TR201807153T4 - Hedefe yönelik termomodülasyon için bileşimler ve yöntemler. - Google Patents

Abstract

İnsanlar gibi memelilere kozmetik, diyagnostik ve terapötik uygulamalar için faydalı olan nanopartiküller ve formülasyonlar sağlanmaktadır.

Description

TARIFNAME HEDEFE YÖNELIK TERMOMODÜLASYON IÇIN BILESIMLER VE YÖNTEMLER BULUS SAHASI Bulusun alani; kozmetik, diyagnostik ve/veya terapötik prosedürlerde kullanima yönelik nanopartiküllerdir.

BULUSUN ALT YAPISI Derinin lazerli tedavileri yaygin olarak bilinmekte olup, bunlar terapötik ve kozmetik kullanim açisindan bir hayli revaçtadir. (bakiniz örnegin USZOO50203495 A1) Terapötik olarak, lazerli deri terapisine iliskin potansiyel kullanimlar; kanser hastalarinda kanserli hücrelerin lazer ablasyonunu ve yanik magdurlarinda hasarli dokunun lazer ablasyonunu içerir. Lazerli deri terapisine iliskin kozmetik uygulamalar çok daha çesitli olup, kil uzaklastirmayi/azaltmayi, diskromi tedavisini, yag aldirma gibi operasyonlar sonrasinda derinin sikilastirilmasini, akne tedavisini, deri üzerindeki istenmeyen lekelerin kimyasal veya fiziksel olarak asindirilmasini, burun küçültme ve yüz-boyun germe de dâhil olmak üzere cerrahi tedavileri ve baska estetik deri yeniden modelleme girisimlerini içerir.

BULUSUN KISA AÇIKLAMASI Deri terapötiginde ve kozmetiginde lazer terapisi ümit vaat edici olsa da, mevcut lazer prosedürleri sinirli bir etkililige sahip olup, bunlar tedavilerin haddinden fazla tekrarlanmasini gerektirmekte, bu da maliyetleri artirmaktadir. Ayrica standart alti lazer tedavileri sinirli bir spesifiklige sahip olup; bunlar, spesifik olmayan deri hasari, deri tahrisi ve skarlasma gibi, kisiyi güçten düsüren klinik yan etkiler ortaya çikarmaktadir. 01589-P-0002 lsik bazli kil uzaklastirma sistemleri, bilhassa açik renkli killari (ince, sari, kir, kizil killar) uzaklastirmada düsük etkililik oranlarindan mustariptir. Çoklu (hatta 6 ve üstü) tedaviler, karbon gibi topik uygulanan kromoforlarin kullanimi ile dahi, sari, kir veya kizil killara sahip hastalarda terapötik sonuç ortaya çikarmakta yetersiz kalmaktadir. Termoablatif teknoloji, açik renkli killarin uzaklastirilinasina ilave olarak, yara iyilestirme, doku yeniden modelleme, vasküler onarim ve akne tedavisi sahalarinda, faydalanilmamis bir potansiyele sahiptir.

Akne vulgaris; kil gövdesini, kil folikülünü, sebasöz bezi ve arektör pili kasini içeren pilosebasöz ünitenin obstrüksiyonundan kaynaklaninakta olup, bu durum, sebasöz bezden üretilen sebum yaginin birikmesine ve bunu müteakip folikül içinde bakterilerin kolonize olmasina yol açar. Sebuinun birikmesi sonucu olusan mikrokomedonlar, entlamasyonsuz deri lekeleri (beyaz/siyah noktalar) veya enilamatuvar hücreleri barindiran deri lekeleri haline gelir ve papüllerin, nodüllerin ve içi irin dolu kistlerin olusmasina yol açar. Tedavi edilmemis akne vulgarisin sekelleri genellikle hiperpigmentasyon, skarlasma ve deride görünüm bozuklugunun yani sira önemli derecede psikolojik sikintiyi içerir. Dolayisiyla, akne tedavilerinde genel olarak, foliküller ve sebasöz bez içinde sebum ve mikroorganizma birikimini azaltmak hedeflenir. ümit vaat edicidir, ancak bunlarin etkililigi halen yetersizdir. Ultraviyole (UV)/mavi isik, muhtemelen foliküller içindeki endojen portirin fotosensitizerlerinin etkinligi vasitasiyla, deri hücreleri (keratinositler) üzerinde aracilik ettigi antienflamatuvar etkiler nedeniyle, FDA tarafindan, yalnizca hafif ila orta derece aknenin tedavisi için onaylanmistir. 5-aminolevulinik asit (S-ALA) gibi ekzoj en portirin prekürsörleri topik veya oral salim için formüle edilmis olup, bunlarin sebasöz foliküller içinde biriktikleri, kirmizi isik maruziyetinde fotonlari absorbe ettikleri ve hücre membranlarina ve proteinlere dogrudan zarar veren reaktif oksijen türleri olusturduklari gösterilmistir. Porfirin uygulamasi ile yüksek 01589-P-0002 yogunluklu kirmizi isigin kombine edildigi ve "fotodinamik terapi" olarak adlandirilan bu prosedürün, isinlama sonrasinda 20 hafta boyunca sebum üretimini ve akneyi %50 azalttigi gösterilmistir. Ancak yüksek yogunluklu enerjilerin (50-150 J/cmz) sebasöz bez deri yapilarini hasara ugratmasi icap etmekte ve transdermal porfirin penetrasyonu; isiga karsi hassasiyet, agri, enflamasyon, hiper/hipopigmentasyon ve kalici skarlasma da dâhil olmak üzere, hedef disi yan etkilere yol açmaktadir.

Lazer terapisinin, insanlardaki deri bozukluklarinin tedavisinde tam fayda saglayabilmesi için, çevre dokulari etkilemeksizin, deri yapilarinda foto-yikimi lokal olarak indükleyecek yöntemler gelistirilmelidir.

Burada belirli uygulamalarda kozmetik tedaviler ile birlikte kronik ve akut hastalik ve bozukluklarin tedavisi ve önlenmesi amaçlari dogrultusunda, hedef hücre popülasyonlarinin ve hedef dokularin hedefe yönelik terrnomodülasyonunda faydali olacak yeni bilesimler ve yöntemler saglanmaktadir.

Bir açida maddenin bilesimleri açiklanir. Örnegin bir düzenlemede kozmetik olarak kabul edilebilir bir tasiyiciyi ve bilesimin topik olarak temas ettigi bir hedef doku bölgesinde terrnomodülasyonu indükleyecek kadar etkili bir miktarda çok sayida plazmonik nanopartikülü içeren bir bilesim saglanir.

Bazi uygulamalarda bilesim, bir dogrusal olmayan eksitasyon yüzeyi plazinon rezonans kaynagindan hedef doku bölgesine salinan enerjiye maruz kalma yoluyla aktive olan plazmonik nanopartiküller içerir. Diger veya ilave uygulamalarda bir metal, metalik kompozit, metal oksit, metalik tuz, elektrik iletkeni, elektrik süper iletkeni, elektrik yari iletkeni, dielektrik, kuantum noktasi veya bunlarin bir kombinasyonundan kompozit içeren en az bir plazmonik nanopartikül ihtiva eden bilesimler tarif edilmektedir. Diger veya ilave uygulamalarda bir bilesim tarif edilmekte olup, bilesimde mevcut olan plazmonik partiküllerin önemli bir miktari geometrik olarak ayarlanmis nanoyapilari içermektedir. Belirli uygulamalarda bir 01589-P-0002 bilesim tarif edilmekte olup, bu bilesimde plazmonik partiküller; nanoplakalar, kati nano kabuklar, bos nano kabuklar, nano çubuklar, nano pirinçler, nano küreler, nano fiberler, nano teller, nano piramitler, nano prizmalar, nano yildizlar ve bunlarin bir kombinasyonu da dâhil olmak üzere, isigi absorbe eden ve istenen bir dalga boyunda plazmon rezonansi üreten, halihazirda bilinen veya sonradan olusturulabilecek herhangi bir geometrik sekli içerir. Diger ilave uygulamalarda bir bilesim açiklanir burada plazmonik partiküller; gümüs ve/veya altini içerebilir ve ayrica nikel, bakir, titanyum, silikon, galadyum, paladyum, platin ve kromu da içerebilir.

Bazi uygulamalarda; bir katki maddesi, bir renklendirici, bir emülgatör, bir koku, bir nem tutucu, bir polimerize edilebilir monomer, bir stabilize edici, bir çözücü veya bir sürfaktan ihtiva eden kozmetik olarak kabul edilebilir bir tasiyici içeren bir bilesim saglanmaktadir. Bir uygulamada, bir bilesim saglanmakta olup, bu bilesimde sürfaktan asagidakilerden olusan bir gruptan seçilmektedir: lauret 2- sülfat, sodyum dodesil sülfat, amonyum lauril sülfat, sodyum oktek-l/deset-l sülfat, lipitler, proteinler, peptitler veya bunlarin türevleri. Bir uygulamada, bir bilesim saglanmakta olup, bu bilesimde bir sürfaktan, agirlik olarak tasiyicinin yaklasik %0.1 ve yaklasik %10.0,luk bir agirlik ila agirlik miktari arasinda bulunmaktadir. Yine bir baska uygulamada, çözücü; su, propilen glikol, alkol, hidrokarbon, kloroform, asit, baz, aseton, dietil-eter, dimetil sülfoksit, dimetilformamid, asetonitril, tetrahidrofuran, diklorometan ve etilasetattan olusan bir gruptan seçilmektedir. Bir uygulamada, bilesim, bir veya daha fazla pik rezonans dalga boyunda en az yaklasik 1 O.D.'lik bir optik yogunluga sahip plazmonik partiküller içerir.

Diger veya ilave uygulamalarda burada bir bilesim açiklanir, burada plazmonik partiküller, bir hidrofilik veya alifatik kaplama içermekte olup, burada kaplama bir memeli bireyin derisine büyük ölçüde adsorbe olmaz ve burada kaplama; polietilen glikol, silika, silika-oksit, polivinilpirolidin, polistiren, bir protein veya bir peptit içerir. Yine bir ilave uygulamada, termomodülasyon; hedef doku 01589-P-0002 bölgesinde entlamasyonun hasara ugratilmasini, ablasyonunu, lizisini, denatürasyonunu, deaktivasyonunu, aktivasyonunu, indüksiyonunu, isi sok proteinlerinin aktivasyonunu, hücre sinyallerinin kesintiye ugratilmasini veya hücre mikroortaminin bozulmasini içerir. Ayrica yine, bazi sunumlarda hedef doku alani; bir sebasöz bezi, bir sebasöz bezin bir bilesenini, bir sebositi, bir sebositin bir bilesenini, sebumu veya kil folikülü infundibulumunu içerir. Baska uygulamalarda hedef doku alani; bir tümsek, bir sogan, bir kök hücre, bir kök hücre nisi, bir dermal papilla, bir korteks, bir kütikül, bir kil kilifi, bir medulla, bir pilori kasi, bir Huxley katmani veya bir Henle katmani içerir.

Diger bir açida burada hedefe yönelik doku ablasyonunun gerçeklestirilmesi için yöntemler tarif edilir. Örnegin bir düzenlemede buna ihtiyaci olan bir memeli özneyi tedavi etmek üzere hedefe yönelik doku ablasyonunun gerçeklestirilmesine yönelik bir yöntem saglanir, asagidaki adimlardan olusur: i) bireyin deri yüzeyine istem l'e göre bilesimin uygulanmasi; ii) plazmonik partiküllerin deri yüzeyinden, dermal dokunun bir bilesimine yeniden dagitilmasi için penetrasyon vasitasinin saglanmasi; ve iii) deri yüzeyinin isik ile isinlanmasmin saglanmasi. Baska veya ilave uygulamalarda, bir yöntem saglanmakta olup, burada isik kaynagi; civa, ksenon, döteryum veya bir metal-halid eksitasyonu, fosforesans, inkandesans, luminesans, isik yayan diyot veya günes isigini içerir. Yine baska veya ilave uygulamalarda, bir yöntein tarif edilmekte olup, burada penetrasyon vasitasi; yüksek frekansli ultrasonu, düsük frekansli ultrasonu, masaji, iyontoforezi, yüksek basinçli hava akisini, yüksek basinçli sivi akisini, vakumu, fraksiyonel fototermoliz ile ön muameleyi veya dermabrazyonu ya da bunlarin bir kombinasyonunu içerir. Yine baska uygulamalarda, bir yöntem saglanmakta olup, burada isinlama; yaklasik 200 nm ve yaklasik 10,000 nm arasi bir isik dalga boyuna sahip isigi, yaklasik 1 ila yaklasik 100 jul/cmz'lik bir fluansi, yaklasik 1 femptosaniye ila yaklasik 1 saniye arasi bir pals genisligini ve yaklasik 1 Hz ila yaklasik 1 THz arasi bir tekrarlama sikligini içerir.

Diger bir açida burada kozmetik olarak kabul edilebilir bir tasiyiciyi, etkili 01589-P-0002 miktarda bir sodyum dodesil sülfati ve çok sayida plazmonik nanopartikülü, bilesimin topik olarak temas ettigi bir hedef doku alaninda termal hasari indükleyecek kadar etkili bir miktarda içeren bir bilesim saglanmakta olup, burada nanopartiküller, yaklasik 810 nanometrelik veya 1064 nanometrelik bir rezonans dalga boyunda en az yaklasik 1 O.D.'lik bir optik yogunluga sahiptir ve burada plazmonik partiküller yaklasik 5 ila yaklasik 35 nanometrelik bir silika kaplama içerir ve burada kabul edilebilir tasiyici, su ve propilen glikol içerir.

Diger bir açida killarin lazer ablasyonu veya akne tedavisi için bir sistem saglanmakta olup, bu sistem, insan derisine uygulanmaya müsait bir bilesim ve bir plazmonik enerji kaynagi içerir.

SEKILLERIN KISA AÇIKLAMASI Sekil 1; formülasyonlarin, kil uzaklastirma ve akne tedavisi için kullanimina yönelik çesitli uygulamalari tasvir eden semalari göstermektedir. (A) kil uzaklastirma için tasvir edilmis olup, plazmonik nanopartikül formülasyonu (siyah) 1. insan derisine topik olarak uygulanmistir, 2. folikülün derinine salinmis ve deri yüzeyinden yikanmistir, 3. plazmonik partikülün pik absorpsiyon dalga boyuyla rezonant olan bir dalga boyunda bir klinik lazer ile isinlanmistir ve 4. hasar görmüs kil folikülü ile birlikte folikülden dökülmüstür; ve (B) akne tedavisi için tasvir edilmis olup, plazmonik nanopartikül formülasyonu (siyah) 1. insan derisine topik olarak uygulanmistir, 2. spesifik olarak sebasöz bez içine salinmis ve deri yüzeyinden yikanmistir, 3. plazmonik partikülün pik absorpsiyon dalga boyuyla rezonant olan bir dalga boyunda bir klinik lazer ile isinlanmistir ve 4. hedef yerinden dökülmüs olup, burada biriken sebum ve sebasöz bezin sebum üretme kabiliyeti yok edilmistir.

Sekil 2, 1064 nm, 20 J/cmz, 55 ms lazer palslarina maruziyet sonrasinda örnek niteligindeki mevcut klinik boyalar olan karbon losyunu (daireler), 01589-P-0002 meladin spreyi (karolar) ve indosiyanin yesili (kareler) ile karsilastirmali olarak saglanan plazinonik nanopartikül formülasyonlarina iliskin çesitli uygulamalarin bir sicaklik profilini göstermektedir (SL-001, üçgenler).

SL-001 ve boyalar, klinik konsantrasyondan 121000 oraninda esit olarak mg/ml, ICG 5 mg/ml), n=3, hata, ortalamanin standart sapmasi.

Sekil 3, domuz deri eksplantlari kullanilarak belirlenen, floresan olarak etiketlenmis nanopartiküllerin kil folikülü penetrasyonunu ve burada tarif edilen konuya iliskin çesitli uygulamalarin es odakli görüntülerini göstermektedir. Burada tasvir edilen, (A) muamele edilmis domuz derisinin, 60 um'lik iki seri düzlem üzerinde, kesiti alinmis ve folikülle açili bir sekilde görüntülenmis bir semasidir: 'düzlem 1' (folikül infundibulumunu gösterir) ve 'düzlem 2' (derin folikülü gösterir); (B) temsili es odakli görüntüler, yüzeysel ve derin folikül içindeki kirmizi Iloresan nanopartikülleri (548 nm) gösterir, ancak altta bulunan demiistekileri göstermez; ve (C) yüksek derecede büyütme ile, derin folikül içinde kalan kirmizi Iloresan nanopartiküllerdir (-400 um). Yesil, doku otofloresansidir.

Sekil 4, domuz derisi eksplantlari ve karanlik alan görüntülemesi kullanilarak belirlenen plazmonik nanopartiküllerin, kil folikülüne penetrasyonunu gösterir. Burada gösterilen, (A) muamele edilmis, bölümlenmis ve folikülle yatay olarak imaji alinmis domuz derisinin semasidir; (B) parlak mavi plazinonik partiküller 1.2 mm derinlikteki bir kesitte görünmektedir ve (C) pigmentlerin görünür olmadigi, muamele edilmemis (negatif kontrol) domuz derisinden farklilasmistir.

Sekil 5, Yalnizca Lazer ile (sol ön kol) veya Plazmonik Partiküller + Lazer ile (sag ön kol) muamele edilen canli insan derisindeki klinik gözlemleri tasvir eder, spesifik olmayan ve spesifik fototermal hasari gösterir. (A,B) Üst panelde insan derisi, 810 nm lazer palslari (30 J/cm2, 30 ms, 2 geçis) ile tek basina (A) veya %20 propilen glikol içinde, 830 nm rezonant, kaplanmamis bir plazmonik nanopartikül formülasyonuyla muamele 01589-P-0002 edildikten sonra (B) isinlanmistir. Plazmonik nanopartikül formülasyonu 3 dakikalik masajla uygulanmis ve lazer isinlama öncesinde deri yüzeyi dönüsümlü olarak 3 kez su ve etanol uygulamasi ile temizlenmistir. Lazer isinlamayi müteakip 30. dakikada, deri yüzeyindeki artik, kaplanmamis partiküllerin fototermal olarak anlamli derecede isinmasi nedeniyle A'ya kiyasla B'de spesifik olmayan klinik yaniklar gözlenmistir. (C,D) Alt panelde insan derisi 1064 nm lazer palslari (40 J/cmz, 55 ms, 3 geçis) ile tek basina (C) veya %20 propilen glikol içinde, 1020 nm rezonant, silika kaplanmis bir plazmonik nanopartikül fonnülasyonuyla tedavi sonrasinda (D) isinlanmistir. Plazmonik nanopartikül formülasyonu 3 dakikalik masajla uygulanmis ve lazer isinlama öncesinde deri yüzeyi dönüsümlü olarak 3 kez su ve etanol uygulamasi ile temizlenmistir. Lazer isinlamayi müteakip 30. dakikada, Silika kapli partiküller deri yüzeyinden yeterince temizlenebildigi için D veya C*de deri yanmasi veya eritemaya dair bir iz görülmemistir. D'nin büyütülmüs fotografi, nanopartikül hedefli bölgede spesifik fototermal hasar (perifoliküler eritema ve ödem) göstermistir.

Sekil 6, bir plazmonik nanopartikül formülasyonu ve klinik lazer ile muamele edilen canli insan derisindeki, nanopartikül hedefli fototermal hasari göstermektedir. %20 propilen glikol içinde 1020 nm rezonant, silika kapli (200 nm çapli) plazmonik nanopartiküllerden olusan bir fonnülasyon ve 3 dakikalik masaj, canli insan derisiyle temas ettirilmistir. Bu prosedür 3 kez tekrar edilmis ve artik partikülleri uzaklastirmak üzere deri yüzeyi dönüsümlü olarak 3 kez su ve etanol uygulamasi ile temizlenmistir. isinlanmistir. Lazer isinlamanin ardindan, nanopartiküllerin hedeflendigi kil foliküllerinde perifoliküler eritema ve ödem klinik olarak gözlemlenmis, ancak çevre veya partikülle muamele edilmeyen dokularda gözlemlenmemistir.

Sekil 7, bir plazmonik nanopartikül formülasyonunun, insan derisinin sebasöz bezine salimini göstermektedir. (A) Kolajen IV bazal membran (mavi) ve PGP 9.5 sinir markeri (yesil) için iminün boyama uygulanmis 01589-P-0002 bir insan deri biyopsisi ve kesitinin es odakli bir mikroskop görüntüsü olup, kil folikülü (HF) ve sebasöz bez (SG) mikroanatomisini gösterir.

Kirmizi, silika nanopartiküllerdir (200nm). (B) Eksize edilip, plazmonik nanopartikül formülasyonu ile muamele edilmis, daha sonra kesiti alinip folikülle yatay bir sekilde görüntülenmis insan derisinin semasi ve karanlik alan mikroskop görüntüsüdür. Parlak mavi plazmonik partiküller 400 nm derinlige kadar ve insan sebasöz bezinin içinde görülebilmektedir.

Sekil 8, sebasöz bezlerin hedeflenmesine yönelik olarak, plazmonik nanopartiküllerden olusan ve sürfaktan içeren kozmetik forrnülasyonlari göstermektedir. Silika kapli nanopartiküller (200 nm çap, %20 propilen glikol içinde, sodyum dodesil sülfat (SDS) veya sodyum lauret-2 sülfat (SLES) sürfaktanlarinin ilavesi ile formüle edilmis, masaj + ultrason ile insan dersine uygulanmis ve karanlik alan inikroskopisi için yatay düzlemler üzerinde derinin kesiti alinmistir. (A) %1 SDS/%2O PG içindeki plazmonik partikül formülasyonlari Sekil 7'de oldugu gibi, sebasöz bez içine 400 um derinlige kadar nüfuz etmistir. (B) %1 SLES/%20 PG içindeki plazmonik partikül formülasyonlari sebasöz bez içine 600 nm derinlige kadar nüfuz etmistir. Ek, görünür partiküller olmadan, bir deri kesitini göstermektedir (ölçek çubugu 40 um). Sebasöz bezin anahatlari yapay çizgilerle gösterilmistir.

Sekil 9, insan folikülüne ve sebasöz beze hedeflenen nanopartikül üzerinde ultrason ve masajin karsilastirmali etkisini tasvir eden bir görüntüdür.

Silika kapli nanopartiküller (200 nm çap, %1 SDS/%20 propilen glikol içinde formüle edilmis ve insan derisine masaj veya ultrason ile uygulanmistir. Yatay düzlemsel kesitlerin, düsük (20x) ve yüksek (50x) büyütme ile alinan karanlik alan görüntüleri (A) tek basina masaj sonrasinda plazmonik partiküllerin folikül infundibulumu içine birikiminin çok az veya sifir düzeyde oldugunu, buna karsilik (B) tek basina ultrason sonrasinda ise folikül infundibulumuna dogru genisleme ve anlamli plazmonik partikül birikimi oldugunu göstermektedir. 01589-P-0002 Sekil 10, sebasöz bez hedeflemesi için plazmonik nanopartikül kozmetik formülasyonlarinm bir uygulamasini tasvir etmektedir. Farkli sekiller ve kaplamalar içeren plazmonik nanopartiküller %1 SDS/%20 propilen glikol içinde formüle edilmis ve masaj + ultrason seklinde insan derisine uygulanmis ve karanlik alan mikroskopisi için yatay düzlemlerde derinin kesiti alinmistir. (A) 200 um derinlige kadar folikül infundibulumu içinde (beyaz ok) polietilen glikol (PEG) kapli nano çubuklar (altin, 15 x 30 nm boyutlu) gözlemlenmistir. (B) Folikülün 600 um derinligine kadar ve sebasöz bezin içinde (açik ok) düsük konsantrasyonlu (10 0D.) Silika kapli nano plakalar (gümüs, 200 nm çapli) gözlemlenmistir. Ek, görünür partiküller olmadan, deri kesitlerini göstermektedir (ölçek çubugu 100 BULUSUN DETAYLI AÇIKLAMASI Fizyolojik ve patofizyolojik doku büyümesinin ve yeniden modellenmesinin biyolojisi, ayrica hücre morfolojisindeki degisiklikler genel olarak zannedildiginden daha karmasik olup, biyolojik bilesikleri, fiziksel kuvvetleri ve hücre türlerini içine alan etkilesimli bir agdan meydana gelmektedir.

Burada tarif edilen konunun bir amaci, derinin ve bunun altindaki dokularin ya da erisilebilen diger doku bosluklarinin, nanopartiküllerin kullanimi vasitasiyla invaziv olmayan ve minimal düzeyde invaziv muamelesine yönelik bilesimler, yöntemler ve sistemler saglamaktir. Bu muamele; bunlarla sinirli olmamak üzere kil uzaklastirmayi, kil büyümesi ve yeniden büyümesi ve deri tazelenmesi veya yenilenmesi, akne uzaklastirilmasi veya azaltilmasi, kirisiklarin azaltilmasi, gözeneklerin azaltilmasi, selülitin ve diger dermal lipit birikimlerinin ablasyonu, sigil ve mantarlarin uzaklastirilmasi, hipertrofik yaralar ve keloidler, anormal pigmentasyon (porto sarabi lekesi gibi) da dâhil olinak üzere yaralarin inceltilmesi veya uzaklastirilmasi, dövmelerin uzaklastirilmasi ve deri uyumsuzluklari (Örnegin doku, renk, ton, esneklik, hidrasyon) içermektedir. Diger terapötik veya 01589-P-0002 önleyici yöntemler, bunlarla sinirli olmamak üzere, asagidakilerin tedavisini içerir: hiperhidroz, anhidroz, Frey Sendromu (gustatuvar terleme), Horner Sendromu ve Ross Sendroinu, aktinik keratoz, keratoz folikülaris, dermatit, vitiligo, pitiryazis, psöryazis, liken planus, egzema, alopesya, psöryazis, habis veya habis olmayan deri tümörleri.

Baska bir sekilde açiklanmadikça, burada kullanilan bütün teknik ve bilimsel terimler, bu açiklamanin ait oldugu teknikteki olagan uzmanliga sahip bir kisi tarafindan yaygin olarak anlasilanla ayni anlama sahiptir. Mevcut açiklamanin uygulanmasinda veya test edilmesinde, burada tarif edilenlere benzer veya esdeger herhangi bir yöntem ve materyal kullanilabilecek olmakla birlikte, uygun yöntemler ve materyaller burada tarif edilmistir. Materyaller, yöntemler ve örnekler yalnizca tasvir amaçli olup, sinirlayici olmalari amaçlaninamistir.

Açiklamanin diger özellikleri, asagidaki ayrintili tarif ve istemlerden yola çikilarak anlasilabilecektir.

Burada kullanildigi sekliyle "uygulamak" ve "uygulama" ifadeleri, bir materyalin bir bireye, topik, subdermal, subkütan, intradermal, enteral, parenteral, rektal, nazal, intravenöz, intramusküler, intraperitoneal veya baska bir yoldan tatbik edilmesini veya tatbik ettirilmesini içerir.

Bir bireye "uygulama için uygun olan bir tasiyici", bir omurgali bireye topik veya istenen uygulama yoluyla fizyolojik olarak geçimli olan herhangi bir materyaldir.

Tasiyicilar; forinülasyon için kati bazli, kuru materyalleri içerebilir veya tasiyici, sivi ya da jel formlar halindeki formülasyonlar için sivi ya da jel bazli materyalleri içerebilir. Tasiyicinin spesifik türü ve ayrica nihai formülasyon, kismen, seçilen uygulama yoluna/yollarina ve ürünün tipine baglidir. düzeyde benzer olan bir miktardir. 01589-P-0002 Bir forrnülasyonun "bilesenleri", bununla iliskilendirilen veya bunun tarafindan ihtiva edilen herhangi bir ürünü veya bilesigi içerir.

Bir "etkili doz", "etkili miktar" veya "terapötik miktar", istenen farmakolojik, kozmetik veya terapötik etkileri ortaya çikarmaya yetecek, dolayisiyla bir hastaligin ya da bozuklugun etkili bir sekilde önlenmesini veya tedavisini saglayan ya da omurgali bir bireyde bir fayda meydana getiren bir miktardir.

Bir "terapötik etki" veya "terapötik olarak istenen etki", istenen sekilde etkilendiginin isaretlerini gösterecek sekilde, tedavi edilen bir bölge veya alandaki bir degisiklige atifta bulunur, örnegin kanser tedavisi, tümör hücrelerinin yok edilmesini saglar veya tümör hücrelerinin büyümesini durdurur; akne tedavisi lekelerin sayisinda ve/veya siddetinde azalina saglar; kil uzaklastirina tedavisi belirgin kil kaybina yol açar veya kirisiklik azaltma tedavisi kirisiklarin yok olmasini saglar.

Bir ”izole" biyolojik bilesen (bir nükleik asit molekülü, protein veya hücre gibi), bilesenin üretildigi, herhangi bir baska protein, lipitler, karbohidratlar ve diger bilesenler de dâhil olmak üzere, baska biyolojik bilesenlerden önemli ölçüde ayrilmis veya saflastirilmistir.

Burada kullanildigi sekliyle bir "nanopartikül", genel olarak, boyutlarindan en az biri yaklasik 0.1 nm ile yaklasik 9000 nm arasi olan bir partiküle atifta bulunur.

Burada kullanildigi sekliyle bir "birey" veya "hasta", herhangi bir omurgali türdür.

Burada kullanildigi sekliyle, "büyük ölçüde sat" veya "büyük ölçüde izole" bir bilesik, bir veya daha fazla baska bilesigi büyük ölçüde içermez.

Bir "hedef doku", bir fiziksel veya kimyasal kuvvet veya degisiklik uygulanmak istenen bir organizmanin bir bölgesini içerir. Burada tarif edildigi sekilde, akne 01589-P-0002 tedavisine yönelik örnek niteligindeki hedef dokular bir sebasöz bezi içerirken, kil uzaklastirmaya yönelik örnek niteligindeki hedef dokular bir pilosebasöz üniteyi, bir kil infundibulumunu, bir kil folikülünü veya non-foliküler epidermisi içerir.

Bir hedef dokunun bir "alani", dokunun bir veya daha fazla bilesenini içerir. Örnek niteligindeki hedef doku alanlari; kök hücre nisini, tümsegi, sebasöz bezi, dermal papillayi, koiteksi, kütikülü, iç kök kilifini, dis kök kilifini, medullayi, Huxley katmanini, Henle katmanini veya pilori kasini içerir. Bir hedef doku alaninin bir "bölgesi"; bazal membrani, ekstraselüler matrisi, hücre yüzeyi proteinlerini, baglanmamis proteinleri/analitleri, glikomatrisleri, glikoproteinleri veya lipit çift katmani içerir.

Bazi ilave içerikleri "büyük ölçüde içermeyen" bir bilesik, söz konusu içerikleri ekseriyetle veya tümden içermez.

Bir "plazmonik nanopartikül", içindeki lokalize yüzey plazmonlarinin isik ile eksite edildigi, nanometre boyutlu bir metalik yapidir. Bu yüzey plazmonlari, metal/dielektrik arayüze (örnegin metal/hava veya metal/ su) paralel yönde yayilan yüzey elektromanyetik dalgalardir.

Bir "isik absorbe eden nanomateryal", bir kuantum boyut etkisi gösterme kabiliyetine sahip bir nanomateryaldir.

Burada tarif edildigi sekilde, bir hedef doku içinde seçici termomodülasyon indüklemek üzere plazmonik nanopartiküller içeren bilesimler saglanmaktadir.

Plazmonik nanopartiküller. 109 ila yaklasik 1016 arasi nanopartikül içerir. Tercihen, bilesimler, lml'lik etkili bir muamele hacmine lokalize edilmis partiküllerin miktari 10° ila 10” arasinda olacak sekilde, 1011 ila 1013 partikül içerir. Bir hedef alana yönelik artan 01589-P-0002 nanopartikül konsantrasyonunun arzu edildigi çesitli uygulamalarda, bilesimler 10 0D. - lOOO O.D'lik optik yogunluklara (CD.) veya 1000 O.D.'nin üzerindeki optik yogunluklara sahip partikül konsantrasyonlari içerir. Bazi uygulamalarda bu degerler, nanopartiküllerin, yaklasik %1-10 W/W veya üstündeki konsantrasyonlarina karsilik gelir.

Nanopartiküller boyut ve baska karakteristikleri açisindan homojen veya heterojen olabilir. Nanopartikülün boyutu genellikle en az bir boyutta yaklasik 0.1 nm ile yaklasik 5000 nm arasindadir. Nanopartikül popülasyonunun boyutunda bir miktar degiskenlik olmasi beklenmektedir. Örnegin bu degiskenlik %001, %01, yüksek olabilir. Optima] plazmonik rezonansin arzu edildigi bazi uygulamalarda, yaklasik 10 nm ila yaklasik 100 nm araligindaki bir partikül boyutu saglanmaktadir. Alternatif olarak, bir kil folikülü gibi, bir hedef doku alani içine nanopartiküllerin gelistirilmis penetrasyonunun arzu edildigi uygulamalarda, yaklasik 100 nm ila yaklasik 1000 nrn araliginda bir partikül boyutu saglanmaktadir. Bilesimde mevcut olan partikül boyutunun modülasyonu da, bir hedef bölgedeki bilesimi konsantre etmenin faydali bir yoludur. Ayrica, burada tarif edildigi gibi, yaklasik 10 nm ila yaklasik 100 nm araliginda bir boyuta sahip nanopartiküller, genel olarak yaklasik 100 nm ila yaklasik 1000 nm araliginda olan daha büyük bir moleküler yapinin bir bileseni olarak kullanilabilir. Örnegin, plazmonik nanopartiküle; boyutunun artirilmasini ve kabul edilebilir bir tasiyici içine gömülmesini saglamak üzere yüzey kaplama uygulanabilir veya bu, daha büyük bir partikül meydana getiren baska partiküllere ya da baska materyallere çapraz baglanabilir veya bunlarla bir araya getirilebilir. Plazmonik nanopartiküllerden olusan bir çözelti içinde en az bir nanopartikülün en az bir boyutunun 50-100 nm altinda oldugu bazi uygulamalarda, nanopartikül yüzeyi, bu üstü bir kalinliga sahip bir matris (örnegin silika) ile kaplanabilir. Boyuttaki bu artis, bütün nanopartiküllerin bir hedef alana (örnegin kil folikülüne) salimini artirabilir ve hedef disi alana (örnegin dermise) salimi sinirlayabilir. 01589-P-0002 Nanopartiküller olusturulurken dikkate alininasi gereken önemli hususlar sunlari içerir: 1) partiküllerin ve ortaya çikan bilesimlerin zeta potansiyeli (pozitif, negatif veya nötral) ve yük yogunlugu; 2) partiküllerin ve ortaya çikan bilesimlerin hidrofilikligi/hidrofobikligi; 3) bir adsorpsiyon tabakasinin (örnegin bir partikül kayma düzleminin) varligi ve 4) hedef hücreye yapisma özellikleri. Nanopartikül yüzeyleri; çesitli oranlarda negatif, pozitif veya nötral yüklere sahip tiyollenmis kisimlar ile (örnegin karboksilik asit, amin, hidroksiller) islevsellestirilebilir.

Dahasi, anyon aracili yüzey kaplama (örnegin akrilat, sitrat ve digerleri), sürfaktan kaplama (örnegin sodyum dodesil sülfat, sodyum lauret 2-sülfat, amonyum lauril sülfat, sodyum oktek-l/deset-l sülfat, lesitin ile birlikte, setil trimetilamonyum bromürü (CTAB), lipitleri ve peptitleri de içeren diger sürfaktanlar) veya protein/peptit kaplamalari (örnegin albumin, ovalbumin, yumurta proteini, süt proteini, diger gida, bitki, hayvan, bakteri, maya veya rekombinant olarak türetilmis protein) uygulanabilir. Blok kopolimerler de faydalidir. Ayrica, spesifk moleküler etkilesimleri tesvik etmek veya engellemek ve gözeneklere ya da foliküllere partikül girisini iyilestirmek için isik absorbe eden partiküllerin yüzeyine yapisan herhangi bir baska bilesik veya materyalin kullaniminin faydali oldugu da kabul edilecektir. Bazi uygulamalarda, partikül yüzeyi modifiye edilmemistir. Hidrofobiklige karsi hidrofilikligin modülasyonu islemi; silanlar, izotiyosiyanatlar, kisa poliinerler (örnegin PEG) veya islevsellestirilmis hidrokarbonlar da dâhil olmak üzere, kimyasal nitelikleri teknikte bilinen nanopartikül yüzeylerinin modifiye edilmesi ile gerçeklestirilir. Farkli uzunluklara ve paket yogunluklarina sahip polimer zincirleri (örnegin proteinler, polisakkaritler, lipitler gibi biyopolimerler ve bunlarin hibridleri; polietilenglikol, PLGA gibi polimerler ve digerleri; biyopolimer-sentetik hibridler), partiküllerin adsorpsiyon tabakasini/kayma düzlemini degistirmek açisindan faydalidir.

Optik absorpsiyon. Tercih edilen nanopartiküller, yaklasik 10 nm ile yaklasik Spesifik uygulamalarda, nanopartiküller, standart lazer cihazlari veya baska isik kaynaklari ile eksitasyon için faydali olan bir optik absorpsiyona sahiptir. 01589-P-0002 Örnegin, nanopartiküller, yaklasik 755 nm'lik dalga boylarinda (aleksandrit (Nd: YAG lazerleri) aralikta absorbe olur. Benzer sekilde nanopartiküller, örnegin yaklasik 500 nm ila yaklasik 1200 nm'lik bir aralikta yogun palsli isigi (lPL) absorbe eder.

Birlesim. Burada saglanan nanopartiküller genellikle birlestirilmemis bir nanopartikül toplulugunu içerir. "Birlesmemis" nanopartiküller ifadesi, böyle bir topluluktaki nanopartiküllerin birbirlerine bir fiziksel kuvvet veya bir kimyasal kuvvet ile dogrudan (partikül-partikül) veya bir araci vasitasiyla (örnegin partikül- hücre-partikül, partikül-protein-partikül, partikül-analit-partikül) dolayli olarak baglanmadigi anlamina gelir. Baska uygulamalarda nanopartikül bilesimleri sirali diziler halinde birlestirilmistir. Bilhassa bu tür sirali diziler herhangi bir üç boyutlu diziyi içerebilir. Bazi uygulamalarda nanopartiküllerin yalnizca bir kismi birlestirilmistir. Nanopartiküller bir van der Walls çekimi, bir London kuvveti, bir hidrojen bagi, bir dipol-dipol etkilesimi veya bir kovalent bag ya da bunlarin bir kombinasyonu ile birlestirilir. dikdörtgenler, fiberler, teller, çubuklar, kabuklar, ince filmler veya düzlemsel yüzey seklinde patem olusturulmus veya patem olusturulmamis bireysel parçalardan olusan bir makroyapi formunu alabilir. Buna karsilik, bir "sirasiz dizi" temel makroyapiyi içermez.

Geometrik olarak ayarlanmis nanovapilar. Burada saglanan nanopartiküller, isigi absorbe eden ve bir pik dalga boyu veya 200 nm ila 10.000 nm arasi dalga boylarindan olusan bir bilesimde plazmon rezonansi üreten, halihazirda bilinen veya meydana getirilecek bütün sekillerde olusturulabilir. Sinirlayici olmayan örneklerde, nanopartiküller; küreler, ovaller, silindirler, kareler, dikdörtgenler, 01589-P-0002 çubuklar, yildizlar, tüpler, piramitler, yildizlar, prizmalar, üçgenler, dallar, plakalar veya düzlemsel yüzeye sahip sekiller olarak biçimlendirilir. Sinirlayici olmayan örneklerde plazmonik partiküller; nanoplakalari, kati nano kabuklari, bos nano kabuklari, nano çubuklari, nano pirinçleri, nano küreleri, nano fiberleri, nano telleri, nano piramitleri, nano prizmalari, nano plakalari veya bunlarin bir kombinasyonunu içerir. Bilesimde mevcut olan plazmonik partiküller; olarak ayarlanmis nano yapilar içerir.m. Nanopartikül; bir metal (ömegin, altin, gümüs), metalik kompozit (Örnegin gümüs ve silika, altin ve silika), metal oksit (örnegin demir oksit, titanyum oksit), metalik tuz (örnegin potasyum oksalat, stronsiyum klorür), intermetalik (örnegin titanyuin alüminid, alniko), elektrik iletkeni (örnegin bakir, alüminyum), elektrik süper iletkeni (örnegin itriyum baryum bakir oksit, bismut stronsiyum kalsiyum bakir oksit), elektrik yari iletkeni (örnegin silikon, germanyum), dielektrik (örnegin silika, plastik) veya kuantum noktasidir (örnegin civa sülfit, kadmiyum selenyum). Kisitlayici olmayan örneklerde materyaller altin, gümüs, nikel, platin, titanyum, paladyum, silikon, galadyumdur. Alternatif olarak, nanopartikül; bir metal, bir dielektrik, bir metal ve yari iletken veya bir metal, yari iletken ve dielektrik ihtiva eden bir komposit içerir.

Kaplama. Tercihen bilesim kaplanmis nanopartikülleri içerir.

Materyalin Tipi Özellikleri Örnek Niteligindeki Materyaller Bir substrat veya analite Biyotanimlayici atinitesi veya aviditesi Antikor, peptit, faj,DNA, RNA materyal olan kisim Biyoaktif materyal veya hücrenin hücre yüzey reseptörleri, reseptör ligandlari, 01589-P-0002 Materyalin Tipi Özellikleri aktivitesini sorgulayan veya modüle eden kisim (örnegin protein, analit) Canli maddeden temin Biyolojik materyal . edilen materyal Biyolojik maddeyi Biyosit materyal bozmada aktif olan materyal Bir elektrik alani ile Dielektrik . . ' polarize edilebilecek materyaller olan bir yalitkan Baglanma, biyolojik veya kimyasal Kemotanimlayici . i _ . reaksiyonlar içm bir materyal . _ kisimla etkilesebilen materyal . . Bir maddenin Kimyasal aktif dönüsümüne yol açan materyal materyal Uzun Zincirli molekül (do'rusal ve a Polimer/dendrimer g y dallanmis, blok veya ko- Örnek Niteligindeki Materyaller G-protein, kinaz / fosfataz Albumin, ovalbumin, yumurta proteini, süt proteini, diger gida, bitki, hayvan, bakteri, maya veya rekombinant olarak türetilmis protein; enzimler, lipitler, peptitler; yag asitleri, sekerler Sentetik veya dogal pestisitler, sentetik veya dogal antimikrobiyaller Silikon, katkili yari iletkenler Reseptör, reseptör ligandi, kimyasal molekül Aldehit, halojenler, metaller PLGA, PEG, PEO, polistiren, karboksilat stiren, kauçuklar, naylonlar, silikonlar, polisakkaritler 01589-P-0002 Materyalin Tipi Çevresel olarak hassas polimer Hidrojel Yari iletkenler Bir floresan marker içeren polimer Matris Özellikleri Ortamina göre degisen yüzey molekülü (örnegin asit) Yüksek hidrofiliklige ve su "siralama" kapasitesine sahip polimer Gelismis rezonans ve/veya islevsellestirme elde etmeye yönelik ince metal kaplama Plazmon rezonansini iyilestiren yari iletken tabaka veya çekirdek Bir polimer kaplamaya veya dogrudan yüzeyine çapraz baglanan florofor partikülün Nanopartiküllerin çözünürlügünü artiran ve/Veya biyolojik yapilara "yapiskanligi" azaltan matris kaplama Örnek Niteligindeki Materyaller Ph'a duyarli bag, isiga duyarli bag, isiya duyarli bag, enziine duyarli bag, hidrolitik bag Sentetik 2-hidroksietil metakrilat (HEMA) bazli, polietilen glikol (PEG) bazli, PLGA, PEG-diakrilat; Dogal iyonik jeller, aljinat, j elatin, hyalüronik asitler, fibrin Altin, gümüs, nikel, platin, titanyum ve paladyum.

Silikon ve galadyum..

Fluoresin, rodamin, Cy5, Cy5.5, Cy7, Alexa boyalari, Bodipy boyalari poliakrilamid, polietilen glikol, polivinil pirolidon, polisülfon, polistiren selüloz, karbopol.

Biyolojik moleküller. Bilesim bir peptit, bir nükleik asit, bir protein veya bir antikor içerebilir. Örnegin, bir foliküler kök hücrenin proteinini (örnegin keratin 15) baglayan bir protein, antikor, peptit veya nükleik asit, bir hücre veya kök 01589-P-0002 hücre üzerindeki bir protein, glikomatris veya lipid, hücre disi matrisin veya bazal membranin bir proteini, peptidi, glikomatrisi.

Yüklü kisimlar. Kapli nanopartiküller yüklü kisimlari içerebilecek olup, burada bu yükler, elektrostatik veya kimyasal etkilesimler vasitasiyla kil folikülünün içindeki veya disindaki bilesenlere baglanmanin iyilesmesine veya azalmasina aracilik eder.

Kisim Sinifi Polar kisimlar Non-polar kisimlar kisimlar Iyonik kisimlar kisimlar kisiinlar Oksidatif kisimlar Hidrofonik kisimlar Özellikleri Nötral yüklüdür, ancak suda hidrofilikligi artirir çözünürlügü iyilestirir Zeta potansiyelini, izoelektrik noktayi veya pKa'yi degistiren ve adsorpsiyonu/ tamamlayici yüklü bilesiklere baglanmayi etkileyen islevsel yüzey modifikasyonlari Tek bir iyona sahip yüzey gruplari Bir hidrojen iyonu veren gruplar kisimlar Oksidize olan kisimlar Susuz çözeltide çözünürlügü iyilestiren ve/veya deri üzerinde bir Örnek Niteligindeki Kisimlar Hidroksil gruplari, izotiyosiyanitler Hidrokarbonlar, miristollenmis bilesikler, silanlar, izotiyosiyanatlar Aminler, karboksilik asitler, hidroksiller Amonyum tuzlari, klorür tuzlari Amidler, hidroksitler, metal oksitler, tluorid Karboksilik asitler, sülfonik asitler, mineral asitleri Manganez iyonlari, reaktif oksijen türleri Hidrokarbonlar, miristollenmis bilesikler, Silanlar 01589-P-0002 Kisim Sinifi Özellikleri Örnek Niteligindeki Kisimlar kil folikülü içindeki adsorpsiyonu iyilestiren kisimlar Hidrofilik Suyu seven ve adsorpsiyonu önleyen PEG, PEO, PLGA kisimlar kisimlar Agnostik Bir hedef hücreyi, yapiyi veya Antikorlar, peptitler, proteinler kisimlar ilgilenilen proteini baglayan kisimlar Antagonistik Ilgilenilen bir hedefe baglanmayi Antikorlar, peptitler, proteinler kisimlar bloke eden kisimlar Biyolojik veya biyolojik olmayan Reaktif bilesenlerle reaksiyona girerek hedef Aldehitler kisimlar üzerindeki yapida degisik ortaya çikaran kisimlar Hedef d0kularin tarifi.

Topik ve Dermatoloiik Uygulamalar. Topik ve dermatolojik uygulamalar için hedef dokular, derinin yüzeyini, epidermisi ve dermisi içerir. Topik ve dermatolojik uygulamalarla tedavi için uygun hastaliklar ve durumlar akneyi, Sigiller, mantar enfeksiyonlari, psöryazis, yara uzaklastirma, kil uzaklastirma, kil büyümesi, hipertrofil yaralarin veya keloidlerin azaltilmasi, deri uyumsuzluklari (örnegin doku, renk, ton, esneklik, hidrasyon) ve habis ya da habis olmayan deri tümörlerini içermektedir.

Burada kullanildigi sekliyle "akne" ifadesi, akne vulgarisin yani sira akne aestivalis, akne konglobata, akne kozmetik, akne fulminans, akne keloidalis nukae, akne mekanika, akne miliaris nekrotika, akne nekrotika, klorakne, ilaçla indüklenen akne, ekskoriye akne, halojen akne, lupus miliaris disseininatus 01589-P-0002 fasieyi, pomad akne, tar akne ve tropikal akne de dâhil olmak üzere baska akne formlarini ve ilgili kütanöz durumlari içerir.

Subdermal Uygulamalar. Burada subdermal uygulamalar için hedef dokular, integumental sistemin altindaki adipoz doku ve bag dokuyu içerir.

Subdermatolojik uygulamalar ile tedavi için uygun hastaliklar ve durumlar kirisikliklari ve dövmeleri içerir. Diger uygulamalar, deri tazelenmesini ve/veya yenilenmesini, çatlaklarin azaltilmasini ve yag ablasyonunu içerir.

Genel olarak hedef dokunun bir spesifik alani bir kil folikülü, bir sebasöz bez, bir merokrin ter bezi, bir apokrin ter bezi, bir arektör pili kasi olup, bu alan içinde bir spesifik bölge hedeflenmistir. Örnegin kil folikülünün tümsek alani hedefleninistir. Bir uygulamada nanopartiküller kil folikülünün kök hücrelerini termal olarak uzaklastirmada faydali oldugu için, kil folikülünün kök hücrelerini içeren alanlar hedeflenme açisindan özel ilgi alani içinde bulunmaktadir.

Dolayisiyla hedef doku alanlari; kök hücre nisini, tümsegi, sebasöz bezi, dermal papillayi, korteksi, kütikülü, iç kök kilifini, dis kök kilifini, medullayi, Huxley katmanini, Henle katmanini veya pilori kasini içerebilir. Bu alanlarin her biri; hücreleri, kök hücreleri, bazal membrani, hücre disi matrisi, büyüme faktörlerini, analitleri veya kil folikülünün tazelenmesine aracilik eden diger biyolojik bilesenleri içerebilir. Bu bilesenlerin bozulmasi veya yikima ugratilmasi bir terapötik etki ortaya çikaracak, örnegin killarin yeniden uzamasina aracilik eden prosesleri yavaslatacak veya durduracak, sebasöz bezden sebuin salgilanmasini önleyecek, tümör hücrelerine zarar verecek veya engelleyecek, kirisikliklarin görünümü azaltacaktir. Ayrica bilhassa isinin etkili bir sekilde iletilebilecegi durumlarda, uzaklastirilmak istenen hedefe yakin bir noktada bulunan yapilar da hedeflenebilecektir.

Lokalizasyon Bölgeleri. Tercihen bilesimin uygulandigi bir memeli bireyin bir hedef alaninin bir bölgesine lokalize olan nanopartikülleri içeren bilesim saglanmaktadir. 01589-P-0002 Hedefleme kisimlari. Nanopartiküller üzerinde, hedef dokunun bir bölgesine baglanmalarini saglayacak sekilde seçici olarak mühendislik uygulanabilir. Örnegin, nanopartiküller, nanopartiküllerin hedef doku bölgesine etkili bir sekilde hedeflenebilmesi için bir biyolojik kisim araciligiyla bölgeye isler bir vaziyette baglanir. Tercihen, bu kisim, bir kök hücrenin bir bilesenini, bir projenitor hücreyi, bir hücre disi matris bilesenini, bir bazal membran bilesenini, bir kil gövdesi bilesenini, bir foliküler epitel bileseni veya bir non-foliküler epidermis bilesenini içerir. Biyolojik kisimlar; hücre yüzey reseptörleri, glikoproteinler veya hücre disi matris proteinleri gibi proteinleri ve ayrica karbohidratlari, analitleri veya nükleik asitleri (DNA, RNA) ve ayrica membran bilesenlerini (lipit çift katmanli bilesenler, mikrozomlar) içerir.

Delokalizasyon Bölgeleri. Bilesim içinde mevcut olan nanopartiküller, tercihen bir hedef doku alaninin bir bölgesinden delokalize olur. Delokalizasyon bölgeleri, bir dokunun, nanopartiküllerin büyük ölçüde birikmedigi veya alternatif olarak bölgeden daha etkili bir sekilde uzaklastirildigi spesifik alanlarini içerir. Tercih edilen uygulamalarda delokalizasyon bölgesi bir non-foliküler epidermis, dennis, bir kil folikülünün bir bileseni (örnegin bir kil kök hücresi, bir kök hücre nisi, bir tümsek, bir sebasöz bez, bir dermal papilla, bir korteks, bir kütikül, bir iç kök kilifi, bir dis kök kilifi, bir medulla, bir Huxley katmani, bir Henle katmani, bir pilori kasi), bir kil folikülü infundibulumu, bir sebasöz bez, bir sebasöz bezin bir bileseni, bir sebosit, bir sebositin bir bileseni veya sebumdur.

Enerji kaynaklari. Burada, çesitli isik kaynaklarini veya optik kaynaklari içeren dogrusal olmayan eksitasyon yüzey plazmon rezonans kaynaklari saglanmaktadir. Örnek niteligindeki isik kaynaklari; bir lazeri (iyon lazeri, yari iletken lazer, Q anahtarli lazer, serbest hareketli lazer veya fiber lazer), isik yayan diyodu, lambayi, günesi, bir floresan isik kaynagini ve bir elektroluminesan isik kaynagini 5000 nm ila yaklasik 10.000 nm veya daha fazla bir dalga boyunda isinim yayma kapasitesine sahiptir. Dogrusal olmayan eksitasyon yüzey plazmon rezonans 01589-P-0002 kaynagi, elektromanyetik isinim, ultrason, termal enerji, elektrik enerjisi, manyetik enerji veya elektrostatik enerji yayina kabiliyetine sahiptir. Örnegin yogunluktaki isinimdir. Optimum yogunluk, yaklasik 10 mikron ila çevre dokudaki yüzlerce mikronluk alan içinde plazmonik nanopartiküllerden yüksek termal gradyanlar indüklenecek, ama nanopartikülden yaklasik 100 mikronluk veya daha fazla bir yariçap içinde, partiküllerin yer almadigi dokunun isitilmasi üzerinde minimal kalinti etki gösterecek sekilde seçilir. Çesitli uygulamalarda, hedef doku alani ve diger doku alanlari (örnegin deri) arasindaki diferansiyel isi büyüktür.

Enerji, bir termal/kizilötesi kamera ile derinin yüzeyi üzerindeki termal isi gradyanlari izlenerek ayarlanabilir. Burada gösterildigi gibi, mevcut açiklamanin yöntemleri ve sistemleri, isinim aktivitesi ile nanopartiküller üzerinde bir yüzey plazmonu üretildiginde üstün bir etkililik saglamaktadir. Tipik olarak, plazmon, bir tek fotonlu modda veya alternatif olarak bir iki fotonlu modda, birçok fotonlu modda, bir basamakli modda veya bir yukari dönüsüm modunda üretilir. kaynagindan hedef doku alanina enerji salimina yönelik fiziksel vasitalar, bir fiberi, bir dalga kilavuzunu, bir temas ucunu veya bunlarin bir kombinasyonunu Optik kaynaklar, bir CW optik kaynak veya palsli bir optik kaynak içermekte olup, bunlar yaklasik 200 nm ila yaklasik 10.000 nm arasinda bir frekansta isinim yayma kabiliyetine sahip bir tek dalga boylu polarize (veya alternatif olarak polarize olmayan) optik kaynak olabilir. Alternatif olarak, optik kaynak, yaklasik 200 nm ila yaklasik 10.000 nm arasi bir dalga boyunda isinim yayma kabiliyetine sahip bir çok dalga boylu polarize (veya alternatif olarak polarize olmayan) optik kaynaktir. Palsli optik kaynak genellikle yaklasik 1 Hz ila yaklasik 1 THz arasi bir 01589-P-0002 frekansta palsli isinim yayma kabiliyetine sahiptir. Palsli optik kaynak, süre olarak bir milisaniyeden, mikrosaniyeden. nanosaniyeden, pikosaniyeden veya femtosaniyeden daha düsük bir pals kapasitesine sahiptir. Optik kaynak; deri yüzeyi üzerindeki partiküllerin veya yapilarin isinmasini azaltinak ve isinmayi daha dip tabakalardaki foliküller ya da doku yapilarina odaklamak için bir deri yüzeyi sogutma cihaziyla eslestirilebilir.

Nanopartikül içeren bilesimler. Hedef doku içine optimal dermal penetrasyon saglamak amaciyla, bazi uygulamalardaki plazmonik nanopartiküller çesitli bilesimler içinde formüle edilmektedir. Tercihen, nanopartiküller, %1-10 V/V sürfaktan (örnegin sodyum dodesil sülfat, sodyum lauret 2-sülfat, amonyum lauril sülfat, sodyum oktek-l/deset-l sülfat) içeren bilesimler içinde formüle edilir.

Sürfaktanlar sebum veya diger hidrofilik sivilari bozup emülsifiye ederek, hidrofilik nanopartiküllerin kil folikülüne, infundibuluma, sebasöz beze veya derinin diger alanlarina daha iyi bir sekilde hedeflenebilmesini saglar.

Sürfaktanlar ayrica hidrofilik nanopartiküllerin, kil gövdesi ve folikül arasindaki bosluk gibi küçük hidrofobik çatlaklar içine veya sebasöz bezin içine salinmasi için gereken serbest enerjiyi azaltir. Nanopartikül içeren bilesimler ayrica sulu çözeltiler, silikon/yag çözücüleri, propilen glikol veya kremler (örnegin alkol, yag, parafin, koloidal silika içerenler) içinde çesitli konsantrasyonlarda emülsiyonlari da içerebilir (%1-20 W/v). Baska uygulamalarda formülasyon; bir bozunabilir veya bozunmaz polimer, örnegin sentetik polilaktit/ko-glikolit ko- polimer, poröz laurillaktam/kaprolaktam naylon ko-polimer, hidroksietilselüloz, polielektrolit monotabakalari veya alternatif olarak hyaluronik asit, jelatin ve digerleri gibi dogal hidrojeller içerir. Baska uygulamalarda, formülasyon içine bir hidrojel PLGA, PEG-akrilat dâhil edilir. Alternatif olarak, formülasyon içinde silika, polistiren veya polietilen glikol gibi bir matris bileseni saglanir. Diger formülasyonlar, sürfaktanlarin bilesenlerini, bir lipit çift katmani, bir lipozomu veya bir mikrozomu içerir. Bir nanopartikül, daha büyük bir mikron boyutlu partikülü içerebilir. 01589-P-0002 Etkili dozlar. Burada tarif edildigi gibi, nanopartikül içeren bilesimlerin etkili bir dozu, bazi yönlerde, partiküllerin, bir hedef doku alaninda etkili bir isi gradyani olusturmak, böylece hedef doku alaninin bir kismi üzerinde, eksite edilen nanopartiküllerden elde edilen termal enerji ile aktivite gösterilmesini saglamak için gereken bir miktarini içerir. Bir "minimal etkili doz", nanopartiküllerin, bir bilesim içindeki, istenen biyolojik, fiziksel ve/veya terapötik etkiyi/etkileri elde etmek için etkili olan en küçük sayisi veya en düsük konsantrasyonudur. Tercihen, plazmonik nanopartiküller, bir veya çok sayida pik rezonans dalga boylarinda 10 O.D.-1000 O.D. arasi bir optik yogunluga sahiptir.

Kozmetik olarak kabul edilebilir tasivicilar. Çok sayida plazmonik nanopartikül ve bir kozmetik olarak veya farmasötik olarak kabul edilebilir tasiyici içeren kozmetik veya farmasötik bilesimler saglanmaktadir. Genel olarak, tasiyici ve bilesim, bir memeli bireyin derisine topik uygulama için uygun olmalidir, öyle ki, plazmonik nanopartiküller, derinin bir bileseninin seçici termomodülasyonu için etkili bir miktarda mevcuttur. Tercihen, nanopartiküller, epidermal deri bariyerinin bozulmasini saglamak, sebumu emülsifiye etmek, hidrofilik nanopartiküllerin hidrofobik çözeltilerle karismasini iyilestirmek ve hidrofilik partiküllerin, derinin hidrofobik alanlarina (örnegin kil gövdesi ve çevresindeki kilif ya da folikül arasina) salimi önündeki entropik bariyerleri azaltmak için %1- v/v sürfaktan içeren bir tasiyici ile formüle edilir (örnegin sodyum dodesil sülfat, sodyum lauret 2-sülfat, amonyum lauril sülfat, sodyum oktet-l/deset-l sülfat). Bazi uygulamalarda tasiyici bir polar veya non-polar çözücü içerir. Örnegin, uygun çözücüler asagidakileri içerir: alkoller (örnegin n-Butanol, izopropanol, n-Propanol, Etanol, Metanol), hidrokarbonlar (örnegin pentan, siklopentan, hekzan, siklohekzan, benzen, toluen, 1,4-Di0ksan), klorofonn, Dietil- eter, su, propilen glikol ile su, asitler (örnegin asetik asit, formik asit), bazlar, aseton, izooktanlar, dimetil sülfoksit, dimetilformamid, asetonitril, tetrahidrofuran, diklorometan, etilasetat, tetrametilamonyum hidroksit, izopropanol ve digerleri. Baska uygulamalarda, materyallerin istenmeyen oksidasyonunu Önleyen antioksidanlar gibi bir stabilize edici ajan, selat 01589-P-0002 kompleksleri olusturan ve aksi durumda katalizör olarak aktivite gösterecek olan metal iyonlarin zerrelerini inaktive eden sekuestranlar, emülgatörler, iyonik veya non-iyonik sürfaktanlar, emülsiyonlarin stabilizasyonu için kolesterol veya fosfolipitler (örnegin yumurta sarisi lesitini, sodyum stearoillaktilat, sodyum bis(2-etilheksil-sülfosuksinat (AOT)), ultraviyole stabilizörler, ultraviyole isinimin zararli etkilerine karsi koruyucu maddeler, bilhassa plastikler saglanmaktadir. Baska uygulamalarda, bir kozmetik olarak kabul edilebilir tasiyici içeren bir bilesim, nanopartiküllerin bir süspansiyon içinde büyük oranda mevcut olmasini saglayacak sekilde olusturulur.

Diger bilesenler de tercihe bagli olarak dâhil edilmekte olup, bunlar bir emülsiyonu, polimeri, hidrojeli, matrisi, lipit çift katmanini, lipozomu veya mikrozomu içerir. Ilave olarak, tespit edilebilir bir renklendirici (örnegin bir pigment), bir koku, bir nemlendirici ve/veya bir deri koruyucusunun dâhil edilmesi tercihe baglidir. Bazi örneklerde, formülasyon, milipaskal saniye (mPa-s) cinsinden ölçüldügü sekilde 0.1-1000,in üstünde, altinda veya içinde bir viskoziteye sahiptir.

Bir bilesim içinde her milimetredeki nanopartikül miktarlari, spesifik baglanma 9 ila 10'8 partikül araliginda degiskenlik için modifikasyona tabi olup, 10 gösterebilir, ancak genellikle her mililitrede yaklasik 1011 ila 1013 nanopartikül düzeyindedir. Bir hedef alana yönelik artan nanopartikül konsantrasyonunun arzu edildigi çesitli uygulamalarda, bilesimler 10 0D. - 1000 O.D'lik optik yogunluklara veya 1000 O.D.`nin üzerindeki optik yogunluklara sahip partikül konsantrasyonlari içerir. Bazi uygulamalarda bu degerler, nanopartiküllerin, yaklasik %0.l-10 w/w veya üstündeki konsantrasyonlarina karsilik gelir.

Nanopartikül formülasyonlarinin uygulanmasindan önce, nanopartiküllerin bir hedef alana salimini artirmak için deri ve kil folikülleri ön muameleye tabi tutulabilir. Bazi uygulamalarda kil gövdeleri; kil gövdesini ve/veya kil folikül pluglarini uzaklastirip, nanopartiküllerin birikebilecegi bir bosluk olusturmak 01589-P-0002 üzere tiraslama, agdalama, siyanoakrilat yüzey peelingi, kalsiyum tiyoglikolat muamelesi ve baska tekniklerle kesilebilir veya uzaklastirilabilir. Aktif veya inaktif foliküllerin delikleri, korneositlerden ve/veya baska materyallerden olusan pluglarla bloke edilebilir (örnegin hücre debrisi, kurum, hidrokarbonlar, kozmetikler). Bazi uygulamalarda, mekanik eksfoliyasyon (örnegin tuz isiltisi veya mikrodermabrasyon) ve kimyasal eksfoliyasyon (örnegin enzimler, alfahidroksi asitleri veya betahidroksi asitleri) da dâhil olmak üzere yüzey eksfoliyasyon ile ön muamele, foliküllerin deliklerinden pluglari uzaklastirarak, nanopartikül formülasyonlarinin kil folikülü içindeki hedef alanlara hedeflenmesini artirir.

Bazi uygulamalarda nanopartikül formülasyonlari bir sünger aplikatörü, bez aplikatörü, elle veya eldivenli el ile dogrudan temas, sprey, aerosol, vakumlu emme, yüksek basinçli hava akisi veya yüksek basinçli sivi akisi, silindir, firça, düzlemsel yüzey, yari düzlemsel yüzey, agda, ultrason ve baska sonik kuvvetler, mekanik vibrasyonlar, kil gövdesi manipülasyonu (çekme, masaj dâhil), fiziksel kuvvet, termal manipülasyon ve baska muameleler ile uygulama için formüle edilir. Bazi uygulamalarda nanopartikül formülasyon muameleleri tek basina, kombinasyon halinde, sirali olarak veya 1-24 arasi tekrarlar ile gerçeklestirilir.

Diger uygulamalarda, plazmonik nanopaitiküller derinin bir birinci bilesenine seçici olarak lokalize olma kabiliyetine sahip olup, burada fiziksel masaj veya baski, ultrason ya da isi, nanopartiküllerin bu birinci bilesene seçici lokalizasyonunu artirir. Ilave olarak nanopartiküller derinin, birinci bilesen disindaki bilesenlerinden seçici olarak uzaklastirilabilmekte olup, bu uzaklastirma islemi, aseton, alkol, su, hava, deri peelingi, kimyasal peeling ve agda ile veya plazmonik bilesimin azaltilmasi ile gerçeklestirilir. Ayrica bazi uygulamalarda nanopartiküller, tasiyici içindeki nanopartiküllerin çözünürlügünü artirmak ve/veya "yapiskanligi" ve hedef disi alanlardaki birikmeyi azaltmak için bir kaplama tabakasina sahiptir. Burada tarif edilen konu, uygulamalari saglamakta olup, burada nanopartikülün bir dis yüzeyinin en az bir kismi, bir polimer, polar monomer, non-polar monomer, biyolojik bilesik, bir metal (örnegin metalik ince 01589-P-0002 film, metalik kompozit, metal oksit veya metalik tuz), bir dielektrik veya bir yari iletken tabakasini içermek üzere modifiye edilir. Alternatif olarak, dis yüzey modifikasyonu; polar, non-polar, yüklü, iyonik, bazik, asidik, reaktif, hidrofobik, hidrofilik, agonistik veya antagonistiktir. Plazmonik nanopartiküllerden olusan bir çözelti içinde en az bir nano partikülün en az bir boyutunun 50-100 nm altinda oldugu belirli uygulamalarda, nanopartikül yüzeyi, bu boyutu veya partikülü 50- 100 nm veya üstüne artirmak üzere 10-100 nm veya üstü bir kalinliga sahip bir matris (örnegin silika) ile kaplanabilir. Boyuttaki bu artis, bütün nanopartiküllerin bir hedef alana (örnegin kil folikülüne) salimini artirabilir ve hedef disi alana (örnegin dermise) salimi sinirlayabilir.

Penetrasyon araçlari.

Tercihen mevcut açiklamanin bilesimleri topik olarak uygulanmaktadir. Burada plazmonik partiküllerin, yüksek frekansli ultrason, düsük frekansli ultrason, masaj, iyontoforez, yüksek basinçli hava akisi, yüksek basinçli sivi akisi, vakum, Fraksiyonel Fototermoliz lazeri ile ön muamele veya dermabrasyon ya da bunlarin bir kombinasyonu kullanilarak, deri yüzeyinden, bir kil folikülü, bir kil folikülünün bir bileseni, bir folikül infundibulumu, bir sebasöz bez veya bir sebasöz bezin bir bileseni de dâhil olmak üzere dennal dokunun bir bilesenine yeniden salinmasina yönelik vasitalar sunulmaktadir. Örnegin, bu bilesiinler; bir sünger aplikatörü, bez aplikatörü, sprey, aerosol, vakumlu einme, yüksek basinçli hava akisi veya yüksek basinçli sivi akisi, elle dogrudan temas, ultrason ve baska sonik kuvvetler, mekanik Vibrasyonlar, kil gövdesi manipülasyonu (çekme, masaj dâhil), fiziksel kuvvet, termal manipülasyon veya baska muamelelerin kullanimi ile uygulanabilir. Nanopartikül formülasyon muameleleri tek basina, kombinasyon halinde, sirali olarak veya 1-24 arasi tekrarlar ile gerçeklestirilir. 01589-P-0002 Plazmonik nanopartiküllerin kozmetik ve terapötik kullanimlari.

Genel itibariyle, basvuru sahibi/sahipleri, nanopartikül bazli muamele yöntemleri kullanarak, dermatolojik durumlarin, hastaliklarin ve bozukluklarin kozmetik ve terapötik tedavisi için sistemler ve yöntemler meydana getirmistir.

Akne tedavisi.

Akne; beslenme, hormon dengesizligi, bakteriyel enfeksiyon (Propionibakteriyum akneler), genetik yatkinlik ve baska faktörlerin bir kombinasyonundan kaynaklanir. Burada akne tedavisi için tarif edilen nanopartikül bazli yöntemler ve sistemler, dermisin, sebasöz bezin ve kil folikülünün kozatif alanlarini odakli bir sekilde hedefleyebilmekte ve böylece, kimyasal muamele (peroksitler, hormonlar, antibiyotikler, retinoitler ve antienflamatuvar bilesikler), dermabrazyon, fototerapi (lazerler, mavi ve kirmizi isik muamelesi veya fotodinamik muamele) ya da cerrahi prosedürler de dâhil olmak üzere, teknikte bilinen mevcut yöntemlere göre avantajlara sahip olmaktadir.

Bilhassa lazer bazli teknikler giderek popülaritesi artan bir akne tedavisi halini almaktadir, ancak bunun önemli bir kisitlamasi, dogal pigmentlerde (örnegin yag, sebum), spesifik isik dalga boylarina karsi seçici absorpsiyon özellikleri bulunmamasi olup, öyle ki, bir hücrenin, yapinin veya doku bileseninin, bilhassa sebasöz bezlerde, infundibulumda ve kil folikülünün alanlarinda seçici isitilmasi islemi, hedef disi komsu doku isitilinadan gerçeklestirilememektedir. Burada tarif edilen nanopartiküller, dogal pigmentlerden anlamli derecede daha yüksek fototermal dönüsüm saglayarak, lazer enerjisinin, sebasöz bez, infundibulum ya da kil folikünün alanlarinda seçici fototermal hasara yönelik bir biçimde, spesifik hücrelere, yapilara veya dokunun bilesenlerine odaklanmasina izin vermektedir.

Burada tarif edilen materyallerin ve tekniklerin kullanilmasi, mevcut metodolojilerden daha uzun süreli akne tedavileri saglayabilir. Bazi 01589-P-0002 uygulamalarda, sebasöz bezin veya infundibulumun ayarlanmis seçici ablasyonu burada tarif edildigi sekilde gerçeklestirilir. Bilhassa, plazmonik nanopartiküller, sebasöz bez veya infundibuluin içindeki ya da buraya yakin kil foliküllerinin alanlarina spesifik olarak lokalize edilir.

Plazmonik nanopartiküller, standart lazerli kil uzaklastirma cihazlarindan yayilan göre kuvvetli absorpsiyon sergiler. Dolayisiyla hedeflenmis plazmonik nanopartiküllerin lazer isigi ile isinlanmasi, partiküllerden komsu sebuma, sebasöz beze, infiindibuluma ve akneye yol açan diger ajanlara isi isinimi indükler.

Kil uzaklastirma.

Burada deri tedavisi için tarif edilen yöntemler ve sistemler; lazer bazli teknikler, kimyasal teknikler, elektroliz, elektromanyetik dalga teknikleri ve mekanik teknikler (örnegin agda, cimbiz) da dâhil olmak üzere, teknikte bilinen mevcut yöntemlere kiyasla avantajlara sahiptir. Bu tür teknikler, pek çok bireyde kalici kil uzaklastirmasini yeterince saglayamamaktadir. Bilhassa, açik renk ila orta pigmentli killari olan bireyler bu tekniklerden yeterince faydalanamamakta olup, bu teknikler agri gibi yan etkiler meydana getirmekte ve kil uzaklastinnasi da dâhil olmak üzere faydali kozmetik etkiler saglainamaktadir. Lazer bazli teknikler çesitli uygulamalarda popülerdir, ancak bunlarin önemli bir kisitlamasi, dogal pigmentlerde (örnegin melanin), spesifik isik dalga boylarina karsi seçici absorpsiyon özellikleri bulunmamasi olup, öyle ki, bir hücrenin, yapinin veya doku bileseninin, bilhassa sebasöz bezlerde, infundibulumda ve kil folikülünün alanlarinda seçici isitilmasi islemi, hedef disi komsu doku isitilmadan gerçeklestirilememektedir. Burada tarif edilen nanopartiküller, dogal pigmentlerden anlamli derecede daha yüksek fototermal dönüsüm saglayarak, lazer enerjisinin, seçici fototermal hasara yönelik bir biçimde, spesifik hücrelere, yapilara veya dokunun bilesenlerine odaklanmasina izin vermektedir. 01589-P-0002 Burada, teknikte bilinen kil uzaklastirma tedavilerine kiyasla, bütün kil tiplerinin kalici bir sekilde azaltilmasi veya uzaklastirilmasi saglanmaktadir. Bazi uygulamalarda, burada tarif edildigi sekilde, kil gövdesinin ayarlanmis seçici ablasyonu ve tümsek alani içindeki kök hücrelerin ortadan kaldirilmasi saglanmaktadir. Bilhassa plazmonik nanopartiküller, kil folikülünün kök hücre bakimindan zengin bir bölgesi olan tümsek alani içindeki veya buraya yakin kil folikülü alanlarina spesifik olarak lokalize edilmektedir. Ayrica plazmonik nanopartiküller, kil gövdesi yapisinin ~%50-75'ine yakin bir konumda lokalizedir.

Plazmonik nanopartiküller, standart lazerli kil uzaklastirma cihazlarindan yayilan göre kuvvetli absorpsiyon sergiler. Dolayisiyla hedeflenmis plazmonik nanopartiküllerin lazer isigi ile isinlanmasi, partiküllerden komsu kök hücrelere (veya bazi durumlarda kil gövdesinin kendisinin yapisina) isi isinimi indükleyerek, hücre ölümüne ve normal rejeneratif yolagin bozulmaya ugramasina yol açar.

Habis olmayan ve habis deri tümörleri.

Habis olmayan, habis, melanoin ve melanoin olmayan deri kanserlerinin önlenmesi ve tedavisine yönelik lazer terapileri, agirlikli olarak fotodinamik terapi yaklasimlarina odaklanmis olup, burada isiga duyarli porfirinler deriye uygulanmakta ve lazer isigini lokalize etmek, reaktif oksijen türlerini üretmek ve toksik radikaller araciligiyla kanser hücrelerini yok etmek için kullanilmaktadir. Örnegin, lazer tedavisi ile kombine edilen 5-ALA, melanom olmayan deri kanseri aktinik keratozlarin tedavisi için FDA tarafindan onaylanmistir ve genis olarak yayilmis, cerrahi olarak tedavi edilemeyen veya tekrar eden bazal hücre karsinomlarinin (BCC) tedavisinde etiket disi bir sekilde kullanilmaktadir. Ancak bu prosedür, poriirin moleküllerinin spesifik olmayan alimi nedeniyle hastalarin isiga karsi hassasiyet, yanma, peeling, skarlasma, hipo ve hiper pigmentasyon ve baska yan etkiler yasamasina yol açmaktadir. Burada tarif edilen nanopartiküller, 01589-P-0002 dogal pigmentlerden ve boyalardan anlamli derecede daha yüksek fototermal dönüsüm saglayarak, lazer enerjisinin, seçici termomodülasyona yönelik bir biçimde, spesifik hücrelere, yapilara veya dokunun bilesenlerine odaklanmasina izin vermektedir.

Burada tarif edilen materyallerin ve tekniklerin kullanilmasi, mevcut metodolojilerden daha büyük düzeyli ve daha uzun süreli kanser tedavileri saglayabilir. Belirli düzenlemelerde spesifik hedef hücrelerin ayarlanmis seçici ablasyonu burada tarif` edilmektedir. Bilhassa plazmonik nanopartiküller, foliküler tümsek kök hücrelerinin ortaya çikarak nodüler bazal hücre karsinomlarini ve baska karsinomlari olusturdugu kil folikülü alanlarina spesifik olarak lokalize edilir. Plazmonik nanopartiküller ayrica, tümörlere yol açan ve yüzeyel bazal hücre karsinomlari için asil hücreyi içeren diger hedef hücrelere, örnegin interfoliküler epitele de salinabilir.

Plazmonik nanopartiküller, standart lazerli kil uzaklastirma cihazlarindan yayilan göre kuvvetli absorpsiyon sergiler. Dolayisiyla hedeflenmis plazmonik nanopartiküllerin lazer isigi ile isinlanmasi, partiküllerden komsu keratinosite, melanosite, foliküler tümsek kök hücreye, kanser hücresine veya kanser hücre prekürsörüne isi isinimi indükleyerek, hücre ölümünü ve kanserin önlenmesi ve tedavisi için hücre büyümesinin inhibe edilmesini saglar.

Subdermal Uygulamalar. Subderinal uygulamalar için hedef` dokular, integumental sistemin altindaki adipoz doku ve bag dokuyu içerir.

Subderrnatolojik uygulamalar ile tedavi için uygun hastaliklar ve durumlar kirisikliklari ve dövmeleri içerir. Diger uygulamalar, deri tazelenmesini ve/veya yenilenmesini, çatlaklarin giderilmesini veya azaltilmasini ve yag uzaklastirmasini Vasküler Uygulamalar. Burada vasküler uygulamalar için hedef dokular arterleri, 01589-P-0002 aiteriyolleri, kapilerleri, damarlari ve küçük damarlari içerir. Vasküler uygulamalar ile tedavi için uygun hastaliklar ve durumlar örümcek damarlari, sizintili kapakçiklari ve vasküler stenozisi içerir. Bilhassa, damar anormallikleri, vaskülatürü etkileyen kozmetik hastaliklarin veya durumlarin önemli bir kismini olusturmaktadir. Örümcek damarlar veya kusurlu venöz kapakçiklar gibi damar anormallikleri olan bireyler, agri, kasinti ve estetik bozuklugundan yakinir.

Ilave olarak, arterler, arteriyoller veya kapilerler de dâhil olmak üzere baska damarlarin ablasyonunun terapötik veya kozmetik fayda saglayabilecegi çesitli endikasyonlar mevcut olup, bunlar asagidakileri içerinektedir: 1) yag pedleri ve/veya yag hücreleri saglayan vaskülatüiün ablasyonu, 2) tümörleri/kanser hücrelerini destekleyen vaskülatürün ablasyonu, 3) vasküler dogum lekelerinin (porto sarabi lekeleri, hemanjiyomlar, maküler lekeler) ablasyonu, 4) damarlarin ablasyonunun, terapötik veya kozmetik fayda saglayacak sekilde doku yikimina ve apoptoza ya da bu damarlarla desteklenen hücrelerin nekrozuna aracilik ettigi herhangi bir baska endikasyon. Burada, kan içinde, odakli veya daginik bir sekilde yayilmis olan plazmonik nanopartiküllerden damarlarin bilesen(ler)inin seçici yikimi için burada tarif edilen bilesimleri kullanmaya yönelik yöntemler saglanmaktadir. Plazmonik nanopartiküller, yukarida tarif edildigi sekilde farmasötik olarak kabul edilebilir bir tasiyici ile kombine edilir ve intravenöz enjeksiyon yoluyla vücut içine gönderilir. Nanopartiküller kan içine yayilir ve bazi uygulamalarda spesifik vasküler dokulara lokalize olur. Akabinde nanopartiküller, kil uzaklastirma veya örümcek damar uzaklastirma gibi deri durumlarinin tedavisi için teknikte bilinen lazer veya isik bazli sistemlerle aktive edilir. Alternatif olarak, görüntülü veya görüntüsüz olarak yönlendirilen fiber optik dalga boyu bazli lazer veya isik sistemleri kullanilarak damarlar veya genis damarlar içindeki kan bilesenleri uzaklastirilabilir. Bir uygulamada hem nanopartikülleri enjekte etmek hem de optik dalga kilavuzu içinden isigi uygulamak için ikili isleve sahip bir cihaz kullanilabilir. Aktive edilmis nanopartiküller kan ve komsu dokuyu (damarlar, damar çeperleri, endotel hücreler, endotel hücreler üzerindeki veya içindeki bilesenler, endotel bazal 01589-P-0002 membrani içeren bilesenler, destekleyici mezenkimal dokular, hücreler veya damar etrafindaki hücre bilesenleri, kan hücreleri, kan hücre bilesenleri, baska kan bilesenleri) uzaklastirma sicakliklarina (38-50 santigrat derece veya üstü) kadar Burada, bir farmasötik olarak kabul edilebilir tasiyiciyi ve çok sayida plazmonik nanopartikülü, bilesimin intravenöz olarak temas ettigi bir vasküler veya intravasküler hedef doku bölgesinin termomodülasyonu indükleyecek kadar etkili bir miktarda içeren bir bilesim saglanmaktadir. Ayrica, plazmonik nanopartikülün bilesimi; antimikrovasküler endotel hücre antikorlarindan ve mikrovasküler endotel hücre yüzeyi reseptörlerine iliskin ligandlardan olusan gruptan seçilen bir mikrovasküler hedefleme vasitasi içerebilir. Ayrica, bir memeli bireyde bir hedef vasküler dokunun termoablasyonunu gerçeklestirmeye yönelik bir yöntem saglanmakta olup, bu yöntem, hedef vasküler dokunun bir alaninin, çok sayida plazmonik nanopartikül ve farmasötik olarak kabul edilebilir bir tasiyici içeren bir bilesim ile, plazmonik nanopartiküllerin etkili bir miktarinin, hedef vasküler alanin bir bölgesine lokalize olmasini saglayacak kosullar altinda temas ettirilmesi ve bu hedef doku alaninin, bir dogrusal olmayan eksitasyon yüzey plazmon rezonans kaynagindan, hedef vasküler alanin bölgesinin termoablasyonunu indükleyecek kadar etkili bir miktarda salinan enerjiye maruz birakilmasi adimlarini içerir.

Oral ve Nazal Uygulamalar. Oral uygulamalar için hedef dokular; agiz, burun, yutak, girtlak ve soluk borusunu içerir. Vasküler uygulamalar ile tedaviye uygun hastaliklar veya durumlar; oral kanseri, polipleri, girtlak kanserini, nazal kanseri ve Mounier-Kuhn sendromunu içerir.

Endoskopik Uygulamalar. Endoskopik uygulamalar için hedef dokular, mide, ince bagirsak, kalin bagirsak, rektum ve anüsü içerir. Vasküler uygulamalar ile tedavi için uygun hastaliklar ve durumlar; gastrointestinal kanser, ülseratif kolit, Crohn hastaligi, Iritabl Bagirsak Sendromu, Çölyak Hastaligi, Kisa Bagirsak Sendromu 01589-P-0002 ve giyardiyaz, tropikal sprue, tenya enfeksiyonu, askariyaz, enteris, ülserler ve Whipple hastaligi gibi bir enfeksiyöz hastaligi ve megakolonu içerir.

Termomodülasvon yöntemleri. Bir hedef doku alaninin termoinodülasyonunu gerçeklestirmeye yönelik yöntemler saglanmaktadir. Bir nanopartikül bilesimi olup, bu bilesim, çok sayida plazmonik nanopartikülü, bu plazmonik nanopartiküllerin etkili bir miktarinin hedef doku alaninin bir bölgesine lokalize olmasini saglayacak kosullar altinda içerir ve ayrica bu hedef doku alaninin, bir dogrusal olmayan eksitasyon yüzey plazmon rezonans kaynagindan, hedef doku alaninin terrnomodülasyonunu indükleyecek kadar etkili bir miktarda salinan enerjiye maruz birakilmasini içerir.

Spesifik olmayan bir sekilde baglanmis nanopartiküllerin uzaklastirilmasi. Derinin yüzeyinde lokalize olmus nanopartiküllerin uzaklastirilmasi, derinin aseton, alkol, su, hava, bir debridman ajani veya agda ile temas ettirilmesi ile gerçeklestirilir.

Alternatif olarak fiziksel debridman gerçeklestirilebilir. Alternatif olarak, plazmonik bilesik azaltilabilir. baska dalga boylarindaki, bilhassa infrared isik araligindaki lazer dalga boylari ile her cmz'de 1-60 JuFlük bir fluansta isinlanir. Sürekliden palsliya kadar çesitli Bir miktar enerji yansisa da, burada tarif edilen konunun avantaji, enerjinin daha küçük bir miktari deri tarafindan absorbe edilmekle birlikte, enerjinin önemli bir miktarinin partiküller tarafindan absorbe edilmesidir. Nanopartiküller; kil folikülüne, infundibuluma veya sebasöz beze, benzer hacimdeki diger deri bilesenlerine kiyasla, örnegin 1.1-100x daha fazla enerji absorbe edilmesini saglamaya yetecek bir konsantrasyonda salinmaktadir. Bu, bazi uygulamalarda, kil folikülü içindeki partiküllerin konsantrasyonunun, benzer hacimdeki diger deri bilesenlerine kiyasla lazer pikinde 1.1-100x'lik bir absorbans saglayacak sekilde temin edilmesi yoluyla elde edilmektedir. 01589-P-0002 Hedef deri yapilarinin (örnegin sebasöz bezler, infundibulum, kil folikülleri) ayarlanabilir bir sekilde yikima ugratilmasini saglamak için, uygun dalga boyuna sahip bir lazer veya baska eksitasyon kaynagi ile birlikte isik absorbe eden nanopartiküller kullanilmaktadir. Lazer isigi; tek veya birden fazla isik palslari ile sürekli veya aralikli bir sekilde uygulanabilir. Isinma yogunlugu ve fototermal hasarin meydana gelecegi uzaklik, isik maruziyetinin yogunlugu ve süresine baglidir. Bazi uygulamalarda lokalize termal yikim saglamak için palsli lazerler kullanilmaktadir. Bu tür bazi uygulamalarda, termal hasar alanlarini, partiküllerin lokalize etmek için degisen sürelerde palslar saglanmaktadir. Palslar süre olarak en az femtosaniye, pikosaniye, mikrosaniye veya milisaniyedir. Bazi uygulamalarda, dokuda nanopartikül isitmasindan kaynaklanan pik sicaklik en az derecedir. Palsli isitmanin kullanildigi bazi uygulamalarda, yüksek pik santigrat derecenin üzerine çikarilmaksizin, kil gövdesi içinde lokal olarak meydana gelir. Bazi uygulamalarda, hasari partikül konumuna yakin bir bölgeye lokalize etmek amaciyla, hedef deri yapilarinin (örnegin sebasöz bez ve/veya kil folikülü) içinde ve etrafinda gömülü partikül kaynakli olarak çok yüksek geçici isi gradyanlari elde etmek için kisa palslar (100 nanosaniye - 1000 mikrosaniye) kullanilir. Baska uygulamalarda, termal enerjiyi tümsek alanindaki veya diger bilesenlerdeki, lokalize partiküllerden 100 um'den daha uzak kök hücrelere lokalize etmek amaciyla isi gradyanlarini hedef yapidan uzaga çekmek için daha uzun pals uzunluklari (1-500 ms) kullanilmaktadir. Her cml'de 1-30 Jul*lük Iluanslar genellikle yüksek partikül konsantrasyonlarina ve dolayisiyla deriden daha yüksek absorbansa sahip (örnegin derinin her hacim absorbansinda 1.1-100 kat) folikülleri termal olarak uzaklastirmak için yeterlidir. Bu fluanslar genellikle halihazirda uygulanandan daha düsüktür (örnegin Diyot: 25-40 J/cmz, Aleksandrit: 20 J/cmz, Nd: YAG: 30-60 J/cmz) ve non-foliküler alanlara daha az hasar ve potansiyel olarak daha az agri verir. 01589-P-0002 Plazmon Rezonans Sistemleri. Burada, çok sayida plazmonik nanopartikül ve dogrusal olinayan bir eksitasyon kaynagi ihtiva eden bir yüzey içeren plazmon rezonans sistemleri saglanmaktadir. Tercihen yüzey, kozmetik veya terapötik tedavi için hedeflenen derinin bir bilesenidir (örnegin kil uzaklastirma için tümsek alani, akne önleme için infundibulum veya sebasöz bez). Sistemin bir bileseni olarak ayrica plazmonik nanopartikülleri deri yüzeyine salmak için; bir aplikatör, bir sprey, bir aerosol, vakumlu emme, yüksek basinçli hava akisi veya yüksek basinçli sivi akis gibi bir vasita da saglanmaktadir. Ayrica, plazmonik nanopartiküllerin, derinin bir bilesenine (örnegin kil folikülü, tümsek alani, sebasöz bez, infundibulum) lokalize edilmesi için vasitalar da saglanmaktadir.

Faydali yüzey salim vasitalari, yüksek frekansli ultrason, düsük frekansli ultrason ve isi üreten bir cihaz, inasaj, temas basinci ya da bunlarin bir kombinasyonunu Ayrica, derinin non-foliküler kismi üzerindeki nanopartikülleri uzaklastirmak için bir uzaklastirma vasitasi içeren sistemler de saglanmaktadir. Uzaklastirma vasitalari en az bir aseton, alkol, su, hava, kimyasal peeling, agda veya plazmonik bilesimi azaltan bir bilesik içerir.

Ayrica mevcut açiklamanin sistemleri, sürekli dalgali bir optik kaynak veya palsli bir optik kaynak üreten, dogrusal olmayan eksitasyon kaynagi saglar. Alternatif olarak, dogrusal olmayan eksitasyon kaynagi, elektromanyetik isinim, ultrason, termal enerji, elektrik enerjisi, manyetik enerji veya elektrostatik enerji üretme kabiliyetine sahiptir. Dogrusal olmayan eksitasyon kaynaginin, nanopartikülleri isinlama kabiliyetine sahip oldugu sistemler saglanmaktadir. Ayrica, dogrusal olmayan eksitasyon kaynagi, bir tek fotonlu modda, bir iki fotonlu modda, bir çok fotonlu modda, bir basamakli modda veya bir yukari dönüsüm modunda isleme kabiliyeti bulunur. Mevcut sistemlerde bir fiber, bir dalga kilavuzu, bir temas ucu veya bunlarin bir kombinasyonu kullanilabilir. 01589-P-0002 Bazi uygulamalarda sistem, bir sicaklik sensörü veya bir termal enerji detektörü gibi bir izleme cihazi içerir. Baska uygulamalarda sistemler ayrica dogrusal olmayan eksitasyon kaynagini modüle etmek için bir kontrol vasitasi (örnegin bir yüzeyin sicakligini veya yüzeye komsu bir hedef dokunun sicakligini tespit etmek için bir vasita içermekte olup, burada kontrol vasitasi, dogrusal olmayan eksitasyon kaynaginin yogunlugunu ve/veya eksitasyonunun süresini modüle eder. Bu tür uygulamalarda kontrol vasitasi tercihen dogrusal olmayan eksitasyon kaynaginin yogunlugunu, ki] folikülünün bir birinci bileseni, ki] folikülünün bir ikinci bilesenine göre seçici olarak termoablasyona ugratilacak sekilde modüle eder. Baska uygulamalarda, bir sogutma cihazi; folikül, deri veya sebasöz bezin daha derinlerine nüfuz eden nanopartiküllerin, komsu dokulari seçici olarak uzaklastiran sicakliklara isitilmasi esnasinda, yüzeydeki nanopartiküllerin veya derinin isinmasini minimize etmek amaciyla isinlanina sirasinda deriyle dogrudan temas ettirilir. Örnek niteligindeki bir hedef doku deridir. Deri tercihen bir kil folikülü ve/veya bir sebasöz bez içermekte olup, burada dogrusal olmayan eksitasyon kaynagi, derinin; örnegin deri sicakliginin 37°C'yi, örnegin 38°C'yi, 39°C'yi, 40°C'yi, asacak sekilde, yaklasik 50°C'ye ve üstüne ulasmasini saglamaya yetecek derecede isitilmasi suretiyle, bir kil folikülünün, bir infundibulumun, bir sebasöz bezin veya bunlarin bir bileseninin termomodülasyonunu etkilemek için etkili olan bir miktarda isitilmasi ile sonuçlanan bir enerji üretir.

Formülasvon Yöntemleri. Ayrica burada açiklandigi üzere kullanima yönelik uygun bir formda mevcut açiklamanin nanopartiküllerinin formüle edilmesine yönelik yöntemler saglanmaktadir, nanopartikül bilesimleri; a) çok sayida nanopartikül ve bir birinci çözelti içeren bir birinci karisim olusturulmasi suretiyle; 01589-P-0002 b) bir birinci çözücünün, bir ikinci karisim olusturmak üzere bir ikinci çözücü ile degistirilmesi suretiyle; ve 0) ikinci karisimin, kozmetik olarak veya farmasötik olarak kabul edilebilir bir tasiyici ile kombine edilmesi suretiyle meydana getirilir ve böylece bir nanopartikül bilesimi olusturulur.

Degistirme basamagi, tercihe bagli olarak, sivi kromatografi, bir çözücü degisim sistemi, bir santriiîij, çökelme veya diyaliz kullanilarak gerçeklestirilir. Tercihen, nanopartiküller, bir kontrollü azaltim basamagi veya bir oksidasyon basamagi araciligiyla yüzey modifikasyonuna tabi tutulur. Bu tür bir yüzey modifikasyonu; bir monomerin, polimerin veya biyolojik maddenin, nanopartikülün yüzeyine adsorbe edilmesi gibi bir kaplama basamagini içerebilir. Tipik olarak kaplama basamagi, nanopartiküllerin bir oksidatif ortam ile temas ettirilmesini içerir.

Ayrica kaplama basamagi, polimer kaplama olusturmak üzere monomer Burada tarif edilen yöntemler ayrica, nanopartiküllerin bir non-polar çözücü içinde çözülmesi ve ardindan çözünen nanopartikülleri bir emülsiyon içinde kapsüllemek üzere, bu nanopartiküllerin bir polar çözücü ile karistirilmasi basamaklarini içerebilir. Ayrica, %0.1-10'luk konsantrasyonlarda sürfaktanlarin (örnegin sodyum dodesil sülfat, sodyum Iauret 2-sülfat, amonyum lauril sülfat, sodyum oktek-l/deset-l sülfat) ilavesi, epidermal deri bariyerini bozmak, sebuinu emülsifiye etmek, hidrofilik nanopartiküllerin sulu çözeltiler içinde karismasini iyilestirmek için kullanilabilir. Ayrica, santrifügasyon veya liyofilizasyon gibi, nanopartiküllerin bir konsantrasyonu da uygulanabilir. Ayrica nanopartiküller isi veya isinim ile ön muameleden de geçirilebilir. Bir biyolojik maddenin veya çok sayida biyolojik maddenin nanopartiküllere konjuge edilmesini içeren tercihe bagli bir basamak da saglanmaktadir. Böyle bir konjugasyon basamagi; biyolojik maddelerin nanopartiküllere bir tiyol, amin veya karboksil ile baglanmasini içerebilir. 01589-P-0002 Hastaliklar ve bozukluklar. Mevcut açiklama, kirisikliklarin ve foto yaslanma ya da kronolojik yaslanmaya iliskin diger degisikliklerin tedavisi (genel olarak deri tazelenmesi olarak anilmaktadir), deri hastaliklarini içeren hastaliklarin tedavisi, aknenin ve rozase gibi ilgili hastaliklarin azaltilmasi, folikülit, psödofolikülit barbae veya psöryazis gibi proliferatif ya da papuloskuamöz bozukluklar, kil büyümesinin uyarilmasi veya azaltilmasi ve selülitin, Sigillerin, porto sarabi lekesi (PWS, nevüs Ilamöz), dogum lekesi gibi hipopigmentasyonlarin, hiperhidrozun, varikoz damarlarin, pigment problemlerinin, dövmelerin, vitiligonun, melazmanin, skarlarin, deri çatlaklarinin, mantar enfeksiyonlarinin, bakteriyel enfeksiyonlarin deimatolojik enflamatuvar bozukluklarin, kas iskelet sistemi problemlerinin (örnegin, tendonit veya artrit) azaltilmasi, cerrahi yaralarin iyilestirilmesinin gelistirilmesi, iyilesmenin hizlandirilmasi ve/veya skarlasmanin azaltilmasi ve minimize edilmesi için yanik tedavisi, deri içindeki sirkülasyonun iyilestirilmesi ve benzerlerine yönelik insan (veya baska hayvan) derisi üzerinde kullanilabilir.

Mevcut açiklama ayrica, kronik deri ülserlerini, diyabetik ülserleri, termal yanik yaralanmalarini, viral ülserleri veya bozukluklari, periodontal hastaligi ve diger dental hastaliklari içeren, ancak bunlarla sinirli olmayan yara iyilesmelerinin hizlandirilmasinda faydali olabilir. Mevcut açiklama ayrica belirli uygulamalarda kirisiklarin, skarlarin, çatlaklarin ve baska deri bozukluklarinin tedavisi için non- ablatif termal yara olusturma tekniklerini de içeren kozmetik cerrahi operasyonlarinin gerçeklestiriline sürecinde bir kesik veya yara olusturan cihazlarin etkisinin iyilestirilmesinde de faydali olabilir. Bu tür durumlarda, mevcut açiklamanin yöntemleriyle birlikte geleneksel non-ablatif termal tedavilerin kullanilmasi tercih edilebilir. Mevcut uygulama belirli uygulamalarda tedaviyi iyilestirmek için nanopartikül uygulamasi ile veya bu uygulamalar olmadan mikro veya yüzey abrazyonu, dermabrazyon veya derinin enzimatik ya da kimyasal peelingi veya topik kozmetik uygulamalar ile birlikte kullanilir, stratum korneumun (ve muhtemelen ilave epitel katmanlarin) uzaklastirilmasi bazi tedavi rejimlerinde fayda saglayabilmektedir. Mevcut açiklamanin yöntemleri 01589-P-0002 burada açiklandigi üzere özellikle ancak bunlarla sinirli olmamak üzere akne tedavisi ve kil uzaklastirilmasinda, kil büyümesi/kil folikülü uyarimi, habis ve habis olinayan deri tümörlerinin azaltilmasi/önlenmesi ve deri tazelenmesinde uygulama alanina sahiptir.

Burada tarif edilen dermatolojik olarak terapötik yöntemler, tek basina nanopartikül isinlamasi, nano veya mikropartiküllerle kombinasyon halinde nanopartikül isinlanmasi veya nano ya da mikropaitikülleri ve bir veya daha fazla terapötik ajani içeren bir bilesim ile nanopartikül isinlamasi kullanilarak olusturulabilir. Böyle bir nanopartikül isinlamasi bilinen herhangi bir nanopartikül jeneratörü ile üretilebilecek olup, tercihen odaklanmis nanopartikül dalgalarini üretme ve isinlaina kabiliyetine sahip bir odaklanmis nanopartikül jeneratörüdür. ÖRNEKLER Örnek 1. Termomodülasvon için plazmonik nanopartiküllerin üretilmesi.

Nano çubuklar, bos nano kabuklar, silikon nano kabuklar, nano plakalar, nano pirinçler, nano teller, nano piramitler, nano prizmalar, nano plakalar ve burada tarif edilen ve teknikteki uzman kisilerin bildigi diger yapilandirmalari içeren plazmonik nanopartiküller, yüzey özelliklerinin derin foliküler penetrasyonu kolaylastirdigi kosullar altinda l-lOOO nm boyut araliginda üretilir. Yüzey özellikleri, bir hedef doku bölgesinde nanopartikül konsantrasyonunu artirmak üzere bir veya daha fazla (2, 3 veya 4) farkli boyutlar arasinda degiskenlik gösterebilir. 10-200 um'lik foliküler açikliklar içine penetrasyon, burada tarif edilen nanopartiküller kullanilarak maksimize edilebilir. Burada, yaklasik 10 ila yaklasik 100 nm araliginda bir boyuta sahip nanopartiküller üretilmekte olup, bunlar tercihen 100-300 nm araliginda bir boyuta sahip çok partiküllü yapilar halinde birlestirilmekte veya formüle edilmektedir. Alternatif olarak, partikül boyutunu 100-300 nm veya üstü bir araliga çikarmak için tek partiküllü yapilar üzerinde bir kaplama (örnegin silika) meydana getirilmektedir. 01589-P-0002 Yüzey modifikasyonu uygulanmis plazmonik nanopartiküller. Yüzey modifikasyonu uygulanmis plazmonik nanopartiküllerin örnek niteligindeki bir peraparati asagida saglanmaktadir. Plazmonik nanopartiküller stabil setriltrimetilamonyum broinür (CTAB) kaplama ile sentezlenmekte ve 16.000 rcfde bir ila üç santrifukasyon döngüsü araciligiyla, üst faz dekantlama ile, 1 0D edilmektedir. Alternatif olarak CTAB kaplanmis nanopartiküller konsantre edilmekte ve PEG kapli nanopartiküller yapmak için 250 Amol/L 5-kDa metil polietilen glikol (PEG)-tiy01 içinde tekrar süspanse edilmektedir. PEG polimer stoklarinin tamamen azaltildigina dair dogrulama islemi, polimer-tiyollerinin tiyol aktivitesinin 5,5-ditiyobis(2-nitrobenzoik asit) ile bir DTT gradyana karsi Ölçülmesi için spektrofotometri kullanilarak gerçeklestirilir. Metil-PEG-tiyol çözeltisi ve CTAB-kapli nanopartiküller oda sicakliginda 1 saat karistirilir ve ardindan 4 L distile su içinde 24 saat boyunca 5 kDa MWCO'ya karsi diyalize edilir. Diyalize edilen numuneler, polimer fazlasini uzaklastirmak için 100 kDa filtreler içinden geçirilir. Her partiküldeki PEG polimerlerinin sayisinin belirlenmesi islemi, amino-PEG-tiyol polimerine sahip yüzey modifikasyon nanopartikülleri ile gerçeklestirilirken, aminlerin sayisi ise bir SPDP tayini ile belirlenir. Test formülasyonlari için distile su içinde 100 O.D.'1ik CTAB kapli plazmonik nanopartikül çözeltileri yapilir ve 100 O.D'lik PEG kapli plazmonik nanopartiküller ise distile su, etanol, DMSO veya mineral yagi içinde yapilir.

Silika kabuklu plazmonik nanopartiküller, nanopartiküllerin, tetra-etil-orto-silikat (TEOS), sodyum silikat, aminopropiltrietoksisilan (APTS) vb. gibi silikatlarla reaksiyona sokulmasi suretiyle 5-50 nm veya üstü kalinlikta olusturulur. Yalnizca vehikül içeren kontrol formülasyonlari nanopartikül ihtiva etmez.

Gömülü nanopartiküller. Nanopartiküller, boyutlarini ayarlamak için çok çesitli boyut araliklarina izin veren materyaller içine gömülür (veya kapsüllenir). 100- 2000 nm araligindaki partikül boyutlarinin, dermise nüfuz etmeden kil foliküline girdigi gösterilmistir. Nanopartiküller; silika, bir sentetik polilaktit/ko-glikolit ko polimer, poröz laurillaktam/kaprolaktam naylon ko-polimer, hidroksietilselüloz, 01589-P-0002 polielektrolit monotabakalari veya alternatif olarak hyaluronik asit gibi dogal hidrojeller içinde, plazmon rezonans özelliklerini önemli ölçüde degistirmeksizin kapsüllenebilir. Nanopartiküller, kovalent baglanma olmadan veya nanopartikül yüzeyindeki aminlerin, karboksillerin veya baska kisimlarin polimer yapisina nm'lik materyalin yüzeyi optimal zeta potansiyeli, hidrofiliklik/hidrofobiklik ve/veya adsorpsiyon tabakasi için, burada tarif edilen teknikler ile modifiye edilebilir. Ayrica polimerin çerçeve oraninin sekli, gömülen plazmonik nanopartiküllerin konsantrasyonlarini ve penetrasyon derinliklerini artirmak için düsükten yüksege modifiye edilebilir. Nanopartiküller avantajli bir sekilde yaklasik 1'in üzerinde bir çerçeve oranina sahiptir. Örnek 2. Topik salim için termoablatif plazmonik nanopartiküllerin formülasyonu.

Nanopartiküller, Örnek [de oldugu gibi, uygun bir çözücü kullanilarak (örnegin su, etanol, dimetil sülfoksit) olusturulabilir. Su içinde çok sayida nanopartikül içeren karisim yaklasik 100-500 0 O.D.`ye konsantre edilir ve sivi kromatografi, bir çözücü degisim sistemi, bir santrifüj, çökeltine veya diyaliz kullanilarak yeni bir çözücü ile degistirilir. Çözücü, bir alkol (örnegin n-Butanol, izopropanol, n- Propanol, Etanol, Metanol), bir hidrokarbon (örnegin pentan, siklopentan, hekzan, siklohekzan, benzen, toluen, 1,4-Di0ksan), kloroforrn, Dietil-eter, su, bir asit (örnegin asetik asit, formik asit), bir baz, aseton, dimetil sülfoksit, dimetilformamid, asetonitril, tetrahidrofuran, diklorometan veya etilasetat içerebilir. Yeni çözücü, kozmetik veya farmasötik olarak kabul edilebilir bir tasiyici ile kombine edilerek bir nanopartikül bilesimi meydana getirilir.

Genellikle partiküller ve tasiyici bir emülsiyon olusturacaktir.

Nanopartiküllerin kil folikülleri içine penetrasyonunu kuvvetlendiren veya hizlandiran plazmonik nanopartikül formülasyonlari saglanmaktadir. Bazi uygulamalarda nano ve mikroemülsiyonlar, kil folikülü gibi lipit bakimindan 01589-P-0002 zengin deri kisimlari içindeki bölünmeyi kolaylastirir. Bazi uygulainalarda nanopartiküller; epidermal deri bariyerinin bozulmasini saglamak, sebumu emülsif'iye etmek, hidrof'ilik nanopartiküllerin hidrofobik çözeltilerde karismasini iyilestirmek veya derideki hidrofobik bosluga (örnegin kil gövdesi ile çevresindeki folikül arasindaki bosluga) hedeflenmeyi saglamak için %0.5-2 v/v sürfaktan içeren bilesimler içinde formüle edilir. Nanopartikül fonnülasyonlari ayrica sulu çözeltiler, silikon/yag çözüeüleri, propileii glikol veya kremler (örnegin alkol, yag, parafin, koloidal silika içerenler) içinde çesitli konsantrasyonlarda (%1-20 W/V) da saglanir. Bazi uygulamalarda, ki] folikülleri içine isik absorbe eden nanopartikül girisini iyilestirmek için, özellestirilmis pH, sicaklik, ozmolit konsantrasyonu, Viskozite, uçuculuk ve baska karakteristiklere sahip çözeltiler içinde isik absorbe eden nanopartiküller kullanilir.

Formülasyonlar; nanopartikül stabilitesini (çözelti içindeki birikme derecesi), nanopartikül konsantrasyonunu ve nanopartikül absorbansini (farkli konsantrasyonlarda lazerle indüklenen isinmanin derecesi) maksimize etmek üzere hazirlanir.

Plazmonik nanopartiküllerin formülasyonlari, partikülün pik absorpsiyon dalga boyuna karsilik gelen bir dalga boyuna sahip bir klinik lazer ile aydinlatildiginda, formülasyon, geleneksel klinik absorptif boyalara kiyasla termoablatif sicakliklara daha hizli bir sekilde ve daha yüksek bir derecede isinir. Sekil 2, 1064 nm, 20 J/cmz, 55 ms lazer palslarina maruziyet sonrasinda, plazmonik partiküller ile (1020 nm pik apsorpsiyon dalga boyu) geleneksel klinik boyalar, karbon losyonu, meladin spreyi ve indosiyanin yesilinin sicaklik profilini karsilastirmaktadir.

Palsli 1064 nm lazer isiginin yol açtigi sicaklik artisi, ayni seyreltmede (klinik konsantrasyondan 1:1000 seyreltme olup, burada klinik konsantrasyonlar söyledir: karbon 20-200 mg/ml, meladin 1 mg/ml, indosiyanin yesili 5 mg/ml) kullanilan geleneksel klinik boyalar ile karsilastirildiginda plazmonik çözelti için 2.5 kat daha fazla bulunmustur. 01589-P-0002 Örnek 3. Kil termomodülasvonu için plazmonik nanopartiküllerin kullanimi.

Sari, kizil, kir veya açik renk killari olan bireyler mevcut isik bazli kil uzaklastirma teknikleri ile yeterince tedavi edilememektedir. Burada, tedavi edilemeyen sari, kizil, kir veya açik renkli killarin seçici olarak uzaklastirilmasi veya azaltilmasi için burada tarif edilen bilesimlerin kullanildigi yöntemler saglanmaktadir. Yukarida tarif edildigi sekilde üretilen ve formüle edilen plazmonik nanopartiküller bir hedef doku alanina, genellikle bir deri alanina yerlestirilmekte ve etkili bir kil uzaklastirrnasi elde etmek amaciyla, teknikte bilinen lazer bazli kil uzaklastirma Sistemleri ile aktive edilmektedir.

Kil folikülünde ve/veya sebasöz kanalini, sebumu, sebasöz bezin epitel baglantisini da içeren sebasöz bezin bilesenlerinin yaninda ve/veya kök hücrelerini, kök hücre nisini, tümsek alaninin epitelyal astarini içeren tümsek alaninin yaninda ve/veya foliküler soganin yaninda plazmonik nanopartiküllerin maksimum penetrasyon derinligini ve konsantrasyonunu elde etmek için, bir veya birkaç plazmonik nanopartikül içeren 30-800 nm'lik bir optimal partikül boyutu insa edilmektedir. Plazmonik nanopartikülleri kapsülleyen nanopartiküller herhangi bir sayida polimer veya matristen formüle edilebilir. Bazi uygulamalarda formülasyon; bir bozunabilir veya bozunmaz polimer, örnegin sentetik polilaktit/ko-glikolit ko-polimer, poröz laurillaktam/kaprolaktam naylon ko- polimer, hidroksietilselüloz, polielektrolit monotabakalari veya alternatif olarak hyaluronik asit, jelatin ve digerleri gibi dogal hidrojelleri içerir. Baska uygulamalarda, formülasyon içine bir hidrojel PLGA, PEG-akrilat dâhil edilir.

Tercihen, partikül stabilitesini iyilestirmek ve uygulama ve folikül hedeflemesi sonrasinda deri yüzeyinden kolay uzaklastirmayi mümkün kilmak amaciyla, formülasyon içinde silika, polistiren veya polietilen glikol gibi bir matris bileseni saglanir. Diger foimülasyonlar sürfaktanlarin bilesenini (örnegin sodyum dodesil sülfat, sodyum lauret 2-sülfat, amonyum lauril sülfat, sodyum oktet-l/deset-l sülfat), bir lipit çift katmani, bir lipozomu veya bir mikrozomu içerir. Nano çubuklari, nano kabuklari, nano küreleri, nano plakalari veya nano pirinçleri 01589-P-0002 içeren plazmonik nanopartiküller polimer içinde veya lipit bazli nanopartikül veya matris içinde kapsüllenebilir ya da partikül yüzeyi üzerinde biriktirilebilir. araligindaki veya 1500 nm'den büyük nanopartiküller kullanilabilir.

Derinin mekanik veya kimyasal eksfoliyasyon ile Ön muamelesi, kil pluglarini uzaklastirmak ve partikül salimi için folikülü "açmak" üzere bazi uygulamalarda kullanilir. Ilave olarak, partiküllerin doldurmasi için kil folikülünde bir bosluk meydana getirmek amaciyla killar tiraslanabilir veya agda yapilabilir. Fiziksel veya termal kuvvet kullanimi, kismen nanopatiküllerin uygulanmasi öncesinde kil folikülünün dilasyonunu saglamasi suretiyle, isigi absorbe eden nanopartiküllerin ve konjugatlarm kil foliküllerine penetrasyonunu kuvvetlendirir veya hizlandirir. amaciyla, örnegin ultrason ve baska sonik kuvvetler, mekanik vibrasyonlar, saç gövdesi manipülasyonu (çekme dâhil), fiziksel kuvvet, termal manipülasyon ve baska muamelelerden faydalanilir. Nanopartikül formülasyon muameleleri tek basina, kombinasyon halinde, sirali olarak veya 1-24 arasi tekrarlar ile gerçeklestirilir.

Nanopartiküllerin bilesimini foliküller içine tekdüze bir sekilde uygulamak için bir aplikatör kullanilir. Bu aplikatör bir sünger, bir bez, dogrudan parmak temasi, bir tüp, bir enjektör, emme uygulayan bir cihaz, bir aerosol, bir sprey veya teknikte bilinen baska vasitalar olabilir. Bir örnekte, bir yetiskin insan bireyin derisinin yaklasik 200 cm2'lik bir alanina enjektör yardimiyla, 810 nm'lik pik rezonansi ile 100 O O.D.'lik bir konsantrasyonda 1 ml'lik plazmonik nanopartiküllerden olusan bir formülasyon uygulanir. Çözeltiyi deri alani çevresinde ve kil folikülleri içinde esit bir sekilde dagitmak için bir bez kullanilir.

Partikülleri folikülün derinlerine göndermek için 5 dakikalik bir 1 MHz ultrason ile veya ultransonsuz olarak, 2 dakika boyunca bir mekanik vibrasyon cihaziyla derin masaj saglanir. Partiküller, deriyi, 100 um'lik bir yariçapta, bir Diyot (810 nm) lazer ile isinlandigi durumda komsu derinin benzer hacimlerinden üretilenden 01589-P-0002 -20 kat daha fazla artan sicakliklarda isitmaya yetecek konsantrasyonlarda, kil gövdesinin tam boyunun %50-75 asagisina nüfuz eder. Derinin non-foliküler isinmasini azaltmak veya önlemek amaciyla, folikül içinde birikmemis bütün partikülleri derinin yüzeyinden uzaklastirmak için aseton, etanol veya bir debridman ajani kullanilabilir.

Nanopartikül formülasyonlari ex vivo hayvan numunelerinde, ex vivo insan derisi numunelerinde ve in vivo insan derisinde test edilmekte olup, bu test, asagidakilerin degerlendirilmesini içermektedir: 1) saç foliküllerine nanopartikül penetrasyonunun derinligi; 2) elde edilen partikül konsantrasyonu; 3) salinan nanopartikül konsantrasyonlarinda elde edilen isinmanin derecesi; ve 4) geçici ve kalici kil uzaklastirmasi da dâhil olmak üzere, fototermal yikimin etkililigi, 5) muamele sonrasi nanopartiküllerin temizlenmesi. Nanopartikül penetrasyon derinliklerini degerlendirmek amaciyla, Iloresan moleküller ile yüzey islevsellestirmesi uygulanan plazmonik nanopartiküller, histolojik kesitleme veya foliküler biyopsi (saç gövdesinin uzaklastirilmasi) sonrasinda floresans mikroskopisi ile görsellestirilir. Alternatif olarak plazmonik nanopartiküller, histolojik kesitleme veya foliküler biyopsi sonrasinda karanlik alan mikroskopisi ile dogrudan görsellestirilir. Folikül boyunca çesitli derinliklerde nanopartikül konsantrasyonlarini degerlendirmek amaciyla, eksize edilen deri numuneleri bant ile soyma (tape stripping) veya isi bazli teknikler ile ayrilmakta, metal konsantrasyonunun lCP-MS (endüktif eslestirilmis plazma kütle spektrometrisi) ile bulk analizi için numuneler çözündürülmektedir. Makroskopik isitma derecesi, deri numunelerinin infrared termografisi ile ve lazer maruziyetine ugrayan deri bölümlerinin termal hasar markerleri açisindan degerlendirilmesi ile valide edilmektedir. Son olarak, nanopartikül birikme yerinde fototermal yikimin etkililigi, foliküler kil gövdesini, iç kök kilifini, dis kök kilifini ve yeni kil büyümesine katkida bulunan kök hücre nisini ihtiva eden tümsegi içeren hedef yerdeki histolojik hücresel lezyonlarin analiz edilmesi ile ölçülebilir. Tümsek alani genellikle kil gövdesinin yaklasik yari yolunda (uzunlugunun ~%50 asagi kisminda) lokalize oldugu için, kalici kil uzaklastirmasi, plazmonik 01589-P-0002 nanopartiküllerin bu derinlikte birikmesi ile yeterli bir sekilde elde edilir. Bazi durumlarda nanopartikül salimi ayrica kil gövdesinin daha da asagisina yayilan bir isi gradyani da olusturabilir. Hayvan çalismalari; inuainele edilmis kilsiz kemirgenlerde, albino kemirgenlerde ve koyu renk killi kemirgenlerde kil gövdesinin isi profilleri, termal ablasyonu ve tümsek kök hücrelerinin termal hasari karsilastirilarak pigmentsiz kil uzaklastirmanin etkililigini göstermek için faydalidir. Canli insan derisi üzerindeki etkililik 3 ve 12 aylik takiplerde kil sayimlari ölçülmek suretiyle ölçülmektedir. Nanopartiküllerin, dermise gömülme olmaksizin, deriden temizlendigini teyit etmek amaciyla 2, 4 ve 6 haftalik takiplerde seçilen hastalardan biyopsiler alinmaktadir.

Floresan olarak etiketlenen nanopartiküllerin, domuz derisi eksplantlari ve es odakli görüntüleme kullanilarak belirlenen kil folikülü penetrasyonu. 25 mg/ml'lik bir sulu Çözelti silikon diyoksit kapli nanopartiküller (200 nm çap) yeni çözülmüs domuz derisi ile temas ettirilmis ve bunun ardindan nanopartikül süspansiyonu fazlasi uzaklastirilip üç dakika boyunca elle masaj gerçeklestirilmistir. Eksplantin kesiti alinmis ve es odakli görüntülemeye tabi tutulmustur. Sekil 3A'da gösterildigi gibi, eksplant kesitleri 60 nm düzlemlerde kil foliküllerine açili bir sekilde görüntülenmistir; Düzlem 1, folikül infundibulumunu gösterirken, Düzlem 2 folikülün distal alanlarini göstermektedir. Sekil 3B, kirmizi nanopartiküllerin (548 nm absorbans) hem yüzeysel hem de derin foliküller içinde görünür oldugunu, ancak foliküllerin altindaki derrnal tabakalarda tespit edilemedigini gösteren temsili es odakli görüntüleri göstermektedir. Sekil 3C, bir derin folikül (~4OO um) içine lokalize edilen ve burada tutulan kirinizi nanopartiküllerin yüksek büyütmeli görüntüsünü göstermektedir. Yesil renk, doku otofloresansini belirtmektedir (488 nm).

Domuz derisi ve karanlik alan görüntülemesi kullanilarak belirlenen plazmonik nanopartiküllerin kil folikülü penetrasvonu. 100 O.D.lik bir plazmonik nanopartikül süspansiyonu (200 nm çap) yeni çözülmüs domuz derisi ile temas ettirilmis ve bunun ardindan nanopartikül süspansiyonu fazlasi uzaklastirilip üç 01589-P-0002 dakika boyunca elle masaj gerçeklestirilmistir. Bu prosedür toplam 3 kez uygulanarak tekrar edilmis ve yüzey artigi, su ve etanolün dönüsümlü bir sekilde 3-5 kez uygulanmasi suretiyle uzaklastirilmistir. Deri numunesi eksize edilmis, sabitlenmis, yatay düzlem boyunca kesiti alinmis ve koyu alan görüntülemesine tabi tutulmustur. Sekil 4A'da gösterildigi gibi, deri numunelerinin kesiti alinmis ve çesitli derinliklerde kil folikülüne yatay sekilde görüntülenmistir. Bu deri kesiti görüntülerinde, plazmonik nanopartiküller, domuz folikül bosluklarinda 1.2 mm'ye kadar olan derinliklerde parlak mavi renkli nokta kaynaklari olarak gözlemlenmistir (Sekil 4B). Plazmonik nanopartikül içermeyen kontrol numuneleri açikca birbirinden ayirt edilmektedir (Sekil 4C). Folikül boyunca çesitli derinliklerde nanopartikül konsantrasyonlarini degerlendirmek için deri kesitleri üzerinde ayrica lCP-MS de gerçeklestirilmistir Kilsiz kemirgenlerde. albino kemirgenlerde ve koyu renk killi kemirgenlerde nanopartiküllerin kil folikülü penetrasyonu. 8 haftalik beyaz killi Isviçre Webster farelerine (n=3) enjekte edilebilir ketamin/ksilazin anestetik çözeltisi ile anestezi uygulanmis ve dorsal sirt derisi ve kili yikanip kurutulmustur. Formülasyonun uygulanmasindan önce üç adet 10 cm x 10 cm alan her bir fare üzerinde permanent marker ile isaretlenmis ve 1) elektrikli tiras makinesi, 2) Nair depilasyon reaktifi veya 3) ilik agda/reçine karisimi uygulamasi ve siyinna ile kil uzaklastirma islemine tabi tutulmustur. Her bir fare, isaretlenmis deri alani basina dörtlü 5 url nokta boyutlarinda (her alan için 12 nokta veya fare basina 36 noktaya kadar), 3 nanopartikül formülasyonu ile pipet yardimiyla muamele edilmistir.

Kesin nokta konumlari, pipetle muamele öncesinde kalemle isaretlenmistir.

Dorsal sol taraftaki çift muamele noktalari 5 dakika boyunca deri içine masaj ile uygulanirken, dorsal sag taraftaki çift tedavi noktalari masaj yapilmadan uygulanmistir. Uygulamadari otuz dakika sonra fareler karbon diyoksitle bogularak ve servikal dislokasyon ile öldürülmüs ve deri dikkatlice eksize edilerek, nokta boyutlu isaretlemeler boyunca kesitler halinde zimbalanmistir.

Deri biyopsileri, %10 paraformaldehitle sabitlenmis, parafin içine gömülmüs ve çapraz yönlerde bir mikrotom üzerinde 5-um kesitler halinde kesilmistir. Parafin 01589-P-0002 kesitleri yerlestirilmis lamlar deparafinize edilmis ve hematoksilin ve eozin ile boyanmistir (H&E) veya karanlik alan mikroskopisi için boyanmamis halde tutulmustur. H&E boyama, isik mikroskopisi ve/veya karanlik alan mikroskopisi kullanilarak formülasyon basina 50'den fazla folikülün görüntüsü alinmis ve varsayimsal tümsek kök hücre nisinin bulundugu yerde ve folikül soganinin derinliklerinde kil gövdesi boyunca folikül içinde görünür makroskopik nanopartikül birikmesi açisindan deri kesitleri için puanlama yapilmistir. Seri histolojik kesitler üzerinde, metalik gümüsün çökeltilmesi yoluyla plazmonik nanopartikül sinyalinin genisletilmesi için sodyum tiyosülfat bazli bir gümüs gelistirme boyama kiti kullanilabilir. Faz ve karanlik alan mikrograflari alinmis ve her bir nanopartikül formülasyonu ile uygulama yöntemi için foliküler penetrasyonun derinliklerini kaydetmek için kullanilmistir. Folikül boyunca çesitli derinliklerde nanopartikül konsantrasyonlarini degerlendirmek için deri kesitleri üzerinde ayrica lCP-MS de gerçeklestirilmistir Nanopartikül birikme yerinde fototermal vikimin degerlendirilmesi. Domuz, insan veya fare derisinin muamele edilen alanlari, klinik parametreler (1 s 30-50 J/cm2 maruziyet ve 10-50 ms pals genisligi) kullanilarak nanopartiküllerin pik ansorpsiyon dalga boyuna karsilik gelen bir lazer ile (örnegin 1020 nm plazmonik partiküller için isinlanir. Uygulama ve isinlanma sonrasinda kil folikülü ve kil folikülü tümsek kök hücreleri gibi hedef deri yapilarinin mikroskopik fototermal hasarini belirlemek için insan bireylere, muamele alanlarini uyusturmak amaciyla lidokain enjeksiyonlari verilmis ve deri dikkatlice eksize edilip nokta boyutlu isaretlemeler boyunca kesitler halinde zimbalanmistir.

Taze insan derisi biyopsileri veya eksplante edilmis insan ve hayvan derisi numuneleri %10 paraformaldehitle sabitlenmis, parafin içine gömülmüs ve çapraz yönlerde bir mikrotom üzerinde 5-um kesitler halinde kesilmistir veya bunlar Zamboni çözeltisi içinde %2 pikrik asit ile sabitlenmis ve dondurucu kayan mikrotom ile kriyo-kesit alinmistir. Parafin kesitleri yerlestirilmis lamlar deparafinize edilmis ve hematoksilin ve eozin ile boyaninistir (H&E). Histolojik kesitler, çesitli derinliklerde, termal hasar ve entlamasyon markerleri açisindan 01589-P-0002 incelenmistir. Hematoksilin ve eozin (H&E), deri ve folikül mikroanatomisini görüntülemek ve kil gövdelerinin dejenerasyonunu, sebasöz bezlerin atrofisini ve hücre vakuolizasyonunu (hücre hasarinin isaretidir) göstermek için kullanilir.

Hücrelerin termal hasar görmesi sonrasinda kaybolan bir laktat dehidrojenaz boyasi olan Nitro mavi tetrazolyum klorür (NBTC), keratinositlerin aldigi hasari degerlendirmek için kullanilir. Plazmonik nanopartikül arti lazer muamelesi alan deri numunelerinin folikülleri içindeki hücre hasari puanlanir ve tek basina lazer muamelesi alanlarla karsilastirilir. Canli muamele edilmis insan derisi alanlari da plazmonik nanopartikül + lazer muamelesi sonrasinda veya tekrarlanan plazmonik nanopartikül + lazer muameleleri sirasinda klinik olarak 2 hafta ila 3 ay boyunca takip edilmekte ve ilk muamele öncesinde çekilen taban çizgisindeki dijital fotografla ve yalnizca lazer muamelesi yapilan negatif kontrolle karsilastirilmaktadir. Kil uzaklastirma ve ayrica eritema, ödem, sizi, iritasyon veya skarlasmaya iliskin klinik gözlemler, spesifik olinayan termal hasarin derecesini belirlemek üzere not alinmaktadir.

Plazmonik partikül kaplamasinin salimin spesifikligi ve fototermal isinma üzerindeki etkisi. Tercihen, partikül stabilitesini iyilestirmek ve uygulama ve folikül hedeflemesi sonrasinda deri yüzeyinden kolay uzaklastinnayi müinkün kilmak amaciyla, formülasyon içinde silika, polistiren veya polietilen glikol gibi bir matris bileseni saglanir. Derinin non-foliküler isinmasini azaltmak veya Önlemek amaciyla, folikül içinde birikmemis bütün partikülleri derinin yüzeyinden uzaklastirmak için aseton, etanol veya bir debridman ajani kullanilabilir. Sekil 5'te, canli insan derisi, lazer isinlamasi öncesinde silika kapli plazmonik partiküller ile karsilastirmali olarak, kaplanmamis plazmonik partiküller ile muamele edilmis ve partikül muamelesi almamis (yalnizca lazer) kontrollerle karsilastirilmistir. Kil pluglarini uzaklastirmak ve partikül salimi için folikülü "açmak" üzere jiletle tiraslama ve mikrodermabrazyon (15 saniye, orta ayar) da dâhil olmak üzere, her iki ön kol üzerinde derinin ön muamelesi gerçeklestirilmistir. Insan ön kol derisi tek basina (30 J/cmz, 30 ms, 2 geçis) 810 nm lazer palslari ile (Sekil 5A) veya %20 propilen glikol içinde 830 nm rezonant, 01589-P-0002 kaplanmamis plazmonik nanopartikül formülasyonuyla muamele sonrasinda (Sekil SB) isinlanmistir. Plazmonik nanopartikül formülasyonu 3 dakikalik masaj ile uygulanmis, 3 kez tekrar edilmis ve deri yüzeyi, su ve etanolün dönüsümlü bir sekilde 3 kez uygulanmasi suretiyle, lazer isinlamasi öncesinde temizlenmistir.

Lazer isinlamayi müteakip 30. dakikada, deri yüzeyindeki artik, kaplanmamis partiküllerin anlamli fototermal isinmasi nedeniyle spesifik olmayan klinik yaniklar gözlenmistir (Sekil SB). Canli insan derisi tek basina 1064 nm lazer palslari ile (40 J/cm2, 55 ms, 3 geçis) (Sekil SC) veya %20 propilen glikol içinde 1020 nm rezonant, silika kaplanmis plazmonik nanopartikül formülasyonuyla muamele sonrasinda (Sekil 5D) isinlanmistir. Plazmonik nanopartikül formülasyonu 3 dakikalik masaj ile uygulanmis, 3 kez tekrar edilmis ve deri yüzeyi, su ve etanolün dönüsümlü bir sekilde 3 kez uygulanmasi suretiyle, lazer isinlamasi öncesinde temizlenmistir. Lazer isinlamayi müteakip 30. dakikada, silika kapli partiküller deri yüzeyinden yeterince temizlenebildigi için deri yanmasi veya eritemaya dair bir iz görülmemistir (Sekil 5D). Silika kapli partiküller + lazer ile muamele edilen deri alaninin büyütülmüs fotografi, çevre veya partikül ile muamele edilmemis dokularda hasar olmaksizin, nanopaitikül hedefli bölgede spesifik fototermal hasar (perifoliküler eritema ve ödem) göstermistir (Sekil 6). Örnek 4. Akne tedavisi için plazmonik nanopartiküllerin kullanimi.

Burada, akne vulgaris ve diger aknelerin ve akne benzeri deri durumlarinin tedavisi ve sebasöz foliküllerin, bilhassa sebasöz bezlerin ve/veya kil foliküllerinin seçici hedeflenmesi için, burada tarif edilen bilesimlerin kullanimina yönelik yöntemler saglanmaktadir. Yukarida tarif edildigi sekilde üretilen ve formüle edilen plazmonik nanopartiküller bir hedef doku alanina, genellikle bir deri alanina yerlestirilmekte ve etkili bir kil uzaklastirmasi elde etmek amaciyla, teknikte bilinen lazer bazli kil uzaklastirma sistemleri ile aktive edilmektedir.

Kil folikülünde ve/veya sebasöz kanalini, sebumu, sebasöz bezin epitel 01589-P-0002 baglantisini da içeren sebasöz bezin bilesenlerinin yaninda ve/veya kök hücrelerini, kök hücre nisini, tümsek alaninin epitelyal astarini içeren tümsek alaninin yaninda ve/veya foliküler soganin yaninda plazmonik nanopartiküllerin maksimum penetrasyon derinligini ve konsantrasyonunu elde etmek için, bir veya birkaç plazmonik nanopartikül içeren 100-800 nm'lik bir optimal boyutlu partikül insa edilmektedir. Plazmonik nanopartikülleri kapsülleyen nanopartiküller herhangi bir sayida polimer veya matristen formüle edilebilir. Bazi uygulamalarda formülasyon; bir bozunabilir veya bozunmaz polimer, örnegin sentetik polilaktit/ko-glikolit ko-polimer, poröz laurillaktam/kaprolaktam naylon ko- polimer, hidroksietilselüloz, polielektrolit monotabakalari veya alternatif olarak hyaluronik asit, jelatin ve digerleri gibi dogal hidrojelleri içerir. Baska uygulamalarda, formülasyon içine bir hidrojel PLGA, PEG-akrilat dâhil edilir.

Tercihen, partikül stabilitesini iyilestirmek ve uygulama ve folikül hedeflemesi sonrasinda deri yüzeyinden kolay uzaklastirmayi mümkün kilmak amaciyla, forrnülasyon içinde silika, polistiren veya polietilen glikol gibi bir matris bileseni saglanir. Tercihen formülasyonlar sürfaktanlari (örnegin sodyum dodesil sülfat, sodyum lauret 2-sülfat, amonyum lauril sülfat, sodyum oktet-l/deset-l sülfat), bir lipit çift katmanin bilesenlerini, bir lipozomu veya bir mikrozomu içerir.

Sürfaktanlar epidermal deri bariyerini bozar, sebumu emülsifiye eder, hidrofilik nanopartiküllerin hidrofobik çözeltilerle karismasini iyilestirir ve hidrofilik partiküllerin, derinin hidrofobik alanlarina (örnegin kil gövdesi arasinda ve çevresindeki kilif ya da folikül) salimi önündeki entropik bariyerleri azaltir. Nano çubuklari, nano kabuklari, nano küreleri veya nano pirinçleri içeren plazmonik nanopartiküller polimer nanopartikülü veya matris içinde kapsüllenebilir ya da kullanilabilir.

Fiziksel veya termal kuvvet kullanimi, kismen nanopatiküllerin uygulanmasi öncesinde kil folikülünün dilasyonunu saglamasi suretiyle, isigi absorbe eden nanopartiküllerin ve konjugatlarin kil foliküllerine ve/veya sebasöz bezlere 01589-P-0002 penetrasyonunu kuvvetlendirir ve hizlandirir. Isigi absorbe eden nanopaitiküllerin kil folikülleri ve/veya sebasöz bezler içine girisini iyilestirmek amaciyla, örnegin ultrason ve baska sonik kuvvetler, mekanik vibrasyonlar, saç gövdesi manipülasyonu (çekme dâhil), fiziksel kuvvet, termal manipülasyon ve baska muamelelerden faydalanilir. Nanopartikül formülasyon muameleleri tek basina, kombinasyon halinde, sirali olarak veya 1-24 arasi tekrarlar ile gerçeklestirilir.

Plazmonik nanopaitiküllerin uygulanmasindan önce, kimyasal ve/veya mekanik vasitalar kullanilarak, derinin yüzeyinden sebum fazlasini uzaklastirmaya yönelik bir ön muamele basamagi uygulanabilir. Derinin mekanik veya kimyasal eksfoliyasyon ile ön muamelesi, kil pluglarini uzaklastirmak ve partikül salimi için folikülü "açmak" üzere bazi uygulamalarda kullanilir. Ilave olarak, partiküllerin doldurmasi için kil folikülünde bir bosluk meydana getirmek amaciyla killar tiraslanabilir veya agda yapilabilir.

Nanopartiküllerin bilesimini foliküller içine tekdüze bir sekilde uygulamak için bir aplikatör kullanilir. Bu aplikatör bir sünger, bir bez, dogrudan parmak temasi, bir tüp, bir enjektör, emme uygulayan bir cihaz, bir aerosol, bir sprey veya teknikte bilinen baska vasitalar olabilir. Bir örnekte, bir yetiskin insan bireyin derisinin yaklasik 200 cmz'lik bir alanina enjektör yardimiyla, 810 nm'lik pik rezonansi ile 100 O.D.'lik bir konsantrasyonda l inl'lik plazmonik nanopartiküllerden olusan bir formülasyon uygulanir. Çözeltiyi deri alani çevresinde ve kil folikülleri içinde esit bir sekilde dagitmak için bir bez kullanilir.

Partikülleri folikülün derinlerine göndermek için 5 dakikalik bir 1 MHz ultrason ile veya ultransonsuz olarak, 2 dakika boyunca bir mekanik vibrasyon cihaziyla masaj saglanir. Partiküller, deriyi, 100 um'lik bir yariçapta, bir Diyot (810 nm) lazer ile isinlandigi durumda komsu derinin benzer hacimlerinden üretilenden 5- kat daha fazla artan sicakliklarda isitmaya yetecek konsantrasyonlarda, kil gövdesinin tam boyunun ~%50 asagisina nüfuz eder. Derinin non-foliküler isinmasini azaltmak veya önlemek amaciyla, folikül içinde birikmemis bütün 01589-P-0002 partikülleri derinin yüzeyinden uzaklastirmak için aseton, etanol veya bir debridman ajani kullanilabilir. lnsan abdominoplasti derisi ve karanlik alan görüntülemesi kullanilarak belirlenen, nanopartiküllerin sebasöz beze salimi. Insan sebasöz bezi; kili, kil folikülünü, arektör pili kasini ve sebasöz bezi içeren pilosebasöz ünite içinde yer alir. Sekil 7A'da, kil folikülünü (HF), sebasöz bezi (SG) ve arektör pili kasini içeren temsili pilosebasöz ünite mikroanatomisini görsellestirmek için bir insan deri biyopsisine, Kolajen IV (bazal membran markeri, mavi) ve PGP 9.5'e (sinir markeri, yesil) karsi antikorlar ile immün boyama uygulanmistir. Nanopartikülleri kil folikülüne ve sebasöz beze salmak için deri ilk olarak ekstrüzyon yapan killari uzaklastirmak üzere tiraslama ile ön muameleye, kil pluglarini ve korneositleri uzaklastirmak üzere mikro dermabrasyona (15 saniye, orta ayar) ve partikül salimi için folikülün mikro kuyularini "açmak" üzere kimyasal depilasyona tabi tutulmustur. %1 sodyum dodesil sülfat (SDS) ve %20 propilen glikol (PG) içinde formüle edilen plazmonik nanopartiküllerin (200 nm çap) 100 O.D.'lik bir süspansiyonu eksize edilmis insan abdominoplasti derisi ile temas ettirilmis ve bunun ardindan nanopartikül süspansiyonu fazlasi uzaklastirilip üç dakika boyunca elle masaj gerçeklestirilmis, daha sonra da 5 dakika boyunca ultrason (1 MHz) uygulanmistir. Bu prosedür toplam 3 kez uygulanarak tekrar edilmis ve yüzey artigi, su ve etanolün dönüsümlü bir sekilde 3-5 kez uygulanmasi suretiyle uzaklastirilmistir. Deri numunesi eksize edilmis, sabitlenmis, yatay düzlemler boyunca kesiti alinmis ve koyu alan görüntülemesine tabi tutulmustur. Yatay deri kesitlerinin karanlik alan görüntülemesi ile degerlendirildigi sekilde, masaj ve ultrason ile uygulanan, plazmonik nanopartiküllerin %1 SDS/%20 PG'lik kozmetik olarak kabul edilebilir bir tasiyici ile bilesimleri insan folikülünün 400- 600 nm derinine, bilhassa sebasöz bezin içine salinabilir (Sekil 7B).

Insan derisinde folikül ve sebasöz bez salimi için kozmetik formülasyonlar.

Tercihen formülasyonlar sürfaktanlari (örnegin sodyum dodesil sülfat, sodyum lauret 2-sülfat, amonyum lauril sülfat, sodyum oktet-l/deset-l sülfat), bir lipit çift 01589-P-0002 katmanin bilesenlerini, bir lipozomu veya bir mikrozomu içerir. Sürfaktanlar epiderinal deri bariyerini bozar ve hidrofilik nanopartiküllerin hidrofobik çözeltiler içinde karismasini iyilestirmek için sebumu emülsifiye eder. Propilen glikol gibi nem tutucular, topik Viskozitesini iyilestirmeye yardimci olmak ve fizyolojik pH'i muhafaza etmek için kullanilir. Insanda sebasöz beze salim için örnek niteligindeki kozmetik forinülasyonlarin etkililigini ve mekanizmasini ortaya koymak amaciyla, deri ilk olarak ekstrüzyon yapan killari uzaklastirmak üzere tiraslama ile ön muameleye, kil pluglarini ve komeositleri uzaklastirmak üzere mikro deimabrasyona (15 saniye, orta ayar) ve partikül salimi için folikülün mikro kuyularini "açmak" üzere kimyasal depilasyona tabi tutulmustur. Iki ayri 100 O.D.'lik plazmonik nanopartikül süspansiyonu (200 nm çap) %1 sodyum dodesil sülfat ve %20 propilen glikol (SDS/PG) veya %1 sodyum lauret-2-sülfat ve %20 propilen glikol (SLES/PG) içinde formüle edilmistir. Formülasyonlar, eksize edilmis iki ayri insan abdominoplasti deri nuinunesi ile temas ettirilmis, 3 dakika boyunca masaj uygulanmis ve ardindan partikülleri foliküllerin derinlerine göndermek için 5 dakika ultrason (l MHz) uygulanmistir. Bu prosedür toplam 3 kez uygulanarak tekrar edilmis ve yüzey artigi, su ve etanolün dönüsümlü bir sekilde 3-5 kez uygulanmasi suretiyle uzaklastirilmistir. Deri numunesi eksize edilmis, sabitlenmis, yatay düzlemler boyunca kesiti alinmis ve partikül salimini degerlendirmek için koyu alan görüntülemesine tabi tutulmustur. Yatay deri kesitlerinin karanlik alan görüntülemesi ile degerlendirildigi sekilde, masaj ve ultrason ile uygulanan, plazmonik nanopartiküllerin %l SLES/%20'lik kozmetik olarak kabul edilebilir bir tasiyici ile bilesimleri insan folikülünün 400-600 um derinine, bilhassa sebasöz bezin içine salinabilir (Sekil 8B).

Ultrasona ve masaiin, insan foliküllerine ve sebasöz beze nanopartikül salimi üzerindeki karsilastirmali etkisi. Isigi absorbe eden nanopartiküllerin kil folikülleri ve/veya sebasöz bezler içine girisini iyilestirmek amaciyla, ultrason ve baska sonik kuvvetler, mekanik vibrasyonlar, kil gövdesi manipülasyonu (çekme dâhil), fiziksel kuvvet, termal manipülasyon ve baska muamelelerden faydalanilir.

Mekanik masaj, kil gövdesi 'pompalama' mekanizmalari içinden foliküler 01589-P-0002 penetrasyonu iyilestirirken, ultrason, derinin lipit çift katmaninin geçici olarak bozulmasi, baloncuk olusumu ve sivi mikro-akim yoluyla transdermal ilaç salimini iyilestirir. Ultrasonla eslestirilmemis masajin etkilerini karakterize etmek için deri ilk olarak ekstrüzyon yapan killari uzaklastirmak üzere tiraslama ile ön muameleye, kil pluglarini ve korneositleri uzaklastirmak üzere mikro dermabrasyona (15 saniye, orta ayar) ve partikül salimi için folikülün mikro kuyularini "açmak" üzere kimyasal depilasyona tabi tutulmustur. %1 sodyum dodesil sülfat (SBS) ve %20 propilen glikol (PG) içinde formüle edilmis bir 100 O.D.'lik plazmonik nanopartikül süspansiyonu (200 nm çap), eksize edilmis üç ayri insan abdominoplasti deri numunesi ile temas ettirilmistir. Muamele edilmis bu üç insan deri numunesinde, masaj yalnizca 3 dakika uygulanmis, ultrason yalnizca (1 MHz) 5 dakika uygulanmis ya da partikülleri foliküllerin derinlerine göndermek için masaj ve ardindan ultrason uygulanmistir. Dördüncü bir numunede deriye herhangi bir partikül uygulanmamistir. Bu prosedür toplam 3 kez uygulanarak tekrar edilmis ve yüzey artigi, su ve etanolün dönüsümlü bir sekilde 3-5 kez uygulanmasi suretiyle uzaklastirilmistir. Deri numunesi eksize edilmis, sabitlenmis, yatay düzlemler boyunca kesiti alinmis ve partikül salimini degerlendirmek için koyu alan görüntülemesine tabi tutulmustur. Yatay deri kesitlerinin karanlik alan görüntülemesi ile degerlendirildigi sekilde, ultrason ile uygulanan, plazmonik nanopartiküllerin %1 SLES/%20'lik kozmetik olarak kabul edilebilir bir tasiyici ile bilesimleri, masaja kiyasla, her ne kadar her iki mekanizma da salimi kolaylastirsa da, infundibuluma daha fazla plazmonik nanopartikül salmaktadir (Sekil 9).

Insan derisinde folikül ve sebasöz beze salima yönelik ilave plazmonik nanopartikül formülasyonlari. Bazi uygulamalarda, plazmonik nanopartiküller; nano çubuklari, nano kabuklari, nano küreleri veya nano pirinçleri içerir ya da plazmonik nanopartiküller; polimer nanopartikülü veya matris içine kapsüllenebilir ya da partikül yüzeyi üzerinde biriktirilir. Tercihen, partikül stabilitesini iyilestirmek ve uygulama ve folikül hedeflemesi sonrasinda deri yüzeyinden kolay uzaklastirmayi mümkün kilmak amaciyla, formülasyon içinde 01589-P-0002 silika, polistiren veya polietilen glikol gibi bir matris bileseni saglanir. Ilave plazmonik nanopartikül sekillerinin formülasyonunu ve folikül, infundibulum ve sebasöz bez salimi için konsantrasyonlari göstermek amaciyla, deri ilk olarak ekstrüzyon yapan killari uzaklastirmak üzere tiraslama ile ön muameleye, kil pluglarini ve korneositleri uzaklastirmak üzere mikro dermabrasyona (15 saniye, orta ayar) ve partikül salimi için folikülün mikro kuyularini "açmak" üzere kimyasal depilasyona tabi tutulmustur. Ayri olarak 10 O.D.'lik silika kapli nanoplaka süspansiyonlari, 30 O.D.'lik polietilen glikol kapli plazmonik nano çubuk süspansiyonu ve fluoresan silika partiküller %1 sodyum dodesil sülfat ve ayri insan abdominoplasti deri numunesi ile temas ettirilmis, 3 dakika boyunca masaj uygulanmis ve ardindan partikülleri foliküllerin derinlerine göndermek için dakika ultrason (l MHz) uygulanmistir. Bu prosedür toplam 3 kez uygulanarak tekrar edilmis ve yüzey artigi, su ve etanolün dönüsümlü bir sekilde 3-5 kez uygulanmasi suretiyle uzaklastirilmistir. Deri numunesi eksize edilmis, sabitlenmis, yatay düzlemler boyunca kesiti alinmis ve partikül salimini degerlendirmek için koyu alan görüntülemesine tabi tutulmustur. Yatay deri kesitlerinin karanlik alan görüntülemesi ile degerlendirildigi sekilde, ultrason ve masaj ile uygulanan, kozmetik olarak kabul edilebilir bir tasiyici içindeki polietilen glikol (PEG) kapli nano çubuk bilesimleri (altin, 15 x 30 nm boyut), 200 um derinlikte folikül infundibulumu içinde gözlemlenmistir (Sekil 10A).

Düsük konsantrasyondaki (10 0D.) plazmonik nanopartiküllerin bilesimleri (silika kapli nanoplakalar), 100 O.D'deki benzer bir kozmetik tasiyici içinde yer alan karsilastirilabilir partiküllere kiyasla daha düsük konsantrasyonda olmakla birlikte, folikül içinde ve sebasöz bez içinde 400-600 um derinlikte görünürdür (Sekil IOB).

Sebasöz bez ve hedeflenmis deri yapilarinin fototermal yikiminin degerlendirilmesi. Nanopartikül formülasyonlari, Örnek 3'te tarif edildigi gibi, ex Vivo hayvan deri numunelerinde, ex Vivo insan deri numunelerinde ve in Vivo insan derisinde test edilmektedir. Muamele edilen sebasöz foliküller içindeki 01589-P-0002 sebositlerin ugradigi termal hasar ve sebum üretimindeki azalma ölçülerek, nanopartikül birikme yerindeki fototermal yikimin etkililigi ölçülebilir.

Fototerrnal yikimi degerlendirmek amaciyla deri ilk olarak ekstrüzyon yapan killari uzaklastirmak üzere tiraslama ile ön muameleye, kil pluglarini ve korneositleri uzaklastirmak üzere mikro derrnabrasyona (15 saniye, orta ayar) ve partikül salimi için folikülün mikro kuyularini "açmak" üzere kimyasal depilasyona tabi tutulmustur. Deri, 810 nm rezonant plazmonik nanopartiküllerden (200 nm çap) olusan bir 100 O.D.'lik süspansiyon ile temas ettirilmis, 3 dakika boyunca masaj uygulanmis ve ardindan partikülleri foliküllerin derinlerine göndermek için 5 dakika ultrason (1 MHZ) uygulanmistir. Bu prosedür toplam 3 kez uygulanarak tekrar edilmis ve yüzey artigi, su ve etanolün dönüsümlü bir sekilde 3-5 kez uygulanmasi suretiyle uzaklastirilmistir. Muamele edilen insan deri numuneleri 810 nm lazer (40 J/cmz, 30 ms, 5 pals) ile isinlaninis ve yalnizca lazerle muamele edilen insan derisi ile karsilastirilmistir. Insan derisinin biyopsisi alinmis, Zamboni çözeltisi içinde %2 pikrik asit ile sabitlenmis ve donduruculu kayan mikrotom ile kriyo-kesit alinmistir. Parafin kesitleri yerlestirilmis lamlar deparafinize edilmis ve hematoksilin ve eozin ile boyanmistir (H&E). Histolojik kesitler, çesitli derinliklerde, termal hasar ve enflamasyon markerleri açisindan incelenmistir. Hematoksilin ve eozin (H&E), deri ve folikül inikroanatomisini görüntülemek ve kil gövdelerinin dejenerasyonunu, sebasöz bezlerin atrofisini ve hücre vakuolizasyonunu (hücre hasarinin isaretidir) göstermek için kullanilir. Hücrelerin termal hasar görmesi sonrasinda kaybolan bir laktat dehidrojenaz boyasi olan Nitro mavi tetrazolyuin klorür (NBTC), keratinositler ve sebosözitlerin aldigi hasari karsilastirmali olarak degerlendirmek için de kullanilabilir. Bir hücre içi boya olan Oil-Red-O, muamele edilen numuneler içindeki lipit ve sebum yagi içerigini belirlemek için kullanilabilir.

Sebum akisindaki islevsel degisimi göstermek için, sebum ekskresyon oranlari in vivo deri üzerinde 1-3 aylik takipte sebum-absorban teypler kullanilarak ölçülmüstür Akne lezyonlarinin temizlenmesi ve önlenmesi, hasta tarafindan bildirilen çiktilarla ve 1-3 aylik takipte akne lezyonlarinin sayilmasi ile ölçülmüstür. 01589-P-0002 Örnek 5. Vasküler ablasvon için termoablatif plazmonik nanopartiküllerin formülasyonunu.

Formülasyonlar; kan akimina enjekte edildikten sonra, nanopartikül stabilitesini (çözelti içindeki birikme derecesi), nanopartikül konsantrasyonunu ve nanopartikül absorbansini (farkli konsantrasyonlarda lazerle indüklenen isinmanin derecesi) maksimize etmek üzere hazirlanir. Nanopartiküller, uygun bir çözücü kullanilarak Örnek 1'deki gibi olusturulur. Su içinde çok sayida nanopartikül içeren karisim pik absorbansta yaklasik 100-500 O.D.'ye konsantre edilir ve sivi kromatografi, bir çözücü degisim sistemi, bir santrifüj, çökeltme veya diyaliz kullanilarak yeni bir çözücü ile degistirilir. Tipik degisim çözücüsü 0.15 mol/L NaCl, 0.1 mol/L Na fosfat tamponudur (pH 7.2). Örnek 6. Damarlarin ve mikro damarlarin bilesim(ler)inin termoablasvonu için plazmonik nanopartiküllerin kullanimi.

Nanopartikül içeren bilesimler, tipik olarak intravenöz yoldan uygulanmaktadir.

Plazmonik nanopartiküllerin bu sekilde uygulanmasini müteakip, partiküllerin pik lazer, nanopartikülleri ve çevre dokuyu isitmak için uygulanmaktadir. 20-200 nm'lik partikül veya partiküllerin yakininda termal isi gradyanlari ve lokalize pals genislikleri veya sürekli dalga isinlamasi kullanilmaktadir. 200nm-2um, 2- partiküllerden elde edilmektedir. Milimetre üstü termal gradyanlar, birkaç yüz mikron veya daha büyük çapli damarlar içinde pek çok partikülün ortak isi birikimi ile elde edilir. Isinlama, saniyeler ile dakikalar içinde 1 pals'tari pek çok palsa kadar uygulanir. Agriyi azaltmak ve baska yerdeki termal hasari önlemek amaciyla, isinlama ile es zamanli olarak epidermal tabakalar için bir sogutma cihazi kullanilmaktadir. Lazer konumu, fluans, dalga boyu, insidans açisi, isinlama paterni, 0-10 mm arasi spesifik derinliklerde damarlarin isinlanmasini 01589-P-0002 saglamak, bir yandan da hedef disi vaskülatürün isinmasini engellemek üzere modifiye edilmektedir. Alternatif olarak, lazer veya isik, daha büyük damarlardaki partikülleri isitinak için, bir kateter vasitasiyla uygulanan fiber optik dalga kilavuzu ile uygulanmaktadir.

Bir düzenlemede, 810 nm'de pik plazmon rezonansi ile PEG nano çubuklarinin enjeksiyonunun ardindan dokunun bir tarafi 2 W/cmz, 810 nm, 1 cm isin çapi ile isinlanmaktadir. Isinlamanin hemen ardindan dokunun yüzey sicakligini degerlendirmek için termografik görüntüleme kullanilmaktadir.

Damar, mikro damar veya kapilerlerin bilesen(ler)inin ugradigi termal hasarin degerlendirmesi. Uygulamadan otuz dakika sonra hedef damarlar ve çevredeki destekleyici doku (örnegin deri) uzaklastirilir. Biyopsiler, %10 paraformaldehit içinde sabitlenir, parafin içine gömülür ve çapraz yönlerde bir mikrotom üzerinde -um kesitler halinde kesilir. Parafin kesitleri yerlestirilmis lamlar deparafinize edilir ve hematoksilin ve eozin ile veya gümüs gelistirme boyama ile boyanir (H&E). H&E boyama ve isik mikroskopisi kullanilarak bir veya birkaç damar, mikrodamar ve kapiler görüntülenebilir. Damar yapilarinin görünür termal hasari için puanlama gerçeklestirilir. Ilave olarak, doku numuneleri içindeki vasküler yapilari açikça tespit etmek için damar boyama (örnegin CD31 boya) gerçeklestirilir.

Mevcut uygulama ve bulus ayrica asagidaki sayili istemlerin konusunu içerir: 1. Kozmetik olarak kabul edilebilir bir tasiyiciyi ve bilesimin topik olarak temas ettigi bir hedef doku bölgesinde termomodülasyonu indükleyecek kadar etkili bir miktarda çok sayida plazmonik nanopartikülü içeren bir bilesimdir. 2. Madde 1”e göre bilesimdir, burada plazmonik nanopartiküller, bir dogrusal olmayan çikarilan yüzey plazmon rezonans kaynagindan hedef doku bölgesine aktarilan enerjiye tabi tutularak aktive edilir. 01589-P-0002 3. Madde 1”e göre bilesimdir, burada plazmonik nanopartiküle bir metal, metalik bilesim, metal oksit, metalik tuz, elektrik kondüktörü, elektrik süperkondüktörü, elektrik yarikondüktörü, dieletrik, bunun bir kombinasyonundan kuantum noktasi veya kompozitini içerir. 4. Madde lle göre bilesimdir, burada bilesim içinde mevcut olan plazmonik partiküllerin büyük bir miktari, geometrik olarak ayarlanan nanayapilari içerir.

. Madde 1'e göre bilesimdir, burada plazmonik partiküller; nanoplakalar, kati nano kabuklar, bos nano kabuklar, nano çubuklar, nano pirinçler, nano küreler, nano fiberler, nano teller, nano piramitler, nano prizmalar, nano yildizlar veya bunlarin bir kombinasyonu dahil olmak üzere, isigi absorbe eden ve istenen bir dalga boyunda plazmon rezonansi üreten, hâlihazirda bilinen veya sonradan olusturulabilecek herhangi bir geometrik sekli 6. Madde lle göre bilesimdir, burada plazmonik partiküller gümüs, altin, nikel, bakir, titanyum, silikon, galadyum, paladyum, platinyum veya kromu içerir. 7. Madde l“e göre bilesimdir, burada kozmetik olarak kabul edilebilir tasiyici; bir katki maddesi, bir renklendirici, bir emülgatör, bir koku, bir nem tutucu, bir polimerize edilebilir monomer, bir stabilize edici, bir çözücü veya bir sürfaktan içerir. 8. Madde 73ye göre bilesimdir, burada sürfaktan asagidakilerden olusan bir gruptan seçilir: sodyum lauret 2-sü1fat, sodyum dodesil sülfat, amonyum lauril sülfat, sodyum oktek-l/deset-l sülfat, lipitler, proteinler, peptitler veya bunlarin türevleri. 9. Madde 7°ye göre bilesimdir, tasiyicinin agirlikça yaklasik %0.l°i ile yaklasik %10.01 arasinda bir miktarda sürfaktan içerir.

. Madde 7'ye göre bilesimdir, burada çözücü; su, propilen glikol, alkol, hidrokarbon, kloroform, asit, baz, aseton, dietil-eter, dimetil sülfoksit, dimetilformamid, asetonitril, tetrahidrofuran, diklorometan ve etilasetattan olusan bir gruptan seçilir. 01589-P-0002 11. Madde l,e göre bilesimdir, bir veya daha fazla pik rezonansi dalgaboyunda en az yaklasik 1 0D. degerinde bir optik yogunluga sahip olan plazmonik partikülleri içerir. 12. Madde l”e göre bilesimdir, burada plazmonik partiküller bir hidrofilik veya alifatik kaplamayi içerir, burada kaplama bir memeli öznenin derisini büyük oranda adsorbe etmez ve burada kaplama polietilen glikol, silika, silika oksit, polivinilpirolidon, polistiren, bir protein veya bir peptit içerir. 13. Madde 1,e göre bilesimdir, burada termomodülasyon hedef doku bölgesinde enflamasyonun hasara ugratilmasini, ablasyonunu, lizisini, denatürasyonunu, deaktivasyonunu, aktivasyonunu, indüksiyonunu, isi sok proteinlerinin aktivasyonunu, hücre sinyallerinin kesintiye ugratilmasini veya hücre mikroortaminin bozulmasini içerir. 14. Madde 1,e göre bilesimdir, burada hedef doku bölgesi bir yag bezini, bir yag bezinin bir bilesenini, bir sebositi, bir sebositin bilesenini, sebum veya kil folikül infundibulumunu içerir.

. Madde l°e göre bilesimdir, burada hedef doku bölgesi bir tümsek, bir sogan, bir kök hücre, bir kök hücre nisi, bir dermal papilla, bir korteks, bir kütikül, bir kil kilifi, bir medulla, bir pilori kasi, bir Huxley katmani veya bir Henle katmani içerir. 16. Buna ihtiyaci olan bir memeli özneyi tedavi etmek üzere hedefe yönelik doku ablasyonunun gerçeklestirilmesine yönelik bir yöntemdir, asagidaki adimlardan olusur: i) plazmonik partiküllerin deri yüzeyinden, dermal dokunun bir bilesimine yeniden dagitilmasi için penetrasyon vasitasinin saglanmasi; ve ii) deri yüzeyinin isik ile isinlanmasinin saglanmasi. 17. Madde 16,ya göre yöntemdir, burada burada isik kaynagi; civa, ksenon, döteryum veya bir metal-halid eksitasyonu, fosforesans, inkandesans, luminesans, isik yayan diyot veya günes isigini içerir. 18. Madde 16aya göre yöntemdir, burada penetrasyon vasitasi; yüksek frekansli ultrasonu, düsük frekansli ultrasonu, masaji, iyontoforezi, yüksek basinçli hava akisini, yüksek basinçli sivi akisini, vakumu, fraksiyonel 01589-P-0002 fototermoliz ile ön muameleyi veya dermabrazyonu ya da bunlarin bir kombinasyonunu içerir. 19. Madde 16Sya göre yöntemdir, burada isinlanma yaklasik 200 nm ve yaklasik 10,000 nm arasi bir isik dalga boyuna sahip isigi, yaklasik 1 ila yaklasik 100 jul/cm2'lik bir fluansi, yaklasik 1 femptosaniye ila yaklasik 1 saniye arasi bir pals genisligini ve yaklasik 1 Hz ila yaklasik 1 THZ arasi bir tekrarlama sikligini içerir.

. Kozmetik olarak kabul edilebilir bir tasiyieiyi, etkili miktarda bir sodyum dodesil sülfati ve çok sayida plazmonik nanopartikülü, bilesiinin topik olarak temas ettigi bir hedef doku alaninda termal hasari indükleyecek kadar etkili bir miktarda içeren bir bilesim saglanmakta olup, burada nanopartiküller, yaklasik 810 nanometrelik veya 1064 nanometrelik bir rezonans dalga boyunda en az yaklasik 1 O.D.'lik bir optik yogunluga sahiptir ve burada plazmonik partiküller yaklasik 5 ila yaklasik 35 nanometrelik bir silika kaplama içerir ve burada kabul edilebilir tasiyici, su ve propilen glikol içerir. 21. Madde l°e göre bilesimi ve insan derisine uygulamaya yönelik uygun bir plazmonik enerji kaynagini içeren kil lazer ablasyonuna veya aknenin tedavisine yönelik sistemdir.

Claims (2)

ISTEMLER

1. Bir memeli bireyde akneyi tedaviye etineye yönelik bir yöntemde kullanilmak üzere, kozmetik olarak kabul edilebilir bir tasiyici ve bilesimin her mililitresinde 109 ila 1018 nanopartiküllük bir miktarda çok sayida plazmonik nanopartikül içeren bir bilesimdir, plazmonik nanopartiküller bir hidrofilik veya alifatik kaplama burada kaplama bir memeli bireyin derisine adsorbe olmaz ve söz konusu kaplama; polietilen glikol veya silika arasindan seçilir söz konusu yöntem asagidakileri içerir: i) söz konusu bilesimin, memeli bireyin deri yüzeyine topik olarak uygulanmasi; ii) plazmonik nanopartiküllerin deri yüzeyinden, yag bezine yeniden dagitilmasi için penetrasyon vasitasinin saglanmasi; iii) deri yüzeyinden plazmonik nanopartiküllerin yikanmasi; iv) deri yüzeyinin isik ile isinlanmasinin saglanmasi ve v) yag bezinden plazmonik nonapartiküllerin dökülmesi.

2. Bir memeli bireyden kil uzaklastinnaya yönelik bir yöntemdir, asagidaki basamaklari içerir: i) memeli bireyin deri yüzeyine, kozmetik olarak kabul edilebilir bir tasiyici ve bilesimin her mililitresinde 109 ila 1018 nanopartiküllük bir miktarda çok sayida plazmonik nanopartikül içeren bir bilesimin topikal olarak uygulanmasi, burada plazmonik nanopartiküller bir hidrofilik veya alifatik kaplama içerir, burada kaplama bir memeli bireyin derisine adsorbe olmaz, burada söz konusu kaplama; polietilen glikol veya silika arasindan seçilir; ii) plazmonik nanopartiküllerin deri yüzeyinden, kil folikülüne yeniden dagitilmasi için penetrasyon vasitasinin saglanmasi; iii) deri yüzeyinden plazmonik nanopartiküllerin yikanmasi, iv) deri yüzeyinin isik ile isinlanmasinin saglanmasi ve v) zarar görmüs kil folikülü ile birlikte kil folikülünden plazmonik nanpartiküllerin dökülmesi. Istem 1'e göre veya Istem 2'nin yöntemine göre kullanilmak üzere bilesimdir, burada isik kaynagi; civa, ksenon, döteryum veya bir metal- halid eksitasyonu, fosforesans, inkandesans, luminesans, isik yayan diyot veya günes isiginin uyarimini içerir. Istem 1'e göre veya Istem 2'nin yöntemine göre kullanilmak üzere bilesimdir, burada penetrasyon vasitasi; yüksek frekansli ultrasonu, düsük frekansli ultrasonu, masaji, iyontoforezi, yüksek basinçli hava akisini, yüksek basinçli sivi akisini, vakumu, fraksiyonel fototermoliz ile ön muameleyi veya dermabrazyonu veya bunlarin bir kombinasyonunu içerir. Istem 1'e göre veya Istem 2'nin yöntemine göre kullanilmak üzere bilesimdir, burada isinlama; yaklasik 200 nm ve yaklasik 10,000 nm arasi bir isik dalga boyuna sahip isigi, yaklasik 1 ila yaklasik 100 jul/cmz'lik bir fluansi, yaklasik 1 femptosaniye ila yaklasik 1 saniye arasi bir pals genisligini ve yaklasik 1 Hz ila yaklasik 1 THz arasi bir tekrarlama sikligini içerir. Istem l'e göre veya Istem 2'nin yöntemine göre kullanilmak üzere bilesimdir, burada kozmetik olarak kabul edilebilir tasiyici; bir katki maddesi, bir renklendirici, bir emülgatör, bir koku, bir nem tutucu, bir polimerize edilebilir monomer, bir stabilize edici, bir çözücü veya bir sürfaktan içerir. Istem 6'ya göre veya Istem 6'nin yöntemine göre kullanilmak üzere bilesimdir, burada sürfaktan asagidakilerden olusan bir gruptan seçilir: sodyum lauret 2-sülfat, sodyum dodesil sülfat, amonyum lauril sülfat, sodyum oktek-l/deset-l sülfat, lipitler, proteinler, peptitler veya bunlarin türevleri. Istem 6'ya göre veya Istem 6'nin yöntemine göre kullanilmak üzere bilesimdir, burada kozmetik olarak kabul edilebilir tasiyici; sürfaktani, agirlik olarak tasiyicinin yaklasik %0.1 ve yaklasik %100 W/W'lik bir miktari arasinda içerir. Istein 6'ya göre veya Istem 6'nin yöntemine göre kullanilmak üzere bilesimdir, burada çözücü; su, propilen glikol, alkol, hidrokarbon, kloroform, asit, baz, aseton, dietil-eter, dimetil sülfoksit, diinetilforinamid, asetonitril, tetrahidrofuran, diklorometan ve etilasetattan olusan bir gruptan seçilir. Istem l'e göre veya istem 2'nin yöntemine göre kullanilmak üzere bilesimdir, burada plazmonik nanopartiküller, yaklasik 1 nm ila yaklasik 1000 nm araliginda bir partikül boyutuna sahiptir. Istem l'e göre veya istem 2'nin yöntemine göre kullanilmak üzere bilesimdir, burada plazmonik nanopartiküller, bir veya daha fazla pik rezonans dalga boylarinda en az yaklasik 1 O.D.'lik bir optik yogunluga sahiptir. .Istem l'e göre veya istem 2'nin yöntemine göre kullanilmak üzere bilesimdir, burada plazmonik nanopaitiküller, bir veya çok sayida pik rezonans dalga boyunda 10 0D. - 1000 O.D.'lik bir optik yogunluga sahiptir. Istem l'e göre veya istem 2'nin yöntemine göre kullanilmak üzere gruptan seçilen bir dalga boyuna sahiptir. Istem l'e göre veya istem 2'nin yöntemine göre kullanilmak üzere bilesimdir, burada söz konusu yöntem ayrica plazmonik nanopartiküllerin deri yüzeyinden dermal dokunun bilesenine salimini artirmak için deri yüzeyinin ön muameleden geçirilmesini içerir, burada ön muamele, kil gövdesini ve/Veya kil folikül pluglarini uzaklastirmak üzere tiraslama, agdalama, siyanoakrilat yüzey peelingi, kalsiyum tiyoglikolat muamelesi ve baska tekniklerle kil uzaklastirmasindan ve eksfoliyasyondan olusan gruptan en az birini içerir. Istem l'e göre veya istein 2'nin yöntemine göre kullanilmak üzere bilesimdir, burada plazmonik nanopartiküller gümüs, altin, nikel bakir, titanyum, silikon, galadyum, paladyum, platinyum veya krom içerir. Istem l'e göre veya istem 2'nin yöntemine göre kullanilmak üzere bilesimdir, burada kaplama bir silika kaplamadir. Istem l'e göre veya istem 2'nin yöntemine göre kullanilmak üzere bilesimdir, burada söz konusu çok sayida plazmonik nanopartikül, bilesimin her milimetresinde 10” ila 1013 nanopartiküllük bir miktarda mevcuttur. . Istem l°e göre kullanima yönelik bilesimdir, burada plazmonik nanapartiküller gümüs nanaplakalardir, burada nanoplaka, 100-250 nm araliginda bir boyuta sahiptir, burada kaplama bir hidrofilik, silika kaplamadir, burada söz konusu birçok plazmonik nanopartikül, bilesimin mililitresi basina 1011 ila 1013 nanopartikül miktarinda mevcuttur, burada plazmonik nanopartiküller birlestirilmemistir, burada birlestirilmemis plazinonik nanpartiküller bir fiziksel kuvvet veya kimyasal bag, dogrudan veya dolayli olarak bir araci ile birbirlerine bagli degildir, burada isinlanma, asagidakilerden olusan gruptan seçilen isigin bir dalga Istem 1,e göre kullanima yönelik bilesimdir, burada plazmonik nanapartiküller altin içerir, burada kaplama bir hidrofilik, polietilen glikol kaplamadir, burada söz konusu birçok plazmonik nanopartikül, bilesimin mililitresi basina 1011 ila 1013 nanopartikül miktarinda mevcuttur, burada plazmonik nanopartiküller birlestirilmemistir, burada birlestirilmemis plazmonik nanpartiküller bir fiziksel kuvvet veya kimyasal bag, dogrudan veya dolayli olarak bir araci ile birbirlerine bagli degildir, burada isinlanma, asagidakilerden olusan gruptan seçilen isigin bir dalga Istem 2”ye göre yöntemdir, burada plazmonik nanapartiküller gümüs nanaplakalardir, burada nanoplaka, 100-250 nm araliginda bir boyuta sahiptir, burada kaplama bir hidrofilik, silika kaplamadir, burada söz konusu birçok plazmonik nanopartikül, bilesimin mililitresi basina 10il ila 1013 nanopartikül miktarinda mevcuttur, burada plazmonik nanopartiküller birlestirilmemistir, burada birlestirilmemis plazmonik nanpartiküller bir fiziksel kuvvet veya kimyasal bag, dogrudan veya dolayli olarak bir araci ile birbirlerine bagli degildir, burada isinlanma, asagidakilerden olusan gruptan seçilen isigin bir dalga burada plazmonik nanapartiküller altin içerir, burada kaplama bir hidrofilik, polietilen glikol kaplamadir, burada söz konusu birçok plazmonik nanopartikül, bilesimin mililitresi basina 10ll ila 10'3 nanopartikül miktarinda mevcuttur, burada plazmonik nanopartiküller birlestirilmemistir, burada birlestirilmemis plazmonik nanpartiküller bir fiziksel kuvvet veya kimyasal bag, dogrudan veya dolayli olarak bir araci ile birbirlerine bagli degildir, burada isinlanma, asagidakilerden olusan gruptan seçilen isigin bir dalga