BR112013013167B1 - Inibidores de bromodomínio e usos dos mesmos - Google Patents

Abstract

inibidores de bromodomínio e usos dos mesmos. a presente invenção refere-se a compostos úteis como inibidores de proteínas contendo bromodomínio. a invenção também fornece composições farmaceuticamente aceitáveis compreendendo compostos da presente invenção e métodos de uso das ditas composições no tratamento de vários distúrbios.

Description

CAMPO TÉCNICO DA INVENÇÃO

A presente invenção refere-se aos compostos úteis como inibi- 5 dores de uma ou mais proteínas contendo bromodomínio.

PEDIDOS RELACIONADOS

O presente pedido reivindica o benefício de pedido provisório US 61/419.119, depositado em 2 de dezembro de 2010, e pedido provisório US 61/540.725 depositado em 29 de setembro de 2011. Este pedido reivindica o 10 benefício de pedido provisório US 61/451.332, depositado em 10 de março de 2011; pedido provisório US 61/482.473, depositado em 4 de maio de 2011; e pedido provisório US 61/540.788, depositado em 29 de setembro de 2011. Os conteúdos inteiros dos pedidos acima referenciados são aqui incorporados por referência.

ANTECENDENTES DA INVENÇÃO

O empacotamento de 3 bilhões de nucleotídeos do genoma humano no núcleo de uma célula requer uma enorme compactação. Para conseguir este feito, o DNA em nossos cromossomos é envolto ao redor de bobinas de proteínas chamadas histomas para formar proteína de repetição 20 densa/polímeros de DNA conhecidos como cromatina: o molde que define regulação de gene. Longe de servir como meros módulos de empacotamento, moldes de cromatina formam a base de um conjunto recentemente apreciado e fundamentalmente importante de mecanismos de controle de gene chamados de regulação epigenética. Conferindo uma ampla faixa de modifi- 25 cações químicas específicas às histonas e ao DNA, reguladores epigenéti- cos modulam a estrutura, função e acessibilidade de nosso genoma, assim exercendo um impacto tremendo em expressão gênica. Centenas de efeto- res epigenéticos foram recentemente identificados, muitos dos quais são proteínas de ligação à cromatina ou enzimas modificadoras de cromatina.

De modo significativo, um número crescente destas proteínas foi associado com uma variedade de distúrbios tais como distúrbios neurodegenerativos, doenças metabólicas, inflamação e câncer. Assim, agentes terapêuticos al- tamente seletivos direcionados contra esta classe emergente de proteínas regulatonas de gene prometem novas abordagens ao tratamento de doenças humanas.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

Em um aspecto, a invenção fornece um composto de fórmula I:

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: XéOou N; Y é O ou N; em que pelo menos um de X ou Y é O; Ri é H, alquila, alquenila, alquinila, aralquila, arila, heteroarila, halo, CN, ORA, NRARB, N(RA)S(O)qRARB, N(RA)C(O)RB, N(RA)C(O)NRARB, N(RA)C(O)ORA, N(RA)C(S)NRARB, S(O)qRA, C(O)RA, C(O)ORA, OC(O)RA, OU C(O)NRARB; cada RA é independentemente alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída ou alquinila opcionalmente substituída, cada um contendo 0, 1, 2, ou 3 heteroátomos selecionados de O, S, ou N; arila opcionalmente substituída; heteroarila opcionalmente substituída; hete- rocíclico opcionalmente substituído; carbocíclico opcionalmente substituído; ou hidrogênio; cada RRC é independentemente alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída ou alquinila opcionalmente substituída, cada um contendo 0, 1, 2, ou 3 heteroátomos selecionados de O, S, ou N; arila opcionalmente substituída; heteroarila opcionalmente substituída; heterocíclico opcionalmente substituído; carbocíclico opcionalmente substituído; ou hidrogênio; ou RA e RB, juntos com os átomos aos quais cada um é fixado, po- dem formar um heterocicloalquila ou um heteroarila; cada um dos quais é opcionalmente substituído;

Anel A é cicloalquila, arila, heterocicloalquila, ou heteroarila; Rc é alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, arila, heterocicloalquila, ou heteroarila, cada um opcionalmente substituído com 1 a 5 independentemente selecionados de R4, e quando Li é outro além de uma ligação covalente, Rc é adicionalmente selecionado de H; R2 e R3 são cada um independentemente H, halogênio, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila opcionalmente substituída, arila opcionalmente substituída, aralquila opcio-nalmente substituída, cicloalquila opcionalmente substituída, heteroarila op-cionalmente substituída, heterocicloalquila opcionalmente substituída, -OR, - SR, -CN, -N(R')(R”), -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, -C(O)N(R')(R”), -C(O)SR, - C(O)C(O)R, -C(O)CH2C(O)R, -C(S)N(R')(R”), -C(S)OR, -S(O)R, -SO2R, - SO2N(R')(R”), -N(R')C(O)R, -N(R')C(O)N(R')(R”), -N(R')C(S)N(R')(R”), - N(R')SO2R, -N(R')SO2N(R')(R”), -N(R')N(R')(R”), -N(R')C(=N(R'))N(R')(R”), - C=NN(R')(R”), -C=NOR, -C(=N(R'))N(R')(R”), -OC(O)R, -OC(O)N(R')(R”), ou -(CH2)PRX; ou R2 e R3 juntos com os átomos aos quais cada um é fixado, formam um anel espiro-fundido saturado ou insaturado de 3 a 7 membros opcionalmente substituído contendo 0 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre; cada Rx é independentemente halogênio, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila opcionalmente substituída, arila opcionalmente substituída, aralquila opcionalmente substituída, cicloalquila opcionalmente substituída, heteroarila opcionalmente substituída, heterocicloalquila opcionalmente substituída, -OR, -SR, -CN, - N(R')(R”), -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, -C(O)N(R')(R”), -C(O)SR, -C(O)C(O)R, - C(O)CH2C(O)R, -C(S)N(R')(R”), -C(S)OR, -S(O)R, -SO2R, -SO2N(R’)(R”), - N(R')C(O)R, -N(R')C(O)N(R')(R”), -N(R')C(S)N(R')(R”), -N(R')SO2R, - N(R')SO2N(R')(R”), -N(R')N(R')(R”), -N(R')C(=N(R'))N(R’)(R”), -C=NN(R')(R”), -C=NOR, -C(=N(R'))N(R')(R”), -OC(O)R, -OC(O)N(R’)(R”); L1 é uma ligação covalente ou uma cadeia de hidrocarboneto Ci. 6 opcionalmente substituído bivalente em que uma ou duas unidades de me- tileno é opcionalmente substituída por -NR'-, -N (R')C(O)-, -C(O)N(R')-, - N(R')SO2-, -SO2N(R')-, -O-, -C(O)-, -OC(O)-, -C(O)O-, -S-, -SO- ou -SO2-; cada R é independentemente hidrogênio, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila opcionalmente substituída, arila opcionalmente substituída, aralquila opcionalmente substituída, cicloalquila opcionalmente substituída, heteroarila opcionalmente substituída, ou opcionalmente substituído heterocicloalquila; cada R’ é independentemente -R, -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, - C(O)N(R)2, -C(S)N(R)2I -S(O)R, -SO2R, -SO2N(R)2, OU dois grupos R no mesmo nitrogênio são tomados juntos com seus átomos intervenientes para formar um heteroarila opcionalmente substituída ou grupo heterocicloalquila; cada R” é independentemente -R, -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, - C(O)N(R)2, -C(S)N(R)2, -S(O)R, -SO2R, -SO2N(R)2I OU dois grupos R no mesmo nitrogênio são tomados juntos com seus átomos intervenientes para formar um heteroarila opcionalmente substituída ou grupo heterocicloalquila; ou R’ e R”, juntos com os átomos aos quais cada um é fixado, podem formar um cicloalquila, um heterocicloalquila, um arila, ou um heteroarila; cada um dos quais é opcionalmente substituído; cada R4 é independentemente alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila opcionalmente substituída, arila opcionalmente substituída, aralquila opcionalmente substituída, cicloalquila opcionalmente substituída, heteroarila opcionalmente substituída, ou heterocicloalquila opcionalmente substituída, halogênio, -OR, -SR, - N(R')(R”), -CN, -NO2, -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, -C(O)N(R')(R”), -C(O)SR, - C(O)C(O)R, -C(O)CH2C(O)R, -C(S)N(R')(R”), -C(S)OR, -S(O)R, -SO2R, - SO2N(R')(R”), -N(R')C(O)R, -N(R')C(O)N(R')(R”), -N(R')C(S)N(R')(R”), - N(R')SO2R, -N(R')SO2N(R')(R”), -N(R')N(R')(R”), -N(R')C(=N(R'))N(R')(R”), - C=NN(R')(R”), -C=NOR, -C(=N(R'))N(R')(R”), -OC(O)R, ou -OC(O)N(R')(R”); cada R5 é independentemente -R, halogênio, -OR, -SR, - N(R')(R”), -CN, -NOZ, -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, -C(O)N(R')(R”), -C(O)SR, - C(O)C(O)R, -C(O)CH2C(O)R, -C(S)N(R')(R”), -C(S)OR, -S(O)R, -SO2R, - SO2N(R')(R”), -N(R')C(O)R, -N(R')C(O)N(R')(R”), -N(R')C(S)N(R')(R”), - N(R')SO2R, -N(R')SO2N(R')(R”), -N(R')N(R')(R”), -N(R')C(=N(R'))N(R')(R”), - C=NN(R')(R”), -C=NOR, -C(=N(R'))N(R’)(R”), -OC(O)R, ou -OC(O)N(R’)(R”); n é 0-5; cada q é independentemente 0, 1, ou 2; e p é 1-6.

Em outro aspecto, a invenção fornece um método para inibir ati-vidade de uma proteína contendo bromodomínio, ou uma mutante do mesmo, em uma amostra biológica compreendendo a etapa de contatar dita amostra biológica com um composto da a invenção (por exemplo, Fórmula I).

Em outro aspecto, a invenção fornece um método para inibir ati-vidade de uma proteína contendo bromodomínio, ou uma mutante do mesmo, atividade em um paciente compreendendo a etapa de administrar a dito paciente um composto da invenção (por exemplo, Fórmula I).

Em outro aspecto, a invenção fornece um método para tratar um distúrbio mediado por proteína contendo bromodomínio em um paciente em necessidade do mesmo, compreendendo a etapa de administrar a dito paciente um composto da invenção (por exemplo, Fórmula I).

Compostos fornecidos, e composições farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, são úteis para tratar uma variedade de doenças, distúrbios ou condições associadas com respostas celulares anormais disparados por eventos mediados por proteínas contendo bromodomínio. Tais doenças, distúrbios ou condições, incluem aquelas descritas aqui.

Os compostos fornecidos são ainda úteis para estudo de proteínas contendo bromodomínio em um fenômeno biológico e patológico, o estudo de vias de transdução de sinal intracelular mediada por proteínas contendo bromodomínio, e a avaliação comparativa de novos inibidores de proteínas contendo bromodomínio.

DESCRIÇÃO DETALHADA Compostos e Definições

As definições de grupos funcionais e termos químicos específicos são descritos em mais detalhes abaixo. Para os propósitos desta invenção, os elementos químicos são identificados de acordo cm a Tabela Periódica dos Elementos, versão CAS, Handbook of Chemistry e Physics, 75a Ed., contracapa, e grupos funcionais específicos são geralmente definidos como descrito neste. Além disso, princípios gerais de química orgânica, bem como frações funcionais específicas e reatividade, são descritos em Organic Chemistry, Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito, 1999; Smith e March March’s Advanced Organic Chemistry, 5a Edition, John Wiley & Sons, Inc., New York, 2001; Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers, Inc., New York, 1989; Carruthers, Some Modern Methods of Organic Synthesis, 3a Edição, Cambridge University Press, Cambridge, 1987; os conteúdos inteiros dos quais são incorporados aqui por referência.

Salvo se declarado de outra forma, as estruturas descritas aqui pretendem incluir todas as formas isoméricas (por exemplo, enantiomérica, diastereoisomérica, e geométrica (ou conformacional)) da estrutura; por exemplo, as configurações R e S para cada centro assimétrico, isômeros de ligação dupla Z e E, e isômeros conformacionais Z e E. Portanto, isômeros estereoquímicos únicos bem como misturas enantioméricas, diastereoisomé- ricas, e geométricas (ou conformacionais) dos presentes compostos estão dentro do escopo da invenção. Salvo se declarado de outra forma, todas as formas tautoméricas dos compostos da invenção estão dentro do escopo da invenção. Além disso, salvo se declarado de outra forma, as estruturas descritas aqui também pretendem incluir compostos que diferem somente na presença de um ou mais átomos isotopicamente enriquecidos. Por exemplo, compostos contendo as presentes estruturas incluindo a substituição de hidrogênio por deutério ou trítio, ou a substituição de um carbono ou um carbono enriquecido em a 13C- ou 14C- estão dentro do escopo desta invenção. Tais compostos são úteis, por exemplo, como ferramentas analíticas, como sondas em ensaios biológicos, ou como agentes terapêuticos de acordo com a presente invenção.

Quando um enantiômero particular é preferencial, este pode, em algumas modalidades ser fornecido substancialmente isento do enantiômero correspondente, e pode ainda ser referenciado como “opticamente enriquecido”. “Opticamente enriquecido,” conforme usado aqui, significa que o composto é preparado de uma proporção significativamente maior de um enantiômero. Em certas modalidades o composto é preparado de pelo menos cerca de 90% em peso de um enantiômero preferencial. Em outras modalidades o composto é preparado de pelo menos cerca de 95%, 98%, ou 99% em peso de um enantiômero preferencial. Enantiômeros preferenciais podem ser isolados de misturas racêmicas por qualquer método conhecido por aqueles versados na técnica, incluindo cromatografia líquida de alta pressão (HPLC) e a formação e cristalização de sais quirais ou preparados por sínteses assimétricas. Ver, por exemplo, Jacques et al., Enantiomers, Racemates and Resolutions (Wiley Interscience, New York, 1981); Wilen, et al., Tetrahedron 33:2725 (1977); Eliel, E.L. Stereochemistry of Carbon Compounds (McGraw-Hill, NY, 1962); Wilen, S.H. Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions p. 268 (E.L. Eliel, Ed., Univ, of Notre Dame Press, Notre Dame, IN 1972).

Os compostos sintetizados podem ser separados de uma mistura de reação e ainda purificados por um método como cromatografia em coluna, cromatografia líquida de alta pressão, ou recristalização. Como pode ser apreciado pelos especialistas na técnica, outros métodos de síntese de compostos das fórmulas aqui serão evidentes aos especialistas na técnica. Além disso, as várias etapas sintéticas podem ser realizadas em uma sequência alternada ou para gerar os compostos desejados. Além disso, os solventes, temperaturas, durações de reação, etc. delineadas aqui são para fins de ilustração somente e uma pessoa versada na técnica reconhecerá que a variação das condições de reação podem produzir os produtos desejados da presente invenção. As transformações químicas sintéticas e metodologias de grupo de proteção (proteção e desproteção) úteis na síntese de compostos descritos aqui são conhecidas na técnica e incluem, por exemplo, aquelas como as descritas em R. Larock, Comprehensive Organic Transfer mations, VCH Publishers (1989); T.W. Greene e P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 2a. Ed., John Wiley e Sons (1991); L. Fieser and M. Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994); e L. Paguette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley e Sons (1995), e edições subsequentes das mesmas.

Os compostos desta invenção podem ser modificados por anexação de várias funcionalidades através de meios sintéticos delineados aqui para melhorar as propriedades biológicas seletivas. Ditas modificações são conhecidas na técnica e incluem aquelas que aumentam a penetração biológica em um determinado sistema biológico (por exemplo, sangue, sistema linfático, sistema nervoso central), aumento de disponibilidade oral, aumento de solubilidade para permitir a administração por injeção, alteração de metabolismo e alteração de taxa de excreção.

A menção de uma lista de grupos químicos em qualquer definição de uma variável aqui inclui definições daquelas variáveis como qualquer ou combinação de grupos listados. A menção de uma modalidade para uma variável aqui inclui aquela modalidade como qualquer modalidade única ou em combinação com qualquer outra modalidade ou porção da mesma. A menção de uma modalidade aqui inclui aquela modalidade como qualquer modalidade única ou em combinação com qualquer outra modalidade ou porção da mesma.

O número de átomos de carbono em um substituinte hidrocarbila pode ser indicado pelo prefixo “Cx-Cy,” onde x é o mínimo e y é o máximo de átomos de carbono no substituinte.

O prefixo “halo” indica que o substituinte ao qual o prefixo é ligado é substituído com um ou mais radicais independentemente selecionados de halogênio. Por exemplo, “haloalquila” significa um substituinte alquila em que pelo menos um radical hidrogênio é substituído com um radical halogênio.

Se um elemento ligante em uma estrutura represntada é “ausente”, então, o elemento à esquerda na estrutura representada é diretamente ligado ao elemento à direita na estrutura descrita. Por exemplo, se uma estrutura química é representada como X-L-Y em que L é ausente, então a estrutura química é X-Y.

O termo “heteroátomo” significa um ou mais de oxigênio, enxofre, nitrogênio, fósforo, ou silício (incluindo, qualquer forma oxidada de nitrogênio, enxofre, fósforo, ou silício; a forma quaternizada de qualquer nitrogênio básico ou; um nitrogênio substituível de um anel heterocíclico, por exemplo, N (como em 3,4-di-hidro-2H-pirrolil), NH (como em pirrolidinil) ou NR+ (como em pirrolidinila N-substituído)).

Conforme usado aqui uma “ligação direta” ou “ligação covalente” refere-se a uma ligação simples, dupla ou tripla. Em certas modalidades, uma “ligação direta” ou “ligação covalente” refere-se a uma ligação simples.

Os termos “halo” e “halogênio” conforme usados aqui referem-se a um átomo selecionado de flúor (fluor, -F), cloro (cloro, -Cl), bromo (bromo, -Br), e iodo (iodo, -I).

O termo “alifático” ou “grupo alifático”, conforme usado aqui, denota uma fração de hidrocarboneto que pode ser de cadeia linear (ou seja, não ramificada), ramificada, ou cíclica (incluindo fundida, em ponte, e espiro- fundida policíclica) e pode ser completamente saturado ou pode conter uma ou mais unidades de insaturação, mas que não é aromático. Salvo se especificado de outra forma, grupos alifáticos contêm 1 a 6 átomos de carbono. Em algumas modalidades, grupos alifático contêm 1 a 4 átomos de carbono, e ainda em outras modalidades alifáticos contêm 1 a 3 átomos de carbono. Grupos alifático incluem, entre outros, alquila, alquenila, alquinila, carbociclo. Grupos alifáticos apropriados incluem, entre outros, grupos lineares ou ramificados, alquila, alquenila, e alquinila, e híbridos dos mesmos como (cicloal- quil)alquila, (cicloalquenil)alquila ou (cicloalquil)alquenila.

O termo “insaturado”, conforme usado aqui, significa que uma fração tem uma ou mais unidades de insaturação.

Os termos “cicloalifático”, “carbociclo”, “carbociclila”, “carbociclo”, ou “carbocíclico”, usados isolados ou como parte de uma fração maior, se referem a um sistema de anel monocíclico ou bicíclico cíclico alifático satu- rado ou parcialmente insaturado, como descrito aqui, contendo de 3 a 18 átomos de carbono no anel, em que o sistema de anel alifático é opcionalmente substituído como definido acima e descrito aqui. Grupos cicloalifáticos incluem, entre outros, ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclopentenila, ciclo-hexila, ciclo-hexenila, ciclo-heptila, ciclo-heptenila, ciclooctila, cicloocte- nila, e ciclooctadienila. Em algumas modalidades, o cicloalquila tem 3-6 carbonos. Os termos “cicloalifático”, “carbociclo”, “carbociclila”, “carbociclo”, ou “carbocíclico” também incluem anéis alifáticos que são fundidos a um ou mais anéis aromáticos ou não aromáticos, como deca-hidronaftila, tetra- hidronaftila, decalina, ou biciclo[2.2.2]octano, onde o radical ou ponto de conexão é um anel alifático.

Conforme usado aqui, o termo “cicloalquileno” se refere a um grupo cicloalquila bivalente. Em certas modalidades, um grupo cicloalquileno é um grupo 1,1-cicloalquileno (ou seja, um anel espiro-fundido). Grupos e- xemplares 1,1-cicloalquileno incluem

. Em outras modalidades, um grupo cicloalquileno é um grupo 1,2-cicloalquileno ou um grupo 1,3- cicloalquileno. Grupos exemplares 1,2-cicloalquileno incluem

e

.

O termo “alquila” conforme usado aqui, refere-se à um radical hidrocarboneto de cadeia saturada, linear, ou ramificada tipicamente contendo de 1 a 20 átomos de carbono. Por exemplo, “C-i-C8 alquila” contém de um a oito átomos de carbono. Exemplos de radicais alquila incluem, entre outros, metila, etila, propila, isopropila, n-butila, tert-butila, neopentila, n-hexila, heptila, radicais octila e similares.

O termo “alquenila” conforme usado aqui, denota um radical hi drocarboneto de cadeia linear ou ramificada contendo uma ou mais ligações duplas e tipicamente de 2 a 20 átomos de carbono. Por exemplo, “C2-C8 alquenila” contém de dois a oito átomos de carbono. Grupos alquenila incluem, entre outros, por exemplo, etenila, propenila, butenila, 1-metil-2-buten-1- ila, heptenila, octenila e similares.

O termo “alquinila” conforme usado aqui, denota um radical hi- drocarboneto de cadeia linear ou ramificada contendo uma ou mais ligações triplas e tipicamente de 2 a 20 átomos de carbono. Por exemplo, “C2-C8 alquinila” contém de dois a oito átomos de carbono. Grupos alquinila representativos incluem, entre outros, por exemplo, etinila, 1-propinila, 1-butinila, hep- tinila, octinila e similares.

O termo “arila” usado isolado ou como parte de uma fração maior como em “aralquila”, “aralcoxi”, ou “ariloxialquila”, refere-se aos sistemas de anel monocíclico, bicíclico, e tricíclico contendo um total de cinco a 15 membros do anel, em que pelo menos um anel no sistema é aromático e em que cada anel no sistema contém três a sete membros do anel. O termo “arila” pode ser usado de modo intercambiável com o termo “anel arila”. Em certas modalidades da presente invenção, “arila” refere-se a um sistema de anel aromático que inclui, entre outros, fenila, bifenila, naftila, antracila e similares, que podem conter um ou mais substituintes. O termo “aralquila” ou “arilalquila” refere-se a um resíduo de alquila ligado a um anel arila. Exemplos de aralquila incluem, entre outros, benzila, fenetila e similares. Ainda incluíram dentro do escopo do termo arila”, como é usado aqui, é um grupo em que um anel aromático é fundido a um ou mais anéis não aromáticos, como indanila, ftalimidila, naftimidila, fenantridinila, ou tetra-hidronaftila, e similares.

Os termos “heteroarila” e “heteroar-”, usados isolados ou como parte de uma fração maior, por exemplo, “heteroaralquila”, ou “heteroaralco- xi”, se referem aos grupos contendo 5 a 18 átomos no anel, preferencialmente 5, 6, ou 9 átomos no anel; contendo 6, 10, ou 14 π elétrons compartilhados em um arranjo cíclico; e contendo, além dos átomos de carbono, de um a cinco heteroátomos. O termo “heteroátomo” inclui, entre outros, nitrogênio, oxigênio, ou enxofre, e inclui qualquer forma oxidada de nitrogênio ou enxofre, e qualquer forma quaternizada de um nitrogênio básico. Um heteroarila pode ser um anel simples, ou dois ou mais anéis fundidos. Grupos heteroarila incluem, entre outros, tienila, furanila, pirrolila, imidazolila, pirazolila, triazolila, tetrazolila, oxazolila, isoxazolila, oxadiazolila, tiazolila, isotiazolila, tiadia- zolila, piridila, piridazinila, pirimidinila, pirazinila, indolizinila, purinila, naftiridi- nila, e pteridinila. Os termos “heteroarila” e “heteroar”, conforme usado aqui, ainda incluem grupos em que um anel heteroaromático é fundido a um ou mais anéis arila, cicloalifático, ou heterociclila, onde o radical ou ponto de ligação está no anel heteroaromático. Exemplos não limitantes incluem indolila, isoindolila, benzotienila, benzofuranila, dibenzofuranila, indazolila, ben- zimidazolila, benztiazolila, quinolila, isoquinolila, cinnolinila, ftalazinila, quina- zolinila, quinoxalinila, 4/7-quinolizinila, carbazolila, acridinila, fenazinila, feno- tiazinila, fenoxazinila, tetra-hidroquinolinila, tetra-hidroisoquinolinila, e piri- do[2,3-b]-1,4-oxazin-3(4H)-ona. Um grupo heteroarila pode ser mono ou bi- cíclico. O termo “heteroarila” pode ser usado de modo intercambiável com os termos “anel heteroarila”, “grupo heteroarila”, ou “heteroaromático”, qualquer um dos termos incluem anéis que são opcionalmente substituídos. O termo “heteroaralquila” refere-se a um grupo alquila substituída por um heteroarila, em que as porções alquila e heteroarila independentemente são opcionalmente substituídos. Exemplos incluem, entre outros, piridinilmetila, pirimidini- letila e similares.

Conforme usado aqui, os termos “heterociclo”, “heterociclila”, “heterocíclico radical”, e “anel heterociclico” são usados de modo intercambiável e se referem a uma fração estável de 3 a 7 membros monocíclica ou 7 a 10 membros bicíclica heterocíclica que é saturada ou parcialmente insatu- rada, e contendo, além dos átomos de carbono, um ou mais, preferencialmente um a quatro, heteroátomos, como definido acima. Quando usado em referência a um átomo de anel de um heterociclo, o termo “nitrogênio” inclui um nitrogênio substituído. Como um exemplo, em um anel saturado ou parcialmente insaturado contendo 0 a 3 heteroátomos selecionados de oxigênio, enxofre ou nitrogênio, o nitrogênio pode ser N (como em 3,4-di-hidro-2/-/- pirrolil), NH (como em pirrolidinil), ou +NR (como em A/-substituído pirrolidi- nil). Grupos heterocicloalquila representativos incluem, entre outros, [1,3]dioxolano, pirrolidinila, pirazolinila, pirazolidinila, imidazolinila, imidazoli- dinila, piperidinila, piperazinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, morfolinila, tiazo- lidinila, isotiazolidinila, e tetra-hidrofurila e similares.

Um anel heterocíclico pode ser ligado ao seu grupo pendente em qualquer heteroátomo ou átomo de carbono que resulta em uma estrutura estável e qualquer um dos átomos no anel pode ser opcionalmente substituído. Exemplos de ditos radicais heterocíclicos saturados ou parcialmente insaturados incluem, entre outros, tetra-hidrofuranoila, tetra-hidrotienila, pir- rolidinila, pirrolidonila, piperidinila, pirrolinila, tetra-hidroquinolinila, tetra- hidroisoquinolinila, deca-hidroquinolinila, oxazolidinila, piperazinila, dioxanila, dioxolanila, diazepinila, oxazepinila, tiazepinila, morfolinila, e quinuclidinila. Os termos “heterociclo”, “heterociclila”, “anel heterociclila”, “grupo heterocíclico”, “fração heterocíclica”, e “radical heterocíclico”, são usados de modo intercambiável aqui, e ainda incluem grupos em que um anel heterociclila é fundido a um ou mais anéis arila, heteroarila, ou cicloalifático, como indolini- la, 3H-indolila, cromanila, fenantridinila, 2-azabiciclo[2.2.1]heptanila, octa- hidroindolila, ou tetra-hidroquinolinila, onde o radical ou ponto de ligação está no anel heterociclila. Um grupo heterociclila pode ser mono ou bicíclico. O termo “heterociclilalquila” refere-se a um grupo alquila substituída por um heterociclila, em que as porções alquila e heterociclila independentemente são opcionalmente substituídas.

Conforme usado aqui, o termo “parcialmente insaturado” refere- se a uma fração de anel que inclui pelo menos uma ligação dupla ou tripla entre átomos no anel, mas não é aromático. O termo “parcialmente insaturado” pretende incluir anéis contendo vários sítios de insaturação, mas não é pretendido para incluir frações arila ou heteroarila, como definido aqui.

O termo “hidrocarboneto bivalente” refere-se a um grupo hidro- carboneto bivalente saturado ou insaturado. Ditos grupos hidrocarbonetos bivalentes incluem alquileno, alquenileno, e alquinileno.

O termo “alquileno” refere-se a um grupo divalente derivado de uma cadeia hidrocarbila linear ou ramificada saturada tipicamente contendo de 1 a 20 átomos de carbono, mais tipicamente de 1 a 8 átomos de carbono. Exemplos de um “alquileno” incluem um grupo polimetileno, ou seja, -(CH2)n-, em que n é um inteiro positivo, preferencialmente de 1 a 6, de 1 a 4, de 1 a 3, de 1 a 2, ou de 2 a 3; ou -CH2-, -CH2CH2-, -CH2CH2CH2-, - CH2CH2CH2CH2-, e -CH2CH(CH3)CH2-. Uma cadeia de alquileno substituído é um grupo polimetileno em que um ou mais átomos de hidrogênio metileno são substituídos com um substituinte. Substituintes apropriados incluem aqueles descritos abaixo para um grupo alifático substituído.

O termo “alquenileno” refere-se a um grupo hidrocarbila divalente insaturado que pode ser linear ou ramificado e que tem pelo menos uma ligação dupla carbono-carbono. Um grupo alquenileno tipicamente contém 2 a 20 átomos de carbono, mais tipicamente de 2 a 8 átomos de carbono. Exemplos não limitantes de grupos alquenileno incluem -C(H)=C(H)-, - C(H)=C(H)-CH2-, -C(H)=C(H)-CH2-CH2-, -CH2-C(H)=C(H)-CH2-, -C(H)=C(H)- CH(CH3)-, e -CH2-C(H)=C(H)-CH(CH2CH3)-.

O termo “alquinileno” refere-se a um grupo hidrocarboneto divalente insaturado que pode ser linear ou ramificado e que tem pelo menos uma ligação tripla carbono-carbono. Grupos alquinilaeno representativos incluem, por meio de exemplo, -C=C-, -C=C-CH2-, -C=C-CH2-CH2-, -CH2- C=C-CH2-, -CHC-CH(CH3)-, e -CH2-C=C-CH(CH2CH3)-.

Como descrito aqui, compostos da invenção podem conter frações “opcionalmente substituídas”. Em geral, o termo “substituído”, se precedido pelo termo “opcionalmente” ou não, significa que um ou mais hidrogénios da fração designada são substituídos com um substituinte apropriado. Salvo se indicado de outra forma, um grupo “opcionalmente substituído” pode ter um substituinte apropriado em cada posição substituível do grupo , e quando mais do que uma posição em qualquer dada estrutura pode ser substituída com mais do que um substituinte selecionado de um grupo especificado, o substituinte pode ser o mesmo ou diferente em cada posição. As combinações de substituintes vislumbrados sob esta invenção são preferencialmente aqueles que resultam na formação de compostos estáveis ou quimicamente praticáveis. O termo “estável”, conforme usado aqui, refere-se aos compostos que não são substancialmente alterados quando submetidos às condições que permitem sua produção, detecção, e, em certas modalidades, sua recuperação, purificação, e uso para uma ou mais finalidades reveladas aqui.

Os termos “opcionalmente substituído”, “alquila opcionalmente substituída,” “alquenila opcionalmente substituída,” “alquinila opcionalmente substituída”, “carbocíclico opcionalmente substituído,” “arila opcionalmente substituída”, “heteroarila opcionalmente substituída,” “heterocíclico opcionalmente substituído,” e qualquer outro grupo opcionalmente substituído conforme usado aqui, se referem aos grupos que são substituídos ou não substituídos por substituição independente de um, dois, ou três ou mais dos átomos de hidrogênio neste com substituintes incluindo, entre outros: - F, -Cl, -Br, -I, - OH, hidróxi protegido, alcóxi, oxo, tio-oxo, - NO2, -CN, CF3I N3, - NH2, amino protegido, -NH-alquila, -NH-alquenila, -NH-alquinila, -NH-cicloalquila, -NH-arila, -NH -heteroarila, -NH -heterocíclico, -dialquila- mino, -diarilamino, -di-heteroarilamino, - O- alquila, -O- alquenila, -O- alquinila, -O- cicloalquila, -O-arila, - O-heteroarila, -O-heterocíclico, - C(O)- alquila, -C(O)- alquenila, -C(O)- alquinila, -C(O)- cicloalquila, -C(O)-arila, -C(O)-heteroarila, -C(O)-heterocicloalquila, - CONH2, -CONH- alquila, -CONH- alquenila, -CONH-alquinila, - CONH- cicloalquila, -CONH-arila, -CONH-heteroarila, -CONH-heterocicloal- quila, - OCO2-alquila, -OCO2-alquenila, -OCO2-alquinila, -OCO2-cicloal- quila, -OCO2-arila, -OCO2-heteroarila, -OCO2-heterocicloalquila, -OCONH2, - OCONH-alquila, -OCONH-alquenila, -OCONH-alquinila, -OCONH-cicloal- quila, -OCONH-arila, -OCONH-heteroarila, -OCONH-heterocicloalquila, - NHC(O)-alquila, -NHC(O)-alquenila, -NHC(O)- alquinila, - NHC(O)-cicloalquila, -NHC(O)-arila, -NHC(O)-heteroarila, -NHC(O)- heterocicloalquila, -NHCO2-alquila, -NHCO2-alquenila, -NHCO2- alquinila, - NHCO2 -cicloalquila, -NHCO2-arila, -NHCO2-heteroarila, -NHCO2- heterocicloalquila, -NHC(O)NH2, -NHC(O)NH-alquila, -NHC(O)NH-alquenila, -NHC(O)NH-alquenila, -NHC(O)NH-cicloalquila, -NHC(O)NH-arila, - NHC(O)NH-heteroarila, -NHC(O)NH-heterocicloalquila, NHC(S)NH2, - NHC(S)NH-alquila, -NHC(S)NH-alquenila, -NHC(S)NH- alquinila, - NHC(S)NH-cicloalquila, -NHC(S)NH-arila, -NHC(S)NH-heteroarila, - NHC(S)NH-heterocicloalquila, -NHC(NH)NH2, -NHC(NH)NH-alquila, - NHC(NH)NH-alquenila, -NHC(NH)NH-alquenila, -NHC(NH)NH-cicloalquila, - NHC(NH)NH-arila, -NHC(NH)NH-heteroarila, -NHC(NH)NH-heterocicloal- quila, -NHC(NH)-alquila, -NHC(NH)-alquenila, -NHC(NH)-alquenila, - NHC(NH)-cicloalquila, -NHC(NH)-arila, -NHC(NH)-heteroarila, -NHC(NH)- heterocicloalquila, -C(NH)NH-alquila, -C(NH)NH-alquenila, -C(NH)NH-alquinila, - C(NH)NH-cicloalquila, -C(NH)NH-arila, -C(NH)NH-heteroarila, -C(NH)NH- heterocicloalquila, -S(O)-alquila, -S(O)-alquenila, -S(O)-alquinila, -S(O)-cicloalquila, -S(O)-arila, -S(O)-heteroarila, -S(O)-heterocicloalquil -SO2NH2, -SO2NH- alquila, -SC^NH-alquenila, -SC^NH-alquinila, -SC^NH-cicloalquila, -SO2NH- arila, -SChNH-heteroarila, -SC^NH-heterocicloalquila, -NHSO2-alquila, -NHSO2-alquenila, -NHSO2-alquinila, -NHSO2- cicloalquila, -NHSO2-arila, -NHSθ2-heteroarila, -NHSθ2-heterocicloalquila, - CH2NH2, -CH2SO2CH3, -alquila, -alquenila, -alquinila, -arila, -arilalquila, -heteroarila, - heteroarilalquila, -heterocicloalquila, -cicloalquila, -carbociclico, -heteroci- clico, polialcoxialquila, polialcóxi, -metoximetóxi, -metoxietóxi, -SH, -S- alquila, -S-alquenila, -S-alquinila, -S-cicloalquila, -S-arila, -S-heteroarila, -S- heterocicloalquila, ou metiltiometila.

Em certas modalidades, substituintes monovalentes apropriados em um átomo de carbono substituível de um grupo “opcionalmente substituído” são independentemente halogênio; -(CH2)o-4R°; -(CH2)o-40R°; -0-(CH2)o- 4C(O)OR°; -(CH2)O-4CH(OR°)2; -(CH2)O-4SR°; -(CH2)o-4Ph, que pode ser substituído com R°; -(CH2)o-40(CH2)o-iPh que pode ser substituído com R°; - CH=CHPh, que pode ser substituído com R°; -NO2; -CN; -N3; -(CH2)o- 4N(R°)2; -(CH2)O-4N(R°)C(0)R0; -N(R°)C(S)R°; -(CH2)O-4N(R0)C(0)NR02; - N(RO)C(S)NR°2; -(CH2)O-4N(R°)C(0)OR0; -N(R°)N(R°)C(O)RO; - N(RO)N(R°)C(O)NRO2; -N(R°)N(RO)C(O)OR°; -(CH2)0-4C(O)RO; -C(S)R°; - (CH2)0.4C(O)OR°; -(CH2)0_4C(O)SRO; -(CH2)0-4C(O)OSÍR°3; -(CH2)0.4OC(O)RO; -OC(0)(CH2)O.4SR-, SC(S)SRO; -(CH2)0^SC(O)RO; -(CH2)0-4C(O)NRO2; - C(S)NR°2; -C(S)SR°; -SC(S)SR°, -(CH2)0.4OC(O)NRO2; -C(O)N(OR°)R°; - C(O)C(O)R°; -C(O)CH2C(O)RO; -C(NOR°)R°; -(CH2)O.4SSR°; -(CH2)O. 4S(0)2RO; -(CH2)O4S(0)2OR°; -(CH2)0^OS(O)2RO,' -S(O)2NRO2; -(CH2)O. 4S(O)RO; -N(RO)S(O)2NR°2; -N(R°)S(O)2RO; -N(OR°)R°; -C(NH)NRO2; - P(O)2R°; -P(0)RO2; -OP(O)RO2; -0P(0)(0RO)2; -SÍR°3; -(CI a 4 linear ou ramifi-cado alquileno)O-N(R°)2; ou -(Ci a 4 linear ou ramificado alquileno)C(O)O- N(RO)2, em que cada R° pode ser substituído como definido abaixo e é independentemente hidrogênio, C^e alifático, -CH2Ph, -O(CH2)0-iPh, ou um anel de 5 a 6 membros saturado, parcialmente insaturado, ou arila contendo 0 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre, ou, não obstante a definição acima, duas ocorrências independentes de R°, tomadas junto com os átomos intervenientes, formam um anel de 3 a 12 membros saturado, parcialmente insaturado, ou arila mono ou bicícli- co contendo 0 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitro-gênio, oxigênio ou enxofre, que pode ser substituído como definido abaixo.

Substituintes monovalentes apropriados em R° (ou o anel formado por duas ocorrências independentes de R° junto com seus átomos intervenientes), são independentemente halogênio, -(CH2)o.2R°, -(haloR ), - (CH2)O-2OH, -(CH2)O-2OR , -(CH2)O-2CH(OR°)2; -O(haloR), -CN, -N3, -(CH2)o- 2C(O)R°, -(CH2)O.2C(0)OH, -(CH2)O-2C(0)OR°, -(CH2)O-2SR°, -(CH2)O.2SH, - (CH2)O-2NH2, -(CH2)O-2NHR°, -(CH2)O.2NR°2, -NO2, -SÍR°3, -OSÍR°3, -C(O)SR°, - (C-i a 4 linear ou ramificado alquileno)C(O)OR°, ou -SSR° em que cada R° é não substituído ou onde precedido por “halo” é substituído somente com um ou mais halogênios, e é independentemente selecionado de Ci a4 alifático, - CH2Ph, -0(CH2)o-iPh, ou um anel 5 a 6 membros saturado, parcialmente insaturado, ou arila contendo 0 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre. Substituintes divalentes apropriados em um átomo de carbono saturado de R° incluem =0 e =S.

Substituintes divalentes apropriados em um átomo de carbono saturado de um grupo “opcionalmente substituído” incluem o seguinte: =0, =S, =NNR*2, =NNHC(O)R‘, =NNHC(O)OR*, =NNHS(O)2R‘, =NR, =NOR, - O(C(R*2))2-3O-, ou -S(C(R*2))2-3S-, em que cada ocorrência independente de R* é selecionado de hidrogênio, Ci_6 alifático que pode ser substituído como definido abaixo, ou um anel não substituído de 5 a 6 membros saturado, parcialmente insaturado, ou arila contendo 0 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre. Substituintes divalentes apropriados que são ligados aos carbonos substituíveis vicinais de um grupo “opcionalmente substituído” incluem: -O(CR*2)2-3O-, em que cada ocorrência independente de R* é selecionado de hidrogênio, Ci-6 alifático que pode ser substituído como definido abaixo, ou um anel não substituído de 5 a 6 membros saturado, parcialmente insaturado, ou arila contendo 0 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre.

Substituintes apropriados no grupo alifático de R* incluem halo- gênio, -R*, -(haloR*), -OH, -OR’, -O(haloR’), -CN, -C(O)OH, -C(O)ORe, - NH2, -NHR*, -NR*2, OU -NO2, em que cada R* é não substituído ou onde precedido por “halo” é substituído somente com um ou mais halogênios, e é independentemente Ci a4alifático, -CH2Ph, -0(CH2)o-iPh, ou um anel 5 a 6 membros saturado, parcialmente insaturado, ou arila contendo 0 a 4 hete-roátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre.

Substituintes apropriados em um nitrogênio substituível de um grupo “opcionalmente substituído” incluem -Rt, -NR^, -C(O)Rf, -C(O)ORt, - C(O)C(O)Rf, -CíCOCHjzCíCOR1, -5(0^, -S(O)2NRt2, -C(S)NRt2, - C(NH)NRt2, ou -N(Rt)S(O)2Rt; em que cada R1 é independentemente hidrogênio, Ci-6 alifático que pode ser substituído como definido abaixo, -OPh não substituído, ou um anel não substituído de 5 a 6 membros saturado, parcialmente insaturado, ou arila anel contendo 0 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre, ou, não obstante a definição acima, duas ocorrências independentes de Rf, tomadas juntas com seus átomos intervenientes formam um anel não substituído de 3 a 12 membros saturado, parcialmente insaturado, ou arila anel mono ou bicíclico con- tendo 0 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre.

Substituintes apropriados no grupo alifático de Rf são independentemente halogênio, -R , -(haloR ), -OH, -OR , -O(haloR ), -CN, -C(O)OH, - C(O)OR°, -NH2, -NHR°, -NR°2, OU -NO2, em que cada R° é não substituído ou onde precedido por “halo” é substituído somente com um ou mais halogê- nios, e é independentemente CMalifático, -CH2Ph, -0(CH2)o-iPh, ou a 5 a 6 membros saturado, parcialmente insaturado, ou arila anel contendo 0 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre.

Conforme usado aqui, o termo “grupo de proteção amino apropriado,” inclui aqueles descritos em detalhes em Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene e P. G. M. Wuts, 3a edição, John Wiley & Sons, 1999.

Grupos de proteção amino apropriados incluem metil carbamato, etil carbamato, 9-fluorenilmetil carbamato (Fmoc), 9-(2-sulfo)fluorenilmetil carbamato, 9-(2,7-dibromo)fluorenilmetil carbamato, 2,7-di-t-butil-[9-(10,10- dioxo-10,10,10,10-tetra-hidrotioxantil)]metil carbamato (DBD-Tmoc), 4-meto- xifenacil carbamato (Fenoc), 2,2,2-tricloroetil carbamato (Troc), 2-trime- tilsililetil carbamato (Teoc), 2-feniletil carbamato (hZ), 1-(1-adamantil)-1- metiletil carbamato (Adpoc), 1,1 -dimetil-2-haloetil carbamato, 1,1-dimetil-2,2- dibromoetil carbamato (DB-t-BOC), 1,1 -dimetil-2,2,2-tricloroetil carbamato (TCBOC), 1 -metil-1 -(4-bifenilil)etil carbamato (Bpoc), 1-(3,5-di-f-butilfenil)-1- metiletil carbamato (f-Bumeoc), 2-(2’- e 4’-piridil)etil carbamato (Pioc), 2- (/V,/V-diciclo-hexilcarboxamido)etil carbamato, t-butil carbamato (BOC), 1- adamantil carbamato (Adoc), vinil carbamato (Voc), alii carbamato (Aloe), 1- isopropilalil carbamato (Ipaoc), cinnamil carbamato (Coc), 4-nitrocinnamil carbamato (Noc), 8-quinolil carbamato, /V-hidroxipiperidinil carbamato, alquil- ditio carbamato, benzil carbamato (Cbz), p-metoxibenzil carbamato (Moz), p- nitrobenzil carbamato, p-bromobenzil carbamato, p-clorobenzil carbamato, 2,4-diclorobenzil carbamato, 4-metilsulfinilbenzil carbamato (Msz), 9- antrilmetil carbamato, difenilmetil carbamato, 2-metiltioetil carbamato, 2- metilsulfoniletil carbamate, 2-(p-toluenossulfonil)etil carbamate, [2-(1,3- ditianil)]metil carbamate (Dmoc), 4-metiltiofenil carbamate (Mtpc), 2,4- dimetiltiofenil carbamate (Bmpc), 2-fosfonioetil carbamate (Peoc), 2- trifenilfosfonioisopropil carbamate (Ppoc), 1,1 -dimetil-2-cianoetil carbamate, m-cloro-p-aciloxibenzil carbamate, p-(di-hidroxiboril)benzil carbamate, 5- benzisoxazolilmetil carbamate, 2-(trifluormetil)-6-cromonilmetil carbamate (Tcroc), m-nitrofenil carbamate, 3,5-dimetoxibenzil carbamate, o-nitrobenzil carbamate, 3,4-dimetoxi-6-nitrobenzil carbamate, fenil(o-nitrofenil)metil carbamate, derivado de fenotiazinil-(10)-carbonila, /V-p-toluenossulfonilami- nocarbonil derivado, derivado de A/-fenilaminotiocarbonila, t-amil carbamate, S-benzil tiocarbamato, p-cianobenzil carbamate, ciclobutil carbamate, ciclo- hexil carbamate, ciclopentil carbamate, ciclopropilmetil carbamate, p- deciloxibenzil carbamate, 2,2-dimetoxicarbonilvinil carbamate, o-(/V,/\/-dime- tilcarboxamido)benzil carbamate, 1,1-dimetil-3-(/V,A/-dimetilcarboxamido)pro- pil carbamate, 1,1-dimetilpropinil carbamate, di(2-piridil)metil carbamate, 2- furanilmetil carbamate, 2-iodoetil carbamate, isobornil carbamate, isobutil carbamate, isonicotinil carbamate, p-(p-metoxifenilazo)benzil carbamate, 1- metilciclobutil carbamate, 1-metilciclo-hexil carbamate, 1-metil-1 -ciclopropilmetil carbamate, 1 -metil-1 -(3,5-dimetoxifenil)etil carbamate, 1-metil-1-(p- fenilazofenil)etil carbamate, 1 -metil-1 -feniletil carbamate, 1-metil-1-(4-piri- dil)etil carbamate, fenil carbamate, p-(fenilazo)benzil carbamate, 2,4,6-tri-t- butilfenil carbamate, 4-(trimetilamônio)benzil carbamate, 2,4,6-trimetilbenzil carbamate, formamida, acetamida, cloroacetamida, tricloroacetamida, trifluo- racetamida, fenilacetamida, 3-fenilpropanamida, picolinamida, 3-piridilcar- boxamida, derivado de A/-benzoilfenilalanila, benzamida, p-fenilbenzamida, o-nitofenilacetamida, o-nitrofenoxiacetamida, acetoacetamida, (/V’-ditioben- ziloxicarbonilamino)acetamida, 3-(p-hidroxifenil)propanamida, 3-(o-nitrofe- nil)propanamida, 2-metil-2-(o-nitrofenoxi)propanamida, 2-metil-2-(o-fenilazo- fenoxi)propanamida, 4-clorobutanamida, 3-metil-3-nitrobutanamida, o-nitro- cinnamida, derivado de A/-acetilmetionine, o-nitrobenzamida, o-(benzoilo- ximetil)benzamida, 4,5-difenil-3-oxazolin-2-one, A/-ftalimida, ZV-ditiasuc- cinimida (Dts), /V-2,3-difenilmaleimida, A/-2,5-dimetilpirrol, aduto /V-1,1,4,4- tetrametildisililazaciclopentano (STABASE), 5-substituido 1,3-dimetil-l ,3,5- triazaciclo-hexan-2-ona, 5-substituido 1,3-dibenzil-1,3,5-triazaciclo-hexan-2- ona, 1-substituído 3,5-dinitro-4-piridona, A/-metilamina, /V-alilamina, A/-[2- (trimetilsilil)etoxi]metilamina (SEM), A/-3-acetoxipropilamina, Δ/-(1-isopropil-4- nitro-2-oxo-3-piroolin-3-il)amina, sais de amónio quaternário, A/-benzilamina, A/-di(4-metoxifenil)metilamina, A/-5-dibenzosuberilamina, /V-trifenilmetilamina (Tr), A/-[(4-metoxifenil)difenilmetil]amina (MMTr), A/-9-fenilfluorenilamina (PhF), /V-2,7-dicloro-9-fluorenilmetilenoamina, A/-ferrocenilmetilamino (Fem), A/-2-picolilamino A/-oxido, A/-1,1-dimetiltiometilenoamina, /V-benzilide- neamina, A/-p-metoxibenzilideneamina, /V-difenilmetilenoamina, /V-[(2- piridil)mesitil]metilenoamina, A/-(A/’,A/’-dimetilaminometileno)amina, N,N’- isopropilidenediamina, /V-p-nitrobenzilideneamina, /V-salicilideneamina, A/-5- clorosalicilideneamina, /V-(5-cloro-2-hidroxifenil)fenilmetilenoamina, A/-ciclo- hexilideneamina, A/-(5,5-dimetil-3-oxo-1-ciclo-hexenil)amina, derivado de N- borano, derivado de ácido /V-difenilborinico, A/-[fenil(pentacarbonilcromo- ou tungstênio)carboni!]amina, A/-cobre celato, /V-zinco celato, /V-nitroamina, N- nitrosoamina, amina A/-óxido, difenilfosfinamida (Dpp), dimetiltiofosfinamida (Mpt), difeniltiofosfinamida (Ppt), dialquil fosforamidatos, dibenzil fosforami- dato, difenil fosforamidato, benzenossulfenamida, o-nitrobenzenossulfe- namida (Nps), 2,4-dinitrobenzenossulfenamida, pentaclorobenzenossulfe- namida, 2-nitro-4-metoxibenzenossulfenamida, trifenilmetilsulfenamida, 3- nitropiridinesulfenamida (Npys), p-toluenossulfonamida (Ts), benzenossulfo- namida, 2,3,6,-trimetil-4-metoxibenzenossulfonamida (Mtr), 2,4,6-trimeto- xibenzenossulfonamida (Mtb), 2,6-dimetil-4-metoxibenzenossulfonamida (Pme), 2,3,5,6-tetrametil-4-metoxibenzenossulfonamida (Mte), 4-metoxiben- zenossulfonamida (Mbs), 2,4,6-trimetilbenzenossulfonamida (Mts), 2,6- dimetoxi-4-metilbenzenossulfonamida (iMds), 2,2,5,7,8-pentametilcroman-6- sulfonamida (Pmc), metanossulfonamida (Ms), β-trimetilsililetanossulfo- namida (SES), 9-antracenossulfonamida, 4-(4’,8’-dimetoxinaftilmetil)ben- zenossulfonamida (DNMBS), benzilsulfonamida, trifluormetilsulfonamida, e fenacilsulfonamida.

Conforme usado aqui, o termo “inibidor” é definido como um composto que se liga a e/ou inibe a proteína contendo bromodomínio alvo (como uma proteína BET, por exemplo, BRD2, BRD3, BRD4, e/ou BRDT) com afinidade mensurável. Em certas modalidades, um inibidor tem uma IC5o e/ou constante de ligação de menos do que cerca de 50 pM, menos do que cerca de 1 μM, menos do que cerca de 500 nM, menos do que cerca de 100 nM, ou menos do que cerca de 10 nM.

Os termos “afinidade mensurável” e “mensuravelmente inibe” conforme usados aqui, significa uma alteração mensurável em atividade de pelo menos uma proteína contendo bromodomínio entre uma amostra compreendendo um composto fornecido, ou composição do mesmo, e pelo menos uma histona metiltransferase, e uma amostra equivalente compreendendo pelo menos uma proteína contendo bromodomínio, na ausência de dito composto, ou composição do mesmo.

O termo “sujeito” conforme usado aqui refere-se a um mamífero. Um sujeito, portanto, refere-se a, por exemplo, cães, gatos, cavalos, vacas, porcos, cobaias, e similares. Preferencialmente 0 sujeito é um humano. Quando 0 sujeito é um humano, o sujeito pode ser ou um paciente ou um humano saudável.

Conforme usado aqui, 0 termo “sal farmaceuticamente aceitável” refere-se àqueles sais de compostos formados pelo processo da presente invenção que estão, dentro do escopo do julgamento médico, apropriados para uso em contato com os tecidos de humanos e animais inferiores sem toxicidade indevida, irritação, resposta alérgica e similares, e são fornecidos com uma razão razoável de risco/benefício. Sais farmaceuticamente aceitáveis são bem conhecidos na técnica. Por exemplo, S. M. Berge, et al. descreve sais farmaceuticamente aceitáveis em detalhes em J. Pharmaceutical Sciences, 66: 1-19 (1977). Os sais podem ser preparados in situ durante o isolamento e purificação final dos compostos da invenção, ou separadamente por reação de função de base livre com um ácido orgânico apropriado. Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, entre outros, sais de adição de ácido não tóxicos, ou sais de um grupo amino formados com ácidos inorgânicos como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido fosfórico, ácido sulfúrico e ácido perclórico ou com ácidos orgânicos como ácido acético, ácido maleico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido succínico ou ácido ma- lônico ou usando outros métodos usados na técnica como troca iônica. Outros sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, entre outros, sais de adipa- to, alginato, ascorbato, aspartate, benzenossulfonato, benzoate, bisulfato, borato, butirato, camforato, camforsulfonato, citrato, ciclopentanopropionato, digluconato, dodecilsulfato, etanossulfonato, formato, fumarate, glucoheptonate, glicerofosfato, gluconate, hemisulfato, heptanoato, hexanoate, hidroiodeto, 2-hidróxi-etanossulfonato, lactobionato, lactato, laurato, lauril sulfato, malato, maleato, malonato, metanossulfonato, 2-naftalenossulfonato, nicotinate, nitrato, oleate, oxalate, palmitate, pamoate, pectinate, persulfate, 3-fenilpropionato, fosfato, picrato, pivalate, propionate, estearato, succinate, sulfato, tartrato, tiocianato, p-toluenossulfonato, undecanoato, valerato, e similares. Sais de metal alcalino ou alcalinos terrosos representativos incluem sais de sódio, lítio, potássio, cálcio, ou magnésio, e similares. Outros sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, quando apropriado, cátions de amónio não tóxicos, amónio quaternário, e cátions de amina formados usando contraíons como haleto, hidróxido, carboxilato, sulfato, fosfato, nitrato, alquila contendo de 1 a 6 átomos de carbono, sulfonate e aril sulfonate.

Conforme usado aqui, o termo “éster farmaceuticamente aceitável” refere-se aos ésteres dos compostos formados pelo processo da presente invenção que hidrolisam in vivo e incluem aqueles que se quebram prontamente no corpo humano para deixar o composto parente ou um sal do mesmo. Grupos éster apropriados incluem, por exemplo, aqueles derivados de ácidos carboxílicos alifáticos farmaceuticamente aceitáveis, particularmente ácidos alcanoico, alquenoico, cicloalcanoico e alcanodioicos, em que cada fração alquila ou alquenila vantajosamente tem não mais do que 6 átomos de carbono. Exemplos de ésteres particulares incluem, entre outros, formatos, acetatos, propionates, butiratos, acrilatos e etilsuccinatos.

O termo “profármacos farmaceuticamente aceitáveis” conforme usado aqui refere-se àquelas profármacos dos compostos formados pelo processo da presente invenção que estão, dentro do escopo e julgamento médico, apropriado para uso em contato com os tecidos de humanos e animais inferiores com toxicidade indevida, irritação, resposta alérgica, e similares, proporcionada com uma razão razoável de risco/benefício, e efetivo para seu uso pretendido, bem como formas zwitterionicas, onde possível, dos compostos da presente invenção. “Pró-droga”, conforme usado aqui significa um composto que é conversível in vivo por meio metabólico (por exemplo, por hidrólise) para obter qualquer composto delineado pelas fórmulas da presente invenção. Várias formas de profármacos são conhecidas na técnica, por exemplo, como discutidos em Bundgaard, (ed.), Design of Prodrugs, Elsevier (1985); Widder, et al. (ed.), Methods in Enzymology, vol. 4, Academic Press (1985); Krogsgaard-Larsen, et al., (ed). “Design and Application of Prodrugs, Textbook of Drug Design and Development, Chapter 5, 113-191 (1991); Bundgaard, et al., Journal of Drug Deliver Reviews, 8:1-38(1992); Bundgaard, J. of Pharmaceutical Sciences, 77:285 et seq. (1988); Higuchi e Stella (eds.) Prodrugs as Novel Drug Delivery Systems, American Chemical Society (1975); e Bernard Testa & Joachim Mayer, “Hydrolysis In Drug and Prodrug Metabolism: Chemistry, Biochemistry and Enzymology,” John Wiley e Sons, Ltd. (2002).

Combinações de substituintes e variáveis vislumbradas por esta invenção são somente aqueles que resultam na formação de compostos estáveis. O termo “estável”, conforme usado aqui, refere-se aos compostos que possuem estabilidade suficiente para permitir fabricação e que mantém a integridade do composto por um período de tempo suficiente a ser útil para a finalidade detalhada aqui (por exemplo, administração terapêutica ou profilática a um sujeito).

Descrição de compostos exemplares

Em um aspecto, a invenção fornece um composto de fórmula I:

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: XéOou N; Y é O ou N; em que pelo menos um de X ou Y é O; R-i é H, alquila, alquenila, alquinila, aralquila, arila, heteroarila, halo, CN, ORA, NRARB, N(RA)S(O)qRARB, N(RA)C(O)RB, N(RA)C(O)NRARB, N(RA)C(O)ORA, N(RA)C(S)NRARB, S(O)qRA, C(O)RA, C(O)ORA, OC(O)RA, OU C(O)NRARB; cada RA é independentemente alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída ou alquinila opcionalmente substituída, cada um contendo 0, 1, 2, ou 3 heteroátomos selecionados de O, S, ou N; arila opcionalmente substituída; heteroarila opcionalmente substituída; heterocíclico opcionalmente substituído; carbocíclico opcionalmente substituído; ou hidrogênio; cada RBé independentemente alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída ou alquinila opcionalmente substituída, cada um contendo 0, 1, 2, ou 3 heteroátomos selecionados de O, S, ou N; arila opcionalmente substituída; heteroarila opcionalmente substituída; heterocíclico opcionalmente substituído; carbocíclico opcionalmente substituído; ou hidrogênio; ou RA e RB, juntos com os átomos aos quais cada um é fixado, podem formar um heterocicloalquila ou um heteroarila; cada um dos quais é opcionalmente substituído; Anel A é cicloalquila, arila, heterocicloalquila, ou heteroarila; Rc é alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, arila, heterocicloalquila, ou heteroarila, cada um opcionalmente substituído com 1 a 5 independentemente selecionados de R4, e quando L é outro além de uma ligação covalente, Rc é adicionalmente selecionado de H; R2 e R3 são cada um independentemente H, halogênio, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila opcionalmente substituída, arila opcionalmente substituída, aralquila opcio-nalmente substituída, cicloalquila opcionalmente substituída, heteroarila op-cionalmente substituída, heterocicloalquila opcionalmente substituída, -OR, - SR, -CN, -N(R’)(R”), -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, -C(O)N(R')(R”), -C(O)SR, - C(O)C(O)R, -C(O)CH2C(O)R, -C(S)N(R')(R”), -C(S)OR, -S(O)R, -SO2R, - SO2N(R')(R”). -N(R')C(O)R, -N(R')C(O)N(R')(R”), -N(R')C(S)N(R')(R”), - N(R')SO2R, -N(R')SO2N(R')(R”), -N(R')N(R')(R”), -N(R')C(=N(R'))N(R')(R”), - C=NN(R')(R”), -C=NOR, -C(=N(R'))N(R')(R”), -OC(O)R, -OC(O)N(R')(R”), ou -(CH2)pRx, ou R2 e R3 juntos com os átomos aos quais cada um é fixado, formam um opcionalmente anel espiro-fundido substituído 3 a 7 membros saturado ou insaturado contendo 0 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre; cada Rx é independentemente halogênio, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila opcionalmente substituída, arila opcionalmente substituída, aralquila opcionalmente substituída, cicloalquila opcionalmente substituída, heteroarila opcionalmente substituída, heterocicloalquila opcionalmente substituída, -OR, -SR, -CN, - N(R')(R”), -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, -C(O)N(R')(R”), -C(O)SR, -C(O)C(O)R, - C(O)CH2C(O)R, -C(S)N(R')(R”), -C(S)OR, -S(O)R, -SO2R, -SO2N(R')(R”), - N(R')C(O)R, -N(R')C(O)N(R')(R”), -N(R’)C(S)N(R')(R”), -N(R')SO2R, - N(R')SO2N(R')(R”), -N(R')N(R')(R”), -N(R')C(=N(R'))N(R')(R”), -C=NN(R')(R”), -C=NOR, -C(=N(R'))N(R')(R”), -OC(O)R, -OC(O)N(R')(R”); L1 é uma ligação covalente ou uma cadeia de hidrocarboneto Ci. 6 bivalente opcionalmente substituído em que uma ou duas unidades de me- tileno é opcionalmente substituída por -NR'-, -N(R')C(O)-, -C(O)N(R')-, - N(R')SO2-, -SO2N(R')-, -O-, -C(O)-, -OC(O)-, -C(O)O-, -S-, -SO- ou -SO2-; cada R é independentemente hidrogênio, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila opcionalmente substituída, arila opcionalmente substituída, aralquila opcionalmente substituída, cicloalquila opcionalmente substituída, heteroarila opcionalmente substituída, ou opcionalmente substituído heterocicloalquila; cada R' é independentemente -R, -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, - C(O)N(R)2, -C(S)N(R)2, -S(O)R, -SO2R, -SO2N(R)2, OU dois grupos R no mesmo nitrogênio são tomados juntos com seus átomos intervenientes para formar um heteroarila opcionalmente substituída ou grupo heterocicloalquila; cada R” é independentemente -R, -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, - C(O)N(R)2, -C(S)N(R)2I -S(O)R, -SO2R, -SO2N(R)2, OU dois grupos R no mesmo nitrogênio são tomados juntos com seus átomos intervenientes para formar um heteroarila opcionalmente substituída ou grupo heterocicloalquila; ou R’ e R”, juntos com os átomos aos quais cada um é fixado, podem formar um cicloalquila, um heterocicloalquila, um arila, ou um heteroarila; cada um dos quais é opcionalmente substituído; cada R4 é independentemente alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila opcionalmente substituída, arila opcionalmente substituída, aralquila opcionalmente substituída, cicloalquila opcionalmente substituída, heteroarila opcionalmente substituída, ou heterocicloalquila opcionalmente substituída, halogênio, -OR, -SR, - N(R')(R”), -CN, -NO2, -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, -C(O)N(R')(R”), -C(O)SR, - C(O)C(O)R, -C(O)CH2C(O)R, -C(S)N(R')(R”), -C(S)OR, -S(O)R, -SO2R, - SO2N(R')(R”), -N(R')C(O)R, -N(R')C(O)N(R')(R”), -N(R')C(S)N(R')(R”), - N(R')SO2R, -N(R')SO2N(R')(R”), -N(R')N(R')(R”), -N(R')C(=N(R'))N(R’)(R”), - C=NN(R')(R”), -C=NOR, -C(=N(R'))N(R')(R”), -OC(O)R, ou -OC(O)N(R')(R”); cada R5 é independentemente -R, halogênio, -OR, -SR, - N(R')(R”), -CN, -NO2, -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, -C(O)N(R')(R”), -C(O)SR, - C(O)C(O)R, -C(O)CH2C(O)R, -C(S)N(R')(R”), -C(S)OR, -S(O)R, -SO2R, - SO2N(R’)(R”), -N(R')C(O)R, -N(R')C(O)N(R')(R”), -N(R')C(S)N(R')(R”), - N(R')SO2R, -N(R')SO2N(R')(R”), -N(R')N(R')(R”), -N(R')C(=N(R'))N(R')(R”), - C=NN(R')(R”), -C=NOR, -C(=N(R'))N(R')(R”), -OC(O)R, ou -OC(O)N(R')(R”); n é 0-5; cada q é independentemente 0, 1, ou 2; e p é 1-6.

Em uma modalidade, a invenção fornece um composto de fórmula II ou Fórmula III:

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: Ri é H, alquila, alquenila, alquinila, aralquila, arila, heteroarila, halo, CN, ORA, NRARB, N(RA)S(O)qRARB, N(RA)C(O)RB, N(RA)C(O)NRARB, N(RA)C(O)ORA, N(RA)C(S)NRARB, S(O)qRA, C(O)RA, C(O)ORA, OC(O)RA, OU C(O)NRARB; cada RA é independentemente alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída ou alquinila opcionalmente substituída, cada um contendo 0, 1, 2, ou 3 heteroátomos selecionados de O, S, ou N; arila opcionalmente substituída; heteroarila opcionalmente substituída; hete- rocíclico opcionalmente substituído; carbocíclico opcionalmente substituído; ou hidrogênio; cada RB é independentemente alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída ou alquinila opcionalmente substituída, cada um contendo 0, 1, 2, ou 3 heteroátomos selecionados de O, S, ou N; arila opcionalmente substituída; heteroarila opcionalmente substituída; hete- rocíclico opcionalmente substituído; carbocíclico opcionalmente substituído; ou hidrogênio; ou RA e RB, juntos com os átomos aos quais cada um é fixado, podem formar um heterocicloalquila ou um heteroarila; cada um dos quais é opcionalmente substituído; Anel A é um anel arila fundido de 5 a 6 membros; um anel heteroarila fundido de 5 a 6 membros contendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre; um anel arila bicí- clico de 8 a 12 membros; ou um anel heteroarila bicíclico de 8 a 12 membros contendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; Rc é alquila, alquenila, alquinila, um anel carbocíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 3 a 7 membros; um anel arila de 3 a 7 membros; um anel carbocíclico bicíclico de saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 8 a 12 membros; um anel arila bicíclico de 8 a 12 membros; um anel heterocíclico saturado, 5 parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 3 a 7 membros contendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; um anel heteroarila monocíclico de 3 a 7 membros contendo 1 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; um anel heterocíclico bicíclico saturado, parcialmen- 10 te insaturado ou completamente insaturado de 7 a 10 membros contendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; ou um anel heteroarila bicíclico de 7 a 10 membros contendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre, cada um opcionalmente substituído com 1 a 5 independentemente 15 selecionados de R4, e quando L é outro além de uma ligação covalente, Rc é adicionalmente selecionado de H; R2 e R3 são cada um independentemente H, halogênio, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila opcionalmente substituída, arila opcionalmente substituída, aralquila opcio- 20 nalmente substituída, cicloalquila opcionalmente substituída, heteroarila opcionalmente substituída, heterocicloalquila opcionalmente substituída, -OR, - SR, -CN, -N(R')(R”), -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, -C(O)N(R')(R”), -C(O)SR, - C(O)C(O)R, -C(O)CH2C(O)R, -C(S)N(R')(R”), -C(S)OR, -S(O)R, -SO2R, - SO2N(R')(R”), -N(R')C(O)R, -N(R')C(O)N(R')(R”), -N(R')C(S)N(R')(R”), - 25 N(R')SO2R, -N(R')SO2N(R')(R”), -N(R')N(R')(R”), -N(R')C(=N(R'))N(R')(R”), - C=NN(R')(R”), -C=NOR, -C(=N(R'))N(R')(R”), -OC(O)R, -OC(O)N(R')(R”), ou -(CH2)pRx, ou R2 e R3 juntos com os átomos aos quais cada um é fixado, formam um anel espiro-fundido opcionalmente substituído de 3 a 7 membros 30 saturado ou insaturado contendo 0 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre; cada Rx é independentemente halogênio, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila opcionalmente substituída, arila opcionalmente substituída, aralquila opcionalmente substituída, cicloalquila opcionalmente substituída, heteroarila opcionalmente substituída, heterocicloalquila opcionalmente substituída, -OR, -SR, -CN, - N(R')(R”), -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, -C(O)N(R')(R”), -C(O)SR, -C(O)C(O)R, - C(O)CH2C(O)R, -C(S)N(R')(R”), -C(S)OR, -S(O)R, -SO2R, -SO2N(R')(R”), - N(R')C(O)R, -N(R')C(O)N(R')(R”), -N(R')C(S)N(R')(R”), -N(R')SO2R, - N(R')SO2N(R')(R”), -N(R')N(R')(R”), -N(R')C(=N(R'))N(R')(R”), -C=NN(R')(R”), -C=NOR, -C(=N(R'))N(R')(R”), -OC(O)R, -OC(O)N(R’)(R”); L1 é uma ligação covalente ou uma cadeia de hidrocarboneto 6 bivalente opcionalmente substituído em que uma ou duas unidades de me- tileno é opcionalmente substituída por -NR'-, -N(R')C(O)-, -C(O)N(R')-, - N(R')SO2-, -SO2N(R')-, -O-, -C(O)-, -OC(O)-, -C(O)O-, -S-, -SO- ou -SO2-; cada R é independentemente hidrogênio, Ci_6 alifático, um anel arila de 5 a 6 membros, um anel carbocíclico saturado, parcialmente insaturado, ou completamente insaturado de 3 a 7 membros, um anel carbocíclico bicíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 7 a 12 membros, um anel heteroarila monocíclico de 3 a 7 membros contendo 1 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre, um anel heterocíclico saturado, parcialmente insaturado, ou completamente insaturado de 3 a 7 membros contendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre, um anel heterocíclico bicíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 7 a 12 membros contendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre, ou um anel heteroarila bicíclico de 7 a 12 membros contendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; cada um dos quais é opcionalmente substituído; cada R' é independentemente -R, -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, - C(O)N(R)2, -C(S)N(R)2J -S(O)R, -SO2R, -SO2N(R)2, OU dois R no mesmo nitrogênio são tomados juntos com seus átomos intervenientes para formar um anel heterocíclico monocíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 3 a 7 membros contendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; um anel heterocíclico fundido bicíclico saturado, parcialmente insaturado ou comple-tamente insaturado de 7 a 12 membros contendo 1 a 3 heteroátomos inde-pendentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; um anel he-teroarila monocíclico de 3 a 7 membros; ou um heteroarila bicíclico de 7 a 12 membros; cada um dos quais é opcionalmente substituído; cada R” é independentemente -R, -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, - C(O)N(R)2, -C(S)N(R)2, -S(O)R, -SO2R, -SO2N(R)2, OU dois R no mesmo nitrogênio são tomados juntos com seus átomos intervenientes para formar um anel heterocíclico monocíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 3 a 7 membros contendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; um anel heterocíclico fundido bicíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 7 a 12 membros contendo 1 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; um anel heteroarila monocíclico de 3 a 7 membros; ou um heteroarila bicíclico de 7 a 12 membros; cada um dos quais é opcionalmente substituído; ou R’ e R”, juntos com os átomos aos quais cada um é fixado, podem formar um anel heterocíclico monocíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 3 a 7 membros contendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; um anel heterocíclico fundido bicíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 7 a 12 membros contendo 1 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; um anel heteroarila monocíclico de 3 a 7 membros; ou um heteroarila bicíclico de 7 a 12 membros; cada um dos quais é opcionalmente substituído; cada R4 é independentemente alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila opcionalmente substituída, arila opcionalmente substituída, aralquila opcionalmente substituída, cicloalquila opcionalmente substituída, heteroarila opcionalmente substituída, ou heterocicloalquila opcionalmente substituída, halogênio, -OR, -SR, - N(R')(R”), -CN, -NO2, -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, -C(O)N(R')(R”), -C(O)SR, - C(O)C(O)R, -C(O)CH2C(O)R, -C(S)N(R')(R”), -C(S)OR, -S(O)R, -SO2R, - SO2N(R')(R”), -N(R')C(O)R, -N(R')C(O)N(R')(R”), -N(R')C(S)N(R')(R”), - N(R')SO2R, -N(R')SO2N(R')(R”), -N(R')N(R’)(R”), -N(R')C(=N(R'))N(R')(R”), - C=NN(R')(R”), -C=NOR, -C(=N(R'))N(R')(R”), -OC(O)R, ou -OC(O)N(R')(R”); cada R5 é independentemente -R, halogênio, -OR, -SR, - N(R')(R”), -CN, -NO2, -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, -C(O)N(R')(R”), -C(O)SR, - C(O)C(O)R, -C(O)CH2C(O)R, -C(S)N(R')(R”), -C(S)OR, -S(O)R, -SO2R, - SO2N(R')(R”), -N(R')C(O)R, -N(R')C(O)N(R')(R”), -N(R')C(S)N(R’)(R”), - N(R')SO2R, -N(R')SO2N(R')(R”), -N(R')N(R’)(R”), -N(R')C(=N(R'))N(R')(R”), - C=NN(R')(R”), -C=NOR, -C(=N(R'))N(R’)(R”), -OC(O)R, ou -OC(O)N(R')(R”); n é 0-5; cada q é independentemente 0, 1, ou 2; e p é 1-6.

Em certas modalidades, Anel A é benzo ou um anel heteroarila fundido de 5 a 6 membros contendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre.

Em outras modalidades, Rc é um anel arila de 3 a 7 membros; anel carbocíclico saturado ou parcialmente insaturado de 3 a 7 membros ou um anel heterocíclico saturado ou parcialmente insaturado de 4 a 7 membros contendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre, em que Rc é opcionalmente substituído com 1 a 5 independentemente selecionados de R4.

Em várias modalidades, R2 é H, halogênio, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila opcionalmente substituída, arila opcionalmente substituída, aralquila opcionalmente substituída, cicloalquila opcionalmente substituída, heteroarila opcionalmente substituída, heterocicloalquila opcionalmente substituída, -OR, -SR, -CN, - N(R')(R”), -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, -C(O)N(R')(R”), -C(O)SR, ou -(CH2)PRX.

Ainda em outras modalidades, R3 é H, halogênio, alquila opcio-nalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila opcio-nalmente substituída, arila opcionalmente substituída, aralquila opcionalmen te substituída, cicloalquila opcionalmente substituída, heteroarila opcionalmente substituída, heterocicloalquila opcionalmente substituída, -OR, -SR, - CN, -N(R')(R”), -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, -C(O)N(R')(R”), -C(O)SR, ou - (CH2)PRX.

Em certas modalidades, R2 e R3, juntos com os átomos aos quais cada um é fixado, forma um anel espiro fundido saturado ou parcialmente insaturado de 3 a 7 membros opcionalmente substituído contendo 0 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre.

Em outras modalidades, quando X é N e Y é O, Ri é H, alquila, alquenila, alquinila, aralquila, arila, heteroarila, halo, CN, ORA, NRARB, N(RA)S(O)qRARB, N(RA)C(O)RB, N(RA)C(O)NRARB, N(RA)C(O)ORA, N(RA)C(S)NRARB, S(O)qRA, C(O)RA, C(O)ORA, OC(O)RA, OU C(O)NRARB; com a provisão que Ri não é -OH.

Em outras modalidades, quando XéNeYéO, o composto não é 6-fenil-4/-/-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-1 -ol.

Em outras modalidades, quando XéNeYéO, Lié uma ligação covalente e Rc é alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, heterocicloalquila, ou heteroarila, cada um opcionalmente substituído com 1 a 5 independentemente selecionados de R4, ou arila substituída com 1 a 5 independentemente selecionados de R4.

Em outras modalidades, quando XéNeYéO, Rcé arila substituída com 1 a 5 independentemente selecionados de R4.

Em outras modalidades, Li é uma ligação covalente e a invenção fornece um composto de fórmula ll-A:

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: R-i é H, alquila, aralquila, arila, heteroarila, halo, ORA, NRARB, S(O)qRA, C(O)RA, C(O)ORA, OC(O)RA, OU C(O)NRARB; cada RA é independentemente alquila opcionalmente substituída, contendo 0, 1, 2, ou 3 heteroátomos selecionados de O, S, ou N; arila opcio-nalmente substituída; heteroarila opcionalmente substituída; heterocíclico opcionalmente substituído; carbocíclico opcionalmente substituído; ou hidrogênio; cada RB é independentemente alquila opcionalmente substituída, contendo 0, 1, 2, ou 3 heteroátomos selecionados de O, S, ou N; arila opcio-nalmente substituída; heteroarila opcionalmente substituída; heterocíclico opcionalmente substituído; carbocíclico opcionalmente substituído; ou hidrogênio; Anel A é benzo ou um anel heteroarila fundido de 5 a 6 membros contendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre, que é opcionalmente substituído; Rc é um anel carbocíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 3 a 7 membros; um anel arila de 3 a 7 membros; ou um anel heterocíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 3 a 7 membros contendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre, em que Rc é opcionalmente substituído com 1 a 5 independentemente selecionados de R4; R2 e R3 são cada um independentemente H, halogênio, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila opcionalmente substituída, arila opcionalmente substituída, aralquila opcio-nalmente substituída, cicloalquila opcionalmente substituída, heteroarila op-cionalmente substituída, heterocicloalquila opcionalmente substituída, -OR, - SR, -CN, -N(R')(R”), -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, C(O)N(R')(R”), -C(O)SR, ou - (CH2)PRX, ou R2 e R3 juntos com os átomos aos quais cada um é fixado, formam um anel espiro-fundido opcionalmente substituído de 3 a 7 membros saturado ou insaturado contendo 0 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre; cada Rx é independentemente halogênio, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila opcionalmente substituída, arila opcionalmente substituída, aralquila opcionalmente substituída, cicloalquila opcionalmente substituída, heteroarila opcionalmente substituída, heterocicloalquila opcionalmente substituída, -OR, -SR, -CN, - N(R')(R”), -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, -C(O)N(R')(R”), -C(O)SR, -C(O)C(O)R, - C(O)CH2C(O)R, -C(S)N(R')(R”), -C(S)OR, -S(O)R, -SO2R, -SO2N(R')(R”), - N(R')C(O)R, -N(R')C(O)N(R')(R”), -N(R')C(S)N(R')(R”), -N(R’)SO2R, - N(R')SO2N(R')(R”), -N(R')N(R')(R”), -N(R')C(=N(R'))N(R’)(R”), -C=NN(R')(R”), -C=NOR, -C(=N(R'))N(R')(R”), -OC(O)R, -OC(O)N(R')(R”); cada R é independentemente hidrogênio, Ci_6 alifático, um anel arila de 5 a 6 membros, um anel carbocíclico saturado, parcialmente insaturado, ou completamente insaturado de 3 a 7 membros, um anel carbocíclico bicíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 7 a 12 membros, um anel heteroarila monocíclico de 3 a 7 membros contendo 1 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre, um anel heterocíclico saturado, parcialmente insaturado, ou completamente insaturado de 3 a 7 membros contendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre, um anel heterocíclico bicíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 7 a 12 membros contendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre, ou um anel heteroarila bicíclico de 7 a 12 membros contendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; cada um dos quais é opcionalmente substituído; cada R' é independentemente -R, -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, - C(O)N(R)2, -C(S)N(R)2I -S(O)R, -SO2R, -SO2N(R)2, OU dois R no mesmo nitrogênio são tomados juntos com seus átomos intervenientes para formar um anel heterocíclico monocíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 3 a 7 membros contendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; um anel heterocíclico fundido bicíclico saturado, parcialmente insaturado ou comple- tamente insaturado de 7 a 12 membros contendo 1 a 3 heteroátomos inde-pendentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; um anel he-teroarila monocíclico de 3 a 7 membros; ou um heteroarila bicíclico de 7 a 12 membros; cada um dos quais é opcionalmente substituído; cada R” é independentemente -R, -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, - C(O)N(R)2, -C(S)N(R)2I -S(O)R, -SO2R, -SO2N(R)2I OU dois R no mesmo nitrogênio são tomados juntos com seus átomos intervenientes para formar um anel heterocíclico monocíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 3 a 7 membros contendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; um anel heterocíclico fundido bicíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 7 a 12 membros contendo 1 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; um anel heteroarila monocíclico de 3 a 7 membros; ou um heteroarila bicíclico de 7 a 12 membros; cada um dos quais é opcionalmente substituído; ou R’ e R”, juntos com os átomos aos quais cada um é fixado, podem formar um anel heterocíclico monocíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 3 a 7 membros contendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; um anel heterocíclico fundido bicíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 7 a 12 membros contendo 1 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; um anel heteroarila monocíclico de 3 a 7 membros; ou um heteroarila bicíclico de 7 a 12 membros; cada um dos quais é opcionalmente substituído; cada R4 é independentemente alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila opcionalmente substituída, arila opcionalmente substituída, aralquila opcionalmente substituída, cicloalquila opcionalmente substituída, heteroarila opcionalmente substituída, ou heterocicloalquila opcionalmente substituída, halogênio, -OR, -SR, - N(R')(R”), -CN, -NO2, -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, -C(O)N(R')(R”), -C(O)SR, - C(O)C(O)R, -C(O)CH2C(O)R, -C(S)N(R')(R”), -C(S)OR, -S(O)R, -SO2R, - SO2N(R’)(R”), -N(R')C(O)R, -N(R')C(O)N(R')(R”), -N(R')C(S)N(R')(R”), - N(R')SO2R, -N(R')SO2N(R')(R”), -N(R')N(R')(R”), -N(R')C(=N(R'))N(R')(R”), - C=NN(R')(R”), -C=NOR, -C(=N(R'))N(R')(R”), -OC(O)R, ou -OC(O)N(R')(R”); cada R5 é independentemente -R, halogênio, -OR, -SR, - N(R')(R”), -CN, ou -NO2; n é 0-5; q é 0, 1, ou 2; e p é 1-6.

Em outras modalidades, Li é uma ligação covalente e a invenção fornece um composto de fórmula lll-A:

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: Ri é H, alquila, aralquila, arila, heteroarila, halo, ORA, NRARB, S(O)qRA, C(O)RA, C(O)ORA, OC(O)RA, OU C(O)NRARB; cada RA é independentemente alquila opcionalmente substituída, contendo 0, 1, 2, ou 3 heteroátomos selecionados de O, S, ou N; arila opcio-nalmente substituída; heteroarila opcionalmente substituída; heterocíclico opcionalmente substituído; carbocíclico opcionalmente substituído; ou hidro-gênio; cada RB é independentemente alquila opcionalmente substituída, contendo 0, 1, 2, ou 3 heteroátomos selecionados de O, S, ou N; arila opcio-nalmente substituída; heteroarila opcionalmente substituída; heterocíclico opcionalmente substituído; carbocíclico opcionalmente substituído; ou hidro-gênio; ou RA e RB, juntos com os átomos aos quais cada um é fixado, podem formar um cicloalquila, um heterocicloalquila, um arila, ou um heteroarila; cada um dos quais é opcionalmente substituído; Anel A é benzo ou um anel heteroarilaa fundido de 5 a 6 mem- bros contendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre, que é opcionalmente substituído; Rc é um anel carbocíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 3 a 7 membros; um anel arila de 3 a 7 membros; ou um anel heterocíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 3 a 7 membros contendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre, em que Rc é opcionalmente substituído com 1 a 5 independentemente selecionados de R4; R2 e R3 são cada um independentemente H, halogênio, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila opcionalmente substituída, arila opcionalmente substituída, aralquila opcio-nalmente substituída, cicloalquila opcionalmente substituída, heteroarila op-cionalmente substituída, heterocicloalquila opcionalmente substituída, -OR, - SR, -CN, -N(R')(R”), -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, - C(O)N(R')(R”), -C(O)SR, ou - (CH2)PRX; ou R2 e R3 juntos com os átomos aos quais cada um é fixado, formam um anel espiro-fundido opcionalmente substituído de 3 a 7 membros saturado ou insaturado contendo 0 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre; cada Rx é independentemente halogênio, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila opcionalmente substituída, arila opcionalmente substituída, aralquila opcionalmente substituída, cicloalquila opcionalmente substituída, heteroarila opcionalmente substituída, heterocicloalquila opcionalmente substituída, -OR, -SR, -CN, - N(R’)(R”), -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, -C(O)N(R')(R”), -C(O)SR, -C(O)C(O)R, - C(O)CH2C(O)R, -C(S)N(R')(R”), -C(S)OR, -S(O)R, -SO2R, -SO2N(R')(R”), - N(R')C(O)R, -N(R')C(O)N(R')(R”), -N(R')C(S)N(R')(R”), -N(R')SO2R, - N(R')SO2N(R')(R”), -N(R')N(R')(R”), -N(R')C(=N(R'))N(R')(R”), -C=NN(R')(R”), -C=NOR, -C(=N(R'))N(R')(R”), -OC(O)R, -OC(O)N(R')(R”); cada R é independentemente hidrogênio, C-|.6 alifático, um anel arila de 5 a 6 membros, um anel carbocíclico saturado, parcialmente insatu- rado, ou completamente insaturado de 3 a 7 membros, um anel carbocíclico bicíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 7 a 12 membros, um anel heteroarila monocíclico de 3 a 7 membros contendo 1 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre, um anel heterocíclico saturado, parcialmente insaturado, ou completamente insaturado de 3 a 7 membros contendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre, um anel heterocíclico bicíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 7 a 12 membros contendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre, ou um anel heteroarila bicíclico de 7 a 12 membros contendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; cada um dos quais é opcionalmente substituído; cada R' é independentemente -R, -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, - C(O)N(R)2, -C(S)N(R)2, -S(O)R, -SO2R, -SO2N(R)2I OU dois R no mesmo nitrogênio são tomados juntos com seus átomos intervenientes para formar um anel heterocíclico monocíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 3 a 7 membros contendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; um anel heterocíclico fundido bicíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 7 a 12 membros contendo 1 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; um anel heteroarila monocíclico de 3 a 7 membros; ou um heteroarila bicíclico de 7 a 12 membros; cada um dos quais é opcionalmente substituído; cada R” é independentemente -R, -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, - C(O)N(R)2, -C(S)N(R)2, -S(O)R, -SO2R, -SO2N(R)2, OU dois R no mesmo nitrogênio são tomados juntos com seus átomos intervenientes para formar um anel heterocíclico monocíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 3 a 7 membros contendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; um anel heterocíclico fundido bicíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 7 a 12 membros contendo 1 a 3 heteroátomos inde pendentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; um anel he-teroarila monocíclico de 3 a 7 membros; ou um heteroarila bicíclico de 7 a 12 membros; cada um dos quais é opcionalmente substituído; ou R’ e R”, juntos com os átomos aos quais cada um é fixado, podem formar um anel heterocíclico monocíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 3 a 7 membros contendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; um anel heterocíclico fundido bicíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 7 a 12 membros contendo 1 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; um anel heteroarila monocíclico de 3 a 7 membros; ou um heteroarila bicíclico de 7 a 12 membros; cada um dos quais é opcionalmente substituído; cada R4 é independentemente alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila opcionalmente substituída, arila opcionalmente substituída, aralquila opcionalmente substituída, cicloalquila opcionalmente substituída, heteroarila opcionalmente substituída, ou heterocicloalquila opcionalmente substituída, halogênio, -OR, -SR, - N(R')(R”), -CN, -NO2, -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, -C(O)N(R')(R”), -C(O)SR, - C(O)C(O)R, -C(O)CH2C(O)R, -C(S)N(R')(R”), -C(S)OR, -S(O)R, -SO2R, - SO2N(R')(R”), -N(R')C(O)R, -N(R')C(O)N(R')(R”), -N(R')C(S)N(R')(R”), - N(R')SO2R, -N(R')SO2N(R')(R”), -N(R')N(R')(R”), -N(R')C(=N(R'))N(R')(R”), - C=NN(R')(R”), -C=NOR, -C(=N(R'))N(R')(R”), -OC(O)R, ou -OC(O)N(R')(R”); cada R5 é independentemente -R, halogênio, -OR, -SR, - N(R')(R”), -CN, ou -NO2; n é 0-5; q é 0, 1, ou 2; e p é 1-6.

Em certas modalidades, Anel A é um anel heteroarila fundido de 6 membros contendo 1 a 2 átomos de nitrogênio. Em outra modalidade, Anel A é pirido, pirimidino, pirazino, ou piridazino.

Em várias modalidades, Anel A é um anel heteroarila fundido de 5 membros contendo 1 heteroátomo selecionado de nitrogênio, oxigênio ou enxofre. Em outra modalidade, Anel A é tieno.

Em outras modalidades, Anel A é um anel heteroarila fundido de 5 membros contendo 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre. Em outra modalidade, Anel A é isotiazolo.

Em outras modalidades, Anel A é benzo.

Em certas modalidades, Rc é fenila ou um anel heterocíclico saturado ou parcialmente insaturado de 4 a 7 membros contendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre. Em outra modalidade, Rc é piperidinila, morfolinila, ou piperazinila. Em cada uma das modalidades acima, Rc é opcionalmente substituído com 1 a 5 in-dependentemente selecionados de R4.

Em outras modalidades, Ri é halo, alquila, aralquila, arila, ou he-teroarila. Em outra modalidade, Ri é metila, etila, propila, i-propila, butila, s- butila, t-butila, pentila, hexila, ou heptila.

Em outras modalidades, R2 é H, metila, etila, propila, i-propila, butila, s-butila, pentila, hexila, -OR, -SR, -CN, -N(R')(R”), -C(O)R, -C(S)R, - CO2R, - C(O)N(R')(R”), -C(O)SR, ou -(CH2)PRX. Em outra modalidade, R2 é H ou -(CH2)PRX.

Em certas modalidades, Rxé -N(R')(R”), -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, -C(O)N(R')(R”), -C(S)N(R')(R”), -S(O)R, -SO2R, -SO2N(R')(R”), -N(R')C(O)R, -N(R')SO2R, -OC(O)R, -OC(O)N(R')(R”), metila, etila, propila, i-propila, butila, s-butila, pentila ou hexila.

Em outras modalidades, R3 é H, metila, etila, propila, i-propila, butila, s-butila, pentila, hexila, -OR, -SR, -CN, -N(R')(R”), -C(O)R, -C(S)R, - CO2R, - C(O)N(R')(R”), -C(O)SR, ou -(CH2)PRX. Em outra modalidade, R2 é H ou -(CH2)PRX.

Em certas modalidades, Rx é -N(R')(R”), -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, -C(O)N(R')(R”), -C(S)N(R')(R”), -S(O)R, -SO2R, -SO2N(R')(R”), -N(R')C(O)R, -N(R')SO2R, -OC(O)R, -OC(O)N(R')(R”), metila, etila, propila, i-propila, butila, s-butila, pentila ou hexila.

Em certas modalidades, R2 e R3 juntos com os átomos aos quais cada um é fixado, forma um anel espiro fundido saturado ou parcialmente insaturado de 3 a 7 membros opcionalmente substituído contendo 0 a 3 he-teroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre. Em outra modalidade, R2 e R3 juntos com os átomos aos quais cada um é fixado, formam um ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila, azetidina, oxetano, tetra-hidrofurano, ou pirrolidina opcionalmente substituído.

Em outra modalidade, R2 e R3 são opcionalmente substituídos por halogênio, alquila, alquenila, alquinila, arila, aralquila, cicloalquila, heteroarila, heterocicloalquila, cada um dos quais é ainda opcionalmente substituído; ou R2 e R3 são opcionalmente substituídos por -OR, -SR, -CN, - N(R')(R”), -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, -C(O)N(R')(R”), -C(O)SR, -C(O)C(O)R, - C(O)CH2C(O)R, -C(S)N(R')(R”), -C(S)OR, -S(O)R, -SO2R, -SO2N(R')(R”), - N(R')C(O)R, -N(R')C(O)N(R')(R”), -N(R')C(S)N(R')(R”), -N(R')SO2R, - N(R’)SO2N(R')(R”), -N(R')N(R')(R”), -N(R')C(=N(R'))N(R’)(R”), -C=NN(R')(R”), -C=NOR, -C(=N(R'))N(R’)(R”), -OC(O)R, -OC(O)N(R')(R”), ou -(CH2)PRX.

Em várias modalidades, Rx é halogênio, alquila opcionalmente substituída, alquenila op-cionalmente substituída, alquinila opcionalmente substituída, arila opcionalmente substituída, aralquila opcionalmente substituída, cicloalquila opcionalmente substituída, heteroarila opcionalmente substituída, heterocicloalquila opcionalmente substituída, -OR, -SR, -CN, -N(R')(R”), -C(O)R, -C(S)R, - CO2R, -C(O)N(R')(R”), -C(O)SR, -C(O)C(O)R, -C(O)CH2C(O)R, - C(S)N(R')(R”), -C(S)OR, -S(O)R, -SO2R, -SO2N(R')(R”), -N(R')C(O)R, - N(R')C(O)N(R')(R”), -N(R')C(S)N(R')(R”), -N(R')SO2R, -N(R')SO2N(R')(R”), - N(R')N(R')(R”), -N(R')C(=N(R'))N(R')(R”), -C=NN(R')(R”), -C=NOR, - C(=N(R'))N(R’)(R”), -OC(O)R, -OC(O)N(R')(R”); cada R é independentemente hidrogênio, Ci-6 alifático, um anel arila de 5 a 6 membros, um anel carbocíclico saturado, parcialmente insaturado, ou completamente insaturado de 3 a 7 membros, um anel carbocíclico bicíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 7 a 12 membros, um anel heteroarila monocíclico de 3 a 7 membros conten- do 1 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre, um anel heterocíclico saturado, parcialmente insaturado, ou completamente insaturado de 3 a 7 membros contendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre, um anel heterocíclico bicíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 7 a 12 membros contendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre, ou um anel heteroarila bicíclico de 7 a 12 membros contendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; cada um dos quais é opcionalmente substituído; cada R' é independentemente -R, -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, - C(O)N(R)2, -C(S)N(R)2I -S(O)R, -SO2R, -SO2N(R)2, ou dois R no mesmo nitrogênio são tomados juntos com seus átomos intervenientes para formar um anel heterocíclico monocíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 3 a 7 membros contendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; um anel heterocíclico fundido bicíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 7 a 12 membros contendo 1 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; um anel heteroarila monocíclico de 3 a 7 membros; ou um heteroarila bicíclico de 7 a 12 membros; cada um dos quais é opcionalmente substituído; cada R” é independentemente -R, -C(O)R, -C(S)R, -CO2R, - C(O)N(R)2, -C(S)N(R)2, -S(O)R, -SO2R, -SO2N(R)2I OU dois R no mesmo nitrogênio são tomados juntos com seus átomos intervenientes para formar um anel heterocíclico monocíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 3 a 7 membros contendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; um anel heterocíclico fundido bicíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 7 a 12 membros contendo 1 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; um anel heteroarila monocíclico de 3 a 7 membros; ou um heteroarila bicíclico de 7 a 12 membros; cada um dos quais é opcionalmente substituído; ou R’ e R”, juntos com os átomos aos quais cada um é fixado, podem formar um anel heterocíclico monocíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 3 a 7 membros contendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; um anel heterocíclico fundido bicíclico saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado de 7 a 12 membros contendo 1 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre; um anel heteroarila monocíclico de 3 a 7 membros; ou um heteroarila bicíclico de 7 a 12 membros; cada um dos quais é opcionalmente substituído.

Em cada uma das modalidades de Rc estabelecidos abaixo, Rc é opcionalmente substituído com 1 a 5 independentemente selecionados de R4.

Em algumas modalidades, Rc é fenila.

Em algumas modalidades, Rc é um anel carbocíclico de 3 a 7 membros saturado ou parcialmente insaturado. Em certas modalidades, Rc é ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila, ou ciclo-heptila. Em certas modalidades, Rc é ciclopentenila, ciclo-hexenila, ou ciclo-heptenila.

Em algumas modalidades, Rc é um anel heterocíclico saturado ou parcialmente insaturado de 4 a 7 membros contendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre. Em certas modalidades, Rc é um anel heterocíclico de 5 a 6 membros saturado ou parcialmente insaturado contendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre. Em certas modalidades, Rc é tetra-hidrofuranoila, tetra-hidrotienila, tetra-hidropiranila, tetra-hidrotiopiranila, pirrolidinila, pirrolidonila, piperidinila, pirrolinila, oxazolidinila, piperazinila, dioxanila, dioxolanila, diazepinila, oxazepinila, tiazepinila, ou morfolinila.

Em algumas modalidades, Rc é um anel heteroarila monocíclico de 5 a 6 membros contendo 1 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre.

Em certas modalidades, Rc é um anel heteroarila de 6 membros contendo 1 a 3 átomos de nitrogênio. Em outras modalidades, Rc é um anel heteroarila de 6 membros contendo 1 átomo de nitrogênio. Em certas outras modalidades, Rc é um anel heteroarila de 6 membros contendo 2 átomos de nitrogênio. Ainda em outras modalidades, Rc é um anel heteroarila de 6 membros contendo 3 átomos de nitrogênio.

Em outras modalidades, Rc é um anel heteroarila de 5 membros contendo 1 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre. Em certas modalidades, Rc é um anel heteroarila de 5 membros contendo 1 heteroátomo independentemente selecionado de nitrogênio, oxigênio ou enxofre. Em certas modalidades, Rc é um anel heteroarila de 5 membros contendo 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre. Em outras modalidades, Rc é um anel heteroarila de 5 membros contendo 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio e oxigênio. Em algumas modalidades, Rc é um anel heteroarila de 5 membros contendo 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio e enxofre. Em outras modalidades, Rc é um anel heteroarila de 5 membros contendo 1 a 3 átomos de nitrogênio. Em certas modalidades, Rc é tienila, furanila, pirrolila, imidazolila, pirazolila, triazolila, tetrazolila, oxazolila, isoxazolila, oxadiazolila, tiazolila, isotiazolila, tiadia- zolila, piridila, piridazinila, pirimidinila, ou pirazinila.

Em algumas modalidades, Rc é um anel heterocíclico bicíclico saturado ou parcialmente insaturado de 7 a 10 membros contendo 1 a 4 he-teroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre, ou anel heteroarila bicíclio de 8 a 10 membros contendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre. Em certas modalidades, Rc é um anel a 5,5-fundido, 5,6-fundido, ou 6,6- fundido saturado, parcialmente insaturado, ou aromático bicíclico. Em algumas modalidades, Rc é um anel 5,5-fundido, 5,6-fundido, ou 6,6-fundido aromático bicíclico. Em outras modalidades, Rc é um grupo naftalenila, indanila ou indenila.

Em algumas modalidades, Rc é um anel heterocíclico bicíclico saturado ou parcialmente insaturado de 7 a 10 membros contendo 1 a 4 he-teroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre. Em certas modalidades, Rc é um anel heterocíclico bicíclico saturado de 7 a 8 membros contendo 1 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre. Em certas modalidades, Rc é um anel heterocíclico bicíclico parcialmente insaturado de 7 a 8 membros contendo 1 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre. Em certas modalidades, Rc é um anel heterocíclico bicíclico saturado de 9 a 10 membros contendo 1 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre. Em certas modalidades, Rc é um anel heterocíclico bicíclico parcialmente insaturado de 9 a 10 membros contendo 1 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre. Em certas modalidades, Rc é tetra-hidroquinolinila, tetra-hidroisoquinolinila, deca-hidroquinolinila, ou quinuclidinila. Em certas modalidades, Rc é indolinila, 3/7-indolila, cromanila, fenantridinila, 2-azabi- ciclo[2.2.1 ]heptanila, octa-hidroindolila, ou tetra-hidroquinolinila.

Em algumas modalidades, Rc é um anel heteroarila bicíclico de 8 a 10 membros contendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre.

Em algumas modalidades, Rc é um anel 5,5-fundido, 5,6-fun- dido, ou 6,6-fundido saturado, parcialmente insaturado, ou aromático bicíclico contendo 1 a 4 heteroátomos, independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre. Em outras modalidades, Rc é um anel 5,5- fundido, 5,6-fundido, ou 6,6-fundido anel de heteroarila anel contendo 1 a 4 heteroátomos, independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio ou enxofre. Em certas modalidades, Rc é um anel de heteroarila 5,5-fundido, 5,6-fundido, ou 6,6-fundido contendo 1 a 4 átomos de nitrogênio. Em outras modalidades, Rc é um anel de heteroarila 5,6-fundido contendo 1 a 4 átomos de nitrogênio. Em certas modalidades, Rc é pirrolizinila, indolila, quinolinila, isoquinolinila, benzimidazolila, imidazopiridinila, indazolila, purinila, cinolinila, quinazolinila, ftalazinila, naftridinila, quinoxalinila, tianafteneila, ou benzofu- ranila. Em certas modalidades, Rc é um indolizinila, purinila, naftiridinila, ou pteridinila.

Em certas modalidades, h é uma ligação covalente e a inven- ção fornece um composto de fórmula IV:

, em que: Rc é selecionado de fenila, cicloalquila, heteroarila, saturado he-terociclila e alquila, em que qualquer porção de anel de Rc é opcionalmente substituído com 1 a 2 substituintes independentemente selecionados de halo, alquila, oxo, amino, alquilcarbonilamino, carbamila, e -CN; e R’ é selecionado de hidrogênio, alquila e fluoralquila.

Em certas modalidades de fórmula IV, Rc é selecionado de 1H- pirazol-3-ila, 1-metil-1 H-pirazol-3-ila, pirimidin-5-ila, piridazin-4-ila, 2-ami- nopiridin-5-ila, piridin-3-ila, piridin-4-ila, fenila, 4-fluorfenila, 4-clorofenila, 2- clorofenila, 2-metil-4-clorofenila, 4-cianofenila, 4-carbamilfenila, 3-carba- milfenila, 4-acetilaminofenila, 1-metilpiridin-2(1H)-ona-4-ila, 1-metilpiridin- 2(1H)-ona-5-ila, 4-metilpiperazin-1-ila, morfolin-4-ila, 1-metil-1,4-diazepan-4- ila, propila, ciclopropila, ciclo-hexila, e tetra-hidro-2H-piran-4-ila.

Em certas modalidades de fórmula IV, R’ é selecionado de hidrogênio, etila, e 2-fluoretila.

Em certas modalidades, a invenção fornece um composto de fórmula V: 5b

, em que: R5a é selecionado de hidrogênio, halo, e alcóxi; R5b é selecionado de hidrogênio, halo, e alquila; Rc é selecionado de fenila, heteroarila, e saturado heterociclila, em que Rc é opcionalmente substituído com 1 a 2 substituintes independentemente selecionados de halo, -CN, alquila, alcóxi, haloalcóxi, haloalquila, e carbamila; e R’ é selecionado de hidrogênio, alquila, e alcoxialquila.

Em algumas modalidades de fórmula V, R5a é selecionado de hi- drogênio, cloro, e metóxi.

Em algumas modalidades de fórmula V, R5b é selecionado de hi-drogênio, cloro, e metila.

Em algumas modalidades de fórmula V, R5a e R5b são simulta-neamente hidrogênio.

Em algumas modalidades de fórmula V, Rc é selecionado de 4- clorofenila, 4-cianofenila, 4-fluorfenila, piridin-4-ila, 4-trifluormetilfenila, 5-clo- ropiridin-2-ila, 4-carbamilfenila, 3-metoxifenila, 4-metoxifenila, 4-trifluormeto- xifenila, 2-metil-4-clorofenila, e morfolin-4-ila.

Em algumas modalidades de fórmula V, R’ é selecionado de hidrogênio, etila, e 2-metoxietila. Compostos exemplares da invenção são estabelecidos nas tabelas 1 a 4 abaixo. Tabela 1. Compostos Exemplares Compostos da invenção incluem o seguinte:

Tabela 2. Compostos exemplares de fórmula IV:

Tabela 3. Compostos exemplares de formula V:

Tabela 4. Com ostos exem lares adicionais da invencão

Em certas modalidades, a presente invenção fornece um método para inibir a proteína contendo bromodomínio (como uma proteína BET, por exemplo, BRD2, BRD3, BRD4, e/ou BRDT) compreendendo contatar dita proteína contendo bromodomínio com qualquer composto descrito nas tabelas aqui, ou um sal farmaceutícamente aceitável ou composição do mesmo.

Usos, Formulação e Administração Composições farmaceutícamente aceitáveis

De acordo com outra modalidade, a presente invenção fornece um método para inibir a proteína contendo bromodomínio (como uma proteína BET, por exemplo, BRD2, BRD3, BRD4, e/ou BRDT) usando uma composição compreendendo um composto da invenção ou um derivado farma- ceuticamente aceitável do mesmo e um veículo farmaceutícamente aceitável, adjuvante, ou veículo. A quantidade de um composto da invenção em uma composição fornecida é tal que é efetiva para mensuravelmente inibir uma ou mais proteínas contendo bromodomínio (como uma proteína BET, por exemplo, BRD2, BRD3, BRD4, e/ou BRDT), ou uma mutante do mesmo, em uma amostra biológica ou em um paciente. Em certas modalidades, a quantidade de composto em uma composição fornecida é tal que é efetiva para mensuravelmente inibir um ou mais proteínas contendo bromodomínio (como uma proteína BET, por exemplo, BRD2, BRD3, BRD4, e/ou BRDT), ou uma mutante do mesmo, em uma amostra biológica ou em um paciente. Em certas modalidades, uma composição fornecida é formulada para admi-nistração a um paciente em necessidade de dita composição. Em algumas modalidades, uma composição fornecida é formulada para administração oral a um paciente.

O termo “paciente,” conforme usado aqui, significa um animal, como um mamífero, como um humano.

O termo “veículo, adjuvante ou veículo farmaceutícamente aceitável” refere-se a um veículo, adjuvante ou veículo não tóxico que não destrói a atividade farmacológica do composto com o qual este é formulado. Veículos, adjuvantes ou veículos farmaceutícamente aceitáveis que podem ser usados nas composições desta revelação incluem, entre outros, trocadores de ion, alumina, estearato de alumínio, lecitina, proteínas séricas, como albumina sérica humana, substâncias de tampão como fosfatos, glicina, ácido sórbico, corbato de potássio, misturas de glicerídeo parcial de ácidos graxos vegetais saturados, água, sais ou eletrólitos, como sulfato protamina, hidrogênio fosfato disódio, hidrogênio fosfato potássio, cloreto de sódio, sais de zinco, sílica coloidal, trissilicato de magnésio, polivinil pirrolidona, substâncias a base de celulose, polietileno glicol, carboximetilcelulose de sódio, po- liacrilatos, ceras, polímeros de bloco polietileno-polioxipropileno, polietileno glicol e gordura de lã.

Um “derivado farmaceutícamente aceitável” significa qualquer sal, sal de um éster ou outro derivado não tóxico de um composto desta invenção que, na administração a um receptor, é capaz de fornecer, direta ou indiretamente, um composto desta invenção ou um metabólito ativo inibitório ou resíduo do mesmo.

Conforme usado aqui, o termo “metabólito ativo inibitório ou resíduo do mesmo” significa que um metabólito ou resíduo do mesmo é ainda um inibidor de uma ou mais proteínas contendo bromodomínio (como uma proteína BET, por exemplo, BRD2, BRD3, BRD4, e/ou BRDT), ou uma mutante do mesmo.

Composições descritas aqui podem ser administradas por via ora, parenteral, por spray de inalação, topicamente, via retal, nasal, bucal, vaginal ou via um reservatório implantado. O termo “parenteral” conforme usado aqui inclui técnicas de infusão ou injeção subcutânea, intravenosa, intramuscular, intra-articular, intra-sinovial, intraesternal, intratecal, intrahe- páticas, intralesionais e intracranial.

As formas de dosagem líquida para administração oral incluem, entre outros, emulsões farmaceutícamente aceitáveis, microemulsões, soluções, suspensões, xaropes e elixires. Além do composto ativo, a forma de dosagem líquida pode conter diluentes comumente usados na técnica como, por exemplo, água ou outros solventes, agentes de solubilização e emulsifi- cantes como álcool etílico, álcool isopropila, etil carbonato, acetato de etila, álcool benzila, benzoato benzila, propileno glicol, 1,3-butileno glicol, dimetil- formamida, óleos (em particular, óleos de semente de algodão, amendoim, milho, germen, oliva, rícino, e gergelim), glicerol, álcool tetra-hidrofurfurila, polietileno glicóis e ésteres de ácido graxo de sorbitano, e misturas dos mesmos. Além de diluentes inertes, as composições orais podem ainda incluir adjuvantes como agentes molhantes, agentes de emulsificação e de suspensão, adoçantes, flavorizantes, e perfumantes.

Preparações injetáveis, por exemplo, suspensões estéreis aquosas ou oleaginosas injetáveis podem ser formuladas de acordo com a técnica conhecida usando agentes de dispersão ou molhantes apropriados e agentes de suspensão. A preparação injetável estéril pode ainda ser uma solução injetável estérila, suspensão ou emulsão em um diluente ou solvente não tóxico aceitável por via parenteral, por exemplo, como uma solução em 1,3-butanodiol. Entre os veículos e solventes aceitáveis que podem ser empregados são água, solução de Ringer, U.S.P. e solução isotônica de cloreto de sódio. Além isso, óleos estéreis fixados são convencionalmente empregados como um solvente ou meio de suspensão. Para esta finalidade qualquer mistura de óleo fixado pode ser empregado incluindo mono ou diglicerí- deos sintéticos. Além disso, ácidos graxos como ácido oleico são usados na preparação de injetáveis.

Formulações injetáveis podem ser esterilizadas, por exemplo, por filtração por um filtro de retenção de bactérias, ou incorporando agentes esterilizantes na forma de composições sólidas estéreis que podem ser dissolvidas ou dispersas em água estérila ou outro meio injetável estéril antes do uso.

Para prolongar o efeito de um composto fornecido, é geralmente desejável retardar a absorção do composto da injeção subcutânea ou intra-muscular. Isto pode ser conseguido pelo uso de uma suspensão líquida de material cristalino ou amorfo material com pouca solubilidade em água. A taxa de absorção do composto então dependendo de sua taxa de dissolução que, por sua vez, pode depender do tamanho do cristal e forma cristalina. Alternativamente, a absorção retardada de um composto administrado por via parenteral é obtido dissolvendo ou suspendendo o composto em um veículo oleoso. O depósito injetável é feito formando matrizes microencapsula- das de composto em polímeros biodegradáveis como polilactida-poliglicolida.

Dependendo da razão do composto ao polímero e a natureza do polímero particular empregado, a taxa de liberação do composto pode ser controlada. Exemplos de outros polímeros biodegradáveis incluem poli(ortoésteres) e poli(anidridos). Formulações injetáveis de depósito são ainda preparadas aprisionando o composto em lipossomas ou microemulsões que são compatíveis com tecidos corporais.

As composições para administração retal ou vaginal são prefe-rencialmente supositórios que podem ser preparados misturando os compostos desta invenção com excipientes ou veículos não irritantes apropriados como manteiga de cacau, polietileno glicol ou uma cera de supositório que são sólidos em temperatura ambiente, mas líquidos em temperatura corporal e, portanto, fundem no reto ou cavidade vaginal e liberam o composto ativo.

Formas de dosagem sólidas para administração oral incluem cápsulas, comprimidos, pílulas, pós, e grânulos. Em ditas formas de dosagem sólidas, o composto ativo é misturado com pelo menos um veículo ou excipiente farmaceutícamente aceitável inerte como citrato de sódio ou fosfato dicálcio e/ou a) preenchedores ou extensores como amidos, lactose, sacarose, glicose, manitol, e ácido silícico, b) ligantes como, por exemplo, car- boximetilcelulose, alginatos, gelatina, polivinilpirrolidinona, sacarose, e acácia, c) umectantes como glicerol, d) agentes de desintegração como ágar- ágar, carbonato de cálcio, amido de batata ou tapioca, ácido algínico, certos silicatos, e carbonato de sódio, e) agentes de retardo de solução como parafina, f) aceleradores de absorção como compostos de amónio quaternário, g) agentes molhantes como, por exemplo, álcool cetílico e monoestearato de glicerol, h) absorventes como caolim e argila de bentonita, e i) lubrificantes como talco, estearato de cálcio, estearato de magnésio, polietileno glicóis sólidos, lauril sulfato de sódio, e misturas dos mesmos. No caso de cápsu-las, comprimidos e pílulas, a forma de dosagem pode ainda compreender agentes de tamponamento.

Composições sólidas de um tipo similar podem ainda ser empregadas como preenchedores em cápsulas gelatinosas moles ou duras u- sando ditos excipientes como lactose ou açúcar do leite bem como polietile- no glicóis de alto peso molecular e similares. A forma de dosagem sólida de comprimidos, drágeas, cápsulas, pílulas, e grânulos pode ser preparada com revestimentos e conchas como revestimentos entéricos e outros revestimentos bem conhecidos na técnica de formulação farmacêutica. Podem opcionalmente conter agentes opacificantes e podem ainda ser de uma composição que liberam os ingredientes ativos somente, ou preferencialmente, em certa parte do trato intestinal, opcionalmente, em um modo atrasado. Exemplos de composições de incorporação que podem ser usadas incluem substâncias poliméricas e ceras. As composições sólidas de um tipo similar podem ainda ser empregadas como preenchedores em cápsulas gelatinosas moles e duras usando ditos excipientes como lactose ou açúcares do leite bem como polietileno glicóis de alto peso molecular e similares.

Compostos fornecidos podem ainda estar na forma microencap- sulada com um ou mais excipientes como notado acima. A forma de dosagem sólida de comprimidos, drágeas, cápsulas, pílulas, e grânulos pode ser preparada com revestimentos e conchas como revestimentos entéricos, revestimentos de controle de liberação e outros revestimentos bem conhecidos na técnica de formulação farmacêutica. Em dita forma de dosagem sólida o composto ativo pode ser misturada com pelo menos um diluente inerte como sacarose, lactose ou amido. Dita forma de dosagem pode ainda compreender, como é na prática normal, substâncias adicionais além de diluentes inertes, por exemplo, lubrificantes de compressão e outros ajudantes de compressão como estearato de magnésio e celulose microcristalina. No caso de cápsulas, comprimidos e pílulas, a forma de dosagem pode ainda compreender agentes de tamponamento. Podem opcionalmente conter agentes o- pacificantes e podem ainda ser de uma composição que liberam os ingredientes ativos somente, ou preferencialmente, em certa parte do trato intestinal, opcionalmente, em um modo atrasado. Exemplos de composições de incorporação que podem ser usadas incluem substâncias poliméricas e ceras.

Forma de dosagem para administração tópica ou transdérmica de um composto desta invenção incluem pomadas, pastas, cremes, loções, géis, pós, soluções, sprays, inalantes ou adesivos. O componente ativo é misturado em condições estéreis com um veículo farmaceuticamente aceitável e qualquer preservativo necessário ou tampões conforme necessário. A formulação oftálmica, gotas para ouvidos, e colírios são ainda contemplados como estando dentro do escopo desta invenção. Além disso, a presente invenção contempla o uso de adesivos transdérmicos, que têm uma vantagem adicionada de fornecer liberação controlada de um composto ao corpo. Dita forma de dosagem pode ser feita dissolvendo ou dispensando o composto no meio apropriado. Melhoradores de absorção podem ainda ser usados para aumentar o fluxo do composto através da pele. A taxa pode ser controlada pelo fornecimento de uma membrana de controle de velocidade ou por dispersão do composto em uma matriz de polímero ou gel.

Composições farmaceuticamente aceitáveis fornecidas aqui podem ainda ser administradas por aerossol nasal ou inalação. Ditas composições são preparadas de acordo com técnicas bem conhecidas de formulação farmacêutica e podem ser preparadas como soluções em salina, preservativos que empregam álcool benzila ou outros apropriados, promotores de absorção para aumentar a biodisponibilidade, fluorcarbonos, e/ou outros agentes de dispersão ou de solubilização convencionais.

Composições farmaceuticamente aceitáveis fornecidas aqui podem ser formuladas para administração oral. Ditas formulações podem ser administradas com ou sem alimento. Em algumas modalidades, composições farmaceuticamente aceitáveis desta revelação são administradas sem alimento. Em outras modalidades, composições farmaceuticamente aceitáveis desta revelação são administradas com alimento.

A quantidade de compostos fornecidos que podem ser combinados com materiais veículos para produzir uma composição em uma forma de dosagem única irá variar dependendo do paciente a ser tratado e o modo de administração particular. Composições fornecidas podem ser formuladas de modo que uma dosagem de entre 0,01 - 100 mg/kg peso corporal/dia do inibidor podem ser administradas ao um paciente que recebe estas composi- ções.

Deve ser ainda entendido que uma dosagem específica e regime de tratamento para qualquer paciente particular irá dependendo de uma variedade de fatores, incluindo idade, peso corporal, saúde geral, sexo, dieta, tempo de administração, taxa de excreção, combinação de droga, o julgamento do médico assistente, e a gravidade da doença particular sendo tratada. A quantidade de um composto fornecido na composição irá ainda dependendo do composto particular na composição.

Usos de Compostos e Composições farmaceutícamente aceitáveis

Compostos e composições descritas aqui são geralmente úteis para a inibição de atividade de inibição de uma ou mais proteínas envolvidas em regulação epigenética. Assim, em algumas modalidades, a presente invenção fornece um método para inibir uma ou mais proteínas envolvidas em regulação epigenética, como proteínas contendo motivos de reconhecimento de acetil-lisina, também conhecidos como bromodomínios (por exemplo, proteínas BET, como BRD2, BRD3, BRD4, e/ou BRDT), por administração de um composto ou composição fornecida.

Epigenética é o estudo de alterações hereditárias em expressão de gene causada por mecanismos além de outras alterações na sequência de DNA subjacente. Mecanismos moleculares que desempenham um papel em regulação epigenética metilação de DNA e modificações de cromati- na/histona. Reconhecimento de cromatina, em particular, é crítica em muitos fenômenos epigenéticos.

Cromatina, a montagem organizada de DNA nuclear e proteínas de histona, é a base de para uma multitude de processos nucleares vitais incluindo regulação de transcrição, replicação, reparo de dano ao DNA e progressão pelo ciclo celular. Um número de fatores, como enzimas modificadoras de cromatina, foi identificado por ter um papel importante na manutenção do equilíbrio dinâmico de cromatina (Margueron, et al. (2005) Curr. Opin. Genet. Dev. 15:163-176).

Histonas são os componentes de proteína principais da cromatina. Atuam como bobinas ao redor das quais DNA se envolve, e desempe nham um papel na regulação do gene. Há um total de seis classes de histo- nas (H1, H2A, H2B, H3, H4, e H5) organizado em duas super classes: histo- nas central (H2A, H2B, H3, e H4) e histonas ligantes (H1 e H5). A unidade básica de cromatina é o nucleosoma, que consiste de cerca de 147 pares de base de DNA envolvido ao redor de octamero histona, consiste de duas cópias de cada uma das histonas centrais H2A, H2B, H3, e H4 (Luger, et al. (1997) Nature 389:251-260).

Histonas, particularmente resíduos de terminais amino de histonas H3 e H4 e os terminais amino e carboxil de histonas H2A, H2B e H1, são susceptíveis a uma variedade de modificações pós-tradução incluindo acetilação, metilação, fosforilação, ribosilação sumoilação, ubiquitibação, citrulinação, deiminação, e biotinilação. O centro das histonas H2A e H3 pode ainda ser modificado. Modificações de histona são integrais aos diversos processos biológicos como regulação de gene, reparo de DNA, e condensação de cromossomo.

Um tipo de modificação de histona, acetilação de lisina, é reconhecido por proteínas contendo bromodomínio. Proteínas contendo bromodomínio são componentes de complexos de fator de transcrição e determinantes de memória epigenética (Dey, et al. (2009) Mol. Biol. Cell 20:48994909). Há 46 proteínas humanas contendo um total de 57 bromodomínios descobertos até o momento. Uma família de proteínas contendo bromodomínio, proteínas BET (BRD2, BRD3, BRD4, e BRDT) foram estabelecidas usadas para estabelecer prova de conceito para direcionar interações de proteína-proteína de “leitores” epigenéticos como oposto as enzimas modificadoras de cromatina, ou chamados “escritores” e “apagadores” epigenéticos (Filippakopoulos, et al. “Selective Inhibition of BET Bromodomains,” Nature (publicado em 24 de setembro de 2010); Nicodeme, et al. “Suppression of Inflammation by a Synthetic Histone Mimic,” Nature (publicado em 10 de novembro de 2010)).

Exemplos de proteínas inibidas pelos compostos e composições descritos aqui e contra os quais os métodos descritos aqui são úteis incluem proteínas contendo bromodomínio, como proteínas BET, como BRD2, BRD3, BRD4, e/ou BRDT, ou uma isoforma ou mutante do mesmo.

A atividade de um composto fornecido, ou composição do mesmo, como um inibidor de uma proteína contendo bromodomínio, como uma proteína BET, como BRD2, BRD3, BRD4, e/ou BRDT, ou uma isoforma ou mutante do mesmo, pode ser avaliada in vitro, in vivo, ou em uma linhagem de célula. Ensaios in vitro incluem ensaios que determinam a inibição de proteínas contendo bromodomínio, como proteínas BET, como BRD2, BRD3, BRD4, e/ou BRDT, ou uma mutante do mesmo. Alternativamente, ligação inibidora pode ser determinada realizando um experimento de competição onde um composto fornecido é incubado com a proteína contendo bromodomínio, como uma proteína BET, como BRD2, BRD3, BRD4, e/ou BRDT ligado aos ligantes conhecidos, marcados ou não marcados. Condições detalhadas para avaliar um composto fornecido como um inibidor de uma proteína contendo bromodomínio, como uma proteína BET, como BRD2, BRD3, BRD4, e/ou BRDT ou uma mutante do mesmo, são estabelecidos nos Exemplos abaixo.

A invenção fornece um método para tratar um sujeito com um câncer dependente de MYC, compreendendo: identificar um sujeito em necessidade do tratamento; administrando ao sujeito um inibidor de BET; determinando pelo menos um de expressão de MYC mRNA, expressão de proteína MYC e massa de tumor, e em que após a administração, há um aumento em pelo menos um de expressão de myc mRNA, expressão de proteína MYC e massa de tumor, assim, tratando a doença.

Em uma modalidade, a etapa de identificação compreende determinar se o sujeito tem pelo menos um de uma translocação de MYC, um rearranjo genético de MYC, amplificação de MYC, super expressão de MYC e pelo menos uma função celular que facilita crescimento celular e/ou de tumor e é alterado na redução de uma expressão de myc mRNA ou de proteína.

A invenção ainda fornece um método para tratar um sujeito com um câncer dependente de MYC, compreendendo: determinar pelo menos um de expressão de MYC mRNA, expressão de proteína MYC e massa de tumor; administrando ao sujeito um inibidor BET; e compreendendo pelo menos um de expressão de MYC mRNA, expressão de proteína MYC e massa de tumor no sujeito antes e após administração do inibidor de BET.

A invenção ainda fornece um método para tratar um sujeito com câncer dependente de MYC, compreendendo: administrando ao sujeito um inibidor BET que é definido como capaz de reduzir pelo menos um de expressão de MYC mRNA, expressão de proteína MYC e massa de tumor; e determinar pelo menos um de expressão de MYC mRNA, expressão de proteína MYC e massa de tumor; em que após a administração, há uma redução em pelo menos um de expressão de MYC mRNA, expressão de proteína MYC e massa de tumor, assim, tratando a doença.

A invenção ainda fornece um método para tratar um sujeito com uma doença, compreendendo: administrar um inibidor BET que é identificado como capaz de reduzir pelo menos um de expressão de MYC mRNA, expressão de proteína MYC e massa de tumor, em que após a administração, há uma redução em pelo menos um de expressão de MYC mRNA, expressão de proteína MYC e massa de tumor, assim, tratando a doença.

Reconhecimento de histona acetilada e proteínas contendo bro-modomínio (como proteínas BET) foram envolvidos na doença proliferativa. Camundongos sem BRD4 morrem rapidamente após implantação e são comprometidos em suas capacidades para manter uma massa de célula interna, e heterozigotos apresenta crescimento pré e pós-natal associados com taxas de proliferação reduzidas. BRD4 regula genes expresso durante M/G1, incluindo genes associados ao crescimento, e permanece ligado à cromatina ao longo do ciclo celular (Dey, et al. (2009) Mol. Biol. Cell 20:4899-4909). BRD4 ainda fisicamente se associa com Mediador e P-TEFb (CDK9/ciclina T1) para facilitar o alongamento transcricional (Yang, et al. (2005) Oncogene 24:1653-1662; Yang, et al. (2005) Mol. Cell 19:535-545). CDK9 é um alvo validado em leucemia linfocítica crônica (CLL), e é ligado a transcrição dependente de c-Myc- (Phelps, et al. Blood 113:2637-2645; Rahl, et al. (2010) Ce//141:432-445).

BRD4 é translocado a proteína NUT em pacientes com carcino- ma de linha média letal, uma forma agressiva de carcinoma escamoso humano (French, et al. (2001) Am. J. Pathol. 159:1987-1992; French, et al. (2003) Cancer Res. 63:304-307). Análise in vitro com RNAi suporta um papel causal para BRD4 neste t recorrente (15; 19) de translocação cromosomal. A inibição farmacológica de BRD4 bromodomínios resulta em parada de cres- cimento/diferenciação de linhagens de células BRD4-NUT in vitro e in vivo (Filippakopoulos, et al. “Selective Inhibition of BET Bromodomains,” Nature (publicado online em 24 de setembro de 2010)).

Proteínas contendo bromodomínio (como proteínas BET) foram ainda envolvidas em doença inflamatórias. Proteínas BET (por exemplo, BRD2, BRD3, BRD4, e BRDT) regulam montagem de complexos de croma- tina dependentes de acetilação de histona que controla expressão de gene inflamatório (Hargreaves, et al. (2009) Cell 138:129-145; LeRoy, et al. (2008) Mol. Cell 30:51-60; Jang, et al. (2005) Mol. Cell 19:523-534; Yang, et al. (2005) Mol. Cell 19:535-545). Os genes inflamatórios chaves (genes de resposta secundária) são regulados para baixo na inibição de bromodomínio de subfamília BET, e genes não responsivos (genes de resposta primária) são prontos para transcrição. Inibição de BET bromodomínio protege contra choque endotóxico induzido por LPS e sepse induzida por bactéria in vivo (Ni- codeme, et al. “Suppression of Inflammation by a Synthetic Histone Mimic,” Nature (publicado em 10 de novembro de 2010)).

Proteínas contendo bromodomínio (como proteínas BET) também desempenham um papel na doença virai. Por exemplo, BRD4 está envolvido em vírus papiloma humano (HPV). Na fase primária de infecção por HPV de epitélio basal, o genoma virai é mantido em um epissoma extra- cromosomal. Em algumas cepas de HPV, BRD4 ligação à proteína HPV E2 funciona para prender o genoma virai aos cromossomos. E2 é crítico para ambos a repressão de E6/E7 e ativação de genes virais de HPV. Rompimento de interação BRD4 ou BRD4-E2 bloqueia ativação de gene dependente de E2. BRD4 ainda funciona para prender outras classes de genomas virais à cromatina hospedeira (por exemplo, Herpesvirus, vírus de Epstein-Barr).

Conforme usado aqui, os termos “tratamento,” “tratar,” e “tratan- do” se referem a reversão, alívio, retardo de início de, ou inibição de progresso de uma doença ou distúrbio, ou um ou mais sintomas dos mesmos, como descrito aqui. Em algumas modalidades, tratamento pode ser administrado após um ou mais sintomas terem sido desenvolvidos. Em outras modalidades, o tratamento pode ser administrado na ausência de sintomas. Por exemplo, tratamento pode ser administrado a um indivíduo susceptível antes do início dos sintomas (por exemplo, à luz de uma história de sintomas e/ou à luz de genética ou outros fatores susceptíveis). O tratamento pode ainda ser continuado após sintomas terem sido resolvidos, por exemplo, para prevenir ou retardar sua ocorrência.

Em certas modalidades, um composto fornecido inibe um ou mais de BRD2, BRD3, BRD4, BRDT, e/ou outro membro das proteínas contendo bromodomínio, ou uma mutante do mesmo. Em algumas modalidades, um composto fornecido inibe dois ou mais de BRD2, BRD3, BRD4, BRDT, e/ou outro membro das proteínas contendo bromodomínio, ou uma mutante do mesmo. Compostos fornecidos são inibidores de uma ou mais das proteínas contendo bromodomínio, como BRD2, BRD3, BRD4, e/ou BRDT e são, portanto, úteis para tratar um ou mais distúrbios associados com atividade de uma ou mais das proteínas contendo bromodomínio, como BRD2, BRD3, BRD4, e/ou BRDT. Assim, em certas modalidades, a presente invenção fornece um método para tratar uma proteína contendo distúrbio mediado por bromodomínio, como um distúrbio BET, mediado por BRD2, mediado por BRD3, mediado por BRD4, e/ou distúrbio mediado por BRDT compreendendo a etapa de inibir a proteína contendo bromodomínio, como uma proteína BET, como BRD2, BRD3, BRD4, e/ou BRDT, ou uma mutante do mesmo, ao administrar a um paciente em necessidade do mesmo um composto fornecido, ou uma composição farmaceuticamente aceitável do mesmo.

Conforme usado aqui, os termos distúrbios ou condições “mediadas por proteína contendo bromodomínio”, “mediado por BET”, “mediado por BRD2”, “mediado por BRD3”, “mediado por BRD4”, e/ou “mediado por BRDT” significa qualquer doença ou outra condição deletéria em que uma ou mais das proteínas contendo bromodomínio, como proteínas BET, como BRD2, BRD3, BRD4 e/ou BRDT, ou uma mutante do mesmo, são conhecidos por desempenhar um papel. Assim, outra modalidade da presente invenção refere-se a tratar ou diminuir a gravidade de uma ou mais doenças em que uma ou mais das proteínas contendo bromodomínio, como proteínas BET, como BRD2, BRD3, BRD4, e/ou BRDT, ou uma mutante do mesmo, são conhecidas por desempenhar um papel.

Doenças e condições tratáveis de acordo com os métodos desta invenção incluem, entre outros, câncer e outros distúrbios proliferativos, doenças inflamatórias, sepse, doença autoimune, e infecção virai. Assim, em um aspecto é um método de tratar um sujeito contendo uma doença, distúrbio ou sintoma do mesmo, o método incluindo administração de um composto ou composição aqui ao sujeito. Em uma modalidade, um paciente humano é tratado com um composto da invenção e um veículo, adjuvante ou veículo farmaceutícamente aceitável, em que dito composto está presente em uma quantidade para mensuravelmente inibir proteína contendo atividade de bromodomínio (como proteína BET, por exemplo, BRD2, BRD3, BRD4, e/ou BRDT) no paciente.

A invenção ainda refere-se a um método para tratar ou amenizar câncer ou outro distúrbio proliferativo pela administração de uma quantidade efetiva de um composto de acordo com esta invenção a um mamífero, em particular um humano em necessidade de dito tratamento. Em alguns aspectos da invenção, a doença a ser tratada pelos métodos da presente invenção é câncer. Exemplos de cânceres tratados usando os compostos e métodos descritos aqui incluem, entre outros, câncer adrenal, carcinoma de célula acínica, neuroma acústico, melanoma lentiginoso acral, acrospiroma, leucemia eosinofílica aguda, leucemia eritroide aguda, leucemia linfoblástica aguda, leucemia megacarioblastica aguda, leucemia monocítica aguda, leucemia promielocítica aguda, adenocarcinoma, carcinoma cístico adenoide, adenoma, tumor odontogenico adenomatoide, carcinoma adenoescamoso, neoplasma de tecido adiposo, carcinoma adrenocortical, leucemia de célula T adulta/linfoma, leucemia de célula NK agressivo, linfoma relacionado a AIDS, rabdomiosarcoma alveolar, sarcoma de parte mole alveolar, fibroma ameloblastico, linfoma de célula grande anaplástica, câncer de tireoide ana- plastico, linfoma de célula T angioimunoblastico, angiomiolipoma, angiosarcoma, astrocitoma, tumor radoide teratoide atípico, leucemia linfocitica crônica de célula B, leucemia prolinfocítica de célula B, linfoma de célula B, carcinoma de célula basal, câncer de trato biliar, câncer de bexiga, blastoma, câncer ósseo, tumor de Brenner, tumor de Brown, linfoma de Burkitt, câncer de mama, câncer de cérebro, carcinoma, carcinoma in situ, carcinosarcoma, tumor de cartilagem, cementoma, mieloide sarcoma, condroma, cordoma, coriocarcinoma, papiloma de plexo coroide, sarcoma de célula clara do rim, craniofaringioma, linfoma de célula T cutânea, câncer cervical, câncer colo- retal, doença de Degos, tumor de célula redonda pequena desmoplastica, linfoma de célula B grande difusa, tumor neuroepitelial disembrioplastico, disgerminoma, carcinoma embrionário, neoplasma de glândula endócrina, tumor de seio endodermal, linfoma de célula T associado a enteropatia, câncer esofágico, fetus in fetu, fibroma, fibrosarcoma, linfoma folicular, câncer de tireoide folicular, ganglioneuroma, câncer gastrointestinal, tumor de célula germinativa tumor, coriocarcinoma gestacional, fibroblastoma de célula gigante, tumor de célula gigante do osso, tumor glial, glioblastoma multiforme, glioma, gliomatose cerebral, glucagonoma, gonadoblastoma, tumor de célula granulosa, ginandroblastoma, câncer de vesícula biliar, câncer gástrico, leucemia de célula pilosa, hemangioblastoma, câncer de cabeça e pescoço, hemangiopericitoma, malignidade hematológica, hepatoblastoma, linfoma de célula T hepatoesplênico, linfoma de Hodgkin, linfoma não Hodgkin, carcinoma lobular invasiva, câncer intestinal, câncer renal, câncer de laringe, lentigo maligna, carcinoma de linha média letal, leucemia, tumor de célula de leydig, liposarcoma, câncer pulmonar, linfangioma, linfangiosarcoma, linfoe- pitelioma, linfoma, leucemia linfocitica aguda, leucemia mieloide aguda, leucemia linfocitica crônica, câncer hepático, câncer pulmonar de célula pequena, câncer pulmonar de célula não pequena, linfoma MALT, histiocitoma maligno fibroso, tumor maligno de bainha de nervo periférico, tumor de triton maligno, linfoma de célula de manto, linfoma de célula B de zoma marginal, leucemia de mastócito, tumor de célula germinativa mediastinal, carcinoma medular de mama, câncer de tireoide medular, meduloblastoma, melanoma, meningioma, câncer de célula merkel, mesotelioma, carcinoma urotelial me- tastático, tumor Mullerian misto, tumor mucoso, mieloma múltiplo, neoplasma de tecido muscular, micose fungoide, liposarcoma mixoide, mixoma, mixo- sarcoma, carcinoma de nasofaringe, neurinoma, neuroblastoma, neurofibroma, neuroma, melanoma nodular, câncer ocular, oligoastrocitoma, oligodendroglioma, oncocitoma, meningioma de bainha de nervo óptico, tumor do nervo óptico, câncer oral, osteosarcoma, câncer ovariano, tumor de Pancoast, câncer de tireoide papilar, paraganglioma, pinealoblastoma, pineocito- ma, pituicitoma, adenoma pituitário, tumor pituitário, plasmacitoma, poliem- brioma, linfoma de precursor T-linfoblastico, linfoma de sistema nervoso central primário, linfoma de efusão primária, câncer peritoneal primário, câncer de próstata, câncer pancreático, câncer de faringe, pseudomixoma peritonei, carcinoma de célula renal, carcinoma medular renal, retinoblastoma, rabdo- mioma, rabdomiosarcoma, transformação de Richter, câncer retal, sarcoma, Schwannomatose, seminoma, tumor de célula de Sertoli, tumor estromal gonadal e de cordões sexuais, carcinoma de célula em anel de sinete, câncer de pele, tumores de células redondas azuis pequenas, carcinoma de célula pequena, sarcoma de tecido mole, somatostatinoma, verrugas, tumor espinhal, linfoma de zona marginal esplénica, carcinoma de célula escamosa, sarcoma sinovial, doença de Sezary, câncer de intestino delgado, carcinoma escamoso, câncer de estômago, linfoma de célula T, câncer testicular, tecoma, câncer de tireoide, carcinoma de célula de transição, câncer de garganta, câncer de uraco, câncer urogenital, carcinoma urotelial, melanoma uveal, câncer uterino, carcinoma verrucoso, glioma da via visual, câncer vulvar, câncer vaginal, macroglobulinemia de Waldenstrom, tumor de Warthin, e tumor de Wilms.

Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um método para tratar um distúrbio proliferativo benigno. Ditos distúrbios proliferati- vos benignos incluem, entre outros, tumores de tecido mole benignos, tumores ósseos, tumor espinhal e cerebral, tumores de pálpebra e orbital, granuloma, lipoma, meningioma, neoplasia endócrina múltipla, polipos nasais, tu mores pituitários, prolactinoma, pseudotumor cerebral, queratoses seborrei- cas, pólipos estomacais, nódulos de tireoide, neoplasmas císticos do pâncreas, hemangiomas, nódulos de corda vocal, pólipos, e cistos, doença de Castleman, doença pilonidal crônica, dermatofibroma, cisto pilar, granuloma piogênica, e síndrome polipose juvenila.

A invenção ainda se refere a um método para tratar eventos in-fecciosos e não infecciosos inflamatórios e autoimunes e outras doenças inflamatórias por administração de uma quantidade efetiva de um composto fornecido a um mamífero, em particular um humano em necessidade de dito tratamento. Exemplos de doenças autoimune e inflamatórias, distúrbios, e síndromes tratadas usando os compostos e métodos descritos aqui incluem doença pélvica inflamatória, uretrite, queimadura de sol, sinusite, pneumoni-te, encefalite, meningite, miocardite, nefrite, osteomielite, miosite, hepatite, gastrite, enterite, dermatite, gengivite, apendicite, pancreatite, colecistite, agamaglobulinemia, psoríase, alergia, doença de Crohn, síndrome de intes-tino irritável, colite ulcerativa, doença de Sjogren, rejeição de enxerto de te-cido, rejeição hiperaguda de órgãos transplantados, asma, rinite alérgica, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD), doença políglandular autoimu-ne (ainda conhecida como síndrome políglandular autoimune), alopecia autoimune, anemia perniciosa, glomerulonefrite, dermatomiosite, esclerose múltipla, escleroderma, vasculite, estados hemolíticos e trombocitopênicos autoimune, síndrome de Goodpasture, ateroesclerose, doença de Addison, doença de Parkinson, doença de Alzheimer, diabetes tipo I, choque séptico, lúpus eritematoso sistêmico (SLE), artrite reumatoide, artrite psoriática, artrite juvenila, osteoartrite, purpura trombocitopênica idiopática crônica, macro- globulinemia Waldenstrom, myasthenia gravis, tireoidite de Hashimoto, der-matite atopica, doença de articulação degenerativa, vitiligo, hipopituitarismo autoimune, síndrome de Guillain-Barre, doença de Behcet’s, escleracierma, micosie fungoide, respostas inflamatórias agudas (como síndrome respirató-ria aguda e isquemia/lesão de reperfusão), e doença de Graves.

Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um mé-todo para tratar síndromes de resposta inflamatória sistêmicas como choque endotóxico induzido por LPS e/ou sepse induzida por bactéria pela adminis-tração de uma quantidade efetiva de um composto fornecido a um mamífero, em particular um humano em necessidade de dito tratamento.

A invenção ainda se refere a um método para tratar infecções vi- 5 rais e doenças por administração de uma quantidade efetiva de um composto fornecido a um mamífero, em particular um humano em necessidade de dito tratamento. Exemplos de infecções virais e doenças tratadas usando os compostos e métodos descritos aqui incluem vírus de DNA a base de episoma incluindo, entre outros, papilomavírus humano, Herpesvirus, vírus Eps- 10 tein-Barr, vírus da imunodeficiência humana, vírus da hepatite B, e vírus da hepatite C.

A invenção ainda fornece um método para tratar um sujeito, co-mo um humano, que sofre de uma das condições acima mencionadas, en-fermidade, distúrbios ou doenças. O método compreende administrar uma 15 quantidade terapeuticamente efetiva de um ou mais compostos fornecidos, que funcionam inibindo um bromodomínio e, em geral, por modulação de expressão de gene, para induzir vários efeitos celulares, em particular indução ou repressão da expressão de gene, interrompendo a proliferação celular, induzir diferenciação celular e/ou induzir apoptose, a um sujeito em ne- 20 cessidade de tal tratamento.

A invenção ainda fornece um método terapêutico para modular a metilação de proteína, expressão de gene, proliferação de célula, diferenciação celular e/ou apoptose in vivo em doenças mencionadas acima, em particular câncer, doença inflamatória, e/ou doença virai compreendendo admi- 25 nistrar a um sujeito em necessidade de dita terapia uma quantidade farma- cologicamente ativa e terapeuticamente efetiva de um ou mais compostos fornecidos.

A invenção ainda fornece um método para regular atividade promotora endógena ou heteróloga contatando uma célula com um compos- 30 to fornecido.

Em certas modalidades, a invenção fornece um método para tra-tar um distúrbio (como descrito acima) em um sujeito, compreendendo ad- ministrar ao sujeito identificado em necessidade do mesmo, um composto da invenção. A identificação daqueles pacientes que estão em necessidade de tratamento para os distúrbios descritos acima está dentro da capacidade e conhecido dos especialistas na técnica. Alguns dos métodos para identifica-ção dos pacientes que estão em risco de desenvolver os distúrbios acima que podem ser tratados pelo método objeto são apreciados nas técnicas médicas, como histórico familiar, e a presença de fatores de risco associados com o desenvolvimento daquele estado da doença no sujeito paciente. Um médico versado na técnica pode prontamente identificar ditos pacientes candidatos, pelo uso de, por exemplo, testes clínicos, avaliação física e his-tórico clínico/familiar.

Um método para avaliar a eficácia de um tratamento em sujeitos inclui determinar a extensão de pré-tratamento de um distúrbio pelos méto-dos bem conhecidos na técnica (por exemplo, determinar tamanho de tumor ou triagem para marcadores tumorais onde o distúrbio de célula proliferativa é câncer) e então administrar uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto da invenção, ao sujeito. Após um período de tempo apropriado após a administração do composto (por exemplo, 1 dia, 1 semana, 2 sema-nas, um mês, seis meses), a extensão do distúrbio é determinada novamen-te. A modulação (por exemplo, redução) da extensão ou invasividade do dis-túrbio indica eficácia do tratamento. A extensão ou invasividade do distúrbio pode ser determinada periodicamente em todo o tratamento. Por exemplo, a extensão ou invasividade do distúrbio pode ser verificada a cada algumas horas, dias ou semanas para avaliar a eficácia do tratamento. Uma redução na extensão ou invasividade do distúrbio indica que o tratamento é eficaz. O método descrito pode ser usado para triar ou selecionar pacientes que po-dem se beneficiar do tratamento com um composto da invenção.

A invenção ainda se refere ao uso de compostos fornecidos para a produção de composições farmacêuticas que são empregados para o tra-tamento e/ou profilaxia e/ou amenização das doenças, distúrbios, enfermi-dades e/ou condições como mencionado aqui.

A invenção ainda se refere ao uso de compostos fornecidos para a produção de composições farmacêuticas que são empregadas para o tratamento e/ou profilaxia de doenças e/ou distúrbios ou sensíveis à inibição de proteínas contendo bromodomínio, particularmente aquelas doenças mencionadas acima, como por exemplo, câncer, doença inflamatória, doença virai.

Outro objeto da presente invenção é o uso de um composto co-mo descrito aqui (por exemplo, de qualquer fórmula aqui) na produção de um medicamento para uso no tratamento de um distúrbio ou doença aqui. Outro objeto da presente invenção é o uso de um composto como descrito aqui (por exemplo, de qualquer fórmula aqui) para uso no tratamento de um distúrbio ou doença aqui.

Compostos ou composições descritos aqui podem ser adminis-trados usando qualquer quantidade e qualquer via de administração efetiva para tratar ou reduzir a gravidade de câncer ou outro distúrbio proliferativo. A quantidade exata requerida irá variar de sujeito a sujeito, dependendo da espécie, idade, e condição geral do sujeito, a gravidade da infecção, o agente particular, seu modo de administração, e similares. Compostos fornecidos são preferencialmente formulados em forma de dosagem unitária para facili-tar a administração e uniformidade de dosagem. A expressão “forma de do-sagem unitária” conforme usado aqui refere-se a uma unidade fisicamente discreta de agente apropriado para o paciente ser tratado. Será entendido, no entanto, que o uso diário total dos compostos e composições da presente revelação serão decididos pelo médico dentro do escopo de seu julgamento clínico. O nível de dose efetivo específico para qualquer paciente particular ou organismo irá depender de uma variedade de fatores incluindo o distúrbio sendo tratado e a gravidade do distúrbio; a atividade de composto específico empregado; a composição específica empregada; a idade, peso corporal, saúde geral, sexo e dieta do paciente; o tempo de administração, via de ad-ministração, e taxa de excreção do composto específico empregado; a dura-ção do tratamento; drogas usadas em combinação ou coincidentes com o composto específico empregado, e fatores similares bem conhecidos nas técnicas farmacêuticas.

As composições farmaceuticamente aceitáveis desta revelação podem ser administradas aos humanos e outros animais por via oral, retal, parenteral, intracisternal, intravaginal, intraperitoneal, tópica (as por pós, pomadas, ou gotas), bucal, como um spray oral ou nasal, ou similares, de-pendendo da gravidade da infecção sendo tratada. Em certas modalidades, compostos fornecidos podem ser administrados por via oral ou parenteral em níveis de dose de cerca de 0,01 mg/kg a cerca de 50 mg/kg e preferen-cialmente de cerca de 1 mg/kg a cerca de 25 mg/kg, de peso corporal do sujeito por dia, um ou mais vezes ao dia, para obter o efeito terapêutico de-sejado.

De acordo com algumas modalidades, a invenção refere-se a um método para inibir proteínas contendo bromodomínio em uma amostra biológica compreendendo a etapa de contatar dita amostra biológica com um composto fornecido, ou a composição do mesmo.

De acordo com algumas modalidades, a invenção se refere a um método para inibir a proteína contendo bromodomínio, como uma proteína BET, como BRD2, BRD3, BRD4 e/ou BRDT, ou uma mutante do mesmo, atividade em uma amostra biológica compreendendo a etapa de contatar dita amostra biológica com um composto fornecido, ou a composição do mesmo.

O termo “amostra biológica”, conforme usado aqui, inclui, entre outros, culturas de célula, ou extratos das mesmas, material de biopsia obtido de um mamífero ou extratos dos mesmos, e sangue, saliva, urina, fezes, sêmen, lágrimas, ou outros fluidos corporais ou extratos dos mesmos.

A inibição da atividade de uma proteína, por exemplo, proteína contendo bromodomínio, como uma proteína BET, como BRD2, BRD3, BRD4 e/ou BRDT, ou uma mutante do mesmo, em uma amostra biológica é útil para uma variedade de finalidades que são conhecidas por aqueles versados na técnica. Exemplos de ditas finalidades incluem, entre outros, transfusão de sangue, transplante de órgão, armazenamento de espécime biológico, e ensaios biológicos.

De acordo com outra modalidade, a invenção refere-se a um método para inibir atividade de uma ou mais proteína contendo bromodomínio, como uma proteína BET, como BRD2, BRD3, BRD4, e/ou BRDT, ou uma mutante do mesmo, em um paciente compreendendo a etapa de administrar a dito paciente um composto fornecido, ou uma composição compreendendo dito composto. Em certas modalidades, a presente invenção fornece um método para tratar um distúrbio mediado por uma ou mais proteínas contendo bromodomínio, como uma proteína BET, como BRD2, BRD3, BRD4, e/ou BRDT, ou uma mutante do mesmo, em um paciente em necessidade do mesmo, compreendendo a etapa de administrar a dito paciente um composto fornecido ou farmaceuticamente aceitável composição do mesmo. Ditos distúrbios são descritos em detalhes aqui.

Dependendo da condição particular, ou doença, a ser tratada, agentes terapêuticos adicionais que são normalmente administrados para tratar aquela condição podem ainda estar presentes nas composições desta revelação ou administradas separadamente como parte de um regime de dosagem. Conforme usado aqui, agentes terapêuticos adicionais que são normalmente administrados para tratar uma doença particular, ou condição, são conhecidos como “apropriados para a doença, ou condição, sendo tra-tada.”

Em algumas modalidades, o agente terapêutico adicional é uma droga epigenética. Conforme usado aqui, o termo “droga epigenética” refere- se a um agente terapêutico que direciona um regulador epigenético. Exem-plos de reguladores epigenéticos incluem a histona lisina metiltransferases, histona arginina metil transferases, histona demetilases, histona deacetila- ses, histona acetilases, e DNA metiltransferases. Inibidores de histona dea- cetilase incluem, entre outros, vorinostat.

Outras terapias, agentes quimioterápicos, ou outros agentes an- tiproliferativos podem ser combinados com um composto fornecido para tratar doenças proliferativas e câncer. Exemplos de terapias ou agentes anti- câncer que podem ser usados em combinação com compostos de fórmula I incluem cirurgia, radioterapia (por exemplo, radiação gama, radioterapia de feixe de nêutron, radioterapia de feixe de elétron, terapia de próton, braquite- rapia, e isótopos radioativos sistêmicos), terapia endócrina, um modificador de resposta biológica, por exemplo, um interferon, uma interleucina, fator de necrose tumoral (TNF), hipertermia e crioterapia, um agente para atenuar qualquer efeito adverso (por exemplo, um antiemético), e qualquer outra droga quimioterápica aprovada.

Um composto fornecido pode ainda ser usado para ter vantagem em combinação com um ou mais compostos antiproliferatives. Tais compos-tos antiproliferativos incluem um inibidor de aromatase; um anti-estrogênio; um anti-androgênio; um agonista de gonadorelina; um inibidor de topoisome-rase I; um inibidor de topoisomerase II; um agente ativo de microtúbulo; um agente alquilante; um retinoide, um carotenoide, ou um tocoferol; um inibidor de ciclooxigenase; um inibidor de MMP; um inibidor de mTOR; um antimeta- bólito; um composto de platina; um inibidor de metionina aminopeptidase; um bisfosfonato; um anticorpo antiproliferative; um inibidor de heparanase; um inibidor de isoformas oncogênicas de Ras; um inibidor de telomerase; um inibidor de proteasome; um composto usado no tratamento de malignidades hematológicas; um inibidor de Flt-3; um inibidor de Hsp90; um inibidor de proteína de fuso de quinesina; um inibidor de MEK; um antibiótico antitumor; uma nitrosoureia; um composto direcionador/proteína redutora ou atividade de lipídeo quinase, um composto direcionador/proteína redutora ou atividade de lipídeo fosfatase, ou qualquer outro composto antiangiogênico.

Inibidores de aromatase exemplares incluem esteroides, como atamestano, exemestano e formestano, e não esteroides, como aminoglute- timida, rogletimida, piridoglutetimida, trilostano, testolactona, cetoconazol, vorozol, fadrozol, anastrozol e letrozol.

Antiestrogênios exemplares incluem tamoxifeno, fulvestrant, ra- loxifeno e raloxifeno cloridrato. Antiandrogênios incluem, entre outros, bicalu- tamida. Agonistas de gonadorelina incluem, entre outros, abarelix, goserelina e acetato de goserelina.

Inibidores de topoisomerase I exemplares incluem topotecano, gimatecano, irinotecano, camptotecina e seus análogos, 9-nitrocamptotecina e a camptotecina macromolecular conjugada PNU-166148. Inibidores de

Topoisomerase II incluem, entre outros, as antraciclinas como doxorubicina, daunorubicina, epirubicina, idarubicina e nemorubicina, as antraquinonas mitoxantrona e losoxantrona, e o podofilotoxinas etoposida e teniposida.

Agentes ativos de microtúbulo exemplares estabilizadores de microtúbulo, compostos desestabilizadores de microtúbulo e inibidores de polimerização de microtubulina incluindo, entre outros, taxanos, como pacli-taxel e docetaxel; alcaloides da vinca, como vinblastina ou vinblastina sulfa-to, vincristina ou vincristina sulfato, e vinorelbina; discodermolides; colchicina e epotilonas e derivados dos mesmos.

Agentes alquilantes exemplares ciclofosfamida, ifosfamida, mel- falan ou nitrosoureias como carmustina e lomustina.

Inibidores exemplares de ciclooxigenases incluem inibidores de Cox-2, 5-alquila substituída ácido 2-arilaminofenilacético e derivados, como celecoxibe, rofecoxibe, etoricoxibe, valdecoxibe ou um ácido 5-alquil-2- ari- laminofenilacético, como lumiracoxibe.

Exemplos de inibidores de metaloproteinase de matriz (“inibido-res de MMP”) incluem inibidores peptidomiméticos de colágeno e não pepti- domiméticos, derivados de tetraciclina, batimastat, marimastat, prinomastat, metastat, BMS-279251, BAY 12-9566, TAA211, MMI270B, e AAJ996.

Inibidores mTOR exemplares incluem compostos que inibem o alvo mamífero de rapamicina (mTOR) e possui atividade antiproliferativa como sirolimus, everolimus, CCI-779, e ABT578.

Antimetabólitos exemplares incluem 5-fluoruracil (5-FU), capeci- tabina, gemcitabina, compostos desmetilantes de DNA, como 5-azacitidina e decitabina, metotrexato e edatrexato, e antagonistas de ácido fólico como pemetrexed.

Compostos de platina exemplares incluem carboplatina, cis-platina, cisplatina, e oxaliplatina.

Inibidores exemplares de metionina aminopeptidase incluem bengamida ou um derivado do mesmo e PPI-2458.

Bisfosfonatos exemplares incluem ácido etidronico, ácido clo- dronico, ácido tiludronico, ácido pamidronico, ácido alendronico, ácido iban- dronico, ácido risedronico e ácido zoledronico.

Anticorpos exemplares antiproliferatives incluem trastuzumab, trastuzumab-DM1, cetuximab, bevacizumab, rituximab, PRO64553, e 2C4. O termo “anticorpo” pretende significar incluir anticorpos monoclonais intactos, anticorpos policlonais, anticorpos multiespecíficos formados de pelo menos dois anticorpos intactos, e fragmentos de anticorpo, contanto que apresentem a atividade biológica desejada.

Exemplos de inibidores de heparanase incluem compostos que direcionam, reduzem ou inibem a degradação de heparina sulfato, como Pl- 88eOGT2115.

O termo “um inibidor de isoformas oncogênicas Ras,” como H- Ras, K-Ras, ou N-Ras, conforme usado aqui refere-se a um composto que direciona, reduz ou inibe a atividade oncogênica de Ras; por exemplo, um inibidor de farnesil transferase como L-744832, DK8G557, tipifarnibe, e lona- farnibe.

Inibidores exemplares de telomerase incluem compostos que di-recionam, reduzem ou inibem a atividade de telomerase, como compostos que inibem o receptor de telomerase, como telomestatina.

Inibidores exemplares de proteasoma incluem compostos que di-recionam, reduzem ou inibem a atividade da proteosoma incluindo, entre outros, bortezomibe.

A frase “compostos usados no tratamento de malignidades he-matológicas” conforme usado aqui inclui inibidores de tirosina quinase tipo FMS, que são compostos que direcionam, reduzem ou inibem a atividade de receptores de tirosina quinase tipo FMS (Flt-3R); interferon, 1-β-D-arabi- nofuransilcitosina (ara-c) e busulfan; e inibidores ALK, que são compostos que direcionam, reduzem ou inibem quinase linfoma anaplastica.

Inibidores exemplares Flt-3 incluem PKC412, midostaurina, um derivado de estaurosporina, SU11248 e MLN518.

Inibidores exemplares HSP90 incluem compostos que direcio-nam, reduzem ou inibem a atividade de ATPase intrínseca de HSP90; de-gradar, direcionar, reduzir ou inibir as proteínas cliente HSP90 através da via de proteosoma ubiquitina. Compostos que direcionam, reduzem ou inibem a atividade de ATPase intrínseca de HSP90 são especialmente compostos, proteínas ou anticorpos que inibem a atividade de ATPase de HSP90, como 17-alilamino,17-demetoxigeldanamicina (17AAG), um derivado de geldana- micina; outros compostos relacionados a geldanamicina; radicicol e inibido-res de HDAC.

A frase “um composto que direciona/reduz uma proteína ou ati-vidade de lipídeo quinase; ou uma proteína ou atividade de lipídeo fosfatase; ou qualquer outro composto anti-angiogênico” conforme usado aqui inclui um inibidor de proteína tirosina quinase e/ou serina e/ou treonina quinase ou inibidor de lipídeo quinase, como a) um composto que direciona, reduz ou inibir a atividade de receptores de fator de crescimento derivado de plaqueta (PDGFR), como um composto que direciona, reduz ou inibe a atividade de PDGFR, como um derivado de N-fenil-2-pirimidina-amina, como imatinibe, SU101, SU6668 e GFB-111; b) um composto que direciona, reduz ou inibir a atividade de receptores de fator de crescimento de fibroblasto (FGFR); c) um composto que direciona, reduz ou inibir a atividade de receptor de fator de crescimento tipo insulina I (IGF-IR), como um composto que direciona, reduz ou inibe a atividade de IGF-IR; d) um composto que direciona, reduz ou inibir a atividade de família de receptor Trk de tirosina quinase, ou inibidores de efrin B4; e) um composto que direciona, reduz ou inibir a atividade de recep-tor Axl de família de tirosina quinase; f) um composto que direciona, reduz ou inibir a atividade de receptor tirosina quinase Ret; g) um composto que direciona, reduz ou inibir a atividade de receptor Kit/SCFR tirosina quinase, como imatinibe; h) um composto que direciona, reduz ou inibir a atividade de receptor c-Kit tirosina quinases, como imatinibe; i) um composto que direcio-na, reduz ou inibir a atividade de elementos de família c-Abl, seus produtos de fusão de gene (por exemplo, quinase Bcr-Abl) e mutantes, como um deri-vado N-fenil-2-pirimidina-amina, como imatinibe ou nilotinibe; PD180970; AG957; NSC 680410; PD173955; ou dasatinibe; j) um composto que dire-ciona, reduz ou inibir a atividade de elementos da proteína quinase C (PKC) e família Raf de serina/treonina quinases, elemento de família MEK, SRC, JAK, FAK, PDK1, PKB/Akt, e Ras/MAPK, e/ou elementos da família depen-dente de ciclina (CDK), como um derivado de estaurosporina revelado em US 5.093.330, como midostaurina; exemplos de outros compostos incluem UCN-01, safingol, BAY 43-9006, briostatina 1, perifosine; ilmofosine; RO 318220 e RO 320432; GO 6976; ISIS 3521; LY333531/LY379196; um composto isoquinolina; um inibidor farnesil transferase; PD184352 ou QAN697, ou AT7519; k) um composto que direciona, reduz ou inibir a atividade de uma proteína tirosina quinase, como imatinibe mesilato ou um tirfostin como Tirfostin A23/RG-50810; AG 99; Tirfostin AG 213; Tirfostin AG 1748; Tirfostin AG 490; Tirfostin B44; Tirfostin B44 (+) enantiômero; Tirfostin AG 555; AG 494; Tirfostin AG 556, AG957 e adafostina éster adamantil de ácido (4-{[(2,5- di-hidroxifenil)metil]amino}-benzoico; NSC 680410, adafostina); I) um com-posto que direciona, reduz ou inibir a atividade de família de fator de cresci-mento epidérmico de receptor tirosina quinases (EGFR, ErbB2, ErbB3, ErbB4 como homo ou heterodímeros) e seus mutantes, como CP 358774, ZD 1839, ZM 105180; trastuzumabe, cetuximabe, gefitinibe, erlotinibe, OSI- 774, CI-1033, EKB-569, GW-2016, anticorpos E1.1, E2.4, E2.5, E6.2, E6.4, E2.11, E6.3 e E7.6.3, e 7H-pirrolo-[2,3-d]pirimidina derivados; e m) um composto que direciona, reduz ou inibir a atividade de receptor c-Met.

Compostos exemplares que direcionam, reduzem ou inibem a a-tividade de uma proteína ou lipídeo fosfatase incluem inibidores de fosfatase 1, fosfatase 2A, ou CDC25, como ácido okadaico ou um derivado do mesmo.

Outros compostos anti-angiogênicos incluem compostos conten-do outro mecanismo para suas atividades não relacionadas à proteína ou inibição de lipídeo quinase, por exemplo, talidomida e TNP-470.

Compostos quimioterápicos exemplares adicionais, um ou mais dos quais podem ser usados em combinação com compostos fornecidos, incluem: daunorubicina, adriamicina, Ara-C, VP-16, teniposideo, mitoxantro- ne, idarubicina, carboplatina, PKC412, 6-mercaptopurina (6-MP), fludarabi- nae fosfato, octreotida, SOM230, FTY720, 6-tioguanina, cladribina, 6-mer-captopurina, pentostatina, hidroxiureia, 2-hidróxi-1H-isoindol-1,3-dione deri-vados, 1-(4-cloroanilino)-4-(4-piridilmetil)ftalazina ou a sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, 1-(4-cloroanilino)-4-(4-piridilmetil)ftalazina succinato, angiostatina, endostatina, amidas de ácido antranílico, ZD4190, ZD6474, SU5416, SU6668, bevacizumabe, rhuMAb, rhuFab, macugen; inibidores de FLT-4, inibidores de FLT-3, anticorpo VEGFR-2 IgGI, RPI 4610, bevacizu-mabe, porfímero de sódio, anecortave, triamcinolona, hidrocortisona, 11-α- epi-hidrocotisol, cortexolona, 17a-hidroxiprogesterona, corticosterona, deso- xicorticosterona, testosterona, estrona, dexametasona, fluocinolona, um al-caloide da planta, um composto hormonal e/ou antagonista, um modificador de resposta biológica, como uma linfocina ou interferon, um oligonucleotídeo antissenso ou derivado oligonucleotídeo, shRNA ou siRNA, ou um composto de miscelânea ou composto com outro ou mecanismo desconhecido de ação.

Para uma discussão mais compreensiva de terapias de câncer atualizadas ver, The Merck Manual, Seventeenth Ed. 1999, os conteúdos totais dos quais estão aqui incorporados por referência. Ver ainda website de National Cancer Institute (CNI) website (www.nci.nih.gov) e Food e Drug Administration (FDA) para uma lista de drogas oncológicas aprovadas pelo FDA.

Outros exemplos de agentes, um ou mais dos quais um composto fornecido pode ainda ser combinado com incluem: um tratamento para Doença de Alzheimer como donepezila e rivastigmina; um tratamento para doença de Parkinson como L-DOPA/carbidopa, entacapona, ropinirol, pra- mipexol, bromocriptina, pergolida, tri-hexifenidila, e amantadina; um agente para tratar esclerose múltipla (MS) como beta interferon (por exemplo, Avo-nex® e Rebif®), acetato de glatiramer, e mitoxantrona; um tratamento para asma como albuterol e montelukast; um agente para tratar esquizofrenia como zyprexa, risperdal, seroquel, e haloperidol; um agente anti-inflamatório como um corticosteroide, um bloqueador TNF, IL-1 RA, azatioprina, ciclofos- famida, e sulfasalazina; um agente imunomodulador, incluindo agentes imu- nossupressores, como ciclosporina, tacrolimus, rapamicina, micofenolato mofetila, um interferon, um corticosteroide, ciclofosfamida, azatioprina, e sul-fasalazina; um fator neurotrófico como um inibidor de acetilcolinesterase, um inibidor MAO, um interferon, um anti-convulsivante, um bloqueador de canal iônico, riluzol, ou um agente anti-Parkinson; um agente para tratar doença cardiovascular como um beta-bloqueador, um inibidor de ACE, um diurético, um nitrato, um bloqueador de cálcio, ou uma estatina; um agente para tratar doença hepática como um corticosteroide, colestiramina, um interferon, e um agente antiviral; um agente para tratar distúrbios sanguíneos como um corti-costeroide, um agente antileucêmico, ou um fator de crescimento; ou um agente para tratar distúrbios de imunodeficiência como gama globulina.

Os compostos acima mencionados, um ou mais dos quais podem ser usados em combinação com um composto fornecido, podem ser preparados e administrados como descrito na técnica.

Compostos fornecidos podem ser administrados isolados ou em combinação com um ou mais outros compostos terapêuticos, possível terapia de combinação tomando a forma de combinações fixadas ou a administração de um composto fornecido e um ou mais outros compostos terapêuticos sendo confundidos ou administrados independentemente de outro, ou a administração combinada de combinações fixas e um ou mais outros com-postos terapêuticos. Compostos fornecidos podem, além disso, ser adminis-trados especialmente para terapia de tumor em combinação com quimiote-rapia, radioterapia, imunoterapia, fototerapia, intervenção cirúrgica, ou uma combinação destes. Terapia de longo prazo é igualmente possível como uma terapia adjuvante no contexto de outras estratégias de tratamento, como descrito acima. Outros possíveis tratamentos são terapia para manter o estado do paciente após regressão do tumor, ou ainda terapia quimiopreven- tiva, por exemplo, em pacientes em risco.

Ditos agentes adicionais podem ser administrados separada-mente de uma composição contendo um composto fornecido, como parte de um regime de dosagem múltipla. Alternativamente, aqueles agentes podem ser parte de uma forma de dosagem única, misturadas juntas com um com-posto fornecido em uma composição única. Se administrado como parte de um regime de dosagem múltipla, os dois agentes ativos podem ser submeti-dos simultaneamente ou dentro de um período de tempo de outro normal- mente dentro de cinco horas de outro.

Na melhora de uma condição de sujeito, uma dose de manuten-ção de um composto, composição ou combinação desta invenção pode ser administrada, se necessário. Subsequentemente, a dosagem ou frequência de administração, ou ambas, podem ser reduzidas, como uma função dos sintomas, em um nível em que a condição melhorada é retida quando os sintomas foram aliviados ao nível desejado, o tratamento deve cessar. O sujeito pode, no entanto, requerer tratamento intermitente em uma base de longo prazo em qualquer recorrência de sintomas da doença.

Será entendido, no entanto, que o uso diário total dos compostos e composições da presente revelação serão decididos pelo médico dentro do escopo de seu julgamento clínico. A dose inibitória específica para qualquer paciente particular irá depender de uma variedade de fatores incluindo o distúrbio sendo tratado e a gravidade do distúrbio; a atividade de composto específico empregado; a composição específica empregada; a idade, peso corporal, saúde geral, sexo e dieta do paciente; o tempo de administração, via de administração, e taxa de excreção do composto específico empregado; a duração do tratamento; drogas usadas em combinação ou coincidentes com o composto específico empregado, e fatores similares bem conhecidos nas técnicas médicas.

A dose inibitória diária total dos compostos desta invenção ad-ministrada a um sujeito em doses únicas ou divididas pode ser em quantida-des, por exemplo, de 0,01 a 50 mg/kg peso corporal ou mais geralmente de 0,1 a 25 mg/kg de peso corporal. Composições de dose única podem conter ditas quantidades ou submúltiplos dos mesmos para preparar a dose diária. Em uma modalidade, regimes de tratamento de acordo com a presente in-venção compreendem administração a um paciente em necessidade de dito tratamento de cerca de 10 mg a cerca de 1000 mg dos compostos desta in-venção por dia em doses únicas ou múltiplas.

Conforme usado aqui, o termo “combinação,” “combinado,” e ter-mos relacionados refere-se à administração simultânea ou sequencial de agentes terapêuticos de acordo com esta invenção. Por exemplo, um com posto fornecido pode ser administrado com outro agente terapêutico simul-taneamente ou sequencialmente em forma de dosagem unitária separada ou junto em uma forma de dosagem unitária única. Assim, uma modalidade da invenção fornece uma forma de dosagem unitária única compreendendo um composto fornecido, um agente terapêutico adicional, e um veículo, adjuvan-te ou veículo farmaceuticamente aceitável para uso nos métodos da inven-ção.

A quantidade de ambos, um composto fornecido e agente tera-pêutico adicional (naquelas composições que compreendem um agente te-rapêutico adicional como descrito acima) que pode ser combinado com os materiais veículos para produzir uma forma de dosagem única irá variar de-pendendo do hospedeiro tratado e o modo particular de administração. Pre-ferencialmente, composições devem ser formuladas de modo que uma do-sagem de entre 0,01 - 100 mg/kg peso corporal/dia de um composto fornecido pode ser administrado.

Naquelas composições que compreendem um agente terapêuti-co adicional, aquele agente terapêutico adicional e o composto fornecido podem atuar de modo sinérgico. Portanto, a quantidade de agente terapêuti-co adicional em ditas composições serão menos do que necessários em uma monoterapia que utiliza somente aquele agente terapêutico. Em ditas composições uma dosagem de entre 0,01 - 1.000 μg/kg peso corporal/dia do agente terapêutico adicional pode ser administrada.

A quantidade de agente terapêutico adicional presente nas com-posições desta revelação não serão mais do que a quantidade que seriam normalmente administradas em uma composição compreendendo aquele agente terapêutico como o único agente ativo. Preferencialmente a quanti-dade de agente terapêutico adicional nas composições atualmente reveladas irá variar de cerca de 50% a 100% da quantidade normalmente presente em uma composição compreendendo aquele agente como o único agente tera-peuticamente ativo.

Compostos fornecidos, ou composições farmacêuticas dos mes-mos, podem ainda ser incorporados nas composições para revestimento de um dispositivo médico implantável, como próteses, válvulas artificiais, enxer-tos vasculares, stents e cateteres. Stents vasculares, por exemplo, foram usados para superar restenose (novo estreitamento da parede do vaso após lesão). No entanto, os pacientes usando stents ou outros dispositivos im-plantáveis estão em risco de formação de coágulo ou ativação de plaqueta. Estes efeitos indesejados podem ser prevenidos ou mitigados por pré- revestimento do dispositivo com uma composição farmaceutícamente acei-tável compreendendo um composto fornecido. Dispositivos implantáveis re-vestidos com um composto desta invenção são outra modalidade da presente invenção.

A menção de uma lista de grupos químicos em qualquer defini-ção de uma variável aqui inclui definições daquelas variáveis como qualquer grupo único ou combinação dos grupos listados. A menção de uma modali-dade para uma variável aqui inclui aquela modalidade como modalidade úni-ca ou em combinação com qualquer outra modalidade ou porções das mes-mas. A menção de uma modalidade aqui inclui aquela modalidade como modalidade única ou em combinação com qualquer outra modalidade ou porções das mesmas.

Em outro aspecto, a invenção fornece um método de sintetizar um composto de fórmula I. Outra modalidade é um método de preparar um composto de qualquer uma das fórmulas aqui usando qualquer um, ou uma combinação de, reações delineadas aqui. O método pode incluir o uso de um ou mais intermediários ou reagentes químicos delineados aqui.

EXEMPLIFICAÇÃO

Como descrito nos Exemplos abaixo, em determinadas modali-dades exemplares, os compostos são preparados de acordo com os seguintes procedimentos gerais. Será apreciado que, embora os métodos gerais descrevam a síntese de certos compostos da presente invenção, os seguintes métodos gerais, e outros métodos conhecidos por aqueles versados na técnica, podem ser aplicados a todos os compostos e subclasses e espécies de cada um destes compostos, conforme aqui descrito.

EXEMPLO 1. Síntese de (2-bromfenil)(4-clorofenil) metanona:

A uma solução de 2-bromobenzaldeído (3,15 mL, 27,0 mmol) e THF (135 mL) a 0°C foi adicionada solução de brometo de (4-clorofe- nil)magnésio (29,7 mL, 1M em THF, 29,7 mmol). A reação foi agitada a 0°C por 30 min antes da adição de uma solução saturada de cloreto de amónio. As camadas foram separadas e a aquosa extraída com EtOAc. As orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage para gerar (2-bromofenil)(4-clorofenil)metanol. A uma solução de DCM (100 mL) e cloreto de oxalil (2,471 mL, 28,2 mmol) a -78°C foi adicionado DMSO (3,34 mL, 47,0 mmol) e a reação agitada a -78°C durante 15 min. Após 15 minutos, uma solução de (2-bromofenil)(4-clorofenil)metanol em DCM (25 mL) foi adi-cionada sob gotejamento e agitada durante 15 minutos a -78°C antes da a-dição de Et3N (9,84 mL, 70,6 mmol). O banho frio foi removido e a reação foi aquecida até a temperatura ambiente. A esta solução foi adicionada água e as camadas separaram. A aquosa foi extraída com DCM e as orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar (2- bromofenil)(4-clorofenil)metanona. LC/MS m/z 295 [M+H]+.

EXEMPLO 2. Síntese de benzoato de prop-2-in-1-ila

A uma solução de prop-2-in-1-ol (3,63 mL, 62,4 mmol), DCM (180 mL) e Et3N (17,40 mL, 125 mmol) a 0°C foram adicionados cloreto de benzoil (7,25 mL, 62,4 mmol) e DMAP (0,381 g, 3,12 mmol). A reação foi agitada enquanto aquecida até a temperatura ambiente durante a noite. A reação foi diluída com água e as camadas separaram. A aquosa foi extraída com DCM e as orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas para gerar benzoato de prop-2-in-1 -ila, que foi usado nas reações subsequentes sem outra purificação. LC/MS m/z 161 [M+H]+.

EXEMPLO 3. Síntese de benzoato de (3-metilisoxazol-5-il)metila

A uma solução de clorofórmio, EtsN (0,435 mL, 3,12 mmol), ben-zoato de prop-2-inil (1 g, 6,24 mmol) e oxima de (E)-acetaldeido (0,571 mL, 9,37 mmol) a 0°C foi adicionado alvejante (23,12 mL, 18,73 mmol). A reação foi agitada durante a noite, antes de as camadas separarem e a aquosa ser extraída com DCM. As orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, fil-tradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (E- tOAc/hex) para gerar benzoato de (3-metilisoxazol-5-il)metila. LC/MS m/z 218[M+H]+.

EXEMPLO 4. Síntese de benzoato de (4-bromo-3-metilisoxazol-5- il)metila

A um frasco revedável foi adicionado benzoato de (3-metiliso- xazol-5-il)metil (907 mg, 4,18 mmol), AcOH (3,5 mL, 61,1 mmol) e NBS (892 mg, 5,01 mmol). A reação foi aquecida a 110°C durante a noite. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e diluída com água. A aquosa foi extraída com EtOAc e as orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar benzoato de (4-bromo-3-metilisoxazol-5- il)metila. LC/MS m/z 296 [M+H]+.

EXEMPLO 5. Síntese de benzoato de (4-(2-(4-clorobenzoil)fenil)-3- metilisoxazol-5-il)metila

A um frasco revedável foi adicionado Pd(OAc)2 (3,87 mg, 0,017 mmol) e X-fos (16,42 mg, 0,034 mmol) antes de o frasco ser vedado e eva-cuado e purgado com N2 (3X). À este frasco foi adicionado frasco benzoato de (4-bromo-3-metilisoxazol-5-il)metil (102 mg, 0,344 mmol) em dioxano (1 mL), Et3N (144 μl, 1,033 mmol) e solução de 4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolano (517 μl, 1M em THF, 0,517 mmol). A reação foi agitada durante a noite a 80°C, resfriada até temperatura ambiente e filtrada. O filtrado foi concentrado para gerar benzoato bruto de (3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolano-2-il)isoxazol-5-il)metila. A um frasco revedável foi adicionado K2CO3 (47,5 mg, 0,344 mmol), Aduto PdCE (dppf)-CH2Cl2 (20,06 mg, 0,025 mmol), (2-bromofenil)(4-clorofenil) metanona (72,6 mg, 0,246 mmol). O frasco foi vedado e evacuado e purgado com N2 (3X) antes da adição do benzoato bruto (3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano-2- il)isoxazol-5-il)metil (118 mg, 0,344 mmol) dissolvido em dioxano (2 mL). Água (0,5 mL) foi então adicionada à esta solução antes que 0 frasco fosse aquecido a 110°C durante a noite. A reação foi resfriada à temperatura ambiente, diluída com EtOAc, filtrada e concentrada. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar benzoato de (4-(2-(4- clorobenzoil)fenil)-3-metilisoxazol-5-il). LC/MS m/z 432 [M+H]+.

EXEMPLO 6. Síntese de 6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo [4,5-e] azepina.

(4-clorofenil)(2-(5-(hidroximetil)-3-metilisoxazol-4-il)fenil)metanona.

A um frasco de fundo redondo foi adicionado benzoato de (4-(2- (4-clorobenzoil)fenil)-3-metilisoxazol-5-il)metil (32,7 mg, 0,076 mmol), THF (3 mL), MeOH (3 mL) e água (1,5 mL). Esta solução foi resfriada até 0°C antes da adição de Hidróxido de Lítio Mono-hidratado (9,53 mg, 0,227 mmol) e a reação foi agitada a 0°C durante 1h antes da diluição com água e EtOAc. As camadas foram separadas e a aquosa extraída com EtOAc (3X). As orgâni cas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas para gerar (4-clorofenil)(2-(5-(hidroximetil)-3-metilisoxazol-4- il)fenil)metanona bruta.

(4-(2-(4-clorobenzoil)fenil)-3-metilisoxazol-5-il)metila. Metanossulfonato

A um frasco de fundo redondo foi adicionado (4-clorofenil)(2-(5- (hidroximetil)-3-metilisoxazol-4-il)fenil)metanona bruta (24,9 mg, 0,076 mmol), DCM (2 mL) e Et3N (21,18 μl, 0,152 mmol). Esta solução foi resfriada até 0°C, antes da adição de MsCI (7,10 μl, 0,091 mmol) e a reação agitada a 0°C por 30 min antes da diluição com água e da extração com DCM. As orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas para gerar (4-(2-(4-clorobenzoil)fenil)-3-metilisoxazol-5-il)metil metanossulfonato bruto.

(2-(5-(azidometil)-3-metiHsoxazol-4-il)fenil)(4-clorofenil)metanona.

A um frasco de fundo redondo foi adicionado Metanossulfonato bruto de (4-(2-(4-chlorobenzoil)fenil)-3-metilisoxazol-5-il)metil (30,8 mg, 0,076 mmol), DMF (2 mL) e azida de sódio (4,93 mg, 0.076 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente por 2 h antes da diluição com água e da extração com EtOAc. As orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas para gerar (2-(5-(azidometil)- 3-metilisoxazol-4-il)fenil)(4-clorofenil)metanona bruta.

6-(4-clorofenil)- 1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepina(Composto 190).

A um frasco revedável foi adicionada (2-(5-(azidometil)-3- metilisoxazol-4-il)fenil) (4-clorofenil)metanona bruta (27 mg, 0,077 mmol) e tolueno. O frasco foi vedado e colocado sob N2 antes da adição da solução de trimetilfosfino (92 μl, 1 M tolueno, 0,092 mmol). A reação foi agitada em temperatura ambiente por 2 h antes de purificação através de Biotage (10 g, EtOAc/hex) para gerar 6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5- e]azepina. 1H RMN (400 MHz, Acetona) δ 7,78 - 7,84 (m, 1H), 7,65 - 7,74 (m, 1H), 7,34 - 7,47 (m, 6H), 4,62 (br. s, 2H), 2,54 (s, 3H). LC/MS m/z 309 [M+H]+.

EXEMPLO 7. Síntese de 3-(((4-metoxibenzil)oxi)metil)-5-metilisoxazol

A um frasco revedável foram adicionados NaH (193 mg, 60% de dispersão em óleo mineral, 4,82 mmol) e THF. O frasco foi resfriado a 0°C antes de adição de (4-metoxifenil)metanol (639 μl, 5,14 mmol) e a reação foi agitada a 0°C por 30 min antes da adição de 3-(clorometil)-5-metilisoxazol (423 mg, 3,22 mmol) e iodeto de tetrabutilamônio (119 mg, 0,322 mmol). A reação foi aquecida sob refluxo durante a noite. O frasco foi resfriado até temperatura ambiente antes de ser diluído com solução de cloreto de amónio. A aquosa foi extraída com EtOAc e as orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2SO4 filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar 3-((4- metoxibenziloxi)metil)-5-metilisoxazol. LC/MS m/z 256 [M+Naf.

EXEMPLO 8. Síntese de 2-(3-(((4-metoxibenzil)oxi)metil)-5-metilisoxazol- 4-il)benzonitrila

A um frasco revedável foi adicionado acetato de potássio (112 mg, 1,143 mmol), cloreto de paládio(ll) (0,507 mg, 2,86 μmol) e 2-bromoben- zonitrila (104 mg, 0,572 mmol). O frasco foi vedado e evacuado e purgado com N2 (3X) antes da adição de DMA (4 mL) e 3-((4-metoxibenziloxi)metil)-5- metilisoxazol (200 mg, 0,857 mmol) O frasco foi aquecido a 130°C durante a noite. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e diluída com água. A aquosa foi extraída com EtOAc e as orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2SO4 filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar 2-(3-((4-meto- xibenziloxi)metil)-5-metilisoxazol-4-yl)benzonitrila. LC/MS m/z 335 [M+H]+.

EXEMPLO 9. Síntese de 2-(3-(((4-metoxibenzil)oxi)metil)-5-metilisoxazol- 4-il)benzaldeído.

A um frasco de fundo redondo foi adicionado 2-(3-((4-metoxiben- ziloxi)metil)-5-metilisoxazol-4-il)benzonitrila (165,3 mg, 0,494 mmol) e DCM (3 mL). Esta solução foi resfriada a 0°C, antes da adição de uma solução de DIBAL-H (593 μl, 1M em DCM, 0,593 mmol). A reação foi agitada em 0°C por 1h antes da adição de 1N HCI. As camadas foram separadas e a aquosa extraída com DCM (3X). As orgânicas combinadas foram lavadas com 1N HCI e salmoura, antes de serem secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar 2- (3-((4-metoxibenziloxi)metil)-5-metilisoxazol-4-il)benzaldeído. LC/MS m/z 338 [M+H]+.

EXEMPLO 10. Síntese de (4-clorofenil)(2-(3-(((4-metoxibenzil)oxi)metil)- 5-metilisoxazol-4-il)fenil)metanol

A um frasco de fundo redondo foi adicionado 2-(3-((4-metoxi- benziloxi)metil)-5-metilisoxazol-4-il)benzaldeído (94 mg, 0,279 mmol) e THF. A solução foi resfriada a- 78°C antes da adição da solução de brometo de (4- clorofenil)magnésio (418 μl, 1M em THF, 0,418 mmol) e a reação agitada a - 78°C por 30 min. A solução foi extinta através da adição de água e aquecida à temperatura ambiente. A aquosa foi extraída com EtOAc (3X) e as orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2SO4 filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar (4-clorofenil)(2-(3-((4-metoxibenziloxi)metil)-5-metilisoxazol-4- il)fenil)metanol. LC/MS m/z 450 [M+H]+.

EXEMPLO 11. Síntese de (4-clorofenil)(2-(3-(((4-metoxibenzil)oxi)metil)- 5-metilisoxazol-4-il)fenil)metanona

A um frasco de fundo redondo foi adicionado DCM (4 mL) e cloreto de oxalil (28,0 μl, 0,320 mmol) antes de a solução ser resfriada a -78°C. A esta solução foi adicionado DMSO (37,9 μl, 0,533 mmol) e a reação foi agitada a -78°C durante 15 minutos antes da adição do (4-clorofenil)(2-(3- ((4-metoxibenziloxi)metil)-5-metilisoxazol-4-il)fenil)metanol (120 mg, 0,267 mmol) dissolvido em DCM. A solução foi agitada por 15 minutos adicionais antes da adição de Et3N (112 μl, 0,800 mmol) e a reação aquecida até temperatura ambiente. A esta solução foi adicionada a água e as camadas separaram. A aquosa foi extraída com DCM e as orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar (4-clorofenil)(2-(3-((4-metoxiben- ziloxi)metil)-5-metilisoxazol-4-il)fenil)metanona. LC/MS m/z 448 [M+H]+.

EXEMPLO 12. Síntese de (4-clorofenil)(2-(3-(hidroximetil)-5-metiliso- xazol-4-il)fenil)metanona

A um frasco de fundo redondo foi adicionada (4-clorofenil)(2-(3- ((4-metoxibenziloxi)metil)-5-metilisoxazol-4-il)fenil)metanona (69 mg, 0,154 mmol), DCM, e água. Esta solução foi resfriada até 0°C antes da adição de DDQ (69,9 mg, 0,308 mmol) e a reação foi agitada a 0°C durante 4 h antes da adição da solução de NaHCOβ. As camadas foram separadas e a aquosa extraída com DCM. As orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (E- tOAc/hex) para gerar (4-clorofenil)(2-(3-(hidroximetil)-5-metilisoxazol-4-il)fe- nil)metanona. LC/MS m/z 328 [M+H]+.

EXEMPLO 13. Síntese de 6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxa- zolo[4,3-e]azepina (Composto 191)

A um frasco de fundo redondo foi adicionado (4-clorofenil)(2-(3- (hidroximetil)-5-metilisoxazol-4-il)fenil)metanona (47,2 mg, 0,144 mmol), DCM, e Et3N (40,1 μl, 0,288 mmol). A solução foi resfriada até 0°C antes da adição de Ms-CI (13,47 μl, 0,173 mmol). A reação foi agitada a 0°C por 30min antes da adição de água. As camadas foram separadas e a aquosa extraída com DCM. As orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4 filtradas e concentradas para gerar metanossulfonato bruto de (4-(2-(4-cloro- benzoil)fenil)-5-metilisoxazol-3-il)metila. A um frasco de fundo redondo foi adicionado (4-(2-(4-clorobenzoil)fenil)-5-metilisoxazol-3-il)metal (58,4 mg, 0,144 mmol) metanossulfonato, DMF e azido de sódio (28,1 mg, 0,432 mmol). A reação foi agitada em temperatura ambiente por 2 h antes da diluição com água e da extração da aquosa com EtOAc. As orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentra-das para gerar (2-(3-(azidometil)-5-metilisoxazol-4-il)fenil)(4-clorofenil)meta- nona bruta. A um frasco de fundo redondo foi adicionada (2-(3-(azidometil)- 5-metilisoxazol-4-il)fenil)(4-clorofenil)metanona (50,8 mg, 0,144 mmol), tolueno (3 mL) e solução de trimetilfosfino (216 μl, 1M em tolueno, 0,216 mmol). A reação foi agitada em temperatura ambiente por 2 h antes da purificação através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar 6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-ben- zo[c]isoxazolo[4,3-e]azepina. LC/MS m/z 309 [M+H]+; 1H RMN (400 MHz, Acetona) δ 7,70 - 7,76 (m, 1H), 7,63 - 7,70 (m, 1H), 7,32 - 7,49 (m, 6H), 5,10 (br. s, 1H), 4,10 (br. s, 1H), 2,68 (s, 3H).

EXEMPLO 14. Abordagem Sintética Geral para Compostos de fórmula I, em que R2 é hidrogênio e R3 é -CH2-C(O)-N(R’)(R”).

O esquema 1 estabelece um método geral para preparar certos compostos da invenção. Esquema 1.

Um exemplo de um halo-éster 10 foi sintetizado conforme descrito abaixo.

Metil 2-bromo-4,5-dimetiltiofeno-3-carboxilato.

.

A uma solução de metil 4,5-dimetiltiofeno-3-carboxilato (1,89 g, 11,10 mmol) em DMF (10 mL) foi adicionado N-Bromosuccinimida (2,37 g, 13.32 mmol) em temperatura ambiente. A mistura de reação se tornou laranja ao longo do tempo e foi deixada em agitação por 2 h, quando a análise de LC-MS indicou consumo completo do metil 4,5-dimetiltiofeno-3-carboxilato. À solução foi adicionado MTBE e água. A camada aquosa foi extraída com MTBE (2x), a camada orgânica combinada laranja foi lavada com tiossulfato de sódio 1%, seguido de água (2x). A fase orgânica foi seca em Na2SO4 e concentrada para gerar óleo amarelo. A mistura de reação bruta foi purificada em sistema de Biotage (eluição isocrática 2% EtOAc: Hexanos 98%) para gerar o composto título como um sólido amarelo claro (2,61 g, 10,5 mmol, 94% de rendimento). LC/MS m/z 249 [M+H]+.

Um exemplo de um reagente borolano 11 foi sintetizado confor- me descrito abaixo. (3-Metilisoxazol-5-il)metil acetato.

.

A uma suspensão de N-clorosuccimida (71,5 g, 535 mmol) em CHCI3 (360 mL) e piridina (1,61 g, 20,3 mmol) foi adicionada uma solução de (E)-acetaldeído oxima (31,6 g, 535 mmol). Após um período de 1 h, propargi- lacetato (35,0 g, 357 mmol) em um mínimo de CHCI3 foi adicionado à mistura anterior. Trietilamina (114 g, 1124 mmol) foi então adicionada sob goteja- mento e a mistura da reação foi resfriada em banho-maria para manter a temperatura interna abaixo do ponto de ebulição. Após um período de 1 h, a mistura da reação foi concentrada in vacuo seguido pela adição de EtOAc. A mistura foi filtrada em um filtro de vidro e 0 sólido lavado com EtOAc, os filtrados combinados foram evaporados. Após a evaporação, EtOAc adicional foi adicionado e o processo anterior, repetido. O EtOAc foi evaporado e 0 produto bruto foi purificado em sistema de Biotage (eluição isocrática EtOAc 40%: Hexanos 60%) e as frações seguidas por LC/MS para gerar o composto título como um óleo claro. LC/MS m/z 156 [M+Hf. (4-Bromo-3-metilisoxazol-5-il)metil acetato.

.

A uma solução de (3-metilisoxazol-5-il)metil acetato (0,979 g, 6,31 mmol) em AcOH (10 mL, 175 mmol) foi adicionado /V-Bromosuccinimida (1,30 g, 7,30 mmol) e H2SO4 (0,65 mL, 12,19 mmol). A reação foi aquecida a 110°C. Após 1 h, a mistura da reação foi resfriada até temperatura ambiente e cuidadosamente vertida em um béquer e NaHCOs saturado. A bifásica foi vigorosamente agitada e solução básica (pH ~ 8-9) foi extraída com EtOAc (2x15 mL). A camada orgânica foi lavada com tiossulfato de sódio 2%, lavado com salmoura (20 mL), seca em Na2SO4e concentrada para gerar um óleo amarelo claro. O óleo foi purificado em sistema de Biotage (eluição isocrática 10% EtOAc: Hexanos 90%) para gerar 0 composto título (1,30 g, 5,55 mmol, 88% de rendimento) como um óleo amarelo incolor. LC/MS m/z 234 [M+H]+. (3-Metil-4-(4,4,5,5-tetrametn-1,3,2-clioxaborolan-2-yl)isoxazol-5-yl)metil acetato.

A um frasco de 500 mL (sob N2 (g)) foi adicionado dicloro- bis(acetonitrila)paládio(ll) (0,551 g, 2,12 mmol) e diciclo-hexil(2',6'-dime- toxibifenil-2-il)fosfina (3,50 g, 8,53 mmol). Aos sólidos foram sequencialmente adicionados uma solução de (4-bromo-3-metilisoxazol-5-il)metil acetato (24,8 g, 106 mmol) em 1,4-dioxano (65 mL), Et3N (44,3 mL, 318 mmol) e 4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (24 mL, 160 mmol). O frasco foi sequencialmente evacuado e purgado sob N2 e este processo foi repetido três vezes. A mistura da reação foi aquecida a 110°C (sob uma corrente constante de N2 (g)) e deixada em agitação por ~4 h. A análise de LC-MS, neste ponto, mostrou completa conversão do bromo-isoxazol inicial. A mistura da reação foi resfriada até temperatura ambiente e EtOAc (100 mL) foi adicionado. Após 15 min de agitação, a suspensão foi filtrada sobre um pad de Celite. A torta do filtro foi lavada com EtOAc (3 x 100 mL), concentrada em vácuo e o solvente foi alternado usando 1,4-Dioxano (2 x 50 mL). O éster borato foi usado sem outra purificação.

Acoplamentos de Suzuki para produzir intermediário 12

:

Protocolo I: Acoplamento sob Condições Anidras

Uma solução do reagente borolano (11; equivalente a 1,6) em 1,4-dioxano (1,6 M) foi adicionada ao Pd2(dba)3 (~ 2 mol%), K3PO4 anidro (tribásico) (2,0 equivalente) e diciclo-hexil(2’,6’-dimetoxibifenil-2-il)fosfina (~ 4 mol%) em N2 (g). Após a agitação da suspensão por 2 min., uma solução de halo-éster (10; equivalente a 1,0) em MeOH (0,3 M) foi introduzida em uma porção. A suspensão foi evacuada e purgada com N2 (3x) e subsequentemente aquecida a 67°C por 1h. A mistura da reação foi resfriada até temperatura ambiente e filtrada através de um tampão de Celite. A torta do filtro foi lavada com MeOH (3x). O filtrado foi concentrado para gerar um óleo marrom. O óleo resultante foi concentrado de MeOH várias vezes (3 x) para aju- dar na clivagem do éster acetila e produzido o álcool. A mistura de reação bruta foi purificada em sistema de Biotage (geralmente, eluição gradiente 5% EtOAc: Hexanos 95% para EtOAc 30%: Hexanos 70%, então isocrático E- tOAc 30%: Hexanos 70%) para gerar o composto título (tipicamente em 80% - 93% de rendimento).

Protocolo II: Acoplamento sob Condições Bifásicas

A um frasco de fundo redondo foi adicionado aduto PdChídppf)- CH2CI2 (~ 5 mol%) e carbonato de potássio (2 equivalentes) antes que 0 frasco fosse evacuado e preenchido de volta com N2 (3x). À este frasco foi adicionado um reagente borolano 11 (como 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolano-2-il)isoxazol-5-il)metil acetato (tipicamente 1,5-2 equivalentes) dissolvido em dioxano (tipicamente ~0,3-0,5 M), 0 halo-éster 10 apropriado (1 equivalente) e água. A solução foi aquecida em refluxo até a análise de LC-MS indicar o consumo completo do material inicial (geralmente 2-4 h). A reação foi resfriada até temperatura ambiente e diluída com água e EtOAc. As camadas foram separadas e a fase aquosa extraída com EtOAc. As orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura, antes de serem secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi tomado em MeOH (tipicamente —0,3 M) e metóxido de sódio foi adicionado (0,2 equivalentes). A reação foi agitada em temperatura ambiente até que a análise de LC-MS indicasse consumo completo do material de partida. A reação foi diluída com água e EtOAc. As camadas foram separadas e a aquosa ex-traída com EtOAc (3X). As orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (hex/AcOEt) para gerar o álcool (tipicamente 4080% de rendimento).

Protocolo Geral para Produzir Intermediário 13. a. Oxidação

A um frasco de fundo redondo carregado com CH2CI2 anidro (ti-picamente de 0,2 M em substrato) foi adicionado cloreto de oxalil (2 equivalentes) e a solução resfriada até -78°C antes da adição sob gotejamento de DMSO (4 equivalentes; atenção para evolução de gás). A solução foi agitada a -78°C por 15 min antes de adição sob gotejamento do álcool dissolvido em uma quantidade mínima de CH2CI2. Esta solução foi agitada por 15 min a - 78 0 C antes da adição de trietilamina (3-5 equivalentes) e a solução aquecida até temperatura ambiente. A reação foi diluída com água e as camadas separaram. A fase aquosa foi extraída com CH2CI2 e as orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (hex/AcOEt) para gerar o aldeído (tipicamente 60-90% de rendimento). b. Formação de (S)-tert-Butilsulfinilimina (Intermediário 13)

A um frasco de fundo redondo contendo aldeído, (S) -2- metilpropano-2-sulfinamida (1,2 equivalente) e CH2CI2 (tipicamente ~0,2-0,5 M em substrato) foi adicionado tetraetoxititânio (2 equivalentes). A solução foi agitada durante a noite à temperatura ambiente antes da adição de salmoura. Esta mistura foi vigorosamente agitada por 30 min antes de filtrar. A torta do filtro foi lavada com CH2CI2. As camadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída com CH2CI2. As orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (hex/AcOEt) para gerar a sulfinamina (tipicamente 60-90% de rendimento).

Protocolo Geral para Produzir Intermediário 15

.

A uma solução resfriada (-8,5°C) do (S)-tert-butilsulfinilimina (1 equivalente) apropriado em /V-metilpirrolidinona (0,16 M) foi adicionada sob gotejamento uma 0,5 M de solução do reagente 14, por exemplo, cloreto de 2-tert-butóxi-2-oxoetil)zinco(ll) (2 equivalentes) em Et2O durante um período de 10 min. A solução amarela se tornou clara e incolor. A temperatura de reação foi mantida entre -8,5°C a 5°C até que o consumo completo de sulfi- nilimina foi observado por LC-MS e TLC. Apos 4,5 h, NH4CI aquosa saturada e MTBE foram introduzidos. A camada aquosa se tornou espessa e "tipo gel", quando foi adicionado 1 N HCI. A camada aquosa foi extraída com MTBE (2x). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com NaHCO3 saturado, secas em Na2SO4 e concentradas em vácuo. A mistura foi purificada no sistema Biotage (tipicamente, eluição gradiente 17% MTBE: 83% Hexanos para 70% MTBE: Hexanos 30%) para gerar o desejado (S, S)- diastereoisômero (tipicamente com 60% - 69% de rendimento). Separação parcial do diastereoisômeros foi alcançada durante a purificação e sucessivas corridas cromatográficas foram realizadas para maximizar o rendimento de principal diastereoisômero puro. O (S, R)- diastereoisômeros indesejado foi obtido e é tipicamente obtido em 10% de rendimento.

Protocolo Geral para Produzir Intermediário 16

.

A uma solução de aminas A/-terf-butilsulfinil (1 equivalente) em MeOH (~0,16 M) foi adicionada uma solução de 4 M HCI (1,6 equivalente) em 1,4-dioxano. A análise de LC-MS após 15 min indicou consumo completo do material de partida. O solvente foi evaporado e o HCI em excesso foi removido azeotropicamente usando heptano (2x), seguido por THF para gerar o cloreto de amónio quiral apropriado (99% de rendimento) como uma espuma branca que foi usada sem outra purificação.

Protocolo Geral para Produzir Intermediário 17

.

A uma solução resfriada (-20°C) do sal de amónio quiral apropriado (1 equivalente) em THF (0,4 M) foi introduzida uma solução de brometo de isopropilmagnésio 2,9 M (4,22 equivalentes) em 2-metil-tetra-hidrofurano. Após a completa adição da base, a análise de LC-MS indicou consumo completo do sal de amónio. À mistura da reação foi adicionado 1 N HCI e EtOAc. A camada aquosa (o pH ~ 1) foi extraída com EtOAc (3x), lavada com NaHCO3 saturado, seca em Na2SO4 e concentrada para gerar um óleo vermelho. O produto bruto foi purificado em sistema de Biotage (geralmente, eluição gradiente 7% EtOAc: 93% Hexanos para 60% EtOAc: Hexanos 40%) para gerar o lactam apropriado como uma espuma laranja (tipicamente 74% de rendimento).

Protocolo Geral para Produzir Intermediário 18

.

A uma solução de lactam (1 equivalente) em CH2CI2 (tipicamente ~0,1 M em concentração de substrato) à temperatura ambiente, foi adicionado PCI5 (1,6 equivalente). A mistura da reação homogênea foi deixada em agitação por 1,5 h, em cujo ponto a análise de LC-MS indicou 0 consumo completo de SM. A reação foi extinta pela adição de 2 M Na2CO3 e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (3x). Os extratos de orgânicas combinadas foram lavados com água, secos em Na2SO4 e concentrados para gerar um óleo marrom. O cloro-imina bruto foi purificado em sistema de Biotage usando eluição gradiente (geralmente EtOAc 5%: 95% Hexanos para 20% EtOAc : 80% Hexanos) para gerar 0 composto título como uma espuma branca (tipicamente 50-70% de rendimento).

Acoplamentos Cloro-lmina para produzir o intermediário 19

a. Reações de Suzuki em Cloro-lminas (Etapa H). A uma solução de cloro-imina 18 (1 equivalente) em tolueno (~0,2 M em substrato) foi adicionado 0 ácido borônico ou éster borônico desejado (1,2-2 equivalente) e Pd(PPh3)4 (~5 mol%). A reação foi evacuada e purgada com N2 (g) (3x), seguido por adição de solução aquosa de Na2CO3 (2 equivalente). A mistura de reação heterogênea foi aquecida a 82°C por 0,5 - 1 h. Após consumo completo de cloro-imina como detectado por LC-MS ou TLC, a mistura de reação foi resfriada até temperatura ambiente. A camada orgânica foi removida e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (3x), os extratos orgânicos combinados foram lavados com água, salmoura, e concentrados em vácuo. O produto de acoplamento bruto foi purificado em sistema Biotage.

b. Reações de Stille em Cloro-lminas (Etapa I).

A uma solução de cloro-imina 18 (1 equivalente) em tolueno (~0,1 M em substrato) foi adicionado tributil arila estanano desejado (1,7-2 equivalente) e Pd(PPh3)4 (~5 mol%). A reação foi evacuada e purgada com N2 (g) (3x) e aquecida até 82°C por 40h. Após resfriamento até temperatura ambiente, a camada orgânica foi removida e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (3x), os extratos orgânicos combinados foram lavados com água, salmoura, e concentrados em vácuo. O produto de acoplamento bruto foi purificado em sistema Biotage.

c. Reações de Negishi em Cloro-lminas (Etapa J).

A uma solução de cloro-imina 18 (1 equivalente) em tolueno (—0,1 M em substrato) foi adicionado o reagente dialquil zinco desejado (1,5 equivalente) e aduto PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (~5 mol%). A reação foi evacuada e purgada com N2 (g) (3x) e aquecida até 50°C por 1h. Após resfriamento até temperatura ambiente, a camada orgânica foi removida e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (3x), os extratos orgânicos combinados foram lavados com água, salmoura, e concentrados em vácuo. O produto de acoplamento bruto foi purificado em sistema Biotage.

d. Adições nucleofílicas em Cloro-lminas (Etapa K).

Cloro-imina (1 equivalente) foi dissolvida em amina pura em um frasco de micro-ondas e aquecido por 300 W micro-ondas a 160°C por 2 h. Excesso de amina foi evaporado em pressão reduzida e a mistura bruta purificada em um sistema Biotage.

Procedimento geral para produção de um composto de fórmula I (Etapa L)

A uma solução de éster imino tert-butil 19 (1 equivalente) em CHCI3 (tipicamente 0,5 - 0,1 M em substrato) foi adicionado TFA (40 - 60 equivalente). A mistura de reação foi aquecida a 36°C até análise LC-MS indicar consumo completo de éster e formação de ácido desejado. A mistura de reação amarela é resfriada até temperatura ambiente, concentrados em vácuo, e excesso de TFA é azeotropicamente removido usando tolueno (2x), seguido por CHCh (2x). O ácido carboxílico bruto é seco e usado sem outra purificação.

A uma solução resfriada (0°C) de ácido carboxílico bruto (1 equi-valente) em DMF (tipicamente 0,5 - 0,1 M em concentração de substrato) foi sequencialmente adicionado com base (10 equivalente), amina desejada 20 (8 equivalente), e reagente de acoplamento (tipicamente HATU ou COMU, 1,5 equivalente). Após adição completa de reagentes a mistura de reação foi aquecida até temperatura ambiente e deixada agitar até consumo completo de ácido carboxílico foi detectado por LC-MS. A mistura de reação foi diluída com EtOAc e água. A camada orgânica foi removida e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (3x), os extratos orgânicos combinados foram lavados com água, salmoura, e concentrados em vácuo. O produto de acoplamento bruto foi purificado em sistema Biotage.

2-((6S)-4-benzil-2,3,9-trímetil-6H-isoxazolo[5,4-c]tieno[2,3-e]azepin-6- il)acetamida (Composto 127).

Composto 127 foi ainda sintetizado de acordo com o Esquema 1, acima, usando brometo de benzilzinco(ll) em uma reação de Negishi (E- tapa J) para converter a cloroimina 18 ao intermediário benzilimina correspondente e então ao produto título usando Etapa L.

Os compostos na Tabela 5 foram preparados usando 0 protocolo geral descrito acima. Tabela 5

Todos os compostos foram preparados usando procedimentos gerais A-G, e as duas etapas finais foram como indicado na tabela. Cada versão de procedimento geral A poderia ser usado.

EXEMPLO 15. Síntese de Compostos de fórmula III, em que Rc é 4 Clorofenila, R2 é Hidrogênio e R3 é OH ou N(R’)(R”).

Certos compostos de fórmula III podem ser sintetizados de acordo com 0 Esquema 2, abaixo. Esquema 2:

Exemplos específicos de intermediários e compostos feitos e/ou usados nes-te esquema como a seguir. (4-(2-formilfenil)-5-metilisoxazol-3-il)metil acetato

.

A um frasco revedável foi adicionado cloreto de paládio(ll) (4,49 mg, 0,025 mmol), acetato de potássio (1,24 g, 12,7 mmol), e 2-bro- mobenzaldeído (0,59 mL, 5,07 mmol). O frasco foi vedado e evacuado/pre- enchido de volta com N2 (3x) antes da adição de 3-(clorometil)-5-metili- soxazol (1,00 g, 7,60 mmol) como uma solução em DMA (25 mL). O frasco foi então aquecido até 130°C durante a noite. A reação foi resfriada até tem-peratura ambiente e diluída com água. A solução foi extraída com éter e as orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2SO4, fil-tradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado via Biotage (EtOAc/hex) para gerar (4-(2-formilfenil)-5-metilisoxazol-3-il)metil acetato (1,01 g, 3,90 mmol). LC/MS m/z 260 [M + H]+. (4-clorofenil)(2-(3-(hidroximetil)-5-metilisoxazol-4- il)fenil)metanol

.

A um frasco de fundo redondo foi adicionado (4-(2-formilfenil)-5- metilisoxazol-3-il)metil acetato (1,01 g, 3,90 mmol) e THF (20 mL) antes de a reação ser resfriada a -78°C. A esta solução foi adicionado 1,0 M brometo de (4-clorofenil)magnésio (4,68 mL, 4,68 mmol) e a reação agitada a -78°C por 30 min antes da adição de solução de cloreto de amónio. A reação foi aque cida até temperatura ambiente e diluída com EtOAc. As camadas foram se-paradas e a aquosa foi extraída com EtOAc. As orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi tomado em THF:MeOH:Água (2:2:1,20 mL) antes da adição de hidróxido de lítio hidratado (0,491 g, 11,70 mmol). A reação foi agitada em temperatura ambiente por 1 h antes de diluir com água e EtOAc. As camadas foram separadas e a aquosa foi extraída com EtOAc. As orgânicas com-binadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2$O4, filtradas e concen-tradas. O diol bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar (4-clorofenil)(2-(3-(hidroximetil)-5-metilisoxazol-4-il)fenil)metanol (1,14 g, 3,44 mmol). LC/MS m/z 330 [M + H]+. 4-(2-(4-clorobenzoyl)fenil)-5-metilisoxazol-3-carbaldei- do

.

A um frasco de fundo redondo foi adicionado CH2CI2 e cloreto de oxalil (1,21 mL, 13,8 mmol) antes de a solução ser resfriada até -78°C. A esta solução foi adicionado DMSO (1,47 mL, 20,65 mmol) e a solução agitada por 15 min antes da adição de (4-clorofenil)(2-(3-(hidroximetil)-5-metiliso- xazol-4-il)fenil)metanol (1,14 g, 3,44 mmol) dissolvido em CH2CI2. A reação foi agitada por 15 min a -78°C antes da adição de Et3N (3,84 mL, 27,5 mmol) e aquecer a reação até temperatura ambiente durante a noite. Esta reação foi diluída com água e as camadas separadas. A aquosa foi extraída com CH2CI2 e as orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e con-centradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar 4-(2-(4-clorobenzoil)fenil)-5-metilisoxazol-3-carbaldeído (1,10 g, 3,38 mmol). LC/MS m/z 326 [M + H]+. 6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,3-e]azepin-4- ol

(Composto 153) e 6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]iso- xazolo[4,3-e]azepin-4-amina

(Composto 154).

A um frasco revedável foi adicionado 4-(2-(4-clorobenzoil)fenil)- 5-metilisoxazol-3-carbaldeído (0,052 g, 0,160 mmol) e amónia (1,85 mL, 12,93 mmol, 7M em MeOH). O frasco foi vedado e a reação agitada em temperatura ambiente por dois dias. A solução foi concentrada e o resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar dois produtos. Secundário: 6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,3-e]azepin-4-ami- na (0,0026 g, 0,008 mmol). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,75 - 7,64 (m, 2H), 7,49 - 7,43 (m, 3H), 7,42 - 7,37 (m, 2H), 7,31 (d, J = 7,32 Hz, 1H), 4,88 (s, 1H), 2,86 - 2,71 (m, 2H), 2,65 (s, 3H). LC/MS m/z 324 [M + H]+. Principal: 6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,3-e]azepin-4-ol (27 mg, 0,083 mmol). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,75 - 7,64 (m, 2H), 7,51 - 7,38 (m, 6H), 7,32 (d, J = 7,78 Hz, 1H), 6,84 (br. s, 1H), 5,51 (s, 1H), 2,65 (s, 3H); LC/MS m/z 325 [M + H]+.

Etil (6-(4-clorofenil)-1 -metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,3-e]aze- pin-4-il)carbamate

(Composto 155).

A um frasco de micro-ondas foi adicionado 4-(2-(4-cloroben- zoil)fenil)-5-metilisoxazol-3-carbaldeído (0,055 g, 0,169 mmol) e amónia (1,95 mL, 7M em MeOH, 13,7 mmol). O frasco foi vedado e a reação aquecida até 120°C por 20 min. A solução foi resfriada até temperatura ambiente e concentrada. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage para gerar 6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,3-e]azepin-4-amina que foi tomado em CH2CI2 antes da adição de piridina (0,013 mL, 0,169 mmol) e cloroformato de etila (0,016 mL, 0,169 mmol). A reação foi agitada em temperatura ambiente por 1h antes da adição de NaHCO3 aquoso saturado. As camadas foram separadas e aquosa extraída com CH2CI2. As orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar etil 6-(4- clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,3-e]azepin-4-ilcarbamato (0,0057 g, 0,014 mmol). 1H RMN (500 MHz, Acetone-d6) δ 7,81 - 7,76 (m, 1H), 7,75 - 7,70 (m, 1H), 7,53 - 7,46 (m, 3H), 7,45 - 7,40 (m, 3H), 7,38 (d, J = 9,27 Hz, 1H), 5,85 (d, J= 8,79 Hz, 1H), 4,13 (q, J= 7,32 Hz, 2H), 2,70 (s, 3H), 1,25 (t, J = 7,08 Hz, 3H); LC/MS m/z 396 [M + H]+.

EXEMPLO 16. Síntese de Compostos de fórmula I, em que R3 é Metila.

Certos compostos de fórmula II ou III podem ser sintetizados de acordo com o Esquema 3, abaixo. Esquema 3.

Exemplos específicos de intermediários e compostos feitos e/ou usados neste esquema como a seguir. (2-(3-(1-azidoetíl)-5-metilisoxazol-4-il)fenil)(4-clorofenil)me- tanona

.

A um frasco revedável foi adicionado 4-(2-(4-clorobenzoil)fenil)- 5-metilisoxazol-3-carbaldeído Exemplo 15 (0,100 g, 0,307 mmol) e THF (2,0 mL). O frasco foi vedado e resfriado até -78°C antes da adição de cloreto de metilmagnésio (0,107 mL, 0,322 mmol). A reação foi agitada a -78°C por 30 min antes da adição de solução de cloreto de amónio e água. A aquosa foi extraída com EtOAc e as camadas combinadas lavadas com salmoura, secas em Na2SO4, filtradas, e concentradas para gerar (4-clorofenil)(2-(3-(1- hidroxietil)-5-metilisoxazol-4-il)fenil)metanona bruto (0,092 g, 0,269 mmol).

A um frasco de fundo redondo foi adicionado (4-clorofenil)(2-(3- (1-hidroxietil)-5-metilisoxazol-4-il)fenil)metanona (0,092 g, 0,269 mmol), CH2CI2 (3,0 mL), e Et3N (0,075 mL, 0,538 mmol). O frasco foi resfriado a 0°C antes da adição de cloreto de metanossulfonil (0,025 mL, 0,323 mmol) e a reação agitada por 45 min a 0°C antes de extinguir com água. As camadas foram separadas e a aquosa extraída com CH2CI2. As orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi tomado em DMF (2 mL) e azida de sódio (0,053 g, 0,808 mmol) foi adicionado. A reação foi agitada em temperatura ambiente durante a noite antes de ser diluída com água e EtOAc. As camadas foram separadas e a aquosa foi ex-traída com EtOAc. As orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar (2-(3-(1-azidoetil)-5-metilisoxazol- 4-il)fenil)(4-clorofenil)metanona (0,073 g, 0,199 mmol). LC/MS m/z 389 [M + Na]+. 6-(4-clorofenil)-1,4-dimetil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,3-e]azepi-na

(Composto 156).

A um frasco de fundo redondo foi adicionado (2-(3-(1-azidoetil)- 5-metilisoxazol-4-il)fenil)(4-clorofenil)metanona (0,073 g, 0,199 mmol), tolue- no, e trimetilfosfino (0,239 mL, 1M em tolueno, 0,239 mmol). A reação foi agitada em temperatura ambiente durante a noite antes de concentrar. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar 6-(4- clorofenil)-1,4-dimetil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,3-e]azepina impuro. Este mate-rial foi purificado por HPLC preparatório e as frações neutralizadas antes de ser extraída com EtOAc. As orgânicas foram lavadas com salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar 6-(4-clorofenil)-1,4-dimetil-4H- benzo[c]isoxazolo[4,3-e]azepina (0,0011 g, 0,003 mmol). 1H RMN (400 MHz, Acetone-dθ) δ 7,74 - 7,70 (m, 1H), 7,69 - 7,63 (m, 1H), 7,49 - 7,41 (m, 3H), 7,41 - 7,33 (m, 3H), 4,24 - 4,16 (m, 1H), 2,66 (s, 3H), 1,86 (d, J = 6,35 Hz, 3H); LC/MS m/z 323 [M + H]+.

EXEMPLO 17. Síntese de Compostos de fórmula I, em que R2 é Hidro-gênio e R3 é (S)-CH2-C(O)-N(R’)(R”).

Certos compostos de fórmula II ou III podem ser sintetizados de acordo com o Esquema 4, abaixo. Esquema 4:

Exemplos específicos de intermediários e compostos feitos e/ou usados neste esquema como a seguir. (4-clorofenil)(2-(5-(hidroximetil)-3-metilisoxazol-4-il)fenil)me- tanona

.

A um frasco de fundo redondo foi adicionado (4-(2-(4-cloroben- zoil)fenil)-3-metilisoxazol-5-il)metil benzoato do Exemplo 12 (0,780 g, 1,806 mmol), THF (4 mL), MeOH (4 mL), e água (2 mL). A solução foi resfriada a 0°C antes da adição de hidróxido de lítio mono-hidratado (0,227 g, 5,42 mmol). A reação foi agitada a 0°C por 45 min antes de diluir com água e extrair com EtOAc. As orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na∑SO^ filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar (4-clorofenil)(2-(5-(hidroximetil)-3- metilisoxazol-4-il)fenil)metanona (0,451 g, 1,376 mmol). LC/MS m/z 328 [M + H]+. 4-(2-(4-clorobenzoil)fenil)-3-metilisoxazol-5-carbaldei- do

A um frasco de fundo redondo foi adicionado CH2CI2 (15 mL) e cloreto de oxalil (0,24 mL, 2,75 mmol). A solução foi resfriada a -78°C antes da adição de DMSO (0,29 mL, 4,13 mmol) e a reação agitada a -78°C por 15 minutes antes da adição de (4-clorofenil)(2-(5-(hidroximetil)-3-metilisoxazol- 4-il)fenil)metanona (0,451 mg, 1,38 mmol) dissolvido em CH2CI2 (5 mL). A reação foi agitada por mais 15 min a -78°C antes da adição de Et3N (0,959 mL, 6,88 mmol) e removida do banho frio. Após aquecer até temperatura ambiente água foi adicionada e as camadas separadas. A aquosa foi extraída com CH2CI2 e as orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtO- Ac/hex) para gerar 4-(2-(4-clorobenzoil)fenil)-3-metilisoxazol-5-carbaldeído (0,448 g, 1,38 mmol). LC/MS m/z 326 [M + H]+. (R,E)-N-((4-(2-(4-clorobenzoíl)feníí)-3-metílisoxazol-5-il)meti- leno)-2-metilpropano-2-sulfínamida

A um frasco de fundo redondo foi adicionado 4-(2-(4-cloroben- zoil)fenil)-3-metilisoxazol-5-carbaldeído (0,224 g, 0,688 mmol) e THF (3 mL). A esta solução foram adicionados tetraetoxititânio (0,29 mL, 1,38 mmol) e (R)-2-metilpropano-2-sulfinamida (0,092 g, 0,756 mmol) e a reação agitada em temperatura ambiente durante a noite. A reação foi diluída com salmoura (3 mL) e EtOAc e esta mistura foi agitada vigorosamente por 1,5 h. Esta solução foi filtrada por Celite e as camadas separadas. A aquosa foi extraída com EtOAc e as orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar (R,E)-N-((4-(2-(4-clorobenzoil)fenil)-3-metilisoxazol-5-il)metileno)- 2-metilpropano-2-sulfinamida (0,233 g, 0,543 mmol). LC/MS m/z 429 [M + H]+. (3S)-tert-butil 3-(4-(2-(4-clorobenzoil)fenil)-3-metilisoxazol-5-il)-3-((R)- 1,1-dimetiletilsulfinamido)propanoato

e (3R)-tert-butil 3-(4-(2-(4-clorobenzoil)fenil)-3-metilisoxazol-5-il)-3-((R)- 1,1-dimetiletilsulfinamido)propanoato

.

A um frasco de fundo redondo foi adicionado (R,E)-N-((4-(2-(4- clorobenzoil)fenil)-3-metilisoxazol-5-il)metileno)-2-metilpropano-2-sulfinamida (0,083 g, 0,194 mmol) em THF (0,5 mL). Esta solução foi resfriada a 0°C antes da adição de cloreto (2-tert-butoxi-2-oxoetil)zinco(ll) (0,464 mL, 0,232 mmol) e agitada a 0°C por 1 h antes da adição de mais reagente de zinco (0,388 mL, 0,194 mmol). Após agitação por 3 h a 0°C a solução foi extinta com solução aquosa de cloreto de amónio e EtOAc adicionado. As camadas foram separadas e a aquosa extraída com EtOAc. As orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar (3S)- tert-buti I 3-(4-(2-(4-clorobenzoil)fenil)-3-metilisoxazol-5-il)-3-((R)-1,1 -dime- tiletilsulfinamido)propanoato (Rf (1:1 EtOAc.hex) = ~0,3, Massa: 0,043 g, LC/MS m/z 545 [M + Hf) e (3R)-tert-butil 3-(4-(2-(4-clorobenzoil)fenil)-3- metilisoxazol-5-il)-3-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propanoato (Rf (1:1 EtO- Ac:hex) = -0,15, Massa: 0,045 g, LC/MS m/z 545 [M + Hf). 2-((4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4- il)acetato

(Composto 157).

A um frasco revedável foi adicionado (3S)-tert-butil 3-(4-(2-(4- clorobenzoil)fenil)-3-metilisoxazol-5-il)-3-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propa- noato (0,043 g, 0,079 mmol), EtOH (3 mL), e cloreto de acetila (0,017 mL, 0,237 mmol). O frasco foi vedado e aquecido até 60°C por 1,75 h antes de ser resfriado até temperatura ambiente e diluída com NaHCOs saturado e EtOAc. As camadas foram separadas e a aquosa foi extraída com EtOAc. As orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (E- tOAc/hex) para gerar tert-butil 2-((4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]iso- xazolo[4,5-e]azepin-4-il)acetato (0,026 g, 0,061 mmol). 1H RMN (400 MHz, Acetone-d6) δ 7,87 - 7,83 (m, 1H), 7,76 - 7,70 (m, 1H), 7,51 - 7,41 (m, 2H), 7,40 (s, 4H), 4,40 (br. s, 1H), 3,32 (d, J = 7,19 Hz, 2H), 2,54 (s, 3H), 1,48 (s, 9H); LC/MS m/z 423 [M + H]+.

Tert-butil 2-((4R)-6-(4-clorofenil)- 1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]aze- pin-4-il)acetato

(Composto 158).

O composto título foi preparado de modo similar como acima começando de (3R)-tert-butil 3-(4-(2-(4-clorobenzoil)fenil)-3-metilisoxazol-5- il)-3-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propanoato. 1H RMN (400 MHz, Acetone- d6) δ 7,85 (dd, J = 0,83, 7,66 Hz, 1H), 7,76 - 7,70 (m, 1H), 7,50 - 7,41 (m, 2H), 7,40 (s, 4H), 4,40 (br. s, 1H), 3,32 (d, J= 7,4 Hz, 2H), 2,54 (s, 3H), 1,48 (s, 9H); LC/MS m/z 423 [M + H]+. 2-((4S)-6-(4-clorofenil)- 1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4-il)-N- etilacetamida

(Composto 159).

A um frasco de fundo redondo foi adicionado tert-butil 2-((4S)-6- (4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4-il)acetato (0,019 g, 0,046 mmol), CH2CI2 (2 mL), e TFA (0,400 mL, 5,19 mmol). A reação foi agitada por 1 h antes de ser concentrada. O resíduo bruto foi dissolvido em DMF (1 mL) e etilamina (0,032 mL, 0,064 mmol), HATU (0,026 g, 0,068 mmol), e base de Hunig (0,024 mL, 0,137 mmol) foram adicionados. A reação foi agitada em temperatura ambiente por 1h antes de diluir com água e metanol e purificação por HPLC preparatório. As frações foram neutralizadas e a aquosa extraída com CH2CI2. As orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar 2-((4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-ben- zo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4-il)-N-etilacetamida (0,0068 g, 0,017 mmol). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,27 - 8,13 (m, 1H), 7,83 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,72 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,49 - 7,36 (m, 4H), 7,34 - 7,25 (m, 2H), 4,42 - 4. 23 (m, 1H), 3,14 (dd, J = 6,98, 12,7 Hz, 4H), 2,51 (s, 3H), 1,07 (t, J = 7,2 Hz, 3H); LC/MS m/z 394 [M + Hf. 2-bromo-N,5-dimetoxi-N-metilbenzamida

foi preparado de acordo com o procedimento descrito em Tetrahedron, 2001, 57, 77657770. (2-bromo-5-metoxifenil)(4-clorofenil)metanona

e (4-clorofe- nil)(3-metoxifenil)metanona

.

A um frasco de fundo redondo foi adicionado 2-bromo-N,5- dimetoxi-N-metilbenzamida (6,23 g, 22,73 mmol) e THF (75 mL). A esta solução foi adicionado brometo de (4-clorofenil)magnésio (42 mL, 42,0 mmol) e a reação agitada em temperatura ambiente durante a noite. A solução foi diluída com água e EtOAc. As camadas foram separadas e a aquosa foi extraída com EtOAc. As orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar uma mistura de (2-bromo-5- metoxifenil)(4-clorofenil)metanona e (4-clorofenil)(3-metoxifenil)metanona. LC/MS m/z 325 [M+H]+. 2-((4S)-6-(4-clorofenil)-8-metoxi-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5- e]azepin-4-il)-N-etilacetamida

(Composto 160).

O composto título foi preparado de modo similar a 2-((4S)-6-(4- clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4-il)-N-etilacetamida, partindo de (4-(2-(4-clorobenzoil)-4-metilfenil)-3-metilisoxazol-5-il)metil benzoato, que é sintetizado de acordo com o Exemplo 5. 1H RMN (400 MHz, Acetone-ds) δ 7,76 (d, J = 8,78 Hz, 1H), 7,46 - 7,41 (m, 2H), 7,41 - 7. 36 (m, 2H), 7,31 (dd, J = 2,6, 8,8 Hz, 1H), 6,96 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 4,53 - 4,43 (m, 1H), 3,82 - 3,76 (m, 3H), 3,36 - 3,13 (m, 4H), 2,50 (s, 3H), 1,14 (t, J = 7,31 Hz, 3H); LC/MS m/z 424 [M + H]+. (R,E)-N-((4-(2-(4-clorobenzoil)fenil)-5-metilisoxazol-3-il)metileno)-2- metilpropano-2-suífinamida.

.

Este material pode ser preparado de modo similar a (R,E)-N-((4- (2-(4-clorobenzoil)fenil)-3-metilisoxazol-5-il)metileno)-2-metilpropano-2-sulfi- namida partindo de 4-(2-(4-clorobenzoil)fenil)-5-metilisoxazol-3-carbaldeido (1,10 g, 3,38 mmol). LC/MS m/z 429 [M + H]+. (3S)-tert-butil 3-(4-(2-(4-clorobenzoil)fenil)-5-metilisoxazol-3-il)-3-((R)-1,1 dimetiletilsulfinamido)propanoato

.

A um frasco de fundo redondo foi adicionado (R,E)-N-((4-(2-(4- clorobenzoil)fenil)-5-metilisoxazol-3-il)metileno)-2-metilpropano-2-sulfinamida (0,480 g, 1,12 mmol) e THF (6 mL). Esta solução foi resfriada a 0°C antes da adição de cloreto de (2-tert-butoxi-2-oxoetil)zinco(ll) (4,48 mL, 2,24 mmol). A solução foi agitada a 0°C antes por 3,5 h antes da adição de mais de cloreto de (2-tert-butoxi-2-oxoetil)zinco(ll) (1,12 mL, 0,560 mmol). A reação foi agitada por mais 2,5 h antes de ser diluída com NH4CI aquoso e EtOAc. As camadas foram separadas e a aquosa foi extraída com EtOAc. As orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar (3S)-tert-butil 3-(4-(2-(4-clorobenzoil)fenil)-5-metilisoxazol-3-il)-3- ((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propanoato (0,118 g, 0,216 mmol) e (3R)-tert- butil 3-(4-(2-(4-clorobenzoil)fenil)-5-metilisoxazol-3-il)-3-((R)-1,1 -dimetiletilsuI- finamido)propanoato (0,094 g, 0,172 mmol). LC/MS m/z 545 [M + H]+.

Tert-butil 2-((4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,3-e]aze- pin-4-il)acetato

(Composto 161) e Etil 2-((4S)-6-(4-clorofe- nil)-1’metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,3-e]azepin-4-il)aceta- to

(Composto 162).

A um frasco revedável foi adicionado (3S)-tert-butil 3-(4-(2-(4- clorobenzoil)fenil)-5-metilisoxazol-3-il)-3-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propa- noato (0,118 g, 0,216 mmol), EtOH, e cloreto de acetila (0,046 mL, 0,647 mmol). O frasco foi vedado e aquecida até 60°C por 2 h. A reação foi resfriada até temperatura ambiente e diluída com uma solução de NaHCOs e EtOAc. As camadas foram separadas e a aquosa foi extraída com EtOAc (3x). As orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar dois produtos. Principal: tert-butil 2-((4S)-6-(4- clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,3-e]azepin-4-il)acetato (0,062 g, 0,147 mmol), 423 [M + H]+. Secundário: etil 2-((4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil- 4H-benzo[c]isoxazolo[4,3-e]azepin-4-il)acetato (0,0036 g, 0,0091 mmol). 1H RMN (500 MHz, acetona-d6) δ 7,78 - 7,74 (m, 1H), 7,70 (dt, J = 1,5, 7,6 Hz, 1H), 7,50 - 7,46 (m, 1H), 7,45 - 7,42 (m, 2H), 7,41 - 7. 36 (m, 3H), 4,57 (t, J = 7,08 Hz, 1H), 4,20 - 4,14 (m, 2H), 3,36 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 2,68 (s, 3H), 1,26 (t, J = 7,1 Hz, 3H); LC/MS m/z 395 [M + H]+. 2-((4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,3-e]azepin-4-il)-N- etilacetamida

(Composto 163).

A um frasco de fundo redondo foi adicionado tert-butil 2-((4S)-6- (4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,3-e]azepin-4-il)acetato (0,059 g, 0,140 mmol), CH2CI2 (2 mL), e TFA (0,400 mL, 5,19 mmol). A reação foi agitada em temperatura ambiente por 2 h antes de concentrar. O resíduo bruto foi seco por 30 min antes da adição de DMF (2 mL), etilamina (0,098 mL, 0,195 mmol, 2M in THF), HATU (0,080 g, 0,209 mmol), e Base de Hunig (0,073 mL, 0,419 mmol). A reação foi agitada em temperatura ambiente por 1 h antes de diluir com água e extrair com EtOAc. As orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar 2- ((4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,3-e]azepin-4-il)-N-etila- cetamida (0,022 g, 0,056 mmol). 1H RMN (500 MHz, Acetona-dβ) δ 7,76 - 7,72 (m, 1H), 7,71 - 7,66 (m, 1H), 7,49 - 7,42 (m, 3H), 7,41 - 7,36 (m, 3H), 7,32 (br. s, 1H), 4,62 (dd, J = 5,4, 8,3 Hz, 1H), 3,35 - 3,21 (m, 2H), 3,20 - 3,09 (m, 2H), 2,67 (s, 3H), 1,14 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LC/MS m/z 394. 2-((4R)-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,3-e]azepin-4-il)-N- etilacetamida

(Composto 189).

Este material foi preparado de modo similar a 2-((4S)-6-(4- clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,3-e]azepin-4-il)-N-etilacetamida, partindo de (3R)-tert-butil 3-(4-(2-(4-clorobenzoil)fenil)-5-metilisoxazol-3-il)-3- ((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propanoato. 1H RMN (500 MHz, Acetona-de) δ 7,76 - 7,72 (m, 1H), 7,71 - 7,66 (m, 1H), 7,49 - 7,42 (m, 3H), 7,41 - 7,36 (m, 3H), 7,32 (br. s, 1H), 4,62 (dd, J = 5,4, 8,3 Hz, 1H), 3,35 - 3,21 (m, 2H), 3,20 -3,09 (m, 2H), 2,67 (s, 3H), 1,14 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LC/MS m/z 394.

EXEMPLO 18: Síntese de Compostos de fórmula I em que Ar é Tiofeno.

Os compostos deste exemplo foram preparados do modo esta-belecido no Esquema 4, acima. Síntese de compostos exemplares de fórmula I em que Ar é tiofeno, e intermediários úteis em dito Composto são estabelecidos abaixo.

Metil 4,5-dimetiltiofeno-3-carboxilato

.

Este intermediário foi preparado de acordo com o procedimento descrito em Organic Process Research & Development, 2002, 6, 357-366.

N N-Metóxi-N,4,5-trimetiltiofeno-3-carboxamida

.

A uma mistura resfriada (-30°C a -20°C) de metil 4,5-dimetiltiofe- no-3-carboxilato (5,44 g, 32,0 mmol) e N,O-dimetilhidroxilamina cloridrato (4,80 g, 49,2 mmol) em THF (45 mL) foi adicionado lentamente (por 15 min) uma solução de brometo isopropilmagnésio (3,85 mL, 11,16 mmol, 2,9 M) em 2-metil-tetra-hidrofurano. Após adição completa da base, a mistura de reação foi aquecida a 0°C e particionado entre 1 N HCI (55 mL) e MTBE (50 mL). Uma fase aquosa foi extraída com MTBE (2x) e a camada orgânica combinada foi lavada com água (até o pH da aquosa ser ~5). A camada orgânica foi seca em Na2SO4 e concentrada para gerar um óleo amarelo claro. O produto bruto foi purificado em sistema Biotage (gradiente de eluição 7% EtOAc: 93% Hexanos a 60% EtOAc: 40% Hexanos) para gerar o composto título como um óleo amarelo (5,17 g, 25,9 mmol, 81% de rendimento). LC/MS m/z 200 [M+H]+. (4-Clorofeníl)(4,5-dimetiltiophen-3-il)metanona

.

A uma solução resfriada (-40°C) de N-metoxi-N,4,5-trimetiltiofe- no-3-carboxamida (1,77 g, 8,88 mmol) em THF (10 mL) foi lentamente adicionada (por 10 min) uma solução de brometo 4-clorofenilmagnésio (17 mL, 17,00 mmol, 1 M) em éter dietílico. A mistura de reação foi deixada para gradualmente aquecer até temperatura ambiente e envelhecer por algumas horas. À mistura foi adicionado 1 N HCI e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (2x). A camada orgânica combinada foi lavada com NaHCOs saturado, água, seca em Na2SO4, e concentrada para gerar um óleo. O óleo resultante foi purificado em sistema Biotage (gradiente de eluição 1% EtOAc: 99% Hexanos a 4% EtOAc: 96% Hexanos) para gerar o composto título co- mo sólidos brancos (2,00 g, 7,96 mmol, 90% de rendimento). LC/MS m/z 251 [M+H]+. (2-Bromo-4,5-dimetiltiophen-3-il)(4-clorofenil)metanona

.

A uma solução de (4-clorofenil)(4,5-dimetiltiofen-3-il)metanona (1,99 g, 7,94 mmol) em DMF (15 mL) foi adicionado N-bromosuccinimida (1,55 g, 8,71 mmol) em uma porção. Após 2 h, a mistura de reação foi particionado entre água e MTBE. A camada aquosa foi extraída com MTBE e a camada orgânica combinada foi lavada com 1% tiosulfato de sódio, água, seca em Na2SO4 e concentrada para gerar sólidos amarelos claros. Os sólidos resultantes foram purificados em sistema Biotage (gradiente de eluição 1% EtOAc: 99% Hexanos a 4% EtOAc: 96% Hexanos) para gerar o composto título como sólidos amarelos (2,40 g, 7,28 mmol, 92% de rendimento). LC/MS m/z 329 [(M (35CI, 79Br) + H]+ e m/z 331 [M+H]+. (4-Clorofenn)(2-(5-(hidroximetil)-3-metilisoxazol-4-il)-4,5-dimetiltiofen-3-il)metanona

A uma solução de (3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaboro- lan-2-il)isoxazol-5-il)metil acetato (0,865 g, 3,08 mmol) e (2-bromo-4,5-dime- tiltiofen-3-il)(4-clorofenil)metanona (0,534 g, 1,619 mmol) em 1,4-dioxano (7 mL) e água (2 mL) foi adicionado aduto PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (0,090 g, 0,110 mmol) e K2CC>3 (0,560 g, 4,05 mmol). A mistura bifásica foi aquecida a 95°C sob uma corrente constante de N2 (g). Após 5 h, a mistura foi resfriada a 45°C e 1 N NaOH aquoso (4,0 mL, 4,00 mmol) foi introduzido. Após mais 1 h, análise LC-MS mostra conversão completa de acetato a álcool. A mistura foi resfriada até temperatura ambiente, 1 N HCI foi adicionado para acidificar a camada aquosa (pH ~1) e a camada aquosa extraída MTBE (2x). A camada orgânica combinada foi lavada com NaHCOs saturado, salmoura, seca em Na2SO4, e concentrada para gerar um óleo marrom escuro. O óleo foi diluído com MTBE e agitado em carvão ativado por 15 min, então filtrado por um tampão de sílica e Celite. A torta do filtro foi lavada com MTBE (2x) e subsequentemente a concentração gerou um óleo marrom. O óleo resultante foi purificado em sistema Biotage (gradiente de eluição 5% EtOAc: 95% Hexanos a 40% EtOAc: 60% Hexanos) para gerar o composto título como um óleo amarelo (0,463 g, 1,28 mmol, 79% de rendimento). LC/MS m/z 362 [M+H]+. (R,E)-N-((4-(3-(4-clorobenzoil)-4,5-dimetiltiofen-2-il)-3-metilisoxazol-5- il)metileno)-2-metilpropano-2-sulfinamida

.

A uma solução resfriada (-78°C) de cloreto de oxalil (0,15 mL, 1,714 mmol) in CH2CI2 (1 mL) foi lentamente adicionada uma solução de DMSO (0,17 mL, 2,396 mmol) em CH2CI2 (0,30 mL). Após 15 min, uma solução de (4-clorofenil)(2-(5-(hidroximetil)-3-metilisoxazol-4-il)-4,5-dimetiltiofen- 3-il)metanona (0,399 g, 1,10 mmol) em CH2CI2 (2 mL) foi lentamente adicionada. Após 30 min, Et3N (0,40 mL, 2,87 mmol) foi adicionado e a mistura foi aquecida até temperatura ambiente. Após agitada por mais 15 min, a mistura de reação foi diluída com 1 N HCI e a camada aquosa foi extraída com CH2CI2 (2x). A camada orgânica combinada foi lavada com NaHCOs saturado, água, seca em Na2SO4, e concentrada para gerar 0 aldeído como um óleo marrom claro, que foi usado diretamente sem outra purificação.

A uma solução de aldeído não purificado em CH2CI2 (22 mL) foi sequencialmente adicionado (R)-2-metilpropano-2-sulfinamida (0,150 g, 1,24 mmol) e etóxido de titânio(IV) (0,46 mL, 2,19 mmol). Após 24 h, água (15 mL) foi lentamente introduzido à reação vigorosamente agitada. A mistura heterogênea foi filtrada por Celite, a torta de filtro foi lavada com CH2CI2. A camada orgânica foi lavada com água, seca em Na2SC>4, e concentrada para gerar um óleo laranja. O óleo resultante foi purificado em sistema Biotage (eluição gradiente, 5% EtOAc: 95% Hexanos a 40% EtOAc: 60% Hexanos) para liberar o produto título (0,450 g, 0,972 mmol, 88% de rendimento em 2 etapas) como um óleo amarelo claro. LC/MS m/z 463 [M+Hf. (3R)-tert-butil 3-(4-(3-(4-clorobenzoil)-4,5-dimetiltiofen-2-il)-3-metilisoxa- zol-5-il)-3-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propanoato

e (3S)-tert-butil 3-(4-(3-(4-clorobenzoil)-4,5-dimetiltiofen-2-il)-3-metilisoxa- zol-5-il)-3-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propanoato

.

A uma solução resfriada (0°C) de cloreto de (2-tert-butoxi-2- oxoetil)zinco(ll) (0,200 mL, 0,100 mmol) foi adicionado uma solução de (R,E)-N-((4-(3-(4-clorobenzoil)-4,5-dimetiltiofen-2-il)-3-metilisoxazol-5-il)meti- leno)-2-metilpropano-2-sulfinamida (0,039 g, 0,084 mmol) em THF (0,5 mL). Mais THF (2 x 0,5 mL) foi usado para auxiliar em transferência completa de sulfinamida. Após 1,5 h, mais cloreto (2-tert-butoxi-2-oxoetil)zinco(ll) (1,00 mL, 0,500 mmol) foi adicionado e a temperatura da reação foi deixada atingir temperaturas ambientes. Após várias horas, a mistura de reação foi diluída NH4CI saturado aquoso e EtOAc. A camada aquosa foi extraída com EtOAc (2x), a fase orgânica combinada foi lavada com água (2x), seca em Na2SO4 e concentrada em vácuo para gerar um óleo espesso. O óleo resultante foi purificado em sistema Biotage (eluição gradiente, 12% MTBE: 95% Hexanos a 100% MTBE) para liberar o (3R)-tert-butil 3-(4-(3-(4-clorobenzoil)-4,5- dimetiltiofen-2-il)-3-metilisoxazol-5-il)-3-((R)-1,1 -dimetiletilsulfinamido)propa- noato (0,016 g, 0,027 mmol, 31% de rendimento) como uma espuma branca clara e (3S)-tert-butil 3-(4-(3-(4-clorobenzoil)-4,5-dimetiltiofen-2-il)-3-metiliso- xazol-5-il)-3-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propanoato (0,021 g, 0,036 mmol, 43% de rendimento) como uma espuma branca clara. (3R)-tert-butil 3-(4-(3- (4-clorobenzoil)-4,5-dimetiltiofen-2-il)-3-metilisoxazol-5-il)-3-((R)-1,1 -dime- tiletilsulfinamido)propanoato: LC/MS m/z 579 [(M (35CI) + H]+ e m/z 581 [(M (37CI) + H]+ e (3S)-tert-butil 3-(4-(3-(4-clorobenzoil)-4,5-dimetiltiofen-2-il)-3- metilisoxazol-5-il)-3-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propanoato: LC/MS m/z 579 [M+H]+.

Ácido 2-((6S)-4-(4-Clorofenil)-2,3,9-trimetil-6H-isoxazolo[5,4-c]tieno[2,3- e]azepin-6-il)acético

(Composto 164).

A uma solução de (3S)-tert-butil 3-(4-(3-(4-clorobenzoil)-4,5- dimetiltiofen-2-il)-3-metilisoxazol-5-il)-3-((R)-1,1 -dimetiletilsulfinamido)propa- , noato (0,310 g, 0,535 mmol) em MeOH (1,5 mL) foi adicionado uma solução de HCI em dioxano (0,25 mL, 1,00 mmol, 4 M). Após 30 min, a mistura foi • 10 concentrada em vácuo e excesso HCI foi azeotropicamente removido usando CH2CI2 (3x) para gerar 0 amino-éster como um óleo.

O amino-éster resultante foi diluído com CHCI3 (3 mL) e TFA (0,20 mL, 2,60 mmol) e a mistura foi aquecida em refluxo. Após 24 h, a solução foi resfriada até temperatura ambiente e concentrada para gerar óleo 15 amarelo-verde. O imino-ácido título (0,344 g) foi obtido como um óleo que foi processado à formação de ligação amida sem outra purificação. LC/MS m/z 401 [M+H]+. 2-((6S)-4-(4-clorofenil)-2,3,9-trimetil-6H-isoxazolo[4,5-e]tieno[3,2-c]aze- pin-6-il)-N-etilacetamida

(Composto 165).

A uma solução resfriada (-10°C) de ácido 2-((6S)-4-(4-Clorofe- nil)-2,3,9-trimetil-6H-isoxazolo[5,4-c]tieno[2,3-e]azepin-6-il)acético não purifi-cado (Composto 164; 0,344 g, 0,858 mmol) em CH2CI2 (2 mL) foi adicionado EtsN (1,5 mL, 10,8 mmol) e 2 M EtNH2 (em THF) (2,60 mL, 5,20 mmol), se-guido por 2-(3H-[ 1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-3-il)-1,1,3,3-tetrametilisourônio hexafluorfosfato(V) (1,00 g, 2,63 mmol). Após adição completa dos reagentes, a mistura de reação foi aquecida até temperaturas ambientes e agitada por 1 h. A mistura foi concentrada e a pasta resultante foi particionada entre MTBE e 1 N HCI. A camada aquosa foi extraída com MTBE (2x) e a camada orgânica combinada foi lavada com NaHCO3 saturado, água (2 x), seca em Na2SC>4, a concentração gerou sólidos amarelos claros. Os sólidos resultantes foram purificados em sistema Biotage (eluição gradiente, 12% EtOAc: 95% Hexanos a 75% EtOAc: 25% Hexanos) para gerar sólidos quase brancos. Os sólidos foram diluídos em CH3CN (2,0 mL) e água (0,50 mL), a solução foi congelada e liofilizada para gerar o composto título como sólidos amorfos quase brancos (0,047 g, 0,110 mmol, 13% de rendimento). 1H RMN (400 MHz, D6-Acetona) δ 7,50 - 7,30 (m, 5H), 4,35 (t, J = 6,8 Hz, 1H), 3,42 - 3,16 (m, 4H), 2,46 (s, 3H), 2,44 (s, 3H), 1,70 (s, 3H), 1,14 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LC/MS m/z 428 [M+H]+.

Ácido 2-((6R)-4-(4-Clorofenil)-2,3,9-trímetil-6H-isoxazolo[5,4-c]tieno[2,3- e]azepin-6-il)acético

(Composto 166).

O composto título foi sintetizado de acordo com o protocolo deli-neado acima para o intermediário ácido 2-((6S)-4-(4-Clorofenil)-2,3,9-trimetil- 6H-isoxazolo[5,4-c]tieno[2,3-e]azepin-6-il)acético partindo de intermediário (3R)-tert-butil 3-(4-(3-(4-clorobenzoil)-4,5-dimetiltiofen-2-il)-3-metilisoxazol-5- il)-3-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)propanoato. LC/MS m/z 401 [M+H]+. 2-((6R)-4-(4-clorofenil)-2,3,9-trimetil-6H-isoxazolo[4,5-e]tieno[3,2-c]aze- pin-6-il)-N-etilacetamida

(Composto 167).

O exemplo título foi sintetizado de acordo com o protocolo deli-neado acima por 2-((6S)-4-(4-clorofenil)-2,3,9-trimetil-6/-/-isoxazolo[4,5-e]tié- no[3,2-c]azepin-6-il)-A/-etilacetamida partindo de intermediário ácido 2-((6R)- 4-(4-Clorofenil)-2,3,9-trimetil-6H-isoxazolo[5,4-c]tieno[2,3-e]azepin-6-il)acé- tico. 1H RMN (400 MHz, D6-Acetona) δ 7,50 - 7,30 (m, 5H), 4,35 (t, J = 6,8 Hz, 1H), 3,42 - 3,16 (m, 4H), 2,46 (s, 3H), 2,44 (s, 3H), 1,70 (s, 3H), 1,14 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LC/MS m/z 428 [M+H]+. (Tetra-hidro-2H-piran-4-il)magnésio cloreto o

.

A uma suspensão vigorosamente agitada de Mg (0,500 g, 20,57 mmol) turnings e iodo (0,019 g, 0,075 mmol) em THF (5 mL) sob N2 (g) foi adicionado 1,2-dibromoetano (0,10 mL, 1,160 mmol) e 10% de uma solução de 4-clorotetra-hidro-2H-piran (1,00 mL, 9,24 mmol) em THF (5 mL). A mistu- ra foi aquecida a 60°C e como a mistura de reação ficou clara e iniciação de Grignard ocorreu, o restante da solução de 4-clorotetra-hidro-2H-piran (1,00 mL, 9,24 mmol) em THF foi adicionado lentamente por 30 min. A mistura de reação foi agitada a 65°C por 2 h para liberar uma solução de (tetra-hidro- 2H-piran-4-il)magnésio cloreto em THF. A solução de Grignard foi usada sem qualquer outra purificação. (6S)-tert-butíl 6-(2-(tert-butoxi)-2-oxoetíl)-2,3,9-trimetil-4-oxo-4H-isoxa- zolo[5,4-c]tieno[2,3-e]azepina-5(6H)-carboxilato

,

A uma solução amarela escura de tert-butil 2-((6S)-2,3,9-trimetil- 4-oxo-5,6-di-hidro-4H-isoxazolo[4,5-e]tieno[3,2-c]azepin-6-il)acetato uma for-ma de intermediário 17, preparado de acordo com Exemplo 14 (0,209 g, 0,577 mmol) e DMAP (0,007 g, 0,058 mmol) em THF (2,0 mL) foi adicionado BOC2O (0,166 mL, 0,715 mmol). Após 30 min, a mistura de reação foi concentrada em vácuo para gerar sólidos marrons. O produto bruto foi purificado em sistema Biotage (gradiente de eluição 5% EtOAc: 95% Hexanos a 10% EtOAc: 90% Hexanos, então isocrático 10% EtOAc: 90% Hexanos) para liberar 0 produto título (8,61 g, 20,1 mmol, 88% de rendimento) como sólidos brancos. LC/MS m/z 563 [M+H]+. (3S)-tert-Butil 3-((tert-butoxicarbonil)amino)-3-(4-(4,5-dimetil-2-(tetra-hi- dro-2H-piran-4-carbonil)tiofen-3-il)-3-metilisoxazol-5-il)propanoato

A uma solução resfriada (-40°C) de (6S)-tert-butil 6-(2-tert-buto- xi-2-oxoetil)-2,3,9-trimetil-4-oxo-4H-isoxazolo[4,5-e]tieno[3,2-c]azepina- 5(6H)-carboxilato (136 mg, 0,294 mmol) em THF (0,5 mL) foi adicionado (te- tra-hidro-2H-piran-4-il)magnésio cloreto (1,05 mL, 0,882 mmol) em uma porção. Após 5 min, a mistura roxa foi deixada aquecer em rt. A reação rosa foi extinta com 1 N HCI e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (2x), lavada com NaHCO3 saturado, seca em Na2SO4, e concentrada para gerar um óleo amarelo. O óleo foi purificado em sistema Biotage (gradiente de eluição 5% EtOAc: 95% Hexanos a 30% EtOAc: 70% Hexanos, então isocrático 30% EtOAc: 70% Hexanos) para gerar o composto título (0,148 g, 0,270 mmol, 92% de rendimento) como uma espuma branca. LC/MS m/z 571 [M + Na]+ 2-((6S)-2,3,9-trimetil-4-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-6H-isoxazolo[5,4-c]tié- no[2,3-e]azepin-6-il)acetamida

(Composto 168).

A uma solução de (3S)-tert-butil 3-(tert-butoxicarbonilamino)-3- (4-(4,5-dimetil-3-(tetra-hidro-2H-piran-4-carbonil)tiofen-2-il)-3-metilisoxazol-5- il)propanoato (68 mg, 0,124 mmol) in CHCI3 (1,0 mL) foi adicionado TFA (0,477 mL, 6,20 mmol) e a mistura de reação foi aquecida em refluxo por 3 h. A mistura de reação amarela é resfriada até temperatura ambiente, con-centrada em vácuo, e excesso TFA é azeotropicamente removido usando CHCI3(2 X 2 mL), seguido por tolueno (2x10 mL). O ácido carboxílico bruto é seco e usado sem outra purificação.

A uma solução resfriada (0°C) de ácido carboxílico em DMF (1,0 mL) foi sequencialmente adicionado N, N-diisopropiletil amina (0,100 mL, 0,573 mmol), NH4CI (0,024 g, 0,449 mmol), e COMU (0,080 g, 0,186 mmol). Após adição completa a mistura de reação ficou laranja claro e foi deixada aquecer até temperatura ambiente. Após consumo completo de ácido (como detectado por análise LC-MS), a mistura de reação foi diluída com H2O e MTBE. Uma fase aquosa foi extraída com MTBE (3x) e a fase orgânica combinada foi lavada com H2O (2x), salmoura, seca em Na2SO4, e concen-trada para gerar uma espuma branca. A espuma foi purificada em sistema Biotage (gradiente de eluição 15% EtOAc: 85% Hexanos a 100% EtOAc), os orgânicos voláteis foram removidos, e o Composto purificado foi subsequen-temente diluído com CH3CN (10 mL) e H2O (1 mL), e liofilizado para gerar o composto título (0,031 g, 0,084 mmol, 68% de rendimento) como sólidos quase brancos. 1H RMN (400 MHz, Acetona-d6) õ7,08 (br. s, 1H), 6,28 (br. s, 1H), 4,12 (t, J= 6,73 Hz, 1H), 3,90 (d, J = 11,12 Hz, 1H), 3,66 (d, J = 10,82 Hz, 1H), 3,40 (dt, J = 3,66, 11,19 Hz, 1H), 3,14-3,31 (m, 3H), 2,89-3,00 (m, 1H), 2,45 (s, 3H), 2,41 (s, 3H), 2,31 (d, J = 0,59 Hz, 3H), 1,79 -1,91 (m, 2H), 1,11 (d, J= 12,29 Hz, 1H), 1,00 (dt, J = 4,10, 12,14 Hz, 1H); LC/MS m/z 374 [M + Hf.

EXEMPLO 19: Síntese de Compostos de fórmula I em que Ar é Piridina.

Os compostos deste exemplo foram preparados da maneira es-tabelecida no Esquema 5, abaixo. Modificação apropriada deste esquema para produzir outros compostos da invenção serão prontamente aparentes aos especialistas na técnica. Esquema 5.

Síntese de compostos exemplares de fórmula I em que Ar é piri-dina, e intermediários úteis em dito Composto são estabelecidos abaixo. (4-Clorofenil)(2-fíuor-4-iodopiridin-3-il)metanol

A uma solução de 2-fluor-4-iodonicotinaldeído (1,50 g, 5,98 mmol) em THF anidro (20 mL) a -78°C foi lentamente adicionada uma solu-ção de (4-clorofenil)magnésio brometo (1 M em Et2O) (6,57 mL, 6,57 mmol). Após 15 minutes a -78°C, a reação foi extinta com MeOH seguido por cloreto de amónio aquoso saturado, e o produto foi extraído com CH2CI2 (4x). As camadas orgânicas foram combinadas, secas em um tampão de algodão e concentradas até secagem em vácuo. O resíduo foi usado sem qualquer purificação na etapa seguinte. LC/MS m/z 364 [M+H]+. (4-Clorofenil)(2-fluor-4-iodopirídin-3-il)metanona

.

A uma solução de (4-clorofenil)(2-fluor-4-iodopiridin-3-il)metanol (2,17 g, 5,98 mmol) em CH2CI2 (100 mL) foi adicionado dióxido de manga-nês (10,40 g, 120 mmol) em temperatura ambiente. A reação foi aquecida a 45°C por 3 h antes de a mistura heterogênea foi filtrada por um pad de sílica gel. A torta foi rinsada com EtOAc, e o filtrado foi concentrado até secagem em vácuo. O resíduo foi usado na etapa seguinte sem qualquer purificação adicional. LC/MS m/z 362 [M+H]+. (4-ClorofeniI)(2-fluor-4-(5-(hidroximetil)-3-metilisoxazol-4-il)pirídin-3- il)metanona

Um procedimento análogo à síntese de (4-Clorofenil)(2-(5- (hidroximetil)-3-metilisoxazol-4-il)-4,5-dimetiltiofen-3-il)metanona no Exemplo 18 foi seguido. Haloaril (4-clorofenil)(2-fluor-4-iodopiridin-3-il)metanona foi usado como material de partida. LC/MS m/z 347 [M+H]+. (4-(5-(Azidometil)-3-metilisoxazol-4-ií)-2-fluorpiridin-3-il)(4-clorofenil)me- tanona

.

Um procedimento similar à síntese de (2-(3-(1-azidoetil)-5-me- tilisoxazol-4-il)fenil)(4-clorofenil)metanona no Exemplo 16 foi seguido, exceto que DMF foi substituído por uma mistura de acetonitrila e água; e que (4- Clorofenil)(2-fluor-4-(5-(hidroximetil)-3-metilisoxazol-4-il)piridin-3-il)metanona foi usado como material de partida. LC/MS m/z 372 [M+H]+. 6-(4-Clorofenil)-7-fluor-1-metil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[4,3-e]azepina

(Composto 169).

Um procedimento similar ao usado para produzir 6-(4-clorofenil)- 1,4-dimetil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,3-e]azepina no Exemplo 16 foi seguido. (4-(5-(azidometil)-3-metilisoxazol-4-il)-2-fluorpiridin-3-il)(4-clorofenil)metano- na bruto foi usado como material de partida. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,49 (d, J = 5,26 Hz, 1H), 7,80 (dd, J = 1,14, 5,26 Hz, 1H), 7,45 (td, J = 2,30, 8,70 Hz, 2H), 7,38 (td, J = 2,10, 8,70 Hz, 2H), 5,32 (d, J = 13,50 Hz, 1H), 4,30 (d, J= 13,50 Hz, 1H), 2,57 (s, 3H); LC/MS m/z 328 [M+H]+.

O produto lateral (4-(5-(aminometil)-3-metilisoxazol-4-il)-2-fluorpi- ridin-3-il)(4-clorofenil)metanona foi convertido a 6-(4-clorofenil)-7-fluor-1- metil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[4,3-e]azepina em uma mistura de EtOH abso-luto e ácido acético (2:1 v/v) a 110°C por mais do que 1 h. 6-(4-Clorofenil)-7-metoxi-1-metil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[4,3- o e]azepina

(Composto 170).

A uma solução de 6-(4-clorofenil)-7-fluor-1-metil-4H-isoxazo- lo[4,5-e]pirido[3,4-c]azepina (0,030 g, 0,092 mmol) em MeOH (2 mL) foi adicionado hidreto de sódio (60% disperso em óleo mineral) (0,037 g, 0,915 mmol) em temperatura ambiente. A reação foi agitada em temperatura ambiente por 15 min (ou até que a evolução de gás parasse) antes de ser aquecida a 80°C por 75 min em um frasco vedado. A reação foi então concentrada até secagem em vácuo, e o resíduo foi purificado por cromatografia rápida (hexano/EtOAc 19:1 a 5:5) para gerar 6-(4-clorofenil)-7-metoxi-1- metil-4/-/-isoxazolo[5,4-c]pirido[4,3-e]azepina como um sólido branco (0,031 g). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,42 (d, J = 5,49 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 5,26 Hz, 1H), 7,39 (td, J = 2,10, 8,70 Hz, 2H), 7,26 (td, J = 2,10, 8,47 Hz, 2H), 5,24 (d, J= 13,28 Hz, 1H), 4,11 (d, J= 13,50 Hz, 1H), 3,61 (s, 3H), 2,55 (s, 3H); LC/MS m/z 340 [M+H]+. 6-(4-Clorofenil)-7-isopropoxi-1-metil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[4,3-e]aze- pina

(Composto 171).

Um procedimento similar a 6-(4-clorofenil)-7-metoxi-1-metil-4H- isoxazolo[5,4-c]pirido[4,3-e]azepina foi seguido, exceto que 2-propanol foi usado ao invés de MeOH. 1H RMN (400 MHz, DMSO-dβ) δ 8,38 (d, J = 5,49 Hz, 1H), 7,36 - 7,41 (m, 3H), 7,22 (td, J = 2,10, 8,47 Hz, 2H), 5,22 (d, J = 13,28 Hz, 1H), 5,06 (spt, J = 6,20 Hz, 1H), 4,10 (d, J = 13,28 Hz, 1H), 2,55 (s, 3H), 1,08 (d, J = 5,95 Hz, 3H), 0,62 (d, J = 6,18 Hz, 3H); LC/MS m/z 368 [M+Hf. 6-(4-Clorofenil)-1-metil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[4,3-e]azepin-7-ami- na

(Composto 172).

A uma solução de 6-(4-clorofenil)-7-fluor-1-metil-4H-isoxazo- lo[4,5-e]pirido[3,4-c]azepina (0,025 g, 0,076 mmol) em 1,4-dioxano (1 mL) foi adicionado hidróxido de amónio concentrado (2,00 mL, 51,4 mmol) em tem-peratura ambiente. A reação foi aquecida a 80°C por 17 h antes de sílica gel ser adicionada. O solvente foi removido em vácuo, a sílica gel seca foi em-pacotada e o produto adsorvido foi purificado por cromatografia rápida (he- xano/EtOAc 6:4 a 0:10) para gerar 6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-isoxazolo[5,4- c]pirido[4,3-e]azepin-7-amina como um sólido quase branco (0,006 g). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,19 (d, J = 5,26 Hz, 1H), 7,38 (td, J = 2,20, 8,93 Hz, 2H), 7,34 (td, J = 2,20, 8,47 Hz, 2H), 6,94 (d, J = 5,26 Hz, 1H), 5,91 (s, 2H), 5,21 (d, J = 12,82 Hz, 1H), 4,04 (d, J = 13,05 Hz, 1H), 2,50 (s, 3H); LC/MS m/z 325 [M+H]+. 6-(4-Clorofenil)-N, 1-dimetil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirído[4,3-e]azepin- 7-ami- na

(Composto 173).

A 6-(4-clorofenil)-7-fluor-1-metil-4H-isoxazolo[4,5-e]pirido[3,4- c]azepina (0,020 g, 0,061 mmol) foi adicionado uma solução de metilamina (33% in EtOH) (4 mL) em temperatura ambiente. A reação foi aquecida a 80°C por 22 h antes de sílica gel ser adicionada. O solvente foi removido em vácuo, a sílica gel seca foi empacotada e o produto adsorvido foi purificado por cromatografia rápida (hexano/EtOAc 8:2 a 2:8) para gerar 6-(4-cloro- fen i l)-/V, 1 -dimetil-4/-/-isoxazolo[5,4-c]pirido[4,3-e]azepin-7-amina como um sólido branco (0,014 g). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,27 (d, J = 5,26 Hz, 1H), 7,35 (td, J = 2,30, 8,93 Hz, 2H), 7,30 (td, J = 2,30, 8,93 Hz, 2H), 6,93 (d, J = 5,26 Hz, 1H), 5,87 (q, J = 4,35 Hz, 1H), 5,22 (d, J = 12,82 Hz, 1H), 4,03 (s, 1H), 2,61 (d, J = 4,58 Hz, 3H), 2,50 (s, 3H); LC/MS m/z 339 [M+H]+. 6-(4-Clorofenil)-N-etil-1-metil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirído[4,3-e]azepin-7- amina

(Composto 174).

Um procedimento similar a 6-(4-clorofenil)-/V, 1 -dimetil-4/-/- isoxazolo[5,4-c]pirido[4,3-e]azepin-7-amina foi seguido, exceto que etilamina foi usada no lugar de metilamina. 1H RMN (400 MHz, DMSO-dβ) δ 8,24 (d, J = 5,26 Hz, 1H), 7,35 (td, J = 2,10, 8,93 Hz, 2H), 7,30 (td, J = 1,80, 8,20 Hz, 2H), 6,91 (d, J = 5,26 Hz, 1H), 5,80 (t, J = 5,49 Hz, 1H), 5,22 (d, J = 12,82 Hz, 1H), 4,01 (d, J= 12,82 Hz, 1H), 3,20-3,29 (m, 1H), 2,98 - 3,09 (m, 1H), 2,50 (s, 3H), 0,72 (s, 3H); LC/MS m/z 353 [M+H]+. 6-(4-Clorofeníl)-N,N,1-trimetil-4H-isoxazolo[5,4-c]pírído[4,3-e]azepín-7- amina

(Composto 175).

Um procedimento similar a 6-(4-clorofenil)-/V,1-dimetil-4/-/-isoxa- zolo[5,4-c]pirido[4,3-e]azepin-7-amina foi seguido, exceto que uma solução de dimetilamina (2 M em MeOH) foi usada no lugar de metilamina (33% em EtOH). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,35 (d, J = 5,04 Hz, 1H), 7,37 (d, J = 8,70 Hz, 2H), 7,20 (d, J = 8,70 Hz, 2H), 7,14 (d, J = 5,04 Hz, 1H), 5,28 (s, 1H), 4,25 (d, J = 12,82 Hz, 1H), 2,70 (s, 6H), 2,54 (s, 3H); LC/MS m/z 353 [M+H]+.

EXEMPLO 20. Síntese de Compostos de fórmula I, em que Ar é Pirido- na.

Compostos de fórmula I em que Ar é piridona são sintetizados de acordo com o Esquema 6, abaixo. Modificações apropriadas deste esquema para produzir outros compostos da invenção serão prontamente aparentes aos especialistas na técnica. Esquema 6:

6-(4-Clorofenil)-1-metil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[4,3-e]azepin-7(8H)-ona

(Composto 176).

A uma solução de 6-(4-clorofenil)-7-fluor-1-metil-4/7-isoxazo- lo[4,5-e]pirido[3,4-c]azepina do Exemplo 19 (0,244 g, 0,744 mmol) em 1,4- dioxano (5 mL) foi adicionada uma solução aquosa de hidróxido de sódio (1M) (5,00 mL, 5,00 mmol) em temperatura ambiente. A reação foi aquecida a 110°C por 90 min, então resfriada até temperatura ambiente antes de uma solução saturada de cloreto de amónio foi adicionado. O produto foi extraído com CH2CI2 (repetido 4 vezes), e as camadas orgânicas foram combinadas, secas em sulfato de sódio, filtrado e concentrado até secagem em vácuo. O produto foi purificado duas vezes por cromatografia rápida (hexano/EtOAc 8:2 a 1:9) para gerar 6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[4,3- e]azepin-7(8H)-ona como um sólido branco (0,211 g). 1H RMN (400 MHz, DMSO-dθ) δ 11,92 (br.s., 1H), 7,66 (d, J = 6,64 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 8,00 Hz, 2H), 7,33 (d, J = 8,47 Hz, 2H), 6,60 (d, J = 6,87 Hz, 1H), 5,19 (d, J = 13,05 Hz, 1H), 4,07 (d, J= 13,05 Hz, 1H), 2,50 (s, 3H); LC/MS m/z 326 [M+H]+. 6-(4-Clorofenil)-1,8-dimetil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[4,3-e]azepin-7(8H)- ona

(Composto 177).

A uma solução de 6-(4-clorofenil)-1-metil-4/-/-isoxazolo[4,5-e]piri- do[3,4-c]azepin-7(8H)-ona (0,070 g, 0,215 mmol) em acetonitrila (2 mL) foram adicionados carbonato de césio (0,210 g, 0,645 mmol) e iodometano (16,09 μl, 0,258 mmol) em temperatura ambiente. A reação foi agitada em temperatura ambiente por 2 h antes de ser diluída com CH2CI2 e filtrada. O filtrado foi concentrado até secagem em vácuo, e o resíduo foi purificado por cromatografia rápida (hexano/EtOAc 9:1 a 3:7) para gerar 6-(4-clorofenil)- 1,8-dimetil-4/-/-isoxazolo[5,4-c]pirido[4,3-e]azepin-7(8H)-ona como um sólido quase branco (0,064 g) e 6-(4-clorofenil)-7-metoxi-1-metil-4H-isoxazolo[5,4- c]pirido[4,3-e]azepina como produto colateral. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,00 (d, J = 7,10 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 2,06 Hz, 4H), 6,67 (d, J = 7,10 Hz, 1H), 5,20 (d, J= 13,05 Hz, 1H), 4,06 (d, J= 13,05 Hz, 1H), 3,43 (s, 3H), 2,51 (s, 3H); LC/MS m/z 340 [M+H]+.

Substituições no anel piridona foram obtidos após a etapa geral estabelecida no Esquema 7, abaixo. Esquema 7:

4-(6-(4-Clorofenil)-1-metil-7-oxo-4H-isoxazolo[5,4-c]pirído[4,3-e]azepin- 8(7H)-il)benzonitríla

(Composto 178). 6-(4-Clorofenil)-1-metil-4H-isoxazolo[4,5-e]pirido[3,4-c]azepin- 7(8H)-ona (0,025 g, 0,077 mmol), ácido 4-cianofenilborônico (0,023 g, 0,153 mmol), acetato de cobre (II) (0,035 g, 0,192 mmol) e piridina (1 mL) foram carregados em um frasco equipado com uma barra de agitação. A reação foi aquecida a 40°C por 3 h em um frasco aberto (para permitir contato com ar) antes de sílica gel ser adicionada. Então a piridina foi removida em vácuo. A sílica gel seca foi empacotada e o produto adsorvido foi purificado por cro-matografia rápida (hexano/EtOAc 19:1 a 4:6) para gerar 4-(6-(4-clorofenil)-1- metil-7-oxo-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[4,3-e]azepin-8(7H)-il)benzonitrila como um sólido quase branco (0,027 g). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,04 (d, J = 6,87 Hz, 1H), 8,02 (td, J = 2,10, 8,24 Hz, 2H), 7,66 (td, J = 2,10, 8,70 Hz, 2H), 7,49 (td, J = 2,10, 8,47 Hz, 2H), 7,35 (td, J = 2,30, 8,70 Hz, 2H), 6,84 (d, J= 7,32 Hz, 1H), 5,26 (d, J= 13,28 Hz, 1H), 4,18 (d, J= 13,05 Hz, 1H), 2,56 (s, 3H); LC/MS m/z 427 [M+H]+. 6-(4-Clorofenil)-1-metil-8-fenil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[4,3-e]azepin- 7(8H)-ona

(Composto 179).

Um procedimento similar a 4-(6-(4-clorofenil)-1-metil-7-oxo-4H- isoxazolo[5,4-c]pirido[4,3-e]azepin-8(7H)-il)benzonitrila foi seguido, exceto que ácido fenilborônico foi usado no lugar de ácido 4-cianofenilborônico. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,00 (d, J = 7,10 Hz, 1H), 7,31 - 7,55 (m, 9H), 6,78 (d, J = 7,10 Hz, 1H), 5,25 (d, J = 13,05 Hz, 1H), 4,18 (d, J = 13,28 Hz, 1H), 2,55 (s, 3H); LC/MS m/z 402 [M+H]+.

EXEMPLO 21. Síntese de Compostos de fórmula I Em que Ar é substitu-ído Piridina.

Compostos de fórmula I em que Ar é substituído piridina foram sintetizados de acordo com o Esquema 8. Modificação apropriada deste es-quema para produzir outros compostos da invenção serão prontamente apa-rentes aos especialistas na técnica.

(2-Fluor-4-iodopiridin-3-Mmetanol

.

A uma solução de 2-fluor-4-iodonicotinaldeído (3,50 g, 13,94 mmol) em EtOH absoluto (56 mL) foi adicionado boro-hidreto de sódio (0,264 g, 6,97 mmol) em temperatura ambiente. A reação foi agitada em temperatura ambiente por 1 h, seguido por adição lenta de 1 M ácido clorídrico aquoso. O produto foi extraído com CH2CI2 (repetido quatro vezes), e as camadas orgânicas foram combinadas, secas em sulfato de sódio, filtradas e concentradas até secagem. Uma fase aquosa foi basificada até pH 8-10 com 2 M hidróxido de sódio aquoso e extraída com dietiléter (repetido quatro vezes). Então as camadas orgânicas foram combinadas, secas em sulfato de sódio, filtradas, combinadas com o resíduo anteriormente obtido e concentradas até secagem em vácuo. O resíduo foi usado sem qualquer purificação na etapa seguinte. LC/MS m/z 254 [M+H]+. 3-(((tert-Butildimetilsilil)oxi)metil)-2-fluor-4-iodopirídina

A uma solução de (2-fluor-4-iodopiridin-3-il)metanol (3,52 g, 13,91 mmol) em CH2CI2 (80 mL) em temperatura ambiente foi sequencialmente adicionado imidazol (1,894 g, 27,8 mmol) e TBDMS-CI (2,52 g, 16,69 mmol). A reação foi agitada em temperatura ambiente por 1 h antes de dieti- léter foi adicionado e os sais insolúveis foram filtrados. Sílica gel foi adicionado ao filtrado antes da remoção do solvente em vácuo. A sílica gel seca foi empacotado, e o produto adsorvido foi purificado por cromatografia rápida (hexano/EtOAc 10:0 a 7:3) para gerar 3-(((tert-butildimetilsilil)oxi)metil)-2- fluor-4-iodopiridina como um sólido branco (4,5 g). LC/MS m/z 368 [M+H]+. (4-(3-(((tert-butildimetilsilil)oxi)metil)-2-fluorpiridin-4-il)-3-metilisoxazol- 541)metanol

Um procedimento similar àquele usado para sintetizar (4- Clorofenil)(2-(5-(hidroximetil)-3-metilisoxazol-4-il)-4,5-dimetiltiofen-3- il)metanona no Exemplo 18 foi seguido. LC/MS m/z 353 [M+H]+. 4-(3-(((tert-Butildimetilsilil)oxi)metil)-2-fíuorpiridin-4-il)-3-metilisoxazol- 5-carbaldeído

A uma solução de (4-(3-((tert-butildimetilsililoxi)metil)-2-fluorpiri- din-4-il)-3-metilisoxazol-5-il)metanol (1,35 mg, 8,83 mmol) em CH2CI2 (38 mL) em temperatura ambiente foi adicionado dióxido de manganês (6,66 g, 77 mmol). A reação heterogênea foi aquecida a 50°C em um tubo vedado por 2 h. A reação foi então resfriada até temperatura ambiente e filtrada. Então 0 sólido foi rinsado com EtOAc e o filtrado foi concentrado até secagem em vácuo. O resíduo foi usado sem qualquer purificação na etapa seguinte. LC/MS m/z 351 [M+Hf. (S,E)-N-((4-(3-((tert-Butildimetilsililoxi)metil)-2-fluorpiridin-4-il)-3-me- tilisoxazol-5-il)metileno)-2-metilpropano-2-sulfinamida

.

Um procedimento análogo ao produto geral para formação de (S)-terí-Butilsulfinilimina no Exemplo 14 foi seguido. LC/MS m/z 454 [M+Hf. (3S)-tert-Butil 3-(4-(3-((tert-butildimetilsililoxi)metil)-2-fluorpiridin-4-il)-3- metilisoxazol-5-il)-3-((S)-1t1-dimetiletilsulfinamido)propanoato

Um procedimento análogo ao protocolo geral para adição de (2- tert-Butoxi-2-oxoetil)zinco(ll) Cloreto a (S)-tert-Butilsulfinilimina no Exemplo 14 foi seguido. LC/MS m/z 570 [M+H]+. (3S)-tert-Butil 3-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-(4-(2-fíuor-3-(hidroxi- metil)piridin-4-il)-3-metilisoxazol-5-il)propanoato

.

A uma solução de (3S)-te/t-butil 3-(4-(3-((/ert-butildimetilsililo- xi) meti l)-2-f I uorpi rid in-4-i l)-3-metilisoxazol-5-i l)-3-((S)-1,1 - dimetiletilsulfinamido)propanoato (1,01 g, 1,76 mmol) em THF anidro (20 mL) em temperatura ambiente foi adicionado uma solução de fluoreto tetrabuti- lamônio (1M em THF úmido) (2,21 mL, 2,205 mmol). A reação foi agitada em temperatura ambiente por 1 h antes de MeOH e sílica gel foram adicionados. O solvente foi removido, a sílica gel seca foi empacotada e o produto adsor- vido foi purificado por cromatografia rápida (hexano/EtOAc 7:3 a 5:5) para gerar (3S)-te/f-butil 3-((S)-1, 1 -dimetiletilsulfinamido)-3-(4-(2-fluor-3-(hidroxi- metil)piridin-4-il)-3-metilisoxazol-5-il)propanoato como um sólido pegajoso (0,694 g). LC/MS m/z 456 [M+H]+. (3S)-tert-Butil 3-amino-3-(4-(2-fíuor-3-(hidroximetil)piridin-4-il)-3-me- tilisoxazol-5-il)propanoato

Um procedimento similar ao protocolo geral para divagem mediada por HCI de grupo sulfinil no Exemplo 14 foi seguido. LC/MS m/z 352 [M+Hf. tert-Butil 2-((4S)-7-fluor- 1-metil-6-oxo-5,6-di-hidro-4H-isoxazolo[5,4-c]pi- rido[4,3-e]azepin-4-il)acetato

.

A uma solução de (3S)-tert-butil 3-amino-3-(4-(2-fluor-3-(hidroxi- metil)piridin-4-il)-3-metilisoxazol-5-il)propanoato (200 mg, 0,569 mmol) e TEMPO (4,45 mg, 0,028 mmol) em CH2CI2 (5 mL) a 0°C foi sequencialmente adicionado brometo de potássio (33,9 mg, 0,285 mmol) e uma solução aquosa de hipoclorito de sódio (~0,35M tamponada a pH ~8,6 com bicarbonato de sódio) (4,879 mL, 1,708 mmol). A reação foi vigorosamente agitada (para produzir uma emulsão) a 0°C por 45 min antes de diluir com CH2CI2. O produto foi extraído com CH2CI2 (repetido uma vez), com CH2CI2/MeOH (95:5) (repetido uma vez) e CH2CI2/TFE (95:5) (repetido uma vez). As camadas orgânicas foram combinadas, secas em um tampão de algodão e con-centrada até secagem em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida (Hexano/EtOAc 8:2 to 5:5) para gerar íerí-butil 2-((4S)-7-fluor-1-metil- 6-oxo-5,6-di-hidro-4/-/-isoxazolo[5,4-c]pirido[4,3-e]azepin-4-il)acetato como um sólido (45 mg). LC/MS m/z 348 [M+H]+. (4S)-tert-Butil 4-(2-(tert-butoxi)-2-oxoetil)-7-fluor-1-metil-6-oxo-4H-iso- xazolo[5,4-c]pirido[4,3-e]azepina-5(6H)-carboxilato

.

Um procedimento análogo àquele usado para sintetizar (6S)-tert- butil 6-(2-tert-butoxi-2-oxoetil)-2,3,9-trimetil-4-oxo-4H-isoxazolo[4,5-e]tié- no[3,2-c]azepina-5(6H)-carboxilato no Exemplo 18 foi seguido. LC/MS m/z 448 [M+H]+.

Mistura de (3S)-tert-butil 3-((tert-butoxicarbonil)amino)-3-(4-(3-(4-cloro- benzoil)-2-fíuorpiridin-4-il)-3-metílisoxazol-5-il)propanoa- to

e (4S)-tert-butil 4-(2-(tert-butoxi)-2-oxoetil)-6-(4- clorofenil)-7-fluor-6-hidróxi-1-metil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[4,3-e]aze- pina-5(6H)-carboxilato

Um procedimento análogo àquele usado para sintetizar (3S)-tert- Butil 3-((tert-butoxicarbonil)amino)-3-(4-(4,5-dimetil-2-(tetra-hidro-2H-piran-4- carbonil)tiofen-3-il)-3-metilisoxazol-5-il)propanoato no Exemplo 18 foi seguido. LC/MS m/z 560 [M+H]+. 2-((4S)-6-(4-Clorofenil)-7-fluor-1-metil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[4,3- e]azepin-4-il)acetamida

(Composto 180).

Um procedimento similar àquele usado para sintetizar 2-((6S)- 2,3,9-trimetil-4-(tetra-hidro-2 H-piran-4-il)-6H-isoxazolo[5,4-c]tieno[2,3- e]azepin-6-il)acetamida no Exemplo 18 foi seguido. LC/MS m/z 385 [M+H]+. 2-((4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-7-(metilamino)-4H-isoxazolo[5,4- c]pirído[4,3-e]azepin-4-il)acetamida

(Composto 181).

Um procedimento análogo àquele usado para sintetizar 6-(4- clorofenil)-/V, 1-dimetil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[4,3-e]azepin-7-amina no Exemplo 20 foi seguido. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,30 (d, J = 5,26 Hz, 1H), 7,67 (br. s, 1H), 7,36 (d, J = 8,70 Hz, 2H), 7,30 (d, J = 8,70 Hz, 2H), 7,04 (br. s, 1H), 6,95 (d, J = 5,26 Hz, 1H), 5,76 - 5,91 (q, J = 4,38 Hz, 1H), 4,38 (t, J = 7,30 Hz, 1H), 3,28 (dd, J = 7,80, 15,50 Hz, 1H), 3,12 (dd, J = 6,75, 15,68 Hz, 1H), 2,63 (d, J = 4,58 Hz, 3H), 2,50 (s, 3H); LC/MS m/z 396 [M+Hf.

EXEMPLO 22. Síntese de Compostos de fórmula I Em que R2 é Hidrogênio e R3 é -CH2-NR’-C(O)-R.

A síntese de compostos de fórmula I em que R2 é hidrogênio e R3 é -CH2-NR’-C(O)-R é exemplificada abaixo. Modificações apropriadas deste esquema para produzir outros compostos da invenção serão prontamente aparentes aos especialistas na técnica. N-(((6S)-4-(4-Clorofenil)-2,3,9-trímetil-6H-isoxazolo[5,4-c]tieno[2,3- e]azepin-6-il)metil)acetamida

(Composto 182).

A uma solução de ácido 2-((6S)-4-(4-Clorofenil)-2,3,9-trimetil-6H- isoxazolo[5,4-c]tieno[2,3-e]azepin-6-il)acético (Composto 164; 0,044 g, 0,110 mmol) em tolueno (1,5 mL) foi adicionado Et3N (0,050 mL, 0,359 mmol) e difenilfosforil azida (0,060 mL, 0,278 mmol). A mistura de reação foi aquecida a 80-90°C. Após 30 min, análise LC-MS indicou consumo completo do ácido. A mistura de reação foi resfriada até temperatura ambiente e concentrada em vácuo para gerar o isocianato como uma pasta espessa.

Ao isocianato bruto foi introduzido 1,4-dioxano (1 mL) e 1 N Na- OH aquoso (1,00 mL, 1,000 mmol) e subsequentemente aquecido até 90°C. Após 60 min, análise LC-MS indicou consumo completo de material de partida. A mistura bifásica foi resfriada até temperatura ambiente e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (3x). A fase orgânica combinada foi lavada com água, seca em Na2SO4, e concentrada para gerar a amina livre como um óleo laranja.

A amina resultante foi diluída com 1,4-dioxano (1 mL) seguida por adição sequencial de Et3N (0,1 mL, 0,717 mmol) e anidrido acético (0,05 mL, 0,530 mmol). Após 1 h, a solução foi concentrada em vácuo e o óleo resultante foi purificado em sistema Biotage (gradiente de eluição 10% EtOAc: 90% Hexanos a 80% EtOAc: 20% Hexanos, então isocrático 80% EtOAc: 20% Hexanos) para gerar o composto título como produto como sólidos brancos. Os sólidos foram diluída em CH3CN (2,0 mL) e água (1,0 mL), a solução foi congelada e liofilizado para gerar o produto título (0,030 g, 0,072 mmol, 66% de rendimento) como sólidos amorfos quase brancos. 1H RMN (400 MHz, Acetona) δ 7,60 (br. s, 1H), 7,35 - 7,46 (m, 4H), 4,15 (br. s, 2H), 4,04 (br. s, 1H), 2,47 (s, 3H), 2,43 (s, 3H), 1,91 (s, 3H), 1,69 (s, 3H); LC/MS m/z 414 [M+H]+.

Metil (((6S)-4-(4-clorofenil)-2,3,9-trimetil-6H-isoxazolo[5,4-c]tieno[2,3- e]azepin-6-il)metil)carbamato

(Composto 183).

A uma solução de ácido 2-((6S)-4-(4-Clorofenil)-2,3,9-trimetil-6H- isoxazolo[5,4-c]tieno[2,3-e]azepin-6-il)acético (Composto 164; 0,047 g, 0,117 mmol) em tolueno (1,5 mL) foi adicionado Et3N (0,100 mL, 0,717 mmol) e difenilfosforil azida (0,080 mL, 0,370 mmol). A mistura de reação foi aquecida a 80°C. Após 1 h, análise LC-MS indicou consumo completo do ácido carboxílico. A mistura de reação foi resfriada até temperatura ambiente e concentrada em vácuo para gerar uma pasta espessa.

À pasta foi introduzido 1,4-dioxano (5 mL), MeOH (5 mL) e 1 N NaOH aquoso (5 mL) e a mistura bifásica foi subsequentemente aquecida até 90°C. Após 24 h, análise LC-MS indicou consumo completo de acil- azida. A mistura bifásica foi resfriada até temperatura ambiente e a camada aquosa extraída com EtOAc (3x). A fase orgânica combinada foi lavada com água, secas em Na2SO4, e concentrada para gerar a amina livre como sólidos brancos. Os sólidos foram purificados em sistema Biotage (gradiente de eluição 10% EtOAc: 90% Hexanos a 20% EtOAc: 80% Hexanos) para gerar o produto título (0,005 g, 0,012 mmol, 10% de rendimento) como sólidos brancos.; 1H RMN (400 MHz, D6-Acetona) δ 7,43 (s, 2H), 7,40 (s, 2H), 6,70 (br. s, 1H), 4,00 - 4,22 (m, 3H), 3,58 (s, 3H), 2,47 (s, 3H), 2,44 (s, 3H), 1,70 (s, 3H); LC/MS m/z 430 [M+Hf.

EXEMPLO 23. Síntese de Outros Compostos de fórmula I.

A síntese de outros compostos exemplares de fórmula I são estabelecidos abaixo.

Ácido 2-((6S)-4-((4-Clorofenil)amino)-2,3,9-trimetil-6H-isoxazolo[5,4- c]tieno[2,3-e]azepin-6-il)acético

(Composto 184).

A um frasco foi adicionado tert-butil 2-((6S)-4-cloro-2,3,9-trimetil- 6H-isoxazolo[4,5-e]tieno[3,2-c]azepin-6-il)acetato, uma forma do intermediário 18, preparado de acordo com Exemplo 14 (0,056 g, 0,147 mmol), 4- cloroanilina (0,042 g, 0,333 mmol), ácido ((1S,4R)-7,7-dimetil-2-oxobici- clo[2,2,1]heptan-1-il)metanossulfônico (0,039 g, 0,168 mmol) e DMSO (0,5 mL). O frasco foi vedado e inicialmente aquecido até 125°C por 3 h no reator de micro-ondas. Análise LC-MS mostra consumo completo de material de partida e formação do produto acoplado desejado como uma mistura de ácido e éster. A mistura de reação foi subsequentemente aquecida a 145°C por mais 2 h, em cujo tempo análise LC-MS mostra conversão de todos os intermediários ao ácido desejado. A solução foi particionada entre MTBE e 1 N NaOH. A camada orgânica foi lavada com mais 1 N NaOH (2 x) e a camada aquosa combinada foi acidificada com HCI concentrado. A camada aquosa ácida (pH —3-4) foi extraída com EtOAc (4 x). A fase orgânica combinada foi lavada com água (2x), salmoura (1x), seca em Na2SO4, e concentrada para gerar o produto título (0,056 g, 0,135 mmol, 92% de rendimento) como uma espuma marrom que foi usada sem outra purificação. LC/MS m/z 416 [M+H]+. 2-((6S)-4-((4-Clorofenil)amino)-2!3,9-trimetil-6H-isoxazolo[5,4-c]tie- no[2,3-e]azepin-6-il)acetamida

(Composto 185).

A uma solução de ácido carboxílico bruto em DMF (1,0 mL) foi sequencialmente adicionado N, N-diisopropiletil amina (0,100 mL, 0,573 mmol), NH4CI (0,028 g, 0,523 mmol), e 1-Ciano-2-etoxi-2-oxoetilidenami- nooxi)dimetilamino-morfolino-carbenium hexafluorfosfato ((“COMU”), Sigma- Aldrich) (0,038 g, 0,089 mmol). Após adição completa de reagentes a mistu- ra de reação foi deixada envelhecer até consumo completo do ácido carboxílico foi detectado por LC-MS. A mistura de reação foi diluída com EtOAc e salmoura. A camada aquosa foi extraída com EtOAc (3x) e o extrato orgânico combinado foi lavado com água (2x), seco em Na2SO4 e concentrado para gerar um óleo rosa. O óleo foi purificado em sistema Biotage (gradiente de eluição 10% EtOAc: 90% Hexanos a 80% EtOAc: 20% Hexanos, então iso- crático 80% EtOAc: 20% Hexanos), os orgânicos voláteis foram removidos, e o Composto purificado foi subsequentemente diluído com CH3CN (10 mL) e H2O (1 mL), e liofilizado para gerar o composto título (0,023 g, 0,055 mmol, 41,2% de rendimento) como sólidos quase brancos. 1H RMN (400 MHz, Ace- tona-d6) δπ 7,80 (d, J = 8,78 Hz, 2H), 7,21 (d, J = 8,78 Hz, 2H), 7,12 (br. s, 1H), 6,35 (br. s, 1H), 4,40 (br. s, 1H), 3,03 - 3,19 (m, J = 8,50 Hz, 2H), 2,44 (s, 3H), 2,40 (s, 3H), 2,31 (s, 3H); LC/MS m/z 415 [M+H]+. 2-((6S)-2,3,9-trímetil-4-fenoxi-6H-isoxazolo[5,4-c]tieno[2,3-e]azepin-6- il)acetamida

(Composto 186).

Uma mistura de tert-butil 2-((6S)-4-cloro-2,3,9-trimetil-6H-isoxa- zolo[5,4-c]tieno[2,3-e]azepin-6-il)acetato, uma forma de intermediário 18, preparado de acordo com Exemplo 14 (0,220 g, 0,58 mmol) e fenol (0,276 g, 2,90 mmol) em piridina (1 mL) foi aquecido a 130°C por 1 h por MW. Após o solvente ser removido em vácuo, o resíduo foi lavado com 1 N NaOH, seco em Na2SO4 anidro. O produto foi purificado por Prep-TLC (PE: EA = 4: 1) para gerar tert-butil 2-((6S)-2,3,9-trimetil-4-fenoxi-6H-isoxazolo[5,4-c]tié- no[2,3-e]azepin-6-il)acetato (0,020 g, 7,9% de rendimento) como um sólido branco. Tert-butil 2-((6S)-2,3,9-trimetil-4-fenoxi-6H-isoxazolo[5,4-c]tieno[2,3- e]azepin-6-il)acetato foi convertido ao Composto alvo 2-((6S)-2,3,9-trimetil-4- fenoxi-6H-isoxazolo[5,4-c]tieno[2,3-e]azepin-6-il)acetamida usando Etapa L no Exemplo 14. 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 7,39 - 7,34 (m, 2H), 7,22 - 7,07 (m, 3H), 6,07(s, 1H), 5,18(s, 1H), 4,46 (q, J = 4,5 Hz, 1H), 2,99 - 2,84 (m, 2H), 2,48 (s, 3H), 2,45 (s, 3H), 2,42 (s, 3H); LC/MS m/z 382 [M + H]+. (6S)-6-((1H-imidazol-2-il)metil)-4-(4-clorofenil)-2,3,9-tπmetil-6H- isoxazolo[5,4-c]tieno[2,3-e]azepina

(Composto 187).

A uma solução de 2-((6S)-4-(4-clorofenil)-2,3,9-trimetil-6H-isoxa- zolo[5,4-c]tieno[2,3-e]azepin-6-il)acetamida (Composto 110, 0,120 g, 0,30 mmol) em THF (5 mL) foi adicionado reagente de Lawesson (0,248 g, 0,60 mmol). A mistura foi refluxada durante a noite. A mistura de reação foi concentrada em vácuo e o resíduo foi recristalizado por petróleo e etil acetato para gerar 2-((6S)-4-(4-clorofenil)-2,3,9-trimetil-6H-isoxazolo[5,4-c]tieno[2,3- e]azepin-6-il)etanotioamida (0,080 g, 64% de rendimento).

A uma solução de 2-((6S)-4-(4-clorofenil)-2,3,9-trimetil-6H-isoxa- zolo[5,4-c]tieno[2,3-e]azepin-6-il)etanotioamida (0,080 g, 0,19 mmol) e 2,2- dimetoxietanamina (0,200 g, 1,90 mmol) em CH3CN (5 mL) foi adicionado HgCL (0,515 g, 1,90 mmol). A mistura foi refluxada durante a noite. A mistura de reação foi filtrada, concentrada em vácuo e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (sílica gel, petróleo: etil acetato= 2:1) para gerar (6S)-6-((1H-imidazol-2-il)metil)-4-(4-clorofenil)-2,3,9-trimetil-6H-isoxazolo[5,4- c]tieno[2,3-e]azepina como um sólido amarelo (0,005 g, 6,2% de rendimento): 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,26 (br, 1H), 7,42 (d, J = 4,8 Hz, 2H), 7,24 (d, J = 4,8 Hz, 2H), 6,82 (d, J = 1,2 Hz, 2H), 4,40 - 4,30 (m, 1H), 3,84 - 3,74 (m, 2H), 2,50 (s, 3H), 2,42 (s, 3H), 1,64 (s, 3H); LC/MS m/z 423 [M + H]+. (6S)-4-(4-clorofenil)-2,3,9-trimetil-6-(tiazol-2-ilmetil)-6H-isoxazolo[5,4- c]tieno[2,3-e]azepina

(Composto 188).

A uma solução de ácido 2-((6S)-4-(4-Clorofenil)-2,3,9-trimetil-6H- isoxazolo[5,4-c]tieno[2,3-e]azepin-6-il)acético (Composto 164; 0,160 g, 0,40 mmol) e DMF (1 gota) em diclorometano (2 mL) foi adicionado cloreto de oxalil (0,070 g, 0,55 mmol) gota a gota a 0°C. A mistura foi agitada por 0,5 hora em temperatura ambiente. A solução foi resfriada a 0°C e 2,2- dimetoxietanamina (0,210 g, 5,00 mmol) foi adicionado. A mistura foi agitada por 0,5 hora em temperatura ambiente. Então a solução foi diluída com água (5 mL) e extraída com etil acetato (10 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com 1 N HCI e NaHCOa, secas em Na2SO4, concentradas em vácuo para gerar 2-((6S)-4-(4-clorofenil)-2,3,9-trimetil-6H-isoxa- zolo[5,4-c]tieno[2,3-e]azepin-6-il)-N-(dimetoximetil)acetamida como um sólido amarelo claro (0,120 g, rendimento 63,4%) que foi usado diretamente na etapa seguinte sem outra purificação.

A uma solução de 2-((6S)-4-(4-clorofenil)-2,3,9-trimetil-6H-isoxa- zolo[5,4-c]tieno[2,3-e]azepin-6-il)-N-(dimetoximetil)acetamida (0,120 g, 0,25 mmol) em diclorometano (3 mL) foi adicionado ácido trifluoracético (2 mL, 26 mmol). A mistura de reação foi agitada for 5 h. A mistura foi concentrada e THF (5 mL) e reagente de Lawesson (0,248 g, 0,60 mmol) foram adicionados. A mistura foi refluxada durante a noite. A mistura de reação foi concentrada em vácuo e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (sílica-gel, petróleo: etil acetato = 10:1) para gerar (6S)-4-(4-clorofenil)-2,3,9- trimetil-6-(tiazol-2-ilmetil)-6H-isoxazolo[5,4-c]tieno[2,3-e]azepina como um sólido amarelo (0,030 g, 17% de rendimento). 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 7,73 (d, J = 3,3 Hz, 1H); 7,35 - 7,29 (m, 5H), 4,31 - 4,20 (m, 3H), 2,51 (s, 3H), 2,40 (s, 3H), 1,64 (s, 3H); LC/MS m/z 440 [M+ H]+.

EXEMPLO 24: Medidas de IC50 para inibidores usando ensaio de ligação BRD4 AlphaLisa.

His/Flag epítopo marcado BRD4 BD142-168 foi clonado, expresso e purificado para homogeneidade. Ligação e inibição de BRD4 foi avaliada por monitoramento do engate de peptídeo biotinilado H4-tetraacetil (Millipore #12-379) com 0 alvo usando a tecnologia AlphaLisa (Perkin-Elmer). Especificamente, em uma placa de 384 poços ProxiPlate BRD4(BD1) (30 nM final) foi combinado com peptídeo (200 nM final) em 40 mM HEPES (pH 7,0), 40 mM NaCI, 1 mM DTT, 0,01% (p/v) BSA, e 0,008% (p/v) Brij-35 na presença de DMSO (final 1,2% DMSO) ou diluição serial do Composto em DMSO. A pós 20 minutos de incubação em temperatura ambiente esferas doadoras de Alfa estreptavidina e contas aceptoras de AlfaLisa anti-Flag foram adicionadas a uma concentração final de 10 ug/mL cada. Após três horas as placas em equilíbrio foram lidas em um instrumento Envision e IC5oS calculados usando um ajuste de curva de parâmetro não linear. Os resultados deste ensaio são estabelecidos na tabela 6, abaixo. Tabela 6. Atividade de Compostos Exemplares da invenção

Na tabela 6, “+” representa um valor sob 0,50 μM; “++” um valor entre 0,50 μM e 1 pM; e “+++” um valor maior do que 1 pM.

EXEMPLO 25: Ensaios baseados em células Ensaio de quantificação cMyc RNA (Ensaio QuantiGene®):

Células MV4:11 (AML) ou Raji (linfoma de Burkitt) foram sema- nadas em uma placa de 96 poços e incubadas na presença de várias concentrações de compostos por 4 h. Níveis relativos de mRNA foram quantificados usando ensaio QuantiGene 2,0 (Affymetrix) de acordo com a recomendação do fabricante. Os sinais foram detectados usando um leitor de placa Envision (Perkin-Elmer). Duplicatas biológicas foram ponderadas e normalizadas ao veículo controle (DMSO) para calcular níveis percentuais de MYC mRNA.

Ensaio de quantificação de IL-6 baseado em célula (ELISA, ensaio Me-soscale):

As células 100,000 THP-1 foram semeadas em RPMI1640-10% FBS em placas de 96 poços. LPS (E. Coli Invitrogen) em RPMI-10%FBS em uma concentração final de 4pg/mL foi adicionado aos poços e as células são então incubadas na presença de várias concentrações de compostos por 16 h. As placas são rotacionadas (2rpm, 5min), uma alíquota de 25uL de sobre- nadante é transferida a uma placa ELISA (tecnologia Mesoscale, MSD) e a detecção de IL-6 é realizada usando instruções do fabricante. A quantidade de células em cada poço é avaliada usando CelITiter-Glo® (Promega). A razão de valor de ELISA / valor CelITiter-Glo é usado para calcular o percentual de inibição de secreção de IL-6. Os resultados destes ensaios para determinados compostos da invenção são estabelecidos na tabela 7 abaixo.

Na tabela 7, “n.t.” = não testado, “+” representa um valor abaixo de 0,50 μM; “++” um valor entre 0,50 μM e 1 μM; e “+++” um valor maior do que 1 μM.

EXEMPLO 26: Preparação de Compostos de fórmula II, Onde R5 é arila 5 ou Heteroarila.

Esquema 9, abaixo estabelecido um método geral para preparar certos compostos da invenção. Esquema 9:

Procedimento geral pra formação de Imida 30 (Etapa M).

A uma solução de material de partida lactam (intermediário 17 em que Anel A é arila ou heteroarila e (R5)n é um substituinte halo único; 1 equivalente) e DMAP (0,10 equivalente ou 10 mol%) em THF (0,5 M em concentração de substrato) foi adicionado BOC2O (1,2 - 1,3 equivalente). Após 30 min, a mistura de reação foi concentrada em vácuo para gerar sóli-dos marrons. O produto bruto pode ser ainda purificado em sistema Biotage (gradiente de eluição 5% EtOAc: 95% Hexanos a 10% EtOAc: 90% Hexanos, então isocrático 10% EtOAc: 90% Hexanos) ou cristalizado de misturas de EtOAc:Hexanos para liberar 0 produto título N-Boc imida 30 (geralmente na faixa de 88% a 97% de rendimento) como sólidos brancos.

Procedimento geral para adição de Nucleófilos a N-Boc-lmida 30 (Etapa N).

A uma solução resfriada (-40°C) de N-Boc-lmida 30 (1 equiva-lente) em THF (0,5 M em concentração de substrato) foi adicionado o rea-gente apropriado de Grignard (tipicamente 1,1 - 1,5 equivalente) em uma porção. Após 5 min, a mistura foi deixada aquecer até temperatura ambiente e extinta com 1 N HCI. A camada aquosa foi extraída com EtOAc (2x). Os extratos orgânicos combinados foram lavadas com NaHCOs saturado aquo-so, secos em Na2SO4, e concentrados em vácuo. O produto bruto foi purifi-cado em sistema Biotage (tipicamente gradiente de eluição 5% EtOAc: 95% Hexanos a 30% EtOAc; 70% Hexanos) para gerar a cetona desejada N-Boc Composto 31 (geralmente > 90% de rendimento) geralmente como uma es-puma branca ou sólidos.

Procedimento geral para TFA-Desproteção e formação de Azepina 32 (Etapa O).

A uma solução de N-Boc cetona 31 em CHCI3 (0,2 M em con-centração de substrato) foi adicionado TFA (10-30 equivalente) e a mistura de reação foi aquecida em refluxo for ~24 h. A mistura de reação amarela é resfriada até temperatura ambiente, concentrada em vácuo, e excesso TFA foi azeotropicamente removido usando excesso CHCI3, seguido por tolueno. O ácido carboxílico bruto 32 foi seco e usado sem outra purificação. O ácido carboxílico 32 foi convertido à carboxamida correspondente 33 usando um reagente de acoplamento e uma base apropriada como descrito na Etapa L.

Um método alternativo à etapa de acoplamento descrito na Etapa L utilizou para conversão ácido carboxílico 32 à correspondente carboxamida 33 (designada Etapa S) como a seguir. A uma solução de ácido carboxílico 32 (1 equivalente) em diclorometano anidro foi adicionado cloreto de oxalil (25 equivalentes) em um modo sob gotejamento. Após agitada por 1 h, a mistura foi concentrada. O resíduo resultante foi dissolvido em diclorometano e 0,5 N amónia em 1,4-dioxano (5 equivalentes) foi introduzido. Após envelhecimento por 2 h, a mistura de reação foi concentrada em vácuo e o resíduo resultante foi purificado por cromatografia de coluna rápida (sílica- gel, diclorometano: metanol = 20:1) para gerar o produto desejado carboxa-mida 33 como um sólido.

Procedimento geral para Acoplamento Cruzado de Suzuki ao Aril-haleto (Etapa P).

A um frasco revedável da carboxamida 33 acima (1,0 equivalen-te) foi adicionado Pd2(dba)3 (0,10 equivalente), tri-tert-butilfosfônio tetrafluor- borato (0,22 equivalente), fosfato de potássio tribásico, mono-hidratado (2,0 equivalente), e o apropriado ácido aril borônico ou ácido hetero-aril borônico (1,5 equivalente). O frasco foi evacuado e purgado (3x), seguido por adição sequencial de 1,4-dioxano e água (razão típica 20:1), e o frasco foi mais uma vez evacuado e purgado com N2 (g) (3x) e a mistura de reação foi aquecida a 100°C até consumo do aril cloreto ser detectado por LC-MS. A mistura de reação foi subsequentemente resfriada até temperatura ambiente e filtrada por um tampão de Celite. A torta de filtro foi lavada com EtOAc (3x) e o filtrado foi concentrado em vácuo. O produto de acoplamento cruzado de fórmula II foi purificado através de sistema Biotage (geralmente gradiente de eluição usando misturas de EtOAc-Hexanos) para gerar o produto acoplado desejado (em 50 - 90% de rendimento).

Os compostos nas tabelas 8 e 9 foram feitos usando o protocolo geral descrito acima no Exemplo 26 e/ou os protocolos descritos no Exemplo 14. As etapas finais empregadas dos Exemplos são indicadas para cada composto. Etapas Q e R empregadas na síntese de Compostos 239, 248 e 249 são descritas no exemplo seguinte.

EXEMPLO 27: Preparação de Compostos de fórmula II, Onde Anel A é Fenila e R5 é Hidróxi ou Alcóxi.

Este esquema de preparação geral é exemplificado usando 2- ((4S)-6-(4-clorofenil)-8-metóxi-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4- il)acetamida como material de partida. Procedimento geral para Síntese de Compostos onde Anel A é Fenol (Etapa Q)

Um frasco de fundo redondo foi carregado com 2-((4S)-6-(4- clorofenil)-8-metoxi-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4-il)acetamida -10 (1 equivalente), uma barra de agitação e diclorometano (volume para prepa rar a concentração 0,1M). O frasco foi resfriado a 0°C e BBrs (50 equivalen-tes) foi adicionado sob gotejamento. A suspensão resultante foi deixada agitar e aquecer até temperatura ambiente por 16h, então novamente resfriada até 0°C para adição sob gotejamento de metanol (20 mL). A solução foi con- 15 centrada, então redissolvida em EtOAc e lavada com 1 M HCI. Uma fase aquosa foi extraída com EtOAc (2x); as orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas (Na2SO4), filtradas e concentradas. O produto fenol poderia ser purificado em sílica gel ou usado diretamente na reação se guinte.

Procedimento geral para Síntese de Compostos onde Anel A é Alcóxi- Substituído Fenil (Etapa R)

.

Um frasco de reação revedável foi carregado com 2-((4S)-6-(4- clorofenil)-8-hidróxi-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4-il)acetamida (1 equivalente), uma barra de agitação e 4-metilpentan-2-ona (volume para 25 preparar concentração 0,1M). Carbonato de potássio (3 equivalentes) foi adicionado, seguido por iodeto de alquil apropriado (2 equivalentes). O tubo foi aquecido a 75°C por 4 h, então vertido em água e lavado com EtOAc (3x). As orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas (Na2SO4), filtradas e concentradas. O produto éter foi purificado em sílica gel ou por HPLC de fase reversa.

EXEMPLO 28: Síntese de (4S)-8-cloro-1,4-dimetil-4H-benzo[c]isoxazo- lo[4,5-e]azepin-6(5H)-ona. O composto título foi usado como uma alternativa para o intermediário 17 no Esquema 9 e pode ser usado com Etapas M, N, O e P (mas não requer etapa L).

Metil 5-cloro-2-iodobenzoato

.

A um frasco de fundo redondo foi adicionado NaHCO3 (22,31 g, 266 mmol), ácido 5-cloro-2-iodobenzoico (25 g, 89 mmol), DMF, e Mel (11,07 mL, 177 mmol). A reação foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. A reação foi diluída com água e EtOAc. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x) e salmoura antes de serem secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage para gerar o composto título (25,81 g, 87 mmol). LC/MS m/z 297 [M+H]+.

Metil 2-(5‘((E)-(((S)-tert-butilsulfínil)imino)metíl)-3-metilisoxazol-4-il)-5- clorobenzoato

.

Este intermediário foi preparado usando o protocolo delineado para a síntese de intermediário 13 no Esquema 1, partindo de metil 5-cloro- 2-iodobenzoato. LC/MS m/z 383 [M+H]+. 5-cloro-2-(5-((S)-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfínamido)etil)-3-metilisoxazol-4- il)benzoato

.

A um frasco de fundo redondo foi adicionado metil 2-(5-((E)-((S)- tert-butilsulfinilimino)metil)-3-metilisoxazol-4-il)-5-clorobenzoato (4,18 g, 10,92 mmol) e tolueno (50 mL) antes de a solução ser resfriada até -78°C. A esta solução foi adicionado brometo metilmagnésio (8,58 mL, 12,01 mmol) e a solução agitada a -78°C por 1 h. A esta solução foi adicionado uma quantidade adicional de brometo metilmagnésio (4,9 mL, 6,86 mmol) e a reação agitada a -78°C por 1,25 h. A reação foi extinta com NH4CI saturado aquoso e as camadas separadas. Uma fase aquosa foi extraída com EtOAc. A fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar o composto título como o componente principal de uma mistura de diastereoisômeros (3,37 g, 8,45 mmol); LC/MS m/z 399 [M+H]+. (4S)-8-cloro-1,4-dimetil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-6(5H)-ona

A um frasco de fundo redondo foi adicionado metil 5-cloro-2-(5- ((S)-1-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)etil)-3-metilisoxazol-4-il)benzoato (3,37 g, 8,45 mmol), MeOH (48 mL), e HCI [2M em éter] (8,45 mL, 16,90 mmol). A reação foi agitada em temperatura ambiente por 30 min antes de concentrar. O resíduo bruto foi concentrado de tolueno (2x) e hexano (1x) antes de ser colocado em uma linha de alto vácuo durante a noite. O resíduo bruto (como uma espuma quase branca) foi dissolvido em THF (100 mL) antes de resfriar a -78°C e adição de cloreto isopropilmagnésio (15 mL, 30,0 mmol). A solução foi agitada a -78°C por 5 min antes de remover o banho frio e aquecer a reação até temperatura ambiente. A solução foi extinta com NH4CI aquoso saturado e diluída com EtOAc. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2SO4, filtradas, e concentradas para gerar um sólido branco. Este material foi purificado via SFC quiral para gerar o composto título (1,9 g, 7,23 mmol); LC/MS m/z 263 [M+Hf.

EXEMPLO 29: Síntese de Composto 223.

Síntese de metil 2-((4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazo- lo[4,5-e]azepin-4-il)acetato.

A uma solução de ácido 2-((4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H- benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4-il)acético (100 mg, 0,27 mmol) e N, N- dimetilformamida (1 gota) em diclorometano (10 mL) foi adicionado cloreto de oxalil (56 mg, 0,40 mmol) sob gotejamento a 0°C. A mistura foi agitada por 0,5 hora em temperatura ambiente. A solução foi resfriada a 0°C e metanol (100 mL) foi adicionado. A mistura foi agitada por 0,5 hora em temperatura ambiente. A mistura foi concentrada em vácuo, e o resíduo foi diluído com água (5 mL), e extraído com etil acetato (10 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio, concentradas em vácuo e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (sílica-gel, petróleo: etil acetato= 2: 1) para gerar metil 2-((4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-ben- zo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4-il)acetato (80 mg, 77%) como um sólido amarelo claro. LC/MS m/z 380 [M+H]+.

Síntese de 1-((4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]ísoxazolo[4,5- e]azepin-4-íl)-2-metilpropan-2-ol (Composto 223).

A uma solução de metil 2-((4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-ben- zo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4-il)acetato (76,2 mg, 0,20 mmol) em tetra-hidro- furano (10mL) foi lentamente adicionada metillítio (3N) (0,40 mL, 1,20 mmol) a 0°C. A mistura foi agitada por 0,5 h a 0°C, extinta com cloreto de amónio saturado e extraída com acetato etil (3x10 mL). A fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca em sulfato de sódio e concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (acetonitrila isocrática: 0,01% ácido acético água = 65:35) para gerar 1-((4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-ben- zo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4-il)-2-metilpropan-2-ol (30 mg, 39%) como um sólido branco. LC/MS m/z 380 [M+Hf ; 1H RMN (300 MHz, CD3CI) δ 7,59- 7,63 (m, 2H), 7,40-7,28 (m, 7H), 4,36-4,31 (m, 1H), 2,91-2,82 (m, 1H), 2,55 (s, 3H), 2,30-2,35 (m, 1H), 1,29 (s, 3H), 1,24 (s, 3H).

Outros compostos da invenção foram preparados conforme os procedimentos gerais nos Exemplos 14 e 28 e são estabelecidos na tabela 10. As etapas finais empregadas daqueles Exemplos são indicadas para cada composto.

Tabela 10

EXEMPLO 30. Preparação de 6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]iso- xazolo[4,5-e]azepina-4-carbonitrila (Composto 215). (E)-(2-(5-((benzo-hidrílimino)metil)-3-metilisoxazol-4-il)fenil)(4- clorofenil)metanona

.

A um frasco de fundo redondo foi adicionado 4-(2-(4-cloroben- zoil)fenil)-3-metilisoxazol-5-carbaldeído (3,86 g, 11,85 mmol), DCM (50 mL), difenilmetanamina (2,143 mL, 12,44 mmol), e Na2SO4 (5,05 g, 35,5 mmol). A reação foi agitada em temperatura ambiente durante a noite antes de ser filtrada e concentrada. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (E- tOAc/hex) para gerar o composto título (5,61 g, 11,43 mmol) como uma espuma amarelo clara. LC/MS m/z 491 [M+Hf. 2-(benzo-hidrílamino)-2-(4-(2-(4-clorobenzoil)fenil)-3-metilisoxazol-5- il)acetonitrila

.

A um frasco de fundo redondo foi adicionado (E)-(2-(5-((benzo- hidrilimino)metil)-3-metilisoxazol-4-il)fenil)(4-clorofenil)metanona (320 mg, 0,652 mmol), DCM (4,5 mL), e Yt(OTf)s (40,4 mg, 0,065 mmol). A esta solução foi adicionado TMS-CN (175 μl, 1,304 mmol) e a reação foi agitada durante a noite em temperatura ambiente. Esta solução foi diluída com NaH- CO3 saturado aquoso. As camadas foram separadas e uma fase aquosa foi extraída com DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar o composto título (300 mg, 0,579 mmol). LC/MS m/z 518 [M+H]+. 6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepina-4-carbonitri- la (Composto 215)

.

A um frasco revedável foi adicionado 2-(benzo-hidrilamino)-2-(4- (2-(4-clorobenzoil)fenil)-3-metilisoxazol-5-il)acetonitrila (16 mg, 0,031 mmol), DCE (0,5 mL), e TFA (0,5 mL, 6,49 mmol). O frasco foi vedado e aquecido até 80°C por 3,5 h antes de resfriar até temperatura ambiente e concentração. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar 0 composto título (9 mg, 0,027 mmol). LC/MS m/z 334 [M+H]+; 1H RMN (400MHz, CLOROFORM-d) δ 7,77 - 7,63 (m, 2 H), 7,51 - 7,40 (m, 4 H), 7,38 - 7,32 (m, 2 H), 5,21 - 4,84 (m, 1 H), 2,62 (s, 3 H).

EXEMPLO 31. Preparação de 6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]iso- xazolo[4,5-e]azepina-4-carboxamida (Composto 218)

.

A um frasco de fundo redondo foi adicionado 6-(4-clorofenil)-1- metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepina-4-carbonitrila (32 mg, 0,096 mmol) e HCI conc. (1 mL, 32,9 mmol). A reação foi agitada em temperatura ambiente por 1 h e durante este tempo um precipitado se formou. Esta solução foi diluída com água e o precipitado foi coletado através de filtração. Na lavagem com água o precipitado se dissolveu. As camadas foram separadas e a aquosa foi extraída com éter (3X). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em NasSCU, filtradas e concentradas. A mistu-ra bruta foi tomada em DCE (1 mL) e TFA (1 mL, 12,98 mmol). O frasco foi vedado e a reação aquecida até 80°C por 1 h antes de resfriar até temperatu-ra ambiente e agitada por mais 2 h. A solução foi concentrada e o resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar o composto título (16,2 mg, 0,046 mmol) como um sólido branco. LC/MS m/z 352 [M+H]+; 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) δ 8,07 - 7,86 (m, 2 H), 7,82 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,71 (t, J = 7,2 Hz, 1 H), 7,52 - 7,47 (m, 2 H), 7,46 - 7,36 (m, 4 H), 4,73 - 4,42 (m, 1 H), 2,50 (s, 3 H).

EXEMPLO 32. Preparação de 6-(4-fluorfenil)-1-metil-4-(trifluormetil)-4H- benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepina (Composto 238).

Etil 2-(5-((S)-1-((S)-1,1-dimetíletilsulfínamido)-2,2,2-trifluoretil)-3-me- tilisoxazol-4-il)benzoato

.

A um frasco de fundo redondo foi adicionado etil 2-(5-((E)-((S)- tert-butilsulfinilimino)metil)-3-metilisoxazol-4-il)benzoato (200 mg, 0,552 mmol), THF, e TBAT (tetrabutilamônio difluortrifenilsilicato) (357 mg, 0,662 mmol). A solução foi resfriada a -42°C em um banho de acetonitrila/gelo seco antes da adição de trimetil(trifluormetil)silano (131 μl, 0,883 mmol). A solução foi agitada a -42°C antes de aquecer até -10°C. A solução foi diluída com água e EtOAc antes de as camadas serem separadas. Uma fase aquosa foi extraída com EtOAc e a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca em Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo bruto foi purifica do através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar o composto título (182,4 mg, 0,422 mmol). LC/MS m/z 433 [M+Hf. 1-metil-4-(trifluormetil)-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-6(5H)-ona

A um frasco de fundo redondo foi adicionado etil 2-(5-((S)-1- amino-2,2,2-trifluoretil)-3-metilisoxazol-4-il)benzoato (124,2 mg, 0,378 mmol) e THF (2 mL) antes de a solução ser resfriada até -40°C. A esta solução foi adicionado cloreto isopropilmagnésio (473 μl, 0,946 mmol) e a reação aquecida até temperatura ambiente. A solução foi diluída com solução NH4CI e ’ 10 EtOAc. As camadas foram separadas e uma fase aquosa foi extraída com EtOAc. As orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar o composto título (86 mg, 0,305 mmol). LC/MS m/z 283 [M+H]+. 6-cloro-1-metil-4-(trifluormetil)-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepina

A um frasco de fundo redondo foi adicionado 1-metil-4-(trifluor- metil)-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-6(5H)-ona (86 mg, 0,305 mmol), DCM (2 mL), e PCI5 (102 mg, 0,488 mmol). A solução foi agitada em tempe- ratura ambiente por 30 min antes da adição de mais PCI5 (-0,5 eq). A solução foi agitada em temperatura ambiente por 4 h antes de verter em uma mistura de NaHCO3 aquosa saturado gelado. As camadas foram separadas e uma fase aquosa foi extraída com DCM. A fase orgânica combinada foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo bruto foi purificado atra- vés de Biotage (EtOAc/hex) para gerar o composto título (52,9 mg, 0,176 mmol). LC/MS m/z 301 [M+H]+. 6-(4-fluorfenil)-1 -metil-4-(trifluormetil)-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]aze- pina (Composto 238)

A um frasco revedável foi adicionado Pd(Ph3P)4 (20,33 mg, 0,018 mmol) e ácido 4-fluorfenilborônico (49,2 mg, 0,352 mmol) antes de o frasco ser vedado e evacuado/preenchido de volta com N2 (3x). Ao frasco foi adicionado 6-cloro-1-metil-4-(trifluormetil)-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepi- na (52,9 mg, 0,176 mmol) dissolvido em tolueno (500 μL) e Na2CO3 (2M, 176 μl, 0,352 mmol). A solução foi aquecida a 100°C por 2 h antes de resfriar até temperatura ambiente e diluir com água e EtOAc. As camadas foram separadas e uma fase aquosa foi extraída com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (EtOAc/hex) para gerar o composto título (31,2 mg, 0,087 mmol). LC/MS m/z 361 [M+Hf; 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) δD7,88 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 7,77 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, 1H), 7,52-7,41 (m, 4H), 7,29-7,21 (m, 2H), 5,38 (q, J=7,6 Hz, 1H), 2,56 (s, 3H).

EXEMPLO 33: Síntese de Compostos da Fórmula Geral:

Tert-butil 2-((6S)-2,3,9-trimetil-4-(tiazol-4-il)-6H-isoxazolo[5,4-c]tieno[2,3- e]azepin-6-il)acetato (Etapa T).

Um tubo de reação descartável foi carregado com intermediário 18 do Esquemal, em que Anel A é tiofeno (1 equivalente), tiazol (2 equivalentes), acetato de paládio (10 mol%), acetato de sódio (2 equivalentes) e N- metil pirrolidona (volume para preparar concentração 0,1 M). O tubo foi a- quecido a 90°C por 16 horas. A mistura foi diluída com água e extraída com acetato etil (3x10 mL). A fase orgânica foi lavada com salmoura, seca em sulfato de sódio, e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (sílica-gel, petróleo: etil acetato = 5:1) para gerar tert-butil 2-((6S)- 2,3,9-trimetil-4-(tiazol-4-il)-6H-isoxazolo[5,4-c]tieno[2,3-e]azepin-6-il)acetato (40 mg, 17,8% de rendimento) como um sólido quase branco.

Síntese de Composto 198

. O resultante tert-butil 2-((6S)-2,3,9-trimetil-4-(tiazol-4-il)-6H-isoxazolo[5,4-c]tieno[2,3-e]azepin-6- il)acetato é então submetido à etapa L do Esquema 1 para formar Composto 198.

Tert-butil 2-((6S)-4-isopropoxi-2,3,9-trimetil-6H-isoxazolo[5,4-c]tieno[2,3- e]azepin-6-il)acetato .

Uma mistura de tert-butil 2-((6S)-2,3,9-trimetil-4-oxo-5,6-di-hidro- 4H-isoxazolo[5,4-c]tieno[2,3-e]azepin-6-il)acetato (17 em que Anel A é tiofe- no; 100 mg, 0,276 mmol), óxido de prata (70 mg, 0,304 mmol) e 2- iodopropano (61 mg, 0,359 mmol) em tolueno (5 mL) foi aquecida a 90 °C, e agitada durante a noite. Após resfriamento até temperatura ambiente, a mistura de reação foi evaporada até secagem e o resíduo foi purificado por cromatografia rápida eluindo com éter de petróleo/acetato etil = 5:1 para gerar tert-butil 2-((6S)-4-isopropoxi-2,3,9-trimetil-6H-isoxazolo[5,4-c]tieno[2,3- e]azepin-6-il)acetato como um sólido amarelo (80 mg, 72% de rendimento). LC/MS m/z 404 [M+H]+; 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δC5,30-5,03 (m, 1H), 4,51 (t, J = 6 Hz, 1H), 3,11-3,08 (m, 2H), 2,43 (s, 3H), 2,39 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 1,46 (s, 9H), 1,30 (d, J = 6 Hz, 3H), 1,20 (d, J = 6 Hz, 3H).

Síntese de Composto 193

.

Tert-butil 2-((6S)-4-isopropoxi-2,3,9-trimetil-6H-isoxazolo[5,4- c]tieno[2,3-e]azepin-6-il)acetato é submetido à etapa L ou desproteção se-guido por Etapa S para produzir Composto 193.

A Tabela 11, abaixo, lista inúmeros compostos da fórmula:

, produzidospelas etapas indicadas. Tabela 11

EXEMPLO 34. Síntese de etil (6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]issoxa- zolo[4,5-e]azepin-4-il)carbamato (Composto 225) e seus enantiômeros (Compostos 253 e 254).

Composto 225 foi sintetizado pelo esquema estabelecido abaixo:

6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepín-4-amina.

A um frasco de fundo redondo foi adicionado hidreto de sódio (0,13g, 3,3 mmol, 60% em óleo mineral). O frasco foi então purgado com nitrogênio, DMF (10 mL) foi então adicionado e o frasco foi resfriado a 0°C. 6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepina (930 mg, 3,0 mmol) em DMF (5 mL) foi adicionado e a reação foi deixada agitar por 45 min. Trisil azida (1,40g, 4,5 mmol) em DMF (5 mL) foi adicionado e a reação foi misturada a 0°C por 1 h. A reação vertida em éter (100 mL) e lavada com salmoura (3x). A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada, concentrada para gerar 4-azido-6-(4-clorofenil)-1 -metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepi- na bruto, que foi usado diretamente na reação seguinte. LC/MS m/z 350 [M+H]+.

Um frasco de fundo redondo contendo 4-azido-6-(4-clorofenil)-1- metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepina bruto (1,05g, 3,0 mmol), foi purgado com nitrogênio e diluído com THF (30 mL) e água (6 mL). Trimetilfosfino (6,03 mL, 6,0 mmol, 1M em tolueno) foi adicionado sob gotejamento. A solução foi agitada em temperatura ambiente por 2 h. A reação foi vertida em salmoura semi-saturada (100 mL), extraída com EtOAc (3x), seca em Na2SO4, filtrada, concentrada e purificada em um sistema Biotage (eluição isocrática 65% EtOAc: 35% Hexanos) para gerar o composto título as um óleo (0,44g). LC/MS m/z 324 [M+H]+.

Etil (6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4-il)car- bamato (Compostos 225, 253 e 254).

A um frasco de fundo redondo foi adicionado 6-(4-clorofenil)-1-

metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4-amina (218 mg, 0,67 mmol). O frasco foi purgado com nitrogênio, MeCN foi adicionado (7 mL), e a solução foi resfriada a 0°C. Cloroformato de etila (78 μL, 0,81 mmol) e trietilamina (122 μL, 0,88 mmol) foram adicionados e a reação foi deixada aquecer até temperatura ambiente e agitada por 2 h. A reação foi extinta com uma mistura 1:1 de NaHCOβ aquoso saturado:salmoura e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada, concentrada e purificada em um Biotage (eluição isocrática 25% EtOAc: 75% Hexanos) para gerar o composto título como um sólido branco (120 mg).

Os enantiômeros foram separados por SFC quiral usando uma coluna 3,0 x 25,0 cm RegisPack, com 35% cosolvente (1:1 MeOH: /-PrOH), 80 mL/min a *100 bar. Tempo de retenção do pico 1 (Composto 253): 1,48 min, 100%ee. Tempo de retenção do pico 2 (Composto 254): 2,96 min, 98,1%ee.

A configuração absoluta não foi inequivocamente determinada, mas foi designada baseado nos dados de atividade na tabela 14. LC/MS m/z 396 [M+H]+.

EXEMPLO 35. 1 -(6-(4-clorofenil)-1 -metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]aze- pin-4-il)-3-etilurea (Composto 245)

.

A um frasco de fundo redondo foi adicionado 6-(4-clorofenil)-1- metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4-amina (218 mg, 0,67 mmol). O frasco foi purgado com nitrogênio, MeCN foi adicionado (7 mL), e a solução foi resfriada a 0°C. Etil isocianato (128 pL, 1,62 mmol) e trietilamina (244 pL, 1,75 mmol) foram adicionados e a reação foi deixada aquecer até temperatura ambiente e agitada por 2 h. A reação foi extinta com uma mistura 1:1 de NaHCOs sat. aq.: salmoura e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada, concentrada e purificada em um Biotage (eluição isocrática 40% EtOAc: 60% Hexanos) para gerar o composto título como um sólido branco (220 mg). LC/MS m/z 395 [M+Hf.

EXEMPLO 36. N-(6-(4-cianofenil)-1 -metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5- e]azepin-4-il)acetamida (Composto 263)

.

A um frasco de fundo redondo foi adicionado 4-(4-amino-1-metil- 4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-6-il)benzonitrila (69 mg, 0,22 mmol) e DMAP (2,7 mg, 0,022 mmol). O frasco foi purgado com nitrogênio, MeCN foi adicionado (5 mL), e a solução foi resfriada a 0°C. Anidrido acético (49,5 pL, 0,53 mmol) e trietilamina (79 pL, 0,57 mmol) foram adicionados e a reação foi deixada aquecer até temperatura ambiente e agitada por 2 h. A reação foi extinta com uma mistura 1:1 de NaHCOa sat. aq.:salmoura e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada, concentrada, e purificada em um Biotage (eluição isocrática 50% EtOAc: 50% Hexanos) para gerar o composto título como um sólido branco (64 mg). LC/MS m/z 357 [M+Hf.

EXEMPLO 37. N-(6-(4-cianofenil)-1 -metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5- e]azepin-4-il)isobutiramida (Composto 262)

.

A um frasco de fundo redondo foi adicionado 4-(4-amino-1-metil- 4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-6-il)benzonitrila (69 mg, 0,22 mmol) e DMAP (2,7 mg, 0,022 mmol). O frasco foi purgado com nitrogênio, acetonitri- la (5 mL) foi adicionado (5 mL), e a solução foi resfriada a 0°C. Cloreto Iso- butiril (55 pL, 0,53 mmol) e trietilamina (79 pL, 0,57 mmol) foram adicionados e a reação foi deixada aquecer até temperatura ambiente e agitada por 2 h. A reação foi extinta com uma mistura de 1:1 NaHCOa sat. aq.: salmoura e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada, concentrada, e purificada em um Biotage (eluição isocrática 30% EtOAc: 70% Hexanos) para gerar o composto título como um sólido branco (66 mg). LC/MS m/z 385 [M+H]+.

Dados para cada um dos compostos acima contendo a fórmu la:

são estabelecidos na Tabela 12, abaixo. Tabela 12

EXEMPLO 38. 6-(4-Clorofenil)-1 -metil-7-fenoxi-4H-isoxazolo[5,4-c]piri- do[4,3-e]azepina (Composto 229)

.

Um procedimento similar a 6-(4-clorofenil)-7-metoxi-1-metil-4H- isoxazolo[5,4-c]pirido[4,3-e]azepina (Composto 170) foi seguido, exceto que fenol foi usada no lugar de metanol. LC/MS m/z 402 [M+H]+; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,33 (d, J = 5,40 Hz, 1H), 7,56 (d, J = 5,40 Hz, 1H), 7,41 (s, 4H), 7,31 (tt, J = 2,20, 8,00 Hz, 2H), 7,14 (tt, J = 1,40, 7,50 Hz, 1H), 6,79 (d, J = 8,00 Hz, 2H), 5,31 (d, J = 13,3 Hz, 1H), 4,25 (d, J = 13,29 Hz, 1H), 2,58 (s, 3H).

EXEMPLO 39. Síntese de 5-(4-Clorofenil)-2-metoxi-10-metil-7H-isoxazo- lo[5,4-c]pirido[2,3-e]azepina (Composto 219) e Compostos relacionados.

Metil 2-(5-(hidroximetil)-3-metilisoxazol-4-il)-6-metoxinicotinato

Procedimentos gerais estabelecidos no Esquema 1 foram usados para preparar este intermediário do comercialmente disponível metil 2- cloro-6-metoxinicotinato. LC/MS m/z 279 [M+H]+. 2-Metoxi-10-metil-6,7-di-hidro-5H-isoxazolo[5,4-c]pirido[2,3-e]azepin-5- ona

.

Uma sequência de reação similar à usada para preparar Composto 191 foi seguida, exceto que metil 2-(5-(hidroximetil)-3-metilisoxazol-4- il)-6-metoxinicotinato foi usado como material de partida no lugar de (4- clorofenil)(2-(3-(hidroximetil)-5-metilisoxazol-4-il)fenil)metanona e metanol foi usado como o co-solvente para a conversão de azida ao lactam. LC/MS m/z 246 [M+H]+. 5’(4-Clorofenil)-2-metoxi-10-metil-7H-isoxazolo[5,4-c]pirído[2,3-e]aze- pina (Composto 219)

.

Procedimentos gerais estabelecidos no Esquema 1 foram usados para preparar o composto título de 2-metoxi-10-metil-6,7-di-hidro-5H- isoxazolo[5,4-c]pirido[2,3-e]azepin-5-ona. Mais precisamente, o protocolo Etapa H (reação de acoplamento de Suzuki) foi seguido. LC/MS m/z 340 [M+H]+; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 57,63 (d, J = 8,70 Hz, 1H), 7,45 (td, J = 2,30, 8,80 Hz, 2H), 7,37 (td, J = 2,30, 8,80 Hz, 2H), 6,81 (d, J = 8,70 Hz, 1H), 4,71 (br. s, 2H), 4,02 (s, 3H), 2,62 (s, 3H). 2-Cloro-5-(4-clorofenil)-10-metil-7H-isoxazolo[5,4-c]pirído[2,3-e]azepina (Composto 227)

À 5-(4-clorofenil)-2-metoxi-10-metil-7H-isoxazolo[5,4-c]pirido[2,3- e]azepina (0,050 g, 0,147 mmol) foram adicionados fosforil cloreto (1 mL, 11 mmol) e DMF (0,1 mL) em temperatura ambiente. A reação foi aquecida a 140°C por 4 h usando radiação micro-ondas antes de 2M aq. NaOH e 2M aq. Na2CO3 serem adicionados para extinguir o excesso de reagente. O produto desejado foi extraído usando EtOAc (repetidos 4 vezes). As camadas orgânicas foram combinadas, secas em Na2SC>4 e concentradas até secagem. Uma fração do resíduo foi purificada por cromatografia de fase reversa para gerar o produto título como um sólido branco. LC/MS m/z 344 [M+Hf; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,80 (d, J = 8,52 Hz, 1H), 7,49 (d, J = 8,31 Hz, 1H), 7,46 (td, J = 2,10, 8,70 Hz, 2H), 7,41 (td, J = 2,10, 8,70 Hz, 2H), 4,80 (s, 2H), 2,56 (s, 3H). 5-(4-Clorofenil)-N,10-dimetil-7H-isoxazolo[5,4-c]pirido[2,3-e]azepin-2- amina (Composto 221)

.

Um procedimento similar a 6-(4-clorofenil)-/V,1-dimetil-4H-isoxa- zolo[5,4-c]pirido[4,3-e]azepin-7-amina foi seguido, exceto que 2-cloro-5-(4- clorofenil)-10-metil-7H-isoxazolo[5,4-c]pirido[2,3-e]azepina foi usado como material de partida no lugar de 6-(4-clorofenil)-7-fluor-1-metil-4H-isoxazo- lo[4,5-e]pindo[3,4-c]azepina. LC/MS m/z 339 [M+Hf; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 07,42 (td, J = 2,30, 8,70 Hz, 2H), 7,39 - 7,35 (m, 3H), 7,22 (d, J = 8,72 Hz, 1H), 6,41 (d, J = 8,93 Hz, 1H), 4,63 (br. s, 2H), 2,91 (d, J = 4,57 Hz, 3H), 2,58 (s, 3H). 5-(4-Clorofenil)-10-metil- 7H-isoxazolo[5,4-c]pirído[2,3-e]azepin-2-amina (Composto 228)

.

A uma solução de 2-cloro-5-(4-clorofenil)-10-metil-7H-isoxazo- lo[5,4-c]pirido[2,3-e]azepina (0,050 g, 0,145 mmol) em EtOH (1 mL) foi adi cionado hidróxido de amónio concentrado (4,00 mL) e cloreto amónio (o suficiente para saturar a reação) em temperatura ambiente. A reação foi aquecida a 100°C durante a noite antes de o produto desejado ser extraído usando CH2CI2 (repetidas 4 vezes). As camadas orgânicas foram combinadas, secas em Na2SO4 e concentradas até secagem. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida (hexano/EtOAc 6:4 a 0:10) para gerar 0 composto título como um sólido bronze (0,008 g). LC/MS m/z 325 [M+H]+; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,43 (td, J = 2,10, 8,70 Hz, 2H), 7,37 (td, J = 2,10, 8,70 Hz, 2H), 7,24 (d, J= 8,72 Hz, 1H), 6,77 (br. s, 2H), 6,38 (d, J= 8,72 Hz, 1H), 4,61 (s, 2H), 2,56 (s, 3H). 5-(4-Clorofenil)-10-metil-1H-isoxazolo[5,4-c]pirido[2,3-e]azepin-2(7H)- ona (Composto 220)

.

A uma solução de 5-(4-clorofenil)-2-metoxi-10-metil-7H-isoxa- zolo[5,4-c]pirido[2,3-e]azepina (0,050 g, 0,147 mmol) em AcOH (1 mL) foi adicionado ácido 48% hidrobromico concentrado (1 mL) em temperatura ambiente. A reação foi aquecida a 100°C por 2 h antes desta ser diluída com água, e o produto desejado foi extraído com uma mistura de CH2Cl2/trifluore- tanol (19:1) (repetidas 4 vezes). As camadas orgânicas foram combinadas, secas em Na2SO4 e concentradas até secagem. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida (hexano/EtOAc 7:3 a 0:10) para gerar o composto título como um sólido branco (0,019 g). LC/MS m/z 326 [M+H]+; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ11,79 (br. s, 1H), 7,51 - 7,41 (m, 4H), 7,36 (br. s, 1H), 6,41 (br. s, 1H), 4,53 (br. s, 2H), 2,55 (s, 3H).

EXEMPLO 40. Síntese de 8-Cloro-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-isoxazo- lo[5,4-c]pirido[3,2-e]azepina (Composto 240) e Compostos relacionados 3-Bromo-6-cloro-N-metoxi-N-metilpicolinamida

.

A uma solução de ácido 3-bromo-6-cloropicolinic (4,516 g, 19,10 mmol), /V,O-dimetilhidroxilamina cloridrato (3,73 g, 38,2 mmol), piridina (4,63 mL, 57,3 mmol) em CH2CI2 (40 mL) a 0°C foi adicionado -/V-((etilimino)me- tileno)-A/3,A/3-dimetilpropano-1,3-diamina cloridrato (4,39 g, 22,92 mmol). A- pós 1 h a 0°C, uma solução aquosa saturada de cloreto de amónio foi adi-cionada e o produto foi extraído com MTBE/EtOAc (4:1) (repetidas 4 vezes).

As camadas orgânicas foram combinadas, secas em Na2SC>4 e concentra-das até secagem. O produto foi conduzido sem purificação na etapa seguin-te. LC/MS m/z 281 [M+H]+. (3-Bromo-6-cloropiridin-2-il)(4-clorofenil)metanona

.

A uma solução de 3-bromo-6-cloro-N-metoxi-N-metilpicolinamida (5,34 g, 19,1 mmol) em THF anidro (38 mL) a 0°C foi lentamente adicionada uma solução de (4-clorofenil)magnésio brometo (1M em Et2O) (76 mL, 76 mmol). Após 3 h a 0°C, uma solução aquosa saturada de cloreto de amónio foi adicionada e o produto foi extraído com MTBE (repetido 4 vezes). As ca-madas orgânicas foram combinadas, secas em Na2SO4 e concentradas até secagem. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida (hexano/EtOAc 10:0 to 8:2) para gerar o composto título como um sólido branco (5,98 g). LC/MS m/z 332 [M+H]+. 8-Cloro-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[3,2-e]azepina

(Composto 240).

Uma sequência de reações similar à usada para preparar 6-(4- clorofenil)-7-fluor-1-metil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[4,3-e]azepin (Composto 169) foi seguida, exceto que (3-bromo-6-cloropiridin-2-il)(4-clorofenil) meta-nona como material de partida no lugar de intermediário (4-clorofenil)(2-fluor- 4-iodopiridin-3-il)metanona. Para a reação de acoplamento de Suzuki, um sal de trifluorborato foi usado no lugar de éster borônico. LC/MS m/z 344 [M+H]+; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 08,18 (d, J = 8,72 Hz, 1H), 7,40 (s, 4H), 7,17 (d, J = 8,72 Hz, 1H), 4,70 (br. s, 2H), 2,50 (s, 3H). 6-(4-Clorofenil)-8-metoxi-1-metil-4H-isoxazolo[5,4-c]piπdo[3,2-e]azepina (Composto 242)

.

Um procedimento similar a 6-(4-Clorofenil)-7-metoxi-1-metil-4H- isoxazolo[5,4-c]pirido[4,3-e]azepina (Composto 170) foi seguido, exceto que 8-cloro-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[3,2-e]azepina (Com-posto 240) foi usado como material de partida no lugar de 6-(4-clorofenil)-7- fluor-1-metil-4H-isoxazolo[4,5-e]pirido[3,4-c]azepina. LC/MS m/z 340 [M+H]+; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 08,31 (d, J = 8,31 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 8,31 Hz, 1H), 7,43 (td, J = 2,30, 8,70 Hz, 2H), 7,35 (td, J = 2,30, 8,70 Hz, 2H), 4,79 (br. s, 2H), 3,34 (s, 3H), 2,53 (s, 3H). 6-(4-Clorofenil)-N,1-dimetil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[3,2-e]azepin-8- amina (Composto 241)

.

Um procedimento similar a 6-(4-clorofenil)-N,1-dimetil-4H-isoxa- zolo[5,4-c]pirido[4,3-e]azepin-7-amina (Composto 173) foi seguido, exceto que 8-cloro-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[3,2-e]azepina (Composto 240) foi usado como material de partida no lugar de 6-(4- clorofenil)-7-fluor-1 -metil-4H-isoxazolo[4,5-e]pirido[3,4-c]azepina. LC/MS m/z 339 [M+Hf ; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 07,83 (d, J = 8,72 Hz, 1H), 7,41 (td, J = 2,10, 8,50 Hz, 2H), 7,36 (td, J = 2,10, 8,50 Hz, 2H), 6,96 (q, J = 4,50 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,93 Hz, 1H), 4,61 (br. s, 2H), 2,62 (d, J = 4,78 Hz, 3H), 2,46 (s, 3H). 6-(4-Clorofenil)-1-metil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirído[3,2-e]azepin-8-amina (Composto 257)

.

Um procedimento similar a 5-(4-clorofenil)-10-metil-7H-isoxazo- lo[5,4-c]pirido[2,3-e]azepin-2-amina (Composto 228) foi seguido, exceto que 8-cloro-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[3,2-e]azepina (Com-posto 240) foi usado como material de partida no lugar de 2-cloro-5-(4- clorofenil)-10-metil-7H-isoxazolo[5,4-c]pirido[2,3-e]azepina. LC/MS m/z 325 [M+Hf; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,83 (d, J = 8,72 Hz, 1H), 7,38 (td, J = 2,10, 8,70 Hz, 2H), 7,33 (td, J = 1,90, 8,70 Hz, 2H), 6,76 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,39 (s, 2H), 4,60 (br. s, 2H), 2,46 (s, 3H). 6-(4-Clorofenil)-1-metil-8-(pirrolidin-1-il)-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[3,2- e]azepina (Composto 247)

.

Um procedimento similar a 6-(4-clorofenil)-N,1-dimetil-4H-isoxa- zolo[5,4-c]pirido[3,2-e]azepin-8-amina (Composto 241) foi seguido, exceto que pirrolidina foi usada no lugar de metilamina (33% em EtOH). LC/MS m/z 379 [M+H]+; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ7,92 (d, J = 8,93 Hz, 1H), 7,43 (td, J = 2,20, 8,70 Hz, 2H), 7,36 (td, J = 2,20, 8,70 Hz, 2H), 6,79 (d, J = 8,93 Hz, 1H), 4,62 (br. s, 2H), 3,30 - 3,25 (m, 4H), 2,47 (s, 3H), 1,96 - 1,83 (m, 4H). 6-(4-Clorofenil)-1-metil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[3,2-e]azepin-8(7H)-ona (Composto 243)

.

Um procedimento similar a 5-(4-clorofenil)-10-metil-1H-isoxazo- lo[5,4-c]pirido[2,3-e]azepin-2(7H)-ona foi seguido, exceto que 6-(4-clorofenil)- 8-metoxi-1-metil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[3,2-e]azepina foi usado como ma-terial de partida no lugar de 5-(4-clorofenil)-2-metoxi-10-metil-7H-isoxazo- lo[5,4-c]pirido[2,3-e]azepina. LC/MS m/z 326 [M+Hf; 1H RMN (400 MHz, DMSO-dβ) δ11,27 (br. s, 1H), 8,01 (br. s, 1H), 7,50 - 7,31 (m, 4H), 6,85 (br. s, 1H), 4,66 (br. s, 2H), 2,48 (s, 3H). 6-(4-Clorofenil)-1,7-dimetil-4H-isoxazolo[5,4-c]piπdo[3,2-e]azepin-8(7H)- ona (Composto 246)

.

Um procedimento similar a 6-(4-clorofenil)-1,8-dimetil-4H-isoxa- zolo[5,4-c]pirido[4,3-e]azepin-7(8H)-ona foi seguido, exceto que 6-(4-clorofe- nil)-1-metil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[3,2-e]azepin-8(7H)-ona foi usado como material de partida no lugar de 6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-isoxazolo[5,4- c]pirido[4,3-e]azepin-7(8H)-ona. LC/MS m/z 340 [M+H]+; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) Õ7,98 (d, J = 9,56 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 8,93 Hz, 2H), 7,35 (d, J = 8,52 Hz, 2H), 6,82 (d, J= 9,35 Hz, 1H), 5,32 (d, J= 12,46 Hz, 1H), 4,15 (d, J = 12,7 Hz, 1H), 2,95 (s, 3H), 2,50 (s, 3H). 8-Cloro~6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirído[3,4-e]azepina (Composto 256)

.

Uma sequência similar a 8-cloro-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-iso- xazolo[5,4-c]pirido[3,2-e]azepina (Composto 240) foi seguida, exceto que ácido 5-bromo-2-cloroisonicotinico foi usado como material de partida co-mercialmente disponível no lugar de ácido 3-bromo-6-cloropicolinico. LC/MS m/z 344 [M+H]+; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,93 (d, J = 0,80 Hz, 1H), 7,49 (td, J = 2,10, 8,70 Hz, 2H), 7,46 - 7,42 (m, 3H), 4,77 (br. s, 2H), 2,57 (s, 3H). 6-(4-Clorofenil)-N,1-dimetil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[3,4-e]azepin-8- amina (Composto 258)

.

Um procedimento similar a 6-(4-clorofenil)-N,1-dimetil-4H-iso- xazolo[5,4-c]pirido[4,3-e]azepin-7-amina foi seguido, exceto que 8-cloro-6-(4- clorofenil)-1-metil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[3,4-e]azepina foi usado como material de partida no lugar de 6-(4-clorofenil)-7-fluor-1-metil-4H-isoxa- zolo[4,5-e]pirido[3,4-c]azepina. LC/MS m/z 339 [M+H]+; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,46 (s, 1H), 7,49 - 7,41 (m, 4H), 6,84 (q, J = 5,00 Hz, 1H), 6,33 (s, 1H), 4,67 (br. s, 2H), 2,79 (d, J = 4,78 Hz, 3H), 2,48 (s, 3H). 6-(4-Clorofenil)-1-metil-8-(pirrolidin-1-il)-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[3,4- e]azepina (Composto 255)

.

Um procedimento similar a 6-(4-clorofenil)-N,1-dimetil-4H-isoxa- zolo[5,4-c]pirido[3,4-e]azepin-8-amina foi seguido, exceto que pirrolidina foi usada no lugar de metilamina (33% em EtOH). LC/MS m/z 379 [M+Hf; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ8,56 (d, J = 0,62 Hz, 1H), 7,48 (ddd, J = 1,70, 2,50, 8,20 Hz, 2H), 7,44 (ddd, J = 1,70, 2,50, 8,20 Hz, 2H), 6,23 (d, J = 0,62 Hz, 1H), 4,66 (br. s, 2H), 3,36 - 3,32 (m, 4H), 2,49 (s, 3H), 1,98 - 1,83 (m, 4H). 6-(4-Clorofenil)-1-metil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[3,4-e]azepin-8(9H)-ona (Composto 266)

.

Um procedimento similar a 5-(4-clorofenil)-10-metil-1H-isoxa- zolo[5,4-c]pirido[2,3-e]azepin-2(7H)-ona foi seguido, exceto que 6-(4-clorofe- nil)-8-metoxi-1-metil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[3,4-e]azepina (preparado de 8- cloro-6-(4-clorofenil)-1 -metil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[3,4-e]azepina em um modo similar a 6-(4-clorofenil)-7-metoxi-1-metil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[4,3- e]azepina) foi usado como material de partida no lugar de 5-(4-clorofenil)-2- metoxi-10-metil-7H-isoxazolo[5,4-c]pirido[2,3-e]azepina. LC/MS m/z 326 [M+Hf; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ12,45 (br. s, 1H), 7,92 (br. s, 1H), 7,48 (s, 4H), 6,25 (br. s, 1H), 4,78 (br. s, 2H), 2,43 (s, 3H). 2-((4S)-7-Amino-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[4,3- e]azepin-4-il)acetamida (Composto 222)

.

Um procedimento similar a 5-(4-clorofenil)-10-metil-7H-isoxazo- lo[5,4-c]pirido[2,3-e]azepin-2-amina foi seguido, exceto que uma solução de 2-((4S)-6-(4-clorofenil)-7-fluor-1-metil-4H-isoxazolo[5,4-c]pirido[4,3-e]azepin- 4-il)acetamida em DMSO foi usada no lugar de uma solução de 2-cloro-5-(4- clorofenil)-10-metil-7H-isoxazolo[5,4-c]pirido[2,3-e]azepina em EtOH. LC/MS m/z 382 [M+H]+; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,21 (d, J = 5,19 Hz, 1H), 7,67 (br. s, 1H), 7,38 (td, J = 2,30, 8,70 Hz, 2H), 7,33 (td, J = 2,30, 8,70 Hz, 2H), 7,04 (br. s, 1H), 6,95 (d, J = 5,19 Hz, 1H), 5,89 (br. s, 2H), 4,40 (dd, J = 6,54, 8,00 Hz, 1H), 3,27 (dd, J = 8,00 Hz, 15,60, 1H), 3,11 (dd, J = 6,65, 15,58 Hz, 1H), 2,49 (s, 3H).

EXEMPLO 41. Síntese de Compostos 232 e 244. Esquema 10 descreve a síntese dos compostos títulos. Esquema 10

Metil 2-((4S)-1-metil-6-oxo-5,6-di-hidro-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]aze- pin-4-il)acetato

A um frasco revedável contendo uma solução de tert-butil 2- ((4S)-1-metil-6-oxo-5,6-di-hidro-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4-il)aceta- to (1,04 g, 3,17 mmol) em MeOH (10 mL) foi adicionado ácido clorídrico (0,792 mL, 3,17 mmol, 4 M em 1,4-dioxano). Após adição completa de rea- gentes a mistura de reação foi deixada envelhecer até consumo completo do ácido carboxílico ser detectado por LC-MS. Após ~24 h, a mistura de reação foi resfriada até temperatura ambiente e concentrada em vácuo para gerar sólidos amarelos. Os sólidos foram purificados em sistema Biotage (gradiente de eluição 5% EtOAc: 1% /-PrOH: 94% Hexanos a 80% EtOAc: 1% /- PrOH: 19% Hexanos) para gerar o produto título metil 2-((4S)-1-metil-6-oxo- 5,6-di-hidro-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4-il)acetato (0,500 g, 1,747 mmol, 55,1% de rendimento) como sólidos cristalinos brancos. LC/MS m/z 287 [M + H]+.

Metil 2-((4S)-6-cloro-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4-il)ace- tato

A uma solução de metil 2-((4S)-1-metil-6-oxo-5,6-di-hidro-4H- benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4-il)acetato (0,4754 g, 1,661 mmol) em CH2CI2 (4 mL) foi adicionado pentacloreto fosforoso (0,432 g, 2,075 mmol). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 1 h. À mistura foi adicionado 10% Na2CO3 aquoso e agitada vigorosamente por 15 min. A camada aquosa foi extraída com CH2CI2 (3x). Os extratos orgânicos combinados foram secos em Na2SO4 e concentrados para gerar espuma amarela após secagem. A espuma foi filtrada por um tampão de sílica e eluída com 20% EtOAc: 80% Hexanos. O produto metil 2-((4S)-6-cloro-1-metil-4H-ben- zo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4-il)acetato (0,4701 g, 1,543 mmol, 93% de rendimento) foi obtido como uma espuma branca. LC/MS m/z 305 [M + H]+.

Metil 2-((4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin- 4-il)acetato

.

A um frasco de fundo redondo de 100 mL contendo metil 2- ((4S)-6-cloro-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4-il)acetato (0,4701 g, 1,543 mmol) foi adicionado Pd(PPh3)4 (0,095 g, 0,082 mmol) e ácido 4- clorofenilborônico (0,393 g, 2,51 mmol). O frasco foi evacuado e purgado com N2 (g) (3x), seguido por adição de tolueno (10 mL) e outro ciclo de evacuação e purgação com N2 (g). À mistura heterogênea foi adicionado carbonato de sódio aquoso (2,4 mL, 4,80 mmol, 2 M) em uma porção e o frasco foi aquecido a 80°C. Após ~30 min, a mistura de reação foi resfriada até temperatura ambiente e diluída com água. A camada aquosa foi extraída com E- tOAc (3x), seca em Na2SO4, e concentrada para gerar um óleo laranja escuro. O óleo foi purificado em sistema Biotage (gradiente de eluição 5% EtOAc: 95% Hexanos a 35% EtOAc: 65% Hexanos, então isocrático 35% EtOAc: 65% Hexanos). O produto metil 2-((4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-ben- zo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4-il)acetato (0,444 g, 1,166 mmol, 76% de rendimento) foi obtido como espuma amarela após secagem. LC/MS m/z 381 [M + H]+. 3-((4S)-6-(4-Clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4-il)- 1,1,1-trífluorpropano-2,2-diol

.

Um frasco contendo metil 2-((4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-ben- zo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4-il)acetato (0,110 g, 0,289 mmol) e CsF (0,028 g, 0,184 mmol, seco em vácuo a 140°C por 24 h) foi evacuado e purgado com N2 (g), seguido por adição de DME (1 mL). A mistura heterogênea foi resfriada a 0°C e trimetil(trifluormetil)silano (0,085 mL, 0,578 mmol) foi adicionado sob gotejamento. A mistura de reação foi cuidadosamente monitorada por LC-MS e TLC para consumo completo de éster metil de partida. Após 30 min, 1 N HCI aquoso (1 mL) foi adicionado à mistura. Evolução vigorosa de gás foi observada! A mistura bifásica foi aquecida até temperatura ambiente e diluída com MTBE. A camada aquosa foi extraída com MTBE (2x), os extratos orgânicos combinados foram lavados com água, e secos em Na2SO4, e concentrados para gerar (4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-4-(3,3,3- trifluor-2-metoxi-2-((trimetilsilil)oxi)propil)-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepi- naan como um óleo laranja-amarelo. LC/MS m/z 523 [M + H]+.

A uma solução resfriada (0°C) de (4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-4- (3,3,3-trifluor-2-metoxi-2-((trimetilsilil)oxi)propil)-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5- e]azepina bruto em MeOH (3 mL) foi adicionado CsF (0,048 g, 0,316 mmol). A reação foi mantida a 0°C por 30-60 min ou até conversão completa de material de partida à cetona/di-hidrato desejado ser observada. A mistura de reação foi diluída com MTBE e 1 N HCI aquoso foi adicionado até um corte de fase ser observado. Uma fase aquosa foi extraída com MTBE (3x), as fases orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas em Na2SO4, e concentradas para gerar o produto desejado como um óleo laranja. O produto 3-((4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4-il)- 1,1,1-trifluorpropano-2,2-diol (0,121 g, 0,277 mmol, 96% de rendimento) foi usado sem outra purificação. LC/MS m/z 437 [M + Hf.

Mistura de (2S)-3-((4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5- e]azepin-4-il)-1,1,1-trifluorpropan-2-amina e (2R)-3-((4S)-6-(4-clorofenil)- 1-metíl-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4-il)-1,1,1-trifíuorpropan-2- amina (Composto 232)

.

A um frasco revedável contendo uma solução de 3-((4S)-6-(4- clorofen i I)-1 -metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4-il)-1,1,1 -trifluorpropa- no-2,2-diol (110 mg, 0,252 mmol) em tolueno (1 mL) foi adicionado ácido p- toluenossulfônico mono-hidratado (25 mg, 0,131 mmol) e benzilamina (50 μl, 0,458 mmol). O frasco foi vedado e aquecida até 110°C por 1-2 h ou até análise de TLC (1% TEA: 30% EtOAc: 69%Hex) indicar conversão completa para imina. A mistura de reação foi subsequentemente resfriada até temperatura ambiente, trietilamina (110 μl, 0,789 mmol) foi introduzida, e a reação foi novamente aquecida até 110°C por 24 h. Após 24 h, a mistura de reação foi resfriada até temperatura ambiente. A solução foi diluída com MTBE e água. A camada aquosa foi extraída com MTBE (3x) e os extratos orgânicos combinados foram lavados com mais água (1x). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas para gerar um óleo laranja. Ao óleo foi subsequentemente introduzido CSA (37,5 mg, 0,161 mmol) e MeOH (5 mL) e a mistura foi agitada por 3 h. A hidrólise da imina foi seguido por LC-MS e TLC. Após hidrólise completa (~3 h), a mistura de reação foi concentrada para gerar um óleo amarelo. O óleo foi purificado em sistema Biotage (gradiente de eluição 5% EtOAc: 95% Hexanos a 40% EtOAc: 60% Hexanos) para gerar uma mistura inseparável 1:1 de produtos títulos (2S)-3-((4S)-6-(4- clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepín-4-il)-1,1,1-trifluorpro- pan-2-amina e (2R)-3-((4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5- e]azepin-4-il)-1,1,1-trifluorpropan-2-amina (43 mg, 0,102 mmol, 40,7% de rendimento) como sólidos brancos. LC/MS m/z 420 [M + H]+; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,86 - 7,80 (m, 2H), 7,75 - 7,69 (m, 2H), 7,44 (s, 12H), 4,34 - 4,18 (m, 2H), 3,82 - 3,63 (m, 1H), 3,58 - 3,41 (m, 1H), 2,53 (s, 3H), 2,52 (s, 3H), 2,15 - 2,08 (m, 2H), 2,06 - 2,00 (m, 2H).

Mistura de N-((2S)-3-((4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]isoxazo- lo[4,5-e]azepin-4-il)-1,1,1-trifluorpropan-2-il)acetamida e N-((2R)-3-((4S)- 6-(4-clorofenil)-1 -metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4-il)-1,1,1- trifluorpropan-2-il)acetamida (Composto 244)

.

A uma solução de 3-((4S)-6-(4-clorofenil)-1-metil-4H-benzo[c]iso- xazolo[4,5-e]azepin-4-il)-1,1,1-trifluorpropan-2-amina (11 mg, 0,026 mmol) em CH2CI2 (0,5 mL) foi adicionado DMAP (3,20 mg, 0,026 mmol), trietilamina (11 μl, 0,079 mmol), e anidrido acético (2,72 μl, 0,029 mmol). A mistura de reação foi agitada até o consumo completo de amina e formação de produto como detectado por LC-MS e TLC. A mistura de reação foi concentrada em vácuo para gerar uma pasta espessa. A pasta foi purificada em Biotage (5% EtOAc: Hexanos a 40% EtOAc: Hexanos) O produto N-(3-((4S)-6-(4-cloro- fen i I)-1 -metil-4H-benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepin-4-il)-1,1,1 -trifluorpropan-2- il)acetamida (10 mg, 0,022 mmol, 83% de rendimento) foi isolado como sólidos brancos. LC/MS m/z 462 [M + Hf; 1H RMN (400 MHz, Acetona-d6) δ 7,87 - 7,80 (m, 2H), 7,75 - 7,68 (m, 2H), 7,51 - 7,35 (m, 12H), 5,46 (br. s, 1H), 5,16 - 5,00 (m, 1H), 4,16 (br. s, 1H), 4,05 (br. s, 1H), 3,01 - 2,83 (m, 2H), 2,68 (ddd, J = 7,02, 9,80, 14,19 Hz, 1H), 2,55 (s, 3H), 2,54 (s, 3H), 2,51 - 2,39 (m, 1H), 1,90 (s, 3H), 1,83 (s, 3H).

EXEMPLO 42. Síntese de Compostos 250 e 251. Esquema 11 descreve as etapas envolvidas na síntese de compostos títulos. Esquema 11

Etil 2-(3-metilisoxazol-5-il)acetato

.

A uma solução de ácido 2-(3-metilisoxazol-5-il)acético (7,28 g, 51,6 mmol) em EtOH (200 mL, 3425 mmol) foi adicionado H2SO4 concentrado (0,30 mL, 5,63 mmol) em temperatura ambiente. Após 48 h, a mistura de reação foi concentrada em vácuo para gerar um óleo marrom escuro. O éster bruto foi filtrado por um tampão de sílica (50 g) e o produto foi eluído com 40% Et2O: 60% Hexanos (400 mL). O filtrado foi subsequentemente concentrado para gerar o produto etil 2-(3-metilisoxazol-5-il)acetato (8,50 g, 50,2 mmol, 97% de rendimento) como um óleo claro. LC/MS m/z 170 [M + H]+.

Etil 1-(3’metilisoxazol-5-il)ciclopropanocarboxilato

.

A uma solução de etil 2-(3-metilisoxazol-5-il)acetato (8,22 g, 48,6 mmol) em tolueno (85 mL) foi sequencialmente adicionado n-tetrabutilamô- nio brometo (1,67 g, 5,18 mmol), 1,2-dibromoetano (7,0 mL, 81 mmol), e NaOH (30 mL, 582 mmol, -19,4 M). A mistura de reação foi vigorosamente agitada em temperatura ambiente. Após 1 h, a mistura de reação foi resfria- da até 0°C e diluída com água (50 mL). Uma fase aquosa foi extraída com MTBE (3x). As fases orgânicas combinadas foram lavadas 1 N HCI, água (2x), secas em Na2SO4, e concentradas para gerar o produto etil 1-(3- metilisoxazol-5-il)ciclopropanocarboxilato (9,49 g, 48,6 mmol, 100% de rendimento) como um óleo claro. LC/MS m/z 196 [M + H]+.

Etil 1-(4-bromo-3-metilisoxazol-5-il)ciclopropanocarboxilato

.

A uma solução de etil 1-(3-metilisoxazol-5-il)ciclopropanocar- boxilato (9,49 g, 48,6 mmol) em DMF anidro (50 mL) foi adicionado N- bromosuccinimida (10,31 g, 57,9 mmol). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 24 h. À mistura laranja foi adicionado água e a camada aquosa foi extraída com MTBE (3x). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com 10% tiosulfato de sódio aquoso, água (2x) e secas para gerar o produto etil 1-(4-bromo-3-metilisoxazol-5-il)ciclopropanocarboxi- lato (12,5 g, 45,6 mmol, 94% de rendimento) como um óleo amarelo claro. O produto foi usado diretamente na reação subsequente sem outra purificação. LC/MS m/z 274 [M + H]+.

Ácido 1-(4-Bromo-3-metilisoxazol-5-il)ciclopropanocarboxílico

.

A uma solução de etil 1-(4-bromo-3-metilisoxazol-5-il)ciclopropa- nocarboxilato (11,8 g, 43,0 mmol) em THF (60 mL) foi adicionado NaOH aquoso (86 mL, 86 mmol, 1 M). A mistura de reação bifásica marrom escura foi vigorosamente agitada e aquecida até 45°C até consumo de SM (3-4 h) ser detectado por análise LC-MS e TLC. Após 4 h, a mistura homogênea foi resfriada até temperatura ambiente e diluída com hexanos. A fase orgânica foi separada e uma fase aquosa (pH —14) foi acidificada com 1 N HCI aquoso (pH 1) (~100 mL). O produto cristaliza na acidificação de uma camada aquosa. Após vigorosamente agitada por 30 min, os sólidos foram filtrados, lavados com água fria (0°C) (3 x 50 mL), e secos para gerar cristais brancos. O produto ácido 1-(4-bromo-3-metilisoxazol-5-il)ciclopropanocarboxílico (10,0 g, 40,6 mmol, 94% de rendimento) foi isolado como cristais brancos. LC/MS m/z 246 [M + H]+.

Tert-Butil (1-(4-bromo-3-metilisoxazol-5-il)ciclopropil)carbamato

A uma suspensão de ácido 1-(4-bromo-3-metilisoxazol-5-il)ciclo- propanocarboxílico (1,60 g, 6,50 mmol) e pulverizados em peneiras molecu- 5 lares de 4 Â (pré-secos-0,767 g, 48% em peso) em tolueno (15 mL) foi sequencialmente adicionado N, N-diisopropiletilamina (1,50 mL, 8,59 mmol), difenil fosforazidato (1,576 mL, 7,05 mmol), e tert-butanol (16,80 mL, 176 mmol). O vaso de reação foi ajustado com um condensador de refluxo e a mistura foi aquecida a 100°C por 1 h. Após 1 h, a mistura de reação foi res- 10 friada até temperatura ambiente e filtrada por um tampão de Celite. A torta de filtro foi lavada com EtOAc (3x), e o filtrado foi concentrado para gerar um óleo marrom. O óleo foi purificado em sistema Biotage (5% EtOAc: 95% Hexanos a 20% EtOAc: 80% Hexanos). O produto tert-butil 1-(4-bromo-3- metilisoxazol-5-il)ciclopropilcarbamato (1,55 g, 4,89 mmol, 75% de rendimen- to) foi isolado como cristais brancos após concentração. LC/MS m/z 317 [M + H]+.

Tert-Butil (1-(3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoxa- zol-5-il)ciclopropil)carbamato

.

A um frasco de fundo redondo de 50 mL contendo tert-butil 1-(420 bromo-3-metilisoxazol-5-il)ciclopropilcarbamato (0,219 g, 0,621 mmol) foi adicionado diclorobis(acetonitrila)paládio(ll) (0,0025 g, 9,64 μmol), diciclo- hexil(2',6'-dimetoxibifenil-2-il)fosfino (0,0134 g, 0,033 mmol), seguido por 1,4- dioxano anidro (0,40 mL). O vaso de reação foi evacuado e purgado com N2 (g) (3x). Ao frasco foi adicionado 4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano 25 (0,153 mL, 1,056 mmol) e trietilamina (0,294 mL, 2,113 mmol) sequencial mente. O vaso de reação foi evacuado e purgado com N2 (g) novamente, então aquecido até 100°C. A mistura de reação se tornou heterogênea e foi julgado completo dentro de 1 h por LC-MS. A mistura heterogênea foi resfriada até temperatura ambiente, diluída com EtOAc e a mistura foi filtrada por 30 um tampão de Celite. A torta de filtro foi rinsada com EtOAc (3x) e o filtrado foi concentrado para gerar um óleo amarelo, que cristalizou no repouso em vácuo. O produto tert-butil 1-(3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan- 2-il)isoxazol-5-il)ciclopropilcarbamato (0,226 g, 0,620 mmol, 100% de rendimento) foi usado sem outra purificação. LC/MS m/z 365 [M + H]+.

Metil 2-(5-(1-((tert-butoxicarbonil)amino)ciclopropil)-3-metilisoxazol-4- il)-5-clorobenzoato

.

Um frasco revedável contendo metil 2-bromo-5-clorobenzoato (0,205 g, 0,822 mmol), Pd(Ph3P)4 (0,042 g, 0,036 mmol), e fosfato de potássio anidro, tribásico (0,275 g, 1,296 mmol) foi evacuado e purgado com N2 (g) (3x). Aos sólidos foi adicionada uma solução de tert-butil 1-(3-metil-4- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoxazol-5-il)ciclopropilcarbamato (0,236 g, 0,648 mmol) em MeOH (2 x 1 mL, 2 mL total) e 1,4-Dioxano (2 x 1 mL, 2 mL total). A suspensão foi evacuada e purgada com N2 (g) (3x), o frasco foi vedado, e os teores aquecidos até 80°C. Análise LC-MS indicou conversão completa ao produto desejado dentro de 4 h. Após 4 h, a mistura de reação foi resfriada até temperatura ambiente e filtrada em Celite. A torta de filtro foi lavada com MeOH (3x) e o filtrado foi concentrado para gerar um óleo marrom. O óleo foi purificado em sistema Biotage (5% EtOAc: 95% Hexanos a 30% EtOAc: 70% Hexanos, então isocrático 30% EtOAc: 70% Hexanos). O produto metil 2-(5-(1-(tert-butoxicarbonilamino)ciclopropil)-3-me- tilisoxazol-4-il)-5-clorobenzoato (0,226 g, 0,555 mmol, 86% de rendimento) foi isolado como um óleo claro. LC/MS m/z 407 [M + Hf. 8-Cloro-1-metilspiro[benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepina-4,1’-ciclopropan]- 6(5H)-ona

.

A uma solução de metil 2-(5-(1-(tert-butoxicarbonilamino)ci- clopropil)-3-metilisoxazol-4-il)-5-clorobenzoato (131 mg, 0,322 mmol) em MeOH (2 mL) foi adicionado HCI anidro (1,00 mL, 4,00 mmol, 4 M em 1,4- dioxano). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 6 h, em cujo ponto a análise de LC-MS indicou consumo completo de N-Boc car- bamato e formação do produto desejado. A mistura de reação foi concentrada em vácuo e excesso de HCI foi azeotropicamente removido com MeOH (1x1 mL), tolueno (1x1 mL), e THF (1x1 mL). O óleo amarelo resultante foi seco por 10 min. LC/MS m/z 307 [M + Hf.

A uma suspensão resfriada (-40°C) de sal de cloridrato de amónio bruto (~100 mg) em THF (1,5 mL) foi adicionado brometo isopropilmag- nésio (0,400 mL, 1,160 mmol) sob gotejamento. Após adição completa, a mistura de reação foi deixada aquecer até temperatura ambiente e agitada por mais 15 min. À mistura de reação foi adicionado 1 N HCI aquoso (até pH ~1 ser obtido para uma camada aquosa). Uma fase aquosa foi extraída com EtOAc e a fase orgânica combinada foi lavada com água, seca em Na2SO4 e concentrada para gerar o produto 8-cloro-1-metilspiro[benzo[e]isoxazolo[5,4- c]azepina-4,T-ciclopropan]-6(5H)-ona (0,0631 g, 0,230 mmol, 71,3% de rendimento por 2 etapas) como sólidos amarelos claros. O produto bruto foi suficientemente puro por análise LC-MS e usado sem outra purificação. LC/MS m/z 275 [M + Hf. 6,8-Dicloro-1-metilspiro[benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepina-4,r-ciclopro- pano]

A um frasco contendo 8-cloro-1-metilspiro[benzo[e]isoxazolo[5,4- c]azepina-4,T-ciclopropan]-6(5H)-ona (0,0631 g, 0,230 mmol) foi adicionado CH2CI2 (1 mL). A mistura de reação foi heterógena e para ajudar na solubili-dade CHCI3 (0,5 mL) foi adicionado. À mistura homogênea foi adicionado pentacloreto fosforoso (0,092 g, 0,442 mmol) em uma porção em temperatura ambiente. A mistura de reação eventualmente se tornou heterogênea no-vamente (~<10 min) e análise LC-MS após ~30 min indicou consumo com-pleto de material de partida e formação de produto desejado. A mistura foi diluída com EtOAc e 10% Na2CO3 aquoso (2,8 mL). Após efervescência ini-cial, a mistura foi agitada por mais 5-10 min, e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (3 x). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com água, salmoura, secos em Na2SO4 e concentrados para gerar sólidos amare los. Os sólidos foram filtrados por um tampão de sílica e eluídos com 30% EtOAc: 70% Hexanos. O produto 6,8-dicloro-1-metilspiro[benzo[e]issoxazo- lo[5,4-c]azepina-4,1’-cíclopropano] (61,8 mg, 0,211 mmol, 92% de rendimento) foi obtido como sólidos quase brancos. LC/MS m/z 293 [M + H]+. 8-Cloro-6-(4-fluorfenil)-1-metilspiro[benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepina- 4,1 ’-cíclopropano] (Composto 250)

.

A uma solução de 6,8-dicloro-1-metilspiro[benzo[e]isoxazolo[5,4- c]azepina-4,1'-ciclopropano] (61,9 mg, 0,211 mmol) em tolueno (22 mL) foi adicionado ácido 4-fluorfenilborônico (37 mg, 0,264 mmol) e Pd(Ph3P)4 (11,22 mg, 9,71 μmol). A reação foi evacuada e purgada com N2 (g) (3x), seguido por adição de Na2CO3 aquoso (211 μl, 0,422 mmol, 2 M). A reação foi aquecida a 82°C por 15 min em cujo tempo a análise LC-MS indicou conversão completa ao produto desejado. A mistura de reação foi resfriada até temperatura ambiente e diluída com água. A camada aquosa foi extraída com EtOAc (3x) e os extratos orgânicos combinados foram secos em Na2SO4, e concentrados em vácuo. O produto bruto foi purificado em sistema Biotage (5% EtOAc: 95% Hexanos a 10% EtOAc: 90% Hexanos). O produto 8-cloro-6-(4-f I uorfen i I)-1 -metilspiro[benzo[e]isoxazolo[5,4-c]azepina-4,1 cíclopropano] (62 mg, 0,176 mmol, 83% de rendimento) foi obtido como cristais brancos. LC/MS m/z 353 [M + H]+; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,81 -7,77 (m, 1H), 7,75-7,71 (m, 1H), 7,45-7,38 (m, 2H), 7,19-7,26 (m, 3H), 2,52 (s, 3H), 1,29 (s, 4H). 5-(6-(4-Fluorfenil)-1 -metilspiro[benzo[c]isoxazolo[4,5-e]azepina-4,1 - ciclopropan]-8-il)piridin-2-amina (Composto 251)

.

A um frasco de fundo redondo de 25 mL contendo 8-cloro-6-(4- fluorfeniI)-1 -metilspiro[benzo[e]isoxazolo[5,4-c]azepina-4,1 ’-cíclopropano] (57 mg, 0,162 mmol) foi adicionado Pd2(dba)3 (9,1 mg, 9,94 μmol), tri-tert- butilfosfônio tetrafluorborato (6,5 mg, 0,022 mmol), fosfato de potássio (77 mg, 0,363 mmol), e 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridin-2-ami- na (56 mg, 0,254 mmol). O frasco foi evacuado e purgado com N2 (g) (3x), seguido por adição de 1,4-dioxano (1 mL) e água (0,05 mL). O frasco foi evacuado e purgado com N2 (g) (3x) e a mistura de reação foi aquecida a 100°C. Após 3 h, -50% conversão do material de partida foi observado por análise LC-MS. A mistura de reação foi resfriada até temperatura ambiente e mais Pd2(dba)s (9,1 mg, 9,94 μmol), tri-tert-butilfosfônio tetrafluorborato (6,5 mg, 0,022 mmol), fosfato de potássio (77 mg, 0,363 mmol), e 5-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridin-2-amina (56 mg, 0,254 mmol) foram introduzidos. A mistura foi subsequentemente aquecida novamente por mais 24 h. Análise LC-MS após 24 h, indicou -80% conversão ao produto desejado. A mistura de reação foi resfriada e filtrada por um pad de Celite. A torta de filtro foi lavada com EtOAc (3x) e o filtrado foi concentrado para gerar um óleo marrom escuro. O óleo foi purificado em sistema Biotage (25% EtOAc: 75% Hexanos a 70% EtOAc: 30% Hexanos, então isocrático 70% EtOAc: 30% Hexanos). O produto foi concentrada para gerar sólido amarelo pegajoso que foi contaminado com 2-amino-piridina. O sólido foi triturado com IPA (1 mL) e Et2O (1 mL) e filtrado. Os sólidos foram lavados com éter (1 mL) e filtrados. O amino piridina (cor amarela) foi removido de modo limpo em o rinsado e o produto 5-(6-(4-fluorfenil)-1-metilspiro[benzo[e]isoxazolo[5,4- c]azepina-4,r-ciclopropano]-8-il)piridin-2-amina (0,032 g, 0,078 mmol, 48,3% de rendimento) foram isolados como sólidos brancos. LC/MS m/z 411 [M + H]+; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,16 (d, J = 2,49 Hz, 1H), 7,86 (dd, J = 1,97, 8,21 Hz, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,59 (dd, J = 2,60, 8,62 Hz, 1H), 7,49 - 7,42 (m, 2H), 7,37 (d, J = 1,87 Hz, 1H), 7,24 - 7,15 (m, 2H), 6,49 (dd, J = 0,62, 8,72 Hz, 1H), 6,14 (s, 2H), 2,54 (s, 3H), 1,28 (d, J = 6,02 Hz, 4H).

EXEMPLO 42A. Síntese de Composto 265. 4-bromo-N-metoxi-N, 1-dimetil-1H-pirazol-3-carboxamida

Uma mistura de ácido 4-bromo-1-metil-1H-pirazol-3-carboxílico (2,04 g, 10 mmol), 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametilurônio tetrafluor- borato (3,21 g, 10 mmol), N,O-dimetilhidroxilamina (1,22 g, 20 mmol) em N,N-Diisopropiletilamina (5 mL) e N,N-Dimetilformamida (20 mL) foi agitada por 12 h em temperatura ambiente. A mistura foi concentrada em vácuo, e o resíduo foi purificado por cromatografia rápida eluindo com éter de petró- leo/acetato etil = 5:1 para gerar o produto titulo como um óleo incolor (2,4 g, 97%). LC/MS m/z 247 [M+H]+. (4-bromo-1 -metil-1 H-pirazol-3-il)(4-clorofenil)metanona

.

A uma solução de Composto 4-bromo-N-metoxi-N,1-dimetil-1H- pirazol-3-carboxamida (1,0 g, 4 mmol) em tetra-hidrofurano anidro (20 mL) em atmosfera de nitrogênio foi adicionado (4-clorofenil)magnésio brometo (8 mL) em tetra-hidrofurano (1 M) a 0°C, A mistura resultante foi agitada por 2 h em temperatura ambiente. A reação foi extinta por solução saturada de cloreto de amónio, e diclorometano (100 mL) foi adicionado, a camada orgânica separada foi seca em sulfato de sódio anidro e concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida eluindo com éter de petró- leo/acetato etil = 5:1 para gerar o produto título como um sólido branco (1,0 g, 84%). LC/MS m/z 298 [M+H]+; 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 8,10 (d, J = 9 Hz, 2 H), 7,53 (s, 1 H), 7,43 (d, J = 9 Hz, 2 H), 3,99 (s, 3 H). (4-(3-(4-clorobenzoil)-1 -metil-1 H-pirazol-4-il)-3-metilisoxazol-5-il)metil acetato

.

Uma solução de (4-bromo-1-metil-1H-pirazol-3-il)(4-clorofe- nil)metanona (4-bromo-1-metil-1H-pirazol-3-il)(4-clorofenil)metanona (0,5 g, 1,7 mmol), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferrocene]cloreto de paládio(ll) (62 mg, 0,085 mmol), K2CO3 (0,94 g, 6,8 mmol), (3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)isoxazol-5-il)metil acetato (0,96 g, 3,4 mmol) em água (2 mL) e 1,4-dioxano (10 mL) foi aquecido a 90°C, e agitada por 4 horas. Após resfriamento até temperatura ambiente, DCM (100 mL) foi adicionado e as camadas separadas. A camada orgânica separada foi seca em sulfato de sódio anidro e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida eluindo com éter de petróleo/acetato de etil = 5:1 para gerar o produto título como um óleo amarelo (0,3 g, 47%). LC/MS m/z 373 [M+H]+. (4-clorofenil)(4-(5-(hidroximetil)-3-metilisoxazol-4-il)-1-metil-1H-pirazol- 3-il)metanona

.

A uma solução de (4-(3-(4-clorobenzoil)-1-metil-1H-pirazol-4-il)- 3-metilisoxazol-5-il)metil acetato (0,3 g, 0,8 mmol) em THF (10 mL), foi adi-cionada solução de NaOH (5 mL, 1 N em água). A mistura foi agitada por 2 horas a 55°C. Após resfriamento até temperatura ambiente, DCM (50 mL) foi adicionado e as camadas separadas. A camada orgânica separada foi seca em sulfato de sódio anidro e concentrada para gerar o produto título como um óleo amarelo (0,2 g, 75% de rendimento). LC/MS m/z 331 [M+Hf ; 1H RMN (300 MHz, CDCI3) Ó8,13 (d, J = 9 Hz, 2 H), 7,45 (d, J = 9 Hz, 3 H), 4,62 (s, 2H), 4,07 (s, 3H), 2,15 (s, 3 H). (4-(3-(4-clorobenzoil)-1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-metllisoxazol-5-il)metil metanossulfonato

.

A uma solução de (4-clorofenil)(4-(5-(hidroximetil)-3-metilisoxa- zol-4-il)-1-metil-1H-pirazol-3-il)metanona (0,05 g, 0,15 mmol) em DCM (10 mL), foi adicionado trietilamina (0,1 mL) e cloreto sulfonil metano (0,05 mL) em temperatura ambiente. A mistura foi agitada por 2 h em temperatura ambiente. DCM (50 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturado (20 mL) foram adicionados. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio anidro e concentrada para gerar o produto título como óleo amarelo (0,035 g, 56%). LC/MS m/z 409 [M+Hf. (4-(5-(azidometil)-3-metilisoxazol-4-il)-1-metil-1H-pirazol-3-il)(4-clorofe- nil)metanona

.

Uma mistura de (4-(3-(4-clorobenzoil)-1-metil-1 H-pirazol-4-il)-3- metilisoxazol-5-il)metil metanossulfonato (35 mg, 0,09 mmol), azida de sódio (12 mg, 0,18 mmol) em N, N-dimetilformamida (10 mL) foi aquecida a 80°c e agitada por 10 h. Após resfriamento até temperatura ambiente, a mistura foi concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia rápida eluindo com éter de petróleo/acetato etil = 1:3 para gerar o produto título como um óleo incolor (30 mg, 94%). LC/MS: m/z 356 [M+H]+; 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 8,16 (d, J = 9 Hz, 2 H), 7,50 (s, 1 H), 7,46 (d, J = 9 Hz, 2 H), 4,37 (s, 2 H), 4,09 (s, 3 H), 2,19 (s, 3 H). 6-(4-clorofenil)-1,8-dimetil-4,8-di-hidroisoxazolo[5,4-c]pirazolo[4,3-e]aze- pina (Composto 265)

.

A uma solução de (4-(5-(azidometil)-3-metilisoxazol-4-il)-1-metil- 1H-pirazol-3-il)(4-clorofenil)metanona (0,03 g, 0,08 mmol) em THF anidro (10 mL), foi adicionado trifenilfosfino (32 mg, 0,12 mmol) em temperatura ambi-ente. A mistura foi agitada por 12 h em temperatura ambiente. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia rápida eluindo com (éter de petróleo/acetato etil = 1:3) para gerar o composto título como um sólido branco (15 mg, 60% de rendimento). LC/MS: m/z 312 [M+Hf; 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 7,62 (d, J = 9 Hz, 3 H), 7,36 (d, J = 9 Hz, 2 H), 4,87 (s, 2 H), 4,08 (s, 3 H), 2,45 (s, 3 H).

EXEMPLO 43. Síntese de Composto 209. (2R)-tert-butil 2-((6S)-2,3,9-trimetil-4-oxo-5,6-di-hidro-4H-isoxazolo[4,5- e]tieno[3,2-c]azepin-6-il)propanoato

.

A um frasco de fundo redondo foi adicionado THF (50 mL) e dii- sopropilamina (1,29 mL, 9,10 mmol) antes de a solução ser resfriada até 0°C. A esta solução foi adicionado n-BuLi (3,62 mL, 8,69 mmol) e a reação foi agitada a 0°C por 10 min antes de resfriar a -78°C e adição de tert-butil 2- ((6S)-2,3,9-trimetil-4-oxo-5,6-di-hidro-4H-isoxazolo[4,5-e]tieno[3,2-c]azepin- 6-il)acetato (1,5 g, 4,14 mmol), uma forma de intermediário 17, preparado de acordo com Exemplo 14. A solução foi agitada a -78°C por 1 h antes da adição de iodometano (0,285 mL, 4,55 mmol) e aquecida até temperatura ambiente durante a noite. A reação foi extinta com solução aquosa saturada de NH4CI e então diluída com água e salmoura. A camada aquosa foi extraída com EtOAc e a camada orgânica combinada foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo bruto foi purificado através de Biotage (MT- BE/hexanos) para gerar o produto título (0,259 g, 0,688 mmol). (2R)-2-((6S)-4-(4-cianofenil)-2,3,9-trimetil-6H-isoxazolo[5,4-c]tieno[2,3- e]azepin-6-il)propanamida (Composto 209)

.

Este Composto foi sintetizado de. (2R)-tert-butil 2-((6S)-2,3,9- trimetil-4-oxo-5,6-di-hidro-4H-isoxazolo[4,5-e]tieno[3,2-c]azepin-6-il)propa- noato seguindo os procedimentos gerais H, L para gerar 0 composto título (0,099 g, 0,245 mmol).

EXEMPLO 44. Compostos adicionais da invenção.

Compostos adicionais da a invenção feitos pelos vários esquemas revelados acima são estabelecidos na tabela 13 abaixo, incluindo a identificação das etapas finais utilizadas em suas sínteses. Tabela 13. Oul tros Compostos da invenção

EXEMPLO 44A. Atividade biológica de Compostos 192-266.

A atividade de Compostos 192-266 em ensaio de ligação BRD4 AlphaLisa (“Alphascreen”) (ver Exemplo 24), ensaio de quantificação cMyc RNA e ensaio de quantificação de IL-6 baseado em célula são estabelecidos 5 na tabela 14, abaixo. Na tabela 14, n.t. = não testado, “+” representa um va lor abaixo de 0,50 μM; “++” um valor entre 0,50 pM e 1 pM; e “+++” um valor maior do que 1 pM. Tabela 14. Atividade de Compostos 192-266.

EXEMPLO 44B. Inibição In-vivo de protocolo de produção de IL-6 induzida por LPS.

Camundongos fêmeas Balb/C, 6 semanas de idade na chegada na instalação de animal, e pesando 18-20 g/camundongo foram usadas para este ensaio. Os camundongos são aclimatados na instalação de animal por 5-7 dias antes do início do experimento. Os camundongos foram aleatoriamente divididos em grupos experimentais para incluir várias doses do artigo teste, e veículo e controles de dexametasona. Os camundongos foram deixados em jejum de 12 horas antes do início do estudo (dosagem), mas deixados com acesso livre a água. Os camundongos foram dosados após desenho de grupo de estudo por gavagem oral 30 min antes da estimulação com LPS. Tempo de intervalo de dosagem foi 1 min/camundongo.

Duas horas após o desafio de LPS os animais foram anestesiados por inalação de CO2, e sangue foi amostrado através de punção cardíaca em tubos revestidos de EDTA e colocados em gelo. Plasma foi separado por centrifugação por 3000g a 4°C por 15 min. O plasma separado foi dividido em alíquotas (50ul/alíquota) e armazenado a -80°C até níveis plasmáticos de IL-6 ELISA e droga serem analisados. As concentrações do composto são ainda amostras dos grupos satélites 30 min após a dosagem (e, assim, no momento da estimulação de LPS).

ELISAs foram executados seguindo protocolos padrões e ED50 foi calculado com base em 50% de inibição comparado ao veículo de controle. Os resultados são estabelecidos na tabela 15. (“++” indica um ED50 de menos do que 10 mg/kg; “+” indica um ED50 de entre 10 e 50 mg/kg. Tabela 15

EXEMPLO 45. Quantificação de Myc RNA em modelo de xenoenxerto.

Camundongos fêmeas NOD SCID (Harlan) foram inoculadas s.c. com 3 * 106 células Raji por camundongo ressuspenso em 10% Matrigel. Os tumores foram crescidos até que atingissem um tamanho de 200 mm3 a 400 mm3 como medido por paquímetro. Os camundongos foram tratados oralmente (5 mL/kg) com diferentes doses de compostos preparado como uma suspensão de 2 mg/mL de Carboxi-metil-celulose. Nos pontos de tempo in- dicados após tratamento, os tumores foram colhidos. RNA foi isolado usando extração com TRIzol e processado para ensaio QuantiGene®. ED50s foram calculados com base em 50% de inibição comparado ao veículo de controle. Os resultados são estabelecidos na tabela 16. (“++” indica um ED5o de menos do que 20 mg/kg; “+” indica um ED50 de entre 20 e 50 mg/kg. Tabela 16

Embora tenhamos descrito inúmeras modalidades desta invenção, é aparente que nossos exemplos básicos podem ser alterados para gerar outras modalidades que utilizam os compostos e métodos desta inven- ção. Portanto, será apreciado que o escopo desta invenção será definido pelas reivindicações anexadas ao invés das modalidades específicas que foram representadas por meio de exemplo.

O conteúdo de todas as referências (incluindo referências de lite- 5 ratura, patentes expedidas, pedidos de patentes publicados, e pedidos de patentes copendentes) citadas ao longo deste pedido é aqui expressamente incorporado na totalidade das mesmas por referência. Salvo se definido de outra forma, todos os termos técnicos e científicos têm o significado comu- mente conhecido por aqueles versados na técnica.

Claims (16)

1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a seguinte fórmula estrutural:

ou um sal farmaceutícamente aceitável do mesmo, em que: R5a é selecionado de hidrogênio, halo e alcóxi; R5b é selecionado de hidrogênio, halo e alquila; Rc é selecionado de fenila, heteroarila, e heterociclila saturada, em que o grupo representado por Rc é opcionalmente substituído com 1 a 2 substituintes independentemente selecionados de halo, -CN, alquila, alcóxi, haloalcoxi, haloalquila e carbamila; e R’ é selecionado de hidrogênio, alquila e alcoxialquila.

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pe lo fato de que R5aé selecionado de hidrogênio, cloro e metóxi.

3. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pe-lo fato de que R5b é selecionado de hidrogênio, cloro e metila.

4. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pe-lo fato de que R5a e R5b são simultaneamente hidrogênio.

5. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pe-lo fato de que Rc é selecionado de 4-clorofenila, 4-cianofenila, 4-fluorfenila, piridin-4-ila, 4-trifluormetilfenila, 5-cloropiridin-2-ila, 4-carbamilfenila, 3- metoxifenila, 4-metoxifenila, 4-trifluormetoxifenila, 2-metil-4-clorofenila e mor- folin-4-ila.

6. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pe lo fato de que R’ é selecionado de hidrogênio, etila e 2-metóxietila.

7. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a seguinte fórmula estrutural:

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

8. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a seguinte fórmula estrutural:

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

9. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a seguinte fórmula estrutural:

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

10. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende (i) o composto como definido em qualquer uma das reivindica-ções 1 a 9 ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e (ii) um adjuvante, portador ou veículo farmaceuticamente aceitável.

11. Uso do composto como definido na reivindicação 1, caracte rizado pelo fato de ser na preparação de uma composição farmacêutica para tratar um distúrbio mediado por proteína contendo bromodomínio em um paciente em necessidade do mesmo.

12. Uso, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que a proteína contendo bromodomínio é uma proteína BET.

13. Uso, de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que a proteína BET é BRD4.

14. Uso, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que o distúrbio proliferativo é câncer.

15. Uso, de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que o câncer é adenocarcinoma, leucemia/linfoma de célula T adulta, câncer de bexiga, blastoma, câncer ósseo, câncer de mama, câncer de cé-rebro, carcinoma, sarcoma mieloide, câncer cervical, câncer colorretal, câncer esofágico, câncer gastrointestinal, glioblastoma multiforme, glioma, câncer de vesícula biliar, câncer gástrico, câncer de cabeça e pescoço, linfoma de Hodgkin, linfoma não Hodgkin, câncer intestinal, câncer renal, câncer de laringe, leucemia, câncer pulmonar, linfoma, câncer de fígado, câncer pul-monar de célula pequena, câncer pulmonar de célula não pequena, mesote- lioma, mieloma múltiplo, câncer ocular, tumor do nervo óptico, câncer oral, câncer ovariano, tumor pituitário, linfoma de sistema nervoso central primário, câncer de próstata, câncer pancreático, câncer de faringe, carcinoma de célula renal, câncer retal, sarcoma, câncer de pele, tumor espinhal, câncer de intestino delgado, câncer de estômago, linfoma de célula T, câncer testicular, câncer de tireoide, câncer de garganta, câncer urogenital, carcinoma urotelial, câncer uterino, câncer vaginal, tumor de Wilms, leucemia mieloide aguda ou linfoma de Burkitt.

16. Uso, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que a doença inflamatória é sepse, artrite reumatoide, síndrome do intestino irritável ou psoríase.