RU2713295C2 - Способ сшивания полисахаридов при помощи фотоудаляемых защитных групп - Google Patents

Способ сшивания полисахаридов при помощи фотоудаляемых защитных групп Download PDF

Info

Publication number
RU2713295C2
RU2713295C2 RU2017146010A RU2017146010A RU2713295C2 RU 2713295 C2 RU2713295 C2 RU 2713295C2 RU 2017146010 A RU2017146010 A RU 2017146010A RU 2017146010 A RU2017146010 A RU 2017146010A RU 2713295 C2 RU2713295 C2 RU 2713295C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
polysaccharide
group
electromagnetic radiation
production method
aldehyde
Prior art date
Application number
RU2017146010A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2017146010A (ru
RU2017146010A3 (ru
Inventor
Томас БОБУЛА
Радован БУФФА
Павлина ПРОЧАЗКОВА
Владимир ВЕЛЕБНИЙ
Original Assignee
Контипро А.С.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Контипро А.С. filed Critical Контипро А.С.
Publication of RU2017146010A publication Critical patent/RU2017146010A/ru
Publication of RU2017146010A3 publication Critical patent/RU2017146010A3/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2713295C2 publication Critical patent/RU2713295C2/ru

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
    • C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
    • C08B37/0072—Hyaluronic acid, i.e. HA or hyaluronan; Derivatives thereof, e.g. crosslinked hyaluronic acid (hylan) or hyaluronates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A61K47/38—Cellulose; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/61—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule the organic macromolecular compound being a polysaccharide or a derivative thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/14—Macromolecular materials
    • A61L27/20—Polysaccharides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A61L27/56—Porous materials, e.g. foams or sponges
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L31/00—Materials for other surgical articles, e.g. stents, stent-grafts, shunts, surgical drapes, guide wires, materials for adhesion prevention, occluding devices, surgical gloves, tissue fixation devices
    • A61L31/04—Macromolecular materials
    • A61L31/042—Polysaccharides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B11/00—Preparation of cellulose ethers
    • C08B11/02—Alkyl or cycloalkyl ethers
    • C08B11/04—Alkyl or cycloalkyl ethers with substituted hydrocarbon radicals
    • C08B11/10—Alkyl or cycloalkyl ethers with substituted hydrocarbon radicals substituted with acid radicals
    • C08B11/12—Alkyl or cycloalkyl ethers with substituted hydrocarbon radicals substituted with acid radicals substituted with carboxylic radicals, e.g. carboxymethylcellulose [CMC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B15/00—Preparation of other cellulose derivatives or modified cellulose, e.g. complexes
    • C08B15/005—Crosslinking of cellulose derivatives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B15/00—Preparation of other cellulose derivatives or modified cellulose, e.g. complexes
    • C08B15/05—Derivatives containing elements other than carbon, hydrogen, oxygen, halogens or sulfur
    • C08B15/06—Derivatives containing elements other than carbon, hydrogen, oxygen, halogens or sulfur containing nitrogen, e.g. carbamates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
    • C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
    • C08B37/0069—Chondroitin-4-sulfate, i.e. chondroitin sulfate A; Dermatan sulfate, i.e. chondroitin sulfate B or beta-heparin; Chondroitin-6-sulfate, i.e. chondroitin sulfate C; Derivatives thereof

Abstract

Изобретение относится к пищевой промышленности. Предложен способ получения сшитых материалов на основе полисахаридов при помощи электромагнитного излучения в водном растворе, содержащем полисахарид со связанной карбаматной фотоудаляемой защитной группой (PPG с группой -NH-CO-O-) и полисахарид, содержащий альдегидную группу -СНО. Процесс сшивания проводят посредством реакции конденсации фотохимически высвобождаемой аминогруппы (-NH2) с альдегидной группой (-СНО), получая связь иминного типа (-N=CH-). Оба процесса происходят одновременно, и их можно проводить при физиологических условиях. Изобретение обеспечивает получение улучшенных материалов для тканевой инженерии, где плотность сшивания и, таким образом, механические свойства в структуре материала могут подгоняться. 3 н. и 10 з.п. ф-лы, 3 ил., 15 пр.

Description

Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к сшиванию полисахаридов при помощи фотоудаляемых защитных групп.
Уровень техники изобретения
Гидрогели представляют физически или химически сшитые полимерные структуры, которые способны поглощать большие количества воды без их растворения в водном растворе. Касательно подходящих реологических параметров, гидрогели с их свойствами похожи на живые ткани. Гидрогели используют в виде каркасов при трансплантации или регенерации тканей в случае повреждений ткани. Организацию клеток, пролиферацию клеток или определение морфогенеза можно регулировать при помощи гидрогелей. В то же время гидрогели представляют подходящий источник энергии для клеток. Эти нерастворимые трехмерные сети облегчают иммобилизацию биологически активных средств (аминокислот, пептидов, лекарственных средств, ферментов, факторов роста и пр.) и их последующее регулируемое высвобождение в желаемой концентрации, время и пространство. Из составных компонентов гидрогелей биополимеры предпочтительны относительно синтетических полимеров, особенно где конечное применение направлено на область тканевой инженерии или восстановительной медицины, и должна обеспечиваться высокая биосовместимость тестируемого материала (Slaughter V.В., Khurshid S.S., Fisher О.Z., Khademhosseini, Peppas, N.А. 2009. Adv Mater 21: 3307). Полисахариды являются подходящими полимерами благодаря их простой доступности, относительно низкой цене, превосходной биосовместимости, полезных механических свойств и многообразия структурных или функциональных вариаций. Наиболее часто используемые полисахариды для фармацевтических и биомедицинских применений представляют собой следующие.
Гиалуроновая кислота (НА) представляет собой природный гетерополисахарид гликозаминогликанового типа, образованный из D-глюкуронового и N-ацетил-D-глюкозаминового элемента, взаимосвязанных посредством β(1-3) и β(1-4) Оглюкозидной связи. НА обычно находится во многих соединительных тканях, синовиальной жидкости, водянистой влаге, коже и хрящах (Smeds K.A., Pfister-Serres A., Miki G., Dastqheib K., Inoue М., Hatchell D.L., Grinstaff M.W. 2001. J Biomed Mater Res 54: 115). Из-за ее биосовместимости НА используется в биомедицине, питании, косметике и фармацевтической промышленности.
Хондроитинсульфат (CS) представляет собой гликозаминогликан, состоящий из сульфатированного N-ацетилгалактозамина и D-глюкуроновой кислоты, который в наибольшем количестве находится во внеклеточном матриксе хряща. CS участвует в суставном метаболизме и используется в качестве терапевтических средств против дегенеративного артрита. В качестве пищевых добавок (например, Hyalgel) он играет важную роль в предотвращении остеоартроза (Bottegoni С., Muzzarelli R.A.A., Giovannini F., Busilacchi A., Gigante A. 2014: CarbPol 109: 126).
Хитозан (СН) представляет собой катионный гомополисахарид, получаемый деацетилированием хитина, и экстрагируется из экзоскелета морских ракообразных. Поскольку СН происходит из природного, возобновляемого нетоксичного и биоразлагаемого источника, он рассматривается как экологически приемлемый продукт. Его качество и свойства зависят от его чистоты и степени деацетилирования (обычно в диапазоне 70-95%), также от молекулярной массы и также от кристалличности. СН обычно используют в качестве гипохолестеринемического и бактериостатического препарата, среды для лекарственного средства или материала для образования клеточного каркаса (Pasqui D., De Cagna М., Barbucci, R. 2012. Polymers 4: 1517).
Карбоксиметилцеллюлоза натрия (CMCNa) представляет собой гидрофильное производное целлюлозы, получаемое алкилированием набухающей целлюлозы (гомополимера β-D-глюкопиранозы) при помощи хлоруксусной кислоты при основных условиях. CMCNa в комбинации с различными лекарственными средствами или необязательно совместными вспомогательными веществами в виде медицинских устройств (марли, бинта, раневых повязок) используется при терапии кожных заболеваний. Ее применяют при лечении диабетической стопы, накожных язв, послеоперационных хирургических ран, при токсическом эпидермальном некролизе, а также в качестве имплантов кожи (Pasqui D., De Cagna М., Barbucci, R. 2012. Polymers 4: 1517).
Полисахариды в своей нативной форме не образуют гидрогели. По этой причине требуется дополнительная модификация их физических свойств. Она главным образом состоит в снижении растворимости и повышении стабильности в водном растворе. Одним вариантом является химическая модификация, посредством которой снижается полярность полисахаридной цепи, например, путем блокирования карбоксильной группы, приводя к образованию сложного эфира (US 4851521, US 4965353), или путем гидрофобизации полярных гидроксильных групп (WO 1996/035720, WO 2010/105582, US 3720662).
Вторым вариантом является химическая сшивка в структуре полисахарида. Наиболее используемые реакции, приводящие к химической сшивке, включают полимеризацию (Burdick J.A., Chung с., Jia X., Randolph М.A., Langer R. 2005. Biomacromolecules 6: 386), реакции конденсации (WO 2008014787, WO 2009/108100, WO 2011/069474), реакции димеризации (ЕР 0554898 В1, ЕР 0763754 А2, US 006025444), реакции циклоприсоединения (CZ 304072), необязательно ферментативные реакции (CZ 303879). Окислительные реакции полисахаридов согласно документам WO 2011/069474 и WO 2011/069475 можно использовать для синтеза предшественников полисахаридов, которые подходят для дополнительных химических модификаций, включая реакции сшивания. Реакция дегидратации этих предшественников, таким образом, использовалась для получения α,β-ненасыщенных аналогов (CZ 304512). Деацетилирование полисахаридов согласно документу US 7345117 используют для получения полиаминопроизводных, требуемых, например, для нуклеофильного присоединения.
Однако классическое химическое сшивание также имеет несколько важных и бесспорных недостатков, т.е. неконтролируемое развитие химической реакции, недостаточную хемоселективность, использование сшивающих средств и необходимость в дополнительной очистке готовых продуктов. Комбинация классического химического сшивания полисахаридов с использованием фотореактивных линкеров может успешно преодолевать вышеуказанные ограничения. Фотореактивные линкеры содержат фотоудаляемые защитные группы (PPG), встроенные в их структуру. Получение монофункциональных фотоудаляемых карбаматных линкеров можно проводить согласно (Figueiredo R.М.,
Figure 00000001
R., Christmann М. 2006 J OrgChem 71:4147) или (Werner Т., Barrett A.G. М. 2006 J OrgChem 71:4302 или Furuta, Т., Hirayma Y., Iwamura M. 2001. OrgLett 3: 1809) путем реакции избытка бифункционального аминолинкера со средством ацилирования, несущим PPG.
Одним примером применения PPG является субстрат, маскирующийся от обнаружения в биологической системе in vitro или in vivo, так называемого включения биологического ответа на присутствие конкретного средства. Эти замаскированные субстраты называются защищенными молекулами, а в случае использования PPG используют выражение защитные группы (CG). CG помогают главным образом в биотехнологии и клеточной биологии, поскольку их фоторасщепление происходит при умеренных условиях, быстро, точно и может превосходно регулироваться во времени и пространстве. Применения CG попадают в область фотолитографического создания сложных пептидов, олигонуклеотидов или в область высвобождения биологически активных соединений в клетках или тканях (US 2002/0016472).
Другим практическим примером PPG может быть химическая реакция двух вовлеченных функциональных групп, которая не продолжается, поскольку одна из них маскируется фотоудаляемой защитной группой (PPG). После удаления PPG исходная реакционноспособная группа восстанавливается, и она реагирует с другой участвующей группой в реакционной смеси. Преимущество двухстадийного процесса, введения и расщепления PPG, таким образом облегчает контроль за ходом химической реакции. Если субстрат в реакционной смеси замаскирован (защищен), химическая реакция не происходит. Если субстрат регенерирован (открыт) в реакционной смеси, происходит химическая реакция. Количество или концентрацию замаскированного и открытого субстрата можно определить при помощи источника электромагнитного излучения как во временном аспекте (переключатель «вкл.-выкл.», импульс света), так и в пространственном аспекте (направленный свет, лазер, использование фотомаски и пр.). Другим преимуществом фоторасщепления является то, что его можно надежно применять, где другие подходы введения защитных групп не справляются. Его применяют, например, для чувствительных к рН или теплочувствительных субстратов, биоматериалов и в in vitro или in vivo применениях. Подход, раскрытый здесь, таким образом, облегчает контроль качественных параметров (правильность и плотность сшивания), а также количественных параметров (общий объем относительно части образца) сшитого материала. По этой причине готовый сшитый продукт может переходить из вязких растворов через мягкие в эластичные гели.
Выражение фотохимически регулируемая химическая реакция может представлять не только реакцию сопряжения или реакцию, приводящую к иммобилизации или, напротив, к высвобождению субстрата из структуры-носителя. Этот подход также можно применять к образованию сшитых полимерных структур посредством реакции сшивания с замаскированным субстратом, который является объектом данного патентного документа.
В литературе существует большее количество практических примеров PPG, которые подвергаются фотолизу (Green Т.W. & Wuts P.G. М., 1999, John Wiley, 3rd edition). Фотолиз (химическое расщепление) химических связей в этих группах является результатом поглощения кванта света - фотона молекулой субстрата. Фотохимическое расщепление защитной группы можно проводить непосредственным возбуждением хромофора после поглощения одного протона с желаемой энергией или путем многофотонного поглощения с последующим переносом электрона в защитную группу (US 210/0207078). В случае аминов вводимые защитные группы представляют собой карбаматные функциональные группы. Большинство используемых PPG представляют собой алкокси- или, альтернативно, нитропроизводные ароматических спиртов (
Figure 00000002
Р.,
Figure 00000003
Т., Bochet Ch. G., Blanc A, Givens R., Rubina M., Popik V., Kostikov A., Wirz J. 2013: ChemRev 113: 119; US 2008/0009630), а также гетероароматические соединения кумаринового, хинолинового, ксантанового или тиоксантонового типа (US 2002/0016472).
Применение карбаматных PPG попадает главным образом в область комбинаторного пептидного синтеза или синтеза нуклеиновых кислот (Piggot А.М. & Karuzo Р. 2005. Tetr Lett 46: 8241). Существует еще несколько патентных документов (US 2013309706 A1, US 20008028630 A1, US 20060216324 A1), в которых используют фотолиз для модификации поверхности полимерных материалов, регулируемого высвобождения биологически активного соединения или, напротив, его ковалентной иммобилизации к полимерной структуре. Однако использование PPG для контролируемого сшивания полисахаридов еще не было опубликовано. Вероятно, причиной является комбинация множества факторов, включая, например, недостаточный мольный коэффициент поглощения выбранной PPG для желаемого диапазона длин волн, низкий квантовый выход фотолиза, медленное высвобождение субстрата, низкая стабильность и гидрофобный характер PPG, образование потенциально токсичных и поглощающих дезинтегративных продуктов фотолиза, их последующая конкурирующая реакция с высвобожденным субстратом или биологическим материалом.
Сущность изобретения
Настоящее изобретение обеспечивает способ выполнения реакций сшивания в растворах полисахаридов, который основан на фотохимическом контроле процесса химического сшивания с использованием карбаматной PPG. Выражение фотохимический контроль представляет фотохимическое расщепление карбаматной связи (-NH-CO-O-), образуя соответствующую аминогруппу (-HN2), при помощи электромагнитного излучения. Выражение процесс химического сшивания представляет реакцию конденсации высвобожденной аминогруппы с альдегидной группой, образуя иминогруппу (-N=CH-). Оба одновременно протекающих процесса можно проводить при физиологически приемлемых условиях.
Преимущество предлагаемого решения по сравнению со способами сшивания полисахаридов, используемыми до настоящего времени, состоит во временном и пространственном контроле хода сшивания, что облегчает получение улучшенных материалов для тканевой инженерии, где можно влиять на плотность сшивок и, таким образом, также на механические свойства в структурах материалов. Фотохимический контроль очень предпочтителен в случаях, когда желательно регулировать рост клеток в заданной среде, что важно, например, для биоматериалов, разработанных для восстановления нервных тканей (Perale G. et. al 2011. ACS Chem. Neursci. 2: 336), или при получении инъецируемых гидрогелей в попытке минимизировать влияние классической инвазивной хирургии (Pasqui D., De Cagna М., Barbucci R. 2012. Polymers 4: 1517).
При помощи комбинации классического химического сшивания с фотореактивными производными полисахаридов можно достигать преимуществ временного контроля хода реакции сшивания таким образом, чтобы реакция проходила только когда соответствующий материал облучают электромагнитным излучением. При нормальных условиях реакция сшивания происходит до тех пор, пока не закончится исходный материал, что нежелательно в случаях, когда желательны конкретные свойства сшитого продукта, такие как клейкость материала, размер пор, проницаемость или биоразлагаемость. Также пространственный контроль хода реакции в виде подходящей фотомаски или направленного света обеспечивает местное протекание реакции сшивания в реакционной смеси. Типичный пример представляет собой фотолитографический подход к образованию гидрогеля, в котором используют свет для переноса геометрической формы фотомаски на светочувствительный субстрат (Khetan S., Burdick J.А. (2010). Biomaterials, 31: 8228).
Другим преимуществом введения PPG в структуру полисахарида является хемоспецифический ход фотолиза и, во-вторых, также реакции сшивания. Свет с желаемой энергией возбуждает только те PPG, которые фотолитически создают реакционноспособные сайты для последующей реакции сшивания на точно определенных сайтах в полимерной структуре полисахарида. Кроме того, фотолиз и реакции сшивания происходят при физиологических условиях без необходимости в дополнительном сшивающем средстве, органическом растворителе или выделении готовых сшитых продуктов, которые образуют гели в водной среде, имеют улучшенную гидролитическую стабильность, проявляют сорбционные свойства и обеспечивают удержание жидкостей и присутствующих средств. Применение этих сшитых полисахаридов относится к области тканевой инженерии, восстановительной медицины или биомедицинским применениям в виде каркасов, имплантов или носителей лекарственных средств.
Карбаматные производные полисахаридов согласно настоящему изобретению понимают как производные, которые имеют карбаматные PPG, встроенные в их структуру или непосредственно, или посредством соответствующего линкера, полученного из диамина, аминоспирта, дигидразида, аминокислоты, алкоксиамина, в конечном итоге посредством линкера с комбинацией следующих групп: -ОН, -NH2, -O-NH2, -СООН, -CONHNH2, -NH-NH2, -SH.
Также определено, что карбаматная PPG группа получена из ароматического или гетероароматического спирта, который проявляют поглощение электромагнитного излучения в диапазоне 320-400 нм, предпочтительно 330-370 нм.
Карбаматная PPG фотолизируется (фотохимически расщепляется) при облучении электромагнитным излучением в ароматический спирт, диоксид углерода и соединение с открытой аминной или гидразидной группой. Эта аминная или гидразидная группа взаимодействует с альдегидной группой другого (незамещенного) полисахарида, образуя иминную или гидразоновую группу. Как первый, так и второй полисахарид (полисахарид 1 и полисахарид 2) могут иметь одинаковую или различную структуру типа гиалуроновой кислоты, хондроитинсульфата или целлюлозы, в конце концов, их фармацевтически приемлемых производных и/или солей. Сшивание производных полисахаридов происходит посредством реакций конденсации. Фотолиз карбаматных PPG требует присутствия воды, и он происходит на основании облучения материала электромагнитным излучением и только после него. Фотолиз также происходит одновременно с реакцией сшивания и может проводиться при физиологических условиях или в присутствии других добавок (органических, неорганических солей или буферов).
Настоящее изобретение, таким образом, раскрывает способ осуществления реакции сшивания в водных растворах полисахаридов, который фотохимически регулируется. Из-за фотохимического контроля необходимо присутствие карбаматной фотоудаляемой группы (PPG), поскольку карбаматная группа защищает аминогруппу (-NH2) производного полисахарида от ранней или нежелательной реакции с альдегидной группой другого полисахарида, который присутствует в реакционной смеси. Если аминогруппа не защищена, происходит неконтролируемая реакция без какого-либо влияния на ее ход.
Если присутствует защитная PPG группа, реакция между аминогруппой и альдегидной группой происходит в водной реакционной смеси только тогда, когда реакционную смесь подвергают электромагнитному излучению, предпочтительно УФА в диапазоне длин волн от 320 до 400 нм. Это облегчает временной контроль реакции, например, при помощи переключателя источника облучения или затемнения реакционной смеси. Плотность сшивания увеличивается с повышением времени облучения, смотрите фиг. 1, примеры 8 и 9. Пространственный контроль реакции, например, при помощи фотомаски или луча света, происходит только в облучаемых местах, смотрите фиг. 2.
Настоящее изобретение, в частности, относится к способу получения сшитых полисахаридных материалов согласно общей формуле (I)
Figure 00000004
где полисахарид 1 и полисахарид2 являются одинаковыми или различными полисахаридами, a R1 представляет собой C1-С30алкильный остаток, C1-С30алкиларильный остаток или C1-С30алкилгетероарильный остаток, необязательно содержащий один или несколько одинаковых или различных гетероатомов, выбранных из группы, включающей N, О, S. Способ проводят следующим образом: водный раствор альдегида полисахарида2 общей формулы III
Figure 00000005
где степень замещения альдегида в полисахариде2 находится в диапазоне от 1 до 50%, добавляют в водный раствор полисахарида 1, замещенного аминной группой, модифицированной фотоудаляемой группой, общей формулы (И)
Figure 00000006
где R1 определен выше; R2 представляет собой ароматическую систему, и где степень замещения карбамата находится в диапазоне от 1 до 10%.
Реакционную смесь подвергают электромагнитному облучению, и в то же время происходит деоксигенирование смеси.
Реакцию можно выразить при помощи общей схемы 1:
Figure 00000007
Схема 1 фактически содержит две одновременно происходящие реакции, фотолиз PPG в полисахариде 1 и реакцию конденсации/сшивания амина полисахарида 1 с альдегидом полисахарида 2:
Figure 00000008
Figure 00000009
Азот или NH-группа в формулах (I) и (II) указаны в дополнение, хотя это часть группы R1. Также группа СН в формуле (I) или СН=O в формуле (III) указана в дополнение, хотя это часть полисахарида2. Специалисты в данной области техники поймут, что это сделано только для лучшего понимания и ясности реакции и реакционных субстратов.
Как представлено выше, степень замещения PPG в полисахариде 1 находится в диапазоне от 1 до 10%, предпочтительно от 3 до 10%, и его молекулярная масса составляет от 10 до 400 кДа, предпочтительно от 20 до 300 кДа, более предпочтительно от 20 до 100 кДа. Степень замещения полисахарида2 до альдегида находится в диапазоне от 1 до 50%, предпочтительно от 3 до 25%, и его молекулярная масса составляет от 10 до 800 кДа, предпочтительно от 50 до 250 кДа. Предпочтительные полисахариды включают, например, гиалуроновую кислоту, хондроитинсульфат, целлюлозу и их фармацевтически приемлемые производные и/или соли.
R1 предпочтительно выбирают из группы, включающей дигидразидадипат и гексаметилендиамин, a R2 предпочтительно представляет собой конденсированную ароматическую систему, более предпочтительно выбранную из группы, включающей пирен, антрацен, фенантен, перилен, антрахинон, кумарин и их замещенные производные, которые могут содержать атомы С, Н, О, S, N в своей структуре и проявляют поглощение электромагнитного излучения, наиболее предпочтительно R2 представляет собой пирен.
Массовое отношение полисахарида 1 к полисахариду 2 предпочтительно находится в диапазоне от 1:2 до 2:1. Водные растворы полисахаридов 1 и 2 могут также содержать водорастворимые средства, выбранные из группы, включающей неорганические соли или буферы, предпочтительно фосфатный буфер, тогда как рН раствора находится в диапазоне от 6,5 до 7,5, предпочтительно 7,0.
Реакционную смесь, полученную способом, описанным в настоящем изобретении, подвергают электромагнитному излучению в течение 0,25-2 часов, предпочтительно 0,5-1 часа, при температуре от 10 до 50°С, предпочтительно от 20 до 35°С, тогда как используемое электромагнитное излучение имеет длину волны в диапазоне 320-400 нм, предпочтительно 330-370 нм. Как указано выше, преимущество настоящего изобретения состоит в том, что реакцию можно контролировать по времени при помощи переключения источника электромагнитного излучения, или импульсного источника электромагнитного излучения, или затемнения реакционной смеси. Настоящее изобретение дополнительно также обеспечивает пространственный контроль реакции при помощи фотомаски, направленного электромагнитного излучения или пучка электромагнитного излучения.
Материал, полученный согласно настоящему изобретению, можно использовать в области тканевой инженерии или восстановительной медицины в виде каркасов, наполнителей или в области биомедицины в виде носителей лекарственных средств на основе фоточувствительных материалов с регулируемым высвобождением биологически активного средства.
Подробное описание фигур
Фиг. 1 представляет использование перевернутого способа определения гелеобразования в реакционной смеси, (а) Раствор двухкомпонентной реакционной смеси (Pmoc-DHA-HA и НА-альдегид) перед фотолизом. (b) Гидрогель сшитого продукта (НА-DHA-HA) после фотолиза, (с) Гидрогель сшитого продукта (HA-DHA-HA) через 1 час в PBS (рН=7,4, с=0,9%, масс./об.).
Фиг. 2 показывает пространственный контроль реакции сшивания (Pmoc-DHA-HA и НА-альдегид) при помощи фотомаски в форме полукруга на 50% поверхности реакционной смеси, (а) Реакционная смесь после фотолиза, (b) реакционная смесь через 15 минут в PBS (рН=7,4, с=0,9% масс./об.) и декантирования раствора PBS, (с) реакционная смесь через 15 минут в PBS (рН=7,4, с=0,9% масс./об.) и добавления новой порции PBS.
Фиг. 3 показывает фотографии с микроскопа лиофилизированных образцов, (а): поверхность гидрогеля (100х), (b) сечение гидрогеля (100х), (с) сечение гидрогеля через 1 час в PBS (рН=7,4, с=0,9% мас./об.).
Примеры
Выражение эквивалент (экв.), используемое в настоящем документе, относится к дисахариду гиалуроновой кислоты, дисахариду хондроитинсульфата или моносахариду карбоксиметилцеллюлозы натрия, если не указано иное. Процент используется как массовый процент, если не указано иное.
Молекулярная масса исходной гиалуроновой кислоты (источник: Contipro Pharma a.s., Дольни-Доброуч, Чешская Республика) представляет собой среднюю молекулярную массу в диапазоне от 104 до 106 г⋅моль-1 и была определена при помощи SEC-MALLS.
Молекулярная масса исходного хондроитинсульфата (источник: Sigma-Aldrich s.r.o., Прага, Чешская Республика) представляет собой среднюю молекулярную массу в диапазоне от 4×104 до 5×104 Да или г⋅моль-1 и была определена при помощи способа SEC-MALLS. Соотношение хондроитин-4-сульфата (C4S) и хондроитин-6-сульфата (C6S) составляло 2:3. Материал выделяли из животного материала.
Молекулярная масса исходной карбоксиметилцеллюлозы натрия (источник: Sigma-Aldrich s.r.o., Прага, Чешская Республика) представляет собой среднюю молекулярную массу в диапазоне от 22×104 до 25×104 г⋅моль-1 и была определена при помощи SEC-MALLS. Степень алкилирования карбоксиметильной группой составляла 70%.
Степень замещения или модификации структуры гликозаминогликанов определяли посредством следующего расчета:
DS = степень замещения = 100% * (мольное количество заместителя связи или модифицированного дисахарида) / (мольное количество всех дисахаридов)
Степень модификации структуры карбоксиметилцеллюлозы натрия определяли посредством следующего расчета:
DS = степень замещения = 100% * (мольное количество заместителя связи или модифицированного моносахарида) / (мольное количество всех моносахаридов)
PPG = фотоудаляемая защитная группа
DHA = дигидразидадипат
HMD = 1,6-гексаметилендиамин
Pmoc = пирен-1-илметоксикарбонил
УФА = ближнее ультрафиолетовое излучение в диапазоне длин волн 320-400 нм, излучаемое ртутной точеной лампы - источника длинноволнового ультрафиолетового излучения «черного света», модель В-100А (UVP) с заявленной λмакс.=365 нм.
Морфологию поверхности высушенных сублимацией гелей анализировали при помощи сканирующего электронного микроскопа Zeiss Ultra Plus.
Деацетилированную гиалуроновую кислоту получали при помощи деацетилирования гидразином согласно Buffa R. и соавт. в документе CZ 304512.
Окисление полисахаридов проводили согласно Buffa R и соавт.: документы WO 2011069474 и WO 2011069475.
Пример 1. Получение Pmoc-дигидразидадипата гиалуроновой кислоты (Pmoc-DHA-НА)
НА-альдегид (100 мг, 0,265 ммоль, DS=43%, Mw=1,35×105 г/моль) растворяли в 5 мл дистиллированной воды (раствор I). Pmoc-DHA (54 мг, 0,126 ммоль) растворяли в 5 мл DMSO (раствор II). Оба раствора смешивали и приводили в реакцию в течение 24 часов при комнатной температуре. На второй стадии добавляли PicBH3 (81 мг, 0,754 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 48 часов при комнатной температуре. Продукт осаждали при помощи IPА.
Figure 00000010
DS=10%, Mw=0,34×105 г/моль, практический выход 85%
Figure 00000011
Figure 00000012
Пример 2. Получение Pmoc-гексаметилендиамина гиалуроновой кислоты (Pmoc-HMD-HA)
НА-альдегид (100 мг, 0,265 ммоль, DS=10%, Mw=1,92×105 г/моль) растворяли в 5 мл дистиллированной воды (раствор I). Pmoc-HMD (19 мг, 0,05 ммоль) растворяли в 5 мл DMSO (раствор II). Оба раствора смешивали и приводили в реакцию в течение 24 часов при комнатной температуре. На второй стадии добавляли PicBH3 (81 мг, 0,754 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 48 часов при комнатной температуре. Продукт получали осаждением при помощи IPA.
Figure 00000013
DS=7%, Mw=1,92×105 г/моль, практический выход 71%.
Figure 00000014
Figure 00000015
Пример 3. Получение Pmoc-дигидразидадипата хондроитинсульфата (Pmoc-DHA-CS)
CS-альдегид (50 мг, 0,10 ммоль, DS=14%, Mw=3,0-4,0×105 г/моль) растворяли в 2,5 мл дистиллированной воды (раствор I). Pmoc-DHA (8,7 мг, 0,02 ммоль, 0,2 экв.) растворяли в 2,5 мл DMSO (раствор II). Оба раствора смешивали и приводили в реакцию в течение 24 часов при комнатной температуре. На второй стадии добавляли PicBH3 (32 мг, 0,3 ммоль, 3 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение 48 часов при комнатной температуре. Продукт получали осаждением при помощи IPA.
Figure 00000016
DS=5-6%, Mw=3,0-4,0×105 г/моль, практический выход 84%
Figure 00000017
Figure 00000018
Пример 4. Получение Pmoc-дигидразидадипата карбоксиметилцеллюлозы натрия (Pmoc-DHA-CMCNa)
CMCNa-альдегид (100 мг, 0,45 ммоль, DS=4-5%, Mw=8,2×105 г/моль) растворяли в 5 мл дистиллированной воды (раствор I). Pmoc-DHA (19,4 мг, 0,045 ммоль, 0,1 экв.) растворяли в 5 мл DMSO (раствор II). Оба раствора смешивали и приводили в реакцию в течение 24 часов при комнатной температуре. На второй стадии добавляли PicBH3 (144 мг, 1,345 ммоль, 3 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение 48 часов при комнатной температуре. Продукт получали осаждением при помощи IPA.
Figure 00000019
DS=2%, Mw=0,80×105 г/моль, практический выход 88%
Figure 00000020
Пример 5. Получение Pmoc-HMD-HA
Pmoc-1-H-имидазолкарбоксилат (326 мг, 1 ммоль), растворенный в 20 мл THF, добавляли в 20 мл водного раствора HMD-HA (200 мг, 0,5 ммоль, DS=36%) и реакционную смесь перемешивали в течение 24 часов при комнатной температуре. Продукт (DS=8%, Y=40%) получали осаждением при помощи IPA.
Figure 00000021
Структурный анализ продукта показан в примере 2.
Пример 6. Получение Pmoc-DHA-HA
Pmoc-1-H-имидазолкарбоксилат (326 мг, 1 ммоль), растворенный в 20 мл THF, добавляли в 20 мл водного раствора DHA-HA (200 мг, 0,5 ммоль, DS=25%) и реакционную смесь перемешивали в течение 24 часов при комнатной температуре. Продукт (DS=6%, Y=45%) получали осаждением при помощи IPA.
Figure 00000022
Структурный анализ продукта показан в примере 1.
Пример 7. Получение Pmoc-деацетилированной гиалуроновой кислоты (Pmoc-DEA-НА)
Pmoc-1-H-имидазолкарбоксилат (326 мг, 1 ммоль), растворенный в 20 мл THF, добавляли в 20 мл водного раствора DEA-HA (200 мг, 0,5 ммоль, DS=32%, Mw=0,37×105 г/моль) и реакционную смесь перемешивали в течение 24 часов при 40°С. Продукт получали осаждением при помощи IPA.
Figure 00000023
DS=7%, практический выход 35%
Figure 00000024
Пример 8. Фотолиз Pmoc-DHA-HA в присутствии НА-альдегида и сшивание
Способ 1: Pmoc-DHA-HA (10 мг, 0,025 ммоль, DS=10%, Mw=2,64×105 г/моль) растворяли в 2 мл D2O в кварцевой колбе. Добавляли НА-альдегид (10 мг, 0,025 ммоль, DS=11%, Mw=0,66×105 г/моль). Образец дезоксигенировали потоком азота и облучали в течение 1 часа в УФА в атмосфере N2 при 25°С, рН=7, при перемешивании, в то же время образцы отбирали с 15-минутными интервалами для анализа 1Н-ЯМР. Повышение плотности сшивания (δ=7,49 части на миллион, HA-CH=N-HA) контролировали с конкретными временными интервалами (15/30/45/60 мин) на уровне (18/31/66/85%), соответственно.
Пример 9. Фотолиз Pmoc-DHA-HA в присутствии α,β-ненасыщенного НА-альдегида и сшивание
Способ 1: Pmoc-DHA-HA (10 мг, 0,025 ммоль, DS=10%, Mw=2,64×105 г/моль) растворяли в 2 мл D2O в кварцевой колбе. Добавляли α,β-ненасыщенный НА-альдегид (10 мг, 0,025 ммоль, DS=5%, Mw=0,68×105 г/моль). Образец дезоксигенировали в потоке N2 и облучали в течение 1 часа в УФА в атмосфере N2 при 25°С, рН=7, при перемешивании, в то же время образцы для анализа 1H-ЯМР отбирали с 15-минутными интервалами. Повышение плотности сшивания (δ=7,58 части на миллион (Н6) и 5,60 части на миллион (Н4), HA-CH=N-HA) контролировали с конкретными временными интервалами (15/30/45/60 мин) на уровне (20/32/48/75%), соответственно.
Пример 10. Фотолиз Pmoc-DHA-HA в присутствии насыщенного НА-альдегида и сшивание
Способ 1: Pmoc-DHA-HA (10 мг, 0,025 ммоль, DS=10%, Mw=2,64×105 г/моль) растворяли в 2 мл D2O в кварцевой колбе. Добавляли НА-альдегид (10 мг, 0,025 ммоль, DS=11%, Mw=0,66×105 г/моль). Образец дезоксигенировали в потоке N2 и облучали в течение 1 часа в УФА в атмосфере N2 при 25°С, рН=7, при перемешивании, тогда как аликвоты для анализа 1Н-ЯМР отбирали с 15-минутными интервалами. После 60 минут воздействия УФ образовывалось 85% гидразона (δ=7,49 части на миллион, HA-CH=N-НА).
Способ 2: Pmoc-DHA-HA (10 мг, 0,025 ммоль, DS=10%, Mw=2,64×105 г/моль) растворяли в 2 мл D2O в кварцевой колбе. Добавляли НА-альдегид (10 мг, 0,025 ммоль, DS=45%, Mw=0,35×105 г/моль). Образец дезоксигенировали в потоке азота и облучали в течение 1 часа в УФА в атмосфере N2 при 25°С, рН=7, при перемешивании, причем образцы для анализа 1Н-ЯМР отбирали с 15-минутными интервалами. После 60 минут воздействия УФ образовывалось 95% гидразона (δ=7,49 части на миллион, HA-CH=N-НА).
Способ 3: Pmoc-DHA-HA (10 мг, 0,025 ммоль, DS=10%, Mw=2,64×105 г/моль) растворяли в 2 мл PBS (с=0,9%, рН=7,4) в кварцевой колбе. Добавляли НА-альдегид (10 мг, 0,025 ммоль, DS=11%, Mw=5,10×105 г/моль). Образец дезоксигенировали в потоке азота и облучали в течение 1 часа в УФА в атмосфере N2 при 37°С, рН=7, при перемешивании. После 1 часа облучения УФА вязкость раствора повышалась.
Способ 4: Pmoc-DHA-HA (10 мг, 0,025 ммоль, DS=10%, Mw=2,64×105 г/моль) растворяли в 2 мл PBS (с=0,9%, рН=7,4) в кварцевой колбе. Добавляли НА-альдегид (10 мг, 0,025 ммоль, DS=11%, Mw=5,1×105 г/моль). Образец дезоксигенировали в потоке азота и облучали в течение 1 часа в УФА в атмосфере N2 при 50°С, при 25°С, рН=7, при перемешивании. После 1 часа облучения УФА вязкость раствора повышалась.
Способ 5: Pmoc-DHA-HA (10 мг, 0,025 ммоль, DS=10%, Mw=2,64×105 г/моль) растворяли в 3 мл PBS (с=0,9%, рН=7,4) в кварцевой колбе. Добавляли НА-альдегид (20 мг, 0,050 ммоль, DS=11%, Mw=5,10×105 г/моль). Образец дезоксигенировали в потоке азота и облучали в течение 1 часа в УФА в атмосфере N2, при 25°С, рН=7, при перемешивании. После 1 часа облучения УФА образовывался гель.
Способ 6: Pmoc-DHA-HA (10 мг, 0,025 ммоль, DS=10%, Mw=2,64×105 г/моль) растворяли в 3 мл PBS (с=0,9%, рН=7,4) в кварцевой колбе. Добавляли НА-альдегид (20 мг, 0,050 ммоль, DS=11%, Mw=5,10×105 г/моль). Образец дезоксигенировали в потоке азота и облучали в течение 0,25 часа в УФА в атмосфере N2, при 25°С, рН=6,5, при перемешивании. После 1 часа облучения УФА вязкость раствора повышалась.
Способ 7: Pmoc-DHA-HA (10 мг, 0,025 ммоль, DS=10%, Mw=2,64×105 г/моль) растворяли в 3 мл PBS (с=0,9%, рН=7,4) в кварцевой колбе. Добавляли НА-альдегид (20 мг, 0,050 ммоль, DS=11%, Mw=5,10×105 г/моль). Образец дезоксигенировали в потоке азота и облучали в течение 2 часов в УФА в атмосфере N2 при 25°С, рН=7,5, при перемешивании. После 2 часов облучения УФА образовывался гель.
Figure 00000025
DS=3%, гидразоновая группа
Figure 00000026
Пример 11. Фотолиз Pmoc-DHA-HA в присутствии α,β-ненасыщенного НА-альдегида и сшивание
Способ 1: Pmoc-DHA-HA (10 мг, 0,025 ммоль, DS=10%, Mw=2,64×105 г/моль) растворяли в 2 мл D2O в кварцевой колбе. Добавляли α,β-ненасыщенный НА-альдегид (10 мг, 0,025 ммоль, DS=5%, Mw=0,68×10s г/моль). Образец дезоксигенировали в потоке азота и облучали в течение 1 часа в УФА в атмосфере N2, при 25°С, рН=7, при перемешивании, причем образцы для анализа 1H-ЯМР отбирали с 15-минутными интервалами. После 60 минут воздействия УФА образовывались 75% гидразона (δ=7,58 части на миллион (Н6) и 5,60 части на миллион (Н4), HA-CH=N-HA).
Способ 2: Pmoc-DHA-HA (10 мг, 0,025 ммоль, DS=10%, Mw=2,64×105 г/моль) растворяли в 2 мл PBS (0,9%, рН=7,4) в кварцевой колбе. Добавляли α,β-ненасыщенный НА-альдегид (10 мг, 0,025 ммоль, DS=4%, Mw=2,05×105 г/моль). Образец дезоксигенировали в потоке азота и облучали в течение 1 часа в УФА в атмосфере N2, при 25°С, рН=7, при перемешивании. После 1 часа облучения вязкость раствора повышалась.
Способ 3: Pmoc-DHA-HA (10 мг, 0,025 ммоль, DS=10%, Mw=2,64×105 г/моль) растворяли в 3 мл PBS (0,9%, рН=7,4) в кварцевой колбе. Добавляли α,β-ненасыщенный НА-альдегид (20 мг, 0,05 ммоль, DS=4%, Mw=2,05×105 г/моль). Образец дезоксигенировали в потоке азота и облучали в течение
Figure 00000027
в УФА в атмосфере N2, при 25°С, рН=7, при перемешивании. После 1 часа облучения УФА вязкость раствора повышалась.
Способ 4: Pmoc-DHA-HA (20 мг, 0,05 ммоль, DS=10%, Mw=2,64×105 г/моль) растворяли в 3 мл PBS (0,9%, рН=7,4) в кварцевой колбе. Добавляли α,β-ненасыщенный НА-альдегид (10 мг, 0,025 ммоль, DS=4%, Mw=2,05×105 г/моль). Образец дезоксигенировали в потоке азота и облучали в течение 1 часа в УФА в атмосфере N2, при 25°С, рН=7, при перемешивании. После 1 часа облучения УФА вязкость раствора повышалась.
Figure 00000028
DS=3%, гидразоновая группа
Figure 00000029
Пример 12. Фотолиз Pmoc-DHA-CS в присутствии насыщенного НА-альдегида и сшивание
Способ 1: Pmoc-DHA-CS (10 мг, 0,020 ммоль, DS=5%, Mw=2-4×104 г/моль) растворяли в 1 мл D2O в кварцевой колбе. Добавляли НА-альдегид (8 мг, 0,020 ммоль, DS=33%, Mw=0,40×105 г/моль). Образец дезоксигенировали в потоке азота и облучали в течение 1 часа в УФА в атмосфере N2, при 25°С, рН=7, при перемешивании. После 60 минут воздействия УФА образовывались 100% гидразона (δ=7,60 части на миллион, НА-CH=N-DHA-CS).
Способ 2: Pmoc-DHA-CS (10 мг, 0,020 ммоль, DS=5%, Mw=2-4×104 г/моль) растворяли в 1 мл PBS (с=0,9%, рН=7,4) в кварцевой колбе. Добавляли НА-альдегид (8 мг, 0,025 ммоль, DS=33%, Mw=0,40×105 г/моль). Образец дезоксигенировали в потоке азота и облучали в течение 1 часа в УФА в атмосфере N2, при 25°С, рН=7, при перемешивании. После 1 часа облучения УФА образовывалось 70% гидразона.
Figure 00000030
DS=5%, гидразоновая группа
Figure 00000031
Пример 13. Фотолиз Pmoc-DHA-CMCNa в присутствии насыщенного НА-альдегида и сшивание
Способ 1: Pmoc-DHA-CMCNa(10 мг, 0,038 ммоль, DS=3-4%, Mw=6-8×104 г/моль) растворяли в 1 мл D2O в кварцевой колбе. Добавляли НА-альдегид (15 мг, 0,038 ммоль, DS=33%, Mw=0,40×105 г/моль). Образец дезоксигенировали в потоке азота и облучали в течение 1 часа в УФА в атмосфере N2, при 25°С, рН=7. После 60 минут воздействия УФА образовывались 100% гидразона (δ=7,55 и 7,60 части на миллион, HA-CH=N-DHA-CMC).
Способ 2: Pmoc-DHA-CMCNa (10 мг, 0,038 ммоль, DS=3-4%, Mw - 6-8×104 г/моль) растворяли в 1 мл PBS (с=0,9%, рН=7,4) в кварцевой колбе. Добавляли НА-альдегид (15 мг, 0,038 ммоль, DS=33%, Mw=0,40×105 г/моль). Образец дезоксигенировали в потоке азота и облучали в течение 1 часа в УФА в атмосфере N2, при 25°С, рН=7, при перемешивании. После 1 часа облучения УФА образовывалось 90% гидразона.
Figure 00000032
DS=4%, гидразоновая группа
Figure 00000033
Пример 14 Фотолиз Pmoc-DHA-CS в присутствии насыщенного CS-альдегида и сшивание
Pmoc-DHA-CS (10 мг, 0,020 ммоль, DS=5%, Mw=2-4×104 г/моль) растворяли в 1 мл PBS (с=0,9%, рН=7,4) в кварцевой колбе. Добавляли CS (10 мг, 0,02 ммоль, DS=5%). Образец дезоксигенировали в потоке азота и облучали в течение 1 часа в УФА в атмосфере N2, при 25°С, рН=7, при перемешивании. После 60 минут облучения УФА вязкость раствора повышалась.
Figure 00000034
1Н-ЯМР (D2O)δ5 7,55-7,60 (bs, 1Н, -N=CH-) части на миллион
Пример 15. Фотолиз Pmoc-DHA-CMCNa в присутствии CMCNa-альдегида и сшивание
Pmoc-DHA-CMCNa (10 мг, 0,038 ммоль, DS=3-4%, Mw=0,60-0,80×105 г/моль) растворяли в 1 мл PBS (с=0,9%, рН=7,4) в кварцевой колбе. Добавляли CMCNa-альдегид (9 мг, 0,038 ммоль, DS=3-4%, Mw=0,6×105 г/моль). Образец дезоксигенировали в потоке азота и облучали в течение 1 часа в УФА в атмосфере N2, при 25°С, рН=7, при перемешивании. После 60 минут облучения УФА вязкость раствора повышалась.
Figure 00000035
1Н-ЯМР (D2O) δ 7,55-7,60 (bs, 1H, -N=CH-) части на миллион

Claims (21)

1. Способ получения сшитых полисахаридных материалов согласно общей формуле (I)
Figure 00000036
где полисахарид1 и полисахарид2 являются одинаковыми или различными полисахаридами, выбранными из группы, включающей гиалуроновую кислоту, хондроитинсульфат, карбоксиметилцеллюлозу и их фармацевтически приемлемые производные и/или соли, и R1 представляет собой C1-С30алкильный остаток, C1-С30алкиларильный остаток или C1-С30алкилгетероарильный остаток, необязательно содержащий один или несколько одинаковых или различных гетероатомов, выбранных из группы, включающей N, О, S, отличающийся тем, что
водный раствор альдегида полисахарида 2 общей формулы III
Figure 00000037
где степень замещения альдегида в полисахариде2 находится в диапазоне от 1 до 50%, добавляют в водный раствор полисахарида 1, замещенного на аминогруппе фотоудаляемой группой, согласно общей формуле II
Figure 00000038
где R1 определен выше; R2 представляет собой ароматическую систему, и где степень замещения карбамата в полисахариде 1 находится в диапазоне от 1 до 10%,
и полученную смесь одновременно подвергают электромагнитному облучению и деоксигенированию.
2. Способ получения по п. 1, отличающийся тем, что степень замещения карбамата в полисахариде 1 находится в диапазоне от 3 до 10%, а его молекулярная масса составляет от 10 до 400 кДа, предпочтительно от 20 до 300 кДа, более предпочтительно от 20 до 100 кДа.
3. Способ получения по п. 1, отличающийся тем, что степень замещения альдегида в полисахариде2 находится в диапазоне от 3 до 25%, а его молекулярная масса составляет от 10 до 800 кДа, предпочтительно от 50 до 250 кДа.
4. Способ получения по п. 1, отличающийся тем, что R1 выбирают из группы, включающей дигидразид адипиновой кислоты и гексаметилендиамин.
5. Способ получения по п. 1, отличающийся тем, что R2 выбирают из группы, включающей пирен, антрацен, фенантрен, перилен, антрахинон, кумарин и их замещенные производные, которые могут содержать атомы С, Н, О, S, N в своей структуре и которые проявляют поглощение электромагнитного излучения.
6. Способ получения по п. 1, отличающийся тем, что массовое отношение полисахарида 1 к полисахариду 2 находится в диапазоне от 1:2 до 2:1.
7. Способ получения по п. 1, отличающийся тем, что смесь подвергают электромагнитному облучению в течение 0,25-2 часов, предпочтительно 0,5-1 часа, при температуре от 10 до 50°С, предпочтительно от 25 до 35°С.
8. Способ получения по п. 1, отличающийся тем, что водные растворы полисахаридов 1 и 2 также содержат водорастворимые средства, выбранные из группы, включающей неорганические соли или буферы, предпочтительно фосфатный буфер, причем рН раствора находится в диапазоне от 6,5 до 7,5, предпочтительно 7,0.
9. Способ получения по п. 1, отличающийся тем, что используют электромагнитное излучение с длиной волны 320-400 нм, предпочтительно 330-370 нм.
10. Способ получения по п. 1, отличающийся тем, что реакцию контролируют в отношении времени посредством переключения источника электромагнитного излучения, или посредством импульсного источника электромагнитного излучения, или посредством затемнения реакции.
11. Способ получения по п. 1, отличающийся тем, что реакцию контролируют в отношении пространства посредством фотомаски, направленного электромагнитного излучения или пучка электромагнитного излучения.
12. Применение материала, полученного способом по п. 1, в области тканевой инженерии, восстановительной медицины в виде каркасов, наполнителей.
13. Применение материала, полученного способом по п. 1, для доставки лекарственного средства.
RU2017146010A 2015-06-15 2016-06-14 Способ сшивания полисахаридов при помощи фотоудаляемых защитных групп RU2713295C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ2015-398A CZ2015398A3 (cs) 2015-06-15 2015-06-15 Způsob síťování polysacharidů s využitím fotolabilních chránicích skupin
CZPV2015-398 2015-06-15
PCT/CZ2016/000065 WO2016202314A1 (en) 2015-06-15 2016-06-14 Method of crosslinking of polysaccharides using photoremovable protecting groups

Publications (3)

Publication Number Publication Date
RU2017146010A RU2017146010A (ru) 2019-07-15
RU2017146010A3 RU2017146010A3 (ru) 2019-08-28
RU2713295C2 true RU2713295C2 (ru) 2020-02-04

Family

ID=56549989

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2017146010A RU2713295C2 (ru) 2015-06-15 2016-06-14 Способ сшивания полисахаридов при помощи фотоудаляемых защитных групп

Country Status (9)

Country Link
US (1) US10759878B2 (ru)
EP (1) EP3307790B1 (ru)
JP (1) JP6812369B2 (ru)
KR (1) KR20180019658A (ru)
BR (1) BR112017026859B1 (ru)
CZ (1) CZ2015398A3 (ru)
ES (1) ES2907987T3 (ru)
RU (1) RU2713295C2 (ru)
WO (1) WO2016202314A1 (ru)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111560085B (zh) * 2019-10-29 2020-12-18 皖西学院 壳聚糖荧光探针、制备方法及其应用
CN112778437B (zh) * 2020-12-31 2022-07-15 北京科华微电子材料有限公司 一种天然多糖改性树脂及其制备方法和应用、光刻胶
CN116082534A (zh) * 2022-12-26 2023-05-09 临沂大学 一种海藻酸衍生物、海藻酸衍生物铵盐/石墨烯复合材料及其制备方法和应用

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2146686C1 (ru) * 1995-09-18 2000-03-20 Интернэшнл Бизнес Машинз Корпорейшн Структура материала, содержащего поперечно-сшитый полимер биологического происхождения
EP1023327B1 (de) * 1997-10-06 2003-04-16 Henkel Kommanditgesellschaft auf Aktien Verfahren zur Herstellung von verzögert wasserlöslichen Polysacchariden
RU2230073C2 (ru) * 1998-11-11 2004-06-10 Фармила-Теа Фармасьютичи С.П.А. Способ поперечного сшивания карбоксилированных полисахаридов
WO2011069475A2 (en) * 2009-12-11 2011-06-16 Contipro C A.S. A method of preparation of an oxidized derivative of hyaluronic acid and a method of modification thereof
US20130303748A1 (en) * 2012-05-10 2013-11-14 Actamax Surgical Materials, Llc Method for making aldehyde-functionalized polysaccharides
RU2540667C2 (ru) * 2009-05-11 2015-02-10 Теоксан Способ получения сшитого геля

Family Cites Families (185)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3075527A (en) 1960-06-02 1963-01-29 Chemway Corp Sterile medicated strips
US3720662A (en) 1971-09-13 1973-03-13 Nat Starch Chem Corp Preparation of starch esters
US3728223A (en) 1971-10-08 1973-04-17 Amano Pharma Co Ltd Production of hyaluronidase from a strain of streptomyces
GB1527592A (en) 1974-08-05 1978-10-04 Ici Ltd Wound dressing
CH628088A5 (en) 1975-09-17 1982-02-15 Dresden Arzneimittel Process for obtaining streptococcal metabolic products
US4205025A (en) 1975-12-22 1980-05-27 Champion International Corporation Synthetic polymeric fibrids, fibrid products and process for their production
JPS6033474B2 (ja) 1978-05-11 1985-08-02 藤沢薬品工業株式会社 新規なヒアルロニダ−ゼｂｍｐ−８２３１およびその製造法
US4716224A (en) 1984-05-04 1987-12-29 Seikagaku Kogyo Co. Ltd. Crosslinked hyaluronic acid and its use
US4713448A (en) 1985-03-12 1987-12-15 Biomatrix, Inc. Chemically modified hyaluronic acid preparation and method of recovery thereof from animal tissues
US4851521A (en) 1985-07-08 1989-07-25 Fidia, S.P.A. Esters of hyaluronic acid
GB8519416D0 (en) 1985-08-01 1985-09-04 Unilever Plc Oligosaccharides
JPS62104579A (ja) 1985-10-30 1987-05-15 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd ヒアルロニダ−ゼの製造法
JPH0751064B2 (ja) 1986-08-13 1995-06-05 生化学工業株式会社 新規なヒアルロニダ−ゼｓｄ−６７８およびその製造法
IT1219587B (it) 1988-05-13 1990-05-18 Fidia Farmaceutici Polisaccaridi carbossiilici autoreticolati
JPH0214019A (ja) 1988-06-30 1990-01-18 Tonen Corp 繊維状成形物及びその製造方法
JPH0755961B2 (ja) 1989-04-18 1995-06-14 工業技術院長 新規なヒアルロン酸誘導体及びその製造方法
US5522879A (en) 1991-11-12 1996-06-04 Ethicon, Inc. Piezoelectric biomedical device
IT1254704B (it) 1991-12-18 1995-10-09 Mini Ricerca Scient Tecnolog Tessuto non tessuto essenzialmente costituito da derivati dell'acido ialuronico
US5824335A (en) 1991-12-18 1998-10-20 Dorigatti; Franco Non-woven fabric material comprising auto-crosslinked hyaluronic acid derivatives
JP2855307B2 (ja) 1992-02-05 1999-02-10 生化学工業株式会社 光反応性グリコサミノグリカン、架橋グリコサミノグリカン及びそれらの製造方法
FR2689131B1 (fr) 1992-03-30 1994-05-20 Oreal Procede de preparation de monoesters majoritairement en position 6' du d-maltose et leur utilisation dans les domaines cosmetique, bucco-dentaire, pharmaceutique et alimentaire.
JPH0625306A (ja) 1992-04-21 1994-02-01 Shiseido Co Ltd 溶媒不溶化ヒアルロン酸及びその製造方法
IT1263316B (it) 1993-02-12 1996-08-05 Fidia Advanced Biopolymers Srl Tessuto non tessuto multistrato in cui uno degli strati e' costituito essenzialmente da esteri dell'acido ialuronico
US5616568A (en) 1993-11-30 1997-04-01 The Research Foundation Of State University Of New York Functionalized derivatives of hyaluronic acid
CN1128065A (zh) 1994-03-14 1996-07-31 生化学工业株式会社 戴在眼球上的材料
US5455349A (en) 1994-05-13 1995-10-03 Polaroid Corporation Vinylbenzyl thymine monomers
RU2147243C1 (ru) 1994-09-27 2000-04-10 Нюкомед Имагинг А/С Контрастное средство
US6025444A (en) 1994-11-17 2000-02-15 Seikagaku Kogyo Kabushiki Kaisha (Seikagaku Corporation) Cinnamic acid derivative
JP3308742B2 (ja) 1994-11-17 2002-07-29 生化学工業株式会社 光架橋性ヒアルロン酸誘導体とその架橋体およびそれらの製造方法
US5690961A (en) 1994-12-22 1997-11-25 Hercules Incorporated Acidic polysaccharides crosslinked with polycarboxylic acids and their uses
PT813546E (pt) 1995-03-07 2002-11-29 Novartis Ag Derivados de polissacarideos contendo ligacoes cruzadas por fotoquimica como suporte para a separacao cromatografica de enantiomeros
IT1281877B1 (it) 1995-05-10 1998-03-03 Fidia Advanced Biopolymers Srl Sali di metalli pesanti di succinil derivati dell'acido ialuronico e loro impiego come potenziali agenti terapeutici
IT1281886B1 (it) 1995-05-22 1998-03-03 Fidia Advanced Biopolymers Srl Processo per la preparazione di idrogel ottenuti da derivati chimici dell'acido ialuronico mediante irradiazioni ultraviolette e loro
TR199800353T1 (xx) 1995-08-29 1998-05-21 Fidia Advanced Biopolymers, S.R.L. Ameliyat sonras� adhasyon �nleyici biyo-malzemeler.
US5789462A (en) 1995-09-13 1998-08-04 Seikagaku Kogyo Kabushiki Kaisha (Seikagaku Corporation) Photocured crosslinked-hyaluronic acid contact lens
DE19604706A1 (de) 1996-02-09 1997-08-14 Merck Patent Gmbh Vernetzungsprodukte von Aminogruppen-haltigen Biopolymeren
DE19616010C2 (de) 1996-04-23 1998-07-09 Seitz Filter Werke Verfahren und Vorrichtung zur Herstellung von Fibrets (Fibriden) aus Zellulosederivaten
US6632802B2 (en) 1996-08-29 2003-10-14 Fidia Advanced Biopolymers S.R.L. Hyaluronic acid esters, threads and biomaterials containing them, and their use in surgery
IT1287698B1 (it) 1996-08-29 1998-08-18 Fidia Advanced Biopolymers Srl Fili da sutura essenzialmente costituiti da derivati esterei dello acido ialuronico
US6162537A (en) 1996-11-12 2000-12-19 Solutia Inc. Implantable fibers and medical articles
WO1999001143A1 (en) 1997-07-03 1999-01-14 Orquest, Inc. Cross-linked polysaccharide drug carrier
ITPD980037A1 (it) 1998-02-25 1999-08-25 Fidia Advanced Biopolymers Srl Acido ialuronico solfatato e i suoi derivati legati covalentemente a polimeri sintetici pe la preparazione di biomateriali e per il rivesti
US6613897B1 (en) 1998-04-30 2003-09-02 Maruha Corporation Compounds having glucuronic acid derivatives and glucosamine derivative in the structure, process for producing the same and utilization thereof
CA2331701C (en) 1998-05-07 2008-11-18 Nederlandse Organisatie Voor Toegepast-Natuurwetenschappelijk Onderzoek Tno Process for selective oxidation of primary alcohols
US6630457B1 (en) 1998-09-18 2003-10-07 Orthogene Llc Functionalized derivatives of hyaluronic acid, formation of hydrogels in situ using same, and methods for making and using same
US6472541B2 (en) 1998-11-20 2002-10-29 The Regents Of The University Of California Protecting groups with increased photosensitivities
IT1302534B1 (it) 1998-12-21 2000-09-05 Fidia Advanced Biopolymers Srl Composizioni iniettabili, biocompatibili e biodegradabili comprendentialmeno un derivato dell'acido ialuronico, cellule condrogeniche, per
EP1140199B1 (de) 1998-12-23 2003-07-23 Esparma GmbH Hyaluronatlyase als penetrationsförderer in topischen mitteln
US6288043B1 (en) 1999-06-18 2001-09-11 Orquest, Inc. Injectable hyaluronate-sulfated polysaccharide conjugates
US7033603B2 (en) 1999-08-06 2006-04-25 Board Of Regents The University Of Texas Drug releasing biodegradable fiber for delivery of therapeutics
US6592794B1 (en) 1999-09-28 2003-07-15 Organogenesis Inc. Process of making bioengineered collagen fibrils
EP1237933A1 (en) 1999-11-08 2002-09-11 SCA Hygiene Products Zeist B.V. Process of oxidising primary alcohols
US6180087B1 (en) 2000-01-18 2001-01-30 Mallinckrodt Inc. Tunable indocyanine dyes for biomedical applications
DE10003397A1 (de) 2000-01-27 2001-08-09 Hartmann Paul Ag Polyelektrolyt-Feststoffsystem, Verfahren zur Herstellung desselben sowie Wundverband
DE10009996B4 (de) 2000-03-02 2005-10-13 Cognis Ip Management Gmbh Feststoffgranulate mit monodisperser Korngrößenverteilung, ein Verfahren zu ihrer Herstellung sowie ihre Verwendung
IT1317358B1 (it) 2000-08-31 2003-06-16 Fidia Advanced Biopolymers Srl Derivati cross-linkati dell'acido ialuronico.
IT1317359B1 (it) 2000-08-31 2003-06-16 Fidia Advanced Biopolymers Srl Polisaccaridi percarbossilati, quali l'acido ialuronico, processo perla loro preparazione e loro impiego in campo farmaceutico e
US6669926B1 (en) 2000-10-16 2003-12-30 Mallinckrodt, Inc. Hydrophilic light absorbing indole compounds for determination of physiological function in critically ill patients
US6498269B1 (en) 2000-10-17 2002-12-24 The University Of Connecticut Method for the oxidation of aldehydes, hemiacetals and primary alcohols
WO2002048197A1 (en) 2000-12-13 2002-06-20 Sca Hygiene Products Zeist B.V. Process for oxidising primary alcohols
DE60117502T2 (de) * 2000-12-19 2006-08-24 Seikagaku Corp. Photohärtbare Derivate von Hyaluronsäure, Verfahren zu deren Herstellung, vernetztes und photogehärtetes Derivat der Hyaluronsäure und diese enthaltendes medizinisches Material
FR2819808B1 (fr) 2001-01-19 2003-04-18 Simafex Compositions stabilisees d'acide o-iodoxybenzoique et leur procede de preparation
AU2002230102B9 (en) 2001-01-31 2008-05-01 Seikagaku Corporation Crosslinked polysaccharide sponge
US6902548B1 (en) 2001-03-19 2005-06-07 Ed Schuler Use of Streptomyces hyalurolyticus enzyme in ophthalmic treatments
US6673919B2 (en) 2001-03-30 2004-01-06 Chisso Cororation Chemically modified hyaluronic acid or salts thereof, and a process for producing thereof
US6946284B2 (en) 2001-11-16 2005-09-20 University Of Massachusetts Solubilizing cross-linked polymers with photolyase
FR2833493B1 (fr) 2001-12-18 2005-09-23 Ioltechnologie Production Forme galenique solide et soluble pour l'administration occulaire de principes actifs et procede de fabrication d'un insert ophtalmique solide et soluble
US20060189516A1 (en) 2002-02-19 2006-08-24 Industrial Technology Research Institute Method for producing cross-linked hyaluronic acid-protein bio-composites
ITPD20020064A1 (it) 2002-03-12 2003-09-12 Fidia Advanced Biopolymers Srl Derivati esterei dell'acido ialuronico per la preparazione di idrogelda utilizzare in campo biomedico, sanitario e chirurgico e come sistem
US20040101546A1 (en) 2002-11-26 2004-05-27 Gorman Anne Jessica Hemostatic wound dressing containing aldehyde-modified polysaccharide and hemostatic agents
JP4323148B2 (ja) 2002-09-30 2009-09-02 チッソ株式会社 ｎ−アルカノイル化ヒアルロン酸もしくはその塩およびその製造法
US6965040B1 (en) 2002-11-04 2005-11-15 Xiaolian Gao Photogenerated reagents
US20040116018A1 (en) 2002-12-17 2004-06-17 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Method of making fibers, nonwoven fabrics, porous films and foams that include skin treatment additives
US7550136B2 (en) 2002-12-20 2009-06-23 University Of Massachusetts Photo-reactive polymers and devices for use in hair treatments
US6982298B2 (en) 2003-01-10 2006-01-03 The Cleveland Clinic Foundation Hydroxyphenyl cross-linked macromolecular network and applications thereof
US7465766B2 (en) 2004-01-08 2008-12-16 The Cleveland Clinic Foundation Hydroxyphenyl cross-linked macromolecular network and applications thereof
WO2004081055A1 (ja) * 2003-02-21 2004-09-23 Terumo Kabushiki Kaisha 架橋性多糖誘導体、その製造方法、架橋性多糖組成物および医療用処置材
US20050126338A1 (en) 2003-02-24 2005-06-16 Nanoproducts Corporation Zinc comprising nanoparticles and related nanotechnology
FR2852012B1 (fr) 2003-03-04 2006-06-23 Oreal Procede de preparation de derives o-acyles du glucose
US7365059B2 (en) 2003-03-11 2008-04-29 Seikagaku Corporation Photocrosslinked-polysaccharide composition and production process of the same
US7947766B2 (en) 2003-06-06 2011-05-24 The Procter & Gamble Company Crosslinking systems for hydroxyl polymers
ES2226567B1 (es) 2003-06-20 2006-07-01 Universidad De Santiago De Compostela Nanoparticulas de acido hialuronico.
DE10331342B4 (de) 2003-07-11 2009-03-12 Thüringisches Institut für Textil- und Kunststoff-Forschung e.V. Thermostabile Form- oder Spinnmasse
WO2005014655A2 (en) 2003-08-08 2005-02-17 Fresenius Kabi Deutschland Gmbh Conjugates of hydroxyalkyl starch and a protein
US7235295B2 (en) 2003-09-10 2007-06-26 Laurencin Cato T Polymeric nanofibers for tissue engineering and drug delivery
WO2005028632A2 (en) 2003-09-19 2005-03-31 Colorado State University Research Foundation (Csurf) Hyaluronan (ha) esterification via acylation technique for moldable devices
US8313765B2 (en) 2003-12-04 2012-11-20 Industrial Technology Research Institute Biodegradable hyaluronic acid derivative, biodegradable polymeric micelle composition and pharmaceutical or bioactive composition
GB2408741B (en) 2003-12-04 2008-06-18 Ind Tech Res Inst Hyaluronic acid derivative with urethane linkage
US20100330143A1 (en) 2003-12-04 2010-12-30 University Of Utah Research Foundation Modified macromolecules and methods of making and using thereof
GB0406013D0 (en) 2004-03-17 2004-04-21 Chiron Srl Analysis of saccharide vaccines without interference
EP1732619A1 (en) 2004-03-26 2006-12-20 SurModics, Inc. Composition and method for preparing biocompatible surfaces
ITMI20040605A1 (it) 2004-03-29 2004-06-29 Coimex S C R L United Companie Esteri butirrici dell'acido ialuronico a basso grado di sostituzione procedimento per la loro preparazione ed uso
CN101052684B (zh) 2004-07-09 2014-02-12 克利夫兰临床基金会 羟基苯交联大分子网络及其应用
US7323425B2 (en) 2004-08-27 2008-01-29 Stony Brook Technology And Applied Research Crosslinking of hyaluronan solutions and nanofiberous membranes made therefrom
US8143391B2 (en) 2004-09-07 2012-03-27 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Process for producing water-soluble hyaluronic acid modification
PT1817347T (pt) 2004-11-24 2017-07-21 Albumedix As Resumo
US7214759B2 (en) 2004-11-24 2007-05-08 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Biologically absorbable coatings for implantable devices based on polyesters and methods for fabricating the same
US8053415B2 (en) 2005-01-21 2011-11-08 Washington University In St. Louis Compounds having RD targeting motifs
WO2006102374A2 (en) 2005-03-22 2006-09-28 Tyco Healthcare Group Lp Bioactive wide-weave mesh
US7680038B1 (en) 2005-04-25 2010-03-16 Electronic Arts, Inc. Dynamic bandwidth detection and response for online games
GB0513552D0 (en) 2005-07-01 2005-08-10 Bristol Myers Squibb Co Bandage
RU2429018C2 (ru) 2005-07-06 2011-09-20 Сейкагаку Корпорейшн Гель, полученный из фотосшитой гиалуроновой кислоты с введенным лекарственным средством
ITMI20051415A1 (it) 2005-07-22 2007-01-23 Fidia Advanced Biopolymers Srl Biomateriali a base di corbossimetilcellulosa salificata con zinco associata a derivati dell'acido ialuronico da impiegarsi come dispositivi medici con attivita' antimicrobica ed antifungina e loro processo di produzione
US8183214B2 (en) 2005-09-21 2012-05-22 Kode Biotech Limited Cell surface coating with hyaluronic acid oligomer derivative
US7993678B2 (en) 2005-09-26 2011-08-09 Novozymes Biopolymer A/S Hyaluronic acid derivatives
EP3028677A1 (en) 2005-12-14 2016-06-08 Anika Therapeutics Inc. Treatment of arthritis and other musculoskeletal disorders with crosslinked hyaluronic acid
EP1826274A1 (en) 2006-02-24 2007-08-29 Kikkoman Corporation Enzyme composition, low molecular weight hyaluronan and process for preparing the same
WO2007101243A1 (en) 2006-02-28 2007-09-07 Novozymes Biopolymer A/S Derivatives of hyaluronic acids
JP4892679B2 (ja) 2006-03-27 2012-03-07 国立大学法人弘前大学 ゲル紡糸によるヒアルロン酸繊維およびその製造方法
KR20070118730A (ko) 2006-06-13 2007-12-18 주식회사 코오롱 보습성이 우수한 창상피복재 및 그의 제조방법
US20080124395A1 (en) 2006-06-22 2008-05-29 Weiliam Chen Formulations and devices for treatment or prevention of neural ischemic damage
WO2008008481A2 (en) 2006-07-12 2008-01-17 Georgia Tech Research Corporation Deprotection of functional groups by multi-photon induced electron transfer
JP2009545637A (ja) 2006-08-04 2009-12-24 ノボザイムス バイオファーマ デーコー アクティーゼルスカブ 分岐ヒアルロン酸及びその製造方法
US20080063617A1 (en) 2006-09-07 2008-03-13 Abrahams John M Cosmetics formulations
ITMI20061726A1 (it) 2006-09-11 2008-03-12 Fidia Farmaceutici Derivati crosslinkati a base di acido ialuronico reticolato via click chemistry
CZ302856B6 (cs) 2006-09-27 2011-12-14 Cpn Spol. S R. O. Zpusob prípravy derivátu polysacharidu
US8979931B2 (en) 2006-12-08 2015-03-17 DePuy Synthes Products, LLC Nucleus replacement device and method
BRPI0722061B8 (pt) 2006-12-22 2021-06-22 Croma Pharma Ges M B H uso de um polímero contendo grupo tiol e implante
EP1942117A1 (en) 2006-12-29 2008-07-09 Sigea S.R.L. Derivatives of acid polysaccharides
KR20080062092A (ko) 2006-12-29 2008-07-03 주식회사 핸슨바이오텍 세포전달체로서의 히알루론산 유도체 및 이의 제조 방법
JP5329767B2 (ja) 2007-02-26 2013-10-30 帝人株式会社 芳香族コポリアミド繊維の製造装置
WO2008115799A1 (en) 2007-03-21 2008-09-25 William Marsh Rice University Novel gene delivery vectors for human mesenchymal stem cells
CA2584087C (en) 2007-04-05 2016-11-29 Molly Shoichet Chemically patterned hydrogels, manufacture and use thereof
CZ2007299A3 (cs) 2007-04-24 2009-02-04 Cpn Spol. S R. O. Príprava nanovláken z polysacharidu a jejich smesí s polyvinylalkoholem
JP5165281B2 (ja) 2007-06-01 2013-03-21 株式会社バイオベルデ ２反応剤型の医療用含水ゲル形成剤、及び、これより得られるヒアルロン酸ゲル
WO2009037566A2 (en) 2007-06-19 2009-03-26 Uvarkina Tamara P Hyaluronidase and method of use thereof
KR101226851B1 (ko) 2007-06-20 2013-01-25 (주)엘지하우시스 이중노즐을 이용한 나노섬유의 제조방법
JP5393662B2 (ja) 2007-06-22 2014-01-22 イノベイティブ サーフェイス テクノロジーズ， インコーポレイテッド 潜在反応基を含有するナノ繊維
WO2009012372A1 (en) 2007-07-18 2009-01-22 Advantageous Systems, Llc Methods and apparatuses for detecting analytes in biological fluid of an animal
FR2920786B1 (fr) 2007-09-07 2010-09-10 Univ Claude Bernard Lyon Fibres creuses, notamment multi membranaires, leur procede de preparation par filage et dispositif pour la mise en oeuvre dudit procede
FR2921675B1 (fr) 2007-09-28 2010-03-19 Univ Claude Bernard Lyon Filament a base d'acide hyaluronique et son procede d'obtention.
US20130136784A1 (en) 2007-10-11 2013-05-30 Robert J. Staab Methods for delivery of medication using dissolvable devices
US7976825B2 (en) 2007-12-06 2011-07-12 Janos Borbely Cancer cell diagnosis by targeting delivery of nanodevices
BRPI0908352A2 (pt) 2008-02-11 2015-07-28 Basf Se Processo para produzir estruturas porosas, estrutura porosa, e, uso da mesma
US20110028062A1 (en) 2008-02-14 2011-02-03 Chester Stephen O Bicomponent fibers, textile sheets and use thereof
EP2254944B1 (en) 2008-02-29 2018-12-19 PVAC Medical Technologies Ltd. Composition for the formation of gels
WO2009139972A2 (en) 2008-03-31 2009-11-19 University Of Louisville Research Foundation, Inc. Site specific fluorescence marking and contrast marker for same
WO2009148405A1 (en) 2008-06-05 2009-12-10 Agency For Science, Technology And Research Formation of hydrogel in the presence of peroxidase and low concentration of hydrogen peroxide
JP2010014784A (ja) 2008-07-01 2010-01-21 Fuji Xerox Co Ltd 光書込型表示装置、書込装置、及び光書き込み方法
IT1391734B1 (it) 2008-07-29 2012-01-27 Anika Therapeutics Srl Nuovi biomateriali, loro preparazione per elettrospinning e loro uso in campo biomedico e chirurgico.
FR2934999B1 (fr) 2008-08-13 2011-07-29 Adocia Polysaccharides fonctionnalises par des derives du tryptophane
EP2324064B1 (en) 2008-09-02 2017-11-08 Tautona Group LP Threads of hyaluronic acid and/or derivatives thereof, methods of making thereof and uses thereof
CZ301555B6 (cs) 2008-11-06 2010-04-14 Cpn S. R. O. Zpusob prípravy DTPA sítovaných derivátu kyseliny hyaluronové a jejich modifikace
ITRM20080636A1 (it) 2008-11-28 2010-05-29 Univ Palermo Procedimento per la produzione di derivati funzionalizzati dell acido ialuronico e relativi idrogeli.
WO2010095052A2 (en) 2009-02-21 2010-08-26 Sofradim Production Compounds and medical devices activated with solvophobic linkers
EP2398941B1 (en) 2009-02-21 2016-07-13 Sofradim Production Crosslinked fibers and method of making same by extrusion
EP2398850B1 (en) 2009-02-21 2018-08-22 Sofradim Production Medical devices with an activated coating
CZ2009168A3 (cs) 2009-03-17 2010-07-21 Contipro C, A.S. Zpusob prípravy derivátu kyseliny hyaluronové pomocí O-acyl-O´-alkylkarbonátu v prítomnosti substituovaného pyridinu
US8551378B2 (en) 2009-03-24 2013-10-08 North Carolina State University Nanospinning of polymer fibers from sheared solutions
US20120219554A2 (en) 2009-05-14 2012-08-30 Fidia Farmaceutici S.P.A. Extracellular yaluronidase from streptomyces koganeiensis
WO2010138074A1 (en) 2009-05-29 2010-12-02 Hilborn Joens Hyaluronic acid based delivery systems
CA2764635C (en) 2009-06-09 2018-05-22 Lux Biosciences, Inc. Topical drug delivery systems for ophthalmic use
US8790702B2 (en) 2009-07-30 2014-07-29 Carbylan Therapeutics, Inc. Modified hyaluronic acid polymer compositions and related methods
KR101103423B1 (ko) 2009-09-04 2012-01-06 아주대학교산학협력단 생체 주입형 조직 접착성 하이드로젤 및 이의 생의학적 용도
US9132201B2 (en) 2009-11-11 2015-09-15 University Of Twente, Institute For Biomedical And Technical Medicine (Mira) Hydrogels based on polymers of dextran tyramine and tyramine conjugates of natural polymers
US20120301441A1 (en) 2009-11-11 2012-11-29 Hermanus Bernardus Johannes Karperien Dextran-hyaluronic acid based hydrogels
US20110111012A1 (en) 2009-11-12 2011-05-12 Hemcon Medical Technologies, Inc. Nanomaterial wound dressing assembly
CZ302504B6 (cs) 2009-12-11 2011-06-22 Contipro C A.S. Derivát kyseliny hyaluronové oxidovaný v poloze 6 glukosaminové cásti polysacharidu selektivne na aldehyd, zpusob jeho prípravy a zpusob jeho modifikace
US8197849B2 (en) 2010-02-12 2012-06-12 National Health Research Institutes Cross-linked oxidated hyaluronic acid for use as a vitreous substitute
US20110229551A1 (en) 2010-03-17 2011-09-22 Notus Laboratories, Inc. Drug delivery compositions and methods using nanofiber webs
IT1399202B1 (it) 2010-03-30 2013-04-11 Corbelli Metodo per la produzione di manufatti elastomerici funzionalizzati e manufatti cosi' ottenuti
WO2011163572A2 (en) 2010-06-24 2011-12-29 University Of Kansas Bifunctional conjugate compositions and associated methods
CN101897976A (zh) 2010-07-16 2010-12-01 沈阳药科大学 一种药物增溶载体及其制备方法和应用
CZ305040B6 (cs) 2010-09-14 2015-04-08 Contipro Biotech S.R.O. Způsob přípravy vysoce substituovaných amidů kyseliny hyaluronové
CZ20101001A3 (cs) 2010-12-31 2012-02-08 Cpn S.R.O. Hyaluronová vlákna, zpusob jejich prípravy a použití
US9200271B2 (en) 2011-02-03 2015-12-01 Empire Technology Development Llc Selective 3D biopatterning
KR101201412B1 (ko) 2011-04-19 2012-11-14 한양대학교 에리카산학협력단 다공성 코어쉘 나노웹의 제조방법
CZ304072B6 (cs) 2011-04-26 2013-09-25 Contipro Biotech S.R.O. Amfoterní materiál na bázi sítované kyseliny hyaluronové, zpusob jeho prípravy, materiály obsahující aktivní cinidla uzavrené v síti hyaluronanu, zpusob jejich prípravy a jejich pouzití
CN102154738B (zh) 2011-05-10 2012-08-01 青岛大学 一种红藻琼胶纤维的制备方法
ITTO20110428A1 (it) 2011-05-13 2012-11-14 Rottapharm Spa Esteri dell'acido ialuronico, loro preparazione ed uso in dermatologia
CN104024494B (zh) 2011-10-18 2017-11-10 海克私人有限公司 纤维成型方法和由此方法产生的纤维
KR20130085294A (ko) 2012-01-19 2013-07-29 충남대학교산학협력단 림프노드 탐지용 형광 고분자 나노젤 및 이를 이용한 림프노드 확인 방법
CZ2012136A3 (cs) 2012-02-28 2013-06-05 Contipro Biotech S.R.O. Deriváty na bázi kyseliny hyaluronové schopné tvorit hydrogely, zpusob jejich prípravy, hydrogely na bázi techto derivátu, zpusob jejich prípravy a pouzití
CZ2012282A3 (cs) 2012-04-25 2013-11-06 Contipro Biotech S.R.O. Zesítovaný derivát hyaluronanu, zpusob jeho prípravy, hydrogel a mikrovlákna na jeho bázi
WO2013171764A2 (en) 2012-04-30 2013-11-21 Rubicon Research Private Limited Ophthalmic formulations
CZ304651B6 (cs) 2012-05-11 2014-08-20 Contipro Biotech S.R.O. Způsob přípravy mikrovláken, způsob výroby krytů ran, kryty ran a zařízení pro přípravu polysacharidových vláken
CZ304512B6 (cs) * 2012-08-08 2014-06-11 Contipro Biotech S.R.O. Derivát kyseliny hyaluronové, způsob jeho přípravy, způsob jeho modifikace a použití
CZ2012844A3 (cs) * 2012-11-27 2014-02-05 Contipro Biotech S.R.O. Fotoreaktivní derivát kyseliny hyaluronové, způsob jeho přípravy, 3D síťovaný derivát kyseliny hyaluronové, způsob jeho přípravy a použití
CZ2012841A3 (cs) 2012-11-27 2014-02-19 Contipro Biotech S.R.O. Vlákna založená na hydrofobizovaném hyaluronanu, způsob jejich přípravy a použití, textilie na jejich bázi a použití
CZ304654B6 (cs) 2012-11-27 2014-08-20 Contipro Biotech S.R.O. Nanomicelární kompozice na bázi C6-C18-acylovaného hyaluronanu, způsob přípravy C6-C18-acylovaného hyaluronanu, způsob přípravy nanomicelární kompozice a stabilizované nanomicelární kompozice a použití
KR101386096B1 (ko) 2013-02-28 2014-04-21 강원대학교산학협력단 음이온성 단백질 약물 전달을 위한 키토산 나노섬유, 그 제조방법 및 그 키토산 나노섬유를 포함하는 경점막 투여제
CN103505736A (zh) 2013-09-23 2014-01-15 天津大学 基于改性透明质酸的高分子脂质体及其制备方法
CN103789874B (zh) 2014-01-23 2016-02-10 北京化工大学常州先进材料研究院 平行电场诱导相分离法制备核壳结构天然聚电解质纳米纤维
EP2899214A1 (en) 2014-01-27 2015-07-29 Basf Se Ethylenically unsaturated polysaccharides, method for their production and their use
CZ2014150A3 (cs) 2014-03-11 2015-05-20 Contipro Biotech S.R.O. Konjugáty oligomeru kyseliny hyaluronové nebo její soli, způsob jejich přípravy a použití

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2146686C1 (ru) * 1995-09-18 2000-03-20 Интернэшнл Бизнес Машинз Корпорейшн Структура материала, содержащего поперечно-сшитый полимер биологического происхождения
EP1023327B1 (de) * 1997-10-06 2003-04-16 Henkel Kommanditgesellschaft auf Aktien Verfahren zur Herstellung von verzögert wasserlöslichen Polysacchariden
RU2230073C2 (ru) * 1998-11-11 2004-06-10 Фармила-Теа Фармасьютичи С.П.А. Способ поперечного сшивания карбоксилированных полисахаридов
RU2540667C2 (ru) * 2009-05-11 2015-02-10 Теоксан Способ получения сшитого геля
WO2011069475A2 (en) * 2009-12-11 2011-06-16 Contipro C A.S. A method of preparation of an oxidized derivative of hyaluronic acid and a method of modification thereof
US20130303748A1 (en) * 2012-05-10 2013-11-14 Actamax Surgical Materials, Llc Method for making aldehyde-functionalized polysaccharides

Also Published As

Publication number Publication date
RU2017146010A (ru) 2019-07-15
CZ306479B6 (cs) 2017-02-08
EP3307790B1 (en) 2021-12-15
US20180179302A1 (en) 2018-06-28
KR20180019658A (ko) 2018-02-26
CZ2015398A3 (cs) 2017-02-08
JP6812369B2 (ja) 2021-01-13
JP2018521169A (ja) 2018-08-02
EP3307790A1 (en) 2018-04-18
ES2907987T3 (es) 2022-04-27
BR112017026859B1 (pt) 2021-06-08
BR112017026859A2 (pt) 2018-08-14
WO2016202314A1 (en) 2016-12-22
US10759878B2 (en) 2020-09-01
RU2017146010A3 (ru) 2019-08-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2237971T3 (es) Procedimiento de reticulacion de polisacaridos carboxilados.
JP3439481B2 (ja) 光架橋ヒアルロン酸ゲルおよびその製造法
Jin et al. Enzymatically-crosslinked injectable hydrogels based on biomimetic dextran–hyaluronic acid conjugates for cartilage tissue engineering
Prabaharan et al. Novel thiolated carboxymethyl chitosan-g-β-cyclodextrin as mucoadhesive hydrophobic drug delivery carriers
AU606230B2 (en) Water insoluble derivatives of hyaluronic acid
KR101966555B1 (ko) 생체친화형 하이드로젤 및 제조방법
Shi et al. Characterization of ph-and thermosensitive hydrogel as a vehicle for controlled protein delivery
WO2010083039A9 (en) Preparing biodgradable hydrogel for biomedical application
Xu et al. A fast and dual crosslinking hydrogel based on vinyl ether sodium alginate
RU2713295C2 (ru) Способ сшивания полисахаридов при помощи фотоудаляемых защитных групп
CN112812329B (zh) 巯基改性高分子化合物的水凝胶及其制备方法和用途
Gürer et al. Water-based carbodiimide mediated synthesis of polysaccharide-amino acid conjugates: Deprotection, charge and structural analysis
EP2529226A1 (en) Silylated biomolecules
RU2708327C2 (ru) Производные сульфатированных полисахаридов, их способ получения, модификация и применение
EP2269665B1 (en) Visible medical treatment material
CN112812200A (zh) 巯基改性高分子化合物及其制备方法和用途
Ramos et al. Poly (ethylene glycol)-crosslinked N-methylene phosphonic chitosan. Preparation and characterization
EP4198060A1 (en) Polysaccharide derivative, polysaccharide derivative-drug conjugate, and method for producing same
HUE031774T2 (en) Crosslinked hyaluronic acid derivatives, process and their use
KR102630678B1 (ko) 아민-말단화 된 페놀 유도체가 수식된 알데히드 치환 히알루론산 유도체 및 그의 용도
Guaresti Larrea Click chemistry: an efficient toolbox for the design of chitosand-based hydrogels for biomedicine
CN116178588A (zh) 一种巯基化天然多糖衍生物的制备方法
Van Vlierberghe Cell-Interactive Biopolymer-based Hydrogels designed for Tissue Engineering
Çömert Modification of biopolyelectrolytes for bioadhesive applications