SK279461B6

SK279461B6 - Farmaceutický prípravok vo forme mikroguľôčok a sp

Info

Publication number: SK279461B6
Application number: SK791-91A
Authority: SK
Inventors: William Steber
Original assignee: American Cyanamid Company
Priority date: 1990-03-30
Filing date: 1991-03-25
Publication date: 1998-11-04
Also published as: AU641994B2; YU47650B; KR0159778B1; PL167692B1; PT97160B; DE69102176T2; AU7397291A; HK1000004A1; MX172602B; EP0448930A1; FI101676B1; CN1063941C; IL97145A; YU57091A; US5213810A; KR910016322A; HU219584B; JP2966564B2; CA2039491A1; BG60850B1

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka stabilných farmaceutických prípravkov vo forme mikroguľôčok, ktoré sú vhodné na parenterálne podávanie. Tieto prípravky obsahujú tuk alebo vosk, alebo ich zmes a biologicky účinný proteín, peptid alebo polypeptid.

Doterajší stav techniky

VUS patente č. 4 837 381 je opísaný prípravok vo forme mikroguľôčok obsahujúci tuk alebo vosk, alebo ich zmes a biologicky aktívny proteín, peptid alebo polypcptid, ktorý sa hodí na parenterálne podávanie. V tomto patente sa uvádza, že získané prípravky sa hodia na pomalé uvoľňovanie proteinu, peptidu alebo polypeptidu pri parenterálnom podávaní a sú tu opísané metódy zvyšovania a udržovania zvýšených hladín rastového hormónu v krvi ošetrených zvierat na dlhý čas, čo sa prejavuje vo zvýšení hmotnostného prírastku zvierat a zvýšení produkcie mlieka po podaní týchto prípravkov.

Vo vývoji farmaceutických prípravkov s predĺženým uvoľňovaním účinnej zložky dochádza k špeciálnym problémom, ktoré sú spôsobené veľkosťou a zložitosťou biologicky aktívnych makromolekúl, najmä proteinov, ktoré majú sklon k chemickým a štruktúrnym zmenám pri miesení s farmaceutickými excipientmi. K týmto zmenám dochádza buď počas spracovania, alebo skladovania. Odborníci v obore farmaceutických prípravkov sú si vedomí týchto problémov a charakterizujú ich ako problémy chemickej stability. Nedostatočná chemická stabilita farmaceutických prípravkov, ktorá má za následok ireverzibilné zmeny štruktúry makromolekúl a/alebo interakcie s excipientmi, môže mať za následok, že sa stanú tieto prípravky buď neaktívnymi, alebo neposkytujú očakávanú úroveň biologickej odozvy.

Ďalšiu kategóriu problémov farmaceutických prípravkov tvoria problémy spojené s fyzikálnou stabilitou. Jedným jasným príkladom je odieranie tabliet alebo implantátov pri spracovávaní, balení alebo skladovaní. Ako ďalší príklad je možné uviesť separáciu masti, pasty alebo gélu na jednotlivé zložky, ktorá môže viesť na heterogénne rozdelenie účinnej zložky a k zmene konzistencie prípravku. Dôsledkom takéhoto zhoršenia fyzikálnych vlastností prípravkov, môže byť strata požadovanej jednoduchosti použitia prípravku a nepredvídateľnosť dávkovania účinnej zložky pacientovi. Menej zrejmé fyzikálne zmeny farmaceutického prípravku zahrnujú rôzne zmeny kryštalickej alebo mikroskopickej štruktúry excipientov. Tieto typy zmien môžu viesť k výrazným zmenám v uvoľňovaní účinných látok. Je jasné, že zmeny vo fyzikálnej stabilite farmaceutických dávkovacích foriem, ak už ide o formy určené na orálne alebo parenterálne podávanie, by robili najväčšie problémy v prípravkoch s predĺženým uvoľňovaním účinnej látky. Nutnou podmienkou obchodne využiteľných farmaceutických dávkovacích foriem s predĺženým uvoľňovaním je, že si musia udržiavať uvoľňovacie vlastnosti v jednotlivých šaržiach a v priebehu skladovania počas relatívne dlhcho časového úseku. Pod pojmom fyzikálna stabilita farmaceutických dávkovacích foriem sa rozumie tak konštantnosť manipulačných vlastností, ako je tvrdosť, sypkosť alebo viskozita, ako konštantnosť farmakologického účinku. Vynález sa týka stabilných prípravkov na pa renterálne podávanie. Týka sa tiež nového spôsobu prípravy týchto stálych prípravkov. Prípravok je vo forme mikroguľôčok, ktorý možno baliť ako prípravok na priame použitie a ktorý sa vyznačuje dobrou skladovateľnosťou Tieto a iné úlohy, ktoré vynález rieši, sú zrejmé z nasledujúceho opisu vynálezu.

Podstata vynálezu

Predmetom vynálezu je farmaceutický prípravok vo forme mikroguľôčok na parenterálne podávanie obsahujúci biologicky aktívnu látku zvolenú zo súboru zahrnujúceho proteíny, peptidy a polypeptidy a tuhý tuk alebo vosk alebo ich zmes, ktorého podstata spočíva v tom, že ďalej obsahuje olej, tvorený monoestermi, diestermi a/alebo triestermi mastných kyselín s 2 až 18 atómmi uhlíka a glycerolu, alebo polotuhý tuk, tvorený estermi mastných kyselín a glycerolu a teplote rozpúšťania v rozmedzí od 15 do 30 °C, alebo ich zmes, pričom vzájomný pomer jednotlivých zložiek prípravku je nasledujúci 20 až 70 % hmotnostných biologicky aktívnej látky, 30 až 95 % tuhého tuku alebo vosku alebo ich zmesi a 1 až 30 % hmotnostných oleja alebo polotuhého tuku, alebo ich zmesi.

Pokiaľ farmaceutický prípravok podľa vynálezu obsahuje ako biologicky aktívny proteín hovädzí, bravčový alebo vtáčí rastový hormón, obsahuje ako olej výhodne neutrálny triglycendový olej, v množstve 5 až 20 % hmotnostných.

Mikroguľôčky sú vo farmaceutickom prípravku podľa vynálezu výhodne suspendované vo farmaceutický a farmakologicky vhodnom kvapalnom vehikule.

Predmetom vynálezu je tiež spôsob výroby definovaného farmaceutického prípravku, pri ktorom sa zmieša v tavenine tuhý tuk alebo vosk, alebo ich zmes a biologicky aktívna látka zvolená zo súboru zahrnujúceho proteíny, peptidy a polypeptidy a vzniknutá hmota sa spracuje na prípravok vo forme mikroguľôčok, ktorý· sa následne prípadne suspenduje vo farmaceutický a farmakologicky vhodnom kvapalnom vehikule, ktorého podstata spočíva v tom, že sa k hmote pred jej spracovaním alebo v priebehu jej výroby pridá olej alebo polotuhý tuk, alebo ich zmes.

Tento spôsob výroby farmaceutického prípravku sa opiera o zistenie, že prídavok malého množstva oleja, polotuhého tuku a/alebo derivátu mastnej kyseliny k zmesi tukov a/alebo voskov a biologicky aktívneho proteinu, peptidu alebo polypeptidu pred spracovaním na mikroguľôčky umožňuje urýchlene transformovať alfa-kryštalickú štruktúru na beta-formu. Vzhľadom na to, že beta-forma je podstatne stabilnejšia, sú aj prípravky podľa vynálezu podstatne stabilnejšie. Vynález je najmä prekvapujúci z toho dôvodu, že keď sa podľa doterajšieho stavu techniky používali určité oleje pri výrobe prípravkov až po spracovaní na mikroguľôčky, nedosiahlo sa urýchlenej transformácie kryštálu.

Prípravky podľa vynálezu sú obzvlášť vhodné na parenterálne podávanie zvieratám. Biologicky aktívne proteíny, peptidy alebo polypeptidy zahrnujú rastové hormóny, somatomediny, rastové faktory a iné biologicky aktívne fragmenty alebo ich deriváty.

Vynález sa vzťahuje na prípravky vo forme mikroguľôčok, ktoré je možné baliť ako prípravky na priame použitie. Vzhľadom na svoju zvýšenú stabilitu, majú dobrú skladovateľnosť.

Vosky a tuky, ktoré sa hodia na použitie v prípravkoch podľa vynálezu, majú obvykle teplotu rozpúšťania vyššiu ako 40 °C. Výraz vosky sa v tomto prípade používa pre látky v zmysle definície uvedenej v Hawleyovej The Condensed Chemical Dictionary, 11. vydanie, t j. pre nízkorozpúšťajúce organické zmesi alebo zlúčeniny s vysokou molekulovou hmotnosťou, ktoré sú pevné pri teplote miestnosti a obvykle majú zloženie podobné ako tuky a oleje, s tým rozdielom, že neobsahujú žiadne glyceridy. Niektoré z nich sú uhľovodíky, iné sú estery mastných kyselín a alkoholov. Tieto zlúčeniny zahrnujú mastné kyseliny s 10 až 24 atómami uhlíka, ktorých dlhý reťazec je nasýtený alebo nenasýtený, alkoholy, estery, soli, étery alebo ich zmesi. Radia sa medzi lipidy. Vosky sú termoplastické, ale pretože nejde o vysoké polyméry, neradia sa do triedy plastov. Ich spoločnou vlastnosťou je vodoodpudivosť, hladká textúra, netoxicita a skutočnosť, že nemajú neprijateľný zápach a farbu. Sú horľavé a majú dobré dielektrické vlastnosti. Sú rozpustné vo väčšine organických rozpúšťadiel a sú nerozpustné vo vode. Ako hlavné typy týchto látok je možné uviesť:

I. Prírodné látky

1. živočíšne vosky (včelí vosk, lanolín, šelakový vosk, čínsky vosk),

2. rastlinné vosky (kamaubský vosk, candelilla, vosk z cukrovej trstiny, vosk z bobúl vavrínu),

3. minerálne vosky,

a) fosílne alebo zemné vosky (ozokerit, ccrcsín, montánny vosk),

b) ropné vosky (parafín, mikrokryštalický vosk, surový parafín, parafínové šupiny).

II. Syntetické látky

1. polyméry etylénu a polyoleterestery (Carbovax, sorbitol),

2. chlórované naftalény (Halowax),

3. vosky uhľovodíkového typu, pripravené Fischer-Tropschovou syntézou.

Za tuky sa v zmysle vynálezu považujú látky definované v Hawleyovej The Condensed Chemical Dictionary, 11. vydanie, tvorené glycerylestermi vyšších mastných kyselín, ako kyseliny stearovej a kyseliny palmitovej. Tieto estery a ich zmesi sú pri teplote miestnosti pevné látky a majú kryštalickú štruktúru. Ako ich príklady je možné uviesť masť a loj. Medzi tukmi a olejmi nie je žiadny chemický rozdiel, jediný rozdiel spočíva v tom, že tuky sú pri teplote miestnosti pevné, zatiaľ čo oleje sú kvapalné. Termín tuk sa obvykle používa špecificky pre triglyceridy, zatiaľ čo pojem lipidy zhrňuje všetky tieto látky.

Oleje, polotuhé tuky alebo deriváty mastných kyselín podľa vynálezu sú činidlá, ktoré sú rozpustné v roztavenom tuku, a ktoré urýchľujú fyzikálnu transformáciu kryštálov tuhého tuku z menej stálych foriem na stálejšie formy pri teplote miestnosti alebo v blízkosti teploty miestnosti, potom, čo bol roztavený tuhý tuk alebo vosk spracovaný na mikroguľôčky. Prednostne obsahujú oleje alebo polotuhé tuky zmesi pomerne čistých foriem mono-, di- alebo triglycerylesterov mastných kyselín s krátkym až stredným reťazcom, t.j. s reťazcom obsahujúcim 2 až 18 atómov uhlíka. Polotuhé tuky sú glycerylestery s teplotou rozpúšťania pri teplote miestnosti alebo v jej blízkosti. Pod pojmom deriváty mastných kyselín sa rozumejú mastné kyseliny, alkoholy, estery, étery, soli s krátkym až stredným reťazcom alebo ich zmesi. Oleje a polotuhé tuky na báze glyceridov sú obzvlášť vhodné, pretože sú fyziologickými zložkami tela a sú biokompatibilné a biodegradovateľné.

Mikroguľôčky podľa vynálezu sú dispergované vo farmaceutický a farmakologicky vhodnej kvapaline, za vzniku prípravkov s pomalým uvoľňovaním, ktoré sa hodia na parenterálne podávanie. Vehikulom môže byť vodný pufrovaný systém alebo olejový systém. Olejové systémy môžu pochádzať zo živočíšnych alebo rastlinných zdrojov, alebo môžu byť syntetické. Prednostné vehikulá zahrnujú neutrálne mono-, di- alebo triglyceridy, ktoré sú kvapalné, alebo ich zmesi. Pod pojmom neutrálny olej sa rozumie olej, ktorý· neobsahuje žiadne kyselinové zostatky.

Vehikulá, vhodné na použitie v prípravkoch podľa vynálezu, zahrnujú vodné systémy, ako sú tlmené roztoky solí, organické rozpúšťadlá, ako glykoly a alkoholy, a kvapaliny nemiesiteľné s vodou, ako sú oleje, v závislosti od rozpustnosti účinnej zložky, ktorá sa má podávať.

Biologicky aktívne proteíny, peptidy a polypeptidy, ktoré sú vhodné na podávanie v prípravkoch podľa vynálezu, zahrnujú rastové hormóny, somatomedíny, rastové faktory a iné biologicky aktívne fragmenty a ich deriváty. Ako prednostné proteíny je možno uviesť rastové hormóny hovädzieho dobytka, oviec, koní, prasiat, vtákov a ľudí. Tieto látky zahrnujú rastové hormóny prírodného, syntetického, rekombinantného alebo biosyntetického pôvodu. Na zavádzanie do prípravkov podľa vynálezu sú ďalej vhodné kovy alebo zlúčeniny kovov asociované s biologicky aktívnymi proteínami, peptidmi a polypeptidmi, ako aj soli kyselín, deriváty a komplexy a antihydratačné činidlá.

Prípravky podľa vynálezu môžu tiež obsahovať stabilizátory, konzervačné činidlá, povrchovo aktívne látky, soli, pufry alebo ich zmesi. Ako prednostné stabilizátory je možno uviesť kyseliny dihydrooctovú, salicylanilíd, kyselinu sorbovú, kyselinu boritú, kyselinu benzoovú a ich soli, dusitan sodný a dusičnan sodný. Pokiaľ sa používajú tieto látky, môže byť ich množstvo účelne v rozmedzí od asi 0,1 do asi 20 % hmotnostných.

Prednostnými povrchovo aktívnymi látkami na použitie v prípravkoch podľa vynálezu, ktoré obsahujú biologicky aktívne makromolekuly, sú neiontové povrchovo aktívne látky, ako je polyoxyetylensorbitanmonooleát (20 mólov etylénoxidu) a blokové kopolyméry etylénoxidu a propylénoxidu. Množstvo povrchovo aktívnych látok prítomných v prípravkoch podľa vynálezu leží účelne v rozmedzí od 0,1 do 10 % hmotnostných.

Zistilo sa, že pri injekčnom podávaní prípravkov podľa vynálezu vo vhodnom vehikule zvieratám je možné dosiahnuť zvýšenej hladiny rastového hormónu v krvi, ktorú je možné udržovať dlhodobo. To sa prejaví zvýšením hmotnostných prírastkov a zvýšením produkcie mlieka zvierat v období laktácie. Zvýšená úroveň biologicky aktívnych proteinov, peptidov a polypeptidov v krvi je obvykle spojovaná s užitočnými a/alebo terapeutickými účinkami. Tieto účinky zahrnujú hmotnostné prírastky, zvýšenú rýchlosť rastu, zvýšenú tvorbu mlieka zvierat v období laktácie a v dôsledku toho zvýšenú dostupnosť mlieka pre potomkov ošetrených zvierat, zlepšenú veľkosť svalov, zlepšenú využiteľnosť krmiva, znížené množstvo telesného tuku a zlepšený pomer výberového mäsa k tuku. Z okolnosti, že sa v krvi udržuje zvýšená hladina biologic

SK 279461 Β6 ky účinných látok, je zrejmé, že sa aktívna zložka uvoľňuje z prípravku pomaly. Pri udržovaní zvýšenej hladiny účinnej zložky v krvi je obvykle pozorovaná zvýšená tvorba mlieka, zvýšená rýchlosť rastu, zlepšená využiteľnosť krmiva a zvýšený pomer výberového mäsa k tuku. Do rozsahu vynálezu teda spadá tiež použitie prípravkov podľa vynálezu na zlepšenie produkcie mlieka, zvýšenie rýchlosti rastu, zlepšenie využiteľnosti krmiva, zvýšenie obsahu výberového mäsa a zvýšenie a udržovanie zvýšenej úrovni hormónov v krvnom prúde.

Podľa prednostného uskutočnenia zahrnuje vynález zavádzanie biologicky aktívneho proteínu, peptidu alebo polypeptidu a oleja alebo polotuhého tuku, ktorý’ môže tiež pripadne obsahovať niektoré alebo všetky uvedené excipienty, do tukových alebo voskových mikroguľôčok, ktoré sú potom dispergované vo vehikule. Mikroguľôčky, prednostne tukové mikroguľôčky, môžu mať priemer až do 1000 pm, pričom na parenterálne podávanie sa dáva prednosť rozmedziu hmotnostného stredného priemeru od 25 do 300 pm. Mikroguľôčky obsahujúce až do asi 70 % biologicky aktívneho proteínu, peptidu alebo polypeptidu majú spomalené zvoľňovanie v rôznom čase vzávislosti od rozpustnosti aktívnej zložky a povahy tuku alebo vosku, povrchovo aktívnej látky pufra a vehikula, ktorých sa používa.

V najširšom zmysle je predmetom vynálezu prípravok na spomalené uvoľňovanie obsahujúci zmes tuku alebo vosku alebo ich zmesi, biologicky aktívneho proteínu, peptidu alebo polypeptidu a oleja, polotuhého tuku, derivátu mastnej kyseliny alebo ich zmesi, dispergovanú vo farmaceutickom a farmakologicky vhodnom vehikule. V prípravkoch na spomalené uvoľňovanie môžu byť prítomné mikroguľôčky a povlečené proteínové častice. Prípravok môže obsahovať proteín rozpustený v tuku alebo vosku, alebo môže dochádzať na hydrofóbnu interakciu alebo väzbu medzi účinnou prísadou a tukom alebo voskom. Pri podávaní hormónov sa dáva prednosť prípravkom, ktoré obsahujú hmotnostné 1 až 70 % rastového hormónu, somatomedinu, rastového faktora alebo biologicky aktívneho fragmentu alebo ich derivátu, prednostne vo forme častíc o hmotnostnej strednej veľkosti menšej ako 20 pm; asi 5 až 60 % prednostne asi 10 až 48 % tuku, vosku alebo ich zmesi; asi 1 až 30 % a prednostne 5 až 20 % oleja; a prípadne až asi 15 % excipientov, ako sú povrchovo aktívne látky, stabilizátory, konzervačné činidlá, soli alebo pufry alebo ich zmesi s dostatočným množstvom farmaceutický a farmakologicky vhodného kvapalného vehikula do 100 %. Ako vehikulum sa opäť môže použiť vhodný tlmený systém alebo opísaný olejový systém.

Na parenterálne podávanie rastových hormónov, ako hovädzieho rastového hormónu, sú vhodné mikroguľôčky obsahujúce hmotnostné asi 5 až 40 % pevného hormónu, prednostne vo forme častíc o hmotnostnom strednom priemere nižšom ako 20 pm, ktoré obsahujú až do asi 20 % iných opísaných excipientov, v asi 40 až 95 % tuku alebo vosku, alebo ich zmesi; s časticami o hmotnostnom strednom priemere v rozmedzí od 25 do 300 pm. Tieto prípravky majú spomalené uvoľňovanie hormónu a dlhodobo zvýšenú produkciu mlieka mliečnych kráv v období laktácie asi počas 2 týždňov. Zvýšená produkcia mlieka, ktorá sa s prípravkami podľa vynálezu dosiahne, je zrovnateľná s produkciou, ktorej sa dosiahne pri každodennom injekčnom podávaní hovädzieho rastového hormónu.

Na podávanie prípravkov obsahujúcich proteíny, peptidy alebo polypeptidy, ktoré sú rozpustné vo vode, ako je hovädzí rastový hormón, sa dáva prednosť kvapalinám, ktoré sú nemiesiteľné s vodou. Väčšia prednosť sa dáva olejom alebo tekutým tukom, alkoholom nemiesiteľným s vodou a glykolom a ich zmesiam. Vehikulá sa volia tak, aby tak dispergovali, ako povliekali zmesi mikroguľôčok a aby poskytovali vhodnú viskozitu injekčnej zmesi. Ako kritériá pre ich voľbu sa používa hodnota HLB (hydrofilno-lipofílná rovnováha) a viskozita.

Ako vehikulum v prípravkoch podľa vynálezu sa, v zmysle tohto výkladu, používajú glyceridy mastných kyselín a ich zmesi, ktoré sú kvapalné pri teplote okolia, ako sú syntetické oleje, rastlinné oleje, ako je olivový olej, sezamový olej, podzemnicový olej, slnečnicový olej, sójový olej, olej zo semien bavlníka, kukuričný olej, saflórový olej, palmový olej, repkový olej a kokosový olej; živočíšne oleje, ako sú rybie oleje, oleje z rybacej pečene, spermiové oleje; alebo frakcie získané z týchto olejov; a ich zmesi, ktoré majú hodnotu HLB v rozmedzí od 1 do 5 a viskozitu v rozmedzí od 10 mPa.s do 1000 mPa.s, pri meraní v Brookfieldovom viskozimetre RTV, s použitím vretena č.

1.

Mikroguľôčky sa podľa vynálezu môžu pripravovať tak, že sa účinná zložka s veľkosťou častíc v požadovanom rozmedzí a iné excipienty zamiesia do roztaveného tuku, vosku alebo ich zmesi, pridá sa olej, polotuhý tuk a/alebo derivát mastnej kyseliny a potom sa výsledná zmes spracuje na mikroguľôčky rôznymi technológiami, ako je emulgácia alebo atomizácia (alebo peletizácia). Zmes prísad a roztaveného tuku, vosku alebo ich zmesi sa tiež môže spracovávať mechanicky a potom sa môže ochladiť, napríklad s použitím odstredivého disku. Alternatívne sa môže zmes účinných prísad, excipientov, tuku, voskov a ich zmesi a oleje ochladiť na pevnú látku, ktorá sa môže ďalej spracovávať takými postupmi, ako je mletie, drvenie a podobne.

Zmesi podľa vynálezu, vhodné na injekčné podávanie, sa ľahko pripravujú dispergáciou proteínu, peptidu alebo polypeptidu, excipientov, tuku, vosku alebo ich zmesi a oleja pri zvýšených teplotách, priamo vo vehikule a nasledujúcim ochladením.

Mikroguľôčky väčšiny tukov a zmesí tukov a/alebo voskov, pokiaľ sú pripravené rozprašovacou atomizáciou z horúcich tavenín, sú tvorené časticami, ktorých kryštalická forma je väčšinou tvorená nestálou alfa-formou (podľa analýzy DSC). Tvrdé tuky, ako je tristearín a tripalmitín, pokiaľ sú spracované na mikroguľôčky rozprašovacou atomizäciou, si držia alfa-kryštalickú formu počas mnohých mesiacov pri skladovaní za teplôt, ktoré sú typické pre teploty miestnosti. S prekvapením sa zistilo, že pokiaľ sa v tavenine zmiesia tvrdé tuky s kvapalnými tukmi a zmes sa atomizuje rozprašovaním na mikroguľôčky, dochádza na urýchlenú transformáciu alfa-kryštálov na beta-kryštály pri teplote miestnosti, čo sa prejavuje v podstatne zlepšenej fyzikálnej stabilite a v dôsledku toho výnimočných atribútoch pre farmaceutické parenterálne prípravky. V závislosti od povahy zmesi je transformácia v podstate skončená v priebehu niekoľkých hodín, až niekoľkých dní. Vhodné zloženie tvrdého a kvapalného tuku je nasledujúce: 99 až 70 dielov tvrdých tukov, ktorými sú mono-, di- alebo triglycerylestery s mastnými kyselinami, ktoré majú prevažne nasýtený uhľovodíkový reťazec s dĺžkou 10 až 22 atómov uhlíka, prednostne 14 až 18 atómov uhlíka a 1 až 30 dielov oleja alebo olejov, ktorými sú mono-, di- alebo triglycerylestery mastných kyselín s uhľovodíkovým reťazcom obsahujúcim 2 ž 10 atómov uhlíka.

Dôsledkom urýchlenej spontánnej transformácie kryštalickej štruktúry mikroguľôčok vyrobených s použitím tvrdých a kvapalných tukov bez účinných zložiek alebo s nimi je, že sa viskozita suspenzie týchto mikroguľôčok vo vehikule zvyšuje podstatne pomalšie pri skladovaní za typických teplôt miestnosti alebo typických teplôt pri chladení v chladničke. Kvapalné glycerylestery mastných kyselín s 2 až 12 atómmi uhlíka v reťazci sú obzvlášť vhodné pre farmaceutické excipienty, pretože sú výnimočne dobre biokompatibilné a biodegradovateľné. Mikroguľôčky, ktoré sú takto vyrobené, aby pri nich prebehla rýchla transformácia z nestabilnej alfa-kryštalickej formy na termodynamicky stálejšiu beta-kryštalickú formu, tiež majú nasledujúce vlastnosti: prášky sú dobre sypké, majú nízku lepivosť a nízku tendenciu na aglomeráciu počas skladovania, zvýšenú hustotu a zvýšenú tuhosť pri fyzikálnom spracovávaní. Okrem toho majú tieto zlepšené mikroguľôčkové prípravky rovnakú použiteľnosť na parenterálne predĺžené dodávanie proteínov, peptidov a polypeptidov a na udržovanie zvýšených hladín týchto látok v krvi, s cieľom zvýšiť hmotnostný prírastok a/alebo zvýšiť produkciu mlieka, ako prípravky opísané v US patente č. 4 837 381. Konečne, podstatné zlepšenie fyzikálnych manipulačných vlastností a stability týchto mikroguľôčok umožňuje ich prípravu a balenie na obchodno prijateľné prípravky pripravené na bezprostredné použitie, ktoré majú výbornú skladovateľnosť. Vynález je lepšie opísaný v nasledujúcich príkladoch uskutočnenia. Príklady majú výhradne ilustratívny charakter a rozsah vynálezu v žiadnom ohľade neobmedzujú.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklady 1 až 7

Fyzikálna stabilita mikroguľôčok v neutrálnom olejovom vehikule

Tieto príklady ilustrujú celý rad prípravkov vo forme mikroguľôčok, ktoré sú výrazne stabilizované tým, že sa do prípravku zavedie 1 až 15 % olejov, polotuhých tukov alebo ich zmesí. Fyzikálna stabilizácia sa meria tak, že sa mikroguľôčky suspendujú v neutrálnom olejovom vehikule na báze triglyceridov a suspenzia sa podrobí podmienkam skúšania, ktoré stimulujú skladovanie suspenzie v teplom prostredí s teplotou buď 30 °C, alebo 38 °C. Pri skúške robenej v tomto príklade sa 3 g mikroguľôčok suspendujú v 7,5 ml neutrálneho triglyceridového oleja a suspenzia sa nechá pomaly rotovať (2-6 min.l) pri nastavenej teplote tak dlho, až už suspenzia v nádobe netečie. Za želatinačný čas sa považuje čas, ktorý· uplynie predtým, ako sa tok suspenzie zastaví. Výsledky sú uvedené v nasledujúcej tabuľke 1. Pokiaľ nebol zistený presný čas, je tu uvedené rozmedzie želatinačného času. Čas je uvedený v hodinách, pokiaľ nie je uvedené inak. Každá šarža, každý druh alebo každý typ tvrdého tuku nebol stabilizovaný v rovnakom rozsahu. Želatinačný čas bol preto závislý od voľby tvrdého tuku a od množstva a typu oleja alebo polotuhého tuku, pridaného k zmesi v podobe mikroguľôčok. Ako však výsledky ukazujú, prídavok oleja alebo polotuhého tuku podstatne zvyšuje želatinačný čas každej konkrétnej šarže, každého druhu alebo každého typu tvrdého tuku. V zátvorkách je v tabuľke uvedený tiež vek mikroguľôčok, pretože je dôležitým určujúcim faktorom želatinačného času, vzhľadom na to, že transformácia kryštálov z menej stálych alfa-foriem na stálejšie beta-formy je časovo závislá.

Tabuľka 1

Tuk olej alebo polotuhý tuk želatinačný čas (hodiny) vek mikroguľôčok (dni) pri 30 °C pri 38 °C

GŤŠT

1.	a)	žiadny	1,5(1)
	b)	žiadny	6-24 (14)	10 min. (29)
	c)	10 % Miglyol²
		812 (R)	> 168 (1)	6(15)
	d)	5 %GDS		6-24 (21)
2.	a)	žiadny		7 min. (1)
	b)	10 % Miglyol
		812 (R)		1(1)
	c)	10 % Miglyol
		812 (R)		2(80)
3.	a)	žiadny	<1(1)
	b)	žiadny	1,3 (6)	7 min. (39)
	c)	2 % Miglyol
		812(^r)	2(8)
	d)	5 % Miglyol
		812(R)	1,3 (8)	12 min. (22)
	e)	10 % Miglyol
		812(^r)	6-24 (8)	1(29)
	f)	15 % Miglyol
		812(R)	24(1)
	g)	2 % GDS	<2(1)
	h)	5 % GDS	3(21)	7 min. (39)
	i)	10% GDS	1,3(1)
	j)	5 % Triacetín	8-24 (1)	1,25 (8)
	k)	2 % GDS a 10 % Miglyol
		812 (R)	8-24(1)
4.	a)	žiadny	1,6(1)
	b)	10 % Miglyol
		812(R)	24(1)
5.	a)	žiadny	6-24 (21)
	b)	10 % Miglyol
		812 (R)	> 168(1)
6.	a)	žiadny	5min.(l)

b) 10 % Miglyol

812 (R) 6-24(1)

GDS³

7. a)	žiadny	1,1 (120)
b)	10 % Miglyol
	812 (R)	2(0)

1. V príkladoch 1 až 5 sa používajú rôzne šarže glyceriltristearátu (GTS) od firmy Huls of America, obchodného označenia Dynasah 118. V príklade 6 sa používa výrobok Pfaltz and Bauer.

2. Miglyol 812(R) je neutrálny triglyccridový olej, výrobok firmy Huls of America.

3. Zdroj materiálu: Gattefosse, obeh, označenie Gelucire 64/02.

Príklad 8

Pripraví sa nestabilizovaný prípravok na báze glyccriltristearátu (GTS) vo forme mikroguľôčok a stabilizovaný GTS mikroguľôčkový prípravok nasledujúceho zloženia:

nestabilizované mikroguľôčky % hovädzí samototropín % benzoan sodný

0,14 % Pluronic F68(R)1 % glyceryltristearátu stabilizované mikroguľôčky % hovädzí somatotropín % benzoan sodný

0,14 % Pluronic F68(^R) % glyceryltristearát % Miglyol 812(^r)

Obidva prípravky vo forme mikroguľôčok sa suspendujú v rovnakom množstve neutrálneho oleja, ako vehikula a uložia sa pri 25 alebo 4 °C. Periodicky sa odoberajú vzorky uložených prípravkov, nechajú sa ohriať na teplotu miestnosti (22 až 25 °C) a meria sa ich viskozita (Brookfieldov viskozimeter T, vreteno C, 100 min.'). Výsledky uvedené v tabuľke 2 ukazujú, že za typických podmienok skladovania má stabilizovaný prípravok podstatne nižší prírastok viskozity s časom.

Poznámka: I Pluronic F68(^R) je blokový kopolymér etylénoxidu a propylénoxidu predávaný firmou BASF.

Tabuľka 2

Porovnanie viskozity nestabilizovaných a stabilizovaných prípravkov vo forme mikroguľôčok na báze GTS

Viskozita (mPa.s) meraná pri 25 °C začiatku prvého a tretieho týždňa. Na začiatku 5., 7. a 9. týždňa sa týmto kravám injekuje stabilizovaný prípravok. Kravy zo skupiny C naproti tomu dostávajú stabilizovaný prípravok na počiatku 1. a 3. týždňa a potom nestabilizovaný prípravok na začiatku 5., 7. a 9. týždňa. Výsledky 7. tohto pokusu sú uvedené v tabuľke 3. Urobí sa štatistické porovnanie obidvoch prípravkov tým, že sa stanoví stredný rozdiel v odozve medzi priemernou produkciou mlieka pri každej krave pri dávkovaní nestabilizovaného prípravku a priemernou produkciou mlieka pri dávkovaní stabilizovaného prípravku. Produkcia mlieka v priebehu 5. a 6. týždňa sa do štatistickej analýzy nezahrnuje, pretože v tomto období môže dochádzať na interakcie medzi dvomi prípravkami. Stredný rozdiel je -0,9 ± 4,7 %, čo nie je štatisticky významné (p 0,05). Je teda možné konštatovať, že produkcia mlieka s použitím obidvoch prípravkov je v podstate rovnaká.

Tabuľka

Porovnanie a analýza produkcie mlieka za peužina nestabilizovaných a stabilizovaných prípravkov, vo forme mikroguličiek.s pozvoľným uvoľňovaním účinnej zložky percentuálne zwkn.e produkcie mlieka

dvojlyždeň -»	1	2	3	4	5
skeptna krave.	prionvok 1	prípravok 2		{ogdisl
B	'8,5	24^	24,6	13,5	15.4	5.9
2	12,4	15.3	7.J	9.7	6Í	5,9
3	5,6	143	13.8	9.9	9.8	0.2
4	6.4	2,7	12,9	7,3	12,2	•5,2
5	0.9	4.5	12.8	7,9	8.1	•5,3
6	•4,5	8.3	9,1	S, U	13,9	•9,0
Ί	8.5	31,9	33,4	21,7	24,4	2.9
8	4.7	10,9	4,<	1<)	9.9	•U
9	7.«	16,7	16,4	14,3	14,3	•23
10	18,5	19.2	23,5	2I.3	22.3	•3.0

Tabuľka 3 pokračovanie dvojtýiteft

C nrioravokS

S

-6,95.3

4,0«5

3.1<6

4,3lft.5

2.915.4

94,K

2.94,9

1111.7

9.9H,’

13,42D.1 jsiEfavoL!

12.335

-3,230

8.271

15.499

19.516.9

9,8-6.9

7.71,5

12.79,1

U.l6.0

23.113,5 rorJiel

50-U

874.0

12.33,7

11,75,2 •U,Q-7,4

-3.t-4,2 t 1,91.6

6.3 *5.8

15,6-2.6 čas skladovanie pri 25 °C skladovanie pri 4 °C nestabiliz. stabiliz. nestabiliz. stabiliz.

0. deň 66	66	66	66
l.deň 452	—	168	-
5. deň 2300	—	159	—
l.týž. 7300	119	159	70
2. týž. -	195	159	71
4. týž. -	442	-	79
8. týž. -	1971	164	82
13. týž. -	2629	270	74
26. týž. -	2629	624	70
39. týž. -	5280	741	71

Príklad 9

Porovnanie a analýza produkcie mlieka

Vyrobia sa mikroguľôčky rovnakého zloženia, ako nestabilizované a stabilizované mikroguľôčky vyrobené podľa príkladu 8 a skúšajú sa na mliečnych kravách, aby sa vyhodnotila ich účinnosť v produkcii mlieka. Na výrobu injekcií sa mikroguľôčky suspendujú v neutrálnom triglyceridovom oleji Miglyol 812 (^R). V tomto príklade sa druh ošetrenia po uplynutí dvojtýždňového injekčného obdobia vymení. Kravy zo skupiny B dostávajú teda nestabilizované prípravky počas prvých štyroch týždňov s injekciami na stredný rozdiel -0.9 ·»'· Štandardná odchýlia «7- 4,7 i Inftlie) je vyjadrený pro kaidii kravu > jedna sa u rozdiel medzi priemernou produkciou mlieka pri iBsadem prípravku ¹'ncststtliKr-anébó) v dvojtýtdtoch I 12 pri skupine B alebo »dvnjtýždňoch4a 5 pri skupine C a priemernou produkčnú, mlieka pn nuadeni prípravku 2 (napíhzovwélia) v d-ojtýidni i a 5 pn skupine B alebo dvoiwhlni l a 2 pri stupne C V dňr-edku amtny prípravkov na začiatku 3. dwjlýždŕa n experiment vyrovnáva, pokiaľ si týka poradia dávkovania Výsledky v priebehu tretieho dwjtý!<Ua sa nrspracovárejd Itaúsucky. aby sa znílil mrfný prenosový úŕirvok jedného druhu ošetrenia do druhého. Stredný rozdiel odráža rozd.el v odozve na tieto dva prípravky.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Farmaceutický prípravok vo forme mikroguľôčok na parenterálne podávanie obsahujúci biologicky aktívnu látku zvolenú zo súboru zahrnujúceho proteíny, peptidy a polypeptidy a tuhý tuk alebo vosk, alebo ich zmes, vyznačujúci sa tým, že ďalej obsahuje olej, tvorený monoestermi, diestermi a/alebo triestermi mastných kyselín s 2 až 18 atómami uhlíka a glycerolu, alebo polotuhý tuk, tvorený estermi mastných kyselín a glycerolu s teplotou topenia v rozmedzí 15 až 30 °C, alebo ich zmes, pričom vzájomný pomer jednotlivých zložiek prípravku je nasledujúci:

20 až 70 % hmotnostných biologicky aktívnej látky, 30 až 95 % tuhého tuku alebo vosku, alebo ich zmesi a 1 až 30 % hmotnostných oleja alebo polotuhého tuku, alebo ich zmesi.
2. Farmaceutický prípravok podľa nároku 1 obsahujúci ako biologicky aktívny proteín hovädzí, bravčový alebo vtáčí rastový hormón, vyznačujúci sa tým, že ako olej obsahuje neutrálny triglyceridový olej, v množstve 5 až 20 % hmotnostných.
3. Farmaceutický prípravok podľa nároku 1 alebo 2, vyznačujúci sa tým, že mikroguľôčky sú suspendované vo farmaceutický vhodnom kvapalnom vehikule.
4. Spôsob výroby farmaceutického prípravku podľa niektorého z nárokov 1, 2 alebo 3, pri ktorom sa zmiesi v tavenine tuhý tuk alebo vosk, alebo ich zmes a biologicky aktívna látka zvolená zo súboru zahrnujúceho proteíny, peptidy a polypeptidy a vzniknutá hmota sa spracuje na prípravok vo forme mikroguľôčok, ktorý’ sa následne prípadne suspenduje vo farmaceutický a farmakologicky vhodnom kvapalnom vehikule, vyznačujúci sa tým, že sa ku hmote pred jej spracovaním alebo v priebehu jej výroby pridá olej alebo polotuhý tuk, alebo ich zmes.