CZ301555B6 - Zpusob prípravy DTPA sítovaných derivátu kyseliny hyaluronové a jejich modifikace - Google Patents

Zpusob prípravy DTPA sítovaných derivátu kyseliny hyaluronové a jejich modifikace Download PDF

Info

Publication number
CZ301555B6
CZ301555B6 CZ20080705A CZ2008705A CZ301555B6 CZ 301555 B6 CZ301555 B6 CZ 301555B6 CZ 20080705 A CZ20080705 A CZ 20080705A CZ 2008705 A CZ2008705 A CZ 2008705A CZ 301555 B6 CZ301555 B6 CZ 301555B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
hyaluronic acid
acid
dtpa
anhydride
bis
Prior art date
Application number
CZ20080705A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ2008705A3 (cs
Inventor
Buffa@Radovan
Velebný@Vladimír
Palek@Lukáš
Kettou@Sofiane
Pravda@Martin
Original Assignee
Cpn S. R. O.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Cpn S. R. O. filed Critical Cpn S. R. O.
Priority to CZ20080705A priority Critical patent/CZ2008705A3/cs
Priority to US13/127,871 priority patent/US20110218331A1/en
Priority to PCT/CZ2009/000131 priority patent/WO2010051783A1/en
Priority to BRPI0916131A priority patent/BRPI0916131A2/pt
Priority to CA2742428A priority patent/CA2742428A1/en
Priority to KR1020117012900A priority patent/KR20110082609A/ko
Priority to JP2011534998A priority patent/JP2012507615A/ja
Priority to RU2011121239/13A priority patent/RU2011121239A/ru
Priority to EP09801645A priority patent/EP2350135A1/en
Publication of CZ301555B6 publication Critical patent/CZ301555B6/cs
Publication of CZ2008705A3 publication Critical patent/CZ2008705A3/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
    • C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
    • C08B37/0072—Hyaluronic acid, i.e. HA or hyaluronan; Derivatives thereof, e.g. crosslinked hyaluronic acid (hylan) or hyaluronates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
    • C08B37/0024—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid beta-D-Glucans; (beta-1,3)-D-Glucans, e.g. paramylon, coriolan, sclerotan, pachyman, callose, scleroglucan, schizophyllan, laminaran, lentinan or curdlan; (beta-1,6)-D-Glucans, e.g. pustulan; (beta-1,4)-D-Glucans; (beta-1,3)(beta-1,4)-D-Glucans, e.g. lichenan; Derivatives thereof
    • C08B37/0027—2-Acetamido-2-deoxy-beta-glucans; Derivatives thereof
    • C08B37/003—Chitin, i.e. 2-acetamido-2-deoxy-(beta-1,4)-D-glucan or N-acetyl-beta-1,4-D-glucosamine; Chitosan, i.e. deacetylated product of chitin or (beta-1,4)-D-glucosamine; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
    • A61K49/08—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by the carrier
    • A61K49/10—Organic compounds
    • A61K49/12—Macromolecular compounds
    • A61K49/126—Linear polymers, e.g. dextran, inulin, PEG
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
    • C08L5/00—Compositions of polysaccharides or of their derivatives not provided for in groups C08L1/00 or C08L3/00
    • C08L5/08—Chitin; Chondroitin sulfate; Hyaluronic acid; Derivatives thereof

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Radiology & Medical Imaging (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Vynález se týká modifikace kyseliny hyaluronové pomocí protonizovaného bis anhydridu DTPA (diethylentriaminpentaoctové kyseliny) ve slabe kyselém až neutrálním polárním aprotickém rozpouštedle bez prítomnosti externí báze za vzniku sítovaných produktu. Reakce probíhá pres krok tvorby komplexu, kde acylacním cinidlem je samotný kokation hyaluronanu konkrétne protonizovaný DTPA bis anhydrid. Výsledný sítovaný produkt (linker) obsahuje tri karboxylové skupiny a tri terciální aminy, které jsou schopny efektivne komplexovat ruzné kovy. Výslednou DTPA sítovanou kyselinu hyaluronovou je možné také hydrofobizovat pomocí mono, bis a tris funkcních alkylacních cinidel.

Description

Způsob přípravy DTP A síťovaných derivátů kyseliny hyaluronové a jejich modifikace
Oblast techniky
Vynález se týká nového způsobu modifikace kyseliny hyaluronové za vzniku síťovaných derivátů DTPA (diethylentriaminpentaoctové kyseliny) a reakcí těchto modifikovaných derivátů. Modifikace kyseliny hyaluronové je provedena pomocí protonizovaného DTPA bis anhydridu ve slabě kyselém až neutrálním polárním aprotickém rozpouštědle bez přítomnosti externí báze za vzniku io síťovaných produktů. Linkery těchto síťovaných derivátů obsahuji tři karboxylové skupiny a tři terciální aminy, které jsou schopny efektivně komplexovat různé kovy a dávají také možnost dále modifikovat karboxylové skupiny DTPA, např. hydrofobizovat síťovaný derivát alkylaěními činidly.
Dosavadní stav techniky
Polysacharidy jsou polymery složené z jednoduchých monosacharidů (monomemích jednotek) spojených glykosidickou vazbou. Podle počtu opakujících se jednotek rozlišujeme oligosacharidy (2 až 10 jednotek) spojených glykosidickou vazbou. Podle počtu opakujících se jednotek rozlišujeme oligosacharidy (2 až 10 jednotek) a polysacharidy (10 a více jednotek). Význam polysacharidú je značný. Polysacharidy plní funkci nutriční, ochrannou, stavební (celulóza, chitin) nebo zásobní (škrob). Polymery obecně isou charakterizovány průměrnou molekulovou hmotností, která se běžně pohybuje okolo 16.103 g.mof1 až 16.106 g.mof1. Počet opakujících se jednotek je dán stupněm polymerizace.
Významným polysacharidem je kyselina hyaluronová:
komponovaná z opakujících se jednotek p-(l,3)-D-glukuronové kyseliny a p-(l,4)-2V-acetylD-giukosaminu. Vyznačuje se velkou molekulovou hmotností 5.104 až 5.106 g.mof1, která závisí na způsobu izolace a výchozím materiálu. Kyselina hyaluronová, respektive její sůl hyaluronan, je nezbytnou součástí pojivových tkání, synoviální tekutiny kloubů, hraje významnou roli v řadě biologických procesů jako je hydratace, organizace proteoglykanů, diferenciace buněk, proliferace a angiogeneze. Tento značně hydrofilní polysacharid je ve vodě rozpustný ve formě soli v celé šířipH.
Kyselina hyaluronová je zástupcem skupiny glykosaminoglykanů, která dále zahrnuje chondroi40 tin sulfát, dermatan sulfát, keratan sulfát a heparan sulfát.
Acylace kyseliny hyaluronové
Acylace polysacharidů je nejčastěji využívaná metoda k zavedeni alkylového řetězce, který mění vlastnosti převážně hydrofilních látek na látky hydrofobnf. Reakce se nejčastěji provádí působením anhydridů příslušných kyselin, chloridů kyselin nebo samotnou kyselinou za přídavku katalyzátorů.
Příprava acyl-derivátů oligomerů kyseliny hyaluronové je patentována Couchmannem a kol. so (US patent US 4 761 401; 1988), kde acylace probíhá jak na hydroxylové, tak na amino skupině deacetylováného hyaluronanu. O-acylace zahrnuje reakci s organickou kyselinou za přídavku
-1CZ 301555 B6 kyselého katalyzátoru (minerální kyseliny, organické nebo Lewisovy kyseliny) a aktivačního činidla (XV-dicyklohexylcarbodiimid, 2-ch lor-1-methyl pyridiniumiodid a ty/V-carbonyl di imidazol), nebo používá anhydridu a chloridů kyselin v přítomnosti báze. Michinori a kol. (JP patent 7309902, 1995) připravili acylovanou kyselinu hyaluronovou reakcí s anhydridy karboxylových kyselin nebo jejich acylhalogenidy ve vodném prostředí obsahujícím s výhodou mísitelné organické rozpouštědlo v přítomnosti katalyzátoru. Saponifíkací acylových skupin kyseliny hyaluronové bylo docíleno derivátů s libovolným počtem acylových skupin. Chlorid kyseliny retinové a anhydrid kyseliny máselné použil k přípravě specifických derivátů hyaluronové kyseliny i Perbellini a kol. (WO 2004/056877 Al; 2004). Pro syntézu v prostředí N,Nío dimethylformamidu byla použita kyselina hyaluronová ve formě tetrabutylamonných solí.
Dále je z PV 2006-605 znám způsob modifikace polysacharidů, mj. i kyseliny hyaluronové, pomocí směsných anhydridu v prostředí vody nebo organického rozpouštědla, případně v přítomnosti přídavných látek. Nevýhodou tohoto způsobu oproti vynálezu je nízký stupeň substituce kyseliny hyaluronové a nutnost přídavného kroku způsobu, spočívající v tom, že nestabilní sloučeninu RCO-O-CO-OR1 je nutné si připravit těsně před reakcí.
JP 3975267 popisuje způsob acylace polysacharidů zahrnující reakci polysacharidu s anhydridem karboxylové kyseliny, kde je však nutné použít velký přebytek halogenidu kovu, z Čehož plynou vysoké nároky na čištění produktu a vysoké vstupní náklady. Jelikož DTPA je známá jako vysoce účinné komplexační činidlo, není vhodná pro použití ve způsobu podle JP 3975267 z důvodu extrémní náročnosti odstraňování přítomného kovu ze struktury HA-DTPA-kov. Další nevýhodou JP 3975267 je nutnost použití velkého přebytku anhydridu, což může významně navýšit vstupní náklady. Ještě další nevýhodou JP 3975267 je, že jako rozpouštědlo je nutné použít karboxylovou kyselinu, která má stejný řetězec jako použitý anhydrid, t.j. kyselina octová acetanhydrid, kyselina propionová - propionanhydrid apod. V případě, že příslušná karboxylová kyselina není v podmínkách reakce kapalná (např. kys. benzoová aj.), postup nelze použít vůbec (není přítomné rozpouštědlo). Navíc jako rozpouštědlo je nutné použít karboxylovou kyselinu, která alespoň částečně rozpouští HA, což úplně vylučuje použití např. lipofilních karboxylových kyselin.
Síťování kyseliny hyaluronové
Síťování neboli „crosslinking“ kyseliny hyaluronové bylo popsáno několika způsoby. Mezi nej35 jednodušší způsoby patří síťování pomocí POC13 (US 5 783 691). Balasz a kol. síťovali kyselinu hyaluronovou pomocí divinyísulfonu (US 4 582 865). Dalšími reaktivními elektrofily vhodnými pro síťování jsou aldehydy (US 4 713 448). Velmi rozšířenými Činidly schopnými reagovat se dvěma polymery jsou epoxidy nebo bisepoxidy (WO 86/00912, WO 2007/129828), kde nejznámějším zástupcem této skupiny je epichlorhydrin.
Použitím EDC je možné zvýšit reaktivitu karboxylové skupiny kyseliny hyaluronové, která je pak schopna síťovacích reakcí s polyanionickými sloučeninami (US 4 937 270). Jiným zástupcem polynukleofilních reaktantů jsou polyhydrazidy (WO 2006/001046). Způsob síťování kyseliny hyaluronové pomocí polyanhydridu, poly(alkyloylchloridu), polyepoxidu, polykarbodiimidu byl shrnut v patentu (WO 00/46252). Při reakci bis karbodiimidu s kyselinou hyaluronovou (WO 2005/067994) dochází k síťování pomocí reaktivního elektrofilního činidla. Možnosti síťovat pomocí redox reakcí je zachycena v patentu (EP 1683812 Al), kde vzniká disutfidické přemostění z thiolových derivátů kyseliny hyaluronové. Zvláštní skupinu síťování tvoří fotochemické reakce. Je známo, že vinylenová skupina skořicové kyseliny nebo její aryl-substituovaný ana50 log je schopný fotochemicky cyklizovat na cyklobutan. Tuto skutečnost využili autoři patentu (EP 1217008 Al), kteří N-deacylovaný derivát hyaluronové kyseliny acylovali na dusíku glukosaminové části polysacharidu s chloridem kyseliny skořicové. Samotné síťování proběhlo ozařováním světlem vlnové délky 280 nm. Kromě skořicové kyseliny je taky možné použít jiné fotoreaktivní skupiny navázané na kyselinu hyaluronovou (WO 97/18224, EP 0763754 A2), které ozářením světlem vhodné vlnové délky dávají síťované deriváty. Patenty, které se věnovaly
-2acylaci a síťování kyseliny hyaluronové v přítomnosti báze nebo v bazickém rozpouštědle, byly publikovány Yui a kol (US 6 673 919), resp. Nguyenem a kol. (US 5 690 961).
US 6 509 039 Bl popisuje zesíťované produkty biopolymerů obsahujících aminoskupiny, kons krétně produkty chitosanu nebo želatiny, s poly-anhydridy karboxylových kyselin, vznikající v prostředí kyseliny octové a acetonu. Nejdůležitější rozdíl mezi US 6 509 039 Bl a tímto vynálezem spočívá v tom, že popisuje modifikaci polysacharidů obsahujících volnou aminoskupinu, zatímco kyselina hyaluronová (HA) neobsahuje volnou aminoskupinu. Postupy aplikované v patentu US 6 509 039 Bl by nebyly schopné významněji modifikovat HA, protože HA nemá io dostatečně reaktivní skupinu pro reakci s anhydridem v navrhovaných podmínkách.
Mezi nevýhody výše uvedených známých řešení patří náročné čištění síťovaných derivátů kyseliny hyaluronové od toxických nízkomolekulámích polárních sloučenin, které jsou uvězněny v síti derivátů, složitost známých postupů aj. Způsob podle vynálezu je oproti známým analogům i s jednodušší a nevyžaduje přítomnost výrazně toxických rozpouštědel nebo acylačních katalyzátorů.
Podstata vynálezu
Podstatou vynálezu je způsob přípravy derivátů kyseliny hyaluronové reakcí kyseliny hyaluronové s protonizovaným bis anhydridem DTPA (diethylentriaminpentaoctové kyseliny) dle Schématu 1:
Schéma 1: Reakce proton izovaného DTPA bis anhydridu s kys. hyaluronovou (HA-CH2-OH)
Reakce probíhá ve slabě kyselém až neutrálním polárním aprotickém rozpouštědle bez přítom30 nosti externí báze za vzniku síťovaných produktů. Rozpouštědlo je s výhodou vybráno ze skupiny zahrnující DMSO, sulfolan nebo dialkylsulfony. Ve způsobu podle vynálezu je kyselina hyaluronová s výhodou ve formě volné kyseliny a má s výhodou molekulovou hmotnost v rozsahu 1.104 až 5.106 g-mol“1 a polydisperzitu v rozsahu 1,02 až 5,0.
Navrhovaný postup je oproti známým analogům jednodušší a nevyžaduje přítomnost výrazně toxických rozpouštědel nebo acylačních katalyzátorů.
-3CZ 301555 B6
KovXn
O—CO y—COO
HA^ V/
Kov
O—CO y—COOH
HA-'
-nHX / \:oo
HA—Λ >—N o—CO \—COO
COOH
HA^ r b-CO \—COOH
Schéma 2: Reakce HA-DTPA-HA s kovy a alkylačními činidly
Navázání DTPA bis anhydridů esterickou vazbou probíhá při 15 až 70 °C, s výhodou při 60 °C, což je možné vysvětlit tím, že DTPA bis anhydrid je protonizován karboxylovou skupinou kyseliny hyaluronové za vzniku komplexu, kde acylačním činidlem je samotný kokation hyaluronanu. Příslušná acylace probíhá buď přímo na některé hydroxy skupině, anebo na karboxylátové skupině glukoronové části a následně intramolekulově na hydroxy skupině - viz Schéma 3.
Schéma 3: Detailní schéma reakce protonizovaného DTPA bis anhydridů s kyselinou hyaluronovou.
-4'HNMR spektrum směsi kyseliny hyaluronové a DTPA bis anhydridů v deuterovaném DMSO v časech 0,lh až 24h (viz obr. 1) potvrzuje zánik původních signálů vodíků -N-CHr-CHj-Npatřících DTPA bis anhydridů (3,3; 3,4; 3,65; 3,85 ppm) a vznik nové kvality (píků) v oblasti 3,2 až 3,8 ppm indikující vznik protonovaného DTPA bis anhydridů. Tabulkové údaje pro pKa hodnoty analogických systémů (R-COOH - pKa ~ 4, alkyl3N - pKa ~ 11) tuto možnost také preferují.
Ve způsobu podle vynálezu se kyselina hyaluronová s výhodou rozpustí v DMSO nebo sulfolanu, io pak se přidá DTPA bis anhydrid a směs se míchá bez přístupu vzdušné vlhkosti při teplotě 15 až °C, s výhodou pri 60 °C, po dobu 1 až 150 h, s výhodou 24 h.
Linker, tj. získaný zesíťovaný derivát, obsahuje tři karboxylové skupiny a tři terciální aminy, které jsou schopny efektivně komplexovat různé kovy a dávají taky možnost hydrofobizovat karboxylové skupiny DTPA linkeru pomocí mono, bis a trisfunkčních alkylačních činidel - viz Schéma 2.
Komplexy síťovaných derivátů kyseliny hyaluronové a diethylentriaminpentaoctové kyseliny s atomy kovů se připraví reakcí chloridu nebo acetátu příslušného kovu, jako například kovů alkalických zemin - Ca, Mg nebo přechodných kovů - Fe, Gd, In, Zn, Eu, Tb ve vodě nebo v polárním aprotickém rozpouštědle pri teplotě 15 až 70 °C, s výhodou při 20 °C po dobu 1 min až 24 h. Z hlediska komplexačních vlastností DTPA se nabízí možnost tvorby chelátových komplexů DTPA hyaluronanu např. s gadoliniem pro diagnostické účely nebo s radioaktivním indiem 1I3In pro účely sledování distribuce hyaluronanu v živém organismu nebo zinkem, který by mohl v komplexu s DTPA hyaluronanem vykazovat určitou aktivitu využitelnou v kosmetice.
Hydrofobizace síťovaných derivátů kyseliny hyaluronové a diethylentriaminpentaoctové kyseliny nastává po reakci s mono, bis nebo tris funkčními alkylačními činidly ve vodě nebo v polárním aprotickém rozpouštědle nebo směsi těchto rozpouštědel a báze při teplotě 15 až 70 °C, s výho30 dou pri 60 °C, po dobu 1 až 150 h. Alkylační činidla obecného vzorce R-X zahrnují alkyl(aryl)halogenidy, kde Rje lineární nebo rozvětvený řetězec Ci az C30 volitelně sobsahem aromatických nebo heteroaromatických skupin a X je halogen, nebo alkyl(aryl)sulfáty, kde R má výše uvedený význam a X je skupina -O-SO2-R. Použité báze zahrnují anorganické sloučeniny obecného vzorce MHCO3, M2CO3, MF, kde M je alkalický kov, nebo dusíkaté organické báze obecného vzorce R3N, kde Rje alkyl Cj až C3o s lineárním nebo rozvětveným řetězcem volitelně s obsahem aromatických nebo heteroaromatických skupin.
Zde uváděné molekulové hmotnosti kyseliny hyaluronové a jejích derivátů jsou hmotnostně střední molekulové hmotnosti.
Přehled obrázků na výkresech
Obr. 1 znázorňuje změny v 'H NMR spektru směsi kyseliny hyaluronové a DTPA bis anhydridů v DMSO v čase 0,1 h až 24 h.
-5CZ 301555 B6
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Modifikace kyseliny hyaluronové s DTP A bis anhydridem.
Kyselá forma kyselina hyaluronové HA-COOH (10 kDa, 50 mg) byla rozpuštěna v bezvodém io DMSO (5 ml) při 60 °C. DTPA bisanhydrid (95 mg) byl přidán k roztoku polysacharidu při °C a směs byla míchána 24 h bez přístupu vzdušné vlhkosti. Po ochlazení ledovou vodou byla přidána destilovaná voda a roztok 150 mg Na2CO3 v 30 ml vody, směs se míchala 30 min. a potom byla zředěna destilovanou vodou na 100 ml a dialyzována proti destilované vodě 7 krát 1 1. Výsledný roztok byl lyofilizován za vzniku 88 mg produktu.
Mw = 2800 kDa, Polydisperzita = 2,563 (stanoveno pomocí metody SEC-MALL),
IR 1739cm-1, stupeň substituce 110% (počítáno zNMR na dimer polysacharidu), lHNMR (měřeno po přidání 0,02 ml 20 % aq NaOD) DTPA (δ 2,55 4H, 2,6 4H, 3,10 2H, 3,5 6H), 13C NMR DTPA (δ 183,0, 182,8, 61,5, 61,1, 54,5, 54,4 ppm).
Příklad 2
Modifikace kyseliny hyaluronové s DTPA bis anhydridem
Kyselá forma kyseliny hyaluronové HA-COOH (10 kDa, 50 mg) byla rozpuštěna v bezvodém sulfolanu (5 ml) při 60 °C. DTPA bisanhydrid (95 mg) byl přidán k roztoku polysacharidu při 60 °C a směs byla míchána 24 h bez přístupu vzdušné vlhkosti. Po ochlazení ledovou vodou byla přidána destilovaná voda a roztok 150 mg Na2CO3 v 30 ml vody, směs se míchala 30 min a potom byla zředěna destilovanou vodou na 100 ml a dialyzována proti destilované vodě 7 krát 1 1. Výsledný roztok byl lyofilizován za vzniku 78 mg produktu.
Mw = 2600 kDa, Polydisperzita = 2,951 (stanoveno pomocí metody SEC-MALL),
IR 1739 cm1, stupeň substituce 98 % (počítáno z NMR na dimer polysacharidu),*H NMR (měřeno po přidání 0,02 ml 20 % aq NaOD) DTPA (δ 2,55 4H, 2,6 4H, 3,10 2H, 3,5 6H), l3C NMR DTPA (δ 183,0, 182,8, 61,5, 61,1, 54,5, 54,4 ppm).
Příklad 3
Modifikace kyseliny hyaluronové s DTPA bis anhydridem
Kyselá forma kyseliny hyaluronové HA-COOH (350 kDa, 50 mg) byla rozpuštěna v bezvodém DMSO (5 ml) při 60 °C. DTPA bisanhydrid (95 mg) byl přidán k roztoku polysacharidu při 60 °C a směs byla míchána 24 h bez přístupu vzdušné vlhkosti. Po ochlazení ledovou vodou byla přidána destilovaná voda a roztok 150 mg Na2CO3 v 30 ml vody, směs se míchala 30 min a potom byla zředěna destilovanou vodou na 100 ml a dialyzována proti destilované vodě 7 krát
1 1. Výsledný roztok byl lyofilizován za vzniku 83 mg produktu.
IR 1739 cm”1, stupeň substituce 90 % (počítáno z NMR na dimer polysacharidu),1 H NMR (měřeno po přidání 0,02 ml 20 % aq NaOD) DTPA (δ 2,55 4H, 2,6 4H, 3,10 2H, 3,5 6H), 13C NMR DTPA (δ 183,0, 182,8, 61,5, 61,1, 54,5, 54,4 ppm).
-6Příklad 4
Modifikace kyseliny hyaluronové s DTPA bis cmhydridem
Kyselá forma kyseliny hyaluronové HA-COOH (350 kDa, 50 mg) byla rozpuštěna v bezvodém
DMSO (5 ml) při 60 °C. DTPA bisanhydrid (25 mg) byl přidán k roztoku polysacharidu při °C a směs byla míchána 24 h bez přístupu vzdušné vlhkosti. Po ochlazení ledovou vodou byla přidána destilovaná voda a roztok 150 mg Na2CO3 v 30 ml vody, směs se míchala 30 min io a potom byla zředěna destilovanou vodou na 100 ml a dialyzována proti destilované vodě 7 krát
I. Výsledný roztok byl lyofilízován za vzniku 61 mg produktu.
IR 1739 cm'\ stupeň substituce 30 % (počítáno z NMR na dimer polysacharidu),*H NMR (měřeno po přidání 0,02 ml 20 % aq NaOD) DTPA (δ 2,55 4H, 2,6 4H, 3,10 2H, 3,5 6H), 13C NMR
DTPA (δ 183,0, 182,8, 61,5, 61,1, 54,5, 54,4 ppm
Příklad 5
Modifikace kyseliny hyaluronové s DTPA bis cmhydridem
Kyselá forma kyseliny hyaluronové HA-COOH (350 kDa, 50 mg) byla rozpuštěna v bezvodém DMSO (5 ml) při 60 °C. DTPA bisanhydrid (10 mg) byl přidán k roztoku polysacharidu při 60 °C a směs byla míchána 24 h bez přístupu vzdušné vlhkosti. Po ochlazení ledovou vodou byla přidána destilovaná voda a roztok 150 mg Na2CO3 v 30 ml vody, směs se míchala 30 min a potom byla zředěna destilovanou vodou na 100 ml a dialyzována proti destilované vodě 7 krát 1 1. Výsledný roztok byl lyofilízován za vzniku 53 mg produktu.
IR 1739 cm-1, stupeň substituce 6 % (počítáno z NMR na dimer polysacharidu), *H NMR (měřeno po přidání 0,02 ml 20 % aq NaOD) DTPA (δ 2,55 4H, 2,6 4H, 3,10 2H, 3,5 6H), I3C NMR DTPA (δ 183,0, 182,8, 61,5, 61,1, 54,5, 54,4 ppm).
Příklad 6
Modifikace kyseliny hyaluronové s DTPA bis anhydridem
Kyselá forma kyseliny hyaluronové HA-COOH (2000 kDa, 50 mg) byla rozpuštěna v bezvodém DMSO (10 ml) při 60 °C. DTPA bisanhydrid (95 mg) byl přidán k roztoku polysacharidu při
60 °C a směs byla míchána 24 h bez přístupu vzdušné vlhkosti. Po ochlazení ledovou vodou byla přidána destilovaná voda a roztok 150 mg Na2CO3 v 30 ml vody, směs se míchala 30 min a potom byla zředěna destilovanou vodou na 100 ml a dialyzována proti destilované vodě 7 krát 11. Výsledný roztok byl lyofilízován za vzniku 68 mg produktu.
IR 1739 cm“1, stupeň substituce 76 % (počítáno z NMR na dimer polysacharidu),’H NMR (měřeno po přidání 0,02 ml 20 % aq NaOD) DTPA (δ 2,55 4H, 2,6 4H, 3,10 2H, 3,5 6H), BC NMR DTPA (δ 183,0,182,8, 61,5, 61,1, 54,5, 54,4 ppm).
-7CZ 301555 B6
Příklad 7
Příprava komplexů HA-DTPA-Gd
R = Na,H, HA R'=Na,H
Schéma 4
Do roztoku HA-DTPA (modifikované kyseliny hyaluronové z příkladu 5) (stupeň substituce ío 6 % mol, počítáno na dimer kyseliny hyaluronové, 1 g) ve vodě (100 ml) byl přidán 1% roztok
GdCl3.6H2O (40 mg GdCl3.6H2O,0,04 eq ve vodě) a směs byla míchána 1 h při teplotě místnosti. Výsledný roztok byl pak dialyzován oproti 1 litru destilované vody, přičemž v oddialyzovaném roztoku po odpaření solventu nebyla zjištěna přítomnost gadolinia pomocí chelatačního barviva xylenolové oranže v acetátovém pufru. Z této skutečnosti a z faktu, že takto lze detekovat koncentraci Gd v 10“3 mg/ml, je možné usoudit, že víc než 95 % přidaného gadolinia bylo vázáno v HA-DTPA.
Příklad 8
Příprava komplexů HA-DTPA-Fe
R-Na,H, HA R'=Na,H
Schéma 5
Do roztoku HA-DTPA (modifikované kyseliny hyaluronové z příkladu 5) (stupeň substituce 6 % mol, počítáno na dimer kyseliny hyaluronové, 1 g) ve vodě (100 ml) byl přidán 1% roztok FeCl3 (20 mg FeCl3, 0,04 eq ve vodě) a směs byla míchána 1 h při teplotě místnosti. Výsledný
-8CZ □«!□□□ DO i
i roztok byl pak dialyzován oproti 1 litru destilované vody, přičemž v oddialyzovaném roztoku po odpaření solventu nebyla zjištěna přítomnost železa pomocí chelataěního barviva xylenolové oranže v acetátovém pufru. Z této skutečnosti a z faktu, že takto lze detekovat koncentraci Fe v 10^ mg/ml, je možné usoudit, že víc než 97 % přidaného železa bylo vázáno v HA-DTPA.
Příklad 9
Příprava komplexů HA-DTPA-In
R = Na,H,HA
R1=Na,H
Schéma 6
Do roztoku HA-DTPA (modifikované kyseliny hyaluronové z příkladu 5) (stupeň substituce 15 6 % mol, počítáno na dimer kyseliny hyaluronové, 1 g) ve vodě (100 ml) byl přidán 1% roztok
InCl3 (17 mg lnCl3, 0,04 eq ve vodě) a směs byla míchána 1 h při teplotě místnosti. Výsledný roztok byl pak dialyzován oproti 1 litru destilované vody, přičemž v oddialyzovaném roztoku po odpaření solventu nebyla zjištěna přítomnost india pomocí chelataěního barviva xylenolové oranže v acetátovém pufru. Z této skutečnosti a z faktu, že takto lze detekovat koncentraci In v 10 4 mg/ml, je možné usoudit, že víc než 97 % přidaného india bylo vázáno v HA-DTPA.
Příklad 10
Příprava komplexů HA-DTPA- Eu
R = Na,H,HA R’=Na,H
Schéma 7
-9CZ 301555 B6
Do roztoku HA-DTPA (modifikované kyseliny hyaluronové z příkladu 5) (stupeň substituce 6 % mol, počítáno na dimer kyseliny hyaluronové, 1 g) ve vodě (100 ml) byl přidán 1% roztok EuCl3 (40 mg EuC13, 0,04 eq ve vodě) a směs byla míchána 1 h při teplotě místnosti. Výsledný roztok byl pak dialyzován oproti 1 litru destilované vody, přičemž v oddialyžovaném roztoku po odpaření solventu nebyla zjištěna přítomnost europia pomocí chelatačního barviva xylenolové oranže v acetátovém pufru. Z této skutečnosti a z faktu, že takto lze detekovat koncentraci Eu v 10“3 g/ml, je možné usoudit, že víc než 95 % přidaného europia bylo vázáno v HA-DTPA.
io
Příklad 11
Příprava komplexů HA-DTPA-Tb
R = Na,H, HA R'=Na,H
Schéma 8
Do roztoku HA-DTPA (modifikované kyseliny hyaluronové z příkladu 5) (stupeň substituce 20 6 % mol, počítáno na dimer kyseliny hyaluronové, l g) ve vodě (100 ml) byl přidán 1% roztok
TbCl3 (40 mg TbCl3, 0,04 eq ve vodě) a směs byla míchána 1 h při teplotě místnosti. Výsledný roztok byl pak dialyzován oproti 1 litru destilované vody, přičemž v oddialyzovaném roztoku po odpaření solventu nebyla zjištěna přítomnost therbia pomocí chelatačního barviva xylenolové oranže v acetátovém pufru. Z této skutečnosti a z faktu, že takto lze detekovat koncentraci Tb v 10 3 g/ml, je možné usoudit, že víc než 95 % přidaného therbia bylo vázáno v HA-DTPA.
-10Vii uu
Příklad 12
Schéma 9
Do roztoku HA-DTPA (modifikované kyseliny hyaluronové z příkladu 5) (stupeň substituce 6 % mol, počítáno na dimer kyseliny hyaluronové, 1 g) ve vodě (100 ml) byl přidán 1% roztok ZnCh (0,04 eq) ve vodě a směs byla míchána 1 h při teplotě místnosti. Výsledný roztok byl pak dialyzován oproti 1 litru destilované vody, přičemž v oddíalyzovaném roztoku po odpaření solventu nebyla zjištěna přítomnost zinku pomocí chelatačního barviva xylenolové oranže v acetáto15 vém pufru. Z této skutečnosti a z faktu, že takto lze detekovat koncentraci Zn v 10^ mg/ml, je možné usoudit, že víc než 97 % přidaného zinku bylo vázáno v HA-DTPA.
Příklad 13
Příprava komplexů HA-DTPA-Ca
R = Na,H, HA R*=Na,H
Schéma 10
Do roztoku HA-DTPA (0,1 g, stupeň substituce 30 % mol, počítáno na dimer hyaluronové kyseliny, derivát z příkladu 4) v 10 ml vody byl přidán roztok CaCl2 (0,3 eq) ve vodě (2 ml) a směs
-11CZ 301555 B6 byla míchána 1 h při teplotě místnosti. Reakční směs byla pak zředěna na 300 ml dialyzována oproti 7 krát 1 I destilované vody. Výsledný roztok byl lyofilizován za vzniku 110 mg produktu.
IR 1739 cm'1, 'H NMR (měřeno po přidání 0,02 ml 20% aq NaOD) DTPA (δ 2,4 4H, 2,7 4H, 5 3,15 2H, 3,30 6H) l3C NMR DTPA (δ 64,4, 62,6, 58,5, 57,9 ppm).
ICP 3,1% Ca.
io Přiklad 14
Příprava komplexů HA-DTPA-Mg
R = Na,H,HA R’=Na,H
Schéma 11
Do roztoku HA-DTPA (0,1 g, stupeň substituce 30 % mol, počítáno na dimer hyaluronové kyseliny, derivát z příkladu 4) v 10 ml vody byl přidán roztok MgCb (0,3 eq) ve vodě (2 ml) a směs byla míchána 1 h při teplotě místnosti. Reakční směs byla pak zředěna na 300 ml dialyzována oproti 7 krát 11 destilované vody. Výsledný roztok byl lyofilizován za vzniku 110 mg produktu.
IR 1739 cm1, 'H NMR (měřeno po přidání 0,02 ml 20% aq NaOD) DTPA (δ 2,4 4H, 2,7 4H, 3,15 2H, 3,30 6H) l5C NMR DTPA (δ 64,4,62,6, 58,5,57,9 ppm).
ICP 2,3% Mg.
Příklad 15
Alkylace HA-DTPA-HA s alkylhalogenidy
Síťovaná forma kyseliny hyaluronové HA-DTPA (100 mg, derivát z příkladu 1) byla rozpuštěna ve vodě na 1% roztok a DMSO bylo přidáváno až do vzniku jemného zákalu pri teplotě místnos35 ti. Do směsi přidán nasycený vodný roztok NaHCO3 (2 eq), hexyíbromid (2 eq) a roztok byl zahříván na 60 °C 48 h. Po ochlazení ledovou vodou byl přidán nasycený vodný roztok Na2CO3 (5 eq), směs se míchala 30 min a pak byla zředěna destilovanou vodou na 150 ml, dialyzována oproti 5 litrům destilované vody (opakováno 7 krát). Výsledný roztok byl lyofilizován za vzniku 90 mg produktu.
- 12CL JU1333 BO
IR 1738 cm’1, lH NMR hexyl (8 0,85 3H, 1,3 4H, 1,35 2H, 1,70 2H, 4,25 2H)
Přiklad 16
Alkylace HA-DTPA-HA s alkyltosyláty
Síťovaná forma kyseliny hyaluronové HA-DTPA (100 mg, derivát z příkladu 1) byla rozpuštěna ve vodě na 0,5% roztok. Do směsi přidán nasycený vodný roztok NaHCO3 (2 eq), hexyl tosylát io (2 eq) a roztok byl zahříván na 60 °C 48 h. Po ochlazení ledovou vodou byl přidán nasycený vodný roztok Na2CO3 (5 eq), směs se míchala 30 min a pak byla zředěna destilovanou vodou na
150 ml, dialyzována oproti 5 litrům destilované vody (opakováno 7 krát). Výsledný roztok byl lyofilizován za vzniku 90 mg produktu.
IR 1737 cm“1, *H NMR hexyl (δ 0,86 3H, 1,3 4H, 1,35 2H, 1,70 2H, 4,27 2H).

Claims (6)

  1. 20 PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Způsob přípravy derivátů kyseliny hyaluronové reakcí kyseliny hyaluronové s anhydridem karboxylové kyseliny, vyznačující se tím, žese kyselina hyaluronová rozpustí ve
    25 slabě kyselém až neutrálním polárním aprotickém rozpouštědle, přidá se anhydrid karboxylové kyseliny při teplotě v rozmezí od 15 °C do 70 °C a směs se míchá po dobu 1 až 150 hodin, přičemž anhydrid karboxylové kyseliny je protonizovaný pomocí kyseliny hyaluronové na protonizovaný bis anhydrid diethylen-triaminpentaoctové kyseliny.
    30
  2. 2. Způsob přípravy podle nároku 1, vyznačující se tím, že kyselina hyaluronová je ve formě volné kyseliny.
  3. 3. Způsob přípravy podle nároku 1, vyznačující se tím, že kyselina hyaluronová má molekulovou hmotnost v rozsahu 1.104 až 5.106 g.moT1 a polydisperzitu v rozsahu 1,02 až
    35 5,0.
  4. 4. Způsob přípravy podle nároku 1, vyznačující se tím, že slabě kyselé až neutrální polární aprotické rozpouštědlo je vybráno ze skupiny zahrnující DMSO, sulfolan nebo díalkylsulfony.
  5. 5. Způsob přípravy podle nároku 1, vyznačující se tím, že reakce kyseliny hyaluronové s protonizovaným bis anhydridem diethylentriaminpentaoctové kyseliny probíhá při teplotě 60 °C po dobu 24 hodin.
    45 6. Použití derivátu získaného způsobem podle nároku 1 pro přípravu komplexu derivátu kyseliny hyaluronové s navázanou diethylentriaminpentaoctovou kyselinou s atomy kovů, kde derivát reaguje s halogenidem nebo acetátem kovu v prostředí vody a/nebo polárního aprotického rozpouštědla.
    so 7, Použití podle nároku 6, kde atomy kovů jsou kovy alkalických zemin Ca, Mg nebo přechodné kovy Fe, Gd, In, Zn, Eu, Tb a rozpouštědlo je vybráno ze skupiny zahrnující DMSO, sulfolan nebo dialkylsulfony.
    -138. Použití derivátu získaného způsobem podle nároku 1 pro hydrofobizaci derivátu kyseliny hyaluronové s navázanou diethylentriaminpentaoctovou kyselinou pomocí alkylačních činidel, kde derivát reaguje s mono, bis anebo tris funkčním alkylačním činidlem obecného vzorce R-X
    5 obsahujícím jednu až tri skupiny X, kde Rje alkylový lineární nebo rozvětvený řetězec C| až C30, volitelně s obsahem aromatických nebo heteroaromatických skupin, a kde X je halogen nebo skupina - O SO2 R, v prostředí vody a/nebo polárního aprotického rozpouštědla a báze, pri teplotě 15 °C až 70 °C po dobu 1 až 150 hodin.
  6. 10 9. Použití podle nároku 8, kde báze je vybrána ze skupiny zahrnující anorganické sloučeniny obecného vzorce MHCO3, M2CO3, MF, kde M je alkalický kov, nebo dusíkaté organické sloučeniny obecného vzorce R3N, kde R je alkylový, lineární nebo rozvětvený řetězec Ci až C30 volitelně s obsahem aromatických nebo heteroaromatických skupin, a rozpouštědlo je vybráno ze skupiny zahrnující DMSO, sulfolan nebo dialkylsulfony.
CZ20080705A 2008-11-06 2008-11-06 Zpusob prípravy DTPA sítovaných derivátu kyseliny hyaluronové a jejich modifikace CZ2008705A3 (cs)

Priority Applications (9)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ20080705A CZ2008705A3 (cs) 2008-11-06 2008-11-06 Zpusob prípravy DTPA sítovaných derivátu kyseliny hyaluronové a jejich modifikace
US13/127,871 US20110218331A1 (en) 2008-11-06 2009-11-05 Method of Preparation of DTPA Crosslinked Hyaluronic Acid Derivatives and Modification of Said Dervivatives
PCT/CZ2009/000131 WO2010051783A1 (en) 2008-11-06 2009-11-05 Method of preparation of dtpa crosslinked hyaluronic acid derivatives and modification of said derivatives
BRPI0916131A BRPI0916131A2 (pt) 2008-11-06 2009-11-05 método de preparação de derivados do ácido hialurônico e uso de um derivado obtido pelo método
CA2742428A CA2742428A1 (en) 2008-11-06 2009-11-05 Method of preparation of dtpa crosslinked hyaluronic acid derivatives and modification of said derivatives
KR1020117012900A KR20110082609A (ko) 2008-11-06 2009-11-05 Ｄｔｐａ가 가교된 히알루론산 유도체의 제조 방법 및 상기 유도체의 변형 방법
JP2011534998A JP2012507615A (ja) 2008-11-06 2009-11-05 Ｄｔｐａ架橋ヒアルロン酸誘導体の調製方法及び前記誘導体の修飾
RU2011121239/13A RU2011121239A (ru) 2008-11-06 2009-11-05 Способ получения производных гиалуроновой кислоты
EP09801645A EP2350135A1 (en) 2008-11-06 2009-11-05 Method of preparation of dtpa crosslinked hyaluronic acid derivatives and modification of said derivatives

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ20080705A CZ2008705A3 (cs) 2008-11-06 2008-11-06 Zpusob prípravy DTPA sítovaných derivátu kyseliny hyaluronové a jejich modifikace

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ301555B6 true CZ301555B6 (cs) 2010-04-14
CZ2008705A3 CZ2008705A3 (cs) 2010-04-14

Family

ID=41694684

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20080705A CZ2008705A3 (cs) 2008-11-06 2008-11-06 Zpusob prípravy DTPA sítovaných derivátu kyseliny hyaluronové a jejich modifikace

Country Status (9)

Country Link
US (1) US20110218331A1 (cs)
EP (1) EP2350135A1 (cs)
JP (1) JP2012507615A (cs)
KR (1) KR20110082609A (cs)
BR (1) BRPI0916131A2 (cs)
CA (1) CA2742428A1 (cs)
CZ (1) CZ2008705A3 (cs)
RU (1) RU2011121239A (cs)
WO (1) WO2010051783A1 (cs)

Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2010163485A (ja) * 2009-01-13 2010-07-29 Teijin Ltd カルボキシ多糖類の溶液
CZ302504B6 (cs) 2009-12-11 2011-06-22 Contipro C A.S. Derivát kyseliny hyaluronové oxidovaný v poloze 6 glukosaminové cásti polysacharidu selektivne na aldehyd, zpusob jeho prípravy a zpusob jeho modifikace
CZ302503B6 (cs) 2009-12-11 2011-06-22 Contipro C A.S. Zpusob prípravy derivátu kyseliny hyaluronové oxidovaného v poloze 6 glukosaminové cásti polysacharidu selektivne na aldehyd a zpusob jeho modifikace
KR101480393B1 (ko) * 2011-10-13 2015-01-09 전남대학교병원 간암 진단을 위한 조영제용 가돌리늄 착물과 이를 이용한 간암 진단용 조영제
CZ2012136A3 (cs) 2012-02-28 2013-06-05 Contipro Biotech S.R.O. Deriváty na bázi kyseliny hyaluronové schopné tvorit hydrogely, zpusob jejich prípravy, hydrogely na bázi techto derivátu, zpusob jejich prípravy a pouzití
CZ2012282A3 (cs) * 2012-04-25 2013-11-06 Contipro Biotech S.R.O. Zesítovaný derivát hyaluronanu, zpusob jeho prípravy, hydrogel a mikrovlákna na jeho bázi
CZ304512B6 (cs) 2012-08-08 2014-06-11 Contipro Biotech S.R.O. Derivát kyseliny hyaluronové, způsob jeho přípravy, způsob jeho modifikace a použití
CZ304654B6 (cs) 2012-11-27 2014-08-20 Contipro Biotech S.R.O. Nanomicelární kompozice na bázi C6-C18-acylovaného hyaluronanu, způsob přípravy C6-C18-acylovaného hyaluronanu, způsob přípravy nanomicelární kompozice a stabilizované nanomicelární kompozice a použití
CZ2014150A3 (cs) 2014-03-11 2015-05-20 Contipro Biotech S.R.O. Konjugáty oligomeru kyseliny hyaluronové nebo její soli, způsob jejich přípravy a použití
CZ2014451A3 (cs) 2014-06-30 2016-01-13 Contipro Pharma A.S. Protinádorová kompozice na bázi kyseliny hyaluronové a anorganických nanočástic, způsob její přípravy a použití
CZ309295B6 (cs) 2015-03-09 2022-08-10 Contipro A.S. Samonosný, biodegradabilní film na bázi hydrofobizované kyseliny hyaluronové, způsob jeho přípravy a použití
CZ2015398A3 (cs) 2015-06-15 2017-02-08 Contipro A.S. Způsob síťování polysacharidů s využitím fotolabilních chránicích skupin
CZ306662B6 (cs) 2015-06-26 2017-04-26 Contipro A.S. Deriváty sulfatovaných polysacharidů, způsob jejich přípravy, způsob jejich modifikace a použití
CZ308106B6 (cs) 2016-06-27 2020-01-08 Contipro A.S. Nenasycené deriváty polysacharidů, způsob jejich přípravy a jejich použití
US20190264008A1 (en) * 2016-10-31 2019-08-29 Kewpie Corporation Gel Composition and Method for Producing Same

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5690961A (en) * 1994-12-22 1997-11-25 Hercules Incorporated Acidic polysaccharides crosslinked with polycarboxylic acids and their uses
US6509039B1 (en) * 1996-02-09 2003-01-21 Merck Patent Gesellschaft Crosslinked products of biopolymers containing amino groups
JP3975267B2 (ja) * 2002-06-03 2007-09-12 独立行政法人産業技術総合研究所 多糖物質のアシル化方法
CZ2006605A3 (cs) * 2006-09-27 2008-04-09 Cpn Spol. S R. O. Zpusob modifikace polysacharidu

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SE456346B (sv) 1984-07-23 1988-09-26 Pharmacia Ab Gel for att forhindra adhesion mellan kroppsvevnader och sett for dess framstellning
US4582865A (en) 1984-12-06 1986-04-15 Biomatrix, Inc. Cross-linked gels of hyaluronic acid and products containing such gels
US4713448A (en) 1985-03-12 1987-12-15 Biomatrix, Inc. Chemically modified hyaluronic acid preparation and method of recovery thereof from animal tissues
GB8519416D0 (en) 1985-08-01 1985-09-04 Unilever Plc Oligosaccharides
US4937270A (en) 1987-09-18 1990-06-26 Genzyme Corporation Water insoluble derivatives of hyaluronic acid
US5783691A (en) 1989-02-08 1998-07-21 Biomatrix, Inc. Crosslinked hyaluronate gels, their use and method for producing them
JP3563440B2 (ja) 1994-05-16 2004-09-08 生化学工業株式会社 アシル化ヒアルロン酸の製造法
EP0763754B1 (en) 1995-09-13 2003-01-08 Seikagaku Kogyo Kabushiki Kaisha (Seikagaku Corporation) Photocured crosslinked-hyaluronic acid contact lens
WO1997018224A1 (en) 1995-11-13 1997-05-22 Human Genome Sciences, Inc. Human stem cell antigen 2
GB9902652D0 (en) 1999-02-05 1999-03-31 Fermentech Med Ltd Process
DE60117502T2 (de) 2000-12-19 2006-08-24 Seikagaku Corp. Photohärtbare Derivate von Hyaluronsäure, Verfahren zu deren Herstellung, vernetztes und photogehärtetes Derivat der Hyaluronsäure und diese enthaltendes medizinisches Material
US6673919B2 (en) * 2001-03-30 2004-01-06 Chisso Cororation Chemically modified hyaluronic acid or salts thereof, and a process for producing thereof
ITMI20022745A1 (it) 2002-12-23 2004-06-24 Coimex Scrl United Companies Esteri misti dell'acido ialuronico ad attivita' citostatica e prodifferenziante e procedimento per la loro produzione.
JP4745826B2 (ja) 2003-11-14 2011-08-10 中外製薬株式会社 架橋多糖微粒子およびその製造方法
US8124120B2 (en) 2003-12-22 2012-02-28 Anika Therapeutics, Inc. Crosslinked hyaluronic acid compositions for tissue augmentation
ITRM20040318A1 (it) 2004-06-28 2004-09-28 Univ Palermo Idrogeli di acido ialuronico e alfa, beta-poliaspartilidrazide e loro applicazioni in campo biomedico e farmaceutico.
WO2007129828A1 (en) 2006-05-04 2007-11-15 Seoul National University Industry Foundation Preparation method of porous hyaluronic acid sponge for cell delivery system

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5690961A (en) * 1994-12-22 1997-11-25 Hercules Incorporated Acidic polysaccharides crosslinked with polycarboxylic acids and their uses
US6509039B1 (en) * 1996-02-09 2003-01-21 Merck Patent Gesellschaft Crosslinked products of biopolymers containing amino groups
JP3975267B2 (ja) * 2002-06-03 2007-09-12 独立行政法人産業技術総合研究所 多糖物質のアシル化方法
CZ2006605A3 (cs) * 2006-09-27 2008-04-09 Cpn Spol. S R. O. Zpusob modifikace polysacharidu

Also Published As

Publication number Publication date
KR20110082609A (ko) 2011-07-19
WO2010051783A1 (en) 2010-05-14
EP2350135A1 (en) 2011-08-03
RU2011121239A (ru) 2012-12-20
JP2012507615A (ja) 2012-03-29
US20110218331A1 (en) 2011-09-08
CA2742428A1 (en) 2010-05-14
BRPI0916131A2 (pt) 2015-11-03
CZ2008705A3 (cs) 2010-04-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ301555B6 (cs) Zpusob prípravy DTPA sítovaných derivátu kyseliny hyaluronové a jejich modifikace
Fernando et al. Advances in functionalizing fucoidans and alginates (bio) polymers by structural modifications: A review
CA2420618C (en) Percarboxylated polysaccharides, and a process for their preparation
Sashiwa et al. Chemical modification of chitosan. 14: Synthesis of water-soluble chitosan derivatives by simple acetylation
Kato et al. TEMPO-mediated oxidation of chitin, regenerated chitin and N-acetylated chitosan
AU2001291815A1 (en) Percarboxylated polysaccharides, and a process for their preparation
Gicquel et al. Adsorption versus grafting of poly (N-Isopropylacrylamide) in aqueous conditions on the surface of cellulose nanocrystals
CZ2009836A3 (cs) Derivát kyseliny hyaluronové oxidovaný v poloze 6 glukosaminové cásti polysacharidu selektivne na aldehyd, zpusob jeho prípravy a zpusob jeho modifikace
CZ302856B6 (cs) Zpusob prípravy derivátu polysacharidu
EP3071602B1 (en) Nanofibers containing photocurable ester derivative of hyaluronic acid or its salt, photocured nanofibers, method of synthesis thereof, preparation containing photocured nanofibers and use thereof
CA2481491A1 (en) Amidinated or guanidinated polysaccharides, their use as absorbents and a process for producing same
Muhitdinov et al. Preparation of sodium cellulose sulfate oligomers by free-radical depolymerization
ITPD950089A1 (it) Acido ialuronico e suoi derivati esterei per la preparazione di matri- ci per il rilascio controllato di farmaci
Feng et al. Solubility, chain characterization, and derivatives of chitin
Ma et al. Dissolution and functionalization of celluloses using 1, 2, 3-triazolium ionic liquid
Würfel et al. Chemical Modification of Pectin and Polygalacturonic Acid: A Critical Review.
JP6982321B2 (ja) 多糖類の不飽和誘導体，その調製方法及びその使用
Elsayed et al. Fabrication of photo-active trans-3-(4-pyridyl) acrylic acid modified chitosan
EP1023328B1 (en) Carboxylated polysaccharides 6-substituted
CN112812200B (zh) 巯基改性高分子化合物及其制备方法和用途
JP2003252905A (ja) 架橋ヒアルロン酸
CN109803984A (zh) 制备酯化纤维素醚的有效方法
Gao Regioselective chlorination of cellulose esters
JP2018515657A (ja) 高分子量のエステル化セルロースエーテルを調製するプロセス
JP4207416B2 (ja) 酸化ポリアミノ糖誘導体の製造方法

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20191106