KR20230081865A - 천연물 복합 추출물 및 요오드 혼합물을 유효성분으로 함유하는 비만 또는 대사성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 - Google Patents

천연물 복합 추출물 및 요오드 혼합물을 유효성분으로 함유하는 비만 또는 대사성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 천연물 복합 추출물, 상세하게는 우방자, 인삼, 백출, 의이인 및 진피 복합 추출물에 요오드가 혼합된 혼합물을 유효성분으로 함유하는 비만 또는 대사성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 상기 우방자, 인삼, 백출, 의이인 및 진피 복합 추출물에 요오드가 혼합된 혼합물은 동물모델에 독성을 나타내지 않는 농도에서 고지방식이에 의해 유도되는 체중 증가를 감소시키고, 고지방식이에 의해 유도되는 지방간의 형성 및 부고환 지방의 생성을 억제하며, 혈중 콜레스테롤의 농도를 저하시키는 효과가 우수하므로, 우방자, 인삼, 백출, 의이인 및 진피 복합 추출물에 요오드를 혼합한 혼합물을 유효성분으로 함유하는 본 발명의 조성물은 비만 또는 대사성 질환 개선용 사료 첨가제; 비만 또는 대사성 질환 개선용 건강기능식품; 비만 또는 대사성 질환의 치료제;로 유용하게 사용될 수 있다.

Description

천연물 복합 추출물 및 요오드 혼합물을 유효성분으로 함유하는 비만 또는 대사성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물{Composition for preventing, ameliorating or treating obesity or metabolic diseases comprising mixture of mixed herb extract and iodine as effective component}
본 발명은 천연물 복합 추출물, 상세하게는 우방자, 인삼, 백출, 의이인 및 진피 복합 추출물 및 요오드 혼합물을 유효성분으로 함유하는 비만 또는 대사성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
최근 경제발전과 식습관의 변화에 따라 비만, 고지혈증, 고혈압, 동맥경화, 고인슐린혈증, 당뇨병 또는 간질환 등 다양한 질환을 포함하는 대사성 질환(Metabolic Disease, Metabolic Syndrome)의 발병이 급증하고 있다. 이와 같은 질환들은 각각 발생하기도 하지만 일반적으로는 서로 밀접한 관련을 맺고 있으면서 여러 증상들을 동반하여 발생되는 경우가 대부분이다.
비만은 과다한 체지방 축적으로 인해 건강에 위협을 주는 일종의 질병으로 정의될 수 있다. 국제 비만전문위원회(International Obesity Task Force, IOTF)의 보고에 의하면 세계인구의 1/4을 차지하는 약 17억의 인구가 체중을 감량할 필요가 있다고 하여 선진국과 개발도상국 모두에게 심각한 사회문제로 대두되고 있다.
항비만 소재로는 덱스플렌플루라민(Dexflenfluramine), 올리스타트(Orlistat), 시부트라민(Sibutramine), 에페드린(Ephedrine), 가르시니아 캄보지아, 차천자피, 크로뮴피콜린산(Chromiumpicolinate) 등이 있다. 그러나, 이들 소재들은 약효가 다소 인정되나, 일시적 체중감소, 신속한 체중 손실, 약물들에 의한 심장, 혈압, 신경계에 대한 부작용이 있다.
또한, 핵가족화와 1인 가구의 증가 등으로 가족 규모가 축소되면서 점차 반려동물에 대한 수요가 증가하고 있으며, 이와 관련하여 반려동물의 삶의 질 향상을 위한 건강관리, 반려동물 용품 시장의 다양화 등과 같은 사업이 확대되고 있다.
반려동물의 양육비용 중 사료 및 간식비 다음으로 가장 많은 지출 비중을 차지하는 부분이 의료비에 해당한다. 반려동물이 병원에 내원한 이유로 질병이 가장 많았으며, 이 중 약 40%가 비만 진단을 받는 것으로 나타났다. 그러나 일부 보호자들은 자신의 반려견이 비만이라는 사실을 잘 인지하지 못하고 있는 것으로 알려져 있고 반려견 보호자 중 22%가 자신의 반려견을 정상체중으로 생각하는 것으로 조사되어 사람과 달리 반려동물에 대한 비만 판정이나 비만 관리 인식이 아직 부족하다는 것을 알 수 있다.
따라서, 본 발명자들은 안전하고 부작용이 없는 천연물로부터 비만 혹은 대사성 질환을 효과적으로 개선할 수 있는 새로운 조성물을 개발하고자 하였다.
천연물의 비만 및 대사성 질환 개선효과와 관련된 선행기술로는 한국공개특허 제2021-0019915호에 메밀 발효 추출물을 유효성분으로 하는 비만 또는 대사성 질환 예방 및 개선용 건강기능식품 조성물이 개시되어 있고, 한국등록특허 제1888871호에 차전초 잎 추출물을 포함하는 비만 또는 대사성 질환의 예방 및 치료용 조성물이 개시되어 있지만, 본 발명의 천연물 복합 추출물, 상세하게는 우방자, 인삼, 백출, 의이인 및 진피 복합 추출물에 요오드가 혼합된 혼합물을 유효성분으로 함유하는 비만 또는 대사성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관해 전혀 개시된 바 없다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로, 우방자, 인삼, 백출, 의이인 및 진피 복합 추출물에 요오드가 혼합된 혼합물을 유효성분으로 함유하는 비만 또는 대사성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물을 제공하고, 상기 조성물이 고지방식이에 의한 체중 증가를 감소시키고, 지방간을 개선하며, 혈중 콜레스테롤 농도를 감소시키는 것을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 우방자(Arctii Fructus), 인삼(Panax ginseng), 백출(Atractylodes lancea), 의이인(Coicis Semen) 및 진피(Citrus unshiu) 복합 추출물에 요오드가 혼합된 혼합물을 유효성분으로 함유하는 비만 또는 대사성 질환의 예방 또는 개선용 사료 첨가제를 제공한다.
또한, 본 발명은 우방자, 인삼, 백출, 의이인 및 진피 복합 추출물에 요오드가 혼합된 혼합물을 유효성분으로 함유하는 비만 또는 대사성 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 우방자, 인삼, 백출, 의이인 및 진피 복합 추출물에 요오드가 혼합된 혼합물을 유효성분으로 함유하는 비만 또는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명은 천연물 복합 추출물, 상세하게는 우방자, 인삼, 백출, 의이인 및 진피 복합 추출물에 요오드가 혼합된 혼합물을 유효성분으로 함유하는 비만 또는 대사성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 상기 우방자, 인삼, 백출, 의이인 및 진피 복합 추출물에 요오드가 혼합된 혼합물은 동물모델에 독성을 나타내지 않는 농도에서 고지방식이에 의해 유도되는 체중 증가를 감소시키고, 고지방식이에 의해 유도되는 지방간의 형성 및 부고환 지방의 생성을 억제하며, 혈중 콜레스테롤의 농도를 저하시키는 효과가 있다.
도 1은 고지방식이에 의해 비만이 유도된 동물모델에서 본 발명의 혼합물 섭취에 의한 체중변화(A) 및 누적 체중 증가량(B)을 확인한 결과이다. Blank는 일반식이 그룹이고, Control은 고지방식이 그룹이고, 천연물 복합 추출물+요오드는 고지방식이 및 천연물 복합 추출물에 요오드가 혼합된 혼합물 섭취 그룹이며, Orlistat는 고지방식이 및 오를리스타트를 섭취한 양성대조군이다. *은 Control 대비 천연물 복합 추출물+요오드의 체중이 통계적으로 유의미하게 감소하였다는 것을 의미하며, p<0.05이다.
도 2는 고지방식이에 의해 비만이 유도된 동물모델에서 본 발명의 혼합물 섭취에 의한 간 및 부고환 지방의 형태 변화(A), 간, 부고환 지방 및 피하지방의 무게(B~D)를 확인한 결과이다. Blank는 일반식이 그룹이고, Control은 고지방식이 그룹이고, 천연물 복합 추출물+요오드는 고지방식이 및 천연물 복합 추출물에 요오드가 혼합된 혼합물 섭취 그룹이며, Orlistat는 고지방식이 및 오를리스타트를 섭취한 양성대조군이다. *은 Control 대비 간 무게, 부고환 지방 무게 및 피하지방 무게가 통계적으로 유의미하게 감소하였다는 것을 의미하며, p<0.05이다. #은 Blank 대비 Control의 부고환 지방 무게가 통계적으로 유의미하게 증가하였다는 것을 의미하며, p<0.05이다.
도 3은 고지방식이에 의해 비만이 유도된 동물모델에서 본 발명의 혼합물 섭취에 의한 간 및 부고환 지방 조직의 변화를 H&E(Hematoxylin and eosin) 염색으로 확인한 결과이다. Blank는 일반식이 그룹이고, Control은 고지방식이 그룹이고, 천연물 복합 추출물+요오드는 고지방식이 및 천연물 복합 추출물에 요오드가 혼합된 혼합물 섭취 그룹이며, Orlistat는 고지방식이 및 오를리스타트를 섭취한 양성대조군이다.
도 4는 고지방식이에 의해 비만이 유도된 동물모델의 부고환 지방에서 본 발명의 혼합물 섭취에 의한 PPARγ mRNA 발현 변화를 확인한 결과이다. Blank는 일반식이 그룹이고, Control은 고지방식이 그룹이고, 천연물 복합 추출물+요오드는 고지방식이 및 천연물 복합 추출물에 요오드가 혼합된 혼합물 섭취 그룹이며, Orlistat는 고지방식이 및 오를리스타트를 섭취한 양성대조군이다. *은 Control 대비 PPRARγ mRNA 발현이 통계적으로 유의미하게 감소하였다는 것을 의미하며, p<0.05이다. #은 Blank 대비 Control의 PPRARγ mRNA 발현이 통계적으로 유의미하게 증가하였다는 것을 의미하며, p<0.05이다.
도 5는 고지방식이에 의해 비만이 유도된 동물모델에서 본 발명의 혼합물 섭취에 의한 혈중 총 콜레스테롤(Total cholesterol), TG(triglyceride), HDL 콜레스테롤(high density lipoprotein cholesterol) 및 LDL 콜레스테롤(low density lipoprotein cholesterol) 함량 변화를 확인한 결과이다. Blank는 일반식이 그룹이고, Control은 고지방식이 그룹이고, 천연물 복합 추출물+요오드는 고지방식이 및 천연물 복합 추출물에 요오드가 혼합된 혼합물 섭취 그룹이며, Orlistat는 고지방식이 및 오를리스타트를 섭취한 양성대조군이다. *은 Control 대비 혈중 총 콜레스테롤 함량 및 TG 함량이 통계적으로 유의미하게 감소하였다는 것을 의미하며, p<0.05이다. #은 Blank 대비 Control의 혈중 총 콜레스테롤, TG 및 LDL 콜레스테롤 함량이 통계적으로 유의미하게 증가하였다는 것을 의미하며, p<0.05이다.
도 6은 고지방식이에 의해 비만이 유도된 동물모델에서 본 발명의 혼합물 섭취에 의한 혈중 AST(aspartate transaminase), ALT(alanine transaminase), 크레아티닌(creatinine) 및 BUN(blood urea nitrogen) 변화를 확인한 결과로, A는 고지방식이 및 혼합물(천연물 복합 추출물+요오드)에 의한 변화를 확인한 결과이고, B는 일반식이 및 혼합물(천연물 복합 추출물+요오드)에 의한 변화를 확인한 결과이다. Blank는 일반식이 그룹이고, Control은 고지방식이 그룹이다.
본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 우방자, 인삼, 백출, 의이인 및 진피 복합 추출물에 요오드가 혼합된 혼합물을 유효성분으로 함유하는 비만 또는 대사성 질환의 예방 또는 개선용 사료 첨가제를 제공한다.
상기 복합 추출물의 추출 용매는 C1~C4의 저급 알코올, 물 또는 이들의 혼합물일 수 있고, 바람직하게는 물을 이용하여 추출하는 것이지만, 이에 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 일 구현 예에서, 상기 우방자, 인삼, 백출, 의이인 및 진피 복합 추출물은 우방자 100 중량부에 대하여 인삼, 백출, 의이인 및 진피가 각각 30~70 중량부 혼합된 것일 수 있고, 바람직하게는 우방자 100 중량부에 대하여 인삼, 백출, 의이인 및 진피가 각각 40~60 중량부 혼합된 것일 수 있으며, 더 바람직하게는 우방자 100 중량부에 대하여 인삼, 백출, 의이인 및 진피가 각각 50 중량부 혼합된 것일 수 있지만, 이에 한정하는 것은 아니다.
상기 복합 추출물에 요오드가 혼합된 혼합물은 복합 추출물 100 중량부에 대하여 요오드가 30~50 중량부 혼합된 것일 수 있고, 바람직하게는 복합 추출물 100 중량부에 대하여 요오드가 40 중량부 혼합된 것이지만, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 대사성 질환은 비알코올성 지방간, 고콜레스테롤혈증 및 고지혈증 중에서 선택된 하나 이상일 수 있고, 상기 비알코올성 지방간 질환은 단순 지방간, 영양성 지방간, 기아성 지방간, 비만성 지방간, 당뇨성 지방간, 지방간염, 간섬유화 또는 간경화인 것이지만, 이에 한정하는 것은 아니다.
상기 사료 첨가제는 본 발명의 혼합물을 함유하는 농축액, 분말 또는 과립형태일 수 있다.
본 발명의 사료 첨가제는 구연산, 후말산, 아디픽산, 젖산, 사과산 등의 유기산이나 인산나트륨, 인산칼륨, 산성피로인산염, 폴리인산염(중합인산염) 등의 인산염이나 폴리페놀, 카테킨(catechin), 알파-토코페롤, 로즈메리 추출물(rosemary extract), 비타민 C, 녹차 추출물, 감초 추출물, 키토산, 탄닌산, 피틴산 등의 천연 항산화제 중에서 선택된 하나 이상을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 혼합물을 함유하는 동물사료 첨가제 및 이를 포함하는 사료는 보조성분으로 아미노산, 무기염류, 비타민, 항생물질, 항균물질, 항산화, 항곰팡이 효소, 소화 및 흡수향상제, 성장촉진제, 질병예방제 등과 같은 물질과 함께 사용될 수 있다.
상기 사료 첨가제는 동물에게 단독으로 식용 담체 중에서 다른 사료 첨가제와 조합되어 투여될 수 있다. 또한, 상기 사료첨가제는 탑 드레싱으로서 또는 이들을 동물 사료에 직접 혼합하거나 또는 사료와 별도로, 별도의 경구 제형으로, 주사 또는 경피로 또는 다른 성분과 조합하여 쉽게 투여할 수 있다. 통상적으로, 당 업계에 잘 알려진 바와 같이 단독 일일 투여량 또는 분할 일일 투여량을 사용할 수 있다. 상기 사료 첨가제를 동물 사료와 별도로 투여할 경우, 당 업계에 잘 알려진 바와 같이 추출물의 투여 형태는 이들을 비-독성 제약상 허용 가능한 식용 담체와 조합하여 즉석 방출 또는 서방성 제형으로 제조할 수 있다. 이러한 식용 담체는 고체 또는 액체, 예를 들어 옥수수 전분, 락토스, 수크로스, 콩 플레이크, 땅콩유, 올리브유, 참깨유 및 프로필렌 글리콜일 수 있다. 고체 담체가 사용될 경우, 추출물의 투여형은 정제, 캡슐제, 산제, 토로키제 또는 함당정제 또는 미분산성 형태의 탑 드레싱일 수 있다. 액체 담체가 사용될 경우, 연 젤라틴 캡슐제, 또는 시럽제 또는 액체 현탁액제, 에멀젼제 또는 용액제의 투여 형태일 수 있다. 또한, 투여 형태는 보조제, 예를 들어 보존제, 안정화제, 습윤제 또는 유화제, 용액 촉진제 등을 함유할 수 있다.
또한, 본 발명의 혼합물이 사료 첨가제로 포함되는 동물사료는 동물의 식이 요구를 충족시키는데 통상적으로 사용되는 임의의 단백질-함유 유기 곡분일 수 있다. 이러한 단백질-함유 곡분은 통상적으로 옥수수, 콩 곡분 또는 옥수수/콩 곡분 믹스로 주로 구성되어 있다. 상기의 사료 첨가제는 침지, 분무 또는 혼합하여 상기 동물사료에 첨가하여 이용될 수 있다. 본 발명의 수의학적 조성물 또는 사료첨가제는 반려동물의 식이에 적용할 수 있다.
또한, 본 발명은 우방자, 인삼, 백출, 의이인 및 진피 복합 추출물에 요오드가 혼합된 혼합물을 유효성분으로 함유하는 비만 또는 대사성 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 건강기능식품 조성물을 식품첨가물로 사용하는 경우, 상기 건강기능식품 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 양은 그의 사용 목적(예방 또는 개선)에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시 본 발명의 건강기능식품 조성물은 총 원료에 대하여 15 중량부 이하, 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가된다. 그러나 건강을 목적으로 하는 장기간의 섭취인 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로 사용될 수 있다.
상기 건강기능식품의 종류에 특별한 제한은 없다. 상기 건강기능식품 조성물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
또한, 본 발명의 건강기능식품 조성물은 식품, 특히 기능성 식품으로 제조될 수 있다. 본 발명의 기능성 식품은 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함하며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소 및 조미제를 포함한다. 예컨대, 드링크제로 제조되는 경우에는 유효성분 이외에 천연 탄수화물 또는 향미제를 추가 성분으로서 포함할 수 있다. 상기 천연 탄수화물은 모노사카라이드(예컨대, 글루코오스, 프럭토오스 등), 디사카라이드(예컨대, 말토스, 수크로오스 등), 올리고당, 폴리사카라이드(예컨대, 덱스트린, 시클로덱스트린 등) 또는 당알코올(예컨대, 자일리톨, 소르비톨, 에리쓰리톨 등)인 것이 바람직하다. 상기 향미제는 천연 향미제(예컨대, 타우마틴, 스테비아 추출물 등)와 합성 향미제(예컨대, 사카린, 아스파르탐 등)를 이용할 수 있다.
상기 건강기능식품 조성물 이외에 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 더 함유할 수 있다. 이러한 상기 첨가되는 성분의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 건강기능식품 조성물 100 중량부에 대하여, 0.01 내지 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
또한, 본 발명은 우방자, 인삼, 백출, 의이인 및 진피 복합 추출물에 요오드가 혼합된 혼합물을 유효성분으로 함유하는 비만 또는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명의 약학 조성물은 유효성분 이외에 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포함할 수 있으며, 이러한 담체는 제제 시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 약학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 경구 또는 비경구로 투여할 수 있으며, 비경구 투여의 경우, 정맥 내 주입, 피하 주입, 근육 주입, 복강 주입, 경피 투여 등으로 투여할 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 비만 또는 대사성 질환의 억제 및 치료를 위하여 단독으로, 또는 수술, 방사선치료, 호르몬치료, 화학치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.
본 발명의 조성물에 포함되는 유효성분의 농도는 치료 목적, 환자의 상태, 필요기간 등을 고려하여 결정할 수 있으며 특정 범위의 농도로 한정되지 않는다.
본 발명의 약학 조성물은 당해 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약학적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 이용하여 제제화함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기 내에 내입시켜 제조될 수 있다. 이때 제형은 주사제, 크림, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 및 카타플라스마제 중에서 선택된 어느 하나의 제형으로 제조될 수도 있으며, 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수 있다.
이하, 제조예 및 실시예를 이용하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 한다. 이들 제조예 및 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들에 의해 제한되지 않는다는 것은 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어 자명한 것이다.
제조예 1. 우방자, 인삼, 백출, 의이인 및 진피 복합 추출물에 요오드가 혼합된 혼합물의 제조
우방자(Arctii Fructus) 100 중량부에 대하여, 인삼(Panax ginseng) 50 중량부, 백출(Atractylodes lancea) 50 중량부, 의이인(Coicis Semen) 50 중량부 및 진피(Citrus unshiu) 50 중량부를 혼합한 후, 혼합물 1kg에 대하여 물 10L를 첨가한 다음 105℃에서 3시간 동안 추출한 후, 여과하였다. 그 후, 여액을 스프레이 드라이 방식으로 건조하여 천연물 복합 추출물을 제조하였다.
상기 천연물 복합 추출물 200mg에 요오드를 80mg 혼합한 후, 동물실험의 시료(천연물 복합 추출물+요오드)로 사용하였다.
본 발명의 제조방법으로 제조된 상기 혼합물은 이취가 감소함으로써 후각이 예민한 동물에 적용하기 용이하다.
실시예 1. 혼합물 섭취에 의한 체중 및 조직 무게 감소효과
상기 제조예 1의 혼합물 섭취에 의한 체중 및 조직 무게 감소효과를 확인하기 위해, C57BL/6 마우스의 체중을 측정한 후, 평균 체중이 유사하도록 각 그룹당 60수씩 나눈 후, 총 11주 동안 일반식이 그룹 또는 고지방식이 그룹으로 나눠 실험하였다. 각 그룹은 구체적으로, 일반식이 그룹(Blank), 고지방식이 그룹(Control), 고지방식이 및 상기 제조예 1의 혼합물 섭취 그룹(천연물 복합 추출물+요오드), 고지방식이 및 오를리스타트를 섭취한 양성대조군(Orlistat)으로 나눴다.
상기 제조예 1의 혼합물은 증류수에 현탁하여 280mg/kg/day로 매일 1회 경구투여하였고, 오를리스타트(orlistat)는 40mg/kg/day로 주 3회(월요일, 수요일, 금요일), 1일 1회씩 경구투여하였다.
실험 종료 12시간 전 사료를 제거하여 사료 섭취를 제한하였고, 마우스의 희생(sacrifice)을 위해 디에틸에테르로 마취시킨 후, 안와에서 혈액을 채취한 다음 개복하여 피하지방, 부고환 지방 및 간 조직을 적출하였다.
지방간 관찰 및 부고환지방의 지방세포 크기 관찰을 위해, 파라핀 블록을 제작한 후, H&E 염색을 진행하였다.
파라핀 블록 제작을 위해, 조직을 70%(v/v) 에탄올에서 1시간, 80%(v/v) 에탄올에서 1시간, 90%(v/v) 에탄올에서 1시간, 95%(v/v) 에탄올에서 1시간, 100%(v/v) 에탄올에서 2시간 침지시킨 후, 새로운 100%(v/v) 에탄올에서 2시간, 새로운 100%(v/v) 에탄올에서 1시간 동안 침지시킨 다음 자일렌(xylene) 용액에서 1시간, 새로운 자일렌 용액에서 2시간, 새로운 자일렌 용액에서 2시간 침지시킨 다음 조직포매기를 이용하여 파라핀 블록을 최종 완성하였다. 완성된 파라핀 블록은 랩코어사에 의뢰하여 H&E 염색 후 조직에서의 지방 상태를 분석하였다.
그 결과, 도 1에 개시된 바와 같이 고지방식이 마우스(Control)의 체중은 일반식이 마우스(Blank)에 비해 현저히 증가하였고, 고지방식이와 함께 상기 제조예 1의 혼합물을 함께 섭취한 경우(천연물 복합 추출물+요오드), 고지방식이 단독 그룹(Control)에 비해 체중이 현저히 감소하는 것을 확인하였다.
또한, 도 2A에 개시된 바와 같이 고지방식이에 의해 증가된 간 조직의 크기가 제조예 1의 혼합물(천연물 복합 추출물+요오드) 섭취에 의해 감소하는 것을 확인하였고, 조직의 중량을 측정한 결과, 도 2B에 개시된 바와 같이 제조예 1의 혼합물(천연물 복합 추출물+요오드) 섭취에 의해 간 무게 및 피하지방의 무게가 감소하는 것을 확인하였다. 부고환 지방은 제조예 1의 혼합물 섭취에 의해 형태적으로 감소하는 경향을 나타냈고, 조직 무게 측정결과, 고지방식이 단독 그룹에 비해 소폭 감소하는 것으로 보이나 통계적 유의성을 확인할 수 없었다.
한편, 도 3에 개시된 바와 같이 간 조직 및 부고환 지방 조직을 H&E 염색한 결과, 고지방식이에 의해 확대된 지방의 크기가 제조예 1의 혼합물(천연물 복합 추출물+요오드) 섭취에 의해 현저하게 감소된 것을 확인하였다.
실시예 2. 혼합물 섭취에 의한 부고환 지방에서의 PPARγ mRNA 발현 변화
상기 적출된 부고환 지방에서 RNA를 분리한 후, PPARγ의 mRNA 발현 변화를 확인하였다.
RNA는 RNA 분리 키트(RNA isolation kit)를 이용하여 부고환 지방으로부터 추출하였으며, 추출한 RNA를 cDNA 합성 키트를 사용하여 cDNA로 합성한 다음 이를 주형으로 SYBR 시약(reagent)을 사용하여 중합효소 연쇄반응(PCR, polymerase chain reaction) 함으로써, mRNA 발현 변화를 확인하였다.
그 결과, 도 4에 개시된 바와 같이 고지방식이에 의해 증가된 PPARγ의 mRNA 발현이 제조예 1의 혼합물(천연물 복합 추출물+요오드) 섭취에 의해 현저히 감소된 것을 확인하였다.
실시예 3. 혼합물 섭취에 의한 혈중 총 콜레스테롤, TG(triglyceride), HDL 콜레스테롤(high density lipoprotein cholesterol) 및 LDL 콜레스테롤(low density lipoprotein cholesterol) 함량 변화
상기 실시예 1에서 채취한 안와혈액을 13,000rpm에 20분 동안 원심분리하여 혈청(serum)을 획득한 후, ELISA 키트를 이용하여 제조사의 프로토콜에 따라 총 콜레스테롤, TG, HDL 콜레스테롤 및 LDL 콜레스테롤 수치를 분석하였다.
그 결과, 도 5에 개시된 바와 같이 고지방식이에 의해 증가된 총 콜레스테롤 함량 및 TG 함량이 제조예 1의 혼합물(천연물 복합 추출물+요오드) 섭취에 의해 현저히 감소하였다. HDL 콜레스테롤 함량은 제조예 1의 혼합물(천연물 복합 추출물+요오드) 섭취에 의해 소폭 증가되었고, LDL 콜레스테롤 함량은 제조예 1의 혼합물(천연물 복합 추출물+요오드) 섭취에 의해 소폭 감소되었다.
실시예 4. 혼합물 섭취에 의한 혈중 AST(aspartate transaminase), ALT(alanine transaminase), 크레아티닌(creatinine) 및 BUN(blood urea nitrogen) 변화
상기 실시예 1에서 채취한 안와혈액을 13,000rpm에 20분 동안 원심분리하여 혈청(serum)을 획득한 후, 서울의과학연구소에 의뢰하여 간독성 및 신독성을 확인하기 위해 AST, ALT, 크레아티닌 및 BUN 수치를 분석하였다.
그 결과, 도 6A에 개시된 바와 같이 고지방식이에 의해 증가된 AST, ALT의 함량은 제조예 1의 혼합물(천연물 복합 추출물+요오드) 섭취에 의해 일반식이 그룹과 유사한 수준으로 감소하였고, 크레아티닌 및 BUN의 함량은 모든 그룹에서 유사한 수준을 나타냈다.
또한, 도 6B에 개시된 바와 같이 일반식이에 제조예 1의 혼합물(천연물 복합 추출물+요오드)을 투여한 경우, 일반식이 그룹과 유사한 수준의 AST, ALT, 크레아티닌 및 BUN 수치를 나타냈다.
이를 통해 본 발명의 제조예 1의 혼합물(천연물 복합 추출물+요오드)은 간독성 및 신독성을 나타내지 않는다는 것을 확인하였다.

Claims (8)

  1. 우방자(Arctii Fructus), 인삼(Panax ginseng), 백출(Atractylodes lancea), 의이인(Coicis Semen) 및 진피(Citrus unshiu) 복합 추출물에 요오드가 혼합된 혼합물을 유효성분으로 함유하는 비만 또는 대사성 질환의 예방 또는 개선용 사료 첨가제.
  2. 제1항에 있어서, 상기 복합 추출물의 추출 용매는 C1~C4의 저급 알코올, 물 또는 이들의 혼합물인 것을 특징으로 하는 비만 또는 대사성 질환의 예방 또는 개선용 사료 첨가제.
  3. 제1항에 있어서, 상기 우방자, 인삼, 백출, 의이인 및 진피 복합 추출물은 우방자 100 중량부에 대하여 인삼, 백출, 의이인 및 진피가 각각 30~70 중량부 혼합한 후 추출한 것을 특징으로 하는 비만 또는 대사성 질환의 예방 또는 개선용 사료 첨가제.
  4. 제1항에 있어서, 상기 복합 추출물에 요오드가 혼합된 혼합물은 복합 추출물 100 중량부에 대하여 요오드가 30~50 중량부 혼합된 것을 특징으로 하는 비만 또는 대사성 질환의 예방 또는 개선용 사료 첨가제.
  5. 제1항에 있어서, 상기 대사성 질환은 비알코올성 지방간, 고콜레스테롤혈증 및 고지혈증 중에서 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 하는 비만 또는 대사성 질환의 예방 또는 개선용 사료 첨가제.
  6. 제5항에 있어서, 상기 비알코올성 지방간은 단순 지방간, 영양성 지방간, 기아성 지방간, 비만성 지방간, 당뇨성 지방간, 지방간염, 간섬유화 및 간경화로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 비만 또는 대사성 질환의 예방 또는 개선용 사료 첨가제.
  7. 우방자, 인삼, 백출, 의이인 및 진피 복합 추출물에 요오드가 혼합된 혼합물을 유효성분으로 함유하는 비만 또는 대사성 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
  8. 우방자, 인삼, 백출, 의이인 및 진피 복합 추출물에 요오드가 혼합된 혼합물을 유효성분으로 함유하는 비만 또는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
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