CN101404995B

CN101404995B - 含木脂素类化合物水包油滴型乳剂及含有其的组合物

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Publication number: CN101404995B
Application number: CN2006800098836A
Authority: CN
Inventors: 山田大辅; 河村峰子; 小野佳子; 富森菜美乃; 西海俊宏; 中原光一
Original assignee: Suntory Holdings Ltd
Current assignee: Suntory Holdings Ltd
Priority date: 2005-03-31
Filing date: 2006-03-31
Publication date: 2013-07-31
Anticipated expiration: 2026-03-31
Also published as: EP1864659A1; TW200701992A; CA2603347A1; EP1864659A4; WO2006106926A1; US20090202643A1; ES2375115T3; AU2006231967B2; KR101327649B1; EP1864659B1; AU2006231967A1; KR20080002902A; JPWO2006106926A1; JP5096138B2; CA2603347C; TWI368522B; US8685455B2; CN101404995A

Abstract

本发明的课题是提供使木脂素类化合物的体内吸收速度加快即具有速效性的木脂素类化合物。对于油脂内溶解有一种以上木脂素类化合物的油相与水相乳化形成的水包油滴型乳剂，通过高速搅拌等使分散相的油滴的粒径进行微细化从而制成的平均粒径为1000nm以下、优选500nm以下、更优选300nm以下的木脂素类化合物的体内吸收速度加快、具有速效性的含木脂素类化合物组合物。

Description

含木脂素类化合物水包油滴型乳剂及含有其的组合物

技术领域

本发明涉及含有木脂素类化合物的水包油滴型乳剂及含有其的组合物，更加详细地说，涉及使木脂素类化合物的体内吸收速度改善的组合物。

背景技术

对于木脂素类化合物，已报道了其在身体内的各种作用，例如在USP4427694中公开，芝麻素对酒精中毒、缓和饮酒或吸烟的戒断症状有效。此外，在日本特开平2-138120号公报中公开，芝麻醇、表芝麻醇对支气管哮喘等变应性疾病的治疗·预防有效。本申请者也在研究证实木脂素类化合物具有各种生理作用，到目前为止已明确其具有血中胆固醇降低作用(日本专利3001589号)、Δ⁵-去饱和酶阻断作用(日本专利3070611号)、肝功能改善作用(日本专利3075358号)、胆固醇降低(日本专利3075360号)、防止醉酒作用(日本专利3124062号)、胆固醇及胆汁酸代谢阻断、胆固醇降低作用(日本专利3283274号)、癌抑制作用(日本专利3183664号)、乳腺癌抑制作用(日本特开平05-043458号)、过氧化脂质生成抑制作用(日本特开平05-051388号)、活性氧除去作用(日本特开平06-227977号)等效果。

所述木脂素类化合物的效果中，有优选可长期慢慢发挥的效果，也有优选摄取后可快速发挥的效果。例如防止醉酒的效果、活性氧除去效果，则优选具有速效性。

但是，木脂素类化合物在水中几乎不溶解，在可用于医药用或食用的有机溶剂中仅是某种程度地溶解。这种脂溶性物质存在身体内难吸收的问题。作为提高脂溶性物质的体内吸收性的方法，提出使脂溶性物质的胶粒微细化(微粒子化)的方法。从消化道吸收性来看，这是利用了脂溶性物质的粒径越小越有利于吸收的性质。具体来说，例如日本特开2004-196781号中公开，由CoQ10和特定的聚甘油、脂肪酸单酯等组成的组合物，且其为通过使平均粒径为110nm以下从而使身体内吸收性显著改善的含CoQ10水溶性组合物。此外，在日本特开平9-157159号中公开，使类胡萝卜素类溶解在油脂中形成的油相与含有聚甘油脂肪酸酯、卵磷脂及多元醇的水相乳化从而形成的组合物，且其为通过使上述油相的平均粒径为100nm以下从而使难溶性物质类胡萝卜素的体内吸收性改善的含类胡萝卜素类组合物。

由所述可知，通过使脂溶性物质的胶粒微细化(微粒子化)，可提高其体内吸收性(即总吸收量)。但是，关于脂溶性物质的体内吸收速度，上述文献中未作任何提示。

专利文献1： USP4427694

专利文献2：日本特开平2-138120号

专利文献3：日本专利3001589号

专利文献4：日本专利3070611号

专利文献5：日本专利3075358号

专利文献6：日本专利3075360号

专利文献7：日本专利3124062号

专利文献8：日本专利3283274号

专利文献9：日本专利3183664号(日本特开平04-159221号)

专利文献10：日本特开平05-043458号

专利文献11：日本特开平05-051388号

专利文献12：日本特开平06-227977号

专利文献13：日本特开2004-196781号

专利文献14：日本特开平9-157159号

发明内容

本发明者认为，如果能够使木脂素类化合物的体内吸收速度加快，即如果能够得到具有速效性的木脂素类化合物，木脂素类化合物的部分作用可比以往更高效地发挥。具体来说，在即将饮酒之前或刚饮酒之后通过摄取体内吸收速度加快的木脂素类化合物，能够高效发挥防止醉酒作用。或者，在即将运动之前通过摄取体内吸收速度快的木脂素类化合物，能够高效地除去运动中产生的体内活性氧。

因此，本发明的课题是提供：使木脂素类化合物的体内吸收速度加快、即具有速效性的木脂素类化合物。

本发明者为了达到上述目的进行精心研究，结果吃惊地发现：经口投与使溶解一种以上木脂素类化合物的油相与水相乳化而得到的水包油滴型乳剂的含木脂素类化合物组合物后，与经口投与在油脂内溶解的木脂素类化合物的情况相比，体内吸收速度显著加快，于是完成了本发明。

本发明提供使溶解一种以上木脂素类化合物的油相与水相乳化而成的水包油滴型乳剂。将临床上有效量的含有一种以上木脂素类化合物的乳剂空腹经口投与时，只要以达到最高血药浓度的时间(Tmax)在5小时以内、优选2.5小时以内、更优选2.0小时以内的速度可有效吸收木脂素类化合物，乳剂中作为分散相的油滴的平均粒径无特别限定。根据本发明者的研究，具有100nm、130nm、250nm的平均粒径的任何乳剂，均显示良好的吸收。

本发明还提供，以达到最高血药浓度的时间(Tmax)在经口投与后5小时以内、优选2.5小时以内、更优选2.0小时以内的速度可吸收木脂素类化合物的含木脂素类化合物组合物及其制造方法。这种组合物可通过包括下述工序的方法制造：

(1)将一种以上木脂素类化合物溶解于油脂中，得到成为油相的木脂素类化合物溶解液的工序；

(2)将上述木脂素类化合物溶解液与水相乳化形成水包油滴型乳剂的工序；

(3)进一步乳化使上述乳剂中的油滴的平均粒径微细化到1000nm(优选500nm)以下的工序。

根据本发明，经口投与木脂素类化合物时，与只将木脂素类化合物溶解在油脂内并在相同条件下投与的情况相比，达到最高血药浓度的时间(Tmax)大大缩短，并且能够提高最高血药浓度(Cmax)。

因此，根据本发明，在即将运动之前作为抗氧化剂摄取，能够高效除去运动中产生的活性氧。并且，在即将饮酒之前或刚饮酒之后作为酒精代谢促进剂摄取，能够防止醉酒。

本发明的组合物，可以片剂、胶囊剂等形式利用，因其具有良好的分散稳定性，所以也可以饮食品、特别是健康饮料的形式利用。

附图说明

图1是表示投与本发明的乳剂(平均粒径

100nm)和对比例的组合物后的大鼠血中的芝麻素浓度及表芝麻素浓度的总和(芝麻素+表芝麻素浓度)的经时变化图。

图2是表示投与本发明的乳剂(平均粒径

100nm)和对比例的组合物后的大鼠体内吸收量(AUC)图。

图3是表示投与本发明的乳剂(平均粒径

130nm)和对比例的组合物后的大鼠血中的芝麻素浓度及表芝麻素浓度的总和(芝麻素+表芝麻素浓度)的经时变化图。

图4是表示投与本发明的乳剂(平均粒径

130nm)和对比例的组合物后的大鼠体内吸收量(AUC)图。

图5是表示投与本发明的乳剂(平均粒径250nm)和对比例的组合物后的大鼠血中的芝麻素浓度及表芝麻素浓度的总和(芝麻素+表芝麻素浓度)的经时变化图。

图6是表示投与本发明的乳剂(平均粒径

250nm)和对比例的组合物后的大鼠体内吸收量(AUC)图。

图7是表示投与本发明的乳剂(平均粒径

250nm)的均质乳化组合物和部分非均质乳化组合物后的大鼠体内吸收量(AUC)图。

具体实施方式

木脂素类化合物

作为本发明使用的木脂素类化合物，可以为芝麻素、芝麻醇、表芝麻素、表芝麻醇、芝麻林酚(sesamolin)、2-(3，4-亚甲基二氧苯基)-6-(3-甲氧基-4-羟基苯基)-3，7-二氧杂二环[3，3，0]辛烷、2，6-双-(3-甲氧基-4-羟基苯基)-3，7-二氧杂二环[3，3，0]辛烷、或2-(3，4-亚甲基二氧苯基)-6-(3-甲氧基-4-羟基苯氧基)-3，7-二氧杂二环[3，3，0]辛烷等。这些化合物可以单独使用，也可以混合使用。

上述木脂素类化合物的形态、制造方法等没有任何限定，例如可以使用通过公知的方法(例如在芝麻油中加入热甲醇进行提取，除去甲醇后，在残渣中加入丙酮进行提取的方法(日本特开平4-9331号公报中记载))从芝麻油中提取的木脂素类化合物(木脂素类化合物高含量的提取物或精制物)，也可以直接使用市售的芝麻油(液态)。但是，使用芝麻油时，因为芝麻油特有的风味有时在感官上并不理想，所以优选使用从芝麻油中提取的无臭无味的木脂素类化合物高含量的提取物或精制物。此外，使用芝麻油时，因为木脂素类化合物的含量低，如果要配合优选量的木脂素类化合物，那么所开处方的含有含木脂素类化合物水包油滴型乳剂的组合物的摄取量就变得太大，不适合摄取。因此，从希望摄取量少的观点来看，优选使用从芝麻油中提取的木脂素类化合物高含量提取物或分离精制的木脂素类化合物的精制物。此外，因为从木脂素类化合物高含量的芝麻种子等中提取的提取物具有诱人的芝麻香味，所以如果用于本发明的动物用饮食品，则可以附加芝麻的香味。

此外，通过合成也可以得到木脂素类化合物。作为这种方法，例如根据Beroza等的方法(J.Am.Chem.Soc.，78，1242(1956))可合成芝麻素、表芝麻素，此外，根据Freundenberg等的方法(Chem.Ber.，86，1157(1953))可合成松脂醇，据Freundenberg等的方法(Chem.Ber.，88，16(1955))可合成丁香脂素。

木脂素类化合物可以作为糖苷的形式使用，并且可以将这些化合物单独作为组合物的成分或适当组合后作为组合物的成分。

含木脂素类化合物乳剂

本发明提供含有木脂素类化合物的乳剂。这里所述的作为乳剂的木脂素类化合物，是将溶解有木脂素类化合物的油脂(油相)分散到水等水相中形成的水包油滴型乳剂。

本发明的“油相”是指将木脂素类化合物溶解在油脂中的木脂素类化合物溶解液。具体可以为芝麻油、溶解于芝麻油中的芝麻油的木脂素类化合物高含量提取物(芝麻油浓缩物)，此外可以为芝麻提取物、精制的木脂素类化合物等粉状(固体状)木脂素类化合物溶解在油脂内而制备的油相。这里，使木脂素类化合物溶解的油脂，只要是可在食品或医药品中添加且可溶解木脂素类化合物的油脂，没有特别限定，可以单独使用1种，也可以混合多种使用。具体来说可以为杏仁油、红花油、杏核油、鳄梨油、月见草油、小麦胚芽油、玉米油、向日葵油、核桃油(山核桃油)、橄榄油、蓖麻籽油、夏威夷核油、葡萄籽油、可可脂油、椰子油、大豆油、菜籽油、花生油、米油、芝麻油、棕榈核油、棕榈油、荷荷巴油、澳洲坚果油、乳木果油、芒果油、烛果油、鲸油、沙丁鱼油、乌贼油等天然油脂，人造黄油等合成油脂。以上述橄榄油等中含有的甘油二酯为主要成分的油脂、以棕榈核油等中含有的中链脂肪酸甘油三酯(MCT)为主要成分的油脂等均可以使用。其中，因为含有大量饱和脂肪酸的油脂不易被氧化，所以优选。此外，不仅可使用常温下为液态的油脂，而且也可以使用与半固体状或固体状的猪油、牛脂、氢化鱼油、人造黄油、白油等混合的油脂。木脂素类化合物以及木脂素类化合物高含量提取物，因为其本来就是食用油脂中含有的有效成分及其提取物，所以容易向油脂中添加，常温下只进行混合就可使木脂素类化合物溶解，也可根据需要进行加热溶解等。

本发明中的“水相”，只要是水系溶剂就没有特别限定，可以为水、或水溶液，此外可以为果汁饮料、碳酸饮料、牛奶、豆浆、谷物饮料、咖啡、绿茶等一般饮料、以及酒精饮料等各种水饮料。

此外，为了提高油相的含有率，可以在水相中添加助溶剂。所述助溶剂，例如可以为丙二醇、乙醇、单糖及二糖以及糖醇(例如山梨糖醇、木糖醇、甘露糖醇)。

制备本发明的含木脂素类化合物乳剂时，首先要制备木脂素类化合物的溶解液(油相)。如上所述，可以直接使用芝麻油等的溶解液，也可以将粉末状木脂素类化合物添加到作为溶剂的油脂中混合，优选在加温下通过搅拌使其充分溶解来制备。木脂素类化合物和油脂的配合比，考虑到因木脂素类化合物的种类及作为溶剂的油脂的不同而不同，可进行适当设定。本申请者发现，对于木脂素类化合物的芝麻素、表芝麻素及其混合物，油脂不同其溶解度也不同(参照表1)。

[表1]

芝麻素、表芝麻素及其混合物在各种油脂中的溶解度(％)

※1：MCT-1…Riken Vitamin公司[ActorM-1：ァクタ一M-1](日本商品名)

(C8∶C12＝1∶1的中链脂肪酸甘油三酯)

※2：MCT-2…Riken Vitamin公司[ActorM-2：ァクタ一M-2](日本商品名)

(C8中链脂肪酸甘油三酯)

※3：甘油二酯…花王[Econa Cooking Oil：ェコナクッキングォィル](日本商品名)

※4：混合物…芝麻素∶表芝麻素＝51.1∶48.2

表1表明，木脂素类化合物和油脂的配合比(重量比)，只要木脂素类化合物∶溶剂＝1∶15～2000、优选为1∶15～100的程度，木脂素类化合物就可充分溶解。

通过将该油相和水相混合实施均质化来使其乳化，可得到油滴分散在水中的水包油滴型乳剂。

油相和水相的混合比(重量比)可适当设定，以便含有目标浓度的木脂素类化合物。例如可使油相∶水相＝1∶2～100，或使其为1∶3～50。

实施均质化的物理手段，没有任何限定，例如可以为搅拌乳化机、高压均质机、超声波乳化机、超级搅拌器、胶体磨等装置。

根据本发明者的研究，如果没有形成均质的乳剂即乳剂中油滴的分散稳定性差时，其在体内的吸收性(即总吸收量、在本说明书中有时称为“吸收量”“AUC”)有时会降低。要得到均质的乳剂，可在乳剂的水相及/或油相中添加表面活性剂。表面活性剂可根据木脂素类化合物及油脂的种类、用量进行适当选择，例如可单独或混合使用甘油脂肪酸酯、蔗糖脂肪酸酯、蔗糖醋酸异丁酯、脱水山梨糖醇脂肪酸酯、丙二醇脂肪酸酯、硬脂酰乳酸钙、大豆皂角苷、卵磷脂、小麦蛋白分解物、明胶、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、阿拉伯胶、黄原胶、阿拉伯半乳聚糖、糊精、酪蛋白、酪蛋白钠等。木脂素类化合物是芝麻素及/或表芝麻素时，优选卵磷脂或其衍生物，特别优选溶血卵磷脂。溶血卵磷脂是水溶性卵磷脂衍生物的一种，同时被称为溶血磷脂质、1-单酰基甘油磷脂质、酶解卵磷脂、酶改性卵磷脂、溶血磷脂酰胆碱、单-O-酰基-3-磷酰胆碱，化学名为1-酰基-sn-甘油-3-磷脂酰胆碱，通过用磷脂酶A₂等处理卵磷脂来制造。对于制造方法，例如已在日本特开昭62-279832号、日本特开昭63-44893号、日本特开昭63-279753号等中公开，并且以日本商品名「レシノ一ル：Lecinol」、「サンレシチン：Sunlecithin」等在市场上销售。溶血卵磷脂不必是纯品，虽优选纯度高的，但只要纯度为30％以上也可含有其他杂质。

因为卵磷脂是以大豆、卵黄为原料的天然乳化剂，所以优选。此外，酶解卵磷脂，因为其通过脂肪酸的酯键发生水解使羟基增加从而使其亲水性增强，O/W乳化能力非常高，并且具有水溶性，耐酸性、耐碱性、耐热性高，所以优选。

使用表面活性剂时，含有木脂素类化合物的油相和表面活性剂的配合比例(重量比)，例如为1∶0.05～10，优选1∶0.1～5。

已知一般情况下，随着粒径的减小表面积扩大，所以静电稳定性增加，分散稳定性提高。因此，要得到均质的乳剂，使分散相的油滴的粒径变小(微细化)是有效的。具体来说，可使油滴的平均粒径为1000nm以下，优选为500nm以下，更优选为300nm以下。使其为300nm以下时，在室温下放置2天也不会发生油相分离，表示具有良好的分散稳定性。此外，根据本发明者的研究发现，使用MCT作为油脂时，油滴的粒径特异性变小。具体来说，用橄榄油作油脂制造的含芝麻素及表芝麻素乳剂的平均粒径为862.3nm、157.3nm、172.9nm时，而除使用MCT作油脂外，其他为相同条件下制造的含芝麻素及表芝麻素乳剂的平均粒径分别为277.7nm、81.5nm、95.9nm。因此，要制造微细化的木脂素类的油滴，特别是100nm以下的油滴时，优选MCT作油脂。MCT可使用作为椰子油、巴巴苏籽油等植物油脂中的成分而存在的MCT，也可以使用人工合成的MCT。

本发明的水包油滴型乳剂，可通过混合油相和水相进行均质化来制造，但要制造含有上述油滴的平均粒径微细化到1000nm以下、优选为500nm以下、更优选为300nm以下的油滴的乳剂，在使油相和水相混合进行予乳化后，可通过进一步实施使油滴的平均粒径变到上述粒径大小的乳化(本乳化)手段来制造。这种乳化手段，只要能够快速搅拌均可使用，无任何限制，具体来说，可以为与上述均质化处理相同的搅拌乳化机、高压均质机、超声波乳化机、超级搅拌器、胶体磨等装置。对于搅拌，可根据装置的种类、形状、被搅拌的对象物(油相和水相的混合物)的性质、用量进行适当设定，通常为5000～30000rpm、优选6000～20000rpm，大约搅拌10～30分钟。

本发明的含木脂素类化合物乳剂中，除上述木脂素类化合物、油脂、水系溶剂、表面活性剂外，为了防止氧化，还可以混合维生素C、维生素E、d-α-生育酚、鞣花酸、异抗坏血酸、异抗坏血酸钠、乙二胺四乙酸二钠、二丁基羟基甲苯、L-抗坏血酸钠、pherol等抗氧化剂。并且，根据需要还可以添加甜味料、调味料、酸味料、pH调节剂等。

用途

通过本发明可提高身体内木脂素类化合物的吸收性，因此，本发明的水包油滴型乳剂，能够作为木脂素类的吸收速度可产生优选效果的各种食品组合物或经口用医药组合物的形态使用。本发明的食品组合物，也包括饮料形态的食品组合物。本发明的食品组合物，可以制造成营养功能食品、特定保健用食品、健康食品、营养补助食品、健康饮料、软胶囊等。

本发明的水包油滴型乳剂在食品组合物或经口用医药组合物中的配合比(重量比)，可以适当设定以便含有目标浓度、量的木脂素类化合物，例如为约1～100重量％。此外，本发明的食品组合物或经口医药组合物中，可以使用经允许的各种添加物，例如赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、包衣剂、悬浮剂、乳化剂、稳定剂、保存剂、缓冲剂。

本发明的医药组合物中的有效成分木脂素类化合物的含量，可根据投与时间、间隔、目的、症状、对象的年龄、体重等适当调整。

本发明的食品组合物或经口医药组合物的对象是人或动物。动物为工业化动物、宠物、以及实验动物。具体来说，工业化动物是指牛、马、猪、山羊、羊等家畜，鸡、鸭子、鹌鹑、七面鸟、鸵鸟等家禽，鰤鱼、幼鰤鱼、真鲷、竹荚鱼、鲤鱼、虹鳟、鳗鱼等鱼类等工业上需要饲养的动物；宠物是指狗、猫、土拨鼠、小鸟、仓鼠、金鱼等所谓的玩赏动物、伙伴动物；实验动物是指大鼠、豚鼠、Beagle犬、小型猪、罗猴、红吼猴等医学、生物学、农学、药学等领域研究使用的动物。

评价方法

根据本发明经口投与木脂素类化合物时，与只将木脂素类化合物溶解在油脂内并在同样条件下投与的情况相比，达到最高血药浓度的时间(Tmax)大大缩短，并且可提高最高血药浓度(Cmax)。这种体内吸收性的提高，可通过经时测定血中木脂素类化合物的浓度来进行评价。

血中木脂素类化合物的浓度，可通过下述方法求出，即：采集血液，利用离心分离操作得到血浆样品，添加内标物(例如Funakoshi株式会社制Eudesmine(日本商品名))用固相提取用聚合物填充剂(例如Waters Corporation制造的Oasis HLB)进行固相提取，减压浓缩提取液后，使其悬浮于甲醇中，用过滤器过滤后注入LC-MS/MS中，对木脂素类化合物进行定量。

使用多种木脂素类化合物时，根据总血药浓度求出Cmax、Tmax进行评价。

在本说明书中所述的平均粒径，除特别情况外，是指等量径(对应于筛上分布曲线的50％处的粒径，或称为中位径或50％粒径)，可用光散射式粒度分布测定法测定。也可用动态光散射式粒度分布测定法测定。

实施例

以下列举实施例和对比例对本发明具体说明，但本发明并不限于下述实施例。

实施例1：吸收性试验-1

样品

将1g芝麻素(竹本油脂制造，芝麻素∶表芝麻素＝51.1∶48.2)悬浮于加热到80℃的50g橄榄油中，搅拌20分钟，使芝麻素均匀溶解。使该溶液冷却到约70℃，搅拌注入到将25g酶解卵磷脂(Sunlecitin VA-1：サンレシチンVA-1(日本商品名)，太阳化学(株)制造，有效成分33.3％，原料大豆)混合溶解在加温到70℃的1000ml水中的水溶液中，用Distromix(Atec.Japan(株)制造)，6000rpm乳化处理15分钟。进而将该乳化液在50～60℃保温，用高速搅拌乳化机(M-Technique(株)制造的Clearmix Double Motion)，在转子部为20000rpm、筛鼓部为12500rpm的条件下处理40分钟，得到含有芝麻素的水溶性乳化组合物(含芝麻素水包油滴型乳剂)(样品1)。并且，将得到的含芝麻素水包油滴型乳剂的平均粒径，用堀场制作所株式会社制造的动态光散射式粒度分布测定装置LB-550测定，结果为97.8nm。

作为对比例，使用将50mg芝麻素(竹本油脂制造，芝麻素∶表芝麻素＝51.1∶48.2)悬浮于加热到80℃的50ml橄榄油中并搅拌20分钟所得到的芝麻素均匀溶解的溶解液(对比样品)。

芝麻素体内吸收性试验

从日本Charles River公司购入SD(IGS)系雄性大鼠(9周龄)，在试验环境下驯化1周时间后，将发育正常的动物供给试验。将绝食一夜的大鼠分为2组，每组由4只组成，使用导管并以10mg/10mL/kg的剂量，经口投与样品1的含芝麻素水包油滴型乳剂或对比样品的溶解芝麻素的橄榄油脂。投与开始后，在1、3、5、7、9小时后及25小时后从尾静脉采血到肝素采血管内，通过离心分离操作(8000rpm、10min)得到血浆样品。添加内标物并用Oasis HLB进行固相提取，减压浓缩提取液后，使其悬浮于甲醇中，用过滤器过滤并注入到LC-MS/MS中，对芝麻素及其异构体表芝麻素进行定量。芝麻素及表芝麻素的量，根据常法，由芝麻素及表芝麻素的峰面积和使用Eudesmine(Funakoshi株式会社)作内标物的峰面积之比来决定。LC-MS/MS分析条件如下所示。

(HPLC)

色谱柱：Develosil

C30-UG-5(5μm、2.0Φ×50mm、野村化学公司制造)

移动相：A：蒸馏水、B：甲醇、D：100mM乙酸铵水溶液

流速：0.25mL/min

梯度：B液为55％、D液为10％2分钟，然后经过3分钟B液从55％到60％、D液为10％，经过2分钟B液从60％到85％、D液为10％的线性梯度。

(MS/MS)

测定模式：选择反应监测

检测：表芝麻素(保留时间约5.6分钟)，前驱离子m/z＝372([M+NH4]+)、生成离子m/z＝233

Eudesmine(保留时间约2.8分钟)，前驱离子m/z＝404([M+NH4]+)、生成离子m/z＝249

离子化法：ESI法

图1表示血中芝麻素浓度及表芝麻素浓度的总和(芝麻素+表芝麻素浓度)的经时变化。血中芝麻素+表芝麻素浓度的最大值(Cmax)，样品1摄取组为48ng/mL，而对比样品摄取组为20ng/mL。此外，达到最大值(Cmax)所需的时间(Tmax)，样品1摄取组约为1小时，而对比样品摄取组约为9小时。并且根据图1求出体内吸收量(AUC)，吸收量无差别(图2)。

从以上结果可知，样品1(含微细化木脂素类化合物水溶液)摄取组的体内吸收量虽无变化，但体内吸收速度加快，表明具有速效性。

实施例2：吸收性试验-2

样品

与实施例1相同，制备含芝麻素水包油滴型乳剂(样品2)。除使高速搅拌乳化机的乳化时间为30分钟之外，制造条件与实施例1相同。该乳剂的油滴的平均粒径为130nm(堀场制作所株式会社制造的动态光散射式粒度分布测定装置LB-550)。

芝麻素体内吸收性试验

试验方法以实施例1为标准进行。将绝食一夜的大鼠分为2组，每组由6只组成，使用导管并以10mg/10mL/kg的剂量，经口投与样品2(平均粒径130nm)的含芝麻素水包油滴型乳剂或实施例1中制备的对比样品的溶解芝麻素的橄榄油脂，测定血药浓度变化。

图3表示血中芝麻素浓度及表芝麻素浓度的总和(芝麻素+表芝麻素浓度)的经时变化。达到最大值(Cmax)所需的时间(Tmax)，对比样品摄取组约为7小时，而样品2摄取组约为1小时。血中芝麻素+表芝麻素浓度的最大值(Cmax)，对比样品摄取组为28ng/mL，而样品2摄取组为69ng/mL。此外，求出体内吸收量(AUC)，吸收量无差别(图4)。从上述结果可知，对于平均粒径为130nm的样品2，体内吸收量虽无变化，但体内吸收速度加快，表明具有速效性。

实施例3：吸收性试验-3

样品

与实施例2相同，制备含芝麻素水包油滴型乳剂(样品)。将乳化液在50～60℃保温，除使高速搅拌乳化机(M-Technique(株)制造的Clearmix DoubleMotion)转子部为9000rpm、筛鼓部为6500rpm之外，其他制造条件与实施例2相同。该乳剂的油滴的平均粒径为248.3nm(堀场制作所株式会社制造的动态光散射式粒度分布测定装置LB-550)。

芝麻素体内吸收性试验

试验方法以实施例1为基准进行，将绝食一夜的大鼠分为2组，每组由6只组成，使用导管并以10mg/10mL/kg的剂量，经口投与样品3(平均粒径248.3nm)的含芝麻素水包油滴型乳剂或实施例1制备的对比样品的溶解芝麻素的橄榄油脂，测定血药浓度变化。

图5表示血中芝麻素浓度及表芝麻素浓度的总和(芝麻素+表芝麻素浓度)的经时变化。达到最大值(Cmax)所需的时间(Tmax)，对比样品摄取组约为5小时，而样品3摄取组约为1小时。血中芝麻素+表芝麻素浓度的最大值(Cmax)，对比样品摄取组为24ng/mL，而样品3摄取组为67ng/mL。此外，根据图4求出体内吸收量(AUC)，吸收量无差别(图6)。

从上述结果可知，对于平均粒径为248.3nm(

250nm)的样品3，体内吸收量虽无变化，但体内吸收速度加快，表明具有速效性。

实施例4：吸收性试验-4

将实施例3得到的样品3(平均粒径248.3nm的含芝麻素水包油滴型乳剂)放置数月，对于样品中极少部分发生油相分离的样品(用目视确认)(样品4)，实施与实施例3相同的芝麻素体内吸收性试验。

与样品3相比，达到最大值(Cmax)所需的时间(Tmax)虽无变化，但样品4的Cmax的值已降低(未图示)。求出体内吸收量(AUC)，样品4摄取组与样品3摄取组相比，吸收量降低到约1/2倍(图7)。

从上述结果可知，如果不制备进行充分乳化的稳定的乳剂，那么体内吸收量会降低，即不能得到高效吸收。

实施例5：分散性试验

样品

将1g芝麻素(竹本油脂制造，芝麻素∶表芝麻素＝51.1∶48.2)悬浮于加热到100℃的50g中链脂肪酸三甘油酯(MCT)(ActorM-1：ァクタ一M-1(日本商品名)，Riken Vitamin(株)制造)或50g橄榄油中，使用Magnetic stirrer搅拌20分钟，使芝麻素均匀溶解制备油相。此外，使用0～100g酶解卵磷脂(Sunlecitin VA-1：サンレシチンVA-1(日本商品名)，太阳化学(株)制造，有效成分33.3％，原料大豆)作表面活性剂，混合溶解在加温到80℃的水中制备1000g水相。将上述油相冷却到约80℃，搅拌注入到上述水相中，进行予乳化。予乳化时使用M-Technique(株)制造的Clearmix CLM-1.5S，5000rpm搅拌5分钟。此外，如表2所示，对多个样品在予乳化之后继续进行本乳化处理。本乳化处理是：将予乳化液在温度80℃下，使用M-Technique(株)制造的Clearmix Double Motion CLM-2.2/3.7W，在转子部为20000rpm、筛鼓部为12500rpm的条件下处理30分钟。这样，根据各种不同的条件，得到16种含有芝麻素的水溶性乳化组合物(含芝麻素水包油滴型乳剂)(样品A～P)。这些乳剂的油滴的平均粒径，与实施例1相同，使用堀场制作所株式会社制造的动态光散射式粒度分布测定装置LB-550测定。进而量取10mL所述乳剂到沉淀管内，室温下静置2天，通过目视确认分离状态(分散稳定性)。

[表2]

结果如表3所示，使用MCT作油脂时，与使用橄榄油的情况相比，平均粒径变小。并且，粒径为300nm以下时，显示有良好的分散稳定性。

[表3]

实施例6：软胶囊剂

(油相)

芝麻素3.5g

维生素E(α-生育酚含量50％)40g

小麦胚芽油160g

(水相)

水1000g

酶解卵磷脂25g

与实施例1相同，制备油相和水相，在水相中滴加油相的同时，制成水包油滴型组合物。根据通常的转盘(Rotary)法，将该组合物填充到由明胶薄膜(明胶60.0％、甘油30.0％、对羟基苯(甲)酸甲酯0.15％、对羟基苯(甲)酸丙酯0.51％、水适量)构成的软胶囊中，制成软胶囊剂。

实施例6：健康饮料

芝麻素0.1％

橄榄油5％

液糖10％

酸味料0.2％

香料0.2％

酶解卵磷脂1.5％

水88.4％

在加温条件下将芝麻素添加到橄榄油中使其溶解，制备芝麻素溶解液。将规定量的液糖、水和酶解卵磷脂混合并高速搅拌，接着添加酸味料、香料，制成加入芝麻素的健康饮料。

Claims

1.水包油滴型乳剂，其为使溶解有一种以上木脂素类化合物的油相与水相乳化形成的水包油滴型乳剂，其中，油滴的平均粒径为100nm-300nm；

其中，木脂素类化合物是芝麻素及/或表芝麻素；

其中，油相及/或水相含有乳化上有效量的卵磷脂或其衍生物作为表面活性剂。

2.食品组合物或经口用医药组合物，其为含有权利要求1所述的水包油滴型乳剂的食品组合物或经口用医药组合物。

3.含木脂素类化合物组合物，其为经口投与用的含有木脂素类化合物的组合物，该组合物含有：使溶解有一种以上临床上有效量的木脂素类化合物的油相与水相乳化形成的并可含有乳化上有效量的表面活性剂的水包油滴型乳剂，其中，油滴的平均粒径为100nm-300nm,木脂素类化合物是芝麻素及/或表芝麻素，表面活性剂是卵磷脂或其衍生物；且所述水包油滴型乳剂是以达到最高血药浓度的时间（Tmax）在经口投与后5小时以内的速度可使木脂素类化合物有效吸收的水包油滴型乳剂。

4.如权利要求3所述的经口投与用组合物，其中，含有卵磷脂或其衍生物作为表面活性剂。

5.含木脂素类化合物组合物的制造方法，其中，包括下述工序：

（1）将一种以上木脂素类化合物溶解在油脂内得到成为油相的木脂素类化合物溶解液的工序；

（2）使所述木脂素类化合物溶解液与水相乳化形成水包油滴型乳剂的工序；

（3）进一步乳化使所述乳剂中的油滴的平均粒径微细化到100nm-300nm的工序，

其中，木脂素类化合物是芝麻素及/或表芝麻素；

其中，在油相及/或水相中添加乳化上有效量的卵磷脂或其衍生物作为表面活性剂进行工序（2）。