SK282661B6

SK282661B6 - Trisubstituované fenylové deriváty a farmaceutické prostriedky s ich obsahom

Info

Publication number: SK282661B6
Application number: SK1630-96A
Authority: SK
Inventors: Graham John Warrellow; Rikki Peter Alexander
Original assignee: Celltech Therapeutics Limited
Priority date: 1994-06-21
Filing date: 1995-06-21
Publication date: 2002-11-06
Also published as: NO965524L; RU2201921C2; CN1304372C; US6077854A; FI965126A; EP0770065A1; US5786354A; ES2218548T3; NO312672B1; DE69532808T2; HU9603578D0; DK0770065T3; NZ288294A; AU2746195A; HUT76803A; CN1151732A; AU707472B2; NO965524D0; EP0770065B1; FI965126A0

Abstract

Trisubstituované fenylové deriváty všeobecného vzorca (1), ktoré sú účinné, a selektívne inhibítory fosfodiesterázy IV; farmaceutické prostriedky, ktoré ich obsahujú a ktoré možno použiť na liečenie chorôb, pri ktorých je nutné dosiahnuť selektívnu inhibíciu uvedeného izoenzýmu, zvlášť pri profylaxii a liečení astmy.ŕ

Description

Vynález sa týka substituovaných fenylových derivátov na použitie ako inhibítorov PDE IV a tiež farmaceutických prostriedkov, ktoré tieto látky obsahujú.

Doterajší stav techniky

Rad hormónov a nervových prenášačov mení funkciu rôznych tkanív zvýšením vnútrobunkovej koncentrácie cyklického adenozín-3',5'-monofosfátu, cAMP. Bunkové koncentrácie tejto látky sú riadené mechanizmami, ktoré riadia syntézu a rozklad uvedenej zlúčeniny. Syntéza cAMP je riadená enzýmom adenylcyklázou, ktorá môže byť priamo aktivovaná niektorými látkami, ako forskolínom alebo nepriamo aktivovaná väzbou špecifických agonistov na receptory na povrchu buniek, pričom tieto receptory sú schopné sa viazať na adenylcyklázu. Rozklad cAMP je riadený skupinou izoenzýmov fosfodiesteráz, PDE, tieto enzýmy riadia aj rozklad cyklického guanozín-3',5'-monofosfátu, cGMP. Až dosiaľ bolo opísané sedem izoenzýmov tejto skupiny, PDE I až VII, pričom distribúcia týchto enzýmov je v rôznych tkanivách rôzna. Je pravdepodobné, že by pri použití špecifických inhibítorov rôznych izoenzýmov PDE bolo možné dosiahnuť diferenciálne zvýšenie cAMP v rôznych tkanivách, súhrne údaje o distribúcii, štruktúre a funkcii týchto látok je možné nájsť v publikáciách Beavo a Reifsnyder, 1990, TIPS, 11 : 150 až 155 a Nicholson a ďalší, 1991, TIPS, 12,19 až 27.

Je možné dokázať, že zvýšenie koncentrácie cAMP v leukocytoch pri zápaloch vedie k inhibícii ich aktívácie. Okrem toho zvýšenie cAMP v hladkých svaloch dýchacích ciest má spasmolytický účinok. V týchto tkanivách má hlavnú úlohu pri hydrolýze cAMP enzým PDE IV. Je preto možné očakávať, že selektívne inhibítory tohto izoenzýmu by mohli mať liečivý účinok pri zápalových chorobách, napríklad pri astme a to na základe tak protizápalového, ako aj bronchodilatačného účinku.

Konštrukcia inhibítorov PDE IV bola zatiaľ obmedzene úspešná v tom zmysle, že rad potenciálnych inhibítorov pri biologických skúškach nebo účinný a/alebo spôsobil inhibíciu viac ako jedného izoenzýmu PDE neselektívnym spôsobom. Nedostatok selektívneho účinkuje značný problém, ktorý je dôsledkom veľkého rozšírenia CAMP in vivo, takže je zvlášť nutné nájsť účinné, ale selektívne inhibítory PDE IV, ktorých účinnosť by sa prejavovala len proti PDE IV.

Teraz bolo zistené, že rad trisubstituovaných fenylových derivátov je účinným inhibítorom PDE IV v koncentrácii, pri ktorej tieto látky majú len malý účinok alebo nemajú vôbec žiadny účinok na ostatné izoenzýmy PDE. Tieto látky spôsobujú inhibíciu ľudskej rekombinantnej PDE IV a okrem toho tiež zvyšujú koncentráciu cAMP v izolovaných leukocytoch. Tieto látky je preto možné použiť v lekárstve, zvlášť pri profylaxii a liečení astmy.

Podstata vynálezu

Podstatu vynálezu tvoria trisubstituované fenylové deriváty všeobecného vzorca(1)

kde

R je Ci.6 alkylová alebo C₃._s cykloalkylová skupina, ktorá môže voliteľne obsahovať maximálne tri substituenty vybrané z atómov halogénu, hydroxylových skupín a Ci.₆ alkoxy skupín;

R“ znamená atóm vodíka alebo Ci.₆ alkylovú skupinu, prípadne substituovanú jedným alebo viacerými atómami halogénu a

Z znamená skupinu vzorca (A) alebo (B)

(A) (B) kde jeden zo substituentov R⁴ a R³ je skupina -Ar(Alk⁴)r(O)s(Alk⁵)1Ar' a druhý je skupina -Ar alebo, v prípade, žc ide o substituent R⁴, atóm vodíka, kde Ar a Ar’ sú vybrané z monocyklických arylových skupín voliteľne obsahujúcich jeden alebo viac heteroatómov vybraných z atómov kyslíka, síry a dusíka a voliteľne obsahujúci maximálne tri substituenty' vybrané z atómov halogénu, alklu, halogénalkylu, aminoskupiny, substituovanej aminoskupiny, nitro, -NHSO2NH2, -NHSO2NHCH3, -XHSOjNfCH,),, -NHCOCH,, -NHC(O)NH2, -NCH3C(O)NH2, -NHC(O)NHCH3, -NHC(O)NHCH2CH3 a -NHC(O)N(CH3)2, kde každá zo skupín Alk⁴ a Alk⁵ predstavuje C,.6 alkylénovú skupinu voliteľne obsahujúcu maximálne tri substituenty vybrané z atómov halogénu, hydroxylových skupín a Cj_₆alkoxy skupín; r, s a t každé nezávisle znamená 0 alebo 1; ako aj soli, solváty, hydráty a N-oxidy týchto zlúčenín.

V prípade, že R v zlúčeninách vzorca (1) znamená cykloalkyl alebo cykloalkenyl, prípadne substituovaný, môže ísť napríklad o cykloalkyl s 3 až 8 atómami uhlíka, ako cyklobutyl, cyklopentyl alebo cyklohexyl alebo tiež o cykloalkenyl s 3 až 8 atómami uhlíka, obsahujúci napríklad jednu alebo dve dvojité väzby, ako 2-cyklobuten-l-yl, 2-cyklopenten-l-yl, 3-cyklopenten-l-yl, 2,4-cyklopentadien-1-yl, 2-cyklohexen-l-yl, 3-cyklohexen-l-yl, 2,4-cyklohexadien-l-yl alebo 3,5-cyklohexadien-l-yl, pričom cyklaalkylové alebo cykloalkcnylové skupiny sú prípadne substituované 1, 2 alebo 3 substituentmi zo skupiny atóm halogénu, ako fluóru, chlóru, brómu alebo jódu, alkyl s 1 až 6, napríklad 1 až 3 atómami uhlíka s priamym alebo rozvetveným reťazcom, ako metyl alebo etyl, hydroxyskupina alebo alkoxyskupina s 1 až 6, napríklad 1 až 3 atómami uhlíka, ako metoxyskupina alebo etoxyskupina.

Monocyklické alebo viaccyklické arylové skupiny vo význame Ar alebo Ar' zahrnujú napríklad arylové skupiny so 6 až 12 atómami uhlíka, prípadne substituované, ako prípadne substituovaný fenyl.

V prípade, že monocyklické skupiny vo význame Ar alebo Ar' obsahujú jeden alebo väčší počet heteroatómov, môže ísť napríklad o heterocyklické skupiny s 1 až 9 atómami uhlíka, prípadne substituované a obsahujúce napríklad 1, 2, 3 alebo 4 heteroatómy zo skupiny kyslík, síra alebo dusík. Všeobecne sú heteroarylové skupiny vo význame Ar alebo Ar' napríklad monocyklické heteroarylové skupiny. Monocyklické heteroarylové skupiny zahrnujú napríklad 5- alebo 6-členné heteroarylové skupiny, obsahujúce 1, 2, 3 alebo 4 heteratómy zo skupiny kyslík, síra alebo dusík.

Ako príklady heteroarylových skupín vo význame Ar alebo Ar' je možné uviesť pyrolyl, furyl, tienyl, imidazolyl, N-metylimidazolyl, N-etylimidazolyl, oxazolyl, izoxazolyl, tiazolyl, izotiazolyl, pyrazolyl, 1,2,3-triazolyl, 1,2,4-triazo lyl, 1,2,3-oxadiazolyl, 1,2,4-xadiazolyl, 1,2,5-oxadiazolyl, 1,3,4-oxadiazolyl, pyridyl, pyrimidinyl, pyridazinyl, pyrazinyl, 1,3,5-triazinyl, 1,2,4-triazinyl, 1,2,3-triazinyl, benzofuryl, izobenzofuryl, benzotienyl, izobenzotienyl, indolyl, izoindolyl, benzimidazolyl, benzotiazolyl, benzoxazolyl, chinazolinyl, naňyridinyl, pyrido[3,4-b]pyridyl, pyrido[3,2-bjpyridyl, pyrido[4,3-b]pyridyl, chinolinyl, izochinolinyl, tetrazolyl, 5,6,7,8-tetrahydrochinolinyl a 5,6,7,8-tetrahydroizochinolinyl. Ako príklad bicyklických heteroarylových skupín je možné uviesť chinolinyl alebo izochinolinyl.

Prítomnosť určitých substituentov v zlúčeninách všeobecného vzorca (1) môže umožniť tvorbu solí týchto látok. Vhodné soli sú najmä farmaceutický prijateľné soli, napríklad adičné soli s kyselinami, odvodené od anorganických alebo organických kyselín, soli, odvodené od anorganických a organických báz a podobne.

Adičné soli s kyselinami zahrnujú hydrochloridy, hydrobromidy, hydrojodidy, alkylsulfonáty, napríklad metánsulfonáty, etánsulfonáty alebo isctionáty, ďalej arylsulfonáty, napríklad toluénsulfonáty, besyláty alebo napsyláty, fosfáty, sulfáty, hydrogensulfonáty, acetáty, trifluóracetáty, propionáty, citráty, maleáty, fumaráty, malonáty, sukcináty, laktáty, oxaláty, tartráty a benzoáty.

Soli, odvodené od anorganických a organických báz zahrnujú soli s alkalickými kovmi, ako soli sodné alebo draselné, soli s kovmi alkalických zemín, napríklad soli horečnaté alebo vápenaté a soli s organickými amínmi, ako morfolínom, piperidínom, dimetylamínom alebo dietylamínom.

Prekurzory zlúčenín všeobecného vzorca (1) zahrnujú látky, napríklad estery, alkoholy alebo amíny, ktoré je možné premeniť na zlúčeniny všeobecného vzorca (1) in vivo metabolickým spôsobom, napríklad hydrolýzou, redukciou, oxidáciou alebo transesteriflkáciou.

Zvlášť vhodné soli zlúčenín podľa vynálezu zahrnujú farmaceutický prijateľné soli a najmä adičné soli s farmaceutický prijateľnými kyselinami.

Zvlášť výhodnými zlúčeninami sú tieto látky:

(±)-4-{2-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)-2-[4-(4-trifluórmetylfenyljfenyletyl]} pyridín, (±)-4-[2-(4-benzyloxyfenyl)-2-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)etyl]pyridín, (±)-4-[2-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)-2-[4-(4-nitrofenyloxy)fenyl]etyl]pyridín,

E a Z izoméry 4-[2-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)etenyl]-3-(fenyletyl)pyridínu, (±)-4-[2-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)etyl]-3-(fenyletyljpyridín, (±)-4-[2-[4-(4-aminofenyloxy)fenyl]-2-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)etyl] pyridín, (±)-4-[2-[4-(4-acetamidofenyloxy)fenyl]-2-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)etyl] pyridín, (±)-4-[2-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)-2-[4-(4-N',N'-dimetylaminosulfonylamino fenyl)fenyloxy]etyl]pyridín, (±)-4-[2-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)-2-[4-(4-metylsulfonylaminofenyljfenyloxy] etyljpyridín, (±)-4-[2-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)-2-(4'-metyl-4-bifenyl)etyl]pyridín, ako aj izoméry alebo oddelené enantioméry, soli, solváty, hydráty, prekurzory a N-oxidy týchto látok.

Zlúčeniny podľa vynálezu sú selektívnymi a účinnými inhibítormi PDE IV. Schopnosť týchto látok vyvolať uvedené biologické účinky je možné ľahko dokázať skúškami, ktoré budú ďalej uvedené v príkladovej časti.

Zlúčeniny podľa súčasného vynálezu sú vhodné na profylaxiu a liečenie astmy, predovšetkým zápalov pľúc postihnutých astmatickým ochorením, a cystickej fibrózy alebo pri liečení zápalov dýchacích ciest, chronickej bronchitídy, eozinofilného granulómu, psoriázy alebo iných benígnych a malígnych proliferatívnych chorení kože, endotoxického šoku, septického šoku, ulceratívnej kolitídy, Crohnovej choroby, pri poruche perfuzie srdca alebo mozgu, artritídy, chronickej glomerulonefritídy, atopického ekzému, žihľavky, respiračného distress syndrómu u dospelých, diabetes insipidus, sennej nádchy, alergických zápalov spojiviek, jarného spojivkového kataru, arteriálnej restenózy a artériosklerózy.

Zlúčeniny podľa tohto vynálezu zvyšujú množstvo cAMP v bunkách zmyslových nervov a tým potláčajú vytvorenie neurogénnych zápalov. Majú analgetický, antitusický účinok a pri zápalových ochoreniach majú antihyperanalgetický účinok znižujúci podráždenie a bolesť.

Zlúčeniny podľa tohto vynálezu zvyšujú množstvo cAMP v lymfocytoch a výrazne tým znižujú nežiaducu aktivitu lymfocytov pri ochoreniach vyvolaných poruchami imunitného systému, predovšetkým pri reumatickej artritíde, ankylozujúcej spondylitíde, pri hojení transplantátov a pri reakcii štepu proti hostiteľovi.

Kvôli schopnosti zníženia sekrécie žalúdočnej kyseliny môžu byť zlúčeniny podľa tohto vynálezu použité pri liečení žalúdočnej hypersekrécie.

Zlúčeninu podľa súčasného vynálezu zabraňujú infekcii alebo imunitné aktivovaným zápalovým bunkám v syntéze cytokínov. Tým sú vhodné na liečenie ochorení, v ktorých je kľúčovým mediátorom „Tumor necrosis factor“ (TNF). Ide o sepsy vyvolané bakteriálnym, pliesňovým alebo vírusovým ochorením a septický šok. Vďaka účinku na syntézu cytokínov sú zlúčeniny podľa tohto vynálezu vhodne na potlačenie zápalov a pyrexie, pri liečení chronickej degenerácie tkaniva sprostredkovanej cytokínmi, ktorá sa pozoruje pri reumatických ochoreniach alebo osteoartritídach. Nadprodukcia TNF a iných cytokínov pri bakteriálnych, pliesňových a vírusových infekciách a/alebo pri karcinóme vedie ku kachexii a strate svalového tkaniva. Tým, že zlúčeniny podľa tohto vynálezu výrazne pozitívne ovplyvňujú tieto symptómy, významne zlepšujú kvalitu života pacientov.

Zlúčeniny podľa tohto vynálezu zvyšujú hladinu cAMP v mozgových bunkách a pôsobia tak proti depresii a poruchám pamäti.

Zlúčeniny podľa tohto vynálezu obmedzujú proliferáciu niektorých nádorových buniek a môžu zabrániť rastu nádoru ajeho preniknutiu do zdravého tkaniva.

Na liečenie a profylaxiu chorôb sa zlúčeniny podľa tohto vynálezu podávajú ako farmaceutický prostriedok, ktorý podľa tohto vynálezu obsahuje zlúčeninu všeobecného vzorca (1) a jeden alebo viac farmaceutický vhodných nosičov, pomocných látok a riediacich roztokov.

Vhodnou formou podania farmaceutických prostriedkov podľa tohto vynálezu je podanie orálne, bukálne, parenterálne, nazálne, lokálnou alebo rektálnou cestou, alebo podanie inhalačné alebo insuflačné.

Na orálne podanie sú vhodné formy farmaceutického prostriedku, napríklad tablety, pastilky alebo tobolky pripravené podľa všeobecne známych postupov. Môžu sa použiť pomocné látky, ako sú napríklad spojivá (vopred želatinizovaný kukuričný škrob, polyvinylpyrolidón alebo hydroxypropylmetylcelulóza), plnivá (laktóza, mikrokryštalická celulóza alebo hydrogenfosforečnan vápenatý), klzné látky (stearát horečnatý, mastenec alebo oxid kremičitý), dezintegračné činidlá (zemiakový škrob alebo glykolát sodný) alebo zmáčadlá (laurylsulfát sodný). Tablety sa vybavia povlakom podľa všeobecne známych postupov.

Kvapalné prípravky na orálne použitie sa môžu pripraviť vo forme roztokov, sirupov alebo suspenzií, alebo ako bezvodý produkt, ktorý sa pred použitím rozpustí vo vode alebo v inom vhodnom nosiči. Tieto kvapalné prípravky sa pripravia všeobecne známymi postupmi, s použitím vhodných pomocných látok ako napríklad suspenzných činidiel, emulzifíkačných činidiel, bezvodých nosičov alebo konzervačných prostriedkov. Prípravok môže obsahovať pufrovacie soli, sladidlá, farbivá a látky upravujúce chuť prípravku.

Vhodné sú prípravky na orálne použitie, ktoré kontrolovane uvoľňujú účinnú látku.

Na podanie bukálnou cestou sú vhodné tablety alebo pastilky, pripravené podľa známych postupov.

Zlúčeniny všeobecného vzorca (1) a (2) sa parenterálnou cestou môžu podať vo forme injekcií alebo infúzií. Injekčný prípravok je vhodné vyrobiť po jednotlivých dávkach (sklenené ampulky) alebo vo forme zásobných liekoviek, obsahujúcich viac dávok (sklenené ampuly). Injekčným prípravkom môže byť suspenzia, roztok alebo emulzia v olejovom alebo vodnom prostredí a môže obsahovať pomocné látky ako sú suspenzné činidlá, stabilizačné, konzervačné alebo disperzné činidlá. Účinná látka sa môže eventuálne vyrobiť ako prášok, ktorý sa pred podaním uvedie do roztoku vo vhodnom nosnom prostredí (v sterilnej, apyrogénnej vode).

Zlúčenina podľa toho vynálezu všeobecného vzorca (1) a (2) sa môže vyrobiť aj v depotnej forme na podanie implantačnou cestou alebo intramuskulámou injekciou.

Na podanie cestou nazálnou alebo na inhalačnú aplikáciu sa zlúčenina podľa tohto vynálezu podáva ako aerosólový sprej v tlakovom balení alebo rozprašovači, s použitím vhodného hnacieho prostriedku (dichlórfluórmetánu, trichlórfluórmetánu, dichlórtetrafluóretánu, oxidu uhličitého alebo iného plynu, alebo zmesi plynov).

Prípravok je možné umiestniť do tlakovej nádoby alebo rozprašovacieho zariadenia, ktorá bude obsahovať jednu alebo viac jednotlivých dávok účinnej látky. Tento výrobok by mal byť doplnený návodom na použitie.

Množstvo zlúčeniny podľa tohto vynálezu požadované na profylaxiu alebo liečbu jednotlivých zápalových ochorení závisí od druhu vybranej zlúčeniny a od podmienok liečby pacienta. Denná dávka sa pohybuje v rozmedzí od 100 ng/kg do 100 mg/kg, to znamená približne 0,01 mg/kg do 40 mg/kg telesnej váhy na orálnu alebo bukálnu aplikáciu, približne od 10 ng/kg do 50 mg/kg telesnej hmotnosti na parenterálnu aplikáciu a asi od 0,05 mg do 1000 mg, respektíve od 0,5 mg do 1000 mg na nazálnu aplikáciu, podanie inhaláciou alebo insuíláciou.

Zlúčeniny podľa tohto vynálezu sa pripravia podľa ďalej uvedeného postupu. Pokiaľ nie je uvedené inak, potom skratky Z, R⁴, R⁵, R^a, R, ktoré sú uvedené vo vzorcoch, označujú uvedené skupiny vzťahujúce sa k všeobecnému vzorcu (1). V ďalej uvedených reakciách je nutné chrániť reaktívne funkčné skupiny, napríklad hydroxy-, amino-, tio- alebo karboxyskupiny, ktoré sa vyskytujú pri požadovanej výslednej zlúčeniny tak, aby nedošlo k ich nežiaducej precipitácii pri reakcii. Je možné použiť všeobecne používané ochranné skupiny (pozri napríklad T. W. Green - Protective Groups in Organic Synthcsis, John Wilcy and Sons, 1981).

N-oxídy zlúčenín všeobecného vzorca (1) sa pripravia oxidáciou zodpovedajúcej dusitej bázy s použitím peroxidu vodíka ako oxidačného činidla a za prítomnosti kyseliny, napríklad kyseliny octovej. Reakcia prebieha za zvýšenej teploty v rozmedzí od 70 °C do 80 “C. Výsledná zlúčenina sa pripraví aj reakciou s perkyselinou (s kyselinou peroctovou) v dichlórmetáne ako rozpúšťadle a za teploty miestnosti.

Soli zlúčenín všeobecného vzorca (1) sa pripravia reakciou zlúčeniny všeobecného vzorca (1) so zodpovedajúcou kyselinou alebo zásadou vo vhodnom rozpúšťadle alebo zmesi rozpúšťadiel. Ide napríklad o organické rozpúšťadlá, ako sú étery (dietyléter) alebo alkohol (etanol).

Určitý enantiomér zlúčeniny všeobecného vzorca (1) je možné získať zo zodpovedajúcej zmesi enantiomérov podľa používaných postupov na získanie enantiomérov.

Soli ako diastereomerické deriváty sa pripravia reakciou zmesi enantiomérov zlúčeniny všeobecného vzorca (1) (racemátu) so zodpovedajúcou chirálnou zlúčeninou (chirálnou bázou alebo kyselinou). Ako chirálnu kyselinu je možné použiť napríklad kyselinu vínnu alebo vínany (dibcnzoylvínan alebo ditoluoylvínan), sulfonáty (gafrosulfonát), kyselinu mandľovú alebo jej soli a fosfáty (1,1'-binaftalén-2,2'-diylhydrogenfosfát). Diastereoméry sa potom oddelia bežným postupom, napríklad kryštalizáciou. V prípade, že díastereomérom je soľ, potom sa požadovaný diastereomér izoluje pôsobením kyseliny alebo zásady.

Racemát zlúčeniny všeobecného vzorca (1) je možné rozdeliť pomocou vysokotlakovej kvapalinovej chromatografie.

V príkladoch, ktoré opisujú tento vynález, sú uvedené tieto skratky:

DME - etylénglykoldimetyléter,

THF - tetrahydrofurán,

CH₂C1₂ - dichlórmetán,

Et₂O - dietyléter,

EtOH - etanol,

DMF - N,N-dimetylformamid,

EtOAc - etylacetát,

BuLi - butyllítium,

DMPU - l,3-dimetyl-3,4,5,6-tetrahydro-2(lH)pyrimidinón.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Medziprodukt 1

-Bróm-2-metoxy fenol

Výsledná zlúčenina sa pripraví podľa medzinárodnej patentovej prihlášky WO 93/10118.

Medziprodukt 2 4-Bróm-2-cyklopentyloxyanizol

Výsledná zlúčenina sa pripraví podľa medzinárodnej patentovej prihlášky WO 94/10118.

Medziprodukt 3 (4-Brómfenyl)-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)ketón

Výsledná zlúčenina sa pripraví podľa medzinárodnej patentovej prihlášky WO 94/14742.

Medziprodukt 4 4-[2-(4-Brómfenyl)-2-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)-2-hydroxyetyljpyridín

Medziprodukt 5 (E) a (Z) izoméry 4-[2-(4-brómfenyl)-2-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)-2-hydroxyetyl]pyridínu

Medziprodukt 6

Acylsultam (1)

Výsledná zlúčenina sa pripraví podľa medzinárodnej patentovej prihlášky PCT/GB 94/02799.

Medziprodukt 7 (lR,5S)-N-[(3R)-3-(4-Benzyloxyfenyl)-3-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)-2-(4-pyridyl)propanoyl]-10,10-dimetyl-3-tia-4-azatricyklo[5.2.1 .0^1,5]dekán-3,3-dioxid

Roztok 22,3 g (84,9 mmol, 2,2 ekvivalentov) 4-brómbenzyloxybenzénu v 100 ml tetrahydrofuránu sa pridá do roztoku 2,44 g (101,9 mmol, 2,6 ekvivalentov) hoblín horčíka v 10 ml tetrahydrofuránu, ktorý' obsahuje 2 kvapky 1,2-dibrómetánu. Vzniknutá reakčná zmes sa 0,5-hodín mieša pri teplote refluxu. Ochladený roztok sa po kvapkách pridá pri teplote -40 °C do roztoku 20,68 g (38,6 mmol) medziproduktu 6 v 600 ml zmesi tetrahydrofuránu a dietyléteru v pomere -10 °C a potom sa pridá 150 ml 10 % roztoku chloridu amónneho a 300 ml etylacetátu. Organický podiel sa oddelí, zlúči sa a trikrát sa extrahuje 100 ml etylacetátu. Extrakt sa suší nad síranom horečnatým a zahustí sa vo vákuu. Vznikne žltý zvyšok, ktorý sa rekryštalizuje z etylacetátu za vzniku 17,93 g svetložltej tuhej látky výslednej zlúčeniny.

δ_Η (CDC1₃): 0,69 (s, 3H, MeCMe), 0,87 (s, 3H, MeCMe), 1,15 -1,35 (br m, 2H), 1,4-1,5 (br m, 1H), 1,5 - 2,0 (br m, 12H), 3,31 (d, 1H, J = 13,8 Hz, CHSO₂), 3,44 (d, 1H, J = = 13,8 Hz, CHSO₂), 3,65 - 3,73 (m, 1H, NHC), 4,51 (d, 1H, J = 11,5 Hz, CHCHO), 4,58 (br m, 1H, OHC), 4,95 - 5,1 (m, 3H, OCH₂ + CHCHCO), 6,55 - 6,65 (m, 3H, C₆H₃), 6,86 (ca d, 2H, J = 8,7 Hz, 2x ArH orto k benzyloxy), 7,25 - 7,45 (m, 9H, C₆H₅ + pyridín H₃, H₅ + 2x ArH metá k benzyoloxy), 8,37 (dd, 2H, J = 4,5 Hz, 1,5 Hz, pyridín H₂, H₆).

Medziprodukt 8 (R)-4-[2-(3-Cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)-2-(4-hydroxyfenyl)etyl]pyridín

Pod refluxom sa 2 hodiny zahrieva zmes 9,35 g (19,5 mmol) výslednej zlúčeniny z príkladu 3, 25 ml (195 mmol) cyklohexadiénu a 1,0 g 10 % paládia na aktívnom uhlí v 300 ml etanolu. Reakčná zmes sa filtruje cez celit a filtrát a premývacie podiely sa zahustia vo vákuu za vzniku 7,6 g bielej peny výslednej zlúčeniny.

δ_Η (CDClj): 1,4 -1,9 (br m, 1H, (CH₂)₄), 3,2 - 3,35 (m, 2H, CHCH₂), 3,79 (s, 3H, OMe), 4,05 (ca t, 1H, J = ca 7,8 Hz, CHCH₂), 4,65 (br m, 1H, OCH), 6,6 - 6,8 (m, 5H, C₆H₃ + 2x ArH orto k OH), 6,9 - 7,0 (m, 4H, pyridín H₃, H₃ + 2x ArH mcta k OH), 8,36 (ca d, 2H, J = ca 4,5 Hz, pyridín H₂, H₆).

Medziprodukt 9 4-Metyl-3-pyridínkarboxaldehyd

Do miešaného roztoku 0,245 g (2,4 mmol) Ν,Ν,Ν’-trimetyletylamínu v tetrahydrofuráne sa pri teplote -78 °C po kvapkách pridá 1,37 ml (2,2 mmol) 1,6 M roztoku n-butyllítia v zmesi hexánov. Po pridaní roztoku 0,214 g (2 mmol) 3-pyridínkarboxaldehydu v tetrahydrofuráne sa vzniknutá zmes mieša i 5 minút a potom sa pridá ďalších

2.5 ml (4 mmol) 1,6 M roztoku n-butyllítia v zmesi hexánu. Po dvoch hodinách miešania pri teplote -70 °C sa pridá jódmetán, zmes sa 30 minút mieša pri teplote miestnosti a potom sa vleje do vodného roztoku chloridu sodného. Roztok sa dvakrát extrahuje dietyléterom, suší sa nad síranom horečnatým, filtruje sa a zahustí vo vákuu. Vzniknutý zvyšok sa čistí po absorpcii na oxid kremičitý chromatografiou pri elúcii dietyléterom za vzniku výslednej zlúčeniny.

Medziprodukt 10 (4-Metyl-3 -fenyletenyl)pyridín

Zmes 4,96 g (99 mmol) benzyltrifenylfosfóniumbromidu s amidom sodným sa rozpustí v tetrahydrofuráne pri teplote miestnosti a vzniknutá reakčná zmes sa 30 minút mieša. Vznikne červený roztok, do ktorého sa pridá roztok 1 g (8,3 mmol) medziproduktu 9 v tetrahydrofuráne, zmes sa 16 hodín mieša a potom sa vleje do vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Po extrakcii dvakrát dichlórmetánom, sušení nad síranom horečnatým, filtráciou a zahustení vo vákuu sa vzniknutý zvyšok čistí po absorpcii na oxid kremičitý chromatografiou pri elúcii dietyléterom za vzniku 1,5 g olejovitej látky výslednej zlúčeniny.

Medziprodukt 11 (4-Metyl-3 -fenyletyl)pyridín

Miešaný roztok 1,8 g medziproduktu 10 v etanole sa 16 hodín hydrogenuje v atmosfére vodíka za prítomnosti paládia na aktívnom uhlí. Vznikne olej výslednej zlúčeniny.

Medziprodukt 12 3-Cyklopentyloxy-4-metoxybenzylaldehyd

Výsledná zlúčenina sa pripraví podľa medzinárodnej patentovej prihlášky WO 94/20455.

Medziprodukt 13 2-Bróm-4-metylpyridín

Do 56,55 ml (520,64 mmol) 48 % vodného roztoku bromovodíka sa pri teplote nižšej než -5 °C pomaly pridá 10 g (92,47 mmol) 2-amino-4-metylpyridínu. Po kvapkách sa pri zachovaní teploty nižšej než 0 °C pridá 14 ml (274 mmol) brómu a následne sa opatrne pridá roztok

17.5 g (254 mmol) dusitanu sodného v 20 ml vody tak, aby teplota zostala nižšia ako 5 °C. Reakčná zmes sa 1 hodinu mieša a pri teplote nižšej ako 25 “C sa pridá roztok 37 g (940 mmol) hydroxidu sodného v 50 ml vody. Vzniknutá zmes sa trikrát extrahuje 75 ml dietyléteru, zlúčené podiely sa premyjú nasýteným roztokom chloridu sodného, sušia sa nad síranom horečnatým a odparujú sa do sucha za vzniku surového oleja. Tento zvyšok sa po absorpcii na oxid kremičitý čistí chromatografiou pri elúcii zmesou dietyléteru a hexánu v pomere 50 : 50. Vznikne 10,2 g žltého oleja výslednej zlúčeniny.

5h (CDC1₃): 2,45 (s, 3H, ArCH₃), 7,00 (d, 1H, pyridín H₃), 7,25 (s, 1H, pyridín H₅), 8,15 (d, 1H, pyridín H₆), m/z 172 (M+l), 174 (M+l).

Medziprodukt 14 2-Cyklopentyloxy-4-metylpyridín

Do studenej suspenzie 2 g (50 mmol) hydridu sodného v 20 ml Ν,Ν-dimetylformamidu s teplotou 0 °C sa po kvapkách pridá 4,99 ml (55 mmol) cyklopentanolu a vzniknutý roztok sa nechá zohriať na teplotu miestnosti a 1 hodinu sa mieša. Po kvapkách sa pridá 8,6 g (49,67 mmol) medziproduktu 13 a reakčná zmes sa 2 hodiny zahrieva na teplotu 80 °C. Po ochladení sa pridá 100 ml vody a zmes sa extrahuje trikrát 100 ml dietyléteru, premyje sa nasýteným roztokom chloridu sodného, suší sa nad síranom horečnatým a odparuje sa do sucha za vzniku oranžového oleja. Tento zvyšok sa po absorpcii na oxid kremičitý čistí chromatografiou pri elúcii zmesi dietyléteru a hexánu v pomere 50 : 50. Vznikne 7,5 g oranžového oleja výslednej zlúčeniny. δ_Η (CDClj): 1,5 - 2,0 (m, 8H, (CH₂)₄), 2,25 (s, 3H, CH₃), 5,35 (m, 1H, OCH), 6,45 (s, 1H, pyridín H₂), 6,65 (d, 1H, pyridín H₅), 7,96 (d, 1H, pyridín H₆), m/z 179 (M+l).

Príklad 1

a) (E) a (Z) izoméry 4-{2-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)-2-[4-(4-trifluórmetylfenyl)fenyl]etenyl}pyridínu

Zmes 500 mg (1,1 mmol) medziproduktu 5 a tetrakis(trifenylfosfin)paládia v 20 ml Ν,Ν-dimetylformamidu sa 0,5-hodiny mieša pri teplote miestnosti. Pridá sa 1,5 ml (3,0 mmol) 2 M roztoku uhličitanu sodného a 190 mg (1,0 mol) kyseliny trifluórmetylfenylborovej a vzniknutá reakčná zmes sa ochladí, rozdelí sa od 10 ml vody a 20 ml etylacetátu, organický podiel sa oddelí, zlúči a dvakrát sa extrahuje 10 ml etylacetátu. Extrakty sa premyjú 15 ml nasýteného roztoku chloridu sodného, sušia sa nad síranom horečnatým a zahustia sa vo vákuu za vzniku hnedého oleja. Tento zvyšok sa po absorpcii na oxid kremičitý čistí chromatografiou pri elúcii zmesou etylacetátu a hexánu v pomere 1:1. Vznikne 410 mg bezfarebného oleja výslednej zlúčeniny.

δ_Η (CDClj): 1,5 - 2,0 (br m, 8H, (CH₂)₄), 3,86 a 3,89 (s, 3H, OMe), 4,57 a 4,70 (br m, 1H, OCH), 6,6 - 7,8 (m, 14H, 2x C₆H₄ + C₆H, + pyridín H₃, H_s + C=CH), 8,3 - 8,45 (m, 2H, pyridín H₂, H₆).

b) (E) a (Z) izoméry 4-[2-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)-2-[4'-metyl-4-bifenyl)fenyl]etenyl]pyridínu

Výsledná zlúčenina sa pripraví podľa postupu uvedeného v príklade l.a) s použitím 0,40 g (0,89 mmol) medziproduktu 5, 0,051 g (0,045 mmol) tetrakis(trifenylfosfínjpaládia v 20 ml Ν,Ν-dimetylformamidu, 1,49 ml (2,7 mmol) 2 M roztoku uhličitanu sodného a 0,1151 g (0,846 mmol) 4-metylbenzénborovej kyseliny. Zvyšok sa po absorpcii na oxid kremičitý čistí chromatografiou pri elúcii zmesou etylacetátu a hexánu v pomere 1:1. Vznikne 0,311 g výslednej zlúčeniny.

δ_Η (CDCÍ₃): 1,25 (t, 1H), 1,5 - 1,75 (m, 6H), 1,85 (s, 2H), 2,4 (s, 3H), 3,95 (s, 3H), 6,4 - 6,9 (m, 5H), 7,2 - 7,3 (m, 3H), 7,5 (m, 1H), 7,55 - 7,6 (m, 3H), 8,4 (m, 2H).

Príklad 2

a) (m) 4-{2-(3-Cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)-2-[4-(4-tri fluórmetylfenyljfenyljetenyl) pyridíniummravčan

Zmes 380 mg výslednej zlúčeniny z príkladu 1 a 50 mg 10 % paládia na aktívnom uhlí v 5 ml kyseliny mravčej a 35 ml etanolu sa 3 hodiny mieša pod refluxom. Reakčná zmes sa filtruje cez cclit, zahustí sa vo vákuu za vzniku žltého oleja, ktorý sa po absorpcii na oxid kremičitý čistí chromatografiou pri elúcii zmesou etylacetátu a hexánu v pomere 1:1. Vznikne 190 mg svetložltej tuhej látky výslednej zlúčeniny.

δ_Η (CDClj): 1,5 - 1,95 (br m, 8H, (CH₂)₄), 3,57 (d, 2H, J = = 7,9 Hz, CHCH₂), 3,80 (s, 3H, OMe), 4,24 (t, 1H, J = 7,9 Hz, CHCH₂), 4,68 (br m, 1H, OCH), 6,65 - 6,75 (m, 2H, 2x ArH metá k OMe), 6,78 (d, 1H, J = 8,1 Hz, ArH orto k OMe), 7,29 (d, 2H, J = 8,2 Hz, 2x ArH orto metá k CF₃), 7,41 (d, 2H, J = 5,6 Hz, pyridín H₃, H₅), 7,53 (d, 2H, 2x ArH orto k CF₃), 7,63 (d, 2H, J = 8,8 Hz, 2x ArH C₆H₄CF₃), 7,67 (d, 2H, J = 8,8 Hz, 2x ArH C₅H₄CF₃), 8,62 (d, 2H, J = ca 5 Hz, pyridín H₂, H₆), m/z (EI) 517 (M⁺, 8%), 426 (15), 425 (48), 358 (20), 357 (100), 296 (22) a 69 (28).

Nasledujúca zlúčenina sa pripraví podľa postupu uvedeného v príklade 2.a).

b) (m) 4-[2-(3-Cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)-2-(4'-metyl-4-bifenyl)etyl]pyridín

Výsledná zlúčenina sa pripraví zo zmesi 0,311 g (0,673 mmol) výslednej zlúčeniny z príkladu 1.b) v 35 ml 10 % roztoku kyseliny mravčej v etanole a v 10 % roztoku paládia na aktívnom uhlí. Po čistení HPLC pri elúcii 60 až 80 % roztokom acetonitrilu vo vode vznikne 0,23 g výslednej zlúčeniny.

δ_Η (CDClj): 1,5 - 1,75 (m, 9H), 2,3 (s, 3H), 3,3 (dd, 2H),

3,5 (d, 2H), 3,65 (s, 3H), 4,3 (t, 1H), 6,8 (d, 3H), 7,2 (d, 2H), 7,3 (d, 2H), 7,35 (d, 2H), 7,45 (d, 2H), 8,5 (m, 2H), m/z (ES⁺) 464,2 (M + H⁺).

Príklad 3 (R) 4-[2-(4-Benzyloxyfenyl)-2-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)etyl]pyridín

Pri teplote približne -10 °C sa do roztoku 10,6 ml (14,3 mmol, 5 ekvivalentov) etántiolu v 300 ml tetrahydrofuránu po kvapkách pridá 27 ml (43,0 mmol, 1,5 ekvivalentov), 1,6 M roztoku n-butyllítia. Po 0,5-hodine sa po kvapkách pridá roztok 20,6 g (28,7 mmol) medziproduktu 7 v 20 ml tetrahydrofuránu a reakčná zmes sa mieša 12,5-hodiny pri teplote miestnosti. Pridá sa 10 ml vody a rozpúšťadlo sa odstráni vo vákuu. Vznikne pena, ktorá sa rozpustí v 100 ml etanolu a 200 ml 2 M vodného roztoku hydroxidu sodného a reakčná zmes sa 1 hodinu zahrieva pod refluxom. Zmes sa ochladí na teplotu približne 50 °C a pridaním 37 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej sa pH zmesi privedie na pH 5. Zmes sa 0,75 hodín refluxuje, organické rozpúšťadlá sa odstránia vo vákuu a vzniknutý zvyšok sa rozdelí do 400 ml 1,0 M vodného roztoku hydroxidu sodného a 400 ml dietyléteru. Organický podiel sa oddelí, zlúčené podiely sa extrahujú trikrát 100 ml dietyléteru a extrakty sa dvakrát premyjú 100 ml 1,0 M vodného roztoku hydroxidu sodného a sušia sa nad síranom horečnatým. Po zahustení vo vákuu vznikne svetložltá guma, ktorá sa po absorpcii na oxid kremičitý čistí chromatografiou pri elúcii zmesou dietyléteru a hexánu v pomere 3 : 7 až 100 % dietyléterom. Vznikne 9,35 g bielej tuhej látky výslednej zlúčeniny.

Vypočítané pre C₃₂H₃₃NO₃: C 79,63, H 7,11, N 3,00% nájdené: C 79,76, H 6,98, N 2,62.

δ_Η (CDC1₃): 1,5 - 2,1 (br m, 8H, (CH₂)₄), 3,27 (d, 2H, J = = 7,8 Hz, CHCH₂), 3,79 (s, 3H, OMe), 4,09 (t, 1Η, J = 7,8 Hz, CHCH₂), 4,63 (br m, 1H, OCH), 5,02 (s, 2H, OCH₂), 6,64 (d, 1H, J = 2,0 Hz, ArH orto k cyklopentyloxy), 6,67 (dd, 1H, J = 8,2, 2,0 Hz, ArH para k cyklopentyloxy), 6,74 (d, 1H, J = 8,2 Hz, ArH orto k OMe), 6,87 (ca d, 2H, J = ca

8,6 Hz, 2x ArH orto k benzyloxy), 6,91 (ca d, 2H, J = ca 4,5 Hz, pyridín H₃, H_s), 7,08 (ca d, 2H, J = ca 8,6 Hz, 2x ArH metá k benzyloxy), 7,3 - 7,5 (m, 5H, C₆H₃), 8,38 (dd, 2H, J = 4,5 Hz, 1,5 Hz, pyridín H₂, H₆).

Príklad 4 (R) 4-{2-(3-Cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)-2-[4-(4-nitrofenyloxy)fenyl]etyl} pyridín

Do roztoku 710 mg (1,83 mmol) medziproduktu 8 v 25 ml Ν,Ν-dimetylformamidu a 10 ml DMPU sa pridá 258 mg (2,19 mmol) terc.butoxidu draselného a vzniknutá reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti. Po 0,5-hodine sa pridá 553 mg (2,74 mmol) 4-brómnitrobenzénu a vzniknutý roztok sa pri teplote miestnosti mieša cez noc. Po pridaní 100 ml vody a 20 ml 2 M vodného roztoku hydroxidu sodného sa vzniknutá zmes trikrát extrahuje 150 ml dietyléteru. Extrakt sa dvakrát premyje 30 ml 1 M vodného roztoku hydroxidu sodného, dvakrát 100 ml vody a 100 ml nasýteného roztoku chloridu sodného a suší sa nad síranom horečnatým. Po zahustení vo vákuu sa vzniknutý žltý zvyšok po absorpcii na oxid kremičitý čistí chromatografiou pri elúcii dietylétcrom za vzniku 729 mg svetložltej tuhej látky výslednej zlúčeniny.

δ_Η (CDClj): 1,5 - 1,9 (br m, 8H, (CH₂)₄), 3,32 (d, 2H, J = = 7,9 Hz, CHCH₂), 3,81 (s, 3H, OMe), 4,18 (t, 1H, J = 7,9 Hz, CHCH₂), 4,67 (br m, 1H, OCH), 6,66 (d, 1H, J = 2,0 Hz, ArH orto k cyklopentyloxy), 6,71 (dd, 1H, J = 8,2 Hz, 2,0 Hz, ArH para k cyklopentyloxy), 6,77 (d, 1H, J = 8,2 Hz, ArH orto k OMe), 6,9 - 7,05 (m, 6H, CHC₆H₄ + pyridín H₃, H_s), 7,2 - 7,3 (m, 2H, ArH metá k NO₂), 8,15 - 8,25 (m, 2H, ArH orto k NO₂), 8,42 (dd, 2H, J = 4,5 Hz, 1,6 Hz, pyridín H₂, H₆).

Príklad 5 (E) a (Z) izoméry 4-[2-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)etenyl]-3-(fenyletyl)pyridínu

Do roztoku 1,8 g (4,32 mmol) výslednej zlúčeniny z príkladu lO.a) v 150 ml toluénu sa pridá katalytické množstvo kyseliny tosylovej a reakčná zmes sa refluxuje 8 hodín v Dean-Starkovom prístroji. Reakčná zmes sa ochladí, vleje sa do vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a dvakrát sa extrahuje dichlórmetánom. Zlúčené organické podiely sa sušia nad síranom horečnatým, filtrujú sa vo vákuu a vzniknutý zvyšok sa čistí chromatografiou za vzniku 1,3 g žltej tuhej látky výslednej zlúčeniny s teplotou topenia 78 až 80 °C.

Vypočítané pre C₂₇H₂₉NO₂: C 81,17, H 7,32, N 3,51% nájdené: C 81,44, H 7,35, N 3,62.

δ_Η (CDClj): 1,6 - 2,0 (br m, 8H, (CH₂)₄), 2,9 - 3,1 (m, 4H, Ar(CH₂)₂), 3,81 (s, 3H, OCH₃), 4,85 (s, 1H, OCH), 6,9 - 7,4 (m, 9H, ArH a CH=CH), 7,37 (d, 1H, J = 8 Hz, ArH), 8,37 (s, 1H, H₂ pyridín), 8,42 (d, 1H, J = 5 Hz, H₆ pyridín).

Príklad 6 4-[2-(3-Cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)etyl]-3-(fenyletyl)pyridín

Za rovnakých podmienok a s použitím rovnakých reakčných činidiel pri hydrogenácii medziproduktu 10 za vzniku medziproduktu 11 sa hydrogenuje 800 mg (2 mmol) výslednej zlúčeniny z príkladu 5. Vzniknutý produkt sa čistí po absorpcii na oxid kremičitý chromatografiou pri elúcii dietyléterom za vzniku 605 mg bezfarebnej gumy výslednej zlúčeniny.

Vypočítané pre C₂₇H₃₁NO₂: C 80,76, H 7,78, N 3,49% nájdené: C 80,82, H 7,77, N 3,54.

δ_Η (CDClj): 1,5 - 1,9 (m, 8H, (CH₂)₄), 3,27 - 3,29 (m, 8H, alkyl H), 3,81 (s, 3H, OCH₃), 4,67 (m, 1H, OCH), 6,59 (br s, 1H, ArH), 6,65 (d, 1H, J = 7 Hz, ArH), 6,78 (d, 1H, J = 7 Hz, ArH), 7,03 (d, 1H, J = 5 Hz, H_s pyridín), 7,1 - 7,4 (m, 5H, GHs), 8,3 - 8,4 (m, 2H, H₂, H₆ pyridín).

Príklad 7 4-{2-(S)-[4-(4-Aminofenyloxy)fenyl]-2-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)etyl} pyridín dihydrochlorid

Miešaný roztok 800 mg (1,46 mmol) výslednej zlúčeniny z príkladu 4 v 100 ml etanolu sa hydrogenuje v atmosfére vodíka za prítomnosti 100 mg 10 % roztoku paládia na aktívnom uhlí a pri teplote miestnosti. Reakčná zmes sa filtruje cez celit a filtrát sa zahustí vo vákuu za vzniku žltohnedej sklovitej látky, ktorá sa rozdelí do 1 M vodného roztoku hydroxidu sodného a etylacetátu. Zlúčený organický podiel sa suší nad síranom sodným, zahustí sa vo vákuu za vzniku olej ovitej tuhej látky. Vzniknutý produkt sa čistí po absorpcii na oxid kremičitý chromatografiou pri elúcii zmesou etylacetátu a dietyléteru v pomere 1 : 1 za vzniku 384,9 mg takmer bielej tuhej látky výslednej zlúčeniny. δ_Η (CDClj): 1,5 -1,9 (br m, 8H), 3,27 (ld, 2H, J = 7,9 Hz), 3,79 (s, 3H), 4,10 (t, 1H, J = 7,9 Hz), 4,65 (br m, 1H), 6,63 - 6,69 (m, 4M), 6,75 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 6,80 - 6,85 (m, 4H), 6,93 (dd, 2H, J = 4,5 Hz, 1,5 Hz), 7,09 (dd, 2H, J = = 6,5 Hz, 2,0 Hz), 8,38 (dd, 2H, J = 7,4 Hz, 1,5 Hz).

Do 384,9 mg (0,801 mmol) takto vzniknutých voľných báz v 50 ml dietyléteru sa za teploty miestnosti pridá

1.76 ml 1 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej v dietyléteri. Vzniknutá olejovitá zrazenina sa rozpustí pridaním etanolu a rozpúšťadla vo vákuu. Vzniknutý' zvyšok sa uvedie do suspenzie v dietyléteri a rozpúšťadlo sa odstráni vo vákuu. Vznikne svetložltá tuhá látka, ktorá sa nechá kryštalizovať zo zmesi tetrahydrofuránu a etanolu za vzniku svetložltohnedej vysoko hydroskopickej tuhej látky.

óh (CDClj): 1,5 - 1,9 (m, 8H), 3,72 (m, 2H (prekrýva sa)),

3.76 (s, 3H), 4,46 (t, 1H, J = 8,2 Hz), 4,75 (m, 1H), 6,81 - 54 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 6,97 (dd, 2H, J = 6,6 Hz, 2,0 Hz), 7,06/ /dd, 2H, J = 6,75 Hz, 2,3 Hz), 7,30 -7,40 (m, 4H), 7,87 (d, 2H, J = 6,6 Hz), 8,634 (d, 2H, J = 6,45 Hz), m/z (EI⁺) 480 (M⁺).

Príklad 8

a) 4-{2-(S)-[4-(4-Acetamidofenyloxy)fenyl]-2-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)etyl} pyridínhydrochlorid

Roztok 322 mg (0,67 mmol) voľných báz výslednej zlúčeniny z príkladu 7 v 10 ml pyridínu sa po pridaní 126 μΐ anhydridu kyseliny octovej zahrieva a zmes sa 24 hodín mieša pri teplote miestnosti. Rozpúšťadlo sa odstráni vo vákuu, zvyšok sa dvakrát azeotropicky destiluje s toluénom a následne sa rozdelí do vodného roztoku hydroxidu sodného s pH 13 a etylacetátu. Vodný podiel sa extrahuje etylacetátom, zlúčené organické podiely sa sušia nad síranom sodným a zahustia sa vo vákuu za vzniku špinavobielej sklovitej látky. Tento zvyšok sa čistí po absorpcii na oxid kremičitý chromatografiou pri elúcii etylacetátom za vzniku 303,6 mg špinavobielej tuhej látky výslednej zlúčeniny.

Výsledná zlúčenina sa pripraví reakciou 303,6 mg voľných báz v 30 ml zmesi etanolu a dietyléteru v pomere 1 : 2 s 0,62 ml 1,0 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej v dietyl7 éteri podľa postupu prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca 7. Rekryštalizáciou zo zmesi tetrahydrofuránu a dietyléteru vznikne výsledná zlúčenina ako vysoko hydroskopická špinavobiela amorfná zlúčenina.

δ_Η (CDC1₃): 1,5-1,9 (br m, 8H), 2,11 (s, 3H), 3,67 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 3,76 (s, 3H), 4,40 (t, 1H, J = 8,3 Hz), 4,73 (br m, 1H), 6,79 (s, 1H), 6,83 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 6,85 - 6,95 (m, 4H), 7,28 (d, 1H, (jemné rozštiepenie), J = 8,5 Hz), 7,50 (dd, 2H, J = 6,9 Hz, 2,3 Hz), 7,80 (d, 2H, J = 6,4 Hz), 8,60 (d, 2H, J = 5,9 Hz).

Nasledujúca zlúčenina sa pripraví podľa postupu uvedeného v príklade 8.a).

b) 4- {2-(S)-(3-Cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)-2-[4-(4-Ν',Ν'-dimetylaminosulfonylamino fenyl)fenyloxy]etyľ}pyridínhydrochlorid

Výsledná zlúčenina sa pripraví z 250 mg (0,52 mmol) výslednej zlúčeniny z príkladu 7 v 15 ml pyridínu a 112 μΐ (1,04 mmol) dimetylsulfamoylchloridu. Chromatografiou na oxide kremičitom a pri elúcii zmesou etylacetátu a dietyléteru v pomere 1 : 2 vznikne 188,1 mg voľných báz ako špinavobielej sklovitej látky.

óh (CDC1₃): 1,5 -1,9 (br m, 8H), 2,84 (s, 6H), 3,29 (t, 2H, J = = 7,9 Hz), 3,80 (s, 3H), 4,13 (t, 1H, J = 7,9 Hz), 4,66 (br m, 1H), 6,68 (dd, 1H, J = 8,2 Hz, 2,0 Hz), 6,76 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 6,80 - 6,95 (m, 6H), 7,14 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 7,16 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 7,16 (d, 2H, J = 8,9 Hz), 8,40 (d, 2H, J = = 6,0 Hz).

Výsledná zlúčenina sa pripraví reakciou 259,1 mg (0,44 mmol) voľných báz v 40 ml zmesi etanolu a dietyléteru v pomere 1:1 s 0,5 ml 0,1 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej v dietyléteri. Rekryštalizáciou zo zmesi tetrahydrofuránu a dietyléteru vznikne výsledná zlúčenina ako vysoko hydroskopická špinavobiela tuhá látka.

δ_Η (CDCl₃): 1,5 - 1,9 (br m, 8H), 2,77 (s, 6H), 3,38 (d, 2H, J = 8,1 Hz), 3,76 (s, 3H), 4,26 (t, 1H, J = 8,1 Hz), 4,70 (m, 1H), 6,74 (d, 1H, J = 1,9 Hz), 6,75 - 6,89 (m, 6H), 7,10 - 7,30 (m, 6H), 8,29 (dd, 2H, J = 6 Hz, 1,5 Hz), m/z (ES⁺) (M⁺ + H) 558.

Príklad 9 4-{2-(S)-(3-Cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)-2-[4-(4-metylsulfonylaminofenyljfenyloxy] etyl} pyridínhydrochlorid

Roztok 0,3667 g (0,6 mmol) voľných báz výslednej zlúčeniny z príkladu 7 a 246 μΐ (0,24 mmol) N-metylmorfolínu v 15 ml bezvodého dichlórmetánu sa zahrieva s 93 μΐ (1,2 mmol) metánsulfonylchloridu a zmes sa 24 hodín mieša pri teplote miestnosti. Surová zmes sa rozdelí do vody a etylacetátu a vodný podiel sa ďalej extrahuje etylacetátom. Zlúčený organický podiel sa premyje 0,5 M vodným roztokom hydroxidu sodného a nasýteným roztokom chloridu sodného, suší sa nad síranom sodným a zahustí sa vo vákuu. Vznikne svetlohnedá sklovitá látka, ktorá sa po absorpcii na oxid kremičitý čistí chromatografiou pri elúcii zmesou etylacetátu a dietyléteru v pomere 2:1. Vznikne 230 mg voľných báz výslednej zlúčeniny ako špinavobielej sklovitej tuhej látky.

δ_Η (CDC1₃): 1,5 - 1,9 (br m, 8H), 2,98 (s, 3H), 3,29 (d, 2H, J = 7,9 Hz), 3,80 (s, 3H), 4,14 (t, 1H, J = 7,9 Hz), 4,68 (m, 1H), 6,65 (d, 1H, J = 2,0 Hz), 6,68 (dd, 1H, J = 8,2 Hz, 2,0 Hz), 6,77 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 6,8 - 7,0 (m, 6H), 7,15 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 7,20 (d, 2H, J = 8,9 Hz), 8,40 (d, 2H, J = = 4,5,1,5 Hz).

Soľ tejto zlúčeniny sa získa postupom na prípravu výslednej zlúčeniny z príkladu 7. Zlúčenina sa pripraví z roztoku 224,8 mg (0,4024 mol) voľných báz v 40 ml zmesi dietyléteru a etanolu v pomere 3:1a 0,44 ml 1,0 M vodného roztoku kyseliny chlorovodíkovej v dietyléteri. Vzniknutý produkt sa po absorpcii na oxid kremičitý čistí chromatografiou (dichlórmetán - 5 % roztok metanolu) za vzniku bezfarebnej sklovitej látky, ktorá sa rekryštalizuje zo zmesi tetrahydrofuránu a dietyléteru za vzniku výslednej zlúčeniny ako veľmi hydroskopickej špinavobielej tuhej látkv.

m/z'(EI⁺) 550 (M⁺).

Príklad 10

a) (m) 4-[2-(3-Cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)-2-hydroxy etyl] -3 -fény lety lpyridín

Do roztoku 1,45 g (7,3 mmol) medziproduktu 11 v tetrahydrofuráne sa po kvapkách pridá 5,02 ml (8,03 mmol)

1,6 M roztoku n-butyllítia v zmesi hexánov a vzniknutá reakčná zmes sa 30 minút mieša. Po pridaní roztoku 1,77 g (8,03 mmol) medziproduktu 12 v tetrahydrofuráne sa zmes 30 minút mieša pri teplote -78 °C, nechá sa zohriať na teplotu miestnosti, vleje sa do vodného roztoku hydrogenuhíičitanu sodného, dvakrát sa extrahuje dichlórmetánom, suší sa nad síranom horečnatým, filtruje sa a zahustí vo vákuu. Vzniknutý zvyšok sa po absorpcii na oxid kremičitý čistí chromatografiou pri elúcii etylacetátom za vzniku 2,3 g výslednej zlúčeniny ako špinavobielej tuhej látky.

Nasledujúca zlúčenina sa pripraví podľa postupu prípravy výslednej zlúčeniny z príkladu lO.a).

b) [2-(3 -Cyklopentyloxy-pyrid-4-yl)-1 -pyrid-4-yl)etanol

Výsledná zlúčenina sa pripraví z roztoku 1 g (5,61 mmol) medziproduktu 14 v 10 ml tetrahydrofuránu v atmosfére dusíka, 3,5 ml 1,6 M roztoku n-butyllítia a 534 μΐ (5,61 mmol) pyridín-4-karboxaldehydu. Vzniknutý zvyšok sa po absorpcii na oxid kremičitý čistí chromatografiou pri elúcii dietyléterom za vzniku 550 mg výslednej zlúčeniny ako žltého oleja.

δ_Η (CDC1₃): 1,5 - 2,0 (m, 8H, (CH₂)₄), 2,9 (m, 2H, CH₂-CHOH), 4,93 (t, 1H, CHOH), 5,37 (m, 1H, OCH), 6,51 (s, 1H, pyridín H₃), 8,2 (d, 1H, pyridín H₅), 8,51 (d, 2H, pyridín H₂, H_Ď).

Z nasledujúcich skúšok vyplýva úroveň účinnosti a selektivity zlúčenín podľa vynálezu. Skratka FMLP označuje peptid N-formyl-met-leu-phe.

1. Izolovaný enzým

Účinnosť a selektivita zlúčenín podľa vynálezu sa určila pomocou určitých PDE izoenzýmov;

a) PDE I, srdce králika

b) PDE II, srdce králika

c) PDE III, srdce králika, Jurkatove bunky

d) PDE IV, bunky HL60, mozog králika, obličky králika a ľudský rekombinantný izoenzým PDE IV.

e) PDE V, pľúca králika alebo morčaťa.

Kódový gén pre ľudský enzým PDE IV bol klonovaný z ľudských monocytov (Livi a ďalší, 1990, Molecular and Cellular Biology, 10, 2678). Pri použití podobného postupu boli klonované aj gény pre PDE IV človeka z celého radu zdrojov, vrátane eozinofilov, neutrofilov, lymfocytov, monocytov a mozgového a nervového tkaniva Tieto gény boli použité na transfekciu do kvasiniek pri použití indukovateľného vektora a bola dosiahnutá expresia rôznych rekombinantných bielkovín s biochemickou charakteristikou PDE IV (Beavo a Reifsnyder, 1990, TPS, 11, 150). Tieto rekombinantné enzýmy, zvlášť PDE IV z ľudských eozinofilov boli použité ako základný prostriedok na sériové vyšetrenie účinných a selektívnych inhibítorov PDE IV.

Enzýmy boli čistené na účely získania homogénnych izoenzýmov s použitím štandardných chromatografických postupov.

Účinnosť fosfodiesterázy bola stanovená nasledujúcim spôsobom. Reakcia bola uskutočnená v 150 mikrolitroch štandardnej zmesi, ktorá ako konečnú koncentráciu obsahovala 50 mM kyseliny 2-[[tris(hydroxymetyl)metyl]amino]-l-etansulfónovej (TES) - NAOH ako pufra s pH 7,5, 10 mM chloridu horečnatého, 0,1 μΜ ³H-cAMP a nosné prostredie alebo skúmanú látku v rôznej koncentrácii. Reakcia bola začatá pridaním enzýmu a prebiehala 5 až 30 minút pri teplote 30 °C. Reakcia bola skončená pridaním 50 mikrolitrov 2 % kyseliny trifluóroctovej s obsahom ¹⁴C-5'AMP na stanovenie výťažku produktu. Časť vzorky bola potom nanesená na stĺpec neutrálneho oxidu hlinitého a ^JH-cAMP bol vymývaný 10 ml pufra 0,1 TES-NaOH s pH 8. Produkt, ³H-5'-AMP bol vymývaný s použitím 2 ml 2 M NaOH v scintilačnej nádobke s obsahom 10 ml scintilačnej kvapaliny. Výťažok produktu ³H-5'AMP bol stanovený s použitím _mC-5'AMP, všetky skúšky boli uskutočnené pri lineárnom priebehu reakcie.

Zlúčeniny podľa vynálezu, napríklad zlúčeniny z jednotlivých príkladov spôsobujú v závislosti od koncentrácie rekombinantný PDE IV v koncentračnom rozmedzí 0,1 až 1000 nM, pričom nemajú žiadnu alebo majú len malú účinnosť proti PDE I, II, III alebo V pri koncentrácii do 100 mikromolov.

2. Zvýšenie cAMP v leukocytoch

Bol skúmaný účinok zlúčenín podľa vynálezu na vnútrobunkovú koncentráciu cAMP na použitie ľudských neutrofilov alebo eozinofilov z morčiat. Ľudské neutrofily boli izolované z periférneho obehu, boli inkubované spolu s dihydrocytochalazínom B a skúmanou látkou 10 minút a potom bola uskutočnená stimulácia s použitím FMLP. Eozinofily z morčiat boli získané premytím peritoneálnej dutiny pri zvieratách, ktorým bola predtým podaná intraperitoneálna injekcia ľudského krvného séra. Z peritoneálneho výpotku boli oddelené eozinofily a boli inkubované s izoprenalínom a skúmanou látkou. Pri oboch typoch buniek boli na konci inkubácie suspenzie buniek odstredené, usadenina buniek bola znova uvedená do suspenzie v pufri a povarená 10 minút, potom bol meraný obsah cAMP špecifickou rádioimunologickou skúškou (DuPont).

Najúčinnejšie zlúčeniny z príkladovej časti vyvolali v závislosti od koncentrácie zvýšenie obsahu cAMP v neutrofiloch a/alebo v eozinofiloch v rozmedzí koncentrácií 0,1 nM až 1 mikromol.

3. Potlačenie funkcie leukocytov

Zlúčeniny podľa vynálezu boli skúmané na svoju účinnosť na tvorbu superoxidov, na chcmotaxiu a na adhéziu neutrofilov a eozinofilov. Izolované leukocyty boli inkubované s dihydrocytochalazínom B na tvorbu superoxidu a so skúmanou látkou pred stimuláciou s použitím FMLP. Najúčinnejšie zlúčeniny z jednotlivých príkladov spôsobili v závislosti od použitia koncentrácie inhibíciu tvorby superoxidov, chemotaxiu a adhéziu s použitím v koncentračnom rozmedzí 0,1 nM až 1 mikromol.

Zlúčeniny podľa vynálezu sú schopné spôsobiť inhibíciu syntézy lipopolysacharidov, LPS, ľudskými monocytmi z periférnej krvi, PBM, po pôsobení faktora nekrózy nádorov, TNF, v koncentračnom rozmedzí 0,01 nM až 10 mikromolov.

4. Nežiaduce účinky

Všeobecne nebolo možné pri uskutočnených skúškach pozorovať žiadne toxické účinky' v prípade, že boli zlúčeniny podľa vynálezu podávané zvieratám v dávkach, potrebných na dosiahnutie farmakologického účinku.

Claims

1. Trisubstituované fenylové deriváty všeobecného vzorca(1) kde

R je Ci.6 alkylová alebo C₃.₈ cykloalkylovú skupina, ktorá môže voliteľne obsahovať maximálne tri substituenty vybrané z atómov halogénu, hydroxylových skupín a C|.₆ alkoxy skupín;

R^a znamená atóm vodíka alebo C|.₆ alkylovú skupinu, prípadne substituovanú jedným alebo viacerými atómmi halogénu a

Z znamená skupinu vzorca (A) alebo (B) (A) (B) kde jeden zo substituentov R⁴ a R⁵ je skupina -Ar(Alk⁴)r(O)s(Alk⁵)tAr' a druhý je skupina -Ar alebo, v prípade, že ide o substituent R⁴, atóm vodíka, Ar a Ar¹ sú vybrané z monocyklických arylových skupín voliteľne obsahujúcich jeden alebo viac heteroatómov vybraných z atómov kyslíka, síry a dusíka a voliteľne obsahujúci maximálne tri substituenty vybrané z atómov halogénu, alkylu, halogénalkylu, aminoskupiny, substituovanej aminoskupiny, nitro, -NHSO2NH2, -NHSO-NHCH3, -NHSO2N(CH3)2, -NHCOCH3, -NHQOjNHz, -NCH3CfO)NH2, -NHQO)NHCH3, -NHC(O)NHCH2CH3 a -NHC(O)N(CH3)2, každá zo skupín Alk⁴ a Alk⁵ predstavuje Ομ6 alkylénovú skupinu voliteľne obsahujúcu maximálne tri substituenty vybrané z atómov halogénu, hydroxylových skupín a C_ľ.₆ alkoxy skupín; r, s a t každé nezávisle znamená 0 alebo 1;

ako aj soli, solváty, hydráty a N-oxidy týchto zlúčenín.

2. Trisubstituované fenylové deriváty, podľa nároku 1, v ktorých Z znamená skupinu vzorca (A), R⁴ znamená skupinu Ar(Alk⁴)r(O)s(Alk⁵)tAr', kde Ar a Ar¹ sú voliteľne substitované fenylové skupiny a R⁵ znamená voliteľne substituovanú pyridylovú skupinu.

3. Trisubstituované fenylové deriváty, podľa nároku 2, kde R⁵ znamená voliteľne substituovanú pyridylovú skupinu.

4. Trisubstituované fenylové deriváty, podľa nároku 1, v ktorých Z znamená skupinu vzorca (B) a R⁴ je atóm vodíka.

5. Trisubstituované fenylové deriváty, podľa nároku 1, zo skupiny (±)-4-{2-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)-2-[4-(4-trifluórmetylfenyljfenyletyl]} pyridín, (±)-4-[2-(4-benzyloxyfenyl)-2-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)etyl]pyridín, (±)-4- {2-(3 -cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)-2-[4-(4-nitrofenyloxy)fenyletyl]} pyridín.

izoméry E a Z 4-[2-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)etenyl]-3-(fenyletyl)pyridínu, (±)-4-[2-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)etyl]-3-(fenyletyljpyridín, (±)-4-[2-[4-(4-aminofenyloxy)fenyl]-2-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)etyl]pyridín, (±)-4- [2- [4-(4-acetamidofenyloxy)fenyl] -2-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)etyl] pyridín, (±)-4-[2-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)-2-[4-(4-N',N'-dimctylaminosulfonylamino fenyl)fenyloxy] etyl] pyridín, (±)-4-[2-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)-2-[4-(4-metylsulfonylaminofenyl)fenyloxy] etyl]pyridín, (±)-4-[2-(3-cyklopentyloxy-4-metoxyfenyl)-2-(4'-metyl-4-bifenyl)etyl]pyridín, ako aj izoméry alebo oddelené enantioméry, soli, solváty, hydráty aN-oxidy týchto látok.

6. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa t ý m , že obsahuje trisubstituované fenylové deriváty podľa niektorého z predchádzajúcich nárokov, a jednu alebo viac farmaceutický prijateľných nosičov, excipientov alebo riedidiel.