BR112012004696B1 - Composto modulador da atividade de tlr, seu uso, composição farmacêutica, medicamento, kit e combinação - Google Patents

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David Skibinski
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Abstract

COMPOSTO MODULADOR DA ATIVIDADE DE TLR, SUA COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, SEU MEDICAMENTO, SEU USO, SEU KIT E SUA COMBINAÇÃO. A presente invenção fornece uma classe nova de compostos, composições imunogênicas e composições farmacêuticas compreendendo tais compostos e métodos de usar tais compostos par a tratar ou impedir doenças ou distúrbios associados aos Receptores Toll-símile. Em um aspecto, os compostos são úteis como adjuvantes para intensificar a efetividade de uma vacina.

Description

REFERÊNCIA CRUZADA AOS PEDIDOS DE PATENTE RELACIONADOS
[0001] Este pedido de patente reivindica o benefício de prioridade sob 35 U.S.C. §119(e) para o Pedido de Patente Provisório US 61/239,217, depositado em 2 de setembro de 2009, a revelação do qual é aqui incorporada por referência em sua totalidade e para todos os propósitos.
DECLARAÇÃO DE SUPORTE DO GOVERNO
[0002] Esta invenção foi feita em parte com o suporte do Governo sob Concessão de DTRA No. HDTRA1-07-9-0001 premiada pelo Departamento de Defesa. O Governo tem alguns direitos na invenção.
CAMPO DA INVENÇÃO
[0003] A invenção diz respeito aos moduladores de Receptores Toll-símiles (TLRs), e métodos de usar tais compostos.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
[0004] Detecção antecipada de classes específicas de patógenos é realizada pelo sistema imune inato com a ajuda de receptores de reconhecimento de padrão (PRRs). Os patógenos detectados incluem vírus, bactérias, protozoários e fungos, e cada um constitutivamente expressa um conjunto de moléculas classe-específicas, resistentes à mutação chamadas padrões moleculares associados ao patógeno (PAMPs). Estes marcadores moleculares podem ser compostos de proteínas, carboidratos, lipídios, ácidos nucleicos ou combinações dos mesmos, e podem ser localizados interna ou externamente. Exemplos de PAMPs incluem carboidratos bacterianos (lipopolissacarídeo ou LPS, manose), ácidos nucleicos (DNA ou RNA bacteriano ou viral), peptidoglicanos e ácidos lipotecoicos (de bactérias gram positivas), N- formilmetionina, lipoproteínas e glucans fúngicos.
[0005] Receptores de reconhecimento de padrão evoluíram para se beneficiarem de três qualidades do PAMP. Primeira, a expressão constitutiva permite o hospedeiro detectar o patógeno independente de seu estágio de ciclo de vida. Segunda, os PAMPs são classe- específicos, que permite o
[0006] hospedeiro distinguir entre os patógenos e assim trabalhar sua resposta. Terceira, a resistência à mutação permite o hospedeiro reconhecer o patógeno independente de sua cepa particular.
[0007] Receptores de reconhecimento de padrão estão envolvidos em mais que só reconhecimento de patógenos por meio de seus PAMPs. Uma vez ligados, os receptores de reconhecimento de padrão tendem a agrupar-se, recrutam outras proteínas extracelulares e intracelulares para o complexo, e iniciam cascatas de sinalização que por fim impacto a transcrição. Adicionalmente, os receptores de reconhecimento de padrão estão envolvidos na ativação do complemento, coagulação, fagocitose, inflamação, e funções de apoptose em resposta à detecção do patógeno.
[0008] Receptores de reconhecimento de padrão (PRRs) podem ser divididos em PRRs endocíticos ou PRRs de sinalização. Os PRRs de sinalização incluem as famílias grandes de receptores Toll-símiles (TLRs) ligados à membrana e receptores NOD-símiles citoplásmicos, enquanto os PRRs endocíticos promovem a ligação, engolfamento e destruição dos microorganismos através dos fagócitos sem retransmitir um sinal intracelular, são encontrados em todos os fagócitos e medeiam a remoção das células apoptóticas. Além disso, PRRs endocíticos reconhecem carboidratos e incluem receptores de manose dos macrófagos, receptores de glucan presentes em todos os fagócitos e receptores descontaminantes que reconhecem ligantes carregados.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
[0009] Fornecidos aqui são compostos e composições farmacêuticas dos mesmos que são agonistas do Receptor Toll-símile 7 (TLR7). Tais agonistas de TLR7 são potenciadores imunes que ligam aos adjuvantes contendo alumínio, tais como, por via de exemplo apenas, hidróxido de alumínio, oxi-hidróxido de alumínio e hidroxifosfato de alumínio. Desse modo, também fornecidas aqui são composições imunogênicas contendo um antígeno e um agonista de TLR7 fornecido aqui que ligam aos adjuvantes contendo alumínio. Quando tais composições imunogênicas forem administradas a um sujeito em necessidade das mesmas, tais agonistas de TLR7 intensificam a resposta imune para a composição imunogênica.
[00010] Em um aspecto fornecido aqui tais compostos, e os sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos farmaceuticamente aceitáveis (por exemplo, hidratos), os derivados de N-óxido, derivados de profármaco, derivados protegidos, isômeros individuais e mistura de isômeros dos mesmos, têm uma estrutura de acordo com a Fórmula (I):
Figure img0001
em que: R1 é H, C1-C6 alquila, -C(R5)2OH, -L1R5, -L1R6, -L2R5, -L2R6, -OL2R5, ou -OL2R6; L1 é -C(O)- ou -O-; L2 é C1-C6 alquileno, C2-C6 alquenileno, arileno, heteroarileno ou -((CR4R4)pO)q(CH2)p-, em que C1-C6 alquileno e C2-C6 alquenileno de L2 são opcionalmente substituídos com 1 a 4 grupos fluoro; cada L3é independentemente selecionado de C1-C6 alquileno e -((CR4R4)pO)q(CH2)p-, em que C1-C6 alquileno de L3é opcionalmente substituído com 1 a 4 grupos fluoro; L4é arileno ou heteroarileno; R2é H ou C1-C6 alquila; R3é selecionado de C1-C4 alquila, -L3R5, -L1R5, -L3R7, - L3L4L3R7, -L3L4R5, -L3L4L3R5, -OL3R5, -OL3R7, -OL3L4R7, -OL3L4L3R7, - OR8, -OL3L4R5, -OL3L4L3R5 e -C(R5)2OH; cada R4é independentemente selecionado de H e fluoro; R5é -P(O)(OR9)2, R6é -CF2P(O)(OR9)2 ou -C(O)OR10; R7é -CF2P(O)(OR9)2 ou -C(O)OR10; R8é H ou C1-C4 alquila; cada R9é independentemente selecionado de H e C1-C6 alquila; R10é H ou C1-C4 alquila; cada p é independentemente selecionado de 1, 2, 3, 4, 5 e 6, e q é 1, 2, 3 ou 4; com a condição que quando R3 for C1-C4 alquila ou -OR8, R1 seja -C(R5)2OH, -L1R5, -L1R6, -L2R5, -L2R6, -OL2R5, ou -OL2R6, em que R6é -CF2P(O)(OR9)2 e R7é -CF2P(O)(OR9)2.
[00011] Em certas modalidades dos compostos da Fórmula (I), R1é C1-C6 alquila, em outras modalidades R1é uma metila. Em certas modalidades, R1é H. Em outras modalidades, R1é -C(R5)2OH, -L1R5, -L1R6, -L2R5, -L2R6, -OL2R5, ou -OL2R6.
[00012] Em certas modalidades dos compostos da Fórmula (I), quando R1 - C(R5)2OH, -L1R5, -L1R6, -L2R5, -L2R6, -OL2R5, ou -OL2R6, então R3 seja -OR8 ou C1-C6 alquila. Em certas modalidades, R1é - C(R5)2OH, -L1R5, -L1R6, -L2R5, -L2R6, -OL2R5, ou -OL2R6, e R3é -OMe.
[00013] Em algumas modalidades dos compostos da Fórmula (I), R2 é C1-C6 alquila. Em certas modalidades, R2 é metila.
[00014] Em algumas modalidades dos compostos da Fórmula (I), R3 é selecionado de C1-C4 alquila, -L3R5, -L1R5, -L3R7, -L3L4L3R7, -L3L4R5, e -L3L4L3R5. Em modalidades alternativas, R3 é selecionado de -OL3R5, -OL3R7, -OL3L4R7, -OL3L4L3R7, -OR8, - OL3L4R5, -OL3L4L3R5 e -C(R5)2OH. Em certas modalidades, R3 é - OL3R5, em que -OL3R5 é um grupo da fórmula -O(CH2)1- 5P(O)(OR)2. Em outras modalidades, R3 é -OL3R5, em que -OL3R5 é um grupo da fórmula -O(CH2)1-5CF2P(O)(OR)2.
[00015] Em algumas modalidades, R3 é selecionado de C1-C4 alquila, -L3R5, -L1R5, -L3R7, -L3L4L3R7, -L3L4R5, -L3L4L3R5, - OL3R5, -OL3R7, -OL3L4R7, -OL3L4L3R7, -OR8, -OL3L4R5, e - OL3L4L3R5.
[00016] Onde mais de um R9 estiver presente, como nos compostos compreendendo uma metade de -P(O)(OR9)2, os grupos R9 são os mesmos ou são diferentes. Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R9 é H em cada ocorrência. Em outras modalidades, pelo menos um R9 é H e o outro R9 é C1-C6 alquila. Em outras modalidades, pelo menos um R9 é H e o outro R9 é metila. Em outras modalidades, pelo menos um R9 é H e o outro R9 é etila. Em outras modalidades de tais compostos da Fórmula (I), cada R9 é C1- C6 alquila e em certas modalidades, R9 é metila ou etila, ou uma combinação das mesmas.
[00017] Em certas modalidades dos compostos da Fórmula (I), L2 e/ou L3 são um grupo da fórmula -((CR4R4)pO)q(CH2)p-, e em certas modalidades, este grupo é da fórmula -(CH2CH2O)1-3(CH2)1-3-.
[00018] Em certas modalidades dos compostos da Fórmula (I), L2 é C1-C6 alquileno, enquanto em outras modalidades L2 é C1-C6 alquileno substituído com um a quatro grupos flúor. Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), L2 é da fórmula (CH2)0-5CF2, em que o carbono substituído por fluoro não é ligado diretamente ao anel de fenila da Fórmula I. Em certas modalidades dos compostos da Fórmula (I), L2 é C2-C6 alquenileno, enquanto em outras modalidades L2 é C2-C6 alquenileno substituído com um a quatro grupos flúor.
[00019] Em certas modalidades dos compostos da Fórmula (I), L3 é C1-C6 alquileno enquanto em outras modalidades L3 é C1-C6 alquileno substituído com um a quatro grupos flúor. Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), L3 é da fórmula (CH2)0-5CF2, em que o carbono substituído por fluoro não é ligado diretamente ao anel de fenila da Fórmula I.
[00020] Em certas modalidades dos compostos da Fórmula (I), L2 é arileno ou heteroarileno. Em algumas destas modalidades, L2 é fenileno, tal como fenileno 1,3-dissubstituído ou fenileno 1,4- dissubstituído.
[00021] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1 é C1-C6 alquila; R2 é C1-C6 alquila; R3 é -OL3R5 ou -OL3R7; R5 é -P(O)(OR9)2; R7 é -CF2P(O)(OR9)2, e L3 é C1-C6 alquileno.
[00022] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1 é C1-C6 alquila; R2 é C1-C6 alquila; R3 é -OL3R5 ou -OL3R7; R5 é -P(O)(OR9)2; R7 é -CF2P(O)(OR9)2; L3 é -((CR4R4)pO)q(CH2)p-; R4 é H; q é 1 ou 2, e p é 2.
[00023] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1 é -L2R6; R2 é C1-C6 alquila; R3 é -OL3R5 ou -OL3R7; R5 é - P(O)(OR9)2; R6 é -C(O)OR10; R7 é -CF2P(O)(OR9)2; L2 é C1-C6 alquileno, e L3 é C1-C6 alquileno.
[00024] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1 é -L2R6; R2 é C1-C6 alquila; R3 é -OL3R5 ou -OL3R7; R5 é - P(O)(OR9)2; R6 é -C(O)OR10; R7 é -CF2P(O)(OR9)2; L2 é C1-C6 alquileno; L3 é -((CR4R4)pO)q(CH2)p-; R4 é H; q é 1 ou 2, e p é 2.
[00025] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1é -C(R5)2OH, -L1R5, -L2R5 ou -L1R6; R2 é C1-C6 alquila; R3 é - OR8; R8 é C1-C6 alquila; R5 é -P(O)(OR9)2; R6 é -CF2P(O)(OR9)2; L1 é -C(O)-, e L2 é C1-C6 alquileno ou C2-C6 alquenileno, cada opcionalmente substituído com 1 a 4 grupos flúor.
[00026] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1 é C1-C6 alquila; R2 é C1-C6 alquila; R3 é -OL3L4R5 - OL3L4 L3R5, ou -OL3L4 L3R7; R5 é -P(O)(OR9)2; R7 é -CF2P(O)(OR9)2; cada L3 é independentemente um C1-C6 alquileno, e L4 é fenileno.
[00027] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1 é C1-C6 alquila; R2 é C1-C6 alquila; R3 é -C(R5)2OH ou -L1R5; R5 é -P(O)(OR9)2, e L1 é -C(O)- ou -O-.
[00028] Em certas modalidades, de tais compostos da Fórmula (I), e os sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos farmaceuticamente aceitáveis (por exemplo hidratos), os derivados de N-óxido, derivados de profármaco, derivados protegidos, isômeros individuais e mistura de isômeros dos mesmos,
Figure img0002
R1é C1-C4 alquila, -C(R5)2OH, -L1R5, -L2R5, -L2R6, -OL2R5, ou -OL2R6; L1é -C(O)- ou -O-; L2 é C1-C6 alquileno, C2-C6 alquenileno, arileno, heteroarileno ou -((CR4R4)pO)q(CH2)p-, em que C1-C6 alquileno e C2-C6 alquenileno de L2são opcionalmente substituídos com 1 a 4 grupos fluoro; cada L3é independentemente selecionado de C1-C6 alquileno e -((CR4R4)pO)q(CH2)p-, em que C1-C6 alquileno de L3é opcionalmente substituído com 1 a 4 grupos fluoro; L4é arileno ou heteroarileno; R2é H ou C1-C4 alquila; R3é selecionado de C1-C4 alquila, -L3R5, -L1R5, -L3R7, - L3L4L3R7, -L3L4R5, -L3L4L3R5, -OL3R5, -OL3R7, -OL3L4R7, -OL3L4L3R7, - OR8, -OL3L4R5, -OL3L4L3R5 e -C(R5)2OH; cada R4é independentemente selecionado de H e fluoro; R5é -P(O)(OH)2, R6é -CF2P(O)(OH)2 ou -C(O)OH; R7é -CF2P(O)(OH)2 ou -C(O)OH; R8é H ou C1-C4 alquila; cada p é independentemente selecionado de 1, 2, 3, 4, 5 e 6; q é 1, 2, 3 ou 4, com a condição que quando R3 for -OR8, R1 seja - C(R5)2OH, -L1R5, -L1R6, -L2R5, -L2R6, -OL2R5, ou -OL2R6, em que R6 é -CF2P(O)(OH)2 e R7é -CF2P(O)(OH)2.
[00029] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1é C1-C6 alquila; R2é C1-C6 alquila; R3é -OL3R5 ou -OL3R7; R5é - P(O)(OH)2; R7é -CF2P(O)(OH)2, e L3é C1-C6 alquileno.
[00030] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1é C1-C6 alquila; R2 é C1-C6 alquila; R3 é -OL3R5 ou -OL3R7; R5 é -P(O)(OH)2; R7 é -CF2P(O)(OH)2; L3 é -((CR4R4)pO)q(CH2)p-; R4 é H; q é 1 ou 2, e p é 2.
[00031] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1 é -L2R6; R2 é C1-C6 alquila; R3 é -OL3R5 ou -OL3R7; R5 é - P(O)(OH)2; R6 é -C(O)OH; R7 é -CF2P(O)(OH)2; L2 é C1-C6 alquileno, e L3 é C1-C6 alquileno.
[00032] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1 é -L2R6; R2 é C1-C6 alquila; R3 é -OL3R5 ou -OL3R7; R5 é - P(O)(OH)2; R6 é -C(O)OH; R7 é -CF2P(O)(OH)2; L2 é C1-C6 alquileno; L3 é -((CR4R4)pO)q(CH2)p-; R4 é H; q é 1 ou 2, e p é 2.
[00033] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1 é -C(R5)2OH, -L1R5, -L2R5 ou -L1R6; R2 é C1-C6 alquila; R3 é - OR8; R8 é C1-C6 alquila; R5 é -P(O)(OH)2; R6 é -CF2P(O)(OH)2; L1 é -C(O)-, e L2 é C1-C6 alquileno ou C2-C6 alquenileno, cada opcionalmente substituído com 1 a 4 grupos flúor.
[00034] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1 é C1-C6 alquila; R2 é C1-C6 alquila; R3 é -OL3L4R5, -OL3L4 L3R5, ou -OL3L4 L3R7; R5 é -P(O)(OH)2; R7 é -CF2P(O)(OH)2; cada L3 é independentemente um C1-C6 alquileno, e L4 é fenileno.
[00035] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1 é C1-C6 alquila; R2 é C1-C6 alquila; R3 é -C(R5)2OH ou -L1R5; R5 é -P(O)(OR9)2, e L1 é -C(O)- ou -O-.
[00036] Em certas modalidades dos compostos acima mencionados da Fórmula (I), R8 é metila. Em certas modalidades dos compostos acima mencionados da Fórmula (I), R1 é metila. Em certas modalidades dos compostos acima mencionados da Fórmula (I), R2 é metila.
[00037] Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I) são selecionados de ácido 4-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2- il)etil)-3-metilfenóxi)-1,1-difluorobutilfosfônico; ácido 3-(5-amino-2-(4- (4,4-diflúor-4-fosfonobutóxi)-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8- il)propanoico; ácido 3-(5-amino-2-(4-(2-(3,3-diflúor-3- fosfonopropóxi)etóxi)-2-metilfenetil)benzo[f][1,7] naftiridin-8- il)propanoico; ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(2-(2-(2-fosfonoetóxi) etóxi)etóxi)fenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico; fosfato de di- hidrogênio de 4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3- metilfenila; ácido (4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3- metilfenóxi) metilfosfônico; ácido 5-(4-(2-(5-amino-8- metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenóxi)-1,1- difluoropentilfosfônico; ácido 4-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [1,7] naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenóxi)-1,1-difluorobutilfosfônico; ácido 3-(2-(4- (2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenóxi)etóxi)- 1,1-difluoropropilfosfônico; ácido 2-(4-((4-(2-(5-amino-8- metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il) etil)-3-metilfenóxi)metil)fenil)-1,1- difluoroetilfosfônico; ácido 2-(5-amino-2-(4-metóxi-2- metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)-1,1-diflúor-2-oxoetilfosfônico; ácido (E)-2-(5-amino-2-(4-metóxi-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8- il) vinilfosfônico; ácido 2-(5-amino-2-(4-metóxi-2- metilfenetil)benzo[f][1,7] naftiridin-8-il)etilfosfônico; ácido (E)-2-(5- amino-2-(4-metóxi-2-metilfenetil) benzo [f][1,7]naftiridin-8-il)-1- fluorovinilfosfônico; ácido 3-((4-(2-(5-amino-8-metilbenzo [f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenóxi)metil)fenilfosfônico; ácido 5- amino-2-(4-metóxi-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridino-8- carbonilfosfônico; ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(3- fosfonopropóxi)fenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico; ácido 3-(5- amino-2-(4-(2-(2-(3,3-diflúor-3-fosfonopropóxi)etóxi) etóxi)-2- metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico; ácido 3-(5-amino-2- (2-metil-4-(2-(2-fosfonoetóxi)etóxi)fenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8- il)propanoico; ácido 2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2- il)etil)-3-metilfenóxi) etilfosfônico; ácido 6-(4-(2-(5-amino-8- metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenóxi)hexilfosfônico; ácido 6- (4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7] naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenóxi)-1,1- difluoroexilfosfônico; ácido 4-((4-(2-(5-amino-8- metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenóxi)metil)benzilfosfônico; ácido 2-(2-(2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3- metilfenóxi) etóxi) etóxi)etilfosfônico; ácido 3-[5-amino-2-(2-{4-[2-(3,3- diflúor-3-fosfonopropóxi)etóxi]-2-metilfenil}etil)benzo[f]1,7-naftiridin-8- il]propanoico; ácido {5-[4-(2-{5-amino-8-metilbenzo[f]1,7-naftiridin-2- il}etil)-3-metilfenóxi]pentil} fosfônico, e ácido {4-[4-(2-{5-amino-8- metilbenzo[f]1,7-naftiridin-2-il}etil)-3-metilfenóxi] butil}fosfônico.
[00038] Cada um destes compostos individualmente compreende uma modalidade preferida dos compostos, composições, e métodos descritos aqui.
[00039] Outro aspecto fornecido aqui, são métodos de usar os compostos da Fórmula (I), e composições farmacêuticas compreendendo tais compostos.
[00040] Outro aspecto fornecido aqui são composições farmacêuticas que incluem uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto da Fórmula (I), e um veículo farmaceuticamente aceitável. Em certas modalidades de tais composições farmacêuticas, a composição farmacêutica é formulada para administração intravenosa, administração intravítrea, administração intramuscular, administração oral, administração retal, inalação, administração nasal, administração tópica, administração oftálmica ou administração ótica. Em outras modalidades, as composições farmacêuticas são na forma de um tablete, uma pílula, uma cápsula, um líquido, um inalante, uma solução de pulverização nasal, um supositório, uma solução, uma emulsão, um unguento, colírio ou gota de ouvido. Em outras modalidades, tais composições farmacêuticas ainda incluem um ou mais agentes terapêuticos adicionais.
[00041] Outro aspecto fornecido aqui são composições farmacêuticas que incluem uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto da Fórmula (I), um adjuvante contendo alumínio, um antígeno e um veículo farmaceuticamente aceitável. Em tais composições farmacêuticas, o composto da Fórmula (I) está presente em uma quantidade suficiente para produzir um efeito imunoestimulante quando administrado. Em certas modalidades de tais composições farmacêuticas, a composição farmacêutica é formulada para administração intravenosa, administração intravítrea ou administração intramuscular. Em tais composições o adjuvante contendo alumínio é selecionado de hidróxido de alumínio, oxi- hidróxido de alumínio e hidroxifosfato de alumínio. Em certas modalidades de tais composições, o adjuvante contendo alumínio é oxi-hidróxido de alumínio ou hidróxido de alumínio.
[00042] Outro aspecto fornecido aqui é uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto da Fórmula (I) ligado a um adjuvante contendo alumínio e um veículo farmaceuticamente aceitável. Em certas modalidades, tal composição é um sólido secado. Em certas modalidades, uma tal composição é um sólido liofilizado. Em tais composições, o adjuvante contendo alumínio é selecionado de hidróxido de alumínio, oxi- hidróxido de alumínio e hidroxifosfato de alumínio. Em certas modalidades de tais composições, o adjuvante contendo alumínio é oxi-hidróxido de alumínio ou hidróxido de alumínio.
[00043] Outro aspecto fornecido aqui são composições imunogênicas compreendendo um composto da Fórmula (I), um adjuvante contendo alumínio e um antígeno. Em certas modalidades, o composto da Fórmula (I) está presente em uma quantidade efetiva para suscitar, induzir ou intensificar uma resposta imune ao antígeno em um sujeito a quem é administrada a composição. Em tais composições imunogênicas, o composto da Fórmula (I) está presente em uma quantidade suficiente para produzir um efeito imunoestimulante quando administrado. Em tais composições imunogênicas, o adjuvante contendo alumínio é selecionado de hidróxido de alumínio, oxi-hidróxido de alumínio e hidroxifosfato de alumínio. Em certas modalidades de tais composições imunogênicas, o adjuvante contendo alumínio é oxi-hidróxido de alumínio ou hidróxido de alumínio. Em certas modalidades de tais composições imunogênicas, o antígeno é um antígeno bacteriano. Em outras modalidades de tais composições imunogênicas, o antígeno é um antígeno viral ou um antígeno fúngico. Em certas modalidades de tais composições imunogênicas, o antígeno é um polipeptídeo. Em certas modalidades tais composições imunogênicas ainda compreendem um adjuvante adicional. Em certas modalidades, uma tal composição imunogênica é um sólido secado. Em certas modalidades, uma tal composição imunogênica é um sólido liofilizado.
[00044] Em certas modalidades, os compostos da invenção não são bisfosfonatos.
[00045] Outro aspecto fornecido aqui é um método para intensificar a efetividade de uma composição imunogênica, em que a composição imunogênica compreende um adjuvante contendo alumínio, e o método compreende adicionar uma quantidade efetiva de um composto da Fórmula (I) à composição imunogênica. Em tais métodos, o adjuvante contendo alumínio é selecionado de hidróxido de alumínio, oxi-hidróxido de alumínio e hidroxifosfato de alumínio. Em certas modalidades de tais métodos, o adjuvante contendo alumínio é oxi- hidróxido de alumínio ou hidróxido de alumínio.
[00046] Outro aspecto fornecido aqui são métodos para suscitar ou induzir uma resposta imune em um sujeito vertebrado compreendendo administrar ao sujeito vertebrado uma quantidade efetiva de uma composição imunogênica da invenção. Em algumas modalidades, a presente invenção fornece métodos para suscitar ou induzir uma resposta de linfócitos T citotóxicos (CTL) em um sujeito vertebrado compreendendo administrar ao sujeito vertebrado uma quantidade efetiva de uma composição imunogênica da invenção. Em outras modalidades, a presente invenção fornece métodos de suscitar ou induzir uma resposta imune mediada por anticorpo em um sujeito vertebrado compreendendo administrar ao sujeito vertebrado uma quantidade efetiva de uma composição imunogênica da invenção.
[00047] Outro aspecto fornecido aqui são métodos de fazer as composições imunogênicas descritas aqui.
[00048] Outro aspecto fornecido aqui são composições de vacina compreendendo uma composição imunogênica da invenção.
[00049] Outro aspecto fornecido aqui são medicamentos para tratar um paciente com uma doença ou distúrbio associados com atividade do receptor de TLR7, e tais medicamentos incluem uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto da Fórmula (I), em que o composto da Fórmula (I) é um agonista do receptor de TLR7.
[00050] Outro aspecto fornecido aqui é o uso de um composto da Fórmula (I) na fabricação de um medicamento para tratar uma doença ou distúrbio em um paciente onde modulação de um receptor de TLR7 está implicada.
[00051] Outro aspecto fornecido aqui inclui métodos para ativar um receptor de TLR7, em que o método inclui administrar a um sistema ou um sujeito em necessidade do mesmo, uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto da Fórmula (I), ou sais farmaceuticamente aceitáveis ou composições farmacêuticas dos mesmos, assim ativando o receptor de TLR. Em tais métodos, o composto da Fórmula (I) é um agonista do receptor de TLR7. Em certas modalidades de tais métodos, os métodos incluem administrar o composto a um sistema de célula ou de tecido ou um sujeito humano ou animal.
[00052] Outro aspecto fornecido aqui inclui métodos para tratar uma doença ou distúrbio onde modulação do receptor de TLR7 está implicada, em que o método inclui administrar a um sistema ou sujeito em necessidade de tal tratamento uma quantidade efetiva de um composto da Fórmula (I), ou sais farmaceuticamente aceitáveis ou composições farmacêuticas dos mesmos, assim tratando a doença ou distúrbio. Em tais métodos, o composto da Fórmula (I) é um agonista do receptor de TLR7. Em certas modalidades de tais métodos, os métodos incluem administrar o composto a um sistema de célula ou de tecido ou a um sujeito humano ou animal.
[00053] Em certas modalidades de tais métodos, a doença ou condição é uma doença infecciosa, uma doença inflamatória, uma doença das vias respiratórias, uma doença dermatológica ou uma doença autoimune. Em certas modalidades de tais métodos, a doença ou condição é asma, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD), síndrome de angústia respiratória adulta (ARDS), colite ulcerativa, doença de Crohn, bronquite, dermatite, ceratose actínica, carcinoma de células basais, rinite alérgica, psoríase, escleroderma, urticária, artrite reumatoide, esclerose múltipla, câncer, câncer de mama, HIV ou lúpus.
[00054] Outro aspecto fornecido aqui inclui métodos para tratar uma doença proliferativa celular, compreendendo administrar a um sistema ou sujeito em necessidade de tal tratamento uma quantidade efetiva de um composto da Fórmula (I), ou sais farmaceuticamente aceitáveis ou composições farmacêuticas dos mesmos; em que a doença proliferativa celular é linfoma, osteossarcoma, melanoma, ou um tumor de mama, renal, próstata, tumor colorretal, tiroide, ovariano, pancreático, neuronal, pulmonar, uterino ou gastrintestinal.
[00055] Outro aspecto fornecido aqui é composição farmacêutica que inclui um composto da Fórmula (I), um antígeno e um veículo farmaceuticamente aceitável, em que tais composições farmacêuticas são composições imunogênicas, e o composto é um potencializador imune e está presente em uma quantidade efetiva para intensificar uma resposta imune ao antígeno, em um sujeito recebendo a composição. Em certas modalidades, tais composições farmacêuticas também incluem um ou mais agentes imunorreguladores. Em certas modalidades, o um ou mais agentes imunorreguladores incluem um ou mais adjuvantes. Em certas modalidades, tais adjuvantes são selecionados de adjuvantes que são uma composição contendo mineral, uma emulsão de óleo, uma formulação de saponina, um virossoma, uma partícula semelhante a vírus, um derivado bacteriano, um derivado microbiano, um imunomodulador humano, um bioadesivo, um mucoadesivo, um micropartícula, um lipossoma, uma formulação de éter de polioxietileno, uma formulação de éster de polioxietileno, um polifosfazeno, um peptídeo de muramila, ou um composto de imidazoquinolona. Em certas modalidades, o adjuvante é uma emulsão de óleo. Em certas modalidades, as composições imunogênicas são úteis como vacinas, e o composto está presente em uma quantidade suficiente para produzir um efeito imunoestimulante sob administração.
[00056] Outro aspecto fornecido aqui é o composto para o uso em um método de tratamento médico, em que o método de tratamento médico é para tratar uma doença associada com a atividade do receptor de TLR7, em que a doença é selecionada de uma doença infecciosa, uma doença inflamatória, uma doença das vias respiratórias, uma doença dermatológica ou uma doença autoimune, e em que o composto é um composto da Fórmula (I) da reivindicação 1. Em certas modalidades de tais métodos, a doença ou condição é asma, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD), síndrome de angústia respiratória adulta (ARDS), colite ulcerativa, doença de Crohn, bronquite, dermatite, ceratose actínica, carcinoma de células basais, rinite alérgica, psoríase, escleroderma, urticária, artrite reumatoide, esclerose múltipla, câncer, câncer de mama, HIV ou lúpus.
[00057] BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS
[00058] FIG. 1 mostra a concentração do composto 1 no sobrenadante com e sem a adição de hidróxido de alumínio. A concentração foi obtida por meio de análise de HPLC.
[00059] FIG. 2 mostra o efeito da ligação do composto 1 ao adjuvante de hidróxido de alumínio na ligação de antígenos de Neisseria meningitis (MenB) ao adjuvante de hidróxido de alumínio.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO DEFINIÇÕES
[00060] Os termos "alquenila" ou "alqueno", como aqui usados, referem-se a um hidrocarboneto de cadeia ramificada ou reta parcialmente insaturado tendo pelo menos uma ligação dupla de carbono-carbono. Átomos orientados em volta da ligação dupla são na conformação cis (Z) ou trans (E). Em certas modalidades, tal grupo alquenila ou grupo alqueno são opcionalmente substituídos. Como aqui usado, os termos "C2-C3 alquenila", "C2-C4 alquenila", "C2-C5 alquenila", "C2-C6 alquenila", "C2-C7 alquenila", e "C2-C8 alquenila" referem-se a um grupo alquenila contendo pelo menos 2, e no máximo 3, 4, 5, 6, 7 ou 8 átomos de carbono, respectivamente. Se do contrário não especificado, um grupo alquenila em geral é uma C2-C6 alquenila. Exemplos não-limitativos de grupos alquenila, como aqui usados, incluem etenila, propenila, butenila, pentenila, hexenila, heptenila, octenila, nonenila, decenila e outros.
[00061] O termo "alquenileno", como aqui usado, se refere a um radical de hidrocarboneto divalente de cadeia ramificada ou reta parcialmente insaturado derivado de um grupo alquenila. Em certas modalidades tal grupo alquenileno é opcionalmente substituído. Como aqui usado, os termos "C2-C3 alquenileno", "C2-C4 alquenileno", "C2- C5 alquenileno", "C2-C6 alquenileno", "C2-C7 alquenileno", e "C2-C8 alquenileno" referem-se a um grupo alquenileno contendo pelo menos 2, e no máximo 3, 4, 5, 6, 7 ou 8 átomos de carbono respectivamente. Se do contrário não especificado, um grupo alquenileno em geral é um C2-C6 alquenileno. Exemplos não-limitativos de grupos alquenileno como aqui usados incluem, etenileno, propenileno, butenileno, pentenileno, hexenileno, heptenileno, octenileno, nonenileno, decenileno e outros.
[00062] O termo "alquila", como aqui usado, se refere a um hidrocarboneto de cadeia ramificada ou reta saturado. Em certas modalidades tais grupos alquila são opcionalmente substituídos. Como aqui usado, os termos "C1-C3 alquila", "C1-C4 alquila", "C1-C5 alquila", "C1-C6 alquila", "C1-C7 alquila" e "C1-C8 alquila" referem-se a um grupo alquila contendo pelo menos 1, e no máximo 3, 4, 5, 6, 7 ou 8 átomos de carbono, respectivamente. Se do contrário não especificado, um grupo alquila em geral é uma C1-C6 alquila. Exemplos não-limitativos de grupos alquila como aqui usados incluem metila, etila, n-propila, isopropila, n-butila, isobutila, sec-butila, t-butila, n-pentila, isopentila, hexila, heptila, octila, nonila, decila e outros.
[00063] O termo "alquileno", como aqui usado, se refere a um radical de hidrocarboneto divalente de cadeia ramificada ou reta saturado derivado de um grupo alquila. Em certas modalidades tais grupos alquileno são opcionalmente substituídos. Como aqui usado, os termos "C1-C3 alquileno", "C1-C4 alquileno", "C1-C5 alquileno", "C1-C6 alquileno", "C1-C7 alquileno" e "C1-C8 alquileno" referem-se a um grupo alquileno contendo pelo menos 1, e no máximo 3, 4, 5, 6, 7 ou 8 átomos de carbono respectivamente. Se do contrário não especificado, um grupo alquileno em geral é um C1-C6 alquileno. Exemplos não-limitativos de grupos alquileno como aqui usados incluem, metileno, etileno, n-propileno, isopropileno, n-butileno, isobutileno, sec-butileno, t-butileno, n-pentileno, isopentileno, hexileno e outros.
[00064] O termo "alcóxi", como aqui usado, se refere ao grupo -ORa onde Ra é um grupo alquila como definido aqui. Um grupo alcóxi pode ser opcionalmente substituído. Como aqui usado, os termos "C1-C3 alcóxi", "C1-C4 alcóxi", "C1-C5 alcóxi", "C1-C6 alcóxi", "C1-C7 alcóxi"e "C1-C8 alcóxi"referem-se a um grupo alcóxi em que a metade de alquila contém pelo menos 1, e no máximo 3, 4, 5, 6, 7 ou 8, átomos de carbono. Exemplos não-limitativos de grupos alcóxi, como aqui usados, incluem metóxi, etóxi, n-propóxi, isopropóxi, n-butilóxi, t- butilóxi, pentilóxi, hexilóxi, heptilóxi, octilóxi, nonilóxi, decilóxi e outros.
[00065] O termo "arila", como aqui usado, se refere aos sistemas de anel monocíclico, bicíclico, e tricíclico tendo um total de cinco a quatorze membros no anel, em que pelo menos um anel no sistema é aromático e em que cada anel no sistema contém 3 a 7 membros no anel. Em certas modalidades, tais grupos arila são opcionalmente substituídos. Exemplos não-limitativos de um grupo arila, como aqui usados, incluem fenila, naftila, fluorenila, indenila, azulenila, antracenila e outros. Como uma alternativa opcional, o termo "arila" pode referir-se do contrário aos sistemas de anel bicíclico, monocíclico ou fundidos tendo um total de seis, dez ou quatorze membros no anel de átomo carbono, opcionalmente substituídos com um ou mais substituintes; exemplos não-limitativos de tais grupos arila incluem fenila e naftila.
[00066] O termo "arileno", como aqui usado significa um radical divalente derivado de um grupo arila. Em certas modalidades tais grupos arileno são opcionalmente substituídos.
[00067] O termo "halogênio", como aqui usado, se refere a flúor (F), cloro (Cl), bromo (Br), ou iodo (I).
[00068] O termo "halo", como aqui usado, se refere aos radicais de halogênio: flúor (-F), cloro (-Cl), bromo (-Br), e iodo (-I).
[00069] Os termos "haloalquila" ou "alquila halo-substituída", como aqui usados, referem-se a um grupo alquila como definido aqui, substituído com um ou mais grupos halogênio, em que os grupos halogênio são os mesmos ou diferentes. Um grupo haloalquila pode ser opcionalmente substituído. Exemplos não-limitativos de tais grupos haloalquila de cadeia ramificada ou reta, como aqui usados, incluem metila, etila, propila, isopropila, isobutila e n-butila substituídos com um ou mais grupos halogênio, em que os grupos halogênio são os mesmos ou diferentes, incluindo, mas não limitados a, trifluorometila, pentafluoroetila, e outros.
[00070] Os termos "haloalquenila" ou "alquenila halo-substituída", como aqui usados, referem-se a um grupo alquenila como definido aqui, substituído com um ou mais grupos halogênio, em que os grupos halogênio são os mesmos ou diferentes. Um grupo haloalquenila pode ser opcionalmente substituído. Exemplos não-limitativos de tais grupos haloalquenila de cadeia ramificada ou reta, como aqui usados, incluem etenila, propenila, butenila, pentenila, hexenila, heptenila, octenila, nonenila, decenila e outros substituídos com um ou mais grupos halogênio, em que os grupos halogênio são os mesmos ou diferentes.
[00071] O termo "heteroarila", como aqui usado, se refere aos sistemas de anel monocíclico, bicíclico, e tricíclico tendo um total de cinco a quatorze membros no anel, em que pelo menos um anel no sistema é aromático, pelo menos um anel no sistema contém um ou mais heteroátomos selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre, e em que cada anel no sistema contém 3 a 7 membros no anel. Em certas modalidades, tais grupos heteroarila são opcionalmente substituídos. Exemplos não-limitativos de grupos heteroarila, como aqui usados, incluem benzofuranila, benzofurazanila, benzoxazolila, benzopiranila, benztiazolila, benzotienila, benzazepinila, benzimidazolila, benzotiopiranila, benzo[1,3]dioxol, benzo[b]furila, benzo[b]tienila, cinolinila, furazanila, furila, furopiridinila, imidazolila, indolila, indolizinila, indolin-2-ona, indazolila, isoindolila, isoquinolinila, isoxazolila, isotiazolila, 1,8-naftiridinila, oxazolila, oxaindolila, oxadiazolila, pirazolila, pirrolila, ftalazinila, pteridinila, purinila, piridila, piridazinila, pirazinila, pirimidinila, quinoxalinila, quinolinila, quinazolinila, 4H-quinolizinila, tiazolila, tiadiazolila, tienila, triazinila, triazolila e tetrazolila. Como uma alternativa opcional, o termo "heteroarila" pode do contrário referir-se aos sistemas de anel bicíclico, monocíclico ou fundido tendo um total de 5, 6, 9 ou 10 membros no anel, em que pelo menos um membro do anel é um heteroátomo selecionado de nitrogênio, oxigênio e enxofre, opcionalmente substituído com um ou mais substituintes por exemplo benzofuranila, benzofurazanila, benzoxazolila, benzopiranila, benztiazolila, benzotienila, benzazepinila, benzimidazolila, benzotiopiranila, benzo[b]furila, benzo[b]tienila, cinolinila, furazanila, furila, imidazolila, indolila, indolizinila, indazolila, isoindolila, isoquinolinila, isoxazolila, isotiazolila, 1,8-naftiridinila, oxazolila, oxaindolila, oxadiazolila, pirazolila, pirrolila, ftalazinila, pteridinila, purinila, piridila, piridazinila, pirazinila, pirimidinila, quinoxalinila, quinolinila, quinazolinila, tiazolila, tiadiazolila, tienila, triazinila, triazolila e tetrazolila.
[00072] O termo "heteroarileno", como aqui usado, significa um radical divalente derivado de um grupo heteroarila. Em certas modalidades, tais grupos heteroarileno são opcionalmente substituídos.
[00073] O termo "heteroátomo", como aqui usado, se refere a um ou mais de oxigênio, enxofre, nitrogênio, fósforo, ou silício.
[00074] O termo "hidroxila", como aqui usado, se refere ao grupo - OH.
[00075] O termo "hidroxialquila", como aqui usado se refere a um grupo alquila como definido aqui substituído com um ou mais grupo hidroxila. Exemplos não-limitativos de "grupos de C1-C6 hidroxialquila de cadeia ramificada ou reta", como aqui usados, incluem grupos metila, etila, propila, isopropila, isobutila e n-butila substituídos com um ou mais grupos hidroxila.
[00076] O termo "opcionalmente substituído", como aqui usado, significa que o grupo referenciado pode ou não ser substituído com um ou mais grupos adicionais individual e independentemente selecionados de alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, arila, heteroarila, heterocicloalquila, hidroxila, alcóxi, mercaptila, ciano, halo, carbonila, tiocarbonila, isocianato, tiocianato, isotiocianato, nitro, peraloalquila, perfluoroalquila, e amino, incluindo grupos amino mono e dissubstituídos, e os derivados protegidos dos mesmos. Exemplos não-limitativos de substituintes opcionais incluem, halo, -CN, =O, =N- OH, =N-OR, =N-R, -OR, -C(O)R, -C(O)OR, -OC(O)R, -OC(O)OR, - C(O)NHR, -C(O)NR2, -OC(O)NHR, -OC(O)NR2, -SR-, -S(O)R, - S(O)2R, -NHR, -N(R)2, -NHC(O)R, -NRC(O)R, -NHC(O)OR, - NRC(O)OR, S(O)2NHR, -S(O)2N(R)2, -NHS(O)2NR2, -NRS(O)2NR2, - NHS(O)2R, -NRS(O)2R, C1-C8 alquila, C1-C8 alcóxi, arila, heteroarila, cicloalquila, heterocicloalquila, C1-C8 alquila halo-substituída, e C1-C8 alcóxi halo-substituído onde cada R é independentemente selecionado de H, halo, C1-C8 alquila, C1-C8 alcóxi, arila, heteroarila, cicloalquila, heterocicloalquila, C1-C8 alquila halo-substituída, e C1-C8 alcóxi halo- substituído. A colocação e o número de tais grupos de substituinte são feitos de acordo com as limitações de valência bem entendidas de cada grupo, por exemplo =O é um substituinte adequado para um grupo alquila mas não para um grupo arila.
[00077] O termo "solvato", como aqui usado, se refere a um complexo de estequiometria variável formado por um soluto (por via de exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal do mesmo, como descrito aqui) e um solvente. Exemplos não-limitativos de um solvente são água, acetona, metanol, etanol e ácido acético.
[00078] O termo "aceitável"com respeito a uma formulação, composição ou ingrediente, como aqui usado, significa que não têm nenhum efeito prejudicial persistente na saúde geral do sujeito sendo tratado.
[00079] O termo "administração"ou "administrando" dos compostos em questão significa fornecer um composto da Fórmula (I), um sal farmaceuticamente aceitável, um solvato farmaceuticamente aceitável, ou profármaco do mesmo a um sujeito em necessidade de tratamento.
[00080] O termo "antígeno"se refere a uma molécula contendo um ou mais epítopos (por exemplo, lineares, conformacionais ou ambos) que suscitam uma resposta imunológica. O termo pode ser usado alternadamente com o termo "imunógeno". Por "suscitar"é significado induzir, promover, intensificar ou modular uma resposta imune ou reação imune. Em algumas circunstâncias, a resposta imune ou reação imune é uma resposta humoral e/ou celular. Um antígeno pode induzir, promover, intensificar ou modular uma resposta imune ou reação imune nas células in vitro e/ou in vivo em um sujeito e/ou ex vivo nas células ou tecidos de um sujeito. Tal resposta ou reação imune pode incluir, mas não é limitada, suscitar a formação de anticorpos em um sujeito, ou gerar uma população específica de linfócitos reativos com o antígeno. Antígenos são tipicamente macromoléculas (por exemplo, proteínas, polissacarídeos, polinucleotídeos) que são estranhas ao hospedeiro.
[00081] O termo "antígeno", como aqui usado, também denota antígenos de subunidade (isto é, antígenos que são separados e distintos de um organismo inteiro com o qual o antígeno está associado na natureza), como também bactérias, vírus, parasitas, parasitas mortos, atenuados ou inativados ou outros patógenos ou células tumorais, incluindo domínios extracelulares de receptores da superfície celular e porções intracelulares contendo epítopos de células T. Anticorpos tais como anticorpos anti-idiotípicos, ou fragmentos dos mesmos, e mimótopos de peptídeo sintético que podem imitar um antígeno ou determinante antigênico são também abrangidos pela definição de antígeno, como aqui usado. Similarmente, um oligonucleotídeo ou polinucleotídeo que expressam uma proteína imunogênica, antígeno ou determinante antigênico in vivo, tal como em terapia de gene ou aplicações de imunização de ácido nucleico, são também abrangidos pela definição de antígeno aqui.
[00082] O termo "epítopo"se refere àquela porção de espécie dada (por exemplo, uma molécula antigênica ou complexo antigênico) que determina sua especificidade imunológica. Um epítopo está dentro do escopo da presente definição de antígeno. Comumente, um epítopo é um polipeptídeo ou polissacarídeo em um antígeno de ocorrência natural. Em antígenos artificiais, pode ser uma substância de peso molecular baixo tal como um derivado de ácido arsanílico. Normalmente, um epítopo de célula B incluirá pelo menos cerca de 5 aminoácidos mas pode ser tão pequeno quanto 3-4 aminoácidos. Um epítopo de células T, tal como um epítopo de CTL, tipicamente inclui pelo menos cerca de 7-9 aminoácidos, e um epítopo de células T ajudantes tipicamente inclui pelo menos cerca de 12-20 aminoácidos.
[00083] O termo "câncer", como aqui usado se refere a um crescimento anormal de células que tendem a proliferar de um modo descontrolado e, em alguns casos, para metastasizar (esparramar). Os tipos de câncer incluem, mas não são limitados a, tumores sólidos (tais como aqueles da bexiga, intestino, cérebro, mama, endométrio, coração, rim, pulmão, tecido linfático (linfoma), ovário, pâncreas ou outro órgão endócrino (tiroide), próstata, pele (melanoma) ou tumores hematológicos (tais como as leucemias).
[00084] O termo "veículo", como aqui usado, se refere aos compostos ou agentes químicos que facilitam a incorporação de um composto descrito aqui nas células ou tecidos.
[00085] Os termos "coadministração"ou "administração combinada" ou outros como aqui usados são significados abranger administração dos agentes terapêuticos selecionados a um paciente só, e são intencionados a incluir regimes de tratamento em que os agentes não necessariamente são administrados pela mesma rota de administração ou ao mesmo tempo.
[00086] O termo "distúrbio dermatológico", como aqui usado, se refere a um distúrbio de pele. Tais distúrbios dermatológicos incluem, mas não são limitados a, distúrbios proliferativos ou inflamatórios da pele tais como, dermatite atópica, distúrbios bolhoso, colagenoses, dermatite de contato, eczema, doença de Kawasaki, rosácea, Síndrome de Sjogren-Larsso, ceratose actínica, carcinoma de células basais e urticária.
[00087] O termo "diluente", como aqui usado, se refere aos compostos químicos que são usados para diluir um composto descrito aqui antes de a liberação. Diluentes podem ser também usados para estabilizar os compostos descritos aqui.
[00088] Os termos "quantidade efetiva" ou "quantidade terapeuticamente efetiva", como aqui usados, referem-se a uma quantidade suficiente de um composto descrito aqui sendo administrado que aliviará até certo ponto um ou mais dos sintomas da doença ou condição sendo tratada. O resultado pode ser redução e/ou alívio dos sinais, sintomas, ou causas de uma doença, ou qualquer outra alteração desejada de um sistema biológico. Por exemplo, uma "quantidade efetiva" para usos terapêuticos é a quantidade da composição compreendendo um composto como revelado aqui requerida para fornecer uma diminuição clinicamente significativa nos sintomas da doença. Uma quantidade "efetiva" apropriada em qualquer caso individual pode ser determinada usando técnicas, tais como um estudo de escalação de dose.
[00089] Os termos "intensificar" ou "intensificando", como aqui usados, significam aumentar ou prolongar ou em potência ou duração um efeito desejado. Desse modo, com respeito a intensificar o efeito dos agentes terapêuticos, o termo "intensificar" se refere à habilidade para aumentar ou prolongar, ou em potência ou duração, o efeito de outros agentes terapêuticos em um sistema. Uma "quantidade efetiva de intensificação", como aqui usada, se refere a uma quantidade adequada para intensificar o efeito de outro agente terapêutico em um sistema desejado.
[00090] O termo "excipiente" se refere a qualquer substância essencialmente acessória que possa estar presente na forma de dosagem acabada. Por exemplo, o termo "excipiente" inclui veículos, aglutinantes, desintegrantes, enchedores (diluentes), lubrificantes, agentes de suspensão/dispersão, e outros.
[00091] Os termos "fibrose" ou "distúrbio fibrosante", como aqui usado, referem-se às condições seguindo inflamação aguda ou crônica e estão associados com a acumulação anormal de células e/ou colágeno e incluem, mas não são limitados à fibrose de órgãos ou tecidos individuais tais como coração, rim, juntas, pulmão, ou pele, e incluem tais distúrbios como fibrose pulmonar idiopática e alveolite fibrosante criptogênica.
[00092] O termo "iatrogênica", como aqui usado, significa uma condição, distúrbio, ou doença criados ou piorados por meio de terapia médica ou cirúrgica.
[00093] O termo "quantidade imunologicamente efetiva", como aqui usado, significa que a administração de uma quantidade suficiente a um indivíduo, ou em uma dose única ou como parte de uma série, que é efetiva para o tratamento ou prevenção de uma doença ou distúrbio imunológico. Esta quantidade varia, dependendo da saúde e condição física do indivíduo sendo tratado, idade, do grupo taxonômico do indivíduo a ser tratado (por exemplo, primata não-humano, primata, etc.), a capacidade do sistema imune do indivíduo para sintetizar os anticorpos, o grau de proteção desejado, a formulação da vacina, a avaliação do médico de tratamento da situação médica, e outros fatores relevantes. Espera-se que a quantidade caísse para uma faixa relativamente ampla que pode ser determinada por meio de experimentações rotineiras.
[00094] Uma "resposta imunológica"ou "resposta imune" a um antígeno ou composição, como aqui usado, se refere ao desenvolvimento em um sujeito de uma resposta imune humoral e/ou celular ao antígeno ou à composição.
[00095] Respostas imunes incluem respostas imunes inatas e adaptáveis. Respostas imunes inatas são respostas de ação rápida que fornecem uma primeira linha de defesa para o sistema imune. Em contraste, a imunidade adaptável usa seleção e expansão clonais das células imunes tendo genes do receptor somaticamente rearranjados (por exemplo, receptores de células T e B) que reconhecem os antígenos de um patógeno ou distúrbio dado (por exemplo, um tumor), assim fornecendo especificidade e memória imunológica. Respostas imunes inatas, entre seus muitos efeitos, levam a uma explosão rápida das citocinas inflamatórias e ativação das células de apresentação de antígeno (APCs) tais como macrófagos e células dendríticas. Para distinguir patógenos autocomponentes, o sistema imune inato usa uma variedade de receptores relativamente invariáveis que detectam as assinaturas dos patógenos, conhecidas como padrões moleculares associados ao patógeno, ou PAMPs. A adição de componentes microbianos às vacinas experimentais é conhecida conduzir ao desenvolvimento de respostas imunes adaptáveis robustas e duráveis. O mecanismo por detrás desta potencialização das respostas imunes foi relatado envolver receptores de reconhecimento de padrão (PRRs) que são diferencialmente expressos em uma variedade de células imunes, incluindo neutrófilos, macrófagos, células dendríticas, células assassinas naturais, células B e algumas células não-imunes tais como células epiteliais e endoteliais. Conexão de PRRs leva à ativação de algumas destas células e sua secreção das citocinas e quimocinas, como também maturação e migração de outras células. Em tandem, isso cria um ambiente inflamatório que leva ao estabelecimento da resposta imune adaptável. PRRs incluem receptores não-fagocíticos, tais como Receptores Toll-símiles (TLRs) e proteínas do domínio de oligomerização de ligação de nucleotídeo (NOD), e receptores que induzem fagocitose, tais como receptores de descontaminantes, receptores de manose e receptores de β-glucan. As células dendríticas são reconhecidas como alguns dos tipos de células mais importantes para iniciar a preparação das células T ajudantes (TH) de CD4+ ingênuas e para induzir diferenciação de células T de CD8+ nas células assassinas. Sinalização de TLR foi relatada representar um papel importante em determinar a qualidade destas respostas de células T ajudantes, por exemplo, com a natureza do sinal de TLR determinando o tipo específico da resposta de TH que é observada (por exemplo, resposta de TH1 versus TH2). Uma combinação de anticorpo (humoral) e imunidade celular é produzida como parte de uma resposta do tipo TH1, enquanto uma resposta do tipo TH2 é predominantemente uma resposta de anticorpo.
[00096] Uma "resposta imune humoral" se refere a uma resposta imune mediada por moléculas de anticorpo, enquanto uma "resposta imune celular" se refere a uma resposta imune mediada por linfócitos T e/ou outras células sanguíneas brancas. Um aspecto importante da imunidade celular envolve uma resposta antígeno-específica por meio de células T citolíticas ("CTLs"). CTLs têm especificidade para antígenos de peptídeo que são apresentados em associação com as proteínas codificadas pelo complexo de histocompatibilidade principal (MHC) e expressados nas superfícies das células. CTLs ajudam a induzir e promover a destruição intracelular dos micróbios intracelulares, ou a lise das células infetadas com tais micróbios. Outro aspecto da imunidade celular envolve uma resposta antígeno- específica por meio das células T auxiliares. Células auxiliares atuam para ajudar a estimular a função, e focalizar a atividade, células efetoras não específicas contra células que exibem antígenos de peptídeo em associação com as moléculas de MHC em sua superfície. Uma "resposta imune celular"também se refere à produção de citocinas, quimocinas e outras tais moléculas produzidas pelas células T ativadas e/ou outras células sanguíneas brancas, incluindo aquelas derivadas das células T de CD4+ e CD8+.
[00097] Uma composição tal como uma composição imunogênica ou uma vacina que suscita uma resposta imune celular desse modo serve para sensibilizar um sujeito vertebrado pela apresentação de antígeno em associação com moléculas de MHC na superfície da célula. A resposta imune mediada por célula é direcionada às células que apresentam antígeno, ou próximo, em suas superfícies. Além disso, linfócitos T antígeno-específicos podem ser gerados para permitir a proteção futura de um hospedeiro imunizado. A habilidade de um antígeno ou composição particular para estimular uma resposta imunológica mediada por célula pode ser determinada por vários ensaios conhecidos na técnica, tais como por meio de ensaios de linfoproliferação (ativação de linfócitos), ensaios de célula citotóxica de CTL, por ensaio para linfócitos T específicos para o antígeno em um sujeito sensibilizado, ou por medição de produção de citocina por células T em resposta à re-estimulação com antígeno. Tais ensaios são bem conhecidos na técnica. Vide, por exemplo, Erickson et al. (1993) J. Immunol. 151:4189-4199; Doe et al. (1994) Eur. J. Immunol. 24:2369-2376. Desse modo, uma resposta imunológica como aqui usada pode ser uma que estimule a produção das CTLs e/ou a produção ou ativação das células ajudantes T. O antígeno de interesse pode também suscitar uma resposta imune mediada por anticorpo. Consequentemente, uma resposta imunológica pode incluir, por exemplo, um ou mais dos efeitos seguintes entre outros: a produção de anticorpos, por exemplo, por células B; e/ou a ativação do supressor das células T e/ou Yδ células T especificamente direcionadas para um antígeno ou antígenos presentes na composição ou vacina de interesse. Estas respostas podem servir para neutralizar a infecciosidade, e/ou mediar o complemento do anticorpo, ou citotoxicidade da célula dependente do anticorpo (ADCC) para fornecer proteção a um hospedeiro imunizado. Tais respostas podem ser determinadas usando imunoensaios padrões e ensaios de neutralização, bem conhecidos na técnica.
[00098] As composições imunogênicas da invenção exibem "imunogenicidade intensificada" para um antígeno dado quando elas possuírem uma capacidade maior para suscitar uma resposta imune que a resposta imune suscitada por uma quantidade equivalente do antígeno em uma composição divergente (por exemplo, em que o antígeno é administrado como uma proteína solúvel). Desse modo, uma composição pode exibir "imunogenicidade intensificada", por exemplo, porque a composição gera uma resposta imune mais forte, ou porque uma dose mais baixa ou menos doses de antígeno são necessárias para alcançar uma resposta imune no sujeito ao qual é administrada. Tal imunogenicidade intensificada pode ser determinada, por exemplo, administrando as composições da invenção, e controles de antígeno, aos animais e comparando resultados de ensaio dos dois.
[00099] O termo "distúrbios inflamatórios", como aqui usado, se refere àquelas doenças ou condições que são caracterizadas por um ou mais dos sinais de dor (dor, da geração de substâncias nocivas e da estimulação dos nervos), calor (calor, de vasodilatação), vermelhidão (rubor, de vasodilatação e fluxo sanguíneo aumentado), inchação (tumor, de influxo excessivo ou afluxo restringido de fluido), e perda de função (functio laesa, que pode ser parcial ou total, temporária ou permanente). Inflamação tem muitas formas e inclui, mas não é limitada a, inflamação que é uma ou mais das a seguir: aguda, adesiva, atrófica, catarral, crônica, cirrótica, difusa, disseminada, exsudativa, fibrinosa, fibrosante, focal, granulomatosa, hiperplástica, hipertrófica, intersticial, metastática, necrótica, obliterativa, parenquimatosa, plástica, produtiva, proliferativa, pseudomembranosa, purulenta, esclerosante, seroplástica, sorosa, simples, específica, subaguda, supurativa, tóxica, traumática, e/ou ulcerativa. Distúrbios inflamatórios ainda incluem, sem ser limitados àqueles afetando os vasos sanguíneos (poliarterite, artrite temporal); juntas (artrite: cristalina, osteoartrite, psoriática, reativa, reumatoide, Reiter); trato gastrintestinal (Doença,); pele (dermatite); ou múltiplos órgãos e tecidos (lúpus sistêmico eritematoso).
[000100] O termo "modular", como aqui usado, significa interagir direta ou indiretamente com um alvo para alterar a atividade do alvo, incluindo, por via de exemplo apenas, intensificar a atividade do alvo, inibir a atividade do alvo, limitar a atividade do alvo, ou estender a atividade do alvo.
[000101] O termo "modulador", como aqui usado, se refere a uma molécula que interage direta ou indiretamente com um alvo. As interações incluem, mas não são limitadas a, as interações de um agonista ou um antagonista.
[000102] Os termos "doença ocular" ou "doença oftálmica", como aqui usados, referem-se às doenças que afetam o olho ou olhos e potencialmente os tecidos circunvizinhos também. Doenças oculares ou oftálmicas incluem, mas não são limitadas a, conjuntivite, retinite, esclerite, uveíte, conjuntivite alérgica, conjuntivite vernal, conjuntivite papilar e retinite de citomegalovírus (CMV).
[000103] O termo "oligonucleotídeo", como aqui usado, se refere a um polinucleotídeo que tem na faixa de 5 a 100 nucleotídeos, tipicamente 5 a 30 nucleotídeos em tamanho.
[000104] O termo "farmaceuticamente aceitável", como aqui usado, se refere a um material, tal como veículo ou diluente que não ab- rogam a atividade biológica ou propriedades dos compostos descritos aqui. Tais materiais são administrados a um indivíduo sem causar efeitos biológicos indesejáveis ou interagir de uma maneira deletéria com quaisquer dos componentes da composição na qual estão contidos.
[000105] O termo "sal farmaceuticamente aceitável", como aqui usado, se refere a uma formulação de um composto que não causa irritação significativa a um organismo ao qual é administrado e não ab- roga a atividade biológica e propriedades dos compostos descritos aqui.
[000106] Os termos "combinação"ou "combinação farmacêutica", como aqui usados significam um produto resultante da mistura ou combinação de mais de um ingrediente ativo e inclui combinações fixas e não-fixas dos ingredientes ativos. O termo "combinação fixa" significa que os ingredientes ativos, por via de exemplo, um composto da Fórmula (I) e um agente terapêutico adicional, são ambos administrados simultaneamente a um paciente na forma de uma entidade ou dosagem simples. O termo "combinação não-fixa"significa que os ingredientes ativos, por via de exemplo, um composto da Fórmula (I) e um agente terapêutico adicional, são ambos administrados simultaneamente a um paciente como entidades separadas ou simultânea ou sequencialmente sem prazos específicos, em que tal administração fornece níveis efetivos dos 2 compostos terapeuticamente no corpo do paciente. O último também se aplica à terapia de coquetel, por exemplo a administração de 3 ou mais ingredientes ativos.
[000107] Os termos "composição"ou "composição farmacêutica", como aqui usados, referem-se a uma mistura de pelo menos um composto, tal como os compostos da Fórmula (I) fornecidos aqui, com pelo menos um e opcionalmente mais de um dentre outros componentes químicos farmaceuticamente aceitáveis, tais como veículos, estabilizantes, diluentes, agentes dispersantes, agentes de suspensão, agentes espessantes, e/ou excipientes.
[000108] Por "pH fisiológico"ou um "pH na faixa fisiológica" são significados um pH na faixa de cerca de 7,2 a 8,0 inclusivo, mais tipicamente na faixa de cerca de 7,2 a 7,6 inclusivo.
[000109] O termo "profármaco", como aqui usado, se refere a um agente que é convertido no fármaco de origem in vivo. Um exemplo não-limitativo de um profármaco dos compostos descritos aqui é um composto descrito aqui administrado como um éster que é depois metabolicamente hidrolisado em um ácido carboxílico, a entidade ativa, uma vez dentro da célula. Um outro exemplo de um profármaco é um peptídeo curto ligado a um grupo ácido onde o peptídeo é metabolizado para revelar a metade ativa.
[000110] Os termos "polinucleotídeo"e "ácido nucleico"são usados alternadamente, e referem-se a um polímero uni ou bifilamentado de bases de deoxirribonucleotídeo ou de ribonucleotídeo. Polinucleotídeos unifilamentados incluem filamentos de codificação e filamentos antissentidos. Polinucleotídeos incluem RNA e DNA, e podem ser isolados de fontes naturais, sintetizados in vitro, ou preparados de uma combinação de moléculas naturais e sintéticas. Exemplos de polinucleotídeos incluem, mas não são limitados a, genes, cDNAs, mRNAs, moléculas de RNA de autorreplicação, moléculas de DNA de autorreplicação, sequências de DNA genômicas, sequências de RNA genômicas, oligonucleotídeos. Moléculas de RNA de autorreplicação e moléculas de DNA de autorreplicação são capazes de se autoamplificar quando introduzidas em uma célula hospedeira.
[000111] Um polinucleotídeo pode ser linear ou não-linear (por exemplo, compreendendo elementos circulares, ramificados, etc.). Os termos "polinucleotídeo"e "ácido nucleico" abrangem variantes modificadas (por exemplo, sequências com uma deleção, adição e/ou substituição). Variantes modificadas podem ser deliberadas, tais como por meio de mutagênese dirigida, ou podem ser acidentais, tais como por meio de mutações naturais.
[000112] Um polinucleotídeo pode ser composto de monômeros que são nucleotídeos de ocorrência natural (tais como DNA e RNA), ou análogos de nucleotídeos de ocorrência natural, ou uma combinação de ambos. Nucleotídeos modificados podem ter alterações nas metades de açúcar e/ou nas metades de base de pirimidina ou de purina. Modificações de açúcar incluem, por exemplo, substituição de um ou mais grupos hidroxila com grupos halogênio, alquila, aminas, e grupos azido, ou açúcares podem ser funcionalizados como éteres ou ésteres. Além disso, a metade de açúcar inteira pode ser substituída com estruturas estérica e eletronicamente similares, tais como aza- açúcares e análogos de açúcar carbocíclico. Exemplos de modificações em uma metade de base incluem purinas e pirimidinas alquiladas, purinas ou pirimidinas aciladas, ou outros substitutos heterocíclicos bem conhecidos. Monômeros de polinucleotídeo podem ser ligados por ligações de fosfodiéster ou análogos de tais ligações. Análogos de ligações de fosfodiéster incluem fosforotioato, fosforoditioato, fosforosselenoato, fosforodisselenoato, fosforoanilotioato, fosforanilidato, fosforamidato, e outros. Os termos "polinucleotídeo"e "ácido nucleico"também incluem os assim chamados "ácidos nucleicos de peptídeo"compreendendo bases de ácido nucleico de ocorrência natural ou modificadas ligadas a uma cadeia principal de poliamida.
[000113] O termo "espécie contendo polinucleotídeo", como aqui usado, se refere a uma molécula, pelo menos uma porção desta é um polinucleotídeo.
[000114] Os termos "polipeptídeo", "proteína"e "peptídeo", como aqui usados, referem-se a qualquer polímero formado de múltiplos aminoácidos, independente do comprimento ou modificação pós- translacional (por exemplo, fosforilação ou glicosilação), associado, pelo menos em parte, por meio de ligação covalente (por exemplo, "proteína"como aqui usado referem-se tanto aos polímeros lineares (cadeias) de aminoácidos associados por ligações de peptídeo como também proteínas que exibem estrutura secundária, terciária, ou quaternária que podem incluir outras formas intramoleculares e associação intermolecular, tal como ligações de hidrogênio e van der Waals, dentro ou entre a(s) cadeia(s) de peptídeo. Exemplos de polipeptídeos incluem, mas não são limitados a, proteínas, peptídeos, oligopeptídeos, dímeros, multímeros, variantes, e outros. Em algumas modalidades, o polipeptídeo pode ser inalterado de modo que é desprovido de modificações tais como fosforilação e glicosilação. Um polipeptídeo pode conter parte ou todo de um polipeptídeo de ocorrência natural simples, ou pode ser uma fusão ou polipeptídeo quimérico contendo sequências de aminoácido dois ou mais polipeptídeos de ocorrência natural.
[000115] O termo "espécie contendo polipeptídeo"se refere a uma molécula, pelo menos uma poção desta é um polipeptídeo. Exemplos incluem polipeptídeos, glicoproteínas, metaloproteínas, lipoproteínas, antígenos de sacarídeo conjugados com proteínas como veículo, e assim sucessivamente.
[000116] O termo "doença das vias respiratórias", como aqui usado, se refere às doenças que afetam os órgãos que estão envolvidos na respiração, tais como o nariz, garganta, laringe, traquéia, brônquios, e pulmões. Doenças das vias respiratórias incluem, mas não são limitadas a, asma, síndrome da angústia respiratória adulta e asma alérgica (extrínseca), asma não-alérgica (intrínseca), asma severa aguda, asma crônica, asma clínica, asma noturna, asma induzida por alergênio, asma sensível à aspirina, asma induzida por exercício, hiperventilação isocápnica, asma de princípio infantil, asma de princípio adulto, asma variante de tosse, asma profissional, asma resistente a esteroides, asma sazonal, rinite alérgica sazonal, rinite alérgica perene, doença pulmonar obstrutiva crônica, incluindo bronquite crônica ou enfisema, hipertensão pulmonar, fibrose pulmonar intersticial e/ou inflamação das vias aéreas e fibrose cística, e hipoxia.
[000117] Os termos "sujeito" ou "paciente", como aqui usados, abrangem mamíferos e não-mamíferos. Exemplos de mamíferos incluem, mas não são limitados a, seres humanos, chimpanzés, macacos, bovinos, cavalos, ovelha, cabras, suínos; coelhos, cachorros, gatos, ratos, camundongos, cobaias, e outros. Exemplos de não-mamíferos incluem, mas não são limitados a, pássaros, peixe e outros. Frequentemente, o sujeito é um ser humano, e pode ser um ser humano que foi diagnosticado como em necessidade de tratamento para uma doença ou distúrbio revelados aqui.
[000118] O termo "modulador de TLR7", como aqui usado, se refere a um composto que modula um receptor de TLR7.
[000119] Os termos "doença de TLR7" ou uma "doença ou distúrbio associados com a atividade de TLR7", como aqui usados, referem-se a qualquer estado de doença associado com um Receptor Toll-símile. Tais doenças ou distúrbios incluem, mas não são limitados a, doenças infecciosas, doenças inflamatórias, doenças das vias respiratórias e doenças autoimunes, tais como, por via de exemplo apenas, asma, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD), síndrome de angústia respiratória adulta (ARDs), doença de Crohn, bronquite, dermatite, rinite alérgica, psoríase, escleroderma, urticária, artrite reumatoide, esclerose múltipla, câncer, HIV e lúpus.
[000120] O termo "quantidade terapeuticamente eficaz", como aqui usado, se refere a qualquer quantidade de um composto que, quando comparado a um sujeito correspondente que não recebeu tal quantidade, resulta em tratamento melhorado, cura, prevenção, ou melhora de uma doença, distúrbio, ou efeito colateral, ou uma diminuição na taxa de avanço de uma doença ou distúrbio. O termo também inclui, dentro de seu escopo, quantidades efetivas para intensificar a função fisiológica normal.
[000121] Os termos "tratar", "tratando" ou "tratamento", como aqui usados, referem-se aos métodos de aliviar, enfraquecer ou melhorar uma doença ou sintomas da condição, impedir sintomas adicionais, melhorar ou impedir as causas metabólicas subjacentes dos sintomas, inibir a doença ou condição, deter o desenvolvimento da doença ou condição, aliviar a doença ou condição, causar regressão da doença ou condição, aliviar uma condição causada pela doença ou condição, ou parar os sintomas da doença ou condição ou profilática e/ou terapeuticamente.
[000122] O termo "construção de vetor" em geral se refere a qualquer conjunto que seja capaz de direcionar a expressão de uma(s) sequência(s) de ácido nucleico ou gene(s) de interesse. Uma "construção de vetor de DNA" se refere a uma molécula de DNA que é capaz de direcionar a expressão de uma(s) sequência(s) de ácido nucleico ou gene(s) de interesse. Um tipo específico de construção de vetor de DNA é um plasmídeo que é uma molécula de DNA epissomal circular capaz de replicação autônoma dentro de uma célula hospedeira. Tipicamente, um plasmídeo é uma alça de DNA bifilamentar circular à qual segmentos de DNA adicionais podem ser ligados. pCMV é um plasmídeo específico que é bem conhecido na técnica. Outras construções de vetor de DNA são conhecidas que são com base em vírus de RNA. Estas construções de vetor de DNA tipicamente compreendem um promotor que funciona em uma célula eucariótica, 5’ de uma sequência de cDNA para a qual o produto de transcrição é uma construção de vetor de RNA (por exemplo, um replicon de vetor RNA de alfavírus), e uma região de terminação de 3’. Outros exemplos de construções de vetor incluem construções de vetor de RNA (por exemplo, construções de vetor de alfavírus) e outros. Como aqui usado, "construção de vetor de RNA", "replicon de vetor de RNA" e "replicon" referem-se a uma molécula de RNA que é capaz de direcionar sua própria amplificação ou autorreplicação in vivo, tipicamente dentro de uma célula alva. A construção de vetor de RNA é diretamente usada, sem o requerimento para introdução do DNA em uma célula e transporte ao núcleo onde a transcrição ocorreria. Usando o vetor de RNA para liberação direta no citoplasma da célula hospedeira, replicação autônoma e tradução da sequência de ácido nucleico heteróloga ocorrem eficientemente.
[000123] Os nomes dos compostos fornecidos aqui foram obtidos usando ChemDraw Ultra 10.0 (CambridgeSoft®) ou JChem versão 5.2.2 (ChemAxon).
[000124] Outros objetivos, características e vantagens dos métodos, composições e combinações descritos aqui ficarão evidentes a partir da descrição detalhada a seguir. Porém, deveria ser entendido que a descrição detalhada e os exemplos específicos, indicando modalidades específicas, são dados por via de ilustração apenas. DESCRIÇÃO DAS MODALIDADES PREFERIDAS
[000125] Fornecidos aqui são compostos e composições farmacêuticas dos mesmos, que são agonistas do receptor-7 Toll- símile (TLR7). Também fornecidos aqui são compostos, composições farmacêuticas e métodos para o tratamento de doenças e/ou distúrbios associados com a atividade de TLR7.
[000126] Os agonistas de TLR7 fornecidos aqui são compostos que têm a estrutura da Fórmula (I), e sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos farmaceuticamente aceitáveis (por exemplo hidratos), os derivados de N-óxido, derivados de profármaco, derivados protegidos, isômeros individuais e mistura de isômeros dos mesmos:
Figure img0003
em que: R1é H, C1-C6 alquila, -C(R5)2OH, -L1R5, -L1R6, -L2R5, -L2R6, -OL2R5, ou -OL2R6; L1é -C(O)- ou -O-; L2é C1-C6 alquileno, C2-C6 alquenileno, arileno, heteroarileno ou -((CR4R4)pO)q(CH2)p-, em que C1-C6 alquileno e C2-C6 alquenileno de L2são opcionalmente substituídos com 1 a 4 grupos fluoro; cada L3é independentemente selecionado de C1-C6 alquileno e -((CR4R4)pO)q(CH2)p-, em que C1-C6 alquileno de L3é opcionalmente substituído com 1 a 4 grupos fluoro; L4é arileno ou heteroarileno; R2é H ou C1-C6 alquila; R3é selecionado de C1-C4 alquila, -L3R5, -L1R5, -L3R7, - L3L4L3R7, -L3L4R5, -L3L4L3R5, -OL3R5, -OL3R7, -OL3L4R7, -OL3L4L3R7, - OR8, -OL3L4R5, -OL3L4L3R5 e -C(R5)2OH; cada R4é independentemente selecionado de H e fluoro; R5é -P(O)(OR9)2, R6é -CF2P(O)(OR9)2 ou -C(O)OR10; R7é -CF2P(O)(OR9)2 ou -C(O)OR10; R8é H ou C1-C4 alquila; cada R9é independentemente selecionado de H e C1-C6 alquila; R10é H ou C1-C4 alquila; cada p é independentemente selecionado de 1, 2, 3, 4, 5 e 6, e q é 1, 2, 3 ou 4; com a condição que quando R3 for C1-C4 alquila ou -OR8, R1 seja -C(R5)2OH, -L1R5, -L1R6, -L2R5, -L2R6, -OL2R5, ou -OL2R6, em que R6é -CF2P(O)(OR9)2 e R7é -CF2P(O)(OR9)2.
[000127] Em certas modalidades dos compostos da Fórmula (I), R1é C1-C6 alquila, em outras modalidades R1 é uma metila. Em certas modalidades, R1 é H. Em outras modalidades, R1 é -C(R5)2OH, - L1R5, -L1R6, -L2R5, -L2R6, -OL2R5, ou -OL2R6.
[000128] Em certas modalidades dos compostos da Fórmula (I), quando R1 - C(R5)2OH, -L1R5, -L1R6, -L2R5, -L2R6, -OL2R5, ou - OL2R6, então R3 seja -OR8 ou C1-C6 alquila. Em certas modalidades, R1 é -C(R5)2OH, -L1R5, -L1R6, -L2R5, -L2R6, -OL2R5, ou -OL2R6, e R3 é -OMe.
[000129] Em algumas modalidades dos compostos da Fórmula (I), R2 é C1-C6 alquila. Em certas modalidades, R2é metila.
[000130] Em algumas modalidades dos compostos da Fórmula (I), R3 é selecionado de C1-C4 alquila, -L3R5, -L1R5, -L3R7, -L3L4L3R7, -L3L4R5, e -L3L4L3R5. Em modalidades alternativas, R3é selecionado de -OL3R5, -OL3R7, -OL3L4R7, -OL3L4L3R7, -OR8, -OL3L4R5, -OL3L4L3R5 e - C(R5)2OH. Em certas modalidades, R3 é -OL3R5, em que -OL3R5 é um grupo da fórmula -O(CH2)1-5P(O)(OR)2. Em outras modalidades, R3 é -OL3R5, em que -OL3R5 é um grupo da fórmula -O(CH2)1- 5CF2P(O)(OR)2.
[000131] Em algumas modalidades, R3 é selecionado de C1-C4 alquila, -L3R5, -L1R5, -L3R7, -L3L4L3R7, -L3L4R5, -L3L4L3R5, - OL3R5, -OL3R7, -OL3L4R7, -OL3L4L3R7, -OR8, -OL3L4R5, e - OL3L4L3R5.
[000132] Onde mais de um R9 estiver presente, como nos compostos compreendendo uma metade de -P(O)(OR9)2, os grupos R9 são os mesmos ou são diferentes. Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R9 é H em cada ocorrência. Em outras modalidades, pelo menos um R9 é H e o outro R9 é C1-C6 alquila. Em outras modalidades, pelo menos um R9 é H e o outro R9 é metila. Em outras modalidades, pelo menos um R9 é H e o outro R9 é etila. Em outras modalidades de tais compostos da Fórmula (I), cada R9 é C1- C6 alquila e em certas modalidades, R9 é metila ou etila, ou uma combinação dos mesmos.
[000133] Em certas modalidades dos compostos da Fórmula (I), L2 e/ou L3 são um grupo da fórmula -((CR4R4)pO)q(CH2)p-, e em certas modalidades, este grupo é da fórmula -(CH2CH2O)1-3(CH2)1-3-.
[000134] Em certas modalidades dos compostos da Fórmula (I), L2 é C1-C6 alquileno, enquanto em outras modalidades L2 é C1-C6 alquileno substituído com um a quatro grupos flúor. Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), L2 é da fórmula (CH2)0-5CF2, em que o carbono substituído por fluoro não é ligado diretamente ao anel de fenila da Fórmula I. Em certas modalidades dos compostos da Fórmula (I), L2 é C2-C6 alquenileno, enquanto em outras modalidades L2 é C2-C6 alquenileno substituído com um a quatro grupos flúor.
[000135] Em certas modalidades dos compostos da Fórmula (I), L3 é C1-C6 alquileno enquanto em outras modalidades L3 é C1-C6 alquileno substituído com um a quatro grupos flúor. Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), L3 é da fórmula (CH2)0-5CF2, em que o carbono substituído por fluoro não é ligado diretamente ao anel de fenila da Fórmula I.
[000136] Em certas modalidades dos compostos da Fórmula (I), L2 é arileno ou heteroarileno. Em algumas destas modalidades, L2 é fenileno, tal como fenileno 1,3-dissubstituído ou fenileno 1,4- dissubstituído.
[000137] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1 é C1-C6 alquila; R2 é C1-C6 alquila; R3 é -OL3R5 ou -OL3R7; R5 é -P(O)(OR9)2; R7 é -CF2P(O)(OR9)2, e L3 é C1-C6 alquileno.
[000138] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1 é C1-C6 alquila; R2 é C1-C6 alquila; R3 é -OL3R5 ou -OL3R7; R5 é -P(O)(OR9)2; R7 é -CF2P(O)(OR9)2; L3 é -((CR4R4)pO)q(CH2)p-; R4 é H; q é 1 ou 2, e p é 2.
[000139] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1 é -L2R6; R2 é C1-C6 alquila; R3 é -OL3R5 ou -OL3R7; R5 é - P(O)(OR9)2; R6 é -C(O)OR10; R7 é -CF2P(O)(OR9)2; L2 é C1-C6 alquileno, e L3 é C1-C6 alquileno.
[000140] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1 é -L2R6; R2 é C1-C6 alquila; R3 é -OL3R5 ou -OL3R7; R5 é - P(O)(OR9)2; R6 é -C(O)OR10; R7 é -CF2P(O)(OR9)2; L2 é C1-C6 alquileno; L3 é -((CR4R4)pO)q(CH2)p-; R4 é H; q é 1 ou 2, e p é 2.
[000141] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1 é -C(R5)2OH, -L1R5, -L2R5 ou -L1R6; R2 é C1-C6 alquila; R3 é - OR8; R8 é C1-C6 alquila; R5 é -P(O)(OR9)2; R6 é -CF2P(O)(OR9)2; L1 é -C(O)-, e L2 é C1-C6 alquileno ou C2-C6 alquenileno, cada opcionalmente substituído com 1 a 4 grupos flúor.
[000142] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1 é C1-C6 alquila; R2 é C1-C6 alquila; R3 é -OL3L4R5 - OL3L4 L3R5, ou -OL3L4 L3R7; R5 é -P(O)(OR9)2; R7 é -CF2P(O)(OR9)2; cada L3 é independentemente um C1-C6 alquileno, e L4 é fenileno.
[000143] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1 é C1-C6 alquila; R2 é C1-C6 alquila; R3 é -C(R5)2OH ou -L1R5; R5 é -P(O)(OR9)2, e L1 é -C(O)- ou -O-.
[000144] Em certas modalidades, de tais compostos da Fórmula (I), e sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos farmaceuticamente aceitáveis (por exemplo, hidratos), os derivados de N-óxido, derivados de profármaco, derivados protegidos, isômeros individuais e mistura de isômeros dos mesmos:
Figure img0004
Fórmula (I) R1é C1-C4 alquila, -C(R5)2OH, -L1R5, -L2R5, -L2R6, -OL2R5, ou -OL2R6; L1é -C(O)- ou -O-; L2é C1-C6 alquileno, C2-C6 alquenileno, arileno, heteroarileno ou -((CR4R4)pO)q(CH2)p-, em que C1-C6 alquileno e C2-C6 alquenileno de L2são opcionalmente substituídos com 1 a 4 grupos fluoro; cada L3é independentemente selecionado de C1-C6 alquileno e -((CR4R4)pO)q(CH2)p-, em que C1-C6 alquileno de L3é opcionalmente substituído com 1 a 4 grupos fluoro; L4é arileno ou heteroarileno; R2é H ou C1-C4 alquila; R3é selecionado de C1-C4 alquila, -L3R5, -L1R5, -L3R7, - L3L4L3R7, -L3L4R5, -L3L4L3R5, -OL3R5, -OL3R7, -OL3L4R7, -OL3L4L3R7, - OR8, -OL3L4R5, -OL3L4L3R5 e -C(R5)2OH; cada R4é independentemente selecionado de H e fluoro; R5é -P(O)(OH)2, R6é -CF2P(O)(OH)2 ou -C(O)OH; R7é -CF2P(O)(OH)2 ou -C(O)OH; R8é H ou C1-C4 alquila; cada p é independentemente selecionado de 1, 2, 3, 4, 5 e 6, e q é 1, 2, 3 ou 4, com a condição que quando R3 for -OR8, R1 seja - C(R5)2OH, -L1R5, -L1R6, -L2R5, -L2R6, -OL2R5, ou -OL2R6, em que R6 é -CF2P(O)(OH)2 e R7é -CF2P(O)(OH)2.
[000145] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1é C1-C6 alquila; R2é C1-C6 alquila; R3é -OL3R5 ou -OL3R7; R5é - P(O)(OH)2; R7é -CF2P(O)(OH)2, e L3é C1-C6 alquileno.
[000146] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1é C1-C6 alquila; R2é C1-C6 alquila; R3é -OL3R5 ou -OL3R7; R5é - P(O)(OH)2; R7é -CF2P(O)(OH)2; L3é -((CR4R4)pO)q(CH2)p-; R4é H; q é 1 ou 2, e p é 2.
[000147] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1é -L2R6; R2é C1-C6 alquila; R3é -OL3R5 ou -OL3R7; R5é - P(O)(OH)2; R6é -C(O)OH; R7é -CF2P(O)(OH)2; L2é C1-C6 alquileno, e L3é C1-C6 alquileno.
[000148] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1é -L2R6; R2 é C1-C6 alquila; R3 é -OL3R5 ou -OL3R7; R5 é - P(O)(OH)2; R6é -C(O)OH; R7é -CF2P(O)(OH)2; L2é C1-C6 alquileno; L3é -((CR4R4)pO)q(CH2)p-; R4é H; q é 1 ou 2, e p é 2.
[000149] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1é -C(R5)2OH, -L1R5, -L2R5 ou -L1R6; R2é C1-C6 alquila; R3é -OR8; R8é C1-C6 alquila; R5é -P(O)(OH)2; R6é -CF2P(O)(OH)2; L1é -C(O)-, e L2é C1-C6 alquileno ou C2-C6 alquenileno, cada opcionalmente substituído com 1 a 4 grupos flúor.
[000150] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1 é C1-C6 alquila; R2 é C1-C6 alquila; R3 é -OL3L4R5 - OL3L4 L3R5, ou -OL3L4 L3R7; R5 é -P(O)(OH)2; R7 é -CF2P(O)(OH)2; cada L3 é independentemente um C1-C6 alquileno, e L4 é fenileno.
[000151] Em certas modalidades de tais compostos da Fórmula (I), R1 é C1-C6 alquila; R2 é C1-C6 alquila; R3 é -C(R5)2OH ou -L1R5; R5 é -P(O)(OR9)2, e L1 é -C(O)- ou -O-.
[000152] Em certas modalidades dos compostos acima mencionados da Fórmula (I), R8 é metila. Em certas modalidades dos compostos acima mencionados da Fórmula (I), R1 é metila. Em certas modalidades dos compostos acima mencionados da Fórmula (I), R2 é metila.
[000153] Em outras modalidades dos compostos da Fórmula (I), R5é -P(O)(O-X+)2 ou -P(O)(O-)2X2+; R6é -CF2P(O)(O-X+)2, -CF2P(O)(O-)2X2+ ou -C(O)O-X+, e R7é -CF2P(O)(O-X+)2, -CF2P(O)(O-)2X2+ ou -C(O)O-X+, em que X+ e X2+são cátions farmaceuticamente aceitáveis. Em certas modalidades, tais cátions farmaceuticamente aceitáveis são selecionados de sódio, potássio, cálcio, zinco, e magnésio.
[000154] Em certas modalidades dos compostos da Fórmula (I), R5é -PO3-X3+; R6é -CF2PO3-X3+, e R7é -CF2PO3-X3+, em que X3+é Al3+.
[000155] Adjuvantes contendo alumínio, tais como hidróxido de alumínio, oxi-hidróxido de alumínio e hidroxifosfato de alumínio, são usados em vacinas para ligar antígenos. Um debate de adjuvantes contendo alumínio e seu uso em vacinas é dado em Expert Rev. Vaccines, 46(5), 2007, 685-698 e Vaccines, 25, 2007, 6618-6624, as revelações destas são aqui incorporadas por meio de referências em sua totalidade.
[000156] Compostos da Fórmula (I) fornecidos aqui são agonistas de TLR7 que ligam aos adjuvantes contendo alumínio, tais como, por via de exemplo apenas, hidróxido de alumínio, oxi-hidróxido de alumínio e hidroxifosfato de alumínio. Em certas modalidades, tais compostos da Fórmula (I) têm um grupo fosfato, um ácido fosfônico, um fosfonato, um ácido fosfônico fluorado ou um fosfonato fluorado. Embora em outras modalidades, tais compostos da Fórmula (I) tenham um grupo fosfato, um ácido fosfônico, um fosfonato, um ácido fosfônico fluorado ou fosfonato fluorado, e um ou mais grupos ionizáveis adicionais selecionados de um ácido carboxílico e sulfato.
[000157] Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I) fornecidos aqui são combinados com um antígeno, um adjuvante contendo alumínio, e opcionalmente um veículo, excipiente farmaceuticamente aceitável, para fornecer uma composição imunogênica. Em outras modalidades, tal composição imunogênica compreende um composto da Fórmula (I) e um antígeno, em que o antígeno inclui, mas não é limitado a, um antígeno bacteriano, um antígeno viral, um antígeno fúngico, um antígeno de tumor, ou um antígeno associado com um DST, Alzheimer, distúrbios respiratórios, distúrbios autoimunes tais como, por via de exemplo apenas, artrite reumatoide ou lúpus, distúrbios pediátricos e obesidade, e em que a quantidade do composto é uma quantidade efetiva para intensificar uma resposta imune ao antígeno em um sujeito a quem é administrada a composição. Antígenos adequados para o uso em tais composições imunogênicas são descritos aqui.
[000158] Em certas modalidades, tais composições imunogênicas incluem um antígeno bacteriano de uma cepa de Neisseria meningitides, tal como sorogrupo A, C, W135, Y e/ou B. Antígenos específicos para o uso nestas composições são descritos aqui. Em outras modalidades, tais composições imunogênicas, e similares fornecidos aqui, são usadas como vacinas; seu uso no tratamento de distúrbios associados com o antígeno incluído na composição é descrito aqui.
[000159] Os compostos da Fórmula (I), sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isômeros dos mesmos, e as composições farmacêuticas fornecidas aqui também incluem todas as variações isotópicas adequadas de tais compostos, e sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isômeros dos mesmos, e composições farmacêuticas. Uma variação isotópica de um composto fornecido aqui ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo é definida como um em que pelo menos um átomo é substituído por um átomo que usualmente tem o mesmo número atômico mas uma massa atômica diferente da massa atômica encontrado na natureza. Exemplos de isótopos que podem ser incorporados nos compostos fornecidos aqui e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos incluem mas não são limitados a isótopos de hidrogênio, carbono, nitrogênio e oxigênio tais como 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 15N, 17O, 18O, 35S, 18F, 36Cl e 123I. Certas variações isotópicas dos compostos fornecidos aqui e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, por exemplo, aqueles em que um isótopo radioativo tal como 3H ou 14C é incorporado, são úteis em estudos distribuição de fármaco e/ou substrato tecidual. Em exemplos particulares, os isótopos 3H e 14C podem ser usados para sua facilidade de preparação e detectabilidade. Em outros exemplos, substituição com isótopos tais como 2H pode fornecer certas vantagens terapêuticas resultantes de maior estabilidade metabólica, tal como requerimentos de meia-vida in vivo aumentada ou de dosagem reduzida. Variações isotópicas dos compostos, e sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isômeros dos mesmos, e composições farmacêuticas fornecidas aqui são preparadas por meio de procedimentos convencionais usando variações isotópicas apropriadas de reagentes adequados.
PROCESSOS PARA FAZER OS COMPOSTOS DA FÓRMULA (I)
[000160] Procedimentos gerais para preparar os compostos da Fórmula (I) são descritos nos Exemplos, infra. Nas reações descritas, grupos funcionais reativos, por exemplo grupos hidróxi, amino, imino, tio ou carbóxi onde estes orem desejados no produto final, podem ser protegidos para evitar sua participação indesejada nas reações. Grupos de proteção convencionais podem ser usados de acordo com a prática padrão (vide por exemplo, T.W. Greene e P. G. M. Wuts em "Protective Groups in Organic Chemistry", John Wiley and Sons, 1991).
[000161] Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I) fornecidos aqui são preparados como um sal de adição de ácido farmaceuticamente aceitável reagindo a forma de base livre do composto da Fórmula (I) com um ácido orgânico farmaceuticamente aceitável ou ácido inorgânico. Em outras modalidades, um sal de adição de base farmaceuticamente aceitável dos compostos da Fórmula (I) fornecidos aqui é preparado reagindo a forma de ácido livre do composto da Fórmula (I) com uma base orgânica ou base inorgânica farmaceuticamente aceitável. Alternativamente, a forma de sal dos compostos da Fórmula (I) fornecidos aqui é preparada usando sais dos materiais de partida ou intermediários. Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I) fornecidos aqui são na forma de outros sais incluindo, mas não limitados a, oxalatos e trifluoroacetatos. Em certas modalidades, hemissais de ácidos e bases são formados, por exemplo, sais de hemissulfato e de hemicálcio.
[000162] Tais sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis dos compostos da Fórmula (I) incluem, mas não são limitados a, um bromidrato, cloridrato, sulfato, nitrato, succinato, maleato, formato, acetato, adipato, besilato, bicarbonato/carbonato, propionato, fumarato, citrato, tartarato, lactato, benzoato, salicilato, glutamato, aspartato, p-toluenossulfonato, benzenossulfonato, metanossulfonato, etanossulfonato, naftalenossulfonato (por exemplo, 2- naftalenossulfonato), sal de hexanoato, bissulfato/sulfato, borato, cansilato, ciclamato, edisilato, esilato, gluceptato, gluconato, glucuronato, hexafluorofosfato, hibenzato, cloridrato/cloreto, bromidrato/brometo, hidroiodeto/iodeto, isetionato, lactato, malato, malonato, mesilato, metilsulfato, naftilato, 2-napsilato, nicotinato, orotato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfato/di-hidrogeno fosfato/hidrogeno fosfato, piroglutamato, sacarato, estearato, tanato, tosilato, trifluoroacetato e sais de xinofoato.
[000163] O ácido orgânico ou ácidos inorgânicos usados para formar certos sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis dos compostos da Fórmula (I) incluem, mas não são limitados a, ácido hidrobrômico, clorídrico, sulfúrico, nítrico, fosfórico, succínico, maleico, fórmico, acético, propiônico, fumárico, cítrico, tartárico, láctico, benzóico, salicílico, glutâmico, aspártico, p-toluenossulfônico, benzenossulfônico, metanossulfônico, etanossulfônico, naftalenossulfônico tal como 2-naftalenossulfônico, ou hexanoico.
[000164] Tais sais de adição de base farmaceuticamente aceitável de um composto da Fórmula (I) incluem, mas não são limitados a, sais de alumínio, arginina, benzatina, cálcio, colina, dietilamina, diolamina, glicina, lisina, magnésio, meglumina, olamina, potássio, sódio, trometamina e de zinco.
[000165] Em certas modalidades, as formas de ácido livre ou de base livre dos compostos da Fórmula (I) fornecidas aqui são preparadas do sal de adição de base correspondente ou sal de adição de ácido, respectivamente. Por exemplo um composto da Fórmula (I) em uma forma de sal de adição de ácido é convertido na base livre correspondente tratando com uma base adequada (por via de exemplo apenas, uma solução de hidróxido de amônio, um hidróxido de sódio, e outras). Por exemplo, um composto da Fórmula (I) em uma forma de sal de adição de base é convertido no ácido livre correspondente tratando com um ácido adequado (por via de exemplo apenas, ácido clorídrico).
[000166] Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I) na forma não-oxidada são preparados de N-óxidos dos compostos da Fórmula (I) tratando com um agente redutor (por via de exemplo apenas, enxofre, dióxido de enxofre, trifenil fosfina, boroidreto de lítio, boroidreto de sódio, tricloreto de fósforo, tribrometo, ou outros) em um solvente orgânico inerte adequado (por via de exemplo apenas, acetonitrila, etanol, dioxano aquoso, ou outros) a 0 a 80°C.
[000167] Em certas modalidades, os derivados de profármaco dos compostos da Fórmula (I) são preparados usando métodos conhecidos àqueles de habilidade usual na técnica (por exemplo, para mais detalhes vide Saulnier et al., (1994), Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, pág. 1985). Por exemplo, profármacos apropriados são preparados reagindo um composto não-derivatizado da Fórmula (I) com um agente de carbamilação adequado (por via de exemplo apenas, 1,1-aciloxialquilcarbanocloridato, carbonato de para- nitrofenila, ou outros).
[000168] Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I) são preparados como derivados protegidos usando os métodos conhecidos àqueles de habilidade usual na técnica. Uma descrição detalhada das técnicas aplicáveis à criação de grupos de proteção e sua remoção pode ser encontrada em T. W. Greene, "Protecting Groups in Organic Chemistry", 3a edição, John Wiley and Sons, Inc., 1999.
[000169] Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I) são preparados ou formados, como solvatos (por exemplo, hidratos). Em certas modalidades, os hidratos dos compostos da Fórmula (I) são preparados por meio de recristalização de uma mistura de solvente aquoso/orgânico, usando solventes orgânicos tais como dioxina, tetraidrofurano ou metanol.
[000170] Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I) são preparados como seus estereoisômeros individuais. Em outras modalidades, os compostos da Fórmula (I) fornecidos aqui são preparados como seus estereoisômeros individuais reagindo uma mistura racêmica do composto com um agente solucionador opticamente ativo para formar um par de compostos diastereoisoméricos, separando os diastereômeros e recuperando os enantiômeros opticamente puros. Em certas modalidades, a resolução dos enantiômeros é realizada usando derivados diastereoméricos covalentes dos compostos da Fórmula (I), ou usando complexos dissociáveis (por exemplo, sais diastereoméricos cristalinos). Diastereômeros têm propriedades físicas distintas (por exemplo, pontos de fundição, pontos de ebulição, solubilidade, reatividade, etc.) e são facilmente separados tirando vantagem destas dessemelhanças. Em certas modalidades, os diastereômeros são separados por meio de cromatografia, ou por meio de técnicas de separação/resolução com base nas diferenças na solubilidade. O enantiômero opticamente puro é depois recuperado, junto com o agente solucionador, por qualquer meio prático que não resultasse em racemização. Uma descrição mais detalhada das técnicas aplicáveis à resolução dos estereoisômeros dos compostos de sua mistura racêmica pode ser encontrada em Jean Jacques, Andre Collet, Samuel H. Wilen, "Enantiomers, Racemates e Resolutions", John Wiley and Sons, Inc., 1981.
[000171] Compostos da Fórmula (I) são feitos por processos descritos aqui e como ilustrados nos Exemplos. Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I) são feitos por: (a) opcionalmente convertendo um composto da Fórmula (I) em um sal farmaceuticamente aceitável; (b) opcionalmente convertendo uma forma de sal de um composto da Fórmula (I) para uma forma de não-sal; (c) opcionalmente convertendo uma forma não-oxidada de um composto da Fórmula (I) em um N-óxido farmaceuticamente aceitável; (d) opcionalmente convertendo uma forma de N-óxido de um composto da Fórmula (I) para sua forma não-oxidada; (e) opcionalmente solucionando um isômero individual de um composto da Fórmula (I) de uma mistura de isômeros; (f) opcionalmente convertendo um composto não- derivatizado da Fórmula (I) em um derivado de profármaco farmaceuticamente aceitável; e (g) opcionalmente convertendo um derivado de profármaco de um composto da Fórmula (I) para sua forma não-derivatizada. Exemplos não-limitativos de esquemas sintéticos usados para fazer os compostos da Fórmula (I) fornecidos aqui são ilustrados nos esquemas de reação (I)-(XI).
[000172] Esquema (I) ilustra a síntese de benzonaftiridinas (I-3) acoplando ácidos 2-(terc-butoxicarbonilamino)fenilborônicos (I-1) com derivados de 3-halopicolinonitrila (I-2) na presença de um catalisador de paládio. Por via de exemplo apenas, a metade de halo dos derivados de 3-halopicolinonitrila é bromo ou cloro. Os grupos RA e RB nas benzonaftiridinas (I-3) são como descritos aqui para os substituintes da Fórmula (I) nas respectivas posições, ou RA e RB são grupos que são ainda modificados para obter os respectivos substituintes da Fórmula (I), como descritos aqui. ESQUEMA (I)
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[000173] Em certas modalidades, os ácidos fenil borônicos usados na síntese dos compostos da Fórmula (I) foram sintetizados de acordo com o esquema (II). No esquema (II), anilina (II-1) é Boc-protegida sob condições básicas para dar (II-2), e depois convertida nos ácidos borônico (I-1) por meio de orto-litiação e reação com borato de trimetila seguido por processamento aquoso. ESQUEMA (II)
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[000174] Ácidos bóricos (I-1) são usados como no esquema (I) e reagidos com cianopiridinas (I-2) para fornecer benzonaftiridinas (I-3).
[000175] Em certas modalidades, equivalentes de ácido borônico incluindo, mas não limitado a, ésteres de boronato foram usados na síntese dos compostos da Fórmula (I). Esquema (III) ilustra a síntese de tais ésteres de boronato (III-3) que foram usados como equivalentes de ácido borônico na síntese de benzonaftiridinas (I-3). No esquema (III) 2-haloanilinas (III-1) foram Boc-protegidas sob condições básicas para dar (III-2) que foi depois convertido nos ésteres de boronato (III-3) usando catálise mediada por paládio. Estes ésteres de boronato (III-3) foram usados como no esquema (I) e reagidos com as cianopiridinas (I-2) para render benzonaftiridinas substituídas ou não-substituídas (I-3). ESQUEMA (III)
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[000176] Em certas modalidades, as 2-bromoanilinas usadas como no esquema (III) foram sintetizadas de seus compostos de nitrobenzeno correspondentes como ilustrado abaixo:
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[000177] Em outras modalidades, os compostos da Fórmula (I) foram sintetizados usando as metodologias descritas no esquema (IV). ESQUEMA (IV)
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[000178] No esquema (IV), 3-clorobenzaldeído (IV-1) é primeiro convertido na hidroxilamina correspondente (IV-2) que é depois usada para fazer a nitrila correspondente (IV-3). Usando condições mediadas por paládio, como no esquema (I), derivados de nitrila (IV-3) são acoplados com ácidos borônicos (I1) (ou ésteres de boronato (III-3) para dar a benzonaftiridina (I-3).
[000179] Em outras modalidades, certos compostos da Fórmula (I) tendo substituintes ligados ao carbono, incluindo benzonaftiridinas com vários substituintes ligados ao carbono na posição 2, foram preparados usando a rota sintética mostrada no esquema (V). ESQUEMA (V)
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[000180] No esquema (V), uma 3,5-dialopicolinonitrila, tal como, por via de exemplo apenas, 3,5-dicloropicolinonitrila (V-1), é primeiro monossubstituída usando um equivalente de ácido/éster borônico assim dando a picolinonitrila correspondente (V-2). Usando condições mediadas por paládio mais vigorosas como no esquema (I), os derivados de nitrila (V-2) são acoplados com ácidos borônicos (I-1) (ou ésteres de boronato (III-3)) para dar a benzonaftiridina (V-3) tendo substituintes ligados ao carbono na posição 2. Em certas modalidades, o substituinte ligado ao carbono é um alqueno, enquanto em outras modalidades tais alquenos são ainda modificados por hidrogenação para dar benzonaftiridinas com grupos alquila na posição 2.
[000181] Em outras modalidades, certos compostos da Fórmula (I) tendo vários substituintes, incluindo benzonaftiridinas com vários substituintes na posição 2, foram sintetizados usando as metodologias descritas no esquema (VI). ESQUEMA (VI)
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[000182] No esquema (VI), umas 2,3-dialopiridinas substituídas na posição 5 (VI-1), tais como, por via de exemplo apenas, (5,6- dicloropiridin-3-il)metanol, são convertidas primeiro na nitrila correspondente (VI-2). Usando condições mediadas por paládio como no esquema (I), os derivados de nitrila (VI-2) são acoplados com os ácidos borônico (I-1) (ou ésteres de boronato (III-3)) para dar a benzonaftiridina (I-3).
[000183] Em outras modalidades, certos compostos da Fórmula (I) foram sintetizados usando as metodologias descritas no esquema (VII). ESQUEMA (VII)
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[000184] No esquema (VII), os brometos de arila ou iodetos de arila (VII-1) são acoplados com trietil(etinil)silano (ou seus equivalentes) usando condições mediadas por paládio para render (VII-2). Após desproteção do grupo de proteção de silila, os derivados de acetileno (VII-3) são acoplados com 3,5-dicloropicolinonitrila (VII-4) usando condições mediadas por paládio para fornecer 3-cloro-2-cianopiridinas (VII-5). Derivados de (VII-5) tais como, por via de exemplo apenas, 3- cloro-5-(feniletinil)picolinonitrila, são acoplados com ácidos borônicos (I-1) (ou ésteres de boronato (III-3)) para dar a benzonaftiridina (VII-6). Composto (VII-6) é depois submetido sob condições de hidrogenação para dar benzonaftiridinas (VII-7). R2 é como descrito aqui e os grupos RA e RB nas benzonaftiridinas (VII-7) são como descritos aqui para os substituintes da Fórmula (I) nas respectivas posições, ou RA e RB são grupos que são ainda modificados para obter os respectivos substituintes da Fórmula (I), como descritos aqui.
[000185] Em outras modalidades, certos compostos da Fórmula (I) foram sintetizados usando as metodologias descritas no esquema (VIII). ESQUEMA (VIII)
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[000186] No esquema (VIII), os brometos de arila ou iodetos de arila (VIII-1) são acoplados com trietil(etinil)silano (ou seus equivalentes) usando condições mediadas por paládio para render (VIII-2). Após desproteção do grupo de proteção de silila, os derivados de acetileno (VIII-3) são acoplados com 3,5-dicloropicolinonitrila (VIII-4) usando condições mediadas por paládio para fornecer 3-cloro-2-cianopiridinas (VIII-5). Derivados de (VIII-5) tais como, por via de exemplo apenas, 3- cloro-5-(feniletinil)picolinonitrila são reduzidos na 3-cloro-5- fenetilpicolinonitrila correspondente (VIII-6) sob condições de hidrogenação. Composto (VIII-6) é acoplado com os ácidos borônicos (I-1) (ou ésteres de boronato (III-3)) para dar benzonaftiridinas (VIII-7). R2 é como descrito aqui e os grupos RA e RB nas benzonaftiridinas (VII-7) são como descritos aqui para os substituintes da Fórmula (I) nas respectivas posições, ou RA e RB são grupos que são ainda modificados para obter os respectivos substituintes da Fórmula (I), como descritos aqui.
[000187] Em outras modalidades, certos compostos da Fórmula (I) foram sintetizados usando as metodologias descritas no esquema (IX). ESQUEMA (IX)
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[000188] No esquema (IX), o composto (IX-1) carregando um grupo fenol é alquilado com vários eletrófilos onde R1, R2, L1, L3, L4, R5 e R7 são como definidos aqui. Em certos exemplos, análogos contendo apêndices de alcóxi na posição de fenol foram preparados como exemplificado no Esquema 1, em que um composto carregando um grupo fenol foi alquilado com um eletrófilo contendo fosfonato para dar um fosfonato protegido que foi tratado com um agente de desproteção adequado para fornecer o ácido fosfônico.
[000189] Os exemplos fornecidos aqui são oferecidos para ilustrar, mas não limitar, os compostos da Fórmula (I) fornecidos aqui, e a preparação de tais compostos. Por via de exemplo apenas, certos compostos da Fórmula (I) contendo apêndices de ácido carboxílico na posição C-8 foram posição foram preparados como exemplificado no Esquema 2.
[000190] Por via de exemplo apenas, certos compostos da Fórmula (I) contendo apêndices de ácido fosfônico de α,α’-difluroro na posição C-8 foram preparados como exemplificado no Esquema 3, em que um álcool primário foi oxidado em um aldeído e alquilação deste aldeído com o reagente de fosfonato apropriado rendeu um fosfonato. Adicionalmente, oxidação do álcool benzílico deu a metade de ceto e hidrólise final deu o derivado de ácido fosfônico final.
[000191] Por via de exemplo apenas, certos compostos da Fórmula (I) contendo apêndices de ácido fosfônico na posição C-8 foram preparados como mostrado no Esquema 4, em que um aldeído foi tratado com um reagente de Wittig para fornecer um fosfonatos de vinila. Hidrólise de fosfonato com, por via de exemplo apenas, brometo de trimetilsilila libera um ácido fosfônico. Alternativamente, hidrogenação da metade de vinila forneceu um fosfonato ligado à alquila que foi hidrolisado para dar um ácido fosfônico ligado à alquila.
[000192] Por via de exemplo apenas, certos compostos da Fórmula (I) contendo grupos fosfato de arila foram preparados de acordo com o Esquema 5, em que um composto carregando um grupo fenol foi tratado com 1-(bromometil)-3-iodobenzeno e carbonato de césio resultando em um intermediário que foi submetido ao acoplamento cruzado catalisado por paládio com fosfoato de trietila, seguido por hidrólise com brometo de trimetilsilila que dá um composto carregando um ácido fosfônico.
[000193] Por via de exemplo apenas, certos compostos da Fórmula (I) contendo apêndices de ácido α-ceto fosfônico na posição C-8 são preparados como exemplificado no Esquema 6, em que o tratamento de um aldeído com tris(trimetilsilil)fosfito seguido por oxidação com IBX resultou no ácido fosfônico.
FARMACOLOGIA E UTILIDADE
[000194] Quando um antígeno estranho desafia o sistema imune que responde lançando uma resposta protetora que é caracterizada pela interação coordenada de ambos os sistemas imunes inatos e adquiridos. Estes dois sistemas interdependentes cumprem dois requerimentos mutuamente exclusivos: velocidade (contribuída pelo sistema inato) e especificidade (contribuída pelo sistema adaptativo).
[000195] O sistema imune inato serve como a primeira linha de defesa contra patógenos invasores, mantendo o patógeno sob verificação enquanto as respostas adaptáveis são amadurecidas. É desencadeado dentro de minutos de infecção em uma maneira antígeno-independente, respondendo aos padrões amplamente conservados nos patógenos (entretanto não é não-específico, e pode distinguir entre auto e patógenos). Crucialmente, isto também gera o ambiente inflamatório e coestimulante (às vezes referido como o sinal de perigo) que potencializa o sistema imune adaptável e guia (ou polariza) as respostas celulares ou humorais mais apropriadas para combater o agente infeccioso. O desenvolvimento de moduladores de TLR para visamento terapêutico de imunidade inata foi revisado (vide Nature Medicine, 2007, 13, 552-559; Drug Discovery Today: Therapeutic Strategies, 2006, 3, 343-352 e Journal of Immunology, 2005, 174, 1259-1268).
[000196] A resposta adaptável fica efetiva durante dias ou semanas, mas por fim fornece a especificidade antigênica boa requerida para eliminação completa do patógeno e a geração da memória imunológica. É principalmente mediada por células T e B que sofreram rearranjo gênico de linhagem germinal e são caracterizadas por especificidade e memória duradoura. Porém, isto também envolve o recrutamento de elementos do sistema imune inato, incluindo fagócitos profissionais (macrófagos, neutrófilos etc.) e granulócitos (basófilos, eosinófilos etc.) que engolfam bactérias e até mesmo parasitas protozoários relativamente grandes. Uma vez uma resposta imune adaptável amadureceu, exposição subsequente ao patógeno resulta em sua eliminação rápida devido às células de memória altamente específicas geradas que são rapidamente ativadas sob exposição subsequente a seu antígeno cognato.
[000197] Doenças autoimunes são definidas por (I) resposta humoral ou de autoanticorpos a um autoantígeno (por via de exemplo apenas, o hipertireoidismo primário de Grave com anticorpos para o receptor de TSH), ou (ii) resposta celular em que as células imunes destroem as células não-imunes das quais o autoantígeno é derivado (por via de exemplo apenas, o tirócito (tiroidite de Hashimoto) ou célula da ilhota β pancreática (diabetes Tipo 1). Muitas doenças autoimunes são uma combinação de ambos os fenômenos, por exemplo, Hashimoto e diabetes Tipo 1 também têm autoanticorpos, antitiroide peroxidase (TPO) ou antiácido glutâmico descarboxilase (GAD)/ Célula da Ilhota. Doenças autoimunes frequentemente têm um componente inflamatório incluindo, mas não limitado a, aumento nas moléculas de adesão (por via de exemplo apenas, molécula-1 de adesão de célula vascular (VCAM-1), e adesão de leucócito alterada para a vasculatura tal como, por via de exemplo apenas, colite, lúpus sistêmico, esclerose sistêmica, e as complicações vasculares de diabetes.
[000198] Receptores Toll-símiles (TLRs) são proteínas de transmembrana do tipo I caracterizadas por um domínio de repetição rico em leucina (LRR) N-terminal, seguido por uma região rica em cisteína, um domínio de TM, e uma cauda intracelular (citoplásmica) contendo uma região conservada chamada o domínio do receptor de Toll/IL-1 (TIR). TLRs são receptores de reconhecimento de padrão (PRR) que são expressados predominantemente em células imunes incluindo, mas não limitadas a, células dendríticas, linfócitos T, macrófagos, monócitos e células assassinas naturais. O domínio de LLR é importante para ligação do ligante e sinalização associada e é uma característica comum dos PRRs. O domínio de TIR é importante nas interações de proteína-proteína e está associado com imunidade inata. O domínio de TIR também une uma superfamília maior de IL-1 R/TLR que é composta de três subgrupos. Os membros do primeiro grupo possuem domínios da imunoglobina em suas regiões extracelulares e incluem receptores de IL-1 e IL-18 e proteínas auxiliares como também ST2. O segundo grupo abrange os TLRs. O terceiro grupo inclui proteínas adaptadoras intracelulares importantes para a sinalização.
[000199] TLRs são um grupo de receptores de reconhecimento de padrão que ligam padrões moleculares associados ao patógeno (PAMPs) de bactérias, fungos, protozoários e vírus, e atua como uma primeira linha de defesa contra os patógenos invasores. TLRs são essenciais para induzir expressão de genes envolvidos nas respostas inflamatórias, e TLRs e o sistema imune inato são uma etapa crítica no desenvolvimento de imunidade adquirida antígeno-específica.
[000200] Imunidade adaptável (humoral ou mediada por célula) está associada com o mecanismo de sinal de TLR da imunidade inata. Imunidade inata é uma resposta protetora de célula imune que funciona rapidamente para combater insultos ambientais incluindo, mas não limitados a, agentes bacterianos ou virais. Imunidade adaptável é uma resposta mais lenta que envolve diferenciação e ativação dos linfócitos T ingênuos em tipos de células T auxiliares 1 (Th1) ou T auxiliares 2 (Th2). Células de Th1 promovem principalmente imunidade celular, enquanto que as células de Th2 promovem principalmente imunidade humoral. Embora primariamente um sistema protetor hospedeiro, a expressão patológica dos sinais de imunidade inatos que emanam da via de TLR está implicada no início das doenças autoimunes-inflamatórias.
[000201] Todos os TLRs parecem funcionar como um homodímero ou heterodímero no reconhecimento de uns determinantes moleculares específicos, ou grupo de determinantes específicos, presentes em organismos patogênicos incluindo lipopolissacarídeos bacterianos de superfície da célula, lipoproteínas, flagelina bacteriana, DNA de bactérias e vírus e RNA viral. A resposta celular para ativação de TLR envolve ativação de um ou mais fatores de transcrição, conduzindo à produção e secreção de citocinas e moléculas coestimuladoras tais como interferonas, TNF, interleucinas, MIP-1 e MCP-1 que contribuem para a matança e depuração da invasão patogênica.
[000202] Expressão espacial de TLR é coincidente com a interface ambiental do hospedeiro. Enquanto apenas algumas outras proteínas Toll-símiles tenham sido clonadas em Drosophila, a família de TLR humana é composta de pelo menos 11 membros, TLR1 até TLR11, que suscitam respostas biológicas sobrepostas embora distintas devido às diferenças na expressão celular e vias de sinalização que elas iniciam. Cada um dos TLRs é expressado em um subconjunto diferente de leucócitos e cada um dos TLRs é específico em seus padrões de expressão e sensibilidades de PAMP e detecta subconjuntos diferentes de patógenos permitindo a vigilância cuidadosa pelo sistema imune.
RECEPTOR TOLL-SÍMILE 1 (TLR1)
[000203] TLR1 mapeia para o cromossomo 4p14 e sua sequência codifica uma proteína putativa de 786 aminoácidos (aa) com 18 LRRs N-terminais e um peso molecular calculado de 84 kDa. TLR1 está estritamente relacionado com TLR6 e TLR10 com 68% e 48% de identidade de sequência (aa) geral, respectivamente.
[000204] O mRNA de TLR1 é ubiquamente expresso e encontrado em níveis mais altos que os outros TLRs. Das populações de leucócitos principais, TLR1 é altamente expresso por meio de monócitos, mas é também expresso por macrófagos, células dendríticas, leucócitos polimorfonuclear, células B, T e NK. In vivo, duas transcrições de tamanho diferentes são observadas para TLR1 sugerindo que o mRNA seja alternativamente submetido a splicing para gerar duas formas diferentes da proteína. In vitro, expressão do mRNA e da proteína de TLR1 é suprarregulada em células monocíticas leucêmicas (THP-1) sob diferenciação induzida por PMA. Expressão de TLR1 é suprarregulada por meio de IL-6 autócrina, e é também elevada por IFN-Yβ, IL-10, e TNF-α. Porém, o nível de TLR1 não é afetado pela exposição às bactérias Gram-positivas e Gram- negativas. Ex vivo, expressão tanto dos monócitos como dos granulócitos de TLR1 é infrarregulada após exposição às bactérias Gram-negativas. TLR1 forma um heterodímero com TLR2. TLR1 também heterodimeriza-se com TLR4, que inibe a atividade de TLR4.
RECEPTOR TOLL-SÍMILE 2 (TLR2)
[000205] TLR2 mapeia para o cromossomo 4q31-32 e codifica uma proteína putativa de 784 (aa) com 19 LLRs N-terminais e um peso molecular calculado de 84 kDa. TLR2 está estritamente relacionado com TLR6 com 31% de identidade de sequência (aa) geral.
[000206] Expressão de mRNA de TLR2 é observada em tecidos do cérebro, coração, pulmão, e baço e é mais alta em PBLs, especificamente aqueles de origem mielomonocítica. In vivo, duas transcrições de tamanho diferentes são observadas para TLR2 sugerindo que o mRNA seja alternativamente submetido a splicing. In vitro, expressão do mRNA e da proteína de mRNA é suprarregulada em células monocíticas leucêmicas (THP-1) sob diferenciação induzida por PMA. TLR2 é suprarregulado por meio de IL-6 autócrina e TNF-α, IL-1β, e IL-10. Expressão de mRNA de TLR2 é elevada após exposição às bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. TLR2 forma heterodímeros com TLR1, TLR6, e possivelmente TLR10, onde cada complexo é particularmente sensível aos subconjuntos de PAMPs associados a TLR2. Complexos de TLR2 reconhecem uma gama extensiva de PAMPs, principalmente de bactérias. Estes incluem, mas não são limitados a, lipoarabinomanana (LAM), lipopolissacarídeo (LPS), ácido lipotecoico (LTA), peptidoglicano (PGN), e outros glicolipídeos, glicoproteínas, e lipoproteínas. Complexos de TLR2 são também capazes de detectar vírus, incluindo mas não limitados a, vírus do sarampo (MV), citomegalovírus humano (HCMV), e vírus da hepatite C (HCV) e PAMPs fúngicos, incluindo mas não limitados a, zimosan. TLR2 reconhece uma variedade de lipoproteínas/lipopeptídeos de vários patógenos tais como, por via de exemplo apenas, bactérias Gram-positivas, micobactérias, Trypanosoma cruzi, fungos e Treponema. Além disso, TLR2 reconhece preparações de LPS de não-enterobactéricas tais como, por via de exemplo apenas, Leptospira interrogans, Porphyromonas gingivalis e Helicobacter pylori. Complexos de TLR2 são capazes tanto de detecção de não-autopadrões como detecção de autopadrões alterados, tais como aqueles exibidos pelas células necróticas. TLR2 é recrutado para fagossomas e está envolvido na internalização de produtos microbianos por meio das células.
RECEPTOR TOLL-SÍMILE 3 (TLR3)
[000207] TLR3 mapeia para o cromossomo 4q35 e sua sequência codifica uma proteína putativa de 904 (aa) com 24 LRRs N-terminais e um peso molecular calculado de 97 kDa. TLR3 está estritamente relacionado com TLR5, TLR7, e TLR8, cada com 26% de identidade de sequência (aa) geral.
[000208] O mRNA de TLR3 é expressado em níveis mais altos na placenta e pâncreas. TLR3 é expressado por células dendríticas, células T e NK. In vivo, duas transcrições de tamanho diferentes são observadas para TLR3 sugerindo que o mRNA seja alternativamente submetido a splicing para gerar duas formas diferentes da proteína. In vitro, TLR3 de THP-1 diferenciado com PMA- é suprarregulado moderadamente por meio de IFN-Y autócrina, IL-1β, IL-6, IL-10, e TNF- α. O mRNA de TLR3 é elevado após exposição às bactérias Gram- negativas e para uma extensão até maior em resposta às bactérias Gram-positivas. Ex vivo, a expressão de TLR3 é elevada em monócitos e granulócitos sob exposição às bactérias Gram-negativas. TLR3 forma um homodímero e reconhece RNA bifilamentar viral (dsRNA). Embora seja em geral assumido que TLRs são expressados na superfície das células, porém aqueles TLRs sensíveis aos PAMPs internos, tais como dsRNA no caso de TLR3, são localizados intracelularmente no compartimento lisossomal. RECEPTOR TOLL-SÍMILE 4 (TLR4)
[000209] TLR4 mapeia para o cromossomo 9q32-33, e mostra um grau alto de similaridade a dToll na sequência inteira (aa). A sequência de TLR4 codifica uma proteína de 839 (aa) com 22 regiões de LRR N- terminais e um peso molecular calculado de 90 kDa. TLR4 está estritamente relacionado com TLR1 e TLR6 cada com 25% de identidade de sequência (aa) geral.
[000210] In vivo, o mRNA de TLR4 é expressado como uma transcrição simples, e encontrado em níveis mais altos no baço e PBLs. Das populações de PBL, TLR4 é expressado por células B, células dendríticas, monócitos, macrófagos, granulócitos, e células T. TLR4 é também expresso em células mielomonocíticas e é mais alto em células mononucleares. In vitro, a expressão do mRNA e da proteína de TLR4 é suprarregulada em células de THP-1 sob diferenciação induzida por PMA. TLR4 é suprarregulado moderadamente por meio de IFN-Y autócrina, IL-1β. Expressão do mRNA de TLR4 em células de THP-1 não é afetada por meio de exposição às bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. Ex vivo, granulócito, e monócito, a expressão de TLR4 é suprarregulada em exposição às bactérias Gram-negativas. TLR4 forma um homodímero e requer a associação extracelular de um componente adicional, MD-2. Embora complexos de TLR2 sejam capazes de reconhecer o lipopolissacarídeo (LPS), TLR4 é em geral considerado o receptor de LPS. Porém, homodímeros de TLR4 associados a MD-2 não se ligam diretamente ao LPS. LPS devem ser primeiro ligado pela proteína ligadora de LPS solúvel (LBP). LBP é depois ligado por CD14 solúvel ou ligado a GPI. Componentes adicionais dependentes do tipo celular requeridos para detecção de LPS por TLR4 incluem CXCR4, GDF-5, CD55, várias proteínas de choque térmico (HSPs), e receptores de complemento (CRs). O complexo de TLR4 também reconhece alguns outros PAMPs bacterianos incluindo LTA. Ainda, o complexo de TLR4 reconhece vírus incluindo vírus sincicial respiratório (RSV), vírus da hepatite C (HCV), e vírus tumoral mamário de camundongo (MMTV). O complexo de TLR4 pode também reconhecer ligantes endógenos, por exemplo, proteínas de choque térmico (HSP60 e HSP70), fibrinogênio, domínio A da fibronectina, oligossacarídeo de ácido hialurônico, sulfato de heparan, proteína A de tensoativo (SP-A), e β-defensinas. TLR4 também forma heterodímeros tanto com TLR5, que intensifica sua atividade, como também com TLR1, que inibe sua atividade.
RECEPTOR TOLL-SÍMILE 5 (TLR5)
[000211] TLR5 mapeia para o cromossomo 1q41-42, e o gene codifica uma proteína putativa de 858 (aa) com um peso molecular calculado de 91 kDa. Está estritamente relacionado com TLR3 com 26% de identidade de sequência de (aa) geral.
[000212] In vivo, mRNA de TLR5 é expressado como uma transcrição simples em ovário, próstata, e PBLs. TLR5 é expressado por meio de várias populações de PBL com a expressão mais alta encontrada em monócitos. TLR5 é também expresso no lado basolateral das células epiteliais intestinais e células endoteliais intestinais do compartimento subepitelial. In vitro, TLR5 é suprarregulado em células de THP-1 PMA-diferenciadas por meio de IL-6 autócrina, IL-10, e TNF-α, mas é também elevado por IFN-Yβ. Expressão de mRNA de TLR5 foi elevada após exposição às bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. Ex vivo, expressão de TLR5 de granulócitos e monócitos é infrarregulada sob exposição às bactérias Gram-negativas. TLR5 forma um homodímero como também um heterodímero com TLR4. Ambos os complexos funcionam para reconhecer a proteína Flagelina das bactérias flageladas. Expressão de TLR5 humano em células CHO confere resposta à flagelina, um constituinte monomérico dos flagelos bacterianos. Flagelina ativa as células epiteliais pulmonares para induzir produção de citocina inflamatória. Um polimorfismo de códon de terminação em TLR5 foi associado com suscetibilidade à pneumonia causada pela bactéria flagelada Legionella pneumophila.
RECEPTOR TOLL-SÍMILE 6 (TLR6)
[000213] TLR6 mapeia para o cromossomo 4p14, e a sequência de TLR6 codifica uma proteína de 796 (aa) contendo 20 motivos de LRR N-terminais com um peso molecular calculado de 91 kDa. TLR6 está estritamente relacionado com TLR1, TLR10, e TLR2 com 68%, 46%, e 31% de identidade de sequência de (aa) geral, respectivamente.
[000214] In vivo, transcrição de TLR6 é observada no timo, baço, e pulmão. Expressão de mRNA de TLR6 é mais alta em células B e monócitos. In vitro, expressão de mRNA de TLR6 é suprarregulada em células de THP-1 sob diferenciação induzida por PMA. TLR6 é suprarregulado moderadamente por meio de IFN-Y autócrino, IL-1β. Porém, a expressão de mRNA de TLR6 em células de THP-1 não é afetada pela exposição às bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. Ex vivo, expressão de TLR6 de monócitos e granulócitos é infrarregulada sob exposição às bactérias Gram-negativas. TLR6 forma um heterodímero com TLR2. Como TLR1, acredita-se que TLR6 especifica ou intensificar a sensibilidade de PAMP de TLR2 e contribua para suas capacidades de sinalização por meio de heterodimerização.
RECEPTOR TOLL-SÍMILE 7 (TLR7)
[000215] TLR7 mapeia para o cromossomo humano Xp22, e a sequência de TLR7 codifica uma proteína de 1049 (aa) contendo 27 LRRs N-terminais com um peso molecular calculado de 121 kDa. TLR7 está estritamente relacionado com TLR8 e TLR9 com 43% e 36% de identidade de sequência de (aa) geral, respectivamente.
[000216] In vivo, mRNA de TLR7 é expressado em pulmão, placenta, baço, linfonodo, e amígdala. Expressão de mRNA de TLR7 é mais alta em monócitos, células B, e células dendríticas plasmocitoide. In vitro, expressão de mRNA de TLR7 é suprarregulada em células de THP-1 sob diferenciação induzida por PMA. TLR7 é altamente suprarregulado pela exposição a IL-6 e em uma extensão ligeiramente menor por meio de IFN-y autócrino, IL-1β. Expressão de mRNA de TLR7 em células de THP-1 foi elevada após exposição às bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. Ex vivo, a expressão de TLR7 foi elevada após exposição às bactérias Gram-positivas e Gram-negativas em monócitos e a um grau maior em granulócitos. TLR7 é expressado no endossoma. O papel de TLR7 é detectar a presença de RNA unifilamentado "estranho" dentro de uma célula, como um meio para responder à invasão viral. TLR7 é uma proteína de modo estrutural altamente conservada que reconhece RNA unifilamentado rico em guanosina ou em uridina (ssRNA) de vírus tal como vírus da imunodeficiência humana, vírus da estomatite vesicular e vírus influenza.
RECEPTOR TOLL-SÍMILE 8 (TLR8)
[000217] TLR8 mapeia para o cromossomo Xp22, e a sequência de TLR8 codifica uma proteína de 1041 (aa) contendo 26 LRRs N- terminais com um peso molecular calculado de 120 kDa. TLR8 está estritamente relacionado com TLR7 e TLR9 com 43% e 35% de identidade de sequência de (aa) geral, respectivamente.
[000218] In vivo, mRNA de TLR8 é expressado em pulmão, placenta, baço, linfonodo, medula óssea, e PBLs, com expressão mais alta encontrada em células de origem mieloide, tais como monócitos, granulócitos e células dendríticas mieloides. In vitro, expressão de mRNA de TLR8 é suprarregulada em células de THP-1 sob diferenciação induzida por PMA. TLR8 é altamente suprarregulado por meio de IL-1β autócrino, IL-6, IL-10, e TNF-α, e é até mesmo mais intensificado por meio da exposição à IFN-Y. Expressão de mRNA de TLR8 em células de THP-1 foi elevada após exposição às bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. Ex vivo, expressão de TLR8 de monócitos aumenta enquanto a expressão de granulócitos diminui sob exposição às bactérias Gram-negativas. TLR8 é expressado no endossoma. O papel de TLR8 é detectar a presença de RNA unifilamentado "estranho" dentro de uma célula, como um meio para responder a invasão viral. TLR8 é uma proteína de modo estrutural altamente conservada que reconhece RNA unifilamentado rico em guanosina ou em uridina (ssRNA) de vírus tal como vírus da imunodeficiência humana, vírus da estomatite vesicular e vírus influenza.
RECEPTOR TOLL-SÍMILE 9 (TLR9)
[000219] TLR9 mapeia para o cromossomo 3p21, e a sequência de TLR9 codifica uma proteína de 1032 (aa) contendo 27 LRRs N- terminais com um peso molecular calculado de 116 kDa. TLR9 está estritamente relacionado com TLR7 e TLR8 com 36% e 35% de identidade de sequência de (aa) geral, respectivamente.
[000220] In vivo, mRNA de TLR9 é expressado em baço, linfonodo, medula óssea, e PBLs. Especificamente, mRNA de TLR9 é expressado aos níveis mais altos em células B e células dendríticas. In vitro, TLR9 é suprarregulado moderadamente por meio de IFN-Y autócrino, IL-1β, IL-6, IL-10, e TNF-α em células de THP-1 diferenciadas em PMA. Expressão de mRNA de TLR9 em células de THP-1 não é afetada pela exposição às bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. Ex vivo, a expressão de TLR9 em monócitos e particularmente em granulócitos é infrarregulada em resposta às bactérias Gram-negativas. TLR9 forma um homodímero e reconhece DNA bacteriano não-metilado. TLR9 está envolvido na resposta inflamatória para o DNA bacteriano e oligonucleotídeos contendo sequências de DNA de CpG não-metilado. TLR9 esta localizado internamente, talvez em compartimentos lisossômicos ou endocíticos onde mais provavelmente encontraria PAMPs incluindo sequências de DNA de CpG não-metilado.
[000221] TLR9 é um receptor para DNA de CpG, e reconhece o DNA de CpG bacteriano e viral. DNA bacteriano e viral contém motivos de CpG não-metilado que conferem sua atividade imunoestimulante. Em vertebrados, a frequência dos motivos de CpG é severamente reduzida e os resíduos de citosina dos motivos de CpG são altamente metilados, conduzindo à ab-rogação da atividade imunoestimulante. Estruturalmente, há pelo menos dois tipos de DNA de CpG: DNA de CpG do tipo B/K é um indutor potente de citocinas inflamatórias tais como IL-12 e TNF-α; DNA de CpG do tipo A/D tem uma maior habilidade para induzir produção de IFN-α de células dendríticas plasmacitoide (PDC). TLR9 está também envolvido em patogênese de distúrbios autoimunes, e pode ser importante no hipertiroidismo autoimune de Graves e produção de fator reumatoide por meio de células B autorreativas. Similarmente, a internalização pelo receptor Fc pode causar indução de PDC mediada por TLR9 de IFN-α por complexos imunes contendo IgG e cromatina, que estão implicados na patogênese de lúpus sistêmico eritematoso (SLE). TLR9 está envolvido na patogênese de várias doenças autoimunes por meio de reconhecimento da estrutura da cromatina.
RECEPTOR TOLL-SÍMILE 10 (TLR10)
[000222] A sequência de TLR10 codifica uma proteína putativa de 811 (aa) com peso molecular de 95 kDa. TLR10 está estritamente relacionado com TLR1 e TLR6 com 48% e 46% de identidade de (aa) geral, respectivamente.
[000223] In vivo, expressão de mRNA de TLR10 é mais alta em tecidos relacionados ao sistema imune incluindo baço, linfonodo, timo, e amígdala. O mRNA de TLR10 é altamente expresso em células B e células dendríticas plasmacitoides (PDCs). In vitro, TLR10 é suprarregulado moderadamente por meio de IFN-Y autócrino, IL-1β, IL- 6, IL-10, e TNF-α em células de THP-1 diferenciadas em PMA. Expressão de mRNA de TLR10 em células de THP-1 foi elevada após exposição às bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. Ex vivo, expressão de TLR10 de monócitos aumenta, enquanto a expressão de granulócitos diminui sob exposição às bactérias Gram-negativas.
RECEPTOR TOLL-SÍMILE 11 (TLR11)
[000224] TLR11 é expressado em células epiteliais da bexiga e medeia a resistência à infecção por meio das bactérias uropatogênicas em camundongo.
[000225] Como apresentado acima, TLR2 e TLR4 reconhecem os produtos da parede de células bacterianas Gram-positivas e Gram- negativas, respectivamente; TLR5 reconhece um epítopo estrutural de flagelina bacteriana; TLR3, TLR7, TLR8, e TLR9 reconhecem as diferentes formas do ácido nucleico derivado de micróbio.
[000226] Os domínios de TIR interagem com várias moléculas de adaptador contendo domínio de TIR (MyD88), proteína de adaptador contendo domínio de TIR (TIRAP), IFN-β de indução de adaptador contendo domínio TIR (TRIF), e molécula de adaptador relacionada a TRIF (TRAM) que ativa uma cascata de eventos resultando na indução do fator de transcrição.
VIAS DE SINALIZAÇÃO DO TLR.
[000227] TLRs estão distribuídos ao longo da célula. TLR1, TLR2, TLR3 e TLR4 são expressados na superfície da célula, enquanto que, TLR3, TLR7, TLR8 e TLR9 são expressados em compartimentos intracelulares tais como endossomas. Reconhecimento mediado por TLR3, TLR7 ou TLR9 de seus ligantes requer maturação endossômica e processamento. Quando os macrófagos, monócitos, células dendríticas ou células não-imunes que se tornam células de apresentação de antígeno engolfam as bactérias por meio de fagocitose, as bactérias se degradam e o DNA de CpG é liberado nos fagossomas-lisossomas ou nos endossomas-lisossomas em que eles podem interagir com TLR9 que foi recrutado do retículo endoplásmico sob absorção não-específica do DNA de CpG. Além disso, quando os vírus invadirem as células por meio de endocitose mediada por receptor, os conteúdos virais são expostos ao citoplasma por fusão da membrana viral com a membrana endossômica. Isto resulta em exposição dos ligantes de TLR tais como dsRNA, ssRNA e DNA de CpG ao TLR9 nos compartimentos fagossômicos/lisossômicos ou endossômicos/lisossômicos.
[000228] Nas vias de sinalização a jusante do domínio de TIR, um adaptador contendo domínio de TIR, MyD88, é essencial para a indução das citocinas inflamatórias tais como TNF-α e IL-12 por meio de todos os TLRs. Embora as moléculas de adaptador contendo domínio de TIR (MyD88) sejam comuns a todos os TLRs, vias de sinalização de TLR individuais são divergentes e ativação de TLRs específicos leva a padrões ligeiramente diferentes dos perfis de expressão gênica. Por via de exemplo apenas, a ativação das vias de sinalização de TLR3 e TLR4 resultou na indução das interferonas tipo I (IFNs), enquanto a ativação das vias mediadas por TLR2 e TLR5 não. Porém, a ativação das vias de sinalização de TLR7, TLR8 e TLR9 também leva à indução das IFNs Tipo I, embora isso ocorra por meio de mecanismos distintos da indução mediada por TLR3/4.
[000229] Uma vez conectados, TLRs iniciam uma cascata de transdução de sinal que leva à ativação de NFKB por meio do gene de resposta primária de diferenciação mieloide da proteína de adaptador 88 (MyD88) e recrutamento da cinase associada ao receptor de IL-1 (IRAK). A via dependente de MyD88 é análoga à sinalização pelos receptores de IL-1, e é considerado que MyD88, abrigando um domínio de TIR C-terminal e um domínio de morte N-terminal, associa- se com o domínio de TIR dos TLRs. Sob estimulação, MyD88 recruta IRAK-4 para TLRs por meio da interação dos domínios de morte de ambas as moléculas, e facilita a fosforilação mediada por IRAK-4 de IRAK-1. Fosforilação de IRAK-1 depois leva ao recrutamento do fator associado ao receptor de TNF 6 (TRAF6), levando à ativação de duas vias de sinalização distintas. Uma via leva à ativação dos fatores de transcrição de AP-1 por meio da ativação das MAP cinases. Outra via ativa o complexo de TAK1/TAB que intensifica a atividade do complexo de IKB cinase (IKK). Uma vez ativado, o complexo de IKK leva à fosforilação e degradação subsequente do inibidor de NFKB, IKB, que leva à translocação nuclear do fator de transcrição NFKB e à iniciação da transcrição de genes cujos promotores contêm sítios de ligação de NFkB tais como citocinas. A via dependente de MyD88 representa um papel crucial e é essencial para a produção de citocinas inflamatórias por meio de todos os TLRs.
[000230] Estimulação das células de expressão de TLR8, tais como PBMCs resulta na produção de níveis altos de IL-12, IFN-y, IL-1, TNF- α, IL-6 e outras citocinas inflamatórias. Similarmente, estimulação das células de expressão de TLR7, tais como células dendríticas plasmocitoide, resulta na produção de níveis altos de interferona-α (IFNα) e níveis baixos de citocinas inflamatórias. Desse modo, por meio da ativação de células dendríticas e outras células de apresentação de antígeno, conexão de TLR7, TLR8 ou de TLR9 e a produção de citocina são esperados ativar os diversos mecanismos de respostas imunes inatas e adquirida que levam à destruição dos patógenos, das células infetadas ou das células tumorais.
[000231] Os compostos da Fórmula (I), sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isômeros dos mesmos, composições farmacêuticas, e/ou combinações fornecidas aqui são agonistas da atividade do Receptor Toll-símile 7, e são usados no tratamento de doenças e/ou distúrbios associados com tais receptores de TLR7.
[000232] Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I), sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isômeros dos mesmos, composições farmacêuticas, e/ou combinações fornecidos aqui são usados no tratamento de doenças e/ou distúrbios das vias respiratórias incluindo, mas não limitados a, asma, asma bronquial, asma alérgica, asma intrínseca, asma extrínseca, asma induzida por exercício, asma induzida por fármaco (incluindo induzida por aspirina e NSAID) e asma induzida por pó, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD); bronquite, incluindo bronquite infecciosa e eosinofílica; enfisema; bronquiectasia; fibrose cística; sarcoidose; doenças do pulmão do fazendeiro e relacionadas; pneumonite de hipersensibilidade; fibrose pulmonar, incluindo alveolite fibrosante criptogênica, pneumonias intersticiais idiopáticas, terapia antineoplástica de complicação de fibrose e infecção crônica, incluindo tuberculose e aspergilose e outras infecções fúngicas; complicações de transplantação pulmonar; distúrbios vasculíticos e trombóticos da vasculatura pulmonar, e hipertensão pulmonar; atividade antitussiva incluindo tratamento de tosse crônica associada com condições inflamatórias e secretórias das vias aéreas, e tosse iatrogênica; rinite aguda e crônica incluindo rinite medicamentosa, e rinite vasomotora; rinite alérgica perene e sazonal incluindo rinite nervosa (febre do feno); polipose nasal; infecção viral aguda incluindo resfriado comum, e infecção devido ao vírus sincicial respiratório, influenza, coronavírus (incluindo SARS) e adenovírus.
[000233] Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I), sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isômeros dos mesmos, composições farmacêuticas, e/ou combinações fornecidos aqui são usados no tratamento de distúrbios dermatológicos incluindo, mas não limitados a, psoríase, dermatite atópica, dermatite de contato ou outras dermatoses eczematosas, e reações de hipersensibilidade do tipo tardia; fito e fotodermatite; dermatite seborreica, dermatite herpetiforme, líquen plano, líquen escleroso e atrófico, pioderma gangrenoso, pele sarcoide, carcinoma de células basais, ceratose actínica, lúpus discoide eritematoso, pênfigo, penfigoide, epidermólise bolhosa, urticária, angioedema, vasculitides, eritemas tóxicos, eosinófilos cutâneos, alopecia areata, calvície de padrão masculino, síndrome de Sweet, síndrome de Weber-Christian, eritema multiforme; celulite, infecciosa e não- infecciosa; paniculite; linfomas cutâneos, câncer de pele de não- melanoma e outras lesões displásicas; distúrbios induzidos por fármaco incluindo erupções de fármaco fixas.
[000234] Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I), sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isômeros dos mesmos, composições farmacêuticas, e/ou combinações fornecidas aqui são usados no tratamento de doenças e/ou distúrbios oculares incluindo, mas não limitados a, blefarite; conjuntivite, incluindo conjuntivite alérgica perene e vernal; irite; uveíte anterior e posterior; coroidite; distúrbios autoimunes, degenerativos ou inflamatórios que afetam a retina; oftalmite incluindo oftalmite simpatizante; sarcoidose; infecções incluindo viral, fúngica, e bacteriana.
[000235] Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I), sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isômeros dos mesmos, composições farmacêuticas, e/ou combinações fornecidas aqui são usados no tratamento de doenças e/ou distúrbios geniturinárias incluindo, mas não limitados a, nefrite incluindo intersticial e glomerulonefrite; síndrome nefrótica; cistite incluindo cistite aguda e crônica (intersticial) e úlcera de Hunner; uretrite aguda e crônica, prostatite, epididimite, ooforite e salpingite; vulvo-vaginite; doença de Peyronie; disfunção erétil (masculina e feminina).
[000236] Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I), sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isômeros dos mesmos, composições farmacêuticas, e/ou combinações fornecidas aqui são usados no tratamento de rejeição de aloenxerto incluindo, mas não limitado a, aguda e crônica seguindo, por exemplo, transplantação de rim, coração, fígado, pulmão, medula óssea, pele ou córnea ou seguindo transfusão de sangue; ou doença crônica enxerto versus hospedeiro.
[000237] Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I), sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isômeros dos mesmos, composições farmacêuticas, e/ou combinações fornecidas aqui são usados no tratamento de outros distúrbios autoimunes e alérgicos incluindo, mas não limitados a, artrite reumatoide, síndrome de intestino irritável, lúpus sistêmico eritematoso, esclerose múltipla, tiroidite de Hashimoto, doença de Crohn, doença inflamatória do intestino (IBD), doença de Graves, doença de Addison, diabetes melito, púrpura trombocitopênica idiopática, fasciite eosinofílica, síndrome de hiper-IgE, síndrome de antifosfolipídeos e síndrome de Sazary.
[000238] Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I), sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isômeros dos mesmos, e composições farmacêuticas fornecidas aqui são usados no tratamento de câncer incluindo, mas não limitados a, próstata, mama, pulmão, ovariano, pancreático, intestino e cólon, estômago, pele e tumores cerebrais e malignidades que afetam a medula óssea (incluindo as leucemias) e sistemas linfoproliferativo, tais como linfoma Hodgkin e não-Hodgkin; incluindo a prevenção e tratamento de doença metastática e recorrências de tumor, e síndromes paraneoplásticas. Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I), sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isômeros dos mesmos, e composições farmacêuticas fornecidas aqui são úteis como moduladores da atividade do receptor Toll-símile, e são usados no tratamento de neoplasias incluindo, mas não limitadas a, carcinoma de células basais, carcinoma de células escamosas, ceratose actínica, melanoma, carcinomas, sarcomas, leucemias, carcinoma de células renais, sarcoma de Kaposi, leucemia mielogenosa, leucemia linfocítica crônica e mieloma múltiplo.
[000239] Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I), sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isômeros dos mesmos, composições farmacêuticas, e/ou combinações fornecidas aqui são usados no tratamento de doenças infecciosas incluindo, mas não limitadas a, doenças virais tais como verrugas genitais, verrugas comuns, verrugas plantares, vírus sincicial respiratório (RSV), hepatite B, hepatite C, vírus da Dengue, vírus do herpes simples (por via de exemplo apenas, HSV-I, HSV-II, CMV, ou VZV), molusco contagioso, vacínia, varíola, lentivírus, vírus da imunodeficiência humana (HIV), vírus do papiloma humano (HPV), citomegalovírus (CMV), zoster vírus de varicela (VZV), rinovírus, enterovírus, adenovírus, coronavírus (por exemplo, SARS), influenza, para-influenza, vírus da caxumba, vírus do sarampo, papovavírus, hepadnavírus, flavivírus, retrovírus, arenavírus (por via de exemplo apenas, LCM, vírus de Junin, vírus de Machupo, vírus de Guanarito e Febre de Lassa) e filovírus (por via de exemplo apenas, vírus ebola ou vírus de Marbugo).
[000240] Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I), sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isômeros dos mesmos, composições farmacêuticas, e/ou combinações fornecidas aqui são usados no tratamento de infecções bacterianas, fúngicas, e protozoárias incluindo, mas não limitados a, tuberculose e Micobacterium avium, lepra; Pneumocistis carinii, criptosporidiose, histoplasmose, toxoplasmose, infecção de tripanossoma, leishmaniase, infecções causadas por bactérias do gênero Escherichia, Enterobacter, Salmonella, Staphylococcus, Klebsiella, Proteus, Pseudomonas, Streptococcus, e Chlamydia, e infecções fúngicas tais como candidíase, aspergilose, histoplasmose, meningite criptocócica.
[000241] Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I), sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isômeros dos mesmos, são usados como potencializadores imunes. Em certas modalidades, os compostos fornecidos aqui são incluídos em composições imunogênicas ou são usados em combinação com as composições imunogênicas. Em certas modalidades, as composições imunogênicas são úteis como vacinas, e o composto está presente em uma quantidade suficiente para intensificar uma resposta imune à vacina, ou a um antígeno misturado com o composto. A vacina compreende pelo menos um antígeno que pode ser um antígeno bacteriano ou um antígeno associado ao câncer, ou um antígeno viral. Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I), sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isômeros dos mesmos, e composições farmacêuticas fornecidas aqui são incluídos nas vacinas terapêuticas ou são usados em combinação com as vacinas terapêuticas. Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I), sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isômeros dos mesmos, e composições farmacêuticas fornecidas aqui são incluídos em vacinas profilácticas ou usados em combinação com as vacinas profilácticas. Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I), sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isômeros dos mesmos, e composições farmacêuticas fornecidas aqui são incluídos, ou são usados em combinação com vacinas virais terapêuticas. Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I), sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isômeros dos mesmos, e composições farmacêuticas fornecidas aqui são incluídos, ou são usados em combinação com as com vacinas de câncer.
[000242] Em outras modalidades, os compostos da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato dos mesmos descritos aqui são úteis para o tratamento de pele danificada ou envelhecida tal como cicatrizar e rugas.
ADMINISTRAÇÃO E COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS
[000243] Para os usos terapêuticos dos compostos da Fórmula (I), ou sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isômeros dos mesmos, descritos aqui, tais compostos ou são administrados sozinhos em quantidades terapeuticamente efetivas ou como parte de uma composição farmacêutica. Consequentemente, fornecidas aqui são composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, sais farmaceuticamente aceitáveis e/ou solvatos dos mesmos, e um ou mais veículos, diluentes, ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Além disso, tais compostos e composições são administradas isoladamente ou em combinação com um ou mais agentes terapêuticos adicionais. O método de administração de tais compostos e composições inclui, mas não é limitado a, administração oral, administração retal, administração parenteral, intravenosa, administração intravítrea, administração intramuscular, inalação, administração intranasal, administração tópica, administração oftálmica ou administração ótica.
[000244] A quantidade terapeuticamente eficaz variará, dependendo, entre outros, da doença indicada, da severidade da doença, da idade e saúde relativa do sujeito, da potência do composto administrado, do modo de administração e do tratamento desejado. Em certas modalidades, a dosagem diária de um composto da Fórmula (I), resultados satisfatórios são indicados ser obtidos sistemicamente em dosagens diárias de cerca de 0,03 a 2,5 mg/kg por peso do corpo. Em certas modalidades, a dosagem diária de um composto da Fórmula (I), administrada por meio de inalação, é na faixa de 0,05 micrograma por quilograma de peso do corpo (μg/kg) a 100 microgramas por quilograma de peso do corpo (μg/kg). Em outras modalidades, a dosagem diária de um composto da Fórmula (I), administrado oralmente, é na faixa de 0,01 micrograma por quilograma de peso do corpo (μg/kg) a 100 miligramas por quilograma de peso do corpo (mg/kg). Uma dosagem diária indicada no mamífero maior, por exemplo seres humanos, é na faixa de cerca de 0,5 mg a cerca de 100 mg de um composto da Fórmula (I), convenientemente administrado, por exemplo em doses divididas até quatro vezes por dia ou em forma de liberação controlada. Em certa modalidade, a forma de dosagem de unidade para administração oral compreende de cerca de 1 a 50 mg de um composto da Fórmula (I).
[000245] Outros aspectos fornecidos aqui são processos para a preparação da composição farmacêutica que compreendem pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou sais farmaceuticamente aceitáveis e/ou solvatos do mesmo. Em certas modalidades, tais processos incluem misturar um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, e sais farmaceuticamente aceitáveis e solvatos do mesmo, com um ou mais veículos, diluentes ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Em certas modalidades, as composições farmacêuticas compreendendo um composto da Fórmula (I) em forma livre ou em uma forma de sal farmaceuticamente aceitável ou de solvato, em associação com pelo menos um veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável são fabricadas por métodos de mistura, granulação e/ou revestimento. Em outras modalidades, tais composições opcionalmente contêm excipientes, tais como agentes preservantes, estabilizantes, umectantes ou emulsificantes, promotores de solução, sais para regular a pressão osmótica e/ou tampões. Em outras modalidades, tais composições são esterilizadas.
FORMAS DE DOSAGEM ORAIS
[000246] Em certas modalidades, as composições farmacêuticas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são administradas oralmente como formas de dosagem distintas, em que tais formas de dosagem incluem, mas não são limitadas a, cápsulas, cápsulas de gelatina, microcápsulas, tabletes, tabletes mastigáveis, pós, grânulos, xaropes, xaropes aromatizados, soluções ou suspensões em líquidos aquosos ou não-aquosos, espumas ou cremes comestíveis, e emulsões líquidas de óleo-em-água ou emulsões líquidas de água-em- óleo.
[000247] As cápsulas, cápsulas de gelatina, microcápsulas, tabletes, tabletes mastigáveis, pós ou grânulos, usados para a administração oral de pelo menos um composto da Fórmula (I) são preparados misturando pelo menos um composto da Fórmula (I) (ingrediente ativo) junto com pelo menos um excipiente usando técnicas de composição farmacêutica convencionais. Exemplos não-limitativos de excipientes usados nas formas de dosagem orais descritas aqui incluem, mas não são limitados a, aglutinantes, enchedores, desintegrantes, lubrificantes, absorventes, corantes, sabores, conservantes e adoçantes.
[000248] Exemplos não-limitativos de tais aglutinantes incluem, mas não são limitados a, amido de milho, amido de batata, pasta de amido, amido pré-gelatinizado, ou outros amidos, açúcares, gelatina, gomas naturais e sintéticas tais como acácia, alginato de sódio, ácido algínico, outros alginatos, tragacanto, goma guar, celulose e seus derivados (por via de exemplo apenas, etil celulose, acetato de celulose, carboximetil celulose de cálcio, carboximetilcelulose de sódio, metil celulose, hidroxipropil metilcelulose e celulose microcristalina), silicato de alumínio de magnésio, polivinil pirrolidona e combinações dos mesmos.
[000249] Exemplos não-limitativos de tais enchedores incluem, mas não são limitados a, talco, carbonato de cálcio (por exemplo, grânulos ou pó), celulose microcristalina, celulose em pó, dextratos, caulim, manitol, ácido silícico, sorbitol, amido, amido pré-gelatinizado, e misturas dos mesmos. Em certas modalidades, o aglutinante ou enchedor nas composições farmacêuticas fornecidas aqui está presente de cerca de 50 a cerca de 99 por cento em peso da composição farmacêutica ou forma de dosagem.
[000250] Exemplos não-limitativos de tais desintegrantes incluem, mas não são limitados a, ágar-ágar, ácido algínico, alginato de sódio, carbonato de cálcio, carbonato de sódio, celulose microcristalina, croscarmelose de sódio, crospovidona, potássio de polacrilina, glicolato de amido de sódio, amido de batata ou de tapioca, amido pré- gelatinizado, outros amidos, argila, outras alginas, outras celuloses, gomas, e combinações dos mesmos. Em certas modalidades, a quantidade de desintegrante usado nas composições farmacêuticas fornecidas aqui é de cerca de 0,5 a cerca de 15 por cento em peso de desintegrante, enquanto em outras modalidades a quantidade é de cerca de 1 a cerca de 5 por cento em peso de desintegrante.
[000251] Exemplos não-limitativos de tais lubrificantes incluem, mas não são limitados a, estearato de sódio, estearato de cálcio, estearato de magnésio, ácido esteárico, óleo mineral, óleo mineral leve, glicerina, sorbitol, manitol, polietileno glicol, outros glicóis, sulfato de laurila de sódio, talco, óleo vegetal hidrogenado (por via de exemplo apenas, óleo de amendoim, óleo de caroço de algodão, óleo de girassol, óleo de gergelim, azeite de oliva, óleo de milho, e óleo de soja), estearato de zinco, oleato de sódio, oleato de etila, laureato de etila, ágar, sílica, um sílica-gel siloide (AEROSIL 200, fabricado por W.R. Grace Co. de Baltimore, Md.), um aerossol coagulado de sílica sintética (comercializado por Degussa of Plano, Tex.), CAB-O-SIL (um produto de dióxido de silício pirogênico vendido por Cabot Co. of Boston, Massa.) e combinações dos mesmos. Em certas modalidades, a quantidade de lubrificantes usados nas composições farmacêuticas fornecidas aqui é em uma quantidade de menos que cerca de 1 por cento em peso das composições farmacêuticas ou formas de dosagem.
[000252] Exemplos não-limitativos de tais diluentes incluem, mas não são limitados a, lactose, dextrose, sacarose, manitol, sorbitol, celulose, glicina ou combinações dos mesmos.
[000253] Em certas modalidades, tabletes e cápsulas são preparados misturando uniformemente pelo menos um composto da Fórmula (I) (ingredientes ativos) com veículos líquidos, veículos sólidos finamente divididos, ou ambos, e depois configurando o produto na apresentação desejada, se necessário. Em certas modalidades, os tabletes são preparados por compressão. Em outras modalidades, os tabletes são preparados por moldagem.
[000254] Em certas modalidades, pelo menos um composto da Fórmula (I) é administrado oralmente como uma forma de dosagem de liberação controlada. Tais formas de dosagem são usadas para fornecer liberação lenta ou controlada de um ou mais compostos da Fórmula (I). Liberação controlada é obtida usando, por exemplo, hidroxipropilmetil celulose, outras matrizes de polímero, géis, membranas permeáveis, sistemas osmóticos, revestimentos de camada, micropartículas, lipossomas, microesferas, ou uma combinação dos mesmos. Em certas modalidades, formas de dosagem de liberação controlada são usadas para estender a atividade do composto da Fórmula (I), reduzir frequência de dosagem, e aumentar a complacência do paciente.
[000255] Administração dos compostos da Fórmula (I) como fluidos orais tais como solução, xaropes e elixires são preparados em dosagem de unidade forma de modo que uma quantidade dada de solução, xaropes ou elixires contenha uma quantidade predeterminada de um composto da Fórmula (I). Xaropes são preparados dissolvendo o composto em uma solução aquosa adequadamente aromatizada, enquanto elixires são preparados através do uso de um veículo alcoólico não-tóxico. Suspensões são formuladas dispersando o composto em um veículo não-tóxico. Exemplos não-limitativos de excipientes usados como fluidos orais para administração oral incluem, mas não são limitados a, solubilizantes, emulsificantes, agentes aromatizantes, conservantes, e agentes de coloração. Exemplos não- limitativos de solubilizantes e emulsificantes incluem, mas não são limitados a, água, glicóis, óleos, álcoois, álcoois de isostearila etoxilado e éteres de polióxi etileno sorbitol. Exemplos não-limitativos de conservantes incluem, mas não são limitados a, benzoato de sódio. Exemplos não-limitativos de agentes aromatizantes incluem, mas não são limitados a, óleo de hortelã ou adoçantes naturais ou sacarina ou outros adoçantes artificiais.
FORMAS DE DOSAGEM PARENTERAIS
[000256] Em certas modalidades, as composições farmacêuticas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são administradas parenteralmente por meio de várias rotas incluindo, mas não limitadas a, subcutânea, intravenosa (incluindo injeção de bolo), intramuscular, e intra-arterial.
[000257] Tais formas de dosagem parenterais são administradas na forma de soluções injetáveis estéreis ou esterilizáveis, suspensões, produtos secos e/ou liofilizados prontos para serem dissolvidos ou suspensos em um veículo farmaceuticamente aceitável para injeção (pós reconstituíveis) e emulsões. Veículos usados em tais formas de dosagem incluem, mas não são limitados a, Água para Injeção USP; veículos aquosos tais como, mas não limitados a, Injeção de Cloreto de Sódio, Injeção de Ringer, Injeção de Dextrose, Injeção de Dextrose e de Cloreto de Sódio, e Injeção de Ringer tratada com Lactato; veículos miscíveis em água tais como, mas não limitados a, álcool etílico, polietileno glicol, e polipropileno glicol; e veículos não-aquosos tais como, mas não limitados a, óleo de milho, óleo de caroço de algodão, óleo de amendoim, óleo de gergelim, oleato de etila, miristato de isopropila, e benzoato de benzila.
FORMAS DE DOSAGEM TRANSDÉRMICAS
[000258] Em certas modalidades, as composições farmacêuticas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são administradas transdermicamente. Tais formas de dosagem transdérmicas incluem emplastros "tipo de reservatório" ou "tipo de matriz" que são aplicados à pele e usados durante um período específico de tempo para permitir a penetração de uma quantidade desejada de um composto da Fórmula (I). Por via de exemplo apenas, tais dispositivos transdérmicos são na forma de uma bandagem que compreende um membro de apoio, um reservatório contendo o composto opcionalmente com veículos, opcionalmente uma barreira de controle da taxa para liberar o composto à pele do hospedeiro a uma taxa controlada e predeterminada em um período prolongado de tempo, e meios para deter o dispositivo à pele. Em outras modalidades, formulações transdérmicas de matriz são usadas.
[000259] Formulações para liberação transdérmica de um composto da Fórmula (I) incluem uma quantidade efetiva de um composto da Fórmula (I), um veículo e um diluente opcional. Um veículo inclui, mas não é limitado a, solventes absorvíveis farmacologicamente aceitáveis para ajudar a passagem através da pele do hospedeiro, tal como água, acetona, etanol, etileno glicol, propileno glicol, butano-1,3-diol, miristato de isopropila, palmitato de isopropila, óleo mineral, e combinações dos mesmos.
[000260] Em certas modalidades, tais sistemas de liberação transdérmica incluem intensificadores de penetração para ajudar a liberar um ou mais compostos da Fórmula (I) para o tecido. Tais intensificadores de penetração incluem, mas não são limitados a, acetona; vários alcoóis tais como etanol, oleíla, e tetraidrofurila; sulfóxidos de alquila tais como sulfóxido de dimetila; acetamida de dimetila; formamida de dimetila; polietileno glicol; pirrolidonas tais como polivinilpirrolidona; tipos Kollidon (Povidone, Polyvidone); uréia; e vários ésteres de açúcar solúveis ou insolúveis em água tais como Tween 80 (polissorbato 80) e Span 60 (monoestearato de sorbitan).
[000261] Em outras modalidades, o pH de uma tal composição farmacêutica transdérmica ou forma de dosagem, ou do tecido ao qual a composição farmacêutica ou forma de dosagem é aplicada, é ajustado para melhorar a liberação de um ou mais compostos da Fórmula (I). Em outras modalidades, a polaridade do veículo de solvente, sua resistência iônica, ou tonicidade são ajustadas para melhorar a liberação. Em outras modalidades, os compostos tais como estearatos são vantajosamente adicionados para alterar a hidrofilicidade ou lipofilicidade de um ou mais compostos da Fórmula (I) para melhorar a liberação. Em certas modalidades, tais estearatos servem como um veículo de lipídio para a formulação, como um agente emulsificante ou tensoativo, e como um agente de intensificação da liberação ou intensificação da penetração. Em outras modalidades, sais, hidratos ou solvatos diferentes dos compostos da Fórmula (I) são usados para ainda ajustar as propriedades da composição resultante.
FORMAS DE DOSAGEM TÓPICAS
[000262] Em certas modalidades, pelo menos um composto da Fórmula (I) é administrado por aplicação tópica da composição farmacêutica contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) na forma de loções, géis, soluções de unguentos, emulsões, suspensões ou cremes. Formulações adequadas para aplicação tópica à pele são soluções aquosas, unguentos, cremes ou géis, enquanto as formulações para administração oftálmica são soluções aquosas. Tais formulações opcionalmente contêm solubilizantes, estabilizantes, agentes de intensificação de tonicidade, tampões e conservantes.
[000263] Tais formulações tópicas incluem pelo menos um veículo, e opcionalmente pelo menos um diluente. Tais veículos e diluentes incluem, mas não são limitados a, água, acetona, etanol, etileno glicol, propileno glicol, butano-1,3-diol, miristato de isopropila, palmitato de isopropila, óleo mineral, e combinações dos mesmos.
[000264] Em certas modalidades, tais formulações tópicas incluem intensificadores de penetração para ajudar a liberar um ou mais compostos da Fórmula (I) ao tecido. Tais intensificadores de penetração incluem, mas não são limitados a, acetona; vários alcoóis tais como etanol, oleíla, e tetraidrofurila; sulfóxidos de alquila tais como sulfóxido de dimetila; acetamida de dimetila; formamida de dimetila; polietileno glicol; pirrolidonas tais como polivinilpirrolidona; tipos Kollidon (Povidone, Polyvidone); uréia; e vários ésteres de açúcar solúvel ou insolúveis em água tais como Tween 80 (polissorbato 80) e Span 60 (monoestearato de sorbitan).
[000265] Em certas modalidades, as composições farmacêuticas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são administradas por meio de inalação. Formas de dosagem para administração inalada são formuladas como aerossóis ou pós secos. Formulações de aerossol para administração de inalação compreendem uma solução ou suspensão fino de pelo menos um composto da Fórmula (I) em um solvente aquoso ou não-aquoso farmaceuticamente aceitável. Além disso, tais composições farmacêuticas opcionalmente compreendem uma base de pó tal como lactose, glicose, trealose, manitol ou amido, e opcionalmente um modificador de desempenho tal como L-leucina ou outro aminoácido, e/ou sais de metais de ácido esteárico tais como estearato de magnésio ou de cálcio.
[000266] Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I) são para ser administrados diretamente ao pulmão por meio de inalação usando um Inalador Dosimetrado ("MDI"), que utiliza latas que contêm um propulsor de ebulição baixa adequado por exemplo, diclorodifluorometano, triclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano, dióxido de carbono ou outro gás adequado, ou um dispositivo Inalador de Pó Seco (DPI) que usa uma explosão gasosa para criar uma nuvem de pó seco dentro de um recipiente que é depois para ser inalado pelo paciente. Em certas modalidades, cápsulas e cartuchos de gelatina para uso em um inalador ou insuflador contendo uma mistura de pó de um composto da Fórmula são formulados (I) e uma base de pó tal como lactose ou amido. Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I) são liberados ao pulmão usando um dispositivo de pulverização líquido, em que tais dispositivos usam orifícios de bico extremamente pequenos para aerosolizar as formulações de fármaco líquidas que podem ser depois inaladas diretamente no pulmão. Em outras modalidades, os compostos da Fórmula (I) são liberados ao pulmão usando um dispositivo nebulizador, em que um nebulizador cria uns aerossóis das formulações de fármaco líquidas usando energia ultrassônica para formar partículas finas que podem ser facilmente inaladas. Em outras modalidades, os compostos da Fórmula (I) são liberados ao pulmão usando um dispositivo de aerossol eletroidrodinâmico ("EHD") em que tais dispositivos de aerossol de EHD usam energia elétrica para aerosolizar as soluções ou suspensões de fármaco líquidas.
[000267] Em certas modalidades, a composição farmacêutica contendo pelo menos um composto da Fórmula (I), ou sais farmaceuticamente aceitáveis e solvatos dos mesmos, descritos aqui, também contém um ou mais intensificadores de absorção. Em certas modalidades, tais intensificadores de absorção incluem, mas não são limitados a, glicocolato de sódio, caprato de sódio, N-lauril-β-D- maltopiranosídeo, EDTA, e micelas misturadas.
[000268] Em certas modalidades, as composições farmacêuticas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são administradas nasalmente. A forma de dosagem para administração nasal é formulada como aerossóis, soluções, gotas, géis ou pós secos.
[000269] Em certas modalidades, as composições farmacêuticas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são administradas retalmente na forma de supositórios, enemas, unguento, cremes espumas retais ou géis retais. Em certas modalidades, tais supositórios são preparados de emulsões ou suspensões graxas, manteiga de cacau ou outros glicerídeos.
[000270] Em certas modalidades, as composições farmacêuticas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são administradas oftalmicamente como colírios. Tais formulações são soluções aquosas que opcionalmente contêm solubilizantes, estabilizantes, agentes de intensificação da tonicidade, tampões e conservantes.
[000271] Em certas modalidades, as composições farmacêuticas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são administradas oticamente como gotas de ouvido. Tais formulações são soluções aquosas que opcionalmente contêm solubilizantes, estabilizantes, agentes de intensificação da tonicidade, tampões e conservantes.
[000272] Em certas modalidades, as composições farmacêuticas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são formuladas como uma preparação de depósito. Tais formulações são administradas por meio de implantação (por exemplo subcutânea ou intramuscularmente) ou por meio de injeção intramuscular. Em certas modalidades, tais formulações incluem materiais poliméricos ou hidrofóbicos (por exemplo, como uma emulsão em um óleo aceitável) ou resinas de permuta de íons, ou como derivados fracamente solúveis, por exemplo, como um sal fracamente solúvel.
[000273] Em uma outra modalidade, as composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são adaptadas para administração oral para o tratamento de doenças e/ou distúrbios virais associados com a atividade de TLR7.
[000274] Em uma outra modalidade, as composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são adaptadas para administração oral para o tratamento de doenças e/ou distúrbios infecciosos associados com TLR7.
[000275] Em uma outra modalidade, as composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são adaptadas para administração oral para o tratamento de doenças e/ou distúrbios bacterianos associados com TLR7.
[000276] Em uma outra modalidade, as composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são adaptadas para administração oral para o tratamento de doenças e/ou distúrbios fúngicos associados com TLR7.
[000277] Em uma outra modalidade, as composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são adaptadas para administração oral para o tratamento de câncer associado com TLR7.
[000278] Em uma outra modalidade, as composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são adaptadas para administração intravenosa para o tratamento de câncer associado com TLR7.
[000279] Em uma outra modalidade, as composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são adaptadas para administração oral para o tratamento de doenças e/ou distúrbios de rejeição de aloenxerto associados com TLR7.
[000280] Em uma outra modalidade, as composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são adaptadas para administração oral para o tratamento de doenças e/ou distúrbios geniturinários associados com TLR7.
[000281] Em uma outra modalidade, as composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são adaptadas para administração como colírios para o tratamento de doenças e/ou distúrbios oftálmicos associados com TLR7.
[000282] Em uma outra modalidade, as composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são adaptadas para administração tópica para o tratamento de doenças e/ou distúrbios dermatológicos associados com TLR7.
[000283] Em uma outra modalidade, as composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são adaptadas para administração tópica para o tratamento de ceratose actínica. Em uma outra modalidade, as composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são adaptadas para administração tópica como um creme para o tratamento de ceratose actínica.
[000284] Em uma outra modalidade, as composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são adaptadas para administração tópica para o tratamento de carcinoma de células basais. Em uma outra modalidade, as composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são adaptadas para administração tópica como um creme para o tratamento de carcinoma de células basais.
[000285] Em uma outra modalidade, as composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são adaptadas para administração por meio de inalação para o tratamento de doenças das vias respiratórias e/ou distúrbios associados com TLR7. Em certas modalidades, a doença das vias respiratórias é asma alérgica.
[000286] Fornecidos aqui são compostos da Fórmula (I), sais farmaceuticamente aceitáveis e solvatos dos mesmos, e composições farmacêuticas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) e/ou sais farmaceuticamente aceitáveis e solvatos dos mesmos, para o uso na ativação da atividade de TLR7, e assim é usado na prevenção ou tratamento de doenças e/ou distúrbios associados com atividade de TLR7. Tais compostos da Fórmula (I), sais farmaceuticamente aceitáveis e solvatos dos mesmos, e composições farmacêuticas são agonistas de TLR7.
[000287] Também fornecidos aqui são métodos para o tratamento de um sujeito sofrendo de uma doença e/ou distúrbio associado com a atividade de TLR7, em que os métodos incluem administrar ao sujeito uma quantidade efetiva de um composto da Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato, ou sozinho ou como parte de uma composição farmacêutica como descrita aqui.
[000288] Fornecido aqui é o uso de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, na preparação de um medicamento para o tratamento de uma doença ou distúrbio associados com atividade de TLR7.
TRATAMENTO DE COMBINAÇÃO
[000289] Em certas modalidades, um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, ou uma composição farmacêutica contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, é administrado sozinho (sem um agente terapêutico adicional) para o tratamento de uma ou mais das doenças e/ou distúrbios associados com atividade de TLR descritos aqui.
[000290] Em outras modalidades, um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, ou uma composição farmacêutica contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, é administrado em combinação com um ou mais agentes terapêuticos adicionais, para o tratamento de uma ou mais das doenças e/ou distúrbios associados com atividade de TLR7 descritos aqui.
[000291] Em outras modalidades, um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, ou uma composição farmacêutica contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, é formulado em combinação com um ou mais agentes terapêuticos adicionais e administrado para o tratamento de uma ou mais das doenças e/ou distúrbios associados com atividade de TLR7 descritos aqui.
[000292] Em um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, ou uma composição farmacêutica contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, é administrado sequencialmente com um ou mais agentes terapêuticos adicionais, para o tratamento de uma ou mais das doenças e/ou distúrbios associados com atividade de TLR7 descritos aqui.
[000293] Em outras modalidades, os tratamentos de combinação fornecidos aqui incluem administração de um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, ou uma composição farmacêutica contendo um composto da Fórmula (I), antes da administração de um ou mais agentes terapêuticos adicionais, para o tratamento de uma ou mais das doenças e/ou distúrbios associados com atividade de TLR7 descritos aqui.
[000294] Em outras modalidades, os tratamentos de combinação fornecidos aqui incluem administração de um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, ou uma composição farmacêutica contendo um composto da Fórmula (I), subsequente à administração de um ou mais agentes terapêuticos adicionais, para o tratamento de uma ou mais das doenças e/ou distúrbios associados com atividade de TLR7 descritos aqui.
[000295] Em certas modalidades, os tratamentos de combinação fornecidos aqui incluem administração de um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, ou uma composição farmacêutica contendo um composto da Fórmula (I), simultaneamente com um ou mais agentes terapêuticos adicionais, para o tratamento de uma ou mais das doenças e/ou distúrbios associados com atividade de TLR7 descritos aqui.
[000296] Em certas modalidades, os tratamentos de combinação fornecidos aqui incluem administração de um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, ou uma composição farmacêutica contendo um composto da Fórmula (I) formulado com um ou mais agentes terapêuticos adicionais, para o tratamento de uma ou mais das doenças e/ou distúrbios associados com atividade de TLR7 descritos aqui.
[000297] Em certas modalidades dos tratamentos de combinação descritos aqui, os compostos da Fórmula (I), ou uns sais farmaceuticamente aceitáveis ou solvatos dos mesmos, são agonistas da atividade de TLR7.
[000298] Em certas modalidades das terapias de combinação descritas aqui, os compostos da Fórmula (I) fornecidos aqui, ou uns sais farmaceuticamente aceitáveis ou solvatos dos mesmos, e o(s) agente(s) terapêutico(s) adicional(is) age(m) aditivamente. Em certas modalidades das terapias de combinação descritas aqui, os compostos da Fórmula (I) fornecidos aqui, ou uns sais farmaceuticamente aceitáveis ou solvatos dos mesmos, e o(s) agente(s) terapêutico(s) adicional(is) age(m) sinergisticamente.
[000299] Em outras modalidades, um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou uns sais farmaceuticamente aceitáveis ou solvatos dos mesmos, ou uma composição farmacêutica contendo um composto da Fórmula (I), é administrado a um paciente que previamente não sofreu ou não tenha passado correntemente por tratamento com outro agente terapêutico.
[000300] Os agentes terapêuticos adicionais usados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a antibióticos ou agentes antibacterianos, agentes antieméticos, agentes antifúngicos, agentes anti-inflamatórios, agentes antivirais, agentes imunomoduladores, citocinas, antidepressivos, hormônios, agentes de alquilação, antimetabólitos, antibióticos antitumorais, agentes antimitóticos, inibidores de topoisomerase, agentes citoestáticos, agentes anti-invasão, agentes antiangiogênicos, inibidores da função do fator de crescimento, inibidores de replicação viral, inibidores de enzimas virais, agentes anticâncer, α-interferonas, β-interferonas, ribavirina, hormônios, citocinas, e outros moduladores do receptor Toll-símile.
[000301] Os antibióticos ou agentes antibacterianos usados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, cloridrato de valganciclovir, metronidazol, uma beta-lactama, macrolídeos (tais como, por via de exemplo apenas, azitromicinan, tobramicina (TOBI™)), cefalosporinas (tais como, por via de exemplo apenas, cefaclor, cefadroxil, cefalexina, cefradina, cefamandol, cefatrizina, cefazedona, cefixima, cefozopran, cefpimizol, cefuroxima, cefpiramida, cefprozil, cefpirome, KEFLEX™, VELOSEF™, CEFTIN™, CEFZIL™, CECLOR™, SUPRAX™ e DURICEF™), um claritromicina (tal como, por via de exemplo apenas, claritromicina e BIAXIN™), um eritromicina (tal como, por via de exemplo apenas, eritromicina e EMYCIN™), ciprofloxacina, CIPRO™, uma norfloxacina (tal como, por via de exemplo apenas, NOROXIN™), antibióticos de aminoglicosídeo (tal como, por via de exemplo apenas, apramicina, arbecacina, bambermicinas, butirosina, dibecacina, neomicina, neomicina, undecilenato, netilmicina, paromomicina, ribostamicina, sisomicina, e espectinomicina), antibióticos de anfenicol (tais como, por via de exemplo apenas, azidamfenicol, cloranfenicol, florfenicol, e tianfenicol), antibióticos de ansamicina (tais como, por via de exemplo apenas, rifamida e rifampina), carbacefens (tais como, por via de exemplo apenas, loracarbef), carbapenemos (tais como, por via de exemplo apenas, biapenem e imipenem), cefamicinas (tais como, por via de exemplo apenas, cefbuperazona, cefmetazol, e cefminox), monobactamas (tais como, por via de exemplo apenas, aztreonam, carumonam, e tigemonam), oxacefemos (tais como, por via de exemplo apenas, flomoxef, e moxalactama), penicilinas (tais como, por via de exemplo apenas, andinocilina, andinocilina de pivoxil, amoxicilina, bacampicilina, ácido benzilpenicilínico, benzilpenicilina sódica, epicilina, fenbenicilina, floxacilina, penancilina, hidriodeto de penetamato, penicilina o-benetamina, penicilina 0, penicilina V, penicilina V benzatina, penicilina V hidrabamina, penimepiciclina, fenciicilina de potássio, V-CILLIN K™ e PEN VEE K™), lincosamidas (tais como, por via de exemplo apenas, clindamicina, e lincomicina), anfomicina, bacitracina, capreomicina, colistina, enduracidina, enviomicina, tetraciclinas (tais como, por via de exemplo apenas, apiciclina, clortetraciclina, clomociclina, e demeclociclina), 2,4- diaminopirimidinas (tais como, por via de exemplo apenas, brodimoprim), nitrofuranos (tais como, por via de exemplo apenas, furaltadona, e cloreto de furazólio), quinolonas e seus análogos (tais como, por via de exemplo apenas, uma fluoroquinolona, ofloxacina, cinoxacina, clinafloxacina, flumequina, grepagloxacina e FLOXIN™), sulfonamidas (tais como, por via de exemplo apenas, sulfametoxipirazina de acetila, benzilsulfamida, noprilsulfamida, ftalilsulfacetamida, sulfacrisoidina, e sulfacitina), sulfonas (tais como, por via de exemplo apenas, diatimossulfona, glucossulfona de sódio, e solassulfona), ciclosserina, mupirocina, tuberina e combinações dos mesmos.
[000302] Os agentes antieméticos usados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, metoclopromida, domperidona, proclorperazina, prometazina, clorpromazina, trimetobenzamida, ondansetron, granisetron, hidroxizina, monoetanolamina de acetileucina, alizaprida, azasetron, benzquinamida, bietanautina, bromoprida, buclizina, cleboprida, ciclizina, dimenidrinato, difenidol, dolasetron, meclizina, metalatal, metopimazina, nabilona, oxiperndil, pipamazina, escopo- lamina, sulpirida, tetraidrocanabinois, tietilperazina, tioproperazina, tropisetron, e combinações dos mesmos.
[000303] Os agentes antifúngicos usados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, anfotericina B, itraconazol, cetoconazol, fluconazol, fosfluconazol, intratecal, flucitosina, miconazol, butoconazol, itraconazol, clotrimazol, nistatina, terconazol, tioconazol, voriconazol, ciclopirox, econazol, haloprogrin, naftifina, terbinafina, undecilenato, e griseofulvina.
[000304] Os agentes anti-inflamatórios usados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, fármacos anti-inflamatórios não-esteroidais tais como ácido salicílico, ácido acetilsalicílico, salicilato de metila, diflunisal, salsalato, olsalazina, sulfasalazina, acetaminofeno, indometacina, sulindaco, etodolaco, ácido mefenâmico, meclofenamato de sódio, tolmetin, cetorolaco, diclofenaco, ibuprofeno, naproxeno, naproxeno de sódio, fenoprofeno, cetoprofeno, flurbinprofeno, oxaprozina, piroxicam, meloxicam, ampiroxicam, droxicam, pivoxicam, tenoxicam, nabumetoma, fenilbutazona, oxifenbutazona, antipirina, aminopirina, apazona e nimesulida, os antagonistas de leucotrieno incluindo, mas não limitados a, zileuton, aurotioglicose, tiomalato de sódio de ouro e auranofina, esteroides incluindo, mas não limitados a, diproprionato de alclometasona, ancinonida, dipropionato de beclometasona, betametasona, benzoato de betametasona, diproprionato de betametasona, fosfato de sódio de betametasona, valerato de betametasona, proprionato de clobetasol, pivalato de clocortolona, hidrocortisona, derivados de hidrocortisona, desonida, desoximatasona, dexametasona, flunisolida, flucoxinolida, flurandrenolida, halcinocida, medrisona, metilprednisolona, acetato de metprednisolona, succinato de sódio de metilprednisolona, furoato de mometasona, acetato de parametasona, prednisolona, acetato de prednisolona, fosfato de sódio de prednisolona, tebuatato de prednisolona, prednisona, triancinolona, acetonida de triancinolona, diacetato de triancinolona, e hexacetonida de triancinolona e outros agentes anti-inflamatórios incluindo, mas não limitados a, metotrexato, colcicina, alopurinol, probenecid, talidomida ou um derivado dos mesmos, ácido 5-aminossalicílico, retinoide, ditranol ou calcipotriol, sulfinpirazona e benzbromarona.
[000305] Os agentes antivirais usados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, inibidores de protease, inibidores de transcriptase reversa de nucleosídeo/nucleotídeo (NRTIs), inibidores de transcriptase reversa de não-nucleosídeo (NNRTIs), antagonista de CCR1, antagonistas de CCR5, e análogos de nucleosídeo. Os agentes antivirais incluem mas não são limitados a fomivirsen, didanosina, lamivudina, estavudina, zalcitabina, zidovudina, aciclovir, fanciclovir, valaciclovir, ganciclovir, gangciclovir, cidofovir, zanamivir, oseltamavir, vidarabina, idoxuridina, trifluridina, levovirina, viramidina e ribavirina, como também foscarnet, amantadina, rimantadina, saquinavir, indinavir, nelfnavir, amprenavir, lopinavir, ritonavir, as α-interferons; β- interferonas; adefovir, clevadina, entecavir, pleconarila, HCV-086, EMZ702, entricitabina, celgosivir, valopicitabina, inibidores de HCV protease, tais como BILN 2061, SCH-503034, ITMN-191 ou VX-950, inibidores de NS5B polimerase tais como NM107 (e seu profármaco NM283), R1626, R7078, BILN1941, GSK625433, GILD9128 ou HCV- 796, efavirenz, HBY-097, nevirapina, TMC-120 (dapivirina), TMC-125, BX-471, etravirina, delavirdina, DPC-083, DPC-961, capravirina, rilpivirina, 5-{[3,5-dietil-1-(2-hidroxietil)-1H-pirazol-4-il]óxi}isoftalonitrila, GW-678248, GW-695634, MIV-150, calanolida, TAK-779, SC-351125, ancriviroc, vicriviroc, maraviroc, PRO-140, aplaviroc 40, Ono-4128, AK- 602), AMD-887 CMPD-167, metila 1-endo-{8-[(3S)-3-(acetilamino)-3- (3-fluorofenil)propil]-8-azabiciclo[3.-2.1]oct-3-il}-2-metil-4,5,6,7- tetraidro-1H-imidazo[4,5-c]piridino-5-carboxilato, 3-endo-{8-[(3S)-3- (acetamido)-3-(3-fluorofenil)propil]-8-azabiciclo [3.2.-1]oct-3-il}-2-metil- 4,5,6,7-tetraidro-3H-imidazo[4,5-c]piridino-5-carboxilato de metila, 1- endo-{8-[(3S)-3-(acetilamino)-3-(3-fluorofenil)propil]-8-azabiciclo[3.- 2.1]oct-3-il}-2-metil-4,5,6,7-tetraidro-1H-imidazo[4,5-c]piridino-5-car- boxilato de etila, e N-{(1S)-3-[3-endo-(5-Isobutiril2-metil-4,5,6,7- tetraidro-1H-imidazo[4,-5-c]piridin-1-il)-8-azabiciclo[3.2.1]oct-8-il]-1-(3- fluorofenil)propil} acetamida), BMS-806, BMS-488043, metilamida de ácido 5-{(1S)-2-[(2R)-4-benzoil2-metil-piperazin-1-il]-1-metil-2-oxo- etóxi}-4-metóxi-piridino-2-carboxílico e 4-{(1S)-2-[(2R)-4-benzoil-2- metil-piperazin-1-il]-1-metil-2-oxo-etóxi}-3-metóxi-N-metil-benzamida, enfuvirtide (T-20), sifuvirtide SP-01A, T1249, PRO 542, AMD-3100, CD4 solúvel, inibidores de HMG CoA reductase, atorvastatina, 3-O- (3'3’-dimetilsuccinil) ácido betúlico (do contrário conhecido como PA- 457) e αHGA.
[000306] Os agentes imunomoduladores usados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, azatioprina, tacrolimo, ciclosporina metotrexato, leflunomida, corticosteroides, ciclofosfamida, ciclosporina A, ciclosporina G, micofenolato de mofetila, ascomicina, rapamicina (sirolimo), FK-506, mizoribina, deoxispergualina, brequinar, ácido micofenólico, malononitriloamidas (tais como, por via de exemplo apenas, leflunamida), moduladores do receptor de célula T, e moduladores do receptor de citocina, peptidomiméticos, e anticorpos (tais como, por via de exemplo apenas, humanos, humanizados, quiméricos, monoclonais, policlonais, fragmentos Fvs, ScFvs, Fab ou F(ab)2 ou fragmentos ligantes de epítopo), moléculas de ácido nucleico (tais como, por via de exemplo apenas, moléculas de ácido nucleico antissentido e hélices tripla), moléculas pequenas, compostos orgânicos, e compostos inorgânicos. Exemplos de moduladores do receptor célula T incluem, mas não são limitados a, anticorpos antirreceptor de célula T (tais como, por via de exemplo apenas, anticorpos anti-CD4 (tais como, por via de exemplo apenas, cM-T412 (Boehringer), IDEC-CE9.1™ (IDEC e SKB), mAB 4162W94, Orthoclone e OKTcdr4a (Janssen-Cilag)), anticorpos anti-CD3 (tais como, por via de exemplo apenas, Nuvion (Product Design Labs), OKT3 (Johnson & Johnson), ou Rituxan (IDEC)), anticorpos anti-CD5 (tais como, por via de exemplo apenas, um imunoconjugado ligado à ricicina anti-CD5), anticorpos anti-CD7 (tais como, por via de exemplo apenas, CHH-380 (Novartis)), anticorpos anti-CD8, anticorpos monoclonais ligantes de anti-CD40 (tais como, por via de exemplo apenas, IDEC-131 (IDEC)), anticorpos anti-CD52 (tais como, por via de exemplo apenas, CAMPATH 1H (Ilex)), anticorpos anti-CD2, anticorpos anti-CD11a (tais como, por via de exemplo apenas, Xanelim (Genentech)), anticorpos anti-B7 (tais como, por via de exemplo apenas, IDEC-114 (IDEC)), CTLA4-imunoglobulina, e outros moduladores do receptor de Toll-símile (TLR). Exemplos de moduladores do receptor de citocina incluem, mas não são limitados a, receptores de citocina solúvel (tais como, por via de exemplo apenas, o domínio extracelular de um receptor de TNF-α ou um fragmento do mesmo, o domínio extracelular de um receptor de IL-1β ou um fragmento do mesmo, e o domínio extracelular de um receptor de IL-6 ou um fragmento do mesmo), citocinas ou seus fragmentos (tais como, por via de exemplo apenas, interleucina (IL)-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL- 7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-15, TNF-alfa, interferona (IFN)-α, IFN-β, IFN-Y, e GM-CSF), anticorpos do receptor de anti-citocina (tais como, por via de exemplo apenas, anticorpos do receptor de anti-IFN, anticorpos do receptor de anti-IL-2 (tais como, por via de exemplo apenas, Zenapax (Protein Design Labs)), anticorpos do receptor anti- IL-4, anticorpos do receptor anti-IL-6, anticorpos do receptor anti-IL-10, e anticorpos do receptor anti-IL-12), anticorpos anti-citocina (tais como, por via de exemplo apenas, anticorpos anti-IFN, anticorpos anti-TNF-α, anticorpos anti-IL-1β, anticorpos anti-IL-6, anticorpos anti-IL-8 (tais como, por via de exemplo apenas, ABX-IL-8 (Abgenix)), e anticorpos anti-IL-12).
[000307] As citocinas ou modulador da função das citocinas usadas em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitadas a, interleucina-2 (IL-2), interleucina-3 (IL-3), interleucina-4 (IL-4), interleucina-5 (IL-5), interleucina-6 (IL-6), interleucina-7 (IL-7), interleucina-9 (IL-9), interleucina-10 (IL-10), interleucina-12 (IL-12), interleucina 15 (IL-15), interleucina 18 (IL-18), fator de crescimento derivado das plaquetas (PDGF), eritropoietina (Epo), fator de crescimento epidérmico (EGF), fator de crescimento de fibroblastos (FGF), fator estimulante de granulócitos-macrófagos (GM-CSF), fator estimulante da colônia de granulócitos (G-CSF), fator estimulante da colônia de macrófagos (M- CSF), prolactina, alfa-, beta-, e gama-interferona, interferona β-1a, interferona β-1b, interferona α-1, interferona α-2a (roferon), interferona α-2b, interferonas pegiladas (por via de exemplo apenas, peginterferona α-2a e peginterferona α-2b), íntron, PEG-íntron, Pegasys, interferona de consenso (infergen), albumina-interferona α e albuferona.
[000308] Os antidepressivos usados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, binedalina, caroxazona, citalopram, dimetazan, fencamina, indalpina, hidrocloreto de indeloxazina, nefopam, nomifensina, oxitriptan, oxipertina, paroxetina, sertralina, tiazesim, trazodona, benmoxina, iodeto de equinopsidina, etriptamina, iproclozida, iproniazid, isocarboxazid, mebanazina, metfendrazina, nialamida, pargilina, octamoxina, fenelzina, feniprazina, fenoxipropazi- na, pividrazina, safrazina, selegilina, l-deprenila, cotinina, roliciprina, rolipram, maprotilina, metralindol, mianserina, mirtazepina, adinazolam, amitriptilina, amitriptilinóxido, amoxapina, butriptilina, clomipramina, demexiptilina, desipramina, dibenzepina, dimetacrina, dotiepina, doxepina, fluacizina, imipramina, N-óxido de imipramina, iprindol, lofepramina, melitraceno, metapramina, nortriptilina, noxiptilina, opipramol, pizotilina, propizepina, protriptilina, quinupramina, tianeptina, trimipramina, adrafinila, benactizina, bupropion, butacetina, dioxadrol, duloxetina, etoperidona, febarbamato, femoxetina, fenpentadiol, fluoxetina, fluvoxamina, hematoporfirina, hipericina, levofacetoperano, medifoxamina, milnacipran, minaprina, moclobemida, nefazodona, oxaflozana, piberalina, prolintano, pirissuccideanol, ritanserina, roxindol, cloreto de rubídio, sulpirida, tandospirona, tozalinona, tofenacina, toloxatona, tranilcipromina, L-triptofano, venlafaxina, viloxazina, e zimeldina.
[000309] Em certas modalidades, os antidepressivos usados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, são inibidores de MAO incluindo, mas não é limitados a, benmoxina, iodeto de equinopsidina, etriptamina, iproclozida, iproniazid, isocarboxazid, mebanazina, metfendrazina, moclobamida, nialamida, pargilina, fenelzina, feniprazina, fenoxipropazina, pividrazina, safrazina, selegilina, l-deprenila, toloxatona e tranilcipromina.
[000310] Os hormônios usados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, hormônio de liberação de hormônio luteinizante (LHRH), hormônio de crescimento (GH), hormônio de liberação de hormônio de crescimento, ACTH, somatostatina, somatotropina, somatomedina, hormônio da paratiroide, fatores de liberação hipotalâmicos, insulina, glucagon, encefalinas, vasopressina, calcitonina, heparina, heparinas de peso molecular baixo, heparinoides, timostimulina, opioides sintéticos e naturais, hormônios estimulantes da tiroide de insulina, e endorfinas.
[000311] Os agentes de alquilação usados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, mostardas de nitrogênio, etileniminas, metilmelaminas, sulfonatos de alquila, nitrosoureias, carmustina, lomustina, triazenos, melfalano, mecloretamina, cis-platina, oxaliplatina, carboplatina, ciclofosfamida, ifosfamida, melfalano, clorambucila, hexametilmelaina, tiotepa, bussulfano, carmustina, estreptozocina, dacarbazina e temozolomida.
[000312] Os antimetabólitos usados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, citarabile, gencitabina e antifolatos tais como, por via de exemplo apenas, fluoropirimidinas (por via de exemplo apenas, 5- fluorouracila e tegafur), raltitrexed, metotrexato, arabinosídeo de citosina, e hidroxiureia.
[000313] Os antibióticos antitumorais em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, antraciclinas, bleomicina, doxorrubicina, daunomicina, epirrubicina, idarrubicina, mitomicina-C, dactinomicina e mitramicina.
[000314] Os agentes antimitóticos usados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, alcaloides de vinca (por via de exemplo apenas, vincristina, vinblastina, vindesina e vinorelbina), taxoides (por via de exemplo apenas, taxol, paclitaxel e taxotere) e inibidores de polocinase.
[000315] Os inibidores de topoisomerase usados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, por via de exemplo apenas epipodofilotoxinas, etoposídeo e teniposídeo, ansacrina, topotecan, irinotecan e camptotecina.
[000316] Os agentes citoestáticos usados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, antioestrogênios (tais como, por via de exemplo apenas, tamoxifeno, fulvestrant, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno e iodoxifeno), antiandrogênios (tais como, por via de exemplo apenas, bicalutamida, flutamida, nilutamida e acetato de ciproterona), antagonistas de LHRH ou agonistas de LHRH (tais como, por via de exemplo apenas, goserrelina, leuprorrelina, leuprolida e buserrelina), progestogênios (tais como, por via de exemplo apenas, acetato de megestrol), inibidores de aromatase (tais como, por via de exemplo apenas, como anastrozol, letrozol, vorazol e exemestano) e inibidores de 5α-reductase (tais como, por via de exemplo apenas, finasterida).
[000317] Os agentes de anti-invasão usados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, inibidores de família de c-Src cinase (tais como, por via de exemplo apenas, 4-(6-cloro-2,3-metilenodioxianilino)-7-[2-(4- metilpiperazin-l-il)etóxi]-5-tetraidropiran-4-iloxiquinazolina (AZD0530) e N-(2-cloro-6-metilfenil)-2-{6-[4-(2-hidroxietil)piperazin-l-il]-2- metilpirimidin-4-ilamino}tiazol-5-carboxamida (dasatinib, BMS- 354825)), e inibidores de metaloproteinase (tais como, por via de exemplo apenas, marimastat, inibidores dos anticorpos da função do receptor do ativador de plasminogênio da urocinase para Heparanase).
[000318] Os agentes antiangiogênicos usados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, aqueles tais como que inibem os efeitos do fator de crescimento endotelial vascular, por via de exemplo apenas, anticorpo do fator de crescimento de célula endotelial antivascular bevacizumab (AVASTIN™) e inibidores da tirosina cinase do receptor de VEGF tais como 4-(4-bromo-2-fluoroanilino)-6-metóxi-7-(l-metilpiperidin-4- ilmetóxi)quinazolina (ZD6474), 4-(4-flúor-2-metilindol-5-ilóxi)-6-metóxi- 7-(3-pirrolidin-1-ilpropóxi)quinazolina (AZD2171), vatalanib (PTK787) e SUl 1248 (sunitinib), linomide, e inibidores da função de integrina αvβ3 e angiostatina.
[000319] Os inibidores da função do fator de crescimento usados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, anticorpos do fator de crescimento e anticorpos do receptor do fator de crescimento (tais como, por via de exemplo apenas, o anticorpo anti-erbB2 trastuzumab (HERCEPTIN™), o anticorpo anti-EGFR panitumumab, o anticorpo anti-erbBl cetuximab (Erbitux, C225), inibidores da tirosina cinase, tais como, por via de exemplo apenas, inibidores da família do fator de crescimento epidérmico (por exemplo inibidores da família da tirosina cinase de EGFR tais como, por via de exemplo apenas, N-(3-cloro-4-fluorofenil)- 7-metóxi-6-(3-orfolinopropóxi)quinazolin-4-amina (gefitinib, ZDl 839), N-(3-etinilfenil)-6,7-bis(2-metoxietóxi)quinazolin-4-amina (erlotinib, OSI-774) e 6-acrilamido-N-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(3- morfolinopropóxi)-quinazolin-4-amina (CI 1033), inibidores da tirosina cinase de erbB2 tais como, por via de exemplo apenas, lapatinib, inibidores da família do fator de crescimento de hepatócitos, inibidores da família do fator de crescimento derivado de plaquetas tais como imatinib, GLEEVEC™, inibidores das serina/treonina cinases (tais como, por via de exemplo apenas, inibidores da sinalização de Ras/Raf tais como inibidores de farnesil transferase, por exemplo sorafenib (BAY 43-9006)), inibidores de sinalização celular por meio das cinases MEK e/ou AKT, inibidores da família do fator de crescimento de hepatócitos, inibidores de c-kit, inibidores da abl cinase, receptor de IGF (fator de crescimento insulino-símile) inibidores da cinase; inibidores da aurora cinase (por exemplo AZDl 152, PH739358, VX-680, MLv8054, R763, MP235, MP529, VX-528 E AX39459) e inibidores da cinase ciclina-dependente tais como inibidores de CDK2 e/ou de CDK4.
[000320] Em outras modalidades, pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, é usado em combinação com agentes prejudiciais vasculares tais como, por via de exemplo apenas, Combretastatina A4.
[000321] Em outras modalidades, pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, é usado em combinação com terapias antissentido, tais como, por via de exemplo apenas, ISIS 2503, um anti-ras antissentido.
[000322] Em outras modalidades, pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, é usado em combinação com abordagens de terapia de gene, incluindo por exemplo abordagens para substituir genes aberrantes tais como p53 aberrante ou BRCA1 ou BRCA2 aberrantes, abordagens de GDEPT (terapia de pro-fármacos de enzima direcionada para gene) tais como aquelas usando citosina desaminase, timidina cinase ou uma enzima de nitrorreductase bacteriana e abordagens para aumentar a tolerância do paciente à quimioterapia ou radioterapia tal como terapia de gene de resistência a multifármacos.
[000323] Em outras modalidades, pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, é usado em combinação com abordagens de imunoterapia, incluindo por exemplo abordagens ex vivo e in vivo para aumentar a imunogenicidade das células tumorais do paciente, tal como transfecção com citocinas tais como interleucina 2, interleucina 4 ou fator estimulante da colônia de granulócitos-macrófagos, abordagens para diminuir a anergia das células T, abordagens usando células imunes transfeccionadas tais como células dendríticas transfeccionadas com citocina, abordagens usando linhagens de células tumorais transfeccionadas com citocina e abordagens usando anticorpos anti-idiotípicos.
[000324] Em outras modalidades, pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, é usado em combinação com outros métodos de tratamento incluindo, mas não limitados a, cirurgia e radioterapia (radiação Y, radioterapia de feixe de nêutrons, radioterapia de feixe de elétrons, terapia de próton, braquiterapia, e isótopos radioativos sistêmicos).
[000325] Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I) fornecidos aqui, ou sais farmaceuticamente aceitáveis e solvatos dos mesmos, são administrados ou formulados em combinação com um intensificador de absorção, incluindo, mas não limitados a, glicocolato de sódio, caprato de sódio, N-lauril-β-D-maltopiranosideo, EDTA, e micelas misturadas. Em certas modalidades, tais intensificadores de absorção visam o sistema linfático.
[000326] Em certas modalidades, o(s) agente(s) terapêutico(s) adicional(is) usado(s) nas terapias de combinação descritas aqui incluem, mas não são limitados a, agentes tais como inibidores do fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) (tais como anticorpos monoclonais anti-TNF (por via de exemplo apenas, Remicade, CDP- 870 e adalimumab) e moléculas da imunoglobulina do receptor de TNF (por via de exemplo apenas, Enbrel)); inibidores de ciclo-oxigenase não-seletiva de COX-l/COX-2 (por via de exemplo apenas, piroxicam, diclofenaco, ácidos propiônicos tais como naproxeno, flubiprofeno, fenoprofeno, cetoprofeno e ibuprofeno, fenamatos tais como ácido mefenâmico, indometacina, sulindaco, azapropazona, pirazolonas tais como fenilbutazona, salicilatos tais como aspirina), inibidores de COX- 2 (por via de exemplo apenas, meloxicam, celecoxib, rofecoxib, valdecoxib, lumarocoxib, parecoxib e etoricoxib); glucocorticosteroides; metotrexato, lefunomida; hidroxicloroquina, d-penicilamina, auranofina ou outras preparações de ouro parenterais ou orais.
[000327] Em outras modalidades, as combinações descritas aqui incluem combinação de um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com um inibidor da biossíntese de leucotrieno, inibidor de 5-lipoxigenase (5-LO) ou antagonista da proteína ativadora de 5-lipoxigenase (FLAP) tal como; zileuton; ABT-761; fenleuton; tepoxalina; Abbott-79175; Abbott- 85761; uma N-(5-substituída)-tiofeno-2-alquilsulfonamida; 2,6-di-terc- butilfenolidrazonas; uns metoxitetraidropiranos tais como Zeneca ZD- 2138; composto de SB-210661; um composto de 2-cianonaftaleno piridinil-substituído tal como L-739.010; um composto de 2- cianoquinolina tal como L-746,530; ou um composto de indol ou de quinolina tal como MK-591, MK-886, e BAYx1005.
[000328] Em outras modalidades, as combinações descritas aqui incluem combinação de um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com antagonista de receptor para leucotrienos (LT B4, LTC4, LTD4, e LTE4) selecionado do grupo que consiste nos fenotiazin-3-ilas tais como L-651.392; compostos de amidino tais como CGS-25019c; benzoxalaminas tais como ontazolast; benzenocarboximidamidas tais como BIIL 284/260; e compostos tais como zafirlukast, ablukast, montelukast, SINGULAIR™, pranlukast, verlukast (MK-679), RG- 12525, Ro-245913, iralukast (CGP 45715A), e BAYx7195.
[000329] Em outras modalidades, as combinações descritas aqui incluem combinação de um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com um inibidor de fosfodiesterase (PDE) tal como uma metilxantanina incluindo teofilina e aminofilina; um inibidor seletivo da isoenzima de PDE incluindo um inibidor de PDE4, incluindo, mas não limitados a, cilomilast ou roflumilast, um inibidor da isoforma PDE4D, ou um inibidor de PDE5.
[000330] Em outras modalidades, as combinações descritas aqui incluem combinação de um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com um antagonista de receptor de histamina tipo 1 tal como cetirizina, loratadina, desloratadina, fexofenadina, acrivastina, terfenadina, astemizol, azelastina, levocabastina, clorfeniramina, prometazina, ciclizina, ou mizolastina.
[000331] Em outras modalidades, as combinações descritas aqui incluem combinação de um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com um antagonista do receptor de histamina gastroprotetor tipo 2. Em outras modalidades, as combinações descritas aqui incluem combinação de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, descrito aqui, com antagonista do receptor de histamina tipo 4.
[000332] Em outras modalidades, as combinações descritas aqui incluem combinação de um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com um agente simpatomimético vasoconstritor do agonista de adrenoceptor alfa-1/alfa-2, tal como propilexedrina, fenilefrina, fenilpropanolamina, efedrina, pseudoefedrina, cloridrato de nafazolina, cloridrato de oximetazolina, cloridrato de tetraidrozolina, cloridrato de xilometazolina, cloridrato de tramazolina ou cloridrato de etilnorepinefrina.
[000333] Em outras modalidades, as combinações descritas aqui incluem combinação de um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com um agente anticolinérgico incluindo antagonistas do receptor muscarínico (M1, M2, e M3) tais como atropina, hioscina, glicopirrolato, brometo de ipratrópio, brometo de tiotrópio, brometo de oxitrópio, pirenzepina ou telenzepina.
[000334] Em outras modalidades, as combinações descritas aqui incluem combinação de um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com um agonista de beta-adrenoceptor (incluindo receptor beta subtipos 1-4) tal como isoprenalina, salbutamol, albuterol, formoterol, salmeterol, terbutalina, orciprenalina, mesilato de bitolterol, e pirbuterol.
[000335] Em outras modalidades, as combinações descritas aqui incluem combinação de um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com uma cromona, tal como cromoglicato de sódio ou nedocromil de sódio.
[000336] Em outras modalidades, as combinações descritas aqui incluem combinação de um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com um mimético do fator de crescimento insulino-símile tipo I (IGF-I).
[000337] Em outras modalidades, as combinações descritas aqui incluem combinação de um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com um glicocorticoide, tal como flunisolida, triancinolona acetonida, dipropionato de beclometasona, budesonida, propionato de fluticasona, ciclesonida ou furoato de mometasona.
[000338] Em outras modalidades, as combinações descritas aqui incluem combinação de um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com um inibidor das metaloproteases de matriz (MMPs), isto é, as estromelisinas, as colagenases, e as gelatinases, como também agrecanase; especialmente colagenase-1 (MMP-I), colagenase-2 (MMP-8), colagenase-3 (MMP-13), estromelisina-1 (MMP-3), estromelisina-2 (MMP-IO), e estromelisina-3 (MMP-Il) e MMP-9 e MMP-12.
[000339] Em outras modalidades, as combinações descritas aqui incluem combinação de um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com moduladores da função do receptor de quimocina tal como antagonistas de CCR1, CCR2, CCR2A, CCR2B, CCR3, CCR4, CCR5, CCR6, CCR7, CCR8, CCR9, CCRlO e CCRl 1 (para a família de C-C); CXCRl, CXCR2, CXCR3, CXCR4 e CXCR5 (para a família de C-X-C) e CX3CR1 para a família de C-X3-C.
[000340] Em outras modalidades, as combinações descritas aqui incluem combinação de um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com uma imunoglobulina (Ig), globulina gama, preparação de Ig ou antagonista ou anticorpo que modulam a função de Ig tal como anti-IgE (omalizumab).
[000341] COMPOSTOS DA FÓRMULA (I) COMO POTENCIADORES IMUNES
[000342] Em certas modalidades, as composições farmacêuticas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, são composições imunogênicas. Em certas modalidades, tais composições imunogênicas são úteis como vacinas. Em certas modalidades, tais vacinas são profilácticas (isto é, para impedir infecção), enquanto em outras modalidades, tais vacinas são terapêuticas (isto é, para tratar infecção).
[000343] Em outras modalidades, o(s) composto(s) da Fórmula (I) fornecido(s) aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, são potencializadores imunes e dão um efeito imunoestimulante sob administração quando comparado às formulações imunogênicas que não contêm nenhum composto da Fórmula (I). Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I) dão um efeito imunoestimulante sob administração quando inclusos em uma composição imunogênica que tem um ou mais agentes imunorreguladores, enquanto em outras modalidades, os compostos da Fórmula (I) dão um efeito imunoestimulante sob administração quando inclusos em uma composição imunogênica sem a presença de outros agentes imunorreguladores.
[000344] O efeito imunoestimulante referido aqui é frequentemente uma intensificação do efeito da composição imunogênica. Em certas modalidades a intensificação da eficácia da composição imunogênica é por pelo menos 10% com relação ao efeito da composição imunogênica na ausência do potencializador imune. Em certas modalidades a intensificação da eficácia da composição imunogênica é por pelo menos 20% com relação ao efeito da composição imunogênica na ausência do potencializador imune. Em certas modalidades a intensificação da eficácia da composição imunogênica é por pelo menos 30% com relação ao efeito da composição imunogênica na ausência do potencializador imune. Em certas modalidades a intensificação da eficácia da composição imunogênica é por pelo menos 40% com relação ao efeito da composição imunogênica na ausência do potencializador imune. Em certas modalidades a intensificação da eficácia da composição imunogênica é por pelo menos 50% com relação ao efeito da composição imunogênica na ausência do potencializador imune. Em certas modalidades a intensificação da eficácia da composição imunogênica é por pelo menos 60% com relação ao efeito da composição imunogênica na ausência do potencializador imune. Em certas modalidades a intensificação da eficácia da composição imunogênica é por pelo menos 70% com relação ao efeito da composição imunogênica na ausência do potencializador imune. Em certas modalidades a intensificação da eficácia da composição imunogênica é por pelo menos 80% com relação ao efeito da composição imunogênica na ausência do potencializador imune. Em certas modalidades a intensificação da eficácia da composição imunogênica é por pelo menos 90% com relação ao efeito da composição imunogênica na ausência do potencializador imune. Em certas modalidades a intensificação da eficácia da composição imunogênica é por pelo menos 100% com relação ao efeito da composição imunogênica na ausência do potencializador imune.
[000345] Em certas modalidades, a intensificação do efeito da composição imunogênica é medida pela efetividade aumentada da composição imunogênica para alcançar seus efeitos protetores. Em certas modalidades, esta efetividade aumentada é medida como uma probabilidade diminuída que um sujeito recebendo a composição imunogênica sofrerá de uma condição para a qual a composição imunogênica é considerada protetora, ou uma diminuição na duração ou severidade dos efeitos de tal condição. Em outras modalidades, esta efetividade aumentada é medida como um aumento em uma titulação de um anticorpo suscitado pela composição imunogênica em um sujeito tratado.
[000346] Junto com um ou mais compostos da Fórmula (I) fornecidos aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato dos mesmos, tais composições imunogênicas incluem uma quantidade efetiva de um ou mais antígenos, e um veículo farmaceuticamente aceitável. Tais veículos incluem, mas não são limitados a, proteínas, polissacarídeos, ácidos polilácticos, ácidos poliglicólicos, aminoácidos poliméricos, copolímeros de aminoácido, sacarose, trealose, lactose, agregados de lipídio (tais como gotículas de óleo ou lipossomas), e partículas de vírus inativas. As composições imunogênicas tipicamente também contêm diluentes, tais como água, solução salina, e glicerol, e opcionalmente contêm outros excipientes, tais como agentes intumescentes ou emulsificantes, e substâncias de tamponação de pH.
[000347] Em certas modalidades, as composições imunogênicas opcionalmente incluem um ou mais agentes imunorreguladores. Em certas modalidades, um ou mais dos agentes imunorreguladores incluem um ou mais adjuvantes. Tais adjuvantes incluem, mas não são limitados a, um adjuvante de TH1 e/ou um adjuvante de TH2, ainda debatidos abaixo. Em certas modalidades, os adjuvantes usados nas composições imunogênicas fornecidas aqui incluem, mas não são limitados a: A. Composições contendo mineral; B. Emulsões de óleo; C. Formulações de saponina; D. Virossomas e partículas vírus-símiles; E. Derivados bacterianos ou microbianos; F. Imunomoduladores humanos; G. Bioadesivos e mucoadesivos; H. Micropartículas; I. Lipossomas; J. Formulações de éter de polioxietileno e éster de polioxietileno; K. Polifosfazeno (PCPP); L. Peptídeos de muramila, e M. Compostos de imidazoquinolona.
[000348] Composições contendo mineral adequadas para o uso como adjuvantes incluem, mas não são limitadas a, sais minerais, tais como sais de alumínio e sais de cálcio. Por via de exemplo apenas, tais sais minerais incluem, hidróxidos (por exemplo óxi-hidróxidos, incluindo hidróxidos de alumínio e óxi-hidróxidos de alumínio), fosfato (por exemplo hidroxifosfatos e ortofosfatos, incluindo fosfato de alumínio, hidroxifosfatos de alumínio, ortofosfatos de alumínio e fosfato de cálcio), sulfatos (por exemplo sulfato de alumínio), ou misturas de diferentes compostos minerais. Tais sais minerais são em qualquer forma adequada, tal como, por via de exemplo apenas, gel, formas cristalinas, e amorfas. Em certas modalidades, tais composições contendo minerais são formuladas como uma partícula do sal de metal. Em certas modalidades, componentes das composições imunogênicas descritas aqui são adsorvidos em tais sais minerais. Em certas modalidades, um adjuvante de hidróxido de alumínio e/ou de fosfato de alumínio é usado nas composições imunogênicas descritas aqui. Em outras modalidades, antígenos usados em uma composição imunogênica descrita aqui são adsorvidos em tais adjuvantes de hidróxido de alumínio e/ou de fosfato de alumínio. Em certas modalidades, um adjuvante de fosfato de cálcio é usado nas composições imunogênicas descritas aqui. Em outras modalidades, os antígenos usados em uma composição imunogênica descrita aqui são adsorvidos em tais adjuvantes de fosfato de cálcio.
[000349] Em certas modalidades, fosfato de alumínio é usado como um adjuvante nas composições imunogênicas descritas aqui. Em outras modalidades, fosfato de alumínio é usado como um adjuvante nas composições imunogênicas descritas aqui, em que tais composições incluem um antígeno de sacarídeo de H. influenzae. Em certas modalidades, o adjuvante é hidroxifosfato de alumínio amorfo com uma razão molar de PO4/Al entre 0,84 e 0,92, incluso 0,6 mg de Al3+/ml. Em outras modalidades, adsorção com uma baixa dose de fosfato de alumínio é usada, por via de exemplo apenas, entre 50 e 100 μg de Al3+ por conjugado por dose. Onde houver mais de um conjugado em uma composição, nem todos os conjugados necessitam ser adsorvidos.
[000350] Emulsões de óleo adequado para uso como adjuvantes incluem, mas não são limitados a, emulsões de esqualeno-água (tais como MF59 (5% de Esqualeno, 0,5% de Tween 80, e 0,5% de Span 85, formulados em partículas de submicron usando um microfluidizador), adjuvante de Freund Completo (CFA) e adjuvante de Freund incompleto (IFA).
[000351] Saponinas são um grupo heterólogo de glicosídeos de esterol e glicosídeos de triterpenoide que são encontrados na casca, folhas, talos, raízes e até mesmo flores de uma gama extensiva de espécies de planta. Formulações de saponina adequadas para o uso como adjuvantes incluem, mas não são limitadas a, saponinas da casca da árvore de Quillaia saponaria, de Smilax ornata (salsaparrilha), Gypsophilla paniculata (mosquitinho), e Saponaria officianalis (saponária). Em certas modalidades, as formulações de saponina adequadas para o uso como adjuvantes incluem, mas não são limitadas a, formulações purificadas incluindo, mas não se limitam a, QS7, QS17, QS18, QS21, QH-A QH-B e QH-C. QS21 é comercializado como STIMULOM™. Em outras modalidades, as formulações de saponina incluem esteróis, colesteróis e formulações lipídicas, tais como partículas únicas formadas pelas combinações das saponinas e dos colesteróis chamadas complexos imunoestimulante (ISCOMs). Em certas modalidades, os ISCOMs também incluem um fosfolipídeo tal como fosfatidiletanolamina ou fosfatidilcolina. Qualquer saponina conhecida pode ser usada em ISCOMs. Em certas modalidades, o ISCOM inclui uma ou mais de QuilA, QHA & QHC. Em outras modalidades, os ISCOMS são opcionalmente destituídos de um detergente adicional.
[000352] Virossomas e partículas semelhantes a vírus (VLPs) adequadas para o uso como adjuvantes incluem, mas não são limitados a, uma ou mais proteínas de um vírus opcionalmente combinado ou formulado com um fosfolipídeo. Tais virossomas e VLPs são em geral não-patogênicos, não-replicativos e em geral não contêm nada do genoma viral nativo. Em certas modalidades, as proteínas virais são recombinantemente produzidas, enquanto em outras modalidades as proteínas virais são isoladas do vírus inteiro.
[000353] As proteínas virais adequadas para o uso em virossomas ou VLPs incluem, mas não são limitadas a, proteínas derivadas do vírus influenza (tais como HA ou NA), vírus da hepatite B (tais como proteína de núcleo ou de capsídeo), vírus da hepatite E, vírus do sarampo, vírus de Sindbis, rotavírus, vírus da doença do pé-e-boca, retrovírus, vírus de Norwalk, vírus do papiloma humano, HIV, RNA- fagos, Qβ-fago (tais como proteínas de revestimento), GA-fago, fr- fago, fago de AP205, e Ty (tais como proteína de retrotransposon Ty p1).
[000354] Derivados bacterianos ou microbianos adequados para o uso como adjuvantes incluem, mas não são limitados a, derivados bacterianos ou microbianos tais como derivados não-tóxicos de lipopolissacarídeo enterobacteriano (LPS), derivados de Lipídio A, oligonucleotídeos imunoestimulantes e toxinas de ribosilação de PAD e derivados desintoxicados dos mesmos. Tais derivados não-tóxicos de LPS incluem, mas não são limitados a, lipídio de monofosforila A (MPL) e MPL 3-O-desacilado (3dMPL). 3dMPL é uma mistura de lipídio A de monofosforila de 3 des-O-acilado com 4, 5 ou 6 cadeias aciladas. Outros derivados de LPS não-tóxicos incluem miméticos de lipídio A de monofosforila, tais como derivados de fosfato de glucosaminida de aminoalquila (por exemplo RC-529). Derivados de lipídio A incluem, mas não são limitados a, derivados de lipídio A de Escherichia coli (por exemplo OM-174).
[000355] Oligonucleotídeos imunoestimulantes usados como adjuvantes incluem, mas não são limitados a, sequências de nucleotídeo contendo um motivo de CpG (uma sequência de dinucleotídeo contendo uma citosina não-metilada ligada por uma ligação de fosfato a uma guanosina). Tais sequências de CpG podem ser bifilamentadas ou unifilamentadas. Em certas modalidades, tais sequências de nucleotídeo são RNA bifilamentado ou oligonucleotídeos contendo sequências palindrômicas ou poli(dG). Em outras modalidades, os CpGs incluem modificações/análogos de nucleotídeo tais como modificações de fosforotioato.
[000356] Em certas modalidades, a sequência de CpG é direcionada para TLR9, e em certas modalidades o motivo é GTCGTT ou TTCGTT. Em certas modalidades a sequência de CpG é específica para induzir uma resposta imune de Th1, tal como, por via de exemplo apenas, um ODN de CpG-ona, ou em outras modalidades a sequência de CpG é mais específica para induzir uma resposta de células B, tal como, por via de exemplo apenas, um ODN de CpG-B. Em certas modalidades, o CpG é um ODN de CpG-ona.
[000357] Em certas modalidades, o oligonucleotídeo de CpG é construído de modo que a terminação 5’ seja acessível para reconhecimento do receptor. Em outras modalidades, duas sequências de oligonucleotídeo de CpG são opcionalmente ligadas às suas terminações de 3’ para formar "imunômeros".
[000358] Um adjuvante particularmente útil com base nos oligonucleotídeos imunoestimulantes é conhecido como IC-31™. Em certas modalidades, um adjuvante usado com as composições imunogênicas descritas aqui inclui uma mistura de (I) um oligonucleotídeo (tal como, por via de exemplo apenas, entre 15-40 nucleotídeos) incluindo pelo menos um motivo (e preferivelmente múltiplos) de CpI (tal como, por via de exemplo apenas, uma citosina ligada a uma inosina para formar um dinucleotídeo), e (ii) um polímero policatiônico, tal como, por via de exemplo apenas, um oligopeptídeo (tal como, por via de exemplo apenas, entre 5-20 aminoácidos) incluindo pelo menos uma(s) (e preferivelmente múltiplas) sequência(s) de tripeptídeo de Lys-Arg-Lys. Em certas modalidades, o oligonucleotídeo é um deoxinucleotídeo que compreende sequência de 26-mer de 5’-(IC)13-3’. Em outras modalidades, o polímero policatiônico é um peptídeo que compreende a sequência de aminoácido de 11-mer KLKLLLLLKLK.
[000359] Em certas modalidades, toxinas bacterianas ribosilação de PAD e seus derivados desintoxicados são usados como adjuvantes nas composições imunogênicas descritas aqui. Em certas modalidades, tais proteínas são derivadas de E. coli (enterotoxina termoinstável de E. coli "LT"), cólera ("CT"), ou coqueluche ("PT"). Em outras modalidades, a toxina ou toxoide é na forma de uma holotoxina, compreendendo ambos as subunidades A e B. Em outras modalidades, a subunidade A contém uma mutação desintoxicante; enquanto que a subunidade B não é mutada. Em outras modalidades, o adjuvante é uma LT desintoxicada mutante tal como LT-K63, LT- R72, e LT-G192.
[000360] Os imunomoduladores humanos adequados para o uso como adjuvantes incluem, mas não são limitados a, citocinas, tais como, por via de exemplo apenas, interleucinas (IL-1, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-12), interferonas (tais como, por via de exemplo apenas, interferona-Y), fator estimulante da colônia de macrófagos, e fator de necrose tumoral.
[000361] Os bioadesivos e mucoadesivos usados como adjuvantes nas composições imunogênicas descritas aqui incluem, mas não são limitados a, microesferas de ácido hialurônico estereficado, e derivados de poli(ácido acrílico) reticulados, poli(álcool vinílico), polivinil pirolidona, polissacarídeos e carboximetilcelulose. Em certas modalidades, a quitosana e seus derivados são usados nas composições de vacina descritas aqui como adjuvantes.
[000362] As micropartículas adequadas para o uso como adjuvantes incluem, mas não são limitadas a, micropartículas formadas de materiais que são biodegradáveis e não-tóxicos (por exemplo um poli(hidróxi ácido alfa), um poli(ácido hidroxibutírico), um poliortoéster, um polianidreto, uma policaprolactona, etc.), com poli(lactídeo-co- glicolídeo). Em certas modalidades, tais micropartículas são tratadas para ter uma superfície negativamente carregada (por exemplo, com SDS) ou uma superfície positivamente carregada (por exemplo com um detergente catiônico, tal como CTAB). As micropartículas adequadas para o uso como adjuvantes têm um diâmetro de partícula de cerca de 100 nm a cerca de 150 μm em diâmetro. Em certas modalidades, o diâmetro de partícula é cerca de 200 nm a cerca de 30 μm, e em outras modalidades o diâmetro de partícula é cerca de 500 nm a 10 μm.
[000363] O éter de polioxietileno e formulações de éster de polioxietileno adequado para o uso como adjuvantes incluem, mas não são limitados a, tensoativos éster de polioxietileno sorbitan em combinação com um octoxinol, e éteres de polioxietileno alquila ou tensoativos de éster em combinação com pelo menos um tensoativo não-iônico adicional tal como um octoxinol. Em certas modalidades, os éteres de polioxietileno são selecionados de éter de polioxietileno-9- laurila (laurete 9), éter de polioxietileno-9-estearila, éter de polioxietileno-8-estearila, éter de polioxietileno-4-laurila, éter de polioxietileno-35-laurila, e éter de polioxietileno-23-laurila.
[000364] Os peptídeos de muramila adequados para o uso como adjuvantes incluem, mas não são limitados a, N-acetilmuramil-L- treonil-D-isoglutamina (thr-MDP), N-acetilnormuramil-L-alanil-D- isoglutamina (nem-MDP), e N-acetilmuramil-L-alanil-D-isoglutaminil-L- alanina-2-(1’-2’-dipalmitoils-n-glicero-3-hidroxifosforilóxi)-etilamina MTP-PE).
[000365] Em certas modalidades, um ou mais compostos da Fórmula (I) usados como um potencializador imune são incluídos nas composições que têm as combinações de um ou mais dos adjuvantes identificados acima. Tais combinações incluem, mas não são limitadas a: (1) uma saponina e uma emulsão de óleo-em-água; (2) uma saponina (por exemplo QS21) + um derivado de LPS não-tóxico (por exemplo 3dMPL); (3) uma saponina (por exemplo QS21) + um derivado de LPS não-tóxico (por exemplo 3dMPL) + um colesterol; (4) uma saponina (por exemplo QS21) + 3dMPTL + IL-12 (opcionalmente incluindo um esterol); (5) combinações de 3dMPL com, por exemplo, QS21 e/ou emulsões de óleo-em-água; (6) SAF, contendo 10% de esqualano, 0,4% de Tween 80™, 5% de plurônico-polímero bloco L121, e thr-MDP, ou microfluidizado em uma emulsão de submicron ou submetido a vórtice para gerar uma emulsão de tamanho de partícula maior. (7) sistema de adjuvante de RIBI™ (RAS), (Ribi Immunochem) contendo 2% de esqualeno, 0,2% de Tween 80, e um ou mais componentes da parede das células bacterianas do grupo que consiste em monofosforilipídeo A (MPL), dimicolato de trealose (TDM), e esqueleto da parede celular (CWS), preferivelmente MPL+CWS (Detox™); e (8) um ou mais sais minerais (tais como um sal) + um derivado de alumínio não-tóxico de LPS (tal como 3dMPL).
[000366] Em outras modalidades, as combinações de adjuvante usadas nas combinações imunogênicas fornecidas aqui incluem combinações dos adjuvantes Th1 e Th2 tais como, por via de exemplo apenas, CpG e alumínio ou resiquimod e alumínio.
[000367] Em certas modalidades, as composições imunogênicas fornecidas aqui suscitam tanto uma resposta imune mediada por célula como também uma resposta imune humoral. Em outras modalidades, a resposta imune induz anticorpos de longa duração (por exemplo neutralisando) e uma imunidade mediada por célula que rapidamente responde sob exposição ao agente infeccioso.
[000368] Dois tipos de células T, células CD4 e CD8, são em geral acreditadas ser necessárias para iniciar e/ou intensificar imunidade mediada por célula e imunidade humoral. Células T de CD8 podem expressar um correceptor de CD8 e podem ser comumente referidas como Linfócitos T Citotóxicos (CTLs). Células T de CD8 são capazes de reconhecer ou interagir com antígenos exibidos nas moléculas de MHC da Classe I.
[000369] Células T de CD4 podem expressar um correceptor de CD4 e podem ser comumente referidas como células T auxiliares. Células T de CD4 podem reconhecer peptídeos antigênicos ligados às moléculas de MHC da classe II. Sob interação com uma molécula de MHC da classe II, as células de CD4 podem segregar fatores tais como citocinas. Estas citocinas segregadas podem ativar as células B, células T citotóxicas, macrófagos, e outras células que participam em uma resposta imune. Células T auxiliares ou células de CD4+ podem ser ainda divididas em dois subconjuntos funcionalmente distintos: fenótipo de TH1 e fenótipos de TH2 que diferem em sua citocina e função efetora.
[000370] Células de TH1 ativadas intensificam a imunidade celular (incluindo um aumento na produção de CTL antígeno-específica) e são portanto de valor particular em responder às infecções intracelulares. Células de TH1 ativadas podem segregar uma ou mais de IL-2, IFN-Y, e TNF-β. Uma resposta imune de TH1 pode resultar em reações inflamatórias locais ativando os macrófagos, células NK (assassinas naturais), e células T citotóxicas de CD8 (CTLs). Uma resposta imune de TH1 pode também agir para expandir a resposta imune estimulando o crescimento das células B e T com IL-12. Células B estimuladas com TH1 podem segregar IgG2a.
[000371] Células de TH2 ativadas intensificam a produção de anticorpo e são portanto de valor em responder às infecções extracelulares. Células de TH2 ativadas podem segregar uma ou mais de IL-4, IL-5, IL-6, e IL-10. Uma resposta imune de TH2 que pode resultar na produção de IgG1, IgE, IgA e células B de memória para proteção futura.
[000372] Uma resposta imune intensificada pode incluir um ou mais de uma resposta imune de TH1 e uma resposta imune de TH2 intensificadas.
[000373] Uma resposta imune de TH1 pode incluir um ou mais de um aumento em CTLs, um aumento em uma ou mais das citocinas associadas com uma resposta imune de TH1 (tais como IL-2, IFN-y, e TNF-β), um aumento em macrófagos ativados, um aumento na atividade de NK, ou um aumento na produção de IgG2a. Preferivelmente, a resposta imune de TH1 intensificada incluirá um aumento na produção de IgG2a.
[000374] Adjuvantes de TH1 podem ser usados para suscitar uma resposta imune de TH1. Um adjuvante de TH1 em geral suscitará níveis aumentados de produção de IgG2a com relação à imunização do antígeno sem adjuvante. Adjuvantes de TH1 adequados para o uso nas composições imunogênicas fornecidas aqui incluem, mas não são limitados a, formulações de saponina, virossomas e partículas semelhantes a vírus, derivados não-tóxicos de lipopolissacarídeo enterobacteriano (LPS), oligonucleotídeos imunoestimulantes. Em certas modalidades, os oligonucleotídeos imunoestimulantes usados como adjuvantes de TH1 nas composições imunogênicas fornecidas aqui contêm um motivo de CpG.
[000375] Uma resposta imune de TH2 pode incluir um ou mais de um aumento em um ou mais das citocinas associadas com uma resposta imune de TH2 (tais como IL-4, IL-5, IL-6 e IL-10), ou um aumento na produção de IgG1, IgE, IgA e células B de memória. Preferivelmente, a resposta imune de TH2 intensificada incluirá um aumento na produção de IgG1.
[000376] Os adjuvantes de TH2 podem ser usados para suscitar uma resposta imune de TH2. Um adjuvante de TH2 em geral suscitará níveis aumentados de produção de IgG1 com relação à imunização do antígeno sem adjuvante. Adjuvantes de TH2 adequados para o uso nas composições imunogênicas fornecidas aqui incluem, mas não são limitados a, composições contendo minerais, emulsões de óleo, e toxinas ribosilantes de PAD e seus derivados desintoxicados. Em certas modalidades, as composições contendo minerais usadas como adjuvantes de TH2 nas composições imunogênicas fornecidas aqui são sais de alumínio.
[000377] Em certas modalidades, as composições imunogênicas fornecidas aqui incluem um adjuvante de TH1 e um adjuvante de TH2. Em outras modalidades, tais composições suscitam uma resposta de TH1 intensificada e uma de TH2 intensificada, tal como, um aumento na produção de IgG1 e produção de IgG2a com relação à imunização sem um adjuvante. Em ainda outras modalidades, tais composições compreendendo uma combinação de um adjuvante de TH1 e um de TH2 suscitam uma resposta imune de TH1 aumentada e/ou uma de TH2 aumentada com relação à imunização com um adjuvante só (isto é, com relação à imunização com um adjuvante de TH1 sozinho ou imunização com um adjuvante de TH2 sozinho).
[000378] Em certas modalidades, a resposta imune é uma ou ambos de uma resposta imune de TH1 e uma resposta de TH2. Em outras modalidades, a resposta imune fornece uma ou ambas de uma resposta de TH1 intensificada e uma resposta de TH2 intensificada.
[000379] Em certas modalidades, a resposta imune intensificada é uma ou ambas de uma resposta sistêmica e uma imune mucosa. Em outras modalidades, a resposta imune fornece uma ou ambas de uma resposta sistêmica intensificada e uma imune mucosa intensificada. Em certas modalidades, a resposta imune mucosa é uma resposta imune de TH2. Em certas modalidades, a resposta imune mucosa inclui um aumento na produção de IgA.
[000380] Em certas modalidades as composições imunogênicas fornecidas aqui são usadas como vacinas, em que tais composições incluem uma quantidade imunologicamente efetiva de um ou mais antígenos.
[000381] Antígenos para o uso nas composições imunogênicas fornecidas aqui podem ser fornecidos em uma quantidade efetiva (por exemplo, uma quantidade efetiva para o uso em métodos terapêuticos, profilácticos ou diagnósticos). Por exemplo, as composições imunogênicas da invenção podem ser usadas para tratar ou impedir infecções causadas por quaisquer dos patógenos abaixo listados.
[000382] Antígenos para o uso nas composições imunogênicas fornecidas aqui são tipicamente macromoléculas (por exemplo, polipeptídeos, polissacarídeos, polinucleotídeos) que são estranhas ao hospedeiro, e incluem, mas não são limitados a, um ou mais dos antígenos expostos abaixo, ou antígenos derivado de um ou mais dos patógenos expostos abaixo.
ANTÍGENOS BACTERIANOS
[000383] Antígenos bacterianos adequados para uso nas composições imunogênicas fornecidas aqui incluem, mas não são limitados a, proteínas, polissacarídeos, lipopolissacarídeos, polinucleotídeos, e vesículas de membrana externa que são isoladas, purificadas ou derivadas de uma bactéria. Em certas modalidades, os antígenos bacterianos incluem lisados bacterianos e formulações de bactéria inativadas. Em certas modalidades, os antígenos bacterianos são produzidos por meio de expressão recombinante. Em certas modalidades, os antígenos bacterianos incluem epítopos durante que ficam expostos na superfície das bactérias durante pelo menos um estágio de seu ciclo de vida. Antígenos bacterianos são preferivelmente conservados ao longo de sorotipos múltiplos. Em certas modalidades, os antígenos bacterianos incluem antígenos derivados de uma ou mais das bactérias expostas abaixo como também os exemplos de antígenos específicos identificados abaixo:
[000384] Neisseria meningitidis: antígenos de meningitidis incluem, mas não são limitados a, proteínas, sacarídeos (incluindo um polissacarídeo, oligossacarídeo, lipo-oligossacarídeo ou lipopolissacarídeo), ou vesículas de membrana externa purificada ou derivada do sorogrupo de N. meningitides tais como A, C, W135, Y, X e/ou B. Em certas modalidades, antígenos de proteína de meningitides foram selecionados de adesões, autotransportadores, toxinas, aquisição proteínas de Fe, e proteínas associadas à membrana (preferivelmente proteína de membrana externa integral).
[000385] Streptococcus pneumoniae: antígenos de Streptococcus pneumoniae incluem, mas não são limitados a, um sacarídeo (incluindo um polissacarídeo ou um oligossacarídeo) e/ou proteína de Streptococcus pneumoniae. O sacarídeo pode ser um polissacarídeo que tem o tamanho que surge durante a purificação do sacarídeo das bactérias, ou pode ser um oligossacarídeo alcançado por fragmentação de um tal polissacarídeo. No produto de PREVNAR™ de valência 7, por exemplo, 6 dos sacarídeos são apresentados como polissacarídeos intactos enquanto um (o sorotipo de 18C) é apresentado como um oligossacarídeo. Em certas modalidades, os antígenos de sacarídeo são selecionados de um ou mais dos sorotipos pneumocócicos seguintes 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6B, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 19A, 19F, 20, 22F, 23F, e/ou 33F. Uma composição imunogênica pode incluir sorotipos múltiplos por exemplo 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 ou mais sorotipos. Combinações de conjugado de valência 7, valência 9, valência 10, valência 11 e valência 13 já são conhecidas na técnica, como é uma combinação não conjugada de valência 23. Por exemplo, uma combinação de valência 10 pode incluir sacarídeo dos sorotipos 1, 4, 5, 6B, 7F, 9V, 14, 18C, 19F e 23F. Uma combinação valência 11 pode ainda incluir sacarídeo de sorotipo 3. Uma combinação de valência 12 pode acrescentar à mistura de valência 10: sorotipos 6A e 19A; 6A e 22F; 19A e 22F; 6A e 15B; 19A e 15B; r 22F e 15B; Uma combinação de valência 13 pode acrescentar à mistura de valência 11: sorotipos 19A e 22F; 8 e 12F; 8 e 15B; 8 e 19A; 8 e 22F; 12F e 15B; 12F e 19A; 12F e 22F; 15B e 19A; 15B e 22F. etc. Em certas modalidades, os antígenos de proteína podem ser selecionados de uma proteína identificada em WO98/18931, WO98/18930, patente US 6.699.703, patente US 6.800.744, WO97/43303, WO97/37026, WO 02/079241, WO 02/34773, WO 00/06737, WO 00/06738, WO 00/58475, WO 2003/082183, WO 00/37105, WO 02/22167, WO 02/22168, WO 2003/104272, WO 02/08426, WO 01/12219, WO 99/53940, WO 01/81380, WO 2004/092209, WO 00/76540, WO 2007/116322, LeMieux et al., Infect. Imm. (2006) 74:2453-2456, Hoskins et al., J. Bacteriol. (2001) 183:5709-5717, Adamou et al., Infect. Immun. (2001) 69(2):949-958, Briles et al., J. Infect. Dis. (2000) 182:1694-1701, Talkington et al., Microb. Pathog. (1996) 21(1):17-22, Bethe et al., FEMS Microbiol. Lett. (2001) 205(1):99-104, Brown et al., Infect. Immun. (2001) 69:6702-6706, Whalen et al., FEMS Immunol. Med. Microbiol. (2005) 43:73-80, Jomaa et al., Vaccine (2006) 24(24):5133-5139. Em outras modalidades, proteínas de Streptococcus pneumoniae podem ser selecionadas da família da Tríade de Poli Histidina (PhtX), a família da Proteína Ligadora de Colina (CbpX), truncados de CbpX, família de LytX, truncados de LytX, proteínas quiméricas dos truncados de CbpX-truncados de LytX, pneumolisina (Ply), PspA, PsaA, Spl28, SpIOl, Spl30, Spl25, Spl33, subunidades de pilus pneumocócico.
[000386] Streptococcus pyogenes (Streptococcus do Grupo A): Antígenos estreptococos do grupo A incluem, mas não são limitados a, uma proteína identificada em WO 02/34771 ou WO 2005/032582 (incluindo GAS 40), fusões de fragmentos das proteínas de GAS M (incluindo aquelas descritas em WO 02/094851, e Dale, Vaccine (1999) 17:193-200, e Dale, Vaccine 14(10): 944-948), proteína ligadora da fibronectina (Sfb1), proteína heme-associada estreptocócia (Shp), e Estreptolisina S (SagA).
[000387] Moraxella catarrhalis: antígenos de Moraxella incluem, mas não são limitados a, antígenos identificados em WO 02/18595 e WO 99/58562, antígenos de proteína de membrana externa (HMW-OMP), antígeno C, e/ou LPS.
[000388] Bordetella pertussis: antígenos da coqueluche incluem, mas não são limitados a, holotoxina de coqueluche (PT) e hemaglutinina filamentosa (FHA) de B. pertussis, opcionalmente também combinação com pertactina e/ou aglutinógenos 2 e 3.
[000389] Burkholderia: antígenos de Burkholderia incluem, mas não são limitados a Burkholderia mallei, Burkholderia pseudomallei e Burkholderia cepacia.
[000390] Staphylococcus aureus: antígenos de S. aureus incluem, mas não são limitados a, um polissacarídeo e/ou proteína de S. aureus. Polissacarídeos de S. aureus incluem, mas não são limitados a, polissacarídeos capsulares tipo 5 e tipo 8 (CP5 e CP8) opcionalmente conjugados com exotoxina A de Pseudomonas aeruginosa recombinante não tóxica, tal como StaphVAX™, polissacarídeos tipo 336 (336PS), adesões intercelulares de polissacarídeo (PIA, também conhecidas como PNAG). Proteínas de S. aureus incluem, mas não são limitadas a, antígenos derivados de proteínas de superfície, invasinas (leucocidina, cinases, hialuronidase), fatores de superfície que inibem engolfamento fagocitário (cápsula, Proteína A), carotenoides, produção de catalase, Proteína A, coagulase, fator de coagulação, e/ou toxinas prejudiciais à membrana (opcionalmente desintoxicadas) que lisam as membranas das células eucarióticas (hemolisinas, leucotoxina, leucocidina). Em certas modalidades, antígenos de S. aureus podem ser selecionados de uma proteína identificada em WO 02/094868, WO 2008/019162, WO 02/059148, WO 02/102829, WO 03/011899, WO 2005/079315, WO 02/077183, WO 99/27109, WO 01/70955, WO 00/12689, WO 00/12131, WO 2006/032475, WO 2006/032472, WO 2006/032500, WO 2007/113222, WO 2007/113223, WO 2007/113224. Em outras modalidades, os antígenos de S. aureus podem ser selecionados de IsdA, IsdB, IsdC, SdrC, SdrD, SdrE, ClfA, ClfB, SasF, SasD, Faixa (AdsA), Spa, EsaC, EsxA, EsxB, Emp, HlaH35L, CP5, CP8, PNAG, 336PS.
[000391] Staphylococcus epidermis: antígenos de S. epidermidis incluem, mas não são limitados a, antígeno associado a lodo (SAA).
[000392] Clostridium tetani (Tétano): antígenos de tétano incluem, mas não são limitados a, toxoide de tétano (TT). Tais antígenos são usados como uma proteína de veículo em conjunção/conjugados com as composições imunogênicas fornecidas em certas modalidades aqui.
[000393] Clostridium perfringens: Antígenos incluem, mas não são limitados a, toxina ípsilon de Clostridium perfringen.
[000394] Clostridium botulinums (Botulismo): antígenos de botulismo incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de C. botulinum.
[000395] Cornynebacterium difteriae (Difteria): antígenos de difteria incluem, mas não são limitados a, toxina de difteria, preferivelmente desintoxicada, tal como CRM197. Adicionalmente, os antígenos capazes de modular, inibir ou associados com ribosilação de ADP são contemplados para combinação/coadministração/conjugação com as composições imunogênicas fornecidas aqui. Em certas modalidades, os toxoides de difteria são usados como proteínas de veículo.
[000396] Haemophilus influenzae B (Hib): antígenos de Hib incluem, mas não são limitados a, um antígeno de sacarídeo de Hib.
[000397] Pseudomonas aeruginosa: antígenos de Pseudomonas incluem, mas não são limitados a, endotoxina A, proteína de Wzz, LPS de P. aeruginosa, LPS isolado de PAO1 (sorotipo de O5), e/ou Proteínas de Membrana Externa, incluindo Proteínas de Membrana Externa F (OprF).
[000398] Legionella pneumophila. Antígenos bacterianos derivados de Legionella pneumophila.
[000399] Coxiella burnetii. Antígenos bacterianos derivados de Coxiella burnetii.
[000400] Brucella. Antígenos bacterianos derivados de Brucella, incluindo mas não limitados a, B. abortus, B. canis, B. melitensis, B. neotomae, B. ovis, B. suis e B. pinnipediae.
[000401] Francisella. Antígenos bacterianos derivados de Francisella, incluindo mas não limitados a F. novicida, F. philomiragia e F. tularensis.
[000402] Streptococcus agalactiae (Estreptococo - Grupo B): Antígenos estreptocócicos do Grupo B incluem, mas não são limitados a, uma proteína ou antígeno de sacarídeo identificados em WO 02/34771, WO 03/093306, WO 04/041157, ou WO 2005/002619 (incluindo proteínas GBS 80, GBS 104, GBS 276 e GBS 322, e incluindo antígenos de sacarídeo derivados dos sorotipos Ia, Ib, Ia/c, II, III, IV, V, VI, VII e VIII).
[000403] Neiserria gonorrhoeae: Antígenos de Gonorrhoeae incluem, mas não são limitados a, proteína Por (ou porina), tal como PorB (vide Zhu et al., Vaccine (2004) 22:660 - 669), uma proteína ligadora de transferência, tal como TbpA e TbpB (vide Price et al., Infecction and Immunity (2004) 71(1):277 - 283), uma proteína de opacidade (tal como Opa), uma proteína modificável por redução (Rmp), e preparações vesiculares de membrana externa (OMV) (vide Plante et al, J Infectious Disease (2000) 182:848 - 855), também vide, por exemplo, WO99/24578, WO99/36544, WO99/57280, WO02/079243).
[000404] Chlamydia trachomatis: antígenos de Chlamydia trachomatis incluem, mas não são limitados a, antígenos derivados dos sorotipos A, B, Ba e C (agentes de tracoma, uma causa de cegueira), sorotipos L1, L2 & L3 (associados com Lynfogranuloma venereum), e sorotipos, D-K. Em certas modalidades, antígenos Chlamydia trachomatis incluem, mas não são limitados a, um antígeno identificado em WO 00/37494, WO 03/049762, WO 03/068811, ou WO 05/002619, incluindo PepA (CT045), LcrE (CT089), ArtJ (CT381), DnaK (CT396), CT398, OmpH-símile (CT242), L7/L12 (CT316), OmcA (CT444), AtosS (CT467), CT547, Eno (CT587), HrtA (CT823), e MurG (CT761).
[000405] Treponema pallidum (Sífilis): antígenos de sífilis incluem, mas não são limitados a, antígeno de TmpA.
[000406] Haemophilus ducreyi (causando cancroide): antígenos de ducreyi incluem, mas não são limitados a, proteína de membrana externa (DsrA).
[000407] Enterococcus faecalis ou Enterococcus faecium: Antígenos incluem, mas não são limitados a, uma repetição de trissacarídeo ou outros antígenos derivados de Enterococcus.
[000408] Helicobacter pylori: antígenos de H pylori incluem, mas não são limitados a, antígeno de Cag, Vac, Nap, HopX, HopY e/ou de uréase.
[000409] Staphylococcus saprophyticus: Antígenos incluem, mas não são limitados a, hemaglutinina de 160 kDa de antígeno de S. saprophyticus.
[000410] Antígenos de Yersinia enterocolitica incluem, mas não são limitados a, LPS.
[000411] E. coli: antígenos de E. coli podem ser derivados de E. coli enterotoxigênico (ETEC), E. coli enteroagregativo (EAggEC), E. coli de aderência difusa (DAEC), E. coli enteropatogênico (EPEC), E. coli patogênico extraintestinal (ExPEC) e/ou E. coli enteroemorrágico (EHEC). Antígenos de ExPEC incluem, mas não são limitados a, fator de colonização auxiliar (orf3526), orf353, proteína do domínio bacteriano Ig-símile (grupo 1) (orf405), orf1364, efluxo transportador de lipoproteína do fator de membrana externa da família de NodT (orf1767), gspK (orf3515), gspJ (orf3516), receptor de sideroforo tonB- dependente (orf3597), proteína fimbrial (orf3613), upec-948, upec- 1232, precursor de cadeia A da proteína fimbrial do tipo 1 (upec-1875), homólogo de yap H (upec-2820), e hemolisina A (recp-3768).
[000412] Bacillus anthracis (antraz): antígenos de B. anthracis incluem, mas não são limitados a, componentes A (fator letal (LF) e fator de edema (EF)) ambos destes podem compartilhar um componente B comum conhecido como protetor de antígeno (PA). Em certas modalidades, os antígenos de B. anthracis são opcionalmente desintoxicados.
[000413] Yersinia pestis (pestilência): antígenos de pestilência incluem, mas não são limitados a, antígeno capsular de F1, LPS, antígeno de Yersinia pestis V.
[000414] Mycobacterium tuberculosis: antígenos de tuberculose incluem, mas não são limitados a, lipoproteínas, LPS, antígenos de BCG, uma proteína de fusão de antígeno 85B (Ag85B), ESAT-6 opcionalmente formulado em vesículas lipídicas catiônicas, antígenos associado à isocitrato desidrogenase de Mycobacterium tuberculosis (Mtb), e antígenos de MPT51.
[000415] Rickettsia: Antígenos incluem, mas não são limitados a, proteínas de membrana externa, incluindo a proteína de membrana externa A e/ou B (OmpB), LPS, e antígeno de proteína de superfície (SPA).
[000416] Listeria monocytogenes: antígenos bacterianos incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de Listeria monocytogenes.
[000417] Chlamydia pneumoniae: Antígenos incluem, mas não são limitados a, aqueles identificados em WO 02/02606.
[000418] Vibrio cholerae: Antígenos incluem, mas não são limitados a, antígenos de proteinase, LPS, particularmente lipopolissacarídeos de Vibrio cholerae II, polissacarídeos O-específicos de O1 Inaba, O139 de V. cholerae, antígenos de vacina de IEM108 e toxina de Zonula occludens (Zot).
[000419] Salmonella typhi (febre tifoide): Antígenos incluem, mas não são limitados a, polissacarídeos capsulares preferivelmente conjugados (Vi, isto é vax-TyVi).
[000420] Borrelia burgdorferi (doença de Lyme): Antígenos incluem, mas não são limitados a, lipoproteínas (tais como OspA, OspB, Osp C e Osp D), outras proteínas de superfície tais como proteínas relacionadas a OspE (Erps), proteínas de ligação de decorina (tais como DbpA), e proteínas antigenicamente variáveis VI, tais como antígenos associados com P39 e P13 (uma proteína de membrana integral, Proteína de Variação Antigênica de VlsE.
[000421] Porphyromonas gingivalis: Antígenos incluem, mas não são limitados a, proteína de membrana externa de P. gingivalis (OMP).
[000422] Klebsiella: Antígenos incluem, mas não são limitados a, uma OMP, incluindo OMP A, ou um polissacarídeo opcionalmente conjugado com toxoide de tétano.
[000423] Outros antígenos bacterianos usados nas composições imunogênicas fornecidas aqui incluem, mas não são limitados a, antígenos capsulares, antígenos de polissacarídeo, antígenos de proteína ou antígenos de polinucleotídeo de qualquer um dos acima. Outros antígenos bacterianos usados nas composições imunogênicas fornecidas aqui incluem, mas não são limitados a, uma preparação de vesícula de membrana externa (OMV). Adicionalmente, outros antígenos bacterianos usados nas composições imunogênicas fornecidas aqui incluem, mas não são limitados a, versões vivas, atenuadas, e/ou purificadas de qualquer uma das bactérias acima mencionadas. Em certas modalidades, os antígenos bacterianos usados nas composições imunogênicas fornecidas aqui são derivados de bactérias gram-negativas, enquanto em outras modalidades eles são derivados de bactérias gram-positivas. Em certas modalidades, os antígenos bacterianos usados nas composições imunogênicas fornecidas aqui são derivados de bactérias aeróbias, enquanto em outras modalidades eles são derivados de bactérias anaeróbias.
[000424] Em certas modalidades, qualquer um dos sacarídeos derivados bacterianos acima (polissacarídeos, LPS, LOS ou oligossacarídeos) são conjugados com outro agente ou antígeno, tal como uma proteína de veículo (por exemplo CRM197). Em certas modalidades, tais conjugações são conjugações diretas realizadas por aminação redutora das metades de carbonila no sacarídeo para os grupos amino na proteína. Em outras modalidades, os sacarídeos são conjugados por meio de um ligador, tal como, com succinamida ou outras ligações fornecidas em Bioconjugate Techniques, 1996 e CRC, Chemistry of Protein Conjugation and Cross-Linking, 1993.
[000425] Em certas modalidades úteis para o tratamento ou prevenção de infecção de Neisseria e doenças e distúrbios relacionadas, as proteínas recombinantes de N. meningitidis para o uso nas composições imunogênicas fornecidas aqui podem ser encontradas em WO99/24578, WO99/36544, WO99/57280, WO00/22430, WO96/29412, WO01/64920, WO03/020756, WO2004/048404, e WO2004/032958. Tais antígenos podem ser usados sozinhos ou em combinações. Onde múltiplas proteínas purificadas forem combinadas então é útil usar uma mistura de 10 ou menos (por exemplo 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2) antígenos purificados.
[000426] Uma combinação particularmente útil de antígenos para o uso nas composições imunogênicas fornecidas aqui é revelada em Giuliani et al. (2006) Proc Natl Acad Sci U S A 103(29):10834-9 e WO2004/032958, e assim uma composição imunogênica pode incluir 1, 2, 3, 4 ou 5 de: (1) uma proteína de ‘NadA ' (aka GNA1994 e NMB1994); (2) uma proteína de ‘fHBP’ (aka ‘741’, LP2086, GNA1870, e NMB1870); (3) uma proteína de ‘936’ (aka GNA2091 e NMB2091); (4) uma proteína de ‘953’ (aka GNA1030 e NMB1030); e (5) uma proteína de ‘287’ (aka GNA2132 e NMB2132). Outras possíveis combinações de antígeno podem compreender uma proteína ligadora de transferrina (por exemplo, TbpA e/ou TbpB) e um antígeno de Hsf. Outros possíveis antígenos purificados para o uso nas composições imunogênicas fornecidas aqui incluem proteínas compreendendo uma das sequências de aminoácido a seguir: SEQ ID NO: 650 de WO99/24578; SEQ ID NO: 878 de WO99/24578; SEQ ID NO: 884 de WO99/24578; SEQ ID NO: 4 de WO99/36544; SEQ ID NO: 598 de WO99/57280; SEQ ID NO: 818 de WO99/57280; SEQ ID NO: 864 de WO99/57280; SEQ ID NO: 866 de WO99/57280; SEQ ID NO: 1196 de WO99/57280; SEQ ID NO: 1272 de WO99/57280; SEQ ID NO: 1274 de WO99/57280; SEQ ID NO: 1640 de WO99/57280; SEQ ID NO: 1788 de WO99/57280; SEQ ID NO: 2288 de WO99/57280; SEQ ID NO: 2466 de WO99/57280; SEQ ID NO: 2554 de WO99/57280; SEQ ID NO: 2576 de WO99/57280; SEQ ID NO: 2606 de WO99/57280; SEQ ID NO: 2608 de WO99/57280; SEQ ID NO: 2616 de WO99/57280; SEQ ID NO: 2668 de WO99/57280; SEQ ID NO: 2780 de WO99/57280; SEQ ID NO: 2932 de WO99/57280; SEQ ID NO: 2958 de WO99/57280; SEQ ID NO: 2970 de WO99/57280; SEQ ID NO: 2988 de WO99/57280 (cada uma das sequências de aminoácido anteriores são por este meio incorporadas por referência do documento citado), ou um polipeptídeo que compreende uma sequência de aminoácido que: (a) tem 50% ou mais de identidade (por exemplo, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 99% ou mais) com as ditas sequências; e/ou (b) compreende um fragmento de pelo menos n aminoácidos sucessivos das ditas sequências, em que n é 7 ou mais (por exemplo, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 25, 30, 35, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 150, 200, 250 ou mais). Fragmentos preferidos para (b) compreendem um epítopo da sequência relevante. Mais que um (por exemplo, 2, 3, 4, 5, 6) destes polipeptídeos podem ser incluídos nas composições imunogênicas.
[000427] O antígeno de fHBP enquadra-se em três variantes distintas (WO2004/048404). Uma vacina do sorogrupo de N. meningitidis com base nas composições imunogênicas reveladas aqui utilizando um dos compostos revelados aqui pode incluir uma variante de fHBP simples, mas é útil incluir uma fHBP de cada uma das duas ou todas as três variantes. Desse modo a composição imunogênica pode incluir uma combinação de duas ou três fHBPs purificadas diferentes, selecionados de: (a) uma primeira proteína, compreendendo uma sequência de aminoácido tendo pelo menos a% de identidade de sequência com a SEQ ID NO: 1 e/ou compreendendo uma sequência de aminoácido que consiste em um fragmento de pelo menos x aminoácidos contíguos da SEQ ID NO: 1; (b) uma segunda proteína, compreendendo uma sequência de aminoácido tendo pelo menos b% identidade de sequência com a SEQ ID NO: 2 e/ou compreendendo uma sequência de aminoácido que consiste em um fragmento de pelo menos y aminoácidos contíguos da SEQ ID NO: 2; e/ou (c) uma terceira proteína, compreendendo uma sequência de aminoácido tendo pelo menos c% identidade de sequência com a SEQ ID NO: 3 e/ou compreendendo uma sequência de aminoácido que consiste em um fragmento de pelo menos z aminoácidos contíguos da SEQ ID NO: 3.
[000428] SEQ ID NO: 1 VAADIGAGLADALTAPLDHKDKGLQSLTLDQSVRKNEKLK LAAQGAEKTYG NGDSLNTGKLKNDKVSRFDFIRQIEVDGQLITLESGEFQVYKQSHSAL TAFQ TEQIQDSEHSGKMVAKRQFRIGDIAGEHTSFDKLPEGGRATYRGTAF GSDD AGGKLTYTIDFAAKQGNGKIEHLKSPELNVDLAAADIKPDGKRHAVIS GSVL YNQAEKGSYSLGIFGGKAQEVAGSAEVKTVNGIRHIGLAAKQ
[000429] SEQ ID NO: 2 VAADIGAGLADALTAPLDHKDKSLQSLTLDQSVRKNEKLK LAAQGAEKTYG NGDSLNTGKLKNDKVSRFDFIRQIEVDGQLITLESGEFQIYKQDHSAV VALQ IEKINNPDKIDSLINQRSFLVSGLGGEHTAFNQLPDGKAEYHGKAFSS DDAG GKLTYTIDFAAKQGHGKIEHLKTPEQNVELAAAELKADEKSHAVILGD TRYG SEEKGTYHLALFGDRAQEIAGSATVKIGEKVHEIGIAGKQ
[000430] SEQ ID NO: 3 VAADIGTGLADALTAPLDHKDKGLKSLTLEDSIPQNGTLTL SAQGAEKTFKA GDKDNSLNTGKLKNDKISRFDFVQKIEVDGQTITLASGEFQIYKQNHS AVV ALQIEKINNPDKTDSLINQRSFLVSGLGGEHTAFNQLPGGKAEYHGKA FSS DDPNGRLHYSIDFTKKQGYGRIEHLKTLEQNVELAAAELKADEKSHA VILGD TRYGSEEKGTYHLALFGDRAQEIAGSATVKIGEKVHEIGIAGKQ.
[000431] O valor de a é pelo menos 85, por exemplo, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 99.5, ou mais. O valor de b é pelo menos 85, por exemplo, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 99.5, ou mais. O valor de c é pelo menos 85, por exemplo, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 99.5, ou mais. Os valores de a, b e c não estão intrinsicamente relacionados uns com os outros.
[000432] O valor de x é pelo menos 7, por exemplo, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 120, 140, 160, 180, 200, 225, 250). O valor de y é pelo menos 7, por exemplo, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 120, 140, 160, 180, 200, 225, 250). O valor de z é pelo menos 7, por exemplo, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 120, 140, 160, 180, 200, 225, 250). Os valores de x, y e z não estão intrinsicamente relacionados uns com os outros.
[000433] Em algumas modalidades, as composições imunogênicas como reveladas aqui incluirão proteína(s) de fHBP que são lipidadas, por exemplo, em uma cisteína N-terminal. Em outras modalidades elas não serão lipidadas.
[000434] Uma composição imunogênica útil como revelada aqui inclui proteínas purificadas compreendendo uma mistura de: (I) um primeiro polipeptídeo tendo a sequência de aminoácido SEQ ID NO: 4; (ii) um segundo polipeptídeo tendo a sequência de aminoácido SEQ ID NO: 5; e (iii) um terceiro polipeptídeo tendo a sequência de aminoácido SEQ ID NO: 6. Vide Giuliani et al. (2006) Proc Natl Acad Sci U S A 103(29):10834-9 e WO2004/032958. Uma composição imunogênica útil como revelada aqui inclui proteínas purificadas compreendendo uma mistura de: (I) um primeiro polipeptídeo tendo pelo menos a% de identidade de sequência para com a sequência de aminoácido SEQ ID NO: 4; (ii) um segundo polipeptídeo tendo pelo menos b% de identidade de sequência para com a sequência de aminoácido SEQ ID NO: 5; e (iii) um terceiro polipeptídeo tendo pelo menos a% de identidade de sequência para com a sequência de aminoácido SEQ ID NO: 6.
[000435] SEQ ID NO: 4 MASPDVKSADTLSKPAAPVVSEKETEAKEDAPQAGSQGQ GAPSAQGGQD MAAVSEENTGNGGAAATDKPKNEDEGAQNDMPQNAADTDSLTPNH TPAS NMPAGNMENQAPDAGESEQPANQPDMANTADGMQGDDPSAGGE NAGN TAAQGTNQAENNQTAGSQNPASSTNPSATNSGGDFGRTNVGNSVVI DGP SQNITLTHCKGDSCSGNNFLDEEVQLKSEFEKLSDADKISNYKKDGK NDGK NDKFVGLVADSVQMKGINQYIIFYKPKPTSFARFRRSARSRRSLPAE MPLIP VNQADTLIVDGEAVSLTGHSGNIFAPEGNYRYLTYGAEKLPGGSYAL RVQG EPSKGEMLAGTAVYNGEVLHFHTENGRPSPSRGRFAAKVDFGSKSV DGIID SGDGLHMGTQKFKAAIDGNGFKGTWTENGGGDVSGKFYGPAGEEV AGKY SYRPTDAEKGGFGVFAGKKEQDGSGGGGATYKVDEYHANARFAIDH FNTS TNVGGFYGLTGSVEFDQAKRDGKIDITIPVANLQSGSQHFTDHLKSA DIFDA AQYPDIRFVSTKFNFNGKKLVSVDGNLTMHGKTAPVKLKAEKFNCYQ SPM AKTEVCGGDFSTTIDRTKWGVDYLVNVGMTKSVRIDIQIEAAKQ
[000436] SEQ ID NO: 5 MVSAVIGSAAVGAKSAVDRRTTGAQTDDNVMALRIETTARSYLRQNN QTK GYTPQISVVGYNRHLLLLGQVATEGEKQFVGQIARSEQAAEGVYNYI TVAS LPRTAGDIAGDTWNTSKVRATLLGISPATQARVKIVTYGNVTYVMGIL TPEE QAQITQKVSTTVGVQKVITLYQNYVQRGSGGGGVAADIGAGLADALT APLD HKDKGLQSLTLDQSVRKNEKLKLAAQGAEKTYGNGDSLNTGKLKND KVSR FDFIRQIEVDGQLITLESGEFQVYKQSHSALTAFQTEQIQDSEHSGKM VAKR QFRIGDIAGEHTSFDKLPEGGRATYRGTAFGSDDAGGKLTYTIDFAAK QGN GKIEHLKSPELNVDLAAADIKPDGKRHAVISGSVLYNQAEKGSYSLGI FGGK AQEVAGSAEVKTVNGIRHIGLAAKQ
[000437] SEQ ID NO: 6 ATNDDDVKKAATVAIAAAYNNGQEINGFKAGETIYDIDEDGTITKKDAT AAD VEADDFKGLGLKKVVTNLTKTVNENKQNVDAKVKAAESEIEKLTTKLA DTDA ALADTDAALDATTNALNKLGENITTFAEETKTNIVKIDEKLEAVADTVD KHAE AFNDIADSLDETNTKADEAVKTANEAKQTAEETKQNVDAKVKAAETA AGKA EAAAGTANTAADKAEAVAAKVTDIKADIATNKDNIAKKANSADVYTRE ESDS KFVRIDGLNATTEKLDTRLASAEKSIADHDTRLNGLDKTVSDLRKETR QGLA EQAALSGLFQPYNVG.
ANTÍGENOS DE VESÍCULA BACTERIANA
[000438] As composições imunogênicas como reveladas aqui podem incluir vesículas de membrana externa. Tais vesículas de membrana externa podem ser obtidas de um amplo arranjo de bactérias patogênicas e usadas como componentes antigênicos das composições imunogênicas como reveladas aqui. Vesículas para o uso como componentes antigênicos de tais composições imunogênicas incluem qualquer vesícula proteolipossômica obtida rompendo uma membrana externa bacteriana para formar vesículas a partir da mesma incluindo componentes da proteína de membrana externa. Desse modo o termo inclui OMVs (às vezes referido como ‘bolhas’), microvesículas (MVs, vide, por exemplo, WO02/09643) e ‘OMVs’ nativos (‘NOMVs’ vide, por exemplo, Katial et al. (2002) Infect. Immun. 70:702-707). Composições imunogênicas como reveladas aqui que incluem vesículas de uma ou mais bactérias patogênicas podem ser usadas no tratamento ou prevenção de infecção por tais bactérias patogênicas e doenças e distúrbios relacionados.
[000439] MVs e NOMVs são vesículas de membrana de ocorrência natural que se formam espontaneamente durante o crescimento bacteriano e são liberadas no meio de cultura. MVs podem ser obtidas cultivando bactérias tais como Neisseria em meio de cultura, separando as células inteiras das MVs menores no meio de cultura (por exemplo, por meio de filtração ou por centrifugação de velocidade baixa para empelotar apenas as células e não as vesículas menores), e depois coletando as MVs do meio depeletado de célula (por exemplo, por filtração, por precipitação diferencial ou agregação de MVs, por centrifugação de alta velocidade para empelotar as MVs). Cepas para o uso na produção de MVs podem em geral ser selecionadas com base na quantidade de MVs produzida na cultura (vide, por exemplo, Patente US 6.180.111 e WO01/34642 que descrevem Neisseria com produção de MV alta).
[000440] OMVs são artificialmente preparadas de bactérias, e podem ser preparadas usando tratamento de detergente (por exemplo, com deoxicolato), ou por meios não detergentes (vide, por exemplo, WO04/019977). Métodos para obter preparações de OMV adequadas são bem conhecidos na técnica. Técnicas para formar OMVs incluem tratar bactérias com um detergente de sal do ácido biliar (por exemplo, sais de ácido litocólico, ácido quenodeoxicólico, ácido ursodeoxicólico, ácido deoxicólico, ácido cólico, ácido ursocólico, etc., com deoxicolato de sódio (EP0011243 e Fredriksen et al. (1991) NIPH Ann. 14(2):67- 80) sendo preferidos para tratar Neisseria) a um pH suficientemente alto para não precipitar o detergente (vide, por exemplo, WO01/91788). Outras técnicas podem ser executadas substancialmente na ausência de detergente (vide, por exemplo, WO04/019977) usando técnicas tais como sonicação, homogeneização, microfluidização, cavitação, choque osmótico, moagem, prensa francesa, mistura, etc. Métodos usando nenhum detergente, ou baixo, podem reter antígenos úteis tais como NspA em OMVs de Neisseria. Desse modo, um método pode usar um tampão de extração de OMV com cerca de 0,5% de deoxicolato ou menos, por exemplo, cerca de 0,2%, cerca de 0,1%, < 0,05% ou zero.
[000441] Um processo útil para a preparação de OMV é descrito em WO05/004908 e envolve ultrafiltração em OMVs brutos, ao invés de centrifugação de velocidade alta. O processo pode envolver uma etapa de ultracentrifugação após a ultrafiltração acontecer.
[000442] Vesículas podem ser preparadas de qualquer cepa patogênica tal como Neisseria minigtidis para o uso com a invenção. Vesículas de Neisserial meningitidis do sorogrupo B podem ser de qualquer sorotipo (por exemplo, 1, 2a, 2b, 4, 14, 15, 16, etc.), qualquer serossubtipo, e qualquer imunotipo (por exemplo, L1; L2; L3; L3,3,7; L10; etc.). Os meningococos podem ser de qualquer linhagem adequada, incluindo linhagens hiperinvasivas e hipervirulentas, por exemplo, qualquer uma das seguintes sete linhagens hipervirulentas: subgrupo I; subgrupo III; subgrupo IV 1; complexo de ET 5; complexo de ET 37; grupo A4; linhagem 3. Estas linhagens foram definidas por meio de eletroforese de enzima de locais múltiplos (MLEE), mas tipagem de sequência de locais múltiplos (MLST) foi também usada para classificar os meningococos, por exemplo, o complexo de ET 37 é o complexo de ST 11 por MLST, o complexo de ET 5 é ST-32 (ET- 5), linhagem 3 é ST 41/44, etc. As vesículas podem ser preparadas das cepas tendo um dos subtipos a seguir: P1.2; P1.2,5; P1.4; P1.5; P1.5,2; P1.5,c; P1.5c,10; P1.7,16; P1.7,16b; P1.7h,4; P1.9; P1.15; P1.9,15; P1.12,13; P1.13; P1.14; P1.21,16; P1.22,14.
[000443] Vesículas inclusas nas composições imunogênicas reveladas aqui podem ser preparadas de cepas patogênicas do tipo selvagem tais como cepas de N. meningitidis ou de cepas mutantes. Por via de exemplo, WO98/56901 revela preparações de vesículas obtidas de N. meningitidis com um gene fur modificado. WO02/09746 ensina que expressão de nspA deveria ser suprarregulada com inativação gênica (knockout) concomitante de porA e cps. Outros mutantes inativados (knockout) de N. meningitidis para a produção de OMV são revelados em WO02/0974, WO02/062378, e WO04/014417. WO06/081259 revela vesículas em que fHBP é suprarregulado. Claassen et al. (1996) 14(10):1001-8, revelam a construção de vesículas de cepas modificadas para expressar seis subtipos de porA diferentes. Neisseria mutante com baixos níveis de endotoxina, alcançados por inativação das enzimas envolvidas na biossíntese de LPS, pode também ser usada (vide, por exemplo, WO99/10497 e Steeghs et al. (2001) i20:6937-6945). Estes ou outros mutantes podem todos ser usados com a invenção.
[000444] Desse modo, cepas do sorogrupo B de N. meningitidis incluídas nas composições imunogênicas reveladas aqui podem em algumas modalidades expressar mais de um subtipo de porA. Cepas de porA de valência 6 e valência nove foram previamente construídas. A cepa pode expressar 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 ou 9 de subtipos de porA: P1.7,16; P1.5-1,2-2; P1.19,15-1; P1.5-2,10; P1.12 1,13; P1.7-2,4; P1.22,14; P1.7-1,1 e/ou P1.18-1,3,6. Em outras modalidades, uma cepa pode ter sido infrarregulada para expressão de porA, por exemplo, em que a quantidade de porA foi reduzida em pelo menos 20% (por exemplo, >30%, >40%, >50%, >60%, >70%, >80%, >90%, >95%, etc.), ou até mesmo inativada, com relação aos níveis do tipo selvagem (por exemplo, com relação à cepa H44/76, como revelado em WO03/105890).
[000445] Em algumas modalidades, as cepas do sorogrupo B de N. meningitidis podem supraexpressar (com relação à cepa do tipo selvagem correspondente) certas proteínas. Por exemplo, as cepas podem supraexpressar NspA, proteína 287 (WO01/52885 - também referida como NMB2132 e GNA2132), um ou mais fHBP (WO06/081259 e Pub. Pat. US 2008/0248065 - também referida como proteína 741, NMB1870 e GNA1870), TbpA e/ou TbpB (WO00/25811), Cu,Zn-superóxido dismutase (WO00/25811), etc.
[000446] Em algumas modalidades, cepas do sorogrupo B de N. meningitidis podem incluir uma ou mais das mutações de inativação (knockout) e/ou supraexpressão. Genes preferidos para infrarregulação e/ou inativação (knockout) incluem: (a) Cps, CtrA, CtrB, CtrC, CtrD, FrpB, GalE, HtrB/MsbB, LbpA, LbpB, LpxK, Opa, Opc, PilC, PorB, SiaA, SiaB, SiaC, SiaD, TbpA, e/ou TbpB (WO01/09350); (b) CtrA, CtrB, CtrC, CtrD, FrpB, GalE, HtrB/MsbB, LbpA, LbpB, LpxK, Opa, Opc, PhoP, PilC, PmrE, PmrF, SiaA, SiaB, SiaC, SiaD, TbpA, e/ou TbpB (WO02/09746); (c) ExbB, ExbD, rmpM, CtrA, CtrB, CtrD, GalE, LbpA, LpbB, Opa, Opc, PilC, PorB, SiaA, SiaB, SiaC, SiaD, TbpA, e/ou TbpB (WO02/062378); e (d) CtrA, CtrB, CtrD, FrpB, OpA, OpC, PilC, PorB, SiaD, SynA, SynB, e/ou SynC (WO04/014417).
[000447] Onde uma cepa mutante for usada, em algumas modalidades pode ter uma ou mais, ou todas, das características a seguir: (I) LgtB e/ou GalE infrarregulado ou inativado para truncar o LOS meningocócico; (ii) TbpA suprarregulado; (iii) Hsf suprarregulado; (iv) Omp85 suprarregulado; (v) LbpA suprarregulado; (vi) NspA suprarregulado; (vii) PorA inativado; (viii) FrpB infrarregulado ou inativado; (ix) Opa infrarregulado ou inativado; (x) Opc infrarregulado ou inativado; (xii) complexo de gene de cps deletado. Um LOS truncado pode ser um que não inclui um epítopo de sialilacto-N- neotetraose, por exemplo, poderia ser um LOS deficiente em galactose. O LOS não pode ter nenhuma cadeia α.
[000448] Se o LOS estiver presente em uma vesícula depois é possível tratar a vesícula para ligar seu LOS e componentes da proteína (conjugação "intrabolha" (WO04/014417)).
[000449] As composições imunogênicas como reveladas aqui podem incluir misturas de vesículas de cepas diferentes. Por via de exemplo, WO03/105890 revela vacina compreendendo composições de vesícula meningocócicas multivalentes, compreendendo uma primeira vesícula derivada de uma cepa meningocócica com um serossubtipo prevalecente em um país de uso, e uma segunda vesícula derivada de uma cepa que não necessita ter um serossubtipo para impedir em um país de uso. WO06/024946 revela combinações úteis de vesículas diferentes. Uma combinação das vesículas das cepas em cada um dos imunotipos L2 e L3 pode ser usada em algumas modalidades.
[000450] Antígenos com base em vesícula podem ser preparados de sorogrupos de N. meningitidis diferentes do sorogrupo B (por exemplo, WO01/91788 revela um processo para o sorogrupo A). As composições imunogênicas reveladas aqui consequentemente podem incluir vesículas preparadas de sorogrupos diferente de B (por exemplo A, C, W135 e/ou Y) e de patógenos bacterianos diferentes de Neisseria.
ANTÍGENOS VIRAIS
[000451] Antígenos virais adequados para o uso nas composições imunogênicas fornecidas aqui incluem, mas não são limitados a, vírus inativado (ou morto), vírus atenuado, formulações de vírus fendidas, formulações de subunidade purificadas, proteínas virais que podem ser isoladas, purificadas ou derivadas de um vírus, Partículas Vírus- Símiles (VLPs) e antígenos de polinucleotídeo que podem ser isolados, purificados ou derivados de um vírus ou recombinantemente sintetizados. Em certas modalidades, os antígenos virais são derivados de vírus propagados em cultura de célula ou outro substrato. Em outras modalidades, antígenos virais são recombinantemente expressados. Em certas modalidades, os antígenos virais preferivelmente incluem epítopos que são expostos na superfície do vírus durante pelo menos um estágio de seu ciclo de vida. Antígenos virais são preferivelmente conservados ao longo de múltiplos sorotipos ou isolados. Antígenos virais adequados para o uso nas composições imunogênicas fornecidas aqui incluem, mas não são limitados a, antígenos derivados de um ou mais dos vírus expostos abaixo como também os exemplos de antígenos específicos identificados abaixo.
[000452] Ortomixovírus: antígenos virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um ortomixovírus, tal como Influenza A, B e C. Em certas modalidades, os antígenos de ortomixovírus são selecionados de um ou mais das proteínas virais, incluindo hemaglutinina (HA), neuraminidase (NA), nucleoproteína (NP), proteína de matriz (M1), proteína de membrana (M2), um ou mais dos componentes de transcriptase (PB1, PB2 e PA). Em certas modalidades, o antígeno viral inclui HA e NA. Em certas modalidades, os antígenos de influenza são derivados de cepas de influenza interpandêmicas (anuais), enquanto em outras modalidades, os antígenos de influenza são derivados de cepas com o potencial de causar uma erupção pandêmica (isto é, cepas de influenza com hemaglutinina nova comparada à hemaglutinina em cepas correntemente circulantes, ou cepas de influenza que são patogênicas em sujeitos aviários e têm o potencial para serem transmitidas horizontalmente na população humana, ou cepas de influenza que são patogênicas para seres humanos).
[000453] Vírus de Paramyxoviridae: antígenos virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados do vírus de Paramyxoviridae, tais como Pneumovírus (RSV), Paramixovírus (PIV), Metapneumovírus e Morbilivírus (Sarampo).
[000454] Pneumovírus: antígenos virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Pneumovírus, tais como Vírus Sincicial Respiratório (RSV), Vírus Sincicial Respiratório Bovino, Vírus da Pneumonia de Camundongos, e vírus de rinotraqueite da Turquia. Preferivelmente, o Pneumovírus é RSV. Em certas modalidades, antígenos de pneumovírus são selecionados de uma ou mais das proteínas seguintes, incluindo Fusão de proteínas de superfície (F), Glicoproteína (G) e proteína Hidrofóbica Pequena (SH), proteínas de matriz M e M2, proteínas de nucleocapsídeo N, P e L e proteínas não- estruturais NS1 e NS2. Em outras modalidades, os antígenos de pneumovírus incluem F, G e M. Em certas modalidades, os antígenos de pneumovírus são também formulados ou derivados de vírus quiméricos, tais como, por via de exemplo apenas, vírus de RSV/PIV quiméricos compreendendo componentes de RSV e PIV.
[000455] Paramixovírus: antígenos virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Paramixovírus, tais como vírus da Parainfluenza tipos 1 - 4 (PIV), Caxumba, vírus de Sendai, Símio vírus 5, vírus da parainfluenza Bovina, Nipahvírus, Henipavírus e vírus da doença de Newcastle. Em certas modalidades, o Paramixovírus é PIV ou Caxumba. Em certas modalidades, antígenos de paramixovírus são selecionados de uma ou mais das proteínas a seguir: Hemaglutinina - Neuraminidase (HN), proteínas de Fusão F1 e F2, Nucleoproteína (NP), Fosfoproteína (P), Proteína grande (L), e Proteína de matriz (M). Em outras modalidades, as proteínas de paramixovírus incluem HN, F1 e F2. Em certas modalidades, os antígenos de paramixovírus são também formulados ou derivados de vírus quiméricos, tais como, por via de exemplo apenas, vírus de RSV/PIV quiméricos compreendendo componentes de RSV e PIV. Vacinas anticaxumba comercialmente disponíveis incluem vírus da caxumba atenuado ao vivo, em uma forma monovalente ou em combinação com vacinas de sarampo e rubéolas (MMR). Em outras modalidades, o Paramixovírus é Nipahvírus ou Henipavírus e os antígenos são selecionados de uma ou mais das proteínas a seguir: proteína de fusão (F), proteína de Glicoproteína (G), proteína de Matriz (M), proteína de Nucleocapsídeo (N), proteína Grande (L) e Fosfoproteína (P).
[000456] Poxviridae: Antígenos virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de Ortopoxvírus tais como Variola vera, incluindo mas não limitados a, Variola major e Variola minor.
[000457] Metapneumovírus: Antígenos virais incluem, mas não são limitados a, Metapneumovírus, tais como metapneumovírus humano (hMPV) e metapneumovírus aviários (aMPV). Em certas modalidades, os antígenos de metapneumovírus são selecionados de uma ou mais das proteínas seguintes, incluindo as proteínas de superfície de Fusão (F), Glicoproteína (G) e proteína Hidrofóbica Pequena (SH), proteínas de matriz M e M2, proteínas de nucleocapsídeo N, P e L. Em outras modalidades, os antígenos de metapneumovírus incluem F, G e M. Em certas modalidades, os antígenos de metapneumovírus são também formulados ou derivados de vírus quiméricos.
[000458] Morbilivírus: Antígenos virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Morbilivírus, tais como Sarampo. Em certas modalidades, os antígenos de morbilivírus são selecionados de uma ou mais das proteínas a seguir: hemaglutinina (H), Glicoproteína (G), fator de Fusão (F), proteína Grande (L), Nucleoproteína (NP), fosfoproteína de Polimerase (P), e Matriz (M). Vacinas de sarampo comercialmente disponíveis incluem vírus do sarampo atenuado vivo, tipicamente em combinação com caxumba e rubéola (MMR).
[000459] Picornavírus: Antígenos virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de Picornavírus, tais como Enterovírus, Rinovírus, Heparnavírus, Cardiovírus e Aftovírus. Em certas modalidades, os antígenos são derivados de Enterovírus, enquanto em outras modalidades o enterovírus é Poliovírus. Em ainda outras modalidades, os antígenos são derivados de Rinovírus. Em certas modalidades, os antígenos são formulados em partículas semelhantes a vírus (VLPs).
[000460] Enterovírus: Antígenos virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Enterovírus, tal como Poliovírus tipos 1, 2 ou 3, vírus de Coxsackie A tipos 1 a 22 e 24, vírus de Coxsackie B tipos 1 a 6, Ecovírus (ECO) tipos 1 a 9, 11 a 27 e 29 a 34 e Enterovírus 68 a 71. Em certas modalidades, os antígenos são derivados de Enterovírus, enquanto em outras modalidades o enterovírus é Poliovírus. Em certas modalidades, os antígenos de enterovírus são selecionados de uma ou mais das proteínas de capsídeo seguintes VP0, VP1, VP2, VP3 e VP4. Vacinas de pólio comercialmente disponíveis incluem Vacina de Pólio Inativada (IPV) e Vacina de Poliovírus Oral (OPV). Em certas modalidades, os antígenos são formulados em partículas semelhantes a vírus.
[000461] Buniavírus: Antígenos virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Ortobuniavírus, tal como vírus da encefalite da Califórnia, um Plebovírus, tal como vírus da Febre do Rift Valley, ou um Nairovírus, tal como o vírus da febre hemorrágica de Crimean-Congo.
[000462] Rinovírus: Antígenos virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de rinovírus. Em certas modalidades, os antígenos de rinovírus são selecionados de uma ou mais das proteínas de capsídeo a seguir: VP0, VP1, VP2, VP2 e VP4. Em certas modalidades, os antígenos são formulados em partículas semelhantes a vírus (VLPs).
[000463] Heparnavírus: Antígenos virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Heparnavírus, tal como, por via de exemplo apenas, vírus da hepatite A (HAV). Vacinas de HAV comercialmente disponíveis incluem vacina de HAV inativada.
[000464] Togavírus: Antígenos virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Togavírus, tal como um Rubivírus, um Alfavírus, ou um Arterivírus. Em certas modalidades, os antígenos são derivados de Rubivírus, tal como por via de exemplo apenas, vírus da rubéola. Em certas modalidades, os antígenos de togavírus são selecionados de E1, E2, E3, C, NSP-1, NSPO-2, NSP-3 ou NSP-4. Em certas modalidades, os antígenos de togavírus são selecionados de E1, E2 ou E3. Vacinas rubéolas comercialmente disponíveis incluem um vírus adaptado ao frio vivo, tipicamente em combinação com caxumbas e vacinas sarampo (MMR).
[000465] Flavivírus: Antígenos virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Flavivírus, tal como vírus de encefalite de carrapato (TBE), vírus da Dengue (tipos 1, 2, 3 ou 4), vírus da Febre amarela, vírus da encefalite japonesa, Vírus de Kyasanur Florest, vírus da encefalite do Nilo Ocidental, vírus da encefalite de St. Louis, vírus da encefalite da primavera-verão russo, vírus da encefalite de Powassan. Em certas modalidades, os antígenos de flavivírus são selecionados de PrM, M, C, E, NS-1, NS-2a, NS2b, NS3, NS4a, NS4b, e NS5. Em certas modalidades, os antígenos de flavivírus são selecionados de PrM, M e E. Vacina de TBE comercialmente disponível inclui vacinas de vírus inativado. Em certas modalidades, os antígenos são formulados em partículas semelhantes a vírus (VLPs).
[000466] Pestivírus: Antígenos virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Pestivírus, tal como Diarréia Viral Bovina (BVDV), Febre Suína Clássica (CSFV) ou doença de Border (BDV).
[000467] Hepadnavírus: Antígenos virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Hepadnavírus, tal como vírus da hepatite B. Em certas modalidades, os antígenos de hepadnavírus são selecionados de antígenos de superfície (L, M e S), antígenos de núcleo (HBc, HBe). Vacinas de HBV comercialmente disponíveis incluem vacinas de subunidade compreendendo a proteína do antígeno de superfície S.
[000468] Vírus da Hepatite C: Antígenos virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um vírus da Hepatite C (HCV). Em certas modalidades, os antígenos de HCV são selecionados de um ou mais de E1, E2, E1/E2, poliproteína de NS345, poliproteína de núcleo de NS 345, núcleo, e/ou peptídeos das regiões não estruturais. Em certas modalidades, os antígenos do vírus da Hepatite C incluem um ou mais dos a seguir: proteínas de E1 e E2 de HCV, complexos de heterodímero de E1/E2, proteínas de núcleo e proteínas não- estruturais, ou fragmentos destes antígenos, em que as proteínas não- estruturais podem ser opcionalmente modificadas para remover a atividade enzimática mas reter a imunogenicidade. Em certas modalidades, os antígenos são formulados em partículas semelhantes a vírus (VLPs).
[000469] Rabdovírus: Antígenos virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Rabdovírus, tal como um Lissavírus (vírus da Raiva) e Vesiculovírus (VSV). Antígenos de rabdovírus podem ser selecionados de glicoproteína (G), nucleoproteína (N), proteína grande (L), proteínas não-estruturais (NS). Vacina do vírus da Raiva comercialmente disponível compreende vírus morto crescido em células diploides humanas ou células pulmonares de reso fetal.
[000470] Caliciviridae: Antígenos virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de Calciviridae, tal como vírus de Norwalk, e Vírus Norwalk-símile, tal como Vírus do Havaí e Vírus de Montanha Nevada. Em certas modalidades, os antígenos são formulados em partículas semelhantes a vírus (VLPs).
[000471] Coronavírus: Antígenos virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Coronavírus, SARS, coronavírus respiratório humano, bronquite infecciosa aviária (IBV), vírus de hepatite de camundongo (MHV), e vírus de gastroenterite transmissível porcina (TGEV). Em certas modalidades, os antígenos de coronavírus são selecionados de espiga (S), envelope (E), matriz (M), nucleocapsídeo (N), e glicoproteína de Hemaglutinina-esterase (HE). Em certas modalidades, o antígeno de coronavírus é derivado de um vírus de SARS. Em certas modalidades, o coronavírus é derivado de um antígeno viral de SARS como descrito em WO 04/92360.
[000472] Retrovírus: Antígenos virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Retrovírus, tal como um Oncovírus, um Lentivírus ou um Espumavírus. Em certas modalidades, os antígenos de oncovírus são derivados de HTLV-1, HTLV-2 ou HTLV-5. Em certas modalidades, os antígenos de lentivírus são derivados de HIV-1 ou HIV-2. Em certas modalidades, os antígenos são derivados de HIV-1 subtipos (ou clades), incluindo, mas não limitados a, HIV-1 subtipos (ou clades) A, B, C, D, F, G, H, J. K, O. Em outras modalidades, os antígenos são derivados de formas de HIV-1 circulante recombinante (CRFs), incluindo, mas não limitados a, A/B, A/E, A/G, A/G/I, etc. Em certas modalidades, os antígenos de retrovírus são selecionados de gag, pol, env, tax, tat, rex, rev, nef, vif, vpu, e vpr. Em certas modalidades, os antígenos de HIV são selecionados de gag (p24gag e p55gag), env (gp160 e gp41), pol, tat, nef, rev vpu, miniproteínas, (preferivelmente p55gag e gp140v deletados). Em certas modalidades, os antígenos de HIV são derivados de uma ou mais das cepas a seguir: HIVIIIb, HIVSF2, HIVLAV, HIVLAI, HIVMN, HIV-1CM235, HIV- 1US4, HIV-1SF162, HIV-1TV1, HIV-1MJ4. Em certas modalidades, os antígenos são derivados de retrovírus humanos endógenos, incluindo, mas não limitados a, HERV-K (HERV-K "velho" e HERV-K "novo").
[000473] Reovírus: Antígenos virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Reovírus, tal como um Ortoreovírus, um Rotavírus, um Orbivírus, ou um Coltivírus. Em certas modalidades, os antígenos de reovírus são selecionados de proteínas estruturais A1, À2, À3, μ1, μ2, α1, α2, ou α3, ou proteínas não-estruturais αNS, μNS, ou α1s. Em certas modalidades, os antígenos de reovírus são derivados de um Rotavírus. Em certas modalidades, os antígenos de rotavírus são selecionados de VP1, VP2, VP3, VP4 (ou o produto clivado VP5 e VP8), NSP1, VP6, NSP3, NSP2, VP7, NSP4, ou NSP5. Em certas modalidades, os antígenos de rotavírus incluem VP4 (ou o produto clivado VP5 e VP8), e VP7.
[000474] Parvovírus: Antígenos virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Parvovírus, tal como Parvovírus B19. Em certas modalidades, os antígenos de Parvovírus são selecionados de VP-1, VP-2, VP-3, NS-1 e NS-2. Em certas modalidades, o antígeno de Parvovírus é proteína de capsídeo VP1 ou VP-2. Em certas modalidades, os antígenos são formulados em partículas semelhantes a vírus (VLPs).
[000475] Vírus da hepatite delta (HDV): Antígenos virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de HDV, particularmente δ-antigeno de HDV.
[000476] Vírus da hepatite E (HEV): Antígenos virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de HEV.
[000477] Vírus da hepatite G (HGV): Antígenos virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de HGV.
[000478] Herpesvírus humano: Antígenos virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Herpesvírus Humano, tal como, por via de exemplo apenas, Vírus do herpes simples (HSV), vírus de Varicela-zóster (VZV), vírus de Epstein-Barr (EBV), Citomegalovírus (CMV), Herpesvírus Humano 6 (HHV6), Herpesvírus Humano 7 (HHV7), e Herpesvírus Humano 8 (HHV8). Em certas modalidades, os antígenos de Herpesvírus Humanos são selecionados de proteínas prematuras imediatas (α), proteínas prematuras (β), e proteínas tardias (Y). Em certas modalidades, os antígenos de HSV são derivados de cepas de HSV-1 ou de HSV-2. Em certas modalidades, os antígenos de HSV são selecionados das glicoproteínas gB, gC, gD e gH, proteína de fusão (gB), ou proteínas de fuga imunes (gC, gE, ou gI). Em certas modalidades, os antígenos de VZV são selecionados de proteínas do núcleo, nucleocapsídeo, tegumento, ou do envelope. Uma vacina de VZV atenuada viva está comercialmente disponível. Em certas modalidades, os antígenos de EBV são selecionados de proteínas de antígeno prematuro (EA), antígeno de capsídeo viral (VCA), e glicoproteínas do antígeno de membrana (MA). Em certas modalidades, os antígenos de CMV são selecionados de proteína de capsídeo, glicoproteínas de envelope (tais como gB e gH), e proteínas de tegumento. Em outras modalidades, os antígenos de CMV podem ser selecionados de uma ou mais das proteínas a seguir: pp65, IE1, gB, gD, gH, gL, GM, gN, gO, UL128, UL129, gUL130, UL150, UL131, UL33, UL78, US27, US28, RL5A, RL6, RL10, RL11, RL12, RL13, UL1, UL2, UL4, UL5, UL6, UL7, UL8, UL9, UL10, UL11, UL14, UL15A, UL16, UL17, UL18, UL22A, UL38, UL40, UL41A, UL42, UL116, UL119, UL120, UL121, UL124, UL132, UL147A, UL148, UL142, UL144, UL141, UL140, UL135, UL136, UL138, UL139, UL133, UL135, UL148A, UL148B, UL148C, UL148D, US2, US3, US6, US7, US8, US9, US10, US11, US12, US13, US14, US15, US16, US17, US18, US19, US20, US21, US29, US30 e US34A. Antígenos de CMV podem também ser fusões de uma ou mais proteínas de CMV, tais como, por via de exemplo apenas, pp65/IE1 (Reap et al., Vaccine (2007) 25:7441-7449). Em certas modalidades, os antígenos são formulados em partículas semelhantes a vírus (VLPs).
[000479] Papovavírus: Antígenos incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de Papovavírus, tais como Papilomavírus e Poliomavírus. Em certas modalidades, os Papilomavírus incluem HPV sorotipos 1, 2, 4, 5, 6, 8, 11, 13, 16, 18, 31, 33, 35, 39, 41, 42, 47, 51, 57, 58, 63 e 65. Em certas modalidades, os antígenos de HPV são derivados dos sorotipos 6, 11, 16 ou 18. Em certas modalidades, os antígenos de HPV são selecionados de proteína de capsídeo (L1) e (L2), ou E1 - E7, ou suas fusões. Em certas modalidades, os antígenos de HPV são formulados em partículas semelhantes a vírus (VLPs). Em certas modalidades, os vírus de Poliomiavírus incluem vírus de BK e vírus de JK. Em certas modalidades, os antígenos de Poliomavírus são selecionados de VP1, VP2 ou VP3.
[000480] Adenovírus: Antígenos incluem aqueles derivados de Adenovírus. Em certas modalidades, os antígenos de Adenovírus são derivados de Adenovírus sorotipo 36 (Add-36). Em certas modalidades, o antígeno é derivado de uma proteína ou sequência de peptídeo que codifica uma proteína de revestimento de Add-36 ou fragmento da mesma (WO 2007/120362).
[000481] Ainda fornecidos são antígenos, composições, métodos, e micróbios incluídos em Vaccines, 4a Edição (Plotkin e Orenstein ed. 2004); Medical Microbiology, 4a Edição (Murray et al. ed. 2002); Virology, 3a Edição (W.K. Joklik ed. 1988); Fundamental Virology, 2a Edição (B.N. Fields e D.M. Knipe, eds. 1991) que são contemplados juntos com as composições imunogênicas fornecidas aqui.
[000482] ANTÍGENOS FÚNGICOS
[000483] Antígenos fúngicos para o uso nas composições imunogênicas fornecidas aqui incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um ou mais dos fungos expostos abaixo.
[000484] Antígenos fúngicos são derivados de Dermatophytres, incluindo: Epidermophyton floccusum, Microsporum audouini, Microsporum canis, Microsporum distortum, Microsporum equinum, Microsporum gypsum, Microsporum nanum, Trichophyton concentricum, Trichophyton equinum, Trichophyton gallinae, Trichophyton gypseum, Trichophyton megnini, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton quinckeanum, Trichophyton rubrum, Trichophyton schoenleini, Trichophyton tonsurans, Trichophyton verrucosum, T. verrucosum var. album, var. discoides, var. ochraceum, Trichophyton violaceum, e/ou Trichophyton faviforme; e
[000485] Patógenos fúngicos são derivados de Aspergillus fumigatus, Aspergillus flavus, Aspergillus niger, Aspergillus nidulans, Aspergillus terreus, Aspergillus sydowi, Aspergillus flavatus, Aspergillus glaucus, Blastoschizomyces capitatus, Candida albicans, Candida enolase, Candida tropicalis, Candida glabrata, Candida krusei, Candida parapsilosis, Candida stellatoidea, Candida kusei, Candida parakwsei, Candida lusitaniae, Candida pseudotropicalis, Candida guilliermondi, Cladosporium carrionii, Coccidioides immitis, Blastomyces dermatidis, Cryptococcus neoformans, Geotrichum clavatum, Histoplasma capsulatum, Klebsiella pneumoniae, Microsporidia, Encephalitozoon spp., Septata intestinalis e Enterocytozoon bieneusi; os menos comuns são Brachiola spp, Microsporidium spp., Nosema spp., Pleistophora spp., Trachipleistophora spp., Vittaforma spp Paracoccidioides brasiliensis, Pneumocystis carinii, Pythiumn insidiosum, Pityrosporum ovale, Sacharomyces cerevisae, Saccharomyces boulardii, Saccharomyces pombe, Scedosporium apiosperum, Sporothrix schenckii, Trichosporon beigelii, Toxoplasma gondii, Penicillium marneffei, Malassezia spp., Fonsecaea spp., Wangiella spp., Sporothrix spp., Basidiobolus spp., Conidiobolus spp., Rhizopus spp, Mucor spp, Absidia spp, Mortierella spp, Cunninghamella spp, Saksenaea spp., Alternaria spp, Curvularia spp, Helminthosporium spp, Fusarium spp, Aspergillus spp, Penicillium spp, Monolinia spp, Rhizoctonia spp, Paecilomyces spp, Pithomyces spp, e Cladosporium spp..
[000486] Em certas modalidades, o processo para produzir um antígeno fúngico inclui um método em que uma fração solubilizada é extraída e separada de uma fração insolúvel obtenível de células fúngicas das quais a parede celular foi substancialmente removida ou pelo menos parcialmente removidoa caracterizado em que o processo compreende as etapas de: obter células fúngicas vivendo vivas; obter células fúngicas das quase a parede celular foi substancialmente removida ou pelo menos parcialmente removida; estourando as células fúngicas das quais a parede celular foi substancialmente removida ou pelo menos parcialmente removida; obter uma fração insolúvel; e extrair e separar uma fração solubilizada da fração insolúvel.
ANTÍGENOS/PATÓGENOS PROTOZOÁRIOS
[000487] Antígenos/patógenos protozoários para o uso nas composições imunogênicas fornecidas aqui incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um ou mais dos protozoários a seguir: Entamoeba histolytica, Giardia lambli, Cryptosporidium parvum, Cyclospora cayatanensis e Toxoplasma.
ANTÍGENOS/PATÓGENOS VEGETAIS
[000488] Antígenos/patógenos vegetais para o uso nas composições imunogênicas fornecidas aqui incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de Ricinus communis.
ANTÍGENOS DE DST
[000489] Em certas modalidades, as composições imunogênicas fornecidas aqui incluem um ou mais antígenos derivados de uma doença sexualmente transmitida (DST). Em certas modalidades, tais antígenos fornecem profiláticos para DST tais como clamídia, herpes genital, hepatite (tais como HCV), verrugas genitais, gonorréia, sífilis e/ou cancroide. Em outras modalidades, tais antígenos fornecem terapia para DST tal como clamídia, herpes genital, hepatite (tais como HCV), verrugas genitais, gonorréia, sífilis e/ou cancroide. Tais antígenos são derivados de uma ou mais DSTs virais ou bacterianas. Em certas modalidades, os antígenos de DST virais são derivados de HIV, vírus do herpes simples (HSV-1 e HSV-2), papilomavírus humano (HPV), e hepatite (HCV). Em certas modalidades, os antígenos de DST bacterianos são derivados de Neiserria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Treponema pallidum, Haemophilus ducreyi, E. coli, e Streptococcus agalactiae. Exemplos de antígenos específicos derivados destes patógenos são descritos acima.
ANTÍGENOS RESPIRATÓRIOS
[000490] Em certas modalidades, as composições imunogênicas fornecidas aqui incluem um ou mais antígenos derivados de um patógeno que causa doença das vias respiratórias. Por via de exemplo apenas, tais antígenos respiratórios são derivados de um vírus respiratório tal como Ortomixovírus (influenza), Pneumovírus (RSV), Paramixovírus (PIV), Morbilivírus (sarampo), Togavírus (Rubéola), VZV, e Coronavírus (SARS). Em certas modalidades, os antígenos respiratórios são derivados de uma bactéria que causa doença das vias respiratórias, tal como, por via de exemplo apenas, Streptococcus pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Bordetella pertussis, Mycobacterium tuberculosis, Mycoplasma pneumoniae, Chlamydia pneumoniae, Bacillus anthracis, e Moraxella catarrhalis. Exemplos de antígenos específicos derivados destes patógenos são descritos acima.
ANTÍGENOS DE VACINA PEDIÁTRICA
[000491] Em certas modalidades, as composições imunogênicas fornecidas aqui incluem um ou mais antígenos adequados para o uso em sujeitos pediátricos. Sujeitos pediátricos são tipicamente menores que cerca de 3 anos de idade, ou menores que cerca de 2 anos de idade, ou menores que cerca de 1 ano de idade. Antígenos pediátricos são administrados múltiplas vezes no curso de 6 meses, 1, 2 ou 3 anos. Antígenos pediátricos são derivados de um vírus que pode visar as populações pediátricas e/ou um vírus do qual as populações pediátricas são suscetíveis à infecção. Antígenos virais pediátricos incluem, mas não são limitados a, antígenos derivados de um ou mais de Ortomixovírus (influenza), Pneumovírus (RSV), Paramixovírus (PIV e caxumba), Morbilivírus (sarampo), Togavírus (rubéola), Enterovírus (pólio), HBV, Coronavírus (SARS), e vírus de Varicela-zóster (VZV), vírus de Epstein-Barr (EBV). Antígenos bacterianos pediátricos incluem antígenos derivados de um ou mais de Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitides, Streptococcus pyogenes (Streptococcus do Grupo A), Moraxella catarrhalis, Bordetella pertussis, Staphylococcus aureus, Clostridium tetani (Tétano), Cornynebacterium diphtheriae (Difteria), Haemophilus influenzae B (Hib), Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus agalactiae (Streptococcus do Grupo B), e E. coli. Exemplos de antígenos específicos derivados destes patógenos são descritos acima.
ANTÍGENOS ADEQUADOS PARA O USO EM ANCIÃO OU INDIVÍDUOS IMUNOCOMPROMETIDOS
[000492] Em certas modalidades, as composições imunogênicas fornecidas aqui incluem um ou mais antígenos adequados para o uso em ancião ou indivíduos imunocomprometidos. Tais indivíduos podem necessitar ser vacinados mais frequentemente, com doses mais altas ou com formulações adjuvantes para melhorar sua resposta imune aos antígenos visados. Antígenos que são visados para o uso em Ancião ou Indivíduos Imunocomprometidos incluem antígenos derivados de um ou mais dos patógenos a seguir: Neisseria meningitides, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes (Streptococcus do Grupo A), Moraxella catarrhalis, Bordetella pertussis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermis, Clostridium tetani (Tétano),Cornynebacterium diphtheriae (Difteria), Haemophilus influenzae B (Hib), Pseudomonas aeruginosa, Legionella pneumophila, Streptococcus agalactiae (Streptococcus do Grupo B), Enterococcus faecalis, Helicobacter pylori, Chlamydia pneumoniae, Ortomixovírus (influenza), Pneumovírus (RSV), Paramixovírus (PIV e caxumba), Morbilivírus (sarampo), Togavírus (rubéola), Enterovírus (pólio), HBV, Coronavírus (SARS), vírus da varicela-zóster (VZV), vírus de Epstein Barr (EBV), Citomegalovírus (CMV).
ANTÍGENOS ADEQUADOS PARA O USO EM VACINAS EM ADOLESCENTES
[000493] Em certas modalidades, as composições imunogênicas fornecidas aqui incluem um ou mais antígenos adequados para o uso em sujeitos adolescentes. Adolescentes estão em necessidade de um reforço de um antígeno pediátrico previamente administrado. Antígenos pediátricos que são adequados para o uso em adolescentes são descritos acima. Além disso, os adolescentes são visados receber antígenos derivados de um patógeno de DST para assegurar imunidade protetora ou terapêutica antes de o começo da atividade sexual. Antígenos de DST que são adequados para o uso em adolescentes são descritos acima.
ANTÍGENOS TUMORAIS
[000494] Em certas modalidades, um antígeno de tumor ou antígeno de câncer é usado junto com as composições imunogênicas fornecidas aqui. Em certas modalidades, os antígenos tumorais são uns antígenos tumorais contendo peptídeo, tal como um antígeno de tumor de polipeptídeo ou antígenos tumorais de glicoproteína. Em certas modalidades, o antígeno de tumor é um antígeno de tumor contendo sacarídeo, tal como um antígeno de tumor de glicolipídio ou um antígeno de tumor de gangliosídeo. Em certas modalidades, o antígeno de tumor é um antígeno de tumor contendo polinucleotídeo que expressa um antígeno de tumor contendo polipeptídeo, por exemplo, uma construção de vetor de RNA ou uma construção de vetor de DNA, tal como DNA de plasmídeo.
[000495] Antígenos de tumor apropriados para o uso junto com as composições imunogênicas fornecidas aqui abrangem uma ampla variedade de moléculas, tais como (a) antígenos tumorais contendo polipeptídeo, incluindo polipeptídeos (que podem variar, por exemplo, de 8-20 aminoácidos em comprimento, embora comprimentos fora desta faixa sejam também comuns), lipopolipeptídeos e glicoproteínas, (b) antígenos tumorais contendo sacarídeo, incluindo polissacarídeos, mucinas, gangliosídeos, glicolipídios e glicoproteínas, e (c) polinucleotídeos que expressam polipeptídeos antigênicos.
[000496] Em certas modalidades, os antígenos tumorais são, por exemplo, (a) moléculas de comprimento total associadas com células de câncer, (b) homólogos e suas formas modificadas, incluindo moléculas com porções deletadas, adicionadas e/ou substituídas, e (c) seus fragmentos. Em certas modalidades, os antígenos tumorais são fornecidos em forma recombinante. Em certas modalidades, os antígenos tumorais incluem, por exemplo, antígenos restringidos à classe I reconhecidos por linfócitos de CD8+ ou antígenos restringidos à classe II reconhecidos por meio de linfócitos de CD4+.
[000497] Em certas modalidades, os antígenos tumorais incluem, mas não são limitados a, (a) antígenos de câncer-testículos tais como NY-ESO-1, SSX2, SCP1 como também polipeptídeos da família RAGE, BAGE, GAGE e MAGE, por exemplo, GAGE-1, GAGE-2, MAGE-1, MAGE-2, MAGE-3, MAGE-4, MAGE-5, MAGE-6, e MAGE-12 (que podem ser usados, por exemplo, para tratar melanoma, tumores do pulmão, cabeça e pescoço, NSCLC, mama, gastrintestinais, e da bexiga), (b) antígenos mutados, por exemplo, p53 (associado com vários tumores sólidos, por exemplo, câncer colorretal, pulmão, cabeça e pescoço), p21/Ras (associado com, por exemplo, melanoma, câncer pancreático e câncer colorretal), CDK4 (associado com, por exemplo, melanoma), MUM1 (associado com, por exemplo, melanoma), caspase-8 (associado com, por exemplo, câncer de cabeça e pescoço), CIA 0205 (associado com, por exemplo, câncer de bexiga), HLA-A2-R1701, catenina beta (associado com, por exemplo, melanoma), TCR (associado com, por exemplo, linfoma de células T não-Hodgkin), BCR-abl (associado com, por exemplo, leucemia mielogenosa crônica), triosefosfato isomerase, KIA 0205, CDC-27, e LDLR-FUT, (c) antígenos supraexpressados, por exemplo, Galectina 4 (associada com, por exemplo, câncer colorretal), Galectina 9 (associada com, por exemplo, doença de Hodgkin), proteinase 3 (associada com, por exemplo, leucemia mielogenosa crônica), WT 1 (associado com, por exemplo, várias leucemias), anidrase carbônica (associada com, por exemplo, câncer renal), aldolase A (associada com, por exemplo, câncer pulmonar), PRAME (associada com, por exemplo, melanoma), His-2/neu (associado com, por exemplo, câncer de mama, cólon, pulmão e ovariano), alfa-fetoproteína (associada com, por exemplo, hepatoma), KSA (associada com, por exemplo, câncer colorretal), gastrina (associada com, por exemplo, câncer pancreático e gástrico), proteína catalítica da telomerase, MUC-1 (associado com, por exemplo, câncer de mama e ovariano), G-250 (associado com, por exemplo, carcinoma de célula renal), p53 (associado com, por exemplo, câncer de mama e do cólon), e antígeno carcinoembriônico (associado com, por exemplo, câncer de mama, câncer pulmonar, e cânceres do trato gastrintestinal tais como câncer colorretal), (d) antígenos compartilhados, por exemplo, antígenos de diferenciação de melanoma-melanócitos tais como MART-1/Melan A, gp100, MC1R, receptor do hormônio estimulante dos melanócitos, tirosinase, proteína-1 relacionada à tirosinase/TRP1 e proteína-2 relacionada à tirosinase/TRP2 (associada com, por exemplo, melanoma), (e) antígenos associados à próstata tais como PAP, PSA, PSMA, PSH-P1, PSM-P1, PSM-P2, associados com por exemplo, câncer de próstata, (f) idiotipos de imunoglobulina (associados com mieloma e linfomas de célula B, por exemplo), e (g) outros antígenos tumorais, tal como antígenos contendo polipeptídeo e sacarídeo incluindo (I) glicoproteínas tais como sialila Tn e sialila Lex (associadas com, por exemplo, câncer de mama e colorretal) como também várias mucinas; as glicoproteínas são acopladas a uma proteína de veículo (por exemplo, MUC-1 são acopladas a KLH); (ii) lipopolipeptídeos (por exemplo, MUC-1 ligadas a uma metade de lipídio); (iii) polissacarídeos (por exemplo, hexasacarídeo sintético de Globo H) que são acoplados a umas proteínas de veículo (por exemplo, para KLH), (iv) gangliosídeos tais como GM2, GM12, GD2, GD3 (associados com, por exemplo, câncer do cérebro, pulmonar, melanoma) que também são acoplados às proteínas de veículo (por exemplo, KLH).
[000498] Em certas modalidades, os antígenos tumorais incluem, mas não são limitados a, p15, Hom/Mel-40, H-Ras, E2A-PRL, H4-RET, IGH-IGK, MIL-RAR, antígenos do vírus de Epstein Barr, EBNA, antígenos do papilomavírus humano (HPV), incluindo E6 e E7, antígenos do vírus da hepatite B e C, antígenos do vírus linfotrópicos de células T humanas, TSP-180, p185erbB2, p180erbB-3, c-met, mn- 23H1, TAG-72-4, CA 19-9, CA 72-4, CAM 17.1, NuMa, K-ras, p16, TAGE, PSCA, CT7, 43-9F, 5T4, 791 Tgp72, beta-HCG, BCA225, BTAA, CA 125, CA 15-3 (CA 27.29\BCAA), CA 195, CA 242, CA-50, CAM43, CD68\KP1, CO-029, FGF-5, Ga733 (EpCAM), HTgp-175, M344, MA-50, MG7-Ag, MOV18, NB/70K, NY-CO-1, RCAS1, SDCCAG16, TA-90 (proteína ligadora de Mac-2\proteína associada à ciclofilina C), TAAL6, TAG72, TLP, TPS, e outros.
[000499] Antígenos contendo polinucleotídeo usados juntos com as composições imunogênicas fornecidas aqui incluem polinucleotídeos tais como os que codificam os antígenos de câncer de polipeptídeo tais como aqueles listados acima. Em certas modalidades, os antígenos contendo polinucleotídeo incluem, mas não são limitados a, construções de vetor de DNA ou de RNA, tais como vetores de plasmídeo (por exemplo, pCMV) que são capazes de expressar antígenos de câncer de polipeptídeo in vivo.
[000500] Em certas modalidades, os antígenos tumorais são derivados de componentes celulares mutados ou alterados. Após alteração, os componentes celulares não executam mais suas funções reguladoras, e consequentemente a célula pode sofrer de crescimento descontrolado. Exemplos representativos de componentes celulares alterados incluem, mas não são limitados a ras, p53, Rb, proteína alterada codificada pelo gene de tumor de Wilm, ubiquitina, mucina, proteína codificada pelos genes DCC, APC, e MCC, como também receptores ou estruturas semelhante a receptor tais como neu, receptor do hormônio da tiroide, receptor do fator de crescimento derivado de plaquetas (PDGF), receptor de insulina, receptor do fator de crescimento epidérmico (EGF), e o receptor do fator estimulante de colônias (CSF).
[000501] Adicionalmente, os antígenos bacterianos e virais são usados juntos com as composições imunogênicas fornecidas aqui para o tratamento de câncer. Em certas modalidades, as proteínas de veículo, tais como CRM197, toxoide de tétano, ou antígeno de Salmonella typhimurium, são usadas em conjunção/conjugação com os compostos fornecidos aqui para o tratamento de câncer. As terapias de combinação antígeno de câncer mostrarão eficácia e biodisponibilidade aumentadas quando comparadas com as terapias existentes.
[000502] Em certas modalidades, as composições imunogênicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem sacarídeos capsulares de pelo menos dois dos sorogrupos A, C, W135 e Y de Neisseria meningitides. Em outras modalidades, tais vacinas ainda compreendem um antígeno de um ou mais dos seguintes: (a) N. meningitidis do sorogrupo B; (b) Haemophilus influenzae tipo B; e/ou (c) Streptococcus pneumoniae.
[000503] Em certas modalidades as composições imunogênicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem sorogrupos C, W135 & Y de N. meningitides. Em certas modalidades, as composições imunogênicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem sorogrupos A, C, W135 & Y de N. meningitides. Em certas modalidades, as composições imunogênicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem sorogrupos B, C, W135 & Y de N. meningitides. Em certas modalidades as composições imunogênicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem sorogrupos A, B, C, W135 & Y de N. meningitides. Em certas modalidades as composições imunogênicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem H. influenzae tipo B e sorogrupos C, W135 & Y de N. meningitides. Em certas modalidades as composições imunogênicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem H. influenzae tipo B e sorogrupos A, C, W135 & Y de N. meningitides. Em certas modalidades as composições imunogênicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem H. influenzae tipo B e sorogrupos B, C, W135 & Y de N. meningitides. Em certas modalidades as composições imunogênicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem H. influenzae tipo B e sorogrupos A, B, C, W135 & Y de N. meningitides. Em certas modalidades as composições imunogênicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem S. pneumoniae e sorogrupos C, W135 & Y de N. meningitides. Em certas modalidades as composições imunogênicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem S. pneumoniae e sorogrupos A, C, W135 & Y de N. meningitides. Em certas modalidades as composições imunogênicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem S. pneumoniae e sorogrupos B, C, W135 & Y de N. meningitides. Em certas modalidades as composições imunogênicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem S. pneumoniae e sorogrupos A, B, C, W135 & Y de N. meningitides. Em certas modalidades as composições imunogênicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem H. influenzae tipo B, S. pneumoniae e sorogrupos C, W135 & Y de N. meningitides. Em certas modalidades as composições imunogênicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem H. influenzae tipo B, S. pneumoniae e sorogrupos A, C, W135 & Y de N. meningitides. Em certas modalidades as composições imunogênicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem H. influenzae tipo B, S. pneumoniae e sorogrupos B, C, W135 & Y de N. meningitides. Em certas modalidades as composições imunogênicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem H. influenzae tipo B, S. pneumoniae e sorogrupos A, B, C, W135 & Y de N. meningitidis.
KITS
[000504] Também fornecidos aqui são pacotes ou kits farmacêuticos que incluem um ou mais recipientes contendo um composto da Fórmula (I) útil para o tratamento ou prevenção de uma doença ou distúrbio associados com Receptores Toll-símiles. Em outras modalidades, tais pacotes ou kits farmacêuticos incluem um ou mais recipientes contendo um composto da Fórmula (I) útil para o tratamento ou prevenção de uma doença ou distúrbio associados com Receptores Toll-símiles e um ou mais recipientes contendo um agente terapêutico adicional, incluindo mas não limitados a aqueles listados acima. Em certas modalidades, tais pacotes ou kits farmacêuticos opcionalmente incluem instruções para sua administração de um composto da Fórmula (I) como revelado aqui. Em algumas modalidades de tais kits, o composto da Fórmula (I) é fornecido na forma de uma composição de vacina como descrita aqui, e opcionalmente inclui uma seringa para injetar em um sujeito a composição de vacina.
MÉTODOS DE TRATAMENTO, PREVENÇÃO E ADMINISTRAÇÃO DAS VACINAS
[000505] As composições imunogênicas como reveladas aqui podem ser usadas em conjunto com as vacinas para melhorar a imunogenicidade da vacina ou onde a composição imunogênica incluir um ou mais antígenos, a composição imunogênica pode ser usada como uma vacina. Portanto, em certa modalidade, as composições imunogênicas reveladas aqui podem ser usadas em um método para elevar ou intensificar uma resposta imune em um mamífero compreendendo a etapa de administrar uma quantidade efetiva de uma composição imunogênica como revelada aqui. A resposta imune é preferivelmente protetora e preferivelmente envolve anticorpos e/ou imunidade mediada por célula. O método pode elevar uma resposta de reforço.
[000506] Em certas modalidades, as composições imunogênicas reveladas aqui podem ser usadas como um medicamento, por exemplo, para o uso elevar ou intensificar uma resposta imune em um mamífero.
[000507] Em certas modalidades, as composições imunogênicas reveladas aqui podem ser usadas na fabricação de um medicamento para elevar uma resposta imune em um mamífero.
[000508] A invenção também fornece um dispositivo de liberação pré-enchido com uma composição imunogênica revelada aqui.
[000509] Elevando uma resposta imune no mamífero por estes usos e métodos, a infecção do mamífero pelos patógenos compreendendo o antígeno incluído na composição imunogênica ou administrado junto com a composição imunogênica pode ser reduzida ou até mesmo impedido. O mamífero é preferivelmente um humano, mas pode ser, por exemplo, uma vaca, um porco, uma galinha, um gato ou um cachorro, visto que os patógenos abrangidos aqui podem ser problemáticos ao longo de uma gama extensiva de espécies. Onde a vacina for para o uso profiláctico, o ser humano é preferivelmente uma criança (por exemplo, uma criança ou lactente) ou adolescente; onde a vacina for para o uso terapêutico, o ser humano é preferivelmente um adolescente ou um adulto. Uma vacina visada para crianças pode também ser administrado em adultos, por exemplo, para avaliar a segurança, dosagem, imunogenicidade, etc.
[000510] Um modo de verificar a eficácia do tratamento terapêutico envolve monitorar a infecção do patógeno após a administração das composições imunogênicas reveladas aqui. Um modo de verificar a eficácia do tratamento profiláctico envolve monitorar as respostas imunes, sistemicamente (tal como monitorar o nível de IgG1 e a produção de IgG2a) e/ou mucosamente (tal como monitorar o nível de produção de IgA), contra os antígenos incluídos ou administrados juntos com as composições imunogênicas reveladas aqui após administração da composição imunogênica (e o antígeno se administrado separadamente). Tipicamente, as respostas do anticorpo no soro antígeno-específicas são determinadas pós-imunização mas pré-desafio enquanto que as respostas do anticorpo na mucosa antígeno-específicas são determinadas pós-imunização e pós-desafio.
[000511] Outro modo de avaliar a imunogenicidade das composições imunogênicas reveladas aqui onde o antígeno é uma proteína é expressar as proteínas recombinantemente por triar soros de paciente ou secreções mucosas por meio de imunotingimento e/ou microarranjo. Uma reação positiva entre a proteína e a amostra do paciente indica que o paciente montou uma resposta imune para a proteína em questão. Este método pode também ser usado para identificar antígenos imunodominantes e/ou epítopos dentro dos antígenos da proteína.
[000512] A eficácia das composições imunogênicas pode também ser determinada in vivo mediante desafio de modelos animais apropriados do patógeno de infecção de interesse.
[000513] As composições imunogênicas reveladas aqui em geral serão administradas diretamente a um sujeito. Liberação direta pode ser realizada por meio de injeção parenteral (por exemplo, subcutânea, intraperitoneal, intravenosa, intramuscularmente, ou para o espaço intersticial de um tecido), ou mucosamente, tal como por administração retal, oral (por exemplo, tablete, pulverização), mucosa vaginal, tópica, transdérmica ou transcutânea, intranasal, ocular, auricular, pulmonar ou outra.
[000514] As composições imunogênicas podem ser usadas para suscitar imunidade sistêmica e/ou mucosa, preferivelmente suscitar uma imunidade sistêmica e/ou mucosa intensificada.
[000515] Preferivelmente, a imunidade sistêmica e/ou mucosa intensificada é refletida em uma resposta imune intensificado de TH1 e/ou de TH2. Preferivelmente, a resposta imune intensificada inclui um aumento na produção de IgG1 e/ou IgG2a e/ou IgA.
[000516] A dosagem pode ser por um programa de dose simples ou um programa de doses múltiplas. Doses múltiplas podem ser usadas em um programa de imunização primária e/ou em um programa de imunização de reforço. Em um programa de doses múltiplas, as várias doses podem ser dadas pelas mesmas rotas ou diferentes, por exemplo, um início parenteral e reforço mucoso, um início mucoso e reforço parenteral, etc. Doses múltiplas tipicamente serão administradas pelo menos 1 semana uma da outra (por exemplo, cerca de 2 semanas, cerca de 3 semanas, cerca de 4 semanas, cerca de 6 semanas, cerca de 8 semanas, cerca de 10 semanas, cerca de 12 semanas, cerca de 16 semanas, etc.).
[000517] As composições imunogênicas reveladas aqui que incluem um ou mais antígenos ou são usadas juntas com um ou mais antígenos podem ser usadas para tratar crianças e adultos. Desse modo um sujeito humano pode ser menor que 1 ano de idade, 1-5 anos de idade, 5-15 anos de idade, 15-55 anos de idade, ou pelo menos 55 anos de idade. Sujeitos preferidos para receber tais composições imunogênicas são o ancião (por exemplo, >50 anos de idade, >60 anos de idade, e preferivelmente >65 anos), o jovem (por exemplo, < 5 anos de idade), pacientes hospitalizados, os trabalhadores de cuidado médico, pessoal de serviço armado e militar, mulheres grávidas, os pacientes cronicamente doentes, ou imunodeficientes. As composições imunogênicas não são somente adequadas para estes grupos, porém, e podem ser usadas mais genericamente em uma população.
[000518] As composições imunogênicas reveladas aqui que incluem um ou mais antígenos ou são usadas juntas com um ou mais antígenos podem ser administradas aos pacientes substancialmente ao mesmo tempo que (por exemplo, durante a mesma consulta ou visita médica a um profissional de cuidado médico ou centro de vacinação) outras vacinas, por exemplo, substancialmente ao mesmo tempo que uma vacina de sarampo, uma vacina anticaxumba, uma vacina de rubéola, uma vacina de MMR, uma vacina de varicela, uma vacina de MMRV, uma vacina de difteria, uma vacina antitetânica, uma vacina de coqueluche, uma vacina de DTP, uma vacina de H. influenzae tipo b conjugada, uma vacina de poliovírus inativada, uma vacina do vírus da hepatite B, uma vacina meningocócica conjugada (tal como uma vacina de A C W135 Y tetravalente), uma vacina do vírus sincicial respiratória, etc.
COMPOSTOS DA FÓRMULA (I) FORMULADOS COM ADJUVANTES CONTENDO ALUMÍNIO
[000519] Em certas modalidades, pelo menos um composto da Fórmula (I) fornecido aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, é combinado com um adjuvante contendo alumínio e uma quantidade efetiva de um ou mais antígenos, resultando em uma composição imunogênica. Em tais composições imunogênicas, o composto da Fórmula (I) é ligado ao adjuvante contendo alumínio. Em tais composições imunogênicas, o antígeno é qualquer antígeno fornecido aqui. Em tais composições imunogênicas, o antígeno e o composto da Fórmula (I), um agonista de TLR7, são coliberados a um sítio desejado.
[000520] Em tal composição imunogênica, a ligação de um composto da Fórmula (I) a um adjuvante contendo alumínio não interfere com a ligação do antígeno ao adjuvante contendo alumínio. Por via de exemplo apenas, Figura 1 demonstra que a adsorção dos antígenos de Neisseria meningite para hidróxido de alumínio não é afetada pela ligação de um composto da Fórmula (I) ao adjuvante de hidróxido de alumínio.
[000521] Em certas modalidades, tais composições imunogênicas são úteis como vacinas. Em certas modalidades, tais vacinas são profilácticas (isto é, impedem a infecção), enquanto em outras modalidades, tais vacinas são terapêuticas (isto é, tratam a infecção).
[000522] O(s) composto(s) da Fórmula (I) fornecido(s) aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do(s) mesmo(s), é/são agonistas de TLR7 e é/são potencializador(es) imune(s) que dá(ão) um efeito imunoestimulante sob administração quando comparado às formulações imunogênicas não contendo nenhum composto da Fórmula (I). Em certas modalidades, os compostos da Fórmula (I) dão um efeito imunoestimulante sob administração quando inclusos em uma composição imunogênica tendo um ou mais agentes imunorreguladores, enquanto em outras modalidades, os compostos da Fórmula (I) dão um efeito imunoestimulante sob administração quando inclusos em uma composição imunogênica sem a presença de outros agentes imunorreguladores.
[000523] Em certas modalidades, tais composições imunogênicas intensificam a resposta imune através da retenção do composto da Fórmula (I) no sítio de injeção. Ao invés ligar um agonista de TLR ao alumínio, uma estratégia alternativa para aumentar o tempo de permanência dos agonistas de TRL no sítio de injeção é modificar as propriedades de hidrofilicidade, hidrofobicidade e/ou de solubilidade do agonista de TLR. Compostos não-polares (hidrofóbicos, ou insolúveis) podem ter tempo de permanência aumentado em um sítio de injeção quando administrados intramuscularmente, assim diminuindo os níveis de exposição sistêmica comparada aos compostos polares (hidrófilos, ou solúveis) com potência similar mostrado depuração do sítio de injeção mais rápida e exposição sistêmica mais alta. Similarmente, os compostos não polares da Fórmula (I) podem exibir estas propriedades úteis.
[000524] Em certas modalidades, tais composições imunogênicas incluem um veículo farmaceuticamente aceitável tal como, mas não é limitado a, proteínas, polissacarídeos, ácidos polilácticos, ácidos poliglicólicos, aminoácidos poliméricos, copolímeros de aminoácido, sacarose, trealose, lactose, agregados de lipídio (tais como gotículas de óleo ou lipossomas), e partículas de vírus inativo. As composições imunogênicas tipicamente também contêm diluentes, tais como água, solução salina, e glicerol, e opcionalmente contêm outros excipientes, tais como agentes umectantes ou emulsificantes, e substâncias de tamponação de pH. Em certas modalidades, tais composições imunogênicas incluem um ou mais adjuvantes adicionais fornecidos aqui.
EXEMPLOS
[000525] Os exemplos seguintes foram oferecidos ilustrar, mas não limitar, os compostos da Fórmula (I) fornecidos aqui, e a preparação de tais compostos.
SÍNTESE DOS COMPOSTOS DE PARTIDA
[000526] PREPARAÇÃO DE 5-METIL-2-(4,4,5,5-TETRAMETIL- 1,3,2-DIOXABOROLAN-2-IL)-FENILCARBAMATO DE TERC-BUTILA (A-1)
Figure img0015
ETAPA 1: 2-BROMO-5-METILFENILCARBAMATO DE TERC-BUTILA
[000527] A uma solução de 2-bromo-5-metilanilina (1,0 eq.) em tetraidrofurano (0,2 M) a 0°C sob atmosfera de N2 foi adicionado 1M de NaHMDS a gotas (2,5 eq.). A reação foi agitada durante 15 minutos a 0°C, e uma solução de dicarbonato de di-terc-butila em tetraidrofurano foi adicionada. A reação foi aquecida para temperatura ambiente durante a noite. O solvente foi evaporado, e o resíduo resultante foi extinguido com 0,1N de solução aquosa de HCl. A suspensão aquosa foi extraída duas vezes com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas em MgSO4 anidro, e concentradas a vácuo. O material bruto foi purificado por meio de cromatografia instantânea em um sistema de COMBIFLASH® (ISCO) usando 0-5% de acetato de etila em hexano para dar 2-bromo-5- metilfenilcarbamato de terc-butila como uma óleo amarelo claro.
ETAPA 2: 5-METIL-2-(4,4,5,5-TETRAMETIL-1,3,2-DIQXABQRQLAN- 2-IL) FENILCARBAMATO DE TERC-BUTILA
[000528] 2-bromo-5-metilfenilcarbamato de terc-butila (da etapa anterior) (1,0 eq.), 4,4,4’,4’,5,5,5’,5’-octametil-2,2’-bi(1,3,2- dioxaborolano) (1,5 eq.), dicloro[1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno]paládio (II) (5%), e acetato de sódio (4,5 eq.) foram misturados em dioxano (0,2 M) sob atmosfera de N2. A reação foi aquecida para 100°C e agitada durante a noite. A suspensão resultante foi esfriada para temperatura ambiente, diluída com éter, filtrada por meio de celite, e o filtrado foi concentrada a vácuo. O material bruto foi purificado por meio de cromatografia instantânea em um sistema de COMBIFLASH® (ISCO) usando 0-8% de éter em hexano para dar 5-metil-2-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenilcarbamato de terc-butila (A-1). PREPARAÇÃO DE 4-(2-(5-AMINQ-8- METILBENZQ[F][1,71NAFTIRIDIN-2-IL) ETIL)-3-METILFENQL (B-4)
Figure img0016
ETAPA B-1: 3-CLORO-5-((4-METÓXI-2-METILFENIL)ETINIL) PICOLINONITRILA (B-1)
[000529] A um frasco de fundo redondo com tampa com septos foi adicionado 1-etinil4-metóxi-2-metilbenzeno (1,1 eq), 3,5- dicloropicolinonitrila (1 eq.), trietilamina (5 eq.), e DMF anidro (0,2 M). A mistura foi desgasificada (vácuo) e nitrogênio fluxado três vezes. CuI (0,05 eq.) e bis(trifenilfosfina) dicloro-paládio(II) (0,05 eq) foram adicionados e o septo foi substituído com um condensador de refluxo e o frasco foi aquecido para 60°C durante a noite sob atmosfera de nitrogênio. Sob conclusão da reação como monitorado por TLC, o conteúdo do frasco foi carregado em uma coluna pré-aquecida de sílica-gel grande com hexanos. Cromatografia instantânea (sílica-gel, hexanos:EtOAc (1:4%)) forneceu o produto 3-cloro-5-((4-metóxi-2- metilfenil) etinil)picolinonitrila (B-1). ETAPA B-2:2-((4-METÓXI-2-METILFENIL)ETINIL)-8- METILBENZO[F][1,7] NAFTIRIDIN-5-AMINA (B-2)
[000530] A um frasco de fundo redondo com condensador de refluxo foram adicionados 3-cloro-5-((4-metóxi-2-metilfenil)etinil)picolinonitrila (B-1) (1 eq.), 5-metil-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)fenilcarbamato de terc-butila (A-1) (1,25 eq.), K3PO4 (2 eq.), tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio (0) (0,05 eq.), e 2-dicicloexilfosfino- 2’,6’-dimetoxibifenila (Sphos) (0,1 eq.). n-butanol e água (5:2, 0,2 M) foram adicionados, e o conteúdo foi desgasificado (vácuo seguido por jato de nitrogênio) durante três vezes. A mistura de reação foi agitada vigorosamente sob nitrogênio a 100°C durante a noite em um banho de óleo. O conteúdo foi esfriado e absorvido em 200 ml de água seguida por extração com cloreto de metileno. As camadas orgânicas combinadas foram secadas (Na2SO4) e concentradas. Cromatografia instantânea (sílica-gel, 0 - 50% de EtOAc em CH2Cl2) forneceu o produto 2-((4-metóxi-2-metilfenil)etinil)-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-5- amina (B-2). ETAPA B-3: 2-(4-METÓXI-2-METILFENETIL)-8-METILBENZO[F][1,7] NAFTIRIDIN-5-AMINA (B-3)
[000531] 2-(4-metóxi-2-metilfenetil)-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-5- amina foi preparada de 2-((4-metóxi-2-metilfenil)etinil)-8- metilbenzo[f][1,7]naftiridin-5-amina (da etapa anterior). A um frasco de fundo redondo foi adicionada 2-((4-metóxi-2-metilfenil)etinil)-8- metilbenzo[f][1,7]naftiridin-5-amina (1 eq.) com uma barra de agitação. Etanol e cloreto de metileno (1:2, 0,2 M) foram adicionados, seguido por meio de paládio em carbono (pó ativado, úmido, 10% em carbono, 0,1 eq.). O conteúdo foi desgasificado (vácuo) seguido por meio de jato de hidrogênio (três vezes). A mistura de reação foi agitada vigorosamente em temperatura ambiente durante a noite, sob um balão de hidrogênio. Depois a mistura de reação foi filtrada por meio de um bloco de celite, e o bloco de celite foi lavado subsequentemente com cloreto de metileno e EtOAc até que o filtrado não tivesse nenhuma absorção de UV. Lavagens orgânicas combinadas foram concentradas. Cromatografia instantânea (sílica-gel, 0 - 50% de EtOAc em CH2Cl2) forneceu o produto 2-(4-metóxi-2-metilfenetil)-8- metilbenzo[f][1,7]naftiridin-5-amina. 1H RMN (CDCl3): δ 8,53 (d, 1H), 8,29 (d, 1H), 8,01 (d, 1H), 7,44 (s, 1H), 7,12 (dd, 1H), 6,93 (d, 1H), 6,67 (d, 1H), 6,60 (dd, 1H), 5,93 (bs, 2H), 3,70 (s, 3H), 3,05 - 3,00 (dd, 2H), 2,93 - 2,88 (dd, 2H), 2,44 (s, 3H), 2,19 (s, 3H). LRMS [M+H] = 358,2 ETAPA B-4: 4-(2-(5-AMINO-8-METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2- IL)ETIL)-3-METILFENOL (B-4)
[000532] A uma solução agitada de 2-(4-metóxi-2-metilfenetil)-8- metilbenzo[f][1,7]naftiridin-5-amina (da etapa anterior) em cloreto de metileno (0,2 M) em um banho de gelo-água foi adicionada 1 solução de N de BBr3 (2 eq) em CH2Cl2 em uma maneira a gotas. Em 30 minutos, a reação foi extinguida com metanol e concentrada a vácuo para obter um resíduo bruto. O material bruto foi purificado por meio de cromatografia instantânea em um sistema de COMBIFLASH® (ISCO) usando 0-20% de metanol em diclorometano para dar 4-(2-(5- amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenol (B-4) como um sólido branco. 1H RMN (DMSO-d6): δ 8,99 (s, 1H), 8,75 (d, 1H), 8,60 (d, 1H), 8,27 (d, 1H), 7,28 (s, 1H), 7,09 (dd, 1H), 6,99 (bs, 2H), 6,88 (d, 1H), 6,49 (d, 1H), 6,42 (dd, 1H), 3,02 - 2,96 (dd, 2H), 2,86 - 2,81 (dd, 2H), 2,38 (s, 3H), 2,13 (s, 3H). LRMS [M+H] = 344,2, PREPARAÇÃO DE (5-AMINO-2-(4-METÓXI-2-METILFENETIL)- BENZO [F] [1,7]NAFTIRIDIN-8-IL)METANOL (2-1: VIDE ESQUEMA 2)
Figure img0017
ETAPA 1 5-(( TERC -BUTILDIMETILSILILÓXI)METIL)-2- CLOROFENILCARBAMATO DE TERC -BUTILA
[000533] A uma solução de 5-((terc-butildimetilsililóxi)metil)-2- cloroanilina (comercialmente disponível) (1,0 equiv.) em THF (0,2 M) a 0°C sob atmosfera de N2 é adicionado 1M de NaHMDS a gotas (2,5 equiv.). A reação é agitada durante 15 minutos a 0°C, e uma solução de dicarbonato de di-terc-butila em THF é adicionada. A reação é aquecida para temperatura ambiente durante a noite. O solvente é evaporado, e o resíduo resultante é extinguido com 0,1 N de solução aquosa de HCl. A suspensão aquosa é extraída duas vezes com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas são lavadas com salmoura, secadas em MgSO4 anidro, e concentradas a vácuo. O material bruto é purificado por meio de cromatografia instantânea em um sistema de COMBIFLASH® (ISCO) usando 0-30% de EtOAc/Hexanos para dar 5-((terc-butildimetilsililóxi)metil)-2- clorofenilcarbamato de terc-butila como um óleo incolor. ETAPA 2: 5-(( TERC -BUTILDIMETILSILILÓXI)METIL)-2-(4,4,5,5- TETRAMETIL-1,3,2-DIOXABOROLAN-2-IL)FENILCARBAMATO DE TERC -BUTILA
[000534] 5-((terc-butildimetilsililóxi)metil)-2-clorofenilcarbamato de terc-butila (da etapa 1) (1,0 equiv.), 4,4,4’,4’,5,5,5’,5’-octametil-2,2’- bi(1,3,2-dioxaborolano) (3,0 equiv.), Pd2dba3 (2,5%), XPhos (10%), e KOAc (3 equiv.) são misturados em dioxano (0,2 M) sob atmosfera de N2. A reação é aquecida para 110°C e agitada durante a noite. A suspensão resultante é esfriada para temperatura ambiente, diluída com éter, filtrada por meio de celite, e o filtrado é concentrado a vácuo. As camadas orgânicas combinadas são lavadas com salmoura, secadas em MgSO4 anidro, e concentrado a vácuo. O material bruto é purificado por meio de cromatografia instantânea em um sistema de COMBIFLASH® (ISCO) usando 0-20% de EtOAc/Hexanos para dar 5- ((terc-butildimetilsililóxi)metil)-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan- 2-il)fenilcarbamato de terc-butila como uma espuma branca. ETAPA 3: 3-CLORO-5-((4-METÓXI-2-METILFENIL)ETINIL) PICOLINONITRILA
[000535] A um frasco de fundo redondo com tampa com septos foram adicionados 1-etinil4-metóxi-2-metilbenzeno (1,1 equiv. comercialmente disponível), 3,5-dicloropicolinonitrila (1 equiv. comercialmente disponível), trietilamina (5 equiv.), e DMF anidro (0,2 M) a vácuo e nitrogênio jateado por três vezes. CuI (0,05 equiv.) e bis(trifenilfosfina)dicloro-paládio(II) (0,05 equiv.) foram adicionados. O septo foi substituído com um condensador de refluxo e o frasco foi aquecido para 60°C durante a noite sob atmosfera de nitrogênio. Sob conclusão da reação como monitorado por TLC, o conteúdo do frasco foi carregado em uma coluna pré-aquecida de sílica-gel grande com hexanos. Cromatografia instantânea (sílica-gel, hexanos:EtOAc (1:4%)) forneceu 3-cloro-5-((4-metóxi-2-metilfenil)etinil)picolinonitrila.
[000536] ETAPA 4: 8-((TERC-BUTILDIMETILSILILÓXI)METIL)-2-((4- METÓXI-2-METILFENIL) ETINIL)BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-5-AMINA
[000537] A um frasco de fundo redondo com condensador de refluxo foram adicionados 3-cloro-5-((4-metóxi-2-metilfenil)etinil)picolinonitrila (da etapa 3) (1 equiv.), 5-((terc-butildimetilsililóxi)metil)-2-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenilcarbamato de terc-butila (da etapa 2) (1,25 equiv.), K3PO4 (2 equiv.), tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0) (0,05 equiv.), e 2- Dicicloexilfosfino-2’,6’-dimetoxibifenila (0,1 equiv.). n-butanol e água (5:2, 0,2 M) foram adicionados, e o conteúdo é desgasificado (vácuo seguido por jato de nitrogênio) durante três vezes. A mistura de reação foi agitada vigorosamente sob nitrogênio a 100°C durante a noite em um banho de óleo. Os conteúdos foram esfriados e absorvidos em água seguido por extração com cloreto de metileno. As camadas orgânicas combinadas foram secadas (Na2SO4) e concentradas. Cromatografia instantânea (sílica-gel, 0 - 50% de EtOAc em CH2Cl2) forneceu 8-((terc-butildimetilsililóxi)metil)-2-((4-metóxi-2- metilfenil)etinil)benzo[f][1,7]naftiridin-5-amina como um sólido. ETAPA 5: 8-(( TERC -BUTILDIMETILSILILÓXI)METIL)-2-(4-METÓXI-2- METILFENETIL)BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-5-AMINA
[000538] A um frasco de fundo redondo foi adicionada 8-((terc- butildimetilsililóxi)metil)-2-((4-metóxi-2- metilfenil)etinil)benzo[f][1,7]naftiridin-5-amina (da etapa 4) (1 equiv.) com uma barra de agitação. Etanol e cloreto de metileno (1:2, 0,2 M) foram adicionados, seguido por meio de paládio em carbono (pó ativado, úmido, 10% em carbono, 0,1 equiv.). Os conteúdos foram submetidos a vácuo seguido por jato de hidrogênio durante três vezes. A mistura de reação foi agitada vigorosamente sob balão de hidrogênio em temperatura ambiente durante a noite. Depois a mistura de reação foi filtrada por meio de um bloco de celite, e o bloco de celite foi lavado subsequentemente com cloreto de metileno e EtOAc até que o filtrado não tivesse nenhuma absorção de UV. Lavagens orgânicas combinadas foram concentradas. Cromatografia instantânea (sílica- gel, 0 - 50% de EtOAc em CH2Cl2) forneceu 8-((terc- butildimetilsililóxi)metil)-2-(4-metóxi-2-metilfenetil)benzo [f] [1,7]naftiridin-5-amina como um sólido amarelo. ETAPA 6: 5-AMINO-2-(4-METÓXI-2-METILFENETIL)BENZO[F] [1,7] NAFTIRIDIN-8-IL)METANOL (2-1)
[000539] 8-((terc-butildimetilsililóxi)metil)-2-(4-metóxi-2- metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-5-amina (da etapa 5) (1,0 equiv.) e TBAF (1,1 equiv.) em THF são agitados em temperatura ambiente durante a noite. A reação é extinguida com NaHCO3 saturado. As duas fases são separadas, e a camada aquosa é extraída duas vezes com Et2O. As camadas orgânicas combinadas são lavadas com salmoura, secadas em MgSO4 anidro, e concentradas a vácuo. O material bruto é purificado por meio de cromatografia instantânea em um sistema de COMBIFLASH® (ISCO) usando 0-5% MeOH/DCM para dar 5-amino- 2-(4-metóxi-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)metanol (2-1) como um sólido branco. 1H RMN (acetona - d6): δ 8,79 (s, 1H), 8,73 (s, 1H), 8,35 (d, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,33 (d, 1H), 7,09 (d, 1H), 6,75 (d, 1H), 6,68 (dd, 1H), 6,57 (br s, 2H), 4,47 (d, 2H), 4,32 (t, 1H), 3,58 (s, 3H), 3,17 (t, 2H), 3,04 (t, 2H), 2,30 (s, 3H). LRMS [M+H] = 374,2, SÍNTESE DOS COMPOSTOS EXEMPLARES EXEMPLO 1 (Tabela 1: Composto 6) SÍNTESE DE ÁCIDO 3-(2-(2-(4-(2-(5-AMINO-8-METILBENZO[F] [1,7] NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3-METILFENÓXI)ETÓXI)ETÓXI)-1,1- DIFLUOROPROPILFOSFÔNICO (6)
Figure img0018
ETAPA 1:1,1-DIFLÚOR-3-(2-(2- IODOETÓXI)ETÓXI)PROPILFOSFONATO DE DIETILA (1-1)
[000540] A uma solução de difluorometilfosfonato de dietila (1,0 equiv.) em THF (0,8 M) a -78°C foi lentamente adicionada uma solução de LDA (2 M, 1,1 equiv.) em heptano/THF/etilbenzeno, e a mistura foi agitada vigorosamente durante 30 minutos. Em um frasco de reação separado, uma solução de 1,2-bis(2-iodoetóxi)etano (1,0 equiv.) em THF (0,8M) foi esfriada para -78°C. Para esta solução foi transferida, por meio de cânula, a solução de lítio de alquila recentemente preparada e a mistura de reação foi deixada agitar-se por 1 hora a - 78°C. Neste momento, o banho refrescante foi removido e a mistura de reação foi deixada aquecer para temperatura ambiente. A mistura de reação foi depois extinguida com uma solução aquosa a 1 M de HCl. A mistura resultante foi transferida para um funil separador e lavada com CH2Cl2 três vezes. As camadas orgânicas combinadas foram secadas em Na2SO4 anidro e os voláteis foram removidos a vácuo. O resíduo resultante foi purificado por um sistema de COMBIFLASH® (ISCO) usando CH2Cl2 para fornecer 1,1-diflúor-3-(2-(2- iodoetóxi)etóxi)propilfosfonato de dietila (1-1) como um óleo amarelo. 1H RMN (CDCl3): δ 4,23-4,31 (m, 4H), 3,75-3,80 (m, 4H), 3,60-3,67 (m, 4H), 3,26 (t, 2H), 2,33-2,50 (m, 2H), 1,38 (t, 6H). ETAPA 2: SÍNTESE DE 2-(2-(2-(4-(2-(5-AMINO-8- METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3- METILFENÓXI)ETÓXI)ETÓXI)-1,1-DIFLUOROETILFOSFONATO (1-2) DE DIETILA
[000541] A uma solução de 4-(2-(5-amino-8- metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenol (B-4) (1,0 equiv.) em dimetilformamida (0,10 M) a 22°C 60% de dispersão de hidreto de sódio foram adicionados em óleo mineral (1,5 equiv.) e a mistura resultante foi deixada agitar-se durante 30 minutos. Neste momento, 1,1-diflúor-3-(2-(2-iodoetóxi)etóxi)propilfosfonato de dietila (1,2 equiv.) foi adicionado a esta mistura. A mistura de reação foi depois deixada agitar por 18 horas após as quais foi diluída com acetato de etila e água. As camadas bifásicas foram separadas e a camada orgânica foi lavada duas vezes com água. A camada orgânica foi secada em Na2SO4 anidro e os voláteis foram removidos a vácuo. O resíduo resultante foi purificado por um sistema de COMBIFLASH® (ISCO) usando 0-50% de acetato de etila em gradiente de hexanos para fornecer 3-(2-(2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [1,7]naftiridin-2-il)etil)-3- metilfenóxi)etóxi)etóxi)-1,1-difluoropropilfosfonato de dietila (1-2) como um sólido. ETAPA 3: SÍNTESE DE ÁCIDO 3-(2-(2-(4-(2-(5-AMINO-8- METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3- METILFENÓXI)ETÓXI)ETÓXI)-1,1-DIFLUOROETILFOSFÔNICO (6)
[000542] A uma solução de 3-(2-(2-(4-(2-(5-amino-8- metilbenzo[f][1,7] naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenóxi)etóxi)etóxi)-1,1- difluoropropilfosfonato de dietila (1-2) (1,0 equiv.) em CH2Cl2 (0,10 M) a 0°C foi lentamente adicionado brometo de trimetilsilila (10 equiv.). Após 1 hora, o banho de gelo foi removido e a mistura de reação foi deixada agitar-se a 22°C por 18 horas. Neste momento, os voláteis foram removidos a vácuo e o resíduo resultante foi purificado por meio de HPLC de Fase Reversa usando uns 20-90% de 0,5 mM de NH4OAc (em MeCN) a 10 mM de gradiente de NH4OAc (em água) para liberar ácido 3-(2-(2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3- metilfenóxi) etóxi)etóxi)-1,1-difluoropropilfosfônico (6) como um sólido. 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6): δ 8,83 (s, 1H), 8,68 (s, 1H), 8,32 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 7,14 (d, 1H), 7,09 (br, 2H), 7,08 (d, 1H), 6,74 (s, 1H), 6,68 (d, 1H), 4,01 (t, 2H), 3,70 (t, 2H), 3,61 (t, 2H), 3,54-3,59 (m, 2H), 3,48- 3,50 (m, 2H), 3,07 (t, 2H), 2,94 (t, 2H), 2,43 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,06- 2,21 (m, 2H). LRMS [M+H] = 590,2. EXEMPLO 2 (Tabela 1: Composto 1) SÍNTESE DE ÁCIDO 3-(4-(2-(5-AMINO-8- METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3- METILFENÓXI)PROPILFOSFÔNICO (1)
Figure img0019
ETAPA 1: 3-(4-(2-(5-AMINO-8-METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2- IL)ETIL)-3-METILFENÓXI)PROPILFOSFONATO DE DIETILA
[000543] 3-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3- metilfenóxi)propilfosfonato de dietila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 2, mas usando 3- bromopropilfosfonato de dietila comercialmente disponível como o reagente. ETAPA 2:ÁCIDO 3-(4-(2-(5-AMINO-8- METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3- METILFENÓXI)PROPILFOSFÔNICO
[000544] Ácido 3-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)- 3-metilfenóxi)propilfosfônico (1) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 3, mas usando 3-(4-(2-(5- amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3- metilfenóxi)propilfosfonato de dietila da etapa anterior. TFA foi acrescentado à amostra de 1H RMN para solubilizar o composto para análise. A 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6) obtida para ácido 3-(4-(2-(5- amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenóxi) propilfosfônico (1) foi: δ 9,72 (br, 1H), 9,01 (s, 1H), 8,96 (br, 1H), 8,85 (s, 1H), 8,54 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,54 (s, 1H), 7,42 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 7,08 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,74 (s, 1H), 6,66 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 3,95 (t, 2H, J = 6,4 Hz), 3,14 (t, 2H, J = 8,6 Hz), 2,97 (t, 2H, J = 8,6 Hz), 2,50 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 1,91-1,81 (m, 2H), 1,67-1,56 (m, 2H). LRMS [M+H] = 466,2 EXEMPLO 3 (Tabela 1: Composto 2) SÍNTESE DE FOSFATO DE DI-HIDROGÊNIO DE 4-(2-(5-AMINO-8- METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3-METILFENILA (2)
Figure img0020
ETAPA 1: FOSFATO DE DIBENZILA DE 4-(2-(5-AMINO-8-METIL- BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3-METILFENILA
[000545] Fosfato de dibenzila de 4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7] naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 2, mas usando fosforocloridrato de dibenzila comercialmente disponível como o reagente. ETAPA 2: FOSFATO DE DI-HIDROGÊNIO DE 4-(2-(5-AMINO-8- METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3-METILFENILA
[000546] Fosfato de dibenzila de 4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7] naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenila (1,0 equiv.) e 10% de Pd/C (20% equiv. em peso) em MeOH (0,66 M) foi deixado agitar por 18 horas sob um balão de H2. Neste momento, a mistura de reação foi passada por meio de um bloco de Celite, lavando com uma mistura de 2:1 de CHCl3:MeOH. As camadas orgânicas combinadas foram secadas em Na2SO4 anidro e os voláteis foram removidos a vácuo. O resíduo resultante foi purificado por meio de HPLC de Fase Reversa usando uns 20-90% de 0,5 mM de NH4OAc (em MeCN) a 10 mM de gradiente de NH4OAc (em água) para dar fosfato de di-hidrogênio de 4-(2-(5- amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenila (2) como um sólido. TFA foi acrescentado à amostra de 1H RMN para solubilizar o composto para análise. 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6): δ 9,69 (br, 1H), 9,33 (s, 1H), 9,03 (s, 1H), 8,87 (s, 1H), 8,54 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,51 (s, 1H), 7,42 (d, 1H, J = 9,4 Hz), 7,22 (s, 1H), 7,17 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,10 (s, 1H), 6,97 (s, 1H), 6,92 (d, 1H, J = 6,1 Hz), 3,15 (t, 2H, J = 6,8 Hz), 3,00 (t, 2H, J = 6,8 Hz), 2,50 (s, 3H), 2,29 (s, 3H). LRMS [M+H] = 424,1 EXEMPLO 4 (Tabela 1: Composto 3) SÍNTESE DE ÁCIDO(4-(2-(5-AMINO-8- METILBENZO[F1[1,71NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3- METILFENÓXI)METILFOSFÔNICO (3)
Figure img0021
ETAPA 1: (4-(2-(5-AMINO-8-METILBENZO[F1[1,71NAFTIRIDIN-2- IL)ETIL)-3-METILFENÓXI)METILFOSFONATO DE DIETILA
[000547] (4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3- metilfenóxi) metilfosfonato de dietila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 2, mas usando 4- metilbenzenossulfonato de (dietoxifosforil)metila comercialmente disponível como o reagente. ETAPA 2J ÁCIDO (4-(2-(5-AMINO-8- METILBENZO[F1[1,71NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3- METILFENÓXI)METILFOSFÔNICO
[0005481 Ácido (4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f1[1,71naftiridin-2-il)etil)-3- metilfenóxi)metilfosfônico (3) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 3, mas usando (4-(2-(5- amino-8-metilbenzo [f1[1,71naftiridin-2-il)etil)-3- metilfenóxi)metilfosfonato de dietila da etapa anterior. A 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6) obtida para ácido (4-(2-(5-amino-8- metilbenzo[f1[1,71naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenóxi)metilfosfônico (3) foi: δ 8,86 (br, 1H), 8,67 (br, 1H), 8,34 (d, 1H, J = 10,4 Hz), 7,37 (s, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,14 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,05 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 6,73 (s, 1H), 6,69 (d, 1H, J = 8,6 Hz), 6,60 (s, 1H), 3,70-3,61 (m, 2H), 3,10 (t, 2H, J = 8,8 Hz), 2,94 (t, 2H, J = 8,8 Hz), 2,45 (s, 3H), 2,25 (s, 3H). LRMS [M+H] = 438,2 EXEMPLO 5 (Tabela 1: Composto 4) SÍNTESE DE ÁCIDO 5-(4-(2-(5-AMINO-8- METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3-METILFENÓXI)-1,1- DIFLUOROPENTILFOSFÔNICO (4)
Figure img0022
ETAPA 1: 5-BROMO-1,1-DIFLUOROPENTILFOSFONATO DE DIETILA
[000549] 5-bromo-1,1-difluoropentilfosfonato de dietila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 1, mas usando 1,4-dibromobutano comercialmente disponível como o reagente. ETAPA 2: 5-(4-(2-(5-AMINO-8-METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2- IL)ETIL)-3-METILFENÓXI)-1,1-DIFLUOROPENTILFOSFONATO DE DIETILA
[000550] 5-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3- metilfenóxi)-1,1-difluoropentilfosfonato de dietila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 2, mas usando 5-bromo-1,1-difluoropentilfosfonato de dietila da etapa anterior como o reagente. ETAPA 3:ÁCIDO 5-(4-(2-(5-AMINO-8- METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3-METILFENÓXI)-1,1- DIFLUOROPENTILFOSFÔNICO (4)
[000551] Ácido 5-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)- 3-metilfenóxi)-1,1-difluoropentilfosfônico (4) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 3, mas usando 5- (4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenóxi)-1,1- difluoropentilfosfonato de dietila da etapa 2, TFA foi acrescentado à amostra de 1H RMN para solubilizar o composto para análise. A 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6) obtida para ácido 5-(4-(2-(5-amino-8- metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenóxi)-1,1- difluoropentilfosfônico (4) foi: δ 9,70 (br, 1H), 9,33 (br, 1H), 8,98 (s, 1H), 8,84 (s, 1H), 8,50 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,52 (s, 1H), 7,40 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,06 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,74 (s, 1H), 6,68 (d, 1H, J = 10,8 Hz), 3,91 (t, 2H, J = 6,2 Hz), 3,14 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 2,97 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 2,50 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,13-1,94 (m, 2H), 1,78-1,70 (m, 2H), 1,66-1,59 (m, 2H). LRMS [M+H] = 530,2 EXEMPLO 6 (Tabela 1: Composto 5) SÍNTESE DE ÁCIDO 4-(4-(2-(5-AMINO-8- METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3-METILFENÓXI)-1,1- DIFLUOROBUTILFOSFÔNICO (5)
Figure img0023
ETAPA 1: 4-BROMO-1,1-DIFLUOROBUTILFOSFONATO DE DIETILA
[000552] 4-bromo-1,1-difluorobutilfosfonato de dietila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 1, mas usando 1,3-dibromopropano comercialmente disponível como o reagente. ETAPA 2: 4-(4-(2-(5-AMINO-8-METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2- IL)ETIL)-3-METILFENÓXI)-1,1-DIFLUOROBUTILFOSFONATO DE DIETILA
[000553] 4-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3- metilfenóxi)-1,1-difluorobutilfosfonato de dietila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 2, mas usando 4- bromo-1,1-difluorobutilfosfonato de dietila da etapa anterior como o reagente. ETAPA 3 ÁCIDO 4-(4-(2-(5-AMINO-8- METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3-METILFENÓXI)-1,1- DIFLUOROBUTILFOSFÔNICO (5)
[000554] Ácido 4-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)- 3-metilfenóxi)-1,1-difluorobutilfosfônico (5) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 3, mas usando 4- (4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenóxi)-1,1- difluorobutilfosfonato de dietila da etapa 2, TFA foi acrescentado à amostra de 1H RMN para solubilizar o composto para análise. A 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6) obtida para ácido 4-(4-(2-(5-amino-8- metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenóxi)-1,1- difluorobutilfosfônico (5) foi: δ 9,71 (br, 1H), 9,33 (br, 1H), 9,00 (s, 1H), 8,85 (s, 1H), 8,54 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,53 (s, 1H), 7,42 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,08 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,76 (s, 1H), 6,70 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 3,97 (t, 2H, J = 6,2 Hz), 3,15 (t, 2H, J = 8,5 Hz), 2,98 (t, 2H, J = 8,5 Hz), 2,50 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,21-2,06 (m, 2H), 1,97-1,87 (m, 2H). LRMS [M+H] = 516,2 EXEMPLO 7 (Tabela 1: Composto 7) SÍNTESE DE ÁCIDO 3-(2-(4-(2-(5-AMINO-8-METILBENZO[F][1,7] NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3-METILFENÓXI)ETÓXI)-1,1- DIFLUOROPROPILFOSFÔNICO (7) NH2 O FF OH
Figure img0024
ETAPA 1: 3-(2-BROMOETÓXI)-1,1-DIFLUOROPROPILFOSFONATO DE DIETILA
[000555] Um frasco de fundo redondo secado em forno foi carregado com THF seco (1,07 M) e diisopropilamina (2,0 equiv.). O frasco foi esfriado em um banho de gelo seco-acetona, e tratado com solução de n-butillítio (1,6 equiv.) em cicloexano (1,52 M) em forma de gotas por meio de seringa. O frasco foi transferido para um banho de gelo-água sob conclusão da adição, e agitado durante 30 minutos. O frasco foi depois esfriado de volta para o banho de gelo seco-acetona, e tratado com uma solução de difluorometilfosfonato de dietila (1,0 equiv.) em HMPA (1:1 v/v) por meio de seringa. A agitação foi deixada prosseguir por uma hora. À mistura de reação acima, uma solução esfriada de 1- bromo-2-(2-bromoetóxi)etano (3,0 equiv.) em THF (3 M) foi adicionada rapidamente por meio de uma seringa, e a reação foi deixada agitar-se por outras 3 horas antes de extinguir com 1 N de HCl. O frasco foi aquecido para temperatura ambiente, e o pH foi ajustado em < 4 com 1 N de HCl. A mistura foi extraída com EtOAc (3x). Os extratos orgânicos combinados foram secados em Na2SO4 anidro, e concentrados a vácuo. O material bruto foi purificado por Combiflash usando 0-75% de EtOAc em hexanos, seguido por RP-HPLC (0,035% de TFA em ACN:0,05% de TFA em H2O, coluna de C18) para fornecer 3-(2-bromoetóxi)-1,1-difluoropropilfosfonato de dietila como um óleo amarelo pálido. ETAPA 2: 3-(2-(4-(2-(5-AMINO-8-METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2- IL)ETIL)-3-METILFENÓXI)ETÓXI)-1,1- DIFLUOROPROPILFOSFONATO DE DIETILA
[000556] 3-(2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3- metilfenóxi)etóxi)-1,1-difluoropropilfosfonato de dietila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 2, mas usando 3-(2-bromoetóxi)-1,1-difluoropropilfosfonato de dietila da etapa anterior como o reagente. ETAPA 3:ÁCIDO 3-(2-(4-(2-(5-AMINO-8- METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3- METILFENÓXI)ETÓXI)-1,1-DIFLUOROPROPILFOSFÔNICO
[000557] Ácido 3-(2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2- il)etil)-3-metilfenóxi)etóxi)-1,1-difluoropropilfosfônico (7) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 3, mas usando 3-(2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3- metilfenóxi)etóxi)-1,1-difluoropropilfosfonato de dietila da etapa 2 anterior. A 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6) obtida para ácido 3-(2-(4-(2- (5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenóxi)etóxi)-1,1- difluoropropilfosfônico (7) foi: δ 8,83 (s, 1H), 8,69 (s, 1H), 8,35 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,36 (s, 1H), 7,26 (br, 2H), 7,16 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,07 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,75 (s, 1H), 6,66 (d, 1H, 8,3 J = Hz), 4,00 (t, 2H, J = 4,4 Hz), 3,67 (t, 2H, J = 6,7 Hz), 3,08 (t, 2H, J = 6,8 Hz), 2,94 (t, 2H, J = 6,8 Hz), 2,44 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,22-2,09 (m, 2H). LRMS [M+H] = 546,2 EXEMPLO 8 (Tabela 1: Composto 8) SÍNTESE DE ÁCIDO 2-(4-((4-(2-(5-AMINO-8-METILBENZO[F][1,7] NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3-METILFENÓXI)METIL)FENIL)-1,1- DIFLUOROETILFOSFÔNICO (8)
Figure img0025
ETAPA 1:2-(4-(BROMOMETIL)FENIL)-1,1- DIFLUOROETILFOSFONATO DE DIETILA
[000558] 2-(4-(bromometil)fenil)-1,1-difluoroetilfosfonato de dietila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 1, mas usando 1,4-bis(bromometil)benzeno comercialmente disponível como o reagente. ETAPA 2: 2-(4-((4-(2-(5-AMINO-8-METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2- IL)ETIL)-3-METILFENÓXI)METIL)FENIL)-1,1- DIFLUOROETILFOSFONATO DE DIETILA
[000559] 2-(4-((4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3- metilfenóxi)metil)fenil)-1,1-difluoroetilfosfonato de dietila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 2, mas usando 2-(4-(bromometil)fenil)-1,1-difluoroetilfosfonato de dietila da etapa anterior como o reagente. ETAPA 3 ÁCIDO 2-(4-((4-(2-(5-AMINO-8- METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3- METILFENÓXI)METIL)FENIL)-1,1-DIFLUOROETILFOSFÔNICO
[000560] Ácido 2-(4-((4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2- il)etil)-3-metilfenóxi)metil)fenil)-1,1-difluoroetilfosfônico (8) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 3, mas usando 2-(4-((4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin- 2-il)etil)-3-metilfenóxi)metil)fenil)-1,1-difluoroetilfosfonato de dietila da etapa 3 anterior. TFA foi acrescentado à amostra de 1H RMN para solubilizar o composto para análise. A 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6) obtida para ácido 2-(4-((4-(2-(5-amino-8-metilbenzo [f][1,7]naftiridin-2- il)etil)-3-metilfenóxi)metil)fenil)-1,1-difluoroetilfosfônico (8) foi: δ 9,71 (br, 1H), 9,35 (br, 1H), 9,01 (s, 1H), 8,86 (s, 1H), 8,54 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,53 (s, 1H), 7,44 (d, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,29 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 7,24 (s, 1H), 7,11 (s, 1H), 7,09 (s, 1H), 6,99 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 6,76 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 5,04 (s, 2H), 3,84-3,73 (m, 2H), 3,15 (t, 2H, J = 8,5 Hz), 2,99 (t, 2H, J = 8,5 Hz), 2,50 (s, 3H), 2,29 (s, 3H). LRMS [M+H] = 578,2 EXEMPLO 9 (Tabela 1: Composto 9) SÍNTESE DE ÁCIDO 2-(5-AMINO-2-(4-METÓXI-2-METILFENETIL) BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-8-IL)-1,1-DIFLÚOR-2- OXOETILFOSFÔNICO (9)
Figure img0026
ETAPA 1: 5-AMINO-2-(4-METÓXI-2-METILFENETIL)BENZO[F][1,7] NAFTIRIDINO-8-CARBALDEÍDO (2-2)
[000561] A uma solução de (5-amino-2-(4-metóxi-2- metilfenetil)benzo[f] [1,7] naftiridin-8-il)metanol (2-1), 1,0 equiv. em DMSO (0,15 M) em temperatura ambiente foi adicionado IBX (1,5 equiv.). A reação foi agitada por 2,5 horas e depois diluída com água. A camada aquosa foi extraída 2% de MeOH/DCM (4x). As camadas orgânicas combinadas foram secadas em MgSO4 anidro e concentradas a vácuo. O resíduo resultante foi purificado por um sistema de COMBIFLASH® (ISCO) usando um gradiente de 0-5% MeOH/DCM para fornecer 5-amino-2-(4-metóxi-2- metilfenetil)benzo[f][1,7] naftiridina-8-carbaldeído (2-2) como um sólido. ETAPA 2: 2-(5-AMINO-2-(4-METÓXI-2-METILFENETIL)BENZO[F][1,7] NAFTIRIDIN-8-IL)-1,1-DIFLÚOR-2-HIDROXIETILFOSFONATO DE DIETILA (2-3)
[000562] A uma solução de difluorometilfosfonato de dietila (3,0 equiv.) em THF (0,3 M) a -78°C sob atmosfera de nitrogênio foram adicionados 2M de LDA a gotas (3,0 equiv., tipo comercial). A reação foi agitada a -78°C por 25 min, e uma solução de 5-amino-2-(4-metóxi- 2-metilfenetil)benzo[f] [1,7] naftiridina-8-carbaldeído (2-2) (1,0 equiv.) em THF (0,1 M) foi adicionada lentamente. A reação foi agitada a - 78°C por 1 hora, 0°C por 1 hora, e depois aquecida para temperatura ambiente por 30 minutos. A reação foi extinguida com solução de cloreto de amônio aquoso saturado e extraída duas vezes com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas em MgSO4 anidro, e concentradas a vácuo. O resíduo resultante foi purificado por um sistema de COMBIFLASH® (ISCO) usando um gradiente de 0-5% MeOH/DCM para fornecer 2-(5- amino-2-(4-metóxi-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)-1,1-diflúor- 2-hidroxietilfosfonato de dietila (2-3) como um sólido. ETAPA 3: 2-(5-AMINO-2-(4-METÓXI-2-METILFENETIL)BENZO[F][1,7] NAFTIRIDIN-8-IL)-1,1-DIFLÚOR-2-OXOETILFOSFONATODE DIETILA (2-4)
[000563] A uma solução de 2-(5-amino-2-(4-metóxi-2- metilfenetil)benzo[f] [1,7]naftiridin-8-il)-1,1-diflúor-2-hidroxietilfosfonato de dietila (2-3) (1,0 equiv.) em 1:1 acetato de DMSO/etila (0,07 M) foi adicionado IBX (1,5 equiv.). A reação foi aquecida para 80°C por 1 hora, e depois esfriada para temperatura ambiente. A mistura foi diluída com acetato de etila e filtrou por meio de celite. O filtrado foi lavado com água (2x), salmoura, secada em MgSO4 anidro, e concentrado a vácuo. O resíduo resultante foi purificado por um sistema de COMBIFLASH® (ISCO) usando um gradiente de 0-5% MeOH/DCM para fornecer 2-(5-amino-2-(4-metóxi-2- metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)-1,1-diflúor-2-oxoetilfosfonato de dietila (2-4) como um sólido. ETAPA 4 ÁCIDO 2-(5-AMINO-2-(4-METÓXI-2- METILFENETIL)BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-8-IL)-1,1-DIFLÚOR-2- OXOETILFOSFÔNICO (9)
[000564] A uma solução de 2-(5-amino-2-(4-metóxi-2- metilfenetil)benzo[f] [1,7] naftiridin-8-il)-1,1-diflúor-2-oxoetilfosfonato de dietila (2-4) (1,0 equiv.) em DCM (0,05 M) a 0°C foi adicionado TMSI (5,0 equiv.). A reação foi aquecida para temperatura ambiente por 2 horas, e mais TMSI foi adicionado (2,5 equiv.). A reação foi agitada durante outros 30 minutos, e depois extinguida com quantidades pequenas de água. O DCM foi removido por evaporação, e depois DMSO/água adicionados. A mistura foi ajustada para pH 9 e diretamente purificada em RP-HPLC usando uma coluna de C18, eluindo com 10-40% 95:5 (MeCN/5 mM de NH4OAc) em gradiente de 10 mM de NH4OAc (pH 9). As frações contendo o produto foram combinadas e concentradas a vácuo para dar ácido 2-(5-amino-2-(4- metóxi-2-metilfenetil)benzo[f][1,7] naftiridin-8-il)-1,1-diflúor-2- oxoetilfosfônico (9) como um sólido. 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6): δ 8,82 (s, 1H), 8,5 (br, 1H), 8,44 (s, 1H), 8,2 (br, 1H), 7,98 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 7,2 (br, 2H), 7,05 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 6,73 (s, 1H), 6,67 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 3,70 (s, 3H), 2,99-2,87 (m, 4H), 2,25 (s, 3H). LRMS [M+H] = 502,2 EXEMPLO 10 (Tabela 1: Composto 10) SÍNTESE DE ÁCIDO (E)-2-(5-AMINO-2-(4-METÓXI-2-METILFENETIL) BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-8-IL)VINILFOSFÔNICO (10)
Figure img0027
ESQUEMA 3
Figure img0028
ETAPA 1 2-(5-AMINO-2-(4-METÓXI-2- METILFENETIL)BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-8-IL)VINILFOSFONATO (3-1) DE (E)-DIETILA
[000565] A uma suspensão agitada de NaH (1,2 equiv.) em THF (0,1 M) esfriada para 0°C foi adicionada uma solução de metilenodifosfonato de tetraetila (1,3 equiv.) em THF (0,21 M). À mistura de reação resultante uma solução foi adicionada de 5-amino-2- (4-metóxi-2-metilfenetil)benzo[f] [1,7] naftiridina-8-carbaldeído (2-2) (Exemplo 9 - Etapa 1) (1,0 equiv.) em THF (0,08 M). A reação foi agitada em temperatura ambiente durante 30 minutos, depois os solventes foram removidos a vácuo, e o resíduo resultante foi purificado por um sistema de COMBIFLASH® (ISCO) usando um gradiente de 0-5% MeOH/DCM para fornecer 2-(5-amino-2-(4-metóxi- 2-metilfenetil) benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)vinilfosfonato de (E)-dietila (3- 1) como um sólido incolor. ETAPA 2: ÁCIDO (E)-2-(5-AMINO-2-(4-METÓXI-2-METILFENETIL) BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-8-IL)VINILFOSFÔNICO (10)
[000566] A uma solução de 2-(5-amino-2-(4-metóxi-2-metilfenetil) benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)vinilfosfonato de (E)-dietila (3-1) (1,0 equiv.) em DCM (0,095 M) a 0°C foi adicionado TMSBr (10 equiv.). A reação foi aquecida para temperatura ambiente por 2 horas, e depois extinta com quantidades pequenas de MeOH. O DCM foi removido por evaporação, e depois DMSO/água adicionados. A mistura foi ajustada para pH 9 e diretamente purificada em RP-HPLC usando uma coluna de C18, eluindo com 10-40% 95:5 (MeCN/5 mM de NH4OAc) em gradiente de 10 mM de NH4OAc (pH 9). As frações contendo o produto foram combinadas e concentradas a vácuo para dar o ácido (E)-2-(5- amino-2-(4-metóxi-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)vinilfosfônico (10) como um sólido. 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6): δ 9,76 (s, 1H), 9,33 (s, 1H), 9,03 (s, 1H), 8,82 (s, 1H), 8,60 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,87 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,78 (s, 1H), 7,31 (dd, 1H, J = 17,6, 21,6 Hz), 7,03 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,69 (m, 2H), 6,61 (dd, 1H, J = 2,8, 8,4 Hz), 3,64 (s, 3H), 3,14 - 3,06 (m, 2H), 2,97-2,91 (m, 2H), 2,23 (s, 3H). LRMS [M+H] = 450,2 EXEMPLO 11 (Tabela 1: Composto 11) SÍNTESE DE ÁCIDO 2-(5-AMINO-2-(4-METÓXI-2- METILFENETIL)BENZO [F][1,7]NAFTIRIDIN-8-IL)ETILFOSFÔNICO (11} HO HO PO
Figure img0029
ETAPA 1: 2-(5-AMINO-2-(4-METÓXI-2-METILFENETIL)BENZO[F][1,7] NAFTIRIDIN-8-IL)ETILFOSFONATO DE DIETILA (3-3)
[000567] A uma solução de 2-(5-amino-2-(4-metóxi-2-metilfenetil) benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)vinilfosfonato de (E)-dietila (3-1) (Exemplo 10 - Etapa 1) (1,0 equiv.) em DCM (0,05 M) e EtOH (0,08 M) foram adicionados 10% de paládio em carbono (0,09 equiv.). Um vaso de reação foi carregado com um balão de hidrogênio e agitado em temperatura ambiente durante a noite. Após a reação ter sido concluída como monitorado por LCMS, os solventes foram removidos, e o resíduo resultante foi purificado por um sistema de COMBIFLASH® (ISCO) usando um gradiente de 0-5% de MeOH/DCM fornecer 2-(5-amino-2-(4-metóxi-2- metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)etilfosfonato de dietila (3-3). ETAPA 2J ÁCIDO 2-(5-AMINO-2-(4-METÓXI-2- METILFENETIL)BENZO[F] [1,7]NAFTIRIDIN-8-IL)ETILFOSFÔNICO (11)
[000568] A uma solução de 2-(5-amino-2-(4-metóxi-2- metilfenetil)benzo[f] [1,7] naftiridin-8-il)etilfosfonato de dietila (3-3) (1,0 equiv.) em DCM (0,02 M) a 0°C foi adicionado TMSBr (10 equiv.). A reação foi aquecida para temperatura ambiente por 2 horas, e depois extinta com quantidades pequenas de MeOH. O DCM foi removido por evaporação, e depois DMSO/água foram adicionados. A mistura foi ajustada para pH 9 e diretamente purificada em RP-HPLC usando uma coluna de C18, eluindo com 10-40% 95:5 (MeCN/5 mM de NH4OAc) em gradiente de 10 mM de NH4OAc (pH 9). As frações contendo o produto foram combinadas e concentradas a vácuo para dar ácido 2- (5-amino-2-(4-metóxi-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8- il)etilfosfônico (11) como um sólido. 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6): δ 9,66 (s, 1H), 9,30 (s, 1H), 8,95 (s, 1H), 8,78 (s, 1H), 8,50 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,54 (s, 1H), 7,45 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,02 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,69 (d, 1H, J = 2,8 Hz), 6,61 (dd, 1H, J = 2,8, 8,4 Hz), 3,64 (s, 3H), 3,14-3,06 (m, 2H), 3,00-2,90 (m, 4H), 2,22 (s, 3H), 2,02-1,92 (m, 2H). LRMS [M+H] = 452,2 EXEMPLO 12 (Tabela 1: Composto 12) SÍNTESE DE ÁCIDO (E)-2-(5-AMINO-2-(4-METÓXI-2-METILFENETIL) BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-8-IL)-1-FLUOROVINILFOSFÔNICO (12)
Figure img0030
ETAPA 1: 2-(5-AMINO-2-(4-METÓXI-2-METILFENETIL)BENZO[F][1,7] NAFTIRIDIN-8-IL)-1-FLUOROVINILFOSFONATO (3-2) DE (E)- DIETILA
[000569] A uma solução agitada de fluorometilenodifosfonato de tetraetila (2,5 equiv.) em THF (0,27 M) esfriada para -78°C foi adicionada solução de LDA (1,8 M em etilbenzeno/pentano/hexano, 2,0 equiv.). A mistura de reação resultante foi aquecida para temperatura ambiente e agitada durante 30 minutos, antes de ser esfriada de volta para -78°C. Uma solução de 5-amino-2-(4-metóxi-2- metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridina-8-carbaldeído (2-2) (Exemplo 9 - Etapa 1) (1,0 equiv.) em THF (0,18 M) foi adicionada, e a mistura de reação foi deixada aquecer-se lentamente para temperatura ambiente. A reação foi extinguida com solução de NH4Cl saturada. Fase aquosa foi extraída com DCM (3x). As fases orgânicas combinadas foram combinadas e concentradas a vácuo. O resíduo foi purificado por um sistema de COMBIFLASH® (ISCO) usando um gradiente de 0-5% de MeOH/DCM para fornecer 2-(5-amino-2-(4-metóxi-2- metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)-1-fluorovinilfosfonato de (E)- dietila (3-2) como um sólido incolor. ETAPA 2: ÁCIDO (E)-2-(5-AMINO-2-(4-METÓXI-2- METILFENETIL)BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-8-IL)-1- FLUOROVINILFOSFÔNICO (12)
[000570] A uma solução de 2-(5-amino-2-(4-metóxi-2- metilfenetil)benzo[f] [1,7]naftiridin-8-il)-1-fluorovinilfosfonato de (E)- dietila (3-2) (1,0 equiv.) em DCM (0,05 M) a 0°C foi adicionado TMSBr (10 equiv.). A reação foi aquecida para temperatura ambiente por 2 horas, e depois extinta com quantidades pequenas de MeOH. O DCM foi removido por evaporação, e depois DMSO/água foram adicionados. A mistura foi ajustada para pH 9 e diretamente purificada em RP- HPLC usando uma coluna de C18, eluindo com 10-40% 95:5 (MeCN/5 mM de NH4OAc) em gradiente de 10 mM de NH4OAc (pH 9). As frações contendo o produto foram combinadas e concentradas a vácuo para dar ácido (E)-2-(5-amino-2-(4-metóxi-2-metilfenetil)benzo[f][1,7] naftiridin-8-il)-1-fluorovinilfosfônico (12) como um sólido. 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6): δ 9,80 (s, 1H), 9,41 (s, 1H), 9,05 (s, 1H), 8,87 (s, 1H), 8,65 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 8,08 (s, 1H), 7,76 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,08 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,02 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,83-6,65 (m, 2H), 3,69 (s, 3H), 3,18-3,12 (m, 2H), 3,02-2,96 (m, 4H), 2,28 (s, 3H). LRMS [M+H] = 468,1 EXEMPLO 13 (Tabela 1: Composto 13) SÍNTESE DE ÁCIDO 3-((4-(2-(5-AMINO-8- METILBENZO[F1[1,71NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3- METILFENÓXI)METIL)FENILFOSFÔNICO (13)
Figure img0031
ETAPA 1: 2-(4-(3-IODOBENZILÓXI)-2-METILFENETIL)-8- METILBENZO[F1 [1,7]NAFTIRIDIN-5-AMINA (4-1)
[000571] A uma solução de 4-(2-(5-amino-8- metilbenzo[f1[1,71naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenol (B-4), 1,0 equiv. em dimetilformamida (0,10 M) a 22°C foi adicionado carbonato de césio (1,5 equiv.) e a mistura resultante foi deixada agitar-se durante 30 minutos. Neste momento, 1-(bromometil)-3-iodobenzeno (1,5 equiv.) foi adicionado a esta mistura. A mistura de reação foi deixada agitar-se a 55°C por 18 horas após as quais foi diluída com acetato de etila e água. As camadas bifásicas foram separadas e a camada orgânica foi lavada duas vezes com água. A camada orgânica foi secada em Na2SO4 anidro e os voláteis foram removidos a vácuo. O resíduo resultante foi purificado por um sistema de COMBIFLASH® (ISCO) usando 0-50% de acetato de etila em gradiente de hexanos para fornecer 2-(4-(3-iodobenzilóxi)-2-metilfenetil)-8- metilbenzo[f][1,7]naftiridin-5-amina (4-1) como um sólido. ETAPA 2 ÁCIDO 3-((4-(2-(5-AMINO-8- METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3- METILFENÓXI)METIL)FENILFOSFÔNICO (13)
[000572] A uma solução agitada de 2-(4-(3-iodobenzilóxi)-2- metilfenetil)-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-5-amina (1,0 equiv.) em fosfato de trietila (1,05 eq.) foi adicionado acetato de paládio (0,08 eq.). A mistura de reação resultante foi aquecida para 90°C durante a noite. Após a reação ter sido esfriada para temperatura ambiente, o resíduo foi absorvido em DCM (0,27 M) a 0°C, e tratado com TMSBr (11 equiv.). A reação foi aquecida para temperatura ambiente por 2 horas, e depois extinta com quantidades pequenas de MeOH. O DCM foi removido por evaporação, e depois DMSO/água adicionados. A mistura foi ajustada para pH 9 e diretamente purificada em RP-HPLC usando uma coluna de C18, eluindo com 10-40% 95:5 (MeCN/5 mM de NH4OAc) em gradiente de 10 mM de NH4OAc (pH 9). As frações contendo o produto foram combinadas e concentradas a vácuo para dar ácido 3-((4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3- metilfenóxi)metil) fenilfosfônico (13) como um sólido. 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6): δ 8,84 (s, 1H), 8,72 (s, 1H), 8,35 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,67 (d, 1H, J = 12 Hz), 7,60-7,54 (m, 1H), 7,30-7,20 (m, 2H), 7,15 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,11 (d, 1 H, J = 8,4 Hz), 7,04 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 6,77 (m, 1H), 4,99 (s, 2H), 3,12-2,92 (m, 4H), 2,44 (s, 3 H), 2,27 (s, 3H). LRMS [M+H] = 514,2 EXEMPLO 14 (Tabela 1: Composto 14) SÍNTESE DE ÁCIDO 5-AMINO-2-(4-METÓXI-2- METILFENETIL)BENZO[F][1,7]NAFTIRIDINO-8- CARBONILFOSFÔNICO (14)
Figure img0032
[000573] A uma suspensão agitada de 5-amino-2-(4-metóxi-2- metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridina-8-carbaldeído (2-2) (Exemplo 9 - Etapa 1) (1,0 equiv.) em tolueno (0,27 M) foi adicionado tris(trimetilsilil) fosfito (1,0 equiv.). A reação foi agitada a 80°C durante 60 minutos, depois os solventes foram removidos, e o resíduo resultante foi absorvido em DMSO (0,27 M), e IBX (1,5 equiv.) foi adicionado. A reação foi agitada em temperatura ambiente por 2,5 horas, e filtrada e diretamente purificada em RP-HPLC usando uma coluna de C18, eluindo com 10-40% 95:5 (MeCN/5 mM de NH4OAc) em gradiente de 10 mM de NH4OAc (pH 9). As frações contendo o produto foram combinadas e concentradas a vácuo para dar ácido 5-amino-2-(4- metóxi-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridina-8-carbonilfosfônico (14) como um sólido. 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6): δ 9,84 (s, 1H), 9,35 (s, 1H), 9,09 (s, 1 H), 8,89 (s, 1 H), 8,76 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 8,60 (s, 1H), 8,19 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 7,04 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,70 (d, 1H, J = 2,8 Hz), 6,62 (dd, 1H, J = 2,8, 8,4 Hz), 3,64 (s, 3H), 3,15-3,09 (m, 2H), 2,97-2,91 (m, 2H), 2,23 (s, 3H). LRMS [M+H] = 452,1 EXEMPLO 15 (Tabela 1: Composto 15) SÍNTESE DE ÁCIDO 3-(5-AMINO-2-(2-METIL-4-(3- FOSFONOPROPÓXI)FENETIL)BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-8- IL)PROPANOICO (15)
Figure img0033
ETAPA 1:ÁCIDO 3-(5-AMINO-2-(4-(3- (DIETOXIFOSFORIL)PROPÓXI)-2- METILFENETIL)BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-8-IL)PROPANOICO
[000574] Ácido 3-(5-amino-2-(4-(3-(dietoxifosforil)propóxi)-2- metilfenetil) benzo [f] [1,7] naftiridin-8-il)propanoico foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 19 - Etapa 11, mas usando 3-bromopropilfosfonato de dietila comercialmente disponível como o reagente. ETAPA 2: ÁCIDO 3-(5-AMINO-2-(2-METIL-4-(3-FOSFONOPROPÓXI) FENETIL)BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-8-IL)PROPANOICO (15)
[000575] Ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(3- fosfonopropóxi)fenetil)benzo[f] [1,7] naftiridin-8-il)propanoico (15) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 19 - Etapa 12, mas usando ácido 3-(5-amino-2-(4-(3- (dietoxifosforil)propóxi)-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8- il)propanoico da etapa anterior. A 1H RMN (MeOD-d4) obtida para ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(3- fosfonopropóxi)fenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico (15) foi: δ 8,60 (s, 1H), 8,27 (s, 1H), 8,07 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,52 (s, 1H), 7,30 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,87 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,67 (s, 1H), 6,60 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 3,93(t, J = 6,4 Hz, 2H), 3,49-3,47 (m, 2H), 3,14-3,09 (m, 2H), 2,99-2,95 (m, 2H), 2,69-2,64 (m, 2H), 2,17 (s, 3H), 2,02-2,00 (m, 2H), 1,74 - .66 (m, 2H). LRMS [M+H] = 524,2 EXEMPLO 16 (Tabela 1: Composto 16) SÍNTESE DE ÁCIDO 3-(5-AMINO-2-(4-(4,4-DIFLÚOR-4- FOSFONOBUTÓXI)-2-METILFENETIL)BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-8- IL)PROPANOICO (16)
Figure img0034
ETAPA 1: 4-BROMO-1,1-DIFLUOROBUTILFOSFONATO DE DIETILA
[000576] 4-bromo-1,1-difluorobutilfosfonato de dietila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 1, mas usando 1,3-dibromopropano comercialmente disponível como o reagente. ETAPA 2: ÁCIDO 3-(5-AMINO-2-(4-(4-(DIETOXIFOSFORIL)-4,4- DIFLUOROBUTÓXI)-2-METILFENETIL)BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-8- IL)PROPANOICO
[000577] Ácido 3-(5-amino-2-(4-(4-(dietoxifosforil)-4,4-difluorobutóxi)- 2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 19 - Etapa 11, mas usando 4-bromo-1,1-difluorobutilfosfonato de dietila da etapa anterior 1 como o reagente. ETAPA 3: ÁCIDO 3-(5-AMINO-2-(4-(4,4-DIFLÚOR-4- FOSFONOBUTÓXI)-2-METILFENETIL)BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-8- IL)PROPANOICO (16)
[000578] Ácido 3-(5-amino-2-(4-(4,4-diflúor-4-fosfonobutóxi)-2- metilfenetil) benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico (16) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 19 - Etapa 12, mas usando ácido 3-(5-amino-2-(4-(4-(dietoxifosforil)-4,4-difluorobutóxi)-2- metilfenetil)benzo[f][1,7] naftiridin-8-il)propanoico da etapa 2 anterior. A 1H RMN (MeOD-d4) obtida para ácido 3-(5-amino-2-(4-(4,4-diflúor-4- fosfonobutóxi)-2-metilfenetil)benzo [f] [1,7]naftiridin-8-il)propanoico (16) foi: δ 8,69 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 8,22 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,53 (s, 1H), 7,45 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,89 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,69 (s, 1H), 6,60 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 3,95 (t, 2H, J = 6,4 Hz), 3,92-3,90 (m, 2H), 3,49-3,47 (m, 2H), 3,20-3,16 (m, 2H), 3,14-3,10 (m, 2H), 3,03-2,99 (m, 2H), 2,74- 2,70 (m, 2H), 2,22 (s, 3H). LRMS [M+H] = 574,2 EXEMPLO 17 (Tabela 1: Composto 17) SÍNTESE DE ÁCIDO 3-(5-AMINO-2-(4-(2-(2-(3,3-DIFLÚOR-3- FOSFONOPROPÓXI)ETÓXI)ETÓXI)-2- METILFENETIL)BENZO[F1[1,71NAFTIRIDIN-8-IL)PROPANOICO (17)
Figure img0035
ETAPA 1: 3-(5-AMINO-2-{2-[4-(2-{2-[3-(DIETOXIFOSFORIL)-3,3- DIFLUOROPROPÓXI]ETÓXI}ETÓXI)-2- METILFENIL1ETIL}BENZO[F11,7-NAFTIRIDIN-8-IL)PROPANOATO DE ETILA
[000579] 3-(5-amino-2-{2-[4-(2-{2-[3-(dietoxifosforil)-3,3- difluoropropóxi1etóxi}etóxi)-2-metilfenil1etil}benzo[f11,7-naftiridin-8- il)propanoato de etila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 19 - Etapa 11, mas usando 1,1-diflúor-3-(2-(2- iodoetóxi)etóxi) propilfosfonato de dietila (1-1) (descrito no Exemplo 1 - Etapa 1) como o reagente. ETAPA 2: ÁCIDO 3-(5-AMINO-2-(4-(2-(2-(3,3-DIFLÚOR-3- FOSFONOPROPÓXI)ETÓXI)ETÓXI)-2- METILFENETIL)BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-8-IL) PROPANOICO (17)
[000580] Ácido 3-(5-amino-2-(4-(2-(2-(3,3-diflúor-3- fosfonopropóxi)etóxi) etóxi)-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8- il)propanoico (17) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 19 - Etapa 12, mas usando 3-(5-amino-2-{2-[4-(2- {2-[3-(dietoxifosforil)-3,3-difluoropropóxi]etóxi} etóxi)-2- metilfenil]etil}benzo[f]1,7-naftiridin-8-il)propanoato de etila da etapa anterior. A 1H RMN (DMSO-d6) obtida para ácido 3-(5-amino-2-(4-(2- (2-(3,3-diflúor-3-fosfonopropóxi)etóxi)etóxi)-2- metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il) propanoico (17) foi: δ 9,02 (s, 1H), 8,82 (s, 1H), 8,55 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,58 (s, 1 H), 7,49 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,07(d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,75 (s, 1H), 6,68 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 4,03-4,00 (m, 2H), 3,72-3,70 (m, 2H), 3,66-3,62 (m, 2H), 3,58-3,56 (m, 2H), 3,53-3,52 (m, 2H), 3,16-3,12 (m, 2H), 3,03-2,96 (m, 4H), 2,68- 2,64 (m, 2H), 2,31-2,33 (m, 2H), 2,27 (s, 3H). LRMS [M+H] = 648,2 EXEMPLO 18 (Tabela 1: Composto 18) SÍNTESE DE ÁCIDO 3-(5-AMINO-2-(2-METIL-4-(2-(2-(2-(2- FOSFONO- ETÓXI)ETÓXI)ETÓXI)ETÓXI)FENETIL)BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-8- IL) PROPANOICO (18)
Figure img0036
ETAPA 1: 2-(2-(2-(2-IODOETÓXI)ETÓXI)ETÓXI)ETILFOSFONATO DE DIETILA
[000581] 2-(2-(2-(2-iodoetóxi)etóxi)etóxi)etilfosfonato de dietila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 22 - Etapa 1, mas usando 1-iodo-2-(2-(2-(2-iodoetóxi)etóxi)etóxi)etano comercialmente disponível como o reagente. ETAPA 2: 3-[5-AMINO-2-(2-{4-[2-(2-{2-[2-(DIETOXIFOSFORIL)ETÓXI] ETÓXI}ETÓXI)ETÓXI]-2-METILFENIL}ETIL)BENZO[F]1,7- NAFTIRIDIN-8-IL] PROPANOATO DE ETILA
[000582] 3-[5-amino-2-(2-{4-[2-(2-{2-[2- (dietoxifosforil)etóxi]etóxi}etóxi) etóxi]-2-metilfenil}etil)benzo[f]1,7- naftiridin-8-il]propanoato de etila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 19 - Etapa 11, mas usando 2-(2-(2- (2-iodoetóxi)etóxi)etóxi)etilfosfonato de dietila da etapa 1 anterior como o reagente. ETAPA 3: ÁCIDO 3-(5-AMINO-2-(2-METIL-4-(2-(2-(2-(2-FOSFONO- ETÓXI)ETÓXI)ETÓXI)ETÓXI)FENETIL)BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-8- IL) PROPANOICO (18)
[000583] Ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(2-(2-(2-(2- fosfonoetóxi)etóxi)etóxi) etóxi)fenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8- il)propanoico (18) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 19 - Etapa 12, mas usando 3-[5-amino-2-(2-{4-[2- (2-{2-[2-(dietoxifosforil)etóxi]etóxi}etóxi)etóxi]-2-metilfenil} etil)benzo[f]1,7-naftiridin-8-il]propanoato de etila da etapa 2 anterior. A 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6) obtida para ácido 3-(5-amino-2-(2-metil- 4-(2-(2-(2-(2-fosfonoetóxi)etóxi)etóxi)etóxi)fenetil)benzo[f][1,7]naftiridin- 8-il)propanoico (18) foi: δ 9,02 (s, 1H), 8,82 (s, 1H), 8,56 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,57 (s, 1 H), 7,49 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,07 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,76 (s, 1 H), 6,68(d, 1H, J = 8,4 Hz), 4,03-4,01 (m, 2H), 3,72-3,69 (m, 2H), 3,59-3,47 (m, 10H), 3,16-3,13 (m, 2H), 3,03-2,96 (m, 4H), 2,68- 2,64 (m, 2H), 1,87-1,82 (m, 2H), 2,27 (s, 3H). LRMS [M+H] = 642,3 EXEMPLO 19 (Tabela 1: Composto 19) SÍNTESE DE ÁCIDO 3-(5-AMINO-2-(4-(2-(3,3-DIFLÚOR-3- FOSFONOPROPÓXI)ETÓXI)-2- METILFENETIL)BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-8-IL)PROPANOICO (19)
Figure img0037
ETAPA 1: 3-(3-(TERC-BUTOXICARBONILAMINO)-4-CLOROFENIL) ACRILATO DE (E)-ETILA (6-3)
[000584] A uma solução de 5-bromo-2-clorofenilcarbamato de terc- butila (6-1) (1,0 equiv.) em acetonitrila (0,3 M) e EtOH (0,5 M) foi adicionado K2CO3 (2,0 equiv.). A reação foi desgasificada e fluxada com N2, depois adicionado 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)acrilato de (E)-etila (6-2) (1,2 equiv.) e Pd(PPh3)4 (0,1 equiv.). A reação foi fluxada novamente com N2 e agitada a 100°C durante a noite. Após esfriar para temperatura ambiente, hexano foi adicionado, e a mistura foi filtrada por meio de um bloco de sílica, eluindo com EA/Hex (1:1) até que o produto fosse completamente eluído. O filtrado foi concentrado e purificado em Combiflash, eluindo com 0-15% de EA em Hex 3-(3-(terc-butoxicarbonilamino)-4-clorofenil)acrilato de (E)-etila (6-3) como um sólido branco. ETAPA 2: 3-(3-(TERC-BUTOXICARBONILAMINO)-4-CLOROFENIL) PROPANOATO DE ETILA (6-4)
[000585] A uma solução de 3-(3-(terc-butoxicarbonilamino)-4- clorofenil) acrilato de (E)-etila (6-3) (1,0 equiv.) em acetato de etila/etanol (1:1, 0,3 M) foi adicionado o catalisador de Wilkinson (0,10 equiv.). Foi introduzido gás de hidrogênio por meio de um balão, e a reação foi agitada em temperatura ambiente por 24 horas. A mistura foi filtrada por meio de um bloco de celite, enquanto lavando com diclorometano. O filtrado foi concentrado a vácuo e purificado por Combiflash usando 0-10% de acetato de etila em hexano para dar 3- (3-(terc-butoxicarbonilamino)-4-clorofenil)propanoato de etila (6-4) como um sólido. ETAPA 3: 3-(3-( TERC -BUTOXICARBONILAMINO)-4-(4,4,5,5- TETRAMETIL-1,3,2-DIOXABOROLAN-2-IL)FENIL)PROPANOATO DE ETILA (6-5)
[000586] Uma solução de 3-(3-(terc-butoxicarbonilamino)-4- clorofenil) propanoato de etila (6-4) (1,0 equiv.), 4,4,4’,4’,5,5,5’,5’- octametil-2,2’-bi(1,3,2-dioxaborolano) (2,0 equiv.), tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0) (0,05 equiv.), 2-dicicloexilfosfino- 2’,4’,6’-triisopropilbifenila (0,20 equiv.), e acetato de potássio (2,0 equiv.) em 1,4-dioxano (0,2 M) foi desgasificada e agitada a 100°C durante a noite. Após esfriar para temperatura ambiente o conteúdo de reação foi concentrado a vácuo. O material bruto foi purificado por Combiflash usando 0-50% de acetato de etila em hexano para fornecer 3-(3-(terc-butoxicarbonilamino)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)fenil)propanoato de etila (6-5) como um óleo marrom. O produto foi armazenado a -20°C e usado dentro de um mês de síntese. ETAPA 4: 1-BROMO-4-(METOXIMETÓXI)-2-METILBENZENO (6-7)
[000587] A uma solução de 4-bromo-3-metilfenol (6-6) (1,0 equiv.) em DMF (0,5 M) a 0°C 60% p de NaH foram adicionados em partes (1,5 equiv.). A adição foi controlada de modo que a temperatura da reação interna nunca ficasse acima de 10°C. A reação foi agitada em temperatura ambiente durante 45 minutos, depois uma solução de cloro(metóxi)metano (1,2 equiv.) em DMF (3 M) foi adicionada a gotas por meio de funil adicional. A reação foi agitada em temperatura ambiente por 3,5 horas, e depois extinta vertendo em gelo. A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente por 1 hora. Éter foi adicionado, e as duas camadas foram separadas. A camada aquosa foi extraída (1x) com éter. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (2x), salmoura, secadas em MgSO4, e concentradas para dar 1-bromo-4-(metoximetóxi)-2-metilbenzeno (6-7) como um óleo incolor. O material bruto foi usado na próxima etapa sem purificação adicional. ETAPA 5:TRIETIL((4-(METOXIMETÓXI)-2- METILFENIL)ETINIL)SILANO
[000588] Uma solução de 1-bromo-4-(metoximetóxi)-2-metilbenzeno (1,0 equiv.), trietilamina (5,0 equiv.) em DMF (0,5 M) foi desgasificada e fluxada com nitrogênio. À reação foram adicionados TES-acetileno (1,05 equiv.), CuI (0,098 equiv.), e Pd(PPh3)2Cl2 (0,098 equiv.). A reação foi aquecida para 60°C e agitada durante a noite. Após esfriar para temperatura ambiente, foram adicionados água e éter. As camadas foram separadas, e a camada orgânica foi lavada com água (2x). A camada orgânica foi separada e passada em um bloco de sílica (acumulado com hexano). A sílica foi eluída com 10% de EA em Hex. As frações foram combinadas e concentradas para dar trietil((4- (metoximetóxi)-2-metilfenil)etinil)silano como um óleo preto. O material bruto foi usado na próxima etapa sem purificação adicional. ETAPA 6: 1-ETINIL-4-(METOXIMETÓXI)-2-METILBENZENO (6-8)
[000589] A uma solução de trietil((4-(metoximetóxi)-2-metilfenil)etinil) silano (1,0 equiv.) a 0°C foi lentamente adicionado fluoreto de tetrabutilamônio (1M solução em THF, 0,20 equiv.). Neste momento, o banho de gelo foi removido e a mistura de reação foi deixada agitar-se em temperatura ambiente durante 45 minutos. A mistura de reação foi depois passada em um bloco de sílica (acumulado com hexano) e eluída com 20% de EtOAc em Hexanos para remover os sais insolúveis. O produto bruto foi depois purificado por Combiflash usando 0-10% de EtOAc em Hexanos para dar 1-etinil-4- (metoximetóxi)-2-metilbenzeno (6-8) como um líquido ligeiramente marrom. ETAPA 7: 3-CLORO-5-((4-(METOXIMETÓXI)-2-METILFENIL)ETINIL) PICOLINONITRILA (6-10)
[000590] Uma solução de 1-etinil4-(metoximetóxi)-2-metilbenzeno (6- 8) (1,0 equiv.), 3,5-dicloropicolinonitrila (6-9) (0,90 equiv.), CuI (0,10 equiv.), e Pd(PPh3)2Cl2 (0,10 equiv.), e trietilamina (5,0 equiv.) em DMF (0,25 M) foi desgasificada e fluxada com nitrogênio. A mistura de reação foi depois aquecida para 60°C e agitada durante a noite. Após esfriar para temperatura ambiente, água foi adicionada. A mistura foi extraída com EA (2x). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com 10% de NH4OH aq (2x), salmoura, e concentradas. O material bruto foi filtrado por meio de um bloco de sílica (intumescido com hexano). A sílica foi eluída com 10% de EA em Hex. As frações foram combinadas e concentradas. Os sólidos resultantes foram lavados em éter quente e filtrados para dar um sólido amarelo que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional. O filtrado foi concentrado e purificado por Combiflash usando 0-10% de EtOAc em Hexanos para dar 3-cloro-5-((4-(metoximetóxi)-2- metilfenil)etinil)picolinonitrila (6-10) como um sólido amarelo. ETAPA 8 3-(5-AMINO-2-((4-(METOXIMETÓXI)-2- METILFENIL)ETINIL)-BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-8-IL)PROPANOATO DE ETILA (6-11)
[000591] Uma solução de 3-cloro-5-((4-(metoximetóxi)-2- metilfenil)etinil) picolinonitrila (6-10) (1,0 equiv.), 3-(3-(terc- butoxicarbonilamino)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)fenil)propanoato de etila (6-5) (1,25 equiv.), tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0) (0,10 equiv.), dicicloexil(2’,6’- dimetoxibifenil2-il)fosfina (0,20 equiv.), e bicarbonato de sódio (3,0 equiv.) em n-butanol / H2O (5:1, 0,2 M) foi desgasificada e agitada a 100°C durante a noite. Após esfriar para temperatura ambiente, o conteúdo de reação foi diluído com acetato de etila e água. As duas fases foram separadas, e a camada aquosa foi extraída duas vezes com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas em MgSO4 anidro, e concentradas a vácuo. O material bruto foi purificado por meio de cromatografia instantânea em um sistema de COMBIFLASH® (ISCO) usando primeiro 0-40% de acetato de etila em DCM para remover a impureza, depois 0-4% de MeOH em DCM para dar 3-(5-amino-2-((4- (metoximetóxi)-2-metilfenil)etinil)-benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoato de etila (6-11). Purificação adicional foi realizada precipitando e lavando em éter quente. ETAPA 9:3-(5-AMINO-2-(4-(METOXIMETÓXI)-2- METILFENETIL)BENZO[F] [1,7]NAFTIRIDIN-8-IL)PROPANOATO DE ETILA (6-12)
[000592] Uma solução de 3-(5-amino-2-((4-(metoximetóxi)-2- metilfenil) etinil)-benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoato de etila (6-11) (1,0 equiv.) em EtOH/THF (3:1, 0,16 M) foi fluxada com nitrogênio. Depois, 10% p de Pd/C (0,20 equiv. em peso) foram adicionados. A reação foi fluxada com hidrogênio (2x) e agitada sob um balão de hidrogênio. Após 24 horas, a reação foi filtrada por meio de um bloco de celite, lavando com 5% de MeOH em DCM. O filtrado foi verificado para a presença de material de partida usando LCMS. A reação de hidrogenação foi repetida até que nenhum mais do material de partida de intermediário alquina ou de alqueno fosse detectado. O produto bruto foi purificado por Combiflash usando 0-4% de MeOH em DCM para dar 3-(5-amino-2-(4-(metoximetóxi)-2- metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoato de etila (6-12) como um sólido branco. ETAPA 10: 3-(5-AMINO-2-(4-HIDRÓXI-2-METILFENETIL)BENZO[F] [1,7] NAFTIRIDIN-8-IL)PROPANOATO DE ETILA (6-13)
[000593] 3-(5-amino-2-(4-(metoximetóxi)-2-metilfenetil)benzo[f][1,7] naftiridin-8-il)propanoato de etila (6-12) (1,0 equiv.) foi dissolvido em EtOH (0,2 M), depois adicionada uma solução de 4M HCl em dioxano (0,2 M). O produto precipitou-se como um sal amarelo. Após agitar por 3 horas, a reação foi vertida em uma solução de agitação de éter. A mistura foi agitada durante 10 minutos, depois filtrada e lavada com éter. 3-(5-amino-2-(4-hidróxi-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8- il)propanoato de etila (6-13) foi obtido como um sólido amarelo que foi secado em vácuo durante a noite (sal de bis-HCl). Alternativamente, o produto bruto foi purificado por Combiflash usando 0-5% MeOH em DCM para dar a base livre. ETAPA 11: 3-(5-AMINO-2-(4-(2-(3-(DIETOXIFOSFORIL)-3,3- DIFLUOROPROPÓXI)ETÓXI)-2- METILFENETIL)BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-8-IL)PROPANOATO DE ETILA (6-15)
[000594] A uma solução de 3-(5-amino-2-(4-hidróxi-2- metilfenetil)benzo[f] [1,7]naftiridin-8-il)propanoato de etila (6-13) (1,0 equiv.) dissolvido em DMF (0,14 M) foi adicionada uma solução de 3- (2-bromoetóxi)-1,1-difluoropropilfosfonato de dietila (6-14: descrito no Exemplo 7 - Etapa 1) (1,3 equiv.) em DMF (0,7 M) e carbonato de césio (4 equiv.). A reação foi agitada a 60°C. Após 1,5 hora (ou até que a reação estivesse completada por LCMS), DCM (2 volumes de equivalente) foi acrescentado à reação. Os sólidos (inorgânicos) foram filtrados, e o filtrado foi concentrado. O produto bruto foi purificado por Combiflash usando 0-5% de MeOH em DCM para dar 3-(5-amino-2-(4- (2-(3-(dietoxifosforil)-3,3-difluoropropóxi)etóxi)-2- metilfenetil)benzo[f][1,7] naftiridin-8-il)propanoato de etila (6-15) como um óleo que sob repouso se tornou um sólido branco. ETAPA 12: ÁCIDO 3-(5-AMINO-2-(4-(2-(3,3-DIFLÚOR-3- FOSFONOPROPÓXI)ETÓXI)-2- METILFENETIL)BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-8-IL)PROPANOICO (19)
[000595] A uma solução de 3-(5-amino-2-(4-(2-(3-(dietoxifosforil)-3,3- difluoropropóxi)etóxi)-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoato de etila (6-15) (1,0 equiv.) em DCM (0,16 M) a 0°C foi adicionado lentamente TMSBr (10 equiv.). A reação foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. TMSBr adicional (5,0 equiv.) foi adicionado a 0°C, e a reação foi agitada novamente em temperatura ambiente durante a noite. O solvente foi removido por evaporação e os sólidos laranjas brutos secados brevemente em hi-vac. Os sólidos foram suspensos em EtOH (0,5 M) e adicionados 2,5 N de NaOH (10,0 equiv.). A reação foi agitada a 80°C por 3 horas. Após esfriar para temperatura ambiente, a mistura foi ajustada para pH 9 a 10 e diretamente purificada em RP-HPLC usando uma coluna de C18, eluindo com 10-40% 95:5 (MeCN/5 mM de NH4OAc) em gradiente de 10 mM de NH4OAc (pH 9). As frações contendo o produto foram combinadas e concentradas a vácuo. O gel branco resultante foi dissolvido refluxando 1:1 EtOH/água (0,04 M) com a adição de algumas gotas de hidróxido de amônio. Enquanto quente, a mistura foi lentamente vertida em uma solução quente de agitação de acetona (0,009 M) pré-aquecida para 50°C. A suspensão de acetona foi lentamente esfriada para temperatura ambiente durante 15 minutos com agitação continuada, e depois repousada em um banho de gelo durante 10 minutos. Os sólidos foram filtrados e lavados sucessivamente com acetona (2x) e éter (2x). Os sólidos foram secados em hi-vac durante a noite para dar o ácido 3-(5-amino-2-(4-(2- (3,3-diflúor-3-fosfonopropóxi)etóxi)-2-metilfenetil)benzo[f] [1,7] naftiridin-8-il)propanoico (19) como um sólido. 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6): δ 9,02 (s, 1H), 8,82 (s, 1H), 8,55 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,58 (s, 1H), 7,48 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,07 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,75 (s, 1 H), 6,68 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 4,03-4,00 (m, 2H), 3,72-3,68 (m, 4H), 3,16-3,12 (m, 2H), 3,03-2,96 (m, 4H), 2,67-2,64 (m, 2H), 2,33-2,32 (m, 2H), 2,26 (s, 3H). LRMS [M+H] = 604,2 EXEMPLO 20 (Tabela 1: Composto 20) SÍNTESE DE ÁCIDO 3-(5-AMINO-2-(2-METIL-4-(2-(2-(2- FOSFONOETÓXI) ETÓXI)ETÓXI)FENETIL)BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-8- IL)PROPANOICO (20)
Figure img0038
ETAPA 1: 2-(2-(2-IODOETÓXI)ETÓXI)ETILFOSFONATO DE DIETILA
[000596] Um tubo de micro-onda foi carregado com uma barra de agitação, 1,2-bis(2-iodoetóxi)etano comercialmente disponível (1,0 equiv.) e trietilfosfito (1,0 equiv.). O tubo de micro-onda foi tampado e depois irradiado para 160°C durante 40 minutos com agitação. A mistura de reação foi esfriada para temperatura ambiente e purificada por Combiflash usando 0-75% de EtOAc em hexanos, ou alternativamente por RP-HPLC (0,035% de TFA em ACN:0,05 % de TFA em H2O, coluna de C18) para dar 2-(2-(2-iodoetóxi) etóxi)etilfosfonato de dietila como óleo amarelo pálido. ETAPA 2: 3-(5-AMINO-2-{2-[4-(2-{2-[2-(DIETOXIFOSFORIL)ETÓXI] ETÓXI} ETÓXI)-2-METILFENIL]ETIL}BENZO[F]1,7-NAFTIRIDIN-8- IL)PROPANOATO DE ETILA
[000597] 3-(5-amino-2-{2-[4-(2-{2-[2-(dietoxifosforil)etóxi]etóxi}etóxi)- 2-metilfenil]etil}benzo[f]1,7-naftiridin-8-il)propanoato de etila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 19 - Etapa 11, mas usando 2-(2-(2-iodoetóxi)etóxi)etilfosfonato de dietila da etapa 1 anterior como o reagente. ETAPA 3: ÁCIDO 3-(5-AMINO-2-(2-METIL-4-(2-(2-(2- FOSFONOETÓXI)ETÓXI) ETÓXI)FENETIL)BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-8-IL)PROPANOICO (20)
[000598] Ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(2-(2-(2- fosfonoetóxi)etóxi)etóxi) fenetil) benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico (20) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 19 - Etapa 12, mas usando 3-(5-amino-2-{2-[4-(2-{2-[2- (dietoxifosforil)etóxi]etóxi}etóxi)-2-metilfenil]etil}benzo [f] 1,7-naftiridin- 8-il)propanoato de etila da etapa 2 anterior. A 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6) obtida para o ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(2-(2- (2-fosfonoetóxi)etóxi)etóxi)fenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico (20) foi: δ 9,02 (s, 1H), 8,82 (s, 1H), 8,55 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 7,58 (s, 1 H), 7,49 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,06 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 6,76 (s, 1 H), 6,68 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 4,03-4,00 (m, 2H), 3,71-3,69 (m, 2H), 3,60-3,54 (m, 4H), 3,51-3,49 (m, 2H), 3,16-3,12 (m, 2H), 3,03-2,96 (m, 4H), 2,67-2,66 (m, 2H), 2,33-2,32 (m, 2H), 2,26 (s, 3H). LRMS [M+H] = 598,2 EXEMPLO 21 (Tabela 1: Composto 21) SÍNTESE DE ÁCIDO 3-(5-AMINO-2-(2-METIL-4-(2-(2- FOSFONOETÓXI) ETÓXI)FENETIL)BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-8- IL)PROPANOICO (21)
Figure img0039
ETAPA 1: 2-(2-BROMOETÓXI)ETILFOSFONATO DE DIETILA
[000599] 2-(2-bromoetóxi)etilfosfonato de dietila foi preparado de acordo como o ETAPA 2: ÁCIDO 3-(5-AMINO-2-(4-(2-(2-(DIETOXIFOSFORIL)ETÓXI) ETÓXI)-2-METILFENETIL)BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-8- IL)PROPANOICO
[000600] Ácido 3-(5-amino-2-(4-(2-(2-(dietoxifosforil)etóxi)etóxi)-2- metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 19 - Etapa 11, mas usando 2-(2-bromoetóxi)etilfosfonato de dietila da etapa 1 anterior como o reagente. ETAPA 3: ÁCIDO 3-(5-AMINO-2-(2-METIL-4-(2-(2- FOSFONOETÓXI)ETÓXI) FENETIL)BENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-8- IL)PROPANOICO (21)
[000601] Ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(2-(2- fosfonoetóxi)etóxi)fenetil) benzo [f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico (21) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 19 - Etapa 12, mas usando ácido 3-(5-amino-2-(4-(2-(2- (dietoxifosforil)etóxi)etóxi)-2-metilfenetil)benzo[f][1,7] naftiridin-8- il)propanoico da etapa 2 anterior. A 1H RMN (MeOD-d4) obtida para o ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(2-(2-fosfonoetóxi)etóxi)fenetil)benzo [f][1,7] naftiridin-8-il)propanoico (21) foi: δ 8,59 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 8,18 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,52 (s, 1 H), 7,31 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 6,93 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,72 (s, 1 H), 6,65 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 4,06-4,03 (m, 2H), 3,84-3,76 (m, 4H), 3,15-3,07(m, 4H), 3,01-2,97 (m, 2H), 2,68-2,64 (m, 2H), 2,22 (s, 3H), 2,03-1,99 (m, 2H). LRMS [M+H] = 554,2 EXEMPLO 22 2-(4-(2-(5-AMINQ-8- METILBENZQ[F1[1,71NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3- METILFENÓXI)ETILFOSFÔNICO (22)
Figure img0040
ETAPA 1: 2-BROMOETILFOSFONATO DE DIETILA
[000602] 1,2-dibromoetano comercialmente disponível (1,0 equiv.) e fosfito de trietila (1,0 equiv.) foram aquecidos com irradiação de micro- onda a 160°C durante 20 minutos. O resíduo resultante foi purificado por meio de cromatografia líquida de alto desempenho de fase reversa (HPLC) (0,035% de TFA em ACN: 0,05% de TFA em H2O, coluna de C18) para dar 2-bromoetilfosfonato de dietila como um líquido incolor. ETAPA 2: 2-(4-(2-(5-AMINO-8-METILBENZO[F][1,71NAFTIRIDIN-2- IL)ETIL)-3-METILFENÓXI)ETILFOSFONATO DE DIETILA
[000603] 2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[fl[1,7lnaftiridin-2-il)etil)-3- metilfenóxi) etilfosfonato de dietila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 2, mas usando 2- bromoetilfosfonato de dietila da etapa 1 anterior como o reagente. ETAPA 3 ÁCIDO 2-(4-(2-(5-AMINO-8- METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3- METILFENÓXI)ETILFOSFÔNICO (22)
[000604] Ácido 2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)- 3-metilfenóxi)etilfosfônico (22) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 3, mas usando 2-(4-(2-(5- amino-8-metilbenzo[ f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenóxi)etilfosfonato de dietila da etapa 2 anterior. TFA foi acrescentado à amostra de 1H RMN para solubilizar o composto para análise. A 1H RMN (sulfóxido de dimetila) obtida para o ácido 2-(4-(2-(5-amino-8- metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenóxi)etilfosfônico (22) foi: δ 8,83 (s, 1H), 8,71 (s, 1H), 8,35 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,35 (s, 1H), 7,15 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 7,08 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,06-7,03 (br, 2H) 6,71 (s, 1H), 6,64 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 4,09-3,99 (m, 2H), 3,07 (t, 2H, J = 6,9), 2,93 (t, 2H, J = 6,7), 2,44 (s, 3 H), 2,26 (s, 3H), 1,72-1,62 (m, 2H). LRMS [M+H] = 452,2 EXEMPLO 23 (Tabela 1: Composto 23) SÍNTESE DE ÁCIDO 6-(4-(2-(5-AMINO-8- METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3- METILFENÓXI)HEXILFOSFÔNICO (23)
Figure img0041
ETAPA 1: 6-BROMOEXILFOSFONATO DE DIETILA
[000605] 6-bromoexilfosfonato de dietila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 22 - Etapa 1, mas usando 1,6- dibromoexano comercialmente disponível como o reagente. ETAPA 2: 6-(4-(2-(5-AMINO-8-METILBENZO[F][1,7] NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3-METILFENÓXI)HEXILFOSFONATO DE DIETILA
[000606] 6-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3- metilfenóxi) exilfosfonato de dietila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 2, mas usando 6- bromoexilfosfonato de dietila da etapa 1 anterior como o reagente. ETAPA3 ÁCIDO 6-(4-(2-(5-AMINO-8- METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3- METILFENÓXI)HEXILFOSFÔNICO (23)
[000607] Ácido 6-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)- 3-metilfenóxi)exilfosfônico (23) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 3, mas usando 6-(4-(2-(5- amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenóxi)exilfosfonato de dietila. TFA foi acrescentado à amostra de 1H RMN para solubilizar o composto para análise. A 1H RMN (dimetil sulfóxido-d6) obtida para ácido 6-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3- metilfenóxi)exilfosfônico (23) foi: δ 8,95 (s, 1H), 8,81 (s, 1H), 8,50 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,52 (s, 1H), 7,40 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,01 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,71 (s, 1H), 6,64 (d, 1H, J = 10,9 Hz), 3,87 (t, 2H, J = 6,34 Hz), 3,13 (t, 2H, J = 7,1 Hz), 2,96 (t, 2H, J = 7,0 Hz), 2,69-2,66 (m, 1H), 2,35-2,32 (m, 1H), 2,25 (s, 2H), 1,72-1,62 (m, 2H), 1,62-1,51 (m, 2H), 1,51-1,40 (m, 2H). LRMS [M+H] = 508,2 EXEMPLO 24 (Tabela 1: Composto 24) SÍNTESE DE ÁCIDO 6-(4-(2-(5-AMINO-8- METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3-METILFENÓXI)-1,1- DIFLUOROEXILFOSFÔNICO (24)
Figure img0042
ETAPA 1: 6-BROMO-1.1-DIFLUOROEXILFOSFONATO DE DIETILA
[000608] 6-bromo-1,1-difluoroexilfosfonato de dietila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 1. mas usando 1.5-dibromopentano comercialmente disponível como o reagente. ETAPA 2: 6-(4-(2-(5-AMINO-8-METILBENZO[F][1,71NAFTIRIDIN-2- IL)ETIL)-3-METILFENÓXI)-1.1-DIFLUOROEXILFOSFONATO DE DIETILA
[000609] 6-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1.7]naftiridin-2-il)etil)-3- metilfenóxi)-1.1-difluoroexilfosfonato de dietila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 2. mas usando 6- bromo-1.1-difluoroexilfosfonato de dietila da etapa 1 anterior como o reagente. ETAPA 3:ÁCIDO 6-(4-(2-(5-AMINO-8- METILBENZO[F1[1.71NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3-METILFENÓXI)-1.1- DIFLUOROEXILFOSFÔNICO (24)
[000610] Ácido 6-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1.7]naftiridin-2-il)etil)- 3-metilfenóxi)-1.1-difluoroexilfosfônico (24) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 3. mas usando 6- (4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f1[1.71naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenóxi)-1.1- difluoroexilfosfonato de dietila da etapa 2 anterior. TFA foi acrescentado à amostra de 1H RMN para solubilizar o composto para análise. A 1H RMN (MeOD-d4) obtida para ácido 6-(4-(2-(5-amino-8- metilbenzo[f1[1.71naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenóxi)-1.1- difluoroexilfosfônico (24) foi: δ 8,73 (s, 1H), 8,60 (s, 1H), 8,31 (d, 1H, J = 8.4 Hz). 7.48 (s. 1H). 7.43 (d. 1H. J = 8.3 Hz). 6.91 (d. 1H. J = 8.4 Hz). 6.70 (s. 1H). 6.61 (d. 1H. J = 11.0 Hz). 3.90 (t. 2H. J = 6.3 Hz). 3.20 (t. 2H. J = 7.3 Hz). 3.03 (t. 2H. J = 7.5 Hz). 2.54 (s. 2H). 2.22 (s. 3H). 1.79-1.71 (m. 2H). 1.69-1.59 (m. 2H). 1.57-1.47 (m. 2H). LRMS [M+H1 = 544.2 EXEMPLO 25 (Tabela 1: Composto 25) SÍNTESE DE ÁCIDO 4-((4-(2-(5-AMINO-8-METILBENZO[F][1,7] NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3-METILFENÓXI)METIL)BENZILFOSFÔNICO (25)
Figure img0043
ETAPA 1: 4-(BROMOMETIL)BENZILFOSFONATO DE DIETILA
[000611] 4-(bromometil)benzilfosfonato de dietila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 22 - Etapa 1, mas usando 1,4-bis(bromometil)benzeno comercialmente disponível como o reagente. ETAPA 2: 4-((4-(2-(5-AMINO-8-METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2-IL) ETIL)-3-METILFENÓXI)METIL)BENZILFOSFONATO DE DIETILA
[000612] 4-((4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3- metilfenóxi)metil)benzilfosfonato de dietila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 2, mas usando 4- (bromometil) benzilfosfonato de dietila da etapa 1 anterior como o reagente. ETAPA 3:ÁCIDO 4-((4-(2-(5-AMINO-8- METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3- METILFENÓXI)METIL)BENZILFOSFÔNICO (25)
[000613] Ácido 4-((4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2- il)etil)-3-metilfenóxi)metil)benzilfosfônico (25) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 3, mas usando 4- ((4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3- metilfenóxi)metil)benzilfosfonato de dietila da etapa 2 anterior. A 1H RMN (MeOD-d4) obtida para ácido 4-((4-(2-(5-amino-8- metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenóxi)metil)benzilfosfônico (25) foi: δ 8,72 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 8,30 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,48 (s, 1H), 7,42 (d, 1H, J = 9,5 Hz), 7,36-7,30 (m, 4H), 6,93 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,78 (s, 1H), 6,67 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 4,98 (s, 2H), 3,96 (s, 2H), 3,20 (t, 2H, J = 7,2 Hz), 3,04 (t, 2H, J = 7,2 Hz), 2,54 (s, 3H), 2,23 (s, 3H). LRMS [M+H] = 528,2 EXEMPLO 26 (Tabela 1: Composto 26) SÍNTESE DE ÁCIDO 2-(2-(2-(4-(2-(5-AMINO-8-METILBENZO[F][1,7] NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3- METILFENÓXI)ETÓXI)ETÓXI)ETILFOSFÔNICO (26)
Figure img0044
ETAPA 1: 2-(2-(2-IODOETÓXI)ETÓXI)ETILFOSFONATO DE DIETILA
[000614] 2-(2-(2-iodoetóxi)etóxi)etilfosfonato de dietila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 20 - Etapa 1. ETAPA 2: 2-(2-(2-(4-(2-(5-AMINO-8-METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN- 2-IL) ETIL)-3-METILFENÓXI)ETÓXI)ETÓXI)ETILFOSFONATO DE DIETILA
[000615] 2-(2-(2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)- 3-metilfenóxi)etóxi)etóxi)etilfosfonato de dietila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 2, mas usando 2- (2-(2-iodoetóxi)etóxi)etilfosfonato de dietila da etapa 1 anterior como o reagente. ETAPA 3: ÁCIDO 2-(2-(2-(4-(2-(5-AMINO-8-METILBENZO[F][1,7] NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3- METILFENÓXI)ETÓXI)ETÓXI)ETILFOSFÔNICO (26)
[000616] Ácido 2-(2-(2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2- il) etil)-3-metilfenóxi)etóxi)etóxi)etilfosfônico (26) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 3, mas usando 2-(2-(2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3- metilfenóxi)etóxi)etóxi) etilfosfonato de dietila da etapa 2 anterior. A 1H RMN (MeOD-d4) obtida para ácido 2-(2-(2-(4-(2-(5-amino-8- metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenóxi) etóxi) etóxi)etilfosfônico (26) foi: δ 8,73 (s, 1H), 8,66 (s, 1H), 8,38 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,52 (s, 1H), 7,47 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,36 (s, 1H), 6,93 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,75 (s, 2H), 6,64 (d, 1H, J = 10,8 Hz), 4,09-4,06 (m, 2H), 3,80-3,76 (m, 2H), 3,69-3,64 (m, 2H), 3,64-3,59 (m, 2H), 3,53-3,49 (m, 2H), 3,25 (t, 2H, J = 7,0 Hz), 3,09 (t, 2H, J = 7,5 Hz), 2,58 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,13-2,01 (m, 2H). LRMS [M+H] = 540,2 EXEMPLO 27 (Tabela 1: Composto 27) SÍNTESE DE ÁCIDO 5-(4-(2-(5-AMINO-8- METILBENZQ[Fl[1,71NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3- METILFENÓXI)PENTILFOSFÔNICO (27)
Figure img0045
sETAPA 1: 5-BROMOPENTILFOSFONATO DE DIETILA
[000617] 5-bromopentilfosfonato de dietila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 22 - Etapa 1, mas usando 1,5-dibromopentano comercialmente disponível como o reagente. ETAPA 2: 5-(4-(2-(5-AMINO-8-METILBENZO[F][1,71NAFTIRIDIN-2- IL)ETIL)-3-METILFENÓXI)PENTILFOSFONATO DE DIETILA
[000618l 5-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[fl[1,7lnaftiridin-2-il)etil)-3- metilfenóxi)pentilfosfonato de dietila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 2, mas usando 5- bromopentilfosfonato de dietila da etapa 1 anterior como o reagente. ETAPA 3:ÁCIDO 5-(4-(2-(5-AMINO-8- METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3- METILFENÓXI)PENTILFOSFÔNICO (27)
[000619] Ácido 5-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)- 3-metilfenóxi)pentilfosfônico (27) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 3, mas usando 5-(4-(2-(5- amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3- metilfenóxi)pentilfosfonato de dietila da etapa 2 anterior. A 1H RMN (dimetil sulfóxido-d6) obtida para ácido 5-(4-(2-(5-amino-8- metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenóxi)pentilfosfônico (27) foi: δ 8,99 (s, 1H), 8,83 (s, 1H), 8,53 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,51 (s, 1H), 7,39 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,06 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,71 (s, 1H), 6,65 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 3,87 (t, 2H, J = 6,3 Hz), 3,12 (t, 2H, J = 7,0 Hz), 2,96 (t, 2H, J = 7,0 Hz), 2,5 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 1,73-1,64 (m, 2H), 1,64-1,58 (m, 2H), 1,58-1,51(m, 2H), 1,51-1,41(m, 2H). LRMS [M+H] = 494,2 EXEMPLO 28 (Tabela 1: Composto 28) SÍNTESE DE ÁCIDO 4-(4-(2-(5-AMINO-8- METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3- METILFENÓXI)BUTILFOSFÔNICO (28)
Figure img0046
ETAPA 1: 4-BROMOBUTILFOSFONATO DE DIETILA
[000620] 4-bromobutilfosfonato de dietila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 22 - Etapa 1, mas usando 1,4-dibromobutano comercialmente disponível como o reagente. ETAPA 2: 4-(4-(2-(5-AMINO-8-METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2- IL)ETIL)-3-METILFENÓXI)BUTILFOSFONATO DE DIETILA
[000621] 4-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3- metilfenóxi)butilfosfonato de dietila foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 2, mas usando 4- bromobutilfosfonato de dietila da etapa 1 anterior como o reagente. ETAPA 3 ÁCIDO 4-(4-(2-(5-AMINO-8- METILBENZO[F][1,7]NAFTIRIDIN-2-IL)ETIL)-3- METILFENÓXI)BUTILFOSFÔNICO (28)
[000622] Ácido 4-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)- 3-metilfenóxi)butilfosfônico (28) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 - Etapa 3, mas usando 4-(4-(2-(5- amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenóxi)butilfosfonato de dietila da etapa 2 anterior. A 1H RMN (dimetil sulfóxido-d6) obtida para ácido 4-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3- metilfenóxi)butilfosfônico (28) foi: δ 8,93 (s, 1H), 8,79 (s, 1H), 8,48 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,51 (s, 1H), 7,37 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,04 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,71 (s, 1H), 6,63 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 3,89 (t, 2H, J = 6,09 Hz), 3,12 (t, 2H, J = 6,8 Hz), 2,96 (t, 2H, J = 6,9 Hz), 2,47 (s, 3H), 2,34-2,31 (m, 2H), 2,24 (s, 3H), 1,80-1,67(m, 4H), 1,67-1,61(m, 2H). LRMS [M+H] = 480,2
[000623] Os compostos da Fórmula (I), preparados de acordo com os procedimentos descritos acima, são expostos na Tabela 1 junto com os dados de [M+H] e os dados de EC50 (nM) de TLR7 Humano. TABELA 1
Figure img0047
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Figure img0049
Figure img0050
Figure img0051
ENSAIOS
[000624] Os compostos da Fórmula (I) fornecidos aqui foram ensaiados para medir sua capacidade para modular Receptor Toll- símile 7.
ENSAIO DE CÉLULA MONONUCLEAR DE SANGUE PERIFÉRICO HUMANO
[000625] A bioatividade dos compostos da Fórmula (I) fornecidos aqui foi testada no ensaio de sangue periférico humano (PBMC humano) usando um painel de doadores humanos normais independentes de acordo com as diretrizes aprovadas pelo comitê de revisão institucional. PBMC humano foi isolado de sangue recentemente periférico usando um gradiente de densidade de Ficoll (GE HealthyCare 17-1440-03). 30-35 mL de sangue de humano periférico foram colocados em camadas sobre 15 mL de Ficoll em tubos cônicos de 50 ml, seguido por meio de centrifugação a 1800 rpm (Eppendorf Centrifuge 5810R com tampas de risco biológico nos depósitos do tubo) em temperatura ambiente durante 30 minutos sem aceleração e nenhum freio. As camadas leucoplaquetárias foram depois colhidas e transferidas para novos tubos cônicos de 50 ml e lavados duas vezes em meios completos consistindo em RPMI 1640 (11875085 de Invitrogen Corporation, Carlsbad, Califórnia) suplementado com 10% de soro bovino fetal inativado por calor (Gibco 10099-141), 1% Pen-Strep (Gibco #15140-122), 1 mM de aminoácidos não essenciais (Gibco #11140-050), 1 mM de piruvato de sódio (Gibco #11360-070), 2 mM de L-glutamina (Gibco #25030-081) e 1 mM de HEPES (Gibco #15630-080). Células viáveis foram depois contadas usando tingimento de tripano azul, banhadas em placas de fundo chato de 96 poços (Becton Dickinson #353070) em 2x105 células por poço em 200 μl de volume total de meios completos. Compostos foram depois adicionados em um formato de dose-resposta de 10 pontos iniciando a 100 μM, diluição de 3 vezes. Os poços de controle negativos receberam concentração igual de DMSO. Os sobrenadantes de cultura foram colhidos após 18-24 horas de incubação a 37°C, 5% de CO2, armazenados a -20°C até outro uso.
[000626] Níveis de IL-6 nos sobrenadantes de cultura foram medidos usando um kit de Luminex (Biorad). Análise dos dados é executada usando software Prisma de GraphPad (San Diego, CA). As curvas de dose-resposta são geradas para cada composto e os valores de EC50 foram determinados como a concentração que dá 50% do sinal máximo.
ENSAIO DE GENE REPÓRTER
[000627] Células renais embrionárias humanas 293 (HEK 293) foram estavelmente transfeccionadas com TLR7 humano e um vetor repórter de luciferase dirigida por NF-kb (pNifti-Luciferase). Como um ensaio de controle, Hek293 normais transfeccionadas com pNifti-Luc foram usadas. As células foram cultivadas em DMEM suplementado com 2 mM de L-glutamina, 10% de FBS inativado de coração, 1% de penicilina e estreptomicina, 2 μg/ml de puromicina (InvivoGen #ant-pr- 5) e 5 μg/ml de blasticidina (Invitrogen #46-1120). Tampão e substrato de ensaio de Bright-Glo™ Luciferase foram fornecidos por Promega #E263B e #E264B (substrato e tampão de ensaio, respectivamente). Placas de fundo claro de 384 poços foram fornecidas por Greiner bio- one (#789163-G) e eram placas com códigos de barra.
[000628] As células foram banhadas a 25.000 células/poço em placas de 384 poços em um volume final de 50 μl de meios. As células foram deixadas aderir às placas após a cultura noturna (18 horas) a 37°C e 5% de CO2. Os compostos de controle experimentais e positivos serialmente diluídos foram depois dispensados em cada poço e incubados por 7 horas a 37°C e 5% de CO2. As células estimuladas sozinho com DMSO também servem como controles negativos. Após a incubação, 30 μl do tampão de ensaio de pré-mistura e tampão de substrato foram adicionados a cada poço de acordo com as instruções do fabricante. O sinal de luminescência foi lido em uma máquina de CLIPR com um tempo de integração de 20 segundos por placa.
[000629] As curvas de dose-resposta são geradas para cada composto e os valores de EC50 foram determinados como a concentração que dá 50% do sinal máximo.
CERTOS RESULTADOS DO ENSAIO
[000630] Vários compostos da Fórmula (I) em forma livre ou em forma de sal farmaceuticamente aceitável, apresentam propriedades farmacológicas, por exemplo, como indicado pelos testes in vitro descritos neste pedido de patente. O valor de EC50 naqueles experimentos são dados como aquela concentração do composto de teste em questão que provoca uma resposta a meio caminho entre a linha base e as respostas máximas. Em certos exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de EC50 na faixa de 1 nM a 100 μM. Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de EC50 na faixa de 1 nM a 50 μM. Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de EC50 na faixa de 1 nM a 25 μM. Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de EC50 na faixa de 1 nM a 20 μM. Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de EC50 na faixa de 1 nM a 15 μM. Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de EC50 na faixa de 1 nM a 10 μM. Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de EC50 na faixa de 1 nM a 5 μM. Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de EC50 na faixa de 1 nM a 2 μM. Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de EC50 na faixa de 1 nM a 1 μM. Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de EC50 na faixa de 1 nM a 500 nM. Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de EC50 na faixa de 1 nM a 250 nM. Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de EC50 na faixa de 1 nM a 100 nM. Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de EC50 na faixa de 1 nM a 50 nM. Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de EC50 na faixa de 1 nM a 25 nM. Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de EC50 na faixa de 1 nM a 10 nM. Tais valores de EC50 são obtidos com relação à atividade do resiquimod ajustada em 100%.
[000631] Por via de exemplo apenas, o EC50 para estimulação de TLR-7 por certos compostos da Fórmula (I) é listado na Tabela 1.
FORMULAÇÃO COM ADJUVANTES CONTENDO ALUMÍNIO
[000632] A ligação dos compostos da Fórmula (I) fornecidos aqui aos adjuvantes contendo alumínio em pH 9 e pH 6,5 foi avaliado usando HPLC para monitorar a presença do composto da Fórmula (I) no sobrenadante.
AVALIAÇÃO DA LIGAÇÃO EM pH 9
[000633] Composto 1 (0,5 mg/ml) foi dissolvido em 10 mM de NaOH e acrescentado ao adjuvante de hidróxido de alumínio (2 mg/ml) resultando em uma formulação de 100 μg/dose. O sobrenadante foi avaliado com HPLC usando um gradiente balístico (de 10% de CH3CN-0,1% de TFA a 100% de CH3CN-0,1% de TFA em 2,5 minutos) em uma coluna ACE de C18 (50 cm x 4,6 mm) a 45°C. Para avaliar o efeito da temperatura do sobrenadante e o tempo de incubação na ligação, o sobrenadante foi avaliado em uma temperatura de sobrenadante da temperatura ambiente e a 37°C após 1 hora, 5 horas e 24 horas. Um controle sem hidróxido de alumínio foi também avaliado. Os cromatogramas de HPLC para as formulações do composto 1 com e sem hidróxido de alumínio, a temperatura ou tempo de incubação, indicaram que o composto 1 não estava presente no sobrenadante quando o hidróxido de alumínio foi incluído na formulação. Figura 1 mostra a concentração do composto 1 no sobrenadante, quando medido por meio de HPLC, para o composto 1 com alumínio em temperatura ambiente e 37°C, e para o composto 1 sozinho (controle).
[000634] Composto 5 (1 mg/ml) foi dissolvido em 10 mM de NaOH e acrescentado ao adjuvante de hidróxido de alumínio (2 mg/ml) resultando em uma formulação de 100 μg/dose. O sobrenadante foi avaliado com HPLC usando um gradiente balístico (de 10% de CH3CN-0,1% de TFA a 100% de CH3CN-0,1% de TFA em 2,5 minutos) em uma coluna ACE de C18 (50 cm x 4,6 mm) a 45°C. Para avaliar o efeito da temperatura do sobrenadante e o tempo de incubação na ligação, o sobrenadante foi avaliado a uma temperatura de sobrenadante de temperatura ambiente e a 37°C após 1 hora, 5 horas e 24 horas. Um controle sem hidróxido de alumínio foi também avaliado. Os cromatogramas de HPLC para as formulações do composto 5 com e sem hidróxido de alumínio, a temperatura ou tempo de incubação, indicaram que o composto 5 não estava presente no sobrenadante quando o hidróxido de alumínio foi incluído na formulação.
AVALIAÇÃO DA LIGAÇÃO EM PH 6,5
[000635] Composto 1 (0,5 mg/ml) foi dissolvido em 10 mM de NaOH e acrescentado ao adjuvante de hidróxido de alumínio (2 mg/ml) resultando em uma formulação de 100 μg/dose. O pH da solução foi ajustado em pH 6,5 usando HCl. O sobrenadante foi avaliado com HPLC usando um gradiente balístico (de 10% de CH3CN-0,1% de TFA a 100% de CH3CN-0,1% de TFA em 2,5 minutos) em uma coluna ACE de C18 (50 cm x 4,6 mm) a 45°C. Para avaliar o efeito da temperatura do sobrenadante e o tempo de incubação na ligação, o sobrenadante foi avaliado a uma temperatura de sobrenadante de temperatura ambiente e a 37°C após 1 hora, 5 horas e 24 horas. Um controle sem hidróxido de alumínio foi também avaliado. Os cromatogramas de HPLC para as formulações do composto 1 com e sem hidróxido de alumínio, a temperatura ou tempo de incubação, indicaram que o composto 1 não estava presente no sobrenadante quando o hidróxido de alumínio foi incluído na formulação.
AVALIAÇÃO DA LIGAÇÃO EM pH 6,7
[000636] Composto 5 (1 mg/ml) foi dissolvido em 10 mM de tampão de histidina (1 mg/ml) e acrescentado ao adjuvante de hidróxido de alumínio (2 mg/ml) resultando em uma formulação de 100 μg/dose. O sobrenadante foi avaliado com HPLC usando um gradiente balístico (de 10% de CH3CN-0,1% de TFA a 100% de CH3CN-0,1% de TFA em 2,5 minutos) em uma coluna ACE C18 (50 cm x 4,6 mm) a 45°C. Para avaliar o efeito da temperatura do sobrenadante e o tempo de incubação na ligação, o sobrenadante foi avaliado a uma temperatura de sobrenadante de temperatura ambiente e a 37°C após 1 hora, 5 horas e 24 horas. Um controle sem hidróxido de alumínio foi também avaliado. Os cromatogramas de HPLC para as formulações do composto 5 com e sem hidróxido de alumínio, a temperatura ou tempo de incubação, indicaram que o composto 5 não estava presente no sobrenadante quando o hidróxido de alumínio foi incluído na formulação.
AVALIAÇÃO DA LIGAÇÃO EM pH 9 (TAMPÃO DE HISTIDINA AJUSTADO EM pH 9)
[000637] Um método de extração de solvente orgânico foi usado para avaliar se o composto 1 estava covalentemente ligado ao hidróxido de alumínio. A formulação foi preparada como segue: 2 mg/ml de hidróxido de alumínio, 100 μg/dose de composto 1, 10 mM de tampão de histidina) e o pH foi ajustado em 9. Uma formulação de controle sem hidróxido de alumínio foi também preparada.
[000638] Um ml da formulação contendo Alumínio foi misturado com 1 ml de KH2PO4 1M pH 9 (0,5M conc final, pH 9) e foi deixado em agitação suave durante a noite a 37°C para permitir dessorção do composto 1 (composto 5) do hidróxido de alumínio por meio de permuta de ligante com os ânions de fosfato. Extração orgânica foi depois executada: 1 ml de cada amostra foi misturado com 1 ml de n- butanol e submetida a vórtice. Após a formação de 2 fases, a fase superior (butanol) foi recuperada, secada com N2 e ressuspensa em MeOH/10 mM de NaOH. Análise de HPLC foi corrida tanto para os sobrenadantes da formulação como para as amostras extraídas de butanol (coluna de C18; 0-100% de B em 2 min; A = 0,1% de TFA em H2O; B = 0,1% de TFA em ACN). Quantidades aumentadas do composto 1 foram observadas no sobrenadante da formulação tratado com KH2PO4, indicando dessorção do composto 1 pelos ânions de fosfato. A mesma tendência foi observada com as amostras extraídas. Os dados obtidos são dados na tabela 2 abaixo: TABELA 2
Figure img0052
EFEITO NA LIGAÇÃO DE ANTÍGENOS DE MenB AO HIDRÓXIDO DE ALUMÍNIO
[000639] SDS PAGE foi usada para avaliar o efeito da ligação do composto 1 ao adjuvante de hidróxido de alumínio na habilidade dos antígenos de MenB para ligar ao adjuvante de hidróxido de alumínio. Composto 1 foi dissolvido em 10 mM de NaOH a 0,5 mg/ml de concentração final. Alumínio e o Composto 1 foram combinados 1 em razão de peso de 1:6 (Composto 1:Alumínio) na presença de 10 mM de concentração final de Histidina. O pH foi ajustado para 9,2 e a mistura foi suavemente agitada por 3 horas em temperatura ambiente, permitindo a reação ocorrer. A mistura foi centrifugada a 5000 x g durante 10 minutos e o sobrenadante descartado. A pelota (isto é, o composto Alumínio 1-modificado) foi ressuspensa no tampão de Alumínio inicial para obter a concentração de alumínio de partida. O pH foi ajustado em 6,5. O Alumínio modificado foi depois usado para a formulação com os antígenos de MenB.
[000640] Análise de SDS PAGE do sobrenadante de antígenos de MenB formulados sozinhos com adjuvante de hidróxido de alumínio (Alumínio) ou com adjuvante de hidróxido de alumínio junto com o composto 1 é mostrada na Figura 1. Os antígenos de MenB avaliados foram 287-953, 936-741 e 961c, cujos antígenos são descritos em WO2004/032958 e Giuliani et al. (2006) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 103:10834-10839. Rotas marcadas "Sn" e TCA" representam a análise dos sobrenadantes de formulações após centrifugação para empelotar o adjuvante de hidróxido de alumínio. Rotas marcadas "Des" representam análise de antígenos recuperada após dessorção do hidróxido de alumínio com 0,5 M de tampão de fosfato. Figura 2 mostra que os antígenos de MenB ligam efetivamente ao hidróxido de alumínio como com o composto 1 como obtido sem o composto 1.
[000641] A adsorção do composto 16 e composto 17 para hidróxido de alumínio foi também avaliada usando a formulação de alumínio descrita acima para o composto 1. Análise de HPLC mostrou que, para ambos os compostos, nenhum composto foi observado no sobrenadante após a adição de hidróxido de alumínio. Porém, o composto 16 e o composto 17 foram recuperados após dessorção com 0,5M de KH2PO4. Note que a extração de solvente orgânica não foi requerida devido à solubilidade em água dos dois compostos. Além disso, análise SDS PAGE de ligação de antígeno na presença do composto 16 ou composto 17 foi realizada como descrita acima. Para ambos os compostos todos os 3 antígenos de MenB estavam completamente adsorvidos ao alumínio modificado com o composto 16 e no alumínio modificado com o composto 17.
AVALIAÇÃO DA LIGAÇÃO AO ALUMÍNIO EM 10 mM de TAMPÃO DE HISTIDINA
[000642] A adsorção dos compostos 6, 16, 17, 19 e 20 foi avaliada para hidróxido de alumínio como segue: para três equivalentes de volume de hidróxido de alumínio aquoso (2 mg/ml) foi adicionado um equivalente de volume de composto em 10 mM de tampão de histidina (4 mg/ml) a pH 6,8. A solução resultante foi diluída 10 vezes com tampão de histidina em branco para uma concentração final do composto de 0,1 mg/ml. As soluções diluídas foram incubadas a 37°C por 5 horas. As amostras foram centrifugadas a 14.000 rpm durante 10 minutos para empelotar o insolúvel. O sobrenadante (junto com um padrão interno) foi depois avaliado por LC-MS/MS usando um gradiente balístico (de 5% de CH3CN-0,5% de ácido fórmico a 95% de CH3CN-1,0% de ácido fórmico em 3,5 minutos) em uma coluna de dC18 Waters Atlantis (50mm x 2,1mm) em temperatura ambiente contra uma curva de calibração preparada em concentrações de compostos conhecidas que variam de 0,005 a 50 μM. A concentração no sobrenadante foi calculada como % não-ligado ao alumínio comparado ao controle; % ligado ao alumínio foi calculado como 100% menos % não-ligado. Tabela 3 listas a % de ligação dos respectivos compostos testados. TABELA 3
Figure img0053
[000643] É entendido que os exemplos e modalidades descritos aqui são para propósitos ilustrativos apenas e que várias modificações ou alterações à luz dos mesmos serão sugeridas às pessoas versadas na técnica e serão incluídas dentro do espírito e âmbito deste pedido de patente e escopo das reivindicações em anexo. Todas as publicações, patentes, e pedidos de patente citados aqui são por este meio incorporados por referência para todos os propósitos.

Claims (17)

1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a Fórmula (I):
Figure img0054
na qual R1é C1-C4alquila, -L1R5, -L1R6, -L2R5, ou -L2R6; L1é -C(O)- ou -O-; L2 é C1-C6 alquileno, C2-C6 alquenileno, arileno, heteroarileno ou -((CR4R4)pO)q(CH2)p-, em que o C1-C6alquileno e C2- C6 alquenileno de L2são opcionalmente substituídos por 1 a 4 átomos de flúor; cada L3é independentemente selecionado de C1-C6 alquileno e -((CR4R4)pO)q(CH2)p-, em que o C1-C6alquileno de L3é opcionalmente substituído por 1 a 4 átomos de flúor; L4 é arileno; R2 é C1-C4 alquila; R3 é selecionado de -OL3R7, -OL3L4L3R7, -OR8, e - OL3L4R5; cada R4é independentemente selecionado de H e flúor; R5 é -P(O)(OH)2, R6 é -CF2P(O)(OH)2 ou -C(O)OH; R7 é -CF2P(O)(OH)2; R8 é H ou C1-C4alquila; cada p é independentemente selecionado de 1, 2, 3, 4, 5 e 6, e q é 1, 2, 3 ou 4, com a condição que quando R3 for -OR8, R1 seja L1R5, - L1R6, -L2R5, ou -L2R6, em que R6é -CF2P(O)(OH)2 e R7é - CF2P(O)(OH)2, ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que: R1 é C1-C4alquila; R2 é C1-C4alquila; R3 é -OL3R7; R7é -CF2P(O)(OH)2, e L3 é C1-C6 alquileno.
3. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que: R1 é C1-C4alquila; R2 é C1-C4alquila; R3 é -OL3R7; R7 é -CF2P(O)(OH)2; L3 é -((CR4R4)pO)q(CH2)p-; R4 é H; q é 1 ou 2, e p é 2.
4. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que: R1 é -L2R6; R2 é C1-C4 alquila; R3 é -OL3R7; R6 é -C(O)OH; R7 é -CF2P(O)(OH)2; L2 é C1-C6 alquileno, e L3 é C1-C6 alquileno.
5. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que: R1 é -L2R6; R2 é C1-C4 alquila; R3 é -OL3R7; R6 é -C(O)OH; R7 é -CF2P(O)(OH)2; L2 é C1-C6alquileno; L3 é -((CR4R4)pO)q(CH2)p-; R4 é H; q é 1 ou 2, e p é 2.
6. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que: R1é -L1R5, -L2R5 ou -L1R6; R2 é C1-C4alquila; R3 é -OR8; R8 é C1-C4 alquila; R5 é -P(O)(OH)2; R6 é -CF2P(O)(OH)2; L1 é -C(O)-, e L2 é C1-C6 alquileno ou C2-C6 alquenileno, cada opcionalmente substituído por 1 a 4 átomos de flúor.
7. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que: R1é C1-C4 alquila; R2é C1-C4 alquila; R3é -OL3L4R5, ou -OL3L4 L3R7; R5 é -P(O)(OH)2; R7 é -CF2P(O)(OH)2; cada L3é independentemente um C1-C6alquileno, e L4 é fenileno.
8. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 6, caracterizado pelo fato de que R8é metila.
9. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3 ou 7 e 8, caracterizado pelo fato de que R1é metila.
10. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizado pelo fato de que R2é metila.
11. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é selecionado dentre: ácido 4-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)- 3-metilfenóxi)-1,1-difluorobutilfosfônico; ácido 3-(5-amino-2-(4-(4,4-diflúor-4-fosfonobutóxi)-2- metilfenetil) benzo [f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico; ácido 3-(5-amino-2-(4-(2-(3,3-diflúor-3- fosfonopropóxi)etóxi)-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8- il)propanoico; ácido 5-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)- 3-metilfenóxi)-1,1-difluoropentilfosfônico; ácido 3-(2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2- il)etil)-3-metilfenóxi)etóxi)-1,1-difluoropropilfosfônico; ácido 2-(4-((4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2- il)etil)-3-metilfenóxi)metil)fenil)-1,1-difluoroetilfosfônico; ácido 2-(5-amino-2-(4-metóxi-2- metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)-1,1-diflúor-2-oxoetilfosfônico; ácido 3-((4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2- il)etil)-3-metilfenóxi)metil)fenilfosfônico; ácido 5-amino-2-(4-metóxi-2- metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridino-8-carbonilfosfônico; ácido 3-(5-amino-2-(4-(2-(2-(3,3-diflúor-3- fosfonopropóxi)etóxi) etóxi)-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8- il)propanoico; ácido 6-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)- 3-metilfenóxi)-1,1-difluoroexilfosfônico; e ácido 3-(2-(2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2- il)etil)-3-metilfenóxi)etóxi)etóxi)-1,1-difluoropropilfosfônico.
12. Composto, caracterizado pelo fato de ser selecionado de: ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(2-(2-(2- fosfonoetóxi)etóxi)etóxi)fenetil)benzo[f] [1,7]naftiridin-8-il)propanoico; ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(2-(2-(2-(2- fosfonoetóxi)etóxi)etóxi)etóxi)fenetil)benzo[f] [1,7]naftiridin-8- il)propanoico; fosfato de di-hidrogênio de 4-(2-(5-amino-8- metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenila; ácido (4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3- metilfenóxi)metilfosfônico; ácido (E)-2-(5-amino-2-(4-metóxi-2- metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)vinilfosfônico; ácido 2-(5-amino-2-(4-metóxi-2- metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)etilfosfônico; ácido (E)-2-(5-amino-2-(4-metóxi-2- metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)-1-fluorovinilfosfônico; ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(3-fosfonopropóxi) fenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico; ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(2-(2- fosfonoetóxi)etóxi)fenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico; ácido 2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)- 3-metilfenóxi)etilfosfônico; ácido 6-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)- 3-metilfenóxi)hexilfosfônico; ácido 2-(2-(2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2- il) etil)-3-metilfenóxi)etóxi)etóxi)etilfosfônico; ácido 5-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)- 3-metilfenóxi) pentilfosfônico; ácido 4-((4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2- il)etil)-3-metilfenóxi)metil)benzilfosfônico, e ácido 4-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)- 3-metilfenóxi) butilfosfônico.
13. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 12, e um veículo farmaceuticamente aceitável.
14. Medicamento, caracterizado pelo fato de que compreende um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 12.
15. Uso de um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado pelo fato de que é na fabricação de uma composição farmacêutica ou um medicamento para tratar uma doença ou distúrbio em um paciente onde a modulação de um receptor TLR7 está implicada.
16. Kit, caracterizado pelo fato de que compreende um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 12.
17. Combinação, caracterizada pelo fato de que compreende um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 12, e um ingrediente princípio ativo.
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B06F Objections, documents and/or translations needed after an examination request according [chapter 6.6 patent gazette]
B07E Notification of approval relating to section 229 industrial property law [chapter 7.5 patent gazette]
B06U Preliminary requirement: requests with searches performed by other patent offices: procedure suspended [chapter 6.21 patent gazette]
B09A Decision: intention to grant [chapter 9.1 patent gazette]
B16A Patent or certificate of addition of invention granted [chapter 16.1 patent gazette]

Free format text: PRAZO DE VALIDADE: 10 (DEZ) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 24/09/2020, OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS.

B16D Grant of patent or certificate of addition of invention cancelled

Free format text: ANULADA A PUBLICACAO CODIGO 16.1 NA RPI NO 2594 DE 24/09/2020 POR TER SIDO INDEVIDA.

B09X Republication of the decision to grant [chapter 9.1.3 patent gazette]
B16A Patent or certificate of addition of invention granted [chapter 16.1 patent gazette]

Free format text: PRAZO DE VALIDADE: 10 (DEZ) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 05/01/2021, OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS.

B16C Correction of notification of the grant [chapter 16.3 patent gazette]

Free format text: PRAZO DE VALIDADE: 20 (VINTE) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 01/09/2010 OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS. PATENTE CONCEDIDA CONFORME ADI 5.529/DF