ES2430042T3

ES2430042T3 - Composiciones farmacéuticas estables que comprenden liraglutida y degludec

Info

Publication number: ES2430042T3
Application number: ES08849536T
Authority: ES
Inventors: Anne Plum; Dorte Bjerre Steensgaard; Jens Kaalby Thomsen; Morten Schlein; Anne Sofie Kjaer Markussen; Christian Poulsen
Original assignee: Novo Nordisk AS
Current assignee: Novo Nordisk AS
Priority date: 2007-11-16
Filing date: 2008-11-14
Publication date: 2013-11-18
Anticipated expiration: 2028-11-14
Also published as: EP2209800A2; JP2011503152A; JP5757530B2; EP2597103B1; EP2597103A1; US20110152185A1; CN101861333A; NO2017015I2; DK2597103T3; HUE030383T2; CN107412742A; ES2612736T3; US8937042B2; CN107115523A; CA2705821A1; PT2597103T; CN107412742B; WO2009063072A2; JP5241849B2; EP2209800B1

Abstract

Composición farmacéutica soluble para administración parenteral, que comprende un compuesto GLP-1 insulinotrópico,un péptido de insulina basal, aditivos farmacéuticamente aceptables y zinc, en donde el compuesto de GLP-1 insulinotrópicoes Arg34, Lys26(NB-(γ-Glu(Nα-hexadecanoil)))-GLP-1(7-37), la insulina basal es NεB29- α-(COOH(CH2)14CO)-γ-Glu) desB30insulina humana y en donde el contenido de zinc es entre 7 y 12 iones de Zn por 6 moléculas de insulina y en donde el pHes entre 7.7 y 8.2.

Description

Composiciones farmacéuticas estables que comprenden liraglutida y degludec.

Campo de la Invención

[0001] La presente invención se refiere al campo de composiciones farmacéuticas. Más específicamente la invención se refiere a composiciones farmacéuticas que comprenden dos péptidos farmacéuticamente activos diferentes.

Antecedentes de la Invención

[0002] La diabetes mellitus es un trastorno metabólico en el cual la capacidad para utilizar glucosa se pierde parcial o completamente. Desde la introducción de la insulina en 1920, se han hecho esfuerzos continuos por mejorar el tratamiento de diabetes mellitus. Ya que las personas que sufren de diabetes se someten a tratamiento crónico durante varias décadas, existe una gran necesidad por formulaciones de insulina convenientes y seguras que mejoren la calidad de vida.

[0003] En el tratamiento de diabetes mellitus, se han sugerido y usado muchas variedades de formulaciones de insulina, tales como insulina regular, insulina isofane (designada NPH), suspensiones de insulina y zinc (tales como Semilente®, Lente® y Ultralente®), e insulina isófana bifásica. Algunas de las formulaciones de insulina disponibles comercialmente se caracterizan por un rápido inicio de acción y otras formulaciones tienen un inicio relativamente lento pero muestran una acción más o menos prolongada. Las formulaciones de insulina de acción rápida normalmente son soluciones de insulina, mientras que las formulaciones de insulina de acción retardada pueden ser suspensiones que contengan insulina en forma cristalina y/o amorfa precipitada mediante la adición de sales zinc solas o mediante la adición de protamina o por medio de una combinación de ambas. Dentro de la última década un número de análogos de insulina humana han sido desarrollados. Están diseñados para perfiles de acción particulares, es decir, acción rápida o acción prolongada.

[0004] Otro péptido que se espera se vuelva muy importante en el tratamiento de diabetes es el péptido tipo glucagón-1 (GLP-1). GLP-1 humano es un péptido con 37 residuos de aminoácidos que se origina a partir de preproglucagón el cual es sintetizado entre otros en las células L en el íleon distal, en el páncreas y en el cerebro. GLP-1 es una importante hormona intestinal con función reguladora en metabolismo de glucosa y secreción y metabolismo gastrointestinal. GLP-1 estimula la secreción de insulina de una manera dependiente de glucosa, estimula la biosíntesis de insulina, promueve el rescate de células beta, reduce la secreción de glucagón, vaciado gástrico y consumo de alimento. Ya que la población de diabetes tipo 2 está creciendo rápidamente en el mundo existe una necesidad mucho mayor por una administración más simple de fármacos más efectivos. Una formulación de combinación que comprenda un péptido de insulina y un péptido GLP-1 con una relación fija de los dos farmacéuticos puede ser un tratamiento muy eficaz así como uno que requiera menos inyecciones cuando se administre al mismo paciente.

[0005] Un tratamiento combinado de diabetes que requiere insulina comprende la administración de insulina y GLP-1 se describe en WO 95/31214. Una formulación pre-mezclada de compuestos de GLP-1 e insulina basal se describe en WO 03/020201. Composiciones farmacéuticas estables de larga duración que comprenden GLP-1, una insulina basal y agentes tensioactivos se describen en WO 2006/051103.

Breve Descripción de las Figuras

[0006] La figura 1 muestra la estabilidad física de cuatro composiciones farmacéuticas evaluadas por medio de una prueba estresada acelerada. Las figuras 2-4 muestran los resultados de una prueba de rotación. Las figuras 5-8 muestran los perfiles farmacocinéticos (PK) de formulaciones de combinación fija con el análogo de insulina NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana y la liraglutida examinados en cerdos.

Resumen de la invención

[0007] Un objetivo de la presente invención es proporcionar una combinación fija diaria de una vez al día y estable de larga duración de un compuesto GLP-1 y un compuesto de insulina basal con propiedades PK/PD intercambiadas de los péptidos combinados en comparación con los componentes activos individuales. La invención es una composición farmacéutica estable para administración parenteral, que comprende un compuesto GLP-1 insulinotrópico, un péptido de insulina basal, aditivos farmacéuticamente aceptables y zinc, donde el compuesto GLP-1 insulinotrópico es Arg34,Lys26(NE-(y-Glu(Nahexadecanoil)))-GLP-1(7-37), la insulina basal es NEB29-(Na-(COOH(CH2)|14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana y donde el contenido de zinc es entre 7 y 12 iones de Zn por 6 moléculacas de insulina y donde el pH es entre 7.7 y 8.2.

[0008] De forma más específica la presente invención se refiere a la composición farmacéutica estable de larga duración que comprende una combinación fija de compuesto GLP-1 insulinotrópico y una insulina basal, esta composición contiene al menos 5 iones de zinc por 6 moléculas de insulina basal.

[0009] Preferiblemente, la composición farmacéutica contiene al menos 6 iones de zinc por 6 moléculas de insulina basal. [0010] La composición farmacéutica contiene al menos 7 iones de zinc por 6 moléculas de insulina basal. [0011] La composición farmacéutica contiene al menos 8 iones de zinc por 6 moléculas de insulina basal. [0012] De forma alternativa, la composición farmacéutica contiene al menos 9; 10; 11; 12; 13; 14; 15 ó 16 iones de zinc por 6

moléculas de insulina basal. [0013] El contenido de zinc es de entre 5 y 16 iones de zinc por 6 moléculas de insulina. [0014] El contenido de zinc es de entre 5 y 15; 5 y 14; 5 y 13; 5 y 12; 5 y 11; 5 y 10; 5 y 9, 5 y 8 o entre 5 y 7 iones de zinc

por 6 moléculas de insulina. [0015] El contenido de zinc es de entre 6 y 16 iones de zinc por 6 moléculas de insulina. [0016] El contenido de zinc es de entre 6 y 15; 6 y 14; 6 y 13; 6 y 12; 6 y 11; 6 y 10; 6 y 9 o entre 6 y 8 iones de zinc por 6

moléculas de insulina. [0017] El contenido de zinc es de entre 7 y 16 iones de zinc por 6 moléculas de insulina. [0018] El contenido de zinc es de entre 7 y 14; 7 y 15; 7 y 14; 7 y 13; 7 y 12; 7 y 11; 7 a 10; o 7 y 9 iones de zinc por 6

moléculas de insulina basal. [0019] El contenido de zinc es de entre 8 y 16 iones de zinc por 6 moléculas de insulina. [0020] El contenido de zinc es de entre 8 y 15; 8 y 14; 8 y 13; 8 y 12; 8 y 11 u 8 y 10 iones de zinc por 6 moléculas de

insulina.

[0021] El pH de la formulación farmacéutica en cualquiera de las formas de realización anteriores típicamente será aproximadamente neutro y típicamente será de entre alrededor de 7 y aproximadamente 9. [0022] El pH de la composición farmacéutica está entre alrededor de pH 7.4 y aproximadamente pH 9; entre alrededor de pH

7.4: y aproximadamente pH 8.5 o entre alrededor de pH 7.4 y aproximadamente pH 8.2.

[0023] El pH de la composición farmacéutica es de entre aproximadamente pH 7.5 y alrededor de pH 8.5; entre aproximadamente pH 7.5 y alrededor de pH 8.2 o entre aproximadamente 7.5 y alrededor de 7.7. [0024] En otra forma de realización el pH de la composición farmacéutica es alrededor de pH 7.6 a aproximadamente pH

8.2.: En una forma de realización más el pH es de entre alrededor de 7.7 y aproximadamente 8.2. [0025] El pH será de entre aproximadamente 7.7 y alrededor de 9. [0026] El pH será de entre aproximadamente 7.7 y alrededor de 8.9. [0027] El pH será de entre aproximadamente 7.7 y alrededor de 8.8. [0028] El pH será de entre aproximadamente 7.7 y alrededor de 8.7. [0029] El pH será de entre aproximadamente 7.7 y alrededor de 8.6. [0030] El pH será de entre aproximadamente 7.7 y alrededor de 8.5. [0031] El pH será de entre aproximadamente 7.7 y alrededor de 8.4. [0032] El pH será de entre aproximadamente 7.7 y alrededor de 8.3.

[0033] El pH será de entre aproximadamente 7.7 y alrededor de 8.2.

[0034] El pH será de entre aproximadamente 7.7 y alrededor de 8.1.

[0035] El pH será de entre aproximadamente 7.7 y alrededor de 8.

[0036] El compuesto GLP-1 insulinotrópico puede en cualquiera de las formas de realización anteriores ser cualquier compuesto GLP-1 que sea efectivo para el tratamiento de diabetes tipo 2. El término “péptido GLP-1” según se usa en la presente significa GLP-1(7-37), un análogo de GLP-1(7-37), un derivado de GLP-1(7-37) o un derivado de un análogo de GLP-1(7-37). Derivados de GLP-1 pueden ser compuestos de GLP-1 acilados tales como los descritos en WO 98/08871 o WO 2006/097537.

[0037] En una forma de realización el compuesto GLP-1 es un análogo de GLP-1 acilado tal como Arg34,Lys26(NE-(y-Glu(Nahexadecanoil)))-GLP-1(7-37), Aib8, Lys26(OEG-OEG-gamma-Glu-C18-diácido), Arg34)GLP-1H(7-37)-OH o (N-épsilon26-[2(2-(2-[2-(2-{2-[(S)-4-carboxi-4-(17-carboxi-heptadecanoilamino)butirilamino]etoxi}etoxi)acetilamino]etoxi}etoxi)-acetil][Aib8, Arg34]GLP-1-(7-37).

[0038] En otra forma de realización el GLP-1 es exendina-3, exendina-4 o un análogo de exendina-4. El análogo de exendina-4 puede comprender de 4-10, 4-8 o 4-6 residuos de aminoácidos básicos añadidos ya sea en el extremo Cterminal o N-terminal.

[0039] La insulina basal puede en cualquiera de las formas de realización anteriores ser cualquier insulina basal conocida para el tratamiento de diabetes tipo 1 y tipo 2. En una forma de realización la insulina basal es una insulina acilada en el grupo E-amino en el B29Lys en la cadena B de insulina y análogos del mismo como se describe en WO 95/07931, WO 2005/012347 y en EP2007/054444.

[0040] La insulina basal es una insulina basal desplazada en pl tal como el tipo descrito en la patente de estadounidense 5,656,722 con sustituciones o adiciones de residuos de aminoácidos básicos de la molécula de insulina. Un ejemplo de estas insulinas basales es GlyA21, ArgB31, ArgB32 insulina humana (insulina glargina). Otra insulina basal puede ser una insulina glargina amidada tal como los compuestos descritos en WO2008/006496 y WO2008/006497.

[0041] La insulina basal es NEB29-tetradecanoil des(B30) insulina humana.

[0042] La insulina basal es LysB29 (NE litocolil-y-Glu)-des(B30) insulina humana.

[0043] La insulina basal es NEB29-tetradecanoil des(B30) insulina humana o NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana.

NEB29NEB29

[0044] La insulina basal es-c-carboxipentadecanoil-y-L-glutailamida desB30 insulina humana o -ccarboxipentadecanoil-y-amino-butanoil des(B30) insulina humana.

[0045] La composición farmacéutica comprende una combinación fija de un compuesto GLP-1 insulinotrópico y una insulina basal acilada seleccionada del grupo que consiste en NEB29-tetradecanoil des(B30) insulina humana, LysB29(NE litocolil-y-Glu)

NEB29

desB30) insulina humana, NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-CO)-y-Glu) desB30 insulina humana,-ccarboxipentadecanoil-y-L-glutailamida desB30 insulina humana y NEB29-c-carboxipentadecanoil-y-amino-butanoil des(B30) insulina humana junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables, composición que contiene al menos 5; 6; 7; 8 ó 9 átomos de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0046] La composición farmacéutica comprende una combinación fija de un compuesto GLP-1 insulinotrópico y una insulina basal acilada seleccionada del grupo que consiste en NEB29-tetradecanoil des(B30) insulina humana, LysB29 (NE litocolil-y-Glu)-des(B30) insulina humana, NEB29-(Na-(HOOC(CH2)|14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana, NEB29-c-carboxipentadecanoily-L-glutailamida desB30 insulina humana y NEB29-c-carboxipentadecanoil-y-amino-butanoil des(B30) insulina humana junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables, composición que contiene entre 5 y 16; 5 y 14; 5 y 12; 5 y 10; o entre 5 y 8 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0047] La composición farmacéutica comprende una combinación fija de un compuesto GLP-1 insulinotrópico y una insulina basal acilada seleccionada del grupo que consiste en NEB29-tetradecanoil des(B30) insulina humana, LysB29 (NE litocolil-y-Glu)-des(B30) insulina humana, NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana, NEB29-c-carboxipentadecanoily-L-glutailamida desB30 insulina humana y NEB29-c-carboxipentadecanoil-y-amino-butanoil des(B30) insulina humana junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables, composición que contiene entre 6 y 16; 6 y 14; 6 y 12; 6 y 10; o entre 6 y 8 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0048] La composición farmacéutica comprende una combinación fija de un compuesto GLP-1 insulinotrópico y una insulina basal acilada seleccionada del grupo que consiste en NEB29-tetradecanoil des(B30) insulina humana, LysB29 (NE litocolil-y-Glu)-des(B30) insulina humana, NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana, NEB29-c-carboxipentadecanoily-L-glutailamida desB30 insulina humana y NEB29-c-carboxipentadecanoil-y-amino-butanoil des(B30) insulina humana junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables, composición que contiene entre 7 y 16; 7 y 14; 7 y 12; o entre 7 y 10 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0049] La composición farmacéutica comprende una combinación fija de un compuesto GLP-1 insulinotrópico y una insulina basal acilada seleccionada del grupo que consiste en NEB29-tetradecanoil des(B30) insulina humana, LysB29 (NE litocolil-y-Glu)-des(B30) insulina humana, NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana, NEB29-c-carboxipentadecanoily-L-glutailamida desB30 insulina humana y NEB29-c-carboxipentadecanoil-y-amino-butanoil des(B30) insulina humana junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables, composición que contiene entre 8 y 16; 8 y 14; 8 y 12; o entre 8 y 10 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0050] La composición farmacéutica comprende una combinación fija de un compuesto GLP-1 insulinotrópico y una insulina basal acilada seleccionada con la fórmula NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana, junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables, composición que contiene entre 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 ó 16 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0051] La composición farmacéutica comprende una combinación fija de un compuesto GLP-1 insulinotrópico y una insulina basal acilada NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana, junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables, composición que contiene entre 5 y 16 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0052] La composición farmacéutica comprende una combinación fija de un compuesto GLP-1 insulinotrópico y una insulina basal acilada NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana, junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables, composición que contiene entre 6 y 16; y y 15; 6 y 14; 6 y 13; 6 y 12; 6 y 10; o entre 6 y 8 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0053] La composición farmacéutica comprende una combinación fija de un compuesto GLP-1 insulinotrópico y una insulina basal acilada NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana, junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables, composición que contiene entre 7 y 16; 7 y 15; 6 y 14; 7 y 13; 7 y 12; 7 y 11; 7 y 10; 7 y 9; o entre 7 y 8 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0054] La composición farmacéutica comprende una combinación fija de un compuesto GLP-1 insulinotrópico y una insulina basal acilada NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana, junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables, composición que contiene entre 8 y 16; 8 y 15; 8 y 14; 8 y 13; 8 y 12; 8 y 11; 8 y 10; o entre 8 y 9 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0055] La presente invención está relacionada con una composición farmacéutica que contiene una combinación fija de un compuesto GLP-1 insulinotrópico y una insulina basal NEB29-tetradecanoil desB30 insulina humana, junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables, en donde el contenido de zinc es al menos 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 ó 16 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0056] La presente invención está relacionada con una composición farmacéutica que contiene una combinación fija de un compuesto GLP-1 insulinotrópico y una insulina basal NEB29-tetradecanoil desB30 insulina humana, junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables adecuados, en donde el contenido de zinc es de entre 5 y 16; 6 y 16; entre 7 y 16; o entre 8 y 16 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0057] La composición farmacéutica comprende una combinación fija de un GLP-1(7-37) o un análogo o derivado del mismo y una insulina basal acilada seleccionada del grupo que consiste en NEB29-tetradecanoil des(B30) insulina humana, LysB29(NE

NEB29

litocolil-y-Glu)-des(B30) insulina humana, NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana, -ccarboxipentadecanoil-y-L-glutailamida desB30 insulina humana y NEB29-c-carboxipentadecanoil-y-amino-butanoil des(B30) insulina humana junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables adecuados, composición que contiene al menos 5 y 6 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0058] La composición farmacéutica comprende una combinación fija de un GLP-1(7-37) o un análogo o derivado del mismo y una insulina basal acilada seleccionada del grupo que consiste en NEB29-tetradecanoil des(B30) insulina humana, LysB29(NE

NEB29

litocolil-y-Glu)-des(B30) insulina humana, NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana, -ccarboxipentadecanoil-y-L-glutailamida desB30 insulina humana y NEB29-c-carboxipentadecanoil-y-amino-butanoil des(B30) insulina humana junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables adecuados, composición que contiene al menos 5 y 16; 5 y 14; 5 y 12; 5 y 10 o entre 5 y 8 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0059] La composición farmacéutica comprende una combinación fija de un GLP-1(7-37) o un análogo o derivado del mismo y una insulina basal acilada seleccionada del grupo que consiste en NEB29-tetradecanoil des(B30) insulina humana, LysB29(NE

NEB29

litocolil-y-Glu)-des(B30) insulina humana, NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana, -ccarboxipentadecanoil-y-L-glutailamida desB30 insulina humana y NEB29-c-carboxipentadecanoil-y-amino-butanoil des(B30) insulina humana junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables adecuados, composición que contiene entre 6 y 16; 6 y 14; 6 y 12; o 6 y 10 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0060] La composición farmacéutica comprende una combinación fija de un GLP-1(7-37) o un análogo o derivado del mismo y una insulina basal acilada seleccionada del grupo que consiste en NEB29-tetradecanoil des(B30) insulina humana, LysB29(NE

NEB29

litocolil-y-Glu)-des(B30) insulina humana, NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana, -ccarboxipentadecanoil-y-L-glutailamida desB30 insulina humana y NEB29-c-carboxipentadecanoil-y-amino-butanoil des(B30) insulina humana junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables adecuados, composición que contiene entre 7 y 16; 7 y 14; 7 y 12; o entre 7 y 10 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0061] La composición farmacéutica comprende una combinación fija de un GLP-1(7-37) o un análogo o derivado del mismo y una insulina basal acilada seleccionada del grupo que consiste en NEB29-tetradecanoil des(B30) insulina humana, LysB29(NE

NEB29

litocolil-y-Glu)-des(B30) insulina humana, NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana, -ccarboxipentadecanoil-y-L-glutailamida desB30 insulina humana y NEB29-c-carboxipentadecanoil-y-amino-butanoil des(B30) insulina humana junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables adecuados, composición que contiene entre 8 y 16; 8 y 12; o entre 8 y 10 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0062] La invención está relacionada con una composición farmacéutica que contiene una combinación fija de GLP-1(7-37)

: o un análogo o derivados del mismo y NEB29-tetradecanoil des(B30) insulina humana junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables adecuados, en donde el contenido de zinc es al menos 5, 6, 7, 8, 9 ó 10 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0063] La invención está relacionada con una composición farmacéutica que contiene una combinación fija de GLP-1(7-37)

: o un análogo o derivados del mismo y NEB29-tetradecanoil des(B30) insulina humana junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables adecuados, en donde el contenido de zinc es de entre 6 y 16; 7 y 16; 8 y 16; 8 y 14; 8 y 12; o entre 8 y 10 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0064] La composición farmacéutica comprende una combinación fija de Arg34, Lys26(NE-(y-Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(737) y una insulina basal acilada seleccionada del grupo que consiste en NEB29-tetradecanoil des(B30) insulina humana, LysB29(NE-litocolil-y-Glu)-des(B30) insulina humana, NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana, NEB29-ccarboxipentadecanoil-y-L-glutailamida desB30 insulina humana y NEB29-c-carboxipentadecanoil-y-amino-butanoil des(B30) insulina humana junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables adecuados, composición que contiene al menos 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 ó 16 átomos de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0065] La composición farmacéutica comprende una combinación fija de Arg34, Lys26(NE-(y-Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(737) y una insulina basal acilada seleccionada del grupo que consiste en NEB29-tetradecanoil des(B30) insulina humana, LysB29(NE-litocolil-y-Glu)-des(B30) insulina humana, NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana, NEB29-ccarboxipentadecanoil-y-L-glutailamida desB30 insulina humana y NEB29-c-carboxipentadecanoil-y-amino-butanoil des(B30) insulina humana junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables adecuados, composición que contiene 5 y 16; 5 y 14; 5 y 12; o entre 5 y 10 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0066] La composición farmacéutica comprende una combinación fija de Arg34, Lys26(NE-(y-Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(737) y una insulina basal acilada seleccionada del grupo que consiste en NEB29-tetradecanoil des(B30) insulina humana, LysB29(NE-litocolil-y-Glu)-des(B30) insulina humana, NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana, NEB29-ccarboxipentadecanoil-y-L-glutailamida desB30 insulina humana y NEB29-c-carboxipentadecanoil-y-amino-butanoil des(B30) insulina humana junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables adecuados, composición que contiene entre 6 y 16; 6 y 14; 6 y 12 o entre 6 y 10 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0067] La composición farmacéutica comprende una combinación fija de Arg34, Lys26(NE-(y-Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(737) y una insulina basal acilada seleccionada del grupo que consiste en NEB29-tetradecanoil des(B30) insulina humana, LysB29(NE-litocolil-y-Glu)-des(B30) insulina humana, NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana, NEB29-c

carboxipentadecanoil-y-L-glutailamida desB30 insulina humana y NEB29-c-carboxipentadecanoil-y-amino-butanoil des(B30) insulina humana junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables adecuados, composición que contiene entre 7 y 16; 7 y 14; 7 y 12 o entre 7 y 10 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0068] La composición farmacéutica comprende una combinación fija de Arg34, Lys26(NE-(y-Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(737) y una insulina basal acilada seleccionada del grupo que consiste en NEB29-tetradecanoil des(B30) insulina humana, LysB29(NE-litocolil-y-Glu)-des(B30) insulina humana, NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana, NEB29-ccarboxipentadecanoil-y-L-glutailamida desB30 insulina humana y NEB29-c-carboxipentadecanoil-y-amino-butanoil des(B30) insulina humana junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables adecuados, composición que contiene entre 8 y 16; 8 y 14; 8 y 12 o entre 8 y 10 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0069] La invención está relacionada con una composición farmacéutica que contiene una combinación fija de Arg34, Lys26(NE-(y-Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(7-37) y NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables adecuados, en donde el contenido de zinc es de al menos 5 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0070] La invención está relacionada con una composición farmacéutica que contiene una combinación fija de Arg34, Lys26(NE-(y-Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(7-37) y NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables adecuados, en donde el contenido de zinc es al menos 6 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0071] La invención está relacionada con una composición farmacéutica que contiene una combinación fija de Arg34, Lys26(NE-(y-Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(7-37) y NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables adecuados, en donde el contenido de zinc es de al menos 7 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0072] La invención está relacionada con una composición farmacéutica que contiene una combinación fija de Arg34, Lys26(NE-(y-Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(7-37) y NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables adecuados, en donde el contenido de zinc es al menos 8 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0073] La invención está relacionada con una composición farmacéutica que contiene una combinación fija de Arg34, Lys26(NE-(y-Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(7-37) y NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables adecuados, en donde el contenido de zinc es de al menos 9 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0074] La invención está relacionada con una composición farmacéutica que contiene una combinación fija de Arg34, Lys26(NE-(y-Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(7-37) y NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables adecuados, en donde el contenido de zinc es de entre 10 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0075] La invención está relacionada con una composición farmacéutica que contiene una combinación fija de Arg34, Lys26(NE-(y-Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(7-37) y NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables adecuados, en donde el contenido de zinc es de entre 5 y 16; 5 y 15; 5 y 14; 5 y 13; 5 y 12; 5 y 11; 5 y 10; 5 y 9; o entre 5 y 8 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0076] La invención está relacionada con una composición farmacéutica que contiene una combinación fija de Arg34, Lys26(NE-(y-Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(7-37) y NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables, en donde el contenido de zinc es de entre 6 y 16; 6 y 15; 6 y 14; 6 y 13; 6 y 12; 6 y 11; o entre 6 y 10 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0077] La invención está relacionada con una composición farmacéutica que contiene una combinación fija de Arg34, Lys26(NE-(y-Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(7-37) y NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables adecuados, en donde el contenido de zinc es de entre 7 y 16; 7 y 15; 7 y 14; 7 y 13; 7 y 12; 7 y 11; 7 y 10; 7 y 9; o entre 7 y 8 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0078] La invención está relacionada con una composición farmacéutica que contiene una combinación fija de Arg34, Lys26(NE-(y-Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(7-37) y NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables adecuados, en donde el contenido de zinc es de entre 8 y 16; 8 y 15; 8 y 14; 8 y 13; 8 y 12; 8 y 11; 8 y 10; o entre 8 y 9 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

[0079] La invención está relacionada con una composición farmacéutica que contiene una combinación fija de insulina glargina y un análogo de exendina-4, por ejemplo, un análogo de exendina-4 que comprende residuos de aminoácido Lys o Arg 4-6 añadidos junto con adyuvantes farmacéuticamente aceptables adecuados, en donde el contenido de zinc es al menos superior a 5, 6, 7 u 8 iones de zinc por 6 moléculas de insulina. En esta forma de realización la insulina glargina puede ser también una insulina glargina amidada como la descrita en WO2008/006496 y WO2008/006497.

[0080] El pH puede en cualquiera de las formas de realización anteriores ser de 7.4; 7.5; 7.6; 7.8; 7.9; 8; 8.1; 8.2; 8.3; 8.4 u

8.5. En otra forma de realización, el pH es de entre 7.4 y 8.2 o entre 7.5 y 8. En otra forma de realización más, el pH es de entre 7.6 y 8.

[0081] Si el compuesto GLP-1 es Arg34, Lys26(NE-(y-Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(7-37) el pH típicamente será de entre alrededor de 7.7 y aproximadamente 8.2.

[0082] La presente invención está relacionada con un método para la preparación de una composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de las formas de realización anteriores, que comprende disolver la insulina basal y mezclarla con un conservador y un modificador de isotinicidad, después añadir zinc y finalmente mezclar con el péptido insulinotrópico disuelto.

[0083] El método comprende las siguientes etapas: 1) disolver la insulina basal en una solución de agua de tampón y agente de isotonicidad, 2) añadir zinc opcionalmente por etapas, 3) ajustar el pH, 4) almacenar la solución a una temperatura de entre aproximadamente 4-5° y temperatura ambiente, y 5) añadir el compuesto GLP-1.

[0084] En un aspecto adicional la presente invención está relacionada con un método para el tratamiento de hiperglucemia, que comprende la administración parenteral de una cantidad efectiva de la composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de las formas de realización anteriores a un mamífero que requiera de este tratamiento.

[0085] En un aspecto más la presente invención está relacionada con un método para el tratamiento de obesidad, deficiencia de células beta, IGT o dislipidemia, que comprende la administración parenteral de una cantidad efectiva de la composición farmacéutica de acuerdo con las formas de realización anteriores a un mamífero que requiera de este tratamiento.

[0086] Otro aspecto de la presente invención está relacionado con el uso de una composición farmacéutica estable de larga duración que comprende una mezcla de un compuesto GLP-1 insolinotrópico y una insulina basal, composición que contiene al menos 6 átomos de zinc por 6 moléculas de insulina para el tratamiento de hiperglucemia mediante administración parenteral.

[0087] En otro aspecto la invención está relacionada con un método para la reducción de peso, que comprende administrar una cantidad efectiva de una composición farmacéutica que comprende una mezcla de un compuesto GLP-1 insulinotrópico y una insulina basal, composición que contiene al menos 6 átomos de zinc por 6 moléculas de insulina.

Descripción de la Invención

[0088] Esta invención se refiere a la administración de una mezcla fija de una insulina basal y un compuesto GLP-1 insulinotrópico para pacientes con diabetes tipo 2. Cuando un compuesto GLP-1 y una insulina basal se combinan en una sola formulación, los pacientes se ahorran una inyección en comparación con las dos inyecciones separadas requeridas para administrar los dos componentes separadamente y de manera muy importante, un número de efectos sinérgicos positivos se esperan cuando se administre al mismo tiempo tanto un análogo de insulina basal como un compuesto GLP-1.

[0089] En esta mezcla el componente activo individual, la insulina basal y el compuesto GLP-1, deben mantener su perfil PK atractivo conocido a partir del mono-tratamiento. Por ejemplo, el análogo de insulina basal insulina NEB29-(Na(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana tiene un perfil atractivo adecuado para administración una vez al día. Asimismo, el análogo de GLP-1 Arg34, Lys26(NE-(y-Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(7-37) se administra una vez al día. Por consiguiente, la combinación de insulina NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana y liraglutida constituye una combinación atractiva de análogo de insulina basal y un análogo de GLP-1.

[0090] Sin embargo, la mezcla inmediata de análogos de insulina acilados tales como NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana con un compuesto GLP-1 tal como Arg34, Lys26(NE-(y-Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(7-37) da como resultado tanto una formulación menos físicamente estable como propiedades PK alteradas de la insulina acilada. Una formulación comercial sin embargo tiene que tener una alta estabilidad física. Asimismo, si las propiedades PK de la insulina basal se alteran demasiado puede dar como resultado la pérdida de su cobertura de 24 horas.

[0091] La mayoría de las insulinas basales serán formuladas con zinc para tener un PK y estabilidad física satisfactorias. Por ejemplo, se ha mostrado que NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana es capaz de unirse a más que los 2-3 iones de zinc adicionales por 6 moléculas de insulina. 2-3 Iones de zinc adicionales (un total de 5-6 iones de zinc por 6 moléculas de insulina) se requieren para que NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana tenga un perfil una vez al día óptimo.

[0092] Se ha encontrado que Arg34, Lys26(NE-(y-Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(7-37) tiene una unión a zinc de baja afinidad y que tanto la inestabilidad física como las propiedades PK de la NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana son influenciadas por esto en una mezcla de los dos componentes. En una mezcla de Arg34, Lys26(NE-(y-Glu(Nahexadecanoil)))-GLP-1(7-37) y NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana es por la unión de estos iones de zinc adicionales con la que Arg34, Lys26(NE-(y-Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(7-37) compite con insulina NEB29-(Na(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana.

[0093] Se ha encontrado que añadir iones de zinc adicionales a la mezcla de NEB29-Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana con Arg34, Lys26(NE-(y-Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(7-37) mejora la estabilidad física y mejora el perfil PK de la NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana hacia el perfil deseado obtenido con 5-6 iones de zinc por molécula de insulina para NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana sola.

[0094] El término “compuesto GLP-1” según se usa en la presente significa GLP-1(7-37), análogos insulinotrópicos del mismo y derivados insulinotrópicos del mismo. Los compuestos GLP-1 incluyen también compuestos exendin tales como exendin-3 y exendin-4 y análogos de los mismos tales como ZP10 o ZP10A el cual es un análogo de exendin-4 con 6 residuos de lisina añadidos al extremo C-terminal de la molécula, véase Cristian Thorkildsen et al, The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, vol. 307, No. 2 (2003), 490-496.

[0095] Otro aspecto comprende una composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de las formas de realización anteriores, en donde el péptido GLP-1 insulinotrópico es exendina-4 acilada o un análogo de exendina-4 acilada tal como ácido [N-épsilon(17-carboxiheptadecanoico) 20 exendina-4(1-39)-amida y N-épsilon32-(17-carboxiheptadecanoil)[Lys32]exendina-4(1-39)amida.

[0096] Un sistema simple se usa para describir fragmentos y análogos de GLP-1. Así, por ejemplo, Gly8-GLP-1(7-37) designa un análogo de GLP-1(7-37) derivado formalmente de GLP-1(7-37) al sustituir el residuo de aminoácido de origen natural en la posición 8 (Ala) por Gly. De manera similar, Lys34(NE-tetradecanoil)-GLP-1(7-37) designa GLP-1(7-37) en donde el grupo E-amino del residuo Lys en la posición 34 ha sido tetradecanoilado. Las publicaciones de PCT WO 98/08871 y WO 99/43706 describen derivados estables de análogos de GLP-1, los cuales tienen un sustituyente lipófilo. Estos derivados estables de análogos de GLP-1 tienen un perfil de acción prolongado en comparación con los análogos de GLP-1 correspondientes.

[0097] El término “insulinotrópico” según se usa en la presente en referencia a un péptido o a un compuesto significa la capacidad de estimular la secreción de insulina en respuesta a un nivel de glucosa en plasma incrementado. Los péptidos y compuestos insulinotrópicos son agonistas del receptor GLP-1. La propiedad insulinotrópica de un compuesto puede determinarse mediante ensayos in vitro o in vivo conocidos en la técnica.

[0098] En un aspecto el GLP-1 tiene un residuo Arg en la posición 34. En otra forma de realización el GLP-1 tiene residuo Glu en la posición 22. En otra forma de realización de la invención el GLP-1 tiene un residuo de L-histidina en la posición 8. En otra forma de realización de la invención el GLP-1 tiene un residuo Val en la posición 8. En otra forma de realización de la invención el derivado de un análogo de GLP-1(7-37) es GLP-1(7-36)-amida.

[0099] En un aspecto el análogo de GLP-1(7-37) se selecciona del grupo que consiste en GLP-1(7-36) amida, Arg34-GLP1(7-37), Gly8-GLP-1(7-36)-amida, Gly8-GLP-1(7-37), Val8-GLP-1(7-36)-amida, Val8-GLP-1(7-37), Val8Asp22-GLP-1(7-36)amida, Val8Asp22-GLP-1(7-37), Val8Glu22-GLP-1(7-36)-amida, Val3Glu22-GLUP-1(7-37), Val8Lys22-GLP-1(7-36)-amida, Val8Lys22-GLP-1(7-37), Val8Arg22-GLP-1(7-36)-amida, Val8Arg22-GLP-1(7-37), Val8His22-GLP-1(7-36)-amida, Val8His22-GLP1(7-37), Val8Trp19Glu22-GLP-1(7-37), Val8Glu22Val25-GLP-1(7-37), Val8Tyr16Glu22-GLP-1(7-37), Val8Trp16Glu22-GLP-1(7-37), Val8Leu16Glu22-GLP-1(7-37), Val8Tyr16Glu22-GLP-1(7-37), Val8Glu22His37-GLP-1(7-37), Val8Glu22Ile33-GLP-1(7-37), Val8Trp16Glu22Val25Ile33-GLP-1(7-37), Val8Trp16Glu22Ile33-GLP-1(7-37), Val8Glu22Val25Ile33-GLP-1(7-37), Val8Trp16Glu22Val25GLP-1(7-37).

[0100] En otro aspecto el péptido insulinotrópico es un derivado de GLP-1(7-37) o un derivado de un análogo de GLP-1(737) que tiene un residuo de lisina, tal como una lisina, en donde en donde un sustituyente lipófilo opcionalmente por medio de un separador está fijado al grupo épsilon amino de la lisina. En una forma de realización de la invención el sustituyente lipófilo tiene de 8 a 40 átomos de carbono, de preferencia 8 a 24, por ejemplo 12-18. En otra forma de realización de la invención el separador está presente y se selecciona de un aminoácido, por ejemplo, beta-Ala, L-Glu, aminobutiroilo. En otra forma de realización de la invención el péptido insulinotrópico es un compuesto GLP-1 protegido por dipeptidil aminopeptidasa IV. En otra forma de realización de la invención el péptido insulinotrópico es un compuesto GLP-1 estable en plasma. En otra forma de realización de la invención el derivado de un análogo de GLP-1(7-37) es Arg34, Lys26(NE-(yGlu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(7-37). Ejemplos no limitativos de derivados de GLP-1 son desamino-His7, Arg26, Lys34(NE(NE-(y-Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(7-37), desamino-His7, Arg26, Lys34(NE-octanoil)-GLP-1(7-37), Arg26,34, Lys38(NE-(ccarboxipentadecanoil))-GLP-1(7-38), Arg26,34, Lys36(NE-(y-Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(7-36) y Arg34, Lys26(NE-(y-Glu(Nahexadecanoil)))-GLP-1(7-37). Ejemplos no limitativos de derivados de GLP-1 son desamino-His7, Arg26, Lys34(NE-(NE-(y

Arg26,34

Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(7-37), desamino-His7, Arg26, Lys34(NE-octanoil)-GLP-1(7-37), , Lys38(NE-(ccarboxipentadecanoil))-GLP-1(7-38), Arg26,34, Lys36(NE-(y-Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(7-36) y Arg34, Lys26(NE-(y-Glu(Nahexadecanoil)))-GLP-1(7-37).

[0101] En otra forma de realización el análogo de GLP-1 es un análogo prolongado más del tipo descrito en WO 2006/097537, tal como Aib8, Lys26(OEG-OEG-gamma-Glu-C18-diácido), Arg34)GLP-1(7-37), N-E26-(19carboxinonadecanoil)-[Aib8, Arg34]GLP-1-(7-37)-péptido, N-E26-(4-{[N-(2-carboxietil)-N-(15carboxipentadecanoil)amino]metil}benzoil)[Arg34]GLP-1-(7-37), N-E26-[2-(2-[2-(2-[2-(2-[4-(17-carboxiheptadecanoilamino)4(S)-carboxibutirilamino]etoxi) etoxi]acetilamino) etoxi]entoxi)acetil][Aib8,Arg34]GLP-1-(7-37)péptido.

[0102] El derivado de GLP-1 es Aib8, Lys26(OEG-OEG-gamma-Glu-C18-diácido),Arg34)GLP-1(7-37). Su potencia más alta en comparación con Arg34, Lys26(NE-(y-glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(7-37) y la dosis más baja requerida para dosificación una vez al día en lugar de una por semana dará como resultado una concentración más baja del compuesto GLP-1 que la requerida en una formulación de combinación con insulina basal.

[0103] La insulina basal puede ser una insulina soluble acilada como al descrita en WO 95/07931, WO 2005/012347 o EP2007/054444.

[0104] La insulina basal acilada puede seleccionarse de la siguiente lista: NEB29-tridecanoil des(B30) insulina humana, NEB29-tetradecanoil des(B30) insulina humana, NEB29-decanoil des(B30) insulina humana, NEB29-dodecanoil des(B30) insulina humana, NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) des(B30) insulina humana; NEB29-(Na-(HOOC(CH2)15CO)-y-Glu) des(B30) insulina humana; NEB29-(Na-(HOOC(CH2)16CO)-y-Glu) des(B30) insulina humana; NEB29-(Na-(HOOC(CH2)17CO)-y-Glu) des(B30) insulina humana; NEB29-(Na-(HOOC(CH2)18CO)-y-Glu) des(B30) insulina humana; NEB29-(Na-(HOOC(CH2)16CO)-y-Glu-Na-(y-Glu)) des(B30) insulina humana; NEB29-(Na-(Asp-OC(CH2)16CO)-y-Glu) des(B30) insulina humana; NEB29-(Na-(Glu-OC(CH2)14CO)-y-Glu) des(B30) insulina humana; NEB29-(Na-(Glu-OC(CH2)14CO-) des(B30) insulina humana; NEB29-(Na-(Asp-OC(CH2)16CO-) des(B30) insulina humana; NEB29-(Na-(HOOC(CH2)16CO)-a-Glu-Na-(�-Asp)) des(B30) insulina humana; NEB29-(Na-(Gly-OC(CH2)13CO)-y-Glu) des(B30) insulina humana; NEB29-(Na-(Sar-OC(CH2)13CO)-y-Glu) des(B30) insulina humana; NEB29-c-carboxi-pentadecanoil-y-L-glutamilamida desB30 insulina humana, NEB29-c-carboxi-pentadecanoil-y-amino-butanoil desB30 insulina humana, NEB29-c-carboxi-tetradecanoil-y-L-glutamilamida desB30 insulina humana, NEB29-c-carboxi-tridecanoil-y-L-glutamilamida desB30 insulina humana, NEB29-c-carboxi-pentadecanoil-�-alanil desB30 insulina humana, NEB29-c-carboxi-pentadecanoil-y-L-aspartilamida desB30 insulina humana, NEB29-c-carboxi-pentadecanoil-E-aminohexanoil desB30 insulina humana, NEB29-c-carboxi-pentadecanoil-8-aminopentanoil desB30 insulina humana, NEB29-10-(4-carboxifenoxi)-decanoil-y-L-glutamilamida desB30 insulina humana, NEB29-4-[11-(4-carboxifenil)undecanoilamino]butiril desB30 insulina humana, NEB29-(3-(3-{4-[3-(7-carboxiheptanoilamino)propoxi]butoxi}propilcarbamoil)-propionil-y-glutamilamida)

desB30 insulina humana,

NEB29

-c-carboxi-tridecanoil-y-amino-butanoil desB30 insulina humana, NEB29-c-carboxi-undecanoil-y-amino-butanoil desB30 insulina humana, NEB29

-c-carboxi-tetradecanoil-y-amino-butanoil desB30 insulina humana, NEB29-{4-[10-(4-carboxi-fenoxi)-decanoilamino]-butiril} desB30 insulina humana, NEB29-{4-[(14-carboxi-tetradecanoilamino)-metil]-benzoil}desB30 insulina humana, NEB29-[16-(4-carboxi-fenoxi)-hexadecanoil] desB30 insulina, NEB29-{4-[(15-carboxipentadecanoilamino)benzoil]-desB30 insulina humana y NEB29-{4-[(15-carboxi-pentadecanoilamino)-metil]-benzoil}-desB30 insulina.

[0105] La concentración del compuesto GLP-1 en la composición farmacéutica de acuerdo con la invención puede ser de entre aproximadamente 1 y 25, entre alrededor de 2 a aproximadamente 15, entre alrededor de 2 y aproximadamente 10, entre alrededor de 2 y aproximadamente 8 o entre alrededor de 2 y aproximadamente 6 mg/mL.

[0106] La concentración de la insulina basal será de entre alrededor de 1 y aproximadamente 25, entre alrededor de 1.5 y aproximadamente 15, entre alrededor de 1.5 y aproximadamente 12; entre alrededor de 1.5 y 8; entre alrededor de 2 y aproximadamente 15; entre alrededor de 2 y aproximadamente 10; entre alrededor de 2 y aproximadamente 8; entre 2 y alrededor de 7; y entre alrededor de 3 y 6 mg/mL.

[0107] La concentración de la insulina basal será de 2 mg/mL.

[0108] La concentración de la insulina basal será de entre 4 mg/mL.

[0109] La concentración de la insulina basal será de 8 mg/mL.

[0110] La concentración de Arg34, Lys26(NE-(y-Glu(Na-hexcadecanoil)))-GLP-1(7-37) está en la escala de aproximadamente 2 mg/mL a alrededor de 10 mg/mL y la concentración de insulina basal está en la escala de aproximadamente 3 mg/mL a alrededor de 5 mg/mL.

[0111] La concentración de Arg34, Lys26(NE-(y-Glu(Na-hexcadecanoil)))-GLP-1(7-37) está en la escala de aproximadamente 2 mg/mL a alrededor de 10 mg/mL y la concentración de insulina basal está en la escala de 7 mg/mL a alrededor de 9 mg/mL.

[0112] Cuando se mezclan las formulaciones de combinación el orden de adición de cada compuesto individual es importante. Como la primera etapa se mezclan agua, tampón (si es diferente al tampón de fosfato), modificador e isotonicidad. Después se añade una cantidad adecuada de la solución de abastecimiento de análogo de insulina basal y se mezcla suavemente. Posteriormente se añade el conservador, por ejemplo fenol, y la mezcla se mezcla suavemente durante alrededor de 15-60 minutos. Como la siguiente parte de la etapa del zinc se añade en una cantidad que corresponde a una concentración de 3 iones de zinc por 6 moléculas de insulina. La mezcla es después mezclada suavemente durante al menos 5 minutos. Como la siguiente etapa la cantidad restante de iones de zinc se añade hasta la concentración deseada. Después se ajusta el pH si está fuera de la escala de pH deseada. Luego se añade una cantidad adecuada de la solución de abastecimiento de compuesto GLP-1 para alcanzar la concentración final deseada y el pH se ajusta al valor deseado.

[0113] En un aspecto del proceso para preparar la composición farmacéutica el conservador se añade antes de añadir cualquier zinc a la mezcla. Así, en una forma de realización el orden de adición de los componentes individuales es: 1) insulina basal, 2) conservador, 3) zinc y 4) compuesto GLP-1. En una forma de realización el zinc se añade en varias etapas, por ejemplo hasta 3-4 etapas.

[0114] La estabilidad física fue evaluada mediante ensayos de fibrilación con tioflavina T y mediante la prueba de rotación de Pentfill.

[0115] La unión de zinc por el compuesto GLP-1 fue estudiada usando 1D H-RMN.

[0116] El equilibrio de auto-asociación de la insulina en ausencia y presencia del compuesto GLP-1 y en presencia de una concentración cada vez más alta de zinc se estudió usando un método de cromatografía por exclusión de tamaño con detección de fluorescencia (para identificar el compuesto GLP-1 en el cromatograma).

[0117] Las propiedades PK de las formulaciones de combinación fueron evaluadas usando modelos de cerdo de apariencia estándar.

[0118] La composición farmacéutica de acuerdo con la invención además de los componentes activos contendrá los adyuvantes farmacéuticamente aceptables normales tales como agente de isotonicidad, un tampón, un conservador y un estabilizador.

[0119] Los conservadores farmacéuticamente aceptables son conservadores seleccionados del grupo que consiste en fenol, o-cresol, m-cresol, p-cresol, p-hidroxibenzoato de metilo, p-hidroxibenzoato de propilo, 2-fenoxietanol, p-hidroxibenzoato de butilo, 2-feniletanol, alcohol bencílico, clorobutanol y tiomerosal, bronopol, ácido benzoico, imidurea, clorohexidina, deshidroacetato de sodio, clorocresol, p-hidroxibenzoato de etilo, cloruro de benzetonio, clorfenesina (3p-clorfenoxipropano1,2-diol) o mezclas de los mismos.

[0120] En un aspecto el conservador es una mezcla de fenol y m-cresol. En otro aspecto el conservador es fenol. El uso de un conservador en composiciones farmacéuticas se conoce bien por la persona capacitada. Para conveniencia se hace referencia a Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19ª edición, 1995.

[0121] La formulación comprenderá típicamente un agente isotónico tal como manitol, sorbitol, glicerol, propilenglicol o una mezcla de los mismos. El agente de isotonicidad no es una sal. El uso de un agente isotónico en composiciones farmacéuticas se conoce bien por la persona capacitada. Por conveniencia se hace referencia a Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19ª edición, 1995.

[0122] La composición farmacéutica también puede comprender un tampón. El tampón se puede seleccionar de un tampón que sea un tampón zwitteriónico, glicil-glicina, TRIS, bicina, HEPES, MOBS, MOPS, TES y mezclas de los mismos. Tampones adecuados adicionales son acetato de sodio, carbonato de sodio, citrato, histidina, glicina, lisina, arginina, fosfato diácido de sodio, fosfato ácido disódico, fosfato de sodio y tris(hidroximetil)-aminometano, tricina, ácido málico, succinato, ácido maleico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido aspártico o mezclas de los mismos.

[0123] La formulación farmacéutica de preferencia no contendrá un tampón de unión a zinc tal como un tampón de fosfato.

[0124] La composición también puede comprender un compuesto quelador de zinc, el cual puede actuar como un tampón de zinc para iones de zinc libres en las formulaciones. Esto hará posible una concentración de zinc incrementada con formación de diheptámeros de liraglutida relativamente más baja. Estos compuestos quelantes de zinc pueden incluir (pero no están limitados a), histidina, imidazol, citrato o derivados de los mismos.

[0125] En un aspecto el quelador de zinc es histidina.

[0126] En otro aspecto el quelador de zinc es imidazol.

[0127] La adición de este quelador de zinc es de preferencia debajo de 10 mM, muy preferiblemente debajo de 5 mM, más preferiblemente debajo de 2 mM, muy preferiblemente debajo de 1 mM, más preferiblemente debajo de 0.5 mM.

[0128] El término “composición farmacéutica estable de larga duración” según se usa en la presente significa una composición farmacéutica que es estable durante al menos el periodo que se requiere por las agencias reguladoras en relación con proteínas terapéuticas. De preferencia, una composición farmacéutica estable de larga duración es estable durante al menos un año a 5°C. La estabilidad incluye estabilidad química así como estabilidad física.

[0129] El término “insulina basal” según se usa en la presente significa un péptido de insulina que tiene una acción de tiempo de más de 8 horas en modelos de diabetes estándar. De preferencia, la insulina basal tiene una acción de tiempo de al menos 9 horas. Preferiblemente, la insulina basal tiene una acción de tiempo de al menos 10 horas. De preferencia, la insulina relacionada con comidas basal tiene una acción en tiempo en la escala de 9 a 15 horas. Preferiblemente, la insulina relacionada con comidas tiene una acción de tiempo similar a aquella observada para composiciones farmacéuticas comerciales de NPH insulina y NEB29-tetradecanoil des(B30) insulina humana.

[0130] El término “cantidad efectiva” según se usa en la presente significa una dosis que es suficiente para que el tratamiento del paciente sea efectivo en comparación con ningún tratamiento.

[0131] El término “farmacéuticamente aceptable” según se usa en la presente significa adecuado para aplicaciones farmacéuticas normales, es decir, que da origen a ningún evento adverso en pacientes, etc.

[0132] El término “tampón” según se usa en la presente se refiere a un compuesto químico en una composición farmacéutica que reduce la tendencia del pH de la composición a cambiar con el tiempo como ocurriría de otra manera debido a reacciones químicas. Los tampones incluyen químicos tales como fosfato de sodio, TRIS, glicina y citrato de sodio.

[0133] El término “conservador” según se usa en la presente se refiere a un compuesto químico que se añade a una composición farmacéutica para prevenir o retrasar la actividad microbiana (crecimiento y metabolismo).

[0134] El término “agente de isotonicidad” según se usa en la presente se refiere a un compuesto químico en una composición farmacéutica que sirve para modificar la presión osmótica de la composición farmacéutica de tal manera que la presión osmótica se vuelva más cercana a aquella del plasma humano. Los agentes de isotinicidad incluyen NaCl, glicerol, manitol, etc.

[0135] El término “estabilizador” según se usa en la presente se refiere a químicos añadidos a composiciones farmacéuticas que contienen péptidos para estabilizar el péptido, es decir, para incrementar la duración de conservación y/o tiempo en espera de estas composiciones. Ejemplos de estabilizadores usados en formulaciones farmacéuticas son L-glicina, Lhistidina, arginina, polietilenglicol y carboximetilcelulosa.

[0136] El término “péptido de insulina” según se usa en la presente significa un péptido que es ya sea insulina humana o un análogo derivado de la misma con actividad insulina.

[0137] El término “insulina humana” según se usa en la presente significa la hormona humana cuya estructura y propiedades se conocen bien. La insulina humana tiene dos cadenas de polipéptidos que están conectadas por puentes de disulfuro entre residuos de cisteína, en particular la cadena A y la cadena B. La cadena A es un péptido de 21 aminoácidos y la cadena B es un péptido de 30 aminoácidos, las dos cadenas siendo conectadas por tres puentes de disulfuro: uno entre las cisteínas en la posición 6 y 11 de la cadena A, el segundo entre la cisteína en la posición 7 de la cadena A y la cisteína en la posición 7 de la cadena B, y el tercero entre la cisteína en la posición 20 de la cadena A y la cisteína en la posición 19 de la cadena B.

[0138] El término “análogo” según se usa en la presente en referencia a un péptido significa un péptido modificado en donde uno o más residuos de aminoácido del péptido han sido sustituidos por otros residuos de aminoácido y/o en donde uno o más residuos de aminoácido han sido suprimidos del péptido y/o en donde uno o más residuos de aminoácido han sido suprimidos del péptido y/o en donde uno o más residuos de aminoácido han sido añadidos al péptido. Esta adición o supresión de residuos de aminoácido puede tener lugar en el N-terminal del péptido y/o en el C-terminal del péptido.

[0139] Los análogos de insulina típicamente no comprenderán más de alrededor de 7 mutaciones, más típicamente no más de 5 y todavía más típicamente como mucho 3 mutaciones en comparación con insulina humana.

[0140] Con los años se han descrito un número bastante grande de modificaciones de la cadena A y/o B de insulina. De esta manera la posición 28 de la cadena B puede ser modificada del residuo Pro natural por Asp, Lys o Ile y Lys en la posición B29 también pueden modificarse a Pro.

[0141] Asimismo, Asn en la posición A21 puede modificarse por Ala, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Met, Ser, Thr, Trp, Tyr o Val, en particular por Gly, Ala, Ser o Thr y en particular por Gly. Más aún, Asn en la posición B3 puede modificarse a Lys o Asp. Ejemplos adicionales de análogos de insulina son des(B30) insulina humana, análogos de insulina en los que uno o ambos de B1 y B2 han sido suprimidos; análogos de insulina en los que la cadena A y/o la cadena B tienen una extensión N-terminal y análogos de insulina en los que la cadena A y/o la cadena B tienen una extensión C-terminal. También, el residuo de aminoácido natural en la posición A18 puede ser cambiado por un residuo de Gln o uno o más de los residuos de aminoácido en las posiciones B26-B30 pueden ser suprimidos.

[0142] El término “derivado” según se usa en la presente en relación a un péptido progenitor significa una proteína progenitora modificada químicamente o un análogo de la misma, en donde al menos un sustituyente no está presente en la proteína progenitora o un análogo de la misma, es decir, una proteína progenitora que ha sido modificada covalentemente. Las modificaciones típicas son amidas, carbohidratos, grupos alquilo, grupos acilo, ésteres, PEGilaciones y similares. Ejemplos de derivados de insulina humana son éster metílico de treoninaB30 insulina humana y NEB29-tetradecanoil des(B30) insulina humana.

[0143] El término “punto isoeléctrico” según se usa en la presente significa el valor de pH en el que la carga neta total de una macromolécula tal como un péptido es cero. En péptidos puede haber varios puntos cargados, y en el punto isoeléctrico la suma de todas estas cargas es cero. A un pH arriba del punto isoeléctrico la carga neta total del péptido será negativa, mientras que valores de pH debajo del punto isoeléctrico la carga neta total del péptido será positiva.

[0144] El término “aproximadamente” según se usa en la presente en relación a la concentración de un péptido en una composición farmacéutica significa más o menos 10%. Por consiguiente, la concentración “alrededor de 5 mg/mL de insulina” significa una concentración de 4.5 mg/mL de insulina a 5.5 mg/mL de insulina.

[0145] La invención cubre los siguientes aspectos: 1: Una composición farmacéutica soluble para administración parenteral que comprende un compuesto GLP-1 insulinotrópico, un péptido de insulina basal, aditivos farmacéuticamente aceptables y zinc, en donde el contenido de zinc es al menos 5 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

2: Una composición farmacéutica soluble para administración parenteral de acuerdo con la forma de realización 1, que comprende un compuesto GLP-1 insulinotrópico, un péptido de insulina basal, aditivos farmacéuticamente aceptables y zinc, en donde el contenido de zinc es al menos 6 iones de Zn por 6 moléculas de insulina.

3: La composición farmacéutica de acuerdo con el aspecto 1, en donde el contenido de zinc es de entre 5 y 16 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

4: La composición farmacéutica de acuerdo con el aspecto 1, en donde el contenido de zinc es de entre 5 y 15 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

5: La composición farmacéutica de acuerdo con el aspecto 1, en donde el contenido de zinc es de entre 5 y 14 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

6: La composición farmacéutica de acuerdo con el aspecto 1, en donde el contenido de zinc es de entre 5 y 13 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

7: La composición farmacéutica de acuerdo con el aspecto 1, en donde el contenido de zinc es de entre 5 y 12 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

8: La composición farmacéutica de acuerdo con el aspecto 1, en donde el contenido de zinc es de entre 5 y 11 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

9: La composición farmacéutica de acuerdo con el aspecto 1, en donde el contenido de zinc es de entre 5 y 10 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

10: La composición farmacéutica de acuerdo con el aspecto 1, en donde el contenido de zinc es de entre 5 y 9 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

11: La composición farmacéutica de acuerdo con el aspecto 1, en donde el contenido de zinc es de entre 5 y 8 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

12: La composición farmacéutica de acuerdo con el aspecto 1, en donde el contenido de zinc es de entre 5 y 7 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

13: La composición farmacéutica de acuerdo con el aspecto 2, en donde el contenido de zinc es de entre 6 y 16 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

14: La composición farmacéutica de acuerdo con el aspecto 2, en donde el contenido de zinc es de entre 6 y 15 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

15: La composición farmacéutica de acuerdo con el aspecto 2, en donde el contenido de zinc es de entre 6 y 14 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

16: La composición farmacéutica de acuerdo con el aspecto 2, en donde el contenido de zinc es de entre 6 y 13 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

17: La composición farmacéutica de acuerdo con el aspecto 2, en donde el contenido de zinc es de entre 6 y 12 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

18: La composición farmacéutica de acuerdo con el aspecto 2, en donde el contenido de zinc es de entre 6 y 11 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

19: La composición farmacéutica de acuerdo con el aspecto 2, en donde el contenido de zinc es de entre 6 y 10 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

20: La composición farmacéutica de acuerdo con el aspecto 2, en donde el contenido de zinc es de entre 6 y 9 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

21: La composición farmacéutica de acuerdo con el aspecto 2, en donde el contenido de zinc es de entre 6 y 8 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

22: La composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de los aspectos anteriores, en donde el contenido de zinc es de entre 7 y 16 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

23: La composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de los aspectos anteriores, en donde el contenido de zinc es de entre 7 y 15 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

24: La composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de los aspectos anteriores, en donde el contenido de zinc es de entre 7 y 14 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

25: La composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de los aspectos anteriores, en donde el contenido de zinc es de entre 7 y 13 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

26: La composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de los aspectos anteriores, en donde el contenido de zinc es de entre 7 y 12 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

27: La composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de los aspectos anteriores, en donde el contenido de zinc es de entre 7 y 11 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

28: La composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de los aspectos anteriores, en donde el contenido de zinc es de entre 7 y 10 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

29: La composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de los aspectos anteriores, en donde el contenido de zinc es de entre 7 y 9 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

30: La composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de los aspectos anteriores, en donde el contenido de zinc es de entre 8 y 16 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

31: La composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de los aspectos anteriores, en donde el contenido de zinc es de entre 8 y 15 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

32: La composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de los aspectos anteriores, en donde el contenido de zinc es de entre 8 y 14 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

33: La composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de los aspectos anteriores, en donde el contenido de zinc es de entre 8 y 13 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

34: La composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de los aspectos anteriores, en donde el contenido de zinc es de entre 8 y 12 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

35: La composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de los aspectos anteriores, en donde el contenido de zinc es de entre 8 y 11 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

36: La composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de los aspectos anteriores, en donde el contenido de zinc es de entre 8 y 10 iones de zinc por 6 moléculas de insulina.

37: La composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de los aspectos anteriores, en donde el pH de la composición farmacéutica es de aproximadamente pH 7.4 a alrededor de pH 9.

38: La composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de los aspectos anteriores, en donde el pH de la composición farmacéutica es de aproximadamente pH 7.4 a alrededor de pH 8.2.

39: La composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de los aspectos anteriores, en donde el pH de la composición farmacéutica es de aproximadamente pH 7.4 a aproximadamente pH 7.7.

40: La composición farmacéutica de acuerdo con los aspectos anteriores, en donde el pH de la composición farmacéutica es de aproximadamente pH 7.6 a alrededor de pH 8.2.

41: La composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de los aspectos anteriores, en donde el pH de la composición farmacéutica es de aproximadamente pH 7.7 a aproximadamente pH 8.2.

42: La composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de los aspectos anteriores en donde el pH de la composición farmacéutica es de aproximadamente pH 8.0 a alrededor de pH 9.

43: La composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de los aspectos anteriores, en donde el péptido GLP-1 insulinotrópico es GLP-1(7-37), un análogo de GLP-1(7-37), un derivado de GLP-1(7-37) o un derivado de un análogo de GLP-1(7-37).

44: La composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de los aspectos anteriores, en donde el derivado de GLP-1(737) comprende un residuo de lisina.

45: La composición farmacéutica de acuerdo con el aspecto 44, en donde el derivado de un análogo de GLP-1(7-37) es Arg34, Lys26(NE-(Ny-Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-(7-37).

46: La composición farmacéutica de acuerdo con el aspecto 44, en donde el derivado de un análogo de GLP-1(7-37) es Aib8, Lys26(OEG-OEG-gamma-Glu-C18-diácido), Arg34)GLP-1(7-37).

47: La composición farmacéutica de acuerdo con el aspecto 44, en donde el derivado de un análogo de GLP-1(7-37) es [desaminoHis7, Arg34]GLP-1-(7-37), [Aib8,Glu22,Arg26,Arg34,Lys37]GLP-1-(7-37)amida.

48: La composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de los aspectos anteriores 1-42, en donde el péptido GLP-1 insulinotrópico es exendina-4 o un análogo del mismo.

49: La composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de los aspectos anteriores, en donde el péptido de insulina basal es una insulina acilada.

50: Una composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de los aspectos anteriores, en donde la insulina acilada es acilada en la posición B29 con un grupo lipófilo.

51: La composición farmacéutica de acuerdo con el aspecto 50, en donde el grupo lipófilo tiene de 8 a 40, 8 a 24 o 12-18 átomos de carbono.

52: Una composición farmacéutica de acuerdo con el aspecto 50, en donde la insulina basal se selecciona del grupo que consiste en NEB29-tetradecanoil des(B30) insulina humana, NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana, LysB29(NE litocolil-y-Glu)-des(B30) insulina humana, NEB29-c-carboxipentadecanoil-y-L-glutailamida desB30 insulina humana y

NEB29

-c-carboxipentadecanoil-y-amino-butanoil des(B30) insulina humana.

53: Una composición farmacéutica de acuerdo con el aspecto 50, en donde la insulina basal es NEB29-tetradecanoil des(B30) insulina humana, NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana.

54: Una composición farmacéutica de acuerdo con la forma de realización 50, en donde la insulina basal es NEB29-(Na(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana.

55: Una composición farmacéutica de acuerdo con el aspecto 50, en donde la insulina basal es NEB29-ccarboxipentadecanoil-y-L-glutailamida desB30 insulina humana o NEB29-c-carboxipentadecanoil-y-amino-butanoil des(B30) insulina humana.

56: La composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de los aspectos anteriores 1-42, en donde la insulina basal es NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana y el compuesto GLP-1 insulinotrópico es Arg34, Lys26(NE-(yGlu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(7-37).

57: La composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de los aspectos anteriores, en donde la concentración de insulina basal está en la escala de aproximadamente 1.5 a alrededor de 8 mg/mL y la concentración del compuesto GLP-1

está en la escala de aproximadamente 2 a alrededor de 10 mg/mL.

58: La formulación farmacéutica de acuerdo con el aspecto 1-36, en donde la insulina basal es insulina glargina y el compuesto GLP-1 insulinotrópico es ZP10. El aspecto de acuerdo con la forma de realización 57, en donde el pH es aproximadamente 4.

59: La formulación farmacéutica de acuerdo con el aspecto 58, en donde el contenido de zinc es entre 4 y 5 iones de zinc por 6 moléculas de insulina glargina.

EJEMPLOS Ejemplo 1

[0146] Se preparó como sigue una formulación típica de la combinación fija que consiste en el análogo de insulina NEB29-(Na(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana y el análogo de GLP-1 Arg34,Lys26(NE-(y-Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP1(7-37), liraglutida. Soluciones de abastecimiento adecuadas en agua se prepararon del análogo de insulina y el análogo de GLP-1. Las concentraciones de péptidos de ambas soluciones fueron típicamente alrededor de 10 mM y el pH se ajustó a aproximadamente pH 7.7 para el análogo de insulina y alrededor de pH 8.2 para las soluciones de abastecimiento de liraglutida. Estos ajustes de pH se hicieron usando soluciones ya sea de NaOH o HCIO4 con concentraciones máximas de

1.0 N.

[0147] Los siguientes excipientes se mezclaron a partir de soluciones de abastecimiento adecuadas en agua en este orden: 1) agua, (2) glicerol (modificador de isotonicidad), 3) análogo de insulina, 4) fenol. La adición de fenol antes de zinc fue crítica; de otra manera se formó un gel. Después de 15 minutos el acetato de zinc se añadió en tres porciones: Primero, una cantidad de zinc que correspondía a una concentración de 3 iones de zinc/6 moléculas de análogo de insulina; segundo, una cantidad de zinc que correspondía a una concentración de 3 iones de zinc/6 moléculas de análogo de insulina y tercero cualquier zinc adicional. La solución se equilibró 5 minutos después de cada adición. El pH se midió y se ajustó a pH 8.2 como se describió arriba. Esta solución se dejó equilibrar durante aproximadamente 48 horas a 4°C antes de que se añadiera una cantidad adecuada de la solución de abastecimiento de liraglutida. Finalmente, el pH se midió y si es necesario se ajustó a pH 8.2. Siguiendo este procedimiento se preparó una formulación como la descrita en la tabla 1.

Tabla 1

Compuesto: Concentración de abastecimiento (mM) Concentración final (mM) Volumen añadido (ml) Orden de mezclado

Análogo de insulina: 8.64 0.60 0.972 3

Acetato de zinc: 9.54 0.801) 1.1742) 52)

Fenol: 500 50 1.4 4

Glicerol: 200 16 1.12 2

Liraglutida: 9.95 1.6 1.6 63)

Agua: n.a. n.a. 7.083 1

1) Corresponde a 8 iones de Zn2+/6 moléculas de insulina 2) Se añadió en tres porciones: 0.441 ml, 0.440 ml, 0.293 ml, cada una con 5 minutos entre las mismas y después de la última adición.3) La solución se equilibró a 4°C durante aproximadamente 48 horas antes de la adición de liraglutida.

Ejemplo 2

[0148] El mecanismo de prolongación del análogo de insulina NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana depende de la formación de auto-asociados en presencia de más de 3 iones de zinc por 6 moléculas de análogo de insulina. Por consiguiente, si una formulación de análogo de insulina NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana contiene una fracción significativa del análogo en forma monomérica, se espera que la formulación exhiba un componente de rápida acción indeseable. Más aún, un contenido de monómero de análogo de insulina alto comprometería la estabilidad física de la formulación. La presencia del análogo de de GLP-1 liraglutida en una combinación fija con el análogo de insulina NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana puede alterar el equilibrio de auto-asociación del análogo de insulina hacia el estado monomérico con una formación simultánea de un complejo de unión liraglutida-zinc. Se ha demostrado que liraglutida forma un auto-ensamblaje heptamérico bajo condiciones relevantes de formulación, y en presencia de concentraciones equimolares de iones de zinc, un diheptámero de liraglutida de unión a zinc es formado.

[0149] Formulaciones que contienen tanto el análogo de insulina NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana como liraglutida fueron analizadas mediante un método de cromatografía de exclusión de tamaño (SEC) con detección de fluorescencia. El método SEC usó una columna Superose 12 10/300GL, muestras de 50 μl fueron inyectadas y el flujo fue de 0.8 ml/min. Dos métodos incluyendo y excluyendo fenol se usaron con el solvente 140 mM NaCl, 10 mM Tris/HCl, pH 7.7, +/- 2 mM de fenol. La detección se hizo mediante un canal con absorción a 276 nm (midiendo cantidad de péptido total) y otro canal con detección de fluorescencia (excitación a 310 nm, emisión a 380 nm), lo cual fue específico

5 para liraglutida.

[0150] Bajo algunas condiciones la cuantificación específica fue imposible debido a condiciones experimentales. Aquí, la cantidad de análogo de insulina en la forma monomérica se cuantificó en relación a la cantidad total de péptido.

10 [0151] Se prepararon formulaciones como se describió en el ejemplo 1. Cuatro formulaciones cada una con 0.3 mM y 0.6 mM de análogo de insulina, respectivamente, se prepararon con contenidos de zinc que correspondían a 6, 8, 10 y 12 iones de zinc por 6 moléculas de análogo de insulina. Estas ocho formulaciones se almacenaron tanto a 4°C como a 37°C.

[0152] Todas la formulaciones contenían 0.3 o 0.6 mM de análogo de insulina, acetato de zinc, 1.6 mM de liraglutida, 50 mM 15 de fenol, 174 mM de glicerol, pH 8.2.

[0153] Las formulaciones almacenadas se analizaron usando los métodos tanto SEC con fenol como SEC sin fenol después de 0, 2, 4 y 8 semanas de almacenamiento. La tabla 2 y tabla 3 muestran las cantidades de análogos de insulina en la forma monomérica. Las áreas sombreadas indican condiciones en las que no fue posible una cuantificación exacta. Por lo tanto, la

20 cuantificación también se hizo para monómero de análogo de insulina en relación a contenido de péptido total. Esto se muestra en la tabla 4 y tabla 5.

Tabla 2

Tabla 3

Tabla 4

SEC con fenol: % monómero de Ins del péptido total

0.3 mM de Ins: 0.6 mM de Ins

4°C: 37°C 4°C 37°C

6 Zn/6 ins: 0W 2W 4W 8W 3.8 8.2 12.4 7.8 3.8 7.0 5.4 5.5 2.0 4.8 4.7 4.5 2.0 4.2 2.9 3.4

8 Zn/6 ins: 0W 2W 4W 8W 2.2 7.0 6.8 6.5 2.2 5.6 4.2 4.3 0.8 2.6 2.3 2.8 0.8 2.5 1.8 1.9

10 Zn/6 ins: 0W 2W 4W 8W 1.1 5.2 4.9 5.0 1.1 4.3 2.9 3.5 0.4 0.6 0.4 0.8 0.4 0.8 0.6 1.1

12 Zn/6 ins: 0W 2W 4W 8W 0.9 3.6 3.2 4.2 0.9 3.3 2.3 2.9 0.8 0.5 0.2 0.4 0.8 0.7 0.4 0.5

Tabla 5

SEC sin fenol: % monómero de Ins del péptido total

0.3 mM de Ins: 0.6 mM de Ins

4°C: 37°C 4°C 37°C

6 Zn/6 ins: 0W 2W 4W 8W 16.3 16.6 10.1 13.1 16.3 12.1 8.8 10.8 7.5 8.3 6.3 9.1 7.5 8.8 5.5 8.1

8 Zn/6 ins: 0W 2W 4W 8W 8.4 11.3 8.3 11.1 8.4 10.1 7.4 9.1 2.0 4.3 2.9 4.9 2.0 5.0 3.0 4.9

10 Zn/6 ins: 0W 2W 4W 8W 4.5 8.5 6.3 8.7 4.5 8.3 5.6 7.3 0.5 0.8 0.4 1.3 0.5 1.3 0.8 2.4

12 Zn/6 ins: 0W 2W 4W 8W 2.3 5.6 4.3 6.9 2.3 6.1 4.1 7.0 0.7 0.8 0.2 0.6 0.7 1.1 0.5 1.4

[0154] La cantidad de diheptámero de liraglutida de unión a zinc se midió fácilmente usando la detección de fluorescencia. La tabla 6 y tabla 7 muestran las cantidades medidas en las muestras analizadas.

Tabla 6

SEC con fenol: % Diheptámero del péptido total

0.3 mM de Ins: 0.6 mM de Ins

4°C: 37°C 4°C 37°C

6 Zn/6 ins: 0W 2W 4W 8W 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

8 Zn/6 ins: 0W 2W 4W 8W 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0.3 0.4 0.4

10 Zn/6 ins: 0W 2W 4W 8W 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0.1 0 1.2 1.5 2.1

12 Zn/6 ins: 0W 2W 4W 8W 0 0 0 0 0 0 0 0.1 0.4 0.6 0.4 0.8 0.4 15.4 15.2 15.6

Tabla 7

SEC sin fenol: % Diheptámero de Liraglutida

0.3 mM de Ins: 0.6 mM de Ins

4°C: 37°C 4°C 37°C

6 Zn/6 ins: 0W 2W 4W 8W 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0.1

8 Zn/6 ins: 0W 2W 4W 8W 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0.3 0.2 0.4

10 Zn/6 ins: 0W 2W 4W 8W 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0.1 1.3 1.1 2.4

12 Zn/6 ins: 0W 2W 4W 8W 0 0 0 0 0 0 0 0.1 0.3 0.5 0.3 0.8 0.3 16.7 13.5 17.7

10 Ejemplo 3

[0155] Siguiendo el procedimiento en el ejemplo 1 se prepararon cuatro formulaciones con las composiciones mostradas en la tabla 8. En la formulación 3 el tampón de glicilglicina se añadió junto con el agua. En la formulación 4 el tampón de fosfato se añadió después de que se añadiera el acetato de zinc. Esto se hizo para minimizar la precipitación de fosfato de zinc. El análogo de insulina usado fue NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana.

[0156] La estabilidad física de las cuatro composiciones farmacéuticas se evalúa por medio de una prueba estresada acelerada. La prueba estresada se llevó a cabo como una prueba de rotación. 50 μL de aire se añadieron a cada uno de 5

5 cartuchos (viales de vidrio) de cada formulación. Los cartuchos se hicieron girar con una frecuencia de 30 rotaciones por minuto durante 4 horas diariamente. La inspección de los cartuchos fue seguida diariamente o según se requiriera. La turbidez de la formulación se caracterizó por medición nefelométrica y se especificó en “Unidad de Turbidez Nefelométrica” (NTU). La inestabilidad física de la proteína se caracterizó por mediciones de alta turbidez.

10 [0157] Esta prueba de rotación se muestra en la figura 1. Reveló que la formulación con el análogo de insulina y liraglutida combinados y formulados a pH 7.7 (formulación 3) fue menos estable que el análogo de insulina formulado solo a pH 7.4 (formulación 1) y probablemente tuvo una estabilidad inaceptable para formulación adicional. La formulación 4 contenía también la combinación del análogo de insulina y liraglutida pero se formuló a pH 8.2. Esta formulación tuvo sólo una estabilidad física marginalmente más baja que el análogo de insulina solo. Por consiguiente, esta comparación ilustró que

15 combinar el análogo de insulina y liraglutida sin ninguna optimización dio como resultado una formulación inestable. Incrementar el pH a pH 8.2, sin embargo, dio como resultado una estabilidad física mucho más mejorada comparada a aquella del análogo de insulina solo. Tabla 8

Formulación 1: Formulación 2 Formulación 3 Formulación 4

Análogo de insulina (mM): 0.6 n.d. 0.6 0.6

Acetato de zinc (mM): 0.6 n.d. 0.6 0.6

Liraglutida (mM): n.d. 1.6 1.6 1.6

Fenol (mM): 16 58 40 40

m-cresol (mM): 16 n.d. n.d. n.d.

Glicerol (mM): 174 174 174 174

NaCl (mM): 10 n.d. 10 10

Fosfato (mM): n.d. 8 n.d. 8

Gliciglicina (mM): n.d. n.d. 8 n.d.

pH: 7.4 7.7 7.7 8.2

20: Ejemplo 4

25: [0158] En otra prueba de rotación llevada a cabo como se describió en el ejemplo 3, cuatro formulaciones en combinación que contenían tanto el análogo de insulina NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana como liraglutida y dos referencias con el análogo de insulina y liraglutida sola fueron probadas.

[0159] Las formulaciones se prepararon como se describió en el ejemplo 1 y sus composiciones se muestran en la tabla 9.

30: Tabla 9

Form. 1: Form. 2 Form. 3 Form. 4 Form. 5 Form. 6

Análogo de insulina (mM): 0.6 n.d. 0.6 0.6 0.6 0.3

Acetato de zinc (mM): 0.6 (=6 Zn2+/6 ins) n.d. 0.8 (=8 Zn2+/6 ins) 1.0 (=10 Zn2+/6 ins) 1.2 (=12 Zn2+/6 ins) 0.5 (=10 Zn2+/6 ins

Liraglutida (mM): n.d. 1.6 1.6 1.6 1.6 1.6

Fenol (mM): 16 58 50 50 50 50

m-cresol (mM): 16 n.d. n.d. n.d. n.d. n.d.

Glicerol (mM): 174 174 174 174 174 174

NaCl (mM): 10 n.d. n.d. n.d. n.d. n.d.

Fosfato (mM): n.d. 8 N.a. n.d. n.d. n.d.

pH: 7.4 8.2 8.2 8.2 8.2 8.2

[0160] Los resultados de la prueba de rotación se muestran en las figuras 2-4.

[0161] La formulación 3 contenía 8 iones de zinc/6 moléculas de análogo de insulina y tuvo una estabilidad comparable a la de ambas referencias con el análogo de insulina (con 6 iones de zinc/6 moléculas de análogo de insulina) y liraglutida sola. 35 La formulación 6 sólo contenía 0.3 mM de análogo de insulina pero requirió de 10 iones de zinc/6 moléculas de análogo de insulina para de esta manera exhibir una estabilidad a la de la referencia. Esto indicó que un contenido de zinc más alto en relación a la cantidad de análogo de insulina se requirió para lograr la misma estabilidad que la referencia de análogo de

insulina sola con 6 iones de zinc/6 moléculas de análogo de insulina.

Ejemplo 5

5 [0162] Las propiedades farmacocinéticas (PK) de formulaciones de combinación fija con el análogo de insulina NEB29-(Na(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana y liraglutida fueron examinadas en cerdos. Las apariencias de los dos péptidos en el torrente sanguíneo se midieron mediante técnicas de ensayo estándares durante hasta 72 horas después de inyección. Sin embargo, por claridad, sólo las primeras 24 horas se muestran para el análogo de insulina. Los resultados se muestran en la figura 5 y figura 6 como medias de las seis réplicas y se muestran con error estándar de la media. Tres

10 formulaciones de combinación y dos referencias fueron preparadas como se detalle en el ejemplo 1. Sus composiciones se muestran en la tabla 10. La curva de apariencia de PK para el análogo de insulina se muestra en la figura 5 y la curva de apariencia de PK para liraglutida se muestra en la figura 6.

Tabla 10

Form. 1: Form. 2 Form. 3 Form. 4 Form. 5

Análogo de insulina (mM): 0.6 n.d. 0.6 0.6 0.6

Acetato de zinc (mM): 0.6 (=6 Zn2+/6 ins) n.d. 0.8 (=8 Zn2+/6 ins) 1.0 (=10 Zn2+/6 ins) 1.2 (=12 Zn2+/6 ins)

Liraglutida (mM): n.d. 1.6 1.6 1.6 1.6

Fenol (mM): 50 50 50 50 50

Glicerol (mM): 174 174 174 174 174

pH: 8.2 8.2 8.2 8.2 8.2

[0163] La apariencia del análogo de insulina en la combinación es crítica por varias razones. Un componente de rápida acción dará origen a un inicio de efecto temprano inesperado. Una biodisponibilidad incrementada también dará como resultado un efecto reductor de glucosa en sangre más grande y subsecuentemente un ajuste de la dosis se requeriría. Es

20 interesante concluir que la formulación de combinación 3 (formulada con 8 iones de zinc/6 moléculas de análogo de insulina) exhibió una curva de apariencia de insulina muy similar en comparación con la curva para el análogo de insulina solo (formulación 1). Por consiguiente, una formulación en combinación con 8 iones de zinc/6 moléculas de análogo de insulina exhibió propiedades PK de insulina muy similares cuando se comparó con el análogo de insulina solo. Todas las formulaciones de combinación exhibieron curvas de apariencia de liraglutida muy similares (formulaciones 3-5).

Ejemplo 6

[0164] Las propiedades farmacocinéticas (PK) de otras formulaciones de combinación fija con el análogo de insulina NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana y liraglutida en una relación diferente fueron igualmente 30 examinadas en cerdos. Esta relación hace posible que se suministre una cantidad más grande del análogo de insulina en relación a liraglutida al paciente en una sola inyección. Una dosis igual de insulina se administró a los cerdos tanto de la referencia de análogo de insulina (formulación 1) como las combinaciones (formulaciones 3-5). Las apariencias de los dos péptidos en el torrente sanguíneo se midieron mediante técnicas de ensayo estándares durante hasta 72 horas después de inyección. Sin embargo, por claridad, sólo las primeras 6 horas y 24 horas, respectivamente, se

35 muestran. Los resultados se muestran en la figura 7 y figura 8 como medias de las seis réplicas y se muestran con error estándar de la media. Tres formulaciones de combinación y dos referencias se prepararon como se detalla en el ejemplo 1. Sus composiciones se muestran en la tabla 11. La curva de apariencia PK para el análogo de insulina se muestra en la figura 7 y la curva de apariencia PK para liraglutida se muestra en la figura 8.

40 Tabla 11

Form. 1: Form. 2 Form. 3 Form. 4 Form. 5

Análogo de insulina (mM): 0.6 N.D. 1.2 1.2 1.2

Acetato de zinc (mM): 0.6 (=6 Zn2+/6 ins) n.d. 1.2 (=6 Zn2+/6 ins) 1.4 (=7 Zn2+/6 ins) 1.6 (=8 Zn2+/6 ins)

Liraglutida (mM): n.d. 1.6 1.6 1.6 1.6

Fenol (mM): 50 50 50 50 50

Glicerol (mM): 214 214 214 214 214

pH: 8.2 8.2 8.2 8.2 8.2

[0165] En comparación con la referencia de análogo de insulina (formulación 1), la combinación con 6 iones de Zn2+/6 moléculas de insulina (formulación 3) exhibió una saliente menor con un inicio más temprano que el pico principal de la referencia. Incrementar el contenido de zinc a 7 iones de Zn2+/6 moléculas de insulina (formulación 4) dio como resultado 5 una curva de apariencia de análogo de insulina mucho más similar a aquella de la referencia de insulina (formulación 1). Incrementar el contenido de zinc más a 8 iones de Zn2+/6 moléculas de insulina (formulación 5) no dio como resultado ninguna mejora adicional. Ninguna diferencia estadísticamente significativa se encontró entre las curvas de apariencia PK para liraglutida en las tres combinaciones (formulaciones 3-5) y liraglutida sola (formulación 2). Esto indicó que un contenido de zinc de 7 iones de Zn2+/6 moléculas de insulina para la combinación de 1.2 mM de análogo de insulina – 1.6 mM de

10 liraglutida fue preferible para obtener una curva de apariencia PK similar para el análogo de insulina en la combinación en comparación con el análogo solo.

Ejemplo 7

15 [0166] Se investigó la influencia del pH en el contenido del análogo de insulina monómero de NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana en combinaciones con liraglutida. Se prepararon tres formulaciones como se detalla en el ejemplo 1 pero se ajustaron a pH 8.2, pH 7.7 y pH 7.4. La composición de todas las tres formulaciones fue: 0.6 mM de análogo de insulina, 0.8 mM de acetato de zinc (8 iones de zinc por 6 moléculas de análogo de insulina), 1.6 mM de liraglutida, 50 mM de fenol, 214 mM de glicerol. Después de la preparación las formulaciones se almacenaron a 4°C durante

20 algunas semanas antes de la primera medición en el punto de tiempo 0 semanas. En adelante las formulaciones se almacenaron tanto a 5°C como a 37°C y se analizaron después más 2 y 4 semanas de almacenamiento a las dos temperaturas. Las formulaciones se analizaron usando el método SEC descrito en el ejemplo 2. Ambas versiones con y sin fenol fueron usadas.

25 [0167] Los contenidos relativos de monómero de análogo de insulina en comparación con análogo de insulina total medidos por el análisis SEC con fenol y sin fenol se muestran en la tabla 12 y tabla 13, respectivamente. En ambos métodos SEC y a ambas temperaturas, reducir el pH dio como resultado un contenido más bajo de monómero de análogo de insulina en cada punto de tiempo de medición. Esto indicó que el pH es un factor importante para controlar y modular el contenido de monómero de insulina en las combinaciones con liraglutida. Un contenido de monómero de insulina más bajo podría obtenerse usando un pH

30 más bajo que pH 8.2, por ejemplo, pH 7.7.

Tabla 12

SEC con fenol: % Monómero Ins

0W: 2W 4W

pH 8.2 (4°C): 12.4 8.1 8.8

pH 7.7 (4°C): 2.5 2.8 2.8

pH 7.4 (4°C): 1.1 1.2 1.1

pH 8.2 (37°C): 12.4 8.2 7.8

pH 7.7 (37°C): 2.5 3.1 2.3

pH 7.4 (37°C): 1.1 1.5 1.1

Tabla 13

SEC sin fenol: % Monómero Ins

0W: 2W 4W

pH 8.2 (4°C): 12.5 13.7 13.6

pH 7.7 (4°C): 1.7 3.5 4.3

pH 7.4 (4°C): 0.7 1.3 1.6

pH 8.2 (37°C): 12.5 15.2 17.6

pH 7.7 (37°C): 1.7 4.1 4.6

pH 7.4 (37°C): 0.7 1.9 2.0

[0168] Los contenidos de diheptámero de liraglutida también se midieron de una forma similar y estos resultados se muestran en la tabla 14 y tabla 15 para el método SEC con fenol y sin fenol, respectivamente.

Tabla 14

SEC con fenol: % diheptámero de liraglutida

0W: 2W 4W

pH 8.2 (4°C): 0.0 0.1 0.1

pH 7.7 (4°C): 0.1 0.1 0.1

pH 7.4 (4°C): 0.8 0.4 0.4

pH 8.2 (37°C): 0.0 0.4 0.6

pH 7.7 (37°C): 0.1 4.6 6.1

pH 7.4 (37°C): 0.8 18.0 21.6

Tabla 15

SEC sin fenol: % de diheptámero de liraglutida

0W: 2W 4W

pH 8.2 (4°C): 0.0 0.0 0.0

pH 7.7 (4°C): 0.1 0.1 0.1

pH 7.4 (4°C): 0.9 0.4 0.3

pH 8.2 (37°C): 0.0 0.3 0.5

pH 7.7 (37°C): 0.1 4.4 5.2

pH 7.4 (37°C): 0.9 16.6 19.0

10 Ejemplo 8

[0169] El estudio descrito en el ejemplo 7 contenía también una formulación en combinación de análogo de insulina NEB29-(Na-(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana – liraglutida que contenía una baja concentración de histidina. Se intentó que el aminoácido actuara como un tampón de zinc en presencia de un contenido de zinc 15 incrementado. La formulación 1 estaba compuesta de 0.6 mM de análogo de insulina, 0.8 mM de acetato de zinc (8 iones de zinc por 6 moléculas de análogo de insulina), 1.6 mM de liraglutida, 50 mM de fenol, 214 mM de glicerol, con pH ajustado a pH 8.2. La formulación 2 estaba compuesta de 0.6 mM de análogo de insulina, 1.0 mM de acetato de zinc (10 iones de zinc por 6 moléculas de análogo de insulina), 1.6 mM de liraglutida, 50 mM de fenol, 214 mM de glicerol, 0.5 mM de histidina, pH a pH 8.2. Ambas formulaciones se produjeron básicamente como se detalla en el

20 ejemplo 1, la histidina se añadió como el excipiente final después de liraglutida. Las formulaciones se analizaron como se describió en el ejemplo 2 y ejemplo 7.

[0170] Los contenidos relativos de monómero de análogo de insulina en comparación con análogo de insulina total medido por el análisis SEC con fenol y sin fenol se muestran en la tabla 16 y tabla 17, respectivamente. La formulación 2 con 10 25 iones de zinc/6 moléculas de insulina y 0.5 mM de histidina presente contenía menos monómero de insulina con el tiempo a ambas temperaturas que la formulación 1 sólo con 8 iones de zinc/6 moléculas de insulina.

Tabla 16 Tabla 17

SEC con fenol: % de monómero Ins

0W: 2W 4W

Formulación 1 (4°C): 12.4 8.1 8.8

Formulación 2 (4°C): 3.2 3.0 3.1

Formulación 1 (37°C): 12.4 8.2 7.8

Formulación 2 (37°C): 3.2 3.7 3.4

SEC sin fenol: % de monómero Ins

0W: 2W 4W

Formulación 1 (4°C): 12.5 13.7 1.36

Formulación 2 (4°C): 2.4 4.0 4.5

Formulación 1 (37°C): 12.5 15.2 17.6

Formulación 2 (37°C): 2.4 5.1 6.3

[0171] Los contenidos de diheptámero de liraglutida también se midieron de una forma similar y estos resultados se muestran en la tabla 18 y tabla 19 para el método SEC con fenol y sin fenol, respectivamente.

Tabla 18

SEC con fenol: % de diheptámero de liraglutida

0W: 2W 4W

Formulación 1 (4°C): 0.0 0.1 0.1

Formulación 2 (4°C): 0.1 0.2 0.2

Formulación 1 (37°C): 0.0 0.4 0.6

Formulación 2 (37°C): 0.1 1.9 3.6

Tabla 19

SEC sin fenol: % de diheptámero de liraglutida

0W: 2W 4W

Formulación 1 (4°C): 0.0 0.0 0.0

Formulación 2 (4°C): 0.1 0.1 0.1

Formulación 1 (37°C): 0.0 0.3 0.5

Formulación 2 (37°C): 0.1 1.8 3.0

Ejemplo 9

15 [0172] El estudio descrito en el ejemplo 7 también contenía una combinación de análogo de insulina NEB29-(Na(HOOC(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana-liraglutida compuesta de 0.3 mM de análogo de insulina, 0.8 mM de acetato de zinc (16 iones de zinc por 6 moléculas de análogo de insulina), 1.6 mM de liraglutida, 50 mM de fenol, 214 mM de glicerol, ajustado a pH 8.2.

20 [0173] Los contenidos relativos de monómero de análogo de insulina en comparación con análogo de insulina total medido por el análisis SEC con fenol y sin fenol (como se describió en el ejemplo 2) se muestran en la tabla 20 y tabla 21, respectivamente.

Tabla 20

SEC con fenol: % de monómero de insulina

0W: 2W 4W

4°C: 7.9 7.0 6.8

37°C: 7.9 6.2 5.9

Tabla 21

SEC sin fenol: % de monómero de insulina

0W: 2W 4W

4°C: 7.1 8.3 8.6

37°C: 7.1 8.6 10.0

[0174] Los contenidos de diheptámero de liraglutida también se midieron de una forma similar y estos resultados se muestran en la tabla 22 y tabla 23 para el método SEC con fenol y sin fenol, respectivamente.

Tabla 22

SEC con fenol: % de diheptámero de liraglutida

0W: 2W 4W

4°C: 0.1 0.1 0.1

37°C: 0.1 1.8 2.7

Tabla 23

SEC sin fenol: % de diheptámero de liraglutida

0W: 2W 4W

4°C: 0.1 0.1 0.1

37°C: 0.1 1.9 2.5

Ejemplo 10 (ILUSTRATIVO)

[0175] Se prepararon formulaciones que combinaban insulina glargina y el análogo de exendina-4 ZP10 (conocido también

15 como AVE0010). El análogo de exendina-4 ZP10 se describe en Thorkild-sen et al. (2003), JPET 307:490-496 y tiene el nombre sistemático [des-Pro38]exendina-4-(1-39)yl-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-NH2. A partir de soluciones de abastecimiento adecuadas se prepararon las siguientes composiciones mediante dilución en agua: La formulación 1 consistía en 0.6 mM de insulina glargina, 0.46 mM de acetato de zinc (4.6 zinc/6 insulina glargina), 60 μM de ZP10. La formulación 2 consistía en

0.6 mM de insulina glargina, 0.6 mM de acetato de zinc (6 zinc/6 insulina glargina), 60 μM de ZP10. Ambas formulaciones se

20 ajustaron a alrededor de pH 4.0 usando HCl y NaOH y se almacenaron a temperatura ambiente durante tres días. Después del almacenamiento ambas formulaciones estaban aún alrededor de pH 4.0. Las dos formulaciones mantuvieron soluciones transparentes inmediatamente después de la preparación y después del almacenamiento a temperatura ambiente.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Composición farmacéutica soluble para administración parenteral, que comprende un compuesto GLP-1 insulinotrópico, un péptido de insulina basal, aditivos farmacéuticamente aceptables y zinc, en donde el compuesto de GLP-1 insulinotrópico

5 es Arg34, Lys26(NB-(y-Glu(Na-hexadecanoil)))-GLP-1(7-37), la insulina basal es NEB29-(Na-(COOH(CH2)14CO)-y-Glu) desB30 insulina humana y en donde el contenido de zinc es entre 7 y 12 iones de Zn por 6 moléculas de insulina y en donde el pH es entre 7.7 y 8.2.
2. Composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la concentración

10 de la insulina basal está en la gama desde 1,5 a 8 mg/mL y la concentración del compuesto de GLP-1 está en la gama de 2 a 10 mg/mL.
3. Composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que comprende además

histidina. 15