TW201444831A - 作爲突變ｉｄｈ抑制劑之３－嘧啶－４－基－□唑啶－２－酮 - Google Patents

作爲突變ｉｄｈ抑制劑之３－嘧啶－４－基－□唑啶－２－酮 Download PDF

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Young-Shin Cho
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Martin Sendzik
Cynthia Shafer
Michael David Shultz
James Sutton
Ya-Ping Wang
Qian Zhao
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Abstract

本發明係關於式(I)：□或其醫藥學上可接受之鹽，其中R1、R2a、R2b及R3-R7係在本文中定義。本發明亦關於含有式(I)化合物之組合物及該等化合物用於抑制具有新生形活性之突變IDH蛋白質的用途。本發明進一步關於式(I)化合物用於治療與該等突變IDH蛋白質有關之疾病或病症之用途，該等疾病或病症包括(但不限於)細胞增殖病症，諸如癌症。

Description

作為突變IDH抑制劑之3-嘧啶-4-基- 唑啶-2-酮
本發明係關於新穎的3-嘧啶基-4-基-唑啶-2-酮化合物、含有此等化合物之組合物、該等化合物在抑制具有新生形活性之突變IDH蛋白質及治療與該等突變IDH蛋白質有關之疾病或病症(包括(但不限於)細胞增殖病症，諸如癌症)中的用途。
異檸檬酸脫氫酶(IDH)為在細胞代謝中發現之關鍵酶家族。其為NADP+/NAD+及酶類別EC 1.1.1.42之金屬依賴性氧化還原酶。野生型蛋白質催化異檸檬酸之氧化脫羧基作用，使其成為α-酮戊二酸，在此過程中產生二氧化碳及NADPH/NADH。亦已知其使草醯琥珀酸轉化為α-酮戊二酸。已在多種癌症類型中發現IDH1(胞內)及IDH2(線粒體)中之突變，包括(但不限於)神經膠質瘤、多形性膠質母細胞瘤、副神經節瘤、幕上原始神經外胚層腫瘤、急性骨髓白血病(AML)、前列腺癌、甲狀腺癌、結腸癌、軟骨肉瘤、膽管癌、周邊T細胞淋巴瘤及黑素瘤(參見L.Dang等人，Trends Mol.Med.,2010,16,387；T.Shibata等人，Am.J.Pathol.,2011,178(3),1395；Gaal等人，J.Clin.Endocrinol.Metab.2010；Hayden等人，Cell Cycle,2009；Balss等人，Acta Neuropathol.,2008)。已在活性位點中之關鍵殘基處或其附近發現突變：G97D、R100、R132、H133Q及A134D(IDH1)，以及R140及 R172(IDH2)(參見L.Dang等人，Nature,2009,462,739；L.Sellner等人，Eur.J.Haematol.,2011,85,457)。
已證實IDH之此等突變形式具有新生形活性(亦稱為功能活性之增益)，其使α-酮戊二酸還原為2-羥基戊二酸(2-HG)(參見P.S.Ward等人，CancerCell,2010,17,225)。通常，2-HG之產生為對映特異性，引起產生D-對映異構體(亦稱為R對映異構體或R-2-HG)。正常細胞具有低原生2-HG含量，而具有IDH1或IDH2中之此等突變之細胞展示顯著升高之2-HG含量。已在具有該等突變之腫瘤中偵測到高2-HG含量。舉例而言，已在具有突變IDH(含有AML)之患者之血漿中偵測到高2-HG含量(參見S.Gross等人，J.Exp.Med.,2010,207(2),339)。高2-HG含量與腫瘤形成高度相關。
突變IDH2亦與罕見的神經代謝病症II型D-2-羥基戊二酸尿(II型D-2-HGA)有關。在15名罹患II型D-2-HGA之患者中之IDH2中的R140處發現生殖系突變。罹患此病症之患者亦一致地在其尿液、血漿及腦脊髓液中具有增加之D-2-HG含量(參見Kranendijk,M.等人，Science,2010,330,336)。最終，已證實罹患奧利埃氏病(Ollier Disease)及馬夫西氏症候群(Mafucci Syndrome)(兩種罕見的易引發軟骨瘤之病症)之患者對IDH1及IDH2突變具有體細胞鑲嵌性且呈現高D-2-HG含量(參見Amary等人，Nature Genetics,2011及Pansuriya等人，Nature Genetics,2011)。
因此，需要具有新生形活性之突變IDH蛋白質之小分子抑制劑，其係用於治療與此等蛋白質有關之疾病及病症。
在一個態樣中，本發明提供式(I)化合物
或其醫藥學上可接受之鹽，其中R1、R2a、R2b及R3-R7係如下文中定義。
在第二態樣中，本發明提供醫藥組合物，其包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接受之載劑或賦形劑。
在第三態樣中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其係作為具有新生形活性(諸如使α-酮戊二酸還原為2-羥基戊二酸(2-HG新生形活性))之突變IDH蛋白質之抑制劑。本發明適當地提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其係作為具有新生形活性(諸如2-HG新生形活性)之突變IDH1及/或具有新生形活性(諸如2-HG新生形活性)之突變IDH2之抑制劑。本發明亦提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其係用作在殘基97、100或132處具有突變之IDH1(例如G97D、R100Q、R132H、R132C、R132S、R132G、R132L及R132V)之抑制劑；及/或在殘基140或172處具有突變之IDH2(例如R172K、R172M、R172S、R172G及R172W)之IDH2之抑制劑。
在第四態樣中，本發明提供治療與具有新生形活性之突變IDH蛋白質有關之疾病或病症的方法，其包含投與有需要之個體有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一個實施例中，疾病或病症為細胞增殖病症，諸如癌症。在另一實施例中，癌症為腦癌，諸如神經膠質瘤、多形性膠質母細胞瘤、副神經節瘤及幕上原始神經外胚層腫 瘤(pNET)；白血病，諸如急性骨髓白血病(AML)、脊髓發育不良症候群及慢性骨髓性白血病(CML)；皮膚癌，包括黑素瘤；前列腺癌；甲狀腺癌；結腸癌；肺癌；肉瘤，包括中心性軟骨肉瘤、中心性及骨膜軟骨瘤；及纖維肉瘤。在另一實施例中，疾病或病症為D-2-羥基戊二酸尿。
在第五態樣中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽與另一種治療劑之組合。
本發明之此等及其他態樣進一步描述於本發明之以下詳細描述中。
本發明係關於式(I)化合物
其中：R1為氫、甲基或乙基；R2a為氫、甲基或C1-3鹵烷基；R2b為OH、鹵基、C1-6烷氧基、C1-3鹵烷基、NH2、NH(CH3)或N(CH3)2；R3及R4各自獨立地為氫、甲基或乙基或R3及R4結合在一起形成環丙基、環丁基或氧雜環丁烷基； R5及R6各自獨立地為氫、氘、鹵基、-C(O)OCH3、C1-3烷基或C1-3鹵烷基；R7為 其中：環A為具有一至三個氮原子之6員雜芳基環；環B為具有一至四個各自獨立地選自由N、O及S組成之群之雜原子的5員雜芳基環；X為N或CH；各R8獨立地為氫、鹵基、C1-3烷基、C1-3鹵烷基、C1-3烷氧基或C1-3鹵烷氧基；n為1或2；R9為氫、鹵基、C1-3鹵烷基、視情況經取代之C1-6烷基、視情況經取代之C3-6環烷基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之5或6員雜環、視情況經取代之雜芳基、-OR9a、-SO2R9a、-C(O)NHR9a、CH2R9b或CHCH3R9b，限制條件為當X為N時，R9為氫、C1-3鹵烷基、 視情況經取代之C1-6烷基、視情況經取代之C3-6環烷基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜芳基、-SO2R9a或-C(O)NHR9a，其中：該C1-6烷基視情況經一至三個各自獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：OH、苯基及苯氧基，及該C3-6環烷基、5或6員雜環、芳基及雜芳基各自視情況經一至三個各自獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、-NRR、C1-6烷基、C1-6鹵烷基、C1-3烷氧基及C1-3鹵烷氧基；R9a為視情況經取代之C1-6烷基、C1-6鹵烷基、視情況經取代之C3-6環烷基、視情況經取代之苯基或視情況經取代之雜環，其中：該C1-6烷基視情況經一個C3-6環烷基取代，該C3-6環烷基及雜環各自視情況經一至三個各自獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：羥基、CH2OH、-NRR、氰基、C1-3烷基、C1-3鹵烷基及C1-3烷氧基；及該苯基視情況經一至三個各自獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、-NRR、C1-6烷基、C1-6鹵烷基、C1-3烷氧基及C1-3鹵烷氧基；R9b為視情況經取代之C3-6環烷基、視情況經取代之苯基或視情況經取代之雜環，該C3-6環烷基及雜環各自視情況經一至四個各自獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：羥基、CH2OH、-NRR、-NRC(O)CH3、4至6員雜環、氰基、鹵基、C1-3烷基、C1-3鹵烷基及C1-3烷氧基，及該苯基視情況經一至三個各自獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、C1-6烷基、C1-6鹵烷基、C1-3烷氧基及C1-3鹵烷氧基；及各R獨立地選自由以下組成之群：H、C1-3烷基及C3-6環烷基。
「烷基」係指具有指定數目之碳原子的單價飽和烴鏈。舉例而言，C1-6烷基係指具有1至6個碳原子之烷基。烷基可視情況經一或多個如式(I)中定義之取代基取代。烷基可為直鏈或分支鏈。代表性分支鏈烷基具有一個、兩個或三個分支鏈。烷基之實例包括(但不限於)甲基、乙基、丙基(正丙基及異丙基)、丁基(正丁基、異丁基、第二丁基及第三丁基)、戊基(正戊基、異戊基及新戊基)及己基。
「烷氧基」係指經由氧橋連接之任何烷基部分(亦即-O-C1-3烷基，其中C1-3烷基係如本文中定義)。該等基團之實例包括(但不限於)甲氧基、乙氧基及丙氧基。
「芳基」係指具有芳環之烴環系統。芳基為單環系統或雙環系統。單環芳基環係指苯基。雙環芳基環係指萘基及其中苯基與如本文中定義之C5-7環烷基或C5-7環烯基稠合之環。芳基可視情況經一或多個如式(I)中定義之取代基取代。
「環烷基」係指具有指定數目之碳原子的飽和烴環系統。環烷基為單環或雙環系統。舉例而言，C3-6環烷基係指具有3至6個碳原子之環烷基。環烷基可視情況經一或多個如式(I)中定義之取代基取代。環烷基之實例包括(但不限於)環丙基、環丁基、環戊基及環己基。
「環烯基」係指具有指定數目之碳原子且在環內具有碳-碳雙鍵之不飽和烴環系統。舉例而言，C5-7環烯基係指具有5至7個碳原子之環烯基。在某些實施例中，環烯基在環內具有一個碳-碳雙鍵。在其他實施例中，環烯基在環內具有一個以上碳-碳雙鍵。環烯基環不為芳族。環烯基可視情況經一或多個如式(I)中定義之取代基取代。
「鹵基」係指鹵素基團氟、氯、溴及碘。
「鹵烷基」係指其中烷基內至少一個連接至碳原子之氫原子由鹵基置換之烷基。鹵基取代基之數目(但不限於)1、2、3、4、5或6個取代基。鹵烷基包括(但不限於)單氟甲基、二氟乙基及三氟甲基。
「鹵烷氧基」係指經由氧橋連接之鹵烷基部分(亦即-O-C1-3鹵烷基，其中C1-3鹵烷基係如本文中定義)。鹵烷氧基之實例為三氟甲氧基。
「雜芳基」係指含有1至5個雜原子之芳環系統。含有一個以上雜原子之雜芳基可含有不同雜原子。雜芳基可視情況經一或多個如式(I)中定義之取代基取代。雜芳基基團為單環系統或稠合雙環系統。單環雜芳基具有5至6個環原子。雙環雜芳基環具有8至10個成員原子。雙環雜芳基環包括其中雜芳基環與苯環稠合之環系統。雜芳基包括(但不限於)吡咯基、吡唑基、咪唑基、唑基、異唑基、二唑基(包括1,3,4-二唑基及1,2,4-二唑基)、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基、呋喃基、呋咕基、噻吩基、三唑基、吡啶基(包括2-吡啶基、3-吡啶基及4-吡啶基)、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基、三嗪基、四嗪基、四唑基、茚滿基、異吲哚基、吲哚嗪基、吲唑基、嘌呤基、喹啉基、異喹啉基、喹喏啉基、喹唑啉基、苯并咪唑基、苯并哌喃基、苯并哌喃基、苯并唑基、苯并異唑基、苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并噻吩基、啶基、1H-吡咯并[2,3-b]吡啶基、四唑并[1,5-a]吡啶基、咪唑并[2,1-b][1,3,4]噻二唑基及其類似基團。
「雜原子」係指氮、氧或硫原子。
「雜環」係指含有1至4個雜原子之3至11員飽和或不飽和單環或雙環。雜環系統不為芳族。含有一個以上雜原子之雜環基團可含有不同雜原子。雜環包括其中硫原子經氧化以形成SO或SO2之環系統。雜環基團可視情況經一或多個如式(I)中定義之取代基取代。雜環基團為單環、螺或稠合或橋聯雙環系統。單環雜環具有3至7個環原子。單環雜環基團之實例包括氧雜環丁烷基、四氫呋喃基、二氫呋喃基、1,4-二烷基、嗎啉基、1,4-二噻烷基、哌嗪基、哌啶基、1,3-二氧戊環基、咪唑啶基、咪唑啉基、吡咯啉基、吡咯啶基、四氫哌喃基、二氫 哌喃基、氧硫雜環戊烷基、二硫基、1,3-二烷基、1,3-二噻烷基、氧硫雜環己烷基、硫嗎啉基、1,1-二氧化四氫硫哌喃、1,4-二氮雜環庚烷基及其類似基團。稠合雜環系統具有8至11個環原子且包括其中雜環與苯環、雜芳基環或另一個雜環稠合之基團。稠合雜環之實例包括2,3-二氫苯并[b][1,4]二氧雜環己烯基、苯并[1,3]二氧基、八氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪基、八氫-吡啶并[1,2-a]吡嗪基、八氫-吡咯并[3,4-c]吡咯基、5,6,7,8-四氫[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪基、5,6,7,8-四氫-咪唑并[1,2-a]吡嗪基及其類似基團。橋聯雜環基團之實例包括3,8-二氮雜-雙環[3.2.1]辛烷基、3,8-二氮雜-雙環[4.2.0]辛烷基及其類似基團。螺雜環基團之實例包括4,7-二氮雜-螺[2.5]辛烷基及其類似基團。
「5-6員雜環」係指如上文所定義之雜環基團，其具有5或6個環原子且含有1至4個雜原子。
「視情況經取代」指示基團(諸如烷基、環烷基、雜芳基、雜環、苯基及苯甲基)可未經取代或基團可經一或多個如式(I)中定義之取代基取代。
「醫藥學上可接受」意謂適用於醫藥學用途之化合物。適用於藥品中之本發明化合物之鹽及溶劑合物(例如水合物及鹽之水合物)為在相對離子或相關溶劑中為醫藥學上可接受之鹽及溶劑合物。然而，具有非醫藥學上可接受之相對離子或相關溶劑之鹽及溶劑合物亦屬於本發明之範疇內，例如用作中間物以製備本發明之其他化合物及其醫藥學上可接受之醫藥學上可接受之鹽及溶劑合物。
關於基團(諸如烷基、苯基、苯甲基、雜芳基及雜環)之「經取代」指示連接至基團內之一個原子的一或多個氫原子由選自所定義之取代基群的取代基置換。應理解，術語「經取代」包括該取代符合經取代之原子及取代基之所允許的原子價且該取代可產生穩定化合物(亦即不會自發地發生轉型(例如藉由水解、重排、環化或消除)且對來 自反應混合物之殘餘分離物充分穩定的化合物)之隱含條件。當陳述基團可含有一或多個取代基時，該基團內一或多個(在適當時)原子可經取代。此外，基團內之單一原子可經一個以上取代基取代，只要該取代符合該原子之所允許之原子價即可。合適取代基係針對各經取代或視情況經取代之基團定義。
熟習此項技術者應瞭解，可製備式(I)化合物之鹽，包括醫藥學上可接受之鹽。此等鹽可在化合物之最終分離及純化期間現場製備，或藉由使呈游離酸或游離鹼形式之經純化之化合物分別單獨與合適鹼或酸反應來製備。
可與無機酸及有機酸形成醫藥學上可接受之酸加成鹽，例如乙酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、溴化物/氫溴酸鹽、碳酸氫鹽/碳酸鹽、硫酸氫鹽/硫酸鹽、樟腦磺酸鹽、氯化物/鹽酸鹽、氯茶鹼鹽、檸檬酸鹽、乙二磺酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、葡糖醛酸鹽、馬尿酸鹽、氫碘酸鹽/碘化物、羥乙基磺酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、月桂基硫酸鹽、蘋果酸鹽、順丁烯二酸鹽、丙二酸鹽、杏仁酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、萘甲酸鹽、萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、十八酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸酯、雙羥萘酸鹽、磷酸鹽/磷酸氫鹽/二氫磷酸鹽、多聚半乳糖醛酸鹽、丙酸鹽、硬脂酸鹽、丁二酸鹽、磺基水楊酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽及三氟乙酸鹽。
可用於產生鹽之無機酸包括例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸及其類似物。
可用於產生鹽之有機酸包括例如乙酸、丙酸、乙醇酸、草酸、順丁烯二酸、丙二酸、丁二酸、反丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、扁桃酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、甲苯磺酸、磺基水楊酸及其類似物。醫藥學上可接受之鹼加成鹽可由無機鹼及有機鹼形成。
可用於產生鹽之無機鹼包括例如銨鹽及來自週期表之第I行至第XII行之金屬。在某些實施例中，鹽係來源於鈉、鉀、銨、鈣、鎂、鐵、銀、鋅及銅；尤其合適鹽包括銨鹽、鉀鹽、鈉鹽、鈣鹽及鎂鹽。
可用於產生鹽之有機鹼包括例如一級胺、二級胺及三級胺；經取代之胺，包括天然存在之經取代之胺；環胺；鹼離子交換樹脂及其類似物。某些有機胺包括異丙胺、苄星青黴素(benzathine)、膽茶鹼、二乙醇胺、二乙胺、離胺酸、葡甲胺、哌嗪及緩血酸胺。
可藉由習知化學方法自鹼性或酸性部分合成本發明之醫藥學上可接受之鹽。通常，該等鹽可藉由使此等化合物之游離酸形式與化學計量之量的適當鹼(諸如Na、Ca、Mg或K之氫氧化物、碳酸鹽、碳酸氫鹽或其類似物)反應或藉由使此等化合物之游離鹼形式與化學計量之量的適當酸反應來製備。該等反應典型地在水或有機溶劑或其兩者之混合物中進行。通常，在可行情況下，需要使用非水性介質，如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈。其他適當鹽之列表可見於例如「Remington's Pharmaceutical Sciences」，第20版，Mack Publishing Company,Easton,Pa.,(1985)及Stahl及Wermuth,「Handbook of Pharmaceutical Salts：Properties,Selection,and Use」(Wiley-VCH,Weinheim,Germany,2002)中。
亦可製備式(I)化合物之溶劑合物，包括醫藥學上可接受之溶劑合物。「溶劑合物」係指由溶質及溶劑形成之可變化學計量之複合物。為達成本發明之目的，該等溶劑可不干擾溶質之生物活性。合適溶劑之實例包括(但不限於)水、MeOH、EtOH及AcOH。將其中水為溶劑分子之溶劑合物典型地稱為水合物。水合物包括含有化學計量之量的水的組合物，以及含有可變量之水的組合物。
式(I)化合物(包括其鹽及溶劑合物)可以結晶形式、非結晶形式或其混合物形式存在。化合物或其鹽或溶劑合物亦可呈現多形現象，亦 即以不同結晶形式存在之能力。此等不同結晶形式典型地稱為「多晶型」。多晶型具有相同化學組成，但在封裝、幾何排列及結晶固體狀態之其他說明性性質方面不同。因此，多晶型可具有不同物理性質，諸如形狀、密度、硬度、變形性、穩定性及溶解性。多晶型典型地呈現不同熔點、IR光譜及X射線粉末繞射圖案，其均可用於鑑別。一般熟習此項技術者應瞭解，可例如藉由改變或調節式(I)化合物之結晶/再結晶中所用條件來製備不同多晶型。
本發明亦包括式(I)化合物之各種異構體。「異構體」係指具有相同組成及分子量，但在物理及/或化學性質方面不同的化合物。結構差異可表現在構造(幾何異構體)或使平面偏振光旋轉之能力(立體異構體)方面。關於立體異構體，式(I)化合物可具有一或多個不對稱碳原子且可以外消旋體、外消旋混合物及個別對映異構體或非對映異構體形式存在。除非另有特定說明，否則本發明包括所有該等異構形式，包括其混合物。若化合物含有雙鍵，則取代基可為E或Z組態。若化合物含有經雙取代之環烷基，則環烷基取代基可具有順式或反式組態。亦意欲包括所有互變異構形式。
式(I)化合物之任何不對稱原子(例如碳或其類似物)可以外消旋或對映異構性增濃形式存在，例如(R)-、(S)-或(R,S)-組態。在某些實施例中，(R)-或(S)-組態中各不對稱原子具有至少50%對映體過量，至少60%對映體過量，至少70%對映體過量，至少80%對映體過量，至少90%對映體過量，至少95%對映體過量或至少99%對映體過量。若可能，具有不飽和雙鍵之原子處之取代基可呈順-(Z)形式或反-(E)形式。
因此，如本文中所用，式(I)化合物可呈可能異構體、旋轉異構體、滯轉異構體、互變異構體或其混合物中之一者之形式，例如呈實質上純幾何(順式或反式)異構體、非對映異構體、光學異構體、外消 旋體或其混合物形式。
可基於成分之物理化學差異將任何所得異構體混合物分離為純或實質上純幾何或光學異構體、非對映異構體、外消旋體，例如藉由層析及/或分步結晶。
可藉由已知方法將任何所得最終產物或中間物之外消旋體解析為光學異構體，例如藉由分離用光活性酸或鹼獲得之其非對映異構鹽且釋放光活性酸性或鹼性化合物。詳言之，因此可使用鹼性部分將本發明化合物解析為其光學異構體，例如藉由對用光活性酸(例如酒石酸、二苯甲醯基酒石酸、二乙醯基酒石酸、二-O,O'-對甲苯甲醯基酒石酸、扁桃酸、蘋果酸或樟腦-10-磺酸)形成之鹽進行分步結晶。亦可使用對掌性吸附劑藉由對掌性層析(例如高壓液相層析(HPLC))來解析外消旋產物。
本發明包括式(I)化合物之未經標記之形式以及經同位素標記之形式。同位素標記化合物具有由本文中提供之化學式描繪之結構，不同之處在於一或多個原子由具有所選原子質量或質量數之原子置換。可併入本發明化合物中之同位素之實例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟及氯之同位素，諸如分別為2H、3H、11C、13C、14C、15N、18F、31P、32P、35S、36Cl、125I。如本文中定義，本發明包括各種同位素標記化合物，例如其中存在諸如3H及14C之放射性同位素或其中存在諸如2H及13C之非放射性同位素的化合物。該等同位素標記化合物適用於代謝研究(使用14C)；反應動力學研究(使用例如2H或3H)；偵測或成像技術，諸如電子發射斷層掃描(PET)或單光子發射電腦斷層攝影(SPECT)，包括藥物或受質組織分佈分析法；或患者之放射性治療。詳言之，18F或經標記化合物可尤其適用於PET或SPECT研究。通常可使用合適同位素標記試劑代替先前使用之非標記試劑，藉由熟習此項技術者已知的習知技術或與隨附實例及製備方法中所描述類似之方法 製備同位素標記之式(I)化合物。
此外，以重同位素，尤其氘(亦即2H或D)進行之取代可產生由較高代謝穩定性引起的某些治療優點，例如活體內半衰期增加或所需劑量降低或治療指數改良。應理解，在此情形下，氘視為式(I)化合物之取代基。該重同位素(特定言之氘)之濃度可由同位素增濃因數定義。如本文中使用之術語「同位素增濃因數」意謂指定同位素之同位素豐度與天然豐度之間的比率。若本發明化合物中之取代基表示氘，則該化合物之各指定氘原子之同位素增濃因數為至少3500(各指定氘原子處52.5%氘併入)、至少4000(60%氘併入)、至少4500(67.5%氘併入)、至少5000(75%氘併入)、至少5500(82.5%氘併入)、至少6000(90%氘併入)、至少6333.3(95%氘併入)、至少6466.7(97%氘併入)、至少6600(99%氘併入)或至少6633.3(99.5%氘併入)。
代表性實施例
本文中描述本發明之各種實施例。應認識到，各實施例中指定之特徵可與其他指定特徵合併以提供其他實施例。
在本發明之一個實施例中，R1為氫。
在本發明之另一實施例中，R2a為氫或甲基。R2a宜為甲基。
在本發明之另一實施例中，R2b為OH、氟、甲氧基、第三丁氧基、CHF2、CF3、NH2或NH(CH3)。R2b宜為OH、氟或NH2。
在本發明之另一實施例中，R3及R4各為氫。
在本發明之另一實施例中，R5為氫或鹵基。R5宜為氫、氟或氯。R5更宜為氫或氟。
在本發明之另一實施例中，R6為氫、鹵基、甲基、CH2F、CHF2或CF3。R6宜為氫、氟、氯、甲基、CH2F、CHF2或CF3。R6更宜為氫或甲基。
在本發明之另一實施例中，R5為氫且R6為氫、鹵基、甲基、 CH2F、CHF2或CF3。適當的是，R5為氫且R6為氫、氟、氯、甲基、CH2F、CHF2或CF3。更適當的是，R5為氫且R6為氫或甲基。
在本發明之另一實施例中，R6為氫且R5為氫或鹵基。適當的是，R6為氫且R5為氫、氟或氯。更適當的是，R6為氫且R5為氫或氟。
在另一實施例中，R5及R6均為氫。
在另一實施例中，R7為
在另一實施例中，R7為
在另一實施例中，R8為氫、氟、氯或甲基且n為1。在另一實施例中，各R8獨立地為氫或氯且n為2。
在另一實施例中，R9為氫、鹵基、C1-3鹵烷基、視情況經取代之 C1-6烷基、視情況經取代之C3-6環烷基。R9宜為氫、鹵基、CF2H、CF3、CF2CH3、C(CH3)2F、視情況經一個選自由OH、苯基及苯氧基組成之群之取代基取代的C1-6烷基或視情況經一個選自由氰基、C1-3烷基及C1-3烷氧基組成之群之取代基取代的C3-6環烷基。R9宜為氫、鹵基、CF2H、CF3、CF2CH3、C(CH3)2F、視情況經一個選自由OH、苯基及苯氧基組成之群之取代基取代的C1-3烷基或視情況經一個選自由氰基、C1-3烷基及C1-3烷氧基組成之群之取代基取代的環丙基。
在另一實施例中，R9為視情況經一個或兩個各自獨立地選自由以下組成之群之取代基取代的苯基或2,3-二氫-1H-茚基：氟、氯、溴、氰基、甲氧基、CH2OH、C1-4烷基、C1-4鹵烷基及C1-3鹵烷氧基。
在另一實施例中，R9為視情況經一個或兩個各自獨立地選自由以下組成之群之取代基取代的苯基：氟、氯、溴、氰基、甲氧基、CH2OH、C1-4烷基、C1-4鹵烷基及C1-3鹵烷氧基。R9宜為視情況經一個或兩個各自獨立地選自由以下組成之群之取代基取代的苯基：氟、氯、溴、氰基、甲氧基、CH2OH、C1-4烷基、CF2H、CF3、C(CH3)2CF3、OCF3、-OCH2CF3及-OCHF2。R9宜為在對位經氯、氟、甲基、氰基CF3或異丙基取代之苯基。R9宜為在對位經氯、CF3或異丙基取代之苯基。
在另一實施例中，R9為視情況經取代之雜芳基。R9宜為視情況經取代之吡唑基、吡啶基、吲哚基或異喹啉基。R9宜為視情況經一個或兩個各自獨立地選自由以下組成之群之取代基取代的吡唑基或吡啶基：鹵基、C1-6烷基及C1-6鹵烷基，例如氟、甲基及CF3或C(CH3)2CF3。
在另一實施例中，R9為-OR9a，其中R9a為視情況經取代之C1-6烷基、C1-6鹵烷基、視情況經取代之苯基或視情況經取代之5或6員雜環。R9a宜為四氫呋喃基、CF3、CHF2、CHCF3、視情況經一個環丙基 取代之C1-6烷基或視情況經一個鹵基取代之苯基。
在另一實施例中，R9為-SO2R9a，其中R9a為C1-6烷基。
在另一實施例中，R9為-C(O)NHR9a，其中R9a為視情況經取代之C3-6環烷基。R9宜為-C(O)NHR9a，其中R9a為環戊基。
在另一實施例中，R9為CH2R9b，其中R9b為視情況經取代之雜環。R9宜為視情況經取代之5至6員雜環。R9b宜為哌啶基、哌嗪基或嗎啉基，其各自視情況經一至四個各自獨立地選自由以下組成之群之取代基取代：羥基、鹵基、CH2OH、-NRR、氰基、C1-3烷基、C1-3鹵烷基及C1-3烷氧基。R9b宜為哌啶基、哌嗪基或嗎啉基，其各自視情況經一至三個各自獨立地選自由以下組成之群之取代基取代：羥基、CH2OH、氟、NH2、N(CH3)2、NHCH3、甲基及CF3。
在本發明之另一實施例中，各R獨立地選自由以下組成之群：H、C1-3烷基。
本發明之另一實施例為式(II)化合物。
本發明之另一實施例為式(III)化合物，
其中R2b為OH、NH2或氟。
本發明之另一實施例為式(IV)化合物，
其中R2b為OH或NH2。R2b宜為OH。R2b宜為NH2。
本發明之另一實施例為式(IV)化合物，其中：R2b為OH；R5為氫或氟；R6為氫、氯、甲基或CH2F；R7為 R8為氫、甲基或氟；n為1或2；及R9為甲基環丙基、異丁氧基、視情況經一個或兩個各自獨立地選自由以下組成之群之取代基取代的苯基：氟、氯、溴、C1-4烷基、CF2H及CF3，或視情況經一個或兩個各自獨立地選自由以下組成之群之取代基取代的吡啶基：甲基、CF3及C(CH3)2CF3。適當的是，R5為氫且R6為氯、甲基或CH2F或R6為氫且R5為氟。適當的是，R5為氫且R6均為氫。
本發明之另一實施例為式(V)化合物。
本發明之另一實施例為式(V)化合物，其中：R5為氫或氟；R6為氫；R7為或R8為氫或甲基； n為1；及R9為視情況經一個氯取代之苯基。
本發明之另一實施例為式(VI)化合物
其中：R2b為氟；R5為氫或氟；R6為氫；R7為或R8為氫或甲基；n為1；及R9為視情況經一個氯取代之苯基；或其醫藥學上可接受之鹽。
本發明之較佳化合物包括：(R)-4-((R)-1-羥基(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-(((S)-1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)吡嗪-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮乙基)-3-(2-(((S)-1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)吡嗪-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)吡啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮； (R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-(((S)-1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)吡啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-(((S)-1-(6-(三氟甲基)-[2,3'-聯吡啶]-6'-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-(((S)-1-(4-甲基-2'-(三氟甲基)-[3,4'-聯吡啶]-6-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)異唑-3-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(3,4-二氯苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-(((S)-1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯-3-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(3-氯-5-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-{2-[((R)1-(3-(3-氟-4-甲基苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基]胺基}嘧啶-4-基}-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-{(S)-1-[3-(3,4-二氯-苯基)-異唑-5-基]-乙基胺基}-嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥基-乙基)-唑啶-2-酮； (R)-3-(2-{(S)-1-[3-(3,4-二氯-苯基)-異唑-5-基]-乙基胺基}-5-氟-嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥基-乙基)-唑啶-2-酮；(R)-3-(5-氟-2-(((S)-1-(3-(4-異丙基苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-(((S)-1-(3-(4-(三氟甲基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)-4-甲基唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)-4-甲基唑-2-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(4-(4-溴苯基)噻唑-2-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(3,4-二氯苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-(((S)-1-(4-甲基-5-(2-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)吡啶-4-基)噻唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(4R)-3-(5-氟-2-(((S)-1-(4-甲基-5-(2-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)吡啶-4-基)噻唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)唑-2-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4- 基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)-6-(氟甲基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)異唑-3-基)乙基)胺基)-6-甲基嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)-6-甲基嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)-6-甲基嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-(二氟甲基)苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-((S)-1-(2-氟-4-(1-甲基環丙基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(6-氯-2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(2,5-二氟-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(5-氟-2-(((S)-1-(2-氟-4-異丁氧基苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(2-氟-4-異丁氧基苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4- ((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(3-(3-(第三丁基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(6-氯-2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-甲氧基乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-甲氧基乙基)唑啶-2-酮；(S)-4-((R)-1-胺基乙基)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-氟乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)異唑-3-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-氟乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-2-甲基-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮；(R)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-(氟甲基)唑啶-2-酮；(S)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4- 基)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)唑啶-2-酮；(R)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(2-(((S)-1-(4-甲基-2'-(三氟甲基)-[3,4'-聯吡啶]-6-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(R)-3-(5-氟-2-(((S)-1-(4-甲基-2'-(三氟甲基)-[3,4'-聯吡啶]-6-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(3-氯-4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-(氟甲基)唑啶-2-酮；及(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)唑-2-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-(氟甲基)唑啶-2-酮。
發現本發明之某些化合物具有改良之臨床前性質。舉例而言，發現本發明之某些化合物在生化及/或細胞活性分析法中具有針對mIDH1(例如IDH R132H及/或R132C)之持續效能，而同時在活體外吸收、分散、代謝及排泄(ADME)性質方面得到改良。舉例而言，發現本發明之某些化合物在大鼠及/或小鼠及/或人類活體外肝微粒體穩定性分析法中具有降低之清除率。在肝微粒體存在下之穩定性為重要的，因為其可預示活體內清除率，且因此亦預示化合物在人體中是否將具有足以實現所需藥理學反應的全身暴露概況。較低清除率(亦即化合物在活體外在肝微粒體存在下更穩定)表明化合物更可能在人類中具有足夠全身暴露。
一般合成程序
可藉由多種方法製備本發明化合物，包括標準化學過程。合適合成途徑描繪於下文提供之流程中。
可由如以下合成流程中部分闡述之有機合成技術中已知的方法製備式(I)化合物。在下文描述之流程中，應良好理解，根據一般原理或化學性質視需要使用敏感性或反應性基團之保護基。根據標準有機合成方法操作保護基(T.W.Greene及P.G.M.Wuts,「Protective Groups in Organic Synthesis」，第三版，Wiley,New York 1999)。使用熟習此項技術者易於顯而易見之方法在便利的化合物合成階段移除該等基團。選擇方法以及反應條件及其執行順序應符合式(I)化合物之製備方法。
熟習此項技術者將識別式(I)化合物中是否存在立構中心。因此，本發明包括兩種可能立體異構體，且不僅包括外消旋化合物，亦包括個別對映異構體及/或非對映異構體。當需要呈單一對映異構體或非對映異構體形式之化合物時，其可藉由立體特異性合成或藉由解析最終產物或任何便利中間物之解析獲得。可藉由此項技術中已知的任何適當方法實行最終產物、中間物或起始物質之解析。參見例如「Stereochemistry of Organic Compounds」,E.L.Eliel,S.H.Wilen及L.N.Mander(Wiley-Interscience,1994)。
本文中所描述之化合物可由可商購起始物質製成或使用已知有機、無機及/或酶促方法合成。
其中R2為CH2R2aR2b
可根據流程1之程序製備非市售胺基酸。使酮1轉化為相應咪唑啶-2,4-二酮2，接著水解得到胺基酸3。
流程2.
當胺基醇(唑啶酮之前驅體)不可商購時，其可根據流程2之程序自胺基酸3製備。當R3=R4時，用適當格林納試劑(Grignard reagent)處理受保護之胺基酯5，得到受保護之胺基醇6，其經歷鹼性或酸性去保護步驟。當R3=R4時，使受保護之胺基酸8轉化為魏因勒布(Weinreb)醯胺9，其相繼用不同格林納試劑處理，得到受保護之胺基醇10。10之鹼性或酸性去保護產生11。用若干試劑實現將CO單元插入7或11中產生唑啶酮12，包括(但不限於)三光氣、Et2CO3或N-N'-羰基二咪唑，如流程2中所示。
其中R2為CH2R2aR2b
在NaH存在下使唑啶酮12與二鹵素-嘧啶13偶合，且所得14如流程3中所示在若干不同反應條件下用一級胺15處理以得到16。
其中R2為CH2R2aR2b
或者，中間物14可由如下方法製備：在諸如二異丙基乙基胺之鹼存在下使胺基醇11與二鹵素-嘧啶13偶合，產生中間物17，其可在諸如2,6-二甲基吡啶之鹼存在下用三光氣處理，產生中間物14。
其中R2為CH2R2aR2b
中間物14可在如流程3中所描述轉化為化合物16之前，在上經歷官能基R1、R2、R3或R4之改質。
使用方法
本發明化合物為具有新生形活性之突變IDH蛋白質之抑制劑且因此適用於治療與該等蛋白質有關之疾病或病症，包括(但不限於)細胞 增殖病症，諸如癌症。
具有新生形活性之突變IDH蛋白質之實例為突變IDH1及突變IDH2。與突變IDH1及突變IDH2有關之新生形活性能夠產生2-羥基戊二酸鹽(2-HG新生形活性)，特定言之，R-2-HG(R-2-HG新生形活性)。IDH1中與2-HG新生形活性(特定言之，R-2-HG新生形活性)有關之突變包括殘基97、100以及132處之突變，例如G97D、R100Q、R132H、R132C、R132S、R132G、R132L及R132V。IDH2中與2-HG新活性(特定言之，R-2-HG新生形活性)有關之突變包括殘基140及172處之突變，例如R140Q、R140G、R172K、R172M、R172S、R172G及R172W。
與具有新生形活性之突變IDH蛋白質有關之細胞增殖病症包括(但不限於)癌症。該等癌症之實例包括急性淋巴母細胞性白血病，成年人；急性淋巴母細胞性白血病，兒童期；急性骨髓白血病，成年人；腎上腺皮質癌；腎上腺皮質癌，兒童期；AIDS相關淋巴瘤；AIDS相關惡性腫瘤；肛門癌；星形細胞瘤，兒童期小腦；星形細胞瘤，兒童期大腦；膽管癌，肝外；膀胱癌；膀胱癌，兒童期；骨癌、骨肉/惡性纖維組織細胞瘤；腦幹神經膠質瘤，兒童期；腦腫瘤，成年人；腦腫瘤、腦幹神經膠質瘤，兒童期；腦腫瘤、小腦星形細胞瘤，兒童期；腦腫瘤、大腦星形細胞瘤/惡性神經膠質瘤，兒童期；腦腫瘤、室管膜瘤，兒童期；腦腫瘤、神經管胚細胞瘤，兒童期；腦腫瘤、幕上原始神經外胚層瘤，兒童期；腦腫瘤、視覺路徑及下丘腦神經膠質瘤，兒童期；腦腫瘤，兒童期(其他)；乳癌；乳癌及妊娠；乳癌，兒童期；乳癌，男性；支氣管腺瘤/類癌瘤，兒童期；類癌瘤腫瘤，兒童期；類癌瘤腫瘤，胃腸道；癌瘤，腎上腺皮質；癌瘤，小島細胞；未知原發癌瘤；中樞神經系統淋巴瘤，原發性；小腦星形細胞瘤，兒童期；大腦星形細胞瘤/惡性神經膠質瘤，兒童期；子宮頸 癌；兒童期癌症；慢性淋巴球性白血病；慢性骨髓性白血病；慢性脊髓增生病；腱鞘之透明細胞肉瘤；結腸癌；結腸直腸癌，兒童期；皮膚T細胞淋巴瘤；子宮內膜癌；室管膜瘤，兒童期；上皮癌，卵巢；食道癌；食道癌，兒童期；尤文氏家族腫瘤(Ewing's Family of Tumors)；顱外生殖細胞腫瘤，兒童期；性腺外生殖細胞腫瘤；肝外膽管癌症；眼癌，眼內黑素瘤；眼癌，視網膜母細胞瘤；膽囊癌；胃(胃部)癌；胃(胃部)癌，兒童期；胃腸道類癌腫瘤；生殖細胞腫瘤，顱外，兒童期；生殖細胞腫瘤，性腺外；生殖細胞腫瘤，卵巢；妊娠期滋養葉瘤；神經膠質瘤，兒童期腦幹；神經膠質瘤，兒童期視覺路徑及下丘腦；毛細胞白血病；頭頸癌；肝細胞(肝臟)癌症，成年人(原發性)；肝細胞(肝臟)癌症，兒童期(原發性)；霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin's Lymphoma)，成年人；霍奇金氏淋巴瘤，兒童期；妊娠期間之霍奇金氏淋巴瘤；咽下癌症；下丘腦及視覺路徑神經膠質瘤，兒童期；眼內黑素瘤；小島細胞癌瘤(內分泌胰臟)；卡堡氏肉瘤(Kaposi's Sarcoma)；腎癌；喉癌；喉癌，兒童期；白血病，急性淋巴母細胞，成年人；白血病，急性淋巴母細胞，兒童期；白血病，急性骨髓性，成年人；白血病，急性骨髓性，兒童期；白血病，慢性淋巴細胞性；白血病，慢性骨髓性；白血病，毛細胞；唇及口腔癌症；肝癌，成年人(原發性)；肝癌，兒童期(原發性)；肺癌，非小細胞；肺癌，小細胞；淋巴母細胞白血病，成年人急性；淋巴母細胞白血病，兒童期急性；淋巴球性白血病，慢性；淋巴瘤，AIDS相關；淋巴瘤，中樞神經系統(原發性)；淋巴瘤，皮膚T細胞；淋巴瘤，霍奇金氏，成年人；淋巴瘤，霍奇金氏，兒童期；淋巴瘤，妊娠期間霍奇金氏；淋巴瘤，非霍奇金氏，成年人；淋巴瘤，非霍奇金氏，兒童期；淋巴瘤，妊娠非霍奇金氏；淋巴瘤，原發性中樞神經系統；巨球蛋白血症，瓦爾登斯特倫氏(Waldenstrom's)；男性乳房癌症；惡性間皮 瘤，成年人；惡性間皮瘤，兒童期；惡性胸腺瘤；神經管胚細胞瘤，兒童期；黑素瘤；黑素瘤，眼內；梅克爾細胞癌(Merkel Cell Carcinoma)；中皮瘤，惡性；隱性原發性轉移性鱗狀頸部癌症；多發性內分泌瘤症候群，兒童期；多發性骨髓瘤/漿細胞贅生物；蕈樣肉芽腫病；脊髓發育不良症候群；粒細胞性白血病，慢性；骨髓白血病，兒童期急性；骨髓瘤，多發性；脊髓增生病，慢性；鼻腔及鼻竇癌症；鼻咽癌症；鼻咽癌症，兒童期；神經母細胞瘤；非霍奇金淋巴瘤，成年人；非霍奇金淋巴瘤，兒童期；妊娠期間之非霍奇金淋巴瘤；非小細胞肺癌；口腔癌，兒童期；口腔及唇癌；口咽癌症；骨肉瘤/骨惡性纖維組織細胞瘤；卵巢癌，兒童期；卵巢上皮癌；卵巢生殖細胞腫瘤；卵巢低度潛在惡性腫瘤；胰臟癌；胰臟癌，兒童期；胰臟癌，小島細胞；鼻竇及鼻腔癌症；甲狀旁腺癌症；陰莖癌；嗜鉻細胞瘤；松果體及幕上原始神經外胚層腫瘤，兒童期；垂體瘤；漿細胞贅生物/多發性骨髓瘤；胸膜肺胚細胞瘤；妊娠及乳癌；妊娠及霍奇金氏淋巴瘤；妊娠及非霍奇金淋巴瘤；原發性中樞神經系統淋巴瘤；原發性肝癌，成年人；原發性肝癌，兒童期；前列腺癌；直腸癌；腎細胞(腎)癌；腎細胞癌，兒童期；腎盂及輸尿管，移行細胞癌症；視網膜母細胞瘤；橫紋肌肉瘤，兒童期；唾液腺癌症；唾液腺癌症，兒童期；肉瘤，尤文氏家族腫瘤；肉瘤，卡堡氏；肉瘤(骨肉瘤)/骨惡性纖維組織細胞瘤；肉瘤，橫紋肌肉瘤，兒童期；肉瘤，軟組織，成年人；肉瘤，軟組織，兒童期；塞紮里症候群(Sezary Syndrome)；皮膚癌；皮膚癌，兒童期；皮膚癌(黑素瘤)；皮膚癌，梅克爾細胞(Merkel Cell)；小細胞肺癌；小腸癌；軟組織肉瘤，成年人；軟組織肉瘤，兒童期；隱性原發性鱗狀頸部癌症，轉移性；胃(胃部)癌症；胃(胃部)癌症，兒童期；幕上原始神經外胚層腫瘤，兒童期；T細胞淋巴瘤，皮膚性；睾丸癌；胸腺瘤，兒童期；胸腺瘤，惡性；甲狀腺 癌；甲狀腺癌，兒童期；腎盂及輸尿管之移行細胞癌症；滋養葉瘤，妊娠期；原發部位不明之癌症，兒童期；兒童期罕見癌症；輸尿管及腎盂，移行細胞癌症；尿道癌；子宮肉瘤；陰道癌；視覺路徑及下丘腦神經膠質瘤，兒童期；陰門癌；瓦爾登斯特倫氏巨集球蛋白血；及威耳姆斯氏瘤(Wilms' Tumor)。
在另一實施例中，與具有新生形活性之突變IDH蛋白質有關之癌症為腦癌，諸如飼肥星形細胞腫瘤(例如囊樣含毛星形細胞瘤、室管膜下巨細胞星形細胞瘤、彌漫性星形細胞瘤、多形態黃星形細胞瘤、多形性星形細胞瘤、星形細胞瘤、巨細胞神經膠母細胞瘤、神經膠母細胞瘤、繼發性神經膠母細胞瘤、原發性成年人神經膠母細胞瘤及原發性兒科神經膠母細胞瘤)；少突星形細胞腫瘤(例如少突膠質細胞，及多形性少突膠質細胞)；室管膜瘤(例如黏液性乳頭狀室管膜瘤，及多形性室管膜瘤)；神經管胚細胞瘤；原始神經外胚層腫瘤、神經鞘瘤、腦膜瘤、非典型腦膜瘤、多形性腦膜瘤；及垂體腺瘤。在另一實施例中，腦癌為神經膠質瘤、多形性膠質母細胞瘤、副神經節瘤或幕上幕上原始神經外胚層腫瘤(sPNET)。
在另一實施例中，與具有新生形活性之突變IDH蛋白質有關之癌症為白血病，諸如急性骨髓白血病(AML)、脊髓發育不良症候群(MDS)、慢性骨髓性白血病(CML)、骨髓及外骨髓增殖性贅生物(MPN)、MDS.MPN(包括慢性骨髓單核細胞性白血病、MDS AML後、MPN AML後、MDS/MPN AML後)、del(5q)相關高風險MDS或AML、急性期慢性骨髓性白血病、血管免疫胚細胞淋巴瘤及急性淋巴母細胞性白血病。
在另一實施例中，與具有新生形活性之突變IDH蛋白質有關之癌症為皮膚癌，包括黑素瘤。
在另一實施例中，與具有新生形活性之突變IDH蛋白質有關之癌 症為前列腺癌、甲狀腺癌、結腸癌或肺癌。
在另一實施例中，與具有新生形活性之突變IDH蛋白質有關之癌症為肉瘤，包括中樞軟骨肉瘤、中樞及骨膜軟骨瘤以及纖維肉瘤。
在另一實施例中，與具有新生形活性之突變IDH蛋白質有關之癌症為膽管癌。
另一種與具有R-2-HG新生形活性之突變IDH蛋白質有關之疾病或病症為D-2-羥基戊二酸尿。
另一種與具有R-2-HG新生形活性之突變IDH蛋白質有關之疾病或病症為奧立弗氏病(Oiller disease)及馬夫西氏症候群(Mafucci syndrome)。
如本文中所用，術語「新生形活性」係指獲得野生型蛋白質不具有或不乙有效程度呈現之新的蛋白質活性。舉例而言，與IDH1及IDH2之突變形式有關之新生形活性為使α-酮戊二酸還原為2-羥基戊二酸(亦即2-HG，特定言之，R-2-HG)之能力。IDH1及IDH2之野生型形式不具有使α-酮戊二酸還原為2-羥基戊二酸(亦即2-HG，特定言之，R-2-HG)之能力，或若其具有此能力，則其不產生大量(亦即有害或引起疾病)量之2-HG。
如本文中所用，術語「個體」係指動物。動物典型地為哺乳動物。個體亦係指例如靈長類動物(例如人類，男性或女性)、牛、羊、山羊、馬、犬、貓、兔、大鼠、小鼠、魚、鳥及其類似物。在某些實施例中，個體為靈長類動物。在其他實施例中，個體為人類。
如本文中所用，關於本發明化合物之術語「治療有效量」意謂足以治療個體之疾病或病狀，但在正確醫學判斷範疇內足夠低以避免嚴重副作用(合理的利益/風險比率)之化合物的量。化合物之治療有效量將隨所選特定化合物(例如考慮化合物之)效能、功效及半衰期)；所選投藥途徑；所治療之病狀；所治療之病狀的嚴重性；所治療之個體 的年齡、體型、體重及物理狀態；所治療之個體的病史；治療持續時間；並行療法之性質；所需治療作用；及類似因素而變化且通常可由熟練技師確定。
如本文中使用，在一個實施例中，術語「治療」係指改善疾病或病症(亦即減緩或阻滯或降低疾病或其至少一種臨床症狀之發展)。在另一實施例中，「治療」係指緩和或改善至少一項物理參數，包括患者不可辨別之物理參數。在另一實施例中，「治療」係指身體上(例如可辨別症狀之穩定)、生理上(例如身體參數之穩定)或在兩者上調節疾病或病症。在另一實施例中，「治療」係指預防或延緩疾病或病症之發作或發展或進程。
如本文中使用，若個體將自該治療在生物學、醫學或生活品質上獲益，則該個體「需要」該治療。
本發明化合物可由任何合適途徑(包括口服及非經腸投藥)投與。非經腸投藥係典型地藉由注射或輸注進行且包括靜脈內、肌肉內及皮下注射或輸注。
本發明化合物可一次性投與或根據給藥方案投與，其中在一段時間內以不同時間間隔進行多次給藥。舉例而言，每天可給藥一次、兩次、三次或四次。可進行給藥直至獲得所需治療作用或永久進行以保持所需治療作用。本發明化合物之合適給藥方案視該化合物之藥物動力學性質而定，諸如可由熟練技師確定之吸收、分散及半衰期。此外，本發明化合物之合適給藥方案(包括所投與之該方案之持續時間)視所治療之疾病或病狀、疾病或病狀之嚴重性、所治療之個體的年齡及物理狀態、所治療之個體的病史、並行療法之性質、所需治療作用及熟練技師知識及技術範疇內之類似因素而定。該等熟練技師將進一步理解，合適給藥方案可能需要鑒於個別個體對給藥方案之反應或根據個別個體需求變化隨時間進行調節。典型日劑量可視所選特定投藥 途徑而變化。對於體重為約70kg之人類，用於經口投藥之典型日劑量將在約5mg至約500mg式(I)化合物範圍內。
本發明之一個實施例提供治療與具有新生形活性之IDH之突變形式有關之疾病或病症的方法，其包含投與需要該治療之個體治療有效量之式(I)化合物。在一個實施例中，與具有新生形活性之IDH之突變形式有關之疾病或病症為細胞增殖病症。在另一實施例中，細胞增殖病症為癌症。在另一實施例中，癌症為與具有2-HG新生形活性之突變IDH1或具有2-HG新生形活性之突變IDH2有關的癌症。在另一實施例中，新生形活性為R-2-HG新生形活性。在另一實施例中，癌症與具有2-HG或R-2-HG新生形活性之突變IDH1有關，該突變IDH1在殘基97、100或132處具有突變，諸如G97D、R100Q、R132H、R132C、R132S、R132G、R132L及R132V。在另一實施例中，癌症與具有2-HG或R-2-HG新生形活性之突變IDH2有關，該突變IDH2在殘基140或172處具有突變，例如R140Q、R140G、R172K、R172M、R172S、R172G及R172W。在另一實施例中，癌症為腦癌、白血病、皮膚癌、前列腺癌、甲狀腺癌、結腸癌、肺癌或肉瘤。在另一實施例中，癌症為神經膠質瘤、多形性膠質母細胞瘤、副神經節瘤、幕上原始神經外胚層腫瘤、急性骨髓白血病、脊髓發育不良症候群、慢性骨髓性白血病、黑素瘤、前列腺、甲狀腺、結腸、肺、中樞軟骨肉瘤、中樞及骨膜軟骨瘤、纖維肉瘤及膽管癌。
本發明之另一實施例提供與具有R-2-HG新生形活性之IDH之突變形式有關之疾病或病症的方法，其包含投與有需要之個體治療有效量之式(I)化合物，其中該疾病或病症為D-2-羥基戊二酸尿、奧利埃氏病或馬夫西氏症候群。
本發明之另一實施例提供式(I)化合物在療法中之用途。在另一實施例中，該療法為與具有新生形活性之IDH之突變形式有關之疾病 或病症。在另一實施例中，該療法為與具有新生形活性之IDH之突變形式有關之細胞增殖病症。在另一實施例中，療法為癌症。在另一實施例中，療法為與具有新生形活性之突變IDH蛋白質(諸如具有2-HG新生形活性之突變IDH1或具有2-HG新生形活性之突變IDH2)有關的癌症。在另一實施例中，新生形活性為R-2-HG新生形活性。在另一實施例中，癌症與具有2-HG或R-2-HG新生形活性之突變IDH1有關，該突變IDH1在殘基97、100或132處具有突變，諸如G97D、R100Q、R132H、R132C、R132S、R132G、R132L及R132V。在另一實施例中，癌症與具有2-HG或R-2-HG新生形活性之突變IDH2有關，該突變IDH2在殘基R140或172處具有突變，例如R140Q、R140G、R172K、R172M、R172S、R172G及R172W。在另一實施例中，癌症為腦癌、白血病、皮膚癌、前列腺癌、甲狀腺癌、結腸癌、肺癌或肉瘤。在另一實施例中，癌症為神經膠質瘤、多形性膠質母細胞瘤、副神經節瘤、幕上原始神經外胚層腫瘤、急性骨髓白血病、脊髓發育不良症候群、慢性骨髓性白血病、黑素瘤、前列腺、甲狀腺、結腸、肺、中樞軟骨肉瘤、中樞及骨膜軟骨瘤、纖維肉瘤及膽管癌。
本發明之另一實施例提供式(I)化合物在療法中之用途，其中該療法為D-2-羥基戊二酸尿、奧利埃氏病或馬夫西氏症候群。
本發明之另一實施例提供式(I)化合物之用途，其係用於製造用以治療與具有新生形活性之IDH之突變形式有關之疾病或病症的藥劑。在一個實施例中，與具有新生形活性之IDH之突變形式有關之疾病或病症為細胞增殖病症。在另一實施例中，細胞增殖病症為癌症。在另一實施例中，癌症為與具有新生形活性之突變IDH蛋白質(諸如具有2-HG新生形活性之突變IDH1或具有2-HG新生形活性之突變IDH2)有關的癌症。在另一實施例中，新生形活性為R-2-HG新生形活性。在另一實施例中，癌症與具有2-HG或R-2-HG新生形活性之突變IDH1 有關，該突變IDH1在殘基97、100或132處具有突變，諸如G97D、R100Q、R132H、R132C、R132S、R132G、R132L及R132V。在另一實施例中，癌症與具有2-HG或R-2-HG新生形活性之突變IDH2有關，該突變IDH2在殘基140或172處具有突變，例如R140Q、R140G、R172K、R172M、R172S、R172G及R172W。在另一實施例中，癌症為腦癌、白血病、皮膚癌、前列腺癌、甲狀腺癌、結腸癌、肺癌或肉瘤。在另一實施例中，癌症為神經膠質瘤、多形性膠質母細胞瘤、副神經節瘤、幕上原始神經外胚層腫瘤、急性骨髓白血病、脊髓發育不良症候群、慢性骨髓性白血病、黑素瘤、前列腺、甲狀腺、結腸、肺、中樞軟骨肉瘤、中樞及骨膜軟骨瘤、纖維肉瘤及膽管癌。
本發明之另一實施例提供式(I)化合物之用途，其係用於製造用以治療與具有R-2-HG新生形活性之IDH之突變形式有關之疾病或病症的藥劑，其中該疾病或病症為D-2-羥基戊二酸尿、奧利埃氏病或馬夫西氏症候群。
本發明之另一實施例提供式(I)化合物，其係用於療法。在另一實施例中，療法為與具有新生形活性之IDH之突變形式有關之疾病或病症。在另一實施例中，療法為與具有新生形活性之IDH之突變形式有關之細胞增殖病症。在另一實施例中，療法為癌症。在另一實施例中，療法為與具有新生形活性之突變IDH蛋白質(諸如具有2-HG新生形活性之突變IDH1或具有2-HG新生形活性之突變IDH2)有關的癌症。在另一實施例中，新生形活性為R-2-HG新生形活性。在另一實施例中，癌症與具有2-HG或R-2-HG新生形活性之突變IDH1有關，該突變IDH1在殘基97、100或132處具有突變，諸如G97D、R100Q、R132H、R132C、R132S、R132G、R132L及R132V。在另一實施例中，癌症與具有2-HG或R-2-HG新生形活性之突變IDH2有關，該突變IDH2在殘基R140或172處具有突變，例如R140Q、R140G、R172K、 R172M、R172S、R172G及R172W。在另一實施例中，癌症為腦癌、白血病、皮膚癌、前列腺癌、甲狀腺癌、結腸癌、肺癌或肉瘤。在另一實施例中，癌症為神經膠質瘤、多形性膠質母細胞瘤、副神經節瘤、幕上原始神經外胚層腫瘤、急性骨髓白血病、脊髓發育不良症候群、慢性骨髓性白血病、黑素瘤、前列腺、甲狀腺、結腸、肺、中樞軟骨肉瘤、中樞及骨膜軟骨瘤、纖維肉瘤及膽管癌。
本發明之另一實施例提供式(I)化合物，其係用於療法，其中該療法為D-2-羥基戊二酸尿、奧利埃氏病或馬夫西氏症候群。
組合物
在另一態樣中，本發明提供醫藥組合物，其包含式(I)化合物及醫藥學上可接受之載劑或賦形劑。
本發明之醫藥組合物可以整體形式製備及封裝，其中可提取治療有效量之本發明化合物且接著提供至個體，諸如與散劑或糖漿一起。或者，本發明之醫藥組合物可以單位劑型製備及封裝，其中各實體上離散單元含有治療有效量之本發明化合物。當以單位劑型製備時，本發明之醫藥組合物典型地含有約5mg至500mg式(I)化合物。
如本文中所用，術語「醫藥學上可接受之載劑或賦形劑」意謂醫藥學上可接受之材料、組合物或媒劑，其例如包含於既定形式中或與醫藥組合物相容。每種賦形劑必須在混合時與醫藥組合物中之其他成分相容，使得可避免將實質上降低本發明化合物在投與個體時之功效的相互作用及將產生非醫藥學上可接受之醫藥組合物的相互作用。此外，每種賦形劑當然必須具有足夠高的純度，使得其為醫藥學上可接受的。
本發明化合物及醫藥學上可接受之載劑或賦形劑將典型地調配為適宜藉由所需投藥途徑投與個體之劑型。舉例而言，劑型包括適宜以下投藥途徑之劑型：(1)經口投與，諸如錠劑、膠囊、囊片、丸 劑、糖衣錠、散劑、糖漿、酏劑、懸浮液、溶液、乳液、藥囊及扁膠劑；及(2)非經腸投藥，諸如用於復原之無菌溶液、懸浮液及散劑。合適的醫藥學上可接受之賦形劑將視所選特定劑型而變化。此外，可選擇合適的醫藥學上可接受之賦形劑以用於其可在組合物中起到的特定功能。舉例而言，可出於促進產生均勻劑型之能力而選擇某些醫藥學上可接受之賦形劑。可出於促進產生穩定劑型之能力而選擇某些醫藥學上可接受之賦形劑。可出於促進本發明化合物在投與個體時自身體之一個器官或部分載運或傳遞至身體之另一個器官或另一個部分的能力而選擇某些醫藥學上可接受之賦形劑。可出於增強患者順應性之能力而某些醫藥學上可接受之賦形劑。
合適的醫藥學上可接受之賦形劑包括以下類型之賦形劑：稀釋劑、潤滑劑、黏合劑、崩解劑、填充劑、滑動劑、成粒劑、塗佈劑、濕潤劑、溶劑、共溶劑、懸浮劑、乳化劑、甜味劑、調味劑、氣味掩蔽劑、著色劑、抗結塊劑、潤濕劑、螯合劑、增塑劑、稠化劑、抗氧化劑、防腐劑、穩定劑、界面活性劑及緩衝劑。
熟練技師具有此項技術中之知識及技術以使其能夠選擇適量的合適的醫藥學上可接受之載劑及賦形劑以用於本發明中。此外，存在熟練技師可使用的多種資源，其描述醫藥學上可接受之載劑及賦形劑且可適用於選擇合適的醫藥學上可接受之載劑及賦形劑。實例包括Remington's Pharmaceutical Sciences(Mack Publishing Company),The Handbook of Pharmaceutical Additives(Gower Publishing Limited)，及The Handbook of Pharmaceutical Excipients(the American Pharmaceutical Association and the Pharmaceutical Press)。
本發明之醫藥組合物係使用熟習此項技術者已知的技術及方法製備。在此項技術中常用的一些方法描述於Remington's Pharmaceutical Sciences(Mack Publishing Company)中。
在一個態樣中，本發明係關於固體口服劑型，諸如包含治療有效量之本發明化合物及稀釋劑或填充劑之錠劑或膠囊。合適稀釋劑及填充劑包括乳糖、蔗糖、右旋糖、甘露醇、山梨糖醇、澱粉(例如玉米澱粉、馬鈴薯澱粉及預糊化澱粉)、纖維素及其衍生物(例如微晶纖維素)、硫酸鈣及磷酸氫鈣。口服固體劑型可進一步包含黏合劑。合適黏合劑包括澱粉(例如玉米澱粉、馬鈴薯澱粉及預糊化澱粉)、明膠、阿拉伯膠、褐藻酸鈉、褐藻酸、黃蓍、瓜耳豆膠、聚維酮及纖維素及其衍生物(例如微晶纖維素)。口服固體劑型可進一步包含崩解劑。合適崩解劑包括交聯聚維酮、羥基乙酸澱粉鈉、交聯羧甲纖維素、褐藻酸及羧甲基纖維素鈉。口服固體劑型可進一步包含潤滑劑。合適潤滑劑包括硬脂酸、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣及滑石。
適當時，用於經口投與之劑量單元調配物可經微膠囊化。舉例而言，亦可藉由用聚合物、蠟或其類似物塗佈顆粒物質或將其嵌入聚合物、蠟或其類似物中來製備用於長期或持續釋放之組合物。
本發明化合物亦可與作為可靶向藥物載劑之可溶性聚合物偶合。該等聚合物可包括經軟脂醯基殘基取代之聚乙烯吡咯啶酮、哌喃共聚物、聚羥基丙基甲基丙烯醯胺酚、聚羥基乙基天冬醯胺酚或聚氧化乙烯聚離胺酸。此外，本發明化合物可與一類適用於實現藥物之控制釋放的生物可降解聚合物偶合，例如聚乳酸、聚ε己內酯、聚羥基丁酸、聚原酸酯、聚縮醛、聚二氫哌喃、聚氰基丙烯酸酯及水凝膠之交聯或兩性嵌段共聚物。
在另一態樣中，本發明係關於液體口服劑型。口服液體(諸如溶液、糖漿及酏劑)可以單位劑型製備使得既定量含有預定量之本發明化合物。可藉由使本發明化合物溶解於合適風味的水溶液中來製備糖漿；且可經由使用無毒醇性媒劑來製備酏劑。可藉由使本發明化合物分散於無毒媒劑中來調配懸浮液。亦可添加增溶劑及乳化劑(諸如乙 氧基化異十八醇及聚氧乙烯山梨糖醇醚)、防腐劑、氣味添加劑(諸如薄荷油或其他天然甜味劑或糖精或其他人工甜味劑)及其類似物。
在另一態樣中，本發明係關於非經腸投藥。適宜非經腸投藥之醫藥組合物包括水性及非水性無菌注射溶液，其可含有抗氧化劑、緩衝劑、抑菌劑及使調配物與所欲受體之血液等滲的溶質；及水性及非水性無菌懸浮液，其可包括懸浮劑及增稠劑。組合物可存在於單位劑量或多劑量容器中，例如密封安瓿及小瓶，且可儲存於僅需在臨用前添加無菌液體載劑(例如注射用水)之冷凍乾燥(凍乾)條件下。臨時注射溶液及懸浮液可由無菌散劑、顆粒及錠劑製備。
組合
本發明化合物可與一或多種治療劑同時、在其之前或之後投與。本發明化合物可由相同或不同投藥途徑單獨投與，或與其他藥劑一起於同一醫藥組合物中共同投與。
在一實施例中，本發明提供一種產品，其包含式(I)化合物及作為在療法中同時、單獨或連續使用之組合製劑的至少一種其他治療劑。在一個實施例中，療法為治療與IDH之突變形式有關之疾病或病症。作為組合製劑提供之產品包括組合物，其包含式(I)化合物及同一醫藥組合物中之其他治療劑，或式(I)化合物及其他呈獨立形式(例如呈套組形式)之治療劑。
在一實施例中，本發明提供包含式(I)化合物及另一種治療劑之醫藥組合物。如上文所描述，醫藥組合物可視情況包含醫藥學上可接受之賦形劑。
在一實施例中，本發明提供包含兩種或兩種以上獨立的醫藥組合物之套組，該兩種或兩種以上獨立的醫藥組合物中至少一者含有式(I)化合物。在一實施例中，套組包含用於獨立保存組合物之構件，諸如容器、分隔瓶或分隔式箔封包。該套組之實例為通常用於封裝錠 劑、膠囊及其類似物之泡殼包裝。
本發明之套組可用於投與不同劑型(例如口服及非經腸)、用於在不同給藥時間間隔投與獨立組合物或用於相對於彼此滴定獨立組合物。為有助於順應性，本發明之套組通常包含投藥說明書。
在本發明之組合療法中，本發明化合物及另一種治療劑可由相同或不同製造商製造及/或調配。此外，本發明化合物及另一種治療劑可共同用於組合療法中：(i)在對醫師發行組合產品之前(例如在包含本發明化合物及另一種治療劑之套組情況下)；(ii)在投藥之前不久由醫師親自進行(或在醫師指引下進行)；(iii)由患者親自進行，例如在本發明化合物及另一種治療劑之連續投藥期間。
因此，本發明提供式(I)化合物之用途，其係用於治療與IDH之突變形式有關之疾病或病症，其中該藥劑係製備用於與另一種治療劑共同投藥。本發明亦提供另一種治療劑之用途，其係用於治療與IDH之突變形式有關之疾病或病症，其中該藥劑與式(I)化合物共同投藥。
本發明亦提供式(I)化合物，其係用於治療與IDH之突變形式有關之疾病或病症的方法，其中式(I)化合物係製備用於與另一種治療劑共同投藥。本發明亦提供另一種治療劑，其係用於治療與IDH之突變形式有關之疾病或病症之方法，其中該另一種治療劑係製備用於與式(I)化合物共同投藥。本發明亦提供式(I)化合物，其係用於治療與IDH之突變形式有關之疾病或病症的方法，其中式(I)化合物係與另一種治療劑共同投與。本發明亦提供另一種治療劑，其係用於治療與IDH之突變形式有關之疾病或病症之方法，其中該另一種治療劑係與式(I)化合物共同投與。
本發明亦提供式(I)化合物之用途，其係用於治療與IDH之突變形式有關之疾病或病症，其中患者先前(例如24小時內)經另一種治療劑治療。本發明亦提供另一種治療劑之用途，其係用於治療與IDH之突 變形式有關之疾病或病症，其中患者先前(例如24小時內)經式(I)化合物治療。
在一個實施例中，該另一種治療劑係選自：血管內皮生長因子(VEGF)受體抑制劑、拓撲異構酶II抑制劑、Smoothened抑制劑、烷化劑、抗腫瘤抗生素、抗代謝劑、類視黃素及其他細胞毒性劑。
血管內皮生長因子(VEGF)受體抑制劑之實例包括(但不限於)貝伐珠單抗(bevacizumab)(由Genentech/Roche以商標Avastin®出售)、阿西替尼(axitinib)(N-甲基-2-[[3-[(E)-2-吡啶-2-基乙烯基]-1H-吲唑-6-基]硫基]苯甲醯胺，亦稱為AG013736，且描述於PCT公開案第WO 01/002369號中)、丙胺酸布立尼布(Brivanib Alaninate)((S)-((R)-1-(4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基氧基)-5-甲基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-基氧基)丙-2-基)-2-胺基丙酸酯，亦稱為BMS-582664)、莫替沙尼(motesanib)(N-(2,3-二氫-3,3-二甲基-1H-吲哚-6-基)-2-[(4-吡啶基甲基)胺基]-3-吡啶甲醯胺，且描述於PCT公開案第WO 02/066470中)、帕西瑞肽(pasireotide)(亦稱為SOM230，且描述於PCT公開案第WO 02/010192號中)及索拉非尼(sorafenib)(以商品名Nexavar®出售)。
拓撲異構酶II抑制劑之實例包括(但不限於)依託泊苷(etoposide)(亦稱為VP-16及磷酸依託泊苷，以商品名Toposar®、VePesid®及Etopophos®出售)，及替尼泊苷(teniposide)(亦稱為VM-26，以商品名Vumon®出售)。
烷化劑之實例包括(但不限於)替莫唑胺(temozolomide)(由Schering-Plough/Merck以商品名Temodar®及Temodal®出售)、放線菌素D(dactinomycin)(亦稱為放線菌素-D且以商品名Cosmegen®出售)、美法侖(melphalan)(亦稱為L-PAM、L-溶肉瘤素及苯丙胺酸氮芥，以商品名Alkeran®出售)、六甲蜜胺(altretamine)(亦稱為六甲三聚氰胺(HMM)，以商品名Hexalen®出售)、卡莫司汀(carmustine)(以 商品名BiCNU®出售)、苯達莫司汀(bendamustine)(以商品名Treanda®出售)、白消安(busulfan)(以商品名Busulfex®及Myleran®出售)、卡鉑(carboplatin)(以商品名Paraplatin®出售)、洛莫司汀(lomustine)(亦稱為CCNU，以商品名CeeNU®出售)、順鉑(cisplatin)(亦稱為CDDP，以商品名Platinol®及Platinol®-AQ出售)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)(以商品名Leukeran®出售)、環磷醯胺(cyclophosphamide)(以商品名Cytoxan®及Neosar®出售)、達卡巴嗪(dacarbazine)(亦稱為DTIC、DIC及咪唑甲醯胺，以商品名DTIC-Dome®出售)、六甲蜜胺(altretamine)(亦稱為六甲三聚氰胺(HMM)，以商品名Hexalen®出售)、異環磷醯胺(ifosfamide)(以商品名Ifex®出售)、甲基苯甲肼(procarbazine)(以商品名Matulane®出售)、二氯甲基二乙胺(mechlorethamine)(亦稱為氮芥、鹽酸氮芥及二氯甲基二乙胺鹽酸鹽，以商品名Mustargen®出售)、鏈脲佐菌素(streptozocin)(以商品名Zanosar®出售)、噻替派(thiotepa)(亦稱為硫代磷醯胺、TESPA及TSPA，以商品名Thioplex®出售)。
抗腫瘤抗生素之實例包括(但不限於)阿黴素(doxorubicin)(以商品名Adriamycin®及Rubex®出售)、博來黴素(bleomycin)(以商品名lenoxane®出售)、道諾黴素(daunorubicin)(亦稱為鹽酸道諾黴素、柔紅黴素(daunomycin)及鹽酸紅比黴素(rubidomycin hydrochloride)，以商品名Cerubidine®出售)、道諾黴素脂質體(檸檬酸道諾黴素脂質體，以商品名DaunoXome®出售)、米托蒽醌(mitoxantrone)(亦稱為DHAD，以商品名Novantrone®出售)、表阿黴素(epirubicin)(以商品名EllenceTM出售)、艾達黴素(idarubicin)(以商品名Idamycin®、Idamycin PFS®出售)及絲裂黴素C(mitomycinC)(以商品名Mutamycin®出售)。
抗代謝劑之實例包括(但不限於)克拉屈濱(claribine)(2-氯去氧腺 苷，以商品名leustatin®出售)、5-氟尿嘧啶(以商品名Adrucil®出售)、6-硫鳥嘌呤(以商品名Purinethol®出售)、培美曲塞(pemetrexed)(以商品名Alimta®出售)、阿糖胞苷(cytarabine)(亦稱為阿拉伯糖胞嘧啶(Ara-C)，以商品名Cytosar-U®出售)、阿糖胞苷脂質體(亦稱為脂質體Ara-C，以商品名DepoCytTM出售)、地西他賓(decitabine)(以商品名Dacogen®出售)、羥基脲(以商品名Hydrea®、DroxiaTM及MylocelTM出售)、氟達拉濱(fludarabine)(以商品名Fludara®出售)、氟尿苷(floxuridine)(以商品名FUDR®出售)、克拉屈濱(cladribine)(亦稱為2-氯去氧腺苷(2-CdA)，以商品名LeustatinTM出售)、甲胺喋呤(methotrexate)(亦稱為胺甲嘌呤(amethopterin)、甲胺喋呤鈉(MTX)，以商品名Rheumatrex®及TrexallTM出售)及噴司他汀(pentostatin)(以商品名Nipent®出售)。
類視黃素之實例包括(但不限於)亞利崔托寧(alitretinoin)(以商品名Panretin®出售)、維甲酸(tretinoin)(全反式視黃酸，亦稱為ATRA，以商品名Vesanoid®出售)、異維甲酸(13-順-視黃酸，以商品名Accutane®、Amnesteem®、Claravis®、Clarus®、Decutan®、Isotane®、Izotech®、Oratane®、Isotret®及Sotret®出售)及貝瑟羅汀(bexarotene)(以商品名Targretin®出售)。
其他細胞毒性劑之實例包括(但不限於)砒霜(arsenic trioxide)(以商品名Trisenox®出售)、天冬醯胺酶(亦稱為L-天冬醯胺酶及伊文氏桿菌(Erwinia)L-天冬醯胺酶，以商品名Elspar®及Kidrolase®出售)。
中間物及實例
以下實例意欲僅為說明性且不以任何方式造成限制。除非另有說明，否則以下中間物及實例係使用來自Teledyne Isco,Inc.之RediSep® Rf管柱經由矽膠管柱層析來純化。所用縮寫為此項技術中習知或如下：
設備 LCMS：
除非另有說明，否則LCMS資料(本文中亦簡單報導為MS)係使用Waters System記錄(Acuity UPLC及Micromass ZQ質譜儀；管柱：Acuity HSS C18 1.8微米，2.1×50mm；梯度：經1.8分鐘週期5%-95%乙腈/水(具有0.05% TFA)；流動速率1.2mL/min；分子量範圍200-1500；錐電壓20V；管柱溫度50℃)。除非另有說明，否則所有報導之質量均為質子化母離子之質量。
高解析度質譜分析法(HRMS)：HRMS方法A：ESI-MS資料係使用具有電噴電離源之Synapt G2 HDMS(TOF質譜儀，Waters)記錄。MS系統之解析度為約15000。使用白胺酸腦啡肽作為自鎖定噴霧(lockspary)探針注入之鎖定質量(內標)。藉由UPLC(Acquity，Waters)將化合物自樣品探針注入質譜儀。分離係在Acquity UPLC BEH C18 1×50mm管柱上，以0.2mL/min流動速率在3分鐘內5%至95%之梯度下進行。溶劑A為含有0.1%甲酸之水且溶劑B為含有0.1%甲酸之乙腈。已發現系統之質量精確度<5ppM(針對鎖定質量)。
HRMS方法B：用Acquity G2 Xevo QTof記錄LC-MS/ESI-MS資料，Rs(FWHM)>20000，精確度<5ppm。在Acquity CSH 1.7μm，2.1×50mm-50℃管柱上進行分離。溶離劑A：水+3.75mM乙酸銨。溶離劑B：乙腈梯度：4.4分鐘內2%至98% B-1.0mL/min流動速率。
HRMS方法C：除梯度：3.4分鐘內40%至98% B-1.0mL/min流動速率外，與HRMS方法B相同。
HRMS Method D：用Acquity LCTp Tof記錄LC-MS/ESI-MS資 料，Rs(FWHM)>12000<5ppm。在Acquity BEHC18 1.7μm，2.1×50mm-50℃管柱上進行分離。溶離劑A：水+0.1%甲酸+3.75mM乙酸戊酯。溶離劑B：乙腈+0.04%甲酸+3.75mM乙酸戊酯+5%水。梯度：4.4分鐘內0.2%至98% B-1.0mL/min流動速率。
HRMS方法A、B、C及D始終分別稱為HRMS(A)、HRMS(B)、HRMS(C)及HRMS(D)。
中間物 中間物1：((2R)-(3R)-(第三丁氧基)-1-羥基丁-2-基)胺基甲酸苯甲酯
在-25℃下，向(S)-2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-(R)-3-(第三丁氧基)丁酸二環己基銨鹽(500mg，1.0mmol)於10ml THF及氯甲酸異丁酯(167mg，1.2mmol，1.2當量)中之溶液中添加N-甲基嗎啉(124mg，1.2mmol，1.2當量)，混合物在相同溫度下攪拌10分鐘且過濾。濾液冷卻至-20℃且向其中添加NaBH4，接著立即添加2ml水。反應混合物在相同溫度下攪拌5分鐘，接著逐漸溫至室溫保持25分鐘，倒入水(10ml)中且用EA(2×20mL)萃取。合併之有機相用水、鹽水洗滌且經Na2SO4乾燥。移除溶劑得到呈透明油狀之所需產物。無需進一步純化即可用於下一步驟。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.37-7.16(m,5H),5.25(d,J=8.0Hz,1H),5.02(s,1H),4.04(ddd,J=12.0,8.9,2.8Hz,1H),3.92-3.75(m,1H),3.59(dddd,J=32.3,14.6,8.2,4.3Hz,2H),1.10(s,9H),1.09-1.06(m,3H).
中間物2：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)唑啶-2-酮
方法A：預先冷卻至0℃之((2R)-(3R)-(第三丁氧基)-1-羥基丁-2-基)胺基甲酸苯甲酯(134mg，0.45mmol於5mL THF中)在氮氣下用第三丁醇鉀(153mg，1.4mmol，3.0當量)處理，在相同溫度下攪拌2小時，添加5mL水，用EtOAc(2×20mL)萃取，合併之有機層用水、鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，移除溶劑得到呈黃色油狀之所需產物，無需進一步純化即可用於下一步驟。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 6.20(br s,1H),4.33(t,J=8.7Hz,1H),4.07(dd,J=8.9,5.5Hz,1H),3.67-3.58(m,1H),3.58-3.49(m,1H),1.13(s,9H),1.02(d,J=6.0Hz,3H).
方法B：(2R,3R)-2-胺基-3-(第三丁氧基)丁-1-醇鹽酸鹽(19.77g，100mmol)在0℃下溶解於DCM(200mL)中，且添加三乙胺(69.7ml，500mmol)。溶液用三光氣(12.76g，43.0mmol)於DCM(100mL)中之溶液處理90分鐘[保持反應混合物低於5℃]。反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，隨後溫至室溫且攪拌隔夜。反應混合物用飽和NH4Cl水溶液(200mL)、水(50mL)處理且在室溫下劇烈攪拌1小時。分離有機物，用DCM(500mL)萃取水性物質，合併有機物且用1N HCl(3×150mL)及飽和NH4Cl水溶液洗滌，乾燥(MgSO4)且濃縮至乾燥(小心進行以免離開真空或過度加熱)，得到淡褐色油。TLC證實大部分產物在較高Rf下具有一些小的副產物峰及一些基線物質。在二氧化矽上與純庚烷、20% Et2O/庚烷、50% Et2O/庚烷、純Et2O及30%EtOAc/Et2O一起經歷急驟管柱層析。TLC：純醚，用硫酸銅銨染色(熱硬化1分鐘以觀測藍色產物染色)；產物Rf=0.34。產物主要為純Et2O。將最潔淨的單一部分之一濃縮至乾燥，得到2.02g極淡黃色/褐色油，其在靜置後 結晶。合併剩餘產物部分且濃縮至乾燥，得到15.2g淡褐色油，其藉由初始批次之晶體接種，得到淡褐色結晶固體。總產率為約90%。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 5.28(br s,1H)；4.44(t,1H)；4.13-4.09(m,1H)；3.7-3.57(m,2H)；1.23(s,9H)；1.11(d,3H).
中間物3：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
方法A：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)唑啶-2-酮(86mg，0.46mmol)及2,4-二氟嘧啶(79mg，0.55mmol，1.2當量)於3ml DMF中之溶液在N2下冷卻至0℃，隨後緩慢添加NaH(60%，28mg，0.69mmol，1.5當量)。反應混合物在0℃下攪拌45分鐘，接著逐漸溫至室溫，且在室溫下攪拌隔夜。反應物用5ml水淬滅，且用EtOAc(2×10mL)萃取。移除溶劑得到粗產物。進行矽膠管柱層析(含10%乙酸乙酯之庚烷至含50%乙酸乙酯之庚烷)得到呈白色固體狀之所需產物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.50(dd,J=5.8,2.1Hz,1H),8.14(dd,J=5.8,3.8Hz,1H),4.85-4.63(m,2H),4.56-4.30(m,2H),1.26(s,9H),1.05(d,J=6.5Hz,3H).
方法B：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)唑啶-2-酮(5g，26.7mmol)於DMF(50mL)中之溶液在N2氛圍下冷卻至-5℃。在經5分鐘分批添加60% NaH(1.602g，40.1mmol)期間監測內部溫度且保持為約-5℃(未發現顯著放熱，但觀測到起泡且產生渾濁懸浮液)。逐滴添加2,4-二氟嘧啶(2.507mL，29.4mmol)，同時仍保持溫度為約-5℃。在完成添加後，反應混合物在此溫度下攪拌15分鐘，隨後移除冷卻浴且 將反應混合物溫至室溫(約27℃內部溫度)。在室溫下攪拌2小時。處理：[注意安全：存在NaF鹽。不進行酸化處理]。用水(100mL)淬滅反應混合物，引起顯著起泡，但溫度增加最小。添加EtOAc(75mL)且分離，用EtOAc(2×75mL)萃取水性物質，合併有機物，用水(100mL)、鹽水(50mL)洗滌，乾燥(MgSO4)且濃縮至乾燥，得到呈淡黃色油狀之粗產物[8.33g]，藉由矽膠層析(初始勻變率DCM/庚烷5%至100%，接著EtOAc/DCM 0%至20%，約5% EtOAc/DCM得到產物)。合併且濃縮純產物部分至乾燥，得到白色固體，其置放於高真空下4小時。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.5(dd,1H),8.15(dd,1H)；4.77-4.66(m,2H)；4.53-4.42(m,2H)；1.26(s,9H)；1.05(d,3H).MS m/z 284.1(M+H)+.
中間物4：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2,5-二氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)唑啶-2-酮(5g，26.7mmol)於DMF(50mL)中之溶液在N2氛圍下冷卻至-5℃。在經5分鐘分批添加60% NaH(1.28g，32mmol)期間監測內部溫度且保持為約-5℃(未發現顯著放熱，但觀測到起泡且產生渾濁懸浮液)。逐滴添加2,4,5-三氟嘧啶(3.76g，28mmol)，同時仍保持溫度為約-5℃。在完成添加後，反應混合物在此溫度下攪拌15分鐘，隨後移除冷卻浴且將反應混合物溫至室溫(約27℃內部溫度)。在室溫下攪拌6小時。將反應混合物取樣且用水淬滅，在EtOAc中萃取；TLC及LCMS證實存在大量產物，但剩餘唑啶酮起始物質。反應混合物冷卻至0℃且再添加一份三氟 嘧啶(1.2g，8.95mmol)，溫至室溫且在室溫下攪拌3小時。由樣品之TLC發現更模糊的殘餘起始物質，但在此時淬滅反應混合物。處理：[注意安全：存在NaF鹽。不進行酸化處理]。用水(100mL)淬滅反應混合物，引起顯著起泡。添加EtOAc(75mL)且分離，用EtOAc(2×75mL)萃取水性物質，合併有機物，用水(100mL)、鹽水(50mL)洗滌，乾燥(MgSO4)且濃縮至乾燥，得到呈淡黃色油狀之粗產物。藉由矽膠層析純化粗物質(初始純DCM，接著勻變至20% EtOAc/DCM)。合併純的產物部分且濃縮至乾燥，得到無色油，將其置放在高真空下。在靜置後，油轉化為白色固體。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.47(dd,J=3,1Hz,1H)；4.73-4.68(m,1H)；4.62-4.52(m,2H)；4.34-4.28(m,1H)；1.20(s,9H)；1.11(d,3H).MS m/z 302.1(M+H)+.
中間物5：(R)-3-(2-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮
(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(1.0g，3.35mmol)於20ml DCM中之溶液在冰浴中冷卻，且用8.16mL TFA處理。混合物在相同溫度下攪拌4小時，且溫至室溫且攪拌16小時。將反應物倒入10mL水中。在真空中移除DCM。水性物質藉由緩慢添加飽和NaHCO3溶液來鹼化，接著用EtOAc(2×30mL)萃取。有機物用30mL鹽水洗滌且經Na2SO4乾燥。過濾且濃縮得到所需醇，呈白色固體狀之(R)-3-(2-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮(0.56g，70%產率)。HRMS(B)tR=0.80min；MS m/z 228.4(M+H)+。
中間物6：(R)-3-(2-氟嘧啶-4-基)-2-側氧基唑啶-4-甲酸甲酯
(R)-2-側氧基唑啶-4-甲酸甲酯(200mg，1.4mmol)及2,4-氟嘧啶(176mg，1.5mmol，1.1當量)於DMF(3mL)中之溶液用NaH(60%，66.2mg，1.2mmol，1.2當量)處理，接著所得混合物在0℃下攪拌45分鐘，接著在室溫下攪拌12小時。反應混合物用EtOAc(20mL)稀釋，用飽和NH4Cl(15mL)及4% NaCl水溶液(2×100mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷10%至50%)得到(R)-3-(2-氟嘧啶-4-基)-2-側氧基唑啶-4-甲酸甲酯(240mg，白色蠟狀固體)，71%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.47(dd,J=5.8,2.0Hz,1H),8.07(dd,J=5.7,3.7Hz,1H),5.18(dd,J=9.4,3.7Hz,1H),4.68(t,J=9.4Hz,1H),4.45(dd,J=9.3,3.7Hz,1H),3.78(s,3H).
中間物7：2-胺基-4,4,4-三氟-3-甲基丁-1-醇
向經冷卻(0℃)之2-胺基-4,4,4-三氟-3-甲基丁酸(736mg，4.30mmol)於THF(9mL)中之溶液中逐滴添加氫化鋁(III)鋰(2.26mL，9.03mmol，4M)。添加完成後，反應物在環境溫度下攪拌1小時。冷卻至0℃且用飽和Na2SO4溶液淬滅，添加EtOAc(50mL)、Na2SO4，過濾，在真空中濃縮得到物質，其為標題化合物與起始物質酸之3：2比率混合物，其以粗物質形式用於下一步驟中。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 3.71(dd,J=10.7,3.7Hz,1H),3.57(dd,J=10.4,5.2Hz,1H),3.45(ddd,J=10.7,8.0,4.8Hz,2H),3.28(ddd,J=8.2,5.3,2.9Hz,1H), 3.06(td,J=7.3,3.6Hz,1H),2.44-2.20(m,2H),2.04-1.54(m,1H),1.21-1.08(m,7H).19F NMR(376MHz,CDCl3)δ -68.33(s),-70.12(s).
中間物8：4-(1,1,1-三氟丙-2-基)唑啶-2-酮
向2-胺基-4,4,4-三氟-3-甲基丁-1-醇(580mg，3.69mmol)於DCM(13ml)中之溶液中添加三乙胺(1.132ml，8.12mmol)且經10分鐘逐滴添加三光氣(329mg，1.107mmol)於1mL DCM(3ml)中之溶液。反應混合物用飽和NH4Cl溶液(13ml)洗滌，乾燥且在真空中濃縮。得到450mg(淺黃色固體)。粗物質用於下一步驟中。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 5.91(d,J=13.3Hz,1H),4.61-4.34(m,1H),4.22-4.00(m,2H),3.05(q,J=7.3Hz,1H),2.54-2.14(m,1H),1.34(t,J=7.3Hz,1H),1.17(d,J=7.1Hz,2H),1.09(d,J=7.1Hz,1H).MS 183.0507 m/z.
中間物9：3-(2-氟嘧啶-4-基)-4-(1,1,1-三氟丙-2-基)唑啶-2-酮
4-(1,1,1-三氟丙-2-基)唑啶-2-酮(270mg，1.474mmol)及2,4-二氟嘧啶(171mg，1.474mmol，1當量)於DMF(4mL)中之溶液用NaH(60%，88mg，2.212mmol，1.5當量)處理，接著所得混合物在0℃下攪拌10分鐘，接著在室溫下攪拌1小時。反應混合物用飽和Na2SO4(15mL)淬滅，用EtOAc(20mL)稀釋，洗滌且4% NaCl水溶液(3×20 mL)，經Na2SO4乾燥，在真空中濃縮。用5% EtOAc/DCM進行急驟管柱層析3-(2-氟嘧啶-4-基)-4-(1,1,1-三氟丙-2-基)唑啶-2-酮(二氧化矽，120g，15m)，得到(100mg，白色固體)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.55(dd,J=5.8,2.1Hz,1H),8.20(dd,J=5.8,3.7Hz,1H),5.04-4.84(m,1H),4.68(dd,J=9.5,2.6Hz,1H),4.54(t,J=9.2Hz,1H),3.34(ddddd,J=13.3,9.3,7.1,3.9,1.6Hz,1H),1.29(d,J=7.3Hz,3H).MS 279.0631 m/z.
中間物10：(R)-3-(2,6-二氯嘧啶-4-基)-4-((R)-1-甲氧基乙基)唑啶-2-酮
步驟1
在圓底燒瓶中，在0℃(冰浴)下在起泡器下將NaH(0.54g，13.5mmol，於礦物油中57%分散)添加至2,4,6-三氯嘧啶(1.22ml，10.6mmol)及(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)唑啶-2-酮(1.8g，9.61mmol)於DMF(32mL)中之溶液中。接著黃色懸浮液在0℃下攪拌15分鐘，且接著移除冰浴且反應混合物在室溫下攪拌1小時。反應混合物用EtOAc稀釋，且接著小心地用鹽水淬滅。分離各層且水層用EtOAc萃取。乾燥(Na2SO4)合併之有機層，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至100%)得到呈白色固體狀之(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2,6-二氯嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(2.1g，6.28mmol，65%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.04(d,J=6.55Hz,3 H)1.26(s,9 H)4.38-4.48(m,2 H)4.64-4.75(m,2 H)8.22(s,1 H)。LCMS m/z 334.1(M+H)+,Rt 1.10min。
步驟2
向含有(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2,6-二氯嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(1g，2.99mmol)之圓底燒瓶中添加DCM(7.5mL)，接著添加TFA(7.5mL)。所得均質反應混合物在室溫下攪拌1小時。接著移除揮發性物質。殘餘物溶解於DCM中且用飽和NaHCO3溶液中和。分配各相，水相用DCM萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮，得到(R)-3-(2,6-二氯嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮之白色泡沫狀物(737mg，2.65mmol，89%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.19(d,J=6.46Hz,3 H)4.47(dd,J=9.37,8.53Hz,1 H)4.55(quin,J=5.69Hz,1 H)4.63(dd,J=9.49,2.79Hz,1 H)4.89(ddd,J=8.19,4.96,2.79Hz,1 H)8.24(s,1 H)。LCMS m/z 278.0(M+H)+,Rt 0.66min。
步驟3
向圓底燒瓶中添加(R)-3-(2,6-二氯嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮(364mg，1.31mmol)，接著添加DCM(10.8mL)。接著反應混合物在(冰/水浴)中在氮氣下冷卻至0℃。向此冷的溶液中添加四氟硼酸(0.20mL，1.31mmol，50%水溶液)，接著添加三甲基矽烷基重氮甲烷(1.96mL，3.93mmol，2M於己烷中)，其係分為3份間隔20分鐘添加。第二次添加含三甲基矽烷基重氮甲烷之己烷(1.96mL，3.93mmol，2M於己烷中)，再次分為3份間隔20分鐘添加。反應混合物用水淬滅且用DCM稀釋。分配各相且水相用DCM萃取。合併有機相且用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至100%)得到呈無色油狀之(R)-3-(2,6-二氯嘧啶-4-基)-4-((R)-1-甲氧基乙基)唑啶-2-酮(119mg，0.41mmol，31%產率)，其在靜置後結晶。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.09(d,J=6.50Hz,3 H)3.44(s,3 H)4.09(qd,J=6.46,4.16Hz,1 H)4.38-4.49(m,1 H)4.60 (dd,J=9.49,2.84Hz,1 H)4.99(ddd,J=8.50,3.95,2.96Hz,1 H)8.23(s,1 H)。LCMS m/z 292.0(M+H)+,Rt 0.86min。
中間物11：(R)-3-(2-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-甲氧基乙基)唑啶-2-酮
步驟1
含有攪拌棒及含(2S,3R)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-甲氧基丁酸(2.5g，10.7mmol)之THF(80mL)之圓底燒瓶在氮氣下於乾冰/丙酮浴中冷卻至-30℃。向此冷的溶液中添加氯甲酸異丁酯(1.7mL，12.9mmol)，接著添加N-甲基嗎啉(1.4mL，12.9mmol)。混合物在-30℃下攪拌15分鐘。產生N-甲基嗎啉鹽且自混合物過濾。母液冷卻至-30℃，其中在添加硼氫化鈉(0.61g，16.1mmol)後，接著立即添加水(10mL)。反應混合物在-20℃下攪拌15分鐘，接著逐漸溫至室溫。反應混合物在室溫下攪拌30分鐘。接著反應混合物用水稀釋且用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮，得到呈無色油狀之((2R,3R)-1-羥基-3-甲氧基丁-2-基)胺基甲酸第三丁酯(2.0g，9.1mmol，85%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.18(d,J=6.26Hz,3 H)1.45(s,9 H)3.33(s,3 H)3.55-3.84(m,4 H)。LCMS m/z 220.2(M+H)+,Rt 0.57min。
步驟2
向含有第三丁基((2R,3R)-1-羥基-3-甲氧基丁-2-基)(2g，9.1mmol)及攪拌棒之圓底燒瓶中添加DCM(5.0mL)，接著添加TFA(5.0mL)。所得反應混合物在室溫下攪拌30分鐘。移除揮發性物質得到呈三氟乙酸鹽形式之(2R,3R)-2-胺基-3-甲氧基丁-1-醇(2.1g，9.0 mmol，99%產率)。物質未經進一步純化即用於下一步驟中。LCMS m/z 120.0(M+H)+,Rt 0.15min。
步驟3
向含有(2R,3R)-2-胺基-3-甲氧基丁-1-醇(2.1g，9.0mmol)及攪拌棒之圓底燒瓶中添加乙腈(100mL)，接著添加2,4-二氯嘧啶(1.34g，9.0mmol)及DIEA(4.7mL，27.0mmol)。所得反應混合物在室溫下攪拌18小時。接著移除揮發性物質。殘餘物分配於EtOAc與水之間。水層用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮，得到(2R,3R)-2-((2-氯嘧啶-4-基)胺基)-3-甲氧基丁-1-醇(1.68g，3.63mmol，40%產率)，其含有一些未反應之2,4-二氯嘧啶。LCMS m/z 232.0(M+H)+,Rt 0.38min。
步驟4
在氮氣下向含有(2R,3R)-2-((2-氯嘧啶-4-基)胺基)-3-甲氧基丁-1-醇(1.68g，3.63mmol)及攪拌棒之圓底燒瓶中添加DCM(18mL)。所得反應混合物在鹽水/冰浴中冷卻至0℃。接著向此冷的溶液中添加三光氣(0.59g，1.99mmol)，接著添加2,6-二甲基吡啶(2mL，17.0mmol)。所得反應混合物在0℃下攪拌30分鐘。反應混合物用DCM及水稀釋，且在室溫下攪拌1小時。分配各相且水相用DCM萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至100%)得到呈白色結晶狀之(R)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-((R)-1-甲氧基乙基)唑啶-2-酮(145mg，0.56mmol，15%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.09(d,J=6.26Hz,3 H)3.45(s,3 H)4.15(qd,J=6.39,4.30Hz,1 H)4.39-4.47(m,1 H)4.60(dd,J=9.39,2.74Hz,1 H)5.02(dt,J=8.61,3.52Hz,1 H)8.17(d,J=5.87Hz,1 H)8.48(d,J=5.87Hz,1 H)。LCMS m/z 258.1(M+H)+,Rt 0.69min。
步驟5
向具有攪拌棒之微波小瓶中添加(R)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-((R)-1-甲氧基乙基)唑啶-2-酮(145mg，0.56mmol)、氟化鉀(327mg，5.63mmol)及DMSO(4mL)。將小瓶蓋好且在砂浴中加熱至120℃保持3小時。接著反應混合物冷卻至室溫，用水稀釋且水性混合物用EtOAc萃取。合併有機相且用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮，得到(R)-3-(2-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-甲氧基乙基)唑啶-2-酮之白色結晶(117mg，0.49mmol，86%產率)。LCMS m/z 242.1(M+H)+,Rt 0.63min。
中間物12：(R)-4-((S)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-氯嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
步驟1
含有攪拌棒及含(2S,3S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-(第三丁氧基)丁酸(8.55g，21.5mmol)之THF(72mL)之圓底燒瓶在氮氣下於乾冰/乙腈浴中冷卻至-30℃。向此冷的溶液中添加氯甲酸異丁酯(3.4mL，25.8mmol)，接著添加N-甲基嗎啉(2.8mL，25.8mmol)。混合物在-30℃下攪拌15分鐘。產生N-甲基嗎啉鹽且自混合物過濾。母液冷卻至-30℃，其中在添加硼氫化鈉(1.22g，32.3mmol)後，接著立即添加水(25mL)。反應混合物在-20℃下攪拌15分鐘，接著逐漸溫至室溫。反應混合物在室溫下攪拌30分鐘。接著反應混合物用水稀釋，用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮，得到呈無色油狀之((2R,3S)-3-(第三丁氧基)-1-羥基丁-2- 基)胺基甲酸(9H-茀-9-基)甲酯(8.11g，21.15mmol，98%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.18(s,9 H)1.24(d,J=5.87Hz,3 H)4.11-4.26(m,2 H)4.42(d,J=7.04Hz,2 H)5.73(d,J=7.43Hz,1 H)7.29-7.35(m,2 H)7.38-7.45(m,2 H)7.61(t,J=6.06Hz,2 H)7.78(d,J=7.43Hz,2 H).)。LCMS m/z 384.3(M+H)+,Rt 0.96min。
步驟2
向具有攪拌棒之圓底燒瓶中添加((2R,3S)-3-(第三丁氧基)-1-羥基丁-2-基)胺基甲酸(9H-茀-9-基)甲酯(4.7g，12.3mmol)及乙腈(100mL)，接著添加哌啶(1.8mL，18.4mmol)。將燒瓶蓋好且在室溫下攪拌18小時。接著移除揮發性物質。產生白色固體，其含有胺基醇產物且fmoc去保護副產物。固體再溶解於乙腈(50ml)中(一些fmoc聚合物不可溶)且添加2,4-二氯嘧啶(5.48g，36.8mmol)及DIEA(2.141mL，12.26mmol)。所得反應混合物在室溫下攪拌18小時。再次移除揮發性物質。反應混合物用水稀釋且用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至100%)得到呈無色油狀之(2R,3S)-3-(第三丁氧基)-2-((2-氯嘧啶-4-基)胺基)丁-1-醇(1.80g，6.58mmol，54%產率)，其在靜置後結晶。LCMS m/z 274.1(M+H)+,Rt 0.56min。
步驟3
在氮氣下，向含有(2R,3S)-3-(第三丁氧基)-2-((2-氯嘧啶-4-基)胺基)丁-1-醇(1.8g，6.58mmol)及攪拌棒之圓底燒瓶中添加DCM(66ml)。所得反應混合物在乾冰/丙酮浴中冷卻至-70℃。向此冷的溶液中添加三光氣(1.07g，3.62mmol)，接著添加2,6-二甲基吡啶(3.6mL，30.9mmol)。將所得反應混合物逐漸溫至室溫且在室溫下攪拌30分鐘。反應混合物用DCM及水稀釋，且在室溫下攪拌1小時。接著分配各相且水性物質用DCM萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥 (Na2SO4)，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至100%)得到呈白色結晶狀之(R)-4-((S)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-氯嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(1.44g，4.80mmol，73%產率)。LCMS m/z 300.1(M+H)+,Rt 0.91min。
中間物13：(R)-4-((R)-1-第三丁氧基乙基)-3-(2,6-二氯嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
(R)-4-((R)-1-第三丁氧基乙基)唑啶-2-酮(0.830g，4.43mmol)及2,4,6-三氯嘧啶(0.894g，4.88mmol，1.10當量)於DMF(15mL)中之溶液用NaH(60%，0.248g，6.21mmol，1.40當量)處理，接著所得混合物(黃色)在室溫下攪拌1小時。反應混合物用EtOAc(100mL)稀釋且用飽和NaCl水溶液(100mL)淬滅。分離各層且水層用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。合併之有機層經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至40%)得到(R)-4-((R)-1-第三丁氧基乙基)-3-(2,6-二氯嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(1.0g，白色固體)，69%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.22(s,1H),4.70-4.66(m,2H),4.45-4.40(m,2H),1.26(s,9H),1.04(d,J=6.6Hz,3H)；MS m/z 334.0(M+H)+；Rt-1.10min。
中間物14：(R)-4-((R)-1-第三丁氧基乙基)-3-(6-(二氟甲基)-2-(甲硫基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
(R)-4-((R)-1-第三丁氧基乙基)唑啶-2-酮(0.100g，0.534mmol)及4-氯-6-(二氟甲基)-2-(甲硫基)嘧啶(0.124g，0.587mmol，1.10當量)於DMF(2.7mL)中之溶液用NaH(60%，0.026g，0.64mmol，1.20當量)處理，接著所得混合物(黃色)在室溫下攪拌30分鐘。反應混合物用EtOAc(20mL)稀釋，用飽和NaCl水溶液(2×20mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至40%)得到(R)-4-((R)-1-第三丁氧基乙基)-3-(6-(二氟甲基)-2-(甲硫基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(0.164g，白色固體)，85%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.15(s,1H),6.45(t,J=54Hz,1H),4.80-4.72(m,1H),4.66(dd,J=9.4,3.0Hz,1H),4.49-4.34(m,2H),2.58(s,3H),1.25(s,9H),1.02(d,J=6.5Hz,3H)；MS m/z 362.3(M+H)+；Rt-1.09min。
中間物15：(R)-4-((R)-1-第三丁氧基乙基)-3-(6-(二氟甲基)-2-(甲基磺醯基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
(R)-4-((R)-1-第三丁氧基乙基)-3-(6-(二氟甲基)-2-(甲硫基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(0.164g，0.454mmol)於DCM(4.5mL)中之溶液在0℃下用m-CPBA(0.244g，1.09mmol，2.4當量)處理。將混合物溫至 室溫且攪拌4小時。反應物小心地用1M硫代硫酸鈉水溶液與飽和碳酸氫鈉水溶液之1：1混合物(20mL)淬滅。混合物用DCM(3×20mL)萃取且合併之有機萃取物用飽和NaCl水溶液(20mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷20%至40%)得到呈白色固體狀之(R)-4-((R)-1-第三丁氧基乙基)-3-(6-(二氟甲基)-2-(甲基磺醯基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮，82%產率。MS m/z 338.1(M+H-第三丁基)+；Rt-0.87min。
中間物16：(R)-4-((R)-1-第三丁氧基乙基)-3-(2-氯-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
(R)-4-((R)-1-第三丁氧基乙基)唑啶-2-酮(0.070g，0.374mmol)及2,4-二氯-6-(三氟甲基)嘧啶(0.089g，0.411mmol，1.10當量)於DMF(1.3mL)中之溶液用NaH(60%，0.018g，0.45mmol，1.20當量)處理，接著所得混合物(黃色)在室溫下攪拌60分鐘。反應混合物用EtOAc(20mL)稀釋，用飽和NaCl水溶液(2×20mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至15%)得到(R)-4-((R)-1-第三丁氧基乙基)-3-(2-氯-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(0.116g。白色固體)，84%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.50(s,1H),4.76(ddd,J=8.5,4.2,2.9Hz,1H),4.70(dd,J=9.5,2.9Hz,1H),4.50-4.42(m,2H),1.26(s,9H),1.04(d,J=6.5Hz,3H)。MS m/z 368.1(M+H)+；Rt-1.10min。
中間物17：(2R,3R)-3-(第三丁氧基)-2-((2-氯-6-甲基嘧啶-4-基)胺基)丁-1-醇
(2R,3R)-2-胺基-3-(第三丁氧基)丁-1-醇(267mg，1.35mmol，1.1當量)、2,4-二氯-6-甲基嘧啶(200mg，1.23mmol，1.0當量)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.54mL，3.1mmol，2.5當量)於1,4-二烷(6mL)中之溶液在75℃下加熱4小時。反應物冷卻至室溫且在真空中濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷)得到(2R,3R)-3-(第三丁氧基)-2-((2-氯-6-甲基嘧啶-4-基)胺基)丁-1-醇(86mg，白色固體)，24%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 6.17(s,1H),4.02(m,2H),3.79-3.64(m,2H),2.30(s,3H),1.22(s,9H),1.18(d,J=6.2Hz,3H)；MS m/z 288.1(M+H)+；Rt-0.59min。
中間物18：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-氯-6-甲基嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
在-78℃下，將三光氣(35mg，0.12mmol，0.4當量)添加至(2R,3R)-3-(第三丁氧基)-2-((2-氯-6-甲基嘧啶-4-基)胺基)丁-1-醇(86mg，0.30mmol)於DCM(3mL)中之溶液中，接著逐滴添加2,6-二甲基吡啶(0.14mL，1.2mmol，4當量)。將溶液溫至室溫且接著在35℃下 加熱5小時。接著反應物冷卻至室溫且用DCM(30mL)及飽和氯化鈉水溶液(30mL)稀釋。分離各層且有機層經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷)得到(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-氯-6-甲基嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(0.057g，白色固體)，61%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.01(s,1H),4.73(ddd,J=8.6,4.1,3.0Hz,1H),4.65(dd,J=9.4,2.9Hz,1H),4.48(m,1H),4.41(m,1H),2.52(s,3H),1.26(s,9H),1.03(d,J=6.5Hz,3H)；MS m/z 314.1(M+H)+；Rt-1.02min。
中間物19：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-氟-6-甲基嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
將氟化鉀(0.063g，1.08mmol，10當量)添加至(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-氯-6-甲基嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(34mg，0.108mmol)於DMSO(1.1mL)中之溶液中。懸浮液在120℃下加熱3小時，且接著冷卻至室溫。反應物用乙酸乙酯(20mL)及水(20mL)稀釋。分離各層且用水層乙酸乙酯(20mL)萃取。合併之有機層經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮，得到粗(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-氟-6-甲基嘧啶-4-基)唑啶-2-酮，其未經進一步純化即使用。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.99(d,J=3.8Hz,1H),4.71(m,1H),4.65(m,1H),4.46(m,1H),4.41(m,1H),2.53(s,3H),1.25(s,9H),1.03(d,J=6.5Hz,3H)；MS m/z 298.2(M+H)+；Rt-0.96min。
中間物20：6-((R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-2-側氧基唑啶-3-基)- 2-氯嘧啶-4-甲酸甲酯
在0℃下，將氫化鈉(礦物油中60%分散液，23mg，0.58mmol，1.2當量)添加至2,6-二氯嘧啶-4-甲酸甲酯(100mg，0.483mmol)及(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)唑啶-2-酮(90mg，0.483mmol，1當量)於DMF(2.4mL)中之溶液中。懸浮液在0℃下攪拌1小時，此時其變為黃色。反應物用稀的氯化鈉水溶液(20mL)淬滅且用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。合併之萃取物經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷)分離區位異構體且得到6-((R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-2-側氧基唑啶-3-基)-2-氯嘧啶-4-甲酸甲酯(0.111g，白色固體)，64%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.79(s,1H),4.76(m,1H),4.69(dd,J=9.4,2.7Hz,1H),4.52-4.41(m,2H),4.02(s,3H),1.26(s,9H),1.05(d,J=6.6Hz,3H)。MS m/z 358.2(M+H)+；Rt-1.00min。
中間物21：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-氯-6-(羥基甲基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
在0℃下，將硼氫化鈉(60mg，1.59mmol，1.4當量)添加至6-((R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-2-側氧基唑啶-3-基)-2-氯嘧啶-4-甲酸甲酯(400mg，1.12mmol)於甲醇(11.2mL)中之懸浮液中。移除冰浴且反應物在室溫下攪拌1小時。反應物用飽和氯化銨水溶液(100mL)淬滅且用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。合併之萃取物用飽和氯化鈉水溶液(30mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷)得到(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-氯-6-(羥基甲基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(0.220g，白色固體)，60%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.18(s,1H),4.77-4.72(m,3H),4.66(dd,J=9.4,2.9Hz,1H),4.48(m,1H),4.41(m,1H),2.83(m,1H),1.26(s,9H),1.03(d,J=6.6Hz,3H)。MS m/z 330.1(M+H)+；Rt-0.86min。
中間物22：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-氯-6-(氟甲基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
在-78℃下，將N,N-二乙基胺基硫三氟化物(0.13mL，0.98mmol，1.5當量)添加至(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-氯-6-(羥基甲基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(215mg，0.652mmol)於DCM中之溶液中。反應物在-78℃下攪拌1小時，接著溫至室溫且再攪拌1小時。再添加N,N-二乙基胺基硫三氟化物(0.26mL，2.0mmol，3當量)且反應物再攪拌1小時。反應物用水(50mL)淬滅且用DCM(3×25mL)萃取。合併之萃取物用飽和氯化鈉水溶液(30mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷)得到(R)-4-((R)-1- (第三丁氧基)乙基)-3-(2-氯-6-(羥基甲基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(0.165g，白色固體)，76%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.30(s,1H),5.40(d,J=44Hz,1H),4.75(ddd,J=8.6,4.1,3.0Hz,1H),4.67(dd,J=9.4,2.9Hz,1H),4.49(m,1H),4.43(m,1H),1.27(s,9H),1.04(d,J=6.5Hz,3H)。MS m/z 332.1(M+H)+；Rt-1.02min。
中間物23：(S)-4,6-二氟-N-(1-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)乙基)嘧啶-2-胺
在室溫下，將(S)-1-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)乙胺(175mg，0.724mmol)添加至2,4,6-三氟嘧啶(146mg，1.09mmol，1.5當量)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.32mL，1.8mmol，2.5當量)於1,4-二烷中之溶液中。混合物在室溫下攪拌1小時且接著在真空中濃縮反應物。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷)得到(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-氯-6-(羥基甲基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(0.085g)，37%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.82(s,1H),7.68(s,1H),7.62(dd,J=8.9,4.6Hz,1H),7.18-7.11,(m,2H),5.80(t,J=1.2Hz,1H),5.49(m,1H),5.25(m,1H),1.62(d,J=6.8Hz,3H)。MS m/z 320.1(M+H)+；Rt-0.95min。
藉由與關於中間物23之製備所描述之方法類似的方法製備表1a中之中間物。
中間物26：(R)-4-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)唑啶-2-酮
在室溫下，將咪唑(1.74g，25.6mmol，2.0當量)添加至(S)-4-(羥基甲基)唑啶-2-酮(1.5g，12.8mmol)及第三丁基氯二苯基矽烷(3.95mL，15.4mmol，1.2當量)於DCM(43mL)中之溶液中。形成白色沈澱。在室溫下攪拌溶液16小時，且接著用水稀釋(50mL)。分離各層且水層用DCM(50mL)萃取。合併之有機萃取物用飽和氯化鈉水溶液(50mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷20%至65%)得到(R)-4-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲 基)唑啶-2-酮(3.55g，黏稠無色油)，78%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.64(m,4H),7.50-7.38(m,6H),5.31(m,1H),4.44(t,J=8.7Hz,1H),4.15(m,1H),4.00(m,1H),3.65(d,J=5.5Hz,2H),1.07(s,9H)。MS m/z 356.1(M+H)+；Rt-1.00min。
中間物27：(R)-4-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
將氫化鈉(34mg，0.84mmol，1.5當量)小心地添加至(R)-4-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)唑啶-2-酮(200mg，0.563mmol)於DMF(2.8mL)中之溶液中。混合物在室溫下攪拌20分鐘，且接著添加2,4-二氟嘧啶(0.072mL，0.84mmol，1.5當量)(起泡)。攪拌黃色懸浮液10分鐘且接著反應物小心地用飽和氯化銨水溶液(5mL)淬滅。添加水(20mL)且混合物用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。合併之有機萃取物用飽和氯化鈉水溶液(20mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷30%)得到(R)-4-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(0.185g，黏稠無色油)，73%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.44(dd,J=5.8,2.2Hz,1H),8.12(dd,J=5.8,3.4Hz,1H),7.58(m,2H),7.48-7.32(m,6H),7.23(m,2H),4.80(m,1H),4.65(dd,J=8.6,3.0Hz,1H),4.55(m,1H),4.18(dd,J=11.1,3.5Hz,1H),3.83(dd,J=11.1,2.1Hz,1H),1.04(s,9H)。MS m/z 452.3(M+H)+；Rt-1.15min。
中間物28：(S)-3-(2-氟嘧啶-4-基)-4-(羥基甲基)唑啶-2-酮
在室溫下，將氟化四丁基銨之溶液(1.0M於THF中，0.44mL，0.44mmol，1.1當量)添加至(R)-4-(((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)甲基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(180mg，0.40mmol)於THF(4mL)中之溶液中。溶液攪拌1小時且接著用飽和氯化鈉水溶液(30mL)稀釋。混合物用乙酸乙酯(2×30mL)萃取且合併之萃取物經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷)得到(S)-3-(2-氟嘧啶-4-基)-4-(羥基甲基)唑啶-2-酮(0.051g，白色固體)，60%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.51(dd,J=5.8,2.1Hz,1H),8.19(dd,J=5.8,3.8Hz,1H),4.86(dq,J=8.1,4.0Hz,1H),4.55(m,2H),4.09(m,1H),3.96(m,1H),2.18(t,J=5.4Hz,1H)。MS m/z 214.0(M+H)+；Rt-0.37min。
中間物29：(R)-4-(氟甲基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
在室溫下，將全氟丁烷磺醯氟(0.18mL，0.98mmol，4當量)添加至(S)-3-(2-氟嘧啶-4-基)-4-(羥基甲基)唑啶-2-酮(52mg，0.24mmol)於THF(1.2mL)中之溶液中。接著添加三氫氟化三乙胺(0.16mL，0.98mmol，4當量)及三乙胺(0.41mL，3.0mmol，12當量)且溶液在40℃下攪拌18小時。接著反應物冷卻至室溫且用水(25mL)稀釋。混合物用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。合併之有機萃取物用飽和氯化鈉水 溶液(10mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷)得到(R)-4-(氟甲基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(0.021g，無色油)，40%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.53(dd,J=5.7,2.1Hz,1H),8.18(dd,J=5.7,3.7Hz,1H),5.08-4.93(m,2H),4.91-4.72(m,1H),4.66-4.55(m,2H)。MS m/z 215.9(M+H)+；Rt-0.57min。
中間物30：(R)-4-((R)-1-氟乙基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
步驟1
含有攪拌棒及含(2S,3S)-2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3-(第三丁氧基)丁酸DCHA(10g，20.4mmol)之THF(160mL)之圓底燒瓶在氮氣下於乾冰/丙酮浴中冷卻至-30℃。向此冷的白色懸浮液中添加氯甲酸異丁酯(3.2mL，24.5mmol)，接著添加N-甲基嗎啉(2.7mL，24.5mmol)。混合物在-30℃下攪拌20分鐘。產生N-甲基嗎啉鹽且自混合物過濾。母液冷卻至-30℃，其中在添加硼氫化鈉(1.16g，30.6mmol)後，接著立即添加水(20mL)。反應混合物在-20℃下攪拌15分鐘，接著逐漸溫至室溫。反應混合物在室溫下攪拌30分鐘。接著反應混合物用水稀釋且用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮，得到呈無色油狀之((2R,3S)-3-(第三丁氧基)-1-羥基丁-2-基)胺基甲酸苯甲酯(5.27g，17.8mmol，88%產率)。LCMS m/z 296.1(M+H)+,Rt 0.84min。
步驟2
向含有((2R,3S)-3-(第三丁氧基)-1-羥基丁-2-基)胺基甲酸苯甲酯 (5.27g，17.8mmol)之圓底燒瓶中添加MeOH(100mL)。溶液用氮氣脫氣15分鐘，此時添加含披鈀碳(0.95g，0.89mmol)之MeOH(5mL)。接著插入氫氣氛圍中。當添加水(2mL)時，所得反應混合物在室溫下在大氣壓力下攪拌40分鐘，且再次在大氣壓下插入氫氣氛圍，且隨後反應混合物在室溫下攪拌18小時。反應混合物經矽藻土墊過濾且濃縮至褐色油。油再溶解於甲苯中且濃縮得到呈褐色油狀之(2R,3S)-2-胺基-3-(第三丁氧基)丁-1-醇(2.5g，15.5mmol，87%產率)。LCMS m/z 162.1(M+H)+,Rt 0.41min(僅物質離子，無UV峰)。
步驟3
向含有(2R,3S)-2-胺基-3-(第三丁氧基)丁-1-醇(1.25g，7.75mmol)及攪拌棒之圓底燒瓶中添加乙腈(50mL)，接著添加2,4-二氟嘧啶(0.99g，8.53mmol)及DIEA(4.1mL，23.3mmol)。所得反應混合物在室溫下攪拌1小時。接著移除揮發性物質。將殘餘物分配於EtOAc與水之間。水層用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮得到(2R,3S)-3-(第三丁氧基)-2-((2-氟嘧啶-4-基)胺基)丁-1-醇之黏性黃色油(1.5g，5.83mmol，75%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ ppm 1.14(s,9 H)1.31(d,J=6.26Hz,3 H)3.64(d,J=12.91Hz,2 H)3.86(br.s.,1 H)4.26(d,J=10.17Hz,1 H)6.09(br.s.,1 H)6.25(br.s.,1 H)7.99(br.s.,1 H)。LCMS m/z 258.2(M+H)+,Rt 0.62min
步驟4
在氮氣下，向含有(2R,3S)-3-(第三丁氧基)-2-((2-氟嘧啶-4-基)胺基)丁-1-醇(1.5g，5.83mmol)及攪拌棒之圓底燒瓶中添加DCM(58ml)。所得反應混合物在乾冰/丙酮浴中冷卻至-70℃。向此冷的溶液中添加三光氣(0.95g，3.21mmol)，接著添加2,6-二甲基吡啶(2.7mL，23.3mmol)。所得反應混合物溫至室溫且攪拌1小時。
接著反應混合物用DCM及水稀釋，且在室溫下攪拌1小時。接著分配各相且水相用DCM萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至100%)得到呈白色結晶狀之(R)-4-((S)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(502mg，1.77mmol，30%產率)。LCMS m/z 284.1(M+H)+,Rt 0.89min。
步驟5
向含有(R)-4-((S)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(502mg，1.77mmol)之圓底燒瓶中添加DCM(4mL)及TFA(4mL)。所得反應混合物在室溫下攪拌1小時。接著移除揮發性物質且殘餘物用飽和NaHCO3溶液中和。水性混合物用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮得到(R)-3-(2-氟嘧啶-4-基)-4-((S)-1-羥乙基)唑啶-2-酮之無色殘餘物(382mg，1.68mmol，95%產率)。LCMS m/z 228.1(M+H)+,Rt 0.44min。
步驟6
向含有(R)-3-(2-氟嘧啶-4-基)-4-((S)-1-羥乙基)唑啶-2-酮(348mg，1.53mmol)於THF(5.1mL)中之溶液之圓底燒瓶中添加全氟丁烷磺醯氟(0.83mL，4.60mmol)，接著添加三氫氟化三乙胺(0.75mL，4.60mmol)及三乙胺(1.9mL，13.8mmol)。所得反應混合物在室溫下攪拌6小時。反應混合物用水稀釋且水性混合物用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至60%)得到(R)-4-((R)-1-氟乙基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(125mg，0.44mmol，28%產率)，其在靜置後結晶。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.34(dd,J=24.26,6.65Hz,3 H)4.45-4.55(m,1 H)4.61-4.68(m,1 H)5.11(dt,J=7.63,4.01Hz,1 H)5.30-5.52(m,1 H)8.13-8.17(m,1 H)8.52(d,J=5.87Hz,1 H)。 LCMS m/z 230.0(M+H)+,Rt 0.66min。
中間物31：(R)-3-(2,5-二氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-氟乙基)唑啶-2-酮
步驟1
向含有(2R,3S)-2-胺基-3-(第三丁氧基)丁-1-醇(1.25g，7.75mmol)及攪拌棒之圓底燒瓶中添加乙腈(50mL)，接著添加2,4,5-三氟嘧啶(1.04g，7.75mmol)及DIEA(4.1mL，23.3mmol)。所得反應混合物在室溫下攪拌1小時。接著移除揮發性物質。接著將反應混合物分配於EtOAc與水之間。水層用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮得到(2R,3S)-3-(第三丁氧基)-2-((2,5-二氟嘧啶-4-基)胺基)丁-1-醇之黏性黃色油(1.56g，5.67mmol，73%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.15(s,9 H)1.32(d,J=6.26Hz,3 H)3.45(br.s.,1 H)3.67(d,J=11.35Hz,1 H)3.85-3.92(m,1 H)4.27(d,J=11.74Hz,1 H)6.29(d,J=5.48Hz,1 H)7.87(d,J=2.35Hz,1 H)。LCMS m/z 276.4(M+H)+,Rt 0.71min。
步驟2
在氮氣下，向含有(2R,3S)-3-(第三丁氧基)-2-((2,5-二氟嘧啶-4-基)胺基)丁-1-醇(1.56g，5.67mmol)及攪拌棒之圓底燒瓶中添加DCM(57ml)。所得反應混合物在乾冰/丙酮浴中冷卻至-70℃。向此冷的溶液中添加三光氣(0.93g，3.12mmol)，接著添加2,6-二甲基吡啶(2.64mL，22.7mmol)。所得反應混合物溫至室溫且在室溫下攪拌90小時。接著反應混合物用DCM及水稀釋，且在室溫下攪拌1小時。接著分配各相且水相用DCM萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥 (Na2SO4)，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至100%)得到呈白色結晶狀之(R)-4-((S)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2,5-二氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(0.59g，1.96mmol，35%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.03(s,9 H)1.16(d,J=6.65Hz,3 H)4.15(qd,J=6.39,1.96Hz,1 H)4.43-4.52(m,1 H)4.59-4.72(m,2 H)8.43(d,J=1.57Hz,1 H).LCMS m/z 246.0(-第三丁基片段)(M+H)+,Rt 0.88min。
步驟3
向含有(R)-4-((S)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2,5-二氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(590mg，1.96mmol)之圓底燒瓶中添加DCM(4mL)及TFA(4mL)。所得反應混合物在室溫下攪拌1小時。接著移除揮發性物質。殘餘物用飽和NaHCO3溶液中和且水性混合物用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮得到(R)-3-(2,5-二氟嘧啶-4-基)-4-((S)-1-羥乙基)唑啶-2-酮之無色殘餘物(470mg，1.917mmol，98%產率)。LCMS m/z 246.0(M+H)+,Rt 0.41min。
步驟4
向含有(R)-3-(2,5-二氟嘧啶-4-基)-4-((S)-1-羥乙基)唑啶-2-酮(0.47，1.917mmol)於THF(6.4mL)中之溶液之圓底燒瓶中添加全氟丁烷磺醯氟(1.03mL，5.75mmol)，接著添加三氫氟化三乙胺(0.94mL，5.75mmol)及三乙胺(2.40mL，17.3mmol)，所得反應混合物在室溫下攪拌6小時。反應混合物用水稀釋且水性混合物用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至60%)得到(R)-3-(2,5-二氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-氟乙基)唑啶-2-酮之白色結晶(150mg，0.61mmol，32%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.37(dd,J=24.26, 6.26Hz,3 H)4.48(dd,J=9.39,4.70Hz,1 H)4.63(t,J=8.80Hz,1 H)4.90-5.02(m,1 H)5.02-5.25(m,1 H)8.50(s,1 H)。LCMS m/z 248.0(M+H)+,Rt 0.59min。
中間物32：
步驟1
向含有(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(2.1g，7.41mmol)之圓底燒瓶中添加DCM(18.5mL)及TFA(18.5mL)。所得反應混合物在室溫下攪拌1小時。接著移除揮發性物質且殘餘物用飽和NaHCO3溶液中和。接著水性混合物用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮得到(R)-3-(2-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮之無色殘餘物(1.52g，6.69mmol，90%產率)，其在靜置後結晶。LCMS m/z 228.0(M+H)+,Rt 0.44min。
步驟2
向含有(R)-3-(2-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮(1.52g，6.69mmol)於THF(22mL)中之溶液中添加全氟丁烷磺醯氟(3.6mL，20.1mmol)，接著添加三氫氟化三乙胺(3.3mL，20.1mmol)及三乙胺(8.4mL，60.2mmol)。所得反應混合物在室溫下攪拌2小時。接著反應混合物用水稀釋且水性混合物用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至60%)得到(R)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮之白色結晶(207mg，0.90mmol，14%產率)。1H NMR (400MHz,CDCl3)δ 1.44(dd,J=23.48,6.26Hz,3 H)4.47-4.57(m,1 H)4.66(dd,J=8.80,3.33Hz,1 H)4.71-4.86(m,1 H)5.22-5.45(m,1 H)8.21(dd,J=5.48,3.91Hz,1 H)8.52(dd,J=5.48,1.96Hz,1 H)。LCMS m/z 230.1(M+H)+,Rt 0.63min。
用於製備中間物32之替代性方法：
向經冷卻(0℃)之2,4-二氟嘧啶(160mg，1.375mmol)及(R)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮(183mg，1.375mmol)於DMF(體積：4.6mL)中之溶液中添加NaH(60%於礦物油中，66.0mg，1.650mmol)。所得混合物在0℃下攪拌30分鐘且在室溫下攪拌2小時。由LC-MS觀測所需產物。混合物用鹽水(1ml)淬滅。用EtOAc(20ml)及水(10ml)稀釋，且分離各層。有機物用額外的20mL EtOAc萃取。合併之有機物用鹽水洗滌，乾燥且濃縮。粗物質經由急驟管柱層析(10%-100% EtOAc/庚烷)純化，得到(R)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮，210mg白色固體。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.51(dd,J=5.8,2.1Hz,1H),8.20(dd,J=5.7,3.7Hz,1H),5.33(dqd,J=49.5,6.6,1.3Hz,1H),4.77(dddd,J=26.5,9.1,3.4,1.4Hz,1H),4.65(dd,J=9.0,3.4Hz,1H),4.50(td,J=9.0,1.3Hz,1H),1.43(dd,J=23.1,6.6Hz,3H).MS m/z 230.1(M+H).
中間物33：4-(2-氟丙-2-基)唑啶-2-酮
步驟1：製備2-胺基-3-氟-3-甲基丁-1-醇
向LiBH4(2M於THF中，7.40mL，14.8mmol)及三甲基氯矽烷(3.78mL，29.6mmol)於THF(7mL)中之溶液中添加3-氟-D,L-纈胺酸(1g，7.40mmol)。所得混合物在室溫下攪拌24小時。反應混合物用甲醇淬滅，且接著在減壓下濃縮，得到油性產物。油性產物用DCM及10%碳酸氫鈉水溶液稀釋，且接著在室溫下攪拌約16小時。分離之有機層用飽和碳酸氫鈉水溶液及鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到呈固體狀之2-胺基-3-氟-3-甲基丁-1-醇(350mg),其未經進一步純化即使用。MS m/z 121.9(M+H)+；Rt-0.16min。
步驟2：製備4-(2-氟丙-2-基) 唑啶-2-酮
向N,N'-羰基二咪唑(530mg，3.27mmol)於THF(5mL)中之溶液中緩慢添加2-胺基-3-氟-3-甲基丁-1-醇(360mg，2.97mmol)於THF(10mL)中之溶液。反應混合物在室溫下攪拌18小時，用DCM稀釋且再攪拌30分鐘。分離之有機層用水及鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。藉由管柱層析[SiO2，12g，EtOAc/庚烷=0/100至80/20]純化殘餘物得到呈褐色固體狀之4-(2-氟丙-2-基)唑啶-2-酮(150mg)。MS m/z 148.0(M+H)+；Rt-0.32min。1H NMR(400Mhz,CDCl3)δ ppm 6.30(br.s.,1H),4.39-4.54(m,1H),4.26(dd,J=8.9,5.1Hz,1H),3.84-3.99(m,1H),1.29-1.45(m,6H).
中間物34：3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-(2-氟丙-2-基)唑啶-2-酮
向2,4-二氯嘧啶(150mg，1.006mmol)及4-(2-氟丙-2-基)唑啶-2-酮(148mg，1.01mmol)於DMF(4.5mL)中之溶液中添加氫化鈉(60重量%，89mg，2.21mmol)，得到淡黃色混合物。混合物在室溫下攪拌2小時，用EtOAc稀釋且再攪拌30分鐘。分離之有機層用飽和碳酸氫鈉水溶液、水及鹽水洗滌。有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。藉由管柱層析[SiO2，12g，EtOAc/庚烷=0/100至80/20]純化殘餘物得到呈褐色固體狀之3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-(2-氟丙-2-基)唑啶-2-酮(150mg)。MS m/z 260.1(M+H)+；Rt-0.72min.1H NMR(400Mhz,CDCl3)δ ppm 8.51(d,J=5.9Hz,1H),8.17(d,J=5.9Hz,1H),5.14(dd,J=17.4,8.0Hz,1H),4.66(d,J=9.4Hz,1H),4.43-4.52(m,1H),1.42-1.52(m,3H),1.30-1.40(m,3H).
中間物35：(S)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)唑啶-2-酮
步驟1：(S)-3-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-羥基丁酸苯甲酯
參考：V.L.Truong等人；Synlett 2005,8,1279-1280。
在-40℃(乾冰/乙腈浴)下，經5分鐘向Boc-Asp(OBnzl)-OH(20g，61.9mmol)於DME(60mL)中之溶液中添加N-甲基嗎啉(7.07mL，64.3mmol)，接著經15分鐘逐滴添加氯甲酸異丁酯(8.53ml，64.9 mmol)，保持溫度低於-10℃。攪拌混合物30分鐘(-30℃至-40℃)。快速濾出固體且用DME(60mL)沖洗。透明濾液冷卻至-35℃且逐滴添加NaBH4(2.93g，78mmol)於30mL水中之溶液，保持溫度介於-30℃與-15℃之間[警告：氣體放泄]。經30分鐘向白色懸浮液中逐滴添加水(332mL)，保持溫度低於-15℃。過濾黏稠白色漿料，用水(300mL)沖洗。過濾之固體溶解於DCM(250mL)中。溶液經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到呈白色固體狀之(S)-3-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-羥基丁酸苯甲酯(16.35g)。MS m/z 254.2(M-第三丁基)+；Rt-0.78min。1H NMR(400Mhz,D3C(CO)CD3)δ ppm 7.45-7.28(m,4 H),5.92-5.80(m,1 H),5.11(s,2 H),4.07-3.91(m,1 H),3.67-3.48(m,2 H),2.82-2.77(m,1H),2.74-2.68(m,1 H),2.61-2.52(m,1 H),1.39(s,9 H).
步驟2：製備(S)-2-(2-側氧基 唑啶-4-基)乙酸苯甲酯
參考：V.L.Truong等人；Synlett 2005,8,1279-1280。
在0℃下，經5分鐘分兩份向(S)-3-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-羥基丁酸苯甲酯(16.3g，52.7mmol)及吡啶(10.65ml，132mmol)於DCE(157mL)中之溶液中添加對甲苯磺酸酐(17.10g，52.4mmol)。攪拌混合物數分鐘，接著溫至室溫且攪拌1小時。混合物在92℃下加熱6小時，且接著冷卻至室溫。混合物用DCM(80mL)稀釋，用1N鹽酸水溶液(2×200mL)、鹽水(200mL)及飽和碳酸氫鈉水溶液(100mL)洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。藉由管柱層析[SiO2，220g，EtOAc/庚烷=5/95至75/25]純化殘餘物得到呈白色固體 狀之(S)-2-(2-側氧基唑啶-4-基)乙酸苯甲酯(10.0g)。MS m/z 236.2(M+H)+；Rt-0.59min。
步驟3：製備(R)-2-((S)-2-側氧基 唑啶-4-基)丙酸苯甲酯
在氬氣氛圍下向雙(三甲基矽烷基)醯胺鈉(1M於THF中；68.0mL)之溶液中添加THF(40.4mL)。混合物冷卻至-78℃且經約15分鐘緩慢添加(S)-2-(2-側氧基唑啶-4-基)乙酸苯甲酯(7.80g，33.2mmol)於THF(85mL)中之溶液。混合物在-78℃下攪拌1小時且經約10分鐘緩慢添加碘甲烷(4.25mL，68.0mmol)於THF(40.4mL)中之溶液。反應混合物在-78℃下攪拌1小時且在-40℃下攪拌約1小時。混合物用飽和氯化銨水溶液(約100mL)淬滅且溫至室溫。混合物用DCM(3x)萃取。合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。藉由管柱層析[SiO2，220g，EtOAc/庚烷]純化殘餘物得到呈無色油狀之(R)-2-((S)-2-側氧基唑啶-4-基)丙酸苯甲酯(7.47g)。MS m/z 250.1(M+H)+；Rt-0.65min。1H NMR(400Mhz,DMSO-d6)δ ppm 7.85(s,1 H),7.44-7.28(m,5 H),5.10(s,2 H),4.36(t,J=1.0Hz,1 H),4.11(dd,J=5.4,8.9Hz,1 H),4.06-3.98(m,1 H),2.69(quin,J=6.9Hz,1 H),1.08(d,J=7.1Hz,3 H).
步驟4：製備(R)-2-((S)-2-側氧基 唑啶-4-基)丙酸
向(R)-2-((S)-2-側氧基唑啶-4-基)丙酸苯甲酯(1.99g，7.98mmol)於THF(18.7mL)中之溶液中添加Pd/C(10重量%，德固賽(Degussa)；0.425g)。混合物在室溫下在氫氣氛圍(氣球)下攪拌4小時。混合物經矽藻土塞過濾且用THF沖洗若干次。在減壓下濃縮濾液得到呈白色固體狀之(R)-2-((S)-2-側氧基唑啶-4-基)丙酸(1.17g)，其未經進一步純化即直接使用。MS m/z 160.0(M+H)+；Rt-0.26min。1H NMR(400Mhz,CD3OD)δ ppm 4.53-4.47(m,1 H),4.26(dd,J=5.7,9.1Hz,1 H),4.13(td,J=6.0,8.8Hz,1 H),2.69-2.61(m,1 H),1.18(d,J=7.2Hz,3 H).
步驟5：製備(R)-N-甲氧基-N-甲基-2-((S)-2-側氧基 唑啶-4-基)丙醯胺
在0℃下，向(R)-2-((S)-2-側氧基唑啶-4-基)丙酸(1.1g，6.91mmol)於DCM(20mL)中之混合物中添加1-氯-N,N,2-三甲基丙-1-烯-1-胺(1.385g，10.37mmol)。移除冰浴且混合物在環境溫度下攪拌30分鐘。添加N,O-二甲基羥基胺(1.011g，10.37mmol)及吡啶(1.677mL，20.74mmol)於DCM(20mL)中之混合物且繼續攪拌約1小時。混合物用水(約2mL)及飽和碳酸氫鈉溶液(約2mL)稀釋且攪拌約15分鐘。混合物用二氯甲烷(約30mL)稀釋。分離之水層用DCM(1x)萃取，合併有機層，經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到呈橙色油狀之粗(R)-N-甲氧基-N-甲基-2-((S)-2-側氧基唑啶-4-基)丙醯胺(2.73g)，其未經進一步純化即直接使用。MS m/z 203.1(M+H)+；Rt-0.36min。
步驟6：製備(R)-2-((S)-3-苯甲基-2-側氧基 唑啶-4-基)-N-甲氧基-N- 甲基丙醯胺
在0℃下，向粗(R)-N-甲氧基-N-甲基-2-((S)-2-側氧基唑啶-4-基)丙醯胺(1.3g，6.43mmol)及(溴甲基)苯(1.30mL，11.4mmol)於THF(25mL)中之混合物中緩慢添加氫化鈉(60重量%，0.643g)[警告：氣體放泄！]。移除冰浴且攪拌混合物約2小時。混合物用水及乙酸乙酯小心稀釋。反應以相同規模重複且合併混合物。分離水層且用乙酸乙酯萃取(1x)。合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。藉由管柱層析[SiO2，80g，EtOAc/庚烷=5/95至75/25]純化殘餘物，得到呈淡黃色油狀之(R)-2-((S)-3-苯甲基-2-側氧基唑啶-4-基)-N-甲氧基-N-甲基丙醯胺(1.83g)，其亦含有N-甲氧基-N-甲基異丁醯胺。MS m/z 293.7(M+H)+；Rt-0.64min。
步驟7：製備(R)-2-((S)-3-苯甲基-2-側氧基 唑啶-4-基)丙醛
在-78℃下向，來自步驟6之(R)-2-((S)-3-苯甲基-2-側氧基唑啶-4-基)-N-甲氧基-N-甲基丙醯胺(1.5g，5.13mmol)於THF(30mL)中之溶液中逐滴添加DIBAL-H(己烷中之1M溶液；11.29mL)。混合物在-78℃下攪拌90分鐘，用洛歇爾鹽溶液(1M水溶液；約20mL)緩慢稀釋且劇烈攪拌約15分鐘。分離水層且用乙酸乙酯萃取(3x)。合併之有機萃取物用飽和碳酸氫鈉溶液及鹽水洗滌，經矽藻土/矽膠之混合物過 濾。濾液在減壓下濃縮得到呈無色油狀之(R)-2-((S)-3-苯甲基-2-側氧基唑啶-4-基)丙醛(1.26g)，其未經進一步純化即直接使用。MS m/z 234.2(M+H)+；Rt-0.60min。
步驟8：製備(S)-3-苯甲基-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基) 唑啶-2-酮
在0℃下，向(R)-2-((S)-3-苯甲基-2-側氧基唑啶-4-基)丙醛(1.26g，5.40mmol)於DCM(13mL)中之溶液中緩慢添加DAST(2.85mL，21.6mmol)。混合物溫至室溫且攪拌隔夜。混合物用冰-水小心稀釋。分離之水層用DCM(3x)萃取。合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。藉由管柱層析[SiO2；80g，乙酸乙酯/庚烷]純化殘餘物得到呈淡黃色油狀之(S)-3-苯甲基-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)唑啶-2-酮(627mg)。MS m/z 255.7/257.3(M+H)+；Rt-0.80min。1H NMR(400Mhz,CD3OD)δ ppm 7.31-7.43(m,5 H),5.86(dt,J=1.0Hz,1 H),4.70(d,J=15.3Hz,1 H),4.32(d,J=7.4Hz,2 H),4.23(d,J=15.7Hz,1 H),4.06(td,J=7.4,2.7Hz,1 H),2.40-2.59(m,1 H),0.98(d,J=7.0Hz,3 H).
步驟9：製備(S)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基) 唑啶-2-酮
在-50℃下在氬氣下，向液氨中緩慢添加(S)-3-苯甲基-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)唑啶-2-酮(627mg)(200mg，0.784mmol)於乙醚(10mL)中之溶液。分三份添加鋰(丸粒；54.4mg，7.84mmol)。反應混合 物變為綠色，接著經約10分鐘變為深蘭綠色。混合物再攪拌15分鐘且接著藉由添加飽和氯化銨水溶液(3mL)緩慢淬滅。混合物緩慢溫至室溫。殘餘物用乙醚(20mL)及水(10mL)稀釋。分離之水層用乙醚(2×25mL)及DCM(3×20mL)萃取。在減壓下獨立地濃縮DCM及乙醚層。殘餘物溶解於DCM中且合併。有機層經硫酸鎂乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到呈無色固體狀之粗(S)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)唑啶-2-酮(114mg)，其未經進一步純化即直接使用。MS m/z 166.1(M+H)+；Rt-0.37min。
中間物36：(S)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
在<0℃(氯化鈉/冰)下，分三份向(S)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)唑啶-2-酮(223mg，1.35mmol)及2,4-二氟嘧啶(157mg，1.35mmol)於DMF(4.09mL)中之溶液中添加氫化鈉(60重量%；70.2mg)。在第一份氫化鈉後，攪拌混合物約5分鐘。經約5分鐘添加剩餘兩份氫化鈉且繼續攪拌30分鐘。混合物用乙酸乙酯(10mL)稀釋，攪拌5分鐘且再用鹽水/水(1/1；10mL)緩慢稀釋。混合物溫至5℃且倒入鹽水/水(1/1；20mL)與乙酸乙酯(20mL)之混合物中。分離水層且用乙酸乙酯(25mL)萃取。合併之有機層用鹽水(40mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。藉由管柱層析[SiO2，12g，EtOAc/庚烷]純化殘餘物得到呈白色固體狀之(S)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(207mg)。
MS m/z 262.1(M+H)+；Rt-0.72min。1H NMR(400Mhz,CD3OD)δ ppm 8.55(dd,J=2.3,5.8Hz,1 H),8.17(dd,J=3.8,5.8Hz,1 H), 6.02(q,J=1.0Hz,1 H),5.17(td,J=3.1,8.3Hz,1 H),4.62-4.52(m,2 H),3.11-2.88(m,1 H),1.05(dd,J=0.7,7.2Hz,3 H).
中間物37：(S)-3-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)唑啶-2-酮
在<0℃(氯化鈉/冰)下，分三份向(S)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)唑啶-2-酮(114mg，0.69mmol)及2,4-二氯-5-氟嘧啶(115mg，0.690mmol)於DMF(2.26mL)中之溶液中添加氫化鈉(60重量%；35.9mg)。在第一份氫化鈉後，攪拌混合物約5分鐘。經約5分鐘添加剩餘兩份氫化鈉且繼續攪拌30分鐘。混合物用乙酸乙酯(10mL)稀釋，攪拌5分鐘且再用鹽水/水(1/1；10mL)緩慢稀釋。混合物溫至5℃且倒入鹽水/水(1/1；10mL)與乙酸乙酯(10mL)之混合物中。分離水層且用乙酸乙酯(25mL)萃取。合併之有機層用鹽水(30mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。藉由管柱層析[SiO2，12g，EtOAc/庚烷]純化殘餘物得到呈白色固體狀之(S)-3-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)唑啶-2-酮(134mg)。MS m/z 296.1(M+H)+；Rt-0.75min。1H NMR(400Mhz,CD3OD)δ ppm 8.69(d,J=2.6Hz,1 H),5.99(q,J=1.0Hz,1 H),5.17(ddd,J=3.5,7.4,8.6Hz,1 H),4.69-4.50(m,2 H),2.88-2.70(m,1 H),1.04(d,J=7.1Hz,3 H).
中間物38：2-(1-疊氮基乙基)-5-(4-氯苯基)-4-甲基唑
將疊氮化鈉(635mg，9.760mmol)及催化量之1,4,7,10,13,16-六氧雜環十八烷添加至2-(1-氯乙基)-5-(4-氯苯基)-4-甲基唑(250mg，0.976mmol)於乙腈(10ml)中之溶液中且在80℃下回流3小時。在真空中濃縮反應物。用0-5% EtOAc/DCM溶離進行急驟管柱層析(二氧化矽，40g)，得到標題化合物(254mg，透明油)。HRMS(C)tR=1.52min；MS m/z 262.0621
中間物39：1-(5-(4-氯苯基)-4-甲基唑-2-基)乙胺
將SiliaBond®二苯基膦(1500mg，1.19mmol/g)添加至2-(1-疊氮基乙基)-5-(4-氯苯基)-4-甲基唑(366mg，1.393mmol)於無水甲醇(15ml)中之溶液中且振盪3小時。過濾反應物且在真空中濃縮。用2%-10% MeOH/DCM溶離進行急驟管柱層析(二氧化矽，40g)得到160mg(白色固體)。HRMS(B)tR=1.73min；MS m/z 236.0716
中間物40：(2S)-N-(2-(4-氯苯基)-2-羥乙基)-2-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)丙醯胺
向2-胺基-1-(4-氯苯基)乙醇(1000mg，5.83mmol)及(S)-2-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)丙酸(1280mg，5.83mmol)於THF(20ml)中之溶液中添加N,N'-甲二亞基二環己胺(1.1當量，1322mg，6.41mmol)且在環境溫度下攪拌12小時。在真空中濃縮，用EtOAc稀釋，用EtOAc洗濾，用水、鹽水洗滌，在真空中濃縮。粗物質直接用於下一步驟中。2g白色固體。HRMS(B)tR=1.04min；MS m/z 373.1
中間物41：(S)-N-(2-(4-氯苯基)-2-側氧基乙基)-2-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)丙醯胺
1,1,1-三乙醯氧基-1,1-二氫-1,2-苯并碘氧雜環戊-3(1H)-酮(3.091g，7.29mmol)添加至(2S)-N-(2-(4-氯苯基)-2-羥乙基)-2-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)丙醯胺(2.173g，5.83mmol)於二氯甲烷(20ml)中之溶液中且攪拌2小時。用二氯甲烷(50ml)稀釋，用飽和碳酸氫鈉溶液及10% Na2S2O3溶液洗滌，乾燥，在真空中濃縮。2.162g(未經進一步純化即直接用於下一步驟中)。HRMS(B)tR=1.24min；MS m/z 371.2
中間物42：(S)-2-(1-(5-(4-氯苯基)唑-2-基)乙基)異吲哚啉-1,3-二酮
將磷醯基三氯化物(1.m7ml，10.8mmol)添加至(S)-N-(2-(4-氯苯基)-2-側氧基乙基)-2-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)丙醯胺(2.162g，5.83mmol)於甲苯中之溶液中且在110℃下加熱15小時。用二氯甲烷(50ml)稀釋，用飽和碳酸氫鈉溶液、水、鹽水洗滌，乾燥且在真空中濃縮。用0-50% EtOAc/DCM溶離進行急驟管柱層析(二氧化矽，80g)，得到純產物430mg(黃色泡沫狀物)。HRMS(B)tR=1.42min；MS m/z 353.1
中間物43：(S)-2-(1-(3-(3-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)異吲哚啉-1,3-二酮
向經攪拌之(Z)-3-氯-N'-羥基苯甲脒(500mg，2.93mmol)及(S)-2-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)丙酸(642mg，2.93mmol)之溶液中添加N,N'-甲二亞基二環己胺(1.1當量，665mg，3.22mmol)且在100℃下回流12小時。在真空中濃縮，用EtOAc稀釋，用EtOAc洗濾，用水、鹽水洗滌，在真空中濃縮。用0-10% EtOAc/DCM溶離進行急驟管柱層析(二氧化矽，40g)得到300mg。HRMS m/z 353.0567
中間物44：(S)-1-(5-(4-氯苯基)唑-2-基)乙胺
將肼(0.55ml，6.09mmol)添加至(S)-2-(1-(5-(4-氯苯基)唑-2-基)乙基)異吲哚啉-1,3-二酮(430mg，1.219mmol)於乙醇(15ml)中之溶液中且在80℃下加熱13小時。在真空中濃縮反應物。用2%-10% MeOH/DCM溶離進行急驟管柱層析(二氧化矽，40g)得到所需產物(200mg，黃色油)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.67-7.51(m,9H),7.47-7.35(m,8H),7.31-7.21(m,1H),4.25(q,J=6.8Hz,4H),1.97-1.66(m,15H),1.63-1.48(m,2H).HRMS(B)tR=1.49min；MS m/z 222.0560
中間物45：(Z)-3-氯-N'-羥基-4-(三氟甲氧基)苯甲脒
向3-氯-4-(三氟甲氧基)苯甲腈(1.0g，4.51mmol)及羥胺鹽酸鹽(1.5當量，0.47g，6.77mmol)於乙醇(10ml)中之溶液中添加N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(1.6當量，1.26ml，7.22mmol)且在80℃下在N2下回流12小時。冷卻至室溫。用EtOAc(25ml)稀釋，用水(25ml)、鹽水(25ml)洗滌，乾燥，在真空中濃縮，得到(Z)-3-氯-N'-羥基-4-(三氟甲氧基)苯甲脒(0.71g，62.1%，白色固體)。粗物質用於下一步驟中。HRMS(B)m/z 254.0070
使用與關於中間物45之製備所描述類似的方法製備表2a中之中間物。
中間物65：(S)-1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基胺基甲酸第三丁酯
4-氯-N'-羥基苯甲脒(1.24g，7.27mmol)、(S)-2-(第三丁氧基羰基胺基)丙酸(1.38g，7.27mmol，1.0當量)及DCC(1.65g，8.00mmol，1.1當量)於1,4-二烷(73mL)中之溶液在100℃下加熱18小時。接著反應物冷卻至室溫且在真空中濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷，0至35%)得到(S)-1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基胺基甲酸第三丁酯(1.13g，白色固體)，48%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.03(d,J=8.8Hz,2H),7.47(d,J=8.8Hz,2H),5.18(m,1H),1.64(d,J=6.8Hz,3H),1.47(s,9H).
中間物66 (S)-(1-(3-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯
向經攪拌之(Z)-3-氯-N'-羥基-4-(三氟甲氧基)苯甲脒(500mg，1.964mmol)及(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)丙酸(372mg，1.964mmol)之溶液中添加N,N'-甲二亞基二環己胺(1.1當量，446mg，2.160mmol)且在100℃下回流12小時。在真空中濃縮，用EtOAc稀釋，用EtOAc洗濾，用水、鹽水洗滌，在真空中濃縮。用0-5% EtOAc/DCM溶離進行急驟管柱層析(二氧化矽，80g)得到230mg。HRMS m/z 407.0860
使用與關於中間物66之製備所描述類似的方法製備表3a中之中間物。
中間物86：(S)-(1-(5-溴吡啶-2-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯
向(S)-1-(5-溴吡啶-2-基)乙胺(300mg，1.49mmol)於DCM(7.5mL)中之溶液中添加二碳酸二-第三丁酯(358mg，1.64mmol)及三乙胺(0.31mL，2.24mmol)。溶液在室溫下攪拌16小時，接著用水及鹽水洗滌。有機層經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至80%)得到白色固體(308mg，68.5%產率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.59(d,J=2.2Hz,1H),7.76(dd,J=8.3,2.4Hz,1H),7.16(d,J=8.3Hz,1H),5.57-5.42(m,1H),4.86-4.73(m,1H),1.43(t,J=3.4Hz,12H)；MS m/z 303.4(M+H).
使用與關於中間物86之製備所描述類似的方法製備表4a中之中間物。
中間物92：(S)-(1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)吡啶-2-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯
在5mL微波小瓶中，(S)-(1-(5-溴吡啶-2-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(60mg，0.2mmol)、(4-氟-3-甲基苯基)酸(37mg，0.24mmol)、碳酸氫鈉(0.2mL，0.4mmol，2M水溶液)於二烷(2mL)中 之溶液用N2鼓泡3分鐘，接著添加Cl2Pd(dppf)CH2Cl2(16mg，0.02mmol)。蓋好之試管在100℃下加熱16小時。冷卻後，反應混合物用EtOAc(10ml)稀釋且用水(10ml)洗滌。分離後，水相用EtOAc(3×10mL)萃取。合併之有機物經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。粗物質經由矽膠管柱層析(含EtOAc之庚烷，12%至100%)純化得到白色固體(66mg，80%產率)。LCMS tR=1.43min；MS m/z 331.1(M+H)。
使用與關於中間物92之製備所描述類似的方法製備表5a中之中間物。
使用與關於中間物92之製備所描述類似的方法製備以下中間物。
中間物106：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(2'-(第三丁基)-[3,4'-聯吡啶]-6-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
LCMS tR=1.67min；MS m/z 519.3(M+H)。
中間物107：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(2'-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)-[3,4'-聯吡啶]-6-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.83(d,J=2.2Hz,1H),8.73(d,J=5.1Hz,1H),8.23(d,J=5.6Hz,1H),7.90(dd,J=8.1,2.3Hz,1H),7.68(s,1H),7.50(d,J=5.8Hz,1H),7.47-7.41(m,2H),5.34(p,J=6.9Hz,1H),4.81-4.72(m,1H),4.64(dd,J=9.3,2.9Hz,1H),4.45(p,J=6.3Hz,1H),4.36(t,J=9.0Hz,1H),1.69(s,6H),1.63(d,J=6.9Hz,3H),1.26(s,9H),1.04(d,J=6.4Hz,3H)；MS m/z 573.3(M+H).
中間物108：(S)-4-(1-(第三丁氧基羰基胺基)乙基)-2-氟苯甲酸
向(S)-4-(1-胺基乙基)-2-氟苯甲酸(5g，22.76mmol)於水(66mL)及THF(66mL)中之溶液中添加二碳酸二-第三丁酯(6.95g，31.9mmol)及碳酸鈉(5.74g，68.3mmol)。溶液在室溫下攪拌16小時，接著在減壓下移除THF。水溶液用1N HCl酸化至pH 3-4且用EtOAc(3×60mL)萃取。合併之有機物經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮，得到白色固體(1.94g，30.1%產率)。粗產物未經進一步純化即用於下一步驟。
1H NMR(400MHz,MeOD)δ 7.89(t,J=7.8Hz,1H),7.20(dd,J=8.2,1.7Hz,1H),7.13(dd,J=12.0,1.6Hz,1H),4.70(d,J=7.1Hz,1H),1.47-1.35(m,12H)；MS m/z 282.0(M-H).
中間物109：(S)-1-(3-氟-4-(甲氧基(甲基)胺甲醯基)苯基)乙基胺基甲 酸第三丁酯
(S)-4-(1-(第三丁氧基羰基胺基)乙基)-2-氟苯甲酸(1.416g，5mmol)、N,O-二甲基羥基胺鹽酸鹽(732mg，7.5mmol)、HATU(2.85g，7.5mmol)及DIPEA(3.49mL，20mmol)於DMF(25mL)中之溶液在室溫下攪拌16小時。反應混合物用EtOAc稀釋且用水洗滌。分離後，水相用EtOAc(2×75mL)洗滌。合併之有機物經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷12%至100%)得到呈白色固體狀之(S)-1-(3-氟-4-(甲氧基(甲基)胺甲醯基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(1.5g，92%產率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.40(t,J=7.4Hz,1H),7.13(dd,J=7.8,1.6Hz,1H),7.04(dd,J=10.7,1.6Hz,1H),4.80(br s,1H),3.56(s,3H),3.34(s,3H),1.50-1.29(m,12H)；MS m/z 327.1(M+H).
中間物110：(S)-1-(3-氟-4-甲醯基苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯
在經冷卻(0℃)之(S)-1-(3-氟-4-(甲氧基(甲基)胺甲醯基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(1.175g，3.6mmol)於THF(36mL)中之溶液中添加LAH於THF中之溶液(1.0M，18mL，18mmol)且所得混合物在0℃下攪拌20分鐘。藉由添加飽和Na2SO4溶液淬滅反應混合物直至氣體放泄 停止。反應混合物用EtOAc(2×100mL)萃取。合併之有機物經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷12%至100%)得到呈白色固體狀之(S)-1-(3-氟-4-甲醯基苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(760mg，79%產率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 10.31(s,1H),7.87-7.80(m,1H),7.20(dd,J=8.2,1.3Hz,1H),7.11(dd,J=11.5,1.4Hz,1H),4.80(br s,1H),1.45(br s,12H)；MS m/z 212.1(M-56+H).
中間物111：(S)-1-(3-氟-4-((3,3,4-三甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯
(S)-1-(3-氟-4-甲醯基苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(267mg，1mmol)及1,2,2-三甲基哌嗪二鹽酸鹽(402mg，2mmol)於THF(5mL)中之溶液在室溫下攪拌1小時且用三乙醯氧基硼氫化鈉(848mg，4mmol)處理。所得混合物在室溫下攪拌16小時。反應混合物用飽和NaHCO3水溶液(15mL)淬滅且用EtOAc(3×25mL)萃取。合併之有機物經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。進行矽膠管柱層析(MeOH/CH2Cl2 0至10%)得到呈白色固體狀之(S)-1-(3-氟-4-((3,3,4-三甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(186mg，49%產率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.35(t,J=7.7Hz,1H),7.03(dd,J=7.9,1.9Hz,1H),6.95(dd,J=11.1,1.8Hz,1H),4.77(s,1H),3.49(s,2H),2.56(br s,4H),2.24(br s,5H),1.42(br s,12H),1.04(s,6H)；MS m/z 380.4(M+H).
中間物112：(S)-1-(4-((4,4-二氟哌啶-1-基)甲基)-3-氟苯基)乙基胺基甲 酸第三丁酯
在中間物111之程序後：自(S)-1-(3-氟-4-甲醯基苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯及4,4-二氟哌啶鹽酸鹽製備呈白色固體狀之標題化合物。LCMS tR=1.63min；MS m/z 371.5(M-H)。
中間物113：1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙酮
1-(5-溴嘧啶-2-基)乙酮(300mg，1.49mmol)、3-(三氟甲基)苯基酸(567mg，2.98mmol)、K3PO4(950mg，4.48mmol)、DavePhos配位體[2-二環己基膦-2'-(N,N-二甲基胺基)聯苯](59mg，0.15mmol)及Pd(OAc)2(17mg，0.075mmol)於6mL甲苯中之溶液在100℃下加熱1小時。混合物冷卻至室溫，且經矽藻土過濾。濾餅用30mL EtOAc沖洗。將濾液倒入20mL水中。分離各層，且水溶液進一步用EtOAc(20mL)萃取。合併之有機物用水(20mL)及鹽水(20mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且直接在矽膠上濃縮。進行管柱層析(10%-100% EtOAc/庚烷)得到0.26g呈棕褐色固體狀之1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙酮。MS m/z 267.1(M+H)+.1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 9.16(s,2H),7.93-7.69(m,4H),2.87(s,3H).
使用與關於中間物113之製備所描述類似的方法製備表6a中之中間物。
中間物125：(S)-1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙胺
在室溫下，將2,2,2-三氟乙酸(4mL，52mmol)添加至(S)-1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基胺基甲酸第三丁酯(0.613g，1.89mmol)於DCM(10mL)中之溶液中。溶液在室溫下攪拌1小時且接著在真空中濃縮。殘餘物溶解於氯仿(100mL)中且用飽和碳酸氫鈉水溶液(100mL)洗滌。分離各層且水層用氯仿(3×30mL)萃取且合併之有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在真空中濃縮，得到(S)-1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙胺(500mg，黃色油)。物質未經進一步純化 即使用。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.04(d,J=8.7Hz,2H),7.47(d,J=8.6Hz,2H),4.37(q,J=6.9Hz,1H),1.62(d,J=6.9Hz,3H).MS m/z 224.0(M+H)+；Rt-0.56min。
中間物126 (S)-1-(3-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙胺
(S)-(1-(3-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(2.0g，4.90mmol)用90% TFA/水處理2小時。在真空中濃縮且藉由用MeOH/DCM/MeOH溶離通過MP-碳酸酯樹脂管柱(6.0g，0.55mmol/g)來中和，得到1.4g蠟狀灰白色固體。HRMS m/z 307.0335
中間物127 (S)-1-(3-(3-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙胺
向經攪拌之(S)-2-(1-(3-(3-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)異吲哚啉-1,3-二酮(100mg，0.283mmol)於乙醇(5ml)中之溶液中添加甲肼(16μL,0.311mmol)。在80℃下攪拌13小時。在真空中濃縮。用二氯甲烷溶離進行急驟管柱層析(二氧化矽，40g)，得到50mg所需產物。HRMS m/z 224.4(M+H)
使用與關於中間物126或中間物127之製備所描述類似的方法製備表7a中之中間物
表7a.
中間物149：1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙胺
1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙酮(260mg，0.977mmol)、NH4OAc(1.13g，14.6mmol)及NaBH3CN(245mg，3.91mmol)溶解於8mL 200度(proof)EtOH中，且在微波裝置中在120℃下加熱5分鐘。濃縮混合物以移除EtOH。粗物質溶解於30ml水+25mL EtOAc中。添加6N NaOH直至水性物質pH值為約10。分離各層，且水性物質用EtOAc(25ml)萃取。合併之有機層用25mL鹽水洗滌且經Na2SO4乾燥。過濾且在減壓下濃縮，得到262mg粗黃色油，其未經進一步純化即用於後續應用。分析性RP-HPLC tR=0.90min。(管柱=Inertsil C8管柱，3.0μm，3.0×30mm。管柱溫度=50℃。溶離劑=A：水(5mM甲酸銨，2% ACN)；B：CAN。流動速率=2mL/min。梯度=0min5% B；1.70min內5%至95% B；0.3min 95% B；2.1min 1% B)MS m/z 268.1(M+H)+。
使用與關於中間物149之製備所描述類似的方法製備表8a中之中間物
中間物163：1-(5-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙胺
步驟1：1-(5-氟嘧啶-2-基)乙酮(700mg，5.0mmol)及4-氟酚(616mg，5.50mmol)於6mL DMF中之溶液用碳酸鉀(829mg，6.0mmol)處理且加熱至50℃保持3.5小時。將反應混合物倒入20mL水中且用EtOAc(2×20mL)萃取。有機物用20mL水、20mL鹽水洗滌，且經Na2SO4乾燥。過濾混合物且在矽膠上濃縮。進行管柱層析(10%-100% EtOAc/庚烷)得到295mg(25%)呈白色固體狀之1-(5-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙酮，其直接用於下一步驟中。MS m/z 233.2(M+H)+.1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.55(s,2H),7.23-7.07(m,4H),2.78(s,3H).
步驟2：1-(5-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙酮(290mg，1.25mmol)、NH4OAc(1.9g，24.6mmol)及NaBH3CN(314mg，5.00mmol)溶解於20mL 200度(proof)EtOH中，且在微波裝置中在130℃下加熱3分鐘。濃 縮混合物以移除EtOH。粗物質溶解於30ml水+25mL EtOAc中。添加6N NaOH直至水性物質pH值係約10。分離各層，且水性物質用EtOAc(25ml)萃取。合併之有機層用25mL鹽水洗滌且經Na2SO4乾燥。過濾且在減壓下濃縮，得到275mg粗棕褐色油，其未經進一步純化即用於後續應用。主要產物分析性RP-HPLC tR=1.26min。(管柱=Inertsil C8管柱，3.0μm，3.0×30mm。管柱溫度=50℃。溶離劑=A：水(5mM甲酸銨，2% ACN)；B：CAN。流動速率=2mL/min。梯度=0min 5% B；1.70min內5%至95% B；0.3min 95% B；2.1min 1% B)MS m/z 234.1(M+H)+。
中間物164：1-(4-甲基-5-(2-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)吡啶-4-基)噻唑-2-基)乙胺
步驟1：在開孔透氣小瓶中，90%亞硝酸第三丁酯(4.74mL，35.8mmol)及CuCl(2.96g，29.9mmol)溶解於30mL ACN中。經15分鐘逐份添加4-甲基-5-(2-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)吡啶-4-基)噻唑-2-胺(6.0g，19.9mmol)。氣體放泄。混合物在室溫下攪拌30分鐘，接著溫至65℃再保持30分鐘。
反應混合物經矽藻土過濾。將200mL水添加至濾液中。此物質用EtOAc(2×150mL)萃取。有機物用200mL鹽水洗滌，且經Na2SO4乾燥。過濾且在矽膠上濃縮。進行急驟管柱層析(10%-50% EA/庚烷)得到3.35g(52%)呈綠色油狀之2-氯-4-甲基-5-(2-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)吡啶-4-基)噻唑。MS m/z 321.0(M+H)+.1H NMR(400MHz, CDCl3)δ 8.69(dd,J=5.1,0.8Hz,1H),7.52(dq,J=1.7,0.8Hz,1H),7.31-7.22(m,1H),2.55(s,3H),1.67(s,6H).
步驟2：在氮氣下，向2-氯-4-甲基-5-(2-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)吡啶-4-基)噻唑(3.3g，10.3mmol)及Pd(PPh3)2Cl2(0.72g，1.03mmol)於50mL二烷中之溶液中添加三丁基(1-乙氧基乙烯基)錫烷(3.82ml，11.32mmol)。混合物加熱至100℃保持16小時。反應冷卻至室溫且用25mL EtOAc稀釋。添加2M KF(15.4ml)溶液且攪拌1小時。形成大量沈澱。反應物經矽藻土過濾且用EtOAc沖洗。有機層用60mL水沖洗，且濃縮得到灰色固體。粗固體溶解於THF(50mL)中且添加1N HCl(20.58mL)。反應物在室溫下攪拌2小時。藉由添加1N NaOH中和混合物。在真空中移除THF。水性物質用2×50mL EtOAc萃取。有機層用50mL鹽水洗滌，且經Na2SO4乾燥。過濾且在矽膠上濃縮。使用含10%-50% EtOAc之庚烷進行急驟層析，得到1.65g(49%)呈黃色油狀之1-(4-甲基-5-(2-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)吡啶-4-基)噻唑-2-基)乙酮。MS m/z 329.0(M+H)+.1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.72(dd,J=5.2,0.9Hz,1H),7.60(dq,J=1.8,0.9Hz,1H),7.34(dd,J=5.1,1.6Hz,1H),2.74(s,3H),2.63(s,3H),1.69(s,6H)。
步驟3：1-(4-甲基-5-(2-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)吡啶-4-基)噻唑-2-基)乙酮(1.6g，4.87mmol)、NH4OAc(5.6g，73.1mmol)及NaBH3CN(1.2g，19.5mmol)溶解於40mL 200度(proof)EtOH中，且在密封管中在130℃下加熱10分鐘。濃縮混合物以移除EtOH。粗物質溶解於50ml水+50mL EtOAc中。添加6N NaOH直至水性物質pH值為約9。分離各層，且水性物質用EtOAc(50ml)萃取。合併之有機層用60mL鹽水洗滌且經Na2SO4乾燥。過濾且在減壓下濃縮得到1.58g粗棕褐色油。此物質溶解於20mL二烷中。添加2.2當量HCl(4N於二烷中)，且攪拌1小時。形成黃色沈澱。在真空中濃縮懸浮液得到1.97g 呈黃綠色固體狀之1-(4-甲基-5-(2-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)吡啶-4-基)噻唑-2-基)乙胺二鹽酸鹽，其未經進一步純化即用於後續應用。主要產物分析性RP-HPLC tR=1.23min。MS m/z 330.1(M+H)+。
中間物165：4-((S)-1-胺基-乙基)-哌啶-1-甲酸苯甲酯
4-((1S)-1-(1,1-二甲基乙基亞磺醯胺基)乙基)哌啶-1-甲酸苯甲酯(1.825g，4.98mmole)溶解於二烷(10mL)中且添加含4N HCl之二烷(5mL，1.3當量)。混合物在室溫下攪拌3小時。藉由旋轉蒸發移除溶劑，得到呈鹽酸鹽形式之標題化合物(1.3g)。1H NMR(400MHz,CD2Cl2)δ 8.46(s,2H),7.44-7.27(m,5H),5.11(s,2H),4.26(d,J=13.57Hz,2H),3.24-3.12(m,1H),2.86-2.61(m,2H),1.99-1.86(m,3H),1.38(d,J=6.33Hz,3H),1.34-1.23(m,2H)。HRMS(C)tR=1.87min；MS m/z 263.1760(M+H)+
中間物166：(S)-1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)吡啶-2-基)乙胺
在-78℃下，向(S)-(1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)吡啶-2-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(66mg，0.47mmol)於DCM(2mL)中之溶液中緩慢添加TFA(2mL，26mmol)。反應物在室溫下攪拌1小時，接著濃縮且用DCM(10mL)稀釋。溶液與3當量MP-碳酸酯樹脂(3.28mmol/g，Biotage)一起在室溫下攪拌1小時。藉由過濾移除樹脂且用DCM(2×5 mL)洗滌。濃縮濾液且粗殘餘物未經進一步純化即用於下一步驟。LCMS tR=0.97min；MS m/z 231.1(M+H)。
使用與關於中間物166之製備所描述類似的方法製備表9a中之中間物
中間物180：(S)-(1-肼基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸第三丁酯
(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)丙酸甲酯(1.00g，4.92mmol)及肼(0.23mL，1.5當量)於THF(8mL)中之溶液在密封管中在72℃下加熱15小時。再添加肼(0.23mL，1.5當量)且再繼續加熱21小時。接著反應物冷卻至室溫且在真空中濃縮，得到粗(S)-(1-肼基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸第三丁酯(1g，白色固體)，其未經純化即使用。1H NMR (400MHz,CDCl3)δ 4.20(m,1H),1.44(s,9H),1.36(d,J=7.1Hz,3H).
中間物181：(S)-(1-(2-(4-氯苯甲醯基)肼基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸第三丁酯
在0℃下，將4-氯苯甲醯氯(0.63mL，4.92mmol，1.0當量)添加至(S)-(1-肼基-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸第三丁酯(1.0g，4.92mmol)於DCM(25mL)中之溶液中。形成白色沈澱。混合物在0℃下攪拌1小時且接著反應混合物在真空中濃縮，得到粗(S)-(1-(2-(4-氯苯甲醯基)肼基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸第三丁酯(1.55g)，其未經純化即使用。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 7.85(d,J=8.7Hz,2H),7.49(d,J=8.7Hz,2H),4.21(q,J=7.0Hz,1H),1.45(s,9H),1.41(d,J=7.2Hz,3H)。MS m/z 342.1(M+H)+；Rt-0.69min。
中間物182：(S)-(1-(5-(4-氯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯
(S)-(1-(2-(4-氯苯甲醯基)肼基)-1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸第三丁酯(1.0g，2.93mmol)及2,4-二硫化2,4-雙(4-甲氧基苯基)-1,3,2,4-二噻二磷雜環丁烷(1.18g，2.93mmol，1.0當量)於THF(29mL)中之溶液在回流下加熱2小時。洗滌反應物，接著冷卻至室溫且經矽藻土墊過 濾，使用THF充分洗滌。在真空中濃縮濾液。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷，0至30%)得到(S)-(1-(5-(4-氯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(0.600g，淺綠色固體)，60%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.89(d,J=8.5Hz,2H),7.46(d,J=8.5Hz,2H),5.23(m,1H),1.72(d,J=6.5Hz,3H),1.48(s,9H)。MS m/z 340.1(M+H)+；Rt-0.99min。
中間物183：(S)-1-(5-(4-氯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙胺
在室溫下，將氯化氫(4.0M於1,4-二烷中，4mL，16mmol，9當量)添加至(S)-(1-(5-(4-氯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(600mg，1.77mmol)於1,4-二烷(5mL)中之溶液中。攪拌溶液3小時，此時形成白色沈澱。在真空中濃縮反應物，得到(S)-1-(5-(4-氯苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙胺之鹽酸鹽(480mg，白色固體)，97%產率。該物質未經純化即使用。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.00(d,J=8.7Hz,2H),7.58(d,J=8.7Hz,2H),5.10(q,J=6.9Hz,1H),1.82(d,J=6.9Hz,3H)。MS m/z 240.0(M+H)+；Rt-0.54min。
中間物184：(S)-丁-3-炔-2-基胺基甲酸第三丁酯
(S)-(1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸第三丁酯(500mg，2.89mmol)、(1-重氮基-2-側氧基丙基)膦酸二甲酯(610mg，3.18mmol，1.1當量)及碳酸鉀(638mg，4.62mmol，1.6當量)於甲醇(14.4mL)中之溶液在 室溫下攪拌18小時。接著反應物用乙酸乙酯(30mL)及飽和氯化鈉水溶液(40mL)稀釋。分離各層且水層用乙酸乙酯(30mL)萃取，且合併之有機萃取物經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。進行矽膠管柱層析(含20% EtOAc之庚烷)得到(S)-丁-3-炔-2-基胺基甲酸第三丁酯(0.258g，白色固體)，53%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 4.49(m,1H),2.26(d,J=2.2Hz,1H),1.46(s,9H),1.41(d,J=6.8Hz,3H).
中間物185：(S)-(1-(1-(4-氯苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯
(S)-丁-3-炔-2-基胺基甲酸第三丁酯(250mg，1.48mmol)、1-疊氮基-4-氯苯(227mg，1.48mmol，1.0當量)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.77mL，4.43mmol，3.0當量)於無水乙腈(14.8mL)中之溶液在室溫下攪拌10分鐘。接著逐份添加碘化銅(I)(563mg，2.95mmol，2.0當量)。混合物在室溫下攪拌30分鐘。反應物用飽和氯化銨水溶液(50ml)淬滅且用水稀釋(50mL)稀釋。混合物用乙酸乙酯(3×30mL)萃取且合併之有機萃取物用水(30mL)、飽和氯化鈉水溶液(30mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷)得到(S)-(1-(1-(4-氯苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(0.428g，白色固體)，90%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.86(s,1H),7.68(d,J=8.8Hz,2H),7.50(d,J=8.8Hz,2H),5.02(m,1H),1.63(d,J=6.8Hz,3H),1.46(s,9H)。MS m/z 323.1(M+H)+；Rt-0.92min。
中間物186：(S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)乙胺
在室溫下，將氯化氫(4.0M於1,4-二烷中，3.3mL，13.2mmol，10當量)添加至(S)-(1-(1-(4-氯苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(425mg，1.32mmol)於1,4-二烷(5mL)中之溶液中。攪拌溶液1小時，此時形成白色沈澱。在真空中濃縮反應物，得到(S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)乙胺之鹽酸鹽(338mg，白色固體),99%產率。該物質未經純化即使用。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.68(s,1H),7.90(d,J=9.0Hz,2H),7.63(d,J=9.0Hz,2H),4.77(q,J=6.9Hz,1H),1.78(d,J=6.9Hz,3H)。MS m/z 223.1(M+H)+；Rt-0.50min。
中間物187：2-(6-甲基吡啶-3-基)噻唑-5-甲醛
2-溴噻唑-5-甲醛(400mg，2.08mmol)、(6-甲基吡啶-3-基)酸(428mg，3.12mmol，1.5當量)、[1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)與二氯甲烷之錯合物(170mg，0.21mmol，0.1當量)及2.0M碳酸鈉水溶液(5.2mL，10.4mmol，5當量)於1,2-二甲氧基乙烷(6.9mL)中之混合物在微波反應器中在110℃下加熱20分鐘。接著反應物用乙酸乙酯(50mL)及水(50mL)稀釋。分離各層且水層用乙酸乙酯(2×25mL)萃 取。合併之有機萃取物用飽和氯化鈉水溶液(30mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc)得到2-(6-甲基吡啶-3-基)噻唑-5-甲醛(0.176g，褐色固體)，41%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 10.08(s,1H),9.15(d,J=2.0Hz,1H),8.47(s,1H),8.19(dd,J=8.1,2.4Hz,1H),7.31(d,J=8.3Hz,1H),2.66(s,3H)。MS m/z 205.0(M+H)+；Rt-0.36min。
使用與關於中間物187之製備所描述類似的方法製備表10a中之中間物
中間物191：1-(4-氯苯基)-4-(1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-1H-咪唑
乙-1,2-二醇(0.081mL，1.45mmol，1.5當量)、1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-甲醛(200mg，0.968mmol)及樟腦磺酸(45mg，0.19mmol，0.2當量)於甲苯(10mL)中之溶液用迪恩-斯達克裝置(Dean-Stark apparatus)在回流下加熱1小時。反應物冷卻至室溫且用飽和碳酸氫鈉水溶液(30mL)淬滅。混合物用乙酸乙酯(30mL)萃取，且乾燥(Na2SO4)、過濾且在真空中濃縮有機層。進行矽膠管柱層析(具有7%甲醇之EtOAc)得到1-(4-氯苯基)-4-(1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-1H-咪唑(0.100g，棕褐色固體)，41%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.80(s,1H),7.46(d,J=8.4Hz,2H),7.36(s,1H),7.33(d,J=8.4Hz,2H),5.96(s,1H),4.20(m,2H),4.05(m,2H)。MS m/z 251.0(M+H)+；Rt-0.53min。
中間物192：1-(4-氯苯基)-4-(1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-2-甲基-1H-咪唑
在-78℃下，將正丁基鋰(1.6M於己烷中，0.37mL，0.60mmol，1.5當量)之溶液添加至N,N-二異丙基胺(0.085mL，0.60mmol，1.5當量)於THF(1.5mL)中之溶液中。溶液在-78℃下攪拌10分鐘，且接著逐滴添加1-(4-氯苯基)-4-(1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-1H-咪唑(100mg，0.40mmol)於THF(1mL)中之溶液。所得溶液在-78℃下攪拌30分鐘，且接著添加碘甲烷(0.042mL，0.68mmol，1.7當量)。將溶液溫至室溫且接著用水(20mL)淬滅。混合物用乙酸乙酯(30mL)萃取且有機萃取物用飽和氯化鈉水溶液(15mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在真空中濃縮，得到粗1-(4-氯苯基)-4-(1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-2-甲基-1H- 咪唑。該物質未經進一步純化即使用。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.46(d,J=8.4Hz,2H),7.23(d,J=8.4Hz,2H),7.09(s,1H),5.88(s,1H),4.20(m,2H),4.03(m,2H),2.35(s,3H)。MS m/z 265.0(M+H)+；Rt-0.57min。
中間物193：1-(4-氯苯基)-2-甲基-1H-咪唑-4-甲醛
1-(4-氯苯基)-4-(1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-2-甲基-1H-咪唑(1.05g，3.97mmol)及樟腦磺酸(92mg，0.40mmol，0.1當量)於THF(26.5mL)及水(13.3mL)中之溶液在60℃下加熱1小時。接著反應物冷卻至室溫且用飽和碳酸氫鈉水溶液(100mL)淬滅。混合物用乙酸乙酯(100mL)萃取，且有機層用飽和氯化鈉水溶液(50mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在真空中濃縮。進行矽膠管柱層析(具有7%甲醇之EtOAc)得到1-(4-氯苯基)-2-甲基-1H-咪唑-4-甲醛(0.600g，棕褐色固體)，69%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 9.89(s,1H),7.67(s,1H),7.53(d,J=8.7Hz,2H),7.27(d,J=8.7Hz,2H),2.40(s,3H)。MS m/z 221.0(M+H)+；Rt-0.47min。
中間物194：1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-3-甲醛
1H-吡唑-3-甲醛(0.700g，7.29mmol)、5-溴-2-(三氟甲基)吡啶 (2.31g，10.2mmol，1.4當量)、碳酸銫(4.75g，14.6mmol，2.0當量)、碘化銅(I)(0.069g，0.36mmol，0.05當量)及(1R,2R)-N1,N2-二甲基環己烷-1,2-二胺(0.23mL，1.46mmol，0.2當量)於DMF(9.5mL)中之混合物在密封反應容器中在110℃下加熱16小時。接著反應物冷卻至室溫且添加飽和氯化銨水溶液(100mL)。混合物用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。合併之有機萃取物用飽和氯化鈉水溶液(50mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在真空中濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷)得到1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-3-甲醛(0.470g，褐色固體)，27%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 10.13(s,1H),9.18(d,J=2.1Hz,1H),8.34(dd,J=8.7,2.0Hz,1H),8.12(m,1H),7.88(d,J=8.5Hz,1H),7.10(d,J=1.8Hz,1H)。MS m/z 241.9(M+H)+；Rt-0.78min。
中間物195：(R,E)-N-((5-(4-氯苯基)異唑-3-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺
5-(4-氯苯基)異唑-3-甲醛(2.00g，9.63mmol)、(R)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1.28g，10.6mmol，1.1當量)及無水硫酸銅(II)(2.31g，14.5mmol，1.5當量)於1,2-二氯乙烷(19mL)中之懸浮液在55℃下加熱2-18小時。接著反應物冷卻至室溫且經矽藻土墊過濾，使用1,2-二氯乙烷充分洗滌。在真空中濃縮濾液得到呈綠色固體狀之粗(R,E)-N-((5-(4-氯苯基)異唑-3-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺，其未經 進一步純化即使用。MS m/z 311.0(M+H)+；Rt-1.11min。
使用與關於中間物195之製備所描述類似的方法製備表11a中之中間物
中間物215：(R)-N-((S)-1-(5-(4-氯苯基)異唑-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺
在0℃下，將溴化甲基鎂(3.0M於乙醚中，12.8mL，38.4mmol，4當量)之溶液添加至(R,E)-N-((5-(4-氯苯基)異唑-3-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(2.98g，9.6mmol)於DCM(96mL)中之溶液中。溶液變為橙色，接著褪色為黃色。反應物在0℃下攪拌30分 鐘，且接著用飽和氯化銨水溶液(100mL)小心淬滅。分離各層且水層用DCM(40mL)萃取。合併之有機層用水(50mL)及飽和氯化鈉水溶液(50mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷)得到(R)-N-((S)-1-(5-(4-氯苯基)異唑-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1.0g，白色固體)，32%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.71(d,J=8.6Hz,2H),7.45(d,J=8.6Hz,2H),6.50(s,1H),4.75(m,1H),3.47(m,1H),1.70(d,J=6.8Hz,3H),1.25(s,9H)。MS m/z 327.0(M+H)+；Rt-0.94min。
使用與關於中間物215之製備所描述類似的方法製備表12a中之中間物。
中間物236：(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(1-甲基環丙基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺
步驟1
向烘乾的具有攪拌棒之圓底燒瓶中添加4-溴-2-氟苯甲醛(5g，24.6mmol)、(R)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(3.28g，27.1mmol)及DCE(49mL)。接著向此混合物中添加硫酸銅(II)(5.90g，36.9mmol)。反應混合物在預加熱之油浴中加熱至55℃保持18小時。反應混合物經矽藻土墊過濾，用CH2Cl2洗滌固體。濃縮濾液得到(R,E)-N-(4-溴-2-氟苯亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺之黏性黃色油(7.73g，25.2mmol，103%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.27(s,9 H)7.31-7.42(m, 2 H)7.87(t,J=7.87Hz,1 H)8.83(s,1 H)。LCMS m/z 307.9(M+H)+,Rt 1.01min。
步驟2
在氮氣下向冷卻至0℃(水/冰浴)之(R,E)-N-(4-溴-2-氟苯亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(7.73g，25.2mmol)於CH2Cl2(252mL)中之溶液中添加含3M甲基溴化鎂(33.7mL，101mmol)之Et2O。反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，接著逐漸溫至室溫且在室溫下攪拌1小時。反應混合物冷卻至0℃，接著藉由緩慢添加飽和NH4Cl溶液淬滅。水性混合物用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽胺管柱層析(EtOAc/庚烷40%至100%)得到呈白色結晶固體狀之(R)-N-((S)-1-(4-溴-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯膠(4.93g，15.3mmol，60%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.20(s,9 H)1.56(d,J=6.70Hz,3 H)3.34(br.s.,1 H)4.77-4.87(m,1 H)7.19-7.31(m,3 H)。LCMS m/z 324.0(M+H)+,Rt 0.90min。
步驟3
向具有攪拌棒之微波小瓶中添加(R)-N-((S)-1-(4-溴-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-(1g，3.10mmol)、異丙烯基酸四甲基乙二醇酯(1.51ml，8.07mmol)、DME(8ml)、碳酸鈉(7.76ml，15.5mmol)(2.0M水溶液)及PdCl2(dppf).CH2Cl2加合物(0.127g，0.155mmol)。將容器蓋好且藉由微波輻射在100℃下加熱20分鐘。反應混合物用飽和NH4Cl溶液稀釋。水性混合物用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷50%至100%)得到呈淡褐色結晶狀之(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(丙-1-烯-2-基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(830mg，2.93mmol，94%產率)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ 1.08-1.11(m,9 H) 1.47(d,J=6.80Hz,3 H)2.09(d,J=0.54Hz,3 H)4.61-4.71(m,1 H)5.14(t,J=1.32Hz,1 H)5.43(d,J=5.58Hz,1 H)5.49(s,1 H)7.24-7.30(m,1 H)7.31-7.36(m,1 H)7.41-7.47(m,1 H)。LCMS m/z 284.0(M+H)+,Rt 0.93min。
步驟4
在0℃下，在氬氣下向含有含(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(丙-1-烯-2-基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-(0.37g，1.31mmol)之DCE(13mL)之圓底燒瓶中添加二乙鋅(1.0M於己烷中)(13.1mL，13.1mmol)，接著逐滴添加氯碘甲烷(0.95mL，13.1mmol)。反應混合物溫至室溫且攪拌1小時。反應混合物冷卻至0℃，此時進行第二次添加二乙鋅(1.0M於己烷中)(13.1mL，13.1mmol)，接著添加氯碘甲烷(0.95mL，13.1mmol)。反應混合物溫至室溫且在氬氣下攪拌18小時。反應混合物在冰浴中冷卻至0℃且向冷的反應混合物中緩慢添加飽和NH4Cl溶液。水性混合物用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷20%至100%)得到(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(1-甲基環丙基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺之白色結晶(89mg，0.299mmol，22.92%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 0.75-0.79(m,2 H)0.85-0.90(m,2 H)1.20(s,9 H)1.55(s,3 H)1.57(d,J=6.80Hz,1 H)3.34(d,J=5.23Hz,1 H)4.75-4.85(m,1 H)6.90(dd,J=12.30,1.74Hz,1 H)6.97(dd,J=8.05,1.78Hz,1 H)7.22(t,J=7.97Hz,1 H)。LCMS m/z 298.1(M+H)+,Rt 1.01min。
中間物237：(R)-N-((S)-1-(4-(1-乙氧基環丙基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺
步驟1
向具有攪拌棒之微波小瓶中添加(R)-N-((S)-1-(4-溴-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(500mg，1.55mmol)，接著添加三丁基(1-乙氧基乙烯基)錫烷(1.12g，3.10mmol)、三乙胺(0.65ml，4.65mmol)及PdCl2(dppf).CH2Cl2加合物(63mg，0.078mmol)。向固體中添加甲苯(10ml)。將小瓶蓋好且在預先加熱之砂浴中在100℃下加熱1小時。將反應混合物裝載於矽膠管柱上。進行矽膠管柱層析(MeOH/CH2Cl2 0至10%(具有1% NH4OH緩衝液))得到呈褐色黏性油狀之(R)-N-((S)-1-(4-(1-乙氧基乙烯基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(498mg，1.59mmol，102%產率)，其在靜置後結晶。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.20(s,9 H)1.43(t,J=6.97Hz,3 H)1.58(d,J=6.75Hz,3 H)3.35(d,J=4.74Hz,1 H)3.92(q,J=6.96Hz,2H)4.23(d,J=2.79Hz,1 H)4.65(d,J=2.79Hz,1 H)4.79-4.89(m,1 H)7.16-7.20(m,1 H)7.29-7.34(m,1 H)7.39(dd,J=8.07,1.66Hz,1 H).
步驟2
在0℃下在氬氣下，向含有含(R)-N-((S)-1-(4-(1-乙氧基乙烯基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(0.49g，1.56mmol)及氯碘甲烷(1.14mL，15.6mmol)之甲苯(15mL)之圓底燒瓶中添加二乙鋅(1.0M於己烷中)(15.6mL，15.6mmol)。反應混合物溫至室溫且攪拌1小時。反應混合物在冰浴中冷卻至0℃且向冷的反應混合物中緩慢添加飽和NH4Cl溶液。水性混合物用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽 水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(MeOH/CH2Cl2 0至10%)得到呈黏性褐色油狀之(R)-N-((S)-1-(4-(1-乙氧基環丙基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(145mg，0.44mmol，28%產率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.93-0.99(m,2 H)1.14-1.20(m,3 H)1.21(s,9 H)1.22-1.27(m,2 H)1.57-1.61(m,4 H)3.35(d,J=4.98Hz,1 H)3.45(q,J=7.07Hz,2 H)4.77-4.87(m,1 H)6.98(dd,J=7.58,1.43Hz,3 H)7.00-7.03(m,4 H)7.28-7.32(m,1 H)。LCMS m/z 328.1(M+H)+,Rt 0.95min。
中間物238：(R)-N-((S)-1-(4-(1-氰基環丙基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺
步驟1
向具有攪拌棒之微波小瓶中添加(R)-N-((S)-1-(4-溴-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(300mg，0.93mmol)、4-異唑酸四甲基乙二醇酯(218mg，1.12mmol)、PdCl2(dppf).CH2Cl2加合物(76mg，0.09mmol)、氟化鉀(2.7mL，1.0M於水中，2.79mmol)且最終添加DMSO(9mL)。藉由用氮氣鼓泡(3分鐘)使反應混合物脫氣且將小瓶蓋好，且在預先加熱之油浴中在130℃下加熱18小時。反應混合物用飽和NH4Cl溶液稀釋且用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷40%至100%)得到呈黏性褐色油狀之(R)-N-((S)-1-(4-(氰基甲基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(136mg，0.48mmol， 52%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.19(s,9 H)1.57(d,J=6.80Hz,3 H)3.39(d,J=4.35Hz,1 H)3.74(s,2 H)4.81-4.88(m,1 H)7.04(d,J=10.66Hz,1 H)7.11(d,J=7.97Hz,1 H)7.38(t,J=7.73Hz,1 H)。LCMS m/z 283.0(M+H)+，Rt 0.72min。
步驟2
向含有(R)-N-((S)-1-(4-(氰基甲基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-(86mg，0.31mmol)及攪拌棒之閃爍瓶中添加甲苯(2mL)。接著向此混合物中添加溴化四丁基銨(19mg，0.06mmol)，接著添加NaOH(1.52ml，1.0M(水溶液)，1.52mmol)及1,2-二溴乙烷(0.11ml，1.22mmol)。將小瓶蓋好且反應混合物在室溫下劇烈攪拌18小時。接著，添加1,2-二溴乙烷(0.11ml，1.22mmol)及溴化四丁基銨(19mg，0.06mmol)且反應混合物再攪拌18小時。第三次添加1,2-二溴乙烷(0.11ml，1.22mmol)且反應混合物在預先加熱之鋁盤中再加熱至50℃保持18小時。反應混合物用飽和NH4Cl溶液淬滅且水性混合物用EtOAc萃取。合併有機物且用水、鹽水洗滌兩次，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。粗物質通過小型矽膠塞(使用10% MeOH：90% DCM溶離產物)。濃縮溶液得到(R)-N-((S)-1-(4-(1-氰基環丙基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺之黏性橙色油(23mg，0.08mmol，24%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.20(s,9 H)1.38-1.44(m,2 H)1.56(d,J=6.75Hz,3 H)1.73-1.79(m,2 H)3.37(d,J=4.45Hz,1 H)4.78-4.88(m,1 H)6.94(dd,J=11.35,1.91Hz,1 H)7.09(dd,J=8.07,1.91Hz,1 H)7.34(t,J=7.90Hz,1 H)。LCMS m/z 309.2(M+H)+,Rt 0.83min。
中間物239：(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-異丙基苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺
向含有(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(丙-1-烯-2-基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(204mg，0.72mmol)及攪拌棒之圓底燒瓶中添加MeOH(7.2mL)。向此溶液中添加含披鈀碳(77mg，10%，0.07mmol)之MeOH(1mL)。插入氫氣氛圍且所得反應混合物在室溫下攪拌18小時，此時再添加含披鈀碳(300mg)之MeOH(5mL)。再次插入氫氣氛圍且反應混合物在室溫下再攪拌18小時。反應混合物經針筒過濾器過濾且濃縮得到(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-異丙基苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺之淺褐色黏性油(149mg，0.52mmol，73%產率)，其在靜置後結晶。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.20(s,9 H)1.24(d,J=5.87Hz,6 H)1.58(d,J=6.70Hz,3 H)2.89(dt,J=13.79,6.90Hz,1 H)3.35(d,J=5.04Hz,1 H)4.76-4.85(m,1 H)6.90(dd,J=12.03,1.52Hz,1 H)6.98(dd,J=7.90,1.54Hz,1 H)7.24(t,J=7.97Hz,1 H)。LCMS m/z 286.3(M+H)+,Rt 1.01min。
中間物240：(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺
向兩個具有攪拌棒之微波小瓶中添加(R)-N-((S)-1-(4-溴-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1.5g，4.65mmol)、1-甲基-4-1H-吡唑酸四甲基乙二醇酯(2.91g，13.9mmol)、DME(20mL)、碳酸鈉 (11.6mL，23.3mmol，2.0M水溶液)及PdCl2(dppf).CH2Cl2加合物(190mg，0.23mmol)(在兩個小瓶之間分配)。分別將小瓶蓋好且藉由微波輻射在100℃下加熱20分鐘。合併反應混合物，用飽和NH4Cl溶液及EtOAc稀釋。分配各相且水相用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷40%至100%)得到(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺之橙色結晶(1.07g，3.31mmol，71%產率)。1H NMR(400MHz,CDCL3)δ ppm 1.21(s,9 H)1.60(d,J=6.80Hz,3 H)3.36(d,J=4.25Hz,1 H)3.96(s,3 H)4.79-4.91(m,1 H)7.13(dd,J=11.69,1.61Hz,1 H)7.23(dd,J=8.00,1.64Hz,1 H)7.30-7.37(m,1 H)7.60(s,1 H)7.74(s,1 H)。LCMS m/z 324.0(M+H)+,Rt 0.74min。
藉由與關於中間物240之製備所描述之方法類似的方法製備表13a中之中間物。
中間物243：(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷- 2-亞磺醯胺
步驟1
向具有攪拌棒之烘乾的圓底燒瓶中添加2-氟-4-(三氟甲基)苯甲醛(5g，26.0mmol)、(R)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(3.47g，28.6mmol)及DCE(52mL)。接著向此混合物中添加硫酸銅(II)(6.23g，39.0mmol)。反應混合物在預先加熱之油浴中在55℃下加熱18小時。反應混合物經矽藻土墊過濾，固體用DCE洗滌。濃縮濾液得到(R,E)-N-(2-氟-4-(三氟甲基)苯亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺之黏性綠色油(7.3g，24.7mmol，95%產率)。物質未經進一步純化即用於下一步驟。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ ppm 1.29(s,9 H)7.44(d,J=10.08Hz,1 H)7.51(d,J=8.27Hz,1 H)8.13(t,J=7.46Hz,1 H)8.92(s,1 H)。LCMS m/z 296.0(M+H)+,Rt 1.02min。
步驟2
在氮氣下，向冷卻至0℃(水/冰浴)之(R,E)-N-(2-氟-4-(三氟甲基)苯亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(7.3g，24.7mmol)於CH2Cl2(247mL)中之溶液中添加含3M甲基溴化鎂(33mL，99mmol)之Et2O。反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，接著逐漸溫至室溫且在室溫下攪拌1小時。反應混合物冷卻至0℃，接著藉由緩慢添加飽和NH4Cl溶液淬滅。水性混合物用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷40%至100%)得到呈白色結晶固體狀之(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(4.68g，15.0mmol，61%產率)。1H NMR(400MHz,CDCL3)δ 1.22(s,9 H)1.60(d,J=6.80Hz,3 H)3.38(d,J=4.01Hz,1 H)4.87-4.97(m,1 H)7.33(d,J=10.32Hz,1 H)7.39-7.45(m,1 H)7.49-7.55(m,1 H)。LCMS m/z 312.0(M+H)+,Rt 0.92min。
中間物244：(S)-1-(3-氯-4-(環戊基胺甲醯基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯
步驟1
向具有攪拌棒之圓底燒瓶中添加4-((S)-1-胺基乙基-2-氯苯甲酸鹽酸鹽(1.05g，4.45mmol)，接著添加THF(40mL)。向此溶液中添加DIEA(1.86ml，10.7mmol)。反應混合物變為渾濁白色，接著添加二碳酸二-第三丁酯(1.07g，4.89mmol)。所得反應混合物在室溫下攪拌18小時。接著反應混合物在油浴中加熱至60℃保持2小時。接著添加二碳酸二-第三丁酯(1.07g，4.89mmol)及NMP(20ml)且所得反應混合物在60℃下攪拌2小時。移除揮發性物質。所得油用飽和NH4Cl溶液稀釋且水性混合物用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌兩次，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮得到(S)-4-(1-(第三丁氧基羰基胺基)乙基)-2-氯苯甲酸之黏性黃色油(2.32g，6.19mmol，139%產率)，其含有一些過量的二碳酸二-第三丁酯及NMP。LCMS m/z 284.9(M+H)+(甲酸片段+CH3CN加合物)，Rt 0.75min。
步驟2
向具有攪拌棒之圓底燒瓶中添加(S)-4-(1-(第三丁氧基羰基胺基) 乙基)-2-氯苯甲酸(450mg，1.20mmol)、環戊基胺(355μL，3.60mmol)、EDC HCl(460mg，2.40mmol)、1-羥基-7-氮雜-苯并三唑(229mg，1.68mmol)及DMF(6mL)。接著向此混合物中添加DIEA(629μL，3.60mmol)。反應混合物在室溫下攪拌18小時。反應混合物用水稀釋且用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌兩次，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮得到(S)-1-(3-氯-4-(環戊基胺甲醯基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯之褐色結晶(476mg，1.17mmol，97%產率)。LCMS m/z 367.0(M+H)+,Rt 0.90min。
中間物245：(R)-N-((S)-1-(2,5-二氟-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺
步驟1
向具有攪拌棒之圓底燒瓶中添加4-溴-2,5-二氟苯甲醛(5.3g，24.0mmol)、(R)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(3.2g，26.4mmol)及DCE(80mL)。接著向此混合物中添加硫酸銅(II)(5.74g，36.0mmol)。反應混合物在預先加熱之油浴中在60℃下加熱18小時。反應混合物經矽藻土墊過濾，固體用DCE洗滌。濃縮濾液得到(R,E)-N-(4-溴-2,5-二氟苯亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺之黏性綠色油(7.2g，22.2mmol，93%產率)。物質未經進一步純化即用於下一步驟。LCMS m/z 326.0(M+H)+,Rt 1.04min。
步驟2
在氮氣下，向冷卻至0℃(水/冰浴)之(R,E)-N-(4-溴-2,5-二氟苯亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(7.2g，22.2mmol)於CH2Cl2(200mL)中 之溶液中添加含3M甲基溴化鎂(29.6mL，89mmol)之Et2O。反應混合物在0℃下攪拌5小時，接著藉由緩慢添加飽和NH4Cl溶液淬滅。水性混合物用HCl(1N)調節至pH 8且用DCM萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷30%至100%)得到(R)-N-((S)-1-(4-溴-2,5-二氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(6.86g，20.2mmol，91%產率)。LCMS m/z 342.1(M+H)+,Rt 0.96min。
步驟3
向兩個具有攪拌棒之微波小瓶中添加(R)-N-((S)-1-(4-溴-2,5-二氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(500mg，1.47mmol)、1-甲基-4-1H-吡唑酸四甲基乙二醇酯(917mg，4.41mmol)、DME(6ml)、Na2CO3(3.67ml，7.35mmol)(2.0M水溶液)及PdCl2(dppf).CH2Cl2加合物(60.0mg，0.07mmol)(在兩個容器之間均勻分配)。將容器蓋好且藉由微波輻射在100℃下加熱20分鐘。合併反應混合物，用飽和NH4Cl溶液及EtOAc稀釋。分配各相。水相用EtOAc萃取且合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷60%至100%)得到(R)-N-((S)-1-(2,5-二氟-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(370mg，1.08mmol，73.7%產率)。1H NMR(400MHz,CDCL3)δ ppm 1.23(s,9 H)1.57-1.60(m,3 H)3.33(d,J=4.06Hz,1 H)3.97(s,3 H)4.79-4.88(m,1 H)7.10(dd,J=11.20,6.06Hz,1 H)7.20(dd,J=10.78,6.19Hz,1 H)7.76(d,J=2.20Hz,1 H)7.82(s,1 H)。LCMS m/z 342.1(M+H)+,Rt 0.77min。
中間物246：(S)-N-((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺
步驟1
向1H-咪唑-4-甲醛(3.71g，38.6mmol)、1-氯-4-碘苯(13.81g，57.9mmol)、(1R,2R)-N1,N2-二甲基環己烷-1,2-二胺(1.10g，7.72mmol)、碘化銅(I)(0.368g，1.93mmol)及碳酸銫(25.2g，77mmol)之混合物中添加DMF(50mL)。密封反應物且加熱至110℃保持18小時。接著反應混合物冷卻至室溫且用飽和NH4Cl溶液稀釋。產生褐色固體。收集固體，用水洗滌且風乾。接著固體物質溶解於10% MeOH：90% DCM溶液中且乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮，得到深褐色固體1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-甲醛(8.55g，41.4mmol，107%產率)。物質未經進一步純化即使用。LCMS m/z 207.1(M+H)+,Rt 0.58min。
步驟2
向(S)-(-)第三丁烷亞磺醯胺(2.35g，19.4mmol)及1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-甲醛(4g，19.4mmol)於DCE(39mL)中之懸浮液中添加CuSO4(4.63g，29.0mmol)。反應混合物在油浴中在60℃下加熱18小時。得到深褐色懸浮液。接著反應混合物冷卻至室溫，經矽藻土墊過濾，用DCM沖洗。接著溶液在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至100%)得到呈淺褐色固體狀之(S,E)-N-((1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1.69g，5.45mmol，28.2%產率)。LCMS m/z 310.0(M+H)+,Rt 0.75min。
步驟3
在N2下，向冷卻至-40℃(丙酮/乾冰)之(S,E)-N-((1-(4-氯苯基)-1H- 咪唑-4-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1.69g，5.45mmol)於DCM(27mL)中之溶液中添加含3M MeMgBr(7.27ml，21.8mmol)之乙醚。反應混合物在-40℃下攪拌1小時。反應混合物藉由緩慢添加飽和NH4Cl溶液淬滅且用EtOAc稀釋。分配各相，水相用EtOAc萃取且合併之有機層用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/MeOH：EtOAc 0至5%)得到(S)-N-((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1.11g，3.41mmol，62%產率)。1H NMR(400MHz,CDCL3)δ 1.25(s,9 H)1.58(d,J=6.65Hz,3 H)3.80(d,J=5.48Hz,1 H)4.59(quin,J=6.36Hz,1 H)7.26(s,1 H)7.33(d,J=8.61Hz,2 H)7.41-7.47(m,2 H)7.76(d,J=1.17Hz,1 H)。LCMS m/z 326.1(M+H)+,Rt 0.59min。
中間物247：(S)-1-(5-(4-氯苯基)異唑-3-基)乙胺
在室溫下，將鹽酸之溶液(4.0M於1,4-二烷中，2.1mL，8.2mmol，2當量)添加至(R)-N-((S)-1-(5-(4-氯苯基)異唑-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1.34g，4.1mmol)於1,4-二烷中之溶液中。形成沈澱。攪拌懸浮液1小時且接著在真空中濃縮，得到(S)-1-(5-(4-氯苯基)異唑-3-基)乙胺之鹽酸鹽(1.1g，淺黃色固體)，其未經純化即使用。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 7.87(d,J=8.8Hz,2H),7.56(d,J=8.8Hz,2H),6.98(s,1H),4.72(q,J=6.9Hz,1H),1.72(d,J=7.0Hz,3H)。MS m/z 223.1(M+H)+；Rt-0.59min。
使用與關於中間物247之製備所描述類似的方法製備表14a中之中間物。
中間物278：(S)-1-(2-氟-4-(2-氟丙-2-基)苯基)乙胺
步驟1
向含有(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(丙-1-烯-2-基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1.02g，3.60mmol)之圓底燒瓶中添加二烷(7mL)。接著向此均質溶液中添加含HCl之二烷(1.80mL，7.20mmol，4M)。所得反應混合物在室溫下攪拌10分鐘。移除揮發性物質。添加Et2O且混合物用音波簡單處理。再次移除揮發性物質。添加Et2O且收集固體且用Et2O洗滌，得到(S)-1-(2-氟-4-(丙-1-烯-2-基)苯基)乙胺之白色鹽酸鹽(742mg，3.44mmol，96%產率)。1H NMR(400MHz,D2O)δ 1.65(d,J=6.94Hz,3 H)2.12(s,3 H)5.23(s,1 H)5.50(s,1 H)7.37(d,J=13.06Hz,1 H)7.43(m,2H)。LCMS m/z 163.2(脫胺基片段)(M+H)+,Rt 0.56min。
步驟2
向含有(S)-1-(2-氟-4-(丙-1-烯-2-基)苯基)乙胺(742mg，3.44 mmol)之RBF中添加NMP(7mL)。接著向此溶液中添加TEA(959μl，6.88mmol)，接著添加二碳酸二-第三丁酯(976mg，4.47mmol)。所得反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應混合物用水稀釋且用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至100%)得到呈白色結晶狀之(S)-(1-(2-氟-4-(丙-1-烯-2-基)苯基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(1.28g，4.58mmol，133%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.40-1.48(m,12 H)2.12(d,J=0.44Hz,3 H)4.98(br.s.,2 H)5.10-5.12(m,1 H)5.37(s,1 H)7.11-7.16(m,1 H)7.19-7.24(m,2 H)。LCMS m/z 163.0(脫胺基片段)(M+H)+,Rt 1.13min。
步驟3
向含有(S)-(1-(2-氟-4-(丙-1-烯-2-基)苯基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(1.28g，4.58mmol)之圓底燒瓶中添加DCM(23mL)。均質溶液在丙酮/乾冰浴中冷卻至-70℃。接著臭氧(g)經溶液溫和鼓泡25分鐘，此時溶液顏色變為淡藍色。接著將甲硫醚(1.02mL，13.8mmol)添加至冷的溶液中且混合物逐漸溫至室溫且攪拌30分鐘。反應混合物用水稀釋。分配各相。水相用DCM萃取。合併有機相，用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至60%)得到(S)-(1-(4-乙醯基-2-氟苯基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(296mg，1.05mmol，23%產率)，其在靜置後結晶。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.38-1.49(m,12 H)2.59(s,3 H)5.01(br.s.,1 H)7.40(t,J=7.65Hz,1 H)7.62(dd,J=11.20,1.57Hz,1 H)7.71(dd,J=7.95,1.54Hz,1 H)。LCMS m/z 267.1(甲酸片段+CH3CN)(M+H)+,Rt 0.89min。
步驟4
在N2下，向冷卻至0℃(水/冰浴)之(S)-胺基甲酸(1-(4-乙醯基-2-氟 苯基)乙基)第三丁酯(296mg，1.05mmol)於DCM(5.2mL)中之溶液中添加含3M MeMgBr(1.4mL，4.21mmol)之乙醚。反應混合物在0℃下攪拌5分鐘。接著逐漸溫至室溫且在室溫下攪拌30分鐘。反應混合物冷卻至0℃，接著藉由緩慢添加飽和NH4Cl溶液淬滅且用DCM稀釋。分配各相，水相用DCM萃取且合併之有機層用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮，得到呈無色油狀之(S)-(1-(2-氟-4-(2-羥基丙-2-基)苯基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(288mg，0.97mmol，92%產率)，其在靜置後緩慢結晶。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.39-1.48(m,12 H)1.57(s,6 H)7.15-7.25(m,2 H)7.31-7.36(m,1 H).
步驟5
向含有(S)-(1-(2-氟-4-(2-羥基丙-2-基)苯基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(288mg，0.97mmol)之RBF中添加DCM(5mL)，所得無色溶液在乾冰/丙酮浴中冷卻至-70℃。接著在N2下，向此冷的溶液中添加DAST(0.26mL，1.94mmol)，所得反應混合物在-70℃下攪拌1小時。向冷的溶液中添加冰且所得混合物溫至室溫。混合物用DCM稀釋，分配各相且水相用DCM萃取。合併有機層，用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至50%)得到呈白色固體狀之(S)-(1-(2-氟-4-(2-氟丙-2-基)苯基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(126mg，0.42mmol，44%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.39-1.49(m,12 H)1.66(d,J=21.52Hz,6 H)4.97(br.s.,1 H)7.04-7.12(m,2 H)7.22-7.26(m,1 H)。LCMS m/z 285.1(甲酸片段+CH3CN)(M+H)+,Rt 1.06min。
步驟6
向含有(S)-(1-(2-氟-4-(2-氟丙-2-基)苯基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(126mg，0.42mmol)之圓底燒瓶中添加含HCl之二烷(2.1mL，8.42mmol)。所得反應混合物在室溫下攪拌1小時。移除揮發性物質。接 著添加Et2O且混合物用音波簡單處理。再一次移除揮發性物質得到呈白色固體狀之(S)-1-(2-氟-4-(2-氟丙-2-基)苯基)乙胺之鹽酸鹽(104mg，0.44mmol，105%產率)。1H NMR(400MHz,D2O)δ 1.59-1.80(m,9 H)7.24-7.37(m,2 H)7.43-7.56(m,1 H)。LCMS m/z 200.1(M+H)+,Rt 0.54min。
中間物279：(S)-2-(4-(1-胺基乙基)-3-氟苯基)丙-2-醇
步驟1
向具有攪拌棒之微波小瓶中添加(R)-N-((S)-1-(4-溴-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1g，3.10mmol)，接著添加三丁基(1-乙氧基乙烯基)錫烷(2.24g，6.21mmol)、TEA(1.3mL，9.31mmol)及PdCl2(dppf).CH2Cl2加合物(0.127g，0.155mmol)。接著向固體中添加甲苯(10mL)。將小瓶蓋好且藉由微波輻射在100℃下加熱30分鐘。向此反應混合物中添加1ml TFA以試圖將乙烯醚轉化為酮，但未成功。所得反應混合物在室溫下攪拌5分鐘。接著反應混合物用飽和NaHCO3溶液淬滅至pH 8。水性混合物用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷40%至100%)得到呈黃色黏性殘餘物狀之(R)-N-((S)-1-(4-(1-乙氧基乙烯基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(0.60g，1.91mmol，62%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.20(s,9 H)1.43(t,J=6.94Hz,3 H)1.56-1.63(m,5 H)3.36(d,J=3.13Hz,1 H)3.92(q,J=6.96Hz,2 H)4.23(br.s.,1 H)4.65(s,1 H)4.79-4.91(m,1 H)7.30(s,2 H)7.40(d,J=8.02Hz,1 H)。
步驟2
向含有(R)-N-((S)-1-(4-(1-乙氧基乙烯基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(600mg，1.91mmol)之圓底燒瓶中添加MeOH(19mL)。接著向此均質溶液中添加HCl(水溶液)(3.2mL，19.1mmol，3M)。所得反應混合物在室溫下攪拌30分鐘。接著移除揮發性物質。殘餘物用Et2O濕磨得到呈鹽酸鹽狀之(S)-1-(4-(1-胺基乙基)-3-氟苯基)乙酮(0.43g，1.98mmol，103%產率)。1H NMR(400MHz,D2O)δ 1.67(d,J=6.99Hz,3 H)2.64(s,3 H)4.80-4.87(m,1 H)7.61(t,J=7.73Hz,1 H)7.77(dd,J=11.30,1.66Hz,1 H)7.87(dd,J=8.09,1.64Hz,1 H)。LCMS m/z 182.0(M+H)+,Rt 0.36min。
步驟3
向具有攪拌棒之圓底燒瓶中添加(S)-1-(4-(1-胺基乙基)-3-氟苯基)乙酮(0.43g，1.98mmol)，接著添加NMP(9.9mL)。接著向此溶液中添加DIEA(0.83mL，4.74mmol)及二碳酸二-第三丁酯(0.95g，4.35mmol)。所得反應混合物在室溫下攪拌2小時。反應混合物用水稀釋，用EtOAc萃取。有機相用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至100%)得到呈無色油狀之(S)-1-(4-乙醯基-2-氟苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(369mg，1.31mmol，66.4%產率)，其在靜置後結晶。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.38-1.49(m,12 H)2.59(s,3 H)5.01(br.s.,1 H)7.40(t,J=7.65Hz,1 H)7.62(dd,J=11.20,1.57Hz,1 H)7.71(dd,J=7.95,1.54Hz,1 H)。LCMS m/z 267.1(甲酸片段+CH3CN)(M+H)+,Rt 0.89min。
步驟4
在N2下，向冷卻至0℃(水/冰浴)之(S)-(1-(4-乙醯基-2-氟苯基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(200mg，0.71mmol)於DCM(7.1mL)中之溶液中添加含3M MeMgBr(10.95mL，2.84mmol)之乙醚。反應混合物在 0℃下攪拌5分鐘。接著逐漸溫至室溫且在室溫下攪拌30分鐘。反應混合物冷卻至0℃，接著藉由緩慢添加飽和NH4Cl溶液淬滅且用DCM稀釋。分配各相，水相用DCM萃取且合併之有機層用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮，得到呈無色油狀之(S)-(1-(2-氟-4-(2-羥基丙-2-基)苯基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(184mg，0.62mmol，87%產率)，其在靜置後緩慢結晶。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.39-1.48(m,12 H)1.57(s,6 H)7.15-7.25(m,2 H)7.31-7.36(m,1 H).
步驟5
向含有(S)-(1-(2-氟-4-(2-羥基丙-2-基)苯基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(184mg，0.62mmol)及攪拌棒之圓底燒瓶中添加含二烷(2mL)。接著向此反應混合物中添加含HCl之二烷(0.93ml，3.71mmol，4.0M)。所得反應混合物在室溫下攪拌18小時。接著移除揮發性物質。殘餘物用Et2O濕磨得到呈鹽酸鹽狀之(S)-2-(4-(1-胺基乙基)-3-氟苯基)丙-2-醇(142mg，0.61mmol，98%產率)。1H NMR(400MHz,D2O)δ 1.53(s,6 H)1.64(d,J=7.04Hz,3 H)3.73(s,1 H)7.28-7.37(m,2 H)7.42-7.48(m,1 H)。LCMS m/z 198.1(M+H)+,Rt 0.37min。
中間物280：(R)-N-((S)-1-(2,5-二氟-4-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺
向2-側氧基環己烷甲酸乙酯(58.0mg，0.341mmol)、(R)-N-((S)-1-(4-溴-2,5-二氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(580mg，1.705mmol)、Cs2CO3(1555mg，4.77mmol)、碘化銅(I)(32.5mg，0.170 mmol)之混合物中添加2,2,2-三氟乙醇(871μl，11.93mmol)。密封反應物且在78℃下加熱24小時。LCMS表明完成轉化為產物。接著反應混合物冷卻至室溫且用EtOAc(20mL)稀釋。混合物經矽藻土墊過濾且矽藻土墊用EtOAc(20mL)沖洗。有機物用水(2×15mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)且濃縮。接著殘餘物與EtOAc/庚烷(1：3)一起經矽膠墊(30g)過濾，得到粗(R)-N-((S)-1-(2,5-二氟-4-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(0.601g)。LCMS(B)m/z 360.1(M+H)+
中間物281：(S)-1-(2,5-二氟-4-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)乙胺
向(R)-N-((S)-1-(2,5-二氟-4-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(0.601g，1.672mmol)於二烷(10ml)中之溶液中逐滴添加HCl(0.836ml，3.34mmol)。反應物在室溫下攪拌30分鐘。LCMS表明完成轉化為產物。濃縮反應混合物且將DCM(20mL)及飽和NaHCO3溶液(10mL)添加至殘餘物中。攪拌混合物10分鐘且分離各相。接著水層用DCM(2×10mL)萃取，且乾燥(Na2SO4)合併之有機層且濃縮得到粗產物。LCMS(B)m/z 256.2(M+H)+
使用與關於中間物281之製備所描述類似的方法製備表15a中之中間物。
中間物285：(R,E)-N-((1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-3-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺
向1H-吡唑-3-甲醛(1.52g，15.82mmol)、1-氯-4-碘苯(5.66g，23.73mmol)、(1R,2R)-N1,N2-二甲基環己烷-1,2-二胺(0.450g，3.16mmol)、碘化銅(I)(0.151g，0.791mmol)及K2CO3(4.37g，31.6mmol)之混合物中添加甲苯(20mL)。密封反應物且加熱至110℃保持18小時。接著反應混合物冷卻至室溫且用水(50mL)稀釋，且用EtOAc(3×30mL)萃取。接著乾燥合併之有機物(Na2SO4)且濃縮，得到粗1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-3-甲醛(1.86g，9.0mmol)，向其中添加(R)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1.20g，9.90mmol)、CuSO4(2.155g，13.50mmol)及DCE(30ml)。密封反應物，在60℃下加熱18小時。得到深綠色懸浮液。接著反應混合物冷卻至20℃，經矽藻土墊過濾，用DCM沖洗。接著濃縮溶液得到呈淺綠色油狀之最終粗產物。殘餘物經由矽 膠層析(EtOAc/庚烷)純化。LCMS(B)m/z 310.3(M+H)+
中間物286：(R)-N-((R)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺
在-40℃下，向(R,E)-N-((1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-3-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(2.12g，6.84mmol)於DCM(40mL)中之溶液中添加溴化甲基鎂(9.12ml，27.4mmol)。反應物在-40℃下攪拌3小時。接著反應混合物用飽和NH4Cl溶液(20mL)淬滅。水層用HCl(1M)調節至pH=8且用DCM(2×200mL)萃取。乾燥(Na2SO4)合併之有機物且濃縮。接著殘餘物經由矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷)純化，得到(R)-N-((R)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1.11g)。LCMS(B)m/z 326.3(M+H)+
中間物287：(R)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-3-基)乙胺
向(R)-N-((R)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(0.98g，3.01mmol)於二烷(10ml)中之溶液中逐滴添加HCl(1.504ml，6.01mmol)。反應物在室溫下攪拌30分鐘。LCMS表明完成轉化為產物。濃縮反應混合物且將DCM(20mL)及飽和 NaHCO3溶液(10mL)添加至殘餘物中。攪拌混合物10分鐘且分離各相。接著水層用DCM(2×10mL)萃取，且乾燥(Na2SO4)合併之有機層且濃縮得到產物(0.556g)。LCMS(B)m/z 222.2(M+H)+
中間物288：(R)-N-((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺
在-40℃下，向(R,E)-N-((1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-3-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(2.12g，6.84mmol)於DCM(40mL)中之溶液中添加溴化甲基鎂(9.12ml，27.4mmol)。反應物在-40℃下攪拌3小時。接著反應混合物用飽和NH4Cl溶液(20mL)淬滅。水層用HCl(1M)調節至pH=8且用DCM(2×200mL)萃取。乾燥(Na2SO4)且濃縮合併之有機物。接著殘餘物經由矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷)純化，得到(R)-N-((R)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(1.01g)。LCMS(B)m/z 326.3(M+H)+
中間物289：(S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-3-基)乙胺
向(R)-N-((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(0.98g，3.01mmol)於二烷(10ml)中之溶液中逐滴添加HCl(1.504ml，6.01mmol)。反應物在室溫下攪拌30分鐘。LCMS表 明完成轉化為產物。濃縮反應混合物且將DCM(20mL)及飽和NaHCO3溶液(10mL)添加至殘餘物中。攪拌混合物10分鐘且分離各相。接著水層用DCM(2×10mL)萃取，且乾燥(Na2SO4)且濃縮合併之有機層得到粗產物(0.501g)。LCMS(B)m/z 222.2(M+H)+
使用與關於中間物289之製備所描述類似的方法製備表16a中之中間物
中間物296：(R)-N-((S)-1-(2,5-二氟-4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺
向(R)-N-((S)-1-(4-溴-2,5-二氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(230mg，0.676mmol)於二烷/H2O(5mL/1mL)中之溶液中添加2'-(二環己基膦)-2,6-二甲氧基-[1,1'-聯苯]-3-磺酸鈉(34.7mg，0.068mmol)、(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)酸(194mg，1.014mmol)、K2CO3(234mg，1.690mmol)，接著添加Pd2dba3(31.0mg，0.034mmol)。密封反應混合物且加熱至110℃且攪拌2小時。LCMS證實完成轉化。接著反應混合物冷卻至室溫且用EtOAc(20mL)及水(10mL)稀釋。接著水層用EtOAc(2×20mL)萃取。接著濃縮合併之有機物。殘餘物藉由矽膠層析(含50%庚烷之EtOAc至含10% MeOH之EtOAc)純化得到產物(0.25g)。LCMS(B)m/z 407.6(M+H)+
中間物297：(S)-1-(2,5-二氟-4-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)苯基)乙胺
向(R)-N-((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(0.98g，3.01mmol)於二烷(10ml)中之溶液中逐滴添加HCl(1.504ml，6.01mmol)。反應物在室溫下攪拌30分鐘。LCMS表明完成轉化為產物。濃縮反應混合物且將DCM(20mL)及飽和 NaHCO3溶液(10mL)添加至殘餘物中。攪拌混合物10分鐘且分離各相。接著水層用DCM(2×10mL)萃取，且乾燥(Na2SO4)且濃縮合併之有機層得到粗產物(0.501g)。LCMS(B)m/z 303.2(M+H)+
使用與關於中間物297之製備所描述類似的方法製備表17a中之中間物
中間物301：(R)-N-((S)-1-(2,5-二氟-4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺
向二-第三丁基(2',4',6'-三異丙基-3,4,5,6-四甲基-[1,1'-聯苯]-2-基)膦(80mg，0.166mmol)於甲苯/二烷(8mL/2mL)中之溶液中添加 Pd2dba3(60mg，0.066mmol)。密封反應混合物且加熱至120℃且攪拌5分鐘。反應物冷卻至室溫且將4-甲基-1H-咪唑(157mg，1.910mmol)、(R)-N-((S)-1-(4-溴-2,5-二氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(500mg，1.470mmol)且K3PO4(624mg，2.94mmol)添加至反應混合物中。密封反應物且加熱至120℃保持2小時。LCMS證實完成轉化。接著反應混合物冷卻至室溫且用EtOAc(20mL)及水(10mL)稀釋。接著水層用EtOAc(2×20mL)萃取。接著濃縮合併之有機物。殘餘物藉由矽膠層析(含50%庚烷之EtOAc至含10% MeOH之EtOAc)純化，得到(S)-1-(2,5-二氟-4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)苯基)乙胺(500mg)。LCMS(B)m/z 342.6(M+H)+
中間物302：(S)-1-(2,5-二氟-4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)苯基)乙胺
向(R)-N-((S)-1-(2,5-二氟-4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(500mg)於MeOH(10mL)中之溶液中逐滴添加HCl(732μl，2.93mmol)。反應物在室溫下攪拌30分鐘。LCMS表明完全轉化為產物。濃縮反應混合物且將DCM(20mL)及飽和NaHCO3溶液(10mL)添加至殘餘物中。攪拌混合物10分鐘且分離各相。接著水層用DCM(2×10mL)萃取，且乾燥(Na2SO4)且濃縮合併之有機物，得到(S)-1-(2,5-二氟-4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)苯基)乙胺(330mg)。LCMS(B)m/z 238.1(M+H)+
中間物303：(S)-1-(1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙胺鹽酸鹽
步驟1：製備4-甲醯基-1H-咪唑-1-甲酸第三丁酯
向含二碳酸二-第三丁酯(23.25g，107mmol)及1H-咪唑-4-甲醛(9.75g，101mmol)之THF(200mL)中添加DMAP(100mg，0.819mmol)。攪拌反應物兩小時。接著反應混合物用飽和NaHCO3溶液/EtOAc(100mL/100mL)稀釋。接著水溶液用EtOAc(2×100mL)萃取，且乾燥(Na2SO4)且濃縮合併之有機物得到粗產物(19.9g)。LCMS(B)m/z 197.2(M+H)+
步驟2：製備(S,E)-4-(((第三丁基亞磺醯基)亞胺基)甲基)-1H-咪唑-1-甲酸第三丁酯
向含CuSO4(24.28g，152mmol)及4-甲醯基-1H-咪唑-1-甲酸第三丁酯(19.9g，101mmol)之DCE(100mL)中添加(S)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(13.52g，112mmol)。反應物加熱至65℃保持18小時。接著反應混合物冷卻至室溫且經矽藻土墊過濾。矽藻土墊用DCM(200mL)沖洗且濃縮濾液。接著殘餘物與作為溶離劑之庚烷/EtOAc(3：1)一起通過矽膠墊。濃縮濾液得到粗(S,E)-4-(((第三丁基亞磺醯基)亞胺基)甲基)-1H-咪唑-1-甲酸第三丁酯(22g)。LCMS(B)m/z 300.2(M+H)+
步驟3：製備(S,E)-N-((1H-咪唑-4-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺
在-70℃下，向含(S,E)-4-(((第三丁基亞磺醯基)亞胺基)甲基)-1H-咪唑-1-甲酸第三丁酯(18.61g，62.2mmol)之DCM(250mL)中逐滴添加含溴化甲基鎂(83mL，249mmol)之Et2O。反應物在-70℃下攪拌4小時。接著將反應混合物溫至-40℃且攪拌一小時。接著反應物藉由 小心添加HCl(1N)淬滅。移除冷浴且在攪拌下將水層調節至pH=8。分離水層且用DCM(3×100mL)萃取。乾燥(Na2SO4)且濃縮合併之有機物，得到呈4-((S)-1-((S)-1,1-二甲基乙基亞磺醯胺基)乙基)-1H-咪唑-1-甲酸第三丁酯與(S,E)-N-((1H-咪唑-4-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺之混合物形式之粗產物，在0℃下向其中添加DCM(300mL)及甲酸(100mL，2651mmol)。接著移除冷浴且攪拌反應物2小時。接著反應混合物在減壓下濃縮以移除DCM及甲酸。殘餘物用DCM(400mL)稀釋且用飽和Na2CO3水溶液(2×200mL)洗滌。合併之水溶液用DCM(2×200mL)萃取。接著乾燥(Na2SO4)且濃縮合併之有機物，得到(S,E)-N-((1H-咪唑-4-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(12.5g)。LCMS(B)m/z 216.1(M+H)+
步驟4：製備(S)-1-(1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙胺鹽酸鹽
向200mL RBF中添加甲苯/二烷(80ml/20mL)。燒瓶冷卻至0℃且在高真空下將溶劑混合物抽成真空保持2分鐘，且接著用氬氣再填充。該過程再重複三次。接著此溶劑用於反應。
將含有二-第三丁基(2',4',6'-三異丙基-3,4,5,6-四甲基-[1,1'-聯苯]-2-基)膦(55.8mg，0.116mmol)及Pd2(dba)3(42mg，0.046mmol)之小瓶在高真空下抽成真空保持1分鐘，且接著用氬氣再填充。該過程再重複三次且向含有其他起始物質之反應小瓶中添加如上製備之甲苯/二烷溶劑(10mL)，接著添加如上製備之鈀/配位體錯合物。密封反應混合物且加熱至120℃且攪拌5分鐘。反應物冷卻至室溫。
將(S,E)-N-((1H-咪唑-4-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(500mg，2.322mmol)、1-溴-4-氟苯(447mg，2.55mmol)及K3PO4(986mg，4.64mmol)裝入獨立反應小瓶中。小瓶在高真空下抽成真空保持1分鐘且接著用氬氣再填充。該過程再重複三次且向含有其他起始物質之反應小瓶中添加如上製備之鈀/配位體錯合物。密封反應物且加 熱至120℃保持18小時。LCMS證實完成轉化。接著反應混合物冷卻至室溫且經矽藻土墊過濾。固體用EtOAc(30mL)沖洗。接著濾液用水(2×20mL)洗滌。接著水層用EtOAc(20mL)萃取。接著濃縮合併之有機物。殘餘物經由矽膠層析(EtOAc/庚烷70%-100%(含有5% MeOH))純化，得到(S)-N-((S)-1-(1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺。LCMS(B)m/z 310.2(M+H)+
向上述中間產物中添加MeOH(5mL)及HCl(4M於二烷中，1mL)。攪拌反應混合物一小時且LCMS證實完成轉化。接著濃縮混合物得到(S)-1-(1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙胺鹽酸鹽(300mg)。LCMS(B)m/z 206.0(M+H)+
中間物304：5-氯-6-(1,1-二氟乙基)菸鹼醛
步驟1：製備5,6-二氯菸鹼酸乙酯
在20℃下，向5,6-二氯菸鹼酸(20.01g，104mmol)於EtOH(500mL)中之溶液中添加氯三甲基矽烷(132mL，1042mmol)。攪拌反應物72小時。接著濃縮反應混合物且用EtOAc(500mL)稀釋，且用飽和NaHCO3(2×100mL)及鹽水(100mL)洗滌。接著乾燥(Na2SO4)且在減壓下濃縮有機物，得到最終粗產物(21.25g)。LCMS m/z 220.1(M+H)+,Rt 0.94min。
步驟2：製備6-乙醯基-5-氯菸鹼酸乙酯
向5,6-二氯菸鹼酸乙酯(5.26g，23.90mmol)及氯化四乙基銨(11.88g，71.7mmol)於MeCN(50mL)中之懸浮液中添加三丁基(1-乙氧基乙烯基)錫烷(9.50g，26.3mmol)及PdCl2(PPh3)2(0.671g，0.956 mmol)。密封反應物，在80℃下加熱5小時。得到黑色澄清溶液。接著反應混合物冷卻至20℃，濃縮且用EtOAc(200mL)稀釋，且用水(50mL)及鹽水(50mL)洗滌。接著乾燥(Na2SO4)且濃縮有機物得到粗5-氯-6-(1-乙氧基乙烯基)菸鹼酸乙酯。接著殘餘物溶解於THF(100mL)中且添加HCl(20mL，3M於H2O中)。反應混合物在20℃下攪拌5小時，且添加飽和NaHCO3溶液直至pH=8。接著混合物用EtOAc(200mL)及水(50mL)稀釋。分離各相且水層用EtOAc(2×50mL)萃取。合併之有機物用鹽水(20mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)且濃縮，得到所需產物(3.56g)。LCMS m/z 228.5(M+H)+,Rt 0.83min。
步驟3：製備5-氯-6-(1,1-二氟乙基)菸鹼酸乙酯
向6-乙醯基-5-氯菸鹼酸乙酯(3.01g，13.22mmol)於CHCl3(7mL)中之溶液中添加DAST(5.20mL，39.7mmol)及乙醇(0.061g，1.32mmol)。密封反應物，在60℃下加熱24小時。得到黑色澄清溶液。接著反應混合物冷卻至20℃，且小心添加冷的濃NaHCO3水溶液(50mL)。水層用DCM(2×100mL)萃取。接著乾燥(Na2SO4)且濃縮合併之有機物。殘餘物經由矽膠急驟層析(0-20% EtOAc-己烷)純化，得到呈黃色油狀之所需產物(2.88g)。LCMS m/z 250.1(M+H)+,Rt 0.99min。
步驟4：製備(5-氯-6-(1,1-二氟乙基)吡啶-3-基)甲醇
向5-氯-6-(1,1-二氟乙基)菸鹼酸乙酯(2.68g，10.74mmol)於Et2O(40mL)中之溶液中添加LiBH4(0.351g，16.10mmol)，接著逐滴添加甲醇(0.653mL，16.10mmol)。反應物在40℃下回流一小時。接著反應混合物冷卻至0℃，且用HCl(1M)淬滅直至水層pH=2。分離各相且水層用DCM(3×50mL)萃取。接著乾燥(Na2SO4)且在減壓下濃縮有機物，得到最終粗產物(2.12g)。LCMS m/z 208.0(M+H)+,Rt 0.63min。
步驟5：製備5-氯-6-(1,1-二氟乙基)菸鹼醛
向(5-氯-6-(1,1-二氟乙基)吡啶-3-基)甲醇(2.12g，10.21mmol)於DCM(100ml)中之溶液中添加PCC(3.30g，15.32mmol)。反應物在20℃下攪拌3小時。得到黑色懸浮液。LCMS證實完全轉化為產物。接著反應混合物經矽藻土墊過濾，且用DCM(200mL)洗滌。接著濃縮濾液得到粗產物(1.78g)。LCMS m/z 224.0(M+H2O+H)+,Rt 0.72min。
中間物305：5-氯-6-(2,2,2-三氟乙氧基)菸鹼醛
步驟1：製備5-氯-6-(2,2,2-三氟乙氧基)菸鹼酸乙酯
在-73℃下，向5,6-二氯菸鹼酸乙酯(6.28g，28.5mmol)及2,2,2-三氟乙醇(2.71ml，37.1mmol)於THF(90ml)中之溶液中添加NaHMDS(37.1ml，37.1mmol)。反應物在-73℃下攪拌30分鐘，接著在0℃下攪拌5小時。反應物用30mL飽和NH4Cl溶液淬滅。接著將反應混合物倒入50mL鹽水中且分離各相。水層用DCM(2×100mL)萃取。乾燥(Na2SO4)且濃縮合併之有機物。用100%庚烷至含30% EtOAc之庚烷進行矽膠層析，得到最終產物(7.51g)。LCMS m/z 284.1(M+H)+,Rt 1.07min。
步驟2：製備(5-氯-6-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-3-基)甲醇
向5-氯-6-(2,2,2-三氟乙氧基)菸鹼酸乙酯(7.51g，26.5mmol)於Et2O(200mL)中之溶液中添加LiBH4(0.865g，39.7mmol)，接著逐滴添加甲醇(1.611mL，39.7mmol)。反應物在40℃下回流一小時。接著反應混合物冷卻至0℃，且用HCl(1M)淬滅直至水層pH=2。分離各 相且水層用DCM(3×200mL)萃取。接著乾燥(Na2SO4)且在減壓下濃縮有機物，得到最終粗產物(6.31g)。LCMS m/z 242.1(M+H)+,Rt 0.77min。
步驟3：製備5-氯-6-(2,2,2-三氟乙氧基)菸鹼醛
向(5-氯-6-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-3-基)甲醇(4.00g，16.56mmol)於EtOAc(15mL)中之溶液中添加氧化錳(IV)(16.93g，166mmol)。反應物藉由微波在120℃下加熱30分鐘。接著混合物經矽藻土墊過濾且用EtOAc沖洗。濃縮濾液得到粗產物(3.38g)。
中間物306：(S)-1-(2,3-二氟苯基)乙胺
步驟1
向具有攪拌棒之烘乾之圓底燒瓶中添加2,3-二氟苯甲醛(0.5g，3.52mmol)、(R)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(0.469g，3.87mmol)及DCE(7.04mL)。接著向此混合物中添加硫酸銅(II)(0.842g，5.28mmol)。反應混合物在預先加熱之油浴中加熱至55℃保持24小時。反應混合物經矽藻土墊過濾，固體用DCE洗滌。濃縮合併之濾液得到(R,E)-N-(2,3-二氟苯亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺之黏性黃色油(0.8007g，3.26mmol，93%產率)。MS m/z 246.1(M+H)+；Rt-0.91min。
步驟2
在N2下，向冷卻至0℃(水/冰浴)之(R,E)-N-(2,3-二氟苯亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(0.800g，3.26mmol)於DCM(32.6mL)中之溶液中添加含3M MeMgBr(4.35mL，13.05mmol)之乙醚。反應混合物在0℃下攪拌30分鐘。接著逐漸溫至室溫且在室溫下攪拌30分鐘。反應混 合物冷卻至0℃，接著藉由緩慢添加飽和NH4Cl溶液淬滅且用EtOAc稀釋。分配各相，水相用EtOAc萃取且合併之有機層用水、鹽水洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且濃縮，得到呈黃色固體狀之(R)-N-((S)-1-(2,3-二氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(0.7868g，3.01mmol，92%產率)。MS m/z 262.0(M+H)+；Rt-0.70min。
步驟3
向含有(R)-N-((S)-1-(2,3-二氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(786.8mg，3.01mmol)之圓底燒瓶中添加二烷(10.000mL)。向此溶液中添加含4.0M HCl之二烷(1.505mL，6.02mmol)且溶液在室溫下攪拌15分鐘。濃縮反應混合物，溶解於10ml Et2O中，且再次濃縮。再次添加Et2O且所得混合物用音波處理，且過濾且乾燥固體物質，得到呈白色結晶鹽酸鹽形式之(S)-1-(2,3-二氟苯基)乙胺(0.4213g，2.176mmol，72.3%產率)。1H NMR(400MHz,<d2o>)d ppm 1.55(d,J=6.99Hz,3 H)4.71(q,J=6.96Hz,1 H)7.10-7.26(m,3 H)；MS m/z 158.0(M+H)+；Rt-0.37min。
使用與關於中間物306之製備所描述類似的方法製備表A中之中間物
中間物310：(S)-1-(4-(1,1-二氟乙基)-2-氟苯基)乙胺
步驟1：製備1-(4-溴-3-氟苯基)乙醇
在氬氣下在-60℃至-50℃之溫度下，經約15分鐘將溴化甲基鎂(3M於乙醚中，6.77mL，20.31mmol)逐滴添加至4-溴-3-氟苯甲醛(3.1g，15.27mmol)於THF(50mL)中之溶液中。移除冰浴且使反應混合物溫至室溫且攪拌約20小時。反應混合物用飽和氯化銨水溶液(20mL)緩慢稀釋/淬滅且進一步用水(10mL)稀釋。分離之水層用乙酸乙酯(2×40mL)萃取。合併之有機層用鹽水(60mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到呈淡黃色油狀之1-(4-溴-3-氟苯基)乙醇，其未經進一步純化即直接使用。
LCMS m/z 201.0(M-H2O)+,Rt 0.75min。
步驟2：製備1-(4-溴-3-氟苯基)乙酮
向粗1-(4-溴-3-氟苯基)乙醇油(來自步驟1)於DCM(100mL)中之溶液中添加重鉻酸吡錠(8.96g，23.82mmol)。混合物在室溫下攪拌隔夜。向混合物中添加矽藻土，反應混合物經矽藻土墊過濾且用 DCM沖洗若干次。濾液在減壓下濃縮。粗物質藉由管柱層析[SiO2，40g，庚烷/乙酸乙酯]純化，得到呈白色固體狀之1-(4-溴-3-氟苯基)乙酮(3.08g)。
1H NMR(400Mhz,CDCl3)δ ppm 7.72-7.58(m,3 H),2.59(s,3 H).
步驟3：製備1-溴-4-(1,1-二氟乙基)-2-氟苯
向1-(4-溴-3-氟苯基)乙酮(3.08g，14.19mmol)於氯仿(15mL)中之溶液中添加DAST(5.62mL，42.6mmol)及乙醇(0.083mL，1.42mmol)。橙色溶液於密封容器中在60℃下加熱24小時。反應混合物冷卻至約20℃且向混合物中緩慢添加飽和碳酸氫鈉水溶液(75mL)。繼續攪拌直至氣體放泄停止(約15分鐘)。分離之水層用額外的飽和碳酸氫鈉水溶液(25mL)稀釋且小心混合。鹼性水層用DCM(2×100mL)萃取。合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析[SiO2，庚烷/乙酸乙酯]純化，得到呈輕微渾濁無色油狀之1-溴-4-(1,1-二氟乙基)-2-氟苯(2.1g)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ ppm 7.73(dd,J=7.2,8.1Hz,1 H),7.40(dd,J=2.0,9.4Hz,1 H),7.29(m,J=1.0Hz,1 H),1.92(t,J=18.4Hz,3 H).
步驟4：製備4-(1,1-二氟乙基)-2-氟苯甲醛
在-78℃下，經約20分鐘向1-溴-4-(1,1-二氟乙基)-2-氟苯(2.1g， 8.79mmol)於THF(30.3mL)中之溶液中添加正丁基鋰(1.6M於己烷中，5.60mL)。混合物在-78℃下攪拌30分鐘且經約4分鐘逐滴添加DMF(1.02mL，13.18mmol)。繼續攪拌1小時，混合物用1N鹽酸水溶液/MeOH(2/1，15mL)稀釋/淬滅，且溫至室溫。反應混合物進一步用水(50mL)稀釋且用乙醚(2×50mL)萃取。合併之有機層用1N氫氧化鈉水溶液(50mL)及鹽水(100mL)洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾且在減壓下濃縮。粗物質藉由管柱層析[SiO2，40g，庚烷/乙酸乙酯]純化，得到呈深黃色、揮發性油狀之4-(1,1-二氟乙基)-2-氟苯甲醛(699mg)，其受到1-溴-4-(1,1-二氟乙基)-2-氟苯污染。1H NMR(400Mhz,CDCl3)δ ppm 10.40(s,1 H),7.95(t,J=7.4Hz,1 H),7.39-7.47(m,2 H),7.35(d,J=10.6Hz,1 H),1.94(t,J=18.2Hz,4 H)7.73(dd,J=7.2,8.1Hz,1 H).
步驟5：製備(R,E)-N-(4-(1,1-二氟乙基)-2-氟苯亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺
向4-(1,1-二氟乙基)-2-氟苯甲醛(693mg，來自步驟4)及(R)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(513mg，4.24mmol)於DCE(12.9mL)中之混合物中添加硫酸銅(II)(882mg，5.52mmol)。反應混合物置放於預先加熱之油浴(55℃)中且加熱約2天。混合物冷卻至室溫，經矽藻土墊過濾且用DCE沖洗。合併之濾液在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析[SiO2，24g，庚烷/乙酸乙酯]純化，得到呈黃色油狀之(R,E)-N-(4-(1,1-二氟乙基)-2-氟苯亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(497mg)。LCMS m/z 292.1(M+H)+,Rt 0.97min。
步驟6：製備N-((S)-1-(4-(1,1-二氟乙基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺
在0℃下，向(R,E)-N-(4-(1,1-二氟乙基)-2-氟苯亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(497mg，1.706mmol)於DCM(9.59mL)中之溶液中添加溴化甲基鎂(3M於乙醚中；1.20mL)。反應混合物在0℃下攪拌1小時，逐漸溫至室溫且在室溫下攪拌1小時。混合物冷卻至0℃，再添加溴化甲基鎂(3M於乙醚中；0.5mL)且繼續在0℃下攪拌30分鐘。反應混合物物用飽和氯化銨水溶液(6ml)小心淬滅且用水(20mL)稀釋。分離之水相用DCM(30mL)萃取。合併之有機層用鹽水(50mL)洗滌，在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析[SiO2，24g，庚烷/乙酸乙酯]純化，得到呈白色固體狀之N-((S)-1-(4-(1,1-二氟乙基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(349mg)。LCMS m/z 308.2(M+H)+,Rt 0.91min。
步驟7：製備(S)-1-(4-(1,1-二氟乙基)-2-氟苯基)乙胺
向N-((S)-1-(4-(1,1-二氟乙基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(349mg，1.135mmol)中添加含4M HCl之二烷(3.01mL)，得到紫色溶液。向混合物中添加乙醚(20mL)且混合物在約10℃下攪拌15分鐘。混合物在減壓下濃縮至約2mL體積且添加乙醚(20mL)。濾出固體，用乙醚(4×10mL)沖洗且在減壓下乾燥，得到呈灰白色固體 狀之(S)-1-(4-(1,1-二氟乙基)-2-氟苯基)乙胺(244mg)(鹽酸鹽)。LCMS m/z 204.1(M+H)+,Rt 0.42min。
中間物311：(S)-1-(3-羥基苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯
(S)-3-(1-胺基乙基)酚(1.188g，6.84mmol)及Boc2O(1.747mL，7.53mmol)於DCM(17.10mL)中之漿料在室溫下在N2下攪拌，同時緩慢添加DIEA(1.434mL，8.21mmol)。最初不可溶的起始物質緩慢溶解。溶液在室溫下攪拌16小時且接著濃縮。油性殘餘物再溶解於EtOAc中且相繼用飽和Na2CO3及鹽水洗滌。原始水層再用EtOAc萃取，其接著用鹽水洗滌且與先前EtOAc批料合併。合併之有機物經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮，得到2.4g粗透明淺黃色油，其藉由矽膠管柱(EtOAc/庚烷0至30%)純化，得到呈透明無色油狀之(S)-1-(3-羥基苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯，其在靜置後固化(1.79g，7.55mmol，110%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)d 1.44(br.s.,12 H)4.08-4.18(m,1 H)4.76(br.s.,1 H)6.72(dd,J=7.46,1.83Hz,1 H)6.78(br.s.,1 H)6.88(br.s.,1 H)7.16-7.24(m,1 H)。LCMS m/z 223.0/182.0(未觀測到母體化合物，僅Boc片段)(M+H)+,Rt 0.71min。
中間物312：(S)-1-(4-羥基-3-甲基苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯
如以上中間物195製備：(S)-1-(4-羥基-3-甲基苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯，透明無色油(1.27g，5.05mmol，103%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)d 1.42(s,9 H)1.54(s,3 H)2.24(s,3 H)4.70(br.s., 1 H)6.72(d,J=8.22Hz,1 H)7.01(d,J=9.00Hz,1 H)7.05(s,1 H)。LCMS m/z 252.2(M+H)+,Rt 0.80min。
中間物313：(S)-1-(3-(環己氧基)苯基)乙胺鹽酸鹽
步驟1
在N2下在室溫下，向(S)-1-(3-羥基苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(100mg，0.421mmol)、環己醇(0.180ml，1.686mmol)及PPh3(221mg，0.843mmol)於THF(2ml)中之溶液中逐滴添加DEAD(0.133ml，0.843mmol)。攪拌所得黃色溶液3小時，此時在室溫下添加另一批環己醇(0.180ml，1.686mmol)、PPh3(221mg，0.843mmol)，且10分鐘後添加DEAD(0.133ml，0.843mmol)。攪拌反應混合物16小時且接著濃縮。粗透明油再溶解於DMSO中且藉由逆相HPLC純化。合併之產物部分在分液漏斗中藉由添加等量EtOAc及約250mg Na2CO3來脫鹽。分離各相且有機物用鹽水洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在真空中濃縮，得到呈透明無色膜狀之(S)-1-(3-(環己氧基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(74.1mg，0.232mmol，55.0%產率)。LCMS m/z 305.0/264.0(未觀測到母體化合物，僅Boc片段)(M+H)+,Rt 1.12min。
步驟2
(S)-1-(3-(環己氧基)苯基)乙基胺基甲酸第三丁酯(74.1mg，0.232mmol)溶解於含4M HCl之二烷(1ml，4.00mmol)中且攪拌所得混合物1小時，接著濃縮，得到呈鹽酸鹽狀之(S)-1-(3-(環己氧基)苯基)乙胺(產率假定定量)。LCMS m/z 220.1(M+H)+,Rt 0.66min。
使用關於中間物313之製備所描述之方法製備表19中之中間物。
中間物319：(S)-1-(3-苯氧基苯基)乙胺
將1-(吡啶-2-基)丙-2-酮配位體(90mg，0.665mmol)、苯酚(407mg，4.32mmol)、CuBr(47.7mg，0.332mmol)及Cs2CO3(2166mg，6.65mmol)稱重至20ml微波小瓶中。向混合物中添加DMSO(5ml)及 (S)-1-(3-溴苯基)乙胺(0.5ml，3.32mmol)。試管用N2沖洗，蓋好，且黑色混合物在油浴中在90℃下加熱18小時。非均質混合物用EtOAc稀釋且經玻璃燒結漏斗過濾，用EtOAc及另一份5ml DMSO溶離。接著在真空中移除揮發性物質且粗褐色液體經由1μm PTFE過濾器過濾且藉由逆相HPLC純化。合併之產物部分在分液漏斗中藉由添加等量EtOAc及約250mg Na2CO3來脫鹽。分離各相且有機物用鹽水洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在真空中濃縮，得到呈琥珀色油狀之(S)-1-(3-苯氧基苯基)乙胺(361.5mg，1.678mmol，50.5%產率)。LCMS m/z 214.1(M+H)+,Rt 0.61min。
中間物320：(S)-1-(4-(三氟甲氧基)苯基)乙胺
步驟1
在N2下，向渾濁的4-(三氟甲氧基)苯甲醛(5g，26.3mmol)及(R)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(3.51g，28.9mmol)於DCE(52mL)中之溶液中添加硫酸銅(II)(6.30g，39.4mmol)，且所得混合物在預先加熱之油浴中在55℃下加熱22小時。反應混合物經矽藻土墊過濾，用DCM溶離。濃縮濾液得到(R,E)-2-甲基-N-(4-(三氟甲氧基)苯亞甲基)丙烷-2-亞磺醯胺之黏性黃色油(7.9g，26.9mmol，102%產率)。物質未經進一步純化即用於下一步驟。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ ppm 1.27(s,9 H)7.32(d,J=8.07Hz,2 H)7.91(d,J=8.75Hz,2 H)8.59(s,1 H)。LCMS m/z 294.1(M+H)+,Rt 1.01min。
步驟2
在氮氣下，向冷卻至0℃(水/冰浴)之(R,E)-2-甲基-N-(4-(三氟甲氧 基)苯亞甲基)丙烷-2-亞磺醯胺(7.7g，26.3mmol)於CH2Cl2(150mL)中之溶液中添加含3M甲基溴化鎂(35mL，105mmol)之Et2O。反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，接著溫至室溫且再攪拌4小時。反應混合物再冷卻至0℃且藉由緩慢添加飽和NH4Cl溶液淬滅。雙相混合物用DCM及水稀釋且水性物質用DCM萃取兩次。合併有機相，用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮，得到11.5g粗白色固體。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至30%)得到呈白色結晶固體狀之(R)-2-甲基-N-((S)-1-(4-(三氟甲氧基)苯基)乙基)丙烷-2-亞磺醯胺(5.08g，16.2mmol，62%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.21(s,9 H)1.53(d,J=6.70Hz,3 H)3.31(d,J=2.74Hz,1 H)4.59(qd,J=6.67,3.37Hz,1 H)7.18(d,J=8.02Hz,2 H)7.36(d,J=8.66Hz,2 H)。LCMS m/z 310.2(M+H)+,Rt 0.90min。
步驟3
(R)-2-甲基-N-((S)-1-(4-(三氟甲氧基)苯基)乙基)丙烷-2-亞磺醯胺(5.08g，16.4mmol)藉由在室溫下在含4M HCl之二烷(16.4ml，65.6mmol)中渦動而溶解。溶液在不定期漩渦下攪拌1小時。向澄清溶液中添加45ml乙醚且所得渾濁溶液經音波處理1分鐘，接著沈澱出白色固體產物。固體經布赫納漏斗(Buchner funnel)過濾，用約20ml乙醚洗滌5次且風乾。獲得(S)-1-(4-(三氟甲氧基)苯基)乙胺(3.2g，13.2mmol，80%產率)，1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 1.64(d,J=6.90Hz,3 H)4.52(q,J=6.88Hz,1 H)7.38(d,J=8.02Hz,2 H)7.57(d,J=8.71Hz,2 H)。LCMS m/z 206.1(M+H)+,Rt 0.52min。
使用關於中間物320之製備所描述之方法製備表20中之中間物。
中間物328 (R)-4-((S)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(5-氟-2-(((S)-1-(哌啶-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
向Parshaker燒瓶中添加含4-((S)-1-((4-((R)-4-((S)-1-(第三丁氧基)乙基)-2-側氧基唑啶-3-基)-5-氟嘧啶-2-基)胺基)乙基)哌啶-1-甲酸苯甲酯(850mg，1.56mmole)及20% Pd(OH)2之活性碳(880mg，1.25mmole)，接著在氮氣下添加MeOH(100mL)。反應混合物在50psi氫下振動隔夜。反應混合物經矽藻土過濾。矽藻土餅用MeOH洗滌且濾液在真空中濃縮。所得粗產物用0-20% MeOH/DCM溶離藉由急驟管柱層析(鹼性氧化鋁，40g)純化，得到呈白色固體狀之標題產物(230mg)。1H NMR(400MHz,CD2Cl2)δ 8.18(d,J=2.87Hz,1H),5.15(br s,1H),4.71-4.63(m,1H),4.56-4.47(m,1H),4.47-4.34(m,2H),4.25-4.14(m,1H),3.96-3.82(m,1H),3.16(d,J=12.34Hz,2H),2.67-2.54(m,2H),1.85-1.66(m,2H),1.64-1.52(m,1H),1.40-1.26(m,2H),1.20(d,J=6.60Hz,3H),1.18(s,9H),1.10(d,J=6.46Hz,3H)。HRMS(C)tR=2.36min；MS m/z 410.2571(M+H)+
中間物329 (R)-4-((S)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯-3-(三氟甲氧基)苯基)哌啶-4-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
渾濁的(R)-4-((S)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(5-氟-2-(((S)-1-(哌啶-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(32mg，0.078mmol)、4-溴-1-氯-2-(三氟甲氧基)苯(26mg，0.094mmol)、Pd(OAc)2(2mg，8μmol)、BINAP(5mg，8μmol)及Cs2CO3(51mg，0.156mmol)於6mL甲苯中 之溶液在90℃下加熱3天。混合物冷卻至室溫，且經矽藻土過濾。矽藻土餅用5mL EtOAc沖洗。將濾液倒入5mL水中。分離有機層，且水溶液再用EtOAc(5mL)萃取。合併有機萃取物且藉由旋轉蒸發濃縮。粗物質溶解於MeOH(1mL)與DMSO(1mL)之混合物中且藉由逆相HPLC純化。收集所選部分且藉由旋轉蒸發濃縮，得到呈無色油狀之標題產物(34mg)。(400MHz,CD2Cl2)δ 8.19(d,J=2.95Hz,1H),7.31(d,J=8.85Hz,1H),6.87-6.80(m,2H),5.05(br s,1H),4.73-4.63(m,1H),4.56-4.44(m,2H),4.25-4.13(m,1H),4.01-3.88(m,1H),3.79-3.69(m,2H),2.82-2.69(m,2H),2.00-1.79(m,2H),1.68-1.56(m,1H),1.54-1.36(m,2H),1.23(d,J=6.87Hz,3H),1.15(s,9H),1.09(d,J=6.44Hz,3H),HRMS(C)tR=5.61min；MS m/z 604.2328(M+H)+
藉由與用於製備中間物301之程序類似的程序製備表21之中間物。
藉由與用於製備中間物302之程序類似的程序製備表22之中間物
使用與關於中間物306之製備所描述類似的方法製備表23a中之中間物
中間物342：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-苯基乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(112mg，0.40mmol)、(S)-1-苯基乙胺(58mg，0.48mmol，1.2當量)及DIPEA(153mg，1.2mmol，3.0當量)於DMSO(4.0mL)中之溶液在100℃下加熱90分鐘。將反應混合物倒入5ml水中，用EA(2×10mL)萃取，移除溶劑得到粗產物。進行矽膠管柱層析(含乙酸乙酯之庚烷，10%至50%)得到純產物(142mg，白色固體)，93%產率。HRMS m/z 385.2231(M+H)+,RT=3.35min。
使用與關於中間物342或實例3之製備所描述類似的方法製備以下中間物
中間物343：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(3-(2,3-二氫-1H-茚-5-基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(B)tR=3.54min；m/z 492.2485
中間物344 (4R)-3-(2-((1-(3-(4-溴-3-甲氧基苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)唑啶-2-酮
HRMS(C)tR=1.76min；MS m/z 561.43
中間物345 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(4-乙基苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(C)tR=1.94min；m/z 480.2485
中間物346 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(4-乙基苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(C)tR=1.78min；m/z 498.2391
中間物347 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-苯乙基-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(C)tR=1.71min；m/z 480.2485
中間物348 (R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(3-(異喹啉-8-基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(B)tR=2.77min；m/z 504.2337(M+H)
中間物349 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(C)tR=1.96min；m/z 554.1656
中間物350 (R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(3-(3-(二氟甲氧基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(B)tR=3.13min；m/z 518.2089
中間物351 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(C)tR=1.97min；m/z 536.1995
中間物352 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(4-(三氟甲基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(C)tR=1.91min；m/z 520.2046
中間物353 (R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(3-(3-(三氟甲基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(C)tR=1.87min；m/z 520.2046
中間物354 (R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(3-(2-(三氟甲氧基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(C)tR=1.76min；m/z 536.1995
中間物355 (R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(3-(3-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(C)tR=1.76min；m/z 550.2151
中間物356 (R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(3-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(B)tR=3.38min；m/z 532.1882
中間物357 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(5-(3,4-二甲基苯基)-1,3,4-二唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(C)tR=1.63min；m/z 480.2485
中間物358 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(5-(4-氯苯基)-4-甲基唑-2-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(B)tR=1.65min；MS m/z 518.1(M+H)
中間物359 (R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(B)tR=1.59min；MS m/z 486.2
中間物360 (4R)-3-(2-((1-(3-(4-溴-3-甲氧基苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)唑啶-2-酮
HRMS(C)tR=1.76min；MS m/z 561.43
中間物361 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(4-乙基苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(C)tR=1.94min；m/z 480.2485
中間物362 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(5-氟-2-((1-(3-(4-異丙基苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(C)tR=1.96min；m/z 512.2548
中間物363 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(4-乙基苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(C)tR=1.78min；m/z 498.2391
中間物364 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-苯乙基-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(C)tR=1.71min；m/z 480.2485
中間物365 (R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(3-(異喹啉-8-基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(B)tR=2.77min；m/z 504.2337(M+H)
中間物366 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(C)tR=1.96min；m/z 554.1656
中間物367 (R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(3-(3-(二氟甲氧基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(B)tR=3.13min；m/z 518.2089
中間物368 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(C)tR=1.97min；m/z 536.1995
中間物369 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(4-(三氟甲基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(C)tR=1.91min；m/z 520.2046
中間物370 (R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(3-(3-(三氟甲基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(C)tR=1.87min；m/z 520.2046
中間物371 (R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(3-(2-(三氟甲氧基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(C)tR=1.76min；m/z 536.1995
中間物372 (R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(3-(3-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(C)tR=1.76min；m/z 550.2151
中間物373 (R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(3-(2,2-二氟苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(B)tR=3.38min；m/z 532.1882
中間物374 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(5-(3,4-二甲基苯基)-1,3,4-二唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(C)tR=1.63min；m/z 480.2485
中間物375 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(5-(4-氯苯基)-4-甲基唑-2-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(B)tR=1.65min；MS m/z 518.1(M+H)
中間物376 (R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(4-(4-氯苯基)唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
HRMS(B)tR=1.59min；MS m/z 486.2
中間物377：(4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(5-氟-2-((1-(4-甲基-5-(2-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)吡啶-4-基)噻唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
分析性RP-HPLC tR=1.69min；MS m/z 611.1(M+H)+。
中間物378 4-((S)-1-((4-((R)-4-((S)-1-(第三丁氧基)乙基)-2-側氧基唑啶-3-基)-5-氟嘧啶-2-基)胺基)乙基)哌啶-1-甲酸苯甲酯
1H NMR(400MHz,CD2Cl2)δ 8.18(s,1H),7.41-7.30(m,5H),5.15(s,2H),5.03(br s,1H),4.71-4.64(m,1H),4.54-4.45(m,2H),4.30-4.12(m,3H),3.99-3.86(m,1H),2.77(br s,2H),1.87-1.57(m,3H),1.36-1.24(m,2H),1.20(d,J=6.44Hz,3H),1.16(s,9H),1.09(d,J=5.91Hz,3H).HRMS(C)tR=4.46min；MS m/z 544.2964 (M+H)+
中間物379：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)吡啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.72(d,J=2.3Hz,1H),8.21(d,J=5.7Hz,1H),7.79(dd,J=8.1,2.4Hz,1H),7.47(d,J=5.8Hz,1H),7.39-7.28(m,3H),7.13-7.07(m,1H),5.28(p,J=6.9Hz,1H),4.75(dt,J=8.1,3.5Hz,1H),4.62(dd,J=9.4,3.1Hz,1H),4.49-4.40(m,1H),4.34(t,J=9.0Hz,1H),2.35(d,J=1.9Hz,3H),1.60(d,J=6.7Hz,3H),1.25(s,12H),1.01(d,J=6.5Hz,3H)；MS m/z 492.6(M-H)。
中間物380：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)吡啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
LCMS tR=1.86min；MS m/z 528.5(M-H)+。
中間物381：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(6-(4-氟-3-甲基苯基)吡啶-3-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
LCMS tR=1.69min；MS m/z 494.0(M+H)+。
中間物382：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(6-(3-(三氟甲基)苯基)吡啶-3-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
LCMS tR=1.74min；MS m/z 530.0(M+H)+。
中間物383：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(2'-(三氟甲基)-[3,4'-聯吡啶]-6-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.86(d,J=2.3Hz,1H),8.83(d,J=5.1Hz,1H),8.20(d,J=5.7Hz,1H),7.93(dd,J=8.1,2.4Hz,1H),7.87(s,1H),7.69(dd,J=5.2,1.7Hz,1H),7.48(d,J=5.8Hz,1H),7.45(d,J=8.1Hz,1H),6.37-5.79(m,1H),5.33(p,J=6.9Hz,1H), 4.74(ddd,J=8.2,4.6,3.0Hz,1H),4.62(dd,J=9.3,3.0Hz,1H),4.43(qd,J=6.4,4.2Hz,1H),4.34(t,J=9.0Hz,1H),1.67(br s,1H),1.62(d,J=6.8Hz,3H),1.26(s,9H),1.02(d,J=6.4Hz,3H)；MS m/z 531.3(M+H).
中間物384：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(6'-(三氟甲基)-[2,3'-聯吡啶]-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
LCMS tR=1.51min；MS m/z 531.1(M+H)。
中間物385：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(6'-(三氟甲基)-[3,3'-聯吡啶]-6-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
LCMS tR=1.51min；MS m/z 531.3(M+H)。
中間物386：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(6-(三氟甲基)-[2,3'-聯吡啶]-6'-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
LCMS tR=1.59min；MS m/z 531.2(M+H)。
中間物387：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(4-甲基-2'-(三氟甲基)-[3,4'-聯吡啶]-6-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
LCMS tR=1.60min；MS m/z 545.2(M+H)。
中間物388：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(2-甲基-2'-(三氟甲基)-[3,4'-聯吡啶]-6-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
LCMS tR=1.65min；MS m/z 545.2(M+H)。
中間物389：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(5-氟-2'-(三氟甲基)-[3,4'-聯吡啶]-6-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
LCMS tR=1.65min；MS m/z 549.2(M+H)。
中間物390：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(5-甲基-2'-(三氟甲基)-[3,4'-聯吡啶]-6-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
LCMS tR=1.65min；MS m/z 545.6(M+H)。
中間物391：(R)-4-((S)-1-第三丁氧基乙基)-3-(2-((S)-1-(3-氟-4-((3,3,4-三甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
LCMS tR=1.63min；MS m/z 543.5(M+H)。
中間物392：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)異唑-3-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
LCMS tR=0.94min；MS m/z 486.0(M-H)。
中間物393：(R)-4-((R)-1-第三丁氧基乙基)-3-(2-((S)-1-(4-((4,4-二氟哌啶-1-基)甲基)-3-氟苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
LCMS tR=1.81min；MS m/z 534.5(M-H)。
中間物394：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)吡嗪-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
LCMS tR=1.74min；MS m/z 531.0(M+H)。
中間物395：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)吡嗪-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
LCMS tR=1.71min；MS m/z 495.0(M+H)。
中間物396：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(4-(2,4-二氯苯基)噻唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
LCMS tR=1.84min；MS m/z 536.0(M+H)。
中間物397：(R)-3-(2-(((S)-1-(4-(4-溴苯基)噻唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)唑啶-2-酮
LCMS tR=1.77min；MS m/z 548.0(M+H)。
中間物398：4-(2-((S)-1-((4-((R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基)胺基)乙基)噻唑-4-基)苯甲腈
LCMS tR=1.55min；MS m/z 493.1(M+H)。
中間物399：(R)-3-(2-(((S)-1-(5-溴吡啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)唑啶-2-酮
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.61(d,J=2.2Hz,1H),8.15(d,J=6.0Hz,1H),7.78(dd,J=8.3,2.3Hz,1H),7.50(d,J=5.9Hz,1H),7.21(d,J=8.3Hz,1H),5.22(p,J=6.9Hz,1H),4.72(ddd,J=8.3,4.7,3.0Hz,1H),4.62(dd,J=9.3,3.0Hz,1H),4.41-4.31(m,2H),1.56(d,J=6.8Hz,3H),1.21(s,9H),1.00(d,J=6.4Hz,3H).MS m/z 466.2(M+H).
中間物400：(4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(5-氟-2-((1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
分析性RP-HPLC tR=1.54,1.56min(管柱=Acquity BEH C18，1.7μm，2.1×50mm。管柱溫度=50℃。溶離劑=A：水(3.75mM甲酸銨，2% ACN)；B：ACN(3.75mM甲酸銨，5%水)；流動速率=1mL/min。梯度=1.70min內2%至98% B；MS m/z 549.3(M+H)+。
中間物401：(4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(5-(3,4-二氯苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
分析性RP-HPLC tR=1.69min；MS m/z 549.4(M+H)+。
中間物402：(R)-4-((R)-1-第三丁氧基乙基)-3-(2-((S)-1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基胺基)-6-(二氟甲基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
(R)-4-((R)-1-第三丁氧基乙基)-3-(6-(二氟甲基)-2-(甲基磺醯基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(0.146g，0.371mmol)、(S)-1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙胺(91mg，0.41mmol，1.1當量)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.097mL，0.56mmol，1.5當量)於DMSO(2.0mL)中之溶液在85℃下加熱18小時。反應物冷卻至室溫且用DCM(20mL)及水 (20mL)稀釋。分離各層且水層用DCM(20mL)萃取合併之有機層用飽和NaCl水溶液(10mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷20%至60%)得到呈黃色油性固體狀之(R)-4-((R)-1-第三丁氧基乙基)-3-(2-((S)-1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基胺基)-6-(二氟甲基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮，37%產率。MS m/z 537.2(M+H)+；Rt-1.22min。
中間物403：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(6-氯-2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)異唑-3-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
(R)-4-((R)-1-第三丁氧基乙基)-3-(2,6-二氯嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(70mg，0.209mmol)、(S)-1-(5-(4-氯苯基)異唑-3-基)乙胺(60mg，0.23mmol，1.1當量)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.091mL，0.52mmol，2.5當量)於DMSO(1.0mL)中之溶液在85℃-110℃下加熱3-5小時。反應物冷卻至室溫且用乙酸乙酯(30mL)及稀的氯化鈉水溶液(30mL)稀釋。分離各層且有機層經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮，得到粗(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(6-氯-2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)異唑-3-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮，其未經進一步純化即使用。MS m/z 520.2(M+H)+；Rt-1.31min。
使用與關於中間物403之製備所描述類似的方法製備表24a中之中間物。
表24a.
中間物473：(2R,3R)-3-(第三丁氧基)-2-((6-氟-2-(((S)-1-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)胺基)丁-1-醇
(S)-4,6-二氟-N-(1-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)乙基)嘧啶-2-胺(80mg，0.25mmol)、(2R,3R)-2-胺基-3-(第三丁氧基)丁-1-醇(55mg，0.28mmol，1.1當量)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.11mL，0.63mmol，2.5當量)於DMSO(1.3mL)中之溶液在85℃下加熱16小時。反應物冷卻至室溫且用乙酸乙酯(30mL)及稀的氯化鈉水溶液(30mL)稀釋。分離各層且用水層乙酸乙酯(20mL)萃取。合併之有機萃取物經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷)得到(2R,3R)-3-(第三丁氧基)-2-((6-氟-2-(((S)-1-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)胺基)丁-1-醇(0.058g，白色固體)，50%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.79(s,1H),7.66(s,1H),7.61(m,2H),7.13(t,J=8.6Hz,2H),5.35(s,1H),5.30-5.14(m,2H),5.04(m,1H),3.94(m,1H),3.77-3.65(m,2H),1.57(d,J=6.9Hz,3H),1.21(s,9H),1.15(d,J=6.0Hz,3H)。MS m/z 461.3(M+H)+；Rt-0.88min。
中間物474 (2R,3R)-3-(第三丁氧基)-2-((2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)乙基)胺基)-6-氟嘧啶-4-基)胺基)丁-1-醇
使用與關於中間物473之製備所描述類似的方法製備(2R,3R)-3-(第三丁氧基)-2-((2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)乙基)胺基)-6-氟嘧啶-4-基)胺基)丁-1-醇。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ ppm 7.82(s,1H),7.67(s,1H),7.60(d,J=8.9Hz,2H),7.41(d,J=8.8Hz,2H),5.35(s,1H),5.27(m,1H),5.19(m,1H),5.07(m,1H),3.94(m,1H),3.71(m,2H),1.57(d,J=6.8Hz,3H),1.21(s,9H),1.14(d,J=5.9Hz,3H)。MS m/z 477.3(M+H)+；Rt-0.96min
中間物475：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(6-氟-2-(((S)-1-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
在-78℃下，將三光氣(18mg，0.062mmol，0.5當量)添加至(2R,3R)-3-(第三丁氧基)-2-((6-氟-2-(((S)-1-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)胺基)丁-1-醇(57mg，0.12mmol)於DCM(1.2mL)中之溶液中，接著逐滴添加2,6-二甲基吡啶(0.058mL，0.49mmol，4當量)。將溶液溫至室溫且接著在35℃下加熱30分鐘。接著反應物冷卻至室溫且用DCM(30mL)及飽和氯化鈉水溶液(30mL)稀釋。分離各層且有機層經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮，得到粗(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(6-氟-2-(((S)-1-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮，其未經進一步純化即使用。MS m/z 487.4(M+H)+；Rt-1.12min。
中間物476：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯 基)-1H-吡唑-4-基)乙基)胺基)-6-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
使用與關於中間物475之製備所描述類似的方法製備(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)乙基)胺基)-6-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ ppm 7.82(s,1H),7.66(s,1H),7.60(d,J=8.8Hz,2H),7.43(d,J=8.7Hz,2H),7.17(s,1H),5.31(m,1H),4.70(m,1H),4.62(dd,J=9.2,3.0Hz,1H),4.33(m,2H),1.62(d,J=6.8Hz,3H),1.13(br s,9H),1.02(d,J=6.5Hz,3H)。MS m/z 503.3(M+H)+；Rt-1.21min。
中間物477
向具有攪拌棒之微波小瓶中添加(R)-4-((R)-1-第三丁氧基乙基)-3-(2-氯嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(43.6mg，0.145mmol)及(S)-1-(3-((S)-四氫呋喃-3-基氧基)苯基)乙胺(25.1mg，0.121mmol)，接著添加DMSO(605μL)及DIEA(63.5μl，0.363mmol)。將小瓶蓋好且反應混合物在預先加熱之油浴中在110℃下加熱21小時。混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。合併之有機相用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮且在室內真空乾燥，得到呈褐色固態膜狀之粗(R)-4-((R)-1- 第三丁氧基乙基)-3-(2-((S)-1-(3-((S)-四氫呋喃-3-基氧基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(產率假定定量)。LCMS m/z 471.4(M+H)+,Rt 0.85min。
使用與關於化合物477之製備所描述類似的方法製備表25中之化合物。
中間物490
向具有攪拌棒之微波小瓶中添加(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2,6-二氯嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(75.0mg，0.224mmol)及(S)-1-(4-(三氟甲氧基)苯基)乙胺(59.7mg，0.247mmol)，接著添加DMSO(0.9mL)及DIEA(118μl，0.673mmol)。將小瓶蓋好且反應混合物在預先加熱之油浴中在85℃下加熱2小時。混合物用鹽水稀釋且用EtOAc萃取兩次。合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮且在室內真空乾燥，得到呈褐色固態膜狀之粗(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(6-氯 -2-(((S)-1-(4-(三氟甲氧基)苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(產率假定定量)。LCMS m/z 503.2(M+H)+,Rt 1.24min。
使用與關於化合物490之製備所描述類似的方法製備表26中之化合物
中間物494
在微波小瓶中，向(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-氟嘧啶- 4-基)唑啶-2-酮(30.0mg，0.106mmol)及(S)-1-(4-(三氟甲氧基)苯基)乙胺(38.4mg，0.159mmol)於DMSO(0.53mL)中之懸浮液中添加DIEA(64.7μl，0.371mmol)。將小瓶蓋好且反應混合物在預先加熱之油浴中在100℃下加熱3小時。混合物用稀鹽水稀釋且用EtOAc萃取兩次。合併之有機相用鹽水洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾，濃縮且在室內真空乾燥，得到呈透明無色油狀之粗(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(4-(三氟甲氧基)苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮，其未經進一步純化即使用(產率假定定量)。LCMS m/z 469.3(M+H)+,Rt 0.98min。
使用與關於化合物494之製備所描述類似的方法製備表27中之化合物。
中間物504 (R)-4-((S)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(哌啶-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
向Parshaker燒瓶中添加含4-((S)-1-((4-((R)-4-((S)-1-(第三丁氧基)乙基)-2-唑啶-3-基)嘧啶-2-基)胺基)乙基)哌啶-1-甲酸苯甲酯(1g，1.90mmole)及20% Pd(OH)2之活性碳(1g，1.42mmole)，接著在氮氣下添加MeOH(100mL)。反應混合物在50spi氫下振動隔夜。反應混合物經矽藻土過濾。矽藻土餅用MeOH洗滌且濾液在真空中濃縮，得到呈白色固體狀之標題產物(630mg)。1H NMR(400MHz,CD2Cl2)δ 8.18-8.15(m,1H),7.42-7.37(m,1H),4.99(br,s,1H),4.77-4.70(m,1H),4.64-4.57(m,1H),4.52-4.38(m,1H),4.38-4.31(m,1H),4.12-3.93(m,2H),3.40-3.31(m,1H),3.12-3.29(m,2H),2.81-2.70(m,1H),2.02-1.29(m,5H),1.25(s,9H),1.23-1.16(m,3H),1.05-1.00(m,3H)。HRMS(C)tR=2.65min；MS m/z 392.2655(M+H)+
中間物505 (R)-4-((S)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(1-(2-(1,1,1-三 氟-2-甲基丙-2-基)吡啶-4-基)哌啶-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
使用與關於中間物329之製備所描述類似的方法製備中間物505。1H NMR(400MHz,CD2Cl2)δ 8.23-8.12(m,1H),7.87(d,J=7.45Hz,1H),7.69(d,J=6.22Hz,1H),6.81-6.74(m,2H),4.67(m,1H),4.61-4.55(m,1H),4.37-4.29(m,1H),4.25-4.16(m,2H),4.14-4.04(m,2H),3.97-3.85(m,1H),3.21-3.09(m,2H),2.11-1.87(m,3H),1.61(s,6H),1.39-1.23(m,1H),1.21(d,J=7.45Hz,3H),1.15-1.07(m,1H),1.06(s,9H),0.96(d,J=6.62Hz,3H),HRMS(C)tR=4.80min；MS m/z 579.3273(M+H)+
中間物506 (R)-4-((S)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯-3-(三氟甲氧基)苯基)哌啶-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
使用與關於中間物329之製備所描述類似的方法製備中間物506。1H NMR(400MHz,CD2Cl2)δ 8.17(br,s,1H),7.41(d,J=6.14Hz,1H),7.31(d,J=7.98Hz,1H),6.87-6.80(m,2H),4.77-4.71(m,1H),4.64-4.58(m,1H),4.49-4.40(m,1H),4.39-4.32(m,1H),4.11-3.97(m,1H),3.79-3.70(m,2H),2.82-2.71(m,2H),2.04-1.91(m,1H),1.90-1.80(m,1H),1.66-1.35(m,3H),1.34-1.15(m,13H),1.03(d,J=7.36Hz,3H),HRMS(C)tR=5.68min；MS m/z 586.2419 (M+H)+
中間物507 4-((S)-1-((4-((R)-4-((S)-1-(第三丁氧基)乙基)-2-側氧基唑啶-3-基)嘧啶-2-基)胺基)乙基)哌啶-1-甲酸苯甲酯
使用與關於中間物342之製備所描述類似的方法製備中間物507。1H NMR(400MHz,CD2Cl2)δ 8.16(d,J=5.77Hz,1H),7.41-7.31(m,6H),5.15(s,2H),4.76-4.71(m,1H),4.64-4.58(m,1H),4.48-4.41(m,1H),4.38-4.31(m,1H),4.30-4.18(m,2H),4.09-3.96(m,1H),2.77(br s,2H),1.94-1.54(m,3H),1.37-1.25(m,3H),1.23(s,9H),1.20(d,J=6.53Hz,3H),1.03(d,J=5.91Hz,3H)。HRMS(C)tR=4.64min；MS m/z 526.3012(M+H)+
使用與關於中間物303之製備所描述類似的方法製備表27b中之中間物。
中間物514：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(4-甲氧基苯甲基)唑啶-2-酮
在0℃下，向((2R,3R)-3-(第三丁氧基)-1-羥基丁-2-基)胺基甲酸苯甲酯(5.88g，19.9mmol)於100mL DMF中之溶液中添加NaH(60%於礦物油中，1.62g，40.6mmol)。反應混合物在0℃下攪拌30分鐘。向反應混合物中添加4-甲氧基苯甲基氯(4.07mL，29.9mmol)及碘化四丁銨(0.74g，1.99mmol)且所得混合物溫至室溫且攪拌15.5小時。將反應混合物倒入冰水(200mL)中，形成白色懸浮液。添加EtOAc(100mL)且攪拌所得混合物5分鐘，形成澄清雙層溶液。分離後，水相用EtOAc(100mL×3)萃取。合併之有機溶液用鹽水(80mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。進行急驟管柱層析(EtOAc/庚烷0至70%)得到5.90g具有少量雜質之所需產物。主要產物1H NMR(400MHz,MeOD)δ 7.38-7.29(m,2H),6.99-6.93(m,2H),4.68-4.58(m,1H),4.33(dd,J=9.3,4.5Hz,1H),4.27-4.17(m,2H),3.89(dd,J=6.4,4.8Hz,1H),3.81(s,3H),3.65(dd,J=9.0,4.6Hz,1H),1.26(s,0H),1.09(s,9H),1.02(d,J=6.3Hz,3H).MS m/z 308.2(M+H).
中間物515：(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(4-甲氧基苯甲基)唑啶-2-酮
(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(4-甲氧基苯甲基)唑啶-2-酮(5.90g，19.2mmol)於CH2Cl2(40mL)中之溶液在室溫下用TFA(40 mL)處理20分鐘。反應混合物在真空中濃縮，接著用CH2Cl2(約50mL)稀釋且再次濃縮。重複此程序三次以移除TFA。進行急驟管柱層析(EtOAc/庚烷30%至100%)得到3.81g所需產物。1H NMR(400MHz,MeOD)δ 7.31-7.21(m,2H),7.00-6.87(m,2H),4.67(d,J=15.0Hz,1H),4.34-4.18(m,3H),3.95(q,J=6.2Hz,1H),3.80(s,3H),3.68(dt,J=8.7,5.5Hz,1H),1.09(d,J=6.4Hz,3H).MS m/z 252.2(M+H).
中間物516：(R)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(4-甲氧基苯甲基)唑啶-2-酮
向經冷卻(0℃)之(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(4-甲氧基苯甲基)唑啶-2-酮(2.27g，9.04mmol)於30mL MeCN中之溶液中添加三乙胺(11.4mL，82mmol)，接著添加全氟-1-丁烷磺醯氟(4.9mL，27.3mmol)及NEt3(HF)3(4.5mL，27.6mmol)，且所得混合物在0℃下攪拌70分鐘。反應混合物用水(60mL)稀釋且用EtOAc(3×60mL)萃取。合併之有機物用水(70mL)、鹽水(70mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。進行急驟管柱層析(EtOAc/庚烷5%至70%)得到2.19g所需產物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.25-7.20(m,2H),6.92-6.83(m,2H),4.87(d,J=15.1Hz,1H),4.75(dqd,J=47.6,6.6,2.1Hz,1H),4.26(td,J=9.2,1.4Hz,1H),4.17-4.05(m,2H),3.81(s,3H),3.71(dddd,J=19.8,9.5,5.8,2.1Hz,1H),1.29(dd,J=23.1,6.2Hz,3H).MS m/z 254.5(M+H).
中間物517：(R)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(4-甲氧基苯甲基)唑啶-2-酮
(R)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(4-甲氧基苯甲基)唑啶-2-酮(1.98g，7.8mmol)於40mL TFA中之溶液在65℃下加熱16小時。濃縮反應混合物以移除TFA。進行急驟管柱層析(EtOAc/CH2Cl2，0至100%)得到0.91g淡褐色固體。TLC(1：2庚烷：EtOAc)Rf=0.25。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 5.60(br s,1H),4.72-4.54(m,1H),4.51(td,J=8.9,0.9Hz,1H),4.32(dd,J=9.2,4.8Hz,1H),4.02-3.88(m,1H),1.38(dd,J=24.0,6.3Hz,3H).
中間物518：(R)-3-(2,5-二氟嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮
步驟1：在氮氣氛圍下在0℃下，經3分鐘向(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)唑啶-2-酮(6.35g，33.9mmol)於DMF(170mL)中之溶液中逐份添加氫化鈉(2.14g，50.9mmol，60%)。接著反應混合物在0℃下攪拌2小時，接著添加2,4,5-三氟嘧啶(5g，37.3mmol)且反應混合物在0℃下攪拌75分鐘，接著混合物溫至室溫且在室溫下攪拌1小時。反應混合物藉由緩慢添加飽和NH4Cl溶液淬滅且水性混合物用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至50%)得到(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2,5-二氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮之無色油(6.97g，23.1mmol，68%產率)，其在靜置後結晶。1H NMR(400MHz,CDCl3) δ 1.10(d,J=6.26Hz,3 H)1.18(s,9 H)4.25-4.35(m,1 H)4.49-4.62(m,2 H)4.65-4.73(m,1 H)8.45(d,J=1.57Hz,1 H)。LCMS m/z 246.1(-第三丁基片段)(M+H)+,Rt 0.91min。
步驟2：向含有(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2,5-二氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(6.97g，23.1mmol)之圓底燒瓶中添加DCM(23mL)及TFA(23mL)。所得反應混合物在室溫下攪拌1小時。接著移除揮發性物質且殘餘物用飽和NaHCO3溶液中和。接著水性混合物用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮得到(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2,5-二氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮之無色殘餘物(5.08g，20.7mmol，90%產率)，其在靜置後結晶。LCMS m/z 246.1(M+H)+,Rt 0.34min。
步驟3：向含有冷卻至0℃之(R)-3-(2,5-二氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮(4.64g，18.9mmol)於乙腈(63mL)中之溶液之圓底燒瓶中添加全氟丁烷磺醯氟(10.2mL，56.8mmol)，接著添加三氫氟化三乙胺(9.2mL，56.8mmol)及三乙胺(23.7mL，170mmol)。所得反應混合物在0℃下攪拌4小時。接著反應混合物用水稀釋且水性混合物用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至100%)得到(R)-3-(2,5-二氟嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮之白色結晶(2.24g，8.97mmol，47%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.50(s,1 H),5.00-5.25(m,1 H),4.75-4.92(m,1 H),4.54-4.68(m,2 H),1.39(dd,J=23.1,7.0Hz,3 H)。LCMS m/z 248.0(M+H)+,Rt 0.52min。
使用與關於中間物247之製備所描述類似的方法製備表27c中之中間物。
表27c.
實例 實例1 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(4-氯苯基)異唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
向1-(3-(4-氯苯基)異唑-5-基)乙胺(610mg，2.74mmol)及(R)-4- ((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(774mg，2.74mmol)於DMSO(5ml)中之溶液中添加N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(2當量，0.96mL，5.48mmol)且在微波中在120℃下加熱2小時。用EtOAc(50ml)稀釋，用水(50ml)、鹽水(50ml)洗滌，在真空中濃縮。用0-25% EtOAc/DCM溶離進行急驟管柱層析(二氧化矽，40g)得到500mg白色固體：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.24(dd,J=5.8,1.6Hz,1H),7.80-7.65(m,2H),7.58(dd,J=5.8,1.6Hz,1H),7.49-7.37(m,2H),6.48-6.35(m,1H),5.66-5.44(m,1H),4.71(dddd,J=9.8,8.5,4.6,3.0Hz,1H),4.63(ddd,J=9.4,3.1,2.1Hz,1H),4.50-4.26(m,2H),1.71(s,1H),1.25(s,5H),1.15(s,5H),1.03(dd,J=22.4,6.4Hz,3H),5.44-5.13(m,1H)。HRMS(B)tR=3.36min；m/z 485.1830
實例2 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(5-(4-氯苯基)唑-2-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
向(S)-1-(5-(4-氯苯基)唑-2-基)乙胺(75mg，0.337mmol)及(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2,5-二氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(101mg，0.337mmol)於DMSO(1ml)中之溶液中添加N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(2當量，0.118mL，0.674mmol)且在微波中在120℃下加熱2小時。用EtOAc(25ml)稀釋，用水(25ml)、鹽水(25ml)洗滌，在真空中濃縮。用0-10% EtOAc/DCM溶離進行急驟管柱層析(二氧化矽，40 g)得到124mg黃色泡沫狀物：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.25(d,J=2.8Hz,1H),7.61-7.49(m,2H),7.45-7.36(m,2H),7.28(d,J=6.2Hz,1H),5.65(d,J=8.9Hz,1H),5.43-5.27(m,1H),4.69(qd,J=5.6,2.9Hz,1H),4.62-4.35(m,2H),4.23-4.01(m,1H),1.68(d,J=12.8Hz,2H),1.26-1.16(m,2H),1.12(s,8H),1.05(d,J=6.4Hz,3H)。HRMS(C)tR=1.55min；m/z 503.1736
實例3
向(S)-1-(3-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙胺(150mg，0.488mmol)及(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(138mg，0.488mmol)於DMSO(1ml)中之溶液中添加N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(2當量，170μL，0.975mmol)且在微波中在115℃下加熱2小時。用EtOAc(25ml)稀釋，用水(25ml)、鹽水(25ml)洗滌，在真空中濃縮。用0-5% EtOAc/DCM溶離進行急驟管柱層析(二氧化矽，40g)得到140mg。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.30-8.19(m,4H),8.01(dd,J=8.6,2.1Hz,2H),7.54(d,J=5.7Hz,2H),7.45(dq,J=8.4,1.5Hz,2H),4.53(dd,J=9.3,2.4Hz,2H),4.05(p,J=6.1Hz,1H),3.51(s,5H),1.80(s,1H),1.22(t,J=6.5Hz,12H)。分析性RP-HPLC tR=2.73min(梯度：4.4min內2%至98% B-流動速率1mL/min。溶離劑A：水+3.75mM NH4Ac+0.001%甲酸。溶離劑B：CAN。管柱：Acquity CSH 1.7μm 2.1×50mm-50℃)HRMS m/z 514.1039
以下實例係使用與關於中間物342或實例3之製備所描述類似的方法製備。
實例4：(4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(4-氯-3-甲基苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.24(dd,J=5.6,2.2Hz,3H),7.96(d,J=2.0Hz,3H),7.84(dd,J=8.3,2.1Hz,3H),7.59(dd,J=5.8,3.0Hz,3H),7.46(d,J=8.3Hz,3H),5.71-5.42(m,3H),5.32(s,1H),4.75(dtd,J=10.3,5.2,2.9Hz,3H),1.67-1.60(m,3H),4.64(ddd,J=9.2,6.2,2.9Hz,3H),4.49-4.31(m,6H),4.14(q,J=7.1Hz,1H),2.46(s,9H),2.07(s,1H),1.77(dd,J=6.8,3.2Hz,9H),1.27(d,J=23.6Hz,29H),1.05(dd,J=11.3,6.5Hz,9H)。HRMS(C)tR=2.00min；MS m/z 500.98
實例5 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(4-氟-3-甲基苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.25(dd,J=5.8,2.4Hz,3H),8.02-7.83(m,6H),7.59(dd,J=5.8,2.9Hz,3H),7.12(t,J=8.9Hz,3H),5.72-5.47(m,5H),5.32(s,1H),4.75(dtd,J=8.7,4.8,2.9Hz,3H),4.64(ddd,J=9.3,6.2,2.9Hz,3H),4.49-4.28(m,6H),3.52(s,2H), 2.36(d,J=2.0Hz,9H),1.78(s,2H),1.65(s,3H),1.30(s,22H),1.24(d,J=2.4Hz,6H),1.05(dd,J=11.3,6.4Hz,10H)。HRMS(C)tR=1.95min；m/z 484.2234
實例6 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(4-氯-3-甲氧基苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.25(dd,J=5.8,1.7Hz,3H),7.74-7.57(m,9H),7.53-7.44(m,3H),5.61(qt,J=16.2,9.7,8.6Hz,7H),5.32(s,1H),4.75(ddd,J=8.6,4.6,2.9Hz,3H),4.64(ddd,J=8.8,5.8,2.9Hz,3H),4.50-4.30(m,6H),4.14(q,J=7.2Hz,2H),4.01(s,9H),2.07(s,2H),1.85-1.73(m,9H),1.62(s,2H),1.36-1.18(m,30H),1.05(dd,J=10.8,6.5Hz,9H)。HRMS(C)tR=1.61min；m/z 516.1888
實例7 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(4-氯-3-(三氟甲氧基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.24(dd,J=5.8,3.2Hz,1H),8.11-7.93(m,2H),7.70-7.54(m,2H),5.80-5.40(m,2H),4.75(dtd,J=8.6,4.3,2.2Hz,1H),1.67-1.60(m,1H),4.64(ddd,J=9.4,4.2,2.9 Hz,1H),4.50-4.30(m,2H),1.77(dd,J=6.9,3.4Hz,3H),1.27(d,J=21.9Hz,9H),1.06(dd,J=9.8,6.5Hz,3H)。HRMS(C)tR=2.05min；m/z 570.1605
實例8 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(1-甲基-1H-吲哚-6-基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.26(d,J=5.7Hz,3H),8.10(d,J=1.3Hz,3H),7.84(dd,J=8.3,1.4Hz,3H),7.71(d,J=8.3Hz,3H),7.64-7.55(m,3H),7.20(d,J=3.1Hz,3H),6.55(dd,J=3.1,0.8Hz,3H),5.64(p,J=7.2Hz,5H),5.32(s,1H),1.69-1.61(m,4H),4.77(ddd,J=8.7,4.7,2.9Hz,3H),4.65(td,J=8.8,8.4,2.9Hz,3H),4.52-4.27(m,6H),3.90(s,9H),3.51(s,2H),1.89-1.75(m,9H),1.28(d,J=23.5Hz,27H),1.06(dd,J=10.9,6.4Hz,10H)。HRMS(C)tR=1.77min；m/z 505.2437
實例9 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(3-(第三丁基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 4.64(ddd,J=9.9,7.1,2.9Hz,1H),4.47-4.30(m,2H),1.06(dd,J=9.3,6.4Hz,3H),1.85-1.72(m,3H),1.63(s,1H),1.39(s,9H),1.28(d,J=21.1Hz,9H),4.84-4.71(m, 1H),8.25(d,J=5.7Hz,1H),8.11(q,J=2.0Hz,1H),7.89(dt,J=7.7,1.4Hz,1H),7.66-7.52(m,2H),7.43(t,J=7.8Hz,1H),5.63(p,J=7.3Hz,2H),5.39-5.29(m,0H)。HRMS(C)tR=2.02min；m/z 508.2798
實例10 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(3-(三氟甲氧基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.25(dd,J=5.7,2.9Hz,1H),8.04(dq,J=7.8,1.3Hz,1H),7.95(dt,J=2.5,1.2Hz,1H),7.67-7.49(m,2H),7.39(ddt,J=8.2,2.5,1.2Hz,1H),5.62(h,J=6.7,6.1Hz,2H),4.75(dtd,J=9.1,4.7,2.9Hz,1H),4.64(ddd,J=9.3,4.9,2.9Hz,1H),4.49-4.26(m,2H),1.78(dd,J=6.8,3.6Hz,3H),1.61(s,1H),1.27(d,J=23.8Hz,9H),1.06(dd,J=10.0,6.5Hz,3H)。HRMS(C)tR=1.82min；m/z 536.1995
實例11 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(4-氟-3-(三氟甲氧基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.24(dd,J=5.8,3.3Hz,1H),8.13- 7.99(m,2H),7.60(dd,J=5.8,2.0Hz,1H),5.72-5.56(m,1H),5.48(s,1H),4.85-4.69(m,1H),1.67-1.56(m,1H),4.64(ddd,J=9.5,4.5,2.9Hz,1H),4.53-4.28(m,2H),1.77(dd,J=7.0,3.4Hz,3H),1.27(d,J=22.0Hz,9H),1.06(dd,J=9.8,6.4Hz,3H)。HRMS(C)tR=1.87min；m/z 554.1901
實例12 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(4-異丙基苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.25(dd,J=5.9,1.9Hz,1H),8.09-7.92(m,2H),7.59(dd,J=5.7,3.1Hz,1H),7.43-7.32(m,2H),5.60(dt,J=15.5,7.8Hz,2H),4.75(dtd,J=8.4,5.0,2.9Hz,1H),4.64(ddd,J=9.5,7.1,2.9Hz,1H),4.49-4.27(m,2H),2.99(hept,J=6.9Hz,1H),1.76(dd,J=7.0,2.8Hz,3H),1.60(dd,J=6.9,2.8Hz,1H),1.40-119(m,15H),1.05(dd,J=11.0,6.5Hz,3H)。HRMS(C)tR=2.23min；m/z 494.2642
實例13 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(1,2-二甲基-1H-吲哚-4-基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.26(d,J=5.8Hz,1H),7.91(dd,J=7.5,0.9Hz,1H),7.60(d,J=5.8Hz,1H),7.44(dt,J=8.2,1.1Hz, 1H),7.33-7.20(m,1H),6.99-6.89(m,1H),5.66(p,J=7.3Hz,1H),4.77(ddd,J=8.7,4.7,3.0Hz,1H),1.66-1.60(m,1H),4.66(dd,J=9.5,3.0Hz,1H),4.53-4.44(m,1H),4.38(q,J=9.0,8.3Hz,1H),3.75(s,3H),2.51(d,J=0.9Hz,3H),1.84-1.76(m,3H),1.28(d,J=26.5Hz,9H),1.04(d,J=6.5Hz,3H)。HRMS(C)tR=1.65min；MS m/z 519.60
實例14 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(5-(4-氯苯基)-4-甲基唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
135mg橙紅色樹脂(在靜置後固化)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.25(d,J=5.7Hz,1H),7.62-7.46(m,3H),7.45-7.36(m,2H),4.85-4.69(m,1H),4.64(ddd,J=9.1,5.6,3.0Hz,1H),4.44(qd,J=6.4,4.6Hz,1H),4.34(dt,J=15.4,9.0Hz,1H),2.40(d,J=1.3Hz,3H),1.79-1.60(m,3H),1.34-1.18(m,11H),1.04(dd,J=14.8,6.5Hz,3H)。HRMS(C)tR=2.00min；m/z 499.1986
實例15 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(4-氯-3-甲基苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.24(dd,J=5.6,2.2Hz,3H),7.96 (d,J=2.0Hz,3H),7.84(dd,J=8.3,2.1Hz,3H),7.59(dd,J=5.8,3.0Hz,3H),7.46(d,J=8.3Hz,3H),5.71-5.42(m,3H),5.32(s,1H),4.75(dtd,J=10.3,5.2,2.9Hz,3H),1.67-1.60(m,3H),4.64(ddd,J=9.2,6.2,2.9Hz,3H),4.49-4.31(m,6H),4.14(q,J=7.1Hz,1H),2.46(s,9H),2.07(s,1H),1.77(dd,J=6.8,3.2Hz,9H),1.27(d,J=23.6Hz,29H),1.05(dd,J=11.3,6.5Hz,9H)。HRMS(C)tR=2.00min；MS m/z 500.98
實例16 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(4-氟-3-甲基苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.25(dd,J=5.8,2.4Hz,3H),8.02-7.83(m,6H),7.59(dd,J=5.8,2.9Hz,3H),7.12(t,J=8.9Hz,3H),5.72-5.47(m,5H),5.32(s,1H),4.75(dtd,J=8.7,4.8,2.9Hz,3H),4.64(ddd,J=9.3,6.2,2.9Hz,3H),4.49-4.28(m,6H),3.52(s,2H),2.36(d,J=2.0Hz,9H),1.78(s,2H),1.65(s,3H),1.30(s,22H),1.24(d,J=2.4Hz,6H),1.05(dd,J=11.3,6.4Hz,10H)。HRMS(C)tR=1.95min；m/z 484.2234
實例17 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(4-氯-3-甲氧基苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.25(dd,J=5.8,1.7Hz,3H),7.74-7.57(m,9H),7.53-7.44(m,3H),5.61(qt,J=16.2,9.7,8.6Hz,7H),5.32(s,1H),4.75(ddd,J=8.6,4.6,2.9Hz,3H),4.64(ddd,J=8.8,5.8,2.9Hz,3H),4.50-4.30(m,6H),4.14(q,J=7.2Hz,2H),4.01(s,9H),2.07(s,2H),1.85-1.73(m,9H),1.62(s,2H),1.36-1.18(m,30H),1.05(dd,J=10.8,6.5Hz,9H)。HRMS(C)tR=1.61min；m/z 516.1888
實例18 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(4-氯-3-(三氟甲氧基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.24(dd,J=5.8,3.2Hz,1H),8.11-7.93(m,2H),7.70-7.54(m,2H),5.80-5.40(m,2H),4.75(dtd,J=8.6,4.3,2.2Hz,1H),1.67-1.60(m,1H),4.64(ddd,J=9.4,4.2,2.9Hz,1H),4.50-4.30(m,2H),1.77(dd,J=6.9,3.4Hz,3H),1.27(d,J=21.9Hz,9H),1.06(dd,J=9.8,6.5Hz,3H)。HRMS(C)tR=2.05min；m/z 570.1605
實例19 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(1-甲基-1H-吲哚-6-基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.26(d,J=5.7Hz,3H),8.10(d,J=1.3Hz,3H),7.84(dd,J=8.3,1.4Hz,3H),7.71(d,J=8.3Hz,3H),7.64-7.55(m,3H),7.20(d,J=3.1Hz,3H),6.55(dd,J=3.1,0.8Hz,3H),5.64(p,J=7.2Hz,5H),5.32(s,1H),1.69-1.61(m,4H),4.77(ddd,J=8.7,4.7,2.9Hz,3H),4.65(td,J=8.8,8.4,2.9Hz,3H),4.52-4.27(m,6H),3.90(s,9H),3.51(s,2H),1.89-1.75(m,9H),1.28(d,J=23.5Hz,27H),1.06(dd,J=10.9,6.4Hz,10H).HRMS(C)tR=1.77min；m/z 505.2437
實例20 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(3-(第三丁基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 4.64(ddd,J=9.9,7.1,2.9Hz,1H),4.47-4.30(m,2H),1.06(dd,J=9.3,6.4Hz,3H),1.85-1.72(m,3H),1.63(s,1H),1.39(s,9H),1.28(d,J=21.1Hz,9H),4.84-4.71(m,1H),8.25(d,J=5.7Hz,1H),8.11(q,J=2.0Hz,1H),7.89(dt,J=7.7,1.4Hz,1H),7.66-7.52(m,2H),7.43(t,J=7.8Hz,1H),5.63(p,J=7.3Hz,2H),5.39-5.29(m,0H)。HRMS(C)tR=2.02min；m/z 508.2798
實例21 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(3-(三氟甲氧基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.25(dd,J=5.7,2.9Hz,1H),8.04(dq,J=7.8,1.3Hz,1H),7.95(dt,J=2.5,1.2Hz,1H),7.67-7.49(m,2H),7.39(ddt,J=8.2,2.5,1.2Hz,1H),5.62(h,J=6.7,6.1Hz,2H),4.75(dtd,J=9.1,4.7,2.9Hz,1H),4.64(ddd,J=9.3,4.9,2.9Hz,1H),4.49-4.26(m,2H),1.78(dd,J=6.8,3.6Hz,3H),1.61(s,1H),1.27(d,J=23.8Hz,9H),1.06(dd,J=10.0,6.5Hz,3H)。HRMS(C)tR=1.82min；m/z 536.1995
實例22 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(4-氟-3-(三氟甲氧基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.24(dd,J=5.8,3.3Hz,1H),8.13-7.99(m,2H),7.60(dd,J=5.8,2.0Hz,1H),5.72-5.56(m,1H),5.48(s,1H),4.85-4.69(m,1H),1.67-1.56(m,1H),4.64(ddd,J=9.5,4.5,2.9Hz,1H),4.53-4.28(m,2H),1.77(dd,J=7.0,3.4Hz,3H),1.27(d,J=22.0Hz,9H),1.06(dd,J=9.8,6.4Hz,3H)。HRMS(C)tR=1.87min；m/z 554.1901
實例23 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(4-異丙基苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.25(dd,J=5.9,1.9Hz,1H),8.09-7.92(m,2H),7.59(dd,J=5.7,3.1Hz,1H),7.43-7.32(m,2H),5.60(dt,J=15.5,7.8Hz,2H),4.75(dtd,J=8.4,5.0,2.9Hz,1H),4.64(ddd,J=9.5,7.1,2.9Hz,1H),4.49-4.27(m,2H),2.99(hept,J=6.9Hz,1H),1.76(dd,J=7.0,2.8Hz,3H),1.60(dd,J=6.9,2.8Hz,1H),1.40-1.19(m,15H),1.05(dd,J=11.0,6.5Hz,3H)。HRMS(C)tR=2.23min；m/z 494.2642
實例24 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(1,2-二甲基-1H-吲哚-4-基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.26(d,J=5.8Hz,1H),7.91(dd,J=7.5,0.9Hz,1H),7.60(d,J=5.8Hz,1H),7.44(dt,J=8.2,1.1Hz,1H),7.33-7.20(m,1H),6.99-6.89(m,1H),5.66(p,J=7.3Hz,1H),4.77(ddd,J=8.7,4.7,3.0Hz,1H),166-1.60(m,1H),4.66(dd,J=9.5,3.0Hz,1H),4.53-4.44(m,1H),4.38(q,J=9.0,8.3Hz,1H),3.75(s,3H),2.51(d,J=0.9Hz,3H),1.84-1.76(m,3H),1.28(d,J=26.5Hz,9H),1.04(d,J=6.5Hz,3H)。HRMS(C)tR=1.65min；MS m/z 519.60
實例25 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(5-(4-氯苯基)-4-甲 基唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
135mg橙紅色樹脂(在靜置後固化)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.25(d,J=5.7Hz,1H),7.62-7.46(m,3H),7.45-7.36(m,2H),4.85-4.69(m,1H),4.64(ddd,J=9.1,5.6,3.0Hz,1H),4.44(qd,J=6.4,4.6Hz,1H),4.34(dt,J=15.4,9.0Hz,1H),2.40(d,J=1.3Hz,3H),1.79-1.60(m,3H),1.34-1.18(m,11H),1.04(dd,J=14.8,6.5Hz,3H)。HRMS(C)tR=2.00min；m/z 499.1986
實例26 (4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(4-(4-氯苯基)-5-甲基噻唑-2-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
200mg(白色固體)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.25(dd,J=2.9,1.0Hz,1H),7.68-7.52(m,2H),7.47-7.35(m,2H),5.99-5.65(m,1H),5.49-5.20(m,1H),4.67(ddt,J=21.5,8.9,5.4Hz,1H),4.58-4.40(m,2H),4.22-4.05(m,1H),2.53(d,J=6.0Hz,3H),1.74(s,1H),1.16(s,5H),1.13-1.05(m,6H),1.01(d,J=6.4Hz,3H)。HRMS(B)tR=5.16min；m/z 534.1744
實例27 (4R)-3-(2-((1-(4-(4-溴苯基)噻唑-2-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)唑啶-2-酮
210mg(白色固體)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.25(dd,J=2.9,1.9Hz,1H),7.87-7.71(m,2H),7.62-7.50(m,2H),7.40(d,J=8.7Hz,1H),5.85(d,J=15.8Hz,1H),5.58-5.36(m,1H),4.81-4.57(m,1H),4.57-4.39(m,2H),4.23-4.00(m,1H),2.07(s,2H),1.77(s,1H),1.16(s,5H),1.11(d,J=6.4Hz,2H),1.06(s,5H),0.98(d,J=6.4Hz,2H)。HRMS(B)tR=5.15min；m/z 566.1079(M+H).
實例28 (R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯-3-(三氟甲氧基)苯基)哌啶-4-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((S)-1-羥乙基)唑啶-2-酮
(R)-4-((S)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯-3-(三氟甲氧基)苯基)哌啶-4-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(34mg，0.058mmole)溶解於DCM(1mL)中，添加TFA(1mL)。反應溶液在室溫下攪拌2小時且藉由旋轉蒸發濃縮。所得殘餘物溶解於DCM(2mL)及水(2mL)中且用NH4OH將pH值調節至約9。分離DCM層且藉由旋轉蒸發濃縮，得到28mg呈黃色油狀之標題產物(具有相同MS之兩個峰之比率：96/4%(藉由LC-MS))。(400MHz,CD2Cl2)δ 8.22(d,J=2.27Hz,1H),7.31(d,J=8.85Hz,1H),6.88-6.79(m,2H),5.12(br s,1H),4.61-4.50(m,2H),4.46-4.37(m,1H),4.26-4.15(m,1H),3.93(br s,1H),3.77-3.68(m,2H),3.20(br s,1H),2.79-2.67(m,2H),1.96- 1.78(m,2H),1.70-1.58(m,1H),1.55-1.28(m,2H),1.23(d,J=6.63Hz,3H),1.19(d,J=7.19Hz,3H),HRMS(C)tR=4.47min；MS m/z 548.1689(M+H)+
實例29 (R)-3-(5-氟-2-(((S)-1-(1-(2-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)吡啶-4-基)哌啶-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-羥乙基)唑啶-2-酮
渾濁的(R)-4-((S)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(5-氟-2-(((S)-1-(哌啶-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(21mg，0.051mmol)、4-溴-2-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)吡啶(14mg，0.051mmol)、Pd(OAc)2(1mg，5μmol)、BINAP(3mg，5μmol)及Cs2CO3(25mg，0.077mmol)於6mL甲苯中之溶液在90℃下加熱隔夜。混合物冷卻至室溫，且經矽藻土過濾。矽藻土餅用5mL EtOAc沖洗。將濾液倒入5mL水中。分離有機層，且水性物質進一步用EtOAc(5mL)萃取。合併有機萃取物且藉由旋轉蒸發濃縮。所得粗物質溶解於DCM(1mL)中，添加TFA(1mL)。反應溶液在室溫下攪拌2小時且藉由旋轉蒸發濃縮。所得殘餘物溶解於DCM(2mL)及水(2mL)中且用NH4OH將pH值調節至約9。分離DCM層且藉由旋轉蒸發濃縮。粗物質溶解於MeOH(1mL)與DMSO(1mL)之混合物中且藉由逆相HPLC純化。收集所選部分且藉由旋轉蒸發濃縮，得到呈無色油狀之標題產物(5mg)(具有相同MS之兩個峰之比率：93/7%(由LC-MS))。(400MHz,CD2Cl2)δ 8.16-8.08(m,2H),6.79-6.75(m,1H),6.57-6.52(m,1H),4.97-4.86(m,1H),4.47-4.39(m,2H),4.33-4.25(m,1H),4.11-4.02(m,1H),3.89-3.75(m,3H),2.97(br s,1H),2.80-2.67(m,2H),1.84-1.67(m,2H),1.67- 1.55(m,1H),1.48(s,6H),1.38-1.15(m,2H),1.11(d,J=5.91Hz,3H),1.07(d,J=5.91Hz,3H),HRMS(C)tR=3.59min；MS m/z 541.2557(M+H)+
實例30、31、32及33 3-(2-(((S)-1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-(1,1,1-三氟丙-2-基)唑啶-2-酮
向(S)-1-(5-(4-氯苯基)唑-2-基)乙胺(72mg，0.322mmol)及3-(2-氟嘧啶-4-基)-4-(1,1,1-三氟丙-2-基)唑啶-2-酮(90mg，0.322mmol)於DMSO(1ml)中之溶液中添加N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(2當量，0.113mL，0.645mmol)且在微波中在120℃下加熱2小時。用EtOAc(25ml)稀釋，用水(25ml)、鹽水(25ml)洗滌，在真空中濃縮。用0-5% EtOAc/DCM溶離藉由閃蒸塔(二氧化矽，40g，50μ)接著用0-5% EtOAc/庚烷溶離藉由閃蒸塔(二氧化矽，80g，15μ)分離2個主要峰，其用35% IPA/CO2(v/v)溶離在ID管柱(75公克/分鐘，120巴，21×250mm)上經由對掌性SFC層析進一步分離，得到：實例30，峰1：10mg(白色泡沫狀物)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.27(d,J=5.8Hz,1H),8.09-7.95(m,2H),7.58(d,J=5.7Hz,1H),7.54-7.41(m,2H),5.83(s,1H),5.28(s,1H),4.72(s,1H),4.54(dd,J=9.6,2.5Hz,1H),4.37(d,J=9.5Hz,1H),3.44-3.15(m,1H),1.78(d,J=7.0Hz,3H),1.63(s,1H),1.32(d,J=7.3Hz,3H),1.23(d,J=6.1Hz,3H)。HRMS m/z 482.1081,RT=2.90min。對掌性RT=2.15min
實例31，峰2：38mg(白色泡沫狀物)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.27(d,J=5.7Hz,1H),8.09-7.93(m,2H),7.58(d,J=5.7Hz,1H),7.53-7.41(m,2H),5.84(s,1H),5.33(s,1H),4.72(s,1H),4.55(dd,J=9.6,2.4Hz,1H),4.35(t,J=8.8Hz,1H),3.39-3.17(m,1H),1.78(d,J=7.0Hz,3H),1.62(d,J=6.9Hz,1H),1.32(d,J=7.3Hz,3H),1.23(d,J=6.2Hz,1H)。HRMS m/z 482.1081,RT=2.89min。對掌性RT=2.43min
實例32，峰3：45mg(白色泡沫狀物)1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.27(d,J=5.8Hz,1H),8.09-7.91(m,2H),7.59(d,J=5.7Hz,1H),7.52-7.38(m,2H),6.22(s,1H),5.38(d,J=48.6Hz,1H),4.86(dd,J=8.2,4.2Hz,1H),1.83-1.75(m,3H),4.56(dd,J=9.3,2.5Hz,1H),4.43(t,J=9.2Hz,1H),3.50(s,1H),2.97(d,J=46.0Hz,1H),1.23(d,J=6.2Hz,1H),1.12(d,J=7.6Hz,3H)。HRMS m/z 482.1081,RT=2.86min。對掌性RT=2.55min
實例33，峰4：12mg(白色泡沫狀物)1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.28(d,J=5.8Hz,1H),8.11-7.92(m,2H),7.60(d,J=5.6Hz,1H),7.53-7.40(m,2H),5.77(s,1H),5.45(s,1H),4.96-4.77(m,1H),4.57(dd,J=9.5,2.4Hz,1H),4.44(t,J=9.1Hz,1H),2.94(s,1H),1.79(d,J=7.1Hz,3H),1.63(d,J=7.1Hz,1H),1.23(d,J=6.1Hz,2H),1.20-1.08(m,3H)。HRMS m/z 482.1081,RT=2.86min。對掌性RT=2.66min
實例34 3-(5-氟-2-(((S)-1-(3-氟-4-(羥基甲基)苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-(1,1,1-三氟丙-2-基)唑啶-2-酮
向(S)-(4-(1-胺基乙基)-2-氟苯基)甲醇(62.6mg，0.37mmol)及3-(2-氟嘧啶-4-基)-4-(1,1,1-三氟丙-2-基)唑啶-2-酮(110mg，0.37mmol)於DMSO(1ml)中之溶液中添加N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(2當量，0.129mL，0.74mmol)且在微波中在120℃下加熱2小時。用EtOAc(25ml)稀釋，用水(25ml)、鹽水(25ml)洗滌，在真空中濃縮。用5%-50% EtOAc/DCM溶離藉由閃蒸塔(二氧化矽，40g，55μ)得到155mg(白色泡沫狀物)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.22(dd,J=6.6,2.6Hz,1H),7.40(td,J=7.8,5.2Hz,1H),7.12(ddd,J=7.8,4.6,1.6Hz,1H),7.03(ddd,J=10.9,6.3,1.7Hz,1H),5.52(d,J=22.7Hz,1H),4.90(p,J=7.0Hz,1H),4.75(d,J=9.6Hz,3H),4.59(dt,J=15.7,9.1Hz,1H),4.41(ddd,J=12.4,9.1,6.2Hz,1H),1.89(d,J=18.6Hz,1H),1.16(d,J=7.2Hz,1H),1.04-0.74(m,2H)。HRMS m/z 446.1377,RT=2.03min。
實例35
(R)-3-(2-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮(18.6mg，0.082mmol)及1-(5-(2,3-二氯苯基)嘧啶-2-基)乙胺(22mg，0.082mmol)於DMSO(2mL)中之溶液在100℃下加熱2小時。將反應混合物 傾入水(20mL)中且用EtOAc(2×20mL)萃取。合併之有機物經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。進行矽膠管柱層析((含25% MeOH之EtOAc)/庚烷10%至100%)得到呈白色固體狀之(4R)-3-(2-(1-(5-(2,3-二氯苯基)嘧啶-2-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮(12mg，非對映異構體之約1：1混合物)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.72(s,4H),8.15(d,J=5.7Hz,2H),7.51(ddd,J=8.1,2.8,1.6Hz,2H),7.40-7.11(m,6H),6.07-5.96(m,2H),5.32(t,J=7.4Hz,1H),5.09(s,1H),4.81(s,1H),4.68(s,1H),4.43(dd,J=7.3,4.8Hz,2H),4.33(dd,J=9.4,8.3Hz,1H),4.18(d,J=9.0Hz,2H),3.62(s,1H),3.23(s,1H),1.62-1.58(m,6H),1.07-0.97(m,3H),0.87-0.77(m,3H)。HRMS m/z 475.1039 and 475.1042(M+H)+。
實例36 (R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-(((S)-1-苯基乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-苯基乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(68mg，0.18mmol)於3ml DCM中之溶液冷卻至0℃，用1ml TFA處理，其在相同溫度下攪拌4小時，移除溶劑，得到呈三氟乙酸鹽形式之產物，其溶解於2ml MeOH中，使用PL-HCO3 MP SPE(0.9mmol)濾筒移除TFA，移除溶劑，得到呈白色固體狀之純的產物(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-(((S)-1-苯基乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(52mg)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.19(d,J=5.8Hz,1H),7.43(d,J=5.8Hz,1H),7.40-7.31(m,4H),7.31-7.24(m,1H), 5.84(s,1H),4.94(s,1H),4.58(q,J=4.9,3.2Hz,1H),4.40(dd,J=9.3,2.8Hz,1H),4.31(t,J=8.9Hz,1H),1.56(d,J=7.0Hz,3H),0.98-0.74(m,3H)。HRMS m/z 329.1619(M+H)+,RT=2.23min。
實例37及38
(4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(97mg，0.17mmol)用90% TFA/水處理2小時。在真空中濃縮且用MeOH/DCM/MeOH溶離藉由通過MP-碳酸酯樹脂管柱(2.0g，0.55mmol/g)中和，得到58mg呈蠟狀灰白色泡沫狀之(R)-3-(2-(((R)-1-(3-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-(1-羥乙基)唑啶-2-酮。用25% IPA/CO2(v/v)溶離在AD-H管柱上經由對掌性SFC層析分離非對映異構體(75公克/分鐘，120巴，21×250mm)，得到(R)-3-(2-(((R)-1-(3-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮及(R)-3-(2-(((S)-1-(3-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮。
實例37 峰1：23mg(灰白色泡沫狀物)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.32-8.17(m,4H),8.01(dd,J=8.6,2.1Hz,2H),7.54(d,J=5.7Hz,2H),7.45(dq,J=8.4,1.5Hz,2H),6.16(s,2H),5.32(s,3H),4.82-4.60(m,2H),4.53(dd,J=9.3,2.4Hz,2H),4.43(s,2H),4.29(q,J=8.9Hz,2H),4.05(p,J=6.1Hz,1H),3.51(s,5H),1.80(s,1H),1.22(t,J=6.5Hz,12H)。HRMS(B)tR=2.75min。MS m/z 514.0979 對掌性RT=2.10min
實例38 峰2：58mg(灰白色泡沫狀物)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.23(dd,J=12.4,3.9Hz,8H),8.01(dd,J=8.5,2.1Hz,4H),7.71-7.36(m,8H),6.29(s,4H),5.37(d,J=37.2Hz,5H),4.86(ddd,J=7.7,4.9,2.4Hz,4H),4.55(dd,J=9.5,2.6Hz,4H),4.41(t,J=8.9Hz,4H),4.19-3.77(m,5H),3.51(s,3H),1.83(s,1H),1.23(d,J=6.1Hz,4H),1.12-0.95(m,12H)。HRMS(B)tR=2.73min。MS m/z 514.0979對掌性RT=3.70min
表28a中之化合物係使用與關於實例35、36或37/38之製備所描述類似的方法製備。
表29a中之化合物係使用與關於實例35、36或37/38之製備所描述類似的方法製備。
實例202及203
(4R)-3-(2-((1-(5-(4-氯苯基)唑-2-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮
(4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(5-(4-氯苯基)唑-2-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(124mg，0.246mmol)用90% TFA/水處理2小時。在真空中濃縮，且用MeOH/DCM/MeOH溶離藉由通過MP-碳酸酯樹脂(2.0g，0.55mmol/g)管柱來中和，得到非對映異構混合物。用45% IPA/CO2(v/v)溶離，在ID管柱(75公克/分鐘，120巴，21×250mm)上進行對掌性SFC層析，得到(R)-3-(2-(((R)-1-(5-(4-氯苯基)唑-2-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮及(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)唑-2-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮。
202：峰1：15mg(淡橙色泡沫狀物)：(CDCl3)δ 8.22(d,J=3.2Hz,1H),7.63-7.50(m,2H),7.45-7.38(m,2H),7.28(s,1H),5.65(d,J=7.0Hz,1H),5.16(s,1H),4.80-4.25(m,3H),3.51(s,1H),1.71(d,J=7.0Hz,3H),1.38-1.15(m,4H)。HRMS(B)m/z 447.1110。RT=2.20min。
203：峰2：87mg(淡橙色泡沫狀物)：(CDCl3)δ 8.24(d,J=2.9Hz,1H),7.59-7.49(m,2H),7.46-7.37(m,2H),7.24-7.18(m,1H),5.66(d,J=8.1Hz,1H),5.32(dd,J=8.3,6.6Hz,1H),4.79(s,1H),4.56(t,J=8.9Hz,1H),4.39(dd,J=9.1,5.7Hz,1H),4.04(td,J=11.0,9.7,4.8Hz,1H),3.51(s,1H),1.70(s,1H),1.23(d,J=6.2Hz,2H),1.16(d, J=6.4Hz,3H)。HRMS(B)m/z 447.1110。RT=2.20min。
實例204及205
(4R)-3-(2-((1-(3-(4-氯苯基)異唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮
(4R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-((1-(3-(4-氯苯基)異唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(3.50g，2.88mmol)用90% TFA/水處理2小時。在真空中濃縮，且用MeOH/DCM/MeOH溶離藉由通過MP-碳酸酯樹脂(6.0g，0.55mmol/g)管柱來中和，得到非對映異構混合物。用30% IPA+10mM NH4OH/CO2(v/v)溶離，在OJ-H管柱(75公克/分鐘，120巴，21×250mm)上進行對掌性SFC層析，得到(R)-3-(2-(((S)-1-(3-(4-氯苯基)異唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮及(R)-3-(2-(((R)-1-(3-(4-氯苯基)異唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮。
204：峰1：1.40g(白色粉末結晶)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.22(d,J=5.8Hz,1H),7.76-7.63(m,2H),7.54(d,J=5.7Hz,1H),7.50-7.37(m,2H),6.46(s,1H),5.90-5.55(m,1H),5.27-5.04(m,1H),4.93-4.79(m,1H),4.56(dd,J=9.3,2.5Hz,1H),4.40(dd,J=9.4,8.4Hz,1H),3.51(s,2H),3.25(d,J=68.4Hz,1H),1.98-1.55(m,2H),0.91(s,3H)。HRMS(B)m/z 429.1204。RT=2.45min。
205：峰2：1.35g(灰白色泡沫狀物)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.22(d,J=6.0Hz,1H),7.79-7.64(m,2H),7.54(d,J=5.8Hz,1H), 7.49-7.37(m,2H),6.47(s,1H),5.77(s,1H),1.80-1.61(m,4H),5.16(s,1H),4.71-4.45(m,2H),4.46-4.22(m,2H),3.51(s,2H),2.87(s,1H),1.20(d,J=6.5Hz,4H)。HRMS(B)m/z 429.1204。RT=2.45min。
實例206 (R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮
(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(360mg，0.741mg)用90% TFA/水處理2小時。在真空中濃縮，且用MeOH/DCM/MeOH溶離藉由通過MP-碳酸酯樹脂(2.0g，0.55mmol/g)管柱來中和，得到所需產物(120mg，淡黃色泡沫狀物)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.15(d,J=6.0Hz,1H),7.64-7.49(m,3H),7.49-7.35(m,2H),7.29(s,1H),5.33(dd,J=9.4,5.1Hz,1H),5.04-4.81(m,1H),1.80-1.69(m,3H),4.71-4.53(m,1H),4.45(dd,J=9.4,8.1Hz,1H),4.28-3.97(m,1H),3.51(s,3H),1.14(d,J=6.4Hz,3H)。HRMS(B)m/z 429.1204。RT=2.22min。
實例207：(R)-3-(6-氯-2-((S)-1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮
將三氟乙酸(2mL)添加至(R)-4-((R)-1-第三丁氧基乙基)-3-(6-氯-2-((S)-1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(25.0mg，0.039mmol)於DCM(2mL)中之溶液中且溶液在室溫下攪拌1小時。接著濃縮反應混合物且藉由逆相HPLC純化，得到(R)-3-(6-氯-2-((S)-1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮之三氟乙酸鹽(10.0mg，白色固體)，44%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.00(d,J=8.4Hz,2H),7.63(s,1H),7.48(d,J=8.4Hz,2H),5.30(br m,1H),4.80-4.77(m,1H),4.55-4.52(m,1H),4.41-4.36(m,1H),3.77-3.62(br m,1H),1.78(d,J=7.1Hz,3H),0.95(br m,3H)；HRMS m/z 465.0847(M+H)+；Rt-2.25min。
表30a中之化合物係使用與關於實例35、36、37/38或207之製備所描述類似的方法製備。
表30b. 表30a中列舉之各化合物之化學名稱、NMR化學位移及LCMS
實例334 (R)-3-(5-氟-2-(((S)-1-(6-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-3-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮
向含(R)-3-(2-(((S)-1-(5-氯-6-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-3-基)乙基) 胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮(20mg，0.042mmol)之MeOH(10mL)中添加Pd(OH)2(10mg，0.014mmol)。反應物用N2及H2各吹掃三次。將氫氣球施用於反應。攪拌反應混合物一小時且濃縮。殘餘物直接應用於HPLC分離，得到呈三氟乙酸鹽形式之產物(15mg)。1HNMR(CD3OD)δppm 8.21(d,J=3.1Hz,1 H),7.38(t,J=8.0Hz,1 H),7.12-7.28(m,2 H),4.88-5.00(m,1 H),4.59(br.s.,1 H),4.42-4.55(m,2 H),3.89(br.s.,1 H),1.49(d,J=7.0Hz,3 H),0.81(br.s.,3 H)。HRMS(B)m/z 446.1448(M+H)+,RT=1.90min。
實例335 (R)-3-(2-((S)-1-(4-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮
在密封小瓶中，(R)-4-((R)-1-第三丁氧基乙基)-3-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(40mg，0.126mmol)、(S)-1-(4-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙胺(36.9mg，0.164mmol)及許尼希鹼(Huenig's base)(0.11mL，0.629mmol)於DMSO(0.25mL)中之混合物在氬氣氛圍下在約120℃下加熱約16小時。混合物冷卻至室溫且用乙酸乙酯及水稀釋。水層用乙酸乙酯(2x)萃取，合併之有機層用鹽水洗滌且經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物溶解於DCM(0.8mL)中且冷卻至0℃。向混合物中添加三氟乙酸(0.3mL)，移除冰浴且混合物在室溫下攪拌約1小時。混合物用甲醇(2mL)稀釋且在減壓下濃縮。殘餘物溶解於DMSO/水(約9/1)中，經針筒過濾器過濾，且藉由逆相HPLC純化。收集所選 部分且凍乾，得到呈白色固體狀之呈三氟乙酸鹽形式之(R)-3-(2-((S)-1-(4-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮(19mg)。
1H NMR(400Mhz,CD3OD)δ ppm 9.77(d,J=2.7Hz,1 H),9.06(t,J=7.8Hz,1 H),8.80-8.87(m,2 H),8.12-8.44(m,1 H),6.82(q,J=6.7Hz,1 H),6.12-6.21(m,1 H),5.99-6.11(m,2 H),5.30-5.52(m,1 H),3.09(d,J=7.0Hz,3 H),2.14-2.51(m,3 H)。HRMS m/z 415.1390(M+H)+；Rt-1.84min。
以下實例係使用與關於實例335之製備所描述類似的方法製備。
實例336 (R)-3-(2-(((S)-1-(4-(1,1-二氟乙基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮
1H NMR(400Mhz,CCl3D)δ ppm 8.19(d,J=2.7Hz,1 H),7.33-7.44(m,1 H),7.18-7.30(m,2 H),5.49(m,J=5.9Hz,1 H),5.19(m,J=6.7,6.7Hz,1 H),4.41-4.52(m,2 H),4.34(m,J=7.2,3.7Hz,1 H),1.90(t,J=18.2Hz,3 H),1.51-1.60(m,3 H),0.80-1.00(m,3 H)。HRMS m/z 429.1553(M+H)+；Rt-1.98min。
實例337 (R)-3-(6-氯-2-(((S)-1-(4-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮
在密封小瓶中，(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2,6-二氯嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(55mg，0.165mmol)、(S)-1-(4-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙胺鹽酸鹽(35mg，0.155mmol)及許尼希鹼(0.072mL，0.411mmol)於DMSO(0.6mL)中之混合物在氬氣氛圍下在約85℃下加熱約3小時。混合物冷卻至室溫且用乙酸乙酯及水稀釋。水層用乙酸乙酯(2x)萃取，合併之有機層用鹽水洗滌且經硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物溶解於DCM(0.8mL)中且冷卻至0℃。向混合物中添加三氟乙酸(0.4mL)，移除冰浴且混合物在室溫下攪拌約1小時。混合物用甲醇(2mL)稀釋且在減壓下濃縮。殘餘物溶解於DMSO/水(約9/1)中，經針筒過濾器過濾，且藉由逆相HPLC純化。收集所選部分且凍乾，得到呈白色固體狀之呈三氟乙酸鹽形式之(R)-3-(6-氯-2-(((S)-1-(4-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮(8.2mg)。
1H NMR(400Mhz,CD3OD)δ ppm 7.50(m,J=7.60,7.6Hz,1 H),7.25-7.38(m,3 H),6.76(t,J=1.0Hz,1 H),5.31-5.43(m,1 H),4.72-4.81(m,1 H),4.52(m,J=7.0Hz,1 H),4.34-4.44(m,1 H),1.55(d,J=7.0Hz,3 H),0.54-0.75(m,CH3)。HRMS m/z 431.1097(M+H)+；Rt-2.21min。
以下實例係使用與關於實例337之製備所描述類似的方法製備
實例338 (R)-3-(6-氯-2-(((S)-1-(4-(1,1-二氟乙基)-2-氟苯基)乙基)胺基)嘧啶-4- 基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮
1H NMR(400Mhz,CD3OD)δ ppm 7.45(m,J=7.6,7.6Hz,1 H),7.21-7.36(m,3 H),5.34(m,J=7.0Hz,1 H),4.71-4.79(m,1 H),4.45-4.55(m,1 H),4.32-4.41(m,1 H),1.89(t,J=18.2Hz,3 H),1.52(d,J=7.0Hz,3 H),0.55-0.71(m,CH3)。HRMS m/z 445.1257(M+H)+；Rt-2.32min。
實例339 (R)-3-(6-氯-2-(((S)-1-(5-苯基噻吩-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮
(R)-3-(2,6-二氯嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮(0.040g，0.144mmol)、(S)-1-(5-(吡啶-2-基)噻吩-2-基)乙胺鹽酸鹽(0.083g，0.346mmol，2.4當量)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.075mL，0.432mmol，3.0當量)於DMSO(0.72mL)中之溶液在100℃下加熱1小時。藉由逆相HPLC純化來分離區位異構產物且得到(R)-3-(6-氯-2-(((S)-1-(5-苯基噻吩-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮之三氟乙酸鹽(7.0mg，白色固體)，8%產率。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ 7.59(s,1H),7.56-7.52(m,2H),7.40-7.34(m,2H),7.29(d,J=7.4Hz,1H),7.15(d,J=3.6hz,1H),6.93(br s,1H),521(m,1H),4.78-4.68(m,1H),4.50-4.31(m,2H),3.85(m,1H),1.69(d,J=6.9Hz,3H),0.93(br s,3H)；HRMS m/z 445.1109(M+H)+；Rt-2.49min。
以下實例係使用與關於實例339之製備所描述類似的方法製備
實例340 (R)-3-(6-氯-2-(((S)-1-(5-(吡啶-2-基)噻吩-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ ppm 8.84(d,J=5.0Hz,1H),8.05(t,J=7.8Hz,1H),7.77-7.70(m,2H),7.60(s,1H),7.47(t,J=6.5Hz,1H),7.13(d,J=3.9Hz,1H),5.19(m,1H),4.87(m,1H),4.62(m,1H),4.37(t,J=9.0Hz,1H),3.61(m,1H),1.70(d,J=7.0Hz,3H),0.89(br s,3H)。HRMS m/z 446.1054(M+H)+；Rt-2.04
實例341 (1：1 TFA：DCM)
(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-((S)-1-(3-((S)-四氫呋喃-3-基氧基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(56.5mg，0.12mmol)於DCM(0.6 ml)中之溶液在室溫下用TFA(0.6ml)處理。所得溶液靜置2小時，接著濃縮。藉由逆相HPLC純化粗物質。合併產物部分且凍乾，得到呈三氟乙酸鹽形式之(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-((S)-1-(3-((S)-四氫呋喃-3-基氧基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(15.2mg，0.036mmol，30%產率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 0.65(br.s.,3 H)1.41(d,J=6.99Hz,3 H)1.84-1.94(m,1 H)2.10-2.22(m,1 H)3.67-3.89(m,4 H)4.33-4.47(m,2 H)4.70-4.77(m,1 H)4.96(dd,J=6.06,4.60Hz,1 H)5.01-5.11(m,1 H)6.73(dd,J=8.07,2.05Hz,1 H)6.89-6.97(m,2 H)7.19(t,J=7.85Hz,1 H)7.24(d,J=6.06Hz,1 H)8.14(br.s.,1 H)。LCMS m/z 415.3(M+H)+,Rt 0.55min。HRMS(A)m/z 415.1981(M+H)+,Rt 1.33min。
使用與關於化合物341之製備所描述類似的方法製備表31a中之化合物。
實例356 (1：3 TFA：DCM)
(R)-4-((R)-1-第三丁氧基乙基)-3-(2-((S)-1-(3-苯氧基苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(70.1mg，0.147mmol)於DCM(1.1ml)中之溶液在室溫下用TFA(368μl)處理。所得溶液靜置30分鐘，接著濃縮。藉由逆相HPLC純化粗物質。合併產物部分且凍乾，得到呈三氟乙酸鹽形式之(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-((S)-1-(3-苯氧基苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(41.3mg，0.097mmol，66%產率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 0.64(br.s.,3 H)1.42(d,J=6.90Hz,3 H)3.70(br.s.,1 H)4.32-4.48(m,3 H)4.67-4.75(m,1 H)5.08(br.s.,1 H)6.78(d,J=7.87Hz,1 H)6.91(d,J=7.87Hz,2 H)7.00-7.18(m,3 H)7.22-7.37(m,4 H)8.14(br.s.,1 H)。LCMS m/z 421.3(M+H)+,Rt 0.72min。HRMS(A)m/z 421.1873(M+H)+,Rt 1.84min。
使用與關於化合物356之製備所描述類似的方法製備表32a中之化合物
實例373：(R)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-甲氧基乙基)唑啶-2-酮
向具有攪拌棒之微波小瓶中添加(R)-3-(2-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-甲氧基乙基)唑啶-2-酮(28mg，0.12mmol)及DMSO(1mL)。向此反應混合物中添加(S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙胺(48mg，0.17 mmol)及DIEA(61μl，0.35mmol)。將小瓶蓋好且反應混合物在預先加熱之砂浴中在80℃下加熱18小時。藉由逆相HPLC純化反應混合物。合併產物部分，冷凍且凍乾，得到(R)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-甲氧基乙基)唑啶-2-酮之三氟乙酸鹽(28mg，0.04mmol，38%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.01(d,J=6.65Hz,3 H)1.82(d,J=7.04Hz,3 H)3.24(s,3 H)3.72-3.86(m,1 H)4.36-4.47(m,1 H)4.60(dd,J=9.39,2.35Hz,1 H)4.92-5.01(m,1 H)5.48(t,J=7.04Hz,1 H)7.43(d,J=8.61Hz,2 H)7.72(s,1 H)7.77-7.85(m,4 H)8.02(d,J=7.04Hz,1 H)10.95(d,J=6.65Hz,1 H).LCMS m/z 460.2(M+H)+,Rt 0.82min。HRMS(B)m/z 460.1213(M+H)+,Rt 2.28min。
使用與關於化合物373之製備所描述類似的方法製備表33a中之化合物。
*實例374及375係以游離形式獲得
表33b. 表33a中列舉之各化合物之化學名稱、NMR化學位移及LCMS信號。
實例380：(S)-4-((R)-1-胺基乙基)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
步驟1
向具有攪拌棒之微波小瓶中添加(R)-4-((S)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-氯嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(147mg，0.49mmol)及DMSO(4mL)。向此反應混合物中添加(S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙胺鹽酸鹽(148mg，0.54mmol)及DIEA(0.26mL，1.47mmol)。將小瓶蓋好且反應混合物在預先加熱之砂浴中在110℃下加熱42小時。反應混合物用水稀釋且用EtOAc萃取。合併有機相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在矽膠上濃縮。進行矽膠管柱層析(EtOAc/庚烷0至100%)得到(R)-4-((S)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(82mg，0.16mmol，33%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 0.82(br.s.,9 H)0.90-0.98(m,3 H)1.71(d,J=6.90Hz,3 H)4.13(q,J=7.16Hz,1 H)4.21-4.32(m,1 H)4.42-4.51(m,1 H)4.56(dd,J=8.31,2.79Hz,1 H)5.39(br.s.,1 H)7.34-7.45(m,2 H)7.57(d,J=5.77Hz,1 H)7.64(s,1 H)7.76-7.86(m,2 H)8.22(d,J=5.82Hz,1 H)。LCMS m/z 502.3(M+H)+,Rt 0.92min。
步驟2
向含有攪拌棒及(R)-4-((S)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(82mg，0.16mmol)之圓底燒瓶中添加DCM(1mL)，接著添加TFA(1mL)。所得反應混合物在室溫下攪拌30分鐘。接著移除揮發性物質且殘餘物藉由添加飽和NaHCO3溶液來中和。接著水性混合物用DCM萃取。合併有機 相，用水、鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮，得到(R)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-羥乙基)唑啶-2-酮之褐色泡沫狀物(61mg，0.14mmol，84%產率)，其未經進一步純化即使用。LCMS m/z 446.2(M+H)+,Rt 0.71min。
步驟3
向具有攪拌棒之圓底燒瓶中添加(R)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-羥乙基)唑啶-2-酮(19mg，0.04mmol)，接著在氮氣下添加DCM(1mL)。混合物在冰/水浴中冷卻至0℃。向此冷的溶液中添加DIEA(0.03mL，0.17mmol)，接著添加甲烷磺醯氯(10μL，0.13mmol)。反應混合物在0℃下攪拌1小時。接著反應混合物用水淬滅且用DCM稀釋。分配各相且水相用DCM萃取。合併有機層且用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮，得到甲烷磺酸(S)-1-((R)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-2-側氧基唑啶-4-基)乙酯之橙色殘餘物(21mg，0.04mmol，94%產率)。LCMS m/z 524.2(M+H)+,Rt 0.75min。
步驟4
向含有含甲烷磺酸(S)-1-((R)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-2-側氧基唑啶-4-基)乙酯(21mg，0.04mmol)之DMF(1mL)之微波小瓶中添加疊氮化鈉(13mg，0.20mmol)。所得反應混合物在砂浴中加熱至50℃保持1小時，接著加熱至80℃保持42小時。反應混合物用水稀釋且用EtOAc萃取。合併有機相，用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮，得到(S)-4-((R)-1-疊氮基乙基)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮之黃色殘餘物(14mg，0.030mmol，74.2%產率)。LCMS m/z 471.2(M+H)+,Rt 0.92min。
步驟5
向含有(S)-4-((R)-1-疊氮基乙基)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(14mg，0.03mmol)及攪拌棒之圓底燒瓶中添加THF(1mL)及三甲基膦(0.06mL，0.06mmol，1.0M於THF中)。所得反應混合物在室溫下攪拌2小時。進行第二次添加三甲基膦(0.06mL，0.06mmol)且混合物在室溫下攪拌1.5小時。藉由添加飽和NH4Cl溶液及EtOAc淬滅反應物。分配各相且水相用EtOAc萃取。合併有機相且用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮得到黃色殘餘物。殘餘物溶解於DMSO中且藉由逆相HPLC純化。合併產物部分，冷凍且凍乾，得到呈三氟乙酸鹽形式之(S)-4-((R)-1-胺基乙基)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(2.6mg，4.60μmol，15%產率)。1H NMR(400MHz,CD3CN)δ 1.26-1.44(m,3 H)1.68(d,J=6.65Hz,3 H)3.83(quin,J=6.26Hz,1 H)4.43-4.53(m,1 H)7.46(d,J=8.61Hz,2 H)7.76(s,1 H)7.89(d,J=8.61Hz,2 H)8.20(br.s.,1 H).LCMS m/z 445.2(M+H)+,Rt 0.65min。HRMS(B)m/z 445.1211(M+H)+,Rt 1.58min。
使用與關於化合物380之製備所描述類似的方法製備表34a中之化合物
實例384：(S)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-(甲基胺基)乙基)唑啶-2-酮
向含有含甲烷磺酸(S)-1-((R)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-2-側氧基唑啶-4-基)乙酯(20mg，0.04mmol)之DMF(1mL)之微波小瓶中添加甲胺(30mg，0.38mmol，40重量%於H2O中)。所得反應混合物在80℃下攪拌18小時，接著進行第二次添加甲胺(0.1mL，40重量%於H2O中)。反應混合物在80℃下攪拌18小時。接著反應混合物用水稀釋且用EtOAc萃取。合併有機相且用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且濃縮。殘餘物溶解於DMSO中且藉由逆相HPLC純化。合併產物部分，冷凍且凍乾，得到(S)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-(甲基胺基)乙基)唑啶-2-酮之三氟乙酸鹽(3.4mg，5.87μmol，15%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.47(d,J=5.87Hz,3 H)1.78(d,J=7.04Hz,3 H)2.70(s,3 H)4.02(br.s.,1 H)4.14(br.s.,2 H)5.33(br.s.,1 H)5.73(d,J=6.26Hz,1 H)6.23(d,J=5.48Hz,1 H)7.41(d,J=8.61Hz, 2 H)7.78(s,1 H)7.83(d,J=8.22Hz,2 H)8.05(d,J=5.48Hz,1 H)。LCMS m/z 459.2(M+H)+,Rt 0.73min。HRMS(B)m/z 459.1373(M+H)+,Rt 1.68min。
實例385：(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-氟乙基)唑啶-2-酮
向具有攪拌棒之微波小瓶中添加(R)-4-((R)-1-氟乙基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(20mg，0.09mmol)及DMSO(1mL)。向此反應混合物中添加(S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙胺(34mg，0.13mmol)及DIEA(46μL，0.26mmol)。接著將小瓶蓋好且在預先加熱之砂浴中在80℃下加熱2小時。接著藉由逆相HPLC純化反應混合物。合併產物部分，冷凍且凍乾，得到(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-氟乙基)唑啶-2-酮之三氟乙酸鹽(4.2mg，7.63μmol，8.74%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.21(dd,J=24.26,6.26Hz,3 H)1.74(d,J=6.65Hz,3 H)4.52-4.58(m,2 H)4.79-5.06(m,1 H)5.29(br.s.,1 H)5.65(t,J=6.85Hz,1 H)7.41(d,J=8.61Hz,2 H)7.52(s,1 H)7.57(d,J=9.00Hz,2 H)7.82(d,J=6.65Hz,1 H)7.98(d,J=7.04Hz,1 H)8.48(s,1 H)10.97(d,J=6.65Hz,1 H).LCMS m/z 431.1(M+H)+,Rt 0.61min。HRMS(B)m/z 431.1392(M+H)+,Rt 1.54min。
使用與關於化合物385之製備所描述類似的方法製備表35a中之化合物。
表35b. 表35a中列舉之各化合物之化學名稱、NMR化學位移及LCMS
實例403：(R)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(2-(((S)-1-(1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-3-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
(R)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(10mg，0.044mmol)、(S)-1-(1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-3-基)乙胺(19mg，0.065mmol，1.5當量)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.031mL，0.175mmol，4當量)於DMSO(0.5mL)中之溶液在90℃下加熱3小時。接著反應物冷卻至室溫。藉由逆相HPLC純化，得到(R)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(2-(((S)-1-(1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-3-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮之三氟乙酸鹽(14mg，白色固體)，55%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 10.83(d,J=7.1Hz,1 H),9.06(d,J=2.3Hz,1 H),8.15(dd,J=8.5,2.4Hz,1 H),7.93-8.04(m,2 H),7.81(dd,J=7.7,6.3Hz,2 H),6.61(d,J=2.6Hz,1 H),5.28(quin,J=7.1Hz,1 H),4.96-5.17(m,1 H),4.68-4.81(m,1 H),4.62(dd,J=9.1,3.2Hz,1 H),4.45-4.54(m,1 H),1.72(d,J=7.1Hz,3 H),1.14-1.29(m,3 H)；HRMS m/z 466.1625(M+H)+；Rt-1.83min。
使用與關於化合物403之製備所描述類似的方法製備表36a中之化合物。
表36b. 表36a中列舉之各化合物之化學名稱、NMR化學位移及LCMS信號。
實例407 (R)-4-((S)-1-羥乙基)-3-(2-(((S)-1-(1-(2-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)吡啶-4-基)哌啶-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
實例407係使用與關於實例28之製備所描述類似的方法製備。藉由逆相HPLC純化產物。1H NMR(400MHz,CD2Cl2)δ 8.23(d,J=4.18Hz,1H),8.19(d,J=4.88Hz,1H),7.37(d,J=4.88Hz,1H),6.68(br,s,1H),6.68-6.63(m,1H),5.03(br,s,1H),4.80(br,s,1H),4.50-4.36(m,3H),4.09-3.91(m,3H),2.90-2.79(m,2H),1.99-1.79(m,2H),1.78-1.65(m,2H),1.59(s,6H),1.52-1.32(m,2H),1.23(d,J=6.97Hz,3H),1.18(d,J=6.27Hz,3H),HRMS(C)tR=3.62min；MS m/z 523.2649(M+H)+
實例408 (R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯-3-(三氟甲氧基)苯基)哌啶-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-羥乙基)唑啶-2-酮
實例408係使用與關於實例28之製備所描述類似的方法製備。用MeOH溶離，使用PL-HCO3 MP SPE濾筒將三氟乙酸鹽形式之產物轉化為游離鹼形式。1H NMR(400MHz,CD2Cl2)δ 8.07(d,J=5.33Hz,1H),7.25(d,J=4.33Hz,1H),7.19(d,J=9.48Hz,1H),6.76-6.68(m,2H),4.98(br,s,1H),4.69(br,s,1H),4.39-4.25(m,3H),3.90(br,s,1H),3.65-3.56(m,2H),2.68-2.56(m,2H),1.86-1.15(m,6H),1.12(d,J=6.52Hz,3H),1.07(d,J=4.74Hz,3H),HRMS(C)tR=4.44min；MS m/z 530.1782(M+H)+
實例409 (S)-3-(2-(((S)-1-(4-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)唑啶-2-酮
(S)-3-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)唑啶-2-酮(40mg，0.135mmol)、(S)-1-(4-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙胺鹽酸鹽(61.1mg，0.271mmol)、許尼希鹼(0.095mL，0.541mmol)於DMSO(0.7mL)中之混合物在氬氣氛圍下在107℃下加熱約16小時。混合物用DMSO及水稀釋，經針筒過濾器過濾且藉由逆相HPLC純化。收集所選部分且凍乾，得到呈三氟乙酸鹽形式之(S)-3-(2-(((S)-1-(4-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)唑啶-2-酮(35.4mg)。
1H NMR(400Mhz,CD3OD)δ ppm 8.26(br.s.,1 H),7.42-7.54(m,1 H),7.23-7.33(m,2 H),6.55-6.91(m,1 H),5.26(q,J=6.9Hz,1 H),4.52(t,J=9.0Hz,1 H),4.36-4.45(m,1 H),1.53(d,J=7.0Hz,4 H),0.78(br.s.,3 H)。HRMS m/z 449.1412(M+H)+；Rt-2.27min。
實例410及411 (S)-3-(2-(((S)-1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)唑啶-2-酮/(S)-3-(2-(((R)-1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)唑啶-2-酮
(S)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(40mg，0.153mmol)、(S)-1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙胺/(R)-1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙胺(非對映異構體之約3/1混合物，37.7mg，0.168mmol)及許尼希鹼(0.059mL，0.337mmol)於DMSO(0.7mmol)中之混合物在氬氣氛圍下在微波中於140℃下加熱/輻射15分鐘。混合物用DMSO及水稀釋，經針筒過濾器過濾且藉由逆相HPLC純化。收集所選部分且凍乾，得到呈三氟乙酸鹽形式之(S)-3-(2-(((S)-1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)唑啶-2-酮(31.8mg；第一溶離產物)及(S)-3-(2-(((R)-1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)唑啶-2-酮(11.5mg；第二溶離產物)。
410：第一溶離產物：1H NMR(500Mhz,CD3OD)δ ppm 8.22(s,1H),8.03-7.93(m,2H),7.54-7.46(m,3H),5.84(m,1H),5.49(q,J=7.2Hz,1H),5.13(dt,J=8.4,3.1Hz,1H),4.60-4.21(m,2H),2.74(m,1H),1.75(d,J=7.2Hz,3H),0.90(br.s,3H)。HRMS m/z 465.1260(M+H)+；Rt-2.41min。
411：第二溶離產物：1H NMR(500Mhz,CD3OD)δ ppm 8.19(dd,J=7.5,6.0Hz,1H),8.10-7.91(m,2H),7.55-7.50(m,2H),7.47(d,J=5.8Hz,1H),6.08(td,J=55.6,3.5Hz,1H),5.40(t,J=7.1Hz,1H),4.59-4.42(m,1H),4.39(s,1H),3.03(s,1H),1.72(d,J=7.2Hz,3H),1.03(d,J=7.2Hz,3H)。HRMS m/z 465.1250(M+H)+；Rt-2.42min。
以下實例係使用與關於實例410/411之製備所描述類似的方法製備。
實例412 (S)-3-(2-(((S)-1-(4-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)唑啶-2-酮
1H NMR(400Mhz,CD3OD)δ ppm 8.19(d,J=6.7Hz,1 H),7.70(d,J=6.7Hz,1 H),7.47-7.56(m,1 H),7.28-7.40(m,2 H),6.60-6.95(m,1 H),5.57-5.95(m,1 H),5.47(m,J=5.1Hz,1 H),5.12(dt,J=7.8,3.13Hz,1 H),4.46-4.60(m,2 H),1.63(d,J=7.0Hz,3 H),0.77-0.95(m,3 H)。HRMS m/z 431.1506(M+H)+；Rt-2.09min。
實例413及414 (S)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮/(S)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)-3-(2-(((R)-1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
(S)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(30mg，0.115mmol)、1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙胺(53.1mg，0.230mmol)、許尼希鹼(0.05mL，0.287mmol)於DMSO(0.7mL)中之混合物在氬氣氛圍下在120℃下加熱約16小時。添加額外的胺(2當量)且繼續加熱3小時。再添加胺(2當量)且繼續加熱3小時。混合物用DMSO及水稀釋，經針筒過濾器過濾且藉由逆相HPLC純化。收集所選部分且凍乾，得到呈灰白色固體狀之呈三氟乙酸鹽形式之(S)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮/(S)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)-3-(2-(((R)-1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮。
413：第一溶離產物(2.8mg)：1H NMR(500Mhz,CD3OD)δ ppm 8.98(s,2H),8.16(s,1H),7.59(dd,J=7.3,2.3Hz,1H),7.56-7.45(m,2H),7.18(t,J=9.0Hz,1H),6.40-5.96(m,1H),5.25(q,J=6.9Hz,1H),4.52(dd,J=9.4,2.8Hz,1H),4.42(t,J=8.4Hz,1H),3.08(s,1H),2.34(d,J=2.0Hz,3H),1.62(d,J=7.0Hz,3H),1.05(d,J=7.2Hz,3H)。HRMS m/z 473.1916(M+H)+；Rt-2.12min。
414：第二溶離產物(2.9mg)：1H NMR(500Mhz,CD3OD)δ ppm 8.96(s,2H),8.16(s,1H),7.57(dd,J=7.5,2.4Hz,1H),7.53-7.43(m,2H),7.17(t,J=9.0Hz,1H),5.92(t,J=56.9Hz,1H),5.30(q,J=7.0 Hz,1H),5.13(dt,J=6.9,3.3Hz,1H),4.57-4.40(m,2H),2.53(s,1H),2.34(d,J=2.0Hz,3H),1.64(d,J=7.0Hz,3H),0.87(s,3H)。HRMS m/z 473.1919(M+H)+；Rt-2.17min。
表37a中之化合物係使用與關於實例35、36或37/38之製備所描述類似的方法製備。
實例424及425 (4R)-3-(2-((1-(5-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-3-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮
(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(150mg，0.529mmol)、1-[3-(4-氯-苯基)-[1,2,4]二唑-5-基]乙基胺(118mg，0.529mmol，1.0當量)及DIEA(0.185mL，1.059mmol，2.0當量)於DMSO(2mL)中之溶液在110℃下加熱120分鐘。反應混合物用EtOAc(20mL)稀釋且用水(10mL)、4%鹽水(10mL)洗滌，在真空中濃縮。粗物質(R)-5-((R)-1-第三丁氧基-乙基)-1-(2-{1-[3-(4-氯-苯基)-[1,2,4]二唑-5-基]-乙基胺基}-嘧啶-4-基)-咪唑啶-2-酮未經進一步純化即用於下一步驟。
(R)-5-((R)-1-第三丁氧基-乙基)-1-(2-{1-[3-(4-氯-苯基)-[1,2,4]二唑-5-基]-乙基胺基}-嘧啶-4-基)-咪唑啶-2-酮(200mg，0.411mmol)用10：1 TFA/水(10ml)處理2小時。反應物在真空中濃縮且用MeOH/DCM/MeOH溶離藉由通過MP-碳酸酯管柱及經2.5小時用5%-60% EtOAc/庚烷溶離藉由閃蒸塔(二氧化矽，15μ，40g)來中和，得到(R)-3-(2-(((R)-1-(5-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-3-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮及(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-3-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮
424：第一溶離產物(45mg，50.8%)。HRMS m/z 430.1156。
425：第二溶離產物(46mg，52.0%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.67(s,1H),8.09(dq,J=8.4,2.0,1.6Hz,3H),7.64(d,J=6.4Hz,1H),7.58-7.48(m,2H),5.48-5.27(m,1H),4.94(t,J=6.6Hz,1H),4.63-4.40(m,2H),1.13(d,J=6.5Hz,3H),0.89(d,J=7.1Hz,0H),1.83-1.72(m,3H)。HRMS m/z 430.1156。
實例426 (S)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)唑啶-2-酮
(S)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(23.35mg，0.089mmol)、(S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙胺鹽酸鹽(30mg，0.116mmol)及許尼希鹼(0.047mL，0.268mmol)於DMSO(0.6mL)中混合物在氬氣氛圍下在80℃下加熱約16小時。混合物用DMSO及水稀釋，經針筒過濾器過濾且藉由逆相HPLC純化。收集所選部分且凍乾，得到呈白色固體狀之呈三氟乙酸鹽形式之(S)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)唑啶-2-酮(30.2mg)。
1H NMR(400Mhz,CD3OD)δ ppm 9.07(br.s.,1 H),8.24(d,J=6.3Hz,1 H),7.85(s,1 H),7.53-7.72(m,5 H),5.64-6.06(m,1 H),5.36(q,J=6.9Hz,1 H),5.07-5.23(m,1 H),4.41-4.62(m,2 H),2.62-2.90(m,1 H),1.71(d,J=6.7Hz,3 H),0.97(d,J=7.0Hz,3 H)； LCMS m/z 463.2(M+H)+,Rt 0.64min。
以下實例係使用與關於實例426之製備所描述類似的方法製備。
實例427 (S)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
1H NMR(400Mhz,CD3OD)δ ppm 9.13(s,1 H),8.25(d,J=6.7Hz,1 H),7.86(s,1 H),7.61-7.73(m,3 H),7.36(m,J=8.6,8.6Hz,2 H),5.69-6.06(m,1 H),5.37(q,J=6.7Hz,1 H),5.10-5.18(m,1 H),4.46-4.59(m,2 H),2.67-2.82(m,1 H),1.72(d,J=7.0Hz,3 H),0.98(d,J=7.4Hz,3 H)
LCMS m/z 447.2(M+H)+,Rt 0.57min。
使用與關於實例385及403之製備所描述類似的方法製備表38a中之實例。
實例466 (R)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(2-(((S)-1-(4-甲基-2'-(三氟甲基)-[3,4'-聯吡啶]-6-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
實例466係藉由常規途徑製備。步驟1a-1c產生(S)-1-(4-甲基-2'-(三氟甲基)-[3,4'-聯吡啶]-6-基)乙胺。步驟2a-2f產生(R)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮。此等中間物在步驟3中組合產生(R)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(2-(((S)-1-(4-甲基-2'-(三氟甲基)-[3,4'-聯吡啶]-6-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮。
步驟1a：向(S)-1-(5-溴-4-甲基吡啶-2-基)乙胺鹽酸鹽(750mg，2.98mmol)於DCM(30mL)中之溶液中添加二碳酸二-第三丁酯(0.761mL，3.28mmol)及三乙胺(1.25mL，8.94mmol)。所得溶液在室溫下攪拌隔夜。混合物在減壓下濃縮且用40mL EtOAc稀釋，用水、鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥且濃縮，得到940mg呈淺褐色油狀之(S)-(1-(5-溴-4-甲基吡啶-2-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯。MS m/z 317.2(M+H)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.57(s,1H),7.14(s,1H),5.57-5.50(m,1H),4.79(p,J=7.0Hz,1H),2.40(s,3H),1.47-1.43(m,12H).
步驟1b：N2經(S)-(1-(5-溴-4-甲基吡啶-2-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(200mg，0.635mmol)、(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)酸(145mg，0.761mmol)及Na2CO3(2.0M，635μl，1.269mmol)於二烷中之溶液鼓泡5分鐘。添加Cl2Pd(dppf)(CH2Cl2加合物)(51.8mg，0.063mmol)。反應混合物在90℃下攪拌16小時。混合物用EtOAc稀釋，用水、鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾，濃縮且經由急驟管柱層析(0-100% EtOAc/庚烷)純化，得到200mg呈白色固體狀之(S)-(1-(4-甲基-2'-(三氟甲基)-[3,4'-聯吡啶]-6-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.83(d,J=4.9Hz,1H),8.36(s,1H),7.66(s,1H),7.51-7.42(m,1H),7.21(s,1H),5.60(d,J=7.7Hz,1H),4.87(p,J=6.9Hz,1H),2.30(s,3H),1.48(d,J=6.9Hz,3H),1.45(s,9H)。MS m/z 382.3(M+H)。
步驟1c：在-78℃下，向(S)-(1-(4-甲基-2'-(三氟甲基)-[3,4'-聯吡 啶]-6-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯(200mg，0.524mmol)於DCM(2ml)中之溶液中添加三氟乙酸(2mL，12.98mmol)。溶液在室溫下攪拌1小時。濃縮混合物，用10mL DCM稀釋且與固體MP-碳酸酯一起攪拌以移除TFA。過濾且濃縮得到147mg呈淺褐色黏性油狀之(S)-1-(4-甲基-2'-(三氟甲基)-[3,4'-聯吡啶]-6-基)乙胺。MS m/z 282.1(M+H)。Rt=0.85min。(管柱：XBridge C18 3.5μm 2.1×50mm。溶劑A：2%乙腈、3.75mM乙酸銨、水。溶劑B：乙腈。梯度：經1.70min 5%-95% B。流動速率：2mL/min)粗產物未經進一步純化即用於下一步驟。
步驟2a：在-25℃下，向(2S,3R)-2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3-(第三丁氧基)丁酸二環己基銨鹽(500mg，1.0mmol)於10ml THF及氯甲酸異丁酯(167mg，1.2mmol，1.2當量)中之溶液中添加N-甲基嗎啉(124mg，1.2mmol，1.2當量)，混合物在相同溫度下攪拌10分鐘且過濾。濾液冷卻至-20℃且向其中添加NaBH4，接著立即添加2ml水。反應混合物在相同溫度下攪拌5分鐘，接著逐漸溫至室溫保持25分鐘，倒入水(10ml)中且用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。合併之有機相用水、鹽水洗滌且經Na2SO4乾燥。移除溶劑得到呈透明油狀之((2R)-(3R)-3-(第三丁氧基)-1-羥基丁-2-基)胺基甲酸苯甲酯。無需進一步純化即可用於下一步驟。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.37-7.16(m,5H),5.25(d,J=8.0Hz,1H),5.02(s,1H),4.04(ddd,J=12.0,8.9,2.8Hz,1H),3.92-3.75(m,1H),3.59(dddd,J=32.3,14.6,8.2,4.3Hz,2H),1.10(s,9H),1.09-1.06(m,3H).
步驟2b：在0℃下，向((2R,3R)-3-(第三丁氧基)-1-羥基丁-2-基)胺基甲酸苯甲酯(5.88g，19,9mmol)於100mL DMF中之溶液中添加NaH(60%於礦物油中，1.62g，40.6mmol)。反應混合物在0℃下攪拌30分鐘。向反應混合物中添加4-甲氧基苯甲基氯(4.07mL，29.9mmol)及碘化四丁銨(0.74g，1.99mmol)且所得混合物溫至室溫且攪拌15.5小 時。將反應混合物倒入冰水(200mL)中，形成白色懸浮液。添加EtOAc(100mL)且攪拌所得混合物5分鐘，形成透明雙層溶液。分離後，水相用EtOAc(100mL×3)萃取。合併之有機溶液用鹽水(80mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。進行急驟管柱層析(EtOAc/庚烷0至70%)得到5.90g具有少量雜質之(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(4-甲氧基苯甲基)唑啶-2-酮。主要產物1H NMR(400MHz,MeOD)δ 7.38-7.29(m,2H),6.99-6.93(m,2H),4.68-4.58(m,1H),4.33(dd,J=9.3,4.5Hz,1H),4.27-4.17(m,2H),3.89(dd,J=6.4,4.8Hz,1H),3.81(s,3H),3.65(dd,J=9.0,4.6Hz,1H),1.09(s,9H),1.02(d,J=6.3Hz,3H).MS m/z 308.2(M+H).
步驟2c：(R)-4-((R)-1-(第三丁氧基)乙基)-3-(4-甲氧基苯甲基)唑啶-2-酮(5.90g，19.2mmol)於CH2Cl2(40mL)中之溶液在室溫下用TFA(40mL)處理20分鐘。反應混合物在真空中濃縮，接著用CH2Cl2(約50mL)稀釋且再次濃縮。重複此程序三次以移除TFA。進行急驟管柱層析(EtOAc/庚烷30%-100%)得到3.81g(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(4-甲氧基苯甲基)唑啶-2-酮。1H NMR(400MHz,MeOD)δ 7.31-7.21(m,2H),7.00-6.87(m,2H),4.67(d,J=15.0Hz,1H),4.34-4.18(m,3H),3.95(q,J=6.2Hz,1H),3.80(s,3H),3.68(dt,J=8.7,5.5Hz,1H),1.09(d,J=6.4Hz,3H).MS m/z 252.2(M+H).
步驟2d：向經冷卻(0℃)之(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(4-甲氧基苯甲基)唑啶-2-酮(2.27g，9.04mmol)於30mL MeCN中之溶液中添加三乙胺(11.4mL，82mmol)，接著添加全氟-1-丁烷磺醯氟(4.9mL，27.3mmol)及NEt3(HF)3(4.5mL，27.6mmol)，且所得混合物在0℃下攪拌70分鐘。反應混合物用水(60mL)稀釋且用EtOAc(3×60mL)萃取。合併之有機物用水(70mL)、鹽水(70mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。進行急驟管柱層析(EtOAc/庚烷5%至70%)得到2.19g(R)-4- ((S)-1-氟乙基)-3-(4-甲氧基苯甲基)唑啶-2-酮。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.25-7.20(m,2H),6.92-6.83(m,2H),4.87(d,J=15.1Hz,1H),4.75(dqd,J=47.6,6.6,2.1Hz,1H),4.26(td,J=9.2,1.4Hz,1H),4.17-4.05(m,2H),3.81(s,3H),3.71(dddd,J=19.8,9.5,5.8,2.1Hz,1H),1.29(dd,J=23.1,6.2Hz,3H).MS m/z 254.5(M+H).
步驟2e：(R)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(4-甲氧基苯甲基)唑啶-2-酮(1.98g，7.8mmol)於40mL TFA中之溶液在65℃下加熱16小時。濃縮反應混合物以移除TFA。進行急驟管柱層析(EtOAc/CH2Cl2，0至100%)得到0.91g呈淡褐色固體狀之(R)-4-((S)-1-氟乙基)-唑啶-2-酮。TLC(1：2庚烷：EtOAc)Rf=0.25。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 5.60(br s,1H),4.72-4.54(m,1H),4.51(td,J=8.9,0.9Hz,1H),4.32(dd,J=9.2,4.8Hz,1H),4.02-3.88(m,1H),1.38(dd,J=24.0,6.3Hz,3H).
步驟2f：向經冷卻(0℃)之2,4-二氟嘧啶(160mg，1.375mmol)及(R)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮(183mg，1.375mmol)於DMF(體積：4.6mL)中之溶液中添加NaH(60%於礦物油中，66.0mg，1.650mmol)。所得混合物在0℃下攪拌30分鐘且在室溫下攪拌2小時。由LC-MS觀測所需產物。混合物用鹽水(1ml)淬滅。用EtOAc(20ml)及水(10ml)稀釋，且分離各層。有機物用額外的20mL EtOAc萃取。合併之有機物用鹽水洗滌，乾燥且濃縮。粗物質經由急驟管柱層析(10%-100% EtOAc/庚烷)純化，得到210mg呈白色固體狀之(R)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.51(dd,J=5.8,2.1Hz,1H),8.20(dd,J=5.7,3.7Hz,1H),5.33(dqd,J=49.5,6.6,1.3Hz,1H),4.77(dddd,J=26.5,9.1,3.4,1.4Hz,1H),4.65(dd,J=9.0,3.4Hz,1H),4.50(td,J=9.0,1.3Hz,1H),1.43(dd,J=23.1,6.6Hz,3H).MS m/z 230.1(M+H).
步驟3：(S)-1-(4-甲基-2'-(三氟甲基)-[3,4'-聯吡啶]-6-基)乙胺(28.1mg，0.1mmol)、(R)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(22.9mg，0.100mmol)及DIPEA(52.4μl，0.300mmol)於DMSO(體積：500μl)中之溶液在110℃下加熱1小時。接著溶液冷卻至室溫，且進行RP-HPLC(乙腈：水)純化，得到白色固體。此物質再次藉由急驟管柱層析(0-10% MeOH/EtOAc)純化，得到14mg呈白色固體狀之(R)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(2-(((S)-1-(4-甲基-2'-(三氟甲基)-[3,4'-聯吡啶]-6-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮。1H NMR(400MHz,MeOD)δ 8.81(d,J=5.0Hz,1H),8.41(s,1H),8.18(s,1H),7.86(s,1H),7.69(dd,J=5.0,1.6Hz,1H),7.44(s,1H),7.41(d,J=5.8Hz,1H),5.08(br s,1H),4.73(br d,J=26.0Hz,1H),4.56-4.27(m,3H),2.32(s,3H),1.58(d,J=7.1Hz,3H),1.12(br s,3H)；HRMS(B)m/z 491.1782(M+H)+。分析性RP-HPLC t R=3.42min。純度100%/100%。
實例467 (R)-3-(2-(((S)-1-(5-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮
(R)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(50mg，0.218mmol)及(S)-1-(5-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙胺(75mg，0.262mmol)溶解於3mL DMSO中。添加許尼希鹼(57μL，0.327mmol)。混合物加熱至110℃保持1.5小時。將反應混合物倒入30mL水中，且用EtOAc(2×30mL)萃取。有機物用20mL水及20mL鹽水洗 滌。合併之有機物經Na2SO4乾燥，過濾且在矽膠上濃縮。進行管柱層析(25-100% EtOAc/庚烷)得到82mg白色固體。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.91(d,J=1.4Hz,2H),8.25(d,J=5.7Hz,1H),7.79-7.61(m,2H),7.52(d,J=5.7Hz,1H),7.44(tt,J=7.7,0.8Hz,1H),6.12(s,1H),5.32(s,1H),5.08(br s,1H),4.80(dddd,J=26.5,9.1,3.4,1.5Hz,1H),4.58(dd,J=8.8,3.4Hz,1H),4.44(td,J=9.0,1.3Hz,1H),1.68(d,J=8.8Hz,3H),1.43-1.24(m,3H)。HRMS(A)m/z 495.1611(M+H)+。分析性RP-HPLC t R=3.68min。純度96%/100%。
實例468 (R)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(2-(((S)-1-(2'-(三氟甲基)-[3,4'-聯吡啶]-6-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
(S)-1-(2'-(三氟甲基)-[3,4'-聯吡啶]-6-基)乙胺(27mg，0.10mmol)、(R)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(23mg，0.10mmol)及DIPEA(52.4μl，0.30mmol)於DMSO(500μl)中之溶液在110℃下加熱1小時。接著溶液冷卻至室溫且進行RP-HPLC純化(乙腈：水)，得到32mg呈白色固體狀之主要產物。1H NMR(400MHz,MeOD)δ 8.98(s,1H),8.79(d,J=5.1Hz,1H),8.23(dd,J=8.2,2.4Hz,1H),8.17(br s,1H),8.17-8.12(m,1H),7.98(dd,J=5.1,1.7Hz,1H),7.59(d,J=8.3Hz,1H),7.40(d,J=5.8Hz,1H),5.11(br s,1H),4.69(br d,J=27.2Hz,1H),4.55-4.12(m,3H),1.60(d,J=7.1Hz,3H),1.03(br s,3H)；HRMS(B)m/z 477.1699(M+H)+。
實例469 (R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮
(R)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(50mg，0.218mmol)、(S)-1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙胺(60.5mg，0.262mmol)及DIPEA(57μl，0.327mmol)溶解於3mL DMSO中。加熱至110℃保持1小時。將反應混合物倒入30mL水中且用EtOAc(2×30mL)萃取。有機物用20mL水、20mL鹽水洗滌，且經Na2SO4乾燥，且過濾且在矽膠上濃縮。進行管柱層析(25%-100% EtOAc/庚烷)得到呈白色固體狀之所需產物(92mg)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.87(s,2H),8.25(d,J=5.7Hz,1H),7.51(d,J=5.7Hz,1H),7.42-7.31(m,2H),7.21-7.12(m,1H),6.15(s,1H),5.28(s,2H),4.80(dddd,J=26.6,9.0,3.5,1.6Hz,1H),4.57(dd,J=8.8,3.4Hz,1H),4.44(td,J=9.0,1.3Hz,1H),2.39(d,J=1.9Hz,3H),1.66(d,J=6.9Hz,3H),1.35-1.24(m,3H)。HRMS(A)m/z 441.1849(M+H)+。分析性RP-HPLC t R=3.10min。純度100%/100%。
實例470 (R)-3-(5-氟-2-(((S)-1-(4-甲基-2'-(三氟甲基)-[3,4'-聯吡啶]-6-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮
(S)-1-(4-甲基-2'-(三氟甲基)-[3,4'-聯吡啶]-6-基)乙胺(50mg，0.178mmol)、(R)-3-(2,5-二氟嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮(46.1mg，0.187mmol)及DIPEA(93μl，0.533mmol)於DMSO(889μl)中之溶液在110℃下加熱1小時。接著溶液冷卻至室溫，用10mL EtOAc稀釋，用水、鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，濃縮且經由RP-HPLC(乙腈：水)純化，得到37mg白色固體。1H NMR(400MHz,MeOD)δ 8.81(d,J=5.0Hz,1H),8.39(s,1H),8.26(s,1H),7.85(s,1H),7.69(dd,J=5.1,1.6Hz,1H),7.46(s,1H),5.00br(s,1H),4.66-4.37(m,,4H),2.32(s,3H),1.57(d,J=7.1Hz,3H),1.04(br s,3H)；HRMS(B)m/z 509.1701(M+H)+。
實例471 (R)-4-(氟甲基)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮
(R)-4-(氟甲基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(15mg，0.070mmol)、(S)-1-(1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙胺鹽酸鹽(20mg，0.084mmol，1.2當量)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.043mL，0.24mmol，3.5當量)於DMSO(1.0mL)中之溶液在85℃下加熱14小時。接著反應物冷卻至室溫。藉由逆相HPLC純化，得到(R)-4-(氟甲基)-3-(2-(((S)- 1-(1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮之三氟乙酸鹽(6mg，白色固體)，17%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 11.11(d,J=6.9Hz,1 H),8.40(s,1 H),7.97(d,J=7.0Hz,1 H),7.88(d,J=6.9Hz,1 H),7.62(s,1 H),7.47(dd,J=8.7,4.3Hz,2 H),7.28-7.34(m,2 H),5.75(t,J=7.1Hz,1 H),5.20-5.33(m,1 H),4.45-4.75(m,4 H),1.71(d,J=6.8Hz,3 H)；HRMS(A)m/z 401.1537(M+H)+；Rt-1.22min。
實例472 (R)-3-(2-(((S)-1-(1-(3-氯-4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-(氟甲基)唑啶-2-酮
(R)-3-(2,5-二氟嘧啶-4-基)-4-(氟甲基)唑啶-2-酮(15mg，0.064mmol)、(S)-1-(1-(3-氯-4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙胺鹽酸鹽(21mg，0.077mmol，1.2當量)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.039mL，0.23mmol，3.5當量)於DMSO(1.0mL)中之溶液在85℃下加熱14小時。接著反應物冷卻至室溫。藉由逆相HPLC純化，得到(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(3-氯-4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-(氟甲基)唑啶-2-酮之三氟乙酸鹽(11mg，白色固體)，30%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.56(s,1 H),8.18(d,J=1.9Hz,1 H),7.57-7.63(m,1 H),7.33-7.48(m,3 H),5.34(br.s.,1 H),4.85-5.00(m,1 H),4.41-4.75(m,4 H),1.73(d,J=7.0Hz,3 H)；HRMS(A)m/z 453.1058(M+H)+；Rt-1.51min。
實例473 (R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯-3-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-(氟甲基)唑啶-2-酮
(R)-4-(氟甲基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(15mg，0.070mmol)、(S)-1-(1-(4-氯-3-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙胺鹽酸鹽(22mg，0.084mmol，1.2當量)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.043mL，0.24mmol，3.5當量)於DMSO(1.0mL)中之溶液在85℃下加熱14小時。接著反應物冷卻至室溫。藉由逆相HPLC純化，得到(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯-3-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-(氟甲基)唑啶-2-酮之三氟乙酸鹽(14mg，白色固體)，35%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 11.04(d,J=7.0Hz,1 H),8.29(s,1 H),7.97(d,J=7.1Hz,1 H),7.86(d,J=6.9Hz,1 H),7.57-7.67(m,2 H),7.32(dd,J=8.7,2.5Hz,1 H),7.24(d,J=1.0Hz,1 H),5.64(t,J=7.1Hz,1 H),5.12-5.27(m,1 H),4.43-4.75(m,4 H),1.70(d,J=6.8Hz,3 H)；HRMS(A)m/z 435.1151(M+H)+；Rt-1.51min。
實例474 (R)-3-(2-(((S)-1-(1-(3,4-二氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-(氟甲基)唑啶-2-酮
(R)-4-(氟甲基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(15mg，0.070 mmol)、(S)-1-(1-(3,4-二氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙胺鹽酸鹽(22mg，0.084mmol，1.2當量)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.043mL，0.24mmol，3.5當量)於DMSO(1.0mL)中之溶液在85℃下加熱14小時。接著反應物冷卻至室溫。藉由逆相HPLC純化，得到(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(3,4-二氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-(氟甲基)唑啶-2-酮之三氟乙酸鹽(10mg，白色固體)，26%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 11.05(d,J=8.2Hz,1 H),8.30(s,1 H),7.98(d,J=7.2Hz,1 H),7.87(d,J=7.0Hz,1 H),7.59(s,1 H),7.31-7.46(m,2 H),7.24(br.s.,1 H),5.61-5.71(m,1 H),5.14-5.28(m,1 H),4.44-4.76(m,4 H),1.70(d,J=6.8Hz,3 H)；HRMS(A)m/z 419.1444(M+H)+；Rt-1.35min。
實例475 (R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-(二氟甲基)-3-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-(氟甲基)唑啶-2-酮
(R)-4-(氟甲基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(15mg，0.070mmol)、(S)-1-(1-(4-(二氟甲基)-3-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙胺鹽酸鹽(24mg，0.084mmol，1.2當量)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.043mL，0.24mmol，3.5當量)於DMSO(1.0mL)中之溶液在85℃下加熱14小時。接著反應物冷卻至室溫。藉由逆相HPLC純化，得到(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-(二氟甲基)-3-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-(氟甲基)唑啶-2-酮之三氟乙酸鹽(15mg，白色固體)，37%產率。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 10.99(d,J=7.2Hz,1 H),8.24(s,1 H),7.97(d,J=6.8Hz,1 H),7.78-7.87(m,2 H),7.61(s,1 H),7.38(d,J=8.8Hz,1 H),7.31(d,J=1.0Hz,1 H),6.79-7.09(m,1 H),5.57(t,J=7.0Hz,1 H),5.09-5.23(m,1 H),4.44-4.77(m,4 H),1.70(d,J=6.9Hz,3H)；HRMS(A)m/z 451.1512(M+H)+；Rt-1.48min。
實例476 (R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯-2-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮
步驟1：製備(S)-1-(1-(4-氯-2-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙胺鹽酸鹽
向含1H-咪唑-4-甲醛(2.56g，26.6mmol)、4-氯-2-氟-1-碘苯(0.739g，2.88mmol)及Cs2CO3(1.564g，4.80mmol)之DMF(50mL)中添加碘化銅(I)(0.023g，0.120mmol)及(1R,2R)-N1,N2-二甲基環己烷-1,2-二胺(0.068g，0.480mmol)。反應物加熱至110℃保持18小時。接著反應混合物冷卻至室溫且過濾，且用EtOAc(100mL)洗滌。有機物用水(2×30mL)及鹽水(30mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)且濃縮。藉由矽膠層析純化殘餘物得到1-(4-氯-2-氟苯基)-1H-咪唑-4-甲醛(451mg)，向其中添加(S)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(0.29g，2.4mmol)、CuSO4(0.638g，4mmol)及DCE(10mL)。反應物加熱至65℃保持18小時。反應物冷卻至室溫，過濾且濃縮，得到(S,E)-N-((1-(4-氯-2-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺，向其中添加DCM(20mL)。反應混合物冷卻至-70℃且向溶液中逐滴添加溴化甲基鎂(1.33ml，4mmol)。攪拌反應物兩小時且接著移除冷浴，且反應物溫至室 溫且攪拌30分鐘。反應物冷卻至0℃且小心地添加HCl(1M)以淬滅直至水溶液pH值=8。分離各相且水層用DCM(2×30mL)萃取。乾燥(Na2SO4)且濃縮合併之有機物，得到(S)-N-((S)-1-(1-(4-氯-2-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(130mg)，其接著溶解於MeOH(5mL)中且添加HCl(0.5mL，4M)。攪拌反應物一小時且濃縮得到產物(100mg)。LCMS m/z 240.1(M+H)+；Rt-0.50min。
步驟2：製備(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯-2-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮
(S)-1-(1-(4-氯-2-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙胺鹽酸鹽(20mg，0.072mmol)、(S)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(15mg，0.065mmol)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.040mL，0.23mmol)於DMSO(0.5mL)中之溶液在90℃下加熱8小時。接著反應物冷卻至室溫。藉由逆相HPLC純化，得到(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯-2-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮之三氟乙酸鹽(12mg)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.68(br.s.,1H),8.22(d,J=6.7Hz,1H),7.76(d,J=4.7Hz,1H),7.70-7.55(m,3H),7.45(d,J=8.6Hz,1H),5.36-5.24(m,1H),4.9-4.75(m,2H),4.62(dd,J=2.7,9.4Hz,1H),4.56-4.47(m,1H),1.71(d,J=6.7Hz,3H),1.35-1.17(m,3H)；HRMS(A)m/z 449.1306(M+H)+；Rt-1.57min。
實例477 (R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯-2-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮
(S)-1-(1-(4-氯-2-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙胺鹽酸鹽(20mg，0.072mmol)、(R)-3-(2,5-二氟嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮(15mg，0.061mmol)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.040mL，0.23mmol)於DMSO(0.5mL)中之溶液在90℃下加熱8小時。接著反應物冷卻至室溫。藉由逆相HPLC純化，得到(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯-2-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮之三氟乙酸鹽(10mg)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.25(d,J=3.1Hz,1H),7.96(s,1H),7.58-7.45(m,2H),7.36(d,J=8.6Hz,1H),7.26(s,1H),5.06(d,J=6.7Hz,1H),4.9-4.75(m,2H),4.67-4.55(m,2H),4.53-4.43(m,1H),1.57(d,J=7.0Hz,3H),1.26-1.06(m,3H)；HRMS(A)m/z 467.1217(M+H)+；Rt-1.66min。
實例478 (R)-3-(2-(((S)-1-(1-(2,4-二氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮
步驟1：製備(S)-1-(1-(2,4-二氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙胺鹽酸鹽
向含1H-咪唑-4-甲醛(3.01g，31.3mmol)、2,4-二氟-1-碘苯(1.008 g，4.20mmol)、Cs2CO3(2.281g，7.00mmol)之DMF(50mL)中添加碘化銅(I)(0.033g，0.175mmol)及(1R,2R)-N1,N2-二甲基環己烷-1,2-二胺(0.100g，0.700mmol)。反應物加熱至110℃保持18小時。接著反應混合物冷卻至室溫且過濾，且用EtOAc(100mL)洗滌。有機物用水(2×30mL)及鹽水(30mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)且濃縮。藉由矽膠層析純化殘餘物得到1-(2,4-二氟苯基)-1H-咪唑-4-甲醛(651mg)，向其中添加(S)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(0.424g，3.5mmol)、CuSO4(0.798g，5mmol)及DCE(10mL)。反應物加熱至65℃保持18小時。反應物冷卻至室溫，過濾且濃縮，得到(S,E)-N-((1-(2,4-二氟苯基)-1H-咪唑-4-基)亞甲基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺，向其中添加DCM(20mL)。反應混合物冷卻至-70℃且向溶液中逐滴添加溴化甲基鎂(1.667ml，5mmol)。攪拌反應物兩小時且接著移除冷浴，且反應物溫至室溫且攪拌30分鐘。反應物冷卻至0℃且小心地添加HCl(1M)以淬滅直至水溶液pH=8。分離各相且水層用DCM(2×30mL)萃取。乾燥(Na2SO4)且濃縮合併之有機物，得到(S)-N-((S)-1-(1-(2,4-二氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(230mg)，其接著溶解於MeOH(5mL)中且添加HCl(0.5mL，4M)。攪拌反應物一小時且濃縮得到產物(212mg)。LCMS m/z 224.1(M+H)+；Rt-0.39min。
步驟2：製備(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(2,4-二氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮
(S)-1-(1-(2,4-二氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙胺鹽酸鹽(18mg，0.069mmol)、(S)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(2-氟嘧啶-4-基)唑啶-2-酮(13mg，0.057mmol)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.040mL，0.23mmol)於DMSO(0.5mL)中之溶液在90℃下加熱8小時。接著反應物冷卻至室溫。藉由逆相HPLC純化，得到(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(2,4-二氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮之三氟 乙酸鹽(10mg)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.22(d,J=6.7Hz,1H),7.88(q,J=8.7Hz,6H),7.71(d,J=5.5Hz,1H),5.27(d,J=7.0Hz,1H),4.86(s,2H),4.68-4.44(m,2H),1.71(d,J=7.0Hz,3H),1.34-1.15(m,3H)；HRMS(A)m/z 433.1603(M+H)+；Rt-1.40min。
實例479 (R)-3-(2-(((S)-1-(1-(2,4-二氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮
(S)-1-(1-(2,4-二氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙胺鹽酸鹽(18mg，0.069mmol)、(R)-3-(2,5-二氟嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮(15mg，0.061mmol)及N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(0.040mL，0.23mmol)於DMSO(0.5mL)中之溶液在90℃下加熱8小時。接著反應物冷卻至室溫。藉由逆相HPLC純化，得到(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(2,4-二氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮之三氟乙酸鹽(18mg)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 9.18(s,1H),8.33(d,J=3.1Hz,1H),7.82(s,1H),7.74(dt,J=5.7,8.7Hz,1H),7.39(ddd,J=2.5,8.5,10.9Hz,1H),7.24(t,J=8.4Hz,1H),5.21(d,J=6.7Hz,1H),5.06-4.77(m,2H),4.63(t,J=9.0Hz,1H),4.50(dd,J=5.9,8.6Hz,1H),1.69(d,J=6.7Hz,3H),1.35-1.22(m,3H)；HRMS(A)m/z 451.1514(M+H)+；Rt-1.47min。
實例480 (R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)唑-2-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-(氟甲基)唑啶-2-酮
(R)-3-(2,5-二氟嘧啶-4-基)-4-(氟甲基)唑啶-2-酮(105mg，0.449mmol)、(S)-1-(5-(4-氯苯基)唑-2-基)乙胺(100mg，0.449mmol)及DIPEA(157μl，0.898mmol)溶解於DMSO(1mL)中且反應混合物在120℃下加熱2小時。冷卻反應混合物，用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌且在真空中濃縮。進行管柱層析(5%-50% EtOAc/DCM)得到呈白色泡沫狀物之所需產物(169mg)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.26(d,J=2.8Hz,1H),7.59-7.50(m,2H),7.45-7.36(m,2H),7.25(s,1H),5.66(d,J=7.6Hz,1H),5.21(br s,1H),4.86(ddddd,J=20.0,8.6,7.0,4.3,2.8Hz,1H),4.66-4.44(m,3H),4.41(br s,1H),1.71(d,J=7.0Hz,3H)。在Acquity LCTp Tof-Rs(FWHM)>12000上記錄HRMS-酸式LC-UV/ESI-MS資料，精確度<5ppm。管柱：Acquity BEHC18 1.7μm 2.1×50mm-50℃。溶離劑A：水+0.1%甲酸。溶離劑B：乙腈+0.1%甲酸。梯度：8.05min內0.2%至98% B-流動速率0.9mL/min。m/z 436.0996(M+H)+。分析性RP-HPLC t R=3.46min。純度100%/100%。
表39中列舉之化合物係使用與關於實例1-465所描述類似及如一般合成程序中所概述之方法製備。
表39. 表39中之化合物係根據與關於實例1-465所描述類似或如以上提供之流程中所概述之化學方法製備。
生物學分析法及資料 突變IDH1生化分析法：2-HG之LC-MS偵測。
使用2-HG(NADPH依賴性α-KG還原反應之產物)之定量液相層析/質譜分析(LC-MS)偵測來監測突變IDH1 R132H催化活性。
更特定言之，使用30μL之最終反應體積及以下分析法緩衝條件在384孔Greiner平底板(Costar，目錄號781201)中在室溫下進行生化反應：50mM HEPES pH 7.4、10mM MgCl2、50mM KCl、1mM DTT、0.02% BSA、5μM NADPH及100μM α-KG。
最終反應混合物含有3.3% DMSO且抑制劑濃度範圍為0.02-50μM。IDH1酶係以0.25nM之最終濃度使用。在培育45分鐘後，藉由添加10μL含有800nM經5-碳標記之13C-2-HG)之16%甲酸將反應混合物淬滅。接著藉由添加2.5倍體積乙腈，接著離心(3000 x g，20分鐘)使蛋白質沈澱。藉由LC-MS量測所得上清液中2-HG之濃度(參見下文)。
LC-MS方法。反應混合物上清液在BiobasicAX管柱(2.1mm×20mm，5μm粒子，Thermo Scientific Inc.)上經歷層析分離。層析移動相為A)25mM碳酸氫銨及B)乙腈(0.1%氫氧化銨)。菸鹼醯胺使用經0.9分鐘85%-5% B梯度以1ml/min溶離(Agilent 1200SL LC系統，Thermofisher LX-4自動取樣器)且在API4000 QTrap質譜儀(ABSciex,Framingham,MA)上以陽性電噴電離(ESI+)模式藉由多反應監測(MRM)來分析。2-HG及13C-2-HG之質量轉變分別為147→129及 152→134。在不同抵製劑濃度下量測相對反應(2-HG/13C-2-HG)且用於計算抑制IC50值(經校正之IC50回歸曲線)。
R132蛋白質表現及純化。
使用限制位點XmaI/XhoI將IDH1 R132H選殖至pET47b載體中，其產生可由Prescission蛋白酶裂解之框架內、N端His6位點。此質體轉型為RosettaTM 2(DE3)(Novagen)細胞。在搖瓶中，8L細胞在Terrific Broth(Teknova)(加卡那黴素(kanamycin)(50μg/mL)及氯黴素(chloramphenicol)(34μg/mL))中在37℃下生長至0.8之OD600且藉由添加IPTG達到0.20mM之濃度來誘導蛋白質表現。接著細胞在18℃下生長18小時。
His 6 -IDH1(R132H)Uncut蛋白質
(終止)(SEQ ID NO：1)
IDH1(R132H)Prescission Cut蛋白質(N-端gpg為選殖人工製品)
(終止)(SEQ ID NO：2)
純化
細胞在溶解緩衝液中與蛋白酶抑制劑(完全不含EDTA之蛋白酶抑制劑錠劑(Roche)，每50mL緩衝劑1錠劑)、DNAse及200μM PMSF一起均質化且在微流化床中溶解。溶解後，添加Triton X-100達到0.1%且在4℃下攪拌30分鐘。
將經清洗之溶解產物裝載於2×5mL HisTrap FF粗管柱(GE)上，用溶解緩衝液充分洗滌直至A280穩定且用Ni溶離緩衝液溶離。將峰溶離部分濃縮至30mL，添加EDTA達到1mM且添加GST-Prescission蛋白酶達到3U/100μg蛋白質。樣品針對2L透析緩衝劑I(MWCO 50kDa)在4℃下透析6小時，接著針對2L透析緩衝劑II再透析至少6小時。GST-Prescission裂解之樣品與麩胱甘肽瓊脂糖珠粒一起搖動，旋轉減慢且接著上清液經5mL HisTrap HP管柱裝載且收集通過之流體。
接著通過的流體用冰冷的20mM Tris pH 7.4及1mM TCEP稀釋直至導電性降至小於5mS/cm(約三倍稀釋)。接著此樣品流經HiTrap Q管柱且通過之流體濃縮至10mL且使用SEC緩衝液作為移動相裝載於經平衡之26/60 Superdex 200管柱上。收集峰部分，濃縮且等分試樣。
溶解緩衝液：50mM Tris pH=7.4、500mM NaCl、20mM咪唑及 1mM TCEP
Ni溶離緩衝液：50mM Tris pH=7.4、150mM NaCl、200mM咪唑及1mM TCEP
透析緩衝液I：20mM Tris pH=7.4、150mM NaCl、1mM TCEP及50mM咪唑
透析緩衝液II：20mM Tris pH=7.4、150mM NaCl及1mM TCEP
SEC緩衝液：20mM Tris pH=7.4、150mM NaCl及1mM TCEP
突變IDH1生化分析法(mIDH R132H)之結果提供於表40中。一些實例在分析法中進行多次且因此IC50值可表示為活性範圍。
螢光生化分析法
IDH1(R132H)突變體催化NADP+(NADPH)之還原形式及α-酮戊二酸(α-KG)形成菸醯胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP+)及R(-)-2-羥基戊二酸(2HG)。可藉由在NADPH氧化為NADP+後以動力學方式監測反應，該氧化作用係使用螢光在355nm之激發及530nm之發射下量測。使用Perkin-Elmer Envision，2101型監測反應。更特定言之，生化反應係使用20μL之最終反應體積及以下分析緩衝條件在384孔Greiner平底板(目錄號781076)中在室溫下進行：50mM HEPES pH 7.5、10mM MgCl2、1mM DTT、0.02% BSA、0.02% Tween-20、10μM NADPH及100μM α-KG。最終反應混合物含有2.5% DMSO且測試化合物之濃度範圍為0.0000008-25μM。IDH1(R132H)酶係以10nM之最終濃度使用。使用4參數對數模型進行劑量反應IC50測定值之曲線擬合：y=最小值+((最大值-最小值)/1+(x/IC50)斜率)。
螢光生化分析法(mIDH R132H)之結果提供於表40中。一些實例在分析法中進行多次且因此IC50值可表示為活性範圍。
表40. LC-MS及螢光生化分析法之結果
IDH細胞分析法
IDH細胞分析法由兩個並列比較器分析法組成：1)使用LC-MS之2HG癌代謝物偵測分析法(關於LC-MS偵測之詳細說明，參見突變IDH1生化分析法)及2)用於監測細胞之脫靶殺死及校正2HG含量變化之細胞增殖分析法。
用HCT-116細胞株進行IDH1細胞篩檢(表現內源含量之IDH1mut R132H，可自Horizon Discoveries X-Man等基因人類細胞株獲得，目錄號HD104-013)。細胞在含有10%胎牛血清(Gibco目錄號10099)及1X 非必需胺基酸(NEAA LONZA目錄號13-114E)之DMEM(LONZA目錄號12-540F)中生長。週期性地進行面板分析法以測試在具有不同內源突變HT1080(IDH1mut R132C，EMEM+10% FBS)、SNU-1079(IDH1mut R132C，RPMI+10%FBS+1%丙酮酸鈉)及SW1353(IDH2mut R172S，RPMI+10%FBS+1%丙酮酸鈉)之細胞株中的化合物活性。
分析法方法如下：
第1天：細胞一式三份地接種於384孔板(Corning目錄號3707)中以用於細胞增殖及2HG分析法，且在37℃、95% Rh、5% CO2下培育隔夜。
第2天：化合物以1：3連續稀釋(在DMSO中自10mM溶液進行10點稀釋)且經由聲學施配器傳遞至細胞分析板中，最終濃度在30μM至1.5nM範圍內。板在處理後返回至培育箱中且培育48小時。
增殖分析法第4天：將CTG(cell titer-glo，Promega零件號G755B)添加至分析板中且用板讀取器讀取螢光信號。
2HG分析法第4天：萃取樣品製備由以下步驟組成：自分析板吸出所有培養基，添加70μl含90%甲醇之水，乾冰培育15分鐘，在2000rpm下離心30分鐘以確保所有顆粒沈降，及將30μl上清液轉移至準備進行LC-MS之板中。接著進行LC-MS分析。
在IDH細胞分析法中測試本發明之某些化合物。
肝微粒體中代謝穩定性之測定-方法I
在96孔玻璃板中伴隨在37℃下搖動培育進行活體外代謝穩定性分析法。10mM測試化合物之DMSO儲備溶液以1：1000連續稀釋以使最終反應濃度為50mM KPi中1μM。在即將開始實驗之前，各別動物或人類肝微粒體(雄性史泊格-多利(Sprague-dawley)大鼠，雄性CD-1小鼠或收集之人類肝微粒體)在50mM KPi中稀釋至每毫升1.25mg肝 微粒體蛋白質。將30μL 10μM含有測試化合物之溶液添加至120μL微粒體蛋白質中達到150μL酶-化合物混合物。藉由向酶-化合物混合物中添加150μL輔因子溶液(含2mM NADPH、4mM MgCl之50mM KPi)來起始反應，且最終反應物濃度列舉於下表中。
最終反應物濃度
在反應中之第0、5、10及30分鐘時間點，移除反應等分試樣(50μL)且藉由添加含有質譜分析內標(1μM格列瑞得(glyburide))之乙腈(150μL)來終止反應。將樣品離心且藉由LC-MS/MS分析上清液以進行剩餘化合物之量化。使用相對於0分鐘之剩餘化合物百分比估算活體外消除率常數(kmic)，其用於計算活體外代謝消除率。
用由Thermo TSQ Quantum Ultra質譜儀、H-ESI離子源、CTC-HTS Pal自動取樣器及Agilent LC泵組成之高效液相層析-串聯質譜分析(LC/MS)系統進行樣品分析。使用下文概述之快速移動相梯度在XTerra C18管柱，2.1×20mm，3.5μm上分離樣品。
移動相A由含有0.01%甲酸之純水組成。移動相B由含有0.01%甲酸之乙腈組成。流動速率為1mL/min。注射體積為10μL。使用Thermo QuikQuan軟體偵測化合物，其收集與測試化合物之分子量有關的所有片段之強度資料。在收集原始資料後，軟體鑑別及整合高強 度峰。
各微粒體消除率kmic係基於單次測試之4點消除曲線。反應板之LC-MS/MS原始資料作為測試化合物之經整合之分析物峰面積返回且反應物之淬滅溶液中使用內標以便使用分析物：內標峰面積比(PAR)進行所有資料比較。標繪反應時間點(例如第0、5、20或30分鐘)與相對於0分鐘之剩餘測試化合物百分比之自然對數的關係曲線(基於相對PAR)。使用此清除率曲線之斜率kmic計算活體外半衰期t1/2。為集中於線性反應動力學，在任何可能的情況下，通常自清除率曲線斜率之定義省略表示<10%剩餘測試化合物之資料點。
肝微粒體中代謝穩定性之測定-方法II
在96深孔板中伴隨在37℃下培育進行活體外代謝穩定性分析法。10mM測試化合物之DMSO儲備溶液在乙腈中以1：20稀釋，接著在100mM磷酸鉀緩衝液(KPi)中再以1：10稀釋，使最終反應物濃度為1μM。在即將開始實驗之前，各別動物或人類肝微粒體(雄性史泊格-多利大鼠，雄性CD-1小鼠或收集之人類肝微粒體)在100mM KPi中稀釋至1.25mg/mL肝微粒體蛋白質。將290μL輔因子溶液(含1.7mM NADPH、1.7mM UDPGA、3.4mM MgCl之100mM KPi)添加至200μL微粒體蛋白質中使最終體積達到490μL。藉由將10μL 50μM測試溶液添加至490μL微粒體蛋白質中達到最終體積500μL酶-化合物混合物來起始反應。
最終反應物濃度列舉於下表中：
最終反應物濃度
在反應中之第0、5、15及30分鐘時間點，移除反應等分試樣(75μL)且藉由添加含有質譜分析內標(0.5μM格列瑞得)之50：50乙腈/甲醇溶液(75μL)來終止反應。樣品以4000RPM離心10分鐘。上清液(15μL等分試樣)轉移至新的板中，其中各孔含有90μL去離子水。在多反應監測模式(MRM)下以陽性模式藉由UPLC/MS/MS分析上清液溶液以用於剩餘母體化合物之定量。使用相對於0分鐘之剩餘化合物百分比估算活體外消除率常數(k)，其用於計算活體外代謝消除率。
樣品分析係在由AB Sciex Qtrap 5500質譜儀、AB Sciex Turbo V離子源、Waters Acquity樣品處理器、Waters Acquity管柱管理器、Waters Acquity樣品管理器及Waters Acquity Binary溶劑管理器組成之超效液相層析-串聯質譜分析(UPLC/MS/MS)系統上進行。使用逆相C-18管柱(50×2.1mm，1.7μm，Acquity UPLC BEH C-18)在以下UPLC移動相及溶離梯度下實現分析物及內標之層析分離：UPLC移動相A：含0.25%甲酸之5%甲醇；移動相B：含0.25%甲酸之95%水。
LC梯度及流動速率列於如下：
注射體積為5μL。使用Analyst 1.5.1軟體偵測化合物，其收集與測試化合物之分子量有關的所有片段之強度資料。在收集原始資料後，軟體鑑別及整合高強度峰。
各微粒體消除率k係基於一式兩份測試之4點消除曲線。反應板之LC-MS/MS原始資料作為測試化合物之經整合之分析物峰面積返回且反應物之淬滅溶液中使用內標以便使用分析物：內標峰面積比(PAR)進行所有資料比較。標繪反應時間點(例如第0、5、15及30分鐘)與相對於0分鐘之剩餘測試化合物百分比之自然對數的關係曲線(基於相對PAR)。使用此清除率曲線之斜率k計算活體外半衰期。
固有清除率值CLint(表示為微升/分鐘/毫克微粒體蛋白質)計算展示如下：
其中V=培育體積(mL)且M=培育中之微粒體蛋白質含量(mg)
枚舉實施例
實施例1. 一種式(I)化合物，
其中：R1為氫、甲基或乙基；R2a為氫、甲基或C1-3鹵烷基；R2b為OH、鹵基、C1-6烷氧基、C1-3鹵烷基、NH2、NH(CH3)或N(CH3)2；R3及R4各自獨立地為氫、甲基或乙基或R3及R4結合在一起形成環 丙基、環丁基或氧雜環丁烷基；R5及R6各自獨立地為氫、氘、鹵基、-C(O)OCH3、C1-3烷基或C1-3鹵烷基；R7為 其中：環A為具有一至三個氮原子之6員雜芳基環；環B為具有一至四個各自獨立地選自由N、O及S組成之群之雜原子的5員雜芳基環；X為N或CH；各R8獨立地為氫、鹵基、C1-3烷基、C1-3鹵烷基、C1-3烷氧基或C1-3鹵烷氧基；n為1或2；R9為氫、鹵基、C1-3鹵烷基、視情況經取代之C1-6烷基、視情況經取代之C3-6環烷基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之5或6員 雜環、視情況經取代之雜芳基、-OR9a、-SO2R9a、-C(O)NHR9a、CH2R9b或CHCH3R9b，限制條件為當X為N時，R9為氫、C1-3鹵烷基、視情況經取代之C1-6烷基、視情況經取代之C3-6環烷基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜芳基、-SO2R9a或-C(O)NHR9a，其中：該C1-6烷基視情況經一至三個各自獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：OH、苯基及苯氧基，及該C3-6環烷基、5或6員雜環、芳基及雜芳基各自視情況經一至三個各自獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、-NRR、C1-6烷基、C1-6鹵烷基、C1-3烷氧基及C1-3鹵烷氧基；R9a為視情況經取代之C1-6烷基、C1-6鹵烷基、視情況經取代之C3-6環烷基、視情況經取代之苯基或視情況經取代之雜環，其中：該C1-6烷基視情況經一個C3-6環烷基取代，該C3-6環烷基及雜環各自視情況經一至三個各自獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：羥基、CH2OH、-NRR、氰基、C1-3烷基、C1-3鹵烷基及C1-3烷氧基；及該苯基視情況經一至三個各自獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、-NRR、C1-6烷基、C1-6鹵烷基、C1-3烷氧基及C1-3鹵烷氧基；R9b為視情況經取代之C3-6環烷基、視情況經取代之苯基或視情況經取代之雜環，該C3-6環烷基及雜環各自視情況經一至四個各自獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：羥基、CH2OH、-NRR、-NRC(O)CH3、4至6員雜環、氰基、鹵基、C1-3烷基、C1-3鹵烷基及C1-3烷氧基，及該苯基視情況經一至三個各自獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、C1-6烷基、C1-6鹵烷基、C1-3烷氧基及 C1-3鹵烷氧基；及各R獨立地選自由以下組成之群：H、C1-3烷基及C3-6環烷基；或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例2. 如實施例1之化合物，其中R3及R4均為氫；或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例3. 如實施例1或2之化合物，其中R1為氫；或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例4. 如實施例1至3中任一項之化合物，其具有式(II)： 或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例5. 如實施例1至4中任一項之化合物，其中：R5為氫或鹵基；及R6為氫、鹵基、甲基、CH2F、CHF2或CF3；或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例6. 如實施例5之化合物，其中R5為氫；或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例7. 如實施例5之化合物，其中R6為氫；或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例8. 如實施例5之化合物，其中R5及R6均為氫；或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例9. 如實施例1至8中任一項之化合物，其中R2a為甲基； 或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例10. 如實施例1至9中任一項之化合物，其中R2b為OH、氟、甲氧基、第三丁氧基、CHF2、CF3、NH2或NH(CH3)；或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例11. 如實施例1至10中任一項之化合物，其具有下式：
其中R2b為OH、NH2或氟；或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例12. 如實施例1至11中任一項之化合物，其具有式(IV)：
其中R2b為OH或NH2；或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例13. 如實施例12之化合物，其中R2b為OH；或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例14. 如實施例12之化合物，其中R2b為NH2；或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例15. 如實施例1至11中任一項之化合物，其具有式(V)： 或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例16. 如實施例15之化合物，其中R2a為甲基；或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例17. 如實施例1至16中任一項之化合物，其中R7為： 或；或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例18. 如實施例1至17中任一項之化合物，其中R9為氫、鹵基、C1-3鹵烷基、視情況經取代之C1-6烷基或視情況經取代之C3-6環烷基；或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例19. 如實施例1至17中任一項之化合物，其中R9為視情況經一個或兩個各自獨立地選自由以下組成之群之取代基取代的苯基：氟、氯、溴、氰基、甲氧基、CH2OH、C1-4烷基、C1-4鹵烷基及C1-3鹵烷氧基；或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例20. 如實施例1至17中任一項之化合物，其中R9為吡唑基、吡啶基、吲哚基或異喹啉基，其各自視情況經取代；或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例21. 如實施例1至17中任一項之化合物，其中R9為CH2R9b，其中R9b為哌啶基、哌嗪基或嗎啉基，其各自視情況經一至三個各自獨立地選自由以下組成之群之取代基取代：羥基、鹵基、CH2OH、-NRR、氰基、C1-3烷基、C1-3鹵烷基及C1-3烷氧基。
實施例22. 如實施例1之化合物，其具有式(IV)
其中： R2b為OH；R5為氫或氟；R6為氫、氯、甲基或CH2F；R7為 R8為氫、甲基或氟；n為1或2；及R9為甲基環丙基、異丁氧基、視情況經一個或兩個各自獨立地選自由以下組成之群之取代基取代的苯基：氟、氯、溴、C1-4烷基、CF2H及CF3，或視情況經一個或兩個各自獨立地選自由以下組成之群之取代基取代的吡啶基：甲基、CF3及C(CH3)2CF3；或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例23. 如實施例22之化合物，其中：R5為氫且R6為氯、甲基或CH2F 或R6為氫且R5為氟；或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例24. 如實施例22之化合物，其中R5及R6均為氫；或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例25. 如實施例1之化合物，其具有式(VI)
其中：R2b為氟；R5為氫或氟；R6為氫；R7為或R8為氫或甲基；n為1；及R9為視情況經一個氯取代之苯基；或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例26. 如實施例1之化合物，其係選自由以下組成之群：(R)-4-((R)-1-羥基(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-(((S)-1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)吡嗪-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮乙基)-3-(2-(((S)-1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)吡嗪-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮； (R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)吡啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-(((S)-1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)吡啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-(((S)-1-(6-(三氟甲基)-[2,3'-聯吡啶]-6'-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-(((S)-1-(4-甲基-2'-(三氟甲基)-[3,4'-聯吡啶]-6-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(3,4-二氯苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-(((S)-1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯-3-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(3-氯-5-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(3,4-二氯苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-(((S)-1-(4-甲基-5-(2-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)吡啶-4-基)噻唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(4R)-3-(5-氟-2-(((S)-1-(4-甲基-5-(2-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)吡啶-4-基)噻唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2- 酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；及(R)-3-(2-(((S)-1-(2,5-二氟-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例27. 如實施例1之化合物，其係選自由以下組成之群：(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)異唑-3-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-{2-[((R)1-(3-(3-氟-4-甲基苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基]胺基}嘧啶-4-基}-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-{(S)-1-[3-(3,4-二氯-苯基)-異唑-5-基]-乙基胺基}-嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥基-乙基)-唑啶-2-酮；(R)-3-(2-{(S)-1-[3-(3,4-二氯-苯基)-異唑-5-基]-乙基胺基}-5-氟-嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥基-乙基)-唑啶-2-酮；(R)-3-(5-氟-2-(((S)-1-(3-(4-異丙基苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-(((S)-1-(3-(4-(三氟甲基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)-4-甲基唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)-4-甲基唑-2-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(4-(4-溴苯基)噻唑-2-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4- 基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)唑-2-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)-6-(氟甲基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)異唑-3-基)乙基)胺基)-6-甲基嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)-6-甲基嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)-6-甲基嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-(二氟甲基)苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(6-氯-2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；及(R)-3-(2-(((S)-1-(3-(3-(第三丁基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基) 胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例28. 如實施例1之化合物，其係選自由以下組成之群：(R)-3-(2-((S)-1-(2-氟-4-(1-甲基環丙基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(5-氟-2-(((S)-1-(2-氟-4-異丁氧基苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；及(R)-3-(2-(((S)-1-(2-氟-4-異丁氧基苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例29. 如實施例1之化合物，其係選自由以下組成之群：(R)-3-(6-氯-2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-甲氧基乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-甲氧基乙基)唑啶-2-酮；及(S)-4-((R)-1-胺基乙基)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例30. 如實施例1之化合物，其係選自由以下組成之群：(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-氟乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)異唑-3-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)-5-氟嘧 啶-4-基)-4-((R)-1-氟乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-2-甲基-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮；(R)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-(氟甲基)唑啶-2-酮；及(S)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)唑啶-2-酮；或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例31. 如實施例1之化合物，其為(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-(((S)-1-(3-(4-(三氟甲基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例32. 如實施例1之化合物，其為(S)-4-((R)-1-胺基乙基)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例33. 如實施例1之化合物，其為(R)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮或醫藥學上可接受之鹽。
實施例34. 如實施例1之化合物，其為(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-(氟甲基)唑啶-2-酮或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例35. 如實施例1之化合物，其為(R)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(2-(((S)-1-(4-甲基-2'-(三氟甲基)-[3,4'-聯吡啶]-6-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例36. 如實施例1之化合物，其為(R)-3-(5-氟-2-(((S)-1-(4-甲基-2'-(三氟甲基)-[3,4'-聯吡啶]-6-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟 乙基)唑啶-2-酮或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例37. 如實施例1之化合物，其為(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(3-氯-4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-(氟甲基)唑啶-2-酮或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例38. 一種醫藥組合物，其包含如實施例1至37中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接受之載劑或賦形劑。
實施例39. 一種治療與具有新生形活性之突變IDH蛋白質有關之疾病或病症的方法，其包含投與需要該治療之個體治療有效量之如實施例1至37中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例40. 一種治療與具有新生形活性之突變IDH蛋白質有關之疾病或病症的方法，其包含投與需要該治療之個體治療有效量之如實施例1至37中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及另一種治療劑。
實施例41. 一種治療腦癌、白血病、皮膚癌、前列腺癌、甲狀腺癌、結腸癌、肺癌或肉瘤之方法，其包含投與需要該治療之個體如先前實施例1至37中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例42. 一種用於治療以下疾病之方法：神經膠質瘤、多形性膠質母細胞瘤、副神經節瘤、幕上原始神經外胚層腫瘤、急性骨髓白血病、脊髓發育不良症候群、慢性骨髓性白血病、黑素瘤、前列腺、甲狀腺、結腸、肺、中樞軟骨肉瘤、中樞或骨膜軟骨瘤、纖維肉瘤或膽管癌，其包含投與需要該治療之個體如先前實施例1至37中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例43. 如先前實施例1至37中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其係用於治療腦癌、白血病、皮膚癌、前列腺癌、甲狀腺癌、結腸癌、肺癌或肉瘤。
實施例44. 如先前實施例1至37中任一項之化合物或其醫藥學上 可接受之鹽，其係用於治療神經膠質瘤、多形性膠質母細胞瘤、副神經節瘤、幕上原始神經外胚層腫瘤、急性骨髓白血病、脊髓發育不良症候群、慢性骨髓性白血病、黑素瘤、前列腺、甲狀腺、結腸、肺、中樞軟骨肉瘤、中樞或骨膜軟骨瘤、纖維肉瘤或膽管癌。
實施例45. 如實施例1之化合物，其為(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)唑-2-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-(氟甲基)唑啶-2-酮或其醫藥學上可接受之鹽。

Claims (41)

  1. 一種式(I)化合物， 其中：R1為氫、甲基或乙基；R2a為氫、甲基或C1-3鹵烷基；R2b為OH、鹵基、C1-6烷氧基、C1-3鹵烷基、NH2、NH(CH3)或N(CH3)2；R3及R4各自獨立地為氫、甲基或乙基或R3及R4結合在一起形成環丙基、環丁基或氧雜環丁烷基；R5及R6各自獨立地為氫、氘、鹵基、-C(O)OCH3、C1-3烷基或C1-3鹵烷基；R7為 其中：環A為具有一至三個氮原子之6員雜芳基環；環B為具有一至四個各自獨立地選自由N、O及S組成之群之雜原子的5員雜芳基環；X為N或CH；各R8獨立地為氫、鹵基、C1-3烷基、C1-3鹵烷基、C1-3烷氧基或C1-3鹵烷氧基；n為1或2；R9為氫、鹵基、C1-3鹵烷基、視情況經取代之C1-6烷基、視情況經取代之C3-6環烷基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之5或6員雜環、視情況經取代之雜芳基、-OR9a、-SO2R9a、-C(O)NHR9a、CH2R9b或CHCH3R9b，限制條件為當X為N時，R9為氫、C1-3鹵烷基、視情況經取代之C1-6烷基、視情況經取代之C3-6環烷基、視情況經取代之芳基、視情況經取代之雜芳基、-SO2R9a或-C(O)NHR9a，其中：該C1-6烷基視情況經一至三個各自獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：OH、苯基及苯氧基，及該C3-6環烷基、5或6員雜環、芳基及雜芳基各自視情況經一至三個各自獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、-NRR、C1-6烷基、C1-6鹵烷基、C1-3烷氧基及C1-3鹵烷氧基；R9a為視情況經取代之C1-6烷基、C1-6鹵烷基、視情況經取代 之C3-6環烷基、視情況經取代之苯基或視情況經取代之雜環，其中：該C1-6烷基視情況經一個C3-6環烷基取代，該C3-6環烷基及雜環各自視情況經一至三個各自獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：羥基、CH2OH、-NRR、氰基、C1-3烷基、C1-3鹵烷基及C1-3烷氧基；及該苯基視情況經一至三個各自獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、-NRR、C1-6烷基、C1-6鹵烷基、C1-3烷氧基及C1-3鹵烷氧基；R9b為視情況經取代之C3-6環烷基、視情況經取代之苯基或視情況經取代之雜環，該C3-6環烷基及雜環各自視情況經一至四個各自獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：羥基、CH2OH、-NRR、-NRC(O)CH3、4至6員雜環、氰基、鹵基、C1-3烷基、C1-3鹵烷基及C1-3烷氧基，及該苯基視情況經一至三個各自獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、C1-6烷基、C1-6鹵烷基、C1-3烷氧基及C1-3鹵烷氧基；及各R獨立地選自由以下組成之群：H、C1-3烷基及C3-6環烷基；或其醫藥學上可接受之鹽。
  2. 如請求項1之化合物，其中R3及R4均為氫；或其醫藥學上可接受之鹽。
  3. 如請求項1或2之化合物，其中R1為氫；或其醫藥學上可接受之鹽。
  4. 如請求項1或2之化合物，其具有式(II)： ；或其醫藥學上可接受之鹽。
  5. 如請求項1或2之化合物，其中：R5為氫或鹵基；及R6為氫、鹵基、甲基、CH2F、CHF2或CF3；或其醫藥學上可接受之鹽。
  6. 如請求項5之化合物，其中R5為氫；或其醫藥學上可接受之鹽。
  7. 如請求項5之化合物，其中R6為氫；或其醫藥學上可接受之鹽。
  8. 如請求項5之化合物，其中R5及R6均為氫；或其醫藥學上可接受之鹽。
  9. 如請求項1或2之化合物，其中R2a為甲基；或其醫藥學上可接受之鹽。
  10. 如請求項1或2之化合物，其中R2b為OH、氟、甲氧基、第三丁氧基、CHF2、CF3、NH2或NH(CH3)；或其醫藥學上可接受之鹽。
  11. 如請求項1或2之化合物，其具有下式： 其中R2b為OH、NH2或氟；或其醫藥學上可接受之鹽。
  12. 如請求項1或2之化合物，其具有式(IV)： 其中R2b為OH或NH2；或其醫藥學上可接受之鹽。
  13. 如請求項12之化合物，其中R2b為OH；或其醫藥學上可接受之鹽。
  14. 如請求項12之化合物，其中R2b為NH2；或其醫藥學上可接受之鹽。
  15. 如請求項1或2之化合物，其具有式(V)：；或其醫藥學上可接受之鹽。
  16. 如請求項15之化合物，其中R2a為甲基；或其醫藥學上可接受之鹽。
  17. 如請求項1或2之化合物，其中R7為： 或；或其醫藥學上可接受之鹽。
  18. 如請求項1或2之化合物，其中R9為氫、鹵基、C1-3鹵烷基、視情況經取代之C1-6烷基或視情況經取代之C3-6環烷基；或其醫藥學上可接受之鹽。
  19. 如請求項1或2之化合物，其中R9為視情況經一個或兩個各自獨立地選自由以下組成之群之取代基取代的苯基：氟、氯、溴、氰基、甲氧基、CH2OH、C1-4烷基、C1-4鹵烷基及C1-3鹵烷氧基；或其醫藥學上可接受之鹽。
  20. 如請求項1或2之化合物，其中R9為吡唑基、吡啶基、吲哚基或異喹啉基，其各自視情況經取代；或其醫藥學上可接受之鹽。
  21. 如請求項1或2之化合物，其中R9為CH2R9b，其中R9b為哌啶基、 哌嗪基或嗎啉基，其各自視情況經一至三個各自獨立地選自由以下組成之群之取代基取代：羥基、鹵基、CH2OH、-NRR、氰基、C1-3烷基、C1-3鹵烷基及C1-3烷氧基。
  22. 如請求項1之化合物，其具有式(IV) 其中：R2b為OH；R5為氫或氟；R6為氫、氯、甲基或CH2F；R7為 R8為氫、甲基或氟；n為1或2；及R9為甲基環丙基、異丁氧基、視情況經一個或兩個各自獨立地選自由以下組成之群之取代基取代的苯基：氟、氯、溴、C1-4烷基、CF2H及CF3，或視情況經一個或兩個各自獨立地選自由以下組成之群之取代基取代的吡啶基：甲基、CF3及C(CH3)2CF3；或其醫藥學上可接受之鹽。
  23. 如請求項22之化合物，其中：R5為氫且R6為氯、甲基或CH2F或R6為氫且R5為氟；或其醫藥學上可接受之鹽。
  24. 如請求項22之化合物，其中R5及R6均為氫；或其醫藥學上可接受之鹽。
  25. 如請求項1之化合物，其具有式(VI) 其中：R2b為氟；R5為氫或氟；R6為氫；R7為或R8為氫或甲基；n為1；及R9為視情況經一個氯取代之苯基；或其醫藥學上可接受之鹽。
  26. 如請求項1之化合物，其係選自由以下組成之群：(R)-4-((R)-1-羥基(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-(((S)-1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)吡嗪-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮乙基)-3-(2-(((S)-1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)吡嗪-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)吡啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-(((S)-1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)吡啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-(((S)-1-(6-(三氟甲基)-[2,3'-聯吡啶]-6'-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-(((S)-1-(4-甲基-2'-(三氟甲基)-[3,4'-聯吡啶]-6-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺 基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(3,4-二氯苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-(((S)-1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯-3-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(3-氯-5-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(3,4-二氯苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-(((S)-1-(4-甲基-5-(2-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)吡啶-4-基)噻唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(4R)-3-(5-氟-2-(((S)-1-(4-甲基-5-(2-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)吡啶-4-基)噻唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；及(R)-3-(2-(((S)-1-(2,5-二氟-4-(2-甲基吡啶-4-基)苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；或其醫藥學上可接受之鹽。
  27. 如請求項1之化合物，其係選自由以下組成之群：(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)異唑-3-基)乙基)胺基)嘧啶-4- 基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-{2-[((R)1-(3-(3-氟-4-甲基苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基]胺基}嘧啶-4-基}-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-{(S)-1-[3-(3,4-二氯-苯基)-異唑-5-基]-乙基胺基}-嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥基-乙基)-唑啶-2-酮；(R)-3-(2-{(S)-1-[3-(3,4-二氯-苯基)-異唑-5-基]-乙基胺基}-5-氟-嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥基-乙基)-唑啶-2-酮；(R)-3-(5-氟-2-(((S)-1-(3-(4-異丙基苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-(((S)-1-(3-(4-(三氟甲基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)-4-甲基唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)-4-甲基唑-2-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(4-(4-溴苯基)噻唑-2-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)唑-2-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)唑-2-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)-6-(氟甲基) 嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)異唑-3-基)乙基)胺基)-6-甲基嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)-6-甲基嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)-6-甲基嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-(二氟甲基)苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(6-氯-2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；及(R)-3-(2-(((S)-1-(3-(3-(第三丁基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；或其醫藥學上可接受之鹽。
  28. 如請求項1之化合物，其係選自由以下組成之群：(R)-3-(2-((S)-1-(2-氟-4-(1-甲基環丙基)苯基)乙基胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(5-氟-2-(((S)-1-(2-氟-4-異丁氧基苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；及(R)-3-(2-(((S)-1-(2-氟-4-異丁氧基苯基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)- 4-((R)-1-羥乙基)唑啶-2-酮；或其醫藥學上可接受之鹽。
  29. 如請求項1之化合物，其係選自由以下組成之群：(R)-3-(6-氯-2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-甲氧基乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-甲氧基乙基)唑啶-2-酮；及(S)-4-((R)-1-胺基乙基)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；或其醫藥學上可接受之鹽。
  30. 如請求項1之化合物，其係選自由以下組成之群：(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((R)-1-氟乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)異唑-3-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-((R)-1-氟乙基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-2-甲基-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮；(R)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮；(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-(氟甲基)唑啶-2-酮；及(S)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶- 4-基)-4-((R)-1,1-二氟丙-2-基)唑啶-2-酮；或其醫藥學上可接受之鹽。
  31. 如請求項1之化合物，其為(R)-4-((R)-1-羥乙基)-3-(2-(((S)-1-(3-(4-(三氟甲基)苯基)-1,2,4-二唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮或其醫藥學上可接受之鹽。
  32. 如請求項1之化合物，其為(S)-4-((R)-1-胺基乙基)-3-(2-(((S)-1-(2-(4-氯苯基)噻唑-5-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮或其醫藥學上可接受之鹽。
  33. 如請求項1之化合物，其為(R)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮或醫藥學上可接受之鹽。
  34. 如請求項1之化合物，其為(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(4-氯苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-(氟甲基)唑啶-2-酮或其醫藥學上可接受之鹽。
  35. 如請求項1之化合物，其為(R)-4-((S)-1-氟乙基)-3-(2-(((S)-1-(4-甲基-2'-(三氟甲基)-[3,4'-聯吡啶]-6-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)唑啶-2-酮或其醫藥學上可接受之鹽。
  36. 如請求項1之化合物，其為(R)-3-(5-氟-2-(((S)-1-(4-甲基-2'-(三氟甲基)-[3,4'-聯吡啶]-6-基)乙基)胺基)嘧啶-4-基)-4-((S)-1-氟乙基)唑啶-2-酮或其醫藥學上可接受之鹽。
  37. 如請求項1之化合物，其為(R)-3-(2-(((S)-1-(1-(3-氯-4-氟苯基)-1H-咪唑-4-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-(氟甲基)唑啶-2-酮或其醫藥學上可接受之鹽。
  38. 如請求項1之化合物，其為(R)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)唑-2-基)乙基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-(氟甲基)唑啶-2-酮或其醫藥學上可接受之鹽。
  39. 一種醫藥組合物，其包含如請求項1至38中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接受之載劑或賦形劑。
  40. 一種如請求項1至38中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其係用於製造用以治療與具有新生形活性之突變IDH蛋白質有關之疾病或病症的藥劑。
  41. 一種如請求項1至38中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其係用於製造用以治療與具有新生形活性之突變IDH蛋白質有關之疾病或病症的藥劑，其中該藥劑係與另一種治療劑一起投與。
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