PL188675B1 - Nowy szczep bakterii kwasu mlekowego-Lactobacillus helveticus, fermentowany produkt mleczny oraz sposób wytwarzania fermentowanego produktu mlecznego - Google Patents
Nowy szczep bakterii kwasu mlekowego-Lactobacillus helveticus, fermentowany produkt mleczny oraz sposób wytwarzania fermentowanego produktu mlecznegoInfo
- Publication number
- PL188675B1 PL188675B1 PL98339343A PL33934398A PL188675B1 PL 188675 B1 PL188675 B1 PL 188675B1 PL 98339343 A PL98339343 A PL 98339343A PL 33934398 A PL33934398 A PL 33934398A PL 188675 B1 PL188675 B1 PL 188675B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- pro
- lactic acid
- fermented milk
- milk
- fermented
- Prior art date
Links
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 144
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 title claims abstract description 55
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 title claims abstract description 55
- 240000002605 Lactobacillus helveticus Species 0.000 title claims abstract description 22
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 25
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 48
- DOFAQXCYFQKSHT-SRVKXCTJSA-N Val-Pro-Pro Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 DOFAQXCYFQKSHT-SRVKXCTJSA-N 0.000 claims abstract description 48
- 235000014048 cultured milk product Nutrition 0.000 claims abstract description 31
- 235000013967 Lactobacillus helveticus Nutrition 0.000 claims abstract description 19
- 229940054346 lactobacillus helveticus Drugs 0.000 claims abstract description 19
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims abstract description 16
- 108010015385 valyl-prolyl-proline Proteins 0.000 claims abstract description 16
- 235000020244 animal milk Nutrition 0.000 claims abstract description 13
- FQYQMFCIJNWDQZ-CYDGBPFRSA-N Ile-Pro-Pro Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 FQYQMFCIJNWDQZ-CYDGBPFRSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 108010031424 isoleucyl-prolyl-proline Proteins 0.000 claims abstract description 11
- 229960000448 lactic acid Drugs 0.000 claims description 68
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 claims description 48
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 29
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 29
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 18
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 15
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 14
- 239000013611 chromosomal DNA Substances 0.000 claims description 10
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 claims description 10
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 10
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 10
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 9
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 claims description 6
- 241000209140 Triticum Species 0.000 claims description 6
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 claims description 6
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 claims description 5
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000005018 casein Substances 0.000 claims description 5
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 claims description 5
- 235000021262 sour milk Nutrition 0.000 claims description 5
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims description 4
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims description 4
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000013322 soy milk Nutrition 0.000 claims description 4
- 229940001941 soy protein Drugs 0.000 claims description 4
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000021067 refined food Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000011497 sour milk drink Nutrition 0.000 claims description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 26
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 abstract description 17
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 abstract description 17
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 abstract description 16
- 239000007787 solid Substances 0.000 abstract description 12
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 abstract description 8
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 abstract description 6
- 239000008267 milk Substances 0.000 abstract description 6
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 abstract description 6
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 abstract description 3
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 abstract description 3
- 230000002180 anti-stress Effects 0.000 abstract description 2
- 230000001077 hypotensive effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 abstract 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 abstract 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 abstract 1
- 235000013861 fat-free Nutrition 0.000 abstract 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 20
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 18
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 16
- UUUHXMGGBIUAPW-UHFFFAOYSA-N 1-[1-[2-[[5-amino-2-[[1-[5-(diaminomethylideneamino)-2-[[1-[3-(1h-indol-3-yl)-2-[(5-oxopyrrolidine-2-carbonyl)amino]propanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]pentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]pyrrolidine-2-carbon Chemical compound C1CCC(C(=O)N2C(CCC2)C(O)=O)N1C(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C1CCCN1C(=O)C(CCCN=C(N)N)NC(=O)C1CCCN1C(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C1CCC(=O)N1 UUUHXMGGBIUAPW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 102000004270 Peptidyl-Dipeptidase A Human genes 0.000 description 14
- 108090000882 Peptidyl-Dipeptidase A Proteins 0.000 description 14
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 14
- 102100026819 Inositol polyphosphate 1-phosphatase Human genes 0.000 description 13
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 13
- 239000000047 product Substances 0.000 description 13
- NUHSROFQTUXZQQ-UHFFFAOYSA-N isopentenyl diphosphate Chemical compound CC(=C)CCO[P@](O)(=O)OP(O)(O)=O NUHSROFQTUXZQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 10
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 10
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 10
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 7
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 6
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 5
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 5
- JVTAAEKCZFNVCJ-REOHCLBHSA-N L-lactic acid Chemical compound C[C@H](O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 2
- 102000014171 Milk Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010011756 Milk Proteins Proteins 0.000 description 2
- QIAFMBKCNZACKA-UHFFFAOYSA-N N-benzoylglycine Chemical compound OC(=O)CNC(=O)C1=CC=CC=C1 QIAFMBKCNZACKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 2
- 230000003276 anti-hypertensive effect Effects 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 235000020247 cow milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 235000020251 goat milk Nutrition 0.000 description 2
- 235000021552 granulated sugar Nutrition 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 2
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- 235000008924 yoghurt drink Nutrition 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZJTVIMUHNBCZBP-LBPRGKRZSA-N (2s)-2-[(2-benzamidoacetyl)amino]-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)C=1C=CC=CC=1)C1=CNC=N1 ZJTVIMUHNBCZBP-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- PLXMOAALOJOTIY-FPTXNFDTSA-N Aesculin Natural products OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1Oc2cc3C=CC(=O)Oc3cc2O PLXMOAALOJOTIY-FPTXNFDTSA-N 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 102100035882 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- WNBCMONIPIJTSB-BGNCJLHMSA-N Cichoriin Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1)c1c(O)cc2c(OC(=O)C=C2)c1 WNBCMONIPIJTSB-BGNCJLHMSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N D-Cellobiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- DHCLVCXQIBBOPH-UHFFFAOYSA-N Glycerol 2-phosphate Chemical compound OCC(CO)OP(O)(O)=O DHCLVCXQIBBOPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 108010070551 Meat Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- NGFMICBWJRZIBI-JZRPKSSGSA-N Salicin Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1)c1c(CO)cccc1 NGFMICBWJRZIBI-JZRPKSSGSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 238000011481 absorbance measurement Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000009603 aerobic growth Effects 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- NGFMICBWJRZIBI-UHFFFAOYSA-N alpha-salicin Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=CC=C1CO NGFMICBWJRZIBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- XHCADAYNFIFUHF-TVKJYDDYSA-N esculin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC(C(=C1)O)=CC2=C1OC(=O)C=C2 XHCADAYNFIFUHF-TVKJYDDYSA-N 0.000 description 1
- 229940093496 esculin Drugs 0.000 description 1
- AWRMZKLXZLNBBK-UHFFFAOYSA-N esculin Natural products OC1OC(COc2cc3C=CC(=O)Oc3cc2O)C(O)C(O)C1O AWRMZKLXZLNBBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 230000008821 health effect Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 235000021239 milk protein Nutrition 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000006072 paste Substances 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- NGFMICBWJRZIBI-UJPOAAIJSA-N salicin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=CC=C1CO NGFMICBWJRZIBI-UJPOAAIJSA-N 0.000 description 1
- 229940120668 salicin Drugs 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 239000008371 vanilla flavor Substances 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING OR TREATMENT THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
- A23C9/1234—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt characterised by using a Lactobacillus sp. other than Lactobacillus Bulgaricus, including Bificlobacterium sp.
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING OR TREATMENT THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/13—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using additives
- A23C9/137—Thickening substances
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/02—Preparation of peptides or proteins having a known sequence of two or more amino acids, e.g. glutathione
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/147—Helveticus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/225—Lactobacillus
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Dairy Products (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
1. Nowy szczep bakterii kwasu mlekowego - Lactobacillus helveticus CM4 zdepo- nowany pod numerem FERM BP-6060. PL PL PL PL PL
Description
Przedmiotem wynalazku jest nowy szczep bakterii kwasu mlekowego Lactobacillus helveticus, fermentowany produkt mleczny zawierający bakterie kwasu mlekowego i sposób wytwarzania tego produktu.
Od dawna Lactobacillus helveticus stosowany był do wytwarzania fermentowanego mleka, jako typowa bakteria zakwasu mleczarskiego dla produktów mleczarskich. Lactobacillus helveticus ma wysoką aktywność proteolityczną, a zwłaszcza jego pozakomórkowa proteinaza o wysokiej aktywności gra ważną rolę w fermentacji mleka zwierzęcego. To znaczy, ze pozakomórkowa proteinaza trawi białka mleka zwierzęcego tworząc różne fragmenty peptydów. Produkowane peptydy dalej poddawane są działaniu peptydazy stając się peptydami o niskim ciężarze cząsteczkowym. Wiadomo, że część peptydów produkowana w pożywce, z uwagi na działanie enzymów proteinazy wnika do komórek bakterii kwasu mlekowego i wykorzystywana jest jako źródło azotu. Są również doniesienia, ze niektóre peptydy produkowane w po188 675 żywce mają działanie inhibitujące skierowane przeciw enzymowi przekształcającemu angiotensynę (ACE), który powoduje nadciśnienie (J. Dairy Sei. 78:777-783 (1995)).
Jako peptydy inhibitujące aktywność ACE i tłumiące wzrost ciśnienia krwi, opisano różne skuteczne peptydy takie jak pochodzące z degradacji produktów z białek mleka, białek soi i białek z mięsa ryb. Na przykład Vai-Pro-Pro i Ile-Pro-Pro ( w skrócie nazywane VPP i IPP, odpowiednio, które to peptydy wspólnie nazywane są w niniejszym laktotripeptydami) są znane jako peptydy mające działanie inhibitujące ACE obecne w mleku fermentowanym Lactobacillus helveticus. Stwierdzono, ze iaktotripeptydy mają silne działanie obniżające ciśnienie potwierdzone doświadczeniami na szczurach z samoistnym nadciśnieniem (SHR) (J.Dairy Sei. 78:1253-1257 (1995)).
Jednak, fermentowane mleko zawierające laktotripeptydy produkowane przez fermentację mleka zwierzęcego z tradycyjnymi szczepami Lactobacillus helveticus z trudem można spożywać takim jakie ono jest, ponieważ wykazuje wysoką kwasowość na skutek dużej ilości kwasu mlekowego tworzonego w miarę postępu fermentacji. Rozcieńczenie fermentowanego mleka skutkuje ogromnym obniżeniem zawartości laktotripeptydów.
Pożądane jest zatem wytwarzanie fermentowanego mleka z wyższą zawartością laktotripeptydów w porównaniu z zawartością kwasu mlekowego generowanego w fermentowanym mleku. Przy dodatku małej ilości tak fermentowanego mleka do różnej żywności i napojów, produkty zawierające funkcje laktotripeptydowe mogą być sporządzone z łatwością zapewniając konsumentowi smaczną postać spożywanego produktu.
Jednak, żaden ze znanych szczepów bakterii kwasu mlekowego nie wytwarza laktotripeptydow z dużą wydajnością.
Przedmiotem wynalazku jest nowy szczep bakterii kwasu mlekowego - Lactobacillus helveticus CM4 zdeponowany pod numerem FERM BP-6060 w National Institute of Bioscience and Human-Technology Agency of Industrial Science and Technology dnia 15 sierpnia 1997.
Szczep według wynalazku korzystnie posiada chromosomalny DNA, który, po trawieniu enzymami restrykcyjnymi Pstl i EcoRI, daje fragment DNA o 15 do 17 kb (kilo zasadach).
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest fermentowany produkt mleczny zawierający bakterie kwasu mlekowego opisane powyżej i tripeptyd wybrany z grupy obejmującej ValPro-Pro, Ile-Pro-Pro i ich mieszaniny.
Fermentowany produkt mleczny według wynalazku korzystnie dodatkowo zawiera kwas DL-mlekowy, przy czym ilość tripeptydu w przeliczeniu na Val-Pro-Pro na 0,01 g kwasu DLmlekowego wynosi od 30 do 50 pg.
Pożądane jest, aby produkt według wynalazku zawierał żywe bakterie.
Fermentowany produkt mleczny według wynalazku korzystnie stanowi produkt z fermentowanego mleka z grupy obejmującej jogurt, napoje z kwaśnego mleka, ser, przetwarzaną żywność zawierającą fermentowane kwaśne mleko i zdrową żywność zawierającą fermentowane kwaśne mleko.
Następnym przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania fermentowanego produktu mlecznego opisanego powyżej, w którym poddaje się fermentacji pożywkę zawierającą materiał żywnościowy dobrany z grupy obejmującej peptyd, białko i ich mieszaniny obejmujące sekwencje Val-Pro-Pro i Ile-Pro-Pro, z bakteriami kwasu mlekowego według wynlazku.
Korzystnie, jako materiał żywnościowy stosuje się mleko zwierzęce, kazeinę mleczną, białko kukurydziane, pszenicę, białko pszeniczne, ziarna sojowe, mleczko sojowe, odtłuszczone ziarna sojowe, białko sojowe i ich mieszaniny.
Korzystnie, fermentację prowadzi się w temperaturze 25-50°C przez okres 6 do 60 godzin.
Korzystnie, fermentację prowadzi się do ilości wyprodukowanych tripeptydów Val-ProPro i Ile-Pro-Pro w otrzymanym fermentowanym mleku wynoszącej 60 pg w przeliczeniu na Val-Pro-Pro na ml.
Przedmiot wynalazku w przykładzie wykonania jest odtworzony na rysunku, na którym fig. 1 przedstawia fotografię pokazującą wzór elektroforezy na zelu agarozowym fragmentów chromosomalnego DNA różnych szczepów Lactobacillus helveticus z przykładu 2.
Bakterie kwasu mlekowego według wynalazku należą do Lactobacillus helveticus i produkują tripeptydy Val-Pro-Pro i Ile-Pro-Pro w ilości nie mniejszej niż 60 |ig, a korzystnie nie mniejszej niz 70 ng w przeliczeniu na Val-Pro-Pro na ml pożywki w hodowli w pożywce
188 675 z mleka zwierzęcego zawierającego w odtłuszczonym mleku 9% wagowo ciał stałych i wykazują pozakomórkową aktywność proteinazy nie mniejszą niż 400 j/OD590, a korzystnie nie mniejszą niż 430 j/OD590. Zdefiniowana produktywność laktotripeptydu jest wskaźnikiem odróżniającym obecne bakterie kwasu mlekowego od tradycyjnych bakterii kwasu mlekowego Lactobacillus helveticus. Na przykład, wskaźnik ten definiuje właściwość obecnych bakterii kwasu mlekowego do produkowania, w hodowli prowadzonej w mleku zwierzęcym zawierającym w odtłuszczonym mleku 9% wagowo ciał stałych, laktotripeptydy w ilości nie mniejszej niż 60 pg w przeliczeniu na VPP na ml pożywki, czego nie można uzyskać przy tradycyjnych bakteriach kwasu mlekowego. Zwykle im niższa jest zawartość ciał stałych w odtłuszczonym mleku w pożywce hodowlanej, tym mniejsza jest ilość produkowanych laktotripeptydów. Im wyższa jest zawartość ciał stałych w odtłuszczonym mleku tym wyższa jest zawartość laktotripeptydów.
Produktywność laktotripeptydów jako wskaźnik mierzona poprzez etapy szczepienia bakteriami mlekowymi mleka zwierzęcego, takiego jak mleko krowie, mleko kozie, mleko kobyle i odtłuszczone mleka, zawierające 9% ciał stałych w odtłuszczonym mleku, hodowania bakterii w temperaturze 37°C przez 24 godziny do sporządzenia mleka fermentowanego, wirowania 1 ml fermentowanego mleka przy 15.000 obrotach/minutę przez 10 minut, poddania supernatantu oznaczeniom ilości VPP i IPP oraz przekształcenia tej ilości na ilość VPP. Przekształcona ilość laktotripeptydu w przeliczeniu na VPP obliczana jest za pomocą następującego równania, ponieważ inhibitująca ACE aktywność IPP na jednostkę wagi wynosi 1,7 krotność aktywności VPP.
Przekształcona ilość laktotripeptydu (pg w przeliczeniu na VPP na ml) = ilość IPP (pg/ml) x 1,7 + ilość VPP (pg/ml).
Maksymalna produktywność laktotripeptydów nie jest ograniczona w jakiś szczególny sposób, ale może być osiągnięta, gdy wszystkie Val-Pro-Pro i Ile-Pro-Pro zawarte jako sekwencje w białku pożywki zostaną pobrane jako tripeptydy przez trawienie.
Pozakomórkową aktywność proteinazy mierzy się metodą Yamamoto i wsp. (N.Yamamoto i wsp. J.Biochem. (1993)114, 780) opartą na metodzie Twining i wsp. (S.Twining, Anal. Biochem. 143, 3410 (1984)) oraz wyraża za pomocą określenia ilości enzymu inhibitującego 1% intensywności fluorescencyjnej, jako wynoszącą 1 j/OD590. Górny limit pozakomórkowej aktywności proteinazy również nie jest ograniczony, ale zwykle wynosi 800 j/OD590.
Bakterie kwasu mlekowego według wynalazku mogą produkować dużą ilość laktotripeptydu w odniesieniu do ilości kwasu mlekowego generowanego podczas fermentacji. Zatem fermentacja przy użyciu obecnych bakterii kwasu mlekowego daje fermentowane mleko zawierające większą ilość laktotripeptydów w porównaniu z fermentowanym mlekiem zawierającym podobną ilość kwasu mlekowego sporządzonego z tradycyjnymi bakteriami kwasu mlekowego. Kwas mlekowy z uwagi na taką fermentację jest kwasem DL-mlekowym. Ilość laktotrupeptydu produkowanego przez fermentację z obecnymi bakteriami kwasu mlekowego, korzystnie nie jest mniejsza niż 30 pg w przeliczeniu na VPP na ml otrzynanego fermentowanego mleka zawierającego 0,01 g/ml kwasu DL-mlekowego wytworzonego podczas fermentacji. Górna granica ilości laktotripeptydu nie jest ograniczona w jakiś szczególny sposób, ale bakterie mogą produkować około 50 pg w przeliczeniu na VPP na ml fermentowanego mleka zawierającego 0,01 g kwasu DL-mlekowego. Ilość kwasu DL-mlekowego jest z grubsza proporcjonalna do ilości laktotripeptydów. Tak więc, na przykład, gdy w 1 ml fermentowanego mleka wytworzone jest 0,02 g kwasu DL-mlekowego, to ilość wytworzonych laktotripeptydów korzystnie nie jest mniejsza niż 60 pg w przeliczeniu na VPP. W przeciwieństwie do tego, przez fermentację z tradycyjnymi bakteriami kwasu mlekowego ilość laktotripeptydów jest co najwyżej mniejsza niż 30 pg w przeliczeniu na 0,01 g kwasu DL-mlekowego w 1 ml fermentowanego mleka.
Szczep Lactobacillus helveticus CM4 zdeponowany jako FERM BP-6060 w National Institute of Bioscience and Human-Technology Agency of Industrial Science and Technology (zdeponowany 15 sierpnia 1997) ma następujące właściwości bakteriologiczne:
I Własności morfologiczne:
1) kształt komórki: pałeczka
188 675
2) ruchliwość: brak
3) tworzenie zarodników: brak
4) zabawienie metodą Grama: dodatnie
II. Własności fizjologiczne:
1) produkcja katalazy: wynik ujemny
2) produkcja indolu: wynik ujemny
3) produkcja azotanów: wynik ujemny
4) wzrost aerobowy; fakultatywnie anaerobowy
5) tworzenie kwasu DL-mlekowego z glukozy przez fermentację homolaktyczną bez tworzenia gazów
6) rozkład węglowodanów: glukoza: + laktoza: + mannoza: + fruktoza: + galaktoza: + sacharoza: maltoza: ksyloza:ramnoza: celobioza: trehaloza: melibioza: rafmoza: stachyloza: mannitol: sorbitol: eskulina: salicyna: Wyżej wymienione własności bakteriologiczne szczepu CM4 są identyczne ze znanym szczepem Lactobacillus helveticus NCDO-099 przy badaniu metodą Mitsuoka i wsp. (Rinshoukensa 18, 1163 (1974)). Jednak, w odniesieniu do następujących własności, których nie ma u Mitsuoki i wsp., CM$ jest wyraźnie wyróżniony od NCDO-099.
7) zewnątrzkomórkowa aktywność proteinazy: nie mniejsza niż 400 J/OD590
8) produktywność laktotripeptydu: produkowanie dwóch rodzajów tripeptydów (VPP i IPP) w ilości 60 pg lub więcej w przeliczeniu na VPP na ml fermentowanej cieczy, gdy hodowlę prowadzi się w pożywce zawierającej 9% wagowo chudego mleka w temperaturze 37°C przez 24 godziny.
Produktywność laktotripeptydów w punkcie 8) mierzy się przy użyciu chudego mleka w postaci mleka stałego odtłuszczonego.
Szczep bakterii kwasu mlekowego według wynalazku można otrzymać poprzez następujący skrining i pomiar pozakomórkowej aktywności proteinazy.
1) Wstępny skrining (Selekcja szczepu przez pomiar wysokiej aktywności inhibitującej ACE w fermentowanym mleku)
Szczepy do skriningu hoduje się w pożywce z 9% wagowo chudego mleka w temperaturze 37°C przez 24 godziny. Po zakończeniu hodowli oznacza się liczbę bakterii kwasu mlekowego, kwasowość kwasu mlekowego i aktywność inhibitującą ACE. Wybiera się szczepy produkujące 1 x 108 komórek/ml lub więcej bakterii kwasu mlekowego i wykazujące kwasowość kwasu mlekowego 1,6% wagowo lub więcej oraz aktywność inhibitującą ACE 40 j/ml lub więcej. Inhibitującą aktywność ACE mierzy się metodą Cushmana i Cheunga (D.W.Cushman i H.S.Cheung, Pharmacol. 20, 1637 (1971)).
2) Wtórny skrining (Selekcja szczepu o wysokiej produktywności laktotripeptydu)
188 675
Ciecze z hodowli szczepów wyselekcjonowanych w skriningu wstępnym odwirowuje się z szybkością 15.000 obrotów/minutę przez 10 minut i ich supematanty poddaje się chromatografii HPLC w celu ilościowego oznaczenia laktotripeptydu. Wybiera się szczepy, które produkują nie mniej niż 50 ng w przeliczeniu na VPP na ml.
3) Pomiar pozakomórkowej aktywności proteinazy
Każdy ze szczepów wyselekcjonowany we wtórnym skriningu hoduje się w pożywce z chudego mleka utrzymując pH 6. Próbkę pobiera się w środku logarytmicznej fazy wzrostu i miesza z 1% wagowo cytrynianem sodu i odwirowuje z szybkością. 5.000 obrotów/minutę przez 10 minut w celu zebrania komórek. Zebrane komórki przemywa się 50 mmolami kwasu β-ghcerofosforowego i zawiesza w 50 mmolach buforu Tris-HCl (pH 7,8) doprowadzając zmętnienie (OD590) do 1. Po czym mierzy aktywność proteinazy na powierzchni komórki. Zostanie potwierdzone, ze wynik jest skorelowany z produktywnością szczepów mierzoną we wtórnym skriningu.
Szczep bakterii kwasu mlekowego Lactobacillus helveticus wyselekcjonowany powyższą metodą może zostać zidentyfikowany i wyróżniony od innych szczepów bakterii kwasu mlekowego za pomocą np. wyżej wymienionej produktywności laktotripeptydu i zewnętrzkomórkowej aktywności proteinazy.
Bakteria kwasu mlekowego według wynalazku korzystnie ma, poza wyżej wymienioną produktywnością laktotripeptydów i zewnątrzkomórkową aktywność proteinazy, chromosomalne DNA, które daje fragmenty DNA o 15 do 17 kb podczas trawienia chromosomalnego DNA enzymami restrykcyjnymi Pstl i EcoRI. Zatem, bakteria kwasu mlekowego według wynalazku może być wyraźnie odróżniona od innych szczepów tego samego gatunku przez zbadanie czy szczep ma chromosomalne DNA, które daje taki fragment DNA.
Istnienie fragmentu DNA o 15 do 17 kb może być potwierdzone przez ekstrakcję chromosomalnego DNA z bakterii kwasu mlekowego według metody Leenhouts i wsp. (K.Leenhouts (1990) Appl. Environ.Microbiol. 56:2726), trawienie chromosomalnego DNA za pomocą EcoRI 1 Pstl, przeprowadzenie elektroforezy na 0,8% żelu agarozowym i zanalizowanie otrzymanego wzoru elektroforezy. Po elektroforezie, istnienie fragmentów DNA jest wyraźnie potwierdzone przez poddanie równoległej elektroforezie a fagu DNA trawionemu enzymem restrykcyjnym Hind III jako markerowi miejsca.
Fermentowany produkt mleczny według wynalazku zawiera, jako składnik konieczny, fermentowane mleko zawierające bakterie kwasu mlekowego i tripeptyd z grupy obejmującej VPP i IPP oraz ich mieszaniny. Zatem, fermentowany produkt mleczny według wynalazku zawiera fermentowane mleko zawierające laktotripeptydy i bakterie kwasu mlekowego, i sporządzone jest przez fermentację pożywki zawierającej materiał żywnościowy składający się z peptydów i/lub protein z włączoną sekwencją VPP i/lub IPP bakteriami kwasu mlekowego według wynalazku. Tak więc, można z łatwością dobrać zawartości bakterii kwasu mlekowego i tripeptyd w zależności od rodzaju sporządzanego produktu z fermentowanego mleka.
Fermentowany produkt mleczny według wynalazku zawiera kwas DL-mlekowy tworzony podczas fermentacji. Fermentowany produkt mleczny według wynalazku, korzystnie, zawiera laktotripeptydy w ilości 30 do 50 pg w przeliczeniu na VPP w odniesieniu do 0,01 g kwasu DL-mlekowego. Ilość kwasu DL-mlekowego jest z grubsza proporcjonalna do ilości laktotripeptydu. Zatem, jeśli fermentowany produkt mleczny zawiera zatężone mleko fermentowane i zawiera np. 0,02 g kwasu DL-mlekowego, ilość laktotripeptydu korzystnie jest w zakresie 60 do 100 pg w przeliczeniu na VPP. Jeśli fermentowany produkt mleczny zawiera rozcieńczone mleko fermentowane i zawiera np. 0,005 g kwasu DL-mlekowego, ilość laktotripeptydu korzystnie wynosi 15 do 25 pg w przeliczeniu na VPP. Chociaż fermentowany produkt mleczny według wynalazku może zawierać kwas L-mlekowy, który jest dodatkiem do żywności służącym do regulowania kwasowości, ten kwas L-mlekowy należy odróżnić od kwasu DL-mlekowego tworzonego podczas fermentacji.
Bakterie kwasu mlekowego w fermentowanym produkcie mlecznym według wynalazku mogą być bądź sterylizowane po fermentacji bądź w stanie żywym, bez sterylizacji.
Fermentowanym produktem mlecznym według wynalazku może być jogurt, zakwaszone napoje zawierające mleko, ser, przetwarzana żywność zawierająca fermentowane kwaśne mleko i zdrowa żywność zawierająca fermentowane mleko. Zatem, fermentowany produkt mleczny według wynalazku może zawierać, poza fermentowanym mlekiem jako koniecznym
188 675 składnikiem, różne materiały, które zwykle dodaje się do produkcji takich różnych produktów. Fermentowany produkt mleczny według wynalazku może być w postaci stałej takiej jak proszki, granulki i tabletki lub w postaci płynnej takiej jak pasta, żel i ciecz.
Sposób wytwarzania fermentowanych produktów mlecznych według wynalazku obejmuje fermentowanie za pomocą bakterii kwasu mlekowego pożywki zawierającej materiał żywnościowy wybrany z grupy złożonej z peptydów, protein i ich mieszanin zawierających Val-Pro-Pro i/lub Ile-Pro-Pro jako część ich sekwencji.
Materiał żywnościowy w pożywce może być dowolnego rodzaju o ile zawiera peptydy i/lub proteiny w tym, jako część ich sekwencji, VPP i/lub IPP. Przykładowym takim materiałem może być mleko zwierzęce, kazeina mleczna, kukurydza, białko kukurydziane, pszenica, białko pszenicy, soja, mleko sojowe, odtłuszczone mleko sojowe, białko sojowe lub ich mieszaniny. Zwłaszcza korzystne jest stosowanie materiału żywnościowego zawierającego mleko zwierzęce takie jak mleko krowie, mleko kozie, mleko klaczy lub ich chude mleka. Zawartość ciał stałych w odtłuszczonym mleku zwierzęcym nie jest w szczególny sposób limitowana, ale zwykle wynosi 5 do 20% wagowo.
Nie ma szczególnego ograniczenia ilości bakterii kwasu mlekowego, którymi szczepi się pożywkę. Ilość stosowana do szczepienia zwykle wynosi 105 do łO7 komórek bakterii kwasu mlekowego na 1 g wyżej wymienionego materiału żywnościowego w pożywce.
Fermentacje prowadzi się w temperaturze 25 do 50°C, korzystnie 30 do 45°C, przez 6 do 30 godzin a korzystnie 10 do 24 godzin, przy pH w zakresie 3,0 do 4,0 a korzystniej 3,0 do 3,5.
Fermentację korzystnie prowadzi się tak, aby ilość laktotripeptydów była nie mniejsza niz 60 |ig w przeliczeniu na VPP na ml otrzymanego fermentowanego mleka. W szczególności, gdy jako pożywkę stosuje się mleko krowie zawierające 9% ciał stałych w mleku odtłuszczonym, z fermentacji w temperaturze 25 do 40°C otrzymuje się sfermentowane mleko zawierające laktoripeptydy w ilości nie mniejszej niz 70 gg w przeliczeniu na VPP na ml. Zawartość ciał stałych w odtłuszczonym mleku w pożywce jest z grubsza proporcjonalna do produkowanych laktotripeptydów. Na przykład, jeśli materiał żywnościowy zawiera 5% wagowo ciał stałych w odtłuszczonym mleku, fermentacja zgodna z wyżej wymienionymi warunkami dawałaby produkcję laktotripeptydów w ilości około 33,3 pg w przeliczeniu na VPP na ml.
Fermentowane mleko otrzymane przez wyżej wymienioną fermentację może być zmieszane z produktem takim jakim jest. Ewentualnie, fermentowane mleko może być poddane rozcieńczaniu lub oczyszczaniu przed zmieszaniem. Fermentowane mleko można ochłodzić i przechowywać w temperaturze 5°C, a następnie zmieszać z innymi komponentami otrzymując produkt mrożony. Alternatywnie, fermentowane mleko może być poddane sterylizacji i ewentualnie proszkowane przez suszenie rozpyłowe sporządzając produkt do rozprowadzania w zwykłej temperaturze.
Ponieważ fermentowany produkt mleczny według wynalazku zawiera fermentowane mleko otrzymane przez fermentację z bakteriami kwasu mlekowego, z łatwością może on być stosowany do sporządzania produktów o wysokiej zawartości laktotripeptydu w odniesieniu do zawartości kwasu mlekowego, w postaci przyjemnej do spożycia. Oczekuje się, że fermentowany produkt mleczny spożyty przez człowieka wykaże działanie obniżające ciśnienie i przeciwstresowe.
Ponieważ bakterie kwasu mlekowego według wynalazku mogą produkować dużą ilość laktotripeptydu przez hodowanie ich w danym materiale żywnościowym, bakterie te są przydatne do produkowania różnych fermentowanych produktów mlecznych, żywności o określonej funkcji, zdrowej żywności, żywności o szczególnym działaniu zdrowotnym, żywności przeznaczonej dla ludzi starych i materiałów dla takich produktów mających laktotripeptydowe działanie obniżające ciśnienie i działanie łagodzące stres.
Wynalazek zostanie bliżej wyjaśniony w ponizszych przykładach, ale nie jest do nich ograniczony. Wśród szczepów Lactobacillus helveticus stosowanych w przykładach, szczep CM4 został zdeponowany w National Institute of Bioscience and Human-Technology Agency of Industrial Science and Technology i został zarejetrowany za numerem dostępu FERM BP-6060. Ogólnie dostępnymi szczepami są ATCC15009, NCDO-099, JCM1006, ATCC10797, JCM1062, JCMH03, JCM1120 i JCM1004. Szczepy inne niż wyżej wymienione, stosowane w przykładach są szczepami wybranymi z koleksji zgłaszającego.
188 675
Przykład 1 (Selekcja szczepów dających fermentowane mleko o wysokiej aktywności inhibitującej ACE).
Poddano skriningowi 36 szczepów Lactobacillus helveticus wyodrębnionych z różnych produktów mleczarskich. Aktywność inhibitującą ACE fermentowanego mleka każdego ze szczepów oznaczano za pomocą następującej procedury. Każdy ze szczepów Lactobacillus helveticus hodowano w pożywce z odtłuszczonego mleka i zawartości ciał stałych 9% wagowo, w temperaturze 37°C przez 24 godziny. Pożywkę hodowlaną dodano do świeżej pożywki tego samego rodzaju w takiej ilości, że nowa pożywka zawiera 3% wagowo pożywki hodowlanej. Fermentację prowadzono dalej w temperaturze 37°C przez 24 godziny. Po zakończeniu fermentacji oznaczono kwasowość kwasu mlekowego (% wagowo), ilość peptydu w serwatce (mg/ml), liczbę komórek i aktywność inhibitującą ACE (j/ml). Wyniki przedstawiono w tabeli 1. Z 36 szczepów 7, szczepów miało bardzo słabą zdolność fermentacji, 15 szczepów produkowało fermentowane mleko z wytworzoną kwasowością kwasu mlekowego nie mniejszą niż 1,6% wagowo. Z 15 szczepów, wyselekcjonowano 8 szczepów, które miały aktywność inhibitującą ACE nie mniejszą niż 40 j/ml serwatki w fermentowanym mleku.
(Pomiar aktywności inhibitującej ACE fermentowanego mleka) Aktywność inhibitującą ACE mierzono metodą Cushmana i Cheunga (D.W.Cushman i H.S.Cheung, Pharmacol. 20, 1637 (1971)). To znaczy, każde fermentowane mleko wirowano z szybkością 15.000 obrotów/minutę przez 5 minut do otrzymania supernatantu (serwatka). Serwatkę do oznaczenia odpowiednio rozcieńczono. 80 pl rozcieńczonej serwatki umieszczono w probówce, dodano buforu 0,2 ml 0,1 molowego kwasu borowego (zawierającego 0,3 mola NaCl, pH 7,3) zawierającego 5 mmola hippurylu histydyny leucyny (Hip-His-Leu) produkowanej przez SIGMA CHEMICALS CO.) jako substratu, i dalej dodano 20 pl roztworu enzymu (0,1 j/ml, produkowanego przez SIGMA CHEMICALS CO.). Uzyskana mieszanina reagowała w temperaturze 37°C przez 30 minut, a następnie dodano 250 pl 1 n kwasu solnego w celu zakończenia reakcji. Następnie, mieszaninę zmieszano z 1,7 ml octanu etylu, mieszano przez 20 sekund, po czym wirowano z szybkością 3.000 obrotów/minutę odzyskując 1,4 ml fazę octanu etylu (faza górna). Górną fazę ogrzewano w temperaturze 120°C przez, 40 minut dla usunięcia rozpuszczalnika, zmieszano z 1 ml wody destylowanej i mieszano przez około 20 sekund. W wyesktrahowanym kwasie hippurynowym oznaczono absorbancję przy 228 nm. Aktywność enzymu w jednostkach obliczono z następującego równania, przy czym ilość, która daje 50% inhibicję aktywności ACE oznaczono jako jedną jednostkę.
Ilość enzymu (jednostka) = (A-B)/(A-C) x 100 x 1/50
A: absorbancja przy 228 nm bez próbki
B: absorbancja przy 228 nm z próbką
C: absorbancja przy 228 nm bez enzymu i bez próbki (Ilościowa analiza ilości peptydów w fermentowanym mleku) Analizę ilościową peptydów przeprowadzono według metody OPA (F.C.Charch i wsp. J.Dairy Sci. 66, 1219 (1883). Jako substancje standardową dla utworzenia krzywej kalibracji stosowano kazeinę trawioną trypsyną.
Tabela 1
| Szczepy | Kwasowość (% wagowo) | Ilość peptydów (mg/ml) | Liczba komórek (x 108 komórek/ml) | Aktywność inhibitującą ACE (j/ml) |
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| szczep 1 | - | - | - | - |
| szczep 2 | - | - | - | - |
| szczep 3 | - | - | - | - |
| szczep 4 | - | - | - | - |
| szczep 5 | - | - | - | -. |
188 675
c.d.tabeli 1
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| szczep 6 | - | - | - | - |
| szczep 7 | - | - | - | - |
| szczep 8 | 0,498 | 1,59 | 0,29 | 26,4 |
| szczep 9 | 2,022 | 1,99 | 9,53 | 34,5 |
| szczep 10 | 1,709 | 2,10 | 8,53 | 24,5 |
| szczep 11 | 0,615 | 1,76 | 1,28 | 29,1 |
| szczep 12 | 0,411 | 1,35 | 0,38 | 17,6 |
| szczep 13 | 0,917 | 1,57 | 3,63 | 19,9 |
| szczep 14 | 1,026 | 1,71 | 5,78 | 9,4 |
| szczep 15 | 0,517 | 1,59 | 0,56 | 26,9 |
| szczep 16 | 1,532 | 4,69 | 5,97 | 102,5 |
| szczep 17 | 2,101 | 2,01 | 6,09 | 98,9 |
| szczep 18 | 1,783 | 1,94 | 5,39 | 21,9 |
| szczep 19 | 1,955 | 1,69 | 5,31 | 100,6 |
| szczep 20 | 2,095 | 1,74 | 7,16 | 61,4 |
| szczep 21 | 1,963 | 2,03 | 6,05 | 125,3 |
| szczep 22 | 1,798 | 2,85 | 6,19 | 54,2 |
| szczep 23 | 1,604 | 2,32 | 6,81 | 36,6 |
| szczep 24 | 1,932 | 1,77 | 7, 97 | 47,7 |
| szczep 25 | 1,885 | 1,51 | 4,91 | 18,3 |
| szczep 26 | 1,862 | 1,46 | 5,69 | 26,2 |
| szczep 27 | 1,063 | 3,01 | 2,78 | 76,9 |
| szczep 28 | 0,457 | 1,98 | 0,50 | 52,4 |
| szczep 29 | 0,516 | 2,55 | 1,13 | 92,6 |
| JCM1006 | 1,872 | 2,35 | 6,97 | 48,5 |
| JCM1062 | 1,109 | 2,60 | 8,50 | 78,4 |
| JCM1103 | 1,244 | 1,36 | 3,69 | 31,0 |
| ATCC 10797 | 1,359 | 2,11 | 8,56 | 13,8 |
| ATCC 15009 | 1,454 | 1,81 | 5,16 | 16,6 |
| NCDO-099 | 1,769 | 2,76 | 6,59 | 25,5 |
| CM4 | 1,635 | 3,12 | 4,44 | 130,0 |
(Selekcja szczepów o wysokiej produktywności laktotripeptydow)
188 675
W następnej kolejności, 8 szczepów wyselekcjonowanych powyżej, które dały fermentowane mleko o wysokiej aktywności inhibitującej ACE oznaczono na zawartość VPP i IPP w fermentowanym mleku.
ml fermentowanego mleka wirowano z szybkością 15.000 obrotów/minutę przez 10 minut. Zebrano z niego supernatant, tj. serwatkę. 0,3 ml serwatki poddano adsorpcji stosując Sep-Pak Cartridge (produkcji WATERS INC.), przemyto wodą destylowaną a następnie wyeluowano stosując 5 ml metanolu. Eluat osuszono w warunkach wirowania i obniżonego ciśnienia. Wysuszony produkt rozpuszczono w 0,3 ml 0,05% wodnego roztworu kwasu trifluorooctowego i poddano analizie na HPLC (wysokosprawna chromatografia cieczowa) w następujących warunkach.
Wyniki przedstawiono w tabeli 2
Stosowane urządzenie:
Hitachi L4000UV detektor (przy 215 nm)
L6200 pompa inteligentna
L5030 grzejnik kolumny (35°C)
Warunki elucji: szybkość przepływu 0,5 ml/minutę
Eluent: wodny roztwór zawierający 0,3 molowy NaCl i 0,05% kwas trifluorooctowy
Kolumna: Asahipak GS320 (φ 3,9 x 600 mm)
Ponieważ inhibitująca ACE aktywność IPP na jednostkę wagi jest 1,7 krotnością wartości dla VPP, ilość laktotripeptydów w przeliczeniu na VPP obliczono ze zmierzonych ilości IPP i VPP według następującego równania. Wyniki przedstawiono w tabeli 2.
Przekształcona ilość laktotripeptydu (pg w przeliczeniu na VPP na ml) = ilość IPP (pg/ml) x 1,7 + ilość VPP (pg/ml)
Tabela 2
| Szczepy | Ilość peptydu (pg/ml serwatki) | Kwasowość (% wagowo) | ||
| VPP | IPP | Ilość laktotripeptydu w przeliczeniu na VPP | ||
| szczep 17 | 15,2 | 11,1 | 34,0 | 1,5 |
| szczep 19 | 11,2 | 7,3 | 23,7 | 1,4 |
| szczep 20 | 13,0 | 8,1 | 26,8 | 1,6 |
| szczep 21 | 16,6 | 11,4 | 36,0 | 1,6 |
| szczep 22 | 15,8 | 12,1 | 36,3 | 1,5 |
| szczep 24 | 12,6 | 8,7 | 27,4 | 1,6 |
| JCM1006 | 12,9 | 9,3 | 28,6 | 1,3 |
| CM4 | 38,5 | 23,5 | 78,5 | 1,9 |
Mleko fermentowane CM4 miało największą ilość w przeliczeniu na VPP, to znaczy
78,5 pg/ml serwatki. Innych 7 szczepów miało przeciętną ilość 34,2 pg/ml serwatki.
(Pomiar proteinazy pozakomórkowej)
Aktywność proteinazy pozakomórkowej oznaczano na 16 szczepach, które dały stosunkowo dobre wyniki w odniesieniu do zdolnoci fermentacji przedstawione w tabeli 1. Oznaczenie przeprowadzono metodą Yamamoto i wsp. (N.Yamamoto i wsp. J.Biochem. (1993) 114, 740) na bazie metody Twining i wsp (S,Twining, Anal.Biochem. 143, 3410 (1984)). To znaczy, każdy szczep hodowano w pożywce 9% chudego mleka, utrzymując jego pH na poziomie 6,0 Próbkę pobrano pośrodku fazy logarytmicznego wzrostu, i zmieszano z cytrynianem sodu do końcowego stężenia 1% wagowo, w celu sklarowania pożywki mlecznej. Mieszaninę wirowano z szybkością 5.000 obrotów/minutę przez 10 minut i odebrano komórki. Komórki przemyto 50 mmolami kwasu β-glicerofosforowego i zawieszono w 50 mmola bufo188 675 ru Tris-HCl (pH 7,8) dla doprowadzenia zmętnienia (OD590 tj. pomiar absorbancji przy 590 nm) do 1,30 pl zawiesiny zmieszano z 20 pl 0,4% fluorosceiny-kazeiny (produkcji SIGMA CHEMICALS CO.) i inkubowano w temperaturze 42°C przez 1 godzinę. Mieszaninę dalej zmieszano ze 120 pl 5% kwasu trichlorooctowego, odstawiono na 20 minut, i wirowano z szybkością 15.000 obrotów/minutę przez 10 minut. 60 pl supernatantu dodano do 3 ml 500 mmolowego buforu tris-HCl (pH 8,3) i zmierzono intensywność fluorescencji za pomocą detekcji fluorescencji 525 nm tworzonej przez pobudzenie długością fali 490 nm. Pozakomórkową aktywność proteinazy w jednostkach obliczono z ilości enzymu, który wykazuje 1% intensywność fluorescencyjną w powyższych warunkach zdefiniowanych jako jedna jednostka. Wyniki przedstawiono w tabeli 3.
Tabela 3
| Szczepy | J/OD 590 |
| szczep 17 | 136,7 |
| szczep 18 | 102,8 |
| szczep 19 | 103,2 |
| szczep 20 | 89,9 |
| szczep 21 | 80,1 |
| szczep 22 | 243,3 |
| szczep 23 | 116,6 |
| szczep 24 | 116,6 |
| szczep 25 | 192,6 |
| szczep 26 | 108,4 |
| JCM1006 | 185,7 |
| JCM1062 | 96,5 |
| JCM1103 | 176,3 |
| ATCC15009 | 168,1 |
| ATCC10797 | 106,5 |
| NCDO-099 | 229,7 |
| CM4 | 452,6 |
Aktywność Lactobacillus helveticus CM4 była najwyższa, to znaczy 450 j/OD590 Przeciętna aktywność 16 innych szczepów wynosiła 141 j/OD590, co stanowi około jedną trzecią aktywności szczepu CM4.
Przykład 2
Z 11 szczepów spośród 36 szczepów Lactobacillus helveticus wyselekcjonowanych w przykładzie 1, wyekstrahowano chromosomalne DNA według metody Leenhoutsa i wsp. (K.Leenhouts, (1990) Appl. Envirin. Microbiol. 56:2726), trawiono kilkoma enzymami restrykcyjnymi i poddano elektroforezie na 0,8% żelu agarozowym dla zanalizowania wzoru elektroforezy.
W rezultacie, zaobserwowano charakterystyczny fragment DNA wśród fragmentów DNA chromosomu szczepu CM4 trawionego EcoRI i PstI (pokazane strzałką na fig. 1). Takiego fragmentu nie zaobserwowano we fragmentach chromosomów z innych szczepów niż CM4, a fragmenty krótsze niz charakterystyczne fragmenty CM4 zaobserwowano w większości innych szczepów (pokazanych strzałką 2 na fig. 1). Ciężar cząsteczkowy charakterystycz12
188 675 nego fragmentu zmierzono za pomocą elektroforezy porównawczej z produktami trawienia Hind III λ, faga DNA jako markerów rozmiarów (23,1 kb, 9,4 kb, 6,6 kb, 4,4 kb, 2,3 kb, 2,0 kb, w celu zwiększenia mobilności) i stwierdzono, ze wynosi w przybliżeniu 16 kb. Tak więc, potwierdzono, że szczep CM4 ma chromosomalne DNa, które daje fragment DNA o ciężarze cząsteczkowym około 16 kb, przez trawienie z EcoRI i Pstl. Potwierdzono również, że inne szczepy niz CM4 mają chromosomalne DNA, które mają wspólny fragment DNA o ciężarze cząsteczkowym około 13 kb.
Przykład 3
Wyprodukowano fermentowane mleko ze szczepem Lactobacillus helveticus CM4 wyselekcjonowanym w przykładzie 1. Szczep CM4 hodowano w 100 g 9% chudego mleka w temperaturze 37°C przez 12 godzin. W następnej kolejności 3 kg świeżej pożywki zaszczepiono hodowanym chudym mlekiem i hodowano w temperaturze 37°C przez 12 godzin. Po zakończeniu fermentacji, całe fermantowane mleko (liczba komórek szczepu CM4: 6,3 x 108 komórek/ml) użyto do zapoczątkowania fermentacji 100 kg 9% chudego mleka w temperaturze 32°C przez 20 godzin. Po zakończeniu fermentacji fermentowane mleko zawierało 74,8 pg/ml laktotripeptydów. Zawartość kwasu mlekowego wynosiła 1,9% wagowo.
kg otrzymanego mleka fermentowanego zmieszano z 4 kg granulowanego cukru, 3 kg wody i 0,15 kg metoksypektyny (wysokiej jakości) i homogenizowano otrzymując 50 kg jogurtu do picia. Napój jogurtowy miał korzystny, łagodny smak, pH 3,6 i 4,6 x 10 Komórek/g żywych komórek CM4.
Przykład 4
26,5 kg fermentowanego mleka otrzymanego w przykładzie 3 zmieszano z 45,0 kg granulowanego cukru, 4,7 kg syropu wysoko maltozowego i 13,8 kg wody. Do mieszaniny, podczas mieszania dodano 10 kg 3% wagowo roztworu wysoko metoksypektynowego. Otrzymaną mieszaninę homogenizowano za pomocą homogenizatora laboratoryjnego (produkowany przez ATV GAULIN, INC., Model 15M-8BA) przy ciśnieniu roboczym 150 kg/cm2 i roboczej szybkości przepływu 2500 ml/minutę. Ciecz homogenizowaną zmieszano z aromatem waniliowym i sterylizowano przez ogrzanie do temperatury 85°C. Tak wysterylizowane fermentowane mleko zapakowano na gorąco do 200 ml szklanych butelek. Oznaczono zawartość laktotripeptydu w fermentowanym produkcie mlecznym. Stwierdzono, że zawartość laktotripeptydow odpowiadała ich zawartości w fermentowanym mleku przed sterylizacją. Stwierdzono również, ze zawartość kwasu mlekowego wynosiła 0,5% wagowo.
188 675
188 675
Kieiurick elektiofoiczy
23kb—<
2'9.4kb~*
b.ćkbV + 4.4kb-*
2.2kb~*
2.0kb-*
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 50 egz. Cena 4,00 zł.
Claims (10)
- Zastrzeżenia patentowe1. Nowy szczep bakterii kwasu mlekowego - Lactobacillus helveticus CM4 zdeponowany pod numerem FERM BP-6060.
- 2. Szczep bakterii według zastrz. 1, znamienny tym, ze posiada chromosomalny DNA, któiy, po trawieniu enzymami restrykcyjnymi PstI i EcoRI, daje fragment DNA o 15 do 17 kb (kilo zasadach).
- 3. Fermentowany produkt mleczny, znamienny tym, że zawiera bakterie kwasu mlekowego opisane w zastrz. 1 i tripeptyd wybrany z grupy obejmującej Val-Pro-Pro, Ile-Pro-Pro i ich mieszaniny.
- 4. Fermentowany produkt mleczny według zastrz. 3, znamienny tym, że dodatkowo zawiera kwas DL-mlekowy, przy czym ilość tripeptydu w przeliczeniu na Val-Pro-Pro na 0,01 g kwasu DL-mlekowego wynosi od 30 do 50 pg.
- 5. Fermentowany produkt mleczny według zastrz. 3, znamienny tym, że zawiera żywe bakterie kwasu mlekowego opisane w zastrz. 1.
- 6. Fermentowany produkt mleczny według zastrz. 3, znamienny tym, że stanowi produkt z fermentowanego mleka z grupy obejmującej jogurt, napoje z kwaśnego mleka, ser, przetwarzaną żywność zawierającą fermentowane kwaśne mleko i zdrową żywność zawierającą fermentowane kwaśne mleko.
- 7. Sposób wytwarzania fermentowanego produktu mlecznego opisanego w zastrz. 3, znamienny tym, że poddaje się fermentacji pożywkę zawierającą materiał żywnościowy dobrany z grupy obejmującej peptyd, białko i ich mieszaniny obejmujące sekwencje Val-Pro-Pro i Ile-Pro-Pro, z bakteriami kwasu mlekowego opisanymi w zastrz. 1.
- 8. Sposób według zastrz. 7, znamienny tym, że jako materiał żywnościowy stosuje się mleko zwierzęce, kazeinę mleczną, białko kukurydziane, pszenicę, białko pszeniczne, ziarna sojowe, mleczko sojowe, odtłuszczone ziarna sojowe, białko sojowe i ich mieszaniny.
- 9. Sposób według zastrz. 7, znamienny tym, ze fermentację prowadzi się w temperaturze 25-50°C przez okres 6 do 60 godzin.
- 10. Sposób według zastrz. 7, znamienny tym, że fermentację prowadzi się do ilości wyprodukowanych tripeptydów Val-Pro-Pro i Ile-Pro-Pro w otrzymanym fermentowanym mleku wynoszącej 60 pg w przeliczeniu na Val-Pro-Pro na ml.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9277949A JP3028411B2 (ja) | 1997-09-26 | 1997-09-26 | トリペプチド高生産性ラクトバチルス・ヘルベチカス乳酸菌 |
| PCT/JP1998/000481 WO1999016862A1 (en) | 1997-09-26 | 1998-02-05 | Lactobacillus helveticus bacterium having high capability of producing tripeptide, fermented milk product, and process for preparing the same |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL339343A1 PL339343A1 (en) | 2000-12-18 |
| PL188675B1 true PL188675B1 (pl) | 2005-03-31 |
Family
ID=17590526
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL98339343A PL188675B1 (pl) | 1997-09-26 | 1998-02-05 | Nowy szczep bakterii kwasu mlekowego-Lactobacillus helveticus, fermentowany produkt mleczny oraz sposób wytwarzania fermentowanego produktu mlecznego |
Country Status (24)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US6534304B1 (pl) |
| EP (1) | EP1016709B1 (pl) |
| JP (1) | JP3028411B2 (pl) |
| KR (1) | KR100404154B1 (pl) |
| CN (1) | CN1149279C (pl) |
| AR (1) | AR017153A1 (pl) |
| AT (1) | ATE294230T1 (pl) |
| AU (1) | AU734422B2 (pl) |
| BG (1) | BG64422B1 (pl) |
| BR (1) | BR9813218A (pl) |
| CA (1) | CA2304985C (pl) |
| CZ (1) | CZ291067B6 (pl) |
| DE (1) | DE69829983T2 (pl) |
| ES (1) | ES2237834T3 (pl) |
| HU (1) | HU225980B1 (pl) |
| IN (1) | IN188418B (pl) |
| MY (1) | MY118157A (pl) |
| PL (1) | PL188675B1 (pl) |
| PT (1) | PT1016709E (pl) |
| SK (1) | SK284755B6 (pl) |
| TR (1) | TR200000854T2 (pl) |
| TW (1) | TW526268B (pl) |
| WO (1) | WO1999016862A1 (pl) |
| ZA (1) | ZA988659B (pl) |
Families Citing this family (53)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1142481B2 (en) * | 1999-01-11 | 2009-09-02 | Calpis Co., Ltd. | Process for producing fermented milk containing angiotensin converting enzyme inhibitory peptide and process for producing milk serum |
| FR2793257B1 (fr) * | 1999-05-06 | 2001-07-27 | Gervais Danone Sa | Bacteries lactiques a proprietes anxiolytiques, et leurs utilisations |
| FI113741B (fi) * | 1999-11-01 | 2004-06-15 | Valio Oy | Menetelmä verenpainetta alentavia peptidejä sisältävän tuotteen valmistamiseksi |
| JP4633876B2 (ja) * | 1999-11-11 | 2011-02-16 | カルピス株式会社 | トリペプチドの製造方法 |
| FI112031B (fi) | 2002-02-25 | 2003-10-31 | Valio Oy | Biologisesti aktiivisen tuotteen uusi käyttö |
| WO2003082019A2 (en) * | 2002-04-03 | 2003-10-09 | Chr. Hansen A/S | Peptides with anti-hypertensive properties |
| EP1529114A1 (en) * | 2002-08-09 | 2005-05-11 | Chr. Hansen A/S | Process for preparing peptides with anti-hypertensive properties |
| EA200501093A1 (ru) | 2003-01-06 | 2005-12-29 | Юнилевер Н.В. | ФЕРМЕНТИРОВАННЫЙ МОЛОЧНЫЙ ПРОДУКТ, СОДЕРЖАЩИЙ ТРИПЕПТИДЫ VPP (Val-Pro-Pro) И/ИЛИ IPP (Ile-Pro-Pro) |
| TWI411441B (zh) * | 2003-03-18 | 2013-10-11 | Suntory Holdings Ltd | 血管收縮素轉化酶抑制性肽類 |
| US7718171B2 (en) | 2003-04-07 | 2010-05-18 | Chr. Hansen A/S | Reducing heart rate in mammals using milk derived fermentation products produced using Lactobacillus helveticus |
| CA2523410A1 (en) * | 2003-05-05 | 2004-11-18 | Unilever Plc | Hydrolysed casein product comprising tripeptides ipp and/or vpp |
| JP4680571B2 (ja) * | 2003-12-25 | 2011-05-11 | カルピス株式会社 | 経口摂取用保湿剤 |
| TW200536552A (en) * | 2004-03-31 | 2005-11-16 | Calpis Co Ltd | Hepatopathy preventive or inhibitory agents and functional food for preventing or inhibiting hepatopathy |
| JP4891069B2 (ja) * | 2004-03-31 | 2012-03-07 | カルピス株式会社 | 内因性メラトニン分泌リズムの位相調整又は振幅増強剤、及び概日リズム改善剤 |
| JP4723501B2 (ja) * | 2004-07-05 | 2011-07-13 | カルピス株式会社 | ペプチド混合物の製造法、抗高血圧ペプチド含有発酵乳の製造法及び抗高血圧ペプチド製剤の製造法 |
| BRPI0514903A (pt) | 2004-09-03 | 2008-06-24 | Hansens Lab | proteìnas vegetais ou leite fermentado compreendendo ligando de receptor e uso dos mesmos |
| WO2006095764A1 (ja) * | 2005-03-09 | 2006-09-14 | Calpis Co., Ltd. | 皮膚における紫外線感受性抑制剤及び機能性飲食品 |
| CA2614111A1 (en) * | 2005-06-24 | 2006-12-28 | Calpis Co., Ltd. | Promoter of differentiation and keratinization of epidermic cell and functional beverage/food for promotion of keratinization of epidermis |
| CA2616789A1 (en) * | 2005-07-26 | 2007-02-01 | Calpis Co., Ltd. | Process for production of fermented milk and fermented milk beverage/food |
| CN1903052B (zh) * | 2005-07-26 | 2010-04-28 | 天津科技大学 | 具有酪蛋白磷酸肽、抗血管紧张素转化酶肽和低聚半乳糖乳清粉的制备方法 |
| KR20080095898A (ko) | 2006-02-14 | 2008-10-29 | 칼피스가부시키가이샤 | 혈관확장제 |
| KR101048663B1 (ko) * | 2006-02-14 | 2011-07-12 | 칼피스가부시키가이샤 | 동맥경화 예방제, 혈관 내막의 비후 억제제 및 혈관 내피 기능 개선제 |
| EP1820851B9 (fr) | 2006-02-20 | 2012-06-27 | Compagnie Gervais Danone | Souches de Lactobacillus helveticus ne fermentant pas le lactose |
| PT1820850E (pt) * | 2006-02-20 | 2009-05-29 | Gervais Danone Sa | Novas estirpes de lactobacillus helveticus |
| EP1820405B1 (fr) * | 2006-02-20 | 2011-03-30 | Compagnie Gervais Danone | Nouvelles souches de Lactobacillus Helveticus |
| ATE421572T1 (de) * | 2006-02-20 | 2009-02-15 | Gervais Danone Sa | Neue stämme von lactobacillus helveticus |
| CN101443031A (zh) | 2006-05-15 | 2009-05-27 | 瓦利奥有限公司 | 治疗用肽的新应用 |
| WO2007144770A2 (en) | 2006-06-16 | 2007-12-21 | Danisco A/S | Bacterium |
| KR101492650B1 (ko) | 2006-09-04 | 2015-02-12 | 유키지루시 메그밀크 가부시키가이샤 | 혈중 아디포넥틴 농도 증가 촉진 및/또는 감소 억제제 및 내장 지방 축적 억제제 |
| JP2008214253A (ja) | 2007-03-02 | 2008-09-18 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | 内臓脂肪減少剤 |
| TWI414305B (zh) * | 2007-03-27 | 2013-11-11 | Calpis Co Ltd | 腎衰竭預防劑 |
| EP2130546B1 (en) * | 2007-03-27 | 2013-02-27 | Calpis Co., Ltd. | Tripeptides for use in treating heart wall thickening |
| AU2009256950A1 (en) * | 2008-06-12 | 2009-12-17 | Nestec S.A. | Lactobacillus helveticus strains for producing hypotensive peptides |
| ES2381426T3 (es) * | 2008-12-29 | 2012-05-28 | Unilever N.V. | Productos de confitura congelados y bebidas que comprenden teobromina y cafeína |
| WO2011095389A1 (en) * | 2010-02-04 | 2011-08-11 | Unilever Nv | Use of theobromine for lowering central blood pressure |
| CA2798911C (en) | 2010-05-19 | 2018-07-03 | Unilever Plc | Theobromine for increasing hdl-cholesterol |
| JP2010183918A (ja) * | 2010-06-01 | 2010-08-26 | Calpis Co Ltd | トリペプチドの製造方法 |
| JP5797891B2 (ja) * | 2010-11-09 | 2015-10-21 | カルピス株式会社 | Ｎｏｎ−ｄｉｐｐｅｒ型血圧日内変動による疾病発症リスク軽減剤 |
| JP5888701B2 (ja) * | 2010-11-09 | 2016-03-22 | アサヒグループホールディングス株式会社 | 高タンパク質分解活性を有するラクトバチルス・ヘルベティカス菌 |
| RU2453593C1 (ru) * | 2011-04-21 | 2012-06-20 | Общество с ограниченной ответственностью "Бифилюкс" | Штамм lactobacillus helveticus, используемый для получения продукции, содержащей лактобактерии |
| US20120328735A1 (en) * | 2011-06-24 | 2012-12-27 | Naoto Uchida | Process for preparing casein-derived peptides by fermentation of lactic acid bacteria |
| DE102012016127A1 (de) | 2011-08-31 | 2013-02-28 | Daniel Elias | Bioaktive, regenerative Mischung zur Herstellung eines Ergänzungsnahrungsmittels |
| CA2880714C (en) | 2012-08-22 | 2020-06-23 | Kraft Foods Group Brands Llc | Processed cheese with cultured dairy components and method of manufacturing |
| CN102960444A (zh) * | 2012-11-19 | 2013-03-13 | 陕西科技大学 | 一种基于瑞士乳杆菌发酵的含ace抑制肽的羊奶的制备方法 |
| CN104450574B (zh) * | 2014-12-10 | 2017-05-10 | 生合生物科技（南京）有限公司 | 一种瑞士乳杆菌lh43及其制作乳酸菌饮料的方法 |
| RU2577112C1 (ru) * | 2014-12-25 | 2016-03-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Горский государственный аграрный университет" | Штамм lactobacillus helveticus вкпм в-11175, полученный на доступных питательных средах |
| CN107674848A (zh) * | 2017-09-20 | 2018-02-09 | 云南乍甸乳业有限责任公司 | 一种酸奶发酵菌种的制备方法 |
| CN111227049B (zh) * | 2018-11-29 | 2022-08-12 | 内蒙古伊利实业集团股份有限公司 | 一种维持褐色植物基酸奶货架期内组织状态稳定性的方法 |
| CN109517763B (zh) * | 2018-12-27 | 2022-03-22 | 内蒙古农业大学 | 瑞士乳杆菌h11及其应用 |
| CN110226687A (zh) * | 2019-06-12 | 2019-09-13 | 宁波依萃健生物科技有限公司 | 一种解酒护肝组合物及制备方法 |
| EP3845069B1 (en) * | 2019-12-30 | 2022-08-24 | Compagnie Gervais Danone | Sucrose negative streptococcus thermophilus for use in preparation of fermented products |
| CN111979286B (zh) * | 2020-08-31 | 2021-11-26 | 鲁东大学 | 一种发酵法与酶法联合制备贝类高f值寡肽的方法 |
| CN112616925A (zh) * | 2020-12-30 | 2021-04-09 | 光明乳业股份有限公司 | 一种双蛋白发酵乳及其制备方法 |
Family Cites Families (29)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3846560A (en) * | 1971-07-22 | 1974-11-05 | Quaker Oats Co | Process of making a base for protein beverages |
| US3876806A (en) * | 1971-10-14 | 1975-04-08 | Quaker Oats Co | Process for the preparation of acid soluble polypeptides and carbonated beverages containing same |
| US4107334A (en) * | 1976-10-13 | 1978-08-15 | Pfizer Inc. | Modified protein |
| CH636248A5 (fr) * | 1979-03-09 | 1983-05-31 | Nestle Sa | Procede de preparation d'un hydrolysat de proteines purifie. |
| JPS60262561A (ja) * | 1984-06-08 | 1985-12-25 | House Food Ind Co Ltd | 大豆蛋白質水溶液の処理方法 |
| US4585757A (en) * | 1984-07-27 | 1986-04-29 | Texas Tech University Health Sciences Center | Hypotensive active peptides |
| US4687840A (en) * | 1986-02-11 | 1987-08-18 | Texas Tech University Health Sciences Center | Hypotensive active peptides |
| GB8823429D0 (en) * | 1988-10-05 | 1988-11-09 | Agricultural Genetics Co | Method for accelerated ripening of cheddar & related hard type cheese |
| DD300815A5 (de) * | 1989-07-07 | 1992-08-06 | Nestle Sa | Proteinhydrolyse |
| NL9000422A (nl) * | 1990-02-21 | 1991-09-16 | Nl Zuivelonderzoek Inst | Werkwijze voor de bereiding van een gefermenteerd melkprodukt. |
| DE69124274T2 (de) * | 1990-02-27 | 1997-08-14 | Agency Ind Science Techn | Oligopeptide, sie enthaltende pharmazeutische und Futterzusammensetzung und Benützung von Oligopeptiden |
| DE69127020T2 (de) * | 1990-05-18 | 1998-01-29 | Iwase Cosfa Co Ltd | Milchproteinhydrolysate und Zusammensetzungen zur Verwendung als Haar- und Hautbehandlungsmittel |
| JP2571734B2 (ja) * | 1991-08-23 | 1997-01-16 | 株式会社ヤクルト本社 | 乳酸菌飲料 |
| US5486461A (en) * | 1991-11-08 | 1996-01-23 | Novo Nordisk A/S | Casein hydrolyzate and method for production of such casein hydrolyzate |
| FI94088C (fi) * | 1992-03-13 | 1995-07-25 | Valio Oy | Menetelmä fenyylialaniinin poistamiseksi proteiinipitoisista koostumuksista |
| US5418218A (en) * | 1992-07-10 | 1995-05-23 | The University Of Maryland At Baltimore | Histidyl-proline diketopiperazine (cyclo his-pro) a cns-active pharmacologic agent |
| JP2782142B2 (ja) | 1992-07-23 | 1998-07-30 | カルピス株式会社 | アンジオテンシン変換酵素阻害剤及びその製造法 |
| JP2782153B2 (ja) | 1992-11-09 | 1998-07-30 | カルピス株式会社 | アンジオテンシン変換酵素阻害ペプチドの製造法 |
| US5656268A (en) * | 1995-04-21 | 1997-08-12 | Sorodsky; Michael | Biological product |
| US5618689A (en) * | 1995-05-25 | 1997-04-08 | Nestec S.A. | Enhanced procedures for preparing food hydrolysates |
| WO1998027827A1 (en) * | 1996-12-23 | 1998-07-02 | Dsm N.V. | Method for producing a protein hydrolysate |
| US6221423B1 (en) * | 1998-04-13 | 2001-04-24 | Protein Technologies Int'l Inc. | Short-chained peptide material |
| AU2001247334A1 (en) | 2000-03-10 | 2001-09-24 | Monsanto Company | Novel peptides with anti-hypertensive activity |
| AU2001245537A1 (en) | 2000-03-10 | 2001-09-24 | Monsanto Company | Anti-hypertensive peptides |
| EP1264838A4 (en) | 2000-03-13 | 2003-04-02 | Morinaga Milk Industry Co Ltd | PROTEIN HYDROLYSATES, THEIR PRODUCTION PROCESS AND FOOD AND DRINKS CONTAINING PROTEIN HYDROLYSTS |
| US20030040475A1 (en) | 2001-01-16 | 2003-02-27 | Yasuhiro Toba | Agents for improving lipid metabolism and reducing high blood pressure |
| US6815426B2 (en) | 2001-02-16 | 2004-11-09 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Angiogenesis-inhibitory tripeptides, compositions and their methods of use |
| WO2002071854A1 (en) | 2001-03-09 | 2002-09-19 | Unilever N.V. | Fermented milk product |
| US6589574B2 (en) | 2001-03-19 | 2003-07-08 | Council Of Scientific & Industrial Research | Process for preparation of protein-hydrolysate from milk protein |
-
1997
- 1997-09-26 JP JP9277949A patent/JP3028411B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
1998
- 1998-02-05 WO PCT/JP1998/000481 patent/WO1999016862A1/ja not_active Ceased
- 1998-02-05 DE DE69829983T patent/DE69829983T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1998-02-05 AU AU57802/98A patent/AU734422B2/en not_active Ceased
- 1998-02-05 EP EP98901520A patent/EP1016709B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1998-02-05 PT PT98901520T patent/PT1016709E/pt unknown
- 1998-02-05 HU HU0003744A patent/HU225980B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1998-02-05 AT AT98901520T patent/ATE294230T1/de active
- 1998-02-05 CA CA002304985A patent/CA2304985C/en not_active Expired - Fee Related
- 1998-02-05 ES ES98901520T patent/ES2237834T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1998-02-05 TR TR2000/00854T patent/TR200000854T2/xx unknown
- 1998-02-05 US US09/508,840 patent/US6534304B1/en not_active Expired - Fee Related
- 1998-02-05 CN CNB988115301A patent/CN1149279C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1998-02-05 CZ CZ20001082A patent/CZ291067B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1998-02-05 PL PL98339343A patent/PL188675B1/pl unknown
- 1998-02-05 SK SK435-2000A patent/SK284755B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1998-02-05 BR BR9813218-0A patent/BR9813218A/pt not_active Application Discontinuation
- 1998-02-05 KR KR10-2000-7003224A patent/KR100404154B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 1998-09-17 IN IN2795DE1998 patent/IN188418B/en unknown
- 1998-09-22 TW TW087115782A patent/TW526268B/zh not_active IP Right Cessation
- 1998-09-23 MY MYPI98004363A patent/MY118157A/en unknown
- 1998-09-25 AR ARP980104806A patent/AR017153A1/es active IP Right Grant
- 1998-09-25 ZA ZA988659A patent/ZA988659B/xx unknown
-
2000
- 2000-04-26 BG BG104382A patent/BG64422B1/bg unknown
-
2002
- 2002-12-05 US US10/310,628 patent/US7282354B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| PL188675B1 (pl) | Nowy szczep bakterii kwasu mlekowego-Lactobacillus helveticus, fermentowany produkt mleczny oraz sposób wytwarzania fermentowanego produktu mlecznego | |
| Hati et al. | Comparative growth behaviour and biofunctionality of lactic acid bacteria during fermentation of soy milk and bovine milk | |
| KR100704441B1 (ko) | 항고혈압성 디펩타이드 및 트리펩타이드를 생산하는락토바실러스 헬베티쿠스 | |
| CN103270153B (zh) | 质构化乳酸细菌菌株 | |
| CA3163217C (en) | SUCROSE-NEGATIVE STREPTOCOCCUS THERMOPHILUS INTENDED FOR USE IN THE PREPARATION OF FERMENTED PRODUCTS | |
| Jensen et al. | Variation in caseinolytic properties of six cheese related Lactobacillus helveticus strains | |
| KR20080108247A (ko) | 락토스를 발효시키지 않는 락토바실러스 헬베티쿠스 균주 | |
| Mohammadzadeh et al. | Exploring the probiotic properties of Lactiplantibacillus pentosus and gamma-aminobutyric acid production for cheese development | |
| CN109266572B (zh) | 生产谷氨酰胺转氨酶的干酪乳杆菌诱变菌及其用途 | |
| CN104254604A (zh) | 对氨苄西林具有抗性的质地化乳酸菌菌株 | |
| MXPA00002575A (en) | Lactobacillus helveticus bacterium having high capability of producing tripeptide, fermented milk product, and process for preparing the same | |
| WO2025233418A1 (en) | Strains of streptococcus thermophilus with enhanced texturing properties | |
| PL241893B1 (pl) | Sposób przeprowadzenia selekcji mikroorganizmów proteolitycznych, sposób wytwarzania hydrolizatu białek serwatkowych, zawierającego bioaktywne peptydy i hydrolizat białek serwatkowych | |
| CN117916358A (zh) | 乳酸菌、乳酸菌酵种、发酵乳、发酵乳的制造方法、及乳酸菌的筛选方法 | |
| HAYALOGLU | RESEARCH Influence of adjunct cultures on angiotensin-converting enzyme (ACE)-inhibitory activity, organic acid content and peptide profile of kefir | |
| KR20070009626A (ko) | 안지오텐신-ｉ-전환 효소를 억제하는 성질을 갖는 식품원료 및 식품을 제조하는 방법 및 그로부터 수득된 제품 |