SE437375B - Sett att framstella nya hogervridande isomerer av asymmetrisk spirohydantoin - Google Patents

Description

50 55 40 vsosezsás g ¿ diabetesmedel för oral administration. För det mesta har dessa försök innefattat syntes och provning av olika tidi- gare okända och icke tillgängliga organiska föreningar,_i synnerhet inom området-för sulfonylkarbamiderna, detta i ett försök att bestämma deras förmåga att sänka blodsocker- halten (d v s glucoshalten) i väsentlig grad, när de admini- streras oralt. Vid försök att finna nyare och effektivare antidiabetesmedel är emellertid föga känt beträffande effek- ten hos andra organiska föreningar med avseende pà förhind- rande eller hejdande av vissa kroniska komplikationer av diabetes, såsom diabetesstarr, neuropati diabetica; retino- pati etc. Emellertid anger K. Sestanj och medarbetare i den .awfierikanska patentskrirtcen 5 821 583 att vissa, alaosreauktas- inhibítorer såsom_1;5-dioxo-4H-bens1É,§7-isokinolin-2(BH)- ättiksyra och några närbesläktade derivat därav är använd- bara för dessa ändamål, även om dessa.speciella föreningar icke är kända som hypoglykemiska i ooh för sig. Dessa speci- ella aldosreduktasinhibitorer fungerar alla genom inhiberingi av aktiviteten hos enzymet aldosreduktas,~som är-den primära I 1 orsaken till-regleringen av reduktionen av aldoser (såsom glukos och galnktos) till de motsvarande polyolerna (såsom i isorbitol och galaktitol) i den mänskliga organismen. På detta sätt förhindras eller minskas den icke önskvärda an- samlingen av galaktitol i ögonlinserna hos patienter med galaktosemi och sorbitol i ögonlinserna, de perifera nerv-- trådarna och njurarna hos olika diabetespatienter. Följakt- ligen är dessa föreningar avgjort värdefulla som aldosreduk+ tasinhibitorer för reglering av vissa kroniska komplikatio- ner hos diabetiker; inkl. sådana av okulär natur, ty det är känt att närvaron av polyoler i ögonlinserna-ständigt leder- till starrbildning och därmed följande-grumling av linserna. l enlighet med förevarande uppfinning har det nu helt överraskande visat sig, att vissa.nya högervridande spiro- hydantoinföreningar är extremt användbara inom terapin som' aldosreduktasinhibitorer för reglering av kroniska kompli-i kationer, som-uppstår hos diabetiker. Dessa nya högervridan- 'de isomerer är mycket aktivare i.detta avseende än de mot- svarande dl-föreningarna, från vilka de härrör; trots det faktum att samma dl-} d- och l-former alla befunnits vara inbördes väsentligen lika kraftiga antikonvulsíonsmedel. _" i i PDOR lwßulïvrr 40 BO sß's” e 1303626-6 Närmare bestämt är alla de nya föreningarna enligt förevarande uppfinning valda ur en grupp bestående av de högervridande formerna av asymmetriska spiro-hydantoiner med formeln i i i O och bassalterna därav med farmakologiskt'godtagbara kat- joner, i vilken formel Y representerar syre eller svavel.

Typiska föreningar, som speciellt innefattas i förevarande uppfinning är d-6-fluor-spiro-[kronan-4,4'-imidazolidig7-2', '-dion respektive d-6'-fluor-spiro-Lïmidazolidin-4,4'- tiokroman7-2,5-dion. Dessa två föreningar är båda extremt kraftiga med avseende på deras aldosreduktasinhiberande aktivitet förutom att de är lika effektiva i att i mycket _ signifikant hög grad sänka sorbitolhalterna i nervus iscia- dicus och i ögonlinserna hos diabetiker och galaktitolhalten i ögonlinserna hos individer med galaktosemi.

För att enligt förevarande uppfinning erhålla de nya högervridande föreningarna bringas en motsvarande raoemisk eller dl-spiro-hydantoin, som faller under samma allmänna strukturformel som den ovan angivna optiskt aktiva förening- en, i kontakt med minst en ekvimolar mängd l-brucin eller en liknande optískt aktiv alkaloid, såsom oinkonidin i ett lämpligt, gentemot reaktionen inert, organiskt lösningsmedel lämpligen valt bland lägre alkoholer.'De så erhållna diastereo- isomera salterna separeras därefter medelst fraktionerad kris- tallisation och det mindre lösliga saltet omvandlas till den önskade optiskt aktiva spiro-hydantoinen med hjälp av sönder- delning med en syra på konventionellt sätt.

I närmare detalj genomföras det första steget, som le- der till bildning av diastereoisomererna lämpligen i en lägre alkanol med 4-5 kolatomér med användning av l-brucin som före- draget lösningsmedel. I praktiken föredrages i allmänhet att använda ekvimolara mängder raoemisk förening och upplösninge- i medel i ändamål att minska kostnaderna och till ett maximum i Poon ““ uAuTv 40 » 55 40 eevsozsze-6 ß 'öka produktens renhet, men ett ringa överskott av alkaloiden kan användas utan att resultatet av saltbildningen eller den slutliga produktens natur pâvisbart påverkas. Det torde vara överflödigt att påpeka, att tiden icke är av avgörande e betydelse i detta sammanhang och med nödvändighet beror på utgàngsmaterialens natur, deras koncentration i lösning ochi den tillämpade temperaturen. Sedan saltbildningssteget slut- förts avskiljes den önskade diastereoisomeren normalt från blandningen genom fraktionerad kristallisation och för detta erfordras vanligtvis mellan ca 2 och ca 24 timmar vid en kristallisationstemperatur mellan.ca -20 och upp till ca +GO°C ' för föreliggande ändamål. Diastereoisomeren renas ytterligare genom omkristallisation, lämpligen med användning av som lös- gningsmedel en alkanol av samma typ som tidigare användes i eerebiianingeetegev, till aeee 'ett fullständig .optisk renhet I uppnås, vilket visar sig som konstant smältpunkt och konstant smältpunkt och konstant optisk vridning hos nämnda diastereo- isomer. _ _ ä p Omvandling av de så erhållna alkaloidsalterna till de 'önskade,.optiskt aktiva hydantoinerna, åstadkommas därefter på ett mycket enkelt sätt genom sönderdelning med syra och L lämpligen med tillämpning av sur hydroljs i enlighet med standardteknik. Sålunda kan exempelvis saltet: behandlas i~ ett vattenhaltigt medium med en mineralsyra, såsom svavelsyra, saltsyra, bromvätesyra eller jodvätesyra eller med en orga- nisk syra, såsom en lägre alkansyra, såsom ättiksyra eller f en halogenerad, lägre alkansyra, såsom B-klorpropionsyra eller triklorättíksyra. I praktiken är det bekvämast att an- vända en utspädd, vattenhaltig syra,som sådan för föreliggan- de ändamål, varvid svavelsyra och saltsyra i allmänhet före- drages som syrakomponenter i detta sammanhang. För att ytter- ligare underlätta hydrolyssteget användes företrädesvis ett lämpligt, med vatten icke blandhart, organiskt lösningsmedel, såsom en lägre alkyl-alkansyraester, såsom etylacetat, till- sammans med nämnda utspädda, vattenhaltiga syra, varigenom den önskade, optiskt aktiva spiro-hydantoinföreningen (d v s den högervridande isomeren) bekvämt ektraheras in i den or- ganiska fasen och därefter isoleras på konventionellt sätt. dl-spiro-hydantoinföreningarna, som användes som sub- g strat vid upplösningsprocessen enligt förevarande uppfinning, 7803626-6 '\."\ är alla lättsyntetiserade genom att man först kondenserar en lämplig karbonylringförening, ekempelvis den motsvarande 4-kromanonen till tiokromanon-4-on med formeln o,_ Y där Y har ovan angivna betydelse, med en alkalimetallcyanid (exempelvis natrium- eller kaliumcyanid) och ammoniumkarbo- nat till den önskade slutprodukten.spiro-hydantoin (d v s den racemiska föreningen) med den ovan angivna strukturfor- meln. Denna speciella reaktion genomföras normalt i närvaro i av ett gentemot reaktionen inert, polärt, organiskt lösnings- medel, i vilket både reaktionskomponenterna och reagenserna är inbördes blandbara; Bland föredragna organiska lösnings- medel för.användning i detta sammanhang kan nämnas cykliska etrar, såsom dioxan och tetrahydrofuran, lägre alkylenglyko- ler, såsom etylenglykol och trimetylenglykol, vattenblandbara, lägre alkanoler, såsom metanol, etanol och isopropanol, liksom även N,N-di(lägre alkyl)-lägre alkanamider, såsom N,N-dimetyl- formamid, N,N-dietylformamid och N,N-dimetylacetamid etc. I allmänhet genomföras reaktionen vid en temperatur, som ligger mellan ca 20 och upp till ca 420°C under en tid mellan ca 2 timmar och ca 4 dagar. Ehuru mängden reaktionskomponent och reagens, som användes vid reaktionen, kan variera i någon ut- sträckning, föredrages att använda minst ett ringa molart överskott av reagensen alkalimetallcyanid i förhållande till utgångsmaterialet karbonylringföreningen, detta för att åstad- komma maximalt utbyte. Sedan reaktionen slutförts isoleras den önskade produkten lätt på konventionellt sätt, exempelvis genom att man först utspäder reaktionsblandningen med vatten (kokning om så erfordras) och därefter kyler den så erhållna _30 vattenlösningen till rumstemperaturen och surgör för erhål- star lande av den speciella dl-spiro-hydantoinföreningen i form av en lätt utvinnbar fällning. g Utgångsmaterialen som erfordras för framställning av ovannämnda dl-spiro-hydantoinföreningar är för det mesta 55 kända föreningar, som av fackmannen på här ifrågavarande QUALITY D ~ aa ao i dvsosßásésl 6 industriområde lätt kan syntetiseras ur vanliga kemiska reagenser med tillämpning av konventionella organiskt syntetiska metoder. Sålunda är exempelvis 6-fluor-tio- kroman-4-on en känd förening, då däremot 6-fluor-4-kro- manen lätt framställes genom kondensation av ß-(p-fluor- 'fenoxi)propionsyra i närvaro av polyfosforsyra; Den sist- nämnda_organiska syran, som användes såsom utgångsmateríal i detta sammanhang, erhålles slutligen ur en i handeln till- gänglig förening. D ' ' HH _ g De kemiska baser, som användes som reagenser vid fram- ställning av de ovannämnda farmaceutiskt godtagbara bassal- - terna är de, som bildar ogiftiga salter med de här beskrivna sura, högervridande spiro-hydantoinföreningarna, exempelvis d-6-flour-spiro-[kronan-4,4'-imidazolidig7-2',5'-dion, Dessa speciella ogiftiga bassalter är av sådan natur, att deras katjoner kan sägas vara-väsentligen ogiftiga inom ett brett intervall för dosering vid administration. Exempel på sådana katjoner är natrium-, kalium-, kalcium-, magnesium etc.

Dessa salter kan lätt framställas_genom enkel behandling av de ovannämnda d-spiro-hydantoinföreningarna med en vattenlös- ning av den önskade, farmakologiskt godtagbara katjonen ooh indunstning av den så erhållna lösningen till.torrhet, före- trädesvis under reducerat tryck: Älternativt kan de också' framställas genom sammanblandning av lägre alkanollösningar av nämnda sura föreningar och den önskade alkalímetallalkoxi- den och indunstning av den så erhållna lösningen till torrhet .på samma sätt. I vart fall måste man använda stökiometriska' mängder av reagenserna i ändamål att tillförsäkra fullstän- dig reaktion och maximalt utbyte med avseende på den önska- de slutprodukten. 7 7 Såsom ovan-påpekats är alla de högervridande spiro- hydantoinföreningarna enligt förevarande-uppfinning lätta att anpassa till terapeutisk användning som aldosreduktas- inhibitorer för reglering av kroniska diabeteskomplikationer på grund av deras förmåga att i statistiskt signifikant grad sänka sorbitolhalterna i ögonlinserna hos diabetiker. Sålun- da har exempelvis d-6-fluor-spiro-[kronan-4,4'-imidazolidi§7- g?',5'-dion, som är ett typiskt och föredraget medel enligt' förevarande uppfinning, visat sig konsekvent och i signifi- kant hög grad reglera (d-v s inhibera) sorbitolhalten hos 07 0, 0 wsozsze-6 råttor med diabetes, när den administreras oralt i doser mellan 0,25 och 5,0 mg/kg utan att uppvisa några väsent- liga tecken på toxiska biverkningar. De andra föreningarna .enligt förevarande uppfinning ger liknande resultat. Dess- utom kan de här beskrivna föreningarna administreras oralt eller parenteralt för här ifrågavarande ändamål utan att orsaka några signifikanta, olämpliga farmakologiska bireak- tioner. I allmänhet administreras dessa föreningar normalt i doser mellan ca 0,25 och ca 5,0 mg/kg kroppsvikt och dag, ehuru dessa doser med nödvändighet varierar allt efter indi- videns vikt och tillstànd och det valda administrationssättet.

Vid användning av de högervridande spiro-hydantoín~ föreningarna enligt uppfinningen för behandling av diabetiker är att märka, att dessa föreningar kan administreras enbart eller i kombination med farmaceutiskt godtagbara bärare pà vilket som helst av de ovan angivna sätten och att sådan ad- ministration kan genomföras med både enkeldos och multipel- dos. Närmare bestämt kan föreningarna enligt förevarande upp- finning administreras i ett stort antal olika administrations- former, d v s de kan kombineras med olika farmaceutiskt god-, tagbnra, inerta bärare i form av tabletter, kapslar, sugtab- letter, pnstiller, hårda karameller, pulver, sprayar, vatten- suspensioner, injicierbara lösningar, elixirer, sirap och \.fl liknande. _ 7 Bland sàdana_bärare kan nämnas fasta utspädningsmedel eller fyllmedel, sterila vattenhaltiga medier och olika ogif- tiga, organiska lösningsmedel etc. Dessutom kan sådana orala, farmaceutiska beredningar lämpligen sötas och/eller smaksät- tas med hjälp av olika medel av den typ, som vanligtvis an- >O vändes för sådana ändamål. I allmänhet ingår de terapeutiskt användbara föreningarna enligt förevarande uppfinning i såda- na doseringsformer med koncentrationer mellan ca 0,5 och ca 90 viktprocent av blandningens totala vikt, d v s i mäng- der, som är tillräckliga för att ge den önskade enhetsdosen. 55 För oral administration kan tabletter innehållande olika excipienter, såsom natriumcitrat, kalciumkarbonat och kalciumfosfat, användas tillsammans med olika upplösande kom- ponenter, såsom stärkelse, företrädesvis potatisstärkelse eller tapioka, alginsyra och vissa komplexa silikat, tillsam- 40 mans med bindemedel, såsom polyvinylpyrrolidon, saocaros, i Poon Ä nuAuTv 45 50, fe7s03626-6 8 gelatin och acaciagummi. Dessutom är det ofta mycket lämpligt för tabletteringen, att man sätter smörjmedel, såsom magne- _siumstearat, natriumlaurylsulfat och talk. Fasta blandningar av samma typ kan också användas som fyllmedel i mjuka och hårda, fyllda gelatinkapslar och bland föredragna material för detta ändamål kan också nämnas högmolekylära polyetylen- glykoler. När vattensuspensioner och/eller -elixirer önskas för oral administration, kan den väsentliga, aktiva bestånds- ie delen däri kombineras med olika sötningsmedel eller smakämnen, färgämnen och, och så önskas, emulgatorer och/eller disperga- torer tillsammans med sådana utspädningsmedel som vatten, etanol, propylenglykol, glycerol och olika kombinationer där- QV- e_För parenteral administratiön_kan man använda lösningar 7 « av dessa speciella d-spiro-hydantoiner i sesamolja eller jord- nötsolja eller också i vattenhaltig propylenglykol, och man -kan även använda sterila vattenlösningar-av de ovan angivna vattenlösliga salterna av alkalimetall eller alkalisk jord- oartsmetnll.

Sådana vattenlösningar bör, om_så erfordras, buffrasï på* lämpligt sätt och det väetskeformiga utspäafiingsmeaiet först göras isotoniskt med en tillräcklig mängd salt eller glukos. Dessa speciella vattenlösningar är utmärkt lämpade för intravenös, intramuskulär, subkutan och intraperitoneal_ injiciering. Alla de_i detta sammanhang använda, sterila, vattenhaltiga medierna, kan lätt erhållas genom standard- teknik, som är välkänd för fackmannen på här ifrågavarande industriområde. Dessutom är det också möjligt att administre- ra ovannämnda spiro-hydantoinföreningar topiskt via en lämp- lig oftalmisk lösning lämplig för föreliggande ändamål, vil- ken lösning kan administreras genom instillation i ögat.

Föreningarnas enligt förevarande uppfinning aktivitet mot kroniska diabeteskomplikationer bestämmes av deras för- måga att.bestå ett eller flera av följande standardbiolo- giska och/eller farmakologiska test,_nämligen (4) mätning av deras förmåga att inhibera enzymaktiviteten hos isolerad aldosreduktas, (2) mätning av deras förmågaíatt reducera eller inhibera sorbitolackumulation i nervus isciadicus hos akut streptosotociniserade råttor (d vïs diabetiska råttor), (5) mätning av deras förmåga att reversera redan höga sorbi- WO 45 95 55 40 9 0 1803626-6 tolhalter i nervns isciadicus och ögonlinserna hos kroniskt streptosotocininducerade diabetesråttor, (4) mätning av deras förmåga att förhindra eller inhibera galaktitolbild- ning i ögonlinserna hos råttor med akut alaktosemi och (5) mätning av deras förmåga att fördröja starrbildning och minska ögonlinsernas grnmlighet hos råttor med kronisk galak- tosemi. _ Framställningsförfarande A: En blandning bestående av 5,5_g (0,019 mol) ß-(p-fluor- fenoxi)propionsyra (Finger och medarbetare, Journal of the American Chemical Society, Vol.81, p. 94 (1959)) och 40 g polyfosforsyra upphettades på ett vattenàngbad under 10 min. och hälldes därefter i 500 ml isvatten. Den så erhållna vat- tenhaltiga blandningen extraherades därefter med tre separa- ta portioner av etylacetat och de.kombinerade organiska ex- trakten tvättades med en utspädd vattenlösning av natrium- bikarbonat och därefter med vatten, varpå de torkades över vnttenfritt magnesiumsulfat. Sedan_torkmedlet avfiltrerats indunstades lösningsmedlet under reducerat tryck och man er- höll en indunstningsàterstod, som omkristalliserades i eta- nol. Man erhöll på detta sätt 2,95 g (95 %) ren 6-fluor- - 4-kromanon med en smältpunkt av 144-116°0.

Analys: : ' % C 9 % H Beräknat för C9H7FOQ.O,25 H?0 65,54 -4,45 Funnet ' f -65,24 4,45 Framställningsförfarande B: En blandning bestående av 597 g (2,59 mol) 6-fluor-4- kromanon (framställd på sätt som angives här ovan under rubriken Framställningsförfarande A), 255 g (5,58 mol) kaliumcyanid och 917 g (9,56 mol) pulvriserat ammoniumkarbo- nat i 5000 ml av en 50-procentig vattenlösning av etanol upphettades vid 65°C i ungefär 65 timmar. Reaktionsbland- ningen kyldes därefter till rumstemperatnren (ca 25°C) ut- späddes med 2000 ml vatten och surgjordes därefter med 6N-H01.

De så erhållna, blekgula kristallerna avskildes därefter ge- nom sugfiltrering, tvättades väl med vatten och löstes där- efter i en °-normal vattenlösning-av natriumhydroxid. Genom extraktion av denna lösning med etylacetat (5 X 1000 ml) och surgöring av den basiska, vattenhaltiga fasen med 6N-H01 er- hölls blekgula kristaller, som tvättades med vatten-och tor- áooï 50 55 o78Û3626'6 10 kades i luften till konstant vikt- Efter omkristallisation i kokande metanol (den ursprungliga volymen om 9 liter minskades till 5 liter) erhölls ren dl-6-fluor-spir0-¿kroman- 4,4'-imidazolidig7-2',5'-dion med en smältpunkt av 259-241°C i ett utbyte om 276 g (44 %). Ett andra utbyte om 82-g kris- taller erhölls ur filtratet och ökade utbytet av rent mate- fiol till 64 %. D "' “ Framställninqsförfarande C: f Det under rubriken Framställníngsförfarande B här ovan beskriyna förfarandet upprepades_med den ändringen, att 191 g (1,05 mol) Gffluor-tiokroman-4-on (Chemical Abstracts._ vol. 70, p. 473551 («969)>,"1o2fg (1,57 moi) kaliumoyonio och 591 g (4,08 mol) pulvriserat ammoniumkarbonat omsattes i 1000 ml av en 50-procentig vattenhaltig etanol vid 65°C (med användning av ett oljebad) under ca 66 timmar. Reaktions- blandningen hälldes därefter i 1500 ml_vatten och kokades i minuter för förstöring av ammoniumkarbonatöverskottet.

Efter kylning till rumstemperaturen surgjordes reaktionsbland- ningen med koncentrerad saltsyra_bch uppnrbetades därefter på sätt som angives för den motsvarande_blandningen under rubriken Framställningsförfarande B. På detta sätt erhölls slutligen-224 g (85 %) dl-6'-fluor-spiro-Åimidazolidin-4,4'- tiokroman7-2,5-díon, som var ren utan att omkristallisation_ erfordrades och som hade en smältpunkt av 200-202°C.

Exemgel-1: . I .I - En lösning bestående av 120 g (O,508 mol) dl-6-fluor- spiro-[kronan-4,4'-imidazolidin7Ä2',5'-dion med en smält- punkt av 259-24«°c ooh 257 g (o,5oa moi) 1-bruoin-toor¿- hydrat-löstes i 1,8 l kokande etanol och lösningen fick kallna långsamt. De utfällda kristallerna (A) uppeamlades genom sugfiltrering och det därvid erhållna filtratet (B) tillvaratogs. Kristallerna (A) bestod av l-brucinsalt av 1a-6-floor;spiro-¿šfoman-4,4';imiaazo1iaig7L2',5'-aion ooh isolerades som etanolatet. Det hade en smältpunkt av 114- l118°C (sönderdelning) efter omkristallisation i etanol.

Analïsz _W% C - 7% H f% N Beräknat för cqqngrnzo . " : _ - ' c23H26N2o4.c2H5oH 65,88 _ 6,12 8,28 Funnet 63,60 6,07. 8,22 55.

'P fiyü ¶ _ 1803626-6 11 Efter ytterligare omkristallisation av ovannämnda kristaller (A) i etanol diastereoisomer med 1,0 en 1-normal vattenlösning av saltsyra. Den avskilda organiska fasen uppsamlades därefter, torkades över vattenfritt magne- siumsulfat, filtrerades och indunstades i vakuum, varigenom man erhöll en fast indunstningsåterstod; Denna kristallise- rades i 1,0 liter etanol och man erhöll 45 g ràprodukt, d v s den högervridande isomeren av-6-fluor-spiro-¿kroman- 4,üf-imidazclidin7-2',5'-dion. Genom omkristallisation av detta sistnämnda material i 500 ml etanol erhölls 57 g (1,5 liter) behandlades ovannämnda. liter etylacetat och 1,0 liter av (69 %) ren d-6-fluor-spiro- kroman-4,4'-imidaaolidiÉ7-2',5'- dion med en smältpunkt av 241-245°C; ¿_q;7š5°+ 54,0° (c = 1, i metanol). A ' - Analïsz % C %_H % N Beräknat för C,1H9FN2O5 '55,95 5,84 11,86 Funnet 55,59 5,88 _11,52 Det ursprungliga filtratet (B) behandlades därefter_ med 75 ml av en 10-procentig vattenlösning av saltsyra och de utfällda kristallerna uppsamlades på vanligt sätt, vari- genom man erhöll l-hrucinsaltet av l-6-fluor-spiro-ŧroman- 4,4'-imidazolidin7-2',5'-dion, som isolerades i form av monohydroklorid-dihydratet med en smältpunkt av 172-174°C.- Analys: _ Beräknat för C,1H9FN2O5. 5 c25H¿6o4.Hc1.2H2o 58,07 5,73 7,97 Funnet= 58,05 5,79 7,98 Denna speciella diastereoisomer (smältpunkt 172-174°C) L . behandlades därefter med 1,0 liter etylaeetat och 600 ml av '.en 10-procentig vattenlösning av svavelsyra och den så er- hållna organiska fasen avskildes, torkades över vattenfritt magnesiumsulfat, filtrerades och indunstades i vakuum, var- igenom man erhöll 41 g av den råa l-isomeren. Genom kristal- lisation av denna i 400 ml etan erhölls 54 g (52 %) ren 1-6-fiuor-spirø¿¿Er0man-4,4'-imiaaz0iia;g7-2',5f-aion med en smältpunkt av 241-?45°C. Åfa;7š5°-54,8° (c 1, i metanol).

Annlvn: _ Beräknat för C1,H9FN205 55,95 5,84 - 11,86 Funnet ' . 55,59 5,89 11,80 ANY 201 ' 55 40 71303626- 6 i a, Exemgel 2: I' ' I _ 1 -_ En lösning av 2,52 g (0,01 mol)'dl-6'- fluor-spiro- Åimidazolidin-4,4'-tiokromag7l2,5-díon med en smältpunkt av 200-202°C och 4,5 g (0,01 mol) l-brucín-dihydrat löstes i 125 ml kokande etanol och lösningen fick kallna_làngsamt.

De utfällda kristallerna (A) uppsamlades genom sugfiltrering och filtratet (B) togs tillvara. Kristallerna (A) omkristal- liserades därefter i etanol (2 x 100 ml) och man erhöll 2,1 g rent l-brucinsalt av d-6'ffluor-spiro-Åímidazolidin- 4,4'¥tiokromag7Ä2,5-dion, som isolerades i form av etanola- tet med smältpunkt 147-149°C.

Analys: - ~ _ Beräknat för C11H9FNPO2S. %,C “I % Hi % N c25n26N2o4.c2H5oH 62,40 5,9? _a,o9 ”_ Funnet . 62,22 6,25 . i8,06 _ Kristallerna (A) skakades med 100 ml etylacetat och ?OO ml av en 5-normal vattenlösning av'saltsyra för omvand-1 ling av nämnda diastereoisomer till den motsvarande optiskt aktiva hydantoinen. Den organiska fasen, som avskilde sig på detta sätt, uppsamlades, torkades över vattenfritt magne- siumsulfat och filtrerades och filtratet indunstades i vakuum, 'varigenom man erhöll ett fint restmaterial. Genom omkristal- lisation av detta i 20 ml etanol erhölls 230 mg (18 %) ren d-6'-fluor-spiroflimidazolidin-4,4';tiokroma§7-2,5-díonsmed en smältpunkt av 224-226°C; ¿fn¿]š5 + 71,8° (c = 4, i metanol).

Analys: ~ % C. 1 % H % N Beräknat för Cq1H9FN2O2S 52,57 5,60 ' 11,11 Funnet f l 52,19 5,44 _ 10,94 1 Filtratet (B) indunstades därefter i vakuum och den därvid bildade kristalliníska indunstningsàterstoden omkris- talliserades i 50 ml etanol, varigenom man erhöll 1,6 g kris- taller Bestående av rent l-brucinsalt av l-6'-fluor-spiro- Åïmídazolidin-4,4'¥tiokroman7l2,5-dion, som isolerades i form av etanolatet med smältpunkt 120-124°C. lê2âl1a= .a _ % G-_ % H % N Beräknat för C1qH9fN2O2S.l . c25H26N2o4.c2H5oH 62,40 5,97 6,09 Funnet" g 62,21 _5,94 ,8,09 Denna speciella.diastereoisomer (smältpunkt 120-124°C) skakades därefter med 100 ml etylacetat och 200 ml av en 90 50 55 15k 5 e 7303626-se 1-normal vattenlösning av saltsyra och den så erhållna organiska fasen evskildes, torkades över vattenfritt magnesiumsulfat filtrerades och indunstades till torrhet under reducerat tryck. Ãterstoden (190 mg) omkristallise- rades i 10 ml etanol och slutligen i etylacetat/n-hexan , varigenom man erhöll 64 mg (5,8 %) ren l-6'-fluor-spiro- Åimidazolidin-4,4'-tiokromag7l2,5-dion med smältpunkt 2254290; [e__7š5° -75,e° (c = 1, i metanol).

Analys: g ._ % C % H % N Beräknat för C¶qH9FN2O2S 52,57 I 5,60 11,11, Funnet _52,57 5,66 11,00 Exempel Q: 5 Natriumsaltet av d-6-flour-spirojíkroman-4,4'-imida- zo1idin7-2',5'-dion (den i exempel 1 erhållna produkten) preparerades genom att man upplöste föreningen i vatten in- nehållande en ekvivalent mängd i mol av natriumhydroxid_och därefter frystorkade blandningen. Pà detta sätt erhölls det önskade alkalimetallsaltet av hydantoinen i form av ett nmorft pulver, som var fritt lösligt i vatten.

På liknande sätt preparerades också litiumsalterna lik- som även alkalimetallsalterna av d-6f-fluor-spiro-¿Émidazo- lidin-4,4'-tiokroman7-?,5-dion_(den i exempel 2 erhållna pro- dukten). - ' 5 5 Exempel 4: _ I 7 _ Kalciumsaltet av d-6-flour-spiro-1ïmidazolidinf4,4'- tiokroman7¥2§5-dion (den i exempel 2 erhållna produkten) pre- parerades genom upplösning i vatten innehållande en ekviva- lent mängd i mol av kalciumhydroxid, varpå blandningen frys- torkades. Det motsvarande magnesiumsaltet preparerades Också pà detta sätt liksom alla de övriga salterna av alkaliska jordartsmetaller av icke endast denna speciella förening utan också av d-6'-fluor-spiro-[kronan-4,4'-imidazolidin7- 2',5'-dion (den i exempel 1 erhållna produkten).

Exempel §: _ .

En torr fast farmaceutisk beredning framställdes genom snmmnnblnndning av följande komponenter i de angivna vikt- mängderna: 45 55 40 . vsazsze-6 -vi 14 d-6-fluor-spiro-Åkroman-4,Ä^- . imiaazo11a1g7-2',5'-ai°n";..¿.... 50 viktae1ar_ -natriumcitrat ...;,..;«..;........;.. 25 " alginsyra t....;...-................. 40 " polyvinylpyrrolidon ....¿......;..... 10 " magnesiumstearat ...Ä...........,.... 5 " Sedan den torkade blandningen omsorgsfullt samman- - blandats pressades tabletter därav. Tabletterna hade så- dan storlek, att var och en innehöll 200 mg av den aktiva bestàndsdelen. Andra tabletter framställdes också på lik- 'nfinde sätt innehållande 25,'5O respektive 100 mg av den Å aktiva bestàndsdelen endast genom användning av lämplig mängd hydantoinförening i vart och ett av fallen.

Ezsmnsl¿â= e e En torr, fast farmaceutisk beredning framställdes genom sammanblandning av följande beståndsdelar i de an- givna mängdernaz. I ' I I d-6'-fluor-spiro-Åïmidazolidin-4,4'- tiokroma§7-2,5-dion @.Å.......... 50 viktdelar kalciumkarbonat ........;;........... 20 "" 0 polyetylenglykol (medelmolekyl- 0' vikt 4000)0.........;.......:....'ao r " _ Den torra, fasta blandningen omrördes omsorgsfullt så att man erhöll en pulverprodukt som är fullständigt-lik- formig i alla avseenden; Beredningen fylldes på mjuka elas- tiska och hårda gelatinkapslar med användning av tillräck- lig mängd i vart fall för erhållande av kapslar, som var- dera innehöll 250 mg av den aktiva beståndsdelen.

Exempel 2: 0 Följande spiro-hydantoinföreningar framställda på sätt som angives under rubrikerna Framställningsförfarande B och C respektive exemplen 4 och 2 provades med avseende på deras förmåga att ínhíbera aldosreduktasenzymets aktivitet, var- vid man tillämpade det förfarande, som beskrives av S. Hayman 's och medarbetare i Journal of Biological Chemistry, Vol. 240, p. 877 (1965) och modifierat av Kf Sestanj och medarbetare i den amerikanska patentskriften 3 821 583; I samtliga fall användes som substrat partiellt renat'aldosreduktasenzym er- hållet ur ögonlinser_från kalvar. De med varje förening er- hållna resultaten uttryckas här nedan som procent inhibitíon t QUAU..!-«- - "ïööííf Auw nu 451 0 vaosszs-6 av enzymaktiviteten med avseende på de olika konoentrationer, som provadee: Inhibition, % Förening 103m 1o-5m 1o-5M 10-714 dl-förening enligt fram- ' ställningsförfarande B _ 85 58 52 5 d-isomer enligt exempel 1 .10O 100 98 * 59 l-isomer enligt exempel 1 i se i 65 25 -4 dl-förening enligt fram- 1 ställningsförfarande C 81 77 66 58 d-isomer enligt exempel 2 -- 89 80 76 74 l-isomer enligt exempel 2 ' 87' 65 11 10 Exempel 8: _ Följande spiro-hydantoinföreningar framställda enligt framställningsförfarandena B och C respektive exemplen 1 och 2 provades med avseende på deras förmåga att reducera eller inhibera sorbitolackumulation i nervus ísciadicus hos streptosotociniserade råttor (d v se råttor med diabetes) medelst det förfarande, som väsentligen beskrives i den ame- rikanska patentskriften 5 821 587. I förevarande fall be- stämdes sorbitolackumuleringen i nervus isciadicus 27 timmar efter diabetesinduktionen. Föreningarna administrerades oralt i de angivna doserna 4, 8 och 24 timmar efter admini- strationen av streptosotocin. De på detta sätt erhållna re- sultaten är sammanställda här nedan i form av procent inhi- bition orsakad av testföreningen i jämförelse med det fall, där ingen förening administrerades (d v s _obehandlade för- söksdjur, för vilka sorbitolhalterna normalt stiger från ungefär 50-100 mM/g vävnad ända upp till 400 mM/g vävnad under testperioden om 27 timmar): vaoizqàe-Ãe Infiíbition; % Förening _ A 0125 245 590 'mg/kg dlëförening enligt fram- - ' ställningsiörfarande B -19 45 72 - - d-ísomer enligt exempel 1 47 78 -¶ - - ' - låísomer enligt exempel 1 - , 49 Qfl 6 22 äl=föreníng enligt fram- !- lfl ' ¶. . ställningsförfarande C e __- ' 45 _e 45 74 ¿ -,“ d-isomer enligt exempel 2 ' v- f S5, -I -' É - *n, QUAL1Iy$+ n

Claims (1)

1. 0 15 17 i i 7ÛÜ3526'6 Patentkrav Sätt att framställa högervridande isomerer av asymme- trisk spiro-hydantoin med formeln ' o i vilken formeln Y representerar syre eller svavel, k ä n n e t e c k n a t av att man (1l bringar den mot- svarande racemiska eller 1d-spiro-hydantoinen med samma strukturformel i kontakt med minst en ekvimolar mängd av en optisk aktiv alkaloid i ett_gentemot reakti°nefl inert, organiskt lösningsmedel, (2) separerar det resulterade paret av diastereoisomera salter genom fraktionerad kristal4 _1isation och (3) omvandlar det mindre lösliga saltet till den 'motsvarande optiskt aktiva spiro-hydantoinföreningen genom sur hydrolys. í/J* i/ífófiš flUvNv-lwv,