BRPI0610901B1 - Uso de uma solução aquosa de potencial oxi-redutivo (orp). - Google Patents

Abstract

método de uso de uma solução aquosa de potencial oxiredutivo em aplicações dentais. métodos de uso de uma solução aquosa de potencial oxiredutivo (orp) que é estável por pelo menos vinte e quatro horas em aplicações dentais. a solução aquosa de orp pode ser administrada ao pacientes para a desinfecção rotineira da cavidade oral como parte de um programa contínuo de higiene oral. a solução aquosa de orp também pode ser usada para irrigar e/ou desinfetar tecidos e superfícies orais durante procedimentos dentais, cirurgia oral ou cirurgia maxilo-facial. além disso, a solução aquosa de orp pode ser administrada para tratar pacientes com dano aos tecidos orais causados por doença ou cirurgia.

Description

Este pedido de patente reivindica o benefício dos Pedidos Provisórios de Patente U.S. N^os 60/760.635, depositado em 20 de janeiro de 2006; 60/760.567, depositado em 20 de janeiro de 2006; 60/760.645, depositado em 20 de janeiro de 2006; 60/760.557, depositado em 20 de janeiro de 2006; 60/730.743, depositado em 27 de outubro de 2005; e 60/676.883, depositado em 2 de maio de 2005; cada um dos quais é aqui incorporado em sua totalidade por referência.

CAMPO DA INVENÇÃO

Esta invenção está relacionada a um método de tratamento de doença periodontal e outras condições dentárias por administração de soluções aquosas de potencial redutor oxidativo.

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

Doenças periodontais (gengiva), incluindo gengivite e periodontite, são infecções sérias que, caso não sejam tratadas, podem levar à perda de dentes. A doença periodontal pode afetar um dente ou muitos dentes. A doença periodontal começa quando as bactérias na “placa”, uma película incolor e pegajosa que constantemente se forma nos dentes, fazem com que as gengivas fiquem inflamadas. Na forma mais branda da doença, a gengivite, as gengivas ficam avermelhadas, edemaciam-se sangram facilmente. A gengivite é freqüentemente causada por higiene oral inadequada. A gengivite é reversível com tratamento profissional e com uma boa higiene oral em casa.

A gengivite não tratada pode evoluir para a periodontite. Com o tempo, a placa pode se disseminar e de 28/12/2018, pág. 11/140

2/127 crescer abaixo da linha gengival. As toxinas produzidas pelas bactérias na placa irritam as gengivas. As gengivas podem então se separar dos dentes, formando espaços entre os dentes, podendo haver infecção das gengivas. À medida que a doença progride, o tecido e o osso gengivais são destruídos. Por fim, os dentes podem afrouxar e podem ter que ser removidos através de cirurgia periodontal.

A causa principal da doença periodontal é a placa bacteriana. No entanto, fatores como genética, gravidez, puberdade, nutrição deficiente, estresse, tabagismo, diabetes e outras doenças sistêmicas e medicações podem contribuir para a doença periodontal. Antibióticos são usados freqüentemente em combinação com remoção mecânica da placa (raspagem) no tratamento de doença periodontal mais avançada. No entanto, a doença periodontal permanece sendo causa de morbidade e de custos significativos para a sociedade. Conseqüentemente, há uma necessidade de tratamentos eficazes inéditos adicionais para a doença periodontal.

Em particular, a infecção do canal radicular, uma doença infecciosa de etiologia bacteriana, é uma causa importante de perda de dentes no mundo. As modalidades terapêuticas atuais incluem raspagem e aplainamento radicular das superfícies dos dentes para eliminar a placa bacteriana e cálculos, e o uso de soluções anti-sépticas para combater o processo infeccioso causado por um amplo espectro de microorganismos orais. Esses anti-sépticos, no entanto, possuem alta toxicidade e, conseqüentemente, não podem ser usados por períodos prolongados. Além disso, alguns dos anti-sépticos comumente usados têm efeitos de 28/12/2018, pág. 12/140

3/127 colaterais adversos, tais como alteração do paladar e coloração dos dentes.

A água com potencial redutor oxidativo (ORP), também conhecida como água superoxidada, pode ser usada como um desinfetante atóxico para erradicar microorganismos, incluindo bactérias, vírus e esporos, em diversos quadros. Por exemplo, a água ORP pode ser aplicada nos campos da assistência médica e de dispositivos médicos para desinfetar superfícies e equipamentos médicos. Vantajosamente, a água ORP é ambientalmente segura e, dessa forma, evita a necessidade de procedimentos de descarte dispendiosos. A água ORP também tem aplicação no tratamento de feridas, esterilização de dispositivos médicos, esterilização de alimentos, hospitais, usuários domésticos e anti-bioterrorismo.

Embora a água ORP seja um desinfetante eficaz, ela tem uma validade extremamente limitada, normalmente apenas poucas horas. Em conseqüência dessa vida-útil curta, a produção de água ORP deve ocorrer nas proximidades do local onde a água ORP vai ser usada como um desinfetante. Isso significa que uma instalação de assistência médica, por exemplo, um hospital, tem que adquirir, abrigar e manter os equipamentos necessários para a produção da água ORP. Adicionalmente, as técnicas de fabricação anteriores não eram capazes de produzir quantidades suficientes em escala comercial de água ORP para permitir seu uso disseminado como desinfetante em instalações de assistência médica.

Conseqüentemente, existe a necessidade de uma água ORP que seja estável ao longo de um período de tempo prolongado e de métodos de utilização de uma água ORP como essa.

de 28/12/2018, pág. 13/140

4/127

Também existe a necessidade de métodos eficazes em termos de custo de preparação de quantidades em escala comercial de água ORP. A presente invenção fornece uma água ORP como essa e métodos de preparação e de utilização de uma água

ORP como essa.

A água ORP também tem sido usada como um promotor de crescimento de células de tecidos em pacientes, como descrito na Publicação do Pedido de Patente U.S. 2002/0160053 A1. No entanto, a aplicação de água que rapidamente perde contato com o tecido não maximiza a eficácia do tratamento. Conseqüentemente, existe a necessidade de composições contendo água ORP que permaneçam em contato com o tecido tratado, e que sejam estáveis ao longo de um período de tempo prolongado. Essas e outras vantagens da invenção, além de características adicionais da invenção, ficarão evidentes a partir da descrição da invenção aqui apresentada.

BREVE SUMÁRIO DA INVENÇÃO

A presente invenção fornece um método de tratamento de doença periodontal em um paciente por administração de uma solução de água de potencial redutor oxidativo (ORP), em que a solução é estável por pelo menos 24 horas. A invenção também é dirigida a um método de tratamento de doença periodontal em um paciente pela administração de uma solução aquosa de potencial redutor oxidativo, em que a solução compreende água anódica e água catódica. Em uma modalidade, a solução de água ORP usada no método da invenção compreende peróxido de hidrogênio e uma ou mais espécies de cloro.

A presente invenção adicionalmente fornece um método de 28/12/2018, pág. 14/140

5/127 de tratamento de tecido oral danificado, método esse que compreende o contato do tecido lesionado ou danificado com uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma solução de água ORP, em que a solução é estável por pelo menos 24 horas. O método inclui o tratamento do tecido que foi lesionado ou danificado por cirurgia oral ou que foi lesionado ou danificado por causas que não estão necessariamente relacionadas à cirurgia, por exemplo, queimaduras, cortes, abrasões, arranhões, erupções, úlceras, feridas puntiformes, infecções, e semelhantes.

A presente invenção também está relacionada a um método de utilização de uma solução de água ORP como um irrigante em um procedimento dental oral ou maxilofacial por administração de uma solução de água ORP a um paciente em uma quantidade suficiente para irrigar o local.

A presente invenção ainda fornece um método de desinfecção de uma superfície, método esse que compreende o contato da superfície com uma quantidade antiinfecciosa de uma solução de água ORP, em que a solução é estável por pelo menos 24 horas. A superfície pode ser biológica, inanimada ou uma combinação dessas superfícies que podem ser desinfetadas de acordo com a presente invenção. Superfícies biológicas incluem, por exemplo, tecido muscular, tecido ósseo, tecido orgânico, tecido mucoso, e combinações destes, que podem ser desinfetados de acordo com a presente invenção. Superfícies inanimadas incluem, por exemplo, dispositivos implantáveis cirurgicamente, dispositivos prostéticos e dispositivos médicos.

Outro aspecto da presente invenção inclui uma formulação para administração tópica que compreende uma de 28/12/2018, pág. 15/140

6/127 solução aquosa de potencial redutor oxidativo e um agente espessante, em que a formulação é estável por pelo menos 24 horas.

A invenção também está relacionada a uma forma de dosagem farmacêutica que compreende: (1) uma formulação para administração tópica que compreende uma solução aquosa de potencial redutor oxidativo e um agente espessante e (2) um recipiente lacrado, no qual a formulação é estável por pelo menos 24 horas.

Adicionalmente, a invenção é dirigida a um método para o tratamento de uma condição em um paciente que compreende a administração tópica a um paciente de uma de quantidade terapeuticamente eficaz de uma formulação que compreende uma solução aquosa de potencial redutor oxidativo e um agente espessante, em que a formulação é estável por pelo menos cerca de 24 horas.

A invenção ainda fornece a método para a promoção de cicatrização de feridas em um paciente que compreende a aplicação em uma ferida de uma formulação que compreende uma solução aquosa de potencial redutor oxidativo e um agente espessante, em que formulação é administrada em uma quantidade suficiente para promover a cicatrização de feridas, e em que a formulação é estável por pelo menos cerca de 24 horas.

A invenção adicionalmente fornece um método para a prevenção de uma condição em um paciente que compreende a administração tópica a um paciente de uma de quantidade terapeuticamente eficaz de uma formulação que compreende uma solução aquosa de potencial redutor oxidativo e um agente espessante, em que a formulação é estável por pelo de 28/12/2018, pág. 16/140

7/127 menos cerca de 24 horas.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

A FIG. 1 é um diagrama esquemático de uma célula de eletrólise de três câmaras para a produção de uma solução aquosa de potencial redutor oxidativo da presente invenção.

A FIG. 2 ilustra uma célula de eletrólise de três câmaras e revela espécies iônicas nela geradas.

A FIG. 3 é um diagrama de fluxo esquemático de um processo para a produção de uma água de potencial redutor oxidativo da presente invenção.

As FIGS. 4A-4C revelam uma comparação gráfica de viabilidade celular, apoptose e necrose em fibroblastos dérmicos humanos (HDFs) tratados com uma solução de água ORP exemplar (MCN) versus peróxido de hidrogênio (HP).

A FIG. 5 é uma comparação gráfica dos níveis de adutos de 8-hidroxi-2'-desoxiguanosina (8-OHdG) em HDFs tratados com uma solução de água ORP exemplar (MCN) versus 500 μΜ de peróxido de hidrogênio (HP).

As FIGS. 6A-6B ilustram a expressão de um envelhecimento associado à β-galactosidase em HDFs após exposição crônica a baixas concentrações de uma solução de água ORP exemplar (MCN) versus peróxido de hidrogênio (HP).

As FIGS. 7A-B são representações gráficas dos grupos de pacientes e resultados finais no estudo do canal radicular.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

A presente invenção fornece um método de prevenção ou tratamento de uma condição em um paciente, método esse que compreende a administração ao paciente de uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma solução de água de potencial de 28/12/2018, pág. 17/140

8/127 redutor oxidativo (ORP), em que a solução é estável por pelo menos 24 horas. A condição pode incluir, por exemplo, condições médicas, enfermidades, lesões, alergias, e semelhantes, que sejam tratáveis com a solução de água ORP da presente invenção.

A quantidade terapeuticamente eficaz administrada ao paciente, por exemplo, um animal, particularmente um ser humano, no contexto da presente invenção, deve ser suficiente para despertar uma resposta terapêutica ou profilática no paciente ao longo de um intervalo de tempo razoável. A dose pode ser facilmente determinada com o uso de métodos bem conhecidos na técnica. Aqueles habilitados na técnica reconhecerão que o nível de dosagem específico para certo paciente dependerá de diversos fatores. Por exemplo, a dose pode ser determinada com base na potência da solução de água ORP específica empregada, da severidade da condição, do peso corporal do paciente, da idade do paciente, da condição física e mental do paciente, da saúde geral, sexo, dieta, e semelhantes. O tamanho da dose também pode ser determinado com base na existência, natureza e extensão de quaisquer efeitos colaterais adversos que possam acompanhar a administração de uma solução de água ORP em particular. É desejável, sempre que possível, manter o mínimo possível de efeitos colaterais adversos.

Fatores que podem ser considerados para uma dosagem específica podem incluir, por exemplo, biodisponibilidade, perfil metabólico, tempo de administração, via de administração, taxa de excreção, farmacodinâmica associada a uma solução de água ORP em particular em um paciente em particular, e semelhantes. Outros fatores podem incluir, de 28/12/2018, pág. 18/140

9/127 por exemplo, a potência ou eficácia da solução de água ORP com relação à condição específica a ser tratada, a severidade dos sintomas apresentados, antes ou durante o curso da terapia, e semelhantes. Em alguns casos, aquilo que constitui uma quantidade terapeuticamente eficaz também pode ser determinado, em parte, pelo uso de um ou mais dos ensaios, por exemplo, bioensaios, que são razoavelmente clinicamente preditivos da eficácia de uma solução de água ORP em particular para o tratamento ou prevenção de uma condição específica.

A solução de água ORP da presente invenção pode ser administrada terapeuticamente, isoladamente ou em combinação com um ou mais outros agentes terapêuticos, a um paciente, por exemplo, um ser humano, por exemplo, para tratar uma condição existente. A solução de água ORP da presente invenção também pode ser administrada profilaticamente, isoladamente ou em combinação com um ou mais outros agentes terapêuticos, a um paciente, por exemplo, um ser humano, que foi exposto a um ou mais agentes causativos associados à condição. Por exemplo, A solução de água ORP da invenção pode ser administrada adequadamente a um paciente que foi exposto a um ou mais microorganismos que causam infecção (por exemplo, vírus, bactérias e/ou fungos) profilaticamente para inibir ou diminuir a probabilidade de infecção em um paciente, ou diminuir a severidade de uma infecção que se desenvolve em conseqüência de tal exposição.

Aqueles habilitados na técnica observarão que métodos adequados de administração da solução de água ORP da presente invenção estão disponíveis e, embora mais de uma de 28/12/2018, pág. 19/140

10/127 via de administração possa ser usada, uma via específica pode fornecer uma reação mais imediata e mais eficaz do que outra via. A quantidade terapeuticamente eficaz pode ser a dose necessária para se obter um “nível eficaz” da solução de água ORP em um paciente individual. A quantidade terapeuticamente eficaz pode ser definida, por exemplo, como a quantidade que deve ser administrada a um paciente individual para se obter um nível sangüíneo, nível tecidual e/ou nível intracelular da água ORP da presente invenção para evitar ou tratar a condição no paciente.

Quando o nível eficaz for usado como um limite preferido para a dosagem, a dose e o esquema reais poderão variar, dependendo, por exemplo, de acordo com diferenças interindividuais em farmacocinética, distribuição, metabolismo, e semelhantes. O nível eficaz também pode variar quando a solução de água ORP da presente invenção for usada em combinação com um ou mais agentes terapêuticos diferentes da solução de água ORP da presente invenção, por exemplo, um ou mais agentes antiinfecciosos, um ou mais agentes “moderadores”, “moduladores” ou “neutralizantes”, por exemplo, como descrito nas Patentes U.S. N^os 5.334.383 e 5.622.848, um ou mais agentes antiinflamatórios, e semelhantes.

Um indicador apropriado pode ser usado para a determinação e/ou monitoramento do nível eficaz. Por exemplo, o nível eficaz pode ser determinado por análise direta (por exemplo, química analítica) ou por análise indireta (por exemplo, com indicadores químicos clínicos) de amostras adequadas do paciente (por exemplo, sangue e/ou tecidos). O nível eficaz também pode ser determinado, por de 28/12/2018, pág. 20/140

11/127 exemplo, por observações diretas ou indiretas, tais como, por exemplo, a concentração de metabólitos urinários, alterações nos marcadores associados à condição (por exemplo, contagem viral, no caso de uma infecção viral), diminuição dos sintomas associados às condições, e semelhantes.

A água ORP da presente invenção pode ser administrada com o uso de qualquer método de administração adequado conhecido na técnica. A água ORP da presente invenção pode ser administrada em combinação com um ou mais transportadores, veículos, adjuvantes, excipientes ou diluentes farmaceuticamente aceitáveis, que são conhecidos na técnica. Aqueles habilitados na técnica podem determinar facilmente a formulação e o método de administração apropriados para a administração da água ORP de acordo com a presente invenção. Quaisquer ajustes necessários na dose podem ser feitos facilmente por aqueles habilitados na técnica para se adaptar à natureza ou severidade da condição tratada à luz de outros fatores, tais como, por exemplo, efeitos colaterais, alterações na condição geral do paciente, e semelhantes.

Em uma modalidade, a condição é uma condição do trato respiratório superior, que seja tratável pela solução de água ORP da presente invenção. Qualquer método de administração adequado pode ser empregado para o tratamento ou prevenção de uma condição do trato respiratório superior de acordo com a presente invenção. De preferência, a solução ORP é administrada à via aérea superior, por exemplo, de forma a entrar em contato com um ou mais tecidos da via aérea superior associados à condição do de 28/12/2018, pág. 21/140

12/127 trato respiratório superior. A solução ORP da presente invenção pode ser administrada à via aérea superior como um jato ou um spray. Além disso, a solução de água ORP da presente invenção pode ser administrada por aerossolização, nebulização ou atomização. Quando a solução de água ORP da invenção for administrada por aerossolização, nebulização ou atomização, ela será administrada, de preferência, na forma de gotículas com um diâmetro na faixa de cerca de 1 mícron a cerca de 10 mícrons.

Métodos e dispositivos que são úteis para aerossolização, nebulização e atomização são bem conhecidos na técnica. Nebulizadores médicos, por exemplo, foram usados para liberar uma dose metrificada de um líquido fisiologicamente ativo em um jato de gás inspiratório para inalação por um receptor. Veja, por exemplo, Patente U.S. N° 6.598.602. Nebulizadores médicos podem operar para gerar gotículas líquidas, que formam um aerossol com o gás inspiratório. Em outras circunstâncias, os nebulizadores médicos podem ser usados para injetar gotículas de água em um jato de gás inspiratório para gerar gás com um teor de umidade adequado a um receptor, que é particularmente útil quando o jato de gás inspiratório for fornecido por um auxílio mecânico da respiração, por exemplo, um respirador, ventilador ou sistema de liberação anestésica.

Um nebulizador exemplar é descrito, por exemplo, em WO 95/01137, que descreve um dispositivo manual que opera para ejetar gotículas de um líquido médico em um jato de ar (jato de gás inspiratório), que é gerado por uma inalação do receptor através de um bocal. Outro exemplo pode ser encontrado na Patente U.S. N° 5.388.571, que descreve um de 28/12/2018, pág. 22/140

13/127 sistema de ventilador de pressão positiva que fornece controle e aumento da respiração para um paciente com insuficiência respiratória e que inclui um nebulizador para a liberação de partículas de medicação líquida nas vias aéreas e alvéolos dos pulmões de um paciente. A Patente

U.S. N° 5.312.281 descreve um nebulizador de onda ultrasônica que atomiza água ou líquido em baixa temperatura e supostamente pode ajustar o tamanho da névoa. Além disso, a Patente U.S. N° 5.287.847 descreve um aparelho pneumático de nebulização com taxas de fluxo e volumes de saída escalonáveis para a liberação de um aerossol medicinal para neonatos, crianças e adultos. Além disso, a Patente U.S. N°

5.063.922 descreve um atomizador ultra-sônico.

O método da presente invenção pode ser usado para a prevenção ou tratamento de uma condição do trato respiratório superior, que afeta um ou mais tecidos da via aérea superior, particularmente tecido nasal, tecido sinusal e tecido pulmonar. Essas condições do trato respiratório superior podem incluir, por exemplo, uma sinusite (por exemplo, a rinossinusite, uma sinusite aguda, uma sinusite crônica, e semelhantes), uma faringite, uma asma, e semelhantes, que são preveníveis ou tratáveis com a solução ORP da presente invenção.

A sinusite crônica tipicamente refere-se à inflamação dos seios da face que persiste por pelo menos 3 semanas, mas freqüentemente persiste por meses ou mesmo anos. As alergias estão freqüentemente associadas à sinusite crônica. Além disso, pacientes com asma possuem uma freqüência particularmente elevada de sinusite crônica. A inalação de alérgenos transportados pelo ar (substâncias de 28/12/2018, pág. 23/140

14/127 que provocam reação alérgica), tais como poeira, mofo e pólen, freqüentemente desencadeando reações alérgicas (rinite alérgica) as quais, por sua vez, podem contribuir para a sinusite. Pessoas alérgicas a fungos podem desenvolver uma condição denominada “sinusite alérgica fúngica”. O tempo úmido ou os poluentes no ar e em edificações também podem afetar as pessoas que apresentam a sinusite crônica.

Da mesma forma que a sinusite aguda, sinusite crônica é mais comum em pacientes com deficiência imune ou anormalidades da secreção ou movimento de muco (por exemplo, deficiência imune, infecção por HIV, fibrose cística, síndrome de Kartagener). Além disso, alguns pacientes têm asma grave, pólipos nasais e respostas asmáticas severas à aspirina e medicações semelhantes à aspirina (os chamados fármacos antiinflamatórios não esteróides ou NSAIDs). Esses últimos pacientes têm uma freqüência elevada de sinusite crônica.

Um médico pode diagnosticar sinusite pela história médica, exame físico, raios X e, se necessário, varreduras com RMN (ressonância magnética nuclear) ou TC (tomografia computadorizada). Após o diagnóstico de sinusite e a identificação de uma possível causa, um médico pode prescrever um esquema de tratamento que irá reduzir a inflamação e aliviar os sintomas. O tratamento de sinusite aguda tipicamente exige o restabelecimento da drenagem das passagens nasais, o controle ou a eliminação da fonte da inflamação e o alívio da dor.

Os médicos geralmente recomendam descongestionantes para reduzir a congestão, antibióticos para o controle de de 28/12/2018, pág. 24/140

15/127 uma infecção bacteriana, se presente, e analgésicos para reduzir a dor.

Quando tratamento com fármacos é mal sucedido, a cirurgia pode ser a única alternativa para o tratamento de sinusite crônica, por exemplo, remoção de adenóides, remoção de pólipos nasais, reparo de um desvio de septo, cirurgia sinusal endoscópica, e semelhantes. Acredita-se que a administração de água ORP de acordo com o método da presente invenção pode ser usada para o tratamento de sinusite crônica como alternativa para potencialmente evitar terapias mais agressivas, tais como antibióticos e cirurgia.

Com relação à faringite, estima-se que, em todo o mundo, 1 a 2% de todos os atendimentos em consultórios médicos, clínicas e salas de emergência são causados por faringite. Nos Estados Unidos e no México, faringites/amigdalites são supostamente responsáveis por 15 e 12 milhões de consultas por ano, respectivamente. Estabeleceu-se que esses casos são causados por várias bactérias e vírus. Por um lado, sabemos que faringite e amigdalite causadas por Streptococcus β-hemolítico do grupo A aumentam significativamente o risco de febre reumática em populações pobres. Por outro lado, acredita-se que somente 5 a 15% dos casos de faringite são causados por essa bactéria, e que o resto dos casos agudos é causado por bactérias e vírus de pouca relevância epidemiológica. Esses últimos casos tendem a ser autolimitados em poucos dias e não deixam seqüelas.

Verificou-se que um grande número de médicos em todo o mundo prescreve antibióticos indiscriminadamente para de 28/12/2018, pág. 25/140

16/127 faringite aguda. Isso ocorre na prática diária, freqüentemente porque os pacientes tendem a solicitar antibióticos poderosos. Infelizmente, é difícil estabelecer um diagnóstico preciso de faringite/amigdalite estreptocócica clinicamente e a relação custo-benefício do tratamento de faringite/amigdalite aguda com antibióticos é questionável. Em alguns países, por exemplo, México, o gasto de recursos governamentais para cobrir o custo de antibióticos, além dos dias de trabalho perdidos, representa uma perda significativa com relação ao orçamento nacional.

Acredita-se que a administração de água ORP de acordo com o método da presente invenção possa ser útil para o tratamento adjuvante de faringite/amigdalite aguda. O tratamento empírico de faringite/amigdalite aguda pode começar com a administração de uma solução de água ORP de acordo com a presente invenção e, dependendo da evolução ou do resultado do teste rápido para Streptococcus, podem ser iniciados antibióticos em até 48-72 horas após, apenas se necessário. Dessa forma, o método da presente invenção pode permitir que o uso de antibióticos seja adiado e, ao mesmo tempo, reduzir a sintomatologia do paciente e acelerar a recuperação do paciente, caso a faringite/amigdalite não seja por Streptococcus do grupo A. O uso adjuvante de uma solução de água ORP da presente invenção com antibióticos para o tratamento de faringite/amigdalite estreptocócica também pode encurtar o período de resposta clínica e diminuir a incidência de recidivas.

O método da presente invenção também pode ser usado para a prevenção ou tratamento de uma infecção que seja de 28/12/2018, pág. 26/140

17/127 tratável com a solução de água ORP da presente invenção. A infecção pode ser causada por um ou mais patógenos infecciosos, tais como, por exemplo, microorganismos infecciosos. Tais microorganismos podem incluir, por exemplo, vírus, bactérias e fungos. Os vírus podem incluir, por exemplo, um ou mais vírus selecionados do grupo que consiste em adenovírus, HIV, rinovírus e vírus da gripe. As bactérias podem incluir, por exemplo, uma ou mais bactérias selecionadas do grupo que consiste em Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus e Mycobaterium tuberculosis. Os fungos podem incluir, por exemplo, um ou mais fungos selecionados do grupo que consiste em Candida albicans, Bacillus subtilis e Bacillus athrophaeus. O método da presente invenção também pode ser usado para a prevenção ou tratamento de condições inflamatórias ou reações alérgicas que são tratáveis com a solução de água ORP da invenção.

Além disso, organismos que podem ser controlados, reduzidos, mortos ou erradicados por tratamento com a solução de água ORP usada de acordo com a invenção incluem, por exemplo, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Enterococcus hirae, Acinetobacter baumannii, espécies de Acinetobacter, Bacteroides fragilis, Enterobacter aerogenes, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium (VRE, MDR) resistentes à vancomicina, Haemophilus influenzae, Klebsiella oxytoca, Klebsiella pneumoniae, Micrococcus luteus, Proteus mirabilis, Serratia marcescens, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus haemolyticus, Staphylococcus hominis, Staphylococcus saprophyticus, Streptococcus pneumoniae, de 28/12/2018, pág. 27/140

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Streptococcus pyogenes, Salmonella choleraesuis, Shigella dysenteriae e outras bactérias suscetíveis, além de leveduras, por exemplo, Trichophyton mentagrophytes, Candida albicans e Candida tropicalis. A solução de água ORP também pode ser usada de acordo com a invenção para controlar, reduzir, matar ou erradicar vírus que incluem, por exemplo, adenovírus, vírus da imunodeficiência humana (HIV), rinovírus, influenza (por exemplo, influenza A), hepatite (por exemplo, hepatite A), coronavírus (responsável, por exemplo, pela síndrome respiratória aguda grave (SARS)), rotavírus, vírus da gripe aviária, vírus sincicial respiratório, vírus do herpes simples, vírus da varicela-zoster, vírus da rubéola e outros vírus suscetíveis.

Em outra modalidade, o método da presente invenção compreende a administração parenteral da solução de água ORP da invenção. A administração parenteral pode incluir a administração da solução de água ORP da invenção por via intravenosa, subcutânea, intramuscular ou intraperitoneal. Em uma modalidade preferida, a solução de água ORP da presente invenção é administrada por via intravenosa para evitar ou tratar uma condição de acordo com o método da presente invenção. Condições adequadas podem incluir, por exemplo, miocardite viral, esclerose múltipla e AIDS. Veja, por exemplo, as Patentes U.S. N^os 5.334.383 e 5.622.848, que descrevem métodos de tratamento de miocardite viral, esclerose múltipla e AIDS através da administração intravenosa de soluções de água ORP.

A presente invenção adicionalmente fornece um método de tratamento de tecido lesionado ou danificado, método de 28/12/2018, pág. 28/140

19/127 esse que compreende o contato do tecido lesionado ou danificado com uma quantidade terapeuticamente eficaz da solução de água ORP da presente invenção. Qualquer método adequado pode ser usado para o contato do tecido lesionado ou danificado, de forma a tratar tecido lesionado ou danificado de acordo com a presente invenção. Por exemplo, o tecido lesionado ou danificado pode ser tratado de acordo com a invenção por irrigação do tecido com a solução de água ORP da invenção, de forma a colocar em contato o tecido lesionado ou danificado com a água ORP. Alternativamente (e adicionalmente), a solução de água ORP da presente invenção pode ser administrada como um jato ou um spray, ou por aerossolização, nebulização ou atomização, como aqui descrito, de forma a colocar em contato o tecido lesionado ou danificado com a água ORP.

O método da presente invenção pode ser usado no tratamento de tecidos que foram lesionados ou danificados, por exemplo, por cirurgia. Por exemplo, o método da presente invenção pode ser usado para o tratamento de tecidos que foram lesionados ou danificados por uma incisão. Além disso, o método da presente invenção pode ser usado para o tratamento de tecidos que foram lesionados ou danificados por cirurgia oral, cirurgia de enxerto, cirurgia de radiação, combinações destes. Cirurgia oral pode incluir, por exemplo, cirurgias dentais, tais como, por exemplo, cirurgia do canal radicular, extração dentária, cirurgia da gengiva, e semelhantes.

O método da presente invenção também inclui o cirurgia de implante, cauterização, amputação, transplante, quimioterapia, e de 28/12/2018, pág. 29/140

20/127 tratamento de tecidos que foram lesionados ou danificados por um ou mais de queimaduras, cortes, abrasões, arranhões, erupções, úlceras, feridas puntiformes, combinações destes, e semelhantes, que não são necessariamente causados por cirurgia. O método da presente invenção também pode ser usado para o tratamento de tecido lesionado ou danificado que esteja infectado, ou tecido lesionado ou danificado em conseqüência de infecção. Tal infecção pode ser causada por um ou mais patógenos infecciosos, tais como, por exemplo, um ou mais microorganismos selecionados do grupo que consiste em vírus, bactérias e fungos, como aqui descrito.

A presente invenção ainda fornece um método de desinfecção de uma superfície, método esse que compreende o contato da superfície com uma quantidade antiinfecciosa da solução de água ORP da presente invenção. De acordo com o método da presente invenção, a superfície pode ser colocada em contato com a utilização de qualquer método adequado. Por exemplo, a superfície pode ser colocada em contato por irrigação da superfície com a solução de água ORP da invenção, de forma a desinfetar a superfície de acordo com a invenção, por exemplo, durante um procedimento do canal radicular. Adicionalmente, a superfície pode ser colocada em contato pela aplicação da solução de água ORP da presente invenção à superfície por um jato ou um spray, ou por aerossolização, nebulização ou atomização, como aqui descrito, de forma a desinfetar a superfície de acordo com a invenção. Além disso, a solução de água ORP da presente invenção pode ser aplicada à superfície com um lenço de limpeza, como aqui descrito. Com a desinfecção de uma superfície de acordo com a presente invenção, a superfície de 28/12/2018, pág. 30/140

21/127 pode ficar desprovida de microorganismos infecciosos. Alternativamente (ou adicionalmente), a solução de água ORP da presente invenção pode ser aplicada à superfície para fornecer uma barreira à infecção, desinfetando, desse modo, uma superfície de acordo com a presente invenção.

O método da presente invenção pode ser usado para desinfetar uma superfície que seja biológica, inanimada ou uma combinação destas. As superfícies biológicas podem incluir, por exemplo, tecidos dentro de uma ou mais cavidades do corpo, tais como, por exemplo, a cavidade oral, a cavidade sinusal, a cavidade craniana, a cavidade abdominal e a cavidade torácica. Tecidos dentro da cavidade oral incluem, por exemplo, tecido bucal, tecido gengival, tecido lingual e tecido da garganta. O tecido biológico também pode incluir tecido muscular, tecido ósseo, tecido orgânico, tecido mucoso, e combinações destes. Superfícies inanimadas incluem, por exemplo, dispositivos implantáveis cirurgicamente, dispositivos prostéticos e dispositivos médicos. De acordo com o método da presente invenção, as superfícies de órgãos internos, vísceras, músculos, e semelhantes, que podem ser expostos durante cirurgia, podem ser desinfetados, por exemplo, para manter a esterilidade do ambiente cirúrgico.

A presente invenção também fornece formulações para administração tópica que compreendem uma solução de água de potencial redutor oxidativo (ORP) e um agente espessante, que são preparados para gerar eficácia e estabilidade aumentadas.

A quantidade de água presente nas formulações da invenção é geralmente de cerca de 10% por peso a cerca de

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95% por peso, com base no peso da formulação. De preferência, a quantidade de água presente é de cerca de 50% por peso a cerca de 90% por peso.

As formulações da invenção incluem, de preferência, 5 uma solução de água ORP que compreende água anódica e água catódica. A água anódica é produzida na câmara anódica da célula de eletrólise usada na presente invenção. A água catódica é produzida na câmara catódica da célula de eletrólise.

A formulação para administração tópica de acordo com a presente invenção ainda compreende um agente espessante. Qualquer agente espessante adequado pode ser usado para produzir uma formulação que possui a viscosidade desejada, que geralmente é maior do que a da solução de água ORP isolada. O agente espessante utilizado é compatível com a solução de água ORP e outros componentes opcionais na Agentes espessantes adequados incluem, sem polímeros e hidroxietilcelulose. Polímeros adequados podem ser homopolímeros ou copolímeros e são opcionalmente entrecruzados. Outros agentes espessantes adequados são geralmente conhecidos na técnica (veja, por

Cosmetic and Personal Care

Additives, 2^a ed., Ashe e cols. eds. (2002), e “Handbook of Pharmaceutical Excipients”, 4a ed., Rowe e cols. eds.

(2003)).

formulação.

limitação, exemplo,

Handbook of

Agentes espessantes preferidos são polímeros baseados no ácido acrílico. Mais preferivelmente, os agentes espessantes são polímeros baseados no ácido acrílico de alto peso molecular, entrecruzados. Esses polímeros possuem a seguinte estrutura geral:

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Tais polímeros são vendidos sob o nome comercial Carbopol® por Noveon. Polímeros Carbopol® são geralmente fornecidos como modificadores da reologia para uso em espessantes, agentes de suspensão e estabilizantes em diversos produtos de higiene pessoal, substâncias farmacêuticas e materiais de limpeza doméstica. Os polímeros Carbopol® podem ser usados tanto na forma sólida (por exemplo, pó) quanto na forma líquida.

Os polímeros baseados no ácido acrílico adequados para uso na invenção podem ser homopolímeros ou copolímeros. Homopolímeros adequados podem ser entrecruzados, de preferência com alil sacarose ou alilpentaeritritol. Copolímeros de ácido acrílico adequados são modificados por alquil acrilatos de cadeia longa (C10-C30) e podem ser entrecruzados, de preferência com alilpentaeritritol.

Polímeros Carbopol® são neutralizados a fim de obter uma viscosidade máxima. Como fornecidos, polímeros Carbopol® são secos, moléculas ácidas intimamente enroladas, mantidas em uma estrutura enrolada por ligações de hidrogênio. Quando dispersos na água ou em outro solvente, eles começam a se hidratar e se desenrolam parcialmente. A forma mais comum para se obter espessamento de 28/12/2018, pág. 33/140

24/127 máximo de polímeros Carbopol® é pela conversão do polímero ácido em um sal. Isso é obtido facilmente por neutralização com uma base comum, por exemplo, hidróxido de sódio (NaOH) ou trietanolamina (TEA). Essa neutralização desenrola o polímero de cadeia longa, edemacia a molécula de uma forma eficaz para o espessamento.

Agentes espessantes adequados gerarão a viscosidade desejada para formulação, além de outras características, tais como aparência, resistência ao cisalhamento, resistência iônica e estabilidade térmica. Por exemplo, Carbopol® 934 é preferido para uma formulação que seja uma suspensão ou emulsão (em vez de um gel transparente), com uma viscosidade maior do que 3.000 centipoise (cps). Carbopol® 974P pode alternativamente ser usado por suas propriedades bioadesivas vantajosas.

Qualquer quantidade adequada de um agente espessante está presente na formulação da invenção para gerar a viscosidade desejada para a formulação. Geralmente, a quantidade de agente espessante é de cerca de 0,1% por peso a cerca de 50% por peso, com base no peso da formulação. De preferência, a quantidade de agente espessante é de cerca de 0,1% a cerca de 10% por peso.

Em outras palavras, a quantidade de agente espessante com base no volume da solução de água ORP é geralmente de cerca de 0,1% peso/volume (mg/ml) a cerca de 50% peso/volume (mg/ml). De preferência, a quantidade de agente espessante é de cerca de 0,1% p/v a cerca de 10% p/v.

A quantidade de agente espessante geralmente é de cerca de 0,1 g/250 ml a cerca de 50 mg/250 ml da solução de água ORP. De preferência, a quantidade de agente espessante de 28/12/2018, pág. 34/140

25/127 presente é de cerca de 1 mg/250 ml a cerca de 20 mg/250 ml da solução de água ORP e, mais preferivelmente, de cerca de 3 mg/250 ml a cerca de 15 mg/250 ml.

Quando são usados polímeros baseados no ácido acrílico em baixas concentrações, a formulação flui facilmente com uma sensação suave. Em concentrações maiores, a formulação da invenção tem uma alta viscosidade e é pseudoplástica e resistente ao fluxo. Quando é aplicada força de cisalhamento por um misturador ou uma bomba, a viscosidade aparente é reduzida, e a formulação pode ser bombeada.

A formulação da invenção pode opcionalmente incluir um agente neutralizante. Qualquer agente neutralizante adequado pode ser usado para gerar o pH desejado da formulação. Agentes neutralizantes adequados incluem, por exemplo, hidróxido de sódio, trietanolamina, amônia, hidróxido de potássio, L-arginina, AMP-95, Neutrol TE, Tris Amino, Ethomeen, di-isopropanolamina, e triisopropanolamina. Outros agentes neutralizantes são geralmente conhecidos na técnica (veja, por exemplo, “Handbook of Cosmetic and Personal Care Additives”, 2^a ed., Ashe e cols. eds. (2002), e “Handbook of Pharmaceutical Excipients”, 4^a ed., Rowe e cols. eds. (2003)). Agentes neutralizantes adequados podem estar tanto na forma líquida quanto na forma sólida.

De preferência, é usada a trietanolamina neutralizadora quando o agente espessante é um polímero baseado no ácido acrílico como, por exemplo, Carbopol®. O agente neutralizante converte a formulação em um gel.

Qualquer quantidade adequada de agente neutralizante pode ser incluída na formulação da invenção. Geralmente, a de 28/12/2018, pág. 35/140

26/127 quantidade de agente neutralizante é de cerca de 0,1% por peso a cerca de 50% por peso, com base no peso da formulação. De preferência, a quantidade de agente neutralizante é de cerca de 0,1% a cerca de 10% por peso, com base no peso da formulação. Com base no volume, a quantidade de agente neutralizante está presente em uma quantidade de cerca de 1% a cerca de 50% em volume, com base no volume da solução de água ORP.

Quando adicionado em forma líquida, o agente neutralizante pode ser adicionado em uma quantidade de cerca de 1 ml/250 ml a cerca de 100 ml/250 ml da solução de água ORP. De preferência, a quantidade de agente neutralizante é de cerca de 10 ml/250 ml a cerca de 90 mg/250 ml da solução de água ORP. Adicionalmente, quando na forma sólida, o agente neutralizante pode ser adicionado em uma quantidade de cerca de

A formulação pode ainda conter componentes adicionais, tais como corantes, fragrâncias, tampões, transportadores e/ou excipientes fisiologicamente aceitáveis, e semelhantes. Exemplos de corantes adequados incluem, sem limitação, dióxido de titânio, óxidos de ferro, carbazol violeta, óxido de cromo-cobalto-alumínio, copolímeros de bis(2-propenóico)éster de 4-Bis[(2-hidroxietil)amino]-9,10antracenodiona, e semelhantes. Qualquer fragrância adequada pode ser usada.

A formulação da invenção pode ser preparada por qualquer meio adequado. Os componentes da formulação, por exemplo, a solução de água ORP e o agente espessante, podem ser misturados juntos de qualquer forma para gerar uma mistura homogênea. De preferência, os componentes são de 28/12/2018, pág. 36/140

27/127 misturados juntos por vários minutos com o uso de uma mistura elétrica ou outro dispositivo adequado para assegurar a uniformidade. Os componentes da formulação são geralmente misturados a cerca de 400 rpm a cerca de 1000 rpm, preferivelmente de cerca de 500 rpm a cerca de 800 rpm e, mais preferivelmente, de cerca de 500 rpm a cerca de 600 rpm.

A formulação é misturada por um período de tempo suficiente para gerar uma mistura homogênea, geralmente de cerca de 1 minuto a cerca de 10 minutos após todos os componentes terem sido combinados.

Quando o agente espessante estiver na forma de um pó, inicialmente ele será peneirado para a quebra de grandes aglomerados para permitir a preparação de uma formulação homogênea.

Um agente neutralizante, por exemplo, trietanolamina, pode subseqüentemente ser adicionado à formulação que contém a solução de água ORP e o agente espessante. Como observado anteriormente, a adição de trietanolamina pode fazer com que o agente espessante, por exemplo, Carbopol®, se desenrole e, dessa forma, gere uma formulação que possui a viscosidade desejada.

Um corante ou uma fragrância também pode ser acrescentado à mistura, tanto antes quanto depois de o agente espessante, por exemplo, Carbopol®, ser dissolvido na água ORP, mas antes da etapa de neutralização.

As propriedades físicas da formulação da invenção são tipicamente as mesmas daquelas da solução de água ORP presente na formulação. As propriedades da solução de água

ORP permanecem mesmo após a adição de um agente espessante de 28/12/2018, pág. 37/140

28/127 e do agente neutralizante opcional. Por exemplo, a estabilidade e o pH da própria solução de água ORP e da formulação que contém a solução de água ORP são geralmente os mesmos. Conseqüentemente, todas as características da solução de água ORP aqui descritas se aplicam à formulação da invenção.

Por exemplo, a formulação da invenção é geralmente estável por pelo menos 20 horas, e tipicamente pelo menos dois dias. Mais tipicamente, a formulação é estável por pelo menos uma semana (por exemplo, uma semana, duas semanas, três semanas, quatro semanas etc.) e, preferivelmente, pelo menos dois meses. Mais preferivelmente, a formulação é estável por pelo menos seis meses após sua preparação. Ainda mais preferivelmente, a formulação é estável por pelo menos um ano e, principalmente, por pelo menos três anos.

O pH da formulação é geralmente de cerca de 6 a cerca de 8. De preferência, o pH da formulação é de cerca de 6,2 a cerca de 7,8, mais preferivelmente de cerca de 7,2 a cerca de 7,5 e, principalmente, de cerca de 7,4 a cerca de 7,6.

A formulação da invenção pode ser usada de qualquer forma adequada para administração tópica a um paciente. Uma forma adequada inclui, sem limitação, gel, loção, creme, pasta, pomada, e semelhantes, cujas formas são conhecidas na técnica (veja, por exemplo, “Modern Pharmaceutics”, 3^a ed., Banker e cols. ed. (1996)). Géis são tipicamente uma emulsão ou suspensão semi-sólida que possui uma estrutura tridimensional. De preferência, a formulação está na forma de um gel.

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Pastas são geralmente suspensões semi-sólidas que freqüentemente contêm uma grande porção de sólidos (por exemplo, 20% a 50%) dispersa em um veículo aquoso ou gorduroso. Loções são tipicamente emulsões líquidas que contêm um veículo baseado em água e voláteis (mais de 50%) e que possuem uma viscosidade suficientemente baixa (menos de 30.000 cps) para serem derramados. Pomadas e cremes são geralmente emulsões ou suspensões semi-sólidas que podem conter hidrocarbonetos ou polietileno glicóis como parte do veículo, juntamente com outros componentes voláteis.

Quando a formulação da invenção estiver na forma de um gel, a viscosidade do gel estará na faixa de cerca de 10.000 a cerca de 100.000 centipoise (cps) (por exemplo, cerca de 15.000 cps, cerca de 20.000 cps, cerca de 25.000 cps, cerca de 30.000 cps, cerca de 35.000 cps, cerca de

40.000 cps, cerca de 45.000 cps, cerca de 50.000 cps, cerca de 55.000 cps, cerca de 60.000 cps, cerca de 65.000 cps, cerca de 70.000 cps, cerca de 75.000 cps, cerca de 80.000 cps, cerca de 85.000 cps, cerca de 90.000 cps, cerca de

95.000 cps, ou intervalos desses valores), quando medida em temperatura ambiente (cerca de 25°C).

O pH do gel está tipicamente na faixa de cerca de 6,0 a cerca de 8,0. Acima desse pH, a viscosidade do agente espessante, por exemplo, o polímero Carbopol®, pode diminuir, gerando uma formulação tópica insatisfatória. De preferência, o pH do gel é de cerca de 6,4 a cerca de 7,8, mais preferivelmente de cerca de 7,2 a cerca de 7,5, e mais preferivelmente de cerca de 7,4 a cerca de 7,6.

A formulação da invenção é adequada para administração tópica a um paciente, incluindo um ser humano e/ou animal,

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30/127 para o tratamento de várias condições. Especificamente, a formulação pode ser aplicada em animais (por exemplo, camundongos, ratos, porcos, vacas, cavalos, cachorros, gatos, coelhos, porquinhos-da-índia, hamsters, pássaros) e seres humanos. A administração tópica inclui aplicação à pele, bem como às vias de administração oral, intranasal, intrabrônquica e retal.

Em outra modalidade, a invenção é dirigida a um método para o tratamento de uma condição em um paciente pela administração tópica de uma formulação que compreende uma solução de água ORP e um agente espessante.

Condições em um paciente que podem ser tratadas de acordo com a invenção incluem, por exemplo, as seguintes: agente de limpeza cirúrgica/de feridas abertas; desinfecção de patógenos cutâneos (por exemplo, para bactérias, micoplasmas, vírus, fungos, príons); desinfecção de feridas (por exemplo, ferimentos de guerra); promoção da cicatrização de feridas; promoção da cicatrização de queimaduras; tratamento de fungos cutâneos; psoríase; péde-atleta; infecções otológicas (por exemplo, ouvido de nadador); feridas traumáticas; infecções agudas, subcrônicas e crônicas (por exemplo, infecções do pé diabético sendo um exemplo desse último tipo), úlceras de pressão, dermoabrasão, feridas desbridadas, renovação da superfície a laser, sítios doadores/enxertos, feridas exsudativas de espessura parcial e total, lesões superficiais (lacerações, cortes, abrasões, pequenas irritações cutâneas) e outras aplicações médicas no corpo do ser humano ou do animal. Nas úlceras tratadas de acordo com a invenção, pode haver ou não abscessos ou tecido de 28/12/2018, pág. 40/140

31/127 necrótico.

Adicionalmente, a invenção é dirigida a um método para a promoção de cicatrização de feridas em um paciente pela aplicação em uma ferida de uma formulação que compreende uma solução aquosa de potencial redutor oxidativo e um agente espessante. A ferida a ser tratada pode ser causada por qualquer cirurgia, úlcera ou por outro meio. As úlceras que podem ser tratadas incluem, por exemplo, úlceras em pé diabético.

A invenção ainda está relacionada a um método para a prevenção de uma condição em um paciente pela administração tópica de uma formulação que compreende uma solução de água ORP e um agente espessante. Por exemplo, a formulação (por exemplo, na forma de um gel) pode ser usada como uma barreira em feridas abertas para evitar infecção. Especificamente, a formulação (por exemplo, na forma de um gel) pode ser aplicada à superfície de uma ferida, por exemplo, uma ulceração do pé em um diabético, que esteja propensa a complicações neurológicas e vasculares. A formulação assim aplicada pode fornecer uma barreira à infecção, uma vez que essas feridas constituem a porta de entrada principal para infecção para pacientes diabéticos.

A formulação pode ser usada para evitar doenças sexualmente transmitidas em um paciente, incluindo, por exemplo, infecções. Tais infecções que podem ser evitadas incluem herpes, vírus da imunodeficiência humana (HIV) e infecções vaginais. Quando a formulação estiver na forma de um gel, ela poderá ser usada como um espermicida.

A formulação da invenção pode ser usada ou aplicada em uma quantidade terapeuticamente eficaz para gerar o efeito de 28/12/2018, pág. 41/140

32/127 terapêutico desejado sobre bactérias, vírus e/ou germes. Como aqui usada, uma quantidade terapeuticamente eficaz refere-se a uma quantidade da formulação que resulta em uma melhora da condição tratada ou a ser evitada. Por exemplo, quando usada para tratar uma infecção, uma quantidade terapeuticamente eficaz da formulação reduz a extensão da infecção e/ou evita infecção adicional. Como pode ser observado por aqueles habilitados na técnica, a eficácia da formulação da invenção que resulta da administração da formulação pode ser de curto prazo (ou seja, poucos dias) e/ou de longo prazo (por exemplo, meses).

A formulação pode ainda ser aplicada ao longo de um período de tempo suficiente, por exemplo, cerca de um, cerca de dois, vários dias, uma semana, ou várias semanas, até que seja observado o efeito desejado no paciente.

A formulação pode ser aplicada em qualquer forma adequada. Por exemplo, uma quantidade da formulação pode ser aplicada à superfície do paciente a ser tratada, e depois espalhada uniformemente com o uso dos próprios dedos do paciente. Alternativamente, um profissional de saúde pode aplicar a formulação no tecido do paciente. Um implemento adequado, por exemplo, um lenço ou tecido descartável, pode ser usado para aplicar a formulação.

A água ORP da presente invenção é produzida por um processo de oxidação-redução, que pode ser denominado uma reação eletrolítica ou redox, na qual a energia elétrica é usada para produzir uma alteração química em uma solução aquosa. A energia elétrica é introduzida e transportada através da água pela condução de carga elétrica de um ponto a outro na forma de uma corrente elétrica. Para que a de 28/12/2018, pág. 42/140

33/127 corrente elétrica surja e perdure, devem existir transportadores de cargas na água, e deve haver uma força que faça com que os transportadores se movam. Os transportadores de cargas podem ser elétrons, como no caso de metal e semicondutores, ou podem ser íons positivos e negativos, no caso de soluções.

Uma reação de redução ocorre no catodo, enquanto uma reação de oxidação ocorre no anodo no processo para a preparação de uma solução de água ORP de acordo com a invenção. As reações redutoras e oxidativas específicas que ocorrem são descritas no Pedido Internacional WO 03/048421

A1.

Como aqui usada, a água produzida em um anodo é denominada água anódica, e a água produzida em um catodo é denominada água catódica. A água anódica contém espécies oxidadas produzidas pela reação eletrolítica, enquanto a água catódica contém espécies reduzidas pela reação.

A água anódica geralmente tem um pH baixo, tipicamente de cerca de 1 a cerca de 6,8. A água anódica geralmente contém cloro em várias formas, incluindo, por exemplo, gás cloro, íons cloreto, ácido clorídrico e/ou ácido hipocloroso. O oxigênio em várias formas está opcionalmente presente, incluindo, por exemplo, gás oxigênio, peróxidos, e/ou ozônio. A água catódica geralmente tem um pH elevado, tipicamente de cerca de 7,2 a cerca de 11. A água catódica geralmente contém gás hidrogênio, radicais hidroxila e/ou íons sódio.

A solução de água ORP da invenção pode ser ácida, neutra ou básica, e geralmente tem um pH de cerca de 1 a cerca de 14. Nesse pH, a solução de água ORP pode ser de 28/12/2018, pág. 43/140

34/127 aplicada com segurança em quantidades adequadas às superfícies duras, sem danificar as superfícies ou danificar objetos, por exemplo, a pele humana, que entram em contato com a solução de água ORP. Tipicamente, o pH da solução de água ORP é de cerca de 3 a cerca de 8. Mais preferivelmente, o pH da solução de água ORP é de cerca de

6.4 a cerca de 7,8, ainda mais preferivelmente de cerca de 7,2 a cerca de 7,5 e, principalmente, o pH é de cerca de

7.4 a cerca de 7,6.

A solução de água ORP da presente invenção geralmente tem um potencial de oxidação-redução de cerca de —1.000 milivolts (mV) a cerca de +1.350 milivolts (mV). Esse potencial é uma medida da tendência (ou seja, o potencial) da solução para aceitar ou transferir elétrons que é percebida por um eletrodo metálico, e comparada com um eletrodo de referência na mesma solução. Esse potencial pode ser medido por técnicas padronizadas que incluem, por exemplo, medida do potencial elétrico em milivolts da solução de água ORP em relação ao eletrodo-padrão de referência de prata/cloreto de prata. A água ORP geralmente tem um potencial de cerca de —400 mV a +1.150 mV. De preferência, a solução de água ORP tem um potencial de cerca de 0 mV a cerca de +1.250 mV e, mais preferivelmente, de cerca de +500 mV a cerca de +1.250 mV. Ainda mais preferivelmente, a água ORP da presente invenção tem um potencial de cerca de +800 mV a cerca de +1.100 mV, ainda mais preferivelmente de cerca de +800 mV a cerca de +1.000 mV e, principalmente, de cerca de +850 mV a cerca de +1.000 mV.

Várias espécies iônicas e outras espécies podem estar de 28/12/2018, pág. 44/140

35/127 presentes na solução de água ORP da invenção. Por exemplo, a solução de água ORP pode conter cloro (por exemplo, cloro livre e cloro ligado) e, opcionalmente, ozônio e peróxidos (por exemplo, peróxido de hidrogênio). Acredita-se que a presença de uma ou mais dessas espécies contribua para a capacidade desinfetante da solução de água ORP para matar diversos microorganismos, por exemplo, bactérias e fungos, além de vírus.

Cloro livre tipicamente inclui, sem limitação, ácido hipocloroso (HClO), íons hipoclorito (ClO^-), hipoclorito de sódio (NaOCl), íon cloreto (Cl^-), íons cloreto (ClO2), gás cloro dissolvido (Cl2), e outras espécies de radical cloro. A proporção de ácido hipocloroso para íon hipoclorito depende do pH. Em um pH de 7,4, os níveis de ácido hipocloroso são de cerca de 25 ppm a cerca de 75 ppm. A temperatura também tem um impacto na proporção do componente de cloro livre.

O cloro ligado é cloro em combinação química com amônia ou aminas orgânicas (por exemplo, cloraminas). O cloro ligado está geralmente presente em uma quantidade de até cerca de 20 ppm.

Cloro e, opcionalmente, ozônio e peróxido de hidrogênio podem estar presentes na solução de água ORP da invenção em qualquer quantidade adequada. Os níveis desses componentes podem ser medidos por métodos conhecidos na técnica.

Tipicamente, o teor de cloro total, que inclui tanto o cloro livre quanto o cloro ligado, é de cerca de 50 partes por milhão (ppm) a cerca de 200 ppm. De preferência, o teor de cloro total é de cerca de 80 ppm a cerca de 150 ppm.

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O teor de cloro pode ser medido por métodos conhecidos na técnica como, por exemplo, o método colorimétrico DPD (Lamotte Company, Chestertown, Maryland) ou outros métodos conhecidos estabelecidos pela “Environmental Protection

Agency”. No método colorimétrico DPD, uma cor amarela é formada pela reação de cloro livre com N,N-dietil-pfenilenediamina (DPD), e a intensidade é medida com um calorímetro calibrado que fornece o resultado em partes por milhão. Uma adição posterior de iodeto de potássio dá à solução uma cor rosa para gerar o valor do cloro total. A quantidade de cloro ligado presente é então determinada subtraindo-se o cloro livre do cloro total.

Tipicamente, dióxido de cloro está presente em uma quantidade de cerca de 0,01 ppm a cerca de 5 ppm, preferivelmente de cerca de 1,0 ppm a cerca de 3,0 ppm e, mais preferivelmente, de cerca de 1,0 ppm a cerca de 1,5 ppm.

O ozônio está opcionalmente presente em uma quantidade de cerca de 0,03 ppm a cerca de 0,2 ppm e, preferivelmente, de cerca de 0,10 ppm a cerca de 0,16 ppm. Os níveis de peróxido de hidrogênio na solução de água ORP estão opcionalmente na faixa de cerca de 0,01 ppm a cerca de 200 ppm e, preferivelmente, entre cerca de 0,05 ppm e cerca de 100 ppm. Mais preferivelmente, peróxido de hidrogênio está presente em uma quantidade entre cerca de 0,1 ppm e cerca de 40 ppm e, principalmente, entre cerca de 1 ppm e 4 ppm. Peróxidos (por exemplo, H2O2, H2O2^- e HO2) estão geralmente presentes em uma concentração de menos de 0,12 milimolar (mM).

A quantidade total de espécies químicas de oxidação

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37/127 presente na solução de água ORP está na faixa de cerca de 2 milimolar (mM), o que inclui as espécies de cloro mencionadas anteriormente, espécies de oxigênio e espécies adicionais que podem ser difíceis de serem medidas, tais como Cl^-, ClO3, Cl2^- e CIOx. O nível de espécies químicas de oxidação presente também pode ser medido por ESR espectroscopia (usando Tempone H como a molécula captadora de spins (spin trap)).

A solução de água ORP da invenção é geralmente estável por pelo menos cerca de 24 horas e, tipicamente, pelo menos cerca de dois dias. Mais tipicamente, a solução aquosa é estável por pelo menos cerca de uma semana (por exemplo, cerca de uma semana, cerca de duas semanas, cerca de três semanas, cerca de quatro semanas etc.) e, preferivelmente, pelo menos cerca de dois meses. Mais preferivelmente, a solução de água ORP é estável por pelo menos cerca de seis meses após sua preparação. Ainda mais preferivelmente, a solução de água ORP é estável por pelo menos cerca de um ano e, principalmente, por pelo menos cerca de três anos.

Como aqui usado, o termo estável geralmente referese à capacidade de a solução de água ORP permanecer adequada para seu uso desejado, por exemplo, na descontaminação, desinfecção, esterilização, limpeza antimicrobiana e limpeza de feridas, por um período de tempo especificado após sua preparação sob condições normais de estocagem (ou seja, em temperatura ambiente).

A solução de água ORP da invenção também é estável quando estocada sob condições aceleradas, tipicamente cerca de 30°C a cerca de 60°C, por pelo menos cerca de 90 dias e, preferivelmente, cerca de 180 dias.

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As concentrações de espécies iônicas e outras espécies presentes na solução são geralmente mantidas durante a validade da solução de água ORP. Tipicamente, as concentrações de cloro livre e, opcionalmente, ozônio e peróxido de hidrogênios, são mantidas em cerca de 70% ou mais a partir de sua concentração inicial por pelo menos cerca de dois meses após a preparação da solução de água ORP. De preferência, essas concentrações são mantidas em cerca de 80% ou mais de sua concentração inicial por pelo menos cerca de dois meses após a preparação da solução de água ORP. Mais preferivelmente, essas concentrações são cerca de 90% ou mais de sua concentração inicial por pelo menos cerca de dois meses após a preparação da solução de água ORP e, principalmente, cerca de 95% ou mais.

A estabilidade da solução de água ORP da invenção pode ser determinada com base na redução na quantidade de organismos presente em uma amostra após exposição à solução de água ORP. A medida da redução da concentração de organismos pode ser realizada com o uso de qualquer organismo adequado, incluindo bactérias, fungos, leveduras, ou vírus. Organismos adequados incluem, sem limitação, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Candída albicans, e Bacillus athrophaeus (anteriormente B. subtilis). A solução de água ORP é útil tanto como um desinfetante de nível inferior capaz de uma redução de cerca de quatro log (10⁴) na concentração de microorganismos vivos quanto como um desinfetante de nível superior capaz de uma redução de cerca de seis log (10⁶) na concentração de microorganismos vivos.

Em um aspecto da invenção, a solução de água ORP é de 28/12/2018, pág. 48/140

39/127 capaz de gerar pelo menos uma redução de cerca de quatro log (10⁴) na concentração total de organismos após exposição por um minuto, quando medida pelo menos dois meses após a preparação da solução. De preferência, a solução de água ORP é capaz de uma redução da concentração de organismos como essa quando medida pelo menos cerca de seis meses após a preparação da solução. Mais preferivelmente, a solução de água ORP é capaz de uma redução da concentração de organismos como essa quando medida pelo menos cerca de um ano após a preparação da solução de água ORP e, principalmente, quando medida pelo menos três anos após a preparação da solução de água ORP.

Em outro aspecto da invenção, a solução de água ORP é capaz de pelo menos uma redução de cerca de seis log (10⁶) na concentração de uma amostra de microorganismos vivos selecionados do grupo que consiste em Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus e Candida albicans em até um minuto de exposição, quando medida pelo menos dois meses após a preparação da solução de água ORP. De preferência, a solução de água ORP é capaz de obter essa redução de organismos Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus ou Candida albicans quando medida pelo menos cerca de seis meses após a preparação e, mais preferivelmente, pelo menos cerca de um ano após a preparação. De preferência, a solução de água ORP é capaz de pelo menos uma redução de cerca de sete log (10⁷) na concentração de um microorganismo vivo como esse em até cerca de um minuto de exposição, quando medida pelo menos cerca de dois meses após a preparação.

A solução de água ORP da invenção é geralmente capaz de 28/12/2018, pág. 49/140

40/127 de reduzir uma amostra de microorganismos vivos que incluem, sem limitação, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus e Candida albicans, a partir de uma concentração inicial de cerca de 1 x 10⁶ a cerca de 1 x 10⁸ organismos/ml até uma concentração final de cerca de zero organismo/ml em até cerca de um minuto de exposição, quando medida pelo menos cerca de dois meses após a preparação da solução de água ORP. Ou seja, de uma redução de cerca de seis log (10⁶) a uma redução de cerca de oito log (10⁸) na concentração de organismos. De preferência, a solução de água ORP é capaz de obter essa redução de organismos Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus ou Candida albicans quando medida pelo menos cerca de seis meses após a preparação e, mais preferivelmente, em cerca de pelo menos um ano após a preparação.

Alternativamente, a solução de água ORP é capaz de uma redução de cerca de seis log (10⁶) na concentração de uma suspensão de esporos de esporos de Bacillus athrophaeus em até cerca de cinco minutos de exposição, quando medida pelo menos cerca de dois meses após a preparação da solução de água ORP. De preferência, a solução de água ORP é capaz de obter essa redução na concentração de esporos de Bacillus athrophaeus quando medida pelo menos cerca de seis meses após a preparação e, mais preferivelmente, pelo menos cerca de um ano após a preparação.

A solução de água ORP é ainda capaz de uma redução de cerca de quatro log (10⁴) na concentração de uma suspensão de esporos de esporos de Bacillus athrophaeus em até cerca de trinta (30) segundos de exposição, quando medida pelo de 28/12/2018, pág. 50/140

41/127 menos cerca de dois meses após a preparação da solução de água ORP. De preferência, a solução de água ORP é capaz de obter essa redução na concentração de esporos de Bacillus athrophaeus quando medida pelo menos seis meses após a preparação e, mais preferivelmente, pelo menos um ano após a preparação.

A solução de água ORP também é capaz de uma redução de cerca de seis log (10⁶) na concentração de esporos fúngicos, por exemplo, esporos de Aspergillis niger, em até cerca de cinco a cerca de dez minutos de exposição, quando medida pelo menos dois meses após a preparação da solução de água ORP. De preferência, a solução de água ORP é capaz de obter essa redução na concentração de esporos fúngicos quando medida pelo menos cerca de seis meses após a preparação e, mais preferivelmente, em cerca de pelo menos um ano após a preparação.

Em uma modalidade, a solução de água ORP da invenção opcionalmente compreende peróxido de hidrogênio (H2O2) e uma ou mais espécies de cloro. De preferência, as espécies de cloro presentes são espécies de cloro livre. As espécies de cloro livre podem ser selecionadas do grupo que consiste em ácido hipocloroso (HOCl), íons hipoclorito (OCl), hipoclorito de sódio (NaOCl), íons cloreto (ClO2^-), íon cloreto (Cl^-), gás cloro dissolvido (Cl2), e misturas destas.

Peróxido de hidrogênio está opcionalmente presente na solução de água ORP geralmente na faixa de cerca de 0,01 ppm a cerca de 200 ppm e, preferivelmente, de cerca de 0,05 ppm a cerca de 100 ppm. Mais preferivelmente, peróxido de hidrogênio, quando opcionalmente, está presente em uma de 28/12/2018, pág. 51/140

42/127 quantidade de cerca de 0,1 ppm e a cerca de 40 ppm e, principalmente, de cerca de 1 ppm a cerca de 4 ppm.

A quantidade total de espécies de cloro livre é geralmente de cerca de 10 ppm a cerca de 400 ppm, preferivelmente de cerca de 50 ppm a cerca de 200 ppm e, principalmente, de cerca de 50 ppm a cerca de 80 ppm. A quantidade de ácido hipocloroso está geralmente na faixa de cerca de 15 ppm a cerca de 35 ppm. A quantidade de hipoclorito de sódio está geralmente na faixa de cerca de 25 ppm a cerca de 50 ppm.

A solução de água ORP que compreende uma ou mais espécies de cloro é estável, como aqui descrito. Geralmente, a solução de água ORP é estável por pelo menos cerca de uma semana. De preferência, a solução de água ORP é estável por pelo menos cerca de dois meses, mais preferivelmente, a solução de água ORP é estável por pelo menos cerca de seis meses após sua preparação. Ainda mais preferivelmente, a solução de água ORP é estável por pelo menos cerca de um ano e, principalmente, por pelo menos cerca de três anos.

O pH da solução de água ORP nessa modalidade é geralmente de cerca de 6 a cerca de 8. De preferência, o pH da solução de água ORP é de cerca de 6,2 a cerca de 7,8 e, principalmente, de cerca de 7,4 a cerca de 7,6. Uma solução de água ORP exemplar da presente invenção pode compreender, por exemplo, de cerca de 15 ppm a cerca de 35 ppm de ácido hipocloroso, de cerca de 25 ppm a cerca de 50 ppm de hipoclorito de sódio, um pH de cerca de 6,2 a cerca de 7,8, e é estável por pelo menos cerca de uma semana.

Embora isso não limite de forma alguma a presente de 28/12/2018, pág. 52/140

43/127 invenção, acredita-se que o controle do pH permite uma solução de água ORP estável na qual peróxido de hidrogênio e espécies de cloro, tais como, apenas como exemplo, ácido hipocloroso e íons hipoclorito, coexistem.

Após sua preparação, a solução de água ORP ou a formulação da invenção pode ser transferida para um recipiente lacrado para distribuição e venda aos usuários finais tais como, por exemplo, instalações de assistência médica, incluindo hospitais, asilos, consultórios médicos, centros cirúrgicos ambulatoriais, consultórios dentários, e semelhantes. A forma de dosagem farmacêutica de acordo com a presente invenção compreende uma formulação para administração tópica como aqui descrita e um recipiente lacrado no qual a formulação é colocada.

Pode ser usado qualquer recipiente lacrado adequado que mantenha a esterilidade e estabilidade da solução de água ORP ou da formulação contida no recipiente. O recipiente pode ser construído por qualquer material que seja compatível com a solução de água ORP ou os componentes da formulação, por exemplo, a solução de água ORP e o agente espessante. O recipiente deve geralmente ser não reativo, de modo que os íons presentes na solução de água ORP não reajam com o recipiente em nenhum grau apreciável.

De preferência, o recipiente é construído de plástico ou vidro. O plástico pode ser rígido de tal forma que o recipiente seja capaz de ser estocado em uma prateleira. Alternativamente, o plástico pode ser flexível como, por exemplo, uma bolsa flexível.

Plásticos adequados incluem polipropileno, tereftalato de poliéster (PET), poliolefina, cicloolefina, de 28/12/2018, pág. 53/140

44/127 policarbonato, resina ABS, polietileno, cloreto de polivinila, e misturas destes. De preferência, o recipiente compreende polietileno selecionado do grupo que consiste em polietileno de alta densidade (HDPE), polietileno de baixa densidade (LDPE) e polietileno linear de baixa densidade (LLDPE). Principalmente, o recipiente é polietileno de alta densidade.

O recipiente tem uma abertura para permitir a saída da solução de água ORP ou da formulação para administração a um paciente. A abertura do recipiente pode ser tampada por qualquer meio adequado. Por exemplo, o recipiente pode ser tampado com uma tampa ou rolha de rosca. Opcionalmente, a abertura pode ainda ser selada com uma camada de folha metálica.

O gás entre o líquido e a tampa do recipiente lacrado pode ser ar ou outro gás adequado que não reaja com a solução de água ORP ou com os outros componentes de uma formulação que contém a solução de água ORP. Gases adequados para essa finalidade incluem nitrogênio, oxigênio, e misturas destes.

A invenção ainda fornece uma solução de água ORP que compreende água anódica e água catódica. A água anódica é produzida na câmara anódica da célula de eletrólise usada na presente invenção. A água catódica é produzida na câmara catódica da célula de eletrólise.

A água catódica está geralmente presente na solução de água ORP da solução em uma quantidade de cerca de 10% em volume a cerca de 90% em volume da solução. De preferência, água catódica está presente na solução de água ORP em uma quantidade de cerca de 10% em volume a cerca de 50% em

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45/127 volume, mais preferivelmente de cerca de 20% em volume a cerca de 40% em volume da solução e, principalmente, de cerca de 20% em volume a cerca de 30% em volume da solução. Adicionalmente, água anódica pode estar presente na solução de água ORP em uma quantidade de cerca de 50% em volume a cerca de 90% em volume da solução.

Como aqui observado, a solução de água ORP que contém tanto água anódica quanto água catódica pode ser ácida, neutra ou básica, e geralmente tem um pH de cerca de 1 a cerca de 14. Tipicamente, o pH da solução de água ORP é de cerca de 3 a cerca de 8. De preferência, o pH é de cerca de 6,4 a cerca de 7,8 e, mais preferivelmente, de cerca de 7,4 a cerca de 7,6.

A solução de água ORP da invenção tem uma ampla variedade de usos como desinfetante, creme para pele, limpador, anti-séptico e outros, para controlar a atividade de substâncias indesejadas ou prejudiciais presentes no ambiente. Substâncias que podem ser tratadas com a solução de água ORP incluem, por exemplo, organismos e alérgenos.

A solução de água ORP pode ser usada como um desinfetante, agente de esterilização, descontaminante, anti-séptico e/ou creme para pele. A solução de água ORP da invenção é adequada para uso nas seguintes aplicações representativas: equipamentos e dispositivos médicos, dentários e/ou veterinários; indústria de alimentos (por exemplo, superfícies duras, frutas, vegetais, carnes); hospitais/instalações de assistência médica (por exemplo, superfícies duras); indústria de cosméticos (por exemplo, limpador cutâneo); usos domésticos (por exemplo, pisos, balcões, superfícies duras); indústria de eletrônicos (por de 28/12/2018, pág. 55/140

46/127 exemplo, limpeza de circuitos, discos rígidos); e bioterrorismo (por exemplo, antraz, micróbios infecciosos).

A solução de água ORP também pode ser aplicada em seres humanos e/ou animais para o tratamento de várias condições que incluem, por exemplo, as seguintes: agente de limpeza cirúrgica/de feridas abertas; desinfecção de patógenos cutâneos (por exemplo, para bactérias, micoplasmas, vírus, fungos, príons); desinfecção de feridas de guerra; promoção da cicatrização de feridas; promoção da cicatrização de queimaduras; tratamento de úlceras estomacais; irrigação de feridas; fungos cutâneos; psoríase; pé-de-atleta; “olho vermelho” e outras infecções oculares; infecções otológicas (por exemplo, ouvido de nadador); infecções pulmonares/nasais/sinusais; e outras aplicações médicas no corpo do ser humano ou do animal. O uso de soluções de água ORP como um promotor de crescimento de células de tecidos é ainda descrito na Publicação do Pedido de Patente U.S. 2002/0160053 A1.

Embora de forma alguma isso limite a presente invenção, acredita-se que a solução de água ORP erradique as bactérias com as quais entra em contato, além de destruir todos os componentes celulares bacterianos, incluindo proteínas e DNA.

Por exemplo,	a solução de	água	ORP	é capaz de	uma
redução de	pelo	menos cerca	de	cinco	log (105)	na
concentração	de	uma amostra	de	microorganismo	vivo
selecionado	do	grupo que	consiste	em Pseudomonas

aeruginosa, Escherichia coli, Enterococcus hirae,

Acinetobacter baumannii, espécies de Acinetobacter,

Bacteroides fragilis, Enterobacter aerogenes, Enterococcus de 28/12/2018, pág. 56/140

47/127 faecalis, Enterococcus faecium resistente à vancomicina (VRE, MDR), Haemophilus influenzae, Klebsiella oxytoca, Klebsiella pneumoniae, Micrococcus luteus, Proteus mirabilis, Serratia marcescens, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus haemolyticus, Staphylococcus hominis, Staphylococcus saprophyticus, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Candida albicans e Candida tropicalis, em até 30 segundos de exposição, quando medida pelo menos dois meses após a preparação da solução de água ORP.

Em uma modalidade,	a solução	de água	ORP	administrada
de acordo com	a invenção pode	reduzir	uma	amostra de
microorganismos	vivos	que incluem,	sem	limitação,

Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus e Candida albicans, a partir de uma concentração inicial de cerca de 1 x 10⁶ a cerca de 1 x 10⁸ organismos/ml até uma concentração final de cerca de zero organismo/ml em até cerca de um minuto de exposição, quando medida pelo menos cerca de dois meses após a preparação da solução de água ORP. Isso corresponde a uma redução de cerca de seis log (10⁶) a cerca de oito log (10⁸) na concentração de organismos. De preferência, a solução de água ORP é capaz de obter uma redução de cerca de 10⁶ a cerca de 10⁸ de organismos Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus ou Candida albicans, quando medida pelo menos cerca de seis meses após a preparação e, mais preferivelmente, quando medida pelo menos cerca de um ano após a preparação.

Alternativamente, a solução de água ORP administrada de acordo com a presente invenção pode produzir uma redução de 28/12/2018, pág. 57/140

48/127 de cerca de a seis log (10⁶) na concentração de uma suspensão de esporos de Bacillus athrophaeus em até cerca de cinco minutos de exposição, quando medida pelo menos cerca de dois meses após a preparação da solução de água ORP. De preferência, a solução de água ORP administrada de acordo com a invenção pode obter uma redução de cerca de 10⁶ na concentração de esporos de Bacillus athrophaeus, quando medida pelo menos cerca de seis meses após a preparação e, mais preferivelmente, quando medida pelo menos cerca de um ano após a preparação. A solução de água ORP é ainda capaz de uma redução de cerca de quatro log (10⁴) na concentração de uma suspensão de esporos de Bacillus athrophaeus em até cerca de trinta (30) segundos de exposição, quando medida pelo menos dois meses após a preparação da solução de água ORP. De preferência, a solução de água ORP é capaz de obter essa redução na concentração de esporos de Bacillus athrophaeus quando medida pelo menos cerca de seis meses após a preparação e, mais preferivelmente, pelo menos aproximadamente um ano após a preparação.

A solução de água ORP também é capaz de uma redução de cerca de seis log (10⁶) na concentração de esporos fúngicos, por exemplo, esporos de Aspergillis niger, em até cerca de cinco a cerca de dez minutos de exposição, quando medida pelo menos dois meses após a preparação da solução de água ORP. De preferência, a solução de água ORP é capaz de obter essa redução na concentração de esporos fúngicos quando medida pelo menos seis meses após a preparação e, mais preferivelmente, pelo menos um ano após a preparação.

A solução de água ORP administrada de acordo com a de 28/12/2018, pág. 58/140

49/127 invenção pode ainda produzir uma redução de mais de 3 log (10³) na concentração de vírus, por exemplo, vírus da imunodeficiência humana (HIV) e adenovírus, após uma exposição de cerca de cinco a cerca de dez minutos, quando medida pelo menos cerca de dois meses após a preparação da solução de água ORP. De preferência, a solução de água ORP pode obter uma redução > 10³ na concentração de vírus, quando medida pelo menos cerca de seis meses após a preparação e, mais preferivelmente, quando medida pelo menos cerca de um ano após a preparação.

A solução de água ORP administrada de acordo com a invenção pode ainda inibir completamente o crescimento de Mycobacterium bovis com uma exposição de cerca de cinco minutos, quando medida pelo menos cerca de dois meses após a preparação da solução de água ORP. De preferência, a solução de água ORP pode obter a inibição total na concentração de Mycobacterium, quando medida pelo menos cerca de seis meses após a preparação e, mais preferivelmente, quando medida pelo menos cerca de um ano após a preparação.

Conseqüentemente, organismos que podem ser controlados, reduzidos, mortos ou erradicados por tratamento com a solução de água ORP incluem, sem limitação, bactérias, fungos, leveduras, e vírus. Bactérias suscetíveis incluem, sem limitação, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Bacillus athrophaeus, Streptococcus pyogenes, Salmonella choleraesuis, Pseudomonas aeruginosa, Shingella dysenteriae e outras bactérias suscetíveis. Fungos e leveduras que podem ser tratados com a solução de água ORP incluem, por exemplo, Candida albicans e

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Trichophyton mentagrophytes. A solução de água ORP também pode ser aplicada a vírus, incluindo, por exemplo, adenovírus, vírus da imunodeficiência humana (HIV), rinovírus, influenza (por exemplo, influenza A), hepatite (por exemplo, hepatite A), coronavírus (responsável pela síndrome respiratória aguda grave (SARS)), rotavírus, vírus da sincicial respiratório, vírus do herpes simples, vírus da varicela-zoster, vírus da rubéola e outros vírus suscetíveis.

Em uma modalidade preferida, a solução de água ORP da invenção pode ser utilizada em diversas aplicações dentárias. Primeiro, a solução de água ORP pode ser administrada a pacientes para a desinfecção de rotina da cavidade oral como parte de um programa em andamento de higiene oral. Segundo, a solução de água ORP pode ser usada para irrigar e/ou desinfetar tecidos orais, superfícies dentárias, cavidades, ou um canal dentário durante procedimentos orais ou maxilofaciais. Terceiro, a solução de água ORP pode ser administrada para tratar pacientes com dano aos tecidos orais causado, procedimentos ou doenças orais

Finalmente, a solução de água ORP pode ser usada para desinfetar objetos relacionados à odontologia, incluindo, por exemplo, instrumentos dentários, tubos de irrigação de um sistema de irrigação de consultório dentário, e dentaduras.

O uso de soluções anti-sépticas como, por exemplo, clorexidina, peróxido de hidrogênio e água sanitária em aplicações dentárias é conhecido na técnica. As soluções anti-sépticas orais atuais apresentam várias desvantagens.

por exemplo, por ou maxilofaciais.

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Significativamente, esses anti-sépticos orais possuem alta toxicidade e podem danificar tecido saudável, causando um retardo do tempo de cicatrização. Além disso, em função da alta toxicidade, esses anti-sépticos orais não podem ser usados por períodos de tempo prolongados. Outros efeitos colaterais adversos incluem alteração do paladar e coloração dos dentes. Inversamente, a solução de água ORP não é tóxica ou irritante e oferece uma abordagem aprimorada ao tratamento e desinfecção com soluções antisépticas orais.

Em uma modalidade, a solução de água ORP pode ser administrada aos pacientes para a desinfecção de rotina da cavidade oral como parte de um programa em andamento de higiene oral. A solução de água ORP reduz os níveis de um amplo espectro de microorganismos orais presentes na cavidade oral diminuindo, dessa forma, a ocorrência de doenças infecciosas. A solução de água ORP é administrada aos pacientes em qualquer forma adequada. De preferência, a solução de água ORP é administrada como um enxaguatório bucal ou anti-séptico bucal. De preferência, pacientes enxáguam por pelo menos cerca de 30 segundos, mais preferivelmente, por pelo menos cerca de um minuto e, principalmente, por pelo menos cerca de dois minutos. Pacientes enxáguam diariamente, por exemplo, ou duas vezes ao dia, ou três vezes ao dia. De preferência, os pacientes devem enxaguar com solução de água ORP após as refeições. Pacientes devem escovar e utilizar fio dental em seus dentes diariamente em combinação com enxágüe com solução de água ORP. Os pacientes podem, por exemplo, escovar e utilizar fio dental em seus dentes antes de enxaguar com a de 28/12/2018, pág. 61/140

52/127 solução de água ORP.

A redução da flora microbiana oral com o enxágüe com a solução de água ORP pode ser monitorada. Os níveis da flora microbiana são medidos pelo cultivo de swabs bacteriológicos retirados da mucosa bucal. Primeiro, é coletado um swab bacteriológico do nível de base. A redução imediata da flora microbiana oral com o enxágüe com solução de água ORP pode ser determinada coletando-se swabs bacteriológicos cerca de dez minutos após o enxágüe e cerca de quinze minutos após o enxágüe. A redução de longo prazo da flora microbiana oral após um regime de enxágüe também pode ser determinada. Por exemplo, podem ser coletados swabs bacteriológicos após um mês de enxágüe com a solução de água ORP.

Em uma segunda modalidade, a solução de água ORP também pode ser usada como um irrigante e/ou desinfetante durante procedimentos orais ou maxilofaciais. A solução de água ORP pode ser usada como o irrigante na raspagem ultrasônica. A raspagem ultra-sônica é um procedimento para o tratamento de doença periodontal que remove a placa acima e abaixo da linha gengival. O raspador ultra-sônico é operado em conjunto com um líquido de refrigeração ou irrigante, e a atividade de cavitação dentro de uma solução contribui para a ruptura e remoção de placa. Tipicamente, o irrigante é água. O uso de solução de água ORP em vez de água pode tornar mais lenta a recolonização de micróbios após a remoção da placa. O tratamento pode ser monitorado com uma avaliação da inflamação, sangramento e profundidades das bolsas. A raspagem ultra-sônica com solução de água ORP como irrigante pode ser combinada com outros tratamentos de de 28/12/2018, pág. 62/140

53/127 acompanhamento. O paciente deve escovar e utilizar fio dental em seus dentes diariamente. De preferência, a raspagem ultra-sônica é combinada com a administração ambulatorial de solução de água ORP na forma de um enxágüe. O paciente deve enxaguar com solução de água ORP por pelo menos cerca de dois meses ou, de preferência, pelo menos cerca de três meses após o procedimento de raspagem ultrasônica.

A solução de água ORP é usada como um irrigante para limpar e desinfetar uma cavidade ou um canal dentário durante a restauração dentária. O tratamento para cárie ou cavidades dentária consiste na remoção do material careado e sua substituição por material de restauração ou enchimento. Primeiro, o material careado é removido por ação de uma broca. A seguir, o dente é preparado para o preenchimento, o que inclui as etapas de limpeza e desinfecção da superfície da dentina e/ou esmalte. A solução de água ORP pode ser usada como uma solução de irrigação para remover por lavagem restos, tais como material de dente desbridado. Alternativamente, a solução de água ORP pode ser usada para desinfetar a superfície da dentina e/ou esmalte, antes do preenchimento. A solução de água ORP pode ser aplicada por spray na superfície, ou por umedecimento da superfície com um pincel ou esponja. Da mesma forma, a solução de água ORP pode ser usada como uma solução de irrigação durante tratamento endodôntico ou do canal radicular. O tratamento endodôntico é necessário caso o paciente tenha uma infecção bacteriana no tecido nervoso de um dente. O tratamento endodôntico consiste na criação de um orifício de acesso à câmara da polpa com uma broca, de 28/12/2018, pág. 63/140

54/127 limpeza do interior do dente, preenchimento e selagem do interior do dente com material de preenchimento do canal radicular, e preenchimento do orifício de acesso. Como parte da etapa de limpeza, são usados irrigantes para dissolver e remover restos de materiais. A solução de água ORP pode ser usada como o irrigante durante tratamento endodôntico. Alternativamente, a solução de água ORP pode ser usada para desinfetar o interior do dente após a limpeza e antes do preenchimento.

A solução de água ORP é usada como irrigante e/ou anti-séptico durante extração dentária. Após o dente ser extraído, o alvéolo é irrigado com a solução de água ORP para dissolver e remover restos. O alvéolo pode ser irrigado por pelo menos cerca de 30 segundos, ou pelo menos cerca de um minuto, ou pelo menos cerca de dois minutos ou mais tempo, se necessário. De preferência, a solução de água ORP é usada quando o dente é extraído em conseqüência de um abscesso ou doença periodontal.

A solução de água ORP é usada como irrigante e/ou anti-séptico intra-operatório durante cirurgias maxilofaciais. Dois problemas recorrentes na cirurgia maxilofacial são sangramento e infecção. A solução de água ORP reduz o sangramento no campo cirúrgico. A solução de água ORP também diminui o tempo de cicatrização pósoperatório.

A solução de água ORP é administrada aos pacientes que se submetem cirurgias maxilofaciais de qualquer forma adequada. A solução de água ORP pode ser administrada imediatamente antes, durante ou imediatamente depois da cirurgia. Por exemplo, toda a cavidade oral pode ser de 28/12/2018, pág. 64/140

55/127 enxaguada uma, duas ou três vezes, antes de uma incisão. De preferência, a cavidade oral é enxaguada duas vezes. A solução de água ORP pode ser usada para irrigar o local da operação. De preferência, a solução de água ORP é usada para limpar o local da operação, antes da sutura. O local da operação pode ser irrigado por pelo menos um minuto, ou pelo menos dois minutos, ou pelo menos três minutos ou mais tempo, se necessário.

Em uma terceira modalidade, a solução de água ORP pode ser administrada aos pacientes com tecidos orais danificados por uma doença ou um procedimento oral ou

maxilofacial.	De	preferência,	a solução de	água ORP é
administrada	aos	pacientes	que sofrem	de	doenças
periodontais.	Uma	doença periodontal é uma	infecção
bacteriana crônica	que afeta	as gengivas e	o	osso que

apóiam os dentes, e é uma das causas principais de perda de dentes. As bactérias que causam doenças estão presentes na placa acima e abaixo da linha gengival. Exemplos de doenças periodontais include gengivite, ou inflamação dos tecidos gengivais, e periodontite, uma doença inflamatória do periodonto. O tratamento com solução de água ORP causa a interrupção da infecção. Também há uma redução ou eliminação da inflamação e do sangramento. Além disso, em muitos casos, o tratamento com solução de água ORP produz regeneração óssea, interrupção da perda de adesão periodontal.

A solução de água ORP é administrada aos pacientes que sofrem de doenças periodontais de qualquer forma adequada.

De preferência, a solução de água ORP é administrada como um enxaguatório bucal ou anti-séptico bucal. De de 28/12/2018, pág. 65/140

56/127 preferência, pacientes enxáguam por pelo menos cerca de 30 segundos, mais preferivelmente por pelo menos cerca de um minuto e, principalmente, por pelo menos cerca de dois minutos. Pacientes enxáguam diariamente, ou duas vezes ao dia ou, de preferência, três vezes ao dia. De preferência, os pacientes devem enxaguar com solução de água ORP após as refeições. Pacientes devem escovar e utilizar fio dental em seus dentes diariamente em combinação com enxágüe com solução de água ORP. O tratamento de doença periodontal com utilização da solução de água ORP pode continuar até que a doença esteja resolvida. Dependendo da progressão da doença, a solução de água ORP pode ser administrada por pelo menos cerca de um mês ou, de preferência, cerca de dois meses ou, mais preferivelmente, cerca de três meses ou mais. A administração da solução de água ORP pode ser combinada com outros tratamentos para doenças periodontais. Tais tratamentos incluem remoção mecânica da placa e de cálculos, e a administração de antibióticos. De preferência, a administração da solução de água ORP é combinada com remoção mecânica de placa e cálculo. De preferência, a administração da solução de água ORP não é combinada com antibióticos.

A solução de água ORP também pode ser administrada aos pacientes com lesões ou úlceras da mucosa oral. Lesões são acompanhadas por dor e vermelhidão, e podem prejudicar a mastigação e a deglutição. As lesões ou úlceras têm muitas causas. Por exemplo, estomatite da dentadura são lesões causadas pelo uso de dentaduras. Pacientes imunocomprometidos também têm maior probabilidade de desenvolver lesões ou úlceras da mucosa oral. A candidíase de 28/12/2018, pág. 66/140

57/127 oral, uma infecção fúngica da membrana mucosa, causa lesões em torno da boca. A mucosite oral é um efeito colateral comum apresentado por pacientes submetidos a tratamento do câncer como, por exemplo, quimioterapia, radiação ou transplante de medula óssea.

A solução de água ORP é administrada aos pacientes que sofrem de lesões ou úlceras da mucosa oral de qualquer forma adequada. De preferência, a solução de água ORP é administrada como um enxaguatório bucal ou anti-séptico bucal. De preferência, os pacientes enxáguam por pelo menos cerca de 30 segundos, mais preferivelmente por pelo menos cerca de um minuto e, principalmente, por pelo menos cerca de dois minutos. Os pacientes enxáguam diariamente, ou duas vezes ao dia ou, mais preferivelmente, três vezes ao dia. O tratamento de lesões ou úlceras da mucosa oral com utilização da solução de água ORP pode continuar até que as lesões ou úlceras estejam cicatrizadas. Dependendo da progressão da doença, a solução de água ORP pode ser administrada por cerca de duas semanas, por exemplo, ou cerca de três semanas, ou cerca de quatro semanas, ou cerca de dois meses ou mais. A administração da solução de água ORP pode ser profilática em pacientes suscetíveis às lesões ou úlceras da mucosa oral.

A solução de água ORP pode ser administrada aos pacientes para promover a cicatrização de tecidos orais lesionados, por exemplo, por procedimentos dentais, cirurgia oral ou cirurgia maxilofacial. A solução de água ORP pode ser administrada como acompanhamento pósoperatório para tais procedimentos ou cirurgias. Pacientes exibem tempo de cicatrização diminuído, comparado com o de 28/12/2018, pág. 67/140

58/127 tratamento-padrão sem solução de água ORP.

A solução de água ORP é administrada aos pacientes após se submeterem a um procedimento oral ou maxilofacial de qualquer forma adequada. De preferência, a solução de água ORP é administrada como um enxaguatório bucal ou antiséptico bucal. De preferência, os pacientes enxáguam por pelo menos cerca de 30 segundos, mais preferivelmente por pelo menos cerca de um minuto e, principalmente, por pelo menos cerca de dois minutos. Os pacientes enxáguam diariamente ou, de preferência, duas vezes ao dia ou, mais preferivelmente, três vezes ao dia. A solução de água ORP pode ser administrada por cerca de uma semana, ou por cerca de duas semanas, ou por cerca de um mês, ou por cerca de três meses ou mais se necessário. A solução de água ORP pode ser administrada em combinação com NSAID. A solução de água ORP também pode ser administrada em combinação com antibióticos. De preferência, não é administrado nenhum antibiótico.

A solução de água ORP pode ser aplicada para desinfetar e esterilizar equipamentos dentários. Por exemplo, para desinfetar e esterilizar instrumentos dentários, o instrumento é mantido em contato com a solução de água ORP por um período de tempo suficiente para reduzir o nível de organismos presente no equipamento até um nível desejado. Para desinfetar e esterilizar tubos de irrigação do consultório dentário, por exemplo, os tubos de irrigação são enxaguados com a solução de água ORP. A redução dos níveis de bactérias pode ser medida colhendo-se culturas bacterianas antes e depois do enxágüe dos tubos.

A solução de água ORP pode ser aplicada para de 28/12/2018, pág. 68/140

59/127 desinfetar e esterilizar dentaduras. Por exemplo, para desinfetar e esterilizar dentaduras dentárias, as dentaduras são mantidas em contato com a solução de água ORP por um período de tempo suficiente para reduzir o nível de organismos presente no equipamento até um nível desejado. As dentaduras são mantidas em contato com a solução de água ORP de qualquer forma adequada. Por exemplo, as dentaduras podem ser embebidas na solução de água ORP. Alternativamente, as dentaduras podem ser escovadas com a solução de água ORP e uma escova.

A solução de água ORP administrada de acordo com a presente invenção também pode ser usada como a solução de irrigação para dispositivos de hidrocirurgia usados para o desbridamento de lesões orais. Dispositivos de hidrocirurgia adequados podem incluir, por exemplo, os dispositivos VersaJet vendidos nos Estados Unidos por Smith e Nephew, Debritom na Europa por Medaxis, JetOx no Estados Unidos e Europa por DeRoyal ou PulsaVac na Itália. Acredita-se que a solução de água ORP possa atuar sinergicamente com o dispositivo pela redução da carga microbiana nas lesões orais e ao evitar a formação de névoas infecciosas durante o procedimento de desbridamento. Dessa forma, o dispositivo pode ser usado para desbridar uma lesão oral com irrigação contínua, reduzir o processo de infecção e evitar a formação de névoas infecciosas de acordo com a presente invenção.

A solução de água ORP administrada de acordo com a presente invenção também pode ser usada como a solução de irrigação para dispositivos de pressão negativa que são usados para a redução de edema e aumento do fluxo de 28/12/2018, pág. 69/140

60/127 sangüíneo. Dispositivos de pressão negativa adequados podem incluir, por exemplo, um ou mais dispositivos de fechamento de feridas assistidos a vácuo tais como, por exemplo, os dispositivos V.A.C.® e V.A.C.® Instill™ vendidos nos Estados Unidos por Kinetic Concepts, Inc. Acredita-se que a solução de água ORP possa atuar sinergicamente com o dispositivo através do controle do processo inflamatórioalérgico, ao mesmo tempo em que reduz a carga microbiana. Dessa forma, o dispositivo pode ser aplicado a uma lesão oral aberta com irrigação intermitente ou contínua para tratar ou evitar infecção ou necrose de tecido de acordo com a presente invenção.

A administração de solução ORP pode opcionalmente ser combinada com a administração de antibióticos tópicos e/ou sistêmicos. Antibióticos adequados podem incluir, sem limitação, penicilina, cefalosporinas ou outros βlactâmicos, macrolídeos (por exemplo, eritromicina, 6-0metileritromicina e azitromicina), fluorquinolonas, sulfonamidas, tetraciclinas, aminoglicosídeos, clindamicina, quinolonas, metronidazol, vancomicina, cloranfenicol, derivados eficazes em termos antibacterianos destes, e combinações destes. Agentes antiinfecciosos adequados também podem incluir agentes tais como, por exemplo, anfotericina B, fluconazol, flucitosina, cetoconazol, miconazol, derivados destes, e combinações destes. Agentes antiinflamatórios adequados podem incluir, por exemplo, um ou mais fármacos antiinflamatórios, por exemplo, um ou mais esteróides antiinflamatórios ou um ou mais fármacos antiinflamatórios não esteróides (NSAIDs). Fármacos antiinflamatórios exemplares podem incluir, por de 28/12/2018, pág. 70/140

61/127 exemplo, ciclofilinas, proteínas de ligação FIS, anticorpos anti-citocina (por exemplo, anti-TNF), esteróides e NSAIDs.

Verificou-se que a solução de água ORP administrada de acordo com a invenção é praticamente isenta de toxicidade aos tecidos normais e células mamíferas normais. A solução de água ORP administrada de acordo com a invenção não produz diminuição significativa da viabilidade de células eucarióticas, nenhum aumento significativo da apoptose, nenhuma aceleração significativa do envelhecimento celular e/ou nenhum dano oxidativo significativo ao DNA em células mamíferas. A não toxicidade é particularmente vantajosa, e talvez até mesmo surpreendente, considerando que o poder desinfetante da solução de água ORP administrada de acordo com a invenção é aproximadamente equivalente àquele do peróxido de hidrogênio, embora seja significativamente menos tóxica do que o peróxido de hidrogênio aos tecidos normais e células mamíferas normais. Esses achados demonstram que a solução de água ORP administrada de acordo com a presente invenção é segura para uso, por exemplo, em mamíferos, incluindo seres humanos.

Para a solução de água ORP administrada de acordo com a invenção, a taxa de viabilidade celular é preferivelmente pelo menos cerca de 65%, mais preferivelmente pelo menos cerca de 70% e, ainda mais preferivelmente, pelo menos cerca de 75% após uma exposição de cerca de 30 minutos à solução de água ORP. Além disso, a solução de água ORP administrada de acordo com a invenção preferivelmente faz com que apenas até cerca de 10% das células, mais preferivelmente apenas até cerca de 5% das células e, ainda mais preferivelmente, apenas até cerca de 3% das células de 28/12/2018, pág. 71/140

62/127 exponham Anexina-V em suas superfícies celulares, quando colocadas em contato com a solução de água ORP por até cerca de trinta minutos ou menos (por exemplo, após cerca de trinta minutos ou após cerca de cinco minutos de contato com a solução de água ORP). Além disso, a solução de água ORP administrada de acordo com a invenção preferivelmente faz com que menos de cerca de 15% das células, mais preferivelmente menos de cerca de 10% das células e, ainda mais preferivelmente, menos de cerca de 5% das células expressem a enzima SA-p-galactosidase, após exposição crônica à solução de água ORP. A solução de água ORP administrada de acordo com a invenção preferivelmente produz a mesma fração da formação de aduto oxidativo de DNA causada por soro fisiológico, por exemplo, menos de cerca de 20% da formação de aduto oxidativo de DNA, menos de cerca de 10% da formação de aduto oxidativo de DNA, ou cerca de 5% ou menos da formação de aduto oxidativo de DNA normalmente causado por peróxido de hidrogênio em células tratadas sob condições equivalentes.

A solução de água ORP administrada de acordo com a invenção não produz degradação de RNA significativa. Conseqüentemente, RNA extraído de culturas de células humanas após uma exposição de cerca de 30 minutos à solução de água ORP ou cerca de 3 horas após uma exposição de cerca de 30 minutos, e analisado por eletroforese em gel de desnaturação, não exibirá tipicamente nenhuma degradação de RNA significativa e exibirá tipicamente duas bandas distintas que correspondem aos RNAs ribossômicos eucarióticos (ou seja, 28S e 18S), o que indica que a solução de água ORP administrada de acordo com a invenção de 28/12/2018, pág. 72/140

63/127 deixa o RNA substancialmente intacto. Da mesma forma, RNA extraído de culturas de células humanas após cerca de 30 minutos de exposição à solução de água ORP ou após cerca de 3 horas de exposição pode ser submetido à transcrição reversa e amplificação (RT-PCR) do gene constitutivo humano de GAPDH (Gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase) e resulta em uma forte banda de GAPDH na eletroforese em gel dos produtos de RT-PCR. Em contraste, células tratadas com HP por um período similar mostram degradação significativa de RNA e pouco (ou nenhum) produto de RT-PCR GAPDH.

A água ORP da invenção também é adequada pra uso no controle da atividade de alérgenos presentes no ambiente. Como aqui usado, o termo alérgenos inclui qualquer substância diferente de bactérias, fungos, leveduras ou vírus que podem desencadear uma resposta imunológica adversa, ou alergia, em pessoas ou animais suscetíveis. A asma é uma resposta fisiológica comum após exposição a um ou mais alérgenos. Alérgenos podem ser tanto viáveis (ou seja, de organismos vivos ou mortos) quanto não viáveis (por exemplo, não vivos, como têxteis), e podem estar presentes no ambiente, por exemplo, no ambiente doméstico e/ou locais de trabalho.

Alérgenos protéicos domésticos que podem ser tratados com a água ORP incluem, por exemplo, pêlo, pele e fezes de animais, poeira doméstica, ervas daninhas, gramas, árvores, ácaros e polens. Alérgenos animais incluem, por exemplo, epitélio de gato, epitélio de cachorro, caspa de cavalo, caspa de vaca, caspa de cachorro, epitélio de porquinho-daíndia, penas de ganso, epitélio de camundongo, urina de camundongo, epitélio e urina de rato.

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Alérgenos ocupacionais incluem, por exemplo, agentes de alto peso molecular, tais como proteínas naturais geralmente derivadas proteínas de plantas ou animais, e substâncias químicas de baixo peso molecular, tais como diisocianatos, e outros materiais encontrados em alguns têxteis. Outros alérgenos químicos que podem estar presentes no local de trabalho incluem, por exemplo, anidridos, antibióticos, pó de madeira e corantes. Várias proteínas podem ser alérgenos ocupacionais, incluindo gomas vegetais, enzimas, proteínas animais, insetos, proteínas de plantas e legumes.

Alérgenos adicionais adequados para tratamento pela solução de água ORP são descritos em Korenblat e Wedner, “Allergy Theory and Practice” (1992) e Middleton, Jr., “Allergy Principles and Practice” (1993).

A solução de água ORP da invenção pode ser usada ou aplicada em qualquer quantidade adequada para fornecer o efeito bactericida, viricida, germicida e/ou antialergênico desejado.

A solução de água ORP pode ser aplicada para desinfetar e esterilizar de qualquer forma adequada. Por exemplo, para desinfetar e esterilizar equipamento médico ou dentário, o equipamento é mantido em contato com a solução de água ORP por um período de tempo suficiente para reduzir o nível de organismos presente no equipamento até um nível desejado.

Para desinfecção e esterilização de superfícies duras, a solução de água ORP pode ser aplicada à superfície dura diretamente de um recipiente no qual a solução de água ORP é estocada. Por exemplo, a solução de água ORP pode ser de 28/12/2018, pág. 74/140

65/127 derramada, vaporizada ou de algum outro modo aplicada diretamente à superfície dura. A solução de água ORP pode então ser distribuída sobre a superfície dura com o uso de um substrato adequado como, por exemplo, pano, tecido ou toalha de papel. Em aplicações hospitalares, o substrato é preferivelmente estéril. Alternativamente, a solução de água ORP pode primeiro ser aplicada a um substrato com um pano, tecido ou toalha de papel. O substrato umedecido é depois colocado em contato com a superfície dura.

Alternativamente, a solução de água ORP pode ser aplicada às superfícies duras dispersando-se a solução no ar, como aqui descrito. A solução de água ORP pode ser aplicada de uma forma similar em seres humanos e animais.

Opcionalmente, pode ser usado um implemento para aplicar a solução de água ORP às superfícies duras, por exemplo, pisos, paredes e tetos. Por exemplo, a solução de água ORP pode ser dispensada em um esfregão para aplicação em pisos. Outros implementos adequados para aplicação da solução de água ORP às superfícies duras são descritos na

Patente U.S. 6.663.306.

A invenção ainda fornece um lenço de limpeza que compreende um substrato não hidrossolúvel e a solução de água ORP como aqui descrito, em que a solução de água ORP é dispensada sobre o substrato. A solução de água ORP pode ser impregnada, revestida, coberta ou de algum outro modo aplicada a substrato. De preferência, o substrato é prétratado com a solução de água ORP, antes da distribuição dos lenços de limpeza aos usuários finais.

O substrato para o lenço de limpeza pode ser qualquer material não hidrossolúvel absorvente ou adsorvente

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66/127 adequado. Uma ampla variedade de materiais pode ser usada como substrato. Ele deve ter potência de umedecimento, abrasividade, espessura e porosidade suficientes. Além disso, o substrato não deve afetar adversamente a estabilidade da solução de água ORP. Exemplos incluem substratos não trançados, substratos trançados, substratos e esponjas hidroemaranhados.

O substrato pode ter uma ou mais camadas. Cada camada pode ter texturas e abrasividades iguais ou diferentes. Texturas diferentes podem resultar do uso de combinações diferentes de materiais ou do uso de processos de fabricação diferente ou uma combinação destes. O substrato não deve se dissolver ou se desfazer na água. O substrato fornece o veículo para a liberação da solução de água ORP à superfície a ser tratada.

O substrato pode ser uma folha única não trançada ou múltiplas folhas não trançadas. A folha não trançada pode ser feita de polpa de madeira, fibras sintéticas, fibras naturais, e misturas destes. Fibras sintéticas adequadas para uso no substrato incluem, sem limitação, poliéster, viscose, náilon, polipropileno, polietileno, outros polímeros de celulose, e misturas dessas fibras. As não trançadas podem incluir materiais fibrosos não trançados de folha que incluem materiais de fusão a sopro, de co-forma, colocados a ar, ligados por fiação, colocados a úmido, de tramas cardadas ligadas, hidroemaranhados (também conhecidos como entrelaçados por fiação), e combinações destes. Esses materiais podem compreender fibras sintéticas ou naturais ou combinações destas. Opcionalmente, um ligante pode estar presente no substrato.

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Exemplos de substratos não hidrossolúveis não trançados adequados incluem celulose 100% Wadding Grade 1804 de Little Rapids Corporation, material needlepunch de polipropileno 100% NB 701-2.8-W/R de American Non-wovens Corporation, uma mistura de fibras celulósicas e sintéticas Hydraspun 8579 de Ahlstrom Fibre Composites, e Viscose 70%/PES 30% Código 9881 de PGI Nonwovens Polymer Corp.

Exemplos adicionais de substratos não trançados adequados para uso nos lenços de limpeza são descritos nas Patentes U.S. N^os 4.781.974, 4.615.937, 4.666.621 e 5.908.707, e Publicações de Pedido de Patente Internacional WO 98/03713, WO 97/40814 e WO 96/14835.

O substrato também pode ser feito de materiais trançados, tais como fibras de algodão, misturas de algodão/náilon, ou outros têxteis. Celulose regenerada, espumas de poliuretano, e semelhantes, que são usados na fabricação de esponjas, também são adequados para uso.

A capacidade de carga líquida do substrato deve ser pelo menos cerca de 50%-1.000% do peso seco deste, principalmente pelo menos cerca de 200%-800%. Isso é expresso como a carga de 1/2 a 10 vezes o peso do substrato. O peso do substrato varia sem limitação de cerca de 0,01 a cerca de 1.000 gramas por metro quadrado, principalmente 25 a 120 gramas/m² (denominado peso-base) e tipicamente é produzido como uma folha ou trama que é cortada, cortada em matriz, ou de algum outro modo dimensionada no formato e tamanho apropriados. Os lenços de limpeza terão preferivelmente certa potência de tensão úmida que é, sem limitação, cerca de 25 a cerca de 250 Newtons/m, mais preferivelmente cerca de 75-170 Newtons/m.

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A solução de água ORP pode ser dispensada, impregnada, revestida, coberta ou de algum outro modo aplicada ao substrato por qualquer método adequado. Por exemplo, porções individuais de substrato podem ser tratadas com uma quantidade distinta da solução de água ORP. De preferência, é realizado um tratamento em massa de uma trama contínua de material de substrato com a solução de água ORP. Toda a trama de material de substrato pode ser embebida na solução de água ORP. Alternativamente, à medida que a trama de substrato é embobinada, ou mesmo durante a criação de um substrato não trançado, a solução de água ORP é vaporizada ou metrificada sobre a trama. Uma pilha de porções de substrato cortadas e dimensionadas individualmente pode ser impregnada ou revestida com a solução de água ORP em seu recipiente pelo fabricante.

Os lenços de limpeza podem conter opcionalmente componentes adicionais para aperfeiçoar as propriedades dos lenços. Por exemplo, os lenços de limpeza podem ainda compreender polímeros, tensoativos, polissacarídeos, policarboxilatos, alcoóis polivinílicos, solventes, agentes quelantes, tampões, espessantes, tintas, corantes, fragrâncias, e misturas destes, para aperfeiçoar as propriedades dos lenços. Esses componentes opcionais não devem afetar adversamente a estabilidade da solução de água ORP. Exemplos de vários componentes que podem opcionalmente ser incluídos nos lenços de limpeza são descritos nas Patentes U.S. N^os 6.340.663, 6.649.584 e 6.624.135.

Os lenços de limpeza da invenção podem ser selados individualmente com um invólucro termoplástico que pode ser selado por calor ou cola (por exemplo, polietileno, Mylar, de 28/12/2018, pág. 78/140

69/127 e semelhantes). Os lenços também podem ser embalados como várias folhas individuais para um uso mais econômico. Os lenços de limpeza podem ser preparados colocando-se primeiro várias folhas do substrato em um dispensador e depois colocando-se em contato as folhas de substrato com a solução de água ORP da invenção. Alternativamente, os lenços de limpeza podem ser formados como uma trama contínua pela aplicação da solução de água ORP ao substrato durante o processo de fabricação e depois carregando o substrato umedecido em um dispensador.

O dispensador inclui, sem limitação, uma lata com uma tampa ou uma vasilha com tampa. A tampa no dispensador é para isolar os lenços úmidos do ambiente externo e para evitar a volatilização prematura dos ingredientes líquidos.

O dispensador pode ser feito de qualquer material que seja compatível tanto com o substrato quanto com a solução de água ORP. Por exemplo, o dispensador pode ser feito de plástico, por exemplo, polietileno de alta densidade, polipropileno, policarbonato, polietileno tereftalato (PET), cloreto de polivinila (PVC), ou outros plásticos rígidos.

A trama contínua de lenços pode ser passada através de uma abertura fina no topo do dispensador, principalmente, através da tampa. Seria então necessário um meio para dimensionar o comprimento ou o tamanho necessário do lenço da trama. A uma lâmina, uma borda serrilhada ou outro meio de corte da trama no tamanho desejado pode ser fornecido no topo do dispensador, como exemplo não limitante, com a abertura fina na verdade tendo uma função dupla como uma borda cortante. Alternativamente, a trama contínua de de 28/12/2018, pág. 79/140

70/127 lenços pode ser marcada, sobrada, segmentada, perfurada ou parcialmente cortada em tamanhos ou comprimentos uniformes ou não uniformes, o que então evitaria a necessidade de uma borda de corte afiada. Além disso, os lenços podem ser interfoliados, de tal forma que a remoção de um lenço avança o seguinte.

solução de água

ORP da invenção pode alternativamente ser dispersa no ambiente através de um meio gasoso, por exemplo, ar. A solução de água ORP pode ser dispersa no ar por qualquer meio adequado. Por exemplo, a solução de água ORP pode ser formada em gotículas de qualquer tamanho adequado e dispersa em uma sala.

Para aplicações em pequena escala, a solução de água ORP pode ser dispensada através de uma garrafa de spray que inclui uma coluna de alimentação e uma bomba. Alternativamente, a solução de água ORP pode ser embalada em recipientes de aerossol. Recipientes de aerossol geralmente incluem o produto a ser dispensado, um propelente, um recipiente e uma válvula. A válvula inclui um tubo tanto ativador quanto de imersão. Os conteúdos do recipiente são liberados pressionando-se o ativador. Os vários componentes do recipiente de aerossol são compatíveis com a solução de água ORP. Propelentes adequados podem incluir um halocarbono liquefeito, hidrocarboneto ou uma mistura halocarbono-hidrocarboneto, ou um gás comprimido como dióxido de carbono, nitrogênio ou óxido nitroso. Sistemas de aerossol tipicamente geram gotículas que têm tamanhos que variam de cerca de 0,10 pm a cerca de 100 pm, preferivelmente de cerca de 0,15 pm a cerca de 5 pm.

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A solução de água ORP pode ser dispensada em forma de aerossol como parte de um sistema de inalação para tratamento de infecções nos pulmões e/ou as vias aéreas ou para a cicatrização de feridas nessas partes do corpo.

Para aplicações em maior escala, qualquer dispositivo adequado pode ser usado para dispersar a solução de água ORP no ar, incluindo, sem limitação, umidificadores, aspersores, vaporizadores, atomizadores, sprays de água, e outros dispositivos de spray. Tais dispositivos permitem a dispensa da solução de água ORP de forma contínua. Pode ser empregado um ejetor que mistura diretamente ar e água em um bocal. A solução de água ORP pode ser convertida em um jato, por exemplo, um jato de baixa pressão, e liberada em um jato de ar. Vários tipos de umidificadores podem ser usados, tais como umidificadores ultra-sônicos, umidificadores de jato ou vaporizadores, e umidificadores de evaporação.

O dispositivo específico usado para dispersar a solução de água ORP pode ser incorporado em um sistema de ventilação para permitir uma aplicação ampla da solução de água ORP através de toda a casa ou instalação de assistência médica (por exemplo, hospital, asilo etc.).

A solução de água ORP pode conter opcionalmente um agente alvejante. O agente alvejante pode ser qualquer material adequado que clareie ou branqueie um substrato. A solução de água ORP que contém um agente alvejante pode ser usada na lavagem doméstica de roupas para desinfetar e esterilizar bactérias e germes, além de clarear roupas. Agentes alvejantes adequados incluem, sem limitação, agentes alvejantes que contêm cloro e agentes alvejantes de 28/12/2018, pág. 81/140

72/127 que contêm peróxido. Misturas de agentes alvejantes também podem ser adicionadas à solução de água ORP. De preferência, o agente alvejante é adicionado na forma de uma solução aquosa à solução de água ORP.

Agentes alvejantes que contêm cloro úteis na presente invenção incluem cloro, hipocloritos, compostos de N-cloro e dióxido de cloro. De preferência, o agente alvejante que contém cloro adicionado à solução de água ORP é hipoclorito de sódio ou ácido hipocloroso. Outros agentes alvejantes que contêm cloro adequados incluem cloro, hipoclorito de cálcio, água sanitária (por exemplo, solução aquosa de hipoclorito de cálcio e cloreto de cálcio), pó alvejante (por exemplo, mistura de hipoclorito de cálcio, hidróxido de cálcio, cloreto de cálcio e hidratos destes), hipoclorito dibásico de magnésio, hipoclorito de lítio, fosfato clorado trissódico. Podem ser usadas misturas de agentes alvejantes que contêm cloro.

A adição de um agente alvejante à solução de água ORP pode ser realizada de qualquer forma adequada. De preferência, inicialmente é preparada uma solução aquosa que contém o agente alvejante. A solução aquosa que contém o agente alvejante pode ser preparada com o uso de alvejante doméstico (por exemplo, alvejante Clorox®) ou outra fonte adequada de agente alvejante que contenha cloro ou outro agente alvejante. A solução de agente alvejante é então combinada com a solução de água ORP.

O agente alvejante pode ser adicionado à solução de água ORP em qualquer quantidade adequada. De preferência, a solução de água ORP que contém um agente alvejante não é irritante à pele humana ou animal. De preferência, o teor de 28/12/2018, pág. 82/140

73/127 total de íon cloreto da solução de água ORP que contém um agente alvejante contendo cloro é de cerca de 1.000 ppm a cerca de 5.000 ppm e, preferivelmente, de cerca de 1.000 ppm a cerca de 3.000 ppm. O pH da solução de água ORP que contém um agente alvejante contendo cloro é preferivelmente de cerca de 8 a cerca de 10, e o potencial de oxi-redução é de cerca de +700 mV a cerca de +800 mV.

A solução de água ORP pode conter opcionalmente aditivos adequados para a limpeza do ambiente doméstico e do local de trabalho. Aditivos adequados incluem tensoativos, tais como detergentes e agentes de limpeza. Perfumes ou outros compostos que produzem aroma também podem ser incluídos para melhorar a receptividade do consumidor à solução de água ORP.

A presente invenção ainda fornece um processo para a produção de uma solução de água ORP com a utilização de pelo menos uma célula de eletrólise que compreende uma câmara anódica, uma câmara catódica e uma câmara de solução salina localizada entre as câmaras anódicas e catódicas, em que a solução de água ORP compreende água anódica e água catódica. Um diagrama de uma célula de eletrólise de três câmaras típica útil na invenção é mostrado na FIG. 1.

A célula de eletrólise 100 tem uma câmara anódica 102, uma câmara catódica 104 e uma câmara de solução salina 106.

A câmara de solução salina está localizada entre a câmara anódica 102 e a câmara catódica 104. A câmara anódica 102 tem uma entrada 108 e uma saída 110 para permitir o fluxo de água através da câmara anódica 102. Da mesma forma, câmara catódica 104 tem uma entrada 112 e uma saída 114 para permitir o fluxo de água através da câmara catódica

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104. A câmara de solução salina 106 tem uma entrada 116 e uma saída 118. A célula de eletrólise 100 inclui preferivelmente um gabinete para abrigar todos os componentes juntos.

A câmara anódica 102 é separada da câmara de solução salina por um eletrodo anodo 120 e uma membrana de troca aniônica 122. O eletrodo anodo 120 pode ser posicionado adjacente à câmara anódica 102 com a membrana 122 localizada entre o eletrodo anodo 120 e a câmara de solução salina 106. Alternativamente, a membrana 122 pode ser posicionada adjacente à câmara anódica 102, com o eletrodo anodo 120 localizado entre a membrana 122 e a câmara de solução salina 106.

A câmara catódica 104 é separada da câmara de solução salina por um eletrodo catodo 124 e uma membrana de troca catiônica 126. O eletrodo catodo 124 pode ser posicionado adjacente à câmara catódica 104, com a membrana 126 localizada entre o eletrodo catodo 124 e a câmara de solução salina 106. Alternativamente, a membrana 126 pode ser posicionada adjacente à câmara catódica 104, com o eletrodo catodo 124 localizado entre a membrana 126 e a câmara de solução salina 106.

Os eletrodos geralmente são construídos de metal para permitir que seja aplicado um potencial de voltagem entre a câmara anódica e a câmara catódica. Os eletrodos metálicos são geralmente planos e possuem dimensões e área de superfície da seção transversal similares àquelas das membranas de troca iônica. Os eletrodos são configurados para expor uma porção substancial da superfície dos componentes de troca aniônica à água em suas respectivas de 28/12/2018, pág. 84/140

75/127 câmara anódica e câmara catódica. Isso permite a migração de espécies iônicas entre a câmara de solução salina, a câmara anódica e a câmara catódica. De preferência, os eletrodos possuem várias passagens ou aberturas espaçadas igualmente através da superfície dos eletrodos.

Uma fonte de potencial elétrico está conectada ao eletrodo anodo 120 e ao eletrodo catodo 124, de modo a induzir uma reação de oxidação na câmara anódica 102 e uma reação de redução na câmara catódica 104.

As membranas de troca iônica 122 e 126 usadas na célula de eletrólise 100 podem ser construídas de qualquer material adequado para permitir a troca de íons entre a câmara de solução salina 106 e a câmara anódica 102, por exemplo, íons cloreto (Cl^-), e entre a câmara de solução salina 106 e a câmara catódica 104, por exemplo, íons sódio (Na⁺). A membrana de troca aniônica 122 e a membrana de troca catiônica 126 podem ser feitas do mesmo material de construção ou materiais de construção diferentes. De preferência, a membrana de troca aniônica compreende um polímero fluorado. Polímeros fluorados adequados incluem, por exemplo, polímeros e copolímeros de ácido perfluorsulfônico, por exemplo, copolímeros de ácido perfluorsulfônico/PTFE e copolímeros de ácido perfluorsulfônico/TFE. A membrana de troca aniônica pode ser construída de uma única camada de material ou de múltiplas camadas.

A fonte da água para a câmara anódica 102 e para a câmara catódica 104 da célula de eletrólise 100 pode ser qualquer suprimento de água adequada. A água pode ser de um suprimento de água municipal ou, alternativamente, préde 28/12/2018, pág. 85/140

76/127 tratada antes de ser usada na célula de eletrólise. De preferência, a água pré-tratada é selecionada do grupo que consiste em água macia, água purificada, água destilada e água deionizada. Mais preferivelmente, a fonte de água prétratada é água ultrapura obtida com a utilização de equipamento de purificação por osmose reversa.

A solução salina aquosa para uso na câmara de solução salina 106 pode ser qualquer solução salina aquosa que contenha espécies iônicas adequadas para a produção da solução de água ORP. De preferência, a solução salina aquosa é uma solução salina aquosa de cloreto de sódio (NaCl), também comumente denominada soro fisiológico. Outras soluções salinas adequadas incluem outros sais cloreto, por exemplo, cloreto de potássio, cloreto de amônio e cloreto de magnésio, além de outros sais de halogênio, tais como sais de potássio e bromo. A solução salina pode conter uma mistura de sais.

A solução salina pode ter qualquer concentração adequada. A solução salina pode ser saturada ou concentrada. De preferência, a solução salina é uma solução saturada de cloreto de sódio.

As várias espécies iônicas produzidas na célula de eletrólise de três câmaras úteis na invenção são ilustradas na FIG. 2. A célula de eletrólise de três câmaras 200 inclui uma câmara anódica 202, uma câmara catódica 204 e uma câmara de solução salina 206. Mediante a aplicação de uma corrente elétrica adequada ao anodo 208 e ao catodo 210, os íons presentes na solução salina que fluem através da câmara de solução salina 206 migram através da membrana de troca aniônica 212 e da membrana de troca catiônica 214 de 28/12/2018, pág. 86/140

77/127 na água que flui através da câmara anódica 202 e da câmara catódica 204, respectivamente.

Íons positivos migram da solução salina 216 que flui através da câmara de solução salina 206 para a água catódica 218 que flui através da câmara catódica 204. Íons negativos migram da solução salina 216 que flui através da câmara de solução salina 206 para a água anódica 220 que flui através da câmara anódica 202.

De preferência, a solução salina 216 é cloreto de sódio (NaCl) aquoso que contém tanto íons sódio (Na⁺) quanto íons cloreto (Cl^-). Íons positivos Na⁺ migram da solução salina 216 para a água catódica 218. Íons negativos Cl^- migram da solução salina 216 para a água anódica 220.

Os íons sódio e íons cloreto podem ser submetidos a uma reação adicional na câmara anódica 202 e na câmara catódica 204. Por exemplo, íons cloreto podem reagir com vários íons oxigênio e outras espécies (por exemplo, radicais livres oxigênio, O2, O3) presentes na água anódica 220 para produzir ClOn- e ClO^-. Também podem ocorre outras reações na câmara anódica 202, incluindo a formação de radicais livres oxigênio, íons hidrogênio (H⁺), oxigênio (como O2), ozônio (O3) e peróxidos. Na câmara catódica 204, gás hidrogênio (H2), hidróxido de sódio (NaOH), íons hidróxido (OH^-), íons ClOn- e outros radicais podem ser formados.

A invenção ainda fornece um processo e um aparelho para a produção de uma solução de água ORP com o uso de pelo menos duas células de eletrólise de três câmaras. Um diagrama de um processo para a produção de uma solução de água ORP com o uso de duas células de eletrólise da de 28/12/2018, pág. 87/140

78/127 invenção é mostrado na FIG. 3.

O processo 300 inclui duas células eletrolíticas de três câmaras, especificamente uma primeira célula eletrolítica 302 e uma segunda célula eletrolítica 304. A água é transferida, bombeada ou de algum modo liberada pela fonte de água 305 para a câmara anódica 306 e para a câmara catódica 308 da primeira célula eletrolítica 302, e para a câmara anódica 310 e para a câmara catódica 312 da segunda célula eletrolítica 304. Tipicamente, o processo da invenção pode produzir de cerca de 1 litro/minuto a cerca de 50 litros/minuto de solução de água ORP. A capacidade de produção pode ser aumentada com o uso de células eletrolíticas adicionais. Por exemplo, três, quatro, cinco, seis, sete, oito, nove, dez ou mais células eletrolíticas de três câmaras podem ser usadas para aumentar o rendimento da solução de água ORP da invenção.

A água anódica produzida na câmara anódica 306 e na câmara anódica 310 é coletada no tanque de mistura 314. Uma porção da água catódica produzida na câmara catódica 308 e na câmara catódica 312 é coletada no tanque de mistura 314 e combinada com a água anódica. A porção restante de água catódica produzida no processo é descartada. A água catódica pode ser opcionalmente submetida ao separador de gás 316 e/ou ao separador de gás 318, antes da adição ao tanque de mistura 314. Os separadores de gás removem gases como, por exemplo, gás hidrogênio, que são formados na água catódica durante o processo de produção.

O tanque de mistura 314 pode opcionalmente ser conectado a uma bomba de recirculação 315 para permitir uma mistura homogênea da água anódica e da porção de água

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79/127 catódica das células de eletrólise 302 e 304. Além disso, o tanque de mistura 314 pode opcionalmente incluir dispositivos adequados para o monitoramento do nível e do pH da solução de água ORP. A solução de água ORP pode ser transferida do tanque de mistura 314 por meio da bomba 317 para aplicação em desinfecção ou esterilização no local ou próximo ao local do tanque de mistura. Alternativamente, a solução de água ORP pode ser dispensada em recipientes adequados para que seja enviada para locais remotos (por exemplo, almoxarifado, hospital etc.).

O processo 300 ainda inclui um sistema de recirculação de solução salina para fornecer solução salina à câmara de solução salina 322 da primeira célula eletrolítica 302 e à câmara de solução salina 324 da segunda célula eletrolítica 304. A solução salina é preparada no tanque de sal 320. A solução salina é transferida por meio de uma bomba 321 para as câmaras de solução salina 322 e 324. De preferência, a solução salina flui em série, primeiramente através da câmara de solução salina 322 e a seguir para a câmara de solução salina 324. Alternativamente, a solução salina pode ser bombeada para ambas as câmaras de solução salina simultaneamente.

Antes de retornar para o tanque de sal 320, a solução salina pode fluir através de um permutador de calor 326 no tanque de mistura 314 para controlar a temperatura da solução de água ORP da forma necessária.

Os íons presentes na solução salina são eliminados ao longo do tempo na primeira célula eletrolítica 302 e na segunda célula eletrolítica 304. Uma fonte de íons adicional pode ser adicionada periodicamente ao tanque de de 28/12/2018, pág. 89/140

80/127 mistura 320 para substituir os íons que são transferidos para a água anódica e para a água catódica. A fonte de íons adicional pode ser usada para manter um pH constante da solução salina, o qual tende a cair (ou seja, se tornar ácido) ao longo do tempo. A fonte de íons adicional pode ser qualquer composto adequado, incluindo, por exemplo, sais como cloreto de sódio. De preferência, é adicionado hidróxido de sódio ao tanque de mistura 320 para substituir os íons sódio (Na⁺) que são transferidos para a água anódica e para a água catódica.

Em outra modalidade, a invenção fornece um aparelho para a produção de uma solução aquosa de potencial redutor oxidativo que compreende pelo menos duas células eletrolíticas de três câmaras. Cada uma das células eletrolíticas inclui uma câmara anódica, uma câmara catódica e uma câmara de solução salina que separa as câmaras anódicas e catódicas. O aparelho inclui um tanque de mistura para coleta da água anódica produzida pelas células eletrolíticas e uma porção da água catódica produzida por uma ou mais das células eletrolíticas. De preferência, o aparelho ainda inclui um sistema de recirculação de sal para permitir a reciclagem da solução salina fornecida às câmaras de solução salina das células eletrolíticas.

Os exemplos a seguir ilustram ainda mais a invenção, mas, evidentemente, não devem ser considerados de modo algum como limitantes de seu escopo.

EXEMPLOS 1-3

Estes exemplos demonstram as características exclusivas da solução de água ORP da invenção. As amostras de 28/12/2018, pág. 90/140

81/127 da solução de água ORP nos Exemplos 1-3 foram analisadas de acordo com os métodos aqui descritos para determinar as propriedades físicas e os níveis de espécies iônicas e de outras espécies químicas presentes em cada amostra. Os resultados obtidos para dióxido de cloro, ozônio e peróxido de hidrogênio são baseados em testes padronizados usados para medir cada espécie; no entanto, os resultados podem ser indicativos de espécies diferentes, as quais também podem gerar resultados positivo do teste. Além disso, foi relatado que dióxido de cloro, ozônio e peróxido de hidrogênio podem reagir com hipoclorito, causando o seu consumo e a produção de outras espécies (por exemplo, HCl e O2). O pH, o potencial de oxi-redução (ORP) e as espécies iônicas presentes são apresentados na Tabela 1 para cada amostra da solução de água ORP.

Tabela 1. Características físicas e espécies iônicas presentes para a amostra de solução de água ORP

	EXEMPLO 1	EXEMPLO 2	EXEMPLO 3
pH	7,45	7,44	7,45
ORP (mV)	+ 879	+ 881	+ 874
Cl- total (ppm)	110	110	120
Cl- ligado (ppm)	5	6	6

A solução de água ORP tem características físicas adequadas para uso em desinfecção, esterilização e/ou limpeza.

EXEMPLOS 4-10

Estes exemplos demonstram a adição de um agente alvejante à solução de água ORP de acordo com a invenção em várias quantidades. Em particular, estes exemplos demonstram a atividade antimicrobiana e capacidade de 28/12/2018, pág. 91/140

82/127 alvejante de tecidos das composições.

Uma solução alvejante Clorox® 10% foi preparada usando água destilada. As seguintes soluções foram então preparadas usando a solução alvejante 10%: solução de água

5 ORP 80%/alveja	nte	20% (Exemplo	4); solução	de	água	ORP
60%/alvejante	40%	(Exemplo 5)	; solução	de	água	ORP
40%/alvejante	60%	(Exemplo 6)	; solução	de	água	ORP
20%/alvejante	80%	(Exemplo 7);	e solução	de	água	ORP

0%/alvejante 100% (Exemplo 8). Duas soluções de controle também foram utilizadas para comparação, incluindo solução de água ORP 100%/alvejante 0% (Exemplo 9) e uma solução de água ORP com detergente Tween 20 0,01% (Exemplo 10). As características físicas dessas amostras foram determinadas, especificamente o pH, o potencial de oxi-redução (ORP), o teor de cloro total (Cl^-), teor de ácido hipocloroso (HClO ), teor de dióxido de cloro e teor de peróxido, e elas são apresentadas na Tabela 2.

Tabela 2. Características físicas de composições de solução de água ORP/alvejante

	PH	ORP (mV)	Cl Total (ppm)	HClO (ppm)
Ex. 4	8,92	+ 789	1.248	62
Ex. 5	9,20	+ 782	2.610	104
Ex. 6	9,69	+ 743	4.006	80
Ex. 7	9,86	+ 730	4.800	48
Ex. 8	9, 80	+ 737	5.000	50
Ex. 9	7,06	+ 901	64	32
Ex. 10	6,86	+ 914	51	26

O bolo grande de íons cloro adicionado como parte do agente alvejante impediu a medida precisa dos níveis de dióxido de cloro e peróxido, como indicado com as

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83/127 designações n.d.. Além disso, os resultados obtidos para dióxido de cloro e peróxido são baseados em testes padronizados usados para medir cada espécie; no entanto, os resultados podem ser indicativos de espécies diferentes, as quais também podem gerar resultados positivo do teste. Além disso, foi relatado que dióxido de cloro, ozônio e peróxido de hidrogênio podem reagir com hipoclorito causando o seu consumo e a produção de outras espécies (por exemplo, HCl e O2). Como estes exemplos demonstram, os níveis de ácido hipocloroso da solução de água ORP com e sem a adição de um agente alvejante são similares.

As amostras dos Exemplos 4-10 foram submetidas a um teste de contagem de esporos superiores usando esporos de Bacillus subtilis var. niger (ATCC #9372 obtidos de SPS Medical of Rush, Nova York). As suspensões de esporos foram concentradas (por evaporação em uma coifa estéril) até 4 x 10⁶ esporos por 100 microlitros. Uma amostra de 100 microlitros da suspensão de esporos foi misturada com 900 microlitros de cada uma das amostras nos Exemplos 4-10. As amostras foram incubadas em temperatura ambiente por períodos de 1 a 5 minutos, como apresentado na Tabela 3. Nos tempos indicados, 100 microlitros das amostras incubadas foram plaqueados sobre placas TSA individuais e incubadas por 24 horas a 35°C ± 2°C, quando então o número de colônias resultantes em cada placa foi determinado. As placas de controle demonstraram que as concentrações de esporos de partida eram > 1 x 10⁶ esporos/100 microlitros. A concentração de esporos de Bacillus para as várias amostras nos vários períodos de incubação (como a média de duas determinações) é apresentada na Tabela 3.

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Tabela 3. Concentrações de esporos de Bacillus (esporos/100 microlitros)

	1 minuto	2 minutos	3 minutos	4 minutos	5 minutos
Ex. 4	» 1.000	411	1	0	2
Ex. 5	» 1.000	1.000	1	0	0
Ex. 6	» 1.000	» 1.000	> 1.000	22	0
Ex. 7	» 1.000	» 1.000	> 1.000	15	0
Ex. 8	» 1.000	» 1.000	> 1.000	3	1
Ex. 9	» 1.000	74	0	0	0
Ex 10	» 1.000	239	3	0	0

Como esses resultados demonstram, à medida que a concentração de alvejante (como solução aquosa de alvejante 5 10%) aumenta, a quantidade de esporos de Bacillus morta é reduzida para as amostras incubadas por 2-3 minutos. No entanto, para amostras incubadas por 5 minutos, a concentração de alvejante não interfere com a morte de esporos de Bacillus. Além disso, os resultados demonstram que a adição de detergente 0,01% à solução de água ORP não reduz a morte de esporos.

As amostras dos Exemplos 4-10 foram submetidas a um teste de branqueamento de tecidos. Os tecidos sobre os quais as amostras foram testadas eram camisetas de criança com 100% de viscose com manchas de corante azul escuro. Pedaços quadrados de 5,08 centímetros de tecido colorido foram colocados em tubos plásticos de 50 ml. Cada pedaço de tecido foi coberto por uma amostra da solução dos Exemplos 4-10. O tempo decorrido até o branqueamento completo foi obtido, como determinado pelo clareamento do tecido, e é apresentado na Tabela 4.

Tabela 4. Tempo até o branqueamento completo de amostra de

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85/127 tecido

Exemplo	Tempo
Ex. 4	39 minutos
Ex. 5	23 minutos
Ex. 6	18 minutos
Ex. 7	19 minutos
Ex. 8	10 minutos
Ex. 9	> 6 horas
Ex. 10	> 6 horas

Como demonstrado por estes exemplos, à medida que a concentração da solução de água ORP aumenta na composição, o tempo até a obtenção do branqueamento completo aumenta.

EXEMPLO 11

Este exemplo está relacionado ao perfil toxicológico de uma solução de água ORP da presente invenção. Microcina 60 (Microcyn 60) (ou M60), uma solução de água ORP exemplar da presente invenção, foi usada nestes estudos.

Em termos de segurança, M60 não foi irritante para a pele ou conjuntiva de coelhos, como testado de acordo com padrões internacionais (AAMI 1997; NV SOP 16G-44; PFEUM 2000). Além disso, um estudo de toxicidade por inalação aguda em ratos demonstrou que a administração de Microcina 60 por essa via é segura.

Os efeitos irritantes potenciais de Microcina 60 foram avaliados em um estudo de irritação ocular primária em coelhos. Um volume de 0,1 ml de Microcina 60 foi instilado no olho direito de três coelhos brancos da Nova Zelândia. O olho esquerdo de cada animal não foi tratado para servir de controle. Os olhos foram observados e classificados em 1, 24, 48 e 72 horas quanto à ulceração ou opacificação

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86/127 corneana, inflamação da íris e vermelhidão ou quemose da conjuntiva. Todos os animais também foram observados uma vez ao dia quanto à mortalidade e sinais de doenças.

Nenhum sinal de irritação ocular foi observado em nenhum dos olhos tratados ou de controle em qualquer momento durante o estudo. Todos os animais pareciam clinicamente saudáveis pela duração do estudo. Esses achados indicam que Microcina 60 não causa uma resposta de irritação positiva.

Também foi realizado um estudo de toxicidade por inalação aguda em ratos para determinar a toxicidade potencial por inalação de Microcina 60. Dez ratos albinos Sprauge-Dawley foram expostos a um aerossol gerado por Microcina 60 não diluída por 4 horas. A concentração da Microcina 60 foi determinada como sendo de 2,16 mg/l. Todos os animais foram observados freqüentemente no dia de exposição e uma vez ao dia por 14 dias posteriormente quanto à mortalidade e sinais clínicos/comportamentais de toxicidade. Todos os animais foram submetidos à eutanásia no 14° Dia e foram feitas necropsias macroscópicas.

Todos os animais exibiram piloereção muito discreta a discreta e atividade diminuída muito discreta em 4,5 e 6 horas após o início da exposição, mas estavam assintomáticos no dia seguinte e pareciam clinicamente normais pela duração do estudo. Um macho não ganhou peso entre o Dia 0 e o 7° Dia. Não houve mortalidade e as necropsias macroscópicas não revelaram anormalidades observáveis. A LD50 estimada por inalação aguda por esse estudo é maior do que 2,16 mg/l.

Foram realizados estudos toxicológicos adicionais em de 28/12/2018, pág. 96/140

87/127 coelhos. Água superoxidada em aerossol (1 ml) foi liberada na narina direita por meio de um dispositivo de pressão positiva a 20 coelhos da Nova Zelândia, três vezes ao dia, por 15, 30, 45 e 60 dias. A narina esquerda de controle foi deixada sem qualquer tratamento. Biópsias da mucosa nasal das narinas não tratadas e tratadas com M60 foram obtidas de cinco animais em cada ponto do tempo. Esses tecidos foram então observados sob microscopia óptica e eletrônica. Um exame médico completo foi feito em cada animal em dias alternados para documentar obstrução nasal, dor facial, pressão, rinorréia mucopurulenta, e mal-estar. Os efeitos colaterais foram relatados como infreqüentes, leves e transitórios.

As alterações da mucosa nasal surgiram após aplicação de M60 intranasal por 60 dias. Houve uma destruição leve dos epitélios, discreta infiltração inflamatória da região subepitelial e hiperplasia das glândulas e dos vasos sangüíneos em todas as amostras no 60° dia. Sob observação ultraestrutral, verificamos que surgiram alterações variáveis em forma de cistos dentro das células epiteliais; as mitocôndrias estavam condensadas e deformadas, e parte da membrana estava dissolvida. Algumas células epiteliais estavam descoladas; os cílios epiteliais quase desapareceram, e sua membrana estava dissolvida e os espaços intercelulares estavam ampliados. Algumas células se descolaram da membrana basal. A túnica própria estava levemente edematosa.

Este estudo demonstra que M60 pode irritar levemente a mucosa nasal após administração intranasal por 60 dias. No entanto, esse dano era mínimo e reversível; portanto, a via de 28/12/2018, pág. 97/140

88/127 intranasal de administração de M60 poderia ser considerada segura. Isso se baseia no fato de que, embora a mucosa nasal possa ser seriamente lesada após aplicação de vasoconstrictores por vários anos, ela ainda volta ao normal após a interrupção desses fármacos. Isso é possível em função do processo de regeneração na mucosa nasal que depende de se as células basais e a membrana basal permanecem intactas após a lesão. As células basais vizinhas podem se mover até a lesão ao longo da membrana basal e cobrir a lesão. Portanto, mesmo na presença de leve descolamento das células epiteliais em algumas regiões após tratamento com M60, a membrana basal sobreviveu, e as células epiteliais sobreviventes próximas da região patológica cresceram em direção à região desprovida do epitélio. Além disso, esteróides tópicos também poderiam ter sido aplicados para promover a recuperação da estrutura e da função da mucosa nasal.

Em conclusão, a administração intranasal por cinco dias foi segura nesse grupo. As alterações patológicas da mucosa foram leves e reversíveis. Portanto, a administração intranasal de M60 poderia ser usada amplamente.

EXEMPLO 12

Este exemplo ilustra a atividade, estabilidade e ausência de toxicidade de uma água ORP exemplar.

Uma solução de água ORP como essa para uso neste estudo é conhecida como Microcina, introduzida recentemente mo mercado mexicano como anti-séptico. Microcina é uma solução superoxidada de pH neutro com atividade germicida, de esterilizante e anti-séptica de feridas de acordo com certificações obtidas da Secretariat de 28/12/2018, pág. 98/140

89/127 of Health of Mexico”. Microcina é preparada a partir de água pura e sal (NaCl), tem uma pequena concentração de sódio (<55 ppm) e cloro (<80 ppm), um pH na faixa de 7,2 a 7,8, e potencial de oxidação-redução na faixa de 840 mV a 960 mV. Microcina é produzida apenas em uma concentração, e não precisa ser ativada ou diluída.

Essa solução é produzida a partir de água obtida por osmose reversa, a qual é então submetida a um gradiente eletroquímico gerado por alta voltagem e cloreto de sódio. Dessa forma, as espécies reativas que se formam nas múltiplas câmaras onde o gradiente eletroquímico é gerado são selecionadas de forma controlada para criar Microcina. O resultado é uma solução com um teor controlado de radicais livres que confere um alto potencial de oxidaçãoredução (+840 mV a +960 mV) e, conseqüentemente, uma alta atividade antimicrobiana.

Ácido hipocloroso e hipoclorito de sódio são os elementos mais abundantes contidos em Microcina, com outros em concentrações menores, por exemplo, peróxido de hidrogênio, ozônio, íons cloreto, hidreto e hidróxido de sódio, dentre outros. Embora os requerentes não queiram se prender a uma teoria em particular, acredita-se que o efeito desinfetante não dependa necessariamente da quantidade de cloro, mas sim do teor de radicais livres, uma vez que os níveis de sódio e cloro na Microcina são menores do que 50 e 60 partes por milhão, respectivamente. Além disso, e ao contrário de outras soluções superoxidadas que foram relatadas na literatura, Microcina tem um pH neutro (6,4-7,8), não é corrosiva e é estável em estocagem por até 2 anos. Todas essas características tornaram de 28/12/2018, pág. 99/140

90/127 possível a produção de uma solução superoxidada que é eficaz como desinfetante de nível superior e compatível para uso tanto em superfícies inanimadas quanto em tecidos.

Testes de estabilidade acelerada demonstraram que Microcina pode ser estocada em condições de temperaturas amplamente variáveis, de 4 a 65°C, sem perder sua atividade desinfetante por um período de 2 anos. Essa propriedade de estabilidade prolongada na prateleira também é uma diferença de soluções superoxidadas relatadas previamente que só são eficazes se forem usadas imediatamente após serem produzidas. Em outras palavras, enquanto a Microcina pode ser estocada e distribuída até mesmo em condições extremas sem perda de sua atividade antimicrobiana, outras soluções teriam que ser produzidas por um maquinário especializado e dispendioso em cada hospital que tentasse usar aquela solução. No entanto, o fabricante recomenda que após o recipiente de Microcina ter sido aberto, ela deve ser usada em até 30 dias a fim de garantir atividade uniforme e resultados consistentes.

Como Microcina é produzida em apenas uma concentração, a dose de Microcina pode ser mudada somente por mudanças no volume aplicado por unidade de área da pele. Nos estudos toxicológicos, as doses de Microcina aplicadas topicamente à pele intacta variaram entre 0,05 e 0,07 ml/cm²; no de toxicidade dermatológica aguda e na investigação de irritação cutânea, elas foram de até 8,0 ml/cm² e, naqueles que investigaram sua aplicação em feridas profundas, Microcina foi aplicada em uma dose de 0,09 ml/cm².

Foram feitos estudos toxicológicos que aplicaram

Microcina topicamente à pele intacta, usando uma única de 28/12/2018, pág. 100/140

91/127 aplicação com exposição de 4 a 24 horas. Múltiplas aplicações de Microcina, uma ou duas vezes ao dia, durante um período de 7 dias, foram avaliadas em feridas profundas em ratos.

Foram realizados dois estudos na pele intacta de coelhos para avaliar o efeito de Microcina quanto à irritação aguda e à toxicidade dérmica. Nenhum sinal clínico, irritação dérmica ou anormalidades na pele na necropsia foram encontrados em nenhum dos animais expostos à Microcina.

A caracterização de toxicidade local e sistêmica de Microcina aplicada topicamente a uma ferida profunda foi avaliada em ratos. Não foram observadas anormalidades, diferenças significativas nos parâmetros da bioquímica do sangue ou na citologia hemática, nem anomalias nas necropsias. As classificações da irritação cutânea e a histopatologia das feridas e dos tecidos em torno do local de aplicação não revelaram diferenças entre as feridas tratadas com Microcina e aquelas do grupo de controle tratado com soro fisiológico.

A toxicidade sistêmica de Microcina também foi avaliada através de uma injeção intraperitoneal em camundongos. Para isso, cinco camundongos foram injetados com uma única dose (50 ml/kg) de Microcina pela via intraperitoneal. Da mesma forma, cinco camundongos de controle foram injetados com uma única dose (50 ml/kg) de soro fisiológico (cloreto de sódio a 0,9%). Nessa investigação, não foram observadas mortalidades ou evidências de toxicidade sistêmica em nenhum dos animais que receberam a dose intraperitoneal única de Microcina, de 28/12/2018, pág. 101/140

92/127 para a qual a LD50 é acima de 50 ml/kg.

Microcina foi administrada pela via oral a ratos para permitir sua absorção e para caracterizar qualquer efeito tóxico inerente do produto. Para isso, uma dose única (4,98 ml/kg) foi administrada por tubo esofágico a três ratos albinos da cepa Sprague-Dawley. Não houve mortalidade, nem houve sinais clínicos ou anormalidades nas necropsias de nenhum dos animais expostos à dose oral única de Microcina.

O potencial de Microcina aplicada topicamente para irritação ocular também foi avaliado em coelhos. Não foi observada irritação ocular, da mesma forma que não foi observado nenhum outro sinal clínico em nenhum animal exposto à Microcina por administração tópica através da via ocular.

Microcina foi aplicada pela via inalatória a ratos para determinar a toxicidade aguda potencial por inalação. Todos os animais exibiram uma redução muito ligeira ou ligeira da atividade e piloereção após a exposição, mas todos estavam assintomáticos no dia seguinte. Não foram observadas mortalidades ou anormalidades na necropsia dos animais expostos à Microcina por inalação.

A avaliação do potencial para sensibilização da pele com Microcina foi feita em porquinhos-da-índia com o uso de um método modificado de emplastro de oclusão (Buehler). Não foi observada irritação nos animais do grupo de controle após um ataque de tratamento simples, nem nos animais avaliados (tratados por indução) após ataque com o tratamento. Portanto, Microcina não provoca uma reação de sensibilização.

Dessa forma, quando foi aplicada à pele intacta, de 28/12/2018, pág. 102/140

93/127 feridas dérmicas abertas profundas, no saco conjuntival, pelas vias oral e de inalação ou por meio de injeção intraperitoneal, Microcina não apresentou efeitos adversos relacionados ao produto. Também há uma experiência no tratamento de mais de 500 pacientes com feridas de natureza bem diversa na pele e mucosas, com excelentes resultados anti-sépticos e cosméticos. Conseqüentemente, Microcina aplicada topicamente deve ser eficaz e bem tolerada nesse experimento clínico.

Microcina é embalada em garrafas PET transparentes de 240 ml. Esse produto é estocado em temperatura ambiente e permanece estável por até 2 anos na prateleira, caso a garrafa não seja aberta. Após ter sido aberta, recomenda-se que todo o produto seja usado em menos de 90 dias. A partir de seu perfil de alta segurança biológica, Microcina pode ser esvaziada no esgoto, sem risco de contaminação ou corrosão.

Vários experimentos foram feitos com Microcina, tanto nos Estados Unidos quanto no México. A erradicação de mais de 90% das bactérias ocorre nos primeiros segundos de exposição. A atividade antibacteriana e antimicótica exibida por Microcina de acordo com esse padrão é resumida na Tabela 5.

Tabela 5. Atividade antibacteriana e antimicótica de microcina

Bactéria	Catálogo	Tempo de ação (redução abaixo de 99,999%)
Ps. aeruginosa	ATCC 25619	1 min
St. aureus	ATCC 6538	1 min

de 28/12/2018, pág. 103/140

94/127

E. coli	ATCC 11229	1 min
S. typhi	CDC 99	1 min
C. albicans	ATCC	1 min
B. subtilis	9372
Esporos superiores (104)		10 min
Esporos inferiores (106)		15 min

Foi feito um experimento de atividade esporicida de acordo com o protocolo da OPS (Organização Panamericana de Saúde)/OMS (Organização Mundial de Saúde).

Para atividade viricida, verificou-se que Microcina 5 reduz a carga viral do vírus da imunodeficiência humana (cepa SF33) em mais de 3 logs em cinco minutos. Esse fato foi verificado pela ausência de efeito citopático e do antígeno Agp24 nos experimentos de vírus tratados com Microcina. Esses experimentos foram realizados de acordo com os protocolos viricidas da “United States Environmental Protection Agency” (DIS/TSS-7/ 12 de novembro de 1981).

A atividade viricida de Microcina foi confirmada recentemente nos estudos realizados nos Estados Unidos contra o HIV e o vírus da pólio, e sua atividade contra 15 Listeria monocytogenes, MRSA e Mycobacterium tuberculosas também foi documentada. Dessa forma, demonstrou-se que

Microcina, quando administrada da forma recomendada, pode erradicar bactérias, fungos, vírus e esporos após um a quinze minutos de exposição.

EXEMPLO 13

Este exemplo demonstra o uso de uma solução de água

ORP exemplar, Microcina, como uma solução antimicrobiana

Petição 870180168974, de 28/12/2018, pág. 104/140

95/127 eficaz.

Foi realizada uma avaliação Time-Kill in vitro usando água de potencial redutor oxidativo Microcina. Microcina foi avaliada versus suspensões de ataque de 50 cepas de diferentes microorganismos - 25 cepas da “American Type

Culture Collection” (ATCC) e 25 isolados clínicos daquelas mesmas espécies - como descrito na “Tentative Final Monograph”, “Federal Register”, 17 de junho de 1994, vol. 59: 116, pg. 31.444. As reduções percentuais e as reduções

Log10 da população inicial de cada cepa de ataque foram determinas após exposições à Microcina por trinta (30) segundos, um (1) minuto, três (3) minutos, cinco (5) minutos, sete (7) minutos, nove (9) minutos, onze (11) minutos, treze (13) minutos, quinze (15) minutos e vinte (20) minutos. Todos os plaqueamentos em ágar foram realizados em duplicata, e Microcina foi avaliada em uma concentração de 99% (v/v). Todos os testes foram realizados de acordo com “Good Laboratory Practices”, como especificado em 21 C.F.R. Part 58.

A tabela seguinte resume os resultados da avaliação

Time-Kill in vitro mencionada anteriormente na marca de exposição de trinta segundos para todas as populações testadas que foram reduzidas em mais de 5,0 Log10:

Tabela 6. Morte in vitro em 30 segundos

N°	Espécie de microorganismo	População inicial	População pós- exposição	Redução Log10	Redução percentual
		(CFU/ml)	(CFU/ml)
1	Acinetobacter baumannii	2,340 x 109	< 1,00 x 103	6,3692	99,9999

Petição 870180168974, de 28/12/2018, pág. 105/140

96/127

	(ATCC #19003)
2	Acinetobacter baumannii Isolado clínico BSLI #061901Ab3	1,8150 x 109	< 1,00 x 103	6,2589	99,9999
3	Bacteroides fragilis (ATCC #43858)	4,40 x 1010	< 1,00 x 103	7,6435	99,9999
4	Bacteroides fragilis Isolado clínico BSLI #061901Bf6	2,70 x 1010	< 1,00 x 103	7,4314	99,9999
5	Candida albicans (ATCC #10231)	2,70 x 1010	< 1,00 x 103	6,3345	99,9999
6	Candida albicans Isolado clínico BSLI #042905Ca	5,650 x 109	< 1,00 x 103	6,7520	99,9999
7	Enterobacter aerogenes (ATCC #29007)	1,2250 x 109	< 1,00 x 103	6,0881	99,9999
8	Enterobacter aerogenes Isolado clínico BSLI #042905Ea	1,0150 x 109	< 1,00 x 103	6,0065	99,9999
9	Enterococcus faecalis (ATCC #29212)	2,610 x 109	< 1,00 x 103	6,4166	99,9999
10	Enterococcus faecalis Isolado clínico	1,2850 x 109	< 1,00 x 103	6,1089	99,9999

Petição 870180168974, de 28/12/2018, pág. 106/140

97/127

	BSLI #061901Efs2
11	Enterococcus faecium VRE, MDR (ATCC #51559)	3,250 x 109	< 1,00 x 103	6,5119	99,9999
12	Enterococcus faecium Isolado clínico BSLI #061901Efinl	1,130 x 109	< 1,00 x 103	6,0531	99,9999
13	Escherichia coli (ATCC #11229)	5,00 x 108	< 1,00 x 103	5,6990	99,9998
14	Escherichia coli Isolado clínico BSLI #042905Ec1	3,950 x 108	< 1,00 x 103	5,5966	99,9997
15	Escherichia coli (ATCC #25922)	6, 650 x 108	< 1,00 x 103	5,8228	99,9998
16	Escherichia coli Isolado clínico BSLI #042905Ec2	7,40 x 108	< 1,00 x 103	5,8692	99,9998
17	Haemophilus influenzae (ATCC #8149)	1,5050 x 109	< 1,00 x 104	5,1775	99,9993
18	Haemophilus influenzae Isolado clínico BSLI #072605Hi	1,90 x 109	< 1,00 x 104	5,2788	99,9995
19	Klebsiella oxytoca MDR	1,120 x 109	< 1,00 x 103	6,0492	99,9999

Petição 870180168974, de 28/12/2018, pág. 107/140

98/127

	(ATCC #15764)
20	Klebsiella oxytoca Isolado clínico BSLI #061901Ko1	1,810 x 109	< 1,00 x 103	6,2577	99,9999
21	Klebsiella pneumoniae subsp. ozaenae (ATCC #29019)	1,390 x 109	< 1,00 x 103	6,1430	99,9999
22	Klebsiella pneumoniae Isolado clínico BSLI #061901Kpn2	9,950 x 108	< 1,00 x 103	5,9978	99,9999
23	Micrococcus luteus (ATCC #7468)	6,950 x 108	< 1,00 x 103	5,8420	99,9999
24	Micrococcus luteus Isolado clínico BSLI #061901M12	1,5150 x 109	< 1,00 x 103	6,1804	99,9999
25	Proteus mirabilis (ATCC #7002)	1,5950 x 109	< 1,00 x 103	6,2028	99,9999
26	Proteus mirabilis Isolado clínico BSLI #061901Pm2	2,0950 x 109	< 1,00 x 103	6,3212	99,9999
27	Pseudomonas aeruginosa (ATCC #15442)	6,450 x 108	< 1,00 x 103	5,8096	99,9999

Petição 870180168974, de 28/12/2018, pág. 108/140

99/127

28	Pseudomonas aeruginosa Isolado clínico BSLI #072605Pa	1,3850 x 109	< 1,00 x 103	6,1414	99,9999
29	Pseudomonas aeruginosa (ATCC #27853)	5,550 x 108	< 1,00 x 103	5,7443	99,9999
30	Pseudomonas aeruginosa Isolado clínico BSLI #061901Pa2	1,1650 x 109	< 1,00 x 103	6,0663	99,9999
31	Serratia marcescens (ATCC #14756)	9,950 x 108	< 1,00 x 103	5,9978	99,9999
32	Serratia marcescens Isolado clínico BSLI #042905Sm	3,6650 x 109	< 1,00 x 103	6,5641	99,9999
33	Staphylococcus aureus (ATCC #6538)	1,5050 x 109	< 1,00 x 103	6,1775	99,9999
34	Staphylococcus aureus Isolado clínico BSLI #061901Sa1	1,250 x 109	< 1,00 x 103	6,0969	99,9999
35	Staphylococcus aureus (ATCC #29213)	1,740 x 109	< 1,00 x 103	6,2405	99,9999
36	Staphylococcus aureus	1,1050 x 109	< 1,00 x 103	6,0434	99,9999

Petição 870180168974, de 28/12/2018, pág. 109/140

100/127

	Isolado clínico BSLI #061901Sa2
37	Staphylococcus epidermidis (ATCC #12228)	1,0550 x 109	< 1,00 x 103	6,0233	99,9999
38	Staphylococcus epidermidis Isolado clínico BSLI #072605Se	4,350 x 108	< 1,00 x 103	5,6385	99,9998
39	Staphylococcus haemolyticus (ATCC #29970)	8,150 x 10 8	< 1,00 x 10 3	5,9112	99,9999
40	Staphylococcus haemolyticus Isolado clínico BSLI #042905Sha	8,350 x 108	< 1,00 x 103	5,9217	99,9999
41	Staphylococcus hominis (ATCC #27844)	2,790 x 10 108	< 1,00 x 103	5,4456	99,9996
42	Staphylococcus hominis Isolado clínico BSLI #042905Sho	5,20 x 108	< 1,00 x 103	5,7160	99,9998
43	Staphylococcus saprophyticus (ATCC #35552)	9,10 x 108	< 1,00 x 103	5,9590	99,9999
44	Staphylococcus saprophyticus Isolado clínico BSLI #042905Ss	1,4150 x 109	< 1,00 x 103	6,1508	99,9999

Petição 870180168974, de 28/12/2018, pág. 110/140

101/127

45	Streptococcus pneumoniae (ATCC #33400)	2,1450 x 109	< 1,00 x 104	5,3314	99,9995
46	Streptococcus pyogenes (ATCC #19615)	5,20 x 109	< 1,00 x 103	6,7160	99,9999
47	Streptococcus pyogenes Isolado clínico BSLI #061901Spy7	2,5920 x 109	< 1,00 x 103	6,4141	99,9999

Embora suas reduções microbianas fossem medidas em menos de 5, 0 Log10, Microcina também demonstrou atividade antimicrobiana contra as três espécies restantes não incluídas na Tabela 6. Mais especificamente, uma exposição de trinta segundos à Microcina reduziu a população de Streptococcus pneumoniae (Isolado clínico; BSLI #072605Spnl) em mais de 4,5 Log10, que era o limite de detecção para essa espécie. Além disso, quando atacada com Candida tropicalis (ATCC #750), Microcina demonstrou uma redução microbiana de mais de 3,0 Log10, após uma exposição de trinta segundos. Adicionalmente, quando atacada com Candida tropicalis (BSLI #042905Ct), Microcina demonstrou uma redução microbiana de mais de 3,0 Log10, após uma exposição de vinte minutos.

Os resultados exemplares dessa avaliação Time-Kill in vitro demonstram que a água de potencial redutor oxidativo de Microcina exibe atividade antimicrobiana rápida (ou seja, menos de 30 segundos na maioria dos casos) contra um amplo espectro de microorganismos de ataque. Populações microbianas de 47 das 50 espécies gram-positivas, gramPetição 870180168974, de 28/12/2018, pág. 111/140

102/127 negativas e de leveduras avaliadas foram reduzidas em mais de 5,0 Log10 em até trinta segundos de exposição ao produto.

EXEMPLO 14

Este exemplo demonstra a comparação da atividade antimicrobiana de uma solução de água ORP exemplar, Microcina, versus solução 4,0% de gluconato de clorexidina (p/v) HIBICLENS® e irrigação com cloreto de sódio 0,9% (USP).

Foi feita uma avaliação Time-Kill in vitro como descrito no Exemplo 13, usando solução 4,0% de gluconato de clorexidina (p/v) HIBICLENS^® e uma solução de irrigação estéril de cloreto de sódio 0,9% (US?) como produtos de referência. Cada produto de referência foi avaliado contra suspensões das dez cepas de “American Type Culture Collection” (ATCC) especificamente definidas na “Tentative Final Monograph”. Os dados coletados foram então analisados contra a redução da atividade microbiana de Microcina registrada no Exemplo 13.

A água de potencial redutor oxidativo Microcina reduziu populações microbianas de cinco das cepas de ataque a um nível comparável àquele observado para a solução de gluconato de clorexidina HIBICLENS^®. Tanto Microcina quanto HIBICLENS^® geraram uma redução microbiana de mais de 5,0 Log10, após uma exposição de trinta segundos às seguintes espécies: Escherichia coli (ATCC #11229 e ATCC #25922), Pseudomonas aeruginosa (ATCC #15442 e ATCC #27853) e Serratia marcescens (ATCC #14756). Além disso, como mostrado acima na Tabela 5, Microcina demonstrou excelente atividade antimicrobiana contra Micrococcus luteus (ATCC de 28/12/2018, pág. 112/140

103/127 #7468) ao gerar uma redução de 5, 8420 Logio após uma exposição de trinta segundos. No entanto, uma comparação direta da atividade com HIBICLENS® contra Micrococcus luteus (ATCC #7468) não foi possível, uma vez que, após uma 5 exposição de trinta segundos, HIBICLENS^® reduziu a população até em torno do limite de detecção do teste (nesse caso específico, em mais de 4,8 Log10). Observa-se que a solução de irrigação estéril de cloreto de sódio 0,9% reduziu as populações microbianas de cada uma das seis cepas de ataque discutidas acima em menos de 0,3 Log10 após uma exposição completa de vinte minutos.

A água de potencial redutor oxidativo Microcina gerou maior atividade antimicrobiana do que tanto HIBICLENS^® quanto a irrigação com cloreto de sódio para quatro das cepas de ataque testadas: Enterococcus faecalis (ATCC #29212), Staphylococcus aureus (ATCC #6538 e ATCC #29213), e Staphylococcus epídermídís (ATCC #12228). A tabela seguinte resume os resultados de redução microbiana da avaliação Time-Kill in vitro para essas quatro espécies:

Tabela 7. Resultados comparativos de morte

Espécie de microorg.	Tempo de exposição	Redução Log10
Microcina	HIBICLENS®	Irrigação com NaCl
Enterococcus faecalis (ATCC #29212)	30 segundos	6,4166	1,6004	0,3180
1 minuto	6,4166	2,4648	0,2478
3 minutos	6,4166	5,2405	0,2376
5 minutos	6,4166	5,4166	0,2305
7 minutos	6,4166	5,4166	0,2736
9 minutos	6,4166	5,4166	0,2895
11 minutos	6,4166	5,4166	0,2221

Petição 870180168974, de 28/12/2018, pág. 113/140

104/127

	13 minutos	6,4166	5,4166	0,2783
15 minutos	6,4166	5,4166	0,2098
20 minutos	6,4166	5,4166	0,2847
Staphylococcus aureus (ATCC #6538)	30 segundos	6,1775	1,1130	0,0000
1 minuto	6,1775	1,7650	0,0191
3 minutos	6,1775	4,3024	0,0000
5 minutos	6,1775	5,1775	0,0000
7 minutos	6,1775	5,1775	0,0000
9 minutos	6,1775	5,1775	0,0000
11 minutos	6,1775	5,1775	0,0267
13 minutos	6,1775	5,1775	0,0000
15 minutos	6,1775	5,1775	0,0191
20 minutos	6,1775	5,1775	0,0000
Staphylococcus aureus (ATCC #29213)	30 segundos	6,2405	0,9309	0,0000
1 minuto	6,2405	1,6173	0,0000
3 minutos	6,2405	3,8091	0,0460
5 minutos	6,2405	5,2405	0,0139
7 minutos	6,2405	5,2405	0,0000
9 minutos	6,2405	5,2405	0,0113
11 minutos	6,2405	5,2405	0,0283
13 minutos	6,2405	5,2405	0,0000
15 minutos	6,2405	5,2405	0,0000
20 minutos	6,2405	5,2405	0,0615
Staphylococcus epídermídís (ATCC #12228)	30 segundos	5,6385	5,0233	0,0456
1 minuto	5,6385	5,0233	0,0410
3 minutos	5,6385	5,0233	0,0715
5 minutos	5,6385	5,0233	0,0888
7 minutos	5,6385	5,0233	0,0063
9 minutos	5,6385	5,0233	0,0643

Petição 870180168974, de 28/12/2018, pág. 114/140

105/127

	11 minutos	5,6385	5,0233	0,0211
13 minutos	5,6385	5,0233	0, 1121
15 minutos	5,6385	5,0233	0,0321
20 minutos	5,6385	5,0233	0,1042

Os resultados dessa avaliação Time-Kill in vitro comparativa demonstram que a água de potencial redutor oxidativo Microcina não apenas exibe atividade antimicrobiana comparável com HIBICLENS® contra Escherichia coli (ATCC #11229 e ATCC #25922), Pseudomonas aeruginosa (ATCC #15442 e ATCC #27853), Serratia marcescens (ATCC #14756), e Micrococcus luteus (ATCC #7468), mas fornece tratamento mais eficaz contra Enterococcus faecalis (ATCC #29212), Staphylococcus aureus (ATCC #6538 e ATCC #29213), e Staphylococcus epidermidis (ATCC #12228). Como mostrado na Tabela 7, Microcina exemplifica uma resposta antimicrobiana more rápida (ou seja, menos de 30 segundos) em algumas espécies. Além disso, a exposição à Microcina resulta em uma maior redução microbiana global em todas as espécies listadas na Tabela 7.

EXEMPLO 15 uma formulação da invenção tópica a um paciente. A ingredientes:

Quantidade

250 ml

Este exemplo fornece adequada para administração formulação contém os seguintes

Componente

Solução de água ORP

Pó de polímero Carbopol® (agente espessante)

Trietanolamina (agente neutralizante) g

ml

EXEMPLO 16 de 28/12/2018, pág. 115/140

106/127

Este exemplo fornece adequada para administração formulação contém os seguintes

Componente

Solução de água ORP

Pó de polímero Carbopol® (agente espessante)

Trietanolamina (agente neutralizante) uma formulação da invenção tópica a um paciente. A ingredientes:

Quantidade 1.000 ml g

0 ml

EXEMPLO 17

Este exemplo fornece adequada para administração formulação contém os seguintes

Componente

Solução de água ORP

Pó de polímero Carbopol® (agente espessante)

Trietanolamina (agente neutralizante) uma formulação da invenção tópica a um paciente. A ingredientes:

Quantidade

250 ml ml

EXEMPLO 18

Este exemplo descreve a fabricação de uma formulação da invenção que compreende uma solução de água ORP e um agente espessante.

Uma solução de água ORP é colocada em um recipiente adequado, por exemplo, uma proveta ou um jarro de vidro. O polímero Carbopol® 974P é passado através de uma peneira grossa (ou coador), o que permite uma aspersão rápida, e ao mesmo tempo EME quebra quaisquer aglomerados grandes. O polímero Carbopol® 974P é então adicionado como agente espessante. O polímero Carbopol® é adicionado lentamente de 28/12/2018, pág. 116/140

107/127 para evitar a formação de grumos e, dessa forma, evitar um ciclo de mistura excessivamente longo.

A solução é misturada rapidamente durante a adição do polímero Carbopol®, de tal forma que o pó se dissolva em temperatura ambiente. O agente neutralizante trietanolamina é então adicionado à solução e misturado por meio de um misturador elétrico ou outro dispositivo adequado, até que seja obtido um gel homogêneo. A adição do agente neutralizante à composição de polímero Carbopol® converte a formulação em um gel.

EXEMPLO 19

Este exemplo descreve o tratamento de doença periodontal com a utilização de água ORP.

Foi realizado um estudo de 14 pacientes com gengivite e periodontite incipiente. Os pacientes foram tratados com raspagem ultra-sônica com a utilização da solução aquosa de potencial redutor oxidativo como irrigante no Cavitron. Após os procedimentos de raspagem ultra-sônica, os pacientes usaram água de potencial redutor oxidativo como enxaguatório bucal. Os pacientes enxaguaram com solução aquosa de potencial redutor oxidativo por 2 minutos, três vezes ao dia, preferivelmente após as refeições. Não foram administrados antibióticos ou outras medicações.

Os pacientes foram avaliados semanalmente por 12 semanas após a raspagem. O período de resolução da gengivite nos pacientes foi de 2 a 4 semanas. O sangramento com a escovação foi resolvido em até 24 horas a 4 dias. Nenhum dos pacientes exibiu efeitos adversos decorrentes do uso de solução aquosa de potencial redutor oxidativo. Em até duas semanas de tratamento, todos os pacientes exibiram de 28/12/2018, pág. 117/140

108/127 evidências de regeneração óssea.

EXEMPLO 20

Este exemplo demonstra o efeito de uma solução de água ORP exemplar versus peróxido de hidrogênio (HP) sobre a viabilidade de fibroblastos diplóides humanos (HDFs). Para estudar essa toxicidade potencial, HDFs foram expostos in vitro à solução de água ORP e ao peróxido de hidrogênio (HP). HP é conhecido por ser tóxico para as células eucarióticas, aumentando a apoptose e a necrose e reduzindo a viabilidade celular. Neste exemplo, a viabilidade celular, a apoptose e a necrose foram medidas em HDFs expostos à solução pura de água ORP e 880 mM de HP (uma concentração empregada para usos anti-sépticos do HP) por 5 e 30 minutos.

As culturas de HDF foram obtidas de três prepúcios diferentes, que foram reunidos em pool e criopreservados juntos para os objetivos deste estudo. Somente foram usadas células diplóides para todos os experimentos. Na análise do ciclo celular, a diploidia do DNA foi definida como a presença de um único pico G0-G1 com um CV < 7% e um pico G2/M correspondente coletado de pelo menos 20.000 eventos totais. As Figuras 4A-4C (FIG. 4A-4C) revelam os resultados com tempos de exposição de 5 e 30 minutos mostrados em barras brancas e pretas, respectivamente. A análise simultânea desses parâmetros foi realizada nas mesmas populações de células por citometria de fluxo usando: FIG. 4A- 7-aminoactinomicina D (7AAD); FIG. 4B- Anexina V-FITC e FIG. 4C- iodeto de propídio. As Figuras 8A-8C revelam os valores percentuais expressos como média ± DP (n = 3).

A viabilidade celular foi de 75% e 55% após uma de 28/12/2018, pág. 118/140

109/127 exposição de 5 minutos à solução de água ORP e HP, respectivamente (FIG. 4A). Caso a exposição fosse prolongada até 30 minutos, a viabilidade celular diminuía ainda mais até 60% e 5%, respectivamente. Aparentemente, a solução de água ORP induziu morte celular através de necrose, pois 15% das células incorporaram iodeto de propídio na análise por citometria de fluxo em ambos os tempos (FIG. 4C). Embora sem se prender a nenhuma teoria em particular, esse resultado poderia ser causado por um efeito osmótico induzido pela hipotonicidade de Microcyn (13 mOsm), uma vez que as células foram mantidas na solução de água ORP apenas, sem a adição de fatores do crescimento ou íons. A apoptose não parece ser o mecanismo pelo qual a solução de água ORP induz morte celular, pois somente 3% das células tratadas com solução de água ORP expuseram Anexina-V na superfície celular (um marcador de apoptose) (FIG. 4B). Essa percentagem foi, na verdade, similar àquela medida no grupo de controle. Por outro lado, HP induziu necrose em 20% e 75% das células tratadas e apoptose em 15% e 20% após 5 e 30 minutos de exposição, respectivamente. Em conjunto, esses resultados mostram que a solução de água ORP (não diluída) é bem menos tóxica para os HDFs do que uma concentração anti-séptica de HP.

EXEMPLO 21

Este exemplo demonstra o efeito de uma solução de água ORP exemplar em relação ao peróxido de hidrogênio (HP) sobre o dano oxidativo do DNA e formação do aduto de DNA 8hidroxi-2'-desoxiguanosina (8-OHdG) em HDFs. Sabe-se que a produção de adutos 8-OHdG em uma célula é um marcador de dano oxidativo em resíduos de DNA específicos. Além disso, de 28/12/2018, pág. 119/140

110/127 altos níveis celulares desse aduto estão correlacionados à mutagênese, carcinogênese e envelhecimento celular.

A Figura 5 (FIG. 5) mostra os níveis de adutos 8-OHdG presentes em amostras de DNA de HDFs após tratamentos de controle, tratamentos com solução de água ORP e tratamentos com HP por 30 minutos. O DNA foi extraído logo após a exposição (T0, barras brancas) ou três horas após o período de ataque (T3, barras pretas). O DNA foi digerido e os adutos 8-OHdG foram medidos por um kit ELISA de acordo com as instruções do fabricante. Os valores (ng/ml) são mostrados como média ± DP (n = 3). A exposição à solução de água ORP por 30 minutos não aumentou a formação de adutos nas células tratadas em comparação com células de controle após incubação por 30 minutos. Em contraste, o tratamento com HP altamente diluído (abaixo das concentrações subletais e não terapêuticas de HP (500 μΜ de HP)) de 500 μΜ de HP por 30 minutos aumentou o número de adutos 8-OHdG em cerca de 25 vezes em relação às células tratadas de controle ou às células com solução de água ORP.

As células tratadas com solução de água ORP foram capazes de diminuir os níveis de adutos 8-OhdG, caso fossem deixadas em DMEM suplementado por 3 horas após a exposição à solução de água ORP. Apesar de ter sido permitido o mesmo período de recuperação de 3 horas, as células tratadas com HP ainda apresentaram cerca de 5 vezes mais adutos do que as células tratadas de controle ou as células tratadas com solução de água ORP células tratadas. Em conjunto, esses resultados demonstram que a exposição aguda à solução de água ORP não induz dano oxidativo ao DNA significativo.

Esses resultados também indicam que a solução de água ORP de 28/12/2018, pág. 120/140

111/127 provavelmente não induz mutagênese ou carcinogênese in vitro ou in vivo.

EXEMPLO 22

Este exemplo demonstra os efeitos sobre HDFs da exposição crônica a baixas concentrações de uma solução de água ORP exemplar versus HP. Sabe-se que o estresse oxidativo crônico induz o envelhecimento prematuro das células. A fim de simular um estresse oxidativo prolongado, culturas primárias de HDFs foram expostas cronicamente a uma baixa concentração da solução de água ORP (10%) ou a uma concentração não letal de HP (5 μΜ) durante 20 duplicações da população. A expressão e a atividade da enzima SA-p-galactosidase foram previamente associadas ao processo de envelhecimento in vivo e in vitro. Neste exemplo, a expressão da enzima SA-p-galactosidase foi analisada após um mês de exposição contínua de HDFs à solução de água ORP ou ao HP. Os resultados são apresentados na FIG. 6. A expressão da enzima SA-βgalactosidase foi analisada pela contagem do número de células azuis em 20 campos microscópicos (para um exemplo de padrão de coloração, veja o Painel A.). O Painel B mostra que somente o tratamento com HP acelerou o envelhecimento das células, como indicado pelo número de células que superexpressam SA-p-galactosidase (n= 3). O

tratamento	crônico	com	uma	dos	e baixa de HP	aumentou	a
expressão	de SA-β-	Gal	em	86%	das células,	enquanto	o
tratamento	com a	solução	de	água ORP não	induziu	a

superexpressão dessa proteína. Pode-se concluir a partir deste exemplo que a solução de água ORP não é uma indutora de envelhecimento celular prematuro.

de 28/12/2018, pág. 121/140

112/127

EXEMPLO 23

Este exemplo demonstra os resultados de um estudo de toxicidade com a utilização de uma solução de água ORP exemplar.

Um estudo de toxicidade sistêmica aguda foi realizado em camundongos para determinar a toxicidade sistêmica potencial de Microcyn 60, uma solução de água ORP exemplar. Uma dose única (50 ml/kg) de Microcyn 60 foi injetada por via intraperitoneal em cinco camundongos. Cinco camundongos de controle foram injetados com uma dose única (50 ml/kg) de soro fisiológico (cloreto de sódio 0,9%). Todos os animais foram observados quanto à mortalidade e reações adversas imediatamente após a injeção, com 4 horas após a injeção e depois uma vez ao dia por 7 dias. Todos os animais também foram pesados antes da injeção e novamente no 7° Dia. Não houve mortalidade durante o estudo. Todos os animais pareciam clinicamente normais por todo o estudo. Todos os animais ganharam peso. A LD50 da Microcyn 60 intraperitoneal aguda estimada por este estudo é acima de 50 ml/kg. Este exemplo demonstra que Microcyn 60 é desprovida de toxicidade significativa e deve ser segura para uso terapêutico de acordo com a invenção.

EXEMPLO 24

Este exemplo ilustra um estudo realizado para determinar a toxicidade citogenética potencial de uma solução de água ORP exemplar.

Um teste de micronúcleo foi realizado com o uso de uma solução de água ORP exemplar (Microcyn 10%) para avaliar o potencial mutagênico da injeção intraperitoneal de uma solução de água ORP em camundongos. O teste de micronúcleo de 28/12/2018, pág. 122/140

113/127 mamífero in vivo é usado para a identificação de substâncias que causam danos aos cromossomos ou ao aparelho mitótico de eritrócitos policromáticos murídeos. Esse dano resulta na formação de micronúcleos, estruturas intracelulares que contêm fragmentos cromossômicos atrasados ou cromossomos inteiros isolados. O estudo da solução de água ORP incluiu 3 grupos de 10 camundongos cada (5 machos/5 fêmeas): um grupo de teste, dosado com a solução de água ORP; um grupo de controle negativo, dosado com um solução de NaCl 0,9%; e um grupo de controle positivo, dosado com uma solução mutagênica de ciclofosfamida. O teste e os grupos de controle negativo receberam uma injeção intraperitoneal (12,5 ml/kg) da solução de água ORP ou da solução de NaCl 0,9%, respectivamente, por dois dias consecutivos (1° e 2° dias). Os camundongos do controle positivo receberam uma única injeção intraperitoneal de ciclofosfamida (8 mg/ml, 12,5 ml/kg) no 2^a dia. Todos os camundongos foram observados imediatamente após a injeção quanto a quaisquer reações adversas. Todos os animais pareciam clinicamente normais por todo o estudo, e não foram observados sinais de toxicidade em qualquer um dos grupos. No 3° dia, todos os camundongos foram pesados e sacrificados.

Os fêmures foram retirados dos camundongos sacrificados, a medula óssea foi extraída e foram feitos esfregaços em duplicata para cada camundongo. As lâminas da medula óssea para cada animal foram lidas em um aumento de 40X. A proporção de eritrócitos policromáticos (PCE) para eritrócitos normocromáticos (NCE), um índice de toxicidade para a medula óssea, foi determinada para cada camundongo de 28/12/2018, pág. 123/140

114/127 pela contagem de um total de pelo menos 200 eritrócitos. A seguir, um mínimo de 2.000 PCE classificáveis por camundongo foi avaliado quanto à incidência de eritrócitos policromáticos micronucleados. A análise estatística dos dados foi feita usando o teste de Mann e Whitney (com 5% de limiar de risco) por uma suíte de programas de computador estatísticos (Statview 5.0, SAS Institute Inc., EUA).

Os camundongos do controle positivo tiveram proporções PCE/NCE menores estatisticamente significativas, quando comparados com seus respectivos controles negativos (machos: 0,77 vs. 0,90 e fêmeas: 0,73 vs. 1,02), mostrando a toxicidade da ciclofosfamida na medula óssea tratada. No entanto, não houve diferença estatisticamente significativa entre as proporções PCE/NCE para os camundongos tratados com solução de água ORP e controles negativos. Da mesma forma, os camundongos do controle positivo tiveram um número maior estatisticamente significativo de eritrócitos policromáticos que abrigam micronúcleos, quando comparados tanto com os camundongos tratados com solução de água ORP (machos: 11,0 vs. 1,4/fêmeas: 12,6 vs. 0,8) quanto com os controles negativos (machos: 11,0 vs. 0,6 /fêmeas: 12,6 vs. 1,0). Não houve diferença estatisticamente significativa entre o número de eritrócitos policromáticos que abrigam micronúcleos em camundongos tratados com solução de água ORP e camundongos do controle negativo.

Este exemplo demonstra que Microcyn 10% não induziu toxicidade ou efeitos mutagênicos após injeções intraperitoneais em camundongos.

EXEMPLO 25

Este estudo demonstra a ausência de toxicidade de uma de 28/12/2018, pág. 124/140

115/127 solução de água ORP exemplar, Dermacyn.

Este estudo foi feito de acordo com o padrão ISO 10993-5:1999 para determinar o potencial de uma solução de água ORP exemplar, Dermacyn, para causar citotoxícidade. Um disco de filtro com 0,1 ml de Dermacyn foi colocado sobre uma superfície de agarose, que cobria diretamente uma monocamada de células fibroblásticas de camundongos (L929). As amostras preparadas foram observadas quanto ao dano citotóxico após 24 horas de incubação a 37°C na presença de CO2 5%. As observações foram comparadas com amostras de controle positivo e negativo. As amostras contendo Dermacyn não revelaram nenhuma evidência de lise celular ou toxicidade, enquanto os controles positivo e negativo obtiveram os resultados previstos.

Com base neste estudo, concluiu-se que Dermacyn não gera efeitos citotóxicos em fibroblastos murídeos.

EXEMPLO 26

Este estudo foi realizado em 16 ratos para avaliar a tolerabilidade local de uma solução de água ORP exemplar, Dermacyn, e seus efeitos sobre a histopatologia de leitos de feridas em um modelo de cicatrização de feridas dérmicas de espessura total. As feridas foram feitas em ambos os lados do rato em questão. Durante o processo de cicatrização, foram feitos cortes de pele no lado direito ou esquerdo (por exemplo, tratado com Dermacyn e tratado com soro fisiológico, respectivamente).

Cortes corados com tricromo de Masson e cortes corados com Colágeno do Tipo II dos locais de feridas cirúrgicas tratados com Dermacyn e com soro fisiológico foram avaliados por um patologista veterinário credenciado. Os de 28/12/2018, pág. 125/140

116/127 cortes foram avaliados quanto à quantidade de expressão de Colágeno do Tipo 2 como uma manifestação de proliferação do tecido conjuntivo, morfologia de fibroblastos e formação de colágeno, presença de neoepiderme no corte transversal, inflamação e extensão de ulceração dérmica.

Os achados indicam que Dermacyn foi bem tolerada em ratos. Não houve lesões histopatológicas relacionadas ao tratamento nos cortes de pele de qualquer uma das lâminas de feridas (tratadas com Dermacyn e tratadas com soro fisiológico, respectivamente). Não houve diferenças histopatológicas relevantes entre os locais de feridas tratados com soro fisiológico e os tratados com soro Dermacyn, indicando que o tratamento com Dermacyn foi bem tolerado. Não houve diferenças significativas entre a expressão de Colágeno do Tipo 2 entre os locais de feridas tratados com soro fisiológico e os tratados com Dermacyn, indicando que a Dermacyn não tem um efeito adverso sobre fibroblastos ou sobre a elaboração de colágeno durante a cicatrização de feridas.

EXEMPLO 27

Este estudo foi feito para demonstrar a segurança e a eficácia de uma solução de água ORP exemplar, Dermacyn, usada de acordo com a invenção, como uma solução de substituição para o sistema de lavagem a jato Versajet™ (Smith & Nephew) no tratamento de tecido necrótico (úlceras) distal aos maléolos, comparada com o regimepadrão.

Foi um estudo controlado prospectivo randomizado, duplo-cego. Aproximadamente 30 pacientes (cerca de 20 no grupo de Dermacyn/cerca de 10 no grupo de controle) foram de 28/12/2018, pág. 126/140

117/127 envolvidos no estudo. A população para este estudo foi de pacientes com úlceras da extremidade inferior (por exemplo, úlceras em pé diabético, úlceras por estase venosa). Todos os critérios de inclusão e exclusão no estudo deviam estar cumpridos por volta do Dia 0 para que o paciente fosse elegível para entrar no estudo. Os critérios de inclusão foram: paciente com 18 anos idade ou mais; a úlcera da extremidade inferior do paciente deve possuir tecido necrótico presente e ser um candidato a desbridamento mecânico pelo sistema de lavagem a jato; a úlcera do paciente estar localizada distal aos maléolos; área de superfície da úlcera do paciente ser maior do que ou igual a 1,0 cm²; a úlcera do paciente se estender através da derme e para dentro do tecido subcutâneo (pode estar presente tecido de granulação), com possível exposição de músculo ou de tendão, mas sem exposição óssea e/ou envolvimento da cápsula articular; e o índice tornozelobraço do paciente por Doppler ser um ABI maior ou igual a 0,8 ou a pressão dos dedos dos pés do paciente ser maior ou igual a 40 mmHg.

Os critérios de exclusão foram: paciente com evidências clínicas de gangrena em qualquer parte do membro de tratamento; há a expectativa de que a úlcera do paciente seja ressecada ou amputada durante o período de estudo; o

paciente	apresenta os	seguintes sinais de	uma	síndrome	de
resposta	inflamatória	sistêmica (	SIRS);	a	úlcera	do
paciente	tem uma área	de superfície	total	que	é menor	do

que 1 cm²; o paciente tem uma ou mais condições médicas (incluindo doença renal, hepática, hematológica, neurológica ou imune) que, na opinião do investigador, de 28/12/2018, pág. 127/140

118/127 tornariam o paciente um candidato inadequado para este estudo; o paciente sabidamente faz uso abusivo de álcool ou fármacos; o paciente está fazendo uso de corticosteróides orais ou parenterais, agentes imunossupressores ou citotóxicos, ou prevê-se que venha a necessitar de tais agentes durante a evolução do estudo; o paciente tem alergias conhecidas ao cloro; a úlcera do paciente é acompanhada por osteomielite; e o paciente tem alguma

condição	que	comprometa de	forma séria a	capacidade	do
paciente	para	completar este	estudo.
Após	ter	sido obtido o	consentimento	informado e	os
critérios	de	inclusão e exclusão terem sido	preenchidos	, o
paciente	era	randomizado (	randomização 2:	1) em um	dos

seguintes tratamentos: Tratamento — Dermacyn com o sistema de lavagem a jato, mais o uso de um regime de curativo da ferida com hidrogel; Controle — soro fisiológico (tratamento-padrão com os sistemas de lavagem a jato), mais o uso de um regime de curativo da ferida com hidrogel.

Cada paciente randomizado para Dermacyn recebeu aplicações do produto de estudo Dermacyn, com o sistema de lavagem a jato Versajet durante desbridamento mecânico da ferida do paciente. Um ajuste padrão de pressão no Versajet foi usado para úlceras em pé diabético, as quais eram distais aos maléolos. Após o desbridamento, Dermacyn era aplicada sobre a ferida em quantidades suficientes para enxaguar o leito da ferida e deixá-lo sem restos. A ferida era coberta com um curativo de hidrogel. Em cada mudança de curativo, a ferida era enxaguada com Dermacyn e coberta com um novo curativo de hidrogel. Os curativos eram trocados a cada 3 dias, a menos que especificado de forma diferente de 28/12/2018, pág. 128/140

119/127 pelo investigador. Os fatores de resposta clínica (CFRs) ((1) redução de bactérias na ferida, (2) redução na área da ferida e (3) desenvolvimento de tecido de granulação) foram determinados durante as visitas semanais.

Cada paciente de controle recebeu aplicações do produto de controle (soro fisiológico) com o sistema de lavagem a jato Versajet durante desbridamento mecânico da ferida do paciente. Após o desbridamento, soro fisiológico era aplicado sobre a ferida em quantidades suficientes para enxaguar a ferida e deixá-la sem restos. A ferida era coberta com um curativo de hidrogel. Em cada mudança de curativo, a ferida era enxaguada com soro fisiológico e coberta com um novo curativo de hidrogel. Os curativos eram trocados a cada 3 dias, a menos que especificado de forma diferente pelo investigador. Os fatores de resposta clínica foram determinados durante as visitas semanais.

O desbridamento da ferida pôde ser realizado em cada visita semanal. Qualquer tecido necrótico era desbridado com lavagem a jato, antes das avaliações da ferida. Os

restos da	úlcera eram	enxaguados com	Dermacyn	ou soro
fisiológico	(dependendo	da	randomização)	. Entre as	visitas,
o paciente	enxaguava	a	ferida com	Dermacyn	ou soro
fisiológico	(dependendo	da	randomização)	a cada mudança de

curativo. Foram feitas fotografias da ferida a cada visita após o desbridamento.

Os pontos finais da eficácia primária foram: (1) redução de bactérias na ferida, (2) redução da área da ferida e (3) desenvolvimento de tecido de granulação. A segurança foi avaliada em todos os pacientes que foram randomizados no estudo. O tratamento de efeitos adversos de 28/12/2018, pág. 129/140

120/127 emergentes e sérios foi registrado.

EXEMPLO 28

Este estudo demonstra a segurança e a eficácia de uma solução de água ORP exemplar, Dermacyn, como uma solução de substituição para o sistema de lavagem Jet-Ox ND no tratamento de tecido necrótico em úlceras da extremidade inferior, comparado com o regime-padrão usado pelo sistema

Tet-Ox ND.

O sistema Jet-Ox ND remove tecido necrótico de feridas crônicas por meio de uma lavagem por spray controlada de soro fisiológico estéril, sem danificar os tecidos saudáveis subjacentes. Este estudo substitui o soro fisiológico por Dermacyn, o que espera-se que forneça o mesmo efeito da lavagem em spray e adicionalmente reduza a carga bacteriana da ferida que pode estar inibindo o fechamento da ferida.

Foram estudados vinte pacientes randomizados para gerar 10 pacientes com Dermacyn e 10 pacientes de controle). Os critérios de inclusão foram: paciente com 18 anos de idade ou maiores; paciente com uma úlcera da extremidade inferior abaixo do joelho com tecido necrótico presente e é candidato ao desbridamento mecânico com o sistema de lavagem Jet-Ox ND; a úlcera do pacientes está presente há >30 dias antes da visita de seleção; a área de superfície da úlcera é >1 cm², e a úlcera se estende através da derme e para dentro do tecido subcutâneo (pode estar presente tecido de granulação) com possível exposição de músculo e tendão, mas sem exposição óssea ou de cápsula; o índice tornozelo/braço dos pacientes por Doppler é >0,8 e/ou pressão dos dedos do pé dos pacientes é >40 mmHg; e o de 28/12/2018, pág. 130/140

121/127 paciente tem um pulso palpável na artéria dorsal do pé e/ou tibial posterior.

Foram utilizados os seguintes critérios de exclusão: pacientes com doenças renais, hepáticas, hematológicas, neurológicas ou pacientes imunocomprometidos, incluindo os que apresentavam o vírus da imunodeficiência humana (HIV) ou a síndrome da imunodeficiência adquirida (AIDS); que, na opinião do investigador, pudessem tornar o paciente um candidate inadequado para o estudo; feridas com os seguintes sinais clínicos de infecção; gangrena em qualquer parte do membro de tratamento; úlcera que exibe osso exposto (positivo para osso) ou que tenha outra evidência de osteomielite subjacente no local da úlcera; caso haja uma expectativa de que a úlcera infectada venha a ser amputada ou ressecada durante o período de estudo; mánutrição grave, evidenciada por uma albumina <2,0; uso abusivo conhecido de álcool ou fármacos; pacientes em uso de corticosteróides orais ou parenterais, agentes imunossupressores ou citotóxicos, coumadin, heparina ou os quais prevê-se que venham a necessitar de tais agentes durante a evolução do estudo; e paciente com alergia conhecida ao cloro.

Cada indivíduo foi randomizado em um dos dois braços de tratamento; Dermacyn ou soro fisiológico. A úlcera-alvo recebeu desbridamento mecânico, seguido por irrigação da ferida com Dermacyn ou soro fisiológico e bandagem com um curativo de hidrogel. Uma biópsia central da ferida para cultura quantitativa foi coletada, juntamente com estudos laboratoriais (hematologia, bioquímica do sangue e testes de gravidez, quando apropriado), estudos vasculares de 28/12/2018, pág. 131/140

122/127 periféricos não invasivos, história médica e exame físico, esquemas da úlcera e fotografias da úlcera.

Um sistema de lavagem Jet-Ox ND foi dispensado, juntamente com Dermacyn ou soro fisiológico, hidrogel e materiais de bandagem. Foram fornecidas instruções para uso na residência. As visitas incluíram seleção, cadastramento [dia 0] com randomização, visitas semanais com desbridamento, fotografias e avaliações. A eficácia foi determinada por: (1) redução de bactérias na ferida, (2) redução da área da ferida, e (3) desenvolvimento de tecido de granulação durante a evolução do estudo. A segurança foi avaliada em todos os pacientes que foram randomizados no estudo. O tratamento emergente e eventos adversos sérios foram registrados.

EXEMPLO 29

Este exemplo demonstra o uso de uma solução de água ORP exemplar como parte de um procedimento do canal radicular.

A infecção em conseqüência de um canal não ter sido limpo ou preenchido completamente é uma complicação que pode ocorrer em 10 a 30% dos casos de pacientes que se submetem a tratamento do canal radicular. Isso pode ser causado pela complexidade do sistema do canal radicular; por exemplo, alguns canais radiculares podem ser muito estreitos ou curvados. A infecção também pode ser causada pelo fato de um canal não ter sido limpo ou preenchido de jeito algum, caso os raios-X não tenham mostrado todos os canais do dente. Adicionalmente, certas bactérias podem não responder ao tratamento do canal radicular. Uma vez que a solução de água ORP exerce uma ampla atividade de 28/12/2018, pág. 132/140

123/127 antimicrobiana, sem sensibilizar ou irritar a pele e as mucosas, a solução de água ORP foi avaliada quanto à sua utilidade na prevenção de reações agudas após terapia do canal radicular.

Todos os pacientes consecutivos vistos na “Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo” em Morelia, México, de outubro de 2003 a abril de 2005, e com um diagnóstico de infecção do canal radicular, foram incluídos no grupo de solução de água ORP. Canal radicular agudo foi definido como uma imagem de raios-x que mostra uma lesão periapical, além de testes clínicos de vitalidade negativos e de percussão positivos. A análise retrospectiva de casos pareados que apresentam infecções similares do canal radicular entre 2002 e 2003 na mesma Instituição foi feita para o grupo de controle (o grupo “SH”) (veja as FIGS. 7AB).

Durante o processo, os ductos foram isolados para evitar contaminação. A cavidade foi aberta e a raiz perfurada. O enxágüe de solução de água ORP começava com o processo de perfuração em vez de usar água ou soro fisiológico. A instrumentação foi feita de acordo com a técnica crown down usando instrumentos rotatórios de NiTi.

A instrumentação foi feita de acordo com a extensão do ducto, como medida pelos raios-x. A irrigação do ducto foi realizada com a solução de água ORP após o uso de cada instrumento. Uma irrigação final com solução de água ORP da cavidade radicular foi feita por até 15 minutos (tempo de contato); a injeção de solução de água ORP com uma agulha hipodérmica para infiltrar o tecido mole que circunda a raiz com solução de água ORP foi feita alternativamente de 28/12/2018, pág. 133/140

124/127 para descontaminar completamente o ducto. O ducto foi seco com papel dental e a oclusão feita por condensação lateral com hidróxido de cálcio e resina epóxi. Os tratamentos ambulatoriais consistiram em enxágües orais com solução de água ORP por 30 dias, 3 vezes ao dia por 2 minutos (troca de 15 ml a cada 30 segundos). Após 30 dias, foi recomendado o enxágüe oral uma vez ao dia indefinidamente. Nenhum dos pacientes tratados com a terapia de solução de água ORP recebeu antibióticos ou analgésicos.

Foi realizado um procedimento de tratamento padronizado conhecido na técnica com hipoclorito de sódio (SH) para tratamento do canal radicular em pacientes de controle. Foi dedicada uma atenção especial para evitar a infiltração da solução na região periapical durante a manipulação. Todos os pacientes no grupo de controle receberam ampicilina (500 mg três vezes ao dia) ou cefalexina (500 mg duas vezes ao dia) por 7 dias, além de fármacos antiinflamatórios (naproxeno 500 mg duas vezes ao dia), se necessário.

O estudo incluiu 238 pacientes com tratamento do canal radicular com SH 2,5% (129 pacientes) (grupo de controle ou SH) ou solução de água ORP (109 pacientes). As características demográficas foram similares para ambos os grupos (FIGS. 7 A & B). A idade média foi de 42,5 (variação de 17-68) e 40 anos (variação de 13-67) para o grupo de controle e de solução de água ORP, respectivamente. A proporção homens/mulheres também foi similar para o grupo de controle e de solução de água ORP (44:56 vs 39:61, respectivamente).

Somente 2 pacientes tiveram uma reação local aguda de 28/12/2018, pág. 134/140

125/127 após o tratamento do canal radicular com solução de água ORP, enquanto 16 pacientes o fizeram com SH 2,5%. No entanto, os resultados foram mais significativos, considerando o número total de dentes afetados no grupo de solução de água ORP (2) versus os do grupo SH (23). As perdas dentárias só ocorreram no grupo de controle SH.

A dor cessou em até 24 horas na maioria dos casos. Os pacientes também puderam mastigar em até 24 horas, o que normalmente ocorre em 72 horas com o uso de outros antisépticos.

Dez pacientes dentre 109 no grupo de solução de água ORP apresentaram uma ligeira sensação de queimação na língua quando gargarejaram com solução de água ORP. Nesses casos, a sensação de queimação ocorreu apenas nos primeiros dois dias de aplicação e só foi necessário instruir os pacientes a cuspir a solução sem enxágüe adicional. A queimação então desaparecia, sem nenhum outro efeito secundário. Não houve contra-indicações observadas para o uso de solução de água ORP.

Dessa forma, este exemplo demonstra que a terapia com solução de água ORP foi superior na redução da incidência de reações agudas após terapia do canal radicular em comparação com a solução 2,5% de hipoclorito de sódio. Além disso, os pacientes que não tiveram sucesso no grupo da terapia com solução de água ORP puderam ser tratados novamente com sucesso com a solução. Portanto, nenhum dos indivíduos no grupo SOS perdeu dentes. Além disso, a irrigação agressiva e os procedimentos de infiltração realizados com SOS não puderam ser feitos com qualquer outro anti-séptico atualmente em uso em função da possível de 28/12/2018, pág. 135/140

126/127 necrose dos tecidos circundantes.

Todas as referências, incluindo publicações, pedidos de patente e patentes aqui citados, são aqui incorporados por referência na mesma extensão como se cada referência fosse individual e especificamente aqui indicada para ser incorporada por referência e apresentada em sua totalidade.

O uso dos termos um, uma, o e a e referentes similares no contexto da descrição da invenção (especialmente no contexto das reivindicações a seguir) devem ser considerados como englobando tanto as formas no singular quanto no plural, a menos que aqui indicado de forma diferente ou claramente contradito pelo contexto. Os termos compreendendo, tendo, incluindo e contendo devem ser considerados como termos ilimitados (ou seja, significando incluindo, sem limitação), a menos que observado de forma diferente. A citação de faixas de valores nesta especificação visa meramente a servir como um método abreviado de se referir individualmente a cada valor separado que cai dentro da faixa, a menos que aqui indicado de forma diferente, e cada valor separado é incorporado na especificação como se ele fosse aqui citado individualmente. Todos os métodos aqui descritos podem ser realizados em qualquer ordem adequada, a menos que aqui seja indicado de forma diferente ou claramente contradito pelo contexto. O uso de qualquer um e de todos os exemplos, ou linguagem exemplar (por exemplo, tais como), aqui fornecidos, visa meramente a melhor esclarecer a invenção e não apresenta uma limitação do escopo da invenção, a menos que reivindicado de forma diferente. Nenhuma linguagem na especificação deve ser considerada como indicativa de de 28/12/2018, pág. 136/140

127/127 qualquer elemento não reivindicado como essencial para a prática da invenção.

Modalidades preferidas desta invenção são aqui descritas, incluindo o melhor modo conhecido para que os inventores realizem a invenção. Variações dessas modalidades preferidas podem se tornar evidentes para aqueles habilitados na técnica após a leitura da descrição apresentada anteriormente. Os inventores esperam que aqueles habilitados na técnica empreguem tais variações da forma adequada, e os inventores têm a intenção de que a invenção seja praticada de outra forma, além das especificamente aqui descritas. Conseqüentemente, esta invenção inclui todas as modificações e equivalentes da matéria em questão citada nas reivindicações em anexo, da forma permitida pela lei aplicável. Além disso, qualquer combinação dos elementos descritos acima em todas as variações possíveis destes é englobada pela invenção, a menos que aqui indicado de forma diferente ou de algum modo claramente contradito pelo contexto.

Claims (2)

1. Uso de uma solução aquosa de potencial oxiredutivo (ORP), em que a solução tem um pH de 6,4 a 7,8 caracterizado pelo fato de que é para preparação de um medicamento para tratar doença periodontal e infecção do canal radicular, em que a solução compreende 50 ppm a 80 ppm de espécie de cloro livre selecionada do grupo consistindo em ácido hipocloroso, íons hipoclorito, hipoclorito de sódio, íons clorito, íons cloreto, gás de cloro dissolvido e misturas destes, e em que a solução compreende água anódica e água catódica.

2 . Uso, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o pH é de 7,4 a 7,6. 3. Uso, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a água catódica está presente em uma quantidade de _; 10% por volume a 50% por volume da solução. 4 . Uso, de acordo com a reivindicação 3,

caracterizado pelo fato de que a água anódica está presente em uma quantidade de 50% por volume a 90% por volume da solução.

5. Uso, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a solução compreende níveis de ácido hipocloroso presente em uma quantidade de 25 ppm a 75 ppm e em que a solução tem um pH de 7,4.

6. Uso de uma solução aquosa de potencial oxi-redutivo (ORP), em que a solução tem um pH de 6,4 a 7,8, caracterizado pelo fato de que é para preparação de um medicamento para irrigação em um procedimento endodôntico, em que a solução compreende 50 ppm a 80 ppm de espécie de de 28/12/2018, pág. 138/140

2/2 cloro livre selecionada do grupo consistindo em ácido hipocloroso, íons hipoclorito, hipoclorito de sódio, íons clorito, íons cloreto, gás de cloro dissolvido e misturas destes, e em que a solução compreende água anódica e água

5 catódica.