SE503399C2 - Antibiotiska makrolider, sätt att tillverka dessa och farmaceutiska kompositioner innehållande dessa - Google Patents

Description

503 399 2 Om R2 i föreningen enligt formel I är en Cl_8 alkylgrupp, kan den t.ex. vara en metyl-, etyl-, n-propyl-, i-propyl-, n-butyl-, i-butyl- eller t-butylgrupp, och företrädesvis en metylgrupp.

Om R2 är en C3_8 alkenylgrupp, kan den t.ex. vara en allylgrupp.

Om gruppen OR3 i föreningen enligt formel I är en substituerad hydroxylgrupp, kan den utgöra en alkyloxygrupp, t.ex. en grupp enligt formeln -OCOR4, -OCOZR4 eller -OCSOR4 (där R4 är en alifatisk, aralifatisk eller aromatisk grupp, t.ex. en alkyl, alkenyl, alkynyl, cykloalkyl, arylalkyl eller arylgrupp) , en formyloxygrupp, en grupp -OR5 (där R5 är såsom definierats ovan R4), en grupp -OSO2R6 (där R6 är en C1_4 alkyl eller C6_l0 arylgrupp), en cyklisk eller acyklisk acetaloxygrupp, en grupp OCO(CH2)nCO2R7 (där R7 är en väteatom eller en grupp enligt definitionen för R4 ovan och n är D, l eller 2) eller en grupp OCONR8R9 (där RB och R9 vardera oberoende kan utgöra en väteatom eller en C1_4 alkylgrupp t.ex. metyl).

Där R4 eller R5 är alkylgrupper, kan de t.ex. vara Cl_8 alkylgrupper, t.ex. metyl, etyl, n-propyl, i-propyl, n-butyl, i-butyl, t-butyl eller n-heptyl, vilka alkylgrupper också kan vara substituerade.Där R4 är en substituerad alkylgrupp kan den vara substituerad av, t.ex., en eller flera, t.ex. två eller tre, halogenatomer (t.ex. klor-eller bromatomer), eller en karboxy, Cl_4 alkoxy (t.ex. metoxy, etoxy), fenoxy eller silyloxygrupp. Där R5 är en substituerad alkylgrupp kan den vara substituerad av en cykloalkyl t.ex. cyklopropylgrupp.

Där R4 eller R5 är alkenyl- eller alkynylgrupper, kan de t.ex. vara C2_8 alkenyl, t.ex. allyl, eller C2_8 alkynylgrupper.

Där R4 eller R5 är cykloalkylgrupper, kan de t.ex. vara C3_12 cykloalkyl, t.ex. C3_7 cykoalkyl, t.ex. cyclopentylgrupper. 503 399 3 Där R4 eller R5 är aralkylgrupper, har de företrädesvis 1 till 6 kolatormer i alkyldelen och arylgruppen (-erna) kan vara karbocykliska eller heterocykliska och företrädesvis innehålla 4-15 kolatomer t.ex. fenyl. Exempel på sådana grupper innefattar phenC1_6alkyl, t.ex. benzylgrupper.

Där R4 eller R5 är arylgrupper, kan de vara karbocykliska eller heterocykliska och företrädesvis ha 4-15 kolatomer, och t.ex. vara fenylgrupper.

Där R4 innehåller en silyoxysubstituent, kan silylgruppen bära tre grupper vilka kan vara samma eller olika, valda från alkyl, alkenyl, alkoxy, cykloalkyl, aralkyl, aryl och aryloxy- grupper. Sådana grupper kan vara enligt definitionen ovan för R4 och särskilt innefatta metyl, t-butyl och fenylgrupper.

Speciella exempel på sådana silyloxygrupper är trimetyl- silyloxy och t-butyldimetylsilyloxy.

Där -OR3 är en grupp -OSOZR6, kan den vara t.ex. en metylsulfonyloxy eller p-toluensulfonyloxy-grupp.

Där -OR3 utgör en cyklisk acetaloxygrupp, kan den t.ex. ha 5-7 ringmedlemmar och t.ex. vara en tetrahydropyranyloxy-grupp.

Där OR3 utgör en grupp OC0(CH2)nCO2R7, kan den t.ex. vara en grupp ococozn" eller ococnzcnzcozzfla där n” utgör en väteatom eller en C1_4 alkyl (t.ex. metyl eller etyl) grupp.

Salter, som kan bildas med föreningar enligt formel I innehållande en sur grupp, innefattar salter med baser, t.ex. alkalimetallsalter såsom natrium- och kaliumsalter.

I föreningar enligt formel I, är gruppen R1 företrädesvis en isopropylgrupp.

Gruppen OR3 är företrädesvis en metoxykarbonyloxy, eller, särskilt, en acetoxy, metoxy eller hydroxygrupp. Allmänt sett föredras föreningar enligt formel I i vilka OR3 är en hydroxy- 503 399 grupp- Viktiga föreningar enligt föreliggande uppfinning är de enligt formel I i vilka Rl är en isopropylgrupp, R2 är en metylgrupp och OR3 är en hydroxy, acetoxy eller metoxykarbonyloxygrupp.

Såsom påpekats ovan, kan föreningarna enligt uppfinningen användas såsom antibiotika. Föreningarna enligt uppfinningen kan också användas såsom intermedier för tillverkning av andra aktiva föreningar. När föreningarna enligt uppfinningen används såsom intermedier, kan -OR3-gruppen vara en skyddad hydroxylgrupp och uppfinningen innefattar särskilt sådana skyddade föreningar. Det bör inses att en sådan grupp dels bör ha minsta möjliga tillkommande funktionalitet, för att undvika ytterligare reaktionsställen, och dels bör vara sådan att det är möjligt att selektivt regenerera en hydroxylgrupp från denna. Exempel på skyddade hydroxyl-grupper är välkända och beskrivna, t.ex. i "Protective Groups in Organic Synthesis" av Theodora W. Greene (Wiley-Interscience, New York 1981) och "Protective Groups in Organic Chemistry" av J F W McOmie (Plenum Press, London, 1973). Exempel på OR3 skyddade hydroxygrupper innefattar fenoxy-acetoxy, silyloxyacetoxy, (t.ex. trimetylsilyloxyacetoxy och t-butyldimetylsilyloxy- acetoxy), och silyloxy såsom trimetyl-silyloxy och t-buty1- dimetylsilyloxy.Föreningar enligt uppfinningen innehållande sådana grupper är framförallt användbara såsom intermedier.

Andra grupper, såsom acetoxy, kan tjänstgöra såsom skyddade hydroxylgrupper, men kan också vara närvarande i slutliga aktiva föreningar.

Föreningar enligt uppfinningen har antibiotika-aktivitet, t.ex. antihelmintisk aktivitet, t.ex. mot nematoder, och särskilt, anti-endoparasitisk och anti-ektoparasitisk aktivitet.

Ektoparasiter och endoparasiter infekterar människor och ett flertal djur och är särskilt utbredda i lantbruksdjur såsom grisar, får, boskap, getter och fjäderfä (t.ex. kycklingar och 503 399 kalkoner), hästar, kaniner, jaktfåglar, burfåglar, och husdjur såsom hundar, katter, marsvin, gerbils och hamstrar. Parasit- infektioner på boskap som leder till anemi, undernäring och viktförlust är en huvudorsak till ekonomiska förluster överallt i världen.

Exempel på endoparasiter som infekterar sådana djur och/eller människor är Ancylostoma, Ascaridia, Ascaris, Aspicularis, Brugia, Bunostomum¿ Capillaria¿ Chabertia, Cooperia, Cïathostgmes, Dictyocaulus, Dirofilaria, Dracunculus, Eassseëiasl Esszšezhilasi Essilsashsfii ëssszeäisl Hyostrongylus, Loa, Metastrongylus, Necator, Nematodirus, Nematospiroides, Nippostrongylus, Oesophaostomum, Onchocerca, Ostertagia,Oxyuris, Parafilaria, Parascaris. Probstmayria, Strongylus, Strongyloides, Syphacia, Thelazia, Toxascaris, Egxocara, Trichonem3¿ Trichostrongylus, Trichinella, Trichuris, Triodontophorus, Uncinaria och Wuchereria.

Exempel på ektoparasiter som infekterar djur och/eller människor är arthropod-ektoparasiter såsom bitande insekter, blomflugor, loppor, löss, kvalster, sugande insekter, fästingar och andra tvåvingade skadedjur.

Exempel på arter av sådana ektoparasiter som infekterar djur och/eller människor är Ambylomma, Anopheles, Boophilus, Chorioptes, Culexpipiens, Culliphore, Demodex, Damalinia, Dermatobia, Haematobia, Haematopinus, Haemophysalis, Hyaloma, Hypoderma, Ixodes, Linognathus, Lucilia, Melophagus, Oestrus, Otobius, Otodectes, Psorergates, Psoroptes, Rhipicephalus, Sarcoptes, Solenopotes, Stomoxys och Tabanus.

Föreningarna enligt uppfinningen har funnits vara effektiva både in 11352 och in Xiïg mot ett brett spektrum av endoparasiter och ektoparasiter. Antibiotika-aktiviteten av föreningarna enligt uppfinningen kan, t.ex., demonstreras genom deras aktivitet mot fritt levande nematoder, t.ex.

Caenorhabditis elegans och Nematospiroides dubius. 503 399 6 En viktig aktiv förening av uppfinningen är den enligt formel (I) i vilken: Rl är en metylgrupp, R2 är en metylgrupp och OR3 är en metoxy- grupp.

En annan viktig aktiv förening enligt uppfinningen är den enligt formel (I) i vilken: R1 är en etylgruppf R2 är en metylgrupp och OR3 är hydroxyl- QTUPP- En särskilt viktig aktiv förening enligt uppfinningen är den enligt formel (I) i vilken: R1 är en isopropylgrupp, R2 är en metylgrupp och OR3 är en hydroxylgrupp.

Föreningen enligt (I) i vilken R1 är en isopropylgrupp. R2 är en metylgrupp och OR3 är en hydroxylgrupp är aktiv mot ett brett spektrum av endoparasiter och ektoparasiter.

Exempelvis har denna förening funnits vara aktiv in yizo mot parasitiska nematoder såsom Ascaris, Cooperia curticei, Cooperia oncophora, Cyathostomes, Dictyocaulus viviparus, Dirofilaria immitis, Gastrophilus, Haemonchus contortus, Nematodirus battus, Nematodirus helvetianus, Nematodirus fißsshiaszi äsæfisefieizeiésfi éaëiafii NiPm-Sfwmxlufi braziliensis, Oesophaostomum, Onchocera gutturosa, Ostertagia ostertagi, Oxyuris egui, Parascaris equorum, Probstmayria, Strongylus edentatus, Strongylus vulgaris, Toxocara canis, Trichostrongylus axei, Trichostrongylus vitrinus, Triodonto- phorus och Uncinaria stenocephala, och parasitiska larver, skabb, kvalster, fästingar och löss såsom Amblyomma hebraeum, Anopheles stevensi, Boophilus dicolarartus, Boophilus microplus, Chorioptes ovis, Culexpipiens molestus, Damalinia bovis, Dermatobia, Haematopinus, gïpoderma, Linognathus vituli, Lucilia sericata, Psoroptes ovis, Rhipicephalus 503 399 appendiculatus och Sarcoptes.

Föreningar enligt uppfinningen kan också användas för att bekämpa insekts-, akarid- och nematodskadedjur inom jordbruk, trädgårdsodling, skogsbruk, hälsovård och lagrade produkter.

Skadedjur på jord och planterade skördar, innefattande säd (t.ex. vete, korn, majs och ris), bomull, tobak, grönsaker (t.ex. soja), frukt (t.ex. äpplen, vindruvor och citrus- frukter) såväl som rotfrukter (t.ex. sockerbetor, potatis), kan behandlas så att produkterna blir användbara. Speciella exempel på sådana skadedjur är fruktkvalster och bladlöss såsom Aphis fabae, Aulacorhtum circumflexum, Myzus persicae, Nephotettix cincticeps, Nilparvata lugens, Panonychus ulmi, Phorodon humuli, Phyllocoptruta oleivora, Tetranychus urticae och medlemmar av arten Irialguíoidgs; nematoder såsom medlemmar av arterna Aphelencoides, Globodera, Heterodera, gglgigggxng och gagggrgllgs; fjärilar såsom Heliothis, Plutella och Spodoptera; sädeskornsvivlar såsom Anthonomgå grandis och Sitophilus granarius; blombaggar såsom Tribolium castaneum; flugor såsom Musca domestica; eldmyror (fireants); bladätare (leaf miners): Pear psylla: Thrips tabaci; kackerlackor såsom ålštellâ ggrmgnisa och gsriplâneta americana och myggor såsom Aedes aegzpti.

Vi har funnit att föreningen enligt formel I, i vilken R1 är en isopropylgrupp, R2 är en metylgrupp och OR3 är en hydroxyl- grupp, är aktiv mot Tetranychus urticae (livnärd på blad av fransk böna), Mzzus Eersicae (livnärd på blad av kinesisk kål), (livnärd på bomullsblad), Nilaparvata lugens (livnärd på risplanta), Musca domestica (i en plastburk med bomull ull/sockerlösning), Elattella Heliothis virescens germanica (i en plastburk med näringspelletar, âpgdoptera exiqua (livnärd på ett bomullsblad) och Meloidogyne incognita.

Föreningar enligt uppfinningen kan också användas såsom anti- svampmedel, t.ex. mot stammar av Candida sp. såsom Candida albicans och gandida glabrata och mot jäst såsom Saccharomyces carlsbergiensis. 503 399 Enligt uppfinningen tillhandahåller vi därför föreningar enligt ovan definierade formel I, vilka kan användas såsom antibiotika. De kan i synnerhet användas vid behandling av djur och människor med endoparasitiska, ektoparasitiska och/eller svampinfektioner, och vid jordbruk, trädgårdsodling eller skogsbruk såsom pesticider för att bekämpa insekts-, akarid- och nematodskadedjur. De kan också användas allmänt såsom pesticider för att bekämpa eller kontrollera skadedjur vid andra omständigheter, t.ex. i affärer, byggnader eller andra allmänna platser eller uppehållsorter för skadedjuren. I allmänhet kan föreningarna anbringas antingen till värden (djur eller människa eller växter eller vegetation), eller en del därav, eller till själva skadedjuren.

Föreningar enligt uppfinningen kan formuleras för administrering på godtyckligt bekvämt sätt för användning inom veterinär- eller humanmedicin och uppfinningen innefattar därför farmaceutiska kompositioner innefattande en förening enligt uppfinningen anpassad för användning inom veterinär- eller humanmedicin. Sådana föreningar kan prepareras för användning på konventionellt sätt med hjälp av en eller flera lämpliga bärare eller konstituenser. Föreningarna enligt uppfinningen innefattar sådana som är i en form särskilt sammansatt för parenteral (innefattande intramammär administ- rering), oral, rektal, topisk, intraruminal, implantat, oftalmisk, nasal eller uro-genital användning.

Föreningarna enligt uppfinningen kan formuleras för injicering inom veterinär- eller humanmedicin och kan sammanställas i form av en enhetsdos, i ampuller, eller andra enhets- dosbehållare, eller i multi-dosbehållare, om så är nödvändigt med tillsatt konserveringsmedel. Föreningarna för injicering kan vara i form av suspensioner, lösningar, eller emulsioner, i icke vatteninnehållande eller vatteninnehållande bärare, och kan innehålla formuleringskomponenter såsom suspenderande, stabiliserande, emulgerande, solubiliserande och/eller disper- gerande ämnen. Alternativt kan den aktiva ingrediensen vara i 503 399 9 steril puderform för utspädning med en lämplig bärare, t.ex. sterilt, pyrogen-fritt vatten, innan användning.

Oljiga bärare innefattar flervärda alkoholer och deras estrar såsom glycerolestrar, fettsyror, vegetabiliska oljor såsom jordnötsolja, bomullsfröolja eller fraktionerad kokosnötolja, mineralolja såsom flytande paraffin, isopropylmeristat och etyloleat och andra liknande föreningar. Andra bärare innehållande material såsom glycerolformal, propylenglysol, polyetylenglysoler, etanol eller glykofurol kan också användas. Konventionella icke-joniska, katjoniska eller anjoniska ytaktiva ämnen kan användas ensamma eller i kombination i föreningen.

Föreningar för veterinärmedicin kan också formuleras såsom intramammära preparationer på antingen långtidsverkande eller snabbt frigörande bas och kan vara sterila lösningar eller suspensioner i vatteninnehållande eller oljiga bärare valfritt innehållande ett förtjockande suspenderande ämne såsom mjuka eller hårda paraffiner, bivax, 12-hydroxystearin, hydrerad ricinolja, aluminiumstearater, eller glyceylmonostearat.

Konventionella icke-joniska, katjoniska eller anjoniska ytaktiva ämnen kan användas separat eller i kombination i föreningen.

Föreningarna enligt uppfinningen kan också formuleras för veterinär eller human användning i en form lämplig för oral administrering, t.ex. i form av lösningar, siraper, emulsioner eller suspensioner, eller ett torrt pulver för utspädning med vatten eller andra lämpliga bärare innan användning, valfritt med smaksättande och färgande ämnen.Fasta kompositioner såsom tabletter, kapslar, trokisker, piller, boli, pulver, pasta, granuler, kulor eller förblandade preparat kan också användas.

Fasta och flytande kompositioner för oral användning kan prepareras enligt metoder som är välkända inom teknikområdet.

Sådana föreningar kan också innehålla en eller flera farmaceutiskt accepterbara bärare och konstituenser, vilka kan vara i fast eller flytande form. Exempel på lämpliga 503 399 farmaceutiskt accepterbara bärare för användning i fasta doseringsformer innefattar bindemedel (t.ex. förgelatiniserad majsstärkelse, polyvinylpyrrolidon eller hydroxypropylmetyl- cellulosa): fyllnadsmedel (t.ex. laktos, mikro-kristallinsk cellulosa eller kalciumfosfat); smörjmedel (tflex. magnesium- stearat, talg eller kiseldioxid); disintegrerande ämnen (t.ex. potatisstärkelse eller natriumstärkelse i glykolat); eller vätmedel (t.ex. natriumlaurylsulfat). Tabletterna kan beskiktas genom metoder som är välkända inom teknikområdet.

Exempel på lämpliga farmaceutiskt accepterbara tillsatsmedel för användning vid flytande doseringsformer, innefattar suspenderingsämnen (t.ex. sorbitolsirap, metylcellulosa eller hydrerade ätbara fetter); emulgerande ämnen (t.ex. lecitin eller akacia); icke vatteninnehâllande bärare (t.ex. mandel- olja, oljeestrar eller etylalkohol); och konserveringsmedel (t.ex. metyl eller propyl p-hydroxybensoater eler sorbinsyra); stabiliserande och solubiliserande ämnen kan också innefattas.

Pastor för oral administrering kan formuleras enligt metoder som är välkända inom teknikområdet. Exempel på lämpliga farmaceutiskt accepterbara tillsatsmedel för användning i fasta sammansättningar innefattar suspenderande eller gelé- bildande ämnen, t.ex. aluminiumdistearat eller hydrerad ricin- olja; dispergeringsämnen t.ex. polysorbater; icke vatteninne- hållande bärare,t.ex.jordnötsolja, oljiga estrar, glykoler eller makrogoler; stabiliserande och solubiliserande ämnen.

Föreningarna enligt uppfinningen kan också administreras inom veterinärmedicin genom att de innefattas i djurens dagliga fasta eller flytande dietintag, t.ex. såsom del av det dagliga' djurfodret eller dricksvattnet.

Föreningarna enligt uppfinningen kan också administreras oralt inom veterinärmedicin i form av flytande stora doser (drench) såsom en lösning, suspension eller dispersion av den aktiva ingrediensen tillsammans med en farmaceutiskt accepterbar bärare eller konstituens. 503 399 ll Föreningarna enligt uppfinningen kan också, t.exH sammansättas såsom suppositorier, t.ex. innehållande konventionella suppositoriska baser För användning inom veterinär eller humanmedicin, eller såsom pessarer t.ex. innehållande konventionella pessarbaser.

Föreningar enligt uppfinningen kan sammansättas för topisk administrering, för användning inom veterinär- och human- medicin, såsom salvor, krämer, lotioner, schampon, pulver, sprayer, medel för neddoppning (dips), aerosoler, droppar (t.ex.ögon- eller näsdroppar) eller påhällningsmedel (pour- ons). Salvor och krämer kan, t.ex” sammansättas med en vatteninnehållande eller oljig bas med tillsats av lämpliga förtjocknings- och/eller gelêbildande ämnen. Salvor för administrering till ögat kan tillverkas sterilt med användning av steriliserade komponenter. Uthällningsmedel kan, t.exU sammansättas för veterinär användning i organiska lösnings- medel eller såsom en vatteninnehållande suspension, och kan innefatta ämnen, vilka befrämjar perkutan adsorption, och formuleringsämnen som solubiliserar, stabiliserar, konserverar eller annars förbättrar lagringsegenskaperna och/eller förenklar appliceringen.

Lotioner kan formuleras med en vatteninnehållande eller oljig bas och kommer i allmänhet också att innefatta ett eller flera emulgerande ämnen, stabiliserande ämnen, dispergerande ämnen, suspenderande ämnen, förtjockande ämnen, eller färgämnen- Pulver kan formuleras med hjälp av en godtycklig lämplig pulverbas. Droppar kan formuleras med vatteninnehållande eller icke vatteninnehållande bas också innefattande ett eller flera dispergerande ämnen, stabiliserande ämnen, solubiliserande ämnen eller suspenderande ämnen. De kan också innehålla ett konserveringmedel.

För administrering genom inhalation, kan föreningarna enligt uppfinningen tillföras för användning inom veterinär- eller humanmedicin i form av en aerosolspray eller genom en 5Û3 399 12 andningsapparat.

De totala dagliga doserna av föreningarna enligt uppfinningen som används både inom veterinär- och humanmedicin, är lämpligen inom området 1-2000 ng/kg kroppsvikt, företrädesvis från 5-800 pg/kg och dessa kan ges i uppdelade doser, t.ex. l- 4 gånger per dag.Det bör inses att dosen kommer att variera beroende på ålder och patientens tillstånd, den organism som behandlas, administreringssätt och den speciella förening som har sammansatts. Doseringar för en given värd kan bestämmas på konventionellt sätt, t.ex. genom jämförelse mellan aktiviteterna av den aktuella föreningen och av ett känt antibiotikum.

Föreningarna enligt uppfinningen kan formuleras på godtyckligt bekvämt sätt för användning inom trädgårdsodling eller jordbruk och uppfinningen innefattar därför kompositioner innefattande en föreningen enligt uppfinningen anpassad för användning inom trädgårdsodling eller jordbruk. Sådana formuleringar innefattar torra eller flytande typer, t.ex. stoft, innefattande stoftbaser eller koncentrat, pulver, innefattande lösliga pulver eller pulver som kan vätas, granuler, innefattande mikrogranuler och dispergerbara granuler, pelletar, flytbara ämnen (flowables), emulsioner såsom utspädda emulsioner eller emulgerbara koncentrat, ämnen för neddoppning (dips) såsom rotneddoppning och fröneddoppning, fröförband, fröpelletar, oljekoncentrat, oljelösningar, injektioner t.ex. staminjektioner, sprayer, rökämnen och dimämnen.

I allmänhet innefattar sådana formuleringar föreningen i förbindning med en lämplig bärare eller utspädningsmedel.

Sådana bärare kan vara flytande eller fasta och utformade för att understödja appliceringen av föreningen antingen genom att dispergera den där den skall appliceras eller genom att tillhandahålla en formulering som användaren kan göra till en dispergerbar preparation. Sådana sammansättningar är välkända inom teknikens område och kan prepareras genom konventionella 503 399 13 metoder, t.ex. genom blandning och/eller malning av den (de) aktiva ingrediensen (-erna) tillsammans med bäraren eller utspädningsmedlet, t.ex. fast bärare, lösningsmedel eller ytaktivt ämne. Lämpliga fasta bärare, för användning vid sammansättningarna såsom stoft, granuler och pulver, kan väljas från t.ex. naturliga mineralfyllnadsmedel, såsom diatomit, talk, kaolinit, montmorillonit, profylit eller atapulgit. Kraftigt dispergerade kiselsyror eller kraftigt dispergerade absorbentpolymerer kan, om så önskas, innefattas i föreningen. Granulerade absorptiva bärare, som kan användas, kan vara porösa (såsom pimpsten, jordtegel, sepiolit eller bentonit) eller icke-porösa (såsom kalcit eller sandL Lämpliga förgranulerade material, som kan användas och kan vara organiska eller oorganiska, innefattar dolomit och jordväxtdelar.

Lämpliga lösningsmedel för användning såsom bärare eller utspädningsmedel, innefattar aromatiska kolväten, alifatiska kolväten, alkoholer och glycoler eller etrar därav, estrar, ketoner, sura amider, starkt polära lösningsmedel, valfritt epoxyderade vegetabiliska oljor och vatten.

Konventionella icke-joniska, katjoniska eller anjoniska ytaktiva ämnen, t.ex. etoxylerade alkylfenoler och alkoholer, alkalimetall eller akaliska jordmetallsalter av alkylbensen- sulfonsyror, lignosulfonsyror eller sulfosuccininsyror eller sulfonater av polymera fenoler, vilka har goda emulgerande, dispergerande och/eller våtgörande egenskaper, kan också användas antingen ensamma eller i kombination i föreningarna.

Stabiliseringsmedel, anti-hopklibbnings(caking)medel, anti- skumämnen, viskositetsregulatorer, bindemedel och adhesions- medel, foto-stabiliseringsmedel såväl som gödningsämnen, medel som stimulerar ätandet eller andra aktiva ämnen kan, om så önskas, innefattas i föreningarna. Föreningarna enligt uppfinningen kan också formuleras i blandning med andra insekticider, akaricider och nematicider.

I formuleringarna är koncentrationen av aktivt material 503 399 14 vanligen från 0,01 till 99% och företrädesvis mellan 0,01 och 40 vikts-%.

Konventionella produkter tillhandahålls vanligen såsom kon- centrerade föreningar, som skall spädas ut till en lämplig koncentration tiex. 0,001 till 0,000l vikts-%, för användning.

Hastigheten med vilken en förening anbringas beror på ett antal faktorer innefattande den typ av skadedjur som det handlar om och graden av skada. I allmänhet är emellertid en appliceringshastighet på 10 g/ha till 10 kg/ha lämplig; företrädesvis från l0 g/ha till 1 kg/ha för kontroll av kvalster och från 50 g/ha till 10 kg/ha för kontroll av nematoder.

Föreningarna enligt uppfinningen kan administreras eller användas i kombination med andra aktiva ingredienser. I synnerhet kan föreningarna enligt uppfinningen administreras eller användas i kombination med andra kända antihelmintiska ämnen.Genom att kombinera föreningarna enligt uppfinningen med andra anti-helmintiska ämnen, kan spektrat av parasit- infektioner, som framgångsrikt kan övervinnas, utökas. Således erbjuds en möjlighet att eliminera parasitinfektioner mot vilka de enskilda föreningarna är ineffektiva eller endast partiellt effektiva.

Föreningarna enligt uppfinningen kan prepareras med hjälp av nedanstående processer. I några av dessa processer kan det vara nödvändigt att skydda en hydroxylgrupp vid 5-positionen i startmaterialet innan den beskrivna reaktionen sätts igång. I sådana fall kan det då vara nödvändigt att ta bort skyddet från samma hydroxylgrupp när reaktionen har ägt rum för att erhålla den önskade föreningen enligt uppfinningen.

Konventionella protektions- och deprotektionsmetoder kan användas, t.ex. de som har beskrivits i ovan nämnda böcker av Greene och McOmie.

Enligt en aspekt av uppfinningen tillhandahåller vi ett sätt 503 399 (A) för preparation av föreningar enligt formel (I), vilket sätt innefattar att föreningar enligt formel (II): (II) (där R1 och OR3 är enligt tidigare definitioner) får reagera med ett reagens HZNOR2 eller ett salt därav (där R2 är såsom definierats tidigare), vilket, om så önskas, följs av deprotektion av en förening enligt formel I i vilken OR3 är en skyddad hydroxylgrupp, och valfritt följs av saltbildning.

Oximationsreaktionen kan utföras i vatteninnehållande eller icke vatteninnehållande reaktionsmedium, företrädesvis vid en temperatur i området -20 till +l0O°C, t.ex. -20 till +50°C.

Det är bekvämt att använda reagenset HZNOR2 i form av ett salt, t.ex. ett syra-additionssalt såsom klorväte. Om ett sådant salt används kan reaktionen utföras i närvaro av ett syrabindningsämne.

Användbara lösningsmedel innefattar vatten och lösningsmedel som kan blandas med vatten, såsom alkoholer (t.ex. metanol eller etanol), amider (t.ex. N,N-dimetylformamid, N,N- dimetylacetamid eller hexametylfosforamid), etrar (t.ex. cykliska etrar såsom tetrahydrofuran eller dioxan, och acykliska etrar såsom dimetoxyetan eller dietyleter), nitriler (t.ex. acetonitril), sulfoner (t.ex. sulfolan), kolväten såsom halogenerade kolväten (t.ex. metylenklorid), och estrar såsom etylacetat, såväl som blandningar av två eller flera sådana lösningsmedel. 503 399 16 Om vatteninnehållande ämnen används kan reaktionen företrädes- vis buffras till pH 2-9 med en lämplig syra, bas eller buffert.

Lämpliga syror innefattar mineralsyror, såsom saltsyra eller svavelsyra, och karboxylsyra såsom ättiksyra. Lämpliga baser innefattar alkalimetallkarbonater och bikarbonater såsom natriumbikarbonat, hydroxider såsom natriumhydroxid, och alkalimetallkarboxylater såsom natriumacetat. En lämplig buffert är natriumacetat/ättiksyra.

Föreningar enligt formel (II) är antingen kända föreningar, som har beskrivits i brittiska patentspecifikationen 2176182, eller kan prepareras från kända föreningar beskrivna i denna specifikation med användning av standardtekniker.

Enligt ytterligare en aspekt av uppfinningen tillhandahåller vi ett ytterligare sätt (B) för preparation av föreningar enligt formel I, i vilket R2 är en C1_8 alkyl eller C3_8 alkenylgrupp och OR3 är en substituerad hydroxylgrupp, vilket sätt innefattar att en förening enligt formel I, där OR3 är en hydroxylgrupp får reagera med ett reagens, så att en hydroxyl- grupp omvandlas till en substituerad hydroxylgrupp, valfritt följt av saltbildning.

Acylering, formylering, sulfonylering, eterifiering, sily- lering eller acetalbildningsreaktioner kan utföras med konventionella metoder såsom beskrivs nedan.

Således kan exempelvis acylering utföras med användning av ett acyleringsämne, såsom en syra av formeln R4COOH eller ett reaktivt derivat därav, såsom en sur halogenid (t.ex. sur klorid), anhydrid eller aktiverad ester, eller ett reaktivt derivat av en kolsyra R40C00H eller tiokolsyra R40CSOH.

Acyleringar med användning av syrahalogenider och anhydrider kan om så önskas utföras i närvaro av ett syrabindningsämne 503 399 17 såsom en tertiär amin (t.ex. trietylamin, dimetylanillin eller pyridinL oorganiska baser (t.ex. kalciumkarbonat eller natriumdikarbonat), och oxiraner såsom lägre 1,2-alkylenoxider (t.ex. etylenoxid eller propylenoxid) vilka binder vätehalogenid frigjord i acyleringsreaktionen.

Acyleringar med användning av syror utförs företrädesvis i närvaro av ett kondenserande ämne, t.ex. en karbodiimid såsom NAV-dicyklohexylkarbodiimid eller N-etyl-N*Y-dimetylamino- propylkarbodiimid; en karbonylförening såsom karbonyldiimid- azol; eller ett isoxazoliumsalt såsom N-etyl-5-fenylisox- azoliumperklorat.

En aktiverad ester kan företrädesvis bildas in situ med användning av, t.ex” 1-hydroxybensentriazol i närvaro av ett kondenserande ämne enligt ovan. Alternativt kan den aktiverade estern förformas.

Acyleringsreaktionen kan utföras i vatteninnehållande eller icke vatteninnehållande reaktionsmedium, företrädesvis vid en temperatur i området -2o° till +1oo°c, t.ex. -1o° ti11 +so°c.

Formylering kan utföras med användning av ett aktiverat derivat av myrsyra, t.ex. N-formylimidazol eller myrättiksyra- anhydrid (formic acetic anhydride) under konventionella reaktionsbetingelser.

Sulfonylering kan utföras med ett reaktivt derivat av en sulfonsyra R6SO3H såsom sulfonylhalogenid, t.ex. en klorid R6SO2Cl eller en sulfonanhydrid. Sulfonyleringen utförs företrädesvis i närvaro av ett lämpligt syrabindningsämne såsom beskrivits ovan.

Eterifiering kan utföras med användning av ett reagens enligt formeln RSY (där R5 är såsom definierats tidigare och Y utgör en lämnande grupp såsom en klor-, brom- eller jodatom eller en hydrokarbylsulfonyloxygrupp, såsom mesyloxy eller tosyloxy, eller en haloalkanolyloxygrupp såsom dikloroacetoxy). Reaktio- 503 399 18 nen kan utföras genom bildande av en magnesium alkoxid med användning av ett Grignard-reagens, såsom en metylmagne- siumhalogenid t.ex. metylmagnesiumjodid eller med användning av en trialkylsilylmetylmagnesiumhalogenid, t.ex. trimetyl- silylmetylmagnesiumklorid följt av behandling med reagenset R5Y.

Alternativt kan reaktionen utföras i närvaro av ett silversalt såsom silveroxid, silverperklorat, silverkarbonat eller silversalicylat eller blandningar därav, och detta system föredras när eterifiering utförs med användning av en alkylhalogenid (t.ex. metyljodidL Esterifiering kan företrädesvis utföras i ett lösningsmedel såsom en eter, t.ex. dietyleter.

Acetalbildning kan utföras genom reaktion med en cyklisk eller acyklisk vinyleter. Denna metod är speciellt användbar för produktion av tetrahydropyranyletrar, med användning av dihydropyran såsom reagens, eller l-alkoxyalkyletrar såsom l- etoxyalkyleter, med användning av en alkylvinyleter såsom reagens. Reaktionen utförs företrädesvis i närvaro av en stark syrakatalysator, tflex. en mineralsyra såsom svavelsyra, eller en organisk sulfonsyra såsom p-toluensulfonsyra, i ett icke-hydroxyinnehållande, huvudsakligen vattenfritt lösnings- medel.

Lösningsmedel, vilka kan användas i ovanstående reaktioner innefattar ketoner (t.ex. aceton), amider (t.ex. N,N-dimetyl- formamid, N,N-dimetylacetamid eller hexametylfosforamid), etrar (t.ex. cykliska etrar såsom tetrahydrofuran eller dioxan, och acykliska etrar såsom dimetyloxyetan eller dietyl- eter), nitriler (t.ex. acetonitril), kolväten såsom halogenerade kolväten (t.ex. metylenklorid), och estrar såsom etylacetat, såväl som blandningar av två eller flera sådana lösningsmedel.

Silylering kan utföras genom reaktion med en silylhalogenid 503 399 19 (t.ex. kloridL företrädesvis i närvaro av en bas såsom imidazol trietylamin eller pyridin, med användning av ett lösningsmedel såsom dimetylformamid.

Karbamoylering för att tillhandahålla en förening enligt formel I, i vilken OR3 är en grupp OCONRBR9, kan utföras genom reaktion med ett lämpligt acylerings- (dvs. karbamoylerings-) ämne. Lämpliga karbamoyleringsämnen vilka kan användas för att ge föreningar'i vilka den ena av R8 och R9 är en väteatom och den andra är en C1_4 alkylgrupp, innefattar isocyanater enligt formel RIONCO (där Rlo är en C1_4alkylgrupp). Karbamoy- leringsreaktionen kan företrädesvis utföras i närvaro av ett lösningsmedel eller lösningsmedelsblandning vald från kolväten (t.ex. aromatiska kolväten såsom bensen och toluenL halogenerade kolväten (t.ex. diklorometan), amider (t.ex. formamid eller dimetylformamidL estrar(t.ex.etylacetatL etrar (t.ex. cykliska etrar såsom tetrahydrofuran och dioxan), ketoner (t.ex. aceton), sulfoxider (t.ex. dimetylsulfoxid) eller blandningar av dessa lösningsmedel. Reaktionen kan företrädesvis utföras vid en temperatur mellan -80°C och reaktionsblandningens kokningstemperatur, t.ex. upp till 1oo°c, företrädesvis mellan -2o°c och +3o°c.

Karbamoyleringen kan utföras i närvaro av en bas, t.ex. en tertiär organisk bas såsom tri-(lägre alkyl)amin (tsex. trietylamin).

Ett annat användbart karbamoyleringsämne är cyansyra, som företrädesvis genereras in_§itE,tJex.från en alkalimetall- cyanat såsom natriumcyanat, varvid reaktionen förenklas genom närvaro av en syra, t.ex. en kraftigt organisk syra såsom trifluoroättiksyra. Cyansyra motsvarar effektivt ovan nämnda isocyanatföreningar där R10 är väte och omvandlar därför föreningar enligt formel II direkt till deras karbomoyloxy- analoger (dvs. föreningar enligt formel I i vilka OR3 är en grupp OCONH2).

Alternativt kan karbamoylering utföras genom reaktion med 503 399 fosgen eller karbonyldiimidazol följt av ammoniak eller den lämpliga substituerade aminen, valfritt i ett vatten- innehållande eller icke vatteninnehållande medium.

Bildandet av föreningar enligt formel I, i vilka OR3 utgör en grupp OCO(CH2)nCO2R7, kan utföras genom acylering av motsvarande 5-hydroxyförening med en syra HO2C(CH2)nC02R7 eller ett reaktivt derivat därav enligt ovan beskrivna acyleringsprocedur.

Enligt en annan aspekt av uppfinningen tillhandahåller vi ett ytterligare sätt (C) för preparering av föreningar enligt formel I, där R2 är en Cl_8 alkyl- eller C1_8 alkenylgrupp, vilket sätt innefattar att en förening enligt formel I, där R2 är en väteatom och OR3 är en substituerad hydroxylgrupp, får reagera med ett eterifierande ämne R2Y (där R2 är en C1_8 alkyl- eller C3_8 alkenylgrupp och Y är såsom har definierats tidigare), och om så önskas följt av deprotektion av en förening enligt formel I i vilken OR3 är en skyddad hydroxyl- grupp, och valfritt följt av saltbildning.

Eterifieringsreaktionen kan t.ex. utföras genom bildning av en magnesiumalkoxid med användning av ett Grignard-reagens såsom en metylmagnesiumhalogenid t.ex. metylmagnesiumjodid följt av behandling med reagenset RZY. Alternativt kan reaktionen utföras i närvaro av ett silversalt, såsom silveroxid, silverperklorat, silverkarbonat eller silversalicylat eller blandningar därav i närvaro av en bas t.ex. kaliumkarbonat eller natriumhydrid. Eterifiering kan företrädesvis utföras i ett organiskt lösningsmedel såsom en eter t.ex. dietyleter, tetrahydrofuran eller dioxan eller en amid t.ex. dimetyl- formamid eller hexametylfosforsyratriamid eller en blandning av sådant lösningsmedel vid omgivande temperatur. Under dessa betingelser är konfigurationen av oximinogruppen huvudsakligen oförändrad av eterifieringsreaktionen.

Enligt en annan aspekt av uppfinningen tillhandahåller vi ytterligare ett sätt (D) för preparation av föreningarna SUS 399 21 enligt formel I där OR3 är en hydroxylgrupp, vilket sätt innefattar att en förening enligt formel III Ulm reduceras, varpå valfri saltbildning följer.

Reduktionen kan utföras med ett reducerande ämne som har förmåga att stereoselektivt reducera 5-ketogruppen. Lämpliga reduceringsämnen innefattar borohydrider, såsom alkalimetall- borohydrider (t.ex. natriumborohydrid) och litiumalkoxy- aluminiumhydrider, såsom litiumtributoxyaluminiumhydrid.

Reaktionen innefattande ett borohydrid-reduceringsämne äger rum i närvaro av ett lösningsmedel såsom en alkanol, t.ex. isopropylalkohol eller isobutylalkohol, företrädesvis vid en temperatur i området -30° till +80°C t.ex. vid O°C. Reaktionen innefattande en litiumalkoxyaluminiumhydrid äger rum i närvaro av ett lösningsmedel, såsom en eter, t.ex. tetrahydrofuran eller dioxan företrädesvis vid en temperatur i området -78° till o°c.

Intermediära föreningar enligt formel III kan prepareras från en 5,23-diketon enligt formel IV 503 399 22 (Iv) genom behandling med en ekvivalent av ett reagens H2N0R2 (där R2 är såsom definierats tidigare) med användning av ovan beskrivna oximeringsbetingelser för preparation av föreningar enligt formel I.

Föreningar enligt formel IV kan prepareras genom oxidering av en förening enligt formel V (V) Reaktionen kan utföras med ett oxideringsämne som omvandlar en sekundär hydroxylgrupp till en oxogrupp, varvid en förening enligt formel IV produceras.

Lämpliga oxideringsämnen innefattar kinoner i närvaro av vatten, t.ex. 2,3-dikloro-5,6-dicyano-1,4-bensokinon eller 503 399 23 2,3,5,6-tetrakloro-l,4-bensokinon; ett krom (VI) oxiderande ämne, t.ex. natrium eller pyridiniumdikromat eller kromtrioxid i pyridin företrädesvis i närvaro av en fasöverförings- katalysator; ett mangan (IV) oxiderande ämne, t.ex. mangan- dioxid i diklorometan; en N-halosuccinimid, t.ex. N-kloro- succinimid eller N-bromosuccinimid; en dialkylsulfoxid t.ex. dimetylsulfoxid, i närvaro av ett aktiverande ämne såsom N,Nï- dicykohexylkarbodiimid eller en acylhalogenid, t.ex. oxalylklorid; eller ett pyridin-svaveltrioxidkomplex.

Reaktionen kan företrädesvis utföras i ett lämpligt lösnings- medel som kan väljas från keton,t.ex.aceton: en eter,tnex. dietyleter, dioxan eller tetrahydrofuran; ett kolväte, t.ex. hexan; ett halogenerat kolväte t.ex. kloroform eller metylen- klorid: eller en ester, t.ex. etylacetat eller en substituerad amid t.ex. dimetylformamid. Kombinationer av sådana lösnings- medel antingen ensamma eller med vatten kan också användas.

Val av lösningsmedel beror på den typ av oxideringsämne som används för omvandlingen.

Reaktionen kan utföras vid en temperatur från -80°C till +50°C.

Föreningarna enligt formel V kan t.ex. prepareras genom odling av Streptomyces thermoarchaensis NCIB 12015 (deponerad 1984- 09-10 i den permanenta kulturuppsamlingsplatsen vid National Collection of Industrial and Marine Bacteria, Torry Research Station, Aberdeen, Storbritannien) eller en mutant därav och isolering av föreningen från det på detta sätt erhållna fermentationsmediet.

Streptomzces-organismen kan odlas på konventionellt sätt, dvs. i närvaro av assimilerbara källor av kol, kväve och mineral- salter. Assimilerbara källor av kol, kväve och mineraler kan tillhandahållas av antingen enkla eller komplexa näringsmedel tnex. såsom har beskrivits i brittiska patentspecifikationen 2l66436.Lämpliga media innefattande dessa beskrivs nedan i Preparation 1. 503 399 24 Odling av Streptomyges-organismen utförs vanligen vid en temperatur från 20 till 50°C, företrädesvis från 25 till 40°C, och äger företrädesvis rum med luftning och agitation, t.ex. genom skakning eller omrörning. Mediet kan initialt ympas med en liten kvantitet av en sporulerad suspension av mikro- organismen men för att undvika en tillväxtförsening kan ett vegetativt inokulat av organismen prepareras genom inokulering av en liten kvantitet av odlingsmediet med sporen från organismen, och det erhållna vegetativa inokulatet kan överföras till fermentationsmediet, eller företrädesvis till ett eller flera utspridningsstadier där ytterligare tillväxt äger rum innan överföringen till det huvudsakliga fermentationsmediet. Fermentationen utförs vanligen i pH- området 5,5-8,5.

Fermentationen kan utföras under 2-10 dagar, t.ex. ca. 5 dagar.

Föreningarna enligt formel V kan separeras från det på detta sätt erhållna hela fermentationsmediet genom konventionella isolerings- och separationstekniker. Ett brett spektrum av fraktioneringstekniker kan användas, t.ex. adsorptions- elution, precipitation, fraktionell krisallisation och lösningsmedelsextraktion, vilka kan kombineras på ett flertal olika sätt. Lösningsmedelsextraktion och kromatografi har funnits vara lämpligast för isolering och separering av föreningen. En lämplig metod för att erhålla föreningarna enligt formel V med användning av dessa procedurer beskrivs i Preparation 1 nedan.

Enligt en annan aspekt av uppfinningen tillhandahåller vi ett ytterligare sätt (E) för preparation av föreningar enligt formel I i vilken OR3 är en hydroxylgrupp, vilket sätt innefattar deprotektion av en motsvarande förening enligt formel I i vilken OR3 är en skyddad hydroxylgrupp såsom har beskrivits ovan. 503 399 Således kan t.ex. en acylgrupp såsom en acetylgrupp avlägsnas genom basisk hydrolys t.ex. med användning av natrium- eller kaliumhydroxid i vatteninnehållande alkohol eller genom sur hydrolys t.ex. med användning av koncentrerad svavelsyra i metanol. Acetalgrupper såsom tetrahydropyranyl kan t.ex. avlägsnas med användning av syrahydrolys (med användning av en syra såsom ättiksyra eller trifluoroättiksyra eller en utspädd mineralsyra). Silylgrupper kan avlägsnas med användning av fluoridjoner(tnex.från en tetraalkylammoniumfluoríd såsom tetra-n-butylammoniumfluorid), vätefluorid i vatteninne- hållande acetonitril eller en syra såsom p-toluensulfonsyra (tdex. i metanol). Arylmetylgrupper kan avlägsnas genom behandling med Lewis syra (t.ex. borontrifluorid-eterat) i närvaro av en tiol (t.ex. etantiol) i ett lämpligt lösnings- medel såsom diklorometan vid t.ex. rumstemperatur.

Salter av syror enligt formel I kan prepareras genom konventionella metoder, t.ex. genom att behandla syran med en bas eller omvandla ett salt till ett annat genom jonutbyte.

Uppfinningen illustreras, men är inte begränsad till, följande preparationer och exempel i vilka temperaturerna är i °C, 'L' anger liter och EtOH är etanol.

I nedanstående preparationer och exempel är' föreningar namngivna såsom derivat av de kända 'faktorernafl faktorerna A, B, C, och D. Faktor A är en förening enligt formel VI i vilken Rl är isopropyl och R3 är väte; faktor B är en förening enligt formel VI i vilken R1 är metyl och R3 är metyl; faktor C är en förening enligt formel VI i vilken Rl är metyl och R3 är väte; och faktor D är en förening enligt formel VI i vilken R1 är etyl och R3 är väte. 503 399 26 (VI) Preparation 1-5-keto-faktor A Sporer av Streptomyes thermoarchaensis NCIB 12015 inokulerades på snedagar tillverkade av följande ingredienser 5L_-_.1_ Jästextrakt (Oxoid L2l) ^ 0,5 Maltextrakt (Oxoid L39) 30,0 Mycologisk pepton (0xoid L40) 5,0 Agar nr. 3 (Oxoid L13) 15,0 Destillerat vatten till 1 L pH~5,4 och inkuberades vid 28° under 10 dagar.

Den mogna snedagarn plattan täcktes därefter med 6 ml 10%-ig glycerollösning och skrapades med ett sterilt verktyg för att frigöra sporerna och myceliet. 0,4 ml portioner av den resulterade sporsuspensionen överfördes till sterila polypropylenrör, vilka därefter värmeförseglades och för- varades i flytande kväveånga tills de behövdes. 503 399 27 Två 250 ml Erlenmeyer-kolvar innehållande 50 ml utspridnings- medium tillverkat enligt följande g_L¿l D-glukos 15,0 Glycerol 15,0 Sojapepton 15,0 NaCl 3,0 CaCO3 1,0 Destillerat vatten till 1 L (Det ojusterade pH:t av mediet var 6,7, vilket justerades till pH 7,0 med vatteninnehållande natriumhydroxid innan autoklavering. pH av mediet efter autoklavering var 7,3) inokulerades vardera med 0,2 ml av sporsuspensionen tagen från ett rör.

Kolvarna inkuberades vid 28° under 3 dagar på en skak- anordning som roterade 250 rpm med en 50 mm diameter omlopps- rörelse.

Innehållet i båda kolvarna användes för att inokulera ett 70 L fermentationskärl innehållande 40 L av samma medium utökat med polypropylen 2000 (0,06% v/vL Polypropylen 2000 tillsattes efter behov under fermentationen för att kontrollera skumning.

Fermentationen utfördes vid 20°, med tillräcklig agitation och aeration för att upprätthålla en upplöst syrenivå större än % mättnad. Efter 24 timmar fermentation, överfördes en 9 L portion näringslösning till en 700 L fermentor innehållande 450 L medium tillverkat enligt följande: 503 399 28 gL-l D-glukos 2,8 Maltdextrin (MD30E) 27,8 Arkasoy 50 13,9 Melass 1,7 1<2HPo4 o, 14 Silicone 525 (Dow Corning) 0,06% (v/v) Justerat till pH 6,5 före sterilisering.

Fermentationen utfördes vid 28° med agitation och luftning.

Polypropylen 2000 antiskum tillsattes efter behov och pH hölls ned till 7,2 genom tillsats av H2SO4 tills tillvaratagandet.

Fermentationen tillvaratogs efter 5 dagar.

Näringslösningen (450 L) klargjordes på en Westfalia KA 25 centrifug och den bildade supernatanten ersattes med vatten (20 L). De återvunna cellerna (25,S kg) omrördes l h med en Silverson mixer modell BX i tillräckligt mycket metanol för att ge en total volym på 75 L. Suspensionen filtrerades och den fasta återstoden återextraherades med metanol (35 L) och filtrerades. Det kombinerade filtratet (87 L) utspäddes med vatten (40 L) och extraherades med 60°-80° petroleumeter (30 L). Efter 30 minuter separerades faserna på en Westfalia MEM 1256 centrifug och den lägre metanolfasen återextraherades med 60°-80° petroleumeter (30 L) efter tillsats av vatten (40 L).

Efter separation extraherades den lägre fasen återigen med 60°-80° petroleumeter(30 LL De kombinerade petroleumeter- faserna (85 L) koncentrerades genom tre passeringar genom en Pfaudler 8,8-l2v-27 wiped-film indunstare (ångtryck 0,1 bar, ångtemperatur 20°, ångtemperatur l27°). Koncentratet (9 L) torkades med natriumsulfat (2 kg) och koncentrerades ytterligare under reducerat tryck vid 40° i en roterande film- indunstare. 503 399 29 Den oljiga återstoden (130 g) upplöstes i kloroform för att ge 190 ml och detta anbringades till en kolonn av Merck 7734 silica 60 (200x4 cm) packad i kloroform. Kolonnen tvättades med kloroform (500 ml) och eluerades med kloroform:etylacetat (3:l) och fraktioner på ca. 40 ml uppsamlades efter en förkörning på 1400 ml.

Fraktionerna 32-46 poolades och indunstades och gav en olja (2l,2 g). ge en olja (20,l g) som upplöstes i kloroformzetylacetat (3:l) till 50 ml, och anbringades till en kolonn av Merck 7734 silica 60 (200x4 cm) packad i kloroform:etylacetat (3:lL fraktioner på ca. 40 ml uppsamlades efter en förkörning på Fraktionerna 47-93 poolades och indunstades för att och 1400 ml. Fraktionerna 22-36 poolades och indunstades och gav en olja 3,1 g som tillsattes till oljan som erhölls från fraktionerna 32-46 från den första kolonnen. De kombinerade oljorna upplöstes i kokande metanol (4 ml) som därefter tillsattes till varm propan-2-ol (20 ml) och tilläts att kristallisera.

Moderlut efter kristalliseringen indunstades för att ge en olja som upplöstes i en lika stor volym av metylklorid och anbringades till en kolonn (30x2,2 cm) av Merck kiselgel 60 (70-230 mesh ASTM, art. nr. 7734) packad i metylklorid. Bädden tvättades med metylk1orid(2 bäddvolymer) och eluerades med kloroform:etylacetat (3:l) (2 bäddvolymer). Indunstning av eluatet gav en olja som upplöstes i metanol och utsattes för preparativ hplc(high performance liquid chromatography) på Spherisorb S5 ODS-2 (250 mm x 20 mm, Phase Sep. LtdJ. Delar av provet (5 ml) pumpades in till kolonnen under en minut och kolonnen eluerades med acetonitril:vatten (7:3) under följande betingelser: 503 399 Tid (min) Flöde (ml/min) 0,00 0,00 ) injicerings- 1,00 0,00 ) tid 1,10 30,00 39,90 30,00 40,00 35,00 75,00 35,00 Material som eluerades från hplc-kolonnen registrerades genom uv-spektroskopi vid 238 nm.

Indunstning av de kombinerade fraktionerna med toppar eluerade efter 33,4 minuter gav titelföreningen (34 mg) såsom ett fast ämne.

E.I. mass-spektroskopi gav en molekylär jon vid 610 och gav karaktäristiska fragment vid: S92 574 556 422 259 241 Exempel 1 23 [E] -metoxyimino faktor A (a) 5,23-diketo faktor A En iskyld lösning preparerad från koncentrerad svavelsyra (1,2 ml) och natriumdikromat (120 mg) i vatten (2 ml) tillsattes under 15 minuter till en iskyld lösning av 5-keto faktor A (200 mg) och tetrabutylammoniumvätesulfat (15 mg) i etylacetat (4 ml) med kraftig omrörning. Efter 1 timme utspäddes blandningen med etylacetat och den organiska fasen tvättades med mättad vatteninnehållande natriumbikarbonat. Den torkade organiska fasen indunstades och gummiarten renades genom kromatografi på Merck kiselgel 60 230-400 mesh (100 ml).

Elution med 10%-ig etylacetat i diklorometan gav titålföre- ningen såsom ett blekt gult skun|(861ng)ó(CDCl3) innefattar 503 399 31 6,57 (m,lH); 2,50 (S,2H)7 OCh 1,89 (m,3H). (b) 5-keto, 23[E]-metoxyimino faktor A ,23-diketo faktor A (475 mg), metoxylaminhydroklorid (69 mg) och vattenfri natriumacetat (135 mg) upplöstes i metanol.

Efter 1,5 timme vid rumstemperatur hölls lösningen vid -l8° under 16 timmar, utspäddes med etylacetat och tvättades successivt med l N saltsyra, vatten och saltlösning. Den torkade organiska fasen indunstades och det gula skummet renades genom kromatografi på Merck kiselgel 60, 230-400 mesh (120 ml). Eluering av kolonnen med hexan:etylacetat (4:l) gav titelföreningen såsom ett gult skum 21 'zss > 0 27 500\ mg Ifgge *\8Û <5 1'2Û' cHt13)' Nmax (5fÛH) 24100 (e ' " “max * '2" 3530- 3460 (OH) 1708 . 1676 (c=c-c-0) ess v _ I (C-Û), 5 (CDCl3)innefattar6-53 (s;lH), 3.84 (s;aH), 3_3g (s.1H\ 3 58 i I g n (m;1H>, 3.30 (a1a;1H), 1.00 (ae;3H>, 0.96 (as;3H), 0.92 (as;3H). (c) 23[E]metoxyimino faktor A (i) Natriumborohydrid (6,5 mg) tillsattes till en iskyld lösning av 5-keto, 23 Üfl-metoxyimino faktor A (83 mg) i isopropanol (20 ml). Den gula blandningen omrördes under 35 minuter i ett isbad, utspäddes med etylacetat och tvättades successivt med l N saltsyra, vatten och saltlösning. Den torkade organiska fasen indunstades och det resulterande gula gummiarten renades genom kromatografi på Merck kiselgel 60, 230-400 mesh (60 ml). Elution av kolonnen med hexanzetylacetat (2:l) gav titelföreningen såsom ett gult skum (58 mg).

Kristallisation från hexan gav titelföreningen, smältpunkt2g30, '21 [«]D + 133° 'C 1.12, CHC13), *max (icon) zaanm (E 26,200), 6 (c0c1,) \í innefattar 0.29 (t7;lH), 3.84 (s;3H), 3.29 (d15;1H). (ii) En lösning av 5-keto, 23Dfl-anetoxyimino faktor A (50 mg) i torr tetrahydrofuran (1 ml) tillsattes till en kyld (-78°) lösning av litium tris-t-butoxyaluminiumhydrid (261 mg) i torr tetrahydrofuran (3 ml). Efter 0,75 timmar vid -78°, utspäddes lösningen med etylacetat (30 ml) och tvättades successivt med 503 399 32 0,5 N saltsyra och vatten. Den torkade organiska fasen indunstades och den råa produkten renades genom kromatografi på Merck kiselgel 60, 230-400 mesh (40 ml), eluerades med 25%- ig etylacetat i hexan för att ge titelföreningen såsom ett vitt skum, [a] š1 *_1280 (c 035, CHC13), öfljpgla) jgmefattar 4.29 (:7;1H), 3.ea(s;3H>, 3-29- Exempel 2 23 Éfl-nætoxyimino faktor A, 5-acetat En lösning av vattenfri natriumacetat (2,8 g) i vatten (15 ml) tillsattes till en lösning av 23-keto faktor A, 5-acetat (3,l3 g, Exempel 18 i brittiska patentspecifikationen 2176182) i metanol, följt av metoxyaminhydroklorin (3,0l g). Den resulterade lösningen omrördes under 1,5 timme vid 20°, utspäddes med etylacetat och tvättades därefter successivt med 0,5 N saltsyra, vatten och saltlösning. Den torkade organiska fasen indunstades så att den blev nästan torr och det vüa skummet renades genom kromatografi på Merck kiselgel 60 230- 400 mesh (600 ml). Eluering av kolonnen med hexanzetylacetat (4:l) gav titelföreningen såsom ett färglöst skum (2,l4 g) [alša , ,28o'(g 1.35, cHc1,) xmax (ston) zaanm (cmax z1,2s0); v max (çflßray 3360, 3aeo (on), 1733 (acetac) , 1715 (c=o), 995 (c-0), a(cDc1,> inne- fattar 3.s-5.s (man), 3.61» (san) 3.29 (a1s;H), 2.16 (s=3H).

Exempel 3 ZZBIEJ hydroxyamino faktor A, 5-acetat Reaktion mellan 23-keto faktor A, 5-acetat och hydroxylamin- hydroklorid utfördes på ett sätt liknande det som bekrivits i Exempel 1 ovan. Den råa produkten renades genom kromatografi på Merck kiselgel 60 230-400 mesh, eluerades med etylacetat: acetonitril (4:1) för att ge titelföreningen såsom ett färglöst Skum [,]å1..132° <5 1.01, cHc1,), xmax (ston) zahnm (emax zvaoo), gmax (cusra) 3363, 3a7o (ou), 1732 (acezan) , 1712 (c=0), 993 (c-0), a, 3.3-3.6 (m zu), 3.az (u 1s=1H), 2.16 (S=3H)- 503 399 33 Exempel 4 23[E]-metoxyimino faktor A En lösning av produkten enligt Exempel 2 (1,88 g) i metanol kyldes i ett isbad, l N vatteninnehållande natriumhydroxid (5,6 ml) tillsattes och lösningen omrördes på ett isbad under 1,5 timmar. Lösningen utspäddes med etylacetat och tvättades successivt med 0,5 N vatteninnehållande saltsyra, vatten och saltlösning. Den torkade organiska fasen indunstades och det resulterande skummet renades genom kromatografi på Merck kiselgel 60 230-400 mesh (400 ml). Eluering av kolonnen med hexan:etylacetat (2:l) gav ett färglöst skunx (l,429 g).

Kristallisering från hexan gav den rena titelföreningen, smältiwnkt 2030, [4131 + 1320 (5111, 1211:13), xmax (Ewa) zaanm umax 29200), vmax (cnara) :san (om, noe (un), 992 (c-o), moms) me. fattar ¿,_29 (:7:1H), 3.84 (s:3H), 3.29 (d15:1H).

Exempel 5 23[E1-hydroxyimino faktor A Hydrolys av produkten från Exempel 3 enligt metoden beskriven i Exempel 3 ovan gav en produkt som renades genom kromatografi på Merck kiselgel 60 230-400 mesh (400 ml) eluerad med hexan: etylacetat (l:l) för att ge titelföreningen såsom ett färglöst k 21 o S “m [du + 140 <5 ma, cucla), km (Ecom zaanm (gm 26700) »max (cHera) 3565, 34190 (UH), 1710 (c=o), 9941 (c-0), aütoclêgmæ. fattar 6.11 (snH), 11.29 (Um-i), 3.41 (cnsm-l).

Exempel 6 23[E]-etoxyimino faktor A En lösning av vattenfri natriumacetat (140 mg) i vatten (3 ml) 503 399 34 tillsattes till en lösning av 23-keto faktor A (200 mg, Exempel 23 i brittiska patentspecifikationen 2176182) och etoxyaminhydroklorid (126 mg) i metanol (20 ml). Efter 2 timmar vid 20° utspäddes lösningen med eter (40 ml) och tvättades med vatten. Den torkade organiska fasen indunstades och det resulterande vita skummet renades genom kromatografi på Merck kiselgel 60 230-400 mesh (90 ml). Elution av kolonnen med hexan:ety1acetat (2:1) gav titelföreningen såsom ett fu U 89 argmst skum (1 m9) Mål +12s° (5100, cflcla) xmax (EwH) zaamm (Emax 26,200) vmax (cfißra) 3540, Jaso (0H), 1705 (un), 990 (c-o), (Hcoclalixmefattamßo (Unn), 4.10 (q7=2H), 3.31 (msnH), 1.24 (um).

Föreningarna enligt Exempel 7, 8 och 9 preparerades på ett liknande sätt från 23-keto faktor A och den lämpliga alkoxy- aminen.

Exempel 7 23fE]-allyloxyimino faktor A [nål . 12a° (5 1.17, cflcla), gm (annu) zaamm (emax 204.00), »max (cusfa) ssso, 31.90 (nu), 1700 (cm), 990 (c-o), Mcomgifmefattaf .98 (m;1H), 5.28 (dd17,2;1H), 5.15 (dd9,2;1H), 4.5-4.7 (m;2H), 4.29 (t7;1H), 3,36 (d1a;1H) preparerades från allyloxyaminhydroklorid.

Exempel 8 23[E]-isopropyloxyimino faktor A 21 o i WD + 116 (_c_ 0.97, cHcn), ma, (EwH) zaamm (am 25,000), “max (mera) 3550, 3.190 (UH), 1708 (c=0), 992 (c-o), 5020013) innefattar 4_2-a_a (m;2H), 3.30 (G1&;1H), 1.21 (d7;3H), 1.20 (d7;}H) preparerades från isopropyloxyaminhydroklorid. 503 399 Exempel 9 23[E]-n-butoxyimino faktor A [a]š1 f 1150 (5 1.10, CHCI3), Lmax (Et0H) gaanm (E 31,800), " mâX »max (cr-rara) 3500, :aan (nu), 1700 (c=0), 992 (c-n), 5 (C093) innefattar 4.28 (namn, (H03 (man), 3-96 (omm), 3.31 (omm), ').9-1_1 (m;15H) preparerades från n-butoxyanünhydroklorid.

Exempel 10 23I§]-metoxyimino faktor A, 5-acetat (l) En 3-molarig lösning av metylmagnesiumjodid i eter (0,l6 ml) tillsattes i en omrörd lösning av produkten enligt Exempel 3 (120 mg) i torr hexametylfosfortriamid (5 ml) under kväve.

Jodometan (0,09 ml) tillsattes, och efter en timme, utspäddes blandningen med etylacetat (30 ml) och tvättades successivt med 2 N saltsyra och vatten. Den torkade organiska fasen in- dunstades och den gula gummiarten renades genom kromatografi på Merck kiselgel 60 230-400 mesh (80 ml). Eluering av ko- lonnen med hexan:etylacetat (2:l) gav titelföreningen såsom ett Vitt Skum [af ,, 1230 (3 135, 50.35) (max (now)- zasnm (emax 30,300).

NMR var såsom beskrivits ovan i Exempel 2. (ii) Produkten enligt Exempel 3 (0,082 g) upplöstes i dietyleter (10 ml) innehållande silveroxid (0,4 g), preparerad färsk från vatteninnehållande silvernitrat och 2 M natrium- hydroxid). Blandningen omrördes vid rumstemperatur under två timmar, varefter den filtrerades och lösningsmedlet indunstades för att ge ett gult rågummi. Denna återstod renades genonn preparativ tunnskiktskromatografi (Merck 5717) eluerad med diklorometan/aceton (25:l). Huvudbandet extraherades med aceton och indunstades för att ge titelföreningen (0,059 g). NMR var såsom beskrivits ovan i Exempel 2. 503 399 36 Exemgel ll 23[§l-metoxyimino faktor A, 5-metylkarbamat Metylisocyanat(0,l31nl,125 mg)och trietylamin(2 droppar) tillsattes till en lösning av 23(E1-metoxyimino faktor A (350 mg) i torr dimetylformamid (0,75 ml). Kolven försågs med en plugg och upphettades under 5,5 timmar vid vid 80° under omrörning. Reaktionsblandningen hälldes i vatten (50 ml) och den resulterade blandningen filtrerades genom kiselguhr.

Filterkakan tvättades med vatten (150 ml) och extraherades därefter med diklorometan (75 ml). Extraktet torkades (MgSO4) och koncentrerades för att ge ett gult skum som renades genom mediumtryckskolonnkromatografi på silica (125 g, Merck kiselgel 60, 230-400 mesh). Elution med hexan:etylacetat (l:1) gav titelföreningen såsom ett vitt skum (206 mg). [a] 52 + 99° (5 0,55, cH2c1,); xmax (annu) 2aa.a nm <= 2e710); vmax (cHsr3) 3530 (0H), 3455 (NH), 1720 (eszer), 1720 + 1510 (kflrbamflt ) and 995 cm-1 (C-0); 6 (c0c1,)¿nnefattar1.7a (S, sn), 2.06 (0, 502, su), 3.29 (u, 1a Hz, 1H), 3.83 (s, BH), 4.00 (q, 5 az, 1H) och 5.50 (m, gu).

Exemgel 12 23th]-metoxyimino faktor A, 5-metylkarbonat Till en lösning av 23[E]-metoxyimino faktor A (150 mg) i diklorometan (15 ml) och pyridin (0,3) ml omrörd vid 0° tillsattes metylkloroformat (0,7 ml av 1,0 M lösning i diklorometan). Reaktionsblandningen lämnades för omrörning vid 0-3° under 20 minuter, tillsattes därefter till diklorometan (70 ml) och tvättades med 2 N saltsyra (50 ml) och vatten (50 ml). Den organiska fasen (MgSO4) och lösningsmedel avlägsnades för att ge ett skum, som renades genom mediumtryckkolonn- kromatografi på silica (40 g, Merck kiselgel 60, 230-400 mesh). Elution med diklorometanzetylacetat (30:l) gav titelföreningen såsom ett vitt skum (127 mg). [a]a1 + 1¿50(c=0_¿1, gH2ç12); xmax (tron) 2aa.a nm (E 31:10); umax (cnara) 3a60 + 35a0 (0H), 1742 (xarbçnat) 1710 (ester) and 992 cm-1 (c-0); 5 (cDg13;nnefattar1.ez <5- 3H>, 3.29 (a 10 Hz, 1H), 3.62 (s, JH), 3,03 (S, BH), 5.2-5.4 (m;3H> 5.56 (S, 1H>. 503 399 37 Exempel 13 23{E]-metoxyimino faktor D, 5-acetat En lösning innehållande 23-keto faktor D, 5-acetat (251 mg, Exempel 119 i brittiska patentspecifikationen 2l76l82L natriumacetat (250 mg) och metoxyaminhydroklorid (250 mg) i metanol (40 ml) fick stå vid 20° under 24 timmar, koncentrerades till ca. 10 ml, utspäddes med etylacetat (50 ml), och tvättades successivt med 0,5 N saltsyra och vatten.

Den torkade organiska fasen indunstades för att ge ett gult skum, som renades genom kromatografi på Merck kiselgel 60, 230-400 mesh (120 ml). Elution av kolonnen med hexan gav titelföreningen såsom ett blekgult skum (144 mg); xmax (snoH) zaanm (e 2s,a00); »max (cHsra) (cm-l) 3500 (0H), 1732 (0Ac), 1710 (C=0); 6 (C0C13)irmefatt.s.54 (m 21-1), 4.92 (nu 1H), 3,54 (s: 3H), 3.32 (nu )H), 3.30 ma; 1H), 2.17 (s; 3H), 1.91 ma; 1H), 1-76 (S: JH), 1.63 (s: SH). 1.51 (S, 3H), 1.01 (t7,; 3H), 0.99 (ae, 3H), 0.92 we; 3H).

Exempel 14 23[E]-metoxyimino faktor D En lösning innehållande produkten enligt Exempel 13 (140 mg) och].N natriumhydroxid(0,6 ml)i metano1(8 ml) omrördes i ett isbad under 1,5 timmar. Lösningen utspäddes med etylacetat (30 ml) och tvättades successivt med 1 N saltsyra och vatten.

Den torkade organiska fasen indunstades för att ge ett gult skum, som renades genom kromatografi på Merck kiselgel 60, 230-400 mesh (50 ml). Elution av kolonnen med hexan: etylacetat (2:l) gav titelföreningen såsom ett vitt skum _ 21 (105 m9” (1110 + 96° (_1.;1.3e, cHc1,); xmax (unH) zaanm (e 2e,700); vmax (cHerg) (=m' ) 3530, 3500 (0H), 1710 (c=0); 6 (coclgjlmefattynß (m 1H), 4.30 ms; 1H), 3.93 (den 1H), 3.84 (s; 3H), 3.30 (om 1H), 3.27 (m; 1H), 1.00 (s; 3H), 1.611 (s; 3H),1.32 (s; 3H), 1.01 (:7; 3H), 1.00 me; 3H), 0.92 (as; 3H). 503 399 38 Exemgel 15 23[É]-metoxyimino faktor B En lösning innehållande 23-keto faktor B (1 g, Exempel 19 i brittiska patentspecifikationen 2176182), natriumacetat (400 mg) och metoxyaminhydroklorid (400 mg) omrördes vid 20° under timmar, koncentrerades för att ge ca. 10 ml, utspäddes med etylacetat, och tvättades med vatten. Den organiska fasen tvättades successivt med 0,5 N saltsyra och vatten, och den torkade organiska fasen indunstades och den råa produkten renades genom kromatografi på Merck kiselgel 60, 230-400 mesh (200 ml). Elution av kolonnen med etylacetat:diklorometan (l:9) gav titelföreningen såsom ett vitt skum (500 g):[a]21+ Ü 1200 (3 1.09, cHc1,); xmax (tron) zaanm (e 30,100); vmax (cflsra) (em-l) 3sa0, 31160 (on), 1108 (==0); s (coclgi-fmefatt-sße me; 11-1), 4.03 ms; 1H), 3.97 ms; 111), 3.03 11+), 3.29 (ma, 1H), 1.82 (s; 311), 1.60 (os, 9H), 1.00 (om 3H), 0.92 (d6; 3H).

Exemgel 16 23[§l:metoxyimino faktor C Vattenfri natriumacatat (0,54 g) och metoxyaminhydroklorid (O,58 g) tillsattes i en lösning av 23-keto faktor C (1,97 g, Exempel 12 i brittiska patentspecifikationen 2176182) i metanol (30 ml) innehållande vatten (5 ml) och blandningen omrördes under 30 minuter vid rumstemperatur. Etylacetat (30 ml) och 0,5 M saltsyra (30 ml) tillsattes och det vatten- innehållande lagret återextraherades med etylacetat (15 mlL De kombinerade organiska skikten tvättades i tur och ordning med 0,5 M saltsyra, 5% mättad aq. natriumbikarbonat och 10% mättad aq. natriumklorid, koncentrerades därefter in vacuo till ett gult skum som renades genom kromatografi på Merck 9385 silica-gel. Kolonnen behandlades initialt med diklorometan och därefter eluerades den med diklorometan innehållande en liten mängd av etylacetat (upp till 10%) för sos s99 39 att ge titelföreningen (1,0 9): [a] 51 + M0 (Eno, cHaoHh LH Nm (cnclgmnefattar följande signaler = 611-95 (m. 1H); 4.29 (t. 1H, 7112); 3.96 (d, 11+, 7112); 3.95 (s, 311 [= Nocgah; 3.66 (a, 111, 101m; 1.51 (s, 311); 1.a2 (c, 1H, 121m; IR (cußra) ßezo-ssaocm-l (-oH), 1711 cm-1(t=n).

Nedan följer exempel på formuleringar enligt uppfinningen.

Termen 'aktiv ingrediens' avser, såsom den används här, en förening enligt uppfinningen och kan t.ex. vara föreningen enligt Exempel 4.

Multidos parenteral injektion Exempel l % w/v Spännvidd Aktiv ingrediens 2,0 0,1 - 6,0% w/v Benzylalkohol 1,0 Polysorbat 80 10,0 Glycerol formal 50,0 Vatten för Injektioner till 100,0 Lös upp den aktiva ingrediensen.i polysorbat 80 och glycerol formal. Tillsätt benzylalkoholen och fyll upp volymen med Vatten för Injektioner. Sterilisera produkten med konventionella metoder, t.ex. sterilfiltrering eller genom uppvärmning i en autoklav och aseptisk förpackning.

Exempel 2 % w/v Spännvidd Aktiv ingrediens 4,0 0,1 - 7,5 % w/v Benzylalkohol 2,0 Glyceryl triacetat 30,0 Propylenglykol till 100,0 Upplös den aktiva ingrediensen i benzylalkoholen och glyceryl triacetat. Tillsätt propylenglykol och fyll upp till volymen.

Sterilisera produkten med konventionella farmaceutiska metoder, t.ex. sterilfiltrering, och förpacka aseptiskt. 503 399 40 Exempel 3 §_vv/_3 spännvidd Aktiv ingrediens 2,0 w/v 0,1 - 7,5% w/v Etanol 36,0 v/v Icke-jonisk surfaktant (t.ex. Synperonic PE L44*) 10,0 w/v Propylenglykol till 100,0 Upplös den aktiva ingrediensen i etanolen och surfaktanten och fyll upp till volymen. Sterilisera produkten med konventionella farmaceutiska metoder, t.ex. sterilfiltrering, och förpacka aseptiskt.

* Varumärke av ICI Exempel 4 å Spännvidd Aktiv ingrediens 2,0 w/v 0,1 - 3,0% w/v Icke-jonisk surfaktant (t.ex. Synperonic PE F68*) 2,0 w/v Benzylalkohol 1,0 w/v Miglyol 840** 16,0 v/v Vatten för Injektioner till 100,0 Upplös den aktiva ingrediensen i Miglyol 840. Upplös den icke- joniska surfaktanten och benzylalkohol i det mesta av vattnet.

Preparera emulsionen genom att tillsätta den oljiga lösningen till den vatteninnehållande lösningen under homogenisering med användning av konventionella medel. Fyll upp volymen.

Preparera och förpacka aseptiskt.

* Varumärke av ICI ** Varumärke av Dynamit Nobel 503 399 41 Aerosolspray % w/w Spännvidd Aktiv ingrediens 0,1 0,01 - 2,0% w/w Trikloroetan 29,9 Triklorofluorometan 35,0 Diklorofluorometan 35,0 Blanda den aktiva ingrediensen med trikloroetan och fyll in i aerosolbehållaren. Rena huvudutrymmet med det gasinnehållande drivmedlet och tryck ihop ventilen i läge. Fyll i den nödvändiga vikten av flytande drivmedel under tryck genom ventilen. Utrusta anordningen med igångsättare och damm-lock.

Tablett Tillverkningsmetod - vâtgranulering EE Aktiv ingrediens 250,0 Magnesiumstearat 4,5 Majsstärkelse 22,5 Natriumstärkelseglykolat 9,0 Natriumlaurylsulfat 4,5 Mikrokristallinsk cellulosa till tablettkärnvikt på 450 mg Tillsätt tillräcklig kvantitet av en 10%-ig stärkelsepasta till den aktiva ingrediensen för att producera en lämplig våt massa för granulering. Preparera granulerna och torka med användning av en brick- eller fluid-bäddtorkare. Sikta genom en siktare, tillsätt de återstående ingredienserna och komprimera till tabletter.

Om så önskas, filmbeskikta tablettkärnorna med användning av hydroxypropylmetylcellulosa eller andra liknande film-bildande material med användning av antingen vatteninnehållande eller icke vatteninnehållande lösningssystem. En plastiserare eller lämplig färg kan innefattas i den film-beskiktande lösningen. 503 399 42 Veterinärtablett för användning till små/husdjur Tillverkningsmetod - torr granulering EE Aktiv ingrediens 50,0 Magnesiumstearat 7,5 Mikrokristallinsk cellulosa till tablettkärnvikt på 75,0 Blanda den aktiva ingrediensen med magnesiumstearat och mikro- kristallinsk cellulosa. Komprimera blandningen till klumpar.

Sönderdela klumparna genom att passera dem genom en roterande granulator för att producera fritt flytande granuler.

Komprimera till tabletter.

Tablettkärnorna kan därefter filmbeskiktas, om så önskas, såsom beskrivits ovan.

Veterinär intramammär injektion mg/dos Spännvidd Aktiv ingrediens 150 mg 0,05 - 1,0 g Polysorbat 60 3,0% w/w) ) Vitt bivax 6,0% w/w) till 3 g ) till 3 eller 15 g Jordnötsolja 9l,0% w/w) ) Uppvärm jordnötsoljan, vitt bivax och polysorbat 60 till 160°C under omrörning. Kvarhåll vid l60° under två timmar och kyl därefter till rumstemperatur under omrörning. Tillsätt aseptiskt den aktiva ingrediensen till bäraren och dispergera med användning av en höghastighetsblandare. Förfina genom att passera genom en kolloidkvarn. Fyll aseptiskt produkten i sterila plastsprutor. 503 399 43 Veterinär bolus med långsam frigöring % w/w Spännvidd Aktiv ingrediens 0,25-2 g till Kolloidal silicon- ) erforderlig dioxid 2,0) fyllnadsvikt Mikrokristallinsk ) cellulosa till 100,0) Blanda den aktiva ingrediensen med den kolloidala silicon- dioxiden och mikrokristallinsk cellulosa med användning av en lämplig portionsblandningsteknik för att uppnå en tillfreds- ställande fördelning av aktiv ingrediens i bäraren. Insätt i anordningen med långsam frigöring och ge (1) en konstant fri- göring av aktiv ingrediens eller (2) en pulserande frigöring av aktiv ingrediens.

Veterinär oral stor dos (drench) i sgännvida Aktiv ingrediens 0,35 0,01 - 2% w/v Polysorbat 85 5,0 Benzylalkohol 3,0 Propylenglykol 30,0 Fosfatbuffert vid pH 6,0 - 6,5 Vatten till 100,0 Upplös den aktiva ingrediensen i polysorbat 85, benzyl-alkohol och propylenglykol. Tillsätt en portion av vattnet och justera pH till 6,0-6,5 med fosfatbuffert, om så är nödvändigt. Fyll upp till slutlig volym med vattnet. Fyll i produkten i stor- dosbehållaren.

Veterinär oral pasta å gl! Spännvidd Aktiv ingrediens 4,0 1 - 20% w/w Sackarinnatrium 2,5 Polysorbat 85 3,0 Aluminiumdistearat 5,0 Fraktionerad kokosnötolja till 100,0 503 399 44 Dispergera aluminiumstearatet i den fraktionerade kokosnöt- oljan och polysorbat 85 genom uppvärmning. Kyl till rums- temperatur och dispergera sackarinnatriumet i den oljiga bäraren. Dispergera den aktiva ingrediensen i basen. Fyll in i plastsprutor.

Granuler för veterinär administrering i foder % w/w Spännvidd Aktiv ingrediens 2,5 0,05 - 5% w/w Kalciumsulfat, hemi-hydrat till 100,0 Blanda den aktiva ingrediensen med kalciumsulfat. Preparera granuler med användning av en våtgranuleringsprocess. Torka med användning av en brick- eller fluid-bäddtorkare. Fyll in i den lämpliga behållaren.

Veterinärt påhällningsmedel (pour-on) 3 El! Spännvidd Aktiv ingrediens 2,0 0,1 till 30% Dimetylsulfoxid 10,0 Metylisobutylketon 30,0 Propylenglykol (och pigment) till 100,0 Upplös den aktiva ingredienseni.dimetylsulfoxid och metyl- isobutylketon. Tillsätt pigmentet och fyll upp volymen med propylenglykol. Fyll in i uthällningsbehållaren.

Emulgerbart koncentrat Aktiv ingrediens 50 g Anjonisk emulgerare 40 g (t.ex. fenylsulfonat CALX) Icke-jonisk emulgerare 60 g (t.ex. Synperonic NPl3)* Aromatiskt lösningsmedel (t.ex. Solvesso 100) till l liter. 503 399 45 Blanda alla ingredienser, rör om tills det är upplöst.

* Varumärke av ICI Granuler (a) Aktiv ingrediens 50 g Träkåda (wood resin) 40 g Gipsgranuler (20-60 mesh) till l kg (t.ex. Agsorb l00A) (b) Aktiv ingrediens 50 g Synperonic NPl3 * 40 g Gipsgranuler (20-60 mesh) till l kg.

Upplös alla ingredienser i ett flyktigt lösningsmedel t.ex. metylenklorid, tillsätt till granuler tumlande i blandare.

Torka för att avlägsna lösningsmedel.

* Varumärke av ICI Den pesticidiska aktiviteten av föreningarna enligt uppfinningen bestämdes med användning av ett flertal skadedjur och deras värdar enligt följande allmänna procedur: Produkten användes i form av en flytande preparation.

Preparationerna gjordes genom upplösning av produkten i aceton. Lösningarna utspäddes därefter med vatten innehållande 0,1 eller 0,01 vikts-% av våtgörande ämne tills de flytande preparationerna innehöll den erforderliga koncentrationen av produkten.

Den testproceduren som var tillämpbar på de flesta skade- djuren, innefattade försörjning av ett antal av skadedjuren på ett medium, som vanligen var en värdplanta, och antingen behandling av mediet med preparationen (residualtest) eller i fallet med Tetranychus urticae, Myzus persicae, Nilaparvata lugens och Musca domestica, behandlades både skadedjuren och mediet med preparatet (kontakttest). I fallet med Meloidogyne 46 iggggnitâ anbringades lösningen till jord i. vilken tomatplantor växte, som därefter utsattes för nematoder, och reduktionen i antalet rot-knutar beräknades jämfört med en kontrollplanta.

När dessa procedurer följdes, befanns föreningen enligt formel I, i vilken R1 är isopropyl, R2 är metyl och OR3 är väte, vara effektiv vid koncentrationer (i vikt av produkten) på 100 parts per million eller mindre.

Claims (15)

503 399 LF? PATENTKRAV

1. Föreningar enligt formel (I) (I) och salter därav, där R* är en metyl-, etyl- eller isopropylgrupp; R* är en väteatom, en Ch, alkylgrupp eller en CL, alkenylgrupp och gruppen =NOR2 är i E-form; on” är hyaroxyl, -oafi -oconfi -oco,n* (där n* är CH aikyl) eller -OCONR°R° (där Ra och R° oberoende är H eller C14 alkyl) .

2. Föreningar enligt krav 1, 'i vilka 0R3 är en metoxykarbonyl- oxy, acetoxy-, metoxy- eller hydroxylgrupp.

3. Föreningar enligt krav 1, i vilka 0R3 är en hydroxylgrupp.

4. Föreningar enligt något av föregående krav, i vilka R* är en isopropylgrupp .

5. Föreningar enligt något av föregående krav, i vilka Rz är en metylgrupp. 503 399 *A9

6. Föreningar enligt krav l, i vilka Rlär en isopropylgrupp, Rz är en metylgrupp och ORa är en hydroxy-, acetoxy- eller metoxykarbonyloxygrupp.

7. Förening enligt krav 1, i vilken Rlär en isopropylgrdpp, R* är en metylgrupp och OR3 är en hydroxylgrupp.

8. Föreningar enligt krav 1, i vilka Rlär en metylgrupp, Rzär en metylgrupp och OR” är en metoxygrupp; eller R1 är en etyl- grupp, R2 är en metylgrupp och OR: är en hydroxylgrupp.

9. Komposition för användning inom humanmedicin innehållande en antibiotiskt verkande effektiv mängd av åtminstone en förening enligt krav 1 tillsammans med en eller flera bärare och/eller konstituenser.

10. Komposition för användning inom veterinärmedicin innehållan- de en antibiotiskt verkande effektiv mängd av åtminstone en förening enligt krav 1 tillsammans med en eller flera bärare och/eller konstituenser.

11. ll. En skadedjurskontrollerande komposition innehållande en effektiv mängd av åtminstone en förening enligt krav 1 såsom aktiv komponent tillsammans med en eller flera bärare och/eller konstituenser.

12. Komposition enligt något av kraven 9 - ll innehållande en effektiv mängd av föreningen enligt krav 7 tillsammans med en eller flera bärare och/eller konstituenser.

13. Sätt att bekämpa skadedjur inom jordbruk, trädgårdsodling eller skogsbruk, eller i lager, byggnader eller andra allmänna platser eller uppehållsorter för skadedjuren, vilket sätt innefattar anbringande av en effektiv mängd av en eller flera föreningar enligt krav l till plantorna eller annan vegetation eller till själva skadedjuren, eller en plats därav. 503 399 HQ

14. Sätt enligt krav 13 i vilket nämnda skadedjur är insekter, akarid- eller nematodskadedjur.

15. Sätt att framställa en förening enligt krav 1, innefattande: (A) reaktion mellan en förening enligt formel (II) (II) och ett reagens PQNORZ eller ett salt därav (R*, R2 och OR3 är såsom definierats i krav 1), om så önskas, följt av deprotektion av en förening producerad enligt formel I, i vilken OR3 är en skyddad hydroxylgrupp; (B) vid preparation av en förening enligt formel I, i vilken R: är en Cbæ alkyl- eller Cææ alkenylgrupp och Okaär en substitue- rad hydroxylgrupp, reaktion mellan en motsvarande förening av formel I, där OR: är en hydroxylgrupp, och ett reagens, för omvandling av en hydroxylgrupp till en substituerad hydroxyl- QIUPPF (C) vid preparation av en förening enligt formel I i vilken Rzär en CL¿ alkyl- eller C,¿ alkenylgrupp, reaktion mellan en förening enligt formel I, där Rzär en väteatom och OR3är en substituerad hydroxylgrupp, och ett eterifierande ämne RIY (där R: är en C,¿ alkyl- eller CLE alkenylgrupp och Y är en lämnande grupp), och om så önskas följt av deprotektion av en förening enligt formel I i vilken OR3 är en skyddad hydroxylgrupp; 503 399 5C> (D) vid preparation av en förening enligt formel I, i vilken OR3 är en hydroxylgrupp, reducering av en förening enligt formel III (III) (E) vid preparation av en förening enligt formel I, i vilken OR3 är en hydroxylgrupp, deprotektion av en motsvarande förening enligt formel I, där OR” är en skyddad hydroxylgrupp; eller (F) vid preparation av ett salt av en syra enligt formel I, behandling av nämnda syra med en bas eller omvandling av ett salt till ett annat genom utbyte av jon.