BR122020008544B1 - uso de 4-aril-1,4-di-hidro-1,6-naftiridinamidas substituídas, e medicamento - Google Patents

Abstract

A presente invenção se refere a novas 4-aril-1,4-di-hidro-1,6-naftiridin-3-carboxamidas substituídas, a processos para sua preparação, ao seu uso para o tratamento e/ou profilaxia de doenças bem como ao seu uso para a preparação de medicamentos para o tratamento e/ou profilaxia de doenças, em particular doenças cardiovasculares.

Description

USO DE 4-ARIL-1,4-DI-HIDRO-1,6-NAFTIRIDINAMIDAS SUBSTITUÍDAS, E MEDICAMENTO Dividido do PI0808098-4, depositado em 19.2.2008.

[1] A presente invenção se refere a novas 4-aril-1,4-di-hidro-1,6-naftiridin-3-carboxamidas substituídas, ao processo para sua preparação, ao seu uso para o tratamento e/ou profilaxia de doenças bem como ao seu uso para a preparação de medicamentos para o tratamento e/ou profilaxia de doenças, particularmente de doenças cardiovasculares.

[2] A aldosterona desempenha papel-chave na manutenção da homeóstase eletrolítica e fluida, promovendo no epitélio do néfron distal a retenção de sódio e secreção de potássio, o que contribui para manter constante o volume extracelular e, assim, regular a pressão sanguínea. Além disso, a aldosterona apresenta efeitos diretos sobre a estrutura e função do sistema cardíaco e vascular, sendo que os mecanismos que servem de base para isto ainda não foram completamente esclarecidos. [R.E. Booth, J.P. Johnson, J.D. Stockand, Adv. Physiol. Educ. 26 (1), 8-20 (2002)].

[3] A aldosterona é um hormônio esteroide formado no córtice suprarrenal. Sua produção é indiretamente regulada substancialmente na dependência da irrigação sanguínea dos rins. Cada diminuição da irrigação sanguínea renal leva, nos rins, a uma liberação da enzima renina na circulação sanguínea. Isto, por outro lado, ativa a formação de angiotensina II, o que por um lado tem efeito constritor sobre os vasos sanguíneos arteriais, por outro lado, porém, estimula também a formação de aldosterona no córtice suprarrenal. Desta forma, o rim funciona como sensor da pressão arterial e assim como sensor indireto do volume na circulação sanguínea e reage, via sistema renina-angiotensina-aldosterona, contra críticas perdas de volume, por um lado aumentando a pressão arterial (efeito angiotensina-II), por outro lado, reequilibrando o estado de enchimento do sistema vascular pela reabsorção reforçada de sódio e água no rim, é novamente equilibrado (efeito aldosterona).

[4] Este sistema regulador pode ser patologicamente prejudicado de muitas maneiras. Assim, uma redução crônica na irrigação dos rins (por exemplo em consequência de uma insuficiência cardíaca e de estase sanguínea no sistema venoso por ela provocada) leva a uma liberação crônica demasiadamente elevada de aldosterona. Esta, por sua vez, é seguida por uma expansão do volume de sangue e assim aumenta a insuficiência cardíaca pelo oferecimento de volume excessivo ao coração. As consequências podem ser uma congestão de sangue nos pulmões com falta de respiração e formação de edema nas extremidades bem como ascite e derrame pleural; a irrigação sanguínea dos rins diminui ainda mais. Além disso, o efeito excessivo da aldosterona conduz a uma redução de concentração de potássio no sangue e no fluido extracelular. Em músculos cardíacos anteriormente prejudicados, podem ocorrer arritmias cardíacas com desfecho fatal se houver um desvio abaixo de um valor mínimo crítico. Esta é provavelmente uma das causas principais de falência cardíaca súbita que frequentemente ocorre em pacientes com insuficiência cardíaca.

[5] Adicionalmente aldosterona também foi responsabilizada por uma série de processos de modificação do miocárdio tipicamente observados em insuficiências cardíacas. Desta forma o Hiperaldoste-ronismo é um componente decisivo na patogênese e prognose da insuficiência cardíaca que originalmente pode ser induzida por diferentes tipos de danos, como por exemplo um infarto do miocárdio, uma inflamação do miocárdio ou hipertensão. Esta suposição é reforçada pelo fato de que em muitos estudos clínicos de grupos de pacientes com insuficiência cardíaca crônica ou após infarto agudo do miocárdio, pelo uso de antagonistas aldosterona foi mostrado que a mortalidade total diminuiu nitidamente [B. Pitt, F. Zannad, W.J. Remme et al., N. Engl. J. Med. 341, 709-717 (1999); B. Pitt, W. Remme, F. Zannad et al., N. Engl. J. Med. 348, 1309-1321 (2003)]. Isto foi alcançado, entre outros, por uma queda de incidência de falência cardíaca súbita.

[6] Estudos recentes mostram também que uma parte não insignificante dos pacientes que sofrem de hipertonia essencial também apresentam uma chamada variante normocalêmica de hiperaldostero-nismo primário [prevalência acima de 11% de todos os hipertônicos: L. Seiler e M. Reincke, Der Aldosteron-Renin-Quotient bei sekundärer Hypertonie, Herz 28, 686-691 (2003)]. Como melhor método diagnóstico no hiperaldosteronismo normocalêmico é indicado o quociente al-dosterona/renina das correspondentes concentrações de plasma de modo que também relativos aumentos de aldosterona em relação às concentrações de renina no plasma possam ser diagnosticados e eventualmente tratados. Por isso, um hiperaldosteronismo diagnosticado em relação com uma hipertonia essencial é um ponto de partida para uma terapia causal e profilática conveniente.

[7] Além disso, mais raro que as formas de hiperaldosteronis-mo acima mencionadas são aqueles quadros patológicos nos quais o distúrbio é encontrado ou nas células produtoras de hormônio das suprarrenais ou cujo número ou massa é multiplicada por hiperplasia ou proliferação. Adenomas ou hiperplasias difusas do córtex suprarrenal são as causas mais frequentes do hiperaldosteronismo primário também chamado síndrome de Conn, cujos sintomas principais são hipertonia e alcalose hipocalêmica. Também aqui, ao lado da extirpação cirúrgica do tecido doente encontra-se na vanguarda a terapia medicamentosa com antagonistas-aldosterona. [H.A. Kuhn and J. Schirmeister (Editores), Innere Medizin, 4a edição, Springer Verlag, Berlim, 1982].

[8] Outro quadro patológico tipicamente associado com a elevação da concentração de aldosterona no plasma é a cirrose hepática avançada. A causa da elevação da aldosterona neste caso está preponderantemente na decomposição restrita da aldosterona em virtude da disfunção do fígado. Excesso de volume, edemas e hipocalemias são as consequências típicas que podem ser aliviadas com sucesso na prática clínica por antagonista aldosterona.

[9] Os efeitos da aldosterona são mediados pelo receptor-mineralcorticoide localizado de modo intracelular nas células-alvo. Os antagonistas-aldosterona até agora disponíveis, como a própria aldosterona, possuem uma estrutura base esteroidal. O uso de tais antagonistas esteroidais é limitado por suas interações com os receptores de outros hormônios esteroides que, em parte, levam a consideráveis efeitos colaterais, como ginecomastia e impotência e à interrupção da terapia [M.A. Zaman, S. Oparil, D.A. Calhoun, Nature Rev. Drug Disc. 1, 621-636 (2002)].

[10] O uso de antagonistas não-esteroides de forte efeito e que são seletivos para o receptor mineralcorticoide oferece a possibilidade de contornar este perfil de interação e, assim, obter nítida vantagem terapêutica.

[11] É tarefa da invenção prover novos compostos que possam ser usados como antagonistas seletivos do receptor mineralcorticoide para o tratamento de doenças, em particular de doenças cardiovasculares.

[12] Nas patentes EP 0 133 530-A, EP 0 173 933-A, EP 0 189 898-A e EP 0 234 516-A são descritas 1,4-di-hidro-1,6-naftiridinas ou -naftitidinonas 4-aril -substituídas com efeito antagonista de cálcio para o tratamento de doenças vasculares. O perfil farmacológico desses compostos é relatado entre outros em G. Werner et al., Naunyn-Schmiedeberg's Arch. Pharmacol. 344 (3), 337-344 (1991). Além dis- so, na patente WO 02/10164 são reivindicados derivados de 1,4-di-hidro-1,6-naftiridina como abridores do canal de sódio para o tratamento de diferentes doenças, sobretudo urológicas. Derivados de 4-fluore-nonila ou de 4-cromenonil-1,4-di-hidropiridina como antagonistas de receptor mineralcorticoide são descritos em WO 2005/087740 e WO 2007/009670. Em WO 2006/066011 são descritos ésteres e amidas de ácido 4-aril-3-ciano-1,4-di-hidropiridin-5-carboxílico em parte como moduladores duais de receptores de hormônio esteroide e do canal de cálcio tipo L, e em WO 2005/097118 são reivindicados compostos com estrutura nuclear 4-aril-1,4-di-hidropiridina como antagonistas do receptor de aldosterona.

[13] O objeto da presente invenção são compostos da Fórmula geral (I)

[14] em que

[15] D representa N ou C-R4, em que

[16] R4 significa hidrogênio, flúor, trifluormetila ou (C1-C4)-alquila,

[17] Ar representa um grupo da Fórmula

ou

[18] em que

[19] significa o ponto de ligação,

[20] R5 significa hidrogênio, flúor, cloro, ciano, nitro, trifluormetila ou (C1-C4)-alquila,

[21] R6 significa hidrogênio ou flúor,

[22] R7 significa halogênio, (C1-C4)-alquila, trifluormetila, (C1-C4)-alcóxi ou trifluormetóxi,

[23] R8 significa ciano ou nitro,

[24] R9 significa hidrogênio, halogênio, (C1-C4)-alquila, (C1-C4)-alcóxi, (C1-C4)-alquiltio ou di-(C1-C4)-alquilamino, sendo que os grupos alquila nos radicais (C1-C4)-alquila, (C1-C4)-alcóxi e (C1-C4)-alquiltio mencionados podem ser em cada caso substituídos até três vezes com flúor, ou

[25] fenila, que pode ser substituída com halogênio, (C1-C4)-alquila ou trifluormetila,

[26] R10 significa hidrogênio, halogênio ou (C1-C4)-alquila,

[27] E significa CH, C-R7 ou N, e

[28] n significa o número 0, 1 ou 2,

[29] sendo que para o caso em que o substituinte R7 aparece várias vezes, seus significados podem ser iguais ou diferentes,

[30] R1 representa (C1-C4)-alquila que pode ser substituído até três vezes com flúor,

[31] R2 representa (C1-C6)-alquila que pode ser substituído com (C3-C7)-cicloalquila ou até três vezes com flúor, ou representa um grupo da Fórmula -SO2-R11 em que

[32] R11 significa (C1-C6)-alquila, trifluormetila, (C3-C7)- cicloalquila, fenila ou heteroarila com 5 ou 6 membros com até dois heteroátomos da série N, O e/ou S,

[33] sendo que fenila e heteroarila por sua vez podem ser em cada caso substituídas uma ou duas vezes, de modo igual ou diferente, com halogênio, ciano, nitro, (C1-C4)-alquila, trifluormetila, (C1-C4)-alcóxi e/ou trifluormetóxi, e

[34] R3 significa hidrogênio, flúor, trifluormetila ou (C1-C4)-alquila, bem como seus sais, solvatos e solvatos dos sais.

[35] Compostos de acordo com a invenção são os compostos da Fórmula (I) e seus sais, solvatos e solvatos dos sais, os compostos abrangidos pela Fórmula (I) que são das Fórmulas a seguir, e seus sais, solvatos e solvatos dos sais bem como os compostos abrangidos pela Fórmula (I), mencionados a seguir como exemplos de execução, e seus sais, solvatos e solvatos dos sais, desde que os compostos mencionados a seguir, abrangidos pelo Fórmula (I), não sejam já sais, solvatos e solvatos dos sais.

[36] Os compostos da Fórmula (I), dependendo de sua estrutura podem existir em formas estereoisômeras (enentiômeras, diastereô-meras). A presente invenção abrange, pois, os enantiômeros ou diastereômeros e suas respectivas misturas. Os componentes estereoisômeros individuais podem ser isolados, de modo conhecido, a partir de tais misturas de enantiômeros e/ou diastereômeros.

[37] Desde que os compostos de acordo com a invenção estejam presentes em formas tautômeras, a presente invenção abrange todas as formas tautômeras.

[38] No âmbito da presente invenção, são preferidos os sais fisiologicamente inofensivos dos compostos de acordo com a invenção. Também são abrangidos sais que não são apropriados para aplicações farmacêuticas, mas que, no entanto, podem ser empregados por exemplo para isolar ou purificar os compostos de acordo com a invenção.

[39] Sais fisiologicamente inofensivos dos compostos de acordo com a invenção abrangem sais de adição de ácido de ácidos minerais, ácidos carboxílicos e ácidos sulfônicos, por exemplo sais dos ácidos clorídrico, bromídrico, sulfúrico, fosfórico, metanossulfônico, etanossulfônico, toluenossulfônico, benzenossulfônico, naftalinodissulfônico, acético, trifluoracético, propiônico, láctico, tartárico, málico, cítrico, fumárico, maléico e benzóico.

[40] Sais fisiologicamente inofensivos dos compostos de acordo com a invenção abrangem também sais de bases usuais, como por exemplo e de preferência sais de metais alcalinos (por exemplo sais de sódio e de potássio), sais de metais alcalino-terrosos (por exemplo sais de cálcio e de magnésio) e sais de amônio, derivados de amoníaco ou aminas orgânicas com 1 até 16 átomos de carbono, como por exemplo e de preferência etilamina, dietilamina, trietilamina, etildiisopropilamina, monoetanolamina, dietanolamina, trietanolamina, diciclo-hexilamina, dimetilaminoetanol, procaína, dibenzilamina, N-metilmorfolina, arginina, lisina, etilenodiamina e N-metilpiperidina.

[41] Como solvatos, no âmbito da invenção, são denominadas aquelas formas dos compostos de acordo com a invenção que em estado sólido ou fluido formam um complexo pela coordenação com moléculas de solventes. Hidratos são uma forma especial dos solvatos, nos quais a coordenação ocorre com água. Como solvatos, no âmbito da presente invenção, são preferidos hidratos.

[42] Além disso, a presente invenção abrange também "pró-fármacos" dos compostos de acordo com a invenção. O termo "pró-fármacos" abrange compostos que podem, eles próprios, ser biologicamente ativos ou inativos, mas que, no entanto, durante seu tempo de permanência no corpo são convertidos em compostos de acordo com a invenção (por exemplo metabolicamente ou hidroliticamente).

[43] No âmbito da presente invenção, desde que não seja especificado de modo diferente, os substituintes possuem o significado a seguir:

[44] (C1-C6)-alquila e (C1-C4)-alquila representam, no âmbito da invenção, um radical alquila linear ou ramificado com 1 até 6 e 1 até 4 átomos de carbono. Preferido é um radical alquila linear ou ramificado com 1 até 4 átomos de carbono. Como exemplo e de preferência são mencionados: metila, etila, n-propila, isopropila, n-butila, iso-butila, sec-butila, terc-butila, 1-etilpropila, n-pentila, iso-pentila e n-hexila.

[45] (C3-C7)-cicloalquila representa, no âmbito da invenção, um grupo cicloalquila monocíclico, saturado, com 3 até 7 átomos de carbono. Preferido é um radical cicloalquila com 3 até 6 átomos de carbono. Como exemplo e de preferência são mencionados: ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila e ciclo-heptila.

[46] (C1-C4)-alcóxi representa, no âmbito da invenção, um radical alcóxi linear ou ramificado com 1 até 4 átomos de carbono. Como exemplo e de preferência são mencionados: metóxi, etóxi, n-propóxi, isopropóxi, n-butóxi e terc-butóxi.

[47] (C1-C4)-alquiltio representa, no âmbito da invenção, um radical alquiltio linear ou ramificado com 1 até 4 átomos de carbono. Como exemplo e de preferência são mencionados: metiltio, etiltio, n-propiltio, isopropiltio, n-butiltio e terc-butiltio.

[48] Di-(C1-C4)-alquilamino representa, no âmbito da invenção, um grupo amino com dois substituintes alquila iguais ou diferentes, lineares ou ramificados, que em cada caso apresentam 1 até 4 átomos de carbono. Como exemplo e de preferência são mencionados: N,N-dimetilamino, N,N-dietilamino, N-etil-N-metilamino, N-metil-N-n- propilamino, N,N-di-isopropilamino, N-isopropil-N-n-propilamino, N-n-butil-N-metilamino e N-terc-butil-N-metilamino.

[49] Heteroarila com 5 ou 6 membros representa, no âmbito da invenção, um heterociclo aromático (heteroaromático) com 5 ou 6 átomos no anel, que contém um ou dois heteroátomos no anel da série N, O e/ou S e está ligado por meio de um átomo de carbono no anel. Como exemplo e de preferência são mencionados: furila, pirrolila, tienila, pirazolila, imidazolila, tiazolila, oxazolila, isoxazolila, isotiazolila, piridila, pirimidinila, piridazinila e pirazinila.

[50] Halogênio inclui, no âmbito da invenção, flúor, cloro, bromo e iodo. Flúor ou cloro são preferidos.

[51] Quando radicais nos compostos de acordo com a invenção são substituídos, desde que não seja especificado de modo diferente, os radicais podem ser substituídos uma ou mais vezes. No âmbito da presente invenção, todos os radicais que aparecem várias vezes têm significado independente um do outro. É preferida uma substituição com um, dois ou três substituintes iguais ou diferentes. Muito particularmente preferida é a substituição com um substituinte.

[52] Preferidos do âmbito da presente invenção são compostos da Fórmula (I), em que

[53] D representa C-R4 em que

[54] R4 significa hidrogênio, metila ou trifluormetila,

[55] Ar representa um grupo da Fórmula

ou

[56] em que

[57] significa o ponto de ligação,

[58] R5 significa hidrogênio, flúor, cloro ou ciano,

[59] R8 significa ciano ou nitro, e

[60] R9 significa cloro, bromo, (C1-C4)-alquila, trifluormetila, (C1-C4)-alcóxi, trifluormetóxi, (C1-C4)-alquiltio ou trifluormetiltio,

[61] R1 representa metila ou trifluormetila,

[62] R2 representa (C1-C4)-alquila, trifluormetila ou um grupo da Fórmula -SO2-R11 em que

[63] R11 significa (C1-C4)-alquila ou trifluormetila, e

[64] R3 representa hidrogênio, metila ou trifluormetila, bem como seus sais, solvatos e solvatos dos sais.

[65] Particularmente preferidos no âmbito da presente invenção são compostos da Fórmula (I) em que

[66] D representa C-R4 em que

[67] R4 significa hidrogênio ou metila,

[68] Ar representa um grupo da Fórmula

ou

[69] em que

[70] significa o ponto de ligação e

[71] R9 significa etila, metóxi ou trifluormetóxi,

[72] R1 representa metila ou trifluormetila,

[73] R2 representa metila, etila, n-propila ou isopropila e

[74] R3 significa hidrogênio ou metila, bem como seus sais, solvatos e solvatos dos sais.

[75] Muito particularmente preferidos são compostos de acordo com a Fórmula (I) com as estruturas a seguir:

e

[76] bem como seus sais, solvatos e solvatos dos sais.

[77] Em particular, preferidos são, aqui, os compostos enantiô-meros com as estruturas a seguir:

;e

[78] bem como seus sais, solvatos e solvatos dos sais.

[79] As definições dos radicais dadas especificamente nas respectivas combinações ou combinações preferidas dos radicais são substituídas de modo qualquer, independentemente das respectivas combinações dadas dos radicais, também por definições de radicais de outras combinações.

[80] Muito particularmente preferidas são combinações de dois ou mais dos campos preferidos mencionados acima.

[81] Outro objeto da invenção é um processo para preparação dos compostos de acordo com a invenção de Fórmula (I) caracterizado pelo fato de que um composto da Fórmula (II)

[82] em que Ar possui o significado indicado acima,

[83] é reagido em um solvente inerte eventualmente em presença de um ácido, uma combinação ácido/ base e/ou um agente de desidratação com um composto da Fórmula (III)

[84] em que R1 possui o significado indicado acima e

[85] T representa alila ou 2-cianoetila, para formar um composto da Fórmula (IV)

[86] em que Ar, T e Ri em cada caso possuem os significados indicados acima,

[87] este é então condensado em um solvente inerte com um composto da Fórmula (V)

[88] em que D e R3 possuem os significados indicados acima, para formar um composto da Fórmula (VI)

[89] em que Ar, D, T, R1 e R3 em cada caso possuem os significados indicados acima, a seguir os compostos da Fórmula (VI) são alquilados em um solvente inerte eventualmente em presença de uma base com um composto da Fórmula (VII) ou um são de trialquiloxônio da Fórmula (VIII)

[90] nas quais

[91] R12 representa (C1-C6)-alquila que pode ser substituída com (C3-C7) -cicloalquila ou até três vezes com flúor,

[92] R12A representa metila ou etila,

[93] X representa um grupo de partida, como por exemplo halogênio, mesilato, tosilato ou triflato, e

[94] Y- representa um ânion não-nucleofílico, como por exemplo tetrafluorborato, ou em presença de um ácido com um trialquilortofor-miato da Fórmula (IX)

[95] em que R12A possui o significado indicado acima,

[96] para formar compostos da Fórmula (X-A)

[97] em que Ar, D, T, R1, R3 e R12 em cada caso possuem os significados indicados acima, ou os compostos da Fórmula (VI) são reagidos em um solvente inerte em presença de uma base com um composto da Fórmula (XI)

[98] em que R11 possui o significado indicado acima,

[99] para formar compostos da Fórmula (X-B)

[100] em que Ar, D, T, R1, R3 e R11 em cada caso possuem os significados indicados acima, a seguir, o grupo éster T nos compostos da Fórmula (X-A) ou (X-B) é eliminado por meio de métodos em si conhecidos para formar os ácidos carboxílicos da Fórmula (XII)

[101] em que Ar, D, R1, R2 e R3 em cada caso possuem os significados indicados acima, a seguir são convertidos com 1,1'-carbonildi- imidazol nas imidazolidas da Fórmula (XIII)

[102] em que Ar, D, R1, R2 e R3 em cada caso possuem os significados indicados acima, e estes são então reagidos com amoníaco em um solvente inerte eventualmente em presença de uma base auxiliar para formar as amidas da Fórmula (I), e eventualmente os compostos da Fórmula (I), segundo métodos conhecidos do versado na técnica, são separados em seus enantiômeros e/ou diastereômeros e/ou convertidos com os apropriados (i) solventes e/ou (ii) bases ou ácidos nos seus solvatos, sais e/ou solvatos dos sais.

[103] A sequência processual (II) + (III) → (IV) e (IV) + (V) → (VI) também pode ser efetuada em uma etapa como reação de três componentes (II) + (III) + (V) → (VI) sem isolamento da etapa intermediária (IV).

[104] As etapas processuais (II) + (III) → (IV) e (IV) + (V) → (VI) ou (II) + (III) + (V) → (VI) são de modo geral efetuadas em um solvente inerte em uma faixa de temperatura de +20°C até o ponto de ebulição do solvente sob pressão normal.

[105] Como solvente inerte são apropriados, para esta finalidade, por exemplo álcoois como metanol, etanol, n-propanol, isopropanol, n-butanol ou terc-butanol, hidrocarbonetos halogenados como diclorometano, triclorometano, tetraclorometano, tricloroetano ou 1,2-dicloroetano, ou outros solventes como acetonitrila, tetra-hidrofurano, dioxano, 1,2-dimetoxietano, hexano, benzeno, tolueno, clorobenzeno, piridina ou ácido acético glacial. Preferidas são as reações em diclorometano, tolueno, etanol ou isopropanol na respectiva temperatura de refluxo sob pressão normal.

[106] As reações mencionadas podem eventualmente ocorrer vantajosamente em presença de um ácido, uma combinação áci-do/base e/ou um agente de desidratação, como por exemplo peneira molecular. Como ácidos são apropriados por exemplo ácido acético, ácido trifluoracético, ácido metanossulfônico ou ácido p-toluenossulfônico; como bases são apropriadas particularmente piperidina ou piridina [para síntese de 1,4-di-hidropiridinas, compare também D.M. Stout, A.I. Meyers, Chem. Rev. 1982, 82, 223-243; H. Meier et al., Liebigs Ann. Chem. 1977, 1888; H. Meier et al., ibid. 1977, 1895; H. Meier et al., ibid. 1976, 1762; F. Bossert et al., Angew. Chem. 1981, 93, 755].

[107] Solventes inertes para as etapas processuais (VI) + (VII) → (X-A), (VI) + (VIII) → (X-A) e (VI) + (XI) → (X-B) são por exemplo éteres como dietiléter, metil terc-butil éter, dioxano, tetra-hidrofurano, gli-coldimetiléter ou dietilenoglicoldimetiléter, hidrocarbonetos como benzeno, tolueno, xileno, hexano, ciclo-hexano ou frações de petróleo, hidrocarbonetos halogenados como diclorometano, triclorometano, te-traclorometano, 1,2-dicloroetano, tricloroetano, tetracloroetano, triclo-roetileno, clorobenzeno ou clorotolueno, ou outros solventes como Ν,Ν-dimetilformamida (DMF), dimetilsulfóxido (DMSO), N,N'- dimetilpropileno-uréia (DMPU), N-metilpirrolidona (NMP), piridina ou acetonitrila. É igualmente possível empregar misturas dos solventes mencionados. De preferência, na etapa processual (VI) + (VII) → (X-A) são empregados tetra-hidrofurano e dimetilformamida, na etapa processual (VI) + (VIII) → (X-A) diclorometano, e na etapa processual (VI) + (XI) → (X-B) piridina.

[108] A variante processual (VI) + (IX) → (X-A) é efetuada de preferência com um grande excesso de éster de ácido ortofórmico em dimetilformamida ou sem adição de um outro solvente; como catalisador reacional são vantajosos por exemplo ácidos inorgânicos fortes como ácido sulfúrico [compare por exemplo I.I. Barabanov et al., Russ. Chem. Bl. 47 (11), 2256-2261 (1998)].

[109] Como bases para a etapa processual (VI) + (VII) → (X-A) são apropriados particularmente carbonatos alcalinos ou alcalino-terrosos como carbonato de lítio, de sódio, de potássio, de cálcio ou de césio, hidretos alcalinos como hidreto de sódio ou de potássio, amidas como bis-(trimetilsilil) amida de lítio, de sódio ou de potássio ou di-isopropilamida de lítio, compostos organometálicos como butil-lítio ou fenil-lítio, ou também bases de fosfazeno tais como, por exemplo, P2-t-Bu ou P4-t-Bu [as chamadas " bases Schwesinger", compare R. Schwesinger, H. Schlem-per, Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 26, 1167 (1987); T. Pietzonka, D. See-bach, Chem. Ber. 124, 1837 (1991)]. De preferência é empregado hidreto de sódio ou a base de fosfazeno P4-t-Bu.

[110] Como bases para a etapa processual (VI) + (XI) → (X-B) são apropriados particularmente carbonatos alcalinos ou alcalino-terrosos como carbonato de lítio, sódio, potássio, cálcio ou césio, hidretos alcalinos como hidreto de sódio ou de potássio, compostos organometálicos como butil-lítio ou fenil-lítio, ou aminas orgânicas como trietilamina, N-metilmorfolina, N-metilpiperidina, N,N-di-isopropiletilamina, piridina, 1,5-diazabiciclo[4.3.0]non-5-eno (DBN), 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (DBU) ou 1,4-diazabiciclo [2.2.2] octano (DABCO®). De preferência é empregada piridina, que serve simultaneamente como solvente.

[111] A etapa processual (VI) + (VIII) → (X-A) é de modo geral efetuada sem adição de uma base.

[112] As reações (VI) + (VII) → (X-A), (VI) + (VIII) → (X-A) e (VI) + (XI) → (X-B) ocorrem de modo geral em uma faixa de temperatura de -20°C até +100°C, de preferência a 0°C até +60°C; a variante processual (VI) + (IX) → (X-A) é via de regra efetuada em uma faixa de temperatura de +100°C até +150°C. As reações podem ser efetuadas sob pressão normal, elevada ou reduzida (por exemplo de 50 a 500 KPa (0,5 até 5 bar); de modo geral trabalha-se sob pressão normal.

[113] A dissociação do éster de alila ou de 2-cianoetila na etapa processual (X-A) ou (X-B) → (XII) ocorre segundo métodos conhecidos, usuais na literatura. No caso de 2-cianoetil éster, para esta finalidade é empregada de preferência a solução aquosa de um hidróxido alcalino, como por exemplo, lixívia de soda cáustica ou de potassa cáustica. A reação é efetuada de modo geral sob emprego de um cossolvente inerte, miscível com água, como por exemplo tetrahidrofurano, dioxano ou 1,2-dimetoxietano, em uma faixa de temperatura de 0°C até +40°C. No caso de éster de alila, a dissociação ocorre de preferência com auxílio do catalisador Wilkinson [cloreto de tris(trifenilfosfina)ródio(I)] em uma mistura de água/ álcool/ ácido acético a temperaturas de +50°C até +100°C [compare por exemplo Moseley, J.D., Tetrahedron Lett. 46, 3179-3181 (2005)].

[114] Como solventes inertes para a etapa processual (XII) →(XIII) são apropriados, por exemplo, éteres como dietiléter, metilterc-butiléter, dioxano, tetra-hidrofurano, glicoldimetiléter ou dietilenoglicol-dimetil-éter, hidrocarbonetos halogenados como diclorometano, triclo-rometano, 1,2-dicloroetano, tricloroetano, tetracloroetano, clorobenzeno ou clorotolueno, ou outros solventes como N,N-dimetilformamida (DMF), dimetil sulfóxido (DMSO), N,N'-dimetilpropilenouréia (DMPU), N-metilpirrolidona (NMP), acetona, acetonitrila ou acetato de etila. É igualmente possível empregar misturas dos solventes mencionados. De preferência é empregado tetra-hidrofurano, dimetilformamida ou acetato de etila. A reação é efetuada, via de regra, em uma faixa de temperatura de 0° até +40°C.

[115] Para a etapa processual (XIII) → (I), como solventes inertes, são apropriados por exemplo álcoois como metanol, etanol, n-propanol, isopropanol, n-butanol ou terc-butanol, éteres como dietiléter, metil terc-butiléter, dioxano, tetra-hidrofurano, glicoldimetiléter ou dietilenoglicol dimetiléter, ou outros solventes como N,N-dimetilforma- mida (DMF), dimetilsulfóxido (DMSO), N,N'-dimetilpropilenouréia (DMPU), N-metilpirrolidona (NMP), acetonitrila ou também água. É igualmente possível empregar misturas desses solventes. De preferência é empregado tetra-hidrofurano ou dimetilformamida.

[116] Como fontes de amoníaco para esta reação são apropriados solventes de amoníaco gasoso em um dos solventes mencionados acima, particularmente em água. A reação pode eventualmente ser efetuada vantajosamente em presença de uma amina terciária como base auxiliar, como por exemplo trietilamina, N-metilmorfolina, N-metilpiperidina, N,N-di-isopropiletilamina ou 4-N,N-dimetilaminopiri-dina. A reação ocorre de modo geral em uma faixa de temperatura de +20°C até +120°C, de preferência de +50°C até +100°C.

[117] Os compostos da Fórmula (II) são obteníveis no comércio, conhecidos da literatura ou podem ser preparados analogamente a processos conhecidos da literatura (compare esquemas reacionais 1-7 a seguir). Os compostos das Fórmulas (III), (VII), (VIII), (IX) e (XI) são muitas vezes obtidos no comércio, conhecidos da literatura ou preparados segundo métodos conhecidos da literatura.

[118] Os compostos da Fórmula (V) são descritos na literatura ou podem ser obtidos em analogia a processos conhecidos da literatura [compare por exemplo T. Searls, L.W. McLaughlin, Tetrahedron 55, 11985-11996 (1999); D. McNamara, P.D. Cook, J. Med. Chem. 30, 340-347 (1987); S. Nesnow, C. Heidelberger, J. Heterocycl. Chem. 12, 941-944 (1975); N.C. Hung, E. Bisagni, Synthesis 1984, 765-766; Z. Földi et al., Chem. Ber. 75 (7), 755-763 (1942); G.W. Kenner et al., J. Chem. Soc., 388 (1943)].

[119] Eventualmente pode ocorrer uma separação dos enantiômeros e/ou diastereômeros já na etapa dos intermediários (VI), (X-A), (X-B) ou (XII), os quais são então submetidos separadamente às reações subsequentes.

[120] A preparação dos compostos de acordo com a invenção pode ser ilustrada pelos esquemas de síntese a seguir:

[121] Esquema 1

[122] [a): brometo de alila, carbonato de potássio, iodeto de potássio cat, acetona, refluxo; b): 230°C, 4 h; c): bis- (benzonitrila)dicloropaládio(II), tolueno, 120°C, 16 h; d): cloreto de acetila, hidreto de sódio, THF, 10-25°C, 16 h; e): 1. ozônio, diclorometano, -60°C, 30 min; 2. sulfeto de dimetila].

[123] Esquema 2

[124] [a): n-butil-lítio, THF, 60°C, 3 h; b): anidrido de ácido acéti- co, piridina, refluxo, 6 h; c): H2SO4 concentrado, HNO3, 0°C, 1 h; d): N-bromossuccinimida, AIBN, tetracloreto de carbono, refluxo; e): N-metil-morfolin-N-óxido, acetonitrila, refluxo].

[125] Esquema 3

[126] [a): di-hidrato de cloreto de estanho(II), acetato de etila, 70°C; b): 1. nitrito de sódio, ácido sulfúrico, 0°C, 1.5 h; 2. cianeto de cobre (I), cianeto de sódio, água/ acetato de etila, 0°C, 45 min; c): N-bromossuccinimida, AIBN, tetracloreto de carbono, refluxo; d): N-metilmorfolin-N-óxido, acetonitrila, refluxo].

[127] Esquema 4

[128] [a): anidrido de ácido trifluorometanossulfônico, piridina, 0°C → TA, 30 min; b): terc-butiléster do ácido acrílico, bis(trifenilfosfina) dicloropaládio(II), DMF, 120°C, 24 h; c): tetróxido de ósmio cat., cloreto de benziltrietilamônio cat., periodato de sódio, THF/água, 20-25°C, 2 h].

[129] Esquema 5

[130] [a): n-butil-lítio, THF, -78°C, então N-formilmorfolina; b): cianeto de zinco, tetraquis(trifenilfosfin)paládio(0), DMF, micro-ondas 250°C / 5 min].

[131] Esquema 6

[132] [a): N,N-dimetilformamida-dimetilacetal, DMF, 140-180°C; b): periodato de sódio, THF/água].

[133] Esquema 7

[134] [a): N-bromossuccinimida, AIBN, tetraclorometano, refluxo; b): N-metilmorfolina-N-óxido, acetonitrila, peneira molecular 3Å].

[135] Esquema 8

[136] [a): cat. piperidinea/ácido acético, diclorometano, refluxo, 24 h; b): isopropanol, refluxo, 12-72 h; c): triflato ou iodeto de alquila, base, THF ou DMF, TA; ou tetrafluorborato de trialquiloxonio, diclorometano, TA; ou ortoformato de trialquila , ácido sulfúrico cat., 100-130°C; ou R11-SO2-Cl, piridina, TA; d): T = 2-cianoetila: NaOH aquoso, DME/água, TA; T = alila: (PPh3)3 RhCl, água/etanol/ácido acético, 75°C; e): 1,1'-carbonildi-imidazol, acetato de etila, TA, 12 h; f): amônia aquosa, DMF, 50-100°C, 0,5-12 h].

[137] Os compostos de acordo com a invenção agem como antagonistas do receptor mineralcorticoide e apresentam um espectro de ação farmacologicamente valioso, não previsível. Eles são apropriados, pois, para o uso como medicamento para o tratamento e/ou profilaxia de doenças em humanos e animais.

[138] Os compostos de acordo com a invenção são apropriados para a profilaxia e/ou tratamento de diferentes doenças e estados relacionados com doenças, particularmente de doenças caracterizadas ou por um aumento da concentração de aldosterona no plasma ou por uma modificação da concentração plasmática de aldosterona com relação à concentração de renina no plasma ou associadas com essas modificações. Como exemplo são mencionados: hiperaldosteronismo idiopático primário, hiperaldosteronismo associado com hiperplasia do córtex suprarrenal, adenomas do córtex suprarrenal e/ou carcinomas do córtex suprarrenal, hiperaldosteronismo associado com cirrose hepática, hiperaldosteronismo associado com insuficiência cardíaca bem como hiperaldosteronismo (relativo) associado com hipertonia essencial.

[139] Os compostos de acordo com a invenção, em virtude de seu mecanismo de ação, são mais apropriados para a profilaxia da falência cardíaca súbita em pacientes, que estão sob risco elevado de morrer de uma falência cardíaca súbita. Estes são particularmente pacientes que sofrem por exemplo de uma das doenças a seguir: hipertonia primária e secundária, doenças cardíacas hipertensivas com ou sem insuficiência cardíaca congestiva, hipertonia resistente à terapia, insuficiência cardíaca aguda ou crônica, doença cardíaca coronariana, angina pectoris estável e instável, isquemia do miocárdio, infarto do miocárdio, cardiomiopatias dilatadoras, cardiomiopatias primárias congênitas, tais como por exemplo síndrome de Brugada, cardiomiopatias causadas pela doença de Chagas, choque, arteriosclerose, arritmias atriais e ventriculares, ataques transitórios e isquê- micos, apoplexia, doenças cardiovasculares inflamatórias, doenças vasculares periféricas e cardíacas, distúrbios circulatórios periféricos, doenças arteriais oclusivas como claudicação intermitente, disfunção do ventrículo esquerdo assintomática, miocardite, modificações hipertróficas do coração, hipertonia pulmonar, espasmos das artérias co-ronarianas e artérias periféricas, tromboses, doenças tromboembóli-cas bem como vasculite.

[140] Os compostos de acordo com a invenção podem, além disso, ser empregados para a profilaxia e/ou tratamento de formação de edemas, como por exemplo edema pulmonar, edema renal ou edema causado por insuficiência cardíaca, e de restenoses tal como após terapias trombólicas, angioplastias percutânea-transluminal (PTA) e an-gioplastias coronarianas (PTCA), transplantes cardíacos bem como operações "bypass".

[141] Além disso, os compostos de acordo com a invenção são apropriados para o uso como diuréticos isentos de potássio e em distúrbios eletrolíticos como por exemplo hipercalcemia, hipernatriemia ou hipocaliemia.

[142] Os compostos de acordo com a invenção são igualmente apropriados para o tratamento de doenças renais como falência renal aguda e crônica, doença renal hipertensiva, nefrite arteriosclerótica (crônica e intersticial), nefroesclerose, insuficiência renal crônica e doenças renais císticas, para prevenção de doenças renais que podem ser causadas por exemplo por imunosupressores como ciclosporina A em transplantes de órgãos, bem como em câncer renal.

[143] Além disso, os compostos de acordo com a invenção podem ser empregados para a profilaxia e/ou tratamento de diabetes me-litus e doenças diabéticas resultantes como por exemplo neuropatia e nefropatia.

[144] Os compostos de acordo com a invenção podem, além dis- so, ser empregados para a profilaxia e/ou tratamento de microalbuminurias, por exemplo causadas por diabetes melitus ou hipertensão arterial, bem como a proteinuria.

[145] Os compostos de acordo com a invenção são apropriados também para a profilaxia e/ou tratamento de doenças associadas ou com um aumento da concentração de glucocorticoides no plasma ou com um aumento local da concentração de glucocorticoides no tecido (por exemplo do coração). Como exemplo são mencionados: distúrbios de função do córtex suprarrenal, que leva à superprodução de glucocorticoides (Síndrome de Cushing), tumores adrenocroticais com resultante superprodução de glucocorticoides bem como tumores da hipófise, que produz ACTH (hormônio adrenocorticotrópico) autônomo e com isto leva a hiperplasias do córtex suprarrenal com resultante doença de Cushing (Morbus Cushing).

[146] Além disso, os compostos de acordo com a invenção podem ser empregados para a profilaxia e/ou tratamento da obesidade, da síndrome metabólica e da apnéia obstrutiva do sono.

[147] Os compostos de acordo com a invenção podem além disso ser empregados para a profilaxia e/ou tratamento de doenças inflamatórias, que são causadas por exemplo por vírus, espiroquetas, fungos, bactérias e micobactérias, bem como de doenças inflamatórias de etiologia desconhecida, como a poliartrite, o lúpus eritematoso, a peri- e poli-arterite, a dermatomiosite, a esclerodermia e a sarcoidose.

[148] Além disso, os compostos de acordo com a invenção podem ser empregados para o tratamento de doenças do sistema nervoso central, como depressões, estados de ansiedade e dores crônicas, particularmente enxaqueca, bem como doenças neurodegenerativas como as doenças de Alzheimer e a síndrome de Parkinson.

[149] Os compostos de acordo com a invenção são também apropriados para a profilaxia e/ou tratamento de doenças vasculares, por exemplo após intervenções como angioplastica coronariana percu-tânea-transluminar (PTCA), implante de stents, angioscopia coronariana, reoclusão ou restenose após operações "bypass", bem como em disfunções endoteliais, para doença de Raynaud (Morbus Raynaud), para tromboangeite obliterante (síndrome de Buerger) e para síndrome de Tinnitus.

[150] Outro objeto da presente invenção é o uso dos compostos de acordo com a invenção para o tratamento e/ou prevenção de doenças, particularmente das doenças mencionadas anteriormente.

[151] Outro objeto da presente invenção é o uso dos compostos de acordo com a invenção para a preparação de um medicamento para o tratamento e/ou prevenção de doenças, particularmente das doenças mencionadas acima.

[152] Outro objeto da presente invenção é um processo para o tratamento e/ou prevenção de doenças, particularmente das doenças mencionadas anteriormente com uso de uma quantidade ativa de pelo menos um dos compostos de acordo com a invenção.

[153] Os compostos de acordo com a invenção podem ser empregados sozinhos ou se necessário em combinação com outras substâncias ativas. Outro objetivo da presente invenção são medicamentos contendo pelo menos um dos compostos de acordo com a invenção e uma ou mais outras substâncias ativas, particularmente para o tratamento e/ou prevenção das doenças mencionadas anteriormente. Como substâncias ativas apropriadas para combinações são mencionadas por exemplo e de preferência:

[154] substâncias ativas que diminuem a pressão arterial, por exemplo e de preferência do grupo dos antagonistas de cálcio, antagonistas de angiotensina AII, inibidores ACE, antagonistas de endotelina, inibidores de renina, bloqueador de alfa-receptor, bloqueador de beta-receptor e inibidores de Rho quinase;

[155] diuréticos, particularmente diuréticos de alça, e tiazidas e diuréticos semelhantes à tiazida;

[156] agentes com efeito antitrombótico, por exemplo e de preferência do grupo dos inibidores de agregação dos plaquetas, dos anticoagulantes ou das substâncias profibrinolíticas;

[157] substâncias ativas que alteram o metabolismo da gordura, por exemplo e de preferência do grupo dos agonistas do receptor da tiroide, inibidores da síntese de colesterol, como por exemplo e de preferência inibidores da redutase HMG-CoA ou inibidores da síntese de esqualeno, dos inibidores ACAT, inibidores CETP, inibidores MTP, agonistas PPAR-alfa, PPAR-gama e/ou PPAR-delta, inibidores da absorção de colesterol, inibidores de lipase, absorvedores polímeros de ácido biliar, inibidores de reabsorção de ácido biliar e antagonistas de lipoproteína(a);

[158] nitratos orgânicos e doadores de NO tal como, por exemplo, nitroprussida de sódio, nitroglicerina, mononitrato de isosorbida, dinitrato de isosorbida, molsidomina ou SIN-1, bem como NO para inalação;

[159] compostos com efeito inotrópico positivo, tais como, por exemplo, glicosídeo cardíaco (digoxina), agonistas beta-adrenérgico e dopaminérgico como isoproterenol, adrenalina, noradrenalina, dopamina e dobutamina;

[160] compostos que inibem a decomposição de monofosfato de guanosina cíclico (cGMP) e/ou monofosfato de adenosina cíclico (cAMP), tal como, por exemplo, inibidores de fosfodiesterases (PDE) 1, 2, 3, 4 e/ou 5, particularmente inibidores PDE 5 tal como sildenafil, var-denafil e tadalafil, e inibidores PDE 3 tais como amrinona e milrinona;

[161] peptídeos natrouréticos tais como, por exemplo, "peptídeos natrouréticos atriais" (ANP, anaritida), "peptídeos natrouréticos tipo B" ou "peptídeos natrouréticos cerebrais" (BNP, nesiritida), "peptídeos natrouréticos tipo C" (CNP) e urodilatina;

[162] sensibilizador de cálcio tal como por exemplo e de preferência levosimendan;

[163] estimuladores independentes de NO mas hemo-dependentes da ciclase de guanilato, como particularmente os compostos descritos em WO 00/06568, WO 00/06569, WO 02/42301 e WO 03/095451;

[164] ativadores da ciclase de guanilato NO- e hemo-independentes, tais como particularmente os compostos descritos em WO 01/19355, WO 01/19776, WO 01/19778, WO 01/19780, WO 02/070462 e WO 02/070510;

[165] inibidores da elastase neutrófila humana (HNE), tais como por exemplo sivelestato ou DX-890 (reltran);

[166] compostos inibidores da cascata de transdução de sinal, como por exemplo inibidores de quinase de tirosina, particularmente sorafenib, imatinib, gefitinib e erlotinib; e/ou

[167] compostos que influenciam o metabolismo de energia do coração, tal como por exemplo e de preferência etomoxir, dicloroaceta-to, ranolazina ou trimetazidina.

[168] Em uma forma preferida de execução da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combinação com um diurético, como por exemplo e de preferência furosemida, bumetanida, torsemida, bendroflumetiazida, clorotiazida, hidroclorotia-zida, hidroflumetiazida, meticlotiazida, politiazida, triclorometiazida, clo-rotalidona, indapamida, metolazona, quinetazona, acetazolamida, di-clorofenamida, metazolamida, glicerina, isosorbida, manitol, amilorida ou triamtereno.

[169] Sob agente redutor da pressão arterial entende-se de preferência compostos do grupo dos antagonistas de cálcio, antagonistas de angiotensina AII, inibidores ACE, antagonistas de endotelina, inibidores de renina, bloqueadores de alfa-receptores, bloqueadores de beta-receptores, inibidores de Rho-quinase bem como os diuréticos.

[170] Em uma forma de execução preferida da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combinação com um antagonista de cálcio, como por exemplo e de preferência nifedipina, amlodipina, verapamila ou diltiazem.

[171] Em uma forma de execução preferida da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combinação com um antagonista de angiotensina AII, como por exemplo e de preferência losartan, candesartan, valsartan, telmisartan ou embusartan.

[172] Em uma forma de execução preferida da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combinação com um inibidor ACE, como por exemplo e de preferência enala-pril, captopril, lisinopril, ramipril, delapril, fosinopril, quinopril, perindopril ou trandopril.

[173] Em uma forma de execução preferida da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combinação com um antagonista de endotelina, como por exemplo e de preferência bosentan, darusentan, ambrisentan ou sitaxsentan.

[174] Em uma forma de execução preferida da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combinação com um inibidor de renina, como por exemplo e de preferência aliskiren, SPP-600, SPP-635, SPP-676, SPP-800 ou SPP-1148.

[175] Em uma forma de execução preferida da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combinação com bloqueador de receptores alfa-1, como por exemplo e de preferência prazosina.

[176] Em uma forma de execução preferida da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combinação com um bloqueador de beta-receptor, como por exemplo e de preferência propranolol, atenolol, timolol, pindolol, alprenolol, oxprenolol, penbutolol, bupranolol, metipranolol, nadolol, mepindolol, carazalol, sotalol, metoprolol, betaxolol, celiprolol, bisoprolol, carteolol, esmolol, labetalol, carvedilol, adaprolol, landiolol, nebivolol, epanolol ou bucin-dolol.

[177] Em uma forma de execução preferida da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combinação com um inibidor de Rho quinase, como por exemplo e de preferência fasudil, Y-27632, SLx-2119, BF-66851, BF-66852, BF-66853, KI-23095 ou BA-1049.

[178] Sob agentes com efeito antitrombótico (antitrombóticos) entende-se de preferência compostos do grupo dos inibidores de agregação de plaquetas, dos anticoagulantes ou das substâncias profibri-nolíticas.

[179] Em uma forma de execução preferida da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combinação com um inibidor de agregação de plaquetas, como por exemplo e de preferência aspirina, clopidogrel, ticlopidina ou dipiridamol.

[180] Em uma forma de execução preferida da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combinação com um inibidor de trombina, como por exemplo e de preferência ximelagatran, melagatran, bivalirudina ou clexane.

[181] Em uma forma de execução preferida da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combinação com um antagonista de GPIIb/IIIa, como por exemplo e de preferência tirofiban ou abciximab.

[182] Em uma forma de execução preferida da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combinação com inibidor do fator Xa, como por exemplo e de preferência rivaroxaban (BAY 59-7939), DU-176b, apixaban, otamixaban, fidexaban, razaxaban, fondaparinux, idraparinux, PMD-3112, YM-150, KFA-1982, EMD-503982, MCM-17, MLN-1021, DX 9065a, DPC 906, JTV 803, SSR-126512 ou SSR-128428.

[183] Em uma forma de execução preferida da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combinação com heparina ou um derivado de heparina de baixo peso molecular (LMW).

[184] Em uma forma de execução preferida da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combinação com um antagonista de vitamina K, como por exemplo e de preferência coumarin.

[185] Sob agente modificador do metabolismo da gordura entende-se de preferência compostos do grupo dos inibidores CETP, agonistas do receptor da tiroide, inibidores da síntese de colesterol como inibidores da redutase HMG-CoA ou inibidores da síntese de esqualeno, dos inibidores ACAT, inibidores MTP, agonistas PPAR-alfa, PPAR-gama e/ou PPAR-delta, inibidores da absorção de colesterol, absorvedor de polímero de ácido biliar, inibidores de reabsorção de ácido biliar, inibidores de lipase bem como os antagonistas de lipoproteína(a).

[186] Em uma forma de execução preferida da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combinação com um inibidor CETP, como por exemplo e de preferência torce-trapib (CP-529 414), JJT-705, BAY 60-5521, BAY 78-7499 ou vacinas CETP (Avant).

[187] Em uma forma de execução preferida da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combinação com um agonista do receptor da tiroide, como por exemplo e de preferência D-tiroxina, 3,5,3'-tri-iodotironina (T3), CGS 23425 ou axiti-roma (CGS 26214).

[188] Em uma forma de execução preferida da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combina- ção com um inibidor da redutase HMG-CoA da classe das estatinas, como por exemplo e de preferência lovastatina, simvastatina, pravas-tatina, fluvastatina, atorvastatina, rosuvastatina, cerivastatina ou pita-vastatina.

[189] Em uma forma de execução preferida da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combinação com um inibidor da síntese de esqualeno, como por exemplo e de preferência BMS-188494 ou TAK-475.

[190] Em uma forma de execução preferida da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combinação com um inibidor ACAT como por exemplo e de preferência avasi-miba, melinamida, pactimiba, eflucimiba ou SMP-797.

[191] Em uma forma de execução preferida da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combinação com um inibidor MTP como por exemplo e de preferência implita-pida, BMS-201038, R-103757 ou JTT-130.

[192] Em uma forma de execução preferida da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combinação com um agonista PPAR-gama, como por exemplo e de preferência pioglitazona ou rosiglitazona.

[193] Em uma forma de execução preferida da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combinação com um agonista PPAR-delta como por exemplo e de preferência GW-501516 ou BAY 68-5042.

[194] Em uma forma de execução preferida da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combinação com inibidor de absorção de colesterol como por exemplo e de preferência ezetimiba, tiquesida ou pamaquesida.

[195] Em uma forma de execução preferida da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combina- ção com um inibidor de lipase, como por exemplo e de preferência or-listato.

[196] Em uma forma de execução preferida da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combinação com um absorvedor polímero de ácido biliar, como por exemplo e de preferência colestiramina, colestipol, colesolvam, colestagel ou co-lestimida.

[197] Em uma forma de execução preferida da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combinação com inibidor de reabsorção de ácido biliar, como por exemplo e de preferência inibidores ASBT (= IBAT) tais como por exemplo AZD-7806, S-8921, AK-105, BARI-1741, SC-435 ou SC-635.

[198] Em uma forma de execução preferida da invenção, os compostos de acordo com a invenção são administrados em combinação com um antagonista de lipoproteína(a) como por exemplo e de preferência gemcabeno cálcio (CI-1027) ou ácido nicotínico.

[199] Outro objeto da presente invenção são medicamentos contendo pelo menos um composto de acordo com a invenção, usualmente em conjunto com uma ou mais substâncias auxiliares inertes, atóxicas, farmaceuticamente apropriadas, bem como seu uso para as finalidades mencionadas acima.

[200] Os compostos de acordo com a invenção podem agir de modo sistêmico e/ou local. Para esta finalidade eles podem ser aplicados de modo apropriado como, por exemplo, via oral, parenteral, pulmonar, nasal, sublingual, lingual, bucal, retal, dermal, transdermal, conjuntival, ótica ou como implante ou stent.

[201] Os compostos de acordo com a invenção podem ser administrados em formas de aplicação apropriadas para estas formas de aplicação.

[202] Para aplicação oral, são apropriadas formas de aplicação que funcionam segundo o estado da técnica, que fornecem os compostos de acordo com a invenção de modo rápido e/ou modificado, e as quais contêm os compostos de acordo com a invenção em forma cristalina e/ou amorfa e/ou dissolvida, como por exemplo comprimidos (comprimidos não-revestidos ou revestidos, por exemplo com revestimento resistente ao suco gástrico ou insolúveis ou que seja solúvel com retardo, que controlam a liberação dos compostos de acordo com a invenção), comprimidos que se desfazem rapidamente na boca, ou filmes/hóstias, filmes/liofilisados, cápsulas (por exemplo cápsulas de gelatina dura ou macia), drágeas, granulados, péletes, pós, emulsões, suspensões, aerossóis ou soluções.

[203] A aplicação parenteral pode ser efetuada evitando-se uma etapa de absorção (por exemplo intravenosa, intra-arterial, intracardíaca, intraspinal ou intralumbar) ou com inclusão de uma absorção (por exemplo intramuscular, subcutânea, intracutânea, percutânea ou intraperitoneal). Para aplicação parenteral são apropriadas como formas de aplicação, entre outras, preparações para injeção e infusão em forma de soluções, suspensões, emulsões, liofilizados ou pós estéreis.

[204] Para outros modos de aplicação são apropriadas por exemplo formas farmacêuticas para inalação (entre outros inaladores para pó, nebulizadores), gotas, soluções ou sprays nasais, comprimidos para administração via lingual, sublingual ou bucal, filmes/hóstias ou cápsulas, supositórios, preparações para orelha ou olhos, cápsulas vaginais, suspensões aquosas (loções, misturas para agitar), suspensões lipofílicas, pomadas, cremes, sistemas terapêuticos transdermais (por exmeplo emplastro), leites, pastas, espumas, pós para espalhar, implantes ou stents.

[205] Preferidas são as aplicações orais ou parenterais, particularmente a aplicação oral e a intravenosa.

[206] Os compostos de acordo com a invenção podem ser con- vertidos nas formas de aplicação mencionadas. Isto pode ser efetuado de modo em si conhecido por mistura com substâncias auxiliares inertes, atóxicas, farmaceuticamente apropriadas. A estas substâncias auxiliares somam-se entre outros veículos (por exemplo celulose microcristalina, lactose, manitol), solventes (por exemplo polietilenoglicóis fluidos), emulsificadores e dispersantes ou umectantes (por exemplo dodecilsulfato de sódio, polioxissorbitano-oleato), aglutinante (por exemplo polivinilpirrolidona), polímeros sintéticos e naturais (por exemplo albumina), estabilizadores (por exemplo antioxidantes como por exemplo ácido ascórbico), corantes (por exemplo pigmentos inorgânicos como por exemplo óxido de ferro) e corretores de paladar e/ou odor.

[207] De modo geral mostrou-se vantajoso, na aplicação parenteral, administrar quantidades de aproximadamente 0,001 até 1 mg/kg, de preferência aproximadamente 0,01 até 0,5 mg/kg de peso corporal, para obter resultados efetivos. Na aplicação oral a dosagem perfaz aproximadamente 0,01 até 100 mg/kg, de preferência aproximadamente 0,01 até 20 mg/kg e muito particularmente preferido 0,1 até 10 mg/kg de peso corporal.

[208] Apesar disso, pode ser eventualmente necessário desviar das quantidades mencionadas, dependendo do peso corporal, modo de aplicação, comportamento individual em relação à substância ativa, tipo de preparação e momento ou intervalo no qual a aplicação ocorre. Assim, em alguns casos pode ser suficiente empregar menos que a quantidade mínima mencionada acima, enquanto em outros casos o limite superior mencionado precisa ser ultrapassado. No caso de aplicação de quantidades maiores pode ser aconselhável dividir esta em várias doses menores durante o dia.

[209] Os exemplos de aplicação a seguir elucidam a invenção. A invenção não está limitada aos exemplos.

[210] As indicações em por cento nos testes e exemplos a seguir, desde que não seja indicado de modo diferente, se referem a por cento em peso; partes são partes em peso. Proporções de solventes, proporções de diluentes e indicações de concentração de soluções fluido fluidas se referem em cada caso ao volume.
Exemplos
Abreviações e acrônimos
abs. absoluto
AIBN 2,2'-azobis-2-metilpropanonitrila
cat. catalítico
CI ionização química (em MS)
conc. concentrado
d dia(s)
DC cromatografia em camada fina
DME 1,2-dimetoxietano
DMF dimetilformamida
DMSO dimetilsulfóxido
d. T. da teoria (no rendimento)
ee excesso enantiomérico
EI ionização de impacto de elétrons (em MS)
ent enantiômeros / enantiômeros puros
eq equivalente(s)
ESI ionização de electrospray (em MS)
GC-MS espectroscopia de massa acoplada à cromatografia gasosa
Gew.-% por cento em peso
h hora(s)
HPLC cromatografia líquida de alta eficiência
konz. concentrado
LC-MS espectroscopia de massa acoplada à cromatografia líquida
min minuto(s)
MPLC cromatografia líquida de pressão média
MS espectroscopia de massa
RMN ressonância magnética nuclear
Ph fenila
Rf índice de retenção (em DC)
TA tempo de retenção (em HPLC)
TA temperatura ambiente
THF tetra-hidrofurano
v/v relação volume/volume (de uma solução)
aq. aquoso, solução aquosa

[211] Métodos LC-MS e GC-MS:

Método 1 (LC-MS)

[212] Tipo de instrumentos MS: Micromass ZQ; tipo de instrumento HPLC: Águas Alliance 2795; coluna: Phenomenex Synergi 2μ Hidro-RP Mercury 20 mm x 4 mm; eluente A: 1 l de água + 0,5 mL de ácido fórmico a 50%, eluente B: 1 l de acetonitrila + 0,5 mL de ácido fórmico a 50%; gradiente: 0,0 min 90% A → 2,5 min 30% A → 3,0 min 5% A → 4,5 min 5% A; fluxo: 0,0 min 1 ml/min → 2,5 min/3,0 min/4,5 min 2 ml/min; forno: 50°C; detecção UV: 210 nm.

[213] Método 2 (LC-MS):

[214] Instrumento: Micromass Quattro LCZ com HPLC Agilent Série 1100; coluna: Phenomenex Synergi 2μ Hidro-RP Mercury 20 mm x 4 mm; eluente A: 1 l de água + 0,5 mL de ácido fórmico a 50%, eluente B: 1 l de acetonitrila + 0,5 mL de ácido fórmico a 50%; gradiente: 0,0 min 90% A → 2,5 min 30% A → 3,0 min 5% A → 4,5 min 5% A; fluxo: 0,0 min 1 ml/min → 2,5 min/3,0 min/4,5 min 2 ml/min; forno: 50°C; detecção UV: 208-400 nm.

[215] Método 3 (LC-MS):

[216] Instrumento tipo MS: Micromass ZQ; tipo de instrumento HPLC: HP série 1100; UV DAD; coluna: Phenomenex Gemini 3μ 30 mm x 3,00 mm; eluente A: 1 l de água + 0,5 mL de ácido fórmico a 50%, eluente B: 1 l de acetonitrila + 0,5 mL de ácido fórmico a 50%; gradiente: 0,0 min 90% A → 2,5 min 30% A → 3,0 min 5% A → 4,5 min 5% A; fluxo: 0,0 min 1 ml/min → 2,5 min/3,0 min/4,5 min 2 ml/min; forno: 50°C; Detecção UV: 210 nm.

[217] Método 4 (LC-MS):

[218] Instrumento: Micromass Platform LCZ com HPLC Agilent série 1100; coluna: Thermo Hypersil GOLD 3μ 20 mm x 4 mm; eluente A: 1 l de água + 0,5 mL de ácido fórmico a 50%, eluente B: 1 l de acetonitrila + 0,5 mL de ácido fórmico a 50%; gradiente: 0,0 min 100% A → 0,2 min 100% A → 2,9 min 30% A → 3,1 min 10% A → 5,5 min 10% A; forno: 50°C; fluxo: 0,8 ml/min; Detecção UV: 210 nm.

[219] Método 5 (GC-MS):

[220] Instrumento: Micromass GCT, GC 6890; coluna: Restek RTX-35MS, 30 m x 250 μm x 0.25 μm; fluxo constante com hélio: 0,88 ml/min; forno: 60°C; inlet: 250°C; gradiente: 60°C (manter por 0,30 min), 50°C/min → 120°C, 16°C/min → 250°C, 30°C/min → 300°C (manter por 1,7 min).

[221] Método 6 (LC-MS):

[222] Tipo de instrumento MS: Águas ZQ; tipo de instrumento HPLC: Águas Alliance 2795; coluna: Phenomenex Onyx Monolithic C18, 100 mm x 3 mm; eluente A: 1 l de água + 0,5 mL de ácido fórmico a 50%, eluente B: 1 l de acetonitrila + 0,5 mL de ácido fórmico a 50%; gradiente: 0,0 min 90% A → 2 min 65% A → 4,5 min 5% A → 6 min 5% A; fluxo: 2 ml/min; forno: 40°C; detecção UV: 210 nm.

[223] Método 7 (LC-MS):

[224] Instrumento: Micromass Quattro LCZ com HPLC Agilent série 1100; coluna: Phenomenex Onyx Monolithic C18, 100 mm x 3 mm; eluente A: 1 l de água + 0,5 mL de ácido fórmico a 50%, eluente B: 1 l de acetonitrila + 0,5 mL de ácido fórmico a 50%; gradiente: 0,0 min 90% A → 2 min 65% A → 4,5 min 5% A → 6 min 5% A; fluxo: 2 ml/min; forno: 40°C; detecção UV: 208-400 nm.

[225] Método 8 (LC-MS):

[226] Tipo de instrumento MS: Micromass ZQ; tipo de instrumento HPLC: Águas Alliance 2795: coluna: Phenomenex Synergi 2,5 μ MAX-RP 100A Mercury 20 mm x 4 mm; eluente A: 1 l de água + 0,5 mL de ácido fórmico a 50%, eluente B : 1 l de acetonitrila + 0,5 mL de ácido fórmico a 50%; gradiente 0,0 min 90% A → 0,1 min 90% A → 3,0 min 5% A → 4,0 min 5% A → 4,01 min 90% A; fluxo: 2 ml/min; forno: 50°C; detecção UV: 210nm.

[227] Método 9 (LC-MS):

[228] Instrumento: Micromass Quattro Premier com waters UPLC Acquity; coluna: Thermo Hypersil GOLD 1,9μ 50 mn x 1 mn; eluente A: 1 l de água + 0,5 mL de ácido fórmico a 50%, eluente B: 1 l de acetonitrila + 0,5 mL de ácido fórmico a 50%; gradiente: 0,0 min 90% A → 0,1 min 90% A → 1,5 min 10% A → 2,2 min 10% A; fluxo 0,33 ml/min; forno: 50°C; detecção UV: 210 nm.

[229] Compostos de partida e compostos intermediários:

Exemplo 1A

[230] 1 -[2-(alilóxi)fenil]etanona

[231] 542 g (3,9 mols) de 2-hidroxiacetofenona são aquecidos durante 24 h sob refluxo com 592 g (4,9 mols) de brometo de alila, 1000 g (7,2 mols) de carbonato de potássio e 13,2 g (79 mmols) de iodeto de potássio em 2,4 litros de acetona. Após resfriamento até temperatura ambiente é filtrado e o solvente é removido no vácuo. O resíduo é dissolvido em tolueno e lavado com hidróxido de sódio a 10% e água. Após concentração, são obtidos 689 g (98% da teoria) do composto do título.

[232] 1H-RMN (300 MHz, CDCI3): δ = 2,68 (s, 3H), 4,68 (dd, 2H), 5,89 (dd, 2H), 6,09 (m, 1H), 6,99 (dd, 2H), 7,44 (m, 1H), 7,71 (d, 1H).

Exemplo 2A

[233] 1-(3-alil-2-hidroxifenil)etanona

[234] 160 g (0,9 mol) de 1-[2-(alilóxi)fenil]etanona são agitados no banho de metal durante 4 horas a 230-240°C. Após resfriamento até temperatura ambiente o produto é destilado em um evaporador de camada fina a 140°C e 0,04 KPa (0,4 mbar). São obtidos 155 g (97% da teoria) do composto do título.

[235] 1H-RMN (300 MHz, CDCl3): δ = 2,68 (s, 3H), 3,44 (d, 2H), 5,09 (m, 2H), 6,01 (m, 1H), 6,85 (t, 1H), 7,38 (dd, 1H), 7,62 (dd, 1H), 12,61 (s, 1H).

Exemplo 3A

[236] 1 -{2-hidróxi-3-[(1 E)-prop-1-en-1-il]fenil}etanona

[237] 40 g (227 mmols) de 1-(3-alil-2-hidroxifenil)etanona são dis- solvidos em 120 mL de tolueno e misturados com 2,17 g (5,6 mmols) de bis(benzonitrila) dicloropaládio(II). A mistura reacional é aquecida durante a noite a 120°C. Após resfriamento até temperatura ambiente é filtrado com terra diatomácea e o solvente é removido no vácuo. São obtidos 20,9 g (95% da teoria) do composto do título o qual, sem nova purificação, é reagido na etapa seguinte.

[238] LC-MS (método 1): Tr = 2,36 min; [M+H]+ = 177

[239] 1H-RMN (300 MHz, CDCl3): δ = 1,91 (dd, 3H), 2,63 (s, 3H), 6,32 (m, 1H), 6,73 (dd, 1H), 6,85 (t, 1H), 7,59 (m, 2H), 12,74 (s, 1H).

Exemplo 4A

[240] 2-metil-8-[(1E)-prop-1-en-1-il]-4H-cromen-4-ona

[241] 12,52 g (313,2 mmols) de hidreto de sódio a 60% (suspensão em óleo mineral) são misturados sob argônio a 10°C em 300 mL de THF absoluto. À suspensão são vagarosamente adicionados por gotejamento 18,4 g (104,4 mmols) de 1-{2-hidróxi-3-[(1E)-prop-1-en-1-il]fenil}etanona. Após 15 minutos são adicionados 9 g (114,9 mmols) de cloreto de acetila. A mistura reacional é agitada durante a noite sob temperatura ambiente. A hidrólise é feita com 300 mL de água e a extração é feita várias vezes com acetato de etila. Após lavagem da fase orgânica com solução saturada de cloreto de sódio, é seco com sulfato de sódio. A seguir, o solvente é removido no vácuo. O resíduo é retomado em 200 mL de metanol e aquecido até 80°C com 50 mL de ácido clorídrico a 20% durante 30 minutos. A seguir, o solvente é removido no vácuo e o resíduo misturado com 400 mL de água. É extraído várias vezes com diclorometano. Após secagem da fase orgânica com sulfato de magnésio, o solvente é removido no vácuo e o resíduo purificado por cromatografia de coluna (eluente: diclorometano/metanol 98:2). São obtidos 10,5 g (50,2% da teoria) do composto do título como óleo amarelo.

[242] LC-MS (método 2): Tr = 2,07 min; [M+H]+ = 201

[243] 1H-RMN (300 MHz, CDCl3): δ = 1,98 (dd, 3H), 2,43 (s, 3H), 6,18 (s, 1H), 6,40 (m, 1H), 6,85 (dd, 1H), 7,31 (t, 1H), 7,72 (dd, 1H), 8,05 (dd, 1H).

Exemplo 5A

[244] 2-metil-4-oxo-4H-cromen-8-carbaldeído

[245] 18,5 g (62,8 mmols) de 2-metil-8-[(1E)-prop-1-en-1-il]-4H-cromen-4-ona são dissolvidos em 400 mL de diclorometano e resfriados até -60°C. Na solução reacional, no decorrer de 30 minutos, é introduzido ozônio. A seguir, a mistura reacional é misturada com sulfito de dimetila. O solvente é removido no vácuo após aquecimento até temperatura ambiente e o resíduo é suspenso com um pouco de metanol. Após filtração, o sólido remanescente é recristalizado de dietiléter. São obtidos 9,1 g (77,4% da teoria) do composto do título.

[246] LC-MS (método 1): Tr = 1,31 min; [M+H]+ = 189

[247] 1H-RMN (300 MHz, CDCl3): δ = 2,48 (s, 3H), 6,27 (s, 1H), 7,51 (m, 1H), 8,21 (dd, 1H), 8,46 (dd, 1H), 10,67 (s, 1H).

Exemplo 6A

[248] 4-bromo-2-(trifluormetóxi)benzaldeído

[249] 20,00 g (54,51 mmols) de 4-bromo-2-(trifluormetóxi)- iodobenzeno são dissolvidos em 200 mL de THF e resfriados para -78°C. A seguir, são adicionados por gotejamento 26,16 mL (65,41 mmols) de uma solução 2,5 M de n-butil-lítio em hexano. Agita-se du- rante 30 minutos e, a seguir, são juntados 14,43 g (125,37 mmols) de N-formilmorfolina. Após detectada a completa conversão (controle DC), procede a solvólise com isopropanol, a -78°C. Após aquecimento até temperatura ambiente, é misturado com água e extraído duas vezes com diclorometano. As fases orgânicas unificadas são lavadas com solução saturada de cloreto de sódio, secas com sulfato de sódio e o solvente é separado por destilação sob pressão reduzida. O resíduo é purificado por cromatografia de coluna (sílica-gel, eluente: ciclohexano/ acetato de etila 5:1). São obtidos 11,43 g (78% da teoria) do composto do título.

[250] GC-MS (método 5): Tr = 4,24 min; MS (EIpos): m/z = 270 [M+H]+

[251] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 7,85-7,92 (m, 3H), 10,20 (s, 1H).

Exemplo 7A

[252] 4-formil-3-(trifluormetóxi)benzonitrila

[253] 10,63 g (39,51 mmols) de 4-bromo-2-(trifluormetóxi) ben- zaldeído, 3,43 g (29,24 mmols) de cianeto de zinco e 1,37 g (1,19 mmol) de tetraquis (trifenilfosfino)paladio(0) são dissolvidos em 80 mL de DMF. A seguir, a mistura reacional, é reagida em várias porções em um micro-ondas simples (Emrys Optimizer, 5 min a 220°C). Os preparados unificados são misturados com água e extraídos duas vezes com tolueno. As fases orgânicas unificadas são lavadas com solução saturada de cloreto de sódio, secas com sulfato de sódio e a seguir o solvente é eliminado no evaporador rotativo. O resíduo é purifi- cado por cromatografia de colunas (sílica-gel, eluente: ciclo-hexano/ acetato de etila 10:1), 3,32 g (78% da teoria) do composto do título com 80% de pureza (de acordo com LC-MS).

[254] MS (EIpos): m/z = 215 [M]+

[255] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 7,85-7,91 (m, 3H), 10,20 (s, 1H).

Exemplo 8A

[256] 4-ciano-2-metoxifenil-trifluormetanossulfonato

[257] A uma solução de 20 g (134 mmols) de 4-hidróxi-3-metoxibenzonitrila em piridina (80 ml) são lentamente adicionados, por gotejamento, 24 mL (141 mmols) de anidrido de ácido trifluormetanos-sulfônico, sendo que a temperatura de reação é mantida abaixo de 25°C com auxílio de banho de gelo. A suspensão é então agitada durante 1 hora sob temperatura ambiente. Agua gelada (400 ml) é adicionada e a suspensão agitada ainda até alcançar a temperatura ambiente. A seguir é filtrado, o sólido é dissolvido em acetato de etila e esta solução é lavada com solução saturada de cloreto de sódio. A fase orgânica é seca com sulfato de magnésio e concentrada. São obtidos 37,13 g (92% da teoria) do composto do título como sólido branco.

[258] LC-MS (método 3): Tr = 2,54 min; MS (EIpos): m/z = 282 [M+H]+

[259] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 3,97 (s, 3H), 7,60 (dd, 1H), 7,71 (d, 1H), 7,92 (d, 1H).

Exemplo 9A

[260] Acrilato de terc-butil (2E)-3-(4-ciano-2-metoxifenil)

[261] A uma solução desgassificada de 37,13 g (132 mmols) de 4-ciano
-2-metoxifenil-trifluormetanossulfonato, 35 mL (245 mmols) de terc-butilacrilato e 90 mL (645 mmols) de trietilamina em DMF (250 ml) são adicionados 4 g (5,7 mmols) de cloreto de bis(trifenilfosfina)paládio(II). A solução é agitada durante 24 h a 100°C sob atmosfera de gás inerte. A seguir é adicionada água gelada (1000 ml) e a suspensão extraída com acetato de etila (3 x 100 ml). A fase orgânica é lavada com solução saturada de cloreto de sódio, seca com sulfato de magnésio e concentrada. O resíduo é purificado por cromatografia de coluna (sílica-gel, eluente: ciclo-hexano/ etiléster de ácido acético 10:1). São obtidos 24,6 g (72% da teoria) do composto do título como sólido branco.

[262] LC-MS (método 1): Tr = 2,59 min; MS (EIpos): m/z = 260 [M+H]+

[263] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1,48 (s, 9H), 3,93 (s, 3H), 6,65 (d, 1H), 7,42 (d, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,74 (d, 1H), 7,89 (d, 1H),

Exemplo 10A

[264] 4-formil-3-metoxibenzonitrila

[265] A uma solução fortemente agitada de 48 g (185 mmols) de acrilato de terc-butil (2E)-3-(4-ciano-2-metoxifenil), 207 mg (0,81 mmol) de tetróxido de ósmio e 1,4 g (6,14 mmols) de cloreto de benziltrietilamônio em 750 mL de água/THF (2:1), são adicionados em porções 79 g (370 mmols) de metaperiodato de sódio, sendo que a temperatura reacional é mantida abaixo de 30°C. A solução é agitada por mais 1 hora sob temperatura ambiente. É adicionada água (2000 ml) e a mistura é, então, filtrada. O sólido remanescente é dissolvido em acetato de etila e a solução é lavada com solução saturada de cloreto de sódio. A fase orgânica é seca com sulfato de magnésio e concentrada. O resíduo é misturado com éter de petróleo. São obtidos 21,18 g (71% da teoria) do composto do título como sólido branco.

[266] LC-MS (método 3): Tr = 1,87 min; MS (EIpos): m/z = 162 [M+H]+

[267] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 3,98 (s, 3H), 7,53 (d, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,81 (d, 1H), 10,37 (s, 1H).

Exemplo 11A

[268] 4-formil-3-hidroxibenzonitrila

[269] A uma solução de 8 g (49,64 mmols) de 4-formil-3-metoxibenzonitrila em 80 mL de diclorometano anidro são adicionados por gotejamento, sob atmosfera de argônio, a -78°C, 100 mL de uma solução de tribrometo de boro em diclorometano (1 M, 100 mmols). A mistura reacional é agitada sob temperatura ambiente até total reação do eduto (cerca de 5 dias). A solução reacional é então neutralizada a 0o C com solução saturada de bicarbonato de sódio. As fases são se- paradas e a fase orgânica é lavada com solução saturada de cloreto de sódio, seca com sulfato de magnésio e concentrada. O resíduo é purificado por cromatografia de coluna com sílica-gel (eluente: ciclohexano/ acetato de etila 3:1). São obtidos 4,5 g (61% da teoria) do composto do título como sólido amarelo.

[270] LC-MS (método 1): Tr = 1,38 min; [M-H]- = 146

[271] 1H-RMN (300 MHz, CDCl3): δ = 7,38 (d, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,77 (d, 1H), 10,33 (s, 1H), 11,38 (s, 1H).

Exemplo 12A

[272] 5-ciano-2-formilfenil-trifluormetanossulfonato

[273] A uma solução de 2 g (13,59 mmols) de 4-formil-3-hidroxibenzonitrila e 2,5 mL (14,27 mmols) de N,N-di-isopropiletilamina em 37 mL de diclorometano anidro sob atmosfera de argônio a 0o C são adicionados, por gotejamento, 2,4 mL (14,27 mmols) de anidrido do ácido trifluormetanossulfônico. A mistura reacional é agitada por mais 1 hora sob temperatura ambiente, então diluída com 70 mL de diclorometano e sucessivamente lavada com 1 M de ácido clorídrico, solução saturada de bicarbonato de sódio e solução saturada de cloreto de sódio. A solução orgânica é seca com sulfato de magnésio e concentrada. O resíduo é purificado por cromatografia de coluna com sílica-gel (eluente: ciclo-hexano/ acetato de etila 7:1). São obtidos 2,36 g (62% da teoria) do composto do título como sólido branco.

[274] LC-MS (metodo 3): Tr = 2,34 min; [M+H]+ = 280

[275] 1H-RMN (300 MHz, CDCl3): δ = 8,27 (m, 2H), 8,33 (s, 1H), 10,13 (s, 1H).

Exemplo 13A

[276] 4-formil-3-vinilbenzonitrila

[277] A uma solução de 1 g (3,58 mmols) de 5-ciano-2-formilfenil-trifluormetanossulfonato e 1,15 mL (3,94 mmols) de tri-n-butilvinilestanano em 6 mL de DMF anidro e desgasificado são adicionados, sob atmosfera de argônio, 125 mg (0,18 mmol) de cloreto de bis(trifenilfosfina)paládio(II). A mistura reacional é a seguir agitada durante 90 minutos a 80°C. A seguir, são adicionados 100 mL de solução de fluoreto de potássio a 10% e a mistura é agitada durante mais 1 hora sob temperatura ambiente. A suspensão é extraída três vezes, de cada vez com 20 mL de acetato de etila e as fases orgânicas reunidas são sucessivamente lavadas com solução saturada de bicarbonato de sódio e solução saturada de cloreto de sódio. A solução orgânica é seca com sulfato de magnésio e concentrada. O resíduo (0,6 g), sem outra purificação, é usado na etapa seguinte.

[278] GC-MS (método 5): Tr = 5,02 min; [M]+ = 157

[279] 1H-RMN (300 MHz, CDCl3): δ = 5,62 (d, 1H), 6,05 (d, 1H), 7,58 (dd, 1H), 7,95 (d, 1H), 8,00 (d, 1H), 8,24 (s, 1H), 10,32 (s, 1H).

Exemplo 14A

[280] 3-etil-4-formilbenzonitrila

[281] Uma solução de 1,3 g (8,27 mmols) de 4-formil-3-vinilbenzonitrila em 35 mL de etanol é misturada com 880 mg de paládio a 10% sobre carbono e vigorosamene agitada durante 2 horas sob atmosfera de hidrogênio. A suspensão é filtrada por uma camada de terra diatomácea, o resíduo é lavado com etanol e o filtrado é concentrado. O resíduo (890 mg) sem outra purificação é empregado na etapa seguinte.

[282] 1H-RMN (300 MHz, CDCl3): δ = 1,2 (t, 1H), 3,07 (q, 2H), 7,88 (d, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,97 (d, 1H), 10,32 (s, 1H).

Exemplo 15A

[283] 4-ciano-2-fluorbenzoato de metila

[284] 13,20 g (79,9 mmols) de ácido 4-ciano-2-fluorbenzóico são dissolvidos em 300 mL de acetona. A seguir, são sucessivamente adicionados 22,10 g (159,9 mmols) de carbonato de potássio e 9,08 mL (95,9 mmols) de sulfato de dimetila. É agitado durante 20 horas sob temperatura de refluxo. A mistura reacional é a seguir misturada com 300 mL de água e a acetona é eliminada no vaporizador rotativo. É extraído várias vezes com diclorometano. As fases orgânicas unificadas são lavadas com solução saturada de cloreto de sódio e secas com sulfato de sódio. A seguir, o solvente é eliminado no vácuo. O sólido remanescente, sem nova purificação, é novamente usado. São obtidos 16,1 g (84% da teoria) do composto do título como sólido incolor.

[285] GC-MS (método 5): Tr = 6,23 min; [M]+ (EIpos): m/z = 179

[286] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 3,90 (s, 3H), 7,83 (dd, 1H), 8,01-8,08 (m, 2H).

Exemplo 16A

[287] 3-fluor-4-(hidroximetil)benzonitrila

[288] 16,10 g (89,9 mmols) de 4-ciano-2-fluorbenzoato de metila são dissolvidos em 150 mL de metanol. A seguir são adicionados, em porções, 3,40 g (89,9 mmols) de boroidreto de sódio. Terminada a reação (controle DC), é ajustado em pH 3 com solução clorídrica diluída e extraída várias vezes com diclorometano. As fases orgânicas unificadas são lavadas com solução saturada de cloreto de sódio e secas com sulfato de magnésio. A seguir o solvente é eliminado no vácuo e o resíduo purificado por cromatografia de coluna (sílica-gel, eluente: ciclo-hexano/ acetato de etila 15:1 → 3:7). São obtidos 3,70 g (27,2% da teoria) do composto do título.

[289] GC-MS (método 5): Tr = 6,51 min; [M]+ (EIpos): m/z = 151

[290] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 4,61 (s, 2H), 5,53 (s, 1H), 7,61-7,74 (m, 2H), 7,79 (dd, 1H).

Exemplo 17A

[291] 3-fluor-4-formilbenzonitrila

[292] 1,00 g (6,62 mmols) de 3-fluor-4-(hidroximetil)benzonitrila são dissolvidos em 50 mL de diclorometano e misturados com 9,20 g (105,9 mmols) de óxido de manganês(IV). É agitado durante a noite sob temperatura ambiente e a seguir filtrada com coluna curta de terra diatomácea. O solvente é separado por destilação sob pressão reduzida e o resíduo purificado por cromatografia de colunas (sílica-gel, eluente: diclorometano). São obtidos 120 mg (12,1% da teoria) do composto do título.

[293] GC-MS (método 5): Tr = 5,11 min; [M]+ (EIpos): m/z = 149

[294] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 7,89 (d, 1H), 8,00 (t, 1H), 8,11 (d, 1H), 10,24 (d, 1H).

Exemplo 18A

[295] 3-cloro-4-formilbenzonitrila

[296] 25,0 g (164,91 mmols) de 3-cloro-4-metilbenzonitrila são dissolvidos em 150 mL de DMF e misturados com 25,55 g (214,39 mmols) de N,N-dimetilformamida-dimetilacetal. É agitado durante 20 horas a 140°C e a seguir durante 4 horas a 180°C, temperatura de banho de óleo. Os componentes voláteis são separados no evaporador rotativo e o resíduo remanescente é diretamente reagido.

[297] A 3-cloro-4-[2-(dimetilamino)vinil]benzonitrila bruta assim obtida é retomada em 500 mL de THF/água (1:1) e misturada com 77,6 g (362,9 mmols) de periodato de sodio. É agitado durante 18 h sob temperatura ambiente e, a seguir, o precipitado formado é separado por filtração. O filtrado é misturado com solução saturada de bicarbonato de sódio e extraído três vezes com acetato de etila. As fases orgânicas reunidas são secas com sulfato de sódio e o solvente eliminado no evaporador rotativo. O produto bruto é purificado por cromatografia de coluna (gel de silica, eluente: ciclo-hexano/ acetato de etila 7:3). São obtidos 3,0 g (15% da teoria) do composto do título.

[298] GC-MS (método 5): Tr = 6,64 min; [M]+ (EIpos): m/z = 165

[299] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 7,97-8,03 (m, 2H), 8,27 (s, 1H), 10,34 (d, 1H).

Exemplo 19A

[300] 4-formil-1-naftonitrila

[301] 2,50 g (14,95 mmols) de 4-metil-1-naftonitrila são dissolvidos em 40 mL de tetraclorometano e misturados com 3,19 g (17,94 mmols) de N-bromossuccinimida bem como 245 mg (1,50 mmol) de 2,2'-azobis-2-metilpropanonitrila. É agitado durante a noite sob temperatura de refluxo. Após resfriamento, o produto é separado por filtração. São obtidos 2,75 g (74,7% da teoria) de 4-(bromometil)-1-naftonitrila com pureza de 90% que é reagida sem outra purificação.

[302] 2,75 g (11,17 mmols) do brometo assim obtido são dissolvidos em 60 mL de acetonitrila e misturados com 2 g de peneira molecular (3Å). A seguir, são adicionados 1,44 g (12,29 mmols) de N-metilmorfolina-N-oxido e a mistura é agitada durante a noite sob temperatura ambiente. A seguir, o preparado é filtrado com sílica-gel e o filtrado é concentrado. O resíduo é purificado com um cartucho Biotage (40 M) (eluente: iso-hexano/acetato de etila 3:1). As frações do produto são unificadas, o solvente é eliminado no evaporador rotativo e a seguir o resíduo é misturado com dietiléter, sendo que inicia a cristalização. Lava-se com um pouco de dietiléter e seca-se no alto vácuo. São obtidos 254 mg (12,6% da teoria) do composto do título.

[303] LC-MS (método 3): Tr = 2,27 min; [M+H]+ (Elpos): m/z = 182

[304] 1H-RMN (300 MHz, CDCl3): δ = 7,79-7,87 (m, 2H), 8,05 (d, 1H), 8,09 (d, 1H), 8,37 (m, 1H), 9,27 (m, 1H), 10,51 (s, 1H).

Exemplo 20A

[305] 2-cianoetil 4-(4-ciano-2-metoxifenil)-2-metil-5-oxo-1,4,5,6-tetra-hidro-1,6-naftiridin -3-carboxilato

[306] 14,63 g (90,81 mmols) do composto do exemplo 10A, 10,00 g (90,81 mmols) de 4-aminopiridin-2(1H)-ona [Searls, T., McLaughlin, L,W,, Tetrahedron 55, 11985-11996 (1999)] e 15,65 g (90,81 mmols) de 2-cianoetil -3-oxobutanoato [Yamamoto, T., et al., Bioorg, Med, Chem, Lett, 16, 798-802 (2006)] são dissolvidos em 300 mL de isopropanol e agitados durante 3 dias sob argônio a temperatura de refluxo. A seguir, a mistura é concentrada e em seguida purificada por cromatografia de coluna (sílica-gel; eluente: inicialmente etiléster de ácido acético e depois diclorometano/metanol 10:1). As frações de produto obtidas são concentradas e a seguir retomadas com um pouco de etiléster do ácido acético. O produto precipitado é separado por filtração e seco durante a noite no vácuo a 40°C. São obtidos 10,11 g (27% da teoria) do composto do título.

[307] LC-MS (método 6): Tr = 1,83 min; MS (EIpos): m/z = 391 [M+H]+

[308] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 2,27 (s, 3H), 2,79 (m, 2H), 3,75 (s, 3H), 3,96-4,14 (m, 2H), 5,19 (s, 1H), 5,87 (d, 1H), 7,10 (d, 1H), 7,23 (dd, 1H), 7,30-7,35 (m, 2H), 9,30 (s, 1H), 10,83 (s, 1H).

Exemplo 21A

[309] 2-cianoetil 4-(4-ciano-2-metoxifenil)-5-etóxi-2-metil-1,4-di-hidro-1,6-naftiridin-3-carboxilato

[310] 10,00 g (25,62 mmols) do composto do Exemplo 20A são suspensos em 250 mL de trietiléster de ácido ortofórmico e aquecidos até 130°C. A seguir, a mistura reacional é misturada no decorrer de um tempo total de 8 horas, a cada hora, com 15 gotas de ácido sulfúrico concentrado. A seguir, durante a noite, é agitado sob idêntica temperatura. O or-toéster em excesso é removido no vaporizador rotativo após o resfriamento e o produto bruto é purificado com cromatografia de colunas (sílica-gel; eluente: ciclo-hexano/ etiléster de ácido acético 1:1). São obtidos 7,20 g (65% da teoria) do composto do título.

[311] LC-MS (método 6): Tr = 2,82 min; MS (EIpos): m/z = 419 [M+H]+

[312] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1,12 (t, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,77 (m, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,99-4,13 (m, 4H), 5,37 (s, 1H), 6,48 (d, 1H), 7,25 (dd, 1H), 7,29-7,35 (m, 2H), 7,73 (d, 1H), 9,53 (s, 1H).

Exemplo 22A

[313] Ácido 4-(4-ciano-2-metoxifenil)-5-etóxi-2-metil-1,4-di-hidro-1,6-naftiridin-3-carboxílico

[314] 7,20 g (17,21 mmols) do composto do exemplo 21A são dis- solvidos em 200 mL de 1,2-dimetoxietano/ água (3:1 v/v), misturados com 34,42 mL (34,42 mmols) de solução de hidróxido de sódio 1 N e agitados durante a noite sob temperatura ambiente. O preparado é, a seguir, misturado com 100 mL de dietiléster e 100 mL de água, a fase orgânica é separada e a fase aquosa é ajustada em pH 4-5 com ácido clorídrico 1 N. A suspensão resultante é agitada durante 1 hora e o sólido precipitado é, a seguir, separado por filtração. O precipitado é lavado com água e um pouco de dietiléter. Após a secagem no vácuo a 40°C no vácuo são obtidos 3,57 g (57% da teoria) do composto do título.

[315] LC-MS (método 7): Tr = 2,32 min; MS (EIpos): m/z = 366 [M+H]+

[316] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1,12 (t, 3H), 2,28 (s, 3H), 3,74 (s, 3H), 4,07 (m, 2H), 5,33 (s, 1H), 6,44 (d, 1H), 7,23-7,29 (m, 2H), 7,32 (s, 1H), 7,70 (d, 1H), 9,25 (s, 1H), 11,34 (s, 1H).

Exemplo 23A

[317] 4-[5-etóxi-3-(1H-imidazol-1-ilcarbonil)-2-metil-1,4-di-hidro-1,6-naftiridin-4-il]-3-metoxibenzonitrila

[318] 1,20 g (3,28 mmols) do composto do exemplo 22A são introduzidos em 25 mL de etiléster de ácido acético, misturados com 0,666 g (4,11 mmols) de 1,1'-carbonildi-imidazol e a seguir agitados durante a noite sob temperatura ambiente. A mistura reacional é concentrada no vaporizador rotativo e o produto bruto assim obtido é usado sem purificação para outras reações.

[319] MS (EIpos): m/z = 416 [M+H]+.

Exemplo 24A

[320] 2-cianoetil 2-(4-ciano-2-metoxibenziliden)-3-oxobutanoato

[321] 3,00 g (18,62 mmols) do composto do exemplo 10A, 3,18 g (20,48 mmols) de 2-cianoetil-3-oxobutanoato [Yamamoto, T., et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 16, 798-802 (2006)], 213 μl (3,72 mmols) de ácido acético e 368 μl (3,72 mmols) de piperidina são dissolvidos em 50 mL de diclorometano anidro e agitados no separador de água durante a noite sob refluxo. Os componentes voláteis são, a seguir, separados no evaporador rotativo e o resíduo é purificado por cromatografia de coluna (sílica-gel; eluente: gradiente ciclo-hexano/ etiléster de ácido acético 7:3 → 1:1). São obtidos 2,77 g (48% da teoria) do composto do título como mistura dos isômeros E/Z.

[322] LC-MS (método 7): Tr = 2,89 e 3,00 min; MS (EIpos): m/z = 299 [M+H]+.

Exemplo 25A

[323] 2-cianoetil 4-(4-ciano-2-metoxifenil)-2,7-dimetil-5-oxo-1,4,5,6-tetra-hidro-1,6-naftiridin-3-carboxilato

[324] 1,49 g (5,00 mmols) do composto do exemplo 24A são adicionados a 30 mL de 2-propanol, misturados com 620 mg (5,00 mmols) de 4-amino-6-metilpiridin-2(1H)-ona [Bisagni, E., Hung, N.C., Synthesis, 765766 (1984)] e a seguir agitados sob temperatura de refluxo durante a noite. Após resfriamento, o precipitado é separado por filtração, lavado com dietiléter e seco no alto vácuo. São obtidos 1,53 g (76% da teoria) do composto do título.

[325] LC-MS (método 3): Tr = 1,73 min; MS (EIpos): m/z = 405 [M+H]+

[326] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 2,05 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,78 (m, 2H), 3,74 (s, 3H), 3,96-4,13 (m, 2H), 5,14 (s, 1H), 5,64 (d, 1H), 7,23 (dd, 1H), 7,28-7,33 (m, 2H), 9,22 (s, 1H), 10,82 (s, 1H).

Exemplo 26A

[327] 2-cianoetil 4-(4-ciano-2-metoxifenil)-5-etóxi-2,7-dimetil-1,4-di-hidro-1,6-naftiridin-3-carboxilato

[328] 1,52 g (3,76 mmols) do composto do exemplo 25A são suspensos em 40 mL de trietiléster de ácido ortofórmico e aquecidos até 130°C. A seguir, a mistura reacional é misturada no decorrer de um tempo total de 8 horas, a cada hora com 10 gotas de ácido sulfúrico concentrado. A seguir, durante a noite, é agitado sob idêntica temperatura. O or-toéster em excesso é removido no vaporizador rotativo após o resfriamento e o produto bruto é purificado por cromatografia de colunas (sílica-gel; eluente: ciclo-hexano/ etiléster do ácido acético 1:1). As frações do produto são unificadas, o solvente é eliminado e o resíduo é retomado em um pouco de metanol. O produto que cristaliza é separado por filtração. Após secagem no alto vácuo são obtidos 1,09 g (67% da teoria) do composto do título.

[329] LC-MS (método 3): Tr = 2,23 min; MS (EIpos): m/z = 433 [M+H]+

[330] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1,11 (t, 3H), 2,20 (s, 3H), 2,32 (s, 3H), 2,76 (m, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,97-4,12 (m, 4H), 5,32 (s, 1H), 6,30 (s, 1H), 7,24 (d, 1H), 7,27-7,32 (m, 2H), 9,43 (s, 1H).

Exemplo 27A

[331] Ácido 4-(4-ciano-2-metoxifenil)-5-etóxi-2,7-dimetil-1,4-di-hidro- 1,6-naftiridin-3-carboxílico

[332] 642 mg (2,52 mmols) do composto do exemplo 26A são dissolvidos em 40 mL de 1,2-dimetoxietano/água (3:1 v/v), misturados com 5,04 mL (5,04 mmols) de solução de hidróxido de sódio 1 N e agitados durante a noite sob temperatura ambiente. O preparado é a seguir misturado com 30 mL de dietiléter e 30 mL de água, a fase orgânica é separada e a fase aquosa é ajustada em pH 4-5 com ácido clorídrido 1N. A suspensão resultante é agitada durante 1 hora e o sólido precipitado é a seguir separado por filtração. O precipitado é lavado com água e um pouco de dietiléter. Após secagem no vácuo a 40°C, são obtidos 642 mg (67% da teoria) do composto do título.

[333] LC-MS (método 3): Tr = 1,87 min; MS (EIpos): m/z = 380 [M+H]+

[334] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1,11 (t, 3H), 2,19 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 3,74 (s, 3H), 4,05 (m, 2H), 5,28 (s, 1H), 6,27 (s, 1H), 7,207,28 (m, 2H), 7,31 (s, 1H), 9,17 (s, 1H), 11,31 (s, 1H).

Exemplo 28A

[335] 2-cianoetil 4-(4-ciano-2-metoxifenil)-2,8-dimetil-5-oxo-1,4,5,6-tetra-hidro-1,6-naftiridin-3-carboxilato

[336] 2,69 g (9,00 mmols) do composto do exemplo 24A são adicionados a 45 mL de 2-propanol, misturados com 1,17 g (9,00 mmols) de 4-amino-5-metilpiridin-2(1H)-ona [Bisagni, E., Hung, N.C., Synthesis, 765-766 (1984)] e a seguir agitados durante a noite sob temperatura de refluxo. Após resfriamento, o precipitado é separado por filtração, lavado com dietiléter e seco no alto vácuo. São obtidos 2,22 g (61% da teoria) do composto do título.

[337] LC-MS (método 3): Tr = 1,75 min; MS (EIpos): m/z = 405 [M+H]+

[338] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 2,03 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 2,80 (m, 2H), 3,74 (s, 3H), 4,04 (m, 1H), 4,11 (m, 1H), 5,20 (s, 1H), 6,95 (s, 1H), 7,23 (dd, 1H), 7,28-7,33 (m, 2H), 8,18 (s, 1H), 10,76 (s, 1H).

Exemplo 29A

[339] 2-cianoetil 4-(4-ciano-2-metoxifenil)-5-etóxi-2,8-dimetil-1,4-di-hidro-1,6-naftiridin-3-carboxilato

[340] 2,22 g (5,44 mmols) do composto do exemplo 28A são sus- pensos em 100 mL de trietiléster de ácido ortofórmico e aquecidos até 130°C. A seguir, a mistura reacional é misturada no decorrer de um período total de 8 horas, a cada hora com 10 gotas de ácido sulfúrico concentrado. A seguir, durante a noite, é agitado sob idêntica temperatura. O ortoéster em excesso é removido no evapoador rotativo após resfriamento e o produto bruto é purificado por cromatografia de colunas (sílica-gel; eluente: primeiro diclorometano, depois isohexano/etiléster do ácido acé- tico 1:1).As frações do produto são unificadas, o solvente é eliminado e o resíduo é cristalizado a partir de etiléster do ácido acético/ dietiléter. O precipitado é separado por filtração e seco no alto vácuo. São obtidos 1,80 g (77% da teoria) do composto do título.

[341] LC-MS (método 6): Tr = 3,02 min; MS (EIpos): m/z = 433 [M+H]+

[342] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1,11 (t, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,42 (s, 3H), 2,78 (m, 2H), 3,77 (s, 3H), 4,01-4,13 (m, 4H), 5,37 (s, 1H), 7,25 (d, 1H), 7,28-7,33 (m, 2H), 7,60 (s, 1H), 8,35 (s, 1H).

Exemplo 30A

[343] Ácido 4-(4-ciano-2-metoxifenil)-5-etóxi-2,8-dimetil-1,4-di-hidro-1,6-naftiridin-3-carboxílico

[344] 1,75 g (4,05 mmols) do composto do exemplo 29A são dissolvidos em 60 mL de 1,2-dimetoxietano/ água (2:1 v/v), misturados com 8,09 mL (8,09 mmols) de solução de hidróxido de sódio 1 N e agitado durante 1 hora sob temperatura ambiente. O preparado é então misturado com 30 mL de dietiléter e a fase aquosa acidulada com ácido clorídrico 6N. O precipitado resultante é separado por filtração e lavado com água bem como com um pouco de dietiléter. Após secagem a 40°C no secador a vácuo são obtidos 1,47 g (96% da teoria) do composto do título.

[345] LC-MS (método 7): Tr = 2,50 min; MS (EIpos): m/z = 380 [M+H]+

[346] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1,14 (t, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,37 (s, 3H), 3,73 (s, 3H), 4,04 (m, 2H), 5,33 (s, 1H), 7,26 (m, 2H), 7,32 (s, 1H), 7,57 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 11,43 (br, s, 1H).

Exemplo 31A

[347] 2-cianoetil 2-metil-4-(2-metil-4-oxo-4H-cromen-8-il)-5-oxo- 1,4,5,6-tetra-hidro-1,6-naftiridin-3-carboxilato

[348] 3,00 g (15,94 mmols) do composto do Exemplo 5A, 1,75 g (15,94 mmols) de 4-aminopiridin-2(1H)-ona [Searls, T., McLaughlin, L.W., Tetrahedron 55, 11985-11996 (1999)] e 2,47 g (15,94 mmols) de 2-cianoetil-3-oxobutanoato [Yamamoto, T., et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 16, 798-802 (2006)] são dissolvidos em 60 mL de etanol e agitados durante a noite sob argônio a temperatura de refluxo. O produto precipitado é separado por filtração, lavado com etanol e dietiléter e seco no alto vácuo. São obtidos 2,30 g (35% da teoria) do composto do título sob forma de cristais beges.

[349] LC-MS (método 7): Tr = 1,59 min; MS (EIpos): m/z = 418 [M+H]+.

Exemplo 32A

[350] 2-cianoetil 5-etóxi-2-metil-4-(2-metil-4-oxo-4H-cromen-8-il)- 1,4-di-hidro-1,6-naftiridina-3-carboxilato

[351] 2,20 g (5,27 mmols) do composto do exemplo 31A são suspensos em 80 mL de trietiléster do ácido ortofórmico e aquecidos até 130°C. A seguir, a mistura reacional é misturada, no decorrer de um período total de 8 horas, a cada hora com 5 gotas de ácido sulfúrico concentrado. A seguir, durante a noite, é agitado sob idêntica temperatura. O ortoéster em excesso é removido no vaporizador rotativo após o resfriamento e o produto bruto é purificado por cromatografia de colunas (sílica-gel; eluente: primeiro diclorometano, depois etiléster de ácido acético, e por último etiléster de ácido acético/ metanol 20:1). As frações do produto são concentradas até um volume de cerca de 5 ml. O produto precipitado é separado por filtração e após lavagem com etilester de ácido acético e dietiléter é seco no alto vácuo. São obtidos 282 mg (12% da teoria) do composto do título sob forma de cristais castanhos.

[352] LC-MS (método 3): Tr = 1,96 min; MS (EIpos): m/z = 446 [M+H]+

[353] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1,01 (t, 3H), 2,38 (s, 6H), 2,74 (m, 2H), 3,96-4,13 (m, 4H), 5,54 (s, 1H), 6,19 (s, 1H), 6,53 (d, 1H), 7,31 (t, 1H), 7,67 (dd, 1H), 7,76 (d, 1H), 7,80 (dd, 1H), 9,69 (s, 1H).

Exemplo 33A

[354] Ácido 5-etóxi-2-metil-4-(2-metil-4-oxo-4H-cromen-8-il)-1,4-di-hidro-1,6-naftiridin-3-carboxílico

[355] 270 mg (0,61 mmol) do composto do exemplo 32A são dis- solvidos em 15 mL de 1,2-dimetoxietano/água (2:1 v/v), misturados com 1,21 mL (1,21 mmol) de solução de hidróxido de sódio 1 N, e agitados durante 1 h sob temperatura ambiente. A mistura reacional é então mis- turada com 30 mL de dietiléter. A fase aquosa é separada e acidulada com ácido clorídrico 1 N. O precipitado formado é separado por filtração e lavado com água e um pouco de dietiléter. Após secagem no vácuo a 40°C são obtidos 167 mg (70% da teoria) do composto do título.

[356] LC-MS (método 7): Tr = 2,01 min; MS (EIpos): m/z = 393 [M+H]+

[357] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1,02 (t, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 3,97 (m, 1H), 4,08 (m, 1H), 5,52 (s, 1H), 6,18 (s, 1H), 6,50 (d, 1H), 7,31 (t, 1H), 7,60 (dd, 1H), 7,74 (d, 1H), 7,79 (dd, 1H), 9,42 (s, 1H), 11,45 (br, s, 1H).

Exemplo 34A

[358] 2-cianoetil 4-[4-bromo-2-(trifluormetóxi)fenil]-2-metil-5-oxo- 1,4,5,6-tetra-hidro-1,6-naftiridin-3-carboxilato

[359] 10,00 g (31,17 mmols) do composto do exemplo 6A e 6,41 g (31,17 mmols) de 2-cianoetil-3-oxobutanoato [Yamamoto, T., et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 16, 798-802 (2006)] são introduzidos em 100 mL de 2-propanol, misturados com 4,09 g (37,17 mmols) de 4-aminopiridin-2(1H)-ona [Searls, T., McLaughlin, L.W., Tetrahedron 55, 11985-11996 (1999)] e a seguir agitado durante 3 dias a temperatura de refluxo. Após resfriamento, o solvente é removido sob pressão reduzida e o produto bruto purificado por cromatografia de colunas (sílica-gel; eluente: diclorometano/metanol 10:1). São obtidos 7,38 g (36% da teoria) do composto do título.

[360] LC-MS (método 6): Tr = 2,84 min; MS (EIpos): m/z = 499 [M+H]+.

Exemplo 35A

[361] 2-cianoetil 4-[4-bromo-2-(trifluormetóxi)fenil]-5-etóxi-2-metil- 1,4-di-hidro-1,6-naftiridin-3-carboxilato

[362] 7,30 g (13,19 mmols) do composto do exemplo 34A são suspensos em 150 mL de trietiléster de ácido ortoformico e aquecidos até 130°C. A seguir, a mistura reacional é misturada no decorrer de um período total de 7 horas, a cada hora com 15 gotas de ácido sulfúrico concentrado. Em seguida, durante a noite, é agitado sob idêntica temperatura. O ortoéster em excesso é removido no evaporador rotativo após o resfriamento e o produto bruto é purificado com cromatografia de colunas (sílica-gel; eluente: ciclo-hexano/ etiléster de ácido acético 1:1). São obtidos 4,59 g (64% da teoria) do composto do título.

[363] LC-MS (método 3): Tr = 2,74 min; MS (EIpos): m/z = 527 [M+H]+

[364] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1,17 (t, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,81 (m, 2H), 3,99-4,21 (m, 4H), 5,29 (s, 1H), 6,50 (d, 1H), 7,31 (t, 1H), 7,37 (d, 1H), 7,44 (dd, 1H), 7,78 (d, 1H), 9,63 (s, 1H).

Exemplo 36A

[365] 2-cianoetil 4-[4-ciano-2-(trifluormetóxi)fenil]-5-etóxi-2-metil- 1,4-di-hidro-1,6-naftiridin-3-carboxilato

[366] 4,59 g (8,72 mmols) do composto do exemplo 35A, 758 mg (6,45 mmols) de cianeto de zinco e 504 mg (0,436 mmol) de tetra-quis(trifenilfosfina)paladio(0) são dissolvidos em 40 mL de DMF e, a seguir, divididos em três preparados são aquecidos em um microondas simples (Emrys Opzimizer) durante 5 minutos a 220°C. Os preparados individuais são, depois disto, novamente unificados e o solve-ne é eliminado no evaporador rotativo. O produto bruto é retomado em etiléster de ácido acético e filtrado sobre terra diatomácea. A fase orgânica é lavada com com água (2 x) e com solução saturada de cloreto de sódio. Após eliminação do solvente por destilação, o produto bruto é purificado por cromatografia de colunas (sílica-gel; eluente: ciclohexano/ etiléster de ácido acético 7:3 → 1:1). São obtidos 1,40 g (31% da teoria) do composto do título.

[367] LC-MS (método 3): Tr = 2,48 min; MS (EIpos): m/z = 473 [M+H]+

[368] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1,10 (t, 3H), 2,34 (s, 3H), 2,80 (m, 2H), 4,00-4,21 (m, 4H), 5,36 (s, 1H), 6,51 (d, 1H), 7,60 (d, 1H), 7,66-7,74 (2H), 7,79 (d, 1H), 9,70 (s, 1H).

Exemplo 37A

[369] Ácido 4-[4-ciano-2-(trifluormetóxi)fenil]-5-etóxi-2-metil-1,4-di-hidro-1,6-naftiridin-3-carboxílico

[370] 1400 mg (2,96 mmols) do composto do exemplo 36A são dissolvidos em 35 mL de 1,2-dimetoxietano/água (2,5:1 v/v), misturados com 5,93 mL (5,93 mmols) de solução de hidróxido de sódio 1 N e agitados durante 2 h sob temperatura ambiente. A mistura reacional é então misturada com 50 mL de dietiléter e 50 mL de água. A fase aquosa é separada e o valor pH é ajustado em 4-5 com ácido clorídrico 1N. A suspensão resultante é a seguir agitada durante 1 h. O precipitado formado é separado por filtração e lavado com água e um pouco de dietiléter. Após secagem no vácuo são obtidos 850 mg (68% da teoria) do composto do título.

[371] LC-MS (método 3): Tr = 2,19 min; MS (EIpos): m/z = 420 [M+H]+

[372] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1,11 (t, 3H), 2,31 (s, 3H), 4,06 (m, 1H), 4,13 (m, 1H), 5,37 (s, 1H), 6,49 (d, 1H), 7,51 (d, 1H), 7,65-7,72 (m, 2H), 7,76 (d, 1H), 9,42 (s, 1H), 11,62 (s, 1H).

Exemplo 38A

[373] Ácido 4-(4-ciano-2-metoxifenil)-5-etóxi-2-(trifluormetil)-1,4-di-hidro-1,6-naftiridin-3-carboxílico

[374] O composto do título pode ser obtido a partir de quantidades estequiométricas de 4-formil-3-metoxibenzonitrila (exemplo 10A), 4-aminopiridin-2(1H)-ona [Searls, T., McLaughlin, L.W., Tetrahedron 55, 11985-11996 (1999)] e alil 4,4,4-trifluor-3-oxobutanoato [Moseley, J.D., Tetrahedron Lett, 46, 3179-3181 (2005)]. Para isto, é efetuada inicialmente, durante a noite sob temperatura de refluxo, a síntese de di-hidropiridina em etanol sem adição de aditivos. O produto intermediário precipitado inicial alil 4-(4-ciano-2-metoxifenil)-2-hidróxi-5-oxo-2-(trifluormetil)-1,2,3,4,5,6-hexahidro-1,6-naftiridin-3-carboxilato pode então ser dessidratado com ácido acético baseado em um processo da literatura [compare Moseley, J.D., Tetrahedron Lett. 46, 3179-3181 (2005)]. A seguir, de modo análogo à síntese do exemplo 29A, pode ser obtido alil 4-(4-ciano-2-metoxifenil)-5-etóxi-2-(trifluormetil)-1,4-di-hidro-1,6-naftiridin-3-carboxilato pela reação com trietil ortoformiato. Subsequente dissociação de alilester usando catalisador Wilkinson [cloreto de tris(trifenilfosfina)rodio(I)] em ácido acético fornece o composto do título [compare Moseley, J.D., Tetrahedron Lett. 46, 31793181 (2005)].

[375] LC-MS (método 7): Tr = 2,98 min; MS (EIpos): m/z = 420 [M+H]+

[376] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1,09 (t, 3H), 3,77 (s, 3H), 3,98-4,16 (m, 2H), 5,37 (s, 1H), 6,73 (d, 1H), 7,19 (d, 1H), 7,34 (dd, 1H), 7,42 (d, 1H), 7,78 (d, 1H), 9,62 (s, 1H).

Exemplo 39A

[377] 2-cianoetil 2,8-dimetil-4-(2-metil-4-oxo-4H-cromen-8-il)-5-oxo-1,4,5,6-tetra-hidro-1,6-naftiridin-3-carboxilato

[378] 1,50 g (7,97 mmols) do composto do exemplo 5A, 1,86 g (9,57 mmols) de 2-cianoetil-3-oxobutanoato [Yamamoto, T., et al., Bioorg. Med. Chem., Lett. 16, 798-802 (2006)], 91 μl (1,59 mmol) de ácido acético bem como 158 μl (1,59 mmol) de piperidina são dissolvidos em 30 mL de diclorometano anidro e agitados sob refluxo no dissociador de água durante a noite. Em seguida é lavado com água, a fase orgânica é seca com sulfato de magnésio e os componentes voláteis eliminados no evaporador rotativo. 2,91 g (ca. 7,33 mmols) do produto bruto 2-cianoetil-(2Z)-2-[(2-metil-4-oxo-4H-cromen-8-il)metilideno] -3- oxobutanoato assim obtido são misturados com 0,990 g (9,00 mmols) de 4-amino-5-metilpiridin-2(1H)-ona [Bisagni, E., Hung, N.C., Synthe-sis, 765-766 (1984)], retomados em 40 mL de 2-propanol e agitados durante a noite sob temperatura de refluxo. Após esfriamento, o precipitado formado é separado por filtração e lavado com um pouco de dietiléter. Após secagem no alto vácuo são obtidos 1,20 g (38% da teoria) do composto do título.

[379] LC-MS (método 8): Tr = 1,00 min; MS (EIpos): m/z = 432 [M+H]+

[380] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 2,06 (s, 3H), 2,34 (s, 3H), 2,44 (s, 3H), 2,77 (m, 2H), 3,98-4,14 (m, 2H), 5,76 (s, 1H), 6,15 (s, 1H), 6,98 (s, 1H), 7,28 (t, 1H), 7,71 (dd, 1H), 7,78 (dd, 1H), 8,29 (s, 1H), 10,78 (br, s, 1H).

Exemplo 40A

[381] 2-cianoetil 5-etóxi-2,8-dimetil-4-(2-metil-4-oxo-4H-cromen-8-il)-1,4-di-hidro-1,6-naftiridin-3-carboxilato

[382] 1,20 g (2,78 mmols) do composto do Exemplo 39A e 9,25 mL (55,6 mmols) de trietiléster de ácido ortofórmico são absorvidos em 30 mL de DMF seco, aquecidos até 130°C e misturados com 5 gotas de ácido sulfúrico concentrado. Após 2 horas o controle HPLC mostra completa conversão. Após resfriamento os componentes voláteis são eliminados no evaporador rotativo e o produto bruto é purificado por MPLC (cartucho Biotage 40 M, eluente: isohexano/acetato de etila 1:2). São obtidos 640 mg (50% da teoria) do composto do título.

[383] LC-MS (método 9): Tr = 0,99 min; MS (EIpos): m/z = 460 [M+H]+

[384] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1,01 (t, 3H), 2,19 (s, 3H), 2,38 (s, 3H), 2,48 (s, 3H), 2,75 (m, 2H), 3,93-4,14 (m, 4H), 5,55 (s, 1H), 6,18 (s, 1H), 7,30 (t, 1H), 7,63 (s, 1H), 7,67 (dd, 1H), 7,79 (dd, 1H), 8,49 (s, 1H).

Exemplo 41A

[385] Ácido 5-etóxi-2,8-dimetil-4-(2-metil-4-oxo-4H-cromen-8-il)-1,4-di-hidro-1,6-naftiridin-3-carboxílico

[386] 640 mg (1,39 mmol) do composto do Exemplo 40A são dissolvidos em 30 mL de 1,2-dimetoxietano/água (2:1 v/v), misturados com 2,76 mL (2,76 mmols) de solução de hidróxido de sódio 1 N e agitados durante 30 minutos sob temperatura ambiente. A mistura reacional é a seguir misturada com 20 mL de dietiléter. A fase aquosa é separada, ajustada em um valor pH de 4-5 com ácido clorídrico 1 N e extraído 3 vezes com etiléster de ácido acético. As fases orgânicas são unificadas e secas com sulfato de magnésio. Os componentes voláteis são separados no evaporador rotativo. Após secagem no vácuo são obtidos 335 mg (56% da teoria) do produto do título com pureza de 94% (LC-MS).

[387] LC-MS (método 8): Tr = 1,21 min; MS (EIpos): m/z = 407 [M+H]+

[388] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1,01 (t, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 2,42 (s, 3H), 3,90-4,10 (m, 2H), 5,54 (s, 1H), 6,18 (s, 1H), 7,31 (t, 1H), 7,58 (dd, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,78 (dd, 1H), 8,25 (s, 1H), 11,52 (br, s, 1H).

Exemplos de execução Exemplo 1

[389] 4-(4-ciano-2-metoxifenil)-5-etóxi-2-metil-1,4-di-hidro-1,6-naftiridin-3-carboxamida

[390] 100 mg (ca. 0,24 mmol) do composto do Exemplo 23A são introduzidos em 3 mL de DMF. A seguir, são misturados com 2,94 mg (0,024 mmol) de 4-N,N-dimetilaminopiridina e 340 μl de amoníaco (solução a 28% em peso em água, 2,41 mmols) e temperado durante 3 horas a 100°C. Após resfriamento o produto bruto é diretamente purificado com HPLC preparativo (eluente: acetonitrila/água com 0,1% de ácido fórmico, gradiente 20:80 → 95:5). São obtidos 32 mg (37% da teoria) do composto do título.

[391] LC-MS (método 3): Tr = 1,57 min; MS (EIpos): m/z = 365 [M+H]+

[392] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1,07 (t, 3H), 2,13 (s, 3H), 3,83 (s, 3H), 4,04 (m, 2H), 5,36 (s, 1H), 6,42 (d, 1H), 6,66 (br. s, 2H), 7,18 (d, 1H), 7,29 (dd, 1H), 7,38 (d, 1H), 7,67 (d, 1H), 8,80 (s, 1H).

Exemplo 2

[393] 4-(4-ciano-2-metoxifenil)-5-etóxi-2,7-dimetil-1,4-di-hidro-1,6-naftiridin-3-carboxamida

[394] 640 mg (1,69 mmol) do composto do Exemplo 27A são introduzidos em 30 mL de etiléster do ácido acético, misturados com 342 mg (2,11 mmols) de 1,1'-carbonildi-imidazol e a seguir agitados durante a noite sob temperatura ambiente. Um controle DC (sílica-gel; eluente: ciclo-hexano/etiléster de ácido acético 1:1 ou diclorometa-no/metanol 9:1) mostra a conversão completa.

[395] Os componentes voláteis são removidos no evaporador rotativo e o resíduo é retomado em 20 mL de DMF. A seguir são adicionados 2,36 mL de amoníaco (soluçãoo a 28% em peso em água, 16,87 mmols) e a mistura reacional é temperada duante 8 horas a 50°C. O solvente é separado por destilação sob pressão reduzida e o resíduo é purificado com HPLC preparativo (eluente: acetonitrila/água com 0,1% de ácido fórmico, gradiente 20:80 → 95:5). São obtidos 368 mg (58% da teoria) do composto do título.

[396] LC-MS (método 7): Tr = 1,91 min; MS (EIpos): m/z = 379 [M+H]+

[397] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1,05 (t, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 3,84 (s, 3H), 4,02 (q, 2H), 5,32 (s, 1H), 6,25 (s, 1H), 6,62 (br, s, 2H), 7,16 (d, 1H), 7,28 (dd, 1H), 7,37 (d, 1H), 8,71 (s, 1H).

Exemplo 3

[398] ent-4-(4-ciano-2-metoxifenil)-5-etóxi-2,7-dimetil-1,4-di-hidro- 1,6-naftiridin-3-carboxamida [(-)-enantiomero e (+)-enantiomero]

[399] O racemato do Exemplo 2 pode ser fracionado em escala preparativa por HPLC em fase quiral em seus enantiômeros [coluna: Chiralpak IA, 250 mm x 20 mm; eluente: metil- terc-butileter/metanol 85:15 (v/v); fluxo: 15 ml/min; temperatura: 30°C; detecção UV: 220 nm].

[400] (-)-Enantiômero:

[401] HPLC: Tr = 5,28 min, ee >98% [coluna: Chiralpak IA, 250 mm x 4,6 mm; eluente: metil-terc.butileter/metanol 80:20 (v/v); fluxo: 1 ml/min; temperatura: 25°C; detecção UV: 220 nm];

[402] valor específico de rotação (clorofórmio, 589 nm, 19,8°C, c = 0,50500 g / 100 ml): -239,3°.

[403] Uma análise monocristal de estrutura de raios-X revelou uma configuração-S no átomo-C* para este enentiômero.

[404] (+)-Enantiômero:

[405] HPLC: Tr = 4,50 min, ee >99 % [coluna: Chiralpak IA, 250 mm x 4,6 mm; eluente: metil-terc-butileter/metanol 80:20 (v/v); fluxo: 1 ml/min; temperatura: 25°C; detecção UV: 220 nm];

[406] valor específico de rotação (clorofórmio, 589 nm, 20°C, c = 0,51000 g / 100 ml): +222,7°.

Exemplo 4

[407] 4-(4-ciano-2-metoxifenil)-5-etóxi-2,8-dimetil-1,4-di-hidro-1,6-naftiridin-3-carboxamida

[408] 1,46 g (3,84 mmols) do composto do Exemplo 30A são in- troduzidos em 50 mL de etiléster de ácido acético e misturados com 777 mg (4,79 mmols) de 1,1'-carbonildi-imidazol e a seguir agitados durante a noite sob temperatura ambiente. Um controle DC (sílica-gel; eluente: etiléster de ácido acético) mostra completa conversão. Os componentes voláteis são eliminados no evaporador rotativo e o resíduo é retomado em 20 mL de DMF.

[409] A seguir são adicionados 10,74 mL de amoníaco (solução a 28% em peso de água, 76,8 mmols) e a mistura reacional é aquecida a 100°C durante 30 min. O solvente é eliminado por destilação sob pressão reduzida e o resíduo é purificado com HPLC preparativo (eluente: acetonitrila/água com 0,1% de ácido fórmico, gradiente 20:80 →95:5). Após a concentração das frações do produto o resíduo é diluido em 40 mL de diclorometano/metanol (1:1 v/v) e misturado com 100 mL de etiléster de ácido acético. O solvente é concentrado para um volume de cerca de 20 ml, sendo que o produto cristaliza. O precipitado é separado por filtração e lavado com um pouco de dietiléter. Após secagem a 40°C no secador a vácuo são obtidos 1,40 g (96% da teoria) do composto do título.

[410] LC-MS (método 3): Tr = 1,64 min; MS (EIpos): m/z = 379 [M+H]+

[411] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1,05 (t, 3H), 2,12 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 3,82 (s, 3H), 3,99-4,07 (m, 2H), 5,37 (s, 1H), 6,60-6,84 (m, 2H), 7,14 (d, 1H), 7,28 (dd, 1H), 7,37 (d, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,69 (s, 1H).

Exemplo 5

[412] ent-4-(4-ciano-2-metoxifenil)-5-etóxi-2,8-dimetil-1,4-di-hidro- 1,6-naftiridin-3-carboxamida [(-)-enantiômero e (+)-enantiômero]

[413] O racemato do Exemplo 4 pode ser fracionado em escala preparativa por HPLC em fase quiral em seus enantiômeros [coluna: 680 mm x 40 mm; fase sílica-gel com base no seletor quiral poli(N-metacriloil-D-leucin-diciclopropilmetilamida; eluente: etiléster de ácido acético; temperatura 24°C; fluxo: 80 ml/min; detecção UV: 260 nm].

[414] (-)-Enantiômero:

[415] HPLC: Tr = 2,48 min, ee >99,6% [coluna: 250 mm x 4,6 mm; fase sílica-gel com base no seletor quiral poli(N-metacriloil-D-leucin-diciclopropilmetilamida; eluente: etiléster de ácido acético; temperatura: 24°C; fluxo: 2 ml/min; detecção UV: 20 nm];

[416] valor específico de rotação (clorofórmio, 589 nm, 19,7°C, c = 0,38600 g/100 ml): -148,8°.

[417] Uma análise estrutural de monocristal por raios-X revelou uma configuração-S no átomo-C* para este enentiômero.

[418] (+)-Enantiômero:

[419] HPLC: Tr = 4,04 min, ee >99,3 % [coluna: 250 mm x 4,6 mm; fase sílica-gel com base no seletor quiral poli(N-metacriloil-D-leucin-diciclopropilmetilamida; eluente: etiléster de ácido acético; temperatura: 24°C; fluxo: 2 ml/min; detecção UV: 260 nm];

[420] valor específico de rotação (clorofórmio, 589 nm, 19,8°C, c = 0,36300 g / 100 ml): +153,0°.

Exemplo 6

[421] 5-etóxi-2-metil-4-(2-metil-4-oxo-4H-cromen-8-il)-1,4-di-hidro-1,6-naftiridin-3-carboxamida

[422] 155 mg (0,395 mmol) do composto do Exemplo 31A são in- troduzidos em 10 mL de THF, misturados com 80,1 mg (0,494 mmol) de 1,1'-carbonildi-imidazol e a seguir agitado durante a noite sob temperatu- ra ambiente. Um controle DC (sílica-gel; eluente: etiléster de ácido acético ou diclorometano/metanol 9:1) mostra completa conversão. Os componentes voláteis são eliminados no evaporador rotativo e o resíduo é retomado em 3 mL de DMF. A seguir, são adicionados 553 mg de amoníaco (solução a 28% em peso em água, 3,95 mmols) e a mistura reacional é temperada 10 minutos a 100°C. O solvente é eliminado sob pressão reduzida e o resíduo é purificado com HPLC preparativo (eluente: acetonitrila/água com 0,1% de ácido fórmico, gradiente 20:80 → 95:5). São obtidos 30 mg (19% da teoria) do composto do título.

[423] LC-MS (método 6): Tr = 1,17 min; MS (EIpos): m/z = 392 [M+H]+

[424] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 0,96 (t, 3H), 2,09 (s, 3H), 2,36 (s, 3H), 3,94 (m, 1H), 4,03 (m, 1H), 5,59 (s, 1H), 6,19 (s, 1H), 6,42 (d, 1H), 6,66 (br, s, 1H), 7,00 (br. s, 1H), 7,31 (t, 1H), 7,53 (dd, 1H), 7,68 (d, 1H), 7,79 (dd, 1H), 8,83 (s, 1H).

Exemplo 7

[425] 4-[4-Ciano-2-(trifluormetóxi)fenil]-5-etóxi-2-metil-1,4-di-hidro-1,6-naftiridin-3-carboxamida

[426] 200 mg (0,477 mmol) do composto do Exemplo 37A são introduzidos em 5 mL de etiléster de ácido acético, misturados com 96,7 mg (0,596 mmol) de 1,1'-carbonildi-imidazol e, a seguir, agitado durante a noite sob temperatura ambiente (controle DC: reação insuficiente). A seguir, é adicionado 1 mL de DMF e agitado durante mais uma noite a temperatura ambinte (controle DC: conversão total). Os componentes voláteis são eliminados no evaporador rotativo e o resíduo é retomado em 4 mL de DMF. A seguir, são adicionados 663 μl de amoníaco (solução a 28% em peso em água, 4,77 mmols) e a mistura reacional é temperada durante a noite em um recipiente fechado a 100°C. Após resfriamento o solvente é eliminado sob pressão reduzida e o resíduo purificado com HPLC preparativo (eluente: acetonitri-la/água com 0,1% de ácido fórmico, gradiente 20:80 → 95:5). São obtidos 140 mg (70% da teoria) do composto do título.

[427] LC-MS (método 6): Tr = 2,26 min; MS (EIpos): m/z = 419 [M+H]+

[428] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1,04 (t, 3H), 2,04 (s, 3H), 4,06 (m, 2H), 5,42 (s, 1H), 6,41 (d, 1H), 6,80 (br. s, 1H), 6,97 (br. s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,68-7,74 (m, 3H), 8,82 (d, 1H).

Exemplo 8

[429] 4-(4-ciano-2-metoxifenil)-5-etóxi-2-(trifluormetil)-1,4-di-hidro- 1,6-naftiridin-3-carboxamida

[430] 180 mg (0,429 mmol) do composto do Exemplo 38A são introduzidos em 5 mL de etiléster de ácido acético, misturados com 87,0 mg (0,537 mmol) de 1,1'-carbonildi-imidazol e a seguir agitados durante 2 horas sob temperatura ambiente. Pelo controle DC verifica-se a completa conversão. Os componentes voláteis são eliminados no evaporador rotativo e o resíduo é retomado em 4 mL de DMF. A seguir são adicionados 597 μl de amoníaco (solução a 28% em peso em água, 4,29 mmols) e a mistura reacional é temperada durante 3 horas em um recipiente fechado a 100°C. Após resfriamento, o solvente é eliminado sob pressão reduzida e o resíduo é purificado com HPLC preparativo (eluente: acetonitrila/água com 0,1% de ácido fórmico, gradiente 20:80 → 95:5). São obtidos 10 mg (5% da teoria) do composto do título.

[431] LC-MS (método 3): Tr = 1,85 min; MS (EIpos): m/z = 419 [M+H]+

[432] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 1,03 (t, 3H), 3,79 (s, 3H), 3,96-4,11 (m, 2H), 5,37 (s, 1H), 6,62 (d, 1H), 7,08-7,14 (m, 2H), 7,32 (dd, 1H), 7,37-7,46 (m, 2H), 7,73 (d, 1H), 9,18 (s, 1H).

Exemplo 9

[433] 5-etóxi-2,8-dimetil-4-(2-metil-4-oxo-4H-cromen-8-il)-1,4-di-hidro-1,6-naftiridin-3-carboxamida

[434] 335,0 mg (0,824 mmol) do composto do Exemplo 41A são introduzidos em 10 mL etiléster de ácido acético e são misturados com 167,1 mg (0,537 mmol) de 1,1'-carbonildi-imidazol. A seguir a suspensão é agitada durante a noite sob temperatura ambiente. Já que não resulta em solução clara, são adicionados 2 mL de DMF e a mistura é agitada sob temperatura ambiente durante outras 2 horas. Pelo controle DC pode ser verificada a completa conversão. Os componentes voláteis são eliminados em um evaporador rotativo e o resíduo é retomado em 4 mL de DMF. A seguir, são adicionados 2,293 mL de amoníaco (solução a 28% em peso em água, 16,5 mmols) e 10,1 mg de 4-N,N-dimetilaminopiridina. A mistura reacional é, a seguir, temperada durante 30 minutos em um recipiente fechado a 100°C. Após resfriamento, o solvente é eliminado sob pressão reduzida e o resíduo é purificado com HPLC preparativo (eluente: acetonitrila/água com 0,1% de ácido fórmico, gradiente 20:80 → 95:5). As frações do produto são concentradas e o resíduo é retomado em um pouco de diclorometano e misturado com di-isobutiléter até o produto tornar-se turvo. O sólido precipitado é isolado e seco no vácuo. São obtidos 207 mg (59% da teoria) do composto do título.

[435] LC-MS (método 9): Tr = 0,67 min; MS (EIpos): m/z = 406 [M+H]+

[436] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ = 0,94 (t, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,34 (s, 3H), 3,90 (m, 1H), 4,00 (m, 1H), 5,58 (s, 1H), 6,18 (s, 1H), 6,70 (br, s, 1H), 7,06 (br. s, 1H), 7,30 (t, 1H), 7,50 (dd, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,78 (dd, 1H).

B. Avaliação da eficácia farmacológica

[437] Abreviações:
DMEM Dulbecco's modified Eagle Medium
DNA ácido desoxiribonucléico
FCS soro bovino fetal
HEPES ácido 4-(2-hidroxietil)-1-piperazin-etanosulfônico
PCR reação da cadeia polimerase
Tris tris-(hidroximetil)-metilamina

[438] As vantajosas propriedades farmacológicas dos compostos de acordo com a invenção podem ser mostradas nos ensaios abaixo:

1. Teste celular in vitro para determinação da atividade inibidora-MR e seletividade-MR em relação a outros receptores do hormônio esteroidal

[439] A identificação de antagonistas do receptor-mineralcorti-coide humano (MR) bem como a quantificação da eficácia dos compostos aqui descritos é feita com auxílio de uma linha celular recombinante. A célula deriva originalmente de uma célula epitelial do ovário de hamster (Chinese Hamster Ovary, CHO K1, ATCC: American Type Culture Collection, VA 20108, USA).

[440] Nesta linha de células CHO K1 é empregado um sistema quimérico estabelecido, no qual os domínios de ligação dos ligantes de receptores de hormônio esteroidal humanos são fundidos nos domínios de ligação de DNA do fator de transcrição de levedo GAL4. As quimeras de receptor de hormônio esteroidal-GAL4 assim produzidas são cotransfectadas nas células CHO com um construtor-reporter e expressas de modo estável.

[441] Clonagem:

[442] Para geração das quimeras do receptor de hormonio este-roidal GAL4, o domínio de ligação do DNA GAL4 (aminoácido 1-147) do vetor pFC2-dbd (firma Stratagene) é clonado com os domínios de ligação dos ligantes PCR amplificados do receptor de mineralcorticoides (MR, aminoácidos 734-985), do receptor glucocorticoide (GR, aminoácidos 443-777), do receptor progesterona (PR, aminoácido 680-933) e do receptor androgênio (AR, aminoácidos 667-919) no vetor pIRES2 (firma Clontech). O construtor-reporter que contém cinco cópias do ponto de ligação-GAL4 intercalado com um promotor de quinase de timidina, leva à expressão da firefly-luciferase (Photinus pyralis) após ativação e ligação da quimera do receptor de hormônio esteroide GAL4 pelos respectivos agonistas específicos aldosterona (MR), dexametasona (GR), progesterona (PR) e di-hidrotestosterona (AR).

[443] Decurso do teste:

[444] Um dia antes do teste as células MR, GR, PR e AR são colocadas em meio (Optimem, 2,5% FCS, 2 mM glutamina, 10 mM HEPES) em placas microtituladas com furos de 96 (ou 384 ou 1536) e mantidas em um incubador de células (96% umidade do ar, 5% v/v de CO2, 37°C). No dia do teste, as substâncias a serem testadas são retomadas nos meios mencionados acima e adicionadas às células. Aproximadamente 10 até 30 minutos após a adição das substâncias de teste são adicionados os respectivos agonistas específicos dos receptores de hormônio esteroidal. Após outro tempo de incubação de 5 até 6 horas a atividade luciferase é medida com auxílio de uma vídeo-câmera. As unidades de luz relativas medidas na dependência da concentração da substância fornecem uma curva de estímulo sigmoidal. O valores IC50 são calculados com auxílio de programas computadorizados GraphPad PRISM (Versão 3.02).

[445] A tabela A mostra os valores-IC50 (MR) de compostos dos exemplos representativos:

2. Teste in vitro para determinar possível atividade de ligação ao canal de cálcio tipo L

[446] Preparações de membranas do córtex cerebral de ratos Wistar são utilizadas como material de partida para teste radioativo de ligação, que é detalhadamente descrito na literatura como teste padrão [Ehlert, F.J., Roeske, W.R., Itoga E., Yamamura, H.I., Life Sci. 30, 2191-2202 (1982); Gould, R.J., Murphy, K.M.M., Snyder, S.H., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 79, 3656-3660] e utilizado na área de pesquisa contratada por fornecedores comerciais (por exemplo, firma MDS Pharma Services). Neste teste de ligação, séries de diluições dos compostos de teste em DMSO são incubadas usualmente por 90 minutos a 25°C em um tampão TrisHCl, 50 mM, pH 7,7, com as preparações de membranas e o ligante nitrenodipina marcados com trítio (0,1 nM) e a ligação específica dos compostos de teste é determinada pela quantificação do ligante especificamente deslocado, marcado radioativamente. Valores IC50 são determinados por uma análise de regressão não linear.

[447] Neste teste de ligação do canal de cálcio tipo-L, é determinado um valor IC50 de 0,3nM para um antagonista-cálcio clássico do tipo di-hidropiridina, como por exemplo nitrenodipina, enquanto exemplos pesquisados dos compostos da presente invenção aqui descritos apresentam valores IC50 de > 1 μΜ e, assim, uma afinidade pelo menos reduzida no fator 3000 em relação ao canal de cálcio do tipo-L. Compostos com afinidade de ligação residual reduzida de te modo para o canal cálcio do tipo-L não mostram in vivo mais nenhum efeito hemodiâmico acentuado transmitido pelo canal de cálcio do tipo-L.

3. Teste in vivo para detectar o efeito cardiovascular: pesquisa de diurese em ratos conscientes em gaiolas de metabolismo

[448] Ratos-Wistar (peso corpóreo 250-350 g) são mantidos com livre acesso à comida (Altromina) e água potável. Aproximadamente 72 horas antes do início do teste os animais recebem no lugar da ração normal, exclusivamente ração com reduzido teor de sal com um teor de 0,02% de cloreto de sódio 0,02% (ssniff R/M-H, 10 mm com 0,02% Na, S0602-E081, firma ssniff Spezialdiäten GmbH, D-59494 Soest). Durante o teste, os animais foram mantidos durante aproximadamente 24 horas em gaiolas de metabolismo individuais apropriadas para ratos desta classe de peso (firma Tecniplast Deutschland GmbH, D-82383 Hohenpeissenberg) com livre acesso à ração com reduzido teor de sal e água para beber. No início do teste, as substâncias a serem testadas foram administradas aos animais por meio de sonda eso-fagiana no estomago em um volume de 0,5 ml/kg de peso corpóreo de um solvente apropriado. Animais de controle receberam somente solvente. Controles e testes das substâncias são feitos paralelamente no mesmo dia. Grupos de controle e grupos de dose da substância con- sistem em cada caso em 3 até 6 animais. A urina excretada pelos animais durante o teste é coletada continuamente em um receptáculo coletor no fundo da caixa. O volume de urina por unidade de tempo é determinado separadamente para cada animal e a concentração dos íons de sódio e de potássio excretados na urina é medida por métodos-padrão de fotometria de chama. A partir dos valores medidos é determinado o quociente sódio/potássio como uma medida para a eficácia da substância. Os intervalos de medição são usualmente o intervalo de até 8 horas após o início do teste (intervalo do dia) e o intervalo de 8 até 24 horas após o início do teste (intervalo da noite). Em um teste modificado, a urina é coletada e medida em intervalos de duas horas durante o intervalo dia. A fim obter quantidade suficiente para este procedimento, uma quantidade definida de água é administrada por sondaesofágica aos animais no início do teste e depois em intervalos de duas horas.

4. DOCA/modelo sal

[449] A administração de acetato de desoxicorticosterona (DOCA) em combinação com uma dieta de muito sal e remoção unilateral de rim induz no rato a um hipertonus, que é caracterizado por nível relativamente baixo de renina. Como consequência desta hipertonia endócrina (DOCA é um precursor direto de aldosterona), dependendo da escolha da concentração da DOCA pode surgir hipertrofia cardíaca e outros danos nos órgãos terminais, por exemplo do rim, que entre outros são caracterizados por proteinúria e esclerose glumérula. Neste modelo para ratos é possível investigar tanto substâncias de teste para detectar a presença de efeito protetor anihipertrófico e efeito protetor de órgãos terminais.

[450] Ratos machos Sprague-Dawley (SD) com aproximadamente 8 semanas de idade (peso corpóreo entre 250 e 300 gramas) são submetidos a uninefrectomia esquerda. Para isto, os ratos são aneste- siados com 1,5-2% de isoflurano em mistura com 66% N2O e 33% O2, e o rim é retirado com laparotomia lateral. Como animais de controles posteriores servem os chamados animais "falso-operados" dos quais não foi retirado o rim.

[451] Ratos-SD uninefrectomizados recebem 1% de cloreto de sódio na água de beber e uma injeção subcutânea semanal de acetato de desoxicorticosterona (dissolvido em óleo de sésamo; firma Sigma) injetado entre as omoplatas (dose alta: 100 mg/kg/semana s.c.; dose normal: 30 mg/kg/semana s.c.).

[452] As substâncias que devem ser examinadas em relação ao seu efeito protetor in vivo são administradas via sonda de alimentação ou junto com a ração (firma Ssniff). Um dia antes do início dos testes, os animais são separados aleatoriamente e são formados grupos com o mesmo número de animais, via de regra n = 10. Durante todo o tempo de teste os animais têm à disposição água para beber e ração ad libidum. As substâncias são administradas uma vez por dia durante 4 -8 semanas por sonda de alimentação ou na ração. Como grupos placebo servem animais que são tratados do mesmo modo, mas recebem ou só o solvente ou só a ração sem substância de teste.

[453] A eficácia das substâncias de teste é determinada por parâmetros de medição hemodinâmica [pressão sanguínea, frequência cardíaca, inotropismo (dp/dt), tempo de relaxamento (tau), pressão máxima ventricular esquerda, pressão ventricular esquerda diastólica-final(LVEDP)], determinação de peso do coração, rim e pulmão, medição da excreção de proteina bem como da medição da expressão genética de biomarcas, (por exemplo, ANP, peptídeos natriuréticos atriais, e BNP, "brain natriuretic peptide") por meio de TA/TaqMan PCR após isolamento-RNA do tecido cardíaco.

[454] A avaliação estatística foi efetuada com "Student's t- test" após exame prévio da variância da homogeneidade.

5. Teste in vivo para detecção de efeito anti-mineralcorticoide em cães anestesiados.

[455] Machos ou fêmeas de cães mestiços (Mongrels, Marshall BioResources, USA) com peso entre 20 e 30 kg são anestesiados com pentobarbital (30 mg/kg via intravenosa; Narcoren®, Merial, Alemanha). Cloreto de alcurônio (3 mg/animal via intravenosa; Alloferin®, ICN Pharmaceuticals, Alemanha) é usado adicionalmente como relaxane muscular. Os cães são intubados e ventilados com uma mistura oxigênio-ar ambiental (40/60 % Vol.) (cerca de 5-6 litros/min). A respiração é feita com uma aparelhagem de respiração da firma Draeger (Sulla 808) e é monitorada com um analisador-CO2 (firma Engström). A anestesia é mantida por infusão constante de pentobarbital (50 μg/kg/min) ou isoflurano (1-2 % Vol.). Como analgésico é usado fentanila (10 μg/kg/h).

[456] O alvo primário de teste é estudar a influência de compostos de teste com atividade receptora antimineralcorticoide sobre as retenções de sódio induzidas por aldosterona. Para isto procede-se de modo análogo a um método publicado [H.P. Ramjoe, U.M. Bucher, J. Richter e M. De Gasparo, Anti-mineralocorticoid activity de three novel aldosterone antagonists in the conscious dog and in man, em: Diuretics II: Chemistry, Pharmacology, and Clinical Applications, J.B. Pus-chett e A. Greenberg (Ed.), Elsevier Science Publishing Co., Inc., 1987]. Uma infusão contínua de aldosterona (0,6 μg/kg/h) conduz após 3 horas a um decréscimo da taxa de sódio/ potássio na urina (a determinação de sódio e de potássio ocorre por fotometria de chama). Como outra infusão de aldosterona a substância de teste é aplicada de modo intravenoso, intraduodenal ou oral. Como controle positivo é usado espironolactona que aumenta a taxa de sódio/ potássio dependente da dosagem na urina.

[457] Para assegurar uma hemodinâmica constante e também abranger os parâmetros de funcionamento cardiovascular, o cão é monitorado hemodinamicamente e instrumentado do seguinte modo:

[458] introdução de um cateter vesical para medir o fluxo da urina e da composição da urina;

[459] colocação de derivações-EKG nas extremidades para medição EKG.

[460] introdução de um tubo Fluidmedic PE 300 na A. femoralis contendo uma solução de cloreto de sódio o qual está conectado com um sensor de pressão (firma Braun, Melsungen, Alemanha) para medição da pressão arterial sistêmica;

[461] introdução de um Millar tipo-cateter (tipo 350 PC, Millar Instruments, Houston, USA) através do átrio esquerdo ou por uma sonda fixada na A. carotis para medição da hemodinâmica do coração;

[462] introdução de um cateter Swan-Ganz (CCOmbo 7.5F, Edwards, Irvine, USA) via V.jugularis na A.pulmonalis para medição do volume cardíaco total produzido, saturação de oxigênio, pressão arterial pulmonar e pressão venosa central;

[463] colocação de uma sonda de medição ultrassonica do fluxo (Transsonic Systems, Ithaca, USA) na A. descendens para medir o fluxo da aorta;

[464] colocação de uma sonda de medição ultrassonica do fluxo (Transsonic Systems, Ithaca, USA) na A. coronatia esquerda para medir o fluxo das coronárias;

[465] colocação de uma cânula venosa na V. cephalicae para infusão de pentobarbital, de substitução de líquidos e para coleta de sangue (determinação do nível substância-plasma ou outros parâmetros clínicos de sangue);

[466] colocação de uma cânula venosa na V. saphenae para infusão de fentanila e aldosterona e para administração de substâncias.

[467] Os sinais primários são eventualmente amplificados (amplificador Gould, Gould Instrument Systems, Valley View, USA ou Edwards Vigilance-Monitor, Edwards, Irvine, USA) e a seguir armazenados para avaliação no sistema Ponemah (DataSciences Inc., Minneapolis, USA). Os sinais são continuamente registrados pelo período total do teste, processados digitalmente por este sofware e tirada a média em 30 segundos.

Modelo de infarto do miocárdio crônico do rato consciente.

[468] Ratos machos Wistar (peso corpóreo 280-300 g; Harlan-Winkelmann) são anestesiados com 5% isoflurano em uma caixa para anestesia, intubados, conectados a uma bomba de respiração (ugo basile 7025 rodent, 50 cursos/min, 7 ml) e ventilados com 2% de iso-flurano/N2O/O2. A temperatura do corpo é mantida em 37-38°C por meio de manta térmica. Como analgésico é administrado, via subcutânea, 0,05 mg/kg Temgesic. A caixa torácica é seccionada lateralmene entre a terceira e quarta costela e o coração é exposto. A artéria coronária do ventrículo esquerdo (LAD) é permanentemente ligada por um fio de oclusão ("prolene 1 metric 5-0 ethicon1H") passado imediatamente abaixo do original (abaixo do átrio esquerdo) e permanenemen-te fixado. O surgimento de um infarto do miocárdio é monitorado por medição-EKG (Cardioline, Remco, Italia). O tórax é novamente fechado e as camadas de músculos suturadas com Ethibond excel 1 metric 5/0 6951H e a epiderme suturada com Ethibond excel 3/0 6558H. A sutura OP é umedecida com spray protetor (por exemplo Nebacetin®N Spruhverband, substância ativa: sulfato de neomicina) e, a seguir, a anastesia é terminada.

[469] O tamanho do infarto do miocárdio é avaliado por eletrocardiografia (Sequoia 512, Acuson) uma semana após a oclusão do LAD. Os animais são separados aleatoriamente e divididos em grupos de tratamento separados bem como grupos de controle sem substâncias de tratamento. Um grupo "falso" que foi submetido somente ao processo operatóro mas não à oclusão-LAD, também é monitorado.

[470] O tratamento com as substâncias é feito durante 8 semanas através de sonda de alimentação ou por adição do composto de teste à ração ou água de beber. Os animais são pesados semanalmente e o consumo de água respectivamente ração é avaliado a cada 14 dias.

[471] Após tratamento durante 8 semanas, os animais são novamente anestesiados (2% isoflurano/N2O/ar) e um cateter de pressão (Millar SPR-320 2F) é inserido no ventrículo esquerdo através da A. carotis. Então são medidos e avaliados: frequência cardíaca, pressão do ventrículo esquerdo (LVP), pressão diastólica ventricular esquerda final (LVEDP), contratilidade (dp/dt) e velocidade de relaxamento (τ) com auxílio do sistema Powerlab (AD Instruments, ADI-PWLB-4SP) e o software Chart 5 (SN 425-0586). Em seguida é retirada uma amostra de sangue para determinação do nível substância-plasma e é retirado o marcador de bioplasma, e os animais são sacrificados. Coração (câmara cardíaca, ventrículo esquerdo com septo, ventrículo direito), fígado, pulmão e rim são retirados e pesados.

7. Modelo dos ratos "stroke-prone" espontaneamente hipertensos

[472] Administração de cloreto de sódio aos chamados ratos "stroke-prone" espontaneamente hipertensos (SP-SHR) leva neste modelo, após alguns dias, paradoxalmente, à abolição da repressão fisiologicamente induzida por sal da liberação de renina e angiotensina. Com isto, a hipertensão nos animais SP-SHR é caracterizada por um nível de renina relativamente elevado. Como consequência da hipertensão que está se desenvolvendo ocorre um dano pronunciado dos órgãos terminais do coração e dos rins, que entre outros são caracterizados por proteinuria e esclerose glumérula, bem como a modificações vasculares gerais. Assim, sobretudo pelas lesões cerebrovasculares podem se formar outra apoplexias ("stroke-prone") que levam a uma maior mortalidade dos animais não-tratados. Neste modelo para ratos também é possível pesquisar substâncias de teste com relação ao efeito redutor da pressão arterial e de proteção dos órgãos terminais.

[473] Ratos machos SP-SH com aproximadamente 10 semanas (peso corpóreo entre 190 e 220 g) são divididos aleatoreamente um dia antes do início do teste e formados grupos com igual número de animais, via de regra n = 12-14. Durante todo o tempo de teste os animais têm à disposição água para beber contendo sal (2% NaCl) e ração ad libidum. As substâncias são administradas uma vez por dia durante 6 - 8 semanas por sonda de alimentação ou na ração (Ssniff, Alemanha). Como grupos placebo servem animais que são tratados do mesmo modo, mas recebem ou só o solvente ou só a ração sem substância de teste. No contexto de um estudo de mortalidade o teste é terminado quando aproximadamente 50% dos animais tratados com placebo tiverem morrido.

[474] O efeito das substâncias de teste é seguido de medições da modificação na pressão arterial sistólica (via marcação no rabo) e da excreção de proteína na urina. Post mortem ocorre a determinação do peso do coração, rim e pulmão, bem como análises histopatológi-cas do coração, rins e cérebro com registros semiquantitativos das modificações histológicas. Diferentes biomarcadores (por exemplo ANP, peptídeo natriurético atrial, e BNP, peptídeo natriurético cerebral, KIM-1, molécula induzida pelo rim 1, osteopontin-1) são determinados por TA/TaqMan PCR após isolamento do RNA de tecidos cardiacos e renais e soro ou plasma.

[475] A avaliação estatística é efetuada com "Student's t test" após prévio exame das variantes de homogeneidade.

C. Exemplos de execução para composições farmacêuticas

[476] Os compostos de acordo com a invenção podem ser con- vertidos em preparações farmacêuticas da seguinte maneira:

[477] Comprimido:

[478] Composição:

[479] 100 mg do composto de acordo com a invenção, 50 mg de lactose (mono-hidrato), 50 mg de amido de milho (nativo), 10 mg de polivinilpirrolidona (PVP 25) (firma BASF, Ludwigshafen, Alemanha) e 2 mg de estearato de magnésio.

[480] Peso do comprimido: 212 mg. Diâmetro 8 mm, raio de curvatura 12 mm.

[481] Preparação:

[482] A mistura do composto de acordo com a invenção, lactose e amido é ganulado com uma solução a 5% (m/m) de PVP em água. Depois de seco, o granulado é misturado durante 5 minutos com o es- tearato de magnésio. Esta mistura é comprimida com uma prensa usual para comprimidos (formato do comprimido, veja acima). Como valor teórico para a compressão é utilizada uma força de compressão de 15 kN.

[483] Suspensão para administração oral:

[484] Composição:

[485] 1000 mg do composto de acordo com a invenção, 1000 mg de etanol (96%), 400 mg de Rhodigel® (goma xantana da firma FMC, Pennsylvania, USA) e 99 g de água.

[486] Uma dose individual de 100 mg do composto de acordo com a invenção corresponde a 10 mL de suspensão oral.

[487] Preparação:

[488] O Rhodigel é suspenso em etanol, o composto de acordo com a invenção é adicionado à suspensão. A adição de água é feita sob agitação. Até o término do intumescimento do Rhodigel, é agitado cerca de 6 horas.

[489] Solução para administração oral:

[490] Composição:

[491] 500 mg do composto de acordo com a invenção, 2,5 g de polisorbato e 97 g de polietilenoglicol 400.

[492] Uma dose individual de 100 mg do composto de acordo com a invenção corresponde a 20 g de solução oral.

[493] Preparação:

[494] O composto de acordo com a invenção é suspenso, sob agitação, na mistura de polietilenoglicol e polisorbato. A etapa de agitação é continuada até completa dissolução do composto de acordo com a invenção.

[495] Solução i.v.:

[496] O composto de acordo com a invenção é dissolvido em uma concentração inferior à da solubilidade de saturação em um solvente fisilogicamente compatível (por exemplo, solução de cloreto de sódio isotônica, solução de glicose a 5% e/ou solução PEG 400 a 30%). A solução é filtrada até tornar-se estéril e transferida para receptáculos para injeções estéreis e isentos de pirogênio.

Claims (4)

1. Uso de um composto apresentando uma das seguintes estruturas:

   

   e sais dos mesmos,
   o referido uso sendo caracterizado pelo fato de que é para preparação de um medicamento para tratamento e/ou profilaxia de profilaxia de diabetes mellitus e sequelas diabéticas como nefropatia diabética e retinopatia diabética.
2. Uso, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto apresenta uma das seguintes estruturas:

   

   

   e

   
3. Uso, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que o composto apresenta a seguintes estrutura:

   
4. Medicamento para tratamento e/ou profilaxia de profilaxia de diabetes mellitus e sequelas diabéticas como nefropatia diabética e retinopatia diabética, caracterizado pelo fato de que compreende um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 3, em combinação com uma substância auxiliar inerte, atóxica, farmaceuticamente apropriada.