WO2014065369A1 - 茶葉抽出物 - Google Patents

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WO2014065369A1
WO2014065369A1 PCT/JP2013/078826 JP2013078826W WO2014065369A1 WO 2014065369 A1 WO2014065369 A1 WO 2014065369A1 JP 2013078826 W JP2013078826 W JP 2013078826W WO 2014065369 A1 WO2014065369 A1 WO 2014065369A1
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tea leaf
leaf extract
tea
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史樹 川口
杉田　耕一
村上　章
克彦 中浜
和也 南藤
明義 河岡
山本　万里
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日本製紙株式会社
独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構
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Definitions

  • the present invention relates to a tea leaf extract.
  • Anthocyanins are red pigments contained in plants and are known to have functionalities such as antioxidant properties, rhodopsin resynthesis promotion activity, collagen synthesis promotion activity, capillarity protection and strengthening activity.
  • anthocyanins are known to be unstable to heat and light, and decomposition, discoloration and discoloration of anthocyanins by photolysis or air oxidation have been problems.
  • anthocyanins contained in blackcurrants and blueberries have been found to be unstable.
  • catechins contained in tea leaf extract have attracted attention for physiological effects such as antioxidant action and lipid improving action.
  • a tea leaf extract containing catechins at a high concentration has a strong bitterness and astringency. Therefore, a technique for reducing bitterness and astringency while containing catechins is desired.
  • Patent Document 1 As a method for stabilizing anthocyanins, there is known a technique for stabilizing unacylated anthocyanins by combining non-acylated anthocyanins with crushed, dried, concentrated or extract of plants that produce acylated anthocyanins. (Patent Document 1).
  • tea leaf extracts containing anthocyanins include tea leaf extracts containing anthocyanins and catechins (Patent Document 2), and tea beverages containing anthocyanins and having a pH of less than 5.5 (Patent Document 3).
  • An object of the present invention is to provide a tea leaf extract that is rich in highly stable anthocyanins and has excellent palatability.
  • the present inventors have been obtained under specific extraction conditions, are rich in delphinidin, a kind of anthocyanidin, and the content of catechins is suppressed.
  • a tea leaf extract was found. Since delphinidin or its glycoside has a strong antioxidant effect, it can sufficiently exhibit the functions (an eye strain suppression, anti-inflammatory, antioxidant, etc.) as anthocyanins compared to other glycosides.
  • a combination of catechins and delphinidin can be expected to have a combined antioxidant effect, anti-stress effect, and the like.
  • the tea leaf extraction according to the above [1] which is obtained by extracting tea leaves with water at a temperature of 70 ° C. to 95 ° C. for 5 minutes to 60 minutes using water 10 times the dry weight of the tea leaves object.
  • the manufacturing method of the tea leaf extract which is 0.13 weight% or more and catechin is 23.0 weight% or less.
  • a food or drink comprising the tea leaf extract according to any one of [1] to [9] above.
  • a cosmetic comprising the tea leaf extract according to any one of [1] to [9] above.
  • a hypoglycemic agent comprising the tea leaf extract according to any one of [1] to [9] above.
  • An antidiabetic agent comprising the tea leaf extract according to any one of [1] to [9] above.
  • a cholecystokinin receptor activator comprising the tea leaf extract according to any one of [1] to [9] above.
  • An adrenergic receptor antagonist comprising the tea leaf extract according to any one of [1] to [9] above.
  • An autonomic nervous system symptom enhancing agent comprising the tea leaf extract according to any one of [1] to [9] above.
  • a motility enhancer comprising the tea leaf extract according to any one of [1] to [9] above.
  • the present invention also provides the following aspects.
  • a method for treating or preventing hyperglycemia comprising administering the tea leaf extract according to any one of [1] to [9] above to a human or a non-human animal.
  • a method for treating or preventing diabetes comprising administering the tea leaf extract according to any one of [1] to [9] above to a human or non-human animal.
  • a method for activating a cholecystokinin receptor comprising administering the tea leaf extract according to any one of [1] to [9] above to a human or non-human animal.
  • a method for inhibiting an adrenergic receptor comprising the tea leaf extract according to any one of [1] to [9] above.
  • a method for enhancing autonomic nervous system symptoms comprising the tea leaf extract according to any one of [1] to [9] above.
  • a method for enhancing motility comprising administering the tea leaf extract according to any one of [1] to [9] above to a human or non-human animal.
  • [28] Use for cholecystokinin receptor activation comprising the tea leaf extract according to any one of [1] to [9] above.
  • [29] Use for inhibiting an adrenergic receptor comprising the tea leaf extract according to any one of [1] to [9] above.
  • [30] Use for enhancing autonomic nervous system symptoms comprising the tea leaf extract according to any one of [1] to [9] above.
  • [31] Use of the tea leaf extract according to any one of [1] to [9] above for enhancing motility or stimulation.
  • the tea leaf extract of the present invention contains abundant delphinidin, the function as anthocyanins can be sufficiently exhibited.
  • it has high stability, hypoglycemic action, autonomic nervous system symptoms, motility enhancement or stimulation such as spontaneous movement, cholecystokinin receptors (such as cholecystokinin B receptor), adrenergic receptors (adrenergic ⁇ 2A receptor) It has the effect of regulating receptors related to nerves such as the body. Accordingly, it is possible to exert actions such as anti-stress, suppression of eyestrain, anti-inflammatory, antioxidant, anti-diabetes, arteriosclerosis prevention, autonomic nervous system symptom enhancement, and motility enhancement.
  • catechins since content of catechins is suppressed, there are few bitterness and astringency, and it is excellent in palatability. Furthermore, the combination of catechins and delphinidin can be expected to have combined effects with the physiological activities of catechins such as antioxidant and antistress effects.
  • FIG. 1 is a graph showing the results in Experimental Example 1.
  • FIG. 2 is a graph showing the results in Experimental Example 2.
  • FIG. 3 is a graph showing the residual rate of delphinidin in the extracts of Example 2 and Comparative Example 6.
  • the tea leaf extract of the present invention contains delphinidin or a glycoside thereof.
  • Delphinidin is a kind of anthocyanidin that constitutes anthocyanins. Anthocyanidins are classified into delphinidin, cyanidin, pelargonidin, aurantidine, luteolinidine, peonidin, malvidin, petunidin, europeinidine, rosinidine and the like. Delphinidin is 3,5,7-trihydroxy-2- (3,4,5-trihydroxyphenyl) -1-benzopyrylium (C 15 H 11 O 7 ).
  • a glycoside of delphinidin is a compound in which hydrogen atoms of one or more hydroxyl groups contained in delphinidin are substituted with other substituents.
  • the substitution site is preferably the 3rd or 6th position.
  • other substituents include groups in which one hydrogen atom has been removed from a sugar such as galactose or glucose.
  • delphinidin glycosides are delphinidin-3-O- (6-trans-p-coumaroyl) - ⁇ -galactoside (DCGa), delphinidin-O- ⁇ -galactoside (D3Ga) and delphinidin-3- ⁇ - A glucoside (D3G) is mentioned.
  • the content of delphinidin or a glycoside thereof in the tea leaf extract of the present invention is 0.13% by weight or more, preferably 0.16% by weight or more, based on the dry weight of the tea leaf extract. More preferably, it is 19% by weight or more.
  • the upper limit is not particularly specified, but is usually 0.5% by weight or less.
  • the ratio of the content of delphinidin or its glycoside in the anthocyanin content is preferably 50% or more, and more preferably 60% or more.
  • the upper limit is not particularly specified, but is usually 90% or less.
  • the anthocyanin content means the anthocyanin content relative to the dry weight of the tea leaf extract.
  • the content of delphinidin or a glycoside thereof means the content of delphinidin or a glycoside thereof relative to the dry weight of the tea leaf extract.
  • the content of delphinidin or its glycoside in the tea leaf extract can be measured by high performance liquid chromatography (HPLC).
  • HPLC high performance liquid chromatography
  • the anthocyanin content in the tea leaf extract can be measured by HPLC.
  • the tea leaf extract of the present invention contains catechins.
  • catechins catechins, catechin (C), gallocatechin (GC), catechin gallate (CG), gallocatechin gallate (GCG), epicatechin (EC), epigallocatechin (EGC), epicatechin gallate (ECG) and epigallo Catechin gallate (EGCG), epigallocatechin-3- (3 ′′ -O-methyl) gallate (EGCG3 ′′ Me), epicatechin-3- (3 ′′ -O-methyl) gallate (ECG3 ′′ Me) can be mentioned.
  • the content of catechins in the tea leaf extract of the present invention is 23.0% by weight or less, preferably 21.0% by weight or less, and preferably 18.0% by weight or less, based on the dry weight of the tea leaf extract. It is more preferable that Although a minimum in particular is not specified, Usually, it is 14.0 weight% or more. Within this range, there is little bitterness and astringency and excellent palatability.
  • the content of epigallocatechin gallate (EGCG) in the catechins is preferably 10.5% by weight or less based on the dry weight of the tea leaf extract. More preferably, it is more preferably 10.0% by weight or less.
  • the content of catechin in the tea leaf extract can be measured by HPLC or a colorimetric method.
  • the tea leaf extract of the present invention usually contains caffeine.
  • Caffeine is a kind of purine alkaloid having a purine ring. Caffeine is contained in foods and drinks such as coffee, cola, green tea, black tea, oolong tea, cocoa, chocolate, and energy drinks, and since caffeine contained in tea is tied to tannin and its effect is suppressed, Such excitatory action is weak and acts slowly.
  • the caffeine content in the tea leaf extract of the present invention is preferably 5.4% by weight or less, more preferably 5.2% by weight or less, based on the dry weight of the tea leaf extract. More preferably, it is 1% by weight or less.
  • the lower limit is not particularly specified, but is usually 2.5% by weight or more when low caffeine treatment is not performed.
  • the amount of caffeine in the tea leaf extract can be measured by HPLC.
  • the tea leaf extract of the present invention usually contains an amino acid or a salt thereof.
  • An amino acid is a compound having both an amino group and a carboxyl group.
  • amino acids include theanine, glycine, arginine, lysine, alanine, glutamine, glutamic acid, histidine, threonine, asparagine, aspartic acid, phenylalanine, leucine, valine, tryptophan, proline, cysteine, serine, tyrosine, isoleucine, methionine Is done.
  • amino acid salts include alkali metal salts, alkaline earth metal salts, ammonium salts, inorganic acid salts, and organic acid salts.
  • the content of the amino acid or salt thereof in the tea leaf extract of the present invention is preferably 1.0% by weight or more, preferably 1.3% by weight or more, based on the dry weight of the tea leaf extract. More preferably, it is 5% by weight or more.
  • the upper limit is not particularly specified, but is usually 4.5% by weight or less.
  • the amount of amino acid in the tea leaf extract can be measured by HPLC.
  • the tea leaf extract of the present invention preferably contains hydrolyzable tannin.
  • hydrolyzable tannin By containing hydrolyzable tannin, an antiallergic effect can be obtained.
  • hydrolyzable tannin include strictinin, and strictinin is preferable.
  • Strictinin is 1,2-di-O-galloyl-4,6-O- (S) -hexahydroxydiphenoyl- ⁇ -D-glucopyranose.
  • the content of hydrolyzable tannin is preferably 1.7% by weight or less, more preferably 1.5% by weight or less, and more preferably 1.4% by weight or less based on the dry weight of the tea leaf extract. More preferably it is.
  • the lower limit is not particularly specified, but is usually 0.6% by weight or more.
  • the amount of strictinin can be measured by HPLC.
  • the tea leaf extract of the present invention preferably contains theogarin or a derivative thereof.
  • Theogalin is a glycoside of trihydroxybenzoic acid and is also called (1S) -1 ⁇ , 3 ⁇ , 4 ⁇ -trihydroxy-5 ⁇ - (galloyloxy) cyclohexanecarboxylic acid.
  • the content of theogalin or a derivative thereof is preferably 5.0% by weight or less, more preferably 3.0% by weight or less, and more preferably 1.6% by weight or less, based on the dry weight of the tea leaf extract. More preferably it is. Although a minimum in particular is not specified, Usually, it is 0.7 weight% or more.
  • the amount of theogarin can be measured by HPLC.
  • the delphinidin or glycoside thereof contained in the tea leaf extract of the present invention has higher stability than conventional anthocyanins. Stability can be represented by the residual rate of delphinidin or its glycoside in the tea leaf extract when the tea leaf extract is heated at a temperature of 100 ° C. for 120 minutes. The residual rate is preferably 90% by weight or more. The residual rate of delphinidin or its glycoside is calculated by the formula (1).
  • the tea leaf extract of the present invention can be obtained by extracting tea leaves into water 10 times or more the dry weight of tea leaves at a temperature of 70 to 95 ° C. for 5 to 60 minutes.
  • tea leaves examples include tea leaves of Camellia genus plants such as Camellia sinensis. Examples of the tea leaves produced are green tea, black tea, oolong tea, etc., and green tea is preferred. Examples of tea leaves of green tea include sencha, gyokuro, sayha, stem tea, bud tea, powdered tea, roasted tea, brown rice tea, tencha, kettle roasted tea, and baked tea. Among the tea leaves of green tea, tea leaves of varieties such as “Saint Rouge” (Ministry of Agriculture, Forestry and Fisheries, Variety Registration Number: 21262), F95181 (Tea Chumoku Honno No. 6), “Yabukita”, etc. are preferred. Is preferred.
  • Tea leaves may be crushed before extraction.
  • a crusher for example, a multi-bead shocker (registered trademark, Yasui Kikai Co., Ltd.), a stone mill, a ceramic mill, a ball mill, a hammer mill, or the like can be used for the pulverization treatment.
  • the extraction solvent water or an aqueous ethanol solution can be mentioned, and water is preferred. Further, the concentration of ethanol in the aqueous ethanol solution can be determined within a range that does not impair the effects of the present invention, and is usually 70% by weight or less based on the entire aqueous ethanol solution.
  • the extraction temperature is preferably 70 to 95 ° C, more preferably 70 to 80 ° C.
  • the extraction time is preferably 5 to 60 minutes, more preferably 5 to 10 minutes.
  • the weight ratio of water to tea leaves is preferably 10 times or more of the tea leaf dry weight, more preferably 10 to 100 times the tea leaf dry weight of tea leaf 1. When the extraction temperature is higher than 95 ° C.
  • the solid content may be removed by a process such as filtration or centrifugation after the extraction process. Furthermore, treatments such as concentration (vacuum concentration, reverse osmosis membrane treatment, etc.), drying (spray drying, freeze drying, etc.) may be performed.
  • Examples of the form of the tea leaf extract of the present invention include liquids (tablets, capsules, soft capsules, etc.), slurries (syrups, etc.), semi-solids (creams, pastes, etc.), solids (powder), and are solid. Is preferable, and a powder is preferable.
  • the tea leaf extract of the present invention may be made into a composition by adding various additives.
  • additives include seasonings; acidulants (citric acid, succinic acid, etc.); preservatives (ascorbic acid, acetate, ⁇ -polylysine, etc.); pH adjusters; emulsifiers (sucrose fatty acid esters, glycerin fatty acid esters) Perfume; pigment; thickener (carrageenan, xanthan gum, etc.); swelling agent; protein (soy protein, milk protein, etc.); sugar (starch, sucrose, fructose, reduced starch saccharified, Erythritol, xylitol, etc.); sweeteners (sucralose, thaumatin, etc.); vitamins (vitamin A, vitamin C, vitamin E, vitamin K, etc.); minerals (iron, calcium, etc.) and the like.
  • tea leaf extract of the present invention examples include pharmaceuticals and pharmaceutical departments such as an eye strain reducing agent, an anti-stress agent, an anti-diabetic agent, an antioxidant, a stabilizer, an autonomic nervous system symptom-enhancing agent, and a motility-enhancing agent Foreign goods are listed.
  • pharmaceuticals and pharmaceutical departments such as an eye strain reducing agent, an anti-stress agent, an anti-diabetic agent, an antioxidant, a stabilizer, an autonomic nervous system symptom-enhancing agent, and a motility-enhancing agent Foreign goods are listed.
  • non-pharmaceutical uses such as cosmetics, feed, toiletry products, coloring materials, food and drink, or food additives, papers, stationery, office supplies, toys and the like can be mentioned.
  • the tea leaf extract of the present invention can be used as a non-pharmaceutical product such as cosmetics, feed, toiletries, or other daily necessities.
  • cosmetics makeup cosmetics, basic cosmetics, hair tonics, perfumes
  • feeds livestock feeds, pet foods, etc .
  • toiletry products hair care products such as soaps and shampoos
  • oral care products such as toothpaste and toothpaste liquids
  • the tea leaf extract of the present invention is used as a coloring material such as a coloring material (coloring agent) and a coloring material (coloring agent), such as pharmaceuticals, quasi-drugs, cosmetics, feeds, toiletries, foods and drinks, food additives, and papers. , Stationery, office supplies and toys.
  • the tea leaf extract of the present invention can be used as a food or drink or a food additive.
  • food and drink include beverages (soft drinks, carbonated drinks, nutritional drinks, powdered drinks, fruit drinks, milk drinks, jelly drinks, beer, Japanese sake, Western liquor, Chinese liquor, condiments, etc.); Bread; Seasonings (sauce, miso, soy sauce, mayonnaise, shortening, dressing, sauce, spices, etc.); Soy foods (natto, tofu, fried chicken, etc.); Seafood processed foods (kamaboko, hampen, chikuwa, paste products) Processed meat (ham, sausage, winner); Agricultural processed food (vegetable, fruit, etc.); Pickles; Noodles (noodle, soba, spaghetti, etc.); Soups (powder soup, liquid soup, etc.); Milk Products (cheese, yogurt, cream, etc.); confectionery (jelly, snacks, chewing gum, candy, chocolate, cakes, etc.); health food ( Functional foods, dietary supplements (suppl
  • the tea leaf extract of the present invention contains abundant delphinidin or a derivative thereof, the function as anthocyanins can be sufficiently exerted. Moreover, it is highly stable and human or non-human animals (for example, domestic animals such as cows, pigs, goats, sheep, poultry such as chickens, laboratory animals such as rats, mice, hamsters, guinea pigs, rabbits, dogs, cats, A pet animal such as a small bird), blood glucose lowering effect, enhancement or stimulation of autonomic nervous system symptoms, enhancement or stimulation of exercise such as spontaneous movement, cholecystokinin receptor (for example, A, B receptor, preferably B Receptors), adrenergic receptors (for example, ⁇ 1-2 and ⁇ 1-3 receptors, preferably ⁇ 2 receptors, more preferably ⁇ 2A receptors), and the like.
  • cholecystokinin receptor for example, A, B receptor, preferably B Receptors
  • adrenergic receptors for example,
  • anti-stress improvement, alleviation or prevention of stress
  • anti-inflammation improvement, alleviation, treatment or prevention of inflammation
  • anti-oxidation improvement, alleviation, treatment or prevention of inflammation
  • anti-diabetes Diabetes mellitus improvement, alleviation, treatment or prevention
  • suppression, improvement, alleviation, treatment or prevention of arteriosclerosis, enhancement or stimulation of autonomic nervous system symptoms exerting effects such as enhancement or stimulation of locomotor activity Can do.
  • catechins since the content of catechins is suppressed, there is little bitterness and astringency and excellent palatability.
  • catechins by combining catechins with delphinidin or a derivative thereof, actions possessed by catechins such as an antioxidant action and an anti-stress effect are exhibited, and a composite effect can be expected.
  • anthocyanins such as delphinidin contained in tea leaf extract are different in anthocyanin composition from anthocyanins contained in cassis, blueberry, etc., or contain anthocyanin-stabilizing substances. It is thought to be higher.
  • catechins are also extracted and the content increases, so that the bitterness and astringency is strong and the palatability is poor.
  • the content of catechins particularly epigallocatechin gallate (EGCG)
  • EGCG epigallocatechin gallate
  • Extraction solvent and liquid volume 50 times the weight of distilled water (DW) relative to the dry weight of tea leaves
  • Example 1 and Comparative Examples 1 and 2 As a comparison between varieties, “San Rouge”, “Yabukita”, which has the highest planting area ratio, and “San Rouge” are parent strains of “Chachu-mother mother farm No. 6 (F95181) containing anthocyanins and catechins” Was used to obtain a tea leaf extract under the following conditions.
  • Extraction solvent and liquid volume 50 times weight of distilled water (DW) with respect to tea leaves
  • the content of the components shown in Table 1 in the obtained tea leaf extract was determined according to the literature (Mari Maeda-Yamamoto et al. Chemical analysis and acetylcholinesterase inhibitory of Stift. 92: 2379-2386 (2012).) And analyzed by HPLC.
  • Comparative Examples 3-5 Example 1 was repeated except that acetic acid was used as an extraction solvent. The results obtained in Example 1 and Comparative Examples 1 to 5 are shown in Table 1. The unit was described in weight% per dry weight of the tea leaf extract.
  • Example 1 the content of delphinidin or a glycoside thereof is 0.13% by weight or more, the content of catechins is 21.0% by weight or less, and the content of EGCG is 10.5% by weight or less.
  • a tea leaf extract extract powder in which the ratio of the weight of delphinidin or its glycoside to the weight of anthocyanins was 50% or more was obtained.
  • Extraction solvent and liquid volume 50 times the weight of distilled water (DW) relative to the dry weight of tea leaves
  • tea leaf extract powder After concentrating the tea leaf extract, it was pulverized with a spray dryer (trade name: Pulvis Mini-Spray GA-32 manufactured by Yamato Kagaku Co., Ltd.) to prepare a tea leaf extract powder. This was heat-treated at a temperature of 100 ° C. for 120 minutes, and the residual rate of delphinidin after the treatment was measured.
  • a spray dryer trade name: Pulvis Mini-Spray GA-32 manufactured by Yamato Kagaku Co., Ltd.
  • Comparative Example 6 The standard value of the extract powder derived from Makiberry (made by Oriza Oil Chemical Co., Ltd., trade name: Makiberry extract), which is a delphinidin-rich existing distribution product, was used.
  • Example 2 The results of Example 2 and Comparative Example 6 are shown in FIG.
  • Example 2 The thermal stability (Example 2) of the tea leaf extract powder was superior to the maqui berry extract powder (Comparative Example 6) containing delphinidin.
  • Example 3 Using the same material as in Example 2, a tea leaf extract powder was obtained in the same manner as in Example 2. To a male ICR mouse (5 mice in each group) weighing 22 ⁇ 2 g, the powder of tea leaf extract was adjusted to a dose of 500 mg / kg per body weight and administered orally once a day for 5 consecutive days. During the test of the tea leaf extract, normal laboratory feed and water were freely ingested. In addition, it fasted overnight before the test start. Glucose was loaded 30 minutes after the final administration of tea leaf extract (subcutaneous injection of 1 g / kg of glucose per body weight). Blood samples were collected between the last administration and before glucose loading, and 60 minutes after glucose loading (90 minutes after final administration). The blood glucose level before and after glucose loading of each mouse was measured, and the rate of increase in blood glucose level was calculated.
  • Example 3 was the same as Example 3 except that only the water was administered without administering the tea leaf extract powder.
  • Example 3 The presence or absence of a significant difference (p ⁇ 0.05) in Example 3 with respect to the blood glucose level increase rate of the mouse of Comparative Example 7 was confirmed.
  • the results of Example 3 and Comparative Example 7 are shown in Table 2.
  • Example 3 As is apparent from Table 2, the blood glucose level increase rate of Example 3 to which the tea leaf extract was administered was suppressed compared to that of Comparative Example 7 to which only water was administered. This indicates that the tea leaf extract of the present invention has a blood glucose level lowering action.
  • Example 4 Using the same material as in Example 2, a tea leaf extract powder was obtained in the same manner as in Example 2. To a male ICR mouse (5 mice in each group) weighing 23 ⁇ 3 g, the powder of tea leaf extract was adjusted to a dose of 500 mg / kg per body weight and administered orally once a day for 5 consecutive days. During the test of the tea leaf extract, normal laboratory feed and water were freely ingested. The presence or absence of autonomic nervous system symptoms within 1 hour after the final administration of the tea leaf extract was visually evaluated by a skilled evaluator.
  • Comparative Example 8 The procedure was the same as Example 4 except that only the water was administered without administering the tea leaf extract powder.
  • Table 3 shows the results of Example 4 and Comparative Example 8.
  • Example 5 Using the same material as in Example 2, a tea leaf extract powder was obtained in the same manner as in Example 2. To a male ICR mouse (5 mice in each group) weighing 23 ⁇ 3 g, the powder of tea leaf extract was adjusted to a dose of 500 mg / kg per body weight and administered orally once a day for 5 consecutive days. During the test of the tea leaf extract, normal laboratory feed and water were freely ingested. One hour after the final administration of the tea leaf extract, parameters were measured for the following 10 behavioral responses in mice: irritability; increased locomotor activity; enlarged eyelids; enhanced startle response; enhanced contact response; Increased exploratory behavior; napped; tail; tremor; and convulsions.
  • Comparative Example 9 The procedure was the same as Example 5 except that only the water was administered without administering the tea leaf extract powder.
  • Example 6 Using the same material as in Example 2, a tea leaf extract powder was obtained in the same manner as in Example 2.
  • the powder of tea leaf extract was adjusted to a dose of 500 mg / kg body weight at a time for 1 day per day for 5 consecutive days. Orally administered twice.
  • normal laboratory feed and water were freely ingested.
  • physiological saline was forcibly administered orally to determine gastric acidity ( ⁇ Eq HCl / mL).
  • Example 6 was the same as Example 6 except that only the water was administered without administering the tea leaf extract powder.
  • Example 6 The presence or absence of a significant difference (p ⁇ 0.05) in Example 6 with respect to the gastric juice acidity of the mouse of Comparative Example 10 was confirmed, and the cholecystokinin (CCK B ) receptor activation effect was evaluated. The results are shown in Table 5.
  • Example 7 Using the same material as in Example 2, a tea leaf extract powder was obtained in the same manner as in Example 2.
  • Clonidine (0.03 mg / kg, intraperitoneal administration (IP)) was administered 30 minutes after the final administration of the tea leaf extract.
  • IP intraperitoneal administration
  • the animals were anesthetized with sodium pentobarbital (40 mg / kg, intraperitoneal administration (IP)) and the heart rate was recorded 10 minutes later.
  • Example 7 was the same as Example 7 except that only the water was administered without administering the tea leaf extract powder.
  • Example 7 The heart rate of Example 7 was compared with that of Comparative Example 11 to evaluate whether there was an adrenaline ⁇ 2A receptor antagonistic action.
  • the results of Example 7 and Comparative Example 11 are shown in Table 6.
  • Example 7 administered with the tea leaf extract was higher than that of Comparative Example 11 administered with water alone. This indicates that the tea leaf extract of the present invention has an adrenergic ⁇ 2A receptor antagonistic action.
  • Example 8 2 g of Saint Rouge tea leaves were extracted with 100 ml of hot water at 80 ° C. for 5 minutes. After tasting those extracts (test beverage 1) by 8 panelists, they selected the ones that felt stronger among sweetness, bitterness and refreshing feeling.
  • Example 8 Based on the results of Example 8 and Comparative Example 12, sensory evaluation was performed by eight people. The sweetness, bitter taste, and refreshing feeling were compared, and the beverages that felt strongly were selected for each item, and the number of panelists was counted. The results are shown in Table 7.
  • the tea leaf extract of the present invention has a high refreshing feeling, so it is easy to drink and has sufficient performance as a favorite beverage. Moreover, in the manufacturing method of this invention, since the catechin content of the obtained tea leaf extract can be suppressed, the bitterness and astringency of the obtained tea leaf extract is lost, and it has shown that a refreshing feeling can be improved.

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Abstract

　本発明は、安定性の高いアントシアニンを豊富に含み、かつ、嗜好性の優れた茶葉抽出物を提供することを目的とする。すなわち本発明は、茶葉抽出物の乾燥重量に対してデルフィニジンまたはその配糖体０．１３重量％以上とカテキン類２３．０重量％以下とを含む茶葉抽出物、茶葉を茶葉乾燥重量の１０倍量以上の水を用いて、温度７０℃～９５℃、時間５分～６０分の条件で抽出する前記茶葉抽出物の製造方法、前記茶葉抽出物又は前記組成物を含む飲食品およびその用途を提供する。

Description

茶葉抽出物
　本発明は、茶葉抽出物に関する。
　アントシアニンは植物体に含まれる赤の色素であり、抗酸化性、ロドプシンの再合成促進作用、コラーゲン合成促進作用、毛細血管保護及び強化作用等の機能性を持つことが知られている。しかし、アントシアニンは、熱および光に不安定であることが知られており、光分解又は空気酸化によるアントシアニンの分解、変色および褪色が問題となっていた。例えば、カシス、ブルーベリーなどに含まれるアントシアニンは不安定であることが明らかになっている。
　一方、茶葉抽出物に含まれるカテキン類は、抗酸化作用、脂質改善作用などの生理効果が注目されてきている。しかし、高濃度にカテキン類を含む茶葉抽出物は苦味および渋味が強くなるため、カテキン類を含有しながら苦味および渋味を低下させようとする技術が望まれている。
　アントシアニンを安定化する方法として、非アシル化アントシアニンに、アシル化アントシアニンを産生する植物体の破砕物、乾燥物、濃縮物または抽出物を組み合わせて、非アシル化アントシアニンを安定化させる技術が知られている（特許文献１）。
　アントシアニンを含有する茶葉抽出物としては、アントシアニンとカテキン類を含有する茶葉抽出物（特許文献２）、アントシアニンを含有し、ｐＨ５．５未満である茶飲料（特許文献３）が知られている。
特開２００６－３０６９６６号公報 特開２００７－３０２５７７号公報 特開２００７－２８９３３号公報
　従来のアントシアニンを有する茶葉抽出物よりもアントシアニンの含有量が高く、アントシアニンの機能性を効率よく発揮することのできる安定性の高い抽出物が待望されていた。さらに、苦味および渋味が少なく、嗜好性の優れた茶葉抽出物が待望されていた。
　本発明は、安定性の高いアントシアニンを豊富に含み、かつ、嗜好性の優れた茶葉抽出物を提供することを目的とする。
　本発明者らは、上記目的を達成するために検討を重ねた結果、特定の抽出条件において得られ、かつ、アントシアニジンの一種であるデルフィニジンを豊富に含み、かつ、カテキン類の含有量が抑えられた茶葉抽出物を見出した。デルフィニジンまたはその配糖体は、抗酸化作用が強いため、他の配糖体と比べてアントシアニンとしての機能性（眼精疲労抑制、抗炎症、抗酸化等）を十分に発揮することができる。また、カテキン類とデルフィニジンの組み合わせにより、複合的な抗酸化作用、抗ストレス作用などの効果が期待できる。
　本発明は以下の態様を提供する。
〔１〕茶葉抽出物の乾燥重量に対して、デルフィニジンまたはその配糖体０．１３重量％以上と、カテキン類２３．０重量％以下とを含む茶葉抽出物。
〔２〕茶葉を、茶葉乾燥重量の１０倍量以上の水を用いて、温度７０℃～９５℃、時間５分～６０分の条件で抽出して得られる上記〔１〕に記載の茶葉抽出物。
〔３〕アントシアニンの含有量に占めるデルフィニジンまたはその配糖体の含有量の比率が５０％以上である上記〔１〕又は〔２〕に記載の茶葉抽出物。
〔４〕エピガロカテキンガレートを、茶葉抽出物の乾燥重量に対して１０．５重量％以下含む上記〔１〕～〔３〕のいずれか一項に記載の茶葉抽出物。
〔５〕カフェインを、茶葉抽出物の乾燥重量に対して５．４重量％以下含む上記〔１〕～〔４〕のいずれか一項に記載の茶葉抽出物。
〔６〕アミノ酸を、茶葉抽出物の乾燥重量に対して１．０重量％以上含む上記〔１〕～〔５〕のいずれか一項に記載の茶葉抽出物。
〔７〕茶葉が緑茶の茶葉である上記〔１〕～〔６〕のいずれか一項に記載の茶葉抽出物。
〔８〕茶葉がサンルージュの茶葉である上記〔１〕～〔７〕のいずれか一項に記載の茶葉抽出物。
〔９〕粉末である、上記〔１〕～〔８〕のいずれか一項に記載の茶葉抽出物。
〔１０〕茶葉抽出物を温度１００℃、時間１２０分の条件で加熱したとき、茶葉抽出物中のデルフィニジンまたはその配糖体の残存率が９０％以上である、上記〔１〕～〔９〕のいずれか一項に記載の茶葉抽出物。
〔１１〕茶葉を、茶葉乾燥重量の１０倍量以上の水を用いて、温度７０℃～９５℃、時間５分～６０分の条件で抽出する、茶葉抽出物の重量に対して、デルフィニジンが０．１３重量％以上であり、カテキン類が２３．０重量％以下である茶葉抽出物の製造方法。
〔１２〕上記〔１〕～〔９〕のいずれか一項に記載の茶葉抽出物を含む飲食品。
〔１３〕上記〔１〕～〔９〕のいずれか一項に記載の茶葉抽出物を含む化粧品。
〔１４〕上記〔１〕～〔９〕のいずれか一項に記載の茶葉抽出物を含む血糖値降下剤。
〔１５〕上記〔１〕～〔９〕のいずれか一項に記載の茶葉抽出物を含む抗糖尿病剤。
〔１６〕上記〔１〕～〔９〕のいずれか一項に記載の茶葉抽出物を含むコレシストキニン受容体活性化剤。
〔１７〕上記〔１〕～〔９〕のいずれか一項に記載の茶葉抽出物を含むアドレナリン受容体拮抗剤。
〔１８〕上記〔１〕～〔９〕のいずれか一項に記載の茶葉抽出物を含む自律神経系症状亢進剤。
〔１９〕上記〔１〕～〔９〕のいずれか一項に記載の茶葉抽出物を含む運動性亢進剤。
　本発明は、以下の態様も提供する。
〔２０〕上記〔１〕～〔９〕のいずれか一項に記載の茶葉抽出物をヒトまたはヒト以外の動物に投与する、高血糖の治療又は予防方法。
〔２１〕上記〔１〕～〔９〕のいずれか一項に記載の茶葉抽出物をヒトまたはヒト以外の動物に投与する、糖尿病の治療又は予防方法。
〔２２〕上記〔１〕～〔９〕のいずれか一項に記載の茶葉抽出物をヒトまたはヒト以外の動物に投与する、コレシストキニン受容体の活性化方法。
〔２３〕上記〔１〕～〔９〕のいずれか一項に記載の茶葉抽出物を含むアドレナリン受容体の阻害方法。
〔２４〕上記〔１〕～〔９〕のいずれか一項に記載の茶葉抽出物を含む自律神経系症状の亢進方法。
〔２５〕上記〔１〕～〔９〕のいずれか一項に記載の茶葉抽出物をヒトまたはヒト以外の動物に投与する、運動性の亢進方法。
〔２６〕上記〔１〕～〔９〕のいずれか一項に記載の茶葉抽出物をヒトまたはヒト以外の動物に投与する、血糖値降下のための使用。
〔２７〕上記〔１〕～〔９〕のいずれか一項に記載の茶葉抽出物の、糖尿病の改善、緩和、治療または予防のための使用。
〔２８〕上記〔１〕～〔９〕のいずれか一項に記載の茶葉抽出物を含むコレシストキニン受容体活性化のための使用。
〔２９〕上記〔１〕～〔９〕のいずれか一項に記載の茶葉抽出物を含むアドレナリン受容体阻害のための使用。
〔３０〕上記〔１〕～〔９〕のいずれか一項に記載の茶葉抽出物を含む自律神経系症状亢進のための使用。
〔３１〕上記〔１〕～〔９〕のいずれか一項に記載の茶葉抽出物の、運動性亢進または刺激のための使用。
　本発明の茶葉抽出物は、デルフィニジンを豊富に含むので、アントシアニンとしての機能を十分に発揮することができる。また、安定性が高く、血糖値降下作用、自律神経系症状、自発運動などの運動性の亢進または刺激、コレシストキニン受容体（コレシストキニンＢ受容体など）、アドレナリン受容体（アドレナリンα２Ａ受容体など）などの神経に関わる受容体の調節、などの作用を有する。よって、抗ストレス性、眼精疲労抑制、抗炎症、抗酸化性、抗糖尿病、動脈硬化予防、自律神経系症状亢進、運動性亢進などの作用を発揮することができる。また、カテキン類の含有量が抑えられているので、苦味及び渋味が少なく嗜好性に優れている。さらに、カテキン類とデルフィニジンの組み合わせにより、抗酸化作用、抗ストレス効果などカテキン類の生理活性との複合的な効果が期待できる。
　本発明の茶葉抽出物の製造方法によれば、水を用いて抽出するので固形物などの不純物が少なく、粉末にしたときにも純度が高いという効果が期待できる。
図１は、実験例１における結果を示すグラフである。 図２は、実験例２における結果を示すグラフである。 図３は、実施例２及び比較例６の各抽出物におけるデルフィニジンの残存率を示すグラフである。
　本発明の茶葉抽出物は、デルフィニジンまたはその配糖体を含む。デルフィニジンはアントシアニンを構成するアントシアニジンの一種である。アントシアニジンは、デルフィニジン、シアニジン、ペラルゴニジン、オーランチニジン、ルテオリニジン、ペオニジン、マルビジン、ペチュニジン、ヨーロピニジン、ロシニジン等に分類される。デルフィニジンは、３，５，７－トリヒドロキシ－２－（３，４，５－トリヒドロキシフェニル）－１－ベンゾピリリウム（Ｃ15Ｈ11Ｏ7）である。デルフィニジンの配糖体とは、デルフィニジンに含まれる１つ以上の水酸基の水素原子が他の置換基に置換されている化合物である。置換部位は３位または６位が好ましい。他の置換基の例としては、ガラクトース、グルコース等の糖から１つ水素原子を除いた基が挙げられる。デルフィニジンの配糖体の例としては、デルフィニジン－３－Ｏ－（６－トランス－ｐ－クマロイル）－β－ガラクトシド（ＤＣＧａ）、デルフィニジン－Ｏ－β－ガラクトシド（Ｄ３Ｇａ）およびデルフィニジン－３－β－グルコシド（Ｄ３Ｇ）が挙げられる。
　本発明の茶葉抽出物におけるデルフィニジンまたはその配糖体の含有量は、茶葉抽出物の乾燥重量に対して０．１３重量％以上であり、０．１６重量％以上であることが好ましく、０．１９重量％以上であることがより好ましい。上限は特に特定されないが、通常は０．５重量％以下である。
　本発明の茶葉抽出物における、アントシアニンの含有量に占めるデルフィニジンまたはその配糖体の含有量の比率は、５０％以上であることが好ましく、６０％以上であることがより好ましい。上限は特に特定されないが、通常は９０％以下である。アントシアニンの含有量とは茶葉抽出物の乾燥重量に対するアントシアニンの含有量を意味する。デルフィニジンまたはその配糖体の含有量とは茶葉抽出物の乾燥重量に対するデルフィニジンまたはその配糖体の含有量を意味する。
　茶葉抽出物中のデルフィニジンまたはその配糖体の含有量は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により測定することができる。茶葉抽出物中のアントシアニンの含有量は、ＨＰＬＣにより測定することができる。
　本発明の茶葉抽出物はカテキン類を含む。カテキン類としては、カテキン（Ｃ）、ガロカテキン（ＧＣ）、カテキンガレート（ＣＧ）、ガロカテキンガレート（ＧＣＧ）、エピカテキン（ＥＣ）、エピガロカテキン（ＥＧＣ）、エピカテキンガレート（ＥＣＧ）及びエピガロカテキンガレート（ＥＧＣＧ）、エピガロカテキン－３－（３”－Ｏ－メチル）ガレート（ＥＧＣＧ３”Ｍｅ）、エピカテキン－３－（３”－Ｏ－メチル）ガレート（ＥＣＧ３”Ｍｅ）が挙げられる。
　本発明の茶葉抽出物におけるカテキン類の含有量は、茶葉抽出物の乾燥重量に対して２３．０重量％以下であり、２１．０重量％以下であることが好ましく、１８．０重量％以下であることがより好ましい。下限は特に特定されないが、通常は１４．０重量％以上である。この範囲であると、苦味および渋味が少なく嗜好性に優れている。
　本発明の茶葉抽出物は、カテキン類のうちエピガロカテキンガレート（ＥＧＣＧ）の含有量は、茶葉抽出物の乾燥重量に対して１０．５重量％以下であることが好ましく、１０．２重量％以下であることがより好ましく、１０．０重量％以下であることが更に好ましい。
　茶葉抽出物中のカテキンの含有量は、ＨＰＬＣまたは比色法により測定することができる。
　本発明の茶葉抽出物は、通常、カフェインを含む。カフェインは、プリン環を持つプリンアルカロイドの一種である。カフェインはコーヒー、コーラ、緑茶、紅茶、ウーロン茶、ココア、チョコレート、栄養ドリンクなどの飲食品に含まれ、茶に含まれるカフェインはタンニンと結びつくためにその効果が抑制されることから、コーヒーのような興奮作用は弱く緩やかに作用する。
　本発明の茶葉抽出物におけるカフェインの含有量は、茶葉抽出物の乾燥重量に対して５．４重量％以下であることが好ましく、５．２重量％以下であることがより好ましく、５．１重量％以下であることが更に好ましい。下限は特に特定されないが、低カフェイン処理をしない場合は、通常は２．５重量％以上である。
　茶葉抽出物中のカフェインの量は、ＨＰＬＣにより測定することができる。
　本発明の茶葉抽出物は、通常、アミノ酸またはその塩を含む。アミノ酸はアミノ基とカルボキシル基を両方有する化合物である。アミノ酸の例としては、テアニン、グリシン、アルギニン、リジン、アラニン、グルタミン、グルタミン酸、ヒスチジン、スレオニン、アスパラギン、アスパラギン酸、フェニルアラニン、ロイシン、バリン、トリプトファン、プロリン、システイン、セリン、チロシン、イソロイシン、メチオニンが例示される。アミノ酸の塩の例としては、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、無機酸塩、有機酸塩などが例示される。本発明の茶葉抽出物におけるアミノ酸またはその塩の含有量は、茶葉抽出物の乾燥重量に対して１．０重量％以上であることが好ましく、１．３重量％以上であることが好ましく、１．５重量％以上であることがより好ましい。上限は特に特定されないが、通常は４．５重量％以下である。
　茶葉抽出物中のアミノ酸の量は、ＨＰＬＣにより測定することができる。
　本発明の茶葉抽出物は、加水分解型タンニンを含むことが好ましい。加水分解型タンニンを含むことにより、抗アレルギーの効果を得ることができる。加水分解型タンニンの例としてはストリクチニンなどを挙げることができ、ストリクチニンであることが好ましい。ストリクチニンは１，２－ジ－Ｏ－ガロイル－４，６－Ｏ－（Ｓ）－ヘキサヒドロキシジフェノイル－β－Ｄ－グルコピラノースである。
　加水分解型タンニンの含有量は、茶葉抽出物の乾燥重量に対して１．７重量％以下であることが好ましく、１．５重量％以下であることがより好ましく、１．４重量％以下であることが更に好ましい。下限は特に特定されないが、通常は０．６重量％以上である。
　ストリクチニンの量は、ＨＰＬＣにより測定することができる。
　本発明の茶葉抽出物は、テオガリンまたはその誘導体を含むことが好ましい。テオガリンまたはその誘導体を含むことにより、抗アレルギーの効果が得られる。テオガリンはトリヒドロキシ安息香酸の配糖体であり、（１Ｓ）－１β，３β，４β－トリヒドロキシ－５α－（ガロイルオキシ）シクロヘキサンカルボン酸とも呼ばれる。テオガリンまたはその誘導体の含有量は、茶葉抽出物の乾燥重量に対して５．０重量％以下であることが好ましく、３．０重量％以下であることがより好ましく、１．６重量％以下であることが更に好ましい。下限は特に特定されないが、通常は０．７重量％以上である。
　テオガリンの量は、ＨＰＬＣにより測定することができる。
　本発明の茶葉抽出物に含まれるデルフィニジンまたはその配糖体は、従来のアントシアニンと比べて安定性が高い。安定性は、茶葉抽出物を温度１００℃、時間１２０分の条件で加熱したときの茶葉抽出物中のデルフィニジンまたはその配糖体の残存率で表すことができる。該残存率は９０重量％以上であることが好ましい。デルフィニジンまたはその配糖体の残存率は、式（１）で算出される。
　式（１）：
　デルフィニジンまたはその配糖体の残存率（％）＝
　　｛（茶葉抽出物を温度１００℃、時間１２０分の条件で加熱した後のデルフィニジンまたはその配糖体の含有量）／（上記加熱前の茶葉抽出物のデルフィニジンまたはその配糖体の含有量）｝×１００
　本発明の茶葉抽出物は、茶葉を茶葉乾燥重量の１０倍量以上の水に、温度７０～９５℃、時間５～６０分の条件で抽出して得ることができる。
　茶葉は、Ｃａｍｅｌｌｉａ　ｓｉｎｅｎｓｉｓ等のＣａｍｅｌｌｉａ属植物の茶葉が挙げられる。製茶された茶葉の例としては、緑茶、紅茶、ウーロン茶等が挙げられ、緑茶が好ましい。緑茶の茶葉の例としては、煎茶、玉露、番茶、茎茶、芽茶、粉茶、ほうじ茶、玄米茶、てん茶、釜炒茶、包種茶等が挙げられる。緑茶の茶葉のうち、「サンルージュ」（農林水産省　品種登録番号：２１２６２）、Ｆ９５１８１（茶中間母本農６号）、「やぶきた」等の品種の茶葉が好ましく、「サンルージュ」の茶葉が好ましい。
　茶葉は抽出前に粉砕処理を行ってもよい。粉砕処理には、破砕機（例えば、マルチビーズショッカー（登録商標、安井器械株式会社）、石臼、セラミックミル、ボールミル、ハンマーミルなどを用いることができる。
　抽出溶媒としては、水またはエタノール水溶液が挙げられ、水が好ましい。また、エタノール水溶液におけるエタノールの濃度は、本発明の効果を害さない範囲で定めることができ、通常はエタノール水溶液全体に対し７０重量％以下である。水で抽出する場合、抽出温度は７０～９５℃が好ましく、７０～８０℃がより好ましい。抽出時間は５～６０分であることが好ましく、５～１０分がより好ましい。水と茶葉との重量比は、茶葉１に対し、茶葉乾燥重量の１０倍以上の水を用いることが好ましく、茶葉乾燥重量の１０倍～１００倍量の水を用いることがより好ましい。抽出温度が９５℃より高く、また、抽出時間が６０分より長いと、カテキンの含有量が多くなるため、苦味および渋味が強くなり嗜好性が悪くなるおそれがある。また、酢酸のような有機溶媒で抽出すると、抽出効率は良いが、カテキン類の含有量が多くなるため、苦味および渋味が強く嗜好性が悪くなるおそれがある。
　抽出処理後、ろ過、遠心分離等の処理により固形分を除去してもよい。さらに、濃縮（減圧濃縮、逆浸透膜処理など）、乾燥（噴霧乾燥、凍結乾燥など）等の処理を行ってもよい。
　本発明の茶葉抽出物の形態の例としては、液体（錠、カプセル、ソフトカプセルなど）、スラリー（シロップなど）、半固体（クリーム、ペーストなど）、固体（粉末）が挙げられ、固体であることが好ましく、粉末であることが好ましい。
　本発明の茶葉抽出物には各種の添加剤を添加して、組成物としてもよい。添加剤の例としては、調味料；酸味料（クエン酸、コハク酸など）；保存剤（アスコルビン酸、酢酸塩、ε－ポリリジンなど）；ｐＨ調整剤；乳化剤（ショ糖脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、有機酸モノグリセリド、レシチンなど）；香料；色素；増粘剤（カラギーナン、キサンタンガムなど）；膨張剤；タンパク質（大豆タンパク質、乳タンパク質など）；糖類（デンプン、ショ糖、果糖、還元デンプン糖化物、エリスリトール、キシリトールなど）；甘味料（スクラロース、ソーマチンなど）；ビタミン類（ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ビタミンＫなど）；ミネラル類（鉄、カルシウムなど）などが挙げられる。
　本発明の茶葉抽出物の用途としては例えば、眼精疲労軽減剤、抗ストレス剤、抗糖尿病剤、抗酸化剤、安定剤、自律神経系症状亢進剤、運動性亢進剤などの医薬品および医薬部外品が挙げられる。さらには、化粧品、飼料、トイレタリー製品、色材、飲食品、または食品添加物、紙類、文房具類、事務用品、おもちゃなどの非医薬的用途が挙げられる。
　本発明の茶葉抽出物は、化粧品、飼料、トイレタリー製品、またはその他の日用品等の非医薬品として利用することができる。例としては、化粧品：メーキャップ化粧品、基礎化粧品、ヘアトニック、香水など；飼料：家畜用飼料、ペットフードなど；トイレタリー製品：石鹸類、シャンプーなどヘアケア製品；歯磨き粉、歯磨き用液体などオーラルケア製品；生理用品、入浴剤、消臭剤、芳香剤、殺虫剤などが挙げられる。
　本発明の茶葉抽出物は、着色材（着色料）、発色材（発色料）などの色材として、医薬品、医薬部外品、化粧品、飼料、トイレタリー製品、飲食品、食品添加物、紙類、文房具類、事務用品、おもちゃなどの分野で利用することができる。
　本発明の茶葉抽出物は、飲食品、または食品添加物として利用することができる。飲食品の例としては、飲料（清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、粉末飲料、果実飲料、乳飲料、ゼリー飲料、ビール、日本酒、洋酒、中国酒、薬味酒など）；米飯類（ご飯、お粥など）；パン類；調味料（ソース、味噌、醤油、マヨネーズ、ショートニング、ドレッシング、たれ、香辛料等）；大豆食品（納豆、豆腐、油揚げなど）；水産加工食品（かまぼこ、はんぺん、ちくわ、練り製品など）；食肉加工品（ハム、ソーセージ、ウィンナーなど）；農産加工食品（野菜、果物など）；漬物類；麺類（うどん、そば、スパゲッティなど）；スープ類（粉末スープ、液体スープなど）；乳製品（チーズ、ヨーグルト、クリームなど）；菓子類（ゼリー、スナック菓子、チューインガム、キャンディー、チョコレート、ケーキなど）；健康食品（機能性食品、栄養補助食品（サプリメント）、特定保健用食品）；対象者が特定されている飲食品（医療用食品、病者用食品、乳児用食品、介護用食品、高齢者用食品）等が挙げられる。
［作用］
　本発明の茶葉抽出物は、デルフィニジンまたはその誘導体を豊富に含むので、アントシアニンとしての機能を十分に発揮することができる。また、安定性が高く、ヒト又はヒト以外の動物（例えば、ウシ、ブタ、ヤギ、ヒツジ等の家畜、ニワトリ等の家禽、ラット、マウス、ハムスター、モルモット、ウサギ等の実験動物、イヌ、ネコ、小鳥等の愛玩動物など）において、血糖値降下作用、自律神経系症状の亢進又は刺激、自発運動などの運動の亢進または刺激、コレシストキニン受容体（例えば、Ａ、Ｂ受容体、好ましくはＢ受容体）、アドレナリン受容体（例えば、α１～２およびβ１～３受容体、好ましくはα２受容体、より好ましくはα２Ａ受容体）などの神経に関わる受容体の調節、などの作用を有する。よって、抗ストレス性（ストレスの改善、緩和又は予防）；眼精疲労の抑制、改善、緩和、治療又は予防；抗炎症（炎症の改善、緩和、治療又は予防）；抗酸化性；抗糖尿病（糖尿病の改善、緩和、治療又は予防）；動脈硬化の抑制、改善、緩和、治療又は予防、自律神経系症状の亢進又は刺激；自発運動等の運動性の亢進又は刺激などの作用を発揮することができる。また、カテキン類の含有量が抑えられているので、苦味および渋味が少なく嗜好性に優れている。さらに、カテキン類とデルフィニジンまたはその誘導体との組み合わせにより、抗酸化作用、抗ストレス効果等のカテキン類が有する作用も発揮され、複合的な効果が期待できる。
　その理由は明らかではないが、以下のとおりと推測される。茶葉抽出物に含まれるデルフィニジンは、他のアントシアニンと組成が異なる。茶葉抽出物に含まれるカテキン類には発癌抑制、動脈硬化予防、脂肪代謝異常の抑制、口臭防止、活性酸素のフリーラジカル消去作用、抗酸化作用などの作用があり、その他カテキン類の二次代謝物にも抗酸化作用などの生理活性があることが予想される。そのため、茶葉抽出物は、抗酸化作用、抗ストレス効果などのカテキン類が発揮する作用も発揮され、複合的な効果が得られると考えられる。また、茶葉抽出物に含まれるデルフィニジンなどのアントシアニンは、カシス、ブルーベリーなどに含まれるアントシアニンと比べて、アントシアニンの組成が異なるか、もしくはアントシアニンを安定化させる物質が含まれているので、安定性が高くなると考えられる。さらに、茶葉を酢酸のような有機溶媒で抽出すると、カテキン類も抽出されて含有量が多くなるため、苦味および渋味が強く嗜好性が悪くなる。一方、水またはエタノール水溶液で抽出すると、カテキン類、特にエピガロカテキンガレート（ＥＧＣＧ）の含有量が抗酸化作用、抗ストレス効果等の作用を発揮する程度に抑えられるため、苦味および渋味が少なく嗜好性に優れていると考えられる。
　また、本発明の茶葉抽出物の製造方法によれば、水を用いて抽出するので固形物などの不純物が少なく、粉末にしたときにも純度が高いという効果が期待できる。
　その理由は明らかではないが、水を用いて抽出することでアントシアニン等の親水性物質の割合が高くなり、脂溶性物質の割合が低くなるため、茶葉抽出物に固形物などの不純物が少なくなると考えられる。
実験例１
　以下の条件で茶葉抽出物を得た。
・茶葉：２０１１年産「サンルージュ」茶葉を採取後、蒸し葉乾燥したもの
・前処理：マルチビーズショッカー（登録商標、安井器械株式会社）により粉砕処理（粒子径平均：３０９μｍ）
・温度：４℃、５０℃、７０℃、９０℃、９５℃
・時間：１分、５分、１０分、３０分、６０分
・抽出溶媒と液量：蒸留水（ＤＷ）を茶葉乾燥重量に対して５０倍重量
　抽出した茶葉抽出液（エキス）を用いて、比色法により、アントシアニンの検量線から全量のデルフィニジン含有量を測定した。結果を図１に示す。
実験例２
　比色法により、カテキン類の検量線から全量のカテキン類の含有量を測定したこと、および温度を４℃、３０℃、５０℃、７０℃、９０℃、９５℃のいずれかとしたこと以外は、実験例１と同様にした。結果を図２に示す。
　実験例１および実験例２から、茶葉からの水抽出における温度および時間をそれぞれ７０℃～９５℃、５分～６０分の条件とすることにより、デルフィニジンが効率的に抽出され、カテキン類が抑えられた茶葉抽出物が得られることが分かった。
実施例１及び比較例１～２
　品種間による比較として、「サンルージュ」、最も植栽面積比の高い「やぶきた」、「サンルージュ」の親株でありアントシアニンとカテキンを含有している「茶中間母本農６号（Ｆ９５１８１）」を用いて、以下の条件で茶葉抽出物を得た。
・茶葉：２０１１年産「サンルージュ」、２０１１年産「やぶきた」、２０１１年産「茶中間母本農６号（Ｆ９５１８１）」を採取後、蒸し葉乾燥したもの
・前処理：マルチビーズショッカー（登録商標、安居器械株式会社）により粉砕処理（粒子径平均：３０９μｍ）
・温度：７０℃
・時間：１０分
・抽出溶媒と液量：蒸留水（ＤＷ）を茶葉に対して５０倍重量
　得られた茶葉抽出液の、表１に示す成分の含有量を、文献（Ｍａｒｉ　Ｍａｅｄａ－Ｙａｍａｍｏｔｏ　ｅｔ　ａｌ．Ｃｈｅｍｉｃａｌ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ａｎｄ　ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅｓｔｅｒａｓｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ａｎｔｈｏｃｙａｎｉｎ－ｒｉｃｈ　ｒｅｄ　ｌｅａｆ　ｔｅａ　（ｃｖ．　Ｓｕｎｒｏｕｇｅ）．Ｊ　Ｓｃｉ　Ｆｏｏｄ　Ａｇｒｉｃ　９２：２３７９－２３８６（２０１２）．）に記載された条件でＨＰＬＣにて分析した。
比較例３～５
　抽出溶媒として酢酸を用いた以外は、実施例１と同様にした。
　実施例１、比較例１～５で得られた結果を表１に示す。単位は、茶葉抽出液の乾燥重量あたりの重量％で記載した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
　実施例１において、デルフィニジンまたはその配糖体の含有量が０．１３重量％以上であり、カテキン類の含有量が２１．０重量％以下であり、ＥＧＣＧの含有量が１０．５重量％以下であり、アントシアニンの重量に占めるデルフィニジンまたはその配糖体の重量の比率が、５０％以上の茶葉抽出物（エキス粉末）が得られた。
実施例２
熱安定性の評価
　以下の条件で茶葉抽出物を得た。
・茶葉：２０１２年産「サンルージュ」茶葉を採取後、蒸し葉乾燥したもの
・前処理：マルチビーズショッカー（登録商標、安居器械株式会社）により粉砕処理（粒子径平均：３０９μｍ）
・温度：７０℃
・時間：１０分
・抽出溶媒と液量：蒸留水（ＤＷ）を茶葉乾燥重量に対して５０倍重量
　得られた茶葉抽出物の、乾燥重量あたりのデルフィニジンまたはその配糖体の含有量とカテキンの含有量とを、実施例１と同様にしてＨＰＬＣにより分析したところ、それぞれ０．２重量％、１８．５重量％であった。
　茶葉抽出物を濃縮後、スプレードライヤー（ヤマト科学株式会社製、商品名：Ｐｕｌｖｉｓ　Ｍｉｎｉ－Ｓｐｒａｙ　ＧＡ－３２）にて粉末化し、茶葉抽出物の粉末を作成した。これを温度１００℃で１２０分間加熱処理し、処理後のデルフィニジン残存率を測定した。
比較例６
　デルフィニジンリッチな既存流通品であるマキベリー由来エキス粉末（オリザ油化社製、商品名：マキベリーエキス）の規格値を用いた。
　実施例２、比較例６の結果を図３に示す。
　茶葉抽出物粉末の熱安定性（実施例２）は、デルフィニジンを含有するマキベリーエキス粉末（比較例６）と比較して優れていた。
実施例３
　実施例２と同様の材料を用い、実施例２と同様にして茶葉抽出物の粉末を得た。体重２２±２ｇの雄性ＩＣＲ系マウス（各群５匹）に対し、茶葉抽出物の粉末を、１回につき体重あたり５００ｍｇ／ｋｇの用量に調整し、連続５日間１日１回経口投与した。茶葉抽出物の供試中は、通常実験用飼料、および水を自由摂取させた。尚、試験開始前に一晩絶食させた。茶葉抽出物の最終投与から３０分後にブドウ糖負荷した（体重あたりのブドウ糖１ｇ／ｋｇを皮下注射）。最終投与後からブドウ糖負荷前の間、およびブトウ糖負荷６０分後(最終投与の９０分後)に血液検体を採取した。各マウスのブドウ糖負荷前後の血糖値を測定し、血糖値上昇率を算出した。
比較例７
　茶葉抽出物の粉末を投与せずに水のみを投与したほかは実施例３と同様とした。
　比較例７のマウスの血糖値上昇率に対する、実施例３のそれの有意差（ｐ＜０．０５）の有無を確認した。実施例３及び比較例７の結果を表２に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000002
〔表２の脚注〕
　＊は、溶媒投与対照区との間で、一元配置分散分析及びＤｕｎｎｅｔｔ検定にて有意差（Ｐ＜０．０５）があることを示す。
　ＳＥＭは標準誤差を示す。
　表２から明らかなとおり、茶葉抽出物を投与した実施例３の血糖値上昇率は、水のみを投与した比較例７のそれと比べて抑えられていた。このことは、本発明の茶葉抽出物が血糖値降下作用を有することを示している。
実施例４
　実施例２と同様の材料を用い、実施例２と同様にして茶葉抽出物の粉末を得た。体重２３±３ｇの雄性ＩＣＲ系マウス（各群５匹）に対し、茶葉抽出物の粉末を、１回につき体重あたり５００ｍｇ／ｋｇの用量に調整し、連続５日間１日１回経口投与した。茶葉抽出物の供試中は、通常実験用飼料、および水を自由摂取させた。茶葉抽出物の最終投与後１時間以内の自立神経系症状発症の有無を、熟練した評価員の下、目視評価した。
比較例８
　茶葉抽出物の粉末を投与せずに水のみを投与したほかは実施例４と同様とした。
　実施例４及び比較例８の結果を表３に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000003
〔表３の脚注〕
　±：軽度；＋：重度；Ｆ：早い
　ｎ／５のｎは、その症状を示した個体数を示す。
　表３から明らかなとおり、水のみを投与した比較例８では自発運動および自律神経系症状が見られなかったが、茶葉抽出物を投与した実施例４では自発運動および様々な自律神経系症状が観察された。このことは、本発明の茶葉抽出物が自発運動および自律神経系症状を亢進させることを示している。
実施例５
　実施例２と同様の材料を用い、実施例２と同様にして茶葉抽出物の粉末を得た。体重２３±３ｇの雄性ＩＣＲ系マウス（各群５匹）に対し、茶葉抽出物の粉末を、１回につき体重あたり５００ｍｇ／ｋｇの用量に調整し、連続５日間１日１回経口投与した。茶葉抽出物の供試中は、通常実験用飼料、および水を自由摂取させた。茶葉抽出物の最終投与から１時間後に、マウスの以下１０項目の行動反応について、パラメータを測定した：易刺激性；自発運動の亢進；眼瞼の拡大；驚樗反応の亢進；接触反応の亢進；探索行動の亢進；立毛；挙尾；振戦；及び痙攣。各観察項目を通常時であれば０点とし、各観察項目の最大の運動刺激を２点とし、合計は２（点）×１０（項目）×５（匹）＝１００点とした。合計スコアが２０点以上となった場合、有意な刺激性があるとした。
比較例９
　茶葉抽出物の粉末を投与せずに水のみを投与したほかは実施例５と同様とした。
　実施例５及び比較例９の結果を表４に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000004
　表４から明らかなとおり、水のみを投与した比較例９では合計スコアが０であったのに対し、茶葉抽出物を投与した実施例５のそれは高得点であった。このことは、本発明の茶葉抽出物が運動刺激作用を有することを示している。
実施例６
　実施例２と同様の材料を用い、実施例２と同様にして茶葉抽出物の粉末を得た。体重１５５±５ｇの一晩絶食させた雄性Ｗｉｓｔａｒ系ラット（各群５匹）に対し、茶葉抽出物の粉末を、１回につき体重あたり５００ｍｇ／ｋｇの用量に調整し、連続５日間１日１回経口投与した。茶葉抽出物の供試中は、通常実験用飼料、および水を自由摂取させた。試験開始２時間前および茶葉抽出物の最終投与の１時間後に、生理食塩水を強制経口投与して胃液酸性度（μＥｑ　ＨＣｌ／ｍＬ）を求めた。
比較例１０
　茶葉抽出物の粉末を投与せずに水のみを投与したほかは、実施例６と同様とした。
　比較例１０のマウスの胃液酸性度に対する、実施例６のそれの有意差（ｐ＜０．０５）の有無を確認し、コレシストキニン（ＣＣＫB）受容体活性化作用を評価した。結果を表５に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000005
〔表５の脚注〕
　＊は、比較例１０（溶媒投与対照区）との間で、一元配置分散分析及びＤｕｎｎｅｔｔ検定にて有意差（Ｐ＜０．０５）があることを示す。
　表５から明らかなとおり、実施例６の茶葉抽出物投与後の胃液酸性度は、水のみを投与した比較例１０のそれと比べて抑えられていた。このことは、本発明の茶葉抽出物がＣＣＫB受容体活性化作用を有することを示している。
実施例７
　実施例２と同様の材料を用い、実施例２と同様にして茶葉抽出物の粉末を得た。体重１５０±２０ｇの雄性ＳＤ系ラット（各群５匹）に対し、１回につき体重あたり５００ｍｇ／ｋｇの用量に調整し、連続５日間１日１回経口投与した。茶葉抽出物の供試中は、通常実験用飼料、および水を自由摂取させた。茶葉抽出物の最終投与から３０分後にクロニジン（０．０３ｍｇ／ｋｇ、腹腔内投与（ＩＰ））を投与した。さらに２０分後、動物をペントバルビタールナトリウム（４０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内投与（ＩＰ））で麻酔し、その１０分後に心拍数を記録した。
比較例１１
　茶葉抽出物の粉末を投与せずに水のみを投与したほかは、実施例７と同様とした。
　実施例７の心拍数を比較例１１のそれと比較し、アドレナリンα２Ａ受容体拮抗作用があるか評価した。実施例７及び比較例１１の結果を表６に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000006
　表６から明らかなとおり、水のみを投与した比較例１１よりも茶葉抽出物を投与した実施例７の心拍数が高かった。このことは、本発明の茶葉抽出物が、アドレナリンα２Ａ受容体拮抗作用を有することを示している。
実施例８
　サンルージュ茶葉２ｇを８０℃のお湯１００ｍｌで５分間抽出した。それらの抽出液（試験飲料１）をパネラー８人で試飲後、甘味、苦渋味及び爽快感のうちより強く感じるものを選択してもらった。
比較例１２
　サンルージュ茶葉の代わりに市販されているやぶきた茶葉（１０００円／１００ｇ）を用いて、実施例８と同様に抽出液（試験飲料２）を得て、実施例８と同様に試飲及び評価を行った。
　実施例８及び比較例１２の結果に基づき、８人で官能評価を行なった。甘味、苦渋味、および爽快感のそれぞれを比較して、強く感じた飲料を項目ごとに選択させ、パネラーの人数を数えた。結果を表７に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000007
　表７から明らかなとおり、試験飲料１では爽快感を感じるパネラーが多く、苦渋味を感じるパネラーはゼロであった。
　このことは、本発明の茶葉抽出物は、爽快感が高いので、飲みやすく、嗜好飲料として十分な性能を有していることを示している。また、本発明の製造方法では、得られる茶葉抽出物のカテキン含有量を抑えることができるため、得られる茶葉抽出物の苦渋味が抜け、爽快感を高めることができることを示している。

Claims (19)

  1. 　茶葉抽出物の乾燥重量に対して、デルフィニジンまたはその配糖体０．１３重量％以上と、カテキン類２３．０重量％以下とを含む茶葉抽出物。
  2. 　茶葉を、茶葉乾燥重量の１０倍量以上の水を用いて、温度７０℃～９５℃、時間５分～６０分の条件で抽出して得られる請求項１に記載の茶葉抽出物。
  3. 　アントシアニンの含有量に占めるデルフィニジンまたはその配糖体の含有量の比率が５０％以上である請求項１又は２に記載の茶葉抽出物。
  4. 　エピガロカテキンガレートを、茶葉抽出物の乾燥重量に対して１０．５重量％以下含む請求項１～３のいずれか一項に記載の茶葉抽出物。
  5. 　カフェインを、茶葉抽出物の乾燥重量に対して５．４重量％以下含む請求項１～４のいずれか一項に記載の茶葉抽出物。
  6. 　アミノ酸を、茶葉抽出物の乾燥重量に対して１．０重量％以上含む請求項１～５のいずれか一項に記載の茶葉抽出物。
  7. 　茶葉が緑茶の茶葉である請求項１～６のいずれか一項に記載の茶葉抽出物。
  8. 　茶葉がサンルージュの茶葉である請求項１～７のいずれか一項に記載の茶葉抽出物。
  9. 　粉末である、請求項１～８のいずれか一項に記載の茶葉抽出物。
  10. 　茶葉抽出物を温度１００℃、時間１２０分の条件で加熱したとき、茶葉抽出物中のデルフィニジンまたはその配糖体の残存率が９０％以上である、請求項１～９のいずれか一項に記載の茶葉抽出物。
  11. 　茶葉を、茶葉乾燥重量の１０倍量以上の水を用いて、温度７０℃～９５℃、時間５分～６０分の条件で抽出する、茶葉抽出物の重量に対して、デルフィニジンが０．１３重量％以上であり、カテキン類が２３．０重量％以下である茶葉抽出物の製造方法。
  12. 　請求項１～９のいずれか一項に記載の茶葉抽出物を含む飲食品。
  13. 　請求項１～９のいずれか一項に記載の茶葉抽出物を含む化粧品。
  14. 　請求項１～９のいずれか一項に記載の茶葉抽出物を含む血糖値降下剤。
  15. 　請求項１～９のいずれか一項に記載の茶葉抽出物を含む抗糖尿病剤。
  16. 　請求項１～９のいずれか一項に記載の茶葉抽出物を含むコレシストキニン受容体活性化剤。
  17. 　請求項１～９のいずれか一項に記載の茶葉抽出物を含むアドレナリン受容体拮抗剤。
  18. 　請求項１～９のいずれか一項に記載の茶葉抽出物を含む自律神経系症状亢進剤。
  19. 　請求項１～９のいずれか一項に記載の茶葉抽出物を含む運動性亢進剤。
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