PT2473508T - Compostos e composições como moduladores da atividade de tlr - Google Patents

Description

DESCRIÇÃO

"COMPOSTOS E COMPOSIÇÕES COMO MODULADORES DA ATIVIDADE DE TLR"

Esta invenção foi feita em parte com o suporte do Governo sob a Concessão DTRA No. HDTRAl-07-9-0001 premiada pelo Department of Defense. 0 Governo tem alguns direitos na invenção.

CAMPO DA INVENÇÃO A invenção diz respeito aos moduladores de Recetores do Tipo "Toll" (TLR), e métodos de utilizar tais compostos.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO A deteção antecipada de classes especificas de patogénios é realizada pelo sistema imunitário inato com a ajuda de recetores de reconhecimento padrão (PRR). Os patogénios detetados incluem virus, bactérias, protozoários e fungos, e cada um constitutivamente expresso um conjunto de moléculas especificas de classe, resistentes à mutação chamadas padrões moleculares associados a patogénios (PAMP). Estes marcadores moleculares podem ser compostos de proteínas, hidratos de carbono, lípidos, ácidos nucleicos ou combinações dos mesmos, e podem ser localizados interna ou externamente. Exemplos de PAMP incluem hidratos de carbono bacterianos (lipopolissacarídeo ou LPS, manose), ácidos nucleicos (DNA ou RNA bacteriano ou virai), peptidoglicanos e ácidos lipotecoicos (de bactérias gram positivas), N-formilmetionina, lipoproteínas e glucanos fúngicos.

Recetores de reconhecimento de padrão evoluíram para se beneficiarem de três qualidades do PAMP. Primeira, a expressão constitutiva permite o hospedeiro detetar o patogénio independente de seu estágio de ciclo de vida. Segunda, os PAMP são específicos de classe, que permite o hospedeiro distinguir entre os patogénios e assim trabalhar sua resposta. Terceira, a resistência à mutação permite o hospedeiro reconhecer o patogénio independente de sua estirpe particular.

Recetores de reconhecimento de padrão estão envolvidos em mais que apenas o reconhecimento de patogénios por meio de seus PAMP. Uma vez ligados, os recetores de reconhecimento de padrão tendem a agrupar-se, recrutam outras proteínas extracelulares e intracelulares para o complexo, e iniciam cascatas de sinalização que finalmente têm impacto na transcrição. Adicionalmente, os recetores de reconhecimento de padrão estão envolvidos na ativação do complemento, coagulação, fagocitose, inflamação, e funções de apoptose em resposta à deteção de patogénios.

Recetores de reconhecimento de padrão (PRR) podem ser divididos em PRR endociticos ou PRR de sinalização. Os PRR de sinalização incluem as famílias grandes de recetores do tipo "Toll" (TLR) ligados a membrana e recetores do tipo NOD citoplásmicos, embora os PRR endociticos promovam a ligação, engolfamento e destruição dos microorganismos através dos fagócitos sem retransmitir um sinal intracelular, são encontrados em todos os fagócitos e medeiam a remoção das células apoptóticas. Além disso, PRR endociticos reconhecem hidratos de carbono e incluem recetores de manose dos macrófagos, recetores de glucano presentes em todos os fagócitos e recetores descontaminantes que reconhecem ligandos carregados. W02007/109813 revela composições compreendendo compostos imidazoquinoxalina. As composições são utilizadas para melhorar a respoata imune de um indivíduo.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO A invenção é como definida nas reivindicações. Num primeiro, aspeto, a invenção proporciona um composto como definido na reivindicação 1. Num segundo aspeto, a invenção proporciona um composto como definido na reivindicação 12. Num terceiro aspeto, a invenção proporciona um composto como definido na reivindicação 13. Num quarto aspeto, a invenção proporciona um composto para utilização em terapia como definido na reivindicação 16. Num quinto aspeto, a invenção proporciona um composto para utilização em terapia como definido na reivindicação 17. Num sexto aspeto, a invenção proporciona a utilização de um composto como definida na reivindicação 20. Num sétimo aspeto, a invenção proporciona um método de acordo com a reivindicação 23. São aqui decritos compostos e composições farmacêuticas dos mesmos que são agonistas do recetor do tipo "toll" 7 (TLR7) . Tais agonistas de TLR7 são potenciadores imunes que se ligam aos adjuvantes contendo alumínio, tais como, a titulo de exemplo apenas, hidróxido de alumínio, oxi-hidróxido de alumínio e hidroxifosfato de alumínio. Desse modo, também são aqui descritas composições imunogé-nicas contendo um antigénio e um agonista de TLR7 aqui proporcionado que se ligam aos adjuvantes contendo alumínio. Quando tais composições imunogénicas são administradas a um indivíduo com necessidade das mesmas, tais agonistas de TLR7 intensificam a resposta imune para a composição imuno-génica.

Os compostos aqui descritos, e os sais farmaceu-ticamente aceitáveis, solvatos farmaceuticamente aceitáveis (e.g., hidratos), os derivados N-óxido, derivados profár-maco, derivados protegidos, isómeros individuais e mistura de isómeros dos mesmos, podem ter uma estrutura de acordo com a Fórmula (I) :

em que: R1 é H, Ci-Cô alquilo, -C(R5)20H, -L1R5, -L1R6, -L2R5, -L2R6, -OL2R5, ou -OL2R6; L1 é -C (0)- ou -0-; L2 é Ci-Ce alquileno, C2-C6 alquenileno, arileno, hete-roarileno ou - ( (CR4R4) P0) q (CH2) P-, em que Ci-C6 alquileno e C2-Ce alquenileno de L2 são opcionalmente substituídos com 1 a 4 qrupos fluoro; cada L3 é independentemente selecionado a partir de C1-C6 alquileno e - ( (CR4R4) p0) q (CH2) p-, em que Ci-Cô alquileno de L3 é opcionalmente substituído com 1 a 4 grupos fluoro; L4 é arileno ou heteroarileno; R2 é H ou C1-C6 alquilo; R3 é selecionado a partir de C1-C4 alquilo, -L3R5, -L1R5, -L3R7, -L3L4L3R7, -L3L4R5, -L3L4L3R5, -0L3R5, -OL3R7, -OL3L4R7, -OL3L4L3R7, -OR8, -OL3L4R5, -OL3L4L3R5 e -C (R5) 20H; cada R4 é independentemente selecionado a partir de H e fluoro; R5 é -P (0) (OR9) 2, R6 é -CF2P(0) (OR9)2 ou -C (0) OR10; R7 é -CF2P(0) (OR9)2 ou -C (0) OR10; R8 é H ou C1-C4 alquilo; cada R9 é independentemente selecionado a partir de H e C1-C6 alquilo; R10 é H ou C1-C4 alquilo; cada p é independentemente selecionado a partir de 1, 2, 3, 4, 5 e 6, e q é 1, 2, 3 ou 4; com a condição de que quando R3 for C1-C4 alquilo ou -OR8, R1 seja -C(R5)2OH, -IdR5, -L7R6, -L2R5, -L2R6, -OL2R5, ou -OL2R6, em que R6 é -CF2P (0) (OR9) 2 e R7 é -CF2P(0) (OR9)2.

Nos compostos da Fórmula (I), R1 pode ser C1-C6 alquilo, R1 pode ser um metilo. R1 pode ser H. R1 pode ser -C(R5)2OH, -idR5, -idR6, -L2R5, -L2R6, -OL2R5, ou -OL2R6.

Por exemplo, em alguns casos dos compostos da Fórmula (I), quando R1 -C(R5)2OH, -L1R5, -L1R6, -L2R5, -L2R6, -OL2R5, ou -OL2R6, então R3 é -OR8 ou Ci-Cô alquilo. Em alguns casos, R1 é -C(R5)2OH, -L1R5, -L1R6, -L2R5, -L2R6, -OL2R5, ou -OL2R6, e R3 é -OMe. R2 pode ser C1-C6 alquilo. Por exemplo, R2 pode ser metilo.

Em alguns casos, R3 é selecionado a partir de C1-C4 alquilo, -L3R5, -L1R5, -L3R7, -L3L4L3R7, -L3L4R5, e -L3L4L3R5. Noutros casos, R3 é selecionado a partir de -0L3R5, -0L3R7, -0L3L4R7, -OL3L4L3R7, -OR8, -OL3L4R5, -0L3L4L3R5 e -C(R5)20H. Por exemplo, R3 pode ser -0L3R5, em que -0L3R5 é um grupo da fórmula -0 (CH2) 1-5P (0) (0R)2. Por exemplo, R3 pode ser -OL3R5, em que -0L3R5 é um grupo da fórmula -0 (CH2) i-5CF2P (0) (OR) 2. R3 pode ser selecionado a partir de C1-C4 alquilo, -L3R5, -L1R5, -L3R7, -L3L4L3R7, -L3L4R5, -L3L4L3Rs, -OL3R5, -ol3r7, -ol3l4r7, -ol3l4l3r7, -or8, -ol3l4r5, e -ol3l4l3r5.

Quando mais de um R9 estiver presente, como nos compostos compreendendo uma porção -P(0) (OR9) 2, os grupos R9 são os mesmos ou são diferentes. Por exemplo, R9 pode ser H em cada ocorrência. Por exemplo, pelo menos um R9 pode ser H e o outro R9 é C1-C6 alquilo. Por exemplo, pelo menos um R9 pode ser H e o outro R9 é metilo. Por exemplo, pelo menos um R9 é H e o outro R9 é etilo. Em alguns casos, cada R9 é C1-C6 alquilo, por exemplo, R9 pode ser metilo ou etilo, ou uma combinação dos mesmas.

Em alguns casos, L2 e/ou L3 são um grupo da fórmula - ( (CR4R4) p0) q (CH2) P-, por exemplo, este grupo pode ser da fórmula - (CH2CH2O) 1-3 (CH2) 1-3-.

Em alguns casos, L2 é Ci-Cõ alquileno, enquanto noutros casos L2 é Ci-Cõ alquileno substituído com um a quatro grupos fluoro. Por exemplo, L2 pode ser da fórmula (CH2) 0-5CF2, em que o carbono substituído por fluoro não é ligado diretamente ao anel de fenilo da Fórmula I. Por exemplo, L2 pode ser C2-C6 alquenileno ou C2-C6 alquenileno substituído com um a quatro grupos fluoro.

Em alguns casos, L3 é C1-C6 alquileno enquanto noutros casos L3 pode ser C1-C6 alquileno substituído com um a quatro grupos fluoro. Por exemplo, L3 pode ser da fórmula (CH2) 0-5CF2, em que o carbono substituído por fluoro não é ligado diretamente ao anel de fenilo da Fórmula I.

Em alguns casos, L2 é arileno ou heteroarileno. por exemplo, L2 pode ser fenileno, tal como fenileno 1,3- dissubstituído ou fenileno 1,4-dissubstituído.

Em alguns casos, R1 é C1-C6 alquilo; R2 é C1-C6 alquilo; R3 é -OL3R5 ou -OL3R7; R5 é -P (0) (OR9) 2; R7 é -CF2P(0) (OR9)2, e L3 é Ci-Ce alquileno.

Em alguns casos, R1 é Ci-Cô alquilo; R2 é Ci-Ce alquilo; R3 é -0L3R5 ou -OL3R7; R5 é -P(0)(0R9)2; R7 é -CF2P (0) (OR9) 2; L3 é - ( (CR4R4)pO)q(CH2)p-; R4 é H; q é 1 ou 2, e p é 2.

Em alguns casos, R1 é -L2R6; R2 é C1-C6 alquilo; R3 é -0L3R5 ou -0L3R7; R5 é -P(0)(0R9)2; R6 é -C(0)0R10; R7 é -CF2P (0) (OR9) 2; L2 é C1-C6 alquileno, e L3 é Ci-Cõ alquileno.

Em alguns casos, R1 é -L2R6; R2 é C1-C6 alquilo; R3 é -0L3R5 ou -OL3R7; R5 é -P (0) (OR9) 2; R6 é -C(0)0R10; R7 é -CF2P (0) (OR9) 2; L2 é C1-C6 alquileno; L3 é - ( (CR4R4) p0) q (CH2) p-; R4 é H; q é 1 ou 2, e p é 2.

Em alguns casos, R1 é -C(R5)20H, -L1R5, -L2R5 ou -L1R6; R2 é Ci-Ce alquilo; R3 é -OR8; R8 é Ci-C6 alquilo; R5 é -P(0) (OR9) 2; R6 é -CF2P (0) (OR9) 2; L1 é -C (0)-, e L2 é Ci-C6 alquileno ou C2-C6 alquenileno, cada opcionalmente substituído com 1 a 4 qrupos fluoro.

Em alguns casos, R1 é C1-C6 alquilo; R2 é C1-C6 alquilo; R3 é -OL3L4R5-OL3L4 L3R5, ou -OL3L4 L3R7; R5 é -P(0) (OR9) 2; R7 é -CF2P (0) (OR9) 2; cada L3 é independentemente um C1-C6 alquileno, e L4 é fenileno.

Em alguns casos, R1 é C1-C6 alquilo; R2 é C1-C6 alquilo; R3 é -C(R5)20H ou -L1R5; R5 é -P (0) (OR9) 2, e L1 é -C(0)- ou -0-.

Em alguns casos de tais compostos da Fórmula (I), e os sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos farma-ceuticamente aceitáveis (por exemplo hidratos) , derivados N-óxido, derivados profármaco, derivados protegidos, isómeros individuais e mistura de isómeros dos mesmos,

R1 é C1-C4 alquilo, -C(R5)20H, -IáR5, -L2R5, -L2R6, -OL2R5, OU -OL2R6; L1 é -C(0)- ou -0-; L2 é C1-C6 alquileno, C2-C6 alquenileno, arileno, he-teroarileno ou - ( (CR4R4) p0) q (CH2) p-, em que C1-C6 alqui- leno e C2-C6 alquenileno de L2 são opcionalmente substituídos com 1 a 4 grupos fluoro; cada L3 é independentemente selecionado a partir de C1-C6 alquileno e - ( (CR4R4) P0) q (CH2) p-, em que C1-C6 alquileno de L3 é opcionalmente substituído com 1 a 4 grupos fluoro; L4 é arileno ou heteroarileno; R2 é H ou C1-C4 alquilo; R3 é selecionado a partir de C1-C4 alquilo, -L3R5, -L1R5, -L3R7, -L3L4L3R7, -L3L4R5, -L3L4L3R5, -OL3R5, -OL3R7, -OL3L4R7, -ol3l4l3r7, -or8, -OL3L4R5, -OL3L4L3R5 e -C (R5) 20H; cada R4 é independentemente selecionado a partir de H e fluoro; R5 é -P(0) (OH)2, R6 é -CF2P(0) (OH) 2 ou -C (0) OH; R7 é -CF2P(0) (OH) 2 OU -C (0) OH; R8 é H ou C1-C4 alquilo; cada p é independentemente selecionado a partir de 1, 2, 3, 4, 5 e 6 ; q é 1, 2, 3 ou 4, com a condição que quando R3 for -OR8, R1 seja -C(R5)2OH, -IdR5, -IdR6, -L2R5, -L2R6, -OL2R5, ou -OL2R6, em que R6 é -CF2P(0)(OH)2 e R7 é -CF2P(0)(OH)2.

Em alguns casos, R1 é C1-C6 alquilo; R2 é C1-C6 alquilo; R3 é -OL3R5 ou -0L3R7; R5 é -P(0)(0H)2; R7 é -CF2P(0) (OH) 2, e L3 é C1-C6 alquileno.

Em alguns casos, R1 é Ci-Cõ alquilo; R2 é Ci-Cõ alquilo; R3 é -OL3R5 ou -OL3R7; R5 é -P(0)(0H)2; R7 é -CF2P(0) (OH) 2; L3 é - ((CR4R4)P0)q(CH2)p-; R4 é H; q é 1 ou 2, e p é 2.

Em alguns casos, R1 é -L2R6; R2 é C1-C6 alquilo; R3 é -OL3R5 ou -OL3R7; R5 é -P (0) (OH) 2; R6 é -C(0)0H; R7 é -CF2P(0) (0H)2; L2 é C1-C6 alquileno, e L3 é Ci-Cõ alquileno.

Em alguns casos, R1 é -L2R6; R2 é Ci-Cô alquilo; R3 é -OL3R5 ou -OL3R7; R5 é -P(0) (0H)2; R6 é -C(0)0H; R7 é -CF2P(0) (0H)2; L2 é Ci-Ce alquileno; L3 é - ( (CR4R4) P0) q (CH2) p-; R4 é H; qélou2, epé2.

Em alguns casos, R1 é -C(R5)2OH, -L1R5, -L2R5 ou -L1R6; R2 é C1-C6 alquilo; R3 é -OR8; R8 é C1-C6 alquilo; R5 é -P(0) (OH) 2; R6 é -CF2P(0) (0H)2; L1 é -C(0)-, e L2 é Ci-C6 alquileno ou C2-C6 alquenileno, cada opcionalmente substituído com 1 a 4 grupos fluoro.

Em alguns casos, R1 é C1-C6 alquilo; R2 é C1-C6 alquilo; R3 é -OL3L4R5, -OL3L4 L3R5, ou -OL3L4 L3R7; R5 é -P(0) (0H)2; R7 é -CF2P(0) (0H)2; cada L3 é independentemente um C1-C6 alquileno, e L4 é fenileno.

Em alguns casos, R1 é C1-C6 alquilo; R2 é Ci~Cè alquilo; R3 é -C(R5)2OH ou -L1R5; R5 é -P(0)(0R9)2, e L1 é -C(0)- ou -0-.

Em alguns casos, R8 é metilo. Em alguns casos, R1 é metilo. Em alguns casos, R2 é metilo. 0 composto pode selecionado a partir de ácido 4-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)-1,1-difluorobutilfosfónico; ácido 3-(5-amino-2-(4-(4,4-difluoro-4-fosfonobutoxi)-2-metilfenetil)benzo-[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico; ácido 3-(5-amino-2-(4-(2-(3,3-difluoro-3-fosfonopropoxi)etoxi)-2-metilfenetil)-benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico; ácido 3-(5-amino- 2- (2-meti1-4-(2-(2-(2-fosfonoetoxi)etoxi)etoxi)fenetil)benzo [f] [1,7]naftiridin-8-il)propanoico; di-hidrogenofosfato de 4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)- 3- metilfenilo; ácido (4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]na-ftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)metilfosfónico; ácido 5-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)-1,1-difluoropentilfosfónico; ácido 4-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi) -1,1-difluorobutilfosfónico; ácido 3-(2-(4-(2-(5-ami-no-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi) etoxi)-1,1-difluoropropilfosfónico; ácido 2-(4-((4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi) metil)fenil)-1,1-difluoroetilfosfónico; ácido 2 —(5 — amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)-1,1-difluoro-2-oxoetilfosfónico; ácido (E)-2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il) vinilfosfónico; ácido 2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfene-til)benzo[f] [1,7] naftiridin-8-il)etilfosfónico; ácido (E) - 2- (5-amino-2- (4-metoxi-2-metilfenet.il) benzo [f] [l,7]naftiri-din-8-il)-1-fluorovinilfosfónico; ácido 3-( (4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][l,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)me-til)fenilfosfónico; ácido 5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfene-til) benzo[f] [1,7]naftiridino-8-carbonilfosfónico; ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(3-fosfonopropoxi)fenetil) benzo[f]- [1,7]naftiridin-8-il)propanoico; ácido 3-(5-amino-2-(4-(2-(2-(3,3-difluoro-3-fosfonopropoxi)etoxi)etoxi)-2-metilfe-netil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico; ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(2-(2-fosfonoetoxi)etoxi)fenetil)benzo-[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico; ácido 2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][l,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)-etilfosfónico; ácido 6-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [1,7] — naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)hexiIfosfónico; ácido 6- (4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [1,7]naftiridin-2-il)etil)- 3- metilfenoxi)-1,1-difluoro-hexilfosfónico; ácido 4-((4-(2- (5-amino-8-metilbenzo[f][l,7]naftiridin-2-il)etil)-3-me-tilfenoxi)metil)benzilfosfónico; ácido 2-(2-(2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][l,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfe-noxi)etoxi)etoxi)etilfosfónico; ácido 3-[5-amino-2-(2-{4- [2-(3,3-difluoro-3-fosfonopropoxi)etoxi]-2-metilfenil}-etil)benzo[f]1,7-naftiridin-8-il]propanoico; ácido {5 — [ 4 — (2-{5-amino-8-metilbenzo[f]1,7-naftiridin-2-il}etil)-3-me-tilfenoxi]pentil}fosfónico, e ácido {4-[4-(2-{5-amino-8-metilbenzo[f]l,7-naftiridin-2-il}etil)-3-metilfenoxi]bu-til}fosfónico. Cada um destes compostos individualmente compreende uma forma de realização preferida dos compostos, composições, e métodos aqui descritos. São também aqui descritos métodos de utilização dos compostos da Fórmula (I) , e composições farmacêuticas compreendendo tais compostos. São também aqui descritas composições farmacêuticas que incluem uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula (I), e um veiculo farmaceuticamente aceitável. A composição farmacêutica pode ser formulada para administração intravenosa, administração intravitrea, administração intramuscular, administração oral, administração retal, inalação, administração nasal, administração tópica, administração oftálmica ou administração ótica. As composições farmacêuticas podem estar na forma de um comprimido, uma pílula, uma cápsula, um líquido, um inalante, uma solução de pulverização nasal, um supositório, uma solução, uma emulsão, um unguento, colírio ou gota de ouvido. Tais composições farmacêuticas podem ainda incluir um ou mais agentes terapêuticos adicionais. São também aqui descritas composições farmacêuticas que incluem uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula (I), um adjuvante contendo alumínio, um antigénio e um veículo farmaceuticamente aceitável. Em tais composições farmacêuticas, o composto da Fórmula (I) está presente numa quantidade suficiente para produzir um efeito imunoestimulante quando administrado. A composição farmacêutica pode ser formulada para administração intravenosa, administração intravitrea ou administração intramuscular. Em tais composições o adjuvante contendo alumínio é selecionado a partir de hidróxido de alumínio, oxi-hidróxido de alumínio e hidroxifosfato de alumínio. Por exemplo, o adjuvante contendo alumínio pode ser oxi-hidróxido de alumínio ou hidróxido de alumínio. É também aqui descrita uma composição farmacêutica que inclui uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula (I) ligado a um adjuvante contendo alumínio e um veículo farmaceuticamente aceitável. Em alguns casos, tal composição é um sólido seco. Em alguns casos, uma tal composição é um sólido liofilizado. Em tais composições, o adjuvante contendo alumínio é selecionado a partir de hidróxido de alumínio, oxi-hidróxido de alumínio e hidroxifosfato de alumínio. Em certas formas de realização de tais composições, o adjuvante contendo alumínio é oxi-hidróxido de alumínio ou hidróxido de alumínio. São também aqui descritas composições imunogé-nicas compreendendo um composto da Fórmula (I), um adjuvante contendo alumínio e um antigénio. 0 composto da Fórmula (I) pode estar presente numa quantidade eficaz para suscitar, induzir ou intensificar uma resposta imune ao antigénio num indivíduo a quem é administrada a composição. Em tais composições imunogénicas, o composto da Fórmula (I) está presente numa quantidade suficiente para produzir um efeito imunoestimulante quando administrado. Em algumas de tais composições imunogénicas, o adjuvante contendo alumínio é selecionado a partir de hidróxido de alumínio, oxi-hidróxido de alumínio e hidroxifosfato de alumínio. Em algumas de tais composições imunogénicas, o adjuvante contendo alumínio é oxi-hidróxido de alumínio ou hidróxido de alumínio. Em algumas de tais composições imunogénicas, o antigénio é um antigénio bacteriano. Em algumas de tais composições imunogénicas, o antigénio é um antigénio virai ou um antigénio fúngico. Em algumas de tais composições imunogénicas, o antigénio é um polipéptido. Tais composições imunogénicas podem ainda compreender um adjuvante adicional. Uma tal composição imunogénica pode ser um sólido seco. Uma tal composição imunogénica pode ser um sólido liofilizado.

Em alguns casos, os compostos aqui descritos não são bisfosfonatos. É também aqui descrito um método para intensificar a eficácia de uma composição imunogénica, em que a composição imunogénica compreende um adjuvante contendo alumínio, e o método compreende adicionar uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I) à composição imunogénica. Em tais métodos, o adjuvante contendo alumínio é selecionado a partir de hidróxido de alumínio, oxi-hidróxido de alumínio e hidroxifosfato de alumínio. Em certas formas de realização de tais métodos, o adjuvante contendo alumínio é oxi-hidróxido de alumínio ou hidróxido de alumínio. São também aqui descritos métodos para suscitar ou induzir uma resposta imune num indivíduo vertebrado compreendendo administrar ao indivíduo vertebrado uma quantidade eficaz de uma composição imunogénica da invenção. São também aqui descritos métodos para suscitar ou induzir uma resposta de linfócitos T citotóxicos (CTL) num indivíduo vertebrado compreendendo administrar ao indivíduo vertebrado uma quantidade eficaz de uma composição imunogénica da invenção. São também aqui descritos métodos de suscitar ou induzir uma resposta imune mediada por anticorpo num indivíduo vertebrado compreendendo administrar ao indivíduo vertebrado uma quantidade eficaz de uma composição imunogénica da invenção. São também aqui descritos métodos de fazer as composições imunogénicas aqui descritas. São também aqui descritas composições de vacina compreendendo uma composição imunogénica aqui descrita. São também aqui descritos medicamentos para tratar um paciente com uma doença ou distúrbio associados com atividade do recetor de TLR7, e tais medicamentos incluem uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula (I), em que o composto da Fórmula (I) é um agonista do recetor de TLR7. É também aqui descrita a utilização de um composto da Fórmula (I) no fabrico de um medicamento para tratar uma doença ou distúrbio num paciente onde modulação de um recetor de TLR7 está implicada. São também aqui descritos métodos para ativar um recetor de TLR7, em que o método inclui administrar a um sistema ou um indivíduo com necessidade do mesmo, uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula (I), ou sais farmaceuticamente aceitáveis ou composições farmacêuticas dos mesmos, ativando assim o recetor de TLR. Em tais métodos, o composto da Fórmula (I) é um agonista do recetor de TLR7. Em alguns de tais métodos, os métodos incluem administrar o composto a um sistema de célula ou de tecido ou um indivíduo humano ou animal. São também aqui descritos métodos para tratar uma doença ou distúrbio onde modulação do recetor de TLR7 está implicada, em que o método inclui administrar a um sistema ou indivíduo com necessidade de tal tratamento uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou sais farmaceuticamente aceitáveis ou composições farmacêuticas dos mesmos, assim tratando a doença ou distúrbio. Em tais métodos, o composto da Fórmula (I) é um agonista do recetor de TLR7. Em alguns de tais métodos, os métodos incluem administrar o composto a um sistema de célula ou de tecido ou a um indivíduo humano ou animal. A doença ou condição pode ser uma doença infec-ciosa, uma doença inflamatória, uma doença respiratória, uma doença dermatológica ou uma doença autoimune. Por exemplo, a doença ou condição pode ser asma, doença pulmonar obstrutiva crónica (COPD) , síndrome da dificuldade respiratória do adulto (ARDS), colite ulcerativa, doença de Crohn, bronquite, dermatite, ceratose actinica, carcinoma de células basais, rinite alérgica, psoriase, escleroderma, urticária, artrite reumatoide, esclerose múltipla, cancro, cancro de mama, HIV ou lúpus. São também aqui descritos métodos para tratar uma doença proliferativa celular, compreendendo administrar a um sistema ou indivíduo com necessidade de tal tratamento uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), ou sais farmaceuticamente aceitáveis ou composições farmacêuticas dos mesmos; em que a doença proliferativa celular é linfoma, osteossarcoma, melanoma, ou um tumor de mama, renal, da próstata, colorretal, da tiroide, ovariano, pancreático, neuronal, pulmonar, uterino ou gastrintestinal . São também aqui descritas composições farmacêuticas que incluem um composto da Fórmula (I), um antigénio e um veículo farmaceuticamente aceitável, em que tais composições farmacêuticas são composições imunogénicas, e o composto é um potenciador imune e está presente numa quantidade eficaz para intensificar uma resposta imune ao antigénio, num indivíduo recebendo a composição. Em algumas de tais composições farmacêuticas também incluem um ou mais agentes imunorreguladores. 0 um ou mais agentes imunorregu-ladores pode incluir um ou mais adjuvantes. Tais adjuvantes podem ser selecionados a partir de adjuvantes que são uma composição contendo mineral, uma emulsão de óleo, uma formulação de saponina, um virossoma, uma partícula semelhante a vírus, um derivado bacteriano, um derivado microbiano, um imunomodulador humano, um bioadesivo, um mucoadesivo, uma micropartícula, um lipossoma, uma formulação de éter de polioxietileno, uma formulação de éster de polioxietileno, um polifosfazeno, um muramil-péptido, ou um composto de imidazoquinolona. 0 adjuvante pode ser uma emulsão de óleo. As composições imunogénicas podem ser úteis como vacinas, e o composto está presente numa quantidade suficiente para produzir um efeito imunoestimulante sob administração. É também aqui descrito um composto para utilização num método de tratamento médico, em que o método de tratamento médico é para tratar uma doença associada com a atividade do recetor de TLR7, em que a doença é selecionada de uma doença infecciosa, uma doença inflamatória, uma doença respiratória, uma doença dermatológica ou uma doença autoimune, e em que o composto é um composto da Fórmula (I) tal como aqui descrito. A doença ou condição pode ser asma, doença pulmonar obstrutiva crónica (COPD) , síndrome da dificuldade respiratória do adulto (ARDS), colite ulcera-tiva, doença de Crohn, bronquite, dermatite, ceratose actí-nica, carcinoma de células basais, rinite alérgica, psoríase, escleroderma, urticária, artrite reumatoide, esclerose múltipla, cancro, cancro de mama, HIV ou lúpus.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS FIG. 1 mostra a concentração do composto 1 no sobrena-dante com e sem a adição de hidróxido de alumínio. A concentração foi obtida por meio de análise de HPLC. FIG. 2 mostra o efeito da ligação do composto 1 ao adjuvante de hidróxido de alumínio na ligação de anti-génios de Neisseria meningitis (MenB) ao adjuvante de hidróxido de alumínio.

Definições

Os termos "alquenilo" ou "alqueno", como aqui utilizados, referem-se a um hidrocarboneto de cadeia ramificada ou linear parcialmente insaturado tendo pelo menos uma ligação dupla carbono-carbono. Átomos orientados em volta da ligação dupla estão na conformação cis (Z) ou trans (E). Em certas formas de realização, tal grupo alquenilo ou grupo alqueno está opcionalmente substituído. Como aqui utilizado, os termos "C2-C3 alquenilo", "C2-C4 alquenilo", "C2-C5 alquenilo", "C2-C6 alquenilo", "C2-C7 alquenilo", e "C2-C8 alquenilo" referem-se a um grupo alquenilo contendo pelo menos 2, e no máximo 3, 4, 5, 6, 7 ou 8 átomos de carbono, respetivamente. A menos que de outro modo especificado, um grupo alquenilo em geral é uma C2-C6 alquenilo. Exemplos não limitativos de grupos alquenilo, como aqui utilizados, incluem etenilo, pro-penilo, butenilo, pentenilo, hexenilo, heptenilo, octenilo, nonenilo, decenilo e outros. 0 termo "alquenileno", como aqui utilizado, refere-se a um radical hidrocarboneto divalente de cadeia ramificada ou linear parcialmente insaturado derivado de um qrupo alquenilo. Em certas formas de realização tal grupo alquenileno é opcionalmente substituído. Como aqui utilizado, os termos "C2-C3 alquenileno", "C2-C4 alquenileno", "C2-C5 alquenileno", "C2-C6 alquenileno", "C2-C7 alqueni-leno", e "C2-C8 alquenileno" referem-se a um grupo alquenileno contendo pelo menos 2, e no máximo 3, 4, 5, 6, 7 ou 8 átomos de carbono respetivamente. A menos que de outro modo especificado, um grupo alquenileno em geral é um C2-C6 alquenileno. Exemplos não limitativos de grupos alquenileno como aqui utilizados incluem, etenileno, prope-nileno, butenileno, pentenileno, hexenileno, heptenileno, octenileno, nonenileno, decenileno e outros. 0 termo "alquilo", como aqui utilizado, refere-se a um hidrocarboneto de cadeia ramificada ou linear saturado. Em certas formas de realização tais grupos alquilo são opcionalmente substituídos. Como aqui utilizado, os termos "C1-C3 alquilo", "C1-C4 alquilo", "C1-C5 alquilo", "C1-C6 alquilo", "C1-C7 alquilo" e "Ci-Cs alquilo" referem-se a um grupo alquilo contendo pelo menos 1, e no máximo 3, 4, 5, 6, 7 ou 8 átomos de carbono, respetivamente. A menos que de outro modo especificado, um grupo alquilo em geral é uma C1-C6 alquilo. Exemplos não limitativos de grupos alquilo como aqui utilizados incluem metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, t-butilo, n- pentilo, isopentilo, hexilo, heptilo, octilo, nonilo, decilo e outros. 0 termo "alquileno", como aqui utilizado, refere-se a um radical hidrocarboneto divalente de cadeia ramificada ou linear saturado derivado de um grupo alquilo. Em certas formas de realização tais grupos alquileno são opcionalmente substituídos. Como aqui utilizado, os termos "C1-C3 alquileno", "C1-C4 alquileno", "C1-C5 alquileno", "Ci-Ce alquileno", "C1-C7 alquileno" e "Ci-Cs alquileno" referem-se a um grupo alquileno contendo pelo menos 1, e no máximo 3, 4, 5, 6, 7 ou 8 átomos de carbono respetivamente. A menos que de outro modo especificado, um grupo alquileno em geral é um C1-C6 alquileno. Exemplos não limitativos de grupos alquileno como aqui utilizados incluem, metileno, etileno, n-propileno, isopropileno, n-butileno, isobutileno, sec-butileno, t-butileno, n-pentileno, isopentileno, hexileno e outros. 0 termo "alcoxi", como aqui utilizado, refere-se ao grupo -0Ra onde Ra é um grupo alquilo como definido aqui. Um grupo alcoxi pode ser opcionalmente substituído. Como aqui utilizado, os termos "C1-C3 alcoxi", "C1-C4 alcoxi", "C1-C5 alcoxi", "C1-C6 alcoxi", "C1-C7 alcoxi" e "Ci-Cs alcoxi" referem-se a um grupo alcoxi em que a porção alquilo contém pelo menos 1, e no máximo 3, 4, 5, 6, 7 ou 8, átomos de carbono. Exemplos não limitativos de grupos alcoxi, como aqui utilizados, incluem metoxi, etoxi, n-propoxi, isopropoxi, n-butiloxi, t-butiloxi, pentiloxi, hexiloxi, heptiloxi, octiloxi, noniloxi, deciloxi e outros. 0 termo "arilo", como aqui utilizado, refere-se aos sistemas de anel monociclico, biciclico, e triciclico tendo um total de cinco a catorze membros no anel, em que pelo menos um anel no sistema é aromático e em que cada anel no sistema contém 3 a 7 membros no anel. Em certas formas de realização, tais grupos arilo são opcionalmente substituídos. Exemplos não limitativos de um grupo arilo, como aqui utilizados, incluem fenilo, naftilo, fluorenilo, indenilo, azulenilo, antracenilo e outros. Como uma alternativa opcional, o termo "arilo" pode referir-se, em vez disso, aos sistemas de anel monocíclicos ou bicíclicos fundidos tendo um total de seis, dez ou catorze membros no anel de átomo carbono, opcionalmente substituídos com um ou mais substituintes; exemplos não limitativos de tais grupos arilo incluem fenilo e naftilo. 0 termo "arileno", como aqui utilizado significa um radical divalente derivado de um grupo arilo. Em certas formas de realização tais grupos arileno são opcionalmente substituídos. 0 termo "halogéneo", como aqui utilizado, refere-se a flúor (F), cloro (Cl), bromo (Br), ou iodo (I). 0 termo "halo", como aqui utilizado, refere-se aos radicais de halogéneo: fluoro (-F), cloro (-C1), bromo (-Br), e iodo (-1).

Os termos "haloalquilo" ou "haloalquilo substituído", como aqui utilizados, referem-se a um grupo alquilo como definido aqui, substituído com um ou mais grupos halogéneo, em que os grupos halogéneo são os mesmos ou diferentes. Um grupo haloalquilo pode ser opcionalmente substituído. Exemplos não limitativos de tais grupos haloalquilo de cadeia ramificada ou linear, como aqui utilizados, incluem metilo, etilo, propilo, isopropilo, isobutilo e n-butilo substituídos com um ou mais grupos halogéneo, em que os grupos halogéneo são os mesmos ou diferentes, incluindo, mas não limitados a, trifluoro-metilo, pentafluoroetilo, e outros.

Os termos "haloalquenilo" ou "haloalquenilo substituído", como aqui utilizados, referem-se a um grupo alquenilo como definido aqui, substituído com um ou mais grupos halogéneo, em que os grupos halogéneo são os mesmos ou diferentes. Um grupo haloalquenilo pode ser opcionalmente substituído. Exemplos não limitativos de tais grupos haloalquenilo de cadeia ramificada ou linear, como aqui utilizados, incluem etenilo, propenilo, butenilo, pente-nilo, hexenilo, heptenilo, octenilo, nonenilo, decenilo e outros substituídos com um ou mais grupos halogéneo, em que os grupos halogéneo são os mesmos ou diferentes. 0 termo "heteroarilo", como aqui utilizado, refere-se aos sistemas de anel monocíclico, bicíclico, e tricíclico tendo um total de cinco a catorze membros no anel, em que pelo menos um anel no sistema é aromático, pelo menos um anel no sistema contém um ou mais hete-roátomos selecionados a partir de azoto, oxigénio e enxofre, e em que cada anel no sistema contém 3 a 7 membros no anel. Em certas formas de realização, tais grupos heteroarilo são opcionalmente substituídos. Exemplos não limitativos de grupos heteroarilo, como aqui utilizados, incluem benzofuranilo, benzofurazanilo, benzoxazolilo, benzopiranilo, benzotiazolilo, benzotienilo, benzazepinilo, benzimidazolilo, benzotiopiranilo, benzo[1,3]dioxole, benzo [bjfurilo, benzo[b]tienilo, cinolinilo, furazanilo, furi-lo, furopiridinilo, imidazolilo, indolilo, indolizinilo, indolin-2-ona, indazolilo, isoindolilo, isoquinolinilo, isoxazolilo, isotiazolilo, 1,8-naftiridinilo, oxazolilo, oxaindolilo, oxadiazolilo, pirazolilo, pirrolilo, ftalazinilo, pteridinilo, purinilo, piridilo, piridazinilo, pirazinilo, pirimidinilo, quinoxalinilo, quinolinilo, quinazolinilo, 4H-quinolizinilo, tiazolilo, tiadiazolilo, tienilo, triazinilo, triazolilo e tetrazolilo. Como uma alternativa opcional, o termo "heteroarilo" pode, em vez disso, referir-se aos sistemas de anel monocíclicos ou bicíclicos fundidos tendo um total de 5, 6, 9 ou 10 membros no anel, em que pelo menos um membro do anel é um heteroátomo selecionado a partir de azoto, oxigénio e enxofre, opcionalmente substituído com um ou mais subs-tituintes por exemplo benzofuranilo, benzofurazanilo, benzoxazolilo, benzopiranilo, benztiazolilo, benzotienilo, benzazepinilo, benzimidazolilo, benzotiopiranilo, benzo[bjfurilo, benzo[b]tienilo, cinolinilo, furazanilo, furilo, imidazolilo, indolilo, indolizinilo, indazolilo, isoin- dolilo, isoquinolinilo, isoxazolilo, isotiazolilo, 1,8-naftiridinilo, oxazolilo, oxaindolilo, oxadiazolilo, pira-zolilo, pirrolilo, ftalazinilo, pteridinilo, purinilo, piridilo, piridazinilo, pirazinilo, pirimidinilo, quino-xalinilo, quinolinilo, quinazolinilo, tiazolilo, tiadiazo-lilo, tienilo, triazinilo, triazolilo e tetrazolilo. 0 termo "heteroarileno", como aqui utilizado, siqnifica um radical divalente derivado de um grupo heteroarilo. Em certas formas de realização, tais grupos heteroarileno são opcionalmente substituídos. 0 termo "heteroátomo", como aqui utilizado, refere-se a um ou mais de oxigénio, enxofre, azoto, fósforo, ou silício. 0 termo "hidroxilo", como aqui utilizado, refere-se ao grupo -OH. 0 termo "hidroxialquilo", como aqui utilizado refere-se a um grupo alquilo como definido aqui substituído com um ou mais grupo hidroxilo. Exemplos não limitativos de "grupos de Ci-Cô hidroxialquilo de cadeia ramificada ou linear", como aqui utilizados, incluem grupos metilo, eti-lo, propilo, isopropilo, isobutilo e n-butilo substituídos com um ou mais grupos hidroxilo. 0 termo "opcionalmente substituído", como aqui utilizado, significa que o grupo referenciado pode ou não ser substituído com um ou mais grupos adicionais individual e independentemente selecionados a partir de alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo, heterocicloalquilo, hidroxilo, alcoxi, mercaptilo, ciano, halo, carbonilo, tiocarbonilo, isocianato, tiocianato, isotiocianato, nitro, peraloalquilo, perfluoroalquilo, e amino, incluindo grupos amino mono e dissubstituídos, e os derivados protegidos dos mesmos. Exemplos não limitativos de substituintes opcionais incluem, halo, -CN, =0, =N-0H, =N-0R, =N-R, -OR, -C (0)R, -C(0)0R, -0C(0)R, -0C(0)0R, -C (0)NHR, -C(0)NR2, -0C(0)NHR, -0C(0)NR2, -SR-, -S(0)R, -S(0)2R, -NHR, -N(R)2, -NHC(0)R, -NRC(0)R, -NHC(0)0R, -NRC (0) OR, S(0)2NHR, -S(0)2N(R)2, -NHS (0) 2NR2, -NRS(0)2NR2, -NHS (0)2R, -NRS (0)2R, Ci—Ce alquilo, Ci-Cs alcoxi, arilo, heteroarilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, Ci-Cs alquilo halo-substituída, e Ci-Cs alcoxi halo-substituído onde cada R é independentemente selecionado a partir de H, halo, Ci-Ce alquilo, Ci-Cs alcoxi, arilo, heteroarilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, Ci-Cs alquilo halo-substi tuída, e C1-C8 alcoxi halo-substituído. A colocação e o número de tais grupos de substituinte são feitos de acordo com as limitações de valência bem entendidas de cada grupo, por exemplo =0 é um substituinte adequado para um grupo alquilo mas não para um grupo arilo. 0 termo "solvato", como aqui utilizado, refere-se a um complexo de estequiometria variável formado por um soluto (a título de exemplo, um composto da Fórmula (I), ou um sal do mesmo, como aqui descrito) e um solvente.

Exemplos não limitativos de um solvente são água, acetona, metanol, etanol e ácido acético. 0 termo "aceitável" com respeito a uma formulação, composição ou ingrediente, como aqui utilizado, significa que não têm nenhum efeito prejudicial persistente na saúde geral do indivíduo a ser tratado. 0 termo "administração" ou "administrando" dos compostos em questão significa proporcionar um composto da Fórmula (I), um sal farmaceuticamente aceitável, um solvato farmaceuticamente aceitável, ou profármaco do mesmo a um indivíduo com necessidade de tratamento. 0 termo "antigénio" refere-se a uma molécula contendo um ou mais epítopos (por exemplo, lineares, con-formacionais ou ambos) que suscitam uma resposta imunológica. 0 termo pode ser utilizado alternadamente com o termo "imunogénio". Por "suscitar" é significado induzir, promover, intensificar ou modular uma resposta imune ou reação imune. Em algumas circunstâncias, a resposta imune ou reação imune é uma resposta humoral e/ou celular. Um antigénio pode induzir, promover, intensificar ou modular uma resposta imune ou reação imune nas células in vitro e/ou in vivo num indivíduo e/ou ex vivo nas células ou tecidos de um indivíduo. Tal resposta ou reação imune pode incluir, mas não é limitada, suscitar a formação de anticorpos num indivíduo, ou gerar uma população específica de linfócitos reativos com o antigénio. Antigénios são tipi camente macromoléculas (por exemplo, proteínas, polissa-carídeos, polinucleótidos) que são estranhas ao hospedeiro. 0 termo "antigénio", como aqui utilizado, também denota antigénios de subunidade (isto é, antigénios que são separados e distintos de um organismo inteiro com o qual o antigénio está associado na natureza), como também bactérias, vírus, parasitas, parasitas mortos, atenuados ou inativados ou outros patogénios ou células tumorais, incluindo domínios extracelulares de recetores da superfície celular e porções intracelulares contendo epítopos de células T. Anticorpos tais como anticorpos anti-idio-típicos, ou fragmentos dos mesmos, e mimótopos de péptido sintético que podem imitar um antigénio ou determinante antigénico são também abrangidos pela definição de antigénio, como aqui utilizado. Similarmente, um oligonu-cleótido ou polinucleótido que expressam uma proteína imunogénica, antigénio ou determinante antigénico in vivo, tal como em terapia de gene ou aplicações de imunização de ácido nucleico, são também abrangidos pela definição de antigénio aqui. 0 termo "epítopo" refere-se àquela porção espécie dada (por exemplo, uma molécula antigénica ou complexo antigénico) que determina sua especificidade imunológica. Um epítopo está dentro do âmbito da presente definição de antigénio. Comummente, um epítopo é um polipéptido ou polissacarídeo num antigénio de ocorrência natural. Em antigénios artificiais, pode ser uma substância de peso molecular baixo tal como um derivado de ácido arsanílico. Normalmente, um epítopo de célula B incluirá pelo menos cerca de 5 aminoácidos mas pode ser tão pequeno quanto 3-4 aminoácidos. Um epítopo de células T, tal como um epítopo de CTL, tipicamente inclui pelo menos cerca de 7-9 aminoácidos, e um epítopo de células T auxiliares tipicamente inclui pelo menos cerca de 12-20 aminoácidos. O termo "cancro", como aqui utilizado refere-se a um crescimento anormal de células que tendem a proliferar de um modo descontrolado e, em alguns casos, para metastasizar (espalhar). Os tipos de cancro incluem, mas não são limitados a, tumores sólidos (tais como os da bexiga, intestino, cérebro, mama, endométrio, coração, rim, pulmão, tecido linfático (linfoma), ovário, pâncreas ou outro órgão endócrino (tiroide), próstata, pele (melanoma) ou tumores hematológicos (tais como as leucemias). O termo "veículo", como aqui utilizado, refere-se aos compostos ou agentes químicos que facilitam a incorporação de um composto aqui descrito nas células ou tecidos.

Os termos "coadministração" ou "administração combinada" ou outros como aqui utilizados são significados abranger administração dos agentes terapêuticos selecionados a um paciente individual, e destinam-se a incluir regimes de tratamento em que os agentes não são necessariamente administrados pela mesma via de administração ou ao mesmo tempo. 0 termo "distúrbio dermatológico", como aqui utilizado, refere-se a um distúrbio de pele. Tais distúrbios dermatológicos incluem, mas não são limitados a, distúrbios proliferativos ou inflamatórios da pele tais como, dermatite atópica, distúrbios bolhosos, colagenoses, dermatite de contacto, eczema, doença de Kawasaki, rosácea, Sindrome de Sjogren-Larsso, ceratose actínica, carcinoma de células basais e urticária. 0 termo "diluente", como aqui utilizado, refere-se aos compostos químicos que são utilizados para diluir um composto aqui descrito antes da administração. Diluentes podem ser também utilizados para estabilizar os compostos aqui descritos.

Os termos "quantidade eficaz" ou "quantidade terapeuticamente eficaz", como aqui utilizados, referem-se a uma quantidade suficiente de um composto aqui descrito a ser administrado que aliviará até certo ponto um ou mais dos sintomas da doença ou condição a ser tratada. 0 resultado pode ser redução e/ou alívio dos sinais, sintomas, ou causas de uma doença, ou qualquer outra alteração desejada de um sistema biológico. Por exemplo, uma "quantidade eficaz" para utilizações terapêuticas é a quantidade da composição compreendendo um composto como revelado aqui requerida para proporcionar uma diminuição clinicamente significativa nos sintomas da doença. Uma quantidade "eficaz" apropriada em qualquer caso individual pode ser determinada utilizando técnicas, tais como um estudo de escalação de dose.

Os termos "intensificar" ou "intensificando", como aqui utilizados, significam aumentar ou prolongar ou em potência ou duração um efeito desejado. Desse modo, com respeito a intensificar o efeito dos agentes terapêuticos, o termo "intensificar" refere-se à habilidade para aumentar ou prolongar, ou em potência ou duração, o efeito de outros agentes terapêuticos num sistema. Uma "quantidade eficaz de intensificação", como aqui utilizada, refere-se a uma quantidade adequada para intensificar o efeito de outro agente terapêutico num sistema desejado. 0 termo "excipiente" refere-se a qualquer substância essencialmente acessória que possa estar presente na forma de dosagem acabada. Por exemplo, o termo "excipiente" inclui veículos, aglutinantes, desintegrantes, agentes de enchimento (diluentes), lubrificantes, agentes de suspen-são/dispersão, e outros.

Os termos "fibrose" ou "distúrbio fibrosante", como aqui utilizado, referem-se às condições que se seguem a inflamação aguda ou crónica e estão associados com a acumulação anormal de células e/ou colágeno e incluem, mas não são limitados à fibrose de órgãos ou tecidos individuais tais como coração, rim, juntas, pulmão, ou pele, e incluem tais distúrbios como fibrose pulmonar idiopática e alveolite fibrosante criptogénica. 0 termo "iatrogénica", como aqui utilizado, significa uma condição, distúrbio, ou doença criados ou piorados por terapia médica ou cirúrgica. 0 termo "quantidade imunologicamente eficaz", como aqui utilizado, significa que a administração de uma quantidade suficiente a um indivíduo, ou numa dose única ou como parte de uma série, que é eficaz para o tratamento ou prevenção de uma doença ou distúrbio imunológico. Esta quantidade varia, dependendo da saúde e condição física do indivíduo a ser tratado, idade, do grupo taxonómico do indivíduo a ser tratado (por exemplo, primata não humano, primata, etc.), a capacidade do sistema imunitário do indivíduo para sintetizar os anticorpos, o grau de proteção desejado, a formulação da vacina, a avaliação do médico de tratamento da situação médica, e outros fatores relevantes. É de esperar que a quantidade caia numa gama relativamente ampla que pode ser determinada por meio de experimentações rotineiras.

Uma "resposta imunológica" ou "resposta imune" a um antigénio ou composição, como aqui utilizado, refere-se ao desenvolvimento num indivíduo de uma resposta imune humoral e/ou celular ao antigénio ou à composição.

Respostas imunes incluem respostas imunes inatas e adaptativas. Respostas imunes inatas são respostas de ação rápida que fornecem uma primeira linha de defesa para o sistema imunitário. Em contraste, a imunidade adaptável usa seleção e expansão clonais das células imunes tendo genes do recetor somaticamente rearranjados (por exemplo, recetores de células T e B) que reconhecem os antigénios de um dado patogénio ou distúrbio (por exemplo, um tumor), fornecendo assim especificidade e memória imunológica. As respostas imunes inatas, entre os seus muitos efeitos, levam a uma explosão rápida das citocinas inflamatórias e ativação das células de apresentação de antigénio (APC) tais como macrófagos e células dendríticas. Para distinguir patogénios autocomponentes, o sistema imunitário inato usa uma variedade de recetores relativamente invariáveis que detetam as assinaturas dos patogénios, conhecidas como padrões moleculares associados ao patogénio, ou PAMP. É sabido que a adição de componentes microbianos às vacinas experimentais conduz ao desenvolvimento de respostas imunes adaptáveis robustas e duráveis. 0 mecanismo por detrás desta potencialização das respostas imunes foi relatado envolver recetores de reconhecimento de padrão (PRR) que são diferencialmente expressos numa variedade de células imunes, incluindo neutrófilos, macrófagos, células dendríticas, células assassinas naturais, células B e algumas células não imunes tais como células epiteliais e endoteliais. Conexão de PRR leva à ativação de algumas destas células e sua secreção das citocinas e quimocinas, bem como à maturação e migração de outras células. Em tandem, isso cria um ambiente inflamatório que leva ao estabelecimento da resposta imune adaptável. PRR incluem recetores não fagociticos, tais como Recetores do Tipo "Toll" (TLR) e proteínas do domínio de oligomerização de ligação de nucleótido (NOD), e recetores que induzem fagocitose, tais como recetores de descontaminantes, recetores de manose e recetores de β-glucano. As células dendríticas são reconhecidas como alguns dos tipos de células mais importantes para iniciar a preparação das células T auxiliares (TH) de CD4 + naives e para induzir diferenciação de células T de CD8 + nas células assassinas. Sinalização de TLR foi relatada representar um papel importante em determinar a qualidade destas respostas de células T auxiliares, por exemplo, com a natureza do sinal de TLR determinando o tipo específico da resposta de TH que é observada (por exemplo, resposta de TH1 versus TH2). Uma combinação de anticorpo (humoral) e imunidade celular é produzida como parte de uma resposta do tipo TH1, enquanto uma resposta do tipo Th2 é predominantemente uma resposta de anticorpo.

Uma "resposta imune humoral" refere-se a uma resposta imune mediada por moléculas de anticorpo, enquanto uma "resposta imune celular" refere-se a uma resposta imune mediada por linfócitos T e/ou outros glóbulos brancos. Um aspecto importante da imunidade celular envolve uma resposta específica de antigénio por meio de células T citolíticas ("CTL"). CTL têm especificidade para antigénios de péptido que são apresentados em associação com as proteínas codificadas pelo complexo de histocompatibilidade principal (MHC) e expressos nas superfícies das células. CTL ajudam a induzir e promover a destruição intracelular dos micróbios intracelulares, ou a lise das células infetadas com tais micróbios. Outro aspecto da imunidade celular envolve uma resposta especifica de antigénio por meio das células T auxiliares. Células T auxiliares atuam para ajudar a estimular a função, e focalizar a atividade, células efetoras não especificas contra células que exibem antigénios de péptido em associação com as moléculas de MHC em sua superfície. Uma "resposta imune celular" também refere-se à produção de citocinas, quimocinas e outras tais moléculas produzidas pelas células T ativadas e/ou outros glóbulos brancos, incluindo aquelas derivadas das células T de CD4+ e CD8+.

Uma composição tal como uma composição imuno-génica ou uma vacina que suscita uma resposta imune celular desse modo serve para sensibilizar um indivíduo vertebrado pela apresentação de antigénio em associação com moléculas de MHC na superfície da célula. A resposta imune mediada por célula é direcionada para as células que apresentam antigénio, ou próximo, em suas superfícies. Além disso, linfócitos T específicos de antigénio podem ser gerados para permitir a proteção futura de um hospedeiro imunizado. A habilidade de um antigénio ou composição particular para estimular uma resposta imunológica mediada por célula pode ser determinada por vários ensaios conhecidos na técnica, tais como por meio de ensaios de linf oprolif eração (ativação de linfócitos), ensaios de células citotóxicas de CTL, por ensaio para linfócitos T específicos para o antigénio num indivíduo sensibilizado, ou por medição de produção de citocina por células T em resposta à re-estimulação com antigénio. Tais ensaios são bem conhecidos na técnica. Ver, e.g., Erickson et al. (1993) J. Immunol. 151:4189-4199; Doe et al. (1994) Eur. J. Immunol. 24:2369-2376. Desse modo, uma resposta imunológica como aqui utilizada pode ser uma que estimule a produção das CTL e/ou a produção ou ativação das células auxiliares T. 0 antigénio de interesse pode também suscitar uma resposta imune mediada por anticorpo. Consequentemente, uma resposta imunológica pode incluir, por exemplo, um ou mais dos efeitos seguintes entre outros: a produção de anticorpos, por exemplo, por células B; e/ou a ativação do supressor das células T e/ou γδ células T especificamente direcionadas para um antigénio ou antigénios presentes na composição ou vacina de interesse. Estas respostas podem servir para neutralizar a infecciosidade, e/ou mediar o complemento do anticorpo, ou citotoxicidade celular dependente do anticorpo (ADCC) para proporcionar proteção a um hospedeiro imunizado. Tais respostas podem ser determinadas utilizando imunoensaios padrões e ensaios de neutralização, bem conhecidos na técnica.

As composições imunogénicas da invenção exibem "imunogenicidade intensificada" para um antigénio dado quando elas possuírem uma capacidade maior para suscitar uma resposta imune que a resposta imune suscitada por uma quantidade equivalente do antigénio numa composição divergente (e.g., em que o antigénio é administrado como uma proteína solúvel). Desse modo, uma composição pode exibir "imunogenicidade intensificada", por exemplo, porque a composição gera uma resposta imune mais forte, ou porque uma dose mais baixa ou menos doses de antigénio são necessárias para alcançar uma resposta imune no indivíduo ao qual é administrada. Tal imunogenicidade intensificada pode ser determinada, por exemplo, administrando as composições da invenção, e controlos de antigénio, aos animais e comparando resultados de ensaio dos dois. 0 termo "distúrbios inflamatórios", como aqui utilizado, refere-se àquelas doenças ou condições que são caracterizadas por um ou mais dos sinais de dor (dor, da geração de substâncias nocivas e da estimulação dos nervos), calor (calor, de vasodilatação), vermelhidão (rubor, de vasodilatação e fluxo sanguíneo aumentado), inchação (tumor, de influxo excessivo ou afluxo restringido de fluido), e perda de função (functio laesa, que pode ser parcial ou total, temporária ou permanente). Inflamação tem muitas formas e inclui, mas não é limitada a, inflamação que é uma ou mais das a seguir: aguda, adesiva, atrófica, catarral, crónica, cirrótica, difusa, disseminada, exsuda-tiva, fibrinosa, fibrosante, focal, granulomatosa, hiper-plástica, hipertrófica, intersticial, metastática, necró-tica, obliterativa, parenquimatosa, plástica, produtiva, proliferativa, pseudomembranosa, purulenta, esclerosante, seroplástica, sorosa, simples, específica, subaguda, supu-rativa, tóxica, traumática, e/ou ulcerativa. Distúrbios inflamatórios ainda incluem, sem ser limitados àqueles afetando os vasos sanguíneos (poliarterite, artrite temporal); juntas (artrite: cristalina, osteoartrite, psoriática, reativa, reumatoide, Reiter); trato gastrointestinal (Doença,); pele (dermatite); ou múltiplos órgãos e tecidos (lúpus sistémico eritematoso). 0 termo "modular", como aqui utilizado, significa interagir direta ou indiretamente com um alvo para alterar a atividade do alvo, incluindo, a titulo de exemplo apenas, intensificar a atividade do alvo, inibir a atividade do alvo, limitar a atividade do alvo, ou estender a atividade do alvo. 0 termo "modulador", como aqui utilizado, refere-se a uma molécula que interage direta ou indiretamente com um alvo. As interações incluem, mas não são limitadas a, as interações de um agonista ou um antagonista.

Os termos "doença ocular" ou "doença oftálmica", como aqui utilizados, referem-se às doenças que afetam o olho ou olhos e potencialmente os tecidos circunvizinhos também. Doenças oculares ou oftálmicas incluem, mas não são limitadas a, conjuntivite, retinite, esclerite, uveite, conjuntivite alérgica, conjuntivite vernal, conjuntivite papilar e retinite de citomegalovirus (CMV). 0 termo "oligonucleótido", como aqui utilizado, refere-se a um polinucleótido que tem na gama de 5 a 100 nucleótidos, tipicamente 5 a 30 nucleótidos em tamanho. 0 termo "farmaceuticamente aceitável", como aqui utilizado, refere-se a um material, tal como veiculo ou diluente que não ab-rogam a atividade biológica ou propriedades dos compostos aqui descritos. Tais materiais são administrados a um indivíduo sem causar efeitos biológicos indesejáveis ou interagir de uma maneira deletéria com quaisquer dos componentes da composição na qual estão contidos. 0 termo "sal farmaceuticamente aceitável", como aqui utilizado, refere-se a uma formulação de um composto que não causa irritação significativa a um organismo ao qual é administrado e não ab-roga a atividade biológica e propriedades dos compostos aqui descritos.

Os termos "combinação" ou "combinação farmacêutica", como aqui utilizados significam um produto resultante da mistura ou combinação de mais de um ingrediente ativo e inclui combinações fixas e não fixas dos ingredientes ativos. 0 termo "combinação fixa" significa que os ingredientes ativos, a titulo de exemplo, um composto da Fórmula (I) e um agente terapêutico adicional, são ambos administrados simultaneamente a um paciente na forma de uma entidade ou dosagem simples. 0 termo "combinação não fixa" significa que os ingredientes ativos, a titulo de exemplo, um composto da Fórmula (I) e um agente terapêutico adicional, são ambos administrados simultaneamente a um paciente como entidades separadas ou simultânea ou sequencialmente sem prazos específicos, em que tal administração fornece níveis eficazes dos 2 compostos terapeuticamente no corpo do paciente. 0 último também se aplica à terapia de cocktail, por exemplo a administração de 3 ou mais ingredientes ativos.

Os termos "composição" ou "composição farmacêutica", como aqui utilizados, referem-se a uma mistura de pelo menos um composto, tal como os compostos da Fórmula (I) aqui proporcionados, com pelo menos um e opcionalmente mais de um dentre outros componentes químicos farmaceuticamente aceitáveis, tais como veículos, estabilizantes, diluentes, agentes dispersantes, agentes de suspensão, agentes espessantes, e/ou excipientes.

Por "pH fisiológico" ou um "pH na gama fisiológica" pretende-se significar um pH na gama de cerca de 7,2 a 8,0 inclusive, mais tipicamente na gama de cerca de 7,2 a 7, 6 inclusive. O termo "profármaco", como aqui utilizado, refere-se a um agente que é convertido no fármaco de origem in vivo. Um exemplo não limitativo de um profármaco dos compostos aqui descritos é um composto aqui descrito administrado como um éster que é depois metabolicamente hidrolisado num ácido carboxílico, a entidade ativa, uma vez dentro da célula. Um outro exemplo de um profármaco é um péptido curto ligado a um grupo ácido onde o péptido é metabolizado para revelar a porção ativa.

Os termos "polinucleótido" e "ácido nucleico" são utilizados indiferentemente, e referem-se a um polímero de cadeia simples ou dupla de bases de desoxirribonucleótido ou de ribonucleótido. Polinucleótidos de cadeia simples incluem cadeias codificadoras e cadeias antissentido. Polinucleótidos incluem RNA e DNA, e podem ser isolados de fontes naturais, sintetizados in vitro, ou preparados de uma combinação de moléculas naturais e sintéticas. Exemplos de polinucleótidos incluem, mas não são limitados a, genes, cDNAs, mRNAs, moléculas de RNA de autorreplicação, moléculas de DNA de autorreplicação, sequências de DNA genómicas, sequências de RNA genómicas, oligonucleótidos. Moléculas de RNA de autorreplicação e moléculas de DNA de autorreplicação são capazes de se autoamplificar quando introduzidas numa célula hospedeira.

Um polinucleótido pode ser linear ou não linear (e.g., compreendendo elementos circulares, ramificados, etc.). Os termos "polinucleótido" e "ácido nucleico" abrangem variantes modificadas (por exemplo, sequências com uma deleção, adição e/ou substituição). Variantes modificadas podem ser delibertadas, tais como por meio de mutagénese dirigida, ou podem ser acidentais, tais como por meio de mutações naturais.

Um polinucleótido pode ser composto de monómeros que são nucleótidos de ocorrência natural (tais como DNA e RNA), ou análogos de nucleótidos de ocorrência natural, ou uma combinação de ambos. Nucleótidos modificados podem ter alterações nas porções açúcar e/ou nas porções base de pirimidina ou de purina. Modificações de açúcar incluem, por exemplo, substituição de um ou mais grupos hidroxilo com grupos halogéneo, alquilo, aminas, e grupos azido, ou açúcares podem ser funcionalizados como éteres ou ésteres. Além disso, a porção açúcar inteira pode ser substituída com estruturas estericamente e eletronicamente similares, tais como aza-açúcares e análogos de açúcar carbocíclico. Exemplos de modificações numa porção base incluem purinas e pirimidinas alquiladas, purinas ou pirimidinas aciladas, ou outros substitutos heterocíclicos bem conhecidos. Monómeros de polinucleótido podem ser ligados por ligações de fosfodiéster ou análogos de tais ligações. Análogos de ligações fosfodiéster incluem fosforotioato, fosforodi-tioato, fosforosselenoato, fosforodisselenoato, fosforo-anilotioato, fosforanilidato, fosforamidato, e outros. Os termos "polinucleótido" e "ácido nucleico" também incluem os assim chamados "ácidos nucleicos peptídicos" compreendendo bases de ácido nucleico de ocorrência natural ou modificadas ligadas a uma cadeia principal de poliamida. 0 termo "espécie contendo polinucleótido", como aqui utilizado, refere-se a uma molécula, em que pelo menos uma porção da qual é um polinucleótido.

Os termos "polipéptido", "proteína" e "péptido", como aqui utilizados, referem-se a qualquer polímero formado de múltiplos aminoácidos, independentemente do comprimento ou modificação pós-translacional (e.g., fosforilação ou glicosilação), associado, pelo menos em parte, por meio de ligação covalente (e.g., "proteína" como aqui utilizado refere-se tanto aos polímeros (cadeias) lineares de aminoácidos associados por ligações peptícas bem como proteínas que exibem estrutura secundária, terciária, ou quaternária que podem incluir outras formas intramoleculares e associação intermolecular, tal como ligações de hidrogénio e de van der Waals, dentro ou entre a(s) cadeia(s) de péptido. Exemplos de polipéptidos incluem, mas não são limitados a, proteínas, péptidos, oligopéptidos, dímeros, multímeros, variantes, e outros. Em algumas formas de realização, o polipéptido pode ser não modificado de tal modo que seja desprovido de modificações tais como fosforilação e glicosilação. Um polipéptido pode conter parte ou todo de um polipéptido de ocorrência natural simples, ou pode ser um polipéptido de fusão ou quimérico contendo sequências de aminoácidos de dois ou mais polipéptidos de ocorrência natural. 0 termo "espécie contendo polipéptido" refere-se a uma molécula, em que pelo menos uma porção da qual é um polipéptido. Exemplos incluem polipéptidos, glicoproteínas, metaloproteínas, lipoproteínas, antigénios de sacarídeo conjugados com proteínas veículo, e assim sucessivamente. 0 termo "doença respiratória", como aqui utilizado, refere-se às doenças que afetam os órgãos que estão envolvidos na respiração, tais como o nariz, garganta, laringe, traqueia, brônquios, e pulmões. Doenças respiratórias incluem, mas não são limitadas a, asma, sindrome da dificuldade respiratória do adulto e asma alérgica (extrínseca), asma não alérgica (intrínseca), asma severa aguda, asma crónica, asma clínica, asma noturna, asma induzida por alergénio, asma sensível à aspirina, asma induzida por exercício, hiperventilação isocápnica, asma de início em crianças, asma de início em adultos, asma com variante de tosse, asma ocupacional, asma resistente a esteroides, asma sazonal, rinite alérgica sazonal, rinite alérgica perene, doença pulmonar obstrutiva crónica, incluindo bronquite crónica ou enfisema, hipertensão pulmonar, fibrose pulmonar intersticial e/ou inflamação das vias aéreas e fibrose cística, e hipoxia.

Os termos "indivíduo" ou "paciente", como aqui utilizados, abrangem mamíferos e não mamíferos. Exemplos de mamíferos incluem, mas não são limitados a, seres humanos, chimpanzés, macacos, bovinos, cavalos, ovelhas, cabras, suínos; coelhos, cachorros, gatos, ratazanas, ratinhos, cobaias, e outros. Exemplos de não mamíferos incluem, mas não são limitados a, pássaros, peixe e outros. Frequentemente, o indivíduo é um ser humano, e pode ser um ser humano que foi diagnosticado como tendo necessidade de tratamento para uma doença ou distúrbio revelados aqui. 0 termo "modulador de TLR7", como aqui utilizado, refere-se a um composto que modula um recetor de TLR7.

Os termos "doença de TLR7" ou uma "doença ou distúrbio associados com a atividade de TLR7", como aqui utilizados, referem-se a qualquer estado de doença associado com um recetor do tipo "toll". Tais doenças ou distúrbios incluem, mas não são limitados a, doenças infecciosas, doenças inflamatórias, doenças respiratórias e doenças autoimunes, tais como, a titulo de exemplo apenas, asma, doença pulmonar obstrutiva crónica (COPD), sindrome da dificuldade respiratória do adulto (ARDS), doença de Crohn, bronquite, dermatite, rinite alérqica, psoríase, escleroderma, urticária, artrite reumatoide, esclerose múltipla, cancro, HIV e lúpus. 0 termo "quantidade terapeuticamente eficaz", como aqui utilizado, refere-se a qualquer quantidade de um composto que, quando comparado a um indivíduo correspondente que não recebeu tal quantidade, resulta em tratamento melhorado, cura, prevenção, ou melhoria de uma doença, distúrbio, ou efeito colateral, ou uma diminuição na taxa de avanço de uma doença ou distúrbio. 0 termo também inclui, dentro de seu âmbito, quantidades eficazes para intensificar a função fisiológica normal.

Os termos "tratar", "tratando" ou "tratamento", como aqui utilizados, referem-se aos métodos de aliviar, enfraquecer ou melhorar uma doença ou sintomas da condição, impedir sintomas adicionais, melhorar ou impedir as causas metabólicas subjacentes dos sintomas, inibir a doença ou condição, deter o desenvolvimento da doença ou condição, aliviar a doença ou condição, causar regressão da doença ou condição, aliviar uma condição causada pela doença ou condição, ou parar os sintomas da doença ou condição ou profilática e/ou terapeuticamente. 0 termo "construção de vetor" em geral refere-se a qualquer conjunto que seja capaz de direcionar a expressão de uma(s) sequência (s) de ácido nucleico ou gene(s) de interesse. Uma "construção de vetor de DNA" refere-se a uma molécula de DNA que é capaz de direcionar a expressão de uma(s) sequência(s) de ácido nucleico ou gene(s) de interesse. Um tipo especifico de construção de vetor de DNA é um plasmídeo que é uma molécula de DNA epissomal circular capaz de replicação autónoma dentro de uma célula hospedeira. Tipicamente, um plasmídeo é uma ansa ("loop") circular de DNA de cadeia dupla à qual segmentos de DNA adicionais podem ser ligados. pCMV é um plasmídeo específico que é bem conhecido na técnica. São conhecidas outras construções de vetor de DNA que são com base em vírus de RNA. Estas construções de vetor de DNA tipicamente compreendem um promotor que funciona numa célula eucariótica, 5' de uma sequência de cDNA para a qual o produto de transcrição é uma construção de vetor de RNA (e.g., um replicão de vetor RNA de alfavírus), e uma região de terminação de 3' . Outros exemplos de construções de vetor incluem construções de vetor de RNA (e.g., construções de vetor de alfavírus) e outros. Como aqui utilizado, "construção de vetor de RNA", "replicão de vetor de RNA" e "replicão" referem-se a uma molécula de RNA que é capaz de direcionar sua própria amplificação ou autorreplicação in vivo, tipicamente dentro de uma célula alva. A construção de vetor de RNA é diretamente utilizada, sem o requerimento para introdução do DNA numa célula e transporte ao núcleo onde a transcrição ocorreria. Utilizando o vetor de RNA para libertação direta no citoplasma da célula hospedeira, replicação autónoma e tradução da sequência de ácido nucleico heteróloga ocorrem eficientemente.

Os nomes dos compostos aqui proporcionados foram obtidos utilizando ChemDraw Ultra 10.0 (CambridgeSoft®) ou JChem versão 5.2.2 (ChemAxon).

Outros objetos, caracteristicas e vantagens dos métodos, composições e combinações aqui descritos ficarão evidentes a partir da descrição detalhada a seguir. Porém, deveria ser entendido que a descrição detalhada e os exemplos específicos, indicando formas de realização específicas, são dados por via de ilustração apenas. São aqui descritos compostos e composições farmacêuticas dos mesmos, que são agonistas do recetor do tipo "Toll" 7 (TLR7). São aqui também descritos compostos, composições farmacêuticas e métodos para o tratamento de doenças e/ou distúrbios associados com a atividade de TLR7. Os agonistas de TLR7 aqui proporcionados são compostos que têm a estrutura da Fórmula (I), e sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos farmaceuticamente aceitáveis (por exemplo hidratos) , os derivados de N-óxido, derivados de profármaco, derivados protegidos, isómeros individuais e mistura de isómeros dos mesmos.

Em alguns compostos da Fórmula (I), R5 é -P (0) (CTX+)2 ou -P (0) (0-)2x2+; R6 é -CF2P (0) (0-X+) 2, -CF2P (0) (0-) 2X2+ ou -C(0)0"X+, e R7 é -CF2P(0) (0-X+)2, -CF2P(0) (0-)2X2+ OU -C(0)0-X+, em que X+ e X2+ são catiões farmaceuticamente aceitáveis. Tais catiões farmaceuticamente aceitáveis podem ser selecionados a partir de sódio, potássio, cálcio, zinco, e magnésio.

Em alguns compostos da Fórmula (I), R5 é -P03“X3+; R6 é -CF2P03“X3+, e R7 é -CF2P03-X3+, em que X3+ é Al3+.

Adjuvantes contendo alumínio, tais como hidróxido de alumínio, oxi-hidróxido de alumínio e hidroxifosfato de alumínio, são utilizados em vacinas para ligar antigénios. Um debate de adjuvantes contendo alumínio e sua utilização em vacinas é dado em Expert Rev. Vaccines, 46(5), 2007, 685-698 e Vaccines, 25, 2007, 6618-6624.

Compostos da Fórmula (I) aqui proporcionados são agonistas de TLR7 que ligam aos adjuvantes contendo alumínio, tais como, a título de exemplo apenas, hidróxido de alumínio, oxi-hidróxido de alumínio e hidroxifosfato de alumínio. Tais compostos da Fórmula (I) podem ter um grupo fosfato, um ácido fosfónico, um fosfonato, um ácido fosfónico fluorado ou um fosfonato fluorado. Tais compostos da Fórmula (I) podem ter um grupo fosfato, um ácido fosfónico, um fosfonato, um ácido fosfónico fluorado ou fosfonato fluorado, e um ou mais grupos ionizáveis adicionais selecionados a partir de um ácido carboxílico e sulfato.

Em alguns casos, os compostos da Fórmula (I) são aqui descritos combinados com um antigénio, um adjuvante contendo alumínio, e opcionalmente um veículo, excipiente farmaceuticamente aceitável, para proporcionar uma composição imunogénica. Noutros casos, tal composição imunogénica pode compreender um composto da Fórmula (I) e um antigénio, em que o antigénio inclui, mas não é limitado a, um antigénio bacteriano, um antigénio virai, um antigénio fúngico, um antigénio de tumor, ou um antigénio associado com um DST, Alzheimer, distúrbios respiratórios, distúrbios autoimunes tais como, a título de exemplo apenas, artrite reumatoide ou lúpus, distúrbios pediátricos e obesidade, e em que a quantidade do composto é uma quantidade eficaz para intensificar uma resposta imune ao antigénio num indivíduo a quem é administrada a composição. Antigénios adequados para a utilização em tais composições imunogénicas são aqui descritos.

Em alguns casos, tais composições imunogénicas incluem um antigénio bacteriano de uma estirpe de Neisseria meningitides, tal como serogrupo A, C, W135, Y e/ou B. Antigénios específicos para a utilização nestas composições são aqui descritos. Noutros casos, tais composições imunogénicas, e similares aqui proporcionadas, são utilizadas como vacinas; sua utilização no tratamento de distúrbios associados com o antigénio incluído na composição é aqui descrito.

Os compostos da Fórmula (I), sais farmaceutica-mente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isómeros dos mesmos, e as composições farmacêuticas aqui proporcionadas também incluem todas as variações isotópicas adequadas de tais compostos, e sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isómeros dos mesmos, e composições farmacêuticas. Uma variação isotópica de um composto aqui proporcionado ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo é definida como um em que pelo menos um átomo é substituído por um átomo que usualmente tem o mesmo número atómico mas uma massa atómica diferente da massa atómica encontrado na natureza. Exemplos de isótopos que podem ser incorporados nos compostos aqui proporcionados e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos incluem mas não são limitados a isótopos de hidrogénio, carbono, azoto e oxigénio tais como 2H, 3H, 31C, 13C, 14C, 15N, 170, 180, 35S, 18F, 36C1 e 123I. Certas variações isotópicas dos compostos aqui proporcionados e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, por exemplo, aqueles em que um isótopo radioativo tal como 3H ou 14C é incorporado, são úteis em estudos distribuição tecidual de fármaco e/ou substrato. Em exemplos particulares, os isótopos 3H e 14C podem ser utilizados para sua facilidade de preparação e detetabilidade. Em outros exemplos, substituição com isótopos tais como 2H pode proporcionar certas vantagens terapêuticas resultantes de maior estabilidade metabólica, tal como requerimentos de meia-vida in vivo aumentada ou de dosaqem reduzida. Variações isotópicas dos compostos, e sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isómeros dos mesmos, e composições farmacêuticas aqui proporcionadas são preparadas por meio de procedimentos convencionais utilizando variações isotópicas apropriadas de reagentes adequados.

Processos para Fazer Compostos de Fórmula (I)

Procedimentos gerais para preparar os compostos da Fórmula (I) são descritos nos Exemplos, infra. Nas reações descritas, grupos funcionais reativos, por exemplo grupos hidroxi, amino, imino, tio ou carboxi onde estes forem desejados no produto final, podem ser protegidos para evitar sua participação indesejada nas reações. Grupos de proteção convencionais podem ser utilizados de acordo com a prática padrão (vide por exemplo, T.W. Greene e P. G. M. Wuts em "Protective Groups in Organic Chemistry", John Wiley and Sons, 1991) .

Os compostos da Fórmula (I) aqui proporcionados podem ser preparados como um sal de adição de ácido farmaceuticamente aceitável reagindo a forma de base livre do composto da Fórmula (I) com um ácido orgânico farmaceuticamente aceitável ou ácido inorgânico. Um sal de adição de base farmaceuticamente aceitável dos compostos da Fórmula (I) aqui proporcionados pode ser preparado reagindo a forma de ácido livre do composto da Fórmula (I) com uma base orgânica ou base inorgânica farmaceuticamente aceitável. Alternativamente, a forma de sal dos compostos da Fórmula (I) aqui proporcionados é preparada utilizando sais dos materiais de partida ou intermediários. Em alguns casos, os compostos da Fórmula (I) aqui proporcionados são na forma de outros sais incluindo, mas não limitados a, oxalatos e trifluoroacetatos. Em alguns casos, hemissais de ácidos e bases são formados, por exemplo, sais hemissulfato e de hemicálcio.

Tais sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis dos compostos da Fórmula (I) incluem, mas não são limitados a, um sal bromidrato, cloridrato, sulfato, nitrato, succinato, maleato, formato, acetato, adipato, besilato, bicarbonato/carbonato, propionato, fumarato, citrato, tartarato, lactato, benzoato, salicilato, gluta-mato, aspartato, p-toluenossulfonato, benzenossulfonato, metanossulfonato, etanossulfonato, naftalenossulfonato (e.g., 2-naftalenossulfonato) , hexanoato, bissulfato/sul-fato, borato, cansilato, ciclamato, edisilato, esilato, gluceptato, gluconato, glucuronato, hexafluorofosfato, hibenzato, cloridrato/cloreto, bromidrato/brometo, hidroio-deto/iodeto, isetionato, lactato, malato, malonato, mesi-lato, metilsulfato, naftilato, 2-napsilato, nicotinato, orotato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfato/di-hidrogeno fosfato/hidrogeno fosfato, piroglutamato, sacarato, estea-rato, tanato, tosilato, trifluoroacetato e sais de xino-foato. 0 ácido orgânico ou ácidos inorgânicos utilizados para formar certos sais de adição de ácido farmaceuti-camente aceitáveis dos compostos da Fórmula (I) incluem, mas não são limitados a, ácido bromídrico, clorídrico, sulfúrico, nítrico, fosfórico, succínico, maleico, fórmico, acético, propiónico, fumárico, cítrico, tartárico, láctico, benzóico, salicílico, glutâmico, aspártico, p-toluenossul-fónico, benzenossulfónico, metanossulfónico, etanossulfó-nico, naftalenossulfónico tal como 2-naftalenossulfónico, ou hexanoico.

Tais sais de adição de base farmaceuticamente aceitável de um composto da Fórmula (I) incluem, mas não são limitados a, sais de alumínio, arginina, benzatina, cálcio, colina, dietilamina, diolamina, glicina, lisina, magnésio, meglumina, olamina, potássio, sódio, trometamina e de zinco.

As formas de ácido livre ou de base livre dos compostos da Fórmula (I) aqui proporcionadas podem ser preparadas do sal de adição de base correspondente ou sal de adição de ácido, respetivamente. Por exemplo um composto da Fórmula (I) numa forma de sal de adição de ácido é convertido na base livre correspondente tratando com uma base adequada (a titulo de exemplo apenas, uma solução de hidróxido de amónio, um hidróxido de sódio, e outras). Por exemplo, um composto da Fórmula (I) numa forma de sal de adição de base é convertido no ácido livre correspondente tratando com um ácido adequado (a titulo de exemplo apenas, ácido clorídrico).

Em alguns casos, os compostos da Fórmula (I) na forma não oxidada podem ser preparados de N-óxidos dos compostos da Fórmula (I) tratando com um agente redutor (a título de exemplo apenas, enxofre, dióxido de enxofre, trifenilfosfina, boro-hidreto de lítio, boro-hidreto de sódio, tricloreto de fósforo, tribrometo, ou outros) num solvente orgânico inerte adequado (a título de exemplo apenas, acetonitrilo, etanol, dioxano aquoso, ou outros) a 0 a 80°C.

Em alguns casos, os derivados de profármaco dos compostos da Fórmula (I) podem ser preparados utilizando métodos conhecidos àqueles de habilidade usual na técnica (e.g., para mais detalhes vide Saulnier et al., (1994), Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, pág. 1985) . Por exemplo, profármacos apropriados são preparados reagindo um composto não derivatizado da Fórmula (I) com um agente de carbamilação adequado (a título de exemplo apenas, 1,1-aciloxialquilcarbanocloridato, carbonato de para-nitrofenilo, ou outros).

Em alguns casos, os compostos da Fórmula (I) são preparados como derivados protegidos utilizando os métodos conhecidos daqueles que são especialistas normais na técnica. Uma descrição detalhada das técnicas aplicáveis à criação de grupos de proteção e sua remoção pode ser encontrada em T. W. Greene, "Protecting Groups in Organic Chemistry", 3a edição, John Wiley and Sons, Inc., 1999.

Em alguns casos, os compostos da Fórmula (I) são preparados ou formados, como solvatos (por exemplo, hidratos). Em alguns casos, os hidratos dos compostos da Fórmula (I) podem ser preparados por meio de recris-talização de uma mistura de solvente aquoso/orgânico, utilizando solventes orgânicos tais como dioxina, tetra-hidrofurano ou metanol.

Em alguns casos, os compostos da Fórmula (I) são preparados como seus estereoisómeros individuais. Noutros casos, os compostos da Fórmula (I) aqui proporcionados são preparados como seus estereoisómeros individuais reagindo uma mistura racémica do composto com um agente de resolução oticamente ativo para formar um par de compostos dias-tereoisoméricos, separando os diastereómeros e recuperando os enantiómeros oticamente puros. A resolução dos enantiómeros pode ser realizada utilizando derivados diastereoméricos covalentes dos compostos da Fórmula (I), ou utilizando complexos dissociáveis (por exemplo, sais diastereoméricos cristalinos) . Diastereómeros têm propriedades físicas distintas (por exemplo, pontos de fusão, pontos de ebulição, solubilidade, reatividade, etc.) e são facilmente separados tirando vantagem destas dissemelhanças. Os diastereómeros podem ser separados por meio de cromatograf ia, ou por meio de técnicas de separação/resolução com base nas diferenças na solubilidade. 0 enantiómero oticamente puro é depois recuperado, junto com o agente de resolução, por qualquer meio prático que não resultasse em racemização. Uma descrição mais detalhada das técnicas aplicáveis à resolução dos estereoisómeros dos compostos de sua mistura racémica pode ser encontrada em Jean Jacques, Andre Collet, Samuel H. Wilen, "Enantiomers, Racemates e Resolutions", John Wiley and Sons, Inc., 1981.

Compostos da Fórmula (I) são feitos por processos aqui descritos e como ilustrados nos Exemplos. Em alguns casos, os compostos da Fórmula (I) são feitos por: (a) converter opcionalmente um composto da Fórmula (I) num sal farmaceuticamente aceitável; (b) converter opcionalmente uma forma de sal de um composto da Fórmula (I) numa forma não sal; (c) converter opcionalmente uma forma não oxidada de um composto da Fórmula (I) num N-óxido farmaceuticamente aceitável; (d) converter opcionalmente uma forma N-óxido de um composto da Fórmula (I) na sua forma não oxidada; (e) resolver opcionalmente um isómero individual de um composto da Fórmula (I) de uma mistura de isómeros; (f) converter opcionalmente um composto não derivati-zado da Fórmula (I) num derivado profármaco farmaceu-ticamente aceitável; e (g) converter opcionalmente um derivado profármaco de um composto da Fórmula (I) para sua forma não deriva-tizada.

Exemplos não limitativos de esquemas sintéticos utilizados para fazer os compostos da Fórmula (I) aqui proporcionados são ilustrados nos esquemas de reação (I)-(XI) . 0 esquema (I) ilustra a síntese de benzonafti-ridinas (1-3) acoplando ácidos 2-(tert-butoxicarbonilami-no)fenilborónicos (I—1) com derivados de 3-halopicolinoni-trilo (1-2) na presença de um catalisador de paládio. A título de exemplo apenas, a porção halo dos derivados de 3-halopicolinonitrilo é bromo ou cloro. Os grupos Ra e Rb nas benzonaf tiridinas (1-3) são como aqui descritos para os substituintes da Fórmula (I) nas respetivas posições, ou Ra e Rb são grupos que são ainda modificados para obter os respetivos substituintes da Fórmula (I), como aqui descritos.

Esquema (I)

Em alguns casos, os ácidos fenilborónicos utilizados na síntese dos compostos da Fórmula (I) foram sintetizados de acordo com o esquema (II). No esquema (II), anilina (II-l) é Boc-protegida sob condições básicas para dar (11 — 2), e depois convertida nos ácidos borónico (1-1) por meio de orto-litiação e reação com borato de trimetilo seguido por processamento aquoso.

Esquema (II)

São utilizados os ácidos bóricos (I—1) como no esquema (I) e feitos reagir com cianopiridinas (1-2) para proporcionar benzonaftiridinas (1-3).

Em alguns casos, foram utilizados equivalentes de ácido borónico incluindo, mas não limitado a, ésteres boronato na síntese dos compostos da Fórmula (I). 0 esquema (III) ilustra a síntese de tais ésteres boronato (III-3) que foram utilizados como equivalentes de ácido borónico na síntese de benzonaftiridinas (1-3). No esquema (III) 2-haloanilinas (III-l) foram Boc-protegidas sob condições básicas para dar (III-2) que foi depois convertido nos ésteres boronato (III-3) utilizando catálise mediada por paládio. Estes ésteres boronato (III-3) foram utilizados como no esquema (I) e feitos reagir com as cianopiridinas (1-2) para produzir benzonaftiridinas substituídas ou não substituídas (1-3).

Esquema (III)

Em alguns casos, as 2-bromoanilinas utilizadas como no esquema (III) foram sintetizadas a partir de seus compostos nitrobenzeno correspondentes como ilustrado a seguir:

Em alguns casos, os compostos da Fórmula (I) foram sintetizados utilizando as metodologias descritas no esquema (IV).

Esquema (IV)

No esquema (IV), 3-clorobenzaldeído (IV-1) é primeiro convertido na hidroxilamina correspondente (IV-2) que é depois utilizada para fazer a nitrilo correspondente (IV-3). Utilizando condições mediadas por paládio, como no esquema (I), derivados nitrilo (IV-3) são acoplados com ácidos borónicos (II) (ou ésteres boronato (111 — 3) para dar a benzonaftiridina (1-3).

Em alguns casos, certos compostos da Fórmula (I) tendo substituintes ligados ao carbono, incluindo benzona-ftiridinas com vários substituintes ligados ao carbono na posição 2, foram preparados utilizando a via sintética mostrada no esquema (V).

Esquema (V)

No esquema (V), um 3,5-di-halopicolinonitrilo, tal como, a titulo de exemplo apenas, 3,5-dicloropicolino-nitrilo (V-l), é primeiro monossubstituido utilizando um equivalente de ácido/éster borónico assim dando o picolinonitrilo correspondente (V-2). Utilizando condições mediadas por paládio mais vigorosas como no esquema (I), os derivados nitrilo (V-2) são acoplados com ácidos borónicos (I-1) (ou ésteres boronato (III-3)) para dar a benzo-naftiridina (V-3) tendo substituintes ligados ao carbono na posição 2. Em certas formas de realização, o substituinte ligado ao carbono é um alqueno, enquanto em outras formas de realização tais alquenos são ainda modificados por hidrogenação para dar benzonaftiridinas com grupos alquilo na posição 2.

Em alguns casos, certos compostos da Fórmula (I) tendo vários substituintes, incluindo benzonaftiridinas com vários substituintes na posição 2, foram sintetizados utilizando as metodologias descritas no esquema (VI)

Esquema. (VI)

No esquema (VI), umas 2,3-di-halopiridinas substituídas na posição 5 (VI-1), tais como, a título de exem plo apenas, (5,6-dicloropiridin-3-il)metanol, são convertidas primeiro na nitrilo correspondente (VI-2). Utilizando condições mediadas por paládio como no esquema (I), os derivados de nitrilo (VI-2) são acoplados com os ácidos borónico (1-1) (ou ésteres boronato (III — 3)) para dar a benzonaftiridina (1-3).

Em alguns casos, certos compostos da Fórmula (I) foram sintetizados utilizando as metodologias descritas no esquema (VII).

Esquema (VII)

No esquema (VII), os brometos de arilo ou iodetos de arilo (VII-1) são acoplados com trietil(etinil)silano (ou seus equivalentes) utilizando condições mediadas por paládio para produzir (VII-2). Após desproteção do grupo de proteção de sililo, os derivados de acetileno (VII-3) são acoplados com 3,5-dicloropicolinonitrilo (VII-4) utilizando condições mediadas por paládio para proporcionar 3-cloro-2-cianopiridinas (VII-5). Derivados (VII-5) tais como, a titulo de exemplo apenas, 3-cloro-5-(feniletinil)picoli-nonitrilo, são acoplados com ácidos borónicos (I — 1) (ou ésteres boronato (III — 3)) para dar a benzonaftiridina (VII-6) . Composto (VII-6) é depois submetido sob condições de hidrogenação para dar benzonaftiridinas (VII-7). R2 é como aqui descrito e os grupos Ra e Rb nas benzonaf tiridinas (VII-7) são como aqui descritos para os substituintes da Fórmula (I) nas respetivas posições, ou RA e RB são grupos que são ainda modificados para obter os respetivos substituintes da Fórmula (I), como aqui descritos.

Em alguns casos, certos compostos da Fórmula (I) foram sintetizados utilizando as metodologias descritas no esquema (VIII).

Esquema (VIII)

No esquema (VIII), os brometos de arilo ou iodetos de arilo (VIII-1) são acoplados com trietil(eti-nil)silano (ou seus equivalentes) utilizando condições mediadas por paládio para produzir (VIII-2). Após desproteção do grupo de proteção de sililo, os derivados de acetileno (VIII-3) são acoplados com 3, 5-dicloropicolino-nitrilo (VIII-4) utilizando condições mediadas por paládio para proporcionar 3-cloro-2-cianopiridinas (VIII-5). Derivados (VIII-5) tais como, a titulo de exemplo apenas, 3-cloro-5-(feniletinil)picolinonitrilo são reduzidos até ao 3-cloro-5-fenetilpicolinonitrilo correspondente (VIII-6) sob condições de hidrogenação. Composto (VIII-6) é acoplado com os ácidos borónicos (I — 1) (ou ésteres boronato (III-3)) para dar benzonaf tiridinas (VIII-7). R2 é como aqui descrito e os grupos Ra e Rb nas benzonaftiridinas (VII-7) são como aqui descritos para os substituintes da Fórmula (I) nas respetivas posições, ou Ra e RB são grupos que são ainda modificados para obter os respetivos substituintes da Fórmula (I), como aqui descritos.

Em alguns casos, certos compostos da Fórmula (I) foram sintetizados utilizando as metodologias descritas no esquema (IX).

Esquema (IX)

No esquema (IX), o composto (IX-1) carregando um grupo fenol é alquilado com vários eletrófilos onde R1, R2, L1, L3, L4, R5 e R7 são como definidos aqui. Em certos exemplos, análogos contendo apêndices alcoxi na posição de fenol foram preparados como exemplificado no Esquema 1, em que um composto carregando um grupo fenol foi alquilado com um eletrófilo contendo fosfonato para dar um fosfonato protegido que foi tratado com um agente de desproteção adequado para proporcionar o ácido fosfónico.

Os exemplos aqui proporcionados são oferecidos para ilustrar, mas não limitar, os compostos da Fórmula (I) aqui descritos, e a preparação de tais compostos. A titulo de exemplo apenas, certos compostos da Fórmula (I) contendo apêndices de ácido carboxilico na posição C-8 foram preparados como exemplificado no Esquema 2. A titulo de exemplo apenas, certos compostos da Fórmula (I) contendo apêndices de ácido a,a'-diflurorofos-fónico na posição C-8 foram preparados como exemplificado no Esquema 3, em que um álcool primário foi oxidado num aldeído e alquilação deste aldeído com o reagente de fosfonato apropriado produziu um fosfonato. Adicionalmente, a oxidação do álcool benzílico deu a porção ceto e a hidrólise final deu o derivado de ácido fosfónico final. A título de exemplo apenas, certos compostos da Fórmula (I) contendo apêndices de ácido fosfónico na posição C-8 foram preparados como mostrado no Esquema 4, em que um aldeído foi tratado com um reagente de Wittig para proporcionar um fosfonato de vinilo. A hidrólise do fosfonato com, a título de exemplo apenas, brometo de trimetilsililo liberta um ácido fosfónico. Alternativamente, a hidrogenação da porção vinilo proporcionou um fosfonato ligado a alquilo que foi hidrolisado para dar um ácido fosfónico ligado a alquilo. A título de exemplo apenas, certos compostos da Fórmula (I) contendo grupos fosfato de arilo foram preparados de acordo com o Esquema 5, em que um composto carregando um grupo fenol foi tratado com 1-(bromometil)-3-iodobenzeno e carbonato de césio resultando num intermediário que foi submetido ao acoplamento cruzado catalisado por paládio com fosfoato de trietilo, seguido por hidrólise com brometo de trimetilsililo originando um composto carregando um ácido fosfónico. A título de exemplo apenas, certos compostos da Fórmula (I) contendo apêndices de ácido α-cetofosfónico na posição C-8 são preparados como exemplificado no Esquema 6, em que o tratamento de um aldeído com tris(trimetilsi-lil)fosfito seguido por oxidação com IBX resultou no ácido fosfónico.

FARMACOLOGIA E UTILIDADE

Quando um antigénio estranho desafia o sistema imunitário que responde enviando uma resposta protetora que é caracterizada pela interação coordenada de ambos os sistemas imunes inatos e adquiridos. Estes dois sistemas interdependentes cumprem dois requerimentos mutuamente exclusivos: velocidade (dada pelo sistema inato) e especificidade (dada pelo sistema adaptativo). 0 sistema imunitário inato serve como a primeira linha de defesa contra patogénios invasores, mantendo o patogénio sob verificação enquanto as respostas adaptáveis são amadurecidas. É desencadeado dentro de minutos de infecção numa maneira independente de antigénio, respondendo aos padrões amplamente conservados nos patogénios (entretanto não é não específico, e pode distinguir entre auto e patogénios). Crucialmente, isto também gera o ambiente inflamatório e coestimulante (às vezes referido como o sinal de perigo) que potência o sistema imunitário adaptável e guia (ou polariza) as respostas celulares ou humorais mais apropriadas para combater o agente infeccioso. 0 desenvolvimento de moduladores de TLR para visamento terapêutico de imunidade inata foi passado em revista (vide Nature Medicine, 2007, 13, 552-559; Drug Discovery Today: Therapeutic Strategies, 2006, 3, 343-352 e Journal of Immunology, 2005, 174, 1259-1268). A resposta adaptável fica eficaz durante dias ou semanas, mas por fim fornece a especificidade antigénica boa requerida para eliminação completa do patogénio e a geração da memória imunológica. É principalmente mediada por células T e B que sofreram rearranjo e de linhagem germinal e são caracterizadas por especificidade e memória duradoura. Porém, isto também envolve o recrutamento de elementos do sistema imunitário inato, incluindo fagócitos profissionais (macrófagos, neutrófilos etc.) e granulócitos (basófilos, eosinófilos etc.) que engolem bactérias e até mesmo parasitas protozoários relativamente grandes. Uma vez amadurecida uma resposta imune adaptável, a exposição subsequente ao patogénio resulta na sua eliminação rápida devido às células de memória altamente especificas geradas que são rapidamente ativadas sob exposição subsequente a seu antigénio cognato.

Doenças autoimunes são definidas por (i) resposta humoral ou de autoanticorpos a um autoantigénio (a titulo de exemplo apenas, o hipertireoidismo primário de Grave com anticorpos para o recetor de TSH), ou (ii) resposta celular em que as células imunes destroem as células não imunes das quais o autoantigénio é derivado (a titulo de exemplo apenas, o tirócito (tiroidite de Hashimoto) ou célula da ilhota β pancreática (diabetes Tipo 1). Muitas doenças autoimunes são uma combinação de ambos os fenómenos, por exemplo, Hashimoto e diabetes Tipo 1 também têm autoanticorpos, antitiroide peroxidase (TPO) ou antiácido glutâmico descarboxilase (GAD)/ Célula da Ilhota. Doenças autoimunes frequentemente têm um componente inflamatório incluindo, mas não limitado a, aumento nas moléculas de adesão (a titulo de exemplo apenas, molécula de adesão de célula vascular-1 (VCAM-1), e adesão de leucócito alterada para a vasculatura tal como, a titulo de exemplo apenas, colite, lúpus sistémico, esclerose sistémica, e as complicações vasculares de diabetes.

Recetores do Tipo "Toll" (TLR) são proteínas de transmembrana do tipo I caracterizadas por um domínio de repetição rico em leucina (LRR) N-terminal, seguido por uma região rica em cisteína, um domínio de TM, e uma cauda intracelular (citoplásmica) contendo uma região conservada chamada o domínio do recetor de Toll/IL-1 (TIR) . TLR são recetores de reconhecimento de padrão (PRR) que são expressos predominantemente em células imunes incluindo, mas não limitadas a, células dendríticas, linfócitos T, macrófagos, monócitos e células assassinas naturais. 0 domínio de LLR é importante para ligação a ligandos e sinalização associada e é uma característica comum dos PRRs. 0 domínio de TIR é importante nas interações de proteína-proteína e está associado com imunidade inata. 0 domínio de TIR também une uma superfamília maior de IL-1 R/TLR que é composta de três subgrupos. Os membros do primeiro grupo possuem domínios da imunoglobina em suas regiões extracelulares e incluem recetores de IL-1 e IL-18 e proteínas auxiliares como também ST2. 0 segundo grupo abrange os TLR. 0 terceiro grupo inclui proteínas adaptadoras intracelulares importantes para a sinalização. TLR são um grupo de recetores de reconhecimento de padrão que ligam padrões moleculares associados ao patogénio (PAMP) de bactérias, fungos, protozoários e vírus, e atua como uma primeira linha de defesa contra os patogénios invasores. TLR são essenciais para induzir expressão de genes envolvidos nas respostas inflamatórias, e TLR e o sistema imunitário inato são um passo crítico no desenvolvimento de imunidade adquirida antigénio-específica.

Imunidade adaptável (humoral ou mediada por célula) está associada com o mecanismo de sinal de TLR da imunidade inata. Imunidade inata é uma resposta protetora de célula imune que funciona rapidamente para combater insultos ambientais incluindo, mas não limitados a, agentes bacterianos ou virais. Imunidade adaptável é uma resposta mais lenta que envolve diferenciação e ativação dos linfócitos T naives em tipos de células T auxiliares 1 (Thl) ou T auxiliares 2 (Th2) . Células de Thl promovem principalmente imunidade celular, enquanto que as células de Th2 promovem principalmente imunidade humoral. Embora primariamente um sistema protetor hospedeiro, a expressão patológica dos sinais de imunidade inatos que emanam da via de TLR está implicada no inicio das doenças autoimunes-inflamatórias.

Todos os TLR parecem funcionar como um homodimero ou heterodimero no reconhecimento de uns determinantes moleculares específicos, ou grupo de determinantes específicos, presentes em organismos patogénicos incluindo lipopolissacarídeos bacterianos de superfície da célula, lipoproteínas, flagelina bacteriana, DNA de bactérias e vírus e RNA viral. A resposta celular para ativação de TLR envolve ativação de um ou mais fatores de transcrição, conduzindo à produção e secreção de citocinas e moléculas coestimuladoras tais como interferões, TNF, interleucinas, MIP-1 e MCP-1 que contribuem para a eliminação e depuração da invasão patogénica. A expressão espacial de TLR é coincidente com a interface ambiental do hospedeiro. Enquanto apenas algumas outras proteínas do tipo "Toll" tenham sido clonadas em Drosophila, a família de TLR humana é composta de pelo menos 11 membros, TLRl até TLR11, que suscitam respostas biológicas sobrepostas embora distintas devido às diferenças na expressão celular e vias de sinalização que elas iniciam. Cada um dos TLR é expresso num subconjunto diferente de leucócitos e cada um dos TLR é específico em seus padrões de expressão e sensibilidades de PAMP e deteta subconjuntos diferentes de patogénios permitindo a vigilância cuidadosa pelo sistema imunitário.

Recetor do Tipo "Toll" 1 (TLRl) TLRl mapeia para o cromossoma 4pl4 e sua sequência codifica uma proteína putativa de 786 aminoácidos (aa) com 18 LRRs N-terminais e um peso molecular calculado de 84 kDa. TLRl está estritamente relacionado com TLR6 e TLR10 com 68% e 48% de identidade de sequência (aa) geral, respetivamente. 0 mRNA de TLRl é ubiquamente expresso e encontrado em níveis mais altos que os outros TLR. Das populações de leucócitos principais, TLRl é altamente expresso por meio de monócitos, mas é também expresso por macrófagos, células dendríticas, leucócitos polimorfo- nucleares, células B, T e NK. In vivo, duas transcrições de tamanho diferentes são observadas para TLRl sugerindo que o mRNA seja alternativamente submetido a splicing para gerar duas formas diferentes da proteína. In vitro, expressão do mRNA e da proteína de TLRl é suprarregulada em células monocíticas leucémicas (THP-1) sob diferenciação induzida por PMA. Expressão de TLRl é suprarregulada por meio de IL-6 autócrina, e é também elevada por IFN-γβ, IL-10, e TNF-a. Porém, o nível de TLRl não é afetado pela exposição às bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. Ex vivo, a expressão tanto dos monócitos como dos granulócitos de TLRl é infrarregulada após exposição às bactérias Gram-negativas. TLRl forma um heterodímero com TLR2. TLRl também se heterodimeriza com TLR4, que inibe a atividade de TLR4.

Recetor do Tipo "Toll" 2 (TLR2) TLR2 mapeia para o cromossoma 4q31-32 e codifica uma proteína putativa de 784 (aa) com 19 LLRs N-terminais e um peso molecular calculado de 84 kDa. TLR2 está estritamente relacionado com TLR6 com 31% de identidade de sequência (aa) geral.

Expressão de mRNA de TLR2 é observada em tecidos do cérebro, coração, pulmão, e baço e é mais alta em PBL, especificamente aqueles de origem mielomonocítica. In vivo, duas transcrições de tamanho diferentes são observadas para TLR2 sugerindo que o mRNA seja alternativamente submetido a splicing. In vitro, a expressão do mRNA e da proteína de mRNA é suprarregulada em células monocíticas leucémicas (THP-1) sob diferenciação induzida por PMA. TLR2 é suprarregulado por meio de IL-6 autócrina e TNF-a, IL-Ιβ, e IL-10. Expressão de mRNA de TLR2 é elevada após exposição às bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. TLR2 forma heterodímeros com TLR1, TLR6, e possivelmente TLR10, onde cada complexo é particularmente sensível aos subconjuntos de PAMP associados a TLR2. Complexos de TLR2 reconhecem uma gama extensiva de PAMP, principalmente de bactérias. Estes incluem, mas não são limitados a, lipoarabinomanana (LAM), lipopolissacarídeo (LPS), ácido lipotecoico (LTA), peptido-glicano (PGN), e outros glicolípidos, glicoproteínas, e lipoproteínas. Complexos de TLR2 são também capazes de detetar vírus, incluindo mas não limitados a, vírus do sarampo (MV), citomegalovírus humano (HCMV), e vírus da hepatite C (HCV) e PAMP fúngicos, incluindo mas não limitados a, zimosano. TLR2 reconhece uma variedade de lipoproteínas/lipopéptidos de vários patogénios tais como, a titulo de exemplo apenas, bactérias Gram-positivas, micobactérias, Trypanosoma cruzi, fungos e Treponema. Além disso, TLR2 reconhece preparações de LPS de não enterobactéricas tais como, a título de exemplo apenas, Leptospira interrogans, Porphyromonas gingivalis e Helicobacter pylori. Complexos de TLR2 são capazes tanto de deteção de não autopadrões como deteção de autopadrões alterados, tais como aqueles exibidos pelas células necróticas. TLR2 é recrutado para fagossomas e está envolvido na internalização de produtos microbianos por meio das células.

Recetor do Tipo "Toll" 3 (TLR3) TLR3 mapeia para o cromossoma 4q35 e sua sequência codifica uma proteína putativa de 904 (aa) com 24 LRRs N-terminais e um peso molecular calculado de 97 kDa. TLR3 está estritamente relacionado com TLR5, TLR7, e TLR8, cada com 26% de identidade de sequência (aa) geral. O mRNA de TLR3 é expresso em níveis mais altos na placenta e pâncreas. TLR3 é expresso por células dendríticas, células T e NK. In vivo, duas transcrições de tamanho diferentes são observadas para TLR3 sugerindo que o mRNA seja alternativamente submetido a splicing para gerar duas formas diferentes da proteína. In vitro, TLR3 de THP-1 diferenciado com PMA- é suprarregulado moderadamente por meio de IFN-γ autócrino, IL-Ιβ, IL-6, IL-10, e TNF-a. O mRNA de TLR3 é elevado após exposição às bactérias Gram-negativas e para uma extensão até maior em resposta às bactérias Gram-positivas. Ex vivo, a expressão de TLR3 é elevada em monócitos e granulócitos sob exposição às bactérias Gram-negativas. TLR3 forma um homodímero e reconhece RNA de cadeia dupla virai (dsRNA). Embora seja em geral assumido que TLR são expressos na superfície das células, porém aqueles TLR sensíveis aos PAMP internos, tais como dsRNA no caso de TLR3, são localizados intracelularmente no compartimento lisossomal.

Recetor do Tipo "Toll" 4 (TLR4) TLR4 mapeia para o cromossoma 9q32-33, e mostra um grau alto de similaridade a dToll na sequência inteira (aa). A sequência de TLR4 codifica uma proteína de 839 (aa) com 22 regiões de LRR N-terminais e um peso molecular calculado de 90 kDa. TLR4 está estritamente relacionado com TLRl e TLR6 cada com 25% de identidade de sequência (aa) geral.

In vivo, o mRNA de TLR4 é expresso como uma transcrição simples, e encontrado em níveis mais altos no baço e PBL. Das populações de PBL, TLR4 é expresso por células B, células dendríticas, monócitos, macrófagos, granulócitos, e células T. TLR4 é também expresso em células mielomonocí ticas e é mais alto em células mononucleares. In vitro, a expressão do mRNA e da proteína de TLR4 é suprarregulada em células de THP-1 sob diferenciação induzida por PMA. TLR4 é suprarregulado moderadamente por meio de IFN-γ autócrino, IL- 1β· Expressão do mRNA de TLR4 em células de THP-1 não é afetada por meio de exposição às bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. Ex vivo, granulócito, e monócito, a expressão de TLR4 é suprarregulada em exposição às bactérias Gram-negativas. TLR4 forma um homodímero e requer a associação extracelular de um componente adicional, MD-2. Embora complexos de TLR2 sejam capazes de reconhecer o lipopolissacarídeo (LPS), TLR4 é em geral considerado o recetor de LPS. Porém, homodímeros de TLR4 associados a MD-2 não se ligam diretamente ao LPS. LPS devem ser primeiro ligado pela proteina ligadora de LPS solúvel (LBP). LBP é depois ligado por CD14 solúvel ou ligado a GPI. Componentes adicionais dependentes do tipo celular requeridos para deteção de LPS por TLR4 incluem CXCR4, GDF-5, CD55, várias proteínas de choque térmico (HSP), e recetores de complemento (CR). 0 complexo de TLR4 também reconhece alguns outros PAMP bacterianos incluindo LTA. Ainda, o complexo de TLR4 reconhece vírus incluindo vírus sincicial respiratório (RSV), vírus da hepatite C (HCV), e vírus tumoral mamário de ratinho (MMTV). 0 complexo de TLR4 pode também reconhecer ligandos endógenos, por exemplo, proteínas de choque térmico (HSP60 e HSP70), fibrinogénio, domínio A da fibronectina, oligossacarídeo de ácido hialurónico, sulfato de heparano, proteína A de tensoativo (SP-A), e β-defensinas. TLR4 também forma heterodímeros tanto com TLR5, que intensifica sua atividade, como também com TLR1, que inibe sua atividade.

Recetor do Tipo "Toll" 5 (TLR5) TLR5 mapeia para o cromossoma lq41-42, e o gene codifica uma proteína putativa de 858 (aa) com um peso molecular calculado de 91 kDa. Está estritamente relacionado com TLR3 com 2 6% de identidade de sequências (aa) total.

In vivo, mRNA de TLR5 é expresso como uma transcrição simples em ovário, próstata, e PBL. TLR5 é expresso por meio de várias populações de PBL com a expressão mais alta encontrada em monócitos. TLR5 é também expresso no lado basolateral das células epiteliais intestinais e células endoteliais intestinais do compartimento subepitelial. In vitro, TLR5 é suprarregulado em células de THP-1 PMA-dif erenciadas por meio de IL-6 autócrina, IL-10, e TNF-α, mas é também elevado por IFN-γβ. Expressão de mRNA de TLR5 foi elevada após exposição às bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. Ex vivo, expressão de TLR5 de granulócitos e monócitos é infrarregulada sob exposição às bactérias Gram-negativas. TLR5 forma um homodimero como também um heterodimero com TLR4. Ambos os complexos funcionam para reconhecer a proteína Flagelina das bactérias flageladas. Expressão de TLR5 humano em células CHO confere resposta à flagelina, um constituinte monomérico dos flagelos bacterianos. Flagelina ativa as células epiteliais pulmonares para induzir produção de citocina inflamatória. Um polimorfismo de códon de terminação em TLR5 foi associado com suscetibilidade à pneumonia causada pela bactéria flagelada Legionella pneumophila.

Recetor do Tipo "Toll" 6 (TLR6) TLR6 mapeia para o cromossoma 4pl4, e a sequência de TLR6 codifica uma proteína de 796 (aa) contendo 20 motivos de LRR N-terminais com um peso molecular calculado de 91 kDa. TLR6 está estritamente relacionado com TLRl, TLR10, e TLR2 com 68%, 46%, e 31% de identidade de sequências (aa) total, respetivamente.

In vivo, transcrição de TLR6 é observada no timo, baço, e pulmão. Expressão de mRNA de TLR6 é mais alta em células B e monócitos. In vitro, expressão de mRNA de TLR6 é suprarregulada em células de THP-1 sob diferenciação induzida por PMA. TLR6 é suprarregulado moderadamente por meio de IFN-γ autócrino, IL-Ιβ. Porém, a expressão de mRNA de TLR6 em células de THP-1 não é afetada pela exposição às bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. Ex vivo, expressão de TLR6 de monócitos e granulócitos é infrarregulada sob exposição às bactérias Gram-negativas. TLR6 forma um heterodímero com TLR2. Como TLR1, acredita-se que TLR6 especifica ou intensificar a sensibilidade de PAMP de TLR2 e contribua para suas capacidades de sinalização por meio de heterodimerização.

Recetor do Tipo "Toll" 7 (TLR7) TLR7 mapeia para o cromossoma humano Xp22, e a sequência de TLR7 codifica uma proteína de 1049 (aa) contendo 27 LRRs N-terminais com um peso molecular calculado de 121 kDa. TLR7 está estritamente relacionado com TLR8 e TLR9 com 43% e 36% de identidade de sequências (aa) total, respetivamente.

In vivo, mRNA de TLR7 é expresso em pulmão, placenta, baço, linfonodo, e amígdala. Expressão de mRNA de TLR7 é mais alta em monócitos, células B, e células dendríticas plasmocitoide. In vitro, expressão de mRNA de TLR7 é suprarregulada em células de THP-1 sob diferenciação induzida por PMA. TLR7 é altamente suprarregulado pela exposição a IL-6 e numa extensão ligeiramente menor por meio de IFN-γ autócrino, IL-Ιβ. Expressão de mRNA de TLR7 em células de THP-1 foi elevada após exposição às bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. Ex vivo, a expressão de TLR7 foi elevada após exposição às bactérias Gram-positivas e Gram-negativas em monócitos e a um grau maior em granulócitos. TLR7 é expresso no endossoma. 0 papel de TLR7 é detetar a presença de RNA de cadeia simples "estranho" dentro de uma célula, como um meio para responder à invasão viral. TLR7 é uma proteína de modo estrutural altamente conservada que reconhece RNA de cadeia simples rico em guanosina ou em uridina (ssRNA) de vírus tal como vírus da imunodeficiência humana, vírus da estomatite vesicular e vírus influenza.

Recetor do Tipo "Toll" 8 (TLR8) TLR8 mapeia para o cromossoma Xp22, e a sequência de TLR8 codifica uma proteína de 1041 (aa) contendo 26 LRRs N-terminais com um peso molecular calculado de 120 kDa. TLR8 está estritamente relacionado com TLR7 e TLR9 com 43% e 35% de identidade de sequências (aa) total, respetivamente.

In vivo, mRNA de TLR8 é expresso em pulmão, placenta, baço, linfonodo, medula óssea, e PBL, com expressão mais alta encontrada em células de origem mieloide, tais como monócitos, granulócitos e células dendriticas mieloides. In vitro, expressão de mRNA de TLR8 é suprarregulada em células de THP-1 sob diferenciação induzida por PMA. TLR8 é altamente suprarregulado por meio de IL-Ιβ autócrino, IL-6, IL-10, e TNF-α, e é até mesmo mais intensificado por meio da exposição à IFN-γ. Expressão de mRNA de TLR8 em células de THP-1 foi elevada após exposição às bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. Ex vivo, expressão de TLR8 de monócitos aumenta enquanto a expressão de granulócitos diminui sob exposição às bactérias Gram-negativas. TLR8 é expresso no endossoma. 0 papel de TLR8 é detetar a presença de RNA de cadeia simples "estranho" dentro de uma célula, como um meio para responder a invasão viral. TLR8 é uma proteína de modo estrutural altamente conservada que reconhece RNA de cadeia simples rico em guanosina ou em uridina (ssRNA) de vírus tal como vírus da imunodeficiência humana, vírus da estomatite vesicular e vírus influenza.

Recetor do Tipo "Toll" 9 (TLR9) TLR9 mapeia para o cromossoma 3p21, e a sequência de TLR9 codifica uma proteína de 1032 (aa) contendo 27 LRRs N-terminais com um peso molecular calculado de 116 kDa. TLR9 está estritamente relacionado com TLR7 e TLR8 com 36% e 35% de identidade de sequências (aa) total, respetivamente .

In vivo, mRNA de TLR9 é expresso em baço, linfonodo, medula óssea, e PBL. Especificamente, mRNA de TLR9 é expresso aos níveis mais altos em células B e células dendríticas. In vitro, TLR9 é suprarregulado moderadamente por meio de IFN-γ autócrino, IL-Ιβ, IL-6, IL-10, e TNF-α em células de THP-1 diferenciadas em PMA. A expressão de mRNA de TLR9 em células de THP-1 não é afetada pela exposição às bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. Ex vivo, a expressão de TLR9 em monócitos e particularmente em granulócitos é infrarregulada em resposta às bactérias Gram-negativas. TLR9 forma um homodímero e reconhece DNA bacteriano não metilado. TLR9 está envolvido na resposta inflamatória para o DNA bacteriano e oligonucleótidos contendo sequências de DNA de CpG não metilado. TLR9 esta localizado internamente, talvez em compartimentos lisossómicos ou endocíticos onde mais provavelmente encontraria PAMP incluindo sequências de DNA de CpG não metilado. TLR9 é um recetor para DNA de CpG, e reconhece o DNA de CpG bacteriano e virai. DNA bacteriano e virai contém motivos de CpG não metilado que conferem sua atividade imunoestimulante. Em vertebrados, a frequência dos motivos de CpG é severamente reduzida e os resíduos de citosina dos motivos de CpG são altamente metilados, conduzindo à ab-rogação da atividade imunoestimulante. Estruturalmente, há pelo menos dois tipos de DNA de CpG: DNA de CpG do tipo B/K é um indutor potente de citocinas inflamatórias tais como IL-12 e TNF-α; DNA de CpG do tipo A/D tem uma maior habilidade para induzir produção de IFN-α de células dendriticas plasmacitoide (PDC). TLR9 está também envolvido em patogénese de distúrbios autoimunes, e pode ser importante no hipertiroidismo autoimune de Graves e produção de fator reumatoide por meio de células B autorreativas. Similarmente, a internalização pelo recetor Fc pode causar indução de PDC mediada por TLR9 de IFN-a por complexos imunes contendo IgG e cromatina, que estão implicados na patogénese de lúpus sistémico eritematoso (SLE) . TLR9 está envolvido na patogénese de várias doenças autoimunes por meio de reconhecimento da estrutura da cromatina.

Recetor do Tipo "Toll" 10 (TLR10) A sequência de TLR10 codifica uma proteína putativa de 811 (aa) com peso molecular de 95 kDa. TLR10 está estritamente relacionado com TLRl e TLR6 com 48% e 46% de identidade (aa) total, respetivamente.

In vivo, a expressão de mRNA de TLR10 é mais alta em tecidos relacionados ao sistema imunitário incluindo baço, linfonodo, timo, e amígdala. 0 mRNA de TLR10 é altamente expresso em células B e células dendriticas plasmacitoides (PDC). In vitro, TLR10 é suprarregulado moderadamente por meio de IFN-γ autócrino, IL-Ιβ, IL-6, IL-10, e TNF-α em células de THP-1 diferenciadas em PMA. Expressão de mRNA de TLRl0 em células de THP-1 foi elevada após exposição às bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. Ex vivo, expressão de TLR10 de monócitos aumenta, enquanto a expressão de granulócitos diminui sob exposição às bactérias Gram-negativas.

Recetor do Tipo "Toll" 11 (TLRll) TLRll é expresso em células epiteliais da bexiga e medeia a resistência à infecção por meio das bactérias uropatogénicas em ratinho.

Como apresentado acima, TLR2 e TLR4 reconhecem os produtos da parede de células bacterianas Gram-positivas e Gram-negativas, respetivamente; TLR5 reconhece um epítopo estrutural de flagelina bacteriana; TLR3, TLR7, TLR8, e TLR9 reconhecem as diferentes formas do ácido nucleico derivado de micróbio.

Os domínios de TIR interagem com várias moléculas de adaptador contendo domínio de TIR (MyD88), proteína de adaptador contendo domínio de TIR (TIRAP), IFN-β de indução de adaptador contendo domínio TIR (TRIF), e molécula de adaptador relacionada a TRIF (TRAM) que ativa uma cascata de eventos resultando na indução do fator de transcrição.

Vias de Sinalização de TLR. TLR estão distribuídos ao longo da célula. TLR1, TLR2, TLR3 e TLR4 são expressos na superfície da célula, enquanto que, TLR3, TLR7, TLR8 e TLR9 são expressos em compartimentos intracelulares tais como endossomas. Reconhecimento mediado por TLR3, TLR7 ou TLR9 de seus ligandos requer maturação endossómica e processamento. Quando os macrófagos, monócitos, células dendriticas ou células não imunes que se tornam células de apresentação de antigénio engolfam as bactérias por meio de fagocitose, as bactérias se degradam e o DNA de CpG é libertado nos fagossomas-lisossomas ou nos endossomas-lisossomas em que eles podem interagir com TLR9 que foi recrutado do retículo endoplásmico sob absorção não específica do DNA de CpG. Além disso, quando os vírus invadirem as células por meio de endocitose mediada por recetor, os conteúdos virais são expostos ao citoplasma por fusão da membrana viral com a membrana endossómica. Isto resulta em exposição dos ligandos de TLR tais como dsRNA, ssRNA e DNA de CpG ao TLR9 nos compartimentos fagossómicos/lisossómicos ou endossó-micos/lisossómicos.

Nas vias de sinalização a jusante do domínio de TIR, um adaptador contendo domínio de TIR, MyD88, é essencial para a indução das citocinas inflamatórias tais como TNF-α e IL-12 por meio de todos os TLR. Embora as moléculas de adaptador contendo domínio de TIR (MyD88) sejam comuns a todos os TLR, vias de sinalização de TLR individuais são divergentes e ativação de TLR específicos leva a padrões ligeiramente diferentes dos perfis de expressão génica. A título de exemplo apenas, a ativação das vias de sinalização de TLR3 e TLR4 resultou na indução dos interferões tipo I (IFN), enquanto a ativação das vias mediadas por TLR2 e TLR5 não. Porém, a ativação das vias de sinalização de TLR7, TLR8 e TLR9 também leva à indução das IFNs Tipo I, embora isso ocorra por meio de mecanismos distintos da indução mediada por TLR3/4.

Uma vez conectados, TLR iniciam uma cascata de transdução de sinal que leva à ativação de NFkB por meio do gene de resposta primária de diferenciação mieloide da proteína de adaptador 88 (MyD88) e recrutamento da cinase associada ao recetor de IL-1 (IRAK) . A via dependente de MyD88 é análoga à sinalização pelos recetores de IL-1, e é considerado que MyD88, abrigando um domínio de TIR C-terminal e um domínio de morte N-terminal, associa-se com o domínio de TIR dos TLR. Sob estimulação, MyD88 recruta IRAK-4 para TLR por meio da interação dos domínios de morte de ambas as moléculas, e facilita a fosforilação mediada por IRAK-4 de IRAK-1. Fosforilação de IRAK-1 depois leva ao recrutamento do fator associado ao recetor de TNF 6 (TRAF6), levando à ativação de duas vias de sinalização distintas. Uma via leva à ativação dos fatores de transcrição de AP-1 por meio da ativação das MAP cinases. Outra via ativa o complexo de TAK1/TAB que intensifica a atividade do complexo de IkB cinase (IKK). Uma vez ativado, o complexo de IKK leva à fosforilação e degradação subsequente do inibidor de NFkB, IkB, que leva à translocação nuclear do fator de transcrição NFkB e à iniciação da transcrição de genes cujos promotores contêm sítios de ligação de NFkB tais como citocinas. A via dependente de MyD8 8 representa um papel crucial e é essencial para a produção de citocinas inflamatórias por meio de todos os TLR. A estimulação das células de expressão de TLR8, tais como PBMCs resulta na produção de níveis altos de IL-12, IFN-γ, IL-1, TNF-a, IL-6 e outras citocinas inflamatórias. Similarmente, estimulação das células de expressão de TLR7, tais como células dendríticas plasmocitoide, resulta na produção de níveis altos de interferão-α (IFNa) e níveis baixos de citocinas inflamatórias. Desse modo, por meio da ativação de células dendríticas e outras células de apresentação de antigénio, conexão de TLR7, TLR8 ou de TLR9 e a produção de citocina são esperados ativar os diversos mecanismos de respostas imunes inatas e adquirida que levam à destruição dos patogénios, das células infetadas ou das células tumorais. Os compostos da Fórmula (I), sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isómeros dos mesmos, composições farmacêuticas, e/ou combinações aqui proporcionadas são agonistas da atividade do recetor do tipo "toll" 7, e são utilizados no tratamento de doenças e/ou distúrbios associados com tais recetores de TLR7.

Os compostos da Fórmula (I), sais farmaceuti-camente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isómeros dos mesmos, composições farmacêuticas, e/ou combinações aqui proporcionados podem ser utilizados no tratamento de doenças e/ou distúrbios das vias respiratórias incluindo, mas não limitados a, asma, asma brônquica, asma alérgica, asma intrínseca, asma extrínseca, asma induzida por exercício, asma induzida por fármaco (incluindo induzida por aspirina e NSAID) e asma induzida por pó, doença pulmonar obstrutiva crónica (COPD); bronquite, incluindo bronquite infecciosa e eosinofílica; enfisema; bronquiectasia; fibrose cística; sarcoidose; doenças do pulmão do fazendeiro e relacionadas; pneumonite de hipersensibilidade; fibrose pulmonar, incluindo alveolite fibrosante criptogénica, pneumonias intersticiais idiopá-ticas, terapia antineoplástica de complicação de fibrose e infecção crónica, incluindo tuberculose e aspergilose e outras infecções fúngicas; complicações de transplantação pulmonar; distúrbios vasculíticos e trombóticos da vasculatura pulmonar, e hipertensão pulmonar; atividade antitussiva incluindo tratamento de tosse crónica associada com condições inflamatórias e secretórias das vias aéreas, e tosse iatrogénica; rinite aguda e crónica incluindo rinite medicamentosa, e rinite vasomotora; rinite alérgica perene e sazonal incluindo rinite nervosa (febre do feno); polipose nasal; infecção virai aguda incluindo rarrefecido comum, e infecção devido ao vírus sincicial respiratório, influenza, coronavírus (incluindo SARS) e adenovirus.

Os compostos da Fórmula (I), sais farmaceu-ticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isómeros dos mesmos, composições farmacêuticas, e/ou combinações aqui proporcionados podem ser utilizados no tratamento de distúrbios dermatológicos incluindo, mas não limitados a, psoríase, dermatite atópica, dermatite de contacto ou outras dermatoses eczematosas, e reações de hipersensibilidade do tipo tardia; fito e fotodermatite; dermatite seborreica, dermatite herpetiforme, líquen plano, líquen escleroso e atrófico, pioderma gangrenoso, pele sarcoide, carcinoma de células basais, ceratose actínica, lúpus discoide eritematoso, pênfigo, penfigoide, epider-mólise bolhosa, urticária, angioedema, vasculitides, erite-mas tóxicos, eosinófilos cutâneos, alopecia areata, calvície de padrão masculino, síndrome de Sweet, síndrome de Weber-Christian, eritema multiforme; celulite, infecciosa e não infecciosa; paniculite; linfomas cutâneos, cancro de pele de não melanoma e outras lesões displásicas; distúrbios induzidos por fármaco incluindo erupções de fármaco fixas.

Os compostos da Fórmula (I), sais farmaceutica-mente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isómeros dos mesmos, composições farmacêuticas, e/ou combinações aqui proporcionadas podem ser utilizados no tratamento de doenças e/ou distúrbios oculares incluindo, mas não limitados a, blefarite; conjuntivite, incluindo conjuntivite alérgica perene e vernal; irite; uveíte anterior e posterior; coroidite; distúrbios autoimunes, degenerativos ou inflamatórios que afetam a retina; oftalmite incluindo oftalmite simpatizante; sarcoidose; infecções incluindo virai, fúngica, e bacteriana.

Os compostos da Fórmula (I), sais farmaceu- ticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isómeros dos mesmos, composições farmacêuticas, e/ou combinações aqui proporcionadas podem ser utilizados no tratamento de doenças e/ou distúrbios geniturinárias incluindo, mas não limitados a, nefrite incluindo intersticial e glomerulonefrite; sindrome nefrótica; cistite incluindo cistite aguda e crónica (intersticial) e úlcera de Hunner; uretrite aguda e crónica, prostatite, epidi-dimite, ooforite e salpingite; vulvo-vaginite; doença de Peyronie; disfunção erétil (masculina e feminina).

Os compostos da Fórmula (I), sais farmaceutica-mente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isómeros dos mesmos, composições farmacêuticas, e/ou combinações aqui proporcionadas podem ser utilizados no tratamento de rejeição de aloenxerto incluindo, mas não limitado a, aguda e crónica seguindo, por exemplo, transplantação de rim, coração, fígado, pulmão, medula óssea, pele ou córnea ou seguindo transfusão de sangue; ou doença crónica enxerto versus hospedeiro.

Os compostos da Fórmula (I), sais farmaceu-ticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isómeros dos mesmos, composições farmacêuticas, e/ou combinações aqui proporcionadas podem ser utilizados no tratamento de outros distúrbios autoimunes e alérgicos incluindo, mas não limitados a, artrite reumatoide, sin-drome de intestino irritável, lúpus sistémico eritematoso, esclerose múltipla, tiroidite de Hashimoto, doença de

Crohn, doença inflamatória do intestino (IBD), doença de Graves, doença de Addison, diabetes melito, púrpura trombocitopénica idiopática, fasciite eosinofilica, sindro-me de hiper-IgE, sindrome de antifosfolipidos e sindrome de Sazary.

Os compostos da Fórmula (I), sais farmaceuti-camente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isómeros dos mesmos, e composições farmacêuticas aqui proporcionadas podem ser utilizados no tratamento de cancro incluindo, mas não limitados a, próstata, mama, pulmão, ovariano, pancreático, intestino e cólon, estômago, pele e tumores cerebrais e malignidades que afetam a medula óssea (incluindo as leucemias) e sistemas linfoproliferativo, tais como linfoma Hodgkin e não Hodgkin; incluindo a prevenção e tratamento de doença metastática e recorrências de tumor, e sindromes paraneoplásticas. Os compostos da Fórmula (I) , sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isómeros dos mesmos, e composições farmacêuticas aqui proporcionadas podem ser úteis como moduladores da atividade do recetor do tipo "Toll", e podem ser utilizados no tratamento de neoplasias incluindo, mas não limitadas a, carcinoma de células basais, carcinoma de células escamosas, ceratose actinica, melanoma, carcinomas, sarcomas, leucemias, carcinoma de células renais, sarcoma de Kaposi, leucemia mielogenosa, leucemia linfocitica crónica e mieloma múltiplo.

Os compostos da Fórmula (I), sais farmaceu- ticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isómeros dos mesmos, composições farmacêuticas, e/ou combinações aqui proporcionadas podem ser utilizados no tratamento de doenças infecciosas incluindo, mas não limitadas a, doenças virais tais como verrugas genitais, verrugas comuns, verrugas plantares, virus sincicial respiratório (RSV), hepatite B, hepatite C, virus da

Dengue, virus do herpes simples (a titulo de exemplo apenas, HSV-I, HSV-II, CMV, ou VZV), molusco contagioso, vacinia, variola, lentivirus, virus da imunodeficiência humana (HIV), virus do papiloma humano (HPV), citome-galovírus (CMV), zóster virus de varicela (VZV), rinovirus, enterovirus, adenovirus, coronavirus (por exemplo, SARS), influenza, para-influenza, virus da caxumba, vírus do sarampo, papovavírus, hepadnavírus, flavivírus, retrovirus, arenavirus (a título de exemplo apenas, LCM, vírus de

Junin, vírus de Machupo, vírus de Guanarito e Febre de

Lassa) e filovírus (a título de exemplo apenas, vírus ebola ou vírus de Marbugo).

Os compostos da Fórmula (I), sais farmaceu-ticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isómeros dos mesmos, composições farmacêuticas, e/ou combinações aqui proporcionadas podem ser utilizados no tratamento de infecções bacterianas, fúngicas, e protozoárias incluindo, mas não limitados a, tuberculose e Micobacterium avium, lepra; Pneumocistis carinii, criptos-poridiose, histoplasmose, toxoplasmose, infecção de tri-panossoma, leishmaniase, infecções causadas por bactérias do género Escherichia, Enterobacter, Salmonella, Staphylococcus, Klebsiella, Proteus, Pseudomonas, Streptococcus, e Chlamydia, e infecções fúngicas tais como candidiase, aspergilose, histoplasmose, meningite criptocócica.

Os compostos da Fórmula (I) , sais farmaceutica-mente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isómeros dos mesmos, podem ser utilizados como potenciadores imunes. Em alguns casos, os compostos aqui proporcionados são incluidos em composições imunogénicas ou são utilizados em combinação com as composições imunogénicas. Em alguns casos, as composições imunogénicas são úteis como vacinas, e o composto está presente numa quantidade suficiente para intensificar uma resposta imune à vacina, ou a um antigénio misturado com o composto. A vacina compreende pelo menos um antigénio que pode ser um antigénio bacteriano ou um antigénio associado ao cancro, ou um antigénio virai. Em alguns casos, os compostos da Fórmula (I), sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isómeros dos mesmos, e composições farmacêuticas aqui proporcionadas são incluidos nas vacinas terapêuticas ou são utilizados em combinação com as vacinas terapêuticas. Em alguns casos, os compostos da Fórmula (I), sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isómeros dos mesmos, e composições farmacêuticas aqui proporcionadas são incluidos em vacinas profiláticas ou utilizados em combinação com as vacinas profiláticas. Em alguns casos, os compostos da Fórmula (I), sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isómeros dos mesmos, e composições farmacêuticas aqui proporcionadas são incluídos, ou são utilizados em combinação com vacinas virais terapêuticas. Em alguns casos, os compostos da Fórmula (I), sais farma-ceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isómeros dos mesmos, e composições farmacêuticas aqui proporcionadas são incluídos, ou são utilizados em combinação com as com vacinas de cancro.

Os compostos da Fórmula (I) , ou um sal farma-ceuticamente aceitável ou solvato dos mesmos aqui descritos são úteis para o tratamento de pele danificada ou envelhecida tal como cicatrizes e rugas.

Administração e Composições Farmacêuticas

Para as utilizações terapêuticas dos compostos da Fórmula (I), ou sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, N-óxidos, profármacos e isómeros dos mesmos, aqui descritos, tais compostos ou são administrados sozinhos em quantidades terapeuticamente eficazs ou como parte de uma composição farmacêutica. Consequentemente, são aqui descritas composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, sais farmaceuticamente aceitáveis e/ou solvatos dos mesmos, e um ou mais veículos, diluentes, ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Além disso, tais compostos e composições são administradas isoladamente ou em combinação com um ou mais agentes terapêuticos adicionais. 0 método de administração de tais compostos e composições inclui, mas não é limitado a, administração oral, administração retal, administração parentérica, intravenosa, administração intravitrea, administração intramuscular, inalação, administração intrana-sal, administração tópica, administração oftálmica ou administração ótica. A quantidade terapeuticamente eficaz variará, dependendo, entre outros, da doença indicada, da severidade da doença, da idade e saúde relativa do indivíduo, da potência do composto administrado, do modo de administração e do tratamento desejado. Em alguns casos, a dosagem diária de um composto da Fórmula (I), resultados satisfatórios são indicados ser obtidos sistemicamente em dosagens diárias de cerca de 0,03 a 2,5 mg/kg por peso do corpo. Em alguns casos, a dosagem diária de um composto da Fórmula (I), administrada por meio de inalação, é na gama de 0,05 microgramas por quilograma de peso do corpo (pg/kg) a 100 microgramas por quilograma de peso do corpo (pg/kg). Em alguns casos, a dosagem diária de um composto da Fórmula (I), administrado oralmente, é na gama de 0,01 microgramas por quilograma de peso do corpo (pg/kg) a 100 miligramas por quilograma de peso do corpo (mg/kg). Uma dosagem diária indicada no mamífero maior, por exemplo seres humanos, é na gama de cerca de 0,5 mg a cerca de 100 mg de um composto da Fórmula (I), convenientemente administrado, por exemplo em doses divididas até quatro vezes por dia ou em forma de libertação controlada. Em alguns casos, a forma de dosagem de unidade para administração oral compreende de cerca de 1 a 50 mg de um composto da Fórmula (I). São aqui também descritos processos para a preparação da composição farmacêutica que compreendem pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou sais farmaceuticamente aceitáveis e/ou solvatos do mesmo. Tais processos podem incluir misturar um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, e sais farmaceuticamente aceitáveis e solvatos do mesmo, com um ou mais veículos, diluentes ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Em alguns casos, as composições farmacêuticas compreendendo um composto da Fórmula (I) em forma livre ou numa forma de sal farmaceuticamente aceitável ou de solvato, em associação com pelo menos um veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável são fabricadas por métodos de mistura, granulação e/ou revestimento. Em alguns casos, tais composições opcionalmente contêm excipientes, tais como agentes preservantes, estabilizantes, umectantes ou emulsionantes, promotores de solução, sais para regular a pressão osmótica e/ou tampões. Tais composições podem ser esterilizadas.

Formas de Dosagem Orais

As composições farmacêuticas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) podem ser administradas oralmente como formas de dosagem distintas, em que tais formas de dosagem incluem, mas não são limitadas a, cápsulas, cápsulas de gelatina, comprimidos em forma de cápsulas ("caplets"), comprimidos, comprimidos mastigáveis, pós, grânulos, xaropes, xaropes aromatizados, soluções ou suspensões em líquidos aquosos ou não aquosos, espumas ou cremes comestíveis, e emulsões líquidas de óleo-em-água ou emulsões líquidas de água-em-óleo.

As cápsulas, cápsulas de gelatina, comprimidos em forma de cápsulas ("caplets"), comprimidos, comprimidos mastigáveis, pós ou grânulos, utilizados para a administração oral de pelo menos um composto da Fórmula (I) são preparados misturando pelo menos um composto da Fórmula (I) (ingrediente ativo) junto com pelo menos um excipiente utilizando técnicas de composição farmacêutica convencionais. Exemplos não limitativos de excipientes utilizados nas formas de dosagem orais aqui descritas incluem, mas não são limitados a, aglutinantes, agentes de enchimento, desintegrantes, lubrificantes, absorventes, corantes, aromas, conservantes e edulcorantes.

Exemplos não limitativos de tais aglutinantes incluem, mas não são limitados a, amido de milho, amido de batata, pasta de amido, amido pré-gelatinizado, ou outros amidos, açúcares, gelatina, gomas naturais e sintéticas tais como acácia, alginato de sódio, ácido algínico, outros alginatos, tragacanto, goma de guar, celulose e seus derivados (a título de exemplo apenas, etilcelulose, acetato de celulose, carboximetilcelulose cálcica, carboxi-metilcelulose sódica, metilcelulose, hidroxipropilmetil- celulose e celulose microcristalina) , aluminossilicato de magnésio, polivinilpirrolidona e combinações dos mesmos.

Exemplos não limitativos de tais agentes de enchimento incluem, mas não são limitados a, talco, carbonato de cálcio (por exemplo, grânulos ou pó), celulose microcristalina, celulose em pó, dextratos, caulino, manitol, ácido silicico, sorbitol, amido, amido pré-gelatinizado, e misturas dos mesmos. Em certas formas de realização, o aglutinante ou agente de enchimento nas composições farmacêuticas aqui proporcionadas está presente de cerca de 50 a cerca de 9 9 por cento em peso da composição farmacêutica ou forma de dosagem.

Exemplos não limitativos de tais desintegrantes incluem, mas não são limitados a, ágar-ágar, ácido alginico, alginato de sódio, carbonato de cálcio, carbonato de sódio, celulose microcristalina, croscarmelose sódica, crospovidona, polacrilina potássica, amidoglicolato de sódio, amido de batata ou de tapioca, amido pré-gelati-nizado, outros amidos, argila, outras alginas, outras celuloses, gomas, e combinações dos mesmos. Em alguns casos, a quantidade de desintegrante utilizado nas composições farmacêuticas aqui descritas é de cerca de 0,5 a cerca de 15 por cento em peso de desintegrante, enquanto noutros casos a quantidade é de cerca de 1 a cerca de 5 por cento em peso de desintegrante.

Exemplos não limitativos de tais lubrificantes incluem, mas não são limitados a, estearato de sódio, estearato de cálcio, estearato de magnésio, ácido esteárico, óleo mineral, óleo mineral leve, glicerina, sorbitol, manitol, polietilenoglicol, outros glicois, laurilsulfato de sódio, talco, óleo vegetal hidrogenado (a título de exemplo apenas, óleo de amendoim, óleo de semente de algodão, óleo de girassol, óleo de gergelim, azeite, óleo de milho, e óleo de soja) , estearato de zinco, oleato de sódio, oleato de etilo, laureato de etilo, ágar-ágar, sílica, um gel de silica siloide (AEROSIL 200, fabricado por W.R. Grace Co. de Baltimore, Md.), um aerossol coagulado de sílica sintética (comercializado por Degussa of Plano, Tex.), CAB-O-SIL (um produto de dióxido de silício pirogénico vendido por Cabot Co. of Boston, Massa.) e combinações dos mesmos. Em alguns casos, a quantidade de lubrificantes utilizados nas composições farmacêuticas aqui proporcionadas é numa quantidade de menos que cerca de 1 por cento em peso das composições farmacêuticas ou formas de dosagem.

Exemplos não limitativos de tais diluentes incluem, mas não são limitados a, lactose, dextrose, sacarose, manitol, sorbitol, celulose, glicina ou combinações dos mesmos.

Em alguns casos, comprimidos e cápsulas são preparados misturando uniformemente pelo menos um composto da Fórmula (I) (ingredientes ativos) com veículos líquidos, veículos sólidos finamente divididos, ou ambos, e depois configurando o produto na apresentação desejada, se necessário. Em alguns casos, os comprimidos são preparados por compressão. Em alguns casos, os comprimidos são preparados por moldagem.

Em alguns casos, pelo menos um composto da Fórmula (I) é administrado oralmente como uma forma de dosagem de libertação controlada. Tais formas de dosagem são utilizadas para proporcionar libertação lenta ou controlada de um ou mais compostos da Fórmula (I) . Libertação controlada é obtida utilizando, por exemplo, hidroxipropilmetil celulose, outras matrizes de polímero, géis, membranas permeáveis, sistemas osmóticos, revestimentos de camada, micropartículas, lipossomas, micro-esferas, ou uma combinação dos mesmos. Em certas formas de realização, formas de dosagem de libertação controlada são utilizadas para estender a atividade do composto da Fórmula (I), reduzir frequência de dosagem, e aumentar a aceitação do paciente. A administração dos compostos da Fórmula (I) como fluidos orais tais como solução, xaropes e elixires são preparados em formas dosagem unitária de modo que uma quantidade dada de solução, xaropes ou elixires contenha uma quantidade predeterminada de um composto da Fórmula (I). Xaropes são preparados dissolvendo o composto numa solução aquosa adequadamente aromatizada, enquanto elixires são preparados através da utilização de um veículo alcoólico não tóxico. Suspensões são formuladas dispersando o composto num veículo não tóxico. Exemplos não limitativos de excipientes utilizados como fluidos orais para administração oral incluem, mas não são limitados a, solubi-lizantes, emulsionantes, agentes aromatizantes, conservantes, e agentes de coloração. Exemplos não limitativos de solubilizantes e emulsionantes incluem, mas não são limitados a, água, glicois, óleos, álcoois, álcoois de isoestearilo etoxilado e éteres de sorbitol de polioxi-etileno. Exemplos não limitativos de conservantes incluem, mas não são limitados a, benzoato de sódio. Exemplos não limitativos de agentes aromatizantes incluem, mas não são limitados a, óleo de hortelã ou edulcorantes naturais ou sacarina ou outros edulcorantes artificiais.

Formas de Dosagem Parentéricas

Em alguns casos, as composições farmacêuticas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são administradas parentericamente por meio de várias vias incluindo, mas não limitadas a, subcutânea, intravenosa (incluindo injeção bólus), intramuscular, e intra-arterial.

Tais formas de dosagem parentéricas são administradas na forma de soluções injetáveis estéreis ou esterilizáveis, suspensões, produtos secos e/ou liofi-lizados prontos para serem dissolvidos ou suspensos num veículo farmaceuticamente aceitável para injeção (pós reconstituíveis) e emulsões. Veículos utilizados em tais formas de dosagem incluem, mas não são limitados a, Água para Injeção USP; veículos aquosos tais como, mas não limitados a, Injeção de Cloreto de Sódio, Injeção de Ringer, Injeção de Dextrose, Injeção de Dextrose e de Cloreto de Sódio, e Injeção de Ringer tratada com Lactato; veículos miscíveis em água tais como, mas não limitados a, álcool etílico, polietilenoglicol, e polipropilenoglicol; e veículos não aquosos tais como, mas não limitados a, óleo de milho, óleo de semente de algodão, óleo de amendoim, óleo de gergelim, oleato de etilo, miristato de isopropilo, e benzoato de benzilo.

Formas de Dosagem Transdérmicas

Em alguns casos, as composições farmacêuticas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são administradas transdermicamente. Tais formas de dosagem transdérmicas incluem emplastros "tipo de reservatório" ou "tipo de matriz" que são aplicados à pele e utilizados durante um período específico de tempo para permitir a penetração de uma quantidade desejada de um composto da Fórmula (I). A título de exemplo apenas, tais dispositivos transdérmicos são na forma de uma ligadura que compreende um membro de proteção, um reservatório contendo o composto opcionalmente com veículos, opcionalmente uma barreira de controlo da taxa para libertar o composto para a pele do hospedeiro a uma taxa controlada e predeterminada num período prolongado de tempo, e meios para deter o dispositivo à pele. Noutros casos, formulações transdérmicas de matriz são utilizadas.

Formulações para libertação transdérmica de um composto da Fórmula (I) incluem uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I), um veiculo e um diluente opcional. Um veiculo inclui, mas não é limitado a, solventes absorvíveis farmacologicamente aceitáveis para ajudar a passagem através da pele do hospedeiro, tal como água, acetona, etanol, etilenoglicol, propilenoglicol, butano- 1,3-diol, miristato de isopropilo, palmitato de isopropilo, óleo mineral, e combinações dos mesmos.

Tais sistemas de libertação transdérmica podem incluir intensificadores de penetração para ajudar a libertar um ou mais compostos da Fórmula (I) para o tecido. Tais intensificadores de penetração incluem, mas não são limitados a, acetona; vários alcoóis tais como etanol, oleila, e tetra-hidrofurilo; sulfóxidos de alquilo tais como dimetilsulfóxido; acetamida de dimetilo; formamida de dimetilo; polietilenoglicol; pirrolidonas tais como polivinilpirrolidona; classes Kollidon (Povidona, Polividona); ureia; e vários ésteres de açúcar solúveis ou insolúveis em água tais como Tween 80 (polissorbato 80) e Span 60 (monoestearato de sorbitano). O pH de uma tal composição farmacêutica transdérmica ou forma de dosagem, ou do tecido ao qual a composição farmacêutica ou forma de dosagem é aplicada, pode ser ajustado para melhorar a libertação de um ou mais compostos da Fórmula (I) . Noutros casos, a polaridade do veículo de solvente, sua resistência iónica, ou tonicidade são ajustadas para melhorar a libertação. Noutros casos, os compostos tais como estearatos são vantajosamente adicionados para alterar a hidrofilicidade ou lipofilicidade de um ou mais compostos da Fórmula (I) para melhorar a libertação. Em certos casos, tais estearatos servem como um veículo de lípido para a formulação, como um agente emulsionante ou tensoativo, e como um agente de intensificação da libertação ou intensificação da penetração. Noutros casos, sais, hidratos ou solvatos diferentes dos compostos da Fórmula (I) são utilizados para ainda ajustar as propriedades da composição resultante.

Formas de Dosagem Tópicas

Em certas casos, pelo menos um composto da Fórmula (I) é administrado por aplicação tópica da composição farmacêutica contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) na forma de loções, géis, soluções de unguentos, emulsões, suspensões ou cremes. Formulações adequadas para aplicação tópica à pele são soluções aquosas, unguentos, cremes ou géis, enquanto as formulações para administração oftálmica são soluções aquosas. Tais formulações opcionalmente contêm solubilizantes, estabilizantes, agentes de intensificação de tonicidade, tampões e conservantes .

Tais formulações tópicas incluem pelo menos um veículo, e opcionalmente pelo menos um diluente. Tais veículos e diluentes incluem, mas não são limitados a, água, acetona, etanol, etilenoglicol, propilenoglicol, butano-1,3-diol, miristato de isopropilo, palmitato de isopropilo, óleo mineral, e combinações dos mesmos.

Em certos casos, tais formulações tópicas incluem intensificadores de penetração para ajudar a libertar um ou mais compostos da Fórmula (I) ao tecido. Tais inten-sificadores de penetração incluem, mas não são limitados a, acetona; vários alcoóis tais como etanol, oleílico, e tetra-hidrofurílico; sulfóxidos de alquilo tais como dimetilsulfóxido; dimetilacetamida; dimetilformamida; polietilenoglicol; pirrolidonas tais como polivinilpirro-lidona; classes Kollidon (Povidona, Polividona); ureia; e vários ésteres de açúcar solúveis ou insolúveis em água tais como Tween 80 (polissorbato 80) e Span 60 (monoestearato de sorbitano).

Em certos casos, as composições farmacêuticas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são administradas por meio de inalação. Formas de dosagem para administração inalada são formuladas como aerossóis ou pós secos. Formulações de aerossol para administração de inalação compreendem uma solução ou suspensão fino de pelo menos um composto da Fórmula (I) num solvente aquoso ou não aquoso farmaceuticamente aceitável. Além disso, tais composições farmacêuticas opcionalmente compreendem uma base de pó tal como lactose, glicose, trealose, manitol ou amido, e opcionalmente um modificador de desempenho tal como L-leucina ou outro aminoácido, e/ou sais de metais de ácido esteárico tais como estearato de magnésio ou de cálcio.

Em certos casos, os compostos da Fórmula (I) são para ser administrados diretamente ao pulmão por meio de inalação utilizando um Inalador de Dose Medida ("MDI"), que utiliza latas que contêm um propulsor de ebulição baixa adequado por exemplo, diclorodifluorometano, tricloro- fluorometano, diclorotetrafluoroetano, dióxido de carbono ou outro gás adequado, ou um dispositivo Inalador de Pó Seco (DPI) que usa uma explosão gasosa para criar uma nuvem de pó seco dentro de um recipiente que é depois para ser inalado pelo paciente. Em certos casos, cápsulas e cartuchos de gelatina para utilização num inalador ou insuflador contendo uma mistura de pó de um composto da Fórmula são formulados (I) e uma base de pó tal como lactose ou amido. Em certos casos, os compostos da Fórmula (I) são libertados para o pulmão utilizando um dispositivo de pulverização líquido, em que tais dispositivos usam orifícios de bico extremamente pequenos para aerossolizar as formulações de fármaco líquidas que podem ser depois inaladas diretamente para o pulmão. Em outras formas de realização, os compostos da Fórmula (I) são libertados ao pulmão utilizando um dispositivo nebulizador, em que um nebulizador cria uns aerossois das formulações de fármaco líquidas utilizando energia ultrassónica para formar partículas finas que podem ser facilmente inaladas. Em outras formas de realização, os compostos da Fórmula (I) são libertados para o pulmão utilizando um dispositivo de aerossol eletro-hidrodinâmico ("EHD") em que tais dispositivos de aerossol de EHD usam energia elétrica para aerosaolizar as soluções ou suspensões de fármaco liquidas.

Em certos casos, a composição farmacêutica contendo pelo menos um composto da Fórmula (I), ou sais farmaceuticamente aceitáveis e solvatos dos mesmos, aqui descritos, também contém um ou mais intensificadores de absorção. Em certos casos, tais intensificadores de absorção incluem, mas não são limitados a, glicocolato de sódio, caprato de sódio, N-lauril-p-D-maltopiranósido, EDTA, e micelas mistas.

Em certos casos, as composições farmacêuticas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são administradas nasalmente. A forma de dosagem para administração nasal é formulada como aerossóis, soluções, gotas, géis ou pós secos.

Em certos casos, as composições farmacêuticas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são administradas retalmente na forma de supositórios, enemas, unguento, cremes espumas retais ou géis retais. Em certos casos, tais supositórios são preparados de emulsões ou suspensões graxas, manteiga de cacau ou outros glicéridos.

Em certos casos, as composições farmacêuticas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são administradas oftalmicamente como colírios. Tais formulações são soluções aquosas que opcionalmente contêm solu-bilizantes, estabilizantes, agentes de intensificação da tonicidade, tampões e conservantes.

Em certos casos, as composições farmacêuticas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são administradas oticamente como gotas de ouvido. Tais formulações são soluções aquosas que opcionalmente contêm solubilizantes, estabilizantes, agentes de intensificação da tonicidade, tampões e conservantes.

Em certos casos, as composições farmacêuticas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) são for muladas como uma preparação de depósito. Tais formulações são administradas por meio de implantação (por exemplo subcutânea ou intramuscularmente) ou por meio de injeção intramuscular. Em certas formas de realização, tais formulações incluem materiais poliméricos ou hidrofóbicos (por exemplo, como uma emulsão num óleo aceitável) ou resinas de permuta de iões, ou como derivados fracamente solúveis, por exemplo, como um sal fracamente solúvel.

As composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) podem ser adaptadas para administração oral para o tratamento de doenças e/ou distúrbios virais associados com a atividade de TLR7.

As composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) podem ser adaptadas para administração oral para o tratamento de doenças e/ou distúrbios infecciosos associados com TLR7.

As composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) podem ser adaptadas para administração oral para o tratamento de doenças e/ou distúrbios bacterianos associados com TLR7.

As composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) podem ser adaptadas para administração oral para o tratamento de doenças e/ou distúrbios fúngicos associados com TLR7.

As composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) podem ser adaptadas para administração oral para o tratamento de cancro associado com TLR7.

As composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) podem ser adaptadas para administração intravenosa para o tratamento de cancro associado com TLR7.

As composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) podem ser adaptadas para administração oral para o tratamento de doenças e/ou distúrbios de rejeição de aloenxerto associados com TLR7.

As composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) podem ser adaptadas para administração oral para o tratamento de doenças e/ou distúrbios geniturinários associados com TLR7.

As composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) podem ser adaptadas para administração como colírios para o tratamento de doenças e/ou distúrbios oftálmicos associados com TLR7.

As composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) podem ser adaptadas para administração tópica para o tratamento de doenças e/ou distúrbios dermatológicos associados com TLR7.

As composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) podem ser adaptadas para administração tópica para o tratamento de ceratose actínica. As composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) podem ser adaptadas para administração tópica como um creme para o tratamento de ceratose actínica.

As composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) podem ser adaptadas para administração tópica para o tratamento de carcinoma de células basais. As composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) podem ser adaptadas para administração tópica como um creme para o tratamento de carcinoma de células basais.

As composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da Fórmula (I) podem ser adaptadas para administração por meio de inalação para o tratamento de doenças respiratórias e/ou distúrbios associados com TLR7. A doença respiratória pode ser asma alérgica. São também aqui descritos compostos da Fórmula (I), sais farmaceuticamente aceitáveis e solvatos dos mesmos, e composições farmacêuticas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) e/ou sais farmaceuticamente aceitáveis e solvatos dos mesmos, para a utilização na ativação da atividade de TLR7, e assim é utilizado na prevenção ou tratamento de doenças e/ou distúrbios associados com atividade de TLR7. Tais compostos da Fórmula (I), sais farmaceuticamente aceitáveis e solvatos dos mesmos, e composições farmacêuticas são agonistas de TLR7. São também aqui descritos métodos para o tratamento de um indivíduo sofrendo de uma doença e/ou distúrbio associado com a atividade de TLR7, em que os métodos incluem administrar ao indivíduo uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato, ou sozinho ou como parte de uma composição farmacêutica como aqui descrita. É também aqui descrita a utilização de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, na preparação de um medicamento para o tratamento de uma doença ou distúrbio associados com atividade de TLR7.

Tratamento de Combinação

Um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, ou uma composição farmacêutica contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, pode ser administrado sozinho (sem um agente terapêutico adicional) para o tratamento de uma ou mais das doenças e/ou distúrbios associados com atividade de TLR aqui descritos.

Um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, ou uma composição farmacêutica contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, pode ser administrado em combinação com um ou mais agentes terapêuticos adicionais, para o tratamento de uma ou mais das doenças e/ou distúrbios associados com atividade de TLR7 aqui descritos.

Um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, ou uma composição farmacêutica contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, pode ser formulado em combinação com um ou mais agentes terapêuticos adicionais e administrado para o tratamento de uma ou mais das doenças e/ou distúrbios associados com atividade de TLR7 aqui descritos.

Um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, ou uma composição farmacêutica contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, pode ser administrado sequencialmente com um ou mais agentes terapêuticos adicionais, para o tratamento de uma ou mais das doenças e/ou distúrbios associados com atividade de TLR7 aqui descritos.

Os tratamentos de combinação aqui proporcionados podem incluir administração de um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, ou uma composição farmacêutica contendo um composto da Fórmula (I), antes da administração de um ou mais agentes terapêuticos adicionais, para o tratamento de uma ou mais das doenças e/ou distúrbios associados com atividade de TLR7 aqui descritos.

Os tratamentos de combinação aqui proporcionados podem incluir administração de um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, ou uma composição farmacêutica contendo um composto da Fórmula (I), subsequente à administração de um ou mais agentes terapêuticos adicionais, para o tratamento de uma ou mais das doenças e/ou distúrbios associados com atividade de TLR7 aqui descritos.

Os tratamentos de combinação aqui proporcionados podem incluir administração de um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, ou uma composição farmacêutica contendo um composto da Fórmula (I), simultaneamente com um ou mais agentes terapêuticos adicionais, para o tratamento de uma ou mais das doenças e/ou distúrbios associados com atividade de TLR7 aqui descritos.

Os tratamentos de combinação aqui proporcionados podem incluir administração de um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, ou uma composição farmacêutica contendo um composto da Fórmula (I) formulado com um ou mais agentes terapêuticos adicionais, para o tratamento de uma ou mais das doenças e/ou distúrbios associados com atividade de TLR7 aqui descritos.

Em alguns casos, os tratamentos de combinação aqui descritos, os compostos da Fórmula (I), ou uns sais farmaceuticamente aceitáveis ou solvatos dos mesmos, são agonistas da atividade de TLR7.

Em alguns casos, as terapias de combinação aqui descritas, os compostos da Fórmula (I) aqui proporcionados, ou uns sais farmaceuticamente aceitáveis ou solvatos dos mesmos, e o(s) agente(s) terapêutico(s) adicional(is) atua(m) aditivamente. Em algumas combinações das terapias de combinação aqui descritas, os compostos da Fórmula (I) aqui proporcionados, ou uns sais farmaceuticamente aceitáveis ou solvatos dos mesmos, e o(s) agente (s) terapêutico (s) adicional(is) atua(m) sinergisticamente.

Em alguns casos, um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou uns sais farmaceuticamente aceitáveis ou solvatos dos mesmos, ou uma composição farmacêutica contendo um composto da Fórmula (I), é administrado a um paciente que previamente não sofreu ou não tenha passado correntemente por tratamento com outro agente terapêutico.

Os agentes terapêuticos adicionais utilizados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a antibióticos ou agentes antibacterianos, agentes antiemé-ticos, agentes antifúngicos, agentes anti-inflamatórios, agentes antivirais, agentes imunomoduladores, citocinas, antidepressivos, hormonas, agentes de alquilação, antime-tabolitos, antibióticos antitumorais, agentes antimitó-ticos, inibidores de topoisomerase, agentes citoestáticos, agentes anti-invasão, agentes antiangiogénicos, inibidores da função do fator de crescimento, inibidores de replicação virai, inibidores de enzimas virais, agentes anticancro, α-interferões, β-interferões, ribavirina, hormonas, citocinas, e outros moduladores do recetor do tipo "Toll".

Os antibióticos ou agentes antibacterianos utilizados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, cloridrato de valganciclovir, metronidazole, uma beta-lactama, macrólidos (tais como, a titulo de exemplo apenas, azitromicinan, tobramicina (TOBI™)), cefalosporinas (tais como, a titulo de exemplo apenas, cefaclor, cefadroxil, cefalexina, cefradina, cefamandole, cefatrizina, cefazedona, cefixima, cefozopran, cefpimizole, cefuroxima, cefpiramida, cefprozil, cefpiroma, KEFLEX™, VELOSEF™, CEFTIN™, CEFZIL™, CECLOR™, SUPRAX™ e DURICEF™), um claritromicina (tal como, a titulo de exemplo apenas, claritromicina e BIAXIN™), um eritromicina (tal como, a titulo de exemplo apenas, eritromicina e EMYCIN™), ciprofloxacina, CIPRO™, uma norfloxacina (tal como, a titulo de exemplo apenas, NOROXIN™), antibióticos de ami-noglicósido (tal como, a titulo de exemplo apenas, apra-micina, arbecacina, bambermicinas, butirosina, dibecacina, neomicina, neomicina, undecilenato, netilmicina, paromo-micina, ribostamicina, sisomicina, e espectinomicina), antibióticos de anfenicol (tais como, a titulo de exemplo apenas, azidanfenicol, cloranfenicol, florfenicol e tianfenicol), antibióticos de ansamicina (tais como, a titulo de exemplo apenas, rifamida e rifampina), carba-cefenos (tais como, a titulo de exemplo apenas, loracarbef), carbapenemos (tais como, a titulo de exemplo apenas, biapenemo e imipenemo), cefamicinas (tais como, a titulo de exemplo apenas, cefbuperazona, cefmetazole e cefminox), monobactamas (tais como, a titulo de exemplo apenas, aztreonam, carumonam e tigemonam), oxacefemos (tais como, a titulo de exemplo apenas, flomoxef e moxalactama), penicilinas (tais como, a titulo de exemplo apenas, andinocilina, andinocilina pivoxil, amoxicilina, bacampi-cilina, ácido benzilpenicilínico, benzilpenicilina sódica, epicilina, fenbenicilina, floxacilina, penancilina, iodidrato de penetamato, penicilina o-benetamina, penicilina 0, penicilina V, penicilina V benzatina, penicilina V hidrabamina, penimepiciclina, fenci-hicilina potássica, V-CILLIN K™ e PEN VEE K™) , lincosamidas (tais como, a titulo de exemplo apenas, clindamicina, e lincomicina), anfomicina, bacitracina, capreomicina, colis-tina, enduracidina, enviomicina, tetraciclinas (tais como, a titulo de exemplo apenas, apiciclina, clortetraciclina, clomociclina, e demeclociclina), 2,4-diaminopirimidinas (tais como, a titulo de exemplo apenas, brodimoprim), nitrofuranos (tais como, a título de exemplo apenas, fural-tadona, e cloreto de furazólio), quinolonas e seus análogos (tais como, a titulo de exemplo apenas, uma fluoroquino-lona, ofloxacina, cinoxacina, clinafloxacina, flumequina, grepagloxacina e FLOXIN™), sulfonamidas (tais como, a titulo de exemplo apenas, sulfametoxipirazina de acetilo, benzilsulfamida, noprilsulfamida, ftalilsulfacetamida, sulfacrisoidina, e sulfacitina), sulfonas (tais como, a titulo de exemplo apenas, diatimossulfona, glucossulfona de sódio, e solassulfona), ciclosserina, mupirocina, tuberina e combinações dos mesmos.

Os agentes antieméticos utilizados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, metoclopromida, domperidona, proclorperazina, prometazina, clorpromazina, trimetobenzamida, ondansetron, granisetron, hidroxizina, monoetanolamina de acetileucina, alizaprida, azasetron, benzquinamida, bietanautina, bromoprida, buclizina, clebo-prida, ciclizina, dimenidrinato, difenidol, dolasetron, me-clizina, metalatal, metopimazina, nabilona, oxiperndil, pipamazina, escopolamina, sulpirida, tetra-hidrocanabinois, tietilperazina, tioproperazina, tropisetron, e combinações dos mesmos.

Os agentes antifúngicos utilizados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou sol-vato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, anfote-ricina B, itraconazole, cetoconazole, fluconazole, fosflu-conazole, intratecal, flucitosina, miconazole, butocona-zole, itraconazole, clotrimazole, nistatina, terconazole, tioconazole, voriconazole, ciclopirox, econazole, halopro-grina, naftifina, terbinafina, undecilenato e griseo-fulvina.

Os agentes anti-inflamatórios utilizados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, fármacos anti-inflamatórios não esteroidais tais como ácido salicilico, ácido acetilsalicilico, salicilato de metilo, diflunisal, salsalato, olsalazina, sulfasalazina, acetami-nofeno, indometacina, sulindaco, etodolaco, ácido mefenâ- mico, meclofenamato de sódio, tolmetin, cetorolaco, diclo-fenaco, ibuprofeno, naproxeno, naproxeno de sódio, fenopro-feno, cetoprofeno, flurbinprofeno, oxaprozina, piroxicam, meloxicam, ampiroxicam, droxicam, pivoxicam, tenoxicam, nabumetoma, fenilbutazona, oxifenbutazona, antipirina, ami-nopirina, apazona e nimesulida, os antagonistas de leucotrieno incluindo, mas não limitados a, zileuton, aurotioglicose, tiomalato de sódio de ouro e auranofina, esteroides incluindo, mas não limitados a, diproprionato de alclometasona, ancinonida, dipropionato de beclometasona, betametasona, benzoato de betametasona, diproprionato de betametasona, fosfato de betametasona sódica, valerato de betametasona, proprionato de clobetasol, pivalato de clocortolona, hidrocortisona, derivados de hidrocortisona, desonida, desoximatasona, dexametasona, flunisolida, flu-coxinolida, flurandrenolida, halcinocida, medrisona, metil-prednisolona, acetato de metprednisolona, succinato de metilprednisolona sódica, furoato de mometasona, acetato de parametasona, prednisolona, acetato de prednisolona, fosfato de prednisolona sódica, tebuatato de prednisolona, prednisona, triancinolona, triancinolona acetonido, diacetato de triancinolona e triancinolona hexacetonido e outros agentes anti-inflamatórios incluindo, mas não limitados a, metotrexato, colcicina, alopurinol, probenecid, talidomida ou um derivado dos mesmos, ácido 5-aminossalicílico, retinoide, ditranol ou calcipotriol, sulfinpirazona e benzbromarona.

Os agentes antivirais utilizados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, inibidores de protease, inibidores de transcriptase reversa de nucleósido/nucleótido (NRTI), inibidores de transcriptase reversa de não nucleósido (NNRTI), antagonista de CCRl, antagonistas de CCR5, e análogos de nucleósido. Os agentes antivirais incluem mas não são limitados a fomivirsen, didanosina, lamivudina, estavudina, zalcitabina, zidovu-dina, aciclovir, fanciclovir, valaciclovir, ganciclovir, gangciclovir, cidofovir, zanamivir, oseltamavir, vidara-bina, idoxuridina, trifluridina, levovirina, viramidina e ribavirina, como também foscarnet, amantadina, rimantadina, saquinavir, indinavir, nelfnavir, amprenavir, lopinavir, ritonavir, as α-interferões; β-interferões; adefovir, cle-vadina, entecavir, pleconarilo, HCV-086, EMZ702, entri- citabina, celgosivir, valopicitabina, inibidores de HCV protease, tais como BILN 2061, SCH-503034, ITMN-191 ou VX-950, inibidores de NS5B polimerase tais como NM107 (e seu profármaco NM283) , R1626, R7078, BILN1941, GSK625433, GILD9128 ou HCV-796, efavirenz, HBY-097, nevirapina, TMC-120 (dapivirina), TMC-125, BX-471, etravirina, delavirdina, DPC-083, DPC-961, capravirina, rilpivirina, 5-{[3,5-dietil-1-(2-hidroxietil)-lH-pirazol-4-il]oxi}isoftalonitrilo, GW-678248, GW-695634, MIV-150, calanolida, TAK-779, SC-351125, ancriviroc, vicriviroc, maraviroc, PRO-140, aplaviroc 40, Ono-4128, AK-602), AMD-887 CMPD-167, metilo l-endo-{8- [(3 S)-3-(acetilamino)-3-(3-fluorofenil)propil]-8-azabici-clo[3.-2.1]oct-3-il}-2-metil-4,5,6,7-tetra-hidro-lH-imida- zo[4,5-c]piridino-5-carboxilato, 3-endo-{8-[(3 S)-3-(aceta-mido)-3-(3-fluorofenil)propil]-8-azabiciclo[3.2.-l]oct-3-il}-2-metil-4,5,6,7-tetra-hidro-3H-imidazo[4,5-c]piridino-5-carboxilato de metilo, 1-endo-{8-[(3S)-3-(acetilamino)-3-(3-fluorofenil)propil]-8-azabiciclo[3.-2.1]oct-3-il}-2-metil-4,5,6,7-tetra-hidro-lH-imidazo[4,5-c]piridino-5-car-boxilato de etilo, e N-{ (IS)-3-[3-endo-(5-Isobutiril2-metil-4,5,6,7-tetra-hidro-lH-imidazo[4,-5-c]piridin-l-il)-8-azabiciclo[3.2.1]oct-8-il]-1- (3 — fluorofenil)propil}ace-tamida), BMS-806, BMS-488043, metilomida de ácido 5—{ (IS) — 2-[(2R)-4-benzoil2-metil-piperazin-l-il]-l-metil-2-oxo-etoxi}-4-metoxi-piridino-2-carboxilico e 4—{(IS)—2—[(2R)—4— benzoil-2-metil-piperazin-l-il]-l-metil-2-oxo-etoxi}-3-metoxi-N-metil-benzamida, enfuvirtide (T-20), sifuvirtide SP-01A, T1249, PRO 542, AMD-3100, CD4 solúvel, inibidores de HMG CoA reductase, atorvastatina, ácido 3-0- (3'3'-dimetilsuccinil)betúlico (de outro modo conhecido como PA-457) e aHGA.

Os agentes imunomoduladores utilizados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou sol-vato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, aza-tioprina, tacrolimo, ciclosporina metotrexato, leflunomida, corticosteroides, ciclofosfamida, ciclosporina A, ciclosporina G, micofenolato mofetil, ascomicina, rapamicina (sirolimo), FK-506, mizoribina, desoxispergualina, bre- quinar, ácido micofenólico, malononitriloamidas (tais como, a titulo de exemplo apenas, leflunamida), moduladores do recetor de célula T, e moduladores do recetor de citocina, peptidomiméticos, e anticorpos (tais como, a titulo de exemplo apenas, humanos, humanizados, quiméricos, mono-clonais, policlonais, fragmentos Fvs, ScFvs, Fab ou F(ab)2 ou fragmentos ligandos de epitopo), moléculas de ácido nucleico (tais como, a titulo de exemplo apenas, moléculas de ácido nucleico antissentido e hélices triplas), moléculas pequenas, compostos orgânicos, e compostos inorgânicos. Exemplos de moduladores do recetor célula T incluem, mas não são limitados a, anticorpos antirrecetor de célula T (tais como, a título de exemplo apenas, anticorpos anti-CD4 (tais como, a título de exemplo apenas, CM-T412 (Boehringer), IDEC-CE9.1™ (IDEC e SKB), mAB 4162W94, Orthoclone e 0KTcdr4a (Janssen-Cilag)), anticorpos anti-CD3 (tais como, a titulo de exemplo apenas, Nuvion (Product Design Labs), 0KT3 (Johnson & Johnson), ou Rituxan (IDEC)), anticorpos anti-CD5 (tais como, a titulo de exemplo apenas, um imunoconjugado ligado à ricicina anti-CD5) , anticorpos anti-CD7 (tais como, a titulo de exemplo apenas, CHH-380 (Novartis)), anticorpos anti-CD8, anticorpos monoclonais ligandos de anti-CD40 (tais como, a titulo de exemplo apenas, IDEC-131 (IDEC)), anticorpos anti-CD52 (tais como, a titulo de exemplo apenas, CAMPATH 1H (Ilex)), anticorpos anti-CD2, anticorpos anti-CDlla (tais como, a titulo de exemplo apenas, Xanelim (Genentech)), anticorpos anti-B7 (tais como, a titulo de exemplo apenas, IDEC-114 (IDEC)), CTLA4-imunoglobulina, e outros moduladores do recetor do tipo "Toll" (TLR). Exemplos de moduladores do recetor de citocina incluem, mas não são limitados a, recetores de citocina solúvel (tais como, a título de exemplo apenas, o domínio extracelular de um recetor de TNF-α ou um fragmento do mesmo, o domínio extracelular de um recetor de IL-Ιβ ou um fragmento do mesmo, e o domínio extracelular de um recetor de IL-6 ou um fragmento do mesmo), citocinas ou seus fragmentos (tais como, a título de exemplo apenas, interleucina (IL)-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-15, TNF-alfa, interferão (IFN)-a, IFN-β, IFN-γ, e GM-CSF), anticorpos do recetor de anti-citocina (tais como, a título de exemplo apenas, anticorpos do recetor de anti-IFN, anticorpos do recetor de anti-IL-2 (tais como, a título de exemplo apenas, Zenapax (Protein Design Labs)), anticorpos do recetor anti-IL-4, anticorpos do recetor anti-IL-6, anticorpos do recetor anti-IL-10, e anticorpos do recetor anti-IL-12), anticorpos anti-citocina (tais como, a título de exemplo apenas, anticorpos anti-IFN, anticorpos anti-TNF-α, anticorpos anti-IL-Ιβ, anticorpos anti-IL-6, anticorpos anti-IL-8 (tais como, a título de exemplo apenas, ABX-IL-8 (Abgenix)), e anticorpos anti-IL-12).

As citocinas ou modulador da função das citocinas utilizadas em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitadas a, interleucina-2 (IL-2), interleucina-3 (IL-3), interleucina-4 (IL-4), interleucina-5 (IL-5), interleucina-6 (IL-6), interleucina-7 (IL-7), interleucina-9 (IL-9), interleucina-10 (IL-10), interleucina-12 (IL-12), interleu- cina 15 (IL-15), interleucina 18 (IL-18), fator de crescimento derivado das plaquetas (PDGF), eritropoietina (Epo), fator de crescimento epidérmico (EGF), fator de crescimento de fibroblastos (FGF), fator estimulante de granulócitos-macrófagos (GM-CSF), fator estimulante da colónia de granulócitos (G-CSF), fator estimulante da colónia de macrófagos (M-CSF), prolactina, alfa-, beta-, e gama-interferão, interferão β-la, interferão β-lb, interferão a-1, interferão a-2a (roferon) , interferão a-2b, interferões pegilados (a titulo de exemplo apenas, peginterferão a-2a e peginterferão a-2b), intrão, PEG-intrão, Pegasys, interferão de consenso (infergene), albumina-interferão a e albuferona.

Os antidepressivos utilizados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, binedalina, caroxazona, citalopram, dimetazan, fencamina, indalpina, hidrocloreto de indeloxazina, nefopam, nomifensina, oxitriptan, oxi-pertina, paroxetina, sertralina, tiazesim, trazodona, benmoxina, iodeto de equinopsidina, etriptamina, iproclo-zida, iproniazid, isocarboxazid, mebanazina, metfendrazina, nialamida, pargilina, octamoxina, fenelzina, feniprazina, fenoxipropazina, pividrazina, safrazina, selegilina, 1-deprenilo, cotinina, roliciprina, rolipram, maprotilina, metralindol, mianserina, mirtazepina, adinazolam, amitri-ptilina, amitriptilinóxido, amoxapina, butriptilina, clomi-pramina, demexiptilina, desipramina, dibenzepina, dimeta- crina, dotiepina, doxepina, fluacizina, imipramina, N-óxido de imipramina, iprindole, lofepramina, melitraceno, meta-pramina, nortriptilina, noxiptilina, opipramol, pizotilina, propizepina, protriptilina, quinupramina, tianeptina, tri-mipramina, adrafinilo, benactizina, bupropion, butacetina, dioxadrol, duloxetina, etoperidona, febarbamato, femoxe-tina, fenpentadiol, fluoxetina, fluvoxamina, hematopor-firina, hipericina, levofacetoperano, medifoxamina, mil-nacipran, minaprina, moclobemida, nefazodona, oxaflozana, piberalina, prolintano, pirissuccideanol, ritanserina, roxindole, cloreto de rubidio, sulpirida, tandospirona, tozalinona, tofenacina, toloxatona, tranilcipromina, L-triptofano, venlafaxina, viloxazina, e zimeldina.

Em alguns casos, os antidepressivos utilizados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, são inibidores de MAO incluindo, mas não é limitados a, benmoxina, iodeto de equinopsidina, etripta-mina, iproclozida, iproniazid, isocarboxazid, mebanazina, metfendrazina, moclobamida, nialamida, pargilina, fenel-zina, feniprazina, fenoxipropazina, pividrazina, safrazina, selegilina, 1-deprenilo, toloxatona e tranilcipromina.

As hormonas utilizadas em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitadas a, hormona de libertação de hormona luteinizante (LHRH), hormona de crescimento (GH) , hormona de libertação de hormona de crescimento, ACTH, somatostatina, somatotropina, somatomedina, hormona da paratiroide, fatores de libertação hipotalâmicos, insulina, glucagon, encefalinas, vasopressina, calcitonina, heparina, heparinas de peso molecular baixo, heparinoides, timos-timulina, opioides sintéticos e naturais, hormonas estimulantes da tiroide de insulina e endorfinas.

Os agentes de alquilação utilizados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, mostardas de azoto, etileniminas, metilmelaminas, sulfona-tos de alquilo, nitrosoureias, carmustina, lomustina, triazenos, melfalano, mecloretamina, cis-platina, oxalipla-tina, carboplatina, ciclofosfamida, ifosfamida, melfalano, clorambucilo, hexametilmelaina, tiotepa, bussulfano, carmustina, estreptozocina, dacarbazina e temozolomida.

Os antimetabolitos utilizados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, citarabile, gencitabina e antifolatos tais como, a título de exemplo apenas, fluoropirimidinas (a título de exemplo apenas, 5-fluoro-uracilo e tegafur), raltitrexed, metotrexato, arabinosídeo de citosina, e hidroxiureia.

Os antibióticos antitumorais em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, antraciclinas, bleomi-cina, doxorrubicina, daunomicina, epirrubicina, idarru-bicina, mitomicina-C, dactinomicina e mitramicina.

Os agentes antimitóticos utilizados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, alcaloides de vinca (a titulo de exemplo apenas, vincristina, vin-blastina, vindesina e vinorelbina), taxoides (a titulo de exemplo apenas, taxol, paclitaxel e taxotere) e inibidores de polocinase.

Os inibidores de topoisomerase utilizados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, a titulo de exemplo apenas epipodofilotoxinas, etoposídeo e teniposideo, ansacrina, topotecano, irinotecano e campto-tecina.

Os agentes citoestáticos utilizados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, antioestro-génios (tais como, a titulo de exemplo apenas, tamoxifeno, fulvestrant, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno e iodo- xifeno), antiandrogénios (tais como, a título de exemplo apenas, bicalutamida, flutamida, nilutamida e acetato de ciproterona) , antagonistas de LHRH ou agonistas de LHRH (tais como, a título de exemplo apenas, goserrelina, leu-prorrelina, leuprolida e buserrelina), progestogénios (tais como, a título de exemplo apenas, acetato de megestrol), inibidores de aromatase (tais como, a título de exemplo apenas, como anastrozole, letrozole, vorazole e exemestano) e inibidores de 5a-reductase (tais como, a título de exemplo apenas, finasterida).

Os agentes de anti-invasão utilizados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, inibidores de família de c-Src cinase (tais como, a título de exemplo apenas, 4-(6-cloro-2,3-metilenodioxianilino)-7-[2-(4-metilpiperazin-l-il)etoxi]-5-tetra-hidropiran-4-iloxiquinazolina (AZD0530) e N-(2-cloro-6-metilfenil)-2-{6-[4-(2-hidroxietil)piperazin-l-il]-2-metilpirimidin-4-ilamino}tiazole-5-carboxamida (dasatinib, BMS-354825)), e inibidores de metaloproteinase (tais como, a título de exemplo apenas, marimastat, inibidores dos anticorpos da função do recetor do ativador de plasminogénio da urocinase para Heparanase).

Os agentes antiangiogénicos utilizados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, aqueles tais como que inibem os efeitos do fator de crescimento endotelial vascular, a titulo de exemplo apenas, anticorpo do fator de crescimento de célula endotelial antivascular bevacizumab (AVASTIN™) e inibidores da tirosina cinase do recetor de VEGF tais como 4-(4-bromo-2-fluoroanilino)-6-metoxi-7-(l-metilpiperidin-4-ilmetoxi)quinazolina (ZD6474), 4-(4-fluoro-2-metilindol-5-iloxi)-6-metoxi-7-(3-pirrolidin- 1-ilpropoxi)quinazolina (AZD2171), vatalanib (PTK787) e SUl 1248 (sunitinib), linomide, e inibidores da função de integrina ανβ3 e angiostatina.

Os inibidores da função do fator de crescimento utilizados em combinação com pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, incluem, mas não são limitados a, anticorpos do fator de crescimento e anticorpos do recetor do fator de crescimento (tais como, a titulo de exemplo apenas, o anticorpo anti-erbB2 trastu-zumab (HERCEPTIN™), o anticorpo anti-EGFR panitumumab, o anticorpo anti-erbBl cetuximab (Erbitux, C225), inibidores da tirosina cinase, tais como, a titulo de exemplo apenas, inibidores da família do fator de crescimento epidérmico (por exemplo inibidores da família da tirosina cinase de EGFR tais como, a título de exemplo apenas, N-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-metoxi-6-(3-orfolinopropoxi)quinazolin-4-amina (gefitinib, ZDl 839), N-(3-etinilfenil)-6,7-bis(2-metoxietoxi)quinazolin-4-amina (erlotinib, OSI-774) e 6-acrilamido-N-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(3-morfolinopropo- xi)-quinazolin-4-amina (Cl 1033), inibidores da tirosina cinase de erbB2 tais como, a título de exemplo apenas, lapatinib, inibidores da família do fator de crescimento de hepatócitos, inibidores da família do fator de crescimento derivado de plaquetas tais como imatinib, GLEEVEC™, inibidores das serina/treonina cinases (tais como, a título de exemplo apenas, inibidores da sinalização de Ras/Raf tais como inibidores de farnesil transferase, por exemplo sorafenib (BAY 43-9006)), inibidores de sinalização celular por meio das cinases MEK e/ou AKT, inibidores da família do fator de crescimento de hepatócitos, inibidores de c-kit, inibidores da abl cinase, recetor de IGF (fator de crescimento do tipo insulina) inibidores da cinase; inibidores da aurora cinase (por exemplo AZDl 152, PH739358, VX-680, MLv8054, R763, MP235, MP529, VX-528 E AX39459) e inibidores da cinase ciclina-dependente tais como inibidores de CDK2 e/ou de CDK4.

Em alguns casos, pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, é utilizado em combinação com agentes prejudiciais vasculares tais como, a título de exemplo apenas, Combretastatina A4.

Em alguns casos, pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, é utilizado em combinação com terapias antissentido, tais como, a título de exemplo apenas, ISIS 2503, um anti-ras antissentido.

Em alguns casos, pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, é utilizado em combinação com abordagens de terapia de gene, incluindo por exemplo abordagens para substituir genes aberrantes tais como p53 aberrante ou BRCAl ou BRCA2 aberrantes, abordagens de GDEPT (terapia de pro-fármacos de enzima direcionada para gene) tais como aquelas utilizando citosina desaminase, timidina cinase ou uma enzima de nitrorreductase bacteriana e abordagens para aumentar a tolerância do paciente à quimioterapia ou radioterapia tal como terapia de gene de resistência a multifármacos.

Em alguns casos, pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, é utilizado em combinação com abordagens de imunoterapia, incluindo por exemplo abordagens ex vivo e in vivo para aumentar a imunogeni-cidade das células tumorais do paciente, tal como trans-fecção com citocinas tais como interleucina 2, interleucina 4 ou fator estimulante da colónia de granulócitos-macrófagos, abordagens para diminuir a anergia das células T, abordagens utilizando células imunes transfectadas tais como células dendríticas transfectadas com citocina, abordagens utilizando linhagens de células tumorais transfectadas com citocina e abordagens utilizando anticorpos anti-idiotipicos.

Em alguns casos, pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, é utilizado em combinação com outros métodos de tratamento incluindo, mas não limitados a, cirurgia e radioterapia (radiação γ, radioterapia de feixe de neutrões, radioterapia de feixe de elétrons, terapia de próton, braquiterapia, e isótopos radioativos sistémicos).

Em alguns casos, os compostos da Fórmula (I) aqui proporcionados, ou sais farmaceuticamente aceitáveis e solvatos dos mesmos, são administrados ou formulados em combinação com um intensificador de absorção, incluindo, mas não limitados a, glicocolato de sódio, caprato de sódio, N-lauril-p-D-maltopiranósido, EDTA, e micelas misturadas. Em certas formas de realização, tais intensi-ficadores de absorção visam o sistema linfático.

Em alguns casos, o(s) agente (s) terapêutico(s) adicional(is) utilizado(s) nas terapias de combinação aqui descritas incluem, mas não são limitados a, agentes tais como inibidores do fator de necrose tumoral alfa (TNF-a) (tais como anticorpos monoclonais anti-TNF (a titulo de exemplo apenas, Remicade, CDP-870 e adalimumab) e moléculas da imunoglobulina do recetor de TNF (a titulo de exemplo apenas, Enbrel)); inibidores de ciclo-oxigenase não seletiva de C0X-1/C0X-2 (a titulo de exemplo apenas, piroxicam, diclofenac, ácidos propiónicos tais como napro-xeno, flubiprofeno, fenoprofeno, cetoprofeno e ibuprofeno, fenamatos tais como ácido mefenâmico, indometacina, sulin-dac, azapropazona, pirazolonas tais como fenilbutazona, salicilatos tais como aspirina), inibidores de COX-2 (a titulo de exemplo apenas, meloxicam, celecoxib, rofecoxib, valdecoxib, lumarocoxib, parecoxib e etoricoxib); glucocor-ticosteroides; metotrexato, lefunomida; hidroxicloroquina, d-penicilamina, auranofina ou outras preparações de ouro parentéricas ou orais.

Em alguns casos, as combinações aqui descritas incluem combinação de um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com um inibidor da biossintese de leucotrieno, inibidor de 5-lipoxigenase (5-LO) ou antagonista da proteína ativadora de 5-lipoxigenase (FLAP) tal como; zileuton; ABT-761; fenleuton; tepoxalina; Abbott-79175; Abbott-85761; uma N-(5-substituída)-tiofeno-2-alquilsulfonamida; 2,6-di-tert-butilfenol-hidrazonas; metoxitetra-hidropiranos tais como Zeneca ZD-2138; composto de SB-210661; um composto de 2-cianonaftaleno piridinil-substituído tal como L-739.010; um composto de 2-cianoquinolina tal como L-746,530; ou um composto de indol ou de quinolina tal como MK-591, MK-886, e BAYxl005.

Em alguns casos, as combinações aqui descritas incluem combinação de um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com antagonista de recetor para leucotrienos (LT B4, LTC4, LTD4, e LTE4) selecionado do grupo que consiste em fenotiazin-3-ilos tais como L-651.392; compostos amidino tais como CGS-25019c; benzo-xalaminas tais como ontazolast; benzenocarboximidamidas tais como BIIL 284/260; e compostos tais como zafirlucaste, ablucaste, montelucaste, SINGULAIR™, pranlucaste, verlu-caste (MK-679), RG-12525, Ro-245913, iralucaste (CGP 45715A), e BAYx7195.

Em alguns casos, as combinações aqui descritas incluem combinação de um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com um inibidor de fosfodiesterase (PDE) tal como uma metilxantanina incluindo teofilina e aminofilina; um inibidor seletivo da isoenzima de PDE incluindo um inibidor de PDE4, incluindo, mas não limitados a, cilomilaste ou roflumilaste, um inibidor da isoforma PDE4D, ou um inibidor de PDE5.

Em outras formas de realização, as combinações aqui descritas incluem combinação de um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com um antagonista de recetor de histamina tipo 1 tal como cetirizina, lorata-dina, desloratadina, fexofenadina, acrivastina, terfe-nadina, astemizol, azelastina, levocabastina, clorfe-niramina, prometazina, ciclizina, ou mizolastina.

Em alguns casos, as combinações aqui descritas incluem combinação de um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com um antagonista do recetor de histamina gastroprotetor tipo 2. Em outras formas de realização, as combinações aqui descritas incluem combinação de um composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, aqui descrito, com antagonista do recetor de histamina tipo 4.

Em alguns casos, as combinações aqui descritas incluem combinação de um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com um agente simpatomimético vasocons-tritor do agonista de adrenoceptor alfa-l/alfa-2, tal como propilexedrina, fenilefrina, fenilpropanolamina, efedrina, pseudoefedrina, cloridrato de nafazolina, cloridrato de oximetazolina, cloridrato de tetra-hidrozolina, cloridrato de xilometazolina, cloridrato de tramazolina ou cloridrato de etilnorepinefrina.

Em alguns casos, as combinações aqui descritas incluem combinação de um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com um agente anticolinérgico incluindo antagonistas do recetor muscarinico (Ml, M2, e M3) tais como atropina, hioscina, glicopirrolato, brometo de ipratrópio, brometo de tiotrópio, brometo de oxitrópio, pirenzepina ou telenzepina.

Em alguns casos, as combinações aqui descritas incluem combinação de um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com um agonista de beta-adrenoceptor (incluindo recetor beta subtipos 1-4) tal como isoprena-lina, salbutamol, albuterol, formoterol, salmeterol, terbu-talina, orciprenalina, mesilato de bitolterol, e pirbuterol.

Em alguns casos, as combinações aqui descritas incluem combinação de um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com uma cromona, tal como cromoglicato de sódio ou nedocromil de sódio.

Em outras formas de realização, as combinações aqui descritas incluem combinação de um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com um mimético do fator de crescimento do tipo insulina tipo I (IGF-I).

Em alguns casos, as combinações aqui descritas incluem combinação de um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com um glicocorticoide, tal como flunisolida, triancinolona acetonida, dipropionato de beclometasona, budesonida, propionato de fluticasona, ciclesonida ou furoato de mometasona.

Em alguns casos, as combinações aqui descritas incluem combinação de um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com um inibidor das metaloproteases de matriz (MMP), isto é, as estromelisinas, as colagenases, e as gelatinases, como também agrecanase; especialmente colagenase-1 (MMP-I), colagenase-2 (MMP-8), colagenase-3 (MMP-13), estromelisina-1 (MMP-3), estromelisina-2 (MMP-10), e estromelisina-3 (MMP-Il) e MMP-9 e MMP-12.

Em alguns casos, as combinações aqui descritas incluem combinação de um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com moduladores da função do recetor de quimocina tal como antagonistas de CCRl, CCR2, CCR2A, CCR2B, CCR3, CCR4, CCR5, CCR6, CCR7, CCR8, CCR9, CCR10 e CCRl 1 (para a família de C-C); CXCRl, CXCR2, CXCR3, CXCR4 e CXCR5 (para a família de C-X-C) e CX3CR1 para a família de C-X3-C.

Em alguns casos, as combinações aqui descritas incluem combinação de um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, com uma imunoglobulina (Ig), globulina gama, preparação de Ig ou antagonista ou anticorpo que modulam a função de Ig tal como anti-IgE (omalizumab).

Compostos de Fórmula (I) como Potenciadores Imunes

Em alguns casos, as composições farmacêuticas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, são composições imunogénicas. Tais composições imunogénicas podem ser úteis como vacinas. Tais vacinas podem ser profiláticas (isto é, para impedir infecção), enquanto noutros casoss, tais vacinas são terapêuticas (i.e., para tratar infecção).

Noutros casos, o(s) composto(s) da Fórmula (I) fornecido(s) aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, são potenciadores imunes e dão um efeito imunoestimulante sob administração quando comparado às formulações imunogénicas que não contêm nenhum composto da Fórmula (I) . Em alguns casos, os compostos da Fórmula (I) dão um efeito imunoestimulante sob administração quando inclusos numa composição imunogénica que tem um ou mais agentes imunorreguladores, enquanto noutros casos, os compostos da Fórmula (I) dão um efeito imunoestimulante sob administração quando inclusos numa composição imunogénica sem a presença de outros agentes imunorreguladores. 0 efeito imunoestimulante referido aqui é frequentemente uma intensificação do efeito da composição imunogénica. Em certos casos a intensificação da eficácia da composição imunogénica é por pelo menos 10% com relação ao efeito da composição imunogénica na ausência do potenciador imune. Em certos casos a intensificação da eficácia da composição imunogénica é por pelo menos 20% com relação ao efeito da composição imunogénica na ausência do potenciador imune. Em certos casos a intensificação da eficácia da composição imunogénica é por pelo menos 30% com relação ao efeito da composição imunogénica na ausência do potenciador imune. Em certos casos a intensificação da eficácia da composição imunogénica é por pelo menos 40% com relação ao efeito da composição imunogénica na ausência do potenciador imune. Em certos casos a intensificação da eficácia da composição imunogénica é por pelo menos 50% com relação ao efeito da composição imunogénica na ausência do potenciador imune. Em certos casos a intensificação da eficácia da composição imunogénica é por pelo menos 60% com relação ao efeito da composição imunogénica na ausência do potenciador imune. Em certos casos a intensificação da eficácia da composição imunogénica é por pelo menos 70% com relação ao efeito da composição imunogénica na ausência do potenciador imune. Em certos casos a intensificação da eficácia da composição imunogénica é por pelo menos 80% com relação ao efeito da composição imunogénica na ausência do potenciador imune. Em certos casos a intensificação da eficácia da composição imunogénica é por pelo menos 90% com relação ao efeito da composição imunogénica na ausência do potenciador imune. Em certos casos a intensificação da eficácia da composição imunogénica é por pelo menos 100% com relação ao efeito da composição imunogénica na ausência do potenciador imune.

Em certos casos, a intensificação do efeito da composição imunogénica é medida pela eficácia aumentada da composição imunogénica para alcançar seus efeitos protetores. Em certos casos, esta eficácia aumentada é medida como uma probabilidade diminuída que um indivíduo recebendo a composição imunogénica sofrerá de uma condição para a qual a composição imunogénica é considerada protetora, ou uma diminuição na duração ou severidade dos efeitos de tal condição. Em certos casos, esta eficácia aumentada é medida como um aumento numa titulação de um anticorpo suscitado pela composição imunogénica num indivíduo tratado.

Junto com um ou mais compostos da Fórmula (I) aqui proporcionados, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato dos mesmos, tais composições imunogénicas incluem uma quantidade eficaz de um ou mais antigénios, e um veículo farmaceuticamente aceitável. Tais veículos incluem, mas não são limitados a, proteínas, polissaca-rídeos, ácidos polilácticos, ácidos poliglicólicos, aminoácidos poliméricos, copolímeros de aminoácido, sacarose, trealose, lactose, agregados de lípido (tais como gotículas de óleo ou lipossomas), e partículas de vírus inativas. As composições imunogénicas tipicamente também contêm diluentes, tais como água, solução salina, e glicerol, e opcionalmente contêm outros excipientes, tais como agentes intumescentes ou emulsionantes, e substâncias de tamponação de pH.

As composições imunogénicas opcionalmente incluem um ou mais agentes imunorreguladores. Em certos casos, um ou mais dos agentes imunorreguladores incluem um ou mais adjuvantes. Tais adjuvantes incluem, mas não são limitados a, um adjuvante de ThI e/ou um adjuvante de TH2, ainda debatidos abaixo. Os adjuvantes utilizados nas composições imunogénicas aqui proporcionadas podem incluir, mas não são limitados a: A. Composições contendo minerais; B. Emulsões em óleo; C. Formulações de saponina; D. Virossomas e partículas do tipo vírus; E. Derivados bacterianos ou microbianos; F. Imunomoduladores humanos; G. Bioadesivos e mucoadesivos; H. Micropartícuias; I. Lipossomas; J. Formulações de éter de polioxietileno e éster de polioxietileno; K. Polifosfazeno (PCPP); L. Muramilpéptidos, e M. Compostos imidazoquinolona.

Composições contendo minerais adequadas para a utilização como adjuvantes incluem, mas não são limitadas a, sais minerais, tais como sais de alumínio e sais de cálcio. A título de exemplo apenas, tais sais minerais incluem, hidróxidos (e.g. oxi-hidróxidos, incluindo hidróxidos de alumínio e oxi-hidróxidos de alumínio), fosfato (e.g. hidroxifosfatos e ortofosfatos, incluindo fosfato de alumínio, hidroxifosfatos de alumínio, ortofosfatos de alumínio e fosfato de cálcio), sulfatos (e.g. sulfato de alumínio), ou misturas de diferentes compostos minerais. Tais sais minerais são em qualquer forma adequada, tal como, a título de exemplo apenas, gel, formas cristalinas, e amorfas. Tais composições contendo minerais podem ser formuladas como uma partícula do sal de metal. Em certos casos, componentes das composições imunogénicas aqui descritas são adsorvidos em tais sais minerais. Em certos casos, um adjuvante de hidróxido de alumínio e/ou de fosfato de alumínio é utilizado nas composições imunogénicas aqui descritas. Noutros casos, antigénios utilizados numa composição imunogénica aqui descrita são adsorvidos em tais adjuvantes de hidróxido de alumínio e/ou de fosfato de alumínio. Em alguns casos, um adjuvante de fosfato de cálcio é utilizado nas composições imunogénicas aqui descritas. Noutros casos, os antigénios utilizados numa composição imunogénica aqui descrita são adsorvidos em tais adjuvantes de fosfato de cálcio.

Os fosfatos de alumínio pode ser utilizado como um adjuvante nas composições imunogénicas aqui descritas. 0 fosfato de alumínio pode ser utilizado como um adjuvante nas composições imunogénicas aqui descritas, em que tais composições incluem um antigénio de sacarídeo de H. influenzae. Em alguns casos, o adjuvante é hidroxifosfato de alumínio amorfo com uma razão molar de PO4/AI entre 0,84 e 0,92, incluído em 0,6 mg de Al3+/ml. Em alguns casos, adsorção com uma baixa dose de fosfato de alumínio é utilizada, a título de exemplo apenas, entre 50 e 100 pg de Al3+ por conjugado por dose. Onde houver mais de um conjugado numa composição, nem todos os conjugados necessitam ser adsorvidos.

Emulsões em óleo adequadas para utilização como adjuvantes incluem, mas não são limitados a, emulsões de esqualeno-água (tais como MF59 (5% de Esqualeno, 0,5% de Tween 80, e 0,5% de Span 85, formulados em partículas submicrónicas utilizando um microfluidizador), adjuvante de Freund Completo (CFA) e adjuvante de Freund incompleto (IFA).

Saponinas são um grupo heterólogo de glicósidos de esterol e glicósidos de triterpenoide que são encontrados na casca, folhas, talos, raízes e até mesmo flores de uma gama extensiva de espécies de planta. Formulações de saponina adequadas para a utilização como adjuvantes incluem, mas não são limitadas a, saponinas da casca da árvore de Quillaia saponaria, de Smilax ornata (salsaparrilha), Gypsophilla paniculata (véu-de-noiva), e Saponaria officianalis (saponária). Formulações de saponina adequadas para a utilização como adjuvantes podem incluir, mas não são limitadas a, formulações purificadas incluindo, mas não se limitam a, QS7, QS17, QS18, QS21, QH-A QH-B e QH-C. QS21 é comercializado como STIMULOM™. Formulações de saponina podem incluir esterois, colesteróis e formulações lipídicas, tais como partículas únicas formadas pelas combinações das saponinas e dos colesteróis chamadas complexos imunoestimulante (ISCOM). Os ISCOMs também podem incluir um fosfolípido tal como fosfatidiletanolamina ou fosfatidilcolina. Qualquer saponina conhecida pode ser utilizada em ISCOMs. Por exemplo, o ISCOM pode incluir uma ou mais de QuilA, QHA & QHC. Em alguns casos, os ISCOMS são opcionalmente destituídos de um detergente adicional.

Virossomas e partículas semelhantes a vírus (VLP) adequadas para a utilização como adjuvantes incluem, mas não são limitados a, uma ou mais proteínas de um vírus opcionalmente combinado ou formulado com um fosfolípido. Tais virossomas e VLPs são em geral não patogénicos, não replicativos e em geral não contêm nada do genoma virai nativo. Em alguns casos, as proteínas virais são recombinantemente produzidas, enquanto noutros cases as proteínas virais são isoladas do vírus inteiro.

As proteínas virais adequadas para a utilização em virossomas ou VLPs incluem, mas não são limitadas a, proteínas derivadas do vírus da gripe (tais como HA ou NA), vírus da hepatite B (tais como proteína de núcleo ou de cápside), vírus da hepatite E, vírus do sarampo, vírus de Sindbis, rotavirus, vírus da febre aftosa, retrovirus, vírus de Norwalk, vírus do papiloma humano, HIV, RNA-fagos, Οβ-fago (tais como proteínas de revestimento), GA-fago, fr-fago, fago AP205, e Ty (tais como proteína pl de retro-transposão Ty).

Derivados bacterianos ou microbianos adequados para a utilização como adjuvantes incluem, mas não são limitados a, derivados bacterianos ou microbianos tais como derivados não tóxicos de lipopolissacarideo enterobac-teriano (LPS), derivados de Lípido A, oligonucleótidos imunoestimulantes e toxinas de ribosilação de PAD e derivados desintoxicados dos mesmos. Tais derivados não tóxicos de LPS incluem, mas não são limitados a, monofosforil-lipido A (MPL) e MPL 3-0-desacilado (3dMPL). 3dMPL é uma mistura de lipido A de monofosforilo de 3 des-O-acilado com 4, 5 ou 6 cadeias aciladas. Outros derivados de LPS não tóxicos incluem miméticos de monofosforil-lipido A de, tais como derivados de fosfato de aminoalquil-glucosaminida (por exemplo RC-529). Derivados de lipido A incluem, mas não são limitados a, derivados de lipido A de Escherichia coli (por exemplo OM-174).

Oligonucleótidos imunoestimulantes utilizados como adjuvantes incluem, mas não são limitados a, sequências de nucleótido contendo um motivo de CpG (uma sequência de dinucleótido contendo uma citosina não metiloda ligada por uma ligação de fosfato a uma guanosina) . Tais sequências de CpG podem ser bifilamentadas ou unifilamentadas. Em alguns casos, tais sequências de nucleótido são RNA de cadeia dupla ou oligonucleótidos contendo sequências palin-drómicas ou poli(dG). Em alguns casos, os CpG incluem modificações/análogos de nucleótido tais como modificações fosforotioato.

Em alguns casos, a sequência de CpG é direcionada para TLR9, e em alguns casos o motivo é GTCGTT ou TTCGTT. Em alguns casos, a sequência de CpG é especifica para induzir uma resposta imune de Thl, tal como, a titulo de exemplo apenas, um de CpG-A ODN, ou noutros casos, a sequência de CpG é mais específica para induzir uma resposta de células B, tal como, a título de exemplo apenas, um CpG-B ODN. Em alguns casos, o CpG é um CpG-A ODN.

Em alguns casos, o oligonucleótido de CpG é construído de modo que a terminação 5' seja acessível para reconhecimento do recetor. Noutros casos, duas sequências de oligonucleótido de CpG são opcionalmente ligadas às suas terminações de 3' para formar "imunómeros".

Um adjuvante particularmente útil com base nos oligonucleótidos imunoestimulantes é conhecido como IC-31™. Em alguns casos, um adjuvante utilizado com as composições imunogénicas aqui descritas inclui uma mistura de (I) um oligonucleótido (tal como, a titulo de exemplo apenas, entre 15-40 nucleótidos) incluindo pelo menos um motivo (e preferivelmente múltiplos) de Cpl (tal como, a título de exemplo apenas, uma citosina ligada a uma inosina para formar um dinucleótido), e (ii) um polímero policatiónico, tal como, a título de exemplo apenas, um oligopéptido (tal como, a título de exemplo apenas, entre 5-20 aminoácidos) incluindo pelo menos uma(s) (e preferivelmente múltiplas) sequência(s) de tripéptido de Lys-Arg-Lys. Em alguns casos, o oligonucleótido é um desoxinucleótido que compreende sequência de 26 meros de 5'- (IC)13-3'. Em alguns casos, o polímero policatiónico é um péptido que compreende a sequência de aminoácidos de 11 meros KLKLLLLLKLK.

Em alguns casos, toxinas bacterianas ribosilação de PAD e seus derivados desintoxicados são utilizados como adjuvantes nas composições imunogénicas aqui descritas. Em alguns casos, tais proteínas são derivadas de E. coli (enterotoxina termoinstável de E. coli "LT"), cólera ("CT"), ou coqueluche ("PT"). Em alguns casos, a toxina ou toxoide é na forma de uma holotoxina, compreendendo ambos as subunidades A e B. Em alguns casos, a subunidade A contém uma mutação desintoxicante; enquanto que a subunidade B não é mutada. Em outras formas de realização, o adjuvante é uma LT desintoxicada mutante tal como LT-K63, LT-R72, e LT-G192.

Os imunomoduladores humanos adequados para a utilização como adjuvantes incluem, mas não são limitados a, citocinas, tais como, a titulo de exemplo apenas, interleucinas (IL-1, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-12), interferões (tais como, a titulo de exemplo apenas, inter-ferão-γ) , fator estimulante da colónia de macrófagos, e fator de necrose tumoral.

Os bioadesivos e mucoadesivos utilizados como adjuvantes nas composições imunogénicas aqui descritas incluem, mas não são limitados a, microesferas de ácido hialurónico esterefiçado, e derivados de poli(ácido acrílico) reticulados, poli(álcool vinílico), polivinilpirro-lidona, polissacarídeos e carboximetilcelulose. Em alguns casos, o quitosano e seus derivados são utilizados nas composições de vacina aqui descritas como adjuvantes.

As micropartícuias adequadas para a utilização como adjuvantes incluem, mas não são limitadas a, micropartícuias formadas de materiais que são biodegradáveis e não tóxicos (e.g. um poli(hidroxi ácido alfa), um poli (ácido hidroxibutírico) , um poliortoéster, um polianidreto, uma policaprolactona, etc.), com poli(lacti-do-co-glicolido). Em alguns casos, tais micropartículas são tratadas para ter uma superfície negativamente carregada (e.g., com SDS) ou uma superfície positivamente carregada (e.g. com um detergente catiónico, tal como CTAB) . As micropartículas adequadas para a utilização como adjuvantes têm um diâmetro de partícula de cerca de 100 nm a cerca de 150 pm em diâmetro. Em alguns casos, o diâmetro de partícula é cerca de 200 nm a cerca de 30 pm, e noutros casos o diâmetro de partícula é cerca de 500 nm a 10 pm.

As formulações de éter de polioxietileno e éster de polioxietileno adequadas para a utilização como adjuvantes incluem, mas não são limitadas a, tensoativos éster de polioxietilenossorbitano em combinação com um octoxinol, e éteres de polioxietileno alquilo ou tensoativos de éster em combinação com pelo menos um tensoativo não iónico adicional tal como um octoxinol. Em certas formas de realização, os éteres de polioxietileno são selecionados a partir de éter polioxietileno-9-laurílico (laurete 9) , éter polioxietileno-9-estearílico, éter polioxietileno-8-estearílico, éter polioxietileno-4-laurílico, éter polioxietileno-35-laurílico, e éter polioxietileno-23-laurílico.

Os muramilpéptidos adequados para a utilização como adjuvantes incluem, mas não são limitados a, N-acetil-muramil-L-treonil-D-isoglutamina (thr-MDP), N-acetilnormu-ramil-L-alanil-D-isoglutamina (nor-MDP), e N-acetilmuramil-L-alanil-D-isoglutaminil-L-alanina-2-(1'-2'-dipalmitoils-n-glicero-3-hidroxifosforiloxi)-etilamina MTP-PE).

Em alguns casos, um ou mais compostos da Fórmula (I) utilizados como um potenciador imune são incluídos nas composições que têm as combinações de um ou mais dos adjuvantes identificados acima. Tais combinações incluem, mas não são limitadas a: (1) uma saponina e uma emulsão de óleo-em-água; (2) uma saponina (por exemplo QS21) + um derivado de LPS não tóxico (por exemplo 3dMPL); (3) uma saponina (por exemplo QS21) + um derivado de LPS não tóxico (por exemplo 3dMPL) + um colesterol; (4) uma saponina (por exemplo QS21) + 3dMPTL + IL-12 (opcionalmente incluindo um esterol); (5) combinações de 3dMPL com, por exemplo, QS21 e/ou emulsões de óleo-em-água; (6) SAF, contendo 10% de esqualano, 0,4% de Tween 80™, 5% de plurónico-polímero bloco L121, e thr-MDP, ou microfluidizado numa emulsão de submicron ou submetido a vórtice para gerar uma emulsão de tamanho de partícula maior. (7) sistema de adjuvante de RIBI™ (RAS), (Ribi Immunochem) contendo 2% de esqualeno, 0,2% de Tween 80, e um ou mais componentes da parede das células bacte-rianas do grupo que consiste em monofosforilípido A (MPL), dimicolato de trealose (TDM), e esqueleto da parede celular (CWS), preferivelmente MPL+CWS (Detox™); e (8) um ou mais sais minerais (tais como um sal de alumínio) + um derivado não tóxico de LPS (tal como 3dMPL).

Noutros casos, as combinações de adjuvante utilizadas nas combinações imunogénicas aqui proporcionadas incluem combinações dos adjuvantes Thl e Th2 tais como, a título de exemplo apenas, CpG e alum ou resiquimod e alum.

Em alguns casos, as composições imunogénicas aqui proporcionadas suscitam tanto uma resposta imune mediada por células como também uma resposta imune humoral. Noutros casos, a resposta imune induz anticorpos de longa duração (por exemplo neutralisando) e uma imunidade mediada por célula que rapidamente responde sob exposição ao agente infeccioso.

Dois tipos de células T, células CD4 e CD8, são em geral acreditadas ser necessárias para iniciar e/ou intensificar imunidade mediada por células e imunidade humoral. Células T de CD8 podem expressar um correcetor de CD8 e podem ser comummente referidas como Linfócitos T Citotóxicos (CTL) . Células T de CD8 são capazes de reconhecer ou interagir com antigénios exibidos nas moléculas de MHC da Classe I. Células T de CD4 podem expressar um correcetor de CD4 e podem ser comummente referidas como células T auxiliares. Células T de CD4 podem reconhecer péptidos antigénicos ligados às moléculas de MHC da classe II. Sob interação com uma molécula de MHC da classe II, as células de CD4 podem segregar fatores tais como citocinas. Estas citocinas segregadas podem ativar as células B, células T citotóxicas, macrófagos, e outras células que participam numa resposta imune. Células T auxiliares ou células de CD4+ podem ser ainda divididas em dois subconjuntos funcionalmente distintos: fenótipo de TH1 e fenótipos de TH2 que diferem em sua citocina e função efetora. Células de THl ativadas intensificam a imunidade celular (incluindo um aumento na produção de CTL antigénio-específica) e são portanto de valor particular em responder às infecções intracelulares. Células de THl ativadas podem segregar uma ou mais de IL-2, IFN-γ, e TNF-β. Uma resposta imune de THl pode resultar em reações inflamatórias locais ativando os macrófagos, células NK (assassinas naturais), e células T citotóxicas de CD8 (CTL) . Uma resposta imune de TH1 pode também agir para expandir a resposta imune estimulando o crescimento das células B e T com IL-12. Células B estimuladas com THl podem segregar IgG2a. Células de TH2 ativadas intensificam a produção de anticorpo e são portanto de valor em responder às infecções extracelulares. Células de TH2 ativadas podem segregar uma ou mais de IL-4, IL-5, IL-6, e IL-10. Uma resposta imune de TH2 que pode resultar na produção de IgGl, IgE, IgA e células B de memória para proteção futura. Uma resposta imune intensificada pode incluir um ou mais de uma resposta imune de THl e uma resposta imune de TH2 intensificadas.

Uma resposta imune de THl pode incluir um ou mais de um aumento em CTLs, um aumento numa ou mais das citocinas associadas com uma resposta imune de THl (tais como IL-2, IFN-γ, e TNF-β) , um aumento em macrófagos ativados, um aumento na atividade de NK, ou um aumento na produção de IgG2a. Preferivelmente, a resposta imune de THl intensificada incluirá um aumento na produção de IgG2a.

Adjuvantes de THl podem ser utilizados para suscitar uma resposta imune de THl. Um adjuvante de THl em geral suscitará níveis aumentados de produção de IgG2a com relação à imunização do antigénio sem adjuvante. Adjuvantes de THl adequados para a utilização nas composições imuno-génicas aqui proporcionadas incluem, mas não são limitados a, formulações de saponina, virossomas e partículas semelhantes a vírus, derivados não tóxicos de lipopolis-sacarídeo enterobacteriano (LPS), oligonucleótidos imuno-estimulantes. Em alguns casos, os oligonucleótidos imunoes-timulantes utilizados como adjuvantes de THl nas composições imunogénicas aqui proporcionadas contêm um motivo de CpG.

Uma resposta imune de TH2 pode incluir um ou mais de um aumento num ou mais das citocinas associadas com uma resposta imune de TH2 (tais como IL-4, IL-5, IL-6 e IL-10), ou um aumento na produção de IgGl, IgE, IgA e células B de memória. Preferivelmente, a resposta imune de TH2 intensificada incluirá um aumento na produção de IgGl.

Os adjuvantes de TH2 podem ser utilizados para suscitar uma resposta imune de TH2. Um adjuvante de TH2 em geral suscitará níveis aumentados de produção de IgGl com relação à imunização do antigénio sem adjuvante. Adjuvantes de TH2 adequados para a utilização nas composições imunogénicas aqui proporcionadas incluem, mas não são limitados a, composições contendo minerais, emulsões de óleo, e toxinas ribosilantes de PAD e seus derivados desintoxicados. Em certas formas de realização, as composições contendo minerais utilizadas como adjuvantes de TH2 nas composições imunogénicas aqui proporcionadas são sais de alumínio.

Em alguns casos, as composições imunogénicas aqui proporcionadas incluem um adjuvante de TH1 e um adjuvante de TH2. Noutros casos, tais composições suscitam uma resposta de THl intensificada e uma de TH2 intensificada, tal como, um aumento na produção de IgGl e produção de IgG2a com relação à imunização sem um adjuvante. Ainda noutros casos, tais composições compreendendo uma combinação de um adjuvante de THl e um de TH2 suscitam uma resposta imune de THl aumentada e/ou uma de TH2 aumentada com relação à imunização com um adjuvante só (isto é, com relação à imunização com um adjuvante de THl sozinho ou imunização com um adjuvante de TH2 sozinho).

Em certos casos, a resposta imune é uma ou ambos de uma resposta imune de THl e uma resposta de TH2. A resposta imune pode proporcionar uma ou ambas de uma resposta de THl intensificada e uma resposta de TH2 intensificada. A resposta imune intensificada pode ser uma ou ambas de uma resposta sistémica e uma imune mucosa. A resposta imune pode proporcionar uma ou ambas de uma resposta sistémica intensificada e uma imune mucosa intensificada. A resposta imune mucosa pode ser uma resposta imune de TH2. A resposta imune mucosa pode incluir um aumento na produção de IgA.

Em alguns casos, as composições imunogénicas aqui proporcionadas são utilizadas como vacinas, em que tais composições incluem uma quantidade imunologicamente eficaz de um ou mais antigénios.

Antigénios para a utilização nas composições imunogénicas aqui proporcionadas podem ser fornecidos numa quantidade eficaz (por exemplo, uma quantidade eficaz para a utilização em métodos terapêuticos, profiláticos ou diagnósticos). Por exemplo, as composições imunogénicas da invenção podem ser utilizadas para tratar ou impedir infecções causadas por quaisquer dos patogénios abaixo listados.

Antigénios para a utilização nas composições imunogénicas aqui proporcionadas são tipicamente macromo-léculas (por exemplo, polipéptidos, polissacarídeos, poli-nucleótidos) que são estranhas ao hospedeiro, e incluem, mas não são limitados a, um ou mais dos antigénios expostos abaixo, ou antigénios derivado de um ou mais dos patogénios expostos abaixo.

Antigénios Bacterianos

Antigénios bacterianos adequados para utilização nas composições imunogénicas aqui proporcionadas incluem, mas não são limitados a, proteínas, polissacarídeos, lipopolissacarídeos, polinucleótidos, e vesículas de membrana externa que são isoladas, purificadas ou derivadas de uma bactéria. Os antigénios bacterianos podem incluir lisados bacterianos e formulações de bactéria inativadas. Os antigénios bacterianos podem ser produzidos por meio de expressão recombinante. Os antigénios bacterianos podem incluir epitopos durante que ficam expostos na superfície das bactérias durante pelo menos um estágio de seu ciclo de vida. Antigénios bacterianos são preferivelmente conservados ao longo de serotipos múltiplos. Os antigénios bacterianos podem incluir antigénios derivados de uma ou mais das bactérias expostas abaixo como também os exemplos de antigénios específicos identificados abaixo:

Neisseria meningitidis: antigénios de meningitidis incluem, mas não são limitados a, proteínas, sacarideos (incluindo um polissacarideo, oligossacarideo, lipo-oligossacarídeo ou lipopolissacarideo), ou vesículas de membrana externa purificada ou derivada do serogrupo de N. meningitides tais como A, C, W135, Y, X e/ou B. Por exemplo, antigénios de proteína de meningitides podem ser selecionados a partir de adesões, autotrans-portadores, toxinas, aquisição proteínas de Fe, e proteínas associadas à membrana (preferivelmente proteína de membrana externa integral).

Streptococcus pneumoniae: antigénios de Streptococcus pneumoniae incluem, mas não são limitados a, um sacarídeo (incluindo um polissacarideo ou um oligossacarideo) e/ou proteína de Streptococcus pneumoniae. 0 sacarídeo pode ser um polissacarideo que tem o tamanho que surge durante a purificação do sacarídeo das bactérias, ou pode ser um oligossacarideo alcançado por fragmentação de um tal polissacarideo. No produto de PREVNAR™ 7-valente, por exemplo, 6 dos sacarideos são apresentados como polissacarídeos intactos enquanto um (o serotipo de 18C) é apresentado como um oligos-sacarídeo. por exemplo, os antigénios de sacarídeo podem ser selecionados a partir de um ou mais dos serotipos pneumocócicos seguintes 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6B, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 19A, 19F, 20, 22F, 23F, e/ou 33F. Uma composição imunogénica pode incluir serotipos múltiplos por exemplo 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 ou mais serotipos. Combinações de conjugado 7-valentes, 9-valentes, 10-valentes, 11-valentes e 13-valentes já são conhecidas na técnica, como é uma combinação não conjugada 23-valente. Por exemplo, uma combinação de 10-valente pode incluir sacarídeo dos serotipos 1, 4, 5, 6B, 7F, 9V, 14, 18C, 19F e 23F. Uma combinação 11-valente pode ainda incluir sacarídeo de serotipo 3. Uma combinação de 12-valente pode ser adicionada à mistura de 10-valente: serotipos 6A e 19A; 6A e 22F; 19A e 22F; 6A e 15B; 19A e 15B; r 22F e 15B; Uma combinação de 13- valente pode ser acrescentada à mistura de 11-valente: serotipos 19A e 22F; 8 e 12F; 8 e 15B; 8 e 19A; 8 e 22F; 12F e 15B; 12F e 19A; 12F e 22F; 15B e 19A; 15B e 22F, etc. Por exemplo, os antigénios de proteína podem ser selecionados a partir de uma proteína identificada em W098/18931, WO98/18930, patente US 6.699.703,

patente US 6.800.744, WO97/43303, WO97/37026, WO

02/079241, WO 02/34773, WO 00/06737, WO 00/06738, WO 00/58475, WO 2003/082183, WO 00/37105, WO 02/22167, WO 02/22168, WO 2003/104272, WO 02/08426, WO 01/12219, WO 99/53940, WO 01/81380, WO 2004/092209, WO 00/76540, WO 2007/116322, LeMieux et al., Infect. Imm. (2006) 74:2453-2456, Hoskins et al., J. Bacteriol. (2001) 183:5709-5717, Adamou et al., Infect. Immun. (2001) 69(2):949-958, Briles et al., J. Infect. Dis. (2000) 182:1694-1701, Talkington et al., Microb. Pathog. (1996) 21 (1):17-22, Bethe et al., FEMS Microbiol. Lett. (2001) 205(1):99-104, Brown et al., Infect. Immun. (2001) 69:6702-6706, Whalen et al., FEMS Immunol. Med. Microbiol. (2005) 43:73-80, Jomaa et al., Vaccine (2006) 24(24):5133-5139. Por exemplo, proteínas de

Streptococcus pneumoniae podem ser selecionadas da família da Tríade de Poli Histidina (PhtX), a família da Proteína Ligadora de Colina (CbpX), truncados de CbpX, família de LytX, truncados de LytX, proteínas quiméricas dos truncados de CbpX-truncados de LytX, pneumolisina (Ply), PspA, PsaA, Spl28, SpIOl, Spl30, Spl25, Spl33, subunidades de pilus pneumocócico. Streptococcus pyogenes (Streptococcus do Grupo A): Antigénios estreptococos do grupo A incluem, mas não são limitados a, uma proteína identificada em WO 02/34771 ou WO 2005/032582 (incluindo GAS 40), fusões de fragmentos das proteínas de GAS M (incluindo aquelas descritas em WO 02/094851, e Dale, Vaccine (1999) 17:193-200, e Dale, Vaccine 14(10): 944-948), proteína ligadora da fibronectina (Sfbl), proteína heme-asso-ciada estreptocócia (Shp), e Estreptolisina S (SagA). Moraxella catarrhalis: antigénios de Moraxella incluem, mas não são limitados a, antigénios identificados em WO 02/18595 e WO 99/58562, antigénios de proteína de membrana externa (HMW-OMP), antigénio C, e/ou LPS. Bordetella pertussis: antigénios da coqueluche incluem, mas não são limitados a, holotoxina de coqueluche (PT) e hemaglutinina filamentosa (FHA) de B. pertussis, opcionalmente também combinação com pertactina e/ou aglutinógenos 2 e 3.

Burkholderia: antigénios de Burkholderia incluem, mas não são limitados a Burkholderia mallei, Burkholderia pseudomallei e Burkholderia cepacia.

Staphylococcus aureus: antigénios de S. aureus incluem, mas não são limitados a, um polissacarídeo e/ou proteína de S. aureus. Polissacarídeos de S. aureus incluem, mas não são limitados a, polissacarídeos capsulares tipo 5 e tipo 8 (CP5 e CP8) opcionalmente conjugados com exotoxina A de Pseudomonas aeruginosa recombinante não tóxica, tal como StaphVAX™, polissacarídeos tipo 336 (336PS), adesões intercelulares de polissacarídeo (PIA, também conhecidas como PNAG). Proteínas de S. aureus incluem, mas não são limitadas a, antigénios derivados de proteínas de superfície, invasinas (leucocidina, cinases, hialuronidase), fatores de superfície que inibem engolfamento fagocitário (cápsula, Proteína A) , carotenoides, produção de catalase, Proteína A, coagulase, fator de coagulação, e/ou toxinas prejudiciais à membrana (opcionalmente desintoxicadas) que lisam as membranas das células eucarióticas (hemolisinas, leucotoxina, leucocidina). Por exemplo, antigénios de S. aureus podem ser selec-

ionados a partir de uma proteína identificada em WO 02/094868, WO 2008/019162, WO 02/059148, WO 02/102829, WO 03/011899, WO 2005/079315, WO 02/077183, WO 99/27109, WO 01/70955, WO 00/12689, WO 00/12131, WO 2006/032475, WO 2006/032472, WO 2006/032500, WO 2007/113222, WO 2007/113223, WO 2007/113224. Em outras formas de realização, os antigénios de S. aureus podem ser selecionados a partir de IsdA, IsdB, IsdC, SdrC, SdrD, SdrE, ClfA, ClfB, SasF, SasD, Gama (AdsA), Spa, EsaC, EsxA, EsxB, Emp, HlaH35L, CP5, CP8, PNAG, 336PS. Staphylococcus epidermis: antigénios de S. epidermidis incluem, mas não são limitados a, antigénio associado a lodo (SAA).

Clostridium tetani (Tétano): antigénios de tétano incluem, mas não são limitados a, toxoide de tétano (TT) . Tais antigénios podem ser utilizados como uma proteína de veículo em conjunção/conjugados com as composições imunogénicas fornecidas em certas formas de realização aqui.

Clostridium perfringens: Antigénios incluem, mas não são limitados a, toxina ípsilon de Clostridium per-fringen.

Clostridium botulinums (Botulismo): antigénios de botu-lismo incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de C. botulinum.

Cornynebacterium difteriae (Difteria) : antigénios de difteria incluem, mas não são limitados a, toxina de difteria, preferivelmente desintoxicada, tal como CRM197. Adicionalmente, os antigénios capazes de modu lar, inibir ou associados com ribosilação de ADP são contemplados para combinação/coadministração/conjugação com as composições imunogénicas aqui proporcionadas. Os toxoides de difteria podem ser utilizados como proteínas de veículo.

Haemophilus influenzae B (Hib): antigénios de Hib incluem, mas não são limitados a, um antigénio de saca-rídeo de Hib.

Pseudomonas aeruginosa: antigénios de Pseudomonas incluem, mas não são limitados a, endotoxina A, proteína de Wzz, LPS de P. aeruginosa, LPS isolado de PA01 (serotipo de 05), e/ou Proteínas de Membrana Externa, incluindo Proteínas de Membrana Externa F (OprF). Legionella pneumophila. Antigénios bacterianos derivados de Legionella pneumophila.

Coxiella burnetii. Antigénios bacterianos derivados de Coxiella burnetii.

Brucella. Antigénios bacterianos derivados de Brucella, incluindo mas não limitados a, B. abortus, B. canis, B. melitensís, B. neotomae, B. ovis, B. suis e B. pínnípedíae.

Francisella. Antigénios bacterianos derivados de Francisella, incluindo mas não limitados a F. novicida, F. philomiragia e F. tularensis.

Streptococcus agalactiae (Estreptococo-Grupo B) : Antigénios estreptocócicos do Grupo B incluem, mas não são limitados a, uma proteína ou antigénio de sacarídeo identificados em W0 02/34771, WO 03/093306, WO 04/041157, ou WO 2005/002619 (incluindo proteínas GBS 80, GBS 104, GBS 276 e GBS 322, e incluindo antigénios de sacarideo derivados dos serotipos Ia, lb, Ia/c, II, III, IV, V, VI, VII e VIII).

Neiserria gonorrhoeae: Antigénios de Gonorrhoeae incluem, mas não são limitados a, proteína Por (ou porina), tal como PorB (vide Zhu et ai., Vaccine (2004) 22:660-669), uma proteína ligadora de transferência, tal como TbpA e TbpB (vide Price et ai., Infecction and Immunity (2004) 71(1):277-283), uma proteína de opacidade (tal como Opa), uma proteína modificável por redução (Rmp), e preparações vesiculares de membrana externa (OMV) (vide Plante et al, J Infectious Disease (2000) 182:848-855), também vide, por exemplo, W099/24578, W099/36544, WO99/57280, WO02/079243). Chlamydia trachomatis: antigénios de Chlamydia trachomatis incluem, mas não são limitados a, antigénios derivados dos serotipos A, B, Ba e C (agentes de tracoma, uma causa de cegueira), serotipos Ll, L2 & L3 (associados com Lynfogranuloma venereum), e serotipos, D-K. Em certas formas de realização, antigénios Chlamydia trachomatis incluem, mas não são limitados a, um antigénio identificado em WO 00/37494, WO 03/049762, WO 03/068811, ou WO 05/002619, incluindo PepA (CT045), LcrE (CT089), ArtJ (CT381), DnaK (CT396) , CT398, tipo

OmpH (CT242), L7/L12 (CT316), OmcA (CT444), AtosS

(CT467), CT547, Eno (CT587), HrtA (CT823), e MurG (CT761) .

Treponema pallidum (Sífilis) : antigénios de sífilis incluem, mas não são limitados a, antigénio de TmpA.

Haemophilus ducreyi (causando cancroide): antigénios de ducreyi incluem, mas não são limitados a, proteina de membrana externa (DsrA).

Enterococcus faecalis ou Enterococcus faecium: Antigénios incluem, mas não são limitados a, uma repetição de trissacarideo ou outros antigénios derivados de Enterococcus.

Helicobacter pylori: antigénios de H pylori incluem, mas não são limitados a, antigénio de Cag, Vac, Nap, HopX, HopY e/ou de uréase.

Staphylococcus saprophyticus: Antigénios incluem, mas não são limitados a, hemaglutinina de 160 kDa de antigénio de S. saprophyticus.

Antigénios de Yersinia enterocolitica incluem, mas não são limitados a, LPS. E. coli: antigénios de E. coli podem ser derivados de E. coli enterotoxigénico (ETEC), E. coli enteroagre-gativo (EAggEC), E. coli de aderência difusa (DAEC), E. coli enteropatogénico (EPEC), E. coli patogénico extraintestinal (ExPEC) e/ou E. coli enteroemorrágico (EHEC). Antigénios de ExPEC incluem, mas não são limitados a, fator de colonização auxiliar (orf3526), orf353, proteina do domínio bacteriano do tipo Ig (grupo 1) (orf405) , orfl364, efluxo transportador de lipoproteína do fator de membrana externa da família de NodT (orfl767), gspK (orf3515) , gspJ (orf3516), recetor de sideroforo tonB-dependente (orf3597), proteína fimbrial (orf3613), upec-948, upec-1232, precursor de cadeia A da proteína fimbrial do tipo 1 (upec-1875), homólogo de yap H (upec-2820), e hemolisina A (recp-3768) .

Bacillus anthracis (antraz): antigénios de B. anthracis incluem, mas não são limitados a, componentes A (fator letal (LF) e fator de edema (EF) ) ambos destes podem compartilhar um componente B comum conhecido como protetor de antigénio (PA) . Os antigénios de B. anthracis podem ser opcionalmente desintoxicados. Yersinia pestis (peste): antigénios de peste incluem, mas não são limitados a, antigénio capsular de Fl, LPS, antigénio de Yersinia pestis V.

Mycobacterium tuberculosis: antigénios de tuberculose incluem, mas não são limitados a, lipoproteinas, LPS, antigénios de BCG, uma proteína de fusão de antigénio 85B (Ag85B), ESAT-6 opcionalmente formulado em vesículas lipídicas catiónicas, antigénios associado à isocitrato desidrogenase de Mycobacterium tuberculosis (Mtb), e antigénios de MPT51.

Rickettsia: Antigénios incluem, mas não são limitados a, proteínas de membrana externa, incluindo a proteína de membrana externa A e/ou B (OmpB) , LPS, e antigénio de proteína de superfície (SPA).

Listeria monocytogenes: antigénios bacterianos incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de Listeria monocytogenes.

Chlamydia pneumoniae: Antigénios incluem, mas não são limitados a, aqueles identificados em WO 02/02606. Vibrio cholerae: Antigénios incluem, mas não são limitados a, antigénios de proteinase, LPS, particu larmente lipopolissacarídeos de Vibrio cholerae II, polissacarídeos O-específicos de 01 Inaba, 0139 de V. cholerae, antigénios de vacina de IEM108 e toxina de

Zonula occludens (Zot).

Salmonella typhi (febre tifoide): Antigénios incluem, mas não são limitados a, polissacarídeos capsulares preferivelmente conjugados (Vi, isto é vax-TyVi). Borrelia burgdorferi (doença de Lyme): Antigénios incluem, mas não são limitados a, lipoproteínas (tais como OspA, OspB, Osp C e Osp D) , outras proteínas de superfície tais como proteínas relacionadas a OspE (Erp), proteínas de ligação a decorina (tais como DbpA), e proteínas antigenicamente variáveis VI, tais como antigénios associados com P39 e P13 (uma proteína de membrana integral, Proteína de Variação Antigénica de VIsE.

Porphyromonas gingivalisi Antigénios incluem, mas não são limitados a, proteína de membrana externa de P. gingivalis (OMP) .

Klebsiella: Antigénios incluem, mas não são limitados a, uma OMP, incluindo OMP A, ou um polissacarídeo opcionalmente conjugado com toxoide de tétano.

Outros antigénios bacterianos utilizados nas composições imunogénicas aqui proporcionadas incluem, mas não são limitados a, antigénios capsulares, antigénios de polissacarídeo, antigénios de proteína ou antigénios de polinucleótido de qualquer um dos acima. Outros antigénios bacterianos utilizados nas composições imunogénicas aqui proporcionadas incluem, mas não são limitados a, uma preparação de vesícula de membrana externa (OMV). Adicionalmente, outros antigénios bacterianos utilizados nas composições imunogénicas aqui proporcionadas incluem, mas não são limitados a, versões vivas, atenuadas, e/ou purificadas de qualquer uma das bactérias acima mencionadas. Os antigénios bacterianos utilizados nas composições imunogénicas aqui proporcionadas podem ser derivados de bactérias gram-negativas; eles podem ser derivados de bactérias gram-positivas. Em alguns casos, os antigénios bacterianos utilizados nas composições imunogénicas aqui proporcionadas são derivados de bactérias aeróbias, enquanto noutros casos eles são derivados de bactérias anaeróbias .

Em alguns casos, qualquer um dos sacarídeos derivados bacterianos acima (polissacarídeos, LPS, LOS ou oligossacarídeos) são conjugados com outro agente ou antigénio, tal como uma proteína de veículo (por exemplo CRM197). Em alguns casos, tais conjugações são conjugações diretas realizadas por aminação redutora das porções carbo-nilo no sacarídeo para os grupos amino na proteína, noutros casos, os sacarídeos são conjugados por meio de um ligador, tal como, com succinamida ou outras ligações fornecidas em Bioconjugate Techniques, 1996 e CRC, Chemistry of Protein Conjugation and Cross-Linking, 1993.

Em alguns casos úteis para o tratamento ou prevenção de infecção de Neisseria e doenças e distúrbios re- lacionadas, as proteínas recombinantes de N. meningitidis para a utilização nas composições imunogénicas aqui proporcionadas podem ser encontradas em W099/24578, W099/36544, WO99/57280, WO00/22430, W096/29412, W001/64920, WO03/ 020756, W02004/048404, e W02004/032958. Tais antigénios podem ser utilizados sozinhos ou em combinações. Onde múltiplas proteínas purificadas forem combinadas então é útil utilizar uma mistura de 10 ou menos (por exemplo 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2) antigénios purificados.

Uma combinação particularmente útil de antigénios para a utilização nas composições imunogénicas aqui proporcionadas é revelada em Giuliani et ai. (2006) Proc Natl Acad Sci USA 103(29):10834-9 e W02004/032958, e assim uma composição imunogénica pode incluir 1, 2, 3, 4 ou 5 de: (1) uma proteína 'NadA' (aka GNA1994 e NMB1994); (2) uma proteína 'fHBP' (aka '741', LP2086, GNA1870, e NMB1870); (3) uma proteína '936' (aka GNA2091 e NMB2091); (4) uma proteína '953' (aka GNA1030 e NMB1030) ; e (5) uma proteína '287' (aka GNA2132 e NMB2132). Outras possíveis combinações de antigénio podem compreender uma proteína ligadora de transferrina (por exemplo, TbpA e/ou TbpB) e um antigénio de Hsf. Outros possíveis antigénios purificados para a utilização nas composições imunogénicas aqui proporcionadas incluem proteínas compreendendo uma das sequências de aminoácido a seguir: SEQ ID NO: 650 de WO99/24578; SEQ ID NO: 878 de W099/24578; SEQ ID NO: 884 de WO99/24578; SEQ ID NO: 4 de W099/36544; SEQ ID NO: 598 de WO99/57280; SEQ ID NO: 818 de WO99/57280; SEQ ID NO: 864 de WO99/57280; SEQ ID NO: 866 de WO99/57280; SEQ ID NO: 1196 de WO99/57280; SEQ ID NO: 1272 de WO99/57280; SEQ ID NO: 1274 de WO99/57280; SEQ ID NO: 1640 de WO99/57280; SEQ ID NO: 1788 de WO99/57280; SEQ ID NO: 2288 de WO99/57280; SEQ ID NO: 2466 de WO99/57280; SEQ ID NO: 2554 de WO99/57280; SEQ ID NO: 2576 de WO99/57280; SEQ ID NO: 2606 de WO99/57280; SEQ ID NO: 2608 de WO99/57280; SEQ ID NO: 2616 de WO9 9/572 8 0; SEQ ID NO: 2668 de WO99/57280; SEQ ID NO: 2780 de WO99/57280; SEQ ID NO: 2932 de WO99/57280; SEQ ID NO: 2958 de WO99/57280; SEQ ID NO: 2970 de WO99/57280; SEQ ID NO: 2988 de WO99/57280 (cada uma das sequências de aminoácido anteriores são por este meio incorporadas por referência do documento citado), ou um polipéptido que compreende uma sequência de aminoácidos que: (a) tem 50% ou mais de identidade (por exemplo, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 99% ou mais) com as referidas sequências; e/ou (b) compreende um fragmento de pelo menos n aminoácidos sucessivos das referidas sequências, em que n é 7 ou mais (por exemplo, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 25, 30, 35, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 150, 200, 250 ou mais). Fragmentos preferidos para (b) compreendem um epitopo da sequência relevante. Mais que um (por exemplo, 2, 3, 4, 5, 6) destes polipéptidos podem ser incluídos nas composições imuno-génicas. O antigénio de fHBP enquadra-se em três variantes distintas (W02004/048404) . Uma vacina do serogrupo de N. meningitidis com base nas composições imunogénicas reveladas aqui utilizando um dos compostos revelados aqui pode incluir uma variante de fHBP simples, mas é útil incluir uma fHBP de cada uma das duas ou todas as três variantes.

Desse modo a composição imunogénica pode incluir uma combinação de duas ou três fHBP purificadas diferentes, selecionados a partir de: (a) uma primeira proteína, compreendendo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos a% de identidade de sequência com a SEQ ID NO: 1 e/ou compreendendo uma sequência de aminoácidos que consiste num fragmento de pelo menos x aminoácidos contíguos da SEQ ID NO: 1; (b) uma segunda proteína, compreendendo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos b% identidade de sequência com a SEQ ID NO: 2 e/ou compreendendo uma sequência de aminoácidos que consiste num fragmento de pelo menos y aminoácidos contíguos da SEQ ID NO: 2; e/ou (c) uma terceira proteína, compreendendo uma sequência de aminoácidos tendo pelo menos c% identidade de sequência com a SEQ ID NO: 3 e/ou compreendendo uma sequência de aminoácidos que consiste num fragmento de pelo menos z aminoácidos contíguos da SEQ ID NO: 3. SEQ ID NO: 1

VAADICACLADALTAPLDHKDKGLQSLTLDQSVRKNEKLKLAAQGAEKTYGNGDSLNTC

KlJK'NDKVSRF.DFTRQmVDGQLm,ESGEFQVYKQSHSAITAFQTEQÍQDSHHSGK'MVAKRQ

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AAKQ SEQ ID NO: 2

VAADIGAGLADALTAPLDHKDKSLQSLTLDQSVRKNBKLKLAAQGAEKTYGNGDSLNTGK

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AAAELKADEKSHAVÍLGDTRYGSEEKGrYHLALÍ^GDRAQElAGSATVKlGEKVHEJGiAGSQ SEQ ID NO: 3

VAADÍGTGIADALTAPlDHKDKOLKSLTLEDSiPQ]NGTLTÍ,SAQGAEKTFKAODKDNSi-NT

GKLKNDKlSREI>FVQKÍEVDCjQTlTLASGEFQlYKQNHSAVVALQIEKrNNP.DKTDSLÍNQRS

FLVSGlXXlEHTAFNQiJXjGKAEYHGKAFSSDDPNCiRtiiYSlDFrKKQÇiYGRTEHLKTlJiQN

VELAAAELKADEKSHAVILGDTRYGSEEKGTYHLALFGDRAQEIAGSATVKIGEKVHEIGIA GKQ. 0 valor de a é pelo menos 85, por exemplo, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 99.5, ou mais. O valor de b é pelo menos 85, por exemplo, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 99.5, ou mais. O valor de c é pelo menos 85, por exemplo, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 99.5, ou mais. Os valores de a, b e c não estão intrinsicamente relacionados uns com os outros. O valor de x é pelo menos 7, por exemplo, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 120, 140, 160, 180, 200, 225, 250) . O valor de y é pelo menos 7, por exemplo, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 120, 140, 160, 180, 200, 225, 250) . O valor de z é pelo menos 7, por exemplo, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 120, 140, 160, 180, 200, 225, 250). Os valores de x, y e z não estão intrinsicamente relacionados uns com os outros.

Em alguns casos, as composições imunogénicas como reveladas aqui incluirão proteína(s) de fHBP que são lipidadas, por exemplo, numa cisteína N-terminal. Noutros casos elas não serão lipidadas.

Uma composição imunogénica útil como revelada aqui inclui proteínas purificadas compreendendo uma mistura de: (I) um primeiro polipéptido tendo a sequência de aminoácidos SEQ ID NO: 4; (ii) um segundo polipéptido tendo a sequência de aminoácidos SEQ ID NO: 5; e (iii) um terceiro polipéptido tendo a sequência de aminoácidos SEQ ID NO: 6. Vide Giuliani et al. (2006) Proc Natl Acad Sei U S A 103(29):10834-9 e WO2004/032958. Uma composição imunogénica útil como revelada aqui inclui proteínas purificadas compreendendo uma mistura de: (I) um primeiro polipéptido tendo pelo menos a% de identidade de sequência para com a sequência de aminoácidos SEQ ID NO: 4; (ii) um segundo polipéptido tendo pelo menos b% de identidade de sequência para com a sequência de aminoácidos SEQ ID NO: 5; e (iii) um terceiro polipéptido tendo pelo menos a% de identidade de sequência para com a sequência de aminoácidos SEQ ID NO: 6. SEQ ID NO: 4

MÂSPDVKSADTLSKPAAPWSEKETEAKEDAPQAGSQOQGAPSAQGGQDMAAVSEENTO

NOGAAATDKPKNEDEGAQNDI^PQNAADTDSLTPNHTPASNIMPAGNMENQAPDAGESEQP

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Antiqénios de Vesícula Bacterianos

As composições imunogénicas como reveladas aqui podem incluir vesículas de membrana externa. Tais vesículas de membrana externa podem ser obtidas de um amplo arranjo de bactérias patogénicas e utilizadas como componentes antigénicos das composições imunogénicas como reveladas aqui. Vesículas para a utilização como componentes antigénicos de tais composições imunogénicas incluem qualquer vesícula proteolipossómica obtida rompendo uma membrana externa bacteriana para formar vesículas a partir da mesma incluindo componentes da proteína de membrana externa. Desse modo o termo inclui OMV (às vezes referido como 'bolhas'), microvesículas (MV, vide, por exemplo, W002/09643) e 'OMV' nativos ('NOMV vide, por exemplo, Katial et al. (2002) Infect. Immun. 70:702-707).

Composições imunogénicas como reveladas aqui que incluem vesículas de uma ou mais bactérias patogénicas podem ser utilizadas no tratamento ou prevenção de infecção por tais bactérias patogénicas e doenças e distúrbios relacionados. MV e NOMV são vesículas de membrana de ocorrência natural que se formam espontaneamente durante o crescimento bacteriano e são libertadas no meio de cultura. MV podem ser obtidas cultivando bactérias tais como Neisseria em meio de cultura, separando as células inteiras das MV menores no meio de cultura (por exemplo, por meio de filtração ou por centrifugação de velocidade baixa para empelotar apenas as células e não as vesículas menores) , e depois coletando as MV do meio depeletado de célula (por exemplo, por filtração, por precipitação diferencial ou agregação de MV, por centrifugação de alta velocidade para empelotar as MV). Estirpes para a utilização na produção de MV podem em geral ser selecionadas com base na quantidade de MV produzida na cultura (vide, por exemplo, Patente US 6.180.111 e WOOl/34642 que descrevem Neisseria com produção de MV alta). OMV são artificialmente preparadas de bactérias, e podem ser preparadas utilizando tratamento de detergente (por exemplo, com desoxicolato), ou por meios não detergentes (vide, por exemplo, WO04/019977) . Métodos para obter preparações de OMV adequadas são bem conhecidos na técnica. Técnicas para formar OMV incluem tratar bactérias com um detergente de sal do ácido biliar (por exemplo, sais de ácido litocólico, ácido quenodesoxicólico, ácido ursodesoxicólico, ácido desoxicólico, ácido eólico, ácido ursocólico, etc., com desoxicolato de sódio (EP0011243 e Fredriksen et al. (1991) NIPH Ann. 14(2):67-80) sendo preferidos para tratar Neisseria) a um pH suficientemente alto para não precipitar o detergente (vide, por exemplo, WOOl/91788). Outras técnicas podem ser executadas substancialmente na ausência de detergente (vide, por exemplo, W004/019977) utilizando técnicas tais como sonicação, homogeneização, microfluidização, cavitação, choque osmó-tico, moagem, prensa francesa, mistura, etc. Métodos utilizando nenhum ou pouco detergente, podem reter anti-génios úteis tais como NspA em OMV de Neisseria. Desse modo, um método pode utilizar um tampão de extração de OMV com cerca de 0,5% de desoxicolato ou menos, por exemplo, cerca de 0,2%, cerca de 0,1%, < 0,05% ou zero.

Um processo útil para a preparação de OMV é descrito em W005/004908 e envolve ultrafiltração em OMV brutos, ao invés de centrifugação de velocidade alta. O processo pode envolver um passo de ultracentrifugação após a ultrafiltração acontecer.

Vesículas podem ser preparadas de qualquer estirpe patogénica tal como Neisseria minigtidis para a utilização com a invenção. Vesículas de Neisserial meningitidis do serogrupo B podem ser de qualquer serotipo (por exemplo, 1, 2a, 2b, 4, 14, 15, 16, etc.), qualquer serossubtipo, e qualquer imunotipo (por exemplo, Ll; L2; L3; L3,3,7; LIO; etc.). Os meningococos podem ser de qualquer linhagem adequada, incluindo linhagens hiperinva-sivas e hipervirulentas, por exemplo, qualquer uma das seguintes sete linhagens hipervirulentas: subgrupo I; subgrupo III; subgrupo IV 1; complexo de ET 5; complexo de ET 37; grupo A4; linhagem 3. Estas linhagens foram definidas por meio de eletroforese de enzima de locais múltiplos (MLEE), mas tipagem de sequência de locais múltiplos (MLST) foi também utilizada para classificar os meningococos, por exemplo, o complexo de ET 37 é o complexo de ST 11 por MLST, o complexo de ET 5 é ST-32 (ET-5) , linhagem 3 é ST 41/44, etc. As vesículas podem ser preparadas das estirpes tendo um dos subtipos a seguir: PI .2; Pl.2,5; Pl .4; Pl.5; PI.5,2; Pl.5,c; Pl.5c,10;

Pl.7,16; P1.7,16b; P1.7h,4; Pl.9; P1.15; Pl.9,15; Pl.12,13; P1.13; P1.14; Pl.21,16; Pl.22,14.

Vesículas incluídas nas composições imunogénicas reveladas aqui podem ser preparadas de estirpes patogénicas do tipo selvagem tais como estirpes de N. meningitidis ou de estirpes mutantes. A título de exemplo, WO98/56901 revela preparações de vesículas obtidas de N. meningitidis com um gene fur modificado. W002/09746 ensina que expressão de nspA deveria ser suprarregulada com inativação génica (knockout) concomitante de porA e cps. Outros mutantes inativados (knockout) de N. meningitidis para a produção de OMV são revelados em W002/0974, WO02/062378, e W004/014417. W006/081259 revela vesículas em que fHBP é suprarregulado. Claassen et al. (1996) 14(10):1001-8, revelam a construção de vesículas de estirpes modificadas para expressar seis subtipos de porA diferentes. Neisseria mutante com baixos níveis de endotoxina, alcançados por inativação das enzimas envolvidas na biossíntese de LPS, pode também ser utilizada (vide, por exemplo, WO99/10497 e Steeghs et al. (2001) i20:6937-6945) . Estes ou outros mutantes podem todos ser utilizados com a invenção.

Desse modo, estirpes do serogrupo B de N. meningitidis incluídas nas composições imunogénicas reveladas aqui podem em algumas formas de realização expressar mais de um subtipo de porA. Estirpes de porA de valência 6 e valência nove foram previamente construídas. A estirpe pode expressar 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 ou 9 de subtipos de porA: Pl.7,16; Pl.5-1,2-2; Pl.19,15-1; Pl.5-2,10; Pl.12 1,13; Pl.7-2,4; Pl.22,14; Pl.7-1,1 e/ou Pl.18-1,3,6. Em outras formas de realização, uma estirpe pode ter sido infrarregulada para expressão de porA, por exemplo, em que a quantidade de porA foi reduzida em pelo menos 20% (por exemplo, >30%, >40%, >50%, >60%, >70%, >80%, >90%, >95%, etc.), ou até mesmo inativada, com relação aos níveis do tipo selvagem (por exemplo, com relação à estirpe H44/76, como revelado em W003/105890).

As estirpes do serogrupo B de N. meningitidis podem supraexpressar (com relação à estirpe do tipo selvagem correspondente) certas proteínas. Por exemplo, as estirpes podem supraexpressar NspA, proteína 287 (WOOl/52885-também referida como NMB2132 e GNA2132), um ou mais f HBP (WO06/081259 e Pub. Pat. US 2008/0248065-também referida como proteína 741, NMB1870 e GNA1870), TbpA e/ou

TbpB (WOOO/25811), Cu, Zn-superóxido dismutase (WO00/25811), etc.

As estirpes do serogrupo B de N. meningitidis podem incluir uma ou mais das mutações de inativação (knockout) e/ou supraexpressão. Genes preferidos para infrarregulação e/ou inativação (knockout) incluem: (a) Cps, CtrA, CtrB, CtrC, CtrD, FrpB, GalE, HtrB/MsbB, LbpA,

LbpB, LpxK, Opa, Opc, PilC, PorB, SiaA, SiaB, SiaC, SiaD, TbpA, e/ou TbpB (W001/09350) ; (b) CtrA, CtrB, CtrC, CtrD, FrpB, GalE, HtrB/MsbB, LbpA, LbpB, LpxK, Opa, Opc, PhoP,

PilC, PmrE, PmrF, SiaA, SiaB, SiaC, SiaD, TbpA, e/ou TbpB (W002/09746); (c) ExbB, ExbD, rmpM, CtrA, CtrB, CtrD, GalE,

LbpA, LpbB, Opa, Opc, PilC, PorB, SiaA, SiaB, SiaC, SiaD, TbpA, e/ou TbpB (WO02/062378) ; e (d) CtrA, CtrB, CtrD,

FrpB, OpA, OpC, PilC, PorB, SiaD, SynA, SynB, e/ou SynC (W004/014417).

Quando uma estirpe mutante for utilizada, em alguns casos, pode ter uma ou mais, ou todas, das carac-terísticas a seguir: (I) LgtB e/ou GalE infrarregulado ou inativado para truncar o LOS meningocócico; (ii) TbpA su- prarregulado; (iii) Hsf suprarregulado; (iv) Omp85 suprar-regulado; (v) LbpA suprarregulado; (vi) NspA suprarregulado; (vii) PorA inativado; (viii) FrpB infrarregulado ou inativado; (ix) Opa infrarregulado ou inativado; (x) Opc infrarregulado ou inativado; (xii) complexo de gene de cps deletado. Um LOS truncado pode ser um que não inclui um epitopo de sialilacto-N-neotetraose, por exemplo, poderia ser um LOS deficiente em galactose. 0 LOS não pode ter nenhuma cadeia a.

Se o LOS estiver presente numa vesícula depois é possível tratar a vesícula para ligar seu LOS e componentes da proteína (conjugação "intrabolha" (W004/014417)).

As composições imunogénicas como reveladas aqui podem incluir misturas de vesículas de estirpes diferentes. A título de exemplo, WO03/105890 revela vacina compreendendo composições de vesícula meningocócicas multivalentes, compreendendo uma primeira vesícula derivada de uma estirpe meningocócica com um serossubtipo prevalecente num país de utilização, e uma segunda vesícula derivada de uma estirpe que não necessita ter um serossubtipo para impedir num país de utilização. WO06/024946 revela combinações úteis de vesículas diferentes. Uma combinação das vesículas das estirpes em cada um dos imunotipos L2 e L3 pode ser utilizada .Antigénios com base em vesícula podem ser preparados de serogrupos de N. meningitidis diferentes do serogrupo B (por exemplo, WOOl/91788 revela um processo para o serogrupo A) . As composições imunogénicas reveladas aqui consequentemente podem incluir vesículas preparadas de serogrupos diferente de B (por exemplo A, C, W135 e/ou Y) e de patogénios bacterianos diferentes de Neisseria.

Antigénios Virais

Antigénios virais adequados para a utilização nas composições imunogénicas aqui proporcionadas incluem, mas não são limitados a, vírus inativado (ou morto), vírus atenuado, formulações de vírus divididos, formulações de subunidades purificadas, proteínas virais que podem ser isoladas, purificadas ou derivadas de um vírus, Partículas do Tipo Vírus (VLP) e antigénios de polinucleótido que podem ser isolados, purificados ou derivados de um vírus ou recombinantemente sintetizados. Os antigénios virais podem ser derivados de vírus propagados em cultura de célula ou outro substrato. Antigénios virais podem ser recombinantemente expressos. As antigénios virais preferivelmente podem incluir epítopos que são expostos na superfície do vírus durante pelo menos um estágio de seu ciclo de vida. Antigénios virais são preferivelmente conservados ao longo de múltiplos serotipos ou isolados. Antigénios virais adequados para a utilização nas composições imunogénicas aqui proporcionadas incluem, mas não são limitados a, antigénios derivados de um ou mais dos vírus expostos abaixo como também os exemplos de antigénios específicos identificados abaixo.

Ortomixovírus: Antigénios virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um ortomixovírus, tal como Influenza A, B e C. Em alguns casos, os antigénios de ortomixovirus são selecionados a partir de um ou mais das proteínas virais, incluindo hemaglutinina (HA), neuraminidase (NA), nucleoproteína (NP), proteína de matriz (Ml), proteína de membrana (M2), um ou mais dos componentes de transcriptase (PBl, PB2 e PA) . Em alguns casos, o antigénio virai inclui HA e NA. Em alguns casos, os antigénios de influenza são derivados de estirpes de influenza interpandémicas (anuais), enquanto noutros casos, os antigénios de influenza são derivados de estirpes com o potencial de causar uma erupção pandémica (isto é, estirpes de influenza com hemaglutinina nova comparada à hemaglutinina em estirpes correntemente circulantes, ou estirpes de influenza que são patogénicas em indivíduos aviários e têm o potencial para serem transmitidas horizontalmente na população humana, ou estirpes de influenza que são patogénicas para seres humanos). Vírus de Paramyxoviridae: antigénios virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados do vírus de Paramyxoviridae, tais como Pneumovirus (RSV), Paramixovírus (PIV), Metapneumovírus e Morbilivírus (Sarampo).

Pneumovírus: antigénios virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Pneumovírus, tais como Vírus Sincicial Respiratório (RSV), Vírus Sincicial Respiratório Bovino, Vírus da Pneumonia de

Ratinhos, e vírus de rinotraqueite da Turquia. Preferivelmente, o Pneumovírus é RSV. Em alguns casos, antigénios de pneumovírus são selecionados a partir de uma ou mais das proteínas seguintes, incluindo Fusão de proteínas de superfície (F) , Glicoproteína (G) e proteína Hidrofóbica Pequena (SH), proteínas de matriz M e M2, proteínas de nucleocapsídeo N, P e L e proteínas não estruturais NSl e NS2. Em outras formas de realização, os antigénios de pneumovírus incluem F, G e M. Em alguns casos, os antigénios de pneumovírus são também formulados ou derivados de vírus quiméricos, tais como, a título de exemplo apenas, vírus de RSV/PIV quiméricos compreendendo componentes de RSV e piv.

Paramixovírus: antigénios virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Paramixovírus, tais como vírus da Parainfluenza tipos 1-4 (PIV), Caxumba, vírus de Sendai, Símio vírus 5, vírus da parainfluenza Bovina, Nipahvírus, Henipavírus e vírus da doença de Newcastle. Em alguns casos, o Paramixovírus é PIV ou Caxumba. Em alguns casos, antigénios de paramixovírus são selecionados a partir de uma ou mais das proteínas a seguir: Hemaglutinina-Neurami-nidase (HN), proteínas de Fusão Fl e F2, Nucleopro-teína (NP), Fosfoproteína (P), Proteína grande (L), e Proteína de matriz (M). Em alguns casos, as proteínas de paramixovírus incluem HN, Fl e F2. Em alguns casos, os antigénios de paramixovírus são também formulados ou derivados de vírus quiméricos, tais como, a título de exemplo apenas, vírus de RSV/PIV quiméricos compreendendo componentes de RSV e PIV. Vacinas anticaxumba comercialmente disponíveis incluem vírus da caxumba atenuado ao vivo, numa forma monovalente ou em combinação com vacinas de sarampo e rubéolas (MMR). Em alguns casos, o Paramixovírus é Nipahvírus ou Henipa-vírus e os antigénios são selecionados a partir de uma ou mais das proteínas a seguir: proteína de fusão (F), proteína de Glicoproteína (G), proteína de Matriz (M), proteína de Nucleocapsídeo (N), proteína Grande (L) e Fosfoproteína (P).

Poxviridae: Antigénios virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de Ortopoxvírus tais como Varíola vera, incluindo mas não limitados a, Varíola major e Variola minor.

Metapneumovírus: Antigénios virais incluem, mas não são limitados a, Metapneumovírus, tais como metapneumovírus humano (hMPV) e metapneumovírus aviários (aMPV). Em alguns casos, os antigénios de metapneumovírus são selecionados a partir de uma ou mais das proteínas seguintes, incluindo as proteínas de superfície de Fusão (F), Glicoproteína (G) e proteína Hidrofóbica Pequena (SH), proteínas de matriz M e M2, proteínas de nucleocapsídeo N, P e L. Em alguns casos, os antigénios de metapneumovírus incluem F, G e M. Em alguns casos, os antigénios de metapneumovírus são também formulados ou derivados de vírus quiméricos.

Morbilivirus: Antigénios virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Morbilivírus, tais como Sarampo. Em alguns casos, os antigénios de morbilivirus são selecionados a partir de uma ou mais das proteínas a seguir: hemaglutinina (H), Glico-proteína (G), fator de Fusão (F), proteína Grande (L), Nucleoproteína (NP), fosfoproteína de Polimerase (P) , e Matriz (M). Vacinas de sarampo comercialmente disponíveis incluem vírus do sarampo atenuado vivo, tipicamente em combinação com caxumba e rubéola (MMR). Picornavirus: Antigénios virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de Picornavirus, tais como Enterovirus, Rinovírus, Heparnavírus, Cardiovírus e Aftovírus. Em alguns casos, os antigénios são derivados de Enterovirus, enquanto noutros casos o enterovirus é Poliovirus. Em ainda outros casos, os antigénios são derivados de Rinovírus. Em certos casos, os antigénios são formulados em partículas semelhantes a vírus (VLP).

Enterovirus: Antigénios virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Enterovirus, tal como Poliovirus tipos 1, 2 ou 3, vírus de Coxsackie A tipos 1 a 22 e 24, vírus de Coxsackie B tipos 1 a 6, Ecovírus (ECO) tipos 1 a 9, 11 a 27 e 29 a 34 e

Enterovirus 68 a 71. Em alguns casos, os antigénios são derivados de Enterovirus, enquanto noutros casos o enterovirus é Poliovirus. Em alguns casos, os antigénios de enterovirus são selecionados a partir de uma ou mais das proteínas de capsídeo seguintes VPO, VP1, VP2, VP3 e VP4. Vacinas de pólio comercialmente disponíveis incluem Vacina de Pólio Inativada (IPV) e Vacina de Poliovirus Oral (OPV). Em alguns casos, os antigénios são formulados em partículas semelhantes a vírus.

Buniavírus: Antigénios virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Ortobuniavírus, tal como vírus da encefalite da Califórnia, um Plebovírus, tal como vírus da Febre do Rift Valley, ou um Nairovírus, tal como o vírus da febre hemorrágica de Crimean-Congo.

Rinovirus: Antigénios virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de rinovirus. Em alguns casos, os antigénios de rinovirus são selecionados a partir de uma ou mais das proteínas de capsídeo a seguir: VPO, VP1, VP2, VP2 e VP4. Em certas formas de realização, os antigénios são formulados em partículas semelhantes a vírus (VLP).

Heparnavírus: Antigénios virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Heparnavírus, tal como, a título de exemplo apenas, vírus da hepatite A (HAV) . Vacinas de HAV comercialmente disponíveis incluem vacina de HAV inativada.

Togavirus: Antigénios virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Togavirus, tal como um Rubivírus, um Alfavírus, ou um Arterivírus. Em alguns casos, os antigénios são derivados de Rubivírus, tal como a título de exemplo apenas, vírus da rubéola. Em alguns casos, os antigénios de togavirus são selecionados a partir de El, E2, E3, C, NSP-1, NSPO-2, NSP-3 ou NSP-4. Em alguns casos, os antigénios de togavírus são selecionados a partir de El, E2 ou E3. Vacinas rubéolas comercialmente disponíveis incluem um vírus adaptado ao frio vivo, tipicamente em combinação com caxumbas e vacinas sarampo (MMR).

Flavivírus: Antigénios virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Flavivírus, tal como vírus de encefalite de carrapato (TBE), vírus da Dengue (tipos 1, 2, 3 ou 4) , vírus da Febre amarela, vírus da encefalite japonesa, Vírus de Kyasanur Flo-rest, vírus da encefalite do Nilo Ocidental, vírus da encefalite de St. Louis, vírus da encefalite da primavera-verão russo, vírus da encefalite de Powassan. Em alguns casos, os antigénios de flavivírus são selecionados a partir de PrM, M, C, E, NS-1, NS-2a, NS2b, NS3, NS4a, NS4b, e NS5. Em alguns casos, os antigénios de flavivírus são selecionados a partir de PrM, M e E. Vacina de TBE comercialmente disponível inclui vacinas de vírus inativado. Em alguns casos, os antigénios são formulados em partículas semelhantes a vírus (VLP). Pestivírus: Antigénios virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Pestivírus, tal como Diarréia Virai Bovina (BVDV), Febre Suína Clássica (CSFV) ou doença de Border (BDV).

Hepadnavírus: Antigénios virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Hepadnavírus, tal como vírus da hepatite B. Em alguns casos, os antigénios de hepadnavírus são selecionados a partir de antigénios de superfície (L, M e S) , antigénios de núcleo (HBc, HBe). Vacinas de HBV comercialmente disponíveis incluem vacinas de subunidade compreendendo a proteína do antigénio de superfície S. Vírus da Hepatite C: Antigénios virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um vírus da Hepatite C (HCV). Em certas formas de realização, os antigénios de HCV são selecionados a partir de um ou mais de El, E2, E1/E2, poliproteína de NS345, poliproteína de núcleo de NS 345, núcleo, e/ou péptidos das regiões não estruturais. Em alguns casos, os antigénios do vírus da Hepatite C incluem um ou mais dos a seguir: proteínas de El e E2 de HCV, complexos de heterodímero de E1/E2, proteínas de núcleo e proteínas não estruturais, ou fragmentos destes antigénios, em que as proteínas não estruturais podem ser opcionalmente modificadas para remover a atividade enzimática mas reter a imunogenicidade. Em alguns casos, os antigénios são formulados em partículas semelhantes a vírus (VLP).

Rabdovirus: Antigénios virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Rabdovirus, tal como um Lissavírus (vírus da Raiva) e Vesiculovirus (VSV). Antigénios de rabdovirus podem ser selecionados a partir de glicoproteína (G) , nucleoproteína (N) , proteína grande (L) , proteínas não estruturais (NS) . Vacina do vírus da Raiva comercialmente disponível compreende vírus morto crescido em células diploides humanas ou células pulmonares de reso fetal.

Caliciviridae: Antigénios virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de Calciviridae, tal como virus de Norwalk, e Virus do tipo Norwalk, tal como Virus do Havai e Virus de Montanha Nevada. Em alguns casos, os antigénios são formulados em partículas semelhantes a vírus (VLP).

Coronavirus: Antigénios virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Coronavirus, SARS, coronavirus respiratório humano, bronquite in-fecciosa aviária (IBV), vírus de hepatite de ratinho (MHV), e vírus de gastroenterite transmissível porcina (TGEV). Em alguns casos, os antigénios de coronavirus são selecionados a partir de espiga (S), envelope (E), matriz (M) , nucleocapsídeo (N) , e glicoproteína de Hemaglutinina-esterase (HE). Em alguns casos, o antigénio de coronavirus é derivado de um vírus de SARS. Em alguns casos, o coronavirus é derivado de um antigénio virai de SARS como descrito em WO 04/92360. Retrovirus: Antigénios virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Retrovirus, tal como um Oncovirus, um Lentivírus ou um Espumavírus. Em alguns casos, os antigénios de oncovirus são derivados de HTLV-1, HTLV-2 ou HTLV-5. Em certas formas de realização, os antigénios de lentivírus são derivados de HIV-1 ou HIV-2. Em alguns casos, os antigénios são derivados de HIV-1 subtipos (ou clades), incluindo, mas não limitados a, HIV-1 subtipos (ou clades) A, B, C, D, F, G, H, J. K, O. Noutros casos, os antigénios são derivados de formas de HIV-1 circulante recom-binante (CRF), incluindo, mas não limitados a, A/B, A/E, A/G, A/G/I, etc. Em alguns casos, os antigénios de retrovirus são selecionados a partir de gag, pol, env, tax, tat, rex, rev, nef, vif, vpu, e vpr. Em alguns casos, os antigénios de HIV são selecionados a partir de gag (p24gag e p55gag), env (gpl60 e gp41), pol, tat, nef, rev vpu, miniproteinas, (preferivelmente p55gag e gpl40v deletados). Em certas formas de realização, os antigénios de HIV são derivados de uma ou mais das estirpes a seguir: HlVmb, HIVsf2, HIVlav, HIVlai, HIVmn, HIV-1cm235, HIV-1us4, HIV-1Sfi62, HIV-Itvi, HIV-1Mj4 . Em alguns casos, os antigénios são derivados de retrovirus humanos endógenos, incluindo, mas não limitados a, HERV-K (HERV-K "velho" e HERV-K "novo"). Reovirus: Antigénios virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Reovirus, tal como um Ortoreovirus, um Rotavirus, um Orbivirus, ou um Coltivirus. Em alguns casos, os antigénios de reovirus são selecionados a partir de proteínas estruturais λΐ, λ2, λ3, μΐ, μ2, σΐ, σ2, ou σ3, ou proteínas não estruturais oNS, pNS, ou ols. Em alguns casos, os antigénios de reovirus são derivados de um Rotavirus. Em alguns casos, os antigénios de rotavirus são selecionados a partir de VPl, VP2, VP3, VP4 (ou o produto clivado VP5 e VP8), NSP1, VP6, NSP3, NSP2, VP7, NSP4, ou NSP5. Em alguns casos, os antigénios de rotavirus incluem VP4 (ou o produto clivado VP5 e VP8) , e VP7.

Parvovirus: Antigénios virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Parvovirus, tal como Parvovirus B19. Em alguns casos, os antigénios de Parvovirus são selecionados a partir de VP-1, VP-2, VP-3, NS-1 e NS-2. Em alguns casos, o antigénio de Parvovirus é proteína de capsídeo VPl ou VP-2. Em alguns casos, os antigénios são formulados em partículas semelhantes a vírus (VLP). Vírus da hepatite delta (HDV): Antigénios virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de HDV, particularmente δ-antigénio de HDV. Vírus da hepatite E (HEV): Antigénios virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de HEV. Vírus da hepatite G (HGV): Antigénios virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de HGV. Herpesvirus humano: Antigénios virais incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um Herpesvirus Humano, tal como, a título de exemplo apenas, Vírus do herpes simples (HSV), vírus de Varicela-zóster (VZV), vírus de Epstein-Barr (EBV), Citomegalovírus (CMV), Herpesvirus Humano 6 (HHV6), Herpesvirus Humano 7 (HHV7), e Herpesvirus Humano 8 (HHV8). Em alguns casos, os antigénios de Herpesvirus Humanos são selecionados a partir de proteínas prematuras imediatas (a) , proteínas prematuras (β) , e proteínas tardias (γ). Em alguns casos, os antigénios de HSV são derivados de estirpes de HSV-1 ou de HSV-2. Em alguns casos, os antigénios de HSV são selecionados das glicoproteínas gB, gC, gD e gH, proteína de fusão (gB) , ou proteínas de fuga imunes (gc, gE, ou gl). Em alguns casos, os antigénios de VZV são selecionados a partir de proteínas do núcleo, nucleocapsídeo, tegumento, ou do envelope. Uma vacina de VZV atenuada viva está comercialmente disponível. Em alguns casos, os antigénios de EBV são selecionados a partir de proteínas de antigénio prematuro (EA), antigénio de capsídeo viral (VCA), e glicoproteínas do antigénio de membrana (MA). Em alguns casos, os antigénios de CMV são selecionados a partir de proteína de capsídeo, glicoproteínas de envelope (tais como gB e gH) , e proteínas de tegumento. Em alguns casos, os antigénios de CMV podem ser selecionados a partir de uma ou mais das proteínas a seguir: pp65, IEl, gB, gD, gH, gL, GM, gN, go, UL128, UL129, gULl30, UL150, UL131, UL33, UL78, US27, US2 8, RL5A, RL6, RL10, RLll, RL12, RL13, ULl, UL2, UL4, UL5, UL6, UL7, UL8, UL9, ULlO, ULll, ULl4, UL15A, UL16, UL17, UL18, UL22A, UL38, UL40, UL41A, UL42, UL116, UL119, UL120, UL121, UL124, UL132, UL147A, ULl4 8, UL142, UL144, UL141, UL140, UL135, UL136, UL138, UL139, UL133, UL135, UL148A, UL148B, UL148C, UL148D, US2, US3, US6, US7, US 8, US 9, US10, US11, US12, US13, US14, US15, US16, US17, US18, US19, US2 0, US21, US2 9, US30 e US34A. Antigénios de CMV podem também ser fusões de uma ou mais proteínas de CMV, tais como, a título de exemplo apenas, pp65/IEl (Reap et al., Vaccine (2007) 25:7441-7449). Em alguns casos, os antigénios são formulados em partículas semelhantes a vírus (VLP).

Papovavírus: Antigénios incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de Papovavírus, tais como Papilomavírus e Poliomavírus. Em alguns casos, os Papilomavírus incluem HPV serotipos 1, 2, 4, 5, 6, 8, 11, 13, 16, 18, 31, 33, 35, 39, 41, 42, 47, 51, 57, 58, 63 e 65. Em alguns casos, os antigénios de HPV são derivados dos serotipos 6, 11, 16 ou 18. Em alguns casos, os antigénios de HPV são selecionados a partir de proteína de capsídeo (Ll) e (L2), ou E1-E7, ou suas fusões. Em alguns casos, os antigénios de HPV são formulados em partículas semelhantes a vírus (VLP). Em alguns casos, os vírus de Poliomiavírus incluem vírus de BK e vírus de JK. Em alguns casos, os antigénios de Poliomavírus são selecionados a partir de VP1, VP2 ou VP3.

Adenovirus: Antigénios incluem aqueles derivados de Adenovirus. Em alguns casos, os antigénios de Adenovirus são derivados de Adenovirus serotipo 36 (Add-36). Em alguns casos, o antigénio é derivado de uma proteína ou sequência de péptido que codifica uma proteína de revestimento de Add-36 ou fragmento da mesma (WO 2007/120362). São também aqui descritos antigénios, composições, métodos, e micróbios incluídos em Vaccines, 4a Edição (Plotkin e Orenstein ed. 2004); Medical Microbiology, 4a Edição (Murray et al. ed. 2002); Virology, 3a Edição (W.K. Joklik ed. 1988); Fundamental Virology, 2a Edição (B.N. Fields e D.M. Knipe, eds. 1991) que são contemplados juntos com as composições imunogénicas aqui proporcionadas.

Antigénios Fúngicos

Antigénios fúngicos para a utilização nas composições imunogénicas agui proporcionadas incluem, mas não são limitados a, agueles derivados de um ou mais dos fungos expostos abaixo.

Antigénios fúngicos são derivados de Dermatophytres, incluindo: Epidermophyton floccusum, Microsporum au-douini, Microsporum canis, Microsporum distortum, Microsporum equinum, Microsporum gypsum, Microsporum nanum, Trichophyton concentricum, Trichophyton equinum, Trichophyton gallinae, Trichophyton gypseum, Trichophyton megnini, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton quinckeanum, Trichophyton rubrum, Trichophyton schoenleini, Trichophyton tonsurans, Trichophyton verrucosum, T. verrucosum var. album, var. discoides, var. ochraceum, Trichophyton violaceum, e/ou Trichophyton faviforme; e

Patogénios fúngicos são derivados de Aspergillus fumigatus, Aspergillus flavus, Aspergillus niger, Aspergillus nidulans, Aspergillus terreus, Aspergillus sydowi, Aspergillus flavatus, Aspergillus glaucus, Blastoschizomyces capitatus, Candida albicans, Candida enolase, Candida tropicalis, Candida glabrata, Candida krusei, Candida parapsilosis, Candida stellatoidea, Candida kusei, Candida parakwsei, Candida lusitaniae, Candida pseudotropicalis, Candida guilliermondi, Cla- dosporium carrionii, Coccidioides immitis, Blastomyces dermatidis, Cryptococcus neoformans, Geotrichum cla-vatum, Histoplasma capsulatum, Klebsiella pneumoniae, Microsporldia, Encephalitozoon spp., Septata intesti-nalis e Enterocytozoon bieneusi; os menos comuns são Brachiola spp, Microsporidium spp., Nosema spp., Pleistophora spp., Trachipleistophora spp., Vittaforma spp Paracoccidioides brasiliensis, Pneumocystis carl-nil, Pythiumn insidiosum, Pityrosporum ovale, Sacharo-myces cerevisae, Saccharomyces boulardii, Saccharomyces pombe, Scedosporium apiosperum, Sporothrix schenckii, Trichosporon beigelii, Toxoplasma gondii, Penicillium marneffei, Malassezia spp., Fonsecaea spp., Wangiella spp., Sporothrix spp., Basidiobolus spp., Conidiobolus spp., Rhizopus spp, Mucor spp, Absidia spp, Mortierella spp, Cunninghamella spp, Saksenaea spp., Alternaria spp, Curvularia spp, Helminthosporium spp, Fusarium spp, Aspergillus spp, Penicillium spp, Monolinia spp, Rhizoctonia spp, Paecilomyces spp, Pithomyces spp, e Cladosporium spp.. 0 processo para produzir um antigénio fúngico pode incluir um método em que uma fração solubilizada é extraida e separada de uma fração insolúvel obtenível de células fúngicas das quais a parede celular foi substancialmente removida ou pelo menos parcialmente removidoa caracterizado em que o processo compreende as etapas de: obter células fúngicas vivendo vivas; obter células fúngicas das quase a parede celular foi substan cialmente removida ou pelo menos parcialmente removida; estourando as células fúngicas das quais a parede celular foi substancialmente removida ou pelo menos parcialmente removida; obter uma fração insolúvel; e extrair e separar uma fração solubilizada da fração insolúvel.

Antigénios/Patogénios Protozoários

Antigénios/patogénios protozoários para a utilização nas composições imunogénicas aqui proporcionadas incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de um ou mais dos protozoários a seguir: Entamoeba histolytica, Giardia lambli, Cryptosporidium parvum, Cyclospora cayatanensis e Toxoplasma.

Antiqénios/Patogénios Vegetais

Antigénios/patogénios vegetais para a utilização nas composições imunogénicas aqui proporcionadas incluem, mas não são limitados a, aqueles derivados de Ricinus communis.

Antigénios de TSD

Em alguns casos, as composições imunogénicas aqui proporcionadas incluem um ou mais antigénios derivados de uma doença sexualmente transmitida (TSD). Em alguns casos, tais antigénios fornecem profiláticos para TSD tais como clamidia, herpes genital, hepatite (tais como HCV), verrugas genitais, gonorréia, sífilis e/ou cancroide. Em alguns casos, tais antigénios fornecem terapia para DST tal como clamidia, herpes genital, hepatite (tais como HCV), verrugas genitais, gonorréia, sífilis e/ou cancroide. Tais antigénios são derivados de uma ou mars TSD virais ou bacterianas. Em alguns casos, os antigénios de DST virais são derivados de HIV, vírus do herpes simples (HSV-1 e HSV-2), papilomavírus humano (HPV), e hepatite (HCV). Em alguns casos, os antigénios de DST bacterianos são derivados de Neiserria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Treponema pallidum, Haemophilus ducreyi, E. coli, e Streptococcus agalactiae. Exemplos de antigénios específicos derivados destes patogénios são descritos acima.

Antigénios Respiratórios

Em alguns casos, as composições imunogénicas aqui proporcionadas incluem um ou mais antigénios derivados de um patogénio que causa doença respiratória. A título de exemplo apenas, tais antigénios respiratórios são derivados de um vírus respiratório tal como Ortomixovírus (gripe), Pneumovirus (RSV), Paramixovírus (PIV), Morbilivírus (sarampo), Togavírus (Rubéola), VZV, e Coronavírus (SARS). Em alguns casos, os antigénios respiratórios são derivados de uma bactéria que causa doença respiratória, tal como, a título de exemplo apenas, Streptococcus pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Bordetella pertussis, Mycobacterium tuberculosis, Mycoplasma pneumoniae, Chlamydia pneumoniae,

Bacillus anthracis, e Moraxella catarrhalis. Exemplos de antigénios específicos derivados destes patogénios são descritos acima.

Antigénios de Vacina Pediátrica

Em alguns casos, as composições imunogénicas aqui proporcionadas incluem um ou mais antigénios adequados para a utilização em indivíduos pediátricos. Indivíduos pediátricos são tipicamente menores que cerca de 3 anos de idade, ou menores que cerca de 2 anos de idade, ou menores que cerca de 1 ano de idade. Antigénios pediátricos são administrados múltiplas vezes no curso de 6 meses, 1, 2 ou 3 anos. Antigénios pediátricos são derivados de um vírus que pode visar as populações pediátricas e/ou um vírus do qual as populações pediátricas são suscetíveis à infecção. Antigénios virais pediátricos incluem, mas não são limitados a, antigénios derivados de um ou mais de Ortomixovírus (influenza), Pneumovirus (RSV), Paramixovírus (PIV e caxumba), Morbilivírus (sarampo), Togavírus (rubé-ola), Enterovirus (pólio), HBV, Coronavírus (SARS), e vírus de Varicela-zóster (VZV), vírus de Epstein-Barr (EBV). Antigénios bacterianos pediátricos incluem antigénios derivados de um ou mais de Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitides, Streptococcus pyogenes (Streptococo do Grupo A) , Moraxella catarrhalis, Bordetella pertussis, Staphylococcus aureus, Clostridium tetani (Tétano), Corny-nebacterium diphtheriae (Difteria), Haemophilus influenzae B (Hib), Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus agalactiae (Streptococo do Grupo B), e E. coli. Exemplos de antigénios específicos derivados destes patogénios são descritos acima.

Antigénios adequados para utilização em Indivíduos Idosos ou Imunocomprometidos

Em alguns casos, as composições imunogénicas aqui proporcionadas incluem um ou mais antigénios adequados para a utilização em ancião ou indivíduos imunocomprometidos. Tais indivíduos podem necessitar ser vacinados mais frequentemente, com doses mais altas ou com formulações adjuvantes para melhorar sua resposta imune aos antigénios visados. Antigénios que são visados para a utilização em Ancião ou Indivíduos Imunocomprometidos incluem antigénios derivados de um ou mais dos patogénios a seguir: Neisseria meningitides, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes (Streptococo do Grupo A), Moraxella catarrhalis, Bordetella pertussis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermis, Clostridium tetani (Tétano), Cornynebacterium diphtheriae (Difteria), Haemophilus influenzae B (Hib), Pseudomonas aeruginosa, Legionella pneumophila, Streptococcus agalactiae (Streptococo do Grupo B), Enterococcus faecalis, Helicobacter pylori, Chlamydia pneumoniae, Ortomixovirus (influenza), Pneumovirus (RSV), Paramixovirus (PIV e caxumba), Morbilivírus (sarampo), Togavirus (rubéola), Enterovirus (pólio), HBV, Coronavírus (SARS), vírus da varicela-zóster (VZV), virus de Epstein Barr (EBV), Citomegalovírus (CMV).

Antiqénios adequados para utilização em Vacinas para Adolescentes

Em alguns casos, as composições imunogénicas aqui proporcionadas incluem um ou mais antigénios adequados para a utilização em indivíduos adolescentes. Adolescentes estão com necessidade de um reforço de um antigénio pediátrico previamente administrado. Antigénios pediátricos que são adequados para a utilização em adolescentes são descritos acima. Além disso, os adolescentes são visados receber antigénios derivados de um patogénio de DST para assegurar imunidade protetora ou terapêutica antes de o começo da atividade sexual. Antigénios de DST que são adequados para a utilização em adolescentes são descritos acima.

Antiqénios Tumorais

Em alguns casos, um antigénio de tumor ou antigénio de cancro é utilizado junto com as composições imunogénicas aqui proporcionadas. Em alguns casos, os antigénios tumorais são uns antigénios tumorais contendo péptido, tal como um antigénio de tumor de polipéptido ou antigénios tumorais de glicoproteína. Em alguns casos, o antigénio de tumor é um antigénio de tumor contendo sacarídeo, tal como um antigénio de tumor de glicolípido ou um antigénio de tumor de gangliosídeo. Em alguns casos, o antigénio de tumor é um antigénio de tumor contendo polinucleótido que expressa um antigénio de tumor contendo polipéptido, por exemplo, uma construção de vetor de RNA ou uma construção de vetor de DNA, tal como DNA de plasmídeo. Antigénios de tumor apropriados para a utilização junto com as composições imunogénicas aqui proporcionadas abrangem uma ampla variedade de moléculas, tais como (a) antigénios tumorais contendo polipéptido, incluindo polipéptidos (que podem variar, por exemplo, de 8-20 aminoácidos em comprimento, embora comprimentos fora desta gama sejam também comuns), lipopolipéptidos e glicoproteínas, (b) antigénios tumorais contendo sacarideo, incluindo polissacarideos, mucinas, gangliosideos, glicolípidos e glicoproteínas, e (c) polinucleótidos que expressam polipéptidos antigénicos. Em alguns casos, os antigénios tumorais são, por exemplo, (a) moléculas de comprimento total associadas com células de cancro, (b) homólogos e suas formas modificadas, incluindo moléculas com porçõesletadas, adicionadas e/ou substituídas, e (c) seus fragmentos. Em alguns casos, os antigénios tumorais são fornecidos em forma recombinante. Em alguns casos, os antigénios tumorais incluem, por exemplo, antigénios restringidos à classe I reconhecidos por linfócitos de CD8+ ou antigénios restringidos à classe II reconhecidos por meio de linfócitos de CD4+.

Em alguns casos, os antigénios tumorais incluem, mas não são limitados a, (a) antigénios de cancro-testículos tais como NY-ESO-1, SSX2, SCP1 como também polipéptidos da família RAGE, BAGE, GAGE e MAGE, por exemplo, GAGE-1, GAGE-2, MAGE-1, MAGE-2, MAGE-3, MAGE-4, MAGE-5, MAGE-6, e MAGE-12 (que podem ser utilizados, por exemplo, para tratar melanoma, tumores do pulmão, cabeça e pescoço, NSCLC, mama, gastrintestinais, e da bexiga), (b) antigénios mutados, por exemplo, p53 (associado com vários tumores sólidos, e.g., cancro colorretal, pulmão, cabeça e pescoço), p21/Ras (associado com, e.g., melanoma, cancro pancreático e cancro colorretal), CDK4 (associado com, e.g., melanoma), MUMl (associado com, e.g., melanoma), caspase-8 (associado com, e.g., cancro de cabeça e pescoço), CIA 0205 (associado com, e.g., cancro de bexiga), HLA-A2-R1701, catenina beta (associado com, e.g., melanoma), TCR (associado com, e.g., linfoma de células T não Hodgkin), BCR-abl (associado com, e.g., leucemia mielo-genosa crónica), triosefosfato isomerase, KIA 0205, CDC-27, e LDLR-FUT, (c) antigénios supraexpressos, por exemplo, Galectina 4 (associada com, e.g., cancro colorretal), Galectina 9 (associada com, e.g., doença de Hodgkin), proteinase 3 (associada com, e.g., leucemia mielogenosa crónica), WT 1 (associado com, e.g., várias leucemias), anidrase carbónica (associada com, e.g., cancro renal), aldolase A (associada com, e.g., cancro pulmonar), PRAME (associada com, e.g., melanoma), His-2/neu (associado com, e.g., cancro de mama, cólon, pulmão e ovariano), alfa-fetoproteína (associada com, e.g., hepatoma), KSA (associada com, e.g., cancro colorretal), gastrina (associada com, e.g., cancro pancreático e gástrico), proteína catalítica da telomerase, MUC-1 (associado com, e.g., cancro de mama e ovariano), G-250 (associado com, e.g., carcinoma de célula renal), p53 (associado com, e.g., cancro de mama e do cólon), e antigénio carcinoembriónico (associado com, e.g., cancro de mama, cancro pulmonar, e cancroes do trato gastrintestinal tais como cancro colorretal), (d) antigénios compartilhados, por exemplo, antigénios de diferenciação de melanoma-melanócitos tais como MART-l/Melan A, gplOO, MC1R, recetor da hormona estimulante dos melanócitos, tirosinase, proteína-1 relacionada à tirosinase/TRPl e proteína-2 relacionada à tirosinase/TRP2 (associada com, e.g., melanoma), (e) antigénios associados à próstata tais como PAP, PSA, PSMA, PSH-Pl, PSM-Pl, PSM-P2, associados com, e.g., cancro de próstata, (f) idiotipos de imunoglobulina (associados com mieloma e linfomas de célula B, por exemplo), e (g) outros antigénios tumorais, tal como antigénios contendo polipé-ptido e sacarideo incluindo (i) glicoproteínas tais como sialilo Tn e sialilo Lex (associadas com, e.g., cancro de mama e colorretal) como também várias mucinas; as glicoproteínas são acopladas a uma proteína de veículo (e.g., MUC-1 são acopladas a KLH); (ii) lipopolipéptidos (e.g., MUC-1 ligadas a uma porção lípido); (iii) polis-sacarídeos (e.g., hexassacarídeo sintético Globo H) que são acoplados a umas proteínas de veículo (e.g., para KLH), (iv) gangliosídeos tais como GM2, GM12, GD2, GD3 (associados com, e.g., cancro do cérebro, pulmonar, melanoma) que também são acoplados às proteínas de veículo (e.g., KLH) .

Em alguns casos, os antigénios tumorais incluem, mas não são limitados a, pl5, Hom/Mel-40, H-Ras, E2A-PRL, H4-RET, IGH-IGK, MIL-RAR, antigénios do vírus de Epstein

Barr, EBNA, antigénios do papilomavírus humano (HPV), incluindo E6 e E7, antigénios do virus da hepatite B e C, antigénios do virus linfotrópicos de células T humanas, TSP-180, pl85erbB2, pl80erbB-3, c-met, mn-23Hl, TAG-72-4, CA 19-9, CA 72-4, CAM 17.1, NuMa, K-ras, pl6, TAGE, PSCA, CT7, 43-9F, 5T4, 791 Tgp72, beta-HCG, BCA225, BTAA, CA 125, CA 15-3 (CA 27.2 9\BCAA) , CA 195, CA 242, CA-50, CAM43, CD68\KP1, CO-029, FGF-5, Ga733 (EpCAM), HTgp-175, M344, MA-50, MG7-Ag, MOV18, NB/70K, NY-CO-1, RCAS1, SDCCAG16, TA-90 (proteina ligadora de Mac-2\proteina associada à ciclofi-lina C), TAAL6, TAG72, TLP, TPS, e outros.

Antigénios contendo polinucleótido utilizados juntos com as composições imunogénicas aqui proporcionadas incluem polinucleótidos tais como os que codificam os antigénios de cancro de polipéptido tais como aqueles listados acima. Em certas formas de realização, os antigénios contendo polinucleótido incluem, mas não são limitados a, construções de vetor de DNA ou de RNA, tais como vetores de plasmídeo (por exemplo, pCMV) que são capazes de expressar antigénios de cancro de polipéptido in vivo.

Em alguns casos, os antigénios tumorais são derivados de componentes celulares mutados ou alterados. Após alteração, os componentes celulares não executam mais suas funções reguladoras, e consequentemente a célula pode sofrer de crescimento descontrolado. Exemplos representativos de componentes celulares alterados incluem, mas não são limitados a ras, p53, Rb, proteina alterada codificada pelo gene de tumor de Wilm, ubiquitina, mucina, proteína codificada pelos genes DCC, APC, e MCC, como também recetores ou estruturas semelhante a recetor tais como neu, recetor da hormona da tiroide, recetor do fator de crescimento derivado de plaquetas (PDGF), recetor de insulina, recetor do fator de crescimento epidérmico (EGF), e o recetor do fator estimulante de colónias (CSF).

Adicionalmente, os antigénios bacterianos e virais são utilizados juntos com as composições imunogé-nicas aqui proporcionadas para o tratamento de cancro. Em alguns casos, as proteínas de veículo, tais como CRM197, toxoide de tétano, ou antigénio de Salmonella typhimurium, são utilizadas em conjunção/conjugação com os compostos aqui proporcionados para o tratamento de cancro. As terapias de combinação antigénio de cancro mostrarão eficácia e biodisponibilidade aumentadas quando comparadas com as terapias existentes.

Em alguns casos, as composições imunogénicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem sacarídeos capsulares de pelo menos dois dos serogrupos A, C, W135 e Y de Neisseria meningitides. Em alguns casos, tais vacinas ainda compreendem um antigénio de um ou mais dos seguintes: (a) N. meningitidis do serogrupo B; (b) Haemophilus influenzae tipo B; e/ou (c) Streptococcus pneumoniae.

Em alguns casos as composições imunogénicas con- tendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem serogrupos C, W135 &amp; Y de N. meningitides. Em alguns casos, as composições imunogénicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem serogrupos A, C, W135 &amp; Y de N. meningitides. Em alguns casos, as composições imunogénicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem serogrupos B, C, W135 &amp; Y de N. meningitides. Em alguns casos as composições imunogénicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem serogrupos A, B, C, W135 &amp; Y de N. meningitides. Em alguns casos as composições imunogénicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem H. influenzae tipo B e serogrupos C, W135 &amp; Y de N. meningitides. Em alguns casos as composições imunogénicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem H. influenzae tipo B e serogrupos A, C, W135 &amp; Y de N. meningitides. Em alguns casos as composições imunogénicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem H. influenzae tipo B e serogrupos B, C, W135 &amp; Y de N. meningitides. Em alguns casos as composições imunogénicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem H. influenzae tipo B e serogrupos A, B, C, W135 &amp; Y de N. meningitides. Em alguns casos as composições imunogénicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem S. pneumoniae e serogrupos C, W135 &amp; Y de N. meningitides. Em alguns casos as composições imunogénicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem S. pneumoniae e serogrupos A, C, W135 &amp; Y de N. meningitides. Em alguns casos as composições imunogénicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem S. pneumoniae e serogrupos B, C, W135 &amp; Y de N. meningitides. Em alguns casos as composições imunogénicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem S. pneumoniae e serogrupos A, B, C, W135 &amp; Y de N. meningitides. Em alguns casos as composições imunogénicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem H. influenzae tipo B, S. pneumoniae e serogrupos C, W135 &amp; Y de N. meningitides. Em alguns casos as composições imunogénicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem H. influenzae tipo B, S. pneumoniae e serogrupos A, C, W135 &amp; Y de N. meningitides. Em alguns casos as composições imunogénicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem H. influenzae tipo B, S. pneumoniae e serogrupos B, C, W135 &amp; Y de N. meningitides. Em alguns casos as composições imunogénicas contendo pelo menos um composto da Fórmula (I) incluem H. influenzae tipo B, S. pneumoniae e serogrupos A, B, C, W135 &amp; Y de N. meningitidis.

Estojos ("Kits")

Também aqui proporcionados são embalagens ou estojos ("kits") farmacêuticos que incluem um ou mais recipientes contendo um composto da Fórmula (I) útil para o tratamento ou prevenção de uma doença ou distúrbio associados com Recetores do Tipo "Toll". Tais embalagens ou estojos ("kits") farmacêuticos podem incluir um ou mais recipientes contendo um composto da Fórmula (I) útil para o tratamento ou prevenção de uma doença ou distúrbio associados com Recetores do Tipo "Toll" e um ou mais recipientes contendo um agente terapêutico adicional, incluindo mas não limitados a aqueles listados acima. Tais embalagens ou estojos ("kits") farmacêuticos podem opcionalmente incluir instruções para sua administração de um composto da Fórmula (I) como revelado aqui. Em alguns de tais estojos ("kits"), o composto da Fórmula (I) é fornecido na forma de uma composição de vacina como aqui descrita, e opcionalmente inclui uma seringa para injetar num indivíduo a composição de vacina. Métodos de tratamento, prevenção e administração de vacinas

As composições imunogénicas como reveladas aqui podem ser utilizadas em conjunto com as vacinas para melhorar a imunogenicidade da vacina ou onde a composição imunogénica incluir um ou mais antigénios, a composição imunogénica pode ser utilizada como uma vacina. Portanto, as composições imunogénicas reveladas aqui podem ser utilizadas num método para elevar ou intensificar uma resposta imune num mamífero compreendendo o passo de administrar uma quantidade eficaz de uma composição imunogénica como revelada aqui. A resposta imune é preferivelmente protetora e preferivelmente envolve anticorpos e/ou imunidade mediada por célula. 0 método pode elevar uma resposta de reforço.

As composições imunogénicas reveladas aqui podem ser utilizadas como um medicamento, e.g., para a utilização para elevar ou intensificar uma resposta imune num mamífero.

As composições imunogénicas reveladas aqui podem ser utilizadas na fabricação de um medicamento para elevar uma resposta imune num mamífero. É também aqui descrito um dispositivo de libertação pré-enchido com uma composição imunogénica revelada aqui.

Elevando uma resposta imune no mamífero por estas utilizações e métodos, a infecção do mamífero pelos pato-génios compreendendo o antigénio incluído na composição imunogénica ou administrado junto com a composição imunogénica pode ser reduzida ou até mesmo impedido. 0 mamífero é preferivelmente um humano, mas pode ser, e.g., uma vaca, um porco, uma galinha, um gato ou um cachorro, visto que os patogénios abrangidos aqui podem ser problemáticos ao longo de uma gama extensiva de espécies. Quando a vacina for para a utilização profilática, o ser humano é preferivelmente uma criança (e.g., uma criança ou lactente) ou adolescente; onde a vacina for para a utilização terapêutica, o ser humano é preferivelmente um adolescente ou um adulto. Uma vacina visada para crianças pode também ser administrado em adultos, por exemplo, para avaliar a segurança, dosagem, imunogenicidade, etc.

Um modo de verificar a eficácia do tratamento terapêutico envolve monitorizar a infecção do patogénio após a administração das composições imunogénicas reveladas aqui. Um modo de verificar a eficácia do tratamento profilático envolve monitorizar as respostas imunes, sistemi-camente (tal como monitorizar o nível de IgGl e a produção de IgG2a) e/ou mucosamente (tal como monitorizar o nivel de produção de IgA), contra os antigénios incluídos ou administrados juntos com as composições imunogénicas reveladas aqui após administração da composição imunogénica (e o antigénio se administrado separadamente). Tipicamente, as respostas do anticorpo no soro antigénio-específicas são determinadas pós-imunização mas pré-desafio enquanto que as respostas do anticorpo na mucosa antigénio-específicas são determinadas pós-imunização e pós-desafio.

Outro modo de avaliar a imunogenicidade das composições imunogénicas reveladas aqui onde o antigénio é uma proteína é expressar as proteínas recombinantemente por triar soros de paciente ou secreções mucosas por meio de imunotingimento e/ou microarranjo. Uma reação positiva entre a proteína e a amostra do paciente indica que o paciente montou uma resposta imune para a proteína em questão. Este método pode também ser utilizado para identificar antigénios imunodominantes e/ou epítopos dentro dos antigénios da proteína. A eficácia das composições imunogénicas pode também ser determinada in vivo mediante desafio de modelos animais apropriados do patogénio de infecção de interesse.

As composições imunogénicas reveladas aqui em ge- ral serão administradas diretamente a um indivíduo. Libertação direta pode ser realizada por meio de injeção pa-rentérica (e.g., subcutânea, intraperitoneal, intravenosa, intramuscularmente, ou para o espaço intersticial de um tecido) , ou mucosalmente, tal como por administração retal, oral (e.g., comprimido, pulverização), mucosa vaginal, tópica, transdérmica ou transcutânea, intranasal, ocular, auricular, pulmonar ou outra.

As composições imunogénicas podem ser utilizadas para suscitar imunidade sistémica e/ou mucosa, preferivelmente suscitar uma imunidade sistémica e/ou mucosa intensificada.

Preferivelmente, a imunidade sistémica e/ou mucosa intensificada é refletida numa resposta imune intensificado de THl e/ou de TH2. Preferivelmente, a resposta imune intensificada inclui um aumento na produção de IgGl e/ou IgG2a e/ou IgA. A dosagem pode ser por um programa de dose simples ou um programa de doses múltiplas. Doses múltiplas podem ser utilizadas num programa de imunização primária e/ou num programa de imunização de reforço, num programa de doses múltiplas, as várias doses podem ser dadas pelas mesmas vias ou diferentes, e.g., um início parentérico e reforço mucoso, um início mucoso e reforço parentérico, etc. Doses múltiplas tipicamente serão administradas pelo menos 1 semana uma da outra (e.g., cerca de 2 semanas, cerca de 3 semanas, cerca de 4 semanas, cerca de 6 semanas, cerca de 8 semanas, cerca de 10 semanas, cerca de 12 semanas, cerca de 16 semanas, etc.).

As composições imunogénicas reveladas aqui que incluem um ou mais antigénios ou são utilizadas juntas com um ou mais antigénios podem ser utilizadas para tratar crianças e adultos. Desse modo um indivíduo humano pode ser menor que 1 ano de idade, 1-5 anos de idade, 5-15 anos de idade, 15-55 anos de idade, ou pelo menos 55 anos de idade. Indivíduos preferidos para receber tais composições imunogénicas são o ancião (e.g., >50 anos de idade, >60 anos de idade, e preferivelmente >65 anos), o jovem (e.g., <5 anos de idade) , pacientes hospitalizados, os trabalhadores de cuidado médico, pessoal de serviço armado e militar, mulheres grávidas, os pacientes cronicamente doentes, ou imunodeficientes. As composições imunogénicas não são somente adequadas para estes grupos, porém, e podem ser utilizadas mais genericamente numa população.

As composições imunogénicas reveladas aqui que incluem um ou mais antigénios ou são utilizadas juntas com um ou mais antigénios podem ser administradas aos pacientes substancialmente ao mesmo tempo que (e.g., durante a mesma consulta ou visita médica a um profissional de cuidado médico ou centro de vacinação) outras vacinas, e.g., substancialmente ao mesmo tempo que uma vacina de sarampo, uma vacina anticaxumba, uma vacina de rubéola, uma vacina de MMR, uma vacina de varicela, uma vacina de MMRV, uma vacina de difteria, uma vacina antitetânica, uma vacina de coqueluche, uma vacina de DTP, uma vacina de H. influenzae tipo b conjugada, uma vacina de poliovirus inativada, uma vacina do vírus da hepatite B, uma vacina meningocócica conjugada (tal como uma vacina de A C W135 Y tetravalente), uma vacina do vírus sincicial respiratória, etc.

Compostos da Fórmula (I) formulados com adjuvantes contendo alumínio

Em alguns casos, pelo menos um composto da Fórmula (I) aqui proporcionado, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, é combinado com um adjuvante contendo alumínio e uma quantidade eficaz de um ou mais antigénios, resultando numa composição imunogénica. Em tais composições imunogénicas, o composto da Fórmula (I) é ligado ao adjuvante contendo alumínio. Em tais composições imunogénicas, o antigénio é qualquer antigénio aqui proporcionado. Em tais composições imunogénicas, o antigénio e o composto da Fórmula (I), um agonista de TLR7, são coliber-tados a um sítio desejado.

Em tal composição imunogénica, a ligação de um composto da Fórmula (I) a um adjuvante contendo alumínio não interfere com a ligação do antigénio ao adjuvante contendo alumínio. A título de exemplo apenas, Figura 1 demonstra que a adsorção dos antigénios de Neisseria meningite para hidróxido de alumínio não é afetada pela ligação de um composto da Fórmula (I) ao adjuvante de hidróxido de alumínio.

Tais composições imunogénicas podem ser úteis como vacinas. Tais vacinas podem ser profiláticas (i.e., previnem a infecção) ou terapêuticas (i.e., tratam a infecção). 0(s) composto(s) da Fórmula (I) fornecido(s) aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do(s) mesmo(s), é/são agonista(s) de TLR7 e é/são poten-ciador(es) imune(s) que dá(ão) um efeito imunoestimulante sob administração quando comparado com as formulações imunogénicas não contendo nenhum composto da Fórmula (I) . Em alguns casos, os compostos da Fórmula (I) dão um efeito imunoestimulante sob administração quando inclusos numa composição imunogénica tendo um ou mais agentes imunor-reguladores, enquanto noutros casos, os compostos da Fórmula (I) dão um efeito imunoestimulante sob administração quando inclusos numa composição imunogénica sem a presença de outros agentes imunorreguladores.

Em alguns casos, tais composições imunogénicas intensificam a resposta imune através da retenção do composto da Fórmula (I) no sítio de injeção. Ao invés ligar um agonista de TLR a alum, uma estratégia alternativa para aumentar o tempo de permanência dos agonistas de TRL no sítio de injeção é modificar as propriedades de hidrofilicidade, hidrofobicidade e/ou de solubilidade do agonista de TLR. Compostos não polares (hidrofóbicos, ou insolúveis) podem ter tempo de permanência aumentado num sítio de injeção quando administrados intramuscularmente, assim diminuindo os níveis de exposição sistémica comparada aos compostos polares (hidrófilos, ou solúveis) com potência similar mostrado depuração do sítio de injeção mais rápida e exposição sistémica mais alta. Similarmente, os compostos não polares da Fórmula (I) podem exibir estas propriedades úteis.

Tais composições imunogénicas podem incluir um veículo farmaceuticamente aceitável tal como, mas não é limitado a, proteínas, polissacarídeos, ácidos polilácti-cos, ácidos poliglicólicos, aminoácidos poliméricos, copo-límeros de aminoácido, sacarose, trealose, lactose, agregados de lípido (tais como gotículas de óleo ou lipos-somas), e partículas de vírus inativo. As composições imunogénicas tipicamente também contêm diluentes, tais como água, solução salina, e glicerol, e opcionalmente contêm outros excipientes, tais como agentes umectantes ou emul-sionantes, e substâncias tampão de pH. Tais composições imunogénicas incluem um ou mais adjuvantes adicionais aqui descritos.

Exemplos

Os exemplos seguintes foram oferecidos ilustrar, mas não limitar, os compostos da Fórmula (I) aqui proporcionados, e a preparação de tais compostos. Síntese dos compostos de partida

Preparação de 5-metil-2- (4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxabo-rolan-2-il)-fenilcarbamato de terc-butilo (A-l)

Passo 1: 2-bromo-5-metilfenilcarbamato de terc-butilo A uma solução de 2-bromo-5-metilonilina (1,0 eq.) em tetra-hidrofurano (0,2 M) a 0°C sob atmosfera de N2 foi adicionado, gota a gota, NaHMDS 1 M (2,5 eq.)· A reação foi agitada durante 15 minutos a 0°C, e uma solução de dicarbonato de di-tert-butilo em tetra-hidrofurano foi adicionada. A reação foi aquecida até à temperatura ambiente de um dia para o outro. O solvente foi evaporado, e o resíduo resultante foi extinguido com solução aquosa 0,1N de HC1. A suspensão aquosa foi extraída duas vezes com acetato de etilo. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em MgSCh anidro, e concentradas in vacuo. 0 material bruto foi purificado por meio de cromatografia "flash" num sistema de COMBIFLASH® (ISCO) utilizando acetato de etilo a 0-5% em hexano para dar 2-bromo-5-metilfenilcarbamato de tert-butilo como uma óleo amarelo claro.

Passo 2: 5-metil-2- (4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan- 2-il) fenilcarbamato de tert-butilo 2-bromo-5-metilfenilcarbamato de tert-butilo (do passo anterior) (1,0 eq.), 4,4,4' , 4',5,5,5',5'-octametil- 2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (1,5 eq.), dicloro[1,1'-bis- (difenilfosfino)ferroceno]paládio (II) (5%), e acetato de sódio (4,5 eq.) foram misturados em dioxano (0,2 M) sob atmosfera de N2. A reação foi aquecida até 100°C e agitada de um dia para o outro. A suspensão resultante foi arrefecida até à temperatura ambiente, diluída com éter, filtrada por meio de celite, e o filtrado foi concentrada in vacuo. O material bruto foi purificado por meio de cromatografia "flash" num sistema de COMBIFLASH® (ISCO) utilizando éter a 0-8% em hexano para dar 5-metil-2-(4,4,5,5-tetrametil-l,3, 2-dioxaborolan-2-il)fenilcarbamato de tert-butilo (A-l) .

Preparação de 4- (2- (5-amino-8-metilbenzo[f] [1,7]naftiridin- 2-il)etil)-3-metilfenol (B-4)

Esquema B

Passo B-l: 3-cloro-5-((4-metoxi-2-metilfenil)etlnil) pico-linonitrilo (B-l) A um balão de fundo redondo com tampa com septos foi adicionado l-etinil-4-metoxi-2-metilbenzeno (1,1 eq), 3,5-dicloropicolinonitrilo (1 eq.) , trietilamina (5 eq.), e DMF anidro (0,2 M) . A mistura foi desgasifiçada (vácuo) e azoto fluxado três vezes. Cul (0,05 eq.) e bis(trife-nilfosfina) dicloro-paládio(II) (0,05 eq) foram adicionados e o septo foi substituído com um condensador de refluxo e o balão foi aquecido para 60°C de um dia para o outro sob atmosfera de azoto. Sob conclusão da reação como monito- rizado por TLC, o conteúdo do balão foi carregado numa coluna pré-aquecida de gel de sílica grande com hexanos. Cromatografia "flash" (gel de sílica, hexanos:EtOAc (1:4%)) proporcionou o produto 3-cloro-5-((4-metoxi-2- metilfenil)etinil)picolinonitrilo (B-l).

Passo B-2: 2-((4-metoxi-2-metilfen±l)etinil)-8-metilbenzo- [f][l,7] naftiridin-5-amina (B-2) A um balão de fundo redondo com condensador de refluxo foram adicionados 3-cloro-5-((4-metoxi-2-metilfe-nil)etinil)picolinonitrilo (B-l) (1 eq.), 5-metil-2-(4,4, 5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2-il)fenilcarbamato de tert-butilo (A-l) (1,25 eq.), K3PO4 (2 eq.), tris(diben- zilidenoacetona)dipaládio (0) (0,05 eq.), e 2-diciclo- hexilfosfino-2',6'-dimetoxibifenilo (Sphos) (0,1 eq.). n- butanol e água (5:2, 0,2 M) foram adicionados, e o conteúdo foi desgasifiçado (vácuo seguido por jacto de azoto) durante três vezes. A mistura de reação foi agitada vigorosamente sob azoto a 100°C de um dia para o outro num banho de óleo. O conteúdo foi arrefecido e absorvido em 200 ml de água seguida por extração com cloreto de metileno. As camadas orgânicas combinadas foram secas (Na2S04) e concentradas. Cromatografia "flash" (gel de sílica, 0-50% de

EtOAc em CH2CI2) proporcionou o produto 2-((4-metoxi-2-metilfenil)etinil)-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-5-amina (B-2).

Passo B-3: 2-(4-metoxi-2-metilfenetil)-8-metilbenzo[f]- [1,7]naftiridln-5-amina (B-3) 2-(4-metoxi-2-metilfenetil)-8-metilbenzo[f] [1,7]-naftiridin-5-amina foi preparada a partir de 2-((4-metoxi- 2-metilfenil)etinil)-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-5-amina (do passo anterior). A um balão de fundo redondo foi adicionada 2-((4-metoxi-2-metilfenil)etinil)-8-metilbenzo-[f] [ 1,7 ] naftiridin-5-amina (1 eq.) com uma barra de agitação. Etanol e cloreto de metileno (1:2, 0,2 M) foram adicionados, seguidos por paládio em carbono (pó ativado, húmido, 10% em carbono, 0,1 eq.) . O conteúdo foi desgasifiçado (vácuo) seguido por meio de jacto de hidrogénio (três vezes). A mistura de reação foi agitada vigorosamente à temperatura ambiente de um dia para o outro, sob um balão de hidrogénio. Depois a mistura de reação foi filtrada por meio de uma almofada de celite, e a almofada de celite foi lavada subsequentemente com cloreto de metileno e EtOAc até que o filtrado não tivesse nenhuma absorção de UV. Lavagens orgânicas combinadas foram concentradas. Cromatografia "flash" (gel de silica, 0-50% de EtOAc em CH2CI2) proporcionou o produto 2-(4-metoxi-2-metilfenetil)-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-5-amina. 1H RMN (CDCI3) : δ 8,53 (d, 1H) , 8,29 (d, 1H) , 8,01 (d, 1H) , 7,44 (s, 1H) , 7,12 (dd, 1H) , 6,93 (d, 1H) , 6,67 (d, 1H) , 6,60 (dd, 1H) , 5,93 (si, 2H) , 3,70 (s, 3H) , 3, 05-3, 00 (dd,

2H), 2, 93-2,88 (dd, 2H) , 2,44 (s, 3H) , 2,19 (s, 3H) . EMBR

[M+H] = 358,2

Passo B-4: 4- (2- (5-amino-8-metilbenzo [f] [1,7] naftiridín-2- il)etil)-3-metilfenol (B-4) A uma solução agitada de 2-(4-metoxi-2-metilfene-til)-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-5-amina (do passo anterior) em cloreto de metileno (0,2 M) num banho de gelo-água foi adicionada solução IN de BBr3 (2 eq) em CH2CI2, gota a gota. Em 30 minutos, a reação foi extinguida com metanol e concentrada in vacuo para obter um resíduo bruto. 0 material bruto foi purificado por meio de cromatografia "flash" num sistema de COMBIFLASH® (ISCO) utilizando 0-20% de metanol em diclorometano para dar 4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenol (B-4) como um sólido branco. J-H RMN (DMSO-d6) : δ 8,99 (s, 1H) , 8,75 (d, 1H) , 8,60 (d, 1H) , 8,27 (d, 1H) , 7,28 (s, 1H) , 7,09 (dd, 1H) , 6,99 (si, 2H) , 6,88 (d, 1H) , 6,49 (d, 1H) , 6,42 (dd, 1H), 3, 02-2, 96 (dd, 2H) , 2,86-2,81 (dd, 2H), 2,38 (s, 3H), 2,13 (s, 3H). EMBR [M+H] = 344,2.

Preparação de (5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)-benzo-[f] [ 1 , 7]naftiridin-8-il)metanol (2-1: ver esquema 2)

Passo 1: 5-((tert-butildimetilsililoxi)metil)-2-clorofenil-carbamato de tert-butilo A uma solução de 5-((tert-butildimetilsililoxi) metil) -2-cloroanilina (comercialmente disponível) (1,0 equiv.) em THF (0,2 M) a 0°C sob atmosfera de N2 é adicionado, gota a gota, NaHMDS 1 M (2,5 equiv.). A reação é agitada durante 15 minutos a 0°C, e uma solução de dicarbonato de di-tert-butilo em THF é adicionada. A reação é aquecida até à temperatura ambiente de um dia para o outro. O solvente é evaporado, e o resíduo resultante é extinguido com solução aquosa 0,1N de HCl. A suspensão aquosa é extraída duas vezes com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas são lavadas com salmoura, secas em MgSCb anidro, e concentradas in vacuo. O material bruto é purificado por meio de cromatografia "flash" num sistema de COMBIFLASH® (ISCO) utilizando 0-30% de EtOAc/Hexanos para dar 5-((tert-butildimetilsililoxi)metil)-2-clorofenilcarba-mato de tert-butilo como um óleo incolor.

Passo 2: 5-((tert-butildimetilsililoxi)metil)-2-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenilcarbamato de tert-butilo 5-((tert-butildimetilsililoxi)metil)-2-clorofe-nilcarbamato de tert-butilo (do passo 1) (1,0 equiv.), 4,4,4^4^5,5,5^51 - octametil-2,2 ' -bi (1,3, 2-dioxaborolano) (3,0 equiv.), Pd2dba3 (2,5%), XPhos (10%), e KOAc (3 equiv.) são misturados em dioxano (0,2 M) sob atmosfera de N2. A reação é aquecida até 110°C e agitada de um dia para o outro. A suspensão resultante é arrefecida até à temperatura ambiente, diluída com éter, filtrada por meio de celite, e o filtrado é concentrado in vacuo. As camadas orgânicas combinadas são lavadas com salmoura, secas em MgSCb anidro, e concentradas in vacuo. 0 material bruto é purificado por meio de cromatografia "flash" num sistema de COMBIFLASH® (ISCO) utilizando 0-20% de EtOAc/Hexanos para dar 5-((tert-butildimetilsililoxi)metil)-2-(4,4,5,5-tetra-metil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenilcarbamato de tert-butilo como uma espuma branca.

Passo 3: 3-cloro-5-((4-metoxi-2-metilfeníl)etíníl)picolino-nitrilo A um balão de fundo redondo com tampa com septos foram adicionados l-etinil4-metoxi-2-metilbenzeno (comercialmente disponível, 1,1 equiv.), 3,5-dicloropicolinoni-trilo (1 equiv. comercialmente disponível), trietilamina (5 equiv.), e DMF anidro (0,2 M). Submeteu-se a vácuo e jacto de azoto por três vezes. Cul (0,05 equiv.) e bis(trife-nilfosfina)dicloro-paládio(II) (0,05 equiv.) foram adicionados. O septo foi substituído com um condensador de refluxo e o balão foi aquecido para 60°C de um dia para o outro sob atmosfera de azoto. Após conclusão da reação como monitorizado por TLC, o conteúdo do balão foi carregado numa coluna grande de gel de sílica pré-aquecida com hexa-nos. Cromatografia "flash" (gel de sílica, hexanos:EtOAc (1:4%)) proporcionou 3-cloro-5-( (4-metoxi-2-metilfenil)eti-nil)picolinonitrilo.

Passo 4: 8-((tert-butildimetilsililoxi)metil)-2-((4-metoxi- 2-metilfenil)etinil)benzo[f][1,7]naftiridin-5-amina A um balão de fundo redondo com condensador de refluxo foram adicionados 3-cloro-5-((4-metoxi-2-metil-fenil)etinil)picolinonitrilo (do passo 3) (1 equiv.), 5- ((tert-butildimetilsililoxi)metil)-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenilcarbamato de tert-butilo (do passo 2) (1,25 equiv.), K3PO4 (2 equiv.), tris(diben- zilidenoacetona)dipaládio(0) (0,05 equiv.), e 2-Diciclo- hexilfosfino-2',6'-dimetoxibifenilo (0,1 equiv.). n-butanol e água (5:2, 0,2 M) foram adicionados, e o conteúdo é desgasifiçado (vácuo seguido por jacto de azoto) por três vezes. A mistura de reação foi agitada vigorosamente sob azoto a 100°C de um dia para o outro num banho de óleo. O conteúdo foi arrefecido e absorvido em água seguido por extração com cloreto de metileno. As camadas orgânicas combinadas foram secas (Na2S04) e concentradas. Cromato-grafia "flash" (gel de silica, 0-50% de EtOAc em CH2CI2) proporcionou 8-((tert-butildimetilsililoxi)metil)-2-((4-me-toxi-2-metilfenil)etinil)benzo[f][1,7]naftiridin-5-amina como um sólido.

Passo 5: 8-((tert-butildimetilsililoxi)metil)-2-(4-metoxi- 2-metilfenetil)benzo[f][1, 7]naftiridin-5-amina A um balão de fundo redondo foi adicionada 8-((tert-butildimetilsililoxi)metil)-2-((4-metoxi-2-metil-fenil)etinil)benzo[f][1,7]naftiridin-5-amina (do passo 4) (1 equiv.) com uma barra de agitação. Etanol e cloreto de metileno (1:2, 0,2 M) foram adicionados, seguidor por paládio em carbono (pó ativado, húmido, 10% em carbono, 0,1 equiv.)· O conteúdo foi submetido a vácuo seguido por jacto de hidrogénio por três vezes. A mistura de reação foi agitada vigorosamente sob balão de hidrogénio à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois a mistura de reação foi filtrada por meio de uma almofada de celite, e a almofada de celite foi lavada subsequentemente com cloreto de metileno e EtOAc até que o filtrado não tivesse nenhuma absorção de UV. As lavagens orgânicas combinadas foram concentradas. Cromatografia "flash" (gel de silica, 0-50% de EtOAc em CH2CI2) proporcionou 8-((tert-butildimetilsililo-xi)metil)-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)benzo[f][l,7]naftiri-din-5-amina como um sólido amarelo.

Passo 6: 5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)benzo[f][1, 7]-naftiridin-8-il)metanol (2-1) 8-((tert-butildimetilsililoxi)metil)-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-5-amina (do passo 5) (1,0 equiv.) e TBAF (1,1 equiv.) em THF são agitados à temperatura ambiente de um dia para o outro. A reação é extinguida com NaHC03 saturado. As duas fases são separadas, e a camada aquosa é extraída duas vezes com Et20. As camadas orgânicas combinadas são lavadas com salmoura, secas em MgSCb anidro, e concentradas in vacuo. 0 material bruto é purificado por meio de cromatografia "flash" num sistema de COMBIFLASH® (ISCO) utilizando 0-5% de MeOH/DCM para dar 5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)-benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)metanol (2-1) como um sólido branco. 1H RMN (acetona-d6) : δ 8,79 (s, 1H), 8,73 (s, 1H) , 8,35 (d, 1H) , 7,61 (s, 1H) , 7,33 (d, 1H) , 7,09 (d, 1H) , 6,75 (d, 1H) , 6,68 (dd, 1H) , 6,57 (s lg, 2H) , 4,47 (d, 2H) , 4,32 (t, 1H) , 3,58 (s, 3H) , 3,17 (t, 2H) , 3,04 (t, 2H) , 2,30 (s, 3H). EMBR [M+H] = 374,2. Síntese de Compostos Exemplificativos

Exemplo 1 (Tabela 1: Composto 6) Síntese de ácido 3-(2-(2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f]-[l,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)etoxi)etoxi)-1,1-difluoropropilfosfónico (6)

Passo 1: 1,l-difluoro-3-(2-(2-iodoetoxi)etoxi)propilfosfo- nato de dietilo (1-1) A uma solução de difluorometilfosfonato de dietilo (1,0 equiv.) em THF (0,8 M) a -78°C foi lentamente adicionada uma solução de LDA (2 M, 1,1 equiv.) em hepta-no/THF/etilbenzeno, e a mistura foi agitada vigorosamente durante 30 minutos, num balão de reação separado, uma solução de 1,2-bis(2-iodoetoxi)etano (1,0 equiv.) em THF (0,8 M) foi arrefecida até -78°C. Para esta solução foi transferida, por meio de cânula, a solução de alquil-litio recentemente preparada e a mistura de reação foi deixada a agitar durante 1 hora a -78°C. Neste momento, o banho de arrefecimento foi removido e a mistura de reação foi deixada aquecer até à temperatura ambiente. A mistura de reação foi depois extinguida com uma solução aquosa 1 M de HC1. A mistura resultante foi transferida para um funil separador e lavada com CH2CI2 três vezes. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2S04 anidro e os voláteis foram removidos in vacuo. O resíduo resultante foi purificado por um sistema de COMBIFLASH® (ISCO) utilizando CH2CI2 para proporcionar 1,l-difluoro-3-(2-(2-iodoetoxi)-etoxi)propilfosfonato de dietilo (1-1) como um óleo amarelo. XH RMN (CDCI3) : δ 4,23-4,31 (m, 4H) , 3, 75-3, 80 (m, 4H) , 3, 60-3, 67 (m, 4H) , 3,26 (t, 2H) , 2,33-2,50 (m, 2H) , 1,38 (t, 6H) .

Passo 2: Sintese de 2- (2- (2- (4-(2- (5-amino-8-metilbenzo-[f][1, 7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)etoxi)etoxi)-1,1-difluoroetilfosfonato de dietilo (1-2) A uma solução de 4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f]-[ 1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenol (B-4) (1,0 equiv.) em dimetilf ormamida (0,10 M) a 22°C foi adicionada dispersão de hidreto de sódio a 60% em óleo mineral (1,5 equiv.) e a mistura resultante foi deixada a aqitar durante 30 minutos. Nesta altura, foi adicionado 1,1-difluoro-3-(2-(2-iodoetoxi)etoxi)propilfosfonato de dietilo (1,2 equiv.) a esta mistura. A mistura de reação foi depois deixada a agitar durante 18 horas após o que foi diluída com acetato de etilo e água. As camadas bifásicas foram separadas e a camada orgânica foi lavada duas vezes com água. A camada orgânica foi seca em Na2S04 anidro e os voláteis foram removidos in vacuo. O resíduo resultante foi purificado por um sistema de COMBIFLASH® (ISCO) utilizando gradiente de 0-50% de acetato de etilo em hexanos para proporcionar 3-(2 - (2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [l,7]naftiridin-2-il)-etil)-3-metilfenoxi)etoxi)etoxi)-1,1-difluoropropilfosfonato de dietilo (1-2) como um sólido.

Passo 3: Sintese de ácido 3-(2- (2- (4-(2- (5-amino-8-metil-benzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)etoxi)-etoxi)-1,1-difluoroetilfos fónico (6) A uma solução de 3-(2-(2-(4-(2-(5-amino-8-metil-benzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)etoxi)- etoxi)-1,1-difluoropropilfosfonato de dietilo (1-2) (1,0 equiv.) em CH2CI2 (0,10 M) a 0°C foi lentamente adicionado brometo de trimetilsililo (10 equiv.). Após 1 hora, o banho de gelo foi removido e a mistura de reação foi deixada a agitar a 22°C durante 18 horas. Neste momento, os voláteis foram removidos in vacuo e o resíduo resultante foi purificado por meio de HPLC de Fase Reversa utilizando um gradiente de 20-90% de NH4OAC 0,5 mM (em MeCN) até NH4OAC 10 mM (em água) para libertar ácido 3-(2-(2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [l,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)-etoxi)etoxi)-1,1-difluoropropilfosfónico (6) como um sólido. ΧΗ RMN (Dimetilsulfóxido-d6) : δ 8,83 (s, 1H) , 8,68 (s, 1H) , 8,32 (s, 1H) , 7,34 (s, 1H) , 7,14 (d, 1H) , 7,09 (lg, 2H) , 7,08 (d, 1H), 6,74 (s, 1H) , 6,68 (d, 1H) , 4,01 (t, 2H) , 3,70 (t, 2H) , 3,61 (t, 2H) , 3, 54-3, 59 (m, 2H) , 3,48- 3,50 (m, 2H) , 3,07 (t, 2H) , 2,94 (t, 2H) , 2,43 (s, 3H) , 2,25 (s, 3H), 2,06-2,21 (m, 2H). EMBR [M+H] = 590,2.

Exemplo de Referência 2 (Tabela 1: Composto 1) Síntese de ácido 3-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]na-ftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)propilfosfónico (1)

Passo 1: 3-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo [f] [1,7 ] naftiridin-2-±1)etil)-3-metilfenoxi)propilfosfonato de dietilo 3- (4 - (2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [l,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)propilfosfonato de dietilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 2, mas utilizando 3-bromopropilfosfonato de dietilo comercialmente disponível como reagente.

Passo 2: ácido 3-(4-(2-(5-am±no-8-metilbenzo [f] [1,7] nafti-ridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)propilfos fónico Ácido 3-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][l,7]nafti-ridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)propilfosfónico (1) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 3, mas utilizando 3-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f]- [1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)propilfosfonato de dietilo do passo anterior. TFA foi acrescentado à amostra de 1H RMN para solubilizar o composto para análise. A ΧΗ RMN (Dimetilsulfóxido-d6) obtida para ácido 3-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][l,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfe-noxi) propilf osf ónico (1) foi: δ 9,72 (lg, 1H) , 9,01 (s, 1H) , 8,96 (lg, 1H) , 8,85 (s, 1H) , 8,54 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,54 (s, 1H) , 7,42 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 7,08 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,74 (s, 1H) , 6,66 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 3,95 (t, 2H, J = 6,4 Hz), 3,14 (t, 2H, J = 8,6 Hz), 2,97 (t, 2H, J = 8,6 Hz), 2,50 (s, 3H), 2,27 (s, 3H) , 1,91-1,81 (m, 2H) , 1, 67-1,56 (m, 2H) . EMBR [M+H] = 466,2

Exemplo 3 (Tabela 1: Composto 2) Síntese de di-hidrogenofosfato de 4-(2-(5-amino-8-metil-benzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenilo (2)

Passo 1: dibenzilfosfato de 4-(2- (5-amino-8-metilbenzo[f]-[1, 7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenilo

Dibenzilfosfato de 4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f]-[ 1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 2, mas utilizando fosforocloridato de dibenzilo comercialmente disponível como reagente.

Passo 2: di-hidrogenofosfato de 4-(2-(5-amino-8-metilben-zo[f][1, 7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenilo

Dibenzilfosfato de 4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[fΙΕ 1, 7 ] naf tiridin-2-il) etil)-3-metilf enilo (1,0 equiv.) e Pd a 10%/C (20% equiv. em peso) em MeOH (0,66 M) foram deixados a agitar durante 18 horas sob um balão de H2. Nesta altura, a mistura de reação foi passada através de uma almofada de celite, lavando com uma mistura 2:1 de CHCl3:MeOH. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2S04 anidro e os voláteis foram removidos in vacuo. 0 resíduo resultante foi purificado por meio de HPLC de Fase Reversa utilizando um gradiente de 20-90% de NH4OAC 0,5 mM (em MeCN) até NH4OAC 10 mM (em água) para dar di-hidro-genofosfato de 4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiri-din-2-il)etil)-3-metilfenilo (2) como um sólido. TFA foi acrescentado à amostra de 1H RMN para solubilizar o composto para análise. 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6): δ 9,69 (lg, 1H), 9,33 (s, 1H) , 9,03 (s, 1H) , 8,87 (s, 1H) , 8,54 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,51 (s, 1H) , 7,42 (d, 1H, J = 9,4

Hz), 7,22 (s, 1H), 7,17 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,10 (s, 1H), 6,97 (s, 1H) , 6,92 (d, 1H, J = 6,1 Hz), 3,15 (t, 2H, J = 6,8 Hz), 3,00 (t, 2H, J = 6,8 Hz), 2,50 (s, 3H) , 2,29 (s, 3H). EMBR [M+H] = 424,1

Exemplo 4 (Tabela 1: Composto 3) Síntese de ácido (4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [1,7]nafti-ridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)metilfosfónico (3)

Passo 1: (4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][l,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)metilfosfonato de dietilo (4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][l,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)metilfosfonato de dietilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 2, mas utilizando 4-metilbenzenossulfonato de (di-etoxifosforil)metilo comercialmente disponível como reagente .

Passo 2: ácido (4- (2- (5-amino-8-metilbenzo [f] [1,7] naftiri-din-2-il)etil)-3-metilfenoxi)metilfos fónico Ácido (4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiri-din-2-il)etil)-3-metilfenoxi)metilfosfónico (3) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 3, mas utilizando (4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f]- [l,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)metilfosfonato de dietilo do passo anterior. A 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6) obtida para ácido (4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [1,7]na-ftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)metilfosfónico (3) foi: δ 8,86 (lg, 1H) , 8,67 (lg, 1H) , 8,34 (d, 1H, J = 10,4 Hz), 7,37 (s, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,14 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,05 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 6,73 (s, 1H) , 6,69 (d, 1H, J = 8,6

Hz), 6,60 (s, 1H), 3,70-3,61 (m, 2H) , 3,10 (t, 2H, J = 8,8 Hz), 2,94 (t, 2H, J = 8,8 Hz), 2,45 (s, 3H), 2,25 (s, 3H). EMBR [M+H] = 438,2

Exemplo 5 (Tabela 1: Composto 4) Síntese de ácido 5-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [1,7]-naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)-1,1-difluoropentilfos-fónico (4)

Passo 1: 5-bromo-l,1-difluoropentilfosfonato de dietilo 5-bromo-l,1-difluoropentilfosfonato de dietilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 1, mas utilizando 1,4-dibromobutano comercialmente disponível como reagente.

Passo 2: 5-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][l,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)-1,1-difluoropentilfosfonato de dietilo 5-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][l,7]naftiridin- 2-il)etil)-3-metilfenoxi)-1,1-difluoropentilfosfonato de dietilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 2, mas utilizando 5-bromo-l,1-difluoropentilf osfonato de dietilo do passo anterior como reagente.

Passo 3: ácido 5- (4-(2- (5-amino-8-metilbenzo [f] [1,7] nafti-ridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)-1,1-difluoropentilfos fónico lâl Ácido 5-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [l,7]nafti-ridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)-1,1-difluoropentilfosfónico (4) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 3, mas utilizando 5-(4-(2-(5-amino-8-metil-benzo[f] [1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi) -1,1-di-fluoropentilfosfonato de dietilo do passo 2, TFA foi acrescentado à amostra de 1H RMN para solubilizar o composto para análise. A 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6) obtida para ácido 5-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)-etil)-3-metilfenoxi)-1,1-difluoropentilfosfónico (4) foi: δ 9,70 (lg, 1H) , 9,33 (lg, 1H) , 8,98 (s, 1H) , 8,84 (s, 1H) , 8,50 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,52 (s, 1H) , 7,40 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,06 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,74 (s, 1H) , 6,68 (d, 1H, J = 10,8 Hz), 3,91 (t, 2H, J = 6,2 Hz), 3,14 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 2,97 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 2,50 (s, 3H), 2,27 (s, 3H) , 2,13-1,94 (m, 2H) , 1,78-1,70 (m, 2H) , 1, 66-1,59 (m, 2H). EMBR [M+H] = 530,2

Exemplo 6 (Tabela 1: Composto 5) Síntese de ácido 4-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [1,7]na-ftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)-1,1-difluorobutilfosfó-nico (5)

Passo 1: 4-bromo-l,1-difluorobutilfosfonato de dietilo 4-bromo-l,1-difluorobutilfosfonato de dietilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1- Passo 1, mas utilizando 1,3-dibromopropano comercialmente disponível como o reagente.

Passo 2: 4- (4- (2- (5-amino-8-metilbenzo [f] [1,7] naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)-1,1-difluorobutilfosfonato de dietilo 4-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin- 2- il)etil)-3-metilfenoxi)-1,1-difluorobutilfosfonato de dietilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 2, mas utilizando 4-bromo-l,1-difluorobutilf osfonato de dietilo do passo anterior como reagente.

Passo 3: ácido 4-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo [f] [1,7]nafti-ridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)-1,1-difluorobutilfosfónico (5) Ácido 4-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][l,7]nafti-ridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)-1,1-difluorobutilfosfónico (5) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 3, mas utilizando 4-(4-(2-(5-amino-8-metil-benzo[f] [1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)-1, 1-di-fluorobutilfosfonato de dietilo do passo 2, TFA foi acrescentado à amostra de 1H RMN para solubilizar o composto para análise. A 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6) obtida para ácido 4-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][ 1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)-1,1-difluorobutilfosfónico (5) foi: δ 9,71 (lg, 1H), 9,33 (lg, 1H), 9,00 (s, 1H), 8,85 (s, 1H), 8,54 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,53 (s, 1H) , 7,42 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,08 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,76 (s, 1H) , 6,70 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 3,97 (t, 2H, J = 6,2 Hz), 3,15 (t, 2H, J = 8,5 Hz), 2,98 (t, 2H, J = 8,5 Hz), 2,50 (s, 3H) , 2,28 (s, 3H) , 2,21-2,06 (m, 2H) , 1,97-1, 87 (m, 2H) . EMBR [M+H] = 516, 2 EXEMPLO 7 (Tabela 1: Composto 7)

Sintese de ácido 3-(2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [1,7] — naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)etoxi)-1,1-difluoropro-pilfosfónico (7)

Passo 1: 3-(2-bromoetoxi)-1,1-difluoropropílfosfonato de dietilo

Um balão de fundo redondo seco em estufa foi carregado com THF seco (1,07 M) e di-isopropilamina (2,0 equiv.) . O balão foi arrefecido num banho de gelo seco-acetona, e tratado com solução de n-butil-lítio (1,6 equiv.) em ciclo-hexano (1,52 M), gota a gota, por meio de seringa. O balão foi transferido para um banho de gelo-água após conclusão da adição, e agitado durante 30 minutos. O balão foi depois rearrefecido novamente no banho de gelo seco-acetona, e tratado com uma solução de difluorometil-fosfonato de dietilo (1,0 equiv.) em HMPA (1:1 v/v) por meio de seringa. A agitação foi deixada prosseguir durante uma hora. À mistura de reação anterior, uma solução arrefecida de l-bromo-2-(2-bromoetoxi)etano (3,0 equiv.) em THF (3 M) foi adicionada rapidamente por meio de uma seringa, e a reação foi deixada a agitar durante outras 3 horas antes de se extinguir com HC1 IN. O balão foi aquecido até à temperatura ambiente, e o pH foi ajustado para <4 com HC1 IN. A mistura foi extraída com EtOAc (3x). Os extratos orgânicos combinados foram secos em Na2S04 anidro, e concentrados in vacuo. O material bruto foi purificado por Combiflash utilizando EtOAc a 0-75% em hexanos, seguido por RP-HPLC (TFA a 0, 035% em ACN: TFA a 0,05% em H2O, coluna C18) para proporcionar 3-(2-bromoetoxi)-1,1-difluoropropilfosfonato de dietilo como um óleo amarelo pálido.

Passo 2: 3-(2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo [f] [1,7] naftiri- din-2-il)etil)-3-metilfenoxi)etoxi)-1,1-difluoropropilfos -fonato de dietilo 3-(2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][l,7]naftiri-din-2-il)etil)-3-metilfenoxi)etoxi)-1,1-difluoropropilfos-fonato de dietilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 2, mas utilizando 3 —(2 — bromoetoxi)-1,1-difluoropropilfosfonato de dietilo do passo anterior como o reagente.

Passo 3: ácido 3- (2- (4-(2- (5-amino-8-metilbenzo [f] [1,7]na-ftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)etoxi)-1,1-difluoropropilf os fónico Ácido 3-(2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [l,7]na-ftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)etoxi)-1,1-difluoropro-pilfosfónico (7) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 3, mas utilizando 3-(2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi) etoxi)-1,1-difluoropropilfosfonato de dietilo do passo 2 anterior. A 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6) obtida para ácido 3-(2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]nafti-ridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)etoxi)-1,1-difluoropropil-fosfónico (7) foi: δ 8,83 (s, 1H) , 8,69 (s, 1H) , 8,35 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,36 (s, 1H) , 7,26 (lg, 2H) , 7,16 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,07 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,75 (s, 1H) , 6,66 (d, 1H, 8,3 J = Hz), 4,00 (t, 2H, J = 4,4 Hz), 3,67 (t, 2H, J = 6,7 Hz), 3,08 (t, 2H, J = 6,8 Hz), 2,94 (t, 2H, J = 6,8

Hz), 2,44 (s, 3H), 2,25 (s, 3H) , 2,22-2,09 (m, 2H) . EMBR

[M+H] = 546,2

Exemplo 8 (Tabela 1: Composto 8) Síntese de ácido 2-(4-((4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7] naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)metil)fenil)-1,1-difluoroetilfosfónico (8)

Passo 1: 2-(4-(bromometil)fenil)-1,1-difluoroetilfosfonato de dietilo 2-(4-(bromometil)fenil)-1,1-difluoroetilfosfonato de dietilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 1, mas utilizando 1,4-bis(bromometil) benzeno comercialmente disponível como reagente.

Passo 2: 2- (4-((4-(2- (5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiri- din-2-il)etil)-3-metilfenoxi)metil)fenil)-1,1-difluoroetil-fosfonato de dietilo 2 - (4 - ( (4-(2-(5-Amino-8-metilbenzo[f] [1,7]naftiri- din-2-il)etil)-3-metiIfenoxi) metil)fenil)-1,1-difluoroetil-fosfonato de dietilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 2, mas utilizando 2-(4-(bromometil)fenil)-1,1-difluoroetilfosfonato de dietilo do passo anterior como reagente.

Passo 3: ácido 2-(4-((4-(2-(5-amino-d-metilbenzo [f] [1,7]na-ftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi) me til)fenil)-1,1-difluoroetilf osfónico Ácido 2-(4-( (4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [1,7]-naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi) metil)fenil)-1,1-di-fluoroetilfosfónico (8) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 3, mas utilizando 2-(4 - ( (4 - (2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [l,7]naftiridin-2-il)-etil)-3-metilfenoxi)metil)fenil)-1,1-difluoroetilfosfonato de dietilo do passo 3 anterior. TFA foi acrescentado à amostra de 1H RMN para solubilizar o composto para análise. A 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6) obtida para ácido 2-(4-((4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)metil)fenil)-1,1-difluoroetilfosfónico (8) foi: δ 9,71 (lg, 1H), 9,35 (lg, 1H), 9,01 (s, 1H), 8,86 (s, 1H), 8,54 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,53 (s, 1H), 7,44 (d, 1H), 7,40 (s, 1H) , 7,38 (s, 1H), 7,29 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 7,24 (s, 1H) , 7,11 (s, 1H), 7,09 (s, 1H) , 6,99 (s, 1H) , 6,85 (s, 1H) , 6,76 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 5,04 (s, 2H) , 3, 84-3, 73 (m, 2H) , 3,15 (t, 2H, J = 8,5 Hz), 2,99 (t, 2H, J = 8,5 Hz), 2,50 (s, 3H), 2,29 (s, 3H). EMBR [M+H] = 578,2

Exemplo 9 (Tabela 1: Composto 9) Síntese de ácido 2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenp>-M i \ benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)-1,1-difluoro-2-oxoetilfQsf nico (9)

Passo 1: 5-amino-2- (4-metoxi-2-metilfenetil)benzo[f][ir η] naftiridino-8-carbaldeido (2-2) A uma solução de (5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfe- netil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)metanol (2-1), 1,0 equiv. em DMSO (0,15 M) à temperatura ambiente foi adicionado IBX (1,5 equiv.). A reação foi agitada durante 2,5 horas e depois diluída com água. A camada aquosa foi extraída com

MeOH a 2%/DCM (4x). As camadas orgânicas combinadas foram secas em MgSCb anidro e concentradas in vacuo. 0 resíduo resultante foi purificado por um sistema de COMBIFLASH® (ISCO) utilizando um gradiente de MeOH a 0-5%/DCM para proporcionar 5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)benzo[fΙΕ 1 , 7 ] naf tiridino-8-carbaldeído (2-2) como um sólido.

Passo 2: 2- (5-amino-2- (4-metoxi-2-metilfenetil)benzo[f]- [1, 7]naftiridin-8-il)-1,1-difluoro-2-hidroxietilfosfonato de dietilo (2-3) A uma solução de difluorometilfosfonato de dietilo (3,0 equiv.) em THF (0,3 M) a -78°C sob atmosfera de azoto foi adicionado, gota a gota, LDA 2 M (3,0 equiv., qualidade comercial). A reação foi agitada a -78°C durante 25 min, e uma solução de 5-amino-2-(4-metoxi-2-metil-fenetil)benzo[f][1,7]naftiridino-8-carbaldeído (2-2) (1,0 equiv.) em THF (0,1 M) foi adicionada lentamente. A reação foi agitada a -78°C durante 1 hora, 0°C durante 1 hora, e depois aquecida até à temperatura ambiente durante 30 minutos. A reação foi extinguida com solução de cloreto de amónio aquoso saturado e extraída duas vezes com acetato de etilo. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em MgSCp anidro, e concentradas in vacuo. Ο resíduo resultante foi purificado por um sistema de COMBIFLASH® (ISCO) utilizando um gradiente de 0-5% de MeOH/DCM para proporcionar 2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metil-fenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)-1,1-difluoro-2-hidro-xietilfosfonato de dietilo (2-3) como um sólido.

Passo 3: 2- (5-amino-2- (4-metoxi-2-metilfenetil)benzo[f]- [1,7]naftiridin-8-il)-1,l-difluoro-2-oxoetilfosfonato_de dietilo (2-4) A uma solução de 2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metil-fenetil)benzo[f][l,7]naftiridin-8-il)-l,1-difluoro-2-hidro-xietilfosfonato de dietilo (2-3) (1,0 equiv.) em 1:1 acetato de DMSO/etilo (0,07 M) foi adicionado IBX (1,5 equiv.)· A reação foi aquecida até 80°C durante 1 hora, e depois arrefecida até à temperatura ambiente. A mistura foi diluída com acetato de etilo e filtrada através de celite. O filtrado foi lavado com água (2x) , salmoura, seco em

MgSCP anidro, e concentrado in vacuo. O resíduo resultante foi purificado por um sistema de COMBIFLASH® (ISCO) utilizando um gradiente de 0-5% de MeOH/DCM para proporcionar 2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)benzo-[f][1,7]naftiridin-8-il)-1,1-difluoro-2-oxoetilfosfonato de dietilo (2-4) como um sólido.

Passo 4: ácido 2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)benzo-[f][1,7]naftiridin-8-il)-1,1-difluoro-2-oxoetilfos fónico m. A uma solução de 2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metil-fenetil)benzo[f][l,7]naftiridin-8-il)-l,l-difluoro-2-oxo-etilfosfonato de dietilo (2-4) (1,0 equiv.) em DCM (0,05 M) a 0°C foi adicionado TMSI (5,0 equiv.). A reação foi aquecida até à temperatura ambiente por 2 horas, e mais TMSI foi adicionado (2,5 equiv.)· A reação foi agitada durante outros 30 minutos, e depois extinguida com quantidades pequenas de água. O DCM foi removido por evaporação, e depois DMSO/água adicionados. A mistura foi ajustada para pH 9 e diretamente purificada em RP-HPLC utilizando uma coluna C18, eluindo com gradiente de 10-40% 95:5 de (MeCN/NHíOAc 5 mM) em NH4OAC 10 mM (pH 9) . As frações contendo o produto foram combinadas e concentradas in vacuo para dar ácido 2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)benzo-[f][l,7]naftiridin-8-il)-l,1-difluoro-2-oxoetilfosfónico (9) como um sólido. 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6) : δ 8,82 (s, 1H) , 8,5 (lg, 1H) , 8,44 (s, 1H) , 8,2 (lg, 1H) , 7,98 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 7,2 (lg, 2H) , 7,05 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 6,73 (s, 1H) , 6,67 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 3,70 (s, 3H) , 2,99- 2,87 (m, 4H), 2,25 (s, 3H). EMBR [M+H] = 502,2

Exemplo 10 (Tabela 1: Composto 10) Síntese de ácido (e)-2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil) benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)vinilfosfónico (10)

Passo 1: (E)-2- (5-amino-2- (4-metoxi-2-metilfenetil)benzo- [f] [1,7]naftiridin-8-il)vinilfosfonato de dietilo (3-1) A uma suspensão agitada de NaH (1,2 equiv.) em THF (0,1 M) arrefecida até 0°C foi adicionada uma solução de metilenodifosfonato de tetraetilo (1,3 equiv.) em THF (0,21 M). À mistura de reação resultante foi adicionada uma solução de 5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)benzo[f] [ 1,7]naftiridino-8-carbaldeido (2-2) (Exemplo 9-Passo 1) (1,0 equiv.) em THF (0,08 M) . A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos, depois os solventes foram removidos in vacuo, e o resíduo resultante foi purificado por um sistema de COMBIFLASH® (ISCO) utilizando um gradiente de 0-5% de MeOH/DCM para proporcionar (E)-2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]na-ftiridin-8-il)vinilfosfonato de dietilo (3-1) como um sólido incolor.

Passo 2: ácido (E)-2- (5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil) benzo [f] [1, 7]naftiridin-8-il) vinil f os fónico (10) A uma solução de (E)-2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-

metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)vinilfosfonato de dietilo (3-1) (1,0 equiv.) em DCM (0, 095 M) a 0°C foi adicionado TMSBr (10 equiv.). A reação foi aquecida até à temperatura ambiente durante 2 horas, e depois extinta com pequenas quantidades de MeOH. O DCM foi removido por evaporação, e depois adicionados DMSO/água. A mistura foi ajustada para pH 9 e diretamente purificada em RP-HPLC utilizando uma coluna C18, eluindo com gradiente de 10-40% 95:5 de (MeCN/NHíOAc 5 mM) em NH4OAC 10 mM (pH 9). As frações contendo o produto foram combinadas e concentradas in vacuo para dar o ácido (E)-2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metil-fenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)vinilfosfónico (10) como um sólido. 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6) : δ 9,76 (s, 1H) , 9,33 (s, 1H), 9,03 (s, 1H) , 8,82 (s, 1H) , 8,60 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,87 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,78 (s, 1H) , 7,31 (dd, 1H, J = 17,6, 21,6 Hz), 7,03 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,69 (m, 2H) , 6,61 (dd, 1H, J = 2,8, 8,4 Hz), 3,64 (s, 3H) , 3,14-3,06 (m, 2H) , 2,97-2,91 (m, 2H) , 2,23 (s, 3H) . EMBR [M+H] = 450,2

Exemplo 11 (Tabela 1: Composto 11) Síntese de ácido 2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)-benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)etilfosfónico (11)

Passo 1: 2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)benzo[f]- [1, 7]naftiridin-8-il)etilfosfonato de dietilo (3-3) A uma solução de 2- (5-amino-2- (4-metoxi-2-met.il-fenetil)benzo[f] [1,7]naftiridin-8-il)vinilfosfonato de (E)-dietilo (3-1) (Exemplo 10-Passo 1) (1,0 equiv.) em DCM (0,05 M) e EtOH (0,08 M) foram adicionados paládio a 10% em carbono (0,09 equiv.)· Um vaso de reação foi carregado com um balão de hidrogénio e agitado à temperatura ambiente de um dia para o outro. Após a reação ter sido concluída como monitorizado por CLEM, os solventes foram removidos, e o resíduo resultante foi purificado por um sistema de COMBIFLASH® (ISCO) utilizando um gradiente de 0-5% de MeOH/DCM para proporcionar 2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metil-fenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)etilfosfonato de dietilo (3-3).

Passo 2: ácido 2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)ben-zo[f] [1,7] naftiridin-8-il) etilf os fónico (11) A uma solução de 2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metil-fenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)etilfosfonato de dietilo (3-3) (1,0 equiv.) em DCM (0,02 M) a 0°C foi

adicionado TMSBr (10 equiv.). A reação foi aquecida até à temperatura ambiente durante 2 horas, e depois extinta com pequenas quantidades de MeOH. O DCM foi removido por evaporação, e depois foram adicionados DMSO/água. A mistura foi ajustada para pH 9 e diretamente purificada em RP-HPLC utilizando uma coluna C18, eluindo com gradiente de 10-40% de 95:5 (MeCN/NHíOAc 5 mM) em NlUOAc 10 mM (pH 9) . As frações contendo o produto foram combinadas e concentradas in vacuo para dar ácido 2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)etilfosfónico (11) como um sólido. 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6) : δ 9,66 (s, 1H) , 9,30 (s, 1H), 8,95 (s, 1H) , 8,78 (s, 1H) , 8,50 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,54 (s, 1H), 7,45 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,02 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,69 (d, 1H, J = 2,8 Hz), 6,61 (dd, 1H, J = 2,8, 8,4 Hz), 3,64 (s, 3H) , 3,14-3,06 (m, 2H) ,

3, 00-2, 90 (m, 4H) , 2,22 (s, 3H) , 2, 02-1, 92 (m, 2H) . EMBR

[M+H] = 452,2

Exemplo 12 (Tabela 1: Composto 12) Síntese de ácido (E)-2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil) benzo[f] [ 1,7]naftiridin-8-il)-1-fluorovinilfosfónico (12)

Passo 1: (E)-2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)benzo-[f][1,7]naftiridin-8-il)-1-fluorovinilfosfonato de dietilo (3-2) A uma solução agitada de fluorometilenodifosfo- nato de tetraetilo (2,5 equiv.) em THF (0,27 M) arrefecida até -78°C foi adicionada solução de LDA (1,8 M em etil-benzeno/pentano/hexano, 2,0 equiv.)· A mistura de reação resultante foi aquecida até à temperatura ambiente e agitada durante 30 minutos, antes de ser rearrefecida de novo até -78°C. Uma solução de 5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridino-8-carbaldeido (2-2) (Exemplo 9-Passo 1) (1,0 equiv.) em THF (0,18 M) foi adicionada, e a mistura de reação foi deixada a aquecer lentamente até à temperatura ambiente. A reação foi extinguida com solução saturada de NH4CI. A fase aquosa foi extraída com DCM (3x) . As fases orgânicas combinadas foram combinadas e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado por um sistema de COMBIFLASH® (ISCO) utilizando um gradiente de 0-5% de MeOH/DCM para proporcionar (E)-2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiri-din-8-il)-1-fluorovinilfosfonato de dietilo (3-2) como um sólido incolor.

Passo 2: ácido (E)-2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)-benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)-1-fluorovinilfos fónico (12) A uma solução de 2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metil-fenetil)benzo[f] [1,7]naftiridin-8-il)-1-fluorovinilfosfo-nato de (E)-dietilo (3-2) (1,0 equiv.) em DCM (0,05 M) a 0°C foi adicionado TMSBr (10 equiv.). A reação foi aquecida até à temperatura ambiente durante 2 horas, e depois extinta com pequenas quantidades de MeOH. O DCM foi removido por evaporação, e depois DMSO/água foram adicionados. A mistura foi ajustada para pH 9 e diretamente purificada

em RP-HPLC utilizando uma coluna C18, eluindo com gradiente de 10-40% de 95:5 (MeCN/NH4OAc 5 mM) em NH4OAc 10 mM (pH 9). As frações contendo o produto foram combinadas e concentradas in vacuo para dar ácido (E)-2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)-1-fluorovinilfosfónico (12) como um sólido. 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6) : δ 9,80 (s, 1H) , 9,41 (s, 1H) , 9,05 (s, 1H), 8,87 (s, 1H) , 8,65 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 8,08 (s, 1H), 7,76 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,08 (d, 1H, J = 8,4 Hz),

7,02 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6, 83-6, 65 (m, 2H) , 3,69 (s, 3H) , 3,18-3,12 (m, 2H) , 3, 02-2, 96 (m, 4H) , 2,28 (s, 3H) . EMBR

[M+H] = 468, 1

Exemplo 13 (Tabela 1: Composto 13) Síntese de ácido 3-( (4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f1 [1,7]na-ftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)metil)fenilfosfónico (13)

Passo 1: 2-(4-(3-iodobenziloxi)-2-metilfenetil)-8-metilben-zo[f] [1,7]naftiridin-5-amina (4-1) A uma solução de 4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f]- [1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenol (B-4), 1,0 equiv. em dimetilformamida (0,10 M) a 22°C foi adicionado carbonato de césio (1,5 equiv.) e a mistura resultante foi deixada a aqitar durante 30 minutos. Nesta altura, 1-(bromometil)- 3-iodobenzeno (1,5 equiv.) foi adicionado a esta mistura. A mistura de reação foi deixada a agitar a 55°C durante 18 horas após o que foi diluída com acetato de etilo e água. As camadas bifásicas foram separadas e a camada orgânica foi lavada duas vezes com água. A camada orgânica foi seca em Na2S04 anidro e os voláteis foram removidos in vacuo. Ο resíduo resultante foi purificado por um sistema de COMBIFLASH® (ISCO) utilizando gradiente de 0-50% de acetato de etilo em hexanos para proporcionar 2-(4-(3-iodobenziloxi) -2-metilfenetil)-8-metilbenzo[f][l,7]naftiridin-5-amina (4-1) como um sólido.

Passo 2: ácido 3- ((4-(2- (5-amino-8-metilbenzo [f] [1,7] nafti-ridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)metil)fenilfosfónico (13) A uma solução agitada de 2-(4-(3-iodobenziloxi)-2-metilfenetil)-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-5-amina (1,0 equiv.) em fosfato de trietilo (1,05 eq.) foi adicionado acetato de paládio (0,08 eq.). A mistura de reação resultante foi aquecida até 90°C de um dia para o outro. Após a reação ter sido arrefecida até à temperatura ambi-

ente, o resíduo foi absorvido em DCM (0,27 M) a 0°C, e tratado com TMSBr (11 equiv.)· A reação foi aquecida até à temperatura ambiente durante 2 horas, e depois extinta com pequenas quantidades de MeOH. O DCM foi removido por evaporação, e depois adicionados DMSO/água. A mistura foi ajustada para pH 9 e diretamente purificada em RP-HPLC utilizando uma coluna C18, eluindo com gradiente de 10-40% de 95:5 (MeCN/NH40Ac 5 mM) em NH4OAC 10 mM (pH 9). As frações contendo o produto foram combinadas e concentradas in vacuo para dar ácido 3-((4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f]- [1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)metil)fenilfosfó-nico (13) como um sólido. 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6) : δ 8,84 (s, 1H), 8,72 (s, 1H) , 8,35 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,67 (d, 1H, J = 12 Hz), 7,60-7,54 (m, 1H), 7,30-7,20 (m, 2H), 7,15 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,11 (d, 1 H, J = 8,4 Hz), 7,04 (s, 1H) , 6,84 (s, 1H) , 6,77 (m, 1H) , 4,99 (s, 2H) , 3,12- 2,92 (m, 4H) , 2,44 (s, 3 H) , 2,27 (s, 3H) . EMBR [M+H] = 514,2

Exemplo 14 (Tabela 1: Composto 14) Síntese de ácido 5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)benzo-[f][l,7]naftiridino-8-carbonilfosfónico (14)

A uma suspensão agitada de 5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridino-8-carbaldeído (2-2) (Exemplo 9-Passo 1) (1,0 equiv.) em tolueno (0,27 M) foi adicionado fosfito 'de tris(trimetilsililo) (1,0 equiv.)· A reação foi agitada a 80°C durante 60 minutos, depois os solventes foram removidos, e o resíduo resultante foi absorvido em DMSO (0,27 M), e IBX (1,5 equiv.) foi adicionado. A reação foi agitada à temperatura ambiente durante

2,5 horas, e filtrada e diretamente purificada em RP-HPLC utilizando uma coluna de C18, eluindo com gradiente de 10-40% de 95:5 (MeCN/NH4OAc 5 mM) em NH4OAc 10 mM (pH 9). As frações contendo o produto foram combinadas e concentradas in vacuo para dar ácido 5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfene-til)benzo[f][1,7]naftiridino-8-carbonilfosfónico (14) como um sólido. *H RMN (Dimetilsulfóxido-d6) : δ 9,84 (s, 1H) , 9,35 (s, 1H) , 9,09 (s, 1 H) , 8,89 (s, 1 H) , 8,76 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 8,60 (s, 1H), 8,19 (d, 1H, J= 8,8 Hz), 7,04 (d, J = 8,8 Hz, 1H) , 6,70 (d, 1H, J = 2,8 Hz), 6,62 (dd, 1H, J = 2,8, 8,4 Hz), 3,64 (s, 3H) , 3,15-3,09 (m, 2H) , 2,97-2,91 (m, 2H), 2,23 (s, 3H). EMBR [M+H] = 452,1

Exemplo 15 (Tabela 1: Composto 15) Síntese de ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(3-fosfonopropoxi) fenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico (15)

Passo 1: ácido 3-(5-amino-2-(4-(3-(dietoxifosforil)propo-xi)-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico Ácido 3-(5-amino-2-(4-(3-(dietoxifosforil)propo-xi)-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 19-Passo 11, mas utilizando 3-bromopropilfosfonato de dietilo comercialmente disponível como o reagente.

Passo 2: ácido 3- (5-amino-2-(2-metil-4-(3-fosfonopropoxi) f enetil) benzo [ f] [1,7] naf t ir idin-8-il) propanoico (15) Ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(3-fosfonopropoxi)-fenetil)benzo[f] [1,7] naftiridin-8-il)propanoico (15) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 19-Passo 12, mas utilizando ácido 3-(5-amino-2-(4-(3-(dietoxifosforil) propoxi)-2-metilfenetil)benzo[f][l,7]naftiri- din-8-il)propanoico do passo anterior. A 1H RMN (MeOD-d4) obtida para ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(3-fosfonopro-poxi)fenetil) benzo[f] [ 1,7]naftiridin-8-il)propanoico (15) foi: δ 8,60 (s, 1H) , 8,27 (s, 1H) , 8,07 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,52 (s, 1H), 7,30 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,87 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,67 (s, 1H) , 6,60 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 3,93(t, J = 6,4 Hz, 2H) , 3,49-3, 47 (m, 2H) , 3,14-3,09 (m, 2H) , 2, 99-2, 95 (m, 2H) , 2, 69-2, 64 (m, 2H) , 2,17 (s, 3H) , 2,02- 2,00 (m, 2H), 1,74-.66 (m, 2H). EMBR [M+H] = 524,2

Exemplo 16 (Tabela 1: Composto 16) Síntese de ácido 3- (5-amino-2-(4-(4,4-difluoro-4-fosfono-butoxi)-2-metilfenetil)benzo[f][l,7]naftiridin-8-il)propanoico (16)

Passo 1: 4-bromo-l,1-difluorobutilfosfonato de dietilo 4-bromo-l,1-difluorobutilfosfonato de dietilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 1, mas utilizando 1,3-dibromopropano comercialmente disponível como reagente.

Passo 2: ácido 3-(5-amino-2-(4-(4-(dietoxifosforil)-4,4-difluorobutoxi)-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico Ácido 3-(5-amino-2-(4-(4-(dietoxifosforil)-4,4-difluorobutoxi)-2-metilfenetil)benzo[f][l,7]naftiridin-8-il)propanoico foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 19-Passo 11, mas utilizando 4-bromo-1,1-difluorobutilfosfonato de dietilo do passo anterior 1 como reagente.

Passo 3: ácido 3- (5-amino-2-(4-(4,4-difluoro-4-fosfonobuto-xi)-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il) propanoico (16) Ácido 3-(5-amino-2-(4-(4,4-difluoro-4-fosfonobu-toxi)-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico (16) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 19-Passo 12, mas utilizando ácido 3-(5-amino-2-(4-(4-(dietoxifosforil)-4,4-difluorobutoxi)-2-metilfenetil) benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico do passo 2 anterior. A 1H RMN (MeOD-d4) obtida para ácido 3-(5-amino-2-(4 - (4,4-difluoro-4-fosfonobutoxi)-2-metilfenetil)benzo [f] [1,7] naftiridin-8-il) propanoico (16) foi: δ 8,69 (s, 1H) , 8,45 (s, 1H), 8,22 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,53 (s, 1H), 7,45 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,89 (d, J = 8,4 Hz, 1H) , 6,69 (s, 1H), 6,60 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 3,95 (t, 2H, J = 6,4 Hz), 3, 92-3, 90 (m, 2H) , 3, 49-3, 47 (m, 2H) , 3,20-3,16 (m, 2H) , 3,14-3,10 (m, 2H) , 3, 03-2, 99 (m, 2H) , 2,74-2,70 (m, 2H) , 2,22 (s, 3H). EMBR [M+H] = 574,2

Exemplo 17 (Tabela 1: Composto 17) Síntese de ácido 3-(5-amino-2-(4-(2-(2-(3, 3-difluoro-3-fos-fonopropoxi)etoxi)etoxi)-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]nafti-ridin-8-il)propanoico (17)

Passo 1: 3- (5-amino-2-{2-[4-(2-{2-[3-(dietoxifosforil)-3,j-difluoropropoxi]etoxi}etoxi)-2-metilfenil]etiljbenzo[f]irj~ naftiridin-8-il)propanoato de etilo 3-(5-amino-2-{2-[4—(2—{2—[3—(dietoxifosforil)- 3,3-difluoropropoxi]etoxi}etoxi)-2-metilfenil]etil}benzo-[f]1,7-naftiridin-8-il)propanoato de etilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 19-Passo 11, mas utilizando 1,1-difluoro-3-(2-(2-iodoetoxi)etoxi) pro-pilfosfonato de dietilo (1-1) (descrito no Exemplo 1-Passo 1) como reagente.

Passo 2: ácido 3- (5-amino-2- (4- (2- (2- (3, 3-difluoro-3-fos-fonopropoxi)etoxi)etoxi)-2-metilfenetil)benzo[f][1, 7]nafti-ridin-8-il) propanoico (17) Ácido 3-(5-amino-2-(4-(2-(2-(3,3-difluoro-3-fos-fonopropoxi)etoxi)etoxi)-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]nafti-ridin-8-il)propanoico (17) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 19-Passo 12, mas utilizando 3-(5-amino-2-{2-[4-(2—{2 —[3-(dietoxifosforil)-3,3-di-fluoropropoxi]etoxi}etoxi)-2-metilfenil]etil}benzo[f]1,7-naftiridin-8-il)propanoato de etilo do passo anterior. A 1H RMN (DMS0-d6) obtida para ácido 3-(5-amino-2-(4-(2-(2-(3, 3-difluoro-3-fosfonopropoxi)etoxi)etoxi)-2-metilfenetil)benzo [f] [ 1,7]naftiridin-8-il) propanoico (17) foi: δ 9,02 (s, 1H), 8,82 (s, 1H), 8,55 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,58 (s, 1 H) , 7,49 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,07(d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,75 (s, 1H), 6,68 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 4,03-4, 00 (m, 2H) , 3,72-3,70 (m, 2H) , 3, 66-3, 62 (m, 2H) , 3,58-3,56 (m, 2H) , 3,53-3,52 (m, 2H) , 3,16-3,12 (m, 2H) , 3, 03-2,96 (m, 4H) , 2,68-2,64 (m, 2H) , 2,31-2,33 (m, 2H) , 2,27 (s, 3H) . EMBR [M+H] = 648,2

Exemplo 18 (Tabela 1: Composto 18) Síntese de ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(2-(2-(2-(2-fos-fonoetoxi)etoxi)etoxi)etoxi)fenetil)benzo[f][1,7]naftirid-in-8-il) propanoico (18)

Passo 1: 2-(2-(2-(2-iodoetoxi)etoxi)etoxi)etilfosfonato de dietilo 2- (2-(2-(2-iodoetoxi)etoxi)etoxi)etilfosfonato de dietilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 22-Passo 1, mas utilizando l-iodo-2-(2-(2-(2-iodoetoxi)etoxi)etoxi)etano comercialmente disponível como reagente.

Passo 2: 3-[5-amino-2- (2-{4-[2-(2-{2-[2-(dietoxifosforil)- etoxi]etoxijetoxi)etoxi]-2-metilfenil}etil)benzo[f]1, 7-naftiridin-8-il]propanoato de etilo 3- [5-amino-2-(2 —{4 —[2-(2 —{2 —[2-(dietoxifosforil)-etoxi]etoxi Jetoxi)etoxi]-2-metilfenilJetil)benzo[f]1, 7-naftiridin-8-il]propanoato de etilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 19-Passo 11, mas utilizando 2-(2-(2-(2-iodoetoxi)etoxi)etoxi)etilfosfonato de dietilo do passo 1 anterior como o reagente.

Passo 3: ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(2-(2-(2-(2-fosfono-etoxi)etoxi)etoxi)etoxi)fenetil)benzo[f][lf 7]naftiridin-8-il)propanoico (18) Ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(2-(2-(2-(2-fosfo-noetoxi)etoxi)etoxi)etoxi)fenetil)benzo[f][l,7]naftiridin-8-il)propanoico (18) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 19-Passo 12, mas utilizando 3-[5-amino-2-(2 —{4 —[2-(2 —{2 —[2-(dietoxifosforil)etoxi]etoxi}-etoxi)etoxi]-2-metilfenil}etil)benzo[f]l,7-naftiridin-8-il]propanoato de etilo do passo 2 anterior. A ΧΗ RMN (Dimetilsulfóxido-d6) obtida para ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4- (2-(2-(2-(2 — fosfonoetoxi)etoxi)etoxi)etoxi)fene-til)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico (18) foi: δ 9,02 (s, 1H), 8,82 (s, 1H), 8,56 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,57 (s, 1 H), 7,49 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,07 (d, 1H, J = 8,4

Hz), 6,76 (s, 1 H) , 6, 68 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 4,03-4,01 (m, 2H) , 3,72-3, 69 (m, 2H) , 3, 59-3, 47 (m, 10H) , 3,16-3,13 (m, 2H) , 3, 03-2, 96 (m, 4H) , 2, 68-2, 64 (m, 2H) , 1, 87-1,82 (m, 2H), 2,27 (s, 3H). EMBR [M+H] = 642,3

Exemplo 19 (Tabela 1: Composto 19) Síntese de ácido 3-(5-amino-2-(4-(2-(3,3-difluoro-3-fosfo-nopropoxi)etoxi)-2-metilfenetil)benzo[f][l,7]naftiridin-8-il)propanoico (19)

Passo 1: (E)-3- (3- (tert-butoxicarbonilamino)-4-clorofenil)~ acrilato de etilo (6-3) A uma solução de 5-bromo-2-clorofenilcarbamato de tert-butilo (6-1) (1,0 equiv.) em acetonitrilo (0,3 M) e

EtOH (0,5 M) foi adicionado K2CO3 (2,0 equiv.). A reação foi desgasificada e sujbmetida a jacto de N2, depois adicionado (E)-3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2-il)acrilato de etilo (6-2) (1,2 equiv.) e Pd(PPh3)4 (0,1 equiv.)· A reação foi sujbmetida novamente a jacto de N2 e agitada a 100°C de um dia para o outro. Após arrefecer até à temperatura ambiente, foi adicionado hexano, e a mistura foi filtrada através de uma almofada de silica, eluindo com EA/Hex (1:1) até que o produto fosse completamente eluido. 0 filtrado foi concentrado e purificado em Combiflash, eluindo com 0-15% de EA em Hex para dar (E) —3— (3-(tert-butoxicarbonilamino)-4-clorofenil)acrilato de etilo (6-3) como um sólido branco.

Passo 2: 3- (3- (tert-butoxicarbonilamino)-4-clorofenil)pro- panoato de etilo (6-4) A uma solução de (E)-3-(3-(tert-butoxicarbonilamino) -4-clorofenil) acrilato de etilo (6-3) (1,0 equiv.) em acetato de etilo/etanol (1:1, 0,3 M) foi adicionado o catalisador de Wilkinson (0,10 equiv.). Foi introduzido gás de hidrogénio por meio de um balão, e a reação foi agitada à temperatura ambiente por 24 horas. A mistura foi filtrada por meio de uma almofada de celite, lavando com dicloro-metano. O filtrado foi concentrado in vacuo e purificado por Combiflash utilizando 0-10% de acetato de etilo em hexano para dar 3-(3-(tert-butoxicarbonilamino)-4-clorofenil ) propanoato de etilo (6-4) como um sólido.

Passo 3: 3-(3-(tert-butoxicarbonilamino)-4-(4,4,5,5-tetra- metil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)propanoato de etilo (6- ãl

Uma solução de 3-(3-(tert-butoxicarbonilamino)-4-clorofenil) propanoato de etilo (6-4) (1,0 equiv.), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (2,0 equiv.), tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0) (0,05 equiv.), 2-diciclo-hexilfosfino-2',4',6'-tri-isopropilbife-nilo (0,20 equiv.), e acetato de potássio (2,0 equiv.) em 1,4-dioxano (0,2 M) foi desgasifiçada e agitada a 100°C de um dia para o outro. Após arrefecer até à temperatura ambiente o conteúdo de reação foi concentrado in vacuo. Ο material bruto foi purificado por Combiflash utilizando 0-50% de acetato de etilo em hexano para proporcionar 3— (3 — (tert-butoxicarbonilamino)-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)propanoato de etilo (6-5) como um óleo castanho. O produto foi armazenado a -20°C e utilizado dentro de um mês de síntese.

Passo 4: l-bromo-4-(metoximetoxi)-2-metilbenzeno (6-7) A uma solução de 4-bromo-3-metilfenol (6-6) (1,0 equiv.) em DMF (0,5 M) a 0°C foi adicionado, em porções, NaH a 60% em peso (1,5 equiv.). A adição foi controlada de modo que a temperatura da reação interna nunca ficasse acima de 10°C. A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 45 minutos, depois uma solução de cloro (metoxi) metano (1,2 equiv.) em DMF (3 M) foi adicionada, gota a gota, através de um funil de adição. A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 3,5 horas, e depois extinta vertendo em gelo. A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. Foi adicionado éter, e as duas camadas foram separadas. A camada aquosa foi extraída (lx) com éter. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (2x) , salmoura, secas em MgSCh, e concentradas para dar 1-bromo- 4- (metoximetoxi)-2-metilbenzeno (6-7) como um óleo incolor. 0 material bruto foi utilizado no próximo passo sem purificação adicional.

Passo 5: trietil((4-(metoximetoxi)-2-metilfenil)etinil)si- lano

Uma solução de l-bromo-4-(metoximetoxi)-2-metilbenzeno (1,0 equiv.), trietilamina (5,0 equiv.) em DMF (0,5 M) foi desgasifiçada e submetida a jacto de azoto. À reação foram adicionados TES-acetileno (1,05 equiv.), Cul (0,098 equiv.), e Pd(PPh3)2Cl2 (0, 098 equiv.). A reação foi aquecida até 60°C e agitada de um dia para o outro. Após arrefecer até à temperatura ambiente, foram adicionados água e éter. As camadas foram separadas, e a camada orgânica foi lavada com água (2x) . A camada orgânica foi separada e passada através de uma almofada de silica (embalada com hexano). A silica foi eluida com EA a 10% em Hex. As frações foram combinadas e concentradas para dar trietil ( (4-(metoximetoxi)-2-metilfenil)etinil)silano como um óleo negro. 0 material bruto foi utilizado no próximo passo sem purificação adicional.

Passo 6: l-etinil-4-(metoximetoxi)-2-metilbenzeno (6-8) A uma solução de trietil((4-(metoximetoxi)-2-metilfenil)etinil)silano (1,0 equiv.) a 0°C foi lentamente adicionado fluoreto de tetrabutilamónio (solução 1 M em THF, 0,20 equiv.)· Neste altura, o banho de gelo foi removido e a mistura de reação foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 45 minutos. A mistura de reação foi depois passada através de uma almofada de silica (embalada com hexano) e eluida com EtOAc a 20% em Hexanos para remover os sais insolúveis. O produto bruto foi depois purificado por Combiflash utilizando EtOAc a 0-10% em Hexanos para dar l-etinil-4-(metoximetoxi)-2-metilbenzeno (6-8) como um liquido ligeiramente castanho.

Passo 7: 3-cloro-5-((4-(metoximetoxi)-2-metilfenil)etinil)-picolinonitrilo (6-10)

Uma solução de l-etinil4-(metoximetoxi)-2-metilbenzeno (6-8) (1,0 equiv.), 3,5-dicloropicolinonitrilo (6- 9) (0,90 equiv.), Cul (0,10 equiv.), e Pd(PPh3)2Cl2 (0,10 equiv.), e trietilamina (5,0 equiv.) em DMF (0,25 M) foi desgasifiçada e submetida a jacto de azoto. A mistura de reação foi depois aquecida até 60°C e agitada de um dia para o outro. Após arrefecer até à temperatura ambiente, água foi adicionada. A mistura foi extraída com EA (2x). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com NH4OH a 10% aq (2x), salmoura, e concentradas. O material bruto foi filtrado através de uma almofada de silica (humidificada com hexano) . A silica foi eluida com EA a 10% em Hex. As frações foram combinadas e concentradas. Os sólidos resultantes foram lavados em éter quente e filtrados para dar um sólido amarelo que foi utilizado no próximo passo sem purificação adicional. O filtrado foi concentrado e purificado por Combiflash utilizando EtOAc a 0-10% em Hexanos para dar 3-cloro-5-((4-(metoximetoxi)-2-metilfe-nil)etinil)picolinonitrilo (6-10) como um sólido amarelo.

Passo 8: 3-(5-amino-2-((4-(metoximetoxi)-2-metilfenil)eti nil) -benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoato de etilo (6-11)

Uma solução de 3-cloro-5-((4-(metoximetoxi)-2-me-tilfenil)etinil)picolinonitrilo (6-10) (1,0 equiv.), 3 —(3 — (tert-butoxicarbonilamino)-4-(4,4,5,5-tetrametil-l, 3,2-di-oxaborolan-2-il)fenil)propanoato de etilo (6-5) (1,25 equiv.), tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0) (0,10 equiv.), dici- clo-hexil(2',6'-dimetoxibifenil2-il)fosfina (0,20 equiv.), e bicarbonato de sódio (3,0 equiv.) em n-butanol/H20 (5:1, 0,2 M) foi desgasifiçada e agitada a 100°C de um dia para o outro. Após arrefecer até à temperatura ambiente, o conteúdo de reação foi diluído com acetato de etilo e água. As duas fases foram separadas, e a camada aquosa foi extraída duas vezes com acetato de etilo. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em MgSCh anidro, e concentradas in vacuo. O material bruto foi purificado por meio de cromatografia "flash" num sistema de COMBIFLASH® (ISCO) utilizando primeiro acetato de etilo a 0-40%em DCM para remover a impureza, depois MeOH a 0-4% em DCM para dar 3-(5-amino-2-((4-(metoximetoxi)-2-metilfenil)-etinil)-benzo[f] [1,7]naftiridin-8-il)propanoato de etilo (6-11). Purificação adicional foi realizada precipitando e lavando em éter quente.

Passo 9: 3-(5-amino-2- (4-(metoximetoxi)-2-metilfenetil)benzo [f] [1,7]naftiridin-8-il)propanoato de de etilo (6-11)

Uma solução de 3-(5-amino-2-((4-(metoximetoxi)-2-metilfenil) etinil)-benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoato de etilo (6-11) (1,0 equiv.) em EtOH/THF (3:1, 0,16 M) foi submetida a jacto de azoto. Depois, Pd a 10% em peso/C (0,20 equiv. em peso) foram adicionados. A reação foi submetida a jacto de hidrogénio (2x) e agitada sob um balão de hidrogénio. Após 24 horas, a reação foi filtrada por meio de uma almofada de celite, lavando com MeOH a 5% em DCM. O filtrado foi verificado quanto à a presença de material de partida utilizando CLEM. A reação de hidrogenação foi repetida até que mais nenhum do material de partida de intermediário alquino ou alqueno fosse detetado. O produto bruto foi purificado por Combiflash utilizando MeOH a 0-4% em DCM para dar 3-(5-amino-2-(4-(metoximetoxi)-2-metilfenetil)benzo[f][l,7]naftiridin-8-il)propanoato de etilo (6-12) como um sólido branco.

Passo 10: 3-(5-amino-2-(4-hidrox±-2-metilfenetil)benzo[f]- [1,7]naftiridin-8-il)propanoato de etilo (6-13) 3-(5-amino-2-(4-(metoximetoxi)-2-metilfenetil)-benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoato de etilo (6-12) (1,0 equiv.) foi dissolvido em EtOH (0,2 M), depois adicionada uma solução de HC1 4 M em dioxano (0,2 M). O produto precipitou como um sal amarelo. Após agitar durante 3 horas, a reação foi vertida numa solução em agitação de éter. A mistura foi agitada durante 10 minutos, depois filtrada e lavada com éter. 3-(5-amino-2-(4-hidroxi-2-me-tilfenetil)benzo[f] [ 1,7]naftiridin-8-il)propanoato de etilo (6-13) foi obtido como um sólido amarelo que foi seco em vácuo de um dia para o outro (sal de bis-HCl) . Alternativamente, o produto bruto foi purificado por Combiflash utilizando MeOH a 0-5% em DCM para dar a base livre.

Passo 11: 3-(5-amino-2-(4-(2-(3-(dietoxifosforil)-3,3-di- fluoropropoxi)etoxi)-2-metilfenetil)benzo[f][1, 7]naftiri-din-8-il)propanoato de etilo (6-15) A uma solução de 3-(5-amino-2-(4-hidroxi-2-metil-fenetil)benzo[f] [1,7]naftiridin-8-il)propanoato de etilo (6-13) (1,0 equiv.) dissolvido em DMF (0,14 M) foi adici onada uma solução de 3-(2-bromoetoxi)-1,1-difluoropropil-fosfonato de dietilo (6-14: descrito no Exemplo 7-Passo 1) (1,3 equiv.) em DMF (0,7 M) e carbonato de césio (4 equiv.). A reação foi agitada a 60°C. Após 1,5 hora (ou até que a reação estivesse completa por CLEM), DCM (2 volumes de equivalente) foi acrescentado à reação. Os sólidos (inorgânicos) foram filtrados, e o filtrado foi concentrado. 0 produto bruto foi purificado por Combiflash utilizando MeOH a 0-5% em DCM para dar 3-(5-amino-2-(4-(2-(3-(dietoxifosforil)-3,3-difluoropropoxi)etoxi)-2-metilfe-netil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoato de etilo (6-15) como um óleo que ao repousar se tornou um sólido branco.

Passo 12: ácido 3-(5-amino-2-(4-(2-(3,3-difluoro-3-fosfono-propoxi)etoxi)-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico (19) A uma solução de 3-(5-amino-2-(4-(2-(3-(dietoxifosforil) -3, 3-difluoropropoxi)etoxi)-2-metilfenetil)benzo-[f] [1,7]naftiridin-8-il)propanoato de etilo (6-15) (1,0 equiv.) em DCM (0,16 M) a 0°C foi adicionado lentamente TMSBr (10 equiv.). A reação foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. TMSBr adicional (5,0 equiv.) foi adicionado a 0°C, e a reação foi agitada

novamente à temperatura ambiente de um dia para o outro. O solvente foi removido por evaporação e os sólidos laranja brutos secos brevemente em hi-vac. Os sólidos foram suspensos em EtOH (0,5 M) e adicionou-se NaOH 2,5N (10,0 equiv.). A reação foi agitada a 80°C durante 3 horas. Após arrefecer até à temperatura ambiente, a mistura foi ajustada para pH 9 a 10 e diretamente purificada em RP-HPLC utilizando uma coluna C18, eluindo com 10-40% 95:5 (MeCN/NEUOAc 5 mM) em gradiente de de NH4OAC 10 mM (pH 9) .

As frações contendo o produto foram combinadas e concentradas in vacuo. 0 gel branco resultante foi dissolvido refluindo em EtOH/água 1:1 (0,04 M) com a adição de algumas gotas de hidróxido de amónio. Enquanto quente, a mistura foi lentamente vertida numa solução quente em agitação de acetona (0,009 M) pré-aquecida até 50°C. A suspensão em acetona foi lentamente arrefecida até à temperatura ambiente durante 15 minutos com agitação continuada, e depois colocada num banho de gelo durante 10 minutos. Os sólidos foram filtrados e lavados sucessivamente com acetona (2x) e éter (2x) . Os sólidos foram secos em hi-vac de um dia para o outro para dar o ácido 3-(5-amino-2-(4-(2-(3,3-difluoro-3-fosfonopropoxi)etoxi)-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico (19) como um sólido. 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6) : δ 9,02 (s, 1H) , 8,82 (s, 1H), 8,55 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,58 (s, 1H), 7,48 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,07 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,75 (s, 1 H), 6,68 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 4, 03-4, 00 (m, 2H) , 3, 72-3, 68 (m, 4H) , 3,16-3,12 (m, 2H) , 3, 03-2, 96 (m, 4H) ,

2, 67-2, 64 (m, 2H) , 2,33-2, 32 (m, 2H) , 2,26 (s, 3H) . EMBR

[M+H] = 604,2

Exemplo 20 (Tabela 1: Composto 20) Síntese de ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(2-(2-(2-fosfo-noetoxi)etoxi)etoxi)fenetil)benzo[f][l,7]naftiridin-8-il)-propanoico (20)

Passo 1: 2-(2-(2-iodoetoxi)etoxi)etilfosfonato de dietilo

Um tubo de micro-ondas foi carregado com uma barra de agitação, 1,2-bis(2-iodoetoxi)etano comercialmente disponível (1,0 equiv.) e trietilfosfito (1,0 equiv.)· O tubo de micro-ondas foi tapado e depois irradiado a 160°C durante 40 minutos com agitação. A mistura de reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e purificada por Combiflash utilizando EtOAc a 0-75% em hexanos, ou alternativamente por RP-HPLC (TFA a 0,035% em ACN:TFA a 0,05% em H2O, coluna C18) para dar 2-(2-(2-iodoetoxi)-etoxi)etilfosfonato de dietilo como óleo amarelo pálido.

Passo 2: 3- (5-amino-2-{2-[4-(2-{2-[2-(dietoxifosforil)eto xi ]etoxi}etoxi)-2-metilfenil]etil}benzo[f]1, 7-naftiridin-8-il)propanoato de etilo 3-(5-Amino-2-{2-[4—(2—{2—[2—(dietoxifosforil)etoxi] etoxi } etoxi) -2-metilfenil]etil}benzo[f]1,7-naftiridin-8-il)propanoato de etilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 19-Passo 11, mas utilizando 2-(2-(2-iodoetoxi)etoxi)etilfosfonato de dietilo do passo 1 anterior como reagente.

Passo 3: ácido 3- (5-amino-2- (2-metil-4-(2- (2- (2-fosfono-etoxi)etoxi)etoxi)fene til)benzo[f] fif 7]naftiridin-8-il)pro-panoico (20) Ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(2-(2-(2-fosfono-etoxi)etoxi)etoxi)fenetil)benzo[f][l,7]naftiridin-8-il)pro-panoico (20) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 19-Passo 12, mas utilizando 3-(5-amino-2 —{2 —[4 - (2 —{2 —[2-(dietoxifosforil)etoxi]etoxi}etoxi)-2-metilfenil]etil}benzo[f]1,7-naftiridin-8-il)propanoato de etilo do passo 2 anterior. A 1H RMN (Dimetilsulfóxido-d6) obtida para o ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(2-(2-(2-fosfo-noetoxi)etoxi)etoxi)fenetil)benzo[f][l,7]naftiridin-8-il)-propanoico (20) foi: δ 9,02 (s, 1H) , 8,82 (s, 1H) , 8,55 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 7,58 (s, 1 H) , 7,49 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,06 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 6,76 (s, 1H) , 6,68 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 4,03-4,00 (m, 2H) , 3,71-3,69 (m, 2H) , 3,60-3,54 (m, 4H), 3,51-3,49 (m, 2H) , 3,16-3,12 (m, 2H) , 3,03-2,96 (m, 4H), 2, 67-2, 66 (m, 2H) , 2,33-2,32 (m, 2H) , 2,26 (s, 3H). EMBR [M+H] = 598,2

Exemplo 21 (Tabela 1: Composto 21) Síntese de ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(2-(2-fosfonoeto-xi)etoxi)fenetil)benzo[f][l,7]naftiridin-8-il)propanoico (21)

Passo 1: 2-(2-bromoetoxi)etilfosfonato de dietilo 2-(2-bromoetoxi)etilfosfonato de dietilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 22-Passo 1, mas utilizando l-bromo-2-(2-bromoetoxi)etano comercialmente disponível como reagente.

Passo 2: ácido 3- (5-amino-2- (4-(2- (2- (dietoxifosforil) etoxi )etoxi)-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]na ft iridin-8-il)pro-panoico Ácido 3-(5-amino-2-(4-(2-(2-(dietoxifosforil)etoxi) etoxi ) -2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)pro-panoico foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 19-Passo 11, mas utilizando 2-(2-bromoetoxi)-etilfosfonato de dietilo do passo 1 anterior como reagente.

Passo 3: ácido 3-(5-am±no-2-(2-metil-4-(2-(2-fosfonoetoxi)-etoxi)fenetil)benzo[f][1, 7]naftiridin-8-il)propanoico (21) Ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(2-(2-fosfonoeto-xi)etoxi)fenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico (21) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no

Exemplo 19-Passo 12, mas utilizando ácido 3- (5-amino-2-(4-(2-(2-(dietoxifosforil)etoxi)etoxi)-2-metilfenetil)benzo-[f] [1,7]naftiridin-8-il)propanoico do passo 2 anterior. A 1H RMN (MeOD-d4) obtida para o ácido 3-(5-amino-2-(2-metil- 4-(2-(2-fosfonoetoxi)etoxi)fenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il) propanoico (21) foi: δ 8,59 (s, 1H) , 8,45 (s, 1H) , 8,18 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,52 (s, 1 H) , 7,31 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 6,93 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,72 (s, 1 H) , 6,65 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 4,06-4, 03 (m, 2H) , 3, 84-3,76 (m, 4H) , 3, 15-3,07(m, 4H) , 3,01-2,97 (m, 2H) , 2, 68-2, 64 (m, 2H) , 2,22 (s, 3H), 2,03-1,99 (m, 2H). EMBR [M+H] = 554,2

Exemplo 22 (Tabela 1: Composto 22) Síntese de ácido 2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]— naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)etilfosfónico (22)

Passo 1: 2-bromoetilfosfonato de dietilo 1,2-dibromoetano comercialmente disponível (1,0 equiv.) e fosfito de trietilo (1,0 equiv.) foram aquecidos com irradiação de micro-onda a 160°C durante 20 minutos. O resíduo resultante foi purificado por meio de cromatografia líquida de alta resolução de fase reversa (HPLC) (TFA a 0,035% em ACN:TFA a 0,05% em H2O, coluna C18) para dar 2-bromoetilfosfonato de dietilo como um líquido incolor.

Passo 2: 2- (4- (2- (5-amino-8-metilbenzo [f] [1,7] naftiridin-2-±1)etil)-3-metilfenoxi)etilfosfonato de dietilo 2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][l,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)etilfosfonato de dietilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 2, mas utilizando 2-bromoetilfosfonato de dietilo do passo 1 anterior como reagente.

Passo 3: ácido 2- (4- (2- (5-amino-8-metilbenzo [f] [1,7]nafti-ridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)etilfosfónico (22) Ácido 2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [l,7]nafti-ridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)etilfosfónico (22) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 3, mas utilizando 2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[ f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)etilfosfonato de dietilo do passo 2 anterior. TFA foi acrescentado à amostra de J-H RMN para solubilizar o composto para análise. A J-H RMN (dimetilsulfóxido) obtida para o ácido 2-(4- (2- (5-amino-8-metilbenzo [f] [l,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi) etilf osf ónico (22) foi: δ 8,83 (s, 1H) , 8,71 (s, 1H) , 8,35 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,35 (s, 1H) , 7,15 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 7,08 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7, 06-7,03 (lg, 2H) 6,71 (s, 1H) , 6,64 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 4, 09-3, 99 (m, 2H) , 3,07 (t, 2H, J = 6,9), 2,93 (t, 2H, J = 6,7), 2,44 (s, 3 H), 2,26 (s, 3H), 1,72-1,62 (m, 2H). EMBR [M+H] = 452,2

Exemplo 23 (Tabela 1: Composto 23) Síntese de ácido 6-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [1,7] — naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)hexilfosfónico (23)

Passo 1: 6-bromo-hexilfosfonato de dietilo 6-bromo-hexilfosfonato de dietilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 22-Passo 1, mas utilizando 1,6-dibromoexano comercialmente disponível como reagente.

Passo 2: 6-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo [f] [1,7 ] naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)hexilfosfonato de dietilo 6-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][l,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)exilfosfonato de dietilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 2, mas utilizando 6-bromo-hexilfosfonato de dietilo do passo 1 anterior como reagente.

Passo 3: ácido 6- (4-(2- (5-am±no-8-metilbenzo [f] [1,7] nafti-ridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)hexilfos fónico (23) Ácido 6-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [l,7]nafti-ridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)exilfosfónico (23) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 3, mas utilizando 6-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f]- [l,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)exilfosfonato de dietilo. TFA foi acrescentado à amostra de 1H RMN para solubilizar o composto para análise. A 1H RMN (dimetil-sulfóxido-d6) obtida para ácido 6-(4-(2-(5-amino-8-metil-benzo[f] [1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)exilfosfónico (23) foi: δ 8,95 (s, 1H), 8,81 (s, 1H) , 8,50 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,52 (s, 1H) , 7,40 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,01 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,71 (s, 1H) , 6,64 (d, 1H, J = 10,9 Hz), 3,87 (t, 2H, J = 6,34 Hz), 3,13 (t, 2H, J = 7,1 Hz), 2,96 (t, 2H, J = 7,0 Hz), 2, 69-2, 66 (m, 1H) , 2,35-2, 32 (m, 1H) , 2,25 (s, 2H) , 1,72-1, 62 (m, 2H) , 1,62-1,51 (m, 2H) , 1,51-1,40 (m, 2H). EMBR [M+H] = 508,2

Exemplo 24 (Tabela 1: Composto 24) Síntese de ácido 6-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]na-ftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)-1,1-difluoro-hexilfosfó-nico (24)

Passo 1: 6-bromo-l,1-difluoro-hexilfosfonato de dietilo 6-bromo-l,1-difluoro-hexilfosfonato de dietilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 1, mas utilizando 1,5-dibromopentano comercialmente disponível como reagente.

Passo 2: 6-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1, 7]naftiridin-2- il)etil)-3-metilfenoxi)-1,1-difluoro-hexilfosfonato_de dietilo 6-(4- (2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [l,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)-1,1-difluoro-hexilfosfonato de dietilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 2, mas utilizando 6-bromo-l,1-difluoro-hexilf osfonato de dietilo do passo 1 anterior como reagente.

Passo 3: ácido 6-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo [f] [1,7] nafti-ridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)-1,1-difluoro-hexilfos fónico (24)

Ácido 6-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [l,7]nafti-ridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)-1,1-difluoro-hexilfosfónico (24) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 3, mas utilizando 6-(4-(2-(5-amino-8-metil-benzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)-1,1-difluoro-hexilfosfonato de dietilo do passo 2 anterior. TFA foi acrescentado à amostra de 1H RMN para solubilizar o composto para análise. A 1H RMN (MeOD-d4) obtida para ácido 6- (4 - (2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [l,7]naftiridin-2-il)etil)- 3- metilfenoxi)-1,1-difluoro-hexilfosfónico (24) foi: δ 8,73 (s, 1H) , 8,60 (s, 1H), 8,31 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,48 (s, 1H), 7,43 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 6,91 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,70 (s, 1H), 6,61 (d, 1H, J = 11,0 Hz), 3,90 (t, 2H, J = 6,3 Hz), 3,20 (t, 2H, J = 7,3 Hz), 3,03 (t, 2H, J = 7,5

Hz), 2,54 (s, 2H) , 2,22 (s, 3H) , 1,79-1,71 (m, 2H) , 1,69- 1,59 (m, 2H), 1,57-1,47 (m, 2H). EMBR [M+H] = 544,2

Exemplo 25 (Tabela 1: Composto 25)

Sintese de ácido 4-((4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7] na-ftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)metil)benzilfosfónico (25)

Passo 1: 4-(bromometil)benzilfosfonato de dietilo 4- (bromometil)benzilfosfonato de dietilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 22-Passo 1, mas utilizando 1,4-bis(bromometil)benzeno comercialmente disponível como reagente.

Passo 2: 4-( (4-(2- (5-amino-8-metilbenzo [f] [1,7] naftiridin- 2-il) etil)-3-metilfenoxi)metil)benzilfosfonato de dietilo 4-((4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][l,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)metil)benzilfosfonato de dietilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 2, mas utilizando 4-(bromometil) benzilfosfonato de dietilo do passo 1 anterior como reagente.

Passo 3: ácido 4- ((4- (2- (5-amino-8-metilbenzo [f] [1,7 ] nafti-ridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)metil)benzilfos fónico (25) Ácido 4-((4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]na-ftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)metil)benzilfosfónico (25) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 3, mas utilizando 4-((4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)metil ) benzilf osfonato de dietilo do passo 2 anterior. A 1H RMN (MeOD-d4) obtida para ácido 4-( (4-(2-(5-amino-8-metil-benzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)metil)benzilf osfónico (25) foi: δ 8,72 (s, 1H) , 8,58 (s, 1H) , 8,30 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,48 (s, 1H) , 7,42 (d, 1H, J = 9,5

Hz), 7,36-7,30 (m, 4H) , 6,93 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,78 (s, 1H), 6,67 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 4,98 (s, 2H) , 3,96 (s, 2H) , 3,20 (t, 2H, J = 7,2 Hz), 3,04 (t, 2H, J = 7,2 Hz), 2,54 (s, 3H), 2,23 (s, 3H). EMBR [M+H] = 528,2

Exemplo 26 (Tabela 1: Composto 26) Síntese de ácido 2-(2-(2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f]- [1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)etoxi)etoxi)etil-fosfónico (26)

Passo 1: 2-(2-(2-iodoetoxi)etoxi)etilfosfonato de dietilo 2-(2-(2-iodoetoxi)etoxi)etilfosfonato de dietilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 20-Passo 1.

Passo 2: 2-(2-(2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [1,7] nafti- ridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)etoxi)etoxi)etilfosfonato de dietilo 2 - (2 - (2 - (4 - (2 - (5-amino-8-metilbenzo[f] [1,7]nafti-ridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)etoxi)etoxi)etilfosfonato de dietilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 2, mas utilizando 2-(2-(2-iodoetoxi)-etoxi)etilfosfonato de dietilo do passo 1 anterior como reagente.

Passo 3: ácido 2-(2-(2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo [f] [1,7]-naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)etoxi)etoxi)etilfos fónico (26) Ácido 2- (2- (2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f]- [l,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)etoxi)etoxi)etil-fosfónico (26) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 3, mas utilizando 2- (2- (2- (4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][l,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)etoxi)etoxi) etilfosfonato de dietilo do passo 2 anterior. A 1H RMN (MeOD-d4) obtida para ácido 2-(2-(2-(4 - (2 - (5-amino-8-metilbenzo[f] [l,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)etoxi)etoxi)etilfosfónico (26) foi: Ô 8,73 (s, 1H) , 8,66 (s, 1H), 8,38 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,52 (s, 1H), 7,47 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,36 (s, 1H) , 6,93 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,75 (s, 2H) , 6,64 (d, 1H, J = 10,8 Hz), 4,09-4,06 (m, 2H) , 3, 80-3, 76 (m, 2H) , 3, 69-3, 64 (m, 2H) , 3,64-3,59 (m, 2H), 3, 53-3, 49 (m, 2H) , 3,25 (t, 2H, J = 7,0 Hz), 3,09 (t, 2H, J = 7,5 Hz), 2,58 (s, 3H), 2,28 (s, 3H) , 2,13-2,01 (m, 2H). EMBR [M+H] = 540,2

Exemplo 27 (Tabela 1: Composto 27) Síntese de ácido 5-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [1,7]na-ftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)pentilfosfónico (27)

Passo 1: 5-bromopentilfosfonato de dietilo 5-bromopentilfosfonato de dietilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 22-Passo 1, mas utilizando 1,5-dibromopentano comercialmente disponível como reagente.

Passo 2: 5-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo [f] [1 r7 ] naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)pentilfosfonato de dietilo 5-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)pentilfosfonato de dietilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 2, mas utilizando 5-bromopentilfosfonato de dietilo do passo 1 anterior como reagente.

Passo 3: ácido 5- (4-(2- (5-amino-8-metilbenzo [f] [1,7 ] nafti-ridin-2-il) etil) -3-metilfenoxi) pentilf os fónico (27) Ácido 5-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][l,7]nafti-ridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)pentilfosfónico (27) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 3, mas utilizando 5- (4-(2-(5-amino-8-metilbenzo-[f][l,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)pentilfosfonato de dietilo do passo 2 anterior. A ΧΗ RMN (dimetil sulfó-xido-d6) obtida para ácido 5-(4-(2-(5-amino-8-metilben-zo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)pentilfosfó-nico (27) foi: δ 8,99 (s, 1H), 8,83 (s, 1H), 8,53 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,51 (s, 1H), 7,39 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,06 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,71 (s, 1H) , 6,65 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 3,87 (t, 2H, J = 6,3 Hz), 3,12 (t, 2H, J = 7,0 Hz), 2,96 (t, 2H, J = 7,0 Hz), 2,5 (s, 3H) , 2,26 (s, 3H) , 1,73-1,64 (m, 2H) , 1, 64-1,58 (m, 2H) , l,58-l,51(m, 2H) , 1,51-1,41 (m, 2H). EMBR [M+H] = 494,2

Exemplo 28 (Tabela 1: Composto 28) Síntese de ácido 4-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [1,7]na-ftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)butilfosfónico (28)

Passo 1: 4-bromobutilfosfonato de dietilo 4-bromobutilfosfonato de dietilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 22-Passo 1, mas utilizando 1,4-dibromobutano comercialmente disponível como reagente.

Passo 2: 4-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo [f] [1,7 ] naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)butilfosfonato de dietilo 4-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin- 2-il)etil)-3-metilfenoxi)butilfosfonato de dietilo foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 2, mas utilizando 4-bromobutilfosfonato de dietilo do passo 1 anterior como reagente.

Passo 3: ácido 4-(4-(2- (5-amino-8-metilbenzo [f] [1,7 ] nafti-ridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)butilfos fónico (28) Ácido 4-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][l,7]nafti-ridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)butilfosfónico (28) foi preparado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1-Passo 3, mas utilizando 4-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo-[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)butilfosfonato de dietilo do passo 2 anterior. A ΧΗ RMN (dimetil sulfó-xido-d6) obtida para ácido 4-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo-[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)butilfosfónico (28) foi: Ô 8,93 (s, 1H) , 8,79 (s, 1H) , 8,48 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,51 (s, 1H) , 7,37 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,04 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,71 (s, 1H) , 6,63 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 3,89 (t, 2H, J = 6,09 Hz), 3,12 (t, 2H, J = 6,8 Hz), 2,96 (t, 2H, J = 6,9 Hz), 2,47 (s, 3H), 2,34-2,31 (m, 2H), 2,24 (s, 3H) , 1, 80-1, 67 (m, 4H) , 1,67-1, 61 (m, 2H) . EMBR [M+H] = 480,2

Os compostos da Fórmula (I), preparados de acordo com os procedimentos descritos acima, são apresentados na Tabela 1 junto com os dados de [M+H] e os dados de CE50 (nM) de TLR7 Humano.

Tabela 1

(continuação)

(continuação)

(continuação)

(continuação)

Ensaios

Os compostos da Fórmula (I) aqui proporcionados foram ensaiados para medir sua capacidade para modular o Recetor do tipo "Toll" 7.

Ensaio de células mononucleares de sangue periférico humano A bioatividade dos compostos da Fórmula (I) aqui proporcionados foi testada no ensaio de sangue periférico humano (PBMC humano) utilizando um painel de doadores humanos normais independentes de acordo com as diretrizes aprovadas pelo comité de revisão institucional. PBMC humano foi isolado de sangue recentemente periférico utilizando um gradiente de densidade de Ficoll (GE HealthyCare 17-1440-03). 30-35 mL de sangue de humano periférico foram colocados em camadas sobre 15 mL de Ficoll em tubos cónicos de 50 ml, seguido por centrifugação a 1800 rpm (Eppendorf Centrifuge 5810R com tampas de risco biológico nos depósitos do tubo) à temperatura ambiente durante 30 minutos sem aceleração e sem travagem. As camadas leucoplaquetárias foram depois colhidas e transferidas para novos tubos cónicos de 50 ml e lavados duas vezes em meios completos consistindo em RPMI 1640 (11875085 de Invitrogen Corporation, Carlsbad, Califórnia) suplementado com soro bovino fetal a 10% inativado por calor (Gibco 10099-141), Pen-Strep a 1% (Gibco #15140-122), aminoácidos não essenciais 1 mM (Gibco #11140-050), de piruvato de sódio 1 mM (Gibco #11360-070), L-glutamina (Gibco #25030-081) 2 mM e HEPES 1 mM (Gibco #15630-080) . Células viáveis foram depois contadas utilizando marcação com azul de tripano, colocadas em placas de fundo plano de 96 poços (Becton Dickinson #353070) a 2xl05 células por poço em 200 μΐ de volume total de meios completo. Os compostos foram depois adicionados num formato de dose-resposta de 10 pontos iniciando a 100 μΜ, diluição de 3 vezes. Os poços de controlo negativos receberam concentração igual de DMSO. Os sobrenadantes de cultura foram colhidos após 18-24 horas de incubação a 37°C, 5% de CO2, armazenados a -20°C até outra utilização.

Os níveis de IL-6 nos sobrenadantes de cultura foram medidos utilizando um estojo ("kit") Luminex (Biorad). Análise dos dados é executada utilizando software Prisma de GraphPad (San Diego, CA) . As curvas de dose-resposta são geradas para cada composto e os valores de CE50 foram determinados como a concentração que dá 50% do sinal máximo.

Ensaio de gene repórter Células renais embrionárias humanas 293 (HEK 293) foram estavelmente transfectadas com TLR7 humano e um vetor repórter de luciferase dirigida por NF-kb (pNifti-Luciferase). Como um ensaio de controlo, Hek293 normais transfectadas com pNifti-Luc foram utilizadas. As células foram cultivadas em DMEM suplementado com L-glutamina 2 mM, FBS a 10% inativado de coração, penicilina e estreptomicina a 1%, 2 yg/ml de puromicina (InvivoGen #ant-pr-5) e 5 pg/ml de blasticidina (Invitrogen #46-1120). Tampão de Luciferase Bright-Glo™ e substrato de ensaio foram fornecidos por Promega #E263B e #E264B (substrato de ensaio e tampão, respetivamente). Placas de fundo transparente de 384 poços foram fornecidas por Greiner bio-one (#789163-G) e eram placas personalizadas com códigos de barra.

As células foram colocadas a 25.000 células/poço em placas de 384 poços num volume final de 50 μΐ de meio. As células foram deixadas aderir às placas após cultura de um dia para o outro (18 horas) a 37°C e 5% de CO2. Os compostos de controlo experimentais e positivos seriadamente diluídos foram depois distribuídos em cada poço e incubados durante 7 horas a 37 °C e 5% de CO2. As células estimuladas com DMSO apenas também servem como controles negativos. Após a incubação, 30 μΐ do tampão de ensaio de pré-mistura e tampão de substrato foram adicionados a cada poço de acordo com as instruções do fabricante. 0 sinal de luminescência foi lido numa máquina de CLIPR com um tempo de integração de 20 segundos por placa.

As curvas de dose-resposta são geradas para cada composto e os valores de CE50 foram determinados como a concentração que dá 50% do sinal máximo.

Certos Resultados do Ensaio Vários compostos da Fórmula (I) em forma livre ou em forma de sal farmaceuticamente aceitável, apresentam propriedades farmacológicas, por exemplo, como indicado pelos testes in vitro descritos neste pedido de patente. O valor de CE50 naquelas experiências são dados como aquela concentração do composto de teste em questão que provoca uma resposta a meio caminho entre a linha base e as respostas máximas. Em certos exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de CE50 na gama de 1 nM a 100 μΜ. Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de CE50 na gama de 1 nM a 50 μΜ. Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de CE50 na gama de 1 nM a 25 μΜ. Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de CE50 na gama de 1 nM a 2 0 μΜ. Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de CE50 na gama de 1 nM a 15 μΜ. Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de CE50 na gama de 1 nM a 10 μΜ.

Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de CE50 na gama de 1 nM a 5 μΜ. Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de CE50 na gama de 1 nM a 2 μΜ. Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de CE50 na gama de 1 nM a 1 μΜ. Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de CE50 na gama de 1 nM a 500 nM. Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de CE50 na gama de 1 nM a 250 nM. Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de CE50 na gama de 1 nM a 100 nM. Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de CE50 na gama de 1 nM a 50 nM. Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de CE50 na gama de 1 nM a 25 nM. Em outros exemplos, os compostos da Fórmula (I) têm valores de CE50 na gama de 1 nM a 10 nM. Tais valores de CE50 são obtidos com relação à atividade do resiquimod ajustada para 100%. A titulo de exemplo apenas, as CE50 para estimulação de TLR-7 por certos compostos da Fórmula (I) estão listadas na Tabela 1.

Formulação com adjuvantes contendo Alumínio A ligação dos compostos da Fórmula (I) aqui

proporcionados aos adjuvantes contendo alumínio a pH 9 e pH 6,5 foi avaliada utilizando HPLC para monitorizar a presença do composto da Fórmula (I) no sobrenadante.

Avaliação da ligação a pH 9

Composto 1 (0,5 mg/ml) foi dissolvido em 10 mM de NaOH e acrescentado ao adjuvante de hidróxido de alumínio (2 mg/ml) resultando numa formulação de 100 pg/dose. O sobrenadante foi avaliado com HPLC utilizando um gradiente balístico (desde CH3CN a 10%- TFA a 0,1% até CH3CN a 100%-TFA a 0,1% em 2,5 minutos) numa coluna C18 (50 cm x 4,6 mm) ACE a 45°C. Para avaliar o efeito da temperatura do sobrenadante e o tempo de incubação na ligação, o sobrenadante foi avaliado a uma temperatura de sobrenadante da temperatura ambiente e a 37°C após 1 hora, 5 horas e 24 horas. Um controlo sem hidróxido de alumínio foi também avaliado. Os cromatogramas de HPLC para as formulações do composto 1 com e sem hidróxido de alumínio, a temperatura ou tempo de incubação, indicaram que o composto 1 não estava presente no sobrenadante quando o hidróxido de alumínio foi incluído na formulação. Figura 1 mostra a concentração do composto 1 no sobrenadante, quando medido por meio de HPLC, para o composto 1 com alum à temperatura ambiente e 37°C, e para o composto 1 sozinho (controlo).

Composto 5 (1 mg/ml) foi dissolvido em NaOH 10 mM e adicionado ao adjuvante de hidróxido de alumínio (2 mg/ml) resultando numa formulação de 100 pg/dose. 0 sobrenadante foi avaliado com HPLC utilizando um gradiente balístico (desde CH3CN a 10%-TFA a 0,1% até CH3CN a 100%-TFA a 0,1% em 2,5 minutos) numa coluna C18 (50 cm x 4,6 mm) ACE a 45°C. Para avaliar o efeito da temperatura do sobrenadante e o tempo de incubação na ligação, o sobrenadante foi avaliado a uma temperatura de sobrenadante de temperatura ambiente e a 37°C após 1 hora, 5 horas e 24 horas. Um controlo sem hidróxido de alumínio foi também avaliado. Os cromatogramas de HPLC para as formulações do composto 5 com e sem hidróxido de alumínio, a temperatura ou tempo de incubação, indicaram que o composto 5 não estava presente no sobrenadante quando o hidróxido de alumínio foi incluído na formulação.

Avaliação da ligação a pH 6,5

Composto 1 (0,5 mg/ml) foi dissolvido em 10 mM de NaOH e acrescentado ao adjuvante de hidróxido de alumínio (2 mg/ml) resultando numa formulação de 100 pg/dose. O pH da solução foi ajustado para pH 6,5 utilizando HC1. O sobrenadante foi avaliado com HPLC utilizando um gradiente balístico (desde CH3CN a 10%-TFA a 0,1% até CH3CN a 100%-TFA a 0,1% em 2,5 minutos) numa coluna C18 (50 cm x 4,6 mm) ACE a 45°C. Para avaliar o efeito da temperatura do sobrenadante e o tempo de incubação na ligação, o sobrenadante foi avaliado a uma temperatura de sobrenadante de temperatura ambiente e a 37°C após 1 hora, 5 horas e 24 horas. Um controlo sem hidróxido de alumínio foi também avaliado. Os cromatogramas de HPLC para as formulações do composto 1 com e sem hidróxido de alumínio, a temperatura ou tempo de incubação, indicaram que o composto 1 não estava presente no sobrenadante quando o hidróxido de alumínio foi incluído na formulação.

Avaliação da ligação a pH 6, 7

Composto 5 (1 mg/ml) foi dissolvido em 10 mM de tampão de histidina (1 mg/ml) e adicionado ao adjuvante de hidróxido de alumínio (2 mg/ml) resultando numa formulação de 100 pg/dose. O sobrenadante foi avaliado com HPLC utilizando um gradiente balístico (desde CH3CN a 10%-TFA a 0,1% até CH3CN a 100%-TFA a 0,1% em 2,5 minutos) numa coluna C18 (50 cm x 4,6 mm) ACE a 45°C. Para avaliar o efeito da temperatura do sobrenadante e o tempo de incubação na ligação, o sobrenadante foi avaliado a uma temperatura de sobrenadante de temperatura ambiente e a 37°C após 1 hora, 5 horas e 24 horas. Um controlo sem hidróxido de alumínio foi também avaliado. Os cromatogramas de HPLC para as formulações do composto 5 com e sem hidróxido de alumínio, a temperatura ou tempo de incubação, indicaram que o composto 5 não estava presente no sobrenadante quando o hidróxido de alumínio foi incluído na formulação.

Avaliação da ligação a pH 9 (tampão de Histidina ajustado para pH 9)

Um método de extração de solvente orgânico foi utilizado para avaliar se o composto 1 estava covalen-temente ligado ao hidróxido de alumínio. A formulação foi preparada como segue: 2 mg/ml de hidróxido de alumínio, 100 pg/dose de composto 1, 10 mM de tampão de histidina) e o pH foi ajustado para 9. Uma formulação de controlo sem hidróxido de alumínio foi também preparada.

Um ml da formulação contendo Alum foi misturado com 1 ml de KH2PO4 1 M pH 9 (conc final 0,5 M, pH 9) e foi deixou-se em agitação suave de um dia para o outro a 37°C para permitir dessorção do composto 1 (composto 5) do hidróxido de alumínio por meio de permuta de ligando com os aniões de fosfato. Foi depois executada extração orgânica: 1 ml de cada amostra foi misturado com 1 ml de n-butanol e submetida a vórtice. Após a formação de 2 fases, a fase superior (butanol) foi recuperada, seca com N2 e ressus-pensa em MeOH/ NaOH 10 mM. Análise de HPLC foi realizada tanto para os sobrenadantes da formulação como para as amostras extraídas de butanol (coluna C18; 0-100% de B em 2 min; A = TFA a 0,1% em H20; B = TFA a 0,1% em ACN) . Quantidades aumentadas do composto 1 foram observadas no sobrenadante da formulação tratado com KH2PO4, indicando dessorção do composto 1 pelos aniões de fosfato. A mesma tendência foi observada com as amostras extraídas. Os dados obtidos são dados na tabela 2 abaixo:

Tabela 2

Efeito na ligação de antigénios MenB ao hidróxido de alumínio SDS PAGE foi utilizada para avaliar o efeito da ligação do composto 1 ao adjuvante de hidróxido de alumínio na capacidade dos antigénios MenB se ligarem ao adjuvante de hidróxido de alumínio. Composto 1 foi dissolvido em NaOH 10 mM a 0,5 mg/ml de concentração final. Alum e o Composto 1 foram combinados numa razão em peso de 1:6 (Composto 1:Alum) na presença de concentração final de Histidina 10 mM. O pH foi ajustado para 9,2 e a mistura foi suavemente agitada durante 3 horas à temperatura ambiente, permitindo que a reação ocorresse. A mistura foi centrifugada a 5000 x g durante 10 minutos e o sobrenadante descartado. 0 pélete (i.e., o composto 1-Alum modificado) foi ressuspenso no tampão de Alum inicial para obter a concentração de alum de partida. O pH foi ajustado para 6,5. O Alum modificado foi depois utilizado para a formulação com os antigénios MenB.

Análise de SDS PAGE do sobrenadante de antigénios MenB formulados sozinhos com adjuvante de hidróxido de alumínio (Alum) ou com adjuvante de hidróxido de alumínio junto com o composto 1 é mostrada na Figura 1. Os antigénios MenB avaliados foram 287-953, 936-741 e 961c, antigénios esses descritos em W02004/032958 e Giuliani et al. (2006) Proc. Natl. Acad. Sei. USA 103:10834-10839.

Faixas marcadas "Sn" e TCA" representam a análise dos sobrenadantes de formulações após centrifugação para peletizar o adjuvante de hidróxido de alumínio. Faixas marcadas "Des" representam análise de antigénios recuperada após dessorção do hidróxido de alumínio com tampão de fosfato 0,5 M. Figura 2 mostra que os antigénios MenB ligam-se ao hidróxido de alumínio tanto efetivamente com o composto 1 como obtido sem o composto 1. A adsorção do composto 16 e composto 17 para hidróxido de alumínio foi também avaliada utilizando a formulação de alum descrita anteriormente para o composto 1. Análise de HPLC mostrou que, para ambos os compostos, nenhum composto foi observado no sobrenadante após a adição de hidróxido de alumínio. Porém, o composto 16 e o composto 17 foram recuperados após dessorção com KH2PO4 0,5 M. De notar que a extração de solvente orgânico não foi requerida devido à solubilidade em água dos dois compostos. Além disso, análise SDS PAGE de ligação de antigénio na presença do composto 16 ou composto 17 foi realizada como descrita acima. Para ambos os compostos todos os 3 antigénios MenB estavam completamente adsorvidos no alum modificado com o composto 16 e no alum modificado com o composto 17.

Avaliação da ligação a alum em Tampão de Histidina 10 mM A adsorção dos compostos 6, 16, 17, 19 e 20 foi avaliada para hidróxido de alumínio como segue: para três equivalentes de volume de hidróxido de alumínio aquoso (2 mg/ml) foi adicionado um equivalente de volume de composto em tampão de histidina 10 mM (4 mg/ml) a pH 6,8. A solução resultante foi diluída 10 vezes com branco de tampão de histidina para uma concentração final do composto de 0,1 mg/ml. As soluções diluídas foram incubadas a 37°C durante 5 horas. As amostras foram centrifugadas a 14.000 rpm durante 10 minutos para peletizar o insolúvel. O sobrenadante (junto com um padrão interno) foi depois avaliado por CL-EM/EM utilizando um gradiente balístico (desde CH3CN a 5%-ácido fórmico a 5% até CH3CN a 95%-ácido fórmico a 1,0% em 3,5 minutos) numa coluna Waters Atlantis dC18 (50 mm x 2,1 mm) à temperatura ambiente contra uma curva de calibração preparada a concentrações de compostos conhecidas que variam de 0, 005 a 50 μΜ. A concentração no sobrenadante foi calculada como % de não ligado a alum comparado com o controlo; a % de ligado a alum foi calculada como 100% menos a % de não ligado. Tabela 3 listas a % de ligação dos respetivos compostos testados.

Tabela 3

LISTAGEM DE SEQUÊNCIAS <110> IRM LLC Wu, Tom Yao-Hsiang <120> COMPOSTOS E COMPOSIÇÕES COMO MODULADORES DA ATIVIDADE DE TLR <130> PAT053774-US-PSP <160> 6 <170> Patentln versão 3.5

<210> 1 <211> 248 <212> PRT <213> Neisseria meningitidis <4 0 0> 1

Vai Ala Ala Asp lie Gly Ala Gly Leu Ala Asp Ala Leu Thr Ala Pro 15 10 15

Leu Asp His Lys Asp Lys Gly Leu Gin Ser Leu Thr Leu Asp Gin Ser 20 25 30

Vai Arg Lys Asn Glu Lys Leu Lys Leu Ala Ala Gin Gly Ala Glu Lys 35 40 45

Thr Tyr Gly Asn Gly Asp Ser Leu Asn Thr Gly Lys Leu Lys Asn Asp 50 55 60

Lys Vai Ser Arg Phe Asp Phe lie Arg Gin Ile Glu Vai Asp Gly Gin 65 70 75 80

Leu Ile Thr Leu Glu Ser Gly Glu Phe Gin Vai Tyr Lys Gin Ser His 85 90 95

Ser Ala Leu Thr Ala Phe Gin Thr Glu Gin Ile Gin Asp Ser Glu His 100 105 110

Ser Gly Lys Met Vai Ala Lys Arg Gin Phe Arg lie Gly Asp Ile Ala 115 120 125

Gly Glu His Thr Ser Phe Asp Lys Leu Pro Glu Gly Gly Arg Ala Thr 130 135 140

Tyr Arg Gly Thr Ala Phe Gly Ser Asp Asp Ala Gly Gly Lys Leu Thr 145 150 155 160

Tyr Thr Ile Asp Phe Ala Ala Lys Gin Gly Asn Gly Lys Ile Glu His 165 170 175

Leu Lys Ser Pro Glu Leu Asn Val Asp Leu Ala Ala Ala Asp lie Lys 180 185 190

Pro Asp Gly Lys Arg His Ala Val lie Ser Gly Ser Val Leu Tyr Asn 195 200 205

Gin Ala Glu Lys Gly Ser Tyr Ser Leu Gly lie Phe Gly Gly Lys Ala 210 215 220

Gin Glu Val Ala Gly Ser Ala Glu Val Lys Thr Val Asn Gly lie Arg 225 230 235 240

His lie Gly Leu Ala Ala Lys Gin 245

<210> 2 <211> 247 <212> PRT <213> Neisseria meningitidis <400> 2

Val Ala Ala Asp lie Gly Ala Gly Leu Ala Asp Ala Leu Thr Ala Pro 15 10 15

Leu Asp His Lys Asp Lys Ser Leu Gin Ser Leu Thr Leu Asp Gin Ser 20 25 30

Val Arg Lys Asn Glu Lys Leu Lys Leu Ala Ala Gin Gly Ala Glu Lys 35 40 45

Thr Tyr Gly Asn Gly Asp Ser Leu Asn Thr Gly Lys Leu Lys Asn Asp 50 55 60

Lys Val Ser Arg Phe Asp Phe lie Arg Gin lie Glu Val Asp Gly Gin 65 70 75 80

Leu lie Thr Leu Glu Ser Gly Glu Phe Gin lie Tyr Lys Gin Asp His 85 90 95

Ser Ala Val Val Ala Leu Gin lie Glu Lys lie Asn Asn Pro Asp Lys 100 105 110 lie Asp Ser Leu lie Asn Gin Arg Ser Phe Leu Val Ser Gly Leu Gly 115 120 125

Gly Glu His Thr Ala Phe Asn Gin Leu Pro Asp Gly Lys Ala Glu Tyr 130 135 140

His Gly Lys Ala Phe Ser Ser Asp Asp Ala Gly Gly Lys Leu Thr Tyr 145 150 155 160

Thr He Asp Phe Ala Ala Lys Gin Gly His Gly Lys lie Glu His Leu 165 170 175

Lys Thr Pro Glu Gin Asn Val Glu Leu Ala Ala Ala Glu Leu Lys Ala 180 185 190

Asp Glu Lys Ser His Ala Val lie Leu Gly Asp Thr Arg Tyr Gly Ser 195 200 205

Glu Glu Lys Gly Thr Tyr His Leu Ala Leu Phe Gly Asp Arg Ala Gin 210 215 220

Glu lie Ala Gly Ser Ala Thr Val Lys lie Gly Glu Lys Val His Glu 225 230 235 240 lie Gly lie Ala Gly Lys Gin 245

<210> 3 <211> 250 <212> PRT <213> Neisseria meningitidis <400> 3

Val Ala Ala Asp He Gly Thr Gly Leu Ala Asp Ala Leu Thr Ala Pro 15 10 15

Leu Asp His Lys Asp Lys Gly Leu Lys Ser Leu Thr Leu Glu Asp Ser 20 25 30 lie Pro Gin Asn Gly Thr Leu Thr Leu Ser Ala Gin Gly Ala Glu Lys 35 40 45

Thr Phe Lys Ala Gly Asp Lys Asp Asn Ser Leu Asn Thr Gly Lys Leu 50 55 60

Lys Asn Asp Lys lie Ser Arg Phe Asp Phe Val Gin Lys He Glu Val 65 70 75 80

Asp Gly Gin Thr He Thr Leu Ala Ser Gly Glu Phe Gin He Tyr Lys 85 90 95

Gin Asn His Ser Ala Val Val Ala Leu Gin He Glu Lys He Asn Asn 100 105 110

Pro Asp Lys Thr Asp Ser Leu lie Asn Gin Arg Ser Phe Leu Val Ser 115 120 125

Gly Leu Gly Gly Glu His Thr Ala Phe Asn Gin Leu Pro Gly Gly Lys 130 135 140

Ala Glu Tyr His Gly Lys Ala Phe Ser Ser Asp Asp Pro Asn Gly Arg 145 150 155 160

Leu His Tyr Ser lie Asp Phe Thr Lys Lys Gin Gly Tyr Gly Arg lie 165 170 175

Glu His Leu Lys Thr Leu Glu Gin Asn Val Glu Leu Ala Ala Ala Glu 180 185 190

Leu Lys Ala Asp Glu Lys Ser His Ala Val lie Leu Gly Asp Thr Arg 195 200 205

Tyr Gly Ser Glu Glu Lys Gly Thr Tyr His Leu Ala Leu Phe Gly Asp 210 215 220

Arg Ala Gin Glu lie Ala Gly Ser Ala Thr Val Lys lie Gly Glu Lys 225 230 235 240

Val His Glu lie Gly lie Ala Gly Lys Gin 245 250

<210> 4 <211> 644 <212> PRT <213> Neisseria meningitidis <400> 4

Met Ala Ser Pro Asp Val Lys Ser Ala Asp Thr Leu Ser Lys Pro Ala 15 10 15

Ala Pro Val Val Ser Glu Lys Glu Thr Glu Ala Lys Glu Asp Ala Pro 20 25 30

Gin Ala Gly Ser Gin Gly Gin Gly Ala Pro Ser Ala Gin Gly Gly Gin 35 40 45

Asp Met Ala Ala Val Ser Glu Glu Asn Thr Gly Asn Gly Gly Ala Ala 50 55 60

Ala Thr Asp Lys Pro Lys Asn Glu Asp Glu Gly Ala Gin Asn Asp Met 65 70 75 80

Pro Gin Asn Ala Ala Asp Thr Asp Ser Leu Thr Pro Asn His Thr Pro 85 90 95

Ala Ser Asn Met Pro Ala Gly Asn Met Glu Asn Gin Ala Pro Asp Ala 100 105 110

Gly Glu Ser Glu Gin Pro Ala Asn Gin Pro Asp Met Ala Asn Thr Ala 115 120 125

Asp Gly Met Gin Gly Asp Asp Pro Ser Ala Gly Gly Glu Asn Ala Gly 130 135 140

Asn Thr Ala Ala Gin Gly Thr Asn Gin Ala Glu Asn Asn Gin Thr Ala 145 150 155 160

Gly Ser Gin Asn Pro Ala Ser Ser Thr Asn Pro Ser Ala Thr Asn Ser 165 170 175

Gly Gly Asp Phe Gly Arg Thr Asn Val Gly Asn Ser Val Val lie Asp 180 185 190

Gly Pro Ser Gin Asn He Thr Leu Thr His Cys Lys Gly Asp Ser Cys 195 200 205

Ser Gly Asn Asn Phe Leu Asp Glu Glu Val Gin Leu Lys Ser Glu Phe 210 215 220

Glu Lys Leu Ser Asp Ala Asp Lys lie Ser Asn Tyr Lys Lys Asp Gly 225 230 235 240

Lys Asn Asp Gly Lys Asn Asp Lys Phe Val Gly Leu Val Ala Asp Ser 245 250 255

Val Gin Met Lys Gly lie Asn Gin Tyr He He Phe Tyr Lys Pro Lys 260 265 270

Pro Thr Ser Phe Ala Arg Phe Arg Arg Ser Ala Arg Ser Arg Arg Ser 275 280 285

Leu Pro Ala Glu Met Pro Leu He Pro Val Asn Gin Ala Asp Thr Leu 290 295 300

He Val Asp Gly Glu Ala Val Ser Leu Thr Gly His Ser Gly Asn He 305 310 315 320

Phe Ala Pro Glu Gly Asn Tyr Arg Tyr Leu Thr Tyr Gly Ala Glu Lys 325 330 335

Leu Pro Gly Gly Ser Tyr Ala Leu Arg Val Gin Gly Glu Pro Ser Lys 340 345 350

Gly Glu Met Leu Ala Gly Thr Ala Val Tyr Asn Gly Glu Val Leu His 355 360 365

Phe His Thr Glu Asn Gly Arg Pro Ser Pro Ser Arg Gly Arg Phe Ala 370 375 380

Ala Lys Val Asp Phe Gly Ser Lys Ser Val Asp Gly lie lie Asp Ser 385 390 395 400

Gly Asp Gly Leu His Met Gly Thr Gin Lys Phe Lys Ala Ala lie Asp 405 410 415

Gly Asn Gly Phe Lys Gly Thr Trp Thr Glu Asn Gly Gly Gly Asp Val 420 425 430

Ser Gly Lys Phe Tyr Gly Pro Ala Gly Glu Glu Val Ala Gly Lys Tyr 435 440 445

Ser Tyr Arg Pro Thr Asp Ala Glu Lys Gly Gly Phe Gly Val Phe Ala 450 455 460

Gly Lys Lys Glu Gin Asp Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ala Thr Tyr Lys 465 470 475 480

Val Asp Glu Tyr His Ala Asn Ala Arg Phe Ala lie Asp His Phe Asn 485 490 495

Thr Ser Thr Asn Val Gly Gly Phe Tyr Gly Leu Thr Gly Ser Val Glu 500 505 510

Phe Asp Gin Ala Lys Arg Asp Gly Lys lie Asp lie Thr lie Pro Val 515 520 525

Ala Asn Leu Gin Ser Gly Ser Gin His Phe Thr Asp His Leu Lys Ser 530 535 540

Ala Asp lie Phe Asp Ala Ala Gin Tyr Pro Asp lie Arg Phe Val Ser 545 550 555 560

Thr Lys Phe Asn Phe Asn Gly Lys Lys Leu Val Ser Val Asp Gly Asn 565 570 575

Leu Thr Met His Gly Lys Thr Ala Pro Val Lys Leu Lys Ala Glu Lys 580 585 590

Phe Asn Cys Tyr Gin Ser Pro Met Ala Lys Thr Glu Val Cys Gly Gly 595 600 605

Asp Phe Ser Thr Thr lie Asp Arg Thr Lys Trp Gly Val Asp Tyr Leu 610 615 620

Val Asn Val Gly Met Thr Lys Ser Val Arg lie Asp lie Gin lie Glu 625 630 635 640

Ala Ala Lys Gin

<210> 5 <211> 434 <212> PRT <213> Neisseria meningitidis <400> 5

Met Val Ser Ala Val lie Gly Ser Ala Ala Val Gly Ala Lys Ser Ala 15 10 15

Val Asp Arg Arg Thr Thr Gly Ala Gin Thr Asp Asp Asn Val Met Ala 20 25 30

Leu Arg lie Glu Thr Thr Ala Arg Ser Tyr Leu Arg Gin Asn Asn Gin 35 40 45

Thr Lys Gly Tyr Thr Pro Gin lie Ser Val Val Gly Tyr Asn Arg His 50 55 60

Leu Leu Leu Leu Gly Gin Val Ala Thr Glu Gly Glu Lys Gin Phe Val 65 70 75 80

Gly Gin lie Ala Arg Ser Glu Gin Ala Ala Glu Gly Val Tyr Asn Tyr 85 90 95 lie Thr Val Ala Ser Leu Pro Arg Thr Ala Gly Asp lie Ala Gly Asp 100 105 110

Thr Trp Asn Thr Ser Lys Val Arg Ala Thr Leu Leu Gly lie Ser Pro 115 120 125

Ala Thr Gin Ala Arg Val Lys lie Val Thr Tyr Gly Asn Val Thr Tyr 130 135 140

Val Met Gly lie Leu Thr Pro Glu Glu Gin Ala Gin lie Thr Gin Lys 145 150 155 160

Vai Ser Thr Thr Val Gly Val Gin Lys Val lie Thr Leu Tyr Gin Asn 165 170 175

Tyr Val Gin Arg Gly Ser Gly Gly Gly Gly Val Ala Ala Asp He Gly 180 185 190

Ala Gly Leu Ala Asp Ala Leu Thr Ala Pro Leu Asp His Lys Asp Lys 195 200 205

Gly Leu Gin Ser Leu Thr Leu Asp Gin Ser Val Arg Lys Asn Glu Lys 210 215 220

Leu Lys Leu Ala Ala Gin Gly Ala Glu Lys Thr Tyr Gly Asn Gly Asp 225 230 235 240

Ser Leu Asn Thr Gly Lys Leu Lys Asn Asp Lys Val Ser Arg Phe Asp 245 250 255

Phe lie Arg Gin lie Glu Val Asp Gly Gin Leu lie Thr Leu Glu Ser 260 265 270

Gly Glu Phe Gin Val Tyr Lys Gin Ser His Ser Ala Leu Thr Ala Phe 275 280 285

Gin Thr Glu Gin lie Gin Asp Ser Glu His Ser Gly Lys Met Val Ala 290 295 300

Lys Arg Gin Phe Arg lie Gly Asp lie Ala Gly Glu His Thr Ser Phe 305 310 315 320

Asp Lys Leu Pro Glu Gly Gly Arg Ala Thr Tyr Arg Gly Thr Ala Phe 325 330 335

Gly Ser Asp Asp Ala Gly Gly Lys Leu Thr Tyr Thr He Asp Phe Ala 340 345 350

Ala Lys Gin Gly Asn Gly Lys He Glu His Leu Lys Ser Pro Glu Leu 355 360 365

Asn Val Asp Leu Ala Ala Ala Asp He Lys Pro Asp Gly Lys Arg His 370 375 380

Ala Val He Ser Gly Ser Val Leu Tyr Asn Gin Ala Glu Lys Gly Ser 385 390 395 400

Tyr Ser Leu Gly lie Phe Gly Gly Lys Ala Gin Glu Val Ala Gly Ser 405 410 415

Ala Glu Val Lys Thr Val Asn Gly lie Arg His lie Gly Leu Ala Ala 420 425 430

Lys Gin <210> 6

<211> 327 <212> PRT <213> Neisseria meningitidis <400> 6

Ala Thr Asn Asp Asp Asp Val Lys Lys Ala Ala Thr Val Ala lie Ala 15 10 15

Ala Ala Tyr Asn Asn Gly Gin Glu lie Asn Gly Phe Lys Ala Gly Glu 20 25 30

Thr lie Tyr Asp lie Asp Glu Asp Gly Thr lie Thr Lys Lys Asp Ala 35 40 45

Thr Ala Ala Asp Val Glu Ala Asp Asp Phe Lys Gly Leu Gly Leu Lys 50 55 60

Lys Val Val Thr Asn Leu Thr Lys Thr Val Asn Glu Asn Lys Gin Asn 65 70 75 80

Val Asp Ala Lys Val Lys Ala Ala Glu Ser Glu lie Glu Lys Leu Thr 85 90 95

Thr Lys Leu Ala Asp Thr Asp Ala Ala Leu Ala Asp Thr Asp Ala Ala 100 105 110

Leu Asp Ala Thr Thr Asn Ala Leu Asn Lys Leu Gly Glu Asn lie Thr 115 120 125

Thr Phe Ala Glu Glu Thr Lys Thr Asn lie Val Lys lie Asp Glu Lys 130 135 140

Leu Glu Ala Val Ala Asp Thr Val Asp Lys His Ala Glu Ala Phe Asn 145 150 155 160

Asp lie Ala Asp Ser Leu Asp Glu Thr Asn Thr Lys Ala Asp Glu Ala 165 170 175

Vai Lys Thr Ala Asn Glu Ala Lys Gin Thr Ala Glu Glu Thr Lys Gin 180 185 190

Asn Val Asp Ala Lys Val Lys Ala Ala Glu Thr Ala Ala Gly Lys Ala 195 200 205

Glu Ala Ala Ala Gly Thr Ala Asn Thr Ala Ala Asp Lys Ala Glu Ala 210 215 220

Val Ala Ala Lys Val Thr Asp lie Lys Ala Asp lie Ala Thr Asn Lys 225 230 235 240

Asp Asn lie Ala Lys Lys Ala Asn Ser Ala Asp Val Tyr Thr Arg Glu 245 250 255

Glu Ser Asp Ser Lys Phe Val Arg lie Asp Gly Leu Asn Ala Thr Thr 260 265 270

Glu Lys Leu Asp Thr Arg Leu Ala Ser Ala Glu Lys Ser lie Ala Asp 275 280 285

His Asp Thr Arg Leu Asn Gly Leu Asp Lys Thr Val Ser Asp Leu Arg 290 295 300

Lys Glu Thr Arg Gin Gly Leu Ala Glu Gin Ala Ala Leu Ser Gly Leu 305 310 315 320

Phe Gin Pro Tyr Asn Val Gly 325

Claims (23)

REIVINDICAÇÕES

1. Um composto de Fórmula (I) ou seu sal farma-ceuticamente aceitável:

Fórmula (I) em que: R1 é Ci-C4alquilo, -IdR5, -L1R6, -L2R5 ou -L2R6; L1 é -C (0)- ou -0-; L2 é Ci-C6alquileno ou C2-C6alquenileno, em que o Ci-Cô-alquileno e C2_C6alquenileno de L2 são opcionalmente substituídos com 1 a 4 grupos fluoro; cada L3 é independentemente selecionado a partir de Ci-Cealquileno e - ( (CR4R4) p0) q (CH2) P-, em que o Ci-C6alqui-leno de L3 é opcionalmente substituído com 1 a 4 grupos fluoro; L4 é arileno; R2 é Ci-C4alquilo; R3 é selecionado a partir de -0L3R7, -OL3L4L3R7, -OR8 e -OL3L4R5; cada R4 é independentemente selecionado a partir de H e fluoro; R5 é -P(0) (OH) 2, R6 é -C (0) OH ou -CF2P(0) (OH)2; R7 é -CF2P(0) (OH)2; R8 é H ou Ci-C4alquilo; cada p é independentemente selecionado a partir de 1, 2, 3, 4, 5 e 6, e q é 1, 2, 3 ou 4, com a condição de que quando R3 for -OR8, R1 seja -L1R5, -L1R6, -L2R5 ou -L2R6, em que R6 é -CF2P (0) (OH) 2 e R7 é -CF2P(0)(OH)2.

2. 0 composto da reivindicação 1, em que: R1 é Ci-Cdalquilo; R2 é Ci-C4alquilo; R3 é -0L3R7; R7 é -CF2P (0) (OH) 2, e L3 é Ci-C6alquileno.

3. 0 composto da reivindicação 1, em que: R1 é Ci-C4alquilo; R2 é Ci-C4alquilo; R3 é -0L3R7; R7 é -CF2P(0) (OH)2; L3 é - ( (CR4R4) pO) q (CH2) p- ; R4 é H; q é 1 ou 2, e p é 2 .

4. 0 composto da reivindicação 1, em que: R1 é -L2R6; R2 é Ci-C4alquilo; R3 é -OL3R7; R6 é -C(0)OH; R7 é -CF2P(0) (OH)2; L2 é Ci-C6alquileno, e L3 é Ci-C6alquileno.

5. 0 composto da reivindicação 1, em que: R1 é -L2R6 ; R2 é Ci-C4alquilo; R3 é -0L3R7; R6 é -C(0)OH; R7 é -CF2P(0) (OH)2; L2 é Ci-C6alquileno; L3 é - ( (CR4R4) pO) q (CH2) p-; R4 é H; q é 1 ou 2, e p é 2 .

6. 0 composto da reivindicação 1, em que: R1 é -C(R5)2OH, -L1R5, -L2R5 ou -L1R6; R2 é Ci-C4alquilo; R3 é -OR8; R8 é Ci-C4alquilo; R6 é -CF2P (0) (OH) 2; L1 é -C (0) -, e L2 é Ci-C6alquileno ou C2-C6alquenileno, cada opcionalmente substituído com 1 a 4 qrupos fluoro.

7. 0 composto da reivindicação 1, em que: R1 é Ci-C4alquilo; R2 é Ci-C4alquilo; R3 é -0L3L4R5, -OL3L4L3R5, ou -OL3L4L3R7; R7 é -CF2P (0) (OH) 2; cada L3 é independentemente um Ci-C6alquileno, e L4 é fenileno.

8. 0 composto da reivindicação 1 ou reivindi cação 6, em que R8 é metilo.

9. 0 composto de qualquer uma das reivindica ções 1-3 ou 7-8, em que R1 é metilo.

10. 0 composto de qualquer uma das reivindica ções 1-9, em que R2 é metilo.

11. 0 composto da reivindicação 1, em que o composto é selecionado a partir de: ácido 4-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)-1, 1-difluorobutilfosfónico; ácido 3-(5-amino-2-(4-(4,4-difluoro-4-fosfonobutoxi)-2-metilfenetil) benzo [f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico; ácido 3-(5-amino-2-(4-(2-(3,3-difluoro-3-fosfonopropo-xi)etoxi)-2-metilfenetil)benzo[f][l,7]naftiridin-8-il)propanoico; ácido 5-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [ 1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)-1,1-difluoropentilfosfónico; ácido 3-(2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [1,7]naftiri-din-2-il)etil)-3-metilfenoxi)etoxi)-1,1-difluoropropil-fosfónico; ácido 2-(4-( (4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [1,7]naftiri-din-2-il)etil)-3-metilfenoxi)metil)fenil)-1, 1-difluoro-etilfosfónico; ácido 2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)benzo[f]— [1,7]naftiridin-8-il)-1,1-difluoro-2-oxoetilfosfónico; ácido 3-((4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)metil)fenilfosfónico; ácido 5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]-naftiridino-8-carbonilfosfónico; ácido 3-(5-amino-2-(4-(2-(2-(3,3-difluoro-3-fosfonopro-poxi)etoxi)etoxi)-2-metilfenetil)benzo[f][1,7]naftiri-din-8-il)propanoico; ácido 6-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)-1,1-difluoro-hexilfosfónico; e ácido (3-(2-(2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f]1,7-nafti-ridin-2-il}etil)-3-metilfenoxi)etoxi)etoxi) -1,1-difluo-ropropilfosfónico.

12. Um composto selecionado a partir de: ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(2-(2-(2-fosfonoetoxi)-etoxi)etoxi)fenetil)benzo[f][1,7]naphtiridin-8-il)pro-panoico; ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(2-(2-(2-(2-fosfonoeto-xi)etoxi)etoxi)etoxi)fenetil)benzo[f][1,7]naftiridin-8-il)propanoico; di-hidrogenofosfato de 4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f]- [1.7] naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenilo; ácido (4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)metilfosfónico; ácido (E)-2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)benzo-[f][1,7]naftiridin-8-il)vinilfosfónico; ácido 2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)benzo[f]- [1.7] naftiridin-8-il)etilfosfónico; ácido (E)-2-(5-amino-2-(4-metoxi-2-metilfenetil)benzo-[f] [1,7]naftiridin-8-il)-1-fluorovinilfosfónico ; ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(3-fosfonopropoxi)fenetil) benzo[f][l,7]naftiridin-8-il)propanoico; ácido 3-(5-amino-2-(2-metil-4-(2-(2-fosfonoetoxi)eto-xi)fenetil)benzo[f][l,7]naftiridin-8-il)propanoico; ácido 2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)etilfosfónico; ácido 6-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)hexilfosfónico; ácido 2-(2-(2-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [l,7]nafti-ridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)etoxi)etoxi) etilfosfónico ; ácido 5-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [1,7]naftiridin- 2-il)etil)-3-metilfenoxi)pentilfosfónico ; ácido 4-( (4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f] [1,7]naftiridin- 2-il)etil)-3-metilfenoxi)metil)benzilfosfónico, e ácido 4-(4-(2-(5-amino-8-metilbenzo[f][1,7]naftiridin-2-il)etil)-3-metilfenoxi)butilfosfónico.

13. Uma composição farmacêutica, que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de qualquer uma das reivindicações 1-12 e um veiculo farma-ceuticamente aceitável.

14. A composição farmacêutica da reivindicação 13, em que um composto de fórmula (I) está ligado a um adjuvante contendo alumínio.

15. A composição farmacêutica da reivindicação 14, em que o adjuvante contendo alumínio é selecionado a partir de hidróxido de alumínio, oxi-hidróxido de alumínio e hidroxifosfato de alumínio.

16. 0 composto de qualquer uma das reivindicações 1-12 para utilização em terapia.

17. Um composto de qualquer uma das reivindicações 1-12 para utilização num método de tratamento de um paciente com uma doença ou distúrbio associado com a atividade do recetor TLR7, em que o composto da Fórmula (I) é um agonista do recetor TLR7.

18. 0 composto para utilização num método de tratamento da reivindicação 17, em que a doença ou condição é uma doença infecciosa, uma doença inflamatória, uma doença respiratória, uma doença dermatológica ou uma doença autoimune.

19. 0 composto para utilização num método de tratamento da reivindicação 17, em que a doença ou condição é asma, doença pulmonar obstrutiva crónica (COPD), sindrome da angústia respiratória do adulto (ARDS), colite ulcerativa, doença de Crohn, bronquite, dermatite, ceratose actinica, carcinoma de células basais, rinite alérgica, psoriase, escleroderma, urticária, artrite reumatoide, esclerose múltipla, cancro, cancro de mama, HIV ou lúpus.

20. Utilização de um composto de qualquer uma das reivindicações 1-12, no fabrico de um medicamento para o tratamento de uma doença ou distúrbio num paciente onde a modulação de um recetor TLR7 está implicada.

21. A utilização da reivindicação 20, em que a doença ou condição é uma doença infecciosa, uma doença inflamatória, uma doença respiratória, uma doença dermatológica ou uma doença autoimune.

22. A utilização da reivindicação 20, em que a doença ou condição é asma, doença pulmonar obstrutiva crónica (COPD), sindrome da angústia respiratória do adulto (ARDS), colite ulcerativa, doença de Crohn, bronquite, dermatite, ceratose actinica, carcinoma de células basais, rinite alérgica, psoriase, escleroderma, urticária, artrite reumatoide, esclerose múltipla, cancro, cancro de mama, HIV ou lúpus.

23. Um método para ativar in vitro um recetor de TLR7, em que o método compreende administrar a um sistema ou um indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de qualquer uma das reivindicações 1-12.