BRPI0620292A2

BRPI0620292A2 - triazolopiridazinas como moduladores da cinase

Info

Publication number: BRPI0620292A2
Application number: BRPI0620292-6A
Authority: BR
Inventors: Tianbao Lu; Richard Alexander; Richard W Connors; Maxwell D Cummings; Robert A Galemmo; Heather Rae Hufnagel; Dana L Johnson; Ehab Khalil; Kristi A Leonard; Thomas P Markotan; Anna C Maroney; Jan L Sechler; Jeremy M Travins; Robert W Tuman
Original assignee: Janssen Pharmaceutica Nv
Priority date: 2005-12-21
Filing date: 2006-12-18
Publication date: 2011-11-08
Also published as: MA30084B1; EP1966214B9; LT1966214T; IL192108A0; DK1966214T3; CY1118846T1; KR20080085154A; ZA200806277B; US20070203136A1; HN2008000931A; SV2008002963A; PL1966214T3; AP2008004502A0; EA015754B1; TWI399378B; AU2006331912B2; ME02736B; PE20110008A1; RS55630B1; US20090098181A1

Abstract

TRIAZOLOPIRIDAZINAS COMO MODULADORES DA CINASE. A presente invenção refere-se aos compostos de triazolopiridazina de fórmula (1): em que R^ 1^, R^ 5^, R^ 6^, R^ 7^, R^ 8^, e A são como definidos aqui a seguir, o uso detais compostos como moduladores da proteína tirosina cinase, particularmente os inibidores de c-Met, e o uso de tais compostos para reduzir ou inibir a atividade da cinase de c-Met em uma célula ou um indivíduo, e modular a expressão de c-Met em uma célula ou indivíduo, e o uso de tais compostos para a prevenção ou tratamento em um indivíduo de um distúrbio proliferativo de célula e/ou distúrbios relacionados a c-Met. A presente invenção refe-re-se ainda às composições farmaceuticas que compreendem os compostos da presente e aos métodos para o tratamento de condições tais como cânceres e outros distúrbios proliferativos de célula.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "TRIAZOLO- PIRIDAZINAS COMO MODULADORES DE CINASE".

REFERÊNCIA CRUZADA AOS PEDIDOS RELACIONADOS

Este pedido reivindica a prioridade para o Pedido de Patente Provisório U.S. N0 60/752,634, depositado no dia 21 de dezembro de 2005, cuja descrição completa está aqui a seguir incorporada em sua totalidade.

CAMPO DA INVENÇÃO

A presente invenção refere-se aos novos compostos que funcio- nam como moduladores de proteína tirosina cinase. Mais particulamente, a invenção refere-se aos novos compostos que funcionam como inibidores de c-Met.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

A presente invenção refere-se a triazolopiridazinas como inibido- ras de tirosinas cinases, incluindo c-Met. Triazolopiridazinas têm sido repor- tadas com propriedades terapêuticas úteis: US 5278161 e US 2003181455 descrevem as triazolopiridazinas como inibidoras de renina; US 6355798 descreve as triazolopiridazinas como inibidoras de GABA e Iigantes de re- ceptor de GABAA respectivamente; WO 2005002590 e US 2005096322 descrevem as triazolopiridazinas como mediando aumentos na massa ós- sea; US 2004192696 descreve as triazolopiridazinas como úteis para tratar ou minorar a gravidade de uma doença ou condição. Laboratórios acadêmi- cos descreveram experimentos com triazolopiridazinas no seguinte: Science of Synthesis (2002), 12, 15-225, Heterocycles (2003), 61, 105-112, Hete- rocycles (2002), 57(11), 2045-2064, Joumal of Heterocyclic Chemistry (1998), 35(6), 1281-1284, e Tetrahedron (1999), 55(1), 271-278.

Digno de nota também são US 4810705; DE 2222834 (equiva- lente, US 3823137); DE 2147013 (equivalente, US 3919200); DE 2113438; DE 2030581 (equivalente US 3823137); DE 1670160 (US 3506656); DE 1545598 (equivalente US 3483193); DE 2161587; DE 4309285; WO 2004021984; US 2004147568; JP 63199347; W01999037303; US 6297235; US 6444666; WO 2001034603; WO 2004017950; CA 2132489; WO 2004058769; US 2004192696 WO 2003074525; WO 2003032916; Pe- ido de Patente Japonês Número 62-147775; US 4260755; WO 2002012236; EP 464572; EP 404190; EP 156734; WO 2005002590; WO 2003074525; JP 63310891 e El Massry, Abdel Moneim; Amer1 Adel, "Syn- thesis of new s-triazol[4,3-b]pyridazines, "Heterocycles (1989), 29(10), 1907- 14; Amer, Adel; El Massry, Abdel Moneim; Badawi, Mohamed; Abdel- Rahman, Mohamed, M.; El Sayed, Safaa A. F., "Synthetic reactions and s- tructural studies of heterocycles containing nitrogen. Part 14. Dehydration of 2-(2-arylethyl)-2-hydroxy-4-oxopentanoil acids and their hydrazones a form heterocycles, Journal fuer Praktische Chemie/Chemiker-Zeitung (1997), 339(1), 20-25; Legraverend, Michel; Bisagni, Emile; Lhoste, Jean Marc, "Synthesis of s-triazol[4,3-b]pyridazine C-nucleosides (1), "Journal of Hete- rocyclic Chemistry (1981), 18(5), 893-8; Albright, J. D.; Moran, D. B.; Wright, W. B., Jr.; Collins, J. B.; Beer, B.; Lippa, A. S.; Greenblatt, E. N., "Synthesis and anxiolytic activity of 6-(substituted-phenyl)-1,2,4- triazol[4,3- b]pyridazines, "Journal of Medicinal Chemistry (1981), 24(5), 592-600; How, Pow-Yui; Parrick, John, "Thermal cyclization of pyridazinylhydrazones a give s-triazol[4,3- b]pyridazines and pyridazino[2,3-a]benzimidazole, "Journal of the Chemical Society, Perkin Transactions 1: Organic and Bio-Organic Che- mistry (1972-1999) (1976), (13), 1363-6; Lundina, I. B.; Frolova, N. N.; Pos- tovskii, I. Ya.; Bedrin, Α. V.; Vereshchagina, N. N., "Synthesis and study of the antitubercular activity of 2-(5-nitro-2- furyl)vinyl derivatives of pyridazine and s-triazol[4,3-b]pyridazine, "Khimiko-Farmatsevticheskii Zhurnal (1972), 6(4), 13-17; Sircar, Ila1 "Synthesis of new 1,2,4-triazol[4,3-b]pyridazines and related compounds, "Journal of Heterocyclic Chemistry (1985), 22(4), 1045- 8; Bratusek, Urska et al., "The synthese of N-phthaloyl-azatryptophan deriva- tives, "Acta Chimica Slovenica (1996), 43(2), 105-117; Sala, Martin et ai, "Synthesis of 3-(a- and b-D-arabinofuranosyl)-6-chloro-1,2,4- triazol[4,3- bjpyridazine, "Carbohydrate Research (2003), 338(20), 2057-2066; Cucek1 Karmen et al., "Synthesis of novel [l^^ltriazol^.S-bJpyridazines, "ARKIVOC (Gainesville, FL, United States) [arquivo online de computador] (2001), (5), 79-86, URL: http.7/www.arkat-usa.org/ark/journal/Volume2/Part3/Tisler/MT- 161/MT- 161.pdf; Svete1 Jurij et al., "A simple one pot síntese of 1-(s- triazol[4,3-x]azinyl-3)-substituted polyols,"Journal of Heterocyclic Chemistry (1997), 34(4), 1115-1121; Kosary1 Judit et ai, "Preparation of new [1,2,4]triazol[4,3-b]pyridazines. Part 12: Studies in the field of pyridazine compounds,"Pharmazie (1983), 38(6), 369-71; Kosary, J. et ai, "Studies in the field of pyridazine compounds. II. Derivatives of [1,2,4]triazol[4,3- b]pyridazine-3-earboxylie aeid,"Aeta Chimiea Aeademiae Seientiarum Hunga- ricae (1980), 103(4), 405-13; Stanovnik, B. etal., "Product class 1: pyrazoles, "Science of Synthesis (2002), 12, 15-225; Vranicar, Lidija etal., "Transforma- tion of N-(5-acetyl-6-metil-2-oxo-2H-pyran-3-yl)benzamide with hydrazines in the presence of an acidic catalyst, "Heterocyçles(2003), 61, 105-112; Bratu- sek, Urska et ai, "Synthesis and reactivity of (Z)-3-benzoylamino-4- dimethylamino-2-oxo-3- butene. Preparation of 1-aryl- and 1-heteroaryl- substituído 4-benzoylamino-5-methyl-1H-pyrazoles, "Heterocycles (2002), 57(11), 2045-2064; Bratusek, Urska et ai, "Transformation of 4-[1- (dimethylamino)ethylidene]-2-fenil-5(4H)-oxazolone into methyl 2- (benzoylamino)-3-oxobutanoate. The synthese of 1-substituted 4- (benzoylamino)-3-methyl-5(2H)-pyrazolones, "Journal of Heterocyclic Che- mistry (1998), 35(6), 1281-1284; Vranicar, Lidija etal., "2H-Pyran-2-ones as synthons for (E)-a,p-didehydroamino acid derivatives, "Tetrahedron (1999), 55(1), 271-278.

Proteínas cinases são componentes enzimáticos das vias de transdução de sinal que catalizam a transferência do fosfato do terminal de ATP para o grupo hidróxi de tirosina, serina e/ou resíduos de treonina de proteínas. Dessa maneira, os compostos que inibem as funções da proteína cinase são ferramentas valiosas para avaliar as conseqüências fisiológicas da ativação da proteína cinase. A superexpressão ou expressão não apro- priada de proteínas cinases normais ou mutantes, em mamíferos, tem sido uma questão de estudo extensivo e tem sido demonstrado que desempenha um papel significativo no desenvolvimento de muitas doenças, incluindo dia

O fator de crescimento de receptor de hepatócito (HGF) (tam- bém conhecido como fator de dispersão), c-Met, é um receptor de tirosina cinase que regula a proliferação, morfogênese e motilidade das células. O gene de c-Met é traduzido em uma proteína 170 kD que é processada no receptor de superfície de uma célula composto de uma subunidade de transmembrana β de 140kD β e subunidade α extra celular glicosilada de 50 kD.

Mutações em c-Met, superexpressão de c-Met e/ou HGF/SF, expressão de c-Met e HGF/SF pela mesma célula, e superexpressão e/ou sinalização aberrante de c-Met estão presente em uma variedade de tumo- res sólidos de ser humano, e acredita-se que participam da angiogênese, desenvolvimento, invasão e metástase de tumor.

As linhas de células com ativação de c-Met descontrolada, por exemplo, são altamente invasivas e metástaticas. Um diferença notável en- tre céluas normais e transformadas expressando o receptor de c-Met é que a fosforilação do domínio de tirosina cinase nas células tumorais é muitas ve- zes independente da presença do ligante.

Mutações/alterações de C-Met têm sido identificadas em diver- sas doenças de seres humanos, includndo tumores e cânceres - por exem- plo, carcinomas renais papilares humanos hereditários e esporádicos, cân- cer de mama, câncer colorretal, carcinoma gástrico, glioma, câncer ovariano, carcinoma hepatocelular, carcinomas da célula escamosa da cabeça e pes- coço, carcinoma testicular, carcinoma da célula basal, carcinoma do fígado, sarcoma, mesotelioma pleural maligno, melanoma, mieloma múltiplo, oste- ossarcoma, câncer pacreático, câncer de próstata, sarcoma sinovial, carci- noma da tiroide, câncer pulmonar de células não-pequenas (NSCLC) e cân- cer pulmonar de pequenas células, carcinoma de célula transitional de bexi- ga urinário, carcinoma testicular, carcinoma da célula basal, carcinoma do fígado - e leucemias, linfomas, e mielomas-- por exemplo, leucemia linfocíti- ca aguda (ALL), leucemia mieloide aguda (AML), leucemia promielocítica aguda (APL), leucemia linfocítica crônica (CLL), leucemia mieloide crônica (CML), leucemia neutrofílica crônica (CNL), leucemia indiferenciada aguda (AUL), Iinfoma de células grandes anaplásticas (ALCL), leucemia prolinfocíti- ca (PML), leucemia mielomonocítica juvenil (JMML), Células T ALL de adul- to, AML de adulto com mielodisplasia de trilinhagem (AML/TMDS), leucemia de linhagem mista (MLL)1 síndromes mielodisplásticos (MDSs)1 distúrbios mieloproliferativos (MPD)1 mieloma múltiplo, (MM)1 sarcoma mieloide, Iinfo- ma de não-Hodgkin e doença de Hodgkin (também chamada Iinfoma de Hodgkin).

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Devido ao papel de sinalização de HGF/SF-Met aberrante em patogênese de vários cânceres humanos, os inibidores de receptor de tirosi- na cinase de c-Met têm larga aplicação no tratamento de cânceres nos quais a atividade de Met contribui para o fenótipo invasivo/ metástatico, incluindo aqueles em que c-Met não está superexpressada ou de outra maneira alte- rada. Os inibidores de c-Met também inibem a angiogênese e dessa maneira acredita-se que têm utilidade no tratamento de doenças associadas com a formação de nova vasculatura, tal como reumatoide, artrite, retinopatia. Veja, Michieli P, Mazzone M, Basilico C, Cavassa S, Sottile A, Naldini L, Comoglio PM. Targeting the tumor and its microenvironment by a dual-function decoy Met receptor. Câncer Cell. 2004 Jul;6(1):61-73.

Acredita-se também que a superexpressão de c-Met é um prog- nosticador potencialmente útil para o prognóstico de certas doenças, tais como, por exemplo, câncer de mama, carcinoma de pulmão de células não- pequenas, neoplasmas endócrinos pancreáticos, câncer de próstata, adeno- carcinoma esofageal, câncer colorretal, carcinoma da glândula salivária, Iin- foma da célula B grande difuso e carcinoma endometrial.

Veja Herrera LJ, El-Hefnawy T1 Queiroz de Oliveira PE, Raja S, Finkelstein S, Gooding W, Luketich JD1 Godfrey TE1 Hughes SJ., The HGF Receptor c-Met Is Overexpressed in Esophageal Adenocarcinoma. Neopla- sia. Janeiro de 2005;7(1):75-84; Zeng Z, Weiser MR1 D1AIessio M, Grace A, Shia J, Paty PB., Immunoblot analysis of c-Met expression in human colorec- tal câncer: overexpression is associated with advanced stage câncer. Clin Exp Metastasis. 2004;21(5):409-17; He Y, Peng Z, Pan X, Wang H, Ouyang Y. [Expression and correlation of c-Met and estrogen receptor in endometrial carcinomas] Sichuan Da Xue Xue Bao YiXue Ban. 2003 Jan;34(1):78-9, 88 (apenas o resumo em inglês); Tsukinoki K, Yasuda M1 Mori Y1 Asano S, Nai- to H, Ota Y, Osamura RY1 Watanabe Y. Hepatocyte growth factor and c-Met immunoreactivity are associated with metastasis in high grade salivary gland carcinoma. Oncol Rep. Novembro de 2004; 12(5): 1017-21; Kawano R, Oh- shima K, Karube K, Yamaguchi T, Kohno S, Suzumiya J, Kikuchi M, Tamura K. Prognostic sifnificance of hepatocyte growth factor and c-MET expression in patients with diffuse Iarge B-cell lymphoma. Br J HaematoL 2004 Nov;127(3):305-7; Lengyel E, Prechtel D, Resau JH1 Gauger K1 Welk A, Lin- demann K, Salanti G, Richter T, Knudsen B, Vande Woude GF, Harbeck N. C-Met overexpression in node-positive breast câncer identifies patients with poor clinicai outcome independent of Her2/neu. Int J Câncer, fevereiro de 2005 10;113(4):678-82; Hansel DE, Rahman A, House M, Ashfaq R, Berg K, Yeo CJ1 Maitra A. Met proto-oncogene and insulin-like growth factor binding protein 3 overexpression correlates with metastatic ability in well- differentiated pancreatic indocrine neoplasms. Clin Câncer Res. 2004 Sep 15;10(18 Pt 1):6152-8; Knudsen BS, Edlund M. Prostate câncer and the met hepatocyte growth factor receptor. Adv Câncer Res. setembro de 2004;91:31-67; D Masuya, C Huang, D Liu1 T Nakashima, et ai, The tu- mour-stromal interaction between intratumoral c-Met and stromal hepatocyte growth factor associated with tumour growth and prognosis in non-small-célula Iung câncer patients. British Journal of Câncer. 2004; 90:1552-1562; Ernst Lengyel1 Dieter Prechtel, James Η. Resau1 Katja Gau- ger, et al. C-Met overexpression in node-positive breast câncer identifies pa- tients with poor clinicai outcome independent of Her2/neu. Int. J. Câncer 2005; 113: 678-682.

Muitas estratégias têm sido delineadas para atenuar a sinaliza- ção aberrante de Met em tumores humanos. Algumas dessa estratégias in- cluem o uso de antagonistas de HGF e inibidores de molécula pequena. Por exemplo, existe um grande número de antagonistas ou inibidores de HGF/SF atualmente em desenvolvimento clínico, tal como Abbott (ABT-510), EntreMed (angiostatina), Kosan Biosciences (17-AAG), Amgen (AMG-102), Exelixis (XL-880 e XL-184), Pfizer (PNU-145156E), e ArQuIe (ARQ 197).

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

A presente invenção provê novas triazolopiridazinas (os compos- tos de Fórmula I) como moduladores de proteína tirosina cinase, particula- mente inibidores de c-Met, e o uso de tais compostos para reduzir ou inibir a atividade de cinase de c-Met em uma célula ou um indivíduo, e modular a expressão de c-Met em uma célula ou indivíduo, e o uso de tais compostos para prevenir ou tratar em um indivíduo um distúrbio proliferativo de células e/ou distúrbios relacionados a c-Met.

Ilustrativa da invenção é uma composição farmacêutica que compreende um composto de Fórmula I e um veículo farmaceuticamente aceitável. Outra ilustração da presente invenção é uma composição farma- cêutica preparada misturando qualquer um dos compostos de Fórmula I e um veículo farmaceuticamente aceitável.

Outras características e vantagens da invenção ficarão claras a partir da seguinte descrição detalhada da invenção e das reivindicações.

DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

A Figura 1 mostra os efeitos da administração oral de compostos da presente invenção (Composto de Exemplo N01) sobre a inibição de cres- cimento de tumor (TGI) em tumores glioblastoma de U87MG em camundon- gos escalvados. Todos os tratamentos começaram no Dia 1 em camudon- gos portando tumores U87MG subcutâneos instalados. O crescimento do tumor é plotado como um volume de tumor médio (mm3), versus tempo (Di- as), para cada grupo no estudo. No fim do 21° dia de estudo, a % de TGI final foi calculada a partir da diferença entre os volumes de tumor medianos de camundongos tratados com o veículo e tratados com fármaco, expressa como uma percentagem do volume de tumor médio do grupo de controle tratado com o veículo. (*=p<0,05, **=p<0,01, ***=p<0,001)

A Figura 2 mostra os efeitos da administração oral de compostos da presente invenção (Composto de Exemplo N0 61) sobre a inibição do crescimento do tumor (TGI) em tumores de glioblastoma U87MG em ca- mundongos escalvados. Todos os tratamentos começaram no Dia 1 em ca- mudongos portando tumores U87MG subcutâneos instalados. O crescimento do tumor é plotado como um volume de tumor médio (mm3), versus tempo (Dias), para cada grupo no estudo. No fim do 12° dia de estudo, a % de TGI final foi calculada a partir da diferença entre os volumes de tumor medianos de camundongos tratados com o veículo e tratados com fármaco, expresso como uma percentagem do volume de tumor médio do grupo de controle tratado com o veículo final. (*=p<0,05, **=p<0,01, ***=p<0,001)

Figura 3 mostra os efeitos da administração oral de compostos da presente invenção (Composto de Exemplo N0 61) sobre a inibição do crescimento do tumor (TGI) em tumores de glioblastoma U87MG em ca- mundongos escalvados. Todos os tratamentos começaram no Dia 1 em ca- mudongos portando tumores U87MG subcutâneos instalados. O crescimento do tumor é plotado como um volume de tumor médio (mm3), versus tempo (Dias), para cada grupo no estudo. No fim do 12° dia de estudo, a % de TGI final foi calculada a partir da diferença entre os volumes de tumor medianos de camundongos tratados com o veículo e tratados com fármaco, expressa como uma percentagem do volume de tumor médio do grupo de controle tratado com o veículo final. (*=p<0,05, **=p<0,01, ***=p<0,001)

Figura 4 mostra os efeitos da administração oral de compostos da presente invenção (Composto de Exemplo N0 61) sobre o crescimento de tumores S114. Camundongos escalvados atímicos fêmeas foram inoculados subcutaneamente na região inguinal esquerda da coxa com células 5x10 S114 em um volume de distribuição de 0,1 mL. Deixou-se os tumores cres- cerem por cinco dias. Os camundongos foram dosados oralmente em 100 mg/kg do composto a 20% de HPBCD ou com veículo (20% de HPBCD, grupo de controle). A dosagem foi continuada por 4 dias consecutivos. No dia do término do estudo, os tumores foram imediatamente excisados intac- tos e pesados, com o peso úmido final do tumor (gramas) servindo como um ponto final de eficácia primária.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO DEFINIÇÕES

Como usado aqui a seguir, os seguintes termos pretendem ter os significados a seguir (definições adicionais são providas onde necessário em toda a Especificação):

O termo "alquenila, "se usado só como parte de um grupo subs- tituinte, por exemplo, "Ci^alquenil(arila), "refere-se a um radical de hidrocar- boneto monovalente de cadeia linear ou ramificada parcialmente não- saturada tendo pelo menos uma ligação dupla carbono-carbono, por meio da qual a ligação dupla é derivada pela remoção de um átomo de hidrogênio de cada um de dois átomos de carbono adjacentes de uma molécula de alquila parente, e o radical é derivado pela remoção de um átomo de hidrogênio de um átomo de carbono único. Os átomos podem ser orientados a cerca da ligação dupla tanto na conformação eis (Z) ou trans (E). Radicais de alqueni- la típicos incluem, mas não estão limitados a, etenila, propenila, alila (2-propenila), buteniea e os similares. Exemplos incluem os grupos C2-8alquenila ou C2-4alquenila.

O termo "Ca-b" (em que a e b são números inteiros referindo-se a um número designado de átomos de carbono) refere-se a um radical de al- quila, alquenila, alquinila, alcóxi ou cicloalquila ou a porção de alquila de um radical em que alquila aparece como prefixo raiz contendo de a a b átomos de carbono inclusive. Por exemplo, C1.4 denota um radical contendo 1,2,3 ou 4 átomos de carbono.

O termo "alquila, "quer usado sozinho ou como parte de um gru- po substituinte, refere-se a um radical de hidrocarboneto monovalente de cadeia linear ou ramificada saturada, em que o radical é derivado pela remo- ção de um átomo de hidrogênio de um único átomo de carbono. A menos que especificamente indicado de outra maneira (por exemplo, pelo uso de um termo Iimitante tal como "átomo de carbono terminal"), as variáveis de substituinte podem ser colocadas em qualquer átomo da cadeia de carbono. Radicais de alquila típicos incluem, mas não estão limitados a, metila, etila, propila, isopropila e os similares. Exemplos incluem os grupos C1-8alquila, C1-6alquila e C1-4alquila.

O termo "alquilamino" refere-se a um radical formado pela remo- ção de um átomo de hidrogênio a partir de nitrogênio de uma alquilamina, tal como butilamina, e o termo "dialquilamino" refere-se a um radical formado pela remoção de um átomo de hidrogênio do nitrogênio de uma amina se- cundária, tal como dibutilamina. Em ambos os casos espera-se que o ponto de ligação ao resto da molécula é o átomo de nitrogênio.

O termo "alquinila, "quer usado só ou como parte de um grupo substituinte, refere-se a um radical hidrocarboneto parcialmente monovalen- te de cadeia linear ou raificado não-saturado tendo pelo menos um ligação tripla carbono-carbono, pelo que a ligação tripla é derivada pela remoção de dois átomos de hidrogênios de cada um dos dois átomos de carbono adja- centes de uma molécula de alquila parente e o radical é derivado pela remo- ção de um átomo de hidrogênio de um único átomo de carbono. Radicais de alquila típicos incluem etinila, propinila, butinila e os similares. Exemplos in- cluem grupos C2-8alquinila ou C2-4alquinila.

O termo "alcóxi" refere-se a um radical de álcool de hidrocarbo- neto monovalente de cadeia linear ou ramificada saturada ou parcialmente não-saturada derivada pela remoção do átomo de hidrogênio do substituinte de hidróxido de oxigênio em um alcano, alceno ou alcino parente. Quando níveis específicos de saturação são pretendidos, a nomenclatura "alcóxi", "alquenilóxi" e "alquinilóxi" é usada de acordo com as definições de alquila, alquenila e alquinila. Os exemplos incluem grupos C1-8alcóxi ou C1-4alcóxi.

O termo "aromático" refere-se e um sistema de anel de hidrocar- boneto tendo um sistema de elétron π conjugado, não-saturado. O termo "heterocíclico benzofundido" refere-se a um radical de sistema de anel fundido bicíclico em que um dos anéis é benzeno e o outro é um anel de heterociclila. Radicais de heterociclila benzofundidos típicos in- cluem 1,3-benzodioxolila (também conhecida como 1,3-metilenodioxifenila), 2,3-di-hidro-1,4-benzodioxinila (também conhecida como 1,4-etilenodioxifenila), benzo-di-hidro-furila, benzo-tetra-hidro-piranila, ben- zo-di-hidro-tienila e os similares.

O termo "cicloalquila" refere-se a um radical de hidrocarboneto monocíclico ou bicíclico saturado ou parcialmente não-saturado derivado pela remoção de um átomo de hidrogênio de um átomo de carbono de anel único. Radicais de cicloalquila típicos incluem ciclopropila, ciclobutila, ciclo- pentila, ciclopentenila, ciclo-hexila, ciclo-hexenila, ciclo-heptila e ciclo-octila. Exemplos adicionais incluem C3-8Cicloalquila, Cs-scicloalquila, C3-i2cicloalquila, C3-20Cicloalquila, deca-hidronaftalenila, e 2,3,4,5,6,7-hexa- hidro-1H-indenila.

O termo "sistema de anéis fundidos" refere-se a uma molécula bicíclica em que dois átomos adjacente estão presentes em cada uma de duas porções cíclicas. Heteroátomos podem opcionalmente estar presentes. Exemplos incluem benzotiazol, 1,3-benzodioxol e deca-hidronaftaleno.

O termo "hétero" usado como um prefixo para um sistema de anel refere-se à substituição de pelo menos um átomo de anel de carbono com um ou mais átomos independentemente selecionados de N, S, O ou P. Exemplos incluem anéis em que 1, 2, 3 ou 4 membros de anel são um áto- mo de nitrogênio; ou, 0,1, 2 ou 3 membros de anel são átomos de nitrogênio e 1 membro é um átomo de oxigênio ou enxofre.

O termo "heteroaríla" refere-se a um radical derivado pela remo- ção de um átomo de hidrogênio de um átomo de carbono de anel de um sis- tema de anel heteroaromático. Radicais de heteroarila típicos incluem furila, tienila, pirrolila, oxazolila, tiazolila, imidazolila, pirazolila, isoxazolila, isotiazo- lila, oxadiazolila, triazolila, tiadiazolila, piridinila, piridazinila, pirimidinila, pira- zinila, indolizinila, indolil, isoindolila, benzo[b]furila, benzo[b]tienila, indazolila, benzimidazolila, benztiazolila, purinila, 4H-quinolizinila, quinolinila, isoquino- linila, cinolinila, ftalzinila, quinazolinila, quinoxalinila, 1,8-naftiridinila, pteridini- Ia e os similares.

O termo "heterociclila" refere-se a um radical de anel monocícli- co saturado ou parcialmente não-saturado derivado pela remoção de um átomo de hidrogênio de um átomo de anel de carbono ou nitrogênio único. Radicais de heterociclila típicos incluem 2/-/-pirrol, 2-pirrolinila ou 3-pirrolinila, pirrolidinila, 1,3-dioxolanila, 2-imidazolinila (também referido como 4,5-di- hidro-1H-imidazolila), imidazolidinila, 2-pirazolinila, pirazolidinila, tetrazolila, piperidinila, 1,4-dioxanila, morfolinila, 1,4-ditianila, tiomorfolinila, piperazinila, azepanila, hexa-hidro-1,4-diazepinila e os similares.

O termo "substituído, "refere-se a uma molécula de núcleo em que um ou mais átomos de hidrogênio foram substituídos com um ou mais porções de radical funcional. A substituição não é limitada a uma molécula de núcleo, mas pode também ocorrer em um radical substituinte, pelo que o radical substituinte se torna um grupo de ligação.

O termo "independentemente selecionado" refere-se a um ou mais substituintes selecionados de um grupo de substituintes, em que os substituintes podem ser os mesmos ou diferentes.

A nomenclatura de substituinte usada na descrição da presente invenção foi derivada por primeiro indicar o átomo que tem o ponto de liga- ção seguido pelos átomos do grupo de ligação em direção ao átomo da ca- deia de terminal da esquerda para a direita, substancialmente como em:

(C1-6)alquilC(O)NH(Ci-6)alquil(Ph) ou por primeiro indicar o átomo da cadeia de terminal, seguido pelos átomos de grupo de ligação em direção ao átomo que tem o ponto de ligação, subs- tancialmente como em:

Ph(C1-6)alquilamido(C1-6)alquila

cada um dos quais refere-se a um radical da Fórmula:

<formula>formula see original document page 16</formula>

Linhas introduzidas nos sistemas de anéis de substituintes indi- cam que a ligação pode ser acoplada a qualquer um dos átomos de anel apropriados.

Quando qualquer variável (por exemplo, R4) ocorre mais de uma vez em qualquer modalidade de Fórmula I1 cada definição é destinada a ser independente.

O termos "compreendendo", "incluindo", e "contendo" são usa- dos aqui a seguir em seu sentido aberto, não-limitado. NOMENCLATURA

Exceto quando indicado, os nomes de compostos foram extraí- dos usando regras de nomenclatura bem-conhecidas daqueles versados na técnica, tanto pelo padrão de referências de nomenclaturas IUPAC, tal como Nomenclatura de Química Orgânica, Seções A, B, C, D, E, F e H, (Perga- mon Press, Oxford, 1979, Copyright 1979 IUPAC) e A Guide a IUPAC No- menclature of Organic Compounds (Recommendations 1993), (Blackwell Scientific Publications, 1993, Copyright 1993 IUPAC), ou pacotes de softwa- re comercialmente disponíveis tais como Autonom (software de nomenclatu- ra de marca registrada fornecido no conjunto do escritório de ChemDraw Ultra® comercializado por CambridgeSoft.com) e ACD/Index Name® (marca registrada de software de nomenclatura comercial comercializado por Ad- vanced Chemistry Desenvolvimento, Inc., Toronto, Ontario). É bem- conhecido na técnica que a forma de radical de certos heterociclos, tais co- mo piridina e quinolina, pode ser denominada de acordo com diferentes con- venções sem se referir a radicais diferentes. Por exemplo: tanto piridila ou piridinila referem-se a um radical de piridina, e tanto quinolila ou quinolila referem-se a um radical de quinolina. ABREVIATURAS

Como usado daqui em diante, as abreviaturas a seguir são des- tinadas a ter os seguintes significados (abreviaturas adicionais são providas quando necessário em toda a Especificação): 1H RMN Ressonância Magnética Nuclear por Próton AcOH Ácido acético aq Aquoso CD3OD Metanol Deuterado

CDCI3 Clorofórmio Deuterado

CH2CI2 Cloreto de Metileno

CH3CN Acetonitrila

Cs2CO3 Carbonato de Césio

DAST Trifluoreto de (Dimetilamino)enxofre

DCM Diclorometano

DIEA Di-isopropiletil amina

DMAP 4-Dimetilaminopiridina

DMSO Dimetilsulfóxido

EDC N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etil-carbodi-imida

ESI-MS Espectroscopia de massa de ionização por eletrospray

Et2O Dietil éter

Et3N Trietilamina

EtOAe Acetato de etila

EtOH Etanol

g Gramas

h Hora

H2O Água

HATU hexafluorfosfato de O-(7-Azabenzotriazol-1-il)N,N,N',N' tetrametilurônio

HBTU O-benzotriazol-1 -il-N, N1N', N-tetrametilurônio

HCI Ácido Clorídrico

Hex Hexanos

hexafluorfosfatohwork uptilphosphoramide

HOBT Hidratode 1-Hidroxibenzotriazol

HPLC Cromatografia Líquida de Alta Pressão

K2CO3 Carbonato de Potássio

KOtBu Terc-butóxido de Potássio

LCMS Espectrofometria de Massa de Cromotografia Líquida

MeOH Metanol

mg Miligramas MgSO4 Sulfato de Magnésio

min minuto

mL Mililitros

mmol milimol

mol mol

MW Peso molecular

Na2C03 Carbonato de sódio

Na2S04 Sulfito de sódio

NaHCC>3 Carbonato de hidrogênio de sódio

NaOH Hidróxido de Sódio

NBS n-Bromossuccinimida

NH4CI Cloreto de Amônio

Pd(PPh3)4 Paladio Tetraquistrifenilfosfina (O)

Peppsi-iPr Estabilização e Iniciação de Preparação Precatalista de Piridina-

Aumentada (marca registrada de Sigma-AIdrich) ppt Precipitado

RP-HPLC Cromotografia Líquida de Alta Pressão de Fase Reversa

rt Temperatura Ambiente

SiO2 Dióxido de Silicone

TFA Ácido Trifluoroacético

THF Tetra-hidrofurano

TLC Cromatografia de camada fina

pL Microlitros

FÓRMULA I

A presente invenção compreende compostos de Fórmula I:

<formula>formula see original document page 19</formula>

e N-óxidos, profármacos, sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, e i- sômeros estereoquímicos dos mesmos, em que: R1 é heteroarila mono ou bicíclica (preferivelmente piridila, tiofe- nila, tiazolila, pirazolila, furanila, imidazolila, oxazolila, pirrolila, indolila, isoti- azolila, triazolila, benzotiofenila, benzotiazolila, benzoimidazolila, benzoxazo- liía, quinoliia, benzofuranila, quinazolinila, ou quinoxalinila), ou piridin-2-on-ila (preferivelmente piridin-2-on-5-ila), em que a dita heteroarila é opcionalmen- te substituída com um, dois ou três substituintes de Ra;

em que Ra é -NH2, halogênio (preferivelmente F, Cl ou Br), alcó- xi (preferivelmente C1-6 alcóxi), alquiléter (preferivelmente C(1-6)alquil-0-C(1-6)alquila), alquiltio (preferivelmente C1-6 alquiltio), alquilsulfo- nila (preferivelmente C1-6 alquilsulfonila), fenilsulfonila, heteroarilsulfonila (em que a porção de heteroarila da dita heteroarilsulfonila é preferivelmente piri- dila, tiofenila, tiazolila, pirazolila, furanila, imidazolila, oxazolila, pirrolila, indo- lila, isotiazolila, triazolila, benzotiofenila, benzotiazolila, benzoimidazolila, benzoxazolila, quinoliia, benzofuranila, quinazolinila, ou quinoxalinila), hete- rociclilsulfonila (em que a porção de heterociclila da dita heterociclilsulfonila é preferivelmente pirrolidinila, tetra-hidrofuranila, tetra-hidrotiofenila, imidazo- lidinila, tiazolidinila, oxazolidinila, tetra-hidropiranila, tetra-hidrotiopiranila, piperidinila, tiomorfolinila, 1,1-dióxido de tiomorfolinila, morfolinila, ou pipera- zinila),-SO2NH2, alquilsulfonamida (preferivelmente C1-6 alquilsulfonamida), alquila (preferivelmente C1-6 alquila), aminoalquila (preferivelmente metilami- na), alquilamino (preferivelmente C1-6 alquilamino), fenila, heteroarila (prefe- rivelmente piridila, tiofenila, tiazolila, pirazolila, furanila, imidazolila, oxazolila, pirrolila, indolila, isotiazolila, triazolila, benzotiofenila, benzotiazolila, benzoi- midazolila, benzoxazolila, quinoliia, benzofuranila, quinazolinila, ou quinoxa- linila), ciano, alquenila (preferivelmente C1-6 alquenila),alquinila (preferivel- mente C1-6 alquinila), cicloalquila (preferivelmente ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila ou ciclo-heptila), heterociclila(preferivelmente pirro- lidinila, tetra-hidrofuranila, tetra-hidrotiofenila, imidazolidinila, tiazolidinila, oxazolidinila, tetra-hidropiranila, tetra-hidrotiopiranila, piperidinila, tiomorfolini- la, 1,1-dióxido de tiomorfolinila, morfolinila ou piperazinila),-C02-alquila (pre- ferivelmente -CO2-CH2CH3),-C(O)-Rb,-C(1-4)alquil-morfolinila, -C(1-4)alquil-piperidinila,-C(1-4)alquil-piperazinila,-C(1-4)alquil-N'-metil- pipera- zinila, -C(1-4)alquil-Rb, -C(O)NH-C(1-4)alquil-Rb, ou -C(O)NRcRd;

em que Rb é heterociclila (preferivelmente pirrolidinila, tetra- hidrofuranila, tetra-hidrotiofenila, imidazolidinila, tiazolidinila, oxazolidinila, tetra-hidropiranila, tetra-hidrotiopiranila, piperidinila, tiomorfolinila, 1,1-dióxido de tiomorfolinila, morfolinila, ou piperazinila), alquilsulfonila (preferivelmente C1-6 alquilsulfonila), -SO2NH2, alquilsulfonamida (preferivelmente C1-6 alquil- sulfonamida), -OH, -Oalquila (preferivelmente -OC1-6 alquila), -NH2, -NHalquila (preferivelmente -NHC1-6 alquila), ou -N(alquila)2 (preferivelmente -N(C1-6alquila)2);

Rc e Rd são independentemente selecionados de: H, fenila, hete- roarila, ou C1-6 alquila, em que a dita C1-6alquila pode opcionalmente ser substituída com um substituinte selecionado de: -N(CHa)2, morfolinila, piperi- dinila, piperazinila, N-metil piperazinila, alquilsulfonila (preferivelmente C1-6 alquilsulfonila), -SO2NH2, alquilsulfonamida (preferivelmente C1-6 alquilsulfo- namida), hidroxila, e alcóxi;

ou Rc e Rd juntos podem formar um anel heterocíclico de 5 a 7 elementos, opcionalmente contendo uma segunda heteroporção selecionada de O, NH, N(alquila), SO, SO2, ou S, (o dito anel heterocíclico Rc-Rd preferi- velmente selecionado do grupo que consiste em:

<formula>formula see original document page 21</formula>

em que o dito anel heterocíclico Rc-Rd é opcionalmente substituído com al- quila (preferivelmente -C(1-6)alquila), -S02alquila (preferivelmente -S02C(1-6)alquila), ou -C(0)alquila (preferivelmente -C(0)C(1-6)alquila);

A é um anel selecionado do grupo que consiste em: fenila, hete- roarila mono ou bicíclica (preferivelmente piridila, benzo-oxazolila, benzotia- zolila, quinolinila, quinolin-6-il-N-óxido, quinazolinila, quinoxalinila, benzimi- dazolila, benzotiofenila, benzofuranila, ou [1,2,4]triazol[1,5-a]piridinila), qui- nazolin-4-on-ila (preferivelmente quinazolin-4-on-6-ila, ou 3-(4-Metóxi- benzil)-3H-quinazolin-4-on-6-ila), e heterociclila benzofundida (preferivelmen- te benzo[1,3]dioxolila, ou 2,3-di-hidro-benzofuranila); em que as ditas fenila, heteroarila, ou heterociclila benzofundida são opcionalmente substituídas com um, dois ou três substituintes independentemente selecionados do gru- po que consiste em: -OH, alquila, fenila, heteroarila, alcóxi, -CN, halogênio, nitro, -NH2, -N(CH3)2, -NHC(O)NHC1-6alquila, e -NHC(O)C1-6alquila; R5 e R6 são independentemente selecionados de: H, F, C1-6 alquila, -OH, -OC1-6alquila, -NHC1-6alquila, ou -N(C1-6alquila)2;

ou R5 e R6 podem juntos formar um anel de C3-5 cicloalquila, um anel de azi- ridinila ou um anel de epoxidila; e

R7 e R8 são H, halogênio ou C1-6 alquila.

Como usado aqui a seguir, os termos "composto de Fórmula I" e "compostos de Fórmula I" destinam-se a incliur também os sais farmaceuti- camente aceitáveis, N-óxidos, solvatos e isômeros estereoquímicos dos mesmos.

MODALIDADES DE FÓRMULA I

Modalidades preferidas da invenção são compostos de Fórmula I em que um ou mais das limitações a seguir estão presentes:

R1 é heteroarila mono ou bicíclica, ou piridin-2-on-5-ila, em que a dita heteroarila é opcionalmente substituída com um, dois ou três substituin- tes de Ra;

em que

Ra é -NH2, halogênio, alcóxi, alquiléter, alquiltio, alquilsulfonila, fenilsulfonila, heteroarilsulfonila, heterociclilsulfonila, -SO2NH2, alquilsulfonamida, alquila, aminoalquila, alquilamino, fenila, heteroarila, ciano, alquenila, alquinila, ci- cloalquila, heterociclila, -CO2-alquila, -C(O)-Rb, -C(1-4)alquil-morfolinila, -C(1-4)alquil-piperidinila, -C(1-4)alquil-piperazinila, -C(1-4)alquil-N'-metil piperazi- nila, -C(1-4)alquil-Rb, -C(O)NH-C(1-4)alquil-Rb, ou -C(O)NRcRd;

em que

Rb é heterociclila, alquilsulfonila, -SO2NH2, alquilsulfonamida, -OH, -Oalquila, -NH2, -NHalquila, ou -N(alquila)2;

Rc e Rd são independentemente selecionados de: H, fenila, heteroarila ou C1-6 alquila, em que a dita C1-6alquila pode opcionalmente ser substituída com um substituinte selecionado de: -N(CH3)2, morfolinila, piperidinila, pipe- razinila, N-metil piperazinila, alquilsulfonila, -SO2NH2, alquilsulfonamida, hi- droxila, e aicóxi;

ou Rc e Rd juntos podem formar um anel heterocíclico de 5 a 7 elementos, opcionalmente contendo uma segunda heteroporção selecionada de O1 NH1 N(alquiia), SO1 SO2, ou S, em que o dito anel heterocíclico de Rc-Rd é opcio- nalmente substituído com alquila, -S02alquila, ou -C(0)alquila; A é um anel selecionado do grupo consistindo em: fenila, heteroarila mono ou bicíclica, 3-(4-metóxi-benzil)-3H-quinazolin-4-on-6-ila, quinazolin-4-on-6- ila, e heterociclila benzofundida; em que as ditas fenila, heteroarila, ou hete- rociclila benzofundida são opcionalmente substituídas com um a três substi- tuintes independentemente selecionados do grupo consistindo em: -OH, al- quila, fenila, heteroarila, aicóxi, -CN, halogênio, nitro, -NH2, -N(CH3)2, -NHC(0)NHC1-6alquila, e -NHC(0)C1-6alquila;

R5 e R6 são independentemente selecionados de: H, F, C1-6 alquila, -OH, -OC1-6alquila, -NHC1-6alquila, ou -N(C1-6alquila)2;

R7 e R8 são H.

Outras modalidades preferidas da invenção são compostos de Fórmula I em que um ou mais das limitações a seguir estão presentes: R1 é heteroarila mono ou bicíclica, ou piridin-2-on-5-ila, em que a dita hete- roarila é opcionalmente substituída com um, dois ou três substituintes de Ra; em que Ra é -NH2, halogênio, aicóxi, alquiléter, alquiltio, alquilsulfonila, fenil- sulfonila, heteroarilsulfonila, heterociclilsulfonila, -SO2NH2, alquilsulfonamida, alquila, aminoalquila, alquilamino, fenila, heteroarila, ciano, alquenila, alquini- la, cicloalquila, heterociclila, -C02-alquila, -C(O)-Rbl -C1-6 alquil-morfolinila, -C(1-4)alquil-piperidinila, -C(1-4)alquil-piperazinila, -C(1-4)alquil-N'-metila pipera- zinila, -C(1-4)alquil-Rb, -C(O)NH-C(1-4)alquil-Rb, ou -C(O)NRcRd; em que Rb é heterociclila, alquilsulfonila, -SO2NH2, alquilsulfonamida, -OH, -Oalquila, -NH2, -NHalquila, ou -N(alquila)2;

Rc e Rd são independentemente selecionados de: H, fenila, heteroarila, ou C1-6 alquila, em que a dita C1-6alquila pode opcionalmente ser substituída com um substituinte selecionado de: -N(CH3)2, morfolinila, piperidinila, pipe- razinila, N-metila piperazinila, alquilsulfonila, -SO2NH2, alquilsulfonamida, hidroxila, e alcóxi;

ou Rc e Rd juntos podem formar um anel heterocíclico de 5 a 7 elementos selecionados do grupo consistindo em: piperidinila, morfolinila, e piperazinila, em que a dita piperazinila é opcionalmente substituída com alquila, -SO2alquila, ou -C(O)alquila;

A é um anel selecionado do grupo consistindo em: fenila, heteroarila mono ou bicíclica, 3-(4-metóxi-benzil)-3H-quinazolin-4-on-6-ila, quinazolin-4-on-6- ila, e heterociclila benzofundida; em que as ditas fenila, heteroarila, ou hete- rociclila benzofundida são opcionalmente substituídas com um a três substi- tuintes independentemente selecionados do grupo consistindo em: -OH, al- quila, fenila, heteroarila, alcóxi, -CN, halogênio, nitro, -NH2, -N(CH3)2, -NHC(O)NHC1-6alquila, e -NHC(O)C1-6alquila;

ou R5 e R6 podem juntos formar um anel de C3-5 cicloalquila, um anel de azi- ridinila ou um anel de epoxidila; e R7 e R8 são H.

Outras modalidades preferidas da invenção são os compostos de Fórmula I em que uma ou mais das limitações a seguir estão presentes: R1 é heteroarila mono ou bicíclica, ou piridin-2-on-5-ila, em que a dita hete- roarila é opcionalmente substituída com um, dois ou três substituintes de Ra; em que Ra é -NH2, halogênio, alcóxi, alquiléter, alquiltio, alquilsulfonila, fenil- sulfonila, heteroarilsulfonila, heterociclilsulfonila, -SO2NH2, alquilsulfonamida, alquila, aminoalquila, alquilamino, fenila, heteroarila, ciano, alquenila, alquini- la, cicloalquila, heterociclila, -C02-alquila, -C(O)-Rb, -C(1-4)alquil-morfolinila, -C(1-4)alquil-piperidinila, -C(1-4)alquil-piperazinila, -C(1-4)alquil-N'-metila pipera- zinila, -C(1-4)alquil-Rb, -C(O)NH-C(1-4)alquil-Rb, ou -C(O)NRcRd; em que Rb é heterociclila, alquilsulfonila, -SO2NH2, alquilsulfonamida, -OH, -Oalquila, -NH2, -NHalquila, ou -N(alquila)2; Rc e Rd são independentemente selecionados de: H, fenila, heteroarila, ou C-i-6 alquila, em que a dita Ci.6alquila pode opcionalmente ser substituída com um substituinte selecionado de: -N(CH3)2, morfolinila, piperidinila, pipe- razinila, N-metila piperazinila, alquilsulfonila, -SO2NH2, alquilsulfonamida, hidroxila, e alcóxi;

ou Rc e Rd juntos podem formar um anel heterocíclico de 5 a 7 elementos selecionados do grupo consistindo em: piperidinila, morfolinila e piperazinila, em que a dita piperazinila é opcionalmente substituída com alquila, -S02alquila ou -C(0)alquila;

A é um anel selecionado do grupo consistindo em: fenila, heteroarila mono ou bicíclica, 3-(4-metóxi-benzil)-3H-quinazolin-4-on-6-ila, quinazolin-4-on-6- ila, e heterociclila benzofundida; em que as ditas fenila, heteroarila, ou hete- rociclila benzofundida são opcionalmente substituídas com um a três substi- tuintes independentemente selecionados do grupo consistindo em: -OH, al- quila, fenila, heteroarila, alcóxi, -CN, halogênio, nitro, -NH2, -N(CH3)2, -NHC(0)NHCi.6alquila, e -NHC(0)Ci.6alquila; R5 e R6 são independentemente selecionados de: H, F, ou -CH3; ou R5 e R6 podem juntos formar um anel de ciclopropila; e R7 e R8 são H.

Outras modalidades preferidas da invenção são os compostos de Fórmula I em que uma ou mais das limitações a seguir estão presentes: R1 é heteroarila mono ou bicíclica, ou piridin-2-on-5-ila, em que a dita hete- roarila é opcionalmente substituída com um, dois ou três substituintes de Ra; em que Ra é -NH2, halogênio, alcóxi, alquiléter, alquiltio, alquilsulfonila, fenil- sulfonila, heteroarilsulfonila, heterociclilsulfonila, -SO2NH2, alquilsulfonamida, alquila, aminoalquila, alquilamino, fenila, heteroarila, ciano, alquenila, alquini- la, cicloalquila, heterociclila, -CO2-alquila, -C(O)-Rb, -C(1-4)alquil-morfolinila, -C(1-4)alquil-piperidinila, -C(1-4)alquil-piperazinila, -C(1-4)alquil-N'-metila pipera- zinila, -C(1-4)alquil-Rb, -C(O)NH-C(1-4)alquil-Rb, ou -C(O)NRcRd;

em que Rb é heterociclila, alquilsulfonila, -SO2NH2, alquilsulfonamida, -OH1 -Oalquila, -NH2, -NHalquila, ou -N(alquila)2,

Rc e Rd são independentemente selecionados de: H1 fenila, heteroarila, ou C1-6 alquila, em que a dita C1-6alquila pode opcionalmente ser substituída com um substituinte selecionado de: -N(CH3)2, morfolinila, piperidinila, pipe- razinila, N-metila piperazinila, alquilsulfonila, -SO2NH2, alquilsulfonamida, hidroxila, e alcóxi;

ou Rc e Rd juntos podem formar um anel heterocíclico de 5 a 7 elementos selecionados do grupo consistindo em: piperidinila, morfolinila, e piperazinila, em que a dita piperazinila é opcionalmente substituída com alquila, -SO2alquila ou -C(O)alquila;

A é um anel selecionado do grupo consistindo em: fenila, heteroarila mono ou bicíclica heteroarila, 3-(4-metóxi-benzil)-3H-quinazolin-4-on-6-ila, quinazo- lin-4-on-6-ila, e heterociclila benzofundida; em que as ditas fenila, heteroari- la, ou heterociclila benzofundida são opcionalmente substituídas com um substituinte independentemente selecionado do grupo consistindo em: -OH, alquila, fenila, heteroarila, alcóxi, -CN, halogênio, nitro, -NH2, -N(CH3)2, -NHC(O)NHC1-6alquila e -NHC(O)C1-6alquila; R5 e R6 são independentemente selecionados de: H, F, ou -CH3; ou R5 e R6 podem juntos formar um anel de ciclopropila; e R7 e R8 são H.

Outras modalidades preferidas da invenção são compostos de Fórmula I em que uma ou mais das limitações a seguir estão presentes: R1 é heteroarila mono ou bicíclica, ou piridin-2-on-5-ila, em que a dita hete- roarila é opcionalmente substituída com um, dois ou três substituintes de Ra; em que Ra é -NH2, halogênio, alcóxi, alquiléter, alquiltio, alquilsulfonila, fenil- sulfonila, heteroarilsulfonila, heterociclilsulfonila, -SO2NH2, alquilsulfonamida, alquila, aminalquila, alquilamino, fenila, heteroarila, ciano, alquenila, alquim- ia, cicloalquila, heterociclila, -CO2-alquila, -C(O)-Rb, -C1-6alquil-morfolinila, -C(1-4)alquil-piperidinila, -C1-6alquil-piperazinila, -C1-6alquil-N-metil piperazi- nila, -C(1-4)alquil-Rb, -C(O)NH-C(1-4)alquil-Rb, ou -C(O)NRcRd; em que Rb é heterociclila, alquilsulfonila, -SO2NH2, alquilsulfonamida, -OH, -Oalquila1 -NH2, -NHalquila, ou -N(alquila)2; Rc e Rd são independentemente selecionados de: H, fenila, heteroarila, ou C1-6 alquila, em que a dita C1-6alquila pode ser opcionalmente substituída com um substituinte selecionado de: -N(CH3)2, morfolinila, piperidinila, pipe- razinila, N-metil piperazinila, alquilsulfonila, -SO2NH2, alquilsulfonamida, hi- droxila, e alcóxi;

ou Rc e Rd juntos podem formar um anel heterocíclico de 5 a 7 elmentos se- lecionado do grupo consistindo em: piperidinila, morfolinila, e piperazinila, em que a dita piperazinila é opcionalmente substituída com alquila, -S02alquila, ou -C(0)alquila;

A é um anel selecionado do grupo consistindo em: 2,3 di- hidrobenzofuran-5-ila, quinolin-6-ila, quinolin-6-il-N-óxido, 2-amino benzotia- zol-6-ila, 4-metoxifenila, 3-(4-metóxi-benzil)-3H-quinazolin-4-on-6-ila, quina- zolin-4-on-6-ila, 2-dimetil-amino benzotiazol-6-ila, e 4-hidróxi fenila; R5 e R6 são independentemente selecionados de: H, F, ou -CH3; ou R5 e R6 podem juntos formar um anel de ciclopropila; e R7 e R8 são H.

Outras modalidades preferidas da invenção são compostos de Fórmula I em que uma ou mais das limitações a seguir estão presentes: R1 é heteroarila mono ou bicíclica, ou piridin-2-on-5-ila, em que a dita hete- roarila é opcionalmente substituída com um substituinte de Ra; em que Ra é -NH2, halogênio, alcóxi, alquiléter, alquiltio, alquilsulfonila, fenil- sulfonila, heteroarilsulfonila, heterociclilsulfonila, -SO2NH2, alquilsulfonamida, alquila, aminoalquila, alquilamino, fenila, heteroarila, ciano, alquenila, alquini- la, cicloalquíla, heterociclila, -C02-alquila, -C(O)-Rb, -C(1-4)alquil-morfolinila, -C(1-4)alquil-piperidinila, -C(1-4)alquil-piperazinila, -C(1-4)alquil-N-metil piperazi- nila, -C(1-4)alquil-Rb, -C(O)NH-C(1-4)alquil-Rb, ou -C(O)NRcRd;

em que Rb é heterociclila, alquilsulfonila, -SO2NH2, alquilsulfonamida, -OH, -Oalquila, -NH2, -NHalquila, ou -N(alquila)2;

ou Rc e Rd juntos podem formar um anel heterocíclico de 5 a 7 elementos selecionado do grupo consistindo em: piperidinila, morfolinila, e piperazinila, em que a dita piperazinila é opcionalmente substituída com alquila, -S02alquila, ou -C(0)alquila;

Outras modalidades preferidas da invenção são compostos de Fórmula I em que uma ou mais das limitações a seguir estão presentes: R1 é tiofen-2-ila, tiazol-2-ila, pirazolila, imidazolila, piridin-2-on-5-ila, ou piridi- la, em que as ditas tiofen-2-ila, tiazol-2-ila, pirazolila, imidazolila, e piridila podem ser opcionalmente substituídas com um substituinte de Ra; em que Ra é -NH2, halogênio, alcóxi, alquiléter, alquiltio, alquilsulfonila, fenil- sulfonila, heteroarilsulfonila, heterociclilasulfonila, -SO2NH2, alquilsulfonami- da, alquila, aminoalquila, alquilamina, fenila, heteroarila, ciano, alquenila, alquinila, cicloalquila, heterociclila, -C02-alquila, -C(O)-Rb, -C(1-4)alquil-morfolinila, -C(1-4)alquil-piperidinila, -C(1-4)alquil-piperazinila, -C(1-4)alquil-N'-metil piperazinila, -C(1-4)alquil-Rb, -C(0)NH-C(1-4)alquil-Rb, ou -C(O)NRcRd;

Rc e Rd são independentemente selecionados de: H, fenila, heteroarila, ou C1-6 alquila, em que a dita C1-6alquila pode opcionalmente ser substituída com um substituinte selecionado de: -N(CH3)2, morfolinila, piperidinila, pipe- razinila, N-metil piperazinila, alquilsulfonila, -SO2NH2, alquilsulfonamida, hi- droxila, e alcóxi;

Outras modalidades preferidas da invenção são compostos de Fórmula I em que uma ou mais das limitações a seguir estão presentes: R1 é tiofen-2-ila, tiazol-2-ila, pirazolila, imidazolila, piridin-2-on-5-ila, ou piridi- la, em que as ditas tiofen-2-ila, tiazol-2-ila, pirazolila, imidazolila, e piridila podem ser opcionalmente substituídas com um substituinte de Ra; em que Ra é -NH2, halogênio, alcóxi, alquiléter, alquiltio, alquilsulfonila, fenil- sulfonila, heteroarilsulfonila, heterociclilsulfonila, -SO2NH2, alquilsulfonamida, alquila, aminoalquila, alquilamina, fenila, heteroarila, ciano, alquenila, alquini- la, cicloalquila, heterociclila, -C02-alquila, -C(O)-Rb, -C(1-4)alquil-morfolinila, -C(1-4)alquil-piperidinila, -C(1-4)alquil-piperazinila, -C(1-4)alquil-N'-metila pipera- zinila, -C(1-4)alquil-Rb, -C(O)NH-C(1-4)alquil-Rb, ou -C(O)NR0Rd; em que Rb é heterociclila, alquilsulfonila, -SO2NH2, alquilsulfonamida, -OH, -Oalquila, -NH2, -NHaIquiIa1 ou -N(alquila)2;

A é um anel selecionado do grupo consistindo em: 2,3 di- hidrobenzofuran-5-ila, quinolin-6-ila, quinolin-6-il-N-óxido, 2-amino benzotia- zol-6-ila, 4-metoxifenila, 3-(4-metóxi-benzil)-3H-quinazolin-4-on-6-ila, quina- zolin-4-on-6-ila, 2-dimetil-amino benzotiazol-6-ila, e 4-hidróxi fenila; R5 e R6 são independentemente selecionados de: H ou F; e R7 e R8 são H.

Outras modalidades da invenção são compostos de Fórmula I em que uma ou mais das limitações a seguir estão presentes: R1 é heteroarila mono ou bicíclica (preferivelmente piridila, tiofenila, tiazolila, pirazolila, furanila, imidazolila, oxazolila, pirrolila, indolila, isotiazolila, triazoli- la, benzotiofenila, benzotiazolila, benzoimidazolila, benzoxazolila, quinolila, benzofuranila, quinazolinila, ou quinoxalinila), em que a dita heteroarila é opcionalmente substituída com um, dois ou três substituintes de Ra; em que Ra é halogênio (preferivelmente F, Cl ou Br), alcóxi (preferivelmente C1-6 alcóxi), alquiléter (preferivelmente -C(1-6)alquil-O-C(1-6)alquila), alquiltio (preferivelmente C1-6 alquiltio), alquilsulfonila (preferivelmente C1-6 alquilsul- fonila), fenilsulfonila, heteroarilsulfonila (em que a porção de heteroarila da dita heteroarilsulfonila é preferivelmente piridila, tiofenila, tiazolila, pirazolila, furanila, imidazolila, oxazolila, pirrolila, indolila, isotiazolila, triazolila, benzoti- ofenila, benzotiazolila, benzoimidazolila, benzoxazolila, quinolila, benzofura- nila, quinazolinila, ou quinoxalinila), heterociclilsulfonila (em que a porção de heterociclila da dita heterociclilsulfonila é preferivelmente pirrolidinila, tetra- hidrofuranila, tetra-hidrotiofenila, imidazolidinila, tiazolidinila, oxazolidinila, tetra-hidropiranila, tetra-hidrotiopiranila, piperidinila, tiomorfolinila, tiomorfoli- nila 1,1-dióxido, morfolinila, ou piperazinila), -SO2NH2, alquilsulfonamida (preferivelmente C1-6 alquilsulfonamida), alquila (preferivelmente C1-6 alquila), aminoalquila (preferivelmente metilamina), alquilamino (preferivelmente C1-6 alquilamino), fenila, heteroarila (preferivelmente piridila, tiofenila, tiazolila, pirazolila, furanila, imidazolila, oxazolila, pirrolila, indolila, isotiazolila, triazoli- la, benzotiofenila, benzotiazolila, benzoimidazolila, benzoxazolila, quinolila, benzofuranila, quinazolinila, ou quinoxalinila), ciano, alquenila (preferivel- mente C1-6 alquenila), alquinila (preferivelmente C1-6 alquinila), cicloalquila (preferivelmente ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila ou ciclo- heptila), heterociclila (preferivelmente pirrolidinila, tetra-hidrofuranila, tetra- hidrotiofenila, imidazolidinila, tiazolidinila, oxazolidinila, tetra-hidropiranila, tetra-hidrotiopiranila, piperidinila, tiomorfolinila, 1,1-dióxido de tiomorfolinila, morfolinila, ou piperazinila), -CO2-alquila (preferivelmente -CO2-CH2CH3), -C(O)-Rb, -C(1-4)alquil-morfolinila, -C(1-4)alquil-piperidinila, -C(1-4)alquil-piperazinila, -C(1-4)alquil-N'-metil piperazinila, -C(1-4)alquil-Rb, -C(O)NH-C(1-4)aiquil-Rb, ou -C(O)NRcRd;

em que Rb é heterociclila (preferivelmente pirrolidinila, tetra-hidrofuranila, tetra-hidrotiofenila, imidazolidinila, tiazolidinila, oxazolidinila, tetra- hidropiranila, tetra-hidrotiopiranila, piperidinila, tiomorfolinila, 1,1-dióxido de tiomorfolinila, morfolinila, ou piperazinila), alquilsulfonila (preferivelmente C1-6 alquilsulfonila), -SO2NH2, alquilsulfonamida (preferivelmente C1-6 alquilsulfo- namida), -OH, -Oalquila (preferivelmente -OC1-6 alquila), -NH2, -NHalquila (preferivelmente -NHC1-6 alquila), ou -N(alquila)2 (preferivelmente -N(C1-6 alquila)2);

Rc e Rd são independentemente selecionados de: H, fenila, heteroarila, ou C1-6 alquila, em que a dita C1-6alquila pode opcionalmente ser substituída com um substituinte selecionado de: -N(CH3)2, morfolinila, piperidinila, pipe- razinila, Ν-metil piperazinila, alquilsulfonila (preferivelmente C1-6 alquilsulfoni- la), -SO2NH2, alquilsulfonamida (preferivelmente C1-6 alquilsulfonamida), hi- droxila, e alcóxi;

ou Rc e Rd juntos podem formar um anel heterocíclico de 5 a 7 elementos, opcionalmente contendo uma segunda heteroporção selecionada de O, NH1 N(alquila), SO, SO2, ou S, (o dito anel heterocíclico de Rc-Rd preferivelmente selecionado do grupo consistindo em:

<formula>formula see original document page 31</formula>

em que o dito anel heterocíclico de Rc-Rd é opcionalmente substituído com alquila (preferivelmente -C(1-6)alquila), -SO2alquila (preferivelmente -SO2C(1-6)alquila), ou -C(O)alquila (preferivelmente -C(O)C(1-6)alquila); A é um anel selecionado do grupo consistindo em: fenila, heteroarila mono ou bicíclica (preferivelmente piridila, benzo-oxazolila, benzotiazolila, quinoli- nila, quinazolinila, quinoxalinila, benzimidazolila, benzotiofenila, benzofurani- la, ou [1,2,4]triazol[1,5-a]piridinila), e heterociclila benzofundida (preferivel- mente benzo[1,3]dioxolila, ou 2,3-di-hidro-benzofuranila); em que as ditas fenila, heteroarila, ou heterociclila benzofundida são opcionalmente substitu- ídas com um, dois ou três substituintes independentemente selecionados do grupo consistindo em:-OH, alquila, fenila, heteroarila, alcóxi, -CN1 halogênio, nitro, -NH2,-NHC(O)NHC1-6alquila, e -NHC(0)C1-6alquila; R5 e R6 são independentemente selecionados de: H, F1 C1-6 alquila, -OH, -OC1-6alquila,-NHC1-6alquila, ou -N(C1-6alquila)2;

R7 e R8 são H, halogênio ou C1-6 alquila.

Outra modalidade da invenção inclui:

<formula>formula see original document page 32</formula>

SAIS FARMACEUTICAMENTE ACEITÁVEIS

Os compostos da presente invenção podem também estar pre- sentes na forma da sais farmaceuticamente aceitáveis.

Para uso em remédios, os sais dos compostos desta invenção referem-se aos "sais farmaceuticamente aceitáveis" não-tóxicos. O FDA a- provou formas de sais farmaceuticamente aceitáveis (Ref. International J. Pharm. 1986, 33, 201-217; J. Pharm. Sci., 1977, Jan1 66(1), p1) incluindo sais acídicos/aniônicos ou básicos/catiônicos farmaceuticamente aceitáveis.

Sais acídicos/aniônicos farmaceuticamente aceitáveis incluem, e não estão limitados a acetato, benzenossulfonato, benzoato, bicarbonato, bitartrato, brometo, edetato de cálcio, camsilato, carbonato, cloreto, citrato, di-cloridrato, edetato, edisilato, estolato, esilato, fumarato, gliceptato, gluco- nato, glutamato, glicolilarsanilato, hexilresorcinato, hidrabamina, bromidrato, cloridrato, hidroxinaftoato, iodeto, isetionato, lactato, lactobionato, malato, maleato, mandelato, mesilato, metilbrometo, metilnitrato, metilsulfato, muca- to, napsilato, nitrato, pamoato, pantotenato, fosfato/difosfato, poligalacturo- nato, salicilato, estearato, subacetato, succinato, sulfato, tanato, tartrato, te- oclato, tosilato e trietiodido. Ácidos orgânicos ou inorgânicos também inclu- em, e não estão limitadas a, ácido iodídrico, perclórico, sulfúrico, fosfórico, propiônico, glicólico, metanossulfônico, hidroxietanossulfônico, oxálico, 2-naftalenossulfônico, p-toluenossulfônico, ciclo-hexanossulfâmico, sacaríni- co ou trifluoroacético.

Sais básicos/catiônicos farmaceuticamente aceitáveis incluem, e não estão limitados a alumínio, 2-amino-2-hidroximetil-propano-1,3-diol (também conhecido como tris(hidroximetil)aminometano, trometano ou "TRIS"), benzatina, f-butilamina, cálcio, gluconato de cálcio, hidróxido de cál- cio, cloroprocaina, colina, bicarbonato de colina, cloreto de colina, ciclo- hexílamina, dietilamina, etilenodiamina, lítio, LiOMe1 L-lisina, magnésio, me- glumina, NH3, NH4OH, N-metil-D-glucamina, piperidina, potássio, potás- sio-f-butóxido, hidróxido de potássio (aquoso), procaina, quinina, sódio, car- bonato de sódio, sódio-2-etil-hexanoato (SEH), hidróxido de sódio, trietilami- na (TEA) ou zinco.

PROFÁRMACOS

A presente invenção inclui dentro de seu escopo profármacos dos compostos da invenção. Em geral, tais profármacos serão funcionais derivados dos compostos que são prontamente conversíveis in vivo em um composto ativo. Dessa maneira, nos métodos de tratamento da presente invenção, o termo "administrar" deverá abranger os meios para tratar, mitigar ou prevenir uma síndrome, distúrbio ou doença descritos aqui a seguir com um composto especificamente descrito ou um composto, ou profármaco, que obviamente seria incluído dentro do escopo da invenção se bem que não especificamente descrito para certos compostos correntes. Procedimentos convencionais para a seleção e preparação de derivados de profármacos apropriados estão descritos em, por exemplo, "Desian of Prodruqs". ed. H. Bundgaard, Elsevier, 1985.

FORMAS ESTEREOQUIMICAMENTE ISOMÉRICAS A pessoa versada na técnica reconhecerá que os compostos de Fórmula I podem ter um ou mais átomos de carbono assimétricos na sua estrutura. Pretende-se que a presente invenção inclua dentro de seu escopo formas de enantiômero único de compostos, misturas racêmicas, e misturas de enantiômeros em que um excesso enantiomérico está presente.

O termo "enantiômero único" como usado aqui a seguir define todas as formas homoquirais possíveis que os compostos de Fórmula I e seus N-óxidos, sais de adição, aminas quaternárias ou derivados fisiologi- camente funcionais podem possuir.

Formas isoméricas estereoquimicamente puras podem ser obti- das pela aplicação dos princípios conhecidos na técnica. Os diastereoisôme- ros podem ser separados por métodos de separação física tais como as téc- nicas cromatográfica e de cristalização fracional, e os enantiômeros podem ser separados uns dos outros pela cristalização seletiva dos sais diastereo- méricos com ácidos ou bases opticamente ativos ou por cromatografia qui- ral. Estereoisômeros puros podem também ser preparados sinteticamente de materiais de partida apropriados estereoquimicamente puros, ou usando reações estereoseletivas.

O termo "isômero" refere-se aos compostos que têm a mesma composição e peso molecular mas diferem em propriedades físicas e/ou químicas. Tais substâncias têm o mesmo número e tipo de átomos mas dife- rem em estrutura. A diferença estrutural pode ser na constituição (isômeros geométricos) ou em uma capacidade de girar o plano de luz polarizada (e- nantiômeros).

O termo "estereoisômero" refere-se aos isômeros de constitui- ção idêntica que diferem na disposição de seus átomos no espaço. Enanti- ômeros e diastereômeros são estereoisômeros em que um átomo de carbo- no assimetricamente substituído atua como um centro quiral.

O termo "quiral" refere-se à característica estrutural de uma mo- lécula que torna impossível superimpô-la na sua imagem de espelho.

O termo "enantiômero" refere-se a um par de espécies molecula- res que são imagens de espelho uma da outra e não podem ser superimpos- tas.

O termo "diastereômero" refere-se aos estereoisômeros que não são imagens de espelho.

Os símbolos "R' e "S" representam a configuração de substituin- tes em torno de um(uns) átomo(s) de carbono quiral(ais).

O termo "racemato" ou "mistura racêmica" refere-se a uma com- posição composta de quantidades equimolares de duas espécies enantiomé- ricas, em que a composição é destituída de atividade óptica.

O termo "homoauiral" refere-se a um estado de pureza enantio- mérica.

O termo "atividade óptica" refere-se ao grau em que uma molé- cula homoquiral ou não-racêmica de moléculas quirais gira um plano de luz polarizada.

O termo "isômero geométrico" refere-se a isômeros que diferem na orientação dos átomos substituintes em relação à ligação dupla carbo- no-carbono para um anel de cicloalquila para um sistema bicíclico em cadei- a. Átomos substituintes (distintos de H) em cada lado de uma ligação dupla carbono-carbono podem estar em uma configuração E ou Z. Na configura- ção "E" (lados opostos), os substituintes estão em lados opostos em relação à ligação dupla de carbono- carbono; na configuração "Z" (mesmos lados), os substituintes estão orientados no mesmo lado em relação à ligação dupla carbono-carbono. Os átomos substituintes (distintos de H) ligados a um anel carbocíclico podem estar em uma configuração eis ou trans. Na configuração "eis", os substituintes estão do mesmo lado em relação ao plano do anel; na configuração "trans", os substituintes estão em lados opostos em relação ao plano do anel. Compostos que têm uma mistura de espécies "eis" e "trans" são designadas "cis/trans".

Deve ficar entendido que os vários substituintes estereoisôme- ros, isômeros geométricos e misturas dos mesmos usados para preparar compostos da presente invenção tanto estão comercialmente disponíveis ou podem ser preparados sinteticamente de materiais de partida comercial- mernte disponíveis, ou podem ser preparados como misturas isoméricas e depois obtidos como isômeros decompostos usando técnicas bem- conhecidas das pessoas versadas na técnica.

Os descritores isoméricos "R, ""S, ""E, ""Z, ""cis, "e "trans" são usados como descrito aqui a seguir para indicar a(s) configuração(s) do á- tomo em relação a uma molécula de núcleo e são destinados a ser usados como definido na literatura (IUPAC Recommendations for Fundamental Ste- reochemistry (Section E), Pure Appl. Chem., 1976, 45:13-30).

Os compostos da presente invenção podem ser preparados co- mo isômeros individuais por síntese específica de isômero ou decompostos a partir de uma mistura isomérica. As técnicas de resolução convencionais incluem formar a base livre de cada isômero de um par isomérico usando um sal opticamente ativo (seguido por cristalização fracional e regeneração da base livre), formando um éster ou amida de cada um dos isômeros de um par isomérico (seguido por separação cromatográfica e remoção do auxiliar quiral) ou decompondo uma mistura isomérica de um material de partida ou um produto final usando TLC (cromatografia de camada fina) preparativa ou uma coluna de HPLC quiral.

POLIMORFOS E SOLVATOS

Além do mais, os compostos da presente invenção podem ter uma ou mais formas cristalinas polimorfas ou amorfas e como tal estão des- tinados a ser incluídos no escopo da invenção. Além disso, os compostos podem formar solvatos, por exemplo com água (isto é, hidratos) ou solventes orgânicos comuns. Como usado aqui a seguir, o termo "solvato" significa uma associação física dos compostos da presente invenção com uma ou mais moléculas de solvente. Essa associação física envolve graus de varia- ção de ligação iônica e covalente, incluindo ligação de hidrogênio. Em certos casos o solvato será capaz de isolamento, por exemplo quando uma ou mais moléculas de solvente são incorporadas na treliça de cristal do sólido crista- lino. O termo "solvato" pretende abranger ambos os solvatos de fase de so- lução e isoláveis. Exemplos não-limitantes de solvates apropriados incluem etanolatos, metanolatos, e os similares.

Pretende-se que a presente invenção inclua dentro de seu esco- po solvatos dos compostos da presente invenção. Dessa maneira, nos mé- todos de tratamento da presente invenção, o termo "administacão" deverá abranger os meios de tratar, melhorar ou prevenir uma síndrome, distúrbio ou doença descrita aqui a seguir com os compostos da presente invenção ou um solvato dos mesmos, que obviamente deverá ser incluído dentro do escopo da invenção embora não especificamente descrito.

FORMAS TAUTOMÉRICAS

Alguns dos compostos de Fórmula I podem também existir em suas formas tautoméricas. Tais formas embora não explicitamente indicadas no presente pedido destinam-se a ser incluídas dentro do escopo da presen- te invenção.

PREPARAÇÃO DOS COMPOSTOS DA PRESENTE INVENÇÃO

Durante qualquer um dos processos para preparação dos com- postos da presente invenção, poderá ser necessário e/ou desejável proteger os grupos sensitivos ou reativos em qualquer uma das moléculas envolvidas. Isto pode ser conseguido por meio de grupos de proteção convencionais, tais como aqueles descritos em Protectinq Grupos. P. Kocienski, Thieme Medicai Publishers, 2000; e T.W. Greene & P.G.M. Wuts, Protective Grupos in Orqanic Svnthesis. 3a edição. Wiley Interscience, 1999. Os grupos de pro- teção podem ser removidos em uma etapa subsequente conveniente usando métodos conhecidos na técnica.

ESQUEMA GERAL DE REAÇÃO

Os compostos de Fórmula I podem ser prepados por métodos conhecidos daqueles que são versados na técnica. Os esquemas de reação a seguir são destinados somente para representar exemplos da invenção e de maneira alguma se destinam a ser um limite da invenção. Esquema 1

<formula>formula see original document page 38</formula>

em que: X é Cl ou I ou Br; Y é zincato, ácido borônico, boronato éster ou estânio

O Esquema 1 ilustra as vias sintéticas duais que levam aos compostos de Fórmula I1 em que A, R11 R51 R61 R71 e R8 são como definido na Fórmula I. Começando com a di-halopiiridazina II e seguindo o caminho para a direita, uma transição - reação de ligação cruzada de metal cataliza- do pode acontecer usando um ácido borônico apropriadamente substituído, boronato éster, zincato ou estânio V sob Suzuki (Miyaura, N., Suzuki, A., Chem. Rev. 95:2457 (1995)), Negishi (Negishi, E., et. al., J. Org. Chem. 42:1821 (1977)), ou condições de Stille (Stille, J.K., Agnew. Chem., Int. Ed. Engl., 25: 508 (1986) e referências a referências a esse respeito). A piridazi- na resultante VI pode ser convertida para triazolopiridazina I pela reação de 3-halopiridazina com uma variedade de acil-hidrazinas III ao refluxar 1-butanol (Albright, J.D., et. al., J. Med. Chem., 1981, 24, 592-600). Alternativamente, seguindo o caminho de descida, reagir a 3,6-di-halopiiridazina Il com uma variedade de acil-hidrazinas III1 seguida pela transição - reação de ligação cruzada de metal com IV gera a triazolo- piridazina I. Essa via empresta a si mesma para gerar uma biblioteca de compostos da estrutura do núcleo de triazolopiridazina através de reações de ligação cruzada com a estrutura halogenada.

As reações de ligação cruzada acima mencionadas de haletos de arila com ácido arilborônico, arilzincato ou arilestânio são generalmente realizadas em um ambiente inerte mediado por um catalizador tal como pa- ládio tetraquis-trifenilfosfina. Essas reações podem ocorrer a temperaturas que variam de 60°C a 150°C em solventes apróticos polares ou soluções bifásicas. Na maioria dos casos em que o ácido arilborônico, arilzincato ou arilestânio não estão comercialmente disponíveis, ele pode ser sintetizado do haleto de arila correspondente ou através de procedimentos de metala- ção/transmetalação diretos. Alternativamente, o catalizador Peppsi-iPr pode ser usado no lugar de Pd(PPh3)4, veja M. G. Organ et al, Chemistry - A Eu- ropean Journal, Volume 12, Edição 18, 14 de junho de 2006, pp: 4743-4748, e referências a esse respeito Esquema 2

<formula>formula see original document page 39</formula> Os ácidos aril-acético e heteroaril-acético podem ser acessados por métodos conhecidos na técnica (Journal of Medicinal Chemistry, 1986, 29 (11), 2326-2329;Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 2004, 14(14), 3799-3802; EP 1229034 A1 20020807; Tetrahedron Letters, 2003, 44 (35), 6745-6747; Synthetic Communications, 1997, 27 (22), 3839-3846).

Diversos exemplos de ácido acético de arila estão ilustrados no Esquema 2. O composto heterocíclico benzofundido VII, (Journal of Medicinal Chemistry, 1996, 29 (11), 2362-2369; Journal of Medicinal Chemistry, 1997, 40(7), 1049-1062), é tratado com N-bromossuccinimida em tetracloreto de carbono para dar o composto VIII. O ácido nitrofenilacético IX, (Bioorganic and Medi- cinal Chemistry Letters, 1998, 8 (1), 17-22; Organic Letters, 2002, 4 (16), 2675-2678; WO 00/06566, Helvitica Chemica Acta, 1976, 59 (3), 855-866) é reduzido em condiçãos tais como hidrogenação na presença de paládio em carbono ativado em um solvente tal como metanol para dar o composto X, que é depois tratado com ortoformato de trietila em tolueno para dar XI. O composto Xll pode ser tratado com uma amina apropriada para dar o com- posto XIII.

Os compostos a seguir podem ser sintetizados pelos métodos conhecidos na técnica: <formula>formula see original document page 41</formula>

em que A é selecionado de: (2) e

<formula>formula see original document page 41</formula>

Veja, por exemplo, Journal of Medicinal Chemistry, 1997, 40 (7), 1049-1058, e as referências a esse respeito; e WO 2002085888. Esquema 3

<formula>formula see original document page 42</formula>

A síntese de cloretos de acetil arila e heteroarila e hidrazidas de ácido aril-acético e heteroaril-acético pode também ser acessada pelos mé- todos conhecidos na técnica (veja, Bulletin de la Societe Chimique de Fran- ce, 1964, 2, 245-247; e Helvitica Chemica Acta, 1928, 11, 609-656). O com- posto XIV, em que A é como definido na Fórmula I é tratado com cloreto de oxalila em DCM para dar o Composto XV, que é tratado com hidrazina de anidro em DCM para dar a hidrazida XVI. Alternativamente, o Composto XIV pode ser tratado com anidrido acético, seguido por hidrazina em água para dar o Composto XVI. Metil éster de ácido acético XVII pode ser tratado com hidrazina aquosa em etanol para dar o Composto XVI. Esquema 4a

<formula>formula see original document page 43</formula>

em que:

X é Br ou I

R' é CH3 ou C2H5

O Esquema 4a ilustra as vias tomadas para obter compostos de Fórmula III em que R5 e R6 são ambos F ou H, e A é como definido na Fór- mula I. A primeira via para gerar a acil-hidrazida envolve a troca me- tal-halogênio de uma aril-halida apropriada XVIII com um organometálico como n-butil-lítio seguido pela acetilação com oxalato de dialquila. O alqui- léster de acetila XIX formado é depois fluorinado com DAST (trifluoreto de (dimetilamino)enxofre) em um solvente como cloreto de metileno para formar o difluoroalquiléster XXI, seguido pelo tratamento com hidrazina para formar a difluoroacil-hidrazida III. A segunda via envolve um cobre de ligação cru- zada mediada de aril-halida XVIII com um difluoroéster halogenado gerando o difluoroalquiléster XXI intermediário seguido por tratamento com hidrazina para formar o difluoroacil-hidrazida III. A terceira via envolve a oxidação de um éster aril-acético XX para um cetoéter de arila XIX seguido pela fluorina- ção com DAST gerando o intermediário de difluoroalquiléster XXI e depois tratamento com hidrazina para formar a difluoroacil-hidrazida III. A quarta via envolve a ligação cruzada mediada por cobre do haleto de arila XVIII com um dietiléster de malonato para formar o alquildiéster XXII. A saponificação e depois o tratamento com cloreto de tionila em álcool ou, alternativamente, refluxo com álcool na presença de ácido rende o alquiléster XXI. O tratamen- to com hidrazina resulta em acil-hidrazida III, em que ambos R5 e R6 são H.

Esquema 4b

(<formula>formula see original document page 44</formula>

O Esquema 4b ilustra uma via tomada para obter compostos de Fórmula III em que R5 e R6 são H, F, alquila, OH1 Oalquila, NHalquila, ou N(alquila)2, e A é como definido na Fórmula I. Essa via envolve a oxidação de éster de arila XX para um alquiléster de acetila XIX seguido pela redução para o álcool XXIII seguido pela fluorinação com DAST gerando o intermedi- ário de monofluoroalquiléster XXI e depois o tratamento com hidrazina para formar III. Alternativamente o composto XXIII pode converter diretamente em III pelo tratamento com hidrazina em um solvente tal como metanol ou reagi- do XXIII com haleto de alquila na presença de base forte como um hidreto de sódio seguido pelo tratamento com hidrazina em um solvente tal como metanol para dar III. Os compostos XX podem ser convertidos para III pelo tratamento com haleto de alquila na presença de base tal como hidreto de sódio seguido pelo tratamento com hidrazina em um solvente tal como me- tanol. A conversão de composto XIX para III pode ser realizada pela amina- ção de redução seguida pelo tratamento com hidrazina em um solvente tal como metanol. <formula>formula see original document page 45</formula>

em que: R' é metila ou etila η é 1-5

A síntese de compostos de Fórmula III em que R5 e R6 se juntam para formar um anel, e A é como definido na Fórmula I, pode ser executada por métodos conhecidos na técnica (Chemische Berichte, 119(12), 3694-703; 1986, Australian Journal of Chemistry, 39(2) 271-80; 1986, Bioor- ganic and Medicinal Chemistry Letters 13(14), 2291-2295; 2003). O Esque- ma 4c ilustra duas vias alternadas para obter a hidrizida de acila III. Come- çando com o éster de acrílico comercialmente disponível XXIV seguido pelo tratamento com o tri-halo metano resultando na formação na formação de um di-halo cicila XXV, que é depois tratado com organoestânicos, seguido pelo tratamento com hidrazina para formar III. A segunda via envolve a adi- ção direta de uma di-haloalquila para o material de partida comercialmente disponível XXI seguido pela formação de hidrazina resultando na hidrazina de acila III.

Esquema 4d

<formula>formula see original document page 45</formula>

em que: R' é metila ou etila J é N ou O

A síntese de compostos de Fórmula III em que R5 e R6 se juntam para formar uma aziridina ou epóxido, e A é como definido na Fórmula I, po- de também ser acessada pelos métodos conhecidos na técnica. O Esquema 4d ilustra somente a via pela qual a hidrazida de acila heterocíclica III é for- mada começando com o éster de acrílico comercialmente disponível XXIV seguido pelo tratamento com hidrazina.

Os Esquemas 5a - 5e ilustram vias para funcionalizar grupos heteroarila nos compostos de Fórmula I tais como tiofeno, pirazol e furano. A composição de Ri não está limitada ao texto descrito contido abaixo mas também inclui materiais de partida de heteroarila mono ou bicíclica substituí- da comercialmente disponíveis. Esses materiais podem também ser obtidos pelos métodos descritos na técnica anterior, veja (Miyaura, N., Suzuki, A., Chem. Rev. 95:2457 (1995)), (Negishi, E., et. al., J. Org. Chem. 42:1821 (1977)), (Stille, J.K., Agnew. Chem., Int. Ed. Engl., 25: 508 (1986).

<formula>formula see original document page 46</formula>

O Esquema 5a ilustra o uso de aminação redutiva para introduzir aminas para a série de triazolopiridazina. Essa química começa com com- postos de Fórmula I em que R1 é um tiofeno 2,5-substituído ou um furano 2,5-substituído, e R5, R6, R7, R8, e A são como definido na Fórmula I. O tra- tamento com triacetoxiboro-hidreto de sódio e uma amina secundária em metanol acídico dá o furano ou tiofeno substituído por amina corespondente.

<formula>formula see original document page 46</formula>

O Esquema 5b ilustra o uso de saponificação seguida pelo aco- plamento com aminas secundárias para introduzir amidas para a série de triazolopiridazina. Essa reação de duas etapas começa com compostos de Fórmula I em que R1 é heteroarila mono ou bicíclica, e R5, R6, R7, R8, e A são como definido na Fórmula I. O tratamento com hidróxido de sódio (Na- OH) e hexafluorofosfato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3I3-tetrametilurônio (HBTU) em metanol e tetra-hidrofurano seguidos por 1-hidroxibenzotriazol (HOBT), base de Hunig (DIEA) e a amina secundária desejada resultando em compostos de Fórmula I em que R1 é um tiofeno substituído por amida. Compostos de Fórmula I em que Ra é -C(O)NH-C(1-4)alquil-Rb são feitos de uma maneira análoga.

<formula>formula see original document page 47</formula>

em que Q1, Q2 e Q3 são independentemente CH ou N

O Esquema 5c ilustra o uso de acetilação para introduzir um grupo acila para R1 em que R1 é um nitrogênio contendo heteroarila (por e- xemplo pirazol), e R5, R6, R7, R8, e A são como definido na Fórmula I. Essa química utiliza um grupo acila apropriadamente substituído com um grupo de saída, preferivelmente um halogênio, em um solvente como DCM com uma base de depurador do tipo DIEA resultando na acetilação de R1.

<formula>formula see original document page 47</formula>

em que Q1, Q2, e Q3 são independentemente CH ou N

O Esquema 5d ilustra o uso de sulfoxilação para introduzir um grupo sulfoxila para R1 em que R1 é um nitrogênio contendo heteroarila (por exemplo pirazol) e Ra é uma sulfonila ou sulfonamida, e R5, R6, R7, R8, e A são como definido na Fórmula I. Essa química utiliza um grupo sulfoxila a- propriadamente substituído com um grupo de saída, preferivelmente um ha- logênio, em um solvente do tipo DCM com uma base de depuração como DIEA resultando na sulfoxilação de R1.

<formula>formula see original document page 48</formula>

em que Q1, Q2 e Q3 são independentemente CH ou N

O Esquema 5e ilustra a substituição de R1 com Ra em que R1 é um nitrogênio contendo heteroarila (por exemplo pirazol), Ra é alquila, ami- noalquila, ou C(1-4)alquil-Rb, e R51 R61 R71 R81 e A são como definido na Fór- mula I. A química utiliza um grupo aquila apropriadamente substituída com um grupo de saída, preferivelmente um halogênio, em um solvente como etanol e uma base como carbonato de potássio resultando na alquilação de R1.

COMPOSTOS REPRESENTATIVOS

Compostos representativos da presente invenção sintetizados pelos métodos mencionados acima são apresentados abaixo. Exemplos da síntese de compostos específicos são apresentados daqui em diante. Os compostos preferidos são os de números 17, 20, 22, 38, 39, 47, 51, 54, 55, 57, 59, 60, 61, 65, 66, 72, 73, 74, 77, 86, 87, 97, 98, 99, 100, 100b, 101, 102, 103 e 104; os compostos mais preferidos são os de números 39, 47, 55, 60, 61, 65, 72, 73, 74, 77, 97, e 98. Compostos mais preferidos são os de núme-

ros 60, 61, 97, e 98.

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Exemplos de sínteses de compostos individuais são mostrados abaixo: Exemplo 1

6-[6-(1-Metil-1H^irazol-4-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil]-quinolina <formula>formula see original document page 68</formula>

Exemplo 1: etapa a

3-Cloro-6-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-piridazina

<formula>formula see original document page 68</formula>

Um frasco foi carregado com 3,6-dicloropiridazina (Aldrich, 297 mg, 2,0 mmols), 1-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaboro- lan-2-il)-1 H-pirazol (499 mg, 2,4 mmols), Na2CO3 a 2 M (4 mL) e dioxano (4 mL). Argônio foi borbulhado através da reação por 60 segundos seguido pe- la adição de Tetraquis(trifenilfosfina)paládio (0) (231 mg, 0,2 mmol). A rea- ção foi aquecida a 80°C durante a noite seguida pelo estímulo aquoso usan- do EtOAc e salmoura. A camada orgânica foi seca (MgSO4) e concentrada in vácuo seguida pela purificação da cromatografia de coluna (20 % de acetato de etila em hexanos) resultando no composto do título como um sólido bran- co (183 mg, 47 %). 1H-RMN (CD3OD): δ 8,23 (1H, s), 8,08 (1H, s), 7,84 (1H, br s), 7,34 (1H, br s), 4,00 (3H, s).

Exemplo 1: etapa b

6-[6-(1 -Metil-1 H-pirazol-4-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil]-quinolina

<formula>formula see original document page 68</formula>

Hidrazida de ácido quinolin-6-il-acético (188 mg, 0,93 mmol) e 3-cloro-6-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-piridazina (202 mg, 0,93 mmol, Exemplo 1: etapa a) foram dissolvidos em butanol (120 mL). A mistura de reação foi a- quecida a 120°C durante a noite, ajustada com condensador de refluxo de água congelada e linha de argônio. A reação foi concentrada in vácuo segui- da pela purificação de HPLC (5 a 65% de CH3CN durante 40 min) resultando no composto do título como um sólido castanho (201,6 mg, 65 %). 1H-RMN (CD3OD): δ 9,08-9,04 (2H, m), 8,30-8,29 (2H, m), 8,21-8,06 (4H, m), 7,99-7,95 (1H, q, J = 5,3, 3,0 Hz), 7,68-7,65 (1H, d, J = 9,8), 4,85 (2H, s), 3,89 (3H, s), 4,96 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C19H15N7: 341,37; encontrado: 342,3 (M+H).

Exemplo 2

6-[6-(1H-Pirazol-4-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil]-quinolina

<formula>formula see original document page 69</formula>

O composto do título foi preparado como descrito no Exemplo 1, 1H-RMN (CD3OD): δ 9,08-9,05 (2H, m), 8,30 (1H, s), 8,26 (1H, m), 8,21-8,19 (2H, m), 8,15-8,12 (2H, m), 7,99-7,90 (1H, m), 7,75-7,65 (1H, m), 4,86 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C18H13N7: 327,12; encontrado: 328,2 (M+H).

Exemplo 3

4-[6-(1H-Pirazol-4-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil]-fenol

<formula>formula see original document page 69</formula>

O composto do título foi preparado como descrito no Exemplo 1, 1H-RMN (CD3OD): δ 9,33 (1H, s), 8,67 (1H, s), 8,38-8,35 (1H, d, J = 9,6 Hz), 8,26 (1H, s), 7,79-7,76 (1H, d, J = 9,6 Hz), 7,28-7,26 (1H, d, J = 8,6 Hz), 6,75-6,73 (1H, d, J = 8,5 Hz), 4,45 (2H, s), 3,24-3,22 (2H, d, J = 5,3). ESI-MS (m/z): Calculado para C15H12N6O: 292,11; encontrado: 293,2 (M+H).

Exemplo 4 4-(6-Piridin-3-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-fenol

<formula>formula see original document page 70</formula>

O composto do título foi preparado como descrito no Exemplo 1, 1H-RMN (CD3OD): δ 9,41 (1H, s), 8,93-8,91 (2H, d, J = 9,34 Hz), 8,42-8,40 (1H, d, J = 9,6 Hz), 8,07-8,04 (1H, d, J = 9,6 Hz), 8,01-7,98 (1H, t, J = 7,57 Hz), 7,27-7,25 (2H, d, J = 8,8 Hz), 6,75-6,73 (2H, d, J = 8,5 Hz), 4,59 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C17H13N5O: 303,11; encontrado: 304,2 (M+H).

Exemplo 5

4-[6-(2H-Pirazol-3-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil]-fenol

<formula>formula see original document page 70</formula>

O composto do título foi preparado como descrito no Exemplo 1, 1H-RMN (CD3OD/CDCl3): δ 8,56-8,53 (1H, d, J = 2,2 Hz), 8,32-8,29 (1H, d, J = 10,1 Hz), 8,17-8,19 (1H, d, J = 10,1 Hz), 7,87 (1H, m), 7,26-7,24 (2H, d, J = 8,5 Hz), 6,75-6,72 (2H, d, J = 8,5 Hz), 6,67-6,65 (1H, m), 4,49 (2H, s). E- SI-MS (m/z): Calculado para C15Hi2N6O: 292,11; encontrado: 293,2 (M+H).

Exemplo 6

6-(6-Piridin-4-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-quinolina

<formula>formula see original document page 70</formula>

O composto do título foi preparado como descrito no Exemplo 1, 1H-RMN (CD3OD): δ 9,20-9,18 (1H, d, J = 5,3 Hz), 9,15-9,13 (1H, d, J = 8,3 Hz), 9,00-8,99 (2H, d, J = 6,5 Hz), 8,58-8,56 (2H, d, J = 6,5 Hz), 8,52-8,49 (1H, d, J = 9,8Hz), 8,42 (1H, s), 8,32-8,26 (2H, d, J = 8,8, 10,3 Hz), 8,16-8,14 (1H, d, J = 8,9 Hz), 8,09-8,06 (1H, m), 5,07 (2H, br s). ESI-MS (m/z): Calculado para C20H14N6: 338,37; encontrado: 339,3 (M+H).

Exemplo 7

3-(2,3-Di-hidro-benzofuran-5-ilmetil)-6-piridin-4-il-[1,2,4]triazol[4,3-b] piridazi- na

<formula>formula see original document page 71</formula>

O composto do título foi preparado como descrito no Exemplo 1, 1H-RMN (CD3OD): δ 8,91-8,88 (2H, d, J = 6,5 Hz), 8,48-8,47 (2H, d, J = 6,8 Hz), 8,34-8,31 (1H, d, J = 9,6 Hz), 8,00-7,89 (1H, d, J = 9,8 Hz), 7,15 (1H, s), 7,07-7,04 (1H, d, J = 8,0 Hz), 6,55-6,53 (1H, d, J = 8,3 Hz), 4,49 (2H, s), 4,38-4,34 (2H, t, J = 8,8 Hz), 3,04-3,00 (2H, d, J = 8,5 Hz). ESI-MS (m/z): Calculado para C19H15N5O: 329,13; encontrado: 330,2 (M+H).

Exemplo 8

3-(2,3-Di-hidro-benzofuran-5-ilmetil)-6-(6-morfolin-4-il-piridin-3-il)-[1,2,4] tria- zol[4,3-b]piridazina

<formula>formula see original document page 71</formula>

O composto do título foi preparado como descrito no Exemplo 1, 1H-RMN (CD3OD): δ 8,52-8,51 (1Η, d, J = 2,5 Hz), 8,26-8,23 (1Η, dd, J = 2,2, 9,3 Hz), 8,06-8,03 (1H, d, J = 9,8 Hz), 7,74-7,72 (1H, d, J = 9,8 Hz), 7,05-7,01 (2H, m), 6,94-6,92 (1H, d, J = 9,3 Hz), 6,45-6,42 (1H, d, J = 8,0 Hz), 4,33 (2H, s), 4,28-4,24 (2H, t, J = 8,5 Hz), 3,64-6,32 (4H, m), 3,52-3,50 (4H, m), 2,93-2,89 (2H, t, J = 8,8 Hz). ESI-MS (m/z): Calculado para C23H22N6O2: 414,18; encontrado: 415,3 (M+H).

Exemplo 9

6-[6-(1-Propil-1H-pirazol-4-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil]- quinolina <formula>formula see original document page 72</formula>

O composto do título foi preparado como descrito no Exemplo 1, 1H-RMN (CD3OD): δ 9,18-9,16 (1H, dd, J = 1,5, 5,5 Hz), 9,14-9,12 (1H, d, J = 7,5 Hz), 8,46 (1H, s), 8,39 (1H, s), 8,30-8,19 (4H, m), 8,07-8,04 (1H, q, J = 3,0, 5,3 Hz), 7,78-7,76 (1H, d, J = 9,6 Hz), 4,96 (2H, s), 4,24-4,20 (2H, t, J = 6,8 Hz), 1,99-1,90 (2H, m), 0,91-0,93 (3H, t, J = 7,3 Hz). ESI-MS (m/z): Cal- culado para C21H19N7: 369,17; encontrado: 370,3 (M+H).

Exemplo 10

Morfo- lin-4-il-[5-(3-quinolin-6-ilmetil-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-e-il)-piridin-3-il]-met anona

<formula>formula see original document page 72</formula>

O composto do título foi preparado como descrito no Exemplo 1, 1H-RMN (CD3OD): δ 9,22-9,20 (1H, d, J = 2,2 Hz), 8,72-8,70 (2H, m), 8,41-8,40 (1H, t, J = 2,2 Hz), 8,28-8,23 (2H, m), 7,91-7,89 (2H, m), 7,77-7,74 (1H, dd, J = 2,0, 8,8 Hz), 7,44-7,41 (1H, q, J = 4,2), 4,55 (2H, s), 3,73 (4H, br 15 s), 3,51 (2H, br s), 3,38 (2H, br s). ESI-MS (m/z): Calculado para C25H2IN7O2: 451,18; encontrado: 452,4 (M+H).

Exemplo 11

6-(6-Piridin-3-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-quinolina

<formula>formula see original document page 72</formula> Exemplo 11: etapa a 3-Cloro-6-piridin-3-il-piridazina

<formula>formula see original document page 73</formula>

O composto do título foi preparado como descrito no Exemplo 1: etapa a. 1H-RMN (CDCl3): δ 9,21 (1H, dd, J = 1,0, 2,5 Hz), 8,77(1 H, dd, J = 1,8, 4,8 Hz), 8,46 (1H, ddd, J = 1,8, 2,5, 8,1 Hz), 7,89 (1H, d, J = 8,8 Hz), 7,64 (1H, d, J = 8,8 Hz), (1H, ddd, J = 1,0, 4,8, 8,1 Hz). ESI-MS (m/z): Calcu- lado para C9H6CIN3: 191,0/192,0 encontrado: 192,2/194,4 (M+H/M+2+H).

Exemplo 11: etapa b

6-(6-Piridin-3-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-quinolina

<formula>formula see original document page 73</formula>

O composto do título foi preparado como descrito no Exemplo 1: etapa b. 1H-RMN (CD3OD): δ 9,81 (1H, m), 9,50 (1H, m), 9,27 (1H, m), 9,25 (1H, dd, J = 1,5, 5,3 Hz), 9,16 (1H, m), 8,86 (1H, d, J = 9,9 Hz), 8,71 (1H, d, J = 9,6 Hz), 8,58 (1H, m), 8,42 (1H, m), 8,40 (1H, m), 8,36 (1H, m), 8,14 (1H, dd, J = 5,3, 8,3 Hz), 5,22 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C20Hi6N6: 338,1; encontrado: 339,3 (M+H).

Exemplo 12

6-Piridin-3-il-3-[1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-6-ilmetil-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazina

<formula>formula see original document page 73</formula>

Exemplo 12: etapa a

Dietii ésterde ácido 2-[1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-6-il-malônico

<formula>formula see original document page 73</formula>

Maionato de dietila (400 μL) foi adicionado a uma mistura de 6-iodo-[1,2,4]triazoí[1,5-a]piridina (245 mg, 1 mmol), iodeto de cobre (19 mg, 0,1 mmol), bifenil-2-ol (34 mg, 0,2 mmol), e Cs2CO3 em THF (5 mL). A solu- ção heterogênea foi agitada por 16 h a 70°C. Após resfriar, a mistura foi divi- dida entre clorofórmio (40 mL) e NH4CI aquoso (20 mL). A camada orgânica foi lavada com NH4CI (3x15 mL), NaHCO3 (20 mL), e salmoura (20 mL), depois foi seca sobre Na2SO4, Concentração da solução seguida por purifi- cação de cromatografia de SiO2 rendeu o produto (170 mg, 61%) como um vidro incolor. 1H-RMN (CDCI3): δ 8,77 (1H, m), 8,37 (1H, s), 7,78 (1H, dd, J = 0,9, 9,1 Hz), 7,69 (1H, dd, J = 1,8, 9,3 Hz), 4,76 (1H, s), 4,27 (4H, m), 1,30 (6H, t, J = 7,3 Hz). ESI-MS (m/z): Calculado para C13Hi5N3O4: 277,1; encon- trado: 278,2 (M+H).

Exemplo 12: etapa b

Hidrazida de ácido [1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-6-il-acético

<formula>formula see original document page 74</formula>

A uma solução de dietil éster de ácido 2-[1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-6-il-malônico como preparado no Exemplo 12: etapa a (170 mg, 0,6 mmol) em Dioxano (4 mL) e MeOH (6 mL) foi adiciona- do NaOH a 2N (1,2 mL, 2,4 mmols). A reação foi agitada por 4 h à tempera- tura ambiente, depois a solução foi ajustada para pH~2 com HCI a 0,5N. A solução foi agitada por 1 h (descarboxilação ocorre) e os voláteis foram re- movidos in vácuo. O resíduo foi dissolvido em MeOH seco (15 mL), resfriado em um banho de gelo, e cloreto de tionila (500 pL, 6,8 mmols) foi adicionado em gotas. A solução foi agitada por 4 h à temperatura ambiente, filtrada, e os componentes voláteis foram removidos in vácuo. 1H-RMN (CD3OD/CDCI3): δ 9,23 (1H, s), 9,15 (1H, s), 8,26 (1H, d, J = 8,6 Hz), 8,15 (1H, d, J = 8,6 Hz), 4,02 (2H, s), 3,77 (3H, s). O resíduo foi dissolvido em EtOH (10 mL) e hidra- zina (50 pL) foi adicionada. A solução foi aquecida a 70°C por 14 h, e os vo- láteis foram removidos in vácuo. O resíduo foi redissolvido três vezes em EtOH e concentrado in vácuo para remover hidrazina em excesso. O materi- al foi usado sem purificação adicional. 1H-RMN (DMSO-d6): δ 9,34 (1H, br s), 8,81 (1Η, s), 8,46 (1Η, s), 7,79 (1Η, d, J = 9,0 Hz), 7,56 (1H, dd, J = 1,5, 9,0 Hz), 3,45 (2H, s, mascarado por pico de H2O).

Exemplo 12: etapa c

6-Piridin-3-il-3-[1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-6-ilmetil-[1,2,4]triazol[4,3-b] piridazi- na

<formula>formula see original document page 75</formula>

O composto do título foi preparado como descrito no Exemplo 1: etapa b. 1H-RMN (CD3OD): δ 9,48 (1H, s), 9,09 (1H, s), 8,96 (1H, ddd, J = 1,5, 2,0, 8,1 Hz), 8,94 (1H, d, J = 5,0 Hz), 8,57 (1H, s), 8,46 (1H, d, J = 9,6 Hz), 8,06 (1H, d, J = 9,6 Hz), 8,03 (1H, m, J = 5,3, 8,1 Hz), 7,85 (1H, d, J = 9,4 Hz), 4,89 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C17H12N8: 328,1; encon- trado: 329,3 (M+H).

Exemplo 13

6-(6-Piridin-3-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-benzotiazol-2-ilamina

<formula>formula see original document page 75</formula>

O composto do título foi preparado como descrito no Exemplo 1 de hidrazida de ácido (2-amino-benzotiazol-6-il)-acético (0,65 mmol) e 3-cloro-6-piridin-3-il-piridazina (0,34 mmol) para proporcionar um sólido ama- relo. 1H RMN (DMSO-d6) δ 9,30 (1H, d, J = 1,6 Hz), 8,78 (1H, dd, J = 4,8 Hz, 1,7 Hz), 8,50 (1H, m), 8,49 (1H, d, J = 9,5 Hz), 8,01 (1H, d, J = 9,6 Hz), 7,69 (1H, s), 7,64 (1H, ddd, J = 8,1 Hz, 4,8 Hz, 1,0 Hz), 7,42 (2H, s), 7,26 (2H, s), 4,61 (2H, s). ESI-MS (m/z): calculado para C18H13N7S: 359,1; encontrado 360,3 (M+H).

Exemplo 14

3-(2-Cloro-piridin-4-ilmetil)-6-piridin-3-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazina <formula>formula see original document page 76</formula>

Exemplo 14: etapa a

Dietil éster de ácido 2-(2-cloro-piridin-4-il)-malônico

<formula>formula see original document page 76</formula>

O composto do título foi preparado como um óleo incolor de 2-cloro-4-iodopiridina (4,18 mmols) pelo método de Hennessy e Buchwald (Org. Lett. 2002, 4, 269). 1H RMN (CDCl3) δ 8,37 (1H, dd, J = 21 Hz1 5,2 Hz), 7,35 (1H, dd, J = 49 Hz1 1,4 Hz), 7,24 (1H, ddd, J = 55 Hz, 5,2 Hz, 1,5 Hz), 4,23 (4H, m), 3,61 (1H, s), 1,28 (6H, m). ESI-MS (m/z): Calculado para

C12H14NO4Cl: 271,1; encontrado 272,1 (M+H).

Exemplo 14: etapa b

Ácido (2-cloro-piridin-4-il)-acético

<formula>formula see original document page 76</formula>

O produto da etapa anterior (2,43 mmols) foi dissolvido em me- tanol (20 mL), tratado com NaOH aquoso a 2N (4,0 mL), e agitado à tempe- ratura ambiente por 5 h. A reação foi tratada com HCl aquoso a 2N (4,0 mL), concentrada à secura in vácuo, dissolvida em metanol, e filtrada. Concentra- ção do filtrado in vácuo deu o composto do título como um sólido amarelo higroscópico. 1H RMN (DMSOd6) δ 8,32 (1H, d, J = 5,1 Hz), 7,43 (1H, s), 7,32 (1H, dd, J = 5,1 Hz, 1,5 Hz), 3,64 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C7H6NO2Cl: 171,0; encontrado 172,1 (M+H).

Exemplo 14: etapa c

Hidrazida de ácido (2-cloro-piridin-4-il)-acético

<formula>formula see original document page 76</formula>

O composto do título foi preparado como um sólido amarelo- claro do produto da etapa anterior (2,43 mmols) pelo método do Exemplo 17: etapa b. 1H RMN (400 MHz, CDClI3/CD3OD) δ 8,30(d, J = 5,0 Hz, 1H), 7,34 (m, 1H), 7,22 (dd, J = 5,1 Hz, 1,5 Hz, 1H), 3,48 (s, 2H).

Exemplo 14: etapa d

3-(2-Cloro-piridin-4-ilmetil)-6-piridin-3-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazina

<formula>formula see original document page 77</formula>

O composto do título foi preparado como descrito no Exemplo 1 como um sólido laranja-pálido de hidrazida de ácido (2-cloro-piridin-4-il)-acético (0,61 mmol) e 3-cloro-6-piridin-3-il-piridazina (0,33 mmol). 1H RMN (CDCl3/CD3OD) δ 9,17 (1H, d, J = 2,6 Hz), 8,79 (1H, dd, J = 4,9 Hz1 1,6 Hz), 8,32 (1H, d, J = 4,6 Hz), 8,30 (1H, d, J = 9,5 Hz), 8,28 (1H, ddd, J = 8,0 Hz, 2,4 Hz, 1,6 Hz), 7,70 (1H, d, J = 9,6 Hz), 7,58 (1H, m), 7,47 (1H, s), 7,34 (1H, m), 4,67 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C16H11N6Cl: 322,1; encontrado 323,3 (M+H).

Exemplo 15

6-[6-(1-Metanossulfonil-1H-pirazol-4-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3- ilmetil]-quinolina

<formula>formula see original document page 77</formula>

A uma solução de 6-[6-(1H-pirazol-4-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b] piri- dazin-3-ilmetil]-quinolina como preparada no Exemplo 3 (10 mg, 0,03 mmol) e DIEA (9 μL, 0,05 mmol) em DCM (2 mL) foi adicionado sulfonilcloreto de metano (4 μL, 0,05 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente du- rante a noite. A reação foi concentrada in vácuo seguida pela purificação por HPLC (5 a 65 % de CH3CN durante 35 min) resultando no composto do título (3,1 mg, 31 %) como um sólido branco. 1H-RMN (CD3OD): δ 9,06-9,00 (2H, q, J = 5,3, 7,0 Hz), 8,89 (1H, s), 8,44 (1H, s), 8,29-8,10 (4H, m), 7,96-7,92 (1 Hj q, J = 5,3, 3,0), 7,75-7,73 (1Η, d, J = 9,8 Hz), 4,87 (2H, s), 3,42 (3H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C19Hi5N7O2S: 405,10; encontrado: 406,1 (M+H).

Exemplo 16

6-{6-[1-(2-Metóxi-etil)-1 H-pirazol-4-il]-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-il me- til}-quinolina

<formula>formula see original document page 78</formula>

A uma solução de 6-[6-(1H-pirazol-4-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b] piri- dazin-3-ilmetil]-quinolina como preparada no Exemplo 3 (19 mg, 0,06 mmol) e K2CO3 (12 mg, 0,09 mmol) em EtOH (2 mL) foi adicionado metil éter de 2-bromoetila (8 μL, 0,09 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A reação foi concentrada in vácuo seguida pela purificação por HPLC (5 a 65 % CH3CN durante 35 min) resultando no composto do títu- lo (2,8 mg, 15%) como um vidro límpido. 1H-RMN (CD3OD): Ç 9,05-9,03 (1H, dd, J = 3,7, 5,3 Hz), 9,02-8,99 (1H, d, J = 7,8 Hz), 8,32 (1H, s), 8,27 (1H, s), 8,18-8,08 (4H, m), 7,95-7,91 (1H, q, J = 3,0, 5,5 Hz), 7,66-7,63 (1H, d, J = 9,8 Hz), 4,84 (2H, s), 4,30-4,28 (2H, t, 4,8 Hz), 3,70-3,76 (2H, t, J = 5,3 Hz), 3,23 (2H, br s). ESI-MS (m/z): Calculado para C21Hi9N7O: 385,17; encontra- do: 386,2 (M+H).

Exemplo 17

4-(6-Tiofen-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-fenol

<formula>formula see original document page 78</formula>

Exemplo 17: etapa a 3-Cloro-6-tiofeno-2-il-piridazina <formula>formula see original document page 79</formula>

3,6-dicloropiridizina (149,9 mg, 1 mmol) e brometo-tiofeno de 2- zinco (Aldrich, 0,5 M, 1 mL, 0,5 mmol) foram combinados com THF (2 mL) e borbulhados com argônio por 60 segundos. À mistura de reação foi adicio- nado Tetraquis(trifenilfosfina)paládio (0) (12 mg, 0,01 mmol). A reação foi aquecida a 65°c durante a noite. A reação foi concentrada in vácuo, absorvi- da em sílica seguida pela purificação de cromatografia de coluna (20 % de acetato de etila em hexanos) resultando no composto do título como um só- lido branco. 1H-RMN (CD3OD): δ 7,75-7,73 (1H, d, J = 9,0 Hz), 7,67-7,66 (1H, dd, J = 1,2, 3,7 Hz), 7,53-7,52 (1H, d, J = 5,0 Hz), 7,50-7,48 (1H, d, J = 8,5 Hz), 7,18-7,16 (1H, t, J = 5,3 Hz). ESI-MS (m/z): Calculado para C8H5CIN2S: 195,98; encontrado: 197,2 (M+H).

Exemplo 17: etapa b

Hidrazida de ácido (4-hidróxi-fenil)-acético

<formula>formula see original document page 79</formula>

A uma solução de metil éster de ácido (4-hidróxi-fenil)-acético (5 g, 30,08 mmols) em MeOH (20mL, anidro) foi adicionada hidrazina (3,77 mL, 120,35 mmols) e depois aquecida a 55°C por 1 hora. Formou-se um precipi- tado branco durante aquecimento. A reação foi depois resfriada à temperatu- ra ambiente por uma hora adicional para facilitar precipitação do sólido. A reação foi filtrada e o sólido foi lavado com MeOH e seco resultando no pro- duto desejado (4,3 g, 86%) como um sólido branco. 1H-RMN (DMSO): δ 9,20 (1H, s), 9,10 (1H, s), 7,04-7,02 (2H, d, J = 8,6 Hz), 6,67-6,65 (2H, d, J = 8,6 Hz), 4,17-4,16 (2H, s), 4,11-4,09 (1H, q, J = 5,0, 5,5 Hz).

Exemplo 17: etapa c

4-(6-Tiofen-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-fenol <formula>formula see original document page 80</formula>

Uma solução contendo 3-cloro-6-tiofeno-2-il-piridazina (58 mg, 0,29 mmol) Exemplo 17: etapa a e hidrazida de ácido (4-hidróxi-fenil)-acético (120 mg, 0,58 mmol) em butanol (5 mL) foi aquecida a refluxo durante a noi- te. A reação foi resfriada à temperatura ambiente, e os sólidos foram filtrados e lavados com MeOH. O sólido foi recristalizado de MeOH para render o composto do título como um sólido castanho. 1H-RMN (CD3OD/CDCI3): δ 8,12-8,10 (1H, d, J = 9,34 Hz), 7,83-7,82 (1H, d, J = 3,7 Hz), 7,78-7,76 (1H, d, J = 9,8 Hz), 7,67-7,65 (1H, d, J = 5,0 Hz), 7,34-7,32 (2H, d, J = 6,5 Hz), 7,22-7,21 (1H, m), 6,77-6,75 (2H, d, J = 8,3 Hz), 4,49 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C16H12N4OS: 308,07; encontrado: 309,2 (M+H).

Exemplo 18

4-(6-Tiazol-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-fenol

<formula>formula see original document page 80</formula>

Exemplo 18: etapa a 3-Cloro-6-tiazol-2-il-piridazina

<formula>formula see original document page 80</formula>

3,6-dicloropiridizina (149,9 mg, 1 mmol) e brometo-tiazol de 2-zinco (0,5 M Aldrich, 2,4 mL, 1,2 mmol) foram dissolvidos em THF (2 mL) e borbulhou com argônio por 60 segundos. À mistura de reação foi adicionado Tetra- quis(trifenilfosfina)paládio (0) (57 mg, 0,05 mmol). A reação foi aquecida a 65°C durante a noite. Ensaio por LCMS mostrou conversão ao produto em 60% -ESI-MS (m/z): Calculado para C7H4CIN3S: 196,98; encontrado: 198,2, Portanto, outra porção de brometo-tiazol de 2-zinco (0,5 M Aldrich, 2,4 mL, 1,2 mmol) e Tetraquis(trífenilfosfína)paládio (0) (57 mg, 0,05 mmol) foi adi- cionada e aquecimento continuou por 4 horas até a finalização da reação. A reação foi concentrada in vácuo,absorvida em sílica seguida pela purifica- ção de cromatografia de coluna(20 % de acetato de etila em hexanos) resul- tando no composto do título como um sólido branco. 1H-RMN (CD3OD): δ 8,32-8,30 (1H, d, J = 9,0 Hz), 7,95-7,94 (1H, d, J = 3,0 Hz), 7,84-7,81 (1H, d, J = 9,09 Hz), 7,73-7,72 (1H, d, J = 3,2 Hz).

Exemplo 18: etapa b

4-(6-Tiazol-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-fenol

<formula>formula see original document page 81</formula> 3-cloro-6-tiazol-2il-piridazina(2-mg,0,10 mmol)e hidrazida de ácido (4-hidróxi-fenil)-acético (20 mg, 0,12 mmol) foram combinados em bu- tanol (5 mL), ajustados com condensador enchido com água e aquecido a 120°C durante a noite. A reação foi concentrada in vácuo seguida pela puri- ficação por HPLC (10 a 80% de CH3CN durante 25 min) resultando no com- posto do título (11,5 mg, 37%) como um sólido branco. 1H-RMN (CD3OD/CDCI3): δ 8,26-8,24(1H d,J = 9,6 Hz), 8,17-8,15 (1H, d, J = 9,6 Hz), 8,05-8,04 (1H,d,J = 3,2 Hz),7,82-7,81 (1H, d,J = 3,0 Hz), 7,32-7,30 (2H, t, J = 8,6 Hz), 6,77-6,74 (2H,d,J = 8,3 Hz),4,53 (2H,s). ESI-MS (m/z):

Calculado para Ci5HnN5OS: 309,07; encontrado: 310,2 (M+H).

Exemplo 19

3-(2,3-Di-hidro-benzofuran-5-ilmetil)-6-piridin-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b] piridazi- na

<formula>formula see original document page 81</formula>

O composto do título foi preparado como descrito no Exemplo 17, 1H-RMN (CD3OD/CDCI3): δ 8,78-8,77 (1H, d, J = 7,5 Hz),8,43-8,41(1H, d, J = 9,6 Hz), 8,38-8,36 (1H, d, J = 7,8 Hz), 8,24-8,21 (1H, d, J = 9,8 Hz), 8,09-8,05 (1H, t, J = 9,6 Hz), 7,62-7,58 (1H, m), 7,26 (1H, s), 7,16-7,14 (1H, d, J = 6,3 Hz), 6,69-6,67 (1H, d, J = 8,0 Hz), 4,51 (2H, s), 4,47-4,43 (2H, t, J = 8,8 Hz), 3,13-3,08 (2H, t, J = 8,6 Hz). ESI-MS (m/z): Calculado para C19H15N5O: 329,13; encontrado: 330,3 (M+H).

Exemplo 20

6-[6-(2-Propil-tiazol-5-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil]-quinolina

<formula>formula see original document page 82</formula>

Exemplo 20: etapa a 3-Cloro-6-(2-propil-tiazol-5-il)-piridazina

N-butil-lítio (2,5M em Hexanos, 1,3 mL, 3,3 mmols) foi adiciona- do em gotas durante 2 min a uma solução a -78°C de 2-propiltiazol (380 mg, 3 mmols) em THF (8 mL). Após agitar por 45 min a -78°C, uma solução de cloreto de zinco (0,5M em THF, 7 mL, 3,5 mmols) foi adicionada. A solução foi agitada por 1 h, durante a qual aqueceu à temperatura ambiente. Tetra- quis-trifenilfosfina (172 mg, 0,15 mmol) e 3,6-dicloropiridazina foram adicio- nados, e a reação foi aquecida a 68°C por 16 h. Após resfriar à temperatura ambiente, metanol (3 mL) e HCl a 2N (2 mL) foram adicionados. O pH foi ajustado a ~8 com Na2COa e a mistura foi dividida entre EtOAc (50 mL) e água (30 mL). A camada orgânica foi lavada com água (2 x 10 mL) e sal- moura (20 mL) e foi lavado sobre Na2SO4, Concentração da solução in vá- cuo seguida por cromatografia de SiO2 rendeu o produto como um sólido esbranquiçado (200 mg, 28%). 1H-RMN (CDCI3): δ 8,16 (1H, s), 7,77 (1H, d, J = 8,8 Hz), 7,53 (1H, d, J = 8,8 Hz), 3,04 (2H, t, J = 7,6 Hz), 1,89 (2H, sexte- to, J = 7,6 Hz), 1,06 (2H, t, J = 7,6 Hz). ESI-MS (m/z): Calculado para C10H10CIN3S: 239,0/241,0; encontrado: 240,2/242,2 (M+H; M+2+H).

Exemplo 20: etapa b 6-[6-(2-Propil-tiazol-5-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-iletil]-quinolina

<formula>formula see original document page 83</formula>

O composto do título foi preparado como descrito no Exemplo 17: etapa b. 1H-RMN (CD3OD): δ 9,29 (1H, d, J = 8,3), 9,26 (1H, d, J = 4,8 Hz), 8,97 (1H, s), 8,72 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 8,60 (1H, d, J = 9,9 Hz), 8,55 (1H, s), 8,37 (2H, s), 8,15 (1H, dd, J = 5,6, 8,3 Hz), 5,11 (2H, s), 7,98 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 3,26 (1H, t, J = 7,6 Hz), 1,94 (2H, sexteto, J = 7,3 Hz), 1,06 (2H, t, J = 7,3 Hz). ESI-MS (m/z): Calculado para C21H18N6S: 386,1; encontrado: 387,3 (M+H).

Exemplo 21

6-(6-Tiofen-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-benzo-oxazol-2- ilamina

<formula>formula see original document page 83</formula>

O composto do título foi preparado como descrito no Exemplo 17, 1H-RMN (CDCI3): δ 8,05-8,03 (1H, d, J = 9,6 Hz), 7,66-7,65 (1H, dd J = 1,2, 3,6 Hz), 7,46-7,44 (1H, d, J = 9,8 Hz), 7,23-7,15 (2H, m), 4,64 (2H, s), 3,49 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C17H12N6OS: 348,08; encontra- do: 349,3 (M+H).

Exemplo 22

3-(2,3-Di-hidro-benzofuran-5-ilmetil)-6-tiofen-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b] piridazi- na

<formula>formula see original document page 83</formula>

O composto do título foi preparado como descrito no Exemplo 17, 1H-RMN (CDCI3): δ 8,05-8,03 (1 Η, d, J = 9,8 Hz), 7,67-7,66 (1Η, dd, J = 1,0, 3,7 Hz), 7,56-7,55 (1Η, d, J = 1,0, 5,0 Hz), 7,47-7,44 (1H, d, J = 9,8 Hz), 7,35 (1H, s), 7,29-7,27 (1H, m), 7,19-7,16 (1H, q, J = 3,7 Hz), 6,72-6,70 (1H, d, J = 8,0 Hz), 4,53-4,49 (4H, m), 3,18-3,13 (2H, t, J = 8,8 Hz). ESI-MS (m/z): Calculado para C18H14N4OS: 334,09; encontrado: 335,2 (M+H).

Exemplo 23

3-(2,3-Di-hidro-benzofuran-5-ilmetil)-6-(3-metil-tiofen-2-il)-[1,2,4]triazol [4,3-b]piridazina

<formula>formula see original document page 84</formula>

O composto do título foi preparado como descrito no Exemplo 17, 1H-RMN (CDCI3): δ 8,06-8,04 (1H, d, J = 9,8 Hz), 7,42-7,41 (1H, d, J = 5,0 Hz), 7,40-7,37 (1H, d, J = 9,6 Hz), 7,28 (1H, s), 7,20-7,18 (1H, d, J = 6,82 Hz), 7,02-7,00 (1H, d, J = 5,0 Hz), 6,71-6,69 (1H, d, J = 8,0 Hz), 4,56-4,49 (4H, m), 3,17-3,12 (2H, d, J = 8,5 Hz), 2,55 (3H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C19H16N4OS: 348,10; encontrado:

349,2 (M+H).

Exemplo 24

3-Benzil-6-tiofin-2-il-il1,2,4]triazol[4,3-b]piridazina

<formula>formula see original document page 84</formula>

O composto do título foi preparado como descrito no Exemplo 17 de hidrazida de ácido fenilacético (0,67 mmol) e 3-cloro-6-tiofen-2-il-piridazina (0,21 mmol). 1H RMN (400 MHz1 CDCI3) δ 8,05 (1H, d, J = 9,8 Hz), 7,66 (1H, dd, J = 3,8 Hz, 1,3 Hz), 7,55 (1H, dd, J = 5,0 Hz, 1,0 Hz), 7,53 (2H, m), 7,46 (1H, d, J = 9,9 Hz), 7,31 (2H, m), 7,24 (1H, t, J = 7,5 Hz), 7,17 (1H, dd, J = 5,0 Hz, 3,8 Hz), 4,60 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C16H12N4S: 292,1; encontrado 293,2 (M+H). Exemplo 25

3-(4-Metoxi-benzil)-6-tiofen-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazina

<formula>formula see original document page 85</formula>

O composto do título foi preparado como descrito no Exemplo 17 de hidrazida de ácido 4-metóxi-fenilacético (1,39 mmol) e 3-cloro-6-tiofen-2-il-piridazina (0,32 mmol) como um sólido laranja-pálido. 1H RMN (CD3OD) δ 8,17 (1H, d, J = 9,8 Hz), 7,92 (1H, dd, J = 3,8 Hz, 1,2 Hz), 7,88 (1H, d, J = 9,9 Hz), 7,74 (1H, dd, J = 5,0 Hz, 1,0 Hz), 7,40 (2H, d, J = 8,8 Hz), 7,23 (1H, dd, J = 5,0 Hz, 3,8 Hz), 6,88 (2H, d, J = 8,9 Hz,), 4,51 (s, 2H), 3,75 (3H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para Ci7Hi4N4OS: 322,1; encon- trado 323,2 (M+H).

Exemplo 26

3-4(4-Fluor-benzil)-6-tiofen-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazina

<formula>formula see original document page 85</formula>

O composto do título foi preparado como descrito no Exemplo 17 de hidrazida de ácido 4-fluorofenilacético (1,04 mmol) e 3-cloro-6-tiofen-2-il-piridazina (0,52 mmol) como um sólido bege-pálido. 1H RMN (CD3OD) δ 8,19 (1H, d, J = 9,9 Hz), 7,93 (1H, dd, J = 3,8 Hz, 0,9 Hz), 7,90 (1H, d, J = 9,9 Hz), 7,75 (1H, dd, J = 5,0 Hz, 1,0 Hz), 7,50 (2H, dd, J = 9,0 Hz, 5,3 Hz), 7,24 (1H, dd, J = 5,3 Hz, 3,8 Hz), 7,06 (2H, t, J = 8,8 Hz), 4,59 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C16HnFN4S: 310,1; encontrado 311,2 (M+H).

Exemplo 27

3-(4-Nitro-benzil)-6-tiofen-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazina

<formula>formula see original document page 85</formula> Exemplo 27: etapa a

Hidrazida de ácido 4-nitrofenilacético

<formula>formula see original document page 86</formula>

Uma solução de ácido 4-nitrofenilacético (2,81 mmols) e diclo- rometano seco (10 mL) foi tratado com uma solução a 2N de cloreto de oxa- lila (3,0 mL) e DMF (0,02 mL) através de seringa, e a reação agitada à tem- peratura ambiente por 1h. A reação foi concentrada à secura in vácuo e o produto bruto foi dissolvido em diclorometano seco (20 mL), tratado com hi- drazina anidra (11,1 mmols) através de seringa, e agitada à temperatura ambiente por 18 h. A suspensão resultante foi filtrada, sólidos enxaguados com diclorometano, dissolvidos em MeOHZCH2CI2, filtrados e filtrado concen- trado in vácuo dando o composto do título como um sólido laranja. 1H RMN (DMSOd6) δ 8,17 (2H, d, J = 8,8 Hz,), 7,54 (2H, d, J = 8,8 Hz), 3,54 (2H, s).

Exemplo 27: etapa b

3-(4-Nitro-benzil)-6-tiofen-2-il-[1,2,4]triazol[4,3,-b]piridazina

<formula>formula see original document page 86</formula>

O composto do título foi preparado como um sólido castanho- pálido do produto da etapa anterior (0,52 mmol) e 3-cloro-6-tiofen-2-il-piridazina (0,27 mmol), como preparado no Exemplo 17: etapa a pelo método do Exemplo 16: etapa b. 1H RMN (CDCI3) δ 8,18 (2H, d, J = 8,8 Hz,), 8,09 (1H, d, J = 9,7 Hz,), 7,67 (3H, m), 7,58 (1H, dd, J = 5,0 Hz1 1,0 Hz), 7,51 (1H, d, J = 9,8 Hz), 7,19 (1H, dd, J = 5,1 Hz, 3,7 Hz), 4,70 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para Ci6HnN5O2S: 337,1; encontrado 338,2 (M+H).

Exemplo 28

4-(6-Tiofen-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-fenilamina <formula>formula see original document page 87</formula>

O produto do exemplo precedente (0,20 mmol) foi hidrogenado em 10% em peso de paládio (0) sobre carbono (9 mg) em EtOH/THF (12 mL) 2:1 a temperatura ambiente e pressão por 2 dias, filtrado em Celite 521, concentrado, e purificado duas vezes por TLC preparativa (10% de Me- OH/CH2Cl2 em sílica), produzindo o composto do título na forma de um sóli- do amarelo-pálido. 1H RMN (CDCl3/CD3OD) δ 8,08 (1H, d, J = 10,0 Hz), 7,78 (1H, dd, J = 3,8 Hz, 1,0 Hz), 7,67 (1H, d, J = 9,9 Hz), 7,63 (1H, dd, J = 5,0 Hz, 1,0 Hz), 7,29 (2H, d, J = 8,6 Hz), 7,21 (1H, dd, J = 5,0 Hz, 3,8 Hz), 6,69 (2H, d, J = 8,6 Hz), 4,03 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C16H13N5S: 307,1; encontrado 308,2 (M+H).

Exemplo 29

N-[4-(-Tiofen-il[1,2,4] triazol[4,3-b]piridin-3-ilmetil)-fenil]-acetamida

<formula>formula see original document page 87</formula>

O produto do exemplo precedente (0,09 mmol) foi tratado com cloreto de acetila (0,14 mmol) e trietilamina (1,43 mmol) em CH2Cl2 anidro (5 mL) a temperatura ambiente durante 24 horas, concentrado e purificado por TLC preparativa (10% de MeOH/CH2C12 em sílica), produzindo o composto do título na forma de um sólido amarelo-pálido. 1H RMN (CD3OD) δ 8,18 (1H, d, J = 9,7 Hz), 7,93 (1H, m), 7,90 (1H, d, J = 9,7 Hz), 7,75 (1H, dd, J = 5,1 Hz, 1,1 Hz), 7,52 (2H, m), 7,42 (2H, m), 7,24 (1H, dd, J = 5,1 Hz, 3,8 Hz), 4,56 (2H, s), 2,10 (3H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C18H15N5OS: 349,1; encontrado 350,3 (M+H).

Exemplo 30

1-Etil-3-[4-(6-tiofen-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-fenil]-ureia <formula>formula see original document page 88</formula>

O produto do Exemplo 32 (0,12 mmol) foi tratado com isocianato de etila (0,19 mmol) e trietilamina (0,72 mmol) em CH2CI2 anidro (5 mL) a temperatura ambiente durante 18 horas, concentrado, e purificado duas ve- zes por TLC preparativa (10% de MeOH/CH2CI2, a seguir 7,5% de Me- OH/CH2CI2 em sílica) produzindo o composto do título na forma de um sólido amarelo. 1H RMN (CDCI3/CD3OD) δ 8,05 (1H, d, J = 9,9 Hz), 7,70 (1H, dd, J = 3,8 Hz1 1,2 Hz), 7,59 (1H, dd, J = 5,0 Hz1 1,0 Hz), 7,55 (1H, d, J = 9,7 Hz), 7,40 (2H, d, J = 8,5 Hz), 7,28 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,18 (1H dd, J = 5,0 Hz, 3,8 Hz), 4,51 (2H s,), 3,21 (2H, q, J = 7,3 Hz), 1,11 (3H, t, J = 7,3 Hz). ESI-MS (m/z): Calculado para C19H18N6OS: 378,1; encontrado 379,2 (M+H).

Exemplo 31

3-(6-Metoxi-piridin-3-ilmetil)6-tiofin-2-il-[1-2-4]triazol[4,3-b]piridazina

<formula>formula see original document page 88</formula>

Exemplo 31: etapa a

(6-Metóxi-piridin-3-il)-metanol

<formula>formula see original document page 88</formula>

Uma solução de 6-metóxi-nicotinato de metila (50 mmols) em metanol anidro (60 mL) foi tratada com boro-hidreto de sódio (122 mmols) a O0C1 aquecida à temperatura ambiente durante 18 horas, a seguir aquecido em refluxo for 6 horas. O produto da reação incompleta foi concentrado até secagem in vácuo, dissolvido em 1,4-dioxano anidro (70 mL), tratado com mais boro-hidreto de sódio (122 mmols), e aquecido em refluxo for 18 horas. Após resfriamento à temperatura ambiente, a reação foi interrompida com metanol, filtrada sobre vidro áspero grosseira, os sólidos foram lavados com metanol, e o filtrado concentrado. O resíduo foi repetidamente dissolvido em metanol, filtrado, e concentrado in vácuo até não permanecer mais nenhum sólido, a seguir triturado com 10% de MeOH/CH2Cl2, filtrado, e concentrado. O produto impuro foi em seguida adsorvido em sílica gel, despejado sobre um tampão de sílica gel de 9,5 x 5,5 cm e eluído com um gradiente de 0 a 15% de MeOH/CHCl3, e as frações puras concentradas in vácuo produzindo o composto do título na forma de um óleo amarelo-pálido. 1H RMN (CDCl3) δ 8,08 (1H, d, J = 2,5 Hz), 7,61 (1H, dd, J = 8,5 Hz, 2,4 Hz), 6,74 (1H, d, J = 8,5 Hz), 4,60 (2H, s), 3,92 (3H, s). Exemplo 31: etapa b

Metil éster de éster de ácido 6-metóxi-piridin-3-ilmetil sulfúrico

<formula>formula see original document page 89</formula>

O produto da etapa precedente (31,3 mmols) foi dissolvido em diclorometano anidro (30 mL) e trietilamina (6,5 mL), tratado em gotas com cloreto de metanossulfonila (38,7 mmols) a temperatura ambiente, e a rea- ção foi agitada durante 2 dias. A reação foi lavada com água, a camada a - quosa extraída 3 vezes com CH2Cl2, as camadas orgânicas combinadas fo- ram lavadas com salmoura, secas sobre Na2S04, filtradas, e o filtrado foi concentrado in vácuo, produzindo o composto do título na forma de um óleo amarelo. 1H RMN (CDCl3) δ 8,09 (1 Η, d, J = 2,3 Hz), 7,65 (1 Η, dd, J = 8,5 Hz, 2,4 Hz), 6,77 (1H d, J = 8,5 Hz), 4,57 (2H, s), 3,93 (3H, s), 3,41 (3H, s).

Exemplo 31: etapa c

(6-Metóxi-piridin-3-il)-acetonitrila

<formula>formula see original document page 89</formula>

O produto da etapa precedente (17,0 mmols) foi dissolvido em acetonitrila anidra (35 mL), tratado com cianeto de sódio (41,6 mmols), e aquecido em refluxo durante 2 dias. A reação foi concentrada até secagem in vácuo, o produto bruto foi purificado por cromatografia em sílica gel (gra- diente de eluição, 0 a 30% de EtOAc/CHCl3), e as frações puras da coluna concentradas in vácuo, produzindo o composto do título na forma de um só- lido branco. 1H RMN (CDCI3) 6 8,10 (1H, d, J = 1,6 Hz), 7,56 (1H, dd, J = 8,5 Hz, 2,3 Hz), 6,78 (1H, d, J = 8,6 Hz), 3,94 (3H, s), 3,67 (2H, s).

Exemplo 31: etapa d

Ácido (6-Metóxi-piridin-3-il)-acético

<formula>formula see original document page 90</formula>

O produto da etapa precedente (14,2 mmols) foi dissolvido em etanol reagente (35 mL), tratado com uma solução de hidróxido de potássio (56,7 mmols) em água (35 mL), e aquecido em refluxo por 20 horas. A rea- ção foi concentrada até secagem in vácuo, o resíduo dissolvido em água, acidificado para um pH 5 com 10% de HCI aquoso v/v, e novamente concen- trado até secagem in vácuo. O produto bruto foi triturado com 10% de Me- OH/CHCI3, filtrado, e o filtrado concentrado e seco in vácuo durante a noite, produzindo o composto do título na forma de um sólido amarelo-pálido muito higroscópico. 1H RMN (400 MHz, DMSOd6) δ 7,91 (1H, s), 7,57 (1H, dd, J = 8,5 Hz, 1,8 Hz), 6,65 (1H, d, J = 8,6 Hz), 3,79 (3H, s), 3,51 (1H, bs), 3,13 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C8H9NO3: 167,1; encontrado 168,2 (M+H).

Exemplo 31: etapa e

Metil éster de ácido (6-Metóxi-piridin-3-il)-acético

<formula>formula see original document page 90</formula>

O produto da etapa precedente (7,88 mmols) foi dissolvido em metanol seco sob argônio, resfriado a -10°C, e tratado com cloreto de tionila (20,5 mmols) através de uma seringa. Após aquecimento a temperatura am- biente e agitação durante a noite, a reação foi concentrada in vácuo, e o re- síduo dissolvido em CH2CI2, A solução foi lavada com NaHCO3 aquoso satu- rado e com salmoura, seca sobre Na2SO4, filtrada, e o filtrado concentrado in vácuo, produzindo o composto do título na forma de um óleo amarelo-claro. 1H RMN (CDCI3) δ 8,04 (1 Η, d, J = 2,4 Hz), 7,53 (1Η, dd, J = 8,5 Hz, 2,5 Hz), 6,73 (1H, d, J = 8,6 Hz), 3,92 (3H, s), 3,70 (3H, s), 3,55 (2H, s). Exemplo 31: etapa f

Hidrazida de ácido (6-Metóxi-piridin-3-il)-acético

<formula>formula see original document page 91</formula>

O composto do título foi preparado na forma de um sólido branco a partir do produto da etapa precedente (5,34 mmols) pelo método do exem- plo 17: etapa b. 1H RMN (400 MHz1 DMSO-d6) δ 9,20 (bs, 1H), 8,00 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,58 (dd, J = 8,4 Hz, 2,5 Hz, 1H), 6,75 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 4,21 (bs, 2H), 3,81 (s, 3H), 3,29 (s, 2H). ESI-MS (m/z): Calculado para C8H11N3O2: 181,1; encontrado 182,1 (M+H).

Exemplo 31: etapa g

3-(6-Metóxi-piridin-3-ilmetil)-6-tiofen-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazina

<formula>formula see original document page 91</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- pio 17 a partir do produto da etapa precedente (1,40 mmol) e 3-cloro-6-tiofen-2-il-piridazina (0,58 mmol) na forma de um sólido amarelo- pálido. 1H RMN (CD3OD) δ 8,29 (1H, d, J = 2,5 Hz), 8,19 (1H, d, J = 9,9 Hz), 7,93 (1H, dd, J = 3,8 Hz, 1,3 Hz), 7,90 (1H, d, J = 9,9 Hz), 7,78 (1H, dd, J = 8,6 Hz, 2,5 Hz), 7,75 (1H, dd, J = 5,1 Hz, 1,1 Hz), 7,24 (1H, dd, J = 5,1 Hz, 3,8 Hz), 6,78 (1H, d, J = 8,6 Hz), 4,54 (2H, s), 3,88 (3H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C16H13N5OS: 323,1; encontrado 324,2 (M+H).

Exemplo 32

5-(6-Tiofen-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-1H-piridin-2-ona

<formula>formula see original document page 91</formula>

O produto do exemplo precedente (0,23 mmol) foi dissolvido em diclorometano anidro (10 mL), tratado com uma solução de tribrometo de boro a 1N (4,0 mL) em CH2CI2, e aquecido em refluxo durante 2 dias. A rea- ção foi concentrada até secagem in vácuo, dissolvida em EtOAc, e extraída com NaHCO3 aquoso e NaCl. As camadas aquosas combinadas foram con- centradas até secagem in vácuo e trituradas com 10% de MeOH/CH2Cl2, filtradas, e o filtrado evaporado foi purificado por TLC preparativa (15% de MeOH/CH2Cl2 em sílica) produzindo o composto do título na forma de um sólido amarelo-pálido. 1H RMN (CD3OD) δ 8,21 (1H, d, J = 9,9 Hz), 7,96 (1H, m), 7,93 (1H, d, J = 9,8 Hz), 7,76 (1H, m), 7,73 (1H, dd, J = 9,4 Hz, 2,5 Hz), 7,62 (1H, m), 7,26 (1H, dd, J = 5,3 Hz, 3,8 Hz), 6,54 (1H, d, J = 9,6 Hz), 4,42 (2H, s). ESI-MS (mZz): Calculado para C15H11N5OS: 309,1; encontrado 310,3 (M+H).

Exemplo 33

3-Piridin-4-ilmetil-6-tiofen-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazina

<formula>formula see original document page 92</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 17 a partir da hidrazida de ácido 4-piridino-acético (1,81 mmol) e 3-cloro-6-tiofen-2-il-piridazina (0,58 mmol) na forma de um sólido amarelo- pálido. 1H RMN (CD3OD) δ 8,50 (2H dd, J = 4,6 Hz, 1,4 Hz), 8,22 (1H d, J = 9,6 Hz), 7,94 (1H, dd, J = 3,8 Hz, 1,2 Hz), 7,93 (1H, d, J = 9,8 Hz), 7,74 (1H, dd, J = 5,0 Hz, 1,0 Hz), 7,52 (2H, m), 7,23 (1H, dd, J = 5,3 Hz, 3,8 Hz), 4,69 (2H, s). ESI-MS (mZz): Calculado para C15H11N5S: 293,1; encontrado 294,2 (M+H).

Exemplo 34

3-(1-Óxi-piridin-4-ilmetil)-6-tiofen-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazina

<formula>formula see original document page 92</formula>

O produto do exemplo precedente (0,20 mmol) foi tratado com ácido 3-cloroperoxibenzoico (0,26 mmol) em CHCI3 a 0°C, aquecido à tem- peratura ambiente durante 5 horas, lavado com NaHCO3 aquoso, água e salmoura, e as camadas aquosas combinadas foram extraídas com CH2CI2, As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4, filtradas, e o filtrado evaporado foi purificado por TLC preparativa (10% de MeOH/CH2CI2 em sílica), produzindo o composto do título na forma de um sólido amarelo- pálido. 1H RMN (CD3OD) δ 8,32 (2H, m), 8,24 (1H, d, J = 9,9 Hz), 7,95 (1H, dd, J = 3,8 Hz1 1,1 Hz), 7,94 (1H, d, J = 9,8 Hz), 7,75 (1H, dd, J = 5,1 Hz, 1,1 Hz), 7,65 (2H, d, J = 7,1 Hz), 7,24 (1H, dd, J = 5,1 Hz, 3,8 Hz), 4,72 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C15HnN5OS: 309,1; encontrado 310,3 (M+H).

Exemplo 35

3-Benzofuran-5-ilmetil-6-tiofen-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazina

<formula>formula see original document page 93</formula>

Exemplo 35: etapa a

5-Bromometil-benzofurano

<formula>formula see original document page 93</formula>

A N-bromossuccinimida (5,0 mmols) foi adicionada a uma solu- ção de ácido 2,3-di-hidrobenzofuran-5-ilacético (5,0 mmols) e peróxido de benzoíla (10mg) em tetracloreto de carbono (100 mL) e submetida a refluxo durante 3 horas. A mistura foi resfriada à temperatura ambiente, filtrada e concentrada. O produto foi recristalizado a partir do acetato de etila: hexano (2:1), produzindo o composto do título na forma de um sólido branco. 1H RMN (CD3OD) δ 7,62 (1H, d, J = 2,4 Hz), 7,52 (1H, d, J = 0,8 Hz), 7,46 (1H, d, J = 8,4 Hz), 7,21 (1H, dd, J = 1,6, 8,4 Hz), 6,74 (1H, d, J = 3,2 Hz), 3,74 (2H, s).

Exemplo 35: etapa b Ácido benzofuran-5-il-acético

<formula>formula see original document page 93</formula>

A N-bromossuccinimida (0,89 g, 5,0 mmols) foi adicionada a uma solução de ácido 2,3-di-hidrobenzofuran-5-ilacético (0,89 g, 5,0 mmols) e peróxido de benzoíla (10mg) em tetracloreto de carbono (100 mL) e sub- metida a refluxo durante 3 horas. A mistura foi resfriada à temperatura ambi- ente, filtrada e concentrada. O produto foi recristalizado a partir do acetato de etila: hexano (2:1) para produzir 0,39 g (44%) de sólido branco. 1H RMN (CD3OD) δ 7,62 (1H, d, J = 2,4 Hz), 7,52 (1H, d, J = 0,8 Hz), 7,46 (1H, d, J = 8,4 Hz), 7,21 (1H, dd, J = 1,6, 8,4 Hz), 6,74 (1H, d, J = 3,2 Hz), 3,74 (2H, s).

Exemplo 35: etapa c

Hidrazida de ácido benzofuran-5-il-acético

<formula>formula see original document page 94</formula>

O composto do título foi preparado na forma de um sólido ama- relo a partir do produto da etapa precedente (1,15 mmol) pelo método do exemplo 17: etapa b. 1H RMN (400 MHz1 DMSO-d6) δ 9,22 (1H, bs), 7,96 (1H, d, J = 2,2 Hz), 7,53 (1H, d, J = 1,5 Hz), 7,50 (1H d, J = 8,6 Hz), 7,20 (1H, dd, J = 8,4 Hz, 2,0 Hz), 6,93 (1H, dd, J = 2,2 Hz1 1,0 Hz), 4,24 (2H, bs), 3,43 (2H, s).

Exemplo 35: etapa d

3-Benzofuran-5-ilmetil-6-tiofen-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazina

<formula>formula see original document page 94</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 17 a partir do produto da etapa precedente (0,63 mmol) e 3-cloro-6-tiofen-2-il-piridazina (0,34 mmol) na forma de um sólido amarelo- pálido. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 8,04 (1H, d, J = 9,9 Hz), 7,75 (1H, d, J = 1,3 Hz), 7,66 (1H, dd, J = 3,8 Hz, 1,1 Hz), 7,58 (1H, d, J = 2,3 Hz), 7,56 (1H, dd, J = 5,2 Hz, 1,1 Hz), 7,46 (3H, m), 7,17 (1H, dd, J = 5,0 Hz, 3,8 Hz), 6,72 (1H,m), 4,69 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C18H12N4OS: 332,1; en- contrado 333,3 (M+H).

Exemplo 36

3-Benzo[b]tiofen-õ-ilmetil-6-tiofen-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]-piridazina <formula>formula see original document page 95</formula>

Exemplo 36: etapa a

Ácido benzo[b]tiofen-5-il-acético

<formula>formula see original document page 95</formula>

O composto do título foi produzido mediante tratamento do 5-metilbenzotiofeno com NBS em tetracloreto de carbono, seguido de trata- mento com cianeto de sódio em DMF e, a seguir, submetido a refluxo com hidróxido de sódio aquoso em etanol. 1H RMN (CD3OD) δ 8,02-8,00 (1H, d, J = 8,2 Hz), 7,84-7,83 (1H, m), 7,82 (1H, s), 7,51-7,50 (1H, d, J = 5,0 Hz), 7,35-7,33 (1H, d, J = 9,7 Hz), 3,76 (2H, s).

Exemplo 36: etapa b

Hidrazida de ácido benzo[b]tiofen-5-il-acético

<formula>formula see original document page 95</formula>

O composto do título foi preparado na forma de um sólido ama- relo a partir do produto da etapa precedente (1,08 mmol) pelo método do exemplo 17: etapa b. 1H RMN (400 MHz1 DMSO-d6) δ 9,24 (1H, bs), 7,91 (1H, d, J = 8,3 Hz), 7,75 (1H, d, J = 1,0 Hz), 7,73 (1H, d, J = 5,8 Hz), 7,42 (1H, d, J = 5,3 Hz), 7,26 (1H, dd, J = 8,3 Hz, 1,8 Hz), 4,21 (2H, bs), 3,46 (2H, s). ESi-MS (m/z): Calculado para C10H10N2OS: 206,1; encontrado 207,1 (M+H).

Exemplo 36: etapa c

3-Benzo[b]tiofen-5-ilmetil-6-tiofen-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazina

<formula>formula see original document page 95</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 17 a partir do produto da etapa precedente (0,53 mmol) e 3-cloro-6-tiofen-2-il-piridazina (0,26 mmol) na forma de um sólido amarelo- pálido. 1H RMN (CD3OD) δ 8,17 (1H, d, J = 9,9 Hz), 7,98 (1H, m), 7,90 (1H, dd, J = 3,8 Hz, 1,0 Hz), 7,86 (1H, d, J = 9,8 Hz), 7,85 (1H, d, J = 8,4 Hz), 7,74 (1H, dd, J = 5,0 Hz, 1,3 Hz), 7,55 (1H, d, J = 5,5 Hz), 7,46 (1H, dd, J = 8,3 Hz, 1,7 Hz), 7,34 (1H, d, J = 5,6 Hz), 7,22 (1H, dd, J = 5,0 Hz, 3,8 Hz), 4,71 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C18H12N4S2: 348,1; encontrado 349,2 (M+H).

Exemplo 37

3-Benzo[1,3]dioxol-5-ilmetil-6-tiofen-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazina

<formula>formula see original document page 96</formula>

Exemplo 37: etapa a

Hidrazida de ácido benzo[1,3]dioxol-5-il-acético

<formula>formula see original document page 96</formula>

O composto do título foi preparado na forma de um sólido rosa- pálido a partir do ácido 3,4-(metilenedióxi)-fenilacético (1,74 mmol) pelo mé- todo do exemplo 17: etapa b. 1H RMN (DMSO-d6) δ 9,13 (1H, bs), 6,82 (1H, d, J = 5,3 Hz), 6,81 (1H, d, J = 4,4 Hz), 6,69 (1H, dd, J = 7,9 Hz, 1,6 Hz), 5,96 (2H, s), 4,18 (1H, d, J = 4,3 Hz), 3,24 (2H, s).

Exemplo 37: etapa b

3-Benzo[1,3]dioxol-5-ilmetil-6-tiofen-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazina

<formula>formula see original document page 96</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- pio 17 a partir do produto da etapa precedente (0,39 mmol) e 3-cloro-6-tiofen-2-il-piridazina (0,21 mmol) na forma de um sólido branco. 1H RMN (CDCI3) δ 8,05 (1H, d, J = 9,8 Hz), 7,67 (1H, dd, J = 3,8 Hz1 1,2 Hz), 7,56 (1Η, dd, J = 5,1 Hz, 1,1 Hz), 7,46 (1Η, d, J = 9,8 Hz), 7,18 (1H, dd, J = 5,0 Hz, 3,8 Hz), 7,00 (m, 2H), 6,75 (1H, d, J = 7,8 Hz), 5,90 (2H, s), 4,51 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para Ci8Hi2N4OS: 336,1; encontrado 337,2 (M+H).

Exemplo 38

6-(6-Tiofen-2-rl-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-benzotiazol-2-ilamina

<formula>formula see original document page 97</formula>

Exemplo 38: etapa a

Etil éster de ácido (2-amino-benzotiazol-6-il)-acético

<formula>formula see original document page 97</formula>

Uma solução de ácido (2-amino-benzotiazol-6-il)-acético (0,61 mmol, conforme preparado por Meyer et al. In J. Med. Chem. 1997, 40, 1060) em etanol absoluto (10 mL) foi tratada com 3 gotas de H2SO4 concen- trado e cerca de 1 g de peneiras moleculares 4A secas, e aquecida em re- fluxo durante 3 dias. A reação foi concentrada até secagem in vácuo, parti- cionada entre CH2CI2 e NaHCOa aquoso saturado, filtrada, e as fases foram separadas. A camada aquosa foi extraída com CH2Cl2, e as camadas orgâ- nicas combinadas foram lavadas com água e salmoura, secas sobre Na2SO4, filtradas, e o filtrado concentrado in vácuo, produzindo o composto do título na forma de um sólido amarelo. 1H RMN (CDCl3) δ 7,50 (1H, m), 7,41 (1H, d, J = 8,3 Hz), 7,20 (1H, dd, J = 8,2 Hz, 1,9 Hz), 4,15 (2H, q, J = 7,2 Hz), 3,65 (2H, s), 3,42 (4H, s [NH2 + H2O]), 1,26 (3H, t, J = 7,1 Hz). E- SI-MS (m/z): Calculado para CnHi2N2O2S: 236,1; encontrado 237,1 (M+H).

Exemplo 38: etapa b

Hidrazida de ácido (2-amino-benzotiazol-6-il)-acético

<formula>formula see original document page 97</formula>

O composto do título foi preparado na forma de um sólido ama- relo a partir do produto da etapa precedente (0,40 mmol) pelo método do exemplo 17: etapa b. 1H RMN (400 MHz1 DMSO-d6) δ 9,18 (bs, 1H), 7,51 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 7,40 (bs, 2H), 7,24 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,08 (dd, J = 8,1 Hz, 1,8 Hz, 1H), 4,25 (bs, 2H). Mass spectrum (LCMS, ESI pos).: Calculado para C9H10N40S: 222,1; encontrado 223,1 (M+H).

Exemplo 38: etapa c

6-(6-Tiofen-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-benzotiazol-2-ilamina

<formula>formula see original document page 98</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 17 a partir do produto da etapa precedente (0,36 mmol) e 3-cloro-6-tiofen-2-il-piridazina (0,22 mmol) na forma de um sólido amarelo. 1H RMN (DMSO-d6) δ 8,36 (1H, d, J = 9,8 Hz), 8,08 (1H, dd, J = 3,8 Hz, 1,2 Hz), 7,94 (1H, d, J = 9,6 Hz), 7,87 (1H dd, J = 5,1 Hz, 1,4 Hz), 7,68 (1H, s), 7,41 (2H, m), 7,26 (3H, m), 4,51 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C17H12N6S2: 364,1; encontrado 365,3 (M+H).

Exemplo 39

6-(6-Tiofen-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-quinolina

<formula>formula see original document page 98</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 17, 1H-RMN (CDCl3): δ8,13-8,11 (1H, d, J = 8,5 Hz), 8,08-8,05 (2H, m), 7,96-7,95 (1H, d, J = 1,7 Hz), 7,90-7,87 (1H, dd, J = 2,0, 2,0 Hz), 7,66-7,65 (1H, dd, J = 1,0, 1,0 Hz), 7,57-7,56 (1H, dd, J = 1,3, 1,3 Hz), 7,48-7,46 (1H, d, J = 9,8 Hz), 7,38-7,35 (1H, q, J = 4,2 Hz), 7,18-7,16 (1H, dd, J = 3,7 Hz), 4,79 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C19H13N5S: 343,04; encontrado: 344,3 (M+H).

Exemplo 40

3-(2,3-Di-idro-benzofuran-5-ilmetil)-6-(5-morfolin-4-ilmetil-furan-2-il)- [1,2,4]triazol[4,3-b]piridazina <formula>formula see original document page 99</formula>

Exemplo 40: etapa a

6-Cloro-3-(2)3-di-hidro-benzofuran-5-ilmetil)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazina

<formula>formula see original document page 99</formula>

Hidrazida de ácido (2,3-di-hidro-benzofuran-5-il)-acético (633 mg, 3,3 mmols) e a 3,6-dicloropiridizina (Aldrich, 447 mg, 3,0 mmols) foram combinadas e dissolvidas em butanol (120 mL). A mistura da reação foi a- quecida a 120°C durante a noite. A mistura da reação tornou-se amarela e turva. Após resfriamento à temperatura ambiente, a reação foi filtrada e la- vada com MeOH, tendo como rendimento o produto desejado (816 mg, 95%) na forma de um sólido castanho-amarelado. 1H-RMN (CD3OD): δ 8,06-8,03 (1H, d, J = 9,6 Hz), 7,27 (1H, s), 7,08-7,06 (1H, d, J = 9,6 Hz), 6,72-6,70 (1H, d, J = 8,6 Hz), 4,55-4,50 (2H, t, J = 8,8 Hz), 4,46 (2H, s), 3,18-3,14 (2H, t, J = 8,58 Hz).

Exemplo 40: etapa b

5-[3-(2,3-Di-hidro-benzofuran-5-ilmetil)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-6-il]- furan-2-carbaldeído

<formula>formula see original document page 99</formula>

O procedimento geral para acoplamento cruzado de Suzuki, con forme descrito no Exemplo 1, foi seguido do uso de ácido 2-carbaldeído-furan-5-borônico (24 mg, 0,7 mmol) e 6-Cloro-3-(2,3-di- hidro-benzofuran-5-ilmetil)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazina (41 mg, 0,14 mmol). ESI-MS (m/z): Calculado para C19H14N4O3: 347,2; encontrado: 346,11 (M+H). Exemplo 40: etapa c

3-(2,3-Di-hidro-benzofuran-5-ilmetil)-6-(5-morfolin-4-ilmetil-furan-2-il)- [1,2,4]triazol[4,3-b] piridazina

<formula>formula see original document page 100</formula>

O 5-[3-(2,3-Di-hidro-benzofuran-5-ilmetil)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piri- dazin-6-il]-furan-2-carbaldeído (21,6 mg, 0,06 mmol), morfolina (6,5 μL, 0,07 mmol) e AcOH (2 gotas) foram combinados em DCM (1mL). A isso foi adi- cionado triacetoxiborohidreto de sódio (19 mg, 0,09 mmol), e a reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. A reação foi concentrada in vácuo seguida de purificação por HPLC (5-65 % de CH3CN durante 35 minu- tos), resultando no composto do título (5,9 mg, 27%) na forma de um sólido. 1H-RMN (CD3OD/CDCl3): δ 8,23-8,21 (1H, d, J = 9,6 Hz), 7,81-7,78 (1H, d, J = 9,8 Hz), 7,42-7,41 (1H, d, J = 3,5 Hz), 7,22 (1H, s), 7,17-7,15 (1H, d, J = 9,6 Hz), 6,99-6,98 (1H, d, J = 3,5 Hz), 6,67-6,65 (1H, d, J = 8,3 Hz), 4,57 (2H, s), 4,45-4,38 (4H, m), 3,94 (4H, br s), 3,40-3,33 (4H, m), 3,17-3,13 (2H, t, J = 8,8 Hz). ESI-MS (m/z): Calculado para C23H23N5O3: 417,18; encontra- do: 418,3 (M+H).

Exemplo 41

3-(2,3-Di-hidro-benzofuran-5-ilmetil)-6-(3-metóxi-piridin-4-il)-[1,2,4]triazol[4,3- bjpiridazina

<formula>formula see original document page 100</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 40, 1H-RMN (CD3OD): δ 8,63 (1H, s), 8,44-8,43 (1H, d, J = 5,3 Hz), 8,20-8,17 (1H, d, J = 9,8 Hz), 7,88-7,87 (1H, d, J = 5,3 Hz), 7,80-7,77 (1H, d, J = 9,6 Hz), 7,12 (1H, s), 7,02-7,00 (1H, d, J = 8,0 Hz), 6,56-6,54 (1H, d, J = 8,3 Hz), 4,44 (2H, s), 4,41-4,37 (2H, t, J = 8,3 Hz), 4,00 (3H, s), 3,06-3,01 (2Η, t, J = 8,3 Hz). ESI-MS (m/z): Calculado para C20Hi7N5O2: 359,14; en- contrado: 360,3 (M+H).

Exemplo 42

3-(2,3-Di-hidro-benzofuran-5-ilmetil)-6-(5-morfolin-4-ilmetil-tiofen-2-il)- [1,2,4]triazol[4,3-b]piridazina

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 40, 1H-RMN (CD3OD): δ 8,14-8,12 (1H, d, 9,8 Hz), 7,85-7,84 (1H, d, J = 3,7 Hz), 7,81-7,79 (1H, d, J = 9,8 Hz), 7,35-7,34 (1H, d, J = 3,7 Hz), 7,13 (1H, s), 7,08-7,06 (1H, d, J = 8,8 Hz), 6,56-6,54 (1H, d, J = 8,0 Hz), 4,60 (2H, s), 4,40-4,36 (4H, m), 3,84 (2H, br s), 3,29 (2H, brs), 3,21 (2H, m), 3,05-3,01 (2H, t, J = 8,8 Hz). ESI-MS (m/z): Calculado para C23H23N5O2S: 433,16; en- contrado: 434,3 (M+H).

Exemplo 43

6-(6-lmidazol-1-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-quinolina til)-quinolina, imidazol e carbonato de potássio foi agitada em DMF (3 mL) durante 8 horas a 100°C. Foi adicionado HCI (0,5 N) aquoso e os voláteis foram removidos in vácuo. A purificação por HPLC (5-35% B durante 45 mi- nutos) teve como rendimento o produto na forma de sal de TFA. O resíduo foi dissolvido em HCI aquoso a 1N (5 mL), e os componentes voláteis foram removidos in vácuo. Depois de duas repetições, o produto dicloridrato foi seco sob alto vácuo tendo como rendimento um sólido (53 mg, 44% de ren- dimento). 1H-RMN (CD3OD): δ 9,60 (1H, s), 9,17 (1H, dd, J = 1,5, 5,3 Hz), 9,10 (1H1 m), 8,58 (1H, d, J = 9,9 Hz), 8,38 (1H, m), 8,36 (1H, m), 8,27 (1H, m), 8,23 (1Η, m), 8,05 (1Η, dd, J = 5,3, 8,3 Hz), 7,98 (1Η, d, J = 9,9 Hz), 7,72 (1H, s), 5,12 (2H, s), 4,98 (2H, m). ESI-MS (m/z): Calculado para C18Hi3N7: 327,1; encontrado: 328,3 (M+H).

Exemplo 44

6-[6-(4-Bromo-imidazol-1-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil]-quinolina

<formula>formula see original document page 102</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 43, 1H-RMN (CD3OD): δ 9,21 (2H, m), 8,72 (1H, d, J = 1,5 Hz), 8,59 (1H, d, J = 9,9 Hz), 8,45 (1H, m), 8,32 (1H, dd, J = 1,8, 8,8 Hz), 8,27 (1H, br d, J = 8,8), 8,17 (1H, d, J = 1,5 Hz), 8,11 (1H, dd, J = 5,7, 8,3 Hz), 8,10 (1H, d, J = 9,9 Hz), 5,01 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para Ci8H12BrN7: 405,0/406,0; encontrado: 406,3/408,3 (M+H/M+H+2).

Exemplo 45

4-(6-lmidazol-1-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-fenol

<formula>formula see original document page 102</formula>

Exemplo 45: etapa a

4-(6-Cloro-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-fenol

<formula>formula see original document page 102</formula>

Hidrazida de acido (4-hidroxi-fenil)-acetico (10 g, 0,06 mol) e a 3,6-dicloropiridizina (Aldrich, 8,96 g, 0,06 mol) foram combinadas e dissolvi- das em butanol (120 mL). A mistura da reação foi aquecida a 100°C durante a noite. A mistura da reação tornou-se amarela e turva. Após resfriamento à temperatura ambiente, a reação foi filtrada e lavada com MeOH, tendo como rendimento o produto desejado (11,5 g, 36%) na forma de um sólido anarelo marrom. 1H-RMN (CD3OD): 59,3 (1H, br s), 8,44-8,42 (1H, d, J = 9,6 Hz), 7,48-7,45 (1Η, d, J = 9,6 Hz), 7,12-7,09 (2Η, d, J = 8,6 Hz), 6,70-6,68 (2H, d, J = 8,6 Hz), 4,35 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C12H9CIN4O: 260,05; encontrado: 261,2 (M+H).

Exemplo 45: etapa b

4-(6-Imidazol-1-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-fenol

<formula>formula see original document page 103</formula>

O composto do título foi preparado a partir do 4-(6-Cloro-[1,2)4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-fenol (Exemplo 45: etapa a) e imidazol, conforme descrito no Exemplo 43. 1H-RMN (CD3OD): δ 9,78 (1H, t, J = 1,3 Hz), 8,54 (1H, d, J = 9,9 Hz), 8,38 (1H, t, J = 1,8 Hz), 7,97 (1H, d, J = 9,9 Hz), 7,83 (1H, dd, J = 1,3, 1,8 Hz), 7,23 (2H, d, J = 8,6 Hz), 6,72 (2H, d, J = 8,6 Hz), 4,53 (s, 2H). ESI-MS (m/z): Calculado para C15H12N6O: 292,1; encontrado: 293,2 (M+H).

Exemplo 46

4-(6-Pirazol-1-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-fenol

<formula>formula see original document page 103</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- pio 43. 1H-RMN (CDCl3/CD3OD): δ 8,48 (1H, dd, J = 0,5, 2,8 Hz), 8,24 (1H, d, J = 9,9 Hz), 8,13 (1H, d, J = 9,9 Hz), 7,86 (1H, dd, J = 1,3, 1,8 Hz), 7,26 (2H, d, J = 8,6 Hz), 6,78 (2H, d, J = 8,6 Hz), 6,65 (1H, dd, J = 1,8, 2,8 Hz), 4,50 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C15H12N6O: 292,1; encontrado: 293,2 (M+H).

Exemplo 47

(4-Metil-piperazin-1-il)-[5-(3-quinolin-6-ilmetil-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-6-il) -tiofen-il]-metanona <formula>formula see original document page 104</formula>

Exemplo 47: etapa a

6-(6-Cloro-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-quinolina

<formula>formula see original document page 104</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 45. 1H-RMN (CDCl3): δ 9,17-9,16 (1H, d, J = 6,5 Hz), 8,91-8,88 (1H, d, J = 9,0 Hz), 8,50-8,48 (1H, d, J = 9,6 Hz), 8,28-8,25 (1H, d, J = 8,5 Hz), 8,14 (1H, s), 8,06-8,03 (1H, dd, J = 2,0, 8,8 Hz), 7,93-7,90 (1H, d, J = 9,8 Hz), 6,72-6,70 (1H, d, J = 8,0 Hz), 4,80 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C15H10CIN5: 295,06; encontrado: 296,3 (M+H).

Exemplo 47: etapa b

Etil éster de ácido 5-(3-Quinolin-6-ilmetil-[1,2,4]triazol[4,3-b]pirida- zin-6-il)-tiofeno-2-carboxílico

<formula>formula see original document page 104</formula>

A um frasco contendo 6-(6-Cloro-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilme- til)-quinolina, conforme preparado no exemplo 47: etapa a (625 mg, 2,11 mmol), e Pd(PPh3)4 (120 mg, 0,10 mmol) sob argônio, foi adicionado o bro- meto de 5-etoxicarboniltiofenil-2-zinco (0,5M em THF, 12,7 mL, 6,35 mmols). A solução foi aquecida a 68°C por 3 horas, durante as quais o material inicial foi consumido por LC-MS. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e interrompida pela adição de metanol (5 mL) seguido de HCI a 3N (6 mL). Foram acrescentados metanol adicional(5 mL) e isopropanol (5 mL) com agitação, seguido de NaOH a 2N para ajustar o pH em ~8. Após agitação durante 1 hora, o ppt foi coletado tendo como rendimento o composto do título (480 mg, 54%) contaminado com sais de zinco. O material foi utilizado sem purificação adicional. 1H-RMN (DMSOd6): δ 8,84 (1H, dd, J = 1,5, 4,0 Hz), 8,42 (1H, d, J = 9,9 Hz), 8,30 (1H, m), 8,07 (1H, d, J = 4,0 Hz), 7,97 (3H, m), 7,84 (1H, d, J = 8,1 Hz), 7,77 (1H, dd, J = 2,0, 8,8 Hz), 7,49 (1H, dd, J = 4,3, 8,3 Hz), 4,75 (2H, s), 4,33 (2H, q, J = 7,1 Hz), 1,33 (2H, t, J = 7,1 Hz). ESI-MS (m/z): Calculado para C22H17N5O2S: 415,1 encontrado: 416,2 (M+H).

Exemplo 47: etapa c

(4-Metil-piperazin-1-il)-[5-(3-quinolin-6-ilmetil-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-6-il) -tiofen-il]-metanona

<formula>formula see original document page 105</formula>

A uma suspensão de etil éster de ácido 5-(3-Quinolin-6-ilmetil-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-6-il)-tiofeno-2- carboxílico, conforme preparado no exemplo 47: etapa a (100 mg, 0,24 mmol) em THF (4 mL) e MeOH (2 mL), foi adicionado NaOH a 2N (0,25 mL, 0,5 mmol), tor- nando a mistura escura, porém mais homogênea. Após agitação durante 2 horas, HCI a 1N foi adicionado para levar o pH a ~2. Os solventes foram re- movidos in vácuo, e o resíduo foi seco a alto vácuo. Ao resíduo foram adi- cionados HBTU (114 mg, 0,3 mmol) e HOBt (70 mg, 0,5 mmol), seguido de DMF (3 mL). O DIEA (265 uL, 1,5 mmol) foi adicionado à suspensão agitada, melhorando a homogeneidade. Após agitação durante 30 minutos, a 1-metilpiperazina (110 μL, 1 mmol) foi adicionada, e a reação foi agitada du- rante 1hora. Foi adicionada água (1 mL) e os componentes voláteis foram removidos in vácuo. O resíduo foi purificado por RP-HPLC (5-35% B durante 45 minutos). O produto sal de TFA foi dissolvido três vezes em MeOH/ HCI 2N 1:1 (15 mL) e concentrado tendo como rendimento o produto- salt clori- drato (41 mg, 36%) na forma de um sólido amarelo-claro. 1H-RMN (CD3OD): δ 9,28 (1H, dd, J = 1,3, 8,3 Hz), 9,25 (1H, dd, J = 1,5, 5,6 Hz), 8,68 (1H, d, J = 9,9 Hz), 8,59 (1H, d, J = 9,9 Hz), 8,55 (1H, m), 8,37 (2H, m), 8,16 (1H, dd, J = 5,3, 8,3 Hz), 8,12 (1H, d, J = 4,0 Hz), 7,60 (1H, d, J = 4,0 Hz), 5,10 (2H, s), 4,57 (2Η, m), 3,62 (4Η, m), 3,30 (2Η, m), 2,99 (3Η, s). ESI-MS (m/z): Cal- culado para C25H23N7OS: 469,2; encontrado: 470,2 (M+H).

Exemplo 48

Etil éster de. ácido 5-[3-(4-Hidróxi-benzil)-[1,2,4]triazol[4,3-b]pirida- zin-6-il]-tiofeno-2-carboxílico

<formula>formula see original document page 106</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 47. 1H-RMN (CDCI3/CD3OD): δ 8,18 (1H, d, J = 9,9 Hz), 7,84 (1H, d, J = 4,0 Hz), 7,82 (1H, d, J = 4,0 Hz), 7,79 (1H, d, J = 9,9 Hz), 7,33 (2H, d, J = 8,6 Hz), 6,78 (2H, d, J = 8,6 Hz), 4,51 (2H, s), 4,40 (1H, q, J = 7,7 Hz), 1,46 (1H, t, J = 7,7 Hz). ESI-MS (m/z): Calculado para Ci9H16N4O3S: 380,1; encontra- do: 381,2 (M+H).

Exemplo 49

(3-Dimetilamino-propil)-amida de ácido 5-[3-(4-Hidróxi- benzil)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-6-il]-tiofeno-2-carboxílico

<formula>formula see original document page 106</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 47. 1H-RMN (CD3OD): δ 8,59 (1H, d, J = 9,9 Hz), 8,52 (1H, d, J = 9,9 Hz), 8,12 (1H, d, J = 4,0 Hz), 7,90 (1H, d, J = 4,0 Hz), 7,36 (2H, d, J = 8,6 Hz), 6,80 (2H, d, J = 8,6 Hz), 4,63 (2H, s), 3,54 (2H t, J = 6,6 Hz), 3,27 (2H, m), 2,95 (s, 6H), 2,12 (2H, m). ESI-MS (m/z): Calculado para C22H24N6O2S: 436,2; encontrado: 437,2 (M+H).

Exemplo 50

{5-[3-(2,3-Di-hi- dro-benzofuran-5-ilmetil)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-6-il]-tiofen-2-il}-(4-metil- piperazin-1 -il)-metanona <formula>formula see original document page 107</formula>

Exemplo 50: etapa a

Etil éster de ácido 5-[3-(2,3-Di-hidro-benzofuran-5-ilmetil)-[1,2,4]tria- zol[4,3-b]piridazin-6-il]-tiofeno-2-carboxílico

<formula>formula see original document page 107</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- pio 47. 1H-RMN (CDCI3): δ 8,12 (1H, d, J = 9,6 Hz), 7,81 (1H, d, J = 4,0 Hz), 7,62 (1H, d, J = 4,0 Hz), 7,46 (1H, d, J = 9,6 Hz), 7,37 (1H, m), 7,25 (1H, m), 6,72 (1H, d, J = 8,0 Hz), 4,52 (m, 4H), 4,43 (2H, q, J = 7,1 Hz), 3,17 (2H, m), 1,44 (3H, t, J = 7,1 Hz). ESI-MS (m/z): Calculado para C21H18N4O3S: 406,1; encontrado: 407,2 (M+H).

Exemplo 50: etapa b {5-[3-(2,3-Di- hi- dro-benzofuran-5-ilmetil)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-6-il]-tiofen-2-il}-(4-metil- piperazin-1-il)-metanona

<formula>formula see original document page 107</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 47. 1H-RMN (CDCI3): δ 8,07 (1H, d, J = 9,9 Hz), 7,57 (1H, d, J = 3,8 Hz), 7,45 (1H, d, J = 9,9 Hz), 7,34 (1H, m), 7,29 (1H, d, J = 3,8 Hz), 7,25 (1H, dd, J = 1,8, 8,1 Hz), 6,71 (1H, d, J = 8,1 Hz), 4,51 (2H, t, J = 8,6 Hz), 4,50 (2H, s), 3,80 (4H, t, J = 4,9 Hz), 3,17 (2H, t, J = 8,6 Hz), 2,50 (4H, t, J = 4,9 Hz), 2,36 (3H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C24H24N602S: 460,2; encontrado: 461,2 (Μ+Η).

Exemplo 51

Bis-(2-metóxi-etil)-amida de ácido 5-[3-(2,3-Di-hidro-benzofuran-5-ilme- til)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-6-il]-tiofeno-2-carboxílico

<formula>formula see original document page 108</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 47. 1H-RMN (CHCI3/CD3OD): δ 8,13 (1H, d, J = 9,9 Hz), 7,69 (1H, d, J = 4,0 Hz), 7,66 (1H, d, J = 9,9 Hz), 7,56 (1H, d, J = 4,0 Hz), 7,33 (1H, m), 7,24 (1H, dd, J = 1,8, 8,1 Hz), 6,71 (1H, d, J = 8,3 Hz), 4,53 (2H, t, J = 8,8 Hz), 4,51 (2H, s), 3,83 (4H, m), 3,68 (4H, m), 3,41 (6H, s), 3,19 (2H, t, J = 8,8 Hz). ESI-MS (m/z): Calculado para C25H27N504S: 493,2; encontrado: 494,3 (M+H).

Exemplo 52

(2-Morfolin-4-il-etil)-amida de ácido 5-[3-(2,3-Di-hidro-benzofuran-5-il- metil)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-6-il]-tiofeno-2-carboxílico

<formula>formula see original document page 108</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 47. 1H-RMN (CDCI3/CD3OD): δ 8,24 (1H, d, J = 9,9 Hz), 7,89 (1H, d, J = 3,8 Hz), 7,85 (1H, d, J = 4,0 Hz), 7,76 (1H, d, J = 4,0 Hz), 7,34 (1H, m), 7,21 (1H, dd, J = 1,8, 8,1 Hz), 6,70 (1H, d, J = 8,4 Hz), 4,52 (2H, t, J = 8,6 Hz), 4,51 (2H, s), 4,12 (2H, m), 3,91 (2H m), 3,84 (2H, t, J = 6,0 Hz), 3,70 (2H, m), 3,48 (2H, t, J = 6,0 Hz), 3,27 (2H, m), 3,20 (2H, t, J = 8,6 Hz). ESI-MS (m/z): Calculado para C25H26N6O3S: 490,2; encontrado: 491,3 (M+H).

Exemplo 53

(3-Metil-butil)-amida de ácido 5-[3-(2,3-di-hidro-benzofuran-5-ilme- til)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-6-il]-tiofeno-2-carboxnico

N

e

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem-

plo 47. 1H-RMN (CDCI3/CD3OD): δ 8,58 (1H, d, J = 8,8 Hz), 8,28 (1H, d, J = 8,8 Hz), 7,94 (1H, d, J = 2,8 Hz), 7,76 (1H, d, J = 2,8 Hz), 7,36 (1H, m), 7,22 5 (1H, br d, J = 8,1 Hz), 6,70 (1H, d, J = 8,1 Hz), 4,59 (2H, s), 4,54 (2H, t, J = 8,8 Hz), 4,55 (2H, m), 3,22 (2H, t, J = 8,6 Hz), 1,71 (1H, septet, J = 6,6 Hz), 1,56 (2H, m), 0,98 (6H, d, J = 6,6 Hz). ESI-MS (m/z): Calculado para C24H25N5O2S: 447,2; encontrado: 448,3 (M+H). Exemplo 54

10 (1,1-Dioxo-176-tiomorfolin-4-il)-[5-(3-quinolin-6-ilmetil-[1,2,4]triazol[4,3-b]piri- dazin-6-il)-tiofen-2-il]-metanona

pio 47. 1H-RMN (CD3OD): δ 9,24 (2H, m), 8,62 (1H, d, J = 9,6 Hz), 8,53 (2H, m), 8,34 (2H, m), 8,16 (1H, dd, J = 5,3, 8,3 Hz), 8,09 (1H, d, J = 4,0 Hz), 7,58 15 (1H, d, J = 4,0 Hz), 5,08 (2H, s), 4,19 (4H, m), 3,29 (4H, m). ESI-MS (m/z): Calculado para C24H20N6O3S2: 504,1; encontrado: 505,2 (M+H). Exemplo 55

(4-lsopropil-piperazin-1-il)-[5-(3-quinolin-6-ilmetil-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin- 6-il)-tiofen-2-il]-metanona

o

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem-

N O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 47. 1H-RMN (CD3OD): δ 9,28 (2H, m), 8,67 (1H, d, J = 9,9 Hz), 8,59 (1H, d, J = 9,9 Hz), 8,57 (1H, m), 8,38 (2H, m), 8,18 (1H, dd, J = 5,4, 8,4 Hz), 8,11 (1H, d, J = 4,0 Hz), 7,58 (1H, d, J = 4,0 Hz), 5,12 (2H, s), 4,64 (2H, m), 3,65 (5H, m), 3,33 (2H, m), 1,47 (6H, d, J = 6,3 Hz). ESI-MS (m/z): Calculado para C27H27N7OS: 497,2; encontrado: 498,3 (M+H).

Exemplo 56

(4-Metanossulfonil-piperazin-1-il)-[5-(3-quinolin-6-ilmetil-[1,2,4]triazol[4,3-b]pir idazin-6-il)-tiofen-2-il]-metanona

<formula>formula see original document page 110</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 47. 1H-RMN (CD3OD): δ 9,26 (2H, m), 8,53 (2H, m), 8,37 (1H, m), 8,32 (2H, m), 8,13 (1H, m), 8,05 (2H, s), 7,53 (1H, m), 5,05 (2H, s), 3,91 (4H, m), 3,37 (4H, m), 2,92 (2H, m). ESI-MS (m/z): Calculado para C25H23N7O3S2: 533,1; encontrado: 534,2 (M+H).

Exemplo 57

6-[Diflúor-(6-tiofen-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-il)-metil]-quinolina

<formula>formula see original document page 110</formula>

Exemplo 57: etapa a

Metil éster de ácido oxo-quinolin-6-il-acético

<formula>formula see original document page 110</formula>

À solução de acetato de metila 6-quinolina (1,2 g, 6 mmmol) em dioxano (30 mL) foi adicionado dióxido de selênio (1,65 g, 15 mmol). A mis- tura foi aquecida em refluxo durante 3 dias, resfriada à temperatura ambien- te, filtrada através de Celite e concentrada. O resíduo foi purificado por cro- matografia (cloreto de metileno para 5% de acetato de etila em cloreto) a um sólido branco (0,75 g, 58%). 1H-RMN (CDCl3): 59,07-9,06 (1H, q, J = 1,7, 2,5 Hz), 8,62-8,61 (1H, d, J = 1,7 Hz), 8,32-8,31 (2H, m), 8,22-8,20 (1H, d, J = 8,8 Hz), 7,54-7,51 (1H, q, J = 8,8Hz), 4,05 (3H, s).

Exemplo 57: etapa b

Metil éster de ácido diflúor-quinolin-6-il-acético

<formula>formula see original document page 111</formula>

A uma solução de metil éster de ácido oxa-quinolin-6-il-acético (0,72 g, 3,3 mmols) em cloreto de metileno(20 mL), foi adicionado trifluoreto de (dimetilamino)enxofre (mL, 41 mmols) a O c. A mistura foi agitada à tem- peratura ambiente por 2 dias, despejada em gelo, extraída com cloreto de metileno (50 mL χ 3). A solução de cloreto de metileno foi lavada com sal- moura, seca sobre Na2SC>4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia (0-10% de acetato de etila em cloreto de metileno) para produzir um sólido branco (0,68 g, 87%). 1H-RMN (CDCl3): δ9,02-9,01 (1H, dd, J = 1,7, 2,5 Hz), 8,26-8,23 (1H, d, J = 8,0 Hz), 8,21-8,19 (1H, d, J = 8,8 Hz), 8,13-8,12 (1H, s), 7,91-7,89 (1H, dd, J = 2,0, 2,0 Hz), 7,51-7,48 (1H, q, J = 4,0 Hz), 3,8 (3H, s).

Exemplo 57: etapa c

Hidrazida de ácido diflúor-quinolin-6-il-acético

<formula>formula see original document page 111</formula>

A uma solução de acetato de metila de ácido diflúor- quinolin-6-acético (670 mg, 2,83 mmols) em metanol (20 mL), foi adicionada hidrazina anidra (2 mL). A mistura foi aquecida em refluxo por 2 horas, res- friada à temperatura ambiente, concentrada e seca em alto vácuo para pro- duzir um sólido de cor laranja-claro (680 mg, 100%). 1H-RMN (DMSO): δ9,02-9,01 (1H, dd, J = 1,7 Hz), 8,56-8,54 (1H, d, J = 9,3 Hz), 8,28 (1H, s), 8,17-8,15 (1 H, d, J = 8,8 Hz), 7,91-7,88 (1H, dd, J = 2,0, 2,0 Hz), 7,66-7,63 (1H, q, J = 4,0 Hz). Exemplo 57: etapa d

6-[Diflúor-(6-tiofen-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-il)-metil]-quinoli

<formula>formula see original document page 112</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 1: etapa b. 1H-RMN (CDCI3): δ 9,00-8,98 (1H, dd, J = 1,7, 4,0 Hz), 8,36 (1H, s), 8,29-8,22 (2H, m), 8,15-8,10 (2H, m), 7,68-7,67 (1H, dd, J = 3,7, 1,2 Hz), 7,59-7,57 (2H, m), 7,50-7,46 (1H, q, J = 4,2 Hz), 7,18-7,16 (1H, t, J = 3,7 Hz). ESI-MS (m/z): Calculado para C19H11F2N5S: 397,07; encontrado: 380,3(M+H).

Exemplo 58

3-[Diflúor-(4-metóxi-fenil)-metil]-6-tiofen-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazina

<formula>formula see original document page 112</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 57. 1H-RMN (CDCI3): .δ 8,14-8,12 (1H, d, J = 9,8 Hz), 7,75-7,73 (2H, d, J = 9,0 Hz), 7,69-7,86 (1H, dd, J = 3,5, 1,0 Hz), 7,59-7,56 (2H, t), 7,19-7,17 (1H, d, J = 3,7 Hz), 7,00-6,97 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,83 (3H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para Ci7H12F2N4OS: 358,07; encontrado: 359,2 (M+H).

Exemplo 59

6-[Diflúor-(6-piridin-3-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-il)-metil]-quinolina

<formula>formula see original document page 112</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 57. 1H-RMN (DMSO): δ 9,17 (1H, s), 8,97 (1H, d, J = 4,3 Hz), 8,77 (1H, m), 8,32-8,39 (4H, m), 8,23 (1H, d, J = 8,9 Hz), 8,08 (1H, dd, 8,9, 2,0 Hz), 7,85 (1H, J = 9,8 Hz), 7,58 (1H, m). ESI-MS (m/z): Calculado para C20H11F2N6: 374,11; encontrado: 375,3 (M+H). Exemplo 60

6-[Difluor-(6-piridin-4-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-il)-metil]-quinolina

<formula>formula see original document page 113</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 57. 1H-RMN (DMSO): δ 9,27 (1H, d, J = 3,7 Hz), 9,03 (2H, d, J = 5,7 Hz), 8,00 (1H, d, J = 5,8 Hz), 8,84 (1H, d, J = 9,8 Hz), 8,76 (1H, s), 8,46 (1H, d, J = 9,2 Hz), 8,38 (3H, m), 8,28 (1H, d, J = 9,1 Hz), 7,96 (1H, dd, 8,2, 4,7Hz). ESI-MS (m/z): Calculado para C20H11F2N6: 374,11; encontrado: 375,3 (M+H).

Exemplo 61

6-{Díflúor-[6-(1 -metil-1H-pirazol-4-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-il]-metil}- quinolina

<formula>formula see original document page 113</formula>

Exemplo 61: etapa a 6-iodoquinolina

<formula>formula see original document page 113</formula>

O iodeto de sódio (4,32 g, 28,8 mmols), o iodeto de cobre (I) (137 mg, 0,72 mmol) e a N.N-Dimetil-ciclohexano-1-2-diamina (0,227 mL, 1,44 mmol) e 6-Bromoquinolina (3g, 14,4 mmol) em dioxano (15 mL) foram carregados em um tubo de micro-ondas de 25 mL. O tubo foi lavado com Nitrogênio e vedado com um septo de Teflon, e o nitrogênio foi borbulhado em uma solução durante 10 minutos, deixando o gás escapar através de uma agulha. Após a remoção da agulha, a mistura da reação foi agitada a 110°C durante 15 horas. A seguir, a suspensão verde foi deixada alcançar a temperatura ambiente, despejada em gelo-água e extraída com diclorometa- no. A camada orgânica foi coletada, seca (MgSCM, filtrada e concentrada in vacuum. A mistura bruta foi cromatografada em sílica gel com CH2CI2 100% e CH2CI2/MeOH: 95/5 tendo como rendimento 3,56 g (97%) of 6- lodoquinolina na forma de um sólido amarelo-claro.

1H-RMN (DMSO): δ 8,93 (1H, dd, J = 1,5, 4,1 Hz), 8,47 (1H, d, J = 2,0 Hz), 8,33 (1H, d, J = 8,6 Hz), 8,02 (1H, dd, J = 2,0, 8,6 Hz), 7,80 (1H, d, J = 8,6 Hz), 7,56 (1H, dd, J = 4,1, 8,6 Hz).

Exemplo 61: etapa b

Etil éster de ácido diflúor-quinolin-6-il-acético

<formula>formula see original document page 114</formula>

A uma suspensao de 6-lodoquinolina (10,2 g, 40 mmols) e Co- bre (0) (nanopó, 5,59 g, 88 mmols) em DMSO seco (97 ml_), foram adiciona- dos 8,93g (44 mmols) de bromodifluoroacetato de etila. A mistura da reação foi agitada sob nitrogênio a 55°C por 15 horas. A reação foi deixada para alcançar a temperatura ambiente, e a mistura foi despejada sobre uma solu- ção de cloreto de amônio. O acetato de etila foi adicionado, e a mistura re- sultante foi filtrada em Celite. A camada orgânica foi coletada, seca (Mg- SO4), filtrada e concentrada in vacuum. A mistura bruta foi submetida a cro- matografia em sílica gel com CH2CI2 a 100% e CH2CI2/MeOH: 95/5, tendo como rendimento 5,07g de etil éster de ácido diflúor-quinolin-6-il-acético na forma de óleo amarelo-claro (50%).

1H-RMN (CDCI3): δ 9,1 (1H, m), 8,27 (1H, m), 8,20 (2H, m), 8,15 (1H, m), 7,91 (1 H,m), 7,52 (1 H,m), 4,33 (2H, q, J = 7,1 Hz), 1,31 (3H, t, J = 7,1 Hz).

Exemplo 61: etapa c

Hidrazida de acido diluor-quinolin-6-il-acetico

<formula>formula see original document page 114</formula>

A uma solução de etil éster de ácido diflúor-quinolin-6-il-acético (5,5 g, 21,9 mmols) em metanol (85 mL), foi adicionado hidrato de hidrazina (5,3 mL, 109,5 mmols). A mistura foi aquecida a 45°C durante 10 minutos, resfriada à temperatura ambiente, concentrada e absorvida em diclorometa- no. A camada orgânica foi seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada in va- cuo para produzir um sólido de cor laranja-claro (4,4 g, 85%).

Exemplo 61: etapa d

3-cloro-6-(1 -metil-1 H-pirazol-4-ii)-piridazina

<formula>formula see original document page 115</formula>

Um frasco foi carregado com 3,6-dicloropiridazina (Aldrich, 23,91 g, 160,5 mmols), 1 -Metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-1 H-pirazol (20 g, 96 mmol), Na2CO3 2,0 M (96 mL) e dioxano (65 ml_). O nitrogênio foi borbulha- do através da reação durante 60 segundos, seguido da adição de Diclorobis (trifenilfosfina)paládio (0) (6,75 g, 9,6 mmols). A reação foi aquecida a 80°C durante a noite, seguida de work up aquoso utilizando AcOEt e uma solução de K2CO3, Após filtração em celite, a camada orgânica foi seca (MgS04) e concentrada in vácuo. Uma primeira fração do composto (10,2 g) foi obtida por cristalização no solvente (diclorometano). O filtrado foi purificado por cromatografia de coluna (CH2CI2 a 100% e CH2CI2/MeOH: 95/5). As duas frações foram reunidas e lavadas com éter di-isopropílico para produzir o composto do título na forma de um sólido amarelo (12,7 g, 68 %).

Exemplo 61: etapa e

6-(Diflúor-[6-(1 metil-1H-pirazol-4-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-il]-metil)- quinolina

<formula>formula see original document page 115</formula>

Uma mistura de 3-cloro-6-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-piridazina (e- tapa d) (4,57 g, 23,6 mmols) e hidrazida de ácido diflúor-quinolin-6-il-acético (etapa c) (5,60 g, 23,6 mmols) em n-butanol (125 mL) foi aquecida a 130°C durante a noite. A mistura foi resfriada à temperatura ambiente, seguida de work up aquoso utilizando AcOEt e uma solução de K2CO3, A camada orgâ- nica foi seca (MgSO4) e concentrada in vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna instantânea (primeira cromatografia: CH2CI2 a 100% e CH2CI2/MeOH: 88/12 seguida de outra coluna com tolueno/iPrOH/ NH4OH: 85/15/2) para produzir o composto do título (5,5 g, 62%). M.p = 199,7°C Exemplo 61: Synthesis do sal de cloridrato

A 1g (2,65 mmols) de 6-(diflúor-[6-(1 metil-1H-pirazol-4-il)- [1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-il]-metil)-quinolina em MeOH (5 mL), são adi- cionados em gotas 2 mL de HCI em isopropanol (5 a 6N). O precipitado é filtrado e seco in vácuo tendo como rendimento 1,01 g do sal de cloridrato (C19H13F2N7, 1,30 HCI, 0,60 H2O).

1H RMN (DMSO): δ 9,26 (1H, d, J = 4,5 Hz), 9,16 (1H, d, J = 8,0 Hz), 8,70 (1H, s), 8,58-8,48 (2 H, m), 8,27 (1H, d, J = 9,1Hz), 8,09 ( H, s), 7,97 (1H, dd, J = 8,3 Hz, 4,8 Hz), 7,85 (1H, d, J = 10 Hz) 3,93 (3 H, s). Anal (C19H13F2N7, 1,30 HCI, 0,60 H2O) Calculado C, 52,41; H, 3,59; N, 22,52, En- contrado C, 52,19; H, 3,72; N, 22,53,

Alternativamente, o composto do título pode ser preparado con- forme descrito no Exemplo 57. 1H-RMN (DMSO): δ9,30 (1H, d, J = 4,1 Hz), 9,16 (1H, d, J = 8,4Hz), 8,80 (1H, s), 8,51 (3H, m), 8,33 (1H, d, J = 8,6 Hz), 8,09 (1H, s), 8,04 (1H, m), 7,86 (1H, d, J = 9,7 Hz), 3,93 (3H, s).ESI-MS (m/z): Calculado para C19H13F2N7: 377,36; encontrado: 378,4 (M+H).

Exemplo 62

3-(2,3-Di-hidro-benzofuran-5-ilmetil)-6-(1-metil-1H-pirazol-4-il)- [1,2,4]triazol[4,3-b]piridazina

<formula>formula see original document page 116</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 47. 1H-RMN (DMSO): δ 8,78 (1H, s), 8,33 (1H, d, J = 8,6 Hz), 8,09 (1H, s), 7,86 (1H, d, J = 9,7 Hz), 7,08 (1H, d, J = 9,6 Hz), 6,87 (1H, m), 6,64(1H, d, J = 8,3 Hz), 5,11 (2H, s), 4,53 (2H, t, J = 8,8 Hz), 3,92 (3H, s), 3,20 (2H, t, J = 8,6 Hz), ESI-MS (m/z): Calculado para C18H16N6O: 332,14; encontrado: 333,3 (M+H).

Exemplo 63

1-Óxido de 6-[6-(1-Metil-1H-pirazol-4-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil]- quinolina <formula>formula see original document page 117</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 47. 1H-RMN (CDCI3): δ 8,71 (1H, d, J = 8,8 Hz), 8,48 (1H, d, J = 6,0 Hz), 8,06 (1H, d, J = 9,5 Hz), 7,98 (1H, s), 7,90 (3H, m), 7,66 (1H, d, J = 8,5 Hz), 7,30 (2H, m), 4,78 (2H, s), 4,01 (3H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C19H15N7O: 357,13; encontrado: 358,20 (M+H).

Exemplo 64

6-(6-Pirimidin-5-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-quinolina

<formula>formula see original document page 117</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 47. 1H-RMN (DMSO): δ 9,50 (1H, s), 9,38 (1H, s), 8,86 (1H, dd, J = 5,6, 1,8 Hz), 8,57 (1H, d, J = 9,5 Hz), 8,33 (1H, d, J = 8,6 Hz), 8,07 (1H, d, J = 9,7 Hz), 8,00 (2H, m), 7,84 (1H, dd, J = 8,9, 2,0 Hz), 7,71 (1H, q, J = 4,4 Hz), 4,86 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C19H13N7: 339,12; encontrado: 340,30 (M+H).

Exemplo 65

6-(6-Quinolin-3-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-quinolina

<formula>formula see original document page 117</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 47. 1H-RMN (DMSO): δ 9,60 (1H, d, J = 2,2 Hz), 9,13 (1H, d, J = 2,3 Hz), 8,86 (1H, d, J = 4,1 Hz), 8,56 (1H, d, J = 9,6 Hz), 8,35 (1H, d, J = 8,6 Hz), 8,12 (3H, m), 8,04 (2H, m), 7,91 (2H, m), 7,74 (1H, t, J = 8,1 Hz), 7,51 (1H, q, J = 4,2 Hz), 4,89 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C24H16N6: 388,14; encontrado: 389,30 (M+H).

Exemplo 66 6-[Diflúor-(6-quinolin-3-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-il)-metil]-quinolina

<formula>formula see original document page 118</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 57. 1H-RMN (DMSO): δ 9,52 (1H, d, J = 2,2 Hz), 9,01 (1H, d, J = 4,2 Hz), 8,64 (1H, d, J = 2,1 Hz), 8,36 (2H, d, J = 8,6 Hz), 8,30 (2H, m), 8,23 (1H, m), 8,11 (1H, m), 7,95 (1H, d, J = 7,6 Hz), 7,85 (2H, m), 7,69 (1H, m), 7,50 (1H, q, J = 4,1 Hz). ESI-MS (m/z): Calculado para C24H14F2N6: 424,12; encontra- do: 425,30 (M+H).

EXEMPLO 67

2-Cloro-6-(6-piridin-3-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-quinolina

<formula>formula see original document page 118</formula>

Exemplo 67: etapa a Metil éster de ácido (1-Hidróxi-quinolin-6-il)-acético

<formula>formula see original document page 118</formula>

O ácido m-perclorobenzoico (6,85 g, 39,8 mmols) foi adicionado a uma solução de metil éster de ácido quinolin-6-il-acético (5,00 g, 24,8 mmols) comercialmente disponível em 1,2-dimetoxietano à temperatura am- biente e agitado durante 2 horas. Foi adicionada água, e a solução foi basifi- cada para um pH de 9-10 com carbonato de potássio saturado, e o produto foi extraído com acetato de etila para ter um rendimento quantitativo de metil éster de ácido (1-hidróxi-quinolin-6-il)-acético. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,99 (d, 1H, J=8,4Hz), 7,93 (d, 1H, J=8,4Hz), 7,65 (m, 1H), 7,60 (m, 1H), 7,32 (d, 1H, J=8,8Hz), 7,19 (s, 1H), 3,74 (s, 2H), 3,65 (s, 3H).

Exemplo 67: etapa b

Metil éster de ácido (2-cloro-quinolin-6-il)-acético <formula>formula see original document page 119</formula>

O metil éster de ácido (1-hidróxi-quinolin-6-il)-acético (1,0 g, 4,61 mmols) foi submetido a refluxo durante 25 minutos em oxicloreto de fósforo (30 mL). O oxicloreto de fósforo em excesso foi evaporado, foi adicionado bicarbonato de sódio saturado, e a mistura bruta foi extraída várias vezes com acetato de etila. O produto foi purificado através de cromatografia de coluna de sílica gel em hexano: acetato de etila (1:1) para produzir 0,219 g (20%) de metil éster de ácido (2-cloro-quinolin-6-il)-acético. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 7,99 (d, 1H, J=8,4Hz), 7,93 (d, 1H, J=8,8Hz), 7,63 (m, 1H), 7,60 (dd, 1H, J=2,0, 8,4Hz), 7,30 (d, 1H, J=8,8Hz), 3,73 (s, 2H), 3,64 (s, 3H).

Exemplo 67: etapa c

Hidrazida de ácido (2-cloro-quinolin-6-il)-acético

<formula>formula see original document page 119</formula>

Metil éster de ácido (2-cloro-quinolin-6-il)-acético (0,160 g, 0,679 mmol), hidrazina (0,218 g, 6,79 mmols) e o metanol (3mL) foram agitados à temperatura ambiente. A reação foi evaporada para produzir hidrazida de ácido (2-cloro-quinolin-6-il)-acético. Esse composto não foi purificado e e foi utilizado diretamente na etapa seguinte. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,39 (m, 1H), 8,43 (d, 1H, J=9,2Hz), 7,91 (m, 2H), 7,75 (m, 1H), 7,58 (m, 1H), 4,30 (bs, 2H), 3,57 (s, 2H).

Exemplo 67: etapa d

2-Cloro-6-(6-piridin-3-il-[1,2,4]triazo[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-quinolina

<formula>formula see original document page 119</formula>

Hidrazida de ácido (2-Cloro-quinolin-6-il)-acético (0,030 g, 0,127 mmol) e 3-cloro-6-piridin-3-il-piridazina (0,024 g, 0,127 mmol) foram aqueci- das em refluxo em butanol (0,5 mL) durante várias horas. A reação foi resfri- ada à temperatura ambiente e filtrada. O filtrado foi purificado através de HPLC de fase reversa em uma coluna C18 eluindo com acetonitrila em água (0,1% de TFA) para produzir 0,017 g (35%) de 2-cloro-6-(6-piridin-3-il- [1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-quinolina. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 9,38 (m, 1H), 8,88 (d, 1H, J = 5,2Hz), 8,85 (m, 1H), 8,42 (d, 1H, J=9,6Hz), 8,31 (d, 1H, J = 8,8Hz), 8,06 (s, 1H), 8,03 (m, 1H), 7,92 (m, 3H), 7,50 (d, 1H, J = 8,8Hz), 4,93 (s, 2H). Espectrometria de massa (LCMS, ESI pos).: Calcu- lado para C2oH13ClN6; encontrado: 373,3, 375,3 (M+H).

EXEMPLO 68

3-(4-Metóxi-benzil)-6-(6-piridin-3-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-3H quinazolin-4-ona

<formula>formula see original document page 120</formula>

Exemplo 68: etapa a

6-lodo-3H-quinazolin-4-ona

<formula>formula see original document page 120</formula>

Uma solução de ácido 2-amino-5-iodo-benzoico (5,00 g, 19,0 mmol) e formamida (3,43 g, 76,0 mmols) foi aquecida a 150°C durante 4 ho- ras e, a seguir, resfriada à temperatura ambiente. Foi adicionada água, e a solução foi filtrada e lavada com água várias vezes para produzir 3,6 g (70%) de 6-iodo-1 H-quinazolin-4-ona. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 6 12,39 (s, 1H), 8,37 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 8,09 (dd, 1H, J = 2,0, 8,8Hz), 7,45 (d, 1H, J = 8,8Hz).

Exemplo 68: etapa b

6-lodo-3-(4-metóxi-benzil)-3H-quinazolin-4-ona <formula>formula see original document page 121</formula>

A 6-lodo-1 H-quinazolin-4-ona (0,50 g, 1,84 mmol) foi adicionada a uma solução de hidreto de sódio (0,110 g, 2,76 mmols) em THF (10mL) e agitada à temperatura ambiente durante uma hora. O 1-Clorometil-4-metóxi- benzeno (0,345 g, 2,21 mmols) foi adicionado, e a reação foi agitada durante várias horas. Foi adicionada água, e o produto bruto foi extraído a partir do acetato de etila e evaporado in vácuo. O produto foi purificado através de cromatografia de coluna de sílica gel em hexano: acetato de etila (4:1) para produzir 0,69 g (96%) de 6-iodo-3-(4-metóxi-benzil)-3H-quinazolin-4-ona. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 8,57 (d, 1H, J = 2,0Hz), 8,01 (s, 1H), 7,90 (dd, 1H, J=2,0, 8,8Hz), 7,33 (d, 1H, J = 8,8Hz), 7,22 (d, 2H, J = 8,0Hz), 6,80 (d, 2H, J = 8,8Hz), 5,03 (s, 2H), 3,70 (s, 3H).

Exemplo 68: etapa c

Dietil éster de ácido 2-[3-(4-Metóxi-benzil)-4-oxo-3,4-di-hidro-quinazolin-6-il]- malônico

<formula>formula see original document page 121</formula>

Uma solução de 6-iodo-3-(4-metóxi-benzil)-3H-quinazolin-4-ona (0,69 g, 1,75 mmol), dietil éster de ácido malônico (0,56 g, 3,49 mmols), io- deto de cobre (0,016 g, 0,090 mmol), bifenil-2-ol (0,029 g, 0,175 mmol) e carbonato de césio (0,86 g, 2,63 mmols) em THF (10mL) foi aquecida a 70°C em um tubo vedado durante 24 horas. A solução foi em seguida resfriada à temperatura ambiente, foi adicionado bicarbonato de sódio saturado, e o produto bruto foi extraído a partir de acetato de etila. O produto foi purificado através de cromatografia de coluna de sílica gel em hexano: acetato de etila (1:1) para produzir 0,51 g (69%) de dietil éster de ácido 2-[3-(4-metóxi- benzil)-4-oxo-3,4-di-hidro-quinazolin-6-il]-malônico. 1H RMN (400 MHz, CD- Cl3) δ 8,21 (m, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,80 (dd, 1H, J = 2,0, 8,4Hz), 7,62 (d, 1H, J = 8,4Hz), 7,22 (d, 2H, J = 8,8Hz), 6,78 (d, 2H, J = 8,8Hz), 5,05 (s, 2H), 4,69 (s, 1H), 4,15 (m, 4H), 3,70 (s, 3H), 1,19 (m, 6H). Exemplo 68: etapa d

Metil éster de ácido [3-(4-metóxi-benzil)-4-oxo-3,4-di-hidro-quinazolin-6-il]- acético

<formula>formula see original document page 122</formula>

O hidroxido de sodio [2N] (0,59 mL) foi adicionado a uma solu- ção de dietil éster de ácido 2-[3-(4-metóxi-benzil)-4-oxo-3,4-di-hidro- quinazolin-6-il]-malônico (0,250 g, 0,590 mmol) em metanol (5mL) e agitado à temperatura ambiente durante várias horas. A reação bruta foi então eva- porada in vácuo, foi adicionado HCI a 1N, e o produto foi extraído com aceta- to de etila para produzir 0,141 g de metil éster de ácido [3-(4-metóxi-benzil)- 4-oxo-3,4-di-hidro-quinazolin-6-il]-acético. Isso foi dissolvido em uma mistura de tolueno/metanol [8/1] (3mL), e o trimetilsilildiazometano [2,0 M] (0,22 mL) foi adicionado à temperatura ambiente e agitado até cessar o borbulhamen- to. A seguir, a reação foi evaporada in vácuo e purificada através de croma- tografia de coluna de sílica gel em hexano: acetato de etila (1:1) para produ- zir 0,119 g (60%) de metil éster de ácido [3-(4-metóxi-benzil)-4-oxo-3,4-di- hidro-quinazolin-6-il]-acético. Espectrometria de massa (LCMS, ESI pos).: Calculado para C19H18N2O4; encontrado: 339,1, 340,1 (M+H).

Exemplo 68: etapa e

Hidrazida de ácido [3-(4-metóxi-benzil)-4-oxo-3,4-di-hidro-quinazolin-6-il]- acético

<formula>formula see original document page 122</formula>

O metil éster de ácido [3-(4-metóxi-benzil)-4-oxo-3,4-di-hidro- quinazolin-6-il]-acético (0,050 g, 0,148 mmol) e a hidrazina (0,047 g, 0,148 mmol) foram agitados a 50°C em metanol (5mL) por várias horas. A reação foi então resfriada à temperatura ambiente e filtrada para produzir 0,030 g (60%) de hidrazida de ácido [3-(4-metóxi-benzil)-4-oxo-3,4-di-hidro- quinazolin-6-il]-acético. 1H RMN (400 MHz1 CD3OD) 6 10,09 (s, 1H), 9,33 (s, 1H), 8,85 (m, 1H), 8,53 (d, 1H, J = 2,0, 8,4Hz), 8,42 (d, 1H, J = 8,4Hz), 8,14 (d, 2H, J = 8,4Hz), 7,70 (d, 2H, J = 8,4Hz), 5,93 (s, 2H), 5,04 (bs, 2H), 4,52 (s, 3H), 4,31 (s, 2H).

Exemplo 68: etapa f

<formula>formula see original document page 123</formula>

Hidrazida de ácido [3-(4-metóxi-benzil)-4-oxo-3,4-di-hidro- quinazolin-6-il]-acético (0,024 g, 0,071 mmol) e a 3-cloro-6-piridin-3-il- piridazina (0,012 g, 0,063 mmol) foram aquecidas a 130°C em butanol (0,5 mL) por várias horas. O composto foi purificado através de HPLC de fase 10 reversa em uma coluna C18 eluindo com acetonitrila em água (0,1% de TFA) para produzir 0,016 g (53%) de 3-(4-metóxi-benzil)-6-(6-piridin-3- il[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-3H quinazolin-4-ona. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 9,08 (m, 1H), 8,71 (dd, 1H, J = 4,8, 1,6Hz), 8,39 (m, 1H), 8,25 (m, 1H, 8,13 (d, 1H, J = 9,6Hz), 7,99 (s, 1H), 7,77 (dd, 1H, J = 8,4, 2,0Hz), 15 7,58 (d, 1H, J = 8,4Hz), 7,48 (d, 1H, J = 9,6Hz), 7,41 (m, 1H), 7,21 (d, 2H, J = 8,4Hz), 6,77 (d, 2H, J = 8,8Hz), 5,05 (s, 2H), 5,05 (s, 2H), 4,71 (s, 2H), 3,70 (s, 3H). Espectrometria de massa (LCMS, ESI pos).: Calculado para C27H2iN7O2; encontrado: 476,1, 477,2 (M+H).

EXEMPLO 69

6-(6-Piridin-3-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-3H-quinazolin-4-ona

<formula>formula see original document page 123</formula> A 3-(4-Metóxi-benzil)-6-(6-piridin-3-il-[1,2,43triazol[4,3-b3piridazin- 3-ilmetil)-3H quinazolin-4-ona (0,010 mg, 0,021 mmol) foi tratada com ácido trifluoroacético (1 mL) e anisol (0,1 mL) e aquecida a 90°C durante 18 horas. O composto foi purificado através de HPLC de fase reversa em uma coluna C18 eluindo com acetonitrila em água (0,1% de TFA) para produzir 0,0026 g (35%) de 6-(6-piridin-3-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-3H-quinazolin- 4-ona. 1H RMN (400 MHz1 DMSO-d6) δ 9,32 (m, 1H), 8,79 (m, 1H), 8,53 (m, 2H), 8,20 (m, 1H), 8,10 (s, 1H), 8,03 (d, 1H, J = 10,0Hz), 7,89 (d, 1H, J = 8,4Hz), 7,66 (m, 2H), 4,80 (s, 2H). Espectrometria de massa (LCMS, ESI pos).: Calculado para Ci9Hi3N7O; encontrado: 356,3, 357,3 (M+H).

EXEMPLO 70

6-[6-(1-Metil-1H^irazol-4-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil]-quinazolina

<formula>formula see original document page 124</formula>

Exemplo 70: etapa a

Dietil éster de ácido 2-quinazolin-6-il-malônico

<formula>formula see original document page 124</formula>

Uma solução de 6-iodo-quinazolina (0,500 g, 1,95 mmol), dietil éster de ácido malônico (0,93 g, 5,81 mmols), iodeto de cobre (0,019 g, 0,097 mmol), bifenil-2-ol (0,033 g, 0,195 mmol) e carbonato de césio (0,953 g, 2,93 mmols) em THF (5mL) foi aquecida a 70°C em um tubo vedado du- rante 24 horas. A solução foi em seguida resfriada à temperatura ambiente, foi adicionado cloreto de amônio saturado, e o produto bruto foi extraído a partir de acetato de etila. O produto foi purificado através de cromatografia de coluna com sílica gel em hexano: acetato de etila (1:1) para produzir 0,39 g (80%) de dietil éster de ácido 2-quinazolin-6-il-malônico. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 9,37 (bs, 2H), 7,96 (m, 3H), 4,78 (s, 1H), 4,18 (m, 4H), 1,19 (m, 6H). Exemplo 70: etapa b Ácido quinazolin-6-il-acético

<formula>formula see original document page 125</formula>

O hidróxido de sódio [2 M] (0,77 mL) foi adicionado a uma solu- ção de dietil éster de ácido 2-quinazolin-6-il-malônico (0,20 g, 0,77 mrnol) em metanol (10mL) e agitado à temperatura ambiente por várias horas. A rea- ção foi evaporada, foi adicionado acetato de etila e, a seguir, HCI a 1N foi adicionado em gotas até o composto ficar em uma camada orgânica. A ca- mada orgânica foi evaporada para produzir 0,123 g (85%) de ácido quinazo- lin-6-il-acético. 1H RMN (400 MHz1 DMSO-d6) δ 9,56 (s, 1H), 9,26 <s;, 1H), 7,95 (m, 3H), 3,85 (s, 2H).

Exemplo 70: etapa c

Hidrazida de ácido quinazolin-6-il-acético

<formula>formula see original document page 125</formula>

Uma solução de ácido quinazolin-6-il-acético (0,025 g, 0,133 mmol), cloreto de tionila (0,1 mL) e metanol (2 mL) foi aquecida a 60°C du- rante 6 horas. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e evaporada várias vezes com diclorometano para produzir metil éster de ácido quinazo- lin-6-il-acético. Este foi dissolvido em uma solução de metanol (2 mL] e hi- drazina (0,061 mL) e agitado à temperatura ambiente por várias horas. A reação foi evaporada in vácuo para produzir a hidrazida de ácido quinazolin- 6-il-acético. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,56 (s, 1H), 9,33 (bs, 1HJ, 9,26 (s, 1H), 7,96 (m, 3H), 4,25 (bs, 2H), 3,84 (s, 2H).

Exemplo 70: etapa d

6-[6-(1-Metil-1H-pirazol-4-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil]-quina2olinia

<formula>formula see original document page 125</formula>

Hidrazida de ácido quinazolin-6-il-acético (0,032 g, 0,158 mmol) e a 3-cloro-6-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-piridazina (0,031 g, 0,158 mmol) foram aquecidas a 165°C em butanol (2 mL) durante cinco horas. A reação foi res- friada à temperatura ambiente, evaporada in vácuo e purificada através de cromatografia de coluna com sílica gel eluindo com 5% de metanol em diclo- rometano para produzir 0,0031g (7%) de 6-[6-(1-metil-1H-pirazol-4-il)- [1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil]-quinazolina. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 8,45 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 8,06 (d, 2H, J = 9,6Hz), 7,60 (d, 2H, J = 9,6Hz), 7,55 (m, 1H), 7,17 (d, 1H, J = 8,0Hz), 6,08 (s, 1H), 4,58 (m, 2H), 3,89 (s, 3H). Espectrometria de massa (LCMS, ESI pos).: Calculado para C18H14N8; encontrado: 343,3 (M+H).

EXEMPLO 71

6-[6-(1 -MetiI-1H-pirazol-4-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil]-quinoxalina

<formula>formula see original document page 126</formula>

Exemplo 71: etapa a 6-lodo-quinoxalina

<formula>formula see original document page 126</formula>

Uma solução de 4-iodo-benzeno-1,2-diamina (0,46 g, 1,96 mmol), etanodiol [40% em água] (2,25 mL), ácido acético (1 mL) e etanol (20 mL) foi aquecida a 100°C por várias horas e, a seguir, resfriada à temperatu- ra ambiente. Foi adicionada água, e o produto bruto foi extraído com acetato de etila. O produto foi purificado através de cromatografia de coluna com sílica gel em hexano: acetato de etila (1:1) para produzir 0,323 g (64%) de 6- iodo-quinoxalina. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 8,77 (dd, 2H, J = 2,0, 8,8Hz), 8,46 (d, 1H, 2,0Hz), 7,96 (dd, 1H, J = 2,0, 8,8Hz), 7,75 (d, 1H, J = 8,8Hz).

Exemplo 71: etapa b

Ácido quinoxalin-6-il-acético

<formula>formula see original document page 126</formula> Uma solução de 6-iodo-quinoxalina (0,323 g, 1,26 mmol), dietil éster de ácido malônico (0,404 g, 2,52 mmols), iodeto de cobre (0,012 g, 0,063 mmol), bifenil-2-ol (0,021 g, 0,126 mmol) e carbonato de césio (0,616 g, 1,89 mmol) em THF (5mL) foi aquecida a 70°C em um tubo vedado duran- te 24 horas. A solução foi em seguida resfriada à temperatura ambiente, foi adicionada água, e o produto bruto foi extraído a partir de acetato de etila. O produto foi purificado através de cromatografia de coluna com sílica gel em hexano: acetato de etila (1:1) para produzir o dietil éster de ácido 2- quinoxalin-6-il-malônico. O dietil éster de ácido 2-quinoxalin-6-il-malônico (0,066 g, 0,229 mmol) foi adicionado a uma solução de hidróxido de sódio [2N] (0,229 mL) em metanol (2mL) e agitado durante várias horas à tempera- tura ambiente. A reação foi então evaporada in vácuo, foi adicionado HCI a 1N, e o produto foi extraído com acetato de etila para produzir 0,030 g (70%) de ácido quinoxalin-6-il-acético. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,6 (bs, 1H), 8,93 (dd, 2H, J = 2,0, 6,0Hz), 8,05 (d, 1H, 8,8Hz), 7,99 (m, 1H), 7,79 (dd, 1H, J = 2,0, 8,8Hz), 3,89 (s, 2H).

Exemplo 71: etapa c

Hidrazida de ácido quinoxalin-6-il-acético

<formula>formula see original document page 127</formula>

O trimetilsilildiazometano [2,0 M em hexanos] (0,08 mL) foi adi- cionado em gotas a uma solução de ácido quinoxalin-6-il-acético (0,030 g, 0,159 mmol) em tolueno/metanol [8/1] (0,5 mL) e agitado até cessar o borbu- lhamento. A seguir, a reação foi evaporada, e o produto bruto foi purificado através de cromatografia de coluna com sílica gel em hexano: acetato de etila (1:1) para produzir 0,013g de metil éster de ácido quinoxalin-6-il-acético. Este foi adicionado a uma solução de hidrazina (0,10 mL) em metanol e agi- tado à temperatura ambiente durante a noite. A mistura da reação foi evapo- rada in vácuo para produzir 0,019 g de hidrazida de ácido quinoxalin-6-il- acético. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,77 (bs, 1H), 9,35 (m, 2H), 8,46 (d, 1H, J = 8,8Hz), 8,39 (m, 1H), 8,19 (dd, 1H, J = 2,0, 8,8Hz), 4,68 (bs, 2H), 4,07 (s, 2H). Exemplo 71: etapa d

6-[6-(1-Metil-1H-pirazol-4-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil]-quino

<formula>formula see original document page 128</formula>

Hidrazida de ácido quinoxalin-6-il-acético (0,019 g, 0,094 mmol) e a 3-cloro-6-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-piridazina (0,018 g, 0,094 mmol) foram aquecidas a 125°C em butanol (2 mL) durante quatro horas. A reação foi resfriada à temperatura ambiente, evaporada in vácuo e purificada através de cromatografia de coluna com sílica gel eluindo com 5% de metanol em diclorometano para produzir 0,0029 g (15%) de 6-[6-(1-metil-1H-pirazol-4-il)- [1,2,4]triazol[4,3b]piridazin-3-ilmetil]-quinoxalina. 1H RMN (400 MHz1 CD3OD) δ 8,77 (m, 2H), 8,16 (s, 1H), 8,09 (m, 1H), 8,07 (d, 1H, J = 10,0Hz), 8,00 (m, 2H), 7,85 (dd, 1H, J = 8,8, 2,0Hz), 7,56 (d, 1H, J = 9,6Hz), 4,79 (s, 2H), 3,94 (s, 3H). Espectrometria de massa (LCMS, ESI pos).: Calculado para C18H14N8; encontrado: 343,3, 344,3 (M+H).

Exemplo 72

6-(6-Benzo[b]tiofen-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-quinolina

<formula>formula see original document page 128</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 47. 1H-RMN (CDCI3): 59,20-9,13 (1H, dd), 8,69-8,67 (1H, d, J = 8,6 Hz), 8,50-8,48 (1H, d, J = 8,5 Hz), 8,26-8,23 (2H, m), 8,17-8,15 (1H, d, J = 9,8 Hz), 7,95-7,93 (1H, d, J = 7,3 Hz), 7,80-7,77 (1H, q, J = 5,0 Hz), 7,69-7,67 (1H, d, J = 9,6 Hz), 7,51-7,42 (2H, m), 4,90 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C23H15N5S: 393,47; encontrado: 394,3.

Exemplo 73

6-[6-(1H-Pirazol-4-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil]-quinolin-1-ol <formula>formula see original document page 129</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 47. 1H-RMN (CDCI3): 58,92-8,90 (1H, dd), 8,54-8,53 (1H, d, J = 7,4 Hz), 8,16-8,14 (1H, d, J = 8,8 Hz), 8,06 (1H, m), 8,02-7,97 (2H, m), 7,66-7,60 (2H, m), 7,53-7,48(2H, m), 7,08-7,05 (1H, m), 7,51-7,42 (2H, m), 4,72 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para Ci8H13N7O: 343,34; encontrado: 345,2.

Exemplo 74

6-[6-(5-Metil-4,5-di-hidro-tiofen-2-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil]- quinolina

<formula>formula see original document page 129</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 47. 1H-RMN (CDCI3): 09,07-8,98 (2H, m), 8,27 (1H, s), 8,16-7,98 (3H, m), 7,75-7,73 (1H, d, J = 8,8 Hz), 7,60-7,59 (1H, d, J = 3,8 Hz), 6,79-6,77 (1H, m), 4,06-4,02 (1H, t, J = 6,5 Hz), 3,91 (1H, s), 3,21-3,20 (3H, m), 2,45 (3H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C20H17N5S: 359,12; encontrado: 358,2.

Exemplo 75

3-[4-(3-Quinolin-6-ilmetil-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-6-il-pirazol-1-il]-propan- 1-ol <formula>formula see original document page 130</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 47. 1H-RMN (CDCI3): 58,94-8,92 (1H, d, J = 6,3 Hz), 8,61-8,59 (1H, d, J = 8,9 Hz), 8,20-8,17 (1H, d, J = 8,3Hz), 8,05-7,93 (5H, m), 7,71-7,67 (1H, m), 7,36-7,33 (1H, d, J = 9,6 Hz), 4,72 (2H, s), 4,22-4,20 (2H, m), 3,45-3,42 (2H, m), 1,95-1,95 (2H, m). ESI-MS (m/z): Calculado para C21H19N7O: 385,17; encontrado: 386,31.

Exemplo 76

6-[6-(1H-Pirazol-4-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil]-quinolina

<formula>formula see original document page 130</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- pio 47. 1H-RMN (CDCI3): δ9,05-9,02 (1H, d, J = 6,3 Hz), 8,60-8,57 (1H, d, J = 7,5 Hz), 8,27-8,06 (4H, m), 7,75-7,73 (1H, d, J = 9,0 Hz), 7,59-7,56 (1H, d, J = 9,8 Hz), 7,50-7,48 (1H, d, J = 9,8 Hz ), 4,85 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calcu- lado para Ci8H13N7: 327,12; encontrado: 328,32.

Exemplo 77

6-[6-(5-Cloro-4,5-di-hidro-tiofen-2-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil]- quinolina

<formula>formula see original document page 130</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 47. 1H-RMN (CDCI3): .59,18-9,11 (2H, m), 8,38 (1H, s), 8,28-8,22 (3H, m), 8,06-8,04 (1Η, q, J = 5,3 Hz), 7,91-7,89 (1H, d, J = 9,0 Hz), 7,80-7,79 (1H, d, J = 4,2 Hz), 7,14-7,13(1 H, d, J = 4,0 Hz), 4,94 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calcu- lado para Ci9Hi4CIN5S: 377,05; encontrado: 378,3.

Exemplo 78

6-[6-(3H-Benzotriazol-5-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil]-quinolina

<formula>formula see original document page 131</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 47. 1H-RMN (CDCI3): δ9,02 (1H, s), 8,61-8,60 (1H, d, J = 3,7 Hz), 8,22- 8,19 (1H, d, J = 8,0 Hz), 8,13-8,11 (1H, d, J = 9,6 Hz), 7,78 (1H, s), 7,70-7,68 (1H, d, J = 8,5 Hz), 7,55-7,57(1H, d, J = 9,6 Hz), 7,47-7,44 (1H, q, J = 4,5 Hz), 7,40-7,37 (1H, d, J = 10,4 Hz), 4,67 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C21H14N8: 378,13; encontrado: 379,3.

Exemplo 79

6-[6-(2-Metil-3H-benzoimidazol-5-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil]- quinolina

<formula>formula see original document page 131</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 47. 1H-RMN (CDCI3): 69,15 (1H, s), 8,76-75 (1H, d, J = 3,7 Hz), 8,45-8,42 (1H, d, J = 8,0 Hz), 8,30-8,27 (1H, d, J = 9,6 Hz), 7,84-7,81 (1H, d, J = 9,6 Hz), 7,69 (1H, s), 7,54-7,52(1 H, d, J = 9,6 Hz), 7,43-7,40 (1H, d, J = 8,3 Hz), 4,78 (2H, s), 2,66 (3H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C23H17N7: 391,15; encontrado: 392,3.

Exemplo 80

6-[6-(1H-lndol-2-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil]-quinolina <formula>formula see original document page 132</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 1. 1H-RMN (DMSO-de): δ 11,94 (1H1 s), 9,21 (1H, m), 9,04 (1H, d, J = 8,9 Hz), 8,43 (1H, s), 8,40 (1H, d, J = 9,8 Hz), 8,32 (1H, d, J = 8,5 Hz), 8,26 (1H, m), 8,04 (1H, d, J = 9,7 Hz), 8,00 (1H, dd, J = 8,4 Hz, 5,0 Hz), 7,67 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,59 (1H, d, J = 8,1 Hz), 7,53 (1H, d, J = 1,2 Hz), 7,27 (1H, t, J = 7,6 Hz), 7,09 (1H, t, J = 7,7 Hz), 4,97 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C23H16N6: 376,1; encontrado: 377,3 (M+H).

Exemplo 81

6-(6-Benzofuran-2-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-quinolina

<formula>formula see original document page 132</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 1. 1H-RMN (DMSO-de): δ 9,07 (1H, m), 8,75 (1H, m), 8,49 (1H, d, J = 9,9 Hz), 8,17 (2H, m), 8,06 (2H, m), 8,00 (1H, d, J = 9,9 Hz), 7,80 (3H, m), 7,51 (1H, m), 7,38 (1H, t, J = 7,1 Hz), 4,88 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C23Hi5N5O: 377,1; encontrado: 378,3 (M+H).

Exemplo 82

3-(2-Metil-benzotiazol-6-ilmetil)-6-(1 -metil-1H-pirazol-4-il)-[1,2,4]triazol[4,3- b]piridazina

<formula>formula see original document page 132</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 1. 1H RMN (CDCI3/CD3OD) δ 8,07 (1H, d, J = 9,8 Hz), 8,03 (2H, m), 7,90 (1H, m), 7,86 (1H, d, J = 8,3 Hz), 7,55 (1H, dd, J = 8,3 Hz, 1,8 Hz), 7,39 (1H, d, J = 9,7 Hz), 4,70 (2H, s), 4,02 (3H, s), 2,81 (3H, s). ESI-MS (m/z): Calcu- lado para C18H15N7S: 361,1; encontrado: 362,3 (M+H).

Exemplo 83

5-(3-Quinolin-6-ilmetil-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-6H'l)-nicotinonitrN

<formula>formula see original document page 133</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 1. 1H RMN (CDCI3/CD3OD) δ 9,39 (1H1 d, J = 2,2 Hz), 9,05 (1H, d, J = 1,8 Hz), 8,83 (1H, dd, J = 4,3 Hz, 1,5 Hz), 8,58 (1H, t, J = 2,0 Hz), 8,34 (1H, d, J = 9,6 Hz), 8,21 (1H, m), 8,05 (1H, d, J = 8,8 Hz), 7,93 (1H, d, J = 1,7 Hz), 7,80 (1H, dd, J = 8,9 Hz, 2,0 Hz), 7,71 (1H, d, J = 9,9 Hz), 7,47 (1H, dd, J = 8,3 Hz, 4,5 Hz), 4,88 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C21H13N7: 363,1; encontrado: 364,3 (M+H).

Exemplo 84

6-[6-(1H-lndol-5-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil]-quinolina

<formula>formula see original document page 133</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 1. 1H-RMN (DMSO-de): δ 11,50 (1H, s), 9,25 (1H, d, J = 4,0 Hz), 9,12 (1H, d, J = 8,3 Hz), 8,39 (4H, m), 8,23 (1H, dd, J = 8,8 Hz, 1,9 Hz), 8,08 (1H, d, J = 9,9 Hz), 8,04 (1H, dd, J = 8,3 Hz, 5,2 Hz), 7,87 (1H, dd, J = 8,6 Hz, 1,5 Hz), 7,55 (1H, d, J = 8,6 Hz), 7,47 (1H, t, J = 2,7 Hz), 6,58 (1H, s), 4,94 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C23Hi6N6: 376,1; encontrado: 377,3 (M+H).

Exemplo 85

6-[6-(1 -Metil-1 H-indol-5-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil]-quinolina

<formula>formula see original document page 133</formula>

O produto do exemplo precedente (0,074 g, 0,197 mmol) foi dis- solvido em N,N-dimetilformamida (10 mL) seca sob argônio, tratado com 60% de hidreto de sódio em óleo mineral (0,014 g, 0,350 mmol) e agitado à temperatura ambiente durante 20 minutos. A reação foi tratada com iodome- tano (0,020 mL, 0,320 mmol) através de uma seringa, agitada outras 18 ho- ras, diluída com água, e extraída três vezes com diclorometano e duas ve- zes com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na2SO4, filtradas, e o filtrado foi evaporado in vácuo produzindo um sólido de cor âmbar. Este foi dissolvido em acetonitrila anidra (10 mL) quente, tratado em gotas com HCI a 0,53 N /MeCN (0,75 mL, 0,40 mmol) com agitação, e resfriado a 0°C. A suspensão foi filtrada em uma vidro áspero fino, e os sólidos foram lavados duas vezes com éter e secos sob alto vácuo, produzindo o composto do título na forma de um sólido de cor laranja. 1H-RMN (DMSO-d6): δ 9,24 (1H, d, J = 4,1 Hz), 9,10 (1H, d, J = 8,3 Hz), 8,38 (4H, m), 8,22 (1H, d, J = 8,6 Hz), 8,09 (1H, d, J = 10,1 Hz), 8,04 (1H, m), 7,93 (1H, d, J = 8,5 Hz), 7,61 (1H, d, J = 8,8 Hz), 7,45 (1H, s), 6,58 (1H, s), 4,94 (2H, s), 3,85 (3H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C24H18N6: 390,1; encontrado: 391,3 (M+H).

Exemplo 86

6-{Diflúor-[6-(2-metil-piridin-4-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-il]-metil}- quinolina

<formula>formula see original document page 134</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- pio 1. 1H-RMN (DMSO-de): δ 9,15 (1H, bs), 8,86 (2H, m), 8,80 (1H, d, J = 10,6 Hz), 8,67 (1H, s), 8,33 (1H, d, J = 7,9 Hz), 8,28 (1H, d, J = 10,1 Hz), 8,20 (3H, m), 7,83 (1H, m), 2,75 (3H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C21H14N6F2: 388,4; encontrado: 389,3 (M+H). Alternativamente, o catalisador Peppsi-iPr com KOtBu e álcool isopropílico pode ser utilizado em lugar de Pd(PPh3)4 com Na2CO3 em dioxano.

Exemplo 87 6-[6-(2-Meti(-piridin-4-il)-[1,2,4]triazo([4,3-b]piridazín-3-ilmetil]-quinolina

<formula>formula see original document page 135</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem-

plo 1. 1H-RMN (CDCI3): δ 8,88 (1H, dd, J = 4,3 Hz1 1,8 Hz), 8,70 (1H, d, J = 4,6 Hz), 8,21 (1H, d, J = 9,5 Hz), 8,11 (1H, m), 8,08 (1H, d, J = 8,5 Hz), 7,89 (1H, d, J = 1,8 Hz), 7,84 (1H, dd, J = 8,6 Hz, 2,0 Hz), 7,61 (1H, s), 7,58 (1H, m), 7,52 (1H, d, J = 9,8 Hz), 7,39 (1H, dd, J = 8,3 Hz, 4,3 Hz), 4,86 (2H, s), 2,68 (3H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C2iH16N6: 352,1; encontrado: 353,3 (M+H).

Exemplo 88

5-(3-Quinolin-6-ilmetil-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-6-il)-piridin-2-ilamina

<formula>formula see original document page 135</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 1. 1H-RMN (DMSO-de): δ 8,85 (1H, dd, J = 4,4 Hz, 1,8 Hz), 8,68 (1H, d, J = 2,0 Hz), 8,32 (1H, m), 8,30 (1H, d, J = 9,9 Hz), 8,09 (1H, dd, J = 8,8 Hz, 2,6 Hz), 7,97 (2H, m), 7,86 (1H, d, J = 9,9 Hz), 7,80 (1H, dd, J = 8,6 Hz1 2,1 Hz), 7,50 (1H, dd, J = 8,3 Hz, 4,1 Hz), 6,64 (2H, bs), 6,57 (1H, d, J = 8,6 Hz), 4,77 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C20H15N7: 353,1; encontrado: 354,3 (M+H).

Exemplo 89

6-[6-(6-Metóxi-piridin-3-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil]-quinolina

<formula>formula see original document page 135</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exemplo 1.1H RMN (CDCI3/CD3OD) 5 8,87 (1H, dd, J = 4,0 Hz, 1,8 Hz), 8,74 (1H, d, J = 2,0 Hz), 8,15 (1H, d, J = 9,9 Hz), 8,14 (1H, dd, J = 8,8 Hz, 2,5 Hz), 8,10 (1H, m), 8,06 (1 Η, d, J = 8,9 Hz), 7,87 (1Η, m), 7,84 (1H, m), 7,49 (1H, d, J = 9,8 Hz), 7,37 (1H, dd, J = 8,2 Hz, 4,1 Hz), 6,90 (1H, d, J = 8,8 Hz), 4,82 (2H, s), 4,03 (3H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C2iH16N60: 368,1; encontrado: 369,3 (M+H).

Exemplo 90

O produto do exemplo precedente (0,063 g, 0,171 mmol) foi dis- solvido em diclorometano (5 mL) seco sob argônio, tratado com tribrometo de boro a 1N em diclorometano (1,25 mL, 1,25 mmol) e agitado à temperatu- ra ambiente durante 18 horas. A reação não foi completa por TLC, de modo que foi aquecida a 50°C sob condensador de refluxo durante 20 horas, res- friada à temperatura ambiente, e interrompida com NaHCOa aquoso satura- do. A camada aquosa foi extraída várias vezes com diclorometano e acetato de etila, e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura, secas sobre Na2SO4 e filtradas. O filtrado evaporado foi em se- guida purificado por TLC preparativa em sílica gel (20% de MeOHZCH2CI2), produzindo o composto do título na forma de um sólido amarelo-claro. 1H RMN (CDCI3/CD3OD) 6 8,82 (1H, dd, J = 4,3 Hz, 2,6 Hz), 8,19 (1H, d, J = 8,3 Hz), 8,15 (1H, d, J = 9,9 Hz), 8,14 (1H, dd, J = 9,6 Hz, 2,7 Hz), 8,05 (1H, d, J = 8,6 Hz), 8,01 (1H, d, J = 2,7 Hz), 7,88 (1H, s), 7,83 (1H, dd, J = 8,6 Hz, 1,8 Hz), 7,51 (1H, d, J = 9,6 Hz), 7,45 (1H, dd, J = 8,3 Hz, 4,3 Hz), 6,71 (1H, d, J = 9,9 Hz), 4,81 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C20Hi4N6O: 354,1; en- contrado: 355,4 (M+H). Exemplo 91

5-(6-Piridin-3-il-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil)-quinolina O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 1. 1H RMN (CDCI3/CD3OD) 5 9,16 (1H, d, J = 1,6 Hz), 8,92 (2H, m), 8,80 (1H, dd, J = 4,8 Hz, 1,6 Hz), 8,18 (1H, d, J = 9:6 Hz), 8,16 (1H, m), 8,05 (1H, d, J = 8,3 Hz), 7,76 (1H, m), 7,69 (1H, dd, J = 8,3 Hz, 7,0 Hz), 7,51 (1H, d, J = 9,6 Hz), 7,49 (2H, m), 5,09 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C2OH14N6: 338,1; encontrado: 339,3 (M+H).

Exemplo 92

3-(2-Metil-benzotiazol-6-ilmetil)-6-piridin-3-il-[1,2)4]triazol[4,3-b]piridazina

<formula>formula see original document page 137</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 1. 1H RMN (CDCI3/CD3OD) δ 9,17 (1H, d, J = 1,7 Hz), 8,77 (1H, dd, J = 4,9 Hz, 1,3 Hz), 8,30 (1H, dd, J = 6 Hz, 2 Hz), 8,25 (1H, d, J = 9,5 Hz), 7,92 (1H, d, J = 1,3 Hz), 7,87 (1H, d, J = 8,3 Hz), 7,67 (1H, d, J = 9,9 Hz), 7,57 (2H, m), 4,77 (2H, s), 2,81 (3H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para Ci9Hi4N6S: 358,1; encontrado: 359,2 (M+H).

Exemplo 93

6-[6-(1-MetiI-1 H-pirazol-4-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil]- benzotiazol-2-ilamina

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 1. 1H-RMN (DMSOd6): δ 8,67 (2H, bs), 8,54 (1H, s), 8,31 (1H, d, J = 9,9 Hz), 8,18 (1H, s), 7,82 (1H, d, J = 1,1 Hz), 7,67 (1H, d, J = 9,9 Hz), 7,37 (2H, m), 4,55 (2H, s), 3,94 (3H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para Ci7Hi4N8S: 362,1; encontrado: 363,2 (M+H).

Exemplo 94

Dimetil-{6-[6-(1 -metil-1 H-pirazol-4-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil]- benzotiazol-2-il}-amina <formula>formula see original document page 138</formula>

O produto do exemplo precedente (0,046 g, 0,127 mmol) foi dis- solvido em N,N-dimetilformamida (5 mL) seca sob argônio, tratado com 60% de hidreto de sódio em óleo mineral (0,013 g, 0,325 mmol) e iodometano (0,040 mL, 0,642 mmol) e agitado à temperatura ambiente durante 4 horas.

A reação foi concentrada até secagem in vácuo, dissolvida em 10% de Me- OH/CH2CI2, filtrada, e o filtrado foi purificado duas vezes por TLC preparativa em sílica gel (primeiro com 10%, a seguir com 5% de MeOHZCH2Cfe), produ- zindo o composto do título na forma de um sólido amarelo. 1H RMN (CDCI3) δ 8,02 (1H, d, J = 9,6 Hz), 7,98 (1H, m), 7,91 (1H, s), 7,67 (1H, d, J = 1,8 Hz), 7,48 (1H, d, J = 8,4 Hz), 7,38 (1H, m), 7,23 (1H, d, J = 9,6 Hz), 4,61 (2H, s), 4,01 (3H, s), 3,17 (6H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para Ci9Hi8N8S: 390,1; encontrado: 391,3 (M+H).

Exemplo 95

6-[6-(2-Cloro-piridin-4-il)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-ilmetil]-quinolina

<formula>formula see original document page 138</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo 1. 1H-RMN (DMSOd6): δ 8,44 (1H, dd, J = 4,3 Hz1 1,5 Hz), 8,59 (1H, d, J = 4,6 Hz), 8,30 (1H, d, J = 9,8 Hz), 8,20 (1H, m), 8,06 (1H, d, J = 8,5 Hz), 7,93 (1H, m), 7,88 (1H, m), 7,82 (1H, dd, J = 8,8 Hz, 2,0 Hz), 7,77 (1H, dd, J = 5,3 Hz, 1,5 Hz), 7,63 (1H, d, J = 9,5 Hz), 7,45 (1H, dd, J = 8,4 Hz, 4,3 Hz), 4,87 (2H, s). ESI-MS (m/z): Calculado para C20Hi3N6CI: 372,1; encontrado: 373,4 (M+H).

Exemplo 96

5-(3-Quinolin-6-ilmetil-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-6-il)-piridina-2-carbonitrila <formula>formula see original document page 139</formula>

O composto do título foi preparado conforme descrito no exem- plo. 1H RMN (CDCI3/CD3OD) : δ 9,31 (1H, d, J = 2,3 Hz), 8,83 (1H, dd, J = 4,5 Hz, 1,6 Hz), 8,42 (1H, dd, J = 8,2 Hz1 4,2 Hz), 8,33 (1H, d, J = 9,6 Hz), 8,19 (1H, m), 8,05 (1H, d, J = 8,7 Hz), 7,94 (1H, d, J = 8,1 Hz), 7,89 (1H, d, J = 1,6 Hz), 7,81 (1H, dd, J = 8,7 Hz, 1,9 Hz), 7,69 (1H, d, J = 9,7 Hz), 7,45 (1H, dd, J = 8,4Hz, 4,3 Hz), 4,87 (s, 2H).

ESI-MS (m/z): Calculado para C21H13N7: 363,1; encontrado: 364, 3 (M+H).

Exemplo 97

{5-[3-(Diflúor-quinolin-6-il-metil)-[1,2,4]triazol[4,3-b3piridazin-6-il] tiofen-2-il}- (4-metil-piperazin-1 -il) -metanona

<formula>formula see original document page 139</formula>

Exemplo 97 : etapa a

Etil ester de acido 5-(6-Cloro-piridazin-3-il)-tiofeno-2-carboxilico

<formula>formula see original document page 139</formula>

A um frasco seco contendo 3,6-dicloro-piridazina (2.8 g, 18,8 mmols) e brometo de 5-etoxicarboniltiofenil-2-zinco (0,5 M em TF, 16 ml, 8 mmols) em 100 mL de dioxano seco foi adicionado Pd(PF3)4 (450 mg, 0,39 mmol). A solução resultante foi aquecida a 60°C durante a noite sob N2, dei- xada esfriar até 20°C. A reação foi extinta por adição de 15 mL de metanol seguido da adição de 3NHCI (10 mL). A mistura foi mantida em agitação a 20°C por mais 1 hora. NaHCO3 saturado foi adicionado para neutralizar a mistura. Após work up aquoso, a mistura foi extraída por CH2CI2, seca sobre Na2SO4 e concentrada in vácuo. O resíduo foi purificado por coluna para dar etil éster de ácido 5-(6-cloro-piridazin-3il)-tiofeno-2-carboxílico (1,4 g, 65%). 1H RMN (CDCI3) δ7,81 (d, J = 3,9 Hz1 1H), 7,77(d, J = 9,1 Hz, 1H), 7,63 (d, J = 3,9 Hz, 1H), 7,55 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 4,38 (q, 2H), 1,40(t, 3H); MS (ES) m/z 269(M+H+).

Exemplo 97: etapa b

Ácido 5-[3-(Diflúor-quinolin-6-il-metil)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-6-il]-tiofeno- 2-carboxílico

<formula>formula see original document page 140</formula>

Uma mistura do etil éster de ácido 5-(6-Cloro-piridazin-3-il)- tiofeno-2-carboxílico preparado na etapa a (54 mg, 0,20 mmol), hidrazida de ácido diflúor-quinolin-6-il-acético (Exemplo 57: etapa c) (71 mg, 0,30 mmol) e n-butanol (3 mL) foram combinados em um tubo vedado e aquecido em um banho de óleo a 130°C por 4,5 horas. A mistura foi resfriada até a tempera- tura ambiente, diluída com diclorometando (30 mL) e lavada com NaHCO3 saturado (1 χ). A camada aquosa foi extraída com diclorometano (2 x). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre MgS04, filtradas, evapo- radas in vácuo e o produto bruto cromatografado para prover o intermediário éster etílico (62,4 mg) com 68% de rendimento. O éster etílico foi dissolvido em uma mistura a 2:1 de tetra-hidrofurano/metanol (3 mL) e tratado com NaOH a 2N (0,14 mL). A mistura foi agitada por 3 horas a 20°C, evaporada in vácuo, diluída com água (10 mL), e acidificada com HCI a 6 N até um pH 2. Os precipitados sólidos foram coletados e secos para render o produto 97a (60 mg, 100%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,03 (m, 1H); 8,64 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 8,59 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 8,49 (s, 1H), 8,20 - 8,17 (m, 2H), 8,12 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 8,03 (dd, J = 9,2, 2,1 Hz, 1H), 7,79 (d, J = 4,3 Hz1 1H), 7,65 (dd, J = 8,3, 4,2 Hz1 1H); MS (m/z): 424 (MH+)

Exemplo 97: etapa c

[5-[3-(Diflúor-quinolin-6-il-metil) -[1,2,4]triazol [4,3-b]piridazin-6-il]-tiofen-2-il}- (4-metil-piperazin-1-il)-metanona

<formula>formula see original document page 141</formula>

A uma solução do composto preparado na etapa b (50 mg, 0,12 mmol) em 5 ml de DMF seca foram adicionados HATU (0,112 g, 0,29 mmol), HOBt (0,023 g, 0,17 mmol) e DIEA (0,1 mL, 0,57 mmol) respectivamente. A mistura resultante foi agitada a TA por 30 minutos e N-Metilpiperazina foi adicionada. A agitação foi continuada por uma hora adicional e água (20 mL) foi adicionada. Diclorometano (20 mL) foi adicionado e as camadas separa- das. A camada de CH2Cb foi seca sobre MgSO4, evaporada in vácuo e cro- matografada (CH2Cl2)MeOH com 0,1% de EÍ3N) para prover o composto como um sólido castanho. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 8,97 (m, 1H), 8,57 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 8,49 (s, 1H), 8,35 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 8,19 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 8,07 (dd, J = 9,1, 1,9 Hz, 1H), 8,01 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 7,88 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 7,66 (dd, J = 4,4, 4,3 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 3,86 (m, 4H), 2,82 (m, 4H), 2,57 (s, 3H); MS (m/z): 506 (MH+).

Exemplo 98

{5-[3-(Diflúor-quinolin-6-il-metil)-[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-6-il]-tiofen-2-il}- (4-metanossulfonil-piperazin-1-il)-metanona

<formula>formula see original document page 141</formula>

A uma solução do composto preparado no Exemplo 97b (1,0 g, 2,3 mmols em CH2CI2 seco (100 ml) foram adicionados 1-metanossulfonil- piperazina (460 mg, 2,8 mmols), EDC (560 mg, 2,8 mmols), DMAP (340 mg, 2,8 mmols) respectivamente. A mistura resultante foi agitada a 20°C durante a noite. Após work up aquoso, a camada orgânica foi separada, lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4. O solvente foi removido in vácuo. O resíduo foi purificado por coluna para dar o produto desejado como um sólido branco (680 mg, 51%). 1H RMN (CDCI3) δ9,03 (s, 1H), 8,31 (d, J = 11,2 Hz 1H), 8,11(m, 4H) 7,61 (d, J = 3,8Hz, 1H), 7,57(d, J = 9,8 Hz1 1H) 7,49 (m, 1H), 7,31 (d, J = 3,8 Hz, 1H) 3,90 (m, 4H), 3,34 (m, 4H), 2,86 (s, 3H); MS (ES) m/z 570,2(M+H+).

Exemplo 99

6-{Diflúor-[6-(1-metanossulfonil-1 H-pirazol-4-il) -[1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin- 3-il]-metil}-quinolina

<formula>formula see original document page 142</formula>

Exemplo 99: etapa a

Terc-butil ésterde ácido 4-(6-Cloro-piridazin-3-il)-pirazol-1-carboxílico

<formula>formula see original document page 142</formula>

Uma mistura de 3,6-dicloro-piridazina (1,06 g, 6,98 mmols) e terc-butil éster de ácido 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-pirazol- 1-carboxílico (1,47 g, 5,0 mmols) em carbonato de potássio a 2,0 M (10 mL, 20 mmols) e 1,4-dioxano (40 mL) foi desgaseificada por vácuo caseiro por 15 min seguido de borbulhamento com argônio por - 10 min, Peppsi-ipr (340 mg, 0,5 mmol) foi a seguir adicionado. Após lavar com argônio por um adi- cional de ~ 10 min, a mistura foi aquecida a 70 0C por 4 h e deixada resfriar até a temperatura ambiente. O sólido foi removido por filtração através de Celite, e o filtrado foi separado. A solução aquosa foi extraída CH2CI2 e as fases orgânicas combinadas foram secas sobre Na2S04, concentradas, e purificadas por coluna para prover 0,65 g do produto desejado (46%). 1H RMN(DMSO) δ 9,08(s, 1H), 8,47 (s, 1H), 8,31 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 8,01 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 1,59 (s, 3H); MS (ES) m/z 280,8(M+H+).

Exemplo 99: etapa b

6-{Diflúor-[6-(1 H-pirazol-4-il)-[1,2,4] triazol[4,3-b]piridazin-3-il]-metil}-quinolina <formula>formula see original document page 143</formula>

Um frasco de 100ml contendo uma mistura de 3-cloro-6-(terc- butil éster de ácido pirazol-1-carboxílico)-piridazina (140 mg, 0,5 mmol), hi- drazida de ácido diflúor-quinolin-6-il-acético (130 mg, 0,55 mmol) e a quanti- dade catalítica de HCI a 3N em 40 mL de isopropanol foi aquecido até 80 0C durante a noite. A mistura de reação foi neutralizada por NaHCO3 e extraída por CH2CI2. O solvente foi removido in vácuo e o resíduo foi purificado por cromatografia para dar 110 mg (61%) do produto desejado. 1H RMN (CDCI3) δ 10,2 (bs, 1H), 8,83 (d, J = 9,23Hz, 1H), 8,42 (m, 1H), 8,19-8,31 (m, 4H), 7,77 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,60 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,45-7, 57 (m, 2H); MS (ES) m/z 364,0 (M+H+).

Exemplo 99: etapa c

<formula>formula see original document page 143</formula>

A um frasco seco de 50mL contendo 6-{diflúor-[6-(1H-pirazol-3- il)-[1,2,4]triazol[4,3-b] piridazin-3-il]-metil}-quinolina (110 mg, 0,303 mmol), trietilamina (120 mg, 1,2 mmol) em CH2CI2 (6 mL) foi adicionado cloreto de metanossulfonila (138 mg, 1,21 mmol). A mistura de reação foi agitada a 0°C por 90 min, até que TLC mostrou que a reação estava completa. A mistura foi a seguir neutralizada por NaHCO3 saturado, extraída por CH2CI2, seca sobre Na2SO4, concentrada por vácuo e purificada por coluna para dar 113 mg (85%) do composto-alvo. 1H RMN (CDCI3) δ 9,02 (dd, J = 4,3, 1,3 Hz, 1H) 8,44 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 8,23-8,30 (m, 5H), 8,03 (d, J = 6,4 Hz1 1H), 7,51 (dd, J = 9,7, 4,0 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 3,45 (s, 3H); MS (ES) m/z 442,1 (M+H+).

Exemplo 100 6-{[6-(2-Etinil-piridin-4-il)-[1,2,4] triazol[4,3-b]piridazin-3-il]-diflúor-metil}- quinolina

<formula>formula see original document page 144</formula>

Exemplo 100: etapa a

3-Cloro-6-(2-cloro-piridin-4-il)-piridazina

<formula>formula see original document page 144</formula>

Uma mistura de 3,6-dicloro-piridazina (1,04g, 6,98 mmols) e ácido 2-cloropiridina borônico (1,00 g, 6,37 mmols) em carbonato de potás- sio a 2,0 M (10 mL, 20 mmols) e 1,4-dioxano (20 mL) foi borbulhada com argônio por -10 min, dicloreto de bis(trifenilfosfina) paládio (II) (236 mg, 0,336 mmol) foi a seguir adicionado. Após lavar com argõnio por outros ~ 10 min, a mistura foi aquecida a 80°C por 18 h e deixada resfriar até a tempera- tura ambiente. O sólido foi removido por filtração através de Celite, e o filtra- do foi separado. A solução aquosa foi extraída com CH2Cl2 e as fases orgâ- nicas combinadas foram secas, concentradas, e purificadas por coluna para prover 296 mg (21%) de 100a como um sólido: 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 8,58 (d, J = 5,1 Hz, 1 H), 8,00 (m, 1 H), 7,90 (dd, J = 5,5, 1,6 Hz, 1 H), 7,89 (d, J = 9,0 Hz, 1 H), 7,68 (d, J = 9,0 Hz, 1 H); MS (ES) m/z: 226/228 (M+H+).

Exemplo 100: etapa b

6-{[6-(2-Cloro-piridin-4-il)- [1,2,4]triazol [4,3-b]piridazin-3-il]- diflúor-metilj-quinolina

<formula>formula see original document page 144</formula>

Um tubo de pressão contendo uma mistura de 3-cloro-6-(2-cloro- piridin-4-il)-piridazina (200 mg, 0,884 mmol) e hidrazida de ácido diflúor- quinolin-6-il-acético (314 mg, 1,32 mmol) em butanol (7 mL) foi lavado com argônio e a seguir vedado. Após o aquecimento a 102°C por 64 h, o solvente foi removido in vácuo e o resíduo foi purificado por cromatografia para dar 134 mg (37%) de 100b: 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 9,04 (m, 1 H), 8,62 (d, J = 5,1 Hz1 1 H), 8,37 - 8,33 (m, 4 H), 8,07 (dd, J = 9,0, 2,0 Hz, 1 H), 7,83 (m, 1 H), 7,75 (dd, J = 5,1, 1,6 Hz, 1 H), 7,67 (d, J = 9,8 Hz, 1 H), 7,58 (m, 1 H);

MS (ES) m/z: 409/411 (M+H+).

Exemplo 100: etapa c

6-{[6-(2-Etinil-piridin-4-il) -[1,2,4]triazol[4,3-b] piridazin-3-il]-diflúor-metil}- quinolina

<formula>formula see original document page 145</formula>

Uma mistura de 100b (60 mg, 0,15 mmol) em DMF (0,7 mL) e Et2NH (0,45 mL) foi desgaseificada com argônio por ~ 5 min, e trifenilfosfina (8 mg, 0,031 mmol), Cul (3 mg, 0,016 mmol) e diclloreto de bis(trifenilfosfina)paládio (II) (10 mg, 0,014 mmol) foram a seguir adicioan- dos. A desgaseificação foi continuada por cerca de 5 min e trimetilsililacetile- no foi adicionado. A mistura foi colocada em micro-ondas a 120°C por 50 min e concentrada in vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia para dar 10 mg (14%) de 6-{diflúor-[6-(2-trimetilsilaniletinil-piridin-4-il) - [1,2,4]triazol[4,3-b]piridazin-3-il]-metil}-quinolina.

O produto acima (10 mg, 0,021 mmol) em THF (1,2 mL) foi tra- tado com NaOH a 0,1 M (0,2 mL, 0,02 mmol) por 1 h e concentrado. O resí- duo foi dividido entre CH2Cb e água. A camada orgânica foi seca, concen- trada, e cromatografada para prover 8 mg (94%) de 100:1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 8,96 (d, J = 4,3 Hz, 1 H), 8,74 (d, J = 5,1 Hz, 1 H), 8,29 - 8,19 (m, 4 H), 8,00 - 7,98 (m, 1 H), 7,92 (s, 1 H), 7,72 (dd, J = 5,1, 1,6 Hz, 1 H), 7,62 (d, J = 9,8 Hz, 1 H), 7,45 (dd, J = 8,2, 4,3 Hz, 1 H), 3,26 (s, 1 H); MS (ES) m/z: 399 (M+H+).

Exemplo 101

4-[3-(Diflúor-quinolin-6-il-metil)-[1,2,4]triazol [4,3-b]piridazin-6-il]-piridina-2- carbonitrila <formula>formula see original document page 146</formula>

Uma mistura de 6-{[6-(2-Cloro-piridin-4-il)-[1,2,4] triazol [4,3- b]piridazin-3-il]- diflúor-metilj-quinolina (veja o Exemplo 100b) (50 mg, 0,122 mmol) em DMF (4 mL) e Zn(CN)2 (43 mg, 0,367 mmol) foi desgaseificada com vácuo caseiro por ~ 5 min, e tetraquis(trifenilfosfina)paládio (13,4 mg, 0,012 mmol) foi a seguir adicionado. A mistura foi colocada em micro-ondas a 190°C por 20 min. A após o work up aquoso, o solvente foi removido por vácuo. O composto-alvo, 21 mg (41%), foi obtido por purificação de coluna.

1H RMN (CDCI3) δ 9,04 (dd, J = 4,2, 1,6 Hz, 1H), 8,95 (d, J = 5,12 Hz, 1H), 8,41 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 8,22-8,35 (m, 4H), 8,00-8,05 (m, 2H), 7,70(d, J = 9,8 Hz, 1H), 7,54 (dd, J = 8,2, 3,8 Hz, 1H); MS (ES) m/z 400,3(M+H+).

Exemplo 102

{5-[3-(Benzofuran-5-il-diflúor-metil)-[1,2,4] triazol[4,3-b]piridazin-6-il]-tiofen-2- il} -(4-metil-piperazin-1 -il)-metanona

<formula>formula see original document page 146</formula>

AlCl3 sólido (5,55 g, 0,042 M) foi adicionado em porções a uma solução fria (0°c) de di-hidrobenzofurano (5,0 g, 0,042 M) e cloreto de etil oxalila (4,5 mL, 0,042 M) em diclorometano seco (80 mL). Após a adição completa, a solu- ção escura foi aquecida até a TA e agitada por 2 horas. A mistura de reação resultante foi derramada lentamente em uma solução concentrada de H- Cl/água gelada (5 mL/200 mL). A mistura aquosa foi agitada por 20 minutos e diclorometano (150 mL) foi adicionado. As camadas foram separadas. A camada aquosa foi extraída com diclorometano (1 x). Os extratos de CH2CI2 combinados foram secos sobre MgS04, filtrados, evaporados in vácuo e o óleo bruto purificado por cromatografia (Hexano/EtOAc) para prover o produ- to desejado como um óleo (4,8 g) 54%. 1H RMN (400 MHz1 CDCI3) 57,88 (s, 1H), 7,86 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,85 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 4,72 (t, J = 9 Hz, 2H), 4,45 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,28 (t, J = 9,2 Hz, 2H), 1,42 (t, J = 7,2 Hz1 3H). MS (m/z): 221 (MH+).

Exemplo 102: etapa b

Etil éster de ácido Benzofuran-5-il-oxo-acético

<formula>formula see original document page 147</formula>

N-Bromossuccinimida (3,88 g, 0,022 M) foi lentamente adicionada a uma solução do composto preparado na etapa a (4,8 g, 0,022 M) e péróxido de benzoíla (0,030 g, 0,12 mmol) em tetracloreto de carbono (80 mL). A mistura foi agitada em refluxo por 3 horas, resfriada até a TA, evaporada até a secu- ra e cromatografada (Heptano/EtOAc) para render o produto como um ó- leo(3,8 g) 100%. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 8,32 (s, 1H) 8,02 (dd, J = 8,7, 1,8 Hz, 1H), 7,73 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,61 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,88 (s, 1H), 4,48 (q, J = 7,3 Hz, 2H), 1,46 (t, J = 7,1 Hz, 3H). MS (m/z): 219 (MH+).

Exemplo 102: etapa c

Etil éster de ácido benzofuran-5-il-diflúor-acético

<formula>formula see original document page 147</formula>

A uma solução fria (O0C) do composto preparado na etapa b (0,895 g, 4,1 mmols) em diclorometano (10 mL) foi lentamente adicionado trifluoreto de (dietilamino) enxofre (DAST) (5 g, 31,0 mmols). A mistura foi aquecida até a TA e a agitação foi continuada por 24 horas. A mistura de reação foi a seguir derramada em água gelada (100 mL) e extraída com CH2CI2 (2 χ 100 mL). Os extratos de CH2CI2 combinados foram secos sobre MgSO4, filtrados, evaporados in vácuo e cromatografados (Hexano/CH2CI2) para prover o produto desejado (0,8 g, 79%). 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 7,88 (s, 1H), 7,70 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,56 (m, 2H), 6,83 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 4,32 (q, J = 6,8 Hz, 2H), 1,31 (t, J = 6,8 Hz, 3H); MS (m/z): 241 (MH+).

Exemplo 102: etapa d

Hidrazida de ácido benzofuran-5-il-diflúor-acético

Uma mistura do composto preparado na etapa c (127 mg, 0,53 mmol) e hidrazina (0,28 mL, 8,9 mmols) em metanol seco (3 mL) foi agitada em refluxo por 3 h, resfriada até a TA e evaporada in vácuo para render um produto semissólido (0,12 g) 99%. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,12 (s, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,76 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 7,52 (dd, J= 8,5, 1,5 Hz1 1H), 7,09 (d, J = 1,3 Hz, 1H)

Exemplo 102: etapa e

Etil éster de ácido 5-[3-(Benzofuran-5-il-diflúor-metil)-[1,2,4]triazol [4,3- b]piridazin-6-il] -tiofeno-2-carboxílico

<formula>formula see original document page 148</formula>

A uma mistura do composto preparado na etapa d (0,115 g, 0,51 mmol) e do composto preparado no Exemplo 97a (165 mg 0,61 mmol) em n- butanol (3 mL) foi adicionada uma gota de HCI a 3N. A mistura foi aquecida em um banho de óleo a 130°C por 3 horas, resfriada até a TA, diluída com diclorometano (20 mL) e lavada com NaHCO3 saturado (1 χ). O extrato de CH2CI2 foi seco sobre MgSO4, filtrado e evaporado in vácuo. O semissólido residual bruto foi purificado por cromatografia para prover o produto deseja- do (35 mg) 16%. 1H RMN (400 MHz1 DMSO-d6) δ 8,20 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 8,19 (m, 4H), 7,88 (d, J = 3,8 Hz1 1H), 7,78 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,63 (J = 9,1 Hz, 1H), 7,09 (s, 1H), 4,38 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 1,37 (t, J = 6,9 Hz, 3H). MS (m/z): 441 (MH+). Exemplo 102: etapa f

{5-[3-(Benzofuran-5-il-diflúor-metil) -[1,2,4]triazol [4,3-b]piridazin-6-il]-tiofen-2- il }-(4-metil-piperazin-1-il) -metanona

<formula>formula see original document page 149</formula>

O composto preparado na etapa e foi dissolvido em uma mistura a 2:1 de THF/metanol (3 mL) e tratado com NaOH a 2N (0,15 mL). A mistura foi agitada por 3 horas a TA, evaporada in vácuo, diluída com água (10 mL), e acidificada com HCI a 6 N até o pH 2. Os precipitados sólidos brancos fo- ram coletados, secos sobre pressão reduzida, dissolvidos em DMF (2 mL) e tratados com HATU (0,062 g, 0,16 mmol), HOBt (0,013 g, 0,09 mmol) e DIEA (0,06 mL, 0,32 mmol) respectivamente. A mistura resultante foi agitada a TA por 30 minutos e N-Metilpiperazina (0,014 mL, 0,14 mmol) foi adicionada. A agitação foi continuada por uma hora adicional e água (20 mL) foi adiciona- da. Diclorometano (20 mL) foi adicionado e as camadas separadas. A cama- da de CH2CI2 foi seca sobre MgSO4, evaporada in vácuo e cromatografada (CH2CI2/ 0 - 10% de MeOH) para render um produto sólido. A recristalização para EtOAc rendeu o composto do título como um sólido esbranquiçado. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,60 (d, J = 9,8, 1H), 8,17 - 8,07 (m, 4H), 7,79 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 7,65 (dd, J = 8,5, 2,1 Hz, 1H), 7,50 (d, J = 3,9 Hz, 1H), 7,08 (s, 1H), 3,67 (m, 4H), 3,34 (m, 4H), 2,32 (s, 3H); MS (m/z): 495 (MH+).

Exemplo 103

(5-{3-[(2,3-Di-hidro-benzofuran-5-il) -diflúor-metil] -[1,2,4]triazol[4,3- b]piridazin-6-il}- tiofen-2-il)-(4-metil-piperazin-1 -il) -metanona

<formula>formula see original document page 149</formula> Exemplo 103: etapa a

Etil éster de ácido (2,3-Di-hidro-benzofuran-5-il)-diflúor-acético

<formula>formula see original document page 150</formula>

A uma solução fria (0°C) do composto preparado na etapa a do Exemplo 102 (1,0 g, 4,54 mmols) em diclorometano (20 mL) foi adicionado lentamente trifluoreto de (dietilamino) enxofre (DAST) (5 g, 31,0 mmols). A mistura foi aquecida até a TA e a agitação foi continuada por 24 h. A mistura de reação foi a seguir derramada em água gelada (80 mL) e extraída com CH2CI2 (2 χ 100 mL). Os extratos de CH2CI2 combinados foram secos sobre MgS04, filtrados, evaporados in vácuo e cromatografados (Hexano/EtOAc) para prover o produto desejado. 1H RMN (400 MHz1 CDCI3) δ 7,42 (s, 1H), 7,36 (dd, J = 8,5, 1,9 Hz, 1H), 6,81 (d, J= 8,9 Hz, 1H), 4,62 (t, J = 8,3 Hz1 2H), 4,30 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 3,24 (t, J = 8,9 Hz, 1H), 1,31 (t, J = 7,1 Hz1 1H).

Exemplo 103: etapa b

Etil éster de ácido 5-{3-[(2,3-Di-hidro-benzofuran-5-il) -diflúor-metil]- [1,2,4]triazol[4,3-b] piridazin-6-il}-tiofeno -2-carboxílico

<formula>formula see original document page 150</formula>

Uma solução do composto preparado na etapa a (0,30 g, 1,24 mmol) em CH3OH (10 mL) foi tratada com hidrazina (0,58 mL, 18,6 mmols).

A mistura resultante foi agitada em refluxo por 2,5 h, resfriada até a TA e evaporada até a secura. O resíduo (0,28 g, 1,22 mmol) foi combinado com o composto preparado na etapa a do Exemplo 97 (0,66 g, 2,4 mmols) em n- butanol (5 mL), aquecido em um banho de óleo a 130°C por 3 horas, resfria- do até a TA, diluído com diclorometano (20 mL) e lavado com NaHCO3 satu- rado (1 χ). O extrato de CH2Cl2 foi seco sobre MgSO4, filtrado, evaporado em vácuo e cromatografado (CH2Cl2/0 - 10% de MeOH) para prover o produto desejado (78 mg) 14%. 1H RMN (400 MHz1 DMSO-d6) δ 8,62 (d, J = 9,74 Hz1 1Η), 8,19 (dd, J = 9,8, 3,7 Hz, 2Η), 7,90 (d, J = 3,8 Hz1 1Η), 7,64 (s, 1H), 7,37 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 6,88 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,61 (t, J = 8,7 Hz, 2H), 4,36 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,28(t, J = 8,3 Hz, 2H), 1,34 (t, J = 7,2 Hz). MS (m/z): 443 (MH+)

Exemplo 103: etapa c

(5-{3-[(2,3-Di-hidro-benzofuran-5-il)-diflúor-metil]-[1,2,4] triazol [4,3-b]pirida- zin-6-il} -tiofen-2-il)-(4-metil-piperazin-1-il) -metanona

<formula>formula see original document page 151</formula>

O composto preparado na etapa b foi dissolvido em uma mistura a 2:1 de THF/metanol (3 mL) e tratado com NaOH a 2N (0,15 mL). A mistura foi agitada por 3 horas a TA, evaporada in vácuo, diluída com água (10 mL), e acidificada com HCI a 6 N até o pH 2. Os precipitados sólidos brancos fo- ram coletados, secos sob pressão reduzida, dissolvidos em DMF (3 mL) e tratados com HATU (0,12 g, 0,31 mmol), HOBt (24 mg, 0,18 mmol) e DIEA (0,1 mL, 1,04 mmol) respectivamente. A mistura resultante foi agitada a TA por 30 minutos e N-metilpiperazina (0,027 mL, 0,24 mmol) foi adicionada. A agitação foi continuada por uma hora adicional e água (20 mL) foi adiciona- da. Diclorometano (20 mL) foi adicionado e as camadas separadas. A cama- da de CH2CI2 foi seca sobre MgSO4 e evaporada in vácuo. O resíduo foi pu- rificado por HPLC de fase reversa (Varian Prostar HPLC, coluna preparatória Pursuit1 CH3CN/H20 contendo 0,1% de TFA). O composto final foi filtrado através de um cartucho de HCO3 e seco sob pressão reduzida para prover o composto do título.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,58 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 8,16 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 8,08 (d, J = 3,7 Hz, 1H) 7,58 (s, 1H), 7,49 (d, J = 3,9 Hz, 1H), 7,41 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,88 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 4,59 (t, J = 8,5 Hz, 2H) 3,65 (m, 4H), 3,25 (t, J = 8,9 Hz, 2H), 2,36 (m, 4H), 2,22 (s, 3H); MS (m/z): 497 (MH+)

Exemplo 104 6-{Diflúor- [6-(2-propil-tiazol-5-il) -[1,2,4]triazol [4,3-b]piridazin-3-il]-metil}- quinolina

Um tubo de pressão contendo urna mistura de 3-cloro-6-(2- propil-tiazol-5-il)-piridazina (Exemplo 20, etapa a) (36 mg, 0,15 mmol) e hi- drazida de ácido diflúor-quinolin-6-il-acético (71 mg, 0,30 mmol) em butanol (2 mL) foi lavado com argônio e a seguir vedado. Após o aquecimento a 95°C por 64 h, o solvente foi removido in vácuo e o resíduo foi purificado por cromatografia para dar 60 mg (95%) de 8 como um sólido marrom-claro: 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 9,03 (dd, J = 4,3, 1,6 Hz1 1 H), 8,36 (m, 3 H), 8,18 (d, J = 9,4 Hz, 2 H), 8,16 - 8,14 (m, 1 H), 7,58 (d, J = 9,4 Hz1 2 H), 3,06 (t, J = 7,6 Hz1 2 H), 1,93 - 1,88 (m, 2 H), 1,08 (t, J = 7,4 Hz, 3 H); MS (ES) m/z: 423 (M+H+).

ATIVIDADE BIOLÓGICA

As ensaios representativas seguintes foram desempenhadas para determinar as atividades biológicas de compostos dentro do escopo da invenção. Elas são dadas para ilustrar a invenção em um modo não-limitado.

EXEMPLO A

Clonagem, expressão e purificação de proteína de c-Met recombinante

Esse exemplo descreve a clonagem, expressão e purificação do domínio citoplásmico de c-Met o qual tem a atividade tirosina cinase recepto- ra de c-Met. O domínio citoplásmico tem 435 aminoácidos e mostra alta ho- mologia com a família SRC de tirosina cinases (Park et ai, 1987, Proc Natl Acad Sci USA. 84(18):6379-83).

Um cDNA para o domínio citoplásmico de receptor de Met, con- tendo o domínio de tirosina cinase, foi amplificado por PCR. Oligonucleotí- deos foram sintetizados como de costume pelo Gibco-BRL (Carlsbad, CA). Oligonucleotídeo metkinF2 avançado é idêntico aos nucleotídeos 3068 - 3097 da seqüência de nucleotídeo listada em NM_000245, exceto que nu- cleotídeos entre 3073 e 3078 tenham sido alterados para criar uma localida- de BamHI para propósitos de clonagem. Oligonucleotídeo metkinR2a rever- so é idêntico aos nucleotídeos 4378-4348 da seqüência complementar da- quela listada em NM_000245 exceto que os nucleotídeos entre 4372-4367 tenham sido alterados para criar uma localidade Xhol (sublinhada) para pro- pósitos de clonagem. Os oligonucleotídeos foram usados como instrutores PCR para amplificarem cDNA de domínio citoplásmico de receptor de Met do cDNA placental Quick Clone (Clontech; Palo Alto1 CA). A amplificação foi efetuada usando polimerase Taq DNA (Gibco-BRL; Carlsbad1 CA), 1.25 mM I volume.meada dNTP, 200 nM cada oligo, em um volume de 50 μL. O perfil termociclo foi 30 ciclos de cada contendo 94°C por 30 segundos, 60°C por 30 segundos e 72°C por 1 minuto, em um termocidador Perkin Elmer 9600.

O cDNA amplificado para o domínio citoplásmico de receptor de Met foi clonado em um vetor de expressão. O produto PCR foi digerido com BamHI (New England Biolabs; Beverly, MA) e Xhol (New England Biolabs).

Um produto 1,3 kb digerido foi isolado e purificado de um gel agarosa 1% usando Gene Clean (Qbiogene; Irvine, CA). O vetor pFastBacHTa (Gib- co-BRL) foi digerido com BamHI e Xhol (New England Biolabs) e o fragmen- to linear 4,7 kb foi purificado de um gel agarosa 1 % usando Gene Clean (Bi- o101). O fragemento cDNA Met 1,3 kb foi ligado ao vetor pFastBacHTa a 4°C por 16 horas com Iigase DNA T4 (New l.mEngland Biolabs) em um vo- lume final de 10 μΙ_. Clonando o clone cDNA de domínio citoplasmático Met na localidade BamHI do pFastBacHTa localizado na moldura cDNA com o marcador His-6 do vetor para permissão de expessão de uma proteína mar- cada His N-terminal. Metade da mistura da ligação (5 μ!_) foi usada para transformar 50 μΙ_ DH 5α adequado Ε. Células Coli (Gibco-BRL). A mistura de transformação foi plaqueada em placas de LB ágar contendo 100 μg/mL de ampicilina e encubada por 16 horas a 37°C. Colônias foram colhidas des- sas placas e cultivadas em caldo LB contendo 100 μg/mL de ampicilina por 16 horas. DNA plasmídeo foi isolado usando reagentes de purificação de DNA plasmídeo Qiagem (Qiagen; Valência, CA) e clones peneirados por compilador com BamHI/Xhol. Três clones os quais tinham os fragmentos de tamanho apropriado liberados do copilador foram submetidos para ACGT, Inc paro ensaio de seqüência de DNA.

Um clone, pFastBacHTmetkin-15, não conteve mutações no domínio citoplásmico clonado c-Met e foi usado para gerar um baculovírus recombinante para expressão. Um baculovírus recombinante foi gerado u- sando o sistema Gibco BRL Bac-To-Bac seguindo o protocolo especificado pelo elaborador. Resumidamente, células DHIOBac foram transformadas com pFastBacHTmetkin-15, clones foram selecionados, DNA viral isolado e peneirado por acréscimo de PCR para Met cDNA. Células de insetos Sf9 foram transfectadas com o DNA baculovírus recombinante. Meio contendo estoque viral de PO foi coletado e usado para duas etapas subsequentes de amplificação viral.

Concentrações múltiplas de estoque viral amplificado foram usa- das para infectar células Sf9. As células foram colhidas 24, 48 e e 72 horas após a transfecção. Células Sf9 infectadas foram dissolvidas em 50 mM Tris-HCI pH 8,0, NaCl a 150 mM, imidazolas a 150 mM, 1,0 mM, 0,5% de NP40 3,5 μg/ml de leupeptina, 3,5 μg/ml de aprotinina e concentração de proteína total determinada em um ensaio BCA (Pierce; Rockford, IL). Lisatos de células foram separadas em uma SDS-PAGE 4-15%, depois transferidas para membrana de nitrocelulose paro ensaios imunoblot. Manchas de Nito- celulose foram examinadas com um anticorpo anti-His6 para confirmar ex- pressão da proteína cinase met His-tagged. Concentração viral opcional pa- ra proporção de célula Sf9 foi determinada por work up dos lisatos coletados de condições diferentes de infecção. Recuperação máxima de proteína ocor- reu 48 horas após infecção.

Uma expressão/purificação de escala menor do domínio cito- plásmico His-tagged do receptor de Met foi realizada. Células de inseto Sf9 transfectadas com o baculovírus recombinante que expressa o domínio cito- plásmico His-tagged do receptor de Met foram Iisados em tampão contendo Tris-HCl a 50 mM pH 8,0, NaCl a 150 mM, imidazol a 150 mM, PMSF 1,0 mM, 0,5% de NP40, 3,5 μg/ml de leupeptina, 3,5 μg/ml de aprotinina. O Iisa- to foi encubado com 5 ml de uma solução 50% de glóbulos Ni-agarosa (Qia- gen) em PBS por 2 horas girando em 4°C para capturar a proteína His-tagged. O Iisato contendo proteína limite His-tagged para glóbulos Ni-agarosa foi carregado em uma coluna de 10 ml. Glóbulos Ni-agarosa fo- ram deixadas embalar e os suspensos sob a superfície foram deixados es- coar. A coluna embalada foi então lavada com 60 ml de tampão de água (o mesmo do tampão lisis). 5 ml de tampão de precipitação (Tris-HCl a 50 mM pH 8, NaCl a 150 mM, imidazol a 150 mM, PMSF a 1,0 mM) foi adicionado à coluna e 10 frações (0,5 ml de volume cada) foram coletadas. Alíquotas pe- quenas de cada fração foram separadas por PÁGINA SDS de 4-15% e ou transferidas para nitro celulose paro ensaios imunoblot ou processadas para mancha Coomassie (Bio-Safe Safe Coomassie1 Bio-Rad). A banda de prote- ína principal no gel de mancha Coomassie tem o tamanho aproximado para His6-MetKin (52 kD), correspondente à proteína His-tagged detectada por imunoblot. As concentrações de proteína como estimadas do gel de mancha Coomassie foi de aproximadamente 2 mg/ml.

O estoque viral recombinante foi transferido para o laboratório de contrato, Pan Vera (Madison, Wl) para purificação e expressão de larga es- cala de His6-MetKin em quantidades suficientes para seleção de Alto Ren- dimento. Uma produção em escala de 60 L e esquema de purificação de 4 etapas rendeu 98,4 mg de proteína que é mais do que 95% pura.

EXEMPLO B

Ensaio de autofosforilação Delfia da cinase no c-Met

Um ensaio de fluorescência determinada de tempo DELFIA foi desenvolvido para filtração de compostos que decresce a autofosforilação, dessa forma a atividade cinase do c-Met. O ensaio DELFIA não é radioativo.

A autofosforilação do c-Met é medida através de um anticorpo antifosfotiro- sina emparelhado a um marcador Europium.

A maior vantagem desse formato é que o mesmo permite o de- senvolvimento de um ensaio de autofosforilação usando placas quelato de Ni as quais atam o marcador hexa-his na Met cinase recombinante. O ensaio de autofosforilação permite a alguém usar um substrato conhecido, a própria Met cinase, para a autofosforilação. O ensaio de autofosforilação Met DEL- FIA é muito sensível com uma sinalização para proporção de ruído em ex- cesso de 50:1.

O procedimento de ensaio para filtração é como se segue. O domínio citoplásmico marcado His6 purificado do c-Met foi diluído para uma concentração de 500 ng/ml em tampão de diluição de enzima (Tris-HCl a 50 mM, pH8,0, 0,1% BSA) e dispensado para placas de análise a um volume de 50 μL por poço. Placas de 96 cavidades revestidas de Black opaque His- Grab Nickel (Pierce, Rockford, II) foram selecionadas pra uso. Após, 2,5 μL do composto em 40% de DMSO foi adicionado aos poços de testes, 2,5 μl-de 40% de DMSO somente foi adicionado aos poços de controle negativo.

A reação de autofosforilação foi iniciada sob adição de 50μL de tampão de reação. Tris-HCI a 50 mM, pH 8,0, MgCl2 a 10 mM, Na3VO4 a 0,1 mM, DTT a 1mM, ATP a 1μΜ. As placas foram encubadas à temperatura ambiente por 1 hora seguida de 2 lavagens com μl/ροςο de PBS. Anticorpo antifosfotirosina conjugado Europium, Eu-PY20 do Perkin Elmer foi diluído para 50 ng/ml em tampão Delfia AB (Perkin Elmer, Boston, MA), adicionado a placas de ensaio de 95 poços em um volume de 100 μl/cavidades, e encubado à temperatura ambiente por 2 horas. Placas de ensaio foram então lavadas 4 vezes cada com 200 μl/poço do tampão de lavagem Delfia (Perkin Elmer). Após a Iava- gem final de 150 μl da solução de intensificação de Delfia (Perkin Elmer) foi adicionado a cada poço da placa de ensaio e encubada à temperatura ambi- ente por 1 hora. As placas foram lidas em um instrumento Analista LJL (Mo- lecular Devices; Sunnyvale, CA) com ambientações em filtro de excitação 360, emissão 620 e dicróico 410. Valores ICsoforam calculados usando o software Graphpad Prism (Graphpad Software; San Diego, CA).

EXEMPLO C

Um ensaio ELISA baseado em célula para fosforilação de c-Met

Um ensaio ELISA baseado em célula foi desenvolvido para ava- liar a capacidade dos compostos para inibir fosforilação de c-Met estimulada HGF em células.

Células S114 foram semeadas para uma placa de 96 poços tra- tadas para cultura de tecido a uma concentração de 5 X 10^4 por poço. Após uma incubação de 16-20 horas, o meio de cultura foi removido e substituído com meio livre de soro suplementado com 0,5% de BSA. O composto de teste foi então adicionado e encubado com as células por 60 minutos, segui- do pelo adição de 1μl de HGF a 2,5 μg/μl por 15 minutos. As células foram então lisadas com a adição de 25 μl de tampão resfriado com gelo 3x RIPA (Tris HCI a 50 mM, pH 7,5, 1% de Triton, 1% IGEPAL, 0,25% de ácido deso- xicólico, NaCl a 150 mM, ortovanidato de sódio a 1mM, fluoreto de sódio a 1 mM e 1 comprimido de inibidor de coquetel de protease (Boheringer Man- nheim, cat. N0 1697498). Os lisatos de célula foram então transferidos para placas Maxisorp NUNC revestidas com anticorpo de receptor de anti-c-Met AF276 (Sistemas R&D). Os lisatos foram encubados com as placas de anti- corpo revestido por 1 hora em temperatura ambiente. As placas foram lava- das com tampão de lavagem Delfia (Perkin Elmer, Boston, MA) e 100 μl anticorpo antifosfotirosino conjugado PT 66 m Europium (Perkin Elmer, Bos- ton, MA). Seguindo uma outra hora de incubação à temperatura ambiente, as placas foram lavadas três vezes com tampão de lavagem Delfia (Perkin Elmer). Após a lavagem final, 150 ml de solução par melhoria Delfia (Perkin Elmer) foi adicionada e permitida para incubação por 60 minutos. As placas foram lidas em um instrumento analista LJL (Dispositivos Moleculares; Sunnyvale, CA) com ambientações de filtro de excitação 360, emissão 620 e dicroico 410. Valores IC50 foram calculados usando o software Graphpad Prism (Graphpad Software; San Diego, CA).

Exemplo D

Ensaio de Dispersão Celular HepG2

Introdução

Fator de Crescimento Humano (HGF) e seu receptor de (c-Met) são envolvidos em mobilidade celular. De fato HGF foi também identificado como Fator de Dispersão (SF)1 baseado em seu efeito de mobilidade pode- roso em certos tipos de células. A mobilidade celular é crítica para processos patológicos de doença de oncologia, o mais importante, o estabelecimento de lesões metastáticas distantes do tumor principal e formação de novas veias de sangue (angiogênese). Uma opção terapêutica é que esse movi- mento de tipos de células pode ser embotado ou eliminado pelo uso de inibi- dores cinase de c-Met. (Veja: Jiang, W.C, Martin, T.A., Parr, C., Davies, G., Matsumoto1 K. e Nakamura1 T. Critical Reviews in Oncology/Hematoloy 53 (2005) 35-69 e referências citadas nesta). Deve-se também ser notado que a mobilidade celular, especialmente com respeito à angiogênese, é importante em outros estados da doença.

Métodos

A dispersão celular foi medida com um sistema de Sensor Ele- trônico de Célula de Tempo Real (TA-CES), de ACEA Biosciences Inc. (San Diego, CA). O sistema TA-CES usa placas de microtitulação TA-ACE espe- cializada (cat:RCD96, ACEA Biosciences Inc). para status celular determina- dor de quantidade não evasivamente em tempo real. A interação de células com a superfície das placas, as quais são integradas com disposições de sensor microelétrico, conduz à geração de uma resposta de impedância de eletrodo de célula. Um valor mais alto de impedância indica mais anexação de célula e, dessa forma, menos dispersão celular.

50 μl de Meio de Ensaio (MEM suplementar com 10% de FBS, L-glutamina a 2 mM, 1,5 g/L de bicarbonato de sódio, piruvato de sódio a 1 mM e aminoácidos não-essenciais a 0,1 mM) foi adicionado em placas TA- ACE de 96 cavidades e observadas por 30 minutos no TA-CES. 50 μl de células HepG2 (cat: HB-8065, ATCC) foram adicionados em cada poço (50μl @ 104 células/ml = 5000 células/poço). A placa foi lida em TA-CES e encu- bada por 20-24 horas. Após as 20-24 horas de incubação, 50 μΙ de Meio de Ensaio contendo concentrações diferentes de compostos de teste foi adicio- nada dentro de cada poço e incubada por 1 hora. Finalmente, 50 μΙ de Meio de Ensaio contendo 160 ng/ml de HGF foram adicionados dentro de cada poço (40ng/ml em 200μΙ). A placa foi encubada e lida no TA-CES por 20-24 horas, com um tempo de registro a cada 15 minutos. O controle positivo foi HGF sem compostos e o controle negativo foi não-HGF sem composto. To- das as determinações foram executadas em cavidades duplicadas e valores IC50 foram calculados usando software GraphPad Prism (GraphPad Softwa- re; San Diego1 CA). Exemplo E

Modelo Xenoenxerto de Tumor Glioblastoma U87MG

Introdução

A linhagem de célula glioblastoma U87MG (Piedmont Research Center LLC) expressa o receptor de c-Met e responde ao Fator de Cresci- mento Humano (HGF). Esse estudo investiga se o tratamento com um inibi- dor de c-Met é eficaz contra o modelo xenoenxerto de glioblastoma U87MG. Esse estudo utilizou um ensaio de inibição de crescimento de tumor (TGI) para teste por monoterapia de composto peros (p.o). em grupos de quinze camundongos pelados. Um grupo de controle foi tratado com veículo, 20% de Beta-Ciclodextrina de Hidroxipropila (HPBCD). Todos os tratamentos co- meçaram no Dia 1 (D1) em comportamento de camundongos estabelecidos subcutâneos (s.c). de tumores U87MG.

Métodos e Materiais

Camundongos

Camundongos pelados atímicos fêmeas (HarIan) foram envelhe- cidos 10-11 com uma escala BW de 18,1- 25,0 g no D1 do estudo. Os ani- mais foram alimentados com água ad Iibitum (osmose reversa, 1 ppm Cl) e NIH 31 Modified and Irradiated Lab Diet® consistindo em 18,0% de proteína bruta, 5,0% de gordura bruta e 5,0% de fibra bruta. Os camundongos foram abrigados em ALPHA-dri® bed-o-cobs® Laboratory Animal Bedding em mi- croisoladores estáticos em um ciclo leve de 12-horas a 21-22°C (70-72 0F) e 40-60% de umidade. Todos os animais foram abrigados em uma facilida- de de Medicina Animal Laboratória que é totalmente credenciada pela Ame- rican Association for Assessment and Accreditation of Laboratory Animal Care (AAALAC). Todos os procedimentos envolvendo animais foram condu- zidos em consentimento com o NIH Guide for the Care and Use of Labora- tory Animais e todos os protocolos foram aprovados por um Internai Animal Care e Use Committee (IACUC).

Implantação de Tumor

Xenoenxertos foram iniciadas a partir dos fragmentos de tumor glioblastoma humano U87MG mantido para transplante de série em camun- dongos pelados atímicos. Cada camundongo de teste recebeu um fragmento de tumor U87MG subcutâneo (1 mm3) implantado na costela direita e o crescimento de tumores foi monitorado na medida em que o tamanho médio aproximava-se de 200 mm3. Doze dias depois, no Dia 1 do estudo, os ani- mais foram classificados em 4 grupos (n = 12-15 camundongos/grupo) com volumes de tumor individual alcançando 172-352 mm3 e volumes de tumor de média de grupo de 216 mm3. O volume de tumor foi calculado usando a fórmula:

<formula>formula see original document page 160</formula>

onde w = espessura e I = comprimento em mm do tumor. O peso do tumor pode ser estimado com a hipótese de que 1 mg é equivalente a 1 mm3 do volume do tumor.

Tratamento de Fármacos

Soluções de dosagem de compostos da presente invenção fo- ram preparadas frescas semanalmente em um veículo consistindo em 20% de Beta-Ciclodextrina de Hidroxipropila (HPBCD) em água. Em todos os grupos, o volume da dose de 0,2 mL/20-g de camundongo foi pesado para o peso do corpo de cada animal. As doses foram dadas para permitirem o sal de HCI da forma do composto.

Ensaio de Inibição de Crescimento de Tumor(TGI)

TGI foi calculado da diferença entre os volumes de tumor medi- ano do veículo tratado e camundongos tratados por fármacos, foi expresso como uma porcentagem do volume de tumor mediano do grupo de controle de veículo tratado, pela seguinte relação:

<formula>formula see original document page 160</formula>

V. Volume de tumor medianocontroie J

O MTV (n) é definido como o volume de tumor mediano (MTV) pelo número de animais, n, remanescendo no estudo naquele dia.

Toxidade

Os animais foram pesados diariamente pelos cinco primeiros dias do estudo e depois duas vezes semanais. Os camundongos foram e- xaminados freqüentemente por sinais visíveis de qualquer adverso, efeitos de margem de fármacos relatadas e sinais clínicos de toxidade foram regis- trados quando observados. A toxidade aceitável é definida como um grupo significando perda de peso corporal (BW) de menos que 20% durante o es- tudo, e não mais que uma morte relatada de tratamento (TR) dentre dez a- nimais. Uma morte é classificada como TR se a mesma for atribuída aos efeitos colaterais do tratamento como evidenciado por sinais clínicos e/ou necropsia, ou devido a causas desconhecidas durante o período de dosa- gem ou dentro de 10 dias a partir da última dose. Uma morte é classificada como não relacionada ao tratamento (NTR) se não houver evidência que a morte foi relacionada aos efeitos colaterais do fármaco. Uma morte é classi- ficada como tratamento não relacionado desconhecido (NTRu) se a causa da morte for desconhecida. Ensaios Gráficas e Estatísticas

O teste U Mann-Whitney, paro ensaio de médias, foi usado para determinar a significação estatística da diferença entre os MTVs. O prisma 3,03 (GraphPad) para Windows foi usado para as apresentações gráficas e ensaios estatísticas. O crescimento do tumor foi organizado como volume de tumor mediano, versus tempo, para cada grupo no estudo. Adicionalmente, volume de tumor final e inibição de crescimento de tumor de porcentagem final (%TGI) foram também representados no gráfico ou em um gráfico de barra separado (* = ρ < 0,05, ** = ρ < 0,01, *** = ρ < 0,001). Os resultados do estudo do crescimento U87MG são mostrados na Figura 1, Figura 2 e Figura 3.

Figura 1: O exemplo 1 foi administrado oralmente (p.o). em do- ses de 30 e 50 mg/kg duas vezes ao dia (b.i.d), por 21 dias consecutivos. Ambas as doses produziram significância estatística, inibição dependente de dose de crescimento de tumores U87MG crescidos subcutaneamente em camundongos pelados atímicos. No último dia do tratamento (Dia 21), as doses de 30 e 50 mg/kg decresceram a média de volume de tumor de 66% (p< 0,001) e 97% (p< 0,001), respectivamente, comparadas ao volume de tumor mediano do grupo de veículo tratado. A regressão do tumor foi obser- vada na dose 50 mg/kg.

Figura 2: No exemplo 61 foi administrado p.o. em doses de 25, 50 e 75 mg/kg. Todas as doses produziram signiíicância estatística, inibição de crescimento de tumor de tumores U87MG crescidos subcutaneamente em camundongos pelados atímicos (p< 0,01). A regressão de tumor foi tam- bém observada com todas as três doses. A dose 25 mg/kg foi administrada uma vez ao dia (q.d). no dia 1 e b.i.d. para dia 12. A dose 50 mg/kg foi admi- nistrada b.i.d. por 7 dias, com uma pausa de 24 horas, depois q.d. para dia 12. Como a dose 50 mg/kg, a dose 75 mg/kg foi administrada b.i.d. por 7 dias, com pausa de 24 horas, depois q.d. para dia 12.

Figura 3: O exemplo 61 foi administrado p.o. em doses de 25, 50 e 75 mg/kg. No último dia de tratamento (Dia 12), o volume de tumor media- no foi decrescido por 94% (p < 0,01), 96% (p < 0,01) e 97% (p < 0,01) em doses de 25, 50 e 75 mg/kg, respectivamente. A dose 25 mg/kg foi adminis- trada uma vez ao dia (q.d). no dia 1 e b.i.d. para dia 12. A dose 50 mg/kg foi administrada b.i.d. por 7 dias, com uma pausa de 24 horas, depois q.d. para dia 12. Como a dose 50 mg/kg, a dose 75 mg/kg foi administrada b.i.d. por 7 dias, com uma pausa de 24-hr, depois q.d. para dia 12.

Exemplo F

Modelo de Tumor S114

Métodos

Camundongos

Camundongos pelados atímicos fêmeas (CD-1, nu/nu, 9-10 se- manas de idade) foram obtidos dos Laboratórios Charles River (Wilmington, MA) e foram mantidos de acordo com padrões NIH. Todos os camundongos foram abrigados em grupos (5 camundongos/gaiola) sob condições de am- biente limpo em gaiolas microisoladoras esterilizadas em um ciclo de luz/escuro de 12 horas em um ambiente mantido a 21-22°C e 40-50% de umidade. Os camundongos foram alimentados com dieta de roedores pa- drão irradiado e água ad libitum. Tosos os animais foram abrigados em uma facilidade de Laboratório de Medicina Animal que é totalmente credenciada pela American Association for Assessment e Accreditation of Laboratory A- nimal Care (AAALAC). Todos os procedimentos envolvendo animais foram conduzidos em consentimento com o Guide for the Care and Use of Labora- tory Animais NIH e todos os protocolos foram aprovados por um Internai A- nimal Care and Use Committee (IACUC).

Tumores S114

O camundongo NIH 3T3 derivou linhagem de célula S114, a qual tem sido projetada para superexpressar ambos o Fator de Crescimento Hu- mano (HGF) e o receptor de c-Met humano, foi propagado em meio DMEM (Tecnologias de Vida, Bethesda, MD). Imediatamente antes da injeção, as células foram lavadas, contadas e suspensas novamente em PBS. Camun- dongos pelados atímicos fêmeas pesando não menos que 20- 21 gramas foram inoculados subcutaneamente na região inguinal esquerda da coxa com células 5 χ 106 em um volume de liberação de 0,1 ml_. Os tumores fo- ram permitidos crescerem por cinco dias.

Tratamento de Fármaco

Os camundongos foram dosados oralmente a 100 mg/kg com- posto em 20% de HPBCD ou com veículo (20% de HPBCD, grupo de contro- le). A dosagem foi continuada por 4 dias consecutivos. Os compostos da presente invenção foram preparados frescos diariamente como uma solução transparente em 20% de HPftCD e administrada como descrito acima. O peso corporal foi medido no final do estudo e uma perda de peso corporal >10% foi usada como uma indicação de falta de tolerabilidade de composto. Toxidade inaceitável foi definida como perda de peso corporal > 20% duran- te o estudo. Os camundongos foram examinados de perto diariamente em cada dose por for sinais clínicos visíveis de adverso, efeitos colaterais rela- tados de fármaco. Nenhuma mudança significativa em peso corporal ou comportamental foi notada no estudo.

Ensaios

No dia do término do estudo, um volume final de tumor e um pe- so corporal final foram obtidos em cada animal. Os camundongos foram submetidos à eutanásia usando 100% de CO2 e tumores foram imediata- mente extirpados intactos e pesados, com peso molhado de tumor final (gramas) servindo como um ponto final de eficácia primordial. Um prisma 3,03 (GraphPad) para Windows foi usado para as ensaios estatísticas e a- presentações gráficas. Os resultados do estudo do tumor S114 são mostra- dos na Figura 4.

Figura 4: O exemplo 61 foi administrado p.o. em uma dose de 100 mg/kg q.d., por quatro dias consecutivos. Os tumores S114 regressaram em todos os cinco camundongos tratados com exemplo 61. Além disso, tu- mores em três dos cinco camundongos regressaram para tumores não- palpáveis, não-detectáveis no final do estudo.

Dados Biológicos

A atividade dos compostos representativos da presente invenção é apresentada no gráfico abaixo. Todas as atividades estão em μΜ e os da- dos são aceitos como válidos se 95% dos intervalos de confluência calcula- dos pelo prisma Grafpad estiverem dentro de 2 vezes a da IC5o-

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MÉTODOS DE TRATAMENTO/PREVENÇÃO

Em um outro aspecto desta invenção, os compostos da invenção podem ser usados para inibir a atividade ou a expressão da tirosina cinase, incluindo a atividade de c-Met, reduzir a atividade ou a expressão da cinase, incluindo a atividade de c-Met, e modular a expressão de c-Met em uma cé- lula ou um indivíduo, ou tratar os distúrbios relacionados à atividade ou a expressão de c-Met cinase em um indivíduo. Acredita-se que a inibição da atividade de c-Met module indiretamente a expressão de c-Met.

Em uma modalidade deste aspecto, a presente invenção provê um método para a redução ou inibição da atividade da cinase de c-Met, e modula a expressão de c-Met em uma célula compreendendo a etapa de colocar em contato a célula com um composto de fórmula I. A presente in- venção também provê um método para a redução ou inibição da atividade de cinase de c-Met, e modula a expressão de c-Met em um indivíduo com- preendendo a etapa de administrar um composto de fórmula I ao indivíduo. A presente invenção ainda provê um método de inibição da proliferação ce- lular em uma célula compreendendo a etapa de colocar em contato a célula com um composto de fórmula I.

A atividade de cinase ou expressão de c-Met em uma célula ou um indivíduo pode ser determinada por procedimentos bem-conhecidos na técnica, tais como o ensaio de cinase de c-Met descrito aqui a seguir. A ini- bição da atividade de cinase de c-Met em células pode ser também medida pela determinação do nível de fosforilação de c-Met usando um formato de ensaio de ELISA tal como aquele descrito aqui ou por Western Blotting.

O termo "indivíduo" como usado aqui a seguir se refere a um animal, preferivelmente um mamífero, mais preferivelmente um ser humano, que tem sido o objeto do tratamento, observação ou experimento.

O termo "colocar em contato" como usado aqui a seguir se refe- re à adição do composto às células de forma que o composto seja absorvido pela célula.

Em outras modalidades dete aspecto, a presente invenção provê ambos os métodos profiláticos e terapêuticos para o tratamento de um indi- víduo em risco de (ou suscetível a) desenvolver um distúrbio proliferativo de célula ou um distúrbio relacionado a c-Met. Tais distúrbios incluem as condi- ções preexistentes relacionadas à expressão de c-Met (ou sobre a expres- são) e/ou a mutação de c-Met.

Em um exemplo, a invenção provê os métodos para a prevenção em um indivíduo de um distúrbio proliferativo de célula ou um distúrbio rela- cionado a c-Met, que compreende a administração ao indivíduo de uma quantidade profilaticamente eficaz de uma composição farmacêutica que compreende o composto de Fórmula I e um veículo farmaceuticamente acei- tável. A administração do dito agente profilático pode ocorrer antes da ma- nisfestação dos sintomas característicos do distúrbio proliferativo de célula ou distúrbio relacionado a c-Met, tal que uma doença ou distúrbio seja evita- do ou, alternativamente, retardado em seu progresso.

Em um outro exemplo, a invenção pertence aos métodos de tra- tamento em um indivíduo de um distúrbio proliferativo de célula ou um dis- túrbio relacionado a c-Met que compreende a administração ao indivíduo de uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição farmacêutica que compreende o composto de Fórmula I e um veículo farmaceuticamente aceitável. A administração do dito agente terapêutico pode ocorrer concor- rentemente com a manifestação dos sintomas característicos do distúrbio, tal que o dito agente terapêutico sirva como uma terapia para compensar o dis- túrbio proliferativo de célula ou os distúrbios relacionados a c-Met.

Em um outro exemplo, a invenção pertence aos métodos de modulação em um indivíduo de um distúrbio proliferativo de célula ou um distúrbio relacionado a c-Met, tal que a modulação do nível de expressão de c-Met ou da atividade de c-Met possa atuar para melhorar o distúrbio prolife- rativo de célula ou de um distúrbio relacionado a c-Met, que compreende a administração ao indivíduo de uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição farmacêutica que compreende o composto de Fórmula I e um veículo farmaceuticamente aceitável.

O termo "quantidade profilaticamente eficaz" se refere a uma quantidade de um composto ativo ou agente farmacêutico que inibe ou re- tarda em um indivíduo o início de um distúrbio como sendo investigado por um pesquisador, veterinário, médico clínico ou outro clínico.

O termo "quantidade terapeuticamente eficaz" como usado aqui a seguir, se refere a uma quantidade de composto ativo ou agente farmacêu- tico que elicita a resposta biológica ou medicinal em um indivíduo que está sendo investigado por um pesquisador, veterinário, médico clínico ou outro clínico, que inclui o alívio dos sintomas da doença ou do distúrbio sendo tratado.

Os métodos são conhecidos na técnica para a determinação de doses terapêutica e profilaticamente eficazes para a presente composição farmacêutica.

Como usado aqui a seguir, o termo "composição" pretende a - branger um produto que compreende os ingredientes especificados nas quantidades especificadas, assim como qualquer produto que resulte, direta ou indiretamente, das combinações dos ingredientes especificados nas quantidades especificadas.

Como usado aqui a seguir, os termos "distúrbios relacionados a c-Met", ou "distúrbios relacionados ao receptor de c-Met tirosina cinase" de- vem incluir as doenças associadas com ou que implicam na atividade de c-Met, por exemplo, a superatividade de c-Met, e condições que acompa- nham estas doenças. O termo "superatividade de c-Met" se refere a 1) a ex- pressão de c-Met em células que normalmente não expressam c-Met; 2) a atividade de c-Met por células que normalmente não possuem c-Met ativo; 3) a expressão aumentada de c-Met levando à proliferação de célula indeseja- da; ou 4) a mutações que levam à ativação constitutiva de c-Met. Os exem- plos de "distúrbios relacionados a c-Met" incluem os distúrbios que resultam de sobre-estimulação de c-Met devido à quantidade anormalmente alta de c-Met ou de mutações em c-Met, ou distúrbios que resultam da quantidade anormalmente alta de atividade de c-Met devido à quantidade anormalmente alta de c-Met ou mutações em c-Met.

Sabe-se que a superatividade de c-Met tem sido implicada na patogênese de várias doenças, tais como os distúrbios proliferativos de célu- la, os distúrbios neoplásicos e os cânceres.

O termo "distúrbios proliferativos de célula " se refere à prolifera- ção indesejada de célula de um ou mais subconjuntos de células em um or- ganismo multicelular resultando em dano (isto é, desconforto ou expectativa de vida diminuída) aos organismos multicelulares. Os distúrbios proliferativos de célula podem ocorrer em diferentes tipos de animais e seres humanos.

Os distúrbios proliferativos de célula incluem os distúrbios neoplásicos (co- mo usado aqui a seguir, um "distúrbio neoplásico" se refere a um tumor que resulta de um crescimento celular descontrolado ou anormal) e outros dis- túrbios proliferativos de célula.

O exemplos de distúrbios proliferativos de célula relacionados a c-Met, incluem os tumores e os cânceres - por exemplo, carcinomas renais papilares humanos esporádicos, câncer de mama, câncer colorretal, carci- noma gástrico, glioma, câncer ovariano, carcinoma hepatocelular, carcino- mas de célula escamosa de pescoço e cabeça, carcinoma testicular, carci- noma de célula basal, carcinoma de fígado, sarcoma, mesotelioma pleural maligno, melanoma, mieloma múltiplo, osteossarcoma, câncer pancreático, câncer da próstata, sarcoma sinovial, carcinoma da tireoide, câncer de pul- mão de célula não-pequena (NSCLC) e câncer de pulmão de célula peque- na, carcinoma de célula transicional de bexiga urinária, carcinoma testicular, carcinoma de célula basal, carcinoma de fígado - incluindo as leucemias, os linfomas, e os mielomas - por exemplo, leucémia linfocítica aguda (ALL), leucemia mieloide aguda (AML), leucemia promielocítica aguda (APL)1 leu- cemia linfocítica crônica (CLL), leucemia mieloide crônica (CML), leucemia neutrofílica crônica (CNL), leucemia não-diferenciada aguda (AUL), Iinfoma de célula grande anaplásica (ALCL), leucemia prolinfocítica (PML), leucemia mielomonocítica juvenil (JMML), ALL de célula T adulta, AML com mielodis- plasia trilinear (AMLn-MDS), leucemia de linhagem mista (MLL), síndromes mielodisplásicas (MDSs)1 distúrbios mieloproliferativos (MPD)1 mieloma múl- tiplo, (MM), sarcoma mieloide, Iinfoma de não-Hodgkin e doença de Hodgkin (também chamada de Iinfoma de Hodgkin) - e as doenças asssociadas com a formação de nova vasculatura, tais como a reumatoide, a artrite e a retinopatia.

Os outros distúrbios proliferativos de célula nos quais a superati- vidade de c-Met tem sido implicada na sua patogênese incluem os cânceres nos quais a atividade de c-Met contribui para o fenótipo metastási- co/invasivo, incluindo os cânceres nos quais c-Met não está super expresso ou de outra forma alterado.

Em uma outra modalidade deste aspecto, a invenção abrange uma terapia de combinação para o tratamento ou a inibição do início de um distúrbio proliferativo de célula ou um um distúrbio relacionado a c-Met em um indivíduo. A terapia de combinação compreende a administração ao indi- víduo de uma quantidade terapêutica ou profilaticamente eficaz de um com- posto de Fórmula I, e uma ou mais outras terapias de proliferação de anticé- lula incluindo a quimioterapia, a terapia de radiação, a terapia de gene e a imunoterapia.

Em uma modalidade da presente invenção, o composto da pre- sente invenção pode ser administrado em combinação com quimioterapia. Como usado aqui a seguir, a quimioterapia se refere a uma terapia que en- volve um agente terapêutico. Uma variedade de agentes quimioterapêuticos pode ser usada nos métodos de tratamento combinado descritos aqui a se- guir. Os agentes quimioterapêuticos contemplados como exemplares inclu- em, mas não estão limitados a: compostos de platina (por exemplo, cisplati- na, carboplatina, oxaliplatina); compostos de taxano (por exemplo, paclitax- cel, docetaxol); compostos de campototecina (irinotecan, topotecan); vinca alcalóides (por exemplo, vincristina, vinblastina, vinorelbina); derivados de nucleosídeo antitumor (por exemplo, 5-fluorouracila, leucovorin, gemcitabina, capecitabina); agentes alquilantes (por exemplo, ciclofosfamida, carmustina, lomustina, tiotepa); epipodofillotoxinas/podofilotoxinas (por exemplo, etopo- sídeo, teniposídeo); inibidores de aromatase (por exemplo, anastrozol, Ietro- zol, exemestano); compostos de antiestrogênio (por exemplo, tamoxifen, fulvestrant), antifolatos (por exemplo, dissódio premetrexado); agentes de hipometilação (por exemplo, azacitidina); agentes biológicos (por exemplo, gemtuzamab, cetuximab, rituximab, pertuzumab, trastuzumab, bevacizumab, erlotinib); antibióticos/antraciclinas (por exemplo, idarrubicina, actinomicina D, bleomicina, daunorrubicina, doxorrubicina, mitomicina C, dactinomicina, carminomicina, daunomicina); antimetabolitos (por exemplo, clofarabina, a - minopterin, citosina arabinosídeo, metotrexato); agentes de ligação de tubu- lina (por exemplo, combretastatin, colchicina, nocodazol); inibidores de to- poisomerase (por exemplo, camptotecina); agentes de diferenciação (por exemplo, retinóides, vitamina D e ácido retinoico); agentes de bloqueio do metabolismo do ácido retinoico (RAMBA) (por exemplo, acutano); inibidores de cinase (por exemplo, flavoperidol, masilato de imatinib, gefitinib); inibido- res de farnesiltransferase (por exemplo, tipifarnib); inibidores de histona de- sacetilase; inibidores do caminho de ubiquitina-proteassoma (por exemplo, bortezomib, Yondelis).

Outros agentes incluem verapamila, um antagonista de calico que se verificou ser útil em combinação com agentes antineoplásicos para estabelecer a quimiossensibilidade em células de tumor resistentes aos a- gentes quimioterapêuticos aceitos a para potencializar a eficácia de tais compostos nas malignidades sensíveis ao fármaco. Vide Simpson WG, The calcium channel blocker verapamil and câncer chemotherapy. Cell Calcium. 1985 Dec; 6(6):449-67. Adicionalmente, ainda para emergir os agentes qui- mioterapêuticos são contemplados como sendo úteis em combinação com o composto da presente invenção.

Em uma outra modalidade da presente invenção, o composto da presente invenção pode ser administrado em combinação com a terapia de radiação. Como usado aqui a seguir, "terapia de radiação" se refere à tera- pia que compreende a exposição do indivíduo em necessidade da mesma à radiação. Tal terapia é conhecida por aquelas pessoas versadas na técnica.

O esquema apropriado da terapia de radição será similar àquele já empre- gado nas terapias clínicas em que a terapia de radiação é usada sozinha ou em combinação com outros agentes quimioterapêuticos.

Em uma outra modalidade da presente invenção, o composto da presente invenção pode ser administrado em combinação com uma terapia de gene. Como usado aqui a seguir, "terapia de gene" se refere à terapia direcionada aos genes particulares envolvidos no desenvolvimento do tumor. As estratégias de terapia de gene posíveis incluem a restauração de gsnes inibidores de câncer defeituosos, transdução de célula ou trnsfecção com DNA antissenso que corresponde aos genes que codificam os fatores de crescimento e seus receptores, as estratégias com base em RNA1 tais como ribozimas, atratores de RNA, RNAs mensageiros antissenso e moléculas de RNA (siRNA) pequenas interferentes e os assim chamados "genes suicidas".

Em outras modalidades da invenção, o composto da presente invenção pode ser administrado em combinação com uma imunoterapia. Como usado aqui a seguir, "imunoterapia" se refere à terapia direcioanda à proteína particular envolvida no desenvolvimento do tumor por meio de anti- corpos específicos a tal proteína. Por exemplo, os anticorpos monoclonais contra o fator de crescimento endotelial vascular têm sido usados no trata- mento de cânceres.

Onde um segundo produto farmacêutico for usado em adição a um composto da presente invenção, os dois produtos farmacêuticos podem ser administrados simultaneamente (por exemplo, em composições separa- das ou unitárias) seqüencialmente em ordem, em aproximadamente o mes- mo tempo, ou em planejamento de dosagemns separado. No último caso, os dois components serão administrados dentro de um período e em uma quan- tidade e maneira que seja suficiente para garantir que um efeito vantajoso ou sinergístico seja alcançado. Será apreciado que o método preferido e a or- dem de administração e as quantidades e os regimes de dosagem respecti- vos para cada componente da combinação dependerão do agente quimiote- rapêutico particular, que está sendo administrado em conjunto com o com- posto da presente invenção, sua via de administração, o tumor particular que está sendo tatado e o hospedeiro particular que está sendo tratado.

Como será entendido por aquelas pessoas versadas na técnica, as doses apropriadas de agentes quimioterapêuticos serão geralmente simi- lares a ou menores do que aquelas já empregadas em terapias clínicas em que os agentes quimioterapêuticos são administrados sozinhos ou em com- binação com outros agentes quimioterapêuticos.

O método ótimo e a ordem de administração e as quantidades de dosagem e o regime podem ser prontamente determinados por aquelas pessoas versadas na técnica usando métodos convencionais, e tendo em vista as informações determinadas aqui a seguir.

Por meio de exemplo apenas, os compostos de platina são van- tajosamente administrados em uma dosagem de 1 a 500 mg por metro qua- drado (mg/m2) de área de superfície do corpo, por exemplo, 50 a 400 mg/m2, particularmente para a cisplatina em uma dosagem de cerca de 75 mg/m2 e para a carboplatina em cerca de 300mg/m2 por curso de tratamento. A cis- platina não é absorvida oralmente e deve, portanto, ser distribuída por meio de injeção intravenosa, subcutânea, intratumoral ou intraperitoneal.

Por meio de exemplo apenas, os compostos de taxano são van- tajosamente administrados em uma dosagem de 50 a 400 mg por metro quadrado (mg/m2) de área de superfície do corpo, por exemplo, 75 a 250 mg/m2, particularmente para o paclitaxel em uma dosagem de cerca de 175 a 250 mg/m2 e para o docetaxel em cerca de 75 a 150 mg/m2 por curso de tratamento.

Por meio de exemplo apenas, os compostos de camptotecina são vantajosamente administrados em uma dosagem de 0,1 a 400 mg por metro quadrado (mg/m2) de área de superfície do corpo, por exemplo, 1 a 300 mg/m2, particularmente para o irinotecan em uma dosagem de cerca de 100 a 350 mg/m2 e para o topotecan em cerca de 1 a 2 mg/m2 por curso de tratamento.

Por meio de exemplo apenas, os vinca alcalóides podem ser vantajosamente administrados em uma dosagem de 2 a 30 mg por metro quadrado (mg/m2) de área de superfície do corpo, particularmente para a vinblastina em uma dosagem de cerca de 3 a 12 mg/m2, para a vincristina em uma dosagem de cerca de 1 a 2 mg/m2, e para a vinorelbina em uma dosagem de cerca de 10 a 30 mg/m2 por curso de tratamento.

Por meio de exemplo apenas, os derivados de nucleosídeos an- titumor podem ser vantajosamente administrados em uma dosagem de 200 a 2500 mg por metro quadrado (mg/m2) de área de superfície do corpo, por exemplo, 700 a 1500 mg/m2. 5-fluorouracila (5-FU) é comumente usada por meio de administração intravenosa com doses que variam a partir de 200 a 500 mg/m2 (preferivelmente a partir de 3 a 15 mg/kg/dia). Gemcitabina é van- tajosamente administrada em uma dosagem de cerca de 800 a 1200 mg/m2 e a capecitabina é vantajosamente administrada em cerca de 1000 a 2500 mg/m2 por curso de tratamento.

Por meio de exemplo apenas, os agentes de alquilação podem ser vantajosamente administrados em uma dosagem de 100 a 500 mg por metro quadrado (mg/m2) de área de superfície do corpo, por exemplo, 120 a 200 mg/m2, particularmente para ciclofosfamida em uma dosagem de cerca de 100 a 500 mg/m2, para a cloranbucila em uma dosagem de cerca de 0,1 a 0,2 mg/kg de peso do corpo, para a carmustina em uma dosagem de cerca de 150 a 200 mg/m2, e para Iomustina em uma dosagem de cerca de 100 a 150 mg/m2 por curso de tratamento.

Por meio de exemplo apenas, os derivados de podofilotoxina podem ser vantajosamente administrados em uma dosagem de 30 a 300 mg por metro quadrado (mg/m2) de área de superfície do corpo, por exemplo, 50 a 250 mg/m2, particularmente para o etoposídeo em uma dosagem de cerca de 35 a 100 mg/m2 e para teniposide em cerca de 50 a 250 mg/m2 por curso de tratamento.

Por meio de exemplo apenas, derivados de antraciclina podem ser vantajosamente administrados em uma dosagem de 10 a 75 mg por me- tro quadrado (mg/m2) de área de superfície do corpo, por exemplo, 15 a 60 mg/m2, particularmente para a doxorrubicina em uma dosagem de cerca de 40 a 75 mg/m2, para a daunorrubicina em uma dosagem de cerca de 25 a 45 mg/m2, e para a idarrubicina em uma dosagem de cerca de 10 a 15 mg/m2 por curso de tratamento.

Por meio de exemplo apenas os compostos de antiestrogênio podem ser vantajosamente administrados em uma dosagem de cerca de 1 a 100 mg diariamente dependendo do agente particular e da condição que está sendo tratada. Tamoxifen é vantajosamente administrado oralmente em uma dosagem de 5 a 50 mg, preferivelmente 10 a 20 mg duas vezes ao dia, continuando a terapia por tempo suficiente para alcançar e manter um efeito terapêutico. Toremifeno é vantajosamente administrado oralmente em uma dosagem de cerca de 60 mg uma vez ao dia, continuando a terapia por tem- po suficiente para alcançar e manter um efeito terapêutico. Anastrozol é van- tajosamente administrado oralmente em uma dosagem de cerca de 1 mg uma vez ao dia. Droloxifeno é vantajosamente administrado oralmente em uma dosagem de cerca de 20-100 mg uma vez ao dia. Raloxifeno é vanta- josamente administrado oralmente em uma dosagem de cerca de 60mg uma vez ao dia. Exemestano é vantajosamente administrado oralmente em uma dosagem de cerca de 25 mg uma vez ao dia.

Por meio de exemplo apenas, os agentes biológicos podem ser vantajosamente administrados em uma dosagem de cerca de 1 a 5 mg por metro quadrado (mg/m2) de área de superfície do corpo, ou como conhecido na técnica, se diferente. Por exemplo, trastuzumab é vantajosamente admi- nistrado em uma dosagem de 1 a 5 mg/m2 particularmente 2 a 4 mg/m2 por curso de tratamento.

As dosagens podem ser administradas, por exemplo, uma vez, duas vezes ou mais por curso de tratamento, as quais podem ser repetidas por exemplo, a cada 7, 14, 21 ou 28 dias.

Os compostos da presente invenção podem ser administrados a um indivíduo sistemicamente, por exemplo, intravenosa, oral, subcutanea, intramuscular, intradermal, ou parenteralmente. Os compostos da presente invenção podem ser administrados a um indivíduo localmente. Os exemplos não-limitantes dos sistemas de distribuição local incluem o uso de dispositi- vos médicos intraluminais que incluem cateteres de distribuição de fármaco intravascular, fios, stents e paveamento endoluminal.

Os compostos da presente invenção podem ainda ser adminis- trados a um indivíduo em combinação com um agente de direcionamento para alcançar a concentração local alta do composto no local-alvo. Além dis- so, os compostos da presente invenção podem ser formulados para a libera- ção rápida ou liberação lenta com o objetivo de manter os fármacos ou a- gentes em contato com os tecidos-alvo por um período que varia de horas a semanas.

A presente invenção também provê uma composição farmacêu- tica que compreende um composto de Fórmula I em associação com um veículo farmaceuticamente aceitável. A composição farmacêutica pode con- ter dentre cerca de 0,1 mg e 1000 mg, preferivelmente cerca de 100 a 500 mg, do composto, e pode ser constituído em qualquer forma adequada para o modo de administração selecionado.

As frases "farmaceuticamente aceitável" se referem às entidades moleculares e composições que não produzem uma reação adversa, alérgi- ca ou outra desfavorável quando administrada a um animal, ou um um ser humano, quando apropriado. Os usos veterinários são igualmente incluídos dentro da invenção e as formulações "farmaceuticamente aceitáveis" inclu- em as formulações para uso clínico e/ou veterinário.

Veículos incluem excipientes farmacêuticos inertes e necessá- rios, incluindo, mas não-limitado a, aglutinantes, agentes de suspensão, lu- brificantes, flavorizantes, adoçantes, conservantes, corantes, e revestimen- tos. As composições adequadas para a administração oral incluem as for- mas sólidas, tais como pílulas, comprimidos, pastilhas, cápsulas (cada um incluindo formulações de liberação imediata, liberação cronometrada e libe- ração controlada), grânulos, e pós, e formas líquidas, tais como soluções, xaropes, elixires, emulsões, e suspensões. As formas úteis para a adminis- tração parenteral incluem as soluções estéreis, as emulsões e as suspensões.

A composição farmacêutica da presente invenção também inclui uma composição farmacêutica para a liberação lenta de um composto da presente invenção. A composição inclui um veículo de liberação lenta (tipi- camente, um veículo polimérico) e um composto da presente invenção.

Os veículos biodegradáveis de liberação lenta são bem- conhecidos na técnica. Estes são materiais que podem formar partículas que capturam neles um composto ativo e degradam/dissolvem sob um ambiente adequado (por exemplo, aquoso, acídico, básico, etc), e pelo que degra- dam/dissolvem em fuidos corporais e liberam o composto ativo nele.

As partículas são preferivelmente nanopartículas (isto é, na faixa de cerca de 1 a 500 nm em diâmetro, e mais preferivelmente cerca de 50-200 nm em diâmetro, e mais preferivelmente cerca de 100 nm em diâmetro).

A presente invenção também provê os métodos para preparar as composições farmacêuticas desta invenção. O composto de Fórmula I, como o ingrediente ativo, está intimamente misturado com o veículo farmnacêutico de acordo com as técnicas de formação de compostos farmacêuticos con- vencionais, cujo veículo pode tomar uma ampla variedade de formas depen- dendo da forma de preparação desejada para a administração, por exemplo, oral ou parenteral tal como intramuscular. Na preparação das composições na forma de dosagem oral, qualquer um dos meios farmacêuticos usuais pode ser empregado. Assim, para as preparações orais líquidas, tais como por exemplo, as suspensões, os elixires, e as soluções, os veículos e aditi- vos adequados incluem água, glicóis, óleos, álcoois, agentes de flavoriza- ção, conservantes, agentes de coloração e os similares; para as prepara- ções orais sólidas tais como, por exemplo, pós, cápsulas, pastilhas, cápsulas de gel e comprimidos, veículos e aditivos adequados incluem amidos, açúca- res, diluentes, agentes de granulação, lubrificantes, aglutinantes, agentes de desintegração e os similares. Por causa da sua facilidade de administração, os comprimidos e as cápsulas representam a forma unitária de dosagem oral mais vantajosa, em cujo caso os veículos farmacêuticos sólidos são obvia- mente empregados. Para os parenterais, o veículo compreenderá geralmen- te água estéril, através de outros ingredientes, por exemplo, para os propósi- tos tais como o auxílio à solubilidade ou para a conservação, pode ser inclu- ído. As suspensões injetáveis podem também ser prepradas, cujo caso os veículos líquidos apropriados, os agentes de suspensão e os similares po- dem ser empregados. Na preparação para a liberação lenta, um veículo de liberação lenta, tipicamente um veículo polimérico, e um composto da pre- sente invenção são primeiro dissolvidos ou dispersos em um solvente orgâ- nico. A solução orgância obtida é a seguir adicionada em uma solução a- quosa para obter uma emulsão do tipo óleo-em-água. Preferivelmente, a solução aquosa inclui o agente ativo na superfície. Subseqüentemente, o solvente orgânico é evaporado a partir da emulsão do tipo óleo-em-água para obter uma suspensão coloidal de partículas que contêm o veículo de liberação lenta e o composto da presente invenção.

As composições farmacêuticas aqui a seguir conterão, por uni- dade de dosagem, por exemplo, comprimido, cápsula, pó, injeção, colher de sopa e os similares, uma quantidade do ingrediente ativo para distribuir uma dose eficaz como descrito acima. As composições farmacêuticas aqui a se- guir conterão, por unidade de dosagem única, por exemplo, comprimido, cápsula, pó, injeção, supositório, colher de sopa e os similares, a partir de cerca de 0,01 mg a 200 mg/kg de peso do corpo por dia. Preferivelmente, a faixa é de cerca de cerca de 0,03 a cerca de 100 mg/kg de peso do corpo por dia, mais preferivelmente, a partir de cerca de 0,05 a cerca de 10 mg/kg de peso do corpo por dia. Os compostos podem ser administrados em um regime de 1 a 5 vezes por dia. As dosagens, no entanto, podem ser variadas dependendo da exigência dos pacientes, da severidade da condição que está sendo tratada e o composto que está sendo empregado. O uso da ad- ministração diária ou dosagem pós-periódica pode ser empregado.

Preferivelmente, estas composições nas formas de dosagem unitária tais como comprimidos, pílulas, cápsulas, pós, grânulos, soluções parenterais estéreis ou suspensões, aerossol medido ou sprays líquidos, gotas, ampolas, dispositivos autoinjetores ou supositórios; para administra- ção parenteral oral, intranasal, sublingual ou retal, ou para a administração por inalação ou insuflação. Alternativamente, a composição pode ser apre- sentada de uma forma adequada para administração de uma só vez sema- nal ou mensalmente; por exemplo, um sal insolúvel dos compostos ativos, tais como o sal de decanoato, pode ser adaptado para prover uma prepara- ção de depósito para a injeção intramuscular. Para a preparação de compo- sições sólidas como comprimidos, o principal ingrediente ativo é misturado com um veículo farmacêutico, por exemplo os ingredientes convencionais para a formação de comprimidos, tais como amido de milho, lactose, saca- rose, sorbitol, talco, ácido esteárico, estearato de magnésio, fosfato dicálcico ou gomas, e outros diluentes farmacêuticos, por exemplo, água, de modo a formar uma composição sólida pré- formulação contendo uma mistura ho- mogênea de um composto da presente invenção, ou um sal farmaceutica- mente aceitável dos mesmos. Quando referindo-se a estas composições pré-formulação como homogêneas, significa que o ingrediente ativo é dis- perso uniformemente através da composição de modo que a composição possa ser prontamente subdividida em formas de dosagem igualmente efi- cazes, tais como comprimidos, pílulas e cápsulas. Esta composição sólida pré-formulação é subdividida a seguir em formas de dosagem unitária do tipo descrito acima contendo a partir de 0,1 a cerca de 500 mg de substância ativa da presente invenção. Os comprimidos ou pílulas da nova composição podem ser revestidos ou de outra forma transformados em compostos para prover uma forma de dosagem que ofereça as vantagens de ação prolonga- da. Por Exemplo, o comprimido ou pílula pode representar um componente de dosagem interior e um de dosagem exterior, sendo este último na forma de um envelope durante a antiga. Os dois componentes podem ser separa- dos por uma camada entérica que serve para resistir à desintegração no es- tômago e permite que o componente interno passe intacto para dentro do duodeno ou para ser retardao na liberação. Uma variedade de material pode ser usada para tais camadas entéricas ou revestimento, tais materiais, inclu- indo uma série de ácidos poliméricos com tais materiais como goma laca, acetil álcool e acetato de celulose.

As formas líquidas em que o composto de Fórmula I pode ser incorporado para a administração oralmente ou por injeção incluem, solu- ções aquosas, xaropes adequadamente aromatizados, suspensões aquosas ou oleosas, emulsões e sabores com óleos comestíveis, tais como óleo de algodão, óleo de gergelim, óleo de coco ou óleo de amendoim, bem como elixires e similares veículos farmacêuticos. Agentes de suspensão ou disper- são adequados para as suspensões aquosas, incluem gomas sintéticas e naturais como tragacanto, acácia, alginato, dextrano, carboximetilcelulose de sódio, metilcelulose, polivinil pirrolidona ou gelatina. As formas líquidas em agentes de dispersão ou suspensão adequadamente flavorizados podem também incluir gomas naturais e sintéticas, por exemplo, tragacanto, acácia, metil celulose e os similares. Para a administração parenteral, suspensões estéreis e soluções são desejadas. As preparações isotônicas as quais ge- ralmente contêm conservantes são empregadas quando a administração intravenosa é desejada.

Vantajosamenete, os compostos de Fórmula I podem ser admi- nistrados em uma única dose diariamente, ou as dosagens diáris totais po- dem ser administradas em doses divididas em duas, três ou quatro vezes diariamente. Além disso, os compostos para a presente invenção podem ser administrados por via intranasal em forma de uso tópico via intranasal veícu- los adequados, ou via transdérmica manchas da pele bem-conhecida por aquelas pessoas versadas na técnica. Para ser administrado em forma de um sistema de distribuição transdérmico, a administração da dosagem será, naturalmente, contínua ao invés de intermitente através do regime de dosagem.

Por exemplo, para a administração oral na forma de um compri- mido ou cápsula, o componente ativo do fármaco pode ser combinada com um veículo oral, não-tóxico farmaceuticamente aceitável inerte, tais como etanol, glicerol, água e os similares. Além disso, quando desejado ou neces- sário, aglomerantes adequados; lubrificantes, agentes e desintegração colo- rir agentes também podem ser incorporados na mistura. Aglutinantes ade- quados incluem sem limitação, amido, gelatina, açúcares naturais, como a glicose ou beta lactose, milho edulcorantes, gomas naturais e sintéticas, tais como acácia, ou oleato de sódio ou tragacanto, estearato de sódio, estearato de magnésio, benzoato de sódio, acetato de sódio, cloreto de sódio e os si- milares. Desintegradores incluem, sem limitação, amido, metil celulose, ágar, bentonita, goma xantana e os similares.

A dosagem diária de produtos da presente invenção pode ser variada ao longo de um vasto leque a partir de 1 a 5000 mg por adulto hu- mano por dia. Para a administração oral, preferivelmente as composições são fornecidas na forma de comprimidos contendo 0,01,0,05, 0,1, 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 10,0, 15,0, 25,0, 50,0, 100, 150, 200, 250 e 500 miligramas do in- grediente ativo para o ajuste simtomático da dosagem para o doente a ser tratado. Uma quantidade da droga é ordinariamente suprida em um nível de dosagem a partir de cerca de 0,01 mg/kg para cerca de 200 mg/kg de peso do corpo por dia. Particularmente, a faixa de busca é a partir de 0,03 a cerca de 15 mg/kg de peso do corpo por dia, e, mais particularmente, a partir de cerca de 0,05 a cerca de 10 mg/kg de peso do corpo por dia. O composto da presente invenção pode ser administrado por um regime de até quatro ou mais vezes por dia, preferivelmente de 1 a 2 vezes por dia.

Dosagens ótimas a serem administradas podem ser prontamen- te determinadas por aquelas pessoas versadas na técnica, e variará com o composto particular usado, o modo de administração, a resistência da prepa- ração, o modo de administração, e o avanço da condição da doença. Além disso, fatores associados com o particular doente a ser tratado, incluindo a idade, o peso, a dieta e o tempo de administração ao paciente resultarão na necessidade de adaptar as dosagens.

Os compostos da presente invenção podem ser também admi- nistrados na forma de sistemas de distribuição de lipossomas, tais como pe- quenas vesículas unilamelares, grandes vesículas unilamelares, e vesículas multilamelares. Os lipossomas podem ser formados a partir de uma varieda- de dos lípidos, incluindo, mas não-limitado a lípidos amfipáticos como fosfa- tidilcolinas, esfingomielinas, fosfatidiletanolaminas, fofatidilcolinas, cardiolipi- nas, fosfatidilserinas, fosfatidilgliceróis, ácidos fosfatídico, fosfatidilinositóis, diacil trimetilamônio propanos, diacil dimetilamônio propanos, e estearilami- na, lipídios neutros como triglicerídios, e combinações dos mesmos. Eles podem conter também colesterol ou pode ser livre de colesterol.

Os compostos da invenção podem ser também administrados localmente. Qualquer dispositivo de distribuição, tal como cateteres de distri- buição de fármaco intravascular, fios, stents farmacológicos e pavimento endoluminal, pode ser utilizado. O sistema de distribuição de um tal disposi- tivo pode compreender um cateter de infusão local que distribui o composto a uma taxa controlada pelo administrador. A presente invenção fornece um dispositivo de distribuição de fármaco que compreende um dispositivo médico intraluminal, preferivelmen- te um stent, e uma dosagem terapêutica de um composto da invenção.

O termo "stent" se refere a qualquer dispositivo capaz de ser distribuído por um cateter. Um stent é routineiramenete utilizado para preve- nir o fechamento vascular devido a anomalias tais como crescimento interno indesejado dentro do tecido vascular devido ao trauma cirúrgico. Muitas ve- zes tem uma estrutura do tipo de látex expansível, tubular adequada para ser deixada dentro do lúmen de um duto para aliviar uma obstrução. O stent tem uma superfície de contato com parede do lúmen e uma superfície ex- posta do lúmen. A superfície de contato da parede do lúmen é a superfície externa do tubo e a superfície exposta do lúmen é a superfície interna do tubo. O stent pode ser polimérico, metálico ou polimérico e metálico, e pode opcionalmente ser biodegradável.

Comumente, os stents são inseridos no lúmen em uma forma não ampliada e são a seguir ampliadas autonomamente, ou com a ajuda de um segundo dispositivo in situ. Um método típico de expressão ocorre atra- vés do uso de um balão de angioplastia montado no cateter que é inflado com o vaso de estenosed ou caminho do corpo a fim de cisalhamento e rup- tura das obstruções associadas cornos componentes do vaso e obter um lúmen ampliado. Os stents de alta expansão como descrito no E.U. 6.776.796 (Falotico et af). podem também ser usados. A combinação de um stent com fármacos, agentes ou compostos que impedem a inflamação e a proliferação pode também ser utilizada. A combinação de um stent com fár- maços, agentes ou compostos que previnem a inflamação e a proliferação pode prover o tratamento para restenose pós-angioplastia.

Os compostos da invenção podem ser incorporados em ou afi- xados ao stent em uma série de maneiras e na utilização de qualquer núme- ro de materiais compatíveis. Em uma modalidade exemplar, o composto é diretamente incorporado em uma matriz polimérica, tal como o polipirrol po- límero, e subseqüentemente revestido para a superfície exterior do stent. O composto elui a partir de uma matriz pela difusão através do polímero . Os stents e os métodos para o revestimento de fármacos com stents são discu- tidos em detalhe na técnica. Em uma outra modalidade exemplar, o stent é primeiro revestido como uma camada de base que compreende uma solu- ção do composto, etileno co vinilacetato, e polibutilmetacrilato. A camada externa atua como uma barreira de difusão para prevenir o composto de elu- irtão rapidamente e entrar nos tecidos circundantes. A espessura da camada externa ou revestimento de topo determina a taxa na qual o composto elui a partir da matriz. Os stents e métodos para o revestimento são discutidos em detalhe na WIPO publicação W09632907, E.U. Publicação N0 2002/0016625 e referências descritas nos mesmos aqui a seguir.

A solução do composto da invenção e os materiais/polímeros biocompatíveis podem ser incorporados em ou sobre um stent em uma vari- edade de maneiras. Por exemplo, a solução pode ser pulverizada sobre o stent ou o stent pode ser mergulhado na solução. Em uma modalidade pre- ferida, a solução é pulverizada sobre o stent e a seguir deixada secar. Em uma outra modalidade exemplar, a solução pode ser carregada eletricamen- te em uma polaridade e o stent mudou eletricamente para uma polaridade oposta. Desta maneira, a solução e o stent serão atraídos um ao outro. Ao usar este tipo de processo de pulverização, o desperdício pode ser reduzido e mais controle sobre a espessura do revestimento pode ser alcançada. O composto é preferivelmente apenas afixado a outra superfície do stent que faz contato com um tecido. No entanto, para alguns compostos, o stent total pode ser revestido. A combinação da dose do composto aplicada ao stent e o revestimento do polímero que controla a liberação do fármaco é importante na eficácia do fármaco. O composto preferivelemente permanece sobre o stent por pelo menos três dias até aproximadamente seis meses e mais, pre- ferivelmente entre sete e trinta dias.

Qualquer número de polímeros biocompatíveis não erodível po- de ser utilizado em conjunto com os compostos da invenção. É importante notar que polímeros diferentes podem ser utilizados para stents diferentes. Por exemplo, os etileno-co-vinilacetato e o polibutilmetacrilato matriz descri- tos acima funcionam bem com stents de aço imaculado. Outros polímeros podem ser utilizados mais efetivamente com stents formados partir de outras matérias, incluindo materiais que exibem propriedades super elásticas tais como combinação de metais de níquel e titânio.

A restenose é responsável por morbidez e mortalidade signifi- cantes seguindo de angioplagia coronariana. A restenose ocorre através de uma combinação de quatro processos incluindo retrocesso elástico, forma- ção trombosa, hiperplasia íntima e remodelagem matriz extracelular. Vários fatores de crescimento têm sido identificados para exercerem um papel nes- ses processos conduzindo para restenose. Veja Schiele TM et. al., 2004, "Vascular restenose - striving for therapy." Expert Opin Farmacoter. 5(11 ):2221-32. Células do músculo liso vascular (VSMC) expressam recep- tor c-Met. Exposição ao fator de crescimento hepatócito, o Iigante para c-Met, estimula essas células a exibirem uma migração fenotípica. Veja Ta- her et.al., fator de crescimento hepatócito desperta ondulações de sinaliza- ção mediando migração de célula de músculo liso vascular. Biochem Biofis Res Commun. (2002) 298(1 ):80-6; Morishita R, Aoki Μ, Io I, Ogihara T. Fator de crescimento hepatócito como hormônio cardiovascular: papel do HGF na patogênese de doença cardiovascular. Endocr J. (2002) Jun;49(3):273-84. Desde a migração VSMC a partir da média para a íntima das artérias repre- senta um papel no desenvolvimento de aterosclerose e restenose, antago- nistas da atividade da cinase c-Met são acreditadas para apresentarem uma estratégia terapêutica viável no tratamento dessas doenças.

De acordo, a presente invenção fornece um método para o tra- tamento de desordens relacionadas ao c-Met, incluindo restenose, hiperpla- sia intimai ou inflamação, em paredes de veias sangüíneas, que compreen- de o controle de liberação, através de liberação por um dispositivo médico intraluminal, tal como um stent, de um composto da invenção em quantida- des eficazes terapeuticamente.

Métodos para introduzir um stent em um lúmen de um corpo são bem-conhecidos e os compostos revestidos de stents desta invenção são preferencialmente introduzidos usando um cateter. Como será apreciado por aqueles com técnica ordinária na técnica, os métodos irão variar levemente baseados na localização da implantação do stent. Para implantação de stent coronariana, o cateter da bexiga sustentando o stent é inserido na artéria coronariana e o stent é posicionado na localidade desejada. A bexiga é in- flada, expandindo o stent. Ao que o stent se expande, ele contrai a parede do lúmen. Uma vez que o stent é posicionado, a bexiga é esvaziada e remo- vida. O stent permanece no lugar com a superfície de contato com o lúmen sustentando o composto diretamente em contato com a superfície da parede do lúmen. A implantação do stent pode ser acompanhada por terapia de an- ticoagulação conforme necessário.

Condições melhores para liberação dos compostos para uso no stent da invenção podem variar com os sistemas de liberação locais diferen- tes usados, assim como as propriedades e concentrações dos compostos usadas. As condições que podem ser otimizadas incluem, por exemplo, as concentrações dos compostos, o volume de liberação, a percentagem de liberação, a profundidade de peneiração da parede da veia, a pressão de inflação próxima, a quantidade e tamanho das perfurações e a adequação da bexiga do cateter de liberação da droga. As condições podem ser otimi- zadas para inibição de proliferação de célula de músculo liso na localidade do ferimento de maneira que não ocorra entupimento arterial significante devido ao restenose, como medido, por exemplo, através da capacidade proliferativa das células de músculo liso, ou através de mudanças no diâme- tro de lúmen ou na resistência vascular. Condições melhores podem ser de- terminadas baseadas nos dados partir estudos de modelo animal usando métodos de computação rotineiro.

Um outro método alternativo para administrar compostos desta invenção pode ser através de conjugação do composto para um agente-alvo o qual direciona o conjugado para sua localidade intencional de ação, isto é, para células endoteliais vasculares, ou para células de tumor. Ambos agen- tes-alvos de anticorpo e não-anticorpo podem ser usados. Por causa da inte- ração específica entre o agente-alvo e seu par de ligações correspondente, um composto da presente invenção pode ser administrado com concentra- ções locais altas em ou próximo da localidade-alvo e, dessa forma, trata a desordem na localidade-alvo mais efetivamente.

Os agentes-alvos de anticorpos incluem anticorpos ou fragmen- tos de liberação de antígeno do mesmo, que libera para componente acessí- vel e possível de alvo de uma célula de tumor, vasculatura de tumor ou es- trema de tumor. O "componente acessível ou possível de alvo" de uma célu- la de tumor, vasculatura de tumor ou estroma de tumor, é preferível a um componente de superfície expressa, superfície acessível ou superfície locali- zada. Os agentes-alvos de anticorpos também incluem fragmentos de anti- corpos ou liberação de antígeno dos mesmos, que lança para um compo- nente intracelular que é liberado a partir de uma célula de tumor necrótico. Preferencialmente, tais anticorpos são anticorpos monoclonais, ou fragmen- tos de liberação de antígeno dos mesmos, que liberam para antígeno(s) in- tracelular(es) insolúvel(is) presente(s) em células que podem ser induzidas a ser permeáveis ou em todas as células fantasmas substancialmente neoplá- sicas e células normais, mas não estão presentes ou acessíveis no exterior de células viventes normais de um mamífero. Na presente invenção, o com- ponente acessível ou passivo de alvo pode ser o receptor c-Met pelo mesmo ser acessível e expresso nos ou perto dos tecidos-alvos.

Com usado nesta, o termo "anticorpo" tem o intuito de referir de maneira generalizada a qualquer agente de liberação imunológico tais como IgG, IgM1 IgA, IgE, F(ab')2, um fragmento univalente tais como Fab', Fab, Dab, tanto quanto anticorpos projetados tais como anticorpos recombinan- tes, anticorpos humanizados, anticorpos biespecíficos e semelhantes. O an- ticorpo pode ser tanto o policlonal quanto o monoclonal, apesar de o mono- clonal ser preferido. Existe uma disposição muito vasta de anticorpos conhe- cidas na técnica que têm especificidade imunológica para a superfície de célula de virtualmente qualquer tipo de tumor sólido (veja uma Tabela Sumá- ria de anticorpos monoclonais para tumores sólidos em US Patent N 5,855,866 a Torpe et ai). Os métodos são conhecidos por aqueles versados na técnica para produzir e isolar anticorpos contra tumor (Patente EUA N0 5,855,866 para Torpe et a/., e Patente EUA N0 6,34,2219 para Torpe et al)..

Técnicas para conjugar meio terapêutico para anticorpos são bem-conhecidas, veja, e.g., Amon et al., "Monoclonal Antibodies For Immu- notargeting Of Fármacos In Câncer Terapi", em Monoclonal Antibodies And Câncer Therapy1 Reisfeld et al. (eds)., pp. 243- 56 (Alan R. Liss1 Inc. 1985); Hellstrom et al., "Antibodies For Drug Delivery", em Controlled Drug Delivery (2a Ed)., Robinson et al. (eds)., pp. 623-53 (Mareei Dekker, Inc. 1987); Tor- pe, "Antibody Carriers Of Citotoxic Agents In Câncer Therapy: A Review", in Monoclonal Antibodies '84: Biological And Clinicai Applications, Pinchera et al. (eds)., pp. 475-506 (1985). Técnicas similares também podem ser aplica- das para ligar compostos da invenção aos agentes de alvo do não-anticorpo. Aqueles versados na técnica irão saber, ou serão aptos a determinar, méto- dos para formar conjugados com agentes de alvo do não-anticorpo, tais co- mo moléculas, oligopeptídeos, polissacarídeos pequenos ou outros compos- tos polialiônicos.

Apesar de qualquer meio de ligação que seja razoavelmente estável no sangue, poder ser usado para ligar os compostos da presente invenção ao agente-alvo, ligações biologicamente liberáveis e/ou barras de espaço que podem ser partidas selecionáveis são preferidas. "Ligações bio- logicamente liberáveis" e "barras de espaço que podem ser partidas ou Ii- gantes" ainda têm estabilidade razoável na circulação, mas são liberáveis, passíveis de serem partidas ou hidrolisáveis apenas ou preferencialmente sob certas condições, isto é, dentro de um certo ambiente ou em contato com um agente particular. Tais ligações incluem, por exemplo, ligações de dissulfeto e trissulfeto e ligações de ácido instável, como descrito em Paten- te EUA N— 5, 474,765 e 5,762,918 e ligações de enzima sensível, incluindo ligações de peptídeo, amidos de ésteres, fosfodiésteres e glicosídeos como descrito em Patentes EUA N- 5,474,765 e 5,762,918. Tais liberações carac- terísticas de esboços de liberações seletivas facilitam liberação prolongada dos compostos a partir dos conjugados na localidade-alvo intencionada.

A presente invenção fornece uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz de composto da presente invenção con- jugada para um agente-alvo e um veículo farmaceuticamente aceitáveis.

A presente invenção ainda fornece um método de tratamento de uma desordem relativa ao c-Met, particularmente um tumor, que compreen- de administração a uma matéria, uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula I conjugado para um agente-alvo.

Quando proteínas como anticorpos ou fatores de crescimento, ou polissacarídeos são usados como agentes-alvos, elas são preferivelmen- te administradas na forma de composições injetáveis. A solução de anticorpo injetável será administrada na veia, artéria ou no fluido da coluna vertebral ao longo do curso a partir de 2 minutos até aproximadamente 45 minutos, preferencialmente a partir de 10 a 20 minutos. Em certos casos, administra- ções intradérmicas ou no interior de cavidades são vantajosas para tumores restritos a áreas próximas a regiões particulares da pele e/ou a cavidades corporais particulares. Adicionalmente, administrações intratecal podem ser usadas para tumores localizados no cérebro.

Dose terapeuticamente eficaz do composto da presente inven- ção conjugado para um agente-alvo depende do indivíduo, do tipo de doen- ça, do estado da doença, do método de administração e outras variáveis clínicas. As dosagens eficazes são prontamente determináveis usando da- dos a partir de um modelo animal. Animais experimentais produzindo tumo- res sólidos são freqüentemente usados para otimizar doses terapeuticamen- te apropriadas anterior à tradução para um ambiente clínico. Tais modos são conhecidos como sendo muito confiável na previsão de estratégias anticân- cer eficazes. Por exemplo, tumores sólidos produzidos por camundongos, são largamente usados em teste pró-clínicos para determinarem os alcances de trabalho de agentes terapêuticos que dão efeitos de antitumor benéficos com toxidade mínima.

Ao mesmo tempo em que a especificação antecedente ensina os princípios da presente invenção, com exemplos fornecidos para propósito de ilustração, será entendido que a prática da invenção circunda todas as variações usuais, adaptações e/ou modificações assim como dentro do es- copo das seguintes reivindicações e seus equivalentes

Claims

1. Composto de fórmula I: <formula>formula see original document page 191</formula> Fórmula I e N-óxidos, profármacos, sais, solvatos, e isômeros estereoquímicos farma- ceuticamente aceitáveis dos mesmos, em que: R1 é heteroarila mono ou bicíclica, ou piridin-2-on-ila, em que a dita heteroa- rila é opcionalmente substituída com um, dois, três substituintes Ra; em que Ra é -NH2, halogênio, alcóxi, alquiléter, alquiltio, alquilsulfonila, fenil- sulfonila, heteroarilsulfonila, heterociclilsulfonila, -SO2NH2, alquilsulfonamida, alquila, aminoalquila, alquilamino, fenila, heteroarila, ciano, alquenila, alquini- la, cicloalquila, heterociclila, -C02-alquila, -C(O)-Rb, -C(1-4) alquil-morfolinila, -C(1-4) alquil-piperidinila, -C(1-4) alquil-piperazinila, -C(1-4) alquil-N-metil pipera- zinila, -C(1-4) alquil-Rb, -C(O)NH-C(1-4) alquil-Rb, ou -C(O)NRcRd; em que Rb é heterociclila, alquilsulfonila, -SO2NH2, alquilsulfonamida, -OH, -O alquila, -NH2, -NH alquila, ou -N (alquila)2; Rc e Rd são independentemente selecionados dentre: H, fenila, heteroarila, ou C1-6 alquila, em que a dita C1-6 alquila pode ser opcionalmente substituída com um substituinte selecionado dentre: -N(CHa)2, morfolinila, piperidinila, piperazinila, N-metil piperazinila, alquilsulfonila, -SO2NH2, alquilsulfonamida, hidroxila, e alcóxi; ou Rc e Rd juntos podem formar um anel heterocíclico de 5 a 7 membros, opcionalmente contendo uma segunda heteroporção selecionada dentre O, NH, N(aíquila), SO, SO2, ou S; em que o dito anel heterocíclico Rc-Rd é op- cionalmente substituído com alquila, -SO2 alquila, ou -C(0)alquila; A é um anel selecionado dentre o grupo que consiste em: fenila, heteroarila mono ou bicíclica, 3-(4-metóxi-benzil)-3H-quinazolin-4-on-6-ila, quinazolin-4- οη-6-ila, e heterociclila benzofundida; em que as ditas fenila, heteroarila, ou heterociclila benzofundidas são opcionalmente substituídas com um ou três substituintes independentemente selecionados dentre o grupo que consiste em: -OH, alquila, fenila, heteroarila, alcóxi, -CN, halogênio, nitro, -NH2, - N(CH3)2, -NHC(0)NHC1-6 alquila, e -NHC(O)C1-6 alquila; R5 e R6 são independentemente selecionados dentre: H, F, C1-6 alquila, -OH1 -OC1-6 alquila, -NHCi-6 alquila, ou -N(C1-6alquila)2; ou R5 e R6 podem juntos formar um anel C3-5 cicloalquila, um anel de aziridi- nila, ou, um anel de epoxidila; e R7 e R8 são H, halogênio ou Ci-6 alquila.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que R1 é he- teroarila mono ou bicíclica, ou piridin-2-on-5-ila, em que a dita heteroarila é opcionalmente substituída com um, dois, ou três substituintes Ra; R7 e R8 são H.

3. Composto de acordo com a reivindicação 2, em que: Rc e Rd são independentemente selecionados dentre: H, fenila, heteroarila, ou C1-6 alquila, em que a dita C1-6 alquila pode opcionalmente ser substituída com um substituinte selecionado dentre: -N(CHa)2, morfolinila, piperidinila, piperazinila, N-metil piperazinila, alquilsulfonila, -SO2NH2, alquilsulfonamida, hidroxila, e alcóxi; ou Rc e Rd juntos podem formar um anel heterocíclico de 5 a 7 membros selecionado dentre o grupo que consiste em: piperidinila, mor- folinila, e piperazinila, em que a dita piperazinila é opcionalmente substituída com alquila, -S02alquila, ou -C(O) alquila.

4. Composto de acordo com a reivindicação 3, em que R5 e R6 são independentemente selecionados dentre: H, F, ou -CH3; ou R5 e R6 podem juntos formar um anel ciclopropila.

5. Composto de acordo com a reivindicação 4, em que: A é um anel selecionado dentre o grupo que consiste em: fenila, heteroarila mono ou bicíclica, 3-(4-metóxi-benzil)-3H-quinazolin-4-on-6-ila, quinazolin-4- οη-6-ila, e heterociclila benzofundida; em que as ditas fenila, heteroarila, ou heterociclila benzofundidas são opcionalmente substituídas com um substitu- inte independentemente selecionado dentre o grupo que consiste em: -OH, alquila, fenila, heteroarila, alcóxi, -CN, halogênio, nitro, -NH2, -N(CH3)2, -NHC(0)NHCi-6 alquila, e -NHC(O)C1-6 alquila.

6. Composto de acordo com a reivindicação 5, em que A é um anel selecionado dentre o grupo que consiste em: 2,3 di- hidrobenzofuran-5-ila, quinolin-6-ila, quinolin-6-il-N-óxido, 2-amino benzotia- zol-6-ila, 4-metoxifenila, 3-(4-metóxi-benzil)-3H-quinazolin-4-on-6-ila, quina- zolin-4-on-6-ila, e 4-hidróxi fenila.

7. Composto de acordo com a reivindicação 6, em que: R1 é heteroarila mono ou bicíclica, ou piridin-2-on-5-ila, em que a dita hete- roarila é opcionalmente substituída com um substituinte Ra-

8. Composto de acordo com a reivindicação 7, em que: R1 é tiofen-2-ila, tiazol-2-ila, pirazolila, imidazolila, piridin-2-on-5-ila, ou piridi- la, em que as ditas tiofen-2-ila, tiazol-2-ila, pirazolila, imidazolila, e piridila podem ser opcionalmente substituídas com um substituinte Ra.

9. Composto de acordo com a reivindicação 8, em que: R5 e R6 são independentemente selecionados dentre: H ou F.

10. Composto selecionado dentre o grupo que consiste em: <formula>formula see original document page 194</formula> <formula>formula see original document page 195</formula> <formula>formula see original document page 196</formula> <formula>formula see original document page 197</formula> e N-óxidos, profármacos, sais, solvatos, e isômeros estereoquímicos farma- ceuticamente aceitáveis dos mesmos.

11. Composto selecionado dentre o grupo que consiste em: <formula>formula see original document page 197</formula> <formula>formula see original document page 198</formula> <formula>formula see original document page 199</formula> e N-óxidos, profármacos, sais, solvatos, e isômeros estereoquímicos farma- ceuticamente aceitáveis dos mesmos.

12. Composto que é: <formula>formula see original document page 199</formula> e N-óxidos, profármacos, sais, solvatos, e isômeros estereoquímicos farma- ceuticamente aceitáveis dos mesmos.

13. Composto que é: e N-óxidos, profármacos, sais, solvatos, e isômeros estereoquímicos farma- ceuticamente aceitáveis dos mesmos.

14. Composto que é: <formula>formula see original document page 199</formula> e N-óxidos, profármacos, sais, solvatos, e isômeros estereoquímicos farma- ceuticamente aceitáveis dos mesmos.

15. Composto que é: <formula>formula see original document page 199</formula> e N-óxidos, profármacos, sais, solvatos, e isômeros estereoquímicos farma- ceuticamente aceitáveis dos mesmos.

16. Composto que é: e N-óxidos, profármacos, sais, solvatos, e isômeros estereoquímicos farma- ceuticamente aceitáveis dos mesmos.

17. Composição farmacêutica compreendendo um composto como definido nas reivindicações 1 a 16 e um veículo farmaceuticamente aceitável.

18. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 16 para o uso como um medicamento.

19. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 16 para a fabricação de um medicamento para o trata- mento de um distúrbio prolifertivo de célula.

20. Método para a redução da atividade da cinase de c-Met em um indivíduo que compreende a etapa de administrar um composto como definido nas reivindicações 1 a 16 a um indivíduo.

21. Método para a inibição da atividade da cinase de c-Met em um indivíduo que compreende a etapa de administrar um composto como definido nas reivindicações 1 a 16 a um indivíduo.

22. Método para a modulação da expressão de c-Met em um indivíduo que compreende a etapa de administrar um composto como defini- do nas reivindicações 1 a 16 a um indivíduo.

23. Método para a prevenção em um indivíduo de um distúrbio relacionado a c-Met que compreende a administração a um indivíduo de uma quantidade profilaticamente eficaz de uma composição farmacêutica que compreende um composto como definido nas reivindicações 1 a 16 e um veículo farmaceuticamente aceitável.

24. Método para o tratamento em um indivíduo de um distúrbio relacionado a c-Met que compreende a administração a um indivíduo de uma quantidade profilaticamente eficaz de uma composição farmacêutica que compreende um composto como definido nas reivindicações 1 a 16 e um veículo farmaceuticamente aceitável.

25. Método para a modulação em um indivíduo de um distúrbio relacionado a c-Met que compreende a administração a um indivíduo de uma quantidade profilaticamente eficaz de uma composição farmacêutica que compreende um composto como definido nas reivindicações 1 a 16 e um veículo farmaceuticamente aceitável.

26. Método de acordo com a reivindicação 23, que ainda com- preende a administração de um agente quimioterapêutico.

27. Método de acordo com a reivindicação 23, que ainda com- preende a administração de terapia de gene.

28. Método de acordo com a reivindicação 23, que ainda com- preende a administração de imunoterapia.

29. Método de acordo com a reivindicação 23, que ainda com- preende a administração de terapia de radiação.

30. Método de acordo com a reivindicação 24, que ainda com- preende a administração de um agente quimioterapêutico.

31. Método de acordo com a reivindicação 24, que ainda com- preende a administração de terapia de gene.

32. Método de acordo com a reivindicação 24, que ainda com- preende a administração de imunoterapia.

33. Método de acordo com a reivindicação 24, que ainda com- preende a administração de terapia de radiação.

34. Método de acordo com a reivindicação 25, que ainda com- preende a administração de um agente quimioterapêutico.

35. Método de acordo com a reivindicação 25, que ainda com- preende a administração de terapia de gene.

36. Método de acordo com a reivindicação 25, que ainda com- preende a administração de imunoterapia.

37. Método de acordo com a reivindicação 25, que ainda com- preende a administração de terapia de radiação.

38. Método para o tratamento de um distúrbio relacionado a c-Met que compreende a distribuição controlada pela liberação de um dispo- sitivo médico intraluminal de um composto como definido nas reivindicações 1 a 16 em uma quantidade terapeuticamente eficaz.

39. Método para o tratamento de um distúrbio proliferetivo de célula que compreende a distribuição controlada pela liberação de um dispo- sitivo médico intraluminal de um composto como definido nas reivindicações 1 a 16 em uma quantidade terapeuticamente eficaz.

40. Método de acordo com a reivindicação 38, em que o dito dispositivo médico intraluminal compreeende um stent.

41. Método de acordo com a reivindicação 39, em que o dito dispositivo médico intraluminal compreeende um stent.

42. Composição farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz de um composto como definido nas reivindicações 1 a 16 conjugado a um agente de direcionamento e um veículo farmaceuticamente aceitável.

43. Método para o tratamento de um distúrbio relacionado a c-Met que compreende a administração a um indivíduo de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto como definido nas reivindicações 1 a 16 conjugado a um agente de direcionamento.

44. Combinação de um agente quimioterapêutico e de um com- posto como definidos em qualquer uma das reivindicações 1 a 16.

45. Processo para a preparação de um composto como definido na reivindicação 1, o dito processo compreendendo a reação de um compos- to de fórmula IV: <formula>formula see original document page 202</formula> em que X é Cl ou I ou Br, e Y é zincato, ácido borônico, éster de boronato ou estanano.

46. Processo para a preparação de um composto como definido com um composto de fórmula V: <formula>formula see original document page 202</formula> na reivindicação 1, o dito processo compreendendo a reação de um compos- to de fórmula III: <formula>formula see original document page 203</formula> com um composto de fórmula VI: <formula>formula see original document page 203</formula>

47. Composição farmacêutica que compreende um produto feito pelo processo como definido na reivindicação 46.

48. Composição farmacêutica que compreende um produto feito pelo processo como definido na reivindicação 47.