PT89474A

PT89474A - Processo para a preparacao de sais de cefalosporina e de composicoes injectaveis que os contem

Info

Publication number: PT89474A
Application number: PT89474A
Authority: PT
Inventors: Murray Arthur Kaplan; Thomas W Hudyma; Robert Alan Lipper; Kun Mao Shih; Susan D Boettger
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 1988-01-19
Filing date: 1989-01-18
Publication date: 1990-02-08
Also published as: NL8900111A; CA1298288C; HK72292A; AU615509B2; NL192266B; IT8947539A0; NL192266C; FR2626003A1; HUT50347A; CY1663A; US4910301A; GB8901073D0; FI890213L; CZ24389A3; DK20789A; FI86854B; SK281768B6; CZ281602B6; HU205940B; PT89474B

Description

BRISTOL-MYERS SQUIBB COMPANY

"PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE SAIS DE CEFALOSPORINA

E DE COMPOSIÇÕES INJECTÁVEIS QUE OS CONTEM"

Resumo da patente de invenção

Os sais de adiçao cristalinos, derivados do 7 — (õ< — — ( 2-aminotiazol-4-il)-«(-(Z)-metoximino-acetamido J-3-£(l-me-til-l-pirrolidínio)-metil3-3-cefem-A-carooxilato, do ácido sulfúrico, do ácido di-nítrico, do ácido mono-cloridrico, do ácido di-clorídrico e do ácido di e sesqui-ortofosfórico sao estáveis mesmo a temperaturas elevadas. 0 sal de adiçao criS; talino derivado do ácido sulfúrico prepara-se misturando a) pelo menos um equivalente molar de ácido sulfúrico com b) iao dipolar numa quantidade tal que a sua concentração na mistura seja superior a 25 rag/ml, provocando a cristalizaçao, separando os cristais, lavando-os e secando-os. Os monoclori-dratos, dicloridratos e ortofosfatos cristalinos preparam-se dissolvendo o iao dipolar na quantidade apropriada de ácido, provocando a cristalizaçao, mediante adiçao de acetona, e se parando os cristais. Misturas físicas destes sais com determinadas bases em proporçoes que dêm origem a um pH compreendido entre cerca de 3,5 e cerca de 7, quando diluídas com á-gua, permitem a preparaçao de composiçoes ir.jectáveis após djl luiçao. -2-

Referência a pedidos de patentes de invenção relacionadas

Este pedido de patente de invenção é uma continuação, em parte, de um pedido copendente de uma patente de invenção norte-americana NQ 901 088 concedida em 27 de Agosto de 1986, que, por sua vez, é uma continuação, em parte, de um pe^ dido de patente de invenção norte-americana NQ 762 235, conce dida em 5 de Agosto de 1985 e actualmente abandonada.

Breve descrição dos gráficos A figura 1 é um gráfico que representa o espectro de absorçao infravermelho do sulfato cristalino de 7-[<<-( 2-anti notiazol-4-il)-e<-(Z)-metoximinoacetamido3-3-£(l-metil-l-pírro-lidínio)-metilj-3-cefem-4-carboxilato determinado numa diluição de brometo depotassio correspondente. A figura 2 é uma representação gráfica do espectro de absorçao infravermelho do sesquifosfato cristalino do 7--[j<-(2-aminotiazol-4-il)-j(-(Z)-metoximinoacetamido3-3-£( 1-jite til-l-pirrolidínio)-metilj - 3-cefem-A-carboxilato determinado numa diluição de brometo de potássio correspondente. A figura 3 representa um gráfico do espectro de absorçao infravermelho do difosfato cristalino do 7- [*-( 2-am_i notiazol-4-il)-il-(Z)-metoximinoacetamidoJ-3-(]( 1-metil-l-pirro^ lidínio)-metil3-3-cefem-4-carboxilato determinado numa diluição de brometo de potássio correspondente. A figura A representa um gráfico do espectro de absorçao infravermelho do diclorídrato mono-hidratado cristalino do 7-[<*-(2-aminotiazol-4-il)-il-(Z)-metoximinoacetamidoJ-3--£(l-metil-l-pirrolidíno)-metil^-3-cefem-4-carboxilato. -3-

Campo da invenção A presente invenção diz respeito a sais de cefalos-porina semi-sintéticos estáveis a temperaturas elevadas, cuja preparaçao nao consta na literatura da especialidade, para a preparaçao desses sais e às misturas que os contêm.

Antecedentes da invenção A patente de invenção norte-americana NQ 406 899 de autoria de Aburaki et al., diz respeito ao 7-[rt-(2-aminotia-.zol-4-il)-<A-(Z)-metoximinoacetamido]]-3-[(l-metil-l-pirrolidí-nio)-metil·^-3-cefem-4-carboxilato sob a forma de iao dipolar e menciona os sais de adiçao de ácidos correspondentes (que se encontram sob a forma de iao dipolar em composiçoes injectá-veis) e demonstra que a forma iao dipolar exibe um espectro de acçao mais amplo do que a ceftazidima e a cefotaxima.

Contudo, as cefalosporinas citadas antes e descritas por Aburaki et al., sao estáveis apenas durante algumas horas quando incluídas em composiçoes injectaveis e a forma de iao dipolar, mesmo quando se apresenta sob a forma de po seco, e instável ã temperatura ambiente e exibe uma perda de activid_a de de 30% ou superior quando armazenada a temperaturas elevadas (p.ex. , 45° C ou temperaturas superiores), mesmo quando e^ se período e uma semana e, consequentemente, necessita de uma embalagem isoladora especial e/ou refrigeração, o que representa uma desvantagem quanto à armazenagem e embalagem quando se compara com a ceftazidima e o composto cefotaxima.

Embora Aburaki et al. mencionem sais de adiçao de de ácido, a patente nao descreve a preparaçao dos mesmos nem -4-

---yr especifica se alguns deles exibe boa estabilidade sob a forma de po seco. Kessler et al., "Comparison of a New Cephalosporin, BMY 28142, with Other Broad-Spectrumψ -Lactam Antibiotics", An-timicrobial Agents and Chemotherapy, Vol. 27, Ns 2, pp.207-216, Fevereiro de 1985, mencionam o sulfato mas nao explicam a sua preparaçao nem revelam se este sal é estável à temperatura a_m biente e a temperaturas elevadas sob a forma de pó seco.

Sumário da invenção

Os autores da presente invenção descobriram que certos sais de adiçao de acido cristalinos derivados do 7-[«*-(2-aminotiazol--4-il)-jfi-(Z)-metoxiniinoacetamido3-3-£(l-rnetil-l-pirrolidínio)--metil]-3-cefem-4-carboxilato sob a forma de pó seco, exibem excelente estabilidade à temperatura ambiente e maior estabilidade a temperaturas elevadas tendo como termo de comparaçao a forma de iao anfotérico. A expressão "sob a forma de pó seco", utilizada na presente invenção, significa um valor de hu_ midade inferior a 5% em peso determinado por perda de peso ou secagem à pressão atmosférica e a uma temperatura inferior a 70° C.

Estes sais de adiçao de ácido sao sais cristalinos do 7-(«*-(2-aminotiazol-4-il)-(A-(Z)-metoximinoacetamidoj-3--£(l-metil-l-pirrolidínio)-metil]-3-cefem-4-carboxilato escolhidos entre os sais de adiçao de acido derivados dos ácidos sulfúrico, azótico (di-nitratos), clorídrico (mono- e di-clo-ridratos) e sais de adiçao de ácido derivados do ácido orto-fosforico (1,5 a 2 moles de ácido ortofosfórico/mole de sal, 'p.ex., numa proporção de sais de acido sesqui- para di-orto- -5- fosfórico) ou os seus produtos de solvataçao. 0 termo "cristã lino" utiliza-se na presente invenção para significar, pelo m^ nos, um arranjo de moléculas até certo ponto característico. Enquanto os sais de adiçao de ácido derivados do ácido sulfú-rico, di-azótico, di-clorídrico e ortofosfórico descritos na presente invenção se preparam sob uma forma inteiramente cri£ talina (como se evidenciou por birrefringência utilizando microscópio polarizador) com um arranjo preciso de moléculas, o sal de adiçao do ácido mono-clorídrico preparou-se, apenas, com alguma regularidade no arranjo das suas moléculas (como se evidenciou através da deficiente birrefringência observada por microscópio polarizador) e não com um previsível arranjo definido e, assim, considera-se "deficientemente" cristalino. 0 termo "cristalino" utiliza-se na presente invenção englobando nao apenas os sais inteiramente cristalinos, mas também o sal de adiçao de ácido mono-clorídrico que se apresenta "deficientemente" cristalino.

Quando os sais de adiçao de ácido, de acordo com a presente invenção se preparam no seio de composiçoes injectá-veis aquosas, e se ajusta o pH até 6,0, obtém-se o iao dipo-lar em solução. 0 iao dipolar apresenta a seguinte estrutura

A utilização do espectro largo do iao dipolar contra vários organismos, bem como das composiçoes aquosas, pre^ paradas a partir dos sais de acordo com a presente invenção, -6- -6-

pode observar-se através dos dados apresentados por Aburaki et al. na patente de invenção norte-americana Ns 4 406 899.

As composiçoes aquosas preparadas a partir dos sais de adiçao de ácido, de acordo com a presente invenção, adicio^ nando simplesmente água estéril, fornecem soluçoes acidas que provocam irritaçao inaceitável quando administradas por via ejrç dovenosa a coelhos e sensaçao de dor inaceitável quando administradas por via intramuscular também a coelhos. Os sais de adiçao do ácido sulfúrico e do ácido di-azótico exibem solubilidades reduzidas e insuficientes para preparar composiçoes injectáveis características. 'Observou-se na presente invenção que estas carecterísticas que levantam objecçoes sao ultrapajs sadas utilizando os sais em misturas físicas (isto é, uma mis^ tura de sólidos) com uma base inorgânica ou orgânica nao tóxi_ ca, aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, em proporçoes capazes de fornecer um pH compreendido entre cerca de 3,5 e cerca de 7 mediante diluição com água para se obter uma acti-vidade do iao dipolar compreendida entre 1 mg/ml e 400 mg/ml, normalmente 250 mg/ml (determinado por cromatografia líquida de alta resolução que se designa, na presente invenção, por HPLC). 0 sal preferido para se utilizar como composto intermédio é o sal cristalino de adiçao do ácido sulfúrico. Prefere-se este sal devido à sua baixa solubilidade em água (25 mg/ /ml) o que permite separá-lo do meio aquoso em que se realizou a cristalizaçao e devido à sua excelente pureza. 0 sal de adiçao cristalino do ácido sulfúrico, prepara-se facilmente utilizando-se um processo que consiste em -7- -7-

a) formar uma mistura de (i) pelo menos 1 equivalente molar de ácido sulfúrico e (ii) iao dipolar numa quantidade tal que se encontre presente na mistura numa concentração superior a 25 mg/ml, b) provocar a cristalizaçao do sal de adiçao do ácido sulfúrico e c) isolar o sal de adiçao cristalino do acido su_l f úr ico.

Descrição detalhada

Os sais cristalinos descritos na presente invenção (referidos na mesma simplesmente como sais de acordo com a pre sente invenção) exibem excelente estabilidade à temperatura am biente e uma perda de potência (determinada por HPLC) inferior a 1%, quando armazenadosdurante um mês a temperatura ambiente. Estes sais exibem também excelente actividade a tempera^ turas elevadas e uma perda de potência, determinada por HPLC, inferior a 15% quando armazenados durante um mês a uma temperatura compreendida entre 45° e 56° C.

Na presente invenção prefere-se o sal de adiçao do ácido sulfúrico. Exibe uma perda de potência inferior a 10% quando armazenado durante um mês a uma temperatura compreendi_ da entre 45° e 56° C. Factor importante é a sua baixa solubilidade na água, isto é, cerca de 25 mg/ml e, consequentemente, a sua cristalizaçao na agua com perda residual mínima. 0 sal de adiçao do ácido di-azótico exibe também uma baixa solubilidade na água, isto é, cerca de 60 mg/ml e, consequentemente, fornece também perda residual baixa quando cri_s talizado na água.

Os sais de adiçao do acido mono- e di-clorídrico e ses -8- -8-

qui- ou di-ortofosfórico exibem solubilidades na água superiores a 200 mg/ml e, consequentemente, cristalizam, de preferên_ cia, no seio de dissolventes orgânicos, em vez de água, o que permite obter bons rendimentos.

Voltamos à preparaçao dos sais de acordo com a presente invenção.

Como se indicou previamente, prepara-se o sal de adi çao do ácido sulfúrico utilizando um processo que consiste a) em preparar uma mistura de (i) pelo menos um equivalente molar do ácido sulfúrico e (ii) iao dipolar correspondente ao sal ci^ tado antes numa quantidade tal que esteja presente na mistura numa concentração superior a 25 mg/ml, b) em provocar a cristalização e c) em isolar o sal de adiçao cristalino, derivado do ácido sulfúrico. 0 iao dipolar utiliza-se de preferência no passo a) numa quantidade tal que se encontre presente na mistura numa concentração compreendida entre cerca de 100 mg/ml e cerca de 200 mg/ml, realizando-se o passo b) no seio de um meio aquoso na ausência de dissolventes orgânicos. Na generalidade, nao se utiliza mais do que dois equivalentes molares de ácido sulfúrico no passo a). Na generalidade, no passo a) utiliza-se o iao dipolar numa quantidade tal que este esteja presente na mistura numa concentração inferior a 500 mg/ml. 0 passo a) também se realiza facilmente adicionando iao dipolar sólido a uma solução de ácido sulfúrico (p.ex.ác^ do sulfúrico IN) com agitaçao rápida para se obter uma solução. Alternativamente, pode realizar-se o passo a) dissolvendo o iao dipolar solido em água e adicionando lentamente ácido sulfúrico com agitaçao para se obter uma solução. -9-

0 passo b) realiza-se induzindo a cristalizaçao de preferência por sementeira e formando depois uma pasta, de pre^ ferência durante 15 minutos a duas horas. Prefere-se realizar esta cristalizaçao em meio aquoso na ausência de dissolventes orgânicos, obtendo-se neste caso purezas superiores a 98%. Eji quanto a presença de dissolventes orgânicos como, p.ex,, acetona, favorece a cristalizaçao e aumenta o rendimento diminuindo a solubilidade do sal de adiçao dc ácido sulfúrico for ma do no meio de cristalizaçao, pode também favorecer a precipitação de impurezas dando origem a uma pureza diminuída. Quando se utiliza o iao dipolarno passo a) numa quantidade tal que este se encontre presente na mistura numa quantidade infe^ rior a 25 mg/ml deve incluir-se no meio de cristalizaçao um dissolvente orgânico, de preferência acetona, para se conseguir uma separaçao razoável. Quando se utiliza a acetona as quantidades apropriadas sao 0,5 a 10 volumes por volume de meio de cristalizaçao aquoso. 0 passo c) realiza-se separando os cristais do meio de cristalizaçao, de preferência por filtraçao sob vácuo, lavando depois, p.ex., com uma mistura acetona/água, e depois com acetona ou com ácido sulfúrico 0,1N individualmente (p.ex., 1/10 em volume), depois com acetona (p.ex., 1/4 em volume), s£ cando depois p.ex., sob vácuo a uma temperatura compreendida entre 30° e 50° C durante quatro a vinte horas. 0 método, de acordo com a presente invenção, para a preparaçao do sal de adiçao do ácido sulfúrico, permite a purificação do ião dipolar devido à limitada solubilidade deste sal de adição comparada com a do iao dipolar e pode utilizar- -10- f -se na purificação desse iao sem o isolar sob a forma de um só lido. Se se pretende obter uma quantidade substancial de iao dipolar puro (base livre) a partir do sal de adiçao do ácido sulfúrico formado, basta dissolver-se o sal na água, adicionar hidróxido de bário octo-hidratado numa quantidade compreendida entre 90 e 100% da teórica, a um pH inferior a 6,5 para precipitar sulfato de bário, filtrar para eliminar o sulfa^ to de bário e recuperar o filtrado contendo o iao dipolar dis^ solvido e utilizá-lo sob a forma de solução ou isolando o iao anfotérico sólido (base livre) mediante 1iofi1izaçaoou adiçao de acetona para precipitar o iao anfotérico amorfo seguida do isolamento do iao anfotérico sólido por filtraçao sob vácuo, lavagem, p.ex., com acetona e secagem sob vácuo.

Alternativamente, converte-se o sal de adiçao do áci_ do sulfúrico na base livre, utilizando resinas permutadoras de ioes, p.ex., Dowex WGR (uma resina permutadora de aniões de ba ses fracas) e Dowex XU-40090.01 (uma resina permutadora de ca tioes de ácidos fortes) com liofilizaçao subsequente.

Voltando a preparaçao do sal de adiçao do ácido d i--nítrico cristalino, este obtém-se misturando (i) pelo menos dois equivalentes molares de ácido azótico e (ii) o iao dipolar correspondente ao citado sal, de tal modo que se encontre presente na mistura numa concentração superior a 100 mg/ml, e induzindo depois a cristalização por sementeira ou fricção com uma vareta de vidro, diluindo com 2—propanol e arrefecendo. Separa-se o sal de adiçao do ácido di-nítrico cristalino por filtraçao, lavagem sequencial, p.ex., com uma mistura de 2--propanol/água (50%, v/v), 2-propanol e éter e secando depois -11-

no vazio à temperatura de 52°C durante duas horas. 0 sal de adição de ácido derivado do ácido clorídrico (mono-cloridrato) prepara-se dissolvendo o ião dipolar em apro ximadamente um equivalente molar do ácido clorídrico e provocando a cristalização mediante adição de acetona com agitação e continuando a agitar depois do que separa os cristais, p. ex., por filtração sob vácuo seguida, p. ex., por lavagem com acetona e secagem sob vácuo. Alternativamente forma-se o sal de adição do ácido mono-clorídrico a partir do sal de adição do ácido di-clorídrico preparando uma pasta de sal de adição do ácido di-clorídrico em cloreto de metileno e adicionando um equivalente molar de trietilamina seguida por uma formação de uma pasta para se obter o sal de adição do ácido mono-clorídri co que se separa, por ex., por filtração sob vácuo, se lava de pois com cloreto de metileno e se seca sob vácuo. 0 sal de adição de ácido cristalino di-clorídrico, de acordo com a presente invenção, prepara-se dissolvendo o ião dipolar em, pelo menos, dois equivalentes molares de ácido cio rídrico, provocando depois a cristalização mediante adição de acetona, isolando os cristais, p. ex., por filtração sob vácuo, lavando com acetona e secando sob vácuo. 0 sal de adição do ácido cristalino ortofosfórico de acordo com a presente invenção, prepara-se dissolvendo o ião dipolar em, pelo menos, dois equivalentes molares do ácido fos fórico, provocando a cristalização mediante a adição de acetona e separando os cristais, p. ex., por filtração sob vácuo, seguida pela lavagem primeiramente com acetona e depois com éter e finalmente pela secagem sob vácuo. 0 sal de "adição cristalino -12- do ácido sesqui-ortofosfórico cristalino forma-se utilizando esta mesma técnica, excepto que se utiliza cerca de 1,5 equjj valentes molares de acido fosforico e de preferência metanol para provocar a cristalizaçao.

Os sais, de acordo com a presente invenção, preparam-se sob a forma de composiçoes injectáveis diluindo com água estéril e tamponada até um pH compreendido entre 3,5 e 7, para se obter uma concentração injectável compreendida entre 1 mg/ml até 400 mg/ml de iao dipolar. Tampões apropriados incluem,p.ex., o ortofosfato trissódico, o bicarbonato de sódio, o citrato de sódio, a N-metilglucamina, L(+) lisina e a L(+) arginina. Para administrar por via endovenosa ou intramuscular no homem, considera-se suficiente uma dose total corn preendida entre cerca de 750 e cerca de 3000 mg/dia em doses fraccio nadas. Nao é vantajoso preparar os sais, de acordo com a presente invenção, sob a forma de composiçoes injectáveis, adicionando simplesmente água esteril porque os sais de adição do acido sulfúrico e do ácido di-azótico nao sao suficie_n temente solúveis para se obter composiçoes com uma concentração normal para administrar e porque os sais, de acordo com a presente invenção, quando dissolvidos, fornecem composiçoes com um pH muito baixo (1,8-2,5), o que provoca sensação de dor aquando da injecçao. Tal como se indicou antes, observou-se que estas deficiências sao ultrapassadas preparando os sais , de acordo com a presente invenção, sob a forma de um sólido, isto é, misturando com bases inorgânicas ou orgânicas nao tjó xicas, normalmente solidas e aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, em proporçoes capazes de fornecer um pH compre- -13- endido entre cerca de 3,5 e cerca de 7, de preferência entre cerca de 4 e cerca de 6, após a diluição da mistura com água para se obter uma concentração injectável compreendida entre 1 mg/ml até 400 mg/ml de iao dipolar, p.ex., actividade de 250 mg/ml de iao dipolar determinada por HPLC.

As proporçoes exactas dos ingredientes na mistura física variam de lote para lote do sal, uma vez que a pureza do sal também é variável. As proporçoes dos ingredientes esta belecem-se para cada lote mediante uma pré-titulaçao de uma amostra, obtendo-se um pH escolhido entre os valores citados antes.

Esta mistura física é facilmente armazenada e trans^ portada sob a forma sólida, o que constitui uma vantagem sob o aspecto da estabilidade dos sais, de acordo com a presente in vençao, e e facilmente convertida numa composição injectável me diante a adiçao de água, por exemplo, por um médico ou por uma enfermeira, exactamente na altura em que se pretende utilizar.

Prepara-se a mistura física homogeneizando o sal e a 'base numa mistura uniforme, p.ex., utilizando um misturador convencional em uma atmosfera anidra e acondiciona-se depois de preferência numa ampola ou outro recipiente sempre sob condiçoes assépticas.

As bases que se podem utilizar na mistura, sao, p.ex., o ortofosfato trissódico, o carbonato de hidrogénio e sódio, o nitrato de sodio, a N-metilglucamina, a L(+) lisina e a L( + ) arginina. As bases preferidas sao a L.(+) lisina e a L(+) arginina, uma vez que as misturas contendo estes com postos sao reconstituídas, obtendo-se composiçoes injectáveis -14- que provocam nos animais dores menos intensas do que as compo siçoes derivadas de misturas contendo outras bases. A L(+) ar ginina utiliza-se, de preferência, numa proporção capaz de for necer um pH compreendido entre 3,5 e 6 após diluição da mist£ ra com água, obtendo-se uma composição com uma actividade em iao dipolar de 250 mg/ml que se determina por HPLC.

Os sais, de acordo com a presente invenção, e as mis turas físicas anidras que os contêm, podem armazenar-se sem re frigeraçao ou utilização de embalagens isoladoras continuando, mesmo assim, a conservar uma potência elevada.

Em muitas das composiçoes, de acordo com a presente invenção, utiliza-se o iao dipolar instável como material in_i ciai. A preparaçao deste iao se encontra descrita nos Exemplos 1 a 3 da patente de invenção norte-americana Nc 4 406 899 de autoria de Aburaki et al.

Aburaki et al., designam o iao dipolar por 7-Qz)--2-metoximino-2-(2-aminotiazol-4-il)-acetamido}-3-[(l-metil--l-pirrolidínio)-metilJ-3-cefem-4-carboxilato.

Os exemplos seguintes ilustram a presente invenção.

Exemplo I

Preparaçao do sal de adiçao do ácido sulfúrico A uma temperatura compreendida entre 20° e 26° C adi^ ciona-se lentamente 1,5 g de iao dipolar a 10 ml (1,59 equiva^ lentes molares) de ácido sulfúrico IN agitado energicamente. Obtem-se uma solução. Induz-se depois a cristalizaçao mediante sementeira com um sal de adiçao do ácido sulfúrico cristalino e forma-se uma pasta da massa cristalina durante 30 rainu -15- tos. Separam-se depois os cristais por filtraçao sob vácuo, la_ vara-se com 3 ml de uma mistura de acetona/água (V/V) a 50% e

com 2 x 5 ml de acetona e seca-se sob vácuo durante toda a nojL o o te, a uma temperatura compreendida entre AO e 50 C.

Na generalidade, obtém-se 1,3 g do sal de adiçao do ácido sulfúrico.

Análise elementar para C19H24N6°5S2‘ HoS0,: 2 4 Calculado: c, 39,44%; H, 4,53%; N, 14,52%; s, 16,62%; H20, -; Encontrado: c, 38,91%; H, 4,57%; N, 14,64%; s, 16,71%; H20, 1,42%.

Exemplo II

Preparaçao de sal de adiçao do acido sulfúrico

Dissolve-se 1,5 g de iao dipolar em 5 ml de água. Adiciona-se lentamente 5 ml de ácido sulfúrico 1M a esta solu^ çao com agitaçao. Induz-se depois a cristalizaçao mediante se menteira com sal de adiçao de ácido cristalino e forma-se uma pasta com a massa cristalina durante 30 minutos. Separam-se dje pois os cristais por filtraçao sob vácuo, lavam-se com 3 ml de uma mistura de acetona/água (V/V) a 50% e com 2 x 5 ml de acje tona e seca-se sob vácuo durante toda a noite a uma temperatu^ ra compreendida entre 40° e 50° C.

Obtém-se, na generalidade, 1,3 g de sal de adição do ácido sulfúrico. . . ./16 -16- « * )

Exemplo III

Preparaçao do sal de adiçao do ácido azótico

Dissolvem-se 300 mg de iao dipolar em 0,5 ml de ác_i do azótico 2N. Agita-se esta solução com uma vareta de vidro, dilui-se com 0,4 ml de 2-propanol e arrefece-se. Separa-se o composto do título cristalino e lava-se depois com 0,4 ml de uma mistura de 2-propanol e água (1:1), 2-propanol e, depois, com éter, obtendo-se 127 mg do di-nitrato.

Analise elementar para C19H24N6° s 5 2' 2HN03: Calculado: c, 37,62%; H, 4,32%; N, 18,47%; s, 10,57%. Encontrado: C, 36,92%; H, 4,10%; N, 18,08%; S, 10,67%; teor em água, 0,90%. Exemplo IV

Preparaçao do sal de adiçao do ácido clorídrico (monocloridrato)

Dissolve-se 1 g de iao dipolar em 2,08 ml (1 equiva^ lente molar) de ácido clorídrico IN, a uma temperatura compre 0 o endida entre 20‘ e 25 C. Adicionam-se 30 ml de acetona com agitaçao rápida durante 15 minutos, formando-se os cristais.

Continua-se a agitaçao durante mais uma hora. Separam-se os cristais por filtraçao sob vácuo, lavam-se com 10 ml de aceto o na e secam-se sob vácuo a temperatura de 50 C durante duas hc> ras .

Na generalidade, obtém-se 0,9 g do monocloridrato cristalino . i -17-

Análise elementar para C 19^2^^0^82 · HC1 :

Calculado: C,41,37%; H, 4,75%; N, 15,2%; S, 11,63% ; Cl, 12,86%.

Encontrado: C, 39,32%; H, 4,88%; N, 13,95%; S, 11,28%; Cl, 12,44%; H20, 4,5%. (Correcçao relativamente ao teor em água: C, 41,17%; N, 14,61%; S, 11,82%;

Cl, 13,03%).

Exemplo V

Preparaçao de um sal de adiçao do ácido clorídrico e preparaçao do monocloridrato a partir do primeiro

Dissolve-se 350 mg de iao dipolar em 2 ml de ácido clorídrico IN. Adiciona-se à solução resultante 10 ml de acetona com agitaçao rápida e durante 0 intervalo de 5 minutos, obtendo-se cristais. Continua-se a agitaçao durante mais cinco minutos. Adiciona-se depois mais 10 ml de acetona e continua-se a agitaçao durante 30 minutos. Separam-se os cristais por filtraçao sob vácuo, lavam-se com 2 x 5 ml de acetona e se , o cam-se sob vacuo a uma temperatura compreendida entre 40" e 0 45 ' C durante 24 horas.

Na generalidade, obtém-se 200 mg de sal de adiçao do ácido clorídrico (dicloridrato ) cristalino.

Análise elementar para C19H24N6°5S2 . 2HC1: Calculado: c, 41,38%; H, 4,75%; N, 15,2%; s, 11,62%; Cl, 12,8%. Encontrado: C, 40,78%; H, 4,98%; N, 14,7%; S, 11,25%; HO, 1,25%. (Valores -18- i -18- i ϊ rigidos relativamente ao teor em água: C, 41,1%; N, 14,88%; S,11,39%; Cl, 11,94%) o o A uma temperatura compreendida entre 20 e 25 Ce utilizando um recipiente fechado, forma-se com 1 g do diclori^ drato preparado antes uma pasta em 20 ml de cloreto de metil£ no e adiciona-se durante 15 minutos 0,28 ml de trietilaraina. Forma-se depois uma massa cristalina durante 5 horas. Separara -se os cristais de monocloridrato resultantes por filtraçao sob vácuo, lavam-se com 5 ml de cloreto de metileno e secam- , , o -se sob vacuo durante duas horas, a temperatura de 50' C.

Na generalidade obtém-se 800 mg do produto.

Exemplo VI

Preparaçao do sal de adiçao do ácido ortofosfórico Ç di-ortofosfato) o A temperatura de 15 C dissolve-se 1 g de iao dipo-lar em 3,4 ml de 144 mg/ml (2,2 equivalentes molares) de ácido fosforico. Filtra-se de um modo apropriado a solução resuj^ tante, obtendo-se uma solução límpida. À solução límpida adicionam-se 12 ml de acetona, agitando energicamente e durante um período de 10 minutos, observando-se a formaçao de cristais. Continua-se a agitaçao durante 10 minutos. Adicionam-se depois 30 ml de acetona durante 10 minutos e continua-se a a-gitaçao durante mais 15 minutos. Separam-se os cristais por filtraçao sob vácuo, lavam-se com 2 x 5 ml de acetona e 2 x 5 ml de éter e secam-se sob vácuo elevado durante 16 horas.

Para este tipo de preparaçao obtém-se, na generalidade, 1,1 g de sal de adiçao do ácido di-ortofosfórico cristã 1 i no .

Análise elementar para . 2Η^Ρ0^:

Calculado: C, 33,72%; H, 4,47%; N, 12,42%; Encontrado: C, 33,43%; H, 4,65%; N, 12,02%; H20, 1,82%. (Correcçao relativamente ao teor em água: C, 34,0%; N, 12,2%).

Para se obter o sesqui-ortofosfato utiliza-se a tec nica descrita antes excepto que se utiliza de preferência metanol em vez de todos os outros dissolventes. Este sal é muito útil para utilizar em farmácia.

Exemplo VII

Estabilidade a temperaturas elevadas

Determinaram-se as estabilidades a temperaturas ele^ vadas armazenando as composiçoes em recipientes secos a determi. nadas temperaturas durante períodos como os que se citam no quadro seguinte. As perdas ou aumentos de potência determinaram-se por HPLC. Um aumento de potência em percentagem indica_ -se utilizando um sinal de mais (+) a anteceder o numero. Uma perda de potência inferior a 10% durante duas a quatro semanas o o a uma temperatura compreendida entre 45 e 46 C indica, na ge_ neralidade, uma perda de potência inferior a 10% durante um pe ríodo compreendido entre 2 a 3 anos à temperatura ambiente. -20-

Forma PERDA EM % o 45 C O 0 56 C 100 C 1 ( semaní 2 is) 4 6 ( 1 semanas 2 ) 4 (dias) 1 Iao dipolar 37 51 71 - 57 - - 100 Sulfato 2,4 a +5 3 + 5 1,4 5 a +6 + 3 0 a +6 0-10 Di-nitrato 8,8 3,4 0,68 10,3 3,7 2,4 - - Cloridrato 4,8 2,3 6,0 6,4 6,4 - - - 1 Di-clor idra t o 0 - 7,4 - 0 - 7,2 12,4 Di-Fosfato 0 3,0 1,0 - 2,7 5,0 - -

Exemplo VIII

Ensaios das misturas físicas

Preparam-se misturas físicas contendo um sal cristã lino do ácido sulfúrico com a) ortofosfato trissódico, _b) caj^ bonato de hidrogénio e sódio, c_) L( + ) lisina e dj L( + ) argini^ na. Adicionaram-se estas bases em proporçoes capazes de fornecer um pH após diluição de mistura com água que permita uma aç tividade do iao dipolar de 250 mg/ml, calculada por HPLC, isto é, adicionaram-se as bases citadas antes em quantidades tais que se obteve um pH de 6,0. -21-

As composiçoes injectáveis prepararam-se mediante re constituição com água estéril até obtenção de uma actividade do iao dipolar de 250 mg/ml determinada por HPLC. Nao se observaram problemas de solubilidade. As injecçoes (100 mg/Kg) administraram-se por via intramuscular a coelhos provocando dj3 res nos limites aceitáveis. A dor menos intensa conseguiu-se com a composição contendo arginina.

Obtiveram-se resultados similares de solubilidade ejx celente e aceitáveis quanto à dor administrando injecçoes intramusculares de outros sais, de acordo com a presente invenção, sob a forma de misturas físicas com as bases citadas antes. A figura 1 representa o espectro de absorçao infravermelho do sulfato cristalino preparado de acordo com a técnica descrita nos Exemplos I ou II, cujos cristais se incluíram em graos mediante a adiçao de brometo de potássio. 0 modelo de difracçao dos raios-X do sulfato cristji lino do 7-|c< -( 2-amino t iazol-4-i 1)-ef- (Z)-me toximinoace tamidoj --3- £( l-metil-l-pirrolidínio)-metil]-3-cefem-4-carboxilato pre_ parado de acordo com a técnica descrita nos Exemplos I ou II, determinou-se com um difractómetro de RIGAKU POWDER, utilizar^ do um tubo de raios-X em cobre, um filtro de níquel e acondicionando a amostra numa placa de vidro. A velocidade de expl<5 raçao foi de 2 2 por minuto, entre os limites de 5 2 a 402 , teji do-se registado mecanicamente um gráfico que permite observar os ângulos de difracçao máxima. A partir deste gráfico calcularam-se os espaçamentos (d) e as intensidades relativas (I/I ) tujos valores se podem observar na lista seguinte. -22- espaçamento d (A) I-/I ( % ) 9,20 100 6,80 50 5,50 28 5,09 22 4,50 38 4,41 44 4,19 63 3,78 38 3,64 44 3,39 25 3,31 31 3,15 47

Exemplo IX

Preparaçao do sesquifosfa to

Dissolve-se 0,70 g do ião dipolar com agitaçao rápi^ da em 2,2 a 2,A ml (2,1 a 2,2 equivalentes molares) de ácido fosfórico a 85% que se diluiu a 1:10 (V / V) com água. Mediante uma filtraçao através de uma membrana filtrante com um poro compreendido entre 0,22 e 0,45, obteve-se uma solução límpida. Adicionou-se ao filtrado 5 a 7 partes em volume (15 a 20 ml) de metanol, agitando rapidamente durante 30 a 60 minutos. Os cristais formaram-se durante esta operaçao, tendo-se continua do a agitaçao rápida durante 1,5 a 2 horas. Separou-se o produto cristalino por filtraçao sob vácuo. Lavou-se o produto sobre um filtro, utilizando-se inicialmente^ 6 a 8 ml de uma mistura de metanol/acetona (1:1), (V/V), tendo em atençao que se deve manter o bolo sobre o qual se apresenta o filtrado cojn pacto e depois com acetona. Seca-se o produto sob vácuo du- -23- rante duas horas à temperatura de 50° C.

Obtem-se, na generalidade, 0,7 a 0,75 g.

Interpretação do espectro infravermelho (ver figura 2) (I.V., pastilha de brometo de potássio)

Grupo funcional

Posição do pico (cm ) 2800-3400 1780 1680 1660 1630 1550 980,1040

NH,NH^ +,carboxilo OH ^3-lactama C = 0 Carboxilo C=0 Amida C=0 C=N,C=C Amida 0H

Comportamento quando submetido a aquecimento

No esboço obtido utilizando um calorímetro de explo^ o raçao diferencial, pode observar-se a 171,8 C uma libertação de calor.

Modelo de difracçao pelos raios-X 0 modelo de difracçao pelos raios-X do sesquifosfa-to citado antes determinou-se utilizando o difractómetro de RIGAKU e utilizando a técnica descrita antes para o sulfato, obtendo-se os seguintes resultados: . ../24 -24-

Modelo de difracçao do sesquifosfato d^ I/I (%) o 11,04 32 9,2 16 7,89 24 7,02 42 6,7 32 5,5 26 4,64 - 100 4,456 53 A,3 58 3,88 26 3,75 89 3,56 21 3,31 26 3,05 16 Interpretação do espectro de RMN (½ 90 MHz RMN, solução de D„0)

20

OCH

.../25 -25-

Desvio químico (ppm 6 vs. TSP) Descrição 2,0-2,4 Multipleto 3,04 Singuleto 3,3-3,6 Multipleto 3,94 Dub1e t o 4,12 Singuleto A,12 Dubleto 4,8 Du ble to 5,42 Dubleto 5,88 Dubleto 7,21 Singuleto

Integral Designação 4 14CH2, 14 ' CH 2 3 12CH3 5 2CH , 13CH2, 1 3'CH 1 2CH 3 20CH3 1 11 CH 1 11CH 1 6CH 1 7CH 1 18CH

Estabilidade

Tempo/Temperatura Perda em % 1 dia ; 0 100 C 10,9 3 dias ; o 70 C __ 0 7 dias; o 70 c _ 1,9 1 semana; 56° c - 1,0 2 semanas; 56° c - 1,4 4 semanas; 56° c - 0 1 semana; 45° c - 0 2 semanas; 45° c - 1,4 4 semanas; 45° c - 0,7 8 semanas; 45° c - 1,6 1 mês; 37° c — 2,5 .../26 -26- -26-

Análise elementar (percentagem em peso)

Encontrado Determinado no produto anidro Teórico (Sesquifosfa to) c 35,44 36,3 36,4 H 4,66 4,41 4,7 N 12,88 13,2 13,4 H 2 0 2,29* - monoidrato = 2,8% H^O H3 P0^ 23,06 23,6 23,6 * Método de Karl Fischer

Exemplo X

Cristalizaçao do fosfato no metanol

Em 400 ml de 1 , 1 , 2-tricloro-2,2 , 1-trif luoroetano (Freon TF) dissolvem-se 25 g do sulfato recristalizado preparado de acordo com os Exemplos I ou II citados antes e trata--se a solução resultante com 50 ml de Amberlite LA-2 (Amberli^ te LA-2 é uma amina secundária alifática, solúvel nos dissolventes orgânicos e insolúvel na água, cujos sais derivados de ácidos minerais sao também solúveis nos dissolventes orgânicos) e 50 ml de agua. Agita-se a mistura energicamente durante 70 minutos, depois do que se separam as fases e se isola o iao dipolar contido na fase aquosa que se trata depois com mais 40 ml de Amberlite LA-2, se extrai com mais 310 ml de Freon TF, se trata com carvao para eliminar a coloraçao e se filtra .

Num recipiente munido de agitador introduz-se metade da solução aquosa citada antes contendo o iao dipolar, isto é 33,5 ml e trata-se com 1,65 ml de ácido fosfórico a 85%. -27- /

Mistura-se mais 1,65 ml de ácido fosfórico a 85% com 90 ml de metanol e adiciona-se lentamente a solução resultante, durante 30 minutos, à solução aquosa contendo o iao dipolar, à tem_ peratura de 25° C. Forma-se uma pasta do sesqui-fosfato preten_ dido e continua-se a agitaçao durante uma hora à temperatura de 25° C. Separa-se depois o produto mediante filtraçao por sucção, lava-se com 30 ml de etanol absoluto e depois com 15 ml de cloreto de metileno e seca-se sob vácuo durante 15 horas ã temperatura de 45° C, obtendo-se 9,80 g (rendimento 72% com ba_ se num doseamento biológico) do fosfato de 7-[i<-(2-aminotia-zol-4-il)-f<-(Z)-metoximinoacetamido]-3-[(l-metil-l-pirrolidí-nio)-metil-3-cefem-4-carboxilato contendo 1,5 equivalentes mo leculares de ácido fosfórico e caracterizado pelo gráfico obtido utilizando um calorímetro de exploração diferencial, pelo espectro de absorçao infravermelho e pelo modelo de difrac^ çao pelos raios-X, citados antes.

Exemplo XI

Preparaçao do dicloridrato mono-hidratado a partir do sulfato - Processo da amina (a) Conversão do sulfato em iao dipolar A uma mistura agitada de 600,5 ml (1,332 moles) de Amberlite LA-2, 4,5 1 de Freon TF e 900 ml de água para injec_ táveis USP adicionou-se 300 g (0,581 mole) do sulfato prepara_ do no Exemplo I e agitou-se a mistura durante 1 hora à temperatura de 23° C. Após a separaçao das fases lava-se a camada orgânica com 225 ml de água e agita-se as fases aquosas reuni_ das com uma solução de 421 ml (0,933 mole) de Amberlite LA-2 -28- em 3,6 1 de Freon TF durante 1 hora à temperatura de 23° C. Ejc trai-se a fase aquosa com 2 x 375 ml de Freon TF e elimina-se o dissolvente residual sob vácuo. Trata-se a solução com 30 g de carvao para eliminar a cor e 24 g de terra de infusórios cjo mo adjuvante de filtraçao, separa-se o sólido por filtraçao sob vácuo e lava-se com 420 ml de agua. (b) Conversão do iao dipolar em dicloridrato mono-hidratado.

Arrefece-se o filtrado obtido em (a) até à tempera- O o tura de 5 C. Mantendo a temperatura compreendida entre 5 e 9° C adiciona-se 302,4 ml (1,82 moles) de uma solução aquosa de ácido clorídrico 6N e depois 3,61 1 de acetona com agita-çao. Quando se observa o início da cristalizaçao (nesta altura é conveniente recorrer a diversos meios para induzir a cris^ talizaçao como, por exemplo, o da sementeira) trata-se a mistura com 216 ml (1,3 moles) de uma solução aquosa de ácido cl<5 rídrico 6N. Agita-se depois a mistura durante 10 minutos e tra ta-se com mais 9,02 1 de acetona que se adiciona durante 1 ho^ o o ra a uma temperatura compreendida entre 5 e 8 C. Agita-se a pasta resultante durante 1 hora a uma temperatura compreendida entre 0° e 5 ° C e separa-se o produto por filtraçao, lava--se com 2 x 750 ml de acetona e seca-se sob vácuo, à temperatura de 45° C, até peso constante durante aproximadamente 20 horas. Obtém-se 259,7 g (rendimento 88,6%) de dicloridrato mo_ no-hidratado sob a forma de cristais brancos. Os espectros de RMN e no I.V. confirmam a estrutura atribuída; por HPLC deter^ minou-se uma pureza de 100%. .../29 -29- -29- Análise elementar para ^2^"' Calculado: c, 39,93; H, 4, 94; N, 14,70; S, 11,22; Cl, 12,41; H20, 3,15; Encontrado: C, 39,70; H, 4, 80; N, 14,64; S, 11,12; Cl, 12.44; H20, 3,34.

Modelo de difracçao pelos raios X

Com um difractómetro de RIGAKU utilizando um tubo de raios-X em cobre, um filtro de níquel e acondicionando a amos tra numa placa de vidro determinou-se o modelo de difracçao pe^ los raios-X do dicloridrato cristalinomono-hidratadopreparado de acordo com a técnica descrita no Exemplo XI. A velocidade de exploração foi de 2Q/minuto entre os limites de 5 a 40s, tendo-se registado mecanicamente um gráfico que permite obser_ var os ângulos de difracçao máxima. A partir deste gráfico cal^ cularam-se os espaçamentos (d) e as intensidades relativas (I-I ) que se podem observar na lista seguinte:

Difracçao pelos Raios X do_dicloridrato mononEidratado d I/I 10,21 100 8,62 13 6,78 23 6,28 9 5,84 9 5,12 4 5,01 9 4,95 5 (%) -30-

Difracçao pelos Raios X do dicloridrato monoidratado (cont.) d I/I 4,74 38 4,62 4 4,50 4 4,44 4 4,26 32 4,10 4 3,95 33 3,90 28 3,78 39 3,64 5 3,59 13 3,48 10 3,39 15 3,32 10 3,21 10 3,11 10 3,04 5 2,99 13 2,93 15 2,76 5 2,63 10 2,51 10 2,43 5 2,38 7

Exemplo XII

Preparaçao do dicloridrato monoidratado a partir do sulfato - Processo da resina (a) Conversão do sulfato em iao dipolar A uma suspensão agitada mecanicamente de 568,6 g (1,762 moles) de resina Dowex WGR em 690 ml de água para injec^ taveis USP adiciona-se 300 g (0,518 mole) do sulfato preparado de acordo com a técnica descrita no Exemplo I e agita-se a mistura durante 1 hora à temperatura de 20° C. A resina é um polímero constituído por uma epoxiamina e uma base fraca. Após o período de agitaçao separa-se a resina por filtraçao sob vk_ cuo e lava-se com 2 x 288 ml de água. Trata-se o filtrado com 15 g de carvao para eliminar a cor e 7,5 g de terra de infusão rios como adjuvante de filtraçao depois do que se eliminam os solidos por filtraçao e se lavam com 2 x 144 ml de água. (b) Conversão do iao dipolar em dicloridrato monoidratado

Utilizando a técnica descrita antes na alínea (b) do Exemplo XI converte-se o filtrado preparado em (a). A resina Dowex WGR utilizada na alínea (a) do Exemplo XII pode ser subj; tituída por outras resinas de permuta-iónica especiais insol_ú veis em água e de bases fracas. Neste exemplo utiliza-se a Bio -Rad AG3-X4A que é uma resina de base fraca derivada do divi-nilbenzeno e do polistireno.

As técnicas descritas antes nos Exemplos XI e XII fornecem por rotina monoidratos com um teor em água compreendido entre 2,46 e 3,70% (valor médio 3,31%).0 valor calculado a partir da fórmula estequiométrica é 3,15%. Uma secagem durante 5 dias num exsicador contendo pentóxido de fosforo, à temperatura de 57° C e à pressão reduzida de 0,001 mm de Hg ou durante 2 dias, â temperatura de 45° C e à pressão reduzida de 10 mm de Hg nao provocou diminuição do peso. Quanto à estabilidade do produto observou-se que uma armazenagem duran^ _ o te 3 semanas a temperatura de 56 C produziu uma perda de po- -32- -32-

tência de 0,6%, um valor substancialmente mais favorável quan^ do o termo de comparaçao é o composto anidro (1,25% de água) descrito no Exemplo V da presente invenção (perda de 7,2% em A semanas à temperatura de 56° C). 0 dicloridrato mono-hidratado preparado nos Exemplos XI e XII caracterizou-se ainda por análise termogravimétrica

(TGA) e por calorimetria de exploração diferencial (DSC). A curva obtida por DSC caracteriza-se por uma temperatura cor- o respondente ao pico inicial (emissão de calor) de 196,8 C. A curva obtida por TGA caracteriza-se por uma perda no peso (água de hidrataçao) de 3,17% quando a temperatura está com- o o , preendida entre AO,5 e 153,3 C. A perda de peso teórica e de 3,15%. Este último comportamento é característico dos hi- dratos das cefalosporinas conhecidas. 0 dicloridrato do 7-[*-( 2-aminotiazol-A-i 1 )-í<-(Z)- -metoxominoacetamido]-3-[(l-metil-l-pirrolidínio)-metil]-3- -cefem-A-carboxilato di-hidratado prepara-se por hidrataçao do mono-hidrato descrito nos Exemplos XI e XII mediante contac to com uma humidade relativa superior a 70%. Embora a moléc_u la secundária de água de hidrataçao nao se encontre tao firmje mente ligada como no caso do mono-hidrato,, obtém-se de um modo uniforme uma composição consistente como se verificou por aná^ lise elementar, podendo ainda o di-hidrato distinguir-se do mo no-hidrato por DSC, TGA e modelo de difracçao pelos raios-X.

Exemplo XIII

Preparaçao do dicloridrato di-hidratado

Numa câmara de humidade controlada cujos valores pa^ -33 ra a humidade relativa nao excedam os limites de 80 e 93% e para a temperatura 25° a 37° C colocou-se durante um periodo compreendido entre 2 e 7 dias dicloratomono-hidratado prepara_ do de acordo com a técnica descrita no Exemplo XII. A formação do dicloridrato di-hidratado foi, para cada caso, demonstrada analiticamente. Para A amostras preparadas de acordo com a técnica citada antes obtiveram-se os resultados analíticos seguintes:

Resultados analíticos respeitantes ao dicloridrato di-hidratado Número da amostra

Análise Valor teórico 8-1B 12-2 28-1 28-2 Carbono 38,71 38,76 38,64 38,74 38,53 Hidrogénio 5,13 5,03 4,96 4,79 4,77 Azoto 14,26 14,22 14,19 14,24 14,18 Enxof re 10,88 10,66 10,22 Cloro 12,03 11,90 11,84 12,12 11,90 Agua*(%) 6,11 6,16 6,99 6,34 6,11 DSC captaçao de calor°C 81,6 84,6 85,6 84,6 perda de calor°C 187,8 188,5 187,8 185,7 TGA (perda em peso, %) 25-68° C 2,1 2,3 2,9 3,2 68-180° C 3,4 3,5 3,1 3,1 Total 5,5 5,8 6,0 6,3 * Método de Karl Fisher 0 dicloridrato di-hidratado descrito no Exemplo XIII pode secar-se facilmente obtendo-se o mesmo dicloridrato πνοη-ο,-ΐκΐ -dratado descrito nos Exemplos XI e XII. Isto consegue-se por secagem sob vácuo ou num exsicador sobre pentóxido de fósforo. -34- A estabilidade durante a armazenagem a temperaturas elevadas, como se verificou mediante determinação biológica e química da potência das amostras, foi similar quer para omono-hidrato quer para o di-hidrato, mas a formaçao de vestígios de partículas insolúveis observou-se no di-hidrato. Deste modo, o mono -hidrato contendo até cerca de 1% em peso de água acidental é a forma preferida (conteúdo total de agua cerca de 2,5 a 4,1%) Este material quando armazenado à temperatura de 56° C durante 3 semanas conserva pelo menos uma potência de 96%.

Claims

-35- / ν: REIVINDICAÇÕES 1.- Processo para a preparação de sais cristalinos, estáveis a temperaturas elevadas, do 7-/*ο<. - (2-aminotiazol-4-il)-- (Z) -metoxiiminoacetamido _7-3-/7(1-metil-1 -pirrolidínio) -metil _7-3--cefem-4-carboxilato escolhidos entre sais de adição do ácido sul-fúrico, do ácido nítrico (di-nitratos), do ácido clorídrico (mono-e di-cloridratos) e do ácido ortofosfõrico contendo 1,5 a 2 equivalentes molares desse ácido, ou dos seus produtos de solvatação, caracterizado pelo facto: (A) para a preparação de sais de adição do ácido sulfúrico, (a) de se preparar uma mistura de (1) pelo menos um equivalente molar de ácido sulfúrico e (2) ião anfotérico correspondente ao sal citado antes, - (b) de se provocar a cristalização do sal de adição do ácido sulfúrico, desde que esta se realize na presença de um dis- solvente orgânico guando o ião anfotérico se encontra presente na mistura em uma concentração inferior a 25 mg/ml, e (c) de se isolar o sal de adição do ácido sulfúrico sob a forma cristalina; (B) para a preparação de sais de adição do ácido nítrico (di-nitra-tos) , (a) de se preparar uma mistura de (1) pelo menos dois equivalentes molares de ácido azõtico e (2) ião anfotérico correspondente ao sal citado antes, (b) de se provocar a cristalização do sal de adição do ácido nítrico, desde que esta se realize na presença de um dissolvente orgânico quando o ião anfotérico se encontra presente na mistura em uma concentração superior a 100 mg/ml, e (c) de se isolar o sal de adição do ácido nítrico (di-nitra-to) sob a forma cristalina; (C) para a preparação de sais de adição do ácido clorídrico, (a) de se preparar uma mistura de (1) aproximadamente 1 equivalente molar (mono-cloridrato) ou pelo menos dois equivalentes molares (di-cloridratos) de ácido clorídrico e (2) ião anfotérico correspondente ao sal citado antes, (b) de se provocar a cristalização do sal de adição do ácido clorídrico na presença de um dissolvente orgânico, e (c) de se isolar o sal de adição do ácido clorídrico (mono- oíi di-cloridratos) sob a forma cristalina; (D) para a preparação de sais de adição do ácido ortofosfõrico, -37- (a) de se preparar uma mistura de (1) pelo menos dois equivalentes molares (di-ortofosfatos) ou aproximadamente 1,5 equivalentes molares (sesqui-ortof osf atos) de ácido ortof osf õrico e (2) ião anfotérico correspondente ao sal citado antes, (b) de se provocar a cristalização do sal de adição do ácido fosfórico na presença de um dissolvente orgânico, e (c) de se isolar o sal de adição do ácido fosfórico (di- ou sesqui-ortofosfato) sob a forma, cristalina.
2.- Processo de acordo com a reivindicação 1, caracteri-zado pelo facto de se preparar sais cristalinos escolhidos entre sais de adição do ácido sulfúrico, do ácido clorídrico (mono- e di--cloridrato) e do ácido ortofosfõrico ou os seus produtos de solva-tação.
3. - Processo para a preparação de uma mistura física contendo um sal preparado pelo processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de se adicionar uma base inorgânica ou orgânica não tóxica e aceitável sob o ponto de vista farmacêutico em proporções capazes de proporcionar um pH compreendido entre aproximadamente 3,5 e aproximadamente 7 mediante diluição da mistura com água até ã concentração injectável.
4. - Processo de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo facto de se misturar o sal e a base em proporções capazes

de fornecer um pH compreendido entre aproximadamente 4 e aproxima-damente 6 mediante diluição da mistura com água até ã concentrac-ção injectável.
5. - Processo de acordo com a reivindicação 4, caracteri-zado pelo facto de se utilizar como base a L(+)lisina.
6. - Processo de acordo com a reivindicação 4, caracte-rizado pelo facto de se utilizar como base a L(+)arginina. Processo de acordo com a reivindicação 1, caracte-rizado pelo facto de se realizar a fase (b) da preparação (A) em um meio aquoso isento de dissolventes orgânicos.
8. - Processo de acordo com a reivindicação 7, caracte-rizado pelo facto de se utilizar na fase (a) da preparação (A) uma quantidade tal de ião anfotérico que a sua concentração na mistura é inferior a 500 mg/nl.
9. - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracte-rizado pelo facto de se utilizar na fase (a) da preparação (A) uma quantidade tal de ião anfotérico que a sua concentração na mistura é superior a 25 mg/ml.
10.- Processo de acordo com a reivindicação 7, caracteri- 9- zado pelo facto de se utilizar na fase (a) da preparação (A) uma quantidade tal de ião anfotérico que a sua concentração na mistura está compreendida entre cerca de 100 mg/ml e cerca de 200 mg/ml.
11.- Processo de acordo com a reivindicação 1, caracteri· zado pelo facto de o sulfato do 7-/X,-(2-aminotiazol-4-il)---(Z)-metoxiiminoacetamido-3-/T1-metil-l-pirrolidínio)-metil_7-3--cefem-4-carboxilato, no estado cristalino, exibir o seguinte mo- delo de difracção dos raios X: d espaço (S) VIQ (%> 9,20 100 6,86 50 5,50 28 5,09 22 4,50 38 4,41 44 4,19 63 3,78 38 3,64 44 3,39 25 3,31 31 3,15 47 12.- Processo de acordo com a reivindicação 1, caracte- rizado pelo facto de o fosfato do (2-aminotiazol-4-il)-^~ (Z)-metoxiimino-acetamido._7-3-/. (1-metilpirrolidínio)-metil _7~3- cefem-4-carboxilato, no estado cristalino; exibir o seguinte modelo de difracção dos raios X: d I/I 11,04 32 9,2 16 7,89 24 7,02 42 6,7 32 5,5 26 4,64 100 4,456 53 4,3 58 3,88 26 3,75 89 3,56 21 3,31 26 3,05 16
13.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação do sal cristalino dicloridrato do -(2-aminotia- zol-4-il)-^ - (Z) -metoxiiminoacetamido._7- 3-/ (1-metilpirrolidínio)--metil-3-cefem-4-carboxilato na forma hidratada, caracterizado pelo facto de o produto resultante conter entre 2,5 % e 7,0 % em peso de água.
14,- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação do sal cristalino dicloridrato do - (2-aminotiazol- — 4 — i 1) — 'X-- (Z) -metoxiiminoacetamido__7-3-/ (1-metilpirrolidínio) --metil_7-3-cefem-4-carboxilato sob a forma monohidratada, caracte-rizado pelo facto de o produto resultante conter entre 2,5 % e 4,1 % em peso de água.
15.- Processo de acordo com a reivindicação 1, caracte-rizado pelo facto de o sal cristalino dicloridrato do 7-/7χ_-(2--aminotiazol-4-il) -^X- (Z) -metoxiiminoacetamido J-3-£ (1-metilpirrolidínio) -metil_7-3-cefem-4-carboxilato sob a forma monohidratada exibir o seguinte modelo de difracção dos Raios X: d I/I 10,21 . 100 8,62 13 6,78 23 6,28 9 5,84 9 5,12 4 5,01 9 4,95 5 4,74 38 4,62 4 4,50 4 4,44 4 4,26 32 -42 d IA0 (%) 4,10 4 3,95 33 3,90 28 3,78 39 3,64 5 3,59 13 3,48 10 3,39 15 3,32 10 3,21 10 3,11 10 3,04 5 2,99 13 2,93 15 2,76 5 2,63 10 2,51 10 2,43 5 2,38 7 ) Lisboa, 18 de Janeiro de 1989 η Oficial da Propriedade IndusfcioJ -42Α- f

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16. - Processo para a preparação de composições farmacêuticas, caracterizado pelo facto de se misturar uma quantidade eficaz de um composto preparado pelo processo de acordo com a reivindicaçãc 15 com L(+)lisina.
17. - Processo para a preparação de composições farmacêuticas, caracterizado pelo facto de se misturar uma quantidade eficaz de um composto preparado pelo processo de acordo com a reivindicação 15 com L(+)arginina. O Agente Oficial da Propriedade Industrial

-43- r: RESUMO "Processo para a preparação de sais de cefalosporina e de composições injectáveis que os contêm" Descreve-se um processo para a preparação de sais de adição cristalinos dos ácidos sulfúrico, nítrico (di-nitratos), clorídrico (mono- e di-cloridratos) e ortofosfórico (di- e sesqui--ortofosfõrico) e do 7-/"o< - (2-aminotia2ol-4-il)-'X- (Z) -metoxi--iminoacetamido ./-3-/7(1-metil-l-pirrolidínio)-metil_7-3-cefem-4--carboxilato que consiste (1) para a preparação de sais de adição cristalinos do ácido sulfúrico em misturar (a) pelo menos um equivalente molar do ácido sulfúrico com (b) ião anfotérico em uma quantidade tal que a sua concentração na mistura seja superior a 25 mg/ml, em provocar a cristalização, em separar os cristais e em lavã-los e secá-los; (2) para a preparação de sais de cristalinos dos ácidos nítrico (di-nitratos), clorídrico (mono- e di-cloridratos) e ortofosfórico (di- e sesquifosfatos) em dissolver o ião anfotérico na quantidade apropriada de ácido, em provocar a cristalização mediante a adição de acetona e em isolar os cristais resultantes. Estes sais são estáveis mesmo a temperaturas elevadas. Descreve-se também um processo para a preparação de misturas físicas contendo estes sais e diversas bases em proporções capazes de fornecer um pH compreendido entre aproximadamente 3,5 e aproximada-mente 7 mediante diluição da mistura com água até ã concentração -44 inj ectãvel. Lisboa, 18 de Janeiro de 1989 O An 3": te Oficia! da Prcprisdade Indusfna·'