SA516370442B1 - صورة متغيرة من aav ، وتركيبات وطرق واستخدامات ناقل جين للخلايا والأعضاء والأنسجة - Google Patents

صورة متغيرة من aav ، وتركيبات وطرق واستخدامات ناقل جين للخلايا والأعضاء والأنسجة Download PDF

Info

Publication number
SA516370442B1
SA516370442B1 SA516370442A SA516370442A SA516370442B1 SA 516370442 B1 SA516370442 B1 SA 516370442B1 SA 516370442 A SA516370442 A SA 516370442A SA 516370442 A SA516370442 A SA 516370442A SA 516370442 B1 SA516370442 B1 SA 516370442B1
Authority
SA
Saudi Arabia
Prior art keywords
aav
gly
asn
pro
ser
Prior art date
Application number
SA516370442A
Other languages
English (en)
Inventor
انجويلا زافير
ايه. هاي كاثرين
ن. يازيسيوجلو مصطفى
Original Assignee
ذا شيلدرنز هوسبيتال اوف فيلادلفيا
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=52343737&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=SA516370442(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by ذا شيلدرنز هوسبيتال اوف فيلادلفيا filed Critical ذا شيلدرنز هوسبيتال اوف فيلادلفيا
Publication of SA516370442B1 publication Critical patent/SA516370442B1/ar

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/36—Blood coagulation or fibrinolysis factors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A61K48/005—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'active' part of the composition delivered, i.e. the nucleic acid delivered
    • A61K48/0058—Nucleic acids adapted for tissue specific expression, e.g. having tissue specific promoters as part of a contruct
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
    • C07K14/01—DNA viruses
    • C07K14/015—Parvoviridae, e.g. feline panleukopenia virus, human parvovirus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/86—Viral vectors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
    • C12N9/6402—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from non-mammals
    • C12N9/6405—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from non-mammals not being snakes
    • C12N9/6408—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
    • C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • C12Y304/21022—Coagulation factor IXa (3.4.21.22)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
    • C12N2750/14121—Viruses as such, e.g. new isolates, mutants or their genomic sequences
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
    • C12N2750/14122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
    • C12N2750/14141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2750/14143—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
    • C12N2830/008—Vector systems having a special element relevant for transcription cell type or tissue specific enhancer/promoter combination

Abstract

يتعلق الاختراع بفيروس من نوع مصلي مرتبط بالغدة (AAV) AAV ونواقل ترتبط بـ AAV و AAV-Rh74 ترتبط بطرق ناقلة لجين يتوسطه الناقل AAV واستخداماتها. وعلى نحو خاص، يتعلق الاختراع بـ AAV-Rh74 ونواقل AAV ذات الصلة تستهدف بولي نيوكليوتيدات للخلايا أوالأنسجة أو الأعضاء الخاصة بالتعبير (الانتساخ) الخاص بالجينات التي تشفر بروتينات علاجية وببتيدات وبولي نيوكليوتيدات تعمل كمتواليات لحمض نووي مثبط أو يتم انتساخها في تلك المتواليات. شكل 1.

Description

— \ — صورة متغيرة من ‎AAV‏ « وتركيبات وطرق واستخدامات لنقل الجين للخلايا والأعضاء والأنسجة ‎Variant AAV and compositions, methods and uses for gene transfer to cells, organs‏ ‎and tissues‏ الوصف الكامل خلفية الاختراع يتعلق الاختراع الحالي بفيروس من نوع مصلي مرتبط بالغدة ‎(AAV) adeno-associated‏ ونواقل ترتبط بالفيروس المرتبطة بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ و ‎AAV-Rh74‏ ترتبط بطرق ناقلة لجين ‎gene‏ يتوسطه الناقل ‎AAV transfer‏ واستخداماتها . 5 وعلى نحو ‎(pals‏ يتعلق الاختراع ب 14074-/81/ ونواقل ‎AAV‏ ذات الصلة تستهدف بولي نيوكليوتيدات للخلايا أو الأنسجة أو الأعضاء الخاصة بالتعبير (الانتساخ ‎(transcription‏ ‏الخاص بالجينات التي تشفر بروتينات علاجية ويبتيدات ‎peptides‏ ويولي نيوكليوتيدات ‎polynucleotides‏ تعمل كمتواليات لحمض نووي ‎nucleic acid‏ مثبط أو يتم انتساخها في تلك المتواليات.
0 تؤدي الاضطرابات الجينية ‎Genetic disorders‏ المسببة بواسطة غياب أو عيوب في الجين المطلوب (فقد في الوظيفة ‎(loss of function‏ أو التعبير عن جين غير مرغوب أو جين معيب (اكتساب الوظيفة ‎(gain of function‏ التي تؤدي إلى العديد من الأمراض. ينطوي مثال لاضطراب فقد الوظيفة الجينية في مرض الهيموفيليا ‎hemophilia‏ (نزعة النزف الدموي) واضطرابات النزف المذكورة بواسطة القصور في أي عامل تخثر من ‎FVII VIE‏ هيموفيليا ‎(A‏
5 أو العامل ‎FIX) IX‏ .هيموفيليا 8). ينطوي مثال في اكتساب اضطراب الوظيفة الجينية
‎function genetic disorder‏ مرض هنتجتون ‎Huntington’s disease‏ « ومرض يتم
‏التسبب فيه بواسطة جين ‎"HTT " gene‏ المرضي (الذي يشفر بروتين هنتجتون ‎(Huntington‏
‏والذي يشفر بروتين متطفقر والذي يعمل على التراكم الداخلي والذي يؤدي إلى الاتلاف التدريجي
‏للأعصاب وعلى نحو خاص في العقد القاعدية ‎basal ganglia‏ وقشرة المخ ‎.cerebral cortex‏ ‎TINY‏
ا تتكون المعالجات الحالية للهيموفيليا من الإعطاء في الوريد لعامل تخثر الدم ناتج عودة الارتباط إما عند الرغبة في ذلك أو في حالة حدوث النزف أو لأغراض وقائية. وعلى الرغم من ذلك؛ فإن الطريقة العلاجية يكون لها العديد من العيوب مثل الحاجة للتسريب المتكرر وتكلفة المعالجة وخطورة تطور استجابات مناعية لعامل مضاد للعلاج وخطورة النزف المحتمل المؤدي إلى الوفاة. وقد حثت تلك القيود عمليات تطوير العلاجات المعتمدة على الجين للهيموفيليا. ولهذا الغرض؛ فإن الهيموفيليا تكون عبارة عن علاج يعتمد على انتقال الجين حيث ‎)١‏ تكون النافذة العلاجية واسعة جداً؛ ‎Lady‏ يتعلق بالمستويات الأعلى قليلاً من ‎96١‏ من الموجود بالفعل فإن ذلك يؤدي إلى تغيير في النمط الظاهري من النمط الشديد إلى المتوسط وتكون هناك مستويات من ‎96٠090‏ لا يتم ربطها مع أي تأثيرات جانبية؛ ؟) لا يكون التعبير الخاص بالنسيج من الجين الانتقالي العلاجي مطلوياً 0 بشكل مقيد؛ و ) هناك ‎doses‏ يمكن أخذها في الاعتبار في قياس النقاط الطرفية من الفعالية العلاجية. بالإضافة إلى ذلك؛ فقد تم توضيح التعبير في الكبد عن عامل التخثر لكي يتم حث التحمل الجيني المناعي مع عامل التخثر بنفسه وتقليل احتمالية استجابات مناعية ضارة في مقابل عامل التخثر. وعلى نحو حالي فإن نواقل الفيروس المرتبطة بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ 5 .يتم التعرف عليها في شكل نواقل جينية خاصة بالاختيار حيث أن بها سلامة عند الحد الأدنى لها ويكون بها مخطط فعالية خاصة بتوصيل الجين في الكائن الحي. ومن الأنواع المصلية ‎AAV‏ ‏المعزولة ‎Lad‏ يتعلق ب ‎AAV2‏ و ‎AAV‏ فإنه يتم استخدامها في استهداف الكبد في البشر المصابين بالهيموفيليا 8. يعمل كلا الناقلين على التوثيق بشكل فعال في حالة التعبير طويل الأمد 68 من الجين الناقل العلاجي. أوضحت البيانات الحديثة أن استهداف الكبد باستخدام ناقل ‎AAV 20‏ يحقق التعبير طويل الأمد من الجين الناقل ‎FIX‏ عند مستويات علاجية. وحيث أن تلك البيانات واعدة في هذا المجال؛ فإن تحديد الأنواع المصلية من ‎AAV‏ التي يكون بها ‎sla‏ عالي في الكبد وانتشار منخفض في البشر (العائل الطبيعي للنوع غير المعالج من ‎(AAV‏ ‏يكون أساسياً فيما يتعلق ب ‎)١‏ تحقيق مستويات علاجية من تعبير الجين الناقل في الكبد عند جرعة ناقل منخفضة ما أمكن لتقليل مخاطر حث استجابات مناغية في الغلاف المضاد ل ‎AAV‏ ؛ و ‎(Y‏ ‏5 أنواع مصلية بديلة من ‎AAV‏ مع الانتشار المصلي الفريد والتي تسمح لمجموعات من المرضى
— ¢ —
خلاف ذلك بأن يكونوا معرضين ‎Jaa‏ الجين ‎AAV‏ نتيجة وجود مناعة خلطية موجودة يبشكل مسبق
فيما يتعلق ب 5/ا8/. يخاط الاختراع تلك الاحتياجات ويوفر فائدة إضافية.
تتعلق البراءة الدولية رقم ‎١7/715 [YY‏ بتوصيل الفيروس المأشوب المرتبط بالغدد ‎(FAAV)‏
من جين ألفا-ساركوجلايكان. وتوفر أيضًا نواتج من ‎FAAV‏ وطرق استخدامه لعلاج أنواع الحثل
العضلي بالحزام الطرفي مثل ‎LGMD2D‏
تتعلق البراءة الدولية رقم ‎٠ JAl HY‏ عا بمجالات العلاج الجينى والبيولوجيا الجزيثية . أكثر
‎(dass‏ توفر تركيبات من النواقل الفيروسية المرتبطة بالغدد التى تمت صياغتها لتخفيف تحبيد
‏الفيروس وتجنب الاستجابات المناعية المضادة ل-/2// غير المرغوب بها مما يوفر إيصال فعال
‏داخل الأوعية وتعبير أكثر قدرة على التنبؤ بعديدات نوكليوتيد العلاجية والقدرة على إعادة الإعطاء فى وجود المناعة المضادة للناقل الموجودة.
‏الوصف العام للاختراع
‏يوفر الاختراع ‎Aad‏ نوع مصلي من فيروس مرتبط غدي | ‎adeno-associated virus‏
‎. viral particles ‏وجسيمات فيروسية‎ AAV ‏ونواقل مرتبطة ب‎ AAV-RhT4 ‏من ناقل‎ (AAV)
‏تشتمل تلك النواقل على ‎all AAV-RhT74‏ تستهدف ‎LWA‏ كبدية ‎cells of the liver‏ من 5 الكبد؛ من بين أنواع خلايا أخرى. وكناقل لتوصيل متوالية البولي نيوكليوتيد ‎polynucleotide‏
‎sequence‏ يقوم 4074ا-/اهلظ ونواقل مرتبطة ‎AAV,‏ بدفع التعبير عن البولي نيوكليوتيد في
‏الخلايا ‎٠.‏ تكون بولى نيوكليوتيدات التى تشفر بروتينات ‎Jia ٠‏ بروتينات خاصة بالاستخدامات
‏العلاجية قابلة لأن يتم التعبير عنها عند مستويات علاجية بعد الإعطاء.
‏تشتمل ‎AAV-Rh74‏ التوضيحية ونواقل مرتبطة ب ‎AAV‏ على الصور المتغيرة ‎AAV-Rh74‏ . 0 تشتمل صور كابسيد معينة على متوالية كابسيد ‎Rh74 capsid sequence‏ مع استبدال
‏للحمض الأميني ‎amino acid‏ عند أي من مواضع الحمض الأميني 145 144 ‎7١٠‏ أو
‏07 من متوالية كابسيد 1/01 4174 ( متوالية رقم: ‎.)١‏ في ‎claw‏ معينة؛ الوحدات البنائية
‏المناظرة للحمض الأميني ‎VA‏ © أو اا عند أي من مواضع الحمض الأميني 0145 144
‎Yo‏ أو ‎"9.١‏ من متوالية كابسيد 1 ‎RH74 VP‏ ) متوالية رقم ‎١:‏ ( . في سمات أكثر خصوصية؛
Co ‏عند‎ V ‏عند موضع الحمض الأميني 6190 الوحدة البنائية‎ A ‏تكون لمتوالية الكابسيد الوحدة البنائية‎ ‏أو الوحدة‎ Yo) ‏الوحدة البنائية © عند موضع الحمض الأميني‎ ١99 ‏مواضع لحمض الأميني‎ ‏عند موضع الحمض الأميني 707 من متوالية كابسيد 1/01 41174 ( متوالية رقم:‎ N ‏البنائية‎ ‏يكون لمتوالية الكابسيد أي اثنين» ثلاثة أو كل الأربعة مما يلي:‎ danas ‏في سمات أكثر‎ .)١ ‏عند مواضع لحمض‎ V ‏عند موضع الحمض الأميني 190 الوحدة البنائية‎ A ‏الوحدة البنائية‎ 5 ‏عند‎ N ‏أو الوحدة البنائية‎ ٠١٠ ‏عند موضع الحمض الأميني‎ P ‏الأميني 149 الوحدة البنائية‎ .)١ ‏متوالية رقم:‎ ( RHT4 1/01 ‏من متوالية كابسيد‎ ٠07 ‏موضع الحمض الأميني‎ ‏من أي صورة‎ AAV ‏ناتجة عودة الارتباط من الاختراع على متوالية كابسيد‎ AAV ‏تشتمل جسيمات‎ ‏متوالية رقم: 6)؛‎ ( RHM15-1 »)# ‏متوالية رقم:‎ ( RHM4-1 ‏متغيرة من الكابسيد مثل‎
RHM15-4 (A ‏متوالية رقم:‎ ( RHM15-3/RHM15-5 «(Y ‏متوالية رقم:‎ ( RHM15-2 0 ‏ناتج عودة‎ AAV ‏في نماذج معينة؛ جسيم‎ .)٠١ ‏متوالية رقم:‎ ( RHMIS-6 ‏متوالية رقم: 4( أو‎ ( ‏على سبيل المثال؛ ناقل فيروسي مثل جينوم ناقل‎ ( Jil genome agua Slay ‏الارتباط يغلف أو‎ ‏ناتجة عودة الارتباط على جينوم ناقل فيروسي‎ AAV ‏لالظ ). تشتمل جسيمات الاختراع المذكورة‎ ‏على متوالية بولي نيوكليوتيد غير متجانسة‎ Lad ‏التي تشتمل‎ (AAV ‏(على سبيل المثال؛‎ . heterologous polynucleotide 5 ‏ذي الصلة بالتوسط في ناقل البولي نيوكليوتيد الذي ينتج‎ AAV ‏وناقل‎ AAV-RhT74 ‏يقوم ناقل‎ ‏مستويات تعبر بروتين التي تكون أعلى بشكل هام من العديد من الأنواع المصلية الأخى التي تمت‎
AAV-Rh74 ‏دراستها حالياً في إعدادات إكلينيكية أولية وإعدادات إكلينيكية. وعلى نحو محدد؛‎ ‏تستهدف بولي نيوكليوتيدات خاصة بالكبد مع فعالية عند صورة مشابهة على الأقل أو صورة فائقة‎ ‏في كل من الفثئران وفي كلام‎ AAV ‏العدوى من الكبد‎ Ji ‏فيما يتعلق بمقياس ذهب خاص‎ 0 ‏تستهدف الصور‎ .)١ ‏والشكل رقم‎ ١ ‏الشكل رقم‎ (JU ‏مصابة بهيموفيليا 8 . (انظر؛ على سبيل‎ ‏(المثال‎ RHMA=1 ‏المتغيرة من 474-/8/, على سبيل المثال» الصورة المتغيرة من الكابسيد‎ ‏رقم ©( الذي يستهدف بولي نيوكليوتيد للكبد مع فعالية مقارنة أو فائقة عن 0/1/8 وفائقة عن‎ ‏الشكل رقم #). بالإضافة إلى ذلك؛ فإن‎ (JU ‏لال 874 في الفئران (انظر؛ على سبيل‎
AAV- ‏ر‎ AAV-RhT4 ‏البيانات من الرئيسيات غير البشرية توضح أن الصورة المتغيرة من‎ 5
4 مثل ‎RHM4-1‏ تكون تقريباً اثنين من الأضعاف أو أكثر فعالية من ‎AAV‏ عند التعبير المشتق من الكبد المشترك من 6لا (انظر؛ على سبيل المثال؛ الشكل رقم ؛ ‎(Vs‏ ‏وبالتالي فإن الصورة المتغيرة من ‎Jie AAV-RT4 AAV-RhT4‏ الصورة المتغيرة من الكابسيد (على سبيل المثال» 4110/4-1) يمكن استخدامها لكي يتم توصيل البولي نيوكليوتيدات ‎Jie‏ ‏5 المتواليات المشفرة للجين لكي يتم التعبير عن البروتين التي توفر فائدة مطلوية أو فائدة علاجية ‎Lady‏ لتثبيط البولي نيوكليوتيدات والتي تقلل أو تثبط التعبير عن جين غير مطلوب أو جين معيب وبالتالي معالجة العديد من الأمراض. على سبيل المثال؛ يمكن استخدام الصور المتغيرة من كابسيد ‎AAV-Rh74‏ و ‎Ae) AAV-RhT74‏ سبيل المثال» ‎(RHM4-1‏ في شكل نواقل للتوصيل إلى الخلايا والأعضاء مثل جينات علاجية من الكبد (على سبيل ‎FIX (JU)‏ و ‎FVII‏ ) لمعالجة 0 الهيموفيليا (نزعة نزف الدم) من النوع ‎A‏ و 8؛ إلخ. يمكن ‎Load‏ استخدام الصور المتغيرة من كابسيد ‎AAV-Rh74‏ و ‎AAV-RhT74‏ (على سبيل المثال» ‎(RHM4-1‏ لتوصيل جينات بمدى واسع من القصور في بروتين أيضي أو بروتين بلازما أو فيما يتعلق بأغرارض علاجية ‎edie‏ على سبيل المثال وليس الحصرء؛ الجينات وأصابع الزنك ‎Zine finger‏ المشفرة لنيوكلياز ‎nucleases‏ ‏لإجراء عملية تحرير الجينوم في الكبد وللتوصيل الموضعي (للكبد) من عوامل معدلة للمناعة مثل إترفيرون- ألفا لمعالجة أنواع عدوى فيروس التهاب الكبد أو لمعالجة افتراضية لأي مرض الذي يتطلب نقل الإشارة إلى الكبد أو وجود منتج جين انتقالي علاجي في تيار الدم (الذي يمكن تحقيقه بواسطة استهداف الجينات المتحولة الخاصة بالتعبير في الكبد). بالإضافة إلى التوصيل الفعال الخاص بالبولي نيوكليوتيدات بواسطة ‎AAV-RNT4‏ والنواقل ذات الصلة من ‎AAV‏ مثل الصور المتغيرة من 84074-/2/21 ‎Jie‏ الصور المتغيرة من الكابسيد (على 20 سبيل ‎(RHM4-1 (Ja)‏ في الخلايا في المعمل وفي الكائن الحي فإن انتشار الأجسام المضادة لذ 4074-/281 في البشر يكون أقل من الأجسام المضادة ل ‎AAV‏ وتختلف عن تلك الخاصة بالأجسام المضادة من ‎AAVE‏ (الجدول رقم ‎.)١‏ ونتيجة وجود الانتشار المنخفض من 5630 و ‎AAV-Rh74‏ ونواقل ‎AAV‏ ذات الصلة ‎Jie‏ الصور المتغيرة من ‎AAV-RhT4‏ (كابسيد) (على سبيل ‎(RHM4-T JU‏ التي يمكن استخدامها في نسبة أعلى من البشر والذين يمكن أن لا 5 يكونوا معرضين لنقل الجين؛ على سبيل المثال؛ البشر والذين لا يكونوا موجبين بالنسبة للمصل
—y-
خلاف أنواع ‎AAV‏ المصلية الأخرى ( على سبيل المخال؛ ‎(AAV4 (AAV3 (AAV2 AAVT‏ ‎AAVS‏ 6لاحطح ‎(AAVS (AAVT‏ ولاطفل ‎AAVIT AAVIO‏ إلخ). بالإضافة إلى ذلك فإن نواقل ‎AAV-Rh74‏ والنواقل ذات الصلة مثل الصور المتغيرة من ‎AAV-Rh74‏ تشتمل على صور متغيرة من الكابسيد ‎capsid‏ (على سبيل ‎Ally (RHM4-1 (JE)‏ يمكن أن يتم إنتاجها على نحو فعال عند عيارات عالية (الجدول رقم ‎.)١‏ وبالتالي» فإن 14074-/81/م ونواقل ‎AAV‏
ذات الصلة يمكن إنتاجها في كميات كبيرة للكثير من الأمراض الإكلينيكية السائدة. وطبقاً للاختراع تم توفير نواقل ‎AAV-RhT4‏ ناتجة عودة الارتباط ونواقل ‎AAV‏ ذات الصلة ‎Jie‏ ‏الصور المتغيرة من ‎AAV-RhT4‏ مثل الصور المتغيرة من جسيمات كابسيد ‎Ae)‏ سبيل المثال؛ ‎(RHM4-1‏ التي تشتمل على (تمت ‎leila‏ وتمت تعبئتها) من جينومات ناقل ‎AAV‏ . في أحد
0 النماذج؛ يشتمل ناقل ‎AAV‏ ناتج عودة الارتباط على متوالية بولي نيوكليوتيد غير متجانسة. في نموذج آخرء يكون جينوم ‎AAV‏ ناتج ‎sae‏ الارتباط عبارة عن جينوم تمت كبسلته أو تمت تعبئته بواسطة كابسيد ‎AAV-RhT74‏ أو ‎AAV‏ ذي الصلة مثل الصور المتغيرة من ‎AAV-RhT74‏ مثل الصورة المتغيرة من الكابسيد (على سبيل المثال» ‎(RHM4-1‏ ‏في نواقل ‎AAV‏ ناتجة ‎sage‏ الارتباط من الاختراع ‎Jie‏ نواقل ‎AAV-RhT74‏ ونواقل ‎AAV‏ ذات
5 الصلة مثل الصور المتغيرة من جسيمات ‎AAV-Rh74‏ (كابسيد) (على سبيل المثال» ‎RHM4-‏ ‏1 ) التي تشتمل على جينومات ناقلة ‎AAV‏ ناتجة عودة الارتباط (تم تغليفها أو تمت تعبئتها)؛ يمكن الانتساخ ‎dang‏ ذلك يمكن الترجمة بداخل البروتين. وعلى نحو بديل؛ يمكن انتساخ البولي نيوكليوتيد غير المتجانس في ناتج انتساخ والذي يعمل بدوره أو يكون له نشاط (على سبيل المثال؛ في شكل حمض نووي مثبط).
0 في العديد من السمات؛ تقوم متوالية البولي نيوكليوتيد غير المتجانسة بتشفير البروتين العلاجي. في سمات معينة؛ يكون البروتين عبارة عن عامل تخثر الدم ‎Ae)‏ سبيل المثال» عامل ‎XI‏ ‏وعامل ‎IX‏ وعامل ‎X‏ وعامل ‎VIII‏ وعامل ‎Vila‏ أو بروتين © )؛ ‎CFTR‏ (بروتين منتظم عبر الغشاء متليف كيسي)؛ وجسم مضاد ‎antibody‏ ؛ وبروتين خاص بخضاب شبكية ظهاري ‎epithelium-specific‏ أصعصوام ‎retinal‏ 15 كيلو دالتون (40865!)؛ إرثروبيوتين
¢ lipoprotein lipase ‏ليباز بروتين شحمي‎ «LDL receptor ‏مستقبل‎ ¢ erythropoietin 5
—A— أورنثثين ترانس كارياميلاز ‎ornithine transcarbamylase‏ « ]|-جلويين ‎a « B-globin‏ — جلوبين ‎a-globin‏ ؛ سبكتيرين ‎a » spectrin‏ — أنتيتيريسين؛ أدينوسين دي أميناز ‎a=‏ ‎((ADA) antitrypsin, adenosine deaminase‏ ناقل فلزي ‎metal transporter‏ ‎ATPTA)‏ أو ‎(ATP7‏ سولفاميداز ‎sulfamidase‏ ؛ إنزيم يشتمل على مرض تخزين جسيمي ‎((ARSA) lysosomal storage disease 5‏ هيبوكسانثين جوانين ‎hypoxanthine guanine‏ » فسوفوريبوسيل ترانسفيراز ‎Yo— 3 « phosphoribosyl transferase‏ جلوكوسريبروسيداز ‎B=‏ ‎glucocerebrosidase‏ 25 ؛ سفينجوميليناز ‎sphingomyelinase‏ ¢ ليسوسومال هيكسوسامنيداز ‎lysosomal hexosaminidase‏ » حمض كيتو بسلسلة متفرعة دهيدروجيناز ‎branched-chain keto acid dehydrogenase‏ » وهرمون وعامل نمو الورم ‎hormone,‏ ‎a growth factor 0‏ (على سبيل المثال» عامل نمو شبيه بالأنسولين ‎insulin-like growth‏ ‎factors‏ و" وعامل مشتق من الصفائح وعامل نمو خاص بالبشرة وعامل نمو خاص بالعصب وعامل غذائي عصبي -؟ و-؛ وعامل غذائي عصبي مشتق من المخ وعامل نمو مشتق من خلية عصبية وعامل نمو خاص بالتحويل © و م إلخ)؛ وسيتوكين 6/10/6108 (على سبيل المثال» » - إنترفيرون ‎interferon‏ و 3[ — إنترفيرون»؛ إنترفيرون- ‎oy‏ إنترليوكين ‎interleukin‏ -تء إتترليوكين ‎i=‏ إنترليوكين -17» عامل حث مستعمرة لملتهمة كبيرة حبيبية؛ وتوكسين لمفاوي؛ إلخ)؛ منتج جين خاص بالقتل (على سبيل المثال؛ فيروس حلاً بسيط» وثيميدين كيناز ‎thymidine kinase‏ ؛ وسيتوسين دي أميناز ‎cytosine deaminase‏ » وتوكسين دفتريا ‎toxin‏ 28 وستوكروم ‎«P450 cytochrome‏ ودي أوكسي سيتيدين كيناز «(= « tumor necrosis factor ‏؛ عامل تتكرز الورم‎ deoxycytidine kinase ‏بروتين مقاومة عقار (على سبيل المثال؛ الذي يوفر مقاومة لعقار مستخدم لعلاج السرطان‎ 20 «p53 ‏سبيل المثال؛‎ Je) tumor suppressor protein ‏وبروتين كابت‎ (cancer therapy ‏داء سلاسل قولوني ورمي غدي‎ Von Hippel-Lindau (VHL) Wt-1, NF1 «Rb ‏مع خصائص معدلة للمناعة‎ peptide ‏ويبتيد‎ (APC) adenomatous polyposis coli ‏أو‎ ¢hCDR1 ‏أو‎ protein Tregitopes ‏للمناعة أو بروتين تريجيتوبييس‎ alge ‏مولد للتحمل‎ asin, 2D guanylate cyclase ‏جوانيلات سيكلاز‎ » , glucokinase ‏وجلوكوكيناز‎ insulin ‏أنسولين‎ 5
TIN
‎«(LCA-GUCY2D)‏ بروتين ‎١ Rab escort‏ (تنكس المشيمة ‎LCA 5 ¢((Choroideremia‏ ‎LCA)‏ -ليبيرسيلين ‎((Lebercilin‏ أورنيثين كيتواسيد أمينو ترانفيراز ‎ornithine ketoacid‏ ‎aminotransferase‏ (ضمور تلفيفي ‎Atrophy‏ 1816/ا6)؛ ربتنيوسشيسين ‎١ Retinoschisin‏ (عامل اشتقاق مشيمة مرتبط ب ‎USHIC (X-linked Retinoschisis X‏ (متلازمة ‎Usher’s‏ ‏5 10 ) التهاب شبكية صباغي مرتبط ب ‎X-linked retinitis (XLRP) X GTPase‏ ‎MERTK « pigmentosa GTPase (XLRP)‏ (صور ‎AR‏ من ‎RP‏ : التهاب شبكية صباغي ‎retinitis pigmentosa‏ ) 071181 ( صمم كونيكسين ‎«(Connexin 26 deafness Y1‏ ‎¢(ACHM 2‏ ؟ 5 ¢ (عمى ألوان ‎PKD-1 ((Achromatopsia‏ أو ‎PKD-2‏ (مرض كلية متعدد التكيسات ‎«CLN2 (TPP1 «(Polycystic kidney disease‏ قصور الجين المسبب لأمراض التخزين الشحمية ‎gene deficiencies causative of lysosomal storage diseases‏ (على سبيل المثال؛ إنزيمات سولفاتاز ‎sulfatases‏ ؛ ‎N‏ - أسيتيل جلوكوسامين = )= فوسفات ترانسفيراز ‎N-acetylglucosamine—1-phosphate transferase‏ وكاتباسين ‎cathepsin‏ ‎VPC2 0001 (GM2-AP (A «‏ بروتينات منشط شحم سفينجولي ‎Sphingolipid‏ ‎cactivator proteins‏ إلخ) وواحد أو أكثر من إنزيمات نيوكلياز ‎nucleases‏ إصبع الزنك ‎zinc‏ ‎finger 5‏ لتحرير الجينوم أو متواليات ‎dail)‏ المستخدمة في شكل صورة أساسية للإصلاح لتحرير الجينوم. في سمات إضافية؛ تقوم متوالية البولي نيوكليوتيد بتشفير بروتين علاجي الذي بدوره يثبط تعبير وظيفة بروتين غير مرغوب أو غير منتظم الوظيفة (مختل الوظيفة) موجود (بشكل داخلي) في خاضع. في سمات غضافية؛ تكون متوالية البولي نيوكليوتيد غير المتجانس عبارة عن بولي 0 نيوكليوتيد والذي عندما يتم انتساخه؛ فإنه يتم انتساخه في حمض نووي مثبط (على سبيل ‎(Jud‏ ‎RNA‏ مثبط ). في سمات معينة إضافية؛ يكون الحمض النووي المثبط عبارة عن متوالية بجديلة منفردة أو تشكل متوالية بجديلة مزدوجة أو ثلاثية. في سمات إضافية أو سمات معينة بشكل أكبر؛ فإن الحمض النووي ‎dadiall‏ يكون عبارة عن ‎RNA‏ دقيق ‎ShRNA (siRNA (miRNA)‏ ترانس ‎RNA -‏ مرتبطء ‎RNA‏ في عكس اتجاه النسخ أو صورة ثلاقية تشكل ‎RNA‏ ‎TI‏
“ym في سمات أكثر خصوصية على نحو إضافي؛ فإن الحمض النووي المثبط يثبط تعبير : جين هنتنجتون | ‎(HTT)huntingtin‏ جين يرتبط مع ضمور في فقد الحركة (على سبيل المثال؛ أتروفين ‎٠‏ 87111)؛ مستقبل أندروجين على كروموسوم ‎Chromosome‏ )1 في ضمور بقعي ‎elas‏ بصلي ‎spinobulbar muscular atrophy‏ » و أناتاكسين بشري ‎human Ataxin‏ - ‎Y=) 5‏ -؟ و ‎v=‏ قناة كالسيوم ‎calcium channel‏ معتمدة على الفولتية ‎P/Q‏ 0872.1 يتم تشفيرها بواسطة ‎(CACNALA)‏ ويروتين رابط ‎TATA‏ وجديلة مقابلة لأنتاكسين ‎A Ataxin‏ والمعروفة أيضاً بأنها 877481805 وصورة متماثلة من بيتا 8 لوحدة فرعية خاصة بالانتظام ‎2A‏ ‏00 كيلو دالتون من سيرين /ثريونين -بروتين فوسفاتاز ‎Serine /threonine—protein‏ 6 في الرنح النخاعي المخيخي (من ‎poll‏ ف ت تت ‎CVV OY AV‏ 0 1/141 (تنكس عقلي ل 7 ضعيف من النوع ‎)١‏ في متلازمة ‎X‏ ضعيفة» 71/141 (ارتداد عقلي في ‎X‏ ضعيفة من ‎)١‏ في ارتعاش مرتبط ب ‎X‏ الهشة/ متلازمة رنح» ‎FMRI‏ (تخلف عقلي ل ‎X‏ ‏هش ‎(Y‏ أو عضو عائلة من ‎١ AF4/FMR2‏ في تخلف عقلي هش ل ‎XE‏ ميوتونين - بروتين كيناز ‎(MT-PK) Myotonin—protein ~~ kinase‏ في ‎Ha Jaa‏ عَضَلِي ‎myotonic‏ ‎dystrophy‏ ¢ فراتاكسين ‎Frataxin‏ في رنح ‎Friedreich’s ataxia‏ ؛ وناتج تطفير من جين دسميوتاز سوير أوكسيد ‎١ superoxide dismutase‏ (5001 ) في التصلب الجانبي للضمور العضلي ‎amyotrophic lateral sclerosis‏ ؛ الجين المتضمن في أسباب مرض باركنسون ‎Parkinson’s disease‏ و/أو مرض الزهايمر ‎Alzheimer’s disease‏ أو صميم البروتين الشحمي ‎(APOB) 8 apolipoprotein‏ وكونفيرتاز بروتين أولي سوتيليسين /كيكسين ‎subtilisin /kexin‏ من النوع 05149(9) وفرط كوليستيرول الدم ‎hypercoloesterolemia‏ ¢ ‎(HIV 186 20‏ ومنشط تشاكي لفيرو نقص المناعة البشرية ‎human immunodeficiency virus‏ ‎(transactivator‏ جين انتساخ ‎gene‏ 1805010000 في عدوى لالت ‎HIV TAR‏ ‎(pag (HIV TAR‏ عنصر الاستجابة المنشط التشابكي لفيرو نقص المناعة البشرية في عدوى ‎HIV‏ ؛ مستقبل كيموكين ‎(CCRS) 0-0 chemokine‏ في عدوى ‎HIV‏ ؛ وبروتين فيروس نيوكليوكاسباز لساركوما ‎(RSV) Rous sarcoma virus‏ في عدوى ‎RNA (RSV‏ دقيق ‎(MIR-122) 5‏ خاصة بالكبد في عدوى فيروس التهاب الكبد © ؛ و 053 إصابة الكلية الحادة أو ناقل خاص بالكلية في وظيفة كلية مطعمة متأخرة أو فشل كلوي حاد ناتج عن إصابة الكلية؛ كيناز
TIN
-١١-
بروتين ‎(PKN3) N3‏ في سرطان خبيث صلب انتشاري أو ارتدادي متطور؛ ‎LMP2 (LMP2‏
والتي تكون معروفة في شكل وحدة فرعية لبروتياسوم بيتا ‎proteasome subunit beta‏ من
النوع 4 (9 ‎(PSMB‏ والورم الميلانيني النقيلي ‎metastatic melanoma‏ ؛ ‎LMP7‏ والتي
تكون معروفة في شكل وحدة فرعية من بروتياسوم ‎proteasome‏ من بيتا من النوع ‎PSMB ( A‏
8؛ الورم الميلانيني الانتشاري ‎metastatic melanoma‏ ؛ تكون 1/5011 ‎Lad‏ معروفة في شكل وحدة فرعية من البروتياسوم من النوع ‎(PSMB 10( ٠١‏ والورم الميلانيني الانتشاري؛
عامل نمو بطاني وعائي ‎(VEGF) vascular endothelial growth factor‏ في أورام صلبة؛ بروتين مغزلي من الكينيسين ‎kinesin‏ في أورام صلبة وكابت موت مبرمج من الخلية ‎CLL‏ 8 /
chronic myeloid Bala ‏في لوكيما نشوانية‎ (BCL-2) lymphoma ‏الورم اللمفاوي‎
‎leukemia 0‏ ¢ ريداكتاز نيوكليوتيد ريبوزي ‎(RRM2) M2 ribonucleotide reductase‏ في أورام صلبة ‎solid tumors‏ ؛ وفيورين ‎Furin‏ في أورام صلبة؛ وكيناز ‎kinase‏ مشابه لبولو
‎(PLKT) ١ polo‏ في أورام الكبد ‎liver tumors‏ وداي أسيل جليسيرول أسيل ترانسفيراز ‎١ diacylglycerol acyltransferase‏ (06811) في عدوى التهاب الكبد ‎hepatitis C C‏ ‎infection‏ بيتا-كاتينين 05618-02816010 في داء سلاسل ورمي غدي عائلي ‎familial‏
‎adenomatous polyposis 5‏ ¢ مستقبل بيتا ‎beta? adrenergic receptor Hal Y‏ « الجلوكوما ‎glaucoma‏ ¢ و ‎RTP801/Redd]‏ المعروفة في بروتين ناتج انتساخ 4 قابل للحث
‏في تلف ‎DAN‏ في وذمة بقعية سكرية 060108 ‎(DMO) diabetic macular‏ أو ضمور بقعي مرتبط بالسن؛ ومستقبل عامل نمو بطاني وعائي ‎vascular endothelial growth factor‏ ‎(VEGFRI) | receptor‏ في ضمور بقعي مرتبط بالسن أو التوعي المشيمي؛ كاسباز
‎caspase 0‏ "في اعتلال أعصاب عيني إقفاري غير شرياني ‎non-arteritic ischaemic‏ ‎Optic neuropathy‏ ؛ بروتين ناتج عودة الارتباط 11716 ‎6A‏ من الكيراتين ‎Keratin‏ في ‎GAS‏
‏أظفار ‎ala‏ جينوم فيروس ‎A‏ من الأنفلونزا ‎[influenza‏ متواليات جين في عدوى الأنفلونزا؛
‏جينوم فيروس كورونا متلازمة تنافسية ‎sla‏ شديدة ‎severe acute respiratory syndrome‏ ‎[(SARS)‏ متواليات جينية في عدوى ‎SARS‏ ؛ جينوم فيروس مخلوي تنفسي/ متواليات جين في
‏5 عدوى فيروس مخلوي تنفسي» جينوم فيروسي من ‎Ebola filo‏ / متوالية الجين في عدوى ‎Ebola‏ ‏؛ والتهاب الكبد ‎B‏ وجينوم فيروس © / متواليات الجين في التهاب الكبد 8 وعدوى ‎C‏ ؛ وجينوم
‎TIN
-؟١-‏ فيروس الحلا البسيط ‎herpes simplex virus‏ (/151١)/متواليات‏ جين في عدوى ‎(HSV‏ وجينوم فيروس كُوكساكيّة إيه 83 / متواليات جين في فيروس كُوكساكِيّة 83 ؛ الإخماد الخاص بأليل ممرض من الجين (الإخماد الخاص بالأليل ‎(allele-specific silencing‏ مشابه لتيروسين ‎like‏ ‎(TOR1A) A torsin‏ في أليل ‎١‏ و ‎HLA‏ من الفئة ‎١ pan‏ في ناتج انتساخ وجين ناتج انتساخ من رودوسين 96806 ‎(RHO)rhodopsin‏ في التهاب شبكية صباغي موروث سائد متعلق بالصبغة الجسدية ‎(ARP)‏ أو حمض نووي مثبط يرتبط بناتج انتساخ من أي جينات خارجية أو متواليات. تشتمل نواقل ‎AAV‏ ناتجة ‎sage‏ الارتباط خاصة بالاختراع و نواقل 474ا-/اهل/ظ ونواقل متعلقة ب ‎AAV‏ مثل صور متغيرة لناقل 4074]-/اهل/ ‎Jie‏ جسيمات صور متغيرة من كابسيد (على سبيل المثال» ‎(RHM4-T‏ التي تشتمل على ‎Jib‏ جينوم ‎AAV‏ نات عودة الارتباط والذي يشتمل على عناصر إضافية والتي تعمل في سيس أو في ترانس. في نماذج معينة؛ فإن ناقل فيروسي ناتج عودة الارتباط ‎le)‏ سبيل المثال» ‎(AAV‏ و/أو ناقل ‎AAV-RhT74‏ أو ناقل ‎AAV‏ ذي ‎ila‏ ‏مثل الصور المتغيرة من جسيم 14074-/01/ (كابسيد) (مثل 4111/4-1) التي ‎dads‏ على جينوم ناقل ‎AAV‏ ناتج ‎sage‏ الارتباط (تمت كبسلته؛ تمت تغلفته) والذي يكون به أيضاً: واحد أو 5 أكثر من المتواليات المتكررة ‎(ITR) inverted terminal repeat‏ المعكوسة الطرفية التي تحيط بالطرف 0 ” أو ؟ ” من متوالية بولي نيوكليوتيد غي رمتجانس؛ ومتوالية عينة مقارنة خاصة بالتعبير التي تقوم بدفع الانتساخ الخاص بمتوالية بولي نيوكليوتيد غير متجانسة (على سبيل ‎(JB‏ معزز أو محسن والذي يسهم في انتساخ متوالية بولي نيوكليوتد غير متجانسة مثل عناصر تحكم خاصة الانتظام أو عناصر تأسيسية أو عنصر تحكم في التعبير خاص بنسيج)؛ متوالية 0 بولي أدينين موجودة عند ؟ ” من متوالية بولي نيوكليوتيد غير متجانسة؛ ومرقم قابل للاختيار (على سبيل المثال؛ بروتين يوفر مقاومة خاصة بمضاد حيوي مثل مقاومة كاناميسين ‎Kanamycin‏ )؛ و/أو أصل الانتساخ. يمكن أن تشتمل نواقل ‎AAV‏ ناتجة عودة الارتباط من الاختراع ونواقل ‎AAV-RhT4‏ ونواقل ‎AAV‏ ذات الصلة مثل الصور المتغيرة من ‎AAV-RIT‏ التي بها جسيمات صورة متغيرة من 5 الكابسيد (على سبيل المثال» ‎(RHM4-1‏ التي تشتمل على جينوم ناقل ‎AAV‏ ناتج ‎sage‏ الارتباط ‎TIN‏ yw ‏(مكبسل؛ تمت تعبئته) والذي يمكن أن يشتمل على عناصر إضافية. في أحد النماذج؛ يشتمل‎ ‏الجينوم الناقل ناتج عودة الارتابط على متوالية بولي نيوكليوتيد غير متجانسة ومادة ملء أو‎ ‏متوالقي بولي نيوكليوتيد لمادة حشو. في سمات معينة؛ يكون لمتوالية البولي نيوكليوتيد غير‎ ‏كيلو قاعدة . في سمات إضافية يكون لمتوالية البولي‎ EY ‏المتجانس طول أقل من حوالي‎ ‏نيوكليوتيد غير المتجانسة طول أقل من 4,7 كيلو قاعدة ويتم تثبيته بداخل متواليات فيروس مرتبط‎ 5 ‏في سمات معينة إضافية؛ يكون لمادة الملء أو متوالية نيوكليوتيد لمادة‎ . (AAV) 11“ ‏بالغدة‎ ‏حشو طول بحيث أنه عندما يتم دمجها مع متوالية بولي نيوكليوتيد غير متجانس يكون الطول‎ ‏الإجمال الخاص بمتوالية بولي نيوكيوتيد غير متجانسة ومادة الملء ومتالية البولي نيوكليوتيد‎ ‏كيلو قاعدة أو‎ 5,٠- £0 ‏الخاصة بمادة الحشو بين حوالي 0,5-7,0 كيلو قاعدة أو بين حوالي‎ . ‏كيلو قاعدة‎ E AE ‏بين حوالي‎ 0 ‏يمكن أن توجد متوالية مادة الملء أو متوالية بولي نيوكليوتيد لمادة الحشو في متوالية ناقل عند أي‎ ‏موضع مطلوب بحيث أنها لا تمنع الوظيةف أو التنشيط الخاص بالناقل. في واحدة من السمات لا‎ ‏التي‎ ١1# ‏يتم تثبيت مادة الملء أو متوالية بولي نيوكليوتيد لمادة الحشو بين *” و/أو ؟” من‎ ‏تحيط بالأطراف من 70 و/أو ؟” من متوالية بولي نيوكليوتيد غير المتجانس. في سمة أخرى؛ يتم‎ ‏الحشو بداخل #” و/أو ؟” من “11 التي تحيط‎ sale ‏الملء أو‎ ale ‏تثثبيت متوالية نيوكليوتيد من‎ 5 ‏من متوالية البولي نيوكليوتيد غير المتجانسة. في‎ ITR ‏بالأطراف ذات الصلة من #” و/أو ؟” من‎ "5 ‏الملء أو مادة الحشو على نحو مجاور ل‎ sald ‏سمة إضافية؛ يتم تثبيت متوالية بولي نيوكليوتيد‎ ‏ذات الصلة من متوالية بولي‎ ITR ‏من‎ ”* lf 570 ‏التي تحيط بالأطراف‎ ١1 ‏و/أو *” من‎ ‏نيوكليوتيد غير متجانسة. في سمة إضافية يتم تثبيت مادة الملء أو متوالية البولي نيوكليوتيد‎ ‏غير متجانسة بالنسبة لإنترون‎ (JU ‏بداخل متوالية بولي نيوكليوتيد غير متجانس؛ على سبيل‎ 0 ‏بداخل حمض نووي جينومي.‎ ‏ونتيجة لذلك؛ وفي العديد من النماذج؛ يتم تثبيت مادة الملء أو متوالية بولي نيوكليوتيد لمادة حشو‎ (AAV) adeno-associated ‏يتم تثبيتها بداخل اثنين من متواليات‎ Allg ‏؛‎ AAV 1114 ‏بمتوالية‎ ‎(AAV) ‏من فيروس مرتبط بالغدة؛ أو يتم التثبيت إلى الخارج من اثنين من متواليات‎ Virus ITR ‏فيروس مرتبط بالغدة او هناك اثنين من متوليات بولي نيوكليوتيد لمادة ملء أو مادة حشو؛‎ ١1# 5 ye ‏أو متوالية بولي نيوكليوتيد لمادة ملء أولى أو متولية بولي نيوكليوتيد لمادة حشو تم تثبتيها بداخل‎ ‏مرتبطة بالغدة ومادة ملء ثانية أو متوالية بولي نيوكلويتيد خاصة‎ (AAV) ITR ‏أثنين من متواليات‎ (AAV) ١14 ‏مادة الملء أو مادة الحشو يتم تثبيتها إلى الخارج من اثنين من متواليات فيروس‎ ‏مرتبط بالغدة.‎
في سمات أكثر خصوصية؛ يكون لمتوالية مادة الملء أو متوالية بولي نيوكليوتيد لمادة الحشو طول عندما يتم دمجه مع متوالية البولي نيوكليوتيد غير المتجانس المذكورة بحيث يكون الطول المجمج الكامل من متوالية بولي نيوكلويتيد غير متجانس أو متوالية مادة ملء أو متوالية بولي نيوكليوتيد لمادة حشو بين حوالي 5-7,0 كيلو قاعدة أو بين حوالي 5,0 - ‎5,٠‏ كيلو قاعدة أو بين حوالي ,5,8 كيلو قاعدة عندما يتم التثبيت بداخل متواليات فيروس مرتبط بالغدة ‎(AAV) ١114‏ . في
0 سمات معينة أخرى أيضاً يكون لمتوالية مادة الملء أو متوالية بولي نيوكليوتيد لمادة الحشو طول أعلى من ‎EY‏ كيلو قاعدة أو بين حوالي ‎٠١- 5,٠‏ كيلو قاعدة أو بين حوالي 76.0 = ‎SSA‏ ‏قاعدة؛ عندما يتم التثبيت إلى الخارج من اثنين من فيروسات مرتبط مع الصورة الغدية من متواليات ‎(AAV) ITR‏ في سمات إضافية متنوعة؛ تكون مادة ملء أو متوالية بولي نيوكليوتيد لمادة حشو عبارة عن
5 متوالية بين حوالي ‎em)‏ ناجيت ‎(FeV‏ باأحيى جيم ‎lemon‏ لتحملا عل ل لف ا أرب نالف نات اب الف د ف لنب لف ب لات الف د ب الند ا نت لان اجن ف لبن ا لضا ‎(Yo.‏ ا لاست د اللا نب سد د للف الا سناد الل ا ب لاست ب لف دا اف 2 لف دن الف عااف أ اجافس كن ان لسن حاكن أ ات سد ا اح الات اا د ان الا ا ‎Van‏ ...لاح ءا أو ‎10-6٠١‏ من النيوكليوتيدات في الطول.
0 وعلى نحو نمطي؛ تكون مادة الملء أو متوالية البولي نيوكليوتيد من مادة الحشو ‎Ble‏ عن مادة خاملة أو مادة مناسبة ومادة لا يكون لها نشاط. في سمات معينة متعددة؛ تكون متوالية البولي نيوكليوتيد الخاصة بالحشو ليست متوالية بولي نيوكليوتيد بكتيرية؛ أمادة مالء أو متوالية بولي نيوكليوتيد لمادة حشو والتي لا تكون متوالية التي تشفر بروتين أو ببتيد أو مادة ملء أو متوالية بولي نيو كليوتيد لمادة حشو ولاتي تكون عبارة عن متوالية متمايزة عن أي من: متوالية بولي
-١ع-‎
نيوكليوتيد غير متجانسة ومتوالية تكرار طرفي عكسية من ‎(ITR) AAV‏ وعنصر تعبير خاص
بالتحكم في التعبير وأصل الانتساخ ومرقم قابل للانتقاء ومتوالية بولي أدينين (بولي - ‎(A‏
في سمات معينة إضافية متعددة؛ فإن مادة الملء أو متوالية البولي نيوكليوتيد لمادة الحشو تكون
عبارة عن متوالية إنترون والتي تكون متعلقة ب أو غير متعلقة بمتوالية بولي نيوكليوتيد غير
متجانسة. في سمات معينة؛ يتم تثبيت متوالية الإنترون بداخل متوالية بولي نيوكيوتليد غير
متجانسة. في سمات أخرى؛ تتعلق متوالية الإنترون بمتوالية بولي نيوكليوتيد غير متجانسة مثل
الإنترون والتي تكون في ‎DNA‏ جينومية؛ مثل ‎DNA‏ جينومية التي تشفر بروتين حيث يتم تشفير
البروتين أيضاً بواسطة متوالقي بولي نيوكليوتيد غير متجانسة.
يمكن تضمين نواقل ‎AAV‏ ناتجة ‎sage‏ الارتباط و 474]-/اه/ل ونواقل ‎AAV‏ ذات الصلة ‎Jie‏ ‏0 الصور المتغيرة من 874-/81/ ‎Jie‏ صورة متغيرة من جسيمات كابسيد (على سبيل المثال؛
‎(RHM4-1‏ التي تشتمل على ناقل جينوم ‎AAV‏ بداخل الخلايا. في مثل تلك النماذج؛ يمكن أن
‏تشتمل الخلايا على خلايا مساعد تم تحللها لكي تنتج جسيمات فيروس ‎(AAV)‏ (على سبيل
‏المثال» نواقل ‎AAV-Rh74‏ أو نواقل ‎AAV‏ ذات الصلة ‎Je‏ صور متغيرة من كابسيد ‎AAV-‏
‏4 (على سبيل ‎(JL)‏ 4111/4-1)) أو خلايا مستهدفة والتي تكون مطلوية للتعبير عن 5 متوالية بولي نيوكليوتيد غير متجانسة.
‏تشتمل نواقل ‎AAV‏ ناتجة عودة الارتباط ونواقل ‎AAV-Rh74‏ والنواقل ذات الصلة ‎AAV‏ مثل
‏الصور المتغيرة من ‎AAV-RhT4‏ (على سبيل ‎(JU‏ صورة متغيرة من جسيمات الكابسيد ‎Jie‏
‎(RHM4-1‏ التي تشتمل على جينوم ناقل عودة الارتباط من ‎AAV‏ والذي يمكن تضمينه بداخل
‏التركيبات الصيدلانية. تكون تلك التركيبات مفيدة للإعطاء فيما يتعلق بناقل ناتج عودة الارتباط 0 (على سبيل ‎(AAV (Jia)‏ وجسيمات فيروس مثل نواقل 474/-/1ل/ل ونواقل ‎AAV‏ ذات الصلة
‎Jie ‏صور متغيرة من الكابسيد‎ (JUN ‏صور متغيرة من 874-/81/ (على سبيل‎ Jie
‎RHM4-1‏ ) التي تشتمل على جينومات ناقل ناتج ‎sage‏ الارتباط (مكبسل أو تمت تعبئته) (على
‏سبيل ‎(AAV (Jl)‏ لخاضع.
yi ‏ذات الصلة‎ AAV ‏ونواقل‎ AAV-Rh74 ‏الارتباط ونواقل‎ sage ‏ناتجة‎ AAV ‏يمكن استخدام نواقل‎
Jie ‏صور متغيرة من الكابسيد‎ (JUL ‏مثل جسيمات صور متغيرة من 4074ا-/اهل/ (على سبيل‎ ‏ناتج عودة الارتباط (مكبسل؛ مغلف) في العديد‎ AAV ‏التي تشتمل على جينوم ناقل‎ (RHM4-1 ‏من الطرق والاستخدامات. ونتيجة لذلك؛ تم توفير طرق واستخدامات لتوصيل أو نقل متوالية بولي‎ ‏ثديي أو خلية من ثديي.‎ Jie ‏نيوكليوتيد ناتج عودة الارتباط بداخل كائ حي أو خلية‎ 5 (AAV) ‏في أحد النماذج؛ تشتمل الطريقة أو الاستخدام على إعطاء ناقل فيروس مرتبط بالغدة‎ ‏والذي يشتمل على جسيم متوالية بولي نيوكليوتيد غير متجانس (على سبيل المثال؛ من خلال ناقل‎ ‏(على سبيل المثال؛‎ ) AAV-RhT4 ‏ذي صلة مثل الصور المتغيرة من‎ AAV ‏أو‎ AAV-RNT74 ‏الذي به جينوم ناقل (مغلف أو معباً) لثديي أو خلية‎ )) RHMA=T Jie ‏صور متغيرة من كابسيد‎ 0 من الثديي تحت ظرو مناسبة لتوصيل أو نقل متوالية بولي نيوكليوتيد غير متجانسة بداخل ثديي أو خلية من الثديي. في واحدة من السمات؛ تسمح الطريقة أو الاستخدام بنقل / توصيل بولي نيوكليوتيد غير متجانس بداخل الثديي و/أو الخلية. في سمات ‎(gyal‏ تسمح الطريقة بنقل / توصيل البولي نيوكليوتيد غير املتجانس إلى الثديي و/أو الخلية وبعد ذلك الانتساخ الخاص بالبولي نيوكليوتيد غير املتجانس وبالتالي تشكيل ناتج انتساخ. في سمة إضافية؛ تسمح الطريقة بنقل /توصيل بولي نيوكليوتيد غير متجانس بداخل الخلية؛ ويالتالي الانتساخ لتشكيل ناتج انتساخ وبعد ذلك الترجمة التالية لتشكيل منتج جين (بروتين). وعلى نحو خاص على سبيل المثال؛ في اثنين من السمات التالية متوالية بولي نيوكليوتيد غير متجانسة والتي ترتبط بشكل تشغيل مع التعبير عن عنصر تحكم خاص بالتعبير وتمنح انتساخ خاص بمتوالية بولي نيوكليوتيد غير متجانسة والتي تكون لها ترجمة تالية اختياريه خاصة بناتج الانتساخ. 0 في نماذج إضافية؛ تكون الطريقة أو الاستخدام خاص بتوصيل أو نقل العدوى إلى متوالية بولي نيوكليوتيد غير متجانس بداخل خاضع (على سبيل المثال؛ ثديي) أو خلية من خاضع (على سبيل المتال» ثديي) وتشتمل على الإعطاء لفيروس ‎(Ae)‏ سبيل المثال؛ 074-/الم أى ‎AAV‏ ذات صلة مثل صور متغيرة من كابسيد 8074-/51/ (على سبيل المثال» 111/4-1))؛ جسيم أو مجموعة من الجسيمات الفيروسية (على سبيل ‎(AAV (JU‏ أو تركيبة صيدلانية من الصور 5 المتغيرة الفيروسية (على سبيل المثال» ‎AAV-RhT74‏ أو ‎AAV‏ ذات الصلة مثل الصور المتغيرة
“yy
من كابسيد ‎AAV-RhT74‏ (مثل ‎RHM4-1‏ )) أو مجموعة من الجسيمات الفيروسية المذكورة (على سبيل المثال؛ ‎(AAV‏ لخاضع ‎Ao)‏ سبيل المثال ثديي) أو خلية من الخاضع ‎Ao)‏ سبيل المثال» ثديي) وبالتالي توصيل أو نقل العدوى لمتوالية بولي نيوكليوتيد غير متجانسة في الخاضع (على سبيل المثال؛ ثديي) أو خلية من الخاضع (على سبيل المثال؛ ثديي). في نموذج ‎AT‏ تكون الطريقة أو الاستخدام خاصة بمعالجة خاضع (على سبيل المثال؛ ثديي) به نقص أو في حاجة للتعبير عن البروتين أو وظيفة أو حاجة خاصة بالتعبير المنخفض أو وظيفة خاصة ببروتين داخلي (على سبيل المثال» بروتين به اختلال وظيفي غير مرغوب أو غير منتظم ) وتشتمل الطريقة على توفير الصور المتغيرة الفيروسية (على سبيل المثال» ‎AAV-RNTE‏ و ‎AAV‏ مرتبطة مثل الصور المتغيرة من جسيم 8074-/81// ‎Ae)‏ سبيل المثال صور متغيرة من الكابسيد مثل ‎(RHM4-1 0‏ ومجموعة جسيمات فيروسية مذكورة (على سبيل المثال» ‎(AAV‏ أو تركيبة صيدلانية من جسيم فيروسي (على سبيل المثال»؛ ‎AAV-RhT4‏ و ‎AAV‏ ذي صلة ‎Jie‏ صور متغيرة من جسيم 54074-/81 ‎Ae)‏ سبيل المثال» صور متغيرة من الكابسيد ‎Jie‏ 11004-1)) أو مجموعة من جسيمات فيروسية (على سبيل ‎(AAV (JU)‏ ويتم الإعطاء لجسيم فيروسي (على سبيل المثال» 474|-/اهلظ و ‎AAV‏ ذي الصلة ‎Jie‏ الصور المتغيرة من ‎AAV-RhT4‏ (على 5 سببيل ‎(JU)‏ الصور المتغيرة من الكابسيد مثل 11/4-1!)) ومجموعة من جسيمات فيروسية (على سبيل ‎(AAV (JU)‏ أو تركيبة صيدلانية من جسيم فيروسي (على سبيل المثال؛ ‎AAV=‏ ‏4 و ‎AAV‏ ذي الصلة ‎Jie‏ الصور المتغيرة من 4074-/2281 ) (على سبيل ‎JU)‏ صور متغيرة من الكابسيد مثل ‎(RHMA=T‏ أو مجموعة الجسيمات الفيروسية (على سبيل المثال؛ ‎(AAV‏ لخاضع (على سبيل المثال؛ ثديي) حيث أن متوالية ‎oll‏ نيوكليوتيد غير المتجانسة يتم 0 اتعبير عنها في ثديي أو حيث أن متوالية البولي نيوكليوتيد غير المتجانسة تشفر متوالية متبط أو بروتين الذي يقلل التعبير أو الوظيفة الخاصة ببروتين داخلية ‎(Ae)‏ سبيل المثال؛ بروتين به ‎Daal‏ في الوظيفة أو غير منتظم أو به وظيفة غير مطلوبة) في خاضع (على سبيل المثال؛
ثديي). تشتمل الطرق والاستخدامات الخاصة بالإعطاء أو التوصيل على أي طريقة متوافقة مع الخاضع. 5 في نماذج معينة؛ يتم إعطاء جسيم فيروسي (على سبيل ‎AAV-Rh74 (JU‏ أى ‎AAV‏ ني
A= ‏مجموعة‎ (RHMA=1 ‏(على سبيل المثال»‎ (AAV-RIT4 ‏الصلة مثل صورة متغيرة من كابسيد‎
AAV-RhT74 ‏على سبيل المثال؛ نواقل‎ ( (AAV ‏من الجسيمات الفيروسية (على سبيل المثال؛‎ ‏متعلقة مثل صور متغيرة من كابسيد 474-/21 (على سبيل المثال؛‎ AAV ‏أو نواقل‎ ‏أو يتم التوصيل من خلال الوريد أو في الشريان أو بداخل العضلات أو تحت الجلد‎ (RHM4-1 ‏أو في الفم أو من خلال إدخال أنبوب في عضو أجوف أو من خلال قثطرة أو في الجلد أو بداخل‎ 5 ‏الجمجمة أو من خلال الاستنشاق أو بداخل فجوة أو بداخل الغشاء المخاطي.‎ ‏يشتمل الخاضعين على ثدييات مثل البشر والكائنات غير البشرية (مثل الرئيسيات). في نماذج‎ ‏معينة سوف يستفيد الخاضع من أو يكون في حاجة للتعبير عن متوالية بولي نيوكليوتيد غير‎ (AAV ‏للاختراع تم توفير طرق خاصة بإنتاج بلازميدات ناقل (على سبيل المثال؛‎ Laks 0 ‏الصور المتغيرة‎ Jie ‏ذي الصلة‎ AAV ‏و‎ AAV-RI74 ‏وجسيمات فيروس (على سبيل المثال»‎ ‏التي تشتمل‎ ))4111/4-1 Jie ‏صور متغيرة من كابسيد‎ «Jill ‏سبيل‎ Ae) ‏من 4074-/ا8//‎ ‏الارتباط (تمت كبسلته؛ تغليفه) (على سبيل المثال؛ /اهل ). في أحد النماذج‎ sage ‏على ناقل ناتج‎ ‏على الإدخال في‎ AAV ‏تشتمل طريقة إنتاج جسيمات فيروسية ناتجة عودة الارتباط أو جسيمات‎ ‏لإنتاج‎ (AAV ‏خلية مساعدة خاصة بالتعبئة وبلازميد ناقل ناتج عودة الارتباط (على سبيل المثال؛‎ 5 ‏ذات الصلة مثل‎ AAV ‏و‎ AAV-RIT4 ‏عدوى صور متغيرة فيروسية تكاثرية (على سبيل المثال‎ ‏وزراعة‎ (RHMA=1 Jie ‏صور متيغرة من 474-/21// (على سبيل صور متغيرة من الكابسيد‎ ‏خلايا مساعد تحت ظروف لإنتاج جسيمات صور متغيرة من كابسيد فيروسي ناتج عودة الارتباط‎ ‏الصور المتغيرة من كابسيد -/اهم‎ Jie ‏ذي صلة‎ AAV ‏أو‎ AAV-RhT74 ‏(على سبيل المثال»‎ ‏في نموذج آخرء تشتمل طريقة إنتاج الجسيمات‎ (RHMA-T ‏(على سبيل المثال»‎ ) 8074 20 ‏مع كميات متناقصة من جسيمات فيروسية‎ AAV ‏الفيروسية ناتجة عودة الارتباط أو جسيمات‎ ‏ذات الصلة مثل الصور المتغيرة‎ AAV ‏و‎ AAV-RhT74 Jal ‏ناتجة عودة الارتباط (على سبيل‎ ‏والتي يكون‎ (RHMA-T Jie ‏(على سبيل المثال» صور متغيرة من كابسيد‎ AAV-RIT4 ‏من‎ ‏بها ناقل فيروسي ناتج عودة الارتباط به حمض نووي ملوث؛ على الإدخال بداخل بلازميد الناقل‎ ‏وزراعة خلايا‎ (AAV ‏ناتج عودة الارتباط من خلايا المساعد الخاص بالحشو (على سبيل المثال»‎ 5
-١4- ‏سبيل المثال؛ صور متغيرة من‎ (Ae) ‏الارتباط‎ sage ‏المساعد تحت ظروف لإنتاج فيروس ناتج‎ ‏(على سبيل‎ AAV-RIT74 ‏ذي صلة مثل صور متغيرة من جسيمات‎ AAV ‏و‎ AAV-Rh74 ‏حيث أن جسيمات الصور المتغيرة الفيروسية‎ ))111/4-1 Jie ‏صور متغيرة من كابسيد‎ Jal) ‏ذات الصلة مثل الصور المتغيرة‎ AAV ‏و‎ /81/-8874 (Jal ‏ناتجة عودة الارتباط (على سبيل‎ ‏المنتجة‎ )) RHM4-1)) Jie ‏من 874-/ا08 (على سبيل المثال». صور متغيرة من كاسبيد‎ 5 ‏ني‎ AAV ‏ى‎ AAV-RIT4 ‏يكون بها عدد منخفض من جسيمات فيروسية (على سبيل المثال؛‎ ‏الصلة مثل الصور المتغيرة من 8174-/21/ (على سبيل المثال؛ جسيمات من صور متغيرة من‎ ‏مع جينوم ناقل ناتج عودة الارتباط التي تشتمل على حمض نووي ناتج‎ (RHM4=1 ‏كاسبيد مثل‎
AAV-RhT74 ‏عودة الارتباط بالمقارنة مع الأعداد من جسيمات صور متغيرة فيروسية (على سبيل‎ ‏صور‎ «JU ‏و لاهلظ ذي صلة مثل جسيمات صور متغيرة من 874-/0/21 ) (على سبيل‎ 0 ‏عودة الارتباط تم إنتاجه‎ mili ‏التي تشتمل على حمض نووي‎ (RHMA-T Jie ‏متغيرة من كاسبيد‎ ‏تحت ظروف يكون بها مادة ملء أو متوالية بولي نيوكليوتيد لمادة حشو والتي لا تكون موجودة في‎ ‏ناقل فيروسي ناتج عودة الارتباط. في سمات معينة فإن الحمض النووي ناتج عودة الارتباط يكون‎ ‏عبارة عن حمض نووي بكتيري أو متواليات خلاف متوالية البولي نيوكليوتيد غير المتجانس أو‎ . ‏أو مرقم قابل للانتقاء‎ A - ‏أو معزز أو محسن أو أصل انتساخ لمتوالية أدينين بولي‎ ١11+ 5 ‏تشتمل خلايا المساعد على خلايا ثديية. في نماذج معينة؛ توفر خلية مساعد على وظائف مساعد‎ ‏(على سبيل المثال» /ل//) لكي يتم تعبئة متوالية البولي نيوكليوتيد غير المتجانسة بداخل جسيم‎ ‏الصور المتغيرة‎ Jie AAV ‏ونواقل‎ AAV-RNTS Jie AAV ‏فيروسي ( على سبيل المثال» جسيم‎ ‏في سمات‎ (RHMA-1 ‏سبيل المثال» صور متغيرة من كابسيد مثل‎ Ae) AAV-RNT4 ‏من‎ ‏و/أو‎ Rep78 ‏سبيل المثال»‎ Ae) Cap ‏بروتينات‎ ifs AAV Rep ‏خلية المساعد‎ jig ‏معينة؛‎ 20 ‏تكون ثابتة أو يتم نقل العدوى بها من البولي نيوكليوتيد‎ Ally ‏بروتينات 48068 (¢ وخلية مساعد‎ ‏؛ تكون خلية المساعد‎ CaP ‏و/أو متوالية (متواليات بروتين‎ Rep ‏(البولي نيوكليوتيدات) المشفرة ل‎ ‏ثابتة أو تنقل العدوى باستخدام 6078>او/أو بولي نيوكليوتيد بروتين 46068 يشفر المتوالية‎ ‏(المتواليات).‎
Cy. ‏على‎ (AAV ‏يمكن أن تعتمد بلازميدات الناقل ناتج عودة الارتباط من الاختراع (على سبيل المثال»‎ ‏أي سلسلة أو نوع مصلي والذي يشتمل على الصور الهجينية أو الصور الخيمرية من أنواع مصلية‎ (AAV ‏مختلفة. تكون الجسيمات الفيروسية ناتجة عودة الارتباط من الاختراع (على سبيل المثال؛‎ ‏الصلة مل 74-/اطط ى اط‎ (3 AAV ‏أى‎ AAV-Rh74 ‏بشكل نمطي معتمدة على‎ ‏صور متغيرة من الكابسيد‎ (Jl ‏المتعلقة بها مثل الصور المتغيرة من 4074-/21// (على سبيل‎ 5 ‏ولكنها تشتمل أيضاً على مواد مهجنة أو مواد خيمرية مع أنواع مصلية مختلفة.‎ (RHM4-1 Jie ‏التمثيلية؛ على سبيل المثال لا الحصر على الأنواع المصلية من‎ AAV ‏تشتمل الأنواع المصلية ل‎ ‏10/اطحل‎ AAV9 (AAVS (AAVT (AAV6AAVS (AAV4 AAV3 (AAV2 AAV] ‏والنوع المصلي 4010. ونتيجة لذلك؛ تشتمل جسيمات الفيروس ناتج عودة الارتباط من‎ 1 ‏جينومات ناقل يمكن أن تشتمل على بروتين كابسيد من‎ (AAV ‏على‎ (Jad) ‏سبيل‎ Je) ‏الاختراع‎ 0 ‏أنواع مصلية مختلفة وخليط من الأنواع المصلية أو من مواد مهجنة أو مواد خيمرية من أنواع‎ ‏2/احطى‎ AAV] ‏بروتين كابسيد من‎ VPL, VP2 or VP3 ‏النوع المصلي‎ Jie ‏مصلية مختلفة‎
Rh10 ‏لاط‎ 11 (AAV10 ‏و/اطفل‎ (AAVS ‏لاحطحط‎ 7 (AAV6 AAV5 (AAV4 (AAV3 ‏في شكل نوع مصلي. بالإضافة إلى ذلك؛ يمكن أن تشتمل النواقل ناتجة عودة الارتباط من‎ ‏ومتواليات وبالزميدات وجينومات ناقل على عناصر من أي‎ AAV ‏الاختراع (على سبيل المثال»‎ 5 ‏نوع مصليط أو خليط من الأنواع المصلية أو صور مهجنة أو مواد خيمرية من أنواع مصلية‎
Rep ‏و‎ Cap ‏ناتج عودة الارتباط يشتمل على متوالية‎ AAV ‏مختلفة. في نماذج معينة فإن الناقل‎ ‏6/اطل‎ (AAVS (AAV4 (AAV3 (AAV2 (AAV ‏المشتقة من أنواع مصلية من‎ ITR ‏و/أو‎ ‏أو 010 أو خليط منها أو مادة‎ 474 (AAV11 (AAV10 ‏وناطفل‎ (AAVS (AAVT
AAV ‏نجهة أو مواد خيمرية مما سبق من الأنواع المصلية‎ 0 ‏شرح مختصر للرسومات‎ ‏لكل‎ ٠ =n) ‏في فئران 6/ا6578‎ (FIX) IX ‏مستويات بلازما عامل بشري‎ ١ ‏يوضح الشكل رقم‎ ‏التي تعبير عن جين انتقالي تحت‎ AAV ‏مجموعة) تم حقنها من خلال وريد الذيل مع نواقل من‎ ‏من جينومات الناقل لكل فأر. تم قياس‎ 3,5٠١ ‏تحكم في معزز خاص بالكبد. تكون جرعة الناقل‎
— \ \ — مستويات بلازما منتج الجين الناقل من ‎FIX‏ (بروتين ‎(FIX‏ بواسطة ‎ELISA‏ عند الأسبوع رقم ‎١‏ ‏و7 و؟؛ بعد نقل الجين. تمنح ‎AAV-RIT4‏ مستويات عالية من تعبير عن الجين الناقل ‎FIX‏ ‏يوضح الشكل رقم ؟ مستويات بلازما من ‎FIX‏ في كلاب مصابة بهيموفيليا 8 بعد توصيل جينومات ناقلة ‎7٠7١‏ لكل كيلو جرام ‎(KG)‏ من الوزن. تم تسريب نواقل ‎AAV‏ في الوريد ‎(IV)‏ ‏5 خلال وريد الصفن وتمت مراقبة مستويات ‎FIX‏ بواسطة /5اا. تم اشتقاق التعبير عن الجين ‎Jal‏ من ‎FIX‏ العلاجي بواسطة معزز خاص بالكبد. تم إجراء نواقل ‎AAV‏ ى ‎AAV-Rh74‏ ‏على نحو جيد ‎deg‏ نحو مساو فى كلاب هيموفيليا 8 وكانت كل منها فائقة بالنسبة ل ‎AAVE6‏ ‏يوضح الشكل رقم 7 متواليات 1 ‎AAV-Rh74 VP‏ و 2/ ومتواليات حمض أمينى ‎VP3‏ ‏خاصة ب ‎VP‏ ومتوالية بولى نيوكليوتيد ‎(DNA)‏ (المتواليات أرقام من )87( 0 يوضح الشكل رقم إعطاء ناقل بشري يعبر عن ناقل ‎AAVS‏ و 0/1/0074 من عامل بشري ‎factor IX IX (FIX)‏ (تحت تحكم خاص بمعزز خاص بالكبد) لقرود من المكاك الهندي؛ والرئيسيات غير البشرية والتعبير عن ‎FIX‏ فى الحيوانات. تستقبل الحيوانات نواقل ‎AAVIrhT74-‏ ‎FIX‏ ( الاثنين من القضبان الأخيرة نحو الهامش الأيمن) التي تعبر عن جين انتقالي من ‎FIX‏ عند مستويات عالية للتعبير عن مجموعات أخرى من الحيوانات التي تم حقنها عند نفس الجرعة. يوضح الشكل رقم © مستويات تعبير عامل ‎IX‏ بشري من البلازما في الحيوانات التي تم إعطاؤها ناقل تعبير من ‎IX‏ لعامل بشري ‎AAV‏ تمت كبسلته بواسطة صور متغيرة من ‎AAV‏ موضحة (صور متغيرة من 4074 مثل صورة متغيرة من ‎(RHM4-1‏ بالمقارنة مع ‎RhT74‏ 5 8 /اخلطظط تمت كبلته من ناقل تعبير ‎IX‏ لعامل بشري من ‎AAV‏ مكبسل 5 ‎AAVE‏ ‏يوضح الشكل رقم 1 إعطاء صورة متغيرة من ‎AAVS‏ و ‎AAV- Rh74‏ وناقل صورة متغيرة وأحد الرئيسيات غير البشرة والتعبير عن ‎FIX‏ الحيوانات. الوصف التفصيلي:
AAR
١
يعتمد الاختراع» على الأقل ‎Wie‏ على باينات توضح أن النوع المصلي من فيروس مرتبط ببالغدة ‎(AAV)‏ من نوع 474-/اه/ل والصور المتغيرة من ‎AAV‏ مثل الصور المتغيرة من كابسيد ‎AAV-Rh74‏ على ‎Ju uw‏ المقال ‎RHM15- (RHM15-2 , RHM15-1 (RHM4-1‏
‎RHM15-4 (3/RHM15-5‏ و ‎(RHM15-6‏ يكون لها انتحاء خاص بخلايا كبيدة ولاتي
‏5 تكون عبارة عن ‎LIA‏ من الكبد. وكناقل خاص بالبولي نيوكليوتيد ‎(Ae)‏ سبيل المثال؛ جينات حمض نووي مثبطة؛ إلخ) خلايا ناقل/ خلايا موصلة بداخل الخلية 14074-/51// والصور المتغيرة ذات الصلة ‎AAV‏ مثل الصور المتغيرة من 874-/5// (على سبيل ‎(JU)‏ صور متغيرة من الكابسيد ‎J fie‏ 1044-1 و 415-1الاجاو ‎RHM15-2‏ و ‎RHM15-‏ ‎3/RHM15-5‏ و ‎RHM15-4‏ و ‎(RHM15-6‏ والتي يتم استخدامها لتوفير مستويات علاجية
‏0 من التعبير في الكبد بعد الإعطاء بداخل الوريد. بالإضافة إلى ذلك؛ فإن النواقل ‎AAV-Rh74‏ ‏والصور المتغيرة ذات الصلة ‎Jie AAV‏ الصور المتغيرة من 74-/21// (على سبيل المثال؛ الصور المتغيرة من الكابسيد ‎RHM15-2 sRHM15-1 RHM4-1 (ie‏ و ‎RHM15-‏
‎3/RHM15-5‏ و ‎RHM15-4‏ و ‎RHM15-6‏ ) التي يتوسطها جين ناقل و/أو بروتين تم
‏إنتاجه من مستويات تعبير التي تكون عالية بشكل هام ‎Lad‏ يتعلق بانواع الأمصال الأخرى ‎hil)‏
‏5 على سبيل المثال؛ الأشكال ١ء‏ 7 ‎of‏ © و1). بصفة خاصة فإن الناقل 4074-/21// وجينات مستهدفة من الصور المتغيرة من كابسيد ‎AAV-RhT74‏ الخاصة بالتوصيل إلى الكبد مع فعالية
‏تكون مقارنة على لاأقل وفائقة بشكل نميط بالنسبة لمقياس ذهبي خاص بتقل الإشارة في الكبد؛ 8 وفي الكلاب المصابة بهيموفيليا 8 و/أو في الفئران و/أو قرود المكاك. وبالتالي فإن نواقل ‎AAV-Rh74‏ والصور المتغيرة من ‎AAV‏ ذات الصلة مثل صور متغيرة من الكابسيد ‎AAV-‏
‏0 8074 (على سبيل المشال» 111/4-1) يمكن استخدامها لبولي نيولكيوتيات ناقلة / بولي نيوكليوتيدات توصيل غير متجانسة مثل متواليات التشفير (الجينات) الخاصة بالبروتينات التي
‏توفر فائدة مرغوية أو علاجية وأيضاً وسيلة تثبيط (على سبيل المثال؛ في عكس اتجاه النسخ) من حمض نووي الذي يقلل أو يثبط التعبير عن جين غير مرغوب أو جين معيب (على سبيل المثال مرضي) وبالتالي معالجة العديد من الأمراض. على سبيل المثال؛ فإن الناقل ناتج عودة الارتباط
‏5 (على سبيل المثال؛ الجينوم) يمكن تغليفه أو كبسلته ببداخل ناقل 874-/ا8ه8/ أو صور متغيرة من ‎AAV‏ ذي صلة مثل الصورة المتيغرة من كابسيد 8074-/21/ (على سبيل المثال؛
ار ‎RHM15-4 (RHM15-3/RHM15-5 (RHMI15-2 (RHM15-1 (RHM4-1‏ ‎RHM15-6 4‏ ) لكي يتم نقل [ توصيل البولي نيوكليوتيد غير المتجانس بداخل خلية. وكما تم ذكره هناء يوفر النوع المصلي من فيروس مرتبط بالغدة ‎(AAV)‏ من ‎AAV-RNT74‏ ‏والصور المتعددة من ‎AAV‏ ذات الصلة مثل صور متغيرة من كابسيد ‎AAV-RIT4‏ (على سبيل المنالء ‎RHM15-4 (RHM15-3/RHM15-5 (RHM15-2 (RHM15-1 (RHM4-1‏ و ‎RHM1S-6‏ ) بتوفير وسائل خاصة بتوصيل متواليات بولي نيوكليوتيد بداخل خلايا خارج- الكائن الحي وفي المعمل وفي الكائن الحي. يمكن أن تشفر متواليات البولي نيوكليوتيد المذكورة بروتينات من الخلايا المذكورة والتي تم منها اشتقاقا البولي نيوكليوتيدات لكي تعبر عن البروتينات المشفرة. على سبيل ‎(JU)‏ فإن ناقل ناتج عودة الارتباط من ‎AAV‏ يمكن أن يشتمل على بولي 0 نيوكليوتيد مشفر لبروتين ذي صلة أو ببتيد أو بولي نيوكليوتيد غير متجانس والذي عندما يتم انتساخه فإنه يشتمل على متوالية مثبطة (على سبيل المثال؛ ‎(RNA‏ على سبيل المثال؛ متوالية التي تستهدف جين خاص بتثبيط التعبير. يوفر توصيل الناقل أو الإعطاء الخاص بالخاضع (على سبيل المثال الثديي) بالتالي ليس فقط بولي نيوكليوتيدات غير متجانسة تشفر البروتينات والببتيدات الخاصة بالخاض ولكن أيضاً أحماض نووية مثبطة والتي تستهدف الجينات الخاصة بتثبيط 5 والتعبير عن وظيفة في الخاضع. وبالتالي وطبقاً لنواقل 474]-/81/ل من الاختراع والصور المتغيرة من ناقل ‎AAV‏ ذي الصلة ‎Jie‏ ‏الصور المتغيرة من 874-/81/ ( على سبيل المثال» صور متغيرة من كابسيد؛ ‎Jie‏ -111/4] 1و ‎RHM15-1‏ و ‎RHM15-3/RHM15-5 JRHM15-2‏ و ‎RHM15-4‏ و ‎RHM15-‏ ‎lly ) 6‏ تشتمل على جينوم ناقل (تمت كبسلته أو تعبئته) يتشمل على متواليات بولي نيوكليوتيد 0 تشفر ببتيدات وبروتينات ‎Lady‏ متواليات بولي نيوكليوتيد والتي عندما يتم انتساخها بشكل مباشر أو عندما يتم انتساخها تكون مشتملة على أحماض نووية مثبطة والتي تستهدف جينات خاصة بتثبيت التعبير أو الوظيفة. يتم اشتقاق ‎"UBL‏ ناتج عودة الارتباط أو ‎JB‏ " من جينوم من النوع غير المعالج من فيروس مثل ‎AAV‏ بواسطة استخدام طرق جزيئية لإزالة جينوم من النوع غير المعالج من الفيروس (على سبيل 5 المثال؛ ‎(AAV‏ واستبدال حمض نووي غير اصلي مثل متوالية بولي نيوكليوتيد غير متجانس (على
ا سبيل المثال؛ كاسيت تعبير جيني علاجي). ‎og‏ نحو نمطي؛ وفيما يتلعق ب ‎AAV‏ يكون هناك واحدة أو كل من المتواليات المتكررة الطرفية المعكوسة ‎(ITR) inverted terminal repeat‏ من النوع غير المعالج ‎AAV‏ يتم الحفاظ عليها في ناقل /اظ/. يتم تمييز ناقل فيروس ناتج عودة الارتباط (على سبيل المثال؛ ‎(AAV‏ من جينوم فيروسي (على سبيل ‎(AAV (JU‏ مثل كل أو جزءِ من الجينوم الفيروسي الذي تم استبداله مع متوالية غير أصلية بالنسبة لحمض نووي جينومي فيروسي ( على سبيل ‎(AAV (JU)‏ مثل متوالية بولي نيوكليوتيد غير متجانس. يقوم تضمين المتوالية غير الأصلية مثل البولي نيوكليوتيد غير المتجانس بالتالي بتحديد ناقل فيروسي حيث يمكن الإشارة إلى الناقل (على سبيل المثال» ‎(AAV‏ في شكل ‎JAY‏ 'ناتج ‎age‏ الارتباط" والذي يكون في حالة ‎AAV‏ بأنه " ناقل /أطط".
0 يمكن تعبئة متوالية ناقل ناتج عودة الارتباط (مثل ‎(AAV‏ بداخل فيروس (يطلق عليه أيضاً هنا بأنه 'جسيم” أو 'فيرون") فيما يتعلق العدوى التالية (التحويل العرضي) لخلية؛ خارج الكائن الحي؛ أو في المعمل أو بداخل الكائن الحي. حيث تتم كبسلة متوالية الناقل ناتج عودة الارتباط أو يمكن التغليف في جسيم ‎AAV‏ ويمكن أن يطلق على الجسيم هنا بأنه " ‎TAAV‏ ". سوف تشتمل تلك الجسيمات أو الفيرونات بشكل نمطي على بروتينات والتي تتم كبسلتها أو تغليفها في جينوم ناقل.
5 تشتمل أمثلة محددة على بروتينات مغلفة فيروسية وفي حالة بروتينات التغليف ‎AAV‏ ‏في نماذج معينة؛ يكون الناقل ناتج عودة الارتباط ( على سبيل المثال» ‎(AAV‏ عبارة عن ناقل فيروسة صغيرة. تكون الفيروسات الصغيرة عبارة عن فيروسات صغيرة بها جينوم ‎DNA‏ مجدول. تكون "الفيروسات المرتبطة بالغدة" ‎(AAV)‏ من عائلة الفيروسات الصغيرة. تشتمل الفيروسات الصغيرة على ‎AAV‏ التي تكون عبارة عن فيروسات مفيدة في شكل نواقل علاج
0 جيني حيث أنه يمكنها اختراق الخلايا وإدخال مادة حمض نووي/ مادة جينية بحيث يتم الحفاظ على الحمض النووي/ المادة الجينية ثابتة في الخلايا. بالإضافة غلى ذلك؛ فإن تلك الفيروسات يمكن أن تقوم بإدخال ‎sale‏ نووية و/أو جينية بداخل مواضع معينة؛ على سبيل ‎(JU)‏ موضع معين على الكروموسوم ‎.٠9‏ وبسبب أن ‎AAV‏ غير مرتبطة بممرضات مسببة للمرض في البشر فإن نواقل ‎AAV‏ تزون قادرة على توصيل متواليات البولي نيوكليوتيد ‎le)‏ سبيل المثال» بروبتنيات
_vo-
AAV ‏علاجية وعوامل) إلى مرضى من البشر بدون التسبب في إنشاء عوامل مسببة للمرض من‎ ‏أو المرض.‎
AAV- ‏الارتباط مقل‎ sage ‏ناتجة‎ AAV ‏يمكن أن يكون 874-/اهل والصور المتعددة من‎ ‏سبيل‎ le) AAV-RIT4 ‏ذي الصلة مثل الصور المتغيرة من أنواع مصلية من‎ AAV ‏أو‎ 4
VP2 (VPI ‏(على سبيل المثال متواليات‎ ) »110044-1 Jie ‏المثال» صور متغيرة من كابسيد‎ 5
AAV ‏من‎ (al ‏و/أو 703 ) والتي يمكن أن لا يمكن أن تكون متمايزة من أنواع مصلية‎ ‏سبيل المثلا؛ المتمايزة من متواليات‎ Ae) 410 ‏أو‎ AAVI-AAVIT ‏ذلك؛ على سبيل المثال»‎ ‏أو 4010 ). وكما تم‎ AAVI-AAVIT ‏و/أو 7/03 ) من أي من النوع المصلي‎ VP2 ‏و‎ VPI
Calas ‏به‎ AAV ‏استخدامه هناء يشير المصطلح "نوع مصلي" إلى التمييز المستخدم للإشارة إلى‎ ‏إن الصور المصلية‎ . AAV ‏عن صورة متمايزة من المصل من أنواع أخرى من‎ Ble ‏يكون‎ 0 ‏المتمايزة يتم تحديدها بالاعتماد على عدم وجود نشاط تفاعلي تشابيك بين الأجسام المضادة مع‎ ‏تكون الاختلافات التشابكية المذكورة على نحو‎ AAV ‏بالمقارنة مع أي واحد من‎ AAV ‏واحد من‎ (JU) ‏طبيعية نتيجة الاختلافات في متواليات بروتين كابسيد/ محددات مولدة للجين (على سبيل‎ ‏وعلى الرغم‎ (AAV ‏من الأنواع المصلية‎ VP3 ‏و/أو‎ VP2 ‏نتيجة الاختلاف في متواليات 1/01 و‎ ‏من ذلك فإن هناك احتمالية أن تكون هناك صور متغيرة من 4074-/2/21 التي تشتمل على‎ 15
AAV ‏صور متغيرة من الكابسيد والتي لا يمكن أن تكون متمايزة من النوع المصلي عن 8074 أى‎ ‏الأخرى والتي تختلف بمقدار نيوكليوتيد واحد على الاقل من الوحدات البنائية للحمض الاميني‎ ‏أخرى.‎ AAV ‏بالمقارنة مع 4074 أو‎ ‏وتحت التعريف التقليدي؛ فإن النوع المصلي يشير غلى أن الفيروس محل الاهتمام يمكن اختباره‎ ‏في مقابل مصل خاص بكل الأنواع الموجودة والأنواع المصلية المتمايزة الأخرى الخاصة بالنشاط‎ 0 ‏المتعادل ولم توجد أي أجسام مضادة يمكن أن تعادل الفيروس محل الاهتمام. وكما هو الحال مع‎ ‏نواتج عزل الفيروس بشكل طبيعي من نواتج الطفرة المتكتشفة و/أو نواتج طفرة الكابسيد المتولدة‎ ‏فيمكن أن يكون هناك اختلافات في المصل أو لا يوجد اختلافات مع أي من الأنواع المصلية‎ ‏الموجودة بشكل طبيعي. وبالتالي؛ وفي الحالات التي يكون بها فيروس جديد (على سبيل المثال؛‎ (AAV ‏سبيل المثال؛‎ Ae) ‏فا يكون هناك اختلاف في المصل وحيث أن الفيرسو الجديد‎ (AAV 25
١1) ‏سوف يكون عبارة عن مجموعة فرعية أو صورة متغيرة من النوع المصلي المناظر. في العديد من‎ ‏الحالات؛ فإن الاختبار المصلي الخاص بالنشاط المتعادل لم يتم إجراؤه على فيروسات متطفرة مع‎ ‏تعديلات من متوالية الكابسيد لتحديد ما إذا كان هناك أي نوع مصلي آخر طبقاً للتعريف التقليدي‎ ‏فإن المصطلح "نوع‎ LS ‏يتم تجنب‎ (Sly ‏الخاص بالنوع المصلي. ونتيجة لذلك ولغرض التوافق‎ ‏مصلي" يشير بشكل عام غلى كل من الفيروسات المتماثلة من النوع المصلي (على سبيل المثال؛‎ 5 ‏التي لا تكون تمايزة من النوع المصلي والتي ميكن أن تكون‎ (AAV ‏وأيضاً الفيروسات مثل‎ (AAV ‏في مجموعة فرعية أو صورة متغيرة من نوع مصلي معين.‎ ‏طرق واستخدامات‎ Lady (AAV ‏الارتباط (على سبيل المثال؛‎ sage ‏تشتمل بلازميدات الناقل ناتج‎ ‏لها على أي سلالة فيروسية أو نوع مصلي. يمكن أن يعتمد أي مثال غير حصري من بلازميدات‎ - AAV-1 ‏مثل‎ AAV ‏على أي جنيوم‎ (AAV (JU ‏النواقل ناتجة عودة الارتباط (على سبيل‎ 0
AAV-2i8 ‏حلت 74دات 010 أى‎ VY v— d= A= ‏حلا‎ T= ‏ن حك كاج حم‎ ‏على سبيل المثال. يمكن أن تعتمد تلك النواقل على نفس السلالة أو نوع مصلي (أو مجموعة‎ ‏فرعية أو صورة متغيرة) أو يمكن أن تكون مختلتقف عن بعضها البعض. وكمثال غير حصرين‎ ‏يمكن ان يعتمد على جينوم نوع‎ (AAV ‏فإن بلازميد الناقل ناتج عودة الارتباط (على سبيل المثال؛‎ ‏مصلي يمكن أن يتم تحديده بالنسبة لواحد أو أكثر من بروتينات كابسيد التي تغلف الناقل.‎ 5 ‏يمكن أن‎ (AAV ‏سبيل المثال»‎ Ae) ‏الارتباط‎ sage ‏بلازميد الناقل ناتج‎ old cally ‏بالإضافة إلى‎ ‏المتمايز عن واحد او اكثر‎ (AAV2 ‏(على سبيل المثال؛‎ AAV ‏يعتمد على جينوم النوع المصلي‎ ‏من البروتينات الخاصة بالتغليف والت تقوم بتعبئة ناقل وفي تلك الحالة يكون هناك واحد على‎ ‏الأقل من بروتينات تغليف ثلاثة يمكن أن تكون عبارة عن 14074-/0/21 أو صورة متغيرة من‎
AAV-Rh74 ‏الصور المتغيرة من‎ Jie dha ‏ذات‎ AAV ‏أو‎ AAV-Rh74 ‏ذات صلة مثل‎ AAV 20
RHM15- ‏و‎ RHM15-1 ‏و‎ RHM4-1 (ie ‏سبيل المثال؛ الصور المتغيرة من الكابسيد‎ le) ‏على سبيل‎ (RHM15-6 ‏و‎ RHM15-4 ‏و‎ RHM15-4 ‏و‎ RHM15-3/RHM15-5 ‏2و‎ ‏المثال».‎ ‏على‎ lil) AAV-RNT4 ‏متواليات جين/ بروتين مشابهة لمتواليات تميز‎ AAV-Rh74 1 ‏يكون‎ ‏من الشكل رقم 7). وكما تم استخدامه هناء يشير‎ VP3 1/02 WPL ‏سبيل المثال» من‎ 25
طلا المصطلح ‎AAV JB‏ المتعلق ب 84074-/21/" والصور اللغوية منه إلى واحد ا, أكثر من بروتينات ‎AAV‏ ( على سبيل المثال؛ متواليات 1/51 و ‎VP2‏ و/أو متواليات 753 ) والتي بها تطابق في المتوالية غلى حد كبير بالنسبة لواحد أو اكثر من البولي نيوكليوتيدات أو متواليات البولي ببتيد التي تشتمل على 84074-/28281. وبالتالي يمكن أن يكون للمواد الناقلة من ‎AAV‏ ‏5 المتعلقة ب ‎AAV-Rh74‏ متوالية واحدة أو أكثر متمايزة عن 4074]-/اه/ ولكن يمكن أن تعرض هوية متوالية إلى حد كبير مع واحد أو أكثر من الجينات و/أو بها واحد او أكثر من الخصائص الوظيفية من ‎AAV-RhT74‏ ( على سبيل المثال؛ ‎Jie‏ انتحاء خلية/ نسيج). على سبيل المثال؛ يكون ل ‎AAV-RhT74‏ ذات الصلة أو الصورة المتغيرة من ‎AAV‏ من ‎RHM4-1‏ كابسيد مع ‎day)‏ أحماض أمينية تختلف عن كابسيد 074. تشتمل 4074]-/ال/ل التمثيلية واصور المتغيرة 0 ذات الصلة ‎AAV‏ مثل ‎AAV-Rh74‏ أو ‎AAV‏ ذات الصلة مثل الصور المتغيرة من ‎AAV-‏ ‏4 (على سبيل المثال» صور متغيرة من كابسيد ‎Jie‏ متوائيات ‎(RHM15-1 (RHM4-1‏ ‎(RHM1I5-4 and RHM15-6 (RHM15-3/RHM15-5 (RHM15-2‏ التي تشتمل على ‎VPL‏ و ‎VP2‏ و/أو ‎VP3‏ التي تم توضيحها هنا على سبيل المثال؛ في الشلك رقم 7. في نموذج توضيحي غير ‎(gran‏ فإن ناقل ‎AAV‏ يتعلق ب ‎AAV-RNT4‏ ويكون له بولي نيوكليوتيد؛ بولي ببتيد أو متوالية بعدية منها والتي تشتمل على أو تتكون من المتوالية التي بها على الاقل ‎٠‏ أو أكثر (على ‎PIA (%AY 615 30% 9685 (JA duu‏ 39 65 إلخ) من التطابق مع واحد أو أكثر من متواليات 1/01 ‎AAV-Rh74‏ و ‎VP2‏ و/أو
متواليات ‎VPS‏ التي تم توضيحها في الشكل رقم 7. وطبقاً للاختراع» تشتمل الطرق والاستخدامات على متواليات 8074-/0/20 (بولي ببتيدات 0 ونيوكليوتيدات) ومتواليات فرعية ‎Lie‏ والتي تعرض أق لمن ‎961٠00‏ من التطابق في المتوالية بالنسبة لمتوالية بروتين أو جين ‎AAV-RhT4‏ (على سبيل ‎«JU‏ متواليات ‎VP2 (WPT‏ و/أو متواليات ‎VPS‏ تم توضيحها في الشكل رقم ؟) ولكنها تكون متمايزة عن وغير متطابقة لبروتينات أو جينات ‎AAV‏ المعروفة مثل بروتينات أو جينات ‎AAV-Rh10 AAVI-AAVI]‏ إلخ. في أحد النماذج؛ يشتمل البولي نيوكليوتيد 474-/2/8/ 80 أو المتوالية الفرعية منه على أو يتكون 5 من متوالية بها على الأقل 9686 أو ‎SST‏ من التطابق» على سبيل ‎GOA FAS YAS (Jal‏
CA
%39 FAA PAY %T Fao ‏نذكى‎ (%AY PAY (%A) FHA PAL FAA ‏أو‎ AAV-RhT74 ‏من التطابق مع اي متواية مرجعية‎ % ٠٠١ ‏إلخ؛ أي ما يصل إلى‎ 65 ‏و/أو 03/ التي تم وضعها في‎ VP2 WPT ‏متوالية فرعية منها (على سبيل المثال متواليات‎ ‏لها واحد‎ AAV-RNT4 ‏في سمات محددة؛ يكون هناك صورة متغيرة مرتبطة مع‎ L(V ‏الشكل رقم‎
AAV-RhT74 ‏استبدالات للحمض الاميني تم توضيحها في‎ dag] ‏أو اثنين أو ثلاثة أو أربعة من‎ 5
RHM15-2 ‏و‎ RHM15-1 ‏و‎ RHM4-1 ‏(على سبيل المثال» صورة متغيرة من الكابسيد من‎ .(RHM15-6 ‏و‎ RHM15-4 ‏و‎ RHM15-3/RHM15-5 ‏و‎ ‎AAV] ‏المشتملة على‎ (AAV ‏يمكن إنشاء النواقل ناتجة عودة الارتباط (على سبيل المثال؛‎ ‏لاطخل‎ 11 AAV10 AAVO (AAVS (AAVT (AAV6 (AAVS5 (AAV4 (AAV3 (AAV2 ‏والصورة المتغيرة والصورة لاجينة ذات الصلة والمتواليات الخيمرية‎ AAV-2i8 ‏أو‎ Rh74 (Rh10 0 ‏باستخدام تقنيات ناتج عودة الارتباط المعروفة للماهر في المجال لكي يتم تضمين واحد او أكثر‎ ‏من متواليات بولي نيوكليوتيد غير متجانس (جينات ناقلة) تتم إحاطتها مع واحدة أو أكثر من‎ ‏من‎ AAV ‏الوظيفية. يمكن أن يكون لتلك النواقل واحد أو أكثر من جينات‎ AAV ITR ‏المتواليات‎ ‏جين م8" و/أو‎ Jaa) ‏النوع غير المعالج والتي تم حذفها بشكل كامل أو بشكل جزئي؛ على سبيل‎ ‏خاصة بالإحاطة؛ وكما هو ضورري فيما‎ ITR ‏من متواليات‎ BY) ‏ولكن تحتفظ بواحدة على‎ cap 5 ‏سوف يشتمل‎ AAV ‏يتعلق بالانقاذ والانتساخ والتعبئة لناقل ناتج عودة الارتباط في جسيم ناقل من‎ ‏يتعلق بالتعبئة (على سبيل المثال؛‎ Lady ‏على متواليات مطلوبة في انتساخ سيس‎ AAV ‏جينوم ناقل‎ ‏وظيفية).‎ ITR ‏متواليات‎ ‏نيوكليوتيد" و "حمض نووي" على نحو تبادليه هنا لكي تشير غلى‎ Jo) ‏تم استخدام المصطلحين‎ ‏تشتمل على حمض ديو أوكسي رببوزي‎ lly ‏صور من الحمض النووي» أوليجيونيوكليوتيدات‎ 0 ‏جينومي و‎ DNA ‏تشتمل البولي نيوكليوتيدات على‎ (RNA) ‏وحمض نووي‎ (DNA) ‏نووي‎ ‎STRNA tRNA ‏مرتبط وغير مرتبط و‎ MRNA ‏في عكس اتجاه النسخ و‎ DNA cDNA ‏أو‎ (ShIRNA ‏هيبارين صغير أو قصير‎ (JU ‏(نظل؛ على سبيل‎ RNA ‏متبط أو‎ DNA ‏خاص بالارتباط التشابكي أو‎ RNA ‏متداخل أو صغير و‎ (S))RNA ‏دقيق» أو‎ RNA (miRNA), ‏في عكس اتجاه النسخ. تشتمل البولي نيوكليوتيدات على بولي نيوكليوتيدات حادثة بكشل‎ (RNA) 5 yao ‏طبيعي أو بولي نيوكليوتيدات تخليقية أو بولي نيوكليوتيدات متغيرة بشكل عامل أو بولي‎ ‏نيوكليوتيدات معدلة وأيضاً صور مشابهة ومشتقات. يمكن أن تكون البولي نيوكليوتيدات عبارة عن‎ ‏صورة منفردة أو مزدوجة أو ثلاثية أو خطية أو دائرية ويمكن أن تكون من أي طول. وفي مناقشة‎ ‏البولي نيوكليوتيدات» يمكن أن يكون هناك متوالية أو بنية خاصة ببولي نيوكليوتيد معين يتم‎ .“ ‏وصفها هنا طبقاً لتوافق خاص بتوفير متوالية في الاتجاه من ' إلى‎ 5 ‏(على سبيل‎ JU ‏يشير مصطلح بولي نيوكليوتيد "غير متجانس" إلى بولي نيوكليوتيد يتم إدراجه في‎ ‏التوصيل الخاص بالبولي نيوكليوتيد بداخل‎ [dal ‏لأغراض خاصة بالتسبب في‎ (AAV ‏المتال»‎ ‏خلية. تكون البولي نيوكليوتيدات غير املتجانسة متمايزة بشكل نمطي من نواقل (على سبيل‎ ‏سبيل‎ (Ao) ‏من حمض نووي؛ أي؛ ليست أصلية بالنسبة لحمض نووي فيروسي‎ (AAV (JL ‏وبمجرد أن يتم نقله/ توصيله بداخل خلية؛ فإن البولي نيوكليوتيد غير المتجانس‎ (AAV (Ji 0 ‏الموجود بداخل الفيرون يمكن التعبير عنه (على سبيل المثال؛ انتساخه والتعبير عنه إذا كان ذلك‎ ‏مناسباً). وعلى نحو بديل» فإن البولي نيوكليوتيد الذي تم نقله / توصيلة في خلية سوفي يتم‎ ‏تضمينه بداخل فيرون وبالتالي لا تكون هناك حاجة للتعبير عنه. وعلى الرغم من أن التعبير "غير‎ ‏متجانس” لا يتم استخدامه دائماً هنا للإشارة إلى البولي نيوكليوتيدات» فإن الإشارة إلى البولي‎ ‏نيوكليوتيد حتى في غياب مصطلح "غير متجانس" يقصد منها أن تشتمل على البولي نيوكليوتيدات‎ 5 ‏غير المتجانسة بدلاً من إغفالها.‎ ‏تشتمل "البولي نيوكليوتيدات" "البروتينات" و"الببتيدات" التي تم تشفيرها بواسطة 'متواليات بولي‎ ‏نيوكليوتيد" على كل المتواليات الأصلية كاملة الطول وأيضاً البروتينات التي تحدث بشكل طبيعي‎ ‏وأيضاً المتواليات الوظيفية والصور المعدلة منها وصور متغيرة من المتوالية وأيضاً في شكل متوالية‎ ‏تالية وصورة معدلة أو صورة متغيرة تحتفظ ببعض درجات الفعالية من البروتين كامل الطول‎ 0 ‏الأصلي. في الطرق والاستخدامات الخاصة بالاختراع» فإن البولي ببتيدات المذكورة والبروتينات‎ ‏والببتيدات يتم تشفيرها بواسطة متواليات بولي نيوكليوتيد والتي يمكن أن تكون مطلوية بحيث تكون‎ ‏متماثلة بالنسبة لبروتين داخلي والذي يكون فعالاً أو يكون له تعبير غير كافي أو ناقص في الثديي‎ ‏الذي تمت معالجته.‎
TV
ل يمكن استخدام النوع المصلي لفيروس مرتبط بالغدة ‎(AAV)‏ من ‎AAV-RNT4‏ والصور المتغيرة ذات الصلة ‎Jie AAV‏ الصور المتغيرة من ‎Ae) AAV-RNT4‏ سبيل ‎(JU)‏ صور متغيرة من ‎RHM15- (RHM15-2 (RHM15-1 (RHM4-1 (RHM4-1 J fica il‏ ‎RHM15-4 (3/RHM15-5‏ و ‎(RHM15-6‏ لكي يتم إدخال/ توصيل بولي نيوكليوتيدات بشكل ثابت أو على نحو انتقالي في الخلايا والذرية منها. تم استخدام المصطلح "جين انتقالي” هنا لكي تشير بشكل تقليدي إلى البولي نيوكليوتيد غير المتجانس والذي يتم تقديمه بداخل خلية أو كائن حي. تشتمل الجينات الانتقالية على أي نيوكليوتيد مثل الجين الذي تم تشفيره من بولي ببتيد أو بروتين وبولي نيوكليوتيد الذي يتم انتساخه في بولي نيوكليوتيد مثبط أو بولي نيوكليوتيد الذي يتم انتساخه ‎(Ae)‏ سبيل ‎JU‏ عند فقط التعبير عن عنصر التحكم مثل المعزز الذي يشتق 0 التعبير). على سبيل المثلاء في الخلية المشتملة على جين انتقالي فإن الجين النتقالي يتم إدخلاه / نقله بواسطة ناقل ‎AAV Jie‏ "التحويل التشابكي” من الخلية. تشير مصطلحات صورة متحولة" وصورة تم نقلها غلى إدخال جزيء مثل البولي نيوكليوتيد في خلية أو كائن حي عائل. يطلق على الخلية التي يتم بها إدخال الجين الانتقالي هنا بأنها "خلية متحولة" أو 'ناتج تحول". 5 وتتيجة ‎cM‏ فإن الخلية "المتحولة" أو "التي تم نقل العدوى لها" (على سبيل المثال؛ في ثديي؛ مثل الخلية أو النسيج أو خلية من عضو) فإنها تعني تغييراً جينياً في خلية بعد تضمين جزيء خارجي؛ على سبيل المثال» بولي نيوكليوتيد أو بروتين (على سبيل ‎Sal‏ جين انتقالي) بداخل خلية. وبالتالي فإن الخلية التي "تم نقل العدوى لها" أو 'تم تحويلها" تكون عبارة عن خلية تم بها أو في ذرية منهها إدخال جزيء خارجي؛ على سبيل المثال. يمكن أن يتم نشر الخلية (الخلايا) ويمكن أن 0 .يتم الإدخال والتعبير عن بروتين أو حمض نووي يتم انتساخه. بالنسبة لاستخدامات العلاج الجيني والطرق فإن الخلية المتحولة يمكن أن تكون في خاضع. لا يمكن أن يتم تكامل البولي نيوكليوتيد الذي تم إدخاله في حمض نووي من خلية متلقي أو كائن حي. وغذا تم الإدخال فإن البولي نيوكليوتيد يصبح متكاملاً في الحمض النووي ‎DNA)‏ جنيومي) أو خلية متلقي أو كائن حي يمكن أن يتم الحفاظ عليه بشكل ثابت في الخلية أو الكائن الحي 5 بحيث يتم تمريره على أو يمكن أن يتم توارثه في ذرية ‎WAN‏ أو الكائتنات الحية من خلية المتبلقي ‎TV‏
_— \ اذ أو الكائن الحي. وفي النهاية؛ فإن الحمض النووي الذي تم إدخاله يمكن أن يوجد في خلية المتلقى أو الكائ الحى العائل بشكل انتقالى فقط. ( على سبيل المثال؛ من الجلد المتوسط أو الجلد الخارجي أو الجلد الداخلي). تشتمل الأمثلة غير الحصرية من الخلايا على الكبد ‎(Ae)‏ سبيل ‎(JU)‏ خلايا كبدية وخلايا بطانية جيبية) ‎Plas‏ ‏بنكرياس (على سبيل المثال؛ خلايا جزر بيتا) وخلايا من الرئة خلايا جهاز عصبي مركزي او طرفي مثل المخ(على سبيل المثال؛ ‎WIA‏ عصية وخلايا دبقية أو خلايا بطانية عصبية) أو خلايا شوكية أو خلايا من الكلية أو العين (على سبيل المثال؛ من الشبكية أو مكونات خلية) وخلايا من الطحال والجلد و الغدة الصعترية؛ الخصية والرئة والحجاب الحاجزء ‎Cally‏ (قلبية) ومن العضلات 0 أو من القطنية أو الأحشاء (على سبيل المثال؛ الخلايا الصماء) ونسيج شحمي( ابيض أو بني أو أبيض ضارب للصفرة) أو من عضلة ‎(Ao)‏ سبيل المثال؛ أرومات ليفية)؛ خلايا زليلية و خلايا غضروفية؛ خلايا ناقضة العظم؛ والخلايا الظهارية وخلايا بطانة الأوعية الدموية؛ خلايا الغدة اللعابية؛ وخلايا عصبية للأذن الداخلية أو الخلايا المكونة للدم (على سبيل ‎(JU)‏ من الدم أو اللمف). تشتمل الأمثلة الإضافة على خلايا جذعية مثل خلايا متعددة القدرات أو خلايا نذيرة 5 متعددة الفعالية والتى تقوم بالتطوير أو التمايز بداخل الكبد (على سبيل المثال؛ خلايا كبدية؛ وخلايا بطانية جيبانية) خلايا بنكرياس (على سبيل ‎(JU)‏ خلايا جزر بيتا) وخلايا رئة وخلايا جهاز عصبي مركزي أو طرفي مثل المخ(على سبيل المثال؛ خلايا عصية وخلايا دبقية أو خلايا بطانية عصبية) أو خلايا شوكية أو خلايا من الكلية أو العين ‎(Ao)‏ سبيل ‎JE‏ من الشبكية أو مكونات خلية) وخلايا من الطحال والجلد و الغدة الصعترية؛ الخصية والرئة والحجاب الحاجزء 0 والقلب (قلبية) ومن العضلات أو من القطنية أو الأحشاء (على سبيل المثال؛ الخلايا الصماء) ونسيج شحمي ) ابيض أو بني أو أبيض ضارب للصفرة) أو من عضلة (على سبيل المثال؛ أرومات ليفية)؛ خلايا زليلية و خلايا غضروفية؛ خلايا ناقضة العظم؛ والخلايا الظهارية وخلايا بطانة الأوعية الدموية؛ خلايا الغدة اللعابية؛ وخلايا عصبية للأذن الداخلية أو الخلايا المكونة للدم (على سبيل المثال» من الدم أو اللمف).
لا يكون "جزيء علاجي" في أحد النماذج عبارة عن ببتيد أو بروتين الذي يمكن أن يخفف أو يقلل أعراض تنتج عن غياب أو نقص في البروتين في خلية أو خاضع. على نحو بديل؛ يشير ببتيد أو بروتين "علاجي" تم تشفيره بواسطة جين انتقالي غلى واحد الذي يمنح فائدة في خاضع؛ على سبيل المتال» لكي يتم تصحيح عيب جيني لكي يتم تصحيح فعالية جينية (التعبير أو الوظيفة أو لتأثير مضاد للسرطان. تشتمل أمثلة غير حصرية معينة من البولي نيوكليوتيدات غير المتجانسة التي تشفر منتجات الجين (على سبيل المثال بروتينات علاجية) والتي تكون مفيدة طبقاً للاختراع؛ على سبيل المثال لا الحصر على: جينات التي تشتمل على أو تشفر ‎CFTR‏ (بروتين منتظم عبر الغشاء تليفي كيسي)؛ عامل تخثر الدم (على سبيل المثال» عامل ‎XI‏ وعامل ‎IX‏ وعامل ‎X‏ وعامل ‎VII‏ ‏0 وعامل ‎Vila‏ أو بروتين ©؛ إلخ) بما في ذلك عوامل تخثر ‎pall‏ المكتسبة أو الوظيفية جسم مضاد وبروتين خاص بخضاب شبكية ظهاري ‎١١5‏ كيلو دالتون ‎«(RPEGS)‏ إرثروييوتين» مستقبل ‎(LDL‏ ‏ليباز بروتين ‎and‏ أورنثثين ترانس كارباميلاز» ]-جلويين؛ »© - جلويين» سبكتيرين؛ :© - أنتيتيربسين» أدينوسين دي أميناز ‎(ADA) adenosine deaminase‏ ناقل فلزي ‎ATPTA)‏ أو ‎((ATPT‏ سولفاميداز؛ إنزيم يشتمل على مرض تخزين جسيمي ‎(ARSA)‏ هيبوكسانثين جوانين؛ 5 فسوفوريبوسيل ترانسفيراز» | ‎Yoo‏ جلوكوسريبروسيداز» سفينجوميليناز»؛ ليسوسومال هيكسوسامنيداز» حمض كيتو بسلسلة متفرعة دهيدروجيناز» وهرمون وعامل نمو الورم (على سبيل ‎(Jal)‏ عامل نمو شبيه بالأنسولين ‎١‏ و7 وعامل مشتق من الصفائح وعامل نمو خاص بالبشرة وعامل نمو خاص بالعصب وعامل غذائي عصبي ‎Vo‏ و-؛ وعامل غذائي عصبي مشتق من المخ وعامل نمو مشتق من خلية عصبية وعامل نمو خاص بالتحويل © و ‎(FB‏ وسيتوكين 0 (على سبيل ‎(JG‏ © - إنترفيرون ‎Bs‏ - إنترفيرون؛ إنترفيرون- ‎oy‏ إنترليوكين -؟؛ إنترليوكين ‎of -‏ إنترليوكين ‎VY‏ عامل حث مستعمرة لملتهمة كبيرة حبيبية؛ وتوكسين لمفاوي؛ إلخ)؛ منتج جين خاص بالقتل (على سبيل ‎(Jha)‏ فيروس ‎Sa‏ بسيط وثيميدين ‎«JS‏ وسيتوسين دي أميناز وتوكسين دفتريا وستوكروم ‎PA50‏ ودي أوكسي سيتيدين ‎JUS‏ عامل تنكرز الورم؛ إلخ)؛ بروتين مقاومة عقار (على سبيل المثال؛ الذي يوفر مقاومة لعقار مستخدم لعلاج السرطان)؛ وبروتين 5 كابت ‎Ao)‏ سبيل ‎(Juul‏ 53م ‎Von Hippel-Lindau (VHL) (Wt-1, NF1 «Rb‏ داء yy ‏ويبتيد مع خصائص معدلة للمناعة وببتيد مولد للتحمل مولد‎ (APC) ‏سلاسل قولوني ورمي غدي‎ 20 ‏للمناعة أو بروتين تريجيتوبيس أو 060141 أو أنسولين وجلوكوكيناز» جوانيلات سيكلاز‎ ‏-ليبيرسيلين)؛‎ LCA) LCA 5 ‏(تنكس المشيمة)؛‎ ١ Rab escort ‏بروتين‎ «(LCA-GUCY2D) ‏اشتقاق مشيمة مرتبط‎ dale) ١ ‏أورنيثين كيتواسيد أمينو ترانفيراز (إضمور تلفيفي)؛ ربتنيوسشيسين‎
X GTPase ‏)؛ التهاب شبكية صباغي مرتبط ب‎ Usher's 1C ‏(متلازمة‎ USHIC (Xo 5 ‏التهاب شبكية صباغي (¢ 050181 ( صمم‎ : RP ‏(صور حال من‎ MERTK (XLRP) ‏أو 0140-2 (مرض كلية متعدد‎ 0140-1 «(fell ‏كونيكسين 77 (( 2 8611/4 ¥ و؛ (عمى‎ ‏التكيسات)» 1001 0611802؛ قصور الجين المسبب لأمراض التخزين الشحمية (على سبيل‎ - N ‏فوسفات ترانسفيراز وكاثباسين»‎ -١- ‏أسيتيل جلوكوسامين‎ - ١! ‏المثال» إنزيمات سولفاتاز»‎
VPC2 (NPC1 (GM2-AP (A ‏أسيتيل جلوكوسامين-١- فوسفات ترانسفيراز كائباسين‎ 0 ‏بروتينات منشط شحم سفينجولي» إلخ) وواحد أو أكثر من إنزيمات نيوكلياز إصبع الزنك لتحرير‎ ‏الجينوم أو متواليات المانحة المستخدمة في شكل صورة أساسية للإصلاح لتحرير الجينوم.‎ ‏تشتمل الأمثلة غير الحصرية من البولي نيوكليوتيدات غير المتجانسة لمنتجات جينية مشفرة للبولي‎ ‏نيوكليوتيدات (على سبيل لامثال؛ بروتينات علاجية) التي تكون مفيدة طبقاً للاختراع على تلك التي‎ ‏أن يتم استخدامها في معالجة مرض أو اضطراب يشتمل؛ على سبيل المثال لا الحصر على‎ (Sa 5 ‏ونزف الدم 8؛ و الثلاسيميا؛‎ oA ‏نزف الدم‎ (AL ‏التليف الكيسي (عوأمراض أخرى خاصة‎ ‏ومركب باركنسون؛ ومرض هنتنجتون‎ alll ‏الإيدز» مرض‎ (Al ‏والأنيميا وأي اضطرابات دم‎ ‏والتصلب الجانبي الضموري؛ والاضطرابات العصبي والسرطن ومركض السكر وضمور العضلات‎ ‏ونقص فعالية دي‎ Hurler's ‏ومرض‎ Gaucher's ‏سبيل المثال؛ لدوشين؛ بيكر) ومرض‎ Ae) ‏مرض تخزين جلايكوجيسين وعيوب أيضية أخرى وأمراض ضمورية للشبكية (وأمراض‎ Glad 0 ‏أخرى من العين) وأمراض من الأعضاء الصلبة (على سبيل المثال المخ والكبد والكلية والقلب).‎ ‏تشتمل كل الصور الثديية والصور غير الثديية من البولي نيوكليوتيدات المشفرة لمنجات جين‎ ‏المتشملة على جينات غير حصرية وبروتينات تم الكشف عنها هنا بشكل حصرين غما على صور‎ ‏معروفة أو غير معروفة. وبالتالي» يشتمل الاختراع على جينات وبروتينات من حيوانات غير ثديية‎ ‏وتدييات وأنواع خلاف الأنواع البشرية والبشر حيث تعمل تلك الجينات ولابروتنيات في طريقة‎ 5
وه مشابهة غلى حد كبير للجينات والبروتينات البشرية كما تم وصفها هنا. يشتمل مثال غي رحصري من الجين غير الثديي في نطاق نيوكلياز من نوع ‎FOK‏ والذي يكون من ‎dual‏ بكتيري. تم وصف أمثلة غير حصرية من المتواليات الثديية والمتواليات غير البشرية ‎FIX‏ في ‎Yoshitake et al.,‏ ‎supra; Kurachi et al., 1995, supra; Jallat et al., 1990, supra;‏ ,1985 ‎Kurachi et al., 1982, Proc.
Natl.
Acad.
Sci.
USA 79:6461-6464; Jaye et 5‏ ‎al., 1983, Nucl.
Acids Res. 11:2325-2335; Anson et al., 1984, EMBO J.‏ ‎Wu et al., 1990, Gene 86:275-278; Evans et al., Proc‏ ;1053-1060 :3 ‎Natl Acad Sci USA 86:10095 (1989), Blood 74:207-212; Pendurthi et‏ ‎al., 1992, Thromb.
Res. 65:177-186; Sakar et al., 1990, Genomics‏ ‎and, Katayama et al., 1979, Proc.
Natl.
Acad.
Sci. 10‏ ;6:133-143 ,1990 ‎USA 76:4990-4994‏ وكما تم توضيحه هناء تشتمل متواليات البولي نيوكليوتيد غير المتجانسة (الجينات الانتقالية) على متواليات حمض نووي مثبطة و متواليات حمض في عكس اتجاه النسخ. يمكن تعديل الصورة المثبطة من أو الجزء في عكس اتجاه التسخ من ‎RNA) SIRNA‏ صغيرة متداخلة ‎MIRNA‏ ‏5 (غلال دقيق ) و ‎ShRNA‏ (هيبارين صغير ‎RNAI (RNA‏ وأوليجيو نيوكليوتيدات في عكس اتجاه النسخ بحيث يتم التعبير عن جين مستهدف. تشتمل تلك الجزيئات على تلك القادرة على تثبيط التعبير عن جين مستهدف يتم تضمينه في الأمراض الخاصة بعملية خاصة بالمرض ‎ull‏ تقليل أو تثبيط أو تخفيف واحد أو أكثر من أعراض المرض. يشتمل الجسم في عكس اتجاه النسخ على بولي نيوكليوتيدات بجديلة مزدوجة أو جديلة ثلاثية 0 وأحماض نووية ببتيدية ‎(PNAS)‏ والتي ترتبط مع ناتج انتساخ ‎RNA‏ أو ‎DNA‏ (على سبيل ‎DNA JU‏ جينومي). يتم اشتقاق الأوليجيونيوكليوتيدات من موضع بدء الانتساخ من الجين المستهدف بين المواضع ‎٠١-‏ و+0٠‏ من موضع البداية ‎Ally‏ تكون عبارة عن مثال معين ‎AT‏ ‏يمكن أن يترطب عامل مضاد للانتساخ يشل صور مزدوجة مع ‎DNA‏ بجديلة مزدوجة وبالتالي يثبط انتساخ الجين» يكون ‎(RNA)‏ عبارة عن استخدام متواليات ‎RNA‏ بجديلة منفردة أو مزدوجة خاصة بتثبيط التعبير عن الجين (انظرء على سبيل المثال» ‎Kennerdell et al., Cell‏ ‎TINY‏
د ‎and Fire et al., Nature, 391:806 (1998)‏ ;)1998( 95:1017). وبالتلاي يمكن استخدام متواليات ‎RNA‏ مزدوجة الجديلة من منطقة تشفير الجين المستهدف لكي يتم تثبيط أو منع التعبير عن الجين / الانتساخ طبقاً للطرق والاستخدامات الخاصة بالاختراع. يمكن إنتاج الجسم في عكس اتجاه النسخ بالاعتماد على أحماض نووية تشفر متواليات جين مستهدفة ‎le)‏ سبيل ‎(Jia)‏ ‏5 هنتنجتون أو ‎«(HTT‏ وحمض نووي يشفر ‎HTT‏ ثديي وبشري. على سبيل المثال» يمكن أن يقوم حمض نووي بجديلة منفردة أو مزدوجة ‎Ao)‏ سبيل ‎(RNA (JE‏ باستهدفا ناتج انتساخ ‎HTT‏ ‏(على سبيل المثال؛ ‎(MRNA‏ ‏يشير ‎SIRNA‏ ' إلى جزيء علاجي يتم تضمينه في عملية تداخل ل ‎RNA‏ خاصة بإخماد جين ‎JU‏ للانتساخ خاص بالمتوالية أو معالجة جينية. يكون ل ‎SIRNAS‏ تشابه مع المتوالية من ‎MRNA 0‏ القريب من الجين المستهدف. يمكن تخليق ‎RNAS‏ المتداخل الصغير في المعمل أو يمكن تخليقه بواسطة انشقاق ||| ريبونيوكلياز ‎ribonuclease‏ من ‎dSRNA‏ أطول ويكون عبارة عن وسائل خاص بتحلل ‎MRNA‏ خاص بالمتوالية. يمكن التخليق الكيميائي ل ‎SIRNA‏ أو أي أحماض نووية أخرى من الاختراع باستخدام مركبات ‎gu)‏ نيوكليوتيد فسفورو أميديت رببونيوكليوسيد ‎phosphoramidites‏ 100011006 تمت حمايته بشكل مناسب ووسيلة تخليق ‎DNA/RNA 5‏ تقليدية. يمكن تخليق 514018 في شكل اثنين من جزيئات ‎RNA‏ منفصلة أو جزيئات ‎RNA‏ متممة أو في شكل جزيء ‎RNA‏ منفرد مع اثنين من المناطق المتممة. يشتمل الموردون التجاريون لجزيئات ‎RNA‏ تخليقية أو مواد تفاعل خاصة بالتخليق على ‎Applied‏ ‎Proligo (Hamburg, Germany), Biosystems (Foster City, CA, USA)‏ ‎Dharmacon Research (Lafayette, Colo., USA), Pierce Chemical (part of‏ ‎Perbio Science, Rockford, اا٠‎ USA), Glen Research (Sterling, Va., USA), 20‏ ‎ChemGenes (Ashland, Mass., USA)‏ و ‎.and Cruachem (Glasgow, UK)‏ يمكن أن تكون بنيات ‎SIRNA‏ خاصة بتثبيط ‎MRNA‏ من جين مستهدف والذي يمكن أن يكون بها من ‎50-١‏ نيوكليوتيد في الطول ويفضل أكثر بين حوالي ‎٠-٠١‏ ؟ نيوكليوتيد في الطول. يمكن تضمين الحمض النووي المذكور بسهولة في النواقل اليروسية التي تم الكشف عنها هنا باستخدام طرق تخليقية معروفة لذوي المهارة في المجال. ‎TI‏
تشتمل أمثلة معينة وغير حصرية من الجينات (على سبيل المثال» ‎DNA‏ جنيومي) أو ناتج انتساخ من جين يسبب المرض (على سبيل ‎(JU‏ هلا أو ‎MRNA‏ ) الذي يمكن أن يستهدف متواليات الحمض النووي طبقاً للاختراع الحالي؛ على سبيل المثال لا الحصر؛ على: جينات مرتبطة بأمراض تكرار بولي نيوكليوتيد مثل جين هنتنجتون ‎(HTT) huntingtin‏ جين يرتبط مع ضمور في فقد الحركة (على سبيل ‎(JUS‏ أتروفين ‎١‏ 87111)؛ مستقبل أندروجين على كروموسوم ‎(5X‏ ضمور بقعي نخاعي بصلي؛ و أناتاكسين بشري -1؛ ‎Y=‏ -؟ و ‎(Y=‏ قناة كالسيوم معتمدة على الفولتية ‎P/Q‏ 0872.1 يتم تشفيرها بواسطة ‎(CACNALA)‏ ويروتين رابط ‎(TATA‏ وجديلة مقابتل لأنتاكسين ‎A‏ والمعروفة أيضاً بأنها 8724818058 وصورة متماظلة من بيتا 8 لوحدة فرعية خاصة بالانتظام 2/8 00 كيلو دالتون من سيرين /ثربونين -بروتين فوسفاتاز 0 في الرنح النخاعي المخيخي (من النوع )6 7 ‎VY 8 oY eT af‏ 7١١)؛‏ 1/141 (تنكس ‎ie‏ ل ‎X‏ ضعيف من النوع ‎)١‏ في متلازمة ‎X‏ ضعيفة؛ ‎FMR]‏ (ارتداد عقلي في ‎X‏ ضعيفة من ‎)١‏ في ارتعاش مرتبط ب ‎X‏ الهشة/ متلازمة رنح» ‎FMRI‏ (تخلف عقلي ‎XJ‏ هش ‎)١‏ أو عضو عائلة من 62 *؟ في تخلف ‎Me‏ هش ل ‎XE‏ ميوتونين - بروتين كيناز ‎(MT-PK)‏ في ‎Jia‏ ‎SB‏ عَضَلِي؛ فراتاكسين في رنح 01608801775 وناتج تطفير من جين دسميوتاز سوير أوكسيد ‎١50062000 dismutase 15‏ (5001 ) في التصلب الجانبي للضمور العضلي؛ الجين المتضمن في أسباب مرض باركنسون و/أو مرض الزهايمر أو صميم البروتين الشحمي 8 ‎convertase زاتريفنوكو (APOB) apolipoprotein‏ بروتين أولي سوتيليسين /كيكسين ‎(1s subtilisin/kexin‏ النوع ‎(PCSK9)3‏ وفرط كوليستيرول الدم؛ ‎HIV Tat‏ ومنشط تشاكي لفيرو نقص المناعة البشرية من جين انتساخ» في عدوى ‎(HIV TAR HIV TAR ¢ HIV‏ وجين 0 عنصر الاستجابة المنشط التشابكي لفيرو نقص المناعة البشرية في عدوى ‎HIV‏ ؛ مستقبل كيموكين ‎(CCRS)chemokine receptor C-C‏ في عدوى ‎HIV‏ ؛ وبيروتين فيروس نيوكليوكاسباز لساركوما ‎(RSV)Rous sarcoma virus‏ في عدوى ‎RNA (RSV‏ دقيق ‎(MIR-122)‏ خاصة بالكبد في عدوى فيروس التهاب الكبد © ؛ و 053 إصابة الكلية الحادة أو ناقل خاص بالكلية في وظيفة كلية مطعمة متأخرة أو فشل كلوي حاد ناتج عن إصابة الكلية؛ كيناز 5 بروتين ‎(PKN3) N3 protein kinase‏ في سرطان خبيث صلب انتشاري أو ارتدادي متطور ‎metastatic solid malignancies‏ ؛ ‎LMP2 (LMP2‏ والتي تكون معروفة في شكل وحدة
TIN
— 7 اذ
فرعية لبروتياسوم بيتا ‎proteasome subunit beta‏ من النوع 4 (9 ‎«(PSMB‏ والورم الميلانيني النقيلي؛ ‎LMPT‏ والتي تكون معروفة في شكل ‎Bang‏ فرعية من بروتياسوم من بيتا من النوع ‎(PSMB 8) A‏ الورم الميلانيني الانتشاري؛ تكون 1/5611 أيضاً معروفة في شكل وحدة فرعية من البروتياسوم من النوع ‎٠١‏ )10 091/48) والورم الميلانيني الانتشاري؛ عامل نمو بطاني وعائي ‎(VEGF) vascular endothelial growth factor‏ في أورام صلبة؛ بروتين مغزلي من الكينيسين في أورام صلبة وكابت موت مبرمج من الخلية ‎B-CLL‏ / الورم اللمفاوي ‎(BCL-2)‏ في لوكيما نشوانية ‎sala‏ ربداكتاز نيوكليوتيد ريبوزي ‎(RRM2) M2‏ في أورام صلبة؛ وفيورين في أورام صلبة؛ وكيناز مشابه لبولو ‎١‏ (01141) في أورام الكبد وداي أسيل جليسيرول أسيل تراتسفيراز ‎(DGATIL) ١ acyltransferase‏ في عدوى التهاب الكبد ©؛ بيتا-كاتينين ‎beta—catenin 0‏ في داء سلاسل ورمي غدي عائلي؛ مستقبل بيتا ¥ أدرينالي؛ الجلوكوما؛ و ‎RTP801/Redd]‏ المعروفة في بروتين ناتج انتساخ ¢ قابل للحث في ‎DAN Cali‏ في وذمة بفعية سكرية ‎(D M E)‏ أو ضصمور بقعي مرتبط بالسن 3 ومستقبل عامل نمو بطاني ‎es‏ ‎(VEGFR])‏ في ضمور بقعى مرتبط بالسن أو التوعى المشيمي؛ كاسباز ‎AY‏ اعتلال أعصاب عيني إقفاري غير شرياني؛ بروتين ناتج عودة الارتباط 01716 ‎6A‏ من الكيراتين في ‎GAS‏ أظفار 5 خِلقِي؛ جينوم فيروس ‎A‏ من الأنفلونزا / متواليات جين في عدوى الأنفلونزا؛ جينوم فيروس كورونا متلازمة تنافسية ‎sla‏ شديدة ‎/(SARS) severe acute respiratory syndrome‏ متواليات جينية في عدوى ‎SARS‏ ؛ جينوم فيروس مخلوي تنفسي/ متواليات جين في عدوى فيروس مخلوي تنفسي؛ جينوم فيروسي من ‎Ebola filo‏ / متوالية الجين في عدوى ‎Ebola‏ ؛ والتهاب الكبد 8 وجينوم فيروس © / متواليات الجين في التهاب ‎asl‏ 8 وعدوى © ؛ وجينوم فيروس الحلا البسيط ‎herpes simplex virus 20‏ (/1151)/متواليات جين في عدوى ‎(HSV‏ وجينوم فيروس ‎TELE‏ ‏إيه 83 ‎[coxsackievirus‏ متواليات جين فى فيروس كُوكساكيّة 83 ؛ الإخماد الخاص بأليل ممرض من الجين (الإخماد الخاص بالأليل ‎(allele-specific silencing‏ مشابه لتيروسين ‎A‏ ‏(/10541) في أليل | و ‎HLA‏ من الفئة ‎١ pan‏ في ناتج انتساخ وجين ناتج انتساخ من رودويسين ‎(RHO) mutant rhodopsin gene‏ في التهاب شبكية صباغي موروث سائد متعلق بالصبغة الجسدية ‎autosomal dominantly inherited retinitis pigmentosa‏
.(adRP)
م تشتمل البولي نيوكليوتيدات والبولي ببتيدات ومتواليات فرعية منها على صور متغيرة معدلة وصور متغيرة منها. وكما تم استخدامه هناء تشير المصطلحات "معدل" أو 'صورة متغيرة" والصور النحوية منها إلى بولي نيوكليوتيد» بولي ببتيد أو متوالية منها والتي تكون غير متوافقة مع المتوالية المرجعية. تكون المتواليات المعدلة والصور المتغيرة لها نفس النشاط غلى حد كبير أو نشاط اكبر أو نشاط أقل أو وظيفة أكبر من المتوالية المرجعية ولكن تحتفظ بنشاط جزئي على الأقل أو وظيفة خاصة بالمتوالية المرجعية. ونتجية لذلك يشتمل الاختراع أيضاً على صور متغيرة حادة بشكل طبيعي أو غير طبيعي. تشتمل تلك الصور المتغيرة على صور متغيرة من ‎AAV-RT4‏ من صور متغيرة من ‎AAV-Rh74‏ ‏كابسيد. تشتمل الأمثلة المعينة من صور متغيرة من الكابسيد على ‎RHM 15- (AAV-Rh74‏ ‎RHM 15-6 (RHM 15-5 (RHM 15-4 (RHM 15-3 (RHM 15-2 <1 0‏ و ‎RHM4-‏ ‏1 (انظرء على سبيل المثال» الشكل رقم 0( تشتمل الصور المتغيرة المذكورة على اكتساب وفقط في وظيفة الصور المتغيرة. على سبيل المثال؛ تكون المتواليات ‎FIX DNA‏ من النوع البشري غير المعالج وصر المتغيرة من البروتين أو الصور المتطفرة محتفظة بالوظيفة أو تكون فعالة بشكل علاجي أو تكون على نحو مقارن أو حتى تكون 5 فعالة من الناحية العلاجية بالمقارنة مع ‎FIX‏ بشري متغير في الطرق والاستخدامات الخاصة بالاختراع. في مثال محددة؛ يتم استخدام الكولاجين لكي يتم احتجاز ‎FIX‏ الذي يعني أنه عندما يت الإدخال في نسيج عضلة من الثديي فإن بعض ‎FIX‏ لا تكون متاحة للمشاركة في تخثر الدم بسبب انه يتم الاحتفاظ بها في الحيز بداخل الشبكية في نسيج عضلة. ينتج عن التطفير في المتوالية ‎FIX‏ في بروتين له ارتباط منخفض مع الكولاجين ‎IV‏ (على سبيل المثال؛ فقط في 0 الوظيفة) من تطفير مفيد في الطرق الخاصة بالاختراع؛ على سبيل المثال لمعالجة نزف الدم. يقوم مثال من جين ‎FIX‏ البشري ناتج التطفير بتشفير بروتين ‎FIX‏ بشري مع ألانين حمض أميني في حيز من اللايسين في موضع حمض أميني خامس من البداية الخاصة ببروتين ناضج. تشتمل الأمثلة غير الحصرية من التعديلات على سبيل ‎JU‏ لا الحصر على واحد أو أكثر من النيوكليوتيدات أو استدبالات الحمض الأميني ( على سبيل المقال اح “حم ‎-٠١ ١-5‏ 5 مل ‎(YoY. (Yo-Yo‏ ماح الى . :هم ‎(Ve ١-١.‏ أو أكثر من النيوكليوتيدات
و أو الوحدات البنائية )؛ مثل أرجينين خاص بوحدة بنائية من اللايسين (على سبيل المثال؛ استدبال واحد أو اكثر من الأرجينين من اللايسين كما تم توضيحه أعلاه في أي من 111/4-1؛ ‎RHM15-4 and RHM15-6 (RHM15-3/RHM15-5 (RHM15-2 (RHM15-1‏ ( وغضافات (على سبيل المثال؛ إدراجات ‎ff‏ اح ‎(Ve=o oF‏ ب اأحمل ‎(Yo=Yu (Yayo‏ ©*؟-.» 3.2-. .4-.؛ ‎٠١-0.‏ أو أكثر من النيوكليوتيدات أو الوحدات البنائية) وحذوفات (على سبيل المثال؛ متواليات مرجعية أو شظايا) من المتوالية المرجعية. في نماذج معينة؛ فإن المتوالية المعدلة أو المتوالية متغيرة تحتفظ بجزء على الأقل من الوظيفة أو النشاط في متوالية غير معدلة. يكون للصور المعدلة المذكورة والصور المتغيرة مقدار مشابه أو أكبر من أو أقل من أو وظيفة أو نشاط من المتوالية المرجعية؛ على سبيل المثال كما تم وصفها هنا.
0 يمكن أن يكون للصورة المتغيرة واحد ا, أكثر من الاختلافات في متوالية الحمض الأميني غير المحافظة أو المحافظة أو تعديلات أو كل منها. يكون "الاستبدال المحافظ" عبارة عن استبدال للحمض الأميني بواسطة وحدة بنائية بيولوجية أو كيميائية أو بنيائية. تعني مشابهة من الناحية البيولوجية أن الاستبدال لا يدمر الناشط البيولوجي. يعني مصطلح مشابهة من الناحية البنائية أن الأحماض الأمينية يكون بها سلاسل جانبية لها أطوال مشابهة مثل ألانين» جلايسين وسيرين أو
5 حجم مشابه. يشير التشابه الكيميائي إلى وحدات بنائية لها نفس الشحنة أو كل من الصورة غير الآلفة للماء والصورة الآلفة للماء. تشتمل أمثلة معينة على استبدال لوحدة بنائية واحدة غير آلفة للماء مثل أيزو ليوسين؛ فالين» ليوسين؛ أو ميثيونين بأخرى أو استبدالات لوحدة بنائية قطبية واحدة بأخرى ‎Jie‏ استبدال أرجينين بلايسين ‎Jus He)‏ المقال ‎(RHM15-2 (RHM15-1‏ ‎RHM15-6 3 RHM15-4 (RHM15-3/RHM15-5‏ ) حمض جلوتاميك أو حمض
0 أسبارتيك ‎Lad‏ يتعلق بأسبارجين وسيلين لثريونين وما شابه ذلك. تشتمل أمثلة معينة من االستبدالات المحافظة عى استبدال وحدات بنائية غير آلفة للماء ‎Jie‏ أيزو ليوسين ؛ فالين؛ ليوسين أو ميثيونين بأخرى؛ واستبدال وحدة بنائية قبطية بأخرى مثل استبدال أرجينين خاصة بلايسين» حمض جلوتاميك وحمض أسبارتيك أو جلوتامين لأسبارجين وما شابه ذلك. على سبيل المثال؛ تشتمل استبدالات الحمض الأميني المحافظة بشكل نمطي عى استبدالات بداخل المجموعات التالية:
5 جلايسين ‎glycine‏ » ألانين ‎alanine‏ » فالين ‎valine‏ ؛ أيزو ليوسين ‎isoleucine‏ وليوسين
=« ¢ — ‎leucine‏ وحمض اسبارتيك ‎aspartic acid‏ وحمض جلوتاميك ‎glutamic acid‏ وأسبارجين 686 وجلوتامين ‎glutamine‏ وسيرين ‎serine‏ وثتريونين ‎threonine‏ ولايسين ‎lysine‏ ‏وأرجينين ‎arginine‏ وفينيل ألانينى ‎phenylalanine‏ وتيروسين ‎(tyrosine‏ يشتمل "الاستبدال المحافظ" أيضاً على استخدام حمض أميني ‎amino acid‏ به استبدال ‎Ya‏ من حمض أميني أساسى ليس به استبدال. ونتيجة لذكل يشتمل الاختراع على جين وصور متغيرة من البروتين (على سبيل المثال؛ من بولي نيوكليوتيدات تشفر البروتينات التي تم وصفها هنا) ‎all‏ تحتفظ بواحد أو أكثر من الأنشطة البيولوجية (على سبيل المثال وظيفة في تخثر ‎pall‏ إلخ). تشتمل الصور المتغيرة من البروتينات أو البولي ببتيدات على بروتينات أو بولي ببتيدات والتي يمكن أن يتم تعديلها باستخدام تقنية ‎DNA‏ ‏0 ناتجة ‎sage‏ الارتباط ‎Jie‏ البروتين أو عمليات البولى ببتيد أو خصائص معدلة أو إضافية» على سبيل المثال صور متغيرة تمنح ثبات لبروتين محسن من البروتين. يمكن أن تختلف الصور المتغيرة عن المتوالية لامرجعية مثل البولي نيوكلويتيدات الحادثة بشكل طبيعي أو الببتيدات. سوف يكون مستوي متوالقي نيوكليوتيد وجين صورة متغيرة غير حادثة بشكل طبيتي على الأقل بها حوالي ‎968٠‏ من التطابق يفضل أكثر حوالي ‎967٠0‏ من التطابق ويفضل أكثر حوالي 9686 من 5 التطابق (9690 أو أكثر من التطابق) مع الجين المرجعي. وعند مستوي متوالية الحمض الاميني؛ فإن بروتين الصورة المتغيرة غير الحادثة بشكل طبيعي سوف يكون على الأقل حوالي 96760 ن التطابق وبشكل نمطي أكثر 9680 من التطابق ويفضل أكثر حوالي ‎969٠‏ أو أكثر من التطابق بالنسبة لللبروتين المرجعي على الرغم من أن المناطق إلى حد كبير التي ليس لها هوية يتم السماح بها في مناطق غير محافظة (على سبيل المثال؛ أقل من 96760 من التطباق مثل أقل من 967680 0 -_من التطابق»؛ ‎٠‏ 969 من التطابق أو حتى ‎964٠0‏ من التطابق). في نماذج أخرى يكون للمتواليات على الأقل ‎%Ve 967. 6٠‏ أو أكثر من التطابق ) على سبيل المقالء ‎%Ae YA‏ ‎Pde +‏ 9697؛ ‎HAA PAY‏ 9694 أو أكثر من التطابق) مع متوالية مرجعية. تكون إجراءات إدخال البولي نيوكليوتيد والتغييرات في البولي نيوكليوتيد؛ البروتين أو البولي ببتيد معروفة للشخص الماهر في المجال (انظرء؛ على سبيل المثال؛ ‎Sambrook et al., Molecular‏ ‎.((Cloning: A Laboratory Manual (2007 5‏
يشير المصطلح "هوية" وتشابه والصور النحوية منها إلى اثنين أو اكثر من الكيانات المرجعية ‎ll‏ تكون متشابهة تكون متواليات "تمت محاذاتها". وبالتالي وكمثال؛ عندما يتم تكون اثنين من متواليات البولي ببتيد متطابقة يكون لها نفس متوالية الحمض الأميني على الأقل بداخل منطقة مرجعية أو جزء. عندما يكون هناك اثنين من متواليات البولي نيوكليوتيد متطابقة؛ فيمكن أن يكون لها نفس متوالية البولي نيوكليوتيد عند على الأقل في المنطقة المرجعية أو ‎ein‏ منها. يمكن أن يكون التطابق كبيراً من مساحة محددة (منطقة أو نطاق) من المتوالية. يشير مصطلح 'مساحة' أو "منطقة" إلى جزءِ من اثنين أو أكثر من الكيانات المرجعية والتي تكون متشابهة. وبالتالي؛ وحيث يكون هناك اثنين من متواليات البروتين أو الحمض النووي أو أكثر من مساحة واحدة أو أكثر من المساحات أو المناطق فإنها تشترك في الهوية بداخل المنطقة. تشير المتوالية "التي تمت محاذاتها" 0 هنا إلى متواليات بولي نيوكليوتيد متعددة أو بروتين (مض أميني ‎(amino acid‏ تشتمل في الغالب على تصحيحات خاصة بالفقد أو القواعد الإضافية أو أحماض بنائية (فجوات ‎(gaps‏
بالمقارنة مع المتوالية المرجعية. يمكن أن تمتد الهوية على كامل طول المتوالية أو جزءِ من المتوالية. في سمات معينة؛ يشترك طول المتوالية في النسبة المئوية حيث تكون ‎oF OY‏ 4؛ © أو أكثر من البولي ببتيد المتجاور أو 5 الأحماض الامينية؛ على سبيل المثال 5ت اث ىق نت لك كك اف كك ماك تل ‎AY‏ ‎(Yo 4 VA‏ إلخ؛ من الأحماض الأمينية المتجاورة . في سمات ‎dime‏ إضافية؛ يكون طول الهوية المشترك مع المتوالية هو ‎٠١0‏ أو أو أكثر من الأحماض الأمينية أو البولي نيوكليوتيدات المتجاورة على سبل ‎(JU‏ ١ت‏ لكت كك ‎YE YF‏ معت كك الال ‎OYA‏ كلت نك ‎CFV‏ ‎(FO (FE (FY (YY‏ إلخ؛ من الأحماض الأمينية المتجاورة . في سمات معينة ‎Lad‏ يكون طول 0 الهوية المشترك مع المتوالية هو ©؟ أو أو أكثر من الأحماض الأمينية أو البولي نيوكليوتيدات المتجاورة على سبيل ‎Yo (JU‏ تك ‎(FATA TY‏ ى فى ىك ‎(EY‏ لك فى فى ‎(EA (EY‏ £9( 0؛ ‎cil]‏ من الأحماض الأمينية المتجاورة . في سمات معينة إضافية؛ يكون طول الهوية المشترك مع المتوالية هو ‎٠٠‏ أو أو أكثر من الأحماض الأمينية أو البولي نيوكليوتيدات المتجاورق على سبيل المقال .00-0 ‎(Tv—oo‏ مبتحفىت متحخيال ‎YoY.‏
جه ولاحجيى لحمل مخدءى ‎1٠١-٠٠١ ٠١١-45 ded‏ إلخ؛ بولي نيوكليوتيد متجاور أو أحماض أمينية. يشير المصطلح 'متجانس" أو تجانس إلى أن اثنين من الكيانات المرجعية تشتكر في هوية على الأقل على مدى منطقة أو ‎sia‏ معين. تشترك 'مساحات؛ مناطق أو نطاقات" من التشابه أو الهوية أن هناك جزءِ من اثنين أو أكثر من الكيانات المرجعية تشترك في أو تكون مشابهة. وبالتالي فإن هناك اثنين من المتواليات تكون متماثلة على مدى منطقة متوالية واحدة أو أكثر والتي تشترك في الهوية في تلك المناطق. يشير "التشابه إلى حد كبير" إلى جزيء يتم الحفاظ به على شكل وظيفي أو بنائي تم الحافظ عليه بحيث يكون له أو يمكن أن يتم ‎gall‏ له بنية واحدة على الأقل أو ‎a‏ ‏من واحدة أو أكثر من البنيات أو الوظائف (على سبيل ‎(JU)‏ وظيفة بيولوجية أو نشاط) خاص 0 بالجزيء المرجعي أو المنطقة ذات الصلة/ المناظرة من جزء من الجزيء المرجعي الذي يشترك معه في ‎Lata)‏ ‏يمكن تأكيد مدى الهوية (التشابه) بين اثنين من المتواليات باستخدام برنامج كمبيوتر وخوارزم رياضي. تعود الخوارزمات الرياضية المذكورة التي تحسب هوية المتوالية بالنسبة المئوية (التشابه) بصفة عامة فا يتعلق بفجوات المتالية وعدم التشابه في منطقة لامقارنة او المساحة. على سبيل 5 المثالء ‎BLAST‏ (على سبيل المثال» 2.0 ‎(BLAST‏ خوارزم البحث (انظرء على سبيل ‎JEL‏ ‎Mol.
Biol. 215:403 (1990‏ .ل ‎¢(Altschul et al.,‏ المتاح بشكل تجاري خلال ‎(NCBI)‏ ‏الذي له متغيرات كما يلي: عدم التوافق-؟؛ فتحة فجوة ©؛ وامتداد فجوة ؟. بالنسبة لمقارنات متوالية البولي ببتيد؛ يتم بشكل نمطي استخدام خوارزم ‎BLASTP‏ في توليفات مع قالب درجات ‎PAM100 Jie‏ و 250 ‎PAM‏ و 62 8105/4 و 50 ‎.BLOSUM‏ تم أيضاً استخدام ‎Ae) FASTA 0‏ سبيل المثال» 851/82 و 851/3 ) وبرامج مقارنة خاصة بمتوالية البحث ‎SSEARCH‏ لكي يتم الحساب الكمي عند مدى من الهوية ( ‎Pearson et al., Proc.
Natl.‏ ‎Acad.
Sci.
USA 85:2444 (1988); Pearson, Methods Mol Biol. 132:185‏ ‎and Smith et al., J.
Mol.
Biol. 147:195 (1981)‏ :(2000)). تم أيضاً تطوير برامج خاصة بالتشابه الكمي للبروتين الخاص بالهوية باستخدام تخطيط مظهري يعتمد على ‎Delaunay‏ ‎AAR‏
اع
Bostick et al., Biochem Biophys Res Commun. 304:320 ( ‏والذي تم تطويره‎ .(((2003 تشتمل البولي نيوكليوتيدات على إضافات وإدراجات على سبيل المثال من نطاقات غير متجانسة. يمكن أن تكون الإضافة (على سبيل المثال من نطاق غير متجانس) عبارة عن ربط تساهمي أو غير تسامي لأي نوع من الجزيء فيما يتلعق بالتركيبة. وعلى نحو نمطي الإضافة والإدراجات (على سبيل المثال نطاق غير متجانس) يمنح توافق أو وظيفة خاصة بالتمايز أو النشاط. تشتمل إشافات أو إدراجات على متواليات خيمرية ومتوالية دمج والتي تكون عبارة عن متوالية بولي ببتيد أو متوالية بروتين بها واحد أو اكثر من الحزيئات التي لا تكون موجودة بشكل طبيعي في متوالية النشاط المرجعي (النوع غير الطبيعي) المرتبطة بشكل تساهمي مع المتوالية. تشتمل 0 المصطلحات "اندماج” أو "خيمري" والصور المتغيرة النحوية منهاء عندما يتم استخدامها في المجرع بالنبة لجزيء حيث أن أجزاء أو جزء من الجزيء يشتمل على هوية متمايزة (غير متجانس) من الجزيء حيث أنا لا توجد بشكل نمطي معاً في الطبيعة. أي؛ على سبيل المثال فإن جزءِ من الاندماج أو الجزءِ الخيمري يشتمل على أو يتكون من جزءٍ الذي لا يوجد معه في الطبيعة وهما متمايزات من الناحية الإحصائية. 5 يشير المصطلح ‎"JB‏ إلى بلازميد؛ فيروس (على سبيل المثال» ناقل ‎(AAV‏ كوزميد أو ناقل آخر والذي يمكن معالجته بواسطة إدراج أو تضمين بولي نيوكليوتيد. يمكن استخدام تلك النواقل للمعالجة الجينية (أي» نواقل انتساخ) لكي تم إنتاج/ نقل بولي نيوكليوتيدات في الخلايا أو لكي يتم انتساخ أو ترجمة البولي نيوكليوتيد في الخلايا. تشتمل متوالية حمض نووي خاصة بالنقل على الأقل على أصل الانتساخ الخاص بالانتشار في الخلية وعلى نحو اختياري عناصر إضافية 0 اختيارية مثل متوالية بولي نيوكليوتيد غير متجانس وعناصر التحكم الخاصة بالتعبير (مثل المعززات؛ المحسنات) والمرقمات القابلة للانتقاء ‎(Ao)‏ سبيل ‎(JUN‏ مقاومة مضادات حيوية) ومتوالية بولي -أدينين. وكما تم استخدامه هناء يشير المصطلح ‎mil‏ عودة الارتباط" كمعدل لناقل فيروسي مثل معدل لناقل فيروسي ‎Jie‏ نواقل ‎AAV‏ ناتجة عودة الارتباط وأيضاً معدل خاص بالمتواليات مثل بولي
وه نيوكليوتيدات ناتجة عودة الارتباط ويولي ببتيدات التي تكون عبارة عن تركيبات (على سبيل المثال» ‎AAV‏ أو متواليات) التي تمت معالجتها (أي تعديلها) في طريقة لا تحدث بشكل عام في الطبيعة. ينطوي مثال معين من الناقل ناتج عودة الارتباط ‎Jie‏ ناقل ‎AAV‏ حيث يكون هناك بولي نيوكليوتيد يوجد بشكل طبعيي في الجينوم الفيروسي من النوع غير المعالج (على سبيل المثال ‎(AAV 5‏ بداخل جينوم فيروسي. على سبيل المثال؛ فإن هناك مثال خاص بالبولي نيوكليوتيد حيث أن البولي نيوكليوتيد غير المتجانس (على سبيل المثال؛ الجين) المشفر لبروتين في الناقل مع أو بدون ‎FCO‏ ” و/أو مناطق إنترون التي يرتبط بها الجين بشكل طبيعي بداخل جينوم الفيروس (على سبيل المثال» ‎(AAV‏ وعلى الرغم من ذلك فإن المصطلح ‎mild‏ عودة ‎hls‏ لا يتم استخدامه دائماً هنا لكي يشير إلى النواقل الفيروسية مثل نواقل ‎Loads AAV‏ متواليات مثل البولي 0 نيوكلويتيدات والبولي ببتيدات والصور ناتجة عودة الارتباط من ‎AAV‏ والمتواليات التي تشتمل على بولي نيوكليوتيدات والبولي ببتيدات التي يتم التعبير عنها ويتم تضمينها بدلاً من الحذف المذكور. يمكن كبسلة ناقل ناتج عودة الارتباط "جينوم” (على سبيل المثال» جينوم ناقل ‎(AAV‏ أو يمكن تعبئتها في الفيروس (الذي يطلق عليه هنا "جسيم” أو 'فيرون") فيما يتعلق بالعدوى التالية ( نقل العدوى أو التحويل) لخلية؛ خارج الكائن الحي أو في المعمل أو في الكائن الحي. تمت كبسلة جينوم ناقل ‎AAV‏ ناتج عودة الارتابط أو تمت التعبئة في جسيم ‎AAV‏ يمكن أن يطلق على الجسيم بأنه ' ‎TAAV‏ ". سوف تشتمل تلك الجسيمات أو الفيرونات بشكل نمطي على بروتينات التي تقوم بالكبسلة أو التعئة الخاصة بالجينوم الناقل. تشتمل أمثلة معينة على كابسيد فيروسي وبروتينات مغلفة وفي حالة بروتينات كابسيد ‎AAV‏ ر ‎AAV‏ ‏بالنسبة لبلازميد ناتج عودة الارتباط» يشير ناقل ‎Masia”‏ إلى جزءِ من متوالية البلازميد ناتج عودة 0 الارتباط التي يتم تغليفها إلى حد كبير أو تتم كبسلتها لتشكيل جسيمات فيروسية. في الحالة التي يتم فيها استخدام بلازميدات ناتجة عودة الارتباط لإنشاء نواقل تصنيع ناتجة عودة الارتباط فإن الجينوم الناقل لا يشتمل على ‎oda‏ من "البلازميد" الذي لا يناظر متوالية الجينوم الناقل والبلازميد ناتج عودة الارتباط. يطلق على جزء الجينوم غير الناقل من البلازميد ناتج ‎sage‏ الارتباط ‎ash‏ ‏'صورة أساسية من البلازميد" التي تكون مهمة للانتساخ والتضعيف الخاص بالبلازميد وعملية تكون
اج _
مطلوية لنشر وإنتاج ‎ug dll‏ ناتج عودة الارتباط ولكن لا يتم تغليفها بنفسها أو كبسلتها في
جسيمات فيروس (على سبيل المثال ‎AAV‏ ( .
وبالتالي يشير ناقل "جينوم” إلى ‎sa‏ من البالزميد الناقل الذي يتم تغليفه أو كبسلته بواسطة فيروس
(على سبيل المثال» ‎(AAV‏ والذي يشتمل على متوالية بولي نيوكليوتيد غير متجانس. يشتمل جزءٍ
تاقل الجينوم من البلازميد ناتج عودة الارتباط على الصورة الأساسية التي تكون مهمة فيما يتعلق
بالانتساخ والتضخيم الخاص بالبلازميد ولكن لا يتم تغليفه بنفسه أو كبسلته بواسطة الفيروس (على
سبيل المثال؛ ‎(AAV‏
يتم اشتقاق الناقل الفيروسي من أو يعتمد على واحد أو أكثر من عناصر حمض نووي الذي يشتمل
على جينوم فيروسي . تشتمل النواقل الفيروسية المعينة على نواقل فيروسات صغيرة مثل نواقل فيروس مرتبطة بالغدة ‎(AAV)‏ .
تتم معالجة متواليات ناقل ناتج عودة الارتباط بواسطة إدراج أو تضمين البولي نيوكليوتيد. وكما تم
الكشف عنه هناء فإن البلازميد الناقل يشتمل بصفة عامة على أصل انتساخ واحد على الأقل
للانتشار في الخلية وواحد أو أكثر من عناصر التحكم في التعبير.
تشتمل متواليات الناقل على نواقل ‎AAV‏ التي تشتمل على واحد أو اكثر من "عناصر التحكم في 5 1 التعبير ‎J‏ وبصفة نمطية تكون عناصر التحكم في التعبير عبارة عن متوالية (متواليات) حمض
نووي التي تؤثر في التعبير أو تكون عبارة عن بولي نيوكليوتيد مرتبط بشكل فعال. تشتمل عناصر
التحكم؛ على عناصر التحكم في التعبير كما تم توضيحه هنا مثل المعززات والمحسنات ‎lly‏
تكون موجودة بداخل ناقل والذي يتم تضمينه لتسهيل انتساخ البولي نيوكليوتيد غير المتجانس
المناسب وإذا كان ذلك مناسباً الترجمة (على سبيل المثال» محسن؛ معزز وإشارة انشقاق خاصة بالإنترونات؛ والصيانة لإطار القراءة الصحيح أو الجين للسماح بالترجمة في الإطار الخاصة ب
‎MRNA‏ وكودونات الإيقاف ‎stop codons‏ ؛ إلخ). تعمل العناصر المذكورة بشكل نمطي في
‏صورة سيل ولكنها لا تعمل في صورة ترانس ‎rans‏
‏يمكن التأثير على عامل التعبير عند مستوي خاص بالانتساخ؛ الترجمة؛ الانشاق وثبات الرسائل»
‏إلخ. ‎eg‏ نحو نمطي؛ فإن عنصر التحكم في التعبير يمكنه أن يعديل الترجمة والتي تكون مجاورة
للطرف © ” من البولي نيوكليوتيد الي يتم انتساخه ‎gl)‏ الصورة العلوية". يمكن أن توج عناصر التحكم في التعبير عند الطرف ؟” من متاليات الانتساخ (أي؛ التيار البعدي" أو بداخل صورة انتساخ (على سبيل المثال؛ في الإنترون). يمكن أن توجد عناصر التحكم في التعبير عند مسافة بعيدة من متوالية منتسخة (على سبيل ‎٠٠١ (JE‏ إلى ‎(dove one‏ ١٠٠٠و١٠٠٠‏ إلى 500860 و 000 إلى ‎٠٠٠٠١‏ أو أكثر من النيوكليوتيدات من البولي نيوكليوتيد) حتى عند مسافات كبيرة. وعلى الرغم من ذلك ونتيجة وجود حدود خاصة بطول النيوكلويتيد؛ وبالنسبة لنواقل ‎AAV‏ فإن عناصر التحكم في التعبير سوف تكون بصورةنمطية في مدى من ‎١‏ إلى ‎٠٠٠١‏
نيوكليوتيد من البولي نيوكليوتيد. تكون الوظيفة أو التعبير الخاص ببولي نيوكليوتيد مرتبط بشكل غير متجاهس وعلى نحو فعال
0 قابلاً للتحكم فيه بشكل ‎(a‏ بواسطة العناصر (على سبيل المثال؛ معزز) بحيث يقوم العنصر بتعديل انتساخ البولي نيوكليوتيد وفي شكل ترجمة مناسبة خاصة بناتج الانتساخ. يكون مثال محدد من عنصر التحكم في التعبير ‎Ble‏ عن معزز والذي يوجد بشكل عادي من © 7 من متوالية ناتجة الانتساخ. ينطوي مثال آخر من عنصر التحكم في التعبير في محسن والذي يمكمن أن يوجد عند ‎Fe 7 0‏ من متوالية ناتج الانتساخ أو بداخل متوالية يمكن انتساخها.
5 يشير ‎hall’‏ كما تم استخدامه هنا إلى متوالية ‎DNA‏ التي توجد بشكل مجاور لمتوالية البولي نيوكليوتيد التي تشفر ‎mite‏ ناتج عودة الارتباط. يكون المعزز مرتبطا بشكل نميط مع متوالية مجاورة؛ على سبيل المثال؛ بولي نيوكليوتيد غير متجانس. يزيد المعزز بشكل نمطي لكمية تم التعبير عنها من البولي نيوكليوتيد غير المتجانس بالمقارنة مع كمية تم التعبير عنها عندما لا يوجد أي معزز.
0 يمكن أن يشير 'محسن" كما هو مستخدم هنا إلى متوالية التي تكون موجودة على نحو مجاور لبولي ببتيد غير متجانس. تكون عوامل المحسن موجودة بشكل نمطي عند الجزء العلوي من عنصر المعزز ولكنه يعمل ويمكن أن يكون موجوداً في شكل سفلي في مدى متوالية من ‎DNA‏ ‏(على سبيل المثال؛ بولي ببتيد غير متجانس). وبالتالي يمكن أن يكون المحسن موجودة عند ‎٠٠١‏ ‏زوج قاعدة» ‎You‏ زوج قاعدة» ‎0٠0‏ زوج قاعدة أو أكثر من أزواج القاعدة القبلية أو البعدية من
25 بولي نيوكليوتيد غير متجانس. تزيد عوامل المحسن بشكل نمطي والتي تم التعبير عنها من بولي
ل نيوكليوتيد غير متجانس أعلاه من التعبير المتزايد الذي يتم إعطاؤه بواسطة عنصر المعزز ‎.promoter element‏ تشتمل عناصر التحكم من التعبير (على سبيل المثال» معززات) على تلك التي تكون فعالة بشكل خاص نسيج أو نوع خلية يطلق عليها هنا عن "عناصر التحكم في التعبير الخاصة بنسيج/ المعززات. تكون عناصر التحكم في التعبير الخاصة بالنسيج تكون فعالة بشكل نميط في خلية معينة أو نسيج (على ‎Jaw‏ المثال الكبد ‎liver‏ ؛ المخ ‎brain‏ والجهاز العصبي المركزي ‎central‏ ‎nervous system‏ والحبل الشوكي ‎spinal cord‏ « والعين ‎eye‏ والشبكية ‎retina‏ والعظم 6 والعضلة ‎muscle‏ والرثة ‎lung‏ وخلايا البنكرياس ‎pancreas‏ ؛ والقلب ‎heart‏ وخلية الكبد ‎kidney cell‏ ؛ إلخ). تكون عناصر التحكم الخاصة بالتبير نشطة بشكل موضعي في تلك 0 الخلايا والأنسجة أو أعضاء بسبب أنها تكون معروفة بواسطة بروتينات منشط خاصتب الانتساخ أو أي منظمات أخرى من الانتساخ والتي تكون فريدة بالنسبة لخلية أو نسيج أو نوع العضو. على سبيل المثال؛ إذا كان التعبير في عضلة هيكلية هو المطلوب؛ فيمكن استخدام معزز فعال في العضلة. تشتمل تلك على معززات من جينات تشفر أكتين ‎actin‏ هيكلي - ‎cot‏ سلسلة ميوسين خفيفة ‎AY‏ وكيناز عضلة من كرياتين وأيضاً معززات عضلة تخليقية مع أنشطة أعلى من 5 معززات فعالة بشكل طبيعي (انظر؛ على سبيل المثال» -17:241 ‎Li, et al., Nat.
Biotech.‏ (1999) 245 ). تكون أمثلة المعززات الخاصة بالنسيج للكبد عبارة عن ألبومين ‎albumin‏ ‎Virol., 71:5124-32 (1997)‏ .ل ‎aac Miyatake, et al.‏ أصلي لفيروس التهاب الكبد ‎Wl (Sandig, et al., Gene Ther. 3:1002-9 (1996) B‏ فيتويروتين ‎alpha—‏ ‎Arbuthnot, et al., Hum.
Gene.
Ther., 7:1503-14 (AFP) fetoprotein‏ 0 [(1996)؛ العظم (أوستيوكالسين ‎Stein, et al., Mol.
Biol.
Rep., ¢ osteocalcin‏ )1997( 24:185-96؛ وسيالويروتين العظام ‎Chen, et al., J. « bone sialoprotein‏ ‎Bone Miner.
Res. 11 :654-64 (1996)‏ )؛ الخلايا اللمفاوية ‎«CD2) lymphocytes‏ ‎Hansal, et al., J.
Immunol., 161:1063-8 (1998)‏ ؛ السلسلة الثقيلة لجلويولين مناعي ‎immunoglobulin heavy chain‏ ؛ سلسلة مستقبل الخلية ‎T cell receptor a chain‏ (« معزز عصبي ‎neuronal‏ (إنوكلاز خاص بالعصب ‎¢(NSE)neuron-specific enolase‏ ‎AAR‏ tA ‏جين سلسلة خفيفة‎ ¢Andersen, et al., Cell. Mol. Neurobiol., 13:503-15 (1993)
Piccioli, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88:5611-5 ‏من خيط عصبي‎
Piccioli, et al., Neuron, 15:373-84 )1995([ ‏خاص بالعصب»‎ ١/907 ‏جين‎ (1991) ‏من بين أشياء أخرى.‎ تشتمل عناصر تحكم خاصة بالتعبير على معززات جيدة أو معززات واعدة / محسنات التي تكون قابلة للتعبير القائد من البولي ببتيد في العديد من أنواع خلية مختلفة. تشتمل العناصر المذكورة؛ على سبيل المثال لا الحصر على فيروس مضخم للخلايا ‎(CMV) cytomegalovirus‏ فوري من المعزز المبكر/المحسن / متواليات المحسن»؛ ومعزز فيروس ساركوما ‎Rous sarcoma‏ ‎(RSV)virus‏ / متواليات محسن ومعززات فيروسية أخرى/ محسنات فعالة في العديد من أنواع ‏0 الخلية الثديية أو عناصر تخليقية ‎ally‏ لا تكون موجودة في الطبيعة (انظر؛ على سبيل المثال؛ ‎((Boshart et al, Cell, 41:521-530 (1985)‏ معزز 51/40؛ ومعزز ربداكتاز داي ‏هيدروفولات ‎dihydrofolate reductase promoter‏ ؛ معزز أكتين سيتوبلازمي - ] ‎phosphoglycerol ‏ومعززات كيناز فوسفو جليسيرول‎ Cytoplasmic -actin promoter kinase (PGK) promoter ‏15 يمكن أن تمنح عناصر التحكم في التعبير تعبير في طريقة تكون ‎ALE‏ للانتظام» أي أن الإشارة أو ‏وسلة الحث تزيد أو تقلل التعبير عن البولي نيوكليوتيد غير المتجانس المرتبط بشكل فعال. يكون ‏العنصر القابل للتنظيم الذي يزيد من التعبير من البولي نيوكليوتيد المرتبط بالفعالية في استجابة ‏لإشارة أو وسيلة حث يطلق عليها هنا "عنصر قابل للحث" (أي؛ يتم حثه بواسطة الإشارة). تشتمل ‏الأمثلة؛ على سبيل المثال لا الحصر ‎cle‏ هرمون (على سبيل المثال ستيرويد) ومعزز قابل ‏0 للحث. يطلق على عنصر قابل للحث الذي يقلل التعبير عن بولي ببتيد مرتبط بشكل فعال في ‏استجابة لإشارة أو 'وسيلة حث إلى عنصر قابل للاخضاع” (أي؛ إشارة تقلل التعبير مثل عندما ‏تكون الإشارة قد تمت إزالتها أو تكون غير موجودة في التعبير الذي يتزايد). وعلى نحو نمطي؛ يتم ‏منح كمية الزيادة أو النقص بواسطة تلك العناصر التي تكون متناسبة بكمية من الإشارة أو الحث ‏الموجود؛ كلما كان هناك زيادة في الإشارة أو الحث كلما كان هناك زيادة تقليل في التعبير. تشتمل ‏5 أمظة غير حصرية معينة على معزز ميتالو ثيونين من الأغنام القابلة للحث بالزنك ‎TIN mouse | ‏معزز ورم ثديي فأري قابل للحث بهرمون الستيرويد‎ «(MT) metallothionine ‏(الطلب‎ 17 polymerase ‏نظام معزز بوليميراز‎ (MMTV) mammary tumor virus
Gossen, et ( tetracycline ‏نظام قابل للعكس من تترا سيكلين‎ (V/V 00 AA ‏الدولي رقم‎ ‏ونظام قابل للحث من‎ ¢(al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89:5547-5551 (1992) ‏انظر أيضاً‎ ¢(Gossen, et al., Science. 268:1766-1769 (1995) ‏تترا سيلكين‎ 5 ‏ونظام قابل للحث‎ (Harvey, et al., Curr. Opin. Chem. Biol. 2:512-518 (1998))
Wang, et 4 (Wang, et al., Nat. Biotech. 15:239-243 (1997) RU486 ‏من‎ ‎rapamycin ‏ونظام قابل للحث من رببامسين‎ cal., Gene Ther. 4:432-441 (1997)];
Magari, et al., J. Clin. Invest. 100:2865-2872 (1997); Rivera, et al., ) ‎(Nat. Medicine. 2:1028-1032 (1996) 0‏ يمكن أن تكون عناصر التحكم القابلة للتنظيم مفيدة في سياق تلك التي تم تنظيمها بواسطة حالة فسيولوجية معينة؛ على سبيل المثال؛ درجة الحرارة او الطور الحاد. تشتمل عناصر التحكم في التعبير ‎Load‏ على عنصر (عناصر) أصلية خاصة ببولي نيوكليوتيد. يمكن أن يكون عنصر تحكم أصلي(على سبيل المثال) معزز عندما يكون مطلوباً أن يكون التعبير ‏5 خاصر ببولي نيوكليوتيد غير متجانس والذي يجب أن يحاكي التعبير الأصلي. يمكن استخدام العنصر الأصلي عندما يكون تعبير بولي نيوكليوتيد غير متجانس قد تم تنظيمه على نحو مؤقت أو لكي يتم التطوير في طريقة خاصة بالنسيج أو في استجابة لوسية الحث الخاصة بالانتساخ. يمكن أيضاً استخدام عناصر التحكم ‎Jie‏ الإنترونات ومعالجة ببولي أدينيل ‎polyadenylation‏ ‏أو متواليات تحكم من ‎Kozak‏ . ‏0 وكما تم استخدامه هناء يشير المصطلح ‎hl)‏ قابل للتشغيل” أو 'مرتبط على نحو فعال" إلى التجاور الوظيفي الخاص بمركبات تكون مطلوبة لكي تسمح لها بأن تعمل بالطريقة المطلوبة. في المثال الخاص بعنصر التحكم في التعبير في رابط قابل للتشغيل باستخدام بولي نيوكليوتيد؛ فإن العلاقة تكون عبارة عن عنصر التحكم قابلة للتعديل ‎Lad‏ يتعلق بالتعبير عن حمض نووي. وعلى نحو خاص؛ على سبيل ‎(JU)‏ فإن هناك اثنين من ‎DNA‏ يتم ربطها بشكل فعال وتريط وسائل ‏5 يكون بها ‎cpl‏ من ‎DNAS‏ قد تم ترتيبها (في صورة سيس 65 أو ترانس ‎(trans‏ في مثل تلك
Col
العلاقة التي تكون بها على الأقل متواليات ‎DNA‏ بحيث تكون قادرة على بذل تأثير فيسولوجي
على متواليات أخرى.
تشتمل النواقل على نواقل ‎AAV‏ التي تشتمل على عناصر حمض نووي إضافية أيضاً. تشتمل تلك
العناصر؛ على سبيل المثال لا الحصر أيضاً على واحدة أو أكثر من نسخ متواليات ‎AAV TTR‏ معالجة معزز/محسن. وإشارة إنهاء الانتساخ؛ ومناطق 0 أو ؟ ' غير مترجمة ‎(Ao)‏ سبيل
‎(Jal‏ متواليات معالجة ببولي أدينيل) والتي تحيط بمتوالية البولي نيوكليوتيد أو كل أو جزء من
‏إنترون ا. تشتمل العناصر المذكورة بشكل اختياري أيضاً على إشارة إنهاء انتساخ. ينطوي مثال
‏غير حصري من إشارة إنهاء الانتساخ في إشارة إنهاء انتساخ 51/40.
‏وكما تم الكشف عنه هناء تقبل نواقل ‎AAV‏ بشكل نمطي إدراجات من ‎DNA‏ التي لها مدى
‏0 حجمي معين والذي يكون بصفة عامة حوالي ؛ كيول بايت إلى حوالي 5,7 كيلو بايت أو أكبر قليلاً. وبالتالي؛ وبالنسبة للمتواليات الأقصرء فإن إقحام مادة حشوء أو مادة ملء في الشظبة المدرجة لكي يتم ضبط الطول عند القرب من أو عند الحجم الطبيعي من المتوالية الجينومية البشرية المقبول لحشوة ‎AAV JIU‏ في جسيم فيروسي. في العديد من النماذج؛ فإن متوالية الحمض النووي لماءد الملء/مادة الحشو تكون عبارة عن ‎ia‏ غير قابل للترجمة (تشفير بروتين غير
‏5 مترجم) من حمض نووي. في نماذج معينة من ناقل ‎AAV‏ يكون لمتوالية ‎Jol‏ نيوكليوتيد طول ‎J‏ من 5,7 كيلو بايت ومادة ملء أو متوالية بولي نيوكليوتيد لمادة حشو التي لها طول عندما يتم دمجه (على سبيل ‎(JU)‏ يتم إرداجه بداخل ناقل) باستخدام متوالية بولي نيوكليوتيد لها طول إجمالي بين حوالي 00-70 كيلو بايت أو بين حوالي £0 ‎5,٠-‏ كيول بايت أو بين حوالي £7 ‎EA‏ كيلو بايت.
‏0 يمكن أن يعمل الإنترون أيضاً في شكل متوالية مادة ملء أو متوالية بولي نيوكليوتيد لمادة حشو من لكي يتم تحقيق طول من تعبأة الناقل ‎AAV‏ بداخل جسيم فيروسي. يمكن أن تحسن الإنترونات وشظايا الإنترون (على سبيل المثال جزءِ من الإنترون ‎١‏ من ‎(FIX‏ التي تعمل في شكل مادة ملء أو مادة حشو من متوالية بولي نيوكليوتيد ‎lly‏ تحسن التعبير. على سبيل ‎(JE)‏ تضمين عنصر اءترون يمكن أن يحسن التعبير بالمقارنة مع التعبير في غياب عنصر الإنترون ( ‎Kurachi et‏
‎.(al., 1995, supra 5
-١ه-‏ يكون استخدام الإنترونات غير محدود بتضمين متواليات إنترون ‎FIX‏ من | ولكن تشتمل ايضاً على إنترونات أخرى حيث أن تلك الإنترونات يمكن أن يتم ريطها مع نفس الجين (على سبيل ‎(JU)‏ بولي نيوكليوتيد غير متجانس يشفر ‎FIX‏ يتم اشتقاق الإنترون من إنترون موجود في متوالية جينومية ‎(FIX‏ أو ترتبط مع جين مختلف بشكل كامل أو متوالية ‎DNA‏ أخرى. ونتيجة ا لذكل فإن المناطق غير المترجمة ( غير البروتينة المشفرة ‎(non-protein encoding‏ من الحمض النووي؛ مل الإنترون الموجود في متواليات جينومية من جينات قريبة (مرتبطة) ( متواليات بولي ببتيد غير متجانسة تشفر كل أو ‎ein‏ من نفس البروتين المشفر بواسطة متوالية جينومية) وجينات غير قريبة (غير منتظمة) من متوالية بولي نيوكليوتيد غير متجانسة والتي تشفر بروتين الذي يكون متمايزاً عن البروتين الذي تم تشفيره بواسطة متوالية جينومية) والتي يمكن أن تعمل في 0 شكل مادة ملء أو متوالية بولي نيوكليوتيد من مادة حشو طبقاً للاختراع. تشير عبارة " جزء من إنترون | " كما تم استخدامه هنا إلى منطقة من إنترون | بها طول نيوكليوتيد من حوالي ‎١.١‏ كيلو بايت إلى حوالي ‎١١7‏ كيلو بايت حيث أن تلك المنطقة تحسن التعبير عن ‎FIX‏ وعلى نحو نمطي بمقدار حوالي ‎٠,5‏ طية أو أكثر من البلازميد أو ناقل بصورة أساسية عند المقارنة مع التعبير عن “ا في غياب ‎sa‏ من الإنترون ا. يكون جزءِ محدد بشكل 5 خاص عبارة عن ‎٠,7‏ كيلو بايت من جزءِ من الإنترون ‎.١‏ ‏يشير المصطلح أأوليجيو نيوكليوتيد" كما تم استخدامه هنا غلى متواليات ويادئات ومسابارت تم تحديدها في شكل جزيء حمض نووي يضم اثنين أو أكثر من ريبو - أو دي أوكسي رببو نيوكليوتيدات ‎or deoxyribonucleotides‏ -00 وعلى نحو نمطي أكثر من ثلاثة. يكون الحجم الدقيق من الأوليجيونيوكليوتيد ‎oligonucleotide‏ معتمداً على العديد من العوامل وعلى 0 استخدام معين واستخدام خاص بأوليجيو نيوكليوتيد ولكن على نحو نمطي أوليجيو نيوكليوتيد به طول بين حوالي ‎v=‏ 0 من النيوكليوتيدات. يشير المصطلح "بادئ ‎primer‏ " كما تم استخدامه هنا إلى أوليجيو نيوكليوتيد ‎oligonucleotide‏ ‏» إما منفرد الجديلة أو مزدوج الجديلة أو تم اشتقاقه من نظا بيولوجي تم إنشاؤه بواسطة اهتضام إنزيم تقييد أو تم إنتاجه بشكل تخليق عندما يتم وضعه في وسط مناسب والذي يكون قابلاً للعمل 5 الوظيفي في شكل وسيلة بدء من تخليق حمض نووي يعتمد على الصورة الأساسية. وعندما يتم ‎AAR‏
وه العرض باستخدام صورة أساسية من حمض نووي ‎cilia‏ فإن النيوكليوسيد المناسب ومواد أساسية من تراي فوسفات من الأحماض النووية إنزيمات بولي ميراز وعوامل مشتركة مناسبة وحالات مثل درجة ‎hall‏ المناسبة والرقم الهيدروجيني ‎PH‏ والبادئ يمكن أن يمتد عند الطرف ؟ ' بواسطة إضافة النيوكليوتيدات بواسطة التأثير الخاص ببوليميراز أو نشاط مشابه للحصول على منتج تمديد بادئ. يمكن أن يكون البادئ متنوعاً في الطول بالاعتماد على حالات معينة ومتطلبات خاصة بالاستخدام. على سبيل المثال؛ فإن التطبيقات الخاصة بالتشخيص يكون البادئي عبارة أوليجيو نيوكليوتيد به بشكل نمطي ‎٠-١١‏ أو أكثر من النيوكليوتيدات في الطول. يجب أن يكون البادئ ‎LIS‏ بشكل متمم لصورة أصلية مرغوية لكي يتم البدء في تخليق ‎mite‏ امتداد مطلوب والتالي فإنه يقوم بالتلدين مع الناتج المطلوب الذي به جديلة في طريقة كافية لتوفير جزيء هيدروكسيل ” من 0 البادئ في اقتراب خاص بالاستخدام في بدء التخليق بواسطة بوليميراز أو إنزيم مشابه. من غير المطلوب أن تكون متوالية البادئ ممثلة لمتمم من الصيغة الأصلية المطلوية. على سبيل المثال؛ فإن متوالية النيوكليوتيد يمكن أن يتم ربطها مع الطرف *' من بادئ متمم خلال ذلك. وعلى نحو بديل فإن القواعد غير المتممة يمكن أن تتقاطع مع متوالية بادئ أوليجيو نيوكليوتيد بشرط أن متوالية البادئ يكون لها متمم كاف مع متوالية من الجديلة الأساسية المطلوية والتي تم توفيرها 5 بشكل وظيفي في شكل معقد بادئ أساسي خاص بتخليق منتج خاص التمديد. تم وصف تفاعل سلسلة بوليمراز ‎(PCR) Polymerase chain reaction‏ في طلب البراءة الأمريكي رقم 5,107,198 ورقم 400.146 ورقم 4,178,148 . تشير العبارة 'تم تهجينه ‎hybridize‏ بشكل ‎pala‏ " إلى ارتباط بين اثنين من جزيئات الحمض النووي بمديلة منفردة من متوالية متممة بشكل خاص لكي يتم السماح بالتجهين تحت ظروف تم 0 تحديدها بشكل مسبق وبصفة ‎dale‏ تم استخدامها في المجال( وأحياناً يطلق عليها 'متممة إلى حد كبير"). وبصفة خاصة فإن المصطلح يشير إلى التهجين لاثنين من متواليات البولي نيوكليوتيد مع متمم إلى حد كبير خاص بالاستبعاد القياسي الخاصة بالتجين مع أو بدون متوالية حمض نووي بجديلة منفردة أو متواليات حمض نووي ‎Nucleic acid‏ غير متممة. يشير "جين مرق قابل للانتقاء ‎selectable marker gene‏ إلى جين والذي عندما يتم التعبير 5 عنه فإنه يمنح نمط ظاهري قابل للانتقاء ‎Jie‏ مقاومة مضادات حيوية ‎(He)‏ سبيل المثال؛
الج كاناميسين ‎(kanamycin‏ على خلية متحولة. يكون جين "مسجل" عبارة عن أحد الجينات التي توفر إشارة قابلة للانتقاء. ينطوي مثال غير حصري من جين مسجل في جين ليوسيفيراز ‎Juciferase gene‏ يمكن استتخدام بولي نيوكليوتيدات وبولي ببتيدات تشتمل على صور معدلة يمكن تحضيرها باستخدام العديد من تقنيات الانتساخ القياسية وتقنية ‎DNA‏ ناتج عودة الارتباط من خلال التعبير عن خلية أو المعالجة في المعمل لتقنيات تخليق كيميائية. يمكن تحديد نقاء البولي ببتيدات من خلال التتالي أو الاستشراد الكهربي للجل وما شابه ذلك. على سبيل المثال» فإن الأحماض النووية يمكن أن يتم ‎Lelie‏ باستخدام عملية التهجين أو تقنيات فحص قواعد البيانات المعتمدة على الكمبيوتر. تشتمل مثل تلك التقنيات؛ على سبيل المثال لا لالحصر على: ‎)١(‏ تهجين مكتبات ‎DNA 0‏ جينومية أو مكتبات ‎CDNA‏ باستخدام مسبارات لكي يتم ‎Glas)‏ التشابه الخاص بمتواليات النيوكليوتيد؛ )1( فحص الجسم المضاد لاكتشاف البولي ببتيدات التي بها سمات هيكلية مشتركة؛ على سبيل المثال؛ باستخدام مكتبات التعبير؛ () تفاعل سلسلة بوليميراز ‎polymerase chain‏ ‎(PCR) reaction‏ على ‎DNA‏ الجينومي أو ‎DNA‏ باستخدام بادئات قابلة للتلدين مع متوالية حمض نووي محل الاهتمام؛ )8( البحث بالكمبيوتر من قواعد بيانات متوالية خاصة بمتواليات ذات 5 صلة؛ و )0( فحص متمايز خاص بمكتبات الحمض النووي الذي تم طرحه. يمكن أيضاً إنتاج بولي نيوكليوتيدات وبولي ببتيدات المشتملة على صور معدلة بواسطة التخليق الكيميائي باستخدام طرق معروفة للماهر في المجال؛ على سبيل ‎Jal‏ على سبيل المثال؛ جهاز التخليق الذاتي (انظرء؛ على سبيل المثال؛ ‎Biosystems, Foster City, CA‏ 160ام80). يمكن تخليق الببتيدات بشكل كامل أو بشكل جزئي باستخدام طرق كيميائية (انظرء على سبيل المثال؛ ‎Nucleic Acids Res.
Symp.
Ser. 215; Horn (1980); and .Caruthers (1980 0‏ ‎Banga, A.K., Therapeutic Peptides and Proteins, Formulation, Processing‏ ‎.(and Delivery Systems (1995) Technomic Publishing Co., Lancaster, PA‏ يمكن إجراء تخليق الببتيد باستخدام العديد من تقنيات الطور الصلب (انظر؛ على سبيل المثال؛ ‎Roberge Science 269:202 (1995); Merrifield, Methods Enzymol.‏
وه
)289:3(1997( والتخليق الآلي الذي يمكن أن يتم تحقيقه؛ على سبيل ‎(Jia‏ باستخدام وسيلة
تخليق ببتيد ‎(Perkin Elmer) ABI 431A‏ طبقاً لتعليمات المُصنع. يشير المصطلح "معزول" عندما تم استخدامه مع معدل من التركيبة إلى أن التركيبات يتم تحضيرها بشكل يدوي أو يتم فصلها بشكل كامل أو على الأقل بشكل جزئي من معالجة في الكائن الحي بصورة طبيعية. وبصفة عامة فإن التركيبات المعزولة تكون خالية إلى حد كبير من واحدة أو أكثر من المواد التي ترتبط بشكل طبيعي مع الطبيعة؛ على سبيل المثال؛ بروتين واحد أو ‎JEST‏ حمض نووي؛ ‎Chae Scand‏ وغشاء خلية. لا يتم استثناء المصطلح 'معزول" من التوليفة التي تم إنتاجها بشكل يدوي» على سبيل المثال متوالية ناقل ‎ils‏ عودة الارتباط (على سبيل المثال؛ ‎(AAV‏ أو جسيم فيروسي ‎le)‏ سبيل المثال» ناقل ‎AAV-RhT74‏ أو ‎AAV Jil‏ ذي صلة مثل 0 الصور المتغيرة من 4074ا-/اظ// مثل صور متغيرة من الكابسيد ‎Ao)‏ سبيل ‎RHM4- (JU‏ 1))؛ التي تقوم بتغليف أو تعبأة جينوم الناقل وصيغة صيدلانية. لا يستثني المصطلح 'معزول" . الصور الطبيعية لابديلة من التركيبة؛ مثل الصور المهجنة/ الصور الخيمرية؛ والصور المتعددة / الأوليجيومرات والتعديلات (على سبيل ‎(JU‏ المعالجة بالفسفوريل ‎phosphorylation‏ « المعالجة بجلايكوسيل ‎glycosylation‏ والمعالجة بالشحم ‎(lipidation‏ أو صور مشتقة أو صور
5 .تم التعبير عنها في خلايا عائلة تم إنتاجها بصورة يدوية. توفر الطرق والاستخدامات من الاختراع وسائل خاصة بتوصيل (النقل العارض للإشارة) بولي نيوكليوتيدات غير متجانسة (جينات متحولة) بداخل مدى واسع من الخاليا العائلة؛ بما في ذلك كل من الخلايا المقسمة وغير المقسمة. تكون متواليات الناقل ناتج عودة الارتباط (على سبيل المثال؛ ‎AAV‏ )؛ البلازميدات ‎plasmids‏ والجينومات الناقلة ‎vector genomes‏ والجسيمات الفيروسية 0 ناتجة عودة الارتباط ‎recombinant virus particles‏ (على سبيل المثال» ‎AAV-Rh74‏ أو ‎AAV‏ ذي صلة مثل الصور المتغيرة من ‎AAV-RhT4‏ مثل الصور المتغيرة من الكابسيد 70" على سبيل المثال 4]110/4-1))؛ الطرق والاستخدامات والصيغ الصيدلانية من الاختراع مفيدة بشكل إضافي في طريقة إعطاء ‎Gig yl‏ الببتيد؛ أو الحمض النووي لخاضع في حاجة لها مثل طريقة المعالجة. في مثل تلك الطريقة فإن البروتين أو الببتيد أو الحمض النووي يمكن أن يتم 5 إنتاجه بالتالي في الكائن الحي في الخاضع. يمكن أن يستفيد الخاضع من أو يكون في حاجة ‎TIN‏
وه لبروتين؛ ببتيد أو حمض نووي بسبب أن الخاضع يكون لديه نقص في الببروتين أو الببتيد أو الحمض النووي أو بسبب إنتاج البروتين؛ الببيتيد أو احمض النووي في الخاضع الذي يمكن أن يمنح بعض التأثير العلاجي في شكل طريقة خاصة بالمعالجة أو خلاف ذلك. وعلى نحو نمطي؛ يمكن أن يكون من المطلوب أن يتم تثبيط التعبير أو إنتاج جين مستهدف يتم تضمينه في عملية المرض؛ على سبيل المثال؛ معالجة المرض الخاص بالضور العصبي ‎neurodegenerative‏ ‏أو التصلب ‎atherosclerosis‏ ؛ على سبيل المثال لتحقيق التأثير العلاجي. بصورة ‎dale‏ فإن متواليات لاناقل ناتج ‎sage‏ الارتباط (على سبيل ‎(AAV (Jud!‏ بالزميدات وجينومات ناقلة وجسيمات فيروس ناتج عودة الارتباط ( على سبيل المثال» ‎AAV-RhT74‏ أو ‎AAV‏ مرتبط بها مثل الصور المتغيرة من 14074-/281// مثل لكابسيد والصور المتغيرة (على 0 سبيل ‎RHM4-1) (Jaa‏ ))؛ وطرق واستخداما يمكن أن يتم استخدامه لكي يتم توصيل أي بولي ببتيد غير متجانس (جين تحويلي) مع تأثير مفيد لمعالجة أو تخفيف واحد أو أكثر من الأعراض المرتبطة مع أي اضطراب الذي يتعلق بالتعبير عن عدم الفعالية أو التعبير غير المطلوب عن الجين. يمكن استخدام متواليات ناقل ناتج عودة الارتباط ‎(AAV Jie)‏ ويلازميدات وجينومات ناقل وجسيمات فيروس ناتج ‎sage‏ الارتباط (على سبيل المثال» ‎AAV-Rh74‏ أو ‎AAV‏ ذي ‎dla‏ مثل 5 صور متغيرة من ‎AAV-RNT4‏ مثل الصور المتغيرة من الكابسيد (على سبيل ‎(Jil‏ -140/4] (1 ) وجسيمات وطرق واستخدامات يتم استخدامها لتوفير علاج خاص بالعديد من حالات المرض. هناك عدد من الأمراض الموروثة في الجينات المعيبة المعروفة والتي تم استنساخها. بصفة عامة؛ فإن الحالات المرضية السابقة التي تقع في اثنين من الفئات: حالات النقص بصفة طبيعية خاصة 0 بالإنزيمات والتي تكون موروثة بشكل عام في طريقة مرتدة أوحالات عدم التوازن والتي تشتمل أحياناً على بروتينات منظمة أو بروتينات هيكلية والتي يتم توارثها أو تكون موجودة بطريقة سائدة. بالنسبة لحالات التقص فإن نقل الجين يمكن استخدامه بحيث يكون ‎Ble‏ عن جين طبيعي بداخل أنسجة متأثير خاصة بمعالجة بديلة وأيضا إنشاء نماذج حيوانية خاصة بمرض باستخدام تطفيرات في عكس اتجاه النسخ. بالنسبة لحالات المرض غير امتوازن فإن الناقل الجيني يمكن استخدامه 5 لكي يتم إنشاء حالة مرضية في نظام النموذج؛ والذي يمك أن يتم استخدامه لكي يعطي تأثير
مضاد للحالة المرضية. وبالتالي» فإن متوالية الناقل ناتج عودة الارتباط (على سبيل المثال ‎(AAV‏ ‏ويلازميدات وجينومات ناقل وجسيمات فيروس ناتج ‎sage‏ الارتباط (على سبيل المثال؛ نواقل ‎AAV-Rh74‏ أو نواقل ‎AAV‏ ناتجة عودة الاريتاط ‎Jie‏ الصور المتغيرة من ‎AAV-RhT4‏ مثل صور متغيرة من الكابسيد ‎(Heo)‏ سبيل ‎RHM4-1) (JU‏ ))؛ وطرق واستخدامات للسماح ببمعالجة أمراض جينية. وكما تم استخدامه هنا تتم معالجة الحالة المرضية بكشل جزئي أو بشكل كلي لتخفيف النقص أو عدم التوازن الناتج عن المرض أو الذي يجعله أكثر شدة. من الممكن ‎Loa‏ استخدام التفاعل الخاص بالموضع أو متواليات الحمض النووي للتسبب في التطفيرات لواحدة أو تصحيح العيوب ما أمكن. تشتمل حالات المرض التوضيحية؛ على سبيل المثال وليس الحصر على: تليف كيسي ‎cystic‏ ‎fibrosis 0‏ (وأمراض أخرى من الرثة ‎(lung‏ ومرض هيموفيليا 8 من النوع ‎A‏ ‏ومرض هيموفيليا من النوع 8؛ و الثلإسيميا ‎thalassemia‏ ؛ والأنيميا ‎anemia‏ واضطرابات تخثر الدم ‎blood disorder‏ الأخرى»ء ‎AIDS‏ ومرض الزهايمر ‎Alzheimer's disease‏ ومرض باركنسون ‎Parkinson's disease‏ ومرض هنتنجتون ‎Huntington's disease‏ ومرض التصلب الضموري الجانبي ‎camyotrophic lateral sclerosis (ALS)‏ والصرع ‎epilepsy 5‏ ؛ وغيرها من الاضطرابات العصبية والسرطان ‎cancer‏ وداء السكري ‎diabetes‏ « ضمور العضلات (على سبيل المثال» مرض دوشين ) ومرض جوشير ‎Gaucher's disease‏ ومرض ‎Hurler's‏ ونقص دي أميناز أدينوسين ‎adenosine deaminase deficiency‏ وأمراض تخزين جلايكوجين ‎glycogen storage diseases‏ وعيوب أيضية ‎metabolic‏ ‎defect‏ أخرى ومرض ‎(Pompe’s‏ وفشل القلب الاحتقاني وأمرض الضمور المتعلقة بالشبكية 0 (تنكس المشيمية؛ العمى جزئي الخلقي .؛ وغيرها من أمراض العين) أمراض من الأعضاء الصلبة (على سبيل المتال». مرض المخ ‎brain‏ والكبد ‎liver‏ والكلية ‎kidney‏ والقلب ‎(heart‏ وما شابه ذلك. وطبقاً للاختراع» تشتمل طرق المعالجة والاستخدامات التي تم توفيرها على نواقل ناتجة عودة الارتباط من الاختراع ‎Ae)‏ سبيل المثال؛ ‎(AAV‏ وجينومات ناقل وجسيمات فيروس ناتجة عودة 5 الارتباط ( على سبيل المثال نواقل ‎AAV-Rh74‏ أو نواقل ‎AAV‏ المتعلقة به ‎Jie‏ الصور المتغيرة ‎TIN‏
—oy—
من ‎AAV-RhT74‏ مثل الصور المتغيرة من الكابسيد (على سبيل المثال» ‎RHM4-1‏ (( والجسيمات الفيروسية الخاصة بالاختراع ‎le)‏ سبيل المثال» 4074]-/ل80/م ‎AAV‏ ذات الصلة مثل الصور المتغيرة من ‎AAV-RhT4‏ مثل الصور المتغيرة من الكابسيد( على سبيل ‎JUD‏ ‎(RHM4-1‏ ولاتي تشتمل على جينومات ناقل. تكون طرق واستخدامات الاختراع قابلة للتطبيق على نحو عام بالنسبة لأمراض معينة حيث يمكن تعديل تلك الطرق للمعالجة بواسطة غدخال بروتين تشفر جين أو زيادة أو حث التعبير الخاص بالجن أو الوظيفة؛ على سبيل المثال» إضافة جين أو استبدال. تكون الطرق والاستخدامات الخاصة بالاختراع قابلة للتشغيل بشكل عام لأمراض قابلة للتعديل بواسطة معالجة تقليل أو نقص التعبير عن الجين أو الوظيفة؛ على سبيل المثال؛
معالجة الجين أو الاختزال الخاص بالتعبير عن الجين (معالجة جين).
0 تشتمل أمثلة معينة غير محددة من الأمراض القابلة للمعالجة طبقاً للاختراع على تلك التي تم توضيحها أعلاه هنا وأيضاً أمراض رئة (على سبيل ‎(JU)‏ تليف كيسي)؛ اضطراب أو تخثر الدم (على سبيل المثال؛ هيموفيليا ‎A‏ أو هيموفيليا 8 مع أو بدون مثبطات)؛ الثلاسيمياء اضطراب الدم (على سبيل المثال؛ ‎(Land!‏ مرض الزهايمر» ومرض باركنسون؛ ومرض هنتنجتون؛ والتصلب الجانبي الضموري ‎(ALS)‏ الصرع؛ أمراض التخزين الليزوزومية | ‎lysosomal storage‏
‎diseases 15‏ ؛ واضطرايبات تراكم والنحاس أو الحديد ‎copper or iron accumulation‏ ‎Je) disorders‏ سبيل ‎«Jal‏ مرض ويلسون ‎Wilson’s‏ او مينكس ‎Menkes‏ ) نقص حمض الليباز الليزوزومي ‎lysosomal acid lipase deficiency‏ ؛ اضطراب عصبي أو اضطراب الاعصاب ‎neurological or neurodegenerative disorder‏ والسرطان» السكر من النوع الأول والسكر من النوع الثاني ومرض ‎«Gaucher's‏ ومرض ‎Hurler's‏ ونقص دي أميناز
‏0 أدينوسين وعيوب أيضية (على سبيل المثال» أمراض تخزين جلايكويروتين ‎glycogen storage‏ ‎sain (ayes (diseases‏ الشبكية ‎retinal degenerative disease‏ (مثل النقص في ‎RPEGS‏ أو العيوب بها وتنكس المشيمية ¢ وأمراض أخرى في العين) وأمراض من الذهب الصلب (على سبيل المثال» المخ؛ الكبد والكلية والقلب). بالإضافة ‎le‏ ذلك فإن نواقل ناتج ‎sage‏ الارتباط من الاختراع (على سبيل المثال» ‎(AAV‏
‏5 وجينومات الناقل؛ وجسيمات الفيروس ناتجة ‎sage‏ الارتباط ‎(Ae)‏ سبيل المثال؛ نواقل -/باهم
‎TIN
—oA- ‏مثل صور متغيرة من الكابسيد (على‎ AAV-RIT4 ‏صور متغيرة من‎ Jie AAV ‏أو نواقل‎ 4 ‏سبيل المثال» 111/4-1))؛ وطرق واستخدامات يمكن أن يتم استخدامها لتوصيل أحماض نووية‎ ‏أو شظايا‎ monoclonal antibodies ‏تشفر أجسام مضادة أحادية النسيلة‎ nucleic 5 ‏منها لكي يتم توفير تأثيرات بيولوجية مفيدة لمعالجة أو تخفيف أعراض مرتبطة مع‎ 5 rheumatoid ‏التهاب المفاصل الروماتويدي‎ Jie ‏السرطانات وأمراض معدية وأمراض مناعة ذاتية‎ 5 .arthritis viral ‏في أحد النماذج؛ تشتمل الطريقة أو استخدام الاختراع على: )1( توفير جسيمات فيروسية‎ ‏ذي صلة مثل صور متغيرة من كابسيد‎ AAV ‏أو‎ AAV-Rh74 ‏(على سبيل المثال»‎ particle vector | ‏التي تشتمل على جينوم ناقل‎ (RHM4-1 ‏-/ا228 ( على سبيل المثال»‎ 4 ‏وجينوم ناقل يشتمل على متوالية بولي نيوكليوتيد غير متجانسة (وعلى نحو اختياري‎ genome 10 ‏مادة مل/ متوالية بولي نيوكليوتيد لمادة حشو)؛ حيث تكون متوالية البولي نيوكليوتيد غير المتجانسة‎ ‏مرتبطة بشكل فعال مع عنصر التحكم في التعبير الذي يمنح انتساخ خاص بمتوالية بولي‎ ‏نيوكليوتيد مذكورة؛ و (ب) إعطاء كمية من الجسيمات الفيروسية لثديي مثل البولي نيوكليوتيد غير‎ mammal ‏المتجانس والذي يتم التعبير عنه في ثديي‎ ‏في نموذج آخرء تشتمل طريقة أو استخدام خاص بالاختراع على توصيل أو نقل متوالية البولي‎ 5 ‏نيوكليوتيد غير المتجانسة إلى داخل ثديي أو خلية م الثتديي بواسطة إعطاء جسيم فيروسي (على‎ ‏صور متغيرة‎ Jie dla ‏ذي‎ AAV ‏أو‎ AAV-RNT4 ‏(على سبيل المثال»‎ (AAV (JU) ‏سبيل‎ ‏أو مجموعة‎ (RHMA-1 ‏من 8874-/2/21 مثل صور متغيرة من الكابسيد (على سبيل المثال»‎
AAV ‏أى‎ AAV-RhT4 (Jad) ‏(على سبيل‎ (AAV (Jad) ‏من الجسيمات الفيروسية (على سبيل‎ ‏مثل صور متغيرة من الكابسيد (على سبيل‎ AAV-RNT4 ‏ذي الصلة مثل الصور المتغيرة من‎ 0 ‏التي تشتمل على جينوم ناقل» وجينوم ناقل يشتمل على متوالية بولي‎ (RHM4-1 ‏المثال»‎ ‏نيوكليوتيد غير متجانسة (وعلى نحو اختياري مادة مل/ متوالية بولي نيوكليوتيد لمادة حشو) لثديي‎ ‏متوالية البولي نيوكليوتيد غير المتجانسة بداخل الثديي‎ Ji ‏أو خلية من ثديي وبالتالي توصيل أو‎ ‏أو خلية من الثديي.‎
-4ه- في نموذج إضافي؛ تشتمل طريقة أو استخدام الاختراع الخاص بثديي تمت معالجته في حاجة للتعبير عن البروتين او الوظيفة على توفير جسيم فيروسي ( على سبيل المثال؛ ‎(AAV‏ (على سبيل المثال» ‎AAV-Rh74‏ أو ‎AAV‏ ذي صلة ‎Jie‏ الصور المتغيرة من 474-/21/ مثل صور متغيرة من الكابسيد (على سبيل المثال» ‎((RHMA-1‏ أو مجموعة من الجسيمات الفيروسية (على سبيل المثال» ‎(AAV‏ (على سبيل المثال ‎AAV-RhT74‏ أو ‎AAV‏ ذي صلة؛ مثل الصور المتغيرة من ‎AAV-RNT4‏ مثل صور متغيرة من الكابسيد (على سبيل المثال» ‎(RHAMA-T‏ التي تشتمل على جينوم ناقل وجينوم ناقل يشتمل على متولية بولي نيوكليوتيد غير متجانسة (وعلى نحو اختياري مادة مل/ متوالية بولي نيوكليوتيد لمادة حشو ©16ا8)؛ وإعطاء الجسيم الفيروسي أو مجموعة من الجسيمات الفيروسية لثديي؛ حيث تشفر متوالية البولي نيوكليوتيد غير المتجانس 0 لبروتين تم التعبير عنه في ثديي أو حيث تقوم متالية البولي نيوكليوتيد غير المتجانسة بتشفير متوالية مثبط أو بروتين الذي يقلل من التعبير الخاص ببروتين داخلي المنشاً في الثديي. في سمات معينة من الاختراع واستخدامات تم الكشف عنها ‎(Lia‏ فإن التعبير عن البولي نيوكليوتيد غير المتجانس يشفر بروتين أو حمض نووي مثبط والذي يوفر فائدة علاجية للثتديي (على سبيل المثال» بشري). في سمات معينة؛ يتم تضمين متوالية مادة المل/ مادة الحشو في متوالية ناقل 5 بحث أن الأطوال المدمجة مع متولية بولي نيوكليوتيد غير متجانس يكون لها أطوال كلي بين حوالي 00-0 كيلو قاعدة أو بين حوالي 0٠,؛-٠‏ ,5 كيلو قاعدة أو بين ‎EAE‏ كيلو قاعدة. تشتمل طرق واستخدامات الاختراع على طرق المعالجة والتي ينتج عنها أي تأثير علاجي أو تأثير مفيد. في طرق الاختراع المتعددة؛ والاستخدامات الخاصة بها إنها تشتمل بشكل غضافي على ‎davis‏ تقليل أو خفض واحد أو اكثر من الأعراض الجانبية ‎(Ae)‏ سبيل ‎(JU‏ الفيزيائية) أو 0 الأعراض أو المرض أو الأمراض أو التعقيدات التي يتم التسبب فيها بواسطة أو يتم ريطها مع مرض مثل زمن تخثر الدم المنخفض؛ وجرعة الإعطاء المنخفضة من بروتين عامل التخثر الإضافي. يكون التأثير العلاجي أو التأثير المفيد من المعالجة بالتالي عبارة عن أي تحسن مستهدف أو واضح أو تحسن يمكن اكتشافه أو فائدة تم توفيرها لخاضع معين. يمكن أن لا يحتاج التاثير 5 العلاجي أو التأثير المفيد أن يكون هناك تخفيف كامل لكل أو أي عرض من الأعراض الجانبية؛
اضطراب أو مرض او مضاعفات المرض. وبالتالي؛ يتم تحقيق النقطة الإكلينيكية المرضية عندما يكون هناك تحسناً متقطعاً أو ضعف جزئي في الأعراض العكسية؛ الاضطراب أو المرض أو المضاعفات المسببة بواسطة أو المرتبطة مع المرض أو التثبيط أو النقص أو الاختزال أو الكبت أو الاتجاه إلى الأسوأ المحدد أو الذي يمكن التحكم فيه بواسطة كبت واحد او أكثر من الأعراض الجانبية أو الاضطرابات أو المرض أو المضاعفات الناتجة عن او المرتبطة مع المرض على مدى فترة قصيرة أو فترة طويلة (ساعات؛ أيام؛ أسابيع» ‎sed‏ إلخ). يمكن إعطاء تركيبات ‎Jie‏ جينومات الناقل؛ والجسيمات الفيروسية ناتجة عودة الارتباط (على سبيل المثال» ناقل ‎AAV-Rh74‏ أو نواقل ‎AAV‏ متريطة بها ‎Jie‏ الصور المتيغرة من ‎AAV-RNT4‏ ‏مثل الصور المتغيرة من الكابسيد (على سبيل المثال ‎(RHM4-T‏ التي تشتمل على جينومات 0 تاقل والطرق والاستخدامات الخاصة بالاختراع بكمية كافية أو بكمية فعالة لخاضع في حاجة لها. تشير "كمية فعالة" أو 'كمية كافية" غلى كمية التي تم توفيرها في جرعات منفردة أو جرعات متعددة بمفردها أو في توليفة مع واحد أو أكثر من التركيبات الأخرى (عوامل علاجية مثل العقار) ومعالجات وبروتوكولات أو عوامل أنظمة ‎candle‏ واستجابة قابلة للاكتشاف من أي مدة زمنية (طويلة أو قصيرة) مع نتيجة متوقعة او مطلوية لكي تتم الاستفادة لخاضع من أي درجة قابلة 5 لللقياس بها أو ‎ALG‏ للاكتشاف ‎Lad‏ يتعلق بأي مدة زمنية (على سبيل المثال؛ دقائق؛ ساعات؛ أيام؛ شهور؛ سنوات أو تتم معالجتها). سوف يتنوع جينوم الناقل أو الجسيم الفيروسي (على سبيل المثال؛ ‎Jie AAV‏ ناقل ‎AAV-RhT74‏ ‏أو ناقل ‎AAV‏ ذي صلة مثل صور متغيرة من ‎AAV-RhT4‏ مثل صور متغيرة من الكابسيد (على سبيل ‎RHMA=T (JB)‏ )) والتي تم إعطاؤها في شكل جرعة لتحقيق تأثير علاجي؛ على 20 سبيل المثال» جرعة في جينومات ناقل/ لكل كيلو جرام من وزن الجسم (جينوم ناقل/كجم) والتي تتنوع بالاعتماد على عوامل الخدمة والتي تشتمل؛ على سبيل المثال لا لاحصر على: المسار الخاص بالإعطاء؛ ومستوي تعبير البولي نيوكليوتيد غير المتجانس المطلوب لتحقيق تأثير علاجي لمرض معين تتم معالجته وأي استجابة مناعية لعائل بالنسبة لناقل فيروسي أو استجابة مناعية لعائل بالنسلة لبولي نيوكليوتيد غير متجانس او منتج تعبير (بروتين) وثبات خاص بالبروتين الذي 5 تم التعبير عنه. يمكن أن يحدد الماهر في المجال بسهولة مدى جرعة فيرون لمعالجة مريض به
-١؟-‏ مرض معين أو اضطراب بالاعتماد على عوامل مذكورة فيما سبق وأيضاً فيما يتعلق بعوامل أخرى. وبصفة ‎dale‏ فإن الجرعة يمكن أن تتراوح من على الأقل ‎FA ٠١ 7 ١‏ أكثر على سبيل ‎Jad)‏ ‏نحن ك4 ل دك نك صنل كك دصند اك أرى انال كلف وجينومات ناقل لكل كيلو جرام (جينومات ناقل لكل كيلو جرام) من وزن الخاضع لتحقيق التأثير لللماَظضسش | ل ل لل ل ل ىلل لل ل ل ل ل لال لل للللللللللل سل سلستكاهسكك ا وباستخدام الهيموفيليا ‎(JES‏ وبصفة عامة يعتقد أنه لكي يتم تحقيق تاثير معين فإن تركيز عامل تخثر الدم ييكون أكبر من 961 من تركيز العامل الموجودة في فرد طبيعي بحيث يتم تغيير النمط الظاهري الشديد من المرض إلى نمط متوسط. يتسم النمط الظاهري الشديد بتلف المفاصل والنزف الذي يهدد الحياة. لكي يتم تحويل النمط الظاهري للمرض المتوسط إلى نوع معتدل من المعتقد أن 0 تركيز عامل تخثر ‎pall‏ يمكون أعلى من 965 مما هو مطلوب بشكل طبيعي. وبالنسبة لمعالجة خاضعين مصابين ‎(bisa‏ فإن الجرعة النمطية تكون على الأقل حوالي ‎Ve ٠١ ١‏ من جينومات ناقل ‎(VE)‏ لكل كيلو جرام ‎VE)‏ /كجم) من وزن الخاضع أو بين حوالي ‎٠١ ٠١ * ١‏ إلى ‎١١ ٠١ XO)‏ جينوم ناقل /كجم من الوزن الخاص بالخاضع أو بين حوالي ‎١١ ٠١ * ١‏ إلى ‎XN‏ ‎VY ٠‏ من جينوم ناقل/ كجم من الوزن الخاص بالخاضع أو بين حوالي ‎١١ ٠١ ” ١‏ إلى ‎١‏ * ‎IY ٠١ 5‏ من جينوم ناقل /كجم من الوزن الخاص بالخاضع لتحقيق التأثير العلاجي المطلوب. تكون الجرعات من "كمية ‎Malad‏ أو 'كمية ‎"AIS‏ لمعالجة (على سبيل المثال؛ لتخفيف أو توفير فائدة أو تحسين علاجي) بشكل نمطي فعالة لتوفير استجابة خاصة بواحدة أو العديد من الأعراض الجانبية أو كلها ونواتج أو التعقيدات الخاصة بالمرض لواحد او أكثر من الأعراض العكسية والاضطرابات والمرض والصور المرضية أو تعقيدات؛ على سبيل المثال؛ يتم التسبب فيها بواسطة 0 أو بالارتباط مع المرض عند مدى يمكن قياسه وعلى الرغم من ذلك يكون هناك تقليل أو تثبيط أو كبت أو تحديد أو التحكم في تطور أو التوجه نحو الأسوا لمرض له نتيجة مرضية. يمكن أن تكون الكمية الفعالة أو الكمية الكافية غير قابلة لتوفيرها في جرعة إعطاء واحدة ‎Sally‏ ‏تتلطب العديد من جرعات الإعطاء ولذلك يمكن إعطاؤها بمفردها أو في توليفة مع تركيبة أخرى (على سبيل ‎(JE‏ عامل) أو مع معالجة أخرى أو مع بروتكونل أو نظام علاجي آخر. على 25 سيل المثال؛ فإن الكمية يمكن أن تكون متناسبة في الزيادة كما هو موضح طبقاً لحاجة الخاضع vy
ونوعه وحالة وشدة المرض المراد معالجته والتأثيرات الجانبية )13 وجدت) من المعالجة. بالإضافة إلى ذلك؛ لا تكون الكمية فعالة أو كافية إذا لم تكون فعالة أو كافية عندما يتم إعطاؤها في جرعة منفردة أو جرعات متعددة بدون تركيبة ثانية ‎le)‏ سبيل المثال؛ عقار آخر أو عامل)؛ معالجة أو بروتكونل أو شظية علاجية حيث أن الجرعات الإضافية أو الكميات أو مواد أعلاه وتلك التالية مثل الجرعات او التركيبات الإضافية ‎Ae)‏ سبيل المثال؛ العقاقير أو العوامل) أو المعالجات او البروتوكولاتي يتم بها تضمين تلك الكمية بحيث تكون فعالة أو كافية في خاضع معين. يتم اعتبار الكميات كافية إذا اشتملت أيضاً على كميات التي ينتج عنها تقليل في استخدام معالجة أخرى أو نظام علاجي آخر أو بروتوكول مثل بروتوكول الإعطاء لبورتين عامل تخثر لمعالجة اضطرابات
تخثر ‎Jo)‏ سبيل ‎(JO‏ هيموفيليا من النوع ‎5A‏ 8).
0 لا يكون هناك حاجة لكمية فعالة أو كمية كافية في كل خاضع معين تمت معالجته وليس كل الخاضعين المطلوب معالجتهم في مجموعة أو فئة معينة. تشير كمية فعالة أو كمية كافية من الفعالية أو الكفاية في خاضع معين»؛ ليس مجموعة ولا مجموعة عامة. وبشكل نمطي لتلك الطرق فإن بعض الخاضعين يعرضون استجابة أعلى أو أقل وعدم وجود استجابة لطريقة معالجة معينة أو استخدام معين. ويالتالي فإن الكميات المناسبة سوف تكو معتمدة على الحالة المراد معالجها
5 والكمية المطلوية وأيضاً الفرد الخاضع (على سبيل المثال؛ الإتاحة الحيوية بداخل الخاضع وجنس الخاضع ‎corey‏ إلخ). يشير المصطلح 'تخفيف" إلى تحسين قابل للاكتشاف أو قابل للقياس في مرض خاضع أو أي أعراض منه؛ أو استجابة خلوية مؤكدة. يشتمل تحسين قابل للاكتشاف على التعريض أو التقلي أو التقليل أو التثبيط أو الكبت أو التحديد أو التحكم في الحدوث أو التكرار أو الشدة أو التطور أو مدة
0 المرض أو التعقيدات المسببة بواسطة أو الارتباط مع مرض أو التحسن أو التسبب بشكل مؤكد في ‎das‏ المرض أو عكس المرض. وبالتالي» يمكن أن تؤدي نتيجة المعالجة الجيدة إلى ‎LA‏ علاجي" أو ‎"salina‏ من تقليل وتثبيط أو منع أو كبت أو تقليل أو التحكم أو منع حدوث أو تكرار أو شدة أو تطور أو مدة المرض أو واحد أو اكثر من الأعراض الجانبية أو الحالات المؤكدة أو النتائج الخاصة بالمرض في خاضع.
5 تكون طرق المعالجة والاستخدامات مؤثرة على واحدة أو أكثر من الفئات أو الأمراض أو الأعراض
اس اجانبية وبالتالي يتم أخذها في الاعتبار بأنها مفيدة. يكون هناك نقص أو تقليل في مستوي التحول ‎Todd‏ حيث يتم تثبيت المرض أو الأعراض الجانبية منه والذي يكون عبارة عن نتجة ‎Ladle‏ ‏مفيدة. ‏وبالتالي لا تكون هناك حاجة لاكتمال التخفيف العلاجي من المرض أو اي واحدة أو أكثر من الأعراض الجانبية والمضاعفات والنتائج أو الأسباب الأساسية المرتبطة بالمرض. ‎Ally‏ يكون هناك نقطة مرضية يتم تحقيقها عندما يكون هناك تحسناً تمت زيادته في مرض الخاضع أو التقليل الجزئي أو التقليل أو التثبيت أو الكبد أو تحديد أو التحكم أو منع حدوث المرض أو تكراره أو تقليل الشدة أو التطور أو المدة أو تثبيط الأمراض العكسية (على سبيل ‎(JUN‏ تثبيت واحد أو أكثر من الأعراض أو المضاعفات) على مدى مدة قصيرة أو لمدة طويلة من الزمن (ساعات؛ ‎ald‏ أسابيع؛ 0 شهور؛ إلخ). تكون الفعالية الخاصة بالطريقة أو المرض مثل المعالجة موفرة لفائدة علاجية أو تحسنا خاص المرض ويمكن أن يتم التأكد من ذلك من خلال طرق متنوعة. يمكن دمج طرق الاختراع والاستخدامات مع أي مركب أو عامل أو معالجة عقار أو أي نظام علاجي آخر أو بروتوكول به علاج ممطلوب مفيد أو ماضدة غضافة أو نشاط تآثير تآزري أو نشاط متمم أو تأثير. تشتمل أمثلة تركيبات توليفية ومعالجات على صور نشطة ثانية مثل؛ الصور 5 البيولوجية (البروتينات) عوامل وعقاقير. يمكن إعطاء صور بيولوجية مذكورة (بروتينات) وعوامل وعقاقير أو معالجات وعلاجات أخرى أو يتم إجراؤها قبل أو بعد أو على نحو متزامن أو بعد أي من الطرق أو الاستخدامات الخاصة بالاختراع» على سبيل المثال» طريقة ‎dalled Ladle‏ خاضع مصاب بمرض تخثر الدم. يمكن إعطاء مركب؛ عامل أو عقار أو معالجة أو أي أنظمة علاجية أخرى أو بروتوكولات في 0 شكل توليفة من التركيبة أو لاإعطاء على نحو منفصل؛ على سبيل المثال» على نحو متزام أو في مجموعات على نحو متتابع (قبل أو بعد) توصيل أو إعطاء الجينوم الناقل أو الفيروس (على سبيل المثال» ناقل 474]-/اظ/ أو ناقل ‎AAV‏ ذي ‎dha‏ مثل الصور المتغيرة من 574-/1// مثل صور متغيرة من الكابسيد ‎Je)‏ سبيل المثال» ‎(RHM4-T‏ من الاختراع. وبالتالي يوفر الاختراع توليفات يكون بها طريقة أو استخدام الاختراع في توليفة مع أي مركب أو عامل أو عقال أو نظام 5 علاجي أو بروتوكول ‎dallas‏ أو عملية أو علاج أو تركيبة؛ تم توضيحها هنا أو معروفة للشخص vg
الماهر في المجال. يمكن إعطاء المركب؛ العامل؛ العقار أو النظام العالجي أو بروتوكول المعالجة أو العملية أو العلاج أو التركيبة أو يمكن التنفيذ قبل أو بعد أو على نحو متزامن مع إعطاء جينوم ناقل أو فيروس (على سبيل المثال؛ ناقل 5474-/اهم أو ناقل ‎AAV‏ ذي صلة ‎Jie‏ الصور المتغيرة من ‎AAV-RT4‏ مثل الصور المتغيرة مكا بسيد (على سبيل المثال» 1110/4-1» )) من الاختراع إلى خاضع. وبالتالي تشتمل أمثلة غير حصرية من التوليفات منها على ما سبق أو مركب
آخر أو عامل أو عقار أ و نظام علاجي أو بروتوكول معالجة أو عملية أو علاج أو تركيبة. تشتمل طرق واستخدامات الاختراع أيضاً على» من بين أشياء ‎cal‏ طرق واستخدامات الي ينتج عنها حاجة أقل أو استخدام لمركب آخر أو عامل أو عقار أو أو نظام علاجي أو بروتوكول معالجة أو عملية أو علاج. على سبيل ‎(JU‏ بالنسبة لمرض تخثر ‎cand)‏ فإن الطريقة أو
0 الاستخدام الخاص بالاختراع يكون له فائدة علاجية إذا كان في خاضع معين وله تكرار أقل أو جرعة أقل أو يتم القضاء عليه فيما يتعلق بالإعطاء الخاص ببروتين عامل تخثر ناتج عودة الارتباط لكي يتم الإمداد بكمية كافية أو فعالة من عامل تخثر داخلي ‎Wadd)‏ (غير طبيعي أو متطفر) في الخاضع. وبالتالي وطبقاً للاختراع؛ تم توفير طرق واستخدامات خاصة بالحاجة أو الاستخدام الخاص بالعامل فيما يتعلق بالمعالجة أو العلاج.
5 يكون الاختراع مفيدا في حيوانات والتي تشتمل على التطبيقات الطبية في البيطريين. تشتمل الاستخدامات المناسبة بالتالي على الثدييات؛ مثل البشر وأيضاً ثدييات غير بشرية. يشير المصطلح "خاضع” إلى حيوان وعلى نحو نمطي أحد الثدييات ‎die‏ أح البشر أو رئيسيات غير أساسية (مثل القرود والجيبون والغوريلا وقرود الشامبنزي وإنسان الغاب والمكاك) والحيوانات المنزلية الكلاب والقطط) وحيوانات المزرعة (الدواجن مثل الدجاج والبط والخيول والأبقار والماعز
0 والأغنام والخنازير) وحيوانات التجارب (الفئران» الجرذان؛ الأرانب والخنزير الغيني). يشتمل الخاضعين من البشر على الأجنة والمولودين حديثا والأطفال والبالغين والراشدين. يشتمل الخاضعين على نماذج حيوانية مريضة وفئران ونماذج حيوانية أخرى من أمراض التخثر الخاصة بالدم والعوالم الأخرى المعروفة لذوي المهارة في المجال. ‎LS‏ تم تحديده ‎clin‏ يمكن استخدام النواقل وجسيمات الفيروس (على سبيل المثال» ‎AAV-RhT74‏
5 أو ‎AAV‏ ذي الصلة مثل الصور المتغيرة من 474-/21// ‎Jie‏ الصور المتغيرة من الكابسيد
و1 (على سبيل ‎(Jad)‏ 11/4-1!)) المشتملة على تلك النواقل لتوفير بروتين لخاضع حيث لا يكون هناك كمية كافية من البروتين أو يكون هنا نقص في منتج جين وظيفي (بروتين) أو لكي يتم توفير حمض نووي مثبط أو بروتين لخاضع الذي ينتج متج جين غير وظيفي أو جين فعال بشكل جزئي غير منتظم (بروتين) والذي يؤدي إلى المرض. ونتيجة لذلك؛ يشتمل الخاضعين المناسبين للمعالجة على هؤلاء الذين بهم أو يعانون من خطولة إنتاج كميات غير كافية أو بهم نقص في منتج جين وظيفي (بروتين) أو إنتاج منتج منحرف وعلى نحو خاص وظيفي أو غير وظيفي من الجينات (البروتين) والذي يمكن أن يؤدي إلى المرض. يشتمل الخاضعين المناسبين للإعطاء طبقاً للاختراع على هؤلاء الذين بهم أو يعانون من خطورة إنتاج منتج جين غير منتظم أو ناقص (متطفر) (بورتين) والذي يؤدي إلى مرض بحيث أن الكيمات القليلة أو التعبير أو الوظيفة من 0 منتج الجين غير المنتظم أو غير الفعال (المتطفر (البروتين) يمكن أن تؤدي غلى معالجة مرض أو تقلل من واحد أو أكثر من الأعراض أو تخفف أحد الأمراض. وبالتالي يشتمل الخاضعون المستهدفو على خضاعين بهم تلك العيوب بغض النظر عن نوع المرض ومدة أو درجة البداية والتطور والشدة والتكرار أو نوع أو مدة الأعراض. يشير مصطلح "الوقاية" والصور النحوية منه إلى طريقة يتم فيها ملامسة أو إعطاء أو التوصيل 5 في المعمل لخاضع قبل المرض. يمكن إجراء الإعطاء أو التوصيل في الكائن الحي لخاضع قبل تطور العرض العلاجي او الحالة أو المضاعفات إلخ؛ التي يسببها الارتباط مع المرض. على سبيل المثال فإن الفحص (على سبيل المثال الجيني) يمكن استخدامه لتحديد الخاضعين المذكورين في شكل أعضاء لإعطاء طرق الاختراع واستخدامهاته ولكن لا يمكن تحيد الخاضعين فيما يتعلق بالمرض. وبالتالي تشتمل تلك الأعراض على تلك التي تم فحصها والموجبة فيما يتعلق بكمية فعالة 20 من النقص في منتج الجيني الوظيفية (البروتين) أو تلك التي تنتج متج جيني غير منتظم أو منتج وظفي جزئي أو منتج جيني غير وظيفي (بروتين) والذي يمكن أن يؤدي إلى المرض؛ ‎ly‏ ‏الخاضعين الذين تم فحص أنهم موجبين لمنتج جين ناقص أو غير منتظم (متطفر) (بروتين) فإن ذلك يؤدي بهم إلى المرض حتى ولكل أن هؤلاء الخاضعين لم يظهروا علامات المرض. تشتمل طرق واستخدامات الاختراع على التوصيل والإعطاء الجهازي والمتعلق بمنطقة أو الموضع 5 أو باستخدام أي ‎lane‏ على سبيل المثال؛ بواسطة الحقن أو التسري أو في الفم (على سبيل
Ct ‏في شكل اهتضام,؛ أو استنشاق) أو على نحو موضعي (على سبيل المثال؛ عبر الجلد).‎ (JU ‏يشتمل التوصيل المذكور والإعطاء على الإعطاء في الوريد ويداخل العضلات ويداخل البريتون‎ ‏ويداخل الجلد وتحت الجلد ويداخل الفجوة وبداخل الجمجمة وعبر الجلد (بشكل موضعي) وعن‎ ‏غير طريق القناة الهيضمية؛ على سبيل المثال؛ عبر المخاطر أو في المستقيم. يشتمل الإعطاء‎ ‏التوضيحي ومسارات التوصيل على الإعطاء في الوريد 65 (.ل.1) والبريتون‎ 5 intramuscular ‏ويداخل العضلات‎ intrarterial ‏ويداخل الشرايين‎ (i.p.) intraperitoneal intra— ‏أو بداخل الجنبة‎ subcutaneous ‏أو تحت الجلد‎ parenteral ‏وعن طريق الحقن‎ ‏أو‎ intradermal ‏أو بداخل الجلد‎ dermal ‏أو في الجلد‎ topical ‏أو على نحو موضعي‎ pleural ‏على سبيل‎ « parenterally ‏أو عن غير طريق القناة الهضمية‎ transdermal ‏عبر الجلد‎ ‏أو بداخل النعاع الشوكي‎ intra—cranial ‏أو بداخل القحف‎ transmucosal ‏المثال؛ عبر المخاط‎ 0 ‏أو عن طريق الاستنشاق‎ mucosal ‏؛ في الفم (بشكل غذائي) أو في المخاط‎ intra-spinal ‏أو عن‎ intrapulmonary asl ‏بداخل الأنف أو باستخدام أنبوب أو بداخل‎ of respiration ‏أو تحت‎ buccal ‏أو في الشدقين‎ intrapulmonary instillation ‏طريق التطقير بداخل الرئة‎ ‏أو في فجوة‎ intrathecal ‏أو في الجافية‎ intravascular ‏أو بداخل الأوعية‎ sublingual ‏اللسان‎ ‏أو الإدخال الأيوني أو بداخل العين أو الإعطاء العيني أو الإعطاء البصري أو الإعطاء بداخل‎ 5
Jintralymphatic ‏الغدة أو بداخل الأعضاء أو بداخل اللمف‎ ‏يمكن أن تتنوع الجرعات بالاعتماد على ما إذا كانت المعالجة وقائية أو علاجية ونوع المعالجة‎ ‏وبداية التطور والشدة والتكرار والمدة أو احتمالية المرض الذي يتم إليه توجيه المعالجة والنقطة‎ ‏النهائية الإكلينيكية المطلوية والمعالجة السابقة والمعالجة المتزامنة والصحة العامة والعمر والنوع‎ ‏والعرض أو الدارة العلاجية الخاصة بالخاضع وعوامل أخرى يتم إدراكها بواسطة الماهر في‎ 0 ‏المجال. يمكن أن تزيد كمية الجرعة وعدد التكرار والمدة ويمكن أن تزيد على نحو له نسبة أو تقل‎ ‏كما هو موضح بواسطة التأثيرات الجانبية العكسية والمضاعفات أو اي عوامل خطورة أخرى من‎ ‏المعالجة أو العلاجي والحالة الخاصة بالخاضع. سوف يدرك الماهر في المجال أن العوامل يمكن‎ ‏ان تؤثر في الجرعة والزمن المطلوب لتوفير الكمية الفعالة لتوفير فائدة علاجية أو فائدة وقائية.‎ ‏اح‎ vy ؛7-١ ‏تم الكشف عن طرق واستخدامات للاختراع كما تم الكشف عنها هنا وتم تنفيذها في مدى‎ ‏أو 4 17-7 ساعة بعد أن يتم تحديد الخاضع على أساس أنه مصاب‎ 1 4-١١7 17-4 -" ‏بمرض يستهدف المعالجة أو له واحدة أو أكثر من الأعراض من المرض أو تم به فحص واحدة‎ ‏وتم تحديده في شكل موجب كما هو الحال هنا أو حتى خلال جرعة خاضع ليس به واحدة أو أكثر‎ ‏من الأعراض الخاصة بالمرض. وبطبيعة الحال” فإن الطرق والاستخدامات من الاختراع يمكن‎ 5 ‏أو أكثر من الأيام أو الشهور أو السنوات بعد‎ EASY) ؛7١-١6‎ OEY ءال-١ ‏إجراؤها في مدى‎ ‏أن يتم تحديد أن الخاضع به مرض يتم استهافه بالمعالجة أو أن به واحد او أكثر من أعراض‎ ‏المرض أو تم فحصه وتم تحديده في شكل صورة موجبة كما تم توضيح ذلك هنا.‎ ‏أو‎ AAV-Rh74 ‏مثل ناقل‎ AAV (JU ‏يمكن تضمين ناقل ناتج عودة الارتباط (على سبيل‎ ‏مثل الصور المتغيرة من الكابسيد‎ AAV-RNTS ‏مثل الصور المتغيرة من‎ dla ‏ذي‎ AAV ‏ناقل‎ 0 ‏(على سبيل المثال» 4110/4-1))؛ متواليات وبلازميدات وجينومات ناقلة وجسيمات فيروس ناتجة‎
Jie ‏ذي الصلة‎ AAV ‏أو ناقل‎ AAV-RhT74 ‏مثل ناقل‎ (AAV ‏الارتباط (على سبيل المثال»‎ sae ‏مثل الصور المتغيرة من الكابسيد (على سبيل المثال؛‎ AAV-RhT4 ‏الصور المتغيرة من‎ ‏وتركيبات أخرى وعوامل وعقاقير وصور بيولوجية (بروتينات) يمكن أن يتم تضمينها‎ (RHM4-1 ‏على سبيل المثال؛ مادة حاملة مقبولة بشكل صيدلاني أو سواغ. تكون‎ cdi aa ‏بداخل تركيبات‎ 5 ‏التركيبة الصيدلانية مفيدة؛ من بين أشياء أخرى؛ ويتم إعطاؤها وتوصيلها إلى الخاضع في الكائن‎ ‏الحي أو خارج الكائن الحي.‎ ‏كما تم استخدامه هنا يشير المصطلح "مقبول صيدلانياً” و'مقبول فسيولوجيا" إلى صيغة مقبولة‎ ‏بشكل بيوليوجي وصيغة غازية وصيغة سائلة أو صلبة أو خليط منها والتي تكون مناسبة لواحد أو‎ ‏أو التلامس. تكون تركيبة 'مقبولة بشكل‎ all ‏أكثر من المسارات الخاصة بالتوصيل في الكائن‎ 0 ‏صيدالني” أو مقبولة فسيولوجيا” عبارة عن مادة والتي لا تكون مقبولة بشكل بيولويج أو خلاف ذلك‎ ‏غير مطلوية؛ على سبيل المثال؛ مادة يمكن أن يتم إعطاؤها لخاضع بدون التسبب في وجود‎ ‏تأثيرات بيولوجية غير مقبولة إلى حد كبير. وبالتالي فإن التركيبة الصيدلانية يمكن استخدامها؛‎ ‏أو‎ AAV-Rh74 ‏سبيل المثال»‎ (Ae) ‏على سبيل المثال؛ في إعطاء ناقل فيروسي أو جسيم ناقل‎
م 1- ‎AAV‏ 53( صلة ‎Jie‏ الصور المتغيرة من 11174-/2/81 مثل الصور المتغيرة من الكابسيد ( على سبيل المثال» ‎(RHM4-1‏ أو خلية متحولة إلى خاضع. تشتمل تلك التركيبات على مذيبات ‎solvents‏ (مائية أو غير مائية) ومحاليل ‎solutions‏ (مائية أو غير مائية)»؛ مستحلبات ‎emulsions‏ (زيت في ماء أو ‎sla‏ في زيت)؛ معلقات 5050605005 ؛ ومواد ‎cays‏ وإكسيرات ‎elixirs‏ وأوساط تعليق ‎suspension media‏ أو مشتت ‎«dispersion‏ وتغليفات ‎coatings‏ وعوامل متساوية التوتر ‎isotonic‏ وعوامل تحسين امتصاص ‎absorption promoting‏ أو عوامل تأخير ‎delaying agents‏ وتلك التي تكون متوافقة مع الإعطاء الصيدلاني أو في الكائن الحي أو تلك التي تكون في تلامس مع الكائن الحي أو الخاصة بالتوصيل. يمكن أن تشتمل المذيبات المائية وغير المائية والمعلقات على عوامل تعليق 0 وعوامل تغليظ قوام. تشتمل العوامل المقبولة بشكل صيدلاني المذكورة على أقراص (مغلفة أو غير مغلفة) وكبسولات (صلبة أو ‎(Ld‏ وخرزات دقيقة أو مساحيق أو حبيبات وبللورات. يمكن أن يتم تضمين المركبات الفعالة الخاصة بالمكملات (على سبيل المثال؛ المواد الحافظة ومضادات البكتريا ‎antibacterial‏ ومضادات فيروسية ‎antiviral‏ وعوامل مضادة للفطريات ‎antifungal‏ ‎JS (agents‏ التركيبة. 5 يمكن أن تتم صياغة التركيبات الصيدلانية بحيث تكون متوافقة مع المسار الدقيق الخاص بالإعطاء أو التوصيل كما تم توضيحه هنا أو كم هو معروف لذي المهارة في المجال. وبالتالي فإن التركيبات الصيدلانية تشتمل على مواد حاملة ومواد مخففة أو سواغات مناسبة للإعطاء بواسطة مسارات متنوعة. تكون التركيبات المناسبة للإعطاء عن غير طريق القناة الهضمية مشتملة على محاليل مائية وغير مائية ومعلقات أو مستحلبات من مركب ‎(Jad‏ حيث أن تلك المستحضرات يمن أن تكون معقمة بشكل نمطي ويكن أن تكون متساوية التورت مع الدم من المستقبل المطلوب. تشتمل الأمثلة التوضيحية غير الحصرية على ماء ومحلول ملحي ‎saline‏ وديكستيروز ‎dextrose‏ وفروكتوز 00086 وإيثانول ‎ethanol‏ وزيوت حيوانية ‎animal‏ أو نباتية ‎vegetable‏ أو زيوت تصنيعية ‎.synthetic oils‏ اح
بالنسبة للإعطاء عبر المخاط أو بداخل الجلد ‎(Ao)‏ سبيل ‎(JU‏ التلامس الموضعي)؛ يمكن تضمين وسائل اختراق والتي يتم تضمينها في تركيبة صيدلانية. تكون وسائل الاختراق معروفة في المجال ويتم تضمينهاء على سبيل المثال؛ ‎Lad‏ يتعلق بالإعطاء عبر المخاط والمواد المنظمة ومحاليل صفراء ومشتقات حمض فيوزيديك. بالنسبة للإعطاء؛ فإن المكون الفعال يمكن صياغته في أيروسولات ومواد رش أو مراهم أو ذوابات أو هلامات أو كريات وبصفة عامة يكون معروف في المجال. وبالنسبة للتلامس مع الجلا؛ فإن التركيبة الصيدلانية تشتمل بشكل نميط على مراهم؛ كريمات أو غسولات وعجائن وأيروسيولات وزيوت. تشتمل المواد الحاملة التي يمكن استخدامها على فازلين ‎Vaseline‏ « لانولين ‎lanolin‏ ويولي إيثيلين جليكول ‎polyethylene glycols‏ « كحول ‎alcohols‏ ومحسنات عبر الجلد وتوليفات منها. 0 يمكن إضافة مذيبات مشتركة ومواد مساعدة إلى الصيغة. تشتمل الأمثلة غير الحصرية من المذيبات المشتركة على مجموعات هيدروكسيل ‎hydroxyl‏ أو مجموعات قطبية ‎polar‏ أخرىء؛ على سبيل المثال» مركبات كحولات ‎Jie alcohols‏ أيزو بروييل كحول ‎isopropyl alcohol‏ « مركبات جليكول ‎Jie glycols‏ بروبيلين جليكول ‎propylene glycol‏ ويولي إيثيلين جليكول ‎polyethyleneglycol‏ ويولي بروييلين جليكول ‎polypropylene glycol‏ وجليكول إيثر ‎glycol‏ ‎ether 5‏ وجليسيرول ‎glycerol‏ وبولي أوكسي إيشلين كحول ‎polyoxyethylene alcohols‏ و إسترات حمض دهني من بولي إيثيلين ‎.polyoxyethylene fatty acid esters‏ تشتمل المواد المساعدة؛ على سبيل المثال لا الحصر على مواد خافضة للتوتر السطحي ‎surfactants‏ مثل ليسيثين صويا ‎soya lecithin‏ وحمض أوليك ‎oleic acid‏ وإسترات سوريتات ‎sorbitan‏ ‏65 وتراي أوليات سوربيتات ‎trioleate‏ 07 ويولي فينيل بيروليدون ‎.polyvinylpyrrolidone 0‏ تكون التركيبات الصيدلانية وأنظمة التوصيل المناسبة لجينومان الناقل والجسيمات الفيروسية (على سبيل المثال» ناقل ‎AAV-Rh74‏ أو ناقل ‎AAV‏ ذي صلة مثل الصور المتغيرة من ‎AAV=‏ ‏4 مثل الصور المتغيرة من الكابسيد (على سبيل المثال» ‎(RHMA-1‏ وطرق واستخدامات خاصة بالاختراع والتي تكون معروفة في المجال (انظرء على سبيل ‎Remington: The «Jud‏ ‎Science and Practice of Pharmacy (2003) 20th ed., Mack Publishing Co., 5‏
ولا
Easton, PA; Remington’s Pharmaceutical Sciences (1990) 18th ed., Mack
Publishing Co., Easton, PA; The Merck Index (1996) 12th ed., Merck
Publishing Group, Whitehouse, NJ; Pharmaceutical Principles of Solid
Dosage Forms (1993), Technonic Publishing Co., Inc., Lancaster, Pa.;
Ansel and Stoklosa, Pharmaceutical Calculations (2001) 11th ed., 5
Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore, MD; and Poznansky et al., Drug . Delivery Systems (1980), R. L. Juliano, ed., Oxford, N.Y., pp. 253-315 ‏تم استخدام 'صورة جرعة وحدة" هنا بحيث تشير إلى وحدات منفصلة مناسبة في شكل جرعات‎ ‏وحدوية لخاضع تتم معالجته؛ تشتمل كل وحدة على نوعية محددة بشكل مسبق واختيارية في‎ ‏أو مادة ناقلة أو عامل‎ diluent ‏مخففة‎ sale ‏صيدلانية ( سواغ‎ carrier ‏ارتباطها مع مادة حاملة‎ 0 ‏يتم حسابها‎ Ally ‏الذي عندما يتم إعطاؤه في واحدة أو أكثر من الجرعات‎ (filling agent ‏ملء‎ ‏التأثير الوقائي أو العلاجي). يمكن ن تكون صور‎ (JU ‏لإنتاج التاثير المذكور (على سبيل‎ ‏الجرعة الخاصة بالوحدة في؛ على سبيل المثال؛ أمبولات وزجاجات والتي يمن أن تشتمل على‎ ‏على‎ caine ‏مجففة بالتجميد أو حالة جافة؛ أو مادة حاملة سائلة‎ Ala ‏تركيبة سائلة أو تركيبة في‎ ‏سبيل المثال؛ يمن أن تتم الإضافة قبل الإعطاء أو التوصيل في الكائن الحي. يمكن أن يتم‎ 15 ‏تضمين صور الجرعة الخاصة بالوحدة الفردية في أطقم جرعة متعددة أو حاويات. يمكن وضع‎ ‏وبلازميدات وجينومات ناقلة أو‎ (AAV (Jl ‏الارتباط (على سبيل‎ sage ‏متواليات الناقل ناتج‎ ‏ذي‎ AAV ‏أو ناقل‎ AAV-RhT74 ‏سبيل المثال» ناقل‎ Ae) ‏جسيمات فيروس ناتج عودة الارتباط‎ ‏وتركيبات‎ )) RHM4-1 ‏سبيل المثال»‎ Ae) AAV-RhT4 ‏صلة مثل صور متغيرة من الكابسيد‎ ‏يمكن أن يتم تعبئتها في صور جرعة وحدة متخفرة أو متعددة لسهولة الإعطاء‎ Ally ‏صيدلانية منها‎ 0 ولانتظام الجرعة. يوفر الاختراع أطقم خاصة بمادة مغلفة وواحد او أكثر من لمكونات بداخلها. يشتمل الطقم بشكل نمطي على مرقم أو نشرة حشوة يتم تضمينها في شكل وصف خاص بالمكونات أو التعليمات الخاصة بالإعطاء في المعمل أو في الكائن الحي أو خارج الكائن الحي من لمكونات بداخلها. يمكن أن يشتمل الطقم على تجميعة خاصة بالمكونات؛ على سبيل ‎(JU‏ جينومات ناقل ‎le)‏
TI vi
AAV ‏ناقل‎ of AAV-Rh74 ‏أو جسيم فيروس (على سبيل المثال؛ ناقل‎ (AAV ‏سبيل المثال»‎ ‏صور متغيرة من الكابسيد (على سبيل‎ Jie /81/-5074 ‏الصور المتغيرة من‎ Jie ‏ذي صلة‎ ‏وعامل أو ع قار أو تركيبة.‎ AT ‏من مركب‎ dled ‏ويشكل اختياري نشاط‎ (RHM4-1) ‏المثال»‎ ‏يشير الطقم إلى مبيت بنية بنائية فيزيائية أو واحدة أو اكثر من المكونات الخاصة بالطقم. يمكن‎ ‏الحفاظ على مادة التغعليف في مكونات معقمة ويمكن أن يتم جعلها من مادة مستخدمة بشكل عام‎ 5 ‏ورق أو الياف مجعدة أو زجاج أو بلاستيك أو رقاقة معدنية‎ (Jl) ‏لتلك الاستخدامات (على سبيل‎ ‏أو أمبولات أو زجاجات أو أنابيب» إلخ.).‎ ‏يمكن أن تشتمل المرقمات أو الأجزاء المدرجة على تحديد معلومات خاصة بواحد أو أكثقر من‎ ‏المكونات بداخلها وكميات الجرعة والصور الدوائية الإكلينيكية من المكون (المكونات) النشطة بما‎ ‏في ذلك آلية خاصة بالتأثير والحركيات الدوائية والحركيات الديناميكية . يمكن أن تشتمل المرقمات‎ 0 ‏أو الأجزاء المدرجة على معلومات تحدد المصنع وأرقام الكتلة وموضع التصنيع والتاريخ وتاريخ‎ ‏الانتهاء. يمكن أن تشتمل المرقمات أو أجزاء الإدراج على معلومات تحدد معلومات التصنيع أو‎ ‏عدد الدفعات ومعلوات التصنيع والتاريخ. يمكن أن تشتمل المرقمات أو المدرجات على معلومات‎ ‏عن المرض الخاص بمكون طقم يمكن استخدامه. يمكن أن تشتمل المرقمات أو أجزاء الإدراج‎ ‏على تعليمات خاصة بالتقني أو الخاضع لاستخدامها مع واحد ا, أكثر من الأطقم أو المكونات في‎ 5 ‏الطريقة واستخدام او معالجة البروتوكول أو الأنظمة العلاجية. يمكن ان تشتمل التعليمات على‎ ‏كميات الجرعة أو التردد أو المدة وتعليمات خاصة بالمرضى وأي طرق واستخدامات وبروتوكولات‎ ‏معالجة أو أنظمة وقائية أو علاجية تم وصفها هنا.‎ ‏يمكن أن تشتمل المرقمات وأجزاء الإدراج على معلومات عن أي فائدة حيث أن المكون يمكن أن‎ ‏يتم توفيره لفائدة وفائية أو علاجية. يمكن أن تشتمل المرقمات أو المدرجات على معلومات عن‎ 0 ‏التأثيرات الجانبية المحتملة والمضاعفات أو التفاعلات مثل احتياطات خاصة بالخاضع أو موافق‎ ‏متعلقة الإكلينيكي حيث أنها تكون مناسبة لاستخدامها في تركيبة معينة. يمكن أن تحدث التأثيرات‎ ‏الجانبية أو المضاعفات عندما يأخذ الخاضع على نحو متزامن واحدة أو أكثر من العلاجات التي‎ ‏يمكن أن تكون متوافقة مع التركيبة أو أن يكون الخاضع به أو يخضع حالياً لبروتوكول معالجة‎
آخر أو نظام علاجي والذي يكون متوافقاً مع التركيبة وبالتالي يمكن أن تشتمل التعليمات على تشتمل المرقمات أو المدرجات على 'مادة مطبوعة"؛ على سبيل ‎JU‏ ورقة أو بطاقة أو ‎gia‏ ‎Ladin‏ او مثبت مع مكون أو طقم أو مادة مدرجة (على سبيل المتال 3 في شكل صندوق) أو يتم ‎Leh 5‏ مع أمبول أو أنبوب أو زجاجة تشتمل على مكون طقم ‎٠‏ يمكن أن تشتمل المرقمات أو الأجزاء المدرجة على نحو إضافي على وسط قابل للقراءة بالكمبيوتر ‎Jie‏ رقم مطبوع على شفرة شربطية؛ أو اسطوانة أو أسطوانة برية ‎Jia‏ قرصض أو ذاكرة الوصول العشوائي ‎Random‏ ‎(RAM) Access Memory‏ / ذاكرة القراءة فقط ‎(ROM) Read Only Memory‏ - القرص المتعدد الاستخدامات الرقمية ‎Digital Versatile Disc‏ (01/05)أو شريط مغناطيسي
‎magnetic tape 0‏ أو وسط تخزين ‎RAM (i. electrical storage media eS‏ ر ‎ROM‏ ‏أو أجزاء مهجنة منها ‎Jie‏ أوساط تخزين مغناطسية/ ضوتئية؛ أوساط وميضة ‎FLASH‏ أو بطاقات من نوع الذاكرة. ما لم يتم تحديد خلاف ذلك فإن كل المصطلحات التقنية المستخدمة هنا يكون لها نفس المعني كما هو مفهوم للماهر في المجال الذي يتعلق به الاختراع الحالي. وعلى الرغم من ذلك فإن تلك المواد
‏5 تكون مشابهة أو مكافئة لما تم وصفه هنا ويمكن استخدامها في ممارسة أو اختبار الاختراع الحالي مع طرق مناسبة ومواد والتي تم وصفها هنا. تكون كل الطلبات والنشرات وبراءات الاختراع والمراج الأخرى وذكر ‎GenBank‏ وذكر ‎ATCC‏ ‏الموجودة هنا قد تم تضمينها كمرجع بكاملها. في حالة التناقض؛ تكون السيادة للمواصفة الحالية بما فيها التعريفات.
‏0 يمكن أن يتم دمج كل السمات التي تم الكشف عنها هنا في أي توليفة. تم الكشف عن كل سمة في المواصفة ويمكن استبدالها بواسطة سمة بديلة تستخدمها نفسها والتي تكون لأغراض مكافئة أو مشابهة. ويالتالي وما لم يتم توضيحه بشكل واضع هنا فإن السمات التي تم الكشف عنها هنا (على سبيل المثال» متوالية ناقل ناتج ‎sage‏ الارتباط (مثل ‎(AAV‏ والبلازميد وجينوم ناقل أو جسيم فيروس ناتج عودة ‎J‏ لارتباط (على سبيل المثال ناقل ‎AAV-Rh74‏ أو ناقل ‎AAV‏ مثل صور
‎TINY
الل متغيرة من كابسيد ‎AAV-RhT74‏ ( على سبيل المثال» 111/4-1) هي فقط بمثابة مثال لجنس له سمات مكافئة أو مشابهة. وكما تم استخدامه هناء تشتمل أدوات التنكير والتعريف والعطف عل صور الجمع ما لم يوضح السياق خلاف ذلك. وبالتالي فإن الإشارة إلى ‎dof‏ نيوكليوتيد" تشتمل على مجموعة من البولي نيوكليوتيدات والإشارة إلى "ناقل" يشتمل على مجموعة من تلك النواقل والإشارة إلى 'فيروس" أو "جسيم" تشتمل على مجموعة من الفيرونات/ الجسيمات. كما تم استخدامه هنا فإن كل القيم الرقمية أو الأمداء الرقمية تشتمل على أعداد صحيحة في تلك الأمداء أو الأجزاء من القيم أو أعداد صحيحة بتلك الأمداء ما لمي يذكر النص خلاف ذلك صراحة. وبالتالي ولكي يتم توضيح الإشارة لعلى الأقل 96850 من التطابق فإنها تشتمل على 0 امك كفك ‎cg 9641 % FAL HAA BAY SAT FAS (HAE BAT‏
GOAY,Y BAYT AY.) im HAY,0 SAY, E ‏راطق‎ (SANT PAY, Lad, ‎AY, 0 654‏ إلخ»؛ وما إلى ذلك . ‏إن الإشارة غلى العدد الصحيح مع عبارة (أكثر) من أو أقل من فإن ذلك يعني أي عدد أكبر من ‏أو أقل منالعدد المرجعي ذي الصلة. وبالتالي؛ على سبيل المثال؛ فإن الإشارة المرجعي لأقل من ‎٠٠١١ 5‏ فإنها تشتمل على 499 998 و1997؛ إلخ وكل الأعداد الأقل حتى الوصول إلى العدد ‏واحد ‎)١(‏ وأقل من ‎٠٠١‏ يشتمل على 59 و98 و97؛ إلخ مع الانخفاض حتى الوصول إلى العدد ‎.)١( ‏واحد‎ ‏وكما تم استخدامه هناء فإن كل القيم الرقمية تشتمل على أجزاء من القيم والأعداد في تلك الأمداء ‏والأجزاء من الأعداد الصحيحة بداخل المدى المذكور ما لم يوضح السياق خلاف ذلك. وبالتالي 0 .لكي يتم توضيح المرجع في مدى رقمي ‎Jie‏ مدى النسبة المثوية ‎٠١-١ Jie‏ فإنه يشتمل على ١؛‏ ‏كى ى ى فت لا ىق ‎٠١‏ وأيضاً ارا آراء آراء ذراء #,اء إلخ»؛ وما إلى ذلك. ‏يفتمل المدى المرجعي من ‎oF le 00m)‏ تك فت لاي ى ف لك ‎AY‏ اف كل ‎OY ‏وأيضاً‎ ov ‏إلخ؛ حتى الوصول إلى بما فيه الرقم‎ ٠١ 4 OA OY OT ave ‏“را كرا درا ‎i)‏ ١ر7‏ آراء ار كرا #راء ‎cad]‏ وما إلى ذلك.
تشتمل الإشارة المرجعية غلى أمداء والتي يتم دمجها مع قيم خاصة بالحدود من أمادء معينة في المدى المذكور. وبالتالي ولكي يت توضيح المرجع الخاص بصور مرجعية من الأمداء من ‎-١١‏ ‏ذل ب لساك النسالد الاسدة لد ننس ند لالخسب اله ب لصاف تلفت ب فد اب سات ال بم ‎١...‏ .م لحل الا ين لاحر ‎—-Vo.
Vo ه٠ Ov e—% vv (Ce‏ ‎Jo ٠ ٠ ٠٠ Fa ٠ «—Yo ٠٠ Yo ٠ «YY «١ Y ٠٠ ء.-١‎ Ov 0 Oa —) «١ 0 “ee 5‏ ‎٠٠ —Yo ٠٠‏ ع“ ‎٠ —¢ «١‏ م ‎VY. ٠٠ Va ٠ «1 «١ at re e— 00 vv (Our «—%0 ٠٠‏ ديب أو بيار .رك ‎Jai ig‏ على أمداء من حرق .مكحلل .نا ‎١...‏ ‎enn‏ كك ‎No REAR Fev‏ تم الكشف عن الاختراع بصفة ‎dale‏ باستخدام التعبير التأكيدي لكي يتم وصف العديد من النماذج
0 والسمات. يشتمل الاختراع أيضاً بصفة عامة على نماذج تكون بها مادة معينة قد تم استثناؤهاء بشكل كامل أو بشكل جزئي ‎Jie‏ المواد أو المواد والطرق والخطوات الخاصة بالاختراع ومواد و/أو خطوات طرق يتم استبعادها. ويالتالي وعلى الرغم من ذلك فإن الختراع لا يتم التعبير ‎die‏ بصفة عامة هنا في سياق أن الاختراع لا يشتمل على السمات والتي لا يتم استثناؤها بشكل واضح في الاختراع وتم الكشف عنها هنا.
تم وصف عدد من النماذج الخاصة بالاختراع هنا. ‎og‏ الرغم من ذلك فإن الماره في المجال بدون خروجهة من مجال وفحوى الاختراع يمكنه أن يقوم بإجراء العديد من التغييرات والتعديلات على الاختراع لكي استخدامها في العديد من الاستخدامات والظروف. ونتيجة لذلك؛ فإن الأمثلة التالية يقصد منها أن تحدد؛ ولكن ليس على مجال الحصر مجال الاختراع المطلوب حمايته. الأمثلة
المثال رقم ‎a‏ ‏يشتمل هذا ‎JE‏ على وصف لمواد متعددة وطرق متعددة. الفئران : الذكور من نوع ‎C57BL/6J (WT)‏ بعمر من ‎١٠١‏ أسابيع؛ ‎=n‏ ٠ه‏ لكل مجموعة تجريبية. يكون الكلب عبارة عن كلب من نوع ‎HB‏ من نسيلة ‎University of North Carolina‏
ح١‎
ا ‎Chapel Hill‏ التي تحمل تطفير ‎missense‏ في جين ‎Evans et al., Proc Natl ( FIX‏ ‎.(Acad Sci USA 86:10095 (1989‏ بنيات الناقل ‎AAV‏ تم إجراء الدراسات في الكاتن الحي في الفئران باستخدام البنية التي تعبر عن ‎FIX‏ بشري تحت التحكم في معززات خاصة بالكبد من ‎ApOE-hAAT‏ . تستخدم الدراسة في الكلاب تقريباً المعز الموضع والجين الناقل من ‎FIX‏ بشري. طريقة انتقال الجين: تم توصيل كل النواقل في الوريد. وفي الفئران من خلال وريد الذيل (حجم من ‎٠‏ ميكرو لتر لكل فر تم إعطاؤه وتم تخفيف النواقل في ‎(PBS‏ في الكلاب تم توصيل ‎JI‏ ‏من خلال وريد الصفن. تحديد التعبير عن ‎(FIX‏ تم استخدام ‎ELISA‏ لقياس مستويات ‎FIX‏ في الفئران تم تشكيل زوج 0 جسم ‎FIX ELISA‏ (الإمساك والجزء الثانوي) من صور بيولوجية للألفة. في الكلاب ‎OB‏ زوج الجسم المضاد تكون أيضاً من الصور البيولوجية للألفة وتم استخدامها كما تم وصفها في ‎Haurigot et al. (Mol Ther 18:1318‏ (2010)). التحليل الإحصائي: تم إجراء التحليل الإحصائي باستخدام اختبار ؟ غير المزدوج ثنائي الطرف. يتم اعتبار قيم م > 00+ بأنها مهمة من الناحية الإحصائية. 5 قياسات الجسم المضاد /اظ//: تم وصف اختبار التعادل في المعمل في ‎Manno et al., (Nat‏ ‎Med 12:342 )2006((‏ و ((2007) 13:419 ‎Mingozzi et al. (Nat Med‏ فيما يتعلق بقياس الجسم المضاد. ‎leg‏ نحو مختصر؛ يتم استخدام بنيات ناقل ‎AAV‏ فى الاختبار» ناقل جديلة منفردة يعبر عن إنزيم ل[ا- جلاكتوسيداز تحت التحكم الخاص بمعزز ‎SSAAV-) CMV‏ ‎(LacZ‏ أو ناقل متمم ذاتي يعبر عن جين مسجل ل ‎AAV-Rh74-CBA-Renilla (Renilla‏ تحت التحكم الخاص بمعزز ][— اكتين ‎(CBA) chicken 1-8000 promoter‏ لزيادة الفعالية الخاصة بنقل الإشارة من نواقل ‎AAV‏ في المعمل؛ تم استخدام خلايا 276.11 ‎SIATCC)‏ ‏تعبر عن جين غدي فيروسي 4 تحت تحكم معزز قابل للحث. تمت زراعة الخلايا في طبق به ‎Lie 1‏ عند كثافة من ‎٠١ XY, Yo‏ 4 خلية / العين ويتخفيف ‎٠٠٠١ :١‏ من بوناستيرون ‎A‏ ‎(Invitrogen)‏ تمت إضافتها في الوسط لحث التعبير عن 54. وفي اليوم الخاص بالاختبار؛ يتم ‎TIN‏
— 7 h —
خلط تخفيفات خوارزمية نصفية متسلسلة من مصل اختبار منشط بالحرارة باستخدام فيروس يشتمل
على الوسط. وبالنسبة ‎«ssAAV-LacZ Jad‏ كان تركيز ‎og dl)‏ المستخدم فى ‎f‏ لاختبار هو
حوالي ‎vg ٠١ ٠١ * ١‏ جم/مل ل ‎AAV2‏ وحوالي 0,0 ‎٠١ ٠١ x‏ ولا جم/مل ل ‎١ AAVS‏ أو
‎A‏ وبالنسبة لناقل ‎«sCAAV-Luc‏ كان تركيز الفهيروس فى ‎f‏ لاختبار بين حوالى ‎On‏ وحوالى
‎١٠5١ 5‏ ضعف أقل. تم قياس النشاط المتبقى الخاص بالجين الناقل المسجل باستخدام إما اختبار
‏قياس سعري ‎(SSAAV-LacZ) colorimetric assay‏ أو وسيلة قياس تألق ‎luminometer‏
‎.(scAAV-Luc)
‏تم قياس إجمالي كابسيد ‎AAV‏ من 5196 وا من الفئات الفرعية باستخدام اختبار خاص
‏الإمساك؛ تم تغليف أطباق ‎ELISA‏ باستخدام 0 ‎٠١ ٠١ x‏ جسيمات كابسيد /مل من كابسيد 0 مفرغ ‎AAV‏ . يتم إغلاق الأطباق باستخدام 967 من ‎BSA‏ 0,056 96 من توين ‎٠١‏ في ‎PBS‏
‏لمدة ساعتين عند درجة حرارة الغرفة والتخفيفات المتسلسلة من العينات التي تم تحميلها على آبار
‏وتمت حضانتها طوال الليل عند 4 م. تم استخدام مضاد ‎IGG]‏ بشري مترافق مع البيوتين و
‏2ل ‎19G4 «IgG3‏ أو ‎(Sigma) IgM‏ في شكل أجسام مضادة خاصة بالاكتشاف»؛ وتمت
‏إضافة ستريتافيدين لاكتشاف الركيزة. تم تحديد تركيز وا في مقابل المنحنيات القياسية المصنوعة مع تخفيفات من ‎IgG]‏ بشرية نقية و 62واو ‎19G3‏ و 0664| ‎IgM i‏ (5:908).
‏إنتاج ‎AAV‏ : تم وصف عملية إنتاج الناقل بالتفصيل في ‎Ayuso et al. (Gene Ther‏
‎. ((17:503 (2010
‏المثال رقم ؟
‏يشتمل هذا المثال على دراسات وصف حيوان (فثران) ناقلة لتعبير الجين ‎FIX‏ البشري بعد نقل 0 الجين.
‏تم حقن فئران 6/ا0578 ‎=n)‏ # لكل مجموعة) من خلال وريد الذيل باستخدام نواقل ‎AAV‏
‏التى تحمل جين ‎IX (FIX)‏ (جينومات ناقلة ‎7,١١‏ لكل فأر) تحت تحكم معزز خاص بالكبد. تم
‏تحديد مستويات بلازما (بروتين) منتج نقل ‎FIX‏ بشري في الفئران بواسطة ‎ELISA‏ عند الأسبوع
‎TINY
‎Ja day € 9 ¢ Y‏ الجين وتم التوضيح في الشكل رقم ‎A‏ أوضح ‎AAV-Rh74‏ وجود مستوي
‎dle‏ من تعبير عبر الجين في الحيوانات.
‏المثال رقم ؟
‏يفشتمل ‎Jd)‏ المذكرو على وصف دراسات حيوانية وبيانات توضع توصيل يتوسطه ‎AAV-‏
‏وعلى نحو مختصر؛ تم التسريب في الكلاب المصابة بهيموفيليا 8 في الوريد ‎intravenously‏
‎(IV)‏ خلال وريد الصفن مع ‎VY ٠١ XY‏ جينوم ناقل لكل كيلو جرام من الوزن. تم اشتقاق التعبير
‏عن الجين الناقل ل ‎FIX‏ العلاجي بواسطة معزز خاص بالكبد. تمت مراقبة النواقل ومستويات ‎FIX‏
‏بواسطة ‎(ELISA‏ تم توضيح مستويات البلازما من ‎FIX‏ في الشكل رقم ؟. تم إجراء ‎AAV=‏
‏منها فائقة بالنسبة ل 6/اطفط.
‏المثال رقم 6
‏يشتمل هذا المثال على وصف خاص بالدراسات التي توضح وجود مضاد ‎AAV‏ من الأجسام المضادة المتعادئلة ‎(NAD) neutralizing antibodies‏ في البشر.
‏تقوم البيانات في الجدول رقم ‎١‏ بتوضيح أجسام متعادلة من ‎(NAD) AAV‏ التي يمكن قياسها في
‏البشر باستخدام اختبار في المعمل. تم تحديد الخاضعين المصابين بعيار من ‎Nab‏ من أقل من أو
‏يساوي ‎١:١‏ في شكل غير معالج أو عيار منخفض خاص بالأجسام المضادة ل ‎Allg AAV‏ تكون
‏قابلة لناقل جين خاصة بالنوع المصلي ‎AAV‏ (الذي تم تحديده باللون الرمادي). يتم اعتبار 0 المرضى الذين بهم عيارات من ‎١ :١‏ و ‎٠:7‏ بأنها ‎able‏ مسموحة من ‎AAV‏ ما دام ان هناك
‏كابسيدات فراغية والتي يتم استخدامها في شكل كشراك. يتم الأخذ في الاعتبار لعينات بها عيارات
‏أعلى من ‎:١‏ ؟ حيث أنها غير قابلة لنقل الإشارة من ‎AAV‏ بعد حقن شامل ويتم الملء بضوء
‎TINY
كم ا- رمادي. تعرض ‎AAV-Rh74‏ انتشاراً أقل من مضاد ‎AAV Nab‏ بالمقارنة مع 2-/اهلظ و ‎AAV-8‏ ‎RHM15-‏ ‎RHM4-1 AAVS AAV?2‏
‎Genlmm‏ ‎:٠>‏ لاا ‎١٠ :١< ١٠ :١<‏ <ا: ‎١‏ ‏005 ‎Genlmm‏ ‏<ا: ‎١‏ <ا: ‎١‏ <ا: ‎١‏ <ا: ‎١‏ ‏015 ‎Genlmm‏ ‏<ا: ‎١‏ <ا: ‎١‏ <ا: ‎١‏ <ا: ‎١‏ ‏040 ‎Genlmm‏ 0 ١-ا:‏ : احا ‎١٠ :١< ١٠ :١< ٠١‏ ‎AR 058‏ ‎:1-٠ :١ | Genlmm‏ <ا: ‎١‏ <ا: ‎١‏ <ا: ‎١‏ ‏070 أي ص ‎NY :Y | Genlmm‏ <ا: ‎١٠‏ <ا: ‎١ :١< ١‏ 080 أي ص ‎Genlmm‏ ‏: احا ‎١٠ :١< ١٠ :١< ٠١‏ <ا: ‎١‏ ‏082 ‎Genlmm‏ ‏كمية دقيقة ‎١٠ :١٠< ١٠:١< ١٠:١<‏ 083
Genlmm ١ ‏<ا:‎ ١٠ :١< ١٠ :١< ٠١ ‏احا‎ : 087
NY) Genlmm ١٠ :١< ١٠ :١< ٠١ ‏احا‎ :
Yo 095
Genlmm ١ ‏<ا:‎ ١ ‏<ا:‎ ١ ‏<ا:‎ ١ ‏<ا:‎ ‎099 ‎Genlmm ١ ‏<ا:‎ ١ ‏<ا:‎ ١ ‏<ا:‎ ١ ‏<ا:‎ ‎102 ‎Genlmm ١ ‏<ا:‎ ١ ‏<ا:‎ ١ ‏<ا:‎ ١ ‏<ا:‎ ‎105 ‎Genlmm
ND ١ ‏<ا:‎ ١ ‏<ا:‎ ١ ‏<ا:‎ ‎100 ‎Genlmm ١ ‏<ا:‎ ١ ‏<ا:‎ ١ ‏<ا:‎ ١ ‏<ا:‎ ‎124 ‎ح١‎ Genlmm ١٠ :١< ١٠ :١< ٠١ ‏احا‎ :
Yo 125
Genlmm ١ ‏<ا:‎ ١ ‏<ا:‎ ١ ‏<ا:‎ ١ ‏<ا:‎ ‎130 ‎Genlmm ١ ‏<ا:‎ ١٠ :١< ١٠ :١< ‏:م لتحا ل‎ 131 أ
يم -
Genlmm ١ ‏<ا:‎ ١ ‏<ا:‎ ١ ‏<ا:‎ ١ ‏<ا:‎ ‎133 ‎Genlmm ١ :١ا<‎ ١ ‏<ا:‎ ١ ‏<ا:‎ ND 150
Genlmm ١ :١ا<‎ ١ ‏<ا:‎ ١ ‏<ا:‎ ND 151
Genlmm ١ :١ا<‎ ١ ‏<ا:‎ ١ ‏<ا:‎ ND 154
Genlmm ١ :١ا<‎ ١ ‏<ا:‎ ١ ‏<ا:‎ ND 155
Genlmm ١ ‏<ا:‎ ١٠ :١< ١٠ :١< ‏:م لتحا ل‎ 143
Genlmm ١ ‏<ا:‎ ١٠ :١< ١٠ :١< ‏:م لتحا ل‎ 145
Genlmm ١ :١ا<‎ ١ ‏<ا:‎ ١ ‏<ا:‎ ND 140
Genlmm ١ :١ا<‎ ١ ‏<ا:‎ ١ ‏<ا:‎ ND 141
Genlmm ١ :١ا<‎ ١ ‏<ا:‎ ١ ‏<ا:‎ ND 011
:ا-١‎ Genlmm ١٠ :١< ١٠ :١< ١٠ :١< ‏صن‎ 049
Genlmm
ND Yds | ١ YY ‏ب أحال: ل‎ 146
Genlmm
ND Yds | ١ YY ‏ب أحال: ل‎ 147
AE I I GREER I EER Eh TFN :١ Genlmm
ND ND
Yo ii 007
N=) 2) Genlmm ١ ‏<ا:‎ ١٠ :١< ٠١ ‏احا‎ : ٠١ 084
IRIE N=) NYY :١ Genlmm ٠١ ‏احا‎ :
Yor) Ya ABN 127
NY) N=) NYY :١ Genlmm ٠١ ‏احا‎ :
ARI Yo ii 137 :1-١٠١ : ‏ربا-حا:‎ :١ Genlmm
YY, Ye) ND 1 ٠١ 153
AER YY =Y en :Y | Genlmm
ND ND
YY, Yi 001 :1-١٠١ : AEA ‏حا ا ا:‎ :١ Genlmm ‎Y=) 0‏ 1م ‎Yao 006‏ أي نضا 1 ‎ح١‎
AER AEA :Y | Genlmm
YY, TT ‏انحا‎ Yer ‏أحال:‎ 000)
YY, ٠١ 110
N=). NYY enn a Genlmm
YY, TT ‏انحا‎ Yer ‏أحال:‎ 000)
YY, 7٠ 125
IRIE AEA ‏حا ا ا:‎ :١ Genlmm ٠١ ‏احا‎ :
Yoo) 71 You 129
AEN 2) Genlmm ‏جاتب‎ ٠١ YY ee sy ND
YY, 148 :1-١٠٠١ : AER :١ Genlmm ٠١ ‏احا‎ : ND vy, AI 157
AEN 2) Genlmm
ND ٠١ ‏احا‎ : ND
YY, 158 :-١ ‏:م‎ AER :١ Genlmm ١٠ :١< ٠١ ‏احا‎ :
AR AI 028 ‏تبحا‎ : I EER Eh I :١ Genlmm
ND ١ 7 Y=) ‏ني‎ ‏أي ص .أ‎ 016
AER IES ‏ححا 1 تبحا‎ :١ Genlmm ‏1م‎ Y=) 0 ¥y,1 ١ ١.٠ 0175 ‏ا تبحا‎ Genlmm
YY, TT ‏انحا‎ YY ‏ام الم ملحا‎ 7٠٠١ ‏<ا:‎ ‏.أ‎ 126 ح١‎
‎Genlmm‏ ا تبحا ‎ND‏ 1 1 أحا ‎Yee‏ > تب ‎Yu 139‏ ‎Genlmm‏ ا تبحا ‎ND ١٠١ AEA EA :١ ND ٠ 149 ‏ححا‎ Genlmm ‎YY, TT ‏انحا‎ Yer ‏أحال:‎ 000) 711 : ١.٠ 068 :1- FATE IEA ES i Te SER Genlmm ‎١,1 ‏<ا:‎ 7٠٠١ ‏<ا:‎ ‎١٠١ ٠١ 088 :1- FATE IEA ES i Te SER Genlmm ‎1 ‏<ا:‎ ND ١٠١ ٠١ 138
FARA SER I ‏جح‎ Th :Y | Genlmm ‎ND ND ‎Yi ٠١ 004 ‏اب انمالحا‎ Genlmm ‎YY, TT ‏انحا‎ YY ‏ام الم ملحا‎ 7٠٠١ ‏<ا:‎ ‎BN 035
N=Yee ‏اب‎ Genlmm ‎YY, TT ‏انحا‎ YY ‏ام الم ملحا‎ 711 :
ARR 074 :اح١‎ :1١ :ا--١‎ :1١ Genlmm ‎1 ‏<ا:‎ ND 7٠ AR 142
N=Yee ‏اب‎ Genlmm ‎ND‏ 1 1 أحا ‎Yee‏ > تب ‎AR 152‏ ‏أ
م8 - :ا-١٠١.١‎ : Genlmm ‎٠١ YY ee sy ND‏ جاتب 156 71 ‎ : Genlmm‏ ١.١٠١-ا:‏ ‎١ ‏<ا:‎ ١٠ :١< ٠١ ‏احا‎ : vit 072
AE I FARE EERE ol Te ER Genlmm ‎١,1 ‏<ا:‎ 7٠٠١ ‏<ا:‎ ‎Your ٠١١ 144 :ا-١٠١..١‎ 2) Genlmm ‎YY, TT ‏انحا‎ YY ‏ام الم ملحا‎ 7٠٠١ ‏<ا:‎ ‎١٠ 060 ‏م .احا‎ :1١ Genlmm ‎١,1 ‏<ا:‎ 7٠٠١ ‏<ا:‎ 7٠٠١ ‏<ا:‎ ‎١٠ 069 :1- :1١ Genlmm ‎١,1 ‏<ا:‎ 7١ 2١< 7٠٠١ ‏<ا:‎ ‎١ “er 017
Genlmm ‎ND ND ND AER RS 002
Genlmm ‎١ :١ا<‎ ١ ‏<ا:‎ ND Y :> 003 ‎RHM15- ‎RHM4-1 AAVS AAV?2
اج ‎A‏ _ % من ‎:١<‏ ‎oF, £Y,4 ya,v‏ 4 ‎١‏ ‎RHM4-1 AAVS AAV2‏ المثال رقم ‎e‏ ‏يشتمل المثال المذكور على وصف البيانات التي توضح كميات إنتاج من أنواع مصلية من ‎AAV‏ ‎lg‏ تشتمل على ‎AAV-Rh74‏ ‏5 توضح البيانات في الجدول رقم ¥ حصيلة الإنتاج الخاصة بأنواع مصلية من ‎AAV‏ مختلفة. تم تسجيل حجم دفعة الفيروس في زجاجات أسطوانة وحصيلة ناقل إجمالي وحصيلة لكل زجاجة. تمت تعبئة كل الأنواع المصلية مع نفس كاسيت التعبير. يكون ‎AAV-RNT4‏ له حصيلة مقارنة أو ألعى من أنواع مصلية أخرى تم تقييمها ولعى نحو خاص ل ‎AAV-8, AAV-dj‏ ىر ‎AAV-2‏ ‏0 الجدول رقم ؟ الزجاجات الأسطوانية) | إجمالي (جينومات | أسطوانية (جينومات ناقل) ناقل) ‎1.51E+13| 1.21E+15 AAV-Rh74‏ ‎1.03E+13 | 1.23E+14 AAV-Rh74‏ ا ‎i : ١‏ | ا ا ‎١‏ : 0 زد-/اهم ‎8.95E+12| 1.79E+14‏ ا ‎١‏ : | ا ا ‎١‏ : 7 المثال رقم +
_ A ‏أ‎ _
يشتمل هذا المثال على وصف بيانات توضح أن ناقل 8/81/0774 يعبر عن عامل ‎(FIX) IX‏
تحت تحكم معزز خاص بالكبد يتم إعطاؤه لقرود المكاك والذي يؤدي إلى إنتاج كميات من ‎FIX‏
في الحيوانات وعند مستويات أعلى من ناقل ‎AAVE‏ الذي تم إعطاؤه عند نفس الكمية.
وعلى نحو مختصرء تم إعطاء الحيوانات إما ‎AAVS‏ أو 2/1/0174 عند جرعة من ‎VY ٠١ XY‏ جينوم ناقل (7/9)/كجم من الوزن. تتم صياغة النواقل إما في محلول ملحي أو في ناقل خليط
وكابسيد مفرخ من ‎AAV‏ (تمت الإشارة إليه ‎(EC ash‏
يكون الشكل رقم 4 عبارة عن مخطط من ‎Las‏ متوسط ) لأسبوع ‎Y‏ إلى ‎(A‏ وخطأً قياسي أو
متوسط من ‎FIX‏ بشري تم قياسه بواسطة ‎ELISA‏ التي يتم اكتشافها بشكل خاص بواسطة ‎FIX‏
في البشر في بلازما قرد مكاك الهندي. تم توضيح الحيوانات التي استقبلت ناقل ‎AAVThT4-FIX‏
0 على الأقل فى اثنين من القضبان نحو الهامش الأيمن. أوضحت البيانات أن الحيوانات التى تستقبل نواقل 0/8/0074 (اثنين من القضبان الأخيرة نحو الهامش الأمين) تعبر عن جين انتقالي ‎FIX‏ عند مستويات أعلى بالمقارنة مع مجموعات أخرى من الحيوانات التي تم حقنها عند نفس الجرعة (بقضبان سوداء وقضبان رمادية). تمت مقارنة المستويات المتوسطة باستخدام اختبار ‎Jl student‏ الطرف غير المزدوج.
5 ااستقبل أحد الحيوانات ‎AAV-RHM4-1-FIX‏ تم تطويره كمثبط في مقابلة منتج عبر الجين من عامل ‎IX‏ والذي يكون عبارة عن ظاهرة تم توثيقها بشكل جيد والتي تحدث في حوالي ‎9067١0‏ من حيوانات المكاك التى تمت معالجتها بناقل ‎FIX‏ . تمت مقارنة حيوان تمت معالجته من ‎RHM4-‏ ‏1 من مستويات تم التعبير عنها من ‎FIX‏ وذلك بمقدار ضعفين أعلى بالمقارنة مع مكاك تمت معالجته ب 8/الظط .
0 المثال رقم ‎١‏ ‏تشتمل الأمثلة المذكورة على وصف صور متغيرة من كابسيد 40074 متعددة متغيرة من كابسيد 074 . كانت الصور المتغيرة من كابسيد 8074 المختلفة والأحماض الأمينية التي بها استبدال عند كل موضع كما يلي:
‎A 7 _‏ _ الجدول رقم ‎:Y‏ الصور الصور | استبدالات الحمض الأميني ومواضع موضحة في كابسيد ‎VP]‏ ‏المتغيرة ‎G195A-L199V- $201P-G202N‏ ‎G195A-L199V-S201P-G202N‏ ‎K(137/259/333/530/552/569/38/51/77/169/54T)R | RHM15_1‏ ‎G195A-L199V- S201P-G202N‏ ‎K(137/259/333/530/552/569/38/51[T7/163/169)R | RHM15_2‏ ‎G195A-L199V- S201P-G202N‏ ‎K(137/259/333/530/552/569/38/51/77/163/54T7)R ١ RHM15_3‏ ‎G195A-L199V- S201P-G202N‏ ‎K(137/259/333/530/552/569/38/51[T7/163/668)R | RHM15_4‏ ‎G195A-L199V- S201P-G202N‏ ‎K(137/259/333/530/552/569/38/51[T17/547/163)R | RHM15_5‏ ‎G195A-L199V- S201P-G202N‏ ‎K(137/259/333/530/552/569/38/51/17/547/688)R | RHM15_6‏ يكون للصورة المتغيرة من ‎RHMA-T‏ الانين وليوسين ويرولين واستبدالات أسبارجين عند مواضع الحمض الأميني 0145 0144 ‎70٠‏ و07 على الترتيب من كابسيد 1/01 8074 . تكون الصورة المتيغرة من 4111/4-1) ومتالية الحمض الأميني من الكابسيد 01 مع الوحدات البنائية عند قو لاو 0 و0 التي تم وضع خط تحتها كما يلي (المتوالية رقم#): ‎maadgylpdwlednlsegirewwdlkpgapkpkanqgkqdngrglvlipgykylgpfngld‏ 1 ‎kgepvnaadaaalehdkaydqqlgagdnpylrynhadaefqerlqedtsfggnigraviq‏ 61
م ‎“A‏ ‎akkrvleplglvespvktapgkkrpvepspqrspdsstgigkkgqqgpakkrinfgqtgds‏ 121 181 ‎esvpdpqgpigeppaapsgvgpntmaagggapmadnnegadgvgsssgnwhcdstwigdry‏ ‎ittstrtwalptynnhlykqisngtsggstndntyfgystpwgyfdfnrthchfsprdwq‏ 241 ‎rlinnnwgfrpkrinfkifnigvkevtgnegtktiannltstigvftdseyqlpyvigsa 5‏ 301 ‎hqggclppfpadvimipqygyltinngsqav grssfycleyfpsqmlrtgnnfefsynfed‏ 361 ‎vpfhssyahsqgsldrimnplidqylyylsrtgstggtagtqqllfsgagpnnmsagaknw‏ 421 ‎Ipgpcyrgqgrvsttisgnnnsnfawtgatkyhlngrdslvnpgvamathkddeerffpss‏ 481 ‎gvimfgkqgagkdnvdyssvmltseeeikttnpvateqygvvadnlqggnaapivgavns‏ 541 ‎ggalpgmvwgnrdvylggpiwakiphtdgnfhpspimggfglkhpppgilikntpvpadp 0‏ 601 ‎pttfnqaklasfitqystggvsveiewelgkenskrwnpeiqytsnyykstnvdfavnte‏ 661 ‎gtyseprpigtryltrnl‏ 721 تشتمل الصور المتغيرة من ‎RHMA-T‏ من متوالية الحمض النووي من الكابسيد ‎١/01‏ مع كودونات تشفر و لاو 0 و“ والتي تم وضع خط تحتها ويخط سميك كما يلي (المتوالية رقم ‎:)١١‏ ‎atggctgccgatggttatcticcagattggctcgaggacaacctctctgagggceattcge 5‏ 1 ‎gagtggtgggacctgaaacctggagccccgaaacccaaagccaaccagcaaaagcaggac‏ 61 ‎aacggccggggtctggtgcttcctggctacaagtacctcggacccttcaacggactcgac‏ 121 ‎aagggggagcccgtcaacgcggcggacgcageggcecctcgagcacgacaaggcectacgac‏ 181 ‎cagcagctccaagcgggtgacaatccgtacctgcggtataatcacgccgacgcecgagttt‏ 241
AG — 301 caggagcgtctgcaagaagatacgtcttttgggggcaacctcgggcgegcagtcttccag 361 gccaaaaagcgggttctcgaacctctgggcectggttgaatcgecggttaagacggcetect 421 ggaaagaagagaccggtagagccatcaccccagcgctctccagactcctctacgggcate 481 ggcaagaaaggccagcagcccgcaaaaaagagactcaattttgggcagactggcgactca 541 gagtcagtccccgaccctcaaccaatcggagaaccaccagcagcecccectetggtgtggga 5 601 cctaatacaatggctgcaggcggtggcgctccaatggcagacaataacgaaggecgcecgac 661 ggagtgggtagttcctcaggaaattggcattgcgattccacatggctgggcgacagagte 721 atcaccaccagcacccgcacctgggccctgcccacctacaacaaccacctctacaagcaa 781 atctccaacgggacctcgggaggaagcaccaacgacaacacctacttcggctacagcacc 841 ccctgggggtattttgacttcaacagattccactgccacttttcaccacgtgactggcag 0 901 cgactcatcaacaacaactggggattccggcccaagaggctcaacttcaagctcttcaac 961 atccaagtcaaggaggtcacgcagaatgaaggcaccaagaccatcgccaataaccttacc 1021 agcacgattcaggtctttacggactcggaataccagctcccgtacgtgctcggetcggeg 1081 caccagggctgcctgectcegticccggeggacgtcttcatgatticctcagtacgggtac 1141 ctgactctgaacaatggcagtcaggctgtgggccggtegtectictactgectggagtac 15 1201 tttecttctcaaatgctgagaacgggcaacaactttgaattcagctacaacttcgaggac 1261 gtgcccttccacagcagctacgecgcacagccagagectggaccggcetgatgaaccctete 1321 atcgaccagtacttgtactacctgtcccggactcaaagcacgggeggtactgcaggaact 1381 cagcagttgctattttctcaggccgggcctaacaacatgtcggctcaggccaagaactgg
‎ctacccggtcectgctaccggcagcaacgcegtctccacgacactgtcgcagaacaacaac‏ 1441 ‎agcaactttgcctggacgggtgccaccaagtatcatctgaatggcagagactctctggtg‏ 1501 ‎aatcctggcgttgccatggctacccacaaggacgacgaagagcgattttttccatccage‏ 1561 ‎ggagtcttaatgtttgggaaacagggagctggaaaagacaacgtggactatagcagcgtg‏ 1621 ‎atgctaaccagcgaggaagaaataaagaccaccaacccagtggccacagaacagtacgge 5‏ 1681 ‎gtggtggccgataacctgcaacagcaaaacgccgctectattgtaggggcecgtcaatagt‏ 1741 ‎caaggagccttacctggcatggtgtggcagaaccgggacgtgtacctgcagggtcccatc‏ 1801 ‎tgggccaagattcctcatacggacggcaactttcatccctcgecgetgatgggaggcttt‏ 1861 ‎ggactgaagcatccgcctcctcagatcctgattaaaaacacacctgtticccgeggatect‏ 1921 ‎ccgaccaccttcaatcaggccaagctggcttctttcatcacgcagtacagtaccggccag 0‏ 1981 ‎gtcagcgtggagatcgagtgggagctgcagaaggagaacagcaaacgctggaacccagag‏ 2041 ‎attcagtacacttccaactactacaaatctacaaatgtggactttgctgtcaatactgag‏ 2101 ‎ggtacttattccgagcctcgccccattggcacccgttacctcaccegtaatctg‏ 2161. يكون للصور المتغيرة من ‎(HM15-1‏ 15-3¢15-2« 1-5¢15-4 15-65 استبدالات ألانين وليوسين وبرولين وأسبارجين عند مواضع الحمض الأميني 198 و1959 و01 و07" على الترتيب من كابسيد ‎Rh74 ١1/01‏ . بالإضافة إلى ذلك؛ يكون للصور المتغيرة المذكورة استبدالات أرجينين متغيرة من اللايسين عند مواضع متعددة. تكون الصورة المتغيرة من متوالية الحمض الأميني من كابسيد 01 و ‎RHMI5-1‏ كما يلي (المتوالية رقم ‎HT‏ ‎maadgylpdwlednlsegirewwdlkpgapkpkanqgqgrgdngrglvipgyrylgpfngld 20‏ 1 ‎TI‏ gy 61 kgepvnaadaaalehdraydqqlgagdnpylrynhadaefqerlqedtsfggnigravifq 121 akkrvleplglvespvrtapgkkrpvepspqrspdsstgigkkgqqparkrinfgqtgds 181 esvpdpqgpigeppaapsgvgpntmaagggapmadnnegadgvgsssgnwhcdstwigdrv 241 ittstrtwalptynnhlyrqisngtsggstndntyfgystpwgyfdfnrthchfsprdwq 5 301 rlinnnwgfrpkrinfklfnigvkevtgnegtrtiannltstiqvftdseyqlpyvigsa 361 hqggclppfpadvfmipqygyltinngsqavgrssfycleyfpsqmlirtgnnfefsynfed 421 vpfhssyahsqgsldrimnplidqylyylsrtgstggtagtqqlifsqagpnnmsagaknw 481 Ipgpcyrgqgrvsttisgnnnsnfawtgatkyhlngrdslvnpgvamathrddeerffpss 541 gvimfgrqgagrdnvdyssvmltseeeirttnpvateqygvvadnlgqqn aapivgavns 10 601 qgalpgmvwqnrdvylqgpiwakiphtdgnfhpsplmggfglkhpppgilikntpvpadp 661 pttfnqaklasfitqystggvsveiewelgkenskrwnpeiqytsnyykstnvdfavnte 721 gtyseprpigtryltrnl ‏كما يلي (المتوالية‎ RHMIS5-1 ‏من الصورة المتغيرة‎ VPT ‏تكون متوالية الحمض النووي لكابسيد‎ (VY ‏رقم‎ 5 1 atggctgccgatggttatcttccagattggctcgaggacaacctctctgagggceattcge 61 gagtggtgggacctgaaacctggagccccgaaacccaaagccaaccagcaaaggcaggac 121 aacggccggggtctggtgcttcctggctacaggtacctcggacccttcaacggactcgac 181 aagggggagcccgtcaacgcggcggacgcageggcecctcgagcacgacagggcectacgac
—qy— 241 cagcagctccaagcgggtgacaatccgtacctgcggtataatcacgccgacgecgagttt 301 caggagcgtctgcaagaagatacgtcttttgggggcaacctcgggcgegcagtcttccag 361 gccaaaaagcgggttictcgaacctctgggectggttgaatcgecggttaggacggcetect 421 ggaaagaagagaccggtagagccatcaccccagcgctctccagactcctctacgggcate 481 ggcaagaaaggccagcagcccgcaagaaagagactcaattttgggcagactggcgactca 5 541 gagtcagtccccgaccctcaaccaatcggagaaccaccagcagcecccctetggtgtggga 601 cctaatacaatggctgcaggcggtggcgctccaatggcagacaataacgaaggecgcecgac 661 ggagtgggtagttcctcaggaaattggcattgcgattccacatggctgggcgacagagte 721 atcaccaccagcacccgcacctgggccctgcccacctacaacaaccacctctacaggcaa 781 atctccaacgggacctcgggaggaagcaccaacgacaacacctacttcggctacagcacc 0 841 ccctgggggtattttgacttcaacagattccactgccacttttcaccacgtgactggcag 901 cgactcatcaacaacaactggggattccggcccaagaggctcaacttcaagctcttcaac 961 atccaagtcaaggaggtcacgcagaatgaaggcaccagga ccatcgccaa taaccttacc 1021 agcacgattcaggtctttacggactcggaataccagctce cgtacgtgct cggetcggeg 1081 caccagggctgcctgcctecegttcccggeggacgtcttca tgattcctca gtacgggtac 15 1141 ctgactctgaacaatggcagtcaggctgtgggccggtcgt ccttctactg cctggagtac 1201 tttecttctcaaatgctgagaacgggcaacaactttgaat tcagctacaa cttcgaggac 1261 gtgcccttccacagcagctacgcgcacagccagagectgg accggcetgat gaaccctete 1321 atcgaccagtacttgtactacctgtcccggactcaaagca cgggcggtac tgcaggaact
سو ‎cagcagttgctattttctcaggccgggcctaacaacatgt cggctcagge caagaactgg‏ 1381 ‎ctacccggtccctgctaccggcagcaacgcgtctccacga cactgtcgca gaacaacaac‏ 1441 ‎agcaactttgcctggacgggtgccaccaagtatcatctga atggcagaga ctetctggtg‏ 1501 ‎aatcctggcgttgccatggctacccacagggacgacgaag agcegattttt tccatccage‏ 1561 ‎ggagtcttaatgtttgggagacagggagctggaagagaca acgtggacta tagcagegtg 5‏ 1621
1681 atgctaaccagcgaggaagaaataaggaccaccaacccag tggccacaga acagtacggc 1741 gtggtggccgataacctgcaacagcaaaacgccgctecta ttgtagggge cgtcaatagt 1801 caaggagccttacctggcatggtgtggcagaaccgggacg tgtacctgca gggtcccatc
1861 tgggccaagattcctcatacggacggcaactttcatcect cgeccgetgat gggaggcettt 0 1921 ggactgaagcatccgcctcctcagatcctgattaaaaaca 860101166 cgecggatect 1981 ccgaccaccttcaatcaggccaagctggcttctttcatca cgcagtacag taccggccag 2041 gtcagcgtggagatcgagtgggagctgcagaaggagaaca gcaaacgctg gaacccagag
‎attcagtacacttccaactactacaaatctacaaatgtgg actttgctgt caatactgag 5‏ 2101 ‎ggtacttattccgagcctcgecccattggcacccgttace tcacccgtaa tetgtaa‏ 2161 تكون متوالية الحمض الأميني لكابسيد 1/01 من الصورة المتغيرة ‎RHM15-2‏ كما يلي (المتوالية رقم ‎:)١‏ ‏0 وال لاوماساوو09 ‎maadgylpdwlednlsegirewwdlkpgapkpkanqqrqgd‏ 1
‎61 kgepvnaadaaalehdraydqqlgagdnpylrynhadaef gerlgedtsf ‏وألنقواصوو‎ 20
‎TI qi 121 akkrvleplglvespvrtapgkkrpvepspqrspdsstgi gkrggqqpark rinfgqtgds 181 esvpdpgpigeppaapsgvgpntmaagggapmadnnegad gvgsssgnwh cdstwlgdrv 241 ittstrtwalptynnhlyrqisngtsggstndntyfgyst pwgyfdfnrf hchfsprdwq 301 rlinnnwgfrpkrinfkifnigvkevtgnegtrtiannlt stiqvftdse yqlpyvigsa 5
361 hqggclppfpadvifmipqygyltinngsqavgrssfycley fpsqmlrtgn nfefsynfed 421 vpfhssyahsqgsldrimnplidqylyylsrtgstggtagt qqlifsqagp nnmsagaknw 481 Ipgpcyrgqgrvsttlsgnnnsnfawtgatkyhlngrdslv npgvamathr ddeerffpss 541 gvimfgkqgagrdnvdyssvmltseeeirttnpvateqyg vvadnlqqgn aapivgavns
‎qgalpgmvwgnrdvylggpiwakiphtdgnfhpsplmggf glkhpppqil ikntpvpadp 10‏ 601 ‎pttfnqaklasfitqystggvsveiewelgkenskrwnpe iqytsnyyks tnvdfavnte‏ 661 ‎gtyseprpigtryltrnl‏ 121 تكون متوالية الحمض النووي لكابسيد ‎VPT‏ من الصورة المتغيرة ‎RHMI5-2‏ كما يلي (المتوالية رقم ‎:)١١‏
‎1 atggctgccgatggttatcticcagattggctcgaggaca acctctctga gggceattcge 5 61 gagtggtgggacctgaaacctggagccccgaaacccaaag ccaaccagca aaggcaggac 121 aacggccggggtctggtgcttcctggctacaggtacctcg gacccttcaa cggactcgac 181 aagggggagcccgtcaacgcggcggacgcageggcecctcg agcacgacag ggcctacgac
‎241 cagcagctccaagcgggtgacaatccgtacctgcggtata atcacgccga cgccgagttt 20
—qo- 301 caggagcgtctgcaagaagatacgtcttttgggggcaacc tcgggcegege agtcttccag 361 gccaaaaagcgggttctcgaacctctgggectggttgaat cgcecggttag gacggcetect 421 ggaaagaagagaccggtagagccatcaccccagcgctctc cagactcctc tacgggcatc 481 ggcaagagaggccagcagcccgcaagaaagagactcaatt ttgggcagac tggcgactca 541 gagtcagtccccgaccctcaaccaatcggagaaccaccag cagccecccte tggtgtggga 5 601 cctaatacaatggctgcaggcggtggcgctccaatggcag acaataacga aggcgcecgac 661 ggagtgggtagttcctcaggaaattggcattgcgattcca catggctggg cgacagagtc 721 atcaccaccagcacccgcacctgggccctgcccacctaca acaaccacct ctacaggcaa 781 atctccaacgggacctcgggaggaagcaccaacgacaaca cctacttcgg ctacagcacc 841 ccctgggggtattttgacttcaacagattccactgccact tttcaccacg tgactggcag 10 901 cgactcatcaacaacaactggggattccggcccaagaggc tcaacttcaa gctcttcaac 961 atccaagtcaaggaggtcacgcagaatgaaggcaccagga ccatcgccaa taaccttacc 1021 agcacgattcaggtctttacggactcggaataccagctcc cgtacgtgct cggetcggeg 1081 caccagggctgcctgcctcegttcccggeggacgtcttca tgattcctca gtacgggtac 1141 ctgactctgaacaatggcagtcaggctgtgggccggtegt ccttctactg cctggagtac 5 1201 tttecttctcaaatgctgagaacgggcaacaactttgaat tcagctacaa cttcgaggac 1261 gtgcccttccacagcagctacgcgcacagccagagectgg accggcetgat gaaccctete 1321 atcgaccagtacttgtactacctgtcccggactcaaagca cgggcggtac tgcaggaact 1381 cagcagttgctattttctcaggccgggcctaacaacatgt cggctcagge caagaactgg qe 1441 ctacccggtcectgctaccggcagcaacgcegtctccacga cactgtcgca gaacaacaac 1501 agcaactttgcctggacgggtgccaccaagtatcatctga atggcagaga ctetctggtg 1561 aatcctggcgttgccatggctacccacagggacgacgaag agcegattttt tccatccage 1621 ggagtcttaatgtitgggaaacagggagctggaagagaca acgtggacta tagcagcgtg 1681 atgctaaccagcgaggaagaaataaggaccaccaacccag tggccacaga 5 acagtacggc 1741 gtggtggccgataacctgcaacagcaaaacgccgctecta ttgtagggge cgtcaatagt 1801 caaggagccttacctggcatggtgtggcagaaccgggacg tgtacctgca gggtcccatc 1861 tgggccaagattcctcatacggacggcaactttcatcect cgececgetgat gggaggcttt 1921 ggactgaagcatccgcctcctcagatcctgattaaaaaca cacctgttcc cgeggatcet 0 1981 ccgaccaccttcaatcaggccaagctggcttctttcatca cgcagtacag taccggccag 2041 gtcagcgtggagatcgagtgggagctgcagaaggagaaca gcaaacgctg gaacccagag 2101 attcagtacacttccaactactacaaatctacaaatgtgg actttgctgt caatactgag 2161 ggtacttattccgagcctcgeccccattggcacccgttace tcacccgtaa tetgtaa 15
RHM15-3/RHM15-5 ‏للصورة المتغيرة من‎ VP1 ‏تكون متوالية الحمض الأميني من كابسيد‎
HA ‏كما يلي: (المتوالية رقم‎ 1 maadgylpdwlednisegir ewwdlkpgapkpkanqqrgd ngrglvlpgy rylgpfngld 61 kgepvnaadaaalehdraydqqlqagdnpylrynhadaef gerlqedtsf ggnlgravfq 121 akkrvleplglvespvrtapgkkrpvepspqrspdsstgi gkrgggqpakk rinfgqtgds 0
—qy— 181 esvpdpgpigeppaapsgvgpntmaagggapmadnnegad gvgsssgnwh cdstwlgdrv 241 ittstrtwalptynnhlyrqisngtsggstndntyfgyst pwgyfdfnrf hchfsprdwq 301 rlinnnwgfrpkrinfkifnigvkevtqnegtrtiannit stiqvftdse yqlpyvigsa 361 hqggclppfpadvifmipqgygyltinngsqavgrssfycley fpsgmirtgn nfefsynfed 5 421 vpfhssyahsqgsldrimnplidqylyylsrtgstggtagt qqlifsqagp nnmsagaknw 481 Ipgpcyrgqgrvsttisgnnnsnfawtgatkyhlngrdslv npgvamathr ddeerffpss 541 gvimfgrqgagrdnvdyssvmltseeeirttnpvateqyg vvadnlqqgn aapivgavns 601 qgalpgmvwqnrdvylggpiwakiphtdgnfhpsplmggf glkhpppqil ikntpvpadp 661 pttfnqaklasfitqystggvsveiewelgkenskrwnpe iqytsnyyks tnvdfavnte 0 121 gtyseprpigtryltrnl
RHM15-3/RHM15-5 ‏من الصورة المتغيرة من‎ VPT ‏تكون متوالية الحمض النووي لكابسيد‎ :)١ 6 ‏كما يلي (المتوالية رقم‎ 1 atggctgccgatggttatcttccagattggctcgaggaca acctctctga gggcattcge 61 gagtggtgggacctgaaacctggagccccgaaacccaaag ccaaccagca aaggcaggac 5 121 aacggccggggtctggtgcttcctggctacaggtacctcg gacccttcaa cggactcgac 181 aagggggagcccgtcaacgcggcggacgcageggcecctcg agcacgacag ggcctacgac 241 cagcagctccaagcgggtgacaatccgtacctgcggtata atcacgccga cgccgagttt 301 caggagcgtctgcaagaagatacgtcttttgggggcaacc tcgggcgcgce agtcttccag 0
-8م- ‎gccaaaaagcgggttctcgaacctctgggcectggttgaat cgececggttag gacggcetect‏ 361 ‎ggaaagaagagaccggtagagccatcaccccagcgctctc cagactcctc tacgggcatc‏ 421 ‎ggcaagagaggccagcagcccgcaaaaaagagactcaatt ttgggcagac tggcgactca‏ 481 ‎gagtcagtccccgaccctcaaccaatcggagaaccaccag cagcccccte tggtgtggga‏ 541 ‎cctaatacaatggctgcaggcggtggcgctccaatggcag acaataacga aggcgecgac 5‏ 601
661 ggagtgggtagttcctcaggaaattggcattgcgattcca catggctggg cgacagagtc 721 atcaccaccagcacccgcacctgggccctgcccacctaca acaaccacct ctacaggcaa 781 atctccaacgggacctcgggaggaagcaccaacgacaaca cctacttcgg ctacagcacc 841 ccctgggggtattttgacttcaacagattccactgccact tttcaccacg tgactggcag
901 cgactcatcaacaacaactggggattccggcccaagaggc tcaacttcaa gctcttcaac 10 961 atccaagtcaaggaggtcacgcagaatgaaggcaccagga ccatcgccaa taaccttacc 1021 agcacgattcaggtctttacggactcggaataccagctcc cgtacgtgct cggctecggeg 1081 caccagggctgcctgcctcegttcccggeggacgtcttca tgattcctca gtacgggtac 1141 ctgactctgaacaatggcagtcaggctgtgggccggtcgt ccttctactg cctggagtac
1201 tttccttctcaaatgctgagaacgggcaacaactttgaat tcagctacaa cttcgaggac 5 1261 gtgcccttccacagcagctacgcgcacagccagagcectgg accggctgat gaaccctcete 1321 atcgaccagtacttgtactacctgtcccggactcaaagca cgggcggtac tgcaggaact 1381 cagcagttgctattttctcaggccgggcctaacaacatgt cggctcagge caagaactgg 1441 ctacccggtcectgctaccggcagcaacgcegtctccacga cactgtcgca gaacaacaac
‎agcaactttgcctggacgggtgccaccaagtatcatctga atggcagaga ctetectggtg‏ 1501 ‎aatcctggcgttgccatggctacccacagggacgacgaag agcegattttt tccatccage‏ 1561 ‎ggagtcttaatgtitgggagacagggagctggaagagaca acgtggacta tagcagcgtg‏ 1621 ‎atgctaaccagcgaggaagaaataaggaccaccaacccag tggccacaga‏ 1681 ‎acagtacggc 5‏ ‎gtggtggccgataacctgcaacagcaaaacgccgctccta ttgtaggggce cgtcaatagt‏ 1741 ‎caaggagccttacctggcatggtgtggcagaaccgggacg tgtacctgca gggtcccatc‏ 1801 ‎tgggccaagattcctcatacggacggcaactttcatcect cgececgetgat gggaggcttt‏ 1861 ‎ggactgaagcatccgcctcctcagatcctgattaaaaaca cacctgttcc 0009816‏ 1921 ‎ccgaccaccttcaatcaggccaagctggcttctttcatca cgcagtacag taccggccag 10‏ 1981 ‎gtcagcgtggagatcgagtgggagctgcagaaggagaaca gcaaacgctg‏ 2041 ‎gaacccagag‏ ‎attcagtacacttccaactactacaaatctacaaatgtgg actttgctgt caatactgag‏ 2101 ‎ggtacttattccgagcctcgecccattggcacccgttace tcacccgtaa tetgtaa‏ 2161 تكون متوالية الحمض الأميني من الكابسيد 1/01 للصورة المتغيرة ‎RHM15-4‏ كما يلي (المتوالية رقم 3): ‎maadgylpdwlednisegirewwdlkpgap kpkanqqrqgd ngrglvlipgy rylgpfngld‏ 1 ‎kgepvnaadaaalehdraydqqlgagdnpy Irynhadaef gerlgedtsf ggnlgravfq‏ 61 ‎akkrvleplglvespvrtapgkkrpvepsp qrspdsstgi gkrgggpakk rinfgqtgds‏ 121
Nam 181 esvpdpgpigeppaapsgvgpntmaaggga pmadnnegad gvgsssgnwh cdstwlgdrv 241 ittstrtwalptynnhlyrqisngtsggst ndntyfgyst pwgyfdfnrf hchfsprdwq 301 rlinnnwgfrpkrinfkifniqvkevtgne gtrtiannlt stiqvftdse yqlpyvigsa 361 hqggclppfpadvimipqygyltinngsgav grssfycley fpsqmlrtgn nfefsynfed 5 421 vpfhssyahsqgsldrimnplidqylyylsr tqstggtagt qqllifsgagp nnmsaqaknw 481 Ipgpcyrqqgrvsttisqnnnsnfawtgatk yhingrdslv npgvamathr ddeerffpss 541 gvimfgkqgagrdnvdyssvmltseeeirt thpvateqyg vvadnlgqqn aapivgavns 601 qgalpgmvwqgnrdvylqgpiwakiphtdgn fhpsplmggf glkhpppqil ikntpvpadp 661 pttfnqarlasfitqystgqvsveiewelq kenskrwnpe iqytsnyyks tnvdfavnte 0 721 gtyseprpigtryltrnl ‏كما يلي (المتوالية‎ RHM15-4 ‏من الصورة المتغيرة‎ VPT ‏تكون متوالية الحمض النووي لكابسيد‎ (Vo ‏رقم‎ ‎1 atggctgccgatggttatcttccagattggctcgaggaca acctctctga gggcattcge 61 gagtggtgggacctgaaacctggagccccgaaacccaaag ccaaccagca aaggcaggac 5 121 aacggccggggtctggtgcttcctggctacaggtacctcg gacccttcaa cggactcgac 181 aagggggagcccgtcaacgcggcggacgcagcggcecctcg agcacgacag ggcctacgac 241 cagcagctccaagcgggtgacaatccgtacctgcggtata atcacgccga cgccgagttt 301 caggagcgtctgcaagaagatacgtcttttgggggcaacc tcgggcgcgce agtcttccag 0
-١.١- 361 gccaaaaagcgggttctcgaacctctgggectggttgaat cgcecggttag gacggctect 421 ggaaagaagagaccggtagagccatcaccccagcgctctc cagactcctc tacgggcatc 481 ggcaagagaggccagcagcccgcaaaaaagagactcaatt ttgggcagac tggcgactca 541 gagtcagtccccgaccctcaaccaatcggagaaccaccag cagcccccte tggtgtggga 601 cctaatacaatggctgcaggcggtggcgctccaatggcag acaataacga aggcgecgac 5
661 ggagtgggtagttcctcaggaaattggcattgcgattcca catggctggg cgacagagtc 721 atcaccaccagcacccgcacctgggccctgcccacctaca acaaccacct ctacaggcaa 781 atctccaacgggacctcgggaggaagcaccaacgacaaca cctacttcgg ctacagcacc 841 ccctgggggtattttgacttcaacagattccactgccact tttcaccacg tgactggcag
901 cgactcatcaacaacaactggggattccggcccaagaggc tcaacttcaa gctcttcaac 10 961 atccaagtcaaggaggtcacgcagaatgaaggcaccagga ccatcgccaa taaccttacc 1021 agcacgattcaggtctttacggactcggaataccagctcc cgtacgtgct cggctcggeg 1081 caccagggctgcctgectcegttcccggeggacgtcttca tgattcctca gtacgggtac 1141 ctgactctgaacaatggcagtcaggctgtgggccggtcgt ccttctactg cctggagtac
1201 tttecttctcaaatgctgagaacgggcaacaactttgaat tcagctacaa cticgaggac 5 1261 gtgcccttccacagcagctacgcgcacagccagagcectgg accggcetgat gaaccctete 1321 atcgaccagtacttgtactacctgtcccggactcaaagca cgggcggtac tgcaggaact 1381 cagcagttgctattttctcaggccgggcctaacaacatgt cggctcagge caagaactgg 1441 ctacccggtccctgctaccggcagcaacgcegtctccacga cactgtcgca gaacaacaac
-١ ١,
1501 agcaactttgcctggacgggtgccaccaagtatcatctga atggcagaga ctetetggtg
1561 aatcctggcegttgccatggctacccacagggacgacgaag agcegattttt tccatccage
1621 ggagtcttaatgtttgggaaacagggagctggaagagaca acgtggacta tagcagcgtg
1681 atgctaaccagcgaggaagaaataaggaccaccaacccag tggccacaga acagtacggc 5
1741 gtggtggccgataacctgcaacagcaaaacgccgctccta ttgtagggge cgtcaatagt
1801 caaggagccttacctggcatggtgtggcagaaccgggacg tgtacctgca gggtcccatc
1861 tgggccaagattcctcatacggacggcaactttcatcect cgeccgetgat gggaggcttt
1921 ggactgaagcatccgcctcctcagatcctgattaaaaaca cacctgttcc cgcggatcect 1981 ccgaccaccttcaatcaggccaggctggcttctticatca cgcagtacag taccggeccag 10
2041 gtcagcgtggagatcgagtgggagetgcagaaggagaaca gcaaacgctg gaacccagag
2101 attcagtacacttccaactactacaaatctacaaatgtgg actttgctgt caatactgag
2161 ggtacttattccgagcctcgecccattggcacccgttace tcacccgtaa tetgtaa ‏كما يلي (المتوالية‎ RHMI5-6 ‏للصورة المتغيرة‎ VPT ‏متوالية الحمض الأميني من كابسيد‎ 0585 15
:)٠١ ‏رقم‎
1 maadgylpdwlednlsegirewwdlkpgapkpkanqqrqdngrglvipgy rylgpfngld
61 kgepvnaadaaalehdraydqqlgagdnpylrynhadaefqerlgedtsf ggnlgravfq
121 akkrvleplglvespvrtapgkkrpvepspqrspdsstgigkkgqqpakk rinfgqtgds
١, 181 esvpdpqgpigeppaapsgvgpntmaagggapmadnnegadgvgsssgnwh cdstwlgdrv 241 ittstrtwalptynnhlyrgisngtsggstndntyfgystpwgyfdfnrf hchfsprdwq 301 rlinnnwgfrpkrinfkifniqvkevtgnegtrtiannltstiqvftdse yqlpyvigsa 361 hqggclppfpadvimipqygyltinngsqavgrssfycleyfpsgmirtgn nfefsynfed 5 421 vpfthssyahsgsldrimnplidgylyylsrtqstggtagtqqglifsgagp nnmsagaknw 481 Ipgpcyrggrvsttisgnnnsnfawtgatkyhingrdslvnpgvamathr ddeerffpss 541 gvimfgrqgagrdnvdyssvmltseeeirttnpvateqygvvadnlqqqn aapivgavns 601 ggalpgmvwqgnrdvylqgpiwakiphtdgnfthpsplmggfglkhpppqil ikntpvpadp 661 pttinqarlasfitqystgqvsveiewelgkenskrwnpeiqytsnyyks tnvdfavnte 0 721 gtyseprpigtryltrnl ‏كما يلي‎ RAM15-6 ‏من الصورة المتغيرة من‎ VPT ‏تكون متوالية الحمض النووي لكابسيد‎ (VT ‏(المتوالية رقم‎ 1 atggctgccgatggttatcttccagattggctcgaggaca acctctctga gggcattcge 61 gagtggtgggacctgaaacctggagccccgaaacccaaag ccaaccagca aaggcaggac 5 121 aacggccggggtetggtgcttcctggctacaggtacctcg gacccttcaa cggactcgac 181 aagggggagcccgtcaacgcggcggacgcagcggcecctcg agcacgacag ggcctacgac 241 cagcagctccaagcgggtgacaatccgtacctgcggtata atcacgccga cgeccgagttt 301 caggagcgtctgcaagaagatacgtcttttgggggcaacc tcgggcgcege agtcttccag 0
-١ 361 gccaaaaagcgggttctcgaacctctgggectggttgaat 02269091130 gacggctect 421 ggaaagaagagaccggtagagccatcaccccagcgctctc cagactccte tacgggcatc 481 ggcaagaaaggccagcagcccgcaaaaaagagactcaatt ttgggcagac tggcgactca 541 gagtcagtccccgaccctcaaccaatcggagaaccaccag cagcccccte tggtgtggga 601 cctaatacaatggctgcaggcggtggcgctccaatggcag acaataacga aggcgecgac 5
661 ggagtgggtagttcctcaggaaattggcattgcgattcca catggctggg cgacagagtc 721 atcaccaccagcacccgcacctgggccctgcccacctaca acaaccacct ctacaggcaa 781 atctccaacgggacctcgggaggaagcaccaacgacaaca cctacttcgg ctacagcacc 841 ccctgggggtattttgacttcaacagattccactgccact tttcaccacg tgactggcag
901 cgactcatcaacaacaactggggattccggcccaagaggc tcaacttcaa gctcttcaac 10 961 atccaagtcaaggaggtcacgcagaatgaaggcaccagga ccatcgccaa taaccttacc 1021 agcacgattcaggtctttacggactcggaataccagctcc cgtacgtgct cggctcggeg 1081 caccagggctgcctgectecegttccecggeggacgtcttca tgattcctca gtacgggtac 1141 ctgactctgaacaatggcagtcaggctgtgggccggtcgt ccttctactg cctggagtac
1201 tttecttctcaaatgctgagaacgggcaacaactttgaat tcagctacaa cticgaggac 5 1261 gtgcccttccacagcagctacgcgcacagccagagcectgg accggcetgat gaaccctete 1321 atcgaccagtacttgtactacctgtcccggactcaaagca cgggcggtac tgcaggaact 1381 cagcagttgctattttctcaggccgggcctaacaacatgt cggctcagge caagaactgg 1441 ctacccggtccctgctaccggcagcaacgcegtctccacga cactgtcgca gaacaacaac
-ه.١-‏ ‎agcaactttgcctggacgggtgccaccaagtatcatctga atggcagaga ctctetggtg‏ 1501 ‎aatcctggcegttgccatggctacccacagggacgacgaag agcegattttt tccatccage‏ 1561 ‎ggagtcttaatgtttgggagacagggagctggaagagaca acgtggacta tagcagcgtg‏ 1621 ‎atgctaaccagcgaggaagaaataaggaccaccaacccag tggccacaga‏ 1681 ‎acagtacggc 5‏ ‎gtggtggccgataacctgcaacagcaaaacgccgctccta ttgtagggge cgtcaatagt‏ 1741 ‎caaggagccttacctggcatggtgtggcagaaccgggacg tgtacctgca gggtcccatc‏ 1801 ‎tgggccaagattcctcatacggacggcaactttcatcect cgeccgetgat gggaggcttt‏ 1861 ‎ggactgaagcatccgcctcctcagatcctgattaaaaaca cacctgttcc cgecggatect‏ 1921 ‎ccgaccaccttcaatcaggccaggctggcttctticatca cgcagtacag taccggeccag 10‏ 1981 ‎gtcagcgtggagatcgagtgggagctgcagaaggagaaca gcaaacgctg‏ 2041 ‎gaacccagag‏ ‎attcagtacacttccaactactacaaatctacaaatgtgg actttgctgt caatactgag‏ 2101 ‎ggtacttattccgagcctcgecccattggcacccgttace tcaccecgtaa tetgtaa‏ 2161 المثال رقم ‎A‏ ‏يشتمل المثال المذكور على وصف دراسات التعبير من عامل ‎IX‏ باستخدام صور متغيرة من كابسيد 4074 بالمقارنة مع ‎Rh74‏ و 6/اخلط. ‎log‏ نحو مختصر؛ تم استخدام الصور المتغيرة من الكابسيد 4074 لكي تتم تعبئة ناقل تعبير من عامل ‎IX‏ بشري من ‎AAV‏ تم استخدام الصور المتغيرة من ‎AAV‏ لك يتم نقل العدوى للفئران 0 .وتم تحديد مستويات التعبير من عامل )لا لكي يتم التحديد في الحيوانات (بلازما). يكون للصور المتغيرة من الكابسيد استبدالات الحمض الأميني التالي عند المواضع المحددة: ‎TI‏
‎٠ h —‏ \ — الجدول رقم ؛ ‎G195A-L199V- S201P-G202N‏ ‎G195A-L199V-S201P-G202N‏ ‎K(137/259/333/530/552/569/38/51/77/169/54T7)R | RHM15_1‏ ‎G195A-L199V- S201P-G202N‏ ‎K(137/259/333/530/552/569/38/51[T7/163/169)R | RHM15_2‏ ‎G195A-L199V- S201P-G202N‏ ‎K(137/259/333/530/552/569/38/51/77/163/54T7)R ١ RHM15_3‏ ‎G195A-L199V- S201P-G202N‏ ‎K(137/259/333/530/552/569/38/51[T7/163/668)R | RHM15_4‏ ‎G195A-L199V- S201P-G202N‏ ‎K(137/259/333/530/552/569/38/51[T17/547/163)R | RHM15_5‏ ‎G195A-L199V- S201P-G202N‏ ‎K(137/259/333/530/552/569/38/51/17/547/688)R | RHM15_6‏ يوضح الشكل رقم © مستويات تعبير ‎IX‏ لعامل بشري في حيوانات معالجة بعد ‎١‏ أسبوع. وكما تم توضيحه»؛ تتم كبسلة ناقل التعبير ‎IX‏ عن عامل بشري ‎AAV‏ بواسطة كابسيد صورة متغيرة من ‎RHM4-1‏ بشرط وجود مستويات عالية من التعبير ويكون بها تعبير أعلى إلى حد كبير من التعبير الذي تم إنتاجه بواسطة 4074 من ناقل تعبير ‎IX‏ لعامل بشري تمت كبسلته ‎SAAV‏ ‎AAV‏ تمت كبسلته من ناقل تعبير ‎IX‏ لعامل بشري ‎AAV‏ تمت كبسلته. المثال رقم ؟ يشتمل هذا ‎JU‏ على وصف بيانات توضح أن ناقل ‎RHM4-1‏ من الصورة المتغيرة ل 4 تعبر عن عامل ‎IX (FIX)‏ بشري تحت تحكم معزز خاص بالكبد تم إعطاؤه لحيوان ‎AAR‏
لا ‎٠‏ \ _ مكاك من الرياح واذي يؤدي إلى إنتاج كميات من ‎FIX‏ في الحيوانات وعند مستويات أعلى من الناقل ‎AAV‏ الذي تم إعطاؤه نفس الكمية. تم فحص حيوانات الرياح بشكل أولي فيما يتعلق بالأجسام المضاد المتعادلة ‎AAV‏ والحيوانات مع عيارات معالجة قبلية من > ‎ally ١ :١‏ تم اختيارها لكي يم ضمان أن ‎dis‏ الإشارة كان ناجحاً. يتم التسريب فى الحيوانات إما للصورة المتغيرة من ‎AAVS‏ أو ‎AAV-Rh74‏ من نواقل ‎RHM4-1‏ ‎Al‏ تعبر عن الجين الانتقالى ‎IX‏ لعامل بشري عند جرعة من ‎VG YY ٠١ XY‏ /كجم. تم تحديد مستويات بلازما منتج جين انتقالي ل 176 بشري (بروتين) في رئيسيات غير بشرية كما تم تحديدها بواسطة ‎ELISA‏ خلال مدة الدراسة وتم توضيحها في الشكل رقم 6. استقبل أحد الحيوانات ‎AAV-RHM4-1-FIX‏ الذي تم تطويره في مثبط في مقابل منتج جين 0 اتتقالي لعامل ‎IX‏ . بشري والذي يتم توثيقه بشكل جيد في ظاهرة تحدث تقريباً في ‎967٠0‏ من قرود المكاك التي تمت معالجتها باستخدام ناقل ‎FIX‏ بشري ‎Ally‏ توضح أن هناك اختلافات حمض أميني صغير بين بروتينات بشرية وبروتينات من قرد المكاك. يكون الفقد في التعبير في أحد الحيوانات التي تمت معالجتها باستخدام ‎RHM4-T‏ ناتجاً عن التطور في الاستجابة للجسم المضاد في مقابل الجين الانتقالي البشري.تمت مقارنة الحيوان المعالج ب ‎RHM4-1‏ الثاني الذي 5 يعبر عن مستويات ‎FIX‏ تقريباً لحوالي ¥ ضعف بالمقارنة مع حيوانات المكاك التي تمت معالجتها ب 85 /اخلط. المتواليات ‎The Children's Hospital of Philadelphia >١٠١<‏ ‎YAZICIOGLU, MUSTAFA‏ ‎HIGH, KATHERINE 20‏ ‎ANGUELA, XAVIER‏ ‎Variant AAV and Compositions, Methods and Uses for Gene <\Y.>‏ ‎Transfer‏
“NA to Cells, Organs and Tissues ‏نمت امصمهعا ات‎ >< ‏الاعم‎ 1/11 <Vo.> ‏<ادا> 7ل اأحلامحاا‎ ‏51/رمت مم‎ >< 5 ‏<ادا> ااباإحئت حلا‎ ٠١ >اا١<‎
Patentln version 3.5 <\v.> ١ ><
YYA > ١ < 10
PRT >؟١<‎
Adeno-associated virus <Y\y> ١ <g>
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser
Yo 0" 2 ١ 5
Glu Gly lle Arg Glu Trp Trp Asp Leu Lys Pro Gly Ala Pro Lys Pro
Yo Yo Ye
Lys Ala Asn GIn GIn Lys GIn Asp Asn Gly Arg Gly Leu Val Leu Pro ‏م‎ 4 Yo
-١.4-
Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Phe Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
Ta oo on
Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp
As Yo ‏ل‎ qo
GIn GIn Leu GIn Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Arg Tyr Asn His Ala 5 90 qe Ao
Asp Ala Glu Phe GIn Glu Arg Leu Gin Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly ١١٠ Yeo ٠
Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe GIn Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro
YYo YY. ١١٠ 10
Leu Gly Leu Val Glu Ser Pro Val Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg ١ ٠١١٠© ١١٠
Pro Val Glu Pro Ser Pro ‏داى‎ Arg Ser Pro Asp Ser Ser Thr Gly lle ١٠ Yoo You Vé¢o
Gly Lys Lys Gly GIn GIn Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly GIn 15 ‏عد‎ ٠ ‏بحاي‎ ‎Thr Gly Asp Ser Glu Ser Val Pro Asp Pro 60 Pro lle Gly Glu Pro
Ya. YAo YA
Pro Ala Gly Pro Ser Gly Leu Gly Ser Gly Thr Met Ala Ala Gly Gly
“Ny
Y.o Yeo Yao
Gly Ala Pro Met Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser
AR Ye ٠
Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Leu Gly Asp Arg Val
Yeo 77١ YY. YYo 5 lle Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His
Yoo You Y¢o
Leu Tyr Lys Gin lle Ser Asn Gly Thr Ser Gly Gly Ser Thr Asn Asp ٠ ١ Yo
Asn Thr Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn 0 ‏فط علا‎ YVe
Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gin Arg Leu lle Asn
Yoo Yao Ya.
Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn
YY. Ye 7٠ Yeo 5 lle Gln Val Lys Glu Val Thr Gin Asn Glu Gly Thr Lys Thr lle Ala
YYo YY. YYo
Asn Asn Leu Thr Ser Thr lle Gin Val Phe Thr Asp Ser Glu Tyr 0
You Yeo Yeo
-١١١-
Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Gln Gly Cys Leu Pro Pro Phe
Yio Ye Yoo
Pro Ala Asp Val Phe Met lle Pro Gin Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn
YA Yve YV.
Asn Gly Ser Gin Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr 5 6 Yao Ya. YAo
Phe Pro Ser GIn Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Ser Tyr ١١ tA ¢.0
Asn Phe Glu Asp Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gin Ser ٠ ١ EY. 10
Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu lle Asp 60 Tyr Leu Tyr Tyr Leu ¢¢o £8 ‏روا‎ ‎Ser Arg Thr GIn Ser Thr Gly Gly Thr Ala Gly Thr 0 Gin Leu Leu ra ¢oo $0.
Phe Ser GIn Ala Gly Pro Asn Asn Met Ser Ala GIn Ala Lys Asn Trp 5
EA ‏دا‎ ٠ ‏م‎ ‎Leu Pro Gly Pro Cys Tyr Arg GIn ‏ما‎ Arg Val Ser Thr Thr Leu Ser to £9 ‏م‎ ‎Gln Asn Asn Asn Ser Asn Phe Ala Trp Thr Gly Ala Thr Lys Tyr His
-١١- oy. 5.5 Su
Leu Asn Gly Arg Asp Ser Leu Val Asn Pro Gly Val Ala Met Ala Thr oYo oy. ‏5ه‎ ‎His Lys Asp Asp Glu Glu Arg Phe Phe Pro Ser Ser Gly Val Leu Met of. ovo ov. 5
Phe Gly Lys GIn Gly Ala Gly Lys Asp Asn Val Asp Tyr Ser Ser Val oT. coo 54 ogo
Met Leu Thr Ser Glu Glu Glu lle Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr ‏د/اهت‎ ov. oto
Glu GIn Tyr Gly Val Val Ala Asp Asn Leu GIn Gin GIn Asn Ala Ala 0 oq. ‏ده‎ OA
Pro lle Val Gly Ala Val Asn Ser Gln Gly Ala Leu Pro Gly Met Val 1.0 Ta cdo
Trp Gln Asn Arg Asp Val Tyr Leu Gin Gly Pro lle Trp Ala Lys lle 1 ‏ا‎ 1٠ 15
Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe
Te Ye 1 17
Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Gin lle Leu lle Lys Asn Thr Pro Val loo EE 15
Pro Ala Asp Pro Pro Thr Thr Phe Asn Gin Ala Lys Leu Ala Ser Phe
Ye 1e 11 lle Thr Glin Tyr Ser Thr Gly GIn Val Ser Val Glu lle Glu Trp Glu ‏مغ‎ TA Ye
Leu GIn Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu lle GIn Tyr Thr 5
Yeo 190 16
Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Thr Asn Val Asp Phe Ala Val Asn Thr Glu
AAR Yio ‏الا‎ Yeo
Gly Thr Tyr Ser Glu Pro Arg Pro lle Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg ‏هلا‎ YY. YYo 10
Asn Leu
Y <Y).> ١١١ <YYyYy>
DNA <y\yvy> 15
Adeno-associated virus <Y\y>
Y <goa> atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca acctctctga gggcattcge 60
-١١6-
gagtggtggg acctgaaacc tggagccccg aaacccaaag ccaaccagca aaagcaggac
120 aacggccggg gtetggtget tcctggctac aagtacctcg gacccttcaa cggactcgac
180 aagggggagc ccgtcaacgc ggcggacgca gcggcecctcg agcacgacaa ggcctacgac 5
240 cagcagctcc aagcgggtga caatccgtac ctgcggtata atcacgccga cgccgagttt
300 caggagcgtc tgcaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgcgc agtcttccag
360 10 gccaaaaagc gggttctcga acctctgggc ctggttgaat cgccggttaa gacggcetect
420 ggaaagaaga gaccggtaga gccatcaccc cagcgctctc cagactcctc tacgggcatc
480 ggcaagaaag gccagcagcc cgcaaaaaag agactcaatt ttgggcagac tggcgactca 5
540 gagtcagtcc ccgaccctca accaatcgga gaaccaccag caggcccctc tggtctggga
600 tctggtacaa tggctgcagg cggtggcgct ccaatggcag acaataacga aggcgccgac
660 20 ggagtgggta gttcctcagg aaattggcat tgcgattcca catggctggg cgacagagtc
720
— \ \ ‏اج‎ ‎atcaccacca gcacccgcac ctgggccctg cccacctaca acaaccacct ctacaagcaa 780 atctccaacg ggacctcggg aggaagcacc aacgacaaca cctacttcgg ctacagcacc 840 ccctgggggt attttgactt caacagattc cactgccact tttcaccacg tgactggcag 900 5 cgactcatca acaacaactg gggattccgg cccaagaggc tcaacttcaa gctcticaac 960 atccaagtca aggaggtcac gcagaatgaa ggcaccaaga ccatcgccaa taaccttacc 1020 agcacgattc aggtctttac ggactcggaa taccagctcc cgtacgtgct cggctcggeg 10 1080 caccagggct gcctgcectcc gttcccggeg gacgtcttca tgattcctca gtacgggtac 1140 ctgactctga acaatggcag tcaggctgtg ggccggtcgt ccttctactg cctggagtac 1200 15 tttccttctc aaatgctgag aacgggcaac aactttgaat tcagctacaa cttcgaggac 1260 gtgcccttcc acagcagcta cgcgcacagc cagagcctgg accggctgat gaaccctcte 1320 atcgaccagt acttgtacta cctgtcccgg actcaaagca cgggcggtac tgcaggaact 20 1380
-١١- cagcagttgc 311-108 909900999001 aacaacatgt cggctcaggc 09 1440 ctacccggtc cctgctaccg gcagcaacgc gtctccacga cactgtcgca gaacaacaac 1500 agcaacttty cctggacggg tgccaccaag tatcatctga atggcagaga ctctetggtg 5 1560 aatcctggcg ttgccatggc tacccacaag gacgacgaag agcgattttt tccatccagce 1620 ggagtcttaa tgtttgggaa acagggagct ggaaaagaca acgtggacta tagcagcgtg 1680 10 atgctaacca gcgaggaaga aataaagacc accaacccag tggccacaga acagtacggc 1740 gtggtggccg ataacctgca acagcaaaac gccgctccta ttgtaggggce cgtcaatagt 1800 caaggagcct tacctggcat ggtgtggcag aaccgggacg tgtacctgca gggtcccatc 5 1860 tgggccaaga ttcctcatac ggacggcaac tttcatccct cgecgetgat gggaggcttt 1920 ggactgaagc atccgcctcc tcagatcctg attaaaaaca cacctgttcc cgcggatect 1980 20 ccgaccacct tcaatcaggc caagctggct ftctttcatca cgcagtacag taccggccag 2040
-١١/- gtcagcgtgg agatcgagtg ggagctgcag aaggagaaca gcaaacgctg gaacccagag 2100 attcagtaca cttccaacta ctacaaatct acaaatgtgg actttgctgt caatactgag 2160 ggtacttatt ccgagcctcg ccccattggc acccgttace tcacccgtaa tetgtaa 2217 ¥Y <YY.> 5
Te) ‏<اا”>‎ ‎PRT >؟١<‎
Adeno-associated virus <Y\y> © ‏<ء.ء؛>‎ ‎Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg Pro Val Glu Pro Ser Pro Gln Arg Ser 0
Vo ٠١ ° ١
Pro Asp Ser Ser Thr Gly lle Gly Lys Lys Gly Gin GIn Pro Ala Lys
Yo Yo Ye
Lys Arg Leu Asn Phe Gly 60 Thr Gly Asp Ser Glu Ser Val Pro Asp go 2 vo 15
Pro Gin Pro lle Gly Glu Pro Pro Ala Gly Pro Ser Gly Leu Gly Ser
Ta oo on
Gly Thr Met Ala Ala Gly Gly Gly Ala Pro Met Ala Asp Asn Asn Glu
As Yo ‏ل‎ qo
-١١
Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser 90 qe Ao
Thr Trp Leu Gly Asp Arg Val lle Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala ١١٠ Yeo ٠
Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gin lle Ser Asn Gly Thr 5 ١١٠ ١١ ١١
Ser Gly Gly Ser Thr Asn Asp Asn Thr Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro ١ ٠١١٠© ١١٠
Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg 1 yoo You Yeo 10
Asp Trp GIn Arg Leu lle Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg ‏عد‎ ٠ ‏بحاي‎
Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn lle Gin Val Lys Glu Val Thr Gin Asn
Ya. YAo YA
Glu Gly Thr Lys Thr lle Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr lle GIn Val 15
Y.o Yeo Yao
Phe Thr Asp Ser Glu Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His
AR Ye ٠ ‏داك‎ Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met lle Pro 0
-١١4- 9 77١ YY. ١١
Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asn Gly Ser Gin Ala Val Gly Arg Ser
Yoo You Y¢o
Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser GIn Met Leu Arg Thr Gly ٠ ١ 91٠٠ 5
Asn Asn Phe Glu Phe Ser Tyr Asn Phe Glu Asp Val Pro Phe His Ser
YAS YA veo
Ser Tyr Ala His Ser GIn Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu lle
You Ydo Ya.
Asp GIn Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Arg Thr 60 Ser Thr Gly Gly Thr 0
YY. 7١١ 7٠ Yo
Ala Gly Thr Gln Gln Leu Leu Phe Ser Gin Ala Gly Pro Asn Asn Met
YYo YY. YYo
Ser Ala GIn Ala Lys Asn Trp Leu Pro Gly Pro Cys Tyr Arg Gin 0
You Yeo 76 15
Arg Val Ser Thr Thr Leu Ser Gln Asn Asn Asn Ser Asn Phe Ala Trp
Yio Ye Yoo
Thr Gly Ala Thr Lys Tyr His Leu Asn Gly Arg Asp Ser Leu Val Asn
YA Yve YV.
SAY
Pro Gly Val Ala Met Ala Thr His Lys Asp Asp Glu Glu Arg Phe Phe 6 Yao Ya. YAo
Pro Ser Ser Gly Val Leu Met Phe Gly Lys GIn Gly Ala Gly Lys Asp ١١ tA ¢.0
Asn Val Asp Tyr Ser Ser Val Met Leu Thr Ser Glu Glu Glu lle Lys 5 ٠ ١ AR
Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu GIn Tyr Gly Val Val Ala Asp Asn ¢¢o £8 ‏روا‎
Leu GIn GIn GIn Asn Ala Ala Pro lle Val Gly Ala Val Asn Ser 07 6 goo gon 10
Gly Ala Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asn Arg Asp Val Tyr Leu 0
EA ‏دا‎ ٠ ‏م‎ ‎Gly Pro lle Trp Ala Lys lle Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro to £9 ‏م‎ ‎Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Gin lle 5 oY 0.0 84
Leu lle Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Thr Phe Asn ‏داه‎ ov. ه١‎
Gln Ala Lys Leu Ala Ser Phe lle Thr GIn Tyr Ser Thr Gly Gin Val
-١؟١-‎ of ovo ov.
Ser Val Glu lle Glu Trp Glu Leu GIn Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp oT coo YI ogo
Asn Pro Glu lle GIn Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Thr Asn Val oVo ov. ovo 5
Asp Phe Ala Val Asn Thr Glu Gly Thr Tyr Ser Glu Pro Arg Pro lle od. ‏ده‎ OA
Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu
Toe 090 ¢ >٠١< 10 ovo >ا١١<‎
PRT >؟١<‎
Adeno-associated virus <Y\y> § <g>
Met Ala Ala Gly Gly Gly Ala Pro Met Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala 15
Vo ٠١ ° ١
Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Thr Trp
Yo Yo Ye
Leu Gly Asp Arg Val lle Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro
-١؟؟-‎ ‏م‎ 4 Yo
Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gin lle Ser Asn Gly Thr Ser Gly
Ta co on
Gly Ser Thr Asn Asp Asn Thr Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly
A Yeo Ye le 5
Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp 90 9. Ao
Gln Arg Leu lle Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn ١١٠ Yeo ٠
Phe Lys Leu Phe Asn lle Gin Val Lys Glu Val Thr Gin Asn Glu Gly 0 ١١٠ ١١ ١١
Thr Lys Thr lle Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr lle Gln Val Phe Thr ١ ٠١١٠© ١١٠
Asp Ser Glu Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Gin Gly 1 yoo You Yeo 5
Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met lle Pro Gin Tyr Gly ‏عد‎ ٠ ‏بحاي‎ ‎Tyr Leu Thr Leu Asn Asn Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe
Ya. YAo YA
ضف ‎Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn‏ (ا6 ‎Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser‏ ‎Y.o Yeo Yao‏ ‎Phe Glu Phe Ser Tyr Asn Phe Glu Asp Val Pro Phe His Ser Ser Tyr‏ ‎AR Ye ٠‏ ‎Ala His Ser GIn Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu lle Asp GIn 5‏ ‎77١ YY. ١١‏ 9 ‎Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Arg Thr GIn Ser Thr Gly Gly Thr Ala Gly‏ ‎Yoo You Y¢o‏
Thr Gln GIn Leu Leu Phe Ser Gln Ala Gly Pro Asn Asn Met Ser Ala ‎Yio Yl. 10‏ لال ‎Gln Ala Lys Asn Trp Leu Pro Gly Pro Cys Tyr Arg Gln Gln Arg Val‏ ‎YVe‏ فط علا ‎Ser Thr Thr Leu Ser GIn Asn Asn Asn Ser Asn Phe Ala Trp Thr Gly‏ ‎Yoo Ydo Ya.‏ ‎Ala Thr Lys Tyr His Leu Asn Gly Arg Asp Ser Leu Val Ash Pro Gly 15
YY. 7١١ 7٠ Yo
Val Ala Met Ala Thr His Lys Asp Asp Glu Glu Arg Phe Phe Pro Ser ‎YYo YY. YYo
Ser Gly Val Leu Met Phe Gly Lys GIn Gly Ala Gly Lys Asp Asn Val
-١4-
You Yeo Yeo
Asp Tyr Ser Ser Val Met Leu Thr Ser Glu Glu Glu lle Lys Thr Thr
Yio Ye Yoo
Asn Pro Val Ala Thr Glu Gln Tyr Gly Val Val Ala Asp Asn Leu 07
YA Yve ٠٠ 5
Gln GIn Asn Ala Ala Pro lle Val Gly Ala Val Asn Ser GIn Gly Ala 6 Yao Ya. YAo
Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asn Arg Asp Val Tyr Leu 60 Gly Pro ١١ tA ¢.0 lle Trp Ala Lys lle Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro 10 ٠ ١ AR
Leu Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Gin lle Leu lle ¢¢o £8 ‏روا‎ ‎Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Thr Phe Asn Gin Ala $s too £0. 15
Lys Leu Ala Ser Phe lle Thr Gin Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val
EA ‏دا‎ ٠ ‏م‎ ‎Glu lle Glu Trp Glu Leu 60 Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro to £9 ‏م‎ ‎TI
-١؟ه-‎
Glu lle Gin Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Thr Asn Val Asp Phe oY 0.0 JUN
Ala Val Asn Thr Glu Gly Thr Tyr Ser Glu Pro Arg Pro lle Gly Thr ‏داه‎ ov. ه١‎
Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu 5 ovo ov. ‏ه‎ <YV.>
YYA > ١١<
PRT >؟١<‎
Adeno-associated virus >< 0 ‏<..؛> ه‎
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser
Vo ٠١ ° ١
Glu Gly lle Arg Glu Trp Trp Asp Leu Lys Pro Gly Ala Pro Lys Pro ve Yo Yo. 15
Lys Ala Asn GIn GIn Lys GIn Asp Asn Gly Arg Gly Leu Val Leu Pro ‏م‎ 4 Yo
Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Phe Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
Ta oo on
-١؟1-‎
Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp
As Yo ‏ل‎ qo
Gln 0 Leu GIn Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Arg Tyr Asn His Ala 90 9. Ao
Asp Ala Glu Phe Gin Glu Arg Leu GIn Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly 5 ١١٠ Yeo ٠
Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe GIn Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro ١١٠ ١١ ١١
Leu Gly Leu Val Glu Ser Pro Val Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg ١ ١١١ ١١٠ 10
Pro Val Glu Pro Ser Pro ‏داى‎ Arg Ser Pro Asp Ser Ser Thr Gly lle ١٠ Yoo You Vé¢o
Gly Lys Lys Gly GIn GIn Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gin ‏عد‎ ٠ ‏بحاي‎ ‎Thr Gly Asp Ser Glu Ser Val Pro Asp Pro Gin Pro lle Gly Glu Pro 5
Ya. YAo YA
Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Pro Asn Thr Met Ala Ala Gly Gly
Y.o Yeo Yao
Gly Ala Pro Met Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser
—\YV-
AR Ye ٠
Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Leu Gly Asp Arg Val 9 77١ YY. ١١ lle Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His
Yoo You Yé¢o 5
Leu Tyr Lys Gin lle Ser Asn Gly Thr Ser Gly Gly Ser Thr Asn Asp ٠ ١ Yo
Asn Thr Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn ‏فط علا‎ YVe
Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu lle Asn 0
You Ydo Ya.
Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn
YY. 7١١ 7٠ Yo lle Gln Val Lys Glu Val Thr Gin Asn Glu Gly Thr Lys Thr lle Ala 7٠ YY. YYo 15
Asn Asn Leu Thr Ser Thr lle Gln Val Phe Thr Asp Ser Glu Tyr 0
You Yeo Yeo
Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Gln Gly Cys Leu Pro Pro Phe
Yio Ye Yoo
-١"م‎
Pro Ala Asp Val Phe Met lle Pro Gin Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn
YA Yve YV.
Asn Gly Ser GIn Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr 6 Yao Ya. YAo
Phe Pro Ser GIn Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Ser Tyr 5 ١١ tA ¢.0
Asn Phe Glu Asp Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser 60 Ser ٠ ١ AR
Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu lle Asp 60 Tyr Leu Tyr Tyr Leu ¢¢o 4 tye 10
Ser Arg Thr GIn Ser Thr Gly Gly Thr Ala Gly Thr Gin Gin Leu Leu ra ¢oo $0.
Phe Ser Gln Ala Gly Pro Asn Asn Met Ser Ala Gln Ala Lys Asn Trp
EA ‏دا‎ ٠ ‏م‎
Leu Pro Gly Pro Cys Tyr Arg Gin GIn Arg Val Ser Thr Thr Leu Ser 15 to £9 ‏م‎ ‎Gln Asn Asn Asn Ser Asn Phe Ala Trp Thr Gly Ala Thr Lys Tyr His oy. 5.5 Su
Leu Asn Gly Arg Asp Ser Leu Val Asn Pro Gly Val Ala Met Ala Thr
-١"4- oYo oy. ‏5ه‎ ‎His Lys Asp Asp Glu Glu Arg Phe Phe Pro Ser Ser Gly Val Leu Met of. ovo ov.
Phe Gly Lys GIn Gly Ala Gly Lys Asp Asn Val Asp Tyr Ser Ser Val ov. soo oo. sso 5
Met Leu Thr Ser Glu Glu Glu lle Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr ‏د/اهت‎ ov. oto
Glu 60 Tyr Gly Val Val Ala Asp Asn Leu GIn Gin Gin Asn Ala Ala oq. ‏ده‎ OA
Pro lle Val Gly Ala Val Asn Ser GIn Gly Ala Leu Pro Gly Met Val 10 1.0 Ta cdo
Trp Gln Asn Arg Asp Val Tyr Leu Gin Gly Pro lle Trp Ala Lys lle 1 We 1٠
Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe
Tg. vo Tv. Ye 5
Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Gin lle Leu lle Lys Asn Thr Pro Val loo EE 15
Pro Ala Asp Pro Pro Thr Thr Phe Asn Gin Ala Lys Leu Ala Ser Phe
Ye 1e 11
CA lle Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gin Val Ser Val Glu lle Glu Trp Glu ‏مغ‎ TA Ye
Leu GIn Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu lle Gin Tyr Thr
Yeo 190 16
Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Thr Asn Val Asp Phe Ala Val Asn Thr Glu 5
AAR Yio ‏الا‎ Yeo
Gly Thr Tyr Ser Glu Pro Arg Pro lle Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg ‏هلا‎ YY. ‏ه ألا‎
Asn Leu 1 <YV.>
YYA > ١١<
PRT >؟١<‎
Adeno-associated virus <Y\y> 1 ‏<..؛>‎ 15
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser
Vo ٠١ ° ١
Glu Gly lle Arg Glu Trp Trp Asp Leu Lys Pro Gly Ala Pro Lys Pro
Yo Yo Ye
-١1-
Lys Ala Asn 60 GIn Arg Gin Asp Asn Gly Arg Gly Leu Val Leu Pro ‏م‎ 4 Yo
Gly Tyr Arg Tyr Leu Gly Pro Phe Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
Ta oo on
Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Arg Ala Tyr Asp 5
As Yo ‏ل‎ qo
Gln Gin Leu GIn Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Arg Tyr Asn His Ala 90 9. Ao
Asp Ala Glu Phe GIn Glu Arg Leu Gin Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly ١١٠ ٠ Yao 10
Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe GIn Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro ١١٠ ١١ ١١
Leu Gly Leu Val Glu Ser Pro Val Arg Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg ١ ٠١١٠© ١١٠
Pro Val Glu Pro Ser Pro Gin Arg Ser Pro Asp Ser Ser Thr Gly lle 5 ١٠ Yoo You Vé¢o
Gly Lys Lys Gly GIn ‏ماه‎ Pro Ala Arg Lys Arg Leu Asn Phe Gly 0 بحاي ‎٠‏ عد ‎Thr Gly Asp Ser Glu Ser Val Pro Asp Pro Gin Pro lle Gly Glu Pro‏
-١7-
Ya. YAo YA
Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Pro Asn Thr Met Ala Ala Gly Gly
Y.o Yeo Yao
Gly Ala Pro Met Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser
AR Ye ARI 5
Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Leu Gly Asp Arg Val 9 77١ YY. ١١ lle Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His
Yoo You Y¢o
Leu Tyr Arg Gin lle Ser Asn Gly Thr Ser Gly Gly Ser Thr Asn Asp 0 ٠ ١ Yo
Asn Thr Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn ‏فط علا‎ YVe
Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gin Arg Leu lle Asn
Yoo Yao Ya. 15
Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn
YY. 7١١ 7٠ Yo lle Gin Val Lys Glu Val Thr Gin Asn Glu Gly Thr Arg Thr lle Ala
YYo YY. YYo
١م‎
Asn Asn Leu Thr Ser Thr lle ‏ماى‎ Val Phe Thr Asp Ser Glu Tyr Gin
You Yeo Yeo
Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Gln Gly Cys Leu Pro Pro Phe
Yio Ye Yoo
Pro Ala Asp Val Phe Met lle Pro Gin Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn 5
YA Yve YV.
Asn Gly Ser GIn Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr 6 Yao Ya. YAo
Phe Pro Ser Gin Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Ser Tyr ا ‎٠٠‏ دا ‎Asn Phe Glu Asp Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gin Ser‏ ‎٠ ١ AR‏ ‎Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu lle Asp Gin Tyr Leu Tyr Tyr Leu‏ روا £8 ‎¢¢o‏ ‎Ser Thr Gly Gly Thr Ala Gly Thr GIn Gin Leu Leu 5‏ ما ‎Ser Arg Thr‏ ‎ra ¢oo $0.‏
Phe Ser Gln Ala Gly Pro Asn Asn Met Ser Ala Gln Ala Lys Asn Trp
EA ‏دا‎ ٠ ‏م‎
Leu Pro Gly Pro Cys Tyr Arg GIn ‏ما‎ Arg Val Ser Thr Thr Leu Ser
-١4- ‏م 86 ا‎
Gln Asn Asn Asn Ser Asn Phe Ala Trp Thr Gly Ala Thr Lys Tyr His oY 0.0 84
Leu Asn Gly Arg Asp Ser Leu Val Asn Pro Gly Val Ala Met Ala Thr ‏داه‎ ov. ه١‎ 5
His Arg Asp Asp Glu Glu Arg Phe Phe Pro Ser Ser Gly Val Leu Met of ovo ov.
Phe Gly Arg Gin Gly Ala Gly Arg Asp Asn Val Asp Tyr Ser Ser Val oT coo YI ogo
Met Leu Thr Ser Glu Glu Glu lle Arg Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr 0 ‏د/اهت‎ ov. oto
Glu 60 Tyr Gly Val Val Ala Asp Asn Leu GIn Gin GIn Asn Ala Ala od. ‏ده‎ OA
Pro lle Val Gly Ala Val Asn Ser Gln Gly Ala Leu Pro Gly Met Val
Teo Ten cdo 15
Trp Gln Asn Arg Asp Val Tyr Leu Gin Gly Pro lle Trp Ala Lys lle 1 We 1٠
Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe
Te Ye 1 17
TI
—\yo-
Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Gin lle Leu lle Lys Asn Thr Pro Val loo EE 15
Pro Ala Asp Pro Pro Thr Thr Phe Asn Gin Ala Lys Leu Ala Ser Phe
Ye 1e 11 lle Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu lle Glu Trp Glu 5 ‏مغ‎ TA Ye
Leu GIn Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu lle Gin Tyr Thr
Yeo 190 16
Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Thr Asn Val Asp Phe Ala Val Asn Thr Glu
AAR Yio ‏ديلا الا‎ 10
Gly Thr Tyr Ser Glu Pro Arg Pro lle Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg ه ألا ‎YY.‏ هلا
Asn Leu <١٠؟>‏ لا ‎YYA > ١١<‏ <١؟> ‎PRT‏ ‎Adeno-associated virus <Y\y>‏ ‎V <g4>‏
-١“3-
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser
Vo ٠١ ° ١
Glu Gly lle Arg Glu Trp Trp Asp Leu Lys Pro Gly Ala Pro Lys Pro
Yo Yo Ye
Lys Ala Asn GIn GIn Arg Gin Asp Asn Gly Arg Gly Leu Val Leu Pro 5 ‏م‎ 4 Yo
Gly Tyr Arg Tyr Leu Gly Pro Phe Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
Ta co on
Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Arg Ala Tyr Asp
As Vo Ya 19 0 ‏صا‎ 0 Leu GIn Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Arg Tyr Asn His Ala 90 qe Ao
Asp Ala Glu Phe GIn Glu Arg Leu Gin Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly ١١٠ Yeo ٠
Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe GIn Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro 5 ١١٠ ١١ ١١
Leu Gly Leu Val Glu Ser Pro Val Arg Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg ١ ٠١١٠© ١١٠
Pro Val Glu Pro Ser Pro Gln Arg Ser Pro Asp Ser Ser Thr Gly lle
1١ ‏ا‎ ‎Ye Yoo You Vé¢o
Gly Lys Arg Gly GIn ‏ماه‎ Pro Ala Arg Lys Arg Leu Asn Phe Gly 0 ‏عد‎ ٠ ‏بحاي‎ ‎Thr Gly Asp Ser Glu Ser Val Pro Asp Pro 60 Pro lle Gly Glu Pro
ER YAS YA 5
Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Pro Asn Thr Met Ala Ala Gly Gly
Y.o Yeo Yao
Gly Ala Pro Met Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser
AR Ye ٠
Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Leu Gly Asp Arg Val 0 9 77١ YY. ١١ lle Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His
Yoo You Y¢o
Leu Tyr Arg Gin lle Ser Asn Gly Thr Ser Gly Gly Ser Thr Asn Asp ٠ ١ 91٠٠ 15
Asn Thr Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn ‏فط علا‎ YVe
Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gin Arg Leu lle Asn
You Ydo Ya.
-١ ‏م‎ ‎Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn
YY. 7١١ 7٠ Yo lle Gin Val Lys Glu Val Thr Gin Asn Glu Gly Thr Arg Thr lle Ala
YYo YY. YYo
Asn Asn Leu Thr Ser Thr lle Gin Val Phe Thr Asp Ser Glu Tyr Gin 5
You Yeo Yeo
Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Gln Gly Cys Leu Pro Pro Phe
Yio Ye Yoo
Pro Ala Asp Val Phe Met lle Pro Gin Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn
YA Yve ٠٠ 10
Asn Gly Ser GIn Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr 6 Yao Ya. YAo
Phe Pro Ser GIn Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Ser Tyr ١١ tA ¢.0
Asn Phe Glu Asp Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser 15 ٠ ١ AR
Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu lle Asp Gin Tyr Leu Tyr Tyr Leu ¢¢o £8 ‏روا‎ ‎Ser Arg Thr GIn Ser Thr Gly Gly Thr Ala Gly Thr 0 Gin Leu Leu
-١؟4-‎ 16 ¢oo $0.
Phe Ser Gln Ala Gly Pro Asn Asn Met Ser Ala Gln Ala Lys Asn Trp
EA ‏دا‎ ٠ ‏م‎ ‎Leu Pro Gly Pro Cys Tyr Arg GIn ‏ما‎ Arg Val Ser Thr Thr Leu Ser to £9 ‏م‎ 5
Gln Asn Asn Asn Ser Asn Phe Ala Trp Thr Gly Ala Thr Lys Tyr His oY 0.0 84
Leu Asn Gly Arg Asp Ser Leu Val Asn Pro Gly Val Ala Met Ala Thr ‏داه‎ ov. ه١‎
His Arg Asp Asp Glu Glu Arg Phe Phe Pro Ser Ser Gly Val Leu Met 10 of ovo ov.
Phe Gly Lys Gin Gly Ala Gly Arg Asp Asn Val Asp Tyr Ser Ser Val oT coo YI ogo
Met Leu Thr Ser Glu Glu Glu lle Arg Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr oVo ov. oo 15
Glu GIn Tyr Gly Val Val Ala Asp Asn Leu GIn Gin ‏ماك‎ Asn Ala Ala od. ‏ده‎ OA
Pro lle Val Gly Ala Val Asn Ser Gln Gly Ala Leu Pro Gly Met Val 1.0 Ten 090
Nga
Trp Gln Asn Arg Asp Val Tyr Leu Gin Gly Pro lle Trp Ala Lys lle 1 We 1٠
Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe
Te Ye 1 17
Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Gin lle Leu lle Lys Asn Thr Pro Val 5 loo EE 15
Pro Ala Asp Pro Pro Thr Thr Phe Asn Gin Ala Lys Leu Ala Ser Phe
Ye 1e 11 lle Thr Glin Tyr Ser Thr Gly GIn Val Ser Val Glu lle Glu Trp Glu
TAe TA ive 10
Leu GIn Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu lle Gin Tyr Thr
Yeo 190 16
Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Thr Asn Val Asp Phe Ala Val Asn Thr Glu
AAR Yio ‏الا‎ Yeo
Gly Thr Tyr Ser Glu Pro Arg Pro lle Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg 5 ‏هلا‎ YY. ‏ه ألا‎
Asn Leu
A <YY.> kA
YYA > ١١<
PRT >؟١<‎
Adeno-associated virus <Y\y>
A ‏<..؛>‎ ‎Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser 5
Vo ٠١ ° ١
Glu Gly lle Arg Glu Trp Trp Asp Leu Lys Pro Gly Ala Pro Lys Pro
Yo Yo Ye
Lys Ala Asn 60 GIn Arg Gin Asp Asn Gly Arg Gly Leu Val Leu Pro go 2 Yo 10
Gly Tyr Arg Tyr Leu Gly Pro Phe Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
Ta oo on
Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Arg Ala Tyr Asp
As Yo ‏ل‎ qo
GIn GIn Leu GIn Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Arg Tyr Asn His Ala 15 90 9. Ao
Asp Ala Glu Phe GIn Glu Arg Leu Gin Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly ١١٠ Yeo ٠
Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe GIn Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro
EAL
١١٠ ١١ ١١
Leu Gly Leu Val Glu Ser Pro Val Arg Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg ١ ٠١١٠© ١١٠
Pro Val Glu Pro Ser Pro Gln Arg Ser Pro Asp Ser Ser Thr Gly lle ٠ yoo You Yeo 5
Gly Lys Arg Gly GIn Gin Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly GIn ‏عد‎ ٠ ‏بحاي‎ ‎Thr Gly Asp Ser Glu Ser Val Pro Asp Pro 60 Pro lle Gly Glu Pro
Ya. YAo YA
Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Pro Asn Thr Met Ala Ala Gly Gly 0
Y.o Yeo Yao
Gly Ala Pro Met Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser
AR Ye ٠
Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Leu Gly Asp Arg Val 9 77١ YY. 7١ 5 lle Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His
Yoo You Y¢o
Leu Tyr Arg Gin lle Ser Asn Gly Thr Ser Gly Gly Ser Thr Asn Asp ٠ ١ Yo
EAL
Asn Thr Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn ‏فط علا‎ YVe
Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gin Arg Leu lle Asn
Yoo Ydo Ya.
Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn 5
YY. 7١١ 7٠ Yo lle Gin Val Lys Glu Val Thr Gin Asn Glu Gly Thr Arg Thr lle Ala
YYo YY. YYo
Asn Asn Leu Thr Ser Thr lle Gln Val Phe Thr Asp Ser Glu Tyr 60
Yo. Yeo 7 10
Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Gln Gly Cys Leu Pro Pro Phe
Yio Ye Yoo
Pro Ala Asp Val Phe Met lle Pro Gin Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn
YA Yve YV.
Asn Gly Ser Gin Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr 15 6 Yao Ya. YAo
Phe Pro Ser GIn Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Ser Tyr ١١ tA ¢.0
Asn Phe Glu Asp Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gin Ser
٠ ١ AR
Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu lle Asp Gin Tyr Leu Tyr Tyr Leu ¢¢o £8 ‏روا‎ ‎Ser Arg Thr GIn Ser Thr Gly Gly Thr Ala Gly Thr 0 Gin Leu Leu £1 too $0. 5
Phe Ser Gln Ala Gly Pro Asn Asn Met Ser Ala Gin Ala Lys Asn Trp
EA ‏دا‎ ٠ ‏م‎ ‎Leu Pro Gly Pro Cys Tyr Arg GIn ‏ما‎ Arg Val Ser Thr Thr Leu Ser to £9 ‏م‎ ‎GIn Asn Asn Asn Ser Asn Phe Ala Trp Thr Gly Ala Thr Lys Tyr His 0 oY 0.0 84
Leu Asn Gly Arg Asp Ser Leu Val Asn Pro Gly Val Ala Met Ala Thr ‏داه‎ ov. ه١‎
His Arg Asp Asp Glu Glu Arg Phe Phe Pro Ser Ser Gly Val Leu Met of ‏ده‎ oY. 15
Phe Gly Arg Gin Gly Ala Gly Arg Asp Asn Val Asp Tyr Ser Ser Val oT coo YI ogo
Met Leu Thr Ser Glu Glu Glu lle Arg Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr ‏د/اهت‎ ov. oto
-١؟ه-‎
Glu 60 Tyr Gly Val Val Ala Asp Asn Leu GIn ‏داك‎ GIn Asn Ala Ala od. ‏ده‎ OA
Pro lle Val Gly Ala Val Asn Ser Gln Gly Ala Leu Pro Gly Met Val 1.0 Ten 090
Trp Gln Asn Arg Asp Val Tyr Leu Gin Gly Pro lle Trp Ala Lys lle 5 1 We 1٠
Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe
Te Ye 1 17
Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Gin lle Leu lle Lys Asn Thr Pro Val
Too Ton ‏م1‎ 10
Pro Ala Asp Pro Pro Thr Thr Phe Asn Gin Ala Lys Leu Ala Ser Phe
Ye 1e 11 lle Thr Glin Tyr Ser Thr Gly GIn Val Ser Val Glu lle Glu Trp Glu ‏مغ‎ TA Ye
Leu GIn Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu lle GIn Tyr Thr 15
Yeo 190 16
Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Thr Asn Val Asp Phe Ala Val Asn Thr Glu
AAR Yio ‏الا‎ Yeo
Gly Thr Tyr Ser Glu Pro Arg Pro lle Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg
EA
‏هلا‎ YY. ‏ه ألا‎
Asn Leu 4 <YY.> ‏الملا‎ > ١ < 5
PRT >؟١<‎
Adeno-associated virus <Y\y> q <g>
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser yo ٠١ 2 ١ 0
Glu Gly lle Arg Glu Trp Trp Asp Leu Lys Pro Gly Ala Pro Lys Pro
Yo Yo Ye
Lys Ala Asn 60 GIn Arg Gin Asp Asn Gly Arg Gly Leu Val Leu Pro ‏م‎ 4 Yo
Gly Tyr Arg Tyr Leu Gly Pro Phe Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro 5
Ta oo on
Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Arg Ala Tyr Asp
As Yo ‏ل‎ qo
Gln 0 Leu GIn Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Arg Tyr Asn His Ala
-١59/- 90 9. Ao
Asp Ala Glu Phe GIn Glu Arg Leu Gin Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly ١١٠ Yeo ٠
Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe GIn Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro ١١٠ ١١ ١١ 5
Leu Gly Leu Val Glu Ser Pro Val Arg Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg ١ ٠١١٠© ١١٠
Pro Val Glu Pro Ser Pro Gln Arg Ser Pro Asp Ser Ser Thr Gly lle ١٠ Yoo You Vé¢o
Gly Lys Arg Gly Gin Gin Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly GIn 0 ‏عد‎ ٠ ‏بحاي‎ ‎Thr Gly Asp Ser Glu Ser Val Pro Asp Pro 60 Pro lle Gly Glu Pro
Ya. YAo YA
Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Pro Asn Thr Met Ala Ala Gly Gly ٠١٠ AI ٠5 15
Gly Ala Pro Met Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser
AR Ye ٠
Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Leu Gly Asp Arg Val 9 77١ YY. ١١
TI
-١؟0-‎ lle Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His
Yoo You Y¢o
Leu Tyr Arg Gin lle Ser Asn Gly Thr Ser Gly Gly Ser Thr Asn Asp ٠ ١ Yo
Asn Thr Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn 5 ‏فط علا‎ YVe
Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gin Arg Leu lle Asn
You Ydo Ya.
Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn
YY. vio ٠ Yio 0 lle Gin Val Lys Glu Val Thr Gin Asn Glu Gly Thr Arg Thr lle Ala
YYo YY. YYo
Asn Asn Leu Thr Ser Thr lle Gln Val Phe Thr Asp Ser Glu Tyr Gin
You Yeo Yeo
Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His GIn Gly Cys Leu Pro Pro Phe 15
Yio Ye Yoo
Pro Ala Asp Val Phe Met lle Pro Gin Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn
YA Yve YV.
Asn Gly Ser GIn Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr
-١؟4-‎ 6 Yao Ya. YAo
Phe Pro Ser GIn Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Ser Tyr ١١ tA ¢.0
Asn Phe Glu Asp Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gin Ser ٠ ١ EY. 5
Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu lle Asp Gin Tyr Leu Tyr Tyr Leu ¢¢o £8 ‏روا‎ ‎Ser Arg Thr GIn Ser Thr Gly Gly Thr Ala Gly Thr 0 Gin Leu Leu ra ¢oo $0.
Phe Ser GIn Ala Gly Pro Asn Asn Met Ser Ala GIn Ala Lys Asn Trp 0
EA ‏دا‎ ٠ ‏م‎ ‎Leu Pro Gly Pro Cys Tyr Arg GIn ‏ما‎ Arg Val Ser Thr Thr Leu Ser to £9 ‏م‎ ‎Gln Asn Asn Asn Ser Asn Phe Ala Trp Thr Gly Ala Thr Lys Tyr His oY. 5.0 Su 15
Leu Asn Gly Arg Asp Ser Leu Val Asn Pro Gly Val Ala Met Ala Thr oYo oy. ‏5ه‎ ‎His Arg Asp Asp Glu Glu Arg Phe Phe Pro Ser Ser Gly Val Leu Met of. ovo ov.
-١8 ‏م‎ ‎Phe Gly Lys Gin Gly Ala Gly Arg Asp Asn Val Asp Tyr Ser Ser Val oT. coo 54 ogo
Met Leu Thr Ser Glu Glu Glu lle Arg Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr ‏د/اهت‎ ov. oto
Glu GIn Tyr Gly Val Val Ala Asp Asn Leu GIn GIn Gin Asn Ala Ala 5 oq. ‏ده‎ OA
Pro lle Val Gly Ala Val Asn Ser Gln Gly Ala Leu Pro Gly Met Val 1.0 Ta cdo
Trp Gln Asn Arg Asp Val Tyr Leu Gin Gly Pro lle Trp Ala Lys lle 1 ‏ا‎ 1٠ 10
Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe
Te Ye 1 17
Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Gin lle Leu lle Lys Asn Thr Pro Val loo EE 15
Pro Ala Asp Pro Pro Thr Thr Phe Asn GIn Ala Arg Leu Ala Ser Phe 5
Ye 1e 11 lle Thr Gln Tyr Ser Thr Gly GIn Val Ser Val Glu lle Glu Trp Glu ‏مغ‎ TA Ye
Leu GIn Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu lle Gin Tyr Thr
-١81-
Yeo 190 16
Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Thr Asn Val Asp Phe Ala Val Asn Thr Glu
AAR Yio ‏الا‎ Yeo
Gly Thr Tyr Ser Glu Pro Arg Pro lle Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg ‏هلا‎ YY. YYo 5
Asn Leu ٠١ ‏<ا7>‎ ‎YYA > ١١<
PRT >< 10
Adeno-associated virus <Y\y> ٠١ <ga>
Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser
Vo ٠١ ° ١
Glu Gly lle Arg Glu Trp Trp Asp Leu Lys Pro Gly Ala Pro Lys Pro 5
Yo Yo Ye
Lys Ala Asn 60 GIn Arg GIn Asp Asn Gly Arg Gly Leu Val Leu Pro ‏م‎ 4 Yo
Gly Tyr Arg Tyr Leu Gly Pro Phe Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro
-١ ‏م‎ ‎Ta oo on
Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Arg Ala Tyr Asp
As Yo ‏ل‎ qo
Gln 0 Leu GIn Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Arg Tyr Asn His Ala qo 9. Ao 5
Asp Ala Glu Phe Gin Glu Arg Leu 60 Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly ١١٠ Yeo ٠
Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe GIn Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro ١١٠ ١١ ١١
Leu Gly Leu Val Glu Ser Pro Val Arg Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg 0 ١ ٠١١٠© ١١٠
Pro Val Glu Pro Ser Pro GIn Arg Ser Pro Asp Ser Ser Thr Gly lle ١٠ Yoo You Vé¢o
Gly Lys Lys Gly GIn GIn Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gin ‏دلا‎ ٠ Vie 15
Thr Gly Asp Ser Glu Ser Val Pro Asp Pro Gin Pro lle Gly Glu Pro
Ya. YAo YA
Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Pro Asn Thr Met Ala Ala Gly Gly
Y.o Yeo Yao
١ ‏ارج‎ ‎Gly Ala Pro Met Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser
AR Ye ٠
Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Leu Gly Asp Arg Val 9 77١ YY. ١١ lle Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His 5
Yoo You Y¢o
Leu Tyr Arg Gin lle Ser Asn Gly Thr Ser Gly Gly Ser Thr Asn Asp ٠ ١ Yo
Asn Thr Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn ‏فط علا‎ YVe 10
Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gin Arg Leu lle Asn
You Ydo Ya.
Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn
YY. 7١١ 7٠ Yo lle Gln Val Lys Glu Val Thr Gln Asn Glu Gly Thr Arg Thr lle Ala 15
YYo YY. YYo
Asn Asn Leu Thr Ser Thr lle Gln Val Phe Thr Asp Ser Glu Tyr Gin
You Yeo Yeo
Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Gln Gly Cys Leu Pro Pro Phe
-١2-
Yio Ye Yoo
Pro Ala Asp Val Phe Met lle Pro Gin Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn
YA Yve YV.
Asn Gly Ser GIn Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr 6 Ye Ya. YAe 5
Phe Pro Ser GIn Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Ser Tyr ١١ tA ¢.0
Asn Phe Glu Asp Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gin Ser ٠ ١ AR
Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu lle Asp Gin Tyr Leu Tyr Tyr Leu 0 ¢¢o £8 ‏روا‎ ‎Ser Arg Thr GIn Ser Thr Gly Gly Thr Ala Gly Thr 0 Gin Leu Leu ra ¢oo $0.
Phe Ser Gln Ala Gly Pro Asn Asn Met Ser Ala Gin Ala Lys Asn Trp
EA ‏دلا‎ ٠م‎ ¢le 5
Leu Pro Gly Pro Cys Tyr Arg GIn ‏ما‎ Arg Val Ser Thr Thr Leu Ser to £9 ‏م‎ ‎Gln Asn Asn Asn Ser Asn Phe Ala Trp Thr Gly Ala Thr Lys Tyr His oy. 5.5 Su
—Voo—
Leu Asn Gly Arg Asp Ser Leu Val Asn Pro Gly Val Ala Met Ala Thr ‏داه‎ ov. ه١‎
His Arg Asp Asp Glu Glu Arg Phe Phe Pro Ser Ser Gly Val Leu Met of ovo ov.
Phe Gly Arg GIn Gly Ala Gly Arg Asp Asn Val Asp Tyr Ser Ser Val 5 oT coo YI ogo
Met Leu Thr Ser Glu Glu Glu lle Arg Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr ‏د/اهت‎ ov. oto
Glu GIn Tyr Gly Val Val Ala Asp Asn Leu GIn Gin ‏ماك‎ Asn Ala Ala oq. ‏مده‎ OAs 10
Pro lle Val Gly Ala Val Asn Ser GIn Gly Ala Leu Pro Gly Met Val 1.0 Ten 090
Trp Gln Asn Arg Asp Val Tyr Leu Gin Gly Pro lle Trp Ala Lys lle 1 We 1٠
Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe 5
Te Ye 1 17
Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Gin lle Leu lle Lys Asn Thr Pro Val loo EE 15
Pro Ala Asp Pro Pro Thr Thr Phe Asn Gin Ala Arg Leu Ala Ser Phe
-١64-
Ye 1e 11 lle Thr Gln Tyr Ser Thr Gly GIn Val Ser Val Glu lle Glu Trp Glu ‏مغ‎ TA Ye
Leu GIn Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu lle GIn Tyr Thr ‏ولا‎ 140 19. 5
Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Thr Asn Val Asp Phe Ala Val Asn Thr Glu
AAR Yio ‏الا‎ Yeo
Gly Thr Tyr Ser Glu Pro Arg Pro lle Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg ‏هلا‎ YY. ‏ه ألا‎
Asn Leu 10 ١١ <YY.> ١ <YyYy>
DNA <Yy\v>
Adeno-associated virus <Y\Y> 5
VY >..< atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca acctctctga gggcattcge 60 gagtggtggg acctgaaacc tggagccccg aaacccaaag ccaaccagca aaagcaggac 120
— \ o ‏لا‎ aacggccggg gtetggtget tcctggctac aagtacctcg 080001638 cggactcgac 180 aagggggagc ccgtcaacgc ggcggacgca gcggcecctcg agcacgacaa ggcctacgac 240 cagcagctcc aagcgggtga caatccgtac ctgcggtata atcacgccga cgcecgagttt 5 300 caggagcgtc tgcaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgcgc agtcttccag 360 gccaaaaagc dggtictcga acctctgggec ctggttgaat cgccggttaa gacggcetect 420 10 ggaaagaaga gaccggtaga gccatcaccc cagcgctctc cagactcctc tacgggcatc 480 ggcaagaaag gccagcagcc cgcaaaaaag agactcaatt ttgggcagac tggcgactca 540 gagtcagtcc ccgaccctca accaatcgga gaaccaccag cagccccctc tggtgtggga 5 600 cctaatacaa tggctgcagg cggtggcgct ccaatggcag acaataacga aggcgccgac 660 ggagtgggta gttcctcagg aaattggcat tgcgattcca catggctggg cgacagagtc 720 20 atcaccacca gcacccgcac ctgggccctg cccacctaca acaaccacct ctacaagcaa 780
TU
-١ o A— atctccaacg ggacctcggg aggaagcacc aacgacaaca cctacttcgg ctacagcacc 840 ccctgggggt attttgactt caacagattc cactgccact tttcaccacg tgactggcag 900 cgactcatca acaacaactg gggattccgg cccaagaggc tcaacttcaa gctcticaac 960 5 atccaagtca aggaggtcac gcagaatgaa ggcaccaaga ccatcgccaa taaccttacc 1020 agcacgattc aggtctttac ggactcggaa taccagctcc cgtacgtgct cggcetcggeg 1080 caccagggct gcctgcectcc gttcccggeg gacgtcttca tgattcctca gtacgggtac 0 1140 ctgactctga acaatggcag tcaggctgtg ggccggtcgt ccttctactg cctggagtac 1200 tttccttctc aaatgctgag aacgggcaac aactttgaat tcagctacaa cttcgaggac 1260 15 gtgcccttcc acagcagcta cgcgcacagc cagagcctgg accggctgat gaaccctcte 1320 atcgaccagt acttgtacta cctgtcccgg actcaaagca cgggcggtac tgcaggaact 1380 cagcagttgc tatfttctca ggccgggcct aacaacatgt cggctcaggc caagaactgg 20 1440
— \ o q — ctacccggtc cctgctaccg gcagcaacgc gtctccacga cactgtcgca gaacaacaac 1500 agcaactttg cctggacggg tgccaccaag tatcatctga atggcagaga ‏امأ‎ ‎1560 ‎aatcctggcg ttgccatggc tacccacaag gacgacgaag agcgattttt tccatccage 5 1620 ggagtcttaa tgtttgggaa acagggagct ggaaaagaca acgtggacta tagcagcgtg 1680 atgctaacca gcgaggaaga aataaagacc accaacccag tggccacaga acagtacggc 1740 10 gtggtggccg ataacctgca acagcaaaac gccgctccta ttgtaggggce cgtcaatagt 1800 caaggagcct tacctggcat ggtgtggcag aaccgggacg tgtacctgca gggtcccatc 1860 tgggccaaga ttcctcatac ggacggcaac tttcatccct cgecgetgat gggaggettt 15 1920 ggactgaagc atccgcctcc tcagatcctg attaaaaaca cacctgttcc cgcggatect 1980 ccgaccacct tcaatcaggc caagctggcet tctttcatca cgcagtacag taccggccag 2040 20 gtcagcgtgg agatcgagtg ggagctgcag aaggagaaca gcaaacgctg gaacccagag 2100
TU
_ \ ‏أ‎ «= attcagtaca cttccaacta ctacaaatct acaaatgtgg actttgctgt caatactgag 2160 ggtacttatt ccgagcctcg ccccattgge acccgttace tcacccgtaa tetg 2214 ١١ <YY.>
YYVY <YVW\>
DNA >< 5
Adeno-associated virus <Y\y>
VY <¢ee> atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca acctctctga gggcattcge 60 gagtggtggg acctgaaacc tggagccccg aaacccaaag ccaaccagca aaggcaggac 120 10 aacggccggg gtetggtget tcctggctac aggtacctcg gacccttcaa cggactcgac 180 aagggggagc ccgtcaacgc ggcggacgca gecggcecctcg agcacgacag ggcctacgac 240 cagcagctcc aagcgggtga caatccgtac ctgcggtata atcacgccga cgcecgagttt 15 300 caggagcgtc tgcaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgcgc agtcttccag 360 gccaaaaagc dggtictcga acctctggge ctggttgaat cgccggttag gacggcetect 420 20
-١١١-
ggaaagaaga gaccggtaga gccatcaccc cagcgctctc cagactcctc tacgggcatc
480 ggcaagaaag gccagcagcc cgcaagaaag agactcaatt ttgggcagac tggcgactca
540 gagtcagtcc ccgaccctca accaatcgga gaaccaccag cagccccctc tggtgtggga 5
600 cctaatacaa tggctgcagg cggtggcgct ccaatggcag acaataacga aggcgccgac
660 ggagtgggta gttcctcagg aaattggcat tgcgattcca catggctggg cgacagagtc
720 0 atcaccacca gcacccgcac ctgggccctg cccacctaca acaaccacct ctacaggcaa
780 atctccaacg ggacctcggg aggaagcacc aacgacaaca cctacttcgg ctacagcacc
840 ccctgggggt attttgactt caacagattc cactgccact tttcaccacg tgactggcag 900 15 cgactcatca acaacaactg gggattccgg cccaagaggc tcaacttcaa gctcticaac
960 atccaagtca aggaggtcac gcagaatgaa ggcaccagga ccatcgccaa taaccttacc
1020 agcacgattc aggtctttac ggactcggaa taccagctcc cgtacgtgct cggctcggeg 20
1080
-١7- caccagggct 0011001266 gttcccggeg gacgtcttca tgattcctca gtacgggtac 1140 ctgactctga acaatggcag tcaggctgtg ggccggtcgt ccttctactg cctggagtac 1200 tttccttctc aaatgctgag aacgggcaac aactttgaat tcagctacaa cttcgaggac 5S 1260 gtgcccttcc acagcagcta cgcgcacagc cagagcctgg accggctgat gaaccctcte 1320 atcgaccagt acttgtacta cctgtcccgg actcaaagca cgggcggtac tgcaggaact 1380 10 cagcagttgc tatfttctca ggccgggcct aacaacatgt cggctcaggc caagaactgg 1440 ctacccggtc cctgctaccg gcagcaacgc gtctccacga cactgtcgca gaacaacaac 1500 agcaacttty cctggacggg tgccaccaag tatcatctga atggcagaga ctctetggtg 15 1560 aatcctggcg ttgccatggc tacccacagg gacgacgaag agcgattttt tccatccage 1620 ggagtcttaa tgtttgggag acagggagct ggaagagaca acgtggacta tagcagcgtg 1680 20 atgctaacca gcgaggaaga aataaggacc accaacccag tggccacaga acagtacggc 1740
-١1- gtggtggccg ataacctgca acagcaaaac gccgctccta 1191309996 cgtcaatagt 1800 caaggagcct tacctggcat ggtgtggcag aaccgggacg tgtacctgca gggtcccatc 1860 tgggccaaga ttcctcatac ggacggcaac tttcatccct cgcecgetgat gggaggcettt 5 1920 ggactgaagc atccgcctcc tcagatcctg attaaaaaca cacctgttcc cgcggatect 1980 ccgaccacct tcaatcaggc caagctggcet tctttcatca cgcagtacag taccggccag 2040 10 gtcagcgtgg agatcgagtg ggagctgcag aaggagaaca gcaaacgctg gaacccagag 2100 attcagtaca cttccaacta ctacaaatct acaaatgtgg actttgctgt caatactgag 2160 ggtacttatt ccgagcctcg ccccattgge acccgttace tcacccgtaa tetgtaa 2217 ٠١ >ا٠١<‎ 5
YYVY <YVW\>
DNA <Y\Y>
Adeno-associated virus <Y\y>
VY <g> atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca acctctctga gggceattcge 60 20 gagtggtggg acctgaaacc tggagccccg aaacccaaag ccaaccagca aaggcaggac
120 aacggccggg gtetggtget tcctggctac aggtacctcg gacccttcaa cggactcgac
180 aagggggagc ccgtcaacgc ggcggacgca gcggcecctcg agcacgacag ggcctacgac 5
240 cagcagctcc aagcgggtga caatccgtac ctgcggtata atcacgccga cgccgagttt
300 caggagcgtc tgcaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgcgc agtcttccag
360 10 gccaaaaagc gggdttctcga acctctgggc ctggttgaat cgccggttag gacggctect
420 ggaaagaaga gaccggtaga gccatcaccc cagcgctctc cagactcctc tacgggcatc
480 ggcaagagag gccagcagcc cgcaagaaag agactcaatt ttgggcagac tggcgactca 5
540 gagtcagtcc ccgaccctca accaatcgga gaaccaccag cagccccctc tggtgtggga
600 cctaatacaa tggctgcagg cggtggcgct ccaatggcag acaataacga aggcgccgac
660 20 ggagtgggta gttcctcagg aaattggcat tgcgattcca catggctggg cgacagagtc
720
—-y10- atcaccacca gcacccgcac ctgggccctg cccacctaca acaaccacct ctacaggcaa 780 atctccaacg ggacctcggg aggaagcacc aacgacaaca cctacttcgg ctacagcacc 840 ccctgggggt attttgactt caacagattc cactgccact tttcaccacg tgactggcag 900 5 cgactcatca acaacaactg gggattccgg cccaagaggc tcaacttcaa gctcticaac 960 atccaagtca aggaggtcac gcagaatgaa ggcaccagga ccatcgccaa taaccttacc 1020 agcacgattc aggtctttac ggactcggaa taccagctcc cgtacgtgct cggctcggeg 10 1080 caccagggct gcctgcectcc gttcccggeg gacgtcttca tgattcctca gtacgggtac 1140 ctgactctga acaatggcag tcaggctgtg ggccggtcgt ccttctactg cctggagtac 1200 15 tttccttctc aaatgctgag aacgggcaac aactttgaat tcagctacaa cttcgaggac 1260 gtgcccttcc acagcagcta cgcgcacagc cagagcctgg accggctgat gaaccctcte 1320 atcgaccagt acttgtacta cctgtcccgg actcaaagca cgggcggtac tgcaggaact 20 1380
-١؟-‎ cagcagttgc tatfttctca ggccgggcct aacaacatgt cggctcaggc 09 1440 ctacccggtc cctgctaccg gcagcaacgc gtctccacga cactgtcgca gaacaacaac 1500 agcaacttty cctggacggg tgccaccaag tatcatctga atggcagaga ctctetggtg 5 1560 aatcctggcg ttgccatggc tacccacagg gacgacgaag agcgattttt tccatccagce 1620 ggagtcttaa tgtttgggaa acagggagct ggaagagaca acgtggacta tagcagcgtg 1680 10 atgctaacca gcgaggaaga aataaggacc accaacccag tggccacaga acagtacggc 1740 gtggtggccg ataacctgca acagcaaaac gccgctccta ttgtaggggce cgtcaatagt 1800 caaggagcct tacctggcat ggtgtggcag aaccgggacg tgtacctgca gggtcccatc 5 1860 tgggccaaga ttcctcatac ggacggcaac tttcatccct cgecgetgat gggaggcttt 1920 ggactgaagc atccgcctcc tcagatcctg attaaaaaca cacctgttcc cgcggatect 1980 20 ccgaccacct tcaatcaggc caagctggcet tctttcatca cgcagtacag taccggccag 2040
AR gtcagcgtgg agatcgagtg ggagctgcag aaggagaaca gcaaacgctg gaacccagag 2100 attcagtaca cttccaacta ctacaaatct acaaatgtgg actttgctgt caatactgag 2160 ggtacttatt ccgagcctcg ccccattgge acccgttace tcacccgtaa tetgtaa 2217 ٠ >ا٠١<‎ 5
YYVY <YVW\>
DNA <Y\Y>
Adeno-associated virus <Y\y>
VE <¢ ve > atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca acctctctga gggceattcge 60 10 gagtggtggg acctgaaacc tggagccccg aaacccaaag ccaaccagca aaggcaggac 120 aacggccggg gtctggtget tcctggctac aggtacctcg gacccttcaa cggactcgac 180 aagggggagc ccgtcaacgc ggcggacgca gcggcecctcg agcacgacag ggcctacgac 5 240 cagcagctcc aagcgggtga caatccgtac ctgcggtata atcacgccga cgccgagttt 300 caggagcgtc tgcaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgcgc agtcttccag 360 0
-١08-
gccaaaaagc 999110-1-208 acctctggge ctggttgaat 20020090380 gacggcetect
420 ggaaagaaga gaccggtaga gccatcaccc cagcgctctc cagactcctc tacgggcatc
480 ggcaagagag gccagcagcc cgcaaaaaag agactcaatt ttgggcagac tggcgactca 5
540 gagtcagtcc ccgaccctca accaatcgga gaaccaccag cagccccctc tggtgtggga
600 cctaatacaa tggctgcagg cggtggcgct ccaatggcag acaataacga aggcgccgac
660 10 ggagtgggta gttcctcagg aaattggcat tgcgattcca catggctggg cgacagagtc
720 atcaccacca gcacccgcac ctgggccctg cccacctaca acaaccacct ctacaggcaa
780 atctccaacg ggacctcggg aggaagcacc aacgacaaca cctacttcgg ctacagcacc 15
840 ccctgggggt attttgactt caacagattc cactgccact tttcaccacg tgactggcag 900 cgactcatca acaacaactg gggattccgg cccaagaggc tcaacttcaa gctcticaac
960 atccaagtca aggaggtcac gcagaatgaa ggcaccagga ccatcgccaa taaccttacc 20
1020
-١4- agcacgattc aggtctttac ggactcggaa taccagctcc cgtacgtgct 09-1-0929 1080 caccagggct gcctgcectcc gttcccggeg gacgtcttca tgattcctca gtacgggtac 1140 ctgactctga acaatggcag tcaggctgtg ggccggtcgt ccttctactg cctggagtac 5 1200 tttccttctc aaatgctgag aacgggcaac aactttgaat tcagctacaa cttcgaggac 1260 gtgcccttcc acagcagcta cgcgcacagc cagagcctgg accggctgat gaaccctcte 1320 10 atcgaccagt acttgtacta cctgtcccgg actcaaagca cgggcggtac tgcaggaact 1380 cagcagttgc tatfttctca ggccgggcct aacaacatgt cggctcaggc caagaactgg 1440 ctacccggtc cctgctaccg gcagcaacgc gtctccacga cactgtcgca gaacaacaac 5 1500 agcaactttg cctggacggg tgccaccaag tatcatctga atggcagaga ‏امأ‎ ‎1560 ‎aatcctggcg ttgccatggc tacccacagg gacgacgaag agcgattttt tccatccagce 1620 20 ggagtcttaa tgtttgggag acagggagct ggaagagaca acgtggacta tagcagcgtg 1680
_ \ 7 «= atgctaacca gcgaggaaga aataaggacc accaacccag tggccacaga acagtacggc 1740 gtggtggccg ataacctgca acagcaaaac gccgctccta ttgtaggggce cgtcaatagt 1800 caaggagcct tacctggcat ggtgtggcag aaccgggacg tgtacctgca gggtcccatc 5 1860 tgggccaaga ttcctcatac ggacggcaac tttcatccct cgecgetgat gggaggcttt 1920 ggactgaagc atccgcctcc tcagatcctg attaaaaaca cacctgttcc cgcggatect 1980 10 ccgaccacct tcaatcaggc caagctggct tctttcatca cgcagtacag taccggccag 2040 gtcagcgtgg agatcgagtg ggagctgcag aaggagaaca gcaaacgctg gaacccagag 2100 attcagtaca cttccaacta ctacaaatct acaaatgtgg actttgctgt caatactgag 2160 15 ggtacttatt ccgagcctcg ccccattgge acccgttace tcacccgtaa tctgtaa 2217 ١ o <Y ١ «>
YYVY <YVW\>
DNA <Y\Y>
Adeno-associated virus >< 20
Yo <¢ ee
AL AR atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca acctctctga gggcattcge 60 gagtggtggg acctgaaacc tggagccccg aaacccaaag ccaaccagca aaggcaggac 120 aacggccggg gtetggtget tcctggctac aggtacctcg gacccttcaa cggactcgac 180 5 aagggggagc ccgtcaacgc ggcggacgca gecggcecctcg agcacgacag ggcctacgac 240 cagcagctcc aagcgggtga caatccgtac ctgcggtata atcacgccga cgccgagttt 300 caggagcgtc tgcaagaaga tacgtctttt gggggcaacc 12099000006 agtcttccag 10 360 gccaaaaagc dggtictcga acctctggge ctggttgaat cgccggttag gacggcetect 420 ggaaagaaga gaccggtaga gccatcaccc cagcgctctc cagactcctc tacgggcatc 480 15 ggcaagagag gccagcagcc cgcaaaaaag agactcaatt ttgggcagac tggcgactca 540 gagtcagtcc ccgaccctca accaatcgga gaaccaccag cagccccctc tggtgtggga 600 cctaatacaa tggctgcagg cggtggcgct ccaatggcag acaataacga aggcgccgac 20 660
AR AR ggagtgggta gttcctcagg aaattggcat tgcgattcca catggctggg cgacagagtc 720 atcaccacca gcacccgcac ctgggccctg cccacctaca acaaccacct ctacaggcaa 780 atctccaacg ggacctcggg aggaagcacc aacgacaaca cctacttcgg ctacagcacc 5 840 ccctgggggt attttgactt caacagattc cactgccact tttcaccacg tgactggcag 900 cgactcatca acaacaactg gggattccgg cccaagaggc tcaacttcaa gctcttcaac 960 atccaagtca aggaggtcac gcagaatgaa ggcaccagga ccatcgccaa taaccttacc 10 1020 agcacgattc aggtctttac ggactcggaa taccagctcc cgtacgtgct cggetecggceg 1080 caccagggct gcctgcectcc gttcccggeg gacgtcttca tgattcctca gtacgggtac 1140 15 ctgactctga acaatggcag tcaggctgtg ggccggtcgt ccttctactg cctggagtac 1200 tttccttctc aaatgctgag aacgggcaac aactttgaat tcagctacaa cttcgaggac 1260 0106001166 acagcagcta cgcgcacagc 808000100 accggcetgat gaaccctctc 0 1320
A Al atcgaccagt acttgtacta cctgtcccgg actcaaagca cgggcggtac tgcaggaact 1380 cagcagttgc tatfttctca ggccgggcct aacaacatgt cggctcaggc caagaactgg 1440 ctacccggtc cctgctaccg gcagcaacgc gtctccacga cactgtcgca gaacaacaac 5 1500 agcaactttg cctggacggg tgccaccaag tatcatctga atggcagaga ctctctggtg 1560 aatcctggcg ttgccatggc tacccacagg gacgacgaag agcgattttt tccatccage 1620 10 ggagtcttaa tgtttgggaa acagggagct ggaagagaca acgtggacta tagcagcgtg 1680 atgctaacca gcgaggaaga aataaggacc accaacccag tggccacaga acagtacggc 1740 gtggtggccg ataacctgca acagcaaaac gccgctccta ttgtaggggc cgtcaatagt 5 1800 caaggagcct tacctggcat ggtgtggcag aaccgggacg tgtacctgca gggtcccatc 1860 tgggccaaga ttcctcatac ggacggcaac tttcatccct cgecgetgat gggaggcttt 1920 20 ggactgaagc atccgcctcc tcagatcctg attaaaaaca cacctgticc cgcggatcct 1980
—\Vé- ccgaccacct tcaatcaggc caggctggcet tctttcatca cgcagtacag taccggccag 2040 gtcagcgtgg agatcgagtg ggagctgcag aaggagaaca gcaaacgctg gaacccagag 2100 attcagtaca cttccaacta ctacaaatct acaaatgtgg actttgctgt caatactgag 2160 5 ggtacttatt ccgagcctcg ccccattggc acccgttace tcacccgtaa tetgtaa 2217 ٠١ >”٠<
YYVY <YVW\>
DNA <Y\Y>
Adeno-associated virus >< 0
V1 <g> atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca acctctctga gggceattcge 60 gagtggtggg acctgaaacc tggagccccg aaacccaaag ccaaccagca aaggcaggac 120 aacggccggg gtctggtget tcctggctac aggtacctcg gacccttcaa cggactcgac 15 180 aagggggagc ccgtcaacgc ggcggacgca gecggcecctcg agcacgacag ggcctacgac 240 cagcagctcc aagcgggtga caatccgtac ctgcggtata atcacgccga cgccgagttt 300 20
— \ 7 ‏اج‎ ‎caggagcgtc tgcaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgcgc agtcttccag 360 gccaaaaagc dggtictcga acctctggge ctggttgaat cgccggttag gacggcetect 420 ggaaagaaga gaccggtaga gccatcaccc cagcgctctc cagactcctc tacgggcatc 5 480 ggcaagaaag gccagcagcc cgcaaaaaag agactcaatt ttgggcagac tggcgactca 540 gagtcagtcc ccgaccctca accaatcgga gaaccaccag cagccccctc tggtgtggga 600 10 cctaatacaa tggctgcagg cggtggcgct ccaatggcag acaataacga aggcgccgac 660 ggagtgggta gttcctcagg aaattggcat tgcgattcca catggctggg cgacagagtc 720 atcaccacca gcacccgcac ctgggccctg cccacctaca acaaccacct ctacaggcaa 5 780 atctccaacg ggacctcggg aggaagcacc aacgacaaca cctacttcgg ctacagcacc 840 ccctgggggt attttgactt caacagattc cactgccact tttcaccacg tgactggcag 900 cgactcatca acaacaactg gggattccgg cccaagaggc tcaacttcaa gctcttcaac 20 960
-١١7- atccaagtca aggaggtcac gcagaatgaa ggcaccagga ccatcgccaa taaccttacc 1020 agcacgattc aggtctttac ggactcggaa taccagctcc cgtacgtgct cggetecggceg 1080 caccagggct gcctgectcc gttcccggeg gacgtecttca tgattcctca gtacgggtac 5 1140 ctgactctga acaatggcag tcaggctgtg ggccggtcgt ccttctactg cctggagtac 1200 tttccttctc aaatgctgag aacgggcaac aactttgaat tcagctacaa cttcgaggac 1260 10 gtgcccttcc acagcagcta cgcgcacagc cagagcctgg accggctgat gaaccctcte 1320 atcgaccagt acttgtacta cctgtcccgg actcaaagca cgggcggtac tgcaggaact 1380 cagcagttgc tattttctca ggccgggect aacaacatgt cggctcaggc caagaactgg 5 1440 ctacccggtc cctgctaccg gcagcaacgc gtctccacga cactgtcgca gaacaacaac 1500 agcaacttty cctggacggg tgccaccaag tatcatctga atggcagaga ctctctggtg 1560 20 aatcctggcg ttgccatggc tacccacagg gacgacgaag agcgattttt tccatccage 1620
ALA ggagtcttaa tgtttgggag acagggagct ggaagagaca acgtggacta tagcagcgtg 1680 atgctaacca gcgaggaaga aataaggacc accaacccag tggccacaga acagtacggc 1740 gtggtggccg ataacctgca acagcaaaac gccgctccta ttgtaggggc cgtcaatagt 5 1800 caaggagcct tacctggcat ggtgtggcag aaccgggacg tgtacctgca gggtcccatc 1860 tgggccaaga ttcctcatac ggacggcaac tttcatccct cgecgetgat gggaggcttt 1920 10 ggactgaagc atccgcctcc tcagatcctg attaaaaaca cacctgttcc cgcggatect 1980 ccgaccacct tcaatcaggc caggctggcet tctttcatca cgcagtacag taccggccag 2040 gtcagcgtgg agatcgagtg ggagctgcag aaggagaaca gcaaacgctg gaacccagag 15 2100 attcagtaca cttccaacta ctacaaatct acaaatgtgg actttgctgt caatactgag 2160 ggtacttatt ccgagcctcg ccccattgge acccgttace tcacccgtaa tetgtaa 2217

Claims (2)

  1. —\VA- ‏عناصر الحماية‎ ‏الارتباط‎ sage ‏ناتج‎ (AAV) adeno-associated virus ‏جسيم فيروس مرتبط بشكل غدي‎ - ١ adeno-associated virus ‏فيروس مرتبط بشكل غدي‎ capsid ‏يشتمل على متوالية كابسيد‎ ‏ناقلًا يشتمل على متوالية بولي نيوكليوتيد‎ genome ‏جينومًا‎ AAV ‏يُغلف جسيم‎ Cus ‏؛‎ (AAV) ‏وحيث تكون‎ IX ‏تقوم بترميز بروتين العامل‎ heterologous polynucleotide ‏غير متجانسة‎ (AAV) adeno-associated virus ‏الفيروس المرتبط بشكل غدي‎ capsid ‏متوالية كابسيد‎ 5
    بها تطابق على الأقل يبلغ ,9649 مع؛ وبها على الأقل استبدال حمض أميني ‎amino acid‏ واحد عند مواضع الحمض الأميني ‎Yo) 194 195 amino acid‏ أو ‎«YY‏ من متوالية كابسيد ‎capsid‏ 1/01 المذكورة باعتبارها المتوالية رقم:٠.‏
    0 7 - جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ ناتج ‎sage‏ ‏الارتباط وفقًا لعنصر الحماية ‎١‏ حيث يكون لمتوالية كابسيد 08050 الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ الحمض الأميني ‎N J PV camino acid A‏ عند أي من مواضع الحمض الأميني ‎70٠ 0144 148 amino acid‏ أو ‎٠١7‏ من متوالية كابسيد ‎VP] capsid‏ المذكورة باعتبارها المتوالية ‎tad)‏
    *- جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ ناتج عودة الارتباط وفقًا لعنصر الحماية ‎١‏ أو 7؛ حيث تتسم متوالية كابسيد ‎capsid‏ الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎)١( (AAV) adeno-associated virus‏ أن لها واحد من؛ ‎(Y)‏ أي اثنين ‎(oe‏ ‎(Y)‏ أي ‎ADI‏ منء أو (؛) لها كل الوحدة البنائية المتخلفة ‎A‏ عند موضع الحمض الأميني
    ‎¢Y40 amino acid 0‏ الوحدة البنائية المتخلفة ‎١/‏ عند مواضع الحمض الأميني ‎amino acid‏ 4 » الوحدة البنائية المتخلفة © عند موضع الحمض الأميني ‎٠١٠ amino acid‏ أو الوحدة البنائية المتخلفة لاا عند موضع الحمض الأميني ‎٠07 800100 acid‏ من متوالية كابسيد ‎capsid‏ 001/ المذكورة باعتبارها المتوالية رقم: ‎.١‏
    ‎TIN
    -١١74- ‏ناتج عودة‎ (AAV) adeno-associated virus ‏؟- جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي‎ capsid ‏إلى 7 حيث تشتمل متوالية كابسيد‎ ١ ‏الارتباط وفقًا لأي من عناصر الحماية من‎ ‏على متوالية كابسيد‎ (AAV) adeno-associated virus ‏المرتبط بشكل غدي‎ ug dl ‏المذكورة باعتبارها المتوالية رقم:5.‎ VP] capsid
    ‏ناتج عودة‎ (AAV) adeno-associated virus ‏جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي‎ —0 ‏الناقل أيضًا‎ genome ‏حيث يشتمل الجينوم‎ of ‏إلى‎ ١ ‏لأي من عناصر الحماية من‎ Gg ‏الارتباط‎ ‏على عنصر تحكم في التعبير الذي يقوم بدفع الانتساخ الخاص بمتوالية بولي نيوكليوتيد غير‎ ‏ويفضل اشتمال‎ (Factor IX ‏لترميز بروتين‎ heterologous polynucleotide ‏متجانسة‎ ‏عنصر التحكم في التعبير المذكور على عنصر تحكم تكويني أو قابل للتنظيم؛ وأكثر تفضيلًا‎ 0 ‏يشتمل على عنصر تحكم في التعبير خاص بنسيج أو مُعزز.‎ ‏ناتج عودة‎ (AAV) adeno-associated virus ‏جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي‎ -١ ITR ‏تقوم واحدة أو اكثر من متواليات‎ Cum ‏إلى ©؛‎ ١ ‏لأي من عناصر الحماية من‎ Gy ‏الارتباط‎ ‏المتكررة المعكوسة الطرفية بالإحاطة بالطرف 0 * أو © * من متوالية بولي نيوكليوتيد غير‎ 5 Factor IX ‏الذي يقوم بترميز بروتين‎ heterologous polynucleotide ‏متجانس‎ ‏ناتج عودة‎ (AAV) adeno-associated virus ‏جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي‎ -١ capsid ‏إلى 76؛ حيث يكون لمتوالية كابسيد‎ ١ ‏لأي من عناصر الحماية من‎ Lig ‏الارتباط‎ ‎٠:مقر ‏المذكورة كمتوالية‎ (AAV) adeno-associated virus ‏الفيروس المرتبط بشكل غدي‎ 0 ‏؛ أو © من استبدالات الحمض الأميني؛ إضافاته أو إدخالاته.‎ © YO) )١( ‏ناتج عودة‎ (AAV) adeno-associated virus ‏جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي‎ - adeno-associated ‏الفيروس المرتبط بشكل غدي‎ capsid ‏الارتباط يشتمل على كابسيد‎ ‏ناقل يشتمل على متوالية بولي نيوكليوتيد غير‎ genome ‏يقوم بتغليف جينوم‎ (AAV) ‏نالا‎ 25 adeno-associated ‏المرتبط بشكل غدي‎ ug pill capsid ‏متجانسة؛ حيث يشتمل كابسيد‎ TIN
    CAA ‏على بروتين 701 يشتمل على متوالية الحمض الأمينية من المتوالية رقم:*؛‎ (AAV) virus ‏بترميز‎ heterologous polynucleotide ‏حيث تقوم متوالية بولي نيوكليوتيد غير المتجانسة‎ ‏على معزز أو مُحسن‎ Wiad ‏الناقل‎ genome ‏بشري؛ وحيث يشتمل الجينوم‎ Factor IX ‏بروتين‎ ‏خاص بالكبد يكون مرتبط بصورة قابلة للتشغيل بمتوالية نيوكليوتيد غير المتجانسة‎ ‏تحيط‎ AAV ‏المذكورة» ومتكررات طرفية معكوسة من‎ heterologous polynucleotide 5 بالأطراف 570 ” من متوالية نيوكليوتيد غير المتجانسة ‎.heterologous polynucleotide‏ - جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ ناتج عودة الارتباط يشتمل على كابسيد ‎capsid‏ الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎adeno-associated‏ ‎(AAV) virus 0‏ يقوم بتغليف جينوم ‎genome‏ ناقل يشتمل على متوالية بولي نيوكليوتيد غير متجانسة؛ حيث يشتمل كابسيد ‎ug pill capsid‏ المرتبط بشكل غدي ‎adeno-associated‏ ‎(AAV) virus‏ على بروتين 701 يشتمل على متوالية الحمض الأمينية من المتوالية رقم:*؛ حيث تقوم متوالية بولي نيوكليوتيد غير المتجانسة بترميز بروتين ‎Factor IX‏ بشري؛ وحيث يشتمل الجينوم ‎genome‏ الناقل ‎Lad‏ على معزز أو مُحسن خاص بالكبد يكون مرتبط بصورة ‏5 قابلة للتشغيل بمتوالية نيوكليوتيد غير المتجانسة ‎heterologous polynucleotide‏ المذكورة؛ ومتكرر طرفي معكوس من الفيروس المرتبطة بشكل غدي ‎adeno-associated virus‏ ‎(AAV)‏ يحيط بالأطراف #” أو ‎TF‏ من متوالية بولي نيوكليوتيد غير المتجانسة ‎heterologous‏
    ‎.polynucleotide‏ ‎-٠١ 0‏ جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ ناتج ‎sage‏ ‏الارتباط وفقًا لأي من عناصر الحماية من ‎١‏ إلى 4( حيث تشتمل متوالية بولي نيوكليوتيد غير المتجانسة ‎heterologous polynucleotide‏ أيضًّا على متوالية بولي نيوكليوتيد ‎polynucleotide‏ للملء أو الحشو. ‎TIN
    -أم١-‏ ‎-١١‏ جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ ناتج عودة الارتباط وفقًا لأي من عناصر الحماية من ‎١‏ إلى ‎Vv‏ حيث تكون متواليات التكرار الطرفية المعكوسة الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ من 2 ‎AAV‏ ‎-١١ 5‏ جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ ناتج عودة الارتباط وفقًا لأي من عناصر الحماية من ‎١‏ إلى ‎VY‏ حيث تتم إحاطة متوالية بولي نيوكليوتيد ‎polynucleotide‏ المذكورة بمناطق **” و ؟” غير قابلة للترجمة. ‎-١‏ جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ ناتج عودة 0 الارتباط ‎Uy‏ لأي من عناصر الحماية من ‎١‏ إلى ‎OY‏ حيث تشتمل متوالية بولي نيوكليوتيد غير المتجانسة ‎heterologous polynucleotide‏ أيضًا على متوالية بولى ‎A‏ ‎-٠6‏ جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ ناتج عودة الارتباط وفقًا لأي من عناصر الحماية من ‎١‏ إلى ‎OF‏ حيث تشتمل متوالية بولي نيوكليوتيد غير المتجانسة ‎heterologous polynucleotide‏ أيضًا على ‎ga‏ على الأقل من إنترون ‎dntron‏ ‏- جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ ناتج عودة الارتباط وفقًا لأي من عناصر الحماية من ‎١‏ إلى ‎VE‏ حيث تشتمل متوالية بولي نيوكليوتيد غير المتجانسة ‎heterologous polynucleotide‏ أيضًا على جزءِ على الأقل من إنترون 10000 ‎١‏ ‏20 من جين العامل البشري ‎IX‏ ‏)= جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ ناتج عودة الارتباط وفقًا لعنصر الحماية ‎V0‏ حيث يكون ‎gall‏ المذكور من إنترون 10800 ‎١‏ من جين العامل البشري ‎IX‏ طول نيكلوتيدي يتراوح من ‎١/١‏ كيلو قاعدة إلى ‎١,7‏ كيلو قاعدة.
    ‎TINY‏
    -8م١-‏ ‎-١١‏ جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ ناتج عودة الارتباط وفقًا لأي من عناصر الحماية من ‎١‏ إلى ‎OT‏ حيث يكون المحسن أو المعزز الخاص بالكبد المذكور عبارة عن محسن أو معزز ‎ApoE-hAAT‏ ‎-١٠١ 5‏ جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ ناتج عودة الارتباط ‎Lid‏ لأي من عناصر الحماية من ‎١‏ إلى ‎(VY‏ حيث يكون بروتين عامل ‎IX‏ عبارة عن متغير بشري كمكسب وظيفي أكثر فاعلية من عامل بشري ‎IX‏ من النوع البري. 4- تركيبة صيدلانية تشتمل على جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎adeno-associated‏ ‎(AAV) virus 0‏ ناتج عودة الارتباط وفقًا لأي من عناصر الحماية من ‎١‏ إلى ‎AA‏ ‎-٠‏ طريقة لإنتاج جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ ناتج عودة الارتباط وفقًا لأي من عناصر الحماية من ‎١‏ إلى ‎V4‏ تشتمل على زراعة خلية مساعدة تشتمل على بلازميد ناتج عودة الارتباط يشتمل على جينوم ‎gENOME‏ من جسيمات نواتج عودة الارتباط الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ المذكورة. ‎-7١‏ جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ ناتج عودة الارتباط أو التركيبة الصيدلانية وفقًا لأي من عناصر الحماية من ‎١‏ إلى ‎Ye‏ للاستخدام في علاج كائن ثديي ينقصه التعبير عن بروتين عامل ‎IX‏ أو الوظيفة بالتعبير عن بروتين عامل “ا في تديي. ‎—YY‏ جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ ناتج عودة الارتباط أو التركيبة الصيدلانية للاستخدام وفقًا لعنصر الحماية ‎YY)‏ حيث يكون مقدار جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ ناتج عودة الارتباط الذي
    5 .يتم تناوله كافيًا لتوفير تأثير علاجي على الثديي المذكور. ‎TINY‏
    م ‎-١‏ ‎—YY‏ جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ ناتج عودة الارتباط أو التركيبة الصيدلانية للاستخدام وفقًا لعنصر الحماية ‎7١‏ أو ‎YY‏ حيث يكون الثديي عبارة عن انسان» ويعالج التأثير العلاجي مرض النزف/الناعور ب (8 ‎.(Hemophilia‏
    74- جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ ناتج عودة الارتباط أو التركيبة الصيدلانية للاستخدام ‎Wg‏ لأي من عناصر الحماية من ‎5١0‏ إلى ‎(VY‏ حيث يُغير التأثير العلاجي مرض ناعور ب ‎dla‏ موروث ظاهري إلى نمط ظاهري متوسط أو معتدل من مرض ‎.Hemophilia B‏
    ‎=Yo 0‏ جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ ناتج ‎sage‏ ‏الارتباط أو التركيبة الصيدلانية للاستخدام ‎Wg‏ لأي من عناصر الحماية من ١؟‏ إلى ‎(YE‏ حيث يتم إعطاء جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ ناتج عودة الارتباط عند جرعة تبلغ على الأقل ‎٠١ ٠١ * ١‏ من الجينومات الناقلة ‎(VG)‏ لكل كجم ‎(VO/KG)‏ ‏من وزن الثديي؛ أو ما بين حوالي ‎٠١ ٠١ 7 ١‏ إلى ‎١١ ٠١ * ١‏ جينوم ‎genome‏ ناقل/كجم
    ‏5 من وزن الثديي؛ أو ما بين حوالي ‎١١ ٠١ * ١‏ و ‎١١ ٠١ Xx)‏ جينوم ‎genome‏ ناقل/كجم من وزن الثديي؛ أو ما بين حوالي ‎١١ ٠١ XY‏ و ‎١9 ٠١ * ١‏ جينوم ‎genome‏ ناقل/كجم من وزن الثديي.
    ‎-١‏ جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ ناتج عودة
    ‏0 الارتباط أو التركيبة الصيدلانية للاستخدام وفقًا لأي من عناصر الحماية من ١؟‏ إلى ‎(Yo‏ حيث يتم إعطاء جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ ناتج عودة الارتباط ‎recombinant‏ بالحقن؛ في الوريد ‎intravenously‏ ؛ في الشريان ‎intraarterially‏ « في العضل ‎«intramuscularly‏ تحت الجلد ‎subcutaneously‏ « عن طريق أنبوب» عن طريق قسطرة ‎catheter‏ ؛ أو داخل التجويف ‎Jintra—cavity‏
    ‎25
    ‎TIN
    -4م١-‏ ‎-7١‏ جسيم الفيروس المرتبط بشكل غدي ‎(AAV) adeno-associated virus‏ ناتج عودة الارتباط أو التركيبة الصيدلانية للاستخدام وفقًا لأي من عناصر الحماية من ١؟‏ إلى ‎YT‏ ‏وبشتملان ‎Waal‏ على استخدام ‎AAV‏ كابسيد ‎capsid‏ فارغ. ‎TINY‏
    مم ‎-١‏ ‎m‏ ‏| ض 3 ‎ew : |‏ راج ملا 5 ض 1 "0 | 4 ‎x td "‏ الأسبوع ‎١‏ 8 : "0 | : 9 با | 1 ‎rE‏ ‏سيوع وق | ا 1 | ‎a‏ ‏الأسبوع £ ‎a BB Lo‏ أ ‎tease‏ 0 ‎go | LL ll |‏ : | | 3 الال حي ال ‎ve]‏ ‏الل الام ل ؤ 2 © ل ل ‎Ee‏ ‎AAV-d} AAV-rhv‏ يلقم ‎AAV-T‏ ‏شكل١‏
    المي 6 ا ‎I, Ne‏ 8 1 خا << + ‎A‏ ‏0 لد اا ل يي ال اد : 8 ‎LIV‏ الاقم ‎Fe (OT)‏ ٍ ‎SN X Ra | FERRE IRE 3‏ $ 3 -
    7 . 3 ب ‎x‏ & 3 * ا اا ل 1 8 1 8 ‎x Ne {OYA ABV I‏ $ ٍ 3 اط ‎A xr x 5 3 Ho gs % CAA‏ 2 3 ‎d \ wi {JY €) AAV IV‏ | د ‎١‏ $ لاني ‎ao : § BN‏ ‎KN‏ & : وا 8 ‎“Ay‏ ‎xX “8 3‏ ¥ - ‎WN‏ ¥ ¥ 3 حي يد ‎iy 1 8 3d‏ مح 8 ب« + ‎WON‏ ل ‎ER‏ 7 ‎NN SN‏ 0 1 2 ‎IN Ng‏ 0 1 3 ‎N = Ny‏ ٍ 8 = 2 1 م ‎KS‏ : الي ا ا : 3 ٍ ا ‎SE CE ST fo.‏ ا 8 3 ‎ue alt‏ 3 ‎aad oF 0 faa ST TI‏ : ا 4 ‎TUR‏ اد : : ‎i 1 1 3 8 TR‏ ‎Fy‏ 3 ل ‎Fy‏ 3 3 ل : ‎nog’‏ ‏ا © ; ‎N‏ 1 اول - ا ‎X‏ ‎FF a‏ 2
    ‎a . 1‏ ا ‎EF‏ ‏اللي 6 ال ا ا لدبب ‎fT‏ تن ا 8 1 ‎BES meagre Ea Ei‏ ‎ERY :‏ ‎i LL A A. ll‏ ا ‎aa LE Xun i352‏ 5 & 2 8 + ‎ELE i‏ ‎Fg‏
    -١ ‏لام‎ ‎) EE ‏و جوز‎ YE La ‏الحم‎
    102711171150177 71177 ‏ضرعو 01001171 رط ارصم‎ EPVNAADAAALEHDRAYDONLOACD NPY LRY ‏لافيت وفع 15661 مات تاو لشف تي‎ 515057010100170 ‏سوم ووم‎ ‏خا اتات التاق‎ CGAP ‏تت حي لت لال تتا‎ EN WHE DS TW LA DRVIT TS TRTWALPTYN RHE KONG T SOLS TH IN TY FY SS TRW GY FOF RF H CHF SPRD WOR LINN NWGFRPER LATE LF NV KE TNE TR TIAN NL TE TVR TSE LP VLG AHO CLP PF PARVEMEPIYGYLTL NN GEA VCR EY LEY FPS OM LE TG NFER SY NFE VP FHS SY AHSOSLDRLMNPLIDUYLYYLS TS GG TAT OOLL ESA CPR NMS AD AE RW POPOL YR ORVS TTL QU NUNS NF AWTHATRYH LNG RDS LVN PY AMA THR DEER FF RAS OV LM FOR OCA RDN VDYSSVM ETS ERE ‏معيو‎ ‎BUYGVVARNLORONAARIVGAVNEQ GAL PEMVW ON RIV Y LOR IWAKIPHT DE NEHPSFLMGE FOLEH BFP OIL TRY PATE PTT ENO AR LASF TOY STS SVE IB WERLOKENALRIWRPEIOYES WYYRSTNYDFAVNTEGTYSEPRPIGTRYLTRML.
    ies RETA VP DNA ATGOUTACORATEGTTATCT TCOAGATTRGCTCOAGGACAACCTO TC TAG GOCATTIRNGARTS CTGCEACCTE ASAD TREASLOCC CAA ACCLAAAGELANCCAGCA RA AGE ATR AC AACGLLING GUTCTGETHUTTOOTHGU TALS AG TACUT CHUA CE TT AAUG GAC TOG AL AAGGHLGAGUEEET ‏ا ل ا‎ TALS SLCAGCABCTCLAAGLOOG TE ACAATCOG TAL THOOGTATAATCACGOCGALG LCG AGTTTCAGTAGLG TOTO CAS GAAGATAS GICETTTGHGHGCAALCTUGGRIGIELAG TO TTECAGHRUC AAA AAGUG GE TTE TG AALCTCTGE GL TOETTOALTERCCAGTTAAACG OUTRO TOU AA AG AAGAGACLLGTAGAGCCATCACUCCA GOGCTETCCAGATTOUT UT ACEGGCATULGUAAG AAAGGE CAG CATUECHCAS ARAL G ARAL TOA ATTTTGOGCABACTOOIGALTCAGAGTLAGTCLCCOACCE ‏ناه خم طفن‎ LAGAALCACLAGTA 006000170517000 ‏متف ف ف‎ ‏مقع اخ وقع الئل انيتا 1 171 الفا‎ ‏0000م عض نض تنخ ايفتال تلفت تتفت‎ 5600070 CAC TAC AA ‏فد لاف تففة‎ GARRET AAU GORA 010777 ‏انتقث اتا شتات لوارتفة‎ TCGGE TAL ABTATLC CT GOOG G TAT TT TOA TTC AAC AGA TICE ACTUAL TT T TEAC ATE TRACT EOC AGTOACTE AT AACA CAA TEGO GAT TOO G ONL AA CAG GOTIAACTTCAAGUTOT TU AACA TOUAAG TAS ‏تاه لفق ف يي خرن لات خض تلن لا ا‎ CATON CAAT AACE TTACCAGCACGATTCAGGTE ‏ا ل ل‎ AA TAL A ‏ل‎ TES HU TEGO GC ACCAG GO TOOOTOREOTOL ‏ا ا‎ TET TEA TG AT TOL TAR TACO TAC ITEACTU TC ARC AA TOR AGTCAGS CTO CGO TOG TO TT TACT CC TG AG TAC TT TOOT TUT CARATRO TGAGAACAGINAAC AACTTTGAATT CAGE ‏افيا فو اا لفقم‎ TOCCCT TCC ACA AGE TACG US UAC ‏قشعي ع ف‎ COT GGA TO A TCA ACCU TU TC ATCGACCAGN TAD TTR TAC TASS TH TONLGG AC TOA AAGCA CGO TACTOC ALGAAS TCA AGT TGC TAT TT TU TU AGL OCG GOIN TAAL SACATOTOGHCT AGG AAG AAD TLC ACC GET COO TOC TAL CECA GCAACT LO TE TULA ACACTO TURN A GAA AAT AA LAGE AAT T TH LU TH RAL GOB TOO CALC AAG TATCA TE TRAA TEGO AGAGAL TET CTGGTOAATOOTGOUGTTAUCATOOU TAC LCA SAGE ‏ا‎ AAGALCOATTTTTICCR TLCS GACT CT AAT GT TT HOGA AL AGG CALI TOGAAYAGACAALG TH GALTATAGCAGLETEATS ‏الف رةه فت تفع لاخر لفت‎ GAA AACUAR THC AC AGA ADAG TACGGCATHOTGG COGATAACCTOCAATAGCAAMACGECRC TCO TAT TE TAGGOGELO TAR TANT ‏توفي‎ ‎COTHOCATOOT ETE HCAS ALLL LALO TO TACO TECABUO TUCO ATO TEU UO CAARATIOUT A TACGEACSHCAACTITCATCCCTCGUUG CICA TROSAGGUTT TOCA TEAAGCATOOGLOTACTT AGATEOTRAT TARAS ALAC ALITA T TCUC ROG GAT CO TCO GANANTT TU AR TCAGHRENAAGCTG GOT ‏اع‎ ATCACGOAG TALAG TACCOOOCAGUTCAGCO TEN AGA TLL AG TOG HARCTOUAL A ‏كف فت تا‎ ATC AAA CU TOE ASCCCAGAGATTCATACACT TCOAAL TACT ACASA TI TADAAA v, I< x
    - ~ 7 ‏ا‎ A ‏ال‎ a a Fa ts " grt TTCAATACTGAGRG TACT TATTECOAGCCTLRUECCATTRGEACECGTTACC TG ACT IT TEU GT CAA TALTGAGRG TANT TAT TUCGAGECTUGEECCAT ‏افق 1 ى افاي ا‎ 7 pl k 0 ‏اي رلا اله ب 1س‎ ‏انان 1 اانا ا‎ FPALTGAGLG R y ‏ا ا ل‎ PL 12001 0 ‏اوناخ لانن فقا‎ . a a ! .
    of . 4 i ‏ا م‎ ‏ا اب‎ | 1 WTA ETT ‏المي‎ saad J : 8 ‏شنو‎ 8 BRT 1537 ‏الأميني‎ plead ‏ميات لامجاي الح جحي للحي لجيه ار ارا وي الجا الام ل‎ A ‏الت لدب‎ ‏وجي اليه ني ات ان محا ا‎ RT TE ‏مج جح الج اتات ال سلجي ل ادر ا وا وج ل اراح واي لاوا ا‎ ‏ا ل ل ل ا ا ا ا ل ل اا لكان جا ار اي ا الا اا‎ SE 1 ‏ما لاا اتا‎ ‏لان الما اا ااا تا ماقا لاعن ال الا لحا‎ WE J Rn a GR FR VES ay 7 > foi ‏واج حجنت‎ EY ‏حك ا اع حلت اح ل ا با ال و كرد‎ DE ‏جا‎ SET HR ‏جل اموا دا ا ا ل ا لج‎ TNE ‏اي ا لي ع ل ل عي ام عه ادر ا ل ا اج ليا ا ماد‎ TO ‏ا ع ع‎ RP ‏ل اج ايل‎ LAT RAS ‏ا‎ ITT STEYR Sa 2331 AR EE CR IR ‏ال متا‎ A ‏ل‎ RE SH ‏عاد ادام مدا‎ prog] NECA SNR DO TR LER IT DATE RR FTV NRE LYE TER . ‏م 7 ما ال‎ LE TE Tn LF CV LS REARS LE PE ‏ا‎ RR TA FE PRN LE FH ‏ا ال تي لاوا‎ TR Tr a NL VF TO RL FY VLR ‏الم اللا‎ ‏يا ل ا م يه الما الع لالد لا ا تاب يا زا ل ا تك لالت اي جا‎ : : ‏ل ل ا‎ AC TL DT SRL ne mm ps LAR SAR TO LE Fr ‏اح حل ا لحت رضي م‎ HY AES OY LORI MN FLID TER TELVENT FY AYLI LANG SERVER SEFYILENEER ‏متا‎ AEN DRL ‏ارا ال‎ DS ‏ا ل‎ a 0 ‏مر 7 لمحي الح وى لجرا لاد الال اا اي را ران ل ا ا ال ا‎ fy ‏مووي لمق 8 اج ري ا‎ FRR er ‏لاي لالع لاي م ات اي م وا الل ام ال ل ا ل‎ EM ESTA TRY ‏ال المت انتما امد‎ ‏لا ل للا ا ل ل‎ PRA ED ARETE FEDER ‏ا اع ا لحي لجرت كيجا جني ااه الال ل اي‎ ‏لمن‎ TUS IT IR TU LE ‏ارت الا مايا‎ Re 3 1 ‏تحص لخي‎ NAY ‏م‎ x WO TRE REN ‏لجا عا عه حي مح ما لماح ع مح جاجد اع اكه جات جا اج ا ا‎ TO ‏اجا يح يي اا ا ص يحي‎ SAVY ‏ا ل ا ل بجح عي محا جد اع اتج احاح جا ا ا اع ع الماح ري ا تا ات ل اا اجاج صا حي رحد الح اجا‎ TS ‏ليرا ليا أل لي ال ايلام وات اد‎ ‏ا اليا تا‎ VHL TO EBL WT TEV ‏اليا ا‎ I RI SR LER SV ANATHE DDE ‏ل‎ LPG RGRGHDEV IN 2 SVL TIEREIY Ce TAY TT RN ‏اا ار وح‎ TT ER TR OT Te 3 1 ‏ل ا ل‎ FESS RAMS ‏ل ا ل ل‎ I ‏يد ا كارتا ل‎ ‏واي يما العم يجي لامو ويح حت اع اد ل تيج تالص حا‎ TREE TYR ‏ا‎ MR I RE ‏رت تا‎ TL INTE ENTE TUEFRGARLARGEL 3 SOEAL POY WAR ENY LOGE SWARITRTDOE FREER LEGS AN 3 ; 1 CN TR ES NT TY RT PR RT ETRY TRL, RIUGOVIYE CE ‏ا رشو رن ا الجا‎ + WAT pie J 53 58 ‏اا حر لا ان الود وا مح اد داعي لياح اتلك اد هد‎ ‏ل ا الت لا ا ا‎ PE NTR IEEE TROY SH ‏اذب‎ ١ RR ] ‏الفط الت تي مات‎ H PF SST WED pee ek 03 ‏جيه‎ ‏لير عم ا وام موي اج و ل جام يح جه جع جوع الجاع‎ ‏لعا و اجاج عد جح نجي ل"‎ 8 oo I A ORT ‏كان لا جا ا يا ما‎ i A ‏ىن ا‎ SN TL A ‏ال‎ TRE LYE ONT RGSS TR ‏ا‎ ‏رقا اتات ات‎ PMA TN NEGA DRE SERN ‏ل‎ ITT ETR TAL TARR 5 0 ‏عا قر حي الو ا اج أ ا ا‎ A SER ‏الدع مرا لس ماري‎ INE ‏و‎ ‏ل ا تر لاي ا الاي لاجد لج ا جا‎ EL EYL, ‏جاجع لوج ميو لمجا تساع‎ TR ‏جعي ا د مع جع ا‎ LN TRL EN ‏ويج ل ل 7 ابيع لحم عي ا‎ HW ‏لالط‎ HR SAAR A FE EE IE NR ER SSE OE SR IN OHI OE i Er ERY ‏ا ا‎ I NE ‏لا‎ TO ER SR OEY Ty 0 0 ‏ع عا ع جع اليم واي جاجع جاع جيه جمد جك مج الا‎ A TN FV EP OT ‏ا‎ I EEA SAS Loren 3 EAN LPP AY IN TPO OEY TL ERE SORVGRRSH HERERO FR ETEIRIFE SNR NEE © RAR FRR GH SER ER ‏لمان‎ So ‏اب دنه لضم ب‎ ‏تتا ل الات‎ BT RAVER FOS NTI NEE ROR VCR RETICLE SRE 9 0 pe " ‏اال اي ال‎ : ‏ريص ليحن الم حو حم حي لا حايص ريحي رحج ما يحب رن ل وا ا يعي ا راح اج ل‎ IRM SATE RT AT AF RT ‏ا‎ EE ER ‏ل‎ LB ‏لاض العا‎ PT ‏قت‎ EF RI TAT EY fd A TO ‏ال ااه الح اح و احرج حك لح يح ع را الوص‎ SEE EIR AU NR ‏ا اجا ير‎ RN AR a ‏دجن اا ا لي‎ ‏ا الاي لان د اتا‎ TT AR TOG LIF RR PEM AEN QR ed ‏ا ل جام‎ EE ‏اجاج ال ا ا ات ااي ل دعل‎ ‏يه تي جو ص اي اي لج ماع ع ع وت ااا‎ ‏توي جه نايد الام ياد الا قا لاج ليل ا ارج نه جرت ا ل ا ا أ ا ال ا مروت ديارج ااا‎ A NSE AT ‏ل اا تحنلا‎ CRAP ES ‏ل‎ ANA THE DDE ‏ل ا ا لاد ل‎ SVEL TERY NRA 3 ‏وول : ا‎ TA ‏وي ع ا يع و ال ديل مج لمجي تع وم الايد‎ NR A ‏ا بن‎ ‏وا + الكت تنم حي ات امت‎ CIE BEY ‏ا ا ل يو م ا‎ RE ‏ا ع‎ NH NDAD ‏ا ين‎ ‏ل ترا فحت التي ات “قا‎ DOH NH ES ‏ا ا ا ا‎ mo RR ‏ل ا ل ل ا‎ EIT ST SR NE A ATE ‏ا ال‎ EN ‏ا‎ PR ‏اللا لما‎ AT ‏تل اا‎ VN TES TY AP PRP TG TEV LOT REL LR EE ‏اا الاك ل را‎ AE ‏لاي رول كال‎ Nr ‏أ جا اليا اا ا اك‎ TEATRO YA VNTES TYRE PRP IGTEY LS 5 WHR ‏الما‎ UIT TREY SVE ‏جني يي اي يال‎ BERNER CWT TART INSTR ‏ل‎ ‎ّ ‏جد يبب‎ “ : Fo ; § AB TE TRE oI Tn.» ‏ذه‎ ‎; | REME-1 RL ‏الميني‎ roa ok b ‏شنع التو‎ fort FER ‏ا اي‎ an Tai Fri ve Tren Ferre T ed 3 1 EC Avg Vasa ‏ا لز ل‎ nao ‏كه العا ع ع الت الع ادا ا‎ ings ‏اااي لاد اع ان‎ 3 ‏متاح اا‎ indy ‏تع‎ Vasa ‏بدي ل لاض لا‎ TEAL ‏الت ريه الاش ا ايا تال ا اااي لالجا اا‎ AIRE : A TREE ATL TN ROSA dh BR 8 BON N > RNC ‏له لب لحا‎ Ad fads inhdbavadosigesdntyl ‏ا ا ل الل ا الجا تدا الاو‎ foam ‏ا ا‎
  2. 2.8 syspvpasdasniehdiay CEPR NY L TVR Ra ‏جا‎ REET Sas DES EEE RN 8 ‏ا‎ SOE <8 ‏ا‎ on ToT en spear ‏ع‎ stink ‏ل عاج‎ In foeat aris qT Gelber Tern ‏د حو اد‎ BE arcs BR ‏اا لدي ارات‎ obser ari a avers ‏تيم رم حال اج جاح‎ LEY ‏عر يم اع لع عا مع لوعو ل نضح ال بل اناق‎ stds ‏ا ع ع ال ب‎ Ea Ld ‏ال ا ال ا ل ارا الس ا + 5 ام د رت اتات‎ ‏م‎ J 3 er ‏ادا اع رع وحوح توج ممح اماع معت ذأ اجو‎ rs ‏محص يح ل اا فاج اومرح تاج لحواطج بع‎ LEY ‏عد لجع تا ات عد عه لع رواج عمس لاوقا مع معط عي لجووج امج داع‎ ‏ا‎ AA ‏هي ان كمة ع‎ A REA ‏ال‎ RR TR ‏ال اذا عار مداق ا‎ 8 8 0 8 Fd ‏اج ا ل دير لاوما جلاع اا‎ 3 X 3 wa TEE Tee seer ‏دار‎ adie Rr Rene A pi arn oF ‏ا‎ Foe ‏جعي لنت اوداتعا جز‎ ‏يي ايا اي عا ااي الأجة ويه كي ا م الجا ارين او ا‎ bt nda ‏زا لتر ور رلك لوقي ات ال ع‎ Sag + ZF ATLL ‏قود‎ pina ‏ل 1 ل ا ا ااال ل يرز‎ 9 AEE 5 5 : ‏ا 1 :0 ا ع اا ا :0 ا‎ yn Vode onde sey Wie ‏ان اما او وال ال ات لا‎ IHL wid 7 ‏تا رصق لعجاي زجي ل ابا تا تا اا ااا اا ا‎ av I Dune ‏ومع ححا‎ INI 07 RE rdoiity Ree) RRL ELE J 13 157 - Rd ‏ل‎ 3 pa BR Ba = 3 = PY i { ~ Fen Fru Fase 9 Fr ‏ل‎ Fae : sar ‏الا ا لاج الا كد مار ا اه ا الا اج‎ ‏ال ا‎ 2 LAT J POE SN ‏أ لجار جح رحا‎ ERE ‏ارال لد الم د لحت لج بت لد اديه تا ل اتات ات اا الحا ا نايا جاح الجاع‎ ‏مج ده ري تم دي حسمو تمص الي جوع قد بجعم نوج ذه ويا امنا‎ 5 ¥ ‏اساسا‎ Re Oa ‏ا‎ TERRE A be i 1 ‏ا ا‎ ‏سرض اس سا لات الات ا ل جراد اران داع ادام 7 د‎ asl ‏ولس الخس ا الاج لج م ا دج جاه كل‎ 1: 0 ‏ل ا‎ Pr oo Say RN ‏ا لماج اد ا‎ Laat] FES ‏ل ا ا‎ Fh J ‏مار‎ ‎43 ‏الا الت ع و ا ل ال لوول الصا طسق ودع بس تت‎ SEEN : AG FR ded OW ESA RRA AEA A I SRE AR ANNE ) : 3 Rk NE: PR 7 : : + ‏لاع ا اساسا اويا ل ا ل لات الا ال ع‎ ve ‏تج الا‎ HE} ever ad ER ‏لاو سمج دجا‎ ee FF sat eras bass ser eels 1 xs SRE AMA TNs ry ings 443 ipgpovrgorvashtlsgoonsnliavigethyilogrdslivngg rama thas 1 ‏حا راجح ل الل ما‎ RS : > + ‏ا‎ AS ee ‏ل ل‎ ‏ا ا ف و اك جا و تع ال 1 ماح ع جرع ص نط روات عمجا لاا ال‎ vores 241 gvimfohuggaghkdnvdyesvnltaeseiivonpvatbeqigy ‏صقي‎ Lam ‏ترق‎ vans ue 5 ‏ل‎ 8 8 I ‏اجا لحا عل‎ EP a ‏اا وى لجو و لانو‎ 8 ‏دار ا اا لا أ وني ين يو دج اج جه ا ام كل او ع محل الواح كل ووم ااا اد العلا عر ل الت ا ل واوا ما‎ SI ‏د يا الود ارا اس ا لاا الما دا ا ا ااي لص حي‎ ONE ‏ا‎ Ea? ‏ال ل ا اا ا ا ا ل‎ EO ‏ودج لت اي ب د ع ل‎ 3 EOL ‏سر ول م ا وك تح لتقم حو الحا عمط ومسو نوو‎ 03 Tor Sy ; N ¥ ‏أت ل ا‎ rags eames Sesh an ‏لوا دا اه ارات روا‎ WEEE no Rl Tas @ ‏حي راي ل ل ل ليج اي لا ا ال ا تايا رلا و ا ا لجل اح الات للحي الام سج ا‎ 281 ‏تي لع اي وى ع ع ل ع ع ل م ع ال ةم ره مع وي وا تدع لوووط اع‎ NA ‏الا من لكت‎ AEE NEY FE : ) x * ‏ا ا ل ا ل الا‎ TTC Food, QUERIED ‏شلال تال ا لله لدم‎
    ‎p= ro 7%‏ ‎ _ 8‏ » 0 ‎yo] ab‏ ‎mm ١١‏ لد ‎x.‏ ‎٠01 Talal‏ = ‎da 70 0 | | 0‏ ‎١ | mRER |‏ - ااا اا 2 © لما 33 ة3[ؤ8 يؤ]3د33 و23 # © جو جو «ج © ‎ *‏ وة ؟ ل © 8 8 8 »“ ؟ ا ‎Xx‏ ‏55 8 225532285 خم جم ا & ا 8 5 5 & _. 5 © 3333333338 385 3131 3
    ‏شكل؛
    V4. Foe ww oul 3 | ‏الأسبوع ؟‎ {rend 5 3 : | a Cove 7 3 : 8 x | ‏ةو‎ ‏بلغ‎ or ue es ‏سلس‎ ‎= ] § © on at ue o ea © 0 ] Si N 0 + J 1 8 7 S$ " 1 ‏ل ا‎ 0 ‏مي الي حي آي م‎ Ss JS ‏هن‎ ‎"7 ‏كه‎ NNN Ww RGR ‏ين‎ ‎FS SSSR RHMA 1 GI9SA-L199V- ‏تمدو ميم‎ RHMIS_2 G195A-1199V- 5201P-G202N K{137/259/333/530/552/569/38/51/77/163/169)R R RHM15_3 G195A-1190V- S201P-G202N K{137/250/333/530/552/569/38/51/77/163/S47 RR RHMIS 4 GIOSA-L199V- S201P-G202N K{137/259/333/530/552/569/38/51/77/ 163/668) R RHM15.5 ‏نوودب موميع‎ S201P-G202N K{137/250/333/530/552/560/38/5 1/77/5487 163 1RR 8113156 G1958-L199V- 5201P-G202N K{137/259/333/530/552/569/38/51/77/547/688}R R o KS
    -١1- ٌ ‏اد ناء‎ 3 A ‏ذه اقم اله‎ ‏جلي‎ N 2 Yaa : i 0 ‏سح‎ ABN ‏م‎ - i ¥a¥ he A ‏ب‎ N = BH ‏أب‎ £4 i La 3 i | he 4 75 Rey RS 1 ‏يت ايرجاج + ربح ؤ‎ - Cy ‏ا‎ ‎3 ‏ب إ: : | ا ا‎ AN po Be 1 ١ > TSE . dN - i 8 8 Em * ‏ا‎ : Eh Se ‏الأيام يعد الحقن‎ EY, ‏شكا‎
    مدة سريان هذه البراءة عشرون سنة من تاريخ إيداع الطلب وذلك بشرط تسديد المقابل المالي السنوي للبراءة وعدم بطلانها أو سقوطها لمخالفتها لأي من أحكام نظام براءات الاختراع والتصميمات التخطيطية للدارات المتكاملة والأصناف النباتية والنماذج الصناعية أو لائحته التنفيذية صادرة عن مدينة الملك عبدالعزيز للعلوم والتقنية ؛ مكتب البراءات السعودي ص ب ‎TAT‏ الرياض 57؟؟١١‏ ¢ المملكة العربية السعودية بريد الكتروني: ‎patents @kacst.edu.sa‏
SA516370442A 2013-07-22 2016-01-21 صورة متغيرة من aav ، وتركيبات وطرق واستخدامات ناقل جين للخلايا والأعضاء والأنسجة SA516370442B1 (ar)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361857161P 2013-07-22 2013-07-22
US201461985365P 2014-04-28 2014-04-28
PCT/US2014/047670 WO2015013313A2 (en) 2013-07-22 2014-07-22 Variant aav and compositions, methods and uses for gene transfer to cells, organs and tissues

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SA516370442B1 true SA516370442B1 (ar) 2019-08-31

Family

ID=52343737

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SA516370442A SA516370442B1 (ar) 2013-07-22 2016-01-21 صورة متغيرة من aav ، وتركيبات وطرق واستخدامات ناقل جين للخلايا والأعضاء والأنسجة

Country Status (25)

Country Link
US (2) US9840719B2 (ar)
EP (2) EP3613440A1 (ar)
JP (3) JP6495273B2 (ar)
KR (2) KR102380265B1 (ar)
CN (2) CN110606874B (ar)
AU (4) AU2014293253B2 (ar)
CA (2) CA2919103C (ar)
DK (1) DK3024498T3 (ar)
ES (1) ES2774966T3 (ar)
HK (1) HK1223849A1 (ar)
HU (1) HUE047996T2 (ar)
IL (5) IL297919A (ar)
MX (2) MX2016001044A (ar)
MY (1) MY175477A (ar)
NZ (1) NZ716102A (ar)
PE (1) PE20160188A1 (ar)
PH (2) PH12016500162A1 (ar)
PL (1) PL3024498T3 (ar)
PT (1) PT3024498T (ar)
RU (2) RU2019124473A (ar)
SA (1) SA516370442B1 (ar)
SG (2) SG11201600518WA (ar)
SI (1) SI3024498T1 (ar)
WO (1) WO2015013313A2 (ar)
ZA (1) ZA201600481B (ar)

Families Citing this family (159)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2525067T3 (es) 2005-04-07 2014-12-17 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Método de incremento de la función de un vector de AAV
US9255154B2 (en) 2012-05-08 2016-02-09 Alderbio Holdings, Llc Anti-PCSK9 antibodies and use thereof
CN114395559A (zh) 2014-04-25 2022-04-26 吉尼松公司 高胆红素血症的治疗
WO2015191508A1 (en) 2014-06-09 2015-12-17 Voyager Therapeutics, Inc. Chimeric capsids
MX2017005834A (es) 2014-11-05 2017-11-17 Voyager Therapeutics Inc Polinucleotidos aad para el tratamiento de la enfermedad de parkinson.
GB201420139D0 (en) 2014-11-12 2014-12-24 Ucl Business Plc Factor IX gene therapy
CN112375760A (zh) 2014-11-14 2021-02-19 沃雅戈治疗公司 调节性多核苷酸
AU2015346162B2 (en) 2014-11-14 2022-02-10 Voyager Therapeutics, Inc. Compositions and methods of treating amyotrophic lateral sclerosis (ALS)
WO2016094783A1 (en) 2014-12-12 2016-06-16 Voyager Therapeutics, Inc. Compositions and methods for the production of scaav
US10081659B2 (en) 2015-04-06 2018-09-25 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Dept. Of Health And Human Services Adeno-associated vectors for enhanced transduction and reduced immunogenicity
GB201508026D0 (en) 2015-05-11 2015-06-24 Ucl Business Plc Capsid
EP3294309A4 (en) * 2015-05-14 2019-01-16 St. Jude Children's Research Hospital, Inc. NUCLEIC ACID MOLECULES WITH SPACERS AND METHOD FOR USE THEREOF
KR102415896B1 (ko) 2015-06-23 2022-06-30 더 칠드런스 호스피탈 오브 필라델피아 변형된 인자 ix, 및 세포, 기관 및 조직으로 유전자를 전달하기 위한 조성물, 방법 및 용도
PL3356390T3 (pl) 2015-09-28 2021-07-05 The University Of North Carolina At Chapel Hill Sposoby i kompozycje dla wektorów wirusowych unikających przeciwciał
PE20231949A1 (es) * 2015-10-30 2023-12-05 Spark Therapeutics Inc VARIANTES DEL FACTOR VIII REDUCIDO CON CpG, COMPOSICIONES Y METODOS Y USOS PARA EL TRATAMIENTO DE TRASTORNOS DE LA HEMOSTASIA
RU2021102893A (ru) 2015-11-05 2021-03-03 Бамбу Терапьютикс, Инк. Модифицированные гены атаксии фридрейха и векторы для генной терапии
MX2018006682A (es) * 2015-12-01 2018-09-26 Spark Therapeutics Inc Metodos escalables para producir vector viral adenoasociado (aav) recombinante en un sistema de cultivo celular en suspension libre de suero adecuado para su uso clinico.
US10406244B2 (en) 2015-12-02 2019-09-10 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University AAV vectors with expanded packaging capacity
US10385320B2 (en) 2015-12-02 2019-08-20 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Recombinant adeno-associated virus capsids with enhanced human skeletal muscle tropism
CA3006569A1 (en) 2015-12-02 2017-06-08 Voyager Therapeutics, Inc. Assays for the detection of aav neutralizing antibodies
WO2017106326A1 (en) * 2015-12-14 2017-06-22 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Aav-anti pcsk9 antibody constructs and uses thereof
CA3007330A1 (en) 2015-12-14 2017-06-22 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Composition for treatment of crigler-najjar syndrome
EP3417055B1 (en) 2016-02-16 2021-10-13 The Board of Trustees of the Leland Stanford Junior University Novel recombinant adeno-associated virus capsids resistant to pre-existing human neutralizing antibodies
WO2017173043A1 (en) * 2016-03-30 2017-10-05 Spark Therapeutics, Inc. Cell line for recombinant protein and/or viral vector production
WO2017189959A1 (en) 2016-04-29 2017-11-02 Voyager Therapeutics, Inc. Compositions for the treatment of disease
EP3448987A4 (en) 2016-04-29 2020-05-27 Voyager Therapeutics, Inc. COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF DISEASES
SG11201809699XA (en) 2016-05-18 2018-12-28 Voyager Therapeutics Inc Modulatory polynucleotides
RU2764587C2 (ru) 2016-05-18 2022-01-18 Вояджер Терапьютикс, Инк. Способы и композиции для лечения хореи гентингтона
CA2971303A1 (en) 2016-06-21 2017-12-21 Bamboo Therapeutics, Inc. Optimized mini-dystrophin genes and expression cassettes and their use
JP6994018B2 (ja) 2016-07-26 2022-01-14 バイオマリン ファーマシューティカル インコーポレイテッド 新規アデノ随伴ウイルスキャプシドタンパク質
US11298041B2 (en) 2016-08-30 2022-04-12 The Regents Of The University Of California Methods for biomedical targeting and delivery and devices and systems for practicing the same
EP3293259A1 (en) 2016-09-12 2018-03-14 Genethon Acid-alpha glucosidase variants and uses thereof
EP3293260A1 (en) 2016-09-12 2018-03-14 Genethon Acid-alpha glucosidase variants and uses thereof
EP3293203A1 (en) 2016-09-12 2018-03-14 Genethon Acid-alpha glucosidase variants and uses thereof
EP3510149A1 (en) 2016-09-12 2019-07-17 Genethon Acid-alpha glucosidase variants and uses thereof
WO2018085688A1 (en) * 2016-11-04 2018-05-11 The Children's Hospital Of Philadelphia Gene transfer compositions, methods and uses for treating neurodegenerative diseases
US20230190958A1 (en) 2017-01-13 2023-06-22 Jichi Medical University AAV Vector for Disrupting Coagulation Factor-Related Gene on Liver Genome
CA3053455A1 (en) 2017-03-10 2018-09-13 Genethon Treatment of glycogen storage disease iii
CA3054711A1 (en) * 2017-03-15 2018-09-20 The University Of North Carolina At Chapel Hill Polyploid adeno-associated virus vectors and methods of making and using the same
US10550405B2 (en) 2017-03-15 2020-02-04 The University Of North Carolina At Chapel Hill Rational polyploid adeno-associated virus vectors and methods of making and using the same
JP2020518258A (ja) 2017-05-05 2020-06-25 ボイジャー セラピューティクス インコーポレイテッドＶｏｙａｇｅｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｉｎｃ． 筋萎縮性側索硬化症（ａｌｓ）治療組成物および方法
SG11201909868YA (en) 2017-05-05 2019-11-28 Voyager Therapeutics Inc Compositions and methods of treating huntington's disease
WO2018213278A1 (en) * 2017-05-15 2018-11-22 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Reprogramming metabolism by inhibiting vhl for treatment of neurodegeneration
JOP20190269A1 (ar) 2017-06-15 2019-11-20 Voyager Therapeutics Inc بولي نوكليوتيدات aadc لعلاج مرض باركنسون
CN111132626B (zh) 2017-07-17 2024-01-30 沃雅戈治疗公司 轨迹阵列引导系统
BR112020000995A2 (pt) * 2017-07-17 2020-09-08 Spark Therapeutics, Inc. métodos e usos de aférese
US20210228738A1 (en) 2017-07-17 2021-07-29 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Compositions and methods for increasing or enhancing transduction of gene therapy vectors and for removing or reducing immunoglobulins
MX2020002148A (es) * 2017-08-25 2020-07-20 Ovid Therapeutics Inc Vectores adenoasociados recombinantes.
WO2019079242A1 (en) 2017-10-16 2019-04-25 Voyager Therapeutics, Inc. TREATMENT OF AMYOTROPHIC LATERAL SCLEROSIS (ALS)
JP2021502060A (ja) 2017-10-16 2021-01-28 ボイジャー セラピューティクス インコーポレイテッドＶｏｙａｇｅｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｉｎｃ． 筋萎縮性側索硬化症（ａｌｓ）の治療
BR112020014404A2 (pt) 2018-01-17 2020-12-29 Adrenas Therapeutics, Inc. Terapia gênica de vírus adenoassociado para deficiência de 21-hidroxilase
US10610606B2 (en) 2018-02-01 2020-04-07 Homology Medicines, Inc. Adeno-associated virus compositions for PAH gene transfer and methods of use thereof
CA3086942A1 (en) 2018-02-07 2019-08-15 Genethon Hybrid regulatory elements
WO2019161365A1 (en) 2018-02-19 2019-08-22 Homology Medicines, Inc. Adeno-associated virus compositions for restoring f8 gene function and methods of use thereof
EP3758724A4 (en) * 2018-02-27 2022-07-06 The Trustees of The University of Pennsylvania NOVEL ADENO-ASSOCIATED VIRUS (AAV) VECTORS, AAV VECTORS WITH REDUCED CAPSID DEAMIDATION AND USES THEREOF
EP3765624A4 (en) * 2018-03-16 2022-05-25 Research Institute at Nationwide Children's Hospital INCREASE IN TISSUE-SPECIFIC GENE DELIVERY BY CAPSID MODIFICATION
US11608510B2 (en) 2018-03-30 2023-03-21 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Recombinant adeno-associated virus capsids with enhanced human pancreatic tropism
JP7406677B2 (ja) 2018-04-03 2023-12-28 ギンコ バイオワークス インコーポレイテッド 抗体を回避するウイルスベクター
CN112004925A (zh) 2018-04-05 2020-11-27 吉尼松公司 具有降低的肝向性的AAV9和AAVrh74的杂合重组腺相关病毒血清型
WO2019210267A2 (en) * 2018-04-27 2019-10-31 Spark Therapeutics, Inc. Engineered aav capsids with increased tropism and aav vectors comprising the engineered capsids and methods of making and using same
CA3098565A1 (en) 2018-04-29 2019-11-07 Claire G. ZHANG Scalable clarification process for recombinant aav production
WO2019212922A1 (en) 2018-04-29 2019-11-07 Regenxbio Inc. Systems and methods of spectrophotometry for the determination of genome content, capsid content and full/empty ratios of adeno-associated virus particles
AU2018422759A1 (en) * 2018-05-07 2020-01-02 The University Of North Carolina At Chapel Hill Rational polyploid adeno-associated virus vectors and methods of making and using the same
TW202005978A (zh) 2018-05-14 2020-02-01 美商拜奧馬林製藥公司 新穎肝靶向腺相關病毒載體
AU2019285186A1 (en) 2018-06-14 2021-01-07 Regenxbio Inc. Anion exchange chromatography for recombinant AAV production
ES2946415T3 (es) 2018-08-08 2023-07-18 Genethon Mini-GDE para el tratamiento de la enfermedad de almacenamiento de glucógeno III
CN112567027A (zh) 2018-08-10 2021-03-26 再生生物股份有限公司 用于重组aav生产的可扩展方法
US10842885B2 (en) 2018-08-20 2020-11-24 Ucl Business Ltd Factor IX encoding nucleotides
WO2020081415A1 (en) 2018-10-15 2020-04-23 Regenxbio Inc. Method for measuring the infectivity of replication defective viral vectors and viruses
AU2019381803A1 (en) * 2018-11-16 2021-06-10 Asklepios Biopharmaceutical, Inc. Vectors comprising a nucleic acid encoding lysosomal enzymes fused to a lysosomal targeting sequence
WO2020198737A1 (en) * 2019-03-28 2020-10-01 The General Hospital Corporation Engineered adeno-associated (aav) vectors for transgene expression
TW202102526A (zh) 2019-04-04 2021-01-16 美商銳進科斯生物股份有限公司 重組腺相關病毒及其用途
US20220275358A1 (en) 2019-04-11 2022-09-01 Regenxbio Inc. Methods of size exclusion chromatography for the characterization of recombinant adeno-associated virus compositions
JP2022529002A (ja) 2019-04-19 2022-06-16 レジェンクスバイオ インコーポレーテッド アデノ随伴ウイルスベクター製剤及び方法
JP2022529680A (ja) 2019-04-19 2022-06-23 ジェネトン 線維芽細胞増殖因子２３関連低リン血症性疾患の遺伝子療法
CN114144197A (zh) 2019-04-24 2022-03-04 再生生物股份有限公司 完全人类翻译后修饰的抗体治疗剂
EP3967706A4 (en) * 2019-05-08 2022-12-28 Center For Excellence In Brain Science And Intelligence Technology, Chinese Academy Of Sciences AAV MUTANT FOR EFFICIENT INFECTION OF SUPPORT CELLS
CN110205297A (zh) * 2019-05-15 2019-09-06 华北理工大学 一种重组脂肪干细胞及其重组方法
CA3144864A1 (en) 2019-06-27 2020-12-30 Pfizer Inc. Methods of treating duchenne muscular dystrophy using aav mini-dystrophin gene therapy
JP2022540632A (ja) 2019-07-09 2022-09-16 ジェネトン 糖原病（ｇｓｄ）の処置
US20220251567A1 (en) 2019-07-10 2022-08-11 Inserm (Institut National De La Santè Et De La Recherche Médicale) Methods for the treatment of epilepsy
EP4006160A4 (en) 2019-07-12 2023-06-28 Gene Therapy Research Institution Co., Ltd. Adeno-associated virus virion for gene transfer to human liver
EP4004214A1 (en) 2019-07-26 2022-06-01 RegenxBio Inc. Engineered nucleic acid regulatory element and methods of uses thereof
RU2751592C2 (ru) * 2019-08-22 2021-07-15 Общество С Ограниченной Ответственностью "Анабион" Выделенный модифицированный белок VP1 капсида аденоассоциированного вируса 5 серотипа (AAV5), капсид и вектор на его основе
WO2021050666A1 (en) * 2019-09-11 2021-03-18 Aav Gene Therapeutics, Inc. Aav-zyme and use for infusion replacement therapy
CA3157700A1 (en) 2019-10-17 2021-04-22 Stridebio, Inc. Adeno-associated viral vectors for treatment of niemann-pick disease type c
EP4048786A1 (en) 2019-10-22 2022-08-31 Genethon Chimeric polypeptides and uses thereof
WO2021078834A1 (en) 2019-10-22 2021-04-29 Genethon Chimeric acid-alpha glucosidase polypeptides and uses thereof
WO2021097157A1 (en) * 2019-11-14 2021-05-20 Biomarin Pharmaceutical Inc. Treatment of hereditary angioedema with liver-specific gene therapy vectors
US20230016983A1 (en) 2019-11-19 2023-01-19 lNSERM (INSTITUT NATIONAL DE LA SANTÉ ET DE LA RECHERCHE MÉDICALE) Antisense oligonucleotides and thier use for the treatment of cancer
US20230270886A1 (en) 2019-11-28 2023-08-31 Regenxbio Inc. Microdystrophin gene therapy constructs and uses thereof
US20230032826A1 (en) 2019-12-18 2023-02-02 Genethon Production of recombinant viral vectors from plant hairy roots
TW202140791A (zh) 2020-01-13 2021-11-01 美商霍蒙拉奇醫藥公司 治療苯酮尿症之方法
KR20220133900A (ko) 2020-01-29 2022-10-05 리젠엑스바이오 인크. 점액다당류증 iva의 치료
EP3892720A1 (en) 2020-04-06 2021-10-13 Innovative Cellular Therapeutics Holdings, Ltd. Presenting cell and use thereof in cell therapy
WO2021229255A1 (en) 2020-05-14 2021-11-18 Genethon Tools and method for preventing a a¥ neutralization by antibodies
EP3913060A1 (en) 2020-05-22 2021-11-24 Genethon Vectors encoding a glucose-6-phosphatase (g6pase-a) for gene therapy
US20240018524A1 (en) 2020-07-10 2024-01-18 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and compositions for treating epilepsy
EP4200410A1 (en) 2020-08-24 2023-06-28 Genethon C-terminal truncated gde for the treatment of glycogen storage disease iii
EP4214242A1 (en) 2020-09-15 2023-07-26 RegenxBio Inc. Vectorized antibodies for anti-viral therapy
WO2022060915A1 (en) 2020-09-15 2022-03-24 Regenxbio Inc. Vectorized lanadelumab and administration thereof
EP4225777A2 (en) 2020-10-07 2023-08-16 RegenxBio Inc. Adeno-associated viruses for ocular delivery of gene therapy
WO2022076750A2 (en) 2020-10-07 2022-04-14 Regenxbio Inc. Recombinant adeno-associated viruses for cns or muscle delivery
CA3197730A1 (en) 2020-10-15 2022-04-21 F. Hoffman-La Roche Ag Nucleic acid constructs for va rna transcription
KR20230085170A (ko) 2020-10-15 2023-06-13 에프. 호프만-라 로슈 아게 동시 유전자 활성화를 위한 핵산 구조체
CN116528892A (zh) 2020-10-28 2023-08-01 再生生物股份有限公司 用于眼部适应症的载体化抗TNF-α抗体
WO2022094157A1 (en) 2020-10-28 2022-05-05 Regenxbio Inc. Vectorized anti-cgrp and anti-cgrpr antibodies and administration thereof
EP4236974A2 (en) 2020-10-29 2023-09-06 RegenxBio Inc. Vectorized factor xii antibodies and administration thereof
IL302282A (en) 2020-10-29 2023-06-01 Regenxbio Inc Vectored TNF-alpha antagonists for ocular indications
AU2021375404A1 (en) 2020-11-03 2023-06-08 Pfizer Inc. Methods for purification of aav vectors by anion exchange chromatography
CA3199661A1 (en) 2020-12-09 2022-06-16 Mario Amendola Lysosomal acid lipase variants and uses thereof
US20240052322A1 (en) 2020-12-15 2024-02-15 Pfizer Inc. HILIC UPLC-MS Method For Separating and Analyzing Intact Adeno-Associated Virus Capsid Proteins
AU2021403076A1 (en) 2020-12-16 2023-06-29 Regenxbio Inc. Method of producing a recombinant adeno-associated virus particle
IL303959A (en) 2020-12-23 2023-08-01 Pfizer Methods for purification of AAV vectors by affinity chromatography
TW202241943A (zh) 2020-12-29 2022-11-01 美商銳進科斯生物股份有限公司 Tau特異性抗體基因療法組合物、方法及其用途
CA3205209A1 (en) 2021-01-21 2022-07-28 Regenxbio Inc. Improved production of recombinant polypeptides and viruses
BR112023018430A2 (pt) 2021-03-19 2023-11-28 Adrenas Therapeutics Inc Terapias gênicas para deficiência de 21-hidroxilase
WO2022208342A1 (en) 2021-04-01 2022-10-06 Pfizer Inc. Pharmaceutical compositions containing adeno-associated viral vector
WO2022221529A1 (en) * 2021-04-16 2022-10-20 Asklepios Biopharmaceutical, Inc. Rational polyploid aav virions that cross the blood brain barrier and elicit reduced humoral response
EP4329821A1 (en) 2021-04-26 2024-03-06 RegenxBio Inc. Microdystrophin gene therapy administration for treatment of dystrophinopathies
CA3216420A1 (en) 2021-04-26 2022-11-03 Seungil Han Adeno-associated viral vector capsids with improved tissue tropism
WO2022235614A2 (en) 2021-05-04 2022-11-10 Regenxbio Inc. Novel aav vectors and methods and uses thereof
WO2022241030A1 (en) 2021-05-11 2022-11-17 Regenxbio Inc. Treatment of duchenne muscular dystrophy and combinations thereof
EP4359547A1 (en) 2021-06-22 2024-05-01 Pfizer Inc. Production of adeno-associated virus vector in insect cells
WO2023004331A1 (en) 2021-07-19 2023-01-26 New York University Auf1 combination therapies for treatment of muscle degenerative disease
AR126840A1 (es) * 2021-08-20 2023-11-22 Llc «Anabion» Proteína de la cápside vp1 modificada aislada del virus adeno-asociado de serotipo 5 (aav5), cápside y vector basado en esta
AR126839A1 (es) * 2021-08-20 2023-11-22 Llc «Anabion» Proteína de la cápside vp1 modificada aislada del virus adeno-asociado de serotipo 9 (aav9), cápside y vector basado en esta
WO2023060113A1 (en) 2021-10-05 2023-04-13 Regenxbio Inc. Compositions and methods for recombinant aav production
WO2023060272A2 (en) 2021-10-07 2023-04-13 Regenxbio Inc. Recombinant adeno-associated viruses for cns tropic delivery
WO2023060269A1 (en) 2021-10-07 2023-04-13 Regenxbio Inc. Recombinant adeno-associated viruses for targeted delivery
WO2023060264A1 (en) * 2021-10-08 2023-04-13 Dyno Therapeutics, Inc. Capsid variants and methods of using the same
CA3234811A1 (en) 2021-10-20 2023-04-27 Steven Goldman Rejuvenation treatment of age-related white matter loss
WO2023077092A1 (en) 2021-10-28 2023-05-04 Regenxbio Inc. Engineered nucleic acid regulatory elements and methods and uses thereof
CA3236365A1 (en) 2021-11-02 2023-05-11 University Of Rochester Tcf7l2 mediated remyelination in the brain
WO2023114816A1 (en) 2021-12-14 2023-06-22 Neurogene, Inc. Recombinant optimized galc constructs and methods for treating galc-associated disorders
EP4215245A1 (en) 2022-01-19 2023-07-26 Innovative Cellular Therapeutics Holdings, Ltd. Enhanced chimeric antigen receptor cells in hypoxic tumor microenvironment
WO2023139496A1 (en) 2022-01-21 2023-07-27 Pfizer Inc. Gene therapy for gaucher disease
GB202201242D0 (en) 2022-01-31 2022-03-16 Univ Edinburgh Recombinant optimized mecp2 cassettes and methods for treating rett syndrome and related disorders
TW202346590A (zh) 2022-03-13 2023-12-01 美商銳進科斯生物股份有限公司 經修飾之肌肉特異性啟動子
WO2023178220A1 (en) 2022-03-16 2023-09-21 Regenxbio Inc. Compositions and methods for recombinant aav production
WO2023183623A1 (en) 2022-03-25 2023-09-28 Regenxbio Inc. Dominant-negative tumor necrosis factor alpha adeno-associated virus gene therapy
WO2023198685A1 (en) 2022-04-13 2023-10-19 F. Hoffmann-La Roche Ag Method for determining aav genomes
WO2023201308A1 (en) 2022-04-14 2023-10-19 Regenxbio Inc. Gene therapy for treating an ocular disease
WO2023201277A1 (en) 2022-04-14 2023-10-19 Regenxbio Inc. Recombinant adeno-associated viruses for cns tropic delivery
GB202206336D0 (en) 2022-04-29 2022-06-15 Univ Edinburgh Recombinant therapeutic FMR1 constructs and methods of treating fragile X syndrome and related disorders
WO2023215807A1 (en) 2022-05-03 2023-11-09 Regenxbio Inc. VECTORIZED ANTI-TNF-α INHIBITORS FOR OCULAR INDICATIONS
WO2023215806A2 (en) 2022-05-03 2023-11-09 Regenxbio Inc. Vectorized anti-complement antibodies and complement agents and administration thereof
WO2023227438A1 (en) 2022-05-23 2023-11-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Raman-based method for the differentiation of aav particle serotype and aav particle loading status
WO2023232922A1 (en) 2022-06-03 2023-12-07 F. Hoffmann-La Roche Ag Method for producing recombinant aav particles
WO2023239627A2 (en) 2022-06-08 2023-12-14 Regenxbio Inc. Methods for recombinant aav production
WO2023237731A1 (en) 2022-06-09 2023-12-14 Genethon N-terminal truncated gde for the treatment of glycogen storage disease iii
WO2024003687A1 (en) 2022-06-28 2024-01-04 Pfizer Inc. Nucleic acids encoding acid alpha-glucosidase (gaa) and vectors for gene therapy
WO2024013239A1 (en) 2022-07-14 2024-01-18 F. Hoffmann-La Roche Ag Method for producing recombinant aav particles
WO2024017990A1 (en) 2022-07-21 2024-01-25 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Methods and compositions for treating chronic pain disorders
WO2024038002A1 (en) 2022-08-15 2024-02-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Prevention or mitigation of adverse effects related to recombinant viral vectors
WO2024038365A1 (en) 2022-08-16 2024-02-22 Pfizer Inc. Methods for purification of aav vectors by anion exchange chromatography
WO2024044725A2 (en) 2022-08-24 2024-02-29 Regenxbio Inc. Recombinant adeno-associated viruses and uses thereof
WO2024056561A1 (en) 2022-09-12 2024-03-21 F. Hoffmann-La Roche Ag Method for separating full and empty aav particles
WO2024081746A2 (en) 2022-10-11 2024-04-18 Regenxbio Inc. Engineered nucleic acid regulatory elements and methods and uses thereof

Family Cites Families (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA1202962A (en) 1982-10-19 1986-04-08 David P. Clifford Substituted n-phenyl-n'-benzoyl ureas and their use as insecticides and acaricides
US4965188A (en) 1986-08-22 1990-10-23 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or cloning nucleic acid sequences using a thermostable enzyme
US4683195A (en) 1986-01-30 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences
WO1998010088A1 (en) 1996-09-06 1998-03-12 Trustees Of The University Of Pennsylvania An inducible method for production of recombinant adeno-associated viruses utilizing t7 polymerase
US6156303A (en) 1997-06-11 2000-12-05 University Of Washington Adeno-associated virus (AAV) isolates and AAV vectors derived therefrom
US6531298B2 (en) 1997-07-21 2003-03-11 The University Of North Carolina At Chapel Hill Factor IX antihemophilic factor with increased clotting activity
WO2001036603A2 (en) * 1999-11-17 2001-05-25 Avigen, Inc. Recombinant adeno-associated virus virions for the treatment of lysosomal disorders
US6468524B1 (en) 2000-03-22 2002-10-22 The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services AAV4 vector and uses thereof
US20080220015A1 (en) 2001-08-03 2008-09-11 Nokad, S.A. Method of modulating neutralizing antibodies formation in mammals, and uses thereof in gene therapy, animal trangenesis and in functional inactivation of endogenous proteins
NZ532635A (en) 2001-11-13 2007-05-31 Univ Pennsylvania A method of identifying unknown adeno-associated virus (AAV) sequences and a kit for the method
PT1453547T (pt) * 2001-12-17 2016-12-28 Univ Pennsylvania Sequências do vírus adeno-associado (aav) do serotipo 8, vetores contendo as mesmas, e utilizações destas
WO2003082195A2 (en) 2002-03-22 2003-10-09 Board Of Regents, The University Of Texas System Protamine-adenoviral vector complexes and methods of use
ATE405295T1 (de) 2002-05-01 2008-09-15 Univ Florida Verbesserte raav-expressionssysteme für die genetische modifikation spezifischer capsidproteine
DK3235827T3 (da) * 2003-06-19 2021-04-19 Genzyme Corp Aav-virioner med reduceret immunreaktivitet og anvendelser deraf
EP1799826B1 (en) 2004-09-29 2009-08-12 Children's Memorial Hospital siRNA-MEDIATED GENE SILENCING OF ALPHA SYNUCLEIN
ES2525067T3 (es) * 2005-04-07 2014-12-17 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Método de incremento de la función de un vector de AAV
WO2007120542A2 (en) 2006-03-30 2007-10-25 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Aav capsid library and aav capsid proteins
CN101495624A (zh) 2006-04-28 2009-07-29 宾夕法尼亚州立大学托管会 衣壳免疫原性降低的经修饰aav载体及其用途
GB0911870D0 (en) 2009-07-08 2009-08-19 Ucl Business Plc Optimised coding sequence and promoter
LT2561067T (lt) 2010-04-23 2019-03-12 University Of Florida Research Foundation, Inc. Raav-guanilato ciklazės kompozicijos ir būdai, skirti leberio įgimtosios amaurozės-1 (lca1) gydymui
DK2826860T3 (en) 2010-04-23 2018-12-03 Univ Massachusetts CNS targeting AAV vectors and methods for their use
US8609088B2 (en) * 2011-05-10 2013-12-17 Regents Of The University Of Minnesota Intranasal delivery of therapeutic enzymes to the central nervous system for the treatment of lysosomal storage diseases
US20130039888A1 (en) * 2011-06-08 2013-02-14 Nationwide Children's Hospital Inc. Products and methods for delivery of polynucleotides by adeno-associated virus for lysosomal storage disorders
US10640785B2 (en) 2011-11-22 2020-05-05 The Children's Hospital Of Philadelphia Virus vectors for highly efficient transgene delivery
US9434928B2 (en) 2011-11-23 2016-09-06 Nationwide Children's Hospital, Inc. Recombinant adeno-associated virus delivery of alpha-sarcoglycan polynucleotides
KR20190094480A (ko) 2012-02-15 2019-08-13 바이오버라티브 테라퓨틱스 인크. 재조합 인자 viii 단백질
CA2864879C (en) * 2012-02-17 2021-07-20 The Children's Hospital Of Philadelphia Aav vector compositions and methods for gene transfer to cells, organs and tissues
PT2839014T (pt) * 2012-04-18 2021-03-19 Childrens Hospital Philadelphia ¿composição e métodos para transferência de genes altamente eficiente com a utilização de variantes de capsídeo de aav
US20140271550A1 (en) 2013-03-14 2014-09-18 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Constructs and Methods for Delivering Molecules via Viral Vectors with Blunted Innate Immune Responses
KR102415896B1 (ko) 2015-06-23 2022-06-30 더 칠드런스 호스피탈 오브 필라델피아 변형된 인자 ix, 및 세포, 기관 및 조직으로 유전자를 전달하기 위한 조성물, 방법 및 용도

Also Published As

Publication number Publication date
JP2022126765A (ja) 2022-08-30
AU2019201182B2 (en) 2020-11-19
KR20160033217A (ko) 2016-03-25
CN105579465A (zh) 2016-05-11
AU2021200310A1 (en) 2021-03-18
JP7094236B2 (ja) 2022-07-01
PH12020551744A1 (en) 2021-06-14
WO2015013313A3 (en) 2015-04-09
NZ716102A (en) 2021-12-24
RU2016105965A (ru) 2017-08-29
JP6495273B2 (ja) 2019-04-03
CA2919103C (en) 2023-10-10
US9840719B2 (en) 2017-12-12
IL276192B (en) 2022-05-01
EP3024498A4 (en) 2017-01-18
SI3024498T1 (sl) 2020-07-31
AU2019201182A1 (en) 2019-03-14
PH12016500162A1 (en) 2016-04-25
MY175477A (en) 2020-06-30
CN110606874A (zh) 2019-12-24
EP3024498B1 (en) 2019-12-04
BR112016001210A2 (pt) 2017-08-29
JP2016525356A (ja) 2016-08-25
AU2014293253B2 (en) 2018-11-22
EP3024498A2 (en) 2016-06-01
RU2697444C2 (ru) 2019-08-14
AU2014293253A1 (en) 2016-02-11
CA3209883A1 (en) 2015-01-29
PT3024498T (pt) 2020-03-06
SG10201809075XA (en) 2018-11-29
CN105579465B (zh) 2019-09-10
AU2021200310B2 (en) 2023-10-05
IL276192A (en) 2020-09-30
CN110606874B (zh) 2024-04-19
EP3613440A1 (en) 2020-02-26
US20150023924A1 (en) 2015-01-22
MX2016001044A (es) 2016-09-09
HK1223849A1 (zh) 2017-08-11
KR102380265B1 (ko) 2022-03-29
US20180187213A1 (en) 2018-07-05
RU2019124473A (ru) 2019-11-11
IL270085B (en) 2020-08-31
IL297919A (en) 2023-01-01
SG11201600518WA (en) 2016-02-26
MX2021000128A (es) 2021-03-25
IL289249A (en) 2022-02-01
IL243633B (en) 2021-04-29
JP2019116492A (ja) 2019-07-18
AU2024200001A1 (en) 2024-03-21
CA2919103A1 (en) 2015-01-29
DK3024498T3 (da) 2020-03-02
HUE047996T2 (hu) 2020-05-28
PE20160188A1 (es) 2016-04-27
KR20220041963A (ko) 2022-04-01
PL3024498T3 (pl) 2020-05-18
ZA201600481B (en) 2020-08-26
IL243633A0 (en) 2016-03-31
WO2015013313A2 (en) 2015-01-29
ES2774966T3 (es) 2020-07-23
NZ754715A (en) 2022-03-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SA516370442B1 (ar) صورة متغيرة من aav ، وتركيبات وطرق واستخدامات ناقل جين للخلايا والأعضاء والأنسجة
ES2714292T3 (es) Composiciones de vector raav3 con cápside modificada y métodos de uso en terapia génica del cáncer de hígado humano
US20200340012A1 (en) Crispr-cas genome engineering via a modular aav delivery system
KR102527259B1 (ko) 스터퍼/필러 폴리누클레오티드 서열을 포함하는 벡터 및 사용 방법
US20240076698A1 (en) Methods and compositions for modulating a genome
RU2653444C2 (ru) Композиции вектора aav и способы переноса генов в клетки, органы и ткани
AU2017253089A1 (en) Novel CRISPR enzymes and systems
EP3411506B1 (en) Regulation of gene expression via aptamer-mediated control of self-cleaving ribozymes
JP2021527405A (ja) 合成肝臓指向性アデノ随伴ウイルスカプシドおよびその使用
JP2022530457A (ja) 遺伝子操作ａａｖ
WO2019010091A1 (en) METHODS AND COMPOSITIONS FOR FACILITATING HOMOLOGOUS RECOMBINATION
JP2021531044A (ja) ムコ多糖症ｉｖａ型の治療
JP2022525564A (ja) アンジェルマン症候群を治療するためのベクターおよび方法
WO2022182835A1 (en) Compositions for and methods of improving gene therapy
KR20210138030A (ko) 안구인두 근이영양증 (opmd) 치료용 조성물 및 방법
US20230078498A1 (en) Targeted Translation of RNA with CRISPR-Cas13 to Enhance Protein Synthesis
US20240131197A1 (en) Compositions For and Methods of Improving Gene Therapy
US20240042058A1 (en) Tissue-specific methods and compositions for modulating a genome
WO2023212724A2 (en) Compositions and methods for modulating a genome in t cells, induced pluripotent stem cells, and respiratory epithelial cells
WO2019195387A9 (en) Gene therapy for oxidative stress
BR112016001210B1 (pt) Partículas de aav recombinates, e composição farmacêutica
Petrs-Silva et al. 61. Tyrosine Mutations in the Capsid of AAV Vectors Alters Transduction Properties in the Retina