PT85018B - Processo para a preparacao de compostos macrolidos e de composicoes farmaceuticas que os contem - Google Patents

Description

MEMÓRIA DESCRITIVA

A presente invenção refere-se à preparação de novos compostos antibióticos e de composiçoes farma· cêuticas que os contêm.

Ra memória de patente britânica R2. 2166436 descreve-se a preparação de Antibióticos 5541 que podem ser isolados dos produtos de fermentação de uma nova espécie de Streptomyces.

Encontrou-se agora um grupo adicional de compostos com actividade antibiótica que podem ser preparados por modificação química de Antibióticos 5541.

Assim, num dos aspectos a invenção

refere-se a compostos de fórmula (I).

ou isopropilo, R representa um átomo de hidrogénio, um grupo z alquilo C^g °u grupo alcenilo C^_₈, OR e um grupo hidroxilo ou um grupo hidroxilo substituído com até 25 átomos de carbono, p e o grupo =N0R está na configuração E.

termo alquilo ou alcenilo como grupo ou parte de um grupo nos compostos de fórmula (I) significa que o grupo é linear ou ramificado.

Quando R nos compostos de fórmula (I) é um grupo alquilo 0_1-8 pode ser por exemplo, um grupo metilo, etilo, n-propilo, i-propilo, n-butilo, i-butilo ou t-butilo, e é preferivelmente um grupo metilo.

Quando R é um grupo alcenilo pode ser por exemplo um grupo alilo.

Quando o grupo OR nos compostos de fórmula (I) é um grupo hidroxilo substituído, pode representar um grupo aciloxi /por exemplo um grupo de fórmula -OCOr\ • -0002^ ou OCSOR^ (em que R^ é um grupo alifático, aralifático . ou aromático, por exemplo um grupo alquilo, alcenilo, alcinilo,

cicloalquilo, aralquilo ou arilo) 7, um grupo formiloxi, um gru RR, Á. “ po -0R^J (em que R e como acima definido para R ), um grupo -0S0₂r6 (em que R^ é um grupo alquilo C-^ ou arilo Cg_q₀) grupo acetaloxi cíclico ou acíclico um grupo OCOÍCH^^CC^R? (em que r7 é um átomo de hidrogénio ou um grupo como definido para acima e n representa zero, 1 ou 2) ou um grupo 0C0NR⁸R^ (em r,8 que R e drogénio ou grupo alquilo C

8·η9 r9 podem independentemente representar um átomo de hi_{Ί A}, por exemplo metilo).

a r

Quando R ou R são grupos alquilo, podem por exemplo ser grupos alquilo C^_g como por exemplo meti lo, etilo, n-propilo, i-propilo, n-butilo, i-butilo, t-butilo ou n-heptilo em que os grupos alquilo podem também ser substié um grupo alquilo substituído, pode ser subs por exemplo, por um ou mais, por exemplo dois ou três átomos de halogéneo (por exemplo átomos de cloro ou de bromo) ou por um grupo carboxi, alcoxi Cq_4 (por exemplo metoxi, etox^ fenoxi ou sililoxi. Quando R^ é um grupo alquilo substituído ele pode ser substituído por um grupo cicloalquilo por exemplo ciclopropilo.

tuídos. Quando R^ tituído,

Quando R^ou R^ são grupos alcenilo ou alcinilo, eles podem ser por exemplo alcenilo 0₂_θ, ^^{or exem}P-° alilo, ou um grupo alcinilo C_{9 s}.

5

Quando R ou R são grupos cicloalquilo, eles podem por exemplo ser cicloalquilo 0^_q2’ ^como exemplo C_{x 7}, por exemplo ciclopentilo.

' Λ R

Quando R ou R sao grupos aralquilo, eles podem preferivelmente ter 1 a 6 átomos de carbono na parte molecular alquilo e os grupos arilo podem ser earbocíclieos ou heterocíclicos e conterem preferivelmente 4 a 15 átomos de carbono por exemplo fenilo. Exemplos desses grupos incluem fenilalquilo Cn por exemplo grupos benzilo.

·, 4 5

Quando R ou R podem ser carbocíolicos ou heterocíclicos 4 a 15 átomos de carbono, e podem ser por lo.

são grupos arilo, eles e têm preferivelmente exemplo um grupo feni

Quando R^ 0ontem um substituinte sililoxi, o grupo sililo pode conter três grupos que podem ser iguais ou diferentes escolhidos entre alquilo, alcenilo, alcoxi

cicloalquilo, aralquilo, arilo e ariloxi. Esses grupos podem ser como acima definidos para e incluem particularmente meti lo, t-butilo e fenilo. Exemplos particulares desses grupos sili loxi são trimetilsililoxi e t-butildimetilsililoxi.

Quando -OR^ é um grupo -OSO₂R⁶, Ρθόθ ser por exemplo um grupo metilsulfoniloxi ou p-toluenossulfoniloxi.

Quando -OR^ representa um grupo acetiloxi cíclico, pode por exemplo ter 5 a 7 membros em anel e pode por exemplo ser um grupo tetrahidropiraniloxi.

Quando -0R representa um grupo I 7 7a ' OCOÍCHnkCOoR , pode ser por exemplo um grupo 0C0C0₂R ou 0000Η₂0Η₂00₂Ε ^em que R' representa um atomo de hidrogénio ou um grupo alquilo C-^ (por exemplo um grupo metilo ou etilo).

Os sais que se podem formar com compostos de fórmula (I) contendo um grupo acídico incluem sais com bases por exemplo sais de metal alcalino como por exemplo sais de sódio e de potássio.

Hos compostos de fórmula (I), o grupo R^ é preferivelmente um grupo isopropilo.

grupo -0R^J é preferivelmente um grupo metoxicarboniloxi, ou, especialmente, um grupo acetoxi, metoxi ou hidroxi. Em geral, são particularmente preferidos os •z | compostos de fórmula (I) em que OR² é um grupo hidroxi.

Os compostos importantes de acordo com a invenção são os de fórmula (I) em que R^ é um grupo isopropilo, R é um grupo metilo e 0R^J é um grupo hidroxi, acetoxi ou metoxicarboniloxi.

Corno indicado previamente, os compo_s tos de acordo com a invenção podem utilizar-se como antibióticos. Os compostos da invenção podem também ser utilizados como intermediários na preparação de outros compostos activos. Quan do os compostos da invenção são para ser utilizados como inter metiários, o grupo -OR^ pode ser um grupo hidroxilo protegido e a invenção inclui particularmente esses compostos protegidos. Deve notar-se que esse grupo deve ter um mínimo de funcionali. dade adicional para evitar sítios adicionais de reacção e deve _1 ser tal que seja possível regenerar selectivamente um grupo

Λ

hidroxilo a partir dele. Exemplos de grupos hidroxilo protegidos são bem conhecidos e são descritos por exemplo em Protective Groups in Organic Synthesis por Theodora W. Greene. (Wiley-Interscience, Nova Iorque 1931) e Protective Groups in Organic Ghemistry por J F W McOmie (plenum Press, Londres, 1973). Exemplos de grupos hidróxi OR protegidos incluem fenoxi acetoxi, sililoxiacetoxi (por exemplo trimetilsililoxiacetoxi e t-butildimetilsililoxiacetoxi), e sililoxi tais como trimetilsililoxi e t-butildimetilsililoxi. Os compostos da invenção contendo esses grupos serão usados principalmente como intermediários. Outros grupos, como por exemplo acetoxi, podem servir como grupos hidroxilo protegidos, mas podem também estar presen tes em compostos activos finais.

Os compostos da invenção têm activida de antibiótica por exemplo actividade anti-helmíntica, por exemplo contra nematodos, e em particular, anti-endoparasitíca e anti-ectoparasitíca.

Os ectoparasitas e endoparasitas infectam seres humanos e vários animais e são partieularmente importantes em animais de pecuária como por exemplo suínos, ovelhas, ovinos, cabras e aves (por exemplo galinhas e perus), cavalos, coelhos, aves de caça, aves domésticas e animais domésti cos como por exemplo cães, gatos, cobaias, macacos e hamstere. A infecção parasítica do gado, conduzindo a uma anemia, desnutrição e perda de peso é uma causa importante de perdas económicas em todo o mundo.

Exemplos de géneros de endoparasitas que infectam esses animais e/ou seres humanos são Anhylostoma, Ascaridia, Asoaris, Aspicularis, Brizgia, Bunostomum, Çapillaria, Çhabertia, Çooperia, Çyathostomes, pictyocaulus, pirofilaria, Bracunculus, Enterobius, Gastrophilus, Haemon chus, Heterakis, Hyostrongylus, Loa, Metastrongylus, Necator, Nematodirus, Nematospiroides, Rlppostrongylus, Qesophagostomum, Onchocerca, Qstertagia, Qxyuris, Farafilaria, parascaris, Probstmayria, Strongylus, Strongyloides, Syphaoia, Thelazia, Toxascaris, Toxocara, Trichonema, Trichostrongylus, Trichinell^ Trichuris, Triodontophorus, Uncinaria e Wuchereria.

Exemplos de ectoparasitas que infec- 5 -

tam animais e/ou seres humanos são ectoparasitas artrópodes como por exemplo insetos picadores, varejeiras, pulgas, piolhos, ácaros, insectos sugadores, carrapatos e outros pestes dípteras.

Exemplos dos géneros desses ectoparasitas que infectam animais e/ou seres humanos são Ambylomma, Anopheles, Boophilus, Çhorioptes, gulexpipiens, Çulliphore, hemodex, Damalinia, permatobia, Haematobia, Haematopinus, Haemophysalis, Hyaloma, Hypoderma, Ixodes, Iiinognathus, pucilia, Melophagus, Qestrus, Qtobius, Qtodectes, Psorergates, psoroptes, Rhipicephalus, Sarcoptes, Solenopotes, Stomoxys e Tabanus.

Verificou-se que os compostos de acor do com a invenção eram eficazes quer in vitro quer in vivo contra vários endoparasitas e ectoparasitas. A actividade antibiótica dos compostos da invenção pode, por exemplo, ser demonstra da pela sua actividade contra os nematodos vivos livres, por exemplo Caenorhabditis elegans e Mematospiroides dubius.

Um composto activo importante da invenção é o de fórmula (I) em que:

R^x é um grupo metilo, R é um grupo metilo e OR θ um grupo metoxi.

Outro composto activo importante da invenção é o de fórmula (i) em que:

R é um grupo etilo, R é um grupo me tilo e OR^ θ um grupo hidroxilo.

Um composto activo particularmente im portante da invenção é o de fórmula (I) em que;

' - · -ι 2 '

R e um grupo isopropilo, R e um gru •z “ po metilo e Olr é um grupo hidroxilo.

composto de fórmula (I) em que R*^1, é um grupo isopropilo, R é um grupo metilo e OR⁹ é um grupo hidroxilo é aetivo contra uma grande gama de endoparasitas e ecto parasitas. Ror exemplo, verificou-se que este composto era acti vo in vivo contra nematodos parasitas como por exemplo Ascaris, Çooperia curticei, gooperia oncophora, gyathostomes, Dictyocaulus viviparus, pirofilaria immitis, Gastrophilus, Haemonchus contortus, Rematodirus battus, pematodirus helvetianus, Rematodírus spathiger, Rematospiroides dubbius,

Nippostronglyus braziliensis, Qesophaostomum, Qnchocera gutturosa, Qstertagia circuncita, Qstertagia ostertagi, Qxyuris equi Parascaris equorum, Probstmayria, Strongylus edentatus, Strongylus vulgaris, Toxocara canis, Trichostrongylus axei, Trichostrongylus vitrinus, Triodontophorus e Uncianaria steniocephala, e larvas parasitas, sarna, ácaros, carrapatos e piolhos como por exemplo Amblyomma hebraeum, Anopheles stevensi Boophilus dicolarartus, Boophilus microplus, Qhorioptes ovis, Culexpipiens molestus, Damalinia bovis, permatobia, Haematopi- i nus, Hypoderma, Binognathus vituli, Bucilia sericata, psoroptes; ovis, Rhipicephalus appendiculatus e Sarcoptes.

Os compostos da invenção têm também uso no combate aos insectos, e pestes de nematodos e de acarinos na agricultura, horticultura, florestas, saúde pública e produtos armazenados. As pestes de solos e cultura de plantas, incluindo cereais (por exemplo, trigo, cevada, milho e arroz), algodão, tabaco, vegetais (por exemplo soja), frutos (por exem pio maçãs, vinhas e citrinos), bem como culturas de raiz, (por exemplo beterraba, batatas), podem ser também tratadas. Exemplos particulares dessas pestes são os ácaros da fruta e pulgões como por exemplo Aphis fabae, Anlacorthum circunflexus, Myzus fersicae, Nephotettix lineticeps, Nilparvata lugens, Panonychus ulmi, Phorodon humuli, Phyllocoptruta oleivora, Tetranychus urticae e membros do género Trialeuroides; nematodos como por exemplo membros do género Aphelencoides, Globoderq Heterodera, Meloidogyne e Panagrellus; lepidoptera como por exemplo Heliothis, Plutella e Spodoptera; gorgulhos do grão como por exemplo Anthonomus grandis e sitophilus granarius; bichos da farinha como por exemplo Tribolium castaneum» moscas como por exemplo Musca domestica; formigas do fogo, minados de folhas; Pear psylla; Thrips tabaoi; baratas como por exemplo Blatella germanica e periplaneta americana e mosquitos como por exemplo Aedes aegypti.

Verificou-se em particular, que o composto de fórmula (I) em que R é um grupo isopropilo, R é um grupo metilo e OR^ é um grupo hidroxilo é activo contra Tetranychus urticae (suportado em folhas de feijão francês), Myzus persicae (suportado numa folha de couve chinesa),

Heliothis virescens (suportado numa folha de algodão), Nilaparvata lugens (suportada numa planta de arroz), Musoa domestica (num vaso de plástico com lã de algodão/ solução de açúcar), Blatella germanica (num vaso de plástico com agregados alimenta res); Spodoptera exígua (suportada numa folha de algodão) e Meloidogyne incógnita.

Os compostos da invenção podem também usar-se como fungicidas, por exemplo contra estirpes de espécie Çandida, como por exemplo Qandida albicans e Çandida glabrata e contra fungos como por exemplo Saccharomyces carlsbergensis.

De acordo oom a invenção apresentam-se assim compostos de fórmula (I) como acima definida, que podem ser usados como antibióticos. Em particular, eles podem ser utilizados no tratamento de animais e seres humanos com infecções endoparasitícas, ectoparasitícas e/ou de fungos e na agricultura, horticultura, ou florestas como pesticidas para combaterem pestes por insectos, acarinos e nematodos. Eles podem tam bém ser geralmente utilizados como pesticidas para combater ou controlar pestes noutras circunstâncias, por exemplo em armazéns, edifícios ou outros lugares públicos ou localização de pestes. Em geral os compostos podem ser aplicados quer ao hospedeiro (animal ou ser humano ou plantas ou vegetação) ou ao seu local de implantação ou às próprias pestes.

Os compostos de acordo com a invenção podem ser formulados para administração de qualquer forma conveniente para uso em medicina humana ou veterinária e a invenção inclui assim dentro do seu âmbito composições farmacêuticas que compre endem um composto de acordo com a invenção adaptado para uso em medicina humana e veterinária. Essas composições podem apresentar-se para uso de modo convencional com a ajuda de um ou mais veículos ou excipientes adequados. As composições de invenção incluem as que possuem uma fórmula especialmente formulada para administração parenteral (incluindo administração intra-mamáriaj oral, rectal, topical, intraruminal, implantação, oftálmica, nasal ou genito-urinária.

Os compostos de acordo com a invenção . podem ser formulados para uso em medicina humana ou veterinária i por injecção e podem apresentar-se em formas de dose unitária em ampolas, ou outros contentores de doses unitárias, ou contentores de doses unitárias, ou contentores de multi-dose, se necessário com um conservante adicionado. As composições da invenção para injecções podem apresentar-se na forma de suspensões, soluções ou emulsões, em veículos aquosos ou nao aquosos, e podem conter agentes de formulação como por exemplo agentes de suspensão, estabilização, emulsificação, solubilização e/ou dispersão. Alternativamente o ingrediente activo pode ser uma forma em pó esterilizado uma forma reconstituída com um veículo adequado, por exemplo, água esterilizada, sem pirogénio, antes do uso. Os veículos oleosos incluem álcoois poli-hídricos e os seus ésteres como por exemplo éster de glicerol, ácidos gordos, óleos vegetais, como por exemplo óleo de amendoim, óleo de semente de algodão, ou óleo de coco fraccionado, óleos minerais, como por exemplo parafina líquida miistrato de isopropilo e oleato de etilo e outros compostos semelhantes. Podem também usar-se outros veículos contendo substâncias como por exemplo glicerol formal, propileno glicol, polietileno glicóis, etanol ou glicofurol. Podem usar-se agentes tensioactivos não iónicos, catiónicos ou aniónicos convencionais isolados ou em combinação na composição.

As composições para medicina veterinária podem também ser formuladas como preparações intramamárias com base de actuação longa ou de libertação rápida e podem ser soluções ou suspensões estéreis em veículos aquosos ou oleo sos contendo opcionalmente um agente diluente ou de suspensão como por exemplo parafinas macias ou duras, cera de abelhas, 12-hidroxi estearina, óleo de castor hidrogenado, estearato de alumínio, ou monoestearato de glicerilo. Os agentes tensioactivos não-iónicos, catiónicos ou aniónicos convencionais podem também ser utilizados isoladamente ou em combinação na composição.

Os compostos da invenção podem também apresentar-se para utilização humana ou veterinária numa forma adequada para administração oral, por exemplo na forma de soluções, xaropes, emulsões ou suspensões ou em pó seco para constituição com água ou outro veículo adequado antes do uso, opcionalmente com agentes aromatizantes e corantes. As composif

ções sólidas podem também ser utilizadas como por exemplo comprimidos, cápsulas, pastilhas, pílulas, hóstias, pó, pastas, grânulos, supositórios, ou preparações pré-misturadas. podem também serem preparadas composições sólidas ou líquidas para uso oral de acordo com processos bem conhecidos da técnica. Essas composições podem também conter um ou mais veículos e excipientes farmaceuticamente aceitáveis na forma sólida ou líquida. Exemplos de veículos farmaceuticamente aceitáveis para uso em formas de dosagem sólida incluem agentes ligantes (por exemplo amido de milho pré-gelatinizado, polivinilpirrolidona ou hidroxipropilmetilcelulose); cargas de enchimento (por exemplo lactose, celulose microcristalina ou fosfato de cálcio); lubrificantes (por exemplo estearato de magnésio, talco ou sílica); desintegrantes (amido de batata ou amido glicolato de sódio); ou agentes humidificantes (por exemplo tauril sulfato de sódio) podem revestir-se os comprimidos por processos bem conhecidos da técnica.

Exemplos de aditivos farmaceuticamente aceitáveis para uso em formas de dosagem, líquida incluem agentes de suspensão (por exemplo xarope de sorbitol, metilcelulose ou gorduras alimentares hidrogenadas), agentes emulsionantes (por exemplo lecitina ou acácia); veículos não-aquosos (por exemplo óleo de amêndoas, ésteres oleosos ou álcool etílico); e conservantes (por exemplo p-hidroxibenzoatos de metilo ou propilo ou ácido sórbico); agentes estabilizantes e solubili zantes podem também ser incluídos.

As pastas para administração oral podem ser formuladas de acordo com processos bem conhecidos da técnica. Exemplos de aditivos farmaceuticamente aceitáveis para uso em formulações de pastas incluem agentes dè suspensão ou gelificantes por exemplo diestearato de alumínio ou óleo de castor hidrogenado; agentes dispersantes por exemplo polissorba tos; veículos não aquosos por exemplo óleo de amendoim, ésteres oleosos, glicóis ou macrogóis; agentes estabilizantes e solubiiizantes. Os compostos da invenção podem também ser administrados em medicina veterinária pela sua incorporação em tomas diá• rias de animais, sólidas ou líquidas, por exemplo como parte

- da ração animal diária ou água de beber.

_ 1Λ _

Os compostos da invenção podem também ser administrados oralmente em medicina veterinária na forma de um líquido molhável como por exemplo uma solução, suspensão ou dispersão do ingrediente activo juntamente com o veículo ou excipiente farmaceuticamente aceitável.

Os compostos da invenção podem tambéir ser formulados como supositórios, por exemplo contendo bases de supositórios convencionais para uso em medicina veterinária ou humana ou como pessários por exemplo contendo bases de pessárioa convencionais.

Os compostos de acordo com a invenção podem ser formulados para administração tópica, por exemplo em medicina veterinária e humana, como unguentos, cremes, loções, champôs, pós, pulverizações, líquidos para banho, aerossóis, gotas (por exemplo gotas para o olho e nariz) ou de vasar. Os unguentos e cremes podem, por exemplo, ser formulados com uma base aquosa ou oleosa com a adição de agentes diluentes e/ou gelificantes adequados. Os unguentos para administração ao olho podem ser produzidos de maneira estéril utilizando componentes esterilizados. As formulações para vasar, por exemplo, podem ser formuladas para uso veterinário em solventes orgânicos como por exemplo suspensão aquosa e podem incluir agentes que promovem a adsorpção inter-cutanea, e agentes de formulação que solubilizam, estabilizam, conservam ou melhoram de qualquer modo as propriedades de armazenagem e/ou facilidade de aplicação.

Podem formular-se loções com uma base aquosa ou oleosa e elas conterão em geral também um ou mais agentes emulsionantes, agentes estabilizantes, agentes dispersantes, agentes de suspensão, agentes diluentes ou corantes.

Podem também obter-se pós com a ajuda de qualquer base de pó adequada. Podem formular-se gotas com uma base aquosa ou não-aquosa compreendendo também um ou mais agentes dispersantes, agentes estabilizantes, agentes solubilizantes ou agentes de suspensão. Elas podem também conter um con servante.

Para administração por inalação os compostos de acordo com a invenção podem obter-se para uso em medicina veterinária ou humana na forma de uma pulverização por aerossol ou num insuflador.

As doses diárias totais dos compostos da invenção utilizados em medicina humana e veterinária serão adequadamente na gama de 1-2000 Ug/kg de peso corpóreo, preferivelmente 5-800 jig/kg θ elas podem ser dadas em doses divididas, por exemplo uma a quatro vezes ao dia. Deve notar-se que a dosagem variará de acordo com a idade e condição do paciente, organismo a tratar, modo de administração e composição particular formulada. As doses para um dado hospedeiro podem ser deter minadas usando considerações convencionais, por exemplo, comparando as actividades do composto em análise e um agente antibió tico conhecido.

0s compostos de acordo com a invenção podem ser formulados de qualquer modo conveniente para uso hortícula ou agrícola e a invenção inclui assim dentro do seu âníbi to composições que compreendem um composto de acordo com a invenção adaptado para utilização hortícula ou agrícola. Essas formulações incluem tipos secos ou líquidos, por ememplo, pós finos, incluindo bases ou concentrados de pós finos, pós, incluindo pós solúveis ou molháveis, granulados, incluindo microgranulados e granulados dispersáveis, agregados, substâncias fluidizáveis, emulsões, como por exemplo emulsões diluídas ou concentrados emulsionáveis, banhos como por exemplo banhos de raiz e banhos de sementes, adubos de sementes, agregados de sementes, concentrados de óleos, soluções de óleo, injecções, por exemplo injecções de caule, pulverizações, fumos e partículas.

Geralmente essas formulações incluirão o composto em associação com um veículo ou diluente adequado. Esses veículos podem ser líquidos ou sólidos e sao concebidos para ajudar a aplicação do composto quer por dispersão onde deve ser aplicado ou para obter uma formulação que pode ser pro duzida pelo utilizador numa preparação dispersável. Essas formu lações sao bem conhecidas da técnica e podem ser preparadas de modo convencional como por exemplo misturando e/ou moendo os in gredientes activos juntamente com o veículo ou diluente, por exemplo veículo sólido, solvente ou agente tensioactivo.

Os veículos sólidos adequados para

uso nas formulações como por exemplo pós finos, granulados e pós podem ser escolhidos de, por exemplo, cargas minerais naturais, como por exemplo diatomite, talco, caulinite, montmorilonite, profilite ou atapulgite. Pode, se desejado, ser incluído na composição, ácido silícico altamente disperso ou polímeros absorventes altamente dispersos. Os veículos de adsorção granulados que podem ser utilizados podem ser porosos (como por exemplo pedra pomes, tijolo moído, sepiolite ou bentonite) ou não porosos (como por exemplo calcite ou areia). Os materiais pré-granulados adequados que podem ser utilizados e que podem ser orgânicos ou inorgânicos incluem dolomite e resíduos de plantas do solo.

Os solventes adequados para uso como veículos ou diluentes incluem hidrocarbonetos aromáticos, hidro carbonetos alifáticos, álcoois e glicóis ou os seus éteres, ésteres, cetonas, amidas ácidas, solventes fortemente polares, óleos vegetais opcionalmente epoxidados e água.

Os agentes tensioactivos convencionais, não-iónicos, catiónicos ou aniónicos, por exemplo, alquil fenóis etoxilados e álcoois, sais de metais alcalinos ou metais alcalino-terrosos de ácidos alquil benzenossulfónicos, ácidos linhossulfónicos ou ácidos sulfossuccínicos ou sulfonatos de fenóis poliméricos com boas propriedades emulsionantes, dispersantes e/ou molhantes, podem também ser utilizados quer isolada mente quer em combinação nas composições.

Os estabilizantes, agentes anti-formadores de bolo, agentes anti-espumificantes, reguladores da viscosidade, ligantes e adesivos, fotoestabilizadores bem como fertilizantes, estimulantes do apetite e outras substâncias activas podem, se desejado, ser incluídas nas composições. Os compostos da invenção podem também ser formulados em mistura com outros insecticidas, acaricidas e nematicidas.

Has formulações, a concentração do material activo é geralmente de 0,01 a 99$ e mais preferivelmente entre 0,01 e 40$ em peso.

Os produtos comerciais são geralmente apresentados em composições concentradas que devem ser diluídas para uma concentração adequada, por exemplo de 0,001 a 0,0001$

em peso para utilização.

A taxa de aplicação de um composto depende de um certo número de factores incluindo o tipo de peste envolvida e o grau de infestação. Contudo, em geral, será adequada uma taxa de aplicação de 10 g/ha a lo kg/ha; preferivelmente de 10 g/ha a 1 kg/ha para controlo de ácaros e insectos e de 50 g/ha a 10 kg/ha para controlo de nematodos.

Os compostos da invenção podem ser administrados ou utilizados em combinação com outros ingredientes activos. Em particular os compostos da invenção podem ser administrados ou utilizados com outros agentes antelmínticos conhecidos. Combinando os compostos da invenção com outros agentes antelmínticos o espectro das infecçoes parasíticas que podem ser combatidas com sucesso é muito alargado. Assim, pode conseguir-se a possibilidade de eliminar infecçoes parasíticas contra as quais os compostos individuais são ineficazes ou apenas parcialmente eficazes.

Os compostos da invenção podem ser preparados pelos processos descritos a seguir. Em alguns destes processos pode ser necessário proteger um grupo hidroxilo na posição -5 num material de partida antes de efectuar a reacção descrita. Resses casos pode ser então necessário desproteger o mesmo grupo hidroxilo quando a reacção ocorrer para obter o composto pretendido da invenção. Os processos de protecção convencionais podem ser utilizados por exemplo como descrito nos livros acima mencionados de G-reene and McOmie.

De acordo com um aspecto da invenção apresenta-se um processo (A) para a preparação de compostos de fórmula (I) que compreende fazer reagir compostos de fórmula (II):

14.

'ζ na qual R^x e OR^ têm as significações anteriores, com um reagen te H^NOR ou um seu sal (em que R é como anteriormente definido) e, se desejado, seguir-se a desprotecção de um composto de fórmula (I) em que OR^ é um grupo hidroxilo protegido, e seguin do opcionalmente pela formação de um sal.

A reacção de oximação pode serefectua da em meio reaccional aquoso ou não aquoso, convenientemente a uma temperatura na gama de -2o a +100°C, por exemplo -10 a +50°C. É conveniente utilizar o reagente HgNOK na forma de um sal, por exemplo um sal de adição de ácido como por exemplo o cloridrado. Quando se utiliza esse sal, pode efectuar-se a reacção na presença de um agente ligante de ácido.

Os solventes que podem ser utilizados incluem água e solventes miscíveis com a água como por exemplo álcoois (por exemplo metanol ou etanol), amidos (por exemplo N,N-dimetilformamida, Ν,Ν-dimetilacetamida ou hexametilfosforamida), éteres (por exemplo éteres cíclicos como por exemplo tetrahidrofurano ou dioxano, e éteres acíclicos como por exemplo dimetoxietano ou éter dietílico), nitrilos (por

exemplo acetonitrilo), sulfonas (por exemplo sulfolano), hidrocarbonetos como por exemplo hidrocarbonetos halogenados (por exemplo cloreto de metileno) e ésteres como por exemplo, acetato de etilo bem como misturas de dois ou mais desses solventes.

Quando se utilizam condições aquosas, a reacção pode ser convenientemente tamponada a pH 2-9 com um ácido, base ou tampão adequado.

Os ácidos adequados incluem ácidos inorgânicos, como por exemplo ácido clorídrico ou sulfúrico, e ácido carboxílico como por exemplo o ácido acético. As bases adequadas incluem carbonatos e bicarbonatos de metais alcalinos como por exemplo bicarbonato de sódio, hidróxidos como por exemplo hidróxido de sódio, e carboxilatos de metais alcalinos como por exemplo acetato de sódio. Um tampão adequado é o aceta to de sódio/ácido acético.

Os compostos de fórmula (II) são os compostos conhecidos descritos na Especificação da Patente UK 2176182 ou podem ser preparados a partir de compostos conhecidos aqui descritos por procedimentos convencionais.

pe acordo com um aspecto convencional da invenção apresenta-se um processo (B) adicional para a preparação de compostos de fórmula (I) em que R é um grupo alqui1° C-[__g θ OR^ é um grupo hidroxilo substituído que compreende fazer-se reagir um composto de fórmula (I) em que OR^ é um grupo hidroxilo com um reagente que serve para converter um grupo hidroxilo num grupo hidroxilo substituído, opcionalmente seguido de formação de sal.

As reacções de acilação, formilação, sulfonilação, eterificaçao, sililação ou formação de acetal podem ser efectuadas por processos convencionais tal como a seguir descrito.

Assim, por exemplo, a acilação pode ser efectuada usando um agente acilante como por exemplo um ácido de fórmula R^OCSOH ou um seu derivado reactivo, como por exemplo um halogeneto de acilo (por exemplo cloreto de acilo), anidrido ou éster activado, ou um derivado reactivo de um ácido carbónico R^OCOOH ou ácido tiocarbónico R^OCSOH.

As acilaçoes utilizando halogenetos

- 16 de acilo e anidridos podem se desejado ser efectuadas na presen ça de um agente ligante de ácido como por exemplo uma amina ter ciaria (por exemplo trietilamina, dimetilanilina ou piridina), bases inorgânicas (por exemplo carbonato de cálcio ou bicarbona to de sódio), e oxiranos como por exemplo óxidos de 1,2-alquile no inferior (por exemplo óxido de dietileno ou óxido de propile no) que liga o halogeneto de hidrogénio libertado na reacção de acilação.

As acilações utilizando ácidos são desejavelmente conduzidas na presença de um agente condensante, por exemplo uma carbodiimida como por exemplo H,H’-diciclohexil carbodiimida ou N-etil-R’ -dimetilaminopropilcarbodiimida; um composto de carbonilo como por exemplo carbonildiimidazole· ou um sal de isoxazólio como por exemplo perclorato de K-etil-5-fenilisoxazólio.

Pode convenientemente formar-se um éster activado in situ utilizando-se, por exemplo, 1-hidroxiben zotriazole na presença de um agente condensante tal como acima referido. Alternativamente pode préformar-se o éster activado.

A reacção de scilação pode ser efectu ada em meio reaccional aquoso ou não aquoso, convenientemente a uma temperatura na gama de -20°C a +100°C, por exemplo -10° a +50°G.

pode efectuar-se a formilação utilizando um derivado activo do ácido fórmico por exemplo N~formil imidazole ou anidrido de ácido fórmico em condições de reaceão convencionais.

Pode efectuar-se a sulfonilização com um derivado reactivo de um ácido sulfónico R^SO^H como por exem J r — pio halogeneto de sulfonilo, por exemplo um cloreto, R SO₂C1 ou um anidrido sulfónico. A sulfonilização é preferivelmente efectuada na presença de um agente ligante de ácido adequado como acima descrito.

pode efectuar-se a eterificação usando um reagente com a fórmula R^Y (em que R' é como acima defini do e γ representa um grupo substituível como por exemplo cloro, bromo ou iodo ou um grupo hidrocarbilsulfoniloxi, como por exemplo mesiloxi ou tosiloxi, ou um grupo haloalcanoiloxi como

por exemplo dicloroacetoxij. Pode fectuar-se a reacção por formação de um alcóxido de magnésio utilizando um reagente de Grignard como por exemplo halogeneto de metilmagnésio por exemplo iodeto de metil magnésio ou utilizando um halogeneto de trialquilsililmetilmagnésèo por exemplo cloreto de trimetilsililmetilmagnésio seguido de tratamento com o reagente ρ/ Y.

Alternativamente pode efectuar-se a reacção na presença de um sal de prata como por exemplo óxido de prata, perclorato de prata, carbonato de prata ou salicilato de prata ou suas misturas e este sistema pode ser particularmen te adequado quando se efectua a esterificação utilizando um halogeneto de alquilo (por exemplo iodeto de metilo).

A eterificação pode convenientemente ser efectuada num solvente tal como um éter, por exemplo éter dietilico.

A formação de acetal pode efectuar-se por reacção com um éter vinílico cíclico ou acíclico. Este processo é especialmente útil para a produção dos éteres de tetrahidropiranilo por exemplo dihidropirano como reagente, ou éteres de 1-alcoxialquilo como por exemplo éter de l-etoxialquilo, utilizando éter alquilvinílico como reagente. A reacção é desejavelmente efectuada na presença de um catalisador de ácido forte, por exemplo um ácido inorgânico como por exemplo o ácido sulfúrico, um ácido sulfónico orgânico como por exemplo o ácido p-toluenossulfónico, num solvente não hidroxílico substancialmente livre de água. Os solventes que podem ser utilizados nas reacções acima indicadas incluem cetonas (por exemplo acetonas) amidas (N,N-dimetilformamida, Ν,Ν-dimetilacetamida ou hexametil fosforamida), éteres (por exemplo éteres cíclicos como por exemplo tetrahidrofurano ou dioxano, e éteres acíclicos como por exemplo dimetoxietano ou éter dietilico), nitrilos (por exemplo acetonitrilo), hidrocarbonetos como por exemplo hidrocarbonetos halogenados (por exemplo cloreto de metileno e ésteres como por exemplo acetato de etilo bem como misturas de dois ou mais desses solventes.

A acililação pode ser efectuada por • reacção com um halogeneto de sililo (por exemplo o cloreto), - vantajosamente na presença de uma base como por exemplo imida18

^_ zole trietilamina ou piridna, na presença de uma base usando um solvente como dimetilformamida.

A carbamoilação para obter um composto de fórmula (I) em que OF? é um grupo OCONP?P? pode ser efectuada por reacção com um agente de acilação adequado (isto é de carbamoilação). Os agentes de carbamoilação adequados que podem ser utilizados para produzir compostos em que um dos grupos R⁸ e ? é um átomo de hidrogénio e outro é um grupo alquile incluem isocianatos com a fórmula rAtCO (em que F?^ é um grupo alquilo C-^). A reacção de carbamoilação pode desejavelmente ser efectuada na presença de um solvente ou misturas de solventes na presença de hidrocarbonetos (por exemplo aromáticos como por exemplo benzeno e tolueno), hidrocarbonetos halogenados (por exemplo diclorometano), amidas (formamida ou dimetilformamida), ésteres (como por exemplo acetado de etilo), éteres (como por exemplo éteres cíclicos como por exemplo tetrs hidrofurano e dioxano), cetonas (acetona), sulfóxidos (por exemplo dimetilsulfóxido) ou misturas destes solventes. A reacção pode convenientemente ser efectuada a uma temperatura entre -80°C e a temperatura de ebulição da mistura reaccional, por exemplo até 100°C, preferivelmente entre -2o°C e +30°C·

A carbamoilação pode ser ejudada pela presença de uma base por exemplo uma base orgânica terciária como por exemplo tri (alquil inferior) amina (por exemplo trietilamina).

Outro agente de carbamoilação útil é o ácido ciânico, que é convenientemente produzido in sita, por exemplo a partir de um cianato de metal alcalino como por exemplo dianato de sódio, sendo a reacção facilitada pela presença de um ácido por exemplo um ácido orgânico forte como por exemplo o ácido trifluoroacético. 0 ácido ciânico corresponde efectivamente aos compostos isocianato acima mencionados em que p?^ é hidrogénio e converte assim compostos de fórmula (II) directa mente nos seus análogos carbamoiloxi isto é compostos de fórmula (I) em que 01? é um grupo 0C0NH₂·

Alternativamente, pode efectuar-se a . carbamoilação por reacção com fosgénio ou carbonildiimidazole 1 seguido de amoníaco ou de amina substituída adequada, opcional19 mente num meio reaccional aquoso ou nao aquoso.

A formação dos compostos de fórmula z 7 (I) em que OR representa um grupo OCO(CHg).^00gR pode ser conseguida por acilação de composto 5-hidroxi Correspondente com η um ácido HOgCÍCh/OflCC^R ^ou um ^seu derivado reactivo de acordo com o procedimento de acilação acima descrito.

De acordo com um outro aspecto da invenção apresenta-se um processo adicional (c) para a preparação de compostos com a fórmula (I) em que R e um grupo alquilo Cj_—8 ^ou alcenilo que compreende fazer-se reagir um composto com a fórmula (i) em aue R² é um átomo de hidrogénio e OR' é um grupo hidroxilo substituído eom um agente eterificante R X (em que R^z é um grupo alquilo Cj_.g ^{ou a}l^cen;i-l⁰ e γ é como anteriormente definido), e se desejado seguir-se a desprotecção de um composto com a fórmula (i) em que 0R^J é um grupo hidroxilo protegido e seguido opcionalmente pela formação de sal.

A reacção de eterificação pode ser efectuada, por exemplo, pela formação de alcóxido de magnésio usando um reagente de Grignard como por exemplo halogeneto de metil magnésio por exemplo iodeto de metil magnésio seguido de tratamento com o reagente R“Y. Alternativamente, a reacçao pode ser efectuada na presença de um sal de prata como por exemplo óxido de prata, perclorato de prata, carbonato de pràta ou salicilato de prata ou suas misturas na presença de uma base por exemplo carbonato de potássio ou hidreto de sódio. A eterificação pode ser convenientemente efectuada num solvente orgânico como por exemplo um éter por exemplo éter dietilico, tetrahidro furano, ou dioxano ou de uma amida por exemplo dimetilformamida ou triamida hexametilfosfórica ou uma mistura desses solventes à temperatura ambiente. Ressas condições a configuração do grupo oximino não é substancialmente alterada pelo processo da reacção da eterificação.

De acordo com um outro aspecto da invenção apresenta-se um outro processo adicional (D) para, a preparação de compostos de fórmula (I) em que OR⁹ é um grupo hidro xilo que compreende fazer-se reagir um composto de fórmula (III)

CH₃

R’ (III) seguido opcionalmente pela formação de sal.

A redução pode ser efectuada com um agente redutor que é susceptível de reduzir estereoselectivamen te o grupo 5-Ceto. Os agentes redutores adequados incluem borohidretos como por exemplo borohidreto de metal alcalino (por exemplo boro hidreto de sódio) e hidretos de lítio alcoxialumínio como por exemplo hidreto de lítio tributoxialumínio.

A reacção que envolve um agente redutor do tipo borohidreto tem lugar na presença de um solvente co mo por exemplo um alcanol por exemplo álcool isopropilico ou álcool isobutílico convenientemente a uma temperatura na gama de -30°G a +80°G por exemplo a 0°C. Areacção que envolve um hidreto de lítio alcoxialumínio tem lugar na presença de um solvente como por exemplo um éter por exemplo tetrahidrofurano ou dioxano convenientemente a uma temperatura na gama de-78°c a

Os compostos intermediários de fórmu la (III) podem ser preparados a partir de uma 5,23 -dicetona com a fórmula (TV)

por tratamento com um equivalente de um reagente HoNOR^ (em que 2 /

R é como anteriormente definido) utilizando as condições de oxi mação acima descritas para a preparação dos compostos de fórmula (I). Os compostos de fórmula (IV) podem ser preparados oxidando um composto de fórmula (V)

(V)

A reacção pode ser efeotuada com um agente oxidante que sirva para converter um grupo hidroxilo secundário num grupo oxo, obtendo-se um composto com a fórmula (IV).

Os agentes oxidantes adequados incluem quinonas na presença de água, por exemplo 2,5-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona ou 2,5,5,6-tetracloro-1,4-benzoquinona; um agente oxidante de crómio (VI), por exemplo dicromato de sódio ou de piridínio ou trióxido de crómio em piridina, preferivelmente na presença de um catalisador de transferência de fa se· um agente oxidante de manganês (IV), por exemplo dióxido de manganês em diclorometano; uma R-halosuccinimida, por exemplo N-clorosuccinimida ou N-bromosuccinimida; um dialquilsulfóxido por exemplo dimetilsulfóxido; na presença de um agente activante como por exemplo Ν,Ν’-diciclohexilcarbodiimida ou de um halo geneto de acilo por exemplo cloreto de oxalilo; um complexo de trióxido de enxofre-piridina.

A reacção pode ser convenientemente efectuada num agente adequado que pode ser escolhido de uma cetona, por exemplo acetona, um éter por exemplo éter dietílico, dioxano ou tetrahidrofurano; um hidroharboneto por exemplo hexa no, um hidrocarboneto halogenado por exemplo o clorofórmio ou cloreto de metileno; um éster por exemplo acetato de etilo ou uma amida substituída por exemplo dimetilformamida. Podem também utilisar-se combinações desses solventes quer isoladamente quer com água. A escolha do solvente dependerá do tipo de agente oxidante utilisado para a conversão.

A reacção pode efectuar-se a uma temperatura entre -80°C e +50°G.

Os compostos de fórmula (V) podem ser preparados, por exemplo, cultivando a Streptomyces the rmoarcha NC1B 12015 (depositada no dia 10 de setembro de 1984, na colecção de ciilturas permanente do Rational Collections of industrial and Marine Bactéria, Torry Research station, Aberdeen, Reio Unido) ou um seu mutante e isolando o composto do caldo de fermentação assim obtido.

organismo da Streptomyces pode ser cultivado por meios convencionais, isto é na presença de fontes

assimiláveis de carbono, azoto a sais minerais. As fontes assimiláveis de carbono, azoto e sais minerais podem ser fornecidas quer por nutrientes simples ou complexos por exemplo como descrito na Especificação de patnnte do Reio Unido 2166436. Os meios adequados compreendem os descritos na Preparação 1 a seguir apresentada.

A cultura de organismos Streptomyces será efectuada a uma temperatura de 20 a 50°C preferivelmente de 25° a 40°C e terá desejavelmente lugar com arejamento e agitação por exemplo agitando bem. 0 meio pode ser inicialmente inoculado com uma pequena quantidade de uma suspensão esporulada do microorganismo, mas para evitar o crescimento do inoculan te vegetativo do organismo pode ser preparado por inoculação de uma pequena quantidade do meio de cultura com a forma de um esporo do organismo, e o inoculante vegetativo pode ser transferido para um meio de fermentação, ou, mais preferivelmente para uma ou mais fases de nucleação em que tem lugar crescimento adicional antes da transferência para o meio de fermentação principal. A fermentação será geralmente efectuada numa gama de pH de 5,5 a 8,5.

A fermentação pode ser efetuada durante um período de 2-10 dias, por exemplo cerca de 5 dias.

Os compostos de fórmula (V) podem ser separados do caldo de cultura global assim obtido por técnicas de isolamento e separação convencionais, podem utilizar-se várias técnicas de fracionamento, por exemplo adsorpção-eluição, precipitação, cristalização fracionada e extracção com solventes que podem ser combinadas de várias maneiras. Verificou-se que a extracção eom solventes e cromatografia eram as mais adequadas para isolar e separar o composto, um processo adequado para obter os compostos de fórmula (V) utilizando estes procedimentos é descrito na preparação 1 a seguir apresentada.

De acordo com um outro aspecto da invenção apresenta-se um processo adicional (E) para a preparação de compostos com a fórmula (i) em que 0R^J é um grupo hidroxilo . que compreende desproteger-se um composto correspondente de fór - mula (I) em que OR e um grupo hidroxilo protegido como acima

descrito.

Assim, por exemplo, pode remover-se um grupo acilo como por exemplo um grupo acetilo por hidrólise básica, por exemplo com hidróxido de sódio ou de potássio em solução aquosa ou por hidrólise ácida por exemplo utilizando ácido sulfúrico concentrado em metanol. Os grupos acetal como por exemplo tetrahidropiranilo, podem ser removidos, por exemplo, utilizando hidrólise ácida (utilizando um ácido como por exemplo o ácido acético ou trifluroacético ou um ácido inorgâni co diluído), podem remover-se os grupos sililo utilizando iões fluoreto (por exemplo fluoreto de tetra-alquil amónio como por exemplo fluoreto de tetra-n-butilamónio), fluoreto de hidrogénio em acetonitrilo aquoso ou um ácido como por exemplo o ácido p-toluenosulfónico (por exemplo em metanol). Os grupos arilmetilo podem ser removidos por tratamento com um ácido de Lewis (por exemplo trifluoreto deboro-eterato) na presença de um tiol (etano-tiol) num solvente adequado como por exemplo á temparatu ra ambiente.

Podem preparar-se sais dos ácidos de fórmula (I) por processos convencionais, por exemplo tratando o ácido com uma base ou convertendo um sal noutro por permuta iónica.

A invenção é ilustrada mas não limitada pelas seguintes e Exemplos em que EtOH representa etanol.

Nos seguintes Exemplos e Preparações designam-se os compostos como derivados Factores conhecidos, Pactores A, B, C e D. 0 Factor A é um composto de fórmula (VI) Ί X em que R¹ é isopropilo e pg é hidrogénio; Factor B é um composto de fórmula (VI) em que R^x é metilo e P/ é metilo; Factor G é *1 um composto de fórmula (VI) em que R^x é metilo e R^p é hidrogénio; e Factor D é um composto de fórmula (VI) em que é etilo e R^ é hidrogénio.

OH

preparação de 1-5-ceto Factor A

Inocularam-se thermoarchaensis NC1B 12015 em culturas com os seguintes ingredientes esporos de streptomyces inclinadas ágar obtidas

Extracto de levedura (Oxoid 121) 0,5 Extracto de Malte (Oxoid L39) 30,5 Peptona Micológica (Oxoid 140) 5,0 Ágar N2 3 (Oxoid I 13) 15,0 Água destilada a 1 1

PH ~ 5,4 e incubou-se a 28°C durante 10 dias.

Cobriu-se em seguida a cultura inclinada madura com 6 ml de uma solução a 10$ de glicerol e raspou-se com o auxílio de uma ferramenta esterilizada para libertar os esporos e micélios. Transferiram-se alíquotas de 0,4 ml da suspensão de esporos resultante para frascos de polipropileno esterilizados que foram em seguida selados pelo calor e armazenados em vapor de azoto líquido até serem necessários.

- pfi prepararam-se dois frascos de Erlenmeyer de 250 ml contendo 50 ml do meio de nucleação do modo se-

guinte;	_-l
D-Glicose	15,0
Glicerol	15,0
peptona de Soja	15,0
NaCl	5,0
CaCO^	1,0
Agua destilada até 1 L

(0 PH não ajustado do meio era de 6,7 e foi ajustado para PH 7,0 com hidróxido de sódio em solução aquosa antes de se colocar numa autoclave. 0 pH do meio após sair da autoclave era de 7,5) que foram inoculados com 0,2 ml da suspensão de esporos tomada a partir de uma amostra pequena.

Incubaram-se os frascos a 28°C durante 3 dias num agitador rotativo a 250 rpm com um movimento orbital com diâmetro de 50 mm.

Os conteúdos dos dois frascos foram utilizados para inocularem o vaso de fermentação de 70 1 do mes. mo meio e com um suplemento de polipropileno 2000 (0,06/ v/v). Adicionou-se polipropileno 2000 como necessário ao longo da fer mentação para controlar a espumificação. Efectuou-se a fermenta ção a 28°C, com agitação e arejamento suficientes para manterem um nível de oxigénio dissolvido superior a 50/ da saturação. Após 24h de fermentação, transferiu-se uma porção de gL de cal-

do	para um fermentador de 700	1 contendo 450 1	de meio obtido
da	forma seguinte:
	D-glicose		2,8
	Dextrina de Malte	MD30E	27,8
	Arkasoy 50		15,9
	M la		1,7
	k2hpo4		0,16
	CaCO^		1,59
	Silicone 525 (Dow	Corning)	0,06/	(v/v)
	Ajustada a pH 6,5	antes da	esterilização.

Efectuou-se a fermentação a 28°C com agitação e arejamento. Adicionou-se anti-espumante. polipropile no 2000 como necessário e manteve-se o pH a 7,2 por adição de HgSO^ até à colheita. Colheu-se a fermentação após 5 dias.

Clarificou-se o caldo (450 L) numa centrifugadora westfalia KA 25 e deslocou-se o sobrenadante residual com água (20 L). Agitaram-se as células recuperadas (25,5 Kg) durante 1 h com um misturador Silverson modelo BK com metanol suficiente para se obter um volume total de 75 L. Filtrou-se a suspensão e reextraiu-se o resíduo sólido com meta nol (35 L) e filtrou-se. Diluiu-se o filtrado combinado (87 L) com água (40 L) e extraiu-se com éter de petróleo a 6o°-8O°C (30 1)· Passados 30 minutos separaram-se numa centrifugadora Westfalia MEM 1256 e reextraiu-se a fase de metanol inferior com éter de petróleo de 60°-80°C (30 L) após adição de água (40 L). Após separação reextraiu-se de novo a fase inferior com éter do petróleo 60°-80°C (30 L). Concentraram-se as fases do éter de petróleo combinadas (85 L) por três passagens através de um evaporador de pfauder 8,8-12v-27 (pressão de vapor 0,1 bar, temperatura de vapor 2o°C, temperatura de vapor seco 127°$ Secou-se o concentrado (9 L) com sulfato de sódio (2 Kg) e concentrou-se adicionalmente a pressão reduzida a 40°C num evapora dor de filme rotativo.

Dissolveu-se o resíduo oleoso (130 g) em clorofórmio para se obterem 190 ml e aplicou-se este produto a uma coluna de sílica 6o Merck 7734 (200x4 cm) embalada em cio rofórmio. Lavou-se a coluna com clorofórmio (500 ml) e eluiu-se com clorofórmio ; acetato de etilo (3:1) e recolheram-se fracções com aproximadamente 40 ml após um processamento prévio de 1 400 ml.

Combinaram-se as fracçoes 32-46 e eva poraram-se para se obter um óleo (21,2 g). Combinaram-se as fracçoes 47-93 e evaporaram-se para se obter um óleo (20,1 g) que foi dissolvido em clorofórmio ; acetato de etilo (3 : 1) até 50 ml, e aplicou-se a uma coluna de sílica 6o Merck 7734 (200x4 cm) cheia com clorofómio:acetato de etilo (3:1), e combinaram-se as fracçoes com aproximadamente 40 ml, após um processamento de 1400 ml. Combinaram~se as fracçoes 22-36 e evapo'}O

raram-se para se obter um óleo (5,1 g) que foi adicionado ao óleo obtido das fracções 52-46 da primeira coluna. Dissolveram-se os óleos combinados em metanol (4 ml) que em seguida foi adicionado a propan-2-ol quente (20 ml) e deixou-se cristalizar Evaporaram-se as águas mães após cris talização para se obter um óleo que foi dissolvido num volume igual de cloreto de metileno s que se carregou numa coluna (50x2,2 cm) de sílica Merck Kiesselgel 60 (70-230 malhas ASTM, Art^ N² 7734) cheia com cloreto de metileno. Lavou-se o leito com cloreto de metileno (dois volumes de leito) e eluiu-se com clorofórmio-acetato de etilo (3:1) (2 volumes de leito). A evaporação do eluato produziu o óleo que foi dissolvido em metanol e submetido a cromatografia líquida de alto rendimento preparativa (hplc) em Spherisorb S5 ODS-2 (250 mm x 20 mm, phase Sep· Ltd). Transferiram-se por bomba partes da amostra (5 ml) para a coluna durante um período de 1 minuto e eluiu-se a coluna com acetonitrilo *. água (7:3) nas seguintes condições

Tempo (min)

0,00

1,00

1,10

39,90

40,00

75,00

Caudal (ml/min)

0,00 ) Tempo de

0,00 ) Injecção

30,00

30,00

35,00

35,00 controlou-se o material que eluia da coluna de hplc por espectroscopia uv a 233 nm.

A evaporação das fracções combinadas compicos eluindo a 33,4 min produziu o composto do título (34 mg) na forma de um sólido.

A espectrocopia de massa E.I. indicou um ião molecular a 610 e deu fragmentos característicos a : 592 574

556

422

259

241

Exemplo 1

ZÊ^-metoxiimino Factor A (a) 5,23-Diceto Factor A

Adicionou-se uma solução refrigerada com gelo preparada de ácido sulfúrico (1,2 ml) e dicromato de sódio (120 mg) em água (2 ml) durante 15 min a uma solução refrigerada com gelo de 5-ceto Factor A (200 mg) e bissulfato de tetrabutil amónio (15 mg) em acetato de etilo (4 ml) com agitação vigorosa. Passada lha mistura foi diluída com acetato de etilo e as orgânicas foram lavadas com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio. Evaporou-se a fase orgânica seca e purificou-se a goma por cromatografia em sílica Merck Kiesegel 6o 230-400 malhas (100 ml). A eluição com acetato de etilo a 10$ em diclorometano produziu o composto do título na forma de uma espuma amarela pálida (86 mg)£ (CDOI^) incluiu 6,57 (m,lH); 2,50 (s,2H); e 1,89 (m,3H).

(b) 5-Ceto 23ZÊ_7-metoxiimino Factor A

Dissolveram-se em metanol o 5,23-Dice to Factor A (475 mg), cloridrato de metoxilamina (69 mg) e acetato de sódio anidro (135 mg), passadas 1,5 h à temperatura ambiente, manteve-se a solução a -18°C durante 16 h, diluiu-se com acetato de etilo e lavou-se sucessivamente com ácido clorídrico IN, água e solução salina. Evaporou-se a fase orgânica se ca e purificou-se a espuma amarela por cromatografia em sílica Merck Kieselgel 60, 230-400 malhas (12o ml). A eluição da coluna com hexano;acetato de etilo (4:1) produziu o composto do título na forma de uma espuma amarela (255 mg) ZVd + 80 (c 1,20, CHCI₅), λ (EtOH) 241 nm (£ 27,500), (OHBr^),

3530, 3460 (0H) 1708 (0=0), 1676 (0=0-0=0), 986 (C-0), 6 (CDCI^) inclui 6,58 (s; 1H), 3,84 (s«4H), 3,80 (s;lH), 3,58 (m;lH), 3,30 (dl4,lH), 1,00 (d6;3H), 0,96 (d6;3H), 0,92 (d6;3H).

(c) 23/Ê_7Metoxiimino Factor A (i) Adicionou-se borohidreto de sódio (6,5 mg) a uma solução refrigerada com gelo de 5-ceto, 23ZÊ_7~metoxi imino Factor A (83 mg) em isopropanol (20 ml). Agitou-se a mistura amarela durante 35 numa solução refrigerada com gelo, diluída com acetato de etilo e lavou-se sucessivamente com ácido

I „ clorídrico 1N, água e solução salina. Evaporou-se a fase orgânica seca e purificou-se a goma amarela resultante por cromatografia em Merck Kieselgel 60, 250-400 malhas (60 ml). A eluição da coluna com hexano : acetato de etilo (2:1) produziu o compos to do título na forma de uma espuma amarela (58 mg). A cristali zaçao de hexano produziu o composto do título p.f. 205 C, /¾⁷^¹⁵⁵°^{0 ljl2}’ CHCI₅),>_max(EtOH) 244 nm (£ 26,200), í (CDCI^), inclui 4,29 (t7; 1H), 5,84 (s,5H), 5,29 (dl5;lH).

(ii) Adicionou-se uma solução de 5-ceto,

2toxiiminn Ractor A (50 mg) em tetrahidrofurano anidro (1 ml) a uma solução arrefecida (~78°C) de hidreto de lítio tris -t-butoxialimínio (261 mg) em tetrahidrofurano anidro (5 ml), passadas 0,785 h a -78°C, eluiu-se a solução com acetato de etilo (50 ml) e lavou-se sucessivamente com ácido clorídrico 0,5 N e água. Evaporou-se a fase orgânica seca e purificou-se o produto bruto por cromatografia em Merck Kieselgel 60, 250-400 malhas (40 ml), eluindo com acetato de etilo a 25$ para se obter o composto do título na forma de uma espuma branca, + 128°(c 0,95, CHCI^), £ (ODOI^) inclui 4,29 (t7; 1H), 5,84 (s; 5H), 5,29 (dl5; 1H).

Exemplo 2

5-Acetato de 23ZÊ_7~Metoxiimino Ractor A

Adicionou-se uma solução de acetato de sódio anidro (2,8 g) em água (15 ml) a uma solução do acetato de 25-ceto Factor A (5,15 g, Exemplo 18 na Especificação de Patente UK 2176182) em metanol, seguido de cloridrato de metoxiamina (5,01 g). Agitou-se a solução resultante durante 1,5 h a 20°C, diluiu-se com acetato de etilo e em seguida lavou-se sucessivamente com ácido clorídrico 5N, água e solução salina. Evaporou-se a fase orgânica seca até perto da secnra e a espuma esbranquiçada foi purificada por cromatografia em Merck Kieselgel 60 250-400 malhas (600 ml). A eluição da coluna com hexano : : acetato de etilo (4:1) produziu o composto do título na forma de uma espuma incolor (2,14 g) /¾⁷]) ^{+ 12}8°C (c 1,35, CHCI^) \_ax ^(Et0H> ^{244 nm} (è ^{max 2}7>²50); / _max (0ΗΒ?₅)3560, 5480 • (OH), 1753 (acetato), 1715 (0=0),995 (C-0), (CDCIj) inclui • 5,5-5,6 (m:2H), 3,84 (S:3H) 3,29 (d 15:H), 2,16 (S:3H).

Exemplo 3

5-Acetato de 23ZÊ_J⁷-hidroxiimino Factor A

A reacção do acetato de 23-ceto Factor A com cloridrato de hidroxiloamina foi efectuada de modo se melhante ao descrito no Exemplo 1 acima, purificou-se o produto bruto por Merck Kieselgel 6o 230-400 malhas, eluindo com aceto de etilo : acetonitrilo (4:1) para se obter o composto do título na forma de uma espuma incolor + 132 (c 1,01, CHCl^i ^_max (EtOH) 244 nm (£ _max 27800), V_max (CHBr^) 3565, 3470 (OH). 1732 (acetato), 1712 (0=0),993 (C-0), (CDCl^) inclui 8,12 (S;1H), 5,5-5,6 (m:2H), 3,42 (d 15:1H), 2,16 (S:3H).

Exemplo 4 23/Ê_7-Metoxiimino Factor A

Arrefeceu-se com banho de gelo uma solução do protuto do Exemplo 2 (1,88 g) em metanol, adicionou-se uma solução aquosa de hidróxido de sódio 1N (5,6 ml) e agitou-se a solução num banho de gelo durante 1,5 h. Diluiu-se a solução com acetato de etilo e lavou-se sucessivamente com solu ção aquosa de ácido clorídrico 0,5 N, água e solução salina. Evaporou-se a fase orgânica seca e purificou-se a espuma resultante em Merck Kieselgel 6o 230-400 malhas (400 ml). A eluição da coluna com hexano ; acetato de etilo (2:1) produziu uma espuma incolor (1,429 g). Acristalisação de hexano produziu o com posto do título puro p.f. 2o3°C, + 132° (c 1,21, CHCl^),

X_max ^{244 11111} (^emax ²⁹²°°)’ \fmax (^GEBrj) 5540 (OH),

1708 (0=0), 992 (C-0), (CDCl^) inclui 4,29 (t7:lH), 3,84 (s:3H), 3,29 (dl5:lH).

Exemplo 5

23ZÊ_7 -Hidroxiimino Factor A

A hidrólise do produto do Exemplo 3 de acordo com o processo descrito no Exemplo 3 acima apresentado deu um produto que foi purificado por cromatografia em Merck íieselgel 60 230-400 malhas (400 ml) eluindo com hexano ; aceta to de etilo (1:1) para se obter o composto do título na forma

- -----1 ............... .7Γ- --I de uma espuma incolor. /oõL + 140 (c 1,24, CHC1₇), (EtOH) 244 nm (£ _max 26700) V_max (CIíBr^) 3565, 3490 (OH), 1710 (0=0), 994 (C-0), 6(CDCl^) inclui 8,11 (S;1H), 4,29

(t7slH), 3,41 (dl5:lH).

Exemplo 6

23ZÊ_7~Etoxiimãno Factor A

Adicionou-se uma solução de acetato de sódio anidro (140 mg) em água (5 ml) a uma solução de 23-ceto Factor A (200 mg, Exemplo 23 em Especificação de patente UK 2176182) e cloridrato de etoxiamina (126 mg) em metanol (2o ml). Após 2 h a 20°C diluiu-se a solução com éter 40 ml e lavou-se com água. Evaporou-se a fase orgânica seca e purificou-se a espuma esbranquiçada resultante por cromatografia em Merck Kieselgel 6o 230-400 malhas (90 ml). A eluição da coluna com hexano : acetato de etilo (2;1) produziu o composto do tí__ ' .......o .....

tulo na forma de uma espuma incolor (189 mg) + 125° (EtOH) 244 mm (e_ms;í 28,200) _max (0=0), 990 (C-0), / (ODCip inclui 4,50

5,31 (dl5:lH), 1,24 (t7i3H).

(CHBr.J (c 1,00, CHC1₃) A_max 3540, 3480 (OH), 170>

(t7:lH), 4,10 (q7í2H),

Prepararam-se os compostos dos Exemplos 7, 8 e 9 de modo semelhante a partir do 23-ceto Factor A e da alcoxiamina adequada.

Exemplo 7

23/Ê__7-Aliloxiimino Factor A

ZVd¹ + ¹²⁴° (£1.17. CH01,), A_max (EtOH) 244 mm (£_max 28,400), y _max (CHBTj) 3550, 3490 (OH), 1708 (0=0), 990 (c-0), è (CDClj) inclui 5,98 (m;lH), 5,28 (ddl7,2;lH), 5,15 (do9,2;lH), 4,5-4,7 (m;2a), 4,29 (t7;lH),

3,36 (dl4;lH) foi preparado a partir do cloridrato de aliloxiamina.

Exemplo 8

23ZÊ__7-Isopropiloxiimino Factor A

Preparou-se a partir do cloridrato de isopropiloxiamina 116° (c 0,97, CHCl₅),À_max (EtOH)

244 mm ( e_max 25,000), /_max (CHBr^) 3550, 3490 (OH), 1708 (0=0), 992 (C-0), ^(CDCl^) inclui 4,2-4,4 (m;2H), 3,30 (dl4;lH), 1,21 (d7;3H), 1,20 (d7;3H) ’ Exemplo 9 • 23/Ê /n-Butoxiimino Factor A

Preparou-se a partir do cloridrato de n-butoxiamina /“<y21 ₊ qq^⁰ Çq 1,10, CHCl^), A_max (EtOH) 244 nm (£ max 51,800), V _max(CHBr₅) 5540, 5460 (OH), 1708 (0=0), 992 (C-0), 3(CDC1₃) inclui 4,28 (t6;lx), 4,03 (m;2H), 3,96 (d6;lH), 3,31 (dl4;lH), 0,9-1,1 (m;15H)

Exemplo 1Q

5-Acetato de 23/ÍL7Metoxiimino Factor A (1) Adicionou-se uma solução 3-molar de iodeto de metilmagnésio em éter (0,16 ml) a uma solução agitada do produto do Exemplo 3 (120 mg) em triamida hexametilfosfórica seca (5 ml) em azoto. Adicionou-se iodometano (0,09 ml), e após 1 h diluiu-se a mistura com acetato de etilo (30 ml) e lavou-se sucessivamente com ácido clorídrico 2n e água. Evaporou-se a fase organica seca e purificou-se a goma amarela por cromatografia em Merck Kieselgel 60 230-400 malhas (80 ml). A eluição com hexano : acetato de etilo (2·1) produziu o composto do título na forma de uma espuma branca + 123° (ç 1,25,

CHClj) A_max (EtOH) 245 nm (£ _max 30 300). 0 ensaio de Hl foi como descrito no Exemplo 2.

(ii) Dissolveu-se o produto do Exemplo 3 (0,082 g) em éter dietílico (10 ml) contendo óxido de prata (0,4 g), recentemente preparado a partir da forma aquosa de nitrato de prata e hidróxido de sódio 2m. Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 2 h, filtrou-se e evaporou-se o solvente para se obter uma goma amarela bruta. Purificou-se este residuo por cromatografia de camada fina preparativa (Merck 5717) eluindo com diclorometano/acetona (25:1). A banda principal foi extraída com acetona e evaporada para se obter o composto do título (0,059 g). 0 ensaio de RMN foi efectuado como descrito no Exemplo 2.

Exemplo 11

5-Metilcarbamato de 23/Êj/Metoxiimino Factor A

Adicionaram-se isocianato de metilo (0,13 ml, 125 mg) e trietilamina (2 gotas) a uma solução de 23/Ê_y-metoxiimino Factor A (350 mg) em dimetilformamida anidra (0,75 ml). Fechou-se o frasco e aqueceu-se durante 5,5 h a 80°C com agitação. Deitou-se a mistura reaccional em água e filtrouA

-se a mistura resultante através de sílica. Lavou-se o bolo do filtro com água (150 ml) e em seguida extraiu-se com diclorometano (75 ml). Secou-se o extracto (MgSO^) θ concentrou-se para se obter uma espuma amarela que foi purificada por cromatografia de coluna a média pressão em sílica (40 g, Merck Kieselgel 60, 230-400 malhas). A eluição com hexano : acetato de etilo (1;1) produziu o composto do título na forma de uma espuma bran ca (206 mg). /¾⁷^² + 99° (ç 0,55, CH₂Cl₂);A_max ²44,4 nm (£28710); /_max (CHBr^) 3550 (OH), 5455 (NH), 1720 (éster), 1720 + 1510 (carbamato) e 995 cm^-·¹· (C-0); ^(CDCl^) inclui 1,78 (s, 3H), 2,86 (d, 5Hz, 3H), 5,29 (d, 14 Hz, 1H), 5,85 (s, 511), 4,80 (q, 5 Hz, 1H) e 5,50 (m, 2H).

Exemplo 12

5-Metilcarbonato de 23</g7“Metoxiimino Factor A

Adicionou-se a uma solução de 2 3-ZM -metoxiimino Factor A (150 mg) em diclorometano (15 ml) e piridina (0,3 ml) com agitação a 0°C, cloroformato de metilo (0,7 ml de uma solução 1,OM em diclorometano). Deixou-se a mistura reaccional com agitação a 0-3°C durante 20 min, e em seguida adicionou-se a diclorometano (70 ml) e lavou-se com ácido clorídrico 2u (50 ml). Secou-se a fase orgânica (HgSO^) θ removeu-se o solvente para se obter uma espuma que foi purificada por cromatografia de coluna de média pressão em sílica (40 g, Merck Kieselgel 6o, 230-400 malhas). A eluição com diclorometano ; : acetato de etilo (30:1) produziu o composto do título na forma de uma espuma branca (127 mg). + 145° (c=0,41, OHgClg) ^max (^Et0H) 244,4 nm (<<31210); /_max (CHBr^) 3460 + 3540 (OH), 1742 (carbonato) 1710 (éster) e 992 cm^-1 (C-0); cí (CDCl^) incluí. 1,82 (s, 3H), 3,29 (d 14 Hz, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,83 (s, 3H),

5,2-5,4 (m; 3H) 5,56 (s, 1H).

Exemplo 13

5-Acetato de 23₎/Ê_J7-Metoxiimino Factor D

Manteve-se a 2o°C durante 24 h uma so lução contendo 5-acetato de 23-ceto factor D (251 mg, Exemplo 119 em Especificação da Patente UK 2176182), acetato de sódio (250 mg) e cloridrato de metoxiamina (250 mg) em metanol (40 ml) •7 r~

concentrou-se para cerca de 10 ml, diluiu-se com acetato de eti lo (50 ml) e lavou-se sucessivamente com ácido clorídrico 0,5N e água. Evaporou-se a fase orgânica seca para se obter uma espuma amarela que foi purificada por cromatografia em Merck Kieselgel 60, 250-400 malhas (120 ml). A eluição com hexano produziu o composto do título na forma de uma espuma amarelo pálida (144 mg);

>_max (EtOH) 244 nm (£ 26,400); /_max (CEBr^) (cm¹) 5500 (0H), 1752 (OAc), 1710 (C=0); ó(CDC1J inclui 5,54 (m, 2H), 4,92 (m; 1H), 5,84 (s; 5H), 5,52 (mj 1H), 5,50 (<314; 1H), 2,17 (s; 5H), 1,91 (<314; 1H), 1,76 (s, 5H), 1,65 (s; 5H), 1,51 (s; 5H), ' 1,01 (ΐ7; 5H), 0,99 (d6; 5H), 0,92 (<36; 5H).

Exemplo 14

25/Ê..,7-Metoxiimino Pactor D

Agitou-se num banho de gelo durante 1,5 h uma solução contendo o produto do Exemplo 15 (140 mg) e hidróxido de sódio 1N (0,6 ml) em metanol (8 ml). Diluiu-se a solução com acetato de etilo (50 ml) e lavou-se sucessivamente com ácido clorídrico 1N e água. Evaporou-se a fase orgânica seca para se obter uma espuma amarela que foi purificada por cro. matografia em Merck Kiselgel 60, 250-400 malhas (50 ml). A eluição da coluna com hexano ; acetato de etilo (2:1) produziu o composto do título na forma de uma espuma esbranquiçada (105 mg); + 96° (c 1,58, CHCl^); X_ffiax (EtOIí) 244 nm (£26,700); v<_max (CHBr^) (cm^-1) 5550, 5500 (0H), 1710 (0=0); 6(CDC1₃) inclui 4,93 (Μ; 1H), 4,50 (t6; 1H), 5,95 (<36; 1H), 5,84 (s; 5H), 5,50 (<314; 1H), 5,27 (m; 1H), 1,88 (s; 5H), 1,64 (s; 5H), 1,52 (s; 5H), 1,01 (t7; 5H), 1,00 (<36; 5H), 0,92 (d6; 5H).

Exemplo 15

2-3/Ê_7-Metoxiimino Pactor B

Agitou-se a 20°C durante 20 h uma solução contendo 25-ceto Factor Β (1 g, Exemplo 19 na Especificação da Patente UK 2176182), acetato de sódio (400 mg) e Cloridrato de metoxiamina (400 mg), concentrou-se para cerca de 10 ml diluiu-se com acetato de etilo e lavou-se com água. Lavou-se a fase orgânica sucessivamente com ácido clorídrico 0,5 N e r

água e evaporou-se a fase orgânica seca e purificou-se o produto bruto por cromatografia em Merck Kiselgel 60, 250-400 malhas (200 ml). A eluição da coluna com acetato de etilo ; diclo rometano (1:9) produziu o composto do título na forma de uma es puma branca (500 mg); + 128° (c 1,09, CHCl^); A_max (EtOH)

244 nm (ζ 50,100); /_max (CHBr^) (cm¹) 5540, 5460 (0H), 1708 (c=0); ú (CDCl^) inclui 5,46 (q6; 1H), 4,05 (d5; 1H), 5,97 (d5; 1H), 5,85 (s; 5Η), 5,50 (s; 5H), 5,52 (m; 1H), 5,29 (dl4; 1H), 1,82 (s; 5H), 1,68 (d6· 5H), 1,00 (d6; 5H), 0,92 (d6; 3H).

Exemplo 16

25ZÊ_7Metoxiimino Factor C

Adicionaram-se acetato de sódio anidro (0,54 g) e cloridrato de metoxiamina (0,58 g) a uma solução de 25-ceto Factor C (1,97 g, Exemplo 12 na Especificação da Patente UK 2176182) em metanol (50 ml) contendo água (5 ml) e agitou -se a mistura durante 50 min à temperatura ambiente. Adicionaram-se acetato de etilo (50 ml) e ácido clorídrico 0,5 M (50 ml) e reextraiu-se a fase aquosa com acetato de etilo (15 ml). Lavaram-se as fases orgânicas combinadas por sua vez com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada a 5^a/ de bicarbonato de sódio e solução aquosa saturada a 10$ de cloreto de sódio. Em seguida concentrou-se a pressão reduzida para se obter uma espuma amarela que foi purificada por cromatografia em sílica gel Merck 9585 revelando inicialmente a coluna com diclorometano e em seguida eluindo com diclorometano eontendo uma pequena quantidade de acetato de etilo (até 10$) para se obter o composto do título (1,0 g); /¾⁷^¹ + 64° (0 1,0, OH^OH); ^XH NMR (CDCl^) inclui os seguintes finais: <$4.95 (m, 1H); 4,29 (t, 1H, 7Hz); 5,96 (d, 1H, 7Hz); 5,85 (s, 5H / = NOCH^J⁷); 5,66 (d, 1H, 10Hz); 1,51 (s, 5H); 1,42 (t, 1H, 12Hz); IR (CHBr^) 3620-5540^ (-0H), 1711 cm¹(0=0).

Apresentam-se a seguir exemplos de formulações de acordo com a invenção. 0 termo Ingrediente Acti vo aqui utilizado significa um composto da invenção e pode ser por exemplo 0 composto do Exemplo 4.

Multidose para injecção parenteral

Exemplo 1
	/ P/v	Gama
Ingrediente activo	2,0	0,1 - 6,0/ p/v
Álcool benzílico	1,0
Polissorbato 80	10,0
Glicerol formol	50,0
Água para injecções até	100,0

Dissolve-se o ingrediente activo no polissorbato 80 θ glicerol formol, adiciona-se o álcool benzílico e perfaz-se o volume com água para injecções. Esteriliza-se o produto por processos convencionais, por exemplo filtração estéril ou por aquecimento numa autoclave e embalagem asséptica.

Exemplo 2 % V/v

Gama

Ingrediente activo

Álcool benzílico

Triacetato de glicerilo Propileno glicol até

4,0

2,0

30,0

100,0 álcool pileno to por tração

Dissolve-se o ingrediente activo no benzílico e triacetato de glicerila. Adiciona-se o proglicol e perfaz-se até ao volume. Esteriliza-se o produprocessos farmacêuticos convencionais por exemplo filestéril e embalagem asséptica.

Exemplo 3

Ingrediente activo

Etanol

2,0 p/v 0,1 - 7,5/ p/v

36,0 v/v

Gama

3R

Agente Tensioactivo não-iónico (por exemplo Synperonic PE 144*) 10,0 p/v

Propileno glicol até 100,0

Dissolve-se o ingrediente activo no etanol e agente tensioactivo e perfaz-se o volume. Esteriliza-se o produto por processos farmacêuticos convencionais, por exemplo filtração estéril e embala-se assepticamente, * Marca Registada da ICI

Exemplo 4

		Gama
Ingrediente activo	2,0 p/v	0,1 - 3,0/ p/v
Agente Tensioactivo não-iónico
(por exemplo Synperonic PE ?68*)	2,0 p/v
Álcool Benzílico	1,0 p/v
Miglyol 840**	16,0 v/v

Água para injecções até 100,0

Dissolve-se o ingrediente activo em Miglyol 840. Dissolve-se o agente tensioactivo não-iónico em muita água. Prepara-se a emulsão adicionando a solução oleosa à solução aquosa enquanto se homogeneíza utilizando meios convencionais. perfaz-se o volume. Prepara-se assepticamente e embala-se assepticamente.

* Marca Registada da ICI ** Marca Registada da Dynamit Robel

Pulverização de aerossol

	% p/p	Gama
Ingrediente activo	0,1	0,01 - 2,0% p/p
Tricloroetano	29,9
Triclorofluormetano	35,0
Diclorodifluormetano	35,0

Mistura-se o Ingrediente Activo com tricoloroetano e enche-se no contentor de aerossol. Purga-se a câmara superior com o propulsor gasoso e coloca-se a válvula em posição. Enche-se o peso necessário de propulsor líquido sobre pressão através da válvula, juntam-se os actuadores e as capas de pós finos.

Comprimido

Processo de produção. - Granulação húmida.

	mg
Ingrediente activo	250,0
Estearato de Magnésio	4,5
Amido de milho	22,5
Amido Glicolato de sódio	9,0
Lauril Sulfato de sódio	4,5
Celuose Microcristalina até
um peso de núcleo de comprimido de	450 mg

Adiciona-se quantidade suficiente de uma pasta de amido a 10% ao ingrediente activo para produzir uma massa húmida adequada para granulação. Preparam-se os grânulos e secam-se usando um secador de tabuleiro ou de leito fluidizado. Faz-se passar através de um peneiro, adicionam-se os ingredientes restantes e comprimem-se para se obterem comprimidos.

Se necessário, revestem-se com uma película os núcleos dos comprimidos utilizando hidroxipropilmetil celulose ou outro material formador de filme semelhante utilizando um sistema de solventes aquosos ou não-aquosos. Pode incluir-se um plastificante e um corante adequado na composição * formadora de filmes.

• Comprimido Veterinário para animal doméstico pequeno

Processo de Produção - granulação a seco mg

Ingrediente activo 250,0 Estearato de Magnésio 4,5 Celulose Microcristalina até um peso de núcleo de comprimido de 75,0

Mistura-se o ingrediente activo com o estearato de magnésio e a celulose microcristalina. comprime-se a mistura para grânulos. Quebram-se os grânulos fazendo-os passar através de um granulador rotativo para produzir grânulos fluídos. Comprimem-se em comprimidos.

Os núcleos dos comprimidos podem ser em seguida revestidos com filme, se desejado, como acima descrito.

Injecção intramamária veterinária

Ingrediente Activo Polissorbato 6o 5,0% p/p)

Cera de Abelhas Branca 6,0% p/p) Óleo de amendoim 91,0% p/p

Aquece-: abelhas branca e polissorbato 6θ t -se a 16o°C durante duas horas e <

mg/dose	Gama
150 mg	0,05 - 1,0 g
)
) até	3 ou 15 g
)

o óleo de amendoim, cera de 16o°C com agitação. Mantemseguida arrefece-se para a temperatura ambiente. Adiciona-se assepticamente o ingrediente activo ao veículo e dispersa-se usando um misturador de alta velocidade. Refina-se por passagem através de um moinho de colóides. Enche-se assepticamente o produto em seringas de plásti co esterilizadas.

BÓlus de libertação lenta veterinária % P/P

Gama

Ingrediente activo

Dióxido de silício coloidal • Celulose Microcristalina )

2,0 )

100,0

0,25 - 2g necessário para o peso total

Mistura-se o ingrediente activo com o

Λ Ί

dióxido de silício coloidal e celulose microcristalina utilizando uma técnica de mistura de alíquotas adequada para conseguir uma distribuição satisfatória do ingrediente activo no veículo. Ircopora-se no dispositivo de libertação lenta e dá-se (1) uma constante libertação de ingrediente cativo ou (2) uma libertação pulsada do ingrediente activo.

Composição de beber Oral Veterinária	Gama
	% p/v
Ingredienta cativo	0,35	0,01 - 2/ p/p
Polissorbato 85	5,0
Álcool Benzilico	5,0
Propileno glicol	30,0
Tampão de fosfato	PH 6,0-6,5
Água até	100,0
	Dissolve-se o	ingrediente no polis-

sorbato 85, álcool benzilico e propileno glicol. Adiciona-se uma proporção de água e ajusta-se a pH 6,0 ~ 6,5 com tampão de fosfato, se necessário. Perfaz-se até ao volume final com água. Enche9se o produto num contentor de composição de beber adequado.

Pasta Oral Veterinária
	/ p/p	Gama
Ingrediente Activo	4,0	1 - 2o/ p/p
Sacarina de sódio	2,5
Polissorbato 85	3,0
Diesterato de alumínio	5,0
Óleo de coco fracoionado	100,0
	Dispersa-se o	diesterato de alumínio

no óleo de coco fracoionado e polissorbato 85 por aquecimento. Arrefece-se para a temperatura ambiente e dispersa-se a sacarina de sódio no veículo oleoso. Dispersa-se o ingrediente aativo na base. Enche-se em seringas de plástico.

Grânulos para administração veterinária em rações p/p Gama

Ingrediente activo 2,5 0,05-5/ p/p

Sulfato de cálcio, hemi-hidratado até 100,0

Mistura-se o Ingrediente Activo com o sulfato de cálcio, preparam-se os grânulos utilizando um proces so de granulação húmida. Seca-se usando um secador de tabuleiro ou de leito fluidizado. Enche-se num contentor adequado.

Composição veterinária de vasar

	/ p/v	Gama
Ingrediente Activo	2,0	0,1 a 30$
Sulfóxido de dimetilo	10,0
Metil Isobutil Cetona	30,0

Propileno glicol (e pigmento) até 100,0

Dissolve-se o Ingrediente Activo no sulfóxido de dimetil e na metil isobutil cetona. Adiciona-se o pigmento e perfaz-se o volume com o propileno glicol. Enche-se num contentor de vasar.

Concentrado Emulsionável

Ingrediente Activo50g

Emulsionante anióníco40g (p/exemplo sulfonato de fenilo CALX)

Emulsionante não-iónico60g (p/exemplo Synperonic NP13)*

Solvente aromático (p/exemplo Solvesso 100) até 1 litro.

Misturam-se todos os ingredientes, e agitam-se até dissolução.

Marca Registada da ICI

Grânulos (a) Ingrediente Activo50 g

Resina de Madeira40 g

Grânulos de gesso (2o-6o malhas) até 1 Kg (por exemplo Agsorb 100A) (b) Ingrediente Activo50 g

Synperonic NP13 *40 g

Grânulos de gesso (20 a 60 malhas) até 1 Kg

Dissolvem-se todos os ingredientes num solvente volátil como por exemplo cloreto de metileno, adi/1 % -

ciona-se a grânulos num misturador. Seca~se para remover o solvente.

* Marca Registada da IGI

Determinou-se a actividade pesticida dos compostos da invenção utilizando vários tipos de peste e seus hospedeiros de acordo com o seguinte procedimento geral;

Utilizou-se o produto na forma de uma preparação líquida, obtiveram-se as preparações dissolvendo o produto em acetona. Diluiram-se em seguida as soluções com água contendo 0,1$ ou 0,01$ em peso de um agente humidificante até as preparações conterem a concentração desejada de produto.

procedimento de ensaio adoptado em relação à maior parte dos tipoa de peste compreendia colocar-ae um certo número de tipos de peste num meio que era geralmente uma planta hospedeiro e tratar-se o meio com a preparação (ensaio residual) ou no caso de Tetranychus urticae, Myzus persicae, Nilaparvata lugens e Musca doméstica, tratou-se os tipos de peste e o meio com a preparação (ensaio de contacto). RO caso de Meloidogyne incógnita aplicou-se a solução ao solo em que se cultivavam plantas de tomate, tratou-se posteriormente com nematodos e avaliou-se a redução do número de pés de plantas em comparação com uma planta de controlo.

Após estes procedimentos, verificou-se que o composto de fórmula (I) em que R é isopropilo, R é z

metilo e R⁹ é hidrogénio era efioaz em concentrações (em peso de produto) de 100 partes por milhão ou inferior.

Claims (1)

1. - lã posto com a fórmula (I) come dos seus sais, em que R¹· representa um grupo metilo, etilo p ou isopropilo, R representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo C^_g ou um grupo alcenilo C^__g e o grupo =N0R tem a configuração E, OlP é um grupo hidroxilo ou um grupo hidroxilo substituído tendo até 25 átomos de carbono, caracterizado por:

   (A) fazer-se reagir um composto com a fórmula (II) atrás definidos seguindo-se se desejado a desprotecção de um composto de fórmula (I) obtido de forma a que 0R^p seja um grupo hidroxilo protegido;

   (B) para a preparação de um composto com a fórmula (i) em que R é um grupo alquilo 0_1-8 ou alcenilo G^_q θ OR⁹ é um grupo hidromilo substituído, fazer-se reagir um composto com a fórmula (I) correspondente em que OR^ θ um grupo hidroxilo, com um reagente para se converter um grupo hidroxilo num grupo hidroxilo substituído;

   (C) para a preparação de um composto com a fórmula (I) em que R é um grupo alquilo G^g ou alcenilo C^__g, fazer-se reagir um composto com a fórmula (I) em que p/ é um átomo de hidrogénio e OR·⁵ é um grupo hidroxilo substituído, com um reagente eterificante R Y (em que R é um grupo alquilo C2_g ou alcenilo C^_₈ e Y é um grupo substituível), seguindo-se se desejado a desprotecção de um composto com a fórmula (I) em que OR'’ θ um grupo hidroxilo protegido;

   ’ (D) para a preparação de um composto com a fórmula (I) em que • OR^ é um grupo hidroxilo, efectuar-se a redução de um composto * t com a fórmula (III)

   ROR²

   O (E) para a preparação de um comoosto com a formula (I) em que x ,

   OR e um grupo hidroxilo, efectuar-se a desprotecção de um composto com a fórmula (i) correspondente em que OR⁷ e um grupo hidroxilo protegido· ou (F) para a preparação de um sal de um ácido com a fórmula (I), tratar-se o referido ácido com uma base ou converter-se um sal noutro sal por permuta iónica.

   - processo de acordo com a reivindicação x

   1, caracterizado por OR ser um grupo metoxicarboniloxi, aceto- xi, metoxi ou hidroxilo.

   - 3& - processo de acordo com çao 1, caracterizado por se obter um composto em grupo hidroxilo.

   a reivindicaque OPl é um

   - 4a processo de acordo com qualquer das reivindicações anteriores, caracterizado por se obter um composto em que r\ é um grupo isopropilo.

   - 5a _ processo de acordo com qualquei das reivindicações anteriores, caracterizado por se obter um composto em que R , é um grupo metilo.

   — 6â —

   Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se obter um composto em que, pA é um grupo isopropilo, R^ é um grupo metilo e 0R^? é un grupo hidroxilo, acetoxi ou metoxicarboniloxi.

   - 7a Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se obter um composto em que, p3 é um grupo isopropilo, R e um grupo metilo e OR^ e um grupo hidroxilo.

   - ga _

   Processo de acordo com a reivindica-

   1 ' ção 1, caracterizado por se obter um composto em que, R é um. grupo metilo, R é um grupo metilo e OP. é um grupo metoxi, ou R^x é um grupo etilo, R é um grupo metilo e OP/ é um grupo hidroxilo.

   _ qa _

   Processo para a preparação de uma composição farmacêutica, caracterizado por se incorporar como ingrediente activo uma quantidade eficaz de pelo menos um composto quando preparado com as reivindicações anteriores em associação com um ou mais veículos e/ou excipientes adequados.

   - 10- Processo para a preparação de uma composição para a utilização em medicina veterinária, caracterizado por se incorporar como ingrediente activo uma quantidade eficaz de pelo menos um composto quando preparado de acordo com as reivindicações 1 a 8 em associação com um ou mais veículos e/ou excipientes adequados.

   - llã processo para a preparação de uma composição para o controlo de pestes, caracterizado por se incorporar como ingrediente activo uma quantidade eficaz de pelo menos um composto quando preparado de acordo com as reivindicações 1 a 8 em associação com um ou mais veículos e/ou excipientes adequados.

   processo de acordo com qualquer das reivindicações 9 a 11, caracterizado por se incorporar uma quantidade eficaz do composto preparado de acordo com a reivindicação 7 em associação com um ou mais veículos e/ou excipientes adequados.