CN107709327A

CN107709327A - Brk抑制性化合物

Info

Publication number: CN107709327A
Application number: CN201680037068.4A
Authority: CN
Inventors: 山本真吾; 户仓弘嗣; 黑野昌邦; 野村佳则; 堀田真吾
Original assignee: Ono Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Ono Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2015-06-22
Filing date: 2016-06-21
Publication date: 2018-02-16
Also published as: RU2017145026A; US11512087B2; PH12017502363A1; EP3312182A1; RU2017145026A3; EP3312182B1; KR20180015160A; AU2016284402A1; ZA201708699B; EP3312182A4; US10377759B2; JP6819585B2; EP3312182B9; AU2016284402B2; HK1250159A1; ES2909048T3; WO2016208595A1; RU2719477C2; SG11201710604SA; JPWO2016208595A1

Abstract

本发明涉及通式(I)表示的化合物(其中，所有符号代表与说明书中所述的符号相同的含义)，其盐、其溶剂合物、其N‑氧化物、或这些中任一种的前药。由于该化合物具有Brk抑制活性，该化合物可例如用作药物以预防和/或治疗Brk‑相关疾病如癌症。

Description

Brk抑制性化合物

技术领域

本发明涉及以下通式(I)表示的Brk抑制性化合物：

(其中，所有符号均具有与下文所述相同的含义)，其盐、其溶剂合物、其N-氧化物、或这些中任一种的前药(下文称为本发明的化合物)，和包含这些作为活性成分的药物。

背景技术

Brk(乳腺肿瘤激酶)也称为PTK6(蛋白酪氨酸激酶6)，且为属于FRK(Fyn-相关激酶)/PTK6家族激酶的非受体酪氨酸激酶，该FRK(Fyn-相关激酶)/PTK6家族激酶为酪氨酸激酶。Brk由451个氨基酸编码。Brk从人类正常黑素细胞中首先鉴定出来，之后立即在乳腺癌中鉴定出Brk。Brk在许多肿瘤中高度表达，包括乳腺癌、卵巢癌、结肠癌、胰腺癌、膀胱癌、食管癌、胃癌、非小细胞肺癌、前列腺癌、口腔鳞状上皮细胞癌症、头颈部鳞状上皮细胞癌症、黑素瘤、B-细胞淋巴瘤和T-细胞淋巴瘤。特别地，Brk在乳腺癌、前列腺癌、鼻咽癌和非小细胞肺癌中是不良预后因子。此外，认为Brk在肿瘤发生中起重要作用，例如促进癌细胞增殖、迁移和侵袭，并避免细胞死亡(参见非专利文献1至7)。

因此，认为抑制Brk活化的化合物可用于治疗多种类型的癌症。

另一方面，在专利文献1中已经描述了下列通式(A)的化合物或其药学上可接受的盐或其衍生物用于治疗或改善以下疾病的一种或多种症状：α-突触核蛋白毒性、α-突触核蛋白介导的疾病、或α-突触核蛋白原纤维是疾病症状或原因的疾病。

通式(A)如下所示：

(其中：

各个X^A独立地为N或CH；

R^1A和Z^A各自独立地为R^5A、C(O)R^5A等；

R^2A和R^3A各自独立地为H、卤素、R^5A、OR^5A、OC(O)R^5A等；

R^4A独立地为H、卤素、NR^5AR^5A、NR^5AR^6A等；或任选取代的烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、或杂芳烷基；且R^5A和R^6A各自独立地为H、或任选取代的烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、或杂环基(摘录的是基团的部分定义))。

此外，在专利文献2中已经描述了治疗受试者以蛋白质运输受损为特征的疾病的方法，该方法包括向受试者施用有效量的由通式(B)表示的化合物或其药学上可接受的盐的步骤，其中所述病症不是突触核蛋白病。

通式(B)如下所示：

(其中：

各个X^B独立地为N、CH或C(C₁-C₄烷基)；

各个X^1B独立地为N、NR^3B、CH或C(C₁-C₄烷基)；

R^1B和Z^B各自独立地为R^5B、C(O)R^5B等；或，NR^1BZ^B一起为N＝CH-NR^5BR^5B；

R^2B和R^3B各自独立地为H、卤素、R^5B等；

R^4B独立地为H、卤素、NR^5BR^5B、NR^5BR^6B等；

或任选取代的烷基、芳基、芳烷基、杂芳基或杂芳烷基；

且R^5B和R^6B各自独立地为H、或任选取代的烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基或杂环基(摘录的是基团的部分定义))。

而且，专利文献3已描述了下式(C)的化合物或互变异构体或其药物可接受的盐用于治疗Syk和/或JAK相关疾病如心脏病、炎性疾病、免疫相关疾病和细胞增殖疾病。

通式(C)如下所示：

具有下式的化合物，或其互变异构体或其药物可接受的盐：

([其中，

Y^1aC选自N、CH和C；

Z^1aC选自键、-SO₂-、-CO-等；

R^1aC选自：(a)H、(b)可取代有1至3个选自以下的取代基的C_1-8烷基：氨基、羟基、C_1-8烷氧基等、(c)可取代有1至3个氨基取代基的C_3-8环烷基、(d)可取代有1至3个选自以下的取代基的芳基：C_1-8烷基、C_1-8烷氧基、C_1-8烷基氨基等、(e)可取代有1至3个选自以下的取代基的杂环基、卤素、氰基：C_1-8烷基、氧代等、氰基C_1-6烷基羰基、氨基羰基等、和(f)可取代有1至3个选自以下的取代基的杂芳基：C_1-8烷基、C_1-8烷基磺酰基等；

R^2aC为H或C_1-8烷基等；

R^3aC为H或C_1-8烷基等；

R^4aC选自：(a)可取代有1至3个取代基R^4cC的芳基，所述取代基R^4cC各自独立地选自：C_1-8烷氧基，氨基，C_1-8烷基羰基和氨基羰基C_1-8烷氧基，(b)可取代有1至3个取代基R^4cC的杂芳基、杂双环C_1-8烷基、卤素、羟基，所述取代基R^4cC各自独立地选自：C_1-8烷基、卤素、羟基、氧代C_1-8烷氧基和＝S，(c)可取代有1至3个取代基R^4cC的杂环基，所述取代基R^4cC各自独立地选自：C_1-8烷基和氧代；

R^4bC选自：H、C_1-8烷基、C_1-8烷基羰基、C_1-8烷基羰基氨基、C_1-8烷基磺酰基、C_1-8烷基亚磺酰基、C_1-8烷基硫基、C_1-8烷氧基、C_1-8烷氧基羰基氨基、C_1-8烷氧基羰基、氨基、氨基羰基、氨基磺酰基、氨基羰基C_1-8烷氧基、氨基C_1-8亚烷基、羧基、C_3-8环烷基羰基氨基、C_3-8环烷基羰基、卤素、羟基、氧代和杂环基；

当R^4bC为杂环基，其可取代的有1至3个独立选自以下的取代基R^4dC：C_1-8烷基、C_1-8烷氧基、羟基、氨基、卤素、氰基、氧代等；

R^5aC选自H、C_1-8烷基等；

R^6aC选自H、C_1-8烷基等；

R^7aC选自H、C_1-8烷基、C_3-8环烷基和芳基等，芳基和杂芳基各自可取代的有卤素、C_1-8烷基、C_1-8烷氧基、氰基、氨基、羟基、杂芳基；且虚线表示双键或单键](摘录的是基团的部分定义))。

然而，没有专利文献描述或暗示了对Brk有选择性的化合物。

引用列表

专利文献

专利文献1：WO 2007/126841A

专利文献2：WO 2009/062118A

专利文献3：WO 2009/131687A

非专利文献

非专利文献1：Breast Cancer-Current and Alternative TherapeuticModalities,413-434页,2011

非专利文献2：Biochimica et Biophysica Acta，Vol.1806，66-73页，2010

非专利文献3：Cell Cycle,Vol.8,2728-2732页,2009

非专利文献4：Cancer Research，Vol.73，5810-5820页，2013

非专利文献5：Cancer Research，Vol.73，5426-5437页，2013

非专利文献6：OncoTargets and Therapy，Vol.6，183-188页，2013

非专利文献7：Journal of Translational Medicine，Vol.11，59，2013

发明内容

技术问题

本发明的目的是通过产生对Brk具有抑制活性的化合物，找出可用作各种癌症疾病的预防剂和/或治疗剂的化合物。

解决问题的方案

为了实现上述目的，本发明人进行了深入研究以找到对Brk具有抑制活性的化合物。结果，本发明者发现以下所述的通式(I)表示的化合物对Brk具有抑制作用并且相比于其它激酶具有高Brk选择性，从而完成了本发明。

换言之，本发明涉及以下：

[1]通式(I)表示的化合物，其盐、其溶剂合物、其N-氧化物、或这些中任一种的前药：

(其中：

表示

环1表示3至15元环；

R¹表示卤素、氧代基团、羟基、氰基、NR⁴R⁵、C1-4烷基或C1-4烷氧基，所述C1-4烷基或C1-4烷氧基可取代有卤素；

R⁴和R⁵各自独立地表示氢原子、C1-4烷基或C1-4酰基；

p表示0至7的整数；

R³表示C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、(C3-6环烷基)-(CH₂)_r-基团或(3-至6-元饱和杂环)-(CH₂)_s-基团，所述R³可取代有卤素；

r表示0至4的整数；

s表示0至4的整数；

环2表示3至15元环；

R²表示卤素、氧代基团、羟基、氰基、C(O)R⁶、SO₂R⁷、C1-4烷基或C1-4烷氧基,

所述C1-4烷基或C1-4烷氧基可取代有选自以下的取代基：卤素、羟基、氰基、C(O)R⁸、NR⁹R¹⁰和SO₂R¹¹；

R⁶表示羟基、C1-4烷基、C1-4烷氧基或NR¹²R¹³；

R⁷和R¹¹各自独立地表示羟基、C1-4烷基或C3-6环烷基，所述C1-4烷基可取代有卤素或CO₂R¹⁴；

R⁸表示羟基、C1-4烷氧基或NR¹⁵R¹⁶；

R⁹、R¹⁰、R¹²和R¹³各自独立地表示氢原子、C1-4酰基或可取代有NR¹⁵R¹⁶的C1-4烷基；或者

R⁹和R¹⁰，以及R¹²和R¹³，与它们连接的氮原子一起，可形成5至6元饱和环状胺；

R¹⁴表示氢原子或C1-4烷基；

R¹⁵或R¹⁶各自独立地表示氢原子、C1-4烷基或C1-4酰基；或者

R¹⁵和R¹⁶与它们连接的氮原子一起，可形成5至6元饱和环状胺；

q表示0至7的整数；

条件是当p和q各自表示2以上的整数时，R¹和R²各自独立地可相同或不同)；

[2]根据上述项[1]的化合物，其中q为2或3；

[3]根据上述项[1]或[2]的化合物，其中：

为

[4]根据上述项[1]至[3]任一项的化合物，其通过通式(I-1)表示：

(其中：

X表示CH或N；

q-1表示2或3；

所有其它符号表示与上述项[1]所述的符号相同的含义)；

[5]根据上述项[1]至[4]任一项的化合物，其中X为N；

[6]根据上述项[1]至[5]任一项的化合物，其中环1为5至6元单环芳环或可部分饱和的9至10元双环芳环；

[7]根据上述项[1]至[6]任一项的化合物，其中环2为5至6元单环芳环或可部分饱和的9至10元双环芳环；

[8]根据上述项[1]的化合物，其中q为1以上的整数；

[9]根据上述项[1]或[8]的化合物，其通过通式(I-a)表示：

(其中，所有的符号均表示与上述项[1]所述的符号相同的含义)；

[10]根据上述项[1]或[8]的化合物，其通过通式(I-b)表示：

[11]根据上述项[1]、[8]和[10]任一项的化合物，其中R³为可取代有卤素的C3-4支链烷基；

[12]根据上述项[1]、[8]、[10]和[11]任一项的化合物，其中环2为苯环，且当q表示1以上的整数时，至少一个R ²为卤素；

[13]根据上述项[1]、[8]、[10]和[11]任一项的化合物，其中环2为5至6元单环芳族杂环；

[14]根据上述项[1]的化合物，其通过通式(I-c)表示：

[15]化合物，其为：

(1)N⁶-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(1H-吲哚-5-基)-1-异丙基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺；

(2)N⁶-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(7-氟-1H-吲唑-4-基)-1-异丙基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺；

(3)3-(7-氯-1H-吲唑-4-基)-N⁶-[2-氟-4-(甲基磺酰基)苯基]-1-异丙基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺；

(4)N⁶-[2-氟-4-(甲基磺酰基)苯基]-3-(1H-吲唑-4-基)-1-异丙基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺；

(5)3-(7-氟-1H-吲唑-4-基)-N⁶-[2-氟-4-(甲基磺酰基)苯基]-1-异丙基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺；或

(6)4-(4-氨基-2-{[2-氟-4-(甲基磺酰基)苯基]氨基}-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)-1H-吲唑-7-甲腈；

[16]化合物，其为：

其盐、其溶剂合物、其N-氧化物、或这些中任一种的前药；

[17]药物组合物，其包含根据上述项[1]的通式(I)表示的化合物、其盐、其溶剂合物、其N-氧化物、或这些中任一种的前药作为活性成分；

[18]根据上述项[17]的组合物，其为Brk抑制剂；

[19]根据上述项[18]的组合物，其为用于预防和/或治疗癌症的药物。

[20]根据上述项[19]的组合物，其中所述癌症为乳腺癌、卵巢癌、大肠癌、肺癌、前列腺癌、头颈癌、黑素瘤、胰腺癌、膀胱癌、食管癌、胃癌、或淋巴瘤；

[21]根据上述项[19]的组合物，其中所述癌症为乳腺癌、卵巢癌、大肠癌、肺癌、前列腺癌、头颈癌、淋巴瘤、脑肿瘤、神经胶质瘤、垂体腺瘤、眼色素层恶性黑素瘤、脑膜瘤、胸腺瘤、间皮瘤、食管癌、胃癌、十二指肠癌、肝细胞癌、胆管癌、胆囊癌、胰腺癌、肾细胞癌、肾盂-输尿管癌、膀胱癌、阴茎癌、睾丸癌、子宫癌、阴道癌、外阴癌、皮肤癌、恶性骨肿瘤、软组织肉瘤、软骨肉瘤、白血病、骨髓增生异常综合征和多发性骨髓瘤。

[22]一种药物，其包含根据上述项[1]的通式(I)表示的化合物、其盐、其溶剂合物、其N-氧化物、或这些中任一种的前药，以及选自以下的至少一种：烷化剂、抗代谢物、抗癌抗生素、植物衍生的制剂、激素制剂、铂化合物、拓扑异构酶抑制剂、激酶抑制剂、免疫检查点抑制剂、抗CD20抗体、抗HER2抗体、抗EGFR抗体和抗VEGF抗体；

[23]预防和/或治疗癌症的方法，包括向需要预防和/或治疗癌症的患者给药有效量的根据上述项[1]的通式(I)表示的化合物、其盐、其溶剂合物、其N-氧化物、或这些中任一种的前药；

[24]预防和/或治疗癌症的方法，包括向需要预防和/或治疗癌症的患者施用有效量的根据上述项[1]的通式(I)表示的化合物、其盐、其溶剂合物、其N-氧化物、或这些中任一种的前药，并组合使用选自以下的至少一种：放射治疗、嵌和抗原受体T细胞治疗(CAR-T)、热疗、NK细胞治疗、或NKT细胞治疗；

[25]抑制Brk的方法，包括向需要抑制Brk的患者给药有效量的根据上述项[1]的通式(I)表示的化合物、其盐、其溶剂合物、其N-氧化物、或这些中任一种的前药；

[26]根据上述项[1]的通式(I)表示的化合物、其盐、其溶剂合物、其N-氧化物、或这些中任一种的前药，其用于预防和/或治疗癌症；和

[27]根据上述项[1]的通式(I)表示的化合物、其盐、其溶剂合物、其N-氧化物、或这些中任一种的前药在制备用于预防和/或治疗癌症的药物中的用途。

发明的有利效果

本发明的化合物对Brk具有抑制活性并且相比于其它激酶具有高Brk选择性，并因此为对涉及Brk的疾病(例如，癌症)具有优异的安全性的预防剂/治疗剂。

实施方案的描述

本发明在以下详细描述。

在将本说明书和权利要求书翻译成诸如英语的语言的描述中，除非另有定义，单数形式的术语包括复数形式，复数形式的术语包含单数形式。

在本说明书中，"3至15元环"是指"3至15元碳环"和"3至15元杂环"。

在本说明书中，"3至15元碳环"是指，例如，环丙烷、环丁烷、环戊烷、环己烷、环庚烷、环辛烷、环壬烷、环癸烷、环十一烷、环十二烷、环十三烷、环十四烷、环十五烷、环戊烯、环己烯、环庚烯、环辛烯、环戊二烯、环己二烯、环庚二烯、环辛二烯、苯、并环戊二烯、全氢并环戊二烯、薁、全氢薁、茚、全氢茚、茚满、萘、二氢萘、四氢萘、全氢萘、庚搭烯、全氢庚搭烯、亚联苯基、不对称-引达省、对称-引达省、苊烯、苊、芴、非那烯、菲、蒽、螺[4.4]壬烷、螺[4.5]癸烷、螺[5.5]十一烷、双环[2.2.1]庚烷、双环[2.2.1]庚-2-烯、双环[3.1.1]庚烷、双环[3.1.1]庚-2-烯、双环[2.2.2]辛烷、双环[2.2.2]辛-2-烯、双环[4.2.0]辛-1,3,5-三烯、2,3-二氢-1H-茚、1,2,3,4-四氢萘、6,7,8,9-四氢-5H-苯并[7]轮烯、5,6,7,8,9,10-六氢苯并[8]轮烯、2’,3’-二氢螺环丙烷-1,1’-茚、3’,4’-二氢-2’H-螺环丙烷-1,1’-萘、金刚烷、去甲金刚烷、立方烷环等。

在本说明书中，"3至15元杂环"是指，例如，吡咯、咪唑、三唑、四唑、吡唑、吡啶、吡嗪、嘧啶、哒嗪、氮杂二氮杂呋喃、吡喃、氧杂噻吩、噻喃、硫杂噁唑、异噁唑、噻唑、异噻唑、呋咱、噁二唑、噁嗪、噁二嗪、氧氮杂氧杂二氮杂噻二唑、噻嗪、噻二嗪、硫氮杂硫杂二氮杂吲哚、异吲哚、吲嗪、苯并呋喃、异苯并呋喃、苯并噻吩、异苯并噻吩、二硫杂萘、吲唑、喹啉、异喹啉、喹嗪、嘌呤、酞嗪、蝶啶、二氮杂萘、喹喔啉、喹唑啉、噌啉、苯并噁唑、苯并噻唑、苯并咪唑、色烯、苯并氧杂苯并氧氮杂苯并氧杂二氮杂苯并硫杂苯并硫氮杂苯并硫杂二氮杂苯并氮杂苯并二氮杂苯并呋咱、苯并噻二唑、苯并三唑、咔唑、β-咔啉、吖啶、吩嗪、二苯并呋喃、呫吨、二苯并噻吩、吩噻嗪、吩噁嗪、吩噁噻、噻蒽、菲啶、菲咯啉、呸啶、氮丙啶、氮杂环丁烷、吡咯啉、吡咯烷、咪唑啉、咪唑烷、三唑啉、三唑烷、四唑啉、四唑烷、吡唑啉、吡唑烷、二氢吡啶、四氢吡啶、哌啶、二氢吡嗪、四氢吡嗪、哌嗪、二氢嘧啶、四氢嘧啶、全氢嘧啶、二氢哒嗪、四氢哒嗪、全氢哒嗪、二氢氮杂四氢氮杂全氢氮杂二氢二氮杂四氢二氮杂全氢二氮杂氧杂环丙烷、氧杂环丁烷、二氢呋喃、四氢呋喃、二氢吡喃、四氢吡喃、二氢氧杂四氢氧杂全氢氧杂硫杂环丙环、硫杂环丁烷、二氢噻吩、四氢噻吩、二氢噻喃、四氢噻喃、二氢硫杂四氢硫杂全氢硫杂二氢噁唑、四氢噁唑(噁唑烷)、二氢异噁唑、四氢异噁唑(异噁唑烷)、二氢噻唑、四氢噻唑(噻唑烷)、二氢异噻唑、四氢异噻唑(异噻唑烷)、二氢呋咱、四氢呋咱、二氢噁二唑、四氢噁二唑(噁二唑烷)、二氢噁嗪、四氢噁嗪、二氢噁二嗪、四氢噁二嗪、二氢氧氮杂四氢氧氮杂全氢氧氮杂二氢氧杂二氮杂四氢氧杂二氮杂全氢氧杂二氮杂二氢噻二唑、四氢噻二唑(噻二唑烷)、二氢噻嗪、四氢噻嗪、二氢噻二嗪、四氢噻二嗪、二氢硫氮杂四氢硫氮杂全氢硫氮杂二氢硫杂二氮杂四氢硫杂二氮杂全氢硫杂二氮杂吗啉、硫吗啉、氧杂四氢噻喃、二氢吲哚、异二氢吲哚、二氢苯并呋喃、全氢苯并呋喃、二氢异苯并呋喃、全氢异苯并呋喃、二氢苯并噻吩、全氢苯并噻吩、二氢异苯并噻吩、全氢异苯并噻吩、二氢吲唑、全氢吲唑、二氢喹啉、四氢喹啉、全氢喹啉、二氢异喹啉、四氢异喹啉、全氢异喹啉、二氢酞嗪、四氢酞嗪、全氢酞嗪、二氢二氮杂萘、四氢二氮杂萘、全氢二氮杂萘、二氢喹喔啉、四氢喹喔啉、全氢喹喔啉、二氢喹唑啉、四氢喹唑啉、全氢喹唑啉、二氢噌啉、四氢噌啉、全氢噌啉、苯并氧杂硫杂环己烷、二氢苯并噁嗪、二氢苯并噻嗪、吡嗪并吗啉、二氢苯并噁唑、全氢苯并噁唑、二氢苯并噻唑、全氢苯并噻唑、二氢苯并咪唑、全氢苯并咪唑、二氢苯并氮杂四氢苯并氮杂二氢苯并二氮杂四氢苯并二氮杂苯并二氧杂环庚烷、二氢苯并氧氮杂四氢苯并氧氮杂二氢咔唑、四氢咔唑、全氢咔唑、二氢吖啶、四氢吖啶、全氢吖啶、二氢二苯并呋喃、二氢二苯并噻吩、四氢二苯并呋喃、四氢二苯并噻吩、全氢二苯并呋喃、全氢二苯并噻吩、二氧戊环、二噁烷、二硫戊环、二噻烷、二氧杂茚满、苯并二噁烷、色满、苯并二硫戊环、苯并二噻烷、氮杂螺[4.4]壬烷、氧氮杂螺[4.4]壬烷、二氧杂螺[4.4]壬烷、氮杂螺[4.5]癸烷、硫杂螺[4.5]癸烷、二硫杂螺[4.5]癸烷、二氧杂螺[4.5]癸烷、氧氮杂螺[4.5]癸烷、氮杂螺[5.5]十一烷、氧杂螺[5.5]十一烷、二氧杂螺[5.5]十一烷、氮杂双环[2.2.1]庚烷、氧杂双环[2.2.1]庚烷、氮杂双环[3.1.1]庚烷、氮杂双环[3.2.1]辛烷、氧杂双环[3.2.1]辛烷、氮杂双环[2.2.2]辛烷和二氮杂二环[2.2.2]辛烷环等。

在本说明书中，"卤素"是指氟、氯、溴和碘。

在本说明书中，"C1-4烷基"是指，例如，甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基和异丁基。

在本说明书中，"C2-4烯基"是指，例如，乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基等。

在本说明书中，"C2-4炔基"是指，例如，乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、3-丁炔基等。

在本说明书中，"C3-6环烷基"是指环丙基、环丁基、环戊基和环己基。

在本说明书中，"C1-4烷氧基"是指甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基和异丁氧基。

在本说明书中，"C1-4酰基"是指甲酰氧基、乙酰氧基、丙酰基、丁酰基、及它们的异构体。

在本说明书中，"C3-4支链烷基"是指异丙基、仲丁基、叔丁基和异丁基。

在本说明书中，"3-至6-元饱和杂环"是指，例如，氮丙啶、氮杂环丁烷、吡咯烷、哌啶、氧杂环丙烷、氧杂环丁烷、氧杂环戊烷(四氢呋喃)、噁烷(四氢吡喃)、硫杂环丙环、硫杂环丁烷、硫杂环戊烷(四氢噻吩)、硫杂环己烷(四氢噻喃)、吡唑烷、咪唑烷、二氧戊环、二硫戊环、噁唑烷、异噁唑烷、噻唑烷、异噻唑烷、六氢哒嗪、哌嗪、二噁烷、二噻烷、吗啉、硫吗啉环等。

在本说明书中，"5至6元单环芳环"是指，例如，吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、吡唑、噁唑、异噁唑、噻唑、异噻唑、三唑、噁二唑、噻二唑、呋咱、四唑、苯、吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪、三嗪、四嗪环等。

在本说明书中、"5至6元单环芳族杂环"是指，例如，吡咯、咪唑、三唑、四唑、吡唑、呋喃、噻吩、噁唑、异噁唑、噻唑、异噻唑、呋咱、噁二唑、噻二唑、吡啶、吡嗪、嘧啶、哒嗪环等。

在本说明书中、"9至10元双环芳环"是指，例如，萘、苯并呋喃、异苯并呋喃、苯并噻吩、异苯并噻吩、吲哚、异吲哚、吲嗪、苯并噁唑、苯并异噁唑、苯并噻唑、苯并异噻唑、吲唑、苯并咪唑、苯并呋咱、苯并噻二唑、苯并三唑、嘌呤、喹啉、异喹啉、酞嗪、蝶啶、二氮杂萘、喹喔啉、喹唑啉、噌啉、色烯、吡咯并吡啶、吡唑并吡啶、吡咯并嘧啶、吡唑并嘧啶、吡啶并嘧啶、三唑并吡啶、三唑并嘧啶、吡唑并三嗪环等。

在本说明书中，"可部分饱和的9至10元双环芳环"是指，例如，萘、苯并呋喃、异苯并呋喃、苯并噻吩、异苯并噻吩、吲哚、异吲哚、吲嗪、苯并噁唑、苯并异噁唑、苯并噻唑、苯并异噻唑、吲唑、苯并咪唑、苯并呋咱、苯并噻二唑、苯并三唑、嘌呤、喹啉、异喹啉、酞嗪、蝶啶、二氮杂萘、喹喔啉、喹唑啉、噌啉、色烯、吡咯并吡啶、吡唑并吡啶、吡咯并嘧啶、吡唑并嘧啶、吡啶并嘧啶、三唑并吡啶、三唑并嘧啶、吡唑并三嗪、茚满、2,3-二氢苯并呋喃、2,3-二氢苯并噻吩、二氢吲哚、2,3-二氢-1H-吲唑环等。

在本说明书中，"9至10元芳族杂环"是指，例如，吲哚、异吲哚、吲唑、嘌呤、苯并咪唑、苯并三唑、喹啉、异喹啉、酞嗪、蝶啶、二氮杂萘、喹喔啉、喹唑啉、噌啉环等。

在本说明书中，"5至6元饱和环状胺"是指，例如，吡咯烷、咪唑烷、三唑烷、四唑烷、哌啶、吡唑烷、全氢嘧啶、哌嗪、全氢哒嗪、四氢噁唑(噁唑烷)、四氢异噁唑(异噁唑烷)、四氢噻唑(噻唑烷)、四氢异噻唑(异噻唑烷)、四氢呋咱、四氢噁二唑(噁二唑烷)、四氢噁嗪、四氢噁二嗪、四氢噻二唑(噻二唑烷)、四氢噻嗪、四氢噻二嗪、吗啉、硫吗啉环等。

在本说明书中，

优选地为,

且更优选为,

在本说明书中，环1优选为5至6元单环芳环或可部分饱和的9至10元双环芳环，更优选为咪唑、吡唑、噁唑、异噁唑、噻唑、异噻唑、苯、吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪、苯并呋喃、苯并噻吩、吲哚、异吲哚、苯并噁唑、苯并噻唑、吲唑、苯并咪唑、喹啉、异喹啉、酞嗪、二氮杂萘、喹喔啉、喹唑啉、吡咯并吡啶、吡唑并吡啶、吡咯并嘧啶、吡唑并嘧啶、2,3-二氢苯并呋喃、或吡啶并嘧啶环，还更优选为苯、吡啶、苯并呋喃、吲哚、吲唑、苯并噻唑、喹啉、异喹啉、2,3-二氢苯并呋喃或吡咯并吡啶环，尤其优选为其中包含的杂原子仅为氮的9至10元芳族杂环，且最优选为吲哚或吲唑环。

在本说明书中，环2优选为5至6元单环芳环或可部分饱和的9至10元双环芳环，更优选为咪唑、吡唑、噁唑、异噁唑、噻唑、异噻唑、苯、吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪、苯并呋喃、苯并噻吩、吲哚、吲嗪、苯并噁唑、苯并噻唑、吲唑、苯并咪唑、苯并呋咱、喹啉、异喹啉、酞嗪、二氮杂萘、喹喔啉、茚满、二氢吲哚或喹唑啉环，还更优选为吡唑、噻唑、苯、吡啶、茚满、二氢吲哚或嘧啶环，尤其优选为苯或5至6元单环芳族杂环，且最优选为苯或吡唑环。

在本说明书中，环2的苯环优选为其中q为1以上的整数、至少一个R²为卤素的苯环，且更优选为其中q为2以上的整数、R²为卤素和SO₂R⁷中的至少一个的苯环。

在本说明书中，R¹优选为卤素、氧代、羟基、氰基、氨基、甲基、乙基、异丙基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基、乙氧基、异丙氧基、二氟甲氧基或三氟甲氧基，更优选为卤素、氧代、羟基、氰基、氨基、甲基、三氟甲基、甲氧基、二氟甲氧基、或三氟甲氧基，且最优选为卤素或氰基。

在本说明书中，p优选为0至4的整数，更优选为0或1。

在本说明书中，R³优选为甲基、乙基、异丙基、叔丁基、二氟甲基、三氟甲基、2,2,2-三氟乙基、环丙基、环丙基甲基、环丁基、环丁基甲基、环戊基、环戊基甲基、环己基、环己基甲基、氧杂环丁烷基、氧杂环丁烷基甲基、氧杂环戊烷基、或氧杂环戊烷基甲基，更优选为二氟甲基、异丙基、叔丁基、2,2,2-三氟乙基、环丁基、环戊基、或氧杂环丁烷基，还更优选为可取代有卤素的C3-4支链烷基，且尤其优选为异丙基。

在本说明书中，R³基团中的C3-6环烷基优选为环丁基或环戊基。

在本说明书中，R³基团中的3-至6-元饱和杂环优选为氮丙啶、氮杂环丁烷、吡咯烷、哌啶、氧杂环丙烷、氧杂环丁烷、氧杂环戊烷(四氢呋喃)、噁烷(四氢吡喃)、硫杂环丙环、硫杂环丁烷、硫杂环戊烷(四氢噻吩)、或硫杂环己烷(四氢噻喃)环、更优选为氮丙啶、氮杂环丁烷、吡咯烷、氧杂环丙烷、氧杂环丁烷、或氧杂环戊烷(四氢呋喃)环，且尤其优选为氧杂环丁烷环。

在本说明书中，r优选为0或1，更优选为0。

在本说明书中，s优选为0或1，更优选为0。

在本说明书中，R²优选为卤素、氧代、C(O)R⁶、SO₂R⁷、C1-4烷基或C1-4烷氧基，所述C1-4烷基或C1-4烷氧基可取代有选自以下的取代基：卤素、羟基、氰基、C(O)R⁸、NR⁹R¹⁰和SO₂R¹¹，更优选为卤素、氧代、乙酰基、甲基氨基羰基、二甲基氨基羰基、二甲基氨基乙氧基、4-吗啉基甲基、二甲基氨基羰基甲基、4-吗啉基羰基甲基、哌啶-1-羰基、2-(二甲基氨基)乙基氨基甲酰基、羧基、羧基甲基、2-羧基丙-2-基、甲基、二氟甲基、氰基甲基、二甲基氨基乙基、吗啉-4-羰基、2-羟基-2-甲基丙基、1,3-二羟基-2-甲基丙-2-基、甲氧基、2-氨基-2-氧代乙基、2-甲氧基-2-氧代乙基、甲基磺酰基、甲基磺酰基甲基、环丙基磺酰基、羧基甲基磺酰基、或3-(羧基甲基)磺酰基，且尤其优选为甲基、卤素或甲基磺酰基。

在本说明书中，R⁴和R⁵优选各自独立地为氢原子。

在本说明书中，R⁶优选为羟基、C1-4烷基或NR¹²R¹³，更优选为甲基、羟基、胺、甲基胺、二甲基胺、哌啶、哌嗪、二甲基氨基乙基胺、或吗啉，且尤其优选为甲基、羟基、甲基胺、二甲基胺、或哌嗪。

在本说明书中，R⁷优选为C1-4烷基或C3-6环烷基，更优选为甲基、乙基、环丙基、或环丁基，且尤其优选为甲基或环丙基。同时，上述优选的R⁷、更优选的R⁷和尤其优选的R⁷可各自独立地取代有CO₂R¹⁴。

在本说明书中，R⁸优选为羟基、甲氧基、乙氧基、胺、甲基胺、二甲基胺、哌啶、哌嗪、或吗啉，且更优选为羟基、甲氧基、胺、二甲基胺、或吗啉。

在本说明书中，R⁹和R¹⁰优选各自独立地为氢原子或甲基。

在本说明书中，通过R⁹和R¹⁰与它们连接的氮原子一起形成的5至6元饱和环状胺优选为吗啉。

在本说明书中，R¹¹优选为甲基、乙基、或环丙基，且更优选为甲基。

在本说明书中，R¹²和R¹³优选各自独立地为氢原子、甲基、或乙基，且优选R¹²和R¹³可各自独立地取代有NR¹⁵R¹⁶。

在本说明书中，R¹²和R¹³与它们连接的氮原子一起形成的5至6元饱和环状胺优选为哌嗪。

在本说明书中，R¹⁵和R¹⁶优选各自独立为氢原子、甲基、或乙基。

在本说明书中，R¹⁵和R¹⁶，与它们连接的氮原子一起形成的5至6元饱和环状胺优选为吗啉。

在本说明书中，q优选为1以上的整数，更优选为1至4的整数，还更优选为2或3，尤其优选为2。

在本说明书中，X优选为N。

在本说明书中，通式(I)优选为上述环1、环2、R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、R¹⁰、R¹¹、R¹²、R¹³、R¹⁵、R¹⁶、p、q、r、s、和每一个的优选含义的组合。

在本说明书中，通式(I)优选为通式(I-a)表示的化合物：

(其中，所有的符号均表示与上述项[1]所述的符号相同的含义)，其盐、其溶剂合物、其N-氧化物、或这些中任一种的前药。另一优选方面为通式(I-b)表示的化合物：

(其中，所有的符号均表示与上述项[1]所述的符号相同的含义)，其盐、其溶剂合物、其N-氧化物、或这些中任一种的前药。另一优选方面为通式(I-c)表示的化合物：

(其中，所有的符号均表示与上述项[1]所述的符号相同的含义)，其盐、其溶剂合物、其N-氧化物、或这些中任一种的前药。

在本说明书中，通式(I)的另一优选方面为通式(I-1)表示的化合物：

(其中，所有的符号均表示与上述项[1]或[4]所述的符号相同的含义)，其盐、其溶剂合物、其N-氧化物，或这些中任一种的前药，且通式(I-1)的优选方面为通式(I-d)表示的化合物：

(其中，所有的符号均表示与上述项[1]或[4]所述的符号相同的含义)，其盐、其溶剂合物、其N-氧化物、或这些中任一种的前药。通式(I-1)的另一优选方面为通式(I-e)表示的化合物：

(其中，所有的符号均表示与上述项[1]或[4]所述的符号相同的含义)，其盐、其溶剂合物、其N-氧化物，或这些中任一种的前药，且更优选方面为通式(I-f)表示的化合物：

(其中，环1-1表示5至6元单环芳环或可部分饱和的9至10元双环芳环，且所有其它符号表示与上述项[1]或[4]所述的符号相同的含义)、其盐、其溶剂合物、其N-氧化物、或这些中任一种的前药。另一更优选方面为通式(I-g)表示的化合物：

(其中，环2-1表示5至6元单环芳环或可部分饱和的9至10元双环芳环，且所有其它符号表示与上述项[1]或[4]所述的符号相同的含义)，其盐、其溶剂合物、其N-氧化物，或这些中任一种的前药，还更优选为通式(I-h)表示的化合物：

(其中，环1-1表示5至6元单环芳环或可部分饱和的9至10元双环芳环，环2-1表示5至6元单环芳环或可部分饱和的9至10元双环芳环，且所有其它符号表示与上述项[1]或[4]所述的符号相同的含义)，其盐、其溶剂合物、其N-氧化物、或这些中任一种的前药。

在本说明书中，在选自上述通式(I-a)、通式(I-b)、通式(I-c)、通式(I-1)、通式(I-d)、通式(I-e)、通式(I-f)、通式(I-g)和通式(I-h)的通式中，R³优选各自独立地为C1-4烷基、C3-6环烷基和3-至6-元饱和杂环，更优选为甲基、乙基、异丙基、叔丁基、环丁基和环氧杂环丁烷基，还更优选为可取代有卤素的C3-4支链烷基，且尤其优选为异丙基。上述优选的R³和更优选的R³可取代有卤素。

在本说明书中，通式(I)的另一方面最优选的为以下实施例所述的本发明所有化合物、其盐、其溶剂合物、其N-氧化物、或这些中任一种的前药。

在本说明书中，除非另有具体说明，所有异构体包括在本发明中。例如，烷基、烯基、炔基、烷氧基等包括直链和支链的基团。此外，由于环和稠合的环引起的所有异构体((E)-、(Z)-、顺-和反-形式)、由于存在不对称的碳等引起的所有异构体(R-、S-、α-和β-形式、对映异构体和非对映异构体)、具有旋光度的光学活性物质(D-、L-、d-和l-形式)、色谱分离得到的极性物质(极性较大和较小的物质)、平衡的化合物、旋转异构体、它们以任何比例的混合物和外消旋混合物包括在本发明中。此外，由于互变异构现象引起的异构体也都包括在本发明中。

在本说明书中，除非另有说明，符号：

表示取代基自纸面向里(换句话说，α-构型)，符号：

表示取代基自纸面向外(换句话说，β-构型)，且符号：

表示α-构型和β-构型的任意混合物，这对本领域技术人员来说是显而易见的。

[盐]

通式(I)表示的化合物可通过已知方法转化为盐。

盐优选为药物可接受的盐。

盐优选为水溶性盐。

盐的实例包括酸加成盐、碱金属盐、碱土金属盐、铵盐、胺盐等。

酸加成盐的实例包括无机酸盐，例如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、磷酸盐和硝酸盐，以及有机酸盐，例如乙酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、苯甲酸盐、柠檬酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、三氟乙酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐、羟乙基磺酸盐、葡糖醛酸盐和葡糖酸盐。

碱金属盐的实例包括钾盐、钠盐等。

碱土金属盐的实例包括钙盐、镁盐等。

铵盐的实例包括四甲基铵盐等。

胺盐的实例包括三乙胺盐、甲基胺盐、二甲基胺盐、环戊基胺盐、苄基胺盐、苯乙基胺盐、哌啶盐、单乙醇胺盐、二乙醇胺盐、三(羟基甲基)氨基甲烷盐、赖氨酸盐、精氨酸盐、N-甲基-D-葡糖胺盐等。

此外，本发明的化合物可通过任意方法转化为N-氧化物。N-氧化物表示通过氧化通式(I)表示的化合物中的氮原子得到的化合物。具体地，当通式(I)中所示的X、Y和Z各自独立地表示氮原子时，N-氧化物是指该氮原子和嘧啶中的氮原子中的至少一个被氧化的化合物，当环1、环2以及取代基R³是含氮杂环时，N-氧化物是指其中氮原子被氧化的化合物，且当取代基R¹和R²包含氮原子时，N-氧化物是指其中氮原子被氧化的化合物。

通式(I)表示的化合物及其盐也可转化为溶剂合物。

溶剂合物优选为无毒和水溶性溶剂合物。合适的溶剂合物的实例包括水的溶剂合物和基于醇的溶剂的溶剂合物(如乙醇的溶剂合物)。当形成溶剂合物时，该化合物可与任意数目的溶剂分子配位。

[前药]

由通式(I)表示的化合物的前药是指在体内通过酶、胃酸等引起的反应转化成由通式(I)表示的化合物的化合物。通式(I)表示的化合物的前药的实例包括：当通式(I)表示的化合物具有氨基时，通过使通式(I)表示的化合物中的氨基酰化、烷基化或磷酸化而获得的化合物(例如，通过使通式(I)表示的化合物的氨基二十烷酰化、丙氨酰化、戊基氨基羰基化、(5-甲基-2-氧代-1,3-二氧杂环戊烯-4-基)甲氧基羰基化、四氢呋喃基化、吡咯烷基甲基化、新戊酰基氧基甲基化、乙酰氧基甲基化、叔丁基化等获得的化合物)；当由通式(I)表示的化合物具有羟基时，通过使通式(I)表示的化合物中的羟基被酰化、烷基化、磷酸化或硼酸化获得的化合物(例如，通过使通式(I)表示的化合物中的羟基被乙酰化、棕榈酰化、丙酰化、新戊酰化、琥珀酰化、富马酰化、丙氨酰化、二甲基氨基甲基羰基化等获得的化合物)；当由通式(I)表示的化合物具有羧基时，通过使通式(I)表示的化合物中的羧基酯化或酰胺化获得的化合物(例如，通过使通式(I)表示的化合物中的羧基为乙酯、苯酯、羧甲酯、二甲基氨基甲酯、新戊酰氧甲酯、1-{(乙氧基羰基)氧基}乙基酯、酞基酯、(5-甲基-2-氧代-1,3-二氧杂环戊烯-4-基)甲基酯、1-{[(环己基氧基)羰基]氧基}乙基酯、甲基酰胺等获得的化合物)；等等。这些化合物可以通过本身已知的方法制备。此外，由通式(I)表示的化合物的前药可以是溶剂化物或非溶剂化物。此外，通式(I)表示的化合物的前药可以是在生理条件转化为通式(I)表示的化合物的化合物，如"Iyakuhin no kaihatsu(Development ofMedicaments)",Vol.7,"Bunshi sekkei(Molecular Design)",163-198页,Hirokawa-Shoten Ltd.1990年出版所述。

而且，构成通式(I)表示的化合物的各个原子也可被同位素(如²H、³H、¹³C、¹⁴C、¹⁵N、¹⁶N、¹⁷O、¹⁸O、¹⁸F、³⁵S、³⁶Cl、⁷⁷Br和¹²⁵I等)代替。

[本发明的化合物的制备方法]

由通式(I)表示的本发明化合物可以通过已知方法制备。例如，本发明的化合物可以通过以下制备：适当地改进“Comprehensive Organic Transformations：A Guide toFunctional Group Preparations”第2版(Richard C.Larock，John Wiley&Sons Inc，1999)中描述的方法、等同于其的方法、或实施例等中描述的方法或组合这些方法。同时，在以下各个制备方法中，可以使用盐形式的原料化合物。所使用的盐的实例包括作为通式(I)表示的化合物的药学上可接受的盐所述的那些。

在本发明的通式(I)表示的化合物中，以下化合物可通过下面反应方案I所示的方法制备，在该化合物中：

为

反应方案I

(其中，W表示卤素，PG表示氨基保护基，BY₂表示硼酸或硼酸酯，且其他符号表示与上述项[1]或[4]所述的符号相同的含义)。

具有氨基、羧基或羟基的本发明的化合物可如下制备。至Buchwald-Hartwig之前的反应，或上述反应方案I所示的取代反应II通过以下方式进行的，即视需要使用通常用于这些基团的保护基保护的化合物，所述保护基为例如，"Comprehensive OrganicTransformations：A Guide to Functional Group Preparations 2nd Edition(RichardC.Larock，John Wiley&Sons Inc，1999)"中所述的保护基，然后，进行已知的脱保护反应，或，例如，进行"Comprehensive Organic Transformations：A Guide to FunctionalGroup Preparations 2nd Edition(Richard C.Larock，John Wiley&Sons Inc，1999)"中所述的脱保护反应。

在本说明书中，当PG为氨基保护基时"氨基保护基"的实例包括"ComprehensiveOrganic Transformations：A Guide to Functional Group Preparations 2nd Edition(Richard C.Larock，John Wiley&Sons Inc，1999)"中所述的保护基。

在反应方案I中，从通式(II)表示的化合物制备通式(III)表示的化合物的反应步骤(卤化)可通过本说明书所述的方法或已知方法进行。

在反应方案I中，从通式(III)表示的化合物制备通式(IV)表示的化合物的反应步骤(胺化)可通过本说明书所述的方法或已知方法进行。

在反应方案I中，从通式(VI)表示的化合物制备通式(V)表示的化合物的反应步骤(烷基化)可通过本说明书所述的方法或已知方法进行。

在反应方案I中，从通式(V)表示的化合物制备通式(VI)表示的化合物的反应步骤(脱保护)可通过本说明书所述的方法或已知方法进行。

在反应方案I中，从通式(VI)表示的化合物制备通式(VII)表示的化合物的反应步骤(Suzuki-Miyaura偶联)可通过本说明书所述的方法或已知方法进行。

在反应方案I中，从通式(VII)表示的化合物制备通式(I-2)表示的化合物的反应步骤(Buchwald-Hartwig反应)可通过本说明书所述的方法或已知方法进行。

另一方面，在反应方案I中，通式(I-2)表示的化合物也可通过以下反应步骤制备：从通式(VII)表示的化合物制备通式(VIII)表示的化合物的反应步骤(取代反应I)、从通式(VIII)表示的化合物制备通式(IX)表示的化合物的反应步骤(氧化反应)、从通式(IX)表示的化合物进行的取代反应II，且视需要进行的脱保护反应。上述取代反应I、氧化反应和取代反应II可通过本说明书所述的方法或已知方法进行。

在本发明的通式(I)表示的化合物中，以下化合物可通过以下反应方案II所示的方法制备，在该化合物中：

为

反应方案II

(其中，W表示卤素，PG表示氨基保护基，BY₂各自独立地表示硼酸或硼酸酯，且其他符号表示与上述项[1]所述的符号相同的含义)。

具有氨基、羧基或羟基的本发明的化合物可如下制备。上述反应方案中所述的Suzuki-Miyaura偶联反应通过以下方式进行，即视需要使用通常用于这些基团的保护基保护的化合物，所述保护基为例如，"Comprehensive Organic Transformations：A Guide toFunctional Group Preparations 2nd Edition(Richard C.Larock，John Wiley&SonsInc，1999)"中所述的保护基，然后，进行已知的脱保护反应，或，例如进行"ComprehensiveOrganic Transformations：A Guide to Functional Group Preparations 2nd Edition(Richard C.Larock，John Wiley&Sons Inc，1999)"中所述的脱保护反应。

在反应方案II中，从通式(X)表示的化合物制备通式(XI)表示的化合物的反应步骤(胺化反应)可通过本说明书所述的方法或已知方法进行。

在反应方案II中，从通式(XI)表示的化合物制备通式(XII)表示的化合物的反应步骤(Buchwald-Hartwig反应)可通过本说明书所述的方法或已知方法进行。

在反应方案II中，从通式(XII)表示的化合物制备通式(XIII)表示的化合物的反应步骤(卤化反应)可通过本说明书所述的方法或已知方法进行。

在反应方案II中，从通式(XIII)表示的化合物制备通式(XVI)表示的化合物的反应步骤(Suzuki-Miyaura偶联反应)可通过本说明书所述的方法或已知方法进行。

在反应方案II中，从通式(XIV)表示的化合物制备通式(XV)表示的化合物的反应步骤(脱保护反应)可通过本说明书所述的方法或已知方法进行。

在反应方案II中，从通式(XV)表示的化合物制备通式(XVI)表示的化合物的反应步骤(卤化反应)可通过本说明书所述的方法或已知方法进行。

在反应方案II中，从通式(XVI)表示的化合物制备通式(I-3)表示的化合物的反应步骤(Suzuki-Miyaura偶联反应)可通过本说明书所述的方法或已知方法进行。

在反应方案I和II中，胺化反应是已知的，且例如通过以下方式进行：使用相应的胺化合物，在有机溶剂中(如甲醇、乙醇、异丙醇、N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、四氢呋喃、二噁烷、二氯甲烷和氯仿等)或在不存在溶剂的情况下，在存在或不存在碱的情况下(如三乙胺、二异丙基乙基胺、碳酸铯、碳酸钾和碳酸钠等)，在0℃至回流。

在反应方案I和II中，卤化反应是已知的，且例如通过以下进行：使用卤化剂(如N-碘代琥珀酰亚胺、N-溴代琥珀酰亚胺、N-氯琥珀酰亚胺、1,3-二碘代-5,5-二甲基乙内酰脲、1,3-二溴-5,5-二甲基乙内酰脲和1,3-二氯-5,5-二甲基乙内酰脲等)，在有机溶剂中(如二氯甲烷、氯仿、甲醇、四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺、乙腈和乙酸乙酯等)，在存在或不存在酸的情况下(如硫酸和乙酸等)，在温度为-70℃至120℃。

在反应方案I和II中，烷基化反应是已知的，且例如，烷基化可通过将化合物进行Mitsunobu反应而进行。Mitsunobu反应是已知的，且例如通过以下方式进行：使用相应的醇化合物，在有机溶剂中(如二氯甲烷、乙醚、四氢呋喃、乙腈、苯、甲苯、或它们中的两种或更多种的混合溶剂等)，在偶氮化合物(如偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)、偶氮二甲酸二异丙基酯、1,1’-(偶氮二羰基)二哌啶和1,1’-偶氮二(N,N-二甲基甲酰胺)等)和膦化合物(如三苯基膦、三丁基膦、三甲基膦和聚合物-支持的三苯基膦等)的存在下，在0至60℃。

此外，烷基化也可通过使用烷基卤化物进行。使用烷基卤化物的烷基化是已知的，且通过以下进行：使用相应的烷基卤化物(如碘化物、溴化物和氯化物等)，在有机溶剂(如二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、乙腈和N,N-二甲基甲酰胺等)中，在碱(如三乙胺、二异丙基胺、碳酸钾和碳酸铯等)的存在下，在0℃至回流。

在反应方案I和II中，脱保护反应是已知的，且可如下进行。

氨基保护基的实例包括苄基氧基羰基、叔丁氧基羰基、烯丙基氧基羰基(Alloc)基团、1-甲基-1-(4-联苯基)乙氧基羰基(Bpoc)基团、三氟乙酰基、9-芴基甲氧基羰基、苄基(Bn)基团、对甲氧基苄基、苄基氧基甲基(BOM)基团、2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基(SEM)基团等。

保护基并不特别限于上述那些，只要能够容易且有选择地除去保护基既可。例如，使用Green's Protective Groups in Organic Synthesis，第五版(Peter G.M.Wuts，JohnWiley&Sons Inc，2014)中描述的保护基团。

保护基的脱保护反应是众所周知的且脱保护反应的实例包括,

(1)碱性水解；

(2)酸性条件下的脱保护反应；

(3)通过氢解的脱保护反应；

(4)使用氟离子的脱保护反应；

(5)使用金属的脱保护反应；

(6)使用金属复合物的脱保护反应；等。

这些方法如下具体描述：

(1)通过碱性水解的脱保护反应例如如下进行的：在有机溶剂中(如甲醇，四氢呋喃和二噁烷)，使用碱金属氢氧化物(如氢氧化钠、氢氧化钾和氢氧化锂)、碱土金属氢氧化物(如氢氧化钡和氢氧化钙)、碳酸盐(如碳酸钠和碳酸钾)、其水溶液或其混合物，在0至40℃的温度。

(2)在酸性条件下的脱保护反应例如如下进行：在有机溶剂中(如二氯甲烷、氯仿、二噁烷、乙酸乙酯和苯甲醚)，在有机酸(如乙酸、三氟乙酸、甲磺酸和对甲苯磺酸)、无机酸(如盐酸和硫酸)或其混合物(如氢溴酸/乙酸)中，在0至100℃的温度。

(3)通过氢解的脱保护反应例如如下进行：在溶剂中(如醚溶剂(如四氢呋喃、二噁烷、二甲氧基乙烷和乙醚)、基于醇的溶剂(如甲醇和乙醇)、基于苯的溶剂(如苯和甲苯)、基于酮的溶剂(如丙酮和甲基乙基酮)、基于腈的溶剂(如乙腈)、基于酰胺的溶剂(如二甲基甲酰胺)、水、乙酸乙酯、乙酸或它们中两种或更多种的混合溶剂)，在催化剂的存在下(如钯/炭、钯黑、氢氧化钯、氧化铂和阮内镍)，在氢气中在正常压力或在加压情况下，或在甲酸铵的存在下，在0至200℃的温度。

(4)使用氟离子的脱保护反应例如如下进行：在水可混溶的有机溶剂(如四氢呋喃和乙腈)中，使用氟化四丁铵，在0至40℃的温度。

(5)使用金属的脱保护反例如如下进行：在酸性溶剂(如乙酸，pH 4.2至7.2的缓冲液溶液或该溶液和有机溶剂如四氢呋喃的混合溶液中)，在锌粉的存在下，在0至40℃的温度，并且视需要同时施加超声波。

(6)使用金属复合物的脱保护反应例如如下进行：在有机溶剂(如二氯甲烷、二甲基甲酰胺、四氢呋喃、乙酸乙酯、乙腈、二噁烷和乙醇)、水或它们的混合溶剂中，在捕集试剂(如三丁基氢化锡、三乙基硅烷、双甲酮、吗啉、二乙基胺和吡咯烷)、有机酸(如乙酸、甲酸和2-乙基己酸)和/或有机酸盐(如2-乙基己酸钠和2-乙基己酸钾)的存在下，在存在或不存在基于膦的试剂(如三苯基膦)的情况下，使用金属复合物(如四三苯基膦钯(0)、二(三苯基膦)二氯化钯(II)、乙酸钯(II)和氯三(三苯基膦)铑(I))，在0至40℃的温度。

除了上述方法，脱保护反应可通过，例如，Green’s Protective Groups inOrganic Synthesis,Fifth Edition(Peter G.M.Wuts,John Wiley&Sons Inc,2014)中所述的方法进行。

本领域技术人员可容易理解，本发明的感兴趣的化合物可很容易地通过恰当使用这些脱保护反应来制备。

在反应方案I和II中，Suzuki-Miyaura偶联反应是已知的，且例如通过以下方式使用相应的硼化合物进行该反应：在有机溶剂中(如苯、甲苯、二甲基甲酰胺、二噁烷、四氢呋喃、甲醇、乙腈、二甲氧基乙烷和丙酮)、在碱(如乙醇钠、氢氧化钠、氢氧化钾、三乙胺、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸铯、碳酸铊、磷酸钾、氟化铯、氢氧化钡和氟化四丁铵)或其水溶液或其混合物的存在下、在催化剂(如(四(三苯基膦)钯(Pd(PPh₃)₄)、二氯化二(三苯基膦)钯(PdCl₂(PPh₃)₂)、乙酸钯(Pd(OAc)₂)、钯黑、[1,1'-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯合钯(PdCl₂(dppf)₂)、二氯化二烯丙基钯(PdCl₂(烯丙基)₂)和碘化苯基二(三苯基膦)钯(PhP二(PPh₃)₂))的存在下，在室温至120℃。

在反应方案I和II中，Buchwald-Hartwig反应是已知的，且例如通过以下方式使用相应的胺化合物进行该反应：在有机溶剂(如二噁烷、甲苯、二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜、叔丁醇，或这些有机溶剂的合适混合溶剂)中，在钯催化剂(如乙酸钯、氯化烯丙基钯(II)二聚体(Pd₂Cl₂(烯丙基)₂)和三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(Pd₂(dba)₃))，和磷配体(如三苯基膦、三丁基膦、三环己基膦、Xantphos和Xphos)的存在下，在碱(如碳酸钾、碳酸铯、丁醇钠和磷酸钾)的存在下，在室温至约180℃的温度。

在反应方案I中，取代反应I是已知的，且例如如下进行：使用相应的硫醇或相应的金属硫代醇盐(thioalkoxide)，在有机溶剂(如二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺、甲醇、乙醇、异丙醇和四氢呋喃)中、在水中或在它们的混合溶剂中，在存在或不存在碱(如三乙胺和二异丙基乙基胺)的情况下，在0℃至回流。

在反应方案I中，硫的氧化反应是已知的，且例如如下进行：在有机溶剂(如二氯甲烷、氯仿、苯、己烷、甲醇、叔丁醇、丙酮、乙腈、四氢呋喃、乙酸和N,N-二甲基甲酰胺)中、在水中或在它们的混合溶剂中，在过量氧化剂(如过氧化氢、高碘酸钠、亚硝酸酰基酯(acylnitrite)、过硼酸钠、次氯酸钠、过酸(如3-氯过苯甲酸和过乙酸)、过硫酸氢钾制剂(oxone)(商品名，在以下缩写为oxone；过氧单硫酸钾)、高锰酸钾、铬酸和二甲基二氧戊环)的存在下，在存在或不存在氧化催化剂(如七钼酸六铵四水合物((NH₄)₆Mo₇O₂₄·4H₂O))的情况下，在20至60℃的温度。

在反应方案I中，取代反应II是已知的，且例如如下进行：使用相应的胺，在有机溶剂(如N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、乙醇、异丙醇、乙腈和四氢呋喃)中，在存在或不存在碱(如三乙胺、二异丙基胺和叔丁醇钠)的情况下，在0℃至回流。

在反应方案中，用作起始材料的通式(II)、通式(X)、通式(R-1)、通式(R-2)、通式(R-2-2)和通式(R-3)表示的化合物是已知的或可容易地通过使用已知方法制备，例如，在"Comprehensive Organic Transformations：A Guide to Functional GroupPreparations 2nd Edition(Richard C.Larock，John Wiley&Sons Inc，1999)"中所述的方法。

在由通式(I)表示的本发明的化合物中，除了上述化合物以外的化合物可以通过组合本说明书中的实施例中所述的方法或已知方法制备，例如"Comprehensive OrganicTransformations：A Guide to Functional Group Preparations 2nd Edition(RichardC.Larock，John Wiley&Sons Inc，1999)"中所述的方法。

在本说明书中，涉及在反应中加热的各反应可以通过使用本领域技术人员显而易见的水浴、油浴、沙浴或微波来进行。

在本说明书中，在各反应中可以适当地使用由高分子聚合物(如聚苯乙烯、聚丙烯酰胺、聚丙烯和聚乙二醇)支持的固相支持试剂。

在本说明书中，每个反应中的反应产物可以通过常规纯化方法纯化。纯化方法的实例包括在常压或减压下蒸馏，使用硅胶或硅酸镁的高效液相色谱法、薄层色谱法、离子交换树脂、清除树脂、柱色谱法、或诸如洗涤、重结晶的方法等。可以在每个反应中进行纯化，或者可以在几个反应完成后进行纯化。

[毒性]

本发明的化合物的毒性低，因此，本发明的化合物可被安全地用作药物。

[药物应用]

本发明的化合物具有Brk抑制活性，因此，本发明的化合物可用作预防和/或治疗Brk-相关疾病例如癌症等的药物。

癌症的更多具体实例包括乳腺癌，卵巢癌，大肠癌(如，结肠癌)、肺癌(如非小细胞肺癌)、前列腺癌、头颈癌(如口腔鳞状上皮细胞癌症、头颈鳞状上皮细胞癌症、咽癌、喉癌、舌癌、甲状腺癌和听神经神经鞘瘤)、淋巴瘤(如B-细胞淋巴瘤和T-细胞淋巴瘤)、脑肿瘤、神经胶质瘤、垂体腺瘤、眼色素层恶性黑素瘤、脑膜瘤、胸腺瘤、间皮瘤、食管癌、胃癌、十二指肠癌、肝细胞癌、胆管癌、胆囊癌、胰腺癌、肾细胞癌症、肾盂-输尿管癌、膀胱癌、阴茎癌、睾丸癌、子宫癌、阴道癌、外阴癌、皮肤癌(如恶性黑素瘤(黑素瘤))、恶性骨肿瘤、软组织肉瘤、软骨肉瘤、白血病(如急性骨髓性白血病、急性淋巴细胞性白血病、慢性骨髓性白血病和慢性淋巴细胞性白血病)、骨髓增生异常综合征、多发性骨髓瘤等。

本发明的化合物可以与其它药物组合以作为组合药剂施用，目的是：

1)补充和/或增强化合物的预防和/或治疗效果，

2)改善动力学吸收，以及降低化合物剂量，和/或

3)减少化合物的副作用。

本发明化合物与其他药物的组合药剂可以以配合剂(compounding agent)的形式给药，其中两种成分在制剂中混合，或者可以通过单独的制剂给药。通过单独的制剂给药的情况包括共同给药和以一定时间差给药。另外，在以一定时间差给药的情况下，可以首先给予本发明的化合物，然后给予其他药物。或者，可以首先施用其他药物，然后施用本发明的化合物。施用本发明化合物的方法和施用其他药物的方法可以相同或不同。

对上述组合药剂所针对的、表现出预防和/或治疗效果的疾病没有特别限制，只要该疾病是本发明化合物对其具有补充和/或增强的预防和/或治疗效果的疾病。

用于补充和/或增强本发明的化合物对癌症的预防和/或治疗作用的其它药物的实例包括烷化剂、抗代谢物、抗癌抗生素、植物衍生的制剂、激素制剂、铂化合物、拓扑异构酶抑制剂、激酶抑制剂、免疫检查点抑制剂、抗CD20抗体、抗HER2抗体、抗EGFR抗体、抗VEGF抗体、其它抗癌药等。

烷化剂的实例包括环磷酰胺、异环磷酰胺、达卡巴嗪、尼莫司汀盐酸盐、雷莫司汀、苯达莫司汀、塞替派、卡波醌等。

抗代谢物的实例包括甲氨蝶呤、培美曲塞、氟尿嘧啶、替加氟、替加氟/尿嘧啶、替加氟/吉美嘧啶/奥替拉西钾(potassium otastat)、去氧氟尿苷、卡培他滨、阿糖胞苷、盐酸吉西他滨、氟达拉滨、奈拉滨、卡莫氟、盐酸丙卡巴肼等。

抗癌抗生素的实例包括丝裂霉素C、盐酸多柔比星、盐酸阿柔比星、盐酸吡柔比星、表柔比星、色霉素A3、博来霉素、硫酸培洛霉素、吡柔比星等。

植物衍生的制剂的实例包括盐酸伊立替康、依托泊苷、硫酸长春新碱、硫酸长春碱、硫酸长春地辛、二酒石酸长春瑞滨、多西紫杉醇水合物、甲磺酸艾日布林、紫杉醇等。

激素制剂的实例包括雌莫司汀磷酸酯钠、氟他胺、比卡鲁胺、乙酸戈舍瑞林、乙酸亮丙瑞林、柠檬酸他莫昔芬、柠檬酸托瑞米芬、阿那曲唑、来曲唑、依西美坦、美雄烷、醋酸甲羟孕酮、环硫雄醇、磷雌酚、盐酸法倔唑水合物、阿比特龙、氟维司群、氨鲁米特等。

铂化合物的实例包括卡铂、顺铂、奈达铂、奥沙利铂等。

拓扑异构酶抑制剂的实例包括拓扑替康、索布佐生等。

激酶抑制剂的实例包括EGFR抑制剂(包括埃罗替尼、吉非替尼和阿法替尼)、HER2抑制剂(包括拉帕替尼)、BCR-ABL抑制剂(包括伊马替尼)、ALK抑制剂(包括克唑替尼)、多激酶抑制剂(包括瑞戈非尼(regorafenib)和达沙替尼(dasatinib))等。

免疫检查点抑制剂的实例包括抗-CTLA-4抗体(包括易普利单抗)、抗-PD-1抗体(包括纳武单抗和派姆单抗)、抗-PD-L1抗体(包括RG7446/MPDL3280A、MSB0010718C和MEDI4736)等。

抗CD20抗体的实例包括利妥昔单抗、替伊莫单抗、替伊莫单抗、奥瑞珠单抗等。

抗HER2抗体的实例包括抗曲妥单抗，曲妥单抗emtansine，帕妥珠单抗等。

抗EGFR抗体的实例包括抗西妥昔单抗、帕尼单抗等。

抗VEGF抗体的实例包括抗贝伐单抗等。

对本发明的化合物和其它药物的质量比没有特别限制。

任意两种或更多种其他药物可以组合施用。

另外，用于补充和/或增强本发明化合物的预防和/或治疗效果的其它药物不仅包括迄今为止已经发现的药物，而且还包括将来基于上述机理发现的那些。

与本发明的化合物组合用于预防和/或治疗癌症的其它治疗方法的实例包括放射疗法(例如X射线、γ射线、电子束、质子束和重离子)、嵌合抗原受体T细胞疗法(CAR-T)、热疗、NK细胞疗法、NKT细胞疗法等。

为了将本发明的化合物作为单一药剂或组合药剂(其将本发明化合物与其他药物组合)使用以用于预防和/或治疗上述疾病的目的，作为活性成分的物质通常与各种药学上可接受的载体如添加剂和溶剂一起配制，并且以口服制剂或肠胃外制剂的形式全身或局部给药。这里，药学上可接受的载体是指通常用于配制药物的活性成分以外的物质。优选药学上可接受的载体在一剂(dose)制剂中不显示药理作用，是无害的，并且不干扰活性成分的治疗效果。此外，药学上可接受的载体也可用于提高活性成分和制剂的效用的目的，使配制容易，稳定质量，改善可用性等。具体而言，可以根据目的适当地选择2000年出版的“Iyakuhin tenkabutsu jiten(Japanese Pharmaceutical Excipients Directory)(由Japan pharmaceutical Excipients Council编辑)，YAKUJI NIPPO LIMITED等中描述的物质。

用于给药的剂型包括，例如，口服制剂(例如：片剂、胶囊、颗粒剂、粉剂、口服溶液、糖浆剂、口服胶冻剂等)、口腔黏膜制剂(例如：口腔黏膜应用的片剂、口腔黏膜应用的喷雾剂、口腔黏膜应用的半固体制剂、漱口剂等)、用于注射的制剂(例如：注射剂等)、用于透析的制剂(例如：透析剂等)、用于吸入的制剂(例如：吸入剂等)、用于眼部应用的制剂(例如：眼用液体和溶液、眼用软膏等)、耳部应用的制剂(例如：耳制剂等)、鼻应用的制剂(鼻制剂等)、用于直肠的制剂(例如：栓剂、用于直肠应用的半固体制剂、用于直肠应用的灌肠剂等)、用于阴道应用的制剂(例如：用于阴道应用的片剂、用于阴道应用的栓剂等)和用于皮肤应用的制剂(例如：用于皮肤应用的固体制剂、用于皮肤应用的液体和溶液、喷雾剂、软膏剂、乳膏剂、凝胶剂、贴剂等)。

[口服制剂]

口服制剂包括，例如，片剂、胶囊、颗粒剂、粉剂、口服给药的液体和溶液、糖浆剂、口服给药的胶冻剂等。作为口服制剂，存在立即释放剂型和改性释放剂型，立即释放剂型显示活性物质的释放模式没有被有意改性，改性释放剂型是显示活性物质经改性的释放模式的制剂，其通过特定制剂设计和/或制造方法加以适当改性以适用于所需目的。改性释放剂型包括肠溶包衣和延长释放制剂。肠溶包衣(缓释)制剂不在胃中而是主要在肠中释放大量活性物质，为了防止活性物质在胃中降解或分解，或减少活性物质对胃的刺激。肠溶包衣制剂通常用酸不溶的肠膜包衣。延长释放制剂旨在控制活性物质的释放速率和释放时间，并将释放限制在胃肠道中的适当部位以降低给药频率和/或减少不良反应或副作用。延长释放制剂通常通过使用合适的、延长活性物质释放的试剂来制备。口服剂型例如胶囊、颗粒剂和片剂可用合适的包衣剂例如糖、糖醇或聚合物进行包衣，以达到易于吞咽或预防活性物质降解的目的。

(1)片剂

片剂是旨在口服给药的具有所需形状和大小的固体制剂，除了通常所称的片剂(例如素片、薄膜包衣片剂、糖衣片剂、多层片剂和加压包衣片剂等)之外，还包括口服崩解片、咀嚼片、泡腾片、可分散片、可溶片剂。素片通常根据以下方法(a)、(b)和(c)制备：

(a)均匀混合活性物质和赋形剂(例如稀释剂、粘合剂和崩解剂)、通过合适的方法用水或粘合剂溶液制粒、与润滑剂混合，然后压制成所需形状和大小；

(b)均匀混合活性物质和赋形剂(例如稀释剂、粘合剂和崩解剂)，然后直接压缩成型或在将活性物质和润滑剂添加到之前由赋形剂制备的颗粒中并混合均匀之后再压缩；

(c)均匀混合活性物质和赋形剂(例如稀释剂和粘合剂)，用溶剂润湿，形成一定的形状或大小，然后通过合适的方法干燥；

薄膜包衣片通常可通过使用合适的包衣剂(例如聚合物)包衣素片来制备。糖衣片剂通常可通过使用合适的包衣剂(包括糖和糖醇)包衣素片来制备。多层片剂可通过合适的方法压缩不同组成的颗粒形成多层片剂来制备。加压包衣片剂可通过压缩颗粒以覆盖具有不同组成的内核片剂进行制备。此外，片剂可通过合适的公知方法制备成肠溶包衣片剂或定时释放片。口服崩解片、咀嚼片、泡腾片、可分散片、可溶片剂是通过选择合适的赋形剂而增加不同功能的片剂，且可根据所述方法制备。口服崩解片是在口腔中快速溶解或崩解的片剂；咀嚼片是通过咀嚼给药的片剂；泡腾片是在水中快速溶解或起泡分散的片剂；可分散片是分散在水中之后进行给药的片剂；可溶片剂是溶于水中之后给药的片剂。泡腾片可使用合适的酸性物质和使用碳酸盐或碳酸氢盐作为赋形剂来制备。

(2)胶囊

胶囊是用于口服给药的包封在胶囊中或用胶囊基质包裹的制剂。胶囊分为硬胶囊和软胶囊。硬胶囊可通过以下方法制备：将活性物质与稀释剂和其他合适的赋形剂的均匀混合物，或通过合适的方法制备的颗粒或成型物质按原样或稍微压缩后填充到胶囊壳中。软胶囊可通过以下方法制备：将活性物质和合适的赋形剂混合，用合适的胶囊基质(例如明胶)包封，通过加入甘油、D-山梨糖醇等增塑，并模制成合适的形状和大小。胶囊可通过合适的已知方法制备成肠溶包衣或延长释放胶囊。可将着色剂和防腐剂等加至胶囊基质中。

(3)颗粒剂

颗粒剂是通过制粒制备的制剂，除了通常所称的颗粒剂之外，还包括泡腾颗粒剂。颗粒剂可通过以下方法(a)、(b)和(c)制备；

(a)向粉末活性物质中加入稀释剂、粘合剂、崩解剂或其他合适的赋形剂，通过合适的方法混合至均质并制粒；

(b)向之前制粒的活性物质中加入赋形剂(例如稀释剂)并混合至均质；

(c)向之前制粒的活性物质中加入赋形剂(例如稀释剂)，并通过合适的方法制粒；

颗粒剂可根据需要进行包衣并可制备成肠溶包衣颗粒剂或延长释放颗粒剂。泡腾颗粒剂可使用合适的酸性物质和碳酸盐或碳酸氢盐等赋形剂制备。泡腾颗粒剂是在水中快速溶解或起泡分散的颗粒剂。颗粒剂可通过调整粒径制备成细颗粒剂。

(4)粉剂

粉剂是粉末形式的制剂，通常通过将活性物质与稀释剂或其它合适的赋形剂均匀混合制备。

(5)口服给药的液体和溶液

用于口服给药的液体和溶液是液体形式或可流动且粘稠的凝胶状态的制剂，除了通常所称的口服给药的液体和溶液外，还包括酏剂、混悬液、乳液和清凉剂(lemonade)。用于口服给药的液体和溶液通常通过将活性物质与赋形剂一起溶解、乳化或悬浮在纯净水中，并根据需要通过过滤来制备。酏剂是含乙醇的澄清、甜味和芳香的液体制剂且通常通过以下方式进行制备：将固体活性物质或它们的提取物溶于乙醇或纯净水中，加入芳香剂和蔗糖、其他糖或甜味剂，并通过过滤或其他方法澄清。混悬液是活性物质精细且均匀地悬浮在媒介物中的液体制剂，通常通过向固体活性物质中加入悬浮剂或其它合适的赋形剂和纯净水或油，并通过合适的方法整体均匀悬浮而制备。乳剂是活性物质在液体媒介物中精细且均匀乳化的液体制剂，通常通过向液体活性物质中加入乳化剂和纯净水，并通过合适的方法精细和均匀地乳化来制备。此外，清凉剂是酸甜的透明液体制剂，用于口服给药。

(6)糖浆剂

糖浆剂是含糖或甜味剂的粘性液体或固体制剂，且包括用于糖浆剂的制剂。糖浆剂是通常通过将活性物质溶解、混合、悬浮或乳化在蔗糖、其他糖或甜味剂的溶液中或在简单的糖浆中制备。必要时，将混合物煮沸，并趁热过滤。糖浆剂的制剂是颗粒剂或粉剂形式的制剂，其通过加入水成为糖浆剂。它们可被成为“干糖浆剂”。用于糖浆剂的制剂通常根据所述颗粒剂或粉剂的制备方法用糖或甜味剂制备。

(7)用于口服给药的凝胶剂

用于口服给药的胶冻剂是具有一定形状和大小的不流动的凝胶状制剂，且通常通过以下方式制备：将活性物质与合适的赋形剂和聚合物凝胶基质混合，凝胶化并通过合适的方法形成一定形状和大小。

[用于口腔黏膜应用的制剂]

(1)用于口腔黏膜应用的片剂

用于口腔黏膜应用的片剂是具有一定形式的固体制剂，包括糖锭剂/锭剂、舌下片剂、含服片剂、粘膜粘着片剂和药用口香糖。用于口腔黏膜应用的制剂通常根据片剂的所述方法制备。糖锭剂/锭剂是用于口腔黏膜应用的片剂，其在口中逐渐溶解或崩解；舌下片剂是用于口腔黏膜应用的片剂，活性物质从其中快速地舌下溶解并通过口腔黏膜被吸收；含服片剂是用于口腔黏膜应用的片剂，活性物质从其中在脸颊和牙齿之间逐渐溶解并通过口腔黏膜吸收；粘膜粘着片剂是用于口腔黏膜应用的片剂，其通过粘附至口腔黏膜给药；药用口香糖是用于口腔黏膜应用的片剂，其通过咀嚼释放活性物质。

(2)用于口腔黏膜应用的喷雾剂

用于口腔黏膜应用的喷雾剂是通过以雾、粉末、泡沫或糊剂形式喷入口腔来给药活性物质的制剂，并且通常通过以下方式制备：将活性物质和合适的赋形剂溶解或悬浮于溶剂中，必要时过滤，并与液化或压缩气体一起填充到容器中，或者将活性物质和合适的赋形剂溶解或悬浮于溶剂中并填充到容器中，并配有泵进行喷雾。

(3)用于口腔黏膜应用的半固体制剂

用于粘膜应用的半固体制剂是旨在应用至口腔黏膜的乳膏、凝胶或软膏形式的制剂。用于口腔黏膜应用的半固体制剂通常通过以下方式制备：使用纯净水和油组分(如凡士林油)乳化活性物质和赋形剂，或者通过使用聚合物凝胶或油和脂肪作为基质将活性物质与合适的赋形剂一起均化。乳膏剂是半固体制剂，其为水包油或油包水乳剂的形式。油包水乳剂形式的疏水制剂可称为“油性乳膏剂”。乳膏剂通常通过均匀混合并乳化油相组分和水相组分来制备，两者都被加热，其中任一种含有活性物质。这些组分具有以下成分。油相组分：凡士林、脂肪醇等，含或不含乳化剂或其它合适的赋形剂。水相成分：含或不含乳化剂或其他合适赋形剂的纯净水。凝胶剂是凝胶状的制剂。有水性凝胶剂和油性凝胶剂。水性凝胶剂通常通过以下方式制备：向活性物质中加入聚合物、其它赋形剂和纯净水，溶解或悬浮，并通过加热和冷却或通过加入胶凝剂进行凝胶化。油性凝胶剂通常通过向活性物质中加入液体油性基质如二醇、脂肪醇和其它赋形剂并混合来制备。软膏剂是半固体制剂，其中将活性物质溶解或分散在基质中。有两种类型的软膏剂，疏水性软膏剂和亲水性软膏剂。疏水性软膏通常通过以下方式来制备：加热来融化疏水性基质例如脂肪油、蜡或石蜡等烃类、在基质中添加待溶解或分散的活性物质并混合，并将其整体揉捏均匀。亲水性软膏通常通过以下方式来制备：加热熔化亲水性基质如聚乙二醇，在基质中加入活性物质并混合，并将其整体揉捏均匀。

(4)用于漱口剂的制剂

用于漱口剂的制剂是旨在局部应用于口腔和咽喉腔的液体制剂。在使用前溶解在水中的固体型制剂也包括在此类别中。用于漱口剂的制剂通常是通过以下方式制备的：将活性物质与合适的赋形剂一起溶解在溶剂中，并根据需要进行过滤。根据片剂或颗粒剂的所述方法制备固体制剂。

[用于注射的制剂]

(1)注射剂

注射剂是通过皮肤、肌肉或血管直接给药于身体的无菌制剂，通常是活性物质的溶液、混悬液或乳液的形式，或含有在使用前待被溶解或悬浮的活性物质的固体，除了通常所称的注射剂之外，还包括冷冻干燥的注射剂、粉剂、预填充注射器、药筒、肠胃外输注剂、植入物/丸剂和延长释放注射剂。注射剂通过以下方法(a)和(b)制备：

(a)将含有或不含有赋形剂的活性物质均匀溶解、悬浮或乳化在注射用水中或水性或非水性媒介物中，填充到用于注射的容器中，密封并灭菌。

(b)将含有或不含有赋形剂的活性物质溶解、悬浮或乳化在注射用水或水性或非水性媒介物中，无菌过滤，或无菌地制备均匀的液体，填充到用于注射的容器中并密封；

冷冻干燥的注射剂通常通过以下方式制备：将含有或不含赋形剂(例如稀释剂)的活性物质溶解在注射用水中，通过无菌过滤对该溶液进行灭菌，将滤液直接填充到单独的注射用容器中并冷冻干燥，或将滤液分配在特定容器中，冻干并转移到单独的注射用容器中。用于注射的粉剂通常通过以下方式制备：无菌过滤活性物质的溶液，通过从溶液中结晶获得粉末或额外地将粉末与灭菌的赋形剂混合，并将粉末填充到单独的注射用容器中。用于注射的预充注射器通常通过将含有或不含赋形剂的活性物质溶解、悬浮或乳化在媒介物中并填充到注射器中来制备。药筒通过固定在专用注射装置中来使用。用于注射的药筒通常通过将含有或不含赋形剂的活性物质溶解、悬浮或乳化在媒介物中并填充到药筒中来制备。胃肠外输注剂通常为用于静脉内给药的不少于100mL的注射剂。植入物/丸剂是固体或凝胶样形式的注射剂，其旨在通过植入装置或手术治疗进行皮下或肌内给药，目的是长时间释放活性物质。植入物/丸剂通常使用可生物降解的聚合物制成丸剂、微球或凝胶的形式。延长释放的注射剂是用于肌内给药的注射剂，用于长时间释放活性物质，且通常通过将活性物质溶解或悬浮在非水媒介物(如植物油)中来制备，或通过悬浮由可生物降解的聚合物制备的微球来制备。

[用于透析的制剂]

(1)透析剂

透析剂是旨在用于腹膜透析或血液透析的液体制剂或在使用前溶解的固体制剂，且包括腹膜透析剂和血液透析剂。腹膜透析剂是旨在用于腹膜透析的无菌透析剂，且其通常通过将活性物质与合适赋形剂一起溶解在媒介物中以形成一定体积来制备，或通过将活性物质与适合的赋形剂一起填充到容器中并密封来制备。视需要进行灭菌。在使用前进行溶解的固体制剂的情况中，可以根据所述片剂或颗粒剂的制备方法进行制备。血液透析剂是用于血液透析的透析剂，通常通过将活性物质与赋形剂一起溶解在媒介物中以形成一定体积来制备，或通过将活性物质与赋形剂填充在容器中来制备。在使用前进行溶解的固体制剂的情况中，可以根据所述片剂或颗粒剂的制备方法进行制备。

[用于吸入的制剂]

(1)吸入剂

吸入剂是用于作为气雾剂给药于支气管或肺的制剂。吸入剂分为干粉吸入剂、吸入性液体制剂和计量吸入剂。干粉吸入剂是递送恒定呼吸摄取量的制剂，旨在用于作为固体颗粒气溶胶给药，并且通常通过将活性物质粉碎成细颗粒来制备。必要时加入乳糖或其他合适的赋形剂以制备均匀的混合物。吸入性液体制剂是通过诸如操作雾化器的吸入装置给药的液体吸入剂。吸入性液体制剂通常通过将活性物质与媒介物和合适的等渗剂和/或pH调节剂混合以制成溶液或混悬液来制备，并视需要进行过滤。计量吸入剂是从填充有推进剂的容器中递送恒定剂量的活性物质的制剂。计量吸入剂通常通过以下方式来制备：将活性物质与合适的分散剂和稳定剂一起溶解在媒介物中以形成溶液或混悬液，并与液体推进剂一起填充到耐压容器中，并设置计量阀。

[用于眼部应用的制剂]

(1)眼用液体和溶液

眼用液体和溶液是无菌液体制剂或在使用前溶解或悬浮的固体，其旨在应用于结膜囊或其它眼组织。眼用液体和溶液通常通过以下方式来制备：在添加赋形剂以形成恒定体积之后将活性物质溶解、悬浮在媒介物中，或混合活性物质和赋形剂，并将其填充到容器中。

(2)眼用软膏

眼用软膏是半固体的无菌制剂，其旨在应用至结膜囊和其他眼组织。通常通过将活性物质的溶液或细粉状的活性物质与凡士林或其他基质均匀混合并填充到容器中来制备眼用软膏。

[用于耳部应用的制剂]

(1)耳制剂

耳制剂是旨在给药于外耳或内耳的在使用前溶解或悬浮的液体、半固体或固体制剂。耳制剂通常通过以下方式制备：将活性物质和赋形剂溶解或悬浮在媒介物中以形成恒定体积的液体，将该液体填充到容器中，或将活性物质和赋形剂混合的粉末填充到容器中。

[用于鼻应用的制剂]

(1)鼻制剂

鼻制剂是旨在应用于鼻腔或鼻粘膜的制剂。鼻制剂分为鼻用干粉吸入剂和鼻用液体制剂。鼻用干粉吸入剂是应用于鼻腔的细粉末化制剂。鼻用干粉吸入剂通常通过将活性物质粉碎成适度大小的细颗粒来制备，或者根据需要与赋形剂均匀混合来制备。鼻用液体和溶液是液体制剂，或在使用前溶解或悬浮的固体制剂，其旨在应用于鼻腔。鼻用液体和溶液通常通过将活性物质与赋形剂一起溶解或悬浮在媒介物中来制备，并根据需要进行过滤。可以使用等渗剂和/或pH调节剂。

[用于直肠应用的制剂]

(1)用于直肠应用的栓剂

用于直肠应用的栓剂是旨在直肠内给药的具有所需形状和尺寸的半固体制剂，其通过在体温熔化或逐渐溶解或分散于分泌物中以释放活性物质。用于直肠应用的栓剂通常通过以下来制备：将活性物质和赋形剂(如分散剂和乳化剂)均匀混合、均匀地溶解或悬浮在通过加热液化的基质中、将恒定体积的所得材料填充到容器中并将其模制成所需形状和大小。通常使用亲脂性基质或亲水性基质。

(2)用于直肠应用的半固体制剂

用于直肠应用的半固体制剂是旨在应用于肛门周围或内部的乳膏、凝胶或软膏形式的制剂。用于直肠应用的半固体制剂通常通过以下方式来制备：将活性物质和赋形剂乳化在纯净水和油组分(如凡士林)中，或在聚合物凝胶或油脂的基质中均匀混合活性物质和赋形剂。用于直肠给药的乳膏剂通常通过以下方式制备：均匀混合并乳化油相成分(例如凡士林、脂肪醇等)和水相成分(例如含有或不含乳化剂或其它合适赋形剂的纯净水)，两者均温热，其中任一者含有活性物质。用于直肠应用的凝胶是凝胶状制剂。有水性凝胶和油性凝胶。通过以下方式制备水性凝胶：将聚合物、其它赋形剂和纯净水加入到活性物质中，溶解或悬浮并通过加热和冷却或通过加入凝胶剂将其凝胶化。通过向活性物质中加入液体油性基质(如二醇、脂肪醇)和其它赋形剂并混合来制备油性凝胶。用于直肠应用的软膏是将活性物质溶解或分散在基质中的半固体制剂。有两种类型，疏水性软膏和亲水性软膏。疏水性软膏通常通过以下方式制备：加热使疏水性基质例如脂肪油、蜡或石蜡熔化，在待溶解或分散于其中的基质中添加活性物质并混合，并将其整体揉捏均匀。亲水性软膏通常通过以下方式制备：加热熔化亲水性基质如聚乙二醇、在该基质中加入活性物质并混合，并将其整体揉捏均匀。

(3)用于直肠应用的灌肠剂

用于直肠应用的灌肠剂是液体形式或粘稠和凝胶态的制剂，其旨在通过肛门给药。用于直肠应用的灌肠剂通常通过将活性物质溶解或悬浮在纯净水或合适的水性媒介物中以得到给定体积来制备，并填充到容器中。可以使用分散剂、稳定剂和/或pH调节剂。

[用于阴道应用的制剂]

(1)阴道用片剂

阴道用片剂是具有所需形状和尺寸的固体制剂，其旨在给药于阴道，其通过逐渐溶解或分散于分泌物中而释放活性物质。阴道用片剂通常根据所述片剂的制备方法进行制备的。

(2)阴道用栓剂

阴道用栓剂是旨在应用于阴道的具有所需形状和尺寸的半固体制剂，其通过在体温下熔化或逐渐溶解或分散于分泌物中而释放活性物质。阴道用栓剂通常根据所述用于直肠应用的栓剂的制备方法进行制备。

[用于皮肤应用的制剂]

(1)用于皮肤应用的固体制剂

用于皮肤应用的固体制剂是旨在应用于皮肤(包括头皮)或指甲的固体制剂。用于皮肤应用的粉剂包括在此类别中。用于皮肤应用的粉剂是用于外部应用的粉末状固体制剂。用于皮肤应用的粉剂通常通过将活性物质和赋形剂(如稀释剂)混合均匀并粉碎所述混合物来制备。

(2)用于皮肤应用的液体和溶液

用于皮肤应用的液体和溶液是旨在应用于皮肤(包括头皮)或指甲的液体制剂。这个类别包括了搽剂和洗剂。用于皮肤应用的液体和溶液通常通过在媒介物中混合活性物质和赋形剂并根据需要进行过滤来制备。搽剂是旨在通过涂抹外用于皮肤的液体或浑浊制剂。洗剂是将活性物质溶解、乳化或微细分散在水性媒介物中的外用液体。洗剂通常通过将活性物质与赋形剂溶解、悬浮或乳化在纯净水中，并将其整体制成均匀而制备。

(3)用于皮肤应用的喷雾剂

用于皮肤应用的喷雾剂是旨在将活性物质以雾、粉末形式、泡沫或糊剂状态喷洒到皮肤上的制剂。用于皮肤应用的喷雾剂被分为用于皮肤应用的气雾剂和用于皮肤应用的泵喷雾剂。用于皮肤应用的喷雾剂通常通过将活性物质溶解或悬浮在媒介物中、根据需要过滤并填充在容器中来制备。用于皮肤应用的气雾剂是将填充在容器中的活性物质与液化或压缩气体一起雾化的喷雾剂。用于皮肤应用的气雾剂通常通过将活性物质溶解或悬浮在媒介物中、在耐压容器中填充液化推进剂并设置连续喷雾阀来制备。如果需要，可以使用分散剂和稳定剂等赋形剂。用于皮肤应用的泵喷雾剂是通过泵送来雾化容器中的活性物质的喷雾剂。用于皮肤应用的泵喷雾剂通常通过将活性物质与赋形剂一起溶解或悬浮在媒介物中、填充在容器中并将在容器上设置泵来制备。

(4)软膏剂

软膏剂是应用于皮肤的半固体制剂，其将活性物质溶解或分散在基质中。有两种类型，疏水性软膏和亲水性软膏。疏水性软膏通常通过以下方式来制备：加热来熔化疏水性基质(如脂肪油、蜡或石蜡等烃类)、在待溶解或分散于其中的基质中加入和混合活性物质并整体揉捏均匀。亲水性软膏通常通过加热来熔化亲水性基质(如聚乙二醇)、在该基质中加入活性物质并混合，并将其全部揉捏均匀来制备。

(5)乳膏剂

乳膏剂是应用于皮肤的半固体制剂，其为水包油或油包水乳剂的形式。油包水乳剂形式的疏水性制剂可被称为“油性乳膏剂”。乳膏剂通常通过均匀混合并乳化油相组分和水相组分来制备，两者都被加热，其中任一种都含有活性物质。这些组分具有以下成分。油相组分：凡士林、脂肪醇等，其含有或不含乳化剂或其它合适的赋形剂。水相成分：含有或不含乳化剂或其他合适赋形剂的纯净水。

(6)凝胶剂

凝胶剂是旨在应用于皮肤的凝胶状制剂。有水性凝胶剂和油性凝胶剂。水性凝胶剂通常通过以下方式来制备：向活性物质中加入聚合物、其它赋形剂和纯净水，溶解或悬浮，并通过加热和冷却或通过加入胶凝剂来胶化。油性凝胶剂通常通过向活性物质中加入液体油性基质(如二醇、脂肪醇)和其它赋形剂并混合来制备。

(7)贴剂

贴剂是旨在附着在皮肤上的制剂。贴剂被分类成胶带/膏药和泥敷剂/凝胶贴剂。贴剂通常通过以下方式来制备：将活性物质与基质(如聚合物或聚合物混合物)均匀混合、铺展在背涂层(backing layer)或衬垫(liner)上，并切割成给定的尺寸。可以通过使用控制释放速率的膜来制备经皮吸收型制剂。必要时可以使用胶粘剂或渗透增强剂等赋形剂。胶带/膏药是用基本上没有水的基质制成的贴剂。胶带/膏药通常通过将含有或不含赋形剂的活性物质和非水溶性天然或合成聚合物(如树脂、塑料或橡胶)的基质混合均匀，并铺展在布上或铺展在布或塑料薄膜上并密封，切割成给定的尺寸。所述制剂也可以通过在由控制释放膜、支持物和衬垫组成的释放体中填充活性物质与含有或不含有其他赋形剂的基质的混合物来制备。泥敷剂/凝胶是使用含水基质的贴剂。泥敷剂/凝胶贴片通常通过以下方式来制备：混合活性物质、纯净水和甘油或其他液体物质，或将可溶于水或为水的吸收剂的天然或合成聚合物与纯净水混合和揉捏，加入活性物质，将其整体均匀混合，铺展在布或薄膜上，切成一定尺寸。

实施例

下面参照实施例详细描述本发明，但是本发明不限于实施例。

关于色谱分离和TLC，括号中的溶剂对应于使用的洗脱溶剂或显影溶剂，比例以体积比表示。

关于NMR，括号中的溶剂对应于用于测量的溶剂。

使用Yamazen Automated Purification Equipment或Isco CombiflashCompanion MPLC系统进行硅胶柱色谱法。

在以下条件进行HPLC制备型纯化：

[流动相(A)：0.1％三氟乙酸水溶液；流动相(B)：0.1％三氟乙酸-乙腈]。

在以下条件进行LC-MS/ELSD：

[柱：Waters ACQUITY C₁₈(颗粒尺寸：1.7×10^-6m；柱长度：30×2.1mm I.D.)；流速：1.0mL/min；柱温度：40℃；流动相(A)：0.1％甲酸水溶液；流动相(B)：0.1％甲酸-乙腈溶液；梯度(描述了流动相(A)：流动相(B)的比例)：[0min]95：5；[0.1min]95：5；[1.2min]5：95；[1.4min]5：95；[1.41min]95：5；[1.5min]95：5；检测器：UV(PDA)，ELSD，MS]。

在本说明书中使用的化合物名称是通过使用计算机程序ACD/Name(注册商标)给出的，其通常使用根据IUPAC命名法命名化合物，使用Chemdraw Ultra(版本12.0，由Cambridge Soft提供)或通过根据IUPAC命名法命名。

参比例1：N-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)甲酰胺

向1,3-二甲基吡唑-4-胺盐酸盐(2g)在甲酸(10.2mL)中的溶液中添加甲酸钠(1.84g)，且将混合物在室温搅拌18小时。向反应溶液添加饱和碳酸氢钠水溶液，然后，该溶液用乙酸乙酯萃取。所得有机层用水和饱和盐水溶液洗涤。向水层添加氯化钠，且将混合物用二氯甲烷和四氢呋喃的混合溶液萃取。合并有机层，然后，用无水硫酸钠干燥，且在减压下浓缩。所得残余物用甲基叔丁基醚洗涤，然后，过滤以得到标题化合物(1.41g)，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.33(乙酸乙酯：甲醇＝20：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ2.20-2.24，3.81-3.83，6.60-6.94，7.86，8.30.

参比例2：4,6-二氯-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶

向4,6-二氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(5.0g)在乙腈(265mL)/N,N-二甲基甲酰胺(50mL)中的溶液中添加N-碘代琥珀酰亚胺(7.74g)且将混合物在80℃搅拌16小时。向反应溶液中添加乙酸(0.5mL)，且将溶液搅拌9小时。在减压下蒸馏出乙腈后，残余物用乙酸乙酯稀释。向溶液添加少量己烷、水和亚硫酸钠水溶液且将溶液搅拌。向所得溶液添加水且将混合物进行液体分离。所得有机层用水和盐水溶液洗涤，且用无水硫酸钠干燥。向所得有机层添加少量硅胶，并将混合物搅拌且过滤。将滤液减压浓缩以得到标题化合物(7.58g)，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.36(己烷：乙酸乙酯＝4：1)；

¹H-NMR(DMSO-d₆)：δ11.13。

参比例3：6-氯-3-碘-N-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺

在0℃，向参比例2制备的化合物(6.5g)在乙醇(50mL)中的悬浮溶液中添加4-甲氧基苄基胺(2.97mL)和二异丙基乙基胺(7.14mL)，且将混合物在室温搅拌2小时。将反应溶液减压浓缩，然后，将乙酸乙酯添加至残余物中。所得溶液用水、饱和碳酸氢钠水溶液和饱和盐水溶液洗涤。所得有机层用无水硫酸钠干燥，然后，在减压浓缩以得到标题化合物(6.5g)，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.16(己烷：乙酸乙酯＝4：1)；

¹H-NMR(DMSO-d₆)：δ3.76，4.70-4.75，6.92-6.98，7.34-7.40，7.51-7.59。

参比例4：6-氯-3-碘-N-(4-甲氧基苄基)-1-(丙-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺

在0℃，向三苯基膦(3.91g)在四氢呋喃(50mL)中的溶液中添加偶氮二甲酸二异丙酯(1.9mol/L，5.9mL)，且将混合物搅拌10分钟。向反应溶液中添加异丙醇(0.86mL)，且将溶液在0℃搅拌10分钟。向反应溶液中添加参比例3制备的化合物(3.1g)，且将混合物在室温搅拌16小时。反应溶液在减压浓缩，然后，所得残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物(3.0g)，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.51(己烷：乙酸乙酯＝4：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.47-1.53，3.82，4.75-4.78，4.97-5.09，6.42-6.52，6.89-6.95，7.30-7.36。

参比例5：6-氯-3-碘-1-(丙-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺

将参比例4制备的化合物(3.0g)溶于三氟乙酸(9.8mL)中，且将溶液在60℃搅拌16小时。反应溶液在减压浓缩，然后，与甲苯共沸。残余物用2N氢氧化钠水溶液中和，且将混合物用乙酸乙酯萃取。所得有机层用饱和盐水溶液洗涤，然后，用无水硫酸钠干燥。有机层在减压浓缩，然后，残余物用甲基叔丁基醚洗涤。过滤获取所得固体以得到标题化合物(1.9g)，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.26(己烷：乙酸乙酯＝4：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.48-1.56，4.99-5.09，5.75-6.10。

参比例6：3-碘-6-(甲基硫基)-1-(丙-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺

向参比例5制备的化合物(1.9g)在二甲基亚砜(50mL)中的溶液中添加甲硫醇钠(473mg)，且将混合物在室温搅拌3小时。向反应溶液添加水，且将混合物用乙酸乙酯萃取。所得有机层用水和饱和盐水溶液洗涤，且用无水硫酸钠干燥。在减压下蒸馏出溶剂后以得到标题化合物(1.9g)，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.29(己烷：乙酸乙酯＝4：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.48-1.55，2.56，4.97-5.09，5.63-5.81。

参比例7：3-碘-6-(甲基磺酰基)-1-(丙-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺

在0℃，向参比例6制备的化合物(1.97g)在乙腈(50mL)中的溶液中添加钼酸铵四水合物(348mg)和过氧化氢水溶液(30％水溶液，3.16mL)，且将混合物在室温搅拌18小时。反应溶液用乙酸乙酯稀释，然后，用水和饱和盐水溶液洗涤。所得有机层用无水硫酸钠干燥，且在减压下浓缩。残余物用甲基叔丁基醚洗涤，然后，过滤获取固体以得到标题化合物(1.62g)，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.23(己烷：乙酸乙酯＝1：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.53-1.60，3.33，5.05-5.20，6.10-6.45。

参比例8：N⁶-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-3-碘-1-(丙-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺

在0℃，向参比例7制备的化合物(1.62g)在N,N-二甲基甲酰胺(43mL)中的溶液中添加参比例1制备的化合物(1.18g)和叔丁醇钠(817mg)，且将混合物在60℃搅拌16小时。向反应溶液添加2N氢氧化钠水溶液(21.2mL)，且将溶液在室温搅拌1小时。反应溶液用1N盐酸中和，然后，用乙酸乙酯萃取。所得有机层用饱和盐水溶液洗涤，且用无水硫酸钠干燥。在减压下蒸馏出溶剂，且残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物(1.2g)，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.43(乙酸乙酯)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.49-1.55，2.24，3.86，4.82-4.95，5.47-5.62，6.33，7.81.

参比例9：3-{1-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]-1H-吲哚-5-基}-N⁶-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(丙-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺

向参比例8制备的化合物(250mg)在二甲基乙酰胺(5mL)中的溶液中添加磷酸钾(0.61mL,2M水溶液)和1-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-1H-吲哚-5-基硼酸(CAS No.913835-68-4)(200mg)。将反应溶液脱气，然后，在氩气中向溶液添加氯(2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基-1,1′-联苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-联苯基)]钯(II)(第二代XPhos预催化剂，CAS No.1310584-14-5)(38mg)，且将混合物在80℃搅拌2小时。反应溶液用乙酸乙酯稀释，且用水和饱和盐水溶液洗涤。所得有机层用无水硫酸钠干燥，且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物(250mg)，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.25(乙酸乙酯)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ0.09-0.12，0.88-0.94，1.55-1.63，2.27，3.87，4.96-5.04，5.18-5.24，6.32，6.60-6.64，7.26-7.30，7.51-7.53，7.90-7.96。

实施例1：N⁶-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(1H-吲哚-5-基)-1-异丙基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺

向参比例9制备的化合物(250mg)在四氢呋喃(5mL)中的溶液中添加四正丁基氟化铵(0.97mL，1M四氢呋喃溶液)，且将混合物在室温搅拌2小时。反应溶液用乙酸乙酯稀释，且用饱和氯化铵水溶液和饱和盐水溶液洗涤。所得有机层用无水硫酸钠干燥，且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到本发明的化合物(115mg)，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.41(乙酸乙酯：甲醇＝10：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.58-1.64，2.26，3.87，4.95-5.05，5.18-5.26，6.34，6.61-6.64，7.25-7.30，7.51，7.90-7.95，8.34。

参比例10：4-溴-7-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑

向4-溴-7-氟-1H-吲唑(918mg)在二氯甲烷(14mL)中的溶液中添加3,4-二氢-2H-吡喃(1.56mL)和对甲苯磺酸一水合物(81mg)，且将混合物在40℃搅拌1.5小时。向反应溶液添加饱和碳酸氢钠水溶液，且该溶液用乙酸乙酯萃取。所得有机层用饱和盐水溶液洗涤，然后，用无水硫酸钠干燥，且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物(1.24g)，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.61(己烷：乙酸乙酯＝5：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.48-1.82，2.03-2.23，2.51-2.68，3.69-3.80，4.00-4.08，5.83-5.90，6.91-7.00，7.17-7.23，8.03-8.06。

参比例11：[7-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]硼酸

在氮气中，将参比例10制备的化合物(1.24g)和硼酸三异丙基酯(3.8mL)溶于四氢呋喃(16.6mL)中，且将溶液冷却至-78℃。向溶液滴加正丁基锂(8.02mL，1.55M/己烷)，然后，将溶液在-40℃搅拌1小时。向反应溶液添加水，且有机层用0.5N氢氧化钠水溶液反萃取。向所得水层添加乙酸铵(1.39g)，且将混合物在室温搅拌30分钟。将反应溶液冷却至0℃，然后，向溶液添加磷酸二氢钠，且将pH调节至4至5。沉淀的固体通过过滤获取，然后，用冷水洗涤。干燥所得固体以得到本发明的化合物(710mg)，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.34(己烷：乙酸乙酯＝2：1)；

¹H-NMR(DMSO-d₆)：δ1.47-1.60，1.63-1.82，1.97-2.10，2.35-2.54，3.58-3.69，3.83-3.94，5.79-5.85，7.18-7.27，7.58-7.64，8.27，8.34-8.37.

参比例12：N⁶-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-3-[7-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-1-(丙-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺

进行类似于参比例9的步骤，其通过使用参比例11制备的化合物代替1-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-1H-吲哚-5-基硼酸以得到标题化合物，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.51(乙酸乙酯，NH二氧化硅)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.54-1.64，1.72-1.83，2.06-2.23，2.26，2.55-2.70，3.73-3.83，3.88，4.03-4.12，4.98-5.16，5.92-5.98，6.34，7.16-7.23，7.31-7.36，7.88，8.25-8.26。

实施例2：N⁶-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(7-氟-1H-吲唑-4-基)-1-异丙基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺

在室温，向参比例12制备的化合物(61mg)在二氯甲烷(1mL)中的溶液中添加三氟乙酸(0.9mL)，且将混合物搅拌3小时。向反应溶液添加饱和碳酸氢钠水溶液，且该溶液用乙酸乙酯萃取。所得有机层用饱和盐水溶液洗涤，然后，用无水硫酸钠干燥，且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到本发明的化合物(34mg)，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.27(乙酸乙酯，NH二氧化硅)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.60-1.66，2.27，3.88，5.00-5.09，5.12-5.22，6.39，7.17-7.25，7.34-7.40，7.90，8.33-8.36.

实施例3：3-(2,3-二氢-1-苯并呋喃-5-基)-N⁶-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-1-异丙基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺

进行类似于参比例9的步骤，其使用2,3-二氢苯并呋喃-5-硼酸代替1-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-1H-吲哚-5-基硼酸得到本发明的化合物，其具有以下物理性质。

¹H-NMR(DMSO-d₆)：δ1.41-1.46，2.12，3.24-3.30，3.73，4.57-4.62，4.84-4.92，6.10-6.40，6.87-6.90，7.32-7.36，7.48，7.93，8.15.

纯度(LC-MS/ELSD)：99.3％(保留时间：0.77分钟)；

MASS(ESI，正电子)：405(M+H)⁺。

参比例13：N⁶-[2-氟-4-(甲基磺酰基)苯基]-3-碘-1-(丙-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺

进行类似于参比例1→参比例8的步骤，其使用2-氟-4-(甲基磺酰基)苯胺代替1,3-二甲基吡唑-4-胺盐酸盐得到标题化合物，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.34(己烷：乙酸乙酯＝1：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.54-1.62，3.05，4.89-5.03，5.58-5.82，7.37-7.43，7.63-7.69，7.75-7.79，8.89-8.97。

实施例4-1至4-4：

进行类似于参比例9→实施例2的步骤，其使用参比例13制备的化合物代替参比例8制备的化合物，且使用相应的硼酸代替1-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-1H-吲哚-5-基硼酸得到本发明的化合物，其具有以下物理性质。

实施例4-1：3-(7-氯-1H-吲唑-4-基)-N⁶-[2-氟-4-(甲基磺酰基)苯基]-1-异丙基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺

TLC：Rf 0.55(己烷：乙酸乙酯＝1：2)；

¹H-NMR(DMSO-d₆)：δ1.49-1.60，3.23，4.97-5.06，6.38-7.15，7.31-7.35，7.56-7.61，7.68-7.79，8.25，8.66-8.73，8.86，13.74。

实施例4-2：N⁶-[2-氟-4-(甲基磺酰基)苯基]-3-(1H-吲唑-4-基)-1-异丙基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺

TLC：Rf 0.43(己烷：乙酸乙酯＝1：2)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.65-1.71，3.08，5.08-5.20，5.32-5.42，7.42-7.47，7.51-7.62，7.65-7.71，7.77-7.82，8.33，9.01-9.08。

实施例4-3：3-(7-氟-1H-吲唑-4-基)-N⁶-[2-氟-4-(甲基磺酰基)苯基]-1-异丙基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺

TLC：Rf 0.48(己烷：乙酸乙酯＝1：2)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.63-1.71，3.08，5.04-5.20，5.27-5.40，7.20-7.25，7.35-7.40，7.41-7.43，7.66-7.71，7.79-7.85，8.34-8.36，9.00-9.07，10.35-10.50.

实施例4-4：4-(4-氨基-6-{[2-氟-4-(甲基磺酰基)苯基]氨基}-1-异丙基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-1H-吲唑-7-甲腈

TLC：Rf 0.44(己烷：乙酸乙酯＝1：2)；

¹H-NMR(DMSO-₆)：δ1.48-1.60，3.22，4.98-5.10，7.44-7.48，7.63-7.70，8.02-8.07，8.35，8.63-8.70，8.90，14.13.

实施例5-1至5-5：

进行类似于参比例1→参比例8→参比例9→实施例2的步骤，其使用相应的胺化合物代替1,3-二甲基吡唑-4-胺盐酸盐，且使用相应的硼酸代替1-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-1H-吲哚-5-基硼酸得到本发明的化合物，其具有以下物理性质。在实施例5-5中，进行HPLC制备型纯化代替实施例2中的硅胶柱色谱法。

实施例5-1：3-(7-氟-1H-吲唑-4-基)-1-异丙基-N⁶-{3-甲基-1-[(甲基磺酰基)甲基]-1H-吡唑-4-基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺

TLC：Rf 0.27(乙酸乙酯)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.60-1.66，2.31，2.90，5.00-5.12，5.24-5.36，6.61，7.17-7.25，7.34-7.40，8.30-8.36.

实施例5-2：3-(7-氟-1H-吲唑-4-基)-1-异丙基-N⁶-[2-甲氧基-4-(甲基磺酰基)苯基]-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺

TLC：Rf 0.33(己烷：乙酸乙酯＝1：2)；

¹H-NMR(CD₃OD)：δ1.60-1.65，3.13，4.06，5.06-5.21，7.24-7.31，7.35-7.38，7.49，7.58-7.63，8.21-8.23，8.98-9.01。

实施例5-3：N⁶-[4-(环丙基磺酰基)-2-氟苯基]-3-(1H-吲唑-4-基)-1-异丙基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺

¹H-NMR(DMSO-d₆)：δ1.04-1.06，1.12-1.15，1.53-1.55，2.85-2.92，5.00-5.06，7.34-7.36，7.48-7.52，7.62-7.75，8.16，8.70-8.75，8.82，13.24.

纯度(LC-MS/ELSD)：100％(保留时间：0.92分钟)；

MASS(ESI，正电子)：507(M+H)⁺.

实施例5-4：N⁶-(3-氯-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(7-氟-1H-吲唑-4-基)-1-异丙基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺

TLC：Rf 0.42(己烷：乙酸乙酯＝1：2)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.62-1.68，3.92，5.00-5.15，5.20-5.32，6.64-6.71，7.18-7.25，7.35-7.40，8.09，8.34-8.37.

实施例5-5：1-(4-{[4-氨基-3-(7-氟-1H-吲唑-4-基)-1-异丙基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基]氨基}-3-氟苯基)乙酮二(三氟乙酸盐)

¹H-NMR(CD₃OD)：δ1.61-1.65，2.59，5.09-5.19，7.26-7.31，7.36-7.40，7.75-7.79，7.88-7.91，8.22-8.23，8.86-8.92.

纯度(LC-MS/ELSD)：93.2％(保留时间：0.95分钟)；

MASS(ESI，正电子)：463(M+H)⁺.

实施例6-1至6-9：

进行类似于参比例1→参比例8→参比例9→实施例1的步骤，其通过使用相应的胺化合物代替1,3-二甲基吡唑-4-胺盐酸盐，且使用相应的硼酸代替1-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-1H-吲哚-5-基硼酸得到本发明的化合物，其具有以下物理性质。在实施例6-4至6-9，进行HPLC制备型纯化代替实施例1中的硅胶柱色谱法。

实施例6-1：3-(1H-吲哚-5-基)-1-异丙基-N⁶-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺

TLC：Rf 0.35(己烷：乙酸乙酯＝1：3)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.56-1.62，2.31，4.95-5.08，5.23-5.37，6.39，6.61-6.64，7.27-7.31，7.48-7.53，7.94，8.10，8.28-8.35.

实施例6-2：N⁶-[1-(二氟甲基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基]-3-(1H-吲哚-5-基)-1-异丙基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺

TLC：Rf 0.26(己烷：乙酸乙酯＝1：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.60-1.65，2.32，4.95-5.05，5.23-5.31，6.42，6.62-6.65，6.90-7.33，7.50-7.54，7.95，8.28-8.34，8.44.

实施例6-3：N⁶-(1,3-二甲基-1H-吡唑-5-基)-3-(1H-吲哚-5-基)-1-异丙基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺

TLC：Rf 0.40(己烷：乙酸乙酯＝1：3)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.55-1.61，2.28，3.74，4.92-5.04，5.27-5.37，6.15，6.55-6.66，7.27-7.31，7.47-7.54，7.93，8.26-8.34.

实施例6-4：3-(1H-吲哚-5-基)-1-异丙基-N⁶-(5-嘧啶基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺三氟乙酸盐

纯度(LC-MS/ELSD)：85.0％(保留时间：0.76分钟)；

MASS(ESI，正电子)：386(M+H)⁺.

实施例6-5：3-(1H-吲哚-5-基)-1-异丙基-N⁶-(6-甲氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺三氟乙酸盐

纯度(LC-MS/ELSD)：96.4％(保留时间：0.85分钟)；

MASS(ESI，正电子)：415(M+H)⁺。

实施例6-6：5-{[4-氨基-3-(1H-吲哚-5-基)-1-异丙基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基]氨基}-N,N-二甲基-2-嘧啶甲酰胺三氟乙酸盐

纯度(LC-MS/ELSD)：99.4％(保留时间：0.76分钟)；

MASS(ESI，正电子)：457(M+H)⁺.

实施例6-7：N⁶-{4-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-2-氟苯基}-3-(1H-吲哚-5-基)-1-异丙基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺二(三氟乙酸盐)

纯度(LC-MS/ELSD)：99.9％(保留时间：0.66分钟)；

MASS(ESI，正电子)：489(M+H)⁺.

实施例6-8：N⁶-[2-氟-4-(4-吗啉基甲基)苯基]-3-(1H-吲哚-5-基)-1-异丙基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺二(三氟乙酸盐)

纯度(LC-MS/ELSD)：99.5％(保留时间：0.68分钟)；

MASS(ESI，正电子)：501(M+H)⁺.

实施例6-9：5-{[4-氨基-3-(1H-吲哚-5-基)-1-异丙基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基]氨基}-1-2,3-二氢-1-茚酮三氟乙酸盐

纯度(LC-MS/ELSD)：100％(保留时间：0.89分钟)；

MASS(ESI，正电子)：438(M+H)⁺.

实施例7：3-(6-氨基-5-甲氧基-3-吡啶基)-N⁶-[2-氟-4-(甲基磺酰基)苯基]-1-异丙基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺

进行类似于参比例9的步骤，其通过使用参比例13制备的化合物代替参比例8制备的化合物且使用6-氨基-5-甲氧基吡啶-3-硼酸频哪醇酯代替1-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-1H-吲哚-5-基硼酸得到本发明的化合物，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.25(己烷：乙酸乙酯＝1：2)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.59-1.64，3.06，3.94，4.86-4.94，4.97-5.11，5.36-5.42，7.23-7.26，7.39-7.43，7.62-7.69，7.72-7.80，7.95-7.97，8.98-9.05.

实施例8：3-(1-苯并呋喃-5-基)-N⁶-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺二(三氟乙酸盐)

进行类似于参比例4→参比例5→参比例6→参比例7→参比例8→参比例9的步骤，其通过使用2,2,2-三氟乙醇代替异丙醇且使用苯并呋喃-5-硼酸代替1-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-1H-吲哚-5-基硼酸得到本发明的化合物，其具有以下物理性质。同时，进行HPLC制备型纯化代替参比例9中的硅胶柱色谱法。

¹H-NMR(DMSO-d₆)：δ2.13，3.74，5.02-5.13，6.25-6.70，7.07-7.08，7.57-7.59，7.74-7.76，7.92，7.99，8.08-8.09，8.45.

纯度(LC-MS/ELSD)：99.7％(保留时间：0.85分钟)；

MASS(ESI，正电子)：443(M+H)⁺.

实施例9：N⁶-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(7-氟-1H-吲唑-4-基)-1-(3-氧杂环丁烷基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺

进行类似于参比例4→参比例5→参比例6→参比例7→参比例8→参比例9→实施例2的步骤，其通过使用氧杂环丁烷-3-醇代替异丙醇且使用参比例11制备的硼酸代替1-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-1H-吲哚-5-基硼酸得到本发明的化合物，其具有以下物理性质。

¹H-NMR(DMSO-d₆)：δ2.13，3.76，4.98-5.02，5.12-5.16，5.89-5.96，6.30-6.80，7.30-7.37，8.03，8.29-8.31，8.45，13.85.

纯度(LC-MS/ELSD)：99.0％(保留时间：0.61分钟)；

MASS(ESI，正电子)：435(M+H)⁺.

实施例10：1-环丁基-N⁶-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(1H-吲哚-6-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺三氟乙酸盐

进行类似于参比例4→参比例5→参比例6→参比例7→参比例8→参比例9→实施例1的步骤，其使用环丁醇代替异丙醇且使用1-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-1H-吲哚-6-基硼酸代替1-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-1H-吲哚-5-基硼酸得到本发明的化合物，其具有以下物理性质。同时，进行HPLC制备型纯化代替实施例1中的硅胶柱色谱法。

¹H-NMR(DMSO-d₆)：δ1.83-1.90，2.13，2.36-2.41，2.65-2.73，3.76，5.14-5.22，6.51-6.52，7.29-7.31，7.44-7.46，7.67-7.70，7.96，8.25-8.50，11.27.

纯度(LC-MS/ELSD)：96.2％(保留时间：0.81分钟)；

MASS(ESI，正电子)：414(M+H)⁺.

参比例14：1-叔丁基-6-氯-N-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺

在-78℃向2,4,6-三氯嘧啶-5-甲醛(1.1g)在乙醇(25mL)中的溶液中缓慢添加叔丁基肼盐酸盐(620mg)在乙醇(10mL)和三乙胺(3.3mL)中的混悬液，且将混合物在-78℃搅拌2小时。随着搅拌该反应溶液，温度经2小时上升至0℃，且将溶液在0℃搅拌1小时。在0℃向反应溶液添加4-甲氧基苄基胺(656mg)，且将溶液在室温搅拌16小时。向反应溶液中添加水、乙酸乙酯和己烷，搅拌溶液，且沉淀物通过过滤获取。滤液用乙酸乙酯萃取，且有机层用饱和盐水溶液洗涤。所得有机层用无水硫酸钠干燥，然后在减压浓缩。残余物用乙酸乙酯/己烷洗涤。将残余物与之前过滤获取的沉淀合并以得到标题化合物(1.47g)，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.35(己烷：乙酸乙酯＝3：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.76，3.18，4.70-4.76，6.84-6.92，7.21-7.34，7.73.

实施例11：3-(7-氟-1H-吲唑-4-基)-N⁶-[2-氟-4-(甲基磺酰基)苯基]-1-(2-甲基-2-丙基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺

进行类似于参比例2→参比例5→参比例6→参比例7→参比例8→参比例9→实施例2的步骤，其通过使用参比例14制备的化合物代替4,6-二氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶且使用参比例11制备的硼酸代替1-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-1H-吲哚-5-基硼酸得到本发明的化合物，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.64(己烷：乙酸乙酯＝1：2)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.89，3.08，5.23-5.31，7.17-7.25，7.34-7.40，7.41-7.45，7.65-7.71，7.76，7.82，8.35-8.38，8.97-9.03.

实施例12：4-{[4-氨基-1-环戊基-3-(3-羟基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-基]氨基}-3-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺

进行类似于参比例1→参比例4→参比例5→参比例6→参比例7→参比例8→参比例9的步骤，其使用4-氨基-3-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺代替1,3-二甲基吡唑-4-胺盐酸盐，使用环戊醇代替异丙醇，且使用3-羟基苯基硼酸代替1-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-1H-吲哚-5-基硼酸得到本发明的化合物，其具有以下物理性质。

¹H-NMR(DMSO-d₆)：δ1.65-1.68，1.75-1.87，2.02-2.12，2.98，5.00-5.11，6.84-6.87，7.04-7.06，7.24-7.26，7.29-7.35，8.20-8.27，8.72，9.60-9.75.

纯度(LC-MS/ELSD)：100％(保留时间：0.89分钟)；

MASS(ESI，正电子)：476(M+H)⁺.

实施例13-1至13-15：

进行类似于参比例1→参比例2→参比例3→参比例4→参比例5→参比例6→参比例7→参比例8→参比例9→实施例2的步骤，其使用1,3-二甲基吡唑-4-胺盐酸盐或相应的胺化合物代替1,3-二甲基吡唑-4-胺盐酸盐，使用2,4-二氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶代替4,6-二氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶，且使用相应的硼酸代替1-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-1H-吲哚-5-基硼酸得到本发明的化合物，其具有以下物理性质。同时，在实施例13-7中，进行HPLC制备型纯化代替实施例2中的硅胶柱色谱法。

实施例13-1：4-(4-氨基-2-{[2-氟-4-(甲基磺酰基)苯基]氨基}-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)-1H-吲唑-7-甲腈

TLC：Rf 0.18(己烷：乙酸乙酯＝1：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.59-1.64，3.07，4.94-5.08，7.19，7.27-7.31，7.36-7.40，7.62-7.68，7.75-7.80，7.81-7.84，8.27，8.99-9.06.

实施例13-2：5-{[4-氨基-5-(1H-吲唑-4-基)-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基]氨基}-N,N-二甲基-2-吡啶甲酰胺

TLC：Rf 0.32(乙酸乙酯：甲醇＝10：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.54-1.61，3.08-3.23，4.90-5.12，7.01，7.07，7.19-7.23，7.43-7.50，7.68-7.72，8.13，8.23-8.27，8.93-8.95，10.21-10.36.

实施例13-3：1-(4-{[4-氨基-5-(1H-吲唑-4-基)-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基]氨基}-3-甲基-1H-吡唑-1-基)-2-甲基-2-丙醇

TLC：Rf 0.31(乙酸乙酯：甲醇＝9：1)；

¹H-NMR(CD₃OD)：δ1.26，1.57-1.62，2.29，4.09，4.90-5.07，7.20-7.23，7.42，7.49-7.56，7.59-7.63，8.01，8.08.

实施例13-4：2-(4-{[4-氨基-5-(1H-吲唑-4-基)-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基]氨基}-3-甲基-1H-吡唑-1-基)-N,N-二甲基乙酰胺

TLC：Rf 0.40(乙酸乙酯：甲醇＝9：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.52-1.58，2.28，3.00，3.07，4.85-5.03，6.25，6.99，7.19-7.23，7.43-7.49，8.08，8.13.

实施例13-5：2-(4-{[4-氨基-5-(1H-吲唑-4-基)-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基]氨基}-3-甲基-1H-吡唑-1-基)-1-(4-吗啉基)乙酮

TLC：Rf 0.31(乙酸乙酯：甲醇＝9：1)；

¹H-NMR(CD₃OD)：δ1.54-1.61，2.29，3.60-3.64，3.66-3.75，4.95-5.04，5.08，7.17，7.19-7.22，7.47-7.57，8.06，8.12.

实施例13-6：2-(4-{[4-氨基-5-(1H-吲唑-4-基)-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基]氨基}-3-甲基-1H-吡唑-1-基)-2-甲基-1,3-丙二醇

TLC：Rf 0.51(乙酸乙酯：甲醇＝10：1)；

¹H-NMR(CD₃OD)：δ1.57-1.62，2.27，3.83-3.88，3.92-3.97，4.95-5.02，7.16，7.18-7.22，7.46-7.56，8.06，8.16.

实施例13-7：6-{[4-氨基-5-(1H-吲唑-4-基)-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基]氨基}-1-甲基-1,3-二氢-2H-吲哚-2-酮三氟乙酸盐

TLC：Rf 0.35(乙酸乙酯，NH二氧化硅)；

¹H-NMR(DMSO-d₆)：δ1.56-1.62，3.19，3.56，4.85-4.98，7.13-7.00，7.02-7.27，7.44-7.51，7.54-7.60，7.74，8.14，9.58-9.74，13.10-13.36.

实施例13-8：[4-({4-氨基-7-异丙基-5-[4-(三氟甲基)苯基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基}氨基)-3-氟苯基](1-哌嗪基)甲酮

TLC：Rf 0.28(乙酸乙酯：甲醇＝20：1，NH二氧化硅)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.53-1.58，2.82-2.96，3.55-3.75，4.94-5.07，6.93，7.16-7.27，7.59-7.63，7.68-7.73，8.76-8.83.

实施例13-9：4-(4-氨基-2-{[2-氟-4-(1-哌嗪基羰基)苯基]氨基}-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)苄腈

TLC：Rf 0.24(乙酸乙酯：甲醇＝20：1，NH二氧化硅)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.44-1.60，2.83-2.94，3.57-3.72，4.86-5.04，6.96，7.15-7.27，7.57-7.62，7.69-7.76，8.74-8.81.

实施例13-10：[4-({4-氨基-7-异丙基-5-[4-(三氟甲氧基)苯基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基}氨基)-3-氟苯基](1-哌嗪基)甲酮

TLC：Rf 0.23(乙酸乙酯：甲醇＝20：1，NH二氧化硅)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.51-1.58，2.92-3.01，3.63-3.78，4.96-5.08，6.88，7.17-7.34，7.48-7.56，8.76-8.83.

实施例13-11：(4-{[4-氨基-7-异丙基-5-(3-甲氧基苯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基]氨基}-3-氟苯基)(1-哌嗪基)甲酮

TLC：Rf 0.20(乙酸乙酯：甲醇＝20：1，NH二氧化硅)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.52-1.57，2.82-2.94，3.50-3.70，3.86，4.92-5.10，6.85-6.91，7.00-7.03，7.04-7.12，7.13-7.25，7.34-7.40，8.76-8.84.

实施例13-12：N²-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-5-(6-氟-1H-吲唑-4-基)-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二胺

TLC：Rf 0.60(乙酸乙酯：甲醇＝10：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.52-1.58，2.72，3.86，4.80-5.04，6.21，6.98-7.04，7.05-7.12，7.91，8.10.

实施例13-13：N²-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-7-异丙基-5-(6-甲基-1H-吲唑-4-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二胺

TLC：Rf 0.20(乙酸乙酯：甲醇＝20：1)；

¹H-NMR(DMSO-d₆)：δ1.40-1.48，2.11，2.45，3.72，4.80-4.93，5.55-6.05，6.90，7.20-7.30，7.48-7.68，7.85-7.98，12.98.

实施例13-14：N²-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-7-异丙基-5-(7-甲基-1H-吲唑-4-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二胺

TLC：Rf 0.51(乙酸乙酯：甲醇＝10：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.52-1.58，2.27，2.60，3.86，4.82-5.04，6.22，6.95，7.12-7.18，7.21-7.30，7.92，8.13.

实施例13-15：N²-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-7-异丙基-5-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二胺

TLC：Rf 0.27(乙酸乙酯：甲醇＝20：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.48-1.60，2.26，2.37，3.85，4.48-4.62，4.91-5.06，6.26，6.80，7.26，7.32-7.43，7.82，7.92.

实施例14-1至14-13：

进行类似于参比例1→参比例2→参比例3→参比例4→参比例5→参比例6→参比例7→参比例8→参比例9的步骤，其使用1,3-二甲基吡唑-4-胺盐酸盐或相应的胺化合物代替1,3-二甲基吡唑-4-胺盐酸盐，使用2,4-二氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶代替4,6-二氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶，且使用相应的硼酸代替1-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-1H-吲哚-5-基硼酸得到本发明的化合物，其具有以下物理性质。

实施例14-1：5-(1-苯并呋喃-3-基)-N²-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二胺

TLC：Rf 0.65(乙酸乙酯：甲醇＝10：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.50-1.60，2.26，3.86，4.82-5.02，6.24，6.90，7.22-7.44，7.54-7.59，7.61-7.65，7.72，7.91.

实施例14-2：5-(1,2-苯并噻唑-5-基)-N²-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二胺

TLC：Rf 0.54(乙酸乙酯，NH二氧化硅)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.48-1.58，2.27，3.87，4.84-5.02，6.18-6.23，6.87，7.68-7.72，7.91，8.01-8.05，8.16-8.17，8.95.

实施例14-3：5-(2,1-苯并噻唑-5-基)-N²-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二胺

TLC：Rf 0.23(乙酸乙酯)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.51-1.57，2.27，3.86，4.88-5.02，6.20，6.89，7.61-7.66，7.84，7.89-7.94，9.18.

实施例14-4：N²-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-7-异丙基-5-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二胺

TLC：Rf 0.36(乙酸乙酯：甲醇＝5：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.51-1.58，2.27，3.86，4.79-4.83，4.91-5.02，6.17，6.83，7.14-7.18，7.37-7.40，7.93，7.98-8.01，8.37-8.40，8.79.

实施例14-5：5-(4-氨基-2-{[2-氟-4-(甲基磺酰基)苯基]氨基}-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)-1(2H)-异喹啉酮

TLC：Rf 0.27(乙酸乙酯)；

¹H-NMR(CD₃OD)：δ1.56-1.64，3.13，4.98-5.07，6.43-6.67，7.12，7.13-7.17，7.58-7.79，8.36-8.41，9.08-9.16.

实施例14-6：N²-[2-氟-4-(甲基磺酰基)苯基]-7-异丙基-5-(5-喹啉基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二胺

TLC：Rf 0.23(乙酸乙酯)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.52-1.68，3.07，4.52-4.62，4.98-5.10，6.98，7.31-7.38，7.39-7.44，7.60-7.67，7.74-7.82，8.15-8.19，8.28-8.32，8.95-8.99，9.01-9.09.

实施例14-7：(4-{[4-氨基-5-(1-苯并呋喃-5-基)-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基]氨基}-3-甲基-1H-吡唑-1-基)乙酸甲基酯

TLC：Rf 0.50(乙酸乙酯)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.49-1.55，2.29，3.78，4.86，4.90-5.00，6.26，6.78-6.81，7.39-7.43，7.54-7.59，7.67-7.70，8.05.

实施例14-8：5-(1-苯并呋喃-5-基)-N²-(1,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二胺

TLC：Rf 0.58(乙酸乙酯)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.44-1.51，2.23，3.80，4.83-5.02，6.01，6.77，6.78-6.81，7.39-7.44，7.53-7.58，7.66-7.70，7.84.

实施例14-9：5-(1-苯并呋喃-5-基)-N²-[1-(二氟甲基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基]-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二胺

TLC：Rf 0.56(己烷：乙酸乙酯＝2：3)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.53-1.60，2.32，4.89-5.03，6.29，6.79-6.84，7.40-7.45，7.55-7.61，7.65-7.72，8.45.

实施例14-10：5-(1-苯并呋喃-5-基)-N²-(2,5-二甲基-1,3-噻唑-4-基)-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二胺

TLC：Rf 0.25(己烷：乙酸乙酯＝1：2)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.52-1.59，2.37，2.63，4.89-5.03，6.59-6.66，6.80-6.84，7.39-7.43，7.56-7.60，7.67-7.71.

实施例14-11：5-(1-苯并呋喃-5-基)-7-异丙基-N²-(3-甲氧基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二胺

TLC：Rf 0.48(己烷：乙酸乙酯＝1：4)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.46-1.54，3.77，3.96，4.80-5.01，6.32，6.70-6.81，7.40-7.44，7.54-7.58，7.66-7.70，7.86.

实施例14-12：5-[4-(二氟甲氧基)苯基]-N²-[2-氟-4-(甲基磺酰基)苯基]-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二胺

TLC：Rf 0.33(己烷：乙酸乙酯＝2：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.53-1.58，3.07，4.92-5.03，6.32-6.81，6.89，7.18-7.27，7.28-7.34，7.47-7.51，7.62-7.67，7.73-7.77，9.00-9.07.

实施例14-13：4-{[4-氨基-5-(4-氯-3-甲氧基苯基)-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基]氨基}-3-氟-N-甲基苯甲酰胺

TLC：Rf 0.47(己烷：乙酸乙酯＝1：4)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.50-1.60，3.00-3.03，3.96，4.92-5.03，6.00-6.08，6.89，7.00-7.12，7.18-7.21，7.40-7.45，7.52-7.59，8.80-8.86.

参比例15：4-{[4-氨基-5-(1-苯并呋喃-5-基)-7-(丙-2-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基]氨基}-3-氟苯甲酸甲基酯

进行类似于参比例1→参比例2→参比例3→参比例4→参比例5→参比例6→参比例7→参比例8→参比例9的步骤，其使用4-氨基-3-氟苯甲酸甲基酯代替1,3-二甲基吡唑-4-胺盐酸盐，使用2,4-二氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶代替4,6-二氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶，且使用苯并呋喃-5-硼酸代替1-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-1H-吲哚-5-基硼酸以得到标题化合物，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.81(己烷：乙酸乙酯＝1：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.55-1.62,3.90，4.93-5.06，6.81，6.89，7.22-7.28，7.40-7.44，7.56-7.61，7.64-7.77，7.84-7.91，8.84-8.92.

实施例15：4-{[4-氨基-5-(1-苯并呋喃-5-基)-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基]氨基}-3-氟苯甲酸

向参比例15制备的化合物(113mg)在乙醇(5mL)中的溶液中添加2N氢氧化钠水溶液(1mL)，且将混合物在40℃搅拌3小时。反应溶液用2N盐酸中和，然后用乙酸乙酯萃取。所得有机层用无水硫酸钠干燥，且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到本发明的化合物(65mg)，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.45(己烷：乙酸乙酯＝2：3)；

¹H-NMR(DMSO-d₆)：δ1.43-1.49，4.80-4.95，6.00-6.30，6.96-7.00，7.26，7.36-7.42，7.60-7.76，8.00-8.03，8.25-8.43，8.60-8.71.

实施例16：[(4-{[4-氨基-5-(1-苯并呋喃-5-基)-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基]氨基}-3-氟苯基)磺酰基]乙酸

进行类似于参比例1→参比例2→参比例3→参比例4→参比例5→参比例6→参比例7→参比例8→参比例9→实施例15的步骤，其使用[(4-氨基-3-氟苯基)磺酰基]乙酸乙酯代替1,3-二甲基吡唑-4-胺盐酸盐，使用2,4-二氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶代替4,6-二氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶且使用苯并呋喃-5-硼酸代替1-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-1H-吲哚-5-基硼酸得到本发明的化合物，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.40(乙酸乙酯：甲醇＝3：1)；

¹H-NMR(DMSO-d₆)：δ1.40-1.50，4.44，4.87-4.98，5.95-6.18，6.98-7.01，7.25，7.37-7.42，7.63-7.75，8.00-8.02，8.45-8.50，8.81-8.90.

实施例17：N²-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-5-(1H-吲哚-3-基)-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2,4-二胺

进行类似于参比例1→参比例2→参比例3→参比例4→参比例5→参比例6→参比例7→参比例8→参比例9→实施例1的步骤，其使用2,4-二氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶代替4,6-二氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶，且使用1-(甲苯-4-磺酰基)-1H-吲哚-3-硼酸N-叔丁基二甲基甲硅烷基保护的产物代替1-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-1H-吲哚-5-基硼酸得到本发明的化合物，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.40(乙酸乙酯：甲醇＝20：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.50-1.57，2.26，3.86，4.81-5.02，6.22，6.84，7.13-7.21，7.25-7.31，7.41-7.45，7.64-7.70，7.93，8.29.

实施例18-1至18-2：

进行类似于参比例1→参比例2→参比例3→参比例4→参比例5→参比例6→参比例7→参比例8→参比例9→实施例2→实施例15的步骤，其使用相应的胺化合物代替1,3-二甲基吡唑-4-胺盐酸盐，使用2,4-二氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶代替4,6-二氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶，且使用1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基-4-硼酸代替1-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-1H-吲哚-5-基硼酸以得到本发明的化合物，其具有以下物理性质。

实施例18-1：(4-{[4-氨基-5-(1H-吲唑-4-基)-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基]氨基}-2,5-二氟苯基)乙酸

TLC：Rf 0.41(乙酸乙酯：甲醇＝20：1)；

¹H-NMR(CD₃OD)：δ1.57-1.63，3.51，4.95-5.03，7.04-7.14，7.17-7.22，7.43-7.54，8.04，8.53-8.60.

实施例18-2：2-(4-{[4-氨基-5-(1H-吲唑-4-基)-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基]氨基}-2,3-二氟苯基)-2-甲基丙酸

TLC：Rf 0.61(乙酸乙酯：甲醇＝20：1)；

¹H-NMR(CD₃OD)：δ1.54-1.60，4.94-5.03，7.07-7.21，7.43-7.54，8.03，8.33-8.40.

参比例16：[4-({4-氨基-7-(丙-2-基)-5-[1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基}氨基)-3-甲基-1H-吡唑-1-基]乙酸苄酯

进行类似于参比例1→参比例2→参比例3→参比例4→参比例5→参比例6→参比例7→参比例8→参比例9的步骤，其使用(4-氨基-3-甲基-1H-吡唑-1-基)乙酸苄基酯代替1,3-二甲基吡唑-4-胺盐酸盐，使用2,4-二氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶代替4,6-二氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶，且使用1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基-4-硼酸代替1-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-1H-吲哚-5-基硼酸以得到标题化合物，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.62(乙酸乙酯)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.42-1.58，1.62-1.84，2.04-2.23，2.35，2.54-2.67，3.73-3.83，4.03-4.11，4.80-5.00，5.22，5.74-5.80，6.22，6.95，7.19-7.38，7.42-7.49，7.52-7.57，8.07.

参比例17：[4-({4-氨基-7-(丙-2-基)-5-[1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基}氨基)-3-甲基-1H-吡唑-1-基]乙酸

向参比例16制备的化合物(20mg)在乙醇(1mL)中的溶液中添加10％钯炭(Pd/C)(4mg)，且将混合物在氢气中在室温搅拌3小时。反应溶液通过硅藻土过滤，且将滤液减压浓缩以得到本发明的化合物(15mg)，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.39(乙酸乙酯：甲醇＝1：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.42-1.58，1.62-1.84，2.00-2.65，2.35，3.68-3.83，4.02-4.10，4.78-4.95，5.75-5.82，6.98，7.13-7.19，7.42-7.48，7.59-7.64，7.71，8.01.

参比例18：2-[4-({4-氨基-7-(丙-2-基)-5-[1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基}氨基)-3-甲基-1H-吡唑-1-基]乙酰胺

在室温向参比例17制备的化合物(50mg)在N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中的溶液中添加二异丙基乙基胺(25μL)、氯化铵(8mg)和2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(以下缩写为HATU)(54mg)，且将混合物搅拌1小时。反应溶液用乙酸乙酯稀释，且用水和饱和盐水溶液洗涤。所得有机层用无水硫酸钠干燥，且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物(37mg)，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.43(乙酸乙酯：甲醇＝9：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.51-1.59，1.62-1.88，2.06-2.24，2.37，2.54-2.67，3.73-3.83，4.03-4.11，4.77，4.87-5.01，5.39-5.62，5.75-5.80，6.30，6.99，7.18-7.21，7.43-7.49，7.56-7.61，8.03，8.09.

实施例19：2-(4-{[4-氨基-5-(1H-吲唑-4-基)-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基]氨基}-3-甲基-1H-吡唑-1-基)乙酰胺

在室温，向参比例18制备的化合物(10mg)在二氯甲烷(1mL)中的溶液中添加三氟乙酸(140μL)，且将混合物搅拌6小时。反应溶液用二氯甲烷稀释，且用饱和碳酸氢钠水溶液和饱和盐水溶液洗涤。所得有机层用无水硫酸钠干燥，且在减压下浓缩。残余物通过制备型薄层硅胶柱色谱法纯化以得到本发明的化合物(5.5mg)，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.40(乙酸乙酯：甲醇＝1：1)；

¹H-NMR(CD₃OD)：δ1.56-1.61，2.29，4.81，4.95-5.04，7.17，7.19-7.22，7.43-7.57，8.05，8.10.

实施例20：(4-{[4-氨基-5-(1H-吲唑-4-基)-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基]氨基}-3-甲基-1H-吡唑-1-基)乙腈

在0℃，向参比例18制备的化合物(20mg)在二氯甲烷(1.5mL)中的溶液中添加吡啶(0.5mL)和三氟乙酸酐(27μL)，且将混合物在室温搅拌18小时。向反应溶液添加饱和碳酸氢钠水溶液，且将溶液在室温搅拌16小时。反应溶液用二氯甲烷稀释，且用饱和碳酸氢钠水溶液和饱和盐水溶液洗涤。所得有机层用无水硫酸钠干燥，且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到四氢吡喃保护的标题化合物产物(15mg)。进行类似于实施例2的步骤，其通过使用四氢吡喃保护的产物(15mg)得到本发明的化合物，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.29(乙酸乙酯)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.56-1.61，2.29，4.88-5.04，6.41，7.02，7.20-7.23，7.43-7.48，8.14，8.22.

实施例21：4-{[4-氨基-5-(1-苯并呋喃-5-基)-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基]氨基}-N-[2-(二甲基氨基)乙基]-3-氟苯甲酰胺

在室温向实施例15制备的化合物(20mg)在N,N-二甲基甲酰胺(4mL)中的溶液中添加二异丙基乙基胺(23μL)、N,N-二甲基乙二胺(10μL)和HATU(26mg)，且将混合物搅拌16小时。反应溶液用乙酸乙酯稀释，且用水和饱和盐水溶液洗涤。所得有机层用无水硫酸钠干燥，且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到本发明的化合物(19mg)，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.30(己烷：乙酸乙酯＝1：2，NH二氧化硅)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.53-1.60，2.29，2.49-2.57，3.48-3.56，4.94-5.08，6.75-6.83，6.88，7.18-7.22，7.40-7.45，7.55-7.64，7.68-7.72，8.81-8.88.

实施例22：4-{[4-氨基-5-(4-氯-3-羟基苯基)-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基]氨基}-3-氟-N-甲基苯甲酰胺

在0℃，向实施例14-13制备的化合物(32mg)在二氯甲烷(2mL)中的溶液中添加三溴化硼(38μL)，且混合物在室温搅拌1小时。将反应溶液冷却至0℃，然后，将氨水添加至溶液。反应溶液用二氯甲烷萃取，然后，有机层在减压浓缩。残余物通过制备型HPLC纯化以得到本发明的化合物的三氟乙酸盐。向该三氟乙酸盐中添加饱和碳酸氢钠水溶液，且将混合物用二氯甲烷萃取。所得有机层在减压浓缩以得到本发明的化合物(8mg)，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.24(己烷：乙酸乙酯＝1：1)；

¹H-NMR(DMSO-d₆)：δ1.42-1.47，2.76-2.80，4.76-4.86，6.91-6.97，6.98-7.00，7.17-7.22，7.63-7.72，8.36-8.41，8.43-8.52，10.28.

参比例19：2,4-二氯-5-碘-7-(氧杂环丁烷-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶

进行类似于参比例2→参比例4的步骤，其使用2,4-二氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶代替4,6-二氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶，且使用氧杂环丁烷-3-醇代替异丙醇以得到标题化合物，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.51(己烷：乙酸乙酯＝2：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ4.84-4.92，5.15-5.23，5.92-6.02，7.89.

参比例20：2-氯-5-碘-7-(氧杂环丁烷-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺

将参比例19制备的化合物(127mg)在氨/甲醇(1.5mL，8M)中的溶液在封闭管中在90℃搅拌16小时。反应溶液用乙酸乙酯稀释，然后，用水和饱和盐水溶液洗涤。所得有机层用无水硫酸镁干燥，且在减压下浓缩。残余物用水、己烷和乙酸乙酯洗涤以得到标题化合物(88mg)，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.33(己烷：乙酸乙酯＝2：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ4.80-4.88，5.09-5.20，5.70-5.98，7.56.

实施例23：1-(4-{[4-氨基-5-(1H-吲唑-4-基)-7-(3-氧杂环丁烷基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基]氨基}-3-甲基-1H-吡唑-1-基)-2-甲基-2-丙醇

进行类似于参比例1→参比例6→参比例7→参比例8→参比例9→实施例2的步骤，其使用参比例20制备的化合物代替参比例8制备的化合物，使用1-(4-氨基-3-甲基-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇代替1,3-二甲基吡唑-4-胺盐酸盐，且使用[1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]硼酸代替参比例11制备的硼酸以得到本发明的化合物，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.51(乙酸乙酯：甲醇＝9：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.19，2.29，4.01，4.84-4.96，5.12-5.18，5.34-5.40，5.65-5.77，6.33，7.12，7.20-7.23，7.45-7.50，8.12，8.23.

参比例21：2,4-二氯-7-(二氟甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶

将2,4-二氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(188mg)溶于氢氧化钾(898mg)的水溶液(2.7mL)。在-78℃，向溶液中添加1-氯-4-氯二氟甲磺酰基苯(392mg)在乙腈(3mL)中的溶液，且将混合物在80℃搅拌1小时。向反应溶液添加1N盐酸，将混合物用乙酸乙酯萃取，且有机层用饱和盐水溶液洗涤。所得有机层用无水硫酸钠干燥，然后，在减压浓缩。残余物用甲醇洗涤，然后，过滤以得到标题化合物(96mg)，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.25(己烷：乙酸乙酯＝1：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ6.78-6.80，7.52-7.92.

实施例24：4-{[4-氨基-5-(1-苯并呋喃-5-基)-7-(二氟甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基]氨基}-3-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺

进行类似于参比例1→参比例2→参比例3→参比例5→参比例6→参比例7→参比例8→参比例9的步骤，其使用参比例21制备的化合物代替4,6-二氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶，使用苯并呋喃-5-硼酸代替1-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-1H-吲哚-5-基硼酸，且使用4-氨基-3-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺代替2-氟-4-(甲基磺酰基)苯胺得到本发明的化合物，其具有以下物理性质。

TLC：Rf 0.37(二氯甲烷：甲醇＝9：1)；

¹H-NMR(CDCl₃)：δ3.00-3.18，5.02-5.12，6.82-6.84，7.05，7.16-7.19，7.21-7.27，7.40-7.45，7.48-7.89，8.58-8.64.

参比例22：N,N-二苄基-2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺

向2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(19mg)在异丙醇(1mL)中的溶液中添加二苄基胺(20mg)，且将混合物在室温搅拌2小时。反应溶液在减压浓缩，然后，残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物(30mg)，其具有以下物理性质。

¹H-NMR(CDCl₃)：δ4.99，6.49-6.53，7.28-7.36，7.55-7.59.

参比例23：4-{[4-(二苄基氨基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基]氨基}-3-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺

向参比例22制备的化合物(30mg)和4-氨基-3-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺(31.5mg)在叔丁醇(2mL)中的溶液中添加碳酸钾(36mg)和Xantphos(10mg)，且将混合物脱气。在氮气中，向反应溶液中添加三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(Pd₂(dba)₃)(8mg)，且混合物在120℃使用微波加热1小时。反应溶液用乙酸乙酯稀释，且用水和饱和盐水溶液洗涤。所得有机层用无水硫酸钠干燥，且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物(40mg)，其具有以下物理性质。

¹H-NMR(CDCl₃)：δ3.06，5.01，6.42-6.49，6.73，7.15，7.20，7.28-7.38，7.50-7.51，8.50.

参比例24：4-{[7-溴-4-(二苄基氨基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基]氨基}-3-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺

在0℃，向参比例23制备的化合物(30mg)在二氯甲烷(5mL)中的溶液中添加N-溴代琥珀酰亚胺(11mg)，且将混合物搅拌15分钟。反应溶液用二氯甲烷稀释，且用水和饱和盐水溶液洗涤。所得有机层用无水硫酸钠干燥，且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物(40mg)，其具有以下物理性质。

¹H-NMR(CDCl₃)：δ3.07，4.99，6.52，6.85，6.87，7.19-7.23，7.27-7.38，8.68.

参比例25：4-{[4-(二苄基氨基)-7-(丙-1-烯-2-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基]氨基}-3-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺

向参比例24制备的化合物(40mg)在N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中的溶液中添加4,4,5,5-四甲基-2-(丙-1-烯-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(24mg)、2M碳酸氢钠水溶液(0.11mL)和二氯化1,1′-二(二苯基膦基)二茂铁-钯(II)-二氯甲烷复合物(PdCl₂(dppf)·CH₂Cl₂复合物)(6mg)。将反应溶液脱气，然后，在氮气中，将溶液在80℃搅拌2小时。反应溶液用乙酸乙酯稀释，且用水和饱和盐水溶液洗涤。所得有机层用无水硫酸钠干燥，且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物(35mg)，其具有以下物理性质。

¹H-NMR(CDCl₃)：δ2.22，3.06，5.01，5.38，6.21，6.47，6.50，6.75，7.12-7.21，7.27-7.38，8.41.

参比例26：4-{[4-氨基-7-(丙-2-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基]氨基}-3-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺

向参比例25制备的化合物(35mg)在乙醇(3mL)中的溶液中添加氢氧化钯/炭(Pd(OH)₂/C)(3.5mg，10wt％)，且在氢气中，将混合物在80℃搅拌16小时。反应溶液通过硅藻土过滤，然后，将滤液减压浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物(15mg)，其具有以下物理性质。

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.34，3.08，3.46-3.53，5.20，6.38，6.55，6.80，7.20-7.29，8.61.

参比例27：4-{[4-氨基-5-溴-7-(丙-2-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基]氨基}-3-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺

在-78℃向参比例26制备的化合物(100mg)在四氢呋喃(30mL)中的溶液中添加N-溴代琥珀酰亚胺(50mg)，且将混合物搅拌15分钟。反应溶液用二氯甲烷稀释，且用水和饱和盐水溶液洗涤。所得有机层用无水硫酸钠干燥，且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物(130mg)，其具有以下物理性质。

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.34，3.08，3.40-3.47，6.19，6.36，6.96，7.21-7.27，8.48.

参比例28：4-({4-氨基-5-[3-(苄基氧基)苯基]-7-(丙-2-基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基}氨基)-3-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺

向参比例27制备的化合物(130mg)在1,4-二噁烷(15mL)中的溶液中添加3-苄基氧基苯基硼酸(137mg)、2M磷酸钾水溶液(0.45mL)和四(三苯基膦)钯(Pd(PPh₃)₄)(69mg)。将反应溶液脱气，然后，在氮气中，将溶液在100℃搅拌16小时。反应溶液用乙酸乙酯稀释，且用水和饱和盐水溶液洗涤。所得有机层用无水硫酸钠干燥，且在减压下浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物(33mg)，其具有以下物理性质。

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.42，3.09，3.48-3.55，5.13，6.37，6.78，6.97-7.00，7.07-7.09，7.21-7.24，7.28-7.29，7.34-7.46，8.61.

实施例25：4-{[4-氨基-5-(3-羟基苯基)-7-异丙基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基]氨基}-3-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺

向参比例28制备的化合物(33mg)在乙醇(10mL)中的溶液中添加氢氧化钯/炭(Pd(OH)₂/C)(6.6mg，20wt％)，且在氢气中，将混合物在室温搅拌2小时。反应溶液通过硅藻土过滤，然后，将滤液减压浓缩。残余物通过反相柱色谱法纯化(C18，10-90％乙腈/水，IscoCombiflash Companion MPLC系统)以得到本发明的化合物(17mg)，其具有以下物理性质。

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.41，3.09，3.47-3.54，5.27，5.95，6.34，6.73-6.88，6.99-7.02，7.19-7.25，8.61.

纯度(LC-MS/ELSD)：100％(保留时间：0.96分钟)；

MASS(ESI，正电子)：449(M+H)⁺.

实施例26-1至26-3：

进行类似于参比例23→参比例24→参比例25→参比例26→参比例27→参比例28→实施例2的步骤，其使用4-氨基-3-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺或相应的胺化合物代替4-氨基-3-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺，且使用1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吲唑代替4-苄基氧基苯基硼酸得到本发明的化合物，其具有以下物理性质。同时，进行HPLC制备型纯化代替实施例2中的硅胶柱色谱法。

实施例26-1：4-{[4-氨基-5-(1H-吲唑-4-基)-7-异丙基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基]氨基}-3-氟-N,N-二甲基苯甲酰胺三氟乙酸盐

¹H-NMR(CDCl₃)：δ1.35，2.98，3.36-3.45，6.55，7.13-7.55，7.97，8.07，8.61，13.21.

纯度(LC-MS/ELSD)：100％(保留时间：0.94分钟)；

MASS(ESI，正电子)：473(M+H)⁺.

实施例26-2：N²-[2-氟-4-(甲基磺酰基)苯基]-5-(1H-吲唑-4-基)-7-异丙基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2,4-二胺三氟乙酸盐

¹H-NMR(DMSO-d₆)：δ1.38，3.23，3.41-3.51，6.59，7.23，7.41-7.56，7.71-7.77，7.98，8.46，8.55.

纯度(LC-MS/ELSD)：100％(保留时间：0.97分钟)；

MASS(ESI，正电子)：480(M+H)⁺.

实施例26-3：N²-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-5-(1H-吲唑-4-基)-7-异丙基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2,4-二胺三氟乙酸盐

¹H-NMR(DMSO-d₆)：δ1.36，2.15，3.38-3.45，3.75，6.50，7.10-7.12，7.40-7.44，7.52-7.54，7.84-7.97，7.98，13.21.

纯度(LC-MS/ELSD)：99.8％(保留时间：0.81分钟)；

MASS(ESI，正电子)：402(M+H)⁺.

药理学实验例：

药理学实验例1：测量Brk抑制活性

使用LanthaScreen(注册商标)系统(Invitrogen)根据所附的手册进行对Brk酶的抑制活性的测定。使用的试剂如下所述。

反应缓冲液：使用纯净水制备含有50mmol/L HEPES(pH7.5)、0.01％Brij35、10mmol/L MgCl₂和1mmol/L EGTA的溶液。

受试物质(本发明化合物)的溶液：将受试化合物在DMSO中的各浓度溶液用反应缓冲液稀释20倍，且制备所含受试化合物的浓度为终浓度5倍的溶液。

酶溶液：使用反应缓冲液制备含有480ng/mL Brk酶的溶液。

底物溶液：使用反应缓冲液制备含有57μmol/L ATP和500nmol/L荧光素-Poly GT(Invitrogen)的溶液。

检测溶液：使用稀释液B(Invitrogen)制备含有20mmol/L EDTA和4nmol/L PY20(Invitrogen)的溶液。

向96孔板(Nunc)中分配10mmol/L的测试化合物的DMSO溶液，并且进一步通过使用DMSO来制备公比为3的系列稀释液。在用于测量的96-孔板的各孔中，对于空白组和对照组加入含有DMSO的5μL反应缓冲液，和对于测试物质组加入5μL测试物质溶液。接下来，空白组每孔加入10μL反应缓冲液，媒介物组和测试化合物组每孔加入10μL酶溶液，然后在室温下搅拌混合物10分钟。搅拌结束后，向各孔中加入10μL底物溶液，在室温遮光条件下搅拌混合物1小时。反应结束后，向各孔中加入25μL检测溶液，将混合物在室温遮光条件下放置30分钟。放置后，当使用Analyst GT(Molecular Devices，LLC)用340nm的激发光照射时，测定520nm和495nm的荧光强度。通过时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)对人造底物的磷酸化进行定量。关于各孔，通过将520nm的荧光信号除以495nm的荧光信号计算TR-FRET比例，且根据下述数学公式1计算测试化合物组中的抑制率(％)。

[数学公式1]

抑制率(％)＝{1-(测试化合物组的TR-FRET比-A)/(B-A)}×100

A：空白组的TR-FRET比的平均值

B：媒介物组的TR-FRET比的平均值

测试化合物的50％抑制率的值(IC₅₀值)是由基于各浓度的测试化合物的抑制率的抑制曲线计算的。

因此，发现本发明的化合物的各IC₅₀值等于或低于0.1μmol/L，本发明的化合物具有有效的Brk抑制活性。

例如，本发明的多个化合物的IC₅₀值示于以下表1。

[表1]

实施例编号	Brk抑制活性(IC₅₀，nM)
		1	2.1
2	5.4
		4-1	5.1
4-2	9.3
		4-3	8.5
8	7.6
		10	6.9
12	5.1
		13-1	3.3
13-9	4.1
		14-4	12
14-11	50
		18-1	7.7
23	9.7
		25	3.4
26-1	3.7

药理学实验例2：对于除了Brk外的其它激酶的酶抑制活性的测试(选择性实验)

2-1：Lck抑制活性

通过使用含有以下试剂(Tyr 2肽，Tyr 2磷酸-肽，5×激酶缓冲液，ATP，着色试剂A，着色缓冲液和终止试剂)的Z'-LYTE激酶测定Kit-Tyr 2肽(Invitrogen)和Lck进行Lck的酪氨酸磷酸化。通过使用荧光共振能量转移(FRET)方法测定Lck活性。

将本发明化合物在二甲基亚砜(DMSO；Sigma-Aldrich Co.LLC)中的稀溶液(5μL)加入到96孔测定板中。另外，将由DL-二硫苏糖醇(DTT；2mM)、Tyr 2肽(2μM)、激酶缓冲液和Lck组成的肽/激酶缓冲液加入到测定板中，并将反应溶液在25℃预温育20分钟。然后，加入由三磷酸腺苷(ATP；45μM)和激酶缓冲液组成的ATP溶液(5μL)，并将反应溶液在25℃孵育1小时。孵育后，加入由着色剂B和着色缓冲液组成的着色溶液A(10μL)，并将反应溶液在25℃孵育1小时。将终止试剂(10μL)加入到每个孔中，使得酶反应停止。使用445nm和520nm的波长在荧光读板仪上测量每个孔的荧光染色。根据所附手册，通过445nm处的着色与520nm处的着色的比率来确定磷酸化的比率。

本发明的化合物的抑制率(％)根据以下数学公式2计算。

[数学公式2]

抑制率(％)＝{1-(AX-AB)/(AC-AB)}×100

AX：添加本发明的化合物时的磷酸化比率

AB：空白组的磷酸化比率

AC：仅添加DMSO时的磷酸化比率

本发明的化合物的50％抑制率的值(IC₅₀)是从基于各浓度的本发明化合物的抑制率的抑制曲线计算的。

2-2：Syk抑制活性

将本发明的化合物溶解于DMSO中，制备浓度为1μmol/L测试浓度的100倍的溶液。用测试缓冲液(20mmol/LHEPES，0.01％Triton X-100，2mmol/L DTT，pH 7.5)将溶液进一步稀释25倍，得到测试物质溶液。关于阳性对照物质(十字孢碱)，以类似的方式制备阳性对照物质的溶液。

将用测试缓冲液制备的4倍浓度的5微升测试物质溶液、4倍浓度的5μL底物(Blk/Lyntide)/ATP/金属(Mg)溶液和2倍浓度的10μL Syk激酶溶液在由聚丙烯制成的384孔板的孔中混合，并使混合物在室温下反应1小时(底物的最终浓度为1,000nmol/L，ATP终浓度为26μmol/L)。向混合物中加入60μL终止缓冲液(QuickScout Screening Assist MSA；CarnaBiosciences，Inc.)以终止反应。将反应溶液中的底物肽和磷酸化肽分离并定量。通过由底物肽的峰高度(S)和磷酸化肽的峰高度(P)计算的产物比(P/(P+S))来评价激酶反应。

本发明化合物对药理学实验例2中的Lck和Syk激酶的抑制率，例如在

实施例1、实施例4-3和实施例13-1的本发明化合物的情况下对Lck和Syk激酶的抑制率如下表2所示。

[表2]

从结果来看，关于Brk相对于Lck的选择性抑制活性，在实施例1化合物的情况下，对Brk的选择性抑制活性相比于Lck为4,762倍，在实施例4-3化合物的情况下，对Brk的选择性抑制活性相比于Lck为294倍，在实施例13-1的化合物的情况下，对Brk的选择性抑制活性相比于Lck为3,030倍。此外，对于Syk，三种化合物中的每一种在1μM时都没有抑制活性。因此，发现本发明的化合物具有有效的Brk抑制活性并且具有优异的Brk选择性。

[制剂实施例]

制剂实施例1

以下成分可以以常规方式混合，并压制以得到每片含10mg活性成分的10,000片片剂。

·N⁶-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(1H-吲哚-5-基)-1-异丙基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺…100g

·羧甲基纤维素钙(崩解剂)…20g

·硬脂酸镁(润滑剂)…10g

·微晶纤维素…870g

工业应用

本发明的化合物具有Brk抑制活性，且可有效预防和/或治疗涉及Brk的疾病，例如癌症等。

Claims

1.通式(I)表示的化合物、其盐、其溶剂合物、其N-氧化物或这些中任一种的前药，其中该化合物为:

其中:

表示

环1表示3至15元环；

R⁴和R⁵各自独立地表示氢原子、C1-4烷基或C1-4酰基；

p表示0至7的整数；

R³表示C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、(C3-6环烷基)-(CH₂)_r-基或(3-至6-元饱和杂环)-(CH₂)_s-基，所述R³可取代有卤素；

r表示0至4的整数；

s表示0至4的整数；

环2表示3至15元环；

R⁶表示羟基、C1-4烷基、C1-4烷氧基或NR¹²R¹³；

R⁸表示羟基、C1-4烷氧基或NR¹⁵R¹⁶；

R⁹、R¹⁰、R¹²和R¹³各自独立地表示氢原子、C1-4酰基或可取代有NR¹⁵R¹⁶的C1-4烷基；

R¹⁴表示氢原子或C1-4烷基；

R¹⁵或R¹⁶各自独立地表示氢原子、C1-4烷基或C1-4酰基；

R¹⁵和R¹⁶，与它们连接的氮原子一起，可形成5至6元饱和环状胺；

q表示0至7的整数；

条件是当p和q各自表示2或更大的整数时，R¹和R²各自独立地可相同或不同。

2.根据权利要求1的化合物，其中q为1或更大的整数。

3.根据权利要求1或2的化合物，其通过通式(I-a)表示:

其中，所有的符号均表示与权利要求1所述的符号相同的含义。

4.根据权利要求1或2的化合物，其通过通式(I-b)表示:

5.根据权利要求1、2和4任一项的化合物，其中R³为可取代有卤素的C3-4支链烷基。

6.根据权利要求1、2、4和5任一项的化合物，其中环2为苯环，且当q表示1或更大的整数时，至少一个R²为卤素。

7.根据权利要求1、2、4和5任一项的化合物，其中环2为5至6元单环芳族杂环。

8.根据权利要求1的化合物，其通过通式(I-c)表示:

9.化合物，其为：

(6)4-(4-氨基-2-{[2-氟-4-(甲基磺酰基)苯基]氨基}-7-异丙基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)-1H-吲唑-7-甲腈。

10.化合物、其盐、其溶剂合物、其N-氧化物或这些中任一种的前药，其中该化合物为：

11.药物组合物，其包含根据权利要求1的通式(I)表示的化合物、其盐、其溶剂合物、其N-氧化物或这些中任一种的前药作为活性成分。

12.根据权利要求11的组合物，其为Brk抑制剂。

13.根据权利要求11的组合物，其为用于预防和/或治疗癌症的药物。

14.根据权利要求13的组合物，其中所述癌症为乳腺癌、卵巢癌、大肠癌、肺癌、前列腺癌、头颈癌、淋巴瘤、脑肿瘤、神经胶质瘤、垂体腺瘤、眼色素层恶性黑素瘤、脑膜瘤、胸腺瘤、间皮瘤、食管癌、胃癌、十二指肠癌、肝细胞癌、胆管癌、胆囊癌、胰腺癌、肾细胞癌、肾盂-输尿管癌、膀胱癌、阴茎癌、睾丸癌、子宫癌、阴道癌、外阴癌、皮肤癌、恶性骨肿瘤、软组织肉瘤、软骨肉瘤、白血病、骨髓增生异常综合征和多发性骨髓瘤。

15.一种药物，其包含根据权利要求1的通式(I)表示的化合物、其盐、其溶剂合物、其N-氧化物或这些中任一种的前药，以及选自以下的至少一种：烷化剂、抗代谢药、抗癌抗生素、植物衍生的制剂、激素制剂、铂化合物、拓扑异构酶抑制剂、激酶抑制剂、抗CD20抗体、抗HER2抗体、抗EGFR抗体和抗VEGF抗体。

16.预防和/或治疗癌症的方法，包括向需要预防和/或治疗癌症的患者给药有效量的根据权利要求1的通式(I)表示的化合物、其盐、其溶剂合物、其N-氧化物、或这些中任一种的前药。

17.抑制Brk的方法，包括向需要抑制Brk的患者给药有效量的根据权利要求1的通式(I)表示的化合物，其盐、其溶剂合物、其N-氧化物、或这些中任一种的前药。

18.根据权利要求1的通式(I)表示的化合物、其盐、其溶剂合物、其N-氧化物、或这些中任一种的前药，其用于预防和/或治疗癌症。

19.根据权利要求1的通式(I)表示的化合物、其盐、其溶剂合物、其N-氧化物或这些中任一种的前药在制备用于预防和/或治疗癌症的药物中的用途。