SA96170384B1 - وطرق تحضيرها واستخداماتها العلاجية (rsv) الاجسام المضادة المعادلة البشرية احادية النسيلة ذات الالفة العالية المختصة ببروتين - ف للفيروس المخلوي التنفسي - Google Patents

وطرق تحضيرها واستخداماتها العلاجية (rsv) الاجسام المضادة المعادلة البشرية احادية النسيلة ذات الالفة العالية المختصة ببروتين - ف للفيروس المخلوي التنفسي Download PDF

Info

Publication number
SA96170384B1
SA96170384B1 SA96170384A SA96170384A SA96170384B1 SA 96170384 B1 SA96170384 B1 SA 96170384B1 SA 96170384 A SA96170384 A SA 96170384A SA 96170384 A SA96170384 A SA 96170384A SA 96170384 B1 SA96170384 B1 SA 96170384B1
Authority
SA
Saudi Arabia
Prior art keywords
rsv
human
ser
virus
val
Prior art date
Application number
SA96170384A
Other languages
English (en)
Inventor
شيريل جين هيرد
ادوارد اي والش
بيتر برامز
رولاند انطوني نيومان
سليمى سالم شامات
لي - زين بان
Original Assignee
ايدك فارماسوتيكالز كوربوريشن
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ايدك فارماسوتيكالز كوربوريشن filed Critical ايدك فارماسوتيكالز كوربوريشن
Publication of SA96170384B1 publication Critical patent/SA96170384B1/ar

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/42—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum viral
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
    • C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
    • C07K16/1027—Paramyxoviridae, e.g. respiratory syncytial virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18511—Pneumovirus, e.g. human respiratory syncytial virus
    • C12N2760/18522—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2799/00—Uses of viruses
    • C12N2799/02—Uses of viruses as vector
    • C12N2799/021—Uses of viruses as vector for the expression of a heterologous nucleic acid
    • C12N2799/028—Uses of viruses as vector for the expression of a heterologous nucleic acid where the vector is derived from a herpesvirus

Abstract

الملخص: يتعلق الاختراع الراهن بطريقة فعالة بدرجة كبيرة لتوليد أجسام مضادة بشرية human antibodies وبصفة خاصة تلك المختصة ببروتين اندماج fusion protein الفيروس المخلوي التنفسي RSV) respiratory syncytial virus) حيث تتضمن برمجة خلايا طحال بشرية human spleen cells في أنبوب الاختبار in vitro وتعزيزها بمولد مضاد antigen في فئران مصابة بنقص المناعة المركب الشديد Severe Combined Immune SCID mice) Deficient Mice). وتزود هذه الطريقة عيارات titers عالية جدا من الأجسام المضادة البشرية حيث تكون في الغالب من النمط الإسوي IgG isotype IgG (النمط الإسوي لغلوبلين المناعي Immunoglobuline G isotype G) حيث تحتوي على أجسام مضادة عالية التخصص وعالية الألفة لمولدات المضادات المرغوبة. وتعتبر هذه الطريقة ملائمة جدا لتوليد أجسام مضادة بشرية أحادية النسيلة لاستخدامها علاجيا وتشخيصيا بالإضافة إلى استخلاص خلايا بشرية human cells لتوليد مكتبات توافقية لجينات الأجسام المضادة البشريةcombinatorial human antibody gene libraries. ويتعلق الاختراع الراهن كذلك بجسمين مضادين بشريين أحاديي النسيلة، وهما آر إف-١ 1-RF و آر إف-٢ 2-RF اللذين لهما ألفة affinity للبروتين-ف F-protein للفيروس المخلوي التنفسي (RSV) تقل عن أو تساوي 2×10-9 جزيئي molar بالإضافة الى سياقات الأحماض الأمينية DNAو (الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين amino acid (deoxyribonucleic acid and DNA sequences المقابلة لكل منهما.وتستخدم هذه الأجسام المضادة علاجيا therapeutically ووقائيا prophylactically لمعالجة أو منع الإصابة بعدوى الفيروس المخلوي التنفسي RSV infection، بالإضافة إلى تشخيص الإصابة بالفيروس المخلوي التنفسي (RSV) في السوائل المحللة analytes.،

Description

v human monoclonal ‏البشرية أحادية النسيلة‎ antibodies specific ‏الأجسام المضادة المعادلة‎ ‏للفيروس المخلوي‎ F-protein ‏المختصة ببروتين-ف‎ high affinity ‏ذات الألفة العالية‎ ‏وطرق تحضيرها واستخداماتها العلاجية‎ (RSV) ‏التنفسي‎ ‏الوصف الكامل‎ ‏خلفية الاختراع‎ ‏هو نظير الفيروس‎ (RSV) respiratiry syncytial virus ‏إن الفيروس المخلوي التنفسي‎
المخاطي ‎Parmixovirus‏ من جنس الفيروسات الرثوية ‎Pneumovirus genus‏ والذي يصيب ‎sale‏
المجاري التتفسية العليا والسفلى ‎upper and lower respiratory tract‏ وهو شديد العدوى لدرجة ‎٠‏ أن نسبة عالية من الأطفال الذين بلغوا سن الثانية يصابوا به. وعلاوة على ذلك؛ عند بلوغ
سن الرابعة يكتسب كل البشر فعلياً مناعة ضد الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏
وعادة؛ تكون الإصابة بعدوى الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ من النوع الخفيف؛
وتبقى متمركزة في المجاري التنفسية العليا وتسبب أعراضاً تشبه أعراض الرشح العادي
‎common cold‏ الذي لا يحتاج الى معالجة مكثفة ‎.extensive treatment‏ إلا أنه في بعض ‎٠‏ الأشخاص ؛ ‎Jia‏ المكبوتين مناعياً ‎immunosuppressed‏ كالرضع ‎infants‏ وكبار السن ‎elderly‏
‎persons‏ أو الأشخاص المصابين بأمراض القلب والرئة ‎«cardiopulmonary diseases‏ قد يخترق
‏لفيروس المجاري التنفسية السفلى مما يلزم إدخال المريض إلى المستشفى ‎hospitalize‏
‏ومساعدته تنفسياً. وفي بعض هذه الحالات؛ قد تسبب الإصابة بعدوى الفيروس المخلوي
‏التنتفسي ‎Laila damage 1) pa (RSV)‏ في الرئة ‎lung‏ أو حتى قد تشكل خطراً على الحياة. ‎١‏ ويؤدي الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ في الولايات المتحدة الأمريكية وحدهاء إلى إدخال
‏حالة للمستشفى كل ‎ole‏ ويؤدي إلى حوالي ‎500٠‏ حالة وفاة.
‏ويظهر الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ في مجموعتين فرعيتين لسلالة رئيسية
‎«major strain subgroaps‏ 0( و (ب) ؛ بالإعتماد بصفة أساسية على الاختلافات المصلية
‎.G «attachment glycoprotein ‏المرتبطة ببروتين الارتباط السكري‎ serological differences «major surface glycoprotein ‏وقد يختلف البروتين السكري السطحي الرئيسي‎ vy.
‏أي؛ بروتين 6 ‎G protein‏ وزنه 90 كيلودالتون ‎(kd) kilodalton‏ ؛ بنسبة 786 على مستوى
¢ الحمض الأميني ‎amino acid‏ بين نواتج العزل ‎isolates‏ انظر ما ‎ela‏ عن جونسون ‎Johnson‏ ‏ومعاونيه في مجلة ‎Proc.
Natl Acad.
Sei.‏ المجلد ‎(Af‏ صفحة 0179-27075؛ سنة 457 ١م._وعلى‏ نحو مغايرء يحافظ على هدف علاجي محتمل؛ وهو بروتين اندماج-ف ‎fusion (F) protein‏ وزنه ‎Ve‏ كيلودالتون؛ بدرجة كبيرة؛ أي؛ حوالي 7489 على م مستوى الحمض الأميني ‎amino acid‏ انظر ما جاء عن جونسون ‎Johnson‏ ومعاونيه في مجلة ‎oJ.
Gen.
Virol‏ المجلد 19( صفحة 7178-7177 سنة 144 ‎a)‏ وما جاء عن جونسون 0 ومعاونيه في مجلة ‎Gen.
Virol ple‏ .ل المجلد ‎١٠١‏ صفحة 111-7117 سنة ‎AAV‏ لم وما جاء عن بيه. إل. كولينز ‎PL.
Collins‏ إصدار شركة بلنوم برس ‎plenum‏ ‏عم مدينة نيويورك؛ صفحة ‎1537-1٠07‏ سنة 151 )0 وعلاوة على ذلك؛ من المعروف > أن الأجسام المضادة المثارة ضد البروتين-ف لنوع معين تتفاعل تبادلياً :088-888 مع النوع الأخر. ويكون البروتين-ف عبارة عن ديمر مغاير ‎cheterodimer‏ متولد من مصدر خطي ‎precursor‏ 110687 ويتكون من أجزاء مرتبطة ثنائية الكبريت ‎disulfide-linked fragments‏ وزنها و 7 كيلو دالتون على الترتيب انظر ما ‎ela‏ عن والش ‎Walsh‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎Talal 1. Gen.
Virol Vo‏ صفحة ‎4159-4١1٠‏ سنة ‎La) AAG‏ ويرتبط تثبيط تشكل المخلى ‎syncytium‏ عن طريق الأجسام المضادة متعددة النسيلة ‎polyclonal antibodies‏ بتفاعل مهم مع الجزء الذي وزنه ‎YY‏ كيلو دالتون. وكما ‎«SO‏ تكون عادة الإصابة بعدوى الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ خفيفة؛ وعند بعض الأشخاص قد تشكل خطرآً على الحياة. وفي الوقت الحالي؛ تعالج الإصابة الشديدة 7 بعدوى الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ باعطاء العامل المضاد للفيروسات ‎antiviral agent‏ ريبافيرين ‎.Ribavirin‏ إلا ‎«ail‏ وبينما يظهر الريبافيرين ‎Ribavirin‏ بعض الفعالية في التحكم بالإصابة بعدوى الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ فإنه لايفضل استخدامه لعدة أسباب. فعلى سبيل المثال؛ إن الريبافيرين مرتفع السعر ولا يمكن إعطائه إلا في المستشفيات ‎hospitals‏ ولا تعالج معالجات أخرى معروفة للفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ إلا أعراض ‎symptoms‏ ‎vo‏ الإصابة_بعدوى الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ وتشمل استخدام موسعات _قصيبات موضوعة في حلالة هوائية ‎aerosolized bronchodilators‏ في المرضى المصابين بالتهاب م
القصيبات ‎bronchiolitis‏ والعلاج بالستيرويدات القشرية ‎corticosteroids‏ في المرضى المصابين بالتهاب القصيبات والتهاب الرئة ‎pneumonia‏ الذي يسببه الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ ‏وحتى الآن؛ أخفقت اللقاحات ‎vaccines‏ المراد منها تعزيز أجسام مضادة وقائية ضد الفيروس ‎antiviral protective antibodies‏ بشكل كبير. فعلى سبيل المثال» ‎induced Coa‏ لقاح أساسه فورمالين «نل8:©-الفيروس المخلوي التنفسي ‎LF a (RSV)‏ اختبر قبل ‎Yo‏ سنة ‎(Ly ji‏ الأجسام المضادة التي تنقصها فعالية تثبيط الالتحام ‎fusion inhibiting activity‏ انظر ما ‎ela‏ عن ميرفي ‎Murphy‏ ومعاونيه» في مجلة ‎Microbiology‏ لوعندنا؛ المجلد ‎V1‏ صصفحة ‎(Vodv-Yodo‏ سنة ‎a) TAA‏ وفي بعض الأحيان زاد من حدة المرض. ويمكن أن يعزى ذلك بشكل محتمل الى عدم قدرة الفيرروس ‎Jal fall‏ بالفورمالين ‎formalin inactivated virus‏ ‎٠‏ على حث الأجسام المضادة الوقائية. وبينما قيست عيارات ‎titers‏ عالية للأجسام المضادة في متلقي اللقاح ‎evaceine recipients‏ إلا أن العيارات الوقائية الخاصة كانت أقل منها في المجموعة الضابطة ‎control population‏ وقد يكون السبب في ذلك في أن الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ المشبتط بالفورمالين ‎formalin‏ لا يظهر مغيرات الخاصية الامتثالية ‎conformational‏ ‎epitopes‏ الضرورية لإثارة الأجسام المضادة الوقائية. ‎Vo‏ وبينما لا يوجد لقاح معروف فعال للفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ حتى الآن؛ إلا أنه توجد بعض الأدلة السريرية على أن العلاج بالأجسام المضادة يمكن أن يؤدي إلى الوقاية من الإصابة بعدوى الفيروس المخلوي التتفسي ‎(RSV)‏ في الأفراد العرضة للإصابة به ‎individuals‏ 0516م056؛ وحتى قد يكون من الواضح وجود إصابة بعدوى الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ فعلى سبيل المثال؛ فقد ذكر أن حديثي الولادة ‎newborn‏ يكونون أقل عرضة © الحدوث ‎Ala)‏ بالتهاب القصيبات الحاد ‎severe‏ لديهم؛ ويفترض بأن هذا يعزى إلى وجود الأجسام المضادة الوقائية المستمدة من الأم؛ انظر ما جاء عن أوجيلفي ‎Ogilvie‏ في مجلة ‎Med Virol‏ .ل المجلد ا صفحة 771-733 سنة 481 ‎LV‏ كذلك؛ بُظهر الاطفال الذين لديهم مناعة ضد الإصابة بالعدوى مرة أخرى عيارات أعلى إحصائياً لمضاد البروتين-ف من أولئك الذين أصيبوا بالعدوى مرة أخرى. وعلاوة على ذلك؛ يقلل الغلوبلين المناعي داخل ‎Yo‏ الوريد ‎(VIG) intravenous immune globulin‏ المحضر من المتبرعين ‎donors‏ ذوي المناعة العالية ضد الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ من سيلان الفيروس المخلوي التنفسي من الأنف
.
Hemming ‏انظر ما جاء عن همنغ‎ oxygenation ‏ويحسّن من الأكسجة‎ nasal RSV shedding “YAAY ‏صفحة‎ | 7١ ‏.نتصش _المجلد‎ Viral Agents and Chemotherapy ‏ومعاونيه» في مجلة‎ ‏كذلك؛ اقترحت الدراسات الحديثة أنه يمكن مقاومة الفيروس ومنع تلف‎ . AVAAY ‏ها سنة‎
RSV-enriched ‏الرئة عن طريق إعطاء غلوبلين مناعي غني بالفيروس المخلوي التنفسي‎
The New ‏ومعاونيه»؛ في مجلة‎ Groothuis ‏عن جروثيوس‎ ela ‏انظر ما‎ immune globulin °
AS ‏المجلد 749؛ صفحة 574١-.157؛ سنة 1997م؛ وما جاء عن‎ (England J. Med. -١599/7 ‏المجلد 7749 صفحة‎ (The New England J. Med. ‏في مجلة‎ «K. McIntosh ‏ماكنتوش‎ ‎Antiviral ‏.ل في مجلة‎ R. Groothuis ‏جروئيوس‎ ٠ ‏سنة 1197م؛ وما جاء عن جيه. أآر‎ Yovy ‏ومعاونيه؛ في‎ Siber ‏عن سايبر‎ ela ‏صفحة ١-١٠؛ سنة 1194م؛ وما‎ YY ‏المجلد‎ Research ‏صفحة 148 7١-/اآ1ء سنة 94 ام وما جاء‎ N19 ‏المجلد‎ oJ. Infectious Diseases ‏مجلة‎ ye —£01 ‏صفحة‎ V0 ‏المجلد‎ (J Infectious Diseases Alas ‏ومعاونيه؛ في‎ Siber ‏عن سايبر‎ . a) 97 ‏سنة‎ (€Y ‏أن العلاج‎ animal studies ‏وبالمثل فقد اقترحت بعض الدراسات على الحيوانات‎ ‏يمكن‎ virus neutralizing antibodies ‏بالأجسام المضادة باستخدام أجسام مضادة معادلة للفيروس‎ ‏أو حتى قد يشفي من الإصابة بعدوى‎ (RSV) ‏أن يوفر وقاية ضد الفيروس المخلوي التنفسي‎ ve ‏الموجودة أصلا. فعلى سبيل المثال؛. ذكر بأن الأجسام‎ (RSV) ‏الفيروس المخلوي التنفسي‎ ‏المحضرة في أنبوب الاختبار‎ mouse ‏المضادة أحادية التسيلة المعادلة المأخوذة من فأر‎ ‏تقي الفئران من الإصابة بالعدوى وتشفي من الإصابة بعدوى الفيروس المخلوي‎ in vitro ‏ومعاونيه؛ في مجلة‎ Taylor ‏الموجودة فعلياً انظر ما جاء عن تايلور‎ (RSV) ‏التنتفسي‎ ‎stott ‏وما جاء عن ستوت‎ aV AL ‏صفحة 7١١147-1؛ سنة‎ oY ‏المجلد‎ «J. Immunology " ‏إصدار شركة‎ (Immune Responses, Virus Infections and Disease ‏ومعاونيه»؛ في كتاب بعنوان‎ ‏كذلك؛ فقد‎ .م١‎ AA ‏سنة‎ ٠١4-85 ‏صفحة‎ (ad Aaa (LR. Press ‏أي. آر. إل. برس؛‎ (RSV) ‏أظهرت الأجسام المضادة أحادية النسيلة ضد البروتين-ف للفيروس المخلوي التنفسي‎ ‏في أنبوب الاختبار وفي‎ (RSV) ‏الفيروس المخلوي التنفسي‎ models ‏فعالية عالية في نماذج‎ «Bio/Technology ‏ومعاونيه؛ في مجلة‎ Tempest ‏عن تمبست‎ ela ‏انظر ما‎ in vivo ‏الجسم الحي‎ Yo ‏ومعاونيه؛ في مجلة‎ Crowe ‏المجلد 9؛ صفحة 71-7717؛ سنة 15951م؛ وما جاء عن كرو‎
‎(Proc.
Natl. 56‏ المجلد 91؛ صفحة ‎VFA VFA‏ سنة 1994م وما جاء عن والش ‎Walsh‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎and Immunity‏ «دمنء1؛ المجلد 47 صفحة ‎VOA=YOT‏ سنة 64 لم؛ وما جاء عن بارباس ‎Barbas‏ ومعاونيه» في مجلة ‎Proc.
Natl.
Acad.
Sci.‏ المجلد ‎(AS‏ صفحة ‎ca) 44Y Gi) oY TA=Y 0) TE‏ وما ‎els‏ عن والش ‎Walsh‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎Gen.
Virol. °‏ .2 المجلد ‎(TY‏ صفحة 2017-5.5؛ سنة ‎a) AAT‏ وقد ذكر من خلال الدراسات على الحيوانات أن تراكيز قليلة من الأجسام المضادة تتراوح من ‎VeormoYe‏ ‏ميكرو غرام/كيلو غرام ‎(pm/kg) microgram/kilogram‏ من وزن الجسم تكون قادرة على الشفاء بشكل ‎dale‏ انظر ما ‎ela‏ عن كرو ‎Crowe‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎Acad.
Sci.‏ .08.1180 المجلد )9 صفحة ‎FAS) FAT‏ سنة 1594م. وعلاوة على ذلك وصف بأن هذه الأجسام - المضادة أحادية النسيلة تعادل كل من السلالتين (أ) و(ب)؛ بما في ذلك السلالات المخبرية ‎laboratory strains‏ وسلالات النمط الشائع ‎wildtype strains‏ وأعطيت هذه الأجسام المضادة عن طريق الحقن انظر ما ‎ela‏ عن جروثيوس ‎Groothuis‏ ومعاونيه؛ في ‎The New alsa‏ ‎(England J.
Med.‏ المجلد 779 ‎dada‏ 574١-157؛‏ سنة ‎a) AAT‏ وما جاء عن سايبر ‎Siber‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎Infectious Diseases‏ .ل المجلد 119 صفحة ‎1777-1١١4‏ سنة 54 لم؛ أو عن طريق حلالة هوائية ‎aerosol‏ انظر ما ‎ela‏ عن كرو ‎Crowe‏ ومعاونيه؛ في
‏مجلة ‎Proc.
Natl.
Acad.
Sci.‏ المجلد )4( صفحة 1755-1785 سنة 44 الم. وقد وصف مسبقاً نوعان مختلفان من أجسام مضادة أحادية النسيلة ‎ade‏ محتملة ضد البروتين-ف للفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ في النشرات العلمية؛ في مقالة بعنوان ‎humanized murine antibodies‏ باسم تمبست ‎Tempest‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎«Biol.
Technology‏ © - المجلد 4 صفحة 771-715؛ سنة ‎VAY‏ أو في النشرة العلمية بعنوان الأجسام المضادة البشرية الحقيقية ‎true human antibodies (fab fragments)‏ باسم ‎barbaslIl III sb JL‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎Proc.
Natl.
Acad.
Sci.‏ المجلد ‎AY‏ صفحة ‎٠١٠18571164‏ سنة 7 ام. وتم توليد الأجسام المضادة الفأرية المعدلة بصورة بشرية ‎humanized murine‏ ‎antibodies‏ عن طريق تطعيم منطقة تحديد التمامية ‎Complementary Determining Region‏ ‎(CDR grafting) grafting Yo‏ لجسم مضاد ‎sl‏ ضد البروتين-ف معادل متقاطع السلالة ‎cross straim neutralizing murine anti-F-protein antibody‏ على جزء 70 بشري جنيس ‎generic‏
A
‏وقد‎ variable part ‏للجزء المتغير‎ structural areas ‏بالإضافة إلى مناطق بنيوية‎ chuman Fe combinatorial library technology ‏البشرية بواسطة تقنية مكتبة توافقية‎ Fab el jal ‏أنتجت‎ ‏مأخوذة من متبرع مصاب‎ human bone marrow cells ‏باستخدام خلايا نخاع عظم بشرية‎
HIV ) Humane Immunedefeciency Virus positive donor ‏بفيروس نقص المناعة المكتسبة‎ ‏وبلغت العيارات العلاجية في الجسم‎ ٠. (immunocompromised ‏(إضعيف المناعة‎ (positive donor ° 0 ‏المعدلة بصورة بشرية والبشرية‎ (RSV) ‏الحي للأجسام المضادة للفيروس المخلوي التنفسي‎ ‏على الترتيب. غير‎ body weight ‏من وزن الجسم‎ (mg/kg) milligram/kilogram ‏ملغم/كغم‎ ١ ‏و‎ ‏يذكر بأنه تم اختبار الأجسام المضادة المعدلة بصورة بشرية في معايرة تثبيط المخلى؛‎ ead ‏لتحديد فعاليتها‎ (RSV) ‏البشرية ضد الفيروس المخلوي التنفسي‎ Fab ‏بينما تمت معايرة أجزاء‎ ‏المعادلة للفيروس. ولذلك؛ لا يمكن مقارنة النتائج المذكورة للأجسام المضادة المعدلة بصورة‎ - ٠ ‏بشرية والبشرية مباشرة.‎ ‏المولدة بواسطة تقنية المكتبة التوافقية تكون فعالة في‎ Fab ‏وقد وصف أن أجزاء‎ ‏للجزيئات‎ Gas ‏الاستخدام في حلالة هوائية. ويمكن أن يكون ذلك بسبب الحجم الصغير‎ ‏وتعتبر هذه النتائج مشجعة بدرجة كبيرة لأن المجموعة الرئيسية المستهدفة للقاح‎ molecules ‏هي الأطفال. ولذلك؛ فإن الأسلوب المفضل بشكل خاص‎ (RSV) ‏الفيروس المخلوي التنفسي‎ vo ‏للإعطاء هو عن طريق حلالة هوائية.‎ ‏غير أنه؛ على الرغم مما سبق نشره في التقارير عن الأجسام المعدلة بصورة بشرية‎ ‏المختصة بالفيروس المخلوي التنفسي (857)؛ إلا أنه ثمة حاجة ماسة لاجسام‎ Fab ‏وأجزاء‎ ‏وبصفة‎ AT ine ‏محسّنة لها امكانية علاجية‎ (RSV) ‏مضادة ضد الفيروس المخلوي التنفسي‎ ‏التي لها ألفة وخصوصية‎ (RSV) ‏خاصة الأجسام المضادة ضد الفيروس المخلوي التنفسي‎ vy. ‏والتي تعادل وتمنع الإصابة بعدوى‎ (RSV) ‏عالية نحو البروتين-ف للفيروس المخلوي التنفسي‎ ‏بصورة فعالة.‎ (RSV) ‏المخلوي التنفسي‎ (ag pail) (i) ‏ويمكن تقسيم العلاج بالأجسام المضادة فرعياً الى فعاليتين مختلفتين بشكل أساسي:‎ ‏باستخدام أجسام مضادة سليمة ]10180 غير‎ passive immunotherapy ‏العلاج المناعي السلبي‎ active immunotherapy ‏العلاج المتناعي الفعال‎ (ii) 5 labeled ‏أو موسومة‎ non-labeled ‏موسومة‎ Yo
باستخدام مضادات أنماط ذاتية ‎anti-idiotypes‏ لإعادة تكوين شبكة التوازن ‎network balance‏ في المناعة الذاتية ‎.autoimmunity‏ ‏وفي العلاج المناعي السلبي؛ تعطى الأجسام المضادة المكشوفة ‎naked antibodies‏
لمعادلة مولد مضاد ‎antigen‏ أو لتوجيه الوظائف المؤثرة ‎effector functions‏ نحو مولدات
2 مضادات مستهدفة مرتبطة بالغشاء ‎targeted membrane associated antigens‏ وقد تكون المعادلة هي معادلة للمفوكين ‎<ymphokine‏ هرمون ‎hormone‏ أو سم تحساسي ‎«anaphylatoxin‏ أي؛ ‎.CSa‏ وتشمل الوظائف المؤثرة تثبيت المتممة ‎complement fixation‏ تنشيط وتجديد الخلايا البلعمية الكبيرة ‎macrophages‏ وسمية ‎WAN‏ التي تتوسطها الخلايا المعتمدة على الأجسام المضادة ‎.(ADCC) antibody dependent cell mediated cytotoxicity‏ وقد استخدمت الأجسام
- المضادة المكشوفة لعلاج اللوكيميا ‎leukemia‏ انظر ما جاء عن ريتز ‎Ritz‏ ومعاونيه في مجلة : ‎«SF.
BLOOD‏ المجلد ‎AC‏ صفحة ١4١-197؛‏ سنة ‎ca) 9A)‏ واستخدمت الأجسام المضادة ضد 602 لعلاج أورام ‎LAY‏ البدائية العصبية ‎neuroblastomas‏ انظر ما ‎els‏ عن شولز ‎Schulz‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎Cancer Res.‏ المجلد ££( صفحة 0914؛ سنة 9484 ‎cp)‏ وما جاء عن ايريه ‎Irie‏ ومعاونيه» في ‎Alia‏ بعنوان ‎melanoma‏ في مجلة ‎Proc.
Natl.
Acad.
Sci.‏ المجلد
‎AY 6‏ صفحة ‎ATE‏ سنة 1985م. كذلك؛ استخدمت أجسام مضادة ضد لغلوبلين غاما المناعي ‎Jala‏ الوريد ‎intravenous immune gamma globulin‏ (1617) بعيارات عالية من مضادات الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ في محاولات تجريبية لعلاج ضيق التنفس ‎respiratory distress‏ الذي تسببه الإصابة بعدوى الفيروس المخلوي التنفسي ‎٠. (RSV)‏ انظر ما جاء عن همنغ ‎Hemming‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎¢Anti.
Viral Agents and Chemotherapy‏ _المجلد
‎oF) 62‏ صفحة ‎OV AAT=VAAY‏ سنة ‎ca) AY‏ وما ‎sla‏ عن جروثيوس ‎Groothuis‏ ومعاونيه» في مجلة ‎<The New England J.
Med.‏ المجلد ‎«YY‏ صفحة ‎VOY —10Y§‏ سنة ‎ep) AAT‏ وما ‎ela‏ عن كيه. ماكنتوش ‎McIntosh‏ .16 في مجلة ‎(The New England J.
Med.‏ المجلد 795 صفحة 0077-1597 سنة 147 ‎a)‏ وما جاء عن جيه. آر. ‎«J.
R.
Groothuis (sds sa‏ في مجلة ‎(Antiviral Research‏ المجلد ‎(YY‏ صفحة ‎٠١-١‏ سنة 994 ١م؛‏ وما جاء عن سايبر ‎Siber‏
‎vo‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎Infections Diseases‏ .ل المجلد 1695 صفحة 177-1718 سنة 54 لم.
٠١
وتعتمد الفعالية العلاجية للأجسام المضادة أحادية النسيلة على عوامل تشمل؛ ‎Se‏ ‏المقدارء الفاعلية؛ الخصوصية وصنف ‎class‏ الجسم المضاد المرتبط بمولد المضاد. كذلك؛
يعتبر العمر النصفي ‎half life‏ للجسم المضاد في الجسم الحي عامل علاجي مهم. ويتمثل عامل آخر كذلك يمكن أن يؤثر بشكل ملحوظ على الإمكانية العلاجية للأجسام 8 المضادة أصل أنواعها ‎(Ula species of origin‏ يكون أصل الأجسام المضادة أحادية النسيلة المستخدمة في العلاج المناعي من القوارض حصرياً انظر ما جاء عن شولز ‎Schulz.‏ ‏ومعاونيه؛ في مجلة ‎(Cancer Res.‏ المجلد ‎(ff‏ صفحة 0414؛ سنة 9854١م؛‏ وما جاء عن ميلر ‎Miller‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎Blood‏ المجلد ‎0A‏ صفحة ‎(AT=YA‏ سنة ‎ca) AA)‏ وما جاء عن لانزافيشيا ‎Lanzavecchia‏ ومعاونيه» في مجلة ‎Med‏ .م20 ‎J.‏ المجلد ‎VV‏ صفحة 5 ؟- ‎(YoY ٠١‏ سنة ‎ca) 994A‏ وما جاء عن سيكورا ‎sikora‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎«Br.
Med.
Bull‏ المجلد ‎٠‏ صفحة ‎(YE‏ سنة 9484 ‎pV‏ وما ‎ela‏ عن تسوجيساكي ‎Tsujisaki‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎(Cancer Research‏ المجلد )0 صفحة ‎(Y0499‏ سنة )149 ويعود سبب ذلك بدرجة كبيرة لاستخدام ‎Aled clad‏ بدرجة كبيرة ومعروفة ‎fas‏ لتوليد أجسام مضادة أحادية النسيلة لقوارض انظر ما ‎ela‏ عن كوهلر ‎kohler‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎(Nature‏ المجلد ‎(YOU‏ صفحة ‎Vo‏ 58؛ سنة 99/5 ١م؛‏ وما جاء عن جالفر ‎Galfre‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎(Nature‏ المجلد 7717 صفحة 000( سنة ‎La) AVY‏ ومع أن للأجسام المضادة أحادية النسيلة المأخوذة من القوارض فعالية علاجية؛ إلا أنه قد توجد قيود ومساوئ بالنسبة للأجسام المضادة البشرية. فعلى سبيل المثال» تحث غالبا ‎anil‏ دون الأمثل ‎suboptimal stimulation‏ للوظائف المؤثرة في العائل ‎host‏ ‎(ADCC «CDCC Ji)‏ الخ). كذلك؛ قد تحث الأجسام المضادة المأخوذة من الفئران استجابات ‎١‏ متمثلة في أجسام مضادة بشرية لمولدات مضادات فأرية ‎human anti-murine antibody‏ ‎(HAMA)‏ انظر ما ‎ela‏ عن شروف ‎schroff‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎«Cancer Res.‏ المجلد £0« ‎(AAO—AVAisiia‏ سنة ‎cp) 3A0‏ وما جاء عن شاولر ‎Shawler‏ ومعاونيه» في مجلة ‎J Immunol‏ المجلد ‎VoYo— YoY. dasa ١٠5‏ وقد يؤدي هذا الى تقصير العمر النصفي للجسم المضاد انظر ما ‎ela‏ عن ديلمان ‎Dillman‏ ومعاونيه» في مجلة ‎(Mod.‏ المجلد 0 صفحة ‎AE-VY ve‏ سنة ‎ca) AAT‏ وما ‎sla‏ عن ميلر ‎Miller‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎Blood‏ المجلد ‎VY‏
١ ‏وفي بعض الأحيان يمكن أن يسبب تاثيرات جانبية سامة‎ AAT ‏سنة‎ (490-9AA ‏صفحة‎ ‎.anaphylaxis ‏والأعوار‎ serum sickness ‏مثل مرض المصل‎ toxic side effects
Lelie ‏مثل؛ الأفراد المكبوتين‎ csubjects ‏وفي بعض الأشخاص الخاضعين للاختبار‎ heavy chemical ‏المرضى المعرضين للعلاج الكيميائي والإشعاعي الكثيف‎ (Jie) ‏بشكل كبير‎ ‏ومعاونيه؛ في مجلة‎ Irie ‏انظر ما جاء عن إيريه‎ (cancer ‏لعلاج السرطان‎ or radiation therapy ° ‏جاء عن ديلمان‎ Loy op) AAT ‏سنة‎ (ATE ‏صفحة‎ (AY ‏المجلد‎ Proc. Natl. Acad. Sci. ‏جاء عن‎ Los) AAT ‏سنة‎ (AE-VY ‏المجلد 0 صفحة‎ (Mod. ‏ومعاونيه؛ في مجلة‎ Dillman ‏صفحة‎ AValadl (Proc. Natl. Acad. Sci. ‏ومعاونيه؛ في مجلة‎ Koprowski ‏كوبراوسكي‎ ‏سنة 1454 ١م؛ ويؤدي استخدام الأجسام المضادة أحادية النسيلة المأخوذة من فار‎ 1194-7 ‏محدودة. وفي المقابل» في المرضى اللذين‎ negative side effects ‏إلى أعراض جانبية سلبية‎ ٠ ‏قد‎ hyperactive immune system ‏لديهم جهاز مناعة عادي أو جهاز مناعة فعال بشكل مقرط‎ ‏الأجسام المضادة المأخوذة من فأر فعالية محدودة على الأقل بالنسبة لبعض الحالات‎ ells .disease canditions ‏المرضية‎ ‎lb ‏وفي محاولة لتجنب التحديدات على الأجسام المضادة أحادية النسيلة المأخوذة من‎ (deoxyribonucleic acid ‏(حمض نووي ريبوزي منقوص الأكسجين‎ DNA ‏استخدمت ثتقنيات‎ Vo chimeric antibodies ‏لإنتاج أجسام مضادة خيمرية‎ recombinant DNA technologies ‏المأشوب‎ ‏المجلد‎ Proc. Natl. Acad. Sci. ‏ومعاونيه؛ في مجلة‎ Morrison ‏انظر ما جاء عن موريسون‎ ‏وما جاء عن بوليان 300118006 ومعاونيه؛ في مجلة‎ ؛م١‎ AE ‏سنة‎ ١9-710 ‏صفحة‎ A) ‏سنة 1484 ١م؛ والأجسام المضادة المعدلة بصورة‎ (VETTE ‏المجلد 717 صفحة‎ Nature ‏ومعاونيه؛ في مجلة‎ Riechmann ‏عن ريتشمان‎ ela ‏انظر ما‎ "CDR ‏بشرية عن طريق "تطعيم‎ vo ‏1854م والأجسام المضادة "الخفية"‎ Al 77-777 ‏_المجلد 777 صفحة‎ Nature ‏خاصة‎ surface residues ‏عن طريق الاستعاضة عن شقات سطحية‎ "veneered" antibodies .antigenicity ‏أخرى لتخفيف أو إزالة خاصية توليد المضاد‎ amino acids ‏بأحماض أمينية‎ ‏غير أنه؛ وبالرغم من أنه استخدمت أجسام مضادة من هذا القبيل بنجاح علاجياً انظر‎
VA) ‏صفحة‎ (Vo ‏المجلد‎ oJ. Immunol. Meth ‏ومعاونيه؛ في مجلة‎ Gillis ‏ما جاء عن جيلز‎ Yo ‏إلا أنها أثبتت أن إنتاجها بطيء. ويعزى ذلك إلى أن فهم متطلبات التمييز‎ ؛م١589‎ du ‏م‎
١ ‏والألفة المثلى للمولد المضاد لم تتحقق عل نحو جيد بعد. كذلك؛ غالبا ما تتفاعل مناطق هيكلية‎ ‏بتأثير سلبي على‎ sterically ‏ومناطق تحديد التمامية الفأرية تجسمياً‎ human framework ‏بشرية‎ ‏فعالية الجسم المضاد. وعلاوة على ذلك؛ تحث كذلك أجسام مضادة من هذا القبيل استجابات‎ ‏شديدة في المرضى.‎ HAMA ‏وتظهر الأجسام المضادة البشرية ميزات كبيرة بالمقارنة مع نظيراتها المأخوذة من‎ : ‏وقد تؤدي أجسام‎ HAMA ‏الفثران؛ فهي تحث الوظائف المؤثرة المثلى؛ ولا تحث استجابات‎ ‏مضادة في عائل مختصة بمولد مضاد إلى تمييز مغيرات الخاصية ذات الأهمية العلاجية التي‎ xenogeneic immune system ‏ليتم تميزها من قبل جهاز مناعي غيري‎ Tas ‏يمكن أن تكون دقيقة‎
Monoclonal Antibodies in" ‏ومعاونيه؛ في كتاب بعنوان‎ Lennox ‏ما جاء عن لينوكس‎ ha) .م١‎ AAY ‏مدينة لندن؛ سنة‎ (Academic press ‏إصدار شركة أكاديميك برس‎ Clinical Medicine ٠ ‏وبينما تكون الأجسام المضادة البشرية مرغوبة بدرجة كبيرة؛ إلا أن إنتاجها معقد‎ ‏بسبب عدة عوامل تشمل الإعتبارات الأخلاقية؛ وحقيقة كون الطرق التقليدية لإنتاج الأجسام‎ ‏البشر‎ immunize ‏سبيل المثال؛ لا يمكن تمنيع‎ Jad ‏المضادة البشرية غير فعالة غالباً.‎ ‏الخاضعين للاختبار باستخدام بمعظم مولدات المضادات بسبب الاعتبارات الأخلاقية والسلامة.‎ ‏أجسام مضادة أحادية النسيلة بشرية وبألفة‎ isolation ‏وبناءً على ذلك؛ إن التقارير عن عزل‎ ve ‏لمولدات مضادات مختصة قليلة انظر ما جاء عن ماك كاب‎ molar ‏جزيئي‎ * ٠١ > ‏مفيدة‎ ‏صفحة 4/8 707-47 سنة‎ EA ‏المجلد‎ Cancer Research ‏ومعاونيه» في مجلة‎ McCabe ‏كذلك؛ فقد ثبت أن عزل أجسام مضادة بشرية أحادية النسيلة مضادة للفيروسات‎ LLY AAA
I al ‏أنه‎ donor primed cells ‏من خلايا متبرع مبرمجة‎ anti-viral human monoclonal antibodies (cultures ‏أنه ينتج عن 7 مستنبتات‎ Gomy ‏غير عملي. فعلى سبيل المثال؛ ذكر غومي‎ 7 ‏لخلايا أحادية‎ Ebstein-Barr virus ‏بفيروس إبشتاين-بار‎ transformed ‏متحولة‎ ١,795 ‏أصل‎ ‏من متبرعين مصابين ب‎ (PBMC) peripheral blood mononuclear cells ‏النواة من دم محيطي‎ ela ‏انظر ما‎ stable ‏مختصة؛ ثابتة‎ HIV ‏تنتج أجسام مضادة ضد‎ cell lines ‏خطوط خلايا‎ HIV -١1674 ‏صفحة‎ (AT ‏المجلد‎ Proc. Natl. Acad. Sci. ‏ومعاونيه»؛ في مجلة‎ Gomy ‏عن غومي‎ ‏سنة 184 لم.‎ 1378 ye yor
ا
وحتى الآن تم توليد معظم الأجسام المضادة ضد الأورام ‎anti-tumor antibodies‏ من خلايا لمفاوية من دم محيطي ‎(PBLS) peripheral blood lymphocytes‏ انظر ما جاء عن إيريه ‎Irie‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎Br.
J.
Cancer‏ المجلد £6 صفحة ‎(YY‏ سنة ‎ep) GAY‏ أو من خلايا لمفاوية في العقد اللمفاوية المصرفة ‎tumor draining lymph node lymphocytes asl!‏ انظر ما ° جاء عن شلوم 0 ومعاونيه» في مجلة ‎(Proc.
Natl.
Acad.
Sci.‏ المجلد ‎YY‏ صفحة ‎(TAEO—TAE)‏ _سنة ‎cp) AAC‏ وما ‎ela‏ عن كوت ‎Cote‏ ومعاونيه؛ في ‎Proc.
Natl.
Alas‏ ‎(Acad. 9.‏ المجلد ‎A‏ صفحة ‎١١-7٠١7‏ سنة 1/87 ١م؛‏ المأخوذة من مرضى مصابين بالسرطان. غير أنه؛ غالبا ما تتفاعل أجسام مضادة من هذا القبيل مع مولدات مضادات داخلية خلوية ‎intracellular‏ وبالتالي عديمة الفائدة علاجياً انظر ما جاء عن هو ‎Ho‏ ومعاونيه؛ في ‎١‏ مجلة ‎(Hybridoma Technology, Amsterdam‏ صفحة ‎OV=YV‏ سنة ‎AAA‏ )0 أو قد تكون هذه الاجسام المضادة من صنف الغلوبلين المناعي ‎(1eM) immunoglobulin M M‏ انظر ما جاء عن ماك كاب ‎McCabe‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎Cancer Research‏ المجلد ‎EA‏ صفحة 48 4 - ‎a) GAA Au 757‏ وهو صنف من الأجسام المضادة أقل قدرة على اختراق الأورام الصلبة ‎solid tumors‏ من الغلوبلينات المناعية 6 6 ‎-(IgGs) immunoglobulins‏ وقد استعمل ‎0s‏ القليل من هذه الأجسام المضادة البشرية في التجارب السريرية انظر ما جاء عن دروبيسكي ‎Drobyski‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎(RC.
Transplantation‏ المجلد )0 صفحة +11956-1145؛ سنة )44 )2< مما يقترح أن للأجسام المضادة المستخرجة خواص ليست مثالية. وعلاوة على ذلك؛ ولأن هذه الطرق تختبر خلايا-8 لمتبرع؛ فمن الواضح أنه لا يمكن اعتبار هذه الخلايا
المصدر الأمثل لاستخراج أجسام مضادة أحادية النسيلة مفيدة. ‎Ye‏ وفي الآونة الأخيرة؛ تم تحسين توليد الأجسام المضادة البشرية من متبرعين مبرمجين عن طريق تنبيهها بواسطة ‎CDA0‏ مما يؤدي الى توسيع خلايا ‎B‏ البشرية انظر ما جاء عن بانشيرو ‎Banchereau‏ ومعاونيه»؛ في مجلة ‎Science‏ .© المجلد ‎YOO‏ صفحة ‎Ve‏ سنة ‎a) 39)‏ وما جاء عن زاني ‎Zhan‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎oJ Immunol.‏ المجلد ‎dada VEE‏ ‎(YA. —-Yd00‏ سنة 1995م؛ وما جاء عن توما ‎Tohma‏ ومعاونيه؛ في ‎«J.
Immunol. dae‏ ‎vo‏ المجلد ‎VET‏ صفحة ؛0507-7046؟؛ سنة )199 أو عن طريق خطوة تعزيز إضافية في أنبوب الاختبار قبل التخلد ‎immortalization‏ انظر ما ‎ela‏ عن شاودوري ‎Choudhuri‏ ومعاونيه؛
ًا في مجلة ‎«Cancer Supplement‏ المجلد ‎VF‏ صفحة ‎1٠١-٠١54‏ سنة 144 ١م.‏ وقد استخدم هذا المبدأ_لتوليد أجسام مضادة بشرية أحادية النسيلة ضد الفيروس المضخم للخلايا ‎cytomegalovirus‏ فيروس ابشتاين-بار ‎(EBV)‏ وبكتيريا هيموفيلس (نفلونزا ‎hemophilus‏ ‎influenza‏ في ‎LOA‏ من متبرع مبرمج انظر ما جاء عن ستينبيكز ‎steenbikkers‏ ومعاونيه» في ‎ o‏ مجلة ‎(Hum. Atibod. Hybridomas‏ المجلد ‎of‏ صفحة 177-115 سنة 597١م‏ وما ‎ela‏ عن كويكبوم ‎kwekkeboom‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎Immunol. methods‏ المجلد ‎١1060‏ صفحة ‎-١١١7‏ ‎Loy م١957 duu YY‏ جاء فيرارو ‎Ferraro‏ ومعاونيه؛ في ‎Hum. Atibod. Alas‏ ‎(Hybridomas‏ المجلد ‎of‏ صفحة 85-850 سنة ‎99Y‏ )2 بمعدل انتاج أعلى بكثير من ذلك الذي حصل عليه بالطرق الأخرى ‎(FY)‏ ‎١‏ وعلاوة على ‎eld‏ لمواجهة_قيود برمجة المتبرع؛ ذكر تمنيع واستنبات_ الخلايا اللمفاوية خارج الجسم الحي من متبرع سليم. وقد ذكر بعض النجاح في توليد أجسام مضادة بشرية أحادية النسيلة عن طريق تعزيز خلايا لمفاوية من دم محيطي ‎peripheral blood‏ ‎(PBL) lymphocytes‏ خارج الجسم البشري ‎exhomine‏ من متبرعين مبرمجين انظر ما ‎ela‏ ‏عن ‎Maeda law‏ ومعاونيه؛ في ‎<Hybridoma alae‏ المجلد 00 صفحة ‎1-7١‏ سنة ‎(VAAN‏ ‎\o‏ وما ‎ela‏ عن كوزبور ‎kozbor‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎oJ Immunol.‏ المجلد ‎VE‏ صفحة ‎YY‏ سنة 4 ام؛ وما جاء عن دوكوسال ‎Duchosal‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎(Nature‏ المجلد ‎(Foo‏ صفحة ‎di 717-75‏ 1957 1١م.‏ وكان ميشيل ‎Mishell‏ ودوتون ميشيل ‎Dutton Mishell‏ ومعاونيه أول من وضحوا في مجلة ‎J Exp. Med‏ المجلد ‎OTT‏ صفحة 47-477 سنة ‎YTV‏ ‏احتمالية التمنيع في أنبوب الاختبار باستخدام خلايا لمفاوية فأرية. وفي العام 9979١م؛‏ تمكن ‎Hoffman ‏من تمنيع خلايا لمفاوية بشرية بنجاح انظر ما جاء عن هوفمان‎ Hoffman ‏هوفمان‎ Y. ‏كذلك؛ وصفت‎ a) AVY ‏سنة‎ o£) v= £0 A ‏صفحة‎ (YET ‏المجلد‎ Nature ‏ومعاونيه؛ في مجلة‎
Luzzati ‏عن لوزاتي‎ ela ‏لمفاوية من دم محيطي انظر‎ LIA ‏تمنيعات أولية ناجحة باستخدام‎ ‏صفحة 285-597/7؛ لسنة 59/5 ١م؛ وميزيتي‎ ٠44 ‏المجلد‎ J Exp. Med. ‏ومعاونيه؛ في مجلة‎ ‏سنة 181 لم‎ ٠١-٠١14 ‏صفحة‎ 154 Alaa J. Exp. Med. ‏ومعاونيه؛ في مجلة‎ 1 ‎«Ae ‏المجلد‎ dnt. Archs. Allergy Appl. Immunol. ‏ومعاونيه؛ في مجلةٌ‎ Komatsu ‏وكوماتسو‎ Yo ‏كاف‎ Immunology ‏ومعاونيه؛ في مجلة‎ ohlin ‏وأوهلين‎ (pV AAT ‏صفحة ١7؛-574 سنة‎
Vo ‏انظر ما جاء عن سترايك‎ tonsils ‏ومن اللوزتين‎ <a) AAT ‏سنة‎ (FYO ‏صفحة‎ TA ‏المجلد‎ ‎(pV AVA ‏ا نمل سنة‎ -١ 48 dada YY ‏المجلد‎ J. Immunol ‏ومعاونيه» في مجلة‎ Strike
Ho ‏عن هو‎ ela ‏انظر ما‎ trauma ‏المأخوذ من المرضى المصابين بجروح‎ spleen ‏ومن الطحال‎ ‏سنة لحكلمي؛‎ (OV=YY ‏صفحة‎ (Hybridoma Technology, Amsterdam ‏ومعاونيه؛ في مجلة‎ -85 dada NEY ‏المجلد‎ oJ) Immunol. ‏ومعاونيه؛ في مجلة‎ Boerner ‏وما جاء عن بورنر‎ °
Yo ‏المجلد‎ oJ. Immunol. ‏ومعاونيه؛ في مجلة‎ Ho ‏سنة )2149 وما جاء عن هو‎ (40 ‏ومعاوتيه؛ في‎ Wasserman ‏عن واسرمان‎ ela ‏صفحة ١ماحخ كك ؟ء سنة 59 ام؛ وما‎ ‏عن‎ ela ‏وما‎ pV AAT ‏صفحة 77-75 _سنة‎ AY ‏المجلد‎ oJ. Immunol. Meth, ‏مجلة‎ ‎(01—¢V ‏المجلد 4 صفحة‎ (Hum. Antibod. hybridomas ‏برامز 5 ومعاونيه في مجلة‎ «Hum. Antibod. hybridomas ‏ومعاونيه في مجلة‎ Brams ‏4م؛ وما جاء عن برامز‎ Yoda ٠١ ‏صفحة 15-597 سنة 1997م ومن مرضى المصابين بفرفرية قلة الصفيحات‎ of ‏المجلد‎ ‎Boerner ‏ما جاء عن بورنر‎ hail (ITP) idiopathic thrombocytopenia purpura ‏غامضة السبب‎ ela ‏سنة 991١م وما‎ (40-AT ‏صفحة‎ OEY ‏المجلد‎ 1. Immunol. ‏ومعاونيه» في مجلة‎
ON—£V ‏المجلد 4 صفحة‎ (Hum. Antibod. hybridomas ‏ومعاونيه؛ في مجلة‎ Brams ‏برامز‎ «Hum. Antibod. hybridomas ‏ومعاونيه في مجلة‎ Brams ‏عن برامز‎ ela ‏سنة 7م وما‎ Vo ‏ومعاونيه؛‎ McRoberts ‏وما جاء عن ماك روبرتس‎ cp) 44Y ‏سنة‎ (No=0V ‏صفحة‎ of ‏المجلد‎ ‏إصدار شركة إيلسفيير‎ "10 Vitro Immunization in Hybridoma Technology ' ‏في كتاب بعنوان‎ ‏ومعاونيه‎ Lu ‏وما جاء عن لو‎ a) 1484 ‏صفحة 759-7709؟؛ سنة‎ aly judd ‏مدينة‎ ©: ‏صفحة 81-7/81؛ سنة 157 لم.‎ OY ‏المجلد‎ <P. Hybridoma ‏في مجلة‎ 0 ويوفر التمنيع في أنبوب الاختبار ميزة كبيرة؛ مثل تمنيعات سهلة الإحداث؛ مما يجعل من السهل معالجة صنف من جسم مضاد بتقنيات استتبات ومعالجة ملائمة انظر ما ‎ela‏ عن تشاودوري ‎Chaudhuri‏ ومعاونيه»؛ في مجلة ‎Cancer Supplement‏ المجلد ‎VY‏ صفحة 78 ‎-١٠١‏ ‎VY‏ سنة 1594م. كذلك؛ ثمة دليل على أن تحمل مولدات المضادات الذاتية في الجسم الحي غير سائد أثناء التمنيعم في أنبوب الاختبار ‎(IVI) in vitro immunization‏ انظر ما ‎ela‏ ‎Yo‏ عن بورنر ‎Boerner‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎J Immunol.‏ المجلد ‎VEY‏ صفحة ‎(A0-AT‏ سنة )49 )0 وما جاء عن برامز ‎Brams‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎Immunol. Methods‏ .ل المجلد فى
صفحة ١١؛‏ سنة ‎La) GAY‏ ولذلك؛ يمكن تطبيق هذه التقنية بشكل محتمل لإنتاج أجسام مضادة ضد مولدات مضادات ذاتية؛ كعلامات الأورام ‎tumor markers‏ والمستقبلات ‎receptors‏ ذات العلاقة بالمناعة الذاتية ‎.autoimmunity‏ ‏وقد ذكرت عدة مجموعات توليد استجابات لمولدات مضادات متنوعة استثيرت في ° أنبوب الاختبار ‎dads‏ مثل؛ مولدات المضادات المرتبطة بالأورام ‎tumor associated antigens‏ ‎hail (TAAs)‏ ما جاء عن بورنر ‎Boerner‏ ومعاونيه في مجلة ‎Immunol‏ .ل المجلد ‎NEY‏ ‏صفحة ‎(30-AT‏ سنة )49 ‎ca)‏ وما ‎ela‏ عن بوربيك ‎Borrebaeck‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎Proc.‏ ‎(Natl Acad.
Sci.‏ المجلد ‎(AC‏ صفحة ‎(F490‏ سنة 188 ١م.‏ إلا ‎ad‏ ولسوء ‎Ball‏ كانت الأجسام المضادة الناتجة من الصنف الفرعي ‎[gM‏ وليست من الصنف الفرعي 160 انظر ما ‎٠١‏ جاء عن ماك كاب ‎McCabe‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎(Cancer Research‏ المجلد ‎fA‏ صفحة 701-47 سنة ‎ep) TAA‏ وما جاء عن كودا ‎koda‏ ومعاونيه في مجلة ‎Hum.
Antibod.‏ ‎chybridomas‏ المجلد ‎١‏ صفحة ‎V0‏ سنة 15956م؛ وذكرت استجابات ل 156 ثانوية ‎secondary (IgG) responses‏ باستخدام خلايا لمفاوية من متبرعين ممنعين. ‎(lily‏ يظهر أن هذه البروتوكولات لاتنجح إلا في حث استجابة مناعية أولية ‎primary immune respoanse‏ لكن ‎\o‏ تتطلب خلايا ممنعة من متبرع لتوليد استجابات تذكرية ‎recall responses‏ ‎(ell‏ أجري بحث عن طرق لتحليل ‎analyze‏ متغيرات الاستنبات والتمنيع ‎cultivation‏ ‎and immunization variables‏ لتطوير بروتوكول عام ‎dial‏ الأجسام المضادة البشرية أحادية النسيلة بشكل فعال في أنبوب الاختبار انظر ما جاء عن بورئر 80606 ومعاونيه؛ في مجلة ‎Immunol.‏ .ل المجلد ‎VEY‏ صفحة ‎¢90-AT‏ سنة 11951١م؛‏ وما ‎ela‏ عن ‎Brams a pn‏ ‎Y.‏ ومعاونيه» في مجلة ‎(Hum.
Antibod. hybridomas‏ المجلد 4 صفحة 497 -21؛ وما ‎els‏ عن لو ‎Lu‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎Hybridoma‏ المجلد ‎VY‏ صفحة ‎(FAT-TAY‏ سنة ‎a) AY‏ ونتج عن ذلك عزل أجسام مضادة بشرية أحادية النسيلة متخصصة بالفريتين ‎Ferritin‏ انظر ما ‎ela‏ ‏عن بورنر ‎Boerner‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎J Immunol‏ المجلد ‎VEY‏ صفحة ‎A0-AT‏ سنة )214 والمستحثة عن طريق تمنيع ‎WA‏ طحال بشرية غير ممنعة ‎naive human spleen‏ ‎cells vo‏ في أنبوب الاختبار. كذلك؛ نتج عن هذا البحث بروتوكول يمكن بواسطته أن تحث بالكامل استجابات ل ‎IgG‏ ثانوية جديدة ‎de novo secondary (IgG) responses‏ في أنبوب
\Y «Hum. Antibod. hybridomas ‏ومعاونيه؛ في مجلة‎ Brams ‏الاختبار انظر ما جاء عن برامز‎
AY 157 ‏صفحة 10-0( سنة‎ of ‏المجلد‎ ‏تكون فعالية‎ laa) ‏إلا أنه؛ بالرغم من الميزات العديدة المحتملة للتمنيع في أنبوب‎ ‏بأوعية الاستنبات‎ pat ‏طرق من هذا القبيل محدودة جد بسبب حقيقة أن الخلايا الممنعة‎ ‏كطبقات أحادية ©ها0000. وعلى العكس من ذلك؛ توجد المراكز الإنتاشية‎ culture vessels ° ‏في‎ three-dimensional structure ‏في الجسم الحي التي لها بنية ثلاشية الأبعاد‎ germinal centers ‏الفعالة للاستجابة المناعية. وتشتمل هذه البنيات ثلاثية الأبعاد‎ phases ‏الطحال خلال الأطوار‎ antigen- ‏المضاد‎ alge ‏منشطة ومحاطة بخلايا تظهر‎ Bcells ‏و خلايا-ة‎ T-cells ‏على خلايا-1‎ ‏توافق موقع‎ lel immunologists ‏والتي يعتقد غالبية اختصاصي المناعة‎ presenting cells .B- ‏لخلايا‎ antigen-specific activation ‏المضاد‎ Al gay ‏تتشيط مختص‎ ٠١ ‏في "إعادة تخليق‎ natural splenic environment ‏ويتمثل بديل لوسط الطحال الطبيعي‎ ‏كفأر‎ deli) ‏الظروف في الطحال في عائل حيواني ضعيف‎ mimic ‏محاكاة‎ "recreate ‏ويتقبل‎ ."(scID) severe combined immune deficient ‏يعاني من "نقص المناعة المركب الشديد‎ ‏البشري الخلايا اللمفاوية البشرية‎ (SCID) ‏المصاب بنقص المناعة المركب الشديد‎ ll ‏هذا‎ ‏عن موسيير‎ ela ‏من غلوبلينات مناعية انظر ما‎ high levels ‏بسهولة وينتج مستويات عالية‎ Ve ‏وما جاء عن‎ a) AAA ‏سنة‎ (YO ‏صفحة‎ ١7 © ‏المجلد‎ (Nature ‏ومعاونيه؛ في مجلة‎ Mosier ‏صفحة 1191-1577 سنة‎ VE) ‏المجلد‎ Science ‏ومعاونيه؛ في مجلة‎ McCune ‏ماك كون‎ ‏وعلاوة على ذلك؛ إذا كان المتبرع المستخدم لإعادة تكوين الغلوبلينات المناعية قد‎ a) AAA ‏لنفس‎ strong secondary response ‏فقد تحدث استجابة ثانوية قوية‎ (me ‏تعرض لمولد مضاد‎ ‏ومعاونيه في مجلة‎ Duchosal ‏مولد المضاد في هذه الفئران. فعلى سبيل المثال؛ ذكر دوكوسال‎ >» ‏تنبيه خلايا-8 من‎ sale) ‏سنة 1997م أنه يمكن‎ (YIY-YOA ‏صفحة‎ (Yoo ‏المجلد‎ 6
VV ‏قبل‎ tetanus toxoid ‏دم محيطي مأخوذة من متبرع ملقح #0 بسم الكزاز المعطل‎ chigh serum levels ‏سنة في حالة نقص المناعة المركب الشديد لإنتاج مستويات مصلية عالية‎ genes ‏عن جينات‎ expression ‏والتعبير‎ cloning ‏وقد وصفوا كذلك التنسيل‎ ٠. 1 ‏أي؛ حوالي‎ ‏إثنين من الأجسام المضادة البشرية ضد سم الكزاز المعطل باستخدام المكتبة التوافقية للملتهمة‎ ve
RA. ‏ومعاونيه في مجلة‎ Huse ‏عن هيوز‎ els ‏انظر ما‎ M13 phage ‏و1413‎ lambda phage ‏لمدا‎
VA extracted ‏سنة 95489 )2 من خلايا بشرية مستخلصة‎ (VYVO ‏صفحة‎ (YET ‏المجلد‎ ¢Science 1-٠١ ‏إلى‎ * ٠١ ‏وتراوحت ألفات الأجسام المضادة لمولدات المضادات من‎ human cells ‏يستلزم هذا البروتوكول خلايا مبرمجة من متبرع وكان معدل الانتاج‎ ed ‏جزيئي. إلا‎
Ve, ion ‏فقط من مكتبة تحتوي على‎ clones ‏فقد تم الحصول على نسيلتين‎ as ‏منخفضاً‎ ‏نسيلة.‎ ‏المصاب بنقص المناعة المركب الشديد والمنقول‎ Jl ‏ولذلك؛ لم يستخدم في السابق‎ ‏إلا لإنتاج أجسام مضادة بشرية أحادية النسيلة ضد‎ hu-SPL-SCID ‏إليه خلايا طحال بشرية‎ ‏أو عن‎ naturally ‏مولدات مضادات حيث أنه قد تمت برمجة المتبرع بصورة فعالة طبيعياً‎
Methods in sa ‏ومعاونيه؛ في‎ stahli ‏عن ستالي‎ ela ‏انظر ما‎ vaccination ‏طريق التلقيح‎ ‏ويشمل هذا في معظم الحالات‎ cp) AY ‏صفحة 71-77؛ سنة‎ AY ‏المجلد‎ Enzymology ٠ ‏كانت‎ «UX ‏لدا».‎ or bacterial antigens ‏بكتيرية‎ of ‏التعرض الى مولدات مضادات فيروسية‎ ‏مستويات العيارات المصلية المذكورة الناتجة باستخدام نموذج حيواني مصاب بنقص المناعة‎ ‏المركب الشديد البشري 10-5010 أقل بشكل ملحوظ من المستويات التي يتم الحصول عليها‎ normal mice ‏نموذجياً بتمنيع فثران طبيعية‎ ‏وبالإضافة إلى ذلك وصف بروتوكولان حيث يمكن أن يتبع حث الإستجابات الأولية‎ ‏مصاب بنقص المناعة‎ Jl ‏للأجسام المضادة حث استجابات ثانوية للأجسام المضادة في‎
Cad ‏المركب الشديد البشري باستخدام خلايا لمفاوية بشرية غير ممنعة. غير أنه» يكون‎ ‏كلا البروتوكولين محدود بشكل جوهري. وفي البروتوكول الأول؛ يتم حث الإستجابات الأولية‎ surgically Lal a ‏مصاب بنقص المناعة المركب الشديد البشري والذي غرس فيه‎ Jl ‏في‎ ‎lymph node ‏وعقدة لمفية‎ thymus ‏غدة صغرية‎ chuman fetal liver ‏كبد جنين إنسان‎ 0 Ye (fetal tissue ‏إلا أنه؛ تكون هذه الطريقة مقيدة بدرجة كبيرة بالتوفر المحدود لنسيج جنين إنسان‎ ‏للبروتوكول انظر‎ complicated surgical methodology ‏بالإضافة الى المنهجية الجراحية المعقدة‎ -١177 ‏صفحة‎ (VEY ‏المجلد‎ Science ‏ومعاونيه؛ في مجلة‎ McCune ‏ما جاء عن ماك كون‎ ‏وفي البروتوكول الثاني؛ حقنت فئران عادية تلقت كميات إشعاع قاتلة‎ a) TAA ‏سنة‎ 111 human bone ‏بخلايا-1 و خلايا-8 من نخاع عظم بشري‎ lethally irradiated normal mice Yo ‏مصاب بنقص المناعة المركب الشديد انظر ما جاء عن‎ J ‏وبخلايا من نخاع عظم‎ marrow
١ ‏صفحة 71 سنة 991 ١م. غير أنه‎ (YOY ‏المجلد‎ Science ‏ومعاونيه في مجلة‎ Lubin ‏لوبين‎ ‏تبلغ أربعة أشهر. وعلاوة على‎ incubation period ‏فترة حضانة‎ (alla ‏لهذه الطريقة سيئة لأنها‎ . 5٠١ ‏للأجسام المضادة؛ أي؛ أقل من‎ Tan ‏ذلك؛ ينتج عن كلا البروتوكولين عيارات منخفضة‎
NEA ‏.ل المجلد‎ Immunol ‏ومعاونيه؛ في مجلة‎ Carlson ‏كذلك؛ وصف كارلسون‎ ‏سنة 1997م؛ طريقة تستخدم خلايا دم أحادية النواة من دم محيطي‎ ٠١71-٠١55 ‏صفحة‎ ٠ ‏مأخوذة من متبرع مبرمج بمولد مضاد سم الكزاز المعطل. وتمت إزالة الخلايا البلعمية‎
Yl ‏من الخلايا‎ (NK cells) Natural killer cells ‏والخلايا القاتلة الطبيعية‎ macrophages ‏الكبيرة‎ ‏قبل تعريضها لفترة استنبات في أنبوب الاختبار وفترة برمجة قبل نقلها الى فآر مصاب بنقص‎ ‏المناعة المركب الشديد. ومن ثم يتم تعزيز الفأر المصاب بنقص المناعة المركب الشديد‎ ‏نتج عن هذه الطريقة عيارات ل‎ aly ‏بشري بمولد المضاد. وقد ذكر‎ Jab ‏والمنقول إليه‎ a. ‏الفأر المصاب‎ serum ‏في مصل‎ 5٠١ ‏بشري مختص بسم الكزاز المعطل بلغت حوالي‎ 6 .”٠١*8* ‏بنقص المناعة المركب الشديد والمنقول إليه طحال بشري وقد وصلت إلى حوالي‎ ‏إنتاج الأجسام المضادة البشرية أحادية النسيلة إنتاج خلايا-8‎ Lead ‏ما يتطلب‎ sale ‏تفرز كميات ثابتة ودائمة بشكل مثالي من الأجسام المضادة‎ WIA ‏متخلدة؛ وذلك للحصول على‎ ‏البشرية أحادية النسيلة المرغوبة. ويحدث عادة تخليد خلايا-8 باحدى الطرق الأربع التالية:‎ ١
Doe ‏دمج خلايا فأرية وبشرية دمجا‎ (if) (BBV) ‏التحويل بفيروس إيشتاين-بار‎ )( ‏تقنيات‎ (iv) ‏يليه الدمج المغاير؛‎ (EBV) ‏التحويل بفيروس إبشتاين-بار‎ (iii) <heterofusion ‏مكتبة جينات غلوبلين مناعي توافقية.‎ ‏بنجاح في عدد من التقارير؛ وفي‎ (BBY) ‏وقد استخدم التحويل بفيروس إبشتاين-بار‎ ‏الدرجة الأولى لتوليد أجسام مضادة ضد فيروس نقص المناعة البشري انظر ما جاء عن‎ - © -١67 4 ‏صفحة‎ AT ‏المجلد‎ Proc. Natl. Acad. Sci. ‏ومعاونيه»؛ في مجلة‎ Gory ‏جورني‎ ‏المجلد‎ oJ. Immunol. ‏ومعاونيه؛ في مجلة‎ Posner ‏وما جاء عن بوسنر‎ 2) AAT ‏سنة‎ 1174 ‏؛؛ صفحة 77-75 سنة )199 وتتمثل الميزة الأساسية في أنه يتم تحويل حوالي‎ 5 ‏تكون الخلايا المحولة بفيروس إبشتاين-بار‎ cdl ‏خلية واحدة من كل 700 خلية-8. إلا‎ ‏ويتم تنسيلها‎ IgM ‏وتنتج كميات قليلة من الأجسام المضادة‎ cunstable ‏غير مستقرة‎ (EBV) Yo ‏بشكل ضعيف وتتوقف عن إنتاج الأجسام المضادة بعد بضعة أشهر من الاستنبات. ويفضل‎
Y. ‏تفرز مستويات عالية من‎ hybridoma ‏ورمية هجينة‎ WA ‏استخدام الدمج المغاير لإنتاج‎
J. Immunol. ‏ومعاونيه؛ في مجلة‎ Carrol ‏عن كارول‎ ela ‏انظر ما‎ IgG ‏الأجسام المضادة‎ ‏الورمية‎ WAY ‏سنة 1987م. كذلك يسهل تنسيل‎ 77-71 dada AY ‏_المجلد‎ 0 ‏إلا أن عيب الدمج المغاير هو معدل‎ limited dilution ‏الهجينة عن طريق التخفيف المحدود‎ ‏الإنتاج القليلء أي؛ خلية ورمية هجينة واحدة أو أقل لكل 00000 خلية لمفاوية انظر ما جاء‎ ٠ ‏صفحة 55-485؛ سنة‎ VEY ‏المجلد‎ J Immunol. ‏ومعاونيه؛ في مجلة‎ Boerner ‏عن بورنر‎
CIA ‏كاه؛ المجلد‎ Immunology ‏ومعاونيه» في مجلة‎ ohlin ‏151ام؛ وما جاء عن أوهلين‎
Hum. Ase ‏ومعاونيه؛ في‎ Xiv-mei ‏عن زيو-ميه‎ ela ‏وما‎ 2) AA ‏صفحة 78 سنة‎ ‏وما جاء عن سي. إيه. كيه.‎ pV ‏سنة‎ (EY ‏صفحة‎ ١١ ‏المجلد‎ (Atibod. Hybridomas ‏سمت" في‎ Atibod. and Hybridomas' (Jf sis ‏الخلاصة‎ 8 <Borrebaeck C.AK ‏بوربيك‎ ٠١ ‏إبريل؛ سنة 19957 )2( جامعة كامبردج؛‎ YAY ‏المؤتمر الدولي الثاني؛ في الفترة الممتدة من‎ (i) ‏الدمج المغاير ميزتين:‎ (EBV) ‏انجلترا. ويوفر الجمع بين التحويل بفيروس إبشتاين-بار‎ ‏بعد التحويل بفيروس‎ fusion partner ‏اندماج خلايا- البشرية بسهولة أكبر مع زوج الاندماج‎ ‏انتاج خلايا ورمية هجينة أكثر استقرارا وبمعدل إنتاج أعلى انظر‎ (i) ‏و‎ (EBV) ‏يشتاين-بار‎ ‏سنة‎ (FY0 ‏صفحة‎ IA ‏المجلد‎ (Immunology ‏ما جاء عن أوهلين 0 ومعاونيه؛ في مجلة‎ \o «Hum. Atibod. Hybridomas ‏ومعاونيه» في مجلة‎ Xiu-mei ‏ام وما جاء عن زيو-ميه‎ 4
Borrebaeck ‏صفحة 47؛ سنة 196١م وما جاء عن سي. إيه. كيه. بوربيك‎ ١ ‏المجلد‎ ‏في المؤتمر الدولي الثاني؛‎ "Human. Atibodies and Hybridomas™ ‏مدهد؛ في الخلاصة بعنوان‎ ‏في الفترة الممتدة من 748-77 إبريل؛ سنة 1947م؛ جامعة كامبردج؛ إنجلترا. وتتمثل ميزة‎ screen ‏التقنية الأخيرة؛ أي؛ تقنية مكتبة جينات غلوبلين مناعي التوافقية في إمكانية غربلة‎ > © ‏بواسطة تقنية التعبير عن جزء فاب للملتهمة 1413 انظر ما جاء عن هيوز‎ Tas ‏مكتبات كبيرة‎ ‏عن‎ ela ‏سنة 1/49 ام؛ وما‎ ٠79/5 ‏صفحة‎ (VET ‏المجلد‎ Science ‏ومعاونيه»؛ في مجلة‎ Huse "Antibody Engineering: A Practical Guide’ ‏في كتاب بعنوان‎ William Huse ‏ويليام هيوز‎ ‏وفي أنه يمكن نقل الجينات بسهولة الى خط خلايا الإنتاج‎ Ym) EF ‏المجلد 0 صفحة‎ ‏لكل‎ ١ ‏أي حوالي‎ dan ‏صمتاعسضم. إلا أن يكون عادة معدل الإنتاج منخفض‎ cell line Yo
ص ,7 نسيلة انظر ما ‎ela‏ عن دوكوسال ‎Duchosal‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎Nature‏ المجلد ‎(Yoo‏ صفحة 777-788 سنة 497 لم. وهكذاء بناء على ما تقدم؛ من المفيد بدرجة كبيرة توفير طرق أكثر فاعلية لانتاج أجسام مضادة بشرية أحادية النسيلة؛ وبصفة خاصة الأجسام المضادة المختصة بالفيروس ‎٠‏ المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ وعلاوة على ذلك؛ من المفضل بدرجة كبيرة إنتاج أجسام مضادة بشرية مختصة بالبروتين-ف للفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ لها ‎All‏ ارتباط ‎desis‏ ‏ووظائف مؤثرة أفضل من تلك المتوفرة حالياً. أهداف الاختراع من أهداف الاختراع تزويد طرق محسنة لانتاج أجسام مضادة بشرية بعيارات عالية ‎١‏ مختصة بمولدات المضادات المرغوبة. ويتمثل هدف أكثر تحديداً للاختراع في تزويد طريقة جديدة لإنتاج أجسام مضادة بشرية بعيارات ‎dus Alle‏ تتضمن: ‎(i)‏ برمجة خلايا طحال بشرية غير ممنعة بمولد مضاد في أنبوب الاختبارء ‎(ii)‏ نقل خلايا الطحال البشرية المبرمجة في أنبوب الاختبار الى متبرع ضعيف المناعة؛ مثل؛ فأر مصاب بنقص المناعة المركب الشديدء و ‎(ii)‏ التعزيز بمولد ‎Vo‏ مضاد. ويتمثل هدف ‎AT‏ محدد للإختراع في تزويد طرق محسنة لإنتاج أجسام مضادة بشرية أحادية النسيلة مختصة بالفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ وبصفة خاصة ببروتين الاندماج -ف للفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ ‏ويتمثل هدف ‎AT‏ للاختراع في تزويد طريقة محسنة لإنتاج خلايا-3 متخلدة بفيروس ‎٠‏ | بإبشتاين-بار ‎Cus (EBV)‏ تفضل تشكيل خلايا-5 متخلدة تفرز في الغالب 1]80. ويتمثل هدف أكثر ‎Tunas‏ للاختراع في تزويد طريقة محسنة لإنتاج خلايا-8 متخلدة بفيروس إبشتاين-بار ‎(EBV)‏ والتي تفرز غالبا 186 ‎Cua‏ تتضمن: ‎(i)‏ برمجة خلايا طحال بشرية غير ممنعة بمولد مضاد في أنبوب الاختبار؛ ‎(ii)‏ تقل خلايا الطحال البشرية المبرمجة في أنبوب الاختبار إلى متبرع ‎Yo‏ ضعيف المناعة؛ مثل؛ فأر مصاب بنقص المناعة المركب الشديد؛ ‎(i)‏ تعزيز المتبرع ضعيف المناعة بمولد مضاد؛
YY
‏عزل خلايا-8 المنتجة للأجسام المضادة البشرية من المتبرع ضعيف المناعة؛ مثل؛‎ (iv) ‏فأر مصاب بنقص المناعة المركب الشديد؛ و‎ ‏تحويل خلايا-8 المنتجة للأجسام المضادة البشرية المعزولة المذكورة بفيروس‎ )( (EBV) ‏إبشتاين -بار‎ ويتمثل هدف آخر للإختراع في تزويد تراكيب جديدة تحتوي على ‎BTA‏ بشرية محولة بفيروس إبشتاين-بار ‎(EBV)‏ مأخوذة من فئران مصابة بنقص المناعة المركب الشديد حيث تفرز في الغالب ‎IgG‏ بشري. ويتمثل هدف أكثر تحديداً للاختراع في تزويد تراكيب جديدة تحتوي على خلايا-8 بشرية محولة بفيروس إيشتاين-بار ‎Cus (BBV)‏ تفرز 180 بشري ويتم انتاجها بواسطة ‎٠‏ - بطريقة تتضمن: ‎(i)‏ برمجة خلايا ‎Jab‏ بشرية غير ممنعة بمولد مضاد في أنبوب الاختبار؛ ‎(i)‏ تقل خلايا الطحال البشرية المبرمجة بمولد مضاد في أنبوب الاختبار الناتجة إلى متبرع حيواني ضعيف المناعة؛ ‎Hl (Jie‏ مصاب بنقص المناعة المركب الشديد؛ ‎(iii)‏ تعزيز المتبرع الحيواني ضعيف المناعة؛ ‎(fie‏ فأر مصاب بنقص المناعة المركب ‎Veo‏ الشديد؛ بمولد مضاد؛ ‎(iv)‏ عزل خلايا-8 المنتجة للأجسام المضادة البشرية من المتبرع ضعيف المناعة المعزز بمولد المضاد؛ مثل؛ فأر مصاب بنقص المناعة المركب الشديد؛ و ‎(V)‏ تحويل خلايا-8 المنتجة للأجسام المضادة البشرية المعزولة المذكورة بفيروس إبشتاين بار ‎(EBV)‏ ‏أ ويتمثل هدف آخر محدد للاختراع في إنتاج أجسام مضادة بشرية أحادية النسيلة معادلة للفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ ولها ألفة للبروتين-ف للفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ ‏تقل عن أو تساوي ‎17٠١7‏ جزيني. ‏ويتمثل هدف آخر كذلك للاختراع في تزويد خطوط خلايا متخلدة بفيروس إبشتاين- بار ‎(EBV)‏ حيث تفرز أجسام مضادة بشرية أحادية النسيلة من صنف 150 معادلة للفيروس ‎vo‏ المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ ولها ألفة لمولد المضاد ف للفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ تفل ‏عن أو تساوي يي جزيني.
YY
‏ويتمثل هدف أكثر تحديداً للاختراع الراهن في تزويد خطي خلايا متخلدة بفيروس‎ ‏آر إف-؟ و آر إف-1؛ حيث يفرزان أجسام مضادة بشرية أحادية‎ (EBV) ‏إبشتاين-بار‎ ‏النسيلة يشار اليها كذلك ب آر إف-؟ و آر إف-١ على الترتيب؛ حيث تعادل الفيروس‎ ‏في الجسم الحي ولكل منها ألفة للبروتين-ف للفيروس المخلوي‎ (RSV) ‏المخلوي التنفسي‎ ‏رحا جزيئي.‎ oxy ‏تقل عن أو تساي‎ (RSV) ‏التنفسي‎ ٠ transfect eukaryotic ‏سوية النواة تحويلياً‎ LOA ‏ويتمثل هدف آخر للاختراع في تخميج‎ heavy and light variable ‏تحمل شفرة الحقول المتغيرة الثقيلة والخفيفة‎ DNA ‏بسياقات‎ cells ‏خمجت تحولياً حيث تفرز أجسام مضادة‎ WA ‏ل آر إف-١ أو آر إف-؟ لإنتاج‎ domains ‏بشرية تحتوي على الحقل المتغير ل آر إف-١ أو آر إف-7.‎
Chinese ‏مبيض همستر صيني‎ LOA ‏ويتمثل هدف أكثر تحديداً للاختراع في تزويد‎ ٠١ ‏خمجت تحويلياً حيث تعبر عن الحقول المتغيرة الثقيلة والخفيفة ل‎ (CHO) Hamster Ovary
X= ‏آر إف-١ أو آر‎ ‏ويتمثل هدف آخر للاختراع في معالجة أو منع الإصابة بعدوى الفيروس المخلوي‎ ‏أو وقائياً من الأجسام المضادة‎ Ladle ‏في البشر عن طريق إعطاء مقدار فعال‎ (RSV) ‏التنفسي‎ ‏والمختصة بالبروتين-حف‎ (RSV) ‏البشرية أحادية النسيلة المعادلة للفيروس المخلوي التنفسي‎ ve ‏للبروتين-حف‎ dissociation constant ‏والتي تظهر ثابت تفكك‎ (RSV) ‏للفيروس المخلوي التنفسي‎ ‏جزيئي.‎ TVX ‏عن أو يساوي‎ Ji ‏هدف أكثر تحديد للاختراع في معالجة أو منع الإصابة بعدوى الفيروس‎ Jia ‏من أر‎ Was ‏عن طريق إعطاء مقدار فعال علاجيا أو‎ dal ‏في‎ (RSV) ‏المخلوي التنفسي‎ ‏أو آر إف-؟ أو جسم مضاد بشري أحادي النسيلة يعبر عنه في الخلايا أحادية النواة‎ ١-فإ‎ © ١-فإ ‏حيث تحتوي وتعبر عن الحقول المتغيرة الشقيلة والخفيفة ل آر‎ Glad ‏التي خمجت‎ odd ‏و آر‎ ‏هدف آخر للاختراع في تزويد لقاحات لمعالجة أو منع الإصابة بعدوى‎ Jia ‏حيث تشتمل على مقدار فعال علاجيا أو وقائيا من الأجسام‎ (RSV) ‏الفيرروس المخلوي التنفسي‎ (RSV) ‏المضادة البشرية أحادية النسيلة المختصة بالبروتين-ف للفيروس المخلوي التنفسي‎ vo ‏يقل عن أو يساوي‎ (RSV) ‏ثابت تفكك للبروتين-ف للفيروس المخلوي التنفسي‎ Ll
Yi ‏جزيئي؛ والتي تعادل الفيروس المخلوي التنفسي في أنبوب الاختبار؛ وتكون هذه‎ 1 ٠١" pharmaceutically ‏مقبول صيدلياً‎ excipient ‏سواخ‎ carrier ‏اللقاحات في توليفة مع حامل‎ .acceptable ‏ويتمثل هدف أكثر تحديداً للاختراع في تزويد لقاحات لمعالجة أو منع الإصابة بعدوى‎
‎٠‏ الفيروس المخلوي التنفسي ‎Cus (RSV)‏ تشتمل على مقدار فعال ‎Ladle‏ أو وقائياً من آر إف- ‎١‏ أو آر إف-؟ أو أجسام مضادة بشرية أحادية النسيلة مشتقة من خلايا سوية النواة خمجت ‎Ll gan‏ حيث تحتوي وتعبر عن سياقات ‎DNA‏ التي تحمل شفرة الحقول المتغيرة الثقيلة والخفيفة ل أآر إف-١‏ أو آر إف-7؟؛ وتكون هذه اللقاحات في توليفة مع حامل أو ‎Flow‏ ‏مقبول صيدلياً.
‎y‏ ويتمثل هدف ‎AT‏ للاختراع الراهن في تزويد طريقة لتشخيص ‎diagnosis‏ الإصابة بعدوى الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ عن طريق معايرة وجود الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ في السوائل المحللة ‎Jia canalytes‏ السوائل التنفسية ‎respiratory fluids‏ باستخدام الأجسام المضادة البشرية أحادية النسيلة والتي لها ألفة لبروتين الإندماج ف للفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ تقل عن أو تساوي ‎١ ٠١*#7‏ جزيئي.
‏ب ويتمثل هدف آخر كذلك للاختراع في تزويد مسابير مناعية ‎immunoprobes‏ جديدة وأطقم اختبار ‎test kits‏ للكشف عن الإصابة بعدوى الفيروس المخلوي التنفسي ‎Cun (RSV)‏ تشتمل على الأجسام المضادة البشرية أحادية النسيلة المختصة بالبروتين-ف للفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ والتي لها ألفة للبروتين-ف للفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ تقل عن أو تساوي ‎CV eXY‏ جزيئي؛ حيث ترتبط هذه الأجسام المضادة بشكل مباشر أو غير
‏7 مباشر ‎som‏ مبلغ ‎enzyme pa Jie »بسانم reporter molecule‏ أو نويدة مشعة ‎radionuclide‏ وفي التجسيد المفضل؛ تشتمل هذه الأجسام المضادة البشرية أحادية النسيلة على آر إف-١‏ أو آر إف-؟ أو أجسام مضادة بشرية أحادية النسيلة مأشوبة منتجة في خلايا سوية النواةء مثل خلايا ‎(CHO‏ والتي تخمج تحويليا بواسطة الحقول المتغيرة ‎ALE‏ والخفيفة ل آأر إف-١‏ أو آر إف-؟.
‎a ‏الوصف العام للاخترا‎ Yo
Yo ‏يتعلق الاختراع الراهن في أوسع تجسيداته بطرق جديدة لانتاج أجسام مضادة بشرية‎
ضد مولدات مضادات مرغوبة؛ ويفضل مولدات مضادات تستخدم في الوقاية؛ العلاج أو الكشف عن حالات مرضية في البشر. وتتضمن هذه الطرق برمجة خلايا طحال بشرية غير ممنعة بمولد مضاد في أنبوب الاختبار؛ ونقل خلايا الطحال البشرية المبرمجة بمولد المضاد
‎٠‏ في أنبوب الاختبار الناتجة إلى متبرع ضعيف المناعة؛ مثل؛ ‎JU‏ مصاب بنقص المناعة المركب ‎call‏ وتعزيز المتبرع ضعيف المناعة المذكور بمولد المضاد.
‏ويتعلق الاختراع الراهن كذلك بطرق لإنتاج خلايا-8 متخلدة بفيروس إبشتاين-بار
‎Cus (EBV)‏ تفضل إنتاج خلايا تفرز 186 وتتضمن: برمجة ‎Jab WIA‏ بشرية غير ممنعة بمولد مضاد في أنبوب الاختبار؛ ونقل خلايا الطحال البشرية المبرمجة بمولد المضاد في
‎٠‏ أنبوب الاختبار الناتجة الى متبرع ضعيف المناعة؛ مثل؛ فأر مصاب بنقص المناعة المركب الشديد؛ وتعزيز المتبرع ضعيف المناعة بمولد مضاد؛ وعزل خلايا-3 البشرية التي تفرز الأجسام المضادة؛ ويفضل التي تفرز 180؛ من المتبرع ضعيف المناعة المعزز بمولد المضاد؛ مثل؛ فأر مصاب بنقص المناعة المركب الشديد؛ وتحويل هذه الخلايا البشرية والمفرزة للأجسام المضادة المعزولة المذكورة بفيروس إبشتاين-بار ‎(EBV)‏
‎vo‏ ويتعلق الإختراع الراهن بشكل أكثر تحديدا بطرق محسنة لإنتاج أجسام مضادة بشرية ضد الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ وبصفة خاصة بروتين الاندماج ف للفيروس المخلوي التتفسي ‎(RSV)‏ حيث تظهر ألفة عالية للبروتين-ف للفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ وتعادل كذلك الإصابة بعدوى الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ بالإضافة إلى أجسام مضادة بشرية أحادية النسيلة ناتجة عن هذه الطرق. ويفضل إجراء ذلك عن طريق برمجة خلايا طحال :
‎x.‏ بشرية غير ممنعة بإنترلوكين-؟ ‎interleukin2‏ (11-2)؛ واختيارياً بالبروتين-ف للفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ في أنبوب الاختبار؛ ونقل خلايا الطحال المبرمجة في أنبوب الاختبار الى متبرع ضعيف المناعة؛ مثل؛ فأر مصاب بنقص المناعة المركب الشديد؛ وتعزيز المتبرع ضعيف المناعة بالبروتين-ف للفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ لإنتاج ‎BLS‏ ‏بشرية ‎Cus‏ تفرز أجسام مضادة بشرية ضد البروتين-ف للفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏
‎vo‏ معادلة لها ألفة عالية ‎mons nll‏ أي؛ للفيروس المخلوي التنفسي تقل عن أو تساوي ‎١ ٠"‏ جزيئي.
ويفضل تخليد خلايا-8 الناتجة لتزويد مصدر ثابت ‎Alas‏ من الأجسام المضادة البشرية أحادية النسيلة ضد البروتين-ف للفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ وفي التجسيد المفضل؛ تعزل خلايا-8 من ‎Jl‏ المصاب بنقص المناعة المركب الشديد والمعزز بمولد المضاد ثم تحول بفيروس إبشتاين-بار ‎(EBV)‏ لإنتاج خلايا-8 بشرية محولة بفيروس ‎oo‏ إبشتاين-بار ‎(EBV)‏ حيث تفرز في الغالب 180 بشري. ومن ثم تنسّل هذه الخلايا لاختيار خطوط الخلايا المحولة بفيروس إبشتاين-بار ‎(EBV)‏ التي تفرز أجسام مضادة بشرية أحادية النسيلة لها ألفة ‎Ale‏ للبروتين-ف للفيروس المخلوي التنفسي (857)؛ أي؛ تقل عن أو تساوي ‎٠١‏ * جزيئي ويفضل أن تقل عن أو تساوي ‎١ ٠١*7١‏ جزيئي. ‎١‏ ويتعلق الإختراع الراهن ‎Lead‏ باستخدام أجسام مضادة بشرية أحادية النسيلة ضد البروتين-ف للفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ كعلاج و/أو وقاية؛ بالإضافة إلى عوامل تشخيص ‎diagnostic agents‏ وكما هو ملاحظ؛ ينتج عن الطرق موضوع هذا الاختراع توليد أجسام مضادة بشرية أحادية النسيلة حيث تظهر ألفة عالية للبروتين-ف للفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ أي؛ التي لها ثابت تفكك للبروتين-ف للفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ يقل ‎ve‏ .عن أو يساوي ‎٠١#"‏ 1 جزيئي؛ حيث تعادل ‎Lad‏ الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ ‏أنبوب الاختبار. ولذلك؛ تعتبر هذه الأجسام المضادة مناسبة بشكل مثالي كعوامل وقائية وعلاجية لمنع أو معالجة الإصابة بعدوى الفيروس المخلوي التنفسي ‎le (RSV)‏ بأن البروتين-ف للفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ هو بروتين سطحي ‎surface protain‏ محفوظ بدرجة كبيرة ‎highly conserved‏ في مختلف المواد المعزولة ‎isolates‏ من الفيروس المخلوي © . التنفسي ‎(RSV)‏ كذلك؛ نظر للألفة والاختصاص العالي للأجسام المضادة البشرية أحادية النسيلة موضوع هذا الاختراع ضد البروتين-ف للفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ فإنه يمكن استخدامها كذلك لتشخيص الإصابة بعدوى الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ ‏وعلى وجه التحديد؛ يوفر الاختراع الحالي جسمين مضادين أحاديي النسيلة بشريين لبروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي (857)؛ أي آر إف-١‏ و آر إف-7؛ بالإضافة إلى ‎vo‏ أجسام مضادة بشرية مأشوبة ‎recombinant‏ مشتقة منهما ويفضل إنتاجها من الخلايا ‎CHO‏ التي خمجت تحويلياً ‎transfected‏ بسياقات ‎DNA 1b‏ التي تحمل شفرة الأجزاء الثقيلة والخفيفة ا
لف من آر إف-١‏ أو آر إف-؟. وتعتبر هذه الأجسام المضادة مفيدة بشكل خاص كعوامل وقائية ‎prophylactic‏ و/أو علاجية ‎therapeutic‏ لعلاج أو منع عدوى الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ وعلاوة على ذلك؛ تعتبر هذه الأجسام المضادة مفيدة كعوامل تشخيص ‎diagnostic‏ ‏لأنها ترتبط ببروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ بألفة ‎Alle affinity‏ أي أن
م كل منها له ألفة لبروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي ‎٠١ XY > (RSV)‏ . وتعتبر هذه
الأجسام المضادة مفيدة بشكل خاص كعوامل علاجية لألفتها وتخصصها العالي ببروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ وقدرتها على معادلة عدوى الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ في أنبوب الاختبار معادلة فعالة.
شرح مختصر للرسوم:
‎٠١‏ الشكل ‎١‏ : يوضح ‎dx‏ مناعية ‎immunoblot‏ لبروتين-ف لأمصال 28 تحتشوي على مضاد لبروتين- ف من فأر مصاب بنقص مناعة مشركة ومنقول له خلايا طحال بشرية: وضع بروتين-ف ‎(A)‏ وبروتين-ف الممسوخ ‎(B)‏ في فأر ‎(SDS-PAGE)‏ ومن ثم نقلا إلى نتروسليلوز ‎nitrocellulose‏ ‏بطريقة بقعة ويسترن ‎western blot‏ ثم تفاعلت قطع تنتروسليلوز
‎nitrocellulose \o‏ مع مضاد بروتين-حف الفأري الضابط الإيجابي وحيد النسيلة ‎positive control mouse anti-f protein MAb‏ (الصفان ‎1A‏ و ‎(IB‏ ومصل يحتوي على مضاد الكزاز ‎and TT‏ الضابط السلبي من فأر مصاب بنقص المناعة المركب الشديد منقول له خلايا طحال بشرية (الصفان 18 و 28) مع أمصال مضادة لبروتين-ف من فأر مصاب بنقص المناعة المركب الشديد
‎(3B ‏بشرية منقولة من فأر رقم + (الصفان 38 و‎ Jab ‏منقول له خلايا‎ Ye (SB ‏ورقم € (الصفان 58 و‎ (4B ‏ورقم ؟ (الصفان م4 و‎
‏الشكل ؟ : يوضح التألق المناعي ‎immunofluresonce‏ لخلايا ‎HEP-2‏ لأمصال فأر مصاب بنقص المناعة المركب الشديد المنقول له خلايا طحال بشرية يحتوي على مضاد لبروتين-ف. وتفاعلت الخلايا غير المصابة (اليسار) والمصابة
‎+ ‏مع مصل مأخوذ من فأر رقم‎ (RSV) ‏بالفيروس المخلوي التنفسي‎ Yo
‏المصاب بنقص ‎de lial)‏ المركب الشديد والمنقول له ‎WA‏ طحال بشرية؛
YA
‏وقد أظهر‎ boost ‏يوم من التقوية‎ VO ‏ومأخوذ بعد‎ 90:١ ‏ومخفف بنسبة‎ .GAH IgG-FITC ‏الارتباط وجود‎ ‏و آر إف-؟ المنقيين مع‎ ١-فإ‎ reactivity ‏الشكل ؟ : يوضح تفاعلية‎ ‏المنقى الأليف للدائن‎ (RSV) ‏البروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي‎ ‏المخلوي‎ ug dll ‏وكذلك سجلت التفاعلية لمصل بشري مضاد‎ plastic ° ‏وطليت‎ . (LN) reference human anti-RSV serum ‏مرجعي‎ (RSV) ‏التنفسي‎ ‏نانوغرام من بروتين-ف من الفيروس المخلوي‎ 9٠ ‏ب‎ ELISA ‏صفيحة‎ ‎(RSV) ‏التنفسي‎ ‏كأجسام مضادة‎ (FY ‏ور ف-؟ (الصف‎ )١ ‏(الصف‎ Vm ‏ر‎ IEF ‏الشكل ؛ . : يوضح‎ tumor cell supernatant ‏مأخوذة من فأر منقاة من مواد طافية لخلايا ورمية‎ ١ ‏عند درجة حموضة تقع في المدى من ؟ الى١٠. ويمثل‎ [EF ‏وقد أجري‎
Pile) ‏الصف‎ ‏لتدفق التألق المناعي‎ cytometry ‏عد الخلايا‎ assay ‏يوضح معايرة‎ : o Jal ‏المصابة‎ HEp-2 ‏وخلايا‎ HEp-2 ‏لخلديا‎ flow immunofluorescence ‏والتي حضنت مع كميات‎ CVX) (RSV) ‏بالفيروس المخلوي التنفسي‎ ‏وسجلت الشدة‎ (FITC ‏الموسوم ب‎ GAH IgG ‏مختلفة من آر إف-٠١ ثم مع‎ ‏لكافة القطاعات.‎ relative average intensity ‏المتوسطة النسبية‎ ‏المستخدم للتعبير عن الأجسام‎ NEOSPLA vector ‏يوضح ناقل نيوسبلا‎ : ١ JSG) ‏فيروس مضخم للخلية‎ mam ae = CMV ‏المضادة البشرية حيث:‎ ‏محضٌُّض رئيسي لغلوبين بيتا‎ = BETA «cytomegalovirus promoter Y. ‏هرمون‎ signal ‏إشارة‎ = BGH «mouse beta globin major promoter ‏الفأاري‎ ‏لإضافة متعدد الادتيلين‎ bovine growth hormone ‏نمو بقري‎ ‏أكسون‎ = 111 ¢SV40 replication ‏أصل التكرر‎ = SVO «polyadenylation neomycin phosphotransferase exon 1 ‏لنيومايسين فوسفوترانسفراز‎ ١ obey Se dug dp wasn IY ‏أكسون‎ - 2 Yo ‏المنطقة الثابتة كابا‎ = LIGHT «neomycin phosphotransferase exon 2
A
‏من‎ PE ‏الجزء الثابت‎ = HEAVY ‏في الغلوبين المناعي البشري؛‎ Kappa
SV leader Mall = L ‏؛ لغلوبلين مناعي بشري؛‎ Lie ‏أو‎ ١ gamma ‏غاما‎ ‎.SV40 polyadenylation region ‏منطقة إضافة متعدد الادنيلين‎ = ‏يوضح سياق الحمض الاميني والحمض النووي للمنطقة الخفيفة المتغيرة من‎ : IY ‏الشكل‎ ‎.١-فإ ‏آر‎ ° ‏يوضح سياق الحمض الاميني والحمض النووي للمنطقة الشقيلة المتغيرة من‎ : QV ‏الشكل‎ ‎A= ‏يوضح سياق الحمض الاميني والحمض النووي للمنطقة الخفيفة المتغيرة من‎ : IA ‏الشكل‎ ‎.٠-فإ ‏آأر‎ ‏يوضح سياق الحمض الاميني والحمض النووي للمنطقة الثقيلة المتغيرة من‎ : A ‏الشكل‎ Ve ‏آر إف-؟.‎ ‏يوضح سياق الحمض الاميني والحمض النووي للسلسلة الخفيفة من آر إف-‎ : fa ‏الشكل‎ ‏وسياق الجزء الثابت من كابا في الغلوبلين‎ leader sequence ‏وسياق قيادي‎ ١ ‏المناعي البشرية.‎ ‏الشكل 1ب : يوضح سياق الحمض الاميني والحمض النووي للسلسلة الثقيلة من آر إف-‎ ae ‏وسياق قيادي وسياق الجزء الثابت من غاما في الغلوبلين المناعي‎ ١ ‏البشري.‎ ‏الشكل 2 : يوضح سياق الجزء الثابت البشري.‎ 115581 ‏بشكل تخطيطي ويرمز له ب‎ NEOSPLA ‏نيوسبلا‎ JU ‏يوضح‎ : ٠١ ‏الشكل‎ ‏ويحتوي على سياق الحمض النووي آر إف-١ وجزء غاما البشري الثابت‎ 1 2d ‏في الأشكال من + إلى‎ Gla ‏الموضح‎ ‏يوضح سياق الحمض الاميني والحمض النووي للسلسلة الخفيفة من آر إف-‎ : DY ‏الشكل‎ ‏وسياق قيادي وسياق الجزء الثابت من كابا.‎ ¥ ‏من آر‎ Ala A ‏الشكل ١١ب : يوضح سياق الحمض الاميني والحمض النووي للسلسلة‎ ‏إف-؟ وسياق قيادي وسياق الجزء الثابت من غاما في الغلوبلين المناعي‎ Yo ‏البشرية.‎ v. ‏الشكل ١١ج : يوضح سياق الحمض الأميني والحمض النووي للجزء الثابت من غاما في‎ ‏الغلوبلين المناعي البشرية.‎ ‏ويرمز له‎ «NEOSPLA Siw gi expression ‏يوضح تخطيطياً ناقل تعبير‎ : VY ‏الشكل‎ ‏ويحتوي على سياق حمض نووي آر إف-؟ وسياق غاما الثابت‎ 1 .ج١١ ‏إلى‎ ١١ ‏في الأشكال من‎ ls ‏للغلوبلين المناعي البشري الموضح‎ 5 ‏الوصف التفصيلى‎ ‏تقدم؛ يوفر الاختراع الحالي طريقة جديدة وفعالة بدرجة كبيرة لإنتاج‎ Lab ‏كما بين‎ ‏مرغوب؛ ويفضل لمولدات مضاد لها‎ antigen ‏أجسام مضادة بشرية أحادية النسيلة لمولد مضاد‎ ‏علاقة بحالات مرضية في الإنسان. وعادة تكون مولدات المضاد المتعلقة بحالات مرضية في‎ ‏تشمل أهداف علاجية ملائمة للأجسام‎ surface antigens ‏الإنسان مولدات مضاد سطحية‎ > ‏لفيروسات ومولدات مضاد‎ surface proteins ‏المضادة. وهذا يشمل مثلا بروتينات سطحية‎ ‏وفي التجسيد المفضل»؛ يشمل‎ «human cancer cells ‏سرطانية بشرية‎ LIA ‏موجودة على سطح‎ ‏(بروتين-ف) من الفيروس المخلوي‎ fusion protein ‏مولد المضاد السطحي بروتين الاندماج‎ (RSV) gis ‏وتشمل الحالات المرضية في الإنسان على سبيل المثال لا الحصر العدوى‎ Vo ‏وفيروس الورم الحليمي‎ (RSV) ‏الفيروسية؛ مثل عدوى الفيروس المخلوي التنفسي‎ ‏وفيروس متلازمة نقص المناعة‎ hepatitis ‏وفيروس التهاب الكبد‎ papillomavirus ‏والعدوى‎ cancer ‏الخ. .. والسرطان‎ «AIDS Acquired immunodeficiency ‏المكتسبتء وود‎ malaria ‏كالملاريا‎ parasite ‏والعدوى الطفيلية‎ yeast ‏والعدوى الفطرية‎ bacterial ‏البكتيرية‎ ‏وغيرها. وبصفة أساسية يقصد بالحالات المرضية في الإنسان أن تشمل أي حالة مرضية في‎ Yo ‏الإنسان يمكن منعها أو علاجها بإعطاء أجسام مضادة بشرية أحادية النسيلة مختصة بمولد‎ ‏مضاد معين.‎ ‏وبصفة أساسية تشمل هذه الطريقة المستخدمة لإنتاج الأجسام المضادة البشرية أحادية‎ ‏طحال غير ممنعة في أنبوب الاختبارء» ونقل هذه‎ WIA priming ‏النسيلة التوليفة من:- برمجة‎ ‏أي فأر مصاب بنقص‎ «immonocompromised donors ‏الخلايا إلى متبرع ضعيف المناعة‎ Yo ‏المناعة المركب الشديد؛ ومن ثم تقوية الفأر المصاب بنقص المناعة المركب الشديد والمنقول‎
إليه ‎LIA‏ الطحال المذكورة مولد مضاد. وقد تبين على نحو مدهش أن استعمال هاتين الطريقتين لإنتاج الأجسام المضادة البشرية قد أدى إلى نتائج تآزرية ‎synergistic‏ وعلى وجه الخصوص» تؤدي هاتان الطريقتان إلى استجابات متخصصة بمولد مضاد معززة بدرجة كبيرة وعيارات عالية ‎fas‏ من الأجسام المضادة البشرية أحادية النسيلة من نمط ‎God‏ ‎isotype IgG‏ 0ع1. وبالأخص فقد وجد أن الجمع بين هاتين الطريقتين قد أدى إلى استجابات ثانوية عالية لم يسبق الحصول ‎gle‏ فقد كانت استجابات 180 في مصل الفأر المصاب بنقص المناعة المركب الشديد والمنقول إليه خلايا طحال أعلى بعشرة أضعاف من تلك الناتجة عن نقل الخلايا غير الممنعة في ‎Jl‏ المصاب بنقص المناعة المركب الشديد وقد ازداادت استجابات الجسم المضاد المحددة ‎٠٠٠١‏ مرة. وكذلك فقد وجد أن الأجسام المضادة الناتجة ذات ألفة عالية ونوعية ‎specificity‏ أكبر مقارنة بالأجسام المضادة الناتجة عن تجارب على حيوانات ذات مناعة مفرطة ‎hyperactive immune animals‏ ووجد ‎Lad‏ أنه عند استخدام خلايا طحال غير ممنعة للحصول على مثل هذه النتائج غير المتوقعة فإنه ينبغي استثارتها بمولد مضاد في أنبوب الاختبار وبعد ذلك إدخالها إلى ‎J‏ المصاب بنقص المناعة المركب الشديد والمنقول إليه خلايا الطحال. وكذلك يفضل. لكن ليس من ضروري؛ إدخال خلايا طحال غير 1 مبرمجة جديدة أخرى إلى المتبرع المصاب بنقص المناعة المركب الشديد والمنقول إليه خلايا طحال بشرية مباشرة قبل تقويته بمولد المضاد. وقد وجد أن هذا يؤدي إلى زيادة تعزيز استجابة الأجسام المضادة ‎.antibody response‏ وقد طور الاختراع الحالي بعد الكشف بشكل سابق عن بروتوكول مثالي أولي يجرى في أنبوب الاختبار ومقوي لتوليد الاستجابات الثاتوية ‎secondary response‏ من خلايا ‎vy‏ طحال بشرية غير ممنعة في ما جاء عن برامز ‎Brams‏ ومعاونيه» في مجلة ‎Hum. Antibod. Hybridomas‏ المجلد 4؛ صفحة ‎(10—0V‏ 19957م. ووجد أن البروتوكول الذي وصفه برامز ‎Brams‏ ومعاونيه في مجلة ‎Hum. Antibod. Hybridomas‏ ¢ المجلد ‎¢f‏ صفحة هت 997١م‏ توفر استجابات 180 خاصة بمولد مضاد أعلى ب ‎lam ٠١-١"‏ من الاستجابات الناتجة عن استنبتات ‎cultures‏ قد عرضت لحث ‎challenge‏ بمولد مضاد واحد. وقد ‎Yo‏ طورت واستمثلت طريقة التمنيع في أنبوب الاختبار ‎in vitro immunization‏ هذه باستخدام مولدات مضاد مختلفة؛ أي فريتين حصاني ‎horse ferritin (HOF)‏ وكلمودولين
Voor
0 ومولد مضاد البروستات النوعي ‎IgG prostate specific antigen (PSA)‏ فأري وترانسفرين 7050010 وثنائي-نتروفنيل كيهول ليمبت هيموسيسنين ‎Keyhole limpet Hemocysnine (KLH) dinitro phenyl (DNP)‏ مرتبط بمواد حاملة بروتينية معتمدة على خلايا-] ‎T-cell dependent protein carriers‏ وبروتين الاندماج-ف
(RSV) ‏للفيروس المخلوي التنفسي‎ ٠
وبصفة أساسية يشمل هذا البروتوكول ‎sale)‏ حث ‎restimulation‏ مستتبت خلايا الطحال في اليوم الأول بعد بدء الاستنبات بمولد مضاد مع ‎LDA‏ طحال ذاتية بنسبة ‎.٠:١‏ وقد تبين أن استجابات ‎IgG responses IgG‏ المقاسة باستخدام هذا البروتوكول كانت نتيجة لتكرار التعرض ‎exposune‏ لمولد المضاد وهي مكافئة للاستجابات الثانوية.
8 وقد وضحت كذلك هذه التجارب أن خلايا الطحال غير المصابة ‎intact spleens‏ هي المصدر الأمثل للخلايا اللمفاوية 170000087185 ‎Ly‏ في ذلك خلايا الطحال المصاب برض ‎trauma‏ والمصاب بمرض فرفرية قلة الصفيحات التلقائية ‎idiopathic thrombocytopenic‏ ‎purpura ITP‏ وعلى النقيض من ذلك؛ فقد ثبت أن الخلايا اللمفاوية في الدم المحيطي ‎peripheral blood lymphocytes (PBLs)‏ والخلايا من اللوزتين ‎tonsils‏ والعقد اللمفاوية
-antigenic-specific responses ‏أقل جودة في حث استجابات خاصة بمولد المضاد‎ lymph nodes Vo ‏أي من المكونات الخلوية‎ neutralization ‏أو معادلة‎ depletion ‏وعلاوة على ذلك يؤدي استتفاد‎ 1 ‏ومعاونيه في مجلة‎ Boerner ‏عن بويرنر‎ sla ‏إلى استجابات أقل؛ انظر ما‎ cellular ‏وأشارت هذه التجارب كذلك إلى أنه‎ .م١‎ 191 (A0—AT ‏صفحة‎ VEY ‏المجلد‎ dmmunol ‏طحال معينة ومولد مضاد؛ فانه يوجد تركيز أمثل ووحيد لمولد المضاد.‎ WIA ‏لتحضير‎
‎Ye‏ ومن ثم بوجود الطريقة الأولية التي تجرى في أنبوب اختبار والمقوية لإنتاج الاستجابات الثانوية من خلايا طحال بشرية غير ممنعة؛ فقد أمكن اختبار هذا البروتوكول ضمن توليفة مع طرق سابقة لإنتاج الأجسام المضادة البشرية أحادية النسيلة تجرى في الجسم الحي مثل الفأر المصاب بنقص المناعة المركب الشديد. ولم يكن معروفا قبل الاختبار ما هو تأثير؛ إن كان هناك أي تأثيرء لإعطاء خلايا طحال مبرمجة بمولد مضاد على إنتاج أجسام
‎vo‏ مضادة أحادية النسيلة لمولد مضاد معين بواسطة فأر مصاب بنقص المناعة المركب الشديد أو قدرة الخلايا اللمفاوية البشرية على البقاء هناك. بيد أنه كان هناك أمل أن هذا سيعزز تقوية
مولد المضاد وسيعزز تعبير خلايا الطحال غير الممنعة المبرمجة بمولد مضاد في أنبوب الاختبار. وفي هذا الصدد؛ ذكر سابقاً في ما ‎sla‏ عن ماكون ‎McCune‏ ومعاونيه في مجلة معدعنمي؛ المجلد ‎(YE)‏ صفحة 1379-1577 ‎ca) AAA‏ وفي ما ‎ela‏ عن لوبين ‎Lubin‏ ‎١‏ ومعاونيه في مجلة العلوم ‎iscience‏ المجلد ‎YOY‏ صفحة ‎(EVV‏ )249 أن الخلايا اللمفاوية البشرية يكمن أن ترسخ نفسها وتبقى حية لعدة أشهر في مرضى مصابين بنقص المناعة المركب الشديد. بيد أن؛ كما لوحظ؛ الطرق السابقة التي استخدمت المصابين بنقص المناعة المركب الشديد أو الأجسام المضادة البشرية أحادية النسيلة لمولدات مضاد قد استخدمت خلايا من متبرعين قد تعرضوا سابقاً ‎al sal‏ مضاد إما طبيعياً أو عن طريق التلقيح ‎vaccination‏ ولم ‎٠‏ تنتج هذه الطرق عيارات عالية من الأجسام المضادة البشرية. وقد وجد على نحو مدهش أن استخدام البروتوكول الذي يجرى في أنبوب اختبار الأولي والمقوي لإنتاج الاستجابات الثانوية من خلايا طحال غير ممنعة بشرية؛ انظر ما جاء عن برامز ‎Brams‏ ومعاونيه؛ في مجلة بعنوان ‎<Hum.Antibod.
Hybridomas‏ المجلد ‎of‏ صفحة 258-57 19959م؛ في نموذج مصاب بنقص المناعة المركب الشديد يؤدي إلى نتائج تآزرية كما يظهر من الاستجابات العالية ل 1.0 الخاصة بمولد المضاد الممتشع ‎.immunizing antigen‏ وقد تبين عن طريق الجمع بين هذه الطرق (باستخدام فريتين حصاني ‎horse ferritin (HoF)‏ كنموذج لموك المضاد) ما يلي:- ‎(i)‏ أن وجود خطوة التمنيع في أنبوب الاختبار قبل النقل إلى المصاب بنقص المناعة © المركب الشديد مهم لإنتاج استجابات كبيرة خاصة بمولد المضاد بشكل موثوق. ‎(ii)‏ ينبغي نقل الخلايا البشرية إلى الصفاق ‎peritoneum‏ لتحقيق البقاء الأمثل ‎WAT‏ الطحال البشرية ‎human splenocytes‏ في الفأر المصاب بنقص المناعة المركب الشديد. ‎(iii)‏ تبلغ ‎sae‏ الاستنبات في أنبوب الاختبار المثلى حوالي ثلاثة أيام. ‎(iv)‏ يؤدي استخدام انترلوكين-؟ ‎Interleukin‏ 11-2 واختيارياً انترلوكين-؛ 11.4 أو ‎ve‏ اتترلوكين-1 11-6 في أنبوب الاختبار إلى عيارات أجسام مضادة بشرية أعلى للإستجابات
الخاصة بمولد المضاد في الفئران المصابة بنقص المناعة المركب الشديد المنقول لها خلايا
طحال بشرية.
‎(v)‏ يفضل تقوية ال ‎hu-SPL-SCID‏ في ‎JB‏ بمولد مضاد مستحلب في عامل مساعد
‎adjuvant‏ مثل العامل المساعد فروندز الكامل ‎Freunds Complete Adjuvant (FCA)‏ و/أو الشب ‎.alum °‏
‎(vi)‏ وجد على نحو مدهش أنه لا يوجد أي منفعة من قتل ‎Killing‏ أو معادلة الخلايا القاتلة
‏الطبيعية ‎natural killer cells‏ من أصل فأري ‎murine‏ أو بشري فيما يتعلق بإنتاج الأجسام
‏المضادة. ولكن وجد أن استخدام فأر بيج مصاب بنقص المناعة المركب الشديد؛ ذو خط
‏منخفض من خلايا ‎(NK‏ كمضيف ‎host‏ للخلايا المبرمجة في أنبوب ‎JAY‏ يوفر استجابة أعلى عند إجراء التقوية باستخدام توليفة من العاملين المساعدين» أي ‎FCA‏ والشب ‎alum‏
‎(vid)‏ لوحظ تضخم الطحال؛ وليس العقد اللمفاوية؛ في /' الفئران المصابة بنقص المناعة
‏المركب الشديد المنقول إليها ‎LIA‏ طحال بشرية تقريباً بمقدار ‎YO‏ ضعف مقارنة بفئران
‏مصابة بنقص المناعة المركب الشديد فقط. وبالإضافة ‎colli‏ أعطى حتى ‎fr‏ من هذه الخلايا
‏في مثل هذا الطحال نتيجة موجبة عند فحص وجود واسمات ‎markers‏ سطحية لخلايا لمفاوية ‎dle‏ طبيعية.
‏وبصفة خاصة؛ تشمل الطريقة المعنية تميهد لخلايا طحال بشرية غير ممنعة في
‏أنبوب الاختبار لمدة تتراوح من يوم إلى ‎٠١‏ أيام؛ ويفضل حوالي ¥ أيام بمولد مضاد؛ ونقل
‏الخلايا المبرمجة إلى ‎J‏ مصاب بنقص المناعة المركب الشديد؛ ثم تقوية الفأر بمولد مضاد
‏لمدة تتراوح من حوالي ؟ إلى ‎VE‏ يومآ؛ ويفضل لمدة سبعة أيام. وقد تبين أن هذه الخطوات ‎vy.‏ تتتج استجابات عالية لل 10 الخاص بمولد المضاد في أمصال الفأر المصاب بنقص المناعة
‏المركب الشديد المنقول ‎ad)‏ خلايا ‎Jab‏ بشرية بدءاً من يوم ‎YE‏ فصاعداً. ونموذجياًء؛ تبلغ
‏عيارات المصل في نهاية التخفيف حوالي ‎'٠١‏ (نصف الاستجابات القصوى عند ‎٠0 Lyi‏
‏ملغم من 0ع1/مل)؛ باستخدام مولد مضاد غير ممنع؛ وفريتين الحصان ‎chorse ferritin‏ و ‎"٠١‏
‏(نصف الاستجابات القصوى عند حوالي © ‎pile‏ من 186/ ‎(Ja‏ عند إثارة استجابة تذكرية ‎recall response Yo‏ لمولد مضاد فيروسي ‎sheviral antigen‏ بروتين الاندماج من الفيروس المخلوي ro ‏وبناء على هذه النتائج فمن المتوقع الحصول على استجابات مماثلة باستخدام‎ (RSV) ‏التتفسي‎ ‏مولدات مضاد أخرى.‎ ‏لاستجابة الجسم المضاد المنشود تتطلب الحث‎ Ball ‏وكما هو ملاحظ فإن الاستثارة‎ ‏مضاد للخلايا البشرية في فأر مصاب بنقص المناعة المركب الشديد والمنقول له خلايا‎ Al sa ‏طحال بشرية في أنبوب الاختبار وداخل الجسم. وقد وجد كذلك أن 11.2 مهم خلال عملية‎ ٠ ‏البرمجة في أنبوب الاختبارء وأن إعطاء 11-4 و 11-6 مع 11-2 يعزّز من الاستجابات في الفأر‎ ‏ض المصاب بنقص المناعة المركب الشديد والمنقول إليه خلايا طحال بشرية؛ وبالإضافة إلى ذلك‎ ‏مصاب بنقص المناعة المركب الشديد ولكنها لم تكن معتمدة‎ reconstitution ‏يسهل إعادة تكوين‎ ‏داخل‎ irradiated allogenic lymphocytes ‏لمفاوية ذاتية معالجة بالأشضعة‎ WIA ‏على إعطاء‎ .intrapertoneal ‏الصفاق‎ ١ ‏وقد كشف كذلك أن هناك اختلاف واضح في استجابات الأجسام المضادة من طحال‎ ‏إلى آخر. فعلى سبيل المثال؛ تتطلب بعض أنواع الطحال إعطاء مترافق‎ autologous spleen cells ‏لكل من مولد المضاد وخلايا طحال ذاتية‎ concomitant administration ‏جديدة في اليوم العاشر لتوليد استجابات أجسام مضادة خاصة بمولد المضاد. ووجد أيضاً أن‎ ‏مستوى استجابات الأجسام المضادة يختلف لدرجة ما باختلاف الفئران المصابة بنقص المناعة‎ - ‏المركب الشديد والمنقول إليها خلايا طحال بشرية. بيد أن المتمرسين في هذه التقنية يمكنهم‎ ‏بسهولة اختيار الظروف الملائمة لإنتاج استجابة جسم مضاد مثلى خاصة بمولد مضاد معين‎ ‏على ما يصفه هذا الاختراع.‎ alae] ‏وذلك‎ ‏مختلفة‎ spleen preparations Jada ‏سبيل المثال؛ باختبار قدرة مستحضرات‎ lad ‏عديدة على إنتاج أجسام مضادة معينة في المستنبت؛ مثلا بعد عشر أيام من التمنيع في أنبوب‎ - © ‏يمكن تمييز أكثر هذه المستحضرات استجابة. وبالإضافة إلى‎ cin vitro immunization ‏الاختبار‎ ‏ذلك؛ وبما أن عدد كبير من الخلايا تحضر وتجمد من كل طحال؛ فيمكن أن يوضع نظام جديد‎ ‏للتمنيع في أنبوب الاختبار لمدة ثلاثة أيام من الطحال المختار ومتابعتها ونقلها إلى الفأر‎ ‏المصاب بنقص المناعة المركب الشديد. وعلى العكس؛ فإن المواد الخلوية الأخرى كخلايا الدم‎ ‏ليست مهيئة لمثل هذا النظام الأمثل؛ وبالتظر إلى‎ peripheral blood cells 281.8 ‏المحيطي‎ vo vi ‏واحد في عملية نقل‎ donor ‏الكمية المحدودة من 081/5 التي يمكن الحصول عليها من متبرع‎ ‏واحدة.‎ transferal ‏وكما لوحظ سابقاً؛ وبعكس التقارير السابقة؛ وجد في الطريقة الراهنة أنه عند استخدام‎ ‏نشاط الخلايا القاتلة البشرية‎ neutralization ‏خلايا الدم المحيطي؛ لا يوجد أي تأثير لمعادلة‎ ‏على الطحال. وعلاوة على ذلك؛ فان معادلة الخلايا القاتلة الطبيعية في المتبسرع‎ NK activity ° ‏المصاب بنقص المناعة المركب الشديد بالأجسام المضادة لأسيالو جي. ام. أي والمثبتة‎ ‏تقلل استجابات 1:0 الخاصسة بمولد‎ complement fixing anti-asialo GMI antibodies ‏للمتممة‎ ‏المضاد. وعلى النقيض من ذلك فان استخدام الفأر البيج المصاب بنقص المناعة المركب‎
IgG ‏الشديدء؛ وهو سلالة ذات مستويات منخفضة من الخلايا الفاتلة الطبيعية؛ يزيد استجابات‎ ‏الخاصة بمولد المضاد زيادة ملحوظة مقارنة بفأر طبيعي مصاب بنفس المرض فقط.‎ - ٠ ‏داخل‎ intravenous (IV) ‏وبالإضافة إلى لذلك؛ قورنت طريقتي التمنيع؛ داخل الوريد‎ ‏الصفاق من حيث قدرتهما على إعادة تشكيل الفئران المصابة بنقص المناعة المركب الشديد؛‎ ‏أي الاحتفاظ بخلايا الطحال في الفئران وإنتاج الأجسام المضادة البشرية. ووجد أن الصفاق‎ ‏وتمنيعها. وبالإضافة لذلك فإن نقل الخلايا عن‎ cell transfer ‏هو الموقع الأفضل لنقل الخلايا‎ ٠,01 ‏عند الكشف عن أكثر من‎ repopulation ‏إلى إعادة التشكيل‎ BI) ‏طريق الوريد لم يؤدي‎ ve .010056 serum ‏البشري في مصل الفأر‎ IgG ‏ميكروغرام/ مل من‎ ‏ووجد كذلك أن تراكيز 196 الناتجة ترتبط مباشرة بعدد الخلايا البشرية المنقولة‎ ‏فمثلا كانت نسبة إعادة التشكيل في الفأر المصاب بنقص المناعة‎ transferred human cells ‏خلية طحال مبرمجة في أنبوب الاختبار داخل الصفاق‎ ١٠١785 ‏المركب الشديد 797 عند حقن‎ ‏خلية طحال مبرمجة في أنبوب الاختبار داخل الصفاق.‎ VY exo ‏عند حقن‎ 7٠٠١ ‏وفعليا كانت‎ © ‏ويمكن للمتمرس في هذه التقنية؛ اختيار العدد الأمتل من الخلايا الطحالية المبرمجة في أنبوب‎ ‏على ما تم وصفه في هذا الطلب. وعلى وجه العموم؛ يتراوح هذا العدد‎ Sly ‏الاختبار للحقن‎ ‏خلية؛ والأفضل أن لا يقل عن‎ ”٠١ىلإ‎ ٠١ ‏خلية ويفضل من نحو‎ "٠١ ‏إلى‎ ٠١ ‏من نحو‎ ‏خلية.‎ ”٠١ىلإ‎ "٠١ ‏نحو‎ ‏ووجد أيضاً أن إستجابة الجسم المضاد تتأثر بوجود عامل مساعد معين. وبالأخص‎ Ye ‏لوحظ أن استجابات الأجسام المضادة البشرية القصوى قد تحققت عند تقوية الفثران المصابة‎ vv ‏بنقص المناعة المركب الشديد بمولد مضاد قد استحلب في العامل المساعد الكامل فروند‎ ‏وقد أوضحت الاختبارات على الفأر‎ Ls alum ‏والشب‎ CFA ‏أو باستعمال‎ (CFA) Freund
CFA ‏أن العامل المساعد‎ ferritin ‏المصاب بنقص المناعة المركب الشديد والمقوى بالفريتين‎ ‏ملغم/مل و‎ YY ‏كعامل مساعد حيث كان تركيز ال 160 البشري الناتج‎ alum ‏أفضل من الشب‎ ‏وشب «نله من الاستجابة في‎ CFA ‏ملغم/مل على الترتيب. ولم يحسن الجمع بين‎ ١# ٠ ‏المصاب بنقص المناعة المركب الشديد. بيد أن استخدام العوامل المساعدة هذه في فأر بيج‎ ‏مصاب بنقص المناعة المركب الشديد والمنقول إليه خلايا طحال بشرية (ويحتوي على طفرة‎
A ‏تؤدي إلى خفض فعالية الخلايا القاتلة الطبيعية) يزيد إنتاج 156 بمقدار يتراوح من‎ mutation ‏لوحده. بيد انه يتوقع أن استخدام عوامل مساعدة‎ CFA ‏أضعاف بالمقارنة مع استخدام‎ ٠١ ‏إلى‎ ‎1.0 ‏تركيز ل‎ Jel ‏أخرى أو توليفات منها ينتج كذلك نتائج مماثلة أو محسنة. وكان‎ - ٠ ‏ملغم/مل.‎ ٠١ ‏حوالي‎ Leo alum ‏والشب‎ Freund ‏باستعمال العامل المساعد الكامل لفروند‎ ‏ميكروغرام/مل من مكافئ الجسم المضاد أحادي‎ ٠0٠0 ‏حوالي‎ IgG ‏وكان أعلى تركيز ل‎ .monoclonal antibody equivalent ‏النسيتة‎ وقد نتج عن استخدام هذه الطريقة مع الفريتين ‎ferritin‏ استجابات أجسام مضادة متعددة ‎Vo‏ النسيلة ‎polyclonal antibody responses‏ يمكن مقارنتها بالتي حصل عليها من معيز وأرانب وخنازير ذات مناعة ‎hyperimmune da jie‏ فيما يتعلق بالنوعية ‎sepcificity‏ والتفاعلية 8017 واستخدام الأنماط الأسوية لسلسلة ‎Ig‏ وكانت الأجسام المضادة في مصل الفأر المصاب بنقص المناعة المركب الشديد والمنقول له خلايا طحال بشرية معظمها 186 مرتبط فقط بخلايا من أنسجة غنية بالفريتين ‎ferritin‏ غير مرتبطة بخلايا من أنسجة فقيرة ‎x.‏ بالفريتين 20100 أو لاتحتوي على فريتين ‎eferritin negative tissues‏ وتميز كل من الفريتين الطبيعي ‎natural ferritin‏ والفريتين الممسوخ ‎denatured ferritin‏ في بقعة ويسترن ‎Westren‏ ‏1 . وهذه النتائج غير متوقعة تماماً من حيث تركيز الجسم المضاد ‎antibody concentration‏ ونوعية مولد المضاد للأجسام المضادة البشرية الناتجة. وبالإضافة إلى ‎cally‏ يحصل على نتائج مماتلة باستخدام مولدات مضاد مختلفة. ‎Yo‏ وبعد الحقن؛ وجد أن الخلايا البشرية تميل إلى التراكم في موقعين؛ أي الصفاق والطحال في الفأر. بينما لم يوجد ‎AST‏ من نحو 77 من الخلايا البشرية في الدم؛ وكانت العقد ٠.٠
YA
‏من الخلايا‎ AFF ‏مولدات مضاد بشرية؛ ومن 775 إلى‎ liver ‏والكبد‎ lymph nodes ‏اللمفاوية‎ ‏وفي بعض الأورام العرضية‎ enlarged spleen ‏كان من أصل بشري في الطحال المتضخم‎ ‏بعض الحيوانات . وكانت هذه الخلايا البشرية في الأغلب خلايا-8ع‎ occasional tumors monocyte ‏وخلايا-7 مع مقدار قليل من خلايا 0014 وكان معظمها من الخلايا أحادية النواة‎ ‏في الطحال المتضخم.‎ ٠ وقد حددت هذه النتائج باستخدام عد خلايا التدفق لمعرفة تعداد الخلايا في الطحال والعقد اللمفاوية والكبد والصفاق. وفي هذه الحالات حيث تعيد خلايا الطحال البشري تشكيل الطحال؛ فقد وجد أن الطحال يتضخم حجمه بمقدار يصل إلى ‎Yo‏ ضعف حجم الطحال في الفأر المصاب بنقص المناعة المركب الشديد الأصلي. وقد شكلت الخلايا البشرية نحو ‎AY‏ ‎٠‏ من العدد الكلي للخلايا في الطحال عند القياس مباشرة بعد الاستخلاص ‎extraction‏ والباقي من أصل غير معروف. بيد انه بعد ثلاثة أيام من الاستنبات؛ وجد أن معظم الخلايا التي بقيت على قيد الحياة ‎surviving‏ كانت من ‎Jal‏ بشري كالخلايا المرتبطة بالأجسام المضادة gal ‏مع الخلايا اللمفاوية‎ cross relativity ‏ولم تظهر تفاعلية تبادلية‎ cells bound antibodies ‏يمكن تقسيمها إلى‎ reconstituted mice ‏أن الفئران المعاد تكوينهاً‎ La ‏ولوحظ‎ ‏ومجموعة ذات طحال‎ normal size spleens ‏مجموعة ذات طحال بالحجم الطبيعي‎ (fie gona yo ‏متضخم. وتحتوي الفثران المصابة بنقص المناعة المركب الشديد والمنقول إليها خلايا طحال‎
IgG ‏ضعف الحجم الطبيعي؛ على مستويات ال‎ YO ‏بشرية ولها طحال متضخم؛ أي أن حجمه‎ ‏ضعف من المستويات في الفئران ذات الطحال الطبيعي؛ وكانت‎ ١560 ‏البشري أعلى بنحو‎ ‏ضعف في الفئران ذات الطحال‎ ٠٠٠٠١ ‏مستويات 180 الخاصة بمولد مضاد أعلى بنحو‎ relative affinity ‏أن الألفة النسبية‎ Load ‏طبيعي الحجم والتي عولجت بنفس الطريقة. ووجد‎ - ‏للاستجابة الخاصة بمولد المضاد قد ازدادت خلال الاستجابة مما يدل على أن نسبة أعلى من‎ ‏كانت تتكون من أجسام مضادة لها‎ total immunoglobulin pool ‏التجمع الكلي للغلوبلين المناعي‎ خواص ارتباط ‎binding‏ أفضل. وتشير هذه النتائج إلى أن النظام ‎system‏ موجه بمولد مضاد. وهذه النتائج مهمة ‎Tos‏ وتشير إلى أنه ينبغي ‎Goes‏ إنقاذ الخلايا البشرية من فأر ‎ve‏ مصاب بنقص المناعة المركب الشديد ومنقول إليه خلايا طحال بشرية واستخدامها لتوليد مكتبات جينات أجسام مضادة بشرية توافقية ‎combinatiorial human antibody gene libraries‏
Ya ‏وبالتالي الحصول على أجسام مضادة بشرية أحادية النسيلة ذات ألفة عالية ونوعية يمكن‎ diagnostically ‏و/أو تشخيصياً‎ clinically ‏استخدامها سريرياً‎
وبشكل ‎(pals‏ فإن الاختراع الحالي يوفر أجسام مضادة بشرية أحادية النسيلة جديدة لبروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ تظهر ‎Aled a‏ ‎٠‏ البروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ أي < ‎TVX‏ جزيئي غرامي من البروتين ‎protein‏ حيث تتمكن هذه الأجسام المضادة أحادية النسيلة البشرية من معادلة الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ في أنبوب الاختبار. ويوفر الاختراع الحالي كذلك طرق لتحضير مثل هذه الأجسام المضادة البشرية أحادية النسيلة لبروتين-ف من الفيروس المخلوي
لتنفسي ‎(RSV)‏ ‎١‏ وفي العموم؛ تنتج مثل هذه الأجسام المضادة البشرية عن طريق تمنيع خلايا طحال بشرية غير ممنعة ببروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ وتقل هذه الخلايا الطحالية الممنعة البشرية في أنبوب الاختبار إلى متبرع حيواني ضعيف المناعة ‎(immunocompromised animal donor‏ مثل فأر مصاب بنقص المناعة المركب الشديد؛ وتقوية هذا الحيوان ببروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ وعزل خلايا-3 البشرية منه ‎ve‏ والتي تفرز أجسام مضادة أحادية النسيلة لبروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ ‏وتمنيع ‎BLA‏ مذكورة ثم تنسيل ‎cloning‏ خلايا ‎B‏ الممنعة المذكورة هذه لاختيار الخلايا التي تفرز الأجسام المضادة البشرية أحادية النسيلة والتي لها ألفة عالية لبروتين ف من الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ ويفضل على الأقل ‎٠١‏ جزيئي والأفضل <
‎٠7‏ ' جزيئي. 1 وكما بين فيما تقدم؛ فقد اكتشف أن الجمع بين التمنيع في أنبوب ‎laa)‏ وبالأخص لخلايا طحال بشرية؛ سواء كانت معرضة ‎exposed‏ أو غير معرضة لمولد مضاد-ف من الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ من قبل؛ والنقل إلى متبرع حيواني ضعيف المناعة؛ كفأر مصاب بنقص المناعة المركب الشديد والذي يقوى بعد ذلك بمولد مضاد لبروتين- ف من الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ ينتج مزايا ملحوظة مقارنة بالطرق التقليدية لتحضير ‎ve‏ الأجسام المضادة البشرية في فئران مصابة بنقص المناعة المركب الشديد. وتتمثل هذه المزايا في أن هذه الطريقة توفر عيارات عالية ‎fax‏ من الأجسام المضادة؛ أي أن أعلى عيار مضاد
0 لبروتين-ف كان حوالي ‎٠١‏ ”؛ وتوفر تراكيز 180 عالية؛ أي نحو ملغم/مل للإستجابات العالية. وبالإضافة إلى ذلك؛ فإن هذه الطريقة تتيح إنتاج أجسام مضادة بشرية لها عدة خواص مفيدة بدرجة كبيرة؛ أي تلك التي تظهر الألفة العالية لبروتين-ف من الفهيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ وكذلك تظهر نشاط معادل في أنبوب الاختبار. ‎LS >‏ وصف بتفصيل أكثر في ‎AR)‏ فقد قام المخترعون الحاليون بعزل جسمين مضادين بشريين أحاديي النسيلة؛ وهما آر إف-١‏ الذي له ثابت ألفة ‎(Ka)‏ ‏لبروتين-ف- ‎TY em‏ جزيئي محسوباً برنين بلازمون ‎cplasmon resonance‏ و آر إف-؟ الذي له ثابت ألفة = ‎"٠١ x0‏ جزيئي محسوبآً عن طريق قياس الحرارة الدقيق للمعايرة ‎titration microclorimetry‏ وكانت قيمة ‎(Kd)‏ المحسوبة ل آر إف-؟ تساوي ‎yoy‏ ‎٠‏ جزيئي أيضاً. وبالإضافة إلى ذلك؛ أظهر كلا هذين الجسمين المضادين خواص معادلة للفيرروس في أنبوب الاختبار ‎in vitro neutralizing properties‏ عند تراكيز تتراوح من ‎A‏ إلى ‎٠‏ نانوغرام/مل؛ وكذلك فقد أظهرا قدرة على تثبيط اندماج خلايا قد أصيبت ‎[ls‏ بعدوى الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ ومما له أهمية؛ يمكن تطبيق الفعالية المعادلة في أنبوب الاختبار على أنواع مختلفة من سلالات الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ البرية ‎wild‏ ‎vo‏ والمخبرية ‎laboratory‏ من النوع ‎(A)‏ و (8). وبناء على هذه النتائج؛ فإنه بسبب الألفة العالية للأجسام المضادة المعنية لبروتين-ف من الفيروس المخلوي التتفسي ‎(RSV)‏ والذي يشكل بروتين سطحي ‎surface protein‏ موجود على سطح الخلايا المصابة بالفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ والقدرة على معادلة الفيروس وتثبيط ‎inhibit‏ اندماج الخلايا المصابة بالفيروس؛ ينبغي أن تكون الأجسام المضادة أحادية © - النسيلة البشرية المعينة مناسبة كعوامل علاجية ووقائية؛ أي لعلاج أو ‎pia‏ عدوى الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ في الأشخاص المعرضين ‎susceptible‏ أو المصابين بعدوى الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ وكما لوحظ فإن عدوى الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ منتشرة بصفة خاصة في الرضع ‎infants‏ والأشخاص ضعيفي المناعة. ولذلك تكون الأجسام المضادة أحادية النسيلة المعنية مرغوبة بصفة خاصة لمنع أو علاج عدوى الفيروس المخلوي التنفسي »| (857) في هؤلاء الأشخاص.
Ia ‏لهذه الأجسام المضادة‎ human origin ‏على الأصل البشري‎ alae) ‏وبالإضافة إلى ذلك؛‎ .passive immunotherapy ‏أحادية النسيلة فإنها تكون مناسبة بصفة خاصة لعلاج مناعي سلبي‎ ‏وذلك لأنها لن تكون معرضة للقيود المحتملة للأجسام المضادة أحادية النسيلة من‎ ‏وغياب الوظائف المتممة البشرية الطبيعية‎ HAMA ‏أصل فأري؛ كإستجابات‎ ‏اعتماداً على ل خصائص الأجسام المضادة‎ (das ‏وفي‎ -normal human effector function ° ‏البشرية أحادية النسيلة المعنية (الموصوفة في الأمثلة اللاحقة)؛ يتضح أن كل من آر إف-١ و‎ ‏آر إف-؟ يظهران فعالية معادلة في أنبوب الاختبار أكبر وقدرة أكبر على تشبيط اندماج‎ ‏من الأجسام السابقة المضادة‎ (RSV) ‏الخلايا التي قد أصيبت بعدوى الفيروس المخلوي التنفسي‎ ‏بشرية مشتقة من المكتبات‎ Fab ‏وأجزاء‎ chimeric ‏لبروتين-ف المأخوذة من فئران أو الخيمرية‎ ‏التوافقية. ونظرا لأصلها البشري فمن المتوقع أن يحتفظ بفعالية المعادلة بعد إعطائها في‎ - ٠ ‏الجسم الحي.‎ ‏وتتمثل ميزة أخرى للأجسام المضادة أحادية النسيلة المعنية في غياب جوهري‎ ‏فإن الأجسام المضادة موضوع البحث‎ (Ba ‏لتفاعليتها مع الأنسجة الطبيعية. وكما هو موضح‎ ‏ولا ترتبط بخطوط خلايا‎ (RSV) ‏ترتبط فقط بخلايا مصابة بعدوى الفيروس المخلوي التنفسي‎ ‏أو بشرة الحنجرة‎ prostate ‏أو الكبد أو البروستات‎ lymphoid tissue ‏تمثل النسيج اللمفاوي‎ Ve ‏70888:دا. ومن ثم ينبغي أن ترتيط هذه الأجسام المضادة عند إعطائها في الجسم‎ epidermis ‏ولا ينبغي أن ترتبط‎ (RSV) ‏الحي بفاعلية بالخلايا المصابة بعدوى الفيروس المخلوي التنفسي‎ (RSV) ‏بالأنسجة الطبيعية وبذلك ينبغي أن توفر معادلة لعدوى الفيروس المخلوي التنفسي‎ ‏وعلاوة على ذلك؛ اعتماداً على الخواص الموصوفة؛ فمن المتوقع استخدام الأجسام المضادة‎ ‏لوقاية‎ (RSV) ‏أحادية النسيلة المعنية والمضادة لبروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي‎ | © (RSV) ‏المعرضين لعدوى الفيروس المخلوي التنفسي‎ hosts ‏المضيفين‎ ‏وبصفة خاصة تنتج الأجسام المضادة أحادية النسيلة لبروتين-ف من الفيروس‎ ‏مصابة برض‎ Jab ‏خلايا‎ Jie ‏بالحصول على خلايا طحال بشرية؛‎ (RSV) ‏المخلوي التنفسي‎ ‏أو مصابة بفرفرية قلة الصفيحات الدموية التلقائية؛ ثم برمجة هذه الخلايا في أنبوب الاختبار.‎ ‏ويشمل هذا بشكل أساسي استنبات الخلايا الطحالية غير الممنعة المذكورة في أنبوب الاختبار‎ ve ‏في وجود مقدار كافٍ من 17-2 وبشكل اختياري بروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي‎
ل ‎(RSV)‏ لإحداث التمنيع والذي يعرف كذلك بالبرمجة بمولد مضاد ‎antigen priming‏ وفي العموم؛ يتراوح مقدار بروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ الممكن استخدامه من نحو ‎١‏ إلى ‎7٠0٠‏ نانوغرام/مل من بروتين-ف من الفهيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ ‏ويفضل من ‎٠١‏ إلى ‎٠٠١‏ نانوغرام/مل والأفضل نحو 40 نانوغرام/مل من بروتين-ف من ‎٠‏ الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ ‏ويفضل أن يحتوي وسط الاستنبات في أنبوب الاختبار على لمفوكينات ‎lymphokines‏ ‏وبصفة خاصة 11-2؛ وبشكل اختياري أن يحتوي على 11-4 و11-6. ويكون مقدار كل منها هو المقدار الذي يكفل التمنيع والإنتاج المنشود للخلايا المنتجة للأجسام المضادة ‎Lantibody producing cells‏ فمثلا يتراوح المقدار المناسب من 11-2 من نحو © إلى ‎Yoo‏ وحدة ‎٠‏ دولية ن1/مل؛ ويفضل من نحو ‎٠١‏ إلى ‎on‏ وحدة دولية/مل والأفضل ‎Yo‏ وحدة دولية/مل. وسيحتوي وسط الاستنبات هذا كذلك على مكونات أخرى ضرورية للمحافظة على حيوية خلايا الطحال البشرية في وسط الاستثبات؛ مثل؛ الأحماض الأمينية ‎amino acids‏ والمصل. وفي الأمثلة؛ استخدم وسط استنبات يحتوي على ‎IMDM‏ مضاف إليه ؟ ملي جزيئي من غلوتامين ‎cglutamine‏ 7 ملي جزيئي من بيروفات الصوديوم ‎sodium pyruvate‏ وأحماض 1 أمينية ‎amino acids‏ غير أساسية؛75 وحدة دولية/مل من ‎ILD‏ و١٠77‏ من مصل ‎dae‏ جنيني ‎fetal calf serum‏ غير أنه؛ يمكن أن يغير المتمرس في هذه التقنية وسط الاستنبات اعتماداً على التعليمات المبينة في هذا الطلب باستخدام الاستمثال الروتيني. وتجرى خطوة التمنيع في أنبوب الاختبار لمدة زمنية كافية لإحداث التمنيع. وعموماً؛ تستنبت الخلايا في وجود بروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي ‎RSV‏ لمدة تتراوح من © حوالي ‎١‏ إلى ‎٠١‏ أيام ويفضل لمدة تبلغ حوالي ثلاثة أيام. غير أنه؛ تتفاوت هذه الفترة الزمنية ‎le alae‏ على عينة الطحال المعينة. ‎Jilly‏ يمكن للمتمرس في هذه ‎AE‏ تحديد الفترة الملائمة لخطوة التمنيع في أنبوب الاختبار اعتماداً على التعليمات في هذا الطلب وباستخدام طرق معروفة. ويفضل أن يكون مولد المضاد ‎antigen‏ المستخدم للتمنيع في أنبوب الاختبار عبارة ‎vo‏ عن بروتين-ف منقى من الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ النقي وذلك لضمان أن خلايا الطحال تُمنتّع ضد بروتين-ف ‎aly‏ ضد مولدات مضاد أخرى (غير سطحية) غير
مفيدة. وتعرف طرق الحصول على البروتين المنقى من الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ ‏في هذه التقنية. وقد استخدم المخترعون الحاليون بصفة خاصة طريقة والش ‎Walsh‏ ومعاونيه؛ في مجلة ‎Gen Virol‏ ل المجلد ‎Ve‏ صفحة 7571-7957 14895 ١م.‏ غير أنه؛ لا يكون لهذه الطريقة عيوب بشرط أن يتم الحصول على بروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV) ©‏ بنقاوة كافية للحصول على أجسام مضادة أحادية النسيلة بشرية لها تخصسصية لبروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ وبشكل بديل؛ يمكن إنتاج بروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ بطرق مأشوبة كما وصف في براءة الاختراع الأمريكية
رقم 0,778,176 الصادرة في ‎dE YY‏ 494 ١م.‏ وبعد التمنيع في أنبوب الاختبارء يتم إدخال خلايا الطحال البشرية الممنعة أو غير ‎٠‏ ممنعة المبرمجة ببروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ في ‎wile‏ ضعيف المناعة؛ أي فأر مصاب بنقص المناعة المركب الشديد. ويفضل إجراء ذلك بإعطاء ‎Loa‏ الطحال البشري المبرمجة ببروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ داخل الصفاق للفأر المصاب بنقص المناعة المركب الشديد. وعادة يتفاوت عدد خلايا الطحال المعطاة من حوالي ‎٠‏ إلى ‎*٠١‏ خلية طحال؛ ويفضل من حوالي ‎"٠١‏ إلى ‎*٠١‏ خلية طحال. وعدد هذه الخلايا ‎ve‏ هو الذي يؤدي إلى إعادة التكوين المنشود؛ أي؛ ‎Jl‏ المصاب بنقص المناعة المركب الشديد الذي ينتج تراكيز قابلة للاستعادة من الأجسام المضادة البشرية المختصة ببروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ ويفضل؛ تعليق خلايا الطحال هذه في ‎HBSS‏ بتركيز يبلغ
حوالي ‎"Yo xA‏ خلية/مل قبل الاعطاء. وبعد ‎Ji‏ خلايا الطحال إلى الصفاق؛ يقوى الفأر المصاب بنقص المناعة المركب ‎ys‏ الشديد ببروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ وتجرى هذه التقوبة في وقت قريب من تقل خلايا الطحال بحيث يتحقق الإنتاج المنشود للأجسام المضادة البشرية المضادة لبروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ وعموماً؛ قد تجرى التقوية بعد ؟ إلى ‎VE‏ ‏يوم من نقل خلايا الطحال؛ وفي الحالة المثلى بعد حوالي سبعة أيام من نقل الخلايا. ويفضل؛ إعطاء مولد المضاد المذكور داخل الصفاق. ويتراوح المقدار الذي يعطى من بروتين-ف من - الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ في المدى من حوالي ‎١‏ إلى 00 ميكروغرام؛ ويفضل من حوالي ‎١‏ إلى ‎٠١‏ ميكروغرام. وفي الأمثلة؛ كان مقدار البروتين المعطى © ميكروغرام. غير te ‏الطحال ونقاوة‎ due ‏أنه؛ قد يتفاوت المقدار المعطى وفترة التمنيع اعتماداً على نوع الفأر؛‎ (RSV) ‏البروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي‎ ‏مثل عامل‎ cadjuvant ‏ويفضل؛ إجراء التقوية بمولد مضاد في وجود عامل مساعد‎ ‘.. ‏الخ.‎ «saponin ‏والسابونين‎ alum ‏والشب‎ complete Freund's Adjuvant ‏مساعد فرويندي كامل‎ ‏غير أنه؛ من المتوقع أنه‎ alum ‏والشب‎ (CFA) ‏ويفضل استعمال عامل مساعد فرويندي كامل‎ ٠ ‏يمكن استخدام عوامل مساعدة أخرى كبدائل للحصول على نتائج مماثلة أو حتى على نتائج‎ ‏معززة بصورة جوهرية.‎ ‏وبعد تقوية مولد المضاد؛ تجرح هذه الفثران؛ مثلا جرح ذيلهاء ثم يفحص مصلها‎ ‏لمعرفة تركيز 180 البشري فيه وعيارات الجسم المضاد لبروتين-ف. ومن ثم تستعمل‎ ‏الحيوانات التي تظهر أعلى تراكيز وعيارات من الأجسام المضادة لاستخلاص الخلايا المفرزة‎ - ٠ ‏البشري.‎ 1gG ‏ل‎ ‏وقد اكتشف أن الفئران المصابة بنقص المناعة المركب الشديد والتي لها أعلى‎ ‏عيارات من الأجسام المضادة 800-78 البشرية أظهرت أورام بطنية كبيرة مما يوفر مصدر جيد‎ ‏للخلايا المفرزة للأجسام المضادة البشرية. ويفضل؛ أن يتم استخلاص هذه الأورام باستئصالها‎ ‏في ظروف معقمة؛ حيث يتم تحضير معلقات خلية مفردة؛ ثم تغسل الخلايا وتستنبتث. وفي‎ vs ‏جنيني؛ وتستنبت الخلايا‎ dae ‏يحتوي على 77 من مصل‎ IMDM ‏الأمثلة؛. تغسل الخلايا بِ‎ dae ‏من مصل‎ 7٠١ ‏مع‎ IMDM ‏تحتوي على‎ (T-25) ‏خلية/مل في قوارير‎ "٠١ ‏في معلق من‎ ‏يستطيع المتمرس في هذه التقنية تغيير ظروف الاستنبات هذه.‎ cdl ‏جنيني. غير‎ ‘Epstein Barr Virus (EBV) ‏ويفضل تخليد هذه الخلايا باستخدام فيروس ايبشتاين-بار‎ ‏ومن ثم تميز هذه الخلايا المخلدة التي تنتج الأجسام المضادة لبروتين-ف بطرق معروفة؛ مثل‎ © -Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay (ELISA) ‏معايرة إشرابية مناعية مرتبطة بالإنزيم‎ ‏لوحظ؛ لقد اتضح بأن هذه الطريقة أدت إلى تمييز نوعين منفصلين من الأجسام المضادة‎ LS ‏البشرية أحادية النسيلة والتي ترتبط بصفة خاصة ببروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي‎ ‏على تعليمات هذا الطلب؛ وبالأخص‎ oldie) ‏أي آر إف-١ و آر إف-؟. غير أنه؛‎ (Rs) ‏الأمثلة؛ يستطيع المتمرس في هذه التقنية الحصول على أجسام مضادة بشرية أخرى أحادية‎ ve ‏لها خواص مشابهة مع غياب‎ (RSV) ‏النسيلة لبروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي‎ to ‏التجارب العملية غير الضرورية. وتكون هذه الأجسام المضادة متميزة بناء على الحقيقة التي‎ ‏بنقص‎ Alia ‏مختلفة‎ (of JB ‏تتمثل في أن معظمها قد أنتج في تجربتين مختلفتين؛ باستخدام‎ ‏المناعة المركب الشديد. وقد حوفظ على خطوط الخلايا التي تعبر عن آر إف-١ و آر إف-”؟‎ ‏شهرآً على الترتيب؛ مجزأة بزمن‎ VT و١8 ‏في المستنبت لفترة زمنية ممتدة؛ أي؛ حوالي‎ ‏الجسم المضاد‎ 5S 5 ‏تضاعف تقريبي يتراوح من حوالي 50-1 ساعة. ويتراوح متوسط‎ ‏خلية/مل قد نمت‎ ٠١*١5 ‏ميكروغرام/مل في مستنبت بذر ب‎ VA ‏الخاص من حوالي‎ ‏لمدة ثلاثة أيام.‎ ‏سيشرح فيما يلي بتفصيل أكبرء يكون كل من آر إف-١ و آر إف-؟ عبارة عن‎ LS ١ ‏و‎ ١,1 ‏عند تراكيز‎ (ELISA) ‏مع ارتباط نصف مكتمل ببروتين-ف في معايرة‎ IgG (1K)
AA ‏تبلغ حوالي‎ isoelectric points ‏نانو غرام/مل على الترتيب؛ ويظهرا نقاط اسوية التكهرب‎ ١ ‏و 8,5 على الترتيب.‎ ‏لبروتين-ف من‎ Alle ‏وعلاوة على ذلك؛ تظهر هذه الأجسام المضادة تظهر ألفة‎ ‏وبعبارة دقيقة؛ يبلغ ثابت التفكك ل آر إف-١ كما حدد‎ (RSV) ‏الفيروس المخلوي التنفسي‎ ‏حوالي مرا جزيثي. وبالمثل يكون‎ TASYS ‏على جهاز‎ plasmon resonance ‏برنين بلازمون‎ ‏جزيئي؛ كما حدد بمقياس المعايرة‎ TY XY ‏آر إف-؟ عالي؛ يبلغ حوالي‎ Ka ‏ثابت التفكك‎ os ‏ومعاونيه‎ Wiseman ‏وفقاً لوايسمان‎ titration micro colorimetry ‏الدقيق لقياس الألوان‎
Ap) IAQ) ‏ومعاونيه‎ Robert ‏وروبرت‎ (a) 1A) ‏وبالإضافة إلى ذلك؛ فقد تبين أن هذه الأجسام المضادة ترتبط بشكل فعال مع‎ ‏بينما لا ترتبط مع خلايا بشرية‎ (RSV) ‏الخلايا المصابة ب الفيروس المخلوي التنفسي‎ ‏سرطان الحنجرة البشراني‎ (HEP-2) ‏طبيعية مختبرة؛ كبطانة المجاري التنفسية‎ © ‏خط خلايا ورم الكبد البشري‎ «HepG2) ‏؛ والكبد‎ (ccL2s3 ¢laryngeal epidermoid carcinoma ‏خط الخلايا اللمفاوية البدائية‎ (SB ‏النسيج اللمفاوي؛‎ ((HB8068 chuman hepatoma cell line ‏رقم الصنف‎ Aa ll ‏خط 7 اللمفاوي‎ (HSB) ‏و‎ CCL 120 ‏البشري؛ رقم الصنف‎ ‏خط سرطان غدة البروستات البشري؛ رقم الصنف‎ (LNCaP. FGC) ‏والبروستات‎ «CCL 120.1 (CRL 1740 |»
ومما هو جدير بالذكرء فقد تبين أن كل من آر إف-١‏ و آر إف-؟ يظهرا قدرة على معادلة الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ في أنبوب الاختبار بشكل كبير. وقد اثبت هذا في معايرتين مختلفتين (يوصفان بتفصيل أكبر فيما بعد)؛ أي؛ معايرة معادلة العدوى يجرى بتفاعل الفيروس أولياً مع جسم مضاد أحادي النسيلة منقى قبل إضافته إلى الخلايا (الذي يقيس ‎٠‏ قدرة الجسم المضاد على تثبيط العدوى بالفيروس) ومعايرة تثبيط الاندماج الذي يقيس قدرة الجسم المضاد أحادي النسيلة على تثبيط نمو الفيروس والتوسع بعد دخول الفهيروس إلى الخلية. وبالإضافة إلى ذلك؛ وكما سيوصف بتفصيل أكبر فيما بعد؛. يبط كل من آر إف-١‏ و آر إف-؟ العدوى بالفيروس لاثني عشر عزلة مختلفة عند تراكيز تتراوح على ‎٠‏ - الترتيب من حوالي ‎"٠‏ نانوغرام/مل إلى ‎٠٠٠١‏ نانوغرام/مل. وهكذاء يبتضح أن آأر إف-؟ يعمل بشكل أفضل من آر إف-١؛‏ حيث يثبط العدوى بالفيروس إلى ‎٠‏ 75 (8050) عند تراكيز أقل بنحو ‎١,75‏ إلى ‎٠١‏ أضعاف من آر إف-١.‏ وعلى النقيض من ‎lly‏ تلزم تراكيز أعلى من الجسم المضاد أحادي النسيلة لتثبيط الاندماج والتعبير عن مولد المضاد الفيروسي في الخلايا المصابة ‎elie‏ مع كون آر إف-١‏ ‎١‏ أكثر قوة بحوالي ‎٠١-8‏ أضعاف من آر إف-7. وعلاوة على ذلك. كان كل من آر إف-١‏ و آر إف-؟ فعالا ضد الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ من نوع 5 وهو نموذج أولي ل 6556 ‎«RS‏ وضد الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ من نوع ‎eA‏ وهو نموذج أولي ل ‎Long‏ 85. وهكذاء تشير النتائج في أنبوب الاختبار إلى انه يمكن استخدام الأجسام المضادة البشرية أحادية النسيلة الخاضعة للاختبار لمعالجة عدوى الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ ‏© > أو الوقاية منها والتي تسببها سلالات الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ المختلفة؛ ‎Lay‏ في ذلك النموذج الأولي ‎A‏ و 3. وكما وصف سابقاً؛ يحتفظ ببروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ على نحو جيد إلى حد ما في عزلات الفهيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ ‏المختلفة. وبناءً على ذلك؛ يحتمل ارتباط الأجسام المضادة أحادية النسيلة الخاضعة للاختبار والمضادة لبروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ بمغير خاصية محفوظ من ‎Yo‏ بروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏
ف وكما تم وصفه؛ ستستخدم الأجسام المضادة البشرية أحادية النسيلة أو الأجسام المضادة البشرية المأشوبة الخاضعة للاختبار التي تحتوي على سياقاتها الثقيلة والخفيفة المتغيرة (سيوصف تحضيرها ‎Las‏ بعد) كعوامل علاجية ووقائية لمعالجة عدوى الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ أو الوقاية منها بالمعالجة السلبية بالأجسام المضادة. وبصفة خاصة؛ ‎٠‏ قد يدمج سياق ال ‎DNA‏ الذي يحمل شفرة حقول مختلفة من ال ‎DNA‏ في ناقل التعبير الخاص بشركة أي دي ئي سي ‎IDEC‏ الموضح في الشكل ؟. وتوصف هذه النسخة بصفة جوهرية في طلب براءة الاختراع الأمريكي برقم متسلسل 0977 8/797/5. المملوك بشكل مشترك؛ المودع في ‎pV 290 «ly Yo‏ والذي ذكر في هذا البيان للإحالة إليه كمرجع. ويشار إلى هذا الحقل البشري الثابت الذي يحتوي على ‎JBL‏ مثل ‎Jia‏ غاما البشري ‎Jin)‏ ‏غاما البشري ؛ أو الشكل الطافر منهماء بغاما؛ ‎PE‏ (ينظر ‎calla‏ براءة الاختراع الأمريكية برقم متسلسل ‎١8/7974097/7‏ الذي ذكر في هذا البيان للإحالة إليه كمرجع). وفي العموم؛ يشمل هذا إعطاء شخص خاضع للاختبار قابل للإصابة أو مصاب بعدوى الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ مقداراً ‎Yad‏ علاجياً أو وقائياً من الأجسام المضادة البشرية أحادية النسيلة الخاضعة للاختبار. ويفضل أن يتراوح مقدار الجرعة الفعالة من حوالي ‎5٠‏ إلى ‎٠٠٠٠١‏ ‎ve‏ ميكروغرام/كيلوغرام؛ والأفضل من نحو ‎٠٠١‏ إلى ‎٠0050‏ ميكروغرام/كيلوغرام. غير أنه؛ يتراوح مقدار الجرعة المناسبة يختلف ‎alae)‏ على ‎Jol se‏ مثل حالة المصاب الذي ينبغي معالجته ووزنه؛الخ. ويمكن للمتمرسين بهذه التقنية تحديد المقادير المناسبة من الجرعات الفعالة. وقد تعطى الأجسام المضادة البشرية أحادية النسيلة الخاضعة للاختبار بأي أسلوب ‎ve‏ ملائم لإعطاء الأجسام المضادة. ونموذجياً؛ تعطى الأجسام المضادة عن طريق حقنهاء ‎Sle‏ ‏في الوريد؛ في العضل أو في الصفاق؛ ويفضل بتكوين ‎ADS‏ هوائية. وكما لوحظ ساقاء؛ يفضل بصفة خاصة الإعطاء بتكوين الحلالة الهوائية عندما يكون الشخص الذي ينبغي معالجته طفل حديث الولادة. وقد يجرى تشكيل الأجسام المضادة في صورة مقبولة صيدلياً بطرق معروفة؛ > باستعمال مواد حاملة أو سواغات صيدلية معروفة. وتشمل المواد حاملة والسواغات
EA
‏زلال مصل بقري‎ buffered saline ‏الملائمة على سبيل المثال محلول ملحي منظم‎ ad «bovine serum albumin ‏على ذلك؛ يكون للأجسام المضادة الخاضعة للاختبارء نظر؟ لارتفاع‎ 5 dle ‏استخداماً كمجسات‎ (RSV) ‏تخصصها وألفتها للخلايا المصابة بالفيروس المخلوي التنفسي‎ ‏هذا أخذ‎ Jody ‏وعادة‎ (RSV) ‏مناعية لتشخيص الإصابة بعدوى الفيروس المخلوي التنفسي‎ ١ ‏من المائع التنفسي؛ لشخص يتوقع انه مصاب بعدوى الفيروس المخلوي التنفسي‎ Die ‏عينة؛‎ ‏وحضت العينة مع الأجسام المضادة البشرية أحادية النسيلة الخاضعة للاختبار‎ (RSV) (RSV) ‏لكشف وجود خلايا مصابة ب الفيروس المخلوي التنفسي‎ ‏ويشمل هذا وسم الأجسام المضادة البشرية الخاضعة للاختبار بطريقة مباشرة أو غير‎ ‏مباشرة بجزيء مبلغ يكفل الكشف عن المتراكبات المناعية من الأجسام المضادة أحادية النسيلة‎ © ‏وتشمل أمثلة الوسوم المعروفة على سبيل المشال‎ (RSV) ‏مع الفيروس المخلوي التنفسي‎ radiolabels ‏والوسوم المشعة‎ lucifarase ‏لوسيفراز‎ (B-lactamas ‏لاكتاماز‎ -8 Jie ‏الانزيمات؛‎ ‏وتعتبر طرق إجراء الكشف المناعي لمولدات مضاد باستخدام أجسام مضادة أحادية‎ ‏في هذه التقنية. وكذلك؛ يمكن تشكيل توليفة من الأجسام المضادة‎ Tas ‏النسيلة معروفة‎ ‏الخاضعة للاختبار ومقدار فعال تشخيصياً‎ (RSV) ‏لبروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي‎ ve ‏من جزئ مبلغ مناسب؛ واستعمال هذه التوليفة كأدوات اختبار للكشف عن عدوى الفهيروس‎ (RSV) ‏المخلوي التنفسي‎ ‏المواد والطضرق‎ .-١ ‏استخدمت المواد والطرق التالية في الأمثلة من‎ ‏تحضير بروتين-ف وتنقيته‎ > © ‏ومعاونيه في مجلة‎ Walsh ‏حضر بروتين-ف بصفة أساسية وفقا لطريقة والش‎ ‏صفحة 7971-7487 سنة (949١م). وباختصارء أصيبت خلايا‎ Vo ‏المجلد‎ Gen. Virol (RSV) ‏من الفيروس المخلوي التنفسي‎ Long ‏بسلالة لونغ‎ 777٠ ‏عند نسبة اقتران بلغت‎ 2 ‏ساعة في‎ tA ‏وبعد الاستنبات لمدة‎ A ‏وهي سلالة متكيفة في أنبوب الاختبار من النوع‎ ‏جنيني؛‎ dae ‏مضاف إليه 75 من مصل‎ IMDM ‏قوارير الاستنبات 7-150 التي تحتوي على‎ vo ‏و7 ملي جزيئي من بيروفات الصوديوم‎ glutamine ‏و ملي جزيئي من غلوتامين‎
‎sodium pyruvate‏ حللت الخلايا في محلول منظم محلل من محلول ملحي منظم بالفوسفات ‎phosphate buffer saline (PBS)‏ يحتوي على ‎7/1١‏ من تريتون اكس-١٠٠ ‎Triton X-100‏ و ‎7١‏ من كولات منقوصة الأكسجين ‎deoxycholate‏ ثم نقي بروتين-ف من حلالة الخلايا الخام على عمود ألفة من نوع سيفادكس ‎Sephadex‏ المقترن بجسم مضاد لبروتين-ف أحادي ° النسيلة ‎(sl‏ بشكل موسع ‎B4‏ (نوع مقدم من شركة هيروكي ‎Hiroyki Tsutsumi (sa ged guid‏ تسوتسومي ‎Tsutsumi‏ ومعاونيه؛ ‎TAY‏ ١م).‏ وغسل العمود بشكل شامل بالمحلول المحلل ‎pid‏ وصول بروتين-ف المنقى في محلول من غلايسين ‎glycine‏ (بتركيز ‎٠,١‏ ‏جزيئي) درجة حموضته 1,5 ؛ يحتوي على ‎0,١‏ من كولات منقوصة الأكسجين ‎.deoxycholate‏ ثم أجريت معادلة ناتج التصويل مباشرة باستعمال محلول من تروميثامين ‎tromethamine (Tris) ye‏ (بتركيز ‎١‏ جزيئي) ‘ درجة حموضتة ‎AO‏ وأجريت له ديلزة من ‎PBS‏ ‏وبعد إزالة المنظف عن عمود يحتوي على هلام من نوع إكستراكتي-دي ‎Extracti-D gel column‏ (من شركة بيرس ‎(Pierce‏ مدينة روكفورد ‎«Rockford‏ ولاية إلينويس 05 رقم الصنف 46 7١٠)؛‏ حدد تركيز بروتين-ف بمعايرة مناعية أنزيمية ‎enzyme immunoassay (EIA)‏ وعقسْم المحلول باشعة ‎.gamma irradiation Lele‏ ‎Vo‏ تحضير الخلايا اللمفاوية حصل على الطحال بعد عملية استئصال لطحال مريض مصاب بفرفرية قلة الصفائح الدموية الثلقائية ‎cidiopathic trombopenic purpura (ITP)‏ وكانت العملية ضرورية من الناحية الطبية. وحضّر معلق من خلية مفردة عن طريق الغربلة من خلال غربال معدني ‎metal mesh‏ وغسل في وسط دلبيكو عذله إيزكوف ‎Iscov's Modified Dulbecoo's Medium‏ ‎(IMDM) - ©‏ مضاف إليه ‎AY‏ من مصل عجل جنيني. وأزيلت خلايا الدم الحمراء بالمعالجة بمحلول محلل منظم من كلوريد الأمونيوم ‎ammonium chloride‏ لمدة 0 ثانية عند درجة حرارة ‎TV‏ م (درجة مئوية). ثم غسل المعلق الغني بخلايا الدم البيضاء ‎white blood cell‏ مرتين باستعمال وسط يحتوي على مصسل؛ وأعيد تعليقه في وسط مجمد ‎tll‏ ‏)730 من مصل عجل جنيني مع 75 من كبريتوكسيد شائي المثيل ‎(DMSO)‏ ‎(dimethylsulfoxide vo‏ عند تعداد بلغ ‎*٠١‏ خلية/مل وحفظ مجمدا في نتروجين سائل ‎liquid nitrogen‏ لحين استعماله.
التمنيع في انبوب الاختبار ‎In vitro immunization (vi)‏ أحدث الاستنبات في 41 مضاف )4 ‎١‏ ملي جزيني من غلوتامين ‎Y 5 cglutamine‏ ملي جزيني من بيروفات الصوديوم ‎sodium pyruvate‏ والأحماض الأمينية ‎amino acids‏ غير الأساسية؛ 5 ‎YO‏ ميكروغرام/مل من 11-2 و ‎٠١‏ من مصل ‎dae‏ جنيني. وأضيف خليط من المضادات الحيوية يشمل ‎Yoo‏ ميكروغرام/ مل من امفوتيريسين ‎«amphotericin‏ ‎٠‏ ميكروغرام/مل من امبيسيلين ‎Sue ٠٠١ ampicillin‏ 5 غرام/ مل من كانامايسين ‎kanamycin‏ © ميكروغرام/ مل من كلورتتر اسيكيلين ‎9٠ cchlorotetracyeline‏ ميكر و غرام/ مل من نيومايسين ‎neomycin‏ و 8560 ميكروغرام/مل من غنتامايسين 01801010ع88. واستنبتت الخلايا في 7 مجموعات من العيون عند تعداد بلغ ‎"٠١7"‏ خلية/مل مع ‎Er‏ نانوغرام/ مل من ‎٠‏ بروتين-ف. وبعد ثلاثة ‎(old‏ جمعت الخلاياء غسلت وأعيد تعليقها في ‎HBSS‏ عند تعداد ‎MY XA‏ خلية/مل لإعادة تكوين ‎lal‏ المصاب بنقص المناعة المركب الشديد. إعادة تكوين الفئران المصابة بنقص المناعة المركب الشديد أعيد تكوين فئران أنثوية 00817 مصابة بنقص المناعة المركب الشديد عمرها يتراوح من ‎Ao‏ أسابيع عن طريق حقن ‎٠٠0‏ ميكرولتر من ‎HBSS‏ يحتوي على ‎"Vex‏ خلية طحال 0 بشرية قد عرضت لتمنيع في أنبوب الاختبار داخل الصفاق؛ ثم قويت الفئران بعد أسبوع من الحقن ب # ميكروغرام من بروتين-ف في ‎«CFA‏ وجرحت ذيول الفئران بعد ‎VO‏ يوم. ثم فحص مصل الفئران لمعرفة تركيز ال 80] البشري فيه وتحديد عيارات الجسم المضاد لبروتين-ف. استخلاص الخلايا البشرية من الفئران المصابة بنقص المناعة المركب الشديد البشري أ أنتجت فئران من الفئران المصابة بنقص المناعة المركب الشديد المحقونة بخلايا طحال بشرية والتي تحتوي على عيارات عالية من الأجسام المضادة لبروتين-ف البشرية أورام بطنية كبيرة. واستخلصت الأورام باستئصالها من الفئران التي ذبحت في ظروف معقمة؛ وحضرت معلقات من خلية مفردة؛ غسلت الخلايا ب 10034 يحتوي على ‎AY‏ من مصل ‎dae‏ جنيني واستنبتت عند تعداد بلغ ‎٠١‏ خلية/ مل في قوارير 1-25 تحتوي على ‎Ye‏ 14011 مع ‎7٠١‏ من مصل ‎dae‏ جنيني. اختبار لتحديد وجود ال ‎IgG‏ البشري والأجسام المضادة لبروتين-ف
‏لتحديد وجود ال 160 البشري والأجسام المضادة لبروتين-ف.‎ ELISA ‏أجري اختبار‎ ‏ميكروغرام/عين)‎ ١05 ‏ولهذا الغرضء طليت الألواح طوال الليل ب 6811-1 (بتركيز‎ ‏أو بروتين-ف )00 ,+ ميكروغرام/عين) على الترتيب في محلول بيكربونات منظم‎ ‏يحتوي‎ PBS ‏جزيني)؛ درجة حموضته 4,0 وتم حجزها ب‎ ٠,١ ‏(تركيزه‎ bicarbonate buffer ‏جنيني. وتضاف إلى اللوح سلسلة من محاليل مخففة من مصل فأرء‎ dae ‏من مصل‎ AY eo ‏البشري المرتبط بالإضافة‎ 180 Galas ‏محاليل استنبات طافية أو أجسام مضادة منقية.‎ ‏(سيجماء.......). واستعمل مصل بشري ذو‎ OPD ‏وركيزة‎ GAH 180- HRP ‏المتتابعة ل‎ ‏عيارات عالية مختار كضابط إيجابي في كلا المعايرتين؛ واستعمل 180 البشري متعدد النسيلة‎ ‏كمقياس في تقدير تركيز 180 البشري والأجسام المضادة‎ (hy »( ‏المنقى أو البروتين النخاعي‎ ‏أحادية النسيلة على الترتيب.‎ ٠١ ‏تسوية أنماط الأجسام المضادة البشرية‎ ‏على ألواح مطلية ببروتين-ف كما وصسف‎ ELISA ‏أجريت تسوية الأنماط في معايرة‎ ‏البشري المرتبط بإضافة متتابعة لأجسام مضادة أحادية النسيلة فأارية‎ IgG ‏أعلاه. ويُبين‎ ‏وأجريت مقارنات إيجابية‎ ask gr pd 73 2 pl ‏ومتخصصة بسلاسل‎ HRP ‏مقترنة ب‎ (var) ‏(3:3ر) أو‎ «(y2¢x) ‏مع البروتينات النخاعية للأنماط الإسوية من سلاسل ل د‎ Vo ‏الحرة.‎ a ‏وسلاسل » و‎ (A a) ‏أو‎ ‏تنقية بروتين-أ‎ ‏نقيت الأجسام المضادة من محاليل الاستنبات الطافية في عمود من نوع بروتين إيه‎ ‏وباختصارء جمعت المحاليل الطافية؛ رشحت‎ .00101610 A-sepharose 4B column «t= ‏سفروز‎ ‏ملم وأضيف إليها 70.07 من أزيد الصوديوم‎ ١," ‏ا خلال مرشحات حجم عيونها‎ © (Jo 8,6 ‏وأجريت موازنة الأعمدة (التي تحتوي على هلام بحجم يبلغ تقريباً‎ .8001017 azide ‏ثم حملت الأعمدة بالمحلول‎ sodium azide ‏في 5 باستخدام 7 من أزيد الصوديوم‎ ‏الطافي عند سرعة منخفضة. وبعد الغسل الشامل؛ صول 160 البشري أحادي النسيلة المرتبط‎ ‏(بتركيز 1 جزيئثي) ؛ درجة‎ sodium citrate ‏في محلول منظم من سترات الصوديوم‎ ٠١-نوكيرتتس ‏وديلزت من ع2:0و-17358 باستعمال مرشحات من نوع‎ V0 ‏حموضته‎ ve ‏وعقمت بأشعة غاما حتى استخدامها مرة أخرى.‎ (Amicon ‏(من شركة أميكون‎ Centricon 10 oy ‏وأعيدت‎ (V0 ‏الذي درجة حموضته‎ citric acid ‏وجددت الأعمدة باستعمال حمض الستريك‎ ‏لاستعمالها‎ sodium azide ‏موازنة الأعمدة باستعمال 5 مع 67 من أزيد الصوديوم‎ ‏لاحقاً.‎ ‏التركيز أسوي التكهرب‎ ‏للأجسام المضادة البشرية‎ isoelectric focusing (IEF) ‏أجري التركيز إسوي التكهرب‎ ° ‏(من شركة فارماسيا‎ polyacrylamide ‏في هلامات سبق تشكيلها في متعدد أكريل أميد‎ (A VY EAL ‏رقم الصنف‎ csweden ‏ولاية سويدن‎ cuppsala ‏مدينة يويسالا‎ cpharmacia ‏ا‎ ‎Veo ‏وباختصارء حملت عينات حجمها‎ .٠١ ‏ذات درجة حموضة في المدى من ؟ إلى‎ ‏فلط لمدة 90 دقيقة. واستخدمت عيارات للنقطة إسوية‎ ١500 ‏ميكرولتر واختبرت عند‎ ‏كمرجع. وبقعت الهلامات بصبغة كوماسي‎ ٠١١7© ‏إلى‎ BA ‏تتراوح من‎ (PE) ‏التكرهب‎ > /Yo ‏وأزيل التبقيع بمحلول منظم مزيل للصبغة يحتوي على‎ Coomassie blue stain ‏الزرقاء‎ ‎.acetic acid ‏من حمض الأسيتيك‎ ZA ‏و 7148 من الماء و‎ methanol ‏من الميثانول‎ ‏بقعة ويسترن‎ ‏من هلام متعدد أكريل‎ 7٠١ ‏نقل بروتين-ف المنقى الطبيعي وغير الممنع بالغلي إلى‎ ‏عند جهد‎ nitrocellulose ‏وبقسْع الهلام على صحيفة من نتروسليلوز‎ .polyacrylamide ‏أميد‎ Vo ‏فلط طوال الليل. وبعد النقل؛ حجز النتروسليلوز‎ ١ ‏فلط لمدة ساعتين وعند جهد‎ © ‏من‎ 7١١ ‏من 854و‎ 7/١ ‏لمدة ساعة عند درجة حرارة الغرفة باستعمال‎ nitrocellulose ‏وأضيفت الأجسام المضادة‎ PBS ‏وغسلت شرائح مختلفة في‎ PBS ‏في‎ Tween-20 ؟٠<نيوت‎ ‏الأولية؛ المصل المضاد لبروتين-ف من فأر مصاب بنقص المناعة المركب الشديد والمنقول‎ ‏مصاب بنقص‎ Jl ‏إليه طحال بشري؛ الضابط السلبي لسم الكزاز المعطل المضاد المأخوذ من‎ - © ‏المناعة المركب الشديد والمتقول إليه طحال بشري؛ أو الضابط الموجب المضاد لبروتين-ف‎ ‏وبعد الغسل الشامل‎ . 00:١ ‏لمدة ساعة. وقد خففت جميع الأمصال بنسبة‎ lal ‏المأخوذ من‎ ‏للعينات والضابط السالب؛ أو‎ GAH 1gG- HRP ‏أضيف الجسم المضاد الثانوي؛‎ (PBS ‏ب‎ ‎لوتفن-١-ورولك-‎ 4 ‏للضابط الإيجابي ؛ لمدة ساعة. وكشف عن البقع باستعمال‎ GAM IgG -4-chloro-1-naphtol Yo ‏التألق المناعي‎ ov ‏على‎ (RSV) ‏المصابة بالفيروس المخلوي التنفسي‎ HEp-2 ‏من خلايا‎ (1) 0X8) ‏ثبت‎ ‏ميكرولتر من مصل‎ 5١ ‏مبرد بالثلج م تفاعلت مع‎ acetone ‏شرائح زجاجية باستخدام اسيتون‎ ‏لمدة ساعة‎ ((MAD) ‏أو ؟ ميكروغرام/مل من أجسام مضادة فأرية منقاة‎ ٠١:١ ‏مخفف بنسبة‎ ‏م. وغسلت الشرائح وكشفت الأجسام المضادة المرتبطة بواسطة‎ TY ‏عند درجة حرارة بلغت‎ fluorescence ‏وشوهدت تحت مجهر تفلور‎ A YY ‏دقيقة عند‎ ١ ‏لمدة‎ «GAH IgG-FITC ° : .microscope
FAC ‏التحليل باستعمال ماسح‎ ‏خلية/ عينة)‎ '٠١( (RSV) ‏المصابة بالفيروس المخلوي التنفسي‎ HEp-2 ‏غسلت خلايا‎ ‏ثم أعيد تعليق حبيبات‎ ٠ (sodium azide ‏مع 761 من أزيد الصوديوم‎ PBS) ‏بمحلول منظم‎ ‏من أزيد الصوديوم‎ ZY ‏مع‎ PBS) ‏ميكرولتر من محلول منظم حاضن‎ 5٠ ‏الخلية في‎
Y= ‏ميكرو غرام/مل من آر‎ ١ ‏يحتوي على‎ (BSA ‏من‎ 760,١ ‏مضاف إليه‎ sodium azide ‏دقيقة من التحضين في الثلج؛ غسلت الخلايا وأعيد تعليقها في محلول‎ V0 ‏أو آر إف-؟. وبعد‎ ‏دقيقة أخرى في الثلج. وبعد الغسل ثلاث‎ Vo ‏لمدة‎ GAH IgG-FITC ‏منظم حاضن يحتوي على‎ ‏وحللت في‎ formaldehyde ‏من الفورمالدهيد‎ 7١ ‏مع‎ PBS ‏مل من‎ ١ ‏مرات؛ ثبتت الخلايا في‎ -Becton-Dickinson FACScan apparatus FAC ‏جهاز مسح بكتون-ديكينسون‎ Vo ‏تحديد الألفة‎ human MAbs ‏استخدمت طريقتان لتحديد ألفة الأجسام المضادة البشرية أحادية النسيلة‎ ‏لبروتين-ف القابل للذوبان:‎ ‏ارتبط الجسم المضاد‎ 1857/5 All ‏وباستخدام‎ «plasmon resonance ‏في رئنين بلازمون‎ ‏ارتاطا تساهمياً مع الجانب الرطب لأداة يمكن بواسطتها تحديد التغيثثر في الكتلة اعتمادآ‎ > © ‏المشع على الجانب الجاف من الأداة.‎ refraction of light ‏على التغيبشر في انكسار الضوء‎ ‏وجرى قياس‎ PBS ‏بتدفق ثابت من‎ Al La ‏وأضيفت تراكيز مختلفة من بروتين-ف ثم‎ ‏التغيثر في الكتلة نتيجة لانطلاق بروتين-ف من الجسم المضادء وحدد ”م وفقاً لعلم‎ ‏باختبار معدل التصويل من مستويات اشباع ابتدائية مختلفة.‎ Ka ‏الحركة. وحسب‎ ‏بمقياس الحرارة الدقيق‎ affinity constant ‏من ذلك حدد ثابت الألفة‎ Yau Yo ‏ومعاونيه كما‎ Robert ‏ومعاونيه وروبرت‎ Wiseman ‏وفقاً لطريقة وايسمان‎ microcalorimetry
يلي: حضن كل من آر إف-؟ وبروتين-ف مع بعضهما عند تركيز معروف في حجيرة حرارية ‎thermo-chamber‏ عند درجة حرارة بلغت 7 وقيس ‎all‏ في المحتوى الحراري ‎enthalpy change‏ نتيجة لتكون متراكب مناعي ‎immune complex‏ في المحلول. وأعيد التفاعل عند درجة حرارة بلغت ‎a0‏ وحسب ثابت الإرتباط © كدالة لدرجة الحرارة ‎o‏ وتغيُّر المحتوى الحراري ‎Gag‏ لروبرت ‎Robert‏ ومعاونيه 5 88( للمعادلة التالية: ‎KwKobs. ¢ AHobs/R{1/T-1/TTubs). AC Tobs/R. )1/2-1/7 Toba), (T/Tobs) AC/R‏ حيث يمثل ‎Kobs‏ ثابت اتزان الإرتباط ‎binding equilibrium constant‏ ويمثل ‎sill AHP‏ في المحتوى الحراري الملاحظ تجريبياً؛ عند درجة حرارة مطلقة معينة ‎¢(Tobs)‏ يمثل 1 ثابت الغاز العام ‎AY) universal gas constant‏ 3( ويمثل عد التغيثثشر في سعة الترابط الحرارية ‎binding heat capacity change ٠١‏ المحددة تجريبياً. معايرة معادلة فيروس ‎Sn‏ بمتمم استخدمت سلالتان مخبريتان (لونغ ‎Long‏ النوع م و 188797 النوع 8) و ‎٠١‏ مواد معزولة من سلالات الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ من النوع البري؛ التي عُشزلت عن أطفال خضعوا للعلاج في المستشفىء لتقدير ‎MAbs‏ البشرية المضادة لبروتين - ف على ‎Ve‏ المعادلة. وحضنت محاليل مخففة متسلسلة من ‎MAb‏ البشسري مع الفيروس ‎٠٠.١٠‏ وحدة تكوين لويحة ‎((pfu) plaque forming unit‏ في وجود المتممة لمدة © دقيقة عند درجة حرارة الغعرفة في ‎٠٠١‏ ميكرولتر من 741 ين من صفيحة المعايرة الدقيقة. وأضيفت خلايا ‎(osefY x0) HEp-2‏ إلى ‎Yoo‏ ميكرولتر من وسط أصغري أساسي ‎(MEM) minimum essential medium‏ وحضنت لمدة > ثلاثة أيام عند بلي وأضيف 7/45 من ثاني أكسيد الكربون (,00). ثم غلسلت الصفائح؛ ثبثتت بالأسيتون ‎acetone‏ وجففت بالهواء وكشف عن مولد مضاد الفيروس المخلوي التنتفسي ‎(RSV)‏ باختبار ‎ELISA‏ باستخدام ‎MAbs‏ فأرية. وحددت نقطة نهاية المعادلة على نحو اختياري على أنها نقطة التخفيف التي تخفض إنتاج مولد المضاد بنسبة ‎75٠‏ مقارنة بعيون ضابطة ليس فيها جسم مضاد. ‎Yo‏ معايرة تثبيط الدمج الفيروسي
حددت عيارات تثبيط الدمج بحضن ‎٠٠١‏ فيروس مخلوي تنفسي ‎(RSV)‏ من نوع 70050 لونغ ‎Long‏ (نمط أولي لفيروس من النوع ‎(A‏ أو 6556 85 (مادة معزولة سريرية من النوع 8) مع خلايا ‎VERO‏ (©*١٠"/عين)‏ حضنا تمهيديا في صفائح معايرة دقيقة؛ لمدة ؛ ساعات عند درجة حرارة بلغت ‎TiO a FY‏ من ,0©. وأضيفت تراكيز مختلفة من ‎٠‏ الأجسام المضادة أحادية النسيلة البشرية أو الضوابط لكل عين وحضنت المستنبتات المضاعفة أربع مرات لمدة ‎١‏ أيام عند للم 7.0 من ‎.CO,‏ وتحتوي المستنبتات الضابطة على ‎Wa‏ ‏| غير مصابة بالفيروس (سالبة) أو خلايا مصابة في غياب الأجسام المضادة (موجبة). وكشف عن نمو الفيروس باختبار ‎ELISA‏ باستخدام أمصال مضادة لبروتين-ف متعددة النسبلة مأخوذة من أرنب ‎IgGs‏ مضاد للأرنب موسوم ب بيروكسيداز من ‎Jad‏ الخيل ‎horse raddish‏ ‎(HRP) peroxidase ٠‏ وكشف عن التفاعل بركيزة ‎TM Blue‏ (شركة ‎(KPI‏ مدينة جيثرسبرغ ‎«Gaithersburg‏ ولاية ماريلاند ‎(Maryland‏ وحددت العيارات (الجرعة الفعالة ‎5٠‏ (28050)) على أنها تراكيز الأجسام المضادة التي تثبط نمو الفيروس بنسبة ‎Jon‏ بناء على التحليل التراجعي ‎MAD de ad regression analysis‏ التي تحدث الاستجابة. المثال ‎١‏
‎٠‏ عيارات مصاب بنقص المناعة المركب الشديد ومنقول إليه طحال بشري تلقى ‎Yo‏ فأر مصاب بنقص المناعة المركب الشديد خلايا طحال بشرية من متبرع واحد مصاب بفرفرية نقص الصفائح الدموية. وقد سبق استنبات هذه الخلايا لمدة ثلاثة أيام في وجود 11-2 وتراكيز مختلفة من بروتين-ف القابل للذوبان. وأعيد إعداد كل الحيوانات بنجاح؛ وبعد التقوية ببروتين-ف؛ تغيرت تراكيز 180 البشري الكلية من ‎VY‏ ميكروغرام/مل إلى ‎٠١‏ ‏© .- ملغم/مل في المصل وتغيرت عيارات مضاد بروتين-ف من ‎TY XY‏ إلى ‎SBI) Vex ١‏ الجدول 1). ولم يللاحظ أي علاقة بين التعرٌض لبروتين-ف في أنبوب اختبار وعيارات مضاد بروتين-ف داخل الجسم. وقد لوحظ مسبقاً ‎Lad‏ يتعلق باستخدام الطريقة الحالية؛ في نظام مولد مضاد الفريتين في الحصان أن التعرض لمولد المضاد ضروري خلال عملية استنبات خلايا الطحال في أنبوب الاختبار للتأكد لاحقاً من عيار جسم مضاد معين في الجسم ‎Ye‏ الحي ‎٠‏ ويتُعزى التناقض بين هذين النظامين للفرق بين مولدات المضاد الملتضمئنة:
حيث أن البشر غير معرضين لفريتين الحصان بشكلٍ طبيعي؛ وأن خطوة 171 تشمل برمجة خلايا الطحال بمولد مضاد وتعمل على تحفيز استجابة أولية في أنبوب الاختبار؛ ومن ناحية ‎«(5A‏ فإن كل إنسان فعلياً لديه مناعة ضد الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ عن طريق الإصابة الطبيعية في بداية ‎lad‏ والتي تؤدي إلى ذاكرة دائمة لبروتين-ف؛ وعليه فإن ‎٠ |‏ التنبيه ب 1-2 فقط في أنبوب الاختبار ثم التقوية لمرة واحدة داخل الجسم يكفي لتحفيز استجابات ثانوية. وكانت الأمصال المضادة متعددة النسيلة؛ كما تبين من نماذج التركيز متساوية الجهد الكهرباني ‎.isoelectric focusing patterns‏ (البيانات غير موضحة) . واختبرت تفاعلية الأمصال المضادة هذه ل بروتين-ف في بقعة ويسترن ‎Western bolt‏ وقد بينت النتائج أن الأجسام ‎ye‏ المضادة البشرية متعددة النسيلة قد ميزت بروتين-ف الطبيعي القابل للذوبان في صورته الديمرية ‎VE) dimmer form‏ كيلو دالقتون) وصورته المونمرية ‎monomer form‏ ‎vy)‏ كيلودالتون)؛ وكذلك تفاعلت هذه الاجسام المضادة متعددة النسيلة مع بروتين-ف الممسوخ ‎denatured F-protein‏ تفاعلاً_شديداً وارتبطت بصفة خاصة ‏ بوحدتين فرعيتين بمقدار ‎EA‏ كيلودالتون ‎YY‏ كيلودالتون (البيانات التمثيلية في الشكل ‎.)١‏ وهذا يفترض ‎Ve‏ أن جزء على الأقل من الإستجابة الخلطية ‎humoral response‏ لبروتين-ف موجهة نحو مغيرات خاصية خطية غير امتثالية ‎linear, non conformational epitopes‏ للجزيء. وأوضحت دراسات التألق المناعي كذلك نوعية أمصال ‎J‏ المصاب بنقص المناعة المركب الشديد والمنقول إليه خلايا ‎Jab‏ بشري؛ حيث تتفاعل الأمصال الممنعة؛ وليست أمصال الفأر المصاب بنقص المناعة المركب الشديد الأصلي؛ بقوة مع خلايا ‎HEp2‏ المصابة بعدوى © - الفيروس المخلوي التنفسي ‎lai) (RSV)‏ الشكل ؟). ولم تُلاحظ أية تفاعلية اتجاه خلايا 2م غير المصابة المستخدمة كضابط سلبي. وعليه استثنتيج أن بروتين-ف القابل للذوبان هو مولد مضاد ملائم لإنتاج أجسام مضادة متخصصة بمولد مضاد فيروسي غشائي ‎membrane viral antigen‏ يظهر على خلايا ‎Alas‏ طبيعياً. المثال ‎١‏ ‎ve‏ تحديد الأجسام المضادة في مستنبتات خلايا أورام ov ‏وحصدت الخلايا‎ Cig pn ‏كل الفئران ذات العيارات العالية من مضاد‎ Casal ‏ورقم‎ ١ ‏والطحال. وقد شكّل الفأران (رقم‎ peritoneal lavage ‏الصفاق‎ Jue ‏البشرية من‎ ‏بشكل تلقائي أورام بطنية صلبة‎ (hu-SPL ‏والمنقول إليهما‎ SCID ‏ب‎ ناباصملا‎ Vo ‏استتشخلصت ثم مزقت وحولت إلى معلتق خلوي مفرد.‎ abdominal solid tumors ‏وأفرزت خلايا الأورام أجسام مضادة لبروتين-ف كما حدّد اختبار م181158. ويشار إلى‎ ‏هذه الأورام والأجسام المضادة ب آر إف-١ و آر إف-؟. ولقد أنتيج كل من آر إف-١ و‎ ‏عن كل من‎ Vie ‏آر إف-؟ في تجربتين مختلفتين مفصولتين بمدة شهرين تقريباً؛ ثم‎ ‏على حدة؛ وهي بذلك‎ US ‏المصابة بنقص المناعة المركب والمنقول إليها طحال بشري‎ of) dl) ‏شهر و 16 شهر‎ YA ‏أجسام مضادة مميزة؛ قد رسخت نفسها في وسط الاستنبات لأكثر من‎ ‏ساعة. ويتراوح تركيز الجسم‎ EAST ‏على الترتيب؛ مع انقسامها بزمن تضاعف يتراوح من‎ ٠ 1٠١*065 ‏ميكروغرام/مل في مستنبت بثُذر بمعدل‎ 1-١5 ‏المضاد الخاص نموذجياً من‎ ‏خلية/مل وتثرك لينمو لمدة ثلاثة أيام.‎ ‏نقّي الجسمان المضادان أحاديا النسيلة البشريان من مواد‎ Gaal ‏ولمزيد من‎ ‏وباستخدام أعمدة من سفاروز‎ caffinity chromatography (AN ‏الاستنبات الطافية بالاستشراب‎
IgG (1k) ‏ويعتبر كل من آر إف-١ و آر إف-؟ عبارة عن‎ Protein A Sepharose ‏بروتين أ‎ ve ١ ‏عند 6,1 و‎ ELISA ‏تتُظهير نصف الارتباط الأقصى ببروتين-ف في اختبار‎ Cua ‏ومن نموذج النقل في التركيز متساوي الجهد‎ (FSI ‏نانوغرام/مل على الترتيب (انظر‎ ‏الكهربائي (187)؛ حددت نقاط تساوي الجهد الكهربائي لكل من آر إف-١ و آر إف-؟ فبلغت‎ ‏على الترتيب (انظر الشكل 4). وقد ميز كل من آر إف-١ وآر إف-؟ بصفة‎ Ad AA ‏في تعداد الخلايا‎ (RSV) ‏المصابة بعدوى الفيروس المخلوي التنفسي‎ HEp2 ‏ا خاصة خلايا‎ © (Kd) dissociation constant ‏(انظر الشكل #). وحْدٍّ ثابت التفكك‎ flow 100607 ‏التدفقي‎ ‏جزيئي.‎ ٠١ ٠١ ‏ل آر إف-١ بواسطة رئنين بلازمون على جهاز 145975؛ فكان في المدى‎ ‏ومعاونيه‎ Wiseman ‏ل آر إف-؟ بمقياس الحرارة الدقيق للمعايرة وفقآً لوايسمان‎ (Kd) ‏وحدد‎ ‏جزيئي.‎ TV XY ‏ومعاونيه (1584م) فبلغ‎ Robert ‏وروبرت‎ op) 949) ‏المثال ؟‎ vo ‏تخصصية النسيج لمضاد بروتين -حف‎ oA ‏فحصت تفاعلية الأجسام المضادة المنقاة مع سلسلة من خطوط خلايا بشرية متوفرة‎ ‏بمعايرات‎ (ATCC) American type culture collection ‏في مجموعة المزارع النمطية الأمريكية‎ ‏وقد‎ (I ‏التألق المناعي غير المباشر المقاس بمقياس تعداد الخلايا التدفقي (انظر الجدول‎ ‏أظهرت النتائج أن الأجسام المضادة لم ترتبط بخطوط الخلايا التي تمثل بطانة الجهاز التنفسي‎ ‏اوعصصمالء‎ epidermoid carcinoma ‏ورم الحنجرة البشروي‎ «HEp-2) respiratory tract lining 8 ‏خط خلايا ورم كبدي بشري‎ (HepG2) liver ‏الكبد‎ (CCL 23 ‏رقم الصنف‎ lymphoid tissue ‏النسيج اللمفاوي‎ (HB 8065 ‏صعصسراء رقم الصنف‎ hepatoma cell line ‏رقم الصنف‎ chuman B lymphoblastoid cell line B ‏جذعية لمفاوية‎ LA ‏خط أورام‎ «SB) prostate ‏والبروستات‎ (CCL 120.1 ‏خط خلايا أورام لمفاوية 7؛ رقم الصنف‎ <HSB 5 CCL 120 <human prostate adenocarcinoma line ‏خط ورم غدة البروستات البشري‎ (LNCaP.FGC) | ٠ .)081, 1740 ‏رقم الصنف‎ ‏المثال ؛‎ ‏النشاط الوظيفي في أنبوب اختبار‎ ‏عرضت الأجسام المضادة لنوعين من المعايرات الوظيفية لتحديد ما إذا كان لها قدرة‎ ‏على معادلة الفيروس في أنبوب اختبار حيث أجريت معايرات معادلة العدوى بتفاعل الفيروس‎ ve ‏على تثبيط‎ MAD ‏وبذلك تعكس قدرة‎ LDA ‏منقى تفاعلاً تمهيديا قبل إضافته إلى‎ MAD ‏مع‎ ‏عدوى الفيروس؛ تثبيط الاندماج الذي يعكس بدوره قدرة الأجسام المضادة على تثبيط نمو‎ ‏الفيروس وتوسعه بعد دخول الفيروس إلى الخلية. وقيست محصلة كل من‎ ‏المعايرات على أنها مقدار الفهيروس المنطلق في المستنبت بعد فترة حضانة‎ ‘EIA ‏معينة؛ كما هو محدد بمعايرة مولد مضاد الفيروس في‎ Y. ‏من الجسمين المضادين من منع عدوى الفيروس؛ لكل من المواد‎ JS ‏وقد تمكّن‎ ‏نانوغرام/مل إلى‎ Ye ‏عند تراكيز تتراوح من‎ LSI ‏المعزولة الاثنتي عشر الخاضعة‎ ١٠-فإ ‏نانوغرام/مل؛ لكل من آر‎ ١١5 ‏نانوغرام/ مل إلى‎ A ‏نانوغرام/ مل ومن‎ ٠ ‏أفضل على الدوام من آر إف-1؛ حيث‎ Yoda ‏آر‎ eld ‏وآر إف-؟ على الترتيب. وكان‎ ‏عند‎ ((EDSO) 5٠ ‏عدوى الفيروس إلى 7860 ( الجرعة الفعسّالة‎ TA vs
تراكيز أقل ب ‎VY‏ إلى ‎٠١‏ أضعاف من ‎JF‏ إف-١.‏ ويبين الجدول ]1 البيانات التمثيلية. وكما هو متوقع؛ فثمة حاجة إلى تراكيز أعلى من ‎MAb‏ لتثبيط الاندماج والتعبير عن : مولد مضاد الفيروس في الخلايا التي سبق وأصيبت بالفيروس. وفي هذه المعايرة كان آر ‎٠‏ إف--1١‏ أكثر فاعلية بخمس أو عشر أضعاف من آر إف-7. وكان كل من 186 أكثر فاعلية في النموذج الأولي 6556 ‎RS‏ من النوع 8 مقارنة بالنموذج الأولي ‎RS Long‏ من النوع م (انظر الجبدول ‎(I‏ ‏الجدول 1 ض الفار انببوب الاختبار ميكروغرام/مل ‎ee |e‏ الس ل ‎on‏ | رورس | ل لمر ااا ‎seen | + |‏ ااا اا ‎a‏ | تا الس لس ا ا لت ا ‎oc‏ ‏ات ان الجا ل ‎ce‏ ل ان اسن اد مس ل ل ا الجدول !: استنبتت خلايا طحال من متبرع واحد في وجود 11-2 لمدة ثلاثة أيام؛ ‎٠‏ مع أو بدون بروتين-ف. وأعيد إعداد ‎leas J‏ بنقص المناعة المركب الشديد ب ‎Next‏ ‏خلية وقؤي ب ‎٠١‏ ميكروغرام من بروتين-ف في ‎CFA‏ حقناً داخل الصفاق. وفي ‎Ol‏ ‏ذات الأرقام ‎٠‏ 7 ؛ ؛ وه حُقنت خلايا ‎Allee‏ جديدة بمقدار ‎١٠١77١‏ بمادة التقوية. ا
‎DT ag‏ تركيز 190 البشري بالمقارنة مع منحنى قياسي ل 180 متعدد النسيلة ‎A ag‏ عيار مضاد بروتين-ف بالتخفيف في 518 للوصول إلى نقطة النهاية. الجدول ‎I‏ ‎wma‏ 2 مصابة بالفيروس | بشرة حنجرية مصابة بالفيروس المخلوي ++ + + المخلوي ‎(RSV) willl‏ التنفسي ‎(RSV)‏ ‎wees | ow‏ ‎wees | ww‏ أ ‎EE‏ ‎oe hee‏ الجدول 11 : تفاعلية آر ‎Yoo‏ مع خطوط خلايا مختلفة. حيث ‎Cua to‏ خطوط خلايا مختلفة إلى وسم تألق مناعي غير مباشر باستخدام آر إف-؟ بمعدل ‎"Vfl je gli 05‏ خلية. ‎aad “ls‏ جزء ‎Fab‏ من ‎IgG-FITC‏ مأخوذ من ماعز يعمل ضد مولدات مضادات بشرية كخطوة ثانية. ويشير (-) إلى أنّ وجود آر إف-؟ لم يؤدي إلى تغير مجرى معدل التألق؛ ويشير (+) إلى زيادة في معدل الوسم بمقدار ‎Aad ١,5‏ لوغاريتم. الجدول ]11 الجسم عيار 11150 فعالية تثبيط الاندماج الجسم المضاد | عيار ‎EDSO‏ فعالية معادلة العدوى المضاد ‎em]‏ ضيه اهم ‎١‏ (النوع ‎(A‏ (النوع ‎(B‏ (النوع ‎(A‏ (النوع ‎(B‏ ‎١‏ ‎٠.٠ :‏
‎J‏ إف- | ‎©٠١٠١‏ نانوغرام/مل | ‎5٠660‏ نانوغرام/مل آر إف-١أ ‎A‏ نانوغرام/مل | ‎Y‏ نانوغرام/مل ¥ الجدول 11- ييُعرف ‎EDSO‏ على أنه تركيز الجسم المضاد الذي يثبط نمو الفيروس بمقدار ‎Von‏ على أساس التحليل التراجعي لجرعة الأجسام المضادة أحادية النسيلة التي تحدث الاستجابة. مثال المقارنة © تحفيز استجابات استدعاء 186 لبروتين-ف في أنبوب اختبار تعرّض أكثر من 7.55 من السكان الذين تتجاوز أعمارهم السنتين للفيروس المخلوي التتفسي ‎(RSV)‏ واستجابوا له بنجاح؛ انظر ما ‎ela‏ عن ‎Henderson‏ ومعاونيه في مجلة ‎Med‏ ‏المجلد ‎(Fey‏ صفحة 5754-5750 ‎AVA‏ )2 وبناء عليه ينبغي أن يؤدي اختبار مناعة خلايا طحال في أنبوب الاختبار ببروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ إلى استجابات ‎٠‏ - استدعاء؛ وبالفعل حفزت استجابات 180 بصفة رئيسية في أنبوب الاختبار ‎Lay‏ الطحال (انظر الشكل 0( وكان تركيز مولد المضاد الأمثل؛ البالغ ‎5٠‏ نانوغرام/مل؛ أقل برتبة واحدة على الأقل مما لوحظ لمولدات المضاد التي تعمل على تحفيز استجابات ‎ddl‏ أي الفريتين» بتركيز ميكروغرام/مل؛ وانظر ما ‎ela‏ عن بورنر ‎Boerner‏ ومعاونيه في مجلة امسمس«ل_المجلد ‎VEY‏ صفحة ‎(40-AT‏ )2199 وبرامز ‎Brams‏ ومعاونيه في مجلة ‎(Hum.
Antibod.
Hybridomas ٠‏ المجلد ‎of‏ صفحة 7؛-876؛ 187 ١م.‏ وعليه ينبغي الأخذ بعين الإعتبار أن البرمجة في أنبوب الاختبار ببروتين-ف يحفز استجابات ثانوية مماثلة. وقد فشلت عدة محاولات لتحفيز استجابات ملحوظة في أنبوب اختبار لبروتين-ف من الفيروس المخلوي التتفسي ‎(RSV)‏ باستخدام 01145 والخلايا المشتقة من اللوزتين. وقد أنتج جهد محدود لإنتاج أجسام مضادة أحادية النسيلة من خلايا طحال مبرمجة في © | أنبوب اختبار عدة أجسام مضادة أحادية النسيلة من 180 مضاد لبروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ بيد أن معظم هذه الأجسام المضادة يتفاعل ‎Gils‏ مع أحد مولدات المضاد العديدة الضابطة في اختبار 81158 (النتائج غير مبينة). المثال + تنسيل جينات تحمل شفرة آر إف-؟
لم تنتج نسيلة آر إف-١‏ ولا نسيلة آر إف-؟ مقادير ملحوظة من الجسم المضاد. وكذلك ينمو هذان الخطان من الخلايا بشكل أفضل في وسط يحتوي على ‎7.7١‏ من مصل من جين عجل ‎«(FCS) fetal calf serum‏ وهذا يشكل عيب لأنه يؤدي إلى تلويث الجسم المضاد المنقتّى ب 160 بقري. وعليه؛ فإنه بغية التمكثن من إنتاج وتنقية مقادير من الجسم > المضاد الضروري لعمل اختبارات ذات هدف على النماذج الحيوانية؛ والتي تحتاج عادة إلى ما لا يزيد عن ‎١‏ غرام من جسم مضاد معين؛ من المفيد نقل الجينات التي تحمل شفرة آر إف١‏ و آر إف-7 إلى ناقل إنتاجي ‎production vector‏ وخط خلايا. وقد طورت الجهة الحالية المتتازل لها عن براءة الاختراع؛ المتمثلة في شركة فارماسيتيكالز أي دي بي سيء إنك. ‎«IDBC Pharmaceuticals, Inc.‏ نظام إنتاج سوي التتوى ‎eukaryotic production system‏ .0 فعثّال يؤدي إلى إنتاج أجسام مضادة أحادية النسيلة بشرية في خلايا ‎(CHO‏ ويوصف نظام الناقل هذا في طلب براءة الاختراع الأمريكية المتنازل عنه لعدة جهات برقم متسلسل 4/7797 المودع في ‎a) 4300 ly Yo‏ وفي طلب براءة الاختراع الأمريكية المتنازل عنه لعدة جهات برقم متسلسل 4/159,049؛؛ المودع في © نوفمبر؛ ‎YAY‏ وقد ذكر كل منهما في هذا البيان للإحالة إليهما كمرجع. وعادة ينتج عن استخدام هذا النظام من خلايا ‎CHO Vo‏ مخمجة تحويلياً لجين الجسم المضاد إنتاج حوالي ‎٠٠0١0‏ ملغم من الجسم المضاد لكل لتر ‎fide or (pa JST Spinner iss Cline i deme Glo gsin Y Taus (n‏
مخمرات ‎fermentors‏ بعد تضخيمها في ميثوتركسات ‎.methoterxate‏ ‎pa Ce‏ حوالي ‎DV exe‏ من خلايا آر إف-؟ المستنسلة في مستنبت الخلايا (انظر أدناه) إلى استخلاص بالحمض النووي الريبي ‎(RNA) ribonucleic acid‏ باستخدام عدة عزل ‎RNA YT‏ رسول ‎(mRNA) massenger RNA‏ « فاست تراكت ‎Fast Tract‏ (شركة انفتروجين ‎<In Vitro Gen‏ مدينة سان ديجو ‎«San Diego‏ ولاية كاليفورنيا ‎(California‏ وحضرت سلسلة أحادية مجدولة من ‎DNA‏ مكمل ‎(cDNA) complementary DNA‏ باستخدام بادئ من ثيميدين منزوع الأكسجين قصير السلسلة ‎coligo-dT primer‏ وأنزيم النسخ العكسي ‎ad fl .reverse transcriptase‏ جزء من ‎cDNA‏ كمادة أولية لتفاعل البلمرة الأنزيمية ‎yo‏ المتسلسل ‎(PCR) polymerase chain reaction‏ المكبر لمناطق مختلفة من الجينات. وأجري
تفاعل البلمرة الأنزيمية المتسلسل باستخدام مجموعتين من البوادئ إسياقات التمييز أرقام: ‎[o—)‏ (انظر الجدول ‎(IV‏
1¢ الجدول ‎IV‏ ‏بوادئ 5 ‎ALE‏ السلسلة بموقع 1 ‎Mu‏ ‎(AG),,ACGCGTG(T/C)CCA(G/C)TCCCAGGT(G/C)CAGCTGGTG 3 Vil‏ '5 © ‎(AG),oACGCGTGTC(T/C)TGTCCCAGGT (A/G)CAG(C/T)TG(C/A)AG 3' Val‏ 5 ‎(AG);oACGCGIGTCCAGTGTGAGGTGCAGCTG 3' Vid °‏ 5 ‎(AG); oACGCGTGTCCTGTCCCAGGTGCAG 3° Vid‏ 5 ‎(AG), oACGCGIGTCTGGCCGAAGTGCAGCTGETG 3 7‏ 5 إسياق_ التمييز رقم 1[ جديلة غير ‎anti-sense strand di sxe‏ لبادئ منطقة ‎ls‏ من سلسلة ثقيلة بموقع 1 ‎Nhe‏ ‎(AG);oGCCCTTGGTGCTAGCTGAGGAGACGG 3 Ve‏ 1981-4 بوادئ سلسلة ‎LIS‏ بموقع ‎Dra III‏ ‎(AG) ,,CCAGGTGCACGATGTGACATCCAGATGACC 3° .‏ '5' ‎(AG),oCCTGGATCACGATGTIGATATTGTGATGAC 3' . Y‏ '5 ‎(AG) ,oCCAGATACACGATGIGAAATTGTGTIGAC 3' . Y‏ '5 ‎Vo‏ ؛. '3 ‎(AG),TCTGGTGCACGATGTGACATCGTGATGAC‏ '5 جديلة غير معيّنة لبادئ منطقة ‎LIS‏ الثابتة بموقع ‎Bsi WI‏ ‎(AG);oIGCAGCCACCGTACGTTTGATTTCCA(G/C)CTT 3° Cx‏ 5 * تفسير للجدول ‎TV‏ استتخدمت بوادئ من نوويتيدات قصيرة السلسلة ‎oligonucleotides‏ ‎dala‏ لتضخيم تفاعل بلمرة أنزيمية متسلسل لمناطق مختلفة من السلسلة الثشغيلة والخفيفة ‎ve‏ للغلوبلين المناعي البشري ‎٠‏ وو , ضصيع خط غامق تحث مواقع تحديد ‎Wil‏ لتنسيا .
+
صممت المجموعة الأولى من البوادئ لتضخيم المناطق المتغيرة من السلسلة الثقيلة. وتتكون هذه المجموعة من بادئ عند الطرف 3 يرتبط في منطقة ‎J‏ وخمسة بوادئ متخصصة بعائلة معينة عند الطرف 5 ترتبط في القائد المتأخر ومنطقة الهيكل ‎.١‏ وصممت المجموعة الثانية من البوادئ لتضخيم منطقة كابا المتغيرة. وتتكون هذه المجموعة من بادئ عند الطرف 37 وأربعة بوادئ عند الطرف 5 ترتبط في القائد المتأخر ومنطقة الهيكل ‎١.١‏ ورحّلت تفاعلات ‎PCR‏ كهربائياً على هلامات أغاروز ‎agarose gels‏ وقتشطعت ‎day dl‏ مسن © زوج قاعدي ذات حجم مناسب. ‎DNA Spas‏ كهربائياآً؛ قطع بأنزيمات تحديد مناسبة ونسّل في ناقل تعبير نيوسبلا ‎NEOSPLA‏ ل ‎IDEC‏ (انظر الشكل ‎(TV‏ ويحتوي ناقل نيوسبلا ‎NEOSPLA‏ المستّخدم للتعبير عن الأجسام المضادة البشرية على ما يلي: ‎=CMV 0.‏ محضض فيروس مضخم للخلية؛ ‎BETA‏ محضض رئيسي لغلوبين بيتا الفأري؛ ‎=BGH‏ إشارة هرمون نمو بقري لإضافة متعدد الأدنيليين؛ ‎=SVO‏ أصل ‎J Sill‏ 5740؛ ‎NI‏ أكسون ‎١‏ لنيومايسين فوسفوترانسفراز؛ ‎SND‏ أكسون 7 لنيومايسين فوسفوترانسفراز؛ 7-7 المنطقة الثابتة من ‎LIS‏ لغلوبلين مناعي بشريء ‎=HEAVY‏ المنطقة الثابتة ‎PE‏ من غاما ‎١‏ أو غاما 4 لغلوبلين ‎elie‏ بشري؛ ‎=SV AE SL‏ منطقة إضافة متعدد
.5740 ‏الأدنيلين‎ ae ‏لإنتاج جينات غلوبلين‎ IDEC ‏ل‎ NEOSPLA ‏نواقل تعبير نيوسبلا‎ Cia” 0 ia (AY ‏المجلد‎ (Blood ‏ومعاونيه في مجلة‎ Reff ‏مناعي على نطاق واسع (انظر ما جاء عن ريف‎ ‏صفحة 445-4305 1354م المذكورة في هذا البيان بكامل محتواها للإحالة إليها كمرجع).‎ ‏وقد عبر بنجاح عن مخاليط خيمرية من خلايا الفأر والإنسان؛ مخاليط خيمرية من خلايا‎ ‏باستخدام هذه‎ Alle ‏والإنسان والأجسام المضادة البشرية عند مستويات‎ primates ‏الرئيسات‎ © ‏على جين نيومايسين فوسفوترانسفراز لاختيار‎ NEOSPLA ‏نيوسبلا‎ Jil ‏النواقل. ويحتوي‎ ‏البلازميدي بثبات. وبالإضافة إلى ذلك؛ يحتوي ناقل‎ DNA ‏التي تدمج ناقل‎ CHO LDA ‏للتضخيم‎ dihydrofolate reductase ‏على جين ريدكتاز ثنائي هيدروفولات‎ NEOSPLA Slaw ‏في ميثوتركسات 0160:0181 منطقة سلسلة خفيفة ثابتة بشرية (إما > أو 6 ومنطقة سلسلة‎ ‏منطقة 4 الثابتة البشرية التي‎ (PE) ‏أو 74 (08)). وتمثل غاما ؛‎ yl Wl) ‏شقيلة ثابتة بشرية‎ ve ‏في منطقة 0112 الذي‎ glutamic acid ‏تحتوي على طفرتين 001800058 وهما حمض الغلوتاميك‎
٠.0 ht ‏في منطقة المفصلء لتعزيز ثبات تفاعل‎ proline ‏وبديل برولين‎ (FeR ‏أدخل لإزالة بقايا ارتباط‎
Algre ‏انظر ما جاء عن ألجري‎ Ald A ‏مع السلسلة‎ disulfide ‏من ثنائي كبريتيد‎ dad) ‏صفحة 418-7451 1137م وما جاء عن‎ EA ‏المجلد‎ dmmunol ‏ومعاونيه في مجلة‎ (VAY OV A=) 0 ‏صفحة‎ (Fe ‏المجلد‎ (Mol. Immunol ‏ومعاونيه في مجلة‎ Angal ‏أنجال‎ ‏وقد ذكر كل منها في هذا البيان للإحالة إليهما كمرجع. وقد دمجت مواقع تحديد فريدة في‎ 5 ‏عن ريف‎ ela ‏الناقل لتسهيل غرز المناطق المتغيرة المنشودة والخفيفة. انظر ما‎ ‏صفحة 645-1475 44 ام.‎ (AY ‏المجلد‎ (Blood ‏ومعاونيه في مجلة‎ Reff ‏في تضاعف وتتبع‎ NEOSPLA ‏ونسلت السلسلة الخفيفة من آر إف-؟ في نيوسبلا‎
VE aladl ProcNatlAcad.Sei ‏ومعاونيه في مجلة‎ Sanger ‏لطريقة سانجر‎ Gy ‏سياقها‎ ‏طرف من المجموعة الجزئية كابا-؟.‎ US ‏وتعتبر سلسلة‎ 2) AVY 727-046“ ‏صفحة‎ ٠ ‏وبالمتل؛ عزلت المنطقة المتغيرة من السلسلة الشقيلة البشرية ل آر إف-7 ونسلت مقابل‎ ‏المنطقة الثابتة 71 البشرية.‎ ‏وقد نسلت الجينات التي تحمل شيفرة السلسلة الخفيفة ل آر إف-١ و آر إف-؟‎ ‏للجينات التي تحمل شفرة السلاسل الثقيلة باستخدام‎ cDNA ‏بسهولة؛ بينما لم يتمكن من توليد‎ ‏الاعتيادي. بيد أنه؛ تم تفادي هذه المشكلة‎ Tac reverse transcriptase Tac ‏الإنزيم النسخ العكسي‎ Ve ‏وبذلك يمكن‎ pV ‏بالاستعاضة عنه بأنزيم نسخ عكسي يعمل عند درجة حرارة عالية؛ تبلغ‎ ‏سليمة باستخدام بوادئ مشتقة بصفة أساسية‎ PCR ‏توليد منتجات تفاعل بلمرة إنزيمية متسلسل‎ ‏من جينات من عائلة (2ن171).‎ ‏ويبين الشكلان أ و لاب سياق الحمض الأميني وسياق الحمض النووي للمناطق‎ ‏سياق‎ OA ‏على الترتيب. ويبين الشكلان “أ و‎ Oma ‏ل آر‎ als Alp ‏المتغيرة الخفيفة‎ - © ‏الحمض الأميني وسياق الحمض النووي للمناطق المتغيرة الخفيفة والثقيلة ل آر إف-؟‎ ‏على الترتيب. وتوضح الاشكال من أ الى 1ج سياق الحمض النووي وسياق الحمض الأميني‎ ‏يوضح الشكلان 14 و حب السياقات‎ NEOSPLA ‏نيوسبلا‎ BU ‏ل آر إف-١ كما يعبر عنه‎ human ‏القيادية؛ المناطق المتغيرة في السلاسل الخفيفة والثقيلة؛ والمناطق الثابتة البشرية‎ human ةيرشبلا ‏البشرية ومنطقة غاما/الثابتة‎ LIS ‏أي؛ منطقة‎ «constant domain Yo ‏أصفاكدص«مى/هصصسقع. ويبين الشكل 5ج سياق الحمض الأميني والحمض النووي لمنطقة‎ domain
Tv ‏يعبر عن‎ expression vector ‏تخطيطياً ناقل تعبيري‎ ٠١ ‏غاما/الثابتة البشرية. ويوضح الشكل‎ recombinant ‏السياقات المبينة في الاشكال من أ الى 1ج وبذلك يعبر عن آر إف-٠١ المأشوب‎
في خلايا ‎.CHO‏ ‏وبالمتل توضح الاشكال من ١١أ‏ الى ١١ج‏ سياقات الحمض الأميني والحمض النووي
م للسياق القيادي والمنطقة الخفيفة المتغيرة من آر إف-١‏ ومنطقة كابا البشرية الثابتة والمنطقة الثقيلة المتغيرة من آر إف-؟ ومنطقة غاما/الثابتة البشرية. ويوضح الشكل ‎VY‏ رسماً تخطيطياً لناقل تعبيري يعبر عن آر إف-؟ المأشوب في خلايا 000.
المثال ‎٠7‏ ‏تطوير طريقة لتنسيل خلايا محولة بفيروس إبشتاين- بار ‎(EBV)‏
‎١‏ انخفض إنتاج الأجسام المضادة من ‎LIA‏ محولة بفيروس ايبشاتين-بار ‎(BBV)‏ بشكل ‎(Jal sie‏ وفي النهاية توقف»؛ انظر ‎Le‏ جاء عن كوزبور ‎Kozbor‏ ومعاونيه في مجلة ‎(Immunol‏ المجلد ‎YY‏ صفحة ‎AYA TY‏ 541ام. ولتخيلد ‎immortalize‏ إنتاج الأجسام المضادة؛ فمن الضروري استخلاص ‎extract‏ الجينات التي تحمل شيفرة الغلوبلين المناعي ‎Immunoglobulin‏ من الخلايا قبل إنتاجها ونقل هذه الجينات الى نظام تعبيري ملائم. ولعزل
‏. الجينات التي تحمل شفرة المناطق المتغيرة والمرتبطة بمولد مضاد للأجسام المضادة المنتجة من ‎Asse WIA‏ بفيروس إبشتاين-بار ‎(BBV)‏ من الضروري التأكد من أن ‎sale‏ الخلية أحادية النسيلة. بيد ‎etl‏ من الصعب ‎Toa‏ تنسيل الخلايا المحولة بفيروس إبشتاين-بار ‎(EBV)‏ ‏سواء بالتخفيف المحدد ‎limiting dilution‏ أو بالأآأغار شبه ‎semisolid agar wo Lal‏ وقد أظهر الرحلان الكهربائي الهلامي إلى بؤرة نقطة تساوي الجهد الكهربائي
‎isoelectric focusing gel electrophoresis Ye.‏ لمستحضرات ‎purified preparations lite‏ من بروتين أ لكل من الجسمين المضايين آر إف-١‏ و آر إف-؟ المضادين لبروتين-ف»؛ وجود مجموعتين على الأقل من الأجسام المضادة في مستحضر ‎To] J‏ وإمكانية أن يكون التنسيل قليل في مستحضر آر إف-١.‏
‎«feeder layer ‏كطبقة مغذية‎ EL-4 B5 mouse thyoma line ‏وباستخدام خط ثيوما الفأري‎
‎—Y400 ‏صفحة‎ «VEY ‏المجلد‎ ¢ Immunol ‏ومعاونيه في مجلة‎ Zhang ‏انظر ما جاء عن زانج‎ Yo ‏خط‎ Jag ‏توسعت الخلايا من خلية واحدة عن طريق التخفيف المحدد.‎ a) 440 (YA
‎yi ov
TA
خلايا الثيوما البشري 5 ‎EL-4‏ عن ‎gp39‏ في صورة مستقبل غشائي ‎membrane receptor‏ يحث ‎LDA‏ 8 على النمو. حيث تم وضع ‎5٠١7©‏ خلية من نوع ‎[EL-4BS‏ وعين ‎dwell‏ صفيحة ميكروليترية ‎emicrolter plate‏ ووضعت خلايا من المستنبتات ‎cultures‏ على طبقة ‎EL-4 WA‏ ض ‎Bs‏ بتراكيز مختلفة؛ لا تقل عن ‎FA‏ خلية/ عين. وتم عد عدد العيون التي ظهر فيها نمو ‎٠‏ الكل تركيز بعد فترة زمنية مناسبة. وفحصت المادة الطافية ‎supernatant‏ لتحديد وجود ‎IgG‏ البشري و 180 المختص بمولد المضاد. وبهذه الطريقة تم عزل وتنسيل الخلايا التي تنتج آر إف-١‏ (انظر الجدول ») و آر ‎Yo‏ (انظر الجدول 77)؛ على الترتيبء من مستحضرات أصلية ‎ALE‏ التتسيل. وحللت الأجسام المضادة غير المختصة التي وجدت في التتنسيل بالنسبة للنمط الإسوي ‎disotype ٠‏ فوجد أنها تماثل الأجسام المضادة المختصة؛ ‎JgGlk‏ واعتماداً على معدل انتاج ‎yield‏ ‏النسائل الخاصة ببروتين-ف من عمليات تجميد ‎freezes‏ عند نقاط زمنية مختلفة أثناء استتبات ‎cultivation‏ آر إف-اء بالإضافة إلى المقدار الناتج من ‎IgG‏ ولقد حدد مقدار الجسم المضاد الخاص ليكون حوالي ‎70/١‏ من المقدار الكلي للاجسام المضادة بعد فترة زمنية قصيرة من بدء الإستنبات وقد اختفى في المستنبت بعد ‎A‏ أشهر. ‎JT a‏ آر إف-؟ ‎ae‏ جزء أكبر بكثير من المقدار ‎KD‏ ل 180؛ فقد شكّل ما لا يقل عن ‎7٠١‏ في أي فترة زمنية. واستخدم الجسم المضاد من المستحضرات قليلة التنسيل لتوليد بيانات المعادلة في أنبوب الاختبار ‎vitro neutralization‏ د مما يؤدي الى زيادة في تقدير عيارات 2050. بيد أن دراسات الألفة باستخدام رنين بلازمون؛ لم تعتمد على استعمال أجسام مضادة نقية. وقد أجريت دراسات الألفة باستخدام قياس حرارة دقيق للمعايرة ‎titration micro calorimetry‏ ‎Y.‏ باستخدام مادة منسلة؛ الجدول ‎*V‏ ‏مضادة لبروتين-ف (7) نمو للخلايا )7(
*تفسير للجدول 7: تتسيل آر ‎Vm‏ بتخفيف محدود. وضع ‎"٠١75‏ خلية/ عين من خلايا 8145 في صفيحة تحتوي على 96 عيناً مستوية القاع. وبعد حوالي ‎dole YE‏ وضعت خلايا آر إف-١‏ متزايدة النمو بشكل أسي على طبقة مغذية عند التراكيز المبينة. وبعد أسبوعين الى ثلاثة أسابيع؛ سجّلت عدد العيون التي ظهر فيها نمو للخلايا وعدد العيون ° التي ظهر فيها فعالية مضادة لبروتين-ف. الجدول ‎*VI‏ ‏مضادة لبروتين-ف )7( للخلايا )7(
*تفسير للجدول 71: أجري تنسيل آر إف-؟ بالتخفيف المحدد/: كما في الجدول ‎(VID)‏ ‏ولإثبات قابلية الاستخدام السريري ‎clinical applicability‏ للجسمين المضادين البشريين أحاديا النسيلة واللذين لهما فعالية معادلة الفيروس في انبوب اختبارء ميزت هذه الأجسام ‎١‏ المضادة بشكل إضافي بالنسبة لفاعليتها في القضاء على عدوى الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ نموذجين حيوانيين مختلفين. وقد أجريت إجراءات_التقييم السريرية التمهيدية ‎preclinical performance evaluation‏ بمادة ‎ail‏ بواسطة خلايا ‎CHO‏ خمجت تحويلياً ‎transfected‏ بواسطة جينات منسلة تحمل شفرة الأجسام المضادة المولجة في ناقل تعبير خاص (انظر ‎(TJS‏ واختبر نمونجان من الأجسام المضادة؛ أحدهما مع متممة سليمة ‎intact complement \o‏ ومستقبلة ‎receptor Fc‏ © مرتبطة بمنطقة 1 ‎oy‏ والآخر يخلو من هذه المناطق»؛ 74 (طفرة بي .ني ‎(PE mutant‏ » انظر ما جاء عن الجري ‎Algere‏ ومعاونيه في مجلة
Vv.
Angal ‏صفحة 70-451 1957ام؛ وما جاء عن أنجال‎ OV EA aad) dmmunol ‏ويقوم‎ VAY ٠١-٠8 ‏المجلد ١؛ صفحة‎ Molecular Immunology ‏ومعاونيه في مجلة‎ ‏أن أجزاء‎ (i) ‏لاختبار نسخة 74 على أساس الاعتبارين التاليين:-‎ rational ‏الاساس المنطقي‎ ‏انظر‎ laa) ‏فاب المضادة لبروتين-ف أظهرت فعالية معادلة للفيروس ملحوظة في أنبوب‎ ‏صفحة‎ Ad ‏المجلد‎ © Proc.Natl.Acad.Sci ‏ومعاونيه في مجلة‎ Barbas ‏ما جاء عن بارباس‎ °
Crowe o S ‏الجسم الحي؛ انظر ما جاء عن‎ Jala ‏1357امء وكذلك‎ Ve VTA) NTE ‏صفحة 174571775 1954 ام؛ وحتى‎ A) ‏المجلد‎ ¢Proc.Natl.Acad.Sci ‏ومعاونيه في مجلة‎ ‏أنه قد يكون من المفيد التمكن من تفادي تلف الرئة‎ (if) clung ‏تحقن مباشرة في الرئة‎ Lexie ls ‏في نسيج حساس قد أجهد‎ effector function activation ‏بسبب الفعالية الوظيفية المؤثرة‎ ‏من الأجسام المضادة الضابطة غير الخاصة‎ de game ‏بعدوى _الفيروس. وقد أنتجت‎ ٠ ‏من جسم مضاد 180 من ورم‎ «(PE) v4 ‏والآخر‎ v1 ‏أحدهما‎ nonspecific control antibodies هجين ‎hybridoma‏ غير متخصص داخلي. : والنموذج الحيواني الأول هو فأر؛ انظر ما ‎ela‏ عن تايلور ‎Taylor‏ ومعاونيه في مجلة ‎Immunology‏ المجلد ‎OY‏ صفحة ‎Lay VAAL 147-١7‏ جاء عن والش؛ ‎Ee‏ ‎Walsh,E.E ve‏ في ‎dnfectious Diseases Alaa‏ المجلد ‎VV‏ صفحة 0-0 554ام. وقد استعمل هذا النموذج لتحديد الجرعة الفعالة؛ التي تعرّف بأنها أقل جرعة تؤدي إلى خفض في حمل الفيروس ‎Virus load‏ في أنسجة الرئة بعد أسبوع واحد من الحضانة ‎incubation‏ بمقدار ‎Y‏ ‏قيمة لوغاريتم. وقد استخدم هذا النموذج كذلك لتحديد أي من نماذج الأجسام المضادة يمكن استعماله. والنموذج الحيواني الثاني هو نموذج رئيسات ‎primate model‏ باستخدام القرد 7 الأخنضر الأفريقي ‎(African green monkey‏ انظر ما جاء عن كاكوك ‎Kakuk‏ ومعاونيه في مجلة ‎dnfectious Diseases‏ المجلد ‎NY‏ صفحة 0171-59807؛ ‎YAY‏ ويسبب الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ تلف الرئة في القرد الأخضر الأفريقي؛ ويتمتل الهدف الأساسي لهذا النموذج في تقييم خواص الأجسام المضادة المانعة للتلف. ويحدد عدد اختبارات هذا النموذج لاختبار جسم مضاد واحد بخمس جرعات مختلفة. ويحدد الجسم المضادء مقدار الجرعة »| وتاريخ التسريب ‎infusion date‏ (الإعطاء) بالنسبة لتاريخ الإصابة اعتماداً على نتائج اختبار نموذج الفأر. وقد فحصت الرئة لتحديد حمل الفيروس في معايرة لويحة ‎plaque assay‏ وبمجهر
ا ١ل‏ ضوئي ‎light microscopy‏ للكشف عن ‎lesions SY‏ التي سببها الفيروس المخلوي التنفسي ‎.(RSV)‏ ‏ويلاحظط أي تغير يحدث في سياق الحمض الأميني أثناء عملية حث ‎stimulating‏ ‏وتوسيع ‎expanding‏ الخلايا التي تنتج الجسمين المضادين. ويتحقق هذا باستخدام مجموعة من م بوادئ ‎PCR‏ تعتمد على مناطق 0083 للسلاسل الثقيلة ل ‎JF‏ إف-١‏ و آر إف-؟ لاختبار ‎Las‏ إذا كانت سياقات الجينات التي تحمل شفرة آر إف-١‏ و آر إف-؟ موجودة في مادة الخلية المجمدة الأصلية التي ولد منها خطي الخلايا. ويتمثل الضابط الإيجابي ‎positive control‏ في خلايا مصدرية ‎source cells‏ مزودة ب آر إف-١‏ و آر ‎Y=‏ ويتبع التحليل المبادئ التي بيتنها كل من ليفي ‎Levy‏ ومعاونيه في مجلة ‎Exp.Med‏ المجلد 91014 صفحة ‎٠٠١١‏ ‏ً 4م ؛ ألجري ‎Algere‏ ومعاونيه في ‎Molecular Immunology‏ ء المجلد ‎VA‏ صفحة 104-71 اتخكلم؛ أنجال ‎Angal‏ ومعاونيه في مجلة ‎«Molecular Immunology‏ المجلد ‎oY‏ صفحة #١٠-ءاء؛‏ 3957ام؛ فوت ‎Foot‏ ومعاونيه في مجلة ‎Nature‏ المجلد 057 صفحة 271-076 151ام؛ رادا ‎Rada‏ ومعاونيه في مجلة ‎Proc Natl.
Acad.Sci‏ المجلد ‎«AA‏ ‏صفحة 25017-05؛ 191 ¢21 كوكس ‎Kocks‏ ومعاونيه في مجلة ‎Valsad (Rev.Immunol‏ ‎(004—0YY dada Vo‏ 1895 ١م؛‏ إيسوكي ‎Wysocki‏ ومعاونيه في مجلة ‎«Proc.Natl.Acad.Sci‏ ‏المجلد ‎AY‏ صفحة ‎AAT OASIVALY‏ )62 كيبس ‎Kipps‏ ومعاونيه في مجلة ‎Exp Med‏ المجلد ‎OV)‏ صفحة 137-184 1146م؛ ويوكي 6اءل1 ومعاونيه في مجلة 0م المجلد ‎1/١‏ صفحة ‎FEV‏ 18 لم. المثال ‎A‏ ‏© - توليد خطوط خلايا ‎CHO‏ التي تنتج مقادير كبيرة (تتجاوز ‎٠٠١‏ ملغم/ لتر) من أر ‎Vm‏ و آر إف-؟ أ- تخميح بلازميدات التعبير ‎expression plasmids‏ تحويلياً» وعزل وتوسيع نسائل ‎CHO‏ ‏المقاومة ل 6418 والتي تعبر عن أعلى مستويات من آر إف-١‏ و آر ‎Nod‏ ‏ما أن يتم تتسيل جينات المنطقة المتغيرة من آر إف-١‏ و آر إف-؟ في نيوسبلاء تنقل ‎vo‏ خلايا0 (0644) بواسطة ‎DNA‏ البلازميد؛ انظر ما جاء عن يورلوب ‎Urlaub‏ ومعاونيه في مجلة ‎<Somat.Cell Mol.
Genet‏ المجلد ‎VT‏ صفحة 000( 5487 ١م.‏ وقد نمت خلايا ‎CHO‏ في
ل ‎SSFM H‏ يخلو من ‎(GIBCO) thyrnidine (pau ys hypoxanthine (pil oS gua‏ وثقب ‎Ty xg‏ خلية كهربائياً ‎electroporated‏ باستخدام ‎YO‏ ميكروغرام من ‎DNA‏ البلازميد باستخدام أداة الشثقب الكهربي ‎BTX600‏ (شركة بي تي إكس ‎(BTX‏ سان دييغو ‎«San Diego‏ كاليفورنيا ‎(California‏ في 4 مل من مركّن يمكن التخلص منه ‎cuvettes‏ ع19005851ل. وقبل الثقب م الكهربائي؛ حدد ‎DNA‏ البلازميد بواسطة 1 ‎Pac‏ الذي يفصل الجينات المعبر عنها في خلايا الثدييات ‎mammalian cells‏ عن جزء البلازميد المستعمل للنمو في البكتيريا. وكانت ظروف الثقب الكهربائي هي ‎٠‏ فلط ‎cvolts‏ و5060 ميكروفارادي ‎asl VY ¢microfaradays‏ كتتتاه. وأجري كل ثقب كهربائي في طبق يحتوي على 976 عيئاً (حوالي 40005 خلية/ عين). وغنيت الأطباق بوسط يحتوي على ‎fon‏ ميكروغرام/ مل من 418 6 ‎١‏ (جينتيسين ‎cGeneticin‏ تقدمه شركة جيبكو ‎(GIBCO‏ لمدة ثلاثة أيام بعد الثقب الكهربائي وبعد ذلك غذيت بشكل دوري حتى ظهرت المستعمرات ‎colonies‏ وفحصت المواد الطافية من المستعمرات بواسطة ‎ELISA‏ لتحديد وجود 150 وفعالية مضاد بروتين-ف. ب - تضخيم التعبير عن الجسم المضاد في ميثوتركسات ‎-methotrexate‏ ‏تنقل المستعمرات المقاومة ل 6418 التي تنتج أعلى مقدار من الغلوبلين المناعي الى ‎ve‏ أوعية أكبر ‎vessels‏ وتوسع. ويزداد التعبير عن المستعمرات التي تفرز أعلى مقدار من نسيلة 418 بتضخيم الجينات ‎cgen amplification‏ بالإنتقاء في © نانوجزيئي ‎(nM)‏ من ميثوتركسات ‎(MTX) methotrexate‏ في طبق يحتوي على 576 ‎٠ Lue‏ ومن ثم في طبق يحتوي على توسع 0 نانوجزيئي من المستعمرات التي تنتج أعلى مقدار من الجسم المضاد وبعد ذلك يعاد تضخيم التعبير بالانتقاء في ‎٠‏ © نانوجزيئي من 1477 في طبق يحتوي على 96 عيناً. وبعد اتباع هذا © الأسلوب؛ يمكن اشتقاق الخلايا ‎CHO‏ التي تفرز أكثر من ‎٠0١‏ ملغم/لتر في 7 أيام في مستنيت سبينر ‎spinner culture‏ (أكثر من ‎١,5‏ غرام/ لتر في مخمرات خلال + أيام) ‎٠‏ ومن ثم ينقى الجسم المضاد البشري من المادة الطافية بالإستشراب الإلفي الذي يعتمد على ألفة بروتين أ ‎z‏ - إنتاج وتنقية الجسم المضاد. أنتج ‎٠٠١‏ ملغم من كل جسم مضاد. وقد أنتج الجسم المضاد ‎ve‏ المختار بمقادير تحددها دراسات النموذج الفأري . واستعملت قوارير سييثر ‎spinner flasks‏ مع خلايا ‎CHO‏ مصابة بخمج تحويلي مختارة من 571411 0110-5 في وسط يخلو من المصل
ل
‎serum‏ (شركة جيبكو ‎GIBCO‏ صنف رقم ‎٠487-91‏ دي كي ‎(DK‏ مع ‎٠٠‏ نانوجزيئي من أمينوبترين لإنتاج جسم مضاد بالمقادير المطلوبة. وحصدت ‎harvested‏ المواد الطافية ورشحت من خلال مجموعة من المرشحات لإزالة مواد معينة؛ على أن يكون حجم عيون آخر مرشح ؟, نانومتر. وتدخل المادة الطافية خلال عمود يحتوي على بروتين-أ بحجم محدد ‎Bane‏ ‏0 اعتماداً على المقدار الكلي للجسم المضاد. وبعد الغسل؛. صول الجسم المضاد من العمود باستخدام ‎١,١‏ جزيئي من محلول من غلايسين ‎(HCI/Glycine‏ درجة حموضته ‎BVA‏ ‏جزيئي من محلول منظم لدرجة الحموضة معادل من تريس ‎(HCI Tris‏ درجة ‎VE dia gas‏ ويتبادل محلول التصويل/المعادلة بدرجة كبيرة؛ أكثر من ‎٠٠٠١‏ مرة؛ مع ‎PBS‏ معقم ‎sterile‏ بترشيح فاق الدقة ‎ultrafiltration‏ من خلال مرشح أميكون سنتريبرب ‎Amicon Centriprep ٠‏ أو سنتريكون ‎Centricon 30 7٠‏ (رقم الصنف 47056 و ‎(EY‏ وضبط تركيز الجسم المضاد عند ؟ ملغم/مل وعقم بالترشيح خلال مرشح حجم عيونه ‎٠,7‏ نانومتر. ونقي الجسم المضاد وخزن على ثلج في أنابيب قرّي ‎Cryotubes‏ سعتها ¥ مل إلى حين
‏استعماله في الحيوانات.
‏: المثال 5 ‎as‏ تمييز آر إف-١‏ و آر إف-؟ بالنسبة الى أدائها في نماذج حيوانات مصابة بالفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ ‏حدد أداء آر إف-١‏ و آر إف-؟ باستخدام نماذج حيوانية ملائمة. وقد أجري التقييم على خطوتين؛ أولا أ) نموذج بالبيك ‎Balbic‏ لتحديد فعالية الأجسام المضادة؛ بالإضافة إلى تحديد نوع الوظائف الداعمة (المؤثرة) الضرورية للجسم المضاد للقضاء على حمل الفيروس؛ 7 انظر ما ‎ela‏ عن تايلور ‎taylor‏ ومعاونيه في مجلة «ع10©00010؛ المجلد ‎oF‏ صفحة ‎TITY‏ ‎(VEY‏ 445كام؛ كرو ‎Crowe‏ ومعاونيه في ‎ProcNatiAcad.Sci Ase‏ المجلد )3 صفحة 11-3 1444م كونورز ‎Connors‏ ومعاونيه في مجلة ‎virology‏ المجلد ‎AT‏ ‏| صفحة 81-74644؛لاء 97١م.‏ ومن البيانات التي تم الحصول عليها في النموذج الفأري؛ تم اختيار فطر لمزيد من الدراسات في كان نموذج الرئيسات. وكان نموذج الرئيسات ‎vo‏ المستعمل هو القرد الأخضر الإفريقي؛ انظر ما ‎ela‏ عن كاكوك ‎Kakuik‏ ومعاونيه في مجلة 00009 المجلد ‎TY‏ صفحة 0-00 5957 1م. ويعتبر نموذج الرئيسات
Ve ‏بصفة خاصة لاثبات أنه يمكن استخدام الأجسام المضادة أحادية النسيلة موضوع البحث‎ Lidl ‏لمنع تلف الرئة المرافق للفيروس.‎ ‏أ - اختبار الأداء في نموذج الفأر.‎ fas ‏ويعرف هذا النموذج‎ Balb/C ‏أختير من نموذج القوارض نموذج فأر بالب/سي‎ ‏ومعاونيه في‎ Crowe ‏انظر ما جاء عن كرو‎ (passive therapy ‏في دراسات المعالجة السلبية‎ 5 ‏صفحة 171571780 1998 وما جاء عن‎ (A) ‏المجلد‎ cProc.NatiAcad.Sci Alas ‏صفحة 44 لاحجنمئاء تحثكالم.‎ (AT ‏المجلد‎ virology ‏ومعاونيه في مجلة‎ Connors ‏كونورز‎ ‏في كل من المجاري‎ (RSV) ‏ويجيز فأر بالب/سي بدرجة كبيرة نمو الفيروس المخلوي التنفسي‎ ‏عن تايلور‎ ela ‏انظر ما‎ lee) ‏لكافة‎ upper and lower airways ‏التنفسية العليا والسفلى‎ ‏ام. ووضعت‎ 144 ٠47-1797 ‏صفحة‎ OY ‏المجلد‎ dmmunology ‏ومعاونيه في مجلة‎ Taylor ٠ ‏الحيوانات في مجموعات كل منها يتكون من خمسة حيوانات؛ وغذيت بطعام الفأر القياسي‎ ‏لتوجيهات مربى مستشفى روشستر‎ Bag ‏والماء حسب الرغبة ويعنى بها‎ standard mouse chow ‏وتتوافق هذه التوجيهات مع قوانين دائرة‎ Rochester General Hospital Vivarium ‏العمومي‎ ‏رعاية الحيوان‎ ol 8 «(New york State Health Department ‏الصحة في ولاية نيويورك‎ ‏وقوانين 011115. وتجرى كل الخطوات ؛ بما في ذلك‎ Federal Animals Walfare Act ‏الفدرالية‎ Ve ‏والذبح عن طريق الخلع في‎ orbital bleeding ‏الحقن؛ والإصابة بالفيروس؛ ونزف جيب العين‎ ‏تحث التخدير ببنثرين في غرفة جيدة التهوية.‎ cervical dislocation ‏الرقبة‎ ‏من آر = و آر‎ (PE ‏تحديد الجرعة الفعالة للجسم المضاد ومقارنة أداء 591 74 (نسخة‎ )( ‏إف-؟‎ ‎٠١١ ‏ب‎ intranasal instillation ‏أصيبت مجموعات تتكون من © فئران بتقطير الأنف‎ Ye ‏وحدة تكوين‎ (B ‏جزئية‎ Ac sana) 18537 ‏من‎ 7٠١ ‏أو ب‎ (A ‏جزئية‎ dc sans) Long ‏من‎ ‎٠٠١ ‏بحجم‎ (RSV) ‏المخلوي التنفسي‎ (ug ill (he plaque forming unit (PFU) ‏لويحات‎ ‏فيروس؛ حقنت‎ titer ‏عيار‎ peak 3500 ‏في يوم البدء. وفي اليوم الرابع» عند‎ Al Se ‏بكل من المستحضرات الأربع من الجسم المضاد‎ interperitoneally ‏انتربريتون‎ Jala ‏الحيوانات‎ ‏وحددت‎ control antibody ‏وحيد النسيلة المتخصص ببروتين-ف أو بالجسم المضاد الضابط‎ ve ‏حسبت لتكفل‎ reference dose ‏الجرعة المختبرة في البداية لتكون قريبة من جرعة مرجعية‎ vo ‏عيار معادلة مصل يبلغ حوالي ١:00؟ أو أكثر بإجراء دراسات داخل أنابيب اختبار. ويقترن‎ ‏في الحيوانات‎ (RSV) ‏هذا العيار بمستويات واقية ضد عدوى الفيروس المخلوي التنفسي‎ ٠7٠/١ goofy) ‏ف‎ Yo ‏الصغيرة. وقدرت الاستجابة للجرعة عن طريق المعالجة ب‎ ‏من الجرعة المرجعية. وقد تجرى تجارب باستخدام جرعات أكبر أو أقل من ذلك اذا اقتضت‎ ‏الحاجة. وحقنت الفئران الضابطة بجرعة مكافئة من الأجسام المضادة أحادية النسيلة متماثلة‎ ٠ ‏ساعة؛ حيث يعتبر اليوم الخامس‎ YE ‏النوع؛ كما وصف أعلاه. وذبحت الفئران بعد مرور‎ intercardiac puncture ‏ذروة عزل الفيروس. وحصل على المصل عن طريق الوخز في القلب‎ ١ ‏في‎ homogenized ‏والرئتين؛ وزنت وتمت مجانستها‎ nasal turbinates ‏العظم الأنفي‎ ils ‏على الترتيب. وأجريت معايرة المستعلقات النسيجية المتجانسة‎ NMM ‏مل و ؟ مل من‎ ‏وعبر عن عيارات الفيروس ب 1701050 /غرام‎ HEp2 ‏للفيروس على خلايا‎ homogenates - ٠ © ‏من النسيج. وتمت مقارنة متوسط العيارات للمجموعات بالمجموعة الضابطة باختبار-ت‎ ‏وحصل على المصل وقت الإصابة ووقت الذبح لتحديد مقدار الجسم المضاد البشري‎ test ‏ومعايرة المعادلة. ومن المتوقع أن يكون‎ ELISA ‏أحادي النسيلة عن طريق المعايرة المناعية‎ ‏لاتفرز الأنماط المتماثلة‎ Cun ‏الانخفاض الأكبر في عيار الفيروس في نمو الفيروس في الرئة‎ ‏«ع0من.‎ respiratory ‏في المجاري التنفسية العليا‎ (IgA ‏النقيض من‎ lo) ‏من 180 بصورة فعالة‎ Vo ‏وعند إثبات أن العلاج في اليوم الرابع من الإصابة غير فعال في خفض الفيروس في الرئة؛‎ ‏بتم تحديد العلاج في اليوم الثاني و/أو الثالث.‎ ‏وفي‎ stock solution ‏وحدد عيار كل جسم مضاد أحادي النسيلة في محاليل مخزونة‎ ‏مصل من حيوانات محقونة ب 81158؛ كما وصف أعلاه. واستخدم بروتين اندماجي‎ ‏في‎ (AY) ‏للطرق المعروفة‎ ly ‏المنقى بالاستشراب الإلفي‎ (RSV) ‏للفيروس المخلوي التنتفسي‎ ov, ‏وأجريت معايرة منفصلة لبروتين 6 من الفيروس المخلوي التنفسي‎ solid phase ‏طور صلب‎ (RSV) ‏لتقييم استجابات 1860 المأخوذ من الفأر لعدوى الفيروس المخلوي التنفسي‎ (RSV) ‏فأري (متوفر من‎ TG ‏التجريبية. واستخدم جسم مضاد من أرنب متخصص ب ©1860 بشري و‎ ‏للكشف عن الجسم المضاد‎ (Md cbethesda ‏بشيسدا‎ «Virion Systems,Inc ‏أنظمة فيريون؛ إنك.‎ .81158 ‏في‎ (sll ‏البشري أحادي النسيلة أو الجسم المضاد‎ vo va ‏وحدد تأثير الاستجابة للجرعة من الأجسام المضادة أحادية النسيلة للأجسام المضادة‎ ‏بصفته أقل عيار للجسم المضاد الذي يخفض عيارات الفيروس بمقدار أكبر من ؟ قيمة‎ ‏لوغاريتم, , أو انخفاض في عيار الفيروس يبلغ أكثر من 7259. وتتعلق درجة الوقاية‎ ‏بمستويات الجسم المضاد في المصل التي تم الوصول اليها وقت الذبح. وبالإضافة الى ذلك‎ ‏مختلفة من الأجسام‎ combinations ‏المحتمل لتوليفات‎ synergistic effect ‏م حدد التأثير المؤازر‎ ‏المضادة البشرية أحادية النسيلة. واستعملت نتائج الدراسات الأولية في انابيب الاختبارالمبينة‎ ‏أعلاه لتوجيه التجارب داخل الجسم الحي. فعلى سبيل المثال؛ اذا كان ل آر إف-١ و آر‎ ‏مواقع ارتباط محددة لمولد المضاد مميزة على بروتين ف من الفيروس المخلوي‎ +٠-فإ‎ ‏وقاية مؤازرة.‎ (v4 ‏أو‎ yi) ‏فقد توفر توليفات من أنماط إسوية‎ (RSV) ‏التتفسي‎ ‏لنسيج الرئة:‎ histological ‏تقييم نسيجي‎ 0 ٠١ ‏عن طريق تقنيات‎ lung inflammation ‏قيتثم تأثير المعالجة السلبية على التهاب الرئة‎
Immunohistochemical ‏وكيمياء الأنسجة المناعية‎ histopathological ‏علم أمراض الأنسجة‎ alveolar ‏وداخل الحويصلات‎ peribronchiolar ‏القياسية. وقد وصفت الترسبات حول الشعيبات‎ ‏ومعاونيه في مجلة‎ Conners ‏بعد الإصابة الأولية أو الثانوية؛ ما جاء عن كونرز‎ lal ‏في‎ ‏المجلد 11 صفحة 644 481-74/اء 197 1م. وعولجت الحيوانات التجريبية‎ Virology - ‏غير المصابة وغير‎ of il ‏بالجسم المضاد أحادي النسيلة. كما وصف أعلاه. واستخدمت‎ ‏المعالجة كفئران ضابطة بهدف المقارنة لتقييم التأثيرات النسيجية. وفي اليوم الخامس والثامن‎ ‏تحت ضغ ط تعبئفة ثابت‎ formalin ‏بعد الإصابة؛ أزيلت الرئتين ونفخت بالفورمالين‎ ‏دقيقة. وبعد تشريحها وصبغها‎ Ve ‏لمدة‎ (H,0 ‏سم‎ ٠ constant filling pressure ‏حددت درجة الترسبات الالتهابية‎ chematoxyline-eosin ‏باستخدام الهيماتوكسيلين والأيوسين‎ 7
Blo Ml dia nd acl im nda x ta D3) inflammatory infiltrate ‏بشكل‎ lymphocytic ‏والخلايا اللمفاوية‎ (PMN) polymorphonuclear neutrophil leukocyctes ‏منفصل) في مناطق حول الشعيبات والحويصلات الرئوية باستخدام نظام عد قياسي‎ v4 yl ‏أنه من المتوقع أن الأجسام المضادة أحادية النسيلة‎ Lag .standardized scoring system ay lal C3 ‏وتنشط المتممة بشكل مختلف؛ تصبغ أجز اء الرئة لكشف ترسبات‎ Cu” MW Yo ‏في مناطق الإلتهاب باستخدام جسم مضاد ل 03 فأري مأخوذ من أرنب متوفر تجارياً (شركة‎ vy ‏وبيروكسيداز‎ (Maryland ‏ماريلاتد‎ «Bethesda ‏بيئيسدا‎ Viron System ‏فيرون سيستم انك.106‎ ‏مأخوذ من ماعز وأرنب.‎ IgG ‏مرتبط ب‎ 5 ‏حدد‎ All ‏وبالإضافة الى تقييم التغيرات النسيجية الملاحظة في الأنسجة الرئوية‎ ‏وذبحت مجموعات‎ alveolar cytology ‏الإلتهاب الرئوي بتقييم خلايا الحويصلات الرئوية‎ ‏الغسيل الشعبي الحويصلي‎ goals ‏م الفئران » المعالجة كما وصف أعلاه؛‎ ‏بتكرار إعطاء ؟ مل من 085 في المجاري التنفسية السفلى.‎ (BAL) bornchoalveolar lavage ‏وتم عد الخلايا في الغسيل القصبي الحويصلي؛ وميز نوع الخلايا بصبغ مستحضرات الطرد‎ .cytocentrifuge preparation ‏الخلوي‎ ‏تأثير العلاج بالجسم المضاد على الإستجابة المناعية الطبيعية للعدوى‎ (iif) ‏خفضت المعالجة السلبية‎ cowl monkey ‏وقرد البوم‎ cotton rad ‏في نموذجي جرذ القطن‎ Ve polyclonal ‏بمستحضرات 6 متعددة النسيتة‎ (RSV) ‏لعدوى الفيروس المخلوي التنفسي‎ ‏الاستجابة المناعية للجسم المضاد الطبيعي بعد الإصابة بالفيروس؛ على الرغم من أن‎ ‏أخرى؛ انظر ما جاء عن همنغ‎ Bye ‏الحيوانات كانت موقاة تماماً عند إصابتها بالعدوى‎ ‏صفحة الى احتم ل‎ VOY ‏المجلد‎ Infectious Diseases ‏ومعاونيه في مجلة‎ 285 ‏المجلد ؟؛ صفحة‎ (Virus Research ‏ومعاونيه في مجلة‎ Prince ‏عن برنس‎ ela ‏م؛ وما‎ 58 vo ‏أن الفئران المعالجة‎ Graham ‏وعلى النقيض من ذلك؛ 38 وجد جراهام‎ pV AAC 7 ‏قد أظهرت استجابة ضعيفة للأجسام المضادة وكانت عرضة لإصابتها بالفيروس مرة أخرى؛‎ ‏صفحة‎ (FE ‏المجلد‎ Ped Research ‏ومعاونيه في مجلة‎ Graham ‏انظر ما جاء عن جراهام‎ ‏ولكشف هذه الاحتمالية باستخدام الأجسام المضادة البشرية أحادية‎ VARY ١ ‏باخ صلل‎ ‏وعولجت بجرعة‎ (RSV) ‏من الفيروس المخلوي التنفسي‎ Long ‏النسيلة؛ أصيبت الفئران بسلالة‎ - © ‏واقية من الجسم المضاد في اليوم الرابع؛ كما هو مبين أعلاه. وتشمل الحيوانات الضابطة‎ ‏حيوانات مصابة غير معالجة؛ حيوانات غير مصابة معالجة. ثم جعلت الفئران تنزف لتحديد‎ ‏الجسم المضاد كل أسبوعين لمدة ثمانية أسابيع ثم كل أربعة أسابيع لمدة ثمانية أسابيع أخرى.‎ ‏لبروتين-ف و ج‎ oll ‏وحدد كل من الجسم المضاد البشري أحادي النسيلة والجسم المضاد‎ ‏بواسطة 81158. وبالإضافة إلى ذلك؛ حدد عيار‎ (RSV) ‏من الفيروس المخلوي التتفسي‎ ve ‏المعادلة للمصل عند كل فترة زمنية. وقد ظهرت مساهمة الجسم المضاد أحادي النسيلة‎
YA
‏وعن‎ ELISA ‏البشري المتبقي والجسم المضاد الفأاري الفعال المنتج في المعادلة من نتائج‎ ‏طريق نتائج فعالية المعادلة للفثران الضابطة المعالجة بالجسم المضاد وغير المصابة. وعندما‎ ‏يعاد إصابة‎ ELSIA ‏يكون الجسم المضاد البشري أحادي النسيلة غير قابل للكشف بواسطة‎ ‏ذبحت‎ ald ‏وبعد أربعة‎ (RSV) ‏الحيوانات بنفس السلالة من الفيروس المخلوي التنفسي‎ ‏الحيوانات وأجريت معايرة لأنسجة الرئتين والأنسجة الأنفية للفيروس وقورنت بالمجموعات‎ ٠ ‏الضابطة.‎ ‏ولتحديد تأثير العلاج بالجسم المضاد أحادي النسيلة على تحفيز خلايا-7 السامة‎ ‏لكن بعد + أسابيع من الإصابة؛‎ Alles ‏وأجريت تجارب‎ (CTL) cytotoxic T-cells ‏للخلايا‎ ‎(RSV) ‏بالفيروس المخلوي التنفسي‎ spleen ‏ذبحت الفئران وحثت مستنبتات خلايا الطحال‎
Infectious ‏في مجلة‎ «WalshEE ‏انظر ما جاء عن والش؛ ئي. تي‎ cold ‏حي لمدة خمسة‎ ve ‏بمعايرة إطلاق‎ CTL ‏صفحة 580-745 33% )2 وحدد نشاط‎ AV. Asal 165 ‏دائمة الإصابة من‎ fibroblast ‏قياسي باستخدام خط خلايا أرومة ليفية‎ chromium 51 ©١ ‏كروم‎ ‏أرومة ليفية من بالب/سي غير مصابة.‎ LOS ‏وتمت مقارنتها بخط‎ (BOTH ‏بالب/سي (خلايا‎ ‏واعتمادا على دراسات الجرعة الفعالة للمعالجة السلبية لحالات عدوى الفيروس‎ ‏بصفة رئيسية؛ حدد بعد ذلك أي جسم مضاد؛ آر إف-١ أو آر إف-‎ (RSV) ‏المخلوي التنفسي‎ no ‏ويأخذ الاختيار بين‎ (RSV) ‏الأكثر فعالية لمنع أو علاج عدوى الفيروس المخلوي التنفسي‎ CY ‏دراسات أنسجة الرئة بعين الإعتبار» وبصفة خاصة إذا عززت تقوية المتممة‎ (PE) 74 ‏أو‎ #١ ‏بشكل ملحوظ بجسم مضاد مرتبط ب و01. ويمكن أن يكون التحفيز الكبير للمتممة تأثيرات‎ ‏المعزز الناتج عن ذلك قد يزيد‎ vascularization ‏عكسية؛ على الرغم من أن تكن الأوعية‎ ‏المواجهة بين الفيروس والجسم المضاد.‎ Y. : ‏ج - اختبار الأداء في نموذج القرد‎ ‏أجري الاختبار الحاسم للجسم المضاد المختار في نموذج رئيسات. تم اختيار القرد‎ ‏لأنه يتيح نمو الفيروس‎ (Cercopithecus aethiops ‏الأخضر الأفريقي (كيركوبيششص أثيوبس‎ ‏بدرجة كبيرة؛ وتؤدي العدوى إلى أمراض رئوية معززة وإلى آفات‎ (RSV) ‏المخلوي التنفسي‎
Infectious Diseases ‏ومعاونيه في مجلة‎ Kakuk ‏يمكن تحديدهاء انظر ما جاء عن كاكوك‎ ve ‏صفحة 9561-5807 997١م. ومن أسباب إختيار القرد الاخضر الإفريقي كذلك‎ ATV ‏المجلد‎
قلا أنه متوفر بسهولة وغير معرض للانقراض ‎endangered‏ ويتراوح وزن هذا القرد من * الى ‎٠‏ كغم. بلغت أقصى جرعة متوقعة من الجسم المضاد ‎7١0‏ ملغم/كغم. وقد استخدم ‎Yo‏ ‏ملغم/كغم أي ‎٠١‏ ملغم من الجسم المضاد لثلاثة قردة يزن كل منها ‎٠١‏ كغم. وتحتوي بعض القردة الخضراء الإفريقية البرية على مناعة طبيعية ضد الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ ‎oe‏ وتتمثل الحاجة لإدخال القردة في دراستنا في أنها سالبة المصل للفيروس المخلوي التنفسي (257). واعتماداً على القاعدة المبينة في نموذج الفأر ؛ في مايتعلق بالجرعة الفعالة/كغم وزمن العدوى قبل المعالجة؛ أجريت اختبارات متتالية معينة لتحديد الجرعة الفعالة لخفض الفيروس ولاثبات فيما إذا كان ذلك يرتبط بمنع أمراض الرئة؛ وبصفة خاصة التهاب النسيج الحشوي ‎parenchymal)‏ وقد اختبرت سلالة فيروس واحدة ‎Tadd‏ وهي سلالة ‎Long‏ (مجموعة جزئية أ). ‎all A‏ اختبرت الجرعات بمقادير بلغت 75؛ 0 ‎٠‏ و ‎75/١‏ من الجرعة المرجعية. وحللت مجموعتان ضابطتان؛ أحدهما أصيبت بالفيروس ولم تتلقى جسم مضادء والثائية أصيبت بالفيروس وأعطيت الجرعة القصوى من جسم مضاد ضابط ذي نمط إسوي. وقد أجريت التجارب بصفة أساسية كما وصف أعلاه. وأصيبت مجموعات من القردة يتكون كل ‎١‏ .-_منها من ثلاثة قرود بالتقطير داخل الأنف ب ‎٠١‏ من ‎PRU‏ من الفيروس. وبعد ستة إلى سبعة أيام من الإصابة بالفيروس ذبحت القرود وأخذت عينات من الرئة والبلعوم ‎pharynx‏ ‏لمعايرة الفيروس كما وصف أعلاه ولإجراء الفحص النسيجي. وقد أجري الفحص النسيجي بصفة أساسية؛ كما وصف أعلاه. وباختصارء تروى ‎GE‏ ب ‎7٠0‏ من فورمالين ‎formalin‏ طبيعي منظم لدرجة الحموضة تحت ضغط تعبئة ‎x. :‏ ثابت . وتركت الرئتان في الفورمالين ‎formalin‏ لمدة لا تقل عن أسبوع. وبعد التقطيع والصبغ باستخدام هيماتوكسيلين والأيوسين؛ قيّمت الشرائح نسيجياً وفقاً لما جاء عن كاكوك ‎Kakuk‏ ‏ومعاونيه في مجلة ‎Infectious Diseases‏ المجلد ‎NY‏ صفحة 551-087 157 ‎a)‏ وأخذت كذلك عينات من المصل ‎pan‏ عيار الجسم المضاد البشري للفيروس المخلوي التنتفسي ‎(RSV)‏ في ‎ELISA‏ وفي معايرات معادلة العدوى. ‎Yo‏ المثال ‎٠١‏
ف" ‎-١‏ إثبات تخصصية النسيج عن طريق إجراء اختبار على أجزاء نسيج بشري في أنبوب اختبار. اختبر الجسم المضاد كذلك لتحديد تفاعليته المتبادلة المحتملة مع الأنسجة الطبيعية عن طريق ‎Clad jo‏ الأنسجة المناعية على قطع مختلفة من نسيج طبيعي مجمد مأخوذ من ‎oe‏ شخصين مختلفين. وبعبارة مختصرة؛ عرّضت شرائح دقيقة مضبطة للحرارة الخفيفة من أنسجة مجمدة لثلاثة اختبارات:- تحليل التثبيت ‎fixation analysis‏ تحليل نترجة ‎nitration‏ ‏وتحليل تخصصية/توزيع حيث أضيف جسم مضاد لبروتين-ف من الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ موسوم ببيوتين ‎biotin labeled‏ منقى في ‎PBS‏ مع ‎A)‏ من ‎BSA‏ وحضنت الشريحة لمدة ‎Ye‏ دقيقة وفي حجرة رطبة ‎humidified chamber‏ عند درجة حرارة بلغت ‎eX ov‏ ثم ‎٠‏ غسلت الشريحة في ‎PBS‏ مع 11 من ‎BSA‏ ثم حضنت الشريحة مع أفيدين-ط118 -متطيم ‎HRP‏ في ‎PBS‏ مع ‎7١‏ من ‎١ 32a BSA‏ دقيقة. وسمح بتفاعل ‎HRP‏ مع 0 ‎sl‏ ‏أمينوبنزيدين-رباعي هيدروكلوريد ‎diaminobenzidine-tetrahydrochloride‏ 3,3 الذي يشكل بقعة راسبة غير قابلة للذوبان متوسطة عن طريق الأكسدة مع ‎HRP‏ وهذا سيميز أي تفاعلات تبادلية محتملة للأجسام المضادة أحادية النسيلة البشرية موضوع البحث. وقد أجري هذا ‎Vo‏ الإختبار بمختبرات إمباث ‎cimpath laboratories‏ نيويورك ‎NY‏ ووافقت عليه وكالة الغذاء والدواء ‎(FDA) Food and Drug administration‏ ل ‎IND‏ الخاضع للمنتجات المصممة للعلاج البشري. وتستعمل الطريقة النسيجية نسيج متواجد من قبل وأقل تكلفة من الطرق البديلة؛ التي تستهدف دراسات على قردة مصابة بالفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV)‏ باستعمال جسم مضاد موسوم بالأشعة ‎radiolabeled‏ ‏0
AN
‏قائمة بيان السياقات‎ ‎>١6 6<‏ أرقام سياقات التمييز: ‎YY‏ ‎١ ‏سياق التمييز رقم‎ >7٠١< ‎ov ‏؟> الطول:‎ ١١< ‎DNA ‏النوع:‎ <Y\Y> ‎١<‏ ؟> الكائن الحى: سياق اصطناعى ‎١ Thad ‏<.؟ ؟>‎ ‎SYYY>‏ معلومات أخرى: وصف السياق الاصطناعي: بادئ ‏<6 56> الساة,: ‎١‏ ب ‎agagagagag agagagagag acgcgtgycc astcccaggt scagctggtg } 50 ‏سياق التمييز رقم ؟‎ <YV 2 ‎ov ‏؟> الطول:‎ ١١< ‎DNA ‏النوع:‎ >< ‎١ <‏ ؟> الكائن الحي: سياق اصطناعى ‎١ Toda ‏؟>‎ ؟١<‎ ‎SYYY>‏ معلومات أخرى: وصف السياق الاصطناعي: بادئ ‏<6 56> السياق: ؟ ‎agagagagag agagagagag acgegtgtey tgtcccaggt rcagytgmag: 50 ‏سياق التمييز رقم ؟‎ >”7٠١< ‎gv ‏؟> الطول:‎ ١١< ‎DNA ‏؟> النوع:‎ ١< ‎١<‏ > الكائن الحي: سياق اصطناعى ‏<ء؟ ؟> السمة: - ‏<؟ 7؟> معلومات أخرى: وصف السياق الاصطناعي: بادئ ‏<.. > السياق: ؟ ٍْ ‎agagagagag agagagagag acgcgtgtce agtgtgaggt gcagctg 47 ad) ‏سياق التمييز‎ >؟٠٠<‎ ‎£4 ‏؟> الطول:‎ ١١٠< ‎DNA ‏النوع:‎ >”7١١< ‏سياق اصطناعى‎ all ‏الكائن‎ >؟١<‎ ) - ‏السمة:‎ <YY > ‏معلومات أخرى: وصف السياق الاصطناعي: بادئ‎ <YYY> ‏السياق: ؛‎ > . .< ‎agagagagag 89 ‘acgegtgtce tgtcccaqgt 89 44
AY
<١٠؟>‏ سياق التمييز رقم 0 £4 ‏؟> الطول:‎ ١١<
DNA ‏؟> النوع:‎ ١< + ١؟>‏ الكائن الحى: سياق اصطناعى
Crd <YY > ‎<YYY>‏ معلومات أخرى: وصف السياق الاصطناعى: بادئ ‏ح .5 > الساة,: ‎o‏ } } . . . ‎agagagagag agagagagag acgcgtgtet ggccgaagtyg cagctggty 49 + ‏؟> سياق التمييز رقم‎ ٠١< ‎41 ‏؟> الطول:‎ ١< ‎DNA ‏النوع:‎ >؟١<‎ ‎١7<‏ ؟> الكائن الحى: سياق اصطناعى ‏<.؟ ؟> ‎Toda‏ ‎<YYY>‏ معلومات أخرى: وصف السياق الاصطناعى: بادئ ‎| 1 ‏السياق‎ < E> ‎agagagagag agagagagag goocttggty ctagctgagg agacygyg 46 7 ‏مييز رقم‎ all ‏سياق‎ <YY o> ‎ov ‏؟> الطول:‎ ١١< ‎DNA ‏النوع:‎ >؟١7<‎ ‏<١؟>‏ الكائن الحى: سياق اصطناعى ‎- :ةمسلا‎ >7 ١< ‏<؟؟ ؟> معلومات أخرى: وصف السياق الاصطناعي: بادئ ‎a>‏ .45> السباة,: لا ‎gatgtgacat ccagatgacc 50‏ 041998 8 951941929219 <٠؟>‏ سياق التمييز رقم 8 ‎١١<‏ 7؟> الطول: £9 ‎<VVY>‏ النوع: ‎DNA‏ ‎١<‏ ؟> الكائن الحي: سياق اصطناعى <.؟ ؟> ‎To dad‏ ‎<YYY>‏ معلومات أخرى: وصف السياق الاصطناعي: بادئ ‎<g>‏ السياق: ‎A‏ ‎agagagagag agagagagag cctggatcac gatgtgatat tgtgatgac 49
AY
‏سياق التمييز رقم ؟‎ >؟7٠١<‎ £4 ‏؟> الطول:‎ ١١<
DNA ‏النوع:‎ >؟١<‎ ‏؟> الكائن الحي: سياق اصطناعى‎ ١< ١ Todi ‏<.؟ ؟>‎ ‏<؟ 7؟> معلومات أخرى: وصف السياق الاصطناعي: بادئ‎ ٍ 9 ‏حم < السياق:‎ agagagagag agagagagag ccagatacac gatgtgaaat tytgttgac - 49 ٠١ ‏سياق التمييز رقم‎ >؟٠١<‎ £4 ‏7؟> الطول:‎ ١١<
DNA ‏؟> النوع:‎ ١< ‏الكائن الحي: سياق اصطناعى‎ >؟١3<‎
Toda <YYL> ‏معلومات أخرى: وصف السياق الاصطناعي: بادئ‎ SYYY>
Bi ٠ + alt <8 va agagagagag agagagagag tctggtgeac gatgtgacat cgtgatgac 49 ١١ ‏سياق التمييز رقم‎ >7٠١< ‏الطول:‎ > ١١<
DNA ‏النوع:‎ <YVY> ‏الكائن الحي: سياق اصطناعى‎ >؟١<‎ ) Todd ‏<.؟ ؟>‎ al ‏معلومات أخرى: وصف السياق الاصطناعي:‎ <YYY>
VY ‏السياق:‎ >. 6< agagagagag agagagagag 66 gtacgtttga tttccasctt 50
VY ‏سياق التمييز رقم‎ <YY >
FYY ‏الطول:‎ <YVY>
DNA ‏النوع:‎ >" ١١< ‏الحي: إنسان‎ CAS >؟١<‎ ‏السمة:‎ >77١<
CDS ‏الاسم/المفتاح:‎ <YYV> 971 71 ( ‏الموقع:‎ <YYY>
VY ‏السياق:‎ >466<
كم ‎gac atc cag atg acc cag tot cca tec tce ctg tct gca tet gtc gga 48‏ ‎Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser val Gly‏ : 10 5 1 ‎gca ggt cag agg att gct agt tat 96‏ ووه و ‎gac aga gtc acc atc act‏ ‎Xsp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Gly Gln Arg Ile Ala Ser Tyr‏ © 25 20 ‎tta aat tgg tat cag cac aaa cca ggg aaa gcc cct aag ctc ctg ata 144‏ ‎Leu Asn Trp Tyr Gln His Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile‏ ‎oo 35 2 0 45‏ ‎cgt ggg gtc ccg tca 49 tte agt © 192‏ 8 و ‎tat got gga too aat‏ ‎Tyr Ala Gly Ser Asn Leu His Arg Gly Val Pro Ser Arg Fhe Ser Gly‏ 60 55 50 ‎caa cct 240‏ وه ‎ggt gga tect ggg aca gat ttc act ctc acc dtc aac agt‏ ‎Gly Gly Ber Gly Thr Asp phe Thr Leu Thr Ile Asn Sear Leu Gln Pro‏ ب 80 75 70 65 ‎gaa gat ttt gca act tac tat tgt caa cag gct tac agt acc ccc 9 288‏ ‎“Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Tyr Ser Thr Pro Trp‏ 95 © ٍ 90 85 ‎gaa atc aaa 321‏ وو ‎act ttc ggc cca ggg acc aag‏ ‎Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys‏ 105 100 ‎<YY >‏ سياق التمييز رقم ‎١“‏ ‎١١<‏ 7؟> الطول: م7 ‎١<‏ ؟> النوع: ‎DNA‏ ‏<؟١‏ ؟> الكائن الحي: إنسان ‎<YY >‏ السمة: <١؟‏ ؟> الاسم/المفتاح: ‎CDS‏ ‏<؟؟ ؟> الموقع: ‎(YVA)..(V)‏ ‏> .46> السياق: ‎VY‏ ٍْ ٍ ‎aaa ccc aca gag 49‏ وو ‎ttg cag gag tot ggt cct gtg gtg‏ وده ‎cag gtg‏ ‎Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro val Val Val Lys Pro Thr Glu‏ ‎os 10 . 18‏ 1 ‎acc ctc acg ctg acc tgc acc gtc tet ggg ttc tea cte age aac cet 96‏ ‎Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Sex Asn Pro :‏ ‎٠.٠‏
مم ‎aga atg ggt gtg acc tgg atc cgt cag ccc ccc ggg aag gee cta gaa 144‏ ‎Arg Met Gly Val Thr Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu‏ 45 40 35 ‎gag aag tce tte agt cect tet 192‏ عدو ‎agt‏ وه ‎tgg ctt gga aac att ttt‏ ‎Trp Leu Gly Asn Ile Phe Ser Ser Asp Glu Lys Ser Phe Ser Pro Ser‏ 60 55 50 ‎aag agc aga ctc acc acc tcc cag gac acc tcc aga age cag gtg - 240‏ واه ‎Leu Lys Ssr Arg Leu Thr Thr Ser Gln Asp Thr Ser Arg Ser Gln Val‏ ‎١ 80‏ 75 70 65 ‎gac aca gcc aca tat tac 288‏ وو ‎gtc cta agc ttg acc aac gtg gac cct‏ ‎val Leu Ser Leu Thr Asn Val Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr‏ 85 90 85 ‎tgt goa cyg gta gga ctg ‘tat gac atc aat get tat tac cta tac tac 336‏ ‎Cys Ala Arg Val Gly Leu Tyr Asp Ile Asn Ala Tyr Tyr Leu Tyr Tyr‏ 110 105 100 ‎cag gga acc ctg gtc acc gtc tcc tca 318‏ ووو وو ‎ctg gat tat‏ ‎Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser‏ 125 120 113 <١٠؟>‏ سياق التمييز رقم ‎VE‏ ‎١١<‏ > الطول: م ‎>”7١١<‏ النوع: ‎DNA‏ ‎١<‏ ؟> الكائن الحي: إنسان ‎<YY >‏ السمة: ‎<YY\V\>‏ الاسم/المفتاح: ‎CDS‏ ‎<YYY>‏ الموقع: ) 1)..(/ 1 > 6< السياق: ‎VE‏
AR gac atc cag atg acc cag tet cca tcc tco ctg tct geca tct gtc gga 48
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 gac aga gtc acc atc act tgc cgg goa agt cag age att goo agt tat 96
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ala Ser Tyr 20 25 30 gta ast +99 tat caa cag aaa cca ggg aaa gcc cct aaa ‏عو‎ cte att. 144 val Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys val Leu Ile : © 35 40 435 ttt got toca goc aat tig gtg agt ggg gtc cca tca aga ttc agt 6 192 -
Phe Ale Ger Ala Asn Leu Val Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 ss ‏ا‎ 6# agt gga tot ggg aca gtt ttc acc ctc 8 atc ago aat ctg caa cct 240
Ser Gly Sar Gly Thr val Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asn Leu Gln Pro 65 0 70 : 75 1 ‘gaa gat ttt goa acc tac ttc tgt cag cag agt tac act aat ttc ‏او‎ 288
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Tyr Thr Asn Phe Ser 85 0 90 ٍ 095 ٍْ ttt ggc cag ggg acc aag ctg gaa atc aaa 318
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys . 100 105 ‏سياق التمييز رقم‎ >7٠١<
PYA ‏؟> الطول:‎ ١١<
DNA ‏النوع:‎ <YYY> ‏؟> الكائن الحي: إنسان‎ ١< ‏السمة:‎ >7 >
CDS: ‏الاسم/المفتا‎ <YYY> (VA) ‏الموقع:‎ >١١ ١< 0 Yo ‏<..ء> السياق:‎ cag gta cag ttg cag gag tct ggt cct gcg ctg gta aaa ccc aca cag 48
Gln Val Gln Leu Gln Glu Sex Gly Pro Ala Leu Val Lys Pro Thr Gln 1 5 : 10 15 ٠.7
AY acc ctc aca ctg acc ‏عو‎ acc ttc tot ggg ttc tca ctc agc acc aga 96
Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Arg gga atg agt gtg aac ‏وو‎ atc cgt cag ccc cca ggg aag gcc ctg gaa 144
Gly Met Ser Val Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu : 40 45 tgg cta gcc ‏6و0‎ att gat ‏عدو وو‎ gat gat aca ttc tac agc got tet 192
Trp Leu Ala Arg Ile Asp Trp Asp Asp Asp Thr Phe Tyr Ser Ala Ser 60 ‏واه‎ aag act agg ctc age atc tcc aag gac acc tcc aaa aac cag gtg 240
Leu Lys Thr Arg Leu Ser Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Glo Val 63 170 : 75 . 80 gtc ctc aga atg acc aac gta gac cct gtg gac aca gcc aca tat ttt 288 val Leu Arg Mast Thr Asn Val Asp Pro val Asp Thr Ala Thr Tyr Phe 85 90 95 tgt gca ogg goc tca cta tat gac agt gat agt ttc tac cte ttc tac 336
Cys Ala Arg Ala Sar Leu Tyr Asp Ser Asp Ser Phe Tyr Leu Phe Tyr 100 105 110 cat gcc tac ‏وو وو‎ cag gga acc gtg gtc acc gtc tcc tca 378
His Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Val Val Thr Val Ser Ser 115 “120 125 ٠١6 ‏سياق التمييز رقم‎ >؟٠١<‎
Veo ‏؟> الطول:‎ ١١<
DNA ‏النوع:‎ >؟١<‎ ‏الكائن الحي: إنسان‎ >١١ ١< ‏السمة:‎ >7 ٠١<
CDS : ‏؟> الاسم/المفتا‎ ؟١<‎ (V0) ‏الموقع:‎ <YYY> 1 ‏السياق:‎ >. ‏ا‎
هم atg gag acc cct gct cag ctc ctg ggg ‏ماه وه م‎ cte tgg ‏عه‎ cga 48
Met Glu Thr Pro Ala Gin Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp Leu Arg 1 5° 10 15 ggt gcc aga tgt gac atc cag atg acc cag tct cca tcc tcc ‏وه‎ tect 96
Gly Ala Arg Cys Asp Ile Gln Mat Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser + goa ‏ام‎ gtc gga gac aga gtc acc atc act ‏تو‎ cgg gca 99+ cag agg 144
Ala Ser Val Gly Asp Arg val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Gly Gln Arg att gct agt tat tta aat tgg tat cag cac aaa cca ggg aaa gece cect 192
Ile Ala Ser Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln His Lys Pro Gly Lys Ala Pro 55 . 60 . aag ctc ‏واه‎ ata tat gct gga tcc aat ttg cac cgt ggg gte ccg tca 240
Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Gly Ser Asn Leu His Arg Gly Val Pro Ser 65 70 : 75 80 agg ttc agt ggc ggt gga tct ggg aca gat tte act ctc acc atc aac 288
Arg Phe Ser Gly Gly Gly Ser Gly Thr Asp the Thr Leu Thr Ile Asn 85 90 95 agt ctg caa cct gaa gat ttt gca act tac tat tgt caa cag gct tac 336
Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Tyr 100 105 ٠ 110 agt acc ccc tgg act tte gge cca ggg acc aag gtg gaa atc aaa cgt 384
Ser Thr Pro Trp Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 113 120 125 ٠ acg gtg gct gca cca tct gtc ttc ate ttc ecg cca tct gat gag cag 432
Thr Val Ala Ala Pro Ssr Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 130 135 140 ttg aaa tct gga act ‏مو‎ tot gtt gtg tgc ctg ctg aat aac ttc tat 480
Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 145 150 155 : 160
AQ ccc aga gag gcc saz gta cag tgg aag ‏وو‎ gat aac gcc ctc casa tcg 528
Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 165 170 175 ggt aac tcc cag gag ‏اوه‎ gic aca gag cag gac ‏وه‎ aag gac age ace 576
Gly Asn Ser Gln Glu Ser val Thr Glu Gln Asp Sar Lys Asp Ser Thr 180 185 190 tac ago ctc age agc acc ctg 49 ctg age aaa gca gac tac gag aaa 624
Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 185 200 205 cac aaa gtc tac gcc tge gaa gic acc cat cag gge ctg age ‏و6‎ 8 672
His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ber Ser Pro 210 215 ‏ل‎ 220 gtc aca aag agc ttc aac agg gga gag tgt tga 705
Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230
VY ‏سياق التمييز رقم‎ YY >
VEYA ‏؟> الطول:‎ ١١<
DNA:g sil <Y)Y> ‏الكائن الحى: انسان‎ >؟١<‎ ‏السمة:‎ > ٠١<
CDS ‏؟> الاسم/المفتاح:‎ "١< (0 evo). J ) ‏الموقع:‎ <YYY> ١١7 ‏السياق:‎ <> atg ggt ‏وو‎ agc ctec atc ttg otc tte ctt gtc get gtt got 9 cgt 48
Met Gly Trp Ser Leu Ile Leu Lsu Phe Leu Val Ala Val Ala Thr Arg 1 5 10 15 gto ctg tcc cag ‏وو‎ cag ttg cag gag tct ggt cect gtg ‏وو‎ gtg aaa 96
Val Leu Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Val Val Val Lys ccc aca gag acc ctc acg ctg acc tgc acc gte tet ggg tte tca cte 144
Pro Thr Glu Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu 43 age aac oct aga ‏وه‎ ggt gtg acc ‏وو‎ atc cgt cag ccc ccc ggg 9 192 . Ser Asn Pro Arg Met Gly Val Thr Trp Ils Arg Gln Pro Pro Gly Lys ’ 60 goo cta gaa tgg ctt gga aac att ttt tcg agt gac gag ‏وعد‎ tcc ttc 240
Ala Leu Glu Trp Leu Gly Asn Ile Phe Ser Ser Asp Glu Lys Ser Phe 65 70 75 80 sgt cct tot ‏وه‎ aag age agd ctc acc acc tec cag gac acc tcc aga 288
Ser Pro Ser Leu Lys Ser Arg Leu Thr Thr Ser Gln Asp Thr Ser Arg 85 90 95 age cag gtg gtc cta age ttg acc aac gtg gsc cct gtg ‏عدو‎ aca gcc 336
Ser Glu Val Val Leu Ser Leu Thr Asn Val Asp Pro Val Asp Thr Ala 100 105 110 aca tat tac tgt gca ‏ووه‎ gta gga ctg tat gac atc aat gct tat tac 384
Thr Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Gly Leu Tyr Asp Ile Asn Ala Tyr Tyr 113 120 125 ota tac tac ‏واه‎ gat tat ‏وو‎ ggg cag gga acc ctg gte acc ‏تو‎ tee 432
Leu Tyr Tyr Lau Asp Tyr Trp ‘Gly Gln Gly Thr Leu val Thr Val Ser 130 135 1490 tca got ago acc aag ggc cca tcg gte ttc cco ctg goa ccc tec tee 480
Ser Ala Sar Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser 145 150 155 160 ang age acc tet ‏ووو‎ ggc aca ‏وعو‎ gee ‏وه‎ gge ‏و و‎ gtc aag gac 528
Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp 165 170 175 tac tto occ" gaa ccg gtg acy gtg tcg tgy amc toca gge gee ctg ace 576
Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr 180 185 190 age ggc gtg cac ace ttc ccg get gto cta cag tce tca gga ctc tac 624 ger Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr 195 200 208 tcc ctc age agc ‏واو وو‎ acc ‏وو‎ ccc tcc age age tig gge ace cag 672 ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Sar Ser Leu Gly Thr Gln 210 215 220 acc tac atc tgc aac gtg aat cac aag ccc agc aac acc aag gtg gac 720
Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp 225 230 235 240 aag asa gca gag occ aaa tect tgt ‏عدو‎ aaa act cac aca ‏تو‎ cca 9 768
Lys Lys Ala Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro 245 250 255 tgc cca gca ‏ا‎ gaa cte ctg ggg gga ccg tca gtc ttc ‏ع‎ ttc ccc 816
Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro 260 265 270 . cca aaa CCC mag gac acc ctc stg atc tcc cgg ace cct gag gto aca 864
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr 273 280 oo 285 tgc gtg ‏وو وو‎ gac ‏وو‎ ago cac gaa gac ect gag gtc aag ttc aac 912
Cys val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn 290 295 300 ‏وو‎ tas gtg gac ggc gtg gag gtg cat aat gcc aag aca aag ‏و00‎ 39 960
Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg 303 310 315 320 gag gag cag tac aac agc acg tac cgt gtg gtc age ‏مو‎ cte ace gte 1008
Glu Clu Gla Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val 325 330 335 ‏واه‎ cac cag gag ‏وك وو‎ aat ‏وو‎ aag gag tac aag ‏6و‎ aag gtc tee 1056
Leu His Gln Glu Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser 146 345 350 asc aaa ‏00و‎ © cca geo gece atc gag aaa acc atc tcc aaa gcc aaa 1104
Asn Lys Ala Leu Pre Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys 355 360 365 ggg cag cco cga gaa cca cag gtg tac acc ctg ccc cca tcc cgg gat 1152
Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp 370 375 380 gag ctg acc asg aac cag gtc age ctg acc ‏و‎ ctg gtc aaa gg9¢ tte 1200
Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe 38s 390 0 395 400 tat ccc agc gac atc goc gtg ‏ومو‎ tgg gag age aat ggg cag ccg gag 1248
Tyr Pro Ser Asp Ila Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu 405 410 415 anc amc tac mag acc acq cot ccc ‏عدو وه وناو‎ tcc gac ggc tcc tte 1296
Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe 420 425 : 430 tte cto tac ago aag ctc acc ‏وو‎ gac aag age ‘agg tgg cag cag 9 1344 ¥he Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly 438 440 445 aac gtc ttc tca tgc tcc gtg atg cat gag got ctg cac aac cac tac 1352
Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr 450 55 460 acqg cag aag agc ctc tcc ctg tect ccg ggt aaa tga 1428
Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 — ‏ذا‎ 470 473
YA ‏؟> سياق التمبيز رقم‎ ٠١< ال١ ‏الطول: م‎ >؟١١<‎
نل ‎١<‏ ؟> ‎DNA:g sill‏ ‎١<‏ > الكائن الحى: انسان ‎<YY o>‏ السمة: ‎<YYV>‏ الاسم/المفتاح: ‎CDS‏ ‏<7 7 ؟>الموقع: ‎)707(..)١(‏ ‏<> السياق: ‎VA‏ ‎ctec 9 48‏ ته ‎ctg ggg ctc ctg‏ عه ‎atg gac stg agg gtc ccc get cag‏ ‎Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Lsu Leu Leu Trp‏ 10 5 1 ‎cga ggt gcc aga tgt gac atc cag atg acc cag tect cca tea tee 96‏ عم ‎Leu Arg Gly Ala Arg Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser‏ 25 20 ‎ctg tct goa tet gte gga gac aga gtc acc atc act tgc cgg 8 agt 144‏ ‎Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser‏ 43 : 40 35 ‎tat caa cag aaa cca ggg asa 192‏ وو ‎cag agc att gcc agt tat gta aat‏ ‎Gln Ser Ile Ala Ser Tyr Val Asa Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys‏ 60 33 30 ‎gcc cct aaa gte cte att ttt get tca goo ast tg gtg agt 18 gte 240‏ ‎Als Pro Lys Val Leu Ils Phe Ala Ser Ala Asn Leu Val Ser Gly Val‏ 80 75 70 ]1[ ‎cca tca aga ttc agt ggc agt gga tect ggg aca gtt ttc acc ctc ace 268‏ ‎Pro ber Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr val Phe Thr Leu Thr‏ $5 90 85 ‎caa cct gaa gat ttt goa acc tac ttc tgt cag cag 3316‏ وه ‎atc age ant‏ ‎Ile Ser Asn Leu Gln Pro Glu Asp Pho Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln‏ 110 105 100 ‎agt tac act aat ttc agt ttt ggc cag ggg acc aag ctg gaa atc aaa 384‏ ‎Ser Tyr Thr Asn Phe Ser Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ils Lys‏ 125 120 115 ‎acg gtg got goa cca tet gtc tte atc ttc ccg cca tot gat 9 432‏ ون ‎Arg Thr Val Ala Ala Pro fer val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu‏ 140 135 130 ‎ctg aat aac ttc 480‏ وه مو ‎tot gtt gtg‏ وو ‎cag ttg asa tot gga act‏ ‎Gln Lau Lys Ser Gly Thr Ala Ser val Val Cys Leu Leu Asn Asn Fhe‏ 150 155 150 145 ‎sga gag gcc aad gta cag tgg aag gty gat aac gcc ctc caa 528‏ دده ‎tat‏ ‎Tyr Pro Arg Glu Ala Lys val Gln Trp Lys Val Asp Rsn Ala Leu Gln‏ 175 170 : 163 . ‎ggt aac toe cag gag agt gtc aca gag cag gac age aag gac age 576‏ وه ‎Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Glan Asp Ser Lys Asp Ser‏ _ 190 185 180 ‎tac gag 624‏ عدو ‎acg ctg age aaa gca‏ وه ‎ace tac agc cte age age ace‏ ‎Thr Tyr Ger Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu‏ 205 200 15 ‎ctg age tog 672‏ وو ‎gaa gtc acc cat cag‏ 96و ‎axa cac saa gto tac gee‏ ‎Lys His Lys Val Tyr Ma Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser‏ 220 215 210 ‎cco gto aca aag agc ttc aac agg gga gag tgttga 708‏ ‎Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu‏ 230 225 ay 3 ‏؟> سياق التمييز رقم‎ ٠<
VEYA ‏؟> الطول:‎ ١<
DNA ‏النوع:‎ >؟١١<‎ ‏الحي: انسان‎ HEN <YAY> ‏السمة:‎ <YY >
CDS ‏؟> الاسم/المفتاح:‎ ؟١<‎ )١75(..)1( ‏الموقع:‎ <YYY> ٍ ١١ ‏السياق:‎ <g> atg ggt tgg age 6 atc ttg ctc ttc ctt ‏مو‎ got gtt got acg cgt 48
Met Gly Trp Ser Lau Ils Leu Leu Phe Leu Val Ala Val Ala Thr Arg 1 5 10 15
ع ‎ctg gta aaa 96‏ وو ‎cag gta cag ttg cag gag tect ggt cct‏ عو ‎gtc ttg‏ ‎val Leu Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Ala Leu Val Lys‏ 30 25 20 ‎ccc aca cag acc ctc aca ctg acc tgc ace tte tect ggg ttc tca cte 144‏ ‎Pro Thr Gln Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Phe Ser Leu‏ 45 40 35 132 و9 ‎agc acc aga gga atg agt gtg aac tgg atc cgt cag ccc cca ggg‏ ‎Ser Thr Arg Gly Met Ser Val Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys‏ 60 55 50 ‎gac gat gat aca ttc tac 240‏ وو ‎cta gcc cge att gat‏ و ‎gece ctg gas‏ ‎Ala Leu Glu Trp Leu Ala Arg Ile Asp Trp Asp Asp Asp Thr Phe Tyr‏ 80 13 = 70 63 ‎agc got tect ctg aag act agg etc age atc tcc aag gac acc tcc aaa 288‏ ‎Ser Ala Sar Leu Lys Thr Arg Leu Ser Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys‏ . 95 90 85 ‎gac aca gcc 336‏ وو ‎gtc ctc aga atg acc aac gta gac cct‏ وو ‎aac cag‏ ‎Asn Gln Val Val Leu Arg Met Thr Aen val Asp Pro Val Asp Thr Ala‏ 110 105 100 ‎aca tat ttt tgt gca cgg goc tca ota tat gac agt gat agt ttc tac 304‏ ‎Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Ala Ber Leu Tyr Asp Ser Asp Ser Phe Tyr‏ 125 120 115 ‎ggo cag gga ace gtg gta aco gto tcc 432‏ وو ‎cote ttc tac cat gcc tac‏ ‎Leu Phe Tyr His Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Val Val Thr Val Ser‏ 140 135 130 ‎gca ccc tce 8 480‏ وه ‎ttc ccc‏ مو ‎tca got age acc aag gge cca tcg‏ ‎Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser‏ 150 155 150 2 | 145 528 عدو ‎gtc aag‏ ونه و وو وه ‎aag age acc tot ggg ggc aca 9 gcc‏ ‎Lys Ser Thr Ber Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp‏ 175 170 165 ‎gtg 9 tgg aac tca ggo gcc ctg ace 576‏ و ‎tac ttc ccc gma cog gtg‏ ‎Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr’‏ 150 185 180 ‎got gtc ota cag tcc toca gga cto tac 624‏ ووه ‎cac 8 ttc‏ وو ‎ago gge‏ ‎Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr‏ - 205 200 195 ‎gtg acc gtg ccc tcc age age ttg ggc acc cag 672‏ وو ‎tee cte age age‏ ‎Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gla‏ ~ : 220 215 210 ‎acc tac atc tgc sac qtg saat cac asg ccc agc &ac acc aag gtg gac 720‏ ‎Thr Tyr Ils Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp‏ . 240 235 230 225 ‎aca gc cca 9 768‏ ع ‎ang aaa goa gag ccc asa tot tgt gac aaa act‏ ‎Lys Lys Ala Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro‏ 250 245 ‎coa gca cot gaa ctc ctqg ggg gga ccg tca ‘gte ttc cte tte cece 816‏ 0و ‎Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro‏ 270 265 } 260 ‎acc cct gag gtc aca 864‏ وو ‎cca aaa ccc aag gac acc ctc atg atc toc‏ ‎Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr‏ 285 280 275 ‎tge gtg gtg gtyg gac gty agc cac gaa gac cct gag gtc aag ttc aac 912‏ ‎Cys Val Val Val Asp val Sar His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn‏ 300 295 — 290 ‎cat aat gcc aag aca aag ¢cg 9 960‏ وو ‎gag‏ وو ‎gac ggc‏ وو ‎tac‏ 199+ ‎Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg‏ 320 318 310 “ 305 ‎age gte ctc acc gte 1008‏ مو ‎gag gag cag tac aac age acg tac egt gtg‏ ‎Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val‏ 335 330 325 qo ety ‏عم‎ cag ‏عمو‎ tgg ‏واه‎ set ‏وو‎ aay gag tac aag tgc ang gte too 12556
Lea His Gln Asp Trp Leu Asn ‏بيذي‎ Lye Glu Tyr Lys Cye Lys val Sar 340 348 350 aac aan ‏عمو‎ ote ofa goo coc ate gag ana acc ate tco aas 9627 asa 1104
Asn Lye Ala Leu Pro Ala Pro ile Glo Lys thr Ile Sec Lys Ala Lys 355 30 315 ggg cag SGC Cga gaa 2065 ‏وو وم‎ tac noc ctg coc Gea hee ogg gat 1152
Giy Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Fro Pro Ser Ary ‏م28‎ ‎370 373 380 gag ‏فاه‎ BC amg pac cag ‏هجو‎ &ge ‏و‎ ace ‏وج‎ ctg gto ama ggo tt 1200
Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Len Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe
X85 390 395 400 tat coe age ‏عدو‎ atc goo ‏وو‎ gag ‏وو‎ geg age aat ‏ووو‎ cag ‏وده‎ gag 1248
Tyr Pro Ser hep Ila Ala val Glu Trp Glu ser Asn Gly Gln Pro Glu ans 410 418 - adc sac ‏عم‎ aag acc seg 2 ‏عمو و5 وو ع0‎ tee gac ‏موقو‎ bee tre 1296
Asn ssn Tyr Lya Thr Thr Pro Bro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser the 420 425 430 tte cote tam ago aad Cte AGC ‏عمو وو‎ 28g ‏6و‎ 29g ‏و5‎ ng cag 5 1344 phe Leu Tyr Sec Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly 435 40 443 aac gtc ‏ع‎ tea ‏وو‎ tod ‏وو‎ atg cat gag got ‏وه‎ Gee nat C&C tac 13%2 as Val Phe Ser Cys Sez val Met His Glu Ala Leu His ‏معط‎ His Tyr 450 0٠ 453 450 acy ‏ي1قة قو‎ age ota toe cig tet cog ggt aaa tga 1428
Thr Gln Lya Sar Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470 475
Yo ‏سياق التمييز رقم‎ >7٠١< ٠١١ ‏7؟> الطول:‎ ١١<
PRT ‏النوع:‎ >7١7< ‏؟> الكائن الحى: إنسان‎ ١< 7 “ol ‏السياق‎ < ¢ ed hep Tle Gin Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Len Ser Ala Sar Val Gl; 1 5 11 15
Rap Arg Val Thr Ile Thr Cys ‏وعد‎ hla Gly Gln Arg Ils ‏ملم‎ Ger Tyr 2¢ 25 20
Leu Asn Trp TyZ Gln His Lye Pro Gly Lye Ala Fra Lys Leu Leu Ila 35 ١ 40 4
Tyr Ka Gly Ser Asn Leu Ale Arg Gly val Fro Ger Arg The Ser Gly 50 EH ad
Gly Gly Sar Gly Thr Asp ha Thr Les Thr Ils Ren Ser Lzu Gln Pro 70 75 20
Glu Aap Phe ala Thr ‏عا‎ Tye Cye Gln Gln hla Tyr Ser Thr Pro Trp
BS 50 95
Thr The Gly Pro Gly Thr Lys val Glu Ile Lys 100 105 an 7 ‏؟> سياق التمبيز رقم‎ ٠١<
YY ‏؟> الطول:‎ ١٠<
PRT ‏النوع:‎ <YVY> ‏؟> الكائن الح ,: انسان‎ ١<
YY ‏السياق:‎ >66 0<
Glo val Gln Lea Glan Glu Ser Gly Pra vel val val Lys Pro Thr Glu t = 5 10 15
Thr Leu Thr Leu Tor ‏مجح‎ Thr val Sar Gly Fhe Ser Leu Ser Asn Fro 20 25 30
Arg Ket Gly Val Thr Trp Ile Arg Gln Fre Pro Gly Lye Ala Leu Glu 35 40 45
Trp Leu Gly Aan Ile Phe Sur Sar Amp Glu Lys Sar Fhe Ser Pra Sar 50 53 60
Lec Lys Se Arg Leu Thr Thr Ser Glo Asp Thr Ser Arg Eer Glm 1 63 70 73 BQ val Len Sar Leu Thr Aan Val hsp Pro Val Ap Thr Ala Thr Tyr Tyr 85 $0 95 tys Ala Arg Val Gly Leu Tyr Aap Ile Asn Ala Tyr Tyr Leu Tyr Tyr 105 119
Lau ASp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu ¥al Thr Val Ser Ser 115 128 125
YY ‏؟> سياق التمييز رقم‎ ٠١< ٠١١ ‏الطول:‎ >؟١١<‎
PRT ‏النوع:‎ >؟١7<‎ ‏؟> الكائن الحي: إنسان‎ ١<
YY ‏السياق:‎ >. .<
Asp Ile Gln Het Thr Gln Sec Fro Ser Sec Leu Sor Ala Ser val aly 1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ila Thr Cys. Arg Aa Sor Gln Ser Ilw Ala Sar Tyr 3h
Val Aen Trp Tyr Glo Glo Lys Pro Gly Lys hla Fro Lys Yul Leu Ile 25
Phe Mla fax Als kan Lau Val Ser 217 Val Pro Ser Arg ha Ser Gly £0
Ser Gly Sar Gly Thr Val Phe Thr Lau Thr Ilw Ser Aan Leu Gln Pro 65 70 75 30
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Phe Cys Gln ‏مل‎ Sar Tyr Thr Asn Phm Ser 85 90 95
Phe Gly Gln Gly Thr Lya Lem Glu Ile Lye - yoo 15,
ay
YY ‏سياق التمييز رقم‎ >7٠١< ١١7١6 ‏الطول:‎ >؟١١<‎
PRT ‏النوع:‎ <Y1Y> ‏الحى: إنسان‎ Sl <YY >
YY ‏السياق:‎ <E00> clin Vel Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Ala ‏تبسك‎ Val Lys Pro Thr Glo 1 5 . 1a 15. ghr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Arg : 25 ١ 30
Gly Met Sac Val msn Trp Tla Arg Gln Fro Pro Gly Lys Als Lou Glu 0 45
Trp Leu Als Arg Ile Lap Trp Asp ASD Asp Thr Phe Tyr bar Ala Ser 55 . 60
Len Lys Thr Erg Leu Eer Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lye Arn Gln Val &5 TO : 5 80 val Leu Arg Hat The Asn Val Asp Pro Vel Asp Thr Ala Thr Tyr Phe - 85 ‏م‎ . 30 9
Cyn hla Ary Ala Smr Leu Tyr Asp Ser Asp Ser Pha Tyr Lad Phe Tyo . ™ 100 105 110 ‏عدو‎ Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Val Val Thr val Ser Ser 118 120 12%
Yi ‏سياق التمييز رقم‎ >7٠١< 4 ‏الطول:‎ >” ١١<
PRT ‏النوع:‎ >117< ‏؟> الكائن الحى: إنسان‎ ١<
YE ‏السياق:‎ > .6.< aA -Net Glu Thr Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Lau Lsu Trp Leu Arg t 5 10 15
Gly Ala Arq ‏در‎ Asp Ile Gln Mat Thr Gin Ger Fro Ser Ber Lou Ber 20 25 ig
Ala &nr Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Gly Glu Arg as 48 45
Ile Ala Ser Tyr Leu Asn Trp 177 clin His Lys ‘Pro Gly Lye Ala Pro 50 55 : 50 "
Lys Lau Leu Ilo Tyr Ala Gly Ser han Leu His Rig Gly val ¥ro fac ‏ل‎ £5 0 75 BO
Arg Phe Ser Gly Gly Gly Ser Gly Thx Asp Phe Thr Leu The Tle Ran 85 50 95 ‏جوع‎ Lau Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala TYY 140 10.5 11.0
Ser Thr Pro Trp The Phe Gly Pro Gly Thr Lys val Glu Ile Lyx Arg 1158 129 125
Thy vel Ala Ala Pro Sex val Phe Tle Fhe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 13 Q 135% 140
Lwu Lys Ser Gly Thr Als Ser Val Val Cys Led Lou Aso Asn Phe YT 145 150 155 160
Pre Arg Glu Ale Lys Val Gln Trp Lye val Aap Aan Ala Leu Gla Ear © 165 217 175
Gly ‏دعر‎ Ser Gin Olu Ser ¥al Thr Clu Glu Asp Ser. Lye Asp Ber Thr 180 18% i 190
Tyr Ser Lac Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lye. Ala Asp Tyr Glu Lye 153 . 200 . 205
His. Lye ¥al Tyr Ala Cys Glu Val Thr ‏ماج‎ Gla ‏جلي‎ Leu Ear 8mr PXo 214 215 230 ©
Vel Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu ‏حي‎ ‎225 232
Yo ‏سياق التمييز رقم‎ >؟٠١<‎ §Vo ‏؟> الطول:‎ ١١<
PRT ‏النوع:‎ >؟١<‎ ‏؟> الكائن الحى: إنسان‎ ١<
Yo : ‏السياق‎ <§ o>
Wet Gly Trp Sor Leu Ils Loa Lau Phew Leu Val Alan ‏تلد‎ ila Thr Arg
ToL 3 ’ 10 15 vel Lew Ser Gln val Glu Lwu Gln Glu ser Gly Pro Val Vel Vel Lye 20 25 10 pra The Glu Thr Lau Thx Lea Thr Cys Thr Val Ser Gly Phm Sar Leu 35 - 40 45
Bar Ash Pro arg Het Gly Val Thr Trp Ils ‏وني‎ Gln Pro Fro Gly Lys 50 . 5% : &0
Ala Leu Glu TTp Lac Gly Asa Ile Fhe Ser Ser Asp Glu Lys Sor Phe " 7 175 80 ber Proc 8mr Leu ‏نذا‎ Sar Arg Leu Thr Thr Sar Gln Asp Thr Sear Arg 85 99 : 95 ‏ا‎ a9 ser Gln Val Val Leu Ser Leu Thr Zsn Val Asp Pro vel Asp Thr Ala 10¢ 165 118
SThr Tyr Tyr Cye Als Arg val Gly Lau Tyr hep Ile Aan Alm Tyr Tyr 115 120 125
Lea Tyr Tyr Leu Asp Tyr Trp Gly 6lm Gly Thr Leu Val Thr Val Sex 130 138 149 der Ala Ser Thr Lys Gly Pro Gar vel Phe Pro Lex Ala Pra Ser Gar 14% 155 153 150
Lys Ser Thr Ber Gly Gly Thr Ale Ale Leu Gly Cyw Lmsu Val Lys Asp 165. 170 175
Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr val ger Trp Asa Ser Gly Ala Leu Thr 180 185 190
Ber Gly ‏لد‎ Ein Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Lew ‏اخ‎ ‎153 200 205 gar Lad Ser Ear Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr 8 210 215 . 240
Thr Tyr Ils Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser ‏عمج‎ Thr Lys Vel Asp 225 230 235 240
Lys Lym Ala Glu Pro Lys 8er Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Fro Pra 245 250 ٠ . 255
Cys Pro Ale Pro Glu Leu Lem Gly wly Fro Ser Val Phe Leu Pha Pro 260 25 270 pro Lys Pra Lys Rep Thr Ten Hat 11. Ser Arg Thr Fro Glu Val Thr 275 280 ١ 285
Cys val Val Val hsp Val Ear Hie Glu Amp Pro Glu Val Lys Tha jan 290 28% - 300
Trp Tyr Val Rep Gly val Glu Val E13 hen Als Lys Thr Lys Pro Arg 305 X10 : 315 . 120 © glu Glu Glu Tyr Asn Sor Thr Tyr Arg Val val Sar Val Leu Thr 1 335 335 45
Leu Hiw Glo Glu Trp Lau ‏حسم‎ Gly Lys ©lu Tyr Lys Cys Lys val Ser 340 3&5 350
Ran Lys Ala Lmsu Pre ala Pro Tle Glu Lys Thr Ils Ser Lys Ala Lys 355 3680» 0 365 : gly Gln Bro Ary Glu Fro Gln Val Tyr ‘Thr Leo Pro 226 Set Arg Asp 70 175 310 ٠ glu Leu Thr Lys Amn ‏صلق‎ Val Ser Lac Thr Cys Leu Vel Lys Gly Phe 385 390 Iss 400
Tyr Pro Ser Asp Ilo Ala Val Glu Trp Glu Sear hen Gly Gla Pro Glu . 485 410 415
Asn ‏عد مسح‎ Lys The The Pro Pro val Leu Asp Ser Rap Gly Sar Phew 420 ’ 42% 430
Phe Lau Tyr Ser Lys Lan Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gla 6In Gly 440 445
Asn Val Dha Ger Cys Sar Val Met Bis Olu hla Lau Eis Asn Eis Tyr 450 455 460
Thy Gln Lyw Sar Lea Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 0 470 435
A
YU ‏سياق التمييز رقم‎ >” ٠١<
Yye¢ ‏<اا > الطول‎
PRT ‏النوع:‎ >7١< ‏الحى: إنسان‎ SH >7٠3<
YU ‏السياق:‎ >66<
Net App Met Arg Val Pro Ala Gln Lau Lau Gly Leu Lei: Lec Leu Trp 1 5 10 13
Leu Arg Gly Ala Arg Cye App Ila Gln Mat Thr Gln Sex Pro Ser Ber 29 25 ao
Leu Ber ala Ser Val Gly Amp Ar¢ Val Thr Ile Thr Cye Arg Ala Ser 41 45
Gln Ser Tiw Ala Ser Tyr Val Asa Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys
S50 55 50
Ala Pro Lys Val Lou Tle Phe Ala Ser hla Ren Lau val Sar Gly Val 3 70 5 ao
Pro Ser krg Fhe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Val Fhe Thr Leu Thr 85 } 97 "5 ‏علا‎ Ser isn Leu Gln Pro Glu Asp Pha ‏علط‎ Thr Tyr Phe Cys. Gln Gln 100 105 119
Sar Tyr Thr Asn Phe Ser Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Iie Lys 113 ’ 120 125
Arg The val Ala Alm Pro Ser Val Phe Ila Phe Fro Pro Ser Asp Glu 130 135 140 ln Leu Lys ser Gly Tbr Als Ser val Val Cys Leu Leu Asm Asn The 145 1548 155 160
Tyr Pro hry Glu Als Lyn val Gln Trp Lys val imp hen Ala Lau Gln 185 170 175
Sar Gly Asn sar Gln Glu Ser Val Thr Glo Gln Asp Ser Lye Rsp Ger 180 18% 130
Thr Tyr Ser Leu Sar Ser Thr Leu Thc Lau Sar Lys Ale Asp Tyr Glu 195% 208 205 :
Lys His Lys Val Tyr Ala Cya Glu Vel Thr Ris Gin Gly Leu Gar Ger 210 215 : 230
Fro Val Thr Lys Sar Phe Amn Arg Gly Glu | } ] 225 220
Vo
YV ‏سياق التمييز رقم‎ <YY > §Vo ‏الطول:‎ >؟١١<‎
PRT ‏النوع:‎ >؟١<‎ ‏الكائن الحي: إنسان‎ >” ١<
Yv ‏السياق:‎ >
Met Gly Trp Ber Lew Ile Leu Lau Phe Leu Val Ala val Ala Thr Arg 1 5 ١ 10 15 vol Leu Ser Glo Val Gl Leu Gin Glu Ser Gly Fro Ala Leu Val Lys 20 . 25 . 30 pro Thr Gln Thr Lew Thr Leu Thr Cys The Phe Sar Gly Phe Ser Leu 35 40 45
Ser Thr Arg Gly Met Ser Vol Asn Txp Ile ‏وح‎ Gln Pro Fro Gly Lys 50 55 Co £0
Ala Leu Glu Trp Lau Ala Arg Ils hsp Trp ASD Asp Asp Thr Phe Tyr 70 75 ’ HO ger Ala Ser Leu Lys Thr Arg Leg Ser Ila Gar Lys Asp Thr Ber Lys 85 90 95
Amy Glo Va) Val Len Arg Hee Thr Asn val Xep ‏وجط‎ Val Amp Thr Alm 0 ١ 105 119
Thr Tyr Pha Cys Ala Ary Ale ser Leu Tyr ‏رمم‎ Ser Asp Fer Phe ToT 115 120 125
٠١
Leu Phe Tyr His Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Val Val Thr Val Ser 130 135 140
Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Fhe Pro Leu Ala Pro Ser Ser 145 150 155 160
Lys Ear Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp 165 170 175
Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr 180 ‏ا‎ 2 185 0 190
Ser Gly val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr : 195 200 205
Ser Lau Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln 210 215 220
Thr Tyr Ile Cys Asn val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys val Asp 225 230 235 240
Lys Lys Ala Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro 245 250 255
Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Pha Leu Phe Pro 260 265 270 :
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr 275 ٍ 280 285 :
Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Fhe Asn 290 29% 300
Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg 308 | 310 ) 315 } 320
Glu Glu Gln Tyr Asan Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser val Leu Thr Val 325 130 135
Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys val Ser 340 345 : 350 . Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys 335 160 365
Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp 370° 315 380
Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe 385 390 395 400
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu 405 410 415
Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp ser Asp Gly Ser Phe 420 425 : 430
Phe Leu Tyr Sar Lys Leu Thr Val Asp Lys Sar Arg Trp Gln Gln Gly 43% 440 _ 445
Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Ris Ty: 450 : 455 : } 460
Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 ‏ا‎ 470 5
٠١
Leu Phe Tyr His Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Val Val Thr Val Ser 130 135 140
Ssr Ala Ser Thr Lys Gly Pro Sar Val Fhe Pro Leu Ala Pro Ser Ser 145 150 155 160
Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp 165 170 175
Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr 180 . 185 © 0 190
Ser Gly val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr 195 200 205
Ser Lau Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln 210 215 220
Thr Tyr Ile Cys Asn val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp 225 230 235 ‏ل“‎ 2406
Lys Lys Ala Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro 245 250 255%
Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Pha Leu Phe Pro 260 265 270
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr 215 280 285
Cys Val Val Val Asp val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn 290 25 300
Trp Tyr Val Asp Gly val Glu Val Eis Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg 305 | 310 315 320
Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg val Val Ser Val Leu Thr Val 328 330 335.
Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser 340 345 350 . Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys 358 360 365
Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp 370 3715 380
Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe 385 390 : 395 . 400
Tyr Pro Ser Asp Ils Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu 405 410 - 415
Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp ser Asp Gly Ser Phe 420 425 : 430
Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr val Asp Lys Sar Arg Trp Gln Gln Gly 435 440 5 ٍ
Asn Val Phe Sar Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Eis Tyr 450 455 ‏ا‎ 460
Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 46% ‏ا‎ 470 5

Claims (1)

  1. Vet ‏عناصر الحماية‎ ‏يرتبط بصفة خاصة‎ human monoclonal antibody ‏جسم مضاد _بشري أحادي النسيلة‎ - ١ ١ respiratory syncycial virus ‏للفيروس المخلوي التنفسي‎ fusion protein ‏الاندماج‎ Cag yu Y respiratory ‏للفيروس المخلوي التنفسي‎ Foprotein ‏للبروتين-ف‎ affinity ‏وله ألفة‎ (RSV) Y -molar ‏جزيثي‎ = yo xY ‏تقل عن أو تساوي‎ (RSV) syncycial virus ¢ ‏لعنصر الحماية‎ 18 5 human monoclonal antibody ‏الجسم المضاد البشري أحادي النسيلة‎ - ١ ‏في أنبوب‎ (RSV) respiratory syncycial virus ‏حيث يعادل الفيروس المخلوي التنفسي‎ ١ ¥ .in vitro ‏الاختبار‎ 1 ‏حيث يرتبط بصفة خاصة‎ human monoclonal antibody ‏جسم مضاد بشري أحادي النسيلة‎ - 3 ١ respiratory syncycial virus ‏للفيروس المخلوي التنفسي‎ fusion protein ‏ببروتين الإندماج‎ ١ RE-2 Y=) J ‏و‎ 85-1 ١-فإ‎ J ‏حيث يختار من المجموعة التي تتكون من‎ (RSV) r recombinant human monoclonal ‏والأجسام المضادة البشرية أحادية النسيلة المأشوبة‎ ¢ variable heavy and ‏حيث تحتوي على الحقول المتغيرة الثقيلة والخفيفة‎ antibodics ° RF-2 ١ ‏إف‎ Bl ‏أو‎ RF-1 ١-فإ ‏ل آر‎ light domains 1 ‏لعنصر الحماية‎ (8 5 human monoclonal antibody ‏؛- الجسم المضاد البشري أحادي النسيلة‎ \ RE-1 ١-فإ ‏المذكور هو آر‎ antibody ‏؟ حيث يكون الجسم المضاد‎ Y ‏وفقاً لعنصر الحماية‎ human monoclonal antibody ‏الجسم المضاد البشري أحادي النسيلة‎ —0 ١ RE-2 ‏المذكور هو آر إف-؟‎ antibody ‏يكون الجسم المضاد‎ Cun ‏؟*‎ Y ‏لعنصر الحماية حيث يكون الجسم‎ G5 human antibody ‏الجسم المضاد البشري‎ -١ ١
    ‎١١ ©‏ 7 المضاد ‎antibody‏ المذكور عبارة عن جسم مضاد مأشوب ‎recombinant antibody‏ حيث 1 يحتوي على منطقة جاما ‎١‏ الثابتة البشرية ‎human gamma 1 constant region‏ منطقة : جاما 4 الثابتة البشرية ‎<human gamma 4 constant region‏ أو منطقة جاما ؛ ‎PE‏ الثابتة البشرية ‎human gamma 4 PE constant region‏ ‎-١/ ١‏ خلايا سوية النواة ‎Cus eukaryotic cells‏ خمجت تحويلياً ‎transfected‏ بسياقات ‎DNA‏ ‎DNA sequences Y‏ التي تحمل شفرة ‎encode‏ الحقول المتغيرة الثقيلة والخفيفة ‎heavy and‏ ‎light variable domains v‏ ل آر إف ‎RF-1 ١‏ أو آر إف-؟ ‎RF-2‏ ‎cells LIAN —A \‏ وفقاً لعنصر الحماية ‎V‏ حيث تكون الخلايا سوية التواة ‎eukaryotic cells‏ ‎Y‏ عبارة عن خلايا مبيض همستر صيني ‎(CHO cells) Chinese Hamster Ovary cells‏ . ‎١‏ 4- الخلايا سوية النواة ‎cukaryotic cells‏ 4 18 لعنصر الحماية ‎١“‏ حيث تختار سياقات ‎DNA‏ ‎Y‏ المذكورة من سياقات ‎DNA sequences DNA‏ المبينة في أي من الأشكال ”أ (سياق التميز 1 رقم ‎(VY‏ لاب (سياق التمييز رقم ‎)١‏ مأ (سياق التمييز رقم 4 ١)؛ ‎QA‏ (سياق التميز 1 رقم ‎(Ve‏ 18 (سياق التمييز رقم ‎(V1‏ 1ب (سياق التمييز رقم ‎(OY‏ ١٠أ‏ (سياق ‎s‏ التمييز رقم 8١)؛‏ أو ٠ب‏ (سياق التمييز رقم ‎.)١9‏ ‎—V \‏ خط خلايا ‎B cell line B‏ متخلدة ‎immortalized‏ بفيروس ‎Epstein-Barr virus Jb (adsl‏ ‎Cus (EBV) y‏ تفرز أجسام مضادة بشرية أحادية النسيلة ‎human monoclonal antibodies‏ ‎v‏ لها ألفة ‎affinity‏ _لبروتين الاندماج ‎fusion protein‏ للفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV) respiratory syncycial virus ¢‏ تقل عن أو تساوي ‎xy‏ رحا ‎-molar SE‏ ‎-١١ ١‏ خط الخلايا ‎cell line‏ وفقاً لعنصر الحماية ‎٠١‏ حيث يعادل الجسم المضاد ‎antibody‏ ‏7 المذكور الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV) respiratory syncycial virus‏ في أنبوب
    Ved
    .in vitro ‏الاختبار‎ v ‎—VY ١‏ خط الخلايا ‎Tg cell line‏ لعنصر الحماية ‎٠‏ حيث يختار خط الخلايا ‎cell line‏ المذكور ‎Y‏ من المجموعة التي تتكون من ‎Bl‏ إف- \ ‎RF-1‏ و ‎ol‏ إف- ‎RF-2 Y‏ ‎DNA Glow -١٠ ١‏ الذي يحمل شفرة ‎encode‏ الحقل المتغير الثقيل و/أو الحقل المتغير ‎Y‏ الخفيف ‎variable heavy and/or variable light domain‏ ل ‎RF-1 ١-فإ J}‏ أو ‎J‏ إف- ‎RF-2 Y Y‏ ‎-٠4 ١‏ ناقل تعبير ‎expression vector‏ يعبر عن سياق ‎DNA sequence DNA‏ وفقاآً لعنصر ‎Y‏ الحماية ‎AY‏ ‎=o ١‏ سياق ‎DNA sequence DNA‏ وفقاً لعنصر الحماية ‎VY‏ حيث يختار من المجموعة التي ‎Y‏ تتكون من سياقات ‎DNA sequences DNA‏ المبينة في أي من الأشكال "أ (سياق التميز ‎r‏ رقم ١١)؛‏ لاب (سياق التمييز رقم ‎OF‏ مأ (سياق التمييز رقم ‎(VE‏ هب (سياق ¢ التمييز رقم ‎(Ve‏ 18 (سياق التمييز رقم ‎(OT‏ (سياق التميز رقم ‎OV‏ ١٠أ‏ (سياق التمييز رقم ‎SOA‏ ٠ب‏ (سياق التمييز رقم 08( ‎VT ١‏ طريقة لمنع ‎preventing‏ علاج ‎treating‏ الإصابة بعدوى الفيروس المخلوي ‎Y‏ التتفسي ‎(RSV infection) respiratory syncycial virus infection‏ أشخاص ‎Lae‏ ‏¥ للإصابة ب ‎susceptible‏ أو مصابين بعدوى الفيروس المخلوي التنفسي ‎respiratory‏ ‎Cus (RSV infected) syncycial virus infected ¢‏ تتضمن إعطاء مقدار فعال وقائياً أو ‎prophylactically or therapeutically effective amount Ladle °‏ من جسم مضاد بشري 1 أحادي النسيلة ‎human monoclonal antibody‏ واحد أو أكثر حيث له ألفة ‎affinity‏ ‏7 للبروتين -ف ‎Foprotein‏ للفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV) respiratory syncycial virus‏
    ل
    ‎A‏ تقل أو تساوي ‎oxy‏ رح جزيثي ‎molar‏ وحيث يعادل كذلك الفيروس المخلوي التنتفسي ‎(RSV) respiratory syncycial virus 4‏ في أنبوب الاختبار ‎Jn vitro‏
    ‎-١ ١‏ الطريقة ‎(aa‏ لعنصر الحماية ‎Al‏ حيث تختار الأجسام المضادة ‎antibodies‏ المذكورة من ‎Y‏ المجموعة التي تتكون من آر ‎RF-1 Vd)‏ آر إف-؟ 8272 والأجسام المضادة و البشرية أحادية النسيلة المأشوبة ‎recombinant human monoclonal antibodies‏ حيث ¢ تحتوي على الحقول المتغيرة الثقيلة والخفيفة ‎variable heavy and light domains‏ ل أر إف-١ ‎RF-1‏ أو آر إف-؟ ‎RF-2‏
    ‎SYA‏ الطريقة ‎By‏ لعنصر الحماية ‎VT‏ حيث تعطى الأجسام المضادة ‎antibodies‏ المذكورة ‎Y‏ عن طريق الحقن ‎injection‏ أو عن طريق حلالة حوائية ‎.aerosol‏
    ‎١‏ 4- الطريقة ‎{ad‏ لعنصر الحماية ‎١‏ حيث تعطى } لأجسام المضادة ‎antibodies‏ المذكورة في ‎Y‏ توليفة مع عامل مساعد ‎adjuvant‏
    ‎-٠ ١‏ الطريقة ‎Gag‏ لعنصر الحماية 9 ‎١‏ حيث يكون العامل المساعد ‎adjuvant‏ المذكور عبارة عن عامل مساعد فرويندي كامل ‎«(CFA) Complete Freund's Adjuvant‏ شب ‎alum‏ أو 1 توليفة ‎combination‏ منهما.
    ‎treating ze ‏أو‎ preventing ‏ملائم لمنع‎ pharmaceutical composition ‏تركيب صيدلي‎ -7١ ١ respiratory syncycial virus infection ‏الإصابة بعدوى الفيروس المخلوي التنفسي‎ Y ‏أو المصابين بعدوى‎ susceptible ‏في الأشخاص عرضة للإصابة ب‎ (RSV infection) v ‏حيث‎ (RSV infected) respiratory syncycial virus infected ‏الفيروس المخلوي التنفسي‎ ¢ prophylactically or therapeutically effective Ladle ‏يشتمل على مقدار فعال وقائياً أو‎ | > human monoclonal antibodies ‏من الأجسام المضادة البشرية أحادية النسيلة‎ amount 1
    ٠١
    7 التي تعادل الفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV) respiratory syncycial virus‏ في أنبوب ‎A‏ الاختبار ‎in vitro‏ والتي لها ألفة للبروتين-ف ‎Foprotein‏ للفيروس المخلوي التتفسي ‎(RSV) respiratory syncycial virus 9‏ تقل عن أو تساوي ‎«molar ha ٠١7‏ ‎٠١‏ ويشتمل على حامل مقبول صيدلياً ‎.pharmaceutically acceptable carrier‏
    ‎١‏ ؟- التركيب الصيدلي ‎pharmaceutical composition‏ وفقاً لعنصر الحماية ‎7١‏ حيث تختار ‎Y‏ الأجسام المضادة البشرية أحادية النسيلة ‎human monoclonal antibodies‏ المذكورة من ‎r‏ المجموعة التي تتكون من آر إف-١ ‎RE-1‏ آر إف-؟ 812 والأجسام المضادة ٌ البشرية أحادية النسيلة المأشوبة ‎recombinant human monoclonal antibodies‏ حيث ° تحتوي على الحقول المتغيرة ‎ala Al‏ والخفيفة ‎variable heavy and light domains‏ ل 1 آر إف- ‎RF-1 ١‏ أو آر إف-؟ ‎RF-2‏
    ‎(RSV) respiratory syncycial virus ‏طريقة للكشف عن وجود الفيروس المخلوي التنفسي‎ YY ١ analyte ‏المحلل‎ Jill incubating ‏تتضمن حضن‎ Cus analyte ‏في سائل محلل‎ ‏والذي له‎ human monoclonal antibody ‏المنكور مع جسم مضاد بشري أحادي النسيلة‎ respiratory syncycial ‏للفيروس المخلوي التنفسي‎ F-protein ‏للبروتين -حف‎ affinity ‏ألفة‎ ¢ conditions ‏في ظروف‎ molar ‏تقل عن أو تساوي لس رحا جزيني‎ (RSV) virus ° antibody ‏الجسم المضاد‎ ye immune complexes ‏تكفل تكوين متراكبات مناعية‎ 1 respiratory syncycial virus (od) ‏للفيروس المخلوي‎ Foprotein ‏والبروتين-ف‎ ‎5 ‏(857)؛‎ A
    ‎Ris 9‏ عن وجود هذه المتراكبات المناعية ‎immune complexes‏ من الجسم المضاد ‎antibody Ve‏ والبروتين-ف ‎Foprotein‏ للفيروس المخلوي التنفسي ‎respiratory syncycial‏ ‎(RSV) virus ١‏ المذكورة لتحديد وجود الفيروس المخلوي التنفسي ‎respiratory syncycial‏ ‎(RSV) virus VY‏ في السائل المحلل ‎.analyte‏
    و ‎١‏ 4؛- الطريقة وفقآ لعنصر الحماية ‎YY‏ حيث يكون الجسم المضاد ‎antibody‏ المذكور عبارة ‎Y‏ عن آر إف-١ ‎RF-1‏ أو آر إف-؟ ‎RE2‏ ‎—Yo ١‏ الطريقة وفقاً لعنصر الحماية ‎VE‏ حيث ‎dash py‏ الجسم المضاد ‎antibody‏ المذكور بجزيء ‎Y‏ مبلغ ‎reporter molecule‏ إرتباطاً مباشراً ‎directly‏ أو غير مباشر ‎.indirectly‏ ‎١‏ 7؟- الطريقة ‎lg‏ لعنصر الحماية ‎Yo‏ حيث يكون الجزيء المبلغ ‎reporter molecule‏ عبارة ‎Y‏ عن إنزيم يمكن الكشف عنه ‎detectable enzyme‏ أو نويدة مشعة يمكن الكشف عنها
    ‎.detectable radionuclide v‏ ‎fluid ‏على مائع‎ analyte ‏حيث يشتمل السائل المحلل‎ YY ‏الطريقة وفقآً لعنصر الحماية‎ -7١ ١ respiratory tissue ‏مأخوذ من نسيج تنفسي‎ Y ‎respiratory syncycial ‏لمعايرة وجود الفيروس المخلوي التنفسي‎ test kit ‏طقم اختبار‎ —YA ١ ‏حيث يشتمل على:‎ analyte ‏في سائل محلل‎ (RSV) virus Y ‏1 0 جسم مضاد بشري أحادي النسيلة ‎human monoclonal antibody‏ له ألفة ‎affinity‏ ‏¢ للبروتين-ف ‎Foprotein‏ للفيروس المخلوي التنفسي ‎(RSV) respiratory syncycial virus‏ تقل عن أو تساوي ‎oxy‏ رحا جزيثي ‎fmolar‏ و ‏1 0 جزيء مبلغ ‎Cua reporter molecule‏ يرتبط بالجسم المضاد البشري أحادي النسيلة ‎human monoclonal antibody 7‏ المذكور إرتباطاً مباشرآ ‎directly‏ أو غير مباشر
    ‎.indirectly A‏ ‎١‏ 4- طقم اختبار ‎Gg test kit‏ لعنصر الحماية ‎Cua TA‏ يكون الجسم المضاد البشري أحادي ‎Y‏ النسيلة ‎human monoclonal antibody‏ المذكور عبارة عن آر إف-١‏ 8-1 أو آر ‎RF-2 Y= v‏
SA96170384A 1995-06-07 1996-10-22 وطرق تحضيرها واستخداماتها العلاجية (rsv) الاجسام المضادة المعادلة البشرية احادية النسيلة ذات الالفة العالية المختصة ببروتين - ف للفيروس المخلوي التنفسي SA96170384B1 (ar)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/488,376 US5811524A (en) 1995-06-07 1995-06-07 Neutralizing high affinity human monoclonal antibodies specific to RSV F-protein and methods for their manufacture and therapeutic use thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SA96170384B1 true SA96170384B1 (ar) 2006-07-31

Family

ID=23939500

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SA96170384A SA96170384B1 (ar) 1995-06-07 1996-10-22 وطرق تحضيرها واستخداماتها العلاجية (rsv) الاجسام المضادة المعادلة البشرية احادية النسيلة ذات الالفة العالية المختصة ببروتين - ف للفيروس المخلوي التنفسي

Country Status (23)

Country Link
US (11) US5811524A (ar)
EP (2) EP2095827A1 (ar)
JP (1) JP3771267B2 (ar)
KR (1) KR100490687B1 (ar)
CN (2) CN1680447A (ar)
AR (1) AR003423A1 (ar)
AT (1) ATE431159T1 (ar)
AU (1) AU717061B2 (ar)
BR (1) BR9608884A (ar)
CA (1) CA2223033A1 (ar)
CO (1) CO4480110A1 (ar)
DE (1) DE69637930D1 (ar)
HK (1) HK1015282A1 (ar)
IL (1) IL122404A0 (ar)
MX (2) MXPA01011457A (ar)
MY (1) MY137299A (ar)
NO (1) NO324047B1 (ar)
NZ (2) NZ310847A (ar)
RS (1) RS50157B (ar)
SA (1) SA96170384B1 (ar)
UY (1) UY24255A1 (ar)
WO (1) WO1996040252A1 (ar)
ZA (1) ZA964434B (ar)

Families Citing this family (196)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5811524A (en) * 1995-06-07 1998-09-22 Idec Pharmaceuticals Corporation Neutralizing high affinity human monoclonal antibodies specific to RSV F-protein and methods for their manufacture and therapeutic use thereof
FR2758331B1 (fr) * 1997-01-14 1999-03-05 Univ Bourgogne Nouveaux moyens pour le diagnostic, la prevention et le traitement vis-a-vis de contaminations ou d'infections par des virus a tropisme muqueux
US7033589B1 (en) * 1997-02-20 2006-04-25 Biogen Idec Ma Inc. γ-1 anti-human CD23 monoclonal antibodies and use thereof as therapeutics
US6893636B2 (en) * 1997-02-20 2005-05-17 Biogen Idec Ma Inc. Gamma-1 and gamma-3 anti-human CD23 monoclonal antibodies and use thereof as therapeutics
WO1999012553A1 (en) * 1997-09-08 1999-03-18 Idec Pharmaceuticals Corporation Methods for producing human antibodies in scid mice using dendritic cells
ATE458007T1 (de) 1998-04-20 2010-03-15 Glycart Biotechnology Ag Glykosylierungs-engineering von antikörpern zur verbesserung der antikörperabhängigen zellvermittelten zytotoxizität
US6900299B1 (en) * 1999-03-11 2005-05-31 University Of South Florida Interrupting the interaction of intercellular adhesion molecule-1 and respiratory syncytial virus for prevention and treatment of infection
CO5280147A1 (es) * 1999-05-18 2003-05-30 Smithkline Beecham Corp Anticuerpo humano monoclonal
GB9918788D0 (en) * 1999-08-10 1999-10-13 Leuven K U Res & Dev Antithrombotic effect of platelet glycoprotein 1b blocking monoclonal Fab fragments
US6680209B1 (en) 1999-12-06 2004-01-20 Biosite, Incorporated Human antibodies as diagnostic reagents
EP1265928B1 (en) * 2000-01-27 2010-07-21 Medimmune, LLC Ultra high affinity rsv neutralizing antibodies
US7229619B1 (en) 2000-11-28 2007-06-12 Medimmune, Inc. Methods of administering/dosing anti-RSV antibodies for prophylaxis and treatment
WO2001056602A2 (en) 2000-02-02 2001-08-09 The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Cd40 ligand adjuvant for respiratory syncytial virus
EP2341074A1 (en) * 2000-03-01 2011-07-06 MedImmune, LLC Antibodies binding to the f protein of a respiratory syncytial virus (rsv)
EP1278545A1 (en) * 2000-05-03 2003-01-29 Medimmune, Inc. Combination therapy of respiratory diseases using antibodies
US6855493B2 (en) * 2000-11-28 2005-02-15 Medimmune, Inc. Methods of administering/dosing anti-RSV antibodies for prophylaxis and treatment
EP2338512A1 (en) * 2000-11-28 2011-06-29 MedImmune, LLC Methods of administering/dosing anti-RSV antibodies for prophylaxis and treatment
US6818216B2 (en) 2000-11-28 2004-11-16 Medimmune, Inc. Anti-RSV antibodies
US7179900B2 (en) * 2000-11-28 2007-02-20 Medimmune, Inc. Methods of administering/dosing anti-RSV antibodies for prophylaxis and treatment
ES2649037T3 (es) 2000-12-12 2018-01-09 Medimmune, Llc Moléculas con semividas prolongadas, composiciones y usos de las mismas
IL157145A0 (en) 2001-01-31 2004-02-08 Idec Pharma Corp Use of dc23 antagonists for the treatment of neoplastic disorders
CA2439678A1 (en) * 2001-03-23 2002-10-03 Genentech, Inc. Uses of opg ligand to modulate immune responses
WO2002079255A1 (en) * 2001-04-02 2002-10-10 Idec Pharmaceuticals Corporation RECOMBINANT ANTIBODIES COEXPRESSED WITH GnTIII
WO2002102303A2 (en) 2001-05-01 2002-12-27 Medimmune, Inc. Crystals and structure of synagis fab
AU2002315534B2 (en) * 2001-07-10 2008-05-22 Biogen Idec Inc. Inhibition of apoptosis process and improvement of cell performance
WO2003011878A2 (en) 2001-08-03 2003-02-13 Glycart Biotechnology Ag Antibody glycosylation variants having increased antibody-dependent cellular cytotoxicity
US7306919B1 (en) * 2001-10-31 2007-12-11 Thornthwaite Jerry T Antigen-antibody cancer recognition system
CA2466025A1 (en) * 2001-11-02 2003-08-07 Centocor, Inc. Rsv proteins, antibodies, compositions, methods and uses
JP2005538689A (ja) * 2002-02-11 2005-12-22 アレクシオン ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド ワクシニアまたは天然痘に対する治療のためのヒト抗体
AU2003215145A1 (en) * 2002-02-11 2003-09-04 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Production of human antibodies in immunodeficient non-human,mammalian hosts
JPWO2003083114A1 (ja) * 2002-03-28 2005-08-04 アステラス製薬株式会社 アンジオポエチン関連増殖因子
US7132100B2 (en) 2002-06-14 2006-11-07 Medimmune, Inc. Stabilized liquid anti-RSV antibody formulations
US7425618B2 (en) * 2002-06-14 2008-09-16 Medimmune, Inc. Stabilized anti-respiratory syncytial virus (RSV) antibody formulations
JP2006515154A (ja) * 2002-06-21 2006-05-25 セントカー・インコーポレーテツド モノクローナル抗体の作成方法
TW200501985A (en) * 2002-07-25 2005-01-16 Medimmune Inc Methods of treating and preventing RSV, hMPV, and PIV using anti-RSV, anti-hMPV, and anti-PIV antibodies
KR100604038B1 (ko) * 2002-08-02 2006-07-24 주식회사유한양행 항체 중쇄 발현벡터
JP4033390B2 (ja) * 2002-10-30 2008-01-16 独立行政法人科学技術振興機構 不死化ナチュラルキラー細胞株
JP2006520194A (ja) * 2003-01-27 2006-09-07 バイオジェン・アイデック・エムエイ・インコーポレイテッド Ｉｇｓｆ９およびｌｉｖ−１を使用して癌を処置するための組成物および方法
US20040208869A1 (en) * 2003-01-30 2004-10-21 Medimmune, Inc. Uses of anti-integrin alphanubeta3 antibody formulations
KR101106441B1 (ko) * 2003-03-19 2012-01-18 바이오겐 아이덱 엠에이 인코포레이티드 노고 수용체 결합 단백질
EP1614693A4 (en) * 2003-03-31 2006-07-19 Kirin Brewery PURIFICATION OF A HUMAN MONOCLONAL ANTIBODY AND A HUMAN POLYCLONAL ANTIBODY
TWI353991B (en) 2003-05-06 2011-12-11 Syntonix Pharmaceuticals Inc Immunoglobulin chimeric monomer-dimer hybrids
US7070786B2 (en) * 2003-06-06 2006-07-04 Centocor, Inc. RSV proteins, antibodies, compositions, methods and uses
KR101531400B1 (ko) 2003-06-27 2015-06-26 암젠 프레몬트 인코포레이티드 상피 성장 인자 수용체의 결실 돌연변이체 지향 항체 및 그용도
US20050239700A1 (en) * 2003-10-14 2005-10-27 Biogen Idec Inc. Treatment of cancer using antibodies to LRRC15
WO2005047327A2 (en) 2003-11-12 2005-05-26 Biogen Idec Ma Inc. NEONATAL Fc RECEPTOR (FcRn)-BINDING POLYPEPTIDE VARIANTS, DIMERIC Fc BINDING PROTEINS AND METHODS RELATED THERETO
US20060246079A1 (en) * 2003-11-14 2006-11-02 Morrow Phillip R Neutralizing human antibodies to anthrax toxin
WO2005081749A2 (en) * 2004-01-23 2005-09-09 Avanir Pharmaceuticals, Inc. Neutralizing human antibodies to anthraxtoxin
AU2003304600A1 (en) * 2003-11-14 2005-06-29 Avanir Pharmaceuticals Neutralizing human antibodies to anthrax toxin generated by recall technology
US7750123B2 (en) * 2003-11-25 2010-07-06 Dana Farber Cancer Institute, Inc. Antibodies against SARS-CoV and methods of use thereof
AU2005227313A1 (en) 2004-03-19 2005-10-06 Amgen Inc. Reducing the risk of human and anti-human antibodies through V gene manipulation
PL1776136T3 (pl) 2004-06-24 2013-03-29 Biogen Ma Inc Leczenie stanów związanych z demielinizacją
WO2006017673A2 (en) 2004-08-03 2006-02-16 Biogen Idec Ma Inc. Taj in neuronal function
US20060063187A1 (en) * 2004-09-15 2006-03-23 Hotamisligil Gokhan S Modulation of XBP-1 activity for treatment of metabolic disorders
US20060083741A1 (en) * 2004-10-08 2006-04-20 Hoffman Rebecca S Treatment of respiratory syncytial virus (RSV) infection
EP1812068A4 (en) * 2004-10-29 2010-06-09 Medimmune Inc METHODS FOR PREVENTING AND TREATING RSV INFECTIONS AND ASSOCIATED DISEASES
CN101137673B (zh) 2005-01-05 2013-12-04 比奥根艾迪克Ma公司 Cripto结合分子
DK1866339T3 (da) 2005-03-25 2013-09-02 Gitr Inc GTR-bindende molekyler og anvendelser heraf
WO2006138739A2 (en) * 2005-06-17 2006-12-28 Tolerx, Inc. Ilt3 binding molecules and uses therefor
JP2009502123A (ja) 2005-07-08 2009-01-29 バイオジェン・アイデック・エムエイ・インコーポレイテッド Ｓｐ３５抗体およびその使用
WO2008048230A2 (en) * 2005-08-15 2008-04-24 Emory University Methods of identifying biological targets and instrumentation to identify biological targets
MX2008005764A (es) 2005-11-04 2008-11-18 Biogen Idec Inc Metodos para promover el crecimiento de neuritas y la supervivencia en neuronas dopaminergicas.
JP2009516513A (ja) * 2005-11-21 2009-04-23 ラボラトワール セローノ ソシエテ アノニム ハイブリッド抗原結合分子の組成物及び製造方法並びにその使用
US20090175872A1 (en) 2005-12-02 2009-07-09 Biogen Idec Ma Inc. Treatment of Conditions Involving Demyelination
AU2006323315B2 (en) * 2005-12-09 2014-02-20 Academisch Medisch Centrum Bij De Universiteit Van Amsterdam Means and methods for influencing the stability of antibody producing cells
PT1974020E (pt) 2005-12-16 2011-08-26 Ribovax Biotechnologies Sa Métodos para a obtenção de células secretoras de anticorpos imortalizadas
CA2640423C (en) 2006-01-27 2016-03-15 Biogen Idec Ma Inc. Nogo receptor antagonists
WO2007101441A1 (en) * 2006-03-06 2007-09-13 Symphogen A/S Recombinant polyclonal antibody for treatment of respiratory syncytial virus infections
TW200813086A (en) 2006-05-11 2008-03-16 Hoffmann La Roche Immunereconstituted mouse
JP5597793B2 (ja) * 2006-06-19 2014-10-01 メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーション Ｉｌｔ３結合分子およびその使用
US20080171344A1 (en) * 2006-12-22 2008-07-17 Kapsner Kenneth P Methods, Kits and Materials for Diagnosing Disease States by Measuring Isoforms or Proforms of Myeloperoxidase
KR101496479B1 (ko) 2007-01-09 2015-02-26 바이오겐 아이덱 엠에이 인코포레이티드 Ｓｐ３５ 항체 및 그의 용도
US8128926B2 (en) 2007-01-09 2012-03-06 Biogen Idec Ma Inc. Sp35 antibodies and uses thereof
KR20090127341A (ko) * 2007-03-06 2009-12-10 심포젠 에이/에스 호흡기세포 융합 바이러스 감염 치료용 재조합 항체
US7807168B2 (en) * 2007-04-10 2010-10-05 Vaccinex, Inc. Selection of human TNFα specific antibodies
EP1997830A1 (en) * 2007-06-01 2008-12-03 AIMM Therapeutics B.V. RSV specific binding molecules and means for producing them
CA2693677C (en) * 2007-07-12 2018-02-13 Tolerx, Inc. Combination therapies employing gitr binding molecules
BRPI0817257A2 (pt) * 2007-09-24 2015-06-16 Univ Vanderbilt Anticorpos moniclonais para vírus sincital respiratório e usos dos mesmos
EP2217625B1 (en) 2007-11-08 2021-08-04 Precision Biologics, Inc. Recombinant monoclonal antibodies and corresponding antigens for colon and pancreatic cancers
KR20100099221A (ko) * 2007-11-27 2010-09-10 더 유니버시티 오브 브리티쉬 콜롬비아 관절염의 예방과 치료를 위한 14-3-3 길항제
KR100938998B1 (ko) * 2008-01-08 2010-01-28 (주) 에이프로젠 호흡기 신시티움 바이러스에 대한 항체
US20090233295A1 (en) * 2008-01-29 2009-09-17 Elias Georges Trim59 directed diagnostics for neoplastic disease
EP3424526A1 (en) 2008-06-05 2019-01-09 Ablynx NV Immunoglobulin single variable domains binding to the g envelope protein of rabies virus and uses thereof for the treatment and prevention of rabies
US8058406B2 (en) 2008-07-09 2011-11-15 Biogen Idec Ma Inc. Composition comprising antibodies to LINGO or fragments thereof
EP2145621A1 (en) 2008-07-16 2010-01-20 Stephan Lück Prevention of dehydration and reduction of gluconeogenetic losses of amino acids by means of propane-1,2,3-triol
JP5575377B2 (ja) * 2008-07-18 2014-08-20 シスメックス株式会社 抗ｒｓウイルスモノクローナル抗体を用いたｒｓウイルス検出用キット及びイムノクロマトグラフィー用試験具、並びに新規な抗ｒｓウイルスモノクローナル抗体
US8775090B2 (en) 2008-12-12 2014-07-08 Medimmune, Llc Crystals and structure of a human IgG Fc variant with enhanced FcRn binding
AU2009334498A1 (en) 2008-12-31 2011-07-21 Biogen Idec Ma Inc. Anti-lymphotoxin antibodies
US8524869B2 (en) 2009-03-24 2013-09-03 Teva Biopharmaceuticals Usa, Inc. Humanized antibodies against LIGHT and uses thereof
PT2438087T (pt) 2009-06-05 2017-08-04 Ablynx Nv Construções de nanobody trivalentes de vírus sincicial respiratório humano (hrsv) para a prevenção e/ou tratamento de infeções do trato respiratório
HRP20220756T1 (hr) 2009-07-15 2022-09-02 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Proteinski pripravci rsv f i postupci za izradu istih
MX2012001882A (es) 2009-08-13 2012-04-11 Crucell Holland Bv Anticuerpos contra el virus sincitial respiratorio (rsv) humano y metodos de uso.
AU2010296058A1 (en) * 2009-09-16 2012-05-03 Duke University HIV-1 antibodies
US8568726B2 (en) 2009-10-06 2013-10-29 Medimmune Limited RSV specific binding molecule
EP2507262A1 (en) 2009-11-30 2012-10-10 Ablynx N.V. Improved amino acid sequences directed against human respiratory syncytial virus (hrsv) and polypeptides comprising the same for the prevention and/or treatment of respiratory tract infections
CA2793959C (en) 2010-03-25 2019-06-04 Oregon Health & Science University Cmv glycoproteins and recombinant vectors
SI2400298T1 (sl) * 2010-05-28 2013-11-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Postopek kultivacije posamezne B-celice in izdelava specifičnih protiteles
AU2011274472B2 (en) 2010-07-09 2017-03-30 Janssen Vaccines & Prevention B.V. Anti-human respiratory syncytial virus (RSV) antibodies and methods of use
AU2011274423B2 (en) 2010-07-09 2016-02-11 Bioverativ Therapeutics Inc. Chimeric clotting factors
EP2422618A1 (en) 2010-08-27 2012-02-29 Technologie Integrale Ltd. Animal model for the evaluation of the efficacy of an HIV vaccine
US9956236B2 (en) 2011-02-07 2018-05-01 Cornell University Methods for increasing immune responses using agents that directly bind to and activate IRE-1
EP2699688A1 (en) 2011-04-20 2014-02-26 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Regimens and compositions for aav-mediated passive immunization of airborne pathogens
ES2667425T3 (es) 2011-06-10 2018-05-10 Oregon Health & Science University Glucoproteínas y vectores recombinantes de CMV
EP3527218A1 (en) 2011-06-10 2019-08-21 Bioverativ Therapeutics Inc. Pro-coagulant compounds and methods of use thereof
WO2013012733A1 (en) 2011-07-15 2013-01-24 Biogen Idec Ma Inc. Heterodimeric fc regions, binding molecules comprising same, and methods relating thereto
EP2568289A3 (en) 2011-09-12 2013-04-03 International AIDS Vaccine Initiative Immunoselection of recombinant vesicular stomatitis virus expressing hiv-1 proteins by broadly neutralizing antibodies
EP2756092A4 (en) * 2011-09-16 2015-10-28 Giovanni Amabile METHOD FOR THE PRODUCTION OF CELLS, TISSUE AND ANTIBODIES
CN102850454B (zh) * 2011-09-27 2014-06-25 上海博沃生物科技有限公司 抗呼吸道合胞病毒的人单克隆抗体
EP2586461A1 (en) 2011-10-27 2013-05-01 Christopher L. Parks Viral particles derived from an enveloped virus
MX2014005957A (es) 2011-11-16 2015-02-04 Amgen Inc Metodos para tratar trastornos relacionados con mutante viii de eliminacion de factor de crecimiento epidermico.
JP6247226B2 (ja) 2012-01-10 2017-12-13 バイオジェン・エムエイ・インコーポレイテッドＢｉｏｇｅｎ ＭＡ Ｉｎｃ． 血液脳関門を越える治療分子の輸送の向上
MX2014013950A (es) 2012-05-14 2015-02-17 Biogen Idec Inc Antagonistas de proteina que interactua con el receptor nogo 2 que contiene repeticion rica en leucina y dominio de inmunoglobulina (lingo-2) para el tratamiento de afecciones que involucran neuronas motoras.
ES2631608T3 (es) 2012-06-27 2017-09-01 International Aids Vaccine Initiative Variante de la glicoproteína Env del VIH-1
JPWO2014003137A1 (ja) * 2012-06-27 2016-06-02 旭化成メディカル株式会社 高アフィニティー抗体、及びその製造方法
JP2015536145A (ja) * 2012-11-13 2015-12-21 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗原特異的形質芽細胞の濃縮
WO2014114801A1 (en) 2013-01-25 2014-07-31 Amgen Inc. Antibodies targeting cdh19 for melanoma
JO3519B1 (ar) 2013-01-25 2020-07-05 Amgen Inc تركيبات أجسام مضادة لأجل cdh19 و cd3
CN104955324A (zh) 2013-01-29 2015-09-30 巴斯夫植物科学有限公司 表达hcp7的抗真菌植物
CA2891424A1 (en) 2013-01-29 2014-08-07 Basf Plant Science Company Gmbh Fungal resistant plants expressing ein2
CA2897485A1 (en) 2013-01-29 2014-08-07 Basf Plant Science Company Gmbh Fungal resistant plants expressing hcp6
TWI659968B (zh) 2013-03-14 2019-05-21 再生元醫藥公司 針對呼吸道融合病毒ｆ蛋白質的人類抗體及其使用方法
EP2975052B1 (en) * 2013-03-15 2020-09-23 Xiamen University Epitope of rsv fusion protein and antibody identifying same
TWI745671B (zh) 2013-03-15 2021-11-11 美商百歐維拉提夫治療公司 因子ｉｘ多肽調配物
WO2014140368A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Amgen Research (Munich) Gmbh Antibody constructs for influenza m2 and cd3
LT2970449T (lt) 2013-03-15 2019-11-25 Amgen Res Munich Gmbh Viengrandės surišančios molekulės, apimančios n galo abp
CN105324669B (zh) * 2013-06-21 2017-09-15 爱芙乐赛制药株式会社 用于检测rsv的免疫层析装置
US20150065381A1 (en) 2013-09-05 2015-03-05 International Aids Vaccine Initiative Methods of identifying novel hiv-1 immunogens
US9957506B2 (en) 2013-09-25 2018-05-01 Cornell University Compounds for inducing anti-tumor immunity and methods thereof
EP2873423B1 (en) 2013-10-07 2017-05-31 International Aids Vaccine Initiative Soluble hiv-1 envelope glycoprotein trimers
EP3777980B1 (en) 2013-10-29 2023-12-06 President and Fellows of Harvard College Nuclear factor erythroid 2-like 2 (nrf2) for use in treatment of age-related macular degeneration
EP3065769A4 (en) 2013-11-08 2017-05-31 Biogen MA Inc. Procoagulant fusion compound
SG11201609207SA (en) 2014-05-13 2016-12-29 Univ Pennsylvania Compositions comprising aav expressing dual antibody constructs and uses thereof
AR101669A1 (es) 2014-07-31 2017-01-04 Amgen Res (Munich) Gmbh Constructos de anticuerpos para cdh19 y cd3
US20170275373A1 (en) 2014-07-31 2017-09-28 Amgen Research (Munich) Gmbh Bispecific single chain antibody construct with enhanced tissue distribution
TW201609812A (zh) 2014-07-31 2016-03-16 安美基研究（慕尼黑）公司 最佳化之跨物種特異性雙特異性單鏈抗體構築體
WO2016112270A1 (en) 2015-01-08 2016-07-14 Biogen Ma Inc. Lingo-1 antagonists and uses for treatment of demyelinating disorders
EP3253780A1 (en) 2015-02-04 2017-12-13 Basf Plant Science Company GmbH Method of increasing resistance against soybean rust in transgenic plants by increasing the scopoletin content
US10174292B2 (en) 2015-03-20 2019-01-08 International Aids Vaccine Initiative Soluble HIV-1 envelope glycoprotein trimers
US9931394B2 (en) 2015-03-23 2018-04-03 International Aids Vaccine Initiative Soluble HIV-1 envelope glycoprotein trimers
TW202311292A (zh) 2015-04-17 2023-03-16 德商安美基研究（慕尼黑）公司 Ｃｄｈ３與ｃｄ３之雙特異性抗體構築體
CA2985081A1 (en) 2015-05-13 2016-12-15 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Aav-mediated expression of anti-influenza antibodies and methods of use thereof
TWI744242B (zh) 2015-07-31 2021-11-01 德商安美基研究（慕尼黑）公司 Egfrviii及cd3抗體構築體
TWI829617B (zh) 2015-07-31 2024-01-21 德商安美基研究（慕尼黑）公司 Ｆｌｔ３及ｃｄ３抗體構築體
TWI796283B (zh) 2015-07-31 2023-03-21 德商安美基研究（慕尼黑）公司 Ｍｓｌｎ及ｃｄ３抗體構築體
TWI717375B (zh) 2015-07-31 2021-02-01 德商安美基研究（慕尼黑）公司 Ｃｄ７０及ｃｄ３抗體構築體
TW202346349A (zh) 2015-07-31 2023-12-01 德商安美基研究（慕尼黑）公司 Dll3及cd3抗體構築體
JO3555B1 (ar) 2015-10-29 2020-07-05 Merck Sharp & Dohme جسم مضاد يبطل فعالية فيروس الالتهاب الرئوي البشري
EP3411404B1 (en) 2016-02-03 2022-11-09 Amgen Research (Munich) GmbH Psma and cd3 bispecific t cell engaging antibody constructs
DK3411402T3 (da) 2016-02-03 2022-02-07 Amgen Res Munich Gmbh Bcma- og cd3-bispecifikke t-celle-engagerende antistofkonstruktioner
EA039859B1 (ru) 2016-02-03 2022-03-21 Эмджен Рисерч (Мюник) Гмбх Биспецифические конструкты антител, связывающие egfrviii и cd3
US10626126B2 (en) * 2016-04-08 2020-04-21 Pulmocide Limited Compounds
JOP20170091B1 (ar) 2016-04-19 2021-08-17 Amgen Res Munich Gmbh إعطاء تركيبة ثنائية النوعية ترتبط بـ cd33 وcd3 للاستخدام في طريقة لعلاج اللوكيميا النخاعية
EP3054014A3 (en) 2016-05-10 2016-11-23 BASF Plant Science Company GmbH Use of a fungicide on transgenic plants
KR20190103147A (ko) * 2016-10-21 2019-09-04 아디맵 엘엘씨 항-호흡기 세포융합 바이러스 항체, 그리고 이의 생성 방법 및 사용 방법
CA3040893A1 (en) 2016-10-21 2018-04-26 Adimab, Llc Anti-respiratory syncytial virus antibodies, and methods of their generation and use
WO2018075954A2 (en) 2016-10-21 2018-04-26 Adimab, Llc Anti-respiratory syncytial virus antibodies, and methods of their generation and use
JOP20190189A1 (ar) 2017-02-02 2019-08-01 Amgen Res Munich Gmbh تركيبة صيدلانية ذات درجة حموضة منخفضة تتضمن بنيات جسم مضاد يستهدف الخلية t
SG10201913833PA (en) 2017-02-28 2020-03-30 Univ Pennsylvania Influenza vaccines based on aav vectors
JOP20190200A1 (ar) 2017-02-28 2019-08-27 Univ Pennsylvania تركيبات نافعة في معالجة ضمور العضل النخاعي
CA3053399A1 (en) 2017-02-28 2018-09-07 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Novel adeno-associated virus (aav) clade f vector and uses therefor
TW202228779A (zh) 2017-03-01 2022-08-01 英商梅迪繆思有限公司 抗rsv單株抗體配製物
KR20190141243A (ko) 2017-05-05 2019-12-23 암젠 인크 개선된 저장 및 투여를 위한 이중특이적 항체 구축물을 포함하는 약제학적 조성물
JP7166342B2 (ja) 2017-11-30 2022-11-07 エフ．ホフマン－ラ ロシュ アーゲー Ｂ細胞培養法
EP3724229A1 (en) 2017-12-11 2020-10-21 Amgen Inc. Continuous manufacturing process for bispecific antibody products
TW201940518A (zh) 2017-12-29 2019-10-16 美商安進公司 針對ｍｕｃ１７和ｃｄ３之雙特異性抗體構建體
TW202021616A (zh) 2018-07-30 2020-06-16 美商安進公司 結合至ｃｄ３３和ｃｄ３的雙特異性抗體構建體之延長投與
AR114541A1 (es) 2018-08-03 2020-09-16 Amgen Res Munich Gmbh Constructos de anticuerpos para cldn18.2 y cd3
KR20210052494A (ko) 2018-08-27 2021-05-10 아피메트 게엠베하 항체 구조물이 사전 로드된 동결 보존된 nk 세포
AU2019356564A1 (en) 2018-10-11 2021-04-29 Amgen Inc. Downstream processing of bispecific antibody constructs
EP3938504A1 (en) 2019-03-11 2022-01-19 Basf Se Amylases and methods for making and using them
AU2020290573A1 (en) 2019-06-13 2021-11-04 Amgen Inc. Automated biomass-based perfusion control in the manufacturing of biologics
AU2020345787A1 (en) 2019-09-10 2022-03-24 Amgen Inc. Purification method for bispecific antigen-binding polypeptides with enhanced protein L capture dynamic binding capacity
US20220396599A1 (en) 2019-11-13 2022-12-15 Amgen Inc. Method for Reduced Aggregate Formation in Downstream Processing of Bispecific Antigen-Binding Molecules
CA3164129A1 (en) 2019-12-20 2021-06-24 Amgen Inc. Mesothelin-targeted cd40 agonistic multispecific antibody constructs for the treatment of solid tumors
JP2023508366A (ja) 2019-12-27 2023-03-02 アフィメッド ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツンク 二重特異性ｆｃｙｒｉｉｉ×ｃｄ３０抗体構築体の製造方法
EP4093771A1 (en) 2020-01-22 2022-11-30 Amgen Research (Munich) GmbH Combinations of antibody constructs and inhibitors of cytokine release syndrome and uses thereof
WO2021183861A1 (en) 2020-03-12 2021-09-16 Amgen Inc. Method for treatment and prophylaxis of crs in patients comprising a combination of bispecifc antibodies binding to cds x cancer cell and tnfalpha or il-6 inhibitor
WO2021188851A1 (en) 2020-03-19 2021-09-23 Amgen Inc. Antibodies against mucin 17 and uses thereof
WO2021202463A1 (en) 2020-03-30 2021-10-07 Danisco Us Inc Anti-rsv antibodies
AU2021275049A1 (en) 2020-05-19 2022-12-22 Amgen Inc. MAGEB2 binding constructs
TW202210101A (zh) 2020-05-29 2022-03-16 美商安進公司 與ｃｄ３３和ｃｄ３結合的雙特異性構建體的減輕不良反應投與
US20230365709A1 (en) 2020-10-08 2023-11-16 Affimed Gmbh Trispecific binders
AU2021374036A1 (en) 2020-11-06 2023-06-08 Amgen Inc. Polypeptide constructs selectively binding to cldn6 and cd3
KR20230104256A (ko) 2020-11-06 2023-07-07 암젠 인크 증가된 선택성의 다중표적화 이중특이적 항원 결합 분자
CA3199931A1 (en) 2020-11-06 2022-05-12 Amgen Inc. Polypeptide constructs binding to cd3
TW202233678A (zh) 2020-11-06 2022-09-01 德商安美基研究（慕尼黑）公司 具有增強的剪切特徵的多肽
JP2023551903A (ja) 2020-12-01 2023-12-13 ザ・トラステイーズ・オブ・ザ・ユニバーシテイ・オブ・ペンシルベニア 組織特異的標的化モチーフを有する新規組成物及びそれを含有する組成物
CA3215594A1 (en) 2021-04-02 2022-10-06 Agnieszka KIELCZEWSKA Mageb2 binding constructs
IL308404A (en) 2021-04-27 2024-01-01 Generation Bio Co Non-viral DNA vectors expressing therapeutic antibodies and uses thereof
AU2022269312A1 (en) 2021-05-06 2023-10-19 Amgen Research (Munich) Gmbh Cd20 and cd22 targeting antigen-binding molecules for use in proliferative diseases
AU2022320948A1 (en) 2021-07-30 2024-01-18 Affimed Gmbh Duplexbodies
CA3237018A1 (en) 2021-11-03 2023-05-11 Joachim Koch Bispecific cd16a binders
CA3233696A1 (en) 2021-11-03 2023-05-11 Joachim Koch Bispecific cd16a binders
WO2023177655A1 (en) 2022-03-14 2023-09-21 Generation Bio Co. Heterologous prime boost vaccine compositions and methods of use
WO2023218027A1 (en) 2022-05-12 2023-11-16 Amgen Research (Munich) Gmbh Multichain multitargeting bispecific antigen-binding molecules of increased selectivity
WO2024059675A2 (en) 2022-09-14 2024-03-21 Amgen Inc. Bispecific molecule stabilizing composition

Family Cites Families (40)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4517304A (en) * 1980-07-01 1985-05-14 National Research Development Corporation Production of viral antigens
WO1982003089A1 (en) * 1981-03-06 1982-09-16 Lennox Edwin Samuel Monoclonal antibody
US5340926A (en) * 1983-03-25 1994-08-23 Celltech, Limited Process for the recovery of recombinantly produced protein from insoluble aggregate
US5332805A (en) * 1984-02-03 1994-07-26 Celltech Limited Process for the recovery of recombinantly produced chymosin from insoluble aggregate
FR2590674B1 (fr) * 1985-11-25 1989-03-03 Inst Nat Sante Rech Med Nouveaux reactifs de diagnostic
US5149650A (en) * 1986-01-14 1992-09-22 University Of North Carolina At Chapel Hill Vaccines for human respiratory virus
US4659563A (en) * 1986-01-27 1987-04-21 Miles Laboratories, Inc. High titer anti-respiratory syncytial virus intravenous immune globulin
US4717766A (en) * 1986-01-27 1988-01-05 Miles Laboratories, Inc. Method of preparing high titer anti-respiratory syncytial virus intravenous immune globulin
US5271927A (en) * 1986-02-13 1993-12-21 Celltech Limited Antibody conjugates with macrocyclic ligands
US5468606A (en) * 1989-09-18 1995-11-21 Biostar, Inc. Devices for detection of an analyte based upon light interference
US4800078A (en) * 1987-05-28 1989-01-24 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Immunotherapeutic method of treating respiratory disease by intranasal administration of Igb
GB8719041D0 (en) * 1987-08-12 1987-09-16 Parker D Conjugate compounds
GB8720833D0 (en) * 1987-09-04 1987-10-14 Celltech Ltd Recombinant dna product
US5223254A (en) * 1987-09-29 1993-06-29 Praxis Biologics, Inc. Respiratory syncytial virus: vaccines
EP0396563B1 (en) * 1987-12-23 1993-02-10 The Upjohn Company Chimeric glycoproteins containing immunogenic segments of the glycoproteins of human respiratory syncytial virus
US5183657A (en) * 1988-03-11 1993-02-02 Celltech Limited Antibodies for use in antilymphocyte antibody therapy
US5137804A (en) * 1988-05-10 1992-08-11 E. I. Du Pont De Nemours And Company Assay device and immunoassay
IL162181A (en) * 1988-12-28 2006-04-10 Pdl Biopharma Inc A method of producing humanized immunoglubulin, and polynucleotides encoding the same
US5354554A (en) * 1989-02-10 1994-10-11 Celltech Limited Crosslinked antibodies and processes for their preparation
US6093872A (en) * 1989-05-05 2000-07-25 Systemix, Inc. Extended human hematopoiesis in a heterologous host
US5332567A (en) * 1989-08-24 1994-07-26 Immunomedics Detection and treatment of infections with immunoconjugates
US5518725A (en) * 1989-09-25 1996-05-21 University Of Utah Research Foundation Vaccine compositions and method for induction of mucosal immune response via systemic vaccination
US5279935A (en) * 1990-03-01 1994-01-18 Becton, Dickinson And Company Method of immunossay including deactivation of endogenous alkaline phosphatase
WO1991016910A1 (en) * 1990-05-03 1991-11-14 Systemix, Inc. Human lymphoid tissue in an immunocompromised host
EP0581882B1 (en) * 1991-04-22 1998-01-07 Massachusetts Health Research Institute, Inc. (Mhri) Process of screening plasma samples for effective antibody titers against respiratory viruses
AU666852B2 (en) * 1991-05-01 1996-02-29 Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine A method for treating infectious respiratory diseases
CA2044940A1 (en) * 1991-06-10 1992-12-11 Inder M. Verma Transdominant negative proto-oncogene
WO1993005796A1 (en) * 1991-09-19 1993-04-01 The Scripps Research Institute Method for producing human antibodies in a non-human animal, and animals therefor
US5240694A (en) * 1991-09-23 1993-08-31 University Of Virginia Combined antiviral and antimediator treatment of common colds
US5418136A (en) * 1991-10-01 1995-05-23 Biostar, Inc. Devices for detection of an analyte based upon light interference
AU3923293A (en) * 1992-03-20 1993-10-21 Immunet Human monoclonal antibodies and methods for human monoclonal antibody production
GB9207479D0 (en) * 1992-04-06 1992-05-20 Scotgen Ltd Novel antibodies for treatment and prevention of respiratory syncytial virus infection in animals and man
CA2144043C (en) * 1992-09-16 2005-01-18 Dennis R. Burton Human neutralizing monoclonal antibodies to respiratory syncytial virus
JPH08508240A (ja) * 1993-01-12 1996-09-03 ジョージ グリスティーナ，アンソニー 受動免疫の直接的濃厚伝達のための方法および組成物
US5424189A (en) * 1993-03-05 1995-06-13 Kansas State University Research Foundation Bovine respiratory syncytial virus detection and primers
NZ269735A (en) * 1993-07-30 1998-01-26 Oravax Inc Monoclonal iga antibody against respiratory syncytial virus (rsv)
US5506209A (en) * 1994-05-26 1996-04-09 Abbott Laboratories Product for inhibition of infection of mammalian cells by respiratory syncytial virus
US5538952A (en) * 1994-05-26 1996-07-23 Abbott Laboratories Inhibition of infection of mammalian cells by respiratory syncytial virus
US5538733A (en) * 1994-07-07 1996-07-23 Willmar Poultry Company, Inc. Method of priming an immune response in a one-day old animal
US5811524A (en) * 1995-06-07 1998-09-22 Idec Pharmaceuticals Corporation Neutralizing high affinity human monoclonal antibodies specific to RSV F-protein and methods for their manufacture and therapeutic use thereof

Also Published As

Publication number Publication date
DE69637930D1 (de) 2009-06-25
US5939068A (en) 1999-08-17
EP0854730B1 (en) 2009-05-13
US5811524A (en) 1998-09-22
MY137299A (en) 2009-01-30
US20020001798A1 (en) 2002-01-03
AU6172096A (en) 1996-12-30
CO4480110A1 (es) 1997-07-09
NZ310847A (en) 1999-05-28
NO975621L (no) 1998-02-04
WO1996040252A1 (en) 1996-12-19
MX9709778A (es) 1998-07-31
NO324047B1 (no) 2007-08-06
NZ335241A (en) 1999-07-29
CA2223033A1 (en) 1996-12-19
US5958765A (en) 1999-09-28
ATE431159T1 (de) 2009-05-15
MXPA01011457A (es) 2005-09-08
CN1192695A (zh) 1998-09-09
US6537809B2 (en) 2003-03-25
US6413771B1 (en) 2002-07-02
US5840298A (en) 1998-11-24
YU36096A (sh) 1999-06-15
NO975621D0 (no) 1997-12-04
US20070082002A1 (en) 2007-04-12
KR19990022645A (ko) 1999-03-25
AU717061B2 (en) 2000-03-16
JPH11507640A (ja) 1999-07-06
CN1198648C (zh) 2005-04-27
US20020081723A1 (en) 2002-06-27
US5955364A (en) 1999-09-21
AR003423A1 (es) 1998-08-05
UY24255A1 (es) 1996-06-18
KR100490687B1 (ko) 2005-08-05
ZA964434B (en) 1996-12-10
US5866125A (en) 1999-02-02
EP2095827A1 (en) 2009-09-02
CN1680447A (zh) 2005-10-12
EP0854730A1 (en) 1998-07-29
US20040076631A1 (en) 2004-04-22
IL122404A0 (en) 1998-06-15
BR9608884A (pt) 1999-07-06
RS50157B (sr) 2009-05-06
EP0854730A4 (en) 2002-11-06
JP3771267B2 (ja) 2006-04-26
US20040005323A1 (en) 2004-01-08
HK1015282A1 (en) 1999-10-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SA96170384B1 (ar) وطرق تحضيرها واستخداماتها العلاجية (rsv) الاجسام المضادة المعادلة البشرية احادية النسيلة ذات الالفة العالية المختصة ببروتين - ف للفيروس المخلوي التنفسي
JP6022515B2 (ja) 抗ａ型インフルエンザウイルス中和抗体およびその使用
TWI628190B (zh) 可結合及中和ｂ型流感病毒之人類結合分子及其用途
JP4716350B2 (ja) 潜伏期膜タンパク質に対する抗体およびそれらの使用
KR101407216B1 (ko) 인간 사이토메갈바이러스 중화 항체 및 이의 용도
CN104603149B (zh) 与预防和治疗狂犬病感染相关的组合物和方法
KR20090127341A (ko) 호흡기세포 융합 바이러스 감염 치료용 재조합 항체
JP3565351B2 (ja) 免疫応答を惹起するための、多数エピトープ含有抗原の再構成法および組成物
KR20090088871A (ko) 인간 메타뉴모바이러스를 중화시키는 인간 항체
PT1597280E (pt) Produção de anticorpo monoclonal através da transformação de células b pelo ebv
CN113423736B (zh) 对muc18特异性的抗体
JP2002543822A (ja) ヒトモノクローナル抗体
JP4690196B2 (ja) 復活技術によって生成された炭疽菌毒素に対する中和ヒト抗体
EP3037533A1 (en) Anti-influenza virus-neutralizing antibody
JP2023554587A (ja) Ｓａｒｓ－ｃｏｖ－２ スパイクタンパク質の受容体結合ドメインにコンジュゲートまたは融合している抗体およびワクチン目的でのそれらの使用
EP0370090B1 (en) Immunogens and biologically active peptides derived from shared sequences from antigens and anti-idiotypic antibodies or antibodies specific for cellular receptors of the antigens
EP4282880A1 (en) Fully human broad-spectrum neutralizing antibody 76e1 against coronavirus, and use thereof
CN116744966A (zh) Dna编码的用于抵抗sars-cov-2的抗体
CN112574297A (zh) 抗神经氨酸酶的单克隆抗体及其应用