BR112012029131B1 - Formulação farmacêutica aquosa de longa ação de insulinas e seus usos - Google Patents

Abstract

formulações de longa ação de insulinas. o pedido refere-s a uma formulação farmacêutica aquosa compreendendo 200 a 1000 u/ml [equimolar a 200 a 1000 iu de insulina humana] de insulina glargina, com a condição de que a concentração da referida formulação não seja 684 u/ml de insulina glargina, e seu uso.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "FORMULAÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE LONGA AÇÃO DE INSULINAS E SEUS USOS".

[0001] O pedido refere-se a uma formulação farmacêutica aquosa compreendendo 200 a 1000 U/mL [equimolar a 200 a 1000 IU de insulina humana] de insulina glargina, com a condição de que a concentração da referida formulação não seja 684 U/mL de insulina glargina, e seu uso.

[0002] Insulina glargina é insulina humana 31B-32B-Di-Arg, um análogo de insulina humana, com outra substituição de asparagina na posição A21 por glicina.

[0003] Lantus® é um produto de insulina contendo insulina glargina que fornece suprimento de insulina basal de 24 horas após injeção subcutânea de dose única.

[0004] O efeito glicodinâmico de Lantus® é distinguido de outros produtos de insulina atualmente vendidos em virtude de uma absorção retardada e previsível de insulina glargina do sítio de injeção subcutâ-nea resultando em um perfil de ação e concentração com o tempo de 24 horas homogêneo sem um pico definido. Lantus® foi desenvolvida para alcançar a necessidade médica de um produto de insulina de longa ação que pode ser administrado como uma injeção diária única para produzir controle de glicose sanguínea normal ou perto do normal com um perfil de insulina basal que é tanto homogêneo quanto possível durante um período de 24 horas. Uma tal preparação fornece bom controle de glicose sanguínea o dia inteiro, ao mesmo tempo que minimizando a tendência a produzir hipoglicemia observada com outras preparações de insulina com um efeito de "pico" mais definido.

[0005] Um número considerável de pacientes, em particular aqueles com resistência à insulina aumentada devido a obesidade, usa grandes doses para controlar a glicose sanguínea. Por exemplo, uma dose de 100 U requer injeção de 1 mL de Lantus® U100, que pode conferir algum desconforto; cada mL de Lantus® U100 contém 100 U (3,6378 mg) de insulina glargina. Para reduzir o volume de injeção, uma formulação contendo 300 U de insulina glargina por mL foi desenvolvida. Embora a invenção não seja limitada a uma formulação de insulina glargina U300, os estudos clínicos descritos aqui foram realizados com uma formulação de insulina glargina U300; cada mL de insulina glargina U300 contém 300 U (10.9134 mg) de insulina glargina. Esta formulação permitira os pacientes injetarem o mesmo número de unidades de insulina glargina em um terço do volume de injeção.

[0006] Ambas formulações de insulina glargina, U100 e U300, foram esperadas fornecer a mesma exposição de insulina e a mesma eficácia, isto é, perfis de tempo.

DESCRIÇÃO DETALHADA

[0007] Exposição e atividade de insulina glargina U300, a medicação de teste (T), foram testadas em indivíduos sadios não diabéticos em grampos euglicêmicos quanto à equivalência em exposição e atividade a Lantus U100, o produto de referência (R) aprovado. Por conta da longa duração de ação de insulina glargina após administração subcutânea 30 horas foram selecionadas. Exposição foi estimada de perfis de tempo de concentração de insulina glargina após administração subcutânea enquanto a atividade foi simultaneamente estimada como utilização de glicose por unidade de insulina.

[0008] Um projeto de replicação permitiu limitar o número de indivíduos para estimar a bioequivalência e variabilidade como recomendado pela norma de FDA "Guidance for Industry, Statistical Approaches to Establishing Bioequivalence".

[0009] O respectivo estudo clínico foi esperado estabelecer a equivalência em exposição e atividade.

[00010] Uma dose de 0,4 U/kg foi selecionada para este estudo; ela corresponde à dose de insulina basal média em pacientes. Em indivíduos sadios não diabéticos esta dose produz uma elevação bastante grande em concentração de insulina plasmática e um efeito de redução de glicose em jejum que pode ser quantificado em fixações de grampo euglicêmico.

[00011] O projeto de replicação favorecido por normas requer duas injeções de dose única replicadas de cada IP (R: Lantus® U100, T: insulina glargina U300) em sequências cruzadas de quatro maneiras predefinidas (RTTR ou TRRT) como distribuído pelo projeto de rando-mização. Este foi executado nos Períodos (P) 1 a 4 em quatro dias diferentes. Como um resultado, cada indivíduo recebeu duas doses sub-cutâneas únicas replicadas de 0,4 U/kg de Lantus® U100 (R) e insulina glargina U300 (T), alternando entre dois sítios opostos da área periumbilical.

[00012] Um período de eliminação de 4 a 18 dias separou cada dia de dosagem. A duração do período de eliminação variou individualmente permitindo tanto o participante quanto o investigador ajustarem às suas necessidades. Por experiência, 4 dias compreendem um período mínimo para recuperação, permitindo 1 grampo por semana para um participante, enquanto 18 dias representam um intervalo de 3 semanas entre os dias de grampo, permitindo aos indivíduos mais liberdade para cumprir as obrigações relacionadas ao não estudo.

[00013] Antes das visitas de grampo euglicêmico, em SCR (visita de avaliação), os indivíduos foram avaliados quanto à eligibilidade, e em visita de EOS (fim do estudo) os indivíduos têm que ir para um exame final para assegurar estado de saúde normal. Avaliação e P1 não devem ser separados por mais do que 21 dias, enquanto as visitas de EOS ocorreram não mais cedo do que o mesmo dia da semana como Dia 1 de P4 da semana seguinte, isto é, após mais 4 dias, e não mais tarde do que uma quinzena após o Dia 2 de P4, isto é, após mais 14 dias.

[00014] Este foi um estudo de dose única com 4 administrações de replicação no total. O efeito dos IPs durou cerca de 24 horas, que é o motivo pelo qual os indivíduos foram confinados ao instituto durante 2 dias. Os indivíduos foram expostos ao tratamento 4 vezes.

[00015] O objetivo primário do estudo foi estimar a bioequivalência média (ABE) de Lantus® U100 (formulação comercial) e insulina glargina U300 em biodisponibilidade (exposição) e bioeficácia (atividade) usando a técnica de grampo euglicêmico.

[00016] O objetivo secundário do estudo foi estimar a segurança e tolerabilidade de insulina glargina U300.

[00017] Como mencionado acima, ambas as formulações de insulina glargina, U100 e U300, foram esperadas fornecer a mesma exposição de insulina e a mesma eficácia. Entretanto, surpreendentemente exposição e eficácia de insulina foram mostradas não ser iguais. Insulina glargina U 100 e insulina glargina U 300 não são equivalentes em biodisponibilidade (exposição) e bioeficácia (atividade). Exposição e atividade após administração de insulina glargina U300 foram menores em cerca de 40% quando comparadas à exposição e atividade após administração da mesma quantidade (0,4 U/kg) de insulina glargina U100. Insulina glargina U300, entretanto, mostrou um perfil de PK (exposição) e PD (atividade) ainda mais uniforme do que a insulina glar-gina U100, como seria desejado para uma insulina basal. Estas diferenças surpreendentes e inesperadas em exposição e atividade entre as formulações de insulina glargina U100 e insulina glargina U300 após a mesma dose s.c. a indivíduos sadios são eficazmente mostradas nas figuras abaixo. De nota, ao mesmo tempo a glicose sanguínea foi constante.

[00018] O efeito de redução de glicose sanguínea de insulina glar-gina foi adicionalmente avaliado em cães Beagle normoglicêmicos sa- dios. Com concentração de insulina glargina crescente o tempo médio de ação aumentou de 6,8 h (U100) para 7,69 h (U300), respectivamente. Aumentando-se a concentração de glargina de 100 para 300 U/mL, o perfil de ação com o tempo de diminuição de glicose sanguínea foi alterado com respeito a uma atividade mais uniforme e prolongada no cão. Os dados atuais em cães são compatíveis com os dados em humanos mostrando que concentrações de fármaco maiores de insulina glargina são positivamente correlacionadas com perfil e duração mais longa de ação.

[00019] Adicionalmente, os precipitados de formulações de insulina glargina tendo concentrações de 100 U/mL, 300 U/mL, 500 U/mL 700 U/mL e 1000 U/mL foram investigados por microscopia. Estas investigações revelaram diferenças nas características de precipitações, resultando em partículas notavelmente maiores com concentrações crescentes.

[00020] Além disso, a influência das concentrações maiores de formulações de insulina glargina com referência às propriedades de dissolução é investigada usando-se um sistema de teste in vitro. Para fazer desse modo, estudos de precipitação são executados usando um tampão de fosfato com um pH de 7,4, simulando as condições in vivo. [00021] O sobrenadante da insulina precipitada é investigado usando técnica de HPLC para determinar o conteúdo de insulina glargina. [00022] WO2008/013938 A2 descreve uma formulação farmacêuti- ca aquosa compreendendo insulina glargina em uma concentração de 684 U/mL.

[00023] Embora a invenção não seja limitada a uma formulação de insulina glargina U 300, porém é eficaz com outras formulações concentradas maiores de insulina glargina como delineado em detalhes na especificação, os estudos clínicos descritos aqui foram executados com uma formulação de insulina glargina U 300.

[00024] 1 mL de formulação de insulina glargina U 300 contém 10.913 mg de insulina humana 21A-Gly-30Ba-L-Arg-30Bb-L-Arg [equimolar a 300 IU de insulina humana], 90 pg de zinco, 2,7 mg de m-cresol, 20 mg de glicerol a 85%, HCl e NaOH ad pH 4,0; gravidade específica de 1.006 g/mL

[00025] Entretanto, variações com referência ao tipo de excipientes e suas concentrações são possíveis.

[00026] A formulação farmacêutica contém 200 a 1000 U/mL de insulina glargina [equimolar a 200 a 1000 IU de insulina humana], em que a concentração da referida formulação não é 684 U/mL, preferivelmente 250 a 500 U/mL de insulina glargina [equimolar a 250 - 500 IU de insulina humana], mais preferido 270 a 330 U/mL de insulina glargina [equimolar a 270 a 330 IU de insulina humana], e ainda mais preferido 300 U/mL de insulina glargina [equimolar a 300 IU de insulina humana].

[00027] Tensoativos podem ser adicionados à formulação farmacêutica, por exemplo, entre outros, tensoativos não iônicos. Em particular, tensoativos farmaceuticamente habituais são preferidos, tais como, por exemplo: [00028] ésteres de ácido graxo e parciais e éteres de álcoois poli-hídricos tais como de glicerol, sorbitol e similares (Span®, Tween®, em particular Tween® 20 e Tween® 80, Myrj®, Brij®), Cremophor® ou po-loxâmeros. Os tensoativos estão presentes na composição farmacêutica em uma concentração de 5 a 200 pg/ml, preferivelmente de 5 a 120 pg/ml e particularmente preferivelmente de 20 a 75 pg/ml.

[00029] A formulação pode adicionalmente conter preservativos (por exemplo, fenol, m-cresol, p-cresol, parabenos), agentes isotônicos (por exemplo, manitol, sorbitol, lactose, dextrose, trealose, cloreto de sódio, glicerol), substâncias tampões, sais, ácidos e álcalis e também outros excipientes. Estas substâncias podem em cada caso estar pre- sentes individualmente ou alternativamente como misturas.

[00030] Glicerol, dextrose, lactose, sorbitol e manitol podem estar presentes na preparação farmacêutica em uma concentração de 100 a 250 mM, NaCl em uma concentração de até 150 mM. Substâncias tampões, tais como, por exemplo, fosfato, acetato, citrato, arginina, glicilglicina ou tampão TRIS (isto é, 2-amino-2-hidroximetil-1,3-propanodiol) e sais correspondentes, estão presentes em uma concentração de 5 a 250 mM, preferivelmente 10 a 100 mM. Outros excipien-tes podem ser, entre outros, sais ou arginina.

[00031] A concentração de zinco da formulação está na faixa da concentração que é alcançada pela presença de 0 a 1000 pg/mL, preferivelmente 20 a 400 pg/mL de zinco, mais preferivelmente 90 pg/mL. Entretanto, o zinco pode estar presente na forma de cloreto de zinco, porém o sal não é limitado ser cloreto de zinco.

[00032] Na formulação farmacêutica glicerol e/ou manitol podem estar presentes em uma concentração de 100 a 250 mmol/L, e/ou NaCl está preferivelmente presente em uma concentração de até 150 mmol/L.

[00033] Na formulação farmacêutica uma substância tampão pode estar presente em uma concentração de 5 a 250 mmol/L.

[00034] Um outro tema da invenção é uma formulação de insulina farmacêutica que contém outros aditivos tais como, por exemplo, sais que retardam a liberação de insulina. Misturas de tais insulinas de liberação retardada com formulações descritas acima são incluídas aqui. [00035] Um outro tema da invenção é direcionado a um método para a produção de tais formulações farmacêuticas. Para produzir as formulações, os ingredientes são dissolvidos em água e o pH é ajustado usando-se HCl e / ou NaOH. Da mesma maneira, um outro tema da invenção é direcionado ao uso de tais formulações para o tratamento de diabetes melito.

[00036] Um outro tema da invenção é direcionado ao uso ou a adição de tensoativos como estabilizador durante o processo para a produção de insulina, análogos de insulina ou derivados de insulina ou suas preparações.

[00037] A invenção também se refere a uma formulação como descrito acima que adicionalmente compreende também um peptídeo-1 semelhante a glucagon (GLP1) ou um análogo ou derivado do mesmo, ou exendina-3 ou -4 ou um análogo ou derivado do mesmo, preferivelmente exendina-4.

[00038] A invenção também se refere a uma formulação como descrito acima em que um análogo de exendina-4 é selecionado de um grupo compreendendo H-desPro36-exendina-4-Lys6-NH2, H-des(Pro36,37)-exendina-4-Lys4-NH2 e H-des(Pro36,37)-exendina-4-Lys5-NH2, ou um sal farmacologicamente tolerável do mesmo.

[00039] A invenção também se refere a uma formulação como descrito acima em que um análogo de exendina-4 é selecionado de um grupo compreendendo desPro36 [Asp28]exendina-4 (1-39), desPro36 [IsoAsp28]exendina-4 (1-39), desPro36 [Met(O)14, Asp28]exendina-4 (1-39), desPro36 [Met(O)14, IsoAsp28]exendina-4 (1-39), desPro36 [Trp(O2)25, Asp28]exendina-2 (1-39), desPro36 [Trp(O2)25, IsoAsp28]exendina-2 (1-39), desPro36 [Met(O)14Trp(O2)25, Asp28]exendina-4 (1-39) e desPro36 [Met(O)14Trp(O2)25, IsoAsp28]exendina-4 (1-39), ou um sal farmacologicamente tolerável do mesmo.

[00040] A invenção também se refere a uma formulação como descrito no parágrafo anterior, em que o peptídeo -Lys6-NH2 é ligado aos terminais C dos análogos de exendina-4.

[00041] A invenção também se refere a uma formulação como descrito acima em que um análogo de exendina-4 é selecionado de um grupo compreendendo H-(Lys)6- des Pro36 [Asp28]exendina-4(1-39)-Lys6-NH2 des Asp28Pro36, Pro37, Pro38 exendina-4(1-39) -NH2, H-(Lys)6- des Pro36, Pro37, Pro38 [Asp28]exendina-4(1-39) -NH2, H-Asn-(Glu)5 des Pro36, Pro37, Pro38 [Asp28]exendina-4(1-39) -NH2, des Pro36, Pro37, Pro38 [Asp28]exendina-4(1-39)-(Lys)6-NH2, H-(Lys)6- des Pro36, Pro37, Pro38 [Asp28]exendina-4(1-39)-(Lys)6-NH2, H-Asn-(Glu)5- des Pro36, Pro37, Pro38 [Asp28]exendina-4(1-39)-(Lys)6-NH2, H-(Lys)6- des Pro36 [Trp(O2)25, Asp28]exendina-4(1-39)-Lys6-NH2, H- des Asp28 Pro36, Pro37, Pro38 [Trp(O2)25]exendina-4(1-39) -NH2, H-(Lys)6- des Pro36, Pro37, Pro38 [Trp(O2)25, Asp28]exendina-4(1-39) -NH2, H-Asn-(Glu)5- des Pro36, Pro37, Pro38 [Trp(O2)25, Asp28]exendina-4(1-39) -NH2, des Pro36, Pro37, Pro38 [Trp(O2)25, Asp28]exendina-4(1-39)-(Lys)6-NH2, H-(Lys)6- des Pro36, Pro37, Pro38 [Trp(O2)25, Asp28]exendina-4(1-39)-(Lys)6-NH2, H-Asn-(Glu)5- des Pro36, Pro37, Pro38 [Trp(O2)25, Asp28]exendina-4(1-39)-(Lys)6-NH2, H-(Lys)6- des Pro36 [Met(O)14, Asp28]exendina-4(1-39)-Lys6-NH2, des Met(O)14 Asp28 Pro 36, Pro37, Pro38 exendina-4(1-39) -NH2, H-(Lys)6- des Pro36, Pro 37, Pro38 [Met(O)14, Asp28]exendina-4(1 -39) -NH2, H-Asn-(Glu)5- des Pro36, Pro37, Pro38 [Met(O)14, Asp28] exendina-4(1-39) -NH2, des Pro36, Pro37, Pro38 [Met(O)14, Asp28]exendina-4(1-39)-(Lys)6-NH2, H-(Lys)6- des Pro36, Pro37, Pro38 [Met(O)14, Asp28]exendina-4(1-39)-Lys6-NH2, H-Asn-(Glu)5 des Pro36, Pro37, Pro38 [Met(O)14, Asp28] exendina-4(1-39)-(Lys)6-NH2, H-(Lys)6- des Pro36 [Met(O)14, Trp(O2)25, Asp28]exendina-4(1-39)-Lys6-NH2, des Asp28 Pro36, Pro37, Pro38 [Met(O)14, Trp(O2)25]exendina-4(1-39) -NH2, H-(Lys)6- des Pro36, Pro37, Pro38 [Met(O)14, Trp(O2)25, Asp28]exendina-4(1-39) -NH2, H-Asn-(Glu)5- des Pro36, Pro37, Pro38 [Met(O)14, Asp28] exendina-4(1-39) -NH2, des Pro36, Pro37, Pro38 [Met(O)14, Trp(O2)25, Asp28]exendina-4(1-39)-(Lys)6-NH2, H-(Lys)6- des Pro36, Pro37, Pro38 [Met(O)14, Trp(O2)25, Asp28]exendina-4(1-39)-(Lys)6-NH2, H-Asn-(Glu)5- des Pro36, Pro37, Pro38 [Met(O)14, Trp(O2)25, Asp28] exen-dina-4(1-39)-(Lys)6-NH2, ou um sal farmacologicamente tolerável do mesmo.

[00042] A invenção também se refere a uma formulação como descrito acima que adicionalmente compreende Arg34, Lys26 (N£(y-glutamil(Na-hexadecanoíla))) GLP-1 (7-37) [liraglutida] ou um sal far-macologicamente tolerável do mesmo.

[00043] Em uma modalidade, a presente invenção é direcionada a uma formulação farmacêutica aquosa compreendendo insulina glargi-na na faixa de 200 a 1000 U/mL [equimolar a 200 a 1000 IU de insulina humana], preferivelmente 200 U/ml a 650 U/mL, ainda preferivelmente 700 U/ml a 1000 U/ml, mais preferivelmente 270 a 330 U/mL e mais preferivelmente em uma concentração de 300 U/mL, com a condição de que a concentração da referida formulação não seja 684 U/mL de insulina glargina.

[00044] Adicionalmente, a formulação pode também compreender um análogo de exendina-4, tal como, por exemplo, lixisenatida, exena-tida e liraglutida. Estes análogos de exendina-4 estão presentes na formulação na faixa de 0,1 pg a 10 pg por U de insulina glargina, preferivelmente 0,2 a 1 pg por U de insulina glargina, e mais preferivelmente 0,25 pg a 0,7 pg por U de insulina glargina. Lixisenatida é preferida. [00045] Adicionalmente, a formulação farmacêutica aquosa pode compreender um ou mais excipientes selecionados de um grupo compreendendo zinco, m-cresol, glicerol, polissorbato 20 e sódio. Especificamente, a formulação farmacêutica aquosa pode compreender 90 pg/mL de zinco, 2,7 mg/mL de m-cresol e 20 mg/ml de glicerol a 85%. Opcionalmente, a formulação farmacêutica aquosa pode compreender 20 pg/mL de polissorbato 20.

[00046] O pH da formulação farmacêutica aquosa é entre 3,4 e 4,6, preferivelmente 4 ou 4,5.

[00047] A presente invenção é direcionada a um método de tratar Diabetes Melito Tipo I e Tipo II compreendendo administrar ao referido paciente a composição farmacêutica aquosa da presente invenção a um paciente diabético. Preferida entre as várias faixas de concentração descritas é uma concentração de 300 U/mL e o análogo de insulina preferido é insulina glargina. Além disso, a formulação farmacêutica aquosa também pode compreender zinco, m-cresol, glicerol, polissor-bato 20 e sódio e misturas dos mesmos nas faixas descritas aqui em relação à formulação farmacêutica aquosa da presente invenção. Em uma modalidade preferida, a formulação farmacêutica aquosa também compreende 0,1 pg a 10 pg de lixisenatida por U de insulina glargina. [00048] A insulina é administrada preferivelmente uma vez ao dia, porém pode ser administrada duas vezes ao dia conforme necessário. Requisitos de dosagem são uma função das necessidades do paciente individual determinadas pela obtenção de níveis de glicose sanguínea normais ou aceitáveis.

[00049] A presente invenção é também direcionada a um método de estender a duração de exposição de insulina glargina no tratamento de Diabetes Melito Tipo I e Tipo II em um paciente compreendendo administrar ao referido paciente a formulação farmacêutica aquosa da presente invenção. Preferida entre as várias faixas de concentração descritas é uma concentração de 300 U/mL. Além disso, a formulação farmacêutica aquosa também pode compreender zinco, m-cresol, glicerol, polissorbato 20 e sódio e misturas dos mesmos nas faixas descritas aqui em relação à formulação farmacêutica aquosa da presente invenção. Em uma modalidade preferida a formulação farmacêutica aquosa também compreende 0,1 pg a 10 pg de lixisenatida por U de insulina glargina.

[00050] A presente invenção é também direcionada a um método de reduzir a incidência de hipoglicemia no tratamento de Diabetes Melito Tipo I e Tipo II em um paciente com insulina glargina compreendendo administrar ao referido paciente a formulação farmacêutica aquosa da presente invenção. Preferida entre as várias faixas de concentração descritas é uma concentração de 300 U/mL. Além disso, a formulação farmacêutica aquosa também pode compreender zinco, m-cresol, glicerol, polissorbato 20 e sódio e misturas dos mesmos nas faixas descritas aqui em relação à formulação farmacêutica aquosa da presente invenção. Em uma modalidade preferida a formulação farmacêutica aquosa também compreende 0,1 pg a 10 pg de lixisenatida por U de insulina glargina.

[00051] A presente invenção é também direcionada a um método de fornecer uma insulina basal de longa ação de pico menor no tratamento de Diabetes Melito Tipo I e Tipo II em um paciente com insulina glargina compreendendo administrar ao referido paciente a formulação farmacêutica aquosa da presente invenção. Preferida entre as várias faixas de concentração descritas é uma concentração de 300 U/mL. Além disso, a formulação farmacêutica aquosa também pode compreender zinco, m-cresol, glicerol, polissorbato 20 e sódio e misturas dos mesmos nas faixas descritas aqui em relação à formulação farmacêutica aquosa da presente invenção. Em uma modalidade preferida a formulação farmacêutica aquosa também compreende 0,1 pg a 10 pg de lixisenatida por U de insulina glargina.

[00052] Uso de uma formulação aquosa de acordo com quaisquer dos itens anteriores no tratamento de Diabetes Melito Tipo 1 e Diabetes Melito Tipo 2.

[00053] O pedido é descrito abaixo com o auxílio de alguns exemplos, que não são de maneira alguma pretendidos agir restritivamente.

Exemplo 1: Descrição do protocolo [00054] Este estudo foi um estudo cruzado de 2 sequências, 2 tratamentos, quatro períodos, único cego, controlado, randomizado, de único centro em indivíduos sadios com seis visitas: Visita 1:Avaliação (SCR) Visita 2 a 5, Período (P) 1 - 4: Tratamento, período de grampo euglicêmico Visita 6:Fim do estudo (EOS) [00055] Os indivíduos receberam doses subcutâneas únicas de 0,4 U/kg de insulina glargina U100 e insulina glargina U300 alternadamen-te injetadas em dois sítios opostos da área periumbilical (esquerda, direita, esquerda, direita) em quatro dias diferentes. A medicação de estudo foi administrada com uma replicação de tratamento R e T em 2 sequências, RTTR ou TRRT em P1 a P4. Um período de eliminação de 4 a 18 dias foi separado a cada dia de dosagem. R:0,4 U/kg de peso corporal de insulina glargina U100 (formulação comercial; Referência) T:0,4 U/kg de peso corporal de insulina glargina U300 (Teste) [00056] P1 deve ocorrer não mais do que 3 a 21 dias após SCR. Visita de EOS deve ocorrer entre 4 a 14 dias após P4.

[00057] Durante P1 a P4, os indivíduos foram conectados a um Biostator para medição de glicose sanguínea e ajuste de taxa de infusão de glicose. Níveis de glicose sanguínea e taxa de infusão de glicose (GIR) foram monitorados durante 90 minutos (período de referência) antes da injeção subcutânea da medicação de estudo e durante 30 horas após a administração da medicação de estudo. Infusão de solução de glicose a 20% começou a manter os níveis de glicose sanguínea em 5 % abaixo do nível de glicose sanguínea em jejum individual, determinado como a média dos 3 valores de glicose sanguínea em jejum medidos 60, 30 e 5 minutos antes da administração da medicação de estudo. Perfis de GIR foram obtidos. Amostras de sangue foram retiradas em tempos pré-determinados durante o período de grampo euglicêmico para determinação de concentrações de insulina glargina do soro. Com a exceção de água de torneira, os indivíduos foram jejuados durante o período de grampo de glicose.

[00058] A duração deste estudo para um indivíduo foi esperada ser até 13 semanas entre a visita de SCR e EOS.

[00059] O protocolo foi submetido a comitês éticos independentes e/ou quadros de revisão institucionais para revisão e aprovação escrita. O protocolo cumpriu com as recomendações do 18° World Health Congress (Helsinki,1964) e todas emendas aplicáveis. O protocolo também cumpriu com as leis e regulações, bem como quaisquer normas aplicáveis, da Alemanha, onde o estudo foi conduzido. Consentimento informado foi obtido antes da conduta de quaisquer procedimentos relacionados ao estudo.

Exemplo 2: Seleção de indivíduos [00060] Vinte e quatro (24) indivíduos sadios foram planejados ser tratados a fim de ter 20 finalistas.

[00061] Indivíduos que alcançam todos os seguintes critérios foram considerados para arrolamento no estudo: Demografia •Indivíduos de qualquer gênero entre 18 e 50 anos de idade; •Peso corporal entre 50 kg e 110 kg e índice de massa corporal entre 18 e 28 kg /m2;

Estado de Saúde •Certificado como sadio seguindo uma estimativa clínica compreensiva (história médica detalhada e exame físico completo); •Não fumante durante pelo menos 3 meses; •eletrocardiograma de 12 direções, e sinais vitais a menos que o Investigador considere uma anormalidade ser clinicamente irrelevante oSinais vitais normais após 5 minutos repousando em posição supina: o95 mmHg < pressão sanguínea sistólica < 140 mmHg; o45 mmHg < pressão sanguínea diastólica < 90 mmHg; o40 bpm < frequência cardíaca < 100 bpm; oECG de 12 direções normal; 120 ms < PR < 220 ms, QRS < 120 ms, QTc < 430 ms (para fêmeas: QTc < 450 ms); •Parâmetros de laboratório dentro da faixa normal a menos que o Investigador considere uma anormalidade ser clinicamente irrelevante para indivíduos sadios; entretanto creatinina do soro e enzimas hepáticas (AST, ALT) devem ser estritamente abaixo da norma de laboratório superior; •Controle metabólico normal definido como glicose do soro em jejum (< 100 mg/dL) e hemoglobina glicosilada (HbA1c < 6,1 %); •Os indivíduos devem estar em abstinência de uso regular de terapia de fármaco de prescrição, durante pelo menos quatro (4) semanas antes da participação no estudo;

Obrigações para Indivíduos fêmeas •Indivíduos fêmeas de potencial de gravidez e parto (definido como pré-menopausal e não cirurgicamente esterilizado ou pós-menopausal durante menos do que 2 anos) e sexualmente ativos devem praticar controle de natalidade adequado. Controle de natalidade adequado é definido como um método altamente eficaz de contracepção (índice Pearl < 1 %) tais como implantes, injetáveis, contraceptivos orais combinados ou DIUs hormonais (dispositivos intrauterinos). Pós-menopausal para os propósitos desta experiência clínica incluem: amenorreia durante 2 ou mais anos ou cirurgicamente estéril; •Indivíduos fêmeas devem ter um teste de gravidez de go-nadotropina coriônica beta-humana (beta-HCG) de urina negativo durante a avaliação de pré-estudo, e antes do primeiro grampo;

Regulações •Ter fornecido consentimento informado escrito antes de qualquer procedimento relacionado ao estudo; •Protegido por Sistema de Seguro de Saúde e/ou em concordância com as recomendações da Lei Nacional em vigor que relata uma pesquisa biomédica; •Não estar sob qualquer supervisão administrativa ou legal.

Indivíduos apresentando-se com quaisquer dos seguintes não foram incluídos no estudo: História médica e estado clínico •Qualquer história ou presença de doença cardiovascular clinicamente relevante, pulmonar, gastrointestinal, hepática, renal, me-tabólica, hematológica, neurológica, psiquiátrica, sistêmica, ocular ou infecciosa; qualquer doença infecciosa aguda ou sinais de enfermidade aguda; •Presença ou história de alergia a fármaco, ou doença alérgica diagnosticada e tratada por um médico; •Consumo excessivo de bebidas com bases de xantina (> 4 xícaras ou copos/dia); •Contraindicações de (de acordo com as faixas normais -se o valor estiver fora da faixa normal o indivíduo pode ser incluído se o Investigador ver este valor anormal como clinicamente irrelevante): - a história médica/cirúrgica e exame físico - teste de laboratório (hematologia, química clínica, e uriná-lise por vareta verificadora de nível) - eletrocardiograma de 12 direções padrão - pressão sanguínea e frequência cardíaca •Qualquer tratamento contínuo com fármacos prescritos ou qualquer tratamento regular com fármacos prescritos nas 4 semanas antes da participação no estudo; •Sintomas de uma enfermidade clinicamente significante nos 3 meses antes do estudo, ou de qualquer doença médica interna principal nas 4 semanas antes do estudo que, de acordo com a opinião do Investigador, pode interferir com os propósitos do estudo; •Presença ou sequelas de uma doença ou outras condições conhecidas interferir com a absorção, distribuição, metabolismo, ou excreção de fármacos; •História de abuso de fármaco ou álcool; •História de hipersensibilidade à medicação de estudo ou aos fármacos com estruturas químicas similares; •Doença fatal progressiva; •Cirurgia pré-planejada durante o estudo; •Doação de sangue de mais do que 500 mL durante os 3 meses anteriores.

[00062] Nenhum indivíduo foi deixado arrolar neste estudo mais do que uma vez.

Condições gerais •Indivíduo que, no julgamento do Investigador, é provável ser não submisso durante o estudo, ou incapaz de cooperar por causa de um problema de linguagem ou desenvolvimento mental pobre ou devido a uma condição mental que torna o indivíduo incapaz de entender a natureza, escopo e possíveis consequências do estudo; •Indivíduo em período de exclusão de um estudo anterior de acordo com regulações aplicáveis; •Indivíduo é o Investigador ou qualquer Sub-Investigador, Assistente de Pesquisa, Farmacêutico, Coordenador do Estudo, outro Staff do mesmo, diretamente envolvido na conduta do protocolo; •Receita de um fármaco experimental dentro dos 30 dias anteriores antes de SCR.

Estado biológico •Reação positiva a quaisquer dos seguintes testes: antíge-no HBs, anticorpos anti-HCV, anticorpos anti-HIV1, anticorpos anti-HIV2; •Resultados positivos em análise de fármaco na urina em SCR (anfetaminas/metanfetaminas, barbituratos, benzodiazepínicos, canabinoides, cocaína, opiatos); •Teste de respiração de álcool positivo.

Exemplo 3: Tratamentos Detalhes de Tratamentos de Estudo Cálculo da Dose para Lantus® / formulação de insulina glargina [00063] Para calcular a quantidade de insulina glargina administrada para cada indivíduo (0,4 U/kg), o peso corporal (em kg) foi determinado para uma casa decimal e a quantidade de insulina calculada foi arredondada para cima ou para baixo para números inteiros como mostrado nos seguintes exemplos: um indivíduo com um peso corporal de 75,3 kg recebeu 30 U de insulina (75,3 x 0,4 = 30,12 que é arredondado para baixo para 30); um indivíduo com um peso corporal de 74,4 kg recebeu 30 U de insulina (74,4 x 0,4 = 29,76, que é arredondado para cima para 30). O peso corporal registrado durante o Período 1 dia 1 foi usado para cálculo da dose da medição de estudo para os Períodos 2, 3 e 4, a menos que o peso corporal tenha alterado em mais do que 2 kg comparado ao Período 1.

[00064] A quantidade em unidades foi a mesma tanto para insulina glargina U100 quanto insulina glargina U300. Esta gravidade específica é a mesma para ambos produtos de fármaco. Entretanto, devido à concentração três vezes maior de insulina glargina em insulina glargi- na U300 quando comparada à insulina glargina U100, o volume a ser injetado e, portanto, o peso foi 1/3 para insulina glargina U300. As seringas fornecendo a dose individual foram preparadas por peso. O peso líquido foi documentado apenas na documentação de fonte do Investigador. Cálculo e Preparação da Dose para Infusões Tabela 1 - Preparação de infusão Código do INN Formulação Fabricante Dose/Rotina de ad- fármaco____________________________________________________ministração_____ Glicose Glicose solução a 20% para Certificado, selecionado infusão iv infusão por PROFIL

Heparina sódi- Heparina Frasconete contendo Certificado, selecionado infusão iv ca Intramed 5 mL de solução por PROFIL (5000 IU/mL) cloreto de Cloreto de Solução Certificado, selecionado infusão iv sódio a 0,9 % sódio_____________________por PROFIL_________________________ [00065] Solução de glicose: solução de glicose a 20% foi infundida com o Biostator para manter a glicose sanguínea individual dos indivíduos ao nível alvo determinado. Uma segunda bomba de infusão (parte do Biostator) liberou solução de cloreto de sódio a 0,9% para manter a linha patente. No caso da quantidade de solução de glicose a 20% necessária exceder a capacidade de infusão do Biostator, uma segunda bomba de infusão de glicose foi embutida.

[00066] Heparina: 10000 IU de heparina em 100 mL de solução de cloreto de sódio a 0,9% foram infundidas no cateter duplo lúmen em uma taxa de aproximadamente 2 mL/h para mantê-lo patente para medição de glicose sanguínea pelo Biostator.

Descrição de métodos de cegamento: [00067] Este foi um estudo único cego. Os diferentes volumes de injeção impedem o cegamento da medicação. A injeção foi feita por uma pessoa médica autorizada de outro modo não envolvida no estudo. O Investigador tem acesso ao código de randomização. Método de designar indivíduos para o grupo de trata- mento [00068] A medicação de estudo foi administrada apenas aos indivíduos incluídos neste estudo seguindo os procedimentos estabelecidos no protocolo de estudo clínico.

[00069] Um plano de randomização foi gerado, que tem unido os números de randomização, estratificado por gênero, para as sequências de tratamento das duas formulações Lantus® a serem injetadas em P1 a P4.

[00070] Na manhã do dia 1 do Período 1, assim que o Investigador confirmou que os indivíduos satisfazem os critérios especificados no protocolo, os indivíduos elegíveis foram randomizados pelo sítio. O número de randomização foi alocado ao número do indivíduo subsequentemente na ordem em que a eligibilidade dos indivíduos foi confirmada antes de P1. O primeiro indivíduo para uma qualificação de estrato de gênero após SCR recebeu o primeiro número de randomi-zação para o estrato de gênero apropriado. O próximo indivíduo que se qualifica dentro de um estrato recebeu o próximo número de ran-domização dentro do estrato. O número de randomização foi usado como o número de kit de tratamento para alocar o kit de tratamento ao indivíduo. Cada indivíduo foi administrado com a medicação de estudo transportando o número de kit de tratamento ao qual ele foi alocado. O kit de tratamento contendo o IP transportava informação geral, número de kit de tratamento, número do período, um campo para escrever o número do indivíduo na caixa do recipiente, e declarações adicionais como requerido por regulações locais.

[00071] Indivíduos que permanentemente descontinuam o estudo mantiveram o número do indivíduo e número de randomização, se anteriormente fornecido.

Empacotamento e rotulação [00072] A medicação de estudo foi empacotada por Sanofi-Aventis Deutschland GmbH, Frankfurt am Main, Alemanha de acordo com o projeto de randomização. Os cartuchos contendo a medicação de estudo e os cartões em que eles foram empacotados foram rotulados com o número do estudo, o número de randomização, número de ba-telada, condições de armazenagem, Patrocinador e o número P. [00073] Fornecimentos da medição de estudo foram recebidos em um carregamento. Todos recipientes tinham rótulos de formato idêntico. Adicionalmente, 1 série de rótulos para seringas foi fornecida. A medicação de estudo e medicação sobressalente foram armazenadas em diferentes refrigeradores.

[00074] Antes da administração da medicação de estudo, o Farmacêutico ou a pessoa designada por ele preparou as seringas com a medicação de estudo apropriada e rotulou a seringa com o número do indivíduo, o número de randomização e o período apropriado de acordo com os recipientes da medicação de estudo.

[00075] O conteúdo do rótulo estava de acordo com as exigências e especificações regulatórias locais.

Condições de armazenagem [00076] A medicação de estudo foi armazenada protegida da luz em uma temperatura de +2°C a +8°C. A medicação de estudo foi prevenida de congelamento. Durante a preparação não foi necessário ter a medicação protegida da luz.

[00077] Amostras de reserva (300 cartuchos de Lantus® U100 e 300 cartuchos de insulina glargina U300) foram armazenadas nas mesmas condições seguras ao nível do sítio de estudo.

Exemplo 4: Estimativa de produto investigacional Atividade ou farmacodinâmicas [00078] Estimulação de receptores de insulina por insulina glargina é o modo de ação. Captação de glicose periférica subsequente e supressão de produção de glicose endógena compreendem os efeitos glicodinâmicos que produzem uma redução em concentração de glicose sanguínea. A utilização de glicose resultante é melhor caracterizada pelo nível de glicose requerido para manter a concentração de glicose sanguínea constante.

[00079] A técnica de grampo euglicêmico foi empregada para estimar a quantidade de glicose necessária para manter as concentrações de glicose sanguínea em 5 % abaixo do nível de referência após injeção de insulina glargina. Métodos de Estimativa Clínica [00080] Determinação de glicose sanguínea online foi feita pelo Biostator (Life Sciences instruments, Elkhart, IN, USA) empregando o método de glicose oxidase.

[00081] Glicose sanguínea offsite foi determinada com um analisa-dor de glicose Super GL também usando o método de glicose oxidase.

Variáveis farmacodinâmicas/Finalidades [00082] A quantidade de glicose utilizada por unidade (dose) de insulina subcutaneamente injetada é uma medida do efeito glicodinâmi-co.

[00083] A taxa de infusão de glicose (GIR) continuamente registrada é uma reflexão do perfil de ação com o tempo da insulina injetada.

Variável primária/Finalidade [00084] A variável farmacodinâmica primária é a área sob a curva de tempo de taxa de infusão de glicose dentro de 24 horas [GIR-AUC0-24h (mg-kg-1)].

Variável secundária/Finalidade [00085] A variável farmacodinâmica secundária é o tempo para 50% de GIR-AUC0-24h [Ts0% - GIR-AUC(0-24h) (h)].

Farmacocinéticas Tempos de amostragem [00086] Amostras de sangue para estimativa de concentrações de insulina glargina do soro e peptídeo C foram retiradas 1 hora, 30 min e imediatamente antes da injeção subcutânea da medicação de estudo, por conseguinte 30 min, 1 hora, 2 horas e em seguida a cada duas horas até 24 horas, e 30 horas após a injeção.

[00087] A numeração de amostras de insulina glargina foi P00, P01, P02, P03, P04, etc., a numeração de amostras de peptídeo C foi C00, C01, C02, C03, C04, etc (ver também diagrama de fluxo do estudo). Número de Amostragem farmacocinética [00088] Um mínimo de 18 amostras foi retirado por visita de grampo (P1 a P4). No total, 72 amostras foram retiradas por indivíduo.

Procedimento de Manuseio de PK [00089] O tempo exato de coleta de amostra deve ser registrado na CRF. Procedimentos especiais para armazenagem e expedição de amostras farmacocinéticas (insulina glargina, peptídeo C) foram usados. Método Bioanalítico [00090] Bioanálise foi executada usando como uma base as exigências de Good Laboratory Practice (GLP) aplicáveis a este tipo de estudo identificado nos Princípios OECD de Good Laboratory Practice (como revisado em 1997), ENV/MC/CHEM (98)17 e as regulações de GLP aplicáveis ao país local.

[00091] Como nenhuma amostra sobressalente está disponível, prioridade é dada à determinação de insulina glargina.

Insulina Glargina [00092] Concentrações de insulina glargina do soro foram determinadas usando um radioimunoensaio (RIA) para insulina humana (kit RIA de Insulina, ADALTIS, Itália) calibrado para insulina glargina. Kit REF 10624.

[00093] O limite inferior de quantificação (LLOQ) para este ensaio foi 4,92 pU/mL.

Peptídeo C

[00094] Concentrações de peptídeo C do soro foram determinadas usando um radioimunoensaio (RIA) para peptídeo C (kit RIA de peptídeo C, ADALTIS, Itália). Kit REF peptídeo C 10282.

[00095] O limite inferior de quantificação (LLOQ) foi 0,090 nmol/L. Sumário de Método Bioanalítico Analisadoinsulina, peptídeo C Matrizsoro Técnica AnalíticaRIA

Limte inferior de quantificação4,92 pU/mL de insulina; 0,090 nmol/L de peptídeo C

Volume do ensaio100 pL para insulina; 100 pL para peptí- deo C

Referência do MétodoAdaltis S.p.A. Itália; Kit REF 10624 Insulina (Método No. 435VAL02) e Kit REF peptídeo C 10282 (Método No. DMPK/FRA/2003-0002).

Variáveis Farmacocinéticas/Finalidades [00096] A curva de tempo de concentração de insulina glargina foi uma medida da exposição sistêmica de insulina de IP subcutaneamen-te injetado.

Variável primária/Finalidade [00097] A variável farmacocinética primária foi a área sob a curva de tempo de concentração de insulina glargina do soro [INS-AUC0-24h (pU-h-mL-1)].

Variável secundária/Finalidade [00098] A variável farmacocinética secundária foi o tempo para 50% de INS-AUC0-24h [T50% - INS-AUC(0-24h) (h)].

Volume de sangue amostrado Volume de sangue amostrado Sangue arquivai / Genotipagem 0 mL

Hematologia/Química clínica/Sorologia (20 + 12 mL) 32 mL

RBC, Hb, Hct (2x2 mL) opcional 4 mL

Glicose sanguínea (2 mL/hx32x4) 256 mL

Glicose sanguínea (0,3 mLx4x34) 41 mL

PK insulina glargina (3,5 mLx18x4) 252 mL

Total 585 mL

Medidas para proteger o cegamento da experiência [00099] Este foi um estudo único cego. Determinações bioanalíticas foram executadas após conclusão clínica. O código de tratamento foi conhecido para relato de qualquer Evento Adverso Sério (SAE) inesperado e razoavelmente associado com o uso do IP de acordo com o julgamento do Investigador e/ou do Patrocinador.

Exemplo 5: Procedimentos do Estudo Quadro de visita Procedimentos de Avaliação [000100] Os registros médicos de cada indivíduo potencial foram checados antes do início do estudo para determinar a eligibilidade para participação. Os indivíduos jejuaram (exceto para água) durante 10 horas antes do exame de avaliação em SCR.

[000101] Os seguintes itens/exames foram estimados: •Idade, e raça •Exame físico (incluindo sistema cardiovascular, tórax e pulmões, tireoide, abdome, sistema nervoso, pele e mucosas, e sistema musculoesquelético) •História médica e cirúrgica relevante (apenas descobertas relevantes ao estudo devem ser documentadas) •Antropométricos: altura e peso, cálculo de BMI [peso em kg-(altura em m)-2] •Pressão sanguínea e frequência cardíaca (após 5 min em supino e 3 min em posição vertical) •Temperatura corporal central (timpânica) •ECG de 12 direções padrão •Estado da hematologia, química clínica, e urinálise (por vareta verificadora de nível) •Estado de coagulação (INR, aPPT) •Análise de fármaco na urina •Análise de álcool (analisador de respiração) •Controle metabólico normal definido como glicose sanguí- nea em jejum (< 100 mg.dL-1) e hemoglobina glicosilada (HbA1c < 6,1 %) •Teste de Hepatite B/C e HIV

[000102] No caso do indivíduo ser uma falência de avaliação, todos os dados obtidos em SCR incluindo resultados de laboratório de testes de avaliação ficaram disponíveis no registro médico do indivíduo.

Descrição por Tipo de Visita Período(s) [000103] Cada período do estudo (P1 a P4) durou 2 dias, dia 1 e dia 2. Dia 1 foi o dia de início do grampo euglicêmico e administração da medicação de estudo. Dia 2 foi o dia do fim do grampo euglicêmico, que durou 30 horas após a administração da medicação de estudo. Existiu um período de eliminação de 4 a 18 dias entre os períodos do estudo (P1 - P4). Nenhuma atividade estrênua (por exemplo, mountain biking, jardinagem pesada etc.) foi permitida 2 dias antes de cada administração da medicação de estudo. Consumo de bebidas alcoólicas, suco de toranja, e bebidas estimulantes contendo derivados de xantina (chá, chocolate, café, bebidas como Coke®, etc.) e toranja não foi permitido de 24 horas antes até a conclusão do grampo euglicêmico. Os indivíduos jejuaram (exceto para água) durante 10 horas antes do dia 1 de cada período do estudo (P1 a P4) e permaneceram em jejum (exceto para água) até o fim do grampo euglicêmico. Os indivíduos permaneceram na clínica durante aproximadamente 32 horas em cada visita de grampo.

[000104] Na manhã do dia 1 do Período 1, o número do indivíduo de 9 dígitos foi alocado ao indivíduo, iniciando com 276001001. O próximo indivíduo que se qualifica para entrar em SCR recebeu o número do indivíduo 276001002 etc. O primeiro indivíduo recebeu o número de randomização 101. O próximo indivíduo que se qualifica recebeu o número de randomização 102.

[000105] Os indivíduos foram indagados para garantir que eles não tinham nenhuma alteração clinicamente significante em sua condição física e estavam submissos com as restrições gerais e dietéticas como definido no protocolo desde os períodos anteriores. Violação dos critérios do estudo excluiu os indivíduos de participação no estudo. Dependendo do tipo de violação, o indivíduo pode ser excluído apenas do período particular, permitindo um replanejamento do dia de estudo. Quaisquer violações do protocolo foram discutidas com o Patrocinador em uma base de caso-a-caso antecipadamente.

[000106] Quaisquer alterações na condição de saúde dos indivíduos desde o último período foram relatadas nos registros médicos do indivíduo (fonte) e na CRF.

[000107] A pressão sanguínea, frequência cardíaca e temperatura corporal central (timpânica) foram registradas em posição supina após pelo menos 5 minutos de repouso na manhã do dia 1, antes de e após conclusão dos procedimentos de grampo 30 horas após cada administração da medicação de estudo (Dia 2). Peso corporal, análise de álcool e RBC, Hb, HcT (apenas antes do período de grampo de P3 e P4) foram estimados apenas antes de iniciar o grampo na manhã do dia 1.

[000108] No dia 1 de cada período, os indivíduos foram admitidos na clínica às 6:30 da manhã. Após passarem pelos exames descritos acima, os indivíduos foram preparados com três linhas venosas. Uma veia da mão dorsal ou veia do punho lateral do braço esquerdo foi ca-nulizada em modo retrógrado e conectada a um Biostator (Life Sciences instruments, Elkhart, IN, USA) a fim de continuamente retirar sangue venoso arterializado para a determinação de glicose sanguínea. Para obter a arterialização a mão esquerda foi colocada em um "Hot-Box" em torno de 55°C. Uma segunda linha venosa foi colocada na veia antecubital do braço esquerdo e foi usada para coletar as amostras para determinação de insulina glargina do soro e glicose sanguínea de referência. Uma terceira veia foi canulizada no antebraço contralateral permitindo a infusão de solução de glicose a 20% e salina a 0,9% com o Biostator.

[000109] O Biostator determinou os níveis de glicose sanguínea e ajustou a taxa de infusão de glicose para manter os níveis de glicose sanguínea em 5 % abaixo da glicose sanguínea em jejum individual, determinada como a média dos 3 valores de glicose sanguínea em jejum medidos 60, 30 e 5 minutos antes da administração da medicação de estudo. Amostras de sangue adicionais de 0,3 mL para a determinação de glicose sanguínea foram retiradas 60, 30, e 5 minutos antes da administração da medicação de estudo para checar em comparação com uma referência de laboratório baseada no método de glicose oxidase.

[000110] Aproximadamente às 09:00 da manhã, insulina glargina U100 (formulação comercial) ou insulina glargina U300 foi injetada na área periumbilical 5 cm lateral ao umbigo (esquerda, direita, esquerda, direita) usando uma técnica de dobra da pele padronizada. Seringas de insulina de U100 (fabricante: Beckton & Dickinson) de 0,5 mL de volume com uma agulha de 0,30 mm x 8 mm (30G) foram usadas.

[000111] A medicação de estudo foi rotulada com seu respectivo número de kit de tratamento, número do indivíduo (a ser documentado na caixa do recipiente após a randomização), e número do Período (ver Seção 8.5 Empacotamento e Rotulação).

[000112] Após a administração da medicação de estudo, infusão de solução de glicose a 20% começou em uma taxa variável uma vez que o nível de glicose sanguínea caiu em 5 % do nível de jejum individual para manter aquele nível. A duração do período de grampo foi 30 horas. A taxa de liberação de glicose foi ajustada pelo Biostator em resposta a alterações em glicose sanguínea em intervalos de 1 minuto usando um algorítmo predefinido. Os valores de glicose sanguínea do Biostator foram checados em comparação com uma referência de laboratório baseada no método de glicose oxidase em intervalos de 30 minutos para o grampo inteiro. Se necessário o Biostator foi recalibra-do de acordo com os resultados do método de referência de laboratório. Os indivíduos permaneceram em posição supina durante o período de grampeamento.

[000113] Amostras de sangue para determinação de concentrações de insulina glargina do soro e peptídeo C foram retiradas 1 hora, 30 min e imediatamente antes da medicação e, por conseguinte, 30 min, 1 hora, 2 horas e em seguida a cada duas horas até 24 horas, e 30 horas após a administração da medicação de estudo.

[000114] No dia 2 de cada período do estudo (P1 a P4), uma refeição foi servida após o grampo euglicêmico ser concluído. Pressão sanguínea, frequência cardíaca, e temperatura corporal central (timpâ-nica) foram registradas, e uma amostra para glicose sanguínea foi retirada. Os indivíduos foram dispensados da clínica após sua segurança ter sisdo assegurada pelo Investigador.

[000115] Os sítios de injeção foram observados durante o período de grampo inteiro. Quaisquer alterações na condição de saúde dos indiví- duos foram relatadas nos registros médicos do indivíduo (fonte) e na CRF.

Hematologia de Segurança [000116] RBC, Hb e Hct em P 3 foram analisados quanto à ocorrência de anemia em P 4. Se positivo, o intervalo entre P 3 e P 4 foi estendido ao máximo permitido 18 dias e uma estimativa de RBC, Hb e Hct adicional feita antes de P 4.

Procedimentos de Dispensa [000117] Os indivíduos retornaram para uma visita de EOS entre 4 a 14 dias após P4. Os indivíduos jejuaram (à parte de água) durante 10 horas. Quaisquer alterações na condição de saúde dos indivíduos desde o último período foram relatadas nos registros médicos do indivíduo (fonte) e na CRF.

[000118] Os seguintes itens/exames foram estimados: •Exame físico (incluindo sistema cardiovascular, tórax e pulmões, tireoide, abdome, sistema nervoso, pele e mucosas, e sistema musculoesquelético) •Peso •Pressão sanguínea e frequência cardíaca (após 5 min em posição supina) •Temperatura corporal central (timpânica) •ECG de 12 direções padrão •Estado da hematologia, química clínica, e urinálise (por vareta verificadora de nível) •Teste de β-HCG na urina (apenas para fêmeas) [000119] Os indivíduos foram dispensados no dia 2 de cada período, após uma revisão completa pelo Investigador dos dados de segurança disponíveis.

Plano de Coleta para Amostras Biológicas Sangue SCR (Avaliação): •Hematologia, Química clínica, HbA1c, Sorologia (teste de Hepatite B/C, teste de HIV): aproximadamente 20 mL de sangue foram coletados. P1 a P4 (Dia 1 e 2): •Glicose sanguínea [000120] Biostator automaticamente mediu a glicose sanguínea em intervalos de um minuto durante o período de grampo inteiro, incluindo o período antes da medicação de estudo. O volume de sangue necessário pelo Biostator foi 2 mL-h-1. Um volume de sangue estimado de 252 mL foi necessário para leituras de glicose com o Biostator durante os quatro períodos. Amostras de sangue (0,3 mL) para checar os valores de glicose sanguínea do Biostator foram coletadas 60, 30, 5 e 0 minutos antes da dosagem e em intervalos de 30 minutos após a dosagem até o fim do grampo (30 horas). Um volume de sangue estimado de 41 mL foi coletado durante os quatro períodos. •Concentrações de peptídeo C e insulina glargina do soro [000121] Amostras de sangue venoso (3,5 mL) foram coletadas 1 hora, 30 min e imediatamente antes da dosagem, 30 min, 1 hora, 2 horas e em seguida a cada duas horas até 24 horas, e 30 horas após a dosagem. Um volume de sangue estimado de 252 mL foi coletado durante os quatro períodos. Determinação de insulina glargina foi dada prioridade. Amostras sobressalentes apenas foram usadas para determinação de concentração de peptídeo C. •RBC, Hb, Hct [000122] Sangue venoso foi coletado antes de começar os períodos de grampo 3 e 4. Aproximadamente 4 mL de sangue foram coletados durante os dois períodos.

Visita de Fim do estudo (EOS): •Hematologia, Química clínica: aproximadamente 12 mL de sangue foram coletados. •Teste de β-HCG na urina (apenas para fêmeas) Volume de sangue total SCR - EOS: [000123] No total, aproximadamente 585 mL de sangue foram coletados para cada indivíduo durante o estudo inteiro.

Urina [000124] Análise qualitativa de fármaco na urina foi conduzida em SCR e EOS. Análise de fármaco na urina consiste em anfetami-nas/metanfetaminas, barbituratos, benzodiazepínicos, canabinoides, cocaína, opiatos. Urinálise segura qualitativa com varetas verificadoras de nível foi conduzida em SCR e EOS. Urinálise segura consiste em análise para: pH, proteína, glicose, sangue, eritrócitos, leucócitos, bilir-rubina, urobilinogênio, cetona, gravidade específica, e nitrito.

Plano de medição para outras variáveis do estudo [000125] Exame físico foi executado em SCR e EOS.

[000126] Temperatura corporal central (timpânica) foi retirada em SCR, P1 a P4 antes e após o período de grampo, e em EOS.

[000127] Pressão sanguínea e frequência cardíaca foram medidas após cerca de 5 minutos em repouso em uma posição supina, e também após 3 minutos em uma posição vertical em SCR e EOS. Em P1 a P4 pressão sanguínea e frequência cardíaca foram registradas em posição supina após pelo menos 5 minutos antes do início dos procedimentos de grampo na manhã do dia 1, e após conclusão dos procedimentos de grampo 30 horas após cada administração da medicação de estudo (dia 2).

[000128] Eletrocardiogramas (12 direções padrão) foram registrados em SCR e EOS.

[000129] Peso corporal e altura foram medidos em SCR. O peso corporal foi registrado na manhã do dia 1 de P1 a P4 (antes da administração da medicação de estudo) e em EOS.

[000130] Análise de álcool (etanol, analisador de respiração) foi conduzida em SCR e EOS, e na manhã do dia 1 de P1 a P4 (antes da administração da medicação de estudo).

Restrição(ões) do Estudo [000131] Do entardecer do dia -1 (P1 a P4) e durante todos os Períodos (dias de grampo), os indivíduos abstiveram-se de beber álcool, chá, café, bebidas de cola ou cítricas, fumo. Comer frutas cítricas foi também proibido durante todo o estudo. Os indivíduos foram solicitados seguir um estilo de vida estável em toda a duração da experiência, até o último controle, sem nenhuma atividade física intensa.

Definição de dados de fonte [000132] Todas as avaliações listadas abaixo que são relatadas em uma CRF foram sustentadas por documentação de fonte identificada apropriadamente assinalada relacionada a: •identificação do indivíduo, história médica; •exame clínico, sinais vitais, peso corporal e altura; •estimativas de laboratório, ECG; •pontos do tempo farmacocinéticos; •datas e tempos de visitas e estimativas; •datas e tempos de administração, e sítio de injeção; •AEs; •duração de grampo (tempos de início e fim) •Outro [000133] Uma CRF foi considerada como documentação de fonte para outros itens.

Exemplo 6: Considerações estatísticas [000134] Este exemplo fornece informação para o plano de análise estatística para o estudo. Um plano de análise estatística foi delineado antes da inclusão dos indivíduos.

Determinação do tamanho da amostra [000135] INS-AUC(0-24h) foi 0 parâmetro primário para o qual portanto o cálculo de tamanho de amostra foi executado.

[000136] Para o propósito deste cálculo de tamanho de amostra, vários SDdentro do indivíduo de INS-AUC(0-24h) transformado por log natural entre 0,125 e 0,225 foram considerados. Um método de cálculo de tamanho de amostra para um método de bioequivalência média foi usado para um projeto cruzado de 2 sequências, 2 tratamentos, 4 períodos. Se os CIs de 90% para a relação de formulação estavam completamente contidos dentro de [0,80-1,25], então a bioequivalência média foi concluída para o parâmetro.

[000137] O estudo HOE901/1022 foi a base para suposições sobre variabilidade. Com base na análise estatística do estudo HOE901/1022, um valor de 0,175 pode ser esperado para o desvio padrão dentro do indivíduo (SDdentro) da escala transformada por log natural.

[000138] A tabela abaixo indica o número de indivíduos requerido para demonstrar a bioequivalência média da relação de médias geométricas ajustadas (teste versus formulação de referência) usando o intervalo de referência de bioequivalência: [0,80-1,25], adotando uma relação verdadeira entre 0,85 e 1,15 com 90% de capacidade.

Tabela 2 - Número total de indivíduos requerido para obter uma capacidade de pelo menos 90% ______________________________________SD(dentro) de escala log natural___________ 0,125 0,15 0,175 0,2 0,225 Relação verdadeira adotada N N N N N 0,85 38 54 72 94 120 0,90 12 16 20 26 32 0,95 6 8 10 14 16 1,00 6 6 8 10 12 1,05 6 8 10 12 16 1,10 10 14 18 22 28 1,15__________________________________20 30 40 50 64 N = número total de indivíduos [000139] Com este projeto, 20 indivíduos (10 por sequência) são re- queridos para demonstrar equivalência das duas formulações de insulina glargina, com 90% de capacidade, permitindo relação verdadeira de 0,9, se o SDdentro verdadeiro de escala log natural for 0,175.

[000140] Um número de 24 indivíduos randomizados é responsável por casos potenciais de retiradas.

Descrição do indivíduo Disposição de indivíduos [000141] Um sumário detalhado de responsabilidade de indivíduo incluindo cálculo de indivíduos incluídos, randomizados, expostos (isto é, receberam qualquer quantidade da medicação de estudo), completos (isto é, indivíduos que concluíram todos os períodos de tratamento do estudo), descontinuados junto com as razões principais para des-continuação foi gerado para cada sequência e para todos os indivíduos no total.

[000142] A disposição de indivíduo na visita final foi apresentada em uma listagem incluindo grupo de sequência, estado de disposição no fim do estudo com a data da última administração do fármaco de estudo, data da visita final, razão para descontinuação. Todas as retiradas do estudo, que ocorrem em ou após o início da primeira administração do fármaco de estudo, foram totalmente documentadas no corpo do relato de estudo clínico (CSR).

Divergências de protocolo [000143] Antes do fechamento da base de dados, a concordância com o protocolo foi examinada com referência aos critérios de inclusão e exclusão, concordância com o tratamento, terapias proibidas, e duração e disponibilidade de estimativas planejadas. Divergências de protocolo foram identificadas pela equipe de estudo antes do fechamento da base de dados e listadas no Relato de Revisão de Dados, incluindo dados ausentes e descontinuações de IP, e classificadas como divergências menores ou maiores.

[000144] Divergências individuais para critérios de inclusão e exclusão como relatado pelo Investigador foram listadas.

[000145] Outras divergências foram listadas por e/ou descritas no corpo do CSR.

População de Análise População a ser analisada [000146] Os indivíduos excluídos de qualquer população de análise foram listados com a sequência de tratamento, e com a razão para exclusão. Qualquer informação relevante foi totalmente documentada no CSR.

[000147] No evento de indivíduos tendo recebido tratamentos que se diferenciaram daqueles designados de acordo com o plano de randomização, as análises foram conduzidas de acordo com o tratamento recebido em vez de ser de acordo com o tratamento randomizado.

População Farmacocinética [000148] Todos os indivíduos sem quaisquer divergências maiores relacionadas à administração do fármaco de estudo, e para quem parâmetros de PK estão disponíveis, foram incluídos na população farma-cocinética. Para indivíduos com perfis de PK insuficientes em alguns, porém não todos os dias de estudo, os parâmetros dos perfis suficientes foram incluídos na análise.

População Farmacodinâmica [000149] Todos os indivíduos sem quaisquer divergências maiores relacionadas à administração do fármaco de estudo, e para quem parâmetros de PD estão disponíveis, foram incluídos na população farma-codinâmica. Para indivíduos com perfis de GIR insuficientes em alguns, porém não todos os dias do estudo, os parâmetros dos perfis suficientes foram incluídos na análise.

População de Segurança [000150] Avaliação de segurança foi baseada em indivíduos que re- ceberam uma dose do fármaco de estudo (população exposta), independente da quantidade de tratamento administrada, incluindo indivíduos prematuramente retirados.

Características demográficas e básicas Características Demográficas, História Médica e Diagnósticos do Indivíduo [000151] Os seguintes dados foram coletados: sexo, idade na avaliação, altura, peso, e raça. Índice de massa corporal (BMI) por indivíduo foi calculado dos dados de peso corporal e altura: BMI = peso corporal [kg]-(altura [m])-2 [000152] Todas as variáveis no que diz respeito às características demográficas e básicas foram listadas individualmente e resumidas. [000153] Divergências dos critérios de inclusão relacionados à história médica e diagnósticos foram listadas e descritas individualmente.

Parâmetros Farmacodinâmicos de Referência [000154] Níveis de glicose sanguínea de referência foram resumidos por sequência.

Parâmetros de Segurança de referência [000155] Para variáveis de segurança, o último valor escalonado antes da administração do fármaco de estudo dentro do período ou dentro do estudo, qualquer que seja aplicável para a variável, foi retirado como o valor de referência. Se o valor de pré-dosagem de referência for rechecado antes da dosagem, o valor rechecado foi considerado como a referência e usado nas estatísticas.

Extensão da exposição de tratamento do estudo e concordância [000156] Detalhes da dosagem do fármaco de estudo e informação complementar foram listados individualmente e resumidos se apropriado.

Medicação/terapia anterior/concomitante [000157] Medicações/terapias anteriores e concomitantes (se existirem) foram codificadas de acordo com a World Health Organization-Drug Reference List (WHO-DRL) e foram listadas individualmente.

Análise de Variáveis Farmacodinâmicas Descrição de Variável(is) Farmacodinâmicas [000158] A fim de obter comparabilidade entre os indivíduos sob a dosagem de insulina dependente do peso corporal, todos os valores para GIR foram divididos pelo peso corporal do indivíduo em kg para análise. Desse modo, GIR abaixo sempre se refere à taxa de infusão de glicose padronizada com o peso corporal.

[000159] Variável de PD primária foi: •Área sob a curva de tempo de taxa de infusão de glicose padronizada com o peso corporal [GIR-AUC(0-24h) (mg-kg-1)] [000160] Variável de PD secundária foi: •Tempo (h) para 50% de GIR-AUC(0-24h) [T50% - GIR- AUC(0-24h) (h)] [000161] As seguintes variáveis de PD adicionais foram derivadas: •Área sob a curva de tempo de taxa de infusão de glicose padronizada com o peso corporal até o fim do grampo [GIR-AUC(0-fim) (mg-kg-1)] •Áreas fracionais sob a curva de tempo de taxa de infusão de glicose padronizada com o peso corporal [GIR-AUC(4-20h), GIR-AUC(0-12h), GIR-AUC(12-24h) (mg-kg-1)] •Taxa de infusão de glicose padronizada com o peso corporal máxima [GIRmax (mg-kg-1-min-1)] •Tempo para GIRmax [GIR-tmax (h)] [000162] A fim de fornecer dados significativos e seguros, o valor para GIRmax e correspondentemente o tempo para GIRmax foram derivados de uma curva de GIR homogênea para cada indivíduo.

Análise Primária [000163] Para estimar a bioeficácia relativa (atividade) para GIR-AUC(0-24h) (mg-kg-1), o parâmetro não transformado foi analisado com um modelo de efeitos misto linear.

[000164] O modelo misto inclui termos fixos para sequência, período, formulação, e termos aleatórios para o indivíduo dentro da sequência, com variações dentro do indivíduo e entre indivíduos específicas de formulação e variação de indivíduo-por-formulação. Estimativa de ponto e intervalo de confidência de 90% para a relação de formulação (T/R) foram então obtidos com base no teorema de Fieller [Fieller, 1954].

[000165] Bioeficácia equivalente (atividade) foi concluída se o intervalo de confidência para a relação de formulação tiver sido colocado dentro de [0,80-1,25].

[000166] Suposições para a distribuição da variável foram checadas. Análise Secundária/Análise de Variáveis Secundárias [000167] Perfis de GIR padronizados com o peso corporal médio e individuais bem como perfis acumulativos de porcentagem média durante o tempo foram plotados.

[000168] Parâmetros de PD foram listados individualmente, e estatísticas descritivas foram geradas.

[000169] Relações de formulação (T/R) com limites de confidência foram derivadas para GIR-AUCs (mg-kg-1) fracionais e taxa de infusão de glicose padronizada máxima [GIRmax (mg-kg-1-min-1)] usando o modelo de efeitos misto linear correspondente como descrito para a análise primária.

[000170] O tempo para 50%-GIR-AUC (h) e tempo para GIRmax [GIR-tmax (h)] foram analisados não parametricamente.

Desempenho do grampo [000171] Perfis individuais de concentração de glicose sanguínea foram plotados.

Análise de dados de segurança [000172] Todos os sumários de dados de segurança foram baseados na população de segurança.

[000173] A fase de tratamento individual para análise de dados de segurança iniciou com a primeira administração da medicação de estudo e finalizou com a visita de EOS.

Eventos Adversos [000174] Todos AEs foram codificados usando MedDRA (versão em uso).

Definições AEs Emergentes com Tratamento [000175] Todos AEs foram classificados como segue: •AEs emergentes com tratamento (TEAEs): AEs que ocorreram durante o período de tratamento durante o primeiro momento ou pioraram durante o período de tratamento, se presentes antes; •AEs emergentes com não tratamento (NTEAEs): AEs que ocorreram fora do período de tratamento sem piorar durante o período de tratamento;

Designação para as Formulações [000176] Para propósitos de análise, cada TEAE foi designado para a última formulação fornecida antes do início e/ou piora do AE. Se um TEAE desenvolve-se sob uma formulação e piora sob uma formulação posterior, ele foi considerado um TEAE para ambas formulações.

Informação Ausente [000177] No caso de informação ausente ou inconsistente, um AE foi contado como um TEAE, a menos que possa claramente ser excluído que ele não é um TEAE (por exemplo, por datas parciais ou outra informação).

[000178] Se a data de início de um AE estiver incompleta ou ausente, ele foi assumido ter ocorrido após a primeira administração da medicação de estudo exceto se uma data incompleta indicou que o AE iniciou antes do tratamento.

Eventos Adversos Emergentes com Tratamento [000179] Todos AEs foram listados individualmente. Eles foram resumidos por formulação, incluindo sumário por classe de órgão de sistema.

Mortes, Eventos Adversos Sérios e outros Significantes [000180] Se quaisquer tais casos, mortes, AEs sérios, e outros AEs significantes foram listados individualmente e descritos no relato do estudo em detalhes.

Eventos Adversos Levando à Descontinuação do Tratamento [000181] AEs levando à descontinuação do tratamento foram listados individualmente e descritos no relato do estudo em detalhes.

Avaliações Clínicas de Laboratório [000182] Anormalidades potencialmente clinicamente significantes (PCSA) e critérios fora-de-faixa foram definidos no plano de análise estatística deste estudo. Definições de anormalidades potencialmente clinicamente significantes (PCSA) e definições fora-de-faixa foram relatadas por parâmetro.

[000183] Dados individuais foram listados por indivíduo e por visita, bem como informação complementar.

[000184] Indivíduos com valores fora das faixas normais e indivíduos com PCSAs foram analisados por formulação, e globalmente para o fim da avaliação do estudo. Indivíduos com PCSAs pós-referência foram listados.

Sinais Vitais [000185] Anormalidades potencialmente clinicamente significantes (PCSA) e critérios fora-de-faixa foram definidos no plano de análise estatística deste estudo. Definições de PCSA e definições fora-de-faixa foram relatadas por parâmetro.

[000186] Indivíduos com PCSAs foram analisados por formulação, e globalmente para o fim da avaliação do estudo. Indivíduos com PCSAs pós-referência foram listados.

[000187] Valores brutos e parâmetros derivados foram resumidos por formulação, e globalmente para o fim da avaliação do estudo. Os dados individuais foram listados por indivíduo e por visita com bandeiras para anormalidades, bem como informação complementar.

ECG

[000188] Anormalidades potencialmente clinicamente significantes (PCSA) e critérios fora-de-faixa foram definidos no plano de análise estatística deste estudo. Definições de PCSA e definições fora-de-faixa foram relatadas por parâmetro.

[000189] Indivíduos com PCSAs no fim do estudo foram analisados globalmente. Indivíduos com PCSAs pós-referência foram listados. [000190] Valores brutos e parâmetros derivados em SCR e em EOS foram resumidos globalmente. Os dados individuais foram listados por indivíduo e por visita com bandeiras para anormalidades, bem como informação complementar.

Análise de Dados Farmacocinéticos Parâmetros Farmacocinéticos [000191] Tempos relativos reais foram usados para derivar os parâmetros de PK.

[000192] Variável primária foi • INS-AUC(0-24h). (pU-h.mL-1) [000193] Variável de PK secundária foi •Tempo (h) para 50% de INS-AUC(0-24h) [T50% - INS-AUC(0_24h) (h)] [000194] As seguintes variáveis de PK adicionais foram derivadas: • INS-AUCs fracionais [INS-AUC(4-20h), INS-AUC(0-12h), INS-AUC(12-24h) (pU-h-mL-1)] • INS-AUC até o fim do grampo [INS-AUC(0-fim) (pU-h-mL- 1)] •Concentração de insulina do soro máxima [INS-Cmax (pU-mL-1)] •Tempo para INS-Cmax [INS-Tmax (h)] Análise estatística Análises descritivas [000195] Estatísticas descritivas de dados de concentração foram apresentadas por tempos de protocolo.

[000196] Perfis de concentração de insulina do soro média e individuais foram plotados.

[000197] Concentrações de insulina do soro foram individualmente listadas e estatísticas descritivas por ponto do tempo foram geradas. [000198] Estatísticas descritivas de parâmetros de PK foram geradas por formulação.

[000199] Perfis de peptídeo C foram plotados e caracterizados des-critivamente.

Análise Primária [000200] Para estimar a biodisponibilidade relativa para INS-AUC(0-24h), o parâmetro transformado por log foi analisado com um modelo de efeitos misto linear.

[000201] O modelo misto incluiu termos fixos para sequência, período, formulação, e termos aleatórios para indivíduo dentro da sequência, com variações dentro do indivíduo e entre indivíduos específicas de formulação e variação de indivíduo-por-formulação.

[000202] Para INS-AUC(0-24h), estimativa de ponto e intervalos de confidência de 90% para a relação de formulação (T/R) foram obtidos por computação de estimativas e intervalos de confidência de 90% para a diferença entre os métodos de formulação dentro da estrutura de modelo de efeitos misto, e em seguida conversão na escala de relação pela transformação antilog.

[000203] Biodisponibilidade equivalente foi concluída se o intervalo de confidência para a relação de formulação tiver sido colocado dentro de [0,80-1,25].

Análises de Parâmetros de PK Adicionais e Secundários [000204] Tempo para 50% de INS-AUC (h) e tempo para concentração máxima [INS-Tmax (h)] foram analisados não parametricamente. [000205] INS-AUCs fracionais transformados por log e INS-AUC(0-fim) (pU-h-mL-1) e concentração de insulina glargina do soro máxima [INS-Cmax (pU-mL-1)] foram analisados com o modelo de efeitos misto linear correspondente como descrito para a análise primária. Estimativas de ponto e intervalos de confidência foram relatadas.

Peptídeo C

[000206] Quando disponíveis, perfis de peptídeo C foram plotados e caracterizados descritivamente.

ANÁLISE DE PK/PD

[000207] Análises de PK/PD foram executadas de uma maneira exploratória, se apropriado.

Exemplo 6: Resultados do Estudo Disposição do Indivíduo [000208] Um total de 35 indivíduos, 11 mulheres e 24 homens, foram avaliados dos quais 24 indivíduos elegíveis sadios foram arrolados, randomizados e receberam pelo menos uma dose da medicação de estudo. Dos 24 indivíduos randomizados, 1 indivíduo retirou-se do estudo sob sua própria solicitação após o primeiro período de tratamento de dose. Vinte e três (23) indivíduos concluíram o estudo de acordo com o protocolo e foram incluídos nas análises farmacodinâmicas (PD) e farmacocinéticas (PK). Todos 24 indivíduos tratados foram incluídos na avaliação de segurança.

[000209] Não existiu nenhuma divergência maior de protocolo. Características demográficas [000210] Os seguintes dados foram coletados: sexo, idade na avaliação, altura, peso, e raça. Os índices de massa corporal (BMI) por indivíduo foram calculados dos dados de peso corporal e altura: BMI = peso corporal [kg]-(altura [m])-2.

Tabela 3 - Sumário de Características do Indivíduo- População de Segurança Desempenho do grampo [000211] Os dois grupos de tratamento, Lantus U 100 e Lantus U 300, foram similares com respeito às concentrações de glicose sanguínea de referência em jejum dos indivíduos, que serviu para definir o nível de grampo de glicose dos indivíduos. A duração dos grampos após dosagem foi 30 horas e a mesma em todos os períodos de tratamento.

Finalidades Primárias [000212] Equivalência em biodisponibilidade (exposição) para Lantus U 100 e Lantus U 300 não foi estabelecida. Equivalência em bioeficá-cia (atividade) para Lantus U 100 e Lantus U 300 não foi estabelecida.

Variáveis Primárias [000213] A área sob a curva de tempo de concentração de insulina glargina do soro de 0 a 24 horas (INS-AUC(0-24h)) não foi equivalente para Lantus U 100 e Lantus U 300. A exposição foi menor em cerca de 40% com U300. A área sob a curva de GIR versus tempo de 0 a 24 horas (GIR-AUC(0-24h)) não foi equivalente para Lantus U 100 e Lantus U 300. A atividade foi menor em cerca de 40% com U300.

Variáveis Secundárias [000214] O tempo para 50% de INS-AUC(0-24h) (h) foi similar para Lantus U 100 e Lantus U 300. O tempo para 50% de GIR-AUC(0-24h) (h) foi maior em 0,545 (h) (0,158 - 1,030) para Lantus U 300, que foi estatisticamente significante.

Segurança [000215] Nenhum evento adverso sério (AEs) foi relatado. Cinco (5) indivíduos por tratamento (teste e referência) relataram um total de 14 TEAEs, todos dos quais foram de intensidade suave a moderada, e resolveram-se sem sequelas. O evento mais frequentemente relatado foi cefaleia (4 indivíduos por tratamento) seguido por náusea, vômito e pirexia (1 indivíduo cada sob U 100), e dor do procedimento (1 indiví- duo sob U 300). De nota, cefaleia é uma observação comum para estudos de grampo e está relacionada à infusão de soluções de glicose hiperosmoláricas. Entretanto, uma ligação aos produtos investigacio-nais não pode ser excluída. Nenhuma reação do sítio de injeção foi relatada.

Conclusões [000216] Insulina glargina U 100 e insulina glargina U 300 não são equivalentes em biodisponibilidade (exposição) e bioeficácia (atividade). Exposição e atividade após insulina glargina U300 foram menores em cerca de 40% quando comparadas à exposição e atividade após administração da mesma quantidade (0,4U/kg) de insulina glargina U100.

[000217] Insulina glargina U300, entretanto, mostrou um perfil de PK (exposição) e PD (atividade) ainda mais uniforme do que insulina glar-gina U100, como seria desejado para uma insulina basal. Estas diferenças surpreendentes e inesperadas em exposição e atividade entre as formulações de insulina glargina U100 e insulina glargina U300 após a mesma dose s.c. aos indivíduos sadios são eficazmente mostradas nas figuras abaixo. De nota, ao mesmo tempo a glicose sanguínea foi constante.

[000218] A administração de insulina glargina U 300 foi sem resultados de segurança e tolerabilidade.

Exemplo 7: Estudo racional para estudo comparando a atividade glicodinâmica e exposição de três doses subcutâneas diferentes de insulina glargina U300 [000219] Os resultados do estudo em indivíduos sadios (ver exemplos 1 a 6) mostraram a inequivalência em exposição e eficácia entre Lantus® U100 e insulina glargina U300. Os indivíduos receberam a mesma dose de insulina glargina (0,4 U/kg) para U100 e U300, porém a liberação da mesma quantidade por unidade de U300 produziu cerca de 40% menos exposição e efeito do que a liberação de U100. Insulina glargina U300, entretanto, mostrou um perfil farmacodinâmico ainda mais uniforme do que Lantus® U100, como seria desejado para uma insulina basal.

[000220] Um novo estudo descrito nos seguintes exemplos, portanto, compara a atividade glicodinâmica e exposição de três doses subcutâneas diferentes de insulina glargina U300 versus uma dose padrão de Lantus® U100 como comparador em uma fixação de grampo euglicêmico com pacientes com diabetes tipo 1. Este estudo tem o intuito de aproximar uma dose U300 que é equieficaz a 0,4 U/kg de Lantus® U100 como estimado por parâmetros de disposição de glicose sanguínea fornecidos pela técnica de grampo.

[000221] Exposição de insulina glargina é estimada de perfis de con-centração-tempo após administração subcutânea e atividade como utilização de glicose por unidade de insulina.

[000222] O estudo é designado estimar o efeito metabólico e exposição de diferentes doses de insulina glargina U300 comparado a uma dose padrão de Lantus® U100 em uma fixação de grampo euglicêmico em indivíduos com diabetes melito tipo 1. O estudo compreende 4 tratamentos (R, T1, T2 e T3), 4 períodos de tratamento (TP1-4) e 4 sequências. Existe uma visita de avaliação (D-28 a D-3), 4 visitas de tratamento (D1 a D2 em TP1 a TP4), e uma visita de fim do estudo (entre D5 a D14 após a última dosagem) com estimativa final de parâmetros de segurança.

[000223] Os indivíduos são expostos a cada tratamento R, T1, T2 e T3 uma vez de uma maneira cruzada, dupla cega e randomizada de acordo com um projeto quadrado latino. Este projeto é considerado apropriado para avaliar o efeito farmacológico e exposição de diferentes doses de insulina glargina U300 comparadas a Lantus® U100. [000224] A dose de Lantus® U100 de 0,4 U/kg selecionada para o estudo é bem caracterizada para fornecer euglicemia em pacientes com diabetes tipo 1 e foi facilmente investigada em outros estudos de grampo com pacientes com diabetes tipo 1.

[000225] Três doses diferentes são testadas para insulina glargina U300, 0,4, 0,6 e 0,9 U/kg. Esta faixa de dose permite intrapolating uma dose aproximada equieficaz a 0,4 U/kg de Lantus® U100. A dose de 0,4 U/kg de insulina glargina U300 foi anteriormente testada em voluntários sadios (ver os exemplos 1 a 6) e foi descoberta ser menos ativa do que 0,4 U/kg de Lantus® U100 dentro de 30 horas, o fim predefinido do período de observação. A bioatividade de 0,4 U/kg de insulina glargina U300 como medido pela disposição de glicose total foi 39,4% menor do que aquela da medicação de referência (0,4 U/kg de Lantus® U100). Uma dose correspondentemente maior de insulina glargina U300, por exemplo, 0,6 U/kg de insulina glargina U300, foi esperada resultar em uma atividade glicodinâmica aproximadamente equivalente comparada a 0,4 U/kg de Lantus® U100. Além disso, o escalonamento de dose proporcional permite explorar os perfis de exposição e efeito para proporcionalidade de dose.

[000226] Um estudo em pacientes com diabetes tipo 1 evita confundir o impacto de insulina endógena e permite melhor estimativa de exposição e duração de ação. Além disso, a falta de um ensaio específico para insulina glargina obriga usar um ensaio que lê toda insulina endógena. Desse modo, qualquer fonte adicionada de insulina exceto insulina glargina exógena causaria concentrações de insulina falsamente muito altas.

[000227] Este estudo tem um projeto cruzado; por razões práticas e éticas não mais do que 3 doses de U300 serão comparadas a Lantus® U100. A estimativa de atividade glicodinâmica de produtos de insulina de longa ação requer uma fixação de grampo euglicêmico durante até 36 horas devido à duração estendida de ação.

[000228] O ingrediente farmacêutico ativo, insulina glargina, é o mesmo em ambas formulações, U100 e U300. As doses usadas neste estudo são incluídas na faixa de uso regular. Embora um risco global de hipoglicemia não seja completamente excluído, ele é controlado pela técnica de grampo euglicêmico.

Farmacodinâmicas [000229] A atividade farmacodinâmica de insulina glargina é avaliada pela técnica de grampo euglicêmico em pacientes com diabetes tipo 1, que é o procedimento padrão estabelecido para avaliar o efeito de produtos de insulina administrados exógenos sob disposição de glicose sanguínea.

[000230] Parâmetros específicos para estimativa de disposição de glicose em uma fixação de grampo euglicêmico são a taxa de infusão de glicose (GIR) padronizada com o peso corporal, glicose total disposta, GIR-AUC0-36, e tempos para uma determinada porcentagem de GIR-AUC0-36, tal como tempo para 50% de GIR-AUC0-36.

[000231] Parâmetros ancilares são a GIR padronizada com o peso corporal homogênea máxima, GIRmax, e tempo para GIRmax, GIR-Tmax. [000232] Duração de ação de insulina glargina é derivada do tempo entre a dosagem e divergências pré-especificadas acima do nível eu-glicêmico (grampo).

[000233] O monitoramento de glicose é executado durante 36 horas devido à longa duração de ação de insulina glargina após administração subcutânea.

Farmacocinéticas [000234] Devido à natureza de liberação sustentada de insulina glargina existe uma falta de picos pronunciados no perfil de concentração. Portanto, o tempo para 50% de INS-AUC (T50% de INS-AUC0-36) é calculado como uma medida para a localização de tempo do perfil de exposição de insulina glargina, e INS-Cmax e INS-Tmax servirão como me- didas adicionais.

Objetivos primários do estudo [000235] O objetivo primário do estudo é estimar as relações de efeito metabólico de três doses de insulina glargina U300 diferentes versus 0,4 U/kg de Lantus® U100.

Objetivos secundários do estudo [000236] Os objetivos secundários do estudo são estimar as relações de exposição de três doses de insulina glargina U300 diferentes versus 0,4 U/kg de Lantus® U100, comparar a duração de ação de diferentes doses de insulina glargina U300 versus 0,4 U/kg de Lantus® U100, explorar a resposta à dose e relação de exposição à dose de insulina glargina U300, e estimar a segurança e tolerabilidade de insulina glargina U300 em indivíduos com diabetes tipo 1.

Exemplo 8: Projeto do estudo, descrição do protocolo [000237] Controle ativo, cruzado, randomizado, duplo cego, único centro, de fase I (4 tratamentos, 4 períodos de tratamento e 4 sequências; quadrado latino), com uma duração de eliminação entre os períodos de tratamento (5 a 18 dias, preferidos 7 dias) em indivíduos machos e fêmeas com Diabetes Melito Tipo 1 recebendo doses únicas de insulina glargina em •0,4 U/kg de Lantus® U100 (= Referência R) •0,4 U/kg de Insulina glargina U300 (= Teste T1) •0,6 U/kg de Insulina glargina U300 (= Teste T2) •0,9 U/kg de Insulina glargina U300 (= Teste T3) [000238] Os quatro tratamentos R e T1-3 são fornecidos cruzados em quatro períodos de tratamento (TP 1 a TP 4) com as quatro sequências •R-T1-T2-T3 •T3-R-T1-T2 •T2-T3-R-T1 •T1-T2-T3-R aleatoriamente designadas para os indivíduos (relação de 1:1:1:1).

Duração da participação no estudo •Duração do estudo total para um indivíduo: cerca de 4 a 11 semanas (duração min-max, dependendo do período de eliminação, avaliação excl.) •Duração de cada parte do estudo para um indivíduo: -Avaliação: 3 a 28 dias (D-28 a D-3) -Período de Tratamento 1 a 4: 2 dias (1 permanência durante a noite) -Eliminação: 5 a 18 dias (preferencialmente 7 dias entre as dosagens consecutivas) -Visita de fim do estudo: 1 dia entre D5 e D14 após a última administração do fármaco de estudo Exemplo 9: Seleção dos indivíduos [000239] Número de indivíduos planejado: pelo menos 24 indivíduos devem ser arrolados para ter 20 indivíduos avaliáveis.

Critérios de inclusão Demografia I 01.Indivíduos machos ou fêmeas, entre 18 e 65 anos de idade, inclusive, com diabetes melito tipo 1 durante mais do que um ano, como definido pela American Diabetes Association (American Diabetic Association. Report of the Expert Committee on the Diagnosis and Classification of Diabetes Mellitus. Diabetes Care 1998;21:5-19) I 02.Dose de insulina total de < 1,2 U/kg/dia I 03.Peso corporal entre 50,0 kg e 95,0 kg inclusive se macho, entre 50,0 kg e 85,0 kg inclusive se fêmea, índice de massa corporal entre 18,0 e 30,0 kg/m2 inclusive Estado de saúde I 04.Peptídeo C do soro em jejum negativo (< 0,3 nmol/L) I 05.Glicoemoglobina (HbA1c) < 9,0% I 06.Regime de insulina estável durante pelo menos 2 meses antes do estudo (com relação à segurança do indivíduo e integridade científica do estudo) I 07.Descobertas normais em história médica e exame físico (sistema cardiovascular, tórax e pulmões, tireoide, abdome, sistema nervoso, pele e mucosas, e sistema musculoesquelético), a menos que o Investigador considere qualquer anormalidade ser clinicamente irrelevante e não interferindo com a conduta do estudo (com relação à segurança do indivíduo e integridade científica do estudo) I 08.Sinais vitais normais após 10 minutos em repouso na posição supina: 95 mmHg < pressão sanguínea sistólica < 140 mmHg; 45 mmHg < pressão sanguínea diastólica < 90 mmHg; 40 bpm < frequência cardíaca < 100 bpm I 09.ECG normal de 12 direções padrão após 10 minutos em repouso na posição supina; 120 ms < PQ < 220 ms, QRS < 120 ms, QTc < 440 ms se macho, < 450 ms se fêmea I 10.Parâmetros de laboratório dentro da faixa normal (ou limiar de avaliação definido para o sítio do Investigador), a menos que o Investigador considere uma anormalidade ser clinicamente irrelevante para pacientes com diabetes; entretanto creatinina do soro deve ser estritamente abaixo da norma de laboratório superior; enzimas hepáti-cas (AST, ALT) e bilirrubina (a menos que o indivíduo tenha documentado síndrome de Gilbert) não deve ser acima de 1,5 ULN

Indivíduos fêmeas apenas I 11.Mulheres de potencial de gravidez e parto (menos do que dois anos após menopausa ou não cirurgicamente estéril durante mais do que 3 meses), devem ter um teste de gravidez de β-HCG do soro negativo na avaliação e um teste de gravidez de β-HCG da urina negativo no dia 1 de TP1 a TP4 e devem usar um método altamente eficaz de controle de natalidade, que é definido como aqueles que resultam em uma taxa de falência baixa (isto é, menos do que 1% por ano) de acordo com a Nota para guia de estudos de segurança não clínicos para a conduta de experiências clínicas humanas para produtos farmacêuticos (CPMP/ICH/286/95, modificações). Durante o estudo inteiro, indivíduos fêmeas de potencial de gravidez e parto devem usar dois métodos independentes de contracepção, por exemplo, diafragma e condom revestido com espermicina. O uso de um condom e cremes espermicidas não é suficientemente seguro.

[000240] Para mulheres após a menopausa com presença de menos do que dois anos após a menopausa, e não cirurgicamente estéril durante mais do que 3 meses, o estado hormonal será determinado (FSH > 30 IU/L, estradiol < 20 pg/mL) Critérios de exclusão Histórico médica e estado clínico E 01.Qualquer história ou presença de doença cardiovascular clinicamente relevante, pulmonar, gastrointestinal, hepática, renal, metabólica (à parte de diabetes melito tipo 1), hematológica, neurológica, psiquiátrica, sistêmica (que afeta o corpo como um todo), ocular, ginecológica (se fêmea), ou infecciosa; qualquer doença infecciosa aguda ou sinais de enfermidade aguda E 02.Mais do que um episódio de hipoglicemia severa com convulsão, coma ou requerendo assistência de outra pessoa durante os últimos 6 meses E 03.Cefaleias severas frequentes e / ou enxaqueca, náusea recorrente e / ou vômito (mais do que duas vezes ao mês) E 04.Perda de sangue (> 300 ml) dentro dos 3 meses antes da inclusão E 05.Hipotensão sintomática (qualquer que seja a diminui- ção na pressão sanguínea), ou hipotensão postural assintomática definida por uma diminuição em SBP igual a ou maior do que 20 mmHg dentro dos três minutos quando mudando da posição supina para a vertical E 06.Presença ou história de uma alergia a fármaco ou doença alérgica clinicamente significante de acordo com o julgamento do Investigador E 07.Probabilidade de requerer tratamento durante o período do estudo com fármacos não permitidos pelo protocolo de estudo clínico E 08.Participação em uma experiência com qualquer fármaco investigacional durante os últimos três meses E 09.Sintomas de uma enfermidade clinicamente significante nos 3 meses antes do estudo, que, de acordo com a opinião do Investigador, podem interferir com os propósitos do estudo E 10.Presença de abuso de fármaco ou álcool (consumo de álcool > 40 gramas / dia) E 11.Fumar mais do que 5 cigarros ou equivalente por dia, incapaz de abster-se de fumar durante o estudo E 12.Consumo excessivo de bebidas com bases de xantina (> 4 xícaras ou copos / dia) E 13.Se fêmea, gravidez (definida como teste de β-HCG positivo), amamentação Substância de interferência E 14.Qualquer medicação (incluindo Erva de São João) dentro dos 14 dias antes da inclusão, ou dentro de 5 vezes a meia-vida de eliminação ou meia-vida farmacodinâmica daquele fármaco, seja qual for o uso mais longo e regular de qualquer medicação exceto insulinas no último mês antes do início do estudo com a exceção de hormônios da tireoide, fármacos redutores de lipídeo e anti- hipertensivos, e, se fêmea, com a exceção de contracepção hormonal ou terapia de substituição hormonal menopausal; qualquer vacinação dentro dos últimos 28 dias.

Condições gerais E 15.Indivíduo que, no julgamento do Investigador, é provável ser não submisso durante o estudo, ou incapaz de cooperar por causa de um problema de linguagem ou desenvolvimento mental pobre E 16.Indivíduo em período de exclusão de um estudo anterior de acordo com regulações aplicáveis E 17.Indivíduo que não pode ser contactado no caso de emergência E 18.Indivíduo é o Investigador ou qualquer subinvestigator, assistente de pesquisa, farmacêutico, coordenador do estudo, ou outro staff do mesmo, diretamente envolvido na conduta do protocolo Estado biológico [000241] Reação positiva a quaisquer dos seguintes testes: antígeno de superfície de Hepatite B (HBs Ag), anticorpos anti-núcleo de Hepatite B (anti-HBc Ab) se composto tendo atividades imunes possíveis, anticorpos antivírus da Hepatite C (anti-HCV2), anticorpos antivírus da imunodeficiência humana 1 e 2 (anti-HIV1 e anti HIV2 Ab) E 19.Resultados positivos de análise de fármaco na urina (anfetaminas / metanfetaminas, barbituratos, benzodiazepínicos, ca-nabinoides, cocaína, opiatos) E 20.Teste de álcool positivo Específico ao estudo E 21.Hipersensibilidade conhecida à insulina glargina e ex- cipientes E 22.Qualquer história ou presença de trombose de veia profunda da perna ou um aparecimento frequente de trombose de veia profunda da perna em parentes de primeiro grau (pais, irmãos ou filhos).

Exemplo 10: Tratamentos Produto investigacional •Insulina glargina [000242] Duas formulações de insulina glargina diferentes são usadas: -Solução de Lantus® U100 para injeção contendo 100 U/mL de insulina glargina (produto comercializado) -Solução de Insulina glargina U300 para injeção contendo 300 U/mL de insulina glargina •Dose: -Lantus® U100: 0,4 U/kg (= Referência R) -Insulina glargina U300: 0,4, 0,6 e 0,9 U/kg (= Teste T1-T3) •Recipiente: cartuchos de vidro de 3 mL •Rotina de aplicação: Subcutaneamente horizontalmente 5 cm à direita e esquerda do umbigo •Condições: Jejuado •Duração do tratamento: 1 dia em cada período, dose única •Início: 09:00 no dia 1 (D1) em períodos de tratamento 1 a 4 (TP1-4) •Tratamentos adicionais para 100% de indivíduos inclusos são fornecidos Tabela 4 - Tratamentos T ratamento de referência T ratamento de teste Lantus® U100 Insulina glargina U300 INN Insulina glargina (análogo de insulina Insulina glargina (análogo de insulina humana recombinante) humana recombinante) Formulação Cartuchos para 3 mL de solução U100 Cartuchos para 3 mL de solução U300 1 mL contém: 1 mL contém: 3.637 mg de insulina humana 21A-Gly- 10.913 mg de insulina humana 21A-Gly-30Ba-L-Arg-30Bb-L-Arg [equimolar a 100 30Ba-L-Arg-30Bb-L-Arg [equimolar a 300 IU de insulina humana] IU de insulina humana] 30 pg de zinco 90 pg de zinco 2,7 mg de m-cresol 2,7 mg de m-cresol 20 mg de glicerol a 85% 20 mg de glicerol a 85% HCl e NaOH, pH 4,0 HCl e NaOH, pH 4,0 gravidade específica 1.004 g/mL gravidade específica 1.006 g/mL

Dose 0,4 U/kg · 0,4 U/kg • 0,6 U/kg • 0,9 U/kg Fabricante sanofi-aventis Deutschland GmbH sanofi-aventis Recherche & Development, Montpelier, França Número de Formulação comercial, adquirida através tbd batelada de CRO INN = nome não proprietário internacional Dosagem [000243] Este é um estudo de dose única com 4 administrações da medicação de estudo no total. Os indivíduos são randomizados para diferentes sequências do tratamento de referência e teste de modo que cada indivíduo receba o tratamento de referência (R) e cada dos tratamentos de teste (T1-3) uma vez.

[000244] As injeções são administradas à esquerda ou direita do umbigo, com ambos sítios sendo usados para injeções separadas. Um período de eliminação de 5 a 18 dias separa os dias de dosagem consecutivos, a preferência é 7 dias (7 dias entre a dosagem consecutiva). A duração do período de eliminação varia individualmente permitindo tanto o participante quanto o Investigador ajustarem às suas necessidades. Por experiência, 5 dias compreendem um período mínimo para 6 recuperação permitindo 1 gram| enquanto 18 dias representam dias de dosagem, permitindo ac as obrigações relacionadas ao n; [000245] Administração de IP jum; o indivíduo continua a jejuar [000246] A concentração de g faixa de 5,5 mmol/L (100 mg/dL) se durante a última hora antes Quando a glicose sanguínea fict sem qualquer infusão de glicose de IP não ocorre mais cedo do q tarde do que 14:00 horas no dia Se glicose sanguínea não for es para cima ou para baixo para números inteiros como mostrado nos seguintes exemplos para uma dose de 0,6 U/kg de insulina glargina: •um indivíduo com um peso corporal de 75,3 kg recebe 45 U de insulina (75,3 x 0,6 = 45,18 que é arredondado para baixo para 45); •um indivíduo com um peso corporal de 74,4 kg recebe 45 U de insulina (74,4 x 0,6 = 44,64, que é arredondado para cima para 45).

[000250] O peso corporal registrado durante TP1 D1 é usado para cálculo de dose da medição de estudo durante todos os períodos de tratamento. A dose da medicação de estudo não deve ser alterada se uma alteração do peso do indivíduo for menos do que ou igual a 2 kg entre TP1 e um dos TPs subsequentes. Se um peso corporal do indivíduo altera em mais do que 2 kg entre TP1 e um dos TPs subsequentes, a dose da medicação de estudo é recalculada com base no peso em D1 do respectivo período de tratamento.

Seringas e agulhas [000251] Seringas com agulhas unidas apropriadas para acuradamente administrar pequenas quantidades de solução de injeção são usadas apenas (por exemplo, Becton Dickinson, Ref 305502, Dimensões: 1 ML 27G 3/8 0,40x10). As seringas são fornecidas pelo Investigador.

Outros Produtos [000252] Outros produtos usados durante o procedimento de grampo são descritos na tabela 5.

Tabela 5 - Preparação de infusão Código do INN Formulação Fabricante Dose/Rotina de fármaco administração Glicose Glicose solução a 20% para infu- Certificado, selecio- infusão iv são nado por PROFIL

Heparina sódi- Heparina Frasconete contendo 5 mL Certificado, selecio- infusão iv ca Intramed de solução (5000 IU/mL) nado por PROFIL cloreto de Cloreto de Solução Certificado, selecio- infusão iv sódio a 0,9 % sódio nado por PROFIL

Apidra® Insulina 100 U/mL para injeção sanofi-aventis infusão iv glulisina [000253] Solução de glicose, solução de cloreto de sódio, heparina e insulina glulisina são fornecidas pelo Investigador.

[000254] Solução de glicose: solução de glicose a 20% é infundida com o Biostator® para manter a glicose sanguínea individual dos indivíduos no nível alvo determinado. Uma segunda bomba de infusão (parte do Biostator®) libera a solução de cloreto de sódio a 0,9% para manter a linha patente. No caso da quantidade de solução de glicose a 20% necessária exceder a capacidade de infusão do Biostator®, uma segunda bomba de infusão de glicose é embutida.

[000255] Heparina: Uma solução de heparina de dose baixa (10.000 unidades de heparina/100 mL de salina) é infundida por meio de um cateter duplo lúmen. A solução de heparina é associada com o sangue usado para a medição de glicose sanguínea do Biostator® no outro lú-men do cateter e tem o intuito de prevenir coagulação de sangue no sistema.

[000256] Insulina glulisina: 15 U de Apidra® [100 U/mL] são administradas para 49 mL de solução de salina, aos quais 1 mL do próprio sangue do indivíduo é adicionado para prevenir adesão, produzir uma concentração de 0,3 U/mL, que é infundida em uma taxa individual para obter euglicemia.

Descrição de métodos de cegamento [000257] Indivíduos recebem quatro diferentes tratamentos (R, T1, T2 e T3) em um projeto randomizado, cego e de cruzamento.

[000258] A fim de manter o cegamento, uma terça parte de pessoa não cega está envolvida em dispensamento e administração de IP.

Esta pessoa não está de outro modo envolvida no estudo e/ou parte do estudo conduzido no CRO, não divulga qualquer informação para alguém e assegura manter a condição de cegamento do estudo. Ele obtém o código aleatório e dosa indivíduos consequentemente. A preparação de IP e a dosagem é seguida e checada por uma segunda pessoa independente que tem também acesso ao códido aleatório, porém é igualmente ligada à confidencialidade. Método de designação de indivíduos para o grupo de tratamento [000259] IPs são administrados de acordo com o Protocolo de estudo clínico apenas a indivíduos que deram consentimento informado escrito.

[000260] Indivíduos que concordam com todos os critérios de inclu-são/exclusão são designados exatamente antes da administração do Produto investigacional no dia 1 no Período de Tratamento 1: •Um número de indivíduo incremental de acordo com a ordem cronológica de inclusão na manhã de D1 no Período de Tratamento 1. O número de indivíduo de 9 dígitos consiste em 3 componentes (por exemplo, 276 001 001, 276 001 002, 276 001 003, etc.), dos quais os primeiros 3 dígitos (276) são o número do país, os medianos 3 dígitos são o número do sítio e os últimos 3 dígitos são o número incremental do indivíduo dentro do sítio. O número do indivíduo permanence inalterado e permite o indivíduo ser identificado durante todo o estudo; •um número de tratamento em uma ordem pré-planejada seguindo a lista randomizada com o próximo indivíduo elegível sempre recebendo o próximo número de tratamento de acordo com a lista de randomização [000261] A administração de IP é de acordo com a sequência de tratamento randomizado.

[000262] Indivíduos retirados do estudo mantêm seus números de indivíduo e seus números de tratamento, se já designado. Os indivíduos de substituição têm um número de identificação diferente (isto é, 500 + o número do indivíduo que descontinuou o estudo). Cada indivíduo recebe a mesma sequência de tratamento que o indivíduo, que descontinuou a experiência.

[000263] Indivíduos reprovados na triagem são designados um número diferente, por exemplo, 901, 902 (a ser registrado em uma CRF apenas no caso de AE ocorrendo o período de avaliação após sinalização de consentimento informado).

[000264] Notas: A randomização de um indivíduo ocorre após Investigators confirmação de eligibilidade do indivíduo para este estudo. Parâmetros de referência são os parâmetros disponíveis o mais próximo antes da dosagem.

Empacotamento e rotulagem [000265] Solução U300 de Insulina glargina é fornecida por sanofi-aventis em caixa de reagrupamento de cartuchos de 3 mL.

[000266] O respectivo número de IP é empacotado sob a responsabilidade de sanofi-aventis de acordo com boa prática de fabricação e requisito regulatório local e fornecido para CRO.

[000267] O conteúdo da rotulagem é de acordo com as especificações e requisitos regulatórios locais.

[000268] Lantus® U100 é comercialmente disponível e será ordenado pelo CRO.

Condições de armazenagem [000269] Todo IP é armazenado em uma sala fechada apropriada sob a responsabilidade do investigador, e deve ser acessível para o pessoal autorizado apenas.

[000270] O IP tem que ser armazenado a +2°C a +8°C, protegido da luz, e não deve ser congelado.

Acesso ao código de randomização durante o estudo [000271] A fim de manter o cegamento, uma terça parte de pessoas não cegas é responsável para o dispensamento e administração de IP. Esta pessoa não é de outro modo involvida no estudo e/ou parte da equipe de estudo no CRO, não descreve qualquer informação para alguém e assegura a manutenção da condição de cegamento do estudo. Ele obtem o código aleatório e dosa indivíduos consequentemente. A preparação e dosagem de IP é seguida e checada por uma segunda pessoa independente que tem também acesso ao código ran-domizado, porém é igualmente ligado à confidencialidade.

[000272] No caso de um Evento Adverso, o código não esta sendo rompido, exceto nas circunstâncias quando o conhecimento do produto investigacional é essencial para tratar o indivíduo. Para cada indivíduo, material de rompimento do código que contém o nome do tratamento é fornecido como envelopes. Ele é mantido em local seguro no sítio durante toda a experiência clínica. O Patrocinador recupera todo o material de rompimento do código (aberto ou selado) na conclusão da experiência clínica.

[000273] Se o cegamento é rompido, o Investigador documenta a data de abertura e a razão para rompimento do código nos dados fonte.

[000274] O Investigador, o farmacêutico do sítio clínico, ou outro pessoal permitido armazenar e dispensar IP é responsável pela garantia de que o IP usado no estudo é seguramente mantido como especificado pelo Patrocinador e de acordo com os requisitos regulatórios aplicáveis.

[000275] Todo IP é dispensado de acordo com o Protocolo de experiência clínica e é responsabilidade do Investigador garantir que um registro preciso de IP emitido e retornado é mantido.

Tratamento concomitante [000276] O uso de medicação concomitante não é permitido durante o estudo como especificado em Critérios de Exclusão No. E14, com a exceção de fármacos mencionados abaixo, e é interrompido dentro de uma determinada estrutura de tempo (vide E14) antes da inclusão do indivíduo no dia 1 do Período de Tratamento 1.

[000277] Para prevenir a interferência de tratamento de insulina padrão dos indivíduos com a medição do grampo, indivíduos devem abster-se de usar insulinas basais e trocar para •produtos de ação intermediária ou curta de insulina a partir de 48 horas antes da dosagem em D1 de TP1 a TP4, se em produtos de insulina de longa ação, isto é, Lantus® (insulina glargina), Levemir® (detemir) ou insulinas ultralente, •insulinas de curta ação a partir de 24 horas antes da dosagem em D1 de TP1 a TP4 se em produtos de insulina de ação intermediária, isto é, insulina NPHa.

[000278] A última injeção subcutânea de insulina de curta ação não é mais atrasada do que 9 horas antes da administração do fármaco de estudo. Indivíduos em terapia de bomba descontinuam a infusão de insulina na manhã do dia 1, pelo menos 6 horas antes de cada administração de IP (em torno de 03:00 horas assumindo o início de administração de IP às 09:00 horas).

[000279] Para eventos adversos sintomáticos que não estão expondo a segurança dos indivíduos (por exemplo, cefaleia) medicação concomitante é reservada para eventos adversos de intensidade severa ou de intensidade moderada que persiste por uma longa duração. Em particular, o uso de acetaminofeno/paracematol é proibido se existir um risco conhecidos de hepatotoxicidade, ou assim que anormalidades de enzimas do fígado ocorrerem.

[000280] Entretanto, se um tratamento específico é requerido por qualquer razão, um registro preciso deve ser mantido na forma de re- gistro apropriada, incluindo o nome da medicação (nome não proprietário internacional), dosagem diária e duração para tal uso. O Patrocinador deve ser informado dentro de 48 horas por meio de e-mail ou fax, com a exceção de tratamento de cefaleia.

[000281] Tratamento de reações alérgicas potenciais serão em concordância com as recomendações como em outro lugar publicado (Samspon HA, Munoz-Furlong A, Campbell RL et al. Second symposium on the definition e management of anaphylaxis: summary report -Second National Institute of Allergy e Infectious Disease/Food Allergy e Anaphylaxis Network symposium. Journal of Allergy e Clinical Immunology 2006;117(2):391-397). Dependente da severidade do tratamento de reação alérgica com anti-histaminas, corticosteroides e epinefrina podem ser considerados.

Responsabilidade do tratamento e concordância •Concordância do IP: -IP é administrado sob supervisão médica direta, e um registro apropriado é completado pela pessoa responsável pelo disper-samento e administração de IP ou seu representante; qualquer informação sobre a sequência do tratamento ou dose não é descrita e documentos são fechados sem nenhum acesso por outras pessoas envolvidas no estudo -A ingestão de IP é confirmada pelos resultados do ensaio de fármaco mensurável •Responsabilidade do IP: -A pessoa responsável pelo dispensamento e administração de IP ou seu representante conta o número de cartuchos restante nos pacotes retornados, em seguida carrega na Forma Log de Tratamento; -O Investigador registra a informação sobre o dia e tempo de dosagem na(s) página(s) apropriadas da Forma de Relato de Caso (CRF) -A Equipe Monitora incumbida do estudo então checa os dados de CRF comparando-os com o IP e formas de responsabilidade apropriadas após fechamento da base de dados (para impedir não ce-gamento do estudo) [000282] Os cartuchos usados são mantidos pelo Investigador até a reconciliação totalmente documentada executada com o Patrocinador no término do estudo após fechamento da base de dados.

Exemplo 11: Estimativa de produto investigacional [000283] O presente estudo é designado para estimar o efeito metabólico e relações de exposição de três diferentes doses de insulina glargina U300 versus 0,4 U/kg de Lantus® U100, para comparar a duração de ação de diferentes doses de insulina glargina U300 versus 0,4 U/kg de Lantus® U100, para explorar a resposta de dose e ligação da exposição de dose de insulina glargina U300, e para estimar a segurança e tolerabilidade de insulina glargina U300 em uma fixação de grampo euglicêmico em indivíduos com diabetes melito tipo 1.

Farmacodinâmicas Grampo Euglicêmico [000284] O efeito farmacodinâmico de insulina glargina, principalmente a disposição de glicose total e duração de ação de insulina, é avaliado pela técnica de grampo euglicêmico.

[000285] Durante o grampo euglicêmico, concentração glicose sanguínea venosa arterializada, que reflete o suprimento para utilização total de glicose de todos os tecidos, e a taxa de infusão de glicose (GIR) necessária para manter uma concentração de glicose sanguínea do indivíduo em seu nível alvo (nível de grampo) é continuamente medida e registrada usando o dispositivo Biostator® (sistema de monitoração de glicose contínua, Life Sciences Instruments, Elkhart, IN, USA). [000286] A quantidade de glicose requerida (GIR-AUC) é uma medi- da da captação de glicose em tecidos (disposição de glicose ou atividade de redução de glicose) mediada pelo excesso de insulina exógena. O Biostator® determina os níveis de glicose sanguínea em intervalos de 1 minuto e ajusta a taxa de infusão de glicose em resposta a alterações em glicose sanguínea usando um algorítmo predefinido.

Procedimento de Grampo [000287] Para impedir a interferência de tratamento de insulina padrão dos indivíduos com a medição de grampo, indivíduos devem abster-se de usar insulinas basais e trocar para •produtos de ação intermediária ou curta de insulina de 48 horas antes da dosagem em D1 de TP1 a TP4, se em produtos de insulina de longa ação, isto é, Lantus® (insulina glargina), Levemir® (de-temir) ou insulinas ultralente, •insulinas de curta ação a partir de 24 horas antes da dosagem em D1 de TP1 a TP4 se sob produtos de insulina de ação intermediária, isto é, insulina NPH

[000288] A última injeção subcutânea de insulina de curta ação não é mais atrasada do que 9 horas antes da administração de IP. Indivíduos em terapia de bomba descontinuam a infusão de insulina na manhã do dia 1, pelo menos 6 horas antes de cada administração de IP (em torno de 03:00 horas assumindo o início de administração de IP às 09:00 horas).

[000289] Durante os Períodos de Tratamento 1 a 4 (TP1 - TP4), os indivíduos são admitidos ao clínico na manhã de D1 após um jejum durante a noite de pelo menos 10 horas.

[000290] Na manhã do dia 1 o procedimento pré-grampo inicia e indivíduos são ligados ao Biostator®. A concentração de glicose sanguínea é ajustada para 4,4 - 6,6 mmol/L (80 - 120 mg/dL) e mantida dentro destes limites por meio de administrações de bolo iv de um análogo de insulina de rápida ação (por exemplo, insulina glulisine) e subse- quentes infusões individuais de glicose como necessário.

[000291] 60 minutos antes a administração da medicação de estudo glicose sanguínea é então ajustada para 5,5 mmol/L (100 mg/dL) ±20% (*) sem qualquer infusão de glicose para a última hora antes da dosagem. A infusão de insulina glulisine é descontinuada imediatamente antes da administração da medicação de estudo.

[000292] Quando a glicose sanguínea ficou estável durante pelo menos 1 hora dentro de uma faixa de 5,5 mmol/L (100 mg/dL) ±20% sem qualquer infusão de glicose, IP é administrada (= T0 on D1 in TP1 a TP4, em torno de 09:00). Indivíduos recebem reference ou medicação de teste (R, T1-3, veja a Tabela 4) como designado por randomização. Injeção é dada à esquerda ou direita do umbigo.

[000293] Administração de IP não ocorre mais cedo do que 09:00 horas na manhã e não mais tarde do que 14:00 horas no dia 1 nos Períodos de Tratamento 1 a 4. Se a glicose sanguínea não for estabilizada durante pré-grampo antes de 14:00 horas, a dosagem não ocorre. A visita é terminada e o indivíduo é escalado para uma nova visita de dosagem 1 - 7 dias posteriormente.

[000294] Administração de IP é administrada sob condições de jejum; o indivíduo continua jejuado durante todo o período de grampo. [000295] O grampo euglicêmico nível de glicose sanguínea é continuamente mantido por meio de infusão iv de solução de glicose até o término do grampo.

[000296] O objetivo de qualquer suplementação de insulina basal é adicionar ou mesmo substituir secreção de insulina endógena entre as refeições. Em indivíduos sem secreção de insulina endógena, quando convidados para participar neste estudo, insulina exógena deve prover exatamente a quantidade de insulina requerida para descartar a produção de glicose hepática. Se perfeitamente comparado, não existe nenhuma necessidade de glicose extra para compensar o excesso de insulina. A taxa de infusão de glicose resultante aproxima-se de zero. Assim que a ação de insulina cessa, a concentração de glicose sanguínea eleva-se. Os tempos para início de elevação e para regular as concentrações de glicose sanguínea excedendo os limiares predefini-dos são lidos pelo Biostator®.

[000297] As doses selecionadas de Lantus® U100 e insulina glargina U300 são acima da necessidade basal média que por sua vez produz alguma demanda de glicose refletida em um GIR bastante grande até 36 horas.

[000298] O parâmetro correspondente indicative do desempenho do grampo, isto é, a precisão para manter a glicose sanguínea em nível de referência de grampo, é a variabilidade da glicose sanguínea durante o período de grampo. Uma medida para variabilidade da glicose sanguínea é o coeficiente de variação (CV%) por grampo individual. [000299] Um baixo coefficient de variação em glicose sanguínea é um pré-requisito para apropriadamente avaliar um efeito de insulina fixações de grampo.

[000300] O período de grampo não é excedido 36 horas após a injeção de medicação de estudo, o término do grampo predefinido. [000301] Indivíduos continuam jejuando durante todo o período período de grampo de glicose (pré-grampo e grampo) ao mesmo tempo que tendo acesso à água ad libitum.

[000302] No caso em que a glicose sanguínea passa 11,1 mmol/L (200 mg/dL) antes do término do grampo por 30 minutos após a cessação de infusão de glicose e o Investigador confirma que quaisquer erros possíveis induzindo falsos níveis de glicose sanguínea acima de 11,1 mmol/L (200 mg/dL) foram excluídos, a insulina glulisine usada no tempo de pré-administração de IP do grampo é dada para estender o período de observação para 36 horas. Naquele caso, o patrocinador deve ser informado.

[000303] Os indivíduos são desligados da fixação de grampo quando glicose sanguínea inclui-se bem na faixa isoglicêmica.

[000304] Os participantes resumem sua pré-medicação de estudo no dia de descarga em TP1 a TP4, isto é, dia 2.

[000305] O efeito dos IPs é retarder cerca de 24 a 36 horas, que é como os participantes são confinados no instituto durante 2 dias. [000306] Um período de eliminação de 5 a 18 dias separa os consecutivos dias de período de grampo, a preferência é 7 dias (7 dias entre dosagem consecutiva). A duração do período de eliminação varia individualmente permitindo tanto o participante quanto o investigador ajustarem-se às suas necessidades. Por experiência, 5 dias compreendem um período mínimo para recuperação possibilitando 1 grampo por semana para um participante, enquanto que 18 dias representam um intervalo de 3 semanas entre os dias de dosagem, permitindo aos indivíduos a liberdade para satisfazer obrigações relacionadas ao não estudo, se inevitável.

[000307] Avaliação e D1 de TP1 não é separada por mais do que 28 dias, enquanto que o EOS ocorre não mais cedo do que D5 ou não mais tarde do que D14 após a última dosagem, respectivamente.

Tempos de amostragem farmacodinâmica [000308] Sangue venoso arterializado é continuamente coletado em uma taxa de 2 mL/h para determinação de concentração de glicose sanguínea arterial cada minuto durante pré-grampo (antes da administração de IP) e período de grampo (até 36 horas após a administração de IP).

[000309] Amostras de sangue venoso arterializadas (0,2 mL) para calibração coincidente com Biostator®, que é um requisito técnico, são coletadas pelo menos em intervalos de 30 minutos após a conecção ao Biostator® até 36 horas após a medicação. Número de amostras farmacodinâmicas [000310] A glicose sanguínea é continuamente medida durante o procedimento de grampo. Além disso, pelo menos 74 amostras, por indivíduo e período de tratamento, serão coletadas para calibração do Biostator® após a administração de IP. Ao todo, 74*4*24 amostras ou 7104 amostras são coletadas (vide a Tabela abaixo).

Tabela 6 - Número de amostras de sangue e alíquotas por indivíduo durante o grampo Períodos Glicose a Glicose b TP1 Continuamente 74 TP2 Continuamente 74 TP3 Continuamente 74 TP4 Continuamente 74 Total número de amostras por indivíduo Continuamente 296 a monitoração de glicose contínua a 2 mL/h para PD b calibração Procedimento de Manipulação Farmacodinâmica Tabela 7 - Procedimento de Manipulação da Amostra Analisado Volume de amostra Procedimentos de Manipulação sanguínea Glicose for PD 2 mL/h nenhum Glicose para Sangue a ser inserido no capilar e em seguida na xícara 200 pL calibração da amostra para análise imediata.

Parâmetros farmacodinâmicos [000311] A área sob o GIR padronizado de peso corporal dentro de 36 horas (GIR-AUC0-36) e o tempo para 50% do GIR-AUC total dentro de 36 horas (T50%-GIR-AUC0-36) são calculados.

[000312] A duração de controle de glicose sanguínea é adotada como o tempo em euglicemia a partir da dosagem de um desvio acima do nível de glicose de (100 mg/dL). Os tempos de glicose sanguínea controlada dentro de margens predefinidas são adotados a partir da dosagem de limiares especificados, por exemplo, níveis de glicose sanguínea em 110, 130 e 150 mg/dL.

[000313] Além disso, o GIR corrigido de peso corporal homogêneo máximo (GIRmax) e o tempo para GIRmax, GIR-Tmax, são estimados. [000314] Outros parâmetros suplementares são derivados quando apropriado.

Segurança Características demográficas de referência [000315] As características demográficas de referência consistem em: •Idade (anos) •Peso corporal (kg) •Altura (cm) •Índice de Massa Corporal (BMI) (kg/m2) Estimativa de Segurança em Referência e durante o estudo •Exame físico em avaliação: sistema cardiovascular, tórax e pulmões, tireoide, abdome, sistema nervoso, pele e mucosas, e sistema musculo-esqueletal e história médica e cirúrgica relevante, história de diabetes (diagnóstico de diabetes, início de tratamento com insulina, complicações tardias); apenas descobertas relevantes para o estudo são documentadas. •Condição de fumo passada e atual •Exame físico em pré-dose e durante o estudo: sistema cardiovascular, abdome e pulmões; apenas descobertas relevantes para o estudo são documentadas •Temperatura corporal (áurea) •Sinais vitais: Frequência cardíaca, frequência respiratória e pressão sanguínea sistólica e diastólica medido após 10 minutos em condição de repouso supino, frequência cardíaca e pressão sanguínea sistólica e diastólica também após 3 minutos em posição em pé (exce- to para medições não escaladas quando conectados a Biostator®) Testes de laboratório (em condições jejuadas para amostras de sangue): •Hematologia: Contagem de célula vermelha do sangue (RBC), hematócrito (Hct), hemoglobina (Hb), contagem de célula branca do sangue (WBC) com differential (neutrófilos, eosinófilos, basófi-los, monócitos e linfócitos), plaquetas, INR e aPTT •Bioquímica: -Eletrólitos: sódio, potássio, bicarbonato, cloreto, cálcio -Função do fígado: AST, ALT, fosfatase alcalina, gama-glutamil transferase (yGT), bilirubina total e conjugada -Função renal: creatinina, BUN -Metabolismo: Glicose, albumina, proteínas totais, coleste-rol total, triglicerídeos, HbA1c (em avaliação, D1 TP1 e EOS), LDH, amilase, lipase, peptídeo C (avaliação apenas) -Toxicidade muscular potencial: Creatinina fosfocinase (CPK) -Sorologia: Antígeno de hepatite B (HBs Ag), anticorpos de núcleo anti-Hepatite B (anti-HBc Ab), anticorpos anti-Hepatite C (anti-HCV2), anticorpos anti-HIV1 e anti-HIV2 •Amostra de sangue arquival: uma amostra de sangue de 5 mL é coletada em um tubo de topo vermelho, seco, centrifugado em aproximadamente 1500 g durante 10 minutos a 4°C; o soro é então transferido em três tubos de armazenagem, que são imediatamente tampados e congelados em uma posição vertical a -20°C. Esta amostra é usada se qualquer ação de segurança inesperada ocorrer para garantir que um valor de referência de pré-fármaco está disponível para parâmetros previamente não avaliados (por exemplo, sorologia). Se esta amostra não é usada, o Investigador a destrói após a aprovação do Patrocinador.

•Urinálise: Proteínas, glicose, sangue, corpos de cetona, pH -Qualitativa: Uma vareta de verificação de nível é executado em uma espécimen recemente esvaziada para detecção qualitativa usando uma faixa reagente; -Quantitativa: Uma medição quantitativa quanto à contagem de glicose, proteína, eritrócitos e leucócitos é requerida no evento deque o teste de amostra de urina é positivo para qualquer dos parâmetros acima por vareta de verificação do nível de urina (por exemplo, para confirmar qualquer parâmetro de vareta de verificação de nível positivo por uma medição quantitativa). •Análise de fármaco na urina: Anfetaminas/metanfetaminas, barbituratos, benzodiazepínicos, canabinoides, cocaína, opiatos •Teste de respiração de álcool •Gravidez / teste de hormônio (se fêmea): -β-HCG em sangue na avaliação -β-HCG de urina em TP1 a TP4, dia 1 -FSH/estradiol, se pós-menopausa menos do que 2 anos, em avaliação apenas •Eventos Adversos: Espontaneamente relatados pelo indivíduo ou observados pelo Investigador •Telemetria de ECG (único condutor) •ECG de 12 direções (automatic) •Anticorpos anti-insulina [000316] Amostras de sangue para testes de laboratório são tiradas sob condições jejuadas.

Metodologia de ECG

Telemetria de ECG •A telemetria de ECG é continuamente monitorada pela equipe médica. Todos os eventos arrítmicos serão documentados por impressão e incluídos na CRF do indivíduo. Esta documentação provê o diagnóstico do evento, tempo de ocorrência, e duração, e é assinalada pelo Investigador ou delegado. Os registros de telemetria de ECG são mantidos para uma reanálise potencial levando em consideração a exposição do produto investigacional exposição. ECGs de doze condutores •ECGs de doze condutores são registrados após pelo menos 10 minutos em posição supina usando um dispositivo eletrocardi-ográfico (MAC 5500®). Os eletrodos são posicionados no mesmo local para cada registro de ECG em todo o estudo (os sítios de ligação dos condutores são marcados com uma caneta indelével). •ECGs são sempre registrados antes da amostragem de PK (se existir). As amostras de PK são tiradas logo que possível (dentro de 15 minutos) após ECG. •Cada ECG consiste em um registro de 10 segundos dos 12 condutores simultaneamente, induzindo a: -um único ECG de 12 direções (25 mm/s, 10 mm/mV) imprime com avaliação de correção automática de HR, PR, QRS, QT, QTc, incluindo data, tempo, iniciais e número do indivíduo, assinatura do Investigador, e pelo menos 3 complexos para cada condutor. A opinião médica do Investigador e valores automáticos é registrada em uma CRF. Esta impressão é mantida no nível do local. -Uma armazenagem digital que possibilita outra leitura eventual por um lab central de ECG: cada arquivo digital é identificado por tempo teórico (dia e tempo DxxTxxHxx), data real e tempo real (tempo de registro), código de estudo do Patrocinador, número do indivíduo (isto é, 3 dígitos) e números de local e país se relevantes. •O registro digital, armazenagem e transmissão de dados (quando requerido) aquiesce com todos os requisitos regulatórios aplicáveis (isto é, FDA 21 CFR, parte 11).

[000317] Quando sinais vitais, ECG, e amostras de sangue são planejados ao mesmo tempo como uma administração de produto investigacional e/ou uma refeição, eles são feitos antes da administração de produto investigacional e/ou refeição. Quando medições de sinais vitais, ECG, e amostras de sangue para PK, PD, ou segurança coincidem, a seguinte ordem é respeitada: ECG, sinais vitais, PD, PK, e amostra de segurança; a fim de respeitar o tempo exato de amostras de PK (referem-se a diagrama de fluxo para a permissão de janela de tempo para amostras de PK), as outras medidas são feitas à frente do tempo planejado. O planejamento de estimativa é adaptada ao planejamento do estudo Tolerabilidade local no sítio de injeção [000318] Descobertas no sítio de injeção (tal como eritema, edema, pápulas, induração, vesículas, blísteres) são graduadas principalmente de acordo com um Escore de Irritação Global. Uma reação do sítio de injeção local com um escore de > 3 de acordo com a escala de classificação é documentada adicionalmente ccomo um evento adverso. [000319] Os indivíduos são indagados para reporter sensações no sítio de injeção.

Farmacocinéticas [000320] Para a estimativa de insulina glargina farmacocinéticas, a área sob uma curva de concentração de insulina (INS-AUC) até 36 horas, INS-AUC0-36 e o tempo para 50% de INS-AUC0-36 é derivado. Além disso, a concentração de insulina máxima INS-Cmax, e o tempo para C max (INS-T max ) é obtido.

Tempos de amostragem [000321] O sangue é coletado para a determinação de concentrações de insulina glargina nos pontos de tempo 0H, 1H, 2H, 4H, 6H, 8H, 12H, 16H, 20H, 24H, 28H, 32H e 36H após a injeção de medicação de estudo. Número de Amostras farmacocinéticas Tabela 8 - Número de amostras de sangue por indivíduo Períodos Insulina (glargina) Período de T ratamento 1 13 Período de T ratamento 2 13 Período de T ratamento 3 13 Período de T ratamento 4 13 Total número de amostras por indivíduo 52 Total número de amostras a 52*24 = 1248 a assumindo que 24 indivíduos completaram o estudo Procedimento de Manipulação Farmacocinética [000322] O tempo exato de administração de IP e coleta de amostra deve ser registrado em uma CRF.

Parâmetros farmacocinéticos [000323] Os seguintes parâmetros farmacocinéticos são calculados, usando métodos não compartimental para concentrações de insulina glargina após única dose. Os parâmetros incluem, porém não devem ser limitados ao seguinte.

Tabela 9 - Lista de parâmetros farmacocinéticos e definições Parâmetros Fármaco/Analisado Definição/Cálculo Cmax Insulina Concentração máxima observada Tmax Insulina Primeiro tempo para atingir Cmax Área sob a concentração versus a curva de tempo calculada AUC0-36 Insulina usando o método trapezoidal de tempo zero a 36 horas após a dosagem T50%-AUC Insulina Tempo para 50% de AUC0-36 Volume de sangue amostrado Tabela 10 - Volume de sangue amostrado Tipo Volume por Amostra Número da Amostra Total Tipo Volume por Amostra Número da Amostra Total Sorologia 2 mL 1 2 mL

Hematologia 2,7 mL 5 13,5 mL

Coagulação 2 mL 3 6 mL

Bioquímica 5 mL 3 15 mL

Amostra arquival 5 mL 1 5 mL

Insulina 3 mL 13*4 156 mL

Calibração de glicose 0,2 mL 74*4 59,2 mL

Glicose continuamente 2 mL/h 40*4 320 mL

β-HCG (se fêmea) a 0 mL 1 0 mL

FSH/estradiol (se fêmea) a,b 0 mL 1 0 mL

Anticorpos anti-insulina 3 mL 2 6 mL

Tõtãi 582,7 mL a Incluído em sorologia b Se pós-menoausa menos do que 2 anos Medidas para proteger o cegamento da experiência [000324] A fim de manter o cegamento, uma terça parte de pessoas não cegas é envolvido para dispensamento e administração de IP. Esta pessoa não é de outro modo envolvida no estudo e/ou parte da equipe de estudo no CRO ou patrocinador. Ela obtém o código randomizado fornecido por sanofi-aventis e não descreve o código randomizado ou qualquer outra informação para qualquer outra pessoa. Por razão de segurança, o código de randomização de tratamento é não cegado para relatar Autoridade de Saúde de qualquer Reação a Fármaco Adversa Inesperada Suspeita (SUSAR) e razoavelmente associado com o uso do IP de acordo com ou o julgamento do Investigador e/ou do Patrocinador.

Segurança Objeto [000325] O Investigador é a primeira pessoa responsável pela tomada de todas as decisões clinicamente relevantes no caso de assuntos de segurança.

[000326] Se julgado necessário, a opinião de um especialista deve ser considerada de uma maneira conveniente (por exemplo, falência renal aguda, convulsões, brotoejas da pele, angioedema, parada cardíaca, modificações eletrocardiográficas, etc).

Exemplo 12: Procedimentos de estudo Quadro de visita Procedimentos de avaliação [000327] Procedimentos de avaliação são realizados dentro de 28 dias até 3 dias antes da inclusão para determinar eligibilidade do indivíduo para participação. O indivíduo recebe informação sobre os objetivos do estudo e procedimentos do investigador. O indivíduo sinaliza o consentimento informado antes de qualquer ação relacionada com o estudo. O registro de eventos adversos começa, por conseguinte. [000328] Antes da avaliação, os indivíduos jejuaram (à parte de água) durante 10 horas (excluindo uma pequena quantidade de car-boidratos como contramedida para hipoglicemia, se necessário). [000329] A visita de avaliação inclui as seguintes investigações: 1 Demográficas (idade, sexo, raça, condição de fumo passada e atual, altura, peso corporal, BMI) 2 Exame físico (sistema cardiovascular, tórax e pulmões, ti-reoide, abdomen, sistema nervoso, pele e mucosas, e sistema múscu-lo-esqueleta) e história médica e cirúrgica relevante, história de diabetes (diagnóstico de diabetes, início de tratamento de insulina, complicações tardias); apenas descobertas relevantes para o estudo são documentadas. 3 Tratamentos anteriores relevantes e todos os concomitantes, regime de insulina média nos últimos 2 meses antes da entrada no estudo 4 ECG (12 condutores padrões), medidas de sinais vitais (taxa de pulso, pressão sanguínea sistólica e diastólica medido após 10 minutos em condição de repouso supino, e após 3 minutos em posição em pé), e temperatura corporal central (aural) 5 Testes de laboratório com hematologia, HbA1c, peptídeo C, química clínica, sorologia, urinálise, análise de fármaco na urina, teste de respiração de álcool, teste de sangue β-HCG e FSH/estradiol (fêmea apenas, se aplicáveis) [000330] Um novo teste dentro de uma semana é permitido com o resultado do último teste sendo conclusivo.

[000331] Indivíduos que atendem a todos os critérios inclusão, e nenhum dos critérios de exclusão é eligível para a visita de inclusão. [000332] No caso de falhas de avaliação os resultados básicos do exame de são registrados nos documentos de fonte.

Procedimentos de inclusão (Dia 1 de Períodode Tratamento 1) [000333] Indivíduos, que se qualificam para arrolamento no estudo, são admitidos ao clínico no estado jejuado na manhã de D1 de TP1 em aproximadamente 07:00.

[000334] O exame de inclusão é realizado no primeiro dia de dosagem dia (D1, TP1) e inclui as seguintes investigações: [000335] Exame físico com história médica atualizada (AEs), medicação prévia/concomitante e temperatura corporal aural Peso corporal, BMI (altura medida em avaliação) [000336] ECG (12 condutores padrões), medidas de sinais vitais (frequência cardíaca, frequência respiratória, pressão sanguínea sistó-lica e diastólica medido após 10 minutos na posição de repouso supi-na, e após 3 minutos na posição em pé) [000337] Testes de laboratório com hematologia, química clínica, uri-nálise, análise de fármaco na urina, teste de respiração de álcool, teste de urina β-HCG (fêmea apenas, se aplicáveis).

[000338] Cada indivíduo recebe um número de identificação incrementai de acordo com a ordem cronológica de sua inclusão no estudo. [000339] Randomização ocorre em D1/TP1 após confirmação de eli-gibilidade do indivíduo pelo Investigador. Se mais do que um indivíduo é randomizado ao mesmo tempo, os indivíduos são randomizados consecutivamente de acordo com a ordem cronológica de inclusão na manhã do dia 1 / TP1, isto é, o indivíduo com o menor número de indivíduo recebe o seguinte número de randomização disponível.

[000340] Os resultados de testes de laboratório de D1/TP1 são valores de referência e considerados confirmatório, com a exceção do teste de urina β-HCG (com base na amostra coletada durante a visita de avaliação), que deve ser negativo.

[000341] Se um indivíduo é finalmente arrolado, uma amostra de sangue é tirada para arquivamento e para determinação de anticorpos anti-insulina (em D1/TP1 apenas).

Descrição por tipo de visita Períodos de Tratamento 1-4 (D1 a D2) [000342] Para prevenir a interferência de tratamento de insulina padrão dos indivíduos com a medição de grampo, os indivíduos abstêm-se de usar insulinas basais e mudam para •produtos de ação intermediária ou curta de insulina de 48 horas antes da dosagem em D1 de TP1 a TP4, se em produtos de insulina de longa ação, isto é, insulinas Lantus® (insulina glargina), Le-vemir® (detemir) ou ultralente, •insulinas de curta ação a partir de 24 horas antes da dosagem em D1 de TP1 a TP4 se sob produtos de insulina de ação intermediária, isto é, insulina NPH

[000343] A última injeção subcutânea de insulina de curta ação não é mais atrasada do que 9 horas antes da administração de IP. Indivíduos em terapia de bomba discontinuam a infusão de insulina na ma- nhã do dia 1, pelo menos 6 horas antes de cada administração de IP (em torno de 03:00 horas assumindo o início de administração de IP às 09:00 horas).

[000344] Na chegada à clínica, indivíduos são indagados para garantir que eles não tiveram nenhuma alteração clinicamente relevante em sua condição física visto que a visita anterior, que eles foram submissos com as restrições gerais e ditéticas, como definido no protocolo e que eles alteraram seu tratamento de insulina, se requerido. Violação dos critérios de estudo exclui o indivíduo de outra participação no estudo. Dependendo do tipo de violação, um indivíduo pode ser excluído apenas do dia de estudo particular, permitindo um replanejamento do dia de estudo uma vez, ou durante todo o estudo.

[000345] Quaisquer alterações na condição de saúde e a medicação concomitante dos indivíduos visto que a última visita é relatada nos registros médicos do indivíduo (fonte) e a CRF.

[000346] Na manhã imediatamente antes da administração de medicação de estudo (D1 de cada TP) peso corporal, sinais vitais, ECG de 12 direções, monitoração de ECG e temperatura corporal central são registrados, uma urinálise e um fármaco de urina e análise de álcool são executados.

[000347] A quantidade de insulina glargina requerida para injeção será calculada de acordo com o peso corporal do indivíduo.

[000348] A hematologia é analisada quanto a incorrência de anemia no dia 1 do Período de Tratamento 3. Se positiva, o intervalo de eliminação entre os Períodos de Tratamento 3 e 4 é estendida ao máximo permitido de 18 dias ou início de TP4 será adiado até os parâmetros hematológicos terem sido normalizados. Uma estimativa hemato-lógica adicional é feita dia 1 do Período de Tratamento 4.

[000349] Indivíduos permanecem em jejum (à parte de água) até o término do grampo euglicêmico.

[000350] Os indivíduos são então preparados para o início do procedimento de pré-grampo com três linhas venosas conectadas em um dispositivo de leitura de glicose automático (Biostator®) e permanecem em posição semideitada durante toda a duração do período de amostragem. Em aproximadamente 07:30 uma veia da mão dorsal ou veia do punho lateral do braço esquerdo é canulados e conectados ao Biostator® a fim de continuamente extrair sangue venoso arterializado para a determinação de concentração de glicose sanguínea. A mão esquerda é colocada dentro de uma caixa aquecida ("Caixa-Quente"), que provê uma temperatura de ar de cerca de 55°C, permitindo a arte-rialização de sangue venoso. Uma segunda linha venosa é colocada dentro da veia antecubital do braço esquerdo e é usado para coletar amostras para insulina e determinação de glicose sanguínea de referência. Uma terceira veia é canulada no antebraço contralateral permitindo a infusão de 0,9% de salina e 20% de solução de glicose com uma bomba no Biostator® ou insulina glulisine com uma bomba externa.

[000351] A partir da inserção dos cateteres vasculares até 60 minutos antes da administração da medicação de estudo em aproximadamente 09:00 no D1, o nível de glicose sanguínea é mantido dentro de 4,4 a 6,6 mmol/L (80 a 120 mg/dL, pré-grampo). Dependendo do nível de glicose sanguínea, injeção de bolo intravenoso adicional de insulina glulisina é dada para manter a glicose sanguínea dentro da faixa alvo. Na 1 hora antes da administração da medicação de estudo nenhuma injeção de bolo intraveno é dada até o término do grampo.

[000352] Amostras de sangue adicionais para a determinação de glicose sanguínea são tiradas em pelo menos intervalos de 30 minutos para checar em comparação com uma referência de laboratório com base no método de glicose oxidase. Se necessário o Biostator® é reca-librado de acordo com resultados do método de referência de laborató- rio.

[000353] As taxas de infusão de insulina são ajustadas individualmente. Ao mesmo tempo que mantendo a glicose sanguínea no nível alvo, tanto a insulina quanto a taxa de infusão de glicose são minimizadas durante a fase inserção do grampo. A solução de insulina glulisina é infundida por meio de uma bomba de infusão de alta precisão (Terumo Spritzenpumpe TE 311®), solução de glicose a 20% deve ser aplicada por uma bomba de infusão de alta precisão (Terumo infu-sõespumpe TE 171®).

[000354] O nível do grampo é ajustado 60 minutos antes da administração da medicação de estudo para manter a glicose sanguínea em cerca de 5,5 mmol/L (100 mg/dL) até o término do período de grampo. O pré-grampo é prolongado e a administração de IP adiada até 14:00 horas no caso do nível de glicose alvo não ter sido atingido durante a fase de inserção (pré-grampo). Se o nível de glicose alvo não pode ser estabilizada dentro de até 14:00 horas, a visita é terminada e o indivíduo pode ser escalado para uma nova visita de dosagem 1 a 7 dias posteriormente.

[000355] A infusão de insulina glulisine é descontinuada imediatamente antes da administração da medicação de estudo. A primeira amostra de insulina para PK é tirada imediatamente, por conseguinte. Em cerca de 09:00 a medicação de estudo é administrada (Tabela 4), ou •o tratamento de referência (R, 0,4 U/kg de Lantus® U100) •ou o tratamento de teste (T1-3) em um sítio peri-umbilical de acordo com o projeto de randomização, usando uma técnica de duplicação da pele padronizada.

[000356] Durante o grampo ECG de 12 direções são realizados 2 e 12 horas após a injeção de IP e no término do grampo.

[000357] A medicação de estudo é administrada preferivelmente pela mesma pessoa durante todo o estudo. O término da injeção define o tempo zero (T0), que define o tempo de partida dos subsequentes períodos de grampo e amostragem de PK.

[000358] Todo período de observação de grampo demora 36 horas e, desse modo, termina em aproximadamente 21:00 no D2, o término do grampo predefinido. Por conseguinte, os indivíduos são desligados do grampo euglicêmico estabelecendo quando a glicose sanguínea inclui-se bem na faixa isoglicêmica, recebem uma refeição e seu usual tratamento de insulina.

[000359] No caso a glicose sanguínea passa 11,1 mmol/L (200 mg/dL) durante o período de grampo durante 30 minutos, após cessação da infusão de glicose e o Investigador confirma que quaisquer erros possíveis levando a falsos níveis de glicose sanguínea acima de 11,1 mmol/L (200 mg/dL) foram excluídos, o análogo de insulina de rápida ação (por exemplo, insulina glulisina) usado na pré-administração de tempo de IP do grampo é dado para estender o período de grampo para 36 horas para amostragem de sangue farmacoci-nético. Nesse caso, o patrocinador deve ser informado. Por conseguinte os indivíduos são desligados da fixação do grampo euglicêmico quando a glicose sanguínea inclui-se na faixa isoglicêmica, recebem uma refeição e seu usual tratamento de insulina.

[000360] A reação do sítio de injeção é estimada 15 minutos bem como uma hora após a injeção da medicação de estudo e documentada como um AE se um escore de > 3 for observado de acordo com a escala de classificação.

[000361] Antes do descarte, uma refeição ad libitum é servida e o tratamento de insulina usual será resumida. Sinais vitais (frequência cardíaca; pressão sanguínea sistólica e diastólica medidos após 10 minutos na posição de repouso supina, e após 3 minutos na posição em pé) são repetidos e glicose sanguínea é medido (a leitura da glicose sanguínea deve estar acima de 80 mg/dL). Indivíduos são descartados em D2 de TP1 a TP4 após seu bem-estar ser assegurado pelo Investigador. Término da visita de estudo [000362] Os indivíduos retornam para um término de visita de estudo (EOS) entre D5 e D14 após a última dosagem em TP4. Os indivíduos jejuaram (à parte de água) durante 10 horas. O EOS inclui as seguintes investigações: [000363] Exame físico (peso, temperatura corporal) com história médica atualizada.

[000364] ECG, medição de sinais vitais.

[000365] Testes de laboratório com hematologia, HbA1c, bioquímica, urinálise, e se fêmea um teste de sangue β-HCG.

[000366] Qualquer AE ocorreu ou medicação concomitante tomada desde TP4.

Amostra de Sangue para determinação de anticorpo anti-insulina.

[000367] O Investigador assegura que com base em todos os Resultados clínicos disponíveis, o indivíduo pode ser seguramente liberado do estudo.

Restrição(ões) de estudo [000368] Os indivíduos cessam seu tratamento de insulina usual nos dias -2 a -1, dependendo do tipo de insulina usada (atividade longa, NPH, intermediário). Daí em diante, os níveis de glicose sanguínea são controlados somente por injeções subcutâneas múltiplas da insulina de curta ação usual.

[000369] O tratamento de insulina usual é resumido após descarte no dia 2 em TP1 a TP4.

[000370] Os indivíduos não tomam qualquer medicação concomitante, o que interferirá com o controle metabólico ou a sensibilidade à in- sulina dos indivíduos em todo o estudo e nas duas semanas antes do estudo.

[000371] O consumo de bebidas alcoólicas, suco de toranja, e bebidas estimulantes contendo derivados de xantina (chá, café, bebidas tipo Coca Cola, chocolate) não é permitido 24 horas antes da administração de cada medicação de estudo até o término do grampo.

[000372] Suco de laranja ou carboidratos similares são dados como medidas corretivas para hipoglicemia durante o grampo se não neutralizam adequadamente por infusão intravenosa de glicose quando conectados ao Biostator®.

[000373] Nenhuma atividade física vigorosa é permitida dentro de 2 dias antes de cada administração da medicação de estudo.

[000374] Indivíduos que fumam 5 ou menos cigarros por dia são incluídos no estudo e os indivíduos podem fumar durante o estudo, exceto em D1 e D2 de TP1 a TP4.

[000375] No dia de avaliação, os indivíduos vêm para a unidade após um jejum durante a noite de pelo menos 10 horas (excluindo uma pequena quantidade de carboidratos como contramedida para hipogli-cemia, se necessário).

[000376] Na manhã do dia 1 em TP1 a TP4, indivíduos são admitidos para a clínica após um jejum durante a noite de pelo menos 10 horas e permanecem jejuando até o fim de período de grampo no dia 2. Uma refeição ad libitum é servida após o término do grampo.

[000377] O suprimento de fluido é de pelo menos 2500 mL para cada período de 36 horas.

Definição de dados fonte [000378] Todas as avaliações listadas abaixo que são relatadas em uma CRF são suportadas por documentação de fonte identificada apropriadamente assinalada relacionada com: •identificação do indivíduo •história médica (no caso de reação alérgica) •exame clínico, sinais vitais, peso corporal e altura, tempe- ratura corporal; •estimativas de laboratório, ECG •pontos do tempo farmacocinéticos •datas e tempo de visitas e estimativas •eventos adversos •Administração de IP •medicação prévia/concomitante •início/término de grampo procedimento, dados de grampo Exemplo 13: Considerações estatísticas Determinação de tamanho de amostra [000379] O objetivo primário do estudo é avaliar o efeito metabólico relativo para a insulina glargina dada como uma dose de dose de U100 (R) e três diferentes doses de U300 (T1 a T3).

[000380] Com base nos dados de estudo PKD10086, um valor de aproximadamente 0,375 pode ser esperado para o SDdentro de GIR-AUCtérmino de grampo na escala transformada por log natural.

[000381] Para o propósito do cálculo de tamanho de amostra SDs de indivíduo-dentro de entre 0,325 e 0,425 foram usados.

[000382] A Tabela 11 mostra a imprecisão máxima (em termos do intervalo de confidência de 90%) para uma relação dse tratamento em pares de médias geométricas ajustadas que serão obtidos com segurança de 90%, para o número total de indivíduo N entre 16 e 24, as-suminum SD real de indivíduo-entre de valores entre 0,325 e 0,425 para o GIR-AUC0-36 log.

Tabela 11 - Imprecisão máxima para qualquer relação em pares Nível de confidência: 90% Amplitude máxima 90% de CI

Segurança: 90% para uma relação observada igual a Imprecisão SD de indivíduo- Número total máxima (%) dentro de indivíduos na escala log 0,6 0,8 1 0,325 16 197 (0,48;0,75) (0,64;1,00) (0,80;1,25) 20 17,5 (0,49;0,73) (0,66;0,97) (0,82;1,21) 24 15,9 (0,50;0,71) (0,67;0,95) (0,84;1,19) 0,350 16 21,0 (0,47;0,76) (0,63;1,01) (0,79;1,27) 20 18,7 (0,49;0,74) (0,65;0,98) (0,81;1,23) 24 17,0 (0,50;0,72) (0,66;0,96) (0,83;1,21) 0,375 16 22,4 (0,47;0,77) (0,62;1,03) (0,78;1,29) 20 19,9 (0,48;0,75) (0,64;1,00) (0,80;1,25) 24 18,1 (0,49;0,73) (0,65;0,98) (0,82;1,22) 0,400 16 23,7 (0,46;0,79) (0,61;1,05) (0,76;1,31) 20 21,1 (0,47;0,76) (0,63;1,01) (0,79;1,27) 24 19,2 (0,48;0,74) (0,65;0,99) (0,81;1,24) 0,425 16 24,9 (0,45;0,80) (0,60;1,07) (0,75;1,33) 20 22,3 (0,47;0,77) (0,62;1,03) (0,78;1,29) 24 20,3 (0,48;0,75) (0,64;1,00) (0,80;1,25) [000383] Com 20 indivíduos, se o SD real de indivíduo-dentro de GIR-AUC0-36 é tanto quanto 0,375, a relação de tratamento será estimada com uma imprecisão máxima de 19,9 % (isto é, os 90% de CI serão de 0,80 e 1/0,80 = 1,25 vezes a relação observada), com 90% de segurança.

[000384] 24 indivíduos serão incluídos a fim de ter 20 indivíduos completados.

Descrição objeto Disposição de indivíduos [000385] Um sumário detalhado de responsabilidade do indivíduo incluindo contagem de indivíduos incluído, randomizados, expostos (isto é, receberam qualquer quantidade de medicação de estudo), completos (isto é, indivíduos que completaram todos os períodos de tratamento de estudo), discontinuados juntamente com as razões principais para descontinuação, é gerado.

[000386] A disposição do indivíduo na vusuta final é apresentada em uma listagem incluindo grupo de sequência, condição de disposição no término do estudo com os dados de última administração de fármaco de estudo, data de visita final, razão para descontinuação. Todas as retiradas do estudo, que ocorrem em ou após o início da primeira administração do fármaco de estudo, são totalmente documentadas no corpo do relato de estudo clínico (CSR).

Divergências de protocolo [000387] Antes do fechamento de dados do estudo, divergências de protocolo de experiência clínica são examinadas com relação aos critérios definidos para definição de populações e outros critérios de estudo incluindo: •Critérios de inclusão e exclusão; •Tratamento concordância; •Concordância com o protocolo de experiência clínica com referência a terapias proibidas; •Concordância com o protocolo de experiência clínica com referência a intervalos entre visitas e duração de tratamento total; e •Se atividade planejada e avaliação da segurança foram executados, etc.

Divergências abrangidas incluem, porém não estão limitadas a : •Indivíduos sem qualquer avaliação (de quaisquer variáveis) após randomização; •Indivíduos não expostos; •Indivíduo sem qualquer avaliação da variável primária (se relevante); •Indivíduos que ingressaram no estudo mesmo que eles não satisfaçam aos critérios de inclusão; •Indivíduos que desenvolveram os critérios de retirada durante o estudo porém não foram retirados; •Indivíduos que receberam o tratamento errado ou dose incorreta; •Indivíduos que receberam uma medicação concomitante proibida.

Divergências maiores são listadas e resumidas. População de análise [000388] Todas as exclusões de qualquer população de análises (farmacodynamic, farmacokinetic e/ou segurança) são totalmente documentadas no CSR.

[000389] Indivíduos excluídos de qualquer população de análise são listados com sequência de tratamento, e com razão para exclusão. Qualquer informação relevante é totalmente documentada na CSR. Frequências de indivíduos, geral e por tratamento, para a população de análises são tabuladas.

[000390] Para o evento de indivíduos tendo recebido tratamentos que diferiram daqueles designados de acordo com o plano de rando-mização, análises são conduzidas de acordo com o tratamento recebido em vez de acordo com o tratamento randomizado.

População farmacodinâmica [000391] Todos os indivíduos sem quaisquer divergências maiores relacionadas com a administração do fármaco de estudo, e para quem os parâmetros de PD estão disponíveis, são incluídos na população farmacodinâmica. Para indivíduos com perfis PD insuficientes em um, porém não ambos os períodos de tratamento, parâmetros dos perfis suficientes são incluídos na análise.

[000392] Para indivíduos, que recebem (por razões de segurança) insulina glulisine dentro do período de observação de 36 horas após dosagem de IP, dados farmacodinâmicos são apenas levados em consideração até o momento da administração de insulina glulisine.

Exclusões de análise farmacodinâmica [000393] Todas as exclusões da análise farmacodinâmica são listadas junto com a razão. As exclusões são decididas e documentadas com base na revisão ados dados antes do fechamento da base de dados e não cegamento.

População de Segurança [000394] Todos os indivíduos que foram expostos a qualquer tratamento de estudo comparativo, independente da quantidade de tratamento administrado, são incluídos na população de segurança.

Populações farmacocinéticas [000395] Todos os indivíduos sem quaisquer divergências maiores relacionadas com a administração do fármaco de estudo, e para quem os parâmetros de insulina PK estão disponíveis, são incluídos na população farmacocinética. Para indivíduos com insuficientes perfis de insulina PK em um, porém não todos os períodos de tratamento, parâmetros dos perfis suficientes são incluídos na análise.

[000396] A análise bioanalítica para insulina glargina é interferida por outras insulinas como a insulina glulisina. Portanto, os dados farmaco-cinéticos for insulina glargina daqueles indivíduos são excluídos de avaliação, que receberam (por razões de segurança) insulina glulisina dentro do período de observação de grampo de 36 horas após administração de IP.

Características demográficas e de referência Características demográficas do indivíduo, história médica e diagnósticos [000397] Os seguintes dados são coletados: sexo, idade, altura, peso, e raça. Índice de referência de massa corporal (BMI) por indivíduo é calculada de peso corporal de pré-dose e dados de altura: BMI = peso corporal [kg] / (altura [m])2 [000398] Todas as variáveis com respeito a características demográficas e de base são listadas individualmente e resumidas para a população de segurança.

[000399] Divergências de critérios de inclusão relacionadas com a história médica e diagnósticos são listadas e descritas individualmente.

Parâmetros de segurança de referência [000400] Para variáveis de segurança, o último valor escalonado antes da administração do fármaco de estudo dentro do período ou dentro do estudo, Onde quer que seja aplicável para a variável, é tomado como o valor de referência. Se o valor de pré-dosagem de referência for rechecado antes da dosagem, o valor rechecado é considerado como a referência e usado em estatísticas.

Extensão de exposição e concordância com o tratamento de estudo [000401] Detalhes de dosagem de fármaco de estudo e informação complementar são listados individualmente e resumidos se apropriado. [000402] As doses totais individuais de insulina glargina são resumidas por tratamento.

Terapia/medicação antes/concomitante [000403] Medicações/terapias antes e concomitante (se existir) são codificadas de acordo com a Lista de Referência de Fármaco da Organização de Saúde Mundial (WHO-DRL, última versão em uso no momento do fechamento da base de dados) e são listadas individual- mente.

[000404] Medicação de insulina concomitante (subcutânea) é listada separadamente.

[000405] Infusão ou bolo de insulina dado em qualquer momento durante o procedimento de grampo é listado ou plotado durante o tempo em uma base an individual. A infusão ou bolo de insulina dado após a dosagem durante o procedimento de grampo é listado em uma base individual.

Análise de variáveis farmacodinâmicas [000406] Todas as análises farmacodinâmicas abrangem os dados da população farmacodinâmica. Nenhum ajuste do nível alfa é feito para múltiplas análises.

[000407] Para farmacodinâmicas de insulina glargina, a concentração de glicose sanguínea e taxa de infusão de glicose (GIR) é continuamente registrada durante o procedimento de grampo.

[000408] Análises estatísticas comparam os tratamentos de teste (T1 a T3) com o tratamento de referência (R) Descrição de variáveis farmacodinâmicas [000409] A fim de obter comparabilidade entre a dosagem de insulina ajustada ao peso corporal dos indivíduos, todos os valores para GIR são divididos pelo peso corporal do indivíduo em kg para análise. Desse modo no abaixo, se não estabelecido de outro modo, GIR sempre se refere à taxa de infusão de glicose padronizada para o peso corporal.

Variável de PD primária [000410] A seguinte variável de PD é considerada primária. •Área sob a curva de tempo de taxa de infusão de glicose padronizada de peso corporal [GIR-AUC0-36 (mg/kg)] [000411] GIR-AUC0-36 é calculada de acordo com a norma retangular para a função constante em etapas com escala de tempo em minutos.

Variáveis de PD secundárias [000412] As seguintes variáveis de PD são derivadas e consideradas secundárias: •Tempo (h) para 50% de GIR-AUC0-36 [Tõ0%-GIR-AUC0-36 (h)] •Taxa de infusão de glicose padronizada de peso corporal homogêneo máximo [GIRmax (mg*min/kg)] •Primeiro momento após dosagem para atingir GIRmax [GIR- Tmax (h)] •Duração de euglicemia (tempo para elevação de perfil de glicose sanguínea homogênea acima do nível de grampo) é calculada como o tempo de dosagem para o último valor da curva de concentração de glicose sanguínea homogênea em ou abaixo de 105 mg/dL •Durações de glicose sanguínea controlada dentro de margens predefinidas são definidas como o tempo de dosagem no último valor da curva de concentração de glicose sanguínea homogênea em ou abaixo de: -110 mg/dL

-130 mg/dL

-150 mg/dL

Homogeneidade [000413] O máximo do GIR padronizado de peso corporal bruto é submetido ao ruído no ajuste de GIR. Desse modo, a derivação de GIRmax e o tempo para GIRmax, é com base em uma técnica de homogeneidade LOESS (regressão de peso local em plotes de dispersão de homogeneidade) para os dados de GIR padronizado de peso corporal bruto. Devido à morfologia esperada dos perfis de GIR como conhecido sob Lantus®, um fator de homogeneidade de 6% é usado (SAS®, PROC LOESS, fator 0,06).

[000414] Os níveis de glicose sanguínea serão submetidos a ruído.

Portanto, a duração de euglicemia e a duração de controle de glicose sanguínea são com base em uma técnica de homogeneidade LOESS (regressão de peso local em plotes de dispersão de homogeneidade) para os níveis de glicose sanguínea brutos. Devido à morfologia esperada, um fator de homogeneidade de 6% é usado (SAS®, PROC LOESS, fator 0,06).

[000415] No caso de homogeneidade inadequada um fator de homogeneidade diferente é usado para uma análise adicional.

Variáveis de PD adicionais [000416] Outros parâmetros são derivados, como: •Tempo até o término de infusão de glicose, como o último tempo após dosagem com GIR acima zero [000417] Variáveis de PD adicionais são derivadas se julgado necessário para a interpretação dos resultados.

Análise de PD primária [000418] Antes da análise descrita abaixo, GIR-AUC0-36 é log-transformado (log natural).

[000419] GIR-AUC0-36 log-transformado é analisado com um modelo de efeitos mistos lineares com termos fixos para sequência, período e tratamento. log(parâmetro) = sequência + período + tratamento + erro e com uma matriz R não estruturada de variações e covari-ações de tratamento (i, i) para o indivíduo dentro dos blocos de sequência, usando SAS PROC MIXED.

[000420] Intervalo de confidência de 90% (CI) para a relação de médias geométricas de tratamentos (T1/R, T2/R, T3/R) é obtido por computar a estimativa e 90% de CI para a diferença entre as médias de tratamento dentro da estrutura de modelo de efeitos mistos lineares, e então convertendo uma relação de médias geométricas pela trans- pormação antilog. A equivalência é concluída se os 90% de CI para a relação estiverem totalmente dentro do intervalo de referência de equivalência de 0,80 a 1,25.

[000421] As listagens de relações individuais (tratamentos de teste versus tratamento de referência) são fornecidas com as correspondentes estatísticas descritivas.

Análise secundária / análise de variável secundárias Apresentações descritivas para os perfis de GIR

[000422] O GIR padronizado de peso corporal individual (mg*min/kg) é plotado para valores brutos, homogêneos e cumulativos.

[000423] A média e perfis de GIR padronizado de peso corporal médio, bem como os perfis cumulativos de percentagem média durante o tempo são plotados por tratamento.

[000424] Plotes cumulativos abrangem o tempo entre dosagem e o término de grampo.

Apresentações descritivas para parâmetros derivados de PD

[000425] Os parâmetros de PD são listados individualmente, e estatísticas descritivas são geradas por tratamento.

Relações de tratamento para parâmetros secundários de PD

[000426] Relações de tratamento (T1/R, T2/R, T3/R) com limites de confidência são derivadas para a taxa de infusão de glicose padronizada máxima [GIRmax (mg*min/kg)] usando o correspondente modelo de efeitos mistos lineares, como descrito acima para a análise primária. Comparações exploratórias entre os tratamentos são com base em critérios de bioequivalência convencional (90% de limites de confidência de 0,80 a 1,25).

[000427] A distribuição de valores GIR-Tmax é representada por plo-tes de histograma para cada tratamento. Além disso, um histograma de diferenças em GIR-Tmax entre tratamentos de teste e a referência é fornecido.

Diferenças de tratamento para parâmetros secundários de PD

[000428] T50%-GIR-AUC0-36 (h) é analisado não-parametricamente com base no método Hodges-Lehmann para comparações de tratamento pareado. CIs para diferenças de tratamento em pares (T1-R, T2-R, T3-R) em médias são derivadas. A distribuição de valores T50%-GIR-AUC0-36 é representada por plotes de histograma para cada tratamento. Além disso, um histogram de diferenças em T50%-GIR-AUC0-36 entre os tratamentos (T1-R, T2-R, T3-R) é fornecido.

[000429] A distribuição dos valores de GIR-Tmax é representada por plotes de histograma para cada tratamento. Além disso, um histogra-ma de diferenças em GIR-Tmax entre os tratamentos de teste e referência é fornecido.

[000430] A duração de euglicemia e do controle de glicose sanguínea são apresentados por plotes do histograma. As comparações de tratamento são executadas não parametricamente.

Desempenho de grampo [000431] Perfis de concentração de glicose sanguínea individuais são plotados.

[000432] A duração de grampo é derivada por grampo como o tempo entre a dosagem e o final do grampo em horas.

[000433] A variabilidade individual de glicose sanguínea por grampo é derivada como o coeficiente de variação (% de CV) de valores de glicose sanguínea entre o início individual e o final individual do grampo (ou primeira administração de insulina glulisina durante grampo). O nível de glicose sanguínea médio individual por grampo é derivado como o meio aritmético de valores de glicose sanguínea entre o início individual e o final individual de grampo (ou primeira administração de insulina glulisina durante grampo).

[000434] Os parâmetros são listados individualmente e resumidos descritivamente no tratamento.

Análise de Dados de Segurança [000435] A avaliação de segurança é com base na revisão dos valores individuais (anormalidades potencialmente clinicamente significantes), estatísticas descritivas (sumários, tabelas, gráficos) e se necessário em análise estatística (estimativas apropriadas, intervalos de confidência). Os critérios de "Anormalidades Potencialmente Clinicamente Significantes" (PCSA) são usados de acordo com os critérios padrões de sanofi-aventis. Os critérios são documentados no plano de análises estatísticas deste estudo. A análise de segurança é conduzida de acordo com os padrões de sanofi-aventis relacionados com a análise e relato de dados de segurança de experiências clínicas.

[000436] Todas as análises de segurança abrangem os dados da população de segurança.

[000437] Para todos os dados de segurança, o período de observação é dividido em segmentos de três tipos diferentes: •o período de pré-tratamento é definido como o tempo entre quando o indivíduo ganha o consentimento informado e a primeira administração de medicação de estudo. •o período sob tratamento é definido como o tempo da (primeira) administração da medicação de estudo até 72 horas mais tarde. •O período de pós-tratamento é definido como o tempo após o período sob tratamento para a (primeira) administração de medicação de estudo no período seguinte ou o final do período de seguimento.

Eventos Adversos [000438] Todos AEs são codificados usando MedDRA (última versão em uso no momento de bloqueio de banco de dados).

[000439] As seguintes listagens são fornecidas para todos os eventos adversos: •Listagem de todos os eventos adversos (por indivíduo) •Listagem de comentários relacionados com os eventos adversos Definições [000440] Para dados de segurança, o período de observação é dividido nos segmentos de três tipos diferentes: •o período de pré-tratamento é definido como o tempo entre quando o indivíduo ganha o consentimento informado e a primeira administração de medicação de estudo comparativa. •o período sob tratamento por período é definido como o tempo da (primeira) administração da medicação de estudo até 72 horas mais tarde. •o período pós-tratamento é definido como o tempo após o período sob tratamento para a (primeira) administração de medicação de estudo no período seguinte ou o final do período seguinte.

Eventos Adversos Emergentes do Tratamento [000441] Todos os AEs são classificados como segue: •Eventos adversos emergentes do tratamento (TEAEs) são qualquer AEs com um início (agravamento incl.) durante um período sob tratamento. •Eventos adversos emergentes de não tratamento (NTEA-Es) são qualquer AEs não classificados como TEAE: -AEs de pré-tratamento, definidos como AEs que desenvolveram (ou pioraram) durante o período de pré-tratamento antes da primeira dose de medicação de estudo -AEs pós-tratamento, definido como AEs que se desenvolveram durante um período de pós-tratamento sem piorar durante uma fase sob tratamento.

Designação para Tratamentos [000442] Para propósitos de análise, cada TEAE é designado para o último tratamento dado antes do início (ou piora) do AE. Se um TEAE se desenvolve em um tratamento e piora sob um último tratamento, é considerado emergente do tratamento para ambos os tratamentos.

Informação Ausente [000443] No caso de informação ausente ou inconsistente, um AE é contado como um TEAE, a menos que possa claramente ser excluído que não é a TEAE (por exemplo, por datas parciais ou outra informação).

[000444] Se a data de início de um AE está incompleta ou ausente, presume-se ter ocorrido após a primeira administração de medicação de estudo exceto se uma data incompleta indica que o AE iniciou antes do tratamento.

Eventos Adversos Emergentes do Tratamento [000445] Os eventos adversos emergentes do tratamento são listados e resumidos por tratamento: •Visão geral de TEAEs (número e percentual de indivíduos com pelo menos um TEAE, TEAE grave, TEAE levando a descontinu-ações, morte (se alguma)) •Sumário de todos os eventos adversos emergentes do tratamento por classe de órgão de sistema primária e termo preferido (número e percentual de indivíduos com pelo menos um TEAE) ("tabela no texto") -Tabela sem número de eventos (para corpo do relato de estudo clínico) -Tabela com número de eventos (para apêndice do relato de estudo clínico) -Tabela com número de indivíduos por formulação (U100, U300) e de indivíduos gerais (para apêndice do relato de estudo clínico) •Listagem dos indivíduos apresentando eventos adversos emergentes do tratamento por tratamento, classe de órgão de sistema e termo preferido.

Mortes, Eventos Adversos Sérios e Outros Significantes [000446] No caso de qualquer ocorrência, mortes, AEs sérios, e outros AEs significantes são listados individualmente e descritos no relato do estudo em detalhes.

Eventos Adversos Levando a Descontinuação do Tratamento [000447] No caso de qualquer ocorrência, as listagens de indivíduo individuais são geradas para todos os eventos adversos levando a descontinuação do tratamento.

Avaliações de Laboratório Clínicas Dados de Bioquímica e Hematologia [000448] Os parâmetros de segurança de laboratório são medidos em D1 do Período de Tratamento 1 e em EOS. Por horário, esses parâmetros de segurança são estimados durante o período sob tratamento (exceto hematologia em TP3 e TP4).

[000449] Os valores a serem usados com valor de referência (hematologia e bioquímica) são os valores coletados na pré-dose D1 no período do primeiro tratamento. Se quaisquer dos testes de valor de referência programados são repetidos para qualquer indivíduo, os últimos valores rechecados são considerados como valores de referência, desde que eles sejam feitos antes da primeira administração de IP. [000450] As seguintes tabelas e listagens são fornecidas: •Estatísticas descritivas para dados brutos e alterações do valor de referência (incluindo % de mudança para creatinina) •Uma listagem específica de dados individuais de indivíduos com PCSAs pós-valor de referência será fornecida, classificada por função e tempo de medição •Todos os dados individuais, incluindo valores rechecados, para hematologia e bioquímica planejadas, são listados por função biológica e tempo de medição. Se algum, os dados de testes de laboratório não programados são incluídos nesta listagem. Nessas listagens, os dados individuais são sinalizados quando menores ou maiores do que o menor ou maior limite de laboratório e/ou ao alcançar o limite absoluto dos critérios PCSA, quando definida •Uma listagem de dados de função hepática para indivíduos, que experimentaram pelo menos um dos seguintes: -Pelo menos uma ocorrência de ALT > 3ULN e pelo menos uma ocorrência de bilirrubina total > 2 ULN durante o estudo com pelo menos um deles sendo após a primeira dose -Bilirrubina conjugada > 35% de bilirrubina total e bilirrubina total > 1,5 ULN será fornecida na mesma amostra após a primeira dose, irrespectivo da definição para a fase sob tratamento. •Uma listagem relacionada com o aumento em ALT > 2 ULN é fornecida, incluindo notavelmente a informação sobre o influxo de fármaco, história cirúrgica e médica, hábitos de álcool, fatores de ativação, detalhes de evento com valores ALT, associados com os sinais e sintomas. •Uma listagem de definições fora-de-faixa é fornecida.

Nas listagens de indivíduos com PCSAs, dados de função hepática, CPK, e eosinófilos são expressos como múltiplos do ULN correspondente.

Dados de Urinálise [000451] Todos os resultados de teste qualitativos (vareta), incluindo valores rechecado, são listados.

Sinais vitais Pressão Sanguínea e Frequência Cardíaca [000452] Frequência cardíaca e pressão sanguínea sistólica e diastó-lica (SBP e DBP) são medidas após 10 minutos na posição em repouso de supino e também após 3 minutos na posição ereta, exceto quando conectados ao Biostator®.

[000453] Os valores a serem usados como os valores de referência são o valor de estimativa de pré-dose D1 de cada período de tratamento. Se quaisquer dos testes de valor de referência programados são repetidos para qualquer indivíduo, os últimos valores rechecados são considerados como valores de referência, desde que eles sejam feitos antes da Administração de IP.

[000454] Para frequência cardíaca e pressão sanguínea, as diferenças ortostáticas são calculadas como a mudança da posição supina para ereta.

[000455] Para todos os parâmetros, uma análise "em Tratamento" será executada incluindo todos os valores não planejados e valores rechecados.

[000456] As seguintes tabelas e listagens são fornecidas: •As tabelas de sumário de contagens de indivíduos com PCSAs são fornecidas como tabelas de incidência de PCSAs pós-valor de referência, independente do estado normal ou anormal do valor de referência •Para frequência cardíaca e pressão sanguínea (posições supina e ereta), os dados brutos e alterações de valor de referência (posição supina somente) são resumidas em estatísticas descritivas, para tipo de medição (posição) cada parâmetro e ponto de tempo, com base nas medições de pré-dose planejadas e o valor de referência definido •Todos os dados indivíduos, incluindo valores não planeja- dos e rechecados, são listados (supina, ereta, diferença ortostática). Nessas listagens, os valores são sinalizados ao alcançar os limites dos critérios PCSA quando definido •Uma listagem de dados individuais de PCSAs pós-valor de referência é fornecida •Comentários relacionados com as avaliações dos sinais vitais são também listados no Apêndice, se algum.

Peso Corporal, Índice de Massa Corporal, e Temperatura do Corporal [000457] Os valores a serem usados como valores de referência para peso corporal e BMI são os valores coletados em D1 de TP1. [000458] Os valores a serem usados como valores de referência para temperatura corporal são os valores coletados em D1 de cada TP. [000459] Os dados individuais são listados incluindo bandeiras (peso somente) para valores ao alcançar os limites dos critérios de PCSA.

ECG

[000460] Frequência cardíaca, intervalos de PQ, QRS, e QT e QT corrigido (QTc) de leitura automática são analisados como valor de parâmetro bruto e mudança de valor de referência.

[000461] Os valores a serem usados como o valor de referência são o valor de pré-dose do dia 1 de cada período. Se quaisquer dos testes de valor de referência programados são repetidos para qualquer indivíduo, os valores rechecados são considerados como valores de referência, desde que eles tenham sido feitos antes da administração de fármaco do período.

[000462] Para todos os parâmetros, uma análise sob tratamento é executada usando toas as estimativas pós-valor de referência feitas durante o período sob tratamento, incluindo valores rechecados. As contagens de indivíduos com PCSAs pós-valor de referência são fornecidas em tabelas de sumário independente do estado normal ou anormal do valor de referência, por grupos de tratamento.

[000463] Os dados brutos para todos os parâmetros e mudança de valor de referência são resumidos em estatísticas descritivas por parâmetro, tratamento, e tempo de medição.

[000464] Os dados individuais, incluindo valores rechecados, são listados, classificados quanto ao tratamento, indivíduo, visita e tempo de medição. Nas listagens, os valores alcançando os limites dos critérios PCSA são sinalizados.

[000465] Uma listagem de dados individuais de indivíduos com PCSAs pós-valor de referência é fornecida, classificada por tipo de medição e classificada por indivíduo, período, e tempo de medição. [000466] Adicionalmente, uma listagem separada do perfil cardíaco para indivíduos com QTc prolongado (>450 ms para Machos e >470 ms para Fêmeas) ou alterações de valor de referência em QTc >60 ms (para machos e fêmeas) e uma listagem de indivíduos com pelo menos uma anormalidade em estimativa qualitativa (isto é, anormal ECG) após a 1a dosagem são também fornecidas.

Outros Parâmetros de Segurança Relacionados Exame Físico [000467] Listagem de comentários relacionados com o exame físico é fornecida, se alguma.

Tolerabilidade Local no Sítio de Injeção [000468] As distribuições de frequência por tratamento são fornecidas para níveis de tolerabilidade local no sítio de injeção. Os dados individuais são listados. Em cada critério e tratamento, um indivíduo é contado com seu resultado mais grave.

Reações Alérgicas Listagens para reações alérgicas [000469] Qualquer caso de reação alérgica é documentado com evento adverso com informação complementar detalhada. Todos os casos são descritos em detalhes no relato de estudo clínico.

[000470] Casos individuais e todos os dados complementares são listados.

História Médica Alérgica e História Médica Familiar [000471] O histórico médico alérgico e o histórico médico familiar são documentados para indivíduos com qualquer ocorrência de reação alérgica potencial. Todos os detalhes de histórico médico alérgico e histórico médico familiar são listados em uma base individual.

Anticorpos Anti-insulina [000472] Uma tabela de resumo é fornecida com o número de indivíduos para os resultados de anticorpos anti-insulina durante o estudo e das investigações pós-estudo. A listagem de indivíduo individual é fornecida.

Análise de Dados Farmacocinéticos Parâmetros Farmacocinéticos [000473] A lista de parâmetros PK é mostrada acima. Além disso, T50%-AUC0-36 para insulina é derivada no contexto da análise estatística.

Análise Estatística [000474] Os parâmetros farmacocinéticos de insulina glargina são listados e resumidos usando pelo menos médias aritméticas e geométricas, desvio padrão (SD), erro padrão da média (SEM), coeficiente de variação (CV%), mínimo, médio e máximo para cada tratamento. [000475] Todas as análises farmacocinéticas abrangem os dados das populações farmacocinéticas correspondentes como definidas acima. Nenhum ajuste do alfa-nível é feito para múltiplas análises. [000476] As análises estatísticas comparam os tratamentos de teste (T1 a T3) versus tratamento de referência (R).

Relações de Análise de Tratamento [000477] A análise é executada para AUC0-36 para insulina glargina.

Antes de todas as análises descritas abaixo, os valores AUC0-36 são log-transformados (log natural).

[000478] Os parâmetros de Log transformado são analisados com um modelo de efeitos misto linear com termos fixos para sequência, período e tratamento log(parameter) = sequence + período + tratamento + erro, e com uma matriz R não estruturada de variâncias e cova- riâncias de tratamento (i,i) para indivíduo dentro dos blocos de sequência, usando SAS PROC MIXED.

[000479] Estimativa e 90% de intervalo de confidência (CI) para a relação de médias geométricas de tratamentos (T1/R, T2/R, T3/R) são obtidos computando-se a estimativa e 90% de CI para a diferença entre os meios de tratamento na estrutura de modelo de efeitos misto lineares, e em seguida convertendo uma relação de meios geométricos pela transformação de antilog. A bioequivalência é concluída se os 90% de CI para a relação estiver completamente dentro do intervalo de referência de equivalência de 0,80 a 1,25.

[000480] As listagens de relações de tratamento individuais (T1/R, T2/R, T3/R) são fornecidas com as estatísticas descritivas correspondentes. T5o%-AUCo-36 para Insulina [000481] A distribuição de valores Tõ0%-AUC0-36 para insulina é representada por plotes de histograma para cada tratamento. Além disso, um histograma de diferenças em T50%-AUC0-36 entre tratamentos (T1-R, T2-R, T3-R) é fornecido.

[000482] T50%-AUC0-36 (h) é analisado não parametricamente.

Ligação de Exposição de Dose para Insulina Glargina U300 Análises Descritivas de Ligação de Exposição de Dose [000483] Ligação de exposição de dose para insulina glargina U300 é descrita graficamente por •plotes por indivíduo de exposição sobre a dose total por indivíduo •plotes por indivíduo de exposição sobre a dose por kg de peso corporal •plotes por indivíduo de exposição de dose normalizada sobre a dose por kg de peso corporal (normalização da dose em 0,6 U/kg) [000484] Se for considerado necessário para interpretação de resultados, análises descritivas adicionais são adicionadas.

Análise Estatística de Ligação de Exposição de Dose [000485] Para AUC de insulina glargina calculada para os tratamentos de teste T1-T3, Ligação de exposição de dose é estimada usando o modelo de força empírica (PK- parâmetro = uma * doseb), junto com uma interpretação de "estimativa", de acordo com as recomendações em Gough e outros (Gough K, Hutchison M, Keene O e outros Assessment of dose proportionality: report from the pharmaceutical industry. Drug Information Journal 1995; 29:1039-1048).

[000486] O modelo de força empírica fornece uma medida facilmente e interpretável do grau de não proporcionalidade, que pode ser usada tanto para confirmar a proporcionalidade quanto para estimar os farmacocinéticos e significância clínica de qualquer desvio. A análise dos estudos de proporcionalidade de dose, entretanto, requer a estimativa em vez do teste de significância para que o farmacocinético e signifi-cância clínica de qualquer não proporcionalidade possam ser estimados.

[000487] O modelo de força é ajustado na escala de log-transformado usando um modelo de força de coeficiente aleatório para dose (em U/kg de peso corporal): log(parâmetro) = (log(alfa)+alfa[i]) + (beta+beta[i])*log(dose) onde log(alfa) e beta são a interceptação e inclinação da população, respectivamente, e alfa[i] e beta[i] são as divergências aleatórias de alfa e beta, respectivamente, for o indivíduo i-th.

[000488] As estimativas para beta com 90% de intervalos de confidência são obtidas através dos mínimos quadrados generlizados estimados no procedimento SAS®/PROC MIXED, com estimativas de probabilidade máxima restrita (REML) de parâmetros de covariância. As estimativas e 90% de intervalos de confidência para beta são também usados para obter estimativas e 90% de intervalos de confidência para o aumento de parâmetro PK associado com uma diminuição de r-vezes na dose (r=1,5 e r = 2,25 [isto é, dose elevada/dose baixa]), ex-ponenciando-se r pelas forças da beta estimativa e limites de confidência.

[000489] Se há evidência de falta de ajuste, o modelo de efeito misturado (quando usados para análise de relações de tratamento) é usado para a análise. As estimativas com 90% de CIs para os aumentos de parâmetro associados com aumentos de dose em pares são obtidos primeiro computando-se as estimativas com CIs para diferenças em pares entre as doses na estrutura de modelo de efeitos misturados, e em seguida convertendo uma relação usando a tranformação de antilog.

Análise de PK/PD

[000490] Se apropriado, as exibições de gráfico (plotes de dispersão) são geradas para explorar a ligação de PK/PD.

Exemplo 14: Resultados do Estudo Disposição do Indivíduo [000491] Um total de 24 indivíduos com Diabetes Melito Tipo 1 foi inscrito, randomizados e recebeu pelo menos uma dose de medicação de estudo. Dos 24 indivíduos randomizados, 2 indivíduos se retiraram do estudo por pedido próprio. Vinte e dois (22) indivíduos completa- ram o estudo de acordo com o protocolo e foram incluídos nas análises farmacodinâmicas (PD) e farmacocinéticas (PK). Todos os 24 indivíduos tratados foram incluídos na avaliação de segurança.

[000492] Não houve nenhuma maior divergência de protocolo.

Características Demográficas [000493] Os seguintes dados (Tabela 12) foram coletados: sexo, idade em avaliação, altura, peso, e raça. Os índices de massa corporal (BMI) por indivíduo foram calculadas a partir dos dados de peso corporal e altura: BMI = peso corporal [kg]-(altura [m])-2.

Desempenho de grampo [000494] Nos quatro períodos de tratamento para cada indivíduo, R (Lantus U100), T1 (0,4 U/kg de HOE901-U 300), T2 (0,6 U/kg de HOE901-U 300) e T3 (0,9 U/kg de HOE901-U 300), as concentrações de glicose sanguínea de valor de referência do indivíduo antes da medicação de insulina foram similares, definindo o nível do grampo em 100 mg/dL. A duração do período de observação dos grampos após a dosagem foi 36 horas e o mesmo em todos os períodos de tratamento.

Finalidades Primárias [000495] Equivalência na biodisponibilidade (exposição) e bioeficácia (atividade) para R e T não foi estabelecido.

Variáveis Primárias [000496] A área sob uma curva de tempo de concentração de insulina glargina do soro de 0 a 36 horas (INS-AUC(0-36h)) não foi equivalente para R e T1 e T2 e cerca de equivalente com T3. A exposição foi estimada ser menor em cerca de 37% com T1, menor em cerca de 43 % com T2 e similar com T3, comparado a R.

[000497] A área sob o GIR versus curva de tempo de 0 a 36 horas (GIR-AUC(0-36h)) não foi equivalente para R e T1 e T2 e cerca de equivalente com T3. O consumo de glicose exógeno requerido para preservar o controle de glicose sanguínea foi estimado ser menor em cerca de 88% com T1, 67% com T2 ao mesmo tempo em que cerca de similar com T3.

Variáveis Secundárias [000498] O tempo para 50% de INS-AUC(0-36h) (h) com R foi cerca de 14 h e desse modo mais curto quando comparado com cerca de 16 h, 16 h e 19 h com T1, T2 e T3, respectivamente.

[000499] O tempo para 50% de GIR-AUC(0-36h) (h) com R foi cerca de 12 h e desse modo mais curto quando comparado com cerca de 17 h, 18 h e 20 h com T1, T2 e T3, respectivamente.

Segurança [000500] Nenhum evento adverso sério (AEs) ou remoção devido aos AEs foram relatados. Dois indivíduos em R, 2 em T1 e 4 em T3 relataram um total de 8 TEAEs, todos dos quais foram de intensidade homogênea a moderada, e resolvidos sem sequelas. O evento mais frequentemente relatado foi dor de cabeça. De nota, dor de cabeça é uma observação comum para estudos de grampo e está relacionado com a infusão de soluções de glicoses hiper-osmoláricas. Entretanto, uma ligação aos produtos investigacionais não pode ser excluída. Nenhuma reação no sítio de injeção foi relatadas com T1, T2 e T3 ao mesmo tempo em que 2 indivíduos em R desenvolveram eritema dificilmente perceptível no sítio da injeção.

Conclusões [000501] As mesmas doses de R e T U 300 não são equivalentes em biodisponibilidade (exposição) e bioeficácia (atividade) após adminis- tração de dose única. A exposição e atividade após T1 (0,4 U/kg) e T2 (0,6 U/kg) foram menos quando comparadas a exposição e atividade após administração de R (0,4U/kg). R e T3 foram virtualmente equivalentes a exposição e consumo de glicose exógena.

[000502] T1, T2 e T3, entretanto, mostraram perfil de PK (exposição) e PD (atividade) ainda mais plano com flutuação ainda menor em torno das médias do que R, isto é, um perfil como seria desejado para fornecimento de insulina basal. Isto é particularmente evidente ao comparar R e T3 que fornece exposição total equivalente nominal e consumo de glicose total através de diferentes perfis.

[000503] Estas diferenças surpreendentes e inesperadas na exposição e atividade entre as formulações R (Lantus U100) e T (HOE901-U300) em indivíduos com Diabetes Melito Tipo 1 são eficazmente mostradas nas figuras abaixo.

[000504] Além disso, a administração de T (HOE901-U300) foi sem resultados de segurança e tolerabilidade.

Exemplo 15: Estudo racional para comparar a atividade e exposição glicodinâmica de duas doses subcutâneas diferentes de (HOE901-U300) com Lantus U100 em pacientes com Diabetes Melito Tipo 1.

[000505] Os resultados do estudo em indivíduos sadios e em indivíduos com Diabetes Melito Tipo 1 (vide os exemplos a seguir) mostraram que a exposição e eficácia não devem ser equivalentes entre Lan-tus® U100 e insulina glargina U300. Os indivíduos receberam a mesma dose de insulina glargina (0,4U/kg) para U100 e U300, porém a liberação da mesma unidade-quantidade de U300 produziu menos exposição em consumo de glicose menos exógeno para preservar o controle de glicose sanguínea do que a liberação de U100. Embora Lantus U100 mostre exposição e perfis farmacodinâmicos sem flutuação pronunciada em torno das médias, HOE901-U300, entretanto, mostrou ainda menos flutuação em exposição e perfis farmacodinâmicos, como seria desejado para fornecimento de insulina basal, com uma duração ainda mais longa de ação.

[000506] Para estimar o perfil farmacocinético e farmacodinâmico sob condições de estado estável, um novo estudo descrito nos seguintes exemplos, portanto, compara duas doses subcutâneas diferentes de insulina glargina U300 versus uma dose padrão de Lantus® U100 quando comparado com um ambiente de grampo euglicêmico final em pacientes com Diabetes Melito Tipo 1. Este estudo tem como objetivo estimar uma dose de U300 que é eficaz para 0,4U/kg Lantus® U100 como estimado por parâmetros de controle de glicose sanguínea e disposição de glicose sanguínea fornecida pela técnica de grampo. [000507] A exposição de insulina glargina é estimada de perfis de concentração-tempo após administração subcutânea repetida em estado estável, e atividade como utilização de glicose por unidade de insulina no estado estável.

[000508] O estudo compreende dois tratamentos de cruzamento (R e T1, e R e T2) em 2 grupos paralelos, com 2 períodos de tratamento (TP1, TP2) e 2 sequências, cada. Há uma visita de avaliação (D-21 a D-3), visitas de tratamento (D1 a D10 em TP1 e TP2 com dosagem noturna), com períodos domésticos (D1 a D4 manhã e D8 manhã a D10 noturno para estimativas de grampo) e uma visita de fim do estudo (entre D7 a D10 após a última dosagem) com parâmetros de estimativa de segurança finais.

[000509] A dose de Lantus® U100 de 0,4 U/kg selecionada para o estudo é bem caracterizada para fornecer controle de glicose sanguínea euglicêmica em pacientes de diabete tipo 1 e foi facilmente investigada em outros estudos de grampo com pacientes de diabete tipo 1. [000510] Duas doses diferentes são testadas para insulina glargina U300, 0,4 e 0,6 U/kg. Esta faixa de dose permite intrapolar uma eficá- cia de dose aproximada para 0,4 U/kg de Lantus® U100. A dose de 0,4 U/kg de insulina glargina U300 já foi testada em voluntários saudáveis e indivíduos com diabete melito tipo (vide os exemplos a seguir) e descobriu-se ser menos ativa do que 0,4 U/kg de Lantus® U100 em 30 e 36 horas, respectivamente, os finais predefinidos dos períodos de observação. O controle de glicose sanguínea com 0,4 U/kg de insulina glargina U300 exigiu menos disposição de glicose total do que aquele da medicação de referência (0,4 U/kg de Lantus® U100). Uma dose de insulina glargina U300 correspondentemente maior, por exemplo, 0,6 U/kg de insulina glargina U300, é esperada resultar em controle de glicose sanguínea ainda mais restrito em menos disposição de glicose total. Além disso, a escalação de dose proporcional permite explorar exposição e perfis de efeito para proporcionalidade de dose.

[000511] Um estudo em pacientes com diabete tipo 1 evita confundir o impacto de insulina endógena e permite melhor estimativa de exposição e duração de ação.

[000512] Este estudo tem um desenho cruzado; com base no resultado de estudos prévios não mais do que duas doses de HOE901-U300 serão comparadas com Lantus® U100. Estimativa de atividade glicodinâmica de produtos de insulina de longa duração requer um ajuste de grampo euglicêmico além de 24 horas, o intervalo de injeção predefinido, devido à duração prolongada de ação.

[000513] O ingrediente farmacêutico ativo, insulina glargina, é o mesmo em ambas as formulações, U100 e U300. As doses usadas neste estudo estão dentro da faixa de uso regular. Embora um risco total de hipoglicemia não seja completamente excluído, ele é controlado por uma técnica de grampo euglicêmico.

Farmacodinâmicos [000514] A atividade de insulina glargina farmacodinâmica é avaliada por uma técnica de grampo euglicêmico em pacientes de diabete tipo 1, que é o procedimento padrão estabelecido para avaliar o efeito de produtos de insulina administrados exógenos em disposição de glicose sanguínea.

[000515] Os parâmetros específicos para estimativa de disposição de glicose em um ajuste de grampo euglicêmico são a taxa de infusão de glicose (GIR) padronizada pelo peso corporal, glicose total disposta em 24 e 36 horas, respectivamente, GIR-AUC0-24 e GIR-AUC0-36, e tempos para um determinado percentual de GIR-AUC0-24 e GIR-AUC0-36 tal como tempo para 50% de GIR-AUC0-36.

[000516] Os parâmetros auxiliaries são o peso corporal suavizado máximo padronizado GIR, GIRmax, e Tempo para GIRmax, GIR-Tmax. [000517] A duração da ação de insulina glargina é derivada do tempo entre a dosagem e divergências pré-especificadas acima do nível euglicêmico (grampo).

[000518] O monitoramento de glicose é executado durante 36 horas devido a uma longa duração de ação de insulina glargina após administração subcutânea Farmacocinéticos [000519] Devido à natureza de liberação prolongada de insulina glar-gina há uma falta de picos pronunciados em um perfil de concentração. Portanto, o tempo para 50% de INS-AUC (por exemplo, T50% INS-AUC0-36) é calculado como uma medida para a locação de tempo de um perfil de exposição de insulina glargina, e INS-Cmax e INS-Tmax servirão como medições adicionais.

Objetivos Primários de Estudo [000520] O objetivo primário do estudo é estimar o controle de glicose sanguínea e o consumo de glicose exógena requerido de duas diferentes doses de insulina glargina U300 versus 0,4 U/kg de Lantus® U100 em estado estável.

Objetivos Secundários de Estudo [000521] Os objetivos secundários do estudo são para estimar em estado estável, as relações de exposição de duas diferentes doses de insulina glargina U300 versus 0,4 U/kg de Lantus® U100, para comparar uma duração de ação de duas diferentes doses de insulina glargina U300 versus 0,4 U/kg de Lantus® U100, para explorar a ligação de resposta de dose e exposição de dose de insulina glargina U300, e estimar a segurança e tolerabilidade de insulina glargina U300 em indivíduos com diabete tipo 1.

Exemplo 16: Mudança das propriedades de dissolução de formulações ácidas de insulinas de longa ação em concentrações maiores [000522] A influência das concentrações maiores de formulações de insulina glargina com referência às propriedades de dissolução são investigadas usando-se um sistema de teste in vitro. Para fazer isto, os estudos de precipitação são executados usando um tampão de fosfato com um pH de 7,4, simulando as condições in vivo.

[000523] O sobrenadante de uma insulina precipitada é investigado usando técnica de HPLC para determinar o conteúdo de insulina glar-gina.

Descrição detalhada dos estudos: Preparação da solução de tampão de precipitação: [000524] 19,32 mg de monoidrato de fosfato de diidrogênio de sódio (M: 137,98 g/ mol) são dissolvidos por mL de água. Hidróxido de sódio a 0,1 M ou ácido clorídrico a 0,1 M é usado para ajuste do pH a 7,4.

Desempenho dos estudos de precipitação: [000525] As soluções de produto de fármaco de insulina glargina tendo concentrações de até 1000 U/mL e compreendendo a mesma quantidade total de insulina glargina e do tampão são colocadas em tubos plásticos e são levemente agitadas. Após a precipitação de uma insulina glargina as dispersões são centrifugadas em rotações lentas durante um período de tempo predefinido. Um volume definido do meio de dissolução é retirado e substituído com meio de tampão fresco.

Determinação de um teor de insulina: [000526] O conteúdo de insulina glargina nas amostras do sobrena-dante é quantificado contra o respectivo padrão de referência de insulina por HPLC de fase reversa usando um sistema de duas fases móveis, contendo um tampão de diidrogenfosfato de sódio em água, cloreto de sódio (NaCl) e diferentes quantidades de acetonitrila.

[000527] Como fase estacionária uma coluna de octadodecila é usada, detecção de comprimento de onda é 215 nm.

[000528] O perfil de liberação de insulina glargina das soluções concentradas superiores (por exemplo, U500 e U1000) é mais plano e prolongado comparado com Lantus U100.

Exemplo 17: Investigação microscópica de precipitados [000529] Os precipitados de formulações de insulina glargina tendo concentrações de 100 U/mL, 300 U/mL, 500 U/mL 700 U/mL e 1000 U/mL foram investigados por microscopia. As referidas formulações (com uma quantidade idêntica de 60U de insulina glargina) foram precipitadas em 200 pL de um tampão de fosfato, pH 7,4 e foram investigadas por microscópio óptico de luz transmitida (Olympus Model BX61) com as magnitudes 100x, os desenhos são mostrados no seguinte também apresentando os diâmetros máximos. Essas investigações revelaram diferenças nas características de precipitações, levando a partículas maiores notáveis com concentrações crescentes. Os resultados são mostrados na figura 8.

Exemplo 18: Efeito de redução de glicose sanguínea de insulina glargina em cães [000530] O efeito de redução de glicose sanguínea de insulina glar-gina foi avaliado in cães Beagle normoglicêmicos sadios. Os cães re- ceberam injeções subcutâneas únicas de 0,3 lU/kg. A glicose sanguínea venosa foi determinada antes da primeira injeção e subsequentemente até 24 horas.

[000531] Os animais foram tomados do coorte de ~30 cães Beagle machos normoglicêmicos saudáveis, originalmente obtidos de Harlan. Os cães foram mantidos em grupos de canil sob condições padronizadas. O dia antes do início do estudo os cães foram aleatoriamente distribuídos para gaiolas de estudo. Eles foram jejuados 18 horas antes do início e em todo o experimento com acesso livre à água de torneira. O peso corporal dos cães no presente estudo foi entre 13 e 27 kg. Após cada experimento os cães foram permitidos se recuperar durante pelo menos duas semanas.

[000532] Os animais foram randomizados para os grupos de n = 6. No ponto de tempo zero os animais foram tratados com doses únicas do composto de teste. A insulina glargina foi administrada como uma injeção subcutânea única uma dose de 0,3 IU/kg.

[000533] A amostragem de sangue foi executada consecutivamente através de punção da veia do antebraço (Vena cephalica) antes da administração do fármaco (0 h) e, por conseguinte até 24 horas. A glicose sanguínea foi determinada enzimaticamente (kit de Gluco-quant® Glucose/HK em Roche/Hitachi 912).

[000534] O efeito na glicose sanguínea seguinte injeção subcutânea de preparações de insulina glargina diferentemente concentradas, 100 e 300 unidades/mL, foi testado em cães Beagle normoglicêmicos sadios.

[000535] Com o aumento da concentração de insulina glargina o tempo médio de ação aumentou de 6,8h (U100) para 7,69h (U300), respectivamente.

[000536] Aumentando-se uma concentração de glargina de 100 para 300 U/mL o perfil de ação com o tempo de diminuição de glicose san- guínea foi alterado para uma atividade mais uniforme e prolongada no cão.

[000537] Os dados atuais em cães são compatíveis com os dados em humanos mostrando que concentrações de fármaco maiores de insulina glargina são positivamente correlacionadas com perfil e duração mais longa de ação.

FIGURAS

[000538] As figuras abaixo eficazmente mostram as surpreendentes e inesperadas diferenças em exposição (PK) e atividade (PD) entre formulações de Lantus U100 e Lantus U300 (formulações de insulina glargina U100 e insulina glargina U300) após a mesma dose s.c. dada aos indivíduos sadios, ao mesmo tempo em que a glicose sanguínea (PD) foi constante.

Breve Desrição dos Desenhos figura 1: Taxa de infusão de glicose (GIR) Lantus U100 figura 2: Taxa de infusão de glicose (GIR) Lantus U300 figura 3: Concentrações de insulina do soro; Lantus U100 (esquerdo) e U300 (direito) figura 4: glicose sanguínea (1/2) figura 5: glicose sanguínea (2/2) figura 6: Resultados de um estudo de resposta de dose, duplo cego, randomizado, 4 sequências, de cruzamento, de 0,4, 0,6 e 0,9 U/kg de HOE-901-U300 (insulina glargina U300) comparado a 0,4 U/kg de Lantus® U100 (insulina glargina U100) em pacientes com diabetes melito tipo 1 usando a técnica de grampo euglicêmico. Painel Superior: concentração de insulina glargina (mU/L), painel do meio: glicose sanguínea (BG, mg/dL), painel inferior: taxa de infusão de glicose (GIR, mg.kg-1.min-1). As curvas exibem medias suavizadas LO-WESS de todos os pontos de dados de todos os indivíduos (médias da população); LOWESS é uma técnica de análise de dados para produ- zir um conjunto "homogêneo" de valores de uma série de tempo que foi contaminado com ruído, ou de um plote dispersador com uma ligação "ruidosa" entre as 2 variáveis figura 7: Taxa de infusão de glicose (GIR, mg.kg-1.min-1). [000539] As curvas exibem medias homogêneas de LOWESS de todos os pontos de dados de todos os indivíduos (médias da população); LOWESS é uma técnica de análise de dados para produzir um conjunto "homogêneo" de valores de uma série de tempo que foi contaminada com ruído, ou de um plote dispersador com uma ligação "ruidosa" entre a 2 variáveis Legenda: Perfis 1 a 3 (do topo para a base) [000540] Resultados de um estudo de resposta de dose de grupo paralelo, randomizado, duplo cego, de 0,4, 0,6 e 1,2 U/kg Lantus® U100 (insulina glargina U100) em pacientes com diabete melito tipo 1 usando uma técnica de grampo euglicêmico.

Legenda: Perfis 4 a 7 (do topo para base) [000541] Resultados de um estudo de resposta de dose randomiza-do, 4 sequências, de cruzamento, duplo cego de 0,4, 0,6 e 0,9 U/kg de HOE-901-U300 (insulina glargina U300) comparado a 0,4 U/kg de Lan-tus® U100 (insulina glargina U100) em pacientes com diabete melito tipo 1 usando a técnica de grampo euglicêmico.

Figura 8: Desenhos de microscópio óptico de precipitados de formulações de insulina glargina com concentrações crescentes: A: 100 U/mL, B: 300 U/mL, C: 500 U/mL, D: 700 U/mL e E: 1000 U/mL, com a magnitude de 100x e incluindo os diâmetros máximos.

[000542] Todas as precipitações são executadas com 60U de insulina glargina figura 9: Perfil de ação controlada de insulina glargina U-100 vs. U-300 em cães normoglicêmicos Lista de abreviações °C Graus Celsius ABE Bioequivalência média AE Evento Adverso ALT Alanina Aminotransferase aPPT Tempo de Tromboplastina Parcial ativada ARF Insuficiência Renal Aguda AST Aspartato Aminotransferase β-HCG Coriongonadotropina Beta-Humana bpm batimentos por minuto cm centímetro CPK Creatinina Fosfoquinase CRF Forma de Relato de Caso DRF Forma de Resolução de Discrepância ECG Eletrocardiograma EOS Fim do estudo (visita) GCP Boa Prática Clínica GGT Gama-glutamil transferase Hb Hemoglobina HbA1c Hemoglobina glicosilada HBs Superfície de Hepatite B

Hct Hematócrito HCV Vírus da Hepatite C HIV Vírus da Imunodeficiência Humana HR Frequência cardíaca INN Nome Não Proprietário Internacional INR Relação Normalizada Internacional (tempo de protrombina) IP Produto Investigacional IRB/IEC Quadro de Revisão Institucional/Comitês Éticos Independentes Kg Quilograma LOQ Limite de quantificação PT Tempo de Protrombina QTc Intervalo QT automaticamente corrigido pela máquina de ECG QTcB Intervalo QT corrigido pela fórmula Bazett QTcF Intervalo QT corrigido pela fórmula Fridericia QtcN Intervalo QT corrigido por um método de população QtcNi Intervalo QT corrigido por método de população individual RBC Contagem de Célula Sanguínea Vermelha SBP Pressão Sanguínea Sistólica SCR Avaliação (visita) UDS Análise de Fármaco na Urina ULN Limite Superior da Faixa Normal WBC Contagem de Célula Sanguínea Branca REIVINDICAÇÕES

Claims (23)

1. Formulação farmacêutica aquosa, caracterizada pelo fato de que compreende 300 U/mL de insulina glargina que é equimolar a 300 IU de insulina humana, em que a referida formulação farmacêutica aquosa compreende ainda um ou mais excipientes selecionados do grupo compreendendo zinco, m-cresol, glicerol, polissorbato 20 e sódio.

2. Formulação aquosa de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o análogo de exendina-4 é selecionado de um grupo consistindo em lixisenatida, exenatida e liraglutida.

3. Formulação aquosa de acordo com a reivindicação 2, caracterizada pelo fato de que compreende 0,1 pg a 10 pg de lixisenatida por U de insulina glargina.

4. Formulação aquosa de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de que compreende 0,2 a 1 pg de lixisenatida por U de insulina glargina.

5. Formulação aquosa de acordo com a reivindicação 4, caracterizada pelo fato de que compreende 0,25 pg a 0,7 pg de lixisena-tida por U de insulina glargina.

6. Formulação aquosa de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que compreende 90 pg/mL de zinco, 2,7 mg/mL de m-cresol e 20 mg/ml de glicerol a 85%.

7. Formulação aquosa de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que compreende 90 pg/mL de zinco, 2,7 mg/mL de m-cresol, 20 pg/mL de polissorbato 20 e 20 mg/mL de glice-rol a 85%.

8. Formulação aquosa de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizada pelo fato de que o pH é entre 3,4 e 4,6.

9. Formulação aquosa de acordo com a reivindicação 8, ca- racterizada pelo fato de que o pH é 4.

10. Formulação aquosa de acordo com a reivindicação 8, caracterizada pelo fato de que o pH é 4,5.

11. Uso de insulina glargina em uma concentração de 300 U/mL que é equimolar a 300 IU de insulina humana, caracterizado pelo fato de ser na preparação de uma composição farmacêutica aquosa para tratar Diabetes Melito Tipo I e Tipo II em um paciente.

12. Uso de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que a referida composição farmacêutica compreende ainda excipientes selecionados do grupo consistindo em zinco, m-cresol, glicerol, polissorbato 20 e sódio.

13. Uso de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que a referida composição farmacêutica compreende ainda 0,1 pg a 10 pg de lixisenatida por U de insulina glargina.

14. Uso de insulina glargina em uma concentração de 300 U/mL que é equimolar a 300 IU de insulina humana, caracterizado pelo fato de ser na preparação de uma composição farmacêutica aquosa para estender a duração de exposição de uma insulina de longa ação no tratamento de Diabetes Melito Tipo I e Tipo II em um paciente.

15. Uso de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que a referida composição farmacêutica compreende ainda excipientes selecionados do grupo que consiste em zinco, m-cresol, glicerol, polissorbato 20 e sódio.

16. Uso de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que a referida composição farmacêutica compreende ainda 0,1 pg a 10 pg de lixisenatida por U de insulina glargina.

17. Uso de insulina glargina em uma concentração de 300 U/mL que é equimolar a 300 IU de insulina humana, caracterizado pelo fato de que é na preparação de uma composição farmacêutica aquosa para reduzir a incidência de hipoglicemia no tratamento de Diabetes Melito Tipo I e Tipo II em um paciente com uma insulina de longa ação.

18. Uso de acordo com a reivindicação 17, caracterizado pelo fato de que a referida composição farmacêutica compreende ainda excipientes selecionados do grupo que consiste em zinco, m-cresol, glicerol, polissorbato 20 e sódio.

19. Uso de acordo com a reivindicação 17, caracterizado pelo fato de que a referida composição farmacêutica compreende ainda 0,1 pg a 10 pg de lixisenatida por U de insulina glargina.

20. Uso de insulina glargina em uma concentração de 300 U/mL que é equimolar a 300 IU de insulina humana, caracterizado pelo fato de que é na preparação de uma composição farmacêutica aquosa para fornecer uma insulina basal de longa ação de pico menor no tratamento de Diabetes Melito Tipo I e Tipo II em um paciente.

21. Uso de acordo com a reivindicação 20, caracterizado pelo fato de que a referida composição farmacêutica compreende ainda excipientes selecionados do grupo que consiste em zinco, m-cresol, glicerol, polissorbato 20 e sódio.

22. Uso de acordo com a reivindicação 20, caracterizado pelo fato de que a referida composição farmacêutica compreende ainda 0,1 pg a 10 pg de lixisenatida por U de insulina glargina.

23. Uso de uma formulação aquosa como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizado pelo fato de ser no tratamento de Diabetes Melito Tipo 1 e Diabetes Melito Tipo 2.