(2-氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯甲酰胺(85mg，0.19mmol)、1-(4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(105mg，0.480mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.030mL，0.24mmol)的二氧六环(1mL)和nBuOH(1mL)混合物于110℃搅拌72h。将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得3-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯甲酰胺(40mg)。

向3-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯甲酰胺(40mg，0.064mmol)的MeOH(3mL)溶液中加入aq.1N KOH(1.0mL，1.0mmol)。将混合物于60℃加热3h。将其真空浓缩。残留物采用HOAc(1mL)酸化，然后通过HPLC纯化，获得3-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯甲酰胺(15mg)，MS 471.1(M+H)；UV 207.3，284.1，311.5nm；和3-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯甲酰胺(5mg)，MS429.1(M+H)；UV 202.6，279.3nm。

实施例96

3-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯磺酰胺和3-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯磺酰胺

将2-氯代-N-(3-氨基磺酰基-苯基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(100mg，0.210mmol)、1-(4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(92mg，0.42mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.200mL，1.58mmol)的nBuOH(2mL)和二氧六环(2mL)混合物于110℃加热72h。加入更多的1-(4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(92mg，0.42mmol)。将混合物于110℃再搅拌72h。然后将其通过HPLC纯化，获得3-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯磺酰胺(40mg)。

向3-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯磺酰胺(40mg，0.061mmol)的MeOH(3mL)溶液中加入aq.1N KOH(1.0mL，1.0mmol)。将混合物于60℃加热3h。将其真空浓缩。残留物采用HOAc(1mL)酸化，然后通过HPLC纯化，获得3-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯磺酰胺(14mg)，MS 507.1(M+H)；UV 212.0，282.9，313.8nm；和3-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯磺酰胺(4mg)，MS465.1(M+H)；UV 203.8，281.7nm。

实施例97

N-(4-(4-(3-(氨基甲基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺

将3-硝基苄基胺盐酸盐(530mg，2.81mmol)、二碳酸二-叔-丁基酯(613mg，2.81mmol)和TEA(0.800mL，5.75mmol)的CH₂Cl₂(8mL)混合物于室温下搅拌72h。将其真空浓缩，残留物在水和EtOAc之间分配。有机相用1N HCl洗涤，然后用5％碳酸氢钠洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得3-硝基苄基氨基甲酸叔-丁基酯，为固体(705mg)。

将3-硝基苄基氨基甲酸叔-丁基酯(705mg，2.80mmol)和Pd-C(10％，125mg)的EtOAc(25mL)(含有6滴HOAc)混合物在氢气环境中氢化20h。将其通过硅藻土过滤。滤液真空浓缩，获得3-硝基苄基氨基甲酸叔-丁基酯(602mg)。

将2，4-二氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(200mg，0.585mmol)、3-硝基苄基氨基甲酸叔-丁基酯(137mg，0.617mmol)和TEA(0.200mL，1.44mmol)的nBuOH(5mL)混合物于110℃搅拌20h。加入水和EtOAc。有机相用1N HCl洗涤，然后用5％碳酸氢钠洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得3-(2-氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苄基氨基甲酸叔-丁基酯(306mg)。

将3-(2-氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苄基氨基甲酸叔-丁基酯(306mg，0.580mmol)、N-(4-氨基苯基)-N-甲基乙酰胺(190mg，1.16mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.100mL，0.791mmol)的nBuOH(5mL)溶液于116℃搅拌20h。然后将混合物通过HPLC纯化，获得N-(4-(4-(3-(氨基甲基)苯基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺(27mg)。

向N-(4-(4-(3-(氨基甲基)苯基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺(27mg，0.049mmol)的MeOH(3mL)溶液中加入aq.1N KOH(1.0mL，1.0mmol)。将混合物于60℃搅拌3h。将其真空浓缩。残留物采用HOAc(1mL)酸化，通过HPLC纯化，获得目标化合物(15mg)。MS 402.3(M+H)；UV 202.6，282.9，315.0nm。

实施例98

(R)-1-(4-(4-(4-(1-羟基丙-2-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮和(R)-2-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d] 嘧啶-4-基氨基)丙-1-醇

将2，4-二氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(0.35g，1.0mmol)、D-甘氨醇(0.10mL，1.3mmol)和TEA(0.20mL，1.4mmol)的二氧六环(6mL)溶液于70℃搅拌20h。加入水和EtOAc。有机相用1N HCl洗涤，然后用5％碳酸氢钠洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得(R)-2-(2-氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)丙-1-醇(0.38g)。

将(R)-2-(2-氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)丙-1-醇(200mg，0.525mmol)、1-(4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(140mg，0.639mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.130mL，1.03mmol)的nBuOH(4mL)混合物于116℃搅拌48h。将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得(R)-1-(4-(4-(4-(1-羟基丙-2-基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮(25mg)。

向(R)-1-(4-(4-(4-(1-羟基丙-2-基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮(25mg，0.044mmol)的MeOH(1mL)和二氧六环(1mL)的溶液中加入aq.1N KOH(1.0mL，1.0mmol)。于60℃搅拌3h后，将其真空浓缩。残留物采用HOAc(1mL)酸化，然后通过HPLC纯化，获得(R)-1-(4-(4-(4-(1-羟基丙-2-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮(7mg)，MS 410.5(M+H)；UV 202.6，267.5，303.1nm；和(R)-2-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)丙-1-醇(3mg)，MS 368.5(M+H)；UV 229.6，271.0，301.9nm。

实施例99

(S)-1-(4-(4-(4-(1-羟基丙-2-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮和(S)-2-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)丙-1-醇

根据合成(R)-1-(4-(4-(4-(1-羟基丙-2-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮，MS 410.5(M+H)；UV 202.0，266.3，301.9和(R)-2-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)丙-1-醇的类似方法，合成目标化合物MS 368.5(M+H)；但是采用L-甘氨醇代替D-甘氨醇(alaninol)。

实施例100

1-(4-(4-(4-(1，1-二氧基-四氢噻吩-3-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮和N2-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-N4-(1，1-二氧基-四氢噻吩-3-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺

将2，4-二氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(200mg，0.584mmol)、3-氨基四氢-1H-噻吩-1，1-二酮盐酸盐(100mg，0.583mmol)和TEA(0.325mL，2.34mmol)的二氧六环(5mL)混合物于70℃搅拌20h。加入水和EtOAc。分离有机相，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得2-氯代-N-(1，2-二氧基-四氢噻吩-3-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(208mg)。

将2-氯代-N-(1，2-二氧基-四氢噻吩-3-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(208mg，0.472mmol)、1-(4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(165mg，0.753mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.200mL，1.58mmol)的nBuOH(5mL)混合物于120℃搅拌48h。将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得1-(4-(4-(4-(1，1-二氧基-四氢噻吩-3-基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮(65mg)。

向1-(4-(4-(4-(1，1-二氧基-四氢噻吩-3-基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮(65mg，0.104mmol)的MeOH(3mL)溶液中加入aq.1N KOH(1.0mL，1.0mmol)。于60℃搅拌4h后，将其真空浓缩。残留物采用HOAc(1mL)酸化，然后通过HPLC纯化，获得1-(4-(4-(4-(1，1-二氧基-四氢噻吩-3-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮(15mg)，MS 470.5(M+H)；和N2-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-N4-(1，1-二氧基-四氢噻吩-3-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺(3mg)，MS 428.5(M+H)。

实施例101

4-(4-(环丙基氨基)-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺

将2-氯代-N-环丙基-5-(吡啶-4-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(135mg，0.307mmol)、4-氨基苯甲酰胺(100mg，0.735mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.200mL，1.58mmol)的nBuOH(3mL)混合物于135℃搅拌48h。将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(9mg)。MS386.2(M+H)；UV 201.8，309.8nm。

实施例102

4-(4-氨基-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯甲酸

将2-氯代-N-环丙基-5-(吡啶-4-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(245mg，0.557mmol)、4-氨基苯甲酸(150mg，1.09mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.300mL，2.37mmol)的nBuOH(4mL)混合物于135℃搅拌24h。将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得4-(4-氨基-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯甲酸丁基酯(137mg)。

向4-(4-氨基-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯甲酸丁基酯(137mg，0.340mmol)的THF(3mL)溶液中加入aq.1N LiOH(2.0mL，2.0mmol)。将混合物于室温下搅拌20h。将其真空浓缩。残留物采用HOAc(2mL)酸化，然后通过HPLC纯化，获得目标化合物(55mg)。MS347.2(M+H)；UV 203.8，306.7nm。

实施例103

4-(环丙基氨基)-2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-5-甲腈

将2-氯代-4-(环丙基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈(145mg，0.374mmol)、6-氨基-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮(60mg，0.370mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.200mL，1.58mmol)的nBuOH(4mL)混合物于135℃搅拌20h。将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(50mg)。MS 360.3(M+H)；UV 202.2，292.7nm。

实施例104

4-(5-氰基-4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺

将2-氯代-4-(环丙基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈(175mg，0.451mmol)、4-氨基苯甲酰胺(122mg，0.897mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.200mL，1.58mmol)的nBuOH(4mL)混合物于135℃搅拌20h。将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(43mg)。MS334.3(M+H)；UV 204.6，230.2，308.1nm。

实施例105

N-(4-(5-氰基-4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺

将2-氯代-4-(环丙基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈(165mg，0.425mmol)、N-(4-氨基苯基)-N-甲基乙酰胺(107mg，0.652mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.200mL，1.58mmol)的nBuOH(4mL)混合物于135℃搅拌20h。将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(50mg)。MS 362.3(M+H)；UV 202.8，254.0，280.4nm。

实施例106

4-(5-氰基-4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯磺酰胺

将2-氯代-4-(环丙基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈(150mg，0.387mmol)、4-氨基苯磺酰胺(103mg，0.599mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.200mL，1.58mmol)的nBuOH(4mL)混合物于135℃搅拌20h。将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(45mg)。MS370.3(M+H)；UV 202.8，254.6，305.0nm。

实施例107

2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d] 嘧啶-5-甲腈

将2-氯代-4-(环丙基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈(150mg，0.387mmol)、1-(4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(132mg，0.602mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.200mL，1.58mmol)的nBuOH(4mL)混合物于135℃搅拌20h。将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(25mg)。MS 417.4(M+H)；UV 203.4，254.0，291.5nm。

实施例108

4-(环丙基氨基)-2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-5-甲酰胺

将4-(环丙基氨基)-2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈(30mg，0.083mmol)、K₂CO₃(100mg，0.724mmol)和H₂O₂(50％aq.，0.500mL)的DMSO(1mL)溶液于100℃加热5min。气体剧烈逸出。冷却后，混合物通过HPLC纯化，获得目标化合物(7mg)。MS378.4(M+H)；UV 200.4，241.8，295.8nm。

实施例109

4-(4-(1-(2-氰基乙酰基)哌啶-4-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺

将2，4-二氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(171mg，0.500mmol)、4-氨基-1-N-Boc-哌啶(100mg，0.500mmol)和TEA(0.150mL，1.08mmol)的二氧六环(4mL)混合物于70℃搅拌20h。加入水和EtOAc。分离有机相，用1N HCl洗涤，然后用5％碳酸氢钠洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得4-(2-氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(202mg)。

将4-(2-氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(202mg，0.400mmol)、4-氨基苯甲酰胺(82mg，0.60mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.200mL，1.58mmol)的nBuOH(4mL)混合物于116℃在密封的试管中加热20h。将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得4-(4-(哌啶-4-基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺(58mg)。

向氰基乙酸(85mg，1.00mmol)的CH₂Cl₂(2mL)(含有2滴DMF)混悬液中加入草酰氯(0.082mL，0.94mmol)。将混合物于室温下搅拌50min。向在冰浴中冷却的上述溶液中加入4-(4-(哌啶-4-基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺(58mg，0.11mmol)和TEA(0.450mL，3.22mmol)的DMF(2mL)溶液。将混合物搅拌2h。加入水和EtOAc。分离有机相，采用5％的碳酸氢钠洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得4-(4-(1-(2-氰基乙酰基)哌啶-4-基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺(45mg)。

向4-(4-(1-(2-氰基乙酰基)哌啶-4-基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺(45mg，0.078mmol)的二氧六环(2mL)和MeOH(1mL)的溶液中加入aq.1N KOH(1.0mL，1.0mmol)。将混合物于70℃搅拌4h。将其真空浓缩。残留物采用HOAc(1mL)酸化，然后通过HPLC纯化，获得4-(4-(哌啶-4-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺(20mg)。

向氰基乙酸(85mg，1.00mmol)的CH₂Cl₂(2mL)(含有2滴DMF)的混悬液中加入草酰氯(0.082mL，0.94mmol)。将混合物于室温下搅拌50min。向在冰浴中冷却的上述溶液中加入4-(4-(哌啶-4-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺(20mg，0.057mmol)和TEA(0.450mL，3.22mmol)的DMF(2mL)溶液。将混合物于室温下搅拌20h。加入水。真空除去CH₂Cl₂。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(10mg)。MS 419.3(M+H)；UV200.0，311.9nm。

实施例110

4-(4-(1-(2-氰基乙酰基)哌啶-3-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺

将2，4-二氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(233mg，0.681mmol)、3-氨基-1-N-Boc-哌啶(136mg，0.680mmol)和TEA(0.200mL，1.44mmol)的二氧六环(5mL)混合物于70℃搅拌20h。加入水和EtOAc。分离有机相，用1N HCl洗涤，然后用5％碳酸氢钠洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得3-(2-氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(251mg)。

将3-(2-氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(251mg，0.496mmol)、4-氨基苯甲酰胺(102mg，0.750mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.200mL，1.58mmol)的nBuOH(4mL)混合物于116℃在密封的试管中加热20h。将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得4-(4-(哌啶-3-基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺(36mg)。

向4-(4-(哌啶-3-基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺(36mg，0.071mmol)的二氧六环(2mL)和MeOH(2mL)的溶液中加入aq.1N KOH(1.0mL，1.0mmol)。将混合物于70℃搅拌3h。将其真空浓缩。残留物采用HOAc(1mL)酸化，然后通过HPLC纯化，获得需要的化合物，为TFA盐，然后将其溶于MeOH(5mL)，加入MP-碳酸盐(0.10g，0.31mmol)。缓慢震摇30min后，过滤混合物。滤液真空浓缩，获得4-(4-(哌啶-3-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺(18mg)，为游离碱。

向氰基乙酸(46mg，0.54mmol)的CH₂Cl₂(1mL)(含有2滴DMF)的混悬液中加入草酰氯(0.047mL，0.54mmol)。将混合物于室温下搅拌40min。向在冰浴中冷却的上述溶液中加入4-(4-(哌啶-3-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺(18mg，0.051mmol)和TEA(0.250mL，1.80mmol)的DMF(2mL)溶液。将混合物搅拌2h。加入水。真空除去CH₂Cl₂。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(10mg)。MS 419.3(M+H)；UV 201.6，311.9nm。

实施例111

4-(4-甲氧基苯基氨基)-2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈

将2，4-二氯代-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(260mg，0.556mmol)、对氨基苯甲醚(75mg，0.610mmol)和DIEA(0.300mL，1.72mmol)的二氧六环(5mL)混合物于110℃搅拌20h。加入水和EtOAc。分离有机相，用1N HCl洗涤，然后用5％碳酸氢钠洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得2-氯代-5-碘-N-(4-甲氧基苯基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(257mg)。

将2-氯代-5-碘-N-(4-甲氧基苯基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(257mg，0.463mmol)、Pd₂dba₃(25mg，0.027mmol)和dppf(51mg，0.092mmol)的DMF(4mL)溶液采用氩气脱气，然后加入Zn(CN)₂(65mg，0.555mmol)。将混合物于70℃搅拌3h。真空除去DMF。残留物溶于CH₃CN。加入水诱导沉淀。收集沉淀物，真空干燥，获得2-氯代-4-(4-甲氧基苯基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈(68mg)。

将2-氯代-4-(4-甲氧基苯基氨基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈(68mg，0.15mmol)、6-氨基-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮(40mg，0.24mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.100mL，0.790mmol)的nBuOH(2mL)混合物于135℃搅拌20h。加入更多的6-氨基-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮(24mg，0.15mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.200mL，1.58mmol)。将其于135℃再搅拌20h。真空除去nBuOH。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(5mg)。MS 426.4(M+H)；UV 203.5，290.3nm。

实施例112

6-(4-(4-氟苯基氨基)-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-1- 甲基-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮

将2，4-二氯代-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(260mg，0.556mmol)、4-氟苯胺(0.055mL，0.581mmol)和DIEA(0.300mL，1.72mmol)的二氧六环(4mL)混合物于110℃搅拌20h。加入水和EtOAc。分离有机相，用1N HCl洗涤，然后用5％碳酸氢钠洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得2-氯代-N-(4-氟苯基)-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(230mg)。

向2-氯代-N-(4-氟苯基)-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(230mg，0.423mmol)、吡啶-4-硼酸(57mg，0.463mmol)和Pd(Ph₃P)₂Cl₂(30mg，0.042mmol)的二氧六环(4mL)混合物中加入aq.Na₂CO₃(135mg，1.27mmol)(1.0mL)。将混合物于100℃搅拌2h。将其真空浓缩。研磨残留物。过滤收集固体(86mg)。滤液通过HPLC纯化，获得2-氯代-N-(4-氟苯基)-5-(吡啶-4-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(31mg)。

将2-氯代-N-(4-氟苯基)-5-(吡啶-4-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(31mg，0.062mmol)、6-氨基-1-甲基-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮(25mg，0.14mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.100mL，0.790mmol)的nBuOH(1mL)溶液于135℃搅拌20h。将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物。MS480.5(M+H)；UV 204.7，281.7，314.3nm。

实施例113

6-(4-氨基-5-(4-氟苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮

向2-氯代-N-环丙基-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(150mg，0.307mmol)、4-氟苯基硼酸(64mg，0.457mmol)和Pd(Ph₃P)₂Cl₂(22mg，0.031mmol)的二氧六环(3mL)混合物中加入aq.Na₂CO₃(100mg，0.943mmol)(1.0mL)。将混合物于100℃搅拌1h。加入水和EtOAc。分离有机相，硫酸钠干燥，真空浓缩。残留物经硅胶柱过滤，将其采用5-15％EtOAc的己烷溶液洗脱，获得2-氯代-N-环丙基-5-(4-氟苯基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(121mg)。

将2-氯代-N-环丙基-5-(4-氟苯基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(76mg，0.17mmol)、6-氨基-1-甲基-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮(60mg，0.34mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.200mL，1.58mmol)的nBuOH(2mL)溶液于135℃搅拌20h。将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物。MS 403.4(M+H)；UV 205.3，293.4nm。

实施例114

6-(4-(苄基氨基)-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮

将2，4-二氯代-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(1.00g，2.13mmol)、苄基胺(0.233mL，2.13mmol)和DIEA(0.750mL，4.31mmol)的二氧六环(12mL)/nBuOH(12mL)/DMF(3mL)混合物于70℃搅拌2h。将其真空浓缩。残留物在水和EtOAc之间分配。分离有机相，用1N HCl洗涤，然后用5％碳酸氢钠洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得N-苄基-2-氯代-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(0.993g)。

向N-苄基-2-氯代-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(300mg，0.557mmol)、吡啶-4-硼酸(137mg，1.11mmol)和Pd(Ph₃P)₂Cl₂(40mg，0.042mmol)的二氧六环(3mL)混合物中加入aq.Na₂CO₃(120mg，1.13mmol)(1.0mL)。将混合物于100℃搅拌4h。将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得N-苄基-2-氯代-5-(吡啶-4-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(27mg)。

将N-苄基-2-氯代-5-(吡啶-4-基)-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(27mg，0.055mmol)、6-氨基-1-甲基-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮(20mg，0.11mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.070mL，0.553mmol)的nBuOH(1.5mL)溶液于116℃搅拌20h。加入更多的三甲基甲硅烷基氯(0.100mL，0.790mmol)。将其于116℃再搅拌40h。将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物。MS 476.4(M+H)；UV 200.3，268.7，309.3nm。

实施例115

4-(苄基氨基)-2-(1-甲基-2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)-7H-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-5-甲腈

将N-苄基-2-氯代-5-碘-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(386mg，0.716mmol)、Pd₂dba₃(40mg，0.043mmol)和dppf(80mg，0.14mmol)的DMF(6mL)溶液采用氩气脱气，然后加入Zn(CN)₂(100mg，0.555mmol)。将混合物于70℃搅拌20h。真空除去DMF。残留物通过HPLC纯化，获得4-(苄基氨基)-2-氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈(54mg)。

将4-(苄基氨基)-2-氯代-7-甲苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈(54mg，0.12mmol)、6-氨基-1-甲基-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮(43mg，0.24mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.200mL，1.58mmol)的nBuOH(2.5mL)和二氧六环(1.5mL)的溶液于116℃搅拌20h。将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物。MS 424.3(M+H)；UV 207.7，273.1nm。

实施例116

1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-9H-嘌呤-6-基)哌啶-3-甲酸丁基酯

将2，6-二氯代嘌呤(189mg，1.00mmol)、3-哌啶甲酸乙酯(0.155mL，1.00mmol)和DIEA(0.300mL，1.72mmol)的CH₃CN(5mL)溶液于室温下搅拌20h，在此期间析出白色固体，收集固体，获得1-(2-氯代-9H-嘌呤-6-基)哌啶-3-甲酸乙酯(108mg)。

将1-(2-氯代-9H-嘌呤-6-基)哌啶-3-甲酸酯(108mg，0.349mmol)、1-(4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(115mg，0.525mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.300mL，2.37mmol)的nBuOH(4mL)混合物于135℃搅拌20h。将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(86mg)。MS 521.4(M+H)；UV 201.8，272.8nm。

实施例117

1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-9H-嘌呤-6-基)哌啶-3-甲酸和 1-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-9H-嘌呤-6-基)哌啶-3-甲酸

向1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-9H-嘌呤-6-基)哌啶-3-甲酸丁基酯(76mg，0.15mmol)的THF(2mL)溶液中加入aq.1N LiOH(1.00mL，1.00mmol)。将混合物于室温下搅拌68h。加入HOAc(1mL)中和LiOH。然后将混合物通过HPLC纯化，获得1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-9H-嘌呤-6-基)哌啶-3-甲酸(45mg)，MS 465.3(M+H)；UV 205.8，272.8nm；和1-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-9H-嘌呤-6-基)哌啶-3-甲酸(8mg)，MS423.3(M+H)。

实施例118

1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-9H-嘌呤-6-基)哌啶-3-甲酰胺

向1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-9H-嘌呤-6-基)哌啶-3-甲酸(40mg，0.086mmol)和HOBt(30mg，0.196mmol)的DMF(2mL)溶液中加入EDC(35mg，0.183mmol)。搅拌90min后，加入NH3(0.5M的二氧六环溶液，1.00mL，0.500mmol)。将混合物搅拌2h。加入更多的EDC(52mg，0.271mmol)。将其再搅拌20h。然后将混合物通过HPLC纯化，获得目标化合物(30mg)。MS 464.3(M+H)；UV 204.8，273.8nm。

实施例119

2-(1-(2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)哌啶-4-基)乙酸丁基酯

将2，4-二氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(188mg，1.00mmol)、2-(4-哌啶基)乙酸乙基酯(171mg，1.00mmol)和DIEA(0.400mL，2.30mmol)的二氧六环(6mL)溶液于70℃搅拌20h。加入水和EtOAc。分离有机相，用1N HCl洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得2-(1-(2-氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)乙酸乙酯(308mg)。

将2-(1-(2-氯代-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)乙酸乙酯(135mg，0.419mmol)、6-氨基-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮(97mg，0.600mmol)和三甲基甲硅烷基氯(0.200mL，1.58mmol)的nBuOH(4mL)混合物于135℃搅拌20h。加入更多的三甲基甲硅烷基氯(0.200mL，1.58mmol)。将其于135℃再搅拌20h。将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(54mg)。MS 477.3(M+H)；UV 200.0，279.8nm。

实施例120

2-(1-(2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)哌啶-4-基)乙酸

向2-(1-(2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)乙酸丁基酯(48mg，0.101mmol)的THF(2mL)溶液中加入aq.1N LiOH(1.00mL，1.00mmol)。将混合物于室温下搅拌20h。加入HOAc(1mL)中和LiOH。然后将其通过HPLC纯化，获得目标化合物(32mg)。MS 421.3(M+H)；UV 207.8，279.8nm。

实施例121

2-(1-(2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4- 基)哌啶-4-基)乙酰胺

向2-(1-(2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)乙酸(26mg，0.062mmol)和HOBt(35mg，0.23mmol)的DMF(2mL)溶液中加入EDC(40mg，0.21mmol)。搅拌40min后，加入NH3(0.5M的二氧六环溶液，1.00mL，0.500mmol)。将混合物搅拌20h。然后将其通过HPLC纯化，获得目标化合物(20mg)。MS 420.3(M+H)；UV201.8，279.8nm。

实施例122

1-(4-(4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氯代嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1- 基)乙酮

根据合成化合物1-(4-(4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮的类似方法，采用2，4，5-三氯代嘧啶，制备目标化合物。MS 444.3和446.3(M+H，Cl模式)；UV 210.7，265.7nm。

实施例123

6-(5-氟-4-(3-氧代哌嗪-1-基)嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮

根据合成化合物1-(4-(4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮的类似方法，采用哌嗪-2-酮，制备目标化合物。MS 414.3(M+H)；UV 214.8，252.8nm。

实施例124

1-(4-(4-(5-氟-4-(哌嗪-1-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮

根据合成化合物1-(4-(4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮的类似方法，采用1-Boc-哌嗪，合成目标化合物。MS 400.3(M+H)；UV 203.8，268.8nm。

实施例125

4-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌嗪-1-甲酰胺

向1-(4-(4-(5-氟-4-(哌嗪-1-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮(53mg，0.13mmol)的CH₃CN(2mL)混悬液中加入KCN(60mg，0.74mmol)的H₂O(2mL)溶液。混悬液变得澄清。将混合物于70℃搅拌3h。然后将其通过HPLC纯化，获得目标化合物(15mg)。MS 443.3(M+H)；UV 201.8，269.8nm。

实施例126

2-(1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-4-基)乙酰胺

根据合成化合物1-(4-(4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮的类似方法，采用2-(哌啶-4-基)乙酰胺，合成目标化合物。MS 456.3(M+H)；UV 203.8，269.8nm。

实施例127

1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-4-基氨基甲酸苄基酯

根据合成化合物1-(4-(4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮的类似方法，采用哌啶-4-基氨基甲酸苄基酯，合成目标化合物。MS 548.4(M+H)；UV 215.8，258.8，279.8nm。

实施例128

1-(4-(4-(4-(4-氨基哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮

将1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-4-基氨基甲酸苄基酯(370mg，0.676mmol)和Pd-C(10％，55mg)的MeOH(12mL)溶液在氢气环境中氢化20h。然后将其通过硅藻土过滤。滤液真空浓缩，获得目标化合物(239mg)。MS 414.3(M+H)；UV 202.8，268.8nm。

实施例129

1-(1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-4-基)脲

向1-(4-(4-(4-(4-氨基哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮(48mg，0.12mmol)的CH₃CN(2mL)混悬液中加入KCN(60mg，0.74mmol)的H₂O(2mL)溶液。混悬液变得澄清。将混合物于70℃搅拌2h。然后将其通过HPLC纯化，获得目标化合物(12mg)。MS 457.3(M+H)；UV 204.8，266.8nm。

实施例130

2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-4-(4-(脲基甲基)哌啶-1-基)嘧啶-5- 甲酰胺

向2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)嘧啶-5-甲酰胺(8mg，0.018mmol)的CH₃CN(1mL)混悬液中加入KCN(18mg，0.22mmol)的H₂O(1mL)溶液。将混合物于70℃搅拌20h。然后将其通过HPLC纯化，获得目标化合物(6mg)。MS 496.5(M+H)；UV 200.8，271.8nm。

实施例131

4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯甲酸

根据合成化合物1-(4-(4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮的类似方法，采用4-氨基苯甲酸，合成目标化合物。MS 346.2(M+H)；UV 215.8，275.8，292.8nm。

实施例132

6-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-溴嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)- 酮

根据合成化合物6-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮的类似方法，采用5-溴-2，4-二氯代嘧啶，合成目标化合物。MS 431.4和433.3(M+H，Br模式)；UV 222.3，263.9nm。

实施例133

4-(4-(4-((二甲基氨基)甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺

向4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺(100mg，0.291mmol)和HCHO(37％aq.，0.060mL，0.807mmol)的MeOH(3mL)和HOAc(0.3mL)的混合物中加入NaBH₃CN(60mg，0.952mmol)。将混合物于室温下搅拌20h。将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(20mg)。MS 373.3(M+H)；UV 213.8，269.8，292.8nm。

实施例134

3-氨基-3-(1-(5-氟-2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)嘧啶-4-基)哌啶-4-基)丙酸乙酯

向3-(1-Boc-哌啶-4-基)-β-DL-丙氨酸乙酯盐酸盐(518mg，1.54mmol)的CH₂Cl₂(10mL)混悬液中加入NaHCO₃(1.00g，1.20mmol)的H₂O(15mL)溶液。然后加入氯代甲酸苄基酯(0.246mL，95％，1.66mmol)。将混合物于室温下搅拌20h。分离CH₂Cl₂层，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得4-(1-(苄基氧基羰基氨基)-3-乙氧基-3-氧代丙基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(660mg)。

向4-(1-(苄基氧基羰基氨基)-3-乙氧基-3-氧代丙基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(660mg，1.52mmol)的CH₂Cl₂(5mL)溶液中加入TFA(5mL)。将混合物于室温下搅拌3h。将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得3-(苄基氧基羰基氨基)-3-(哌啶-4-基)丙酸乙酯，为TFA盐。将该盐溶于EtOAc(50mL)，采用5％的碳酸氢钠洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得3-(苄基氧基羰基氨基)-3-(哌啶-4-基)丙酸乙酯，为游离碱(102mg)。

向3-(苄基氧基羰基氨基)-3-(哌啶-4-基)丙酸乙酯(102mg，0.305mmol)和2，4-二氯代-5-氟嘧啶(51mg，0.305mmol)的CH₃CN(2mL)溶液中加入DIEA(0.106mL，0.610mmol)。将混合物于室温下搅拌68h。然后将其真空浓缩。残留物溶于nBuOH(3mL)，加入6-氨基-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮(82mg，0.506mmol)。将溶液于116℃搅拌20h。将其真空浓缩。残留物溶于MeOH(9mL)。向该溶液中加入Pd-C(10％，40mg)。然后将混合物在氢气环境中氢化20h。将其通过硅藻土过滤。滤液真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(66mg)。MS 457.4(M+H)；UV 211.9，277.3nm。

实施例135

2-氨基-2-(1-(5-氟-2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)嘧啶-4-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯

根据合成化合物6-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮的类似方法，采用2-(叔-丁氧基羰基氨基)-2-(哌啶-4-基)乙酸甲酯，合成目标化合物。MS 429.3(M+H)；UV 207.0，274.2nm。

实施例136

N-(1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-4-基)-2- 氰基乙酰胺

于室温下，向氰基乙酸(85mg，1.00mmol)的CH₂Cl₂(2mL)(含有2滴DMF)混悬液中加入草酰氯(0.082mL，0.94mmol)。有气体逸出，混悬液变得澄清。然后将其搅拌30分钟。向在冰浴中冷却的上述溶液中滴加1-(4-(4-(4-(4-氨基哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮(70mg，0.17mmol)和TEA(0.478mL，3.43mmol)的DMF(2mL)溶液。然后将混合物于室温下搅拌3h。将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(12mg)。MS 481.5(M+H)；UV 204.7，266.3nm。

实施例137

3-(4-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3- 氧代丙腈

于室温下，向氰基乙酸(85mg，1.00mmol)的CH₂Cl₂(2mL)(含有2滴DMF)的混悬液中加入草酰氯(0.082mL，0.94mmol)。有气体逸出，混悬液变得澄清。然后将其搅拌50min。向在冰浴中冷却的上述溶液中滴加1-(4-(4-(5-氟-4-(哌嗪-1-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮(23mg，0.057mmol)和TEA(0.400mL，2.87mmol)的DMF(1mL)溶液。然后将混合物于室温下搅拌90min。将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(17mg)。MS 467.5(M+H)；UV 201.0，269.4nm。

实施例138

6-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-(吡啶-4-基)嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮

向5-溴-2，4-二氯代嘧啶(0.256mL，2.00mmol)和4-N-Boc-氨基甲基哌啶(428mg，2.00mmol)的CH₃CN(5mL)混合物中加入DIEA(0.700mL，4.02mmol)。将混合物于室温下搅拌40h。加入水和EtOAc。分离有机相，用1N HCl洗涤，然后用5％碳酸氢钠洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得(1-(5-溴-2-氯代嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(610mg)。

向(1-(5-溴-2-氯代嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(229mg，0.564mmol)、吡啶-4-硼酸(76mg，0.618mmol)和Pd(Ph₃P)₂Cl₂(40mg，0.056mmol)的二氧六环(3mL)混合物中加入aq.Na₂CO₃(180mg，1.69mmol)(1.0mL)。将混合物于100℃搅拌20h。将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得(1-(2-氯代-5-(吡啶-4-基)嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(80mg)。

将(1-(2-氯代-5-(吡啶-4-基)嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(80mg，0.20mmol)和6-氨基-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮(50mg，0.30mmol)的nBuOH(3mL)溶液于116℃搅拌20h。将其真空浓缩。残留物溶于TFA(4mL)。于室温下搅拌30min后，真空除去TFA。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物。MS 430.4(M+H)；UV 207.7，264.5nm。

实施例139

6-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-环丙基嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉 -2(1H)-酮

将(1-(5-溴-2-氯代嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(112mg，0.276mmol)、环丙基硼酸(40mg，0.465mmol)、K₃PO₄(200mg，0.943mmol)和三环己基膦(20mg，0.071mmol)的甲苯(3mL)和H₂O(0.2mL)的混合物采用氩气脱气，然后加入Pd(OAc)₂(10mg，0.044mmol)。将混合物于100℃搅拌20h。加入水和EtOAc。分离有机相，盐水洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得(1-(2-氯代-5-环丙基嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(130mg)。

将(1-(2-氯代-5-环丙基嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯(99mg，0.27mmol)和6-氨基-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮(50mg，0.30mmol)的nBuOH(3mL)溶液于116℃搅拌20h。然后将其于140℃再搅拌20h。将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得粉末，然后将其溶于TFA(3mL)。于室温下搅拌20h后，真空除去TFA。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(16mg)。MS 393.5(M+H)；UV 208.9，264.5nm。

实施例140

6-(4-((1s，4s)-4-氨基环己基氨基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉 -2(1H)-酮

于室温下，向反式-4-氨基环己醇(2.07g，13.6mmol)和NaHCO₃(3.50g，41.7mmol)的H₂O(20mL)混合物中加入氯代甲酸苄基酯(1.92mL，13.6mmol)的二氧六环(15mL)的溶液。将混合物于室温下搅拌20h。收集白色沉淀物，为(1R，4R)-4-羟基环己基氨基甲酸苄基酯(3.37g)。

于室温下，向(1R，4R)-4-羟基环己基氨基甲酸苄基酯(1.14g，4.58mmol)和三乙胺(1.30mL，9.34mmol)的CH₂Cl₂(15mL)混悬液中加入甲磺酰氯(0.425mL，5.49mmol)。将混合物于室温下搅拌20h。加入更多的甲磺酰氯(0.425mL，5.49mmol)和三乙胺(1.00mL)。继续搅拌48h。反应溶液采用5％的碳酸氢钠洗涤，然后采用1N HCl洗涤。分离有机相，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得(1R，4R)-4-(苄基氧基羰基)环己基甲磺酸酯，为固体(1.13g)。

将(1R，4R)-4-(苄基氧基羰基)环己基甲磺酸酯(1.13g，3.46mmol)和NaN₃(0.674g，10.4mmol)的DMF(10mL)混合物于100℃搅拌20h。加入水和EtOAc。分离有机相，用水洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得(1s，4s)-4-叠氮基环己基氨基甲酸苄基酯(0.819g)。

于室温下，向(1s，4s)-4-叠氮基环己基氨基甲酸苄基酯(0.410g，1.50mmol)的THF(8mL)和H₂O(0.100mL，5.56mmol)的溶液中加入Ph₃P(0.590g，2.25mmol)。将溶液于70℃搅拌20h。加入EtOAc和1N HCl。分离水层，采用EtOAc洗涤。然后将其采用5N NaOH碱化至pH 12。游离胺产物采用EtOAc萃取。EtOAc溶液经硫酸钠干燥，真空浓缩，获得(1s，4s)-4-氨基环己基氨基甲酸苄基酯(0.270g)。

向2，4-二氯代-5-氟嘧啶(226mg，1.35mmol)和(1s，4s)-4-氨基环己基氨基甲酸苄基酯(335mg，1.35mmol)的CH₃CN(6mL)混合物中加入DIEA(0.600mL，3.45mmol)。将混合物于室温下搅拌20h。加入水和EtOAc。分离有机相，用1N HCl洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得(1s，4s)-4-(2-氯代-5-氟嘧啶-4-基氨基)环己基氨基甲酸苄基酯(511mg)。

将(1s，4s)-4-(2-氯代-5-氟嘧啶-4-基氨基)环己基氨基甲酸苄基酯(170mg，0.450mmol)和6-氨基-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮(109mg，0.670mmol)的nBuOH(3mL)溶液于116℃搅拌20h。将其真空浓缩。残留物溶于MeOH(4mL)。加入Pd-C(10％，30mg)。然后将混合物在氢气环境中氢化20h。将其通过硅藻土过滤，滤液真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(30mg)。MS 371.2(M+H)；UV 215.8，263.8nm。

实施例141

4-(4-((1s，4s)-4-氨基环己基氨基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺

根据合成化合物6-(4-((1s，4s)-4-氨基环己基氨基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮的类似方法，采用4-氨基苯甲酰胺，合成目标化合物。MS 345.3(M+H)；UV 212.8，277.8nm

实施例142

1-(4-(4-(4-((1s，4s)-4-氨基环己基氨基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1- 基)乙酮

根据合成化合物6-(4-((1s，4s)-4-氨基环己基氨基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮的类似方法，采用1-(4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙酮，合成目标化合物。MS 428.3(M+H)；UV 215.8，252.8nm。

实施例143

6-(4-((1s，4s)-4-氨基环己基氨基)-5-(吡啶-4-基)嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮

向2，4-二氯代-5-溴嘧啶(244mg，1.07mmol)和(1s，4s)-4-氨基环己基氨基甲酸苄基酯(266mg，1.07mmol)的CH₃CN(5mL)混合物中加入DIEA(0.373mL，2.14mmol)。将混合物于室温下搅拌20h。加入水和EtOAc。分离有机相，用1N HCl洗涤，然后用5％碳酸氢钠洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得(1s，4s)-4-(5-溴-2-氯代嘧啶-4-基氨基)环己基氨基甲酸苄基酯(440mg)。

向(1s，4s)-4-(5-溴-2-氯代嘧啶-4-基氨基)环己基氨基甲酸苄基酯(220mg，0.500mmol)、吡啶-4-硼酸(68mg，0.552mmol)和Pd(Ph₃P)₂Cl₂(35mg，0.050mmol)的二氧六环(3mL)溶液中加入aq.Na₂CO₃(160mg，1.50mmol)(1.0mL)。将混合物于100℃搅拌20h。加入更多的吡啶-4-硼酸(68mg，0.552mmol)和Pd(Ph₃P)₂Cl₂(35mg，0.050mmol)。将其于100℃再搅拌90min。然后将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得(1s，4s)-4-(2-氯代-5-(吡啶-4-基)嘧啶-4-基氨基)环己基氨基甲酸苄基酯(93mg)。

将(1s，4s)-4-(2-氯代-5-(吡啶-4-基)嘧啶-4-基氨基)环己基氨基甲酸苄基酯(93mg，0.21mmol)和6-氨基-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮(52mg，0.32mmol)的nBuOH(4mL)溶液于116℃搅拌20h。将其真空浓缩。残留物溶于MeOH(6mL)。加入Pd-C(10％，44mg)。然后将混合物在氢气环境中氢化2h。加入更多的Pd-C(10％，26mg)。将其在氢气环境中再氢化20h。将其通过硅藻土过滤，滤液真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(70mg)。MS 430.4(M+H)；UV 210.1，259.6，324.8nm。

实施例144

6-(4-((1s，4s)-4-氨基环己基氨基)-5-环丙基嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮

将(1s，4s)-4-(5-溴-2-氯代嘧啶-4-基氨基)环己基氨基甲酸苄基酯(220mg，0.500mmol)、环丙基硼酸(52mg，0.605mmol)、K₃PO₄(310mg，1.46mmol)和三环己基膦(25mg，0.089mmol)的甲苯(3mL)和H₂O(0.2mL)的化合物采用氩气脱气，然后加入Pd(OAc)₂(10mg，0.044mmol)。将混合物于100℃搅拌20h。加入水和EtOAc。分离有机相，用盐水洗涤，硫酸钠干燥，真空浓缩，获得(1s，4s)-4-(2-氯代-5-环丙基嘧啶-4-基氨基)环己基氨基甲酸苄基酯(200mg)。

将(1s，4s)-4-(2-氯代-5-环丙基嘧啶-4-基氨基)环己基氨基甲酸苄基酯(200mg，0.500mmol)和6-氨基-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮(105mg，0.648mmol)的nBuOH(4mL)溶液于116℃搅拌20h。将其真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得(1s，4s)-4-(5-环丙基-2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)嘧啶-4-基氨基)环己基氨基甲酸苄基酯(97mg)。

将(1s，4s)-4-(5-环丙基-2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)嘧啶-4-基氨基)环己基氨基甲酸苄基酯(70mg，0.13mmol)和Pd-C(10％，30mg)的MeOH(5mL)混合物在氢气环境中氢化20h。将其通过硅藻土过滤。滤液真空浓缩。残留物通过HPLC纯化，获得目标化合物(40mg)。MS393.4(M+H)；UV 219.3，260.8nm。

实施例145

本实施例说明评价本发明化合物的方法和由此类测定方法得到的结果。可通过本领域中已知的各种方法(例如测试化合物抑制人血浆syk活性的能力试验)测定本发明化合物在体外和体内抑制人syk的活性。可通过IC₅₀值(以nM计)测定本发明化合物显示的抑制人syk的有效亲和力。IC₅₀值为使人syk蛋白水解活性抑制50％所需的化合物浓度(按nM计)。IC₅₀值越小，表示化合物抑制syk活性的活性(有效性)越高

用于检测和测定抑制syk活性的体外测定方法如下：

抑制sky酪氨酸磷酸化活性

通过测定试验化合物抑制syk介导的syk特异性底物的酪氨酸磷酸化的能力，评价候选分子抑制syk酪氨酸磷酸化活性的效力。

采用由Perkin Elmer Life和Analytieal Sciences(Boston，MA)开发的LANCE^TM技术，测定SYK酪氨酸磷酸化活性。LANCE^TM是指均相时间分辨荧光分析，该方法采用技术例如时间分辨荧光共振能量转移测定(TR-FRET)(通常参见Perkin Elmer Application Note-如何优化用基于时间分辨荧光分析的LANCE检测的酪氨酸激酶测定，(How to Optimize a Tyrosine Kinase Assay Using Time Resolved Fluorescence-Based LANCE Detection)中的方法，wwww.perkinelmer.com/lifesciences)。该测定主要涉及采用从磷酸特异性铕标记抗体转移到链亲和素-别藻蓝素作为受体的能量转移测定磷酸化底物。

为测试候选分子抑制SYK酪氨酸磷酸化活性的能力，将分子在30％的DMSO中复溶，按1∶3比例进行系列稀释，最终稀释液含DMSO但不含候选分子。在测定中，最终DMSO浓度为3％。通过两部分反应进行激酶实验。第一部分反应为激酶反应，反应物含有候选分子、全长活性重组SYK酶(Millipore，CA)和生物素标记的SYK特异性底物即生物素-DEEDYESP-OH。第二部分反应涉及激酶反应的终止且同时加入检测试剂-铕标记的抗磷酸酪氨酸试剂(Eu-W1024-PY100，Perkin Elmer，Boston，MA)和链亲和素-别藻蓝素检测试剂(SA-APC，Prozyme，CA)。在黑色U形底96孔微量板中进行激酶反应。用含50mM Tris pH 7.5、5mM MgCl₂和1mM DTT的缓冲液稀释至终反应体积为50μL，含1nM终浓度的活性SYK酶、550nM SYK底物和100μM ATP。使反应在室温下进行1小时。淬灭缓冲液含有100mM Tris pH 7.5、300mM NaCl₂、20mM EDTA、0.02％Brij35和0.5％BSA。按以下稀释度，将检测试剂加入反应混合物：对于Eu-W1024-PY100而言按1∶500加入，对于SA-APC而言按1∶250加入。通过加入50μL含检测试剂的淬灭缓冲液将激酶反应终止。在室温下检测1h。在抑制剂存在或不存在的情况下，在TR-FRET仪Analyst HT(Molecular Probes，Sunnyvale，CA)中检测磷酸化底物，用CriterionHost Release2.0(Molecular Probes，Sunnyvale，CA)设置测定条件。使用的参数设置如下：激发波长360nm，发射波长665-7.5nm，分束器350nm 50/50，闪光100脉冲，迟滞60us，积分400us，z-高度2mm。与不存在抑制剂的情况相比，根据在抑制剂的存在下观察到的最大响应计算SYK-酪氨酸激酶活性的抑制。通过非线性回归分析得出IC₅₀值。

用细胞内磷酸-流式细胞计量法测试化合物对完整非霍奇金淋巴瘤细胞系Ramos和SUDHL-6中Syk活性的抑制。吸取处于log期生长的10×10⁶细胞的等份试样；通过将细胞与3μg/ml的B细胞受体的特异性抗体温育10分钟激活Syk激酶。随后在室温下，将细胞在1％多聚甲醛中固化5分钟，在磷酸盐缓冲盐水中漂洗，然后通过在冰冷甲醇中培育2小时将其透化。将细胞再在磷酸盐缓冲盐水中漂洗，然后与磷酸化的Erk(Y204)和BLNK(Y84)的特异性抗体一起温育30分钟，磷酸化的Erk(Y204)和BLNK(Y84)为Syk激酶活性的指示剂、磷酸化的Syk(Y352)为Src家族激酶活性的量度指标。使用的所有抗体均购自BD Pharmingen(San Jose，CA)。与抗体一起温育后，再次漂洗细胞，通过流式细胞仪检测。

也评价了化合物对非霍奇金淋巴瘤B细胞系SUDHL-4、SUDHL-6和Toledo的抗增生作用。SUDHL-4和SUDHL-6的生长和存活均需要B细胞受体信号，而Toledo细胞系(在本文中用作阴性对照)不需要。将细胞等份试样加入96孔板的各孔中，与递增浓度的化合物一起温育72小时，然后根据厂商的说明，用MTT测定法(Chemicon International，Inc.，Temecula，CA)测定细胞存活和增殖。

通过测定凋亡标记半胱氨酸天冬氨酸酶3评价对非霍奇金淋巴瘤B细胞系SUDHL-4、SUDHL-6和Toledo凋亡的诱导。将细胞与1、3或10μM化合物一起温育24、48和72小时。在每个时间点，采用单克隆兔抗活性半胱氨酸天冬氨酸酶-3抗体试剂盒和相关方案(BD Pharmingen)对细胞进行流式细胞计分析。表5A和5B给出由两个独立实验得到的数据，它们代表在指定条件下与化合物一起温育后经历凋亡的总细胞百分比。

如所示，不仅B细胞信号、增生和存活需要Syk活性，而且该活性对B细胞受体交联时细胞的激活也至关重要。B细胞激活导致涉及细胞信号、抗原呈递和粘附的几种蛋白的细胞表面表达增加。其中，通常通过测定CD80、CD86和CD69以确定B细胞激活状态。因此，吸取从脾分离的初级小鼠B细胞的等份试样，在山羊抗小鼠IgD(eBiosciences，Inc.，San Diego，CA)的存在下，将各试样与递增浓度的化合物(0.05-2μM)一起温育20小时，使其与B细胞受体交联。然后，将细胞漂洗，在冰上与CD80、CD86和CD69B细胞激活标记的特异性抗体一起培育30分钟。用B细胞标记CD45RO染色，鉴定合并的种群中的B细胞。所有抗体购自BDPharmingen。

在下表中，化合物在Syk和/或Jak实验中的活性提供如下：

+++++＝IC₅₀＜0.0010μM；++++＝0.0010μM＜IC₅₀＜0.010μM，+++＝0.010μM＜IC₅₀＜0.10μM，++＝0.10μM＜IC₅₀＜1μM，+＝IC₅₀＞1μM。

表3：

实施例

MW

MH+

Syk IC₅₀

58	348.414	349	++
				59	333.399	334.4	+
60	350.43	351.4	+
				61	392.467	393.5	+
62	367.457	368.2	+++
				63	393.495	394.2	+
64	339.403	340.2	++
				65	381.484	382.2	++
66	448.575	449.3	+++
				67	460.385	460.1，462.1	+
68	451.509	452	++
				69	434.5	435.2，436.2	+++
70	406.446	407.0，408.0	+++
				71	476.585	477.0，478.0	++
72	366.425	367.0，368.0	++
				73	352.398	352.9，354.1	++
74	366.425	367.0，368.0	+++
				75	352.398	352.8，353.8	+++
76	371.463	372.1，373.1	++
				77	371.463	372.2，373.1	++
78	428.456	429.1，430.2	+++

79	265.28	266.1，267.1	++
				80	376.464	377.2，378.2	++
81	362.437	363.1，364.1	++
				82	336.399	337.1，338.1	++
83	322.332	323.2，324.2	++
				84	393.495	394.3，395.3	++
85	407.522	408.4，409.4	++
				86	380.452	381.2，382.2	+++
87	366.425	367.2，368.2	+++
				88	331.343	332.1，333.1	++
89	323.36	324.2，325.2	++
				90	409.494	410.2，411.2	++
实施例	MW	MH+	Syk IC₅₀
				91	309.333	310.2，311.1	+++
92	352.402	353.21	+++
				93	438.536	439.07，440.49	++
94	424.509	425.07，426.32	++
				95B	428.5	429.1	++
95A	470.537	471.1	++
				96B	464.552	465.1	+++
96A	506.589	507.1	++

97	401.474	402.3	++
				98B	367.457	368.5	++
98A	409.494	410.5	++
				99B	367.457	368.5	++
99A	409.494	410.5	++
				100B	427.531	428.5	+
100A	469.468	470.5	+
				101	385.431	386.2	+++
102	346.35	347.2	+
				103	359.393	360.3	++++
104	333.355	334.3	+++
				105	361.409	362.3	+++
106	369.407	370.3	++++
				107	416.489	417.4	+++
108	377.408	378.4	+
				109	418.461	419.3	+
110	418.461	419.3	+
				111	425.452	426.4	++
112	479.519	480.5	++
				113	402.433	403.4	+
114	475.556	476.4	++

115	423.48	424.3	++
				15	449.56	450.6	+++
116	520.64	521.4	+
				117B	422.49	423.3	+
实施例	MW	MH+	Syk IC₅₀
				117A	464.53	465.3	+
118	463.55	464.3	++
				119	476.581	477.3	+
120	420.473	421.3	+
				121	419.489	420.3	++
122	443.983	444.3	+++
				123	413.457	414.3	+
124	399.474	400.3	+
				125	442,499	443.3	+
126	455,538	456.3	++
				127	547,635	548.4	+
128	413,501	414.3	+
				129	456,526	457.3	+
130	495,588	496.5	+
				131	345,378	346.2	+++
132	431,343	431.4，433.3	+++

133	372,448	373.3	+
				134	456,522	457.4	++
135	428,468	429.3	+
				136	480,548	481.5	+
137	466,521	467.5	+
				138	429,528	430.4	+
139	392,507	393.5	++
				140	370,432	371.2	++
141	344,394	345.3	++
				142	427,528	428.3	++
143	429,528	430.4	+
				144	392,507	393.4	+++

体外抑制GPVI介导的血小板功能

通过测定对GPVI特异性激动剂凝集素蛋白原诱导的人血小板钙游走或聚集的抑制，测定候选分子抑制syk介导的血小板功能的能力。在96孔微量板模式中，在人洗涤的血小板中评价钙游走。通过96孔微量板测定评价血小板聚集(通常参见Jantzen，H.M.等(1999)Thromb.Hemost.81：111-117中的方法)，或按标准比色池透光率集合度测定法，用人富含血小板血浆(PRP)评价凝集。

体外抑制凝集素蛋白原介导的血小板钙游走

用FLIR钙3测定试剂盒(Molecular Devices，Sunnyvale，CA)，在人洗涤的血小板中测定对凝集素蛋白原诱导的钙游走的抑制。为制备洗涤血小板，将从健康志愿者中采集的不含药物的人静脉血加入含PGI₂的ACD(85mM柠檬酸钠，111mM葡萄糖，71.4mM柠檬酸)(最终1.25ml ACD含0.2μM PGI₂；PGI₂获自Sigma，St.Louis，MO)中。在室温下，通过在160×g下离心20分钟制备富含血小板血浆(PRP)。通过在730g下将PRP离心10分钟制备洗涤血小板，将血小板沉淀再悬浮于CGS(13mM柠檬酸钠，30mM葡萄糖，120mM NaCl；2mlCGS/10ml原始血液体积)。在37℃下温育15分钟后，通过在730g下离心10分钟收集血小板，按3×10⁸血小板/ml浓度，再悬浮于Hepes-Tyrode′s缓冲液(10mM Hepes，138mM NaCl，5.5mM葡萄糖，2.9mM KCl，12mM NaHCO₃，pH7.4)。将该血小板悬浮液在室温下保持＞45分钟，然后用于钙游走测定。

为进行96孔板钙游走试验，将等体积3×10⁸洗涤血小板/ml与悬浮于1×Hank’s平衡盐溶液pH 7.4、20mM Hepes缓冲液的等体积钙-3测定试剂A一起温育。总反应体积0.2ml/孔中含1.5×10⁸/ml洗涤血小板/钙-3测定试剂A混合液、10μM埃替非巴肽(Millennium Pharmaceuticals Inc，Cambridge，MA)、用0.75％DMSO系列稀释(1∶3)的试验化合物溶液。按每8孔组加入1孔(1well of each 8 set)的方式，仅加入DMSO，以便读取最大钙游走数。在室温下预温育20分钟后，将96孔微量板读板器安装在FlexStation(Molecular Devices，Sunnyvale，Calif)上。用SOFTMax Pro设置测定钙游走的FlexStation实验条件。使用的参数设置详述如下。荧光参数-测定模式：挠曲，激发波长485nM、525nM，在515nM处遮光(cut-off)；参数-PMT灵敏度-6，移液枪高度230μl，读板时间2分钟40秒，读板间隔2秒，温度-23-25℃。基线读板18秒后，通过加入凝集素蛋白原至终浓度125ng/ml启动钙游走。与抑制剂不存在的情况相比，根据在抑制剂存在下观察到的最大响应相对值计算钙游走抑制。通过非线性回归分析获得IC₅₀。

体外抑制凝集素蛋白原介导的血小板聚集

为制备用于聚集测定法的人富含血小板血浆(PRP)，将从健康志愿者中采集的不含药物的人静脉血加入0.38％柠檬酸钠(0.013M，最终pH 7.0)。通过在室温下在160×g下将全血离心20分钟制备富含血小板血浆。将PRP层取出，转移到新试管中，如果需要，用贫血小板血浆(PPP)调节血小板计数，以达到血小板浓度为～3×10⁸血小板/ml。通过将剩余血液样品(除去PRP后)在800×g下离心20分钟制备PPP。然后该PRP制剂可用于96孔板或标准吸收池集合度测定的聚集测定。

根据类似于Frantantoni等，Am.J.Clin.Pathol.94，613(1990)所述方法，在96孔平底微量板中，用微量板摇床和读板器测定凝集素蛋白原诱导的聚集的抑制。所有步骤均在室温下进行。对于用富含血小板血浆(PRP)进行96孔板聚集试验而言，总反应体积0.2ml/孔中含190μl PRP(～3×10⁸血小板/ml，参见上述)和5μl的用30％DMSO系列稀释的试验化合物溶液或缓冲液(用于对照孔)。在室温下预温育20分钟后，将5μl 320ng/ml凝集素蛋白原激动剂溶液加入各孔中，得到终浓度为8ng/ml的凝集素蛋白原。然后将板在微量板摇床上振摇5分钟，在微量板读板器(Softmax，Molecular Devices，Menlo Park，Calif.)中记录5分钟读数。由t＝5分钟时，计算在650nm处减少的OD的聚集。通过非线性回归获得IC5₀。

也可用比色池透光率集合度测定法测定凝集素蛋白原诱导的聚集的抑制，在96孔V形底板中，在30％DMSO中制备系列稀释度(1∶2)的试验化合物(在小杯中的终DMSO浓度为0.3％)。将试验化合物(5μl系列稀释度的DMSO溶液)与PRP一起温育20分钟，然后通过在ChronoLog血凝计中将激动剂(125-250ng/ml凝集素蛋白原)加入37℃的495μL PRP，启动聚集反应。记录聚集反应4分钟，通过在4分钟测定期间发生的最大聚集程度与基线的相对差异，确定最大聚集程度。根据在抑制剂的存在下和不存在抑制剂下观察的最大反应相对值计算聚集的抑制。通过非线性回归分析获得IC₅₀。

表4中给出syk和PRP IC₅₀值。

在通过BCR交联诱导的Ramos细胞中进行的钙通量分析

在实验前，以5×10⁵细胞/ml的浓度，将Ramos细胞(2G6.4C10，伯基特淋巴瘤，ATCC目录号：CRL-1923)在新制培养基中亚培养3或4天。将细胞收获，以8×10⁶细胞/ml的浓度，将细胞再悬浮于新制培养基中，然后染色。加入等体积的钙3上样色素(Molecular Device)，将其与细胞悬浮液混合。在96孔板中分配上样细胞，温育30分钟。然后将化合物加入染色细胞中，再温育30分钟。将细胞在1000rpm下离心3分钟，然后在FlexStation中测定荧光。通过加入5μg/ml抗体(AffiniPure F(ab’)2驴抗人IgM片段，Jackson ImmunoResearch Laboraotries)刺激BCR。

在通过TCR交联诱导的Jurkat细胞中进行的钙通量分析

该方案与前述章节中所述B细胞钙通量分析方案非常相似。唯一的区别是用T细胞(克隆E6-1，急性T细胞白血病，ATCC目录号：Tib-152)和抗人CD3(功能级纯化的抗人CD3，克隆OKT3，eBioscience，编号16-0037)代替B细胞和抗人IgM。保持细胞密度不变，但使用100ng/ml浓度的抗体。

TCR交联诱导的Jurkat细胞中IL-2的分泌

Jurkat细胞的繁殖和化合物温育方法与前述章节中Jurkat钙通量分析方案中所述相同。按100ng/孔的浓度，将抗体(抗CD3，OKT3)涂在新板(不含细胞)上。以8×10⁶细胞/ml的密度，将细胞悬浮，在另一个板中与化合物一起温育30分钟。在温育结束时，将细胞转移到涂布抗体的板中，温育16小时。取100μl温育后的细胞培养基用于测定温育后的IL-2。用IL-2ELISA试剂盒(人IL-2 ELISA试剂盒II，BD Bioscience，编号550611)测定IL-2水平。

表4

实施例146 Millipore Upstate激酶Profiler^TM筛选

该测定直接测定化合物对JAK3的催化活性的作用。从昆虫细胞中得到纯化的人JAK3(GenBank AF513860)序列(残基781-C末端)。用放射膜过滤法测定ATP的催化水解。将具有³³[P]ATP的激酶与底物一起温育，使得³³[P]掺入底物，然后可通过过滤将该底物与其它成分分离。在1、0.3或0.1μM化合物存在或不存在下，用10μM ATP进行测定。活性以相对于对照抑制的％表示。

在下表中，化合物对JAK的活性测定提供如下：

表5A：化合物对JAK1、2和3催化活性的抑制(IC₅₀％)

表5B：1、0.3或0.1μM的化合物对JAK3催化活性的抑制百分率(％)

ND：没有进行

实施例147 Ambit KinomeScan筛选

该测定法为依赖ATP位点的竞争性结合测定法，其中将相关人激酶与专属标记(T7噬菌体)融合。在试验化合物存在或不存在下，测定与固定化活性位点导向的配体结合的激酶量。Ambit’s JAK测定使用激酶域和非全长蛋白。用于JAK1结合的域为拟激酶域，而与JAK3结合的域为催化域(Mazen W Karaman，Sanna Herrgard，Daniel K Treiber等，对激酶抑制剂选择性的定量分析(A Quantitative analysis of kinase inhibitotr selectivity).Nature Biotechnology，2008，第26卷，第1期，第127-132页)。

实施例148JAK3/STAT6细胞测定

通过白介素4(IL4)刺激Ramos B细胞诱导通过JAK1/JAK3的信号产生STAT6(信号转导蛋白和转录活化剂)磷酸化。可通过测定磷酸化的STAT6的量评价化合物对JAK3和/或JAK1的抑制作用。可通过蛋白质印迹法，用特异性磷酸-STAT6抗体进行该测定。

将Ramos B细胞悬浮于10mM Hepes-缓冲的RPMI培养基(2×107细胞/ml)。将细胞(90μl)与10μl 3.3μg/ml白介素4(R&D Systems Inc，目录号#204-IL；终浓度：0.33μg/ml)一起温育。在2μl用30％DMSO稀释的化合物存在或不存在下，在37℃下温育10分钟。通过加入等体积2×溶胞缓冲液(100mM TRIS-HCl pH 8.0，2％Triton-X-100，5mM EDTA，250mMNaCl，20％甘油，1.25mM PMSF，5mM原钒酸钠，5mM β-甘油磷酸盐，基本完全EDTA蛋白酶抑制剂混合物(Sigma))将反应终止。

将样品与1μl benzonase核酸酶(Novagen，目录号#71205-3)一起在室温下温育1小时，然后加入50μl 5×上样缓冲液(330mM TRIS pH 6.8，9.5％SDS，34％甘油，0.01％溴酚蓝，10％β-巯基乙醇)。

在减压条件下，使细胞裂解物(15μL)通过SDS-PAGE(Novex 4-12％TRIS-甘氨酸凝胶，Invitrogen)，然后经电印迹-转移到硝基纤维素膜上。然后在室温(RT)下，将膜在Zymed封闭缓冲液(Invitrogen)中温育1h，随后于4℃在Zymed封闭缓冲液中与1∶500抗磷酸酪氨酸-STAT6(Cell Signaling Technology，目录号#9364)初级抗体一起放置过夜。用Tris-缓冲盐水、0.25％NP40(TBSN)漂洗5×10分钟后，在1∶10,000的缀合HRP的驴抗兔二次抗体(Amersham Biosciences，目录号#NA934V)的存在下，在Zymed封闭缓冲液中，将印迹在室温下温育1h。用TBSN漂洗4×10分钟后，通过ECL(Pierce Western Lightening，Perkin Elmer目录号#NEL101)使印迹显色。为测定总β3含量，将印迹剥离，用TBSN漂洗4×，用于4℃在封闭缓冲液中过夜的1∶2000的C3A抗体再探测(re-probed)。用TBSN漂洗4×10分钟后，将印迹在封闭缓冲液中与1∶10,000的山羊抗小鼠次生抗体温育，再用TBSN漂洗4次，然后暴露于Western Lightening试剂。

通过光密度法测定大于背景的化合物的刺激水平和抑制程度。表4显示增加本发明化合物剂量对响应于IL-4刺激的Ramos B-细胞的pSTAT6的形成的影响。

实施例149在用IL-4刺激的Ramos B-细胞系中测定JAK激酶活性抑制

这些实施例说明用于体外和体内评价本发明化合物对人JAK激酶活性的作用的方法，可通过本领域中已知的各种方法(例如测试化合物抑制人血浆JAK激酶活性的能力的试验)测定本发明化合物对人JAK激酶活性的作用。可通过IC₅₀值(以nM计)测定本发明化合物显示出的对人JAK激酶抑制的有效亲和力。IC₅₀值为抑制50％人JAK激酶活性需要的化合物浓度(以nM计)。IC₅₀值越小，表示化合物抑制JAK激酶活性的活性越高(强)。

一种检测和测定抑制JAK激酶活性的体外测定法如下：

用设计的测试JAK抑制程度的细胞分析确认化合物对JAK激酶的活性。简而言之，在用细胞因子白介素-4(IL-4)激活的人Ramos B-细胞中测试JAK抑制。刺激后20-24小时，为测定CD23上调和进行FACS分析，将细胞染色。用IL-4刺激B-细胞，导致通过JAK激酶JAK1和JAK3磷酸化的JAK/STAT通路激活，激活该通路又导致因子STAT-5和STAT-6磷酸化并激活转录。低亲和力IgE受体(CD23)被激活的STAT-5上调。

为进行该测定，根据与细胞一起提供的繁殖方案，将人Ramos B-细胞(ATCC，目录号CRL-1596)在含10％胎牛血清(JRH，目录号12106-500M)的RPMI 1640培养基(Cellgro，目录号10-040-CM)中培养，在约3.5×10⁵细胞/ml密度下保存。在测定前一天，将细胞稀释至3.5×105细胞/ml，确保它们处于对数生长期。将细胞离心，使悬浮于含根据ATCC繁殖方案加热失活的5-10％胎牛血清(FBS)(JRH Biosciences，Inc，Lenexa，Kans.，目录号12106-500M)的RPMI 1640培养基(Cellgro，MediaTech，Inc.，Herndon，Va.，目录号10-040-CM)中。以3.5×10^4-5细胞/ml的密度保存细胞。在测定前一天，将Ramos B-细胞稀释至3.5×10⁵细胞/ml，确保它们处于对数生长期，将其等份试样分配到96孔组织培养板中。将细胞与试验化合物(溶于DMSO)或DMSO(对照)一起在37℃下温育1h，然后用IL-4(Pepotech，目录号200-04)刺激20-24小时(终浓度为50单位/ml)。

将细胞离心，悬浮于含5％血清的RPMI中。在96孔组织培养板中，每个点使用5×10⁴细胞。在37℃培养箱中，将细胞与化合物或DMSO(Sigma-Aldrich，St.Louis，Mo.，目录号D2650)溶媒对照一起温育1小时。然后将细胞用终浓度为50单位/mL的IL-4(Peprotech Inc.，Rocky Hill，N.J.，目录号200-04)刺激20-24小时。然后将细胞离心，用抗CD23-PE(BDPharmingen，San Diego，Calif.，目录号555711)染色，通过FACS分析。用购自Becton Dickinson Biosciences of San Jose，Calif.的BD LSR I System流式细胞计数器检测。

用Cell Titer-Glo.RTM发光细胞生存力测定法(Promega)测定增殖，该方法通过定量存在的ATP，测定培养基中存活细胞数，ATP为代谢活跃细胞的指示剂。将底物解冻，使其恢复至室温。将Cell Titer-Glo试剂和稀释剂混合在一起后，向各孔加入100μL。将板在定轨摇床上振摇2分钟，引起溶胞，在室温下再温育10分钟，使得信号达到平衡。用购自Perkin Elmer，Shelton，Conn.的Wallac Victor2 1420多标记计数器(multilabelCounter)进行检测。

次日，将A549细胞与2，4-嘧啶二胺试验化合物或DMSO(对照)(Sigma-Aldrich，St.Louis，Mo.，目录号D2650)预温育1小时。然后将细胞采用IFNγ(75ng/mL)(Peprotech Inc.，Rocky Hill，N.J.，目录号300-02)刺激，温育24小时。在200μL含5％FBS、0.3％DMSO的F12K培养基中，最终试验化合物的剂量范围为30μM-14nM。

第3日，将细胞培养基除去，细胞用200μL PBS(磷酸盐缓冲盐水)漂洗。向各孔加入胰蛋白酶，将细胞裂解，然后通过加入200μL完全F12K培养基将溶液中和。将细胞离心，用缀合APC的小鼠抗人ICAM-1(CD54)(BD Pharmingen，San Diego，Calif.，目录#559771)抗体于4℃染色20分钟。将细胞用冰冷的FACS缓冲液(PBS+2％FBS)漂洗，通过流式细胞计量法分析表面ICAM-1表达。用购自BD Biosciences of San Jose，Calif.的BD LSR I System流式细胞计数器进行检测。将活散射体事件分类(gated)，计算几何平均值(Becton-DickinsonCellQuest软件3.3版，Franklin Lakes，N.J.)。用几何平均值对化合物浓度作图，生成剂量响应曲线。

实施例150：在非霍奇金淋巴瘤细胞系中抑制Syk介导的通过B细胞受体的信号转导

将细胞用或不用化合物(0.02-2uM)预处理1小时，然后通过将细胞与3μg/ml抗μ抗体于37℃温育10分钟刺激B细胞受体信号。用钙3上样染料和FlexStation(Molecular Device)测定Ca²⁺通量。根据BDPharmingen(San Jose，CA)提供的方案，通过细胞内磷酸流式细胞计量法分析B细胞受体信号。通过在84位氨基酸上诱导BLNK酪氨酸磷酸化(pBLNK Y84)和在204位氨基酸上诱导ERK1/2酪氨酸磷酸化(pERKY204)，测定Syk激活。通过在352位氨基酸上诱导Syk酪氨酸磷酸化(pSykY352)测定Src家族成员Lyn的激活。以μM IC₅₀给出数据。各化合物能够有效抑制B细胞受体诱导的Ca²⁺流出并抑制Syk激活，但不抑制Src家族成员Lyn的激活。

实施例151：抑制Syk导致对非霍奇金淋巴瘤细胞系的抗增生作用

将细胞与递增浓度的各化合物一起温育，然后按厂商提供的方案，于72小时用MTT分析(公司，市，州)评价增生程度。按μM IC₅₀值提供数据，这些数据代表从5或6个独立实验得到的平均值+/-标准差。各化合物在较低的μM范围内能够抑制SUDHL-4和-6细胞系增生，SUDHL-4和-6细胞系的存活和生长信号依赖于Syk。不需要Syk的Toledo细胞明显对Syk抑制导致的抗增生作用较不敏感。

实施例152：抑制Syk诱发非霍奇金淋巴瘤细胞系凋亡

数据代表两个独立实验的结果，用这些结果评价Syk和Syk/JAK抑制对弥散性大非霍奇金淋巴瘤B细胞系存活的作用。SUDHL-4和SUDHL-6细胞系的存活依赖Syk介导的B细胞受体信号，而Toledo细胞不依赖该信号。将细胞与多种浓度的化合物一起在多个时间内温育；通过流式细胞计，用半胱氨酸天冬氨酸酶3检测试剂盒(Sigma-Aldrich，Saint Luis，MO)测定诱导的凋亡。按对凋亡标记物半胱氨酸天冬氨酸酶3呈阳性的总细胞百分率提供数据。

实施例153：Syk抑制剂抑制小鼠初级B细胞激活

将小鼠初级脾细胞用递增浓度(0.05-2μM)的各化合物预处理1小时，然后加入对照或山羊抗小鼠IgD血清。16小时后，通过流式细胞计量法测定抗IgD诱导的B细胞激活，染色，检测激活标记物CD80/86和CD69。数据代表对B细胞活性抑制的IC₅₀范围。

实施例154：免疫介导的血小板减少症小鼠模型

通过抗血小板表面糖蛋白的抗体、抗血小板表面上的含药复合物的抗体，或者通过与血小板表面相互作用的抗体包被的细胞或免疫复合物，造成免疫介导的血小板减少症。评价选择的化合物在抗体介导的血小板减少症小鼠模型中抑制血小板清除的能力。在该模型中，由静脉内给予大鼠抗小鼠GPIIb(克隆MWReg30)抗体(BD Biosciences，Pharmingen)导致循环血小板的快速清除(约50％)。为评价抑制血小板清除的能力，将化合物悬浮于0.5％甲基纤维素的水溶液中，通过经口管饲给予(100ul/小鼠)，当化合物即将达到最大血浆浓度时(通常1-2小时，取决于各化合物的不同的药物动力学实验)，注射抗体。在注射抗体后4和8小时，通过心脏穿刺，从溶媒和试验品处理的小鼠组(n＝5-10只小鼠/组)得到末端血样。用柠檬酸三钠或EDTA抗凝血。在血液学分析仪(Hemavet，Drew Scientific)上测定全血样中的血小板数。将剩余血样进一步处理，得到血浆，通过质谱测定其中的化合物浓度。

通过测定非抗体处理组与给予大鼠抗小鼠GPIIb抗体的动物组之间的血小板数之差的平均值确定血小板清除率。通过比较溶媒和化合物处理的动物间的血小板清除率差确定血小板清除率的抑制。

实施例155：胶原抗体诱发的小鼠关节炎模型

在胶原抗体诱发的小鼠关节炎(CAIA)模型中，研究选择的化合物的抑制活性。通过II型胶原和补体的自身抗体介导胶原诱发的关节炎，因此可通过给予II型胶原的多克隆抗体或单克隆抗体的混合物诱发关节炎。CAIA模型(Chondrex，Inc.，Redmond，WA)采用4种克隆的混合物，这些克隆能够识别聚簇在II型胶原的83氨基酸肽片段内的各个表位。这些表位具有共同的包括鸡、小鼠、大鼠、牛、猪、猴和人在内的多种不同物种的II型胶原所含有的氨基酸序列。在该小鼠模型中依次给予单克隆抗体混合物、细菌脂多糖(LPS)7天诱发严重和持续关节炎。根据通过肠胃道吸附的细菌毒素起协同和病理作用的学说，采用II型胶原的自身抗体触发类风湿性关节炎患者关节炎发作，产生该模型。

为进行这些实验，在第0日，向8周龄雌性Balb/C小鼠(Charles River，Inc.)通过尾静脉以4mg/小鼠(40mg/ml)的剂量静脉注射单克隆抗体混合物(货号#OC-708)，然后以25ug/小鼠的剂量，腹膜内注射用标准盐水稀释的LPS。在IV注射抗体混合物前或后，开始给予试验品。将化合物悬浮于0.5％甲基纤维素的水溶液中，在7-10天的研究期间每日通过经口管饲(100ul/小鼠)给予。每日测评临床炎症分数。在实验结束时，根据溶媒和试验品处理的小鼠之间的差异，确定对临床炎症分数的抑制。血浆浓度代表在研究终止日给予最后剂量后1小时的峰浓度。

实施例156：在Ramos B细胞中抑制IL-4诱导的JAK1/3-Stat-6磷酸化

按所述，在加入IL-4前，将Ramos B细胞用递增浓度的化合物预处理1小时。将细胞与IL-4一起温育10分钟，然后通过细胞内流式细胞计，测定IL-4诱导的Stat-6的抑制百分率。

实施例157：B细胞信号分析：

人类非霍奇金淋巴瘤的B细胞系SUDHL-4(#ACC 495)，、SUDHL-6(#ACC572)和Karpas-422(#ACC32)获自DSMZ(Braunschweig，Germany)；Toledo(#CRL-2631)和Ramos(#CRL-1596)获自美国典型培养物保藏中心(the American Type Culture Collection)(ATCC；Manassas，VA)。所有细胞保存在补充有10％胎牛血清(ATCC)和青霉素/链霉素(Invitrogen)的RPMI培育基(Invitrogen，Carlsbad，CA)中，且该介质保存于37℃的潮湿组织培养恒温箱中。在该研究中应用的抗体包含：多克隆羊F(ab)’2抗人类IgG(H+L)和抗人类IgM(BioSource，Camarillo，CA)；兔抗人类Syk、兔抗人类磷酸Syk(Y525/526)、兔抗人类磷酸Syk(Y352)、抗人类BLNK、抗人类磷酸BLNK(Y84)获自细胞信号技术(Cell Signaling Technologies)，Inc.(Danvers，MA)。用于磷酸流式细胞计量术的下列抗体获自Becton Dickenson(San Jose，CA)：Alexa fluor 488共轭小鼠抗人类磷酸STAT6(Y641)、藻红素(PE)共轭小鼠抗人类磷酸Zap70(Y319)/Syk(Y352)和异硫氰酸荧光素(FITC)共轭小鼠抗人类磷酸ERK1/2(T202/Y204)。

基本上按另外文献(Irish，Czerwinski等Blood 108(9)：3135-42(2006))所述进行磷酸流式细胞计量术。用1μg/ml的抗μ-或抗-γ抗体刺激在生长培养基中的0.5×10⁶细胞10分钟。按照指定时间，通过立即加入低聚甲醛(Electron Microscopy Sciences，Hatfield，PA)至最终浓度为1％终止诱导信号。在室温下，用低聚甲醛培育细胞5分钟，用磷酸盐缓冲液盐水(PBS)洗涤一次，然后在预冷却的甲醇(公司，地址)(-80℃)中再悬浮，于4℃培育过夜。接着在PBS中将固化和透化的细胞洗涤一次，第二次在含有1％牛血清白蛋白(Sigma-Aldrich，St.Louis，MO)的PBS中洗涤，然后用以1∶20稀释于PBS+1％BSA的指定抗体染色。30分钟后，用PBS洗涤细胞一次并采用FACS Calibur(Becton Dickenson)在流式细胞仪中进行测定。为进行蛋白质印迹分析法，用2μg/ml指定的BCR-特异抗体刺激10⁶细胞30分钟。在溶胞缓冲液中再悬浮细胞并在冰中培育1小时终止信号。离心法除去细胞残渣，通过10％的SDS-PAGE分离澄清的蛋白裂解液，按照制造厂商说明用指定的抗体探测。需要时，在37℃下，用多种浓度的Syk抑制或溶媒对照(0.5％DMSO)预先处理细胞1小时，然后用抗BCR抗体刺激。

实施例158：B细胞信号分析：

人非霍奇金淋巴瘤B细胞系SUDHL-4(#ACC 495)、SUDHL-6(#ACC572)和Karpas-422(#ACC32)获自DSMZ(Braunschweig，德国)；Toledo(#CRL-2631)和Ramos(#CRL-1596)获自美国典型培养物保藏中心(ATCC；Manassas，VA)。所有细胞保存在补充有10％胎牛血清(ATCC)和青霉素/链霉素(Invitrogen)的RPMI培养基(Invitrogen，Carlsbad，CA)中，于37℃潮湿组织培养箱中保存。用于这些研究的抗体包括多克隆山羊F(ab)’2抗人IgG(H+L)和抗人IgM(BioSource，Camarillo，CA)；兔抗人Syk、兔抗人磷酸Syk(Y525/526)、兔抗人磷酸Syk(Y352)、抗人BLNK、抗人磷酸BLNK(Y84)获自Cell Signaling Technologies，Inc.(Danvers，MA)。用于磷酸流式细胞计量的以下抗体获自Becton Dickenson(San Jose，CA)：Alexa fluor 488共轭的小鼠抗人磷酸STAT6(Y641)、Phycoerythrin(PE)共轭的小鼠抗人磷酸Zap70(Y319)/Syk(Y352)和异硫氰酸荧光素(FITC)共轭的小鼠抗人磷酸ERK1/2(T202/Y204)。

基本上按另外文献(Irish，Czerwinski等Blood 108(9)：3135-42(2006)所述方法进行磷酸-流式细胞计量分析。在生长培养基中，将0.5×10⁶细胞用1μg/ml抗-μ或抗-γ抗体刺激10分钟。按照规定时间，通过立即加入多聚甲醛(Electron Microscopy Sciences，Hatfield，PA)至终浓度1％终止诱发的信号。将细胞与多聚甲醛在室温下一起温育5分钟，用磷酸缓冲盐水(PBS)洗涤一次，然后在预冷却甲醇(公司，地址)(-80℃)中再悬浮，于4℃培育过夜。然后将固化和透化的细胞在PBS中洗涤一次，再在含1％牛血清白蛋白(BSA)(Sigma-Aldrich，St.Louis，MO)的PBS中洗涤，然后用按1∶20在PBS+1％BSA中稀释的指定抗体染色。30分钟后，将细胞在PBS中洗涤一次，采用FACSCalibur(Becton Dickenson)的流式细胞计测定。为进行印迹分析，将10⁶细胞用2μg/ml指定的BCR特异性抗体刺激30分钟。将细胞再悬浮于溶胞缓冲液，在冰上培养1小时，终止信号。通过离心将细胞残渣除去，通过10％SDS-PAGE分离澄清蛋白溶胞液，按照生产厂商的建议用指定抗体探测。如果需要，将细胞在37℃下与多种浓度的Syk抑制剂或溶媒对照(0.5％DMSO)一起温育1小时，然后用抗BCR抗体刺激。

实施例159：非霍奇金淋巴瘤B细胞系中Syk的钙通量分析和选择性抑制

在实验前3-4天，将Ramos细胞在生长培养基中培养(保持约0.5×10⁶细胞/ml)。将细胞收获，以8×10⁶细胞/ml的浓度再悬浮于新制培养基中，然后染色。将等体积的钙3上样色素(Molecular Device，Sunneyvale，CA)加入细胞悬浮液中。将染色的细胞分配到96孔板中，温育20分钟。然后将Syk抑制剂加入染色的细胞中，再温育30分钟。将B细胞用5μg/ml抗μ抗体刺激。用FlexSTATion(Molecular Devices，Sunnyvale，CA)测定细胞内Ca2+浓度变化。

通过蛋白质印迹分析，测定BCR介导的pSykY525/526和pBLNK Y84的诱导(均为Syk激酶活性的度量)和pSyk Y352的诱导(为Src激酶活性的度量)，首先检测B细胞中Syk抑制的选择性和效力。在各Syk抑制剂或溶媒对照存在或不存在下，将SUDHL-6B细胞用抗BCR特异性抗体刺激30分钟。采用光密度测定法评价(未提供数据)，用0.16或1μM的各化合物处理，分别导致BCR诱导的Syk自磷酸化(Y525/526)减少约40％和60％。采用扩大范围的浓度进一步评价这些化合物对BCR诱导的Syk和Src激酶活性的作用。

还测定了各化合物抑制离BCR远端(distal)的信号事件的能力。在各种浓度的各Syk抑制剂存在或不存在下，用抗BCR抗体再次刺激细胞。测定对作为特异性对照的pSyk Y352的诱导，而采用对pERK1/2/Y204的诱导作为更远端的依赖Syk的信号的度量(Jiang，Craxton等，J Exp Med188(7)：1297-306(1998)。重复该实验，其中测定此两种化合物对Src和Syk活性的作用(图10)。小于125nM的浓度足以抑制BCR诱导的向ERK1/2发出的Syk信号。相反，需要高得多的浓度才能导致Src活性的中等抑制；在蛋白质印迹法中未观察到对Src的作用。这些Syk抑制剂无一抑制PMA诱导的ERK1/2酪氨酸磷酸化，证明这些化合物不抑制PKC的下游信号事件。该结果显示，在B细胞中，选择性抑制Syk导致BCR诱导的Ca2+通量的抑制，IC₅₀值为约100nM。这说明，通过抑制Syk，这些化合物能够抑制信号通路，阻滞细胞响应。

实施例160：半胱氨酸天冬氨酸酶3和增殖分析：Syk抑制能够破坏非霍奇金淋巴瘤B细胞系的增殖和存活

根据供应商说明，用PE共轭的单克隆活性半胱氨酸天冬氨酸酶-3抗体凋亡试剂盒(Becton Dickenson)，测定凋亡的诱导。将细胞悬浮于生长培养基(0.5×106细胞/ml)中，用指定浓度的各Syk抑制剂或溶媒对照处理24、48或72小时，然后进行FACS分析。根据厂商提供的说明，用MTT(3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基四唑鎓溴化物，一种四唑)(公司名)分析法测定细胞存活力和生长。将细胞用指定浓度的各Syk抑制剂或溶媒对照处理72小时。

SUDHL-4和SUDHL-6细胞已划分为“BCR型”(Monti，Savage等Blood 105(5)：1851-61(2005)；Polo，Juszczynski等Proc Natl Acad Sci U S A 104(9)：3207-12(2007)，它们对被R406抑制的Syk敏感(Chen，Monti等2008))。因此，分别缺乏BCR和BLNK表达的Toledo和Karpas-422细胞系(Gabay，Ben-Bassat等Eur J Haematol 63(3)：180-91(1999)；Sprangers，Feldhahn等Oncogene 25(36)：5056-62(2006)已适合不依赖于BCR信号而存活，它们对R406不敏感(Chen，Monti等2008)。在各种浓度的各Syk抑制剂存在或不存在下培养72小时后，测试这些细胞系的增殖。

Syk的选择性抑制足以在“BCR型”NHL细胞系中诱发凋亡。在另一个实验中，发现SUDHL-6和Toledo细胞对用1μM PMA处理72h诱发的凋亡同等敏感。这些数据证明，某些NHL细胞系的存活特别需要Syk。

实施例161：异种移植(Xenograft)研究和肿瘤及血浆浓度分析

抑制Syk可在异种移植小鼠模型中阻止肿瘤形成。小鼠获自(公司)，在临用前，使动物适应环境至少3天。用27号针头，将Ramos细胞(3×10⁶)皮下注射到清醒小鼠的后侧腹区域，注射体积小于0.5ml。注射后，将小鼠随机分为若干治疗组(n＝15)，通过经口管饲给予溶媒或10、15或20mg/kg的syk抑制剂，每日两次。每周称重体重至少一次，从肿瘤明显形成开始，每周用卡尺测定肿瘤两次直至研究结束。通过卡尺测定，采用公式[最大长度×宽度×高度×π/6]评价肿瘤体积。持续每日两次给予溶媒或syk抑制剂直至溶媒或任何治疗组出现大小超过1.5克的肿瘤。研究终止时(接种Ramos 5周后)，将小鼠用氯胺酮混合物麻醉。通过心脏穿刺采集血样，用于CBC和血浆浓度测定，通过颈脱臼将小鼠无痛处死。然后将肿瘤切除，称重。将一半肿瘤在液氮中快速冷冻，用于测定肿瘤组织中syk抑制剂的浓度，将另一半置于10％缓冲甲醛液中，用于组织学研究。

在异种移植小鼠模型中，评价Syk抑制对Ramos肿瘤形成的作用。从开始接种肿瘤细胞日起，每日两次给予小鼠10、15或20mg/kg Sky抑制剂或溶媒对照。当肿瘤开始形成时，肿瘤接种约3周后，开始卡尺测定，每3天重复测定直至研究终止。当肿瘤重量开始达到约1.5mg时，终止研究，此时将肿瘤切除，称重。对肿瘤和血浆样品进行药物动力学分析。

采用KontesMicrotube Pellet Pestle

棒和电机(Kimble Chase，Vineland，NJ)，将各肿瘤样品以3ml盐水/克肿瘤的比例均化。用液相色谱串联质谱仪(LC/MS/MS)分析血浆和肿瘤样品中的syk抑制剂浓度。简而言之，将血浆和肿瘤样品在96孔Captiva^TM滤板(0.2μm，Varian，Inc.，Palo Alto，CA)中处理。将血浆和均化肿瘤样品等份试样用乙腈沉淀，该乙腈溶液含200ng/mL：

内标化合物A。将混合物旋转离心，于4℃冷冻30分钟，使蛋白沉淀完全。将混合物过滤到96孔收集板中。将滤液注射到配备湍流-离子喷雾源的Sciex API3000 LC/MS/MS中。在Phenomenex Luna 5μ HILIC柱(4.6×100mm，5mm；Phenomenex，Torrance，CA)上分离syk抑制剂和化合物A。10％流动相A(0.1％甲酸/水)和90％流动相B(0.1％甲酸/90％乙腈，10％的水)的流动相梯度混合物根据程序在1.1分钟内变为65％流动相B，然后流动相B在0.01分钟内从65％变为90％。根据正离子模式，测定对应于syk抑制剂(内标)的m/z 357/295产物离子的峰面积的sky抑制剂的m/z 394/360产物离子的峰面积。分析范围为2-5000ng/ml。

药物动力学分析显示，在稳态时，肿瘤中syk抑制剂的浓度符合在10、15和20mg/kg剂量组血浆中所观察到的浓度-时间模式。观察到Cmax、AUC(0-8)和肿瘤Cmin按非线性方式随剂量增加而增加，但注意到血浆Cmin增加按比例方式随剂量增加。对于所有实验剂量而言，血浆平均Cmax和AUC(0-8)比肿瘤中的这两个参数大至少2倍；但是，肿瘤中药物的平均最低浓度(Cmin)高于血浆中的该参数，这说明syk抑制剂在肿瘤室中蓄积。由Cmax和AUC(0-8)测定的肿瘤/血浆比在各剂量组中是相似的。在整个给药期，在10、15和20mg/kg syk抑制剂的稳态下，肿瘤浓度分别持续大于60、170和640nM。

在给予所有3种浓度的syk抑制剂的小鼠体内Ramos肿瘤肿瘤生长被抑制。这是由卡尺测定(未提供数据)得到的第一个证据，该卡尺测定显示在Syk抑制剂存在下肿瘤生长速度减慢。研究结束后，将小鼠无痛处死，将肿瘤切除，称重。与卡尺测定相符，相对于溶媒对照，所有给药组的平均肿瘤重量的减少具有统计学显著性。该数据显示，syk抑制剂在亚微摩尔的浓度下通过小鼠中的进攻性NHL细胞系可以阻止肿瘤的形成。

给予syk抑制剂的小鼠在任何白细胞的亚组中不存在数量减少。事实上，观察到的唯一作用为，给予15mg/kg的syk抑制剂后，淋巴细胞的数量有所增加，但是在给予10或20mg/kg sky抑制剂的小鼠中，没有重复该结果。每个细胞亚类的相对比例不受syk抑制剂影响(数据未显示)。给予溶媒对照的小鼠体重平均增加9.45％。另一方面，在整个实验期间，给予10、15和20mg/kg syk抑制剂的小鼠体重分别平均增长0.27％、降低1.67％和降低2.27％。然而体重改变的％和肿瘤生长没有关系(R2＝0.27)。该数据说明，肿瘤生长的抑制的确是由抑制syk活性介导的。

还在Ramos肿瘤小鼠异种移植模型中测试了Syk特异性抑制剂Syk抑制剂的活性。在所有试验浓度下，在以BID给予Syk抑制剂的小鼠中，观察到具有统计学显著性的肿瘤生长减少。最低实验浓度为10mg/kg，在全天中，达到的肿瘤浓度范围在64-140nM之间。在这些浓度下，体内肿瘤生长抑制与在＜125nM浓度下发现的抑制BCR诱导的Ca2+通量和远端BCR向pERK Y204发出信号的结果相符。Syk的选择性药理学抑制产生了对NHL细胞系的繁殖和存活的作用。这些数据说明，选择性靶向Syk同样可在多种B-细胞增殖疾病中具有临床效益。

根据本文中的详述可知，Syk与B细胞发育、繁殖和存活有关。另外，Syk还可能是致癌基因。在过继性转移的骨髓细胞中，构成型活性Syk的表达能够在小鼠中诱发白血病，Syk的过度活性与多种人淋巴瘤有关。鉴于Syk在B细胞生物学中的作用，其选择性抑制可在B细胞增殖疾病中足以提供临床效益，同时能够减少因其它非靶向(off-target)激酶抑制所导致的毒性。

本发明提供了多种实施方案。很显然，可改变实施例以提供本发明的其它实施方案。因此可以理解，本发明范围由其权利要求而非作为示例的具体实施方案限定。

本说明书中引用的和/或列在本申请数据单中的所有以上美国专利、美国专利申请公布、美国专利申请、外国专利、外国专利申请和非专利出版物以其全部内容引入本文作为参考。由上述应当理解，尽管本文中为了说明的目的描述了本发明的特定实施方案，但在不偏离本发明精神和范围的前提下，可进行各种改进。因此除其权利要求外，本发明不受其它限制。

Claims

1.式(I)化合物、其互变异构体或可药用盐：

其中：

Y^1a选自N、CH和C；

Z^1a选自键、-N(C_1-4烷基)-、-SO₂-、-CO-、-NR^4dSO₂-、杂环基、杂环基羰基和杂环基磺酰基；

R^1a选自下列基团：

(a)H；

(b)C_1-8烷基，该烷基任选被1-3个选自下列基团的取代基取代：氨基、羟基、C_1-8烷氧基、杂环基、氨基羰基、氨基C_1-8烷氧基、芳基和杂芳基；

(c)C_3-8环烷基，该环烷基任选被1-3个氨基取代基取代；

(d)芳基，该芳基任选被1-3个选自下列基团的取代基取代：C_1-8烷基、C_1-8烷氧基、C_1-8烷基氨基、C_1-8烷基羰基氨基；氨基羰基C_1-8烷氧基、氨基磺酰基、氨基羰基、氨基C_1-8亚烷基羰基C_1-8烷氧基和卤素；

(e)杂环基，卤素，氰基，任选被1-3个选自下列基团的取代基取代：C_1-8烷基、氧代和C_1-8烷氧基羰基；氰基C_1-6烷基羰基；氨基羰基；芳基C_1-4烷氧基羰基；芳基氨基羰基；和

(f)杂芳基，该杂芳基任选被1-3个选自下列基团的取代基取代：C_1-8烷基、C_1-8烷基磺酰基和氰基C_1-8亚烷基羰基；

R^2a为H、C_1-8烷基，或者与R^1a以及它们各自所连接的氮一起形成含有1-3个包括N、O或S的杂原子的杂环基或杂芳基环，它们任选被1-2个独立选自下列基团的取代基R^2b取代：C_1-8烷氧基、C_1-8烷氧基羰基、C_1-8烷氧基羰基C_1-8亚烷基、C_1-8烷氧基羰基氨基C_1-8亚烷基、氨基、氨基C_1-8亚烷基、氨基芳基、氨基羰基、氨基羰基氨基、氨基羰基C_1-8亚烷基、氨基羰基氨基C_1-8亚烷基、氨基羧基C_1-8亚烷基、氨基磺酰基、氨基磺酰基C_1-8亚烷基、C_1-8烷基、C_1-8烷基磺酰基、C_1-8烷基磺酰基C_1-8亚烷基、C_1-8烷基杂环基、C_1-8烷基杂环基C_1-8亚烷基、芳基、芳基C_1-8烷氧基羰基氨基、羧基、羧基C_1-8亚烷基、氰基、C_3-8环烷基、卤素、杂芳基、杂芳基C_1-8亚烷基、杂环基、羟基、羟基C_1-8亚烷基、羟基羰基C_1-8亚烷基、亚氨基、氧代和＝S；

R^3a为H、C_1-8烷基，或者与R^4a-Z^1a部分以及它们各自所连接的氮一起形成杂环或杂芳基环，它们任选被1-2个各自独立选自下列基团的取代基R^2b和R^2c取代：C_1-8烷氧基、C_1-8烷氧基羰基、C_1-8烷氧基羰基C_1-8亚烷基、C_1-8烷氧基羰基氨基C_1-8亚烷基、氨基、氨基C_1-8亚烷基、氨基芳基、氨基羰基、氨基羰基氨基、氨基羰基氨基C_1-8亚烷基、氨基羧基C_1-8亚烷基、氨基磺酰基、氨基磺酰基C_1-8亚烷基、C_1-8烷基、C_1-8烷基磺酰基、C_1-8烷基磺酰基C_1-8亚烷基、C_1-8烷基杂环基、C_1-8烷基杂环基C_1-8亚烷基、芳基、芳基C_1-8烷氧基羰基氨基、羧基、羧基C_1-8亚烷基、氰基、C_3-8环烷基、卤素、杂芳基、杂芳基C_1-8亚烷基、杂环基、羟基、羟基C_1-8亚烷基、亚氨基、氧代和＝S；

R^4a选自下列基团：

(a)芳基，该芳基任选被1-3个各自独立选自下列基团的取代基R^4c取代：C_1-8烷氧基、氨基、C_1-8烷基羰基和氨基羰基C_1-8烷氧基；

(b)杂芳基、杂双环C_1-8烷基、卤素、羟基，它们任选被1-3个各自独立选自下列基团的取代基R^4c取代：C_1-8烷基、卤素、羟基、氧代C_1-8烷氧基和＝S；

(c)杂环基，它们每一个任选被1-3个各自独立选自下列基团的取代基R^4c取代：C_1-8烷基和氧代；

R^4b选自下列基团：H、C_1-8烷基、氨基C_1-8亚烷基、C_1-8烷基羰基、C_1-8烷基羰基氨基、C_1-8烷基磺酰基、C_1-8烷基亚磺酰基、C_1-8烷基磺酰基氨基、C_1-8烷基磺酰基C_1-8亚烷基、C_1-8烷硫基、C_1-8烷氧基、C_1-8烷氧基C_1-8亚烷基氨基、C_1-8烷氧基羰基氨基、C_1-8烷氧基羰基、C_1-8烷氧基C_1-8亚烷基、C_1-8烷氧基羰基C_1-8亚烷基、氨基、氨基羰基、氨基羰基C_1-8亚烷基、氨基磺酰基、C_1-8烷氧基羰基C_1-8亚烷基氨基磺酰基、氨基C_1-8亚烷基氨基羰基、氨基羰基C_1-8烷氧基、氨基C_1-8亚烷基、氨基C_1-8亚烷基羰基、氨基羰基C_1-8亚烷基氨基磺酰基、羧基、羧基C_1-8亚烷基氨基磺酰基、羧基C_1-8亚烷基、C_3-8环烷基羰基氨基、C_3-8环烷基羰基、卤素、羟基、羟基C_1-8亚烷基、氨基C_1-8亚烷基氨基、氨基C_1-8亚烷基羰基、氨基C_1-8亚烷基氨基羰基C_1-8亚烷基、羟基C_1-8亚烷基羰基氨基、羟基C_1-8亚烷基羰基、羟基C_1-8亚烷基氨基、羟基C_1-8亚烷基氨基磺酰基、羟基C_1-8亚烷基氨基羰基、氧代和杂环基；

如果R^4b为杂环基，则它任选被1-3个独立选自下列基团的取代基R^4d取代：C_1-8烷基、C_1-8烷氧基、羟基、氨基、卤素、氰基、氧代、＝S、C_1-8烷氧基羰基、羧基、氨基羰基、氨基磺酰基、C_1-8烷基羰基和C_1-8烷基氨基羰基；

R^5a选自H、C_1-8烷基、C_3-8环烷基和C_1-8烷基芳基磺酰基；

R^6a选自H、C_1-8烷基、卤素、羟基和氧代；

R^7a选自H、C_1-8烷基、氰基、C_1-8烷氧基C_1-8亚烷基、C_2-8炔基、C_3-8环烷基、C_1-8烷基羰基、羟基、氧代、卤素和芳基，其中每个芳基和杂芳基可以任选被下列基团取代：卤素、C_1-8烷基、C_1-8烷氧基、氰基、氨基、羟基、杂芳基；并且虚线表示双键或单键。

2.权利要求1的化合物，其中R^1a为H。

3.权利要求1的化合物，其中R^1a为C_1-8烷基。

4.权利要求1的化合物，其中R^1a为C_3-8环烷基。

5.权利要求1的化合物，其中R^1a为环己基、环丙基或环丁基。

6.权利要求1的化合物，其中R^1a为芳基。

7.权利要求1的化合物，其中R^1a为苯基。

8.权利要求1的化合物，其中R^1a为杂环基。

9.权利要求1的化合物，其中R^1a为杂芳基。

10.权利要求1-9中任一项的化合物，其中R^2a为H。

11.权利要求1-9中任一项的化合物，其中R^2a为C_1-8烷基。

12.权利要求1-9中任一项的化合物，其中R^2a与R^1a以及它们各自所连接的氮一起形成选自哌啶、哌嗪、高哌嗪和吡咯烷的杂环。

13.权利要求1-9中任一项的化合物，其中每个R^2b独立选自下列基团：-CH₂NH₂、-CH₂NHCH₃、-CH₂N(CH₃)₂、-CH₂CH₂NH₂、-C(CH₃)₂NH₂、-NH₂、-OH、-CH₂OH、-CH₂CH₂OH、-CH₂NHC(O)NH₂、-C(O)NH₂、-CH₂C(O)NH₂、-CH(NH₂)CO₂CH₃和-CH(NH₂)CH₂CO₂Et。

14.权利要求1-13中任一项的化合物，其中Y¹为N。

15.权利要求1-13中任一项的化合物，其中Y^1a为CH。

16.权利要求1-13中任一项的化合物，其中Y^1a为C。

17.权利要求1-13中任一项的化合物，其中R^3a为H。

18.权利要求1-17中任一项的化合物，其中R^3a为C_1-8烷基。

19.权利要求1-17中任一项的化合物，其中R^3a与R^4a-Z^1a部分以及它们各自所连接的氮一起形成杂环。

20.权利要求1-17中任一项的化合物，其中R^3a与R^4a-Z^1a部分以及它们各自所连接的氮一起形成杂芳基环。

21.权利要求1-20中任一项的化合物，其中R^4a为芳基。

22.权利要求1-20中任一项的化合物，其中R^4a为苯基。

23.权利要求1-20中任一项的化合物，其中R^4a为杂芳基。

24.权利要求1-20中任一项的化合物，其中R^4a为杂环基。

25.权利要求1-24中任一项的化合物，其中Z¹为键。

26.权利要求1-24中任一项的化合物，其中Z¹为-N(C_1-8烷基)-。

27.权利要求1-24中任一项的化合物，其中Z¹为-SO₂-。

28.权利要求1-24中任一项的化合物，其中Z¹为-CO-。

29.权利要求1-24中任一项的化合物，其中Z¹为-NR^4dSO₂-。

30.权利要求1-24中任一项的化合物，其中Z¹为杂环基。

31.权利要求1-24中任一项的化合物，其中Z¹为杂环基羰基。

32.权利要求1-24中任一项的化合物，其中Z¹为杂环基磺酰基。

33.权利要求1-32中任一项的化合物，其中R^5a为H。

34.权利要求1-33中任一项的化合物，其中R^6a为H。

35.权利要求1-34中任一项的化合物，其中R^7a选自H、氰基、苯基和吡啶基。

36.权利要求1-35中任一项的化合物，其中R^4b选自下列基团：H、C_1-8烷基、C_1-8烷基羰基、C_1-8烷基羰基氨基、C_1-8烷基磺酰基、C_1-8烷基亚磺酰基、C_1-8烷基磺酰基氨基、C_1-8烷基磺酰基C_1-8亚烷基、C_1-8烷硫基、C_1-8烷氧基、C_1-8烷氧基羰基氨基、C_1-8烷氧基羰基、C_1-8烷氧基羰基C_1-8亚烷基、氨基羰基、氨基磺酰基、C_1-8烷氧基羰基C_1-8亚烷基氨基磺酰基、氨基C_1-8亚烷基氨基羰基、氨基C_1-8亚烷基氨基羰基、氨基羰基C_1-8烷氧基、氨基羰基、氨基羰基C_1-8亚烷基氨基磺酰基、羧基、羧基C_1-8亚烷基氨基磺酰基、C_3-8环烷基羰基氨基、卤素、羟基、羟基C_1-8亚烷基、羟基C_1-8亚烷基羰基氨基、羟基C_1-8亚烷基氨基-、羟基C_1-8亚烷基氨基磺酰基、羟基C_1-8亚烷基氨基羰基、氧代和杂环基。

37.权利要求1的化合物，该化合物为式Ia化合物、其互变异构体或可药用盐：

其中：

Y^1b为N、CH或C；

Z^1b为杂环基、-NR^4dSO₂-、杂环基磺酰基或键；

R^1b选自下列基团：

(a)H；

(b)C_1-8烷基，该烷基任选被下列基团取代：氨基、氨基C_1-8烷基、氨基羰基、烷氧基、C_1-8烷基氨基羰基、氨基C_1-8亚烷基、氨基C_1-8烷氧基、芳基、羟基或杂环基；

(c)C_3-8环烷基，该环烷基任选被下列基团取代：烷基、氨基、羟基、C_1-8烷氧基、C_1-8烷基氨基羰基、氨基C_1-8亚烷基、氨基C_1-8烷氧基；

(d)芳基，该芳基任选被下列基团取代：烷基、氨基、氨基磺酰基、氨基C_1-8亚烷基、C_1-8烷基氨基羰基C_1-8烷氧基、羟基、C_1-8烷氧基、C_1-8烷基氨基羰基、氨基C_1-8亚烷基、氨基C_1-8烷氧基或卤素；

(e)杂环基，该杂环基任选被下列基团取代：C_1-8烷基、C_1-8烷氧基羰基、氨基、羟基、C_1-8烷氧基、C_1-8烷基氨基羰基、氨基C_1-8亚烷基、氨基C_1-8烷氧基、氧代或氰基C_1-8亚烷基羰基；

(f)杂芳基，该杂芳基任选被下列基团取代：烷基、氨基、羟基、C_1-8烷氧基、C_1-8烷基氨基羰基、氨基C_1-8亚烷基或氨基C_1-8烷氧基；

R^4b选自下列基团：H、羟基、C_1-8烷基羰基-、C_1-8烷氧基羰基C_1-8亚烷基、C_1-8烷氧基羰基氨基、氨基羰基C_1-8亚烷基、羟基羰基、羟基羰基C_1-8亚烷基、氨基羰基、氨基C_1-8亚烷基、羟基、羟基C_1-8亚烷基羰基氨基、C_1-8烷基氨基C_1-8亚烷基、C_1-8烷基氨基C_1-8亚烷基氨基羰基、氨基羰基氨基、C_1-8烷基磺酰基C_1-8亚烷基、C_3-8环烷基羰基氨基和C_1-8烷基羰基氨基；并且

R^4c为H、氨基、C_1-8烷基羰基、氨基羰基C_1-8烷氧基；

R^4d为H或C_1-8烷基；

R⁵为H或C_1-8烷基；

R⁶选自H、C_1-8烷基、卤素、羟基和氧代；

R⁷选自H、C_1-8烷基、氰基、C_1-8烷氧基C_1-8亚烷基、C_1-8烷基羰基、羟基、氧代、卤素、芳基和杂芳基；虚线表示双键或单键；

或者R^4b-Z^1b部分与R^4c结合形成含有1-3个包括N、O、S的杂原子的5-7元杂环，该杂环任选被下列基团取代：C_1-8烷基、卤素、氰基、氧代、＝S、氨基、羟基、C_1-8烷基羰基、C_1-8烷氧基或芳基氧基羰基C_1-8亚烷基。

38.权利要求37的化合物，具有选自下列的结构式：

其中R^1b为任选被氨基取代的C_1-8烷基、杂环基或氨基杂环基，以及任选被氨基取代的C_3-8环烷基；R⁷为卤素、羟基、C_1-8烷氧基C_1-8亚烷基、C_1-8烷基羰基、氰基或苯基、吡啶基；R⁶为H、C_1-8烷基或卤素；R⁹为H或C_1-8烷基；R¹⁰为H、C_1-8烷基、C_1-8烷氧基、C_1-8烷氧基羰基C_1-8亚烷基、氨基C_1-8亚烷基、氨基羰基C_1-8亚烷基、羧基C_1-8亚烷基、C_3-8环烷基和羟基C_1-8亚烷基；或其互变异构体或可药用盐。

39.权利要求37或38的化合物，其中R^1b为任选被取代的C_1-8烷基。

40.权利要求37或38的化合物，其中R^1b为任选被取代的C_3-8环烷基。

41.权利要求37或38的化合物，其中R^1b为环己基、环丙基或环丁基，它们每一个任选被取代。

42.权利要求37或38的化合物，其中R^1b为任选被取代的杂环基。

43.权利要求37或38的化合物或其可药用盐，其中R^1b为杂环基，该杂环基选自哌啶基、吗啉代和四氢噻吩基。

44.权利要求37或38的化合物，其中R^1b为芳基。

45.权利要求37或38的化合物，其中R^1b为单环杂芳基。

46.权利要求37或38的化合物，其中R^1b为吡唑。

47.权利要求37-46中任一项的化合物，其中Z^1b为杂环基，该杂环基选自下列基团：

48.权利要求37-46中任一项的化合物，

其中

部分

选自：

其中R⁸选自H、C_1-8烷基、羟基羰基C_1-8亚烷基、烷氧基羰基C_1-8亚烷基和C_1-8烷基氨基C_1-8亚烷基氨基羰基C_1-8亚烷基。

49.权利要求37的化合物，该化合物具有下式结构：

其中R^2c为氨基羰基、氨基C_1-8亚烷基或羟基；R⁷选自卤素、羟基、C_1-8烷氧基C_1-8亚烷基、C_1-8烷基羰基、氰基、苯基和吡啶基。

50.权利要求37的化合物，该化合物具有下式结构：

51.权利要求37的化合物，该化合物具有下式结构：

其中R^1b为C_1-8烷基、C_3-8环烷基、芳基或杂芳基，它们每一个任选被羟基、C_1-8烷氧基或氨基C_1-8烷氧基取代；R^4b为H或CH₃CO-；R⁷为H、C_1-8烷基、C_1-8烷基羰基、氨基羰基、氰基、苯基或吡啶基；R⁹为H或C_1-8烷基；R¹⁰为H、C_1-8烷基、C_1-8烷氧基、C_1-8烷氧基羰基C_1-8亚烷基、氨基C_1-8亚烷基、氨基羰基C_1-8亚烷基、羧基C_1-8亚烷基、C_3-8环烷基和羟基C_1-8亚烷基。

52.权利要求1的化合物，该化合物具有式Ib结构：

(Ib)

其中：

Y^1b为C或N；

每个R^2b独立选自下列基团：氨基、氨基C_1-8亚烷基、氨基羰基、氨基羰基C_1-8亚烷基、羧基、羧基C_1-8亚烷基、C_1-8烷氧基羰基、C_1-8烷氧基羰基C_1-8亚烷基和羟基；

R^4b为C_1-8烷基羰基；

Z^1b为-杂环基；

R^4c为H；

R^7b为H、氰基、吡啶基或无；

m为0或1；并且

p为0或1。

53.权利要求1的化合物、互变异构体或可药用盐，该化合物具有式Ic结构：

其中：

R^2b选自H、氨基C_1-8亚烷基、氨基羰基、氨基羰基C_1-8亚烷基、羟基、羟基羰基C_1-8亚烷基、C_1-8烷氧基羰基和C_1-8烷氧基羰基C_1-8亚烷基；

R^4b为H或CH₃CO-；

R^7b为H、氰基或吡啶基；并且

m为0或1。

54.权利要求1的化合物、其互变异构体或可药用盐，该化合物具有式Id结构：

其中：

Y^1b为C或N；

R^2b选自下列基团：H、氨基、氨基C_1-8亚烷基、氨基羰基、氨基羰基C_1-8亚烷基、羟基、羟基羰基C_1-8亚烷基、羧基、C_1-8羧基亚烷基、C_1-8烷氧基羰基和C_1-8烷氧基羰基C_1-8亚烷基；

R^7a为H、C_1-8烷基、卤素、羟基、C_1-8烷氧基C_1-8亚烷基、C_1-8烷基羰基、氰基或吡啶基；并且

m为0或1。

55.权利要求54的化合物，其中：m为0；R^7a选自H、氰基或吡啶基。

56.权利要求54的化合物，其中：m为1；R^7a选自H、氰基或吡啶基。

57.权利要求1的化合物，该化合物具有下式结构：

并且R^4b为H或CH₃CO-。

58.权利要求1的化合物、其互变异构体或可药用盐，该化合物具有式Ie结构：

其中：

R^7b为H、氰基，或吡啶基；且

m为0或1。

59.权利要求58的化合物、其互变异构体或可药用盐，该化合物具有下式结构：

60.式II化合物、其互变异构体或可药用盐：

其中：

R^1c选自下列基团：

(a)C_3-8环烷基，和

(b)芳基，它们每一个任选被1-2个选自C_1-8烷基、氨基和羟基的取代基取代；或

与R^2c一起形成含有1-3个包括N、O、S的杂原子的杂环，该杂环任选被1-2个各自独立选自下列基团的取代基取代：氨基羰基C_1-8亚烷基、C_1-8烷氧基羰基、氨基C_1-8亚烷基、羟基C_1-8亚烷基、C_1-8烷氧基羰基氨基C_1-8亚烷基、氨基、氨基羰基氨基羰基氨基、芳基C_1-8烷氧基羰基氨基、氨基羰基氨基和氧代；

R^2c为H、，或者与R^1c一起形成杂环、氰基C_1-8烷基羰基、氰基C_1-6烷基羰基氨基，它们任选被1-2个独立选自下列基团的取代基取代：氨基羰基C_1-8亚烷基、C_1-8烷氧基羰基、氨基C_1-8亚烷基、羟基C_1-8亚烷基、C_1-8烷氧基羰基氨基C_1-8亚烷基、氨基、氨基羰基氨基羰基氨基、芳基C_1-8烷氧基羰基氨基、氨基羰基氨基和氧代；

R^3c为H，或与R^4d一起形成杂环或杂芳基环，它们每一个任选被1-2个独立选自下列基团的取代基取代：C_1-8烷基、C_1-8烷基杂环基、氨基C_1-8亚烷基、氨基芳基、羟基C_1-8亚烷基、氨基羰基、C_1-8烷氧基羰基、氨基、亚氨基、C_1-8烷基羰基氨基、氧代、卤素、芳基、杂环基、杂环基C_1-8亚烷基和C_1-8烷基杂环基C_1-8亚烷基；

R^4d独立选自下列基团：

(a)C_3-8环烷基，

(b)芳基，

(c)杂芳基，和

(d)杂环基；它们每一个任选被1-3个各自独立选自下列基团的取代基R^4e、R^4f和-Z^1cR^4g取代：C_1-8烷基、氨基C_1-8亚烷基、羟基C_1-8亚烷基、氨基羰基、C_1-8烷氧基羰基、羧基、氨基、亚氨基、C_1-8烷基羰基氨基、氧代、卤素、芳基、杂环基和杂环基C_1-8亚烷基，前提是R^1c和R^2c或R^3c和R^4d中至少一个与它们各自所连接的氮结合形成杂环基或杂芳基环；并且

61.权利要求60的化合物、其互变异构体或可药用盐，该化合物具有式IIa结构：

62.权利要求60-61中任一项的化合物，其中R^3c为H。

63.权利要求60-61中任一项的化合物，其中R^4d为苯基。

64.权利要求60-61中任一项的化合物，其中R^4d为吲唑基。

65.权利要求60-61中任一项的化合物，其中R^4d为环己基。

66.权利要求60-61中任一项的化合物，其中R^4d为二氢吲哚基。

67.权利要求60-61中任一项的化合物，其中R^3c与R^4d以及它们各自所连接的氮一起形成杂环，该杂环选自下列基团：吡啶基、咪唑基、四氢咪唑基、吲唑基、哌啶基、哌嗪基、吡咯烷基、三唑基和苯并咪唑基。

68.权利要求61的化合物或其可药用盐，其中R^4dR^3cN-部分选自下列基团：

虚线表示单键或双键；波浪线表示与分子其它部分的连接点。

69.权利要求60的化合物、其互变异构体或可药用盐，该化合物具有式IIb结构：

其中：

R^7c为卤素；

R^1c和R^2c一起形成杂环，该杂环任选被1-2个独立选自下列基团的取代基取代：氨基羰基C_1-8亚烷基、C_1-8烷氧基羰基、氨基C_1-8亚烷基、羟基C_1-8亚烷基、C_1-8烷氧基羰基氨基C_1-8亚烷基、氨基、氨基羰基氨基羰基氨基、芳基C_1-8烷氧基羰基氨基、氨基羰基氨基和氧代；

Z^1c为杂环基、-N(C_1-4烷基)-、-SO₂-或-CO-；

R^4g选自H、C_1-8烷氧基、C_1-8烷基羰基、C_1-8烷基羰基氨基、氨基、氨基羰基氨基C_1-8亚烷基、氨基羰基和氨基磺酰基；

每个R^4e和R^4f独立选自H-、C_1-8烷氧基和C_1-8烷基羰基；或与-Z^1c-R^4g以及它们各自所连接的苯环一起形成稠合的杂环环系，该环系任选被1-2个氧代取代基、卤素、C_1-8烷基、C_1-8烷基所取代。

70.权利要求69的化合物，其中所述

部分

选自下列基团：

71.权利要求60-70中任一项的化合物，其中R^7c选自F、Cl、Br、氰基和氨基羰基。

72.权利要求60-70中任一项的化合物或其可药用盐，其中R^7c为CONH₂或F。

73.权利要求60-70中任一项的化合物或其可药用盐，其中R^1c为C_3-8环烷基。

74.权利要求60-70中任一项的化合物或其可药用盐，其中R^1c为环己基。

75.权利要求60-70中任一项的化合物或其可药用盐，其中R^1c为环丙基。

76.权利要求60-70中任一项的化合物或其可药用盐，其中R^1c为环丁基。

77.权利要求60-70中任一项的化合物或其可药用盐，其中R^1c为芳基。

78.权利要求60-70中任一项的化合物或其可药用盐，其中R^1c为苯基。

79.权利要求60-70中任一项的化合物，其中R^2c与R^1c以及它们各自所连接的氮一起形成吡咯烷基、哌啶基或哌嗪基、二氮杂环庚烯环。

80.权利要求60的化合物，该化合物具有选自下列基团的结构式：

其中Y^2b为N、NH、C或CH；R^2d为H、C_1-8烷基氨基C_1-8亚烷基、氨基羰基、氨基羰基氨基、氨基羰基氨基羰基氨基、氨基、氧代、氨基C_1-8亚烷基、氨基羰基氨基C_1-8亚烷基、羟基C_1-8亚烷基、芳基烷氧基羰基氨基、氰基C_1-8亚烷基羰基、氰基C_1-8亚烷基羰基氨基、羟基、C_1-8烷氧基羰基、烷氧基羰基C_1-8亚烷基，任选被氨基取代；R^7c为H、卤素、氨基羰基、环烷基、氰基或吡啶基；R⁹为H或C_1-8烷基；R¹⁰为H、C_1-8烷基、C_1-8烷氧基、C_1-8烷氧基羰基C_1-8亚烷基、氨基C_1-8亚烷基、氨基羰基C_1-8亚烷基、羧基C_1-8亚烷基、C_3-8环烷基和羟基C_1-8亚烷基；m为0或1；q为0或1。

81.权利要求60的化合物，其中R^7c选自F、Cl、Br、氰基和氨基羰基。

82.权利要求60的化合物，其中R^7c为CONH₂或F。

83.权利要求60的化合物、其互变异构体或可药用盐，该化合物具有下述结构：

84.化合物，所述化合物选自下列化合物：N2-(1H-吲唑-6-基)-N4-甲基-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；1-(4-(4-(4-(甲基氨基)-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；N2-(1H-吲唑-6-基)-N4-甲基-5-(吡啶-3-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；1-(4-(4-(4-(环丙基氨基)-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；4-(4-氨基苯基)-1-(5-氨基甲酰基-4-(环丙基氨基)嘧啶-2-基)吡啶鎓；1-(4-氨基苯基)-3-(5-氨基甲酰基-4-(环丙基氨基)嘧啶-2-基)-1H-咪唑-3-鎓；2-(6-氨基-7-氯代-1H-吲唑-1-基)-4-(环丙基氨基)嘧啶-5-甲酰胺；1-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-3-甲酰胺；1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-3-甲酰胺；4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-N-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-胺；1-(4-(4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；(S)-1-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)吡咯烷-3-醇；(S)-1-(4-(4-(4-(3-羟基吡咯烷-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈；1-(4-(4-(6-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-9H-嘌呤-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；N-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基)-1H-吲唑-6-胺；4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟-N-(3，4，5-三甲氧基苯基)嘧啶-2-胺；1-(4-(4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；N-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-4-(哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-胺和1-(4-(4-(4-(哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；N-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-4-(吡咯烷-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-胺和1-(4-(4-(4-(吡咯烷-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；1-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺和1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺；2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)嘧啶-5-甲酰胺；1-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-3-甲酰胺；1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-3-甲酰胺；(1-(5-氟-2-(4-(N-甲基乙酰氨基)苯基氨基)嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯；N-(4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺；(1-(2-(4-氨基甲酰基苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯；4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺；4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯磺酰胺；6-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮；1-(4-(4-(4-(2-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；(1-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-2-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯和N-(4-(2-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基)-1H-吲唑-6-胺；1-((1-(5-氟-2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基)脲；1-(4-(4-(5-氟-4-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；6-(5-氟-4-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮；2-(1H-吲唑-6-基氨基)-4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈；5-(1-丁氧基乙基)-N4-环丙基-N2-(1H-吲唑-6-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；1-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基)乙酮；N4-环丙基-N2-(1H-吲唑-6-基)-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；1-(4-(4-(4-(哌啶-4-基甲基氨基)-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-4-(哌啶-4-基甲基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈；2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈；N-(4-(4-(环丙基氨基)-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺；6-(4-(环丙基氨基)-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮；5-溴-N4-环丁基-N2-(1H-吲唑-6-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；5-氯代-N4-环丁基-N2-(1H-吲唑-6-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；2-(1H-吲唑-6-基氨基)-4-(环丁基氨基)-6，7-二氢吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-酮；1-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-3-甲酰胺；1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-3-甲酰胺；4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-N-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-胺；1-(4-(4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；(S)-4-(2-(氨基甲基)吡咯烷-1-基)-N-(1H-吲唑-6-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-胺；(S)-1-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)吡咯烷-3-醇；(S)-1-(4-(4-(4-(3-羟基吡咯烷-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈；2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-4-(3-(羟基甲基)哌啶-1-基)嘧啶-5-甲酰胺；2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-4-(2-(2-羟基乙基)哌啶-1-基)嘧啶-5-甲酰胺；1-(4-(4-(6-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-9H-嘌呤-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；(S)-4-(3-氨基哌啶-1-基)-N-(1H-吲唑-6-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-胺；(S)-1-(4-(4-(4-(3-氨基哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；N-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基)-1H-吲唑-6-胺；4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟-N-(3，4，5-三甲氧基苯基)嘧啶-2-胺；1-(4-(4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；N-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-4-(哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-胺；1-(4-(4-(4-(哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；N-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-4-(吡咯烷-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-胺；1-(4-(4-(4-(吡咯烷-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；1-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺；1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺；2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)嘧啶-5-甲酰胺；1-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-3-甲酰胺；1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-3-甲酰胺；2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-4-(4-(2-羟基乙基)-1，4-二氮杂环庚-1-基)嘧啶-5-甲酰胺；(1-(5-氟-2-(4-(N-甲基乙酰氨基)苯基氨基)嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯；(1-(2-(4-氨基甲酰基苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯；4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺；4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯磺酰胺；N-(4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺；6-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮；1-(4-(4-(4-(2-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；(1-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-2-基)甲基氨基甲酸叔-丁基酯；和N-(4-(2-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基)-1H-吲唑-6-胺。

85.化合物，所述化合物选自下列化合物：1-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基磺酰基)哌啶-4-醇；2-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-N-甲基苯基磺酰氨基)乙酸丁基酯；2-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基磺酰氨基)乙酰胺；2-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-N-甲基苯基磺酰氨基)乙酸；1-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌啶-4-醇；4-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯；N2-(1H-吲唑-6-基)-N4-(哌啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；N4-环丁基-N2-(1H-吲唑-6-基)-6-甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；N4-(3-氨基-2，2-二甲基丙基)-N2-(1H-吲唑-6-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；N2-(1H-吲唑-6-基)-N4-(3-吗啉代丙基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；N-(4-(4-(4-氨基丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺；N-(4-(4-(2-氨基环己基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺；N-(4-(4-(2-氨基乙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺；N-(4-(4-(5-氨基戊基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺；1-(4-(4-(4-(4-氨基环己基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；N-(4-(4-(5-氨基戊基氨基)-5-溴-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺；N-(4-(4-(5-氨基戊基氨基)-5，6-二溴-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺；N-(4-(4-(3-氨基磺酰基-苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺；2-(6-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-2-氧代-3，4-二氢喹啉-1(2H)-基)乙酸乙基酯；2-(6-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-2-氧代-3，4-二氢喹啉-1(2H)-基)乙酸；2-(6-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-2-氧代-3，4-二氢喹啉-1(2H)-基)-N-(2-(二甲基氨基)乙基)乙酰胺；4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基(甲基)氨基甲酸甲基酯；4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基(甲基)氨基甲酸甲酯；N-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-2-羟基-N-甲基乙酰胺；N-(4-(4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-2-羟基-N-甲基乙酰胺；N⁴-环丁基-N²-(4-甲基磺酰基甲基)苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；N⁴-环丁基-N²-(3-甲基磺酰基甲基)苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；2-(3-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯氧基-N-甲基乙酰胺；N²-(1H-吲唑-6-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；N-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基环丙烷甲酰胺；N-(4-(4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基环丙烷甲酰胺；N-(4-(4-(甲基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基环丙烷甲酰胺；2-(2-(1H-吲唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)乙酰胺；N-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-2-(二甲基氨基)-N-甲基乙酰胺；N-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-N-(3-二甲基氨基丙基)苯甲酰胺；N-(4-(4-(环丁基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-3-羟基-N-甲基丙酰胺；N-(4-(4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-3-羟基-N-甲基丙酰胺；N²-(1H-吲唑-6-基氨基)-N⁴-(1H-吡唑-5-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；N²-(1H-吲唑-6-基氨基)-N⁴-(2-甲氧基乙基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；1-(4-(4-(4-(2-甲氧基乙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；N²-(1H-吲唑-6-基氨基)-N⁴-(2-羟基乙基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；N⁴-(2-2-(氨基乙氧基)乙基)-N²-(1H-吲唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；1-(4-(4-(4-(2-(2-氨基乙氧基)氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；(S)-1-(4-(4-(2-(2-氨基乙氧基)乙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)吡咯烷-2-甲酰胺；3-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯甲酰胺；3-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯甲酰胺；3-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯磺酰胺；3-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)苯磺酰胺；N-(4-(4-(3-(氨基甲基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺；(R)-1-(4-(4-(4-(1-羟基丙-2-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；(R)-2-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)丙-1-醇；(S)-1-(4-(4-(4-(1-羟基丙-2-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；(S)-2-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)丙-1-醇；1-(4-(4-(4-(1，1-二氧基-四氢噻吩-3-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；N2-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-N4-(1，1-二氧基-四氢塞吩-3-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2，4-二胺；4-(4-(环丙基氨基)-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺；4-(4-氨基-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯甲酸；4-(环丙基氨基)-2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈；4-(5-氰基-4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺；N-(4-(5-氰基-4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯基)-N-甲基乙酰胺；4-(5-氰基-4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯磺酰胺；2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-4-(环丙基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈；4-(环丙基氨基)-2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲酰胺；4-(4-(1-(2-氰基乙酰基)哌啶-4-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺；4-(4-(1-(2-氰基乙酰基)哌啶-3-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺；4-(4-甲氧基苯基氨基)-2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈；6-(4-(4-氟苯基氨基)-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮；6-(4-氨基-5-(4-氟苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮；6-(4-(苄基氨基)-5-(吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基氨基)-1-甲基-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮；4-(苄基氨基)-2-(1-甲基-2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-甲腈；1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-9H-嘌呤-6-基)哌啶-3-甲酸丁基酯；1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-9H-嘌呤-6-基)哌啶-3-甲酸；1-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯基氨基)-9H-嘌呤-6-基)哌啶-3-甲酸；1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-9H-嘌呤-6-基)哌啶-3-甲酰胺；2-(1-(2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)乙酸丁基酯；2-(1-(2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)乙酸；2-(1-(2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)乙酰胺；1-(4-(4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氯代嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；6-(5-氟-4-(3-氧代哌嗪-1-基)嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮；1-(4-(4-(5-氟-4-(哌嗪-1-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；4-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌嗪-1-甲酰胺；2-(1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-4-基)乙酰胺；1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-4-基氨基甲酸苄基酯；1-(4-(4-(4-(4-氨基哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；1-(1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-4-基)脲；2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-4-(4-(脲基甲基)哌啶-1-基)嘧啶-5-甲酰胺；4-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯甲酸；6-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-溴嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮；4-(4-(4-((二甲基氨基)甲基)哌啶-1-基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺；3-氨基-3-(1-(5-氟-2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)嘧啶-4-基)哌啶-4-基)丙酸乙酯；2-氨基-2-(1-(5-氟-2-(2-氧代-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基氨基)嘧啶-4-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯；N-(1-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌啶-4-基)-2-氰基乙酰胺；3-(4-(2-(4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙腈；6-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-(吡啶-4-基)嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮；6-(4-(4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-5-环丙基嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮；6-(4-((1s，4s)-4-氨基环己基氨基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮；4-(4-((1s，4s)-4-氨基环己基氨基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯甲酰胺；1-(4-(4-(4-((1s，4s)-4-氨基环己基氨基)-5-氟嘧啶-2-基氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙酮；6-(4-((1s，4s)-4-氨基环己基氨基)-5-(吡啶-4-基)嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮和6-(4-((1s，4s)-4-氨基环己基氨基)-5-环丙基嘧啶-2-基氨基)-3，4-二氢喹啉-2(1H)-酮。

86.具有实施例中所示结构的化合物。

87.具有图中所示结构的化合物。

88.具有表中所示结构的化合物。

89.组合物，该组合物含有前述权利要求任一项中的化合物以及可药用载体或稀释剂。

90.抑制syk、JAK激酶或至少部分由syk或JAK激酶活性介导的信号转导通路的方法，所述方法包括使细胞与前述权利要求中任一项的化合物接触的步骤。

91.在患者中治疗至少部分由syk或JAK激酶活性介导的病症或疾病的方法，所述方法包括给予需要这种治疗的患者治疗有效量的权利要求89的组合物的步骤。

92.权利要求89的方法，其中所述病症或疾病选自心血管病、炎性疾病、自身免疫疾病及细胞增殖性疾病。

93.权利要求92的方法，其中所述心血管疾病选自再狭窄、血栓形成、免疫血小板减少性紫癜、肝素引起的血小板减少症、扩张型心肌炎、镰状细胞病、动脉粥样硬化症、心肌梗塞、脉管炎、不稳定心绞痛和急性冠状动脉综合征。

94.权利要求92的方法，其中所述炎性疾病选自过敏、哮喘、类风湿性关节炎、B细胞介导的疾病例如非霍奇金氏淋巴瘤、抗磷脂综合征、红斑狼疮、银屑病、多发性硬化、克罗恩病和晚期肾病。

95.权利要求92的方法，其中所述心血管病选自血栓形成、免疫血小板减少性紫癜和肝素引起的血小板减少症。

96.权利要求92的方法，其中所述炎性疾病为类风湿性关节炎或非霍奇金氏淋巴瘤。

97.权利要求92的方法，其中所述镰状细胞病选自镰状细胞贫血病、镰状细胞血红蛋白C疾病、镰状细胞β+地中海贫血和镰状细胞β0地中海贫血。

98.权利要求92的方法，其中所述免疫相关疾病选自自身免疫疾病、宿主抗移植物病、移植物抗宿主病、IV型过敏反应和同种异体移植物排斥。

99.权利要求92的方法，其中所述自身免疫疾病选自溶血性贫血、免疫血小板减少性紫癜、多发性硬化、银屑病和斯耶格伦综合征。

100.权利要求92的方法，其中所述细胞增殖性疾病为白血病或淋巴瘤。

101.权利要求92的方法，其中所述病症为急性骨髓细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病或非霍奇金淋巴瘤。

102.权利要求92的方法，其中所述疾病为骨髓增殖性疾病、恶性血液病、慢性原发性骨髓纤维化症。

103.药盒，所述药盒含有权利要求89的组合物、包装和使用说明书。