JP5704292B2 - 茶葉抽出組成物 - Google Patents

Description

本発明はアントシアニンとカテキン類の両方を含有するチャの葉抽出物に関するものである。より詳細には、同量のアントシアニン含有物やカテキン類含有物と比較して、優れた眼精疲労軽減効果又は精神疲労軽減効果を有するチャの葉抽出物及びその用途に関するものである。

近年、急速なＩＴ化により、ビジネスにおいて、ＰＣは当たり前のように使用されるようになり、仕事の効率化、情報伝達のスピード化など多大な利益をもたらしている。職種にもよるが、ＰＣと向き合う時間が１日のほとんどを占める作業者もいる。今や、ＰＣは仕事に欠かすことの出来ないツールといえる。しかし、その反面、ＰＣを用いる作業はモニターを注視し続けることから、作業者の目に対するダメージは非常に大きく、「目の疲れ」や「目のかすみ」など、いわゆる眼精疲労を訴える作業者が増加している。眼精疲労は肩や腰の凝り、イライラ、頭の痛みなど目だけでなく精神の疲労も伴うことから、眼精疲労や精神の疲労感を軽減する健康食品や医薬品の需要が高まっている。

アントシアニン色素は着色剤として食品、化粧品等に利用されているが、最近では、抗酸化性や抗変異性等の機能性に加え、疲労軽減効果や眼精疲労軽減効果が期待されている成分である。カシスやブルーベリーに含まれるアントシアニンの眼精疲労軽減効果に関して、多数報告されている（特許文献１〜６など）。各植物に含まれる主なアントシアニンとしては、ブルーベリーに含まれるデルフィニジン−３−Ｏ−グリコシド、シアニジン−３−Ｏ−グリコシド、ペツニジン−３−Ｏ−グリコシド、ペオニジン−３−Ｏ−グリコシド、マルビジン−３−Ｏ−グリコシド、他にカシスに含まれるデルフィニジン−３−Ｏ−ルチノイド、シアニジン−３−Ｏ−ルチノイドなどが挙げられる。
その他、茶ポリフェノールの抗ストレス効果に関しての報告もある（特許文献７）。
このように、眼精疲労を軽減させる素材は幾つかあるものの、その効果は未だ満足できるものとは言い難い。また、眼精疲労軽減効果と精神疲労感軽減効果の両者を有する素材はない。

特開２００５−１１７９１０号公報 特開２００３−１８９７９号公報 特開２００５−３２８７６１号公報 特開２００２−１２８６８９号公報 特開２００５−２８７３７６号公報 特開２００５−６５５２５号公報 特開２００５−２３９６９４号公報

本発明の目的は、眼精疲労やストレス状態にある場合の各症状を効果的に緩和し、かつ、安全なチャの葉抽出組成物を提供することにある。

本発明は上記目的を達成するためになされたもので、紅花チャ、Ｆ９５１８１（茶中間母本農６号）、それらの後代等の葉の抽出物が、これまで知られていなかったような生理活性を有することを動物実験および臨床試験により確認して本発明を完成するに至った。すなわち、本発明はアントシアニンとカテキン類を含有するチャの葉抽出物を提供する。
また、本発明は前記抽出物を含有する医薬品、飲食品又は飼料を提供する。
さらに、本発明は眼精疲労予防若しくは回復剤又は精神疲労予防若しくは回復剤を製造するための、前記抽出物の使用を提供する。
なお、カテキン類には、発癌 抑制、動脈硬化予防、脂肪代謝異常の抑制、血圧上昇の抑制、血小板凝集抑制作用、抗アレルギー、抗ウイルス、抗菌、虫歯予防、口臭防止、腸内細菌叢正常化効果、活性酸素やフリーラジカルの消去作用、抗酸化作用などがあることが知られている。また、カテキン類には、血糖の上昇を抑制する抗糖尿病効果があることが知られている。しかしながら、眼精疲労予防若しくは回復効果又は精神疲労予防若しくは回復効果に関しての報告はない。カテキン類とは、ポリヒドロキシフラバン−３−オールの総称である。カテキン類としては、（＋）−カテキン、（−）−エピカテキン、（＋）−ガロカテキン、（−）−エピガロカテキン、エピガロカテキンガレート、エピカテキンガレートなどが知られている。天然物からは、狭義のカテキンといわれている（＋）−カテキンの他、ガロカテキン、アフゼレキン、並びに（＋）−カテキン又はガロカテキンの３−ガロイル誘導体が単離されている。

紅花チャ及びＦ９５１８１（茶中間母本農６号）は新芽のアントシアニン含有率が高いチャである。紅花チャは、来歴のはっきりしない在来種であり、Ｆ９５１８１は、独立行政法人農業・生物系特定産業技術研究機構 野菜茶業研究所において、チャの近縁野生種のタリエンシス（Camellia taliensis ）とチャ（品種：おくむさし）の種間交雑から育成した、紅花チャ（Camellia sinensis ）と同等の含有率（乾物重０．３７−１％）を持つアントシアニン高含有系統である。タリエンシス（Camellia taliensis ）はミャンマーで日常的に飲用されている。また大茶樹（中国各地にある茶の巨木）の一部はタリエンシス（Camellia taliensis ）だとされており、数千年も前から飲用されていた。
なお、本明細書において「紅花チャ」はツバキ目ツバキ科ツバキ属の系統名であり、キク科サフラワーの花を乾燥させたものであって「紅花茶」として市販されているものとは異なるものである。また、本明細書において、「チャ」は木を表し、「茶」はチャの葉の抽出物を表す。

本発明によれば、紅花チャ、Ｆ９５１８１（茶中間母本農６号）、それらの後代等の葉を原料として、眼精疲労軽減効果および精神疲労軽減効果を有する組成物を得ることができた。更にこれを、医薬品や飲食品の材料として容易に利用することができた。

本発明のチャの葉抽出物はアントシアニンとカテキン類を含有する。このような葉抽出物は、紅花チャ、Ｆ９５１８１（茶中間母本農６号）、それらの後代等の葉を、溶剤で抽出処理して得ることができる。葉を粉砕して抽出することが好ましい。葉の粉砕物は均一な大きさであることが好ましいため、粉砕物をふるいにかけてもよい。
また、抽出溶剤としては毒性の無いものであればよく、溶媒抽出法に用いる溶媒としては、水若しくは親水性溶媒又はこれらの混合物を挙げることができる。溶媒抽出法において、抽出溶媒に用いる水は特に限定されるものではないが、例えば水道水、蒸留水、純水、イオン交換水等を挙げることができる。溶媒抽出法において、抽出溶媒に用いる親水性溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール等の低級アルコール、アセトン、メチルエチルケトン等の低級脂肪族ケトン、１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の多価アルコールを挙げることができる。抽出物中のカテキン類の回収率を考慮するとエタノールが含有されている溶剤を用いることが好ましい。また、抽出温度としては２０℃から１００℃で抽出することが好ましく、５０℃から１００℃で行なうことが更に好ましい。抽出ｐＨとしては１．０から７．０で抽出することが好ましく、１．５から６．５で行うことが更に好ましい。抽出は、一度抽出した後の残渣を回収して複数回行なっていてもよい。また抽出は、化学分離精製手法として一般的に用いられる方法を使用してもよい。例えば、液−液分配、薄層クロマトグラフィー、吸着カラムクロマトグラフィー、分配カラムクロマトグラフィー、ゲルろ過カラムクロマトグラフィー、イオン交換カラムクロマトグラフィー、電気泳動や高速液体クロマトグラフィーなどを用いることができる。また、必要に応じこれらの分離精製手段を組み合わせて行ってもよい。

上記葉抽出物は、経口の医薬品として用いることができ、また食品素材と混合して飲食品又は飼料とすることができる。性状としては固体状又は液体状を呈し、医薬品としては経口剤として錠剤、カプセル剤、顆粒剤、シロップ剤等の剤型をとる。
抽出物を医薬品として人体に投与するときは、１回あたりカテキン類として１００〜４００ｍｇ/ｋｇ体重の量、かつ、アントシアニンとして１〜６０ｍｇ/ｋｇ体重の量を、１日に１ないし数回経口投与する。なお、デルフィニジン−３−Ｏ−ガラクトシド、シアニジン−３−Ｏ−ガラクトシド、シアニジン−３−ｐ−クマロイルガラクトシドがアントシアニンの４０％以上を占めていることが好ましい。
以下、本発明を実施例によってさらに具体的に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。

（実施例１ 紅花チャの葉抽出物の眼精疲労軽減効果（ヒト試験））
（試験方法）
（１）被験物

・入れ方：紅花チャの葉２ｇに１００℃の熱湯１００ｍｌを注ぎ７分間静置して抽出した。
・被験物摂取量：１００ｍｌを閉眼にて摂取させた。

（２）被験者
２０名（男性１１名、女性９名）
以下の項目のうち、該当する項目が全く無い者を採用した。
・現在何らかの疾病の継続的な治療を受けている者
・管理医師が試験参加不適格と判断した者
・妊娠中・妊娠の可能性のある、または授乳中の婦人
・ＶＤＴ（Visual Display Terminal）作業後に頭痛やめまいを高頻度で経験している者

（３）プロトコール

・ダブルブラインド、クロスオーバー
・作業負荷：ＶＤＴクレペリンテスト正誤判定試験１時間（図１参照）

（４）測定項目
・唾液成分：クロモグラニンＡ
・ＶＡＳ（Visual Analog Scle）：図２参照

（結果）
（１）ＶＡＳ
表３に示すとおり、ＶＤＴ作業によりＶＡＳの各項目の値は上昇し、３０分の回復期間の後、低下した。
・「目の乾き」：紅花チャの葉抽出物は作業直後の値を有意（＊：ｐ＜０．０５）に抑制した（図３）。
・「頭の重み」：紅花チャの葉抽出物は作業３０分後の回復を改善させる傾向（＃：ｐ＜０．０５）が見られた（図４）。

（２）唾液成分
紅花チャの葉抽出物群において、作業３０分後のクロモグラニンＡの値がやぶきた茶と比較して有意に低下していた（図５）。クロモグラニンＡは、ストレスなどの自律神経の刺激によって、副腎髄質などの内分泌組織から放出されるタンパク質であり、ストレスに対する生理的指標としてよく用いられている。紅花チャの葉抽出物群において見られたクロモグラニンＡの低下は、紅花チャの葉抽出物を摂取することでＶＤＴ作業に起因する精神的ストレスが緩和された事を意味している。

（３）効果実感
被験者に、試験終了時に、どちらのお茶を摂取した際に眼精疲労軽減効果を実感したかを質問したところ、紅花チャの葉抽出物と答えた被験者が６０％、やぶきた茶と答えた被験者が０％、どちらでもないと答えた被験者が４０％と紅花チャの葉抽出物がやぶきた茶を有意に上回った（図６）。

（実施例２ 紅花チャの葉抽出物の精神疲労軽減効果（ヒト試験））
（試験方法）
（１）被験者
２０〜４０代の健常人男女４７名

（２）被験物
・紅花チャの葉抽出物
・ブレンド茶（対照：カテキン類及びアントシアニンはほとんど含まれていない。）
・入れ方：紅花チャの葉２ｇに１００℃の熱湯１００ｍｌを注ぎ７分間静置して抽出した。
・試験サンプル摂取量：１５０ｍｌ

（３）測定項目
・唾液成分：クロモグラニンＡ、ｓ−ＩｇＡ、コルチゾール、セロトニン
・アンケート：Eggman Face Scale、ＶＡＳ（図７）

（４）試験プロトコール
会議室に集合後、上記に示した唾液採取と感情項目調査について１回目の測定（pre）を実施した後、各試験飲料１５０ｍＬを摂取した。摂取１０分後にクレペリンテストを２０分間実施した。計算終了後に２回目の測定（post）を実施した。着席したまま１０分間休憩した後、３回目の測定（rest）を実施した。

（結果）
（１）ＶＡＳ
紅花チャの葉抽出物群（実線）（破線は、ブレンド茶群）において「全体的疲労感」「精神的疲労感」「身体的疲労感」「自覚的ストレス」「イライラ感」の低下傾向が見られ、「意欲」では休憩後の回復促進傾向が見られた（図８〜図１９）。

（２）唾液中の生化学的指標
クロモグラニンＡについては、紅花チャの葉抽出物にストレス負荷後における上昇を有意に抑制する効果が見られた。ｓ−ＩｇＡは対照群がストレス負荷後から休憩後も上昇したのに対し、紅花チャの葉抽出物ではストレス負荷後に上昇した後、休憩後に減少する傾向が見られた。コルチゾールについては、紅花チャの葉抽出物にストレス負荷後の上昇を抑制する傾向が見られた。セロトニンでは、紅花チャの葉抽出物においてストレス負荷後に上昇した後、休憩後に減少する傾向が見られた（図２０〜図２７）。

（実施例３ 紅花チャの葉抽出物に含まれるアントシアニンとカテキン類の相乗効果（動物試験））
（試験方法）
６週齢のＢＡＬＢ／ｃ雄性マウスを用いて検討した。１週間予備飼育後、７週齢の時点で紅花チャの葉抽出物、やぶきた茶、ビルベリーエキス、カシスエキスを各素材の総アントシアニン量（３４μｇ／匹）若しくは総カテキン量（２．６ｍｇ／匹）が同量となるように調製し、１匹当たり１０ｍｌ／ｋｇを経口投与した。投与３０分後よりマウスを３０ｍｌの注射用シリンジ内に閉じ込めるストレスを１時間負荷し、直後に採血を行い血漿中のＬＤＨ濃度を測定した。

（結果）
下記表５に示す通り、対照群と比較して、やぶきた茶、ビルベリーエキス、カシスエキス投与群では、有意ではないもののストレス負荷によるLDH上昇を抑制した。さらに紅花チャの葉抽出物投与群では、対照群と比較して有意に抑制され、アントシアニンとカテキン類の相乗効果が確認された。

医薬品に使用されるブルーベリーエキスにはヨーロッパ野生種のビルベリー果実が利用され、アントシアニン含量２５％が標準規格とされている。１日の推奨量は５０〜６００ｍｇであり、代表的な医薬品ＴＥＧＥＮＳは１カプセルに８０ｍｇを配合し１日目安量を１６０−３２０ｍｇとしている。これをアントシアニン含量に換算すると４０−８０ｍｇとなる。紅花チャの葉抽出物を用いたヒト試験においては、ＴＥＧＥＮＳの１日目安量の１０から２０分の１にあたるアントシアニン３．４ｍｇとカテキン類２６０ｍｇの単回摂取で眼精疲労軽減効果および精神疲労軽減効果が得られており（実施例１）、ヒトにおいてもアントシアニンとカテキン類の相乗効果が確認された。容量的には、ＴＥＧＥＮＳより少ない量で効果が得られたのは、カテキン類との相乗作用であると考えている。

（実施例４ 抽出溶媒のｐＨが紅花チャの葉より抽出されるアントシアニン量に与える影響）
紅花チャの葉の重量に対する５０倍の蒸留水（ｐＨ３．０、５．０、６．５に調製）を９０℃まで加熱させてから、紅花チャの葉を投入し、９０℃に保った状態で７分間抽出した。葉をろ過により除去してから、冷水で室温（２０℃〜２５℃）まで冷却し、ろ紙で細かい残渣や澱成分を除去した。得られた抽出物溶液を１％トリフルオロ酢酸溶液で１０倍希釈した後、ＯＤ５２０ｎｍとＯＤ７００ｎｍの吸光度を測定し、アントシアニン含量を算出した。結果は下記表６に示すとおり、いずれのｐＨにおいてもアントシアニンが効率よく抽出されることが示された。

ＶＤＴクレペリンテスト正誤判定試験である。 ＶＡＳ（Visual Analog Scle）である。 目の乾きのスコアを示すグラフである。 頭の重みのスコアを示すグラフである。 唾液クロモグラニンＡ濃度を示すグラフである。 眼精疲労軽減効果を実感したお茶の回答数を示すグラフである。 Eggman Face Scale及びＶＡＳである。 全体的疲労感のスコアを示すグラフである。 全体的疲労感の変動率を示すグラフである。 精神的疲労感のスコアを示すグラフである。 精神的疲労感の変動率を示すグラフである。 身体的疲労感のスコアを示すグラフである。 身体的疲労感の変動率を示すグラフである。 自覚的ストレスのスコアを示すグラフである。 自覚的ストレスの変動率を示すグラフである。 意欲のスコアを示すグラフである。 意欲の変動率を示すグラフである。 イライラ感のスコアを示すグラフである。 イライラ感の変動率を示すグラフである。 セロトニンの濃度を示すグラフである。 セロトニンの変動率を示すグラフである。 クロモグラニンＡの濃度を示すグラフである。 クロモグラニンＡの変動率を示すグラフである。 ｓ−ＩｇＡの濃度を示すグラフである。 ｓ−ＩｇＡの変動率を示すグラフである。 コルチゾールの濃度を示すグラフである。 コルチゾールの変動率を示すグラフである。

Claims (4)

1. ツバキ目ツバキ科ツバキ属の紅花チャ、Ｆ９５１８１（茶中間母本農６号）及びそれらの後代から選ばれる少なくとも１種のチャの葉抽出物を含有する眼精疲労予防又は回復剤。
2. ツバキ目ツバキ科ツバキ属の紅花チャ、Ｆ９５１８１（茶中間母本農６号）及びそれらの後代から選ばれる少なくとも１種のチャの葉抽出物を含有する精神疲労予防又は回復剤。
3. 葉抽出物が５０〜１００℃の温度で水若しくは親水性溶媒又はこれらの混合物を用いて前記チャから抽出したものである、請求項１又は２記載の予防又は回復剤。
4. 葉抽出物がｐＨ１．５〜６．５で前記チャから抽出したものである、請求項１〜３のいずれか１項記載の予防又は回復剤。

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