SU803862A3 - Способ получени 7 -/д-2-амино-2-(низ-ший АлКилСульфОНилАМиНОфЕНил)-АцЕТилАМиНО/- 3-МЕТОКСи (или ХлОР)-3цЕфЕМ-4-КАРбОНОВыХКиСлОТ или иХ СОлЕй - Google Patents

Description

целевой продукт в виде свободной кислоты или ее соли,

Энзиматическое аиилирование преимущественно ведут под действием микроорганизмов рода Pseudomonas melano ,genum АТСС 17806,

Пример 1. а) К суспензии 0,764 г тонкоизмельченного гидрохлорида 7р -амино-3-метокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты, содержащего 1 гадль диоксана, в 10 мл абсолютного хлористого метилена прибавл ют в атмосфере аргона и при комнатной температуре 1,04 мл бис-(триметилсилил -ацетамида (прибавл ют в течение приблизительно 10 мин) и перемешивают в течение 45 мин.

К охлажденному до -15°С раствору 0,896 г 0-2-трет,-бутилоксикарбониламино-2- (3-метилсульфонилс1минофенил) уксусной кислоты и 0,29 мл 4-метилморфолина в 10 мл абсолютного хлористого метилена прибавл ют в атмосфере аргона 0,34 мл изобутилового эфира г::лормуравьиной кислоты и оставл ют реагировать еще 15 мин. К полученному смешанному ангидриду прибал ют по капл м при вышеуказанный силилированный исходный продукт и реакционную смесь перемешивают по 15 мин при -iO,0c и комнатной температуре . Затем разбавл ют 100 мл зтилового эфира уксусной кислоты и промывают три раза насыщенным водным раствором хлорида натри . Водные фазы экстрагируют еще раз этиловым эфиром уксусной кислоты, а объединенные органические растворы высушивают при помощи сульфата магни  и освобождают при пониженном давлении от растворител . Остаток очищают на силикагеле смесью хлористого метилена и этилового эфира уксусной кислот ( 1:1) в качестве элюента.

Получают согласно тонкаслойной хроматографии однородную If)- о-2-трет .-бутилоксикарбониламино-2- (3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино -З-метокси-З-цефем-4-карбоновую кислоту в виде аморфного продукта . Тонкослойна  хроматограмма (силикагель; идентификаци  при помощи нингидрина) : RfvO,63 (система: втор.-бутанол-ухсусна  кислота-вода, 67:10:23). УФ-спектр (в 95%-ном водHOfvi этаноле) нм ( 7100). ИК-спектр (в хлористом метилене): характерные полосы при 3380, 2930, 1765, 1685, 1605, 1485 и 1160 см-.

То же самое соединение можно получить и следующим образом, а) К суспензии 6,22 г (27 моль) тонко из-:мельченной 7 Ь-амино-3-метокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты в 120 мл абсолютного хлористого метилена прибавл ют в атмосфере аргона и при комнатной температуре 7,52 мл бис- (триметилсилил)-ацтамида (прибавл ют в течение приблизительно 10 мин) и перемешивают в течение 45 мин,

К охлажденному до раствору 10,33 г (30 моль) D-2-трет,-бутилсксикарбониламино-2- (3-метилсульфониламинофенил ) -уксусной кислоты и 3,33мл 4-метилморфолина в 180 мл абсолютног ацетонитрила прибавл ют в атмосфере аргона 3,93 мл изобутилового эфира хлормуравьиной кислоты и оставл ют реагировать еще 25 мин, К полученном смешанному ангидриду прибавл ют по капл м при вышеуказанный силилрованный исходный продукт и реакционную смесь перемешивают 2 ч при , а 30 мин при комнатной температуре, Затем удал ют в ротационном выпарном аппарате растворитель, а остаток раствор ют в 400 мл этилового эфира уксусной кислоты и промывают три раза насыщенным водным раствором хлорида натри . Водные фазы экстрагируют еще раз этиловым эфиром уксусной кислоты. Объединенные органические растворы высушивают при помощи сульфата магни  и освобождают при пониженном давлении от растворител . Остаток очищают на силикагеле смесью хлористого метилена и этилового эфира уксусной кислоты (1:1) в качестве элюента.

Получают согласно тонкослойной хроматографии однородную 0-2-трет ,-бутидоксикарбониламино-2-(3-метилсульфониламинофенил )-ацетила1мино -З-метокси-З-цефем-4-карбоновую кислоту в виде аморфного продукта , который кристаллизуют из смеси хлористый метилен - простой диэтиловый эфир (1:3), т, пл. 140С (с разл Физико-химические данные продукта идентичны с данными продукта из примера 1а) ,

aj) К суспензии 891 мг 7-амино-З-метокси-З-цефем-4-карбоновой кислоты в 10 мл абсолютного хлористого метилена прибавл ют 1,23 мл 0-бис- (триметилсилил)-ацетамида и перемешивают 1 ч при 23с (раствор А) .

К раствору 1,58 г D-2-трет,-бутилоксикарбониламино-2- (3-метилсульфониаминофенил ) -уксусной кислоты и 0,52 мл N-метилморфолина в 20 мл ацетонитрила прибавл ют при температуре от -10 до -15°С 0,58 мл изобутилового эфира хлормуравьиной кислоты и перемешивают 30 мин при этой температуре (раствор Б).

К охлажденному до -25 С раствору Б прибавл ют при пропускании азота быстро раствор А, а затем смесь перемешивают 1,5 ч при 0°С, Приготовленную смесь перемешивают со 100 мл 1/3 М фосфатного буфера (рН 7) и из смеси удал ют в вакууме органический растворитель, Дл  удалени  нейтральной части оставшийс  водный раствор промывают уксусным эфиром. Слой водной фазы покрывают слоем уксусного эфира, подкисл ют 85%-ной фосфорной кислотой до рн 2, охлЬкдают и насыщают хлоридом натри . После разделени  фаз и дополнительного экстрагировани  уксусным эфиром получают экстракт, который после высушивани  при помощи сульфата натри  и выпарив ни  дает в тонкослойной хроматограм е однородную Тр- о-2-трет.-бутилоксикарбониламино 2 - С 3-метилсульфониламинофенил )-ацетиламиноЗ-3-метокси-З-цефем-4-карбоновую кислоту в виде светло-бежевой пены. Соединение можно кристаллизовать согласно примеру 1а, . Исходный продукт можно получить следующим образом. К суспензии 1,17 г 7-феноксиацетиламино-З-метокси-З-цефем-4-карбоновой кислоты и 1,45 мл N ,М-диметиламилина в 5,5 мл абсолютного хлорис того метилена прибавл ют в атмосфере азота при 20 С 35 мл диметилдихлорсилана , а затем перемешивают 30 мин при этой температуре. Прозрач ный раствор охлаждают до -20 С, прибавл ют к нему 0,8 г пентахлорида ф фора и перемешивают 30 мин. При этой температуре прибавл ют в течение 2-3 мин предварительно охлаж;денную до -20°С смесь 0,45 мл М,М-д метиланилина и 0,45 мл н-бутанола, а затем прибавл ют быстро 10 мл предварительно охлажденного до -20 н-бутанола, после.чего перемешивают 20 мин при -20°С, а 10 мин без охлаждени . При приблизительно -10 С приливают 0,2 мл воды, перемешивают сначала л/Ю мин в лед ной бане (при лизительно ), затем прибавл ют 5,5 мл диоксана, а после перемешивани  в течение 10 мин при О С приб /л ют по порци м приблизительно 2,25 мл три-н-бутиламина до тех пор пока рН разбавленных водой проб не достигнет посто нной величины 3,5. После перемешивани  в течение 1 ч при 0°С осадок отфильтровывают, про мывают диоксаном и перекристгоплизовывают из смеси вода-диоксан. Полученный гидрохлорид 7р|-амино-3-меток 1си-3-цефем-4-карбоновой кислоты содержит 1 моль диоксана и имеет т. пл. выше 300°С. Тонкослойна  хро матограмма: Rf 0,17 (силикагель; система: н-бутанол-тетрахлорметанметанол-муравьина  кислота-вода, 30:40:20:5:5). Пример 2. а)Аналогично при меру 1а получают 7)- о-2-трет .-бутилоксикарбониламино-2- (3-метилсуль фониламинофенил)-ацетиламино -3-хло -З-цефем-4-карбоновую кислоту путем обработки смешанного ангидрида, полученного из 0,448 г D-2-трет.--бутилоксикарбониламино-2-{3-метилсульфониламинофенил )-уксусной кислоты и 0,17 мл изобутилового эфира хлормуравьиной кислоты в присутствии 0,14 мл 4-метилморфолина и 5 мл хлористого метилена при , триметилсилиловым эфиром 70-амино-3-хлор-З-цефем-4-карбоновой кислоты , который получен из 0,24 г 7р)-амино-3- и1Ор-3-цефем-4-карбоновой кислоты ИуО,5 мл бис-(триметилсилил)-ацетамида в 10 мл хлористого метилена . aj.) Анёшогично примеру 1а из смешанного ангидрида, полученного из 1,55 г (4,5 мол ) D-2-трет.-бутилоксикарбониламино-2- (3-метилсульФо (ниламинофенил)-уксусной кислоты и 0,6 мл изобутилового эфира хлормуравьиной кислоты в присутствии 0,5 MJi 4-метилморфолина и 25 мл ацетонитри|ла при -15°С, путем обработки его |триметилсилиловым эфиром 7р-амино-З-хлор-З-цефем-4-карбоновой кисло- ты, который получен из 0,88 г {3,75 моль) 7р|-амино-3-хлор-3-цефем 4-карбоновой кислоты и 1,05 мл бис-(триметилсилил)-ацетамида в 20 мхлористого метилена, получают Го-2-трет. -бутилоксикарбониламико-2- (3-метилсульфониламинофенил)-ацетил амино}-3-хлор-3-цефем-4-карбоновую кислоту. Тонкослойна  хроматограмма (силикагель; идентификаци  при помощи. нингидрида); Rf 0,68 (система: втор.-бутанол-уксусна  кислота - вода, 67:10:23). ИК-спектр (в хлористом метилене): характерные полосы при 3390, 2930, 1775, 1685, 1485 и 1160 CM-f. Исходный продукт можно получить следующим образом. б) 1,59 г (4 моль) дифенилметилового эфира 7р-амино-3-хлор-3-цефем-4-карбоновой кислоты раствор ют при в 5 мл трифторуксусной кислоты и перемешивают в течение 15 мин. Прозрачный светло-желтый раствор разбавл ют 20 мл толуола, а затем из него удал ют при пониженном давлении избыток трифторуксусной кислоты и толуола. Остаток раствор ют в приблизительно 20 мл смеси вода этилацетата (1:1), отдел ют от органической фазы, а кислую водную фазу довод т 20%-ным триэтиламином в метаноле до рН 3,0. Светло-желтый осадок отфильтровывают, промывают этилацетатом и простым диэтиловым эфиром и высушивают в высоком вакууме. При этом получают 320 мг 7р-амино-3-хлор-З-цефем-4-карбоновой кислоты в виде светло-желтого аморфного порошка.. Тонкослойна  хроматограмма: Rf О,О8 (силикагель, н-бутанол-уксусна  кислота-вода , 67:10:23). Пример З.К oxлaждeннo /Iy до -15с раствору 3,1 г (9 моль) D-2-трет.-бутилоксикарбониламино-2- (3-метилсульфониламинофенил)-уксусной кислоты и 1,0 мл 4-метилморфолина в 50 мл абсолютного ацетонитри ла прибавл ют в атмосфере аргона IB безводных услови х 1,18 мл (9 мол иэобутилового эфира хлормуравьиной кислоты. Через 30 мин к полученному смешанному ангидриду прибавл ют при С 3,0 г (7,5 моль) дифенилметилового эфира /ji-аМино-З-хлор-З-цефем-4-карбоновой кислоты, растворенного в 50 мл абсолютного хлористого метилена. Реакционную смес перемешивают по 1,5 ч при или при ком |натной температуре. Затем в ротационном выпарном аппарате удал ют раст ворители. Остаток раствор ют в 500 мл этилацетата и промывают три раза насыщенным водным раствором хлорида натри . Органическую фазу высушивают при помощи сульфата магни  и удал ют из нее при пониженном давлении растворитель. Сырой продукт очищают на 40-кратном количестве силикагел  смесью хлористый метиленэтилацетат (1:1) в качестве элюента . Получают согласно тонкослойной хроматографии однородный дифенилметиловый эфир 7/)- D-2-тpeт.-бyтилoкcи кapбoнилaминo-2 - (3-метилсульфониламинофенил )-aцeтилaминoЗ-3-xлop-3-цeфeм-4-кapбoнoвoй кислоты, Т.ПЛ.18 187°С (из смеси ацетон - простой эфир - поастой петролейный эфир, 1:2:2). Тонкослойна  хроматограмма (силикагель, идентификаци  при помощи нингидрина). Rf/vO,52 (система: толуол - этилацетат, 1:1). ИК-спектр (в хлористом метилене): характерные полосы при 3420, 1790, 1725, 1700, 5520.,. 1158 CM-i Пример 4. Аналогично при меру 3 из смешанного ангидрида/ полученного из 1,05 г (4,5 моль) D-2-трет,бутилоксикарбониламино-2- (3-метилсульфониламинофенил)-уксусной кислоты и 0,6 мл изобутилового эфира хлормуравьиной кислоты в присутствии 0,5 мл N-метилморфолина в 25 мл ацетонитрила при путем его обработки 1,49 г (3,75 моль) дифенилметилового эфира 7 1-амино-З-метокси-З-цефем-4-карбоновой кис лоты, растворенного в 25 мл хлористого метилена, получают дифенилметиловый эфир 7fb- D-2-трет.-бутилоксик бониламино-2-(З-метилсульфониламино фенил)-ацетиламино -3-метокси-3-цефе )-4-карбоновой кйрлоты, т. пл. 12 130 С. Тонкослойна  хроматограмма: ,21 (силикагель; толуол-ацетон 3:1). ИК-спектр (в хлористом метилене ): характерные полосы при 3440, 1787, 1725, 1705, 1342 и 1162 CMV Пример 5. а) 482мг (1 моль 0-2-азидо-2- (З-метилсульфонилами нофенил)-ацетиламино -3-метокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты, раство ренной в 32 мл смеси метанол - хлороформ (3:1), гидрируют в присутстВИИ 120 мг окиси платины при комнатной температуре и нормальном давлении (врем  реакции 2ч). Раствор разбавл ют 5 мл воды и довод т 1 мл 1 н сол ной кислоты до рН 2. После фильтровани  рН водной фазы довод т 20%-ным раствором триэтиламина в метаноле до 5,2. Раствор концентрируют до приблизительно половины объема, затем прибавл ют 12 мл ацетона и смесь выдерживают в течение 16 ч при приблизительно -18°С. Образовавшийс  осадок отфильтровывают, промывают ацетоном и простым диэтиловым эфиром и высушивают. Таким образом, получают 7fi- о-2-амино-2- (3-метилсульфониламинофенил ) -ацетиламино -3-метокси-З-цефем-4-карбоновую кислоту в виде внутренней соли моногидрата, котора  разлагаетс  при температуре выше 170 С. Тонкостойна  хроматограмма (силикагель идентификаци  при помощи нингидрина): ,20 (система: втор-.-бутанолуксусна  кислота вода 67:10:23). УФ-спектр (в 0,1 н водной сол ной кислоте) :Л/лаис 272 ( 7200) . Исходный продукт можно получить следующим образом. К суспензии 0,622 г (2,7 моль) тонкоизмельченной 7р|-амино-3-метокси-З-цефем-4-карбоновой кислоты в 12мл. абсолютного хлористого метилена прибавл ют в атмосфере аргона и при комнатной температуре 0,75 мл бис- (Триметилсилил)-ацетамида (прибавл ют в течение приблизительно 10 мин) и перемешивают в течение 45 мин. К охлсокденному до -15 С раствору 0,81 г (3,0 моль) 0-2-азидо-2-(3-метилсульфониламинофенил )-уксусной кислоты и 0,35 мл 4-метилморфолина в 18 мл абсолютного ацетонитрила приливают в атмосфере аргона 0,4 мл изобутилового эфира хлормуравьиной кислоты и оставл ют реагировать еще 25 мин. К полученному смешанному ангидриду прибавл ют по капл м при -15°С вышеуказанный силилированный исходный продукт и реакционную смесь перемащивают 2 ч при и 30 мин при комнатной температуре. Затем удал ют в ротационном выпарном аппарате растворитель, а остаток раствор ют в 400 мл этилового эфира уксусной кислоты и промывают три раза насыщенным водным раствором хлорида натри  . Водные фазы экстрагируют еще раз этиловым эфиром уксусной кисЛоты . Объединенные органические растворы высушивают при помощи сульфата магни  и затем из них при пониженном давлении уде.ют растворитель. Остаток очищают на силикагеле смесью хлористый метилен - этиловый эфир уксусной кислоты (1:1) в качестве элюента. Получают согласно тонкослойной хроматографии однородную 7р- D-2-азидо-2- (3-метилсульфониламинофенил ) -ацетиламино -3-метокси-З-цефем-4-карбоновую кислоту в виде . аморфного продукта, который примен ют непосредственно в следующей стадии синтеза аналогично примеру 5 Пример 6. К раствору 10 моль дифенилметилового эфира 7р-(2-фенок сиацетиламино)-3-метокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты и 25 моль N , N-диметиланилина в 50 мл абсолют ного хлористого метилена прибавл ют при -20°С 12,5 твердого пента хлорида фосфора и перемешивают 30 мин при -20с. Затем прибавл ют при этой температуре холодную смесь .0,2 моль метанола и 12 моль Н,М-диметиланилина , после чего перемешивают 2 ч при 0°С. При 0°С прибавл ют 60 моль N-метилморфолина и раствор смешанного ангидрида, полученного путем перемешивани  в течение 30 мин при смеси 15 моль 0-2-(трет.-. -бутилоксикарбониламино)-2(3-метил сульфон 1ламинофенил) -уксусной кислоты , 14 моль иэобутилового эфира хлормуравьиной кислоты и 16 оль N-метилморфолина в 50 мл хлористого метилена, и перемешивают 1 ч при Далее приливают 100 мл воды, встр хивают , раздел ют фазы и органичес-, кую фазу про1иывают фосфатным буфером с рН 2 и фосфатным буфером с рН 6. После в сушивани  экстракта при- помощи суль фата натри  и выпаривани  получают дифенилметиловый эфир 7(i- о-2-трет-бутилоксикарбониламино-2- (3-метилсульфониламинофенил )-ацетиламино}-З-метокси-З-цефем-4-карбоновой кис лоты, который раствор ют в 20 мл трифторуксусной кислоты и 1 мл анизола . Выдержав раствор при комнатной температуре, его выпаривают, остаток раствор ют в метаноле и 7р- о-2-аг 1ино-2- (3-метилсульфонилами нофенил)-ацетиламино -3-метокси-З-дефем-4-карбоновую кислоту выдел ют осторожным прибавлением диэтилами на (до изоэлектрической точки). Пример 7. а) В среде, содер жащей 0,7% ацетона, 0,5% м сного экстракта, 0,5% дрожжевого экстракта , 0,5 % натриевой соли L-глутаминовой кислоты и 0,3% хлорида натри  культивируют Pseudomonas melanogenum АТСС 17808 под водой в течение 55 ч при 28°С, Клетки отдел ют центрифугированием , промывают их 0,8%-ным раствором хлорида натри  и суспендируют в 0,1 н. ацетатном буфере (рН 6,5). К 100 мл этой суспензии (содержащей приблизительно 6 г влажных клеток) прибавл ют 1 г 7|Ь-амино -З-метокси-З-цефем-4-карбоновой кис лоты и 3 г гидрохлорида 0-2-(3-метил сульфониламинофенил)-глицинметиловог эфира и перемешивают 2 ч при . Смесь центрифугируют, а очищенный фильтрат помещают на колонку амберли ;Та ХАО-2. После промывани  колонки водой элюируетс  7pi- о-2-амино-2- (З-метилсульфониламинофенил)-ацетилами но} -3 -метокси-3 -цефем- 4 -к арбонова  кислота с возрастающими дол ми метанола в воде. б) Гидрохлорид D-2- j-метилсульфбниламинофенил )-глицинметилового эфира получают из D-2-(З-метилсульфониламинофенил ) -глицина путем этерификации в сложный эфир метанолом в присутствии сухого хлористого водорода. От полученных соединений можно отщепл ть защитные группы следующим образом. Примере, а) Смесь 0,557 г 7(Ь- о-2-трет. -бутилоксикарбониламино ) -2-(З-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино -3-метокси-З-цефем-4-карбоновой кислоты, 2,5 мл предварительно охлажденной трифторуксусной кислоты и 2,Ь мл хлористого метилена перемешивают в течение 30 мин при 0°С в атмосфере аргона, а затем прибавл ют 25 мл смеси простого петролейного эфира и простого диэтилового эфира (1:1) при . Бежевый осадок отфильтровывают, промывают небольшим количеством простого диэтилового эфира и высушивают при пониженном давлении. Полученную соль трифторуксусной кислоты о-2-амино -2-(З-метилсульфониламинофенил)ацетиламино -З-метокси-З-цефем-4-карбоновой кислоты раствор ют в 5 мл воды , экстрагируют два раза, примен   по 3 мл этилового эфира уксусной кислоты, а кислую водную фазу (рН 1,8) довод т путем прибавлени  по капл м 2 н. водного раствора гидроокиси натри  до рН 5,2. Раствор концентрируют до приблизительно по ,ловины объема, приливают 12 мл ацетона и смесь выдерживают 16 ч при приблизительно -18°С. Образовавшийс  осадок отфильтровывают, промывают ацетоном и простым диэтиловым эфиром и высушивак1Т. Получают 7|)- о-2-амино-2- (З-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино -3-метокси-З-цефем-4-карбоновую кислоту в виде внутренней соли в качестве моногидрата, котора  разлагаетс  при температуре выше 170с. Тонкослойна  хроматограмма (силикагель; идентификаци  при помощи нингидрина): Rf,0,22 (система: втор.-бутанолуксусна  кислота вода , 67:10:23). УФ-спектр (в 0,1 н. водной сол ной кислоте) : Лддакс нм ( е 7000). То же самое соединение можно получить и следующим образом. а ) К огражденному до-О С раствору 8,0 г (14,4 моль)) D-2-трет.бутилоксикарбониламино-2- (З-метилсульфониламинофенил ) -ацетиламино -З-метокси-З-цефем-4-карбоновой кис лоты в 40 мл абсолютного хлористого метилена прибавл ют 40 мл предварительно охлажденной трифторуксусной кислоты , перемешивают в течение 25 мин при О С в атмосфере аргона и прибав л ют 500 мл смеси простого петролей ного эфира и простого диэтилового. эфира (1:1) при . Бежевый осадок отфильтровывают, промывают небольшим количеством простого диэтилового эфира и высушивают при пониженном .давлении. Полученную соль трифтор;уксусной кислоты 7|i- о-2-амино-2- (3-метилсульфониламинофенил)ацетил амино -3-метокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты раствор ют в 70 мл лед ной воды и экстрагируют три раза, примен   по 30 мл этилового эфира уксусной кислоты. Кислую водную фаэу {рНл/2,0) довод т путем прибавлени  по капл м 20%-ного раствора триатиламина в метаноле до рН 5,2. При приливают 160 мл иэопропанола. Образовавшийс  осадок перекристешлизовывают из смеси изопропанол - вода (2:1), затем его отфильтровывают , промывают небольшим количеством изопропанола и высушивают. Так как кристаллизат содержит и после высушивани  еще небольшое количество органического растворител  , его дигерируют еще 30 мин при в 50%-ном водном растворе, охлаждают до , фильтруют и высушивают еще раз в высоком вакууме при комнатной температуре. Таким образом получают о-2-амино-2- (3-метилсульфонилами нофенил) -ацетиламиноЗ-З-метокси-3-цефем-4-карбоновую кислоту в виде внутренней соли моногидратаj т. пл, .выше 174с (с разл. ) . аз.) Раствор 30,0 мг (0,54 моль) 7{Ь- Го-2-трет. -бутилоксикарбониламин -2-(3-метилсульфониламинофенил)-аце тил амино -3 -метокси-З-цефем-4-карбоновой кислоты в 3 мл муравьиной кислоты перемешивают в течение 3 ч при комнатной температуре при пропускании аргона, охлаждают.до О С и прибавл ют к нему 30 мл смеси про той диэтиловый эфир - простой петро лейный эфир (1:1). Выпавшую соль му равьиной кислоты 7 Ь- 0-2-амино-2- (3-метилсульфониламинофенил)-ацети амино -3-метокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты раствор ют в 3 мл лед ной воды,.экстрагируют три раза 1,5 этилацетата и освобождают в ротаци онном выпарном аппарате от воды и избытка муравьиной кислоты. Остаток радтвор ют еще два раза, каждый раз в 3 мл воды, и концентрируют досуха , причем можно выдел ть непосредственно моногидрат 7р)- о-2-амино-2- (З-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино -З-метокси-4-карбоновой кис лоты в виде светло-желтых кристаллов , т. пл. 173-175 с (с разл.).Тон кослойна  хроматограмма (силикагель обработка нингидрином): ,21 (система: втор.-бутанол - уксусна  кислота - вода, 67:10:23). УФ-спектр ( в 0,1 н. водной сол ной кислоте): НАОКС 272 нмс( е 7100) . а) Раствор 2,2 г 7р)- о-2-трет.-бутилоксикарбониламино-2- (3-метилсульфониламинофенил )-ацетиламино -З-метокси-З-цефем-4-карбоновой кислоты в 22 МП 99%-ной муравьиной кислоты выдерживают в течение 1,5 ч при , а затем выпаривают в вакууме . Полученную смолу дигерируют последовательно простым эфиром, ацетонитрилом и смесью ацетонитрил вода (95:5), примен   каждый раз 25 МП. Получают 7В- o-2-aминo.-2-(3-мeтилcyльфoнилaминoфeнил ) -ацетиламиноЗ-З-метокси-З-цефзм-4-карбоновую кислоту в виде светло-бежевого порошка . После перекристаллизации из смеси вода - изопропанол (1:2) моногидрат обладает следующими свойствами: о ( +143° + 1, 0,1 н. HCI); поглощение в ультрафиолетовой области в 0,1 н. HCt :А-.ло1кс272 нм (Е 7300). Пример 9. а) Аналогично примеру 8а) можно освобождать путем взаимодействи  с трифторуксусной кислотой в 7р -Го-2-трет.-бутилоксикарбониламино-2- (3-метилсульфониламинофенил )-ацетиламино -3-хлор-3-цефем-4-карбоновой кислоте аминогруппу и превращать полученную соль трифторуксусной кислоты 7f)- D-2-амино-2- (3-метилсульфониламинофенил)ацетиламино -З-хлор-З-цефем-4-карбоновой кислоты путем обработки водным раствором гидроокиси натри  до изоэлектрической точки во внутреннюю соль 7р- о-2-амино-2-(3-метилсульфониламинофенил ) -ацетиламино -3-хлор-З-цефем-4-карбоновой кислоты. а) Аналогично примеру 8а можно освобождать путем взаимодействи  с трифторуксусной кислотой в If)-ID-2-трет .-бутилоксикарбониламино-2-(3-метилсульфониламинофенил )-aцeтилaминo -3--xлop-3-цeфeм-4-кapбoнoвoй кислоте аминогруппу и превращать полученную соль трифторуксусной кислоты 0-2-амино-2- (3-метилсульфониламинофенил ) -ацетиламино}-3-хлор-3-цефем-4-карбоновой кислоты путем обработки 20%-ным раствором триэтиламина в метаноле до изоэлектрической точки во внутреннюю соль 7р- D-2-амино-2- (3-метилсульфониламинофенил)ацетилами но -3-хлор-3-цефем-4-к арбоновой кислоты, т. пл. выше 165°С (с разл.). Тонкослойна  хроматограмма (силикагель; обработка нингидрином ): Rf 0,17 ((- стема: втор.-бутанол - уксусна  кислота - вода, 67: ;10:23). УФ-спектр (в 0,1 н. сол ной кислоте) 267 ( 7600). а) Аналогично примеру 8аj можно освобождать путем взаимодействи  с муравьиной кислотой в 7))- о-2-трет.-бутилоксикарбониламино-2- (3-метилсульфониламинофенил ) -ацетилами о -З-хлор-З-цефем-4-карбоновой кислоге аминогруппу. Получают 7|Ь- о-2-амино-2- (3-метилсульфониламинофенил -ацетиламино -3-хлор-3-цефем-4-карбо новую кислоту в виде мелкого кристал лиэата с указаннь1ми в пункте а свой ствами, Пример 10. Раствор 2,18 г (3 моль) дифенилметилового эфира О-трет .- и упоксикарбониламино-2- (3-метилсульфониламинофенил)-3-хлор-З-цефем-4-карбоновой кислоты, 1,8 мл анизола и 0,6 мл трифторуксус ной кислоты в 20 мл хлористого метил на перемешивают в течение 30 мин..при 0°С, а затем прибавл ют 200 мл смеси простой эфир - простой петролейный эфир (1:1). Соль трифторуксусной кис юты раствор ют в 10 мл лед ной воды и экстрагируют два раза, примен   по 4 мл этилацетата. Водную фазу довод  20%-ным раствором триэтиламина в метаноле до рН 5,0, причем после прибавлени  24 мл иэопропанола образ етс  бесцветный осадок. После фильтр вани , промывани  небольшим количест вом изопропанола и высушивани  при пониженном давлении получают бесцвет ные кристаллы 7р- о-2-амино-2-(3-метилсульфониламинофенил )-ацетиламино -З-хлор-З-цефем-4-карбоновой кислоты т. пл. выше (с разл.). Тонкослойна  хроматограмма (силикагель; обработка нингидрином): Rf - 0,17 (система: втор.-бутанол - уксусна  кислота - вода, 67:10:23). ИК-спектр (в нуджоле): характерные полосы при 3500, 3220, 1780, 1685, 1340. и 1155 П D и м е р 11. а) Аналогично пр меру 10 путем обработки 1,08 г (1,5 моль) дифенилметилового эфира 7р)- D-2-трет. -бутилоксикарбониламино-2- (3-метилсульфониламинофенил)-ацетиламино1-3-метокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты 4,5 мл трифторуксусной кислоты и 0,8 мл анизола в 10 МП хлористого метилена можно освобождать аминогруппу и защищенную 4-карбоксильную группу и превращать полученную соль трифторуксусной кислоты путем обработки 20%-ным раствором триэтиламина в метаноле до изоэлектрической точки во внутреннюю -соль 7р)- о-2-амино-2-(3-метилсульфониламинофенил ) -З-метокси-З-цефем-4-карбоновой кислоты, т. пл, выше 172с (с разл.) . а.) Смесь 10, 12 г (14 моль) дифенилметилоБОго эфира 7|Ь- D-2-трет -бутилоксикарбониламино-2-(3-метилсульфониламинофенил )-ацетиламино -З-метокси-З-цефем-4-карбоновой кислоты , 8,6 мл анизола и 145 мл трифторуксусной кислоты перемешивают в течениз 15 мин при 0°С, затем прибавл ют 400 мл предварительно охлажденного толуола и-выпаривают при по|ниженном давлении. Остаток высушивают в высоком вакууме, дигерируют ПРОСТЫМ диэтиловым эфиром и отфильтровывают . Таким образом получают в порошкообразном виде т ифторацетат 7|Ь- о-2-амино-2- (3-метилсульфониламинофенил ) -ацетил ами но -3-ме-гокси-З-цефем-4-карбоновой кислоты, который раствор ют в 70 мл воды. Затем промывают три раза, примен   по 25 t-m этилового эфира уксусной кислоты , и довод т рН 20%-ным раствором триэтиламина в метаноле до приблизительно 5,6, причем образуетс  после прибавлени  160 мл изопропанола бесцветный осадок. Перемешивают 1ч на лед ной бане. Бесцветный осадок отфильтровывают , промывают изопропанолом и простым диэтиловым эфиром и высушивают при пониженном давлении. Так как кристаллизат содержит и после высушивани  еще небольшое количество изопропанола или простого диэтилового эфира, его дигерируют еще 30 мин в 50%-ном водном растворе при 40 С, охлаждают до , фильтруют и еще раз высушивают. Таким образом получают в виде микрокристаллического порошка 7р- о-2-амино-2-(3-метилсульфониламинофенил ) ацетамидо -3-метокси-З-цефем-4-карбоновую кислоту в шиде внутренней соли моногидрата, т. пл, выше 175С (с разл,) .(У |° +144с (с 1,035, 0,1 н, сол на  кислота), Тонкослойна  хроматограмма (силикагель , обработка нингидрином): Rf / 0,19 (система: втор.-бутакол уксусна  кислота - вода, 67:10:23). УФ-спектр (в 0,1 н. водной сол ной кислоте) : Л.лс(кс272 нм (g7300). ИК-спектр IB минеральном масле): характерные полосы при 3500, 3180, 1760, 1692, 1608, 1150 и 978 . Пример 12. Суспензию 4, 7)- о-2-амино-2-(3-метилсульфониламинофенил ) -ацетиламино -3-метокси-З-цефем-4-карбоновой кислоты в 50 мл воды и 2 мл спирта раствор ют медленно при перемешивании и контроле рН при величине рН ниже 7,6 в приблизительно 5 мл 2 н раствора едкого натра. Раствор, освобожденный путем фильтровани  от остатка, дает после лиофилизации 4,9 г натриевой соли 7|%- 0-2-амино-2- (3-метилсульфониламинофенил ) -ацетиламино -3-метокси-З-цефем-4-карбоновой кислоты. Пример 13, К суспензии 1,151 г (5 моль)) 7)-амино-3-метокси-3-цефем-4-карбоновой кислоты в 50 мл метиленхлорида прибавл ют 1., 392 мл (5,75 моль) бис-(триметилсилил )-ацетамида в атмосфере аргона и в течение 1 ч перемешивают при комнатной температуре, К охлажденному до внутренней темературы от -10 до раствору ,186 г (6 моль) натриевой соли -2-(1-метоксикарбонил-2-пропилиденhMiKO )-2-(3-метилсульфониламимофенил ) уксус -ой кислоты и 2 капель N , N-AHMeTH.n6eK3HnafvmHa в 40 мл ацетон тррша гфибавл ют в атмосфере аргона 0,784 мл (6 моль) Р13обутилового эфира хлорг/гуравьиной кислоты и в теченгге нескольких, минут дают прореагировать. К получеэЕногу ;/ таким образом смешанному ангидриду прибавл ют по капл м вьшгеописакный силилкр:;ва ный исходный продукт при той же :; .:.- пэратурс и реакционную смесь П ;ре 1ешкаают 2 ч прн температуре от О ,i,o ,, Растворитель удал ют в ротац ;оичом испарителе в вакууме, остаток раствор ют в 15 мл дистиллированной воды и 30 мл ацетонитрила и холог:,,;-; жептый раствор при помощи 2 ;. сол чой кислоты довод т до рН 1 После перемешивани  в течение 2 ч i желтый раствор при помощи 2 и,, растаора е,цкого натра довод т до рН 3,5 и o iTcr; сгущают 3 вакууг-ie при комнаткой температуре . Масл н} стый желтый королю БЗбалтывают с 15 мл воды i-; :. 3 ;.1п этилового сложного эфира уксус,г;он к - слоты, вод ную Фазу еще экстрагируют 10 ли- эти.г-ово:го сложного эфира уксусной г; с.1оты и соединек:- ые оргги-ические фазы промывают 5 мл лед ной .з../,;:1,ы. Водные фазы соёдин:1х . i и ri:.-.ii низкой температуре дог-од т ;-:ач :.:,: рН до 5 при комощи 2 : . ,: едкого патра. После

::-:;г, 40 изоиропгиюла осаж: - --2-a;i;.;Ho-2-- ( 3-метилсуль: ( ) ацетиламино J-S-Mex j s:--- j -ллрбонова  кислота, .j;Ea;c- эттчлоаым сложным .OS/.: лей ;(ислоты и высуизива; .,е .ггрк комнатной темпераэ--; перекристаллизации из смеси дс;т,-изопропанол можно получить чистьй моногидрат, т. пл. 173Исходный продукт можно получить следукчдим образом.

л расгвору 7,329 г (30 моль) 2- (3-метилсульфонила;иноФеи /1Л )-глици;-:л в 60 г/и 0,5 М раст:пг;-;;,з игти аTci катрк.; 3 абсолютном мс-ганоле ггрибавл  0л 3,, 9 (36 мсмть) . метило ого С;АО;;;;;:Ого эфирл ацетоуисуспой кислоты ; кипу-т т ч течение 1 ч с оорат; Ь:М холодильником, ::: тa;oл у,:-;ал ют в nai.yyMe, к осс1Дку i;H-- GTLjpe раза примешивают абсолют иьм-. толуол к каждыГ раз отгон ют приблкэи-гслы-о при Осадок растирают с лКТСЛОВхлоридом и о фильтровкЕают . чНчтьтоуe ЫЯ продукт еще иесколько раз промывают метиленхлоридом и полученную натриевую соль D-2-(1-метоксикарбонил-2-пропилиденимино )-2-(3-метилсульфониламинофенил )-уксуснойг кислоты сушат в течение 16 ч при комнатной температуре и давлении 0,01 мм рт.ст.

Claims (2)

1.Способ получени  7Р)- о-2-амино 2- (низший алкилсульфониламинофенил )-ацетиламино -3-метокси(или хлор) -З-цефем-4-карбонозых кислот, где низший алкил содержит до 4 атомов углерода, или их солей, о т л ич а ю щ и и с.   тем, что 7|5-амино-3-метокси- (или ) -З-цефем-4-карбоновую кислоту, где 4-карбоксилна  группа может быть защищена эфирной группой, такой, как триметилсилильна  или дифенилметильна  , и 7fi-аминогруппа может быть защищена в виде силиламиногруппы, подвергают адлированию соответствующей D-2-амино-2- (низший алкилсульфониламинофенил )-уксусной кислотой, где 2-аминогруппа может быть защищена такой группой, как трет.-бутоксикарбонильна  или алкоксикарбонилзамещенна  изопропилиденова , или ее смешанным ангидридом, или соответствующей 2-аздо-2- (низший алкилсульфониламинофенил )-уксусной кислотой, или ее смешанным ангидридом в среде органического растворител  в присутствии основани  при температуре от -20 до +40с или энзиматическому ацилирован соответствующей 2-амино-2-(низший алкилсульфониламинофенил)-уксусной кислотой, или ее низшим алкиловым эг1.-.ром 3 ьодьой среде при температуре -.т 20 до 50°С и рН среды 5-9 и :е пс.Л;.ч-енном соединении удал ют заmi- .Tijf-.iu группы путем обработки триф1-ор ..OV ,--эй или муравьиной кислотой , (-/нл: - зидогруппу восстанавливают D а-;к1;,-группу путем каталитичес спг-о :г-идркровани  и вьщел ют целевой продукт в виде свободной кислоты или ее соли.

2.Способ по п. 1, отличаю: и с   тем, что энзиматическое апилирование ведут под действием

Р i:,.; jdornona S melsnogenum АТСС 17808.

Источники информации, ;ГЛ1П тые 1Ю вки «1ание при экспертизе

1. Патент СССР 566525, М. :::.;. С 07 D 501/06, 1973.